(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）：
【化１８】
0006696060.tif 000020
または式（ＩＩ）：
【化１９】
0006696060.tif 000021
（式中、Ｒ１は水素原子を示し、Ｒ２は水素原子または炭素数２〜３０のアシル基を示す。）で表される化合物またはその塩。
【請求項２】
Ｒ１、Ｒ２が、ともに水素原子である請求項１に記載の化合物またはその塩。
【請求項３】
Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２が式（ＩＩＩ）：−ＣＯ（ＣＨ２）ｎＣＨ３（ｎは０〜２８の整数である。）で表されるアシル基である請求項１に記載の化合物またはその塩。
【請求項４】
Ｒ２がアセチル基である請求項３に記載の化合物またはその塩。
【請求項５】
薬学的に許容しうる担体および請求項１〜４のいずれか一項記載の化合物またはその塩を含む、医薬組成物。
【請求項６】
夜盲症、くる病、乾癬、白血病若しくは乾燥眼炎を治療するための、または感染に対する抵抗力を付与し、身体の成長並びに骨および／または歯の発育を促進するための、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
請求項１〜４の何れか一項に記載の化合物またはその塩を有効成分として含有する、皮膚の異常乾燥および色素沈着を防止するための、肌のターンオーバー促進剤。
【請求項８】
下記式（ＩＶ）：
【化２０】
0006696060.tif 000022
（式中、ＰＧはヒドロキシ基の保護基を示す。）
で表されるアルデヒドを下記式（Ｖ）：
【化２１】
0006696060.tif 000023
（式中、Ｒ４は、炭素数１〜１２のアルキル基を示し、Ｒ５は、アリール基を示し、Ｘは、ハロゲン原子を示す。）で表されるホスホニウム塩、または下記式（ＶＩ）：
【化２２】
0006696060.tif 000024
（式中、Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、炭素数１〜１２のアルキル基を示す。）
で表されるホスホナートと、ウィッティヒ反応またはホーナー・エモンズ反応させて、下記式（ＶＩＩ）：
【化２３】
0006696060.tif 000025
（式中、Ｒ４は、炭素数１〜１２のアルキル基を示す。）
で表されるエステルを得る工程と、
前記式（ＶＩＩ）で表されるエステルを還元及び場合によりアシル化し、さらに保護基ＰＧを脱保護して下記式（ＶＩＩＩ）：
【化２４】
0006696060.tif 000026
（式中、Ｒ２は、水素原子または炭素数２〜３０のアシル基である。）で表される化合物を得る工程と、
前記式（ＶＩＩＩ）で表される化合物を酸化して下記式（ＩＩ）：
【化２５】
0006696060.tif 000027
で表される化合物を得る工程、
を含む、ビタミンＡ誘導体の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規ビタミンＡ誘導体およびその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
レチノイドまたはビタミンＡ誘導体は、様々な分野、特に医薬、化粧品および農業食糧分野において用いられており、多くの合成方法が知られている。これらは、生体内においてレチノイド受容体に結合し、ニキビや光老化、または特定の悪性腫瘍などの皮膚疾患の治療に用いられ、また、主に美容を目的として化粧品に配合されている。医薬品としては、トレチノインやアダパレン、化粧品としは、シワ改善作用の効能表示が承認されたレチノール、パルミチン酸レチノールといったものがある。トレチノインは、レチノイン酸の二重結合がすべてトランス型をとった、オール・トランスレチノイン酸異性体（ＡＴＲＡ）である。このトレチノインは、急性前骨髄性白血病の治療薬であるベサノイドや、褥瘡、皮膚潰瘍（熱傷潰瘍、糖尿病性潰瘍、下腿潰瘍）に適応を持つ外用薬のオルセノン軟膏として販売されている。【０００３】
一般に、治療標的となる癌細胞は、何らかの遺伝子変異により自律増殖を獲得し、無制限に増殖し続ける。前骨髄性白血病細胞株であるＨＬ６０細胞株は、アポトーシス誘導物質や分化誘導物質のスクリーニングに用いられるモデル細胞株である。ＨＬ６０細胞株は分化誘導されると、増殖が抑制され、最終分化により造腫瘍作用を失う（脱癌状態）。癌治療において、アポトーシスの誘導や分化誘導が有効な手段として考えられており、ある種の抗癌剤やレチノイン酸誘導体はすでに臨床応用されている。【０００４】
トレチノインはレチノールの約１００倍の薬理作用を持つとされるが、催奇性や呼吸困難などの重篤な副作用を有することが知られている。また、レチノイン酸およびその類似体は、紫外線に弱く不安定である。このため、従来のレチノイン酸およびその誘導体と比較して光安定性の高い７−ヒドロキシレチノイン酸が、ある種の藍藻類（Ｃｙａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ）から単離されている（例えば、非特許文献１および特許文献１参照）。しかしながら、藍藻類から抽出して得られる７−ヒドロキシレチノイン酸は極めて少量であり、これを精製する過程で４つの異性体の混合物となるため、７−ヒドロキシレチノイン酸のカルボキシ基を還元して対応する７−ヒドロキシレチノールを得ることは難しい。したがって、７位にヒドロキシ基またはオキソ基を有するレチノールまたはその誘導体は未だ知られていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｋａｙａ  Ｋ．他３名，Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｒｅｔｉｎｏｉｃ  ａｃｉｄ  ａｎａｌｏｇｕｅ，  ７−ｈｙｄｒｏｘｙ  ｒｅｔｉｎｏｉｃ  ａｃｉｄ，  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｆｒｏｍ  ｃｙａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ．  Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ．１８１０（２０１１）４１４−４１９．
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２０１１−２５１９４２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、医薬品および化粧品として有用な、新規ビタミンＡ誘導体およびその製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は一つの実施形態において下記式（Ｉ）：
【化１】
0006696060.tif 000002
または式（ＩＩ）：【０００９】
【化２】
0006696060.tif 000003
（式中、Ｒ１、Ｒ２は、互いに独立して、水素原子、炭素数１〜１２のアルキル基、炭素数２〜１０のアルケニル基、炭素数２〜１０のアルキニル基、または炭素数２〜３０のアシル基である。）で表される化合物またはその塩を提供する。
上記式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物において、Ｒ１、Ｒ２が、ともに水素原子であることが好ましい。また、Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２が式（ＩＩＩ）：−ＣＯ（ＣＨ２）ｎＣＨ３（ｎは０〜２８の整数である。）で表されるアシル基であることがさらに好ましく、Ｒ２がアセチル基であることがさらになお好ましい。【００１０】
本発明の他の実施形態では、薬学的に許容しうる担体および上記のいずれかに記載の化合物またはその塩を含む、医薬組成物を提供する。
この医薬組成物は、夜盲症、くる病、乾癬、白血病若しくは乾燥眼炎を治療するための、または感染に対する抵抗力を付与し、身体の成長並びに骨および／または歯の発育を促進するために使用することが好ましい。【００１１】
本発明のさらに他の実施形態では、上記の何れかに記載の化合物またはその塩を有効成分として含有する、皮膚の異常乾燥および色素沈着を防止するための、肌のターンオーバー促進剤を提供する。【００１２】
別の側面において、本発明は、夜盲症、くる病、乾癬、白血病若しくは乾燥眼炎を治療するための、または感染に対する抵抗力を付与し、身体の成長並びに骨および／または歯の発育を促進するための方法であって、有効量の上記のいずれかに記載の化合物またはその塩を、それを必要としている被検体に投与することを含む、方法を提供する。【００１３】
本発明のさらに別の側面では、下記式（ＩＶ）：
【化３】
0006696060.tif 000004
（式中、ＰＧはヒドロキシ基の保護基を示す。）
で表されるアルデヒドを下記式（Ｖ）：【００１４】
【化４】
0006696060.tif 000005
（式中、Ｒ４は、炭素数１〜１２のアルキル基を示し、Ｒ５は、アリール基を示し、Ｘは、ハロゲン原子を示す。）で表されるホスホニウム塩、または下記式（ＶＩ）：【００１５】
【化５】
0006696060.tif 000006
（式中、Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、炭素数１〜１２のアルキル基を示す。）
で表されるホスホナートと、ウィッティヒ反応またはホーナー・ワズワース・エモンズ反応させて、下記式（ＶＩＩ）：【００１６】
【化６】
0006696060.tif 000007
で表されるエステルを得る工程と、
前記式（ＶＩＩ）で表されるエステルを還元及びアシル化し、さらに保護基ＰＧを脱保護して下記式（ＶＩＩＩ）：【００１７】
【化７】
0006696060.tif 000008
（式中、Ｒ２は、上記と同じ意味を有する。）で表される化合物を得る工程と、
前記式（ＶＩＩ）で表される化合物を酸化して、下記式（ＩＩ）：【００１８】
【化８】
0006696060.tif 000009
で表される化合物を得る工程、を含む、ビタミンＡ誘導体の製造方法を提供する。
【発明の効果】
【００１９】
本発明によれば、医薬品および化粧品として有用な、新規ビタミンＡ誘導体およびその製造方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】図１は、本発明の化合物について、ＨＬ−６０細胞を用いたＮＢＴ陽性細胞率の定量結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
次に、本発明の好適な実施形態について、以下の項目順に説明する。
（１）新規ビタミンＡ誘導体
（２）新規ビタミンＡ誘導体の製造方法
（３）医薬組成物および治療用途
（４）その他の用途
なお、以下に説明する実施形態は、特許請求の範囲に係る発明を限定するものではなく、また、実施形態の中で説明されている諸要素及びその組み合わせのすべてが本発明の解決手段に必須であるとは限らない。また、本明細書において引用されるすべての特許文献及び非特許文献の開示は、全体として本明細書に参照として組み込まれる。
【００２２】
（１）新規ビタミンＡ誘導体
本発明の一実施形態にかかる新規ビタミンＡ誘導体は、下記式（Ｉ）：
【化９】
0006696060.tif 000010
または式（ＩＩ）：
【００２３】
【化１０】
0006696060.tif 000011
（式中、Ｒ１、Ｒ２は、互いに独立して、水素原子、炭素数１〜１２のアルキル基、炭素数２〜１０のアルケニル基、炭素数２〜１０のアルキニル基、または炭素数２〜３０のアシル基である。）で表される化合物またはその塩である。
【００２４】
本明細書において、「炭素数１〜１２のアルキル基」とは、炭素原子と水素原子のみからなり、１〜１２個の炭素原子を有する一価直鎖又は分岐鎖飽和炭化水素基を意味する。例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、１−メチルエチル基、ブチル基、２−メチルプロピル基、１−メチルプロピル基、１，１−ジメチルエチル基、ペンチル基、３−メチルブチル基、２−メチルブチル基、２，２−ジメチルプロピル基、１−エチルプロピル基、１，１−ジメチルプロピル基、ヘキシル基、４−メチルペンチル基、３−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、１−メチルペンチル基、３，３−ジメチルブチル基、２，２−ジメチルブチル基、１，１−ジメチルブチル基、１，２−ジメチルブチル基、ヘプチル基、１−メチルヘキシル基、１−エチルペンチル基、オクチル基、１−メチルヘプチル基、２−エチルヘキシル基、ノニル基、又はデシル基が挙げられる。好ましくは、炭素数１〜６のアルキル基が挙げられ、更に好ましくは、炭素数１〜４のアルキル基が挙げられる。
【００２５】
「炭素数２〜１０のアルケニル基」とは、少なくとも１つの二重結合を含有する、炭素数２〜１０の直鎖状もしくは分枝状のアルケニル基が挙げられる。具体的には、エテニル基、プロペニル基、１−メチルエテニル基、ブテニル基、２−メチルプロペニル基、１−メチルプロペニル基、ペンテニル基、３−メチルブテニル基、２−メチルブテニル基、１−エチルプロペニル基、ヘキセニル基、４−メチルペンテニル基、３−メチルペンテニル基、２−メチルペンテニル基、１−メチルペンテニル基、３，３−ジメチルブテニル基、１，２−ジメチルブテニル基、ヘプテニル基、１−メチルヘキセニル基、１−エチルペンテニル基、オクテニル基、１−メチルヘプテニル基、２−エチルヘキセニル基、ノネニル基、又はデセニル基が挙げられる。好ましくは、炭素数２〜６のアルケニル基が挙げられ、更に好ましくは、炭素数２〜４のアルケニル基が挙げられる。
【００２６】
「炭素数２〜１０のアルキニル基」とは、少なくとも１つの三重結合を含有する、炭素数２〜１０の直鎖状もしくは分枝状のアルキニル基が挙げられる。具体的には、エチニル基、プロピニル基、ブチニル基、ペンチニル基、３−メチルブチニル基、ヘキシニル基、４−メチルペンチニル基、３−メチルペンチニル基、３，３−ジメチルブチニル基、ヘプチニル基、オクチニル基、３−メチルヘプチニル基、３−エチルヘキシニル基、ノニニル基、又はデシニル基が挙げられる。好ましくは、炭素数２〜６のアルキニル基が挙げられ、更に好ましくは、炭素数２〜４のアルキニル基が挙げられる。
【００２７】
また、「炭素数２〜３０のアシル基」とは、基Ｒ′−ＣＯ−を意味し、ここでＲ′は、不飽和結合を有していてもよい炭素数１〜２９の直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基、又はフェニル、ナフチルなどのアリール基、もしくは窒素原子、イオウ原子及び酸素原子から選択されるヘテロ原子を環員として含むピリジル、イミダゾリル、チエニル、フリルなどのヘテロアリール基を表す。これらの基は、アミノ基等の官能基を有するものであってもかまわない。「炭素数２〜３０のアシル基」として具体的には、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、バレリル基、ヘキサノイル基、ラウロイル基、パルミトイル基、オレオイル基等を挙げることができるが、特にアセチル基であることが望ましい。このようなＲが炭素数２〜３０のアシル基である式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物は、レチノール化合物のアシル化として既に公知の方法を用いて合成することができる。例えば、７−ヒドロキシレチノールを、アシル化剤の存在下でリパーゼによりモノアシル化反応を行うことにより、容易に得ることができる（特開平１０−０３６３０１号公報および特開２００７−１４３５６１号公報参照）。
【００２８】
慣用の様々なアルキルアシラートやアルケニルアシラート、例えば酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸ブチル、酢酸ビニル、酢酸アリル、酢酸イソプロペニル、プロピオン酸エチル、酪酸エチルおよびプロピオン酸ビニルならびに長鎖脂肪酸のエステル、例えばラウリン酸ビニルも、アシル化剤として使用できる。アセチル化のためには、酢酸エチル、酢酸ブチルまたは酢酸ビニルが用いられる。長鎖アシラートの製造には対応する脂肪酸のビニルエステルも好適である。用いるアシル化剤の量は、１モル当量ないしそれより数倍多い量とすることができるが、アシル化剤を同時に溶媒として役立てるときは特に過剰に用い、これは、アルキルおよびアルケニルアシラートの場合について該当し得る。
【００２９】
式（Ｉ）または式（ＩＩ）で表される化合物は、異性体または塩の形態であってもよい。酸付加塩としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、過塩素酸塩、リン酸塩等の無機酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、安息香酸塩、トリフルオロ酢酸塩、酢酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩等の有機酸塩が挙げられる。塩基塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩のようなアルカリ金属塩、又は、カルシウム塩のようなアルカリ土類金属塩が挙げられる。
【００３０】
本明細書で使用される「異性体」なる用語は、幾何異性体、光学的異性体又は互変異性体を意味する。本実施形態の化合物は、上記各異性体およびそれらのあらゆる比率での混合物の全てを包含する。
【００３１】
特定の理論に限定されるものではないが、本実施形態の新規ビタミンＡ誘導体は、７位がヒドロキシ化又はオキソ化されるため、従来のレチノール及びレチノール誘導体が有する共役系が遮断され、光安定性が向上していると考えられる。さらに、特定の理論に限定されるものではないが、本実施形態の新規ビタミンＡ誘導体は、互変異性を起こし、常に混合物として存在することで光安定性の向上に貢献する可能性もある。
【００３２】
（２）新規ビタミンＡ誘導体の製造方法
本発明の別の側面におけるビタミンＡ誘導体の製造方法は、下記式（ＩＶ）：
【化１１】
0006696060.tif 000012
（式中、ＰＧはヒドロキシ基の保護基を示す。）
で表されるアルデヒドを下記式（Ｖ）：
【００３３】
【化１２】
0006696060.tif 000013
（式中、Ｒ４は、炭素数１〜１２のアルキル基を示し、Ｒ５は、アリール基を示し、Ｘは、ハロゲン原子を示す。）で表されるホスホニウム塩、または下記式（ＶＩ）：
【００３４】
【化１３】
0006696060.tif 000014
（式中、Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、炭素数１〜１２のアルキル基を示す。）
で表されるホスホナートと、ウィッティヒ反応またはホーナー・エモンズ反応させて、下記式（ＶＩＩ）：
【００３５】
【化１４】
0006696060.tif 000015
（式中、Ｒ４は、炭素数１〜１２のアルキル基を示す。）
で表されるエステルを得る工程を含む。
【００３６】
上記工程において、式（ＩＶ）で表されるアルデヒドは、種々の方法にて合成することができる。例えば、後述するスキーム１および実施例に記載したように、β−シクロシトラール（１）と、４−ブロモ−３−メチル−２−ブテンニトリル（２）とを反応させてヒドロキシニトリル（３）を合成し、７位のヒドロキシ基をシリルエーテルで保護した後、水素化ジイソブチルアルミニウムを用いてニトリルを部分還元してアルデヒドに変換してもよい。ヒドロキシ基の保護基（上記式中、ＰＧで示す）としては、例えば置換シリル基（トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基、フェニルジメチルシリル基など）、テトラヒドロピラニル基、テトラヒドロフラニル基、アルコキシアルキル基（メトキシメチル基、エトキシエチル基など）、ベンジルオキシメチル基、ベンジル基、トリチル基、アシル基（ホルミル基、アセチル基、ベンゾイル基など）が挙げられる。反応温度は−５０℃〜室温、好ましくは−３０〜０℃である。
【００３７】
ウィッティヒ反応は、アルデヒドまたはケトンとトリフェニルホスホニウムイリドとの反応であり、アルケンおよびトリフェニルホスフィン酸化物を得ることができる（Ａ．Ｍａｅｒｃｋｅｒ，Ｏｒｇ．Ｒｅａｃｔ．１９６５，１４，２７０−４９０；Ａ．Ｗ．Ｃａｒｒｕｔｈｅｒｓ，  Ｓｏｍｅ  Ｍｏｄｅｒｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，ＣａｍｂｒｉｄｇｅＵＫ１９７１，ｐｐ８１−９０）。ウィッティヒ反応は、アルデヒドおよびケトンを単独で置換されたホスフィンイリドにカップリングするのに最も一般的に使用される反応である。ウィッティヒ試薬は通常、ホスホニウム塩から製造され、ここでホスホニウム塩は、Ｐｈ３Ｐとハロゲン化アルキルとの反応によって製造される。ウィッティヒ試薬（イリド）を形成するために、ホスホニウム塩をＥｔ２ＯまたはＴＨＦのような溶媒に懸濁し、フェニルリチウムまたはｎ−ブチルリチウムのような強塩基を添加する。単純なイリドを用いると、一般的には生成物は主としてＺ−異性体であるが、比較的少量のＥ−異性体も形成される場合が多い。望ましい生成物がＥ−異性体である場合、シュロッサー（Ｓｃｈｌｏｓｓｅｒ）の改変法を用いてもよい。安定化されたイリド（ホスホン酸カルバニオン）を用いると、生成物は主としてＥ−異性体である。あるいはホーナー・ワズワース・エモンズ（Ｈｏｒｎｅｒ−Ｗａｄｓｗｏｒｔｈ−Ｅｍｍｏｎｓ）反応（Ｂ．Ｅ．Ｍａｒｙａｎｏｆｆ  ａｎｄ  Ａ．Ｂ．Ｒｅｉｔｚ，Ｃｈｅｍ  Ｒｅｖ．１９８９，８９：８６３−９２７）は、優勢にＥ−アルケンを生産するための安定化されたホスホン酸カルバニオンとアルデヒド（またはケトン）との化学反応である。ホーナー・ワズワース・エモンズ反応（またはＨＷＥ反応）は、優勢にＥ−アルケンを生産するための安定化されたホスホン酸カルバニオンとアルデヒド（またはケトン）との縮合反応である。ウィッティヒ反応で用いられるホスホニウムイリドに対して、ホスホネートで安定化されたカルバニオンは、より高い求核性およびより高い塩基性を有する。これらの反応は、通常−７８〜６０℃、好ましくは−１０〜２５℃の範囲内の温度で、通常０．５〜２４時間、好ましくは０．５〜２時間程度行うことができる。
【００３８】
次に、上記式（ＶＩＩ）で表されるエステルを還元及びアシル化し、さらに保護基ＰＧを脱保護して下記式（ＶＩＩＩ）：
【化１５】
0006696060.tif 000016
（式中、Ｒ２は、上記で記載した意味を有する。）で表される化合物を得る。
適切な還元剤として、ＬｉＡｌＨ４、ＬｉＢＨ４、ＮａＢＨ４−ＬｉＢｒ、およびＤＩＢＡＬが挙げられるが、これらに限定されるものではない。一実施形態において、還元剤はＬｉＡｌＨ４である。別の実施形態において、還元剤はＬｉＢＨ４である。さらに別の実施形態において、還元剤ＬｉＢＨ４は、例えばＮａＢＨ４およびＬｉＢｒの共同使用によって、インサイチュで生じてよい。還元剤の量は概して、０．８から１．６等量、またはより具体的には１．０から１．４等量である。
【００３９】
得られた末端アルコールはカルボン酸無水物を用いてアシル化してもよい。さらに、７位ヒドロキシ基の保護基ＰＧは、当業者に公知の方法により脱保護することができ、例えば、置換シリル基によるヒドロキシ基の保護はフッ素アニオン等を用いて容易に脱保護することができる。
【００４０】
続いて、上記式（ＶＩＩＩ）で表される化合物を酸化して、下記式（ＩＩ）：
【化１６】
0006696060.tif 000017
で表される化合物を得る。式中、Ｒ２は、上記で記載したとおりである。
上記式（ＶＩＩＩ）で表される化合物の７位ヒドロキシ基の酸化は、２−ヨードキシ安息香酸（ＩＢＸ）等を用い、温和な条件下で行うことができる。
【００４１】
反応溶媒としては、必要に応じて不活性有機溶媒（例えば、無水テトラヒドロフラン、無水ジメチルスルホキシドなど）を用いる。反応温度は０〜５０℃である。上記各工程の生成物は、必要に応じて、それ自体既知の方法により、例えば、シリカゲルカラムクロマトグラフィーなどの方法により反応混合物から分離、精製することができる。
【００４２】
上記式（ＩＩ）で表される化合物は、７−ヒドロキシレチノール（Ｉ）のケト−エノール互変異性体であり、両者は、溶液中で所定の存在比率にて共存するが、クロロホルムなどの有機溶剤中では式（ＩＩ）で表されるケトフォームの割合が多い。
【００４３】
以下のスキーム１に、式（ＩＩ）の化合物の１つの典型的な製造方法を示す。出発材料は公知の化合物であるか、または当分野で公知の方法に従って製造してもよい。
【化１７】
0006696060.tif 000018
【００４４】
（３）医薬組成物および治療用途
本発明は、上記で説明した少なくとも１つの化合物、または、個々の異性体、異性体のラセミもしくは非ラセミ混合物、または、その薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和物を、少なくとも１つの薬学的に許容しうる担体と、場合により他の治療的および／または予防的成分と共に含む、夜盲症、くる病、乾癬、白血病若しくは乾燥眼炎を治療するための、または感染に対する抵抗力を付与し、身体の成長並びに骨および／または歯の発育を促進するための医薬組成物を含む。
【００４５】
一般に、本実施形態の医薬組成物は、治療有効量の上記化合物を含み、類似の有用性を提供する薬剤について許容されている投与形態のうちの任意のものによって投与されるであろう。治療有効量の化合物とは、処置されるべき疾患の重篤度、被検体の年齢および相対的な健康状態、使用される化合物の効力、投与経路および形態、投与が向けられる適応症、ならびに関わる医師の好みおよび経験などの数多くの要因に応じて、典型的には１日当たり１〜５００ｍｇ、好ましくは１日当たり１〜１００ｍｇ、そして最も好ましくは１日当たり１〜３０ｍｇである。そのような疾患を処置する当業者は、必要以上に実験を行うことなく、かつ個人的な知識及び本出願の開示に依存して、所与の疾患に対する、本発明の化合物の治療有効量を突き止めることができるであろう。
【００４６】
本実施形態の医薬組成物は、経口（頬側及び舌下を含む）、直腸内、鼻腔内、局所、経肺、経膣もしくは非経口（筋肉内、動脈内、髄腔内、皮下及び静脈内を含む）投与に適切なものを含む医薬配合物として、または、吸入もしくは通気による投与に適切な形態で、投与されてもよい。好ましい投与方法は、一般的に、苦痛の程度に従って調整することができる好都合の１日投薬レジメンを使用する経口である。
【００４７】
薬学的に許容しうる担体は、固体又は液体のいずれかであってよい。固体形態の製剤は、粉末剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、カシェ剤、坐剤及び分散性顆粒剤を含む。固体担体は、希釈剤、風味剤、可溶化剤、滑沢剤、懸濁化剤、結合剤、防腐剤、錠剤崩解剤、又はカプセル化材料として働くこともできる１種以上の物質であってよい。粉末剤では、担体は一般に、微粉化した活性成分との混合物である微粉化した固体である。錠剤では、活性成分は一般に、必要な結合能力を有する担体と適切な割合で混合され、所望の形状及び大きさに成形される。粉末剤及び錠剤は好ましくは、活性化合物を約１〜約７０％含有する。適切な担体は、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、ラクトース、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、低融点ワックス、カカオバター等を非限定的に含む。用語「製剤」は、担体を有するか又は有しない活性成分がそれに関連する担体により周囲を囲まれているカプセル剤を提供する、担体としてのカプセル化材料を有する活性化合物の配合物を含むことを意図されている。同様に、カシェ剤及びトローチ剤が含まれる。錠剤、粉末剤、カプセル剤、丸剤、カシェ剤及びトローチ剤は、経口投与に適切な固体形態としてあることができる。
【００４８】
経口投与に適切な他の形態は、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤、水性液剤、水性懸濁剤を含む液体形態の製剤、又は、使用の直前に液体形態の製剤に変換されることが意図されている固体形態の製剤を含む。乳剤は、液剤、例えば、水性プロピレングリコール液剤に調製されることができるか、又は、例えばレシチン、ソルビタンモノオレアートもしくはアカシアなどの乳化剤を含有することができる。水性液剤は、活性成分を水に溶解し、適切な着色剤、風味剤、安定剤及び増粘剤を加えることにより調製することができる。水性懸濁剤は、微粉化した活性成分を、例えば天然又は合成ガム、樹脂、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース及び他の周知の懸濁化剤などの粘性材料と共に水に分散することにより調製することができる。固体形態の製剤は、液剤、懸濁剤及び乳剤を含み、活性成分に加えて、着色剤、風味剤、安定剤、緩衝剤、人工及び天然甘味料、分散剤、増粘剤、可溶化剤等を含有することができる。
【００４９】
本実施形態の医薬組成物は、非経口投与（例えば、注射、例えばボーラス注射又は持続性点滴によって）のために処方されることができ、アンプル、予め充填された注射器、小容量点滴の単位用量形態で、又は、添加された防腐剤を含む複数用量容器で提供されることもできる。組成物は、油性又は水性のビヒクル中の、懸濁剤、液剤もしくは乳剤、例えば水性ポリエチレングリコールの液剤などの形態をとることができる。油性又は非水性担体、希釈剤、溶媒もしくはビヒクルの例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油（例えば、オリーブ油）、及び注射用有機エステル（例えば、エチルオレアート）を含み、防腐剤、湿潤剤、乳化剤もしくは懸濁化剤、安定化剤及び／又は分散剤などの配合剤を含有してよい。代替的には、活性成分は、滅菌固体の無菌分離によるか、もしくは、適切なビヒクル、例えば滅菌した発熱物質を含まない水を用いて、使用前の構成用溶液から凍結乾燥することにより得られる粉末形態であってよい。
【００５０】
本実施形態の医薬組成物は、軟膏剤、クリーム剤又はローション剤として、あるいは経皮パッチとして表皮へ局所投与するために処方されることができる。例えば、軟膏剤及びクリーム剤は、適切な増粘剤及び／又はゲル化剤を加え、水性又は油性基剤を用いて処方することもできる。ローション剤は、水性又は油性基剤を用いて処方することができ、一般に１種以上の乳化剤、安定化剤、分散剤、懸濁化剤、増粘剤又は着色剤も含有するであろう。口腔における局所投与に適する配合物は、通常はスクロース及びアカシア又はトラガカントである風味付けされた基剤中に活性剤を含むトローチ剤；ゼラチン及びグリセリン又はスクロース及びアカシアなどの不活性基剤中に活性成分を含む香錠；ならびに、適切な液体担体中に活性成分を含む口内洗浄薬を含む。
【００５１】
他の適切な薬学的担体及びそれらの配合物は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  １９９５，Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ編集，  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，第１９版，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａに記載されている。
【００５２】
（４）その他の用途
上記で説明した新規ビタミンＡ誘導体は、皮膚の異常乾燥および色素沈着を防止するための、肌のターンオーバー促進剤として使用することができる。具体的には、ターンオーバーの遅延に伴う、表皮生細胞層の菲薄化若しくはしわの形成、乾燥、キメの乱れ、くすみ、シミ、シミの濃色化等の予防および／または改善のために用いることができる。
【００５３】
さらに他の観点において、上記ビタミンＡ誘導体を角層へ塗布することを含む、表皮のターンオーバーの促進方法も提供される。この方法は、美容を目的として行われ、病気の予防や治療を目的とはしていない。また実施の主体は、医師以外の者であり、具体的には、化粧品販売員またはエステティシャン等の他人のための美容を目的とした施術を職業として行う者であり得る。また被施術者自身であってもよい。被施術者に対して本発明の方法の実施を指導・勧誘する行為もまた、本発明の方法の実施に含まれる。
【００５４】
表皮のターンオーバーが促進されたか否かは、公知の方法により評価することができる。例えば、表皮のターンオーバーのスピードを、表皮の色素の時間変化として、評価する方法等が挙げられる。色素は、ＤＨＡ（ジヒドロキシアセトン）水溶液を上腕内側部にパッチし、皮膚を黄褐色に標識させることによって生じさせてもよい。ＤＨＡを皮膚に塗ると、タンパク質をつくるアミノ酸と反応してタンパク質が変質し、この変質したタンパク質が黄色や茶色になる。あるいは角層における角層蛋白質の存在位置を指標とすることを特徴とする表皮ターンオーバーの評価方法（特開２００７−１９９０５３号公報参照）によっても、評価することができる。
【００５５】
本実施形態における肌のターンオーバー促進剤は、特に記載した場合を除き、有効成分である上記ビタミンＡ誘導体に、さらに希釈剤、安定化剤、酸化防止剤、防腐剤等の化粧料または皮膚外用剤として許容される添加物を添加したものであることもある。肌のターンオーバー促進剤は、化粧料、皮膚外用剤、および医薬組成物（以下、「化粧料等」という。）の成分として用いることができる。化粧料等は、固形分として上記ビタミンＡ誘導体を、例えば０．００００１〜１質量％以上含むことができ、０．００００１〜０．１質量％以上含むことが好ましく、０．０００１〜０．１質量％以上含むことがより好ましい。
【００５６】
上記ビタミンＡ誘導体を含む化粧料等はまた、その使用目的に応じて、固形剤、半固形剤、液剤等の各種剤形の形態に調製することができる。より具体的には、化粧料は、基礎化粧品として、クレンジング、洗顔料、化粧水、乳液、クリーム、マッサージ製品、パック製品、美容液・ジェル、リップケア製品等；ベースメーク化粧品として、ファンデーション、フェイスパウダー、化粧下地、コンシーラー等；ポイントメーク化粧品として、口紅、リップグロス・ライナー、チーク製品、アイシャドウ、アイライナー、マスカラ、アイブロウ製品等；ボディ用化粧品として石鹸、液体洗浄料、日焼け止めクリーム、入浴剤等；頭髪用化粧品または頭皮用化粧品としてシャンプー、リンス、ヘアトリートメント、整髪料、ヘアトニック、育毛剤、スキャルプトリートメント等とすることができる。また、硬膏剤、軟膏剤、パップ剤、リニメント剤、ローション剤、塗布剤、貼付剤、エアゾール剤（スプレー薬）とすることができる。
【００５７】
上記ビタミンＡ誘導体を含む化粧料等は、本発明の効果を損なわない範囲で、本発明の剤以外に、化粧料または医薬として許容される、種々の添加物を含有することができる。この例は、水（精製水、温泉水、海洋深層水等）、界面活性剤（乳化剤、可溶化剤、懸濁化剤、安定剤等）、酸化防止剤、防腐剤、ゲル化剤、アルコール類、皮膜形成剤、着色料、香料、消臭剤、塩類、ｐＨ調整剤、清涼剤、キレート剤、角質溶解剤、酵素、ビタミン類等である。また、本実施形態の化粧料等は、肌のターンオーバー促進剤の効果を損なわない限り、化粧料または皮膚外用剤の添加物として許容される種々の機能性の成分を含有することができる。このような成分の例は、美白剤、紫外線防御剤、抗菌剤、抗炎症剤、細胞賦活剤、活性酸素除去剤、保湿剤、皮膚を清浄にする成分、ニキビ、アセモを防ぐ成分である。
【００５８】
次に実施例を挙げ、本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例に制約されるものではない。なお、以下の実施例で記載した化合物番号は、上述のスキーム１に示した番号を括弧書きで示したものである。
【実施例】
【００５９】
（工程１）
＜β−シクロシトラール（１）からヒドロキシニトリル（３）を合成する工程＞
窒素気流中、活性化亜鉛１．２６ｇ（１９．３ｍｍｏｌ）に、β−シクロシトラール（１）１．６３ｇ（１０．７ｍｍｏｌ）とブロモニトリル（２）２．０３ｇ（１２．８ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン溶液（２０ｍＬ）を加え、超音波照射下３時間半室温で反応させた。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、セライトを用いて不溶物をろ別した。ろ液を濃縮して得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを使用して酢酸エチル／ヘキサン（１／４容積比）混合溶媒を溶出用溶媒として用いて精製し、淡黄色油状物質１．１９ｇ（３）［β−シクロシトラール（１）に対する収率４８％］を得た。【００６０】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．９７および１．１１（ｅａｃｈ３Ｈ，ｓ，ｇｅｍ−Ｍｅ），１．４３（２Ｈ，ｍ，２−Ｈ２），１．５７（２Ｈ，ｍ，３−Ｈ２），１．８５（３Ｈ，ｓ，５−Ｍｅ），１．９５（２Ｈ，ｍ，４−Ｈ２），２．１５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１Ｈｚ，９−Ｍｅ），２．３０（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１，２．５および１４．５Ｈｚ，８−Ｈ），２．８０（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１，１０．５および１４．５Ｈｚ，８−Ｈ），４．４５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．５および１０．５Ｈｚ，７−Ｈ），５．２７（１Ｈ，ｓｅｘｔ，Ｊ＝１Ｈｚ，１０−Ｈ）．
ＩＲＶｍａｘ（ＣＨＣｌ３）ｃｍ−１：３６１０および３４８０（ＯＨ），２２２０（ＣＮ）．
ＨＲＭＳｍ／ｚ：２５６．１６７４［（Ｍ＋Ｎａ）＋，Ｃ１５Ｈ２３ＯＮＮａ  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ２５６．１６７２］．【００６１】
（工程２）
＜ヒドロキシニトリル（３）からシロキシニトリル（４）を合成する工程＞
窒素気流中、ヒドロキシニトリル（３）４１０ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン１．２３ｍＬ（８．８０ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン４３ｍｇ（０．３５ｍｍｏｌ）の無水６クロロメタン溶液（１０ｍＬ）に、クロロトリエチルシラン０．５９ｍＬ（３．５ｍｍｏｌ）を０℃で加えて、室温で１６時間反応させた後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて反応を停止させた。有機物をジエチルエーテルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥後、溶媒を留去した。それにより得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを使用して酢酸エチル／ヘキサン（１／９容積比）混合溶媒を溶出用溶媒として用いて精製し、無色油状物質５９０ｍｇ（４）［ヒドロキシニトリル（３）に対する収率９７％］を得た。【００６２】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．５６（６Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ＳｉＣＨ２ＣＨ３×３），０．９３（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ＳｉＣＨ２ＣＨ３×３），０．９３および１．１２（６Ｈ，ｓ，ｇｅｍ−Ｍｅ），１．４２（２Ｈ，ｍ，２−Ｈ２），１．５５（２Ｈ，ｍ，３−Ｈ２），１．８２（３Ｈ，ｂｒ  ｓ，５−Ｍｅ），１．９１，（２Ｈ，ｍ，４−Ｈ２），２．１１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１Ｈｚ，９−Ｍｅ），２．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２および１３．５Ｈｚ，８−Ｈ），２．６５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝０．５，１０および１３．５Ｈｚ，８−Ｈ），４．３６（１Ｈ，ｂｒ  ｄ−ｌｉｋｅ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，７−Ｈ），５．１５（１Ｈ，ｄ−ｌｉｋｅ，Ｊ＝１Ｈｚ，１０−Ｈ）．
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：５．０６（Ｃ×３），６．７２（Ｃ×３），１９．１５，２１．１１，２１．５０，２８．３８，２９．５９，３４．１１，３４．５５，４０．２６，４７．２４，６９．７１，９７．２１，１１７．０７，１３２．２９，１３８．１２，１６３．１５．
ＩＲＶｍａｘ（ＣＨＣｌ３）ｃｍ−１：２２１９（ＣＮ）．
ＨＲＭＳｍ／ｚ：３７０．２５３６［（Ｍ＋Ｎａ）＋，Ｃ２１Ｈ３７ＯＮＮａＳｉ  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ３７０．２５３７］．【００６３】
（工程３）
＜シロキシニトリル（４）からシロキシアルデヒド（５）を合成する工程＞
窒素気流中、シロキシニトリル（４）１．００ｇ（２．８８ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル溶液（５０ｍＬ）に、水素化ジイソブチルアルミニウムの１．０Ｍヘキサン溶液３．４６ｍＬ（３．４６ｍｍｏｌ）を−３０℃で加えて、−３０℃で３０分間反応させた後、水を含むシリカゲルを加えて反応を停止させた。セライトを用いて析出した不溶物をろ別し、ろ液を濃縮して得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを使用してジエチルエーテル／ヘキサン（１５／８５容積比）混合溶媒を溶出用溶媒として用いて精製し、無色油状物質８４３ｍｇ（５）［シロキシニトリル（４）に対する収率８４％］を得た。【００６４】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．５４（６Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ＳｉＣＨ２ＣＨ３×３），０．８９（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ＳｉＣＨ２ＣＨ３×３），１．０１および１．１３（ｅａｃｈ  ３Ｈ，ｓ，ｇｅｍ−Ｍｅ），１．４２（２Ｈ，ｍ，２−Ｈ２），１．５５（２Ｈ，ｍ，３−Ｈ２），１．８４（３Ｈ，ｂｒ  ｓ，５−Ｍｅ），１．９２（２Ｈ，ｍ，４−Ｈ２），２．２４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，９−Ｍｅ），２．３５（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２および１３Ｈｚ，８−Ｈ），２．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０および１３Ｈｚ，８−Ｈ），４．４３（１Ｈ，ｂｒ  ｄ−ｌｉｋｅ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，７−Ｈ），５．９４（１Ｈ，  ｂｒ  ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１０−Ｈ），１０．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，ＣＨＯ）．
ＩＲＶｍａｘ（ＣＨＣｌ３）ｃｍ−１：１６６５（ｃｏｎｊ．ＣＯ），１６３０および１６０７（Ｃ＝Ｃ）．
ＨＲＭＳｍ／ｚ：３７３．２５３４［（Ｍ＋Ｎａ）＋，Ｃ２１Ｈ３８Ｏ２ＮａＳｉ  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ３７３．２５３４］．【００６５】
（工程４）
＜シロキシアルデヒド（５）からシロキシエステル（７）を合成する工程＞
窒素気流中、ホスホナート（６）０．９９ｍＬ（４．０８ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ’−ジメチルプロピレン尿素１．４８ｍＬ（１２．３ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン溶液（１０ｍＬ）に、−３０℃でｎ−ブチルリチウムの１．５９Ｍヘキサン溶液２．５７ｍＬ（４．０８ｍｍｏｌ）を加えて、−３０℃で１５分間反応させ、ホスホナート（６）のリチウム塩を含む無水テトラヒドロフラン溶液を調製した。この溶液に、−３０℃でシロキシアルデヒド（５）７１５ｍｇ（２．０４ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン溶液（１０ｍＬ）を加え、−３０℃で３０分間反応させ後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて反応を停止させた。有機物をジエチルエーテルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥後、溶媒を留去した。それにより得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを使用してジエチルエーテル／ヘキサン（８／９２容積比）混合溶媒を溶出用溶媒として用いて精製し、無色油状物質９０９ｍｇ（７）［シロキシニトリル（５）に対する収率９７％］を得た。【００６６】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．５０（６Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２ＣＨ３  ×３），０．８８（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，ＳｉＣＨ２ＣＨ３  ×３），１．００および１．１２（ｅａｃｈ  ３Ｈ，ｂｒ  ｓ，ｇｅｍ−Ｍｅ），１．２９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，ＯＣＨ２ＣＨ３），１．４１（２Ｈ，ｍ，２−Ｈ２），１．５５（２Ｈ，ｍ，３−Ｈ２），１．８５（３Ｈ，  ｂｒ  ｓ，  ５−Ｍｅ），１．９０（３Ｈ，ｓ，９−Ｍｅ），１．９３（２Ｈ，ｍ，４−Ｈ２），２．２２（１Ｈ，ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１３．５  Ｈｚ，８−Ｈ），２．３４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５  Ｈｚ，１３−Ｍｅ），２．５７（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０および１３．５Ｈｚ，８−Ｈ），４．１７（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７  Ｈｚ，ＯＣＨ２ＣＨ３），４．３４（１Ｈ，ｂｒ  ｄ−ｌｉｋｅ，Ｊ＝９  Ｈｚ，７−Ｈ），５．７５（１Ｈ，ｂｒ  ｓ，１４−Ｈ），５．９９（１Ｈ，ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１１  Ｈｚ，１０−Ｈ），６．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，１２−Ｈ），６．８３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１および１５．５Ｈｚ，１１−Ｈ）．  
ＩＲＶｍａｘ（ＣＨＣｌ３）ｃｍ−１：１７０１（ｃｏｎｊ．ＣＯ），１６３５および１６０２（Ｃ＝Ｃ）．  
ＨＲＭＳ  ｍ／ｚ：４６１．３４４６（ＭＨ＋，Ｃ２８Ｈ４９Ｏ３Ｓｉ  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ４６２．３４４６）．  【００６７】
（工程５）
＜シロキシエステル（７）からヒドロキシエステル（８）を合成する工程＞
窒素気流中、シロキシエステル（７）６５８ｍｇ（１．４３ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン溶液（１０ｍＬ）に、０℃でフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムの１．０Ｍテトラヒドロフラン溶液２．１４ｍＬ（２．１４ｍｍｏｌ）を加えて、室温で１時間ｔ反応させた後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて反応を停止させた。有機物を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥後、溶媒を留去した。それにより得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを使用して酢酸エチル／ヘキサン（１５／８５容積比）混合溶媒を溶出用溶媒として用いて精製し、黄色油状物質３８１ｍｇ（８）［シロキシエステル（７）に対する収率７７％］を得た。【００６８】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．００および１．１２（ｅａｃｈ  ３Ｈ，ｓ，ｇｅｍ−Ｍｅ），１．２９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，ＯＣＨ２ＣＨ３），１．４４（２Ｈ，ｍ，２−Ｈ２），１．５６（２Ｈ，ｍ，３−Ｈ２），１．８８（３Ｈ，ｓ，５−Ｍｅ），１．９５（３Ｈ，ｓ，９−Ｍｅ），１．９５（２Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ，４−Ｈ２），２．２９（１Ｈ，ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１４Ｈｚ，８−Ｈ），２．３３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１Ｈｚ，１３−Ｍｅ），２．７１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５および１４Ｈｚ，８−Ｈ），４．１７（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ，ＯＣＨ２ＣＨ３），４．４４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．５および１０．５Ｈｚ，７−Ｈ），５．７６（１Ｈ，ｂｒ  ｓ，１４−Ｈ），６．０９（１Ｈ，ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１０−Ｈ），６．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，１２−Ｈ），６．８６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１および１５Ｈｚ，  １１−Ｈ）．
ＩＲＶｍａｘ（ＣＨＣｌ３）ｃｍ−１：３６０９（ＯＨ），１７０１（ｃｏｎｊ．ＣＯ），１６０４（Ｃ＝Ｃ）．
ＨＲＭＳｍ／ｚ：３４７．２５７８（ＭＨ＋，Ｃ２２Ｈ３５Ｏ３  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ３４７．２５８１）．【００６９】
（工程６）
＜ヒドロキシエステル（８）からヒドロキシカルボン酸（９）を合成する工程＞
窒素気流中、ヒドロキシエステル（８）３０７ｍｇ（０．８９ｍｍｏｌ）のエタノール溶液（１１ｍＬ）に、１０％水酸化ナトリウム水溶液６．７ｍＬ（１２ｍｍｏｌ）を加え、５０℃で２時間反応させた後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて反応を停止させた。有機物を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥後、溶媒を留去した。それにより得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを使用してメタノール／ジクロロメタン（８／９２容積比）混合溶媒を溶出用溶媒として用いて精製し、黄色固体１５６ｍｇ（９）［シロキシエステル（７）に対する収率５５％］を得た。【００７０】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．００および１．１１（ｅａｃｈ  ３Ｈ，ｓ，ｇｅｍ−Ｍｅ），１．４４（２Ｈ，ｍ，２−Ｈ２），１．５７（２Ｈ，ｍ，３−Ｈ２），１．８８（３Ｈ，ｓ，５−Ｍｅ），１．９６（３Ｈ，ｓ，９−Ｍｅ），１．９６（２Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ，４−Ｈ２），２．３０（１Ｈ，ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１４Ｈｚ，８−Ｈ），２．３４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１Ｈｚ，１３−Ｍｅ），２．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５および１４Ｈｚ，８−Ｈ），４．４５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．５および１０．５Ｈｚ，７−Ｈ），５．７８（１Ｈ，ｂｒ  ｓ，１４−Ｈ），６．１１  （１Ｈ，ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１０−Ｈ），６．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５Ｈｚ，  １２−Ｈ），６．９１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１および１５Ｈｚ，１１−Ｈ）．  
ＩＲＶｍａｘ（ＣＨＣｌ３）ｃｍ−１：３６０５および３５２９（ＯＨ），１６８１（ｃｏｎｊ．ＣＯ），１６００（Ｃ＝Ｃ）．  
ＨＲＭＳｍ／ｚ：３４１．２０８９［（Ｍ＋Ｎａ）＋，Ｃ２０Ｈ３０Ｏ３Ｎａ  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ３４１．２０８７］．  【００７１】
（工程７）
＜ヒドロキシカルボン酸（９）からオキソカルボン酸（１０）を合成する工程＞
窒素気流中、ヒドロキシカルボン酸（９）１５６ｍｇ（０．４９ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン３ｍＬと無水ジメチルスルホキシド３ｍＬの混合溶液に、室温で２―ヨードキシ安息香酸４１０ｍｇ（１．４６ｍｍｏｌ）を数回に分けて加え、室温で４５分間反応させた後、水を加えて反応を停止させた。有機物を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥後、溶媒を留去した。それにより得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを使用してアセトン／ジクロロメタン（１／４容積比）混合溶媒を溶出用溶媒として用いて精製し、黄色固体１４１ｍｇ（１０）［ヒドロキシカルボン酸（９）に対する収率９１％］を得た。【００７２】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．０１（６Ｈ，ｓ，ｇｅｍ−Ｍｅ），  １．４４（２Ｈ，ｍ，２−Ｈ２），１．６１（３Ｈ，ｓ，５−Ｍｅ），１．６６（２Ｈ，ｍ，３−Ｈ２），１．９６（３Ｈ，ｓ，９−Ｍｅ），１．９６（２Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ，４−Ｈ２），２．３４（３Ｈ，ｓ，１３−Ｍｅ），３．３７（２Ｈ，ｓ，  ８−Ｈ２），５．７８（１Ｈ，ｂｒ  ｓ，１４−Ｈ），５．９８（１Ｈ，ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１１  Ｈｚ，１０−Ｈ），６．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，１２−Ｈ），６．９１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１および１５．５Ｈｚ，１１−Ｈ）．  
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１４．００，１８．１０，１８．８０，  ２１．００，２８．７７（Ｃ×２），３１．１６，３３．３３，３８．８９，５６．２８，１１７．８５，１２８．８５，１２９．５４，１３１．１１，１３４．６５，１３７．０９，１４３．２１，１５５．１５，１７１．９８，２０８．３３．  
ＩＲＶｍａｘ（ＣＨＣｌ３）ｃｍ−１：１６８６（ｃｏｎｊ．ＣＯ），１６００（Ｃ＝Ｃ）．  
ＨＲＭＳ  ｍ／ｚ：  ３１７．２１１４（ＭＨ＋，Ｃ２０Ｈ２９Ｏ３  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ３１７．２１１１）．  【００７３】
（工程８）
＜シロキシエステル（７）からヒドロキアセテート（１１）を合成する工程＞
窒素気流中、水素化アルミニウムリチウム４１ｍｇ（１．０６ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル懸濁液（１５ｍＬ）に、０℃でシロキシエステル（７）４９０ｍｇ（１．０６ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル溶液（５ｍＬ）を加え、０℃で１０分間反応させた後、水を少しずつ加えて反応を停止させた。ジエチルエーテル層を乾燥後、溶媒を留去して得られた粗生成物を無水ジクロロメタン８ｍＬに溶解し、窒素気流中、室温でトリエチルアミン０．４５ｍＬ（３．２ｍｍｏｌ）、無水酢酸０．１５ｍＬ（１．６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン５ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分間反応させた後、水を加えて反応を停止させた。有機物を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥後、溶媒を留去した。それにより得られた粗生成物を、無水テトラヒドロフランｍＬに溶解し、窒素気流中、室温でフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムの１．０Ｍテトラヒドロフラン溶液２．６６ｍＬ（２．６６ｍｍｏｌ）を加えて、３５℃で１時間半反応させた後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて反応を停止させた。有機物を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥後、溶媒を留去した。それにより得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを使用して酢酸エチル／ヘキサン（１／４容積比）混合溶媒を溶出用溶媒として用いて精製し、無色油状物質３３８ｍｇ（１２）［シロキシエステル（７）に対する収率９２％］を得た。【００７４】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．９９および１．１２（ｅａｃｈ  ３Ｈ，ｓ，ｇｅｍ−Ｍｅ），１．４２（２Ｈ，ｍ，２−Ｈ２），１．５６（２Ｈ，ｍ，３−Ｈ２），１．８７（６Ｈ，ｓ，５−Ｍｅおよび１３−Ｍｅ），１．９０（３Ｈ，ｓ，９−Ｍｅ），１．９５（２Ｈ，ｂｒ  ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，４−Ｈ２），２．０７（３Ｈ，ｓ，ＯＡｃ），２．２７（１Ｈ，ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１４Ｈｚ，８−Ｈ），２．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５および１４Ｈｚ，８−Ｈ），４．７２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，１５−Ｈ２），５．５９（１Ｈ，ｂｒ  ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，１４−Ｈ），６．０３（１Ｈ，ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１０−Ｈ），６．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，１２−Ｈ），６．５０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１および１５．５Ｈｚ，１１−Ｈ）．
ＩＲＶｍａｘ（ＣＨＣｌ３）ｃｍ−１：３６０９および３５５０（ＯＨ），１７３５（ＯＡｃ）．
ＨＲＭＳ  ｍ／ｚ：３６９．２４０３［（Ｍ＋Ｎａ）＋，Ｃ２２Ｈ３４Ｏ３Ｎａ  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ３６９．２４００］．【００７５】
（工程９）
＜ヒドロキシアセテート（１１）からオキソアセテート（１２）を合成する工程＞
窒素気流中、ヒドロキアセテート（１１）３２０ｍｇ（０．９２ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン６ｍＬと無水ジメチルスルホキシド３ｍＬの混合溶液に、室温で２―ヨードキシ安息香酸５１７ｍｇ（１．８５ｍｍｏｌ）を数回に分けて加え、室温で４０分間反応させた後、水を加えて反応を停止させた。有機物を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥後、溶媒を留去した。それにより得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを使用して酢酸エチル／ヘキサン（１２／８８容積比）混合溶媒を溶出用溶媒として用いて精製し、無色油状物質２５４ｍｇ（１２）［ヒドロキアセテート（１１）に対する収率９０％］を得た。【００７６】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．０８（６Ｈ，ｓ，ｇｅｍ−Ｍｅ），１．４４（２Ｈ，ｍ，２−Ｈ２），１．６０（３Ｈ，ｓ，５−Ｍｅ），１．６７（２Ｈ，ｍ，３−Ｈ２），１．８７（３Ｈ，ｓ，１３−Ｍｅ），１．９１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１Ｈｚ，９−Ｍｅ），１．９６（２Ｈ，ｂｒ  ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，４−Ｈ２），２．０６（３Ｈ，ｓ，ＯＡｃ），３．３３（２Ｈ，ｓ，８−Ｈ２），４．７２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，１５−Ｈ２），５．５８（１Ｈ，ｂｒ  ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，１４−Ｈ），５．９１（１Ｈ，ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１０−Ｈ），６．２０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，１２−Ｈ），６．５１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１および１５．５Ｈｚ，１１−Ｈ）．
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１２．６７，１７．７５，１８．７８，２１．００（Ｃ×２），２８．７４（Ｃ×２），３１．１２，３３．２６，３８．８４，５６．１９，６１．２３，１２４．２５，１２５．１５，１２９．１８，１２９．２９，１３２．７５，１３５．２７，１３８．９３，１４３．１９，１７１．００，２０８．８７．
ＩＲＶｍａｘ（ＣＨＣｌ３）ｃｍ−１：１７３４（ＯＡｃ），１６８８（ｃｏｎｊ．ＣＯ）．
ＨＲＭＳ  ｍ／ｚ：３６７．２２４５［（Ｍ＋Ｎａ）＋，Ｃ２２Ｈ３２Ｏ３Ｎａ  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ３６７．２２４４］．【００７７】
（工程１０）
＜シロキシエステル（７）からジオール（１３）を合成する工程＞
窒素気流中、水素化アルミニウムリチウム４２ｍｇ（１．１１ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル懸濁液（１５ｍＬ）に、０℃でシロキシエステル（７）５１０ｍｇ（１．１１ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル溶液（５ｍＬ）を加え、０℃で１０分間反応させた後、水を少しずつ加えて反応を停止させた。ジエチルエーテル層を乾燥後、溶媒を留去して得られた粗生成物を無水テトラヒドロフラン１０ｍＬに溶解し、窒素気流中、室温でフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムの１．０Ｍテトラヒドロフラン溶液１．４４ｍＬ（１．４４ｍｍｏｌ）を加えて、３５℃で１時間半反応させた後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて反応を停止させた。有機物を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥後、溶媒を留去した。それにより得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを使用して酢酸エチル／ヘキサン（１／３容積比）混合溶媒を溶出用溶媒として用いて精製し、無色油状物質２８１ｍｇ（１３）［シロキシエステル（７）に対する収率８３％］を得た。【００７８】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．００および１．１１（ｅａｃｈ  ３Ｈ，ｓ，ｇｅｍ−Ｍｅ），１．４３（２Ｈ，ｍ，２−Ｈ２），１．５６（２Ｈ，ｍ，３−Ｈ２），１．８５（３Ｈ，ｓ，１３−Ｍｅ），１．８７（３Ｈ，ｓ，５−Ｍｅ），１．９０（３Ｈ，ｓ，９−Ｍｅ），１．９５（２Ｈ，ｂｒ  ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，４−Ｈ２），２．２７（１Ｈ，ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１４Ｈｚ，８−Ｈ），２．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５および１４Ｈｚ，８−Ｈ），４．３０（２Ｈ，ｂｒ  ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，１５−Ｈ２），４．４１（１Ｈ，ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，７−Ｈ），５．６７（１Ｈ，ｂｒ  ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，１４−Ｈ），６．０４（１Ｈ，ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１０−Ｈ），６．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，１２−Ｈ），６．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１および１５．５Ｈｚ，１１−Ｈ）．【００７９】
（工程１１）
＜ジオール（１３）からオキソアルコール（１４）を合成する工程＞
窒素気流中、ジオール（１３）２８１ｍｇ（０．９２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン０．３９ｍＬ（２．８ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン溶液（８ｍＬ）に、０℃でクロロトリエチルシラン０．１７ｍＬ（１．０ｍｍｏｌ）を加え、０℃で５分間反応させた後、水を加えて反応を停止させた。有機物を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥後、溶媒を留去して得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを使用して酢酸エチル／ヘキサン（１／３容積比）混合溶媒を溶出用溶媒として用いて精製した。それにより得られたモノシリルエーテル３５３ｍｇ（０．８４ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン６ｍＬおよび無水ジメチルスルホキシド３ｍＬに溶解し、窒素気流中、室温で２−ヨードキシ安息香酸４７２ｍｇ（３．５７ｍｍｏｌ）を数回に分けて加え、室温で３０分間反応させた後、水を加えて反応を停止した。有機物を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥後、溶媒を留去して得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを使用して酢酸エチル／ヘキサン（５／９５容積比）混合溶媒を溶出用溶媒として用いて精製した。それにより得られたオキソシリルエーテル２３８ｍｇ（０．５７ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン７ｍＬに溶解し、窒素気流中、０℃で酢酸の１．０Ｍテトラヒドロフラン溶液０．６９ｍＬ（０．６９ｍｍｏｌ）およびフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムの１．０Ｍテトラヒドロフラン溶液０．６９ｍＬ（０．６９ｍｍｏｌ）を加えて、室温で３０分間反応させた後、水を加えて反応を停止させた。有機物を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥後、溶媒を留去した。それにより得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを使用して酢酸エチル／ヘキサン（１／２容積比）混合溶媒を溶出用溶媒として用いて精製し、黄色油状物質９２ｍｇ（１４）［ジオール（１３）に対する収率３３％］を得た。【００８０】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．００（６Ｈ，ｓ，ｇｅｍ−Ｍｅ），１．４４（２Ｈ，ｍ，２−Ｈ２），１．６０（３Ｈ，ｓ，５−Ｍｅ），１．６７（２Ｈ，ｍ，３−Ｈ２），１．８４（３Ｈ，ｓ，１３−Ｍｅ），１．９１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１Ｈｚ，９−Ｍｅ），１．９６（２Ｈ，ｂｒ  ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，４−Ｈ２），３．３３（２Ｈ，ｓ，８−Ｈ２），４．３０（２Ｈ，ｂｒ  ｄｄ，Ｊ＝４および６．５Ｈｚ，１５−Ｈ２），５．６６（１Ｈ，ｂｒ  ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１４−Ｈ），５．９１（１Ｈ，ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１０−Ｈ），６．２０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，１２−Ｈ），６．４８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１および１５．５Ｈｚ，１１−Ｈ）．  
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１２．５９，１７．７５，１８．８０，２１．０１，２８．７７（Ｃ×２），３１．１３，３３．２８，３８．８７，５６．２２，５９．４８，１２４．６０，１２９．３２（Ｃ×２），１２９．７５，１３２．２９，１３５．２７，１３６．７６，１４３．２２，２０９．０１．
ＩＲＶｍａｘ（ＣＨＣｌ３）ｃｍ−１：３６０６および３４７４（ＯＨ），１６８８（ｃｏｎｊ．ＣＯ）．
ＨＲＭＳ  ｍ／ｚ：３２５．２１３９［（Ｍ＋Ｎａ）＋，Ｃ２０Ｈ３０Ｏ２Ｎａ  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ３２５．２１３８］【００８１】
（白血病細胞の分化誘導能の測定）
白血病細胞には分化能があり、分化誘導因子の作用により単球、顆粒球、赤血球、リンパ球等に分化誘導されることが知られている。ＨＬ−６０細胞は、急性前骨髄性白血病由来の細胞株であり、分化誘導因子の作用により顆粒球（好中球）へと分化するとＮＢＴ（ｎｉｔｒｏ  ｂｌｕｅ  ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ）を還元する活性酸素生成能が上昇する。そこで、ＮＢＴ還元能を調べることによって、本発明の化合物が白血病細胞の分化誘導に与える影響を調べた。なお、ＮＢＴ還元能の測定は、細胞をＮＢＴで処理してホルマザン沈殿を生じさせ、青色に染色した細胞をカウントすることにより行った。【００８２】
上記工程９および工程１１で製造した化合物（１２）及び（１４）（以下、それぞれ７−ヒドロキシレチノールおよび７−ヒドロキシレチノールのアセチル体という。）を、それぞれエタノールに溶解し、エタノールにて所定の濃度となるように希釈した。この溶液を培地に対して１／５００量添加し、目的終濃度の２倍濃度被験物質添加培地を調製した。溶媒対照として、エタノールを培地に１／５００量添加し、２倍溶媒対照添加培地（エタノール終濃度０．２％）を調製した。これらは用時調製した。【００８３】
ＨＬ−６０細胞は、培地を用いて起眠し、ＣＯ２インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ２、湿潤、以下同様）で浮遊培養した。継代および拡大培養し、試験に用いた。次に、２倍被験物質添加培地および２倍溶媒対照添加培地を、９６ウェルプレートの各ウェルに５０μＬ添加した後、ＨＬ−６０細胞を各ウェルに２×１０４ｃｅｌｌｓ／５０μＬで播種し、１倍溶媒対照濃度とし（ＥｔＯＨ終濃度０．１％）、ＣＯ２インキュベーターで５日間培養し、被験物質処理した。各ウェルにＮＢＴ溶液１００μＬ、ＴＰＡ溶液２μＬを添加し、３７℃で３０分間インキュベートした。次に１，２００ｒｐｍで、５分間遠心し、細胞をＤＰＢＳ２００μＬに再懸濁した。細胞懸濁液５０μＬを新たな９６ウェルプレートに移し、１，２００ｒｐｍで１分遠心した後、ＫＥＹＥＮＣＥ  ＢＺ−Ｘ７１０で各ウェル明視野撮影し、視野中の全細胞数およびＮＢＴ陽性細胞数をカウントし、ＮＢＴ陽性細胞率（ＮＢＴ陽性細胞数／全細胞数×１００）を算出した。ＮＢＴ染色により顆粒球を染色し、ＮＢＴ陽性率（顆粒球分化率）を定量した。【００８４】
その結果を表１および図１に示す。ＨＬ−６０細胞のＮＢＴ陽性細胞率は、７−ヒドロキシレチノールおよび７−ヒドロキシレチノールのアセチル体のそれぞれについて用量依存的に増加することが分かった。【００８５】
【表１】
0006696060.tif 000019
【産業上の利用可能性】
【００８６】
本発明に係る７−ヒドロキシレチノールおよびその誘導体は、少なくとも白血病細胞の分化誘導能を有していることから、レチノールと同様な生理活性を有し、例えば、夜盲症、くる病、乾癬、白血病若しくは乾燥眼炎を治療するための、または感染に対する抵抗力を付与し、身体の成長並びに骨および／または歯の発育を促進するための医薬品用途に用いることができる。本発明の７−ヒドロキシレチノールおよびその誘導体は、７位がヒドロキシ化又はオキソ化されているためレチノールよりも光安定性が向上しており、化粧品、特に皮膚外用剤としての用途に適していると考えられる。
【要約】
下記式（Ｉ）：
0006696060.tif 000028
または式（ＩＩ）：
0006696060.tif 000029
（式中、Ｒ１、Ｒ２は、互いに独立して、水素原子、炭素数１〜１２のアルキル基、炭素数２〜１０のアルケニル基、炭素数２〜１０のアルキニル基、または炭素数２〜３０のアシル基を示す。）で表される化合物またはその塩からなる、医薬品および化粧品として有用な、新規ビタミンＡ誘導体およびその製造方法を提供する。【図１】
0006696060.tif 000030