(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための組成物であって、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の生物学的に純粋な培養物、及び、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の生物学的に純粋な培養物、を含み、
前記植物の種子、前記植物の根又は前記植物の周囲の土壌への当該組成物の適用は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす、
組成物。
【請求項２】
前記組成物は、液体の形態であり、
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在する、
請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記組成物は、粉剤、乾燥水和性粉末剤、展延性粒剤又は乾燥水和性粒剤の形態であり、
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、１．０×１０８ＣＦＵ／ｇから１．０×１０１２ＣＦＵ／ｇの量で存在する、
請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記組成物は、油分散体の形態であり、
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在する、
請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
植物の成長に利益をもたらす及び／又は植物における病原体感染に対する保護を与えるのに適切な量で存在する、微生物学的、生物学的又は化学的な、殺虫剤、殺真菌剤、殺線虫剤、殺細菌剤、除草剤、植物抽出物、植物成長調整剤又は肥料のうちの１つ又は組み合わせを更に含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための組成物で被覆された植物種子であって、
前記組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の生物学的に純粋な培養物の胞子、及び、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の生物学的に純粋な培養物の胞子、を含む、
植物種子。
【請求項７】
植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法であって、
当該方法は、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の生物学的に純粋な培養物、及び、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の生物学的に純粋な培養物、
を含む組成物を、植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌に送達することを含み、
前記組成物の送達は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす、
方法。
【請求項８】
植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法であって、
当該方法は、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の生物学的に純粋な培養物を含む第１の組成物、及び、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の生物学的に純粋な培養物を含む第２の組成物、
を、植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌に送達することを含み、
前記組成物の送達は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす、
方法。
【請求項９】
植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法であって、
当該方法は、適切な成長培地中に植物種子を植え付けることを含み、
前記植物種子は、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の生物学的に純粋な培養物の胞子、及び、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の生物学的に純粋な培養物の胞子、
を含む組成物で被覆されており、
前記バチルス・ベレゼンシスＲＴＩ３０１及び前記バチルス・サブチリスＲＴＩ４７７は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすために適切な量で存在する、
方法。
【請求項１０】
植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための組成物で被覆された植物種子であって、
前記組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の生物学的に純粋な培養物の胞子、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の生物学的に純粋な培養物の胞子、及びビフェントリン殺虫剤を含む、
植物種子。
【請求項１１】
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の生物学的に純粋な培養物、及び、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の生物学的に純粋な培養物を含む第１の組成物、
微生物学的、生物学的又は化学的な、殺虫剤、殺真菌剤、殺線虫剤、殺細菌剤、除草剤、植物抽出物、植物成長調整剤又は肥料のうちの１つ又は組み合わせを含む第２の組成物、並びに、
植物の枝葉、植物の樹皮、植物の果実、植物の花、植物の種子、植物の根、植物の切断片、植物の移植片、植物のカルス組織、植物の周囲の土壌若しくは成長培地、土壌若しくは成長培地中に植物の種子を播種する前の土壌若しくは成長培地、又は、土壌若しくは成長培地中に植物、植物切断片、植物移植片若しくは植物カルス組織を植え付ける前の土壌若しくは成長培地に、前記第１の組成物及び前記第２の組成物の組み合わせを、植物の成長に利益をもたらすのに適切な量で送達するための説明書、を含み、
前記第１の組成物及び前記第２の組成物は、別々に包装されている、
製品。
【請求項１２】
前記殺虫剤は、チアメトキサム、ピレスロイド、ビフェントリン、テフルトリン、ゼータ−シペルメトリン、有機リン酸塩、クロルエトキシホス、クロルピリホス、テブピリンホス、シフルトリン、フィプロール、フィプロニル、ニコチノイド又はクロチアニジンのうちの１つ又は組み合わせである、請求項１１に記載の製品。
【請求項１３】
前記第１の組成物は、液体の形態であり、
前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及び前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の各々は、１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在する、
請求項１１に記載の製品。
【請求項１４】
前記第１の組成物は、粉剤、乾燥水和性粉末剤、展延性粒剤又は乾燥水和性粒剤の形態であり、
前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及び前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の各々は、１．０×１０８ＣＦＵ／ｇから１．０×１０１２ＣＦＵ／ｇの量で存在する、
請求項１１に記載の製品。
【請求項１５】
前記第１の組成物は、油分散体の形態であり、
前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及び前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の各々は、１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在する、
請求項１１に記載の製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、２０１４年１２月２９日に提出された米国仮特許出願第６２／０９７２８７号の優先権の利益を主張しており、その開示はその全体において参照によりここに組み込まれる。
【０００２】
（技術分野）
本開示の主題は、植物の成長に利益をもたらす及び植物病害を治療するために、植物、植物種子及び植物の周囲の土壌に適用する単離された微生物株を含む組成物に関する。特定の場合には、微生物株は、抗菌特性を有する化学活性剤と組み合わせて、植物、植物種子及び植物周囲の土壌に送達される。
【背景技術】
【０００３】
植物の成長及び健康に有益な効果を有する多くの微生物が知られており、それらは土壌中に存在する、特異的には根域中で植物と関連して生息する（植物成長促進根圏細菌“ＰＧＰＲ”）、又は植物内に内生植物として存在する。それらの有益な植物成長促進特性は、窒素固定、鉄キレート化、リン酸塩可溶化、非有益な微生物の阻害、有害生物への耐性、誘導全身抵抗性（ＩＳＲ）、全身獲得抵抗性（ＳＡＲ）、有用な土壌有機物を増加させるための土壌中の植物材料の分解、並びに、植物成長、発達及び干ばつ等の環境ストレスに対する応答を刺激するインドール酢酸（ＩＡＡ）、アセトイン及び２，３−ブタンジオール等の植物ホルモンの合成を含む。更に、これらの微生物は、前駆体分子である１−アミノシクロプロパン−１−カルボキシレート（ＡＣＣ）を分解することにより植物のエチレンストレス応答を妨害することができ、それによって植物成長を刺激し、果実熟成をゆっくりとさせる。これらの有益な微生物は、土壌の品質、植物成長、収量及び作物の品質を改善することができる。種々の微生物は、植物病害を防除するのに有用であるような生物学的活性を示す。そのような生物農薬（生物及びこれらの生物によって天然に産生される化合物）は、合成肥料及び殺虫剤よりも安全で生分解性が高い。
【０００４】
これらに限定されないが、ボトリチス属種（Botrytis spp.）（例えばボトリチス・シネレア（Botrytis cinerea））、フザリウム属種（Fusarium spp.）（例えばフザリウム・オキシスポラム（F. oxysporum）及びフザリウム・グラミネアラム（F. graminearum））、リゾクトニア属種（Rhizoctonia spp.）（例えばリゾクトニア・ソラニ（R. solani））、マグナポルテ属種（Magnaporthe spp.）、マイコスフェレラ属種（Mycosphaerella spp.）、プッチニア属種（Puccinia spp.）（例えばプッチニア・レコンディタ（P. recondita））、フィトフトラ属種（Phytophthora spp.）及びファコプソラ属種（Phakopsora spp.）（例えばファコプソラ・パキリジ（P. pachyrhizi）を含む真菌植物病原体は、農業及び園芸産業における経済的損失を引き起こす可能性のある植物病害虫の１つ目の種類である。真菌の植物病原体を防除するために化学物質を使用することができるが、化学物質の使用は、高コスト、効率性の欠如、菌類の耐性株の出現及び望ましくない環境影響を含む不利益を受ける。更に、そのような化学的処理は無差別である傾向があり、処理の標的とされる植物病原体に加えて有益な細菌、真菌及び節足動物に悪影響を及ぼし得る。植物病害虫の２つ目の種類は細菌病原体であり、エルウィニア属種（Erwinia spp.）（エルウィニア・クリサンテミ（Erwinia chrysanthemi）等）、パントエア属種（Pantoea spp.）（パントエア・シトレア（P. citrea）等）、キサントモナス属種（Xanthomonas spp.）（キサントモナス・カンペストリス（Xanthomonas campestris）等）、シュードモナス属種（Pseudomonas spp.）（シュードモナス・シリンゲ（P. syringae）等）及びラルストニア属種（Ralstonia spp.）（ラルストニア・ソラナケアルム（R. soleacearum）等）を含むがこれらに限定されず、農業及び園芸産業における経済的損失を引き起こす。病原性真菌と同様に、これらの細菌病原体を治療するための化学物質の使用は不利益を受ける。ウイルス及びウイルス様生物は、防除が困難であるが細菌性微生物が誘導全身抵抗性（ＩＳＲ）を介して植物に抵抗性を与えることができる３つ目の種類の植物病原性物質を含む。従って、病原性真菌、ウイルス及び細菌を防除するためのバイオ肥料及び／又はバイオ殺虫剤として適用され得る微生物が望ましく、農業の持続可能性を改善することが強く求められている。植物病原体の最後の種類は、植物病原性線虫及び昆虫が含まれ、これらは植物の重篤な損傷及び損失を引き起こし得る。
【０００５】
バチルス種（Bacillus）のうちのいくつかのものは生物防除株として報告されており、いくつかは市販の製品に適用されている（Joseph W. Kloepperら、２００４年、Phytopathology Vol. 94, No. 11, 1259-1266頁）。例えば、現在市販されている生物防除製品に使用されている菌株は、ＢＡＹＥＲ  ＣＲＯＰ  ＳＣＩＥＮＣＥによって製造されＳＯＮＡＴＡ及びＢＡＬＬＡＤ−ＰＬＵＳ中の活性成分として使用されるバチルス・プミルス（Bacillus pumilus）ＱＳＴ２８０８株、ＢＡＹＥＲ  ＣＲＯＰ  ＳＣＩＥＮＣＥによって製造されＹＩＥＬＤＳＨＩＥＬＤ中の活性成分として使用されるバチルス・プミルス（Bacillus pumilus）ＧＢ３４株、ＢＡＹＥＲ  ＣＲＯＰ  ＳＣＩＥＮＣＥによって製造されＳＥＲＥＮＡＤＥ中の活性成分として使用されるバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＱＳＴ７１３株、ＨＥＬＥＮＡ  ＣＨＥＭＩＣＡＬ  ＣＯＭＰＡＮＹによって製造されＫＯＤＩＡＫ及びＳＹＳＴＥＭ３中の活性成分として使用されるバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＧＢＯ３株を含む。バチルス・チューリンゲンシス（Bacillus thuringiensis）及びバチルス・フィルムス（Bacillus firmus）の様々な株が線虫及びベクター昆虫に対する生物防除剤として適用されており、これらの株はＢＡＹＥＲ  ＣＲＯＰ  ＳＣＩＥＮＣＥで製造されるＮＯＲＴＩＣＡ及びＰＯＮＣＨＯ−ＶＯＴＩＶＯを含む多数の市販の生物防除製品の基礎として機能する。更に、市販の生物刺激製品中に現在使用されているバチルス（Bacillus）株は、ＡＢｉＴＥＰ  ＧｍｂＨにより製造されるＲＨＩＺＯＶＩＴＡＬ  ４２中の活性成分として使用されるバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＦＺＢ４２株、更にはＪＨＢｉｏｔｅｃｈ  Ｉｎｃ．により製造されるＦＵＬＺＹＭＥ等の生物刺激製品中の発酵抽出物を含む細胞全体として含まれている種々の他のバチルス・サブチリス（Bacillus subtilus）種を含む。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ここに開示される主題は、植物の成長に利益をもたらし植物の病気を治療する、微生物組成物及びそれらの使用方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための組成物が提供される。組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、を含み、植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌への組成物の適用は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす。
【０００８】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法が提供される。方法は、植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌に組成物を送達すること（ｄｅｌｉｖｅｒｉｎｇ）を含み、組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、を含み、組成物の送達は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす。
【０００９】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法が提供される。方法は、植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌に、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物を含む第１の組成物、及び、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物を含む第２の組成物の組み合わせを送達することを含み、組み合わせの送達は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす。
【００１０】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための組成物で被覆された植物種子が提供される。組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、及び、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、を含む。
【００１１】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための組成物で被覆された植物種子が提供される。組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、及び、ビフェントリン殺虫剤、を含む。
【００１２】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法が提供される。方法は、適切な成長培地中に植物の種子を植え付けることを含み、種子は組成物で被覆されており、組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、及び、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、を含み、それらは、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすために適切な量で存在する。
【００１３】
１つの実施の形態では、植物の成長に利益をもたらすための組成物が提供される。組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、ビフェントリン殺虫剤、を含む。
【００１４】
１つの実施の形態では、植物の成長に利益をもたらすための組成物が提供される。組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、ビフェントリン殺虫剤、を含み、組成物は、液体肥料と相溶性を有する（ｃｏｍｐａｔｉｂｌｅ）製剤中にある。
【００１５】
１つの実施の形態では、植物の成長に利益をもたらすための組成物が提供される。組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、ルピナス・アルブス・ドーセ（Lupinus albus doce）由来の抽出物、ＢＬＡＤポリペプチド又はＢＬＡＤポリペプチドの断片のうちの１つ又は組み合わせを含む殺真菌剤、を含む。
【００１６】
１つの実施の形態では、製品が提供される。製品は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物を含む第１の組成物、微生物学的、生物学的又は化学的な殺虫剤、殺真菌剤、殺線虫剤、殺細菌剤、除草剤、植物抽出物、植物成長調整剤又は肥料のうちの１つ又は組み合わせを含む第２の組成物、並びに、任意にて、植物の枝葉、植物の樹皮、植物の果実、植物の花、植物の種子、植物の根、植物の切断片、植物の移植片、植物のカルス組織、植物の周囲の土壌若しくは成長培地、土壌若しくは成長培地中に植物の種子を播種する前の土壌若しくは成長培地、又は、土壌若しくは成長培地中に植物、植物切断片、植物移植片若しくは植物カルス組織を植え付ける前の土壌若しくは成長培地に、第１の組成物及び第２の組成物の組み合わせを、植物の成長に利益をもたらすために適切な量において送達するための説明書、を含み、第１の組成物及び第２の組成物は、別々に包装されている。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】本発明の１以上の実施の形態による、２つのバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）参照株であるバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＦＺＢ４２及びバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＴｒｉｇｏＣｏｒ１４４８についての対応領域と比較した、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株に見られる独特なランチビオティック生合成オペロンを取り囲む及び含むゲノム機構の模式図である。
【図２Ａ】図２Ａは、１３日間の成長後の抽出された小麦植物の画像であり、コントロール植物を示す図である。この画像は、本発明の１以上の実施の形態による、小麦における早期植物成長についてのバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株のプラスの効果を示す。
【図２Ｂ】図２Ｂは、１３日間の成長後の抽出された小麦植物の画像であり、ＲＴＩ４７７株を接種した植物を示す図である。この画像は、本発明の１以上の実施の形態による、小麦における早期植物成長についてのバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株のプラスの効果を示す。
【図３Ａ】図３Ａは、バチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＲＴＩ４７２株の成育箇所（ｌａｗｎ）上にスポットされたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株を示す画像である。この画像は、本発明の１以上の実施の形態による、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株とバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株との間の調和性を示す。
【図３Ｂ】図３Ｂは、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株の成育箇所上にスポットされたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株を示す画像である。この画像は、本発明の１以上の実施の形態による、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株とバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株との間の調和性を示す。
【図４Ａ】図４Ａは、本発明の１以上の実施の形態による、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株の形態を示す画像である。
【図４Ｂ】図４Ｂは、本発明の１以上の実施の形態による、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株の形態を示す画像である。
【図５Ａ】図５Ａは、コントロール植物を示す。図５Ａは、本発明の１以上の実施の形態による、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１＋バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の組み合わせでの大豆種子の接種及び８日間の成長後の抽出からもたらされる早期植物成長についてのプラスの効果を示す画像である。
【図５Ｂ】図５Ｂは、１０６ｃｆｕ／ｍｌでＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７（比率３：１）を接種した植物を示す。図５Ｂは、本発明の１以上の実施の形態による、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１＋バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の組み合わせでの大豆種子の接種及び８日間の成長後の抽出からもたらされる早期植物成長についてのプラスの効果を示す画像である。
【図６】本発明の１以上の実施の形態による、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）を含む微生物種により産生される従来に報告されたフェンギシン型及びデヒドロキシフェンギシン型環状リポペプチドと、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１分離株及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７分離株の１つ又は両方により産生される新しく同定された（太字で示す）フェンギシン型及びデヒドロキシフェンギシン型分子との両方を示す模式図である。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
特許請求の範囲を含む本出願で使用される場合、用語“ａ”、“ａｎ”及び“ｔｈｅ”は、“１以上（ｏｎｅ  ｏｒ  ｍｏｒｅ）”を指す。従って、例えば、“植物（ａ  ｐｌａｎｔ）”の言及は、文脈が明らかに矛盾していない限り、複数の植物を含む。
【００１９】
本明細書及び特許請求の範囲を通して、用語“含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）”、“含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）”及び“含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）”は、文脈が他の意味を必要とする場合を除いて、非排他的意味で使用される。同様に、用語“含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）”及びその文法上の変形は非限定的であることを意図しており、リスト中の項目の列挙は、リストされた項目に置換又は追加可能な他の同様の項目を排除するものではない。
【００２０】
本明細書及び特許請求の範囲では、１以上の数字又は数値範囲に関連して使用される時の用語“約”は、範囲内の全ての数字を含む全てのそのような数字又は数値範囲を指すと理解されるべきであり、記載された数値の上下の境界を拡張することによりその範囲を変更する。終点による数値範囲の記載は、例えばその範囲内に包含される端数を含む全体整数である全ての数字を含み（例えば、１から５の記載は１、２、３、４及び５、並びにそれらの端数、例えば１．５、２．２５、３．７５、４．１等を含む）、及びその範囲内の任意の範囲を含む。
【００２１】
本明細書及び特許請求の範囲では、用語“代謝物”及び“化合物”は、ＲＴＩ３０１株又は他のバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）株により産生される抗菌活性を有する化合物に関連して使用される時、互換的に使用される。
【００２２】
本発明の１以上の実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための組成物及び方法が提供される。１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための組成物が提供され、組成物は２以上の調和性を有する微生物を含み、抗菌特性を有する第１の微生物は、土壌中に存在する又は植物と共同して生息する内因性微生物の増殖及び発達を阻害することによりニッチを作り出すために用いられる。第２の微生物は植物の成長及び／又は植物の健康に有益な特性を持っており、第１の微生物の増殖と調和性を有する。第２の微生物は、定着し、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすのに十分な量で存在する。植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌への組成物の適用は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす。植物の成長及び／又は植物の健康に有益な第２の微生物の特性は、植物収量の増加、苗木の活力の改善、根の発達の改善、植物の成長の改善、植物の健康の改善、外観の改善、植物病原体に対する抵抗性の改善、病原体感染の減少又はそれらの組み合わせのうちの１つを含む。植物病原体は、昆虫、線虫、植物病原性真菌又は植物病原性細菌のうちの１つ又は組み合わせを含み得る。
【００２３】
別の実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法が提供される。方法は、植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌に２以上の調和性を有する微生物を含む組成物を送達することを含む。組成物は、抗菌特性を有し、周囲の土壌中に存在する又は植物と共同して生息する内因性微生物の増殖を阻害するのに適切な量で存在する第１の微生物の少なくとも１つの生物学的に純粋な培養物を含む。これは、第２の微生物が確立するためのニッチを確立するためである。組成物はまた、植物の成長及び／又は植物の健康に有益な特性を有する第２の微生物の少なくとも１つの生物学的に純粋な培養物を含み、第２の微生物の増殖は第１の微生物の増殖と調和性を有し、第２の微生物は、定着し、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすのに適切な量で存在する。植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌への組成物の送達は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす。
【００２４】
第２の微生物の確立プロセスを促進するために、第２の微生物の増殖は第１の微生物の増殖よりも速くすることができ、第２の微生物はスウォーミング及び高運動性の表現型により特徴づけることができる。
【００２５】
組成物及び方法は、例えば、単子葉植物、双子葉植物、穀物、コーン、スイートコーン、ポップコーン、シードコーン、サイレージコーン、フィールドコーン、米、小麦、大麦、ソルガム、アスパラガス、ベリー、ブルーベリー、ブラックベリー、ラズベリー、ローガンベリー、ハックルベリー、クランベリー、グーズベリー、エルダーベリー、カラント、カンベリー（Ｃａｎｅｂｅｒｒｙ）、ブッシュベリー、アブラナ科野菜、ブロッコリー、キャベツ、カリフラワー、芽キャベツ、コラード、ケール、マスタードグリーン、コールラビ、ウリ科野菜、キュウリ、カンタロープ、メロン、マスクメロン、スカッシュ、スイカ、カボチャ、ナス、球根野菜、玉ネギ、ニンニク、エシャロット、柑橘類、オレンジ、グレープフルーツ、レモン、タンジェリン、タンジェロ、ブンタン、フルーツ野菜、ペッパー、トマト、グラウンドチェリー、トマティロ、オクラ、ブドウ、ハーブ／スパイス、葉野菜、レタス、セロリ、ホウレン草、パセリ、ラディッキオ、マメ科植物／野菜（多肉の乾燥した豆（ｂｅａｎ）及び鞘に入った豆（ｐｅａ））、インゲン豆（又はソラ豆）、サヤインゲン、スナップ豆、シェルビーンズ、大豆、ドライビーンズ、ガルバンゾー豆、リマ豆、エンドウ豆、ヒヨコ豆、スプリットピー、レンズ豆、油糧種子作物、キャノーラ、キャスター、ココナッツ、綿、亜麻、オイルパーム、オリーブ、ピーナッツ、菜種、ベニバナ、ゴマ、ヒマワリ、大豆、ナシ状果類、リンゴ、クラブアップル、ナシ、マルメロ、サンザシ（Ｍａｙｈａｗ）、根／塊茎及び球茎野菜、ニンジン、ジャガイモ、サツマイモ、キャッサバ（Ｃａｓｓａｖｅ）、ビーツ、ショウガ、西洋ワサビ、ダイコン、朝鮮人参、カブ、核果類、アプリコット、チェリー、ネクタリン、桃、プラム、プルーン、イチゴ、ツリーナッツ、アーモンド、ピスタチオ、ピーカン、クルミ、ハシバミ、クリ（Ｃｈｅｓｔｎｕｔ）、カシュー、ブナ（Ｂｅｅｃｈｎｕｔ）、バタグルミ（Ｂｕｔｔｅｒｎｕｔ）、マカダミア、キウイ、バナナ、（ブルー）アガペ、草（Ｇｒａｓｓ）、芝草（Ｔｕｒｆ  ｇｒａｓｓ）、観葉植物、ポインセチア、広葉樹の伐採片（Ｈａｒｄｗｏｏｄ  ｃｕｔｔｉｎｇｓ）、クリ、オーク、カエデ、サトウキビ又はテンサイを含む任意の種類の植物での使用を含む。
【００２６】
本発明の組成物及び方法における使用のための抗菌特性を有する第１の微生物及び植物の成長及び／又は植物の健康に有益な特性を有する第２の微生物は、バチルス属種（Bacillus spp.）の微生物であり得る。用語“拮抗性”及び“抗菌性”は、本明細書及び特許請求の範囲の目的のためにここでは互換的に使用される。第１の微生物はバチルス属種（Bacillus spp.）株であり得、バチルス属種（Bacillus spp.）株はバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）であり得る。植物の成長及び／又は植物の健康に有益な特性を有する第２の微生物は、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）であり得る。植物の成長及び／又は植物の健康に有益な特性は、植物の病原体感染に対する保護を与える及び／又は植物の病原体感染の治療又は防除をするための、成長促進特性及び拮抗特性のうちの１つ又は両方であり得る。
【００２７】
本発明の組成物及び方法における使用のための抗菌特性を有する第１の微生物及び植物の成長及び／又は植物の健康に有益な特性を有する第２の微生物の例を以下に記載する。例えば、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）種に属すると同定された植物関連細菌が、ノースカロライナ州で栽培されたモリンガオレイフェラの根から単離されて、続いて植物成長促進及び植物病原体拮抗特性について試験された。より具体的には、単離された細菌株は、高度に保存された１６Ｓ  ｒＲＮＡ及びｒｐｏＢ遺伝子の配列分析により、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）の新しい株であると同定された（実施例１参照）。新しい細菌分離株（“バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７”と称する）の１６Ｓ  ＲＮＡ配列は、３つの他の既知の菌株である、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）、バチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＮＳ６株（ＫＦ１７７１７５）及びバチルス・サブチリス亜種サブチリス（Bacillus subtilis subsp. subtilis）ＤＳＭ  １０株（ＮＲ＿０２７５５２）の１６Ｓ  ｒＲＮＡ遺伝子配列と同一であると判定された。更に、ＲＴＩ４７７のｒｐｏＢ配列は、既知であるバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＰＹ７９株（ＣＰ００６８８１）若しくはバチルス・サブチリス亜種サブチリス（Bacillus subtilis subsp. subtilis）６０５１−ＨＧＷ株（ＣＰ００３３２９）（９９％配列同一性；９ｂｐの差異）、又はバチルス・サブチリス亜種サブチリス（Bacillus subtilis subsp. subtilis）ＢＡＢ−１ａ株（ＣＰ００４４０５）（９９％配列同一性；１０ｂｐの差異）と最も高いレベルの配列類似性を有することが決定された。ＤＮＡレベルでのｒｐｏＢ遺伝子の配列の相違は、ＲＴＩ４７７がバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）の新しい株であることを示している。バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株は、米国バージニア州マナッサスのアメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）における特許手続きのための微生物寄託の国際的承認に関するブダペスト条約の条件の下、２０１４年４月１７日に寄託され、特許受託番号ＰＴＡ−１２１１６７を有する。
【００２８】
配列分析によるバチルス・ベレゼンシスとしての最近分離株の同定
抗菌特性を有する第１の微生物の例として、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）種に属すると同定された植物関連細菌が、ニューヨークのブドウ園で生育するブドウのつるの根圏土壌から単離されて、続いて植物病原体の拮抗特性について試験された。より具体的には、単離された細菌株は、高度に保存された１６Ｓ  ｒＲＮＡ及びｒｐｏＢ遺伝子の配列分析により、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）の新しい株であると同定された（実施例２参照）。新しい細菌分離株（“バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１”と称する）の１６Ｓ  ＲＮＡ配列は、３つの他の既知の菌株である、バチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）のバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＮＳ６株（ＫＦ１７７１７５）、バチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＦＺＢ４２株（ＮＲ＿０７５００５）、及びバチルス・サブチリス亜種サブチリス（Bacillus subtilis subsp. subtilis）ＤＳＭ  １０株（ＮＲ＿０２７５５２）の１６Ｓ  ｒＲＮＡ遺伝子配列と同一であると判定された。ＲＴＩ３０１株のｒｐｏＢ遺伝子配列（配列番号４）は、バチルス・アミロリケファシエンス亜種プランタルム（Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum）ＴｒｉｇｏＣｏｒ１４４８（ＣＰ００７２４４）（９９％配列同一性；３塩基対の差異）、バチルス・アミロリケファシエンス亜種プランタルム（Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum）ＡＳ４３．３（ＣＰ００３８３８）（９９％配列同一性；７塩基対の差異）、バチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＣＣ１７８（ＣＰ００６８４５）（９９％配列同一性；８塩基対の差異）、及びバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＦＺＢ４２（ＣＰ０００５６０）（９９％配列同一性；８塩基対の差異）における同一遺伝子と配列類似性を有することも決定された。ＲＴＩ３０１株は、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）として同定された。ＤＮＡレベルでのｒｐｏＢ遺伝子の配列の相違は、ＲＴＩ３０１がバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）の新しい株であることを示している。バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株は、米国バージニア州マナッサスのアメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）における特許手続きのための微生物寄託の国際的承認に関するブダペスト条約の条件の下、２０１４年４月１７日に寄託され、特許受託番号ＰＴＡ−１２１１６５を有する。［この株は当初「バチルス・アミロリケファシエンスＲＴＩ３０１」という名称で寄託されたが、２０１７年８月１０日に「バチルス・ベレゼンシスＲＴＩ３０１」として再分類された。］
【００２９】
バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株のゲノムの更なる配列分析では、この株が、ランチビオティック生合成に関連する遺伝子を有しており、該生合成のための相同器官（ｈｏｍｏｌｏｇｕｅ）が、密接に関連する他のバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１には欠けていることが明らかとなった（実施例３参照）。これは、図１に示される。図１は、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１に見られる独特なランチビオティック生合成クラスターのゲノム機構と、ＲＴＩ３０１株の下に示されている２つの既知のバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）参照株であるＦＺＢ４２株（中央）及びＴｒｉｇｏＣｏｒ１４４８株（下部）についての対応領域の概略図を示す。ＦＺＢ４２株及びＴｒｉｇｏＣｏｒ１４４８株はこのクラスターに存在する多くの遺伝子を欠いており、存在する多くの遺伝子内において低い程度の配列同一性を有することが図１から観察することができる。ＮＣＢＩにおける非重複（ｎｒ）ヌクレオチドデータベースに対するこのクラスターのＢＬＡＳＴ分析は、Ｂ．アミロリケファシエンス（B. amyloliquefaciens）株に対する５’及び３’フランキング領域と高い相同性（図１の高い％類似性と類似）を示した。しかしながら、ランチペプチド生合成クラスターはＲＴＩ３０１株に独特であり、ＮＣＢＩｎｒデータベース中の任意の従前に配列決定されたＤＮＡと有意な相同性は観察されなかった。このデータは、新たに同定されたＲＴＩ３０１株が独特のランチビオティック生合成経路を有することを示している。
【００３０】
更に、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株のゲノムの更なる配列分析では、この株が抗菌特性を有する分子の産生のための多数の生合成経路に関連する遺伝子を有することが明らかになった。これらには、サブチロシン、サーファクチン、イツリン、フェンギシン、アミロサイクリシン、ジフィシジン、バシリシン、バシロマイシン及びバシラエンについての生合成経路が含まれる。広範囲の抗菌生合成経路を有するＲＴＩ３０１株とは対照的に、ＲＴＩ４７７株の更なる配列分析では、この株が抗菌特性を有する更に限定された分子群についての生合成経路に関連する遺伝子を有することが明らかになった。ＲＴＩ４７７株は、サブチロシン、フェンギシン、サーファクチン、ジフィシジン、バシラエン、バシリシン及びバシロマイシンについての生合成経路を有するが、イツリン、ランチビオティック及びアミロサイクリシンについての完全な生合成経路は観察されなかった。
【００３１】
ＲＴＩ３０１株及びＲＴＩ４７７株の成長促進及び拮抗活性を決定するために実験を行った。種々の条件下での様々な植物におけるバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株の成長促進及び拮抗活性を決定するために行った実験は、ここでは実施例４−６に記載されている。実施例４には、プレートアッセイで測定した主要な植物病原体に対するバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７分離株の拮抗活性を記載する。実施例５には、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７分離株の様々な表現型形質の測定を記載しており、この分離株が急速に増殖し強いスウォーミング表現型を有することを示している。実施例６には、小麦におけるＲＴＩ４７７分離株の成長促進活性を記載する。発芽した小麦の種子をＲＴＩ４７７株の約２×１０７ＣＦＵ／ｍｌの懸濁液中で２日間接種し、続いてポットに植え付けた。１３日成長させた後の抽出した植物の写真を図２に示す。図２Ａはコントロール植物を示し、図２ＢはＲＴＩ４７７を接種した植物を示す。小麦苗木の乾燥重量を測定したところ、総平均乾燥植物で、非接種のコントロールでは３３．３８ｍｇに等しい重量になったのに対し、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株を接種した植物では３５．４１ｍｇに等しい重量になり、ＲＴＩ４７７株で処理した植物では非接種のコントロールよりも乾燥重量で６％増加している。
【００３２】
ＲＴＩ４７７株と同様に、種々の条件下での様々な植物におけるベレゼンシス（velezensis）ＲＴＩ３０１株の成長促進及び拮抗活性を決定するために実験を行った。これらの実験は、ここでは実施例４−５に記載されている。実施例４には、プレートアッセイで測定した主要な植物病原体に対するベレゼンシス（velezensis）ＲＴＩ３０１分離株の拮抗活性を記載する。ＲＴＩ３０１株は、ＲＴＩ４７７株と比較して、広範囲の植物病原体微生物に対して優れた拮抗特性を示した。実施例５には、ベレゼンシス（velezensis）ＲＴＩ３０１分離株の種々の表現型形質の測定を記載する。注目すべきことに、ＲＴＩ３０１株と比較して、ＲＴＩ４７７株はより速く増殖し、強力なスウォーミングの表現型を有する。
【００３３】
バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株と他のバチルス（Bacillus）分離株との調和性は、様々な他の株の成育箇所（ｌａｗｎ）にＲＴＩ３０１株をスポットすることによって試験した。これらのデータは実施例７に記載されている。この実験の結果は、図３Ａ−３Ｂに示される。図３Ａ−３Ｂは、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株とバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株との間の増殖調和性、及びＲＴＩ３０１株と別のバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）株であるアメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）でＰＴＡ−１２１１６６として寄託されているバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＲＴＩ４７２株との間の調和性の欠如を示す画像である。ＲＴＩ３０１株をＲＴＩ４７２株の成育箇所にスポットした場合（図３Ａ）、ＲＴＩ４７２株の増殖について一掃された阻害領域が観察された。対照的に、ＲＴＩ３０１株をＲＴＩ４７７株の成育箇所にスポットした場合（図３Ｂ）、ＲＴＩ４７７株について、最小限の阻害のみであり細胞成育箇所の一掃は観察されなかった。従って、ＲＴＩ３０１株及びＲＴＩ４７７株の増殖は調和性があると結論付けられた。
【００３４】
いかなる特定の作用機序に限定されるものではないが、観察される菌株調和性の差異を説明するために、次のような１つの作用様式が提案される。試験した３つの菌株（即ち、ＲＴＩ３０１、ＲＴＩ４７２及びＲＴＩ４７７）のゲノム配列に基づき、これらの株は全て、拮抗化合物であるバシリシン、バシラエン、ジフィシジン及びバシロマイシンを産生することが予測された。しかしながら、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株の両方はサブチロシンの合成のための遺伝子を有するが、この遺伝子はバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＲＴＩ４７２のゲノムには存在しない。サブチロシンは、類似又は密接に関連する細菌株の増殖を阻害するために細菌によって産生されるタンパク質性毒素の１種であるバクテリオシンである。従って、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１により合成されたサブチロシンは、バチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＲＴＩ４７２の増殖の阻害剤であり得ると仮定された。対照的に、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株は、ＲＴＩ４７７株が自身でサブチロシンを産生し、従って化合物に対して耐性であるため、ＲＴＩ３０１によって阻害されない。
【００３５】
バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株とバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株との間の菌株形態の差異も分析した。これらの菌株の各々の形態を示す画像を、図４において、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１（図４Ａ）及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７（図４Ｂ）として示す。図４Ａ−図４Ｂにおいて示されるバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株のコロニー形態は、運動性となる場合の菌株の挙動における潜在的差異を示す。運動性は、植物関連細菌による根圏コロニー形成にとって重要な特質である。バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１は、輪郭のはっきりした円形のコロニーとして増殖する。対照的に、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７は、ふんわりとしたコロニーとして増殖し、スウォーミング及び運動性を示す形態である。スウォーミング及び運動性は、根圏及び植物根の表面の急速なコロニー形成に関連する表現型である。また、いかなる特定の作用機序に限定されるものではないが、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株の形態に関連した強いスウォーミングの表現型により、この株がバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１よりも根圏でのより効率的なコロニー形成体（ｃｏｌｏｎｉｚｅｒ）となることが仮定された。
【００３６】
増殖調和性及び表現型に観察される差異に照らして、ＲＴＩ３０１株及びＲＴＩ４７７株の組み合わせを、植物の成長及び健康を促進するその能力について試験した。大豆種子に対する発芽、根の発達及び早期植物成長において、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株の単独及び組み合わせにおける適用の効果を決定するために、実験を行った。ＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７の胞子を用いて実施例８に記載のように実験を行った。１：３、１：１及び３：１の比率におけるＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７の胞子の組み合わせを種子に添加した。データを表Ｖに示す。１×１０６、１×１０７及び１×１０８の濃度におけるバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１での大豆種子の接種は、植物成長並びに根の発達及び構造に影響を与えなかった。同じ濃度におけるバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７での大豆種子の接種は、最も低い濃度で根の発達及び構造においてほんのわずかな改善をもたらした。しかしながら、ＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７の両方の組み合わせ（１：３の比率）での大豆種子の接種は、試験された全ての濃度において、根の発達及び早期植物成長に改善が生じた。根の発達における最良の結果は、ＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７を３：１の比率において１×１０６ＣＦＵ／ｍｌの濃度で適用した時に観察された。この３：１の比率におけるＲＴＩ３０１とＲＴＩ４７７の胞子での種子の接種のプラスの効果の画像を、図５Ａ及び図５Ｂに示す（Ａ−コントロール植物；Ｂ−１０６ｃｆｕ／ｍｌにおいてＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７（比率３：１）で接種した植物）。図５Ａ−５Ｂに示すように、効果は根の形成及び構造に関して特にプラスであった。細根は、水、栄養分の摂取及び根圏の他の微生物との植物相互作用において重要である。これらの結果は、個々の株の適用はコントロール植物と比較して全く又はほとんど効果を示さなかった一方で、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株の組み合わせの適用での種子処理は、大豆の早期成長及び樹立について期待される有益性よりも大きな有益性をもたらしたということを示す。バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株の組み合わせの相乗効果が観察され、植物成長に予期せぬ利益をもたらした。
【００３７】
収量におけるＲＴＩ３０１株及びＲＴＩ４７７株の組み合わせでの種子処理の効果を試験するために、大豆において更なる実験を実施した。実験は次のように設定した。１）未処理の種子。２）典型的な大豆種子処理であるＣＲＵＩＳＥＲＭＡＸＸ（チアメトキサム、フルジオキソニル＋メタラキシル−Ｍ；ＳＹＮＧＥＮＴＡ  ＣＲＯＰ  ＰＲＯＴＥＣＴＩＯＮ，ＩＮＣ）及びチオファネートメチルの組み合わせで処理した種子（ＣＲＵＩＳＥＲＭＡＸＸ及びチオファネートメチルの組み合わせは“ＣＨＥＭコントロール”として示す）。３）ＣＨＥＭコントロールで処理し、５．０×１０＋５ｃｆｕ／種子でＲＴＩ３０１株を接種した種子。４）ＣＨＥＭコントロールで処理し、５．０×１０＋５ｃｆｕ／種子でＲＴＩ４７７株を接種した種子。５）ＣＨＥＭコントロールで処理し、５．０×１０＋５ｃｆｕ／種子で両方の株の組み合わせを接種した種子。１０回の試験を１０の独立したプロットとして実施し、大豆収量の結果（エーカー当たりのブッシェル）を表ＶＩに示す。表ＶＩの結果は、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７のいずれか単独での接種は、ＣＨＥＭコントロール単独で処理した種子と比較した時、大豆の全収量に影響を及ぼさなかったことを示す。先の実験で観察されたように、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の組み合わせでの接種は相乗効果をもたらし、大豆収量の５％増加の結果となった（エーカー当たり５８．２から６１．１ブッシェル）。バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株の組み合わせは、大豆収量に予期せぬ利益をもたらした。
【００３８】
実施例９は、コーンにおけるバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株の組み合わせでの種子処理の利益を記載する。コーンの実験については、データを表ＶＩＩに要約し、設定は次の通りであった。１）未処理の種子（“ＵＴＣ”）。２）“ＣＨＥＭコントロール”又は“ＣＣ”として示される一般的に使用される化学活性剤の３つの組み合わせで処理した種子。３）ＣＨＥＭコントロール＋ＲＴＩ３０１株及びＲＴＩ４７７株を各々５．０×１０＋５ｃｆｕ／種子で組み合わせて処理した種子（“ＣＣ＋ＲＴＩ３０１／４７７  １：１”）。自然の病気圧力又はリゾクトニア（Rhizoctonia）での土壌の接種の条件下の２つの試験を行った。注目すべきことに、ＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７の１：１の組み合わせ＋化学コントロールは、化学コントロール単独よりも、自然病原体圧力及びリゾクトニア（Rhizoctonia）接種野外試験の各々について、エーカー当たり１０．７ブッシェル及びエーカー当たり５９．８ブッシェルの収量増加が観察された。これらのデータは、これらの株の組み合わせでの種子の処理が、コーン収量において非常に大きな増強をもたらし得ることを示す。
【００３９】
実施例１０は、病原体防除のための化学活性剤に加えて、ＲＴＩ３０１株及びＲＴＩ４７７株の組み合わせで種子を処理した時の大豆における出芽及び収量についての影響を示す実験を記載する。具体的には、大豆における実験は次のように設定された。１）未処理の種子（ＵＴＣ）。２）“ＣＨＥＭコントロール”として示される一般的に使用される化学活性剤の３つの組み合わせで処理した種子。３）ＶＩＢＲＡＮＣＥ（活性成分セダキサン；ＳＹＮＧＥＮＴＡ  ＣＲＯＰ  ＰＲＯＴＥＣＴＩＯＮ，ＩＮＣ）で処理した種子。４）ＣＨＥＭコントロール＋ＲＴＩ３０１株及びＲＴＩ４７７株を各々５．０×１０＋５ｃｆｕ／種子で処理した種子。植え付け時にリゾクトニア・ソラニ（Rhizoctonia solani）を植物種子に接種したものについて２つの試験を行った。表ＶＩＩＩの結果は、ＣＨＥＭコントロールに加えてバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の組み合わせで処理すると、ＣＨＥＭコントロール単独の収量よりも、平均でエーカー当たり１３．３ブッシェルの収量における増加をもたらすことを示す（エーカー当たり５９．４から７２．７ブッシェル）。従って、ＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７の組み合わせでの種子処理は、重大な病原体圧力の条件下でさえも、大豆における収量の有意な改善をもたらす。
【００４０】
実施例１１は、スカッシュ、トマト及びペッパーにおけるバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株の組み合わせでの点滴灌漑の有益性を記載する。土壌菌によって引き起こされる病害は、いずれの試験でも記録されなかった。スカッシュの試験では、植え付け時に根域のドレンチを介して、点滴灌漑による更なる適用をすることなく、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１については３．７５×１０１２ＣＦＵ／ヘクタール、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７については０．６２５×１０１２ＣＦＵ／ヘクタールの割合で胞子を適用した。ＡＣＣＯＭＰＬＩＳＨ  ＬＭ（ＬＯＶＥＬＡＮＤ  ＰＲＯＤＵＣＴＳ）を商業用コントロールとして使用して、ＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７の組み合わせについて記載したのと同じ方法で２３４０ｍｌ／Ｈａの割合で適用した。この製品は、アシドボラックス・ファシリス（Acidovorax facilis）（１×１０３ｃｆｕ／ｍｌ）、バチルス・リケニフォルミス（Bacillus licheniformis）（１×１０３ｃｆｕ／ｍｌ）、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）（１×１０３ｃｆｕ／ｍｌ）、バチルス・オレロニウス（Bacillus oleronius）（１×１０３ｃｆｕ／ｍｌ）、バチルス・マリヌス（Bacillus marinus）（１×１０３ｃｆｕ／ｍｌ）、バチルス・メガテリウム（Bacillus megaterium）（１×１０３ｃｆｕ／ｍｌ）及びロドコッカス・ロドクロウス（Rhodococcus rhodochrous）（１×１０３ｃｆｕ／ｍｌ）の混合を含有する。ＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７胞子の添加は、細菌胞子がドレンチに含まれていない未処理のコントロール植物と比較して、並びに商業用コントロール植物と比較して、スカッシュについての総収量及び市場性収量 （ｍａｒｋｅｔａｂｌｅ  ｙｉｅｌｄ）の両方において増加をもたらした。具体的には、ＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７で処理した植物は合計８７３．４ｋｇ／Ｈａのスカッシュをもたらし、未処理のコントロール植物及びＡＣＣＯＭＰＬＩＳＨで処理した植物について、各々の８３８．３ｋｇ／Ｈａ及び８３６．１ｋｇ／Ｈａで比較すると、総スカッシュの重量において各々４．２％及び４．５％の増加を示す。未処理コントロール植物及び商業的基準で処理された植物と比較した、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１＋バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７胞子で処理した植物の総スカッシュ重量の増加は、この処理によってもたらされるプラスの成長効果を示している。
【００４１】
トマトの試験では、植え付け時における根域のドレンチを介して、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１については０．６２５×１０１２ＣＦＵ／ヘクタール、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７については３．７５×１０１２ＣＦＵ／ヘクタールの割合で胞子を適用し、続いて移植後１７日及び３５日において同じ割合で２回滴下適用した。ＡＣＣＯＭＰＬＩＳＨ  ＬＭを商業用コントロールとして使用して、２３４０ｍｌ／Ｈａの割合でＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７の組み合わせについて記載したのと同じ方法で適用した。ＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７胞子の添加は、細菌胞子がドレンチ及び灌漑に含まれていない未処理のコントロール植物と比較して、並びに商業用コントロール植物と比較して、トマトについての総収量及び市場性収量の両方において増加をもたらした。具体的には、ＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７で処理した植物は合計２１８２４ｋｇ／Ｈａの市場性のあるトマトをもたらし、未処理のコントロール植物及びＡＣＣＯＭＰＬＩＳＨで処理した植物について、各々の１６７６５ｋｇ／Ｈａ及び２１４２０ｋｇ／Ｈａで比較すると、市場性のあるトマトの重量において各々３０．２％及び１．９％の増加を示す。バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１＋バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７胞子で処理した植物の市場性のあるトマト重量の実質的な増加は、特に未処理のコントロール植物と比較して、この処理によりもたらされるプラスの成長効果を示している。
【００４２】
ペッパー（ジャラペノペッパー）の試験では、植え付け時における根域のドレンチを介して、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の両方の株毎に１．２５×１０１２ＣＦＵ／ヘクタールの割合で胞子を適用し、続いて移植後１７日及び３５日において同じ割合で２回滴下適用した。ＡＣＣＯＭＰＬＩＳＨ  ＬＭを商業用コントロールとして使用して、２３４０ｍｌ／Ｈａの割合でＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７の組み合わせについて記載したのと同じ方法で適用した。ＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７胞子の添加は、細菌胞子が適用されていない未処理のコントロール植物と比較して、並びに商業用コントロール植物と比較して、ペッパーについての収量の増加をもたらした。具体的には、ＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７で処理した植物は合計４１５４ｋｇ／Ｈａの市場性のあるペッパーをもたらし、未処理のコントロール植物及びＡＣＣＯＭＰＬＩＳＨで処理した植物について、各々の３４５５ｋｇ／Ｈａ及び３９３０ｋｇ／Ｈａで比較すると、市場性のあるジャラペノペッパーの重量において各々２０％及び５．７％の増加を示す。未処理コントロール植物及び商業的基準で処理された植物と比較した、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１＋バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７胞子で処理した植物の市場性のあるペッパーの重量の実質的な増加は、この処理によりもたらされるプラスの成長効果を示している。
【００４３】
実施例１２ではＲＴＩ３０１株及びＦＴＩ４７７株によって産生される抗菌代謝物が同定され、図６において示されている。実施例１２は、ＲＴＩ３０１株及びＲＴＩ４７７株によって産生される環状リポペプチド、フェンギシン及びデヒドロキシフェンギシンの研究、並びに驚くべきことにこれらの分子のいくつかの従来に報告されていない種類の同定を記載する。バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１は、従来に報告されたフェンギシンＡ、Ｂ及びＣ化合物、並びにデヒドロキシフェンギシンＡ、Ｂ及びＣ化合物を産生することが決定された。予想外にも、これらの既知の化合物に加えて、ＲＴＩ３０１株は、環状ペプチド鎖の８位のＬ−イソロイシン（図６においてＸ３として示す）がＬ−メチオニンで置換された従来に同定されていないこれらの化合物の誘導体も産生するということが決定された。新しい種類のフェンギシン及びデヒドロキシフェンギシンはここではＭＡ、ＭＢ及びＭＣとして示され、図６のＸ３のＬ−イソロイシンがＬ−メチオニンで置換されたＡ、Ｂ及びＣの種類の誘導体を指す。新たに同定された分子を太字において図６及び表ＩＸに示す。新しく同定されたフェンギシンＭＡ、ＭＢ及びＭＣ化合物はＲＴＩ４７７株でも観察されたが、対応するデヒドロキシフェンギシンＭＡ、ＭＢ及びＭＣ化合物はＲＴＩ４７７株には観察されなかった（表ＩＸ参照）。
【００４４】
ＲＴＩ３０１株は、従来に同定されていない更なる種類のフェンギシン及びデヒドロキシフェンギシンを産生することが更に決定された。この種類では、フェンギシンＢ及びデヒドロキシフェンギシンＢのＬ−イソロイシン（図６の位置Ｘ３）がＬ−ホモ−システイン（Ｈｃｙ）で置換されている。これらの従来に同定されていないフェンギシン及びデヒドロキシフェンギシンの代謝物は、ここではフェンギシンＨ及びデヒドロキシフェンギシンＨとして示され、図６及び表ＩＸに示されている。新しく同定されたフェンギシンＨ化合物はＲＴＩ４７７株でも観察されたが、対応するデヒドロキシフェンギシンＨ化合物はＲＴＩ４７７株では観察されなかった（表ＩＸ）。
【００４５】
ＲＴＩ３０１株は、従来に同定されていない更なる種類のフェンギシン及びデヒドロキシフェンギシン代謝物を産生することが更に決定された。この種類では、環状ペプチド主鎖構造の４位のアミノ酸（図６の位置Ｘ１）がＬ−イソロイシンで置換されている。これらの従来に同定されていない代謝物は、ここではフェンギシンＩ及びデヒドロキシフフェンギシンＩとして示され、図６及び表ＩＸに示されている。新しく同定されたフェンギシンＩ及びデヒドロキシフフェンギシンＩ化合物の両方は、ＲＴＩ４７７株でも観察された（表ＩＸ）。
【００４６】
従って、本発明の組成物及び方法では、抗菌特性を有するバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体であり得る。同様に、植物の成長及び／又は健康に有益な特性を有するバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体であり得る。本発明の組成物及び方法では、植物は、大豆又はコーンを含み得、植物の成長の利益は、収量の増加により示され得る。
【００４７】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための２以上の調和性を有する微生物を有する組成物が提供される。組成物は、抗菌特性を有し、周囲の土壌中に存在する又は植物と共同して生息する内因性微生物の増殖を阻害するのに適切な量で存在する第１の微生物の少なくとも１つの生物学的に純粋な培養物と、植物の成長及び／又は植物の健康に有益な特性を有する第２の微生物の少なくとも１つの生物学的に純粋な培養物とを含み、第２の微生物の増殖は第１の微生物の増殖と調和性を有し、第２の微生物は定着し、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすのに十分な量で存在し、植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌への組成物の適用は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす。植物の成長及び／又は植物の健康に有益な第２の微生物の特性は、植物収量の増加、苗木の活力の改善、根の発達の改善、植物の成長の改善、植物の健康の改善、外観の改善、植物病原体に対する抵抗性の改善、病原体感染の減少又はそれらの組み合わせのうちの１つを含む。植物病原体は、昆虫、線虫、植物病原性真菌又は植物病原性細菌のうちの１つ又は組み合わせを含み得る。
【００４８】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための組成物が提供される。組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすのに適切な量で存在する、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物を含む。植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌への組成物の適用は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす。
【００４９】
ここで使用される場合、“細菌株の生物学的に純粋な培養物”との語句は、細菌株の生物学的に純粋な発酵培養物の胞子、細菌株の生物学的に純粋な発酵培養物の栄養細胞、細菌株の生物学的に純粋な発酵培養物の１以上の生成物、細菌株の生物学的に純粋な発酵培養物の培養固体、細菌株の生物学的に純粋な発酵培養物の培養上清、細菌株の生物学的に純粋な発酵培養物の抽出物及び細菌株の生物学的に純粋な発酵培養物の１以上の代謝物のうちの１つ又は組み合わせを指す。
【００５０】
１つの実施の形態では、組成物は、植え付け用の基盤（ｍａｔｒｉｘ）の形態である。植え付け用の基盤は、鉢植え用の土の形態であり得る。
【００５１】
１つの実施の形態では、組成物は、担体、分散剤又は酵母抽出物のうちの１つ又は組み合わせを更に含み得る。
【００５２】
１つの実施の形態では、組成物は、植物の成長に利益をもたらす及び／又は植物における病原体感染に対する保護を与えるのに適切な量で存在する、微生物学的、生物学的又は化学的な殺虫剤、殺真菌剤、殺線虫剤、殺細菌剤、除草剤、植物抽出物、植物成長調整剤又は肥料のうちの１つ又は組み合わせを更に含む。
【００５３】
１つの実施の形態では、植物の成長に利益をもたらすための組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、ビフェントリン殺虫剤を含む。
【００５４】
１つの実施の形態では、植物の成長に利益をもたらすための組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、ビフェントリン殺虫剤を含み、組成物は液体肥料と相溶性を有する製剤中にある。液体肥料と相溶性を有する製剤は、水和ケイ酸アルミニウム−マグネシウム及び少なくとも１つの分散剤を含み得る。ビフェントリン殺虫剤は、０．１ｇ／ｍｌから０．２ｇ／ｍｌの範囲の濃度で存在し得る。ビフェントリン殺虫剤は、約０．１７１５ｇ／ｍｌの濃度で存在し得る。本明細書及び特許請求の範囲を通して使用される“液体肥料と相溶性を有する製剤中”との語句は、液体製剤において植物に送達される肥料との混合を可能にするために、製剤が水溶液中に溶解、分散又は乳化できることを意味する。
【００５５】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法が提供される。方法は、植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌に組成物を送達することを含む。組成物は、抗菌特性を有し、周囲の土壌中に存在する又は植物と共同して生息する内因性微生物の増殖を阻害するのに適切な量で存在する第１の微生物の少なくとも１つの生物学的に純粋な培養物と、植物の成長及び／又は植物の健康に有益な特性を有する第２の微生物の少なくとも１つの生物学的に純粋な培養物とを含み、第２の微生物の増殖は第１の微生物の増殖と調和性を有し、第２の微生物は定着し、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすのに適切な量で存在する。組成物の送達は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす。
【００５６】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法が提供される。方法は、植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌に組成物を送達することを含む。組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物を含み、組成物の送達は植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす。
【００５７】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法が提供される。方法は、植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌に、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物を含む第１の組成物、及び、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物を含む第２の組成物の組み合わせを送達することを含み、組み合わせの送達は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす。
【００５８】
微生物を含む組成物は、液体、油分散体、粉剤、乾燥水和性粉末剤、展延性（ｓｐｒｅａｄａｂｌｅ）粒剤又は乾燥水和性粒剤の形態であり得る。微生物は、胞子又は栄養細胞の形態で存在し得る。組成物は、液体の形態であり得、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在し得る。組成物は、粉剤、乾燥水和性粉末剤、展延性粒剤又は乾燥水和性粒剤の形態であり得、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｇから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｇの量で存在し得る。組成物は、油分散体の形態であり得、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在し得る。
【００５９】
微生物を含む組成物は、担体、分散剤又は酵母抽出物のうちの１つ又は組み合わせを更に含んでもよい。
【００６０】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための２以上の調和性を有する微生物を有する組成物で被覆された植物種子を提供する。被覆組成物は、抗菌特性を有し、周囲の土壌中に存在する又は植物と共同して生息する内因性微生物の増殖を阻害するのに適切な量で存在する第１の微生物の少なくとも１つの生物学的に純粋な培養物の胞子を含む。組成物は、植物の成長及び／又は植物の健康に有益な特性を有する第２の微生物の少なくとも１つの生物学的に純粋な培養物の胞子も含み、第２の微生物の増殖は第１の微生物の増殖と調和性を有し、第２の微生物は、定着し、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすために十分な量で存在する。
【００６１】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための組成物で被覆された植物種子を提供する。組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、及び、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすのに適切な量で存在する、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子を含む。
【００６２】
１つの実施の形態では、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１は、各々約１．０×１０２ＣＦＵ／種子から約１．０×１０９ＣＦＵ／種子の範囲の量で存在する。
【００６３】
１つの実施の形態では、植物種子は、植物の成長に利益をもたらす及び／又は植物における病原体感染に対する保護を与えるために適切な量において存在する、微生物学的、生物学的又は化学的な殺虫剤、殺真菌剤、殺線虫剤、殺細菌剤、除草剤、植物抽出物、植物成長調整剤又は肥料のうちの１つ又は組み合わせを更に含む。１つの実施の形態では、殺虫剤は、ビフェントリンを含む。
【００６４】
１つの実施の形態では、植物種子が提供され、植物種子は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための組成物で被覆されている。組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、及び、ビフェントリン殺虫剤を含む。
【００６５】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法が提供される。方法は、適切な成長培地中に植物の種子を植え付けることを含み、種子は組成物で被覆されており、組成物は、抗菌特性を有し、周囲の土壌中に存在する又は植物と共同して生息する内因性微生物の増殖を阻害するのに適切な量で存在する第１の微生物の少なくとも１つの生物学的に純粋な培養物の胞子、及び、植物の成長及び／又は植物の健康の促進特性を有する第２の微生物の少なくとも１つの生物学的に純粋な培養物の胞子を含み、第２の微生物の増殖は第１の微生物の増殖と調和性を有し、第２の微生物は、定着し、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすのに適切な量で存在する。
【００６６】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法が提供される。方法は、適切な成長培地中に植物の種子を植え付けることを含み、種子は組成物で被覆されており、組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、及び、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子を含み、ＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７の胞子を含む被覆は植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす。
【００６７】
本発明の被覆された種子は、例えば、単子葉植物、双子葉植物、穀物、コーン、スイートコーン、ポップコーン、シードコーン、サイレージコーン、フィールドコーン、米、小麦、大麦、ソルガム、アブラナ科野菜、ブロッコリー、キャベツ、カリフラワー、芽キャベツ、コラード、ケール、マスタードグリーン、コールラビ、球根野菜、玉ネギ、ニンニク、エシャロット、フルーツ野菜、ペッパー、トマト、グラウンドチェリー、トマティロ、オクラ、ブドウ、ハーブ／スパイス、ウリ科野菜、キュウリ、カンタロープ、メロン、マスクメロン、スカッシュ、スイカ、カボチャ、ナス、葉野菜、レタス、セロリ、ホウレン草、パセリ、ラディッキオ、マメ科植物／野菜（多肉の乾燥した豆及び鞘に入った豆）、インゲン豆（又はソラ豆）、サヤインゲン、スナップ豆、シェルビーンズ、大豆、ドライビーンズ、ガルバンゾー豆、リマ豆、エンドウ豆、ヒヨコ豆、スプリットピー、レンズ豆、油糧種子作物、キャノーラ、キャスター、綿、亜麻、ピーナッツ、菜種、ベニバナ、ゴマ、ヒマワリ、大豆、根／塊茎及び球茎野菜、ニンジン、ジャガイモ、サツマイモ、ビーツ、ショウガ、西洋ワサビ、ダイコン、朝鮮人参、カブ、サトウキビ、テンサイ、草及び芝草の種子を含む、多種多様な植物由来の種子であり得る。
【００６８】
被覆された植物種子は、コーン又は大豆であり得、植物の成長の利益は、収量の増加により示され得る。
【００６９】
被覆された植物種子について、植物の成長及び／又は植物の健康に有益な第２の微生物の特性は、収量の増加、苗木の活力の改善、根の発達の改善、植物の成長の改善、植物の健康の改善、外観の改善、植物病原体に対する抵抗性の改善、病原体感染の減少又はそれらの組み合わせのうちの１以上を含む。植物病原体は、昆虫、線虫、植物病原性真菌又は植物病原性細菌のうちの１つ又は組み合わせを含み得る。
【００７０】
植物種子を被覆する組成物の第１の微生物及び第２の微生物は、バチルス属種（Bacillus spp.）の微生物であり得る。第２の微生物の増殖は第１の微生物の増殖よりも速くなり得、第２の微生物はスウォーミング及び高運動性の表現型により特徴づけられ得る。第２の微生物は、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）であり得る。第１の微生物はバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）であり得、第２の微生物はバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）であり得る。バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体であり得る。バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体であり得る。植物種子に被覆された組成物は、各々約１．０×１０２ＣＦＵ／種子から約１．０×１０９ＣＦＵ／種子の量で第１の微生物及び第２の微生物の各々の胞子を含み得る。
【００７１】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法が提供される。方法は、適切な成長培地中に植物の種子を植え付けることを含み、種子は組成物で被覆されており、組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、及び、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすのに適切な量で存在する、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子を含む。
【００７２】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための組成物が提供される。組成物は、抗細菌特性又は抗真菌特性の１つ又は両方を有し、周囲の土壌中に存在する又は植物と共同して生息する内因性微生物の増殖を阻害するのに適切な量で存在する１以上の化学活性剤、及び、植物の成長及び／又は植物の健康に有益な特性を有する微生物の少なくとも１つの生物学的に純粋な培養物を含む。微生物の増殖は化学活性剤と調和性を有し、微生物は、定着し、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすために適切な量で存在する。植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌への組成物の適用は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす。
【００７３】
１つの実施の形態では、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法が提供される。方法は、抗細菌特性又は抗真菌特性の１つ又は両方を有し、周囲の土壌中に存在する又は植物と共同して生息する内因性微生物の増殖を阻害するのに適切な量で存在する１以上の化学活性剤、及び、植物の成長及び／又は植物の健康に有益な特性を有する微生物の少なくとも１つの生物学的に純粋な培養物を含む組成物の組み合わせを、植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌に送達することを含む。微生物の増殖は化学活性剤と調和性を有するか、又は非調和性である場合には微生物は化学活性剤の送達後に送達される。化学活性剤及び微生物の組み合わせの送達が植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすように、微生物は、定着し、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすのに適切な量で存在する。１以上の化学活性剤と微生物が調和性を有する場合、１以上の化学活性剤は、微生物を含む組成物と共に製剤化され得る。植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌への化学活性剤及び微生物の組み合わせの送達は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす。
【００７４】
１以上の化学活性剤を含む組成物及び方法では、植物の成長及び／又は植物の健康に有益な微生物の特性は、収量の増加、苗木の活力の改善、根の発達の改善、植物の成長の改善、植物の健康の改善、外観の改善、植物病原体に対する抵抗性の改善、病原体感染の減少又はそれらの組み合わせを含み得る。植物病原体は、昆虫、線虫、植物病原性真菌又は植物病原性細菌のうちの１つ又は組み合わせを含み得る。
【００７５】
ニッチを作り出すための１以上の化学活性剤は、例えば、ストロビルリン、トリアゾール、フルトリアホール、テブコナゾール、プロチアコナゾール（ｐｒｏｔｈｉａｃｏｎａｚｏｌｅ）、エポキシコナゾール（ｅｘｐｏｘｙｃｏｎａｚｏｌｅ）、フルオピラム、クロロタロニル、チオファネート−メチル、銅系殺真菌剤、水酸化銅殺真菌剤、ＥＤＢＣ系殺真菌剤、マンコゼブ、スクシナーゼデヒドロゲナーゼ（ＳＤＨＩ）殺真菌剤、ビキサフェン、イプロジオン、ジメトモルフ又はバリフェナレートを含み得るが、これらに限定されない。別の例では、１以上の化学活性剤は、例えば、クロロピクリン、ダゾメット、１，３−ジクロロプロペン（Ｔｅｌｏｎｅ）、ジメチルジスルフィド、メタムナトリウム／カリウム、臭化メチル等の燻蒸剤を含むことができる。
【００７６】
組成物は、液体、油分散体、粉剤、乾燥水和性粉末剤、展延性粒剤又は乾燥水和性粒剤の形態であり得る。有益な微生物は、胞子又は栄養細胞の形態で存在し得る。有益な微生物は、バチルス属種（Bacillus spp.）であり得る。有益な微生物は、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）であり得る。微生物は、スウォーミング及び高運動性の表現型により特徴づけられるバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）であり得る。微生物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体であり得る。組成物は、液体の形態であり得、有益な微生物は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在するバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７であり得る。組成物は、粉剤、乾燥水和性粉末剤、展延性粒剤又は乾燥水和性粒剤の形態であり得、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７は約１．０×１０８ＣＦＵ／ｇから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｇの量で存在し得る。組成物は、油分散体の形態であり得、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在し得る。
【００７７】
植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための本発明の２以上の調和性を有する微生物を有する組成物及び方法では、組成物は、植物の成長に利益をもたらす及び／又は植物における病原体感染に対する保護を与えるために適切な量において存在する、微生物学的、生物学的又は化学的な殺虫剤、殺真菌剤、殺線虫剤、殺細菌剤、除草剤、植物抽出物、植物成長調整剤又は肥料のうちの１つ又は組み合わせを更に含むことができる。
【００７８】
１つの実施の形態では、殺真菌剤は、ルピナス・アルブス・ドーセ（Lupinus albus doce）由来の抽出物を含み得る。１つの実施の形態では、殺真菌剤は、ＢＬＡＤポリペプチドを含み得る。ＢＬＡＤポリペプチドは、真菌細胞壁を損傷させ、内部細胞膜を破壊することにより感受性真菌病原体に作用するスウィートルピナス（Lupinus albus doce）由来の天然の種子貯蔵タンパク質の断片であり得る。組成物は、約２０％のＢＬＡＤポリペプチドを含み得る。
【００７９】
１つの実施の形態では、殺虫剤は、ビフェントリンを含み得る。殺線虫剤は、カドサホスを含み得る。組成物は、液体、粉末、浸潤溶解性顆粒又は展延性粒剤として製剤化することができる。殺虫剤は、ビフェントリン及びクロチアニジンを含み得る。殺虫剤はビフェンスリン及びクロチアニジンを含み得、組成物は液体肥料との相溶性のために製剤化することができる。殺虫剤は、ビフェントリン又はゼータ−シペルメトリンを含み得る。
【００８０】
殺線虫剤は、カドサホスを含み得る。殺虫剤は、ビフェントリン及びクロチアニジンを含み得る。組成物は液体として製剤化することができ、殺虫剤はビフェントリン又はゼータ−シペルメトリンを含み得る。
【００８１】
１つの実施の形態では、方法は、植物の周囲の土壌若しくは成長培地、土壌若しくは成長培地中に植物の種子を播種する前の土壌若しくは成長培地、又は、土壌若しくは成長培地中に植物を植え付ける前の土壌若しくは成長培地に、液体肥料を適用することを更に含み得る。
【００８２】
実施の形態では、ビフェントリン組成物は、ビフェントリン、水和ケイ酸アルミニウム−マグネシウム、並びに、スクロースエステル、リグノスルホネート、アルキルポリグリコシド、ナフタレンスルホン酸ホルムアルデヒド縮合物及びリン酸エステルから選択される少なくとも１つの分散剤を含み得る。
【００８３】
ビフェントリンは、好ましくは、組成物中の全成分の総重量に基づいて、１．０重量％から３５重量％、より詳細には１５重量％から２５重量％の濃度で存在し得る。ビフェントリン殺虫剤組成物は、０．１ｇ／ｍｌから０．２ｇ／ｍｌの範囲の濃度で液体製剤中に存在し得る。ビフェントリン殺虫剤は、約０．１７１５ｇ／ｍｌの濃度で液体製剤中に存在してもよい。
【００８４】
分散剤又は複数の分散剤は、好ましくは、組成物中の全成分の総重量に基づいて、約０．０２重量％から約２０重量％の総濃度で存在し得る。
【００８５】
いくつかの実施の形態では、水和ケイ酸アルミニウム−マグネシウムは、モンモリロナイト及びアタパルジャイトからなる群から選択されてもよい。
【００８６】
いくつかの実施の形態では、リン酸エステルは、ノニルフェノールリン酸エステル及びトリデシルアルコールエトキシル化リン酸カリウム塩から選択されてもよい。
【００８７】
他の実施の形態は、凍結防止剤、消泡剤及び殺生物剤のうちの少なくとも１つを更に含んでもよい。
【００８８】
１つの実施の形態では、植物の成長に利益をもたらすための組成物が提供される。組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、殺虫剤を含み、組成物は液体肥料と相溶性を有する製剤中にある。殺虫剤は、ピレスロイド、ビフェントリン、テフルトリン、ゼータ−シペルメトリン、有機リン酸塩、クロルエトキシホス、クロルピリホス、テブピリンホス、シフルトリン、フィプロール、フィプロニル、ニコチノイド又はクロチアニジンのうちの１つ又は組み合わせであり得る。殺虫剤は、ビフェントリンを含み得る。組成物は、ビフェントリン殺虫剤、水和ケイ酸アルミニウム−マグネシウム及び少なくとも１つの分散剤を含み得る。ビフェントリン殺虫剤は、０．１ｇ／ｍｌから０．２ｇ／ｍｌの範囲の濃度で存在し得る。ビフェントリン殺虫剤は、約０．１７１５ｇ／ｍｌの濃度で存在し得る。
【００８９】
更に、本発明の組成物及び方法の適切な殺虫剤、除草剤、殺真菌剤及び殺線虫剤は、次のものを含み得る。
【００９０】
殺虫剤：Ａ０）アグリガタ（agrigata）、アル−ホスフィド、アンブリセイウス、アフェリヌス（apherinus）、アフィディウス、アフィドレテス、アルテミシニン、オートグラファ・カリフォルニカＮＰＶ、アゾシクロチン、バチルス・サブチリス（bacillus subtilis）、バチルス・チューリンゲンシス・アイザワイ（bacillus-thur. aizawai）、バチルス・チューリンゲンシス・クルスタキー（bacillus thur. kurstaki）、バチルス・チューリンゲンシス（bacillus thuringiensis）、ボーベリア（beauveria）、ボーベリア・バシアーナ（beauveria bassiana）、ベータシフルトリン、生物学的製剤、ビスルタップ、ブロフルトリネート、ブロモホス−ｅ、ブロモプロピレート、Ｂｔ遺伝子組換トウモロコシ、Ｂｔ遺伝子組換大豆、カプサイシン、カルタップ、セラストラス（celastrus）抽出物、クロルアントラニリプロール、クロルベンズロン、クロルエトキシフォス、クロルフルアズロン、クロルピリホス−ｅ、シニジアジン（cnidiadin）、クリオライト、シアノホス、シアントラニリプロール、シハロトリン、シヘキサチン、シペルメトリン、ダクヌサ、ＤＣＩＰ、ジクロロプロペン、ジコホル、ジグリファス、ジグリファス＋ダクヌサ、ジメタカルブ、ジチオエーテル、酢酸ドデシル、エマメクチン、エンカルシア（encarsia）、ＥＰＮ、エレツモセルス（eretmocerus）、エチレン−ジブロミド、ユーカリプトール、脂肪酸、脂肪酸／塩、フェナザキン、フェノブカルブ（ＢＰＭＣ）、フェンピロキシメート、フルブロシトリネート（ｆｌｕｂｒｏｃｙｔｈｒｉｎａｔｅ）、フルフェンジン、ホルメタネート、ホルモチオン、フラチオカルブ、ガンマ−シハロトリン、ニンニクジュース、グラニュロシス−ウイルス、ハルモニア（harmonia）、オオタバコガ（heliothis armigera）ＮＰＶ、不活性細菌、インドール−３−イル酪酸、ヨードメタン、鉄、イソカルボホス（ｉｓｏｃａｒｂｏｆｏｓ）、イソフェンホス、イソフェンホス−ｍ、イソプロカルブ、イソチオエート（ｉｓｏｔｈｉｏａｔｅ）、カオリン、リンダン、リウヤンマイシン（ｌｉｕｙａｎｇｍｙｃｉｎ）、マトリン、メホスホラン、メタアルデヒド、メタリジウム−アニソプリエ、メタミドホス、メトルカルブ（ＭＴＭＣ）、鉱物油、マイレックス、ｍ−イソチオシアネート、モノスルタップ、ミロテシウム・ベルカリア（myrothecium verrucaria）、ナレド、ハモグリミドリヒメコバチ（neochrysocharis formos）、ニコチン、ニコチノイド、油脂、オレイン酸、オメトエート、オリウス（ｏｒｉｕｓ）、オキシマトリン、ペシロマイセス、パラフィン油、パラチオン−ｅ、パスツリア、石油、フェロモン、リン酸、フォトラブダス、フォキシム、フィトセイウルス（phytoseiulus）、ピリミホス−ｅ、植物油、プルテラ・キシロステラ（plutella xylostella）ＧＶ、多角体病（polyhedrosis）ウイルス、ポリフェノール抽出物、オレイン酸カリウム、プロフェノホス、プロスレル（prosuler）、プロチオホス、ピラクロホス、ピレトリン、ピリダフェンチオン、ピリミジフェン、ピリプロキシフェン、キラヤ（quillay）抽出物、キノメチオネート、菜種油、ロテノン、サポニン、サポノジット（saponozit）、ナトリウム化合物、フルオロケイ酸ナトリウム、スターチ、ステイネルネマ（steinernema）、ストレプトマイセス、スルフルラミド、硫黄、テブ��リムホス、テフルトリン、テメホス、テトラジホン、チオファノックス、チオメトン、トランスジェニクス（例えば、Ｃｒｙ３Ｂｂ１）、トリアザメート、トリコデルマ、トリコグランマ、トリフルムロン、ベルチシリウム、ベルトリン、殺虫剤の異性体（例えば、カッパ−ビフェントリン、カッパ−テフルトリン）、ジクロロメゾチアズ、ブロフラニリド、ピラジフルミドを含む様々な殺虫剤；Ａ１）アルジカルブ、アラニカルブ、ベンフラカルブ、カルバリル、カルボフラン、カルボスルファン、メチオカルブ、メソミル、オキサミル、ピリミカルブ、プロポクスル及びチオジカルブを含むカルバメート類；Ａ２）アセフェート、アジンホス−エチル、アジンホス−メチル、クロルフェンビンホス、クロルピリホス、クロルピリホス−メチル、デメトン−Ｓ−メチル、ジアジノン、ジクロルボス／ＤＤＶＰ、ジクロトホス、ジメトエート、ジスルホトン、エチオン、フェニトロチオン、フェンチオン、イソキサチオン、マラチオン、メタミダホス、メチダチオン、メビンホス、モノクロトホス、オキシメトエート、オキシデメトン−メチル、パラチオン、パラチオン−メチル、フェントエート、ホレート、ホサロン、ホスメット、ホスファミドン、ピリミホス−メチル、キナルホス、テルブホス、テトラクロルビンホス、トリアゾホス及びトリクロルホンを含むオルガノホスフェート類；Ａ３）エンドスルファン等のシクロジエンオルガノクロリド化合物類；Ａ４）エチプロール、フィプロニル、ピラフルプロール及びピリプロールを含むフィプロール類；Ａ５）アセタミプリド、クロチアニジン、ジノテフラン、イミダクロプリド、ニテンピラム、チアクロプリド及びチアメトキサムを含むネオニコチノイド類；Ａ６）スピノサド及びスピネトラム等のスピノシン類；Ａ７）アバメクチン、エマメクチンベンゾエート、イベルメクチン、レピメクチン及びミルベメクチンを含むメクチン類由来のクロリドチャネルアクチベーター；Ａ８）ヒドロプレン、キノプレン、メトプレン、フェノキシカルブ及びピリプロキシフェン等の若年性ホルモン模倣物；Ａ９）ピメトロジン、フロニカミド及びピリフルキナゾン等の選択的同翅型摂食ブロッカー；Ａ１０）クロフェンテジン、ヘキシチアゾクス及びエトキサゾール等のダニ成長阻害剤；Ａ１１）ジアフェンチウロン、フェンブタチン酸化物及びプロパルギット等のミトコンドリアＡＴＰシンターゼ阻害剤；クロルフェナピル等の酸化的リン酸化の脱共役剤；Ａ１２）ベンスルタップ、カルタップヒドロクロリド、チオシクラム及びチオスルタップナトリウム等のニコチン性アセチルコリン受容体チャネルブロッカー；Ａ１３）ビストリフルロン、ジフルベンズロン、フルフェノクスロン、ヘキサフルムロン、ルフェヌロン、ノバルロン及びテフルベンズロンを含むベンゾイル尿素類由来のキチン生合成のタイプ０の阻害剤；Ａ１４）ブプロフェジン等のキチン生合成のタイプ１の阻害剤；Ａ１５）シロマジン等の脱皮攪乱剤；Ａ１６）メトキシフェノジド、テブフェノジド、ハロフェノジド及びクロマフェノジド等のエクジソン受容体アゴニスト；Ａ１７）アミトラズ等のオクトパミン受容体アゴニスト；Ａ１８）ミトコンドリア複合体電子輸送阻害剤であるピリダベン、テブフ��ンピラド、トルフェンピラド、フルフェネリム、シエノピラフェン、シフルメトフェン、ヒドラメチルノン、アセキノシル又はフルアクリピリム；Ａ１９）インドキサカルブ及びメタフルミゾン等の電圧依存性ナトリウムチャネルブロッカー；Ａ２０）スピロジクロフェン、スピロメシフェン及びスピロテトラマット等の脂質合成阻害剤；Ａ２１）フルベンジアミド、フタルアミド化合物（Ｒ）−３−クロル−Ｎ１−｛２−メチル−４−［１，２，２，２−テトラフルオロ−１−（トリフルオロメチル）エチル］フェニル｝−Ｎ２−（１−メチル−２−メチルスルホニルエチル）フタルアミド及び（Ｓ）−３−クロル−Ｎ１−｛２−メチル−４−［１，２，２，２−テトラフルオロ−１−（トリフルオロメチル）エチル］フェニル｝−Ｎ２−（１−メチル−２−メチルスルホニルエチル）フタルアミド、クロラントラニリプロール及びシアントラニリプロールを含むジアミド類由来のリアノジン受容体モジュレーター；Ａ２２）アザジラクチン、アミドフルメト、ビフェナゼート、フルエンスルホン、ピペロニルブトキシド、ピリダリル、スルホキサフロル等の作用機序の不明又は不確かな化合物；又は、Ａ２３）アクリナトリン、アレスリン、ビフェントリン、シフルトリン、ラムダ−シハロトリン、シペルメトリン、アルファ−シペルメトリン、ベータ−シペルメトリン、ゼータ−シペルメトリン、デルタメトリン、エスフェンバレレート、エトフェンプロックス、フェンプロパトリン、フェンバレレート、フルシトリネート、タウ−フルバリネート、ペルメトリン、シラフルオフェン及びトラロメトリンを含むピレスロイド類由来のナトリウムチャネルモジュレーター。
【００９１】
殺真菌剤：Ｂ０）ベンゾビンジフルピル、アンチペロノスポリック（ａｎｉｔｉｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒｉｃ）、アメトクトラジン、アミスルブロム、銅塩（例えば、水酸化銅、酸塩化銅、硫酸銅、過硫酸銅）、ボスカリド、チフルザミド（ｔｈｉｆｌｕｍａｚｉｄｅ）、フルチアニル、フララキシル、チアベンダゾール、ベノダニル、メプロニル、イソフェタミド、フェンフラム、ビキサフェン（ｂｉｘａｆｅｎ）、フルキサピロキサド、ペンフルフェン、セダキサン、クモキシストロビン、エノキサストロビン、フルフェノキシストロビン、ピラオキシストロビン、ピラメトストロビン、トリクロピリカルブ（ｔｒｉｃｌｏｐｙｒｉｃａｒｂ）、フェナミンストロビン、メトミノストロビン、ピリベンカルブ、メプチルジノカップ（ｍｅｐｔｙｌｄｉｎｏｃａｐ）、酢酸フェンチン、塩化フェンチン、水酸化フェンチン、オキシテトラシクリン、クロゾリネート（ｃｈｌｏｚｏｌｉｎａｔｅ）、クロロネブ、テクナゼン、エトリジアゾール、ヨードカルブ、プロチオカルブ、バチルス・サブチリス・シノニム、バチルス・アミロリクエファシエンス（例えば、ＱＳＴ  ７１３、ＦＺＢ２４、ＭＢＩ６００、Ｄ７４７株）、メラレウカ・アルテルニフォリア（Melaleuca alternifolia）抽出液、ピリソキサゾール（ｐｙｒｉｓｏｘａｚｏｌｅ）、オキスポコナゾール、エタコナゾール（ｅｔａｃｏｎａｚｏｌｅ）、フェンピラザミン、ナフチフィン、テルビナフィン、バリダマイシン、ピリモルフ、バリフェナレート、フタリド、プロベナゾール、イソチアニル、ラミナリン、レイノウトリア・サチャリネンシス（Reynoutria sachalinensis）抽出物、亜リン酸及び塩、テクロフタラム（ｔｅｃｌｏｆｔｈａｌａｍ）、トリアゾキシド（ｔｒｉａｚｏｘｉｄｅ）、ピリオフェノン、有機油、炭酸水素カリウム、クロロタロニル、フルオロイミド；Ｂ１）ビテルタノール、ブロムコナゾール、シプロコナゾール、ジフェノコナゾール、ジニコナゾール、エニルコナゾール、エポキシコナゾール、フルキンコナゾール、フェンブコナゾール、フルシラゾール、フルトリアホール、ヘキサコナゾール、イミベンコナゾール、イプコナゾール、メトコナゾール、ミクロブタニル、ペンコナゾール、プロピコナゾール、プロチオコナゾール、シメコナゾール、トリアジメホン、トリアジメノール、テブコナゾール、テトラコナゾール、トリチコナゾール、プロクロラズ、ペフラゾエート、イマザリル、トリフルミゾール、シアゾファミド、ベノミル、カルベンダジム、チアベンダゾール、フベリダゾール、エタボキサム、エトリジアゾール、ヒメキサゾール、アザコナゾール、ジニコナゾール−Ｍ、オキスポコナゾール、パクロブトラゾール、ウニコナゾール、１−（４−クロロフェニル）−２−（［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−シクロヘプタノール及びイマザリルスルフェートを含むアゾール；Ｂ２）アゾキシストロビン、ジモキシストロビン、エネストロブリン、フルオキサストロビン、クレソキシム−メチル、メトミノストロビン、オリサストロビン、ピコキシストロビン、ピラクロストロビン、トリフロキシストロビン、エネストロブリン、メチル（２−クロロ−５−［１−（３−メチルベンジルオキシイミノ）エチル］ベンジル）カルバメート、メチル（２−クロロ−５−［１−（６−メチルピリジン−２−イルメトキシイミノ）エチル］ベンジル）カルバメート、メチル２−（オルト−（２，５−ジメチルフェニルオキシメチレン）−フェニル）−３−メトキシアクリレート、２−（２−（６−（３−クロロ−２−メチル−フェノキシ）−５−フルオロ−ピリミジン−４−イルオキシ）−フェニル）−２−メトキシイミノ−Ｎ−メチル−アセトアミド及び３−メトキシ−２−（２−（Ｎ−（４−メトキシ−フェニル）−シクロプロパンカルボキシイミドイルスルファニルメチル）−フェニル）−アクリル酸メチルエステルを含むストロビルリン；Ｂ３）カルボキシン、ベナラキシル、ベナラキシル−Ｍ、フェンヘキサミド、フルトラニル、フラメトピル、メプロニル、メタラキシル、メフェノキサム、オフレース、オキサジキシル、オキシカルボキシン、ペンチオピラド、イソピラザム、チフルザミド、チアジニル、３，４−ジクロロ−Ｎ−（２−シアノフェニル）イソチアゾール−５−カルボキサミド、ジメトモルフ、フルモルフ、フルメトベル、フルオピコリド（ピコベンズアミド）、ゾキサミド、カルプロパミド、ジクロシメット、マンジプロパミド、Ｎ−（２−（４−［３−（４−クロロフェニル）プロパ−２−インイルオキシ］−３−メトキシフェニル）エチル）−２−メタンスルホニル−アミノ−３−メチルブチルアミド、Ｎ−（２−（４−［３−（４−クロロフェニル）プロパ−２−インイルオキシ］−３−メトキシ−フェニル）エチル）−２−エタンスルホニルアミノ−３−メチルブチルアミド、メチル３−（４−クロロフェニル）−３−（２−イソプロポキシカルボニル−アミノ−３−メチル−ブチリルアミノ）プロピオネート、Ｎ−（４’−ブロモビフェニル−２−イル）−４−ジフルオロメチル−メチルチアゾール−δ−カルボキサミド、Ｎ−（４’−トリフルオロメチル−ビフェニル−２−イル）−４−ジフルオロメチル−２−メチルチアゾール−５−カルボキサミド、Ｎ−（４’−クロロ−３’−フルオロビフェニル−２−イル）−４−ジフルオロメチル−２−メチル−チアゾール−５−カルボキサミド、Ｎ−（３，４’−ジクロロ−４−フルオロビフェニル−２−イル）−３−ジフルオロ−メチル−１−メチルピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’，４’−ジクロロ−５−フルオロビフェニル−２−イル）−３−ジフルオロメチル−１−メチルピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（２−シアノ−フェニル）−３，４−ジクロロイソチアゾール−５−カルボキサミド、２−アミノ−４−メチル−チアゾール−５−カルボキシアニリド、２−クロロ−Ｎ−（１，１，３−トリメチル−インダン−４−イル）−ニコチンアミド、Ｎ−（２−（１，３−ジメチルブチル）−フェニル）−１，３−ジメチル−５−フルオロ−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（４’−クロロ−３’，５−ジフルオロ−ビフェニル−２−イル）−３−ジフルオロメチル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（４’−クロロ−３’，５−ジフルオロ−ビフェニル−２−イル）−３−トリフルオロメチル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’，４’−ジクロロ−５−フルオロ−ビフェニル−２���イル）−３−トリフルオロメチル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’，５−ジフルオロ−４’−メチル−ビフェニル−２−イル）−３−ジフルオロメチル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’，５−ジフルオロ−４’−メチル−ビフェニル−２−イル）−３−トリフルオロメチル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、
Ｎ−（シス−２−ビシクロプロピル−２−イル−フェニル）−３−ジフルオロメチル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（トランス−２−ビシクロプロピル−２−イル−フェニル）−３−ジフルオロ−メチル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、フルオピラム、Ｎ−（３−エチル−３，５−５−トリメチル−シクロヘキシル）−３−ホルミルアミノ−２−ヒドロキシ−ベンズアミド、オキシテトラサイクリン、シルチオファム、Ｎ−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）シクロプロパンカルボキサミド、２−ヨード−Ｎ−フェニル−ベンズアミド、Ｎ−（２−ビシクロ−プロピル−２−イル−フェニル）−３−ジフルオロメチル−１−メチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（３’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−１，３−ジメチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（３’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−１，３−ジメチル−５−フルオロピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（３’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−５−クロロ−１，３−ジメチル−ピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（３’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−３−フルオロメチル−１−メチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（３’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−３−（クロロフルオロメチル）−１−メチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（３’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−３−ジフルオロメチル−１−メチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（３’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−３−ジフルオロメチル−５−フルオロ−１−メチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（３’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−５−クロロ−３−ジフルオロメチル−１−メチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（３’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−３−（クロロジフルオロメチル）−１−メチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（３’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−トリフルオロメチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（３’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−５−フルオロ−１−メチル−３−トリフルオロメチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（３’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−５−クロロ−１−メチル−３−トリフルオロメチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（２’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−１，３−ジメチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（２’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−１，３−ジメチル−５−フルオロピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（２’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−５−クロロ−１，３−ジメチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（２’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−３−フルオロメチル−１−メチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（２’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−３−（クロロフルオロメチル）−１−メチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（２’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−３−ジフルオロメチル−１−メチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（２’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−３−ジフルオロメチル−５−フルオロ−１−メチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（２’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−５−クロロ−３−ジフルオロメチル−１−メチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（２’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−３−（クロロジフルオロメチル）−１−メチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（２’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−トリフルオロメチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（２’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−５−フルオロ−１−メチル−３−トリフルオロメチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（２’，４’，５’−トリフルオロビフェニル−２−イル）−５−クロロ−１−メチル−３−トリフルオロメチルピラゾール−４−イルカルボキサミド、Ｎ−（３’，４’−ジクロロ−３−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’，４’−ジクロロ−３−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−ジフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’，４’−ジフルオロ−３−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’，４’−ジフルオロ−３−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−Ｓ−ジフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’−クロロ−４’−フルオロ−３−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−ジフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’，４’−ジクロロ−４−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’，４’−ジフルオロ−４−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−Ｓ−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’，４’−ジクロロ−４−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−ジフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’，４’−ジフルオロ−４−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−ジフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’−クロロ−４’−フルオロ−４−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−Ｓ−ジフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’，４’−ジクロロ−５−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’，４’−ジフルオロ−５−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’，４’−ジクロロ−５−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−Ｓ−ジフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’，４−ジフルオロ−５−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−ジフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’，４’−ジクロロ−５−フルオロビフェニル−２−イル）−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（３’−クロロ−４’−フルオロ−５−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−ジフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（４’−フルオロ−４−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（４’−フルオロ−５−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（４’−クロロ−５−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（４’−メチル−５−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（４’−フルオロ−５−フルオロビフェニル−２−イル）−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（４’−クロロ−５−フルオロビフェニル−２−イル）−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（４’−メチル−５−フルオロビフェニル−２−イル）−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（４’−フルオロ−６−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−（４’−クロロ−６−フルオロビフェニル−２−イル）−１−メチル−３−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−［２−（１，１，２，３，３，３−ヘキサフルオロプロポキシ）−フェニル］−３−ジフルオロメチル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、Ｎ−［４’−（トリフルオロメチルチオ）−ビフェニル−２−イル］−３−ジフルオロメチル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド及びＮ−［４’−（トリフルオロメチルチオ）−ビフェニル−２−イル］−１−メチル−３−トリフルオロメチル−ｌ−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドを含むカルボキサミド；Ｂ４）フルアジナム、ピリフェノックス、ブピリメート、シプロジニル、フェナリモル、フェリムゾン、メパニピリム、ヌアリモル、ピリメタニル、トリフォリン、フェンピクロニル、フルジオキソニル、アルジモルフ、ドデモルフ、フェンプロピモルフ、トリデモルフ、フェンプロピジン、イプロジオン、プロシミドン、ビンクロゾリン、ファモキサドン、フェンアミドン、オクチリノン、プロベン（ｐｒｏｂｅｎ）−アゾール、５−クロロ−７−（４−メチルピペリジン−１−イル）−６−（２，４，６−トリフルオロフェニル）−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン、アニラジン、ジクロメジン、ピロキロン、プロキナジド、トリシクラゾール、２−ブトキシ−６−ヨード−３−プロピルクロメン−４−オン、アシベンゾラル−Ｓ−メチル、カプタホール、キャプタン、ダゾメット、ホルペット、フェノキサニル、キノキシフェン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−（３−ブロモ−６−フルオロ−２−メチルインドール−１−スルホニル）−［１，２，４］トリアゾール−１−スルホンアミド、５−エチル−６−オクチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２，７−ジアミン、２，３，５，６−テトラクロロ−４−メタンスルホニル−ピリジン、３，４，５−トリクロロピリジン−２，６−ジ−カルボニトリル、Ｎ−（１−（５−ブロモ−３−クロロ−ピリジン−２−イル）−エチル）−２，４−ジクロロニコチンアミド、Ｎ−（（５−ブロモ−３−クロロピリジン−２−イル）−メチル）−２，４−ジクロロ−ニコチンアミド、ジフルメトリム、ニトラピリン、ドデモルフアセテート、フルオロイミド、ブラストサイジン−Ｓ、キノメチオネート、デバカルブ、ジフェンゾクワット、ジフェンゾクワット−メチルスルフェート、オキソリン酸及びピペラリンを含む複素環式化合物；Ｂ５）マンコゼブ、マネブ、メタム、メタスルホカルブ、メチラム、フェルバム、プロピネブ、チラム、ジネブ、ジラム、ジエトフェンカルブ、イプロバリカルブ、ベンチアバリカルブ、プロパモカルブ、プロパモカルブヒドロクロリド、４−フルオロフェニル−Ｎ−（１−（１−（４−シアノフェニル）−エタンスルホニル）ブト−２−イル）カルバメート、メチル−３−（４−クロロ−フェニル）−３−（２−イソプロキシカルボニルアミノ−３−メチル−ブチリルアミノ）プロパノエートを含むカルバメート；又は、Ｂ６）グアニジン、ドジン、ドジン遊離塩基、
イミノクタジン、グアザチン、抗生物質：カスガマイシン、ストレプトマイシン、ポリオキシン、バリダマイシンＡ、ニトロフェニル誘導体：ビナパクリル、ジノカップ、ジノブトン、硫黄含有複素環式化合物：ジチアノン、イソプロチオラン、有機金属化合物：フェンチン塩、有機リン化合物：エジフェンホス、イプロベンホス、ホセチル、ホセチル−アルミニウム、亜リン酸及びその塩、ピラゾホス、トルクロホス−メチル、有機塩素化合物：ジクロフルアニド、フルスルファミド、ヘキサクロロ−ベンゼン、フタリド、ペンシクロン、キントゼン、チオファネート−メチル、トリルフルアニド、その他：シフルフェナミド、シモキサニル、ジメチリモール、エチリモール、フララキシル、メトラフェノン及びスピロキサミン、グアザチン−アセテート、イミノクタジン−トリアセテート、イミノクタジン−トリス（アルベシレート）、カスガマイシンヒドロクロリド水和物、ジクロロフェン、ペンタクロロフェノール及びその塩、Ｎ−（４−クロロ−２−ニトロ−フェニル）−Ｎ−エチル−４−メチル−ベンゼンスルホンアミド、ジクロラン、ニトロタール−イソプロピル、テクナゼン、ビフェニル、ブロノポール、ジフェニルアミン、ミルジオマイシン、オキシン銅、プロヘキサジオンカルシウム、Ｎ−（シクロプロピルメトキシイミノ−（６−ジフルオロメトキシ−２，３−ジフルオロ−フェニル）−メチル）−２−フェニルアセトアミド、Ｎ’−（４−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェノキシ）−２，５−ジメチル−フェニル）−Ｎ−エチル−Ｎ−メチルホルムアミジン、Ｎ’−（４−（４−フルオロ−３−トリフルオロメチル−フェノキシ）−２，５−ジメチル−フェニル）−Ｎ−エチル−Ｎ−メチルホルムアミジン、Ｎ’−（２−メチル−５−トリフルオロメチル−４−（３−トリメチルシラニル−プロポキシ）−フェニル）−Ｎ−エチル−Ｎ−メチルホルムアミジン、並びに、Ｎ’−（５−ジフルオロメチル−２−メチル−４−（３−トリメチルシラニル−プロポキシ）−フェニル）−Ｎ−エチル−Ｎ−メチルホルムアミジンを含む他の殺真菌剤。
【００９２】
除草剤：Ｃ１）アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ阻害剤（ＡＣＣ）、例えば、アロキシジム、クレトジム、クロプロキシジム、シクロキシジム、セトキシジム、トラルコキシジム、ブトロキシジム、クレフォキシジム若しくはテプラロキシジム等のシクロヘキセノンオキシムエーテル；クロジナホップ−プロパルギル、シハロホップ−ブチル、ジクロホップ−メチル、フェノキサプロップ−エチル、フェノキサプロップ−Ｐ−エチル、フェンチアプロップエチル、フルアジホップ−ブチル、フルアジホップ−Ｐ−ブチル、ハロキシホップ−エトキシエチル、ハロキシホップ−メチル、ハロキシホップ−Ｐ−メチル、イソキサピリホップ、プロパキザホップ、キザロホップ−エチル、キザロホップ−Ｐ−エチル若しくはキザロホップ−テフリル等のフェノキシフェノキシプロピオン酸エステル；又は、フランプロップ−メチル若しくはフランプロップ−イソプロピル等のアリールアミノプロピオン酸；Ｃ２）アセトラクターゼ合成酵素阻害剤（ＡＬＳ）、例えば、イマザピル、イマザキン、イマザメタベンズ−メチル（イマザメ（ｉｍａｚａｍｅ））、イマザモックス、イマザピック若しくはイマゼタピル等のイミダゾリノン；ピリチオバック酸、ピリチオバック−ナトリウム、ビスピリバック−ナトリウム、ＫＩＨ−６１２７若しくはピリベンゾキシム等のピリミジルエーテル；フロラスラム、フルメトスラム若しくはメトスラム等のスルホンアミド；又は、アミドスルフロン、アジムスルフロン、ベンスルフロン−メチル、クロリムロン−エチル、クロルスルフロン、シノスルフロン、シクロスルファムロン、エタメトスルフロン−メチル、エトキシスルフロン、フラザスルフロン、ハロスルフロン−メチル、イマゾスルフロン、メトスルフロン−メチル、ニコスルフロン、プリミスルフロン−メチル、プロスルフロン、ピラゾスルフロン−エチル、リムスルフロン、スルホメツロン−メチル、チフェンスルフロン−メチル、トリアスルフロン、トリベヌロン−メチル、トリフルスルフロン−メチル、トリトスルフロン、スルホスルフロン、ホラムスルフロン若しくはヨードスルフロン等のスルホニル尿素；Ｃ３）アミド、例えば、アリドクロル（ＣＤＡＡ）、ベンゾイルプロップ−エチル、ブロモブチド、クロルチアミド、ジフェナミド、エトベンザニド、フルチアミド、ホサミン又はモナリド；Ｃ４）オーキシン除草剤、例えば、クロピラリド若しくはピクロラム等のピリジンカルボン酸；又は、２，４−Ｄ若しくはベナゾリン；Ｃ５）オーキシン輸送阻害剤、例えば、ナプタラメ又はジフルフェンゾピル；Ｃ６）カロテノイド生合成阻害剤、例えば、ベンゾフェナップ、クロマゾン、ジフルフェニカン、フルオロクロリドン、フルリドン、ピラゾリネート、ピラゾキシフェン、イソキサフルトール、イソキサクロルトール、メソトリオン、スルコトリオン（クロルメスロン）、ケトスピラドックス、フルルタモン、ノルフルラゾン又はアミトロール；Ｃ７）エノールピルビルシキミ酸−３−リン酸合成酵素阻害剤（ＥＰＳＰＳ）、例えば、グリホサート又はスルホサート；Ｃ８）グルタミン合成酵素阻害剤、例えば、ビアラホス又はグルホシネート−アンモニウム；Ｃ９）脂質生合成阻害剤、例えば、アニロホス若しくはメフェナセット等のアニリド；ジメテナミド、Ｓ−ジメテナミド、アセトクロール、アラクロール、ブタクロール、ブテナクロール、ジエタチル−エチル、ジメタクロール、メタザクロール、メトラクロール、Ｓ−メトラクロール、プレチラクロール、プロパクロール、プリナクロール、テルブクロール、テニルクロール若しくはキシラクロール等のクロロアセトアニリド；ブチレート、シクロエート、ジ−アレート、ジメピペレート、ＥＰＴＣ．エスプロカルブ、モリネート、ペブレート、プロスルホカルブ、チオベンカルブ（ベンチオカルブ）、トリ−アレート若しくはバーナレート等のチオ尿素；又は、ベンフレセート若しくはパーフルイドン；Ｃ１０）有糸分裂阻害剤、例えば、アシュラム、カルベタミド、クロルプロファム、オルベンカルブ、プロピザミド、プロファム若しくはチオカルバジル等のカルバメート；ベネフィン、ブトラリン、ジニトラミン、エタルフルラリン、フルクロラリン、オリザリン、ペンジメタリン、プロジアミン若しくはトリフルラリン等のジニトロアニリン；ジチオピル若しくはチアゾピル等のピリジン；又は、ブタミホス、クロルタール−ジメチル（ＤＣＰＡ）若しくはマレイン酸ヒドラジド；Ｃ１１）プロトポルフィリノーゲンＩＸオキシダーゼ阻害剤、例えば、アシフルオルフェン、アシフルオルフェン−ナトリウム、アクロニフェン、ビフェノックス、クロミトロフェン（ＣＮＰ）、エトキシフェン、フルオロジフェン、フルオログリコフェン−エチル、フォメサフェン、フリロキシフェン、ラクトフェン、ニトロフェン、ニトロフルオルフェン若しくはオキシフルオルフェン等のジフェニルエーテル；オキサジアルギル若しくはオキサジアゾン等のオキサジアゾール；アザフェニジン、ブタフェナシル、カルフェントラゾン、カルフェントラゾン−エチル、シニドン−エチル、フルミクロラックペンチル、フルミオキサジン、フルミプロピン、フルプロパシル、フルチアセット−メチル、スルフェントラゾン若しくはチジアジミン等の環状イミド；又は、ＥＴ−７５１、ＪＶ  ４８５若しくはニピラクロフェン等のピラゾール；Ｃ１２）光合成阻害剤、例えば、プロパニル、ピリデート若しくはピリダフォル；ベンタゾン等のベンゾチアジアジノン；ジニトロフェノール、例えば、ブロモフェノキシム、ジノセブ、ジノセブ−アセテート、ジノテルブ若しくはＤＮＯＣ；シペルクアット−クロリド、ジフェンゾクワット−メチルスルフェート、ジクワット若しくはパラコート−ジクロリド等のジピリジレン；クロルブロムロン、クロロトルロン、ジフェノクスロン、ジメフロン、ジウロン、エチジムロン、フェヌロン、フルオメツロン、イソプロチュロン、イソウロン、リヌロン、メタベンズチアズロン、メタゾール、メトベンズロン、メトキスロン、モノリニュロン、ネブロン、シデュロン若しくはテブチウロン等の尿素；ブロモキシニル若しくはイオキシニル等のフェノール；クロリダゾン；アメトリン、アトラジン、シアナジン、デスメイン、ジメタメトリン、ヘキサジノン、プロメトン、プロメトリン、プロパジン、シマジン、シメトリン、テルブメトン、テルブトリン、テルブチラジン若しくはトリエタジン等のトリアジン；メタミトロン等のトリアジノン；ブロマシル、レ���シル若しくはテルバシル等のウラシル；又は、デスメジファム若しくはフェンメジファム等のビスカルバメート；Ｃ１３）相乗剤、例えば、トリジファン等のオキシラン；Ｃ１４）ＣＩＳ細胞壁合成阻害剤、例えば、イソキサベン又はジクロベニル；Ｃ１６）様々な他の除草剤、例えば、ダラポン等のジクロロプロピオン酸；エトフメセート等のジヒドロベンゾフラン；クロルフェナック（フェナック）等のフェニル酢酸；又は、アジプロトリン、バルバン、ベンスリド、ベンズチアズロン、ベンゾフルオール、ブミナホス、ブチダゾール、ブツロン、カフェンストロール、クロルブファム、クロルフェンプロップ−メチル、クロロクスロン、シンメチリン、クミルロン、シクルロン、シプラジン、シプラゾール、ジベンジルロン、ジプロペトリン、ダイムロン、エグリナジン−エチル、エンドタール、エチオジン、フルカバゾン、フルオルベントラニル、フルポキサム、イソカルバミド、イソプロパリン、カルブチレート、メフルイジド、モヌロン、ナプロップアミド、ナプロップアニリド、ニトラリン、オキサシクロメフォン、フェニソファム、ピペロホス、プロシアジン、プロフルアリン、ピリブチカルブ、セクブメトン、スルファレート（ＣＤＥＣ）、テルブカルブ、トリアジフラム、トリアゾフェナミド若しくはトリメツロン；又は、それらの環境適合性の塩。
【００９３】
殺線虫剤又はバイオ殺線虫剤：ベノミル、クロエトカルブ、アルドキシカルブ、チルパート、ジアミダホス、フェナミホス、カズサホス、ジクロフェンチオン、エトプロホス、フェンスルホチオン、ホスチアゼート、ヘテロホス、イサミドホス（ｉｓａｍｉｄｏｆｏｆ）、イサゾホス、ホスホカルブ、チオナジン、イミシアホス、メカルホン、アセトプロール、ベンクロチアズ、クロロピクリン、ダゾメット、フルエンスルホン、１，３−ジクロロプロペン（ｔｅｌｏｎｅ）、ジメチルジスルフィド、メタムナトリウム、メタムカリウム、メタム塩（全てＭＩＴＣ生成）、臭化メチル、生物学的土壌改善物（例えば、マスタード種子、マスタード種子抽出物）、土壌の蒸気燻蒸、アリルイソチオシアネート（ＡＩＴＣ）、硫酸ジメチル、フルフアール（アルデヒド）。
【００９４】
本発明の適切な植物成長調節剤は、次のものを含む。植物成長調整剤：Ｄ１）クロフィブリン酸、２，３，５−トリヨード安息香酸等のアンチオーキシン；Ｄ２）４−ＣＰＡ、２，４−Ｄ、２，４−ＤＢ、２，４−ＤＥＰ、ジクロルプロップ、フェノプロップ、ＩＡＡ、ＩＢＡ、ナフタレンアセトアミド、α−ナフタレン酢酸、１−ナフトール、ナフトキシ酢酸、ナフテン酸カリウム、ナフテン酸ナトリウム、２，４，５−Ｔ等のオーキシン；Ｄ３）２ｉＰ、ベンジルアデニン、４−ヒドロキシフェンエチルアルコール、カイネチン、ゼアチン等のサイトカイニン；Ｄ４）カルシウムシアナミド、ジメチピン、エンドタール、エセフォン、メルホス、メトクスロン、ペンタクロロフェノール、チジアズロン、トリブホス等の枯れ葉剤；Ｄ５）アビグリシン、１−メチルシクロプロペン等のエチレン阻害剤；Ｄ６）ＡＣＣ、エタセラシル、エテホン、グリオキシム等のエチレン放出剤；Ｄ７）フェンリダゾン、マレイン酸ヒドラジド等のガメトシド；Ｄ８）ジベレリン、ジベレリン酸等のジベレリン；Ｄ９）アブシジン酸、アンシミドール、ブトラリン、カルバリル、クロルホニウム、クロルプロファム、ジケグラック、フルメトラリン、フルオリドアミド、ホサミン、グリホジン、イソピリモル、ジャスモン酸、マレイン酸ヒドラジド、メピコート、ピプロクタニル、プロヒドロジャスモン、プロファム、チアオジエアン（ｔｉａｏｊｉｅａｎ）、２，３，５−トリヨード安息香酸等の成長阻害剤；Ｄ１０）クロルフルレン、クロルフレノール、ジクロルフルレノール、フルレノール等のモルファクチン；Ｄ１１）クロルメコート、ダミノジド、フルルプリミドール、メフルイジド、パクロブトラゾール、テトシクラシス、ウニコナゾール等の成長抑制剤；Ｄ１２）ブラシノリド、ブラシノリド−エチル、ＤＣＰＴＡ、ホルクロルフェヌロン、ヒメキサゾール、プロスレル（ｐｒｏｓｕｌｅｒ）、トリアコンタノール等の成長刺激剤；Ｄ１３）バクメデシュ、ベンゾフルオール、ブミナホス、カルボン、コリンクロリド、シオブチド、クロフェンセット、シアナミド、シクラニリド、シクロヘキシミド、シプロスルファミド、エポコレオン、エチクロゼート、エチレン、フフェンチオウレア（ｆｕｐｈｅｎｔｈｉｏｕｒｅａ）、フララン（ｆｕｒａｌａｎｅ）、ヘプトパルギル、ホロスルフ、イナベンフィド、カレタザン、ヒ酸鉛、メタスルホカルブ、プロヘキサジオン、ピダノン、シントフェン、トリアペンテノール、トリネキサパック等の分類されていない植物成長調整剤。
【００９５】
肥料は、液体肥料とすることができる。“液体肥料”という用語は、様々な割合の窒素、リン及びカリウム（例えば、１０％の窒素、３４％のリン及び０％のカリウム等があるが、これに限定されない）並びに微量栄養素を含む流体又は液体形態における肥料を示し、リンを多く含み迅速且つ強力な根の成長を促進するスターター肥料として一般的に知られている。
【００９６】
本発明の化学製剤は、任意の適切な従来型の形態、例えば、乳剤（ＥＣ）、懸濁剤（ＳＣ）、サスポエマルジョン剤（ＳＥ）、カプセル懸濁剤（ＣＳ）、水分散性顆粒剤（ＷＧ）、乳化性顆粒剤（ＥＧ）、油中水型エマルジョン剤（ＥＯ）、水中油型エマルジョン剤（ＥＷ）、マイクロエマルジョン剤（ＭＥ）、油分散剤（ＯＤ）、油混和性フロアブル剤（ＯＦ）、油混和性液剤（ＯＬ）、可溶性濃縮剤（ＳＬ）、超低容量懸濁剤（ＳＵ）、超低容量液剤（ＵＬ）、分散性濃縮剤（ＤＣ）、水和剤（ＷＰ）又は農業上許容されるアジュバントと組み合わせた技術的に可能な任意の製剤であり得る。
【００９７】
１つの実施の形態では、製品が提供される。製品は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物を含む第１の組成物、微生物学的、生物学的又は化学的な殺虫剤、殺真菌剤、殺線虫剤、殺細菌剤、除草剤、植物抽出物、植物成長調整剤又は肥料のうちの１つ又は組み合わせを含む第２の組成物、並びに、必要に応じて、植物の枝葉、植物の樹皮、植物の果実、植物の花、植物の種子、植物の根、植物の切断片、植物の移植片、植物のカルス組織、植物の周囲の土壌若しくは成長培地、土壌若しくは成長培地中に植物の種子を播種する前の土壌若しくは成長培地、又は、土壌若しくは成長培地中に植物、植物切断片、植物移植片若しくは植物カルス組織を植え付ける前の土壌若しくは成長培地に、第１の組成物及び第２の組成物の組み合わせを、植物の成長に利益をもたらすために適切な量において送達するための説明書、を含む。第１の組成物及び第２の組成物は、別々に包装されている。
【００９８】
１つの実施の形態では、第１の組成物は、担体、分散剤又は酵母抽出物のうちの１つ又は組み合わせを更に含む。
【００９９】
１つの実施の形態では、第１の組成物は、液体、粉剤、展延性粒剤、乾燥水和性粉末剤又は乾燥水和性粒剤の形態である。１つの実施の形態では、第１の組成物は、液体の形態であり、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在する。１つの実施の形態では、第１の組成物は、粉剤、乾燥水和性粉末剤、展延性粒剤又は乾燥水和性粒剤の形態であり、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｇから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｇの量で存在する。１つの実施の形態では、第１の組成物は、油分散体の形態であり、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在する。
【０１００】
製品において、殺虫剤は、ピレスロイド、ビフェントリン、テフルトリン、ゼータ−シペルメトリン、有機リン酸塩、クロルエトキシホス、クロルピリホス、テブピリンホス、シフルトリン、フィプロール、フィプロニル、ニコチノイド又はクロチアニジンのうちの１つ又は組み合わせであり得る。１つの実施の形態では、製品の第２の組成物中の殺虫剤は、ビフェントリンを含む。１つの実施の形態では、製品の第２の組成物中の殺虫剤はビフェントリンを含み、液体肥料と相溶性を有する製剤中にある。
【実施例】
【０１０１】
以下の実施例は、本開示の主題の代表的な実施の形態を実施するための当業者への指針を提供するために含まれている。本発明及び当業者の一般的なレベルに照らして、当業者であれば、以下の実施例は単なる例示であり、多くの変更、変形及び改変が本開示の主題の範囲から逸脱することなく実施することができることを理解することができる。
【０１０２】
実施例１
配列分析によるバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）としての細菌分離株の同定
ここにおいてＲＴＩ４７７と示される植物関連細菌株は、ノースカロライナ州で栽培されたモリンタ・オレイフェラの根から単離された。ＲＴＩ４７７株の１６Ｓ  ｒＲＮＡ及びｒｐｏＢ遺伝子を配列決定し、続いてＢＬＡＳＴを用いてＮＣＢＩ及びＲＤＰデータベース中の他の既知の細菌株と比較した。ＲＴＩ４７７の１６Ｓ  ＲＮＡ部分配列（配列番号１）は、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＢＳｎ５株（ＣＰ００２４６８）、バチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＮＳ６株（ＫＦ１７７１７５）及びバチルス・サブチリス亜種サブチリス（Bacillus subtilis subsp. subtilis）ＤＳＭ  １０株（ＮＲ＿０２７５５２）の１６Ｓ  ｒＲＮＡ遺伝子部分配列と同一であることが同定された。更に、ＲＴＩ４７７のｒｐｏＢ配列は、既知であるバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＰＹ７９株（ＣＰ００６８８１）、バチルス・サブチリス亜種サブチリス（Bacillus subtilis subsp. subtilis）６０５１−ＨＧＷ株（ＣＰ００３３２９）（９９％配列同一性；９ｂｐの差異）、及びバチルス・サブチリス亜種サブチリス（Bacillus subtilis subsp. subtilis）ＢＡＢ−１ａ株（ＣＰ００４４０５）（９９％配列同一性；１０ｂｐの差異）に対して９９％の配列同一性を有することが決定された。ＲＴＩ４７７株はバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）の株として同定された。ＤＮＡレベルでのｒｐｏＢ遺伝子の配列の相違は、ＲＴＩ４７７がバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）の新しい株であることを示している。バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株は、米国バージニア州マナッサスのアメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）における特許手続きのための微生物寄託の国際的承認に関するブダペスト条約の条件の下、２０１４年４月１７日に寄託され、特許受託番号ＰＴＡ−１２１１６７を有する。
【０１０３】
実施例２
配列分析によるバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）としての細菌分離株の同定
ここにおいてＲＴＩ３０１と示される植物関連細菌株は、ニューヨークのブドウ園で生育するブドウのつるの根圏土壌から単離された。ＲＴＩ３０１株の１６Ｓ  ｒＲＮＡ及びｒｐｏＢ遺伝子を配列決定し、続いてＢＬＡＳＴを用いてＮＣＢＩ及びＲＤＰデータベース中の他の既知の細菌株と比較した。ＲＴＩ３０１の１６Ｓ  ＲＮＡ部分配列（配列番号３）は、バチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＮＳ６株（ＫＦ１７７１７５）、バチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＦＺＢ４２株（ＮＲ＿０７５００５）、及びバチルス・サブチリス亜種サブチリス（Bacillus subtilis subsp. subtilis）ＤＳＭ  １０株（ＮＲ＿０２７５５２）の１６Ｓ  ｒＲＮＡ遺伝子配列と同一であることが同定された。ＲＴＩ３０１のｒｐｏＢ遺伝子配列（配列番号４）は、バチルス・アミロリケファシエンス亜種プランタルム（Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum）ＴｒｉｇｏＣｏｒ１４４８（ＣＰ００７２４４）（９９％配列同一性；３塩基対の差異）、バチルス・アミロリケファシエンス亜種プランタルム（Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum）ＡＳ４３．３（ＣＰ００３８３８）（９９％配列同一性；７塩基対の差異）、バチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＣＣ１７８（ＣＰ００６８４５）（９９％配列同一性；８塩基対の差異）、及びバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＦＺＢ４２（ＣＰ０００５６０）（９９％配列同一性；８塩基対の差異）における同一遺伝子と配列類似性を有することも決定された。ＲＴＩ３０１株はバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）として同定された。ＤＮＡレベルでのｒｐｏＢ遺伝子の配列の相違は、ＲＴＩ３０１がバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）の新しい株であることを示している。バチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＲＴＩ３０１株は、米国バージニア州マナッサスのアメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）における特許手続きのための微生物寄託の国際的承認に関するブダペスト条約の条件の下、２０１４年４月１７日に寄託され、特許受託番号ＰＴＡ−１２１１６５を有する。
【０１０４】
実施例３
バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７における抗菌化合物の生合成関連遺伝子
バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株のゲノムの更なる配列分析では、この株が抗菌特性を有する分子の産生のための多数の生合成経路に関連する遺伝子を有することが明らかになった。これらには、サブチロシン、サーファクチン、イツリン、フェンギシン、アミロサイクリシン、ジフィシジン、バシリシン、バシロマイシン及びバシラエンについての生合成経路が含まれる。更に、ＲＴＩ３０１株においてランチビオティック生合成に関連する遺伝子が発見されたが、これは他の密接に関連したバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）株に同族体は存在しない。これについては、図１に示され、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株に見られるランチビオティック生合成オペロンを取り囲む及び含むゲノム機構の模式図を示す。図１では、一番上の組の矢印は、示された転写の相対的な方向を有するＲＴＩ３０１株のタンパク質コード領域を表す。比較のために、２つのバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）参照株であるＦＺＢ４２及びＴｒｉｇｏＣｏｒ１４４８についての対応領域を、ＲＴＩ３０１株の下に示す。ＲＴＩ３０１株におけるランチビオティック合成オペロンの遺伝子は、ＲＡＳＴを用いて最初に同定され、次いでそれらの同定はＢＬＡＳＴｐを用いて精査された。２つの参照株と比較したＲＴＩ３０１株の遺伝子によってコードされるタンパク質のアミノ酸同一性の程度は、代表的な矢印の陰影の程度及び矢印内に示される同一性パーセントの両方によって示される。ランチビオティック合成オペロンを囲む領域の３つの異なる株由来の遺伝子には高い程度の配列同一性があるが、ランチビオティック合成オペロン内では低い程度の配列同一性しかない（即ち、ランチビオティック合成オペロン内では４０％未満であるが、周辺領域では９９％より大きい）ということが図１から観察され得る。ＮＣＢＩにおいて非重複（ｎｒ）ヌクレオチドデータベースに対するこのクラスターのＢＬＡＳＴｎ分析を行うと、Ｂ．アミロリケファシエンス（B. amyloliquefaciens）株について５’及び３’フランキング領域中で高い程度の相同性（図１の高％相同性と類似）を示した。しかし、ランチペプチド生合成クラスターはＲＴＩ３０１に独特であり、ＮＣＢＩｎｒデータベースにおいて従来に配列決定された任意のＤＮＡに対して有意な相同性は観察されなかった。従って、このランチビオティック合成オペロンは、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株の独特な特徴である。
【０１０５】
広範囲の抗菌生合成経路を有するＲＴＩ３０１株とは対照的に、ＲＴＩ４７７株の更なる配列分析では、この株が抗菌特性を有する更に限定された分子群についての生合成経路に関連する遺伝子を有することが明らかになった。ＲＴＩ４７７株は、サブチロシン、フェンギシン、サーファクチン、ジフィシジン、バシラエン、バシリシン及びバシロマイシンについての生合成経路を有するが、イツリン、ランチビオティック及びアミロサイクリシンについての完全な生合成経路は観察されなかった。
【０１０６】
実施例４
バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７分離株及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１分離株の抗菌特性
主要な植物病原体に対するバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７分離株及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１分離株の拮抗能力をプレートアッセイで測定した。植物真菌病原体に対する拮抗作用の評価のためのプレートアッセイは、４ｃｍの距離で８６９寒天プレート上に細菌分離株及び病原性真菌を並べて培養することによって実施した。プレートを室温でインキュベートし、増殖阻害、ニッチ占有又は効果無し等の増殖挙動について、２週間まで定期的にチェックした。細菌性病原体に対する拮抗特性をスクリーニングする時、病原体は最初に８６９寒天プレート上に成育箇所として広げられた。続いて、分離株の各々の培養物の２０μｌアリコートをプレート上にスポットした。プレートを室温でインキュベートし、ＲＴＩ４７７及びＲＴＩ３０１が適用された位置の周りの成育箇所の阻害領域について、２週間まで定期的にチェックした。拮抗活性の概要を、それぞれＲＴＩ４７７株及びＲＴＩ３０１株の各々について、以下の表Ｉ及びＩＩに示す。ＲＴＩ３０１株は、ＲＴＩ４７７株と比較して、広い範囲の植物病原性微生物に対する優れた拮抗特性を示した。
【０１０７】
表Ｉ．主要な植物病原体に対するバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７分離株の拮抗特性
【表１】
0006758296.tif 000002
＋＋＋非常に強い活性有り、＋＋強い活性有り、＋活性有り、＋−弱い活性有り、−活性観察されず
【０１０８】
表ＩＩ．主要な植物病原体に対するバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１分離株の拮抗特性
【表２】
0006758296.tif 000003
＋＋＋非常に強い活性有り、＋＋強い活性有り、＋活性有り、＋−弱い活性有り、−活性観察されず
【０１０９】
実施例５
バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７分離株及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１分離株の表現型形質
拮抗特性に加えて、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株についての様々な表現型形質も測定し、そのデータを以下の表ＩＩＩ及びＩＶにそれぞれの菌株の各々について示す。分析は、表の下の文章に記載された手順に従って実施された。注目すべきことに、ＲＴＩ４７７はＲＴＩ３０１と比較してより速く増殖し、強力なスウォーミング表現型を有する。
【０１１０】
表ＩＩＩ．表現型分析：バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７分離株のアセトイン及びインドール酢酸（ＩＡＡ）の植物ホルモン生成、並びに栄養サイクル
【表３】
0006758296.tif 000004
＋＋＋非常に強い、＋＋強い、＋多少、＋−弱い、−観察されず
【０１１１】
表ＩＶ．表現型分析：バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１分離株のアセトイン及びインドール酢酸（ＩＡＡ）の植物ホルモン生成、並びに栄養サイクル
【表４】
0006758296.tif 000005
＋＋＋非常に強い、＋＋強い、＋多少、＋−弱い、−観察されず
【０１１２】
アセトイン試験。８６９富培地中のスターター培養物２０μｌを、１ｍｌのＭｅｔｈｙ  Ｒｅｄ−Ｖｏｇｅｓ  Ｐｒｏｓｋａｕｅｒ培地（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ  ３９４８４）に移した。培養物を３０℃、２００ｒｐｍで２日間インキュベートした。０．５ｍｌの培養物を移し、０．２ｇ／ｌのメチルレッド５０μｌを添加した。赤色は酸生成を示す。残りの０．５ｍｌの培養物を５％α−ナフトール（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｎ１０００）０．３ｍｌ、次いで４０％ＫＯＨ０．１ｍｌと混合した。３０分のインキュベーション後にサンプルを解析した。赤色の進展はアセトイン生成を示す。酸性及びアセトイン試験の両方について、非接種培地をネガティブコントロールとして使用した（Sokolら、１９７９年、Journal of Clinical Microbiology. 9: 538-540頁）。
【０１１３】
インドール−３−酢酸。８６９富培地中のスターター培養物２０μｌを、０．５ｇ／ｌトリプトファン（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｔ０２５４）が添加された１／１０の８６９培地１ｍｌに移した。培養物を３０℃、２００ＲＰＭで４−５日間暗所でインキュベートした。サンプルを遠心分離し、０．１ｍｌの上清を０．２ｍｌのＳａｌｋｏｗｓｋｉ試薬（３５％過塩素酸、１０ｍＭ  ＦｅＣｌ３）と混合した。暗所で３０分間インキュベートした後、ピンク色を呈するサンプルはＩＡＡ合成について陽性と記録された。ＩＡＡ（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｉ５１４８）の希釈液を陽性比較として使用し、非接種培地をネガティブコントロールとして使用した（Taghaviら、２００９年、Applied and Environmental Microbiology 75: 748-757頁）。
【０１１４】
リン酸塩可溶化試験。細菌を、グルコース１０ｇ、三リン酸カルシウム５ｇ、塩化カリウム０．２ｇ、硫酸アンモニウム０．５ｇ、塩化ナトリウム０．２ｇ、硫酸マグネシウム七水和物０．１ｇ、酵母抽出物０．５ｇ、硫酸マンガン２ｍｇ、硫酸鉄２ｍｇ及びリットル当たり１５ｇの寒天からなり、ｐＨ７であり、オートクレーブ処理されたＰｉｋｏｖｓｋａｙａ（ＰＶＫ）寒天培地上に播種した。透明となる領域を、リン酸塩可溶化細菌の指標とした（Sharmaら、２０１１年、Journal of Microbiology and Biotechnology Research 1: 90-95頁）。
【０１１５】
キチナーゼ活性。１０％湿重量のコロイド状キチンを、変性ＰＶＫ寒天培地（グルコース１０ｇ、塩化カリウム０．２ｇ、硫酸アンモニウム０．５ｇ、塩化ナトリウム０．２ｇ、硫酸マグネシウム七水和物０．１ｇ、酵母抽出物０．５ｇ、硫酸マンガン２ｍｇ、硫酸鉄２ｍｇ及びリットル当たり１５ｇの寒天、ｐＨ７、オートクレーブ処理）に添加した。細菌をこれらのキチンプレート上に播種し、透明となる領域はキチナーゼ活性を示す（N. K. S. Murthy & Bleakley.、２０１２年、“Simplified Method of Preparing Colloidal Chitin Used for Screening of Chitinase Producing Microorganisms”、The Internet Journal of Microbiology. 10（2））。
【０１１６】
プロテアーゼ活性。細菌を１０％ミルクを補充した８６９寒天培地に播種した。透明な領域がプロテアーゼ活性を示唆するタンパク質を分解する能力を示す（Sokolら、１９７９年、Journal of Clinical Microbiology. 9: 538-540頁）。
【０１１７】
実施例６
小麦におけるバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７分離株の成長効果
小麦における早期植物成長及び活力についての細菌分離株ＲＴＩ４７７の適用の効果を測定した。実験は、表面滅菌した発芽小麦の種子を、室温で暗所において曝気下で、約２×１０７ＣＦＵ／ｍｌの細菌懸濁液中において２日間接種することによって行った（コントロールも細菌無しで行った）。続いて、接種された種子及びコントロール種子を、砂で満たされた６インチのポットに植え付けた。１ポット毎に１０の種子及び１つの処理当たり１つのポットで植え、必要に応じて水及び改変した（Ｍｏｄｉｆｉｅｄ）Ｈｏａｇｌａｎｄ溶液を交互に摂取させた。ポットを実験室用窓枠内で約２１℃で自然の明／暗サイクルを提供して１３日間インキュベートして、その時点で植物を回収し、パラメーターを測定した。９つの植物当たりの総重量として乾燥重量は測定され、総平均乾燥植物重量で、非接種のコントロールでは３３．３８ｍｇに等しい重量になったのに対し、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株を接種した植物では３５．４１ｍｇに等しい重量になり、非接種のコントロールよりも乾燥重量で６％増加している。１３日成長させた後の抽出した植物の写真を図２に示す。図２Ａはコントロール植物を示し、図２ＢはＲＴＩ４７７を接種した植物を示す。
【０１１８】
実施例７
バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の増殖調和性
バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株と他のバチルス（Bacillus）分離株との調和性は、様々な他の株の成育箇所にＲＴＩ３０１株をスポットすることによって試験した。この実験の結果は、図３Ａ−３Ｂに示される。図３Ａ−３Ｂは、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株とバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株との間の増殖調和性、及びＲＴＩ３０１株と別のバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）株であるアメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）でＰＴＡ−１２１１６６として寄託されているバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＲＴＩ４７２株との間の調和性の欠如を示す画像である。ＲＴＩ３０１株をＲＴＩ４７２株の成育箇所にスポットした場合（図３Ａ）、ＲＴＩ４７２株の増殖について一掃された阻害領域が観察された。対照的に、ＲＴＩ３０１株をＲＴＩ４７７株の成育箇所にスポットした場合（図３Ｂ）、ＲＴＩ４７７株について、最小限の阻害のみであり細胞成育箇所の一掃は観察されなかった。従って、ＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７の増殖は調和性があると結論付けられた。
【０１１９】
いかなる特定の作用機序に限定されるものではないが、観察される菌株調和性の差異を説明するために、次のような１つの作用様式が提案される。試験した３つの菌株（即ち、ＲＴＩ３０１、ＲＴＩ４７２及びＲＴＩ４７７）のゲノム配列に基づき、これらの株は全て、拮抗化合物であるバシリシン、バシラエン、ジフィシジン及びバシロマイシンを産生することが予測された。しかしながら、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の両方はサブチロシンの合成のための遺伝子を有するが、この遺伝子はバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＲＴＩ４７２のゲノムには存在しない。サブチロシンは、類似又は密接に関連する細菌株の増殖を阻害するために細菌によって産生されるタンパク質性毒素の１種であるバクテリオシンである。従って、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１により合成されたサブチロシンは、バチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）ＲＴＩ４７２の増殖の阻害剤であり得ると仮定された。対照的に、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株は、ＲＴＩ４７７株が自身でサブチロシンを産生し、従って化合物に対して耐性であるため、ＲＴＩ３０１によって阻害されない。
【０１２０】
バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株とバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株との間の菌株形態の差異も分析した。これらの菌株の各々の形態を示す画像を、図４において、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１（図４Ａ）及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７（図４Ｂ）として示す。図４Ａ−図４Ｂにおいて示されるバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株のコロニー形態は、運動性となる場合の菌株の挙動における潜在的差異を示す。運動性は、植物関連細菌による根圏コロニー形成にとって重要な形質である。バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１は、輪郭のはっきりした円形のコロニーとして増殖する。対照的に、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７は、ふんわりとしたコロニーとして増殖し、スウォーミング及び運動性を示す形態である。スウォーミング及び運動性は、根圏及び植物根の表面の急速なコロニー形成について潜在的に重要な表現型である。また、いかなる特定の作用機序に限定されるものではないが、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株の形態に示唆される強いスウォーミングの表現型は、この株がバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１よりも根圏のより効率的なコロニーとなり得ることが仮定された。
【０１２１】
増殖調和性及び表現型に観察される差異に照らして、ＲＴＩ３０１株及びＲＴＩ４７７株の組み合わせを、植物の成長及び健康を促進する活性について更に試験した。
【０１２２】
実施例８
相乗的植物成長促進特性をもたらすバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の組み合わせ
バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株の栄養細胞を接種又は胞子を被覆した様々な植物種子について、種子の発芽並びに根の発達及び構造におけるプラスの効果を観察した。これは、例えばここでは上記の実施例６での小麦において記載されている。更に、大豆種子に対する発芽、根の発達及び構造、並びに早期植物成長及び／又は植物健康において、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株の適用の効果を決定するために、実験を行った。ＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７の胞子を用いて次に記載するように実験を行った。実験では、菌株を１４Ｌ発酵槽中の２ＸＳＧ中に胞子形成させた。胞子は洗浄されずに回収され、その後、１．０×１０８ＣＦＵ／ｍＬの濃度とされた。実験において胞子濃度を１０倍又はそれより大きく希釈した。滅菌濾紙を個々の滅菌プラスチック成長チャンバーの底に置き、６つの種子を各容器内に置いた。ＲＴＩ３０１又はＲＴＩ４７７の胞子の各希釈液３ｍＬを成長チャンバーに加え、これを密封し、１９℃で８日間インキュベートし、その後の苗木を画像化した。更に、１：３、１：１及び３：１の比率において添加されたＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７の胞子の組み合わせも試験した。データを以下の表Ｖに示す。単独で適用した時、２つの菌株のいずれについても非接種のコントロールと比較して種子の発芽を阻害しなかった。
【０１２３】
１×１０６、１×１０７及び１×１０８の濃度におけるバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１での大豆種子の接種は、根の発達及び構造に影響を与えなかった。同様の濃度におけるバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７での大豆種子の接種は、最も低い濃度で根の発達及び構造においてほんのわずかな改善をもたらした。予想外に、ＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７の両方の組み合わせ（比率１：３）での大豆種子の接種は、試験された全ての濃度において、根の発達に改善が生じた。ＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７の組み合わせ（比率１：１）での大豆種子の接種は、１×１０６ＣＦＵ／ｍｌ及び１×１０７ＣＦＵ／ｍｌの濃度で根の発達に改善をもたらし、１×１０６ＣＦＵ／ｍｌの濃度で最も一貫した結果が観察された。根の発達における最良の結果は、ＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７を３：１の比率において１×１０６ＣＦＵ／ｍｌの濃度で適用した時に観察された。
【０１２４】
更に、ＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７の胞子（比率３：１）での種子の接種のプラスの効果の画像を、図５Ａ及び図５Ｂに示す（Ａ−コントロール植物；Ｂ−１０６ｃｆｕ／ｍｌにおいてＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７（比率３：１）で接種した植物）。図５Ａ−５Ｂに示すように、効果は根の形成及び構造に関して特にプラスとなっていた。細根は、水、栄養分の摂取及び根圏の他の微生物との植物相互作用において重要である。これらの結果は、個々の株の適用はコントロール植物と比較して全く又はほとんど効果を示さなかった一方で、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株の組み合わせの適用での種子処理は、大豆の早期成長及び樹立について有意な利益を有し得ることを示す。
【０１２５】
表Ｖ．ＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７の胞子での処理についての大豆種子発芽分析
【表５】
0006758296.tif 000006
＋＋＋非常に顕著な成長有益性有り、＋＋強い成長有益性有り、＋成長有益性有り、＋−弱い成長有益性有り、＝影響は観察されず、−弱い阻害有り、−−強い阻害有り、ｎ．ｄ．測定せず
【０１２６】
ＲＴＩ３０１株及びＲＴＩ４７７株の組み合わせでの植物種子の接種後の植物成長及び発達における効果を調べるために、更なる実験を行った。具体的には、大豆における実験は次のように設定した。１）未処理の種子。２）典型的な大豆種子処理であるＣＲＵＩＳＥＲＭＡＸＸ（チアメトキサム、フルジオキソニル＋メタラキシル−Ｍを含む殺虫剤＋殺真菌剤；ＳＹＮＧＥＮＴＡ  ＣＲＯＰ  ＰＲＯＴＥＣＴＩＯＮ，ＩＮＣ）及びチオファネートメチル殺真菌剤の組み合わせで処理した種子（ＣＲＵＩＳＥＲＭＡＸＸ及びチオファネートメチルの組み合わせは“ＣＨＥＭコントロール”として示す）。３）ＣＨＥＭコントロールで処理し、５．０×１０＋５ｃｆｕ／種子でＲＴＩ３０１株を接種した種子。４）ＣＨＥＭコントロールで処理し、５．０×１０＋５ｃｆｕ／種子でＲＴＩ４７７株を接種した種子。５）ＣＨＥＭコントロールで処理し、５．０×１０＋５ｃｆｕ／種子で両方の株の組み合わせを接種した種子。１回の試験毎の１回の処理当たり４又は５回反復して１０回の試験を実施した。ウィスコンシン州（２）、インディアナ州（２）、イリノイ州（３）及びアイオワ州（３）に位置する試験野外箇所での、１０回の野外試験についての平均大豆収量結果（エーカー当たりのブッシェル）を下記表ＶＩに示す。４つの試験でリゾクトニア・ソラニ（Rhizoctonia solani）を接種し、３つの試験でフザリウム・グラミネアラム（Fusarium graminearum）又はＦ．ビルグリフォルメ（F. virguliforme）のいずれかを接種し、１つの試験でフィトフトラ・ソジェ（Phytophthora sojae）を接種し、２つの試験を非接種とした。各病原体は、オートクレーブ処理され湿らせた穀物種子に別々に増殖させ、次いで空気乾燥させた。選択した試験で使用される乾燥させた接種材料を、種子が成長し始めた時に感染がなされるように所定の割合で種子と混合して植え付けた。
【０１２７】
表ＶＩの結果は、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７のいずれか単独の接種は、ＣＨＥＭコントロール単独で処理した種子と比較した時、大豆の全体の平均収量に影響を及ぼさなかったことを示す。先の実験で観察されたように、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の組み合わせでの接種は相乗効果をもたらし、１０回の野外試験での平均において、大豆収量の５％増加の結果となった（エーカー当たり５８．２から６１．１ブッシェル、表ＶＩ参照）。特に、非接種野外試験（Ｎ＝２試験）の野外についてＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７の組み合わせ＋化学コントロールでは化学コントロールよりもエーカー当たり３．７ブッシェルの収量利益が観察され、リゾクトニア（Rhizoctonia）を接種した試験（Ｎ＝４試験）について２つの菌株＋化学コントロールでは化学コントロールよりもエーカー当たり４．３ブッシェル増加しており、フザリウム（Fusarium）を接種した試験（Ｎ＝３試験）について２つの菌株＋化学コントロールでは化学コントロールよりもエーカー当たり１．５ブッシェル増加しており、フィトフトラ（Phytophthora）を接種した試験（Ｎ＝１試験）について２つの菌株＋化学コントロールでは化学コントロールよりもエーカー当たり１．０ブッシェル増加しており、このように、病害接種及び化学的殺真菌剤での種子処理とは無関係に収量応答が起こった。
【０１２８】
表ＶＩ．バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び両方の株の組み合わせでの大豆種子の接種の平均結果
【表６】
0006758296.tif 000007
【０１２９】
いかなる特定の作用機序に限定されるものではないが、大豆収量における２つの菌株の組み合わせで観察される相乗的結果の１つの説明は次の通りである。バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１は、密接に関連するバチルス（Bacillus）種を含む真菌及び細菌の両方の競合する菌株の増殖及び発育を阻害することができるサブチロシン等の広範な拮抗代謝物を産生する。そうすることによって、植物に単独で適用された時のＲＴＩ３０１株は、根圏においてその確立のためのニッチ／スペースを開くことができる。しかし、データは、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１について強い植物成長促進特性を支持していない。従って、ＲＴＩ３０１株が導入され根圏においてニッチを開いた後、定着され得るが、植物の成長及び／又は植物の健康を有意に促進することはできない。これは、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１単独での種子処理後の大豆について収量増加が観察されないことによって確認される。
【０１３０】
対照的に、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７は、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１よりも狭い範囲の拮抗作用を有するように見え、従って、植物種子に単独で適用された時に定着するようにニッチを開くことにおいて低効率と予想され得る。結果として、その株はより簡単には大豆の根圏において確立され得ず、植物の成長に有益な効果をもたらし得ないことになる。これは、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７単独での種子処理後の大豆について収量増加が観察されないことによって確認される。
【０１３１】
バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７株の増殖は、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１と調和性を有することが実験により示されている。更に、ＲＴＩ４７７の表現型はこの株が強力なスウォーミング表現型であり得ることを示し、そのため、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１よりも根圏でのより効率的なコロニー形成種となることが仮説される。従って、両株の組み合わせは大豆における有益な効果を有することが期待できる。具体的には、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１が大豆の根圏内に確立のためのニッチを開いた後、そのスウォーミング表現型のためにバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７によって、菌株が外へと競合され（ｏｕｔｃｏｍｐｅｔｅｄ）得る。ＲＴＩ４７７株は、その後、その植物宿主に有益な効果を提供することができる大豆の根圏内に自身を確立し得る。これは、両方の菌株の組み合わせでの植物種子の接種後に観察された大豆の収量増加によって確認された。
【０１３２】
実施例９
バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の胞子の組み合わせでの種子処理のコーンの収量増加
ＲＴＩ３０１株及びＲＴＩ４７７株の組み合わせでの植物種子接種後の植物の成長、発達及び収量における効果を調べるために、更なる実験を行った。
【０１３３】
具体的には、コーンにおける実験は次のように設定し、データを以下の表ＩＸに要約する。１）未処理の種子（“ＵＴＣ”）。２）典型的なコーン種子処理であるＭＡＸＩＭ（その有効成分として広域スペクトル種子処理殺真菌剤フルジオキソニル０．０６２５ｍｇ／種子；ＳＹＮＧＥＮＴＡ  ＣＲＯＰ  ＰＲＯＴＥＣＴＩＯＮ，ＩＮＣ）、ＡＰＲＯＮ  ＸＬ（活性成分メタラキシル−Ｍ０．０６２５ｍｇ／種子；ＳＹＮＧＥＮＴＡ  ＣＲＯＰ  ＰＲＯＴＥＣＴＩＯＮ，ＩＮＣ）及びＰＯＮＣＨＯ（クロチアニジン殺虫剤０．２５ｍｇ／種子；ＢＡＹＥＲ  ＣＲＯＰＳＣＩＥＮＣＥ，ＩＮＣ）の組み合わせで処理した種子（ＭＡＸＩＭ、ＡＰＲＯＮ  ＸＬ及びＰＯＮＣＨＯの組み合わせを“ＣＨＥＭコントロール”又は“ＣＣ”として示す）。３）ＣＨＥＭコントロール＋ＲＴＩ３０１株及びＲＴＩ４７７株を各々５．０×１０＋５ｃｆｕ／種子で組み合わせて処理した種子（“ＣＣ＋ＲＴＩ３０１／４７７  １：１”）。自然の病気圧力又はリゾクトニア（Rhizoctonia）での土壌の接種の各々の条件下において、１回の試験毎の１回の処理当たり５回反復して２回の試験を実施した。接種試験では、リゾクトニア（Rhizoctonia）はオートクレーブ処理され湿らせた穀物種子に別々に増殖させ、次いで空気乾燥させた。乾燥させた接種材料を、種子が成長し始めた時に感染がなされるように所定の割合で種子と混合して植え付けた。野外試験での平均コーン収量結果（エーカー当たりのブッシェル）は下記の表ＩＸに示され、試験野外箇所はイリノイ州ショーネタウンに位置する。
【０１３４】
表ＶＩＩの結果は、ＣＨＥＭコントロール単独で処理した種子と比較した場合、ＣＨＥＭコントロール＋バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の１対１の組み合わせを接種すると、平均コーン収量を有意に増加させたことを示している。特に、ＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７の１：１の組み合わせ＋化学コントロールは、化学コントロール単独よりも、自然病原体圧力及びリゾクトニア（Rhizoctonia）接種野外試験の各々について、エーカー当たり１０．７ブッシェル及びエーカー当たり５９．８ブッシェルの収量増加が観察された。これらのデータは、これらの株の組み合わせでの種子の処理が、コーン収量を有意に増強することを示す。
【０１３５】
表ＶＩＩ．自然の病気圧力及びリゾクトニア（Rhizoctonia）の人工接種の両方における条件下での、未処理のコーン種子（ＵＴＣ）、化学コントロールでの処理のコーン種子（ＣＣ）及びＣＣ＋バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の組み合わせでの処理のコーン種子についての収量増加。統計的関連性（文字としての）は、Ｐ＝０．１に基づく。
【表７】
0006758296.tif 000008
【０１３６】
実施例１０
リゾクトニア・ソラニ（Rhizoctonia solani）を人工的に接種した大豆におけるバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の組み合わせでの種子処理による収量増加
病原体防除のために化学活性剤に加えてＲＴＩ３０１株及びＲＴＩ４７７株の組み合わせで種子を処理した場合の大豆における出芽及び収量の効果を調べるために、実験を行った。具体的には、大豆における実験は次のように設定した。１）未処理の種子（ＵＴＣ）。２）典型的な大豆種子処理であるＣＲＵＩＳＥＲＭＡＸＸ（チアメトキサム、フルジオキソニル＋メタラキシル−Ｍを含む殺虫剤＋殺真菌剤；ＳＹＮＧＥＮＴＡ  ＣＲＯＰ  ＰＲＯＴＥＣＴＩＯＮ，ＩＮＣ）及びチオファネートメチル殺真菌剤の組み合わせで処理した種子（ＣＲＵＩＳＥＲＭＡＸＸ及びチオファネートメチルの組み合わせは“ＣＨＥＭコントロール”として示す）。３）ＶＩＢＲＡＮＣＥ（活性成分セダキサン；ＳＹＮＧＥＮＴＡ  ＣＲＯＰ  ＰＲＯＴＥＣＴＩＯＮ，ＩＮＣ）で処理した種子。４）ＣＨＥＭコントロール＋ＲＴＩ３０１株及びＲＴＩ４７７株を各々５．０×１０＋５ｃｆｕ／種子で処理した種子。１回の試験毎の１回の処理当たり４回反復して、ホワイトウォーター、ＷＩにおいて、２回の試験を実施した。試験は、オートクレーブ処理され湿らせた穀物種子に別々に病原体を最初に増殖させることによりリゾクトニア・ソラニ（Rhizoctonia solani）を接種し、続いて乾燥させた接種材料を、種子が成長し始めた時に感染がなされるように所定の割合で植え付け時において種子と混合した。試験での平均大豆出芽及び収量の結果を、以下の表ＶＩＩＩに示す。表ＶＩＩＩの結果は、ＣＨＥＭコントロールに加えてバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の組み合わせで処理すると、化学活性剤単独の収量よりも、エーカー当たり１３．３ブッシェルの収量における平均増加をもたらすことを示す（エーカー当たり５９．４から７２．７ブッシェル）。従って、ＲＴＩ３０１及びＲＴＩ４７７の組み合わせでの種子処理は、重大な病原体圧力の条件下でさえも、大豆の収量において有意な改善をもたらすことができる。
【０１３７】
表ＶＩＩＩ．大豆種子用化学活性剤に加えてＢ．ベレゼンシス（B. velezensis）ＲＴＩ３０１及びＢ．サブチリス（B. subtilis）ＲＴＩ４７７の組み合わせでの大豆種子処理による、リゾクトニア・ソラニ（Rhizoctonia solani）を人工的に接種した植物での野外試験の大豆出芽及び収量における平均結果
【表８】
0006758296.tif 000009
【０１３８】
実施例１１
果実及び野菜におけるバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１分離株＋バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７分離株での点滴灌漑の効果
スカッシュ、トマト及びペッパーにおけるバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１＋バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の胞子での点滴灌漑の効果を調べるために、野外試験実験を行った。土壌菌によって引き起こされる病害圧は、いずれの試験でも記録されなかった。植物収量における効果は、下記の実験に従って決定した。
【０１３９】
ペッパー植物（ジャラペノペッパー）では、植え付け時における根域のドレンチを介して、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及びバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の両方の株毎に１．２５×１０１２ＣＦＵ／ヘクタールの割合で胞子を適用し、続いて移植後１７日及び３５日において同じ割合で２回滴下適用して、野外試験を実施した。ＡＣＣＯＭＰＬＩＳＨ  ＬＭ（ＬＯＶＥＬＡＮＤ  ＰＲＯＤＵＣＴＳ）を商業用コントロールとして使用して、ＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７の組み合わせについて記載したのと同じ方法で２３４０ｍｌ／Ｈａの割合で適用した。この製品は、アシドボラックス・ファシリス（Acidovorax facilis）（１×１０３ｃｆｕ／ｍｌ）、バチルス・リケニフォルミス（Bacillus licheniformis）（１×１０３ｃｆｕ／ｍｌ）、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）（１×１０３ｃｆｕ／ｍｌ）、バチルス・オレロニウス（Bacillus oleronius）（１×１０３ｃｆｕ／ｍｌ）、バチルス・マリヌス（Bacillus marinus）（１×１０３ｃｆｕ／ｍｌ）、バチルス・メガテリウム（Bacillus megaterium）（１×１０３ｃｆｕ／ｍｌ）及びロドコッカス・ロドクロウス（Rhodococcus rhodochrous）（１×１０３ｃｆｕ／ｍｌ）の混合を含有する。
【０１４０】
ＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７胞子の添加は、細菌胞子が適用されていない未処理のコントロール植物と比較して、並びに商業用コントロール植物と比較して、ジャラペノペッパーについての収量の増加をもたらした。具体的には、ＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７で処理した植物は合計４１５４ｋｇ／Ｈａの市場性のあるジャラペノペッパーをもたらし、未処理のコントロール植物及びＡＣＣＯＭＰＬＩＳＨで処理した植物について、各々の３４５５ｋｇ／Ｈａ及び３９３０ｋｇ／Ｈａで比較すると、市場性のあるペッパーの重量において各々２０％及び５．７％の増加を示す。未処理コントロール植物及び商業的基準で処理された植物に対する、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１＋バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７胞子で処理した植物の市場性のあるペッパーの重量の実質的な増加は、この処理によりもたらされるプラスの成長効果を示している。
【０１４１】
トマト植物では、植え付け時における根域のドレンチを介して、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１については０．６２５×１０１２ＣＦＵ／ヘクタール、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７については３．７５×１０１２ＣＦＵ／ヘクタールの割合で胞子を適用して、続いて移植後１７日及び３５日において同じ割合で２回滴下適用して、同様の野外試験を実施した。ＡＣＣＯＭＰＬＩＳＨ  ＬＭを商業用コントロールとして使用して、２３４０ｍｌ／Ｈａの割合でＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７の組み合わせについて記載したのと同じ方法で適用した。
【０１４２】
ＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７胞子の添加は、細菌胞子がドレンチ及び灌漑に含まれていない未処理のコントロール植物と比較して、並びに商業用コントロール植物と比較して、トマトについての総収量及び市場性収量の両方において増加をもたらした。具体的には、ＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７で処理した植物は合計２１８２４ｋｇ／Ｈａの市場性のあるトマトをもたらし、未処理のコントロール植物及びＡＣＣＯＭＰＬＩＳＨで処理した植物について、各々の１６７６５ｋｇ／Ｈａ及び２１４２０ｋｇ／Ｈａで比較すると、市場性のあるトマトの重量において各々３０．２％及び１．９％の増加を示す。バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１＋バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７胞子で処理した植物の市場性のあるトマト重量の実質的な増加は、特に未処理のコントロール植物と比較して、この処理によりもたらされるプラスの成長効果を示している。
【０１４３】
スカッシュ植物では、植え付け時に根域のドレンチを介して、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１については３．７５×１０１２ＣＦＵ／ヘクタール、バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７については０．６２５×１０１２ＣＦＵ／ヘクタールの割合で胞子を適用して、点滴灌漑による更なる適用をすることなく、同様の野外試験を実施した。ＡＣＣＯＭＰＬＩＳＨ  ＬＭを商業用コントロールとして使用して、ＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７の組み合わせについて記載したのと同じ方法で２３４０ｍｌ／Ｈａの割合で適用した。
【０１４４】
ＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７胞子の添加は、細菌胞子がドレンチに含まれていない未処理のコントロール植物と比較して、並びに商業用コントロール植物と比較して、スカッシュについての総収量及び市場性収量の両方において増加をもたらした。具体的には、ＲＴＩ３０１＋ＲＴＩ４７７で処理した植物は合計８７３．４ｋｇ／Ｈａのスカッシュをもたらし、未処理のコントロール植物及びＡＣＣＯＭＰＬＩＳＨで処理した植物について、各々の８３８．３ｋｇ／Ｈａ及び８３６．１ｋｇ／Ｈａで比較すると、総スカッシュの重量において各々４．２％及び４．５％の増加を示す。未処理コントロール植物及び商業的基準で処理された植物に対する、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１＋バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７胞子で処理した植物の総スカッシュ重量の増加は、この処理によってもたらされるプラスの成長効果を示している。
【０１４５】
実施例１２
バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７分離株及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１分離株により産生される新しい代謝物の同定
バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）を含む微生物種によって５種類のフェンギシン型代謝物及びデヒドロキシフェンギシン型代謝物が産生されることがこれまでに報告されている（例えば、Li, Xing-Yuら、２０１３年、J. Microbiol. Biotechnol. 23（3）, 313-321頁；Pecci Yら、２０１０年、Mass Spectrom., 45（7）：772-77頁参照）。これらの代謝物は、脂肪酸基も含む環状ペプチド分子である。５種類のフェンギシン型及びデヒドロキシフェンギシン型代謝物は、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ及びＳと示される。これらの代謝物の骨格構造並びに５種類のそれぞれについての特定のアミノ酸配列を図６に示す。バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）において、フェンギシン型化合物はプリパスタチンと示される。プリパスタチンＡ及びＢは分子量がフェンギシンＡ及びＢと同様であり、ペプチド環の３位のチロシン残基がフェンギシンではＤ体及びプリパスタチンではＬ体であり、ペプチド環の９位のチロシン残基がフェンギシンではＬ体及びプリパスタチンではＤ体であるという側面が異なるのみである（Marc Ongena and Philippe Jacques、２００７年、Trends in Microbiology Vol.16, No.3: 115-125頁）。本明細書及び特許請求の範囲では、用語“フェンギシン”は、プリパスタチン代謝物及びフェンギシン代謝物の両方を指すように使用される。同様に、本明細書及び特許請求の範囲の目的のために、用語“デヒドロキシフェンギシン”は、デヒドロキシプリパスタチン代謝物及びデヒドロキシフェンギシン代謝物の両方を指すように使用される。
【０１４６】
バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１により産生されるフェンギシン型及びデヒドロキシフェンギシン型代謝物を、ＵＨＰＬＣ−ＴＯＦ  ＭＳを用いて分析した。３０℃で８６９培地又は２×ＳＧ培地で６日間増殖させた後のこれらの株により産生されるこれらの代謝物の分子量を、フェンギシン型及びデヒドロキシフェンギシン型代謝物について予想される理論的分子量と比較した。更に、これらの株により産生される種々のフェンギシン型代謝物のアミノ酸組成を決定するために、ＵＨＰＬＣ−ＴＯＦ  ＭＳを介して従来に同定されたフェンギシン型代謝物の各々について、ＬＣ−ＭＳ−ＭＳを用いたペプチド配列決定を行った。このようにして、これらの株がフェンギシンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ及びＳ、並びにデヒドロキシフェンギシンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ及びＳを産生することが決定された。驚くべきことに、これらの既知の化合物に加えて、これらの株は従来に同定されていないこれらの化合物の誘導体を産生することも決定された。
【０１４７】
例えば、バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１株は、環状ペプチド鎖の８位のＬ−イソロイシン（図６においてＸ３として示す）がＬ−メチオニンで置換されたフェンギシン様及びデヒドロキシフェンギシン様化合物を産生することが判明した。新しい種類のフェンギシン及びデヒドロキシフェンギシンは、ここではＭＡ、ＭＢ及びＭＣとして示され、図６のＸ３のＬ−イソロイシンがＬ−メチオニンで置換されたＡ、Ｂ及びＣの種類の誘導体で示される。新たに同定された分子を、図６及び以下の表ＩＸに示す。新しく同定されたフェンギシンＭＡ、ＭＢ及びＭＣ化合物はＲＴＩ４７７株でも観察されたが、対応するデヒドロキシフェンギシンＭＡ、ＭＢ及びＭＣ化合物はＲＴＩ４７７株では観察されなかった（表ＩＸ）。
【０１４８】
ＲＴＩ３０１株は、従来に同定されていない更なる種類のフェンギシン及びデヒドロキシフェンギシンを産生することが更に決定された。この種類では、フェンギシンＢ及びデヒドロキシフェンギシンＢのＬ−イソロイシン（図６の位置Ｘ３）がＬ−ホモ−システイン（Ｈｃｙ）で置換されている。これらの従来に同定されていないフェンギシン及びデヒドロキシフェンギシンの代謝物は、ここではフェンギシンＨ及びデヒドロキシフェンギシンＨとして示され、図６及び表ＩＸに示されている。新しく同定されたフェンギシンＨ化合物はＲＴＩ４７７株でも観察されたが、対応するデヒドロキシフェンギシンＨ化合物はＲＴＩ４７７株では観察されなかった（表ＩＸ）。
【０１４９】
ＲＴＩ３０１株は、従来に同定されていない更なる種類のフェンギシン及びデヒドロキシフェンギシン代謝物を産生することが更に決定された。この種類では、環状ペプチド主鎖構造の４位のアミノ酸（図６の位置Ｘ１）がＬ−イソロイシンで置換されている。これらの従来に同定されていない代謝物は、ここではフェンギシンＩ及びデヒドロキシフフェンギシンＩとして示され、図６及び表ＩＸに示されている。新しく同定されたフェンギシンＩ及びデヒドロキシフフェンギシンＩ化合物の両方は、ＲＴＩ４７７株でも観察された（表ＩＸ）。
【０１５０】
従来に報告されたフェンギシン型及びデヒドロキシフェンギシン型代謝物と新たに同定された代謝物についてのアミノ酸配列の要約を以下の表ＩＸに示す。
表ＩＸ．バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７分離株及びバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１分離株のフェンギシン型代謝物のＭＳ／ＭＳ同定の概要
【表９】
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【０１５１】
参考文献
ここで引用した全ての刊行物、特許出願、特許及び他の参考文献は、その全体が参照によりここに組み込まれる。
【０１５２】
前述の主題は、理解を明確にする目的で例示及び実施例によってある程度詳細に記載されているが、当業者であれば特許請求の範囲内で特定の変更及び変形を実施できることは理解されるだろう。
【０１５３】
（付記）
（付記１）
植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための組成物であって、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、を含み、
前記植物の種子、前記植物の根又は前記植物の周囲の土壌への当該組成物の適用は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす、
組成物。
【０１５４】
（付記２）
植物の成長及び／又は植物の健康に有益な特性は、収量の増加、苗木の活力の改善、根の発達の改善、植物の成長の改善、植物の健康の改善、外観の改善、植物病原体に対する抵抗性の改善、病原体感染の減少又はそれらの組み合わせを含む、付記１に記載の組成物。
【０１５５】
（付記３）
前記組成物は、液体、油分散体、粉剤、乾燥水和性粉末剤、展延性粒剤又は乾燥水和性粒剤の形態である、付記１に記載の組成物。
【０１５６】
（付記４）
前記組成物は、液体の形態であり、
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在する、
付記１に記載の組成物。
【０１５７】
（付記５）
前記組成物は、粉剤、乾燥水和性粉末剤、展延性粒剤又は乾燥水和性粒剤の形態であり、
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｇから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｇの量で存在する、
付記１に記載の組成物。
【０１５８】
（付記６）
前記組成物は、油分散体の形態であり、
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在する、
付記１に記載の組成物。
【０１５９】
（付記７）
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、胞子又は栄養細胞の形態で存在する、付記１に記載の組成物。
【０１６０】
（付記８）
担体、分散剤又は酵母抽出物のうちの１つ又は組み合わせを更に含む、付記１に記載の組成物。
【０１６１】
（付記９）
植物の成長に利益をもたらす及び／又は植物における病原体感染に対する保護を与えるのに適切な量で存在する、微生物学的、生物学的又は化学的な、殺虫剤、殺真菌剤、殺線虫剤、殺細菌剤、除草剤、植物抽出物、植物成長調整剤又は肥料のうちの１つ又は組み合わせを更に含む、付記１に記載の組成物。
【０１６２】
（付記１０）
前記殺虫剤は、ビフェントリンを含む、付記９に記載の組成物。
【０１６３】
（付記１１）
前記組成物は、液体肥料と相溶性を有する製剤中にある、付記１０に記載の組成物。
【０１６４】
（付記１２）
前記組成物は、水和ケイ酸アルミニウム−マグネシウム及び少なくとも１つの分散剤を更に含む、付記１０に記載の組成物。
【０１６５】
（付記１３）
前記ビフェントリン殺虫剤は、０．１ｇ／ｍｌから０．２ｇ／ｍｌの範囲の濃度で存在する、付記１０に記載の組成物。
【０１６６】
（付記１４）
前記ビフェントリン殺虫剤は、約０．１７１５ｇ／ｍｌの濃度で存在する、付記１０に記載の組成物。
【０１６７】
（付記１５）
前記組成物は、植え付け用の基盤（ｍａｔｒｉｘ）の形態である、付記１に記載の組成物。
【０１６８】
（付記１６）
前記植え付け用の基盤は、鉢植え用の土の形態である、付記１５に記載の組成物。
【０１６９】
（付記１７）
植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための組成物で被覆された植物種子であって、
前記組成物は、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、及び、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、を含む、
植物種子。
【０１７０】
（付記１８）
植物の成長及び／又は植物の健康への前記利益は、収量の増加、苗木の活力の改善、根の発達の改善、植物の成長の改善、植物の健康の改善、外観の改善、植物病原体に対する抵抗性の改善又は病原体感染の減少のうちの１以上を含む、付記１７に記載の植物種子。
【０１７１】
（付記１９）
前記植物病原体は、昆虫、線虫、植物病原性真菌又は植物病原性細菌のうちの１つ又は組み合わせを含む、付記１７に記載の植物種子。
【０１７２】
（付記２０）
前記植物病原体は、植物真菌病原体、植物細菌病原体、さび病菌、ボトリチス属種（Botrytis spp.）、ボトリチス・シネレア（Botrytis cinerea）、ボトリチス・スクアモサ（Botrytis squamosa）、エルウィニア属種（Erwinia spp.）、エルウィニア・カロトボラ（Erwinia carotovora）、エルウィニア・アミロボラ（Erwinia amylovora）、フザリウム属種（Fusarium spp.）、フザリウム・コルモラム（Fusarium colmorum）、フザリウム・グラミネアラム（Fusarium graminearum）、フザリウム・オキシスポラム（Fusarium oxysporum）、フザリウム・オキシスポラムｆ属種キューベンセ（Fusarium oxysporum f. sp. Cubense）、フザリウム・オキシスポラムｆ属種リコペルシシ（Fusarium oxysporum f. sp. Lycopersici）、フザリウム・ビルグリフォルメ（Fusarium virguliforme）、キサントモナス属種（Xanthomonas spp.）、キサントモナス・アクソノポディス（Xanthomonas axonopodis）、キサントモナス・カンペストリス・パソバー・カロテ（Xanthomonas campestris pv. carotae）、キサントモナス・プルニ（Xanthomonas pruni）、キサントモナス・アルボリコラ（Xanthomonas arboricola）、キサントモナス・オリゼ・パソバー・オリゼ（Xanthomonas oryzae pv. oryzae）、シュードモナス属種（Pseudomonas spp.）、シュードモナス・シリンゲ・パソバー・トマト（Pseudomonas syringae pv. Tomato）、フィトフトラ属種（Phytophthora spp.）、フィトフトラ・インフェスタンス（Phytophthora infestans）、フィトフトラ・パラシチカ（Phytophthora parasitica）、フィトフトラ・ソジェ（Phytophthora sojae）、フィトフトラ・カプシシ（Phytophthora capsici）、フィトフトラ・シナモン（Phytophthora cinnamon）、フィトフトラ・フラガリエ（Phytophthora fragariae）、フィトフトラ属種（Phytophthora spp.）、フィトフトラ・ラモラム（Phytophthora ramorum）、フィトフトラ・パルミバラ（Phytophthora palmivara）、フィトフトラ・ニコチアネ（Phytophthora nicotianae）、リゾクトニア属種（Rhizoctonia spp.）、リゾクトニア・ソラニ（Rhizoctonia solani）、リゾクトニア・ゼエ（Rhizoctonia zeae）、リゾクトニア・オリゼ（Rhizoctonia oryzae）、リゾクトニア・カリテ（Rhizoctonia caritae）、リゾクトニア・セレアリス（Rhizoctonia cerealis）、リゾクトニア・クロコラム（Rhizoctonia crocorum）、リゾクトニア・フラガリエ（Rhizoctonia fragariae）、リゾクトニア・ラミコラ（Rhizoctonia ramicola）、リゾクトニア・ルビ（Rhizoctonia rubi）、リゾクトニア・レグミニコラ（Rhizoctonia leguminicola）、マクロフォミナ・ファソリナ（Macrophomina phaseolina）、マグナオルテ・オリゼ（Magnaorthe oryzae）、ピチウム属種（Pythium spp.）、ピチウム・ウルチマム（Pythium ultimum）、ピチウム・アファニデルマタム（Pythium aphanidermatum）、ピチウム・イレギュラウム（Pythium irregularum）、ピチウム・ウロサム（Pythium ulosum）、ピチウム・ルトリアリウム（Pythium lutriarium）、ピチウム・シルバチウム（Pythium sylvatium）、ウスチラゴ属種（Ustilago spp.）、ウスチラゴ・ヌーダ（Ustilago nuda）、ウスチラゴ・マイディス（Ustilago maydis）、ウスチラゴ・サイタミネア（Ustilago scitaminea）、クラビセプス属種（Claviceps spp.）、クラビセプス・ププレア（Claviceps puprrea）、ティレチア属種（Tilletia spp.）、ティレチア・トリチシ（Tilletia tritici）、ティレチア・ラエビス（Tilletia laevis）、ティレチア・ホリド（Tilletia horrid）、ティレチア・コントロベルサ（Tilletia controversa）、フォーマ属種（Phoma spp.）、フォーマ・グリシニコラ（Phoma glycinicola）、フォーマ・エキシグア（Phoma exigua）、フォーマ・リンガム（Phoma lingam）、コクリオボラス・サチバス（Cocliobolus sativus）、ガエウマノマイセス・ガミニス（Gaeumanomyces gaminis）又はコレトトリカム属種（Colleototricum spp.）のうちの１以上を含む、付記１７に記載の植物種子。
【０１７３】
（付記２１）
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、約１．０×１０２ＣＦＵ／種子から約１．０×１０９ＣＦＵ／種子の範囲の量で存在する、付記１７に記載の植物種子。
【０１７４】
（付記２２）
前記植物種子は、単子葉植物、双子葉植物、穀物、コーン、スイートコーン、ポップコーン、シードコーン、サイレージコーン、フィールドコーン、米、小麦、大麦、ソルガム、アブラナ科野菜、ブロッコリー、キャベツ、カリフラワー、芽キャベツ、コラード、ケール、マスタードグリーン、コールラビ、球根野菜、玉ネギ、ニンニク、エシャロット、フルーツ野菜、ペッパー、トマト、ナス、グラウンドチェリー、トマティロ、オクラ、ブドウ、ハーブ／スパイス、ウリ科野菜、キュウリ、カンタロープ、メロン、マスクメロン、スカッシュ、スイカ、カボチャ、ナス、葉野菜、レタス、セロリ、ホウレン草、パセリ、ラディッキオ、マメ科植物／野菜（多肉の乾燥した豆（ｂｅａｎ）及び鞘に入った豆（ｐｅａ））、インゲン豆（又はソラ豆）、サヤインゲン、スナップ豆、シェルビーンズ、大豆、ドライビーンズ、ガルバンゾー豆、リマ豆、エンドウ豆、ヒヨコ豆、スプリットピー、レンズ豆、油糧種子作物、キャノーラ、キャスター、綿、亜麻、ピーナッツ、菜種、ベニバナ、ゴマ、ヒマワリ、大豆、根／塊茎及び球茎野菜、ニンジン、ジャガイモ、サツマイモ、ビーツ、ショウガ、西洋ワサビ、ダイコン、朝鮮人参、カブ、サトウキビ、テンサイ、草（Ｇｒａｓｓ）又は芝草（Ｔｕｒｆ  ｇｒａｓｓ）の種子を含む、付記１７に記載の植物種子。
【０１７５】
（付記２３）
前記植物は、大豆又はコーンの種子を含み、
前記植物の成長の利益は、収量の増加により示される、
付記１７に記載の植物種子。
【０１７６】
（付記２４）
植物の成長に利益をもたらす及び／又は植物における病原体感染に対する保護を与えるのに適切な量で存在する、微生物学的、生物学的又は化学的な、殺虫剤、殺真菌剤、殺線虫剤、殺細菌剤、除草剤、植物抽出物、植物成長調整剤又は肥料のうちの１つ又は組み合わせを更に含む、付記１７に記載の植物種子。
【０１７７】
（付記２５）
前記殺虫剤は、ビフェントリンを含む、付記２４に記載の植物種子。
【０１７８】
（付記２６）
植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法であって、
当該方法は、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、
を含む組成物を、植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌に送達することを含み、
前記組成物の送達は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす、
方法。
【０１７９】
（付記２７）
植物の成長及び／又は植物の健康への前記利益は、収量の増加、苗木の活力の改善、根の発達の改善、植物の成長の改善、植物の健康の改善、外観の改善、植物病原体に対する抵抗性の改善、病原体感染の減少又はそれらの組み合わせを含む、付記２６に記載の方法。
【０１８０】
（付記２８）
前記植物病原体は、昆虫、線虫、植物病原性真菌又は植物病原性細菌のうちの１つ又は組み合わせを含む、付記２７に記載の方法。
【０１８１】
（付記２９）
前記植物病原体は、植物真菌病原体、植物細菌病原体、さび病菌、ボトリチス属種（Botrytis spp.）、ボトリチス・シネレア（Botrytis cinerea）、ボトリチス・スクアモサ（Botrytis squamosa）、エルウィニア属種（Erwinia spp.）、エルウィニア・カロトボラ（Erwinia carotovora）、エルウィニア・アミロボラ（Erwinia amylovora）、ディケヤ属種（Dickeya spp.）、ディケヤ・ダダンチイ（Dickeya dadantii）、ディケヤ・ソラニ（Dickeya solani）、アグロバクテリウム属種（Agrobacterium spp.）、アグロバクテリウム・ツメファシエンス（Agrobacterium tumefaciens）、キサントモナス属種（Xanthomonas spp.）、キサントモナス・アクソノポディス（Xanthomonas axonopodis）、キサントモナス・カンペストリス・パソバー・カロテ（Xanthomonas campestris pv. carotae）、キサントモナス・プルニ（Xanthomonas pruni）、キサントモナス・アルボリコラ（Xanthomonas arboricola）、キサントモナス・オリゼ・パソバー・オリゼ（Xanthomonas oryzae pv. oryzae）、キシレラ属種（Xylella spp.）、キシレラ・ファスチディオーサ（Xylella fastidiosa）、カンジダタス属種（Candidatus spp.）、カンジダタス・リベリバクター（Candidatus liberibacter）、フザリウム属種（Fusarium spp.）、フザリウム・コルモラム（Fusarium colmorum）、フザリウム・グラミネアラム（Fusarium graminearum）、フザリウム・オキシスポラム（Fusarium oxysporum）、フザリウム・オキシスポラムｆ属種キューベンセ（Fusarium oxysporum f. sp. Cubense）、フザリウム・オキシスポラムｆ属種リコペルシシ（Fusarium oxysporum f. sp. Lycopersici）、フザリウム・ビルグリフォルメ（Fusarium virguliforme）、スクレロチニア属種（Sclerotinia spp.）、スクレロチニア・スクレロチオラム（Sclerotinia sclerotiorum）、スクレロチニア・マイナー（Sclerotinia minor）、スクレロチニア・ホメオカルパ（Sclerotinia homeocarpa）、セルコスポラ／セルコスポリディウム属種（Cercospora/Cercosporidium spp.）、ウンシヌラ属種（Uncinula spp.）、ウンシヌラ・ネカトル（Uncinula necator）（うどんこ病菌）、ポドスフェラ属種（Podosphaera spp.）（うどんこ病菌）、ポドスフェラ・ロイコトリカ（Podosphaera leucotricha）、ポドスフェラ・クランデスチン（Podosphaera clandestine）、ホモプシス属種（Phomopsis spp.）、ホモプシス・ビチコラ（Phomopsis viticola）、アルテルナリア属種（Alternaria spp.）、アルテルナリア・テヌイッシマ（Alternaria tenuissima）、アルテルナリア・ポーリ（Alternaria porri）、アルテルナリア・アルテルナート（Alternaria alternate）、アルテルナリア・ソラニ（Alternaria solani）、アルテルナリア・テヌイス（Alternaria tenuis）、シュードモナス属種（Pseudomonas spp.）、シュードモナス・シリンゲ・パソバー・トマト（Pseudomonas syringae pv. Tomato）、フィトフトラ属種（Phytophthora spp.）、フィトフトラ・インフェスタンス（Phytophthora infestans）、フィトフトラ・パラシチカ（Phytophthora parasitica）、フィトフトラ・ソジェ（Phytophthora sojae）、フィトフトラ・カプシシ（Phytophthora capsici）、フィトフトラ・シナモン（Phytophthora cinnamon）、フィトフトラ・フラガリエ（Phytophthora fragariae）、フィトフトラ属種（Phytophthora spp.）、フィトフトラ・ラモラム（Phytophthora ramorum）、フィトフトラ・パルミバラ（Phytophthora palmivara）、フィトフトラ・ニコチアネ（Phytophthora nicotianae）、ファコプソラ属種（Phakopsora spp.）、ファコプソラ・パキリジ（Phakopsora pachyrhizi）、ファコプソラ・メイボミエ（Phakopsora meibomiae）、アスペルギルス属種（Aspergillus spp.）、アスペルギルス・フラバス（Aspergillus flavus）、アスペルギルス・ニガー（Aspergillus niger）、ウロマイセス属種（Uromyces spp.）、ウロマイセス・アペンディキュラタス（Uromyces appendiculatus）、クラドスポリウム属種（Cladosporium spp.）、クラドスポリウム・ヘルバラム（Cladosporium herbarum）、リゾプス属種（Rhizopus spp.）、リゾプス・アリザス（Rhizopus arrhizus）、ペニシリウム属種（Penicillium spp.）、リゾクトニア属種（Rhizoctonia spp.）、リゾクトニア・ソラニ（Rhizoctonia solani）、リゾクトニア・ゼエ（Rhizoctonia zeae）、リゾクトニア・オリゼ（Rhizoctonia oryzae）、リゾクトニア・カリテ（Rhizoctonia caritae）、リゾクトニア・セレアリス（Rhizoctonia cerealis）、リゾクトニア・クロコラム（Rhizoctonia crocorum）、リゾクトニア・フラガリエ（Rhizoctonia fragariae）、リゾクトニア・ラミコラ（Rhizoctonia ramicola）、リゾクトニア・ルビ（Rhizoctonia rubi）、リゾクトニア・レグミニコラ（Rhizoctonia leguminicola）、マクロフォミナ・ファソリナ（Macrophomina phaseolina）、マグナオルテ・オリゼ（Magnaorthe oryzae）、マイコスフェレラ属種（Mycosphaerella spp.）、マイコスフェレラ・グラミノコラ（Mycosphaerella graminocola）、マイコスフェレラ・フィジエンシス（Mycosphaerella fijiensis）（ブラックシガトガ病）、マイコスフェレラ・ポミ（Mycosphaerella pomi）、マイコスフェレラ・シトリ（Mycosphaerella citri）、マグナポルテ属種（Magnaporthe spp.）、マグナポルテ・グリセア（Magnaporthe grisea）、モニリニア属種（Monilinia spp.）、モニリニア・フルチコラ（Monilinia fruticola）、モニリニア・バクシニイコリムボシ（Monilinia vacciniicorymbosi）、モニリニア・ラクサ（Monilinia laxa）、コレトトリカム属種（Colletotrichum spp.）、コレトトリカム・ゴレオスポリオデス（Colletotrichum gloeosporiodes）、コレトトリカム・アクタタム（Colletotrichum acutatum）、コレトトリカム・カンジダム（Colletotrichum Candidum）、ディアポルテ属種（Diaporthe spp.）、ディアポルテ・シトリ（Diaporthe citri）、コリネスポラ属種（Corynespora spp.）、コリネスポラ・カッシイコラ（Corynespora Cassiicola）、ギムノスポランギウム属種（Gymnosporangium spp.）、ギムノスポランギウム・ジュニペリ−バージニアネ（Gymnosporangium juniperi-virginianae）、シゾチリウム属種（Schizothyrium spp.）、シゾチリウム・ポミ（Schizothyrium pomi）、ゴレオデス属種（Gloeodes spp.）、ゴレオデス・ポミゲナ（Gloeodes pomigena）、ボトリオスフェリア属種（Botryosphaeria spp.）、ボトリオスフェリア・ドチデア（Botryosphaeria dothidea）、ネオファブラエア属種（Neofabraea spp.）、ウィルソノマイセス属種（Wilsonomyces spp.）、ウィルソノマイセス・カルポフィラス（Wilsonomyces carpophilus）、スフェロテカ属種（Sphaerotheca spp.）、スフェロテカ・マキュラリス（Sphaerotheca macularis）、スフェロテカ・パンノサ（Sphaerotheca pannosa）、エリシフェ属種（Erysiphe spp.）、スタゴノスポラ属種（Stagonospora spp.）、スタゴノスポラ・ノドラム（Stagonospora nodorum）、ピチウム属種（Pythium spp.）、ピチウム・ウルチマム（Pythium ultimum）、ピチウム・アファニデルマタム（Pythium aphanidermatum）、ピチウム・イレギュラウム（Pythium irregularum）、ピチウム・ウロサム（Pythium ulosum）、ピチウム・ルトリアリウム（Pythium lutriarium）、ピチウム・シルバチウム（Pythium sylvatium）、���ンチュリア属種（Venturia spp.）、ベンチュリア・イネキュアリス（Venturia inaequalis）、バーチシリウム属種（Verticillium spp.）、ウスチラゴ属種（Ustilago spp.）、ウスチラゴ・ヌーダ（Ustilago nuda）、ウスチラゴ・マイディス（Ustilago maydis）、ウスチラゴ・サイタミネア（Ustilago scitaminea）、クラビセプス属種（Claviceps spp.）、クラビセプス・ププレア（Claviceps puprrea）、ティレチア属種（Tilletia spp.）、ティレチア・トリチシ（Tilletia tritici）、ティレチア・ラエビス（Tilletia laevis）、ティレチア・ホリド（Tilletia horrid）、ティレチア・コントロベルサ（Tilletia controversa）、フォーマ属種（Phoma spp.）、フォーマ・グリシニコラ（Phoma glycinicola）、フォーマ・エキシグア（Phoma exigua）、フォーマ・リンガム（Phoma lingam）、コクリオボラス・サチバス（Cocliobolus sativus）、ガエウマノマイセス・ガミニス（Gaeumanomyces gaminis）、コレトトリカム属種（Colleototricum spp.）、リコスポリウム属種（Rhychosporium spp.）、リコスポリウム・セカリス（Rhychosporium secalis）、ビオポラリス属種（Biopolaris spp.）、ヘルミントスポリウム属種（Helminthosporium spp.）、ヘルミントスポリウム・セカリス（Helminthosporium secalis）、ヘルミントスポリウム・マイディス（Helminthosporium maydis）、ヘルミントスポリウム・ソラニ（Helminthosporium solai）又はヘルミントスポリウム・トリチシ−レペンチス（Helminthosporium tritici-repentis）のうちの１以上を含む、付記２７に記載の方法。
【０１８２】
（付記３０）
前記組成物は、液体、油分散体、粉剤、乾燥水和性粉末剤、展延性粒剤又は乾燥水和性粒剤の形態である、付記２６に記載の方法。
【０１８３】
（付記３１）
前記組成物は、液体の形態であり、
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在する、
付記２６に記載の方法。
【０１８４】
（付記３２）
前記組成物は、粉剤、乾燥水和性粉末剤、展延性粒剤又は乾燥水和性粒剤の形態であり、
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｇから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｇの量で存在する、
付記２６に記載の方法。
【０１８５】
（付記３３）
前記組成物は、油分散体の形態であり、
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在する、
付記２６に記載の方法。
【０１８６】
（付記３４）
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１は、胞子又は栄養細胞の形態で存在する、付記２６に記載の方法。
【０１８７】
（付記３５）
前記組成物は、担体、分散剤又は酵母抽出物のうちの１つ又は組み合わせを更に含む、付記２６に記載の方法。
【０１８８】
（付記３６）
前記植物は、単子葉植物、双子葉植物、穀物、コーン、スイートコーン、ポップコーン、シードコーン、サイレージコーン、フィールドコーン、米、小麦、大麦、ソルガム、アスパラガス、ベリー、ブルーベリー、ブラックベリー、ラズベリー、ローガンベリー、ハックルベリー、クランベリー、グーズベリー、エルダーベリー、カラント、カンベリー（Ｃａｎｅｂｅｒｒｙ）、ブッシュベリー、アブラナ科野菜、ブロッコリー、キャベツ、カリフラワー、芽キャベツ、コラード、ケール、マスタードグリーン、コールラビ、ウリ科野菜、キュウリ、カンタロープ、メロン、マスクメロン、スカッシュ、スイカ、カボチャ、ナス、球根野菜、玉ネギ、ニンニク、エシャロット、柑橘類、オレンジ、グレープフルーツ、レモン、タンジェリン、タンジェロ、ブンタン、フルーツ野菜、ペッパー、トマト、グラウンドチェリー、トマティロ、オクラ、ブドウ、ハーブ／スパイス、葉野菜、レタス、セロリ、ホウレン草、パセリ、ラディッキオ、マメ科植物／野菜（多肉の乾燥した豆（ｂｅａｎ）及び鞘に入った豆（ｐｅａ））、インゲン豆（又はソラ豆）、サヤインゲン、スナップ豆、シェルビーンズ、大豆、ドライビーンズ、ガルバンゾー豆、リマ豆、エンドウ豆、ヒヨコ豆、スプリットピー、レンズ豆、油糧種子作物、キャノーラ、キャスター、ココナッツ、綿、亜麻、オイルパーム、オリーブ、ピーナッツ、菜種、ベニバナ、ゴマ、ヒマワリ、大豆、ナシ状果類、リンゴ、クラブアップル、ナシ、マルメロ、サンザシ（Ｍａｙｈａｗ）、根／塊茎及び球茎野菜、ニンジン、ジャガイモ、サツマイモ、キャッサバ（Ｃａｓｓａｖｅ）、ビーツ、ショウガ、西洋ワサビ、ダイコン、朝鮮人参、カブ、核果類、アプリコット、チェリー、ネクタリン、桃、プラム、プルーン、イチゴ、ツリーナッツ、アーモンド、ピスタチオ、ピーカン、クルミ、ハシバミ、クリ（Ｃｈｅｓｔｎｕｔ）、カシュー、ブナ（Ｂｅｅｃｈｎｕｔ）、バタグルミ（Ｂｕｔｔｅｒｎｕｔ）、マカダミア、キウイ、バナナ、（ブルー）アガペ、草（Ｇｒａｓｓ）、芝草（Ｔｕｒｆ  ｇｒａｓｓ）、観葉植物、ポインセチア、広葉樹の伐採片（Ｈａｒｄｗｏｏｄ  ｃｕｔｔｉｎｇｓ）、クリ、オーク、カエデ、サトウキビ又はテンサイを含む、付記２６に記載の方法。
【０１８９】
（付記３７）
前記植物は、大豆又はコーンを含み、
前記植物の成長の利益は、収量の増加により示される、
付記２６に記載の方法。
【０１９０】
（付記３８）
前記組成物は、植物の成長に利益をもたらす及び／又は植物における病原体感染に対する保護を与えるのに適切な量で存在する、微生物学的、生物学的又は化学的な、殺虫剤、殺真菌剤、殺線虫剤、殺細菌剤、除草剤、植物抽出物、植物成長調整剤又は肥料のうちの１つ又は組み合わせを更に含む、付記２６に記載の方法。
【０１９１】
（付記３９）
前記殺虫剤は、ビフェントリンを含む、付記３８に記載の方法。
【０１９２】
（付記４０）
前記組成物は、液体肥料と相溶性を有する製剤中にある、付記３９に記載の方法。
【０１９３】
（付記４１）
前記組成物は、水和ケイ酸アルミニウム−マグネシウム及び少なくとも１つの分散剤を更に含む、付記３９に記載の方法。
【０１９４】
（付記４２）
前記ビフェントリン殺虫剤は、０．１ｇ／ｍｌから０．２ｇ／ｍｌの範囲の濃度で存在する、付記３９に記載の方法。
【０１９５】
（付記４３）
前記ビフェントリン殺虫剤は、約０．１７１５ｇ／ｍｌの濃度で存在する、付記３９に記載の方法。
【０１９６】
（付記４４）
植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法であって、
当該方法は、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物を含む第１の組成物、及び、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物を含む第２の組成物、
の組み合わせを、植物の種子、植物の根又は植物の周囲の土壌に送達することを含み、
前記組み合わせの送達は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらす、
方法。
【０１９７】
（付記４５）
植物の成長及び／又は植物の健康への前記利益は、収量の増加、苗木の活力の改善、根の発達の改善、植物の成長の改善、植物の健康の改善、外観の改善、植物病原体に対する抵抗性の改善、病原体感染の減少又はそれらの組み合わせを含む、付記４４に記載の方法。
【０１９８】
（付記４６）
前記植物病原体は、昆虫、線虫、植物病原性真菌又は植物病原性細菌のうちの１つ又は組み合わせを含む、付記４５に記載の方法。
【０１９９】
（付記４７）
前記植物病原体は、植物真菌病原体、植物細菌病原体、さび病菌、ボトリチス属種（Botrytis spp.）、ボトリチス・シネレア（Botrytis cinerea）、ボトリチス・スクアモサ（Botrytis squamosa）、エルウィニア属種（Erwinia spp.）、エルウィニア・カロトボラ（Erwinia carotovora）、エルウィニア・アミロボラ（Erwinia amylovora）、ディケヤ属種（Dickeya spp.）、ディケヤ・ダダンチイ（Dickeya dadantii）、ディケヤ・ソラニ（Dickeya solani）、アグロバクテリウム属種（Agrobacterium spp.）、アグロバクテリウム・ツメファシエンス（Agrobacterium tumefaciens）、キサントモナス属種（Xanthomonas spp.）、キサントモナス・アクソノポディス（Xanthomonas axonopodis）、キサントモナス・カンペストリス・パソバー・カロテ（Xanthomonas campestris pv. carotae）、キサントモナス・プルニ（Xanthomonas pruni）、キサントモナス・アルボリコラ（Xanthomonas arboricola）、キサントモナス・オリゼ・パソバー・オリゼ（Xanthomonas oryzae pv. oryzae）、キシレラ属種（Xylella spp.）、キシレラ・ファスチディオーサ（Xylella fastidiosa）、カンジダタス属種（Candidatus spp.）、カンジダタス・リベリバクター（Candidatus liberibacter）、フザリウム属種（Fusarium spp.）、フザリウム・コルモラム（Fusarium colmorum）、フザリウム・グラミネアラム（Fusarium graminearum）、フザリウム・オキシスポラム（Fusarium oxysporum）、フザリウム・オキシスポラムｆ属種キューベンセ（Fusarium oxysporum f. sp. Cubense）、フザリウム・オキシスポラムｆ属種リコペルシシ（Fusarium oxysporum f. sp. Lycopersici）、フザリウム・ビルグリフォルメ（Fusarium virguliforme）、スクレロチニア属種（Sclerotinia spp.）、スクレロチニア・スクレロチオラム（Sclerotinia sclerotiorum）、スクレロチニア・マイナー（Sclerotinia minor）、スクレロチニア・ホメオカルパ（Sclerotinia homeocarpa）、セルコスポラ／セルコスポリディウム属種（Cercospora/Cercosporidium spp.）、ウンシヌラ属種（Uncinula spp.）、ウンシヌラ・ネカトル（Uncinula necator）（うどんこ病菌）、ポドスフェラ属種（Podosphaera spp.）（うどんこ病菌）、ポドスフェラ・ロイコトリカ（Podosphaera leucotricha）、ポドスフェラ・クランデスチン（Podosphaera clandestine）、ホモプシス属種（Phomopsis spp.）、ホモプシス・ビチコラ（Phomopsis viticola）、アルテルナリア属種（Alternaria spp.）、アルテルナリア・テヌイッシマ（Alternaria tenuissima）、アルテルナリア・ポーリ（Alternaria porri）、アルテルナリア・アルテルナート（Alternaria alternate）、アルテルナリア・ソラニ（Alternaria solani）、アルテルナリア・テヌイス（Alternaria tenuis）、シュードモナス属種（Pseudomonas spp.）、シュードモナス・シリンゲ・パソバー・トマト（Pseudomonas syringae pv. Tomato）、フィトフトラ属種（Phytophthora spp.）、フィトフトラ・インフェスタンス（Phytophthora infestans）、フィトフトラ・パラシチカ（Phytophthora parasitica）、フィトフトラ・ソジェ（Phytophthora sojae）、フィトフトラ・カプシシ（Phytophthora capsici）、フィトフトラ・シナモン（Phytophthora cinnamon）、フィトフトラ・フラガリエ（Phytophthora fragariae）、フィトフトラ属種（Phytophthora spp.）、フィトフトラ・ラモラム（Phytophthora ramorum）、フィトフトラ・パルミバラ（Phytophthora palmivara）、フィトフトラ・ニコチアネ（Phytophthora nicotianae）、ファコプソラ属種（Phakopsora spp.）、ファコプソラ・パキリジ（Phakopsora pachyrhizi）、ファコプソラ・メイボミエ（Phakopsora meibomiae）、アスペルギルス属種（Aspergillus spp.）、アスペルギルス・フラバス（Aspergillus flavus）、アスペルギルス・ニガー（Aspergillus niger）、ウロマイセス属種（Uromyces spp.）、ウロマイセス・アペンディキュラタス（Uromyces appendiculatus）、クラドスポリウム属種（Cladosporium spp.）、クラドスポリウム・ヘルバラム（Cladosporium herbarum）、リゾプス属種（Rhizopus spp.）、リゾプス・アリザス（Rhizopus arrhizus)、ペニシリウム属種（Penicillium spp.）、リゾクトニア属種（Rhizoctonia spp.）、リゾクトニア・ソラニ（Rhizoctonia solani）、リゾクトニア・ゼエ（Rhizoctonia zeae）、リゾクトニア・オリゼ（Rhizoctonia oryzae）、リゾクトニア・カリテ（Rhizoctonia caritae）、リゾクトニア・セレアリス（Rhizoctonia cerealis）、リゾクトニア・クロコラム（Rhizoctonia crocorum）、リゾクトニア・フラガリエ（Rhizoctonia fragariae）、リゾクトニア・ラミコラ（Rhizoctonia ramicola）、リゾクトニア・ルビ（Rhizoctonia rubi）、リゾクトニア・レグミニコラ（Rhizoctonia leguminicola）、マクロフォミナ・ファソリナ（Macrophomina phaseolina）、マグナオルテ・オリゼ（Magnaorthe oryzae）、マイコスフェレラ属種（Mycosphaerella spp.）、マイコスフェレラ・グラミノコラ（Mycosphaerella graminocola）、マイコスフェレラ・フィジエンシス（Mycosphaerella fijiensis）（ブラックシガトガ病）、マイコスフェレラ・ポミ（Mycosphaerella pomi）、マイコスフェレラ・シトリ（Mycosphaerella citri）、マグナポルテ属種（Magnaporthe spp.）、マグナポルテ・グリセア（Magnaporthe grisea)、モニリニア属種(Monilinia spp.）、モニリニア・フルチコラ（Monilinia fruticola）、モニリニア・バクシニイコリムボシ（Monilinia vacciniicorymbosi）、モニリニア・ラクサ（Monilinia laxa）、コレトトリカム属種（Colletotrichum spp.）、コレトトリカム・ゴレオスポリオデス（Colletotrichum gloeosporiodes）、コレトトリカム・アクタタム（Colletotrichum acutatum）、コレトトリカム・カンジダム（Colletotrichum Candidum）、ディアポルテ属種（Diaporthe spp.）、ディアポルテ・シトリ（Diaporthe citri）、コリネスポラ属種（Corynespora spp.）、コリネスポラ・カッシイコラ（Corynespora Cassiicola）、ギムノスポランギウム属種（Gymnosporangium spp.）、ギムノスポランギウム・ジュニペリ−バージニアネ（Gymnosporangium juniperi-virginianae）、シゾチリウム属種（Schizothyrium spp.）、シゾチリウム・ポミ（Schizothyrium pomi）、ゴレオデス属種（Gloeodes spp.）、ゴレオデス・ポミゲナ（Gloeodes pomigena）、ボトリオスフェリア属種（Botryosphaeria spp.）、ボトリオスフェリア・ドチデア（Botryosphaeria dothidea）、ネオファブラエア属種（Neofabraea spp.）、ウィルソノマイセス属種（Wilsonomyces spp.）、ウィルソノマイセス・カルポフィラス（Wilsonomyces carpophilus）、スフェロテカ属種（Sphaerotheca spp.）、スフェロテカ・マキュラリス（Sphaerotheca macularis）、スフェロテカ・パンノサ（Sphaerotheca pannosa）、エリシフェ属種（Erysiphe spp.）、スタゴノスポラ属種（Stagonospora spp.）、スタゴノスポラ・ノドラム（Stagonospora nodorum）、ピチウム属種（Pythium spp.）、ピチウム・ウルチマム（Pythium ultimum）、ピチウム・アファニデルマタム（Pythium aphanidermatum）、ピチウム・イレギュラウム（Pythium irregularum）、ピチウム・ウロサム（Pythium ulosum）、ピチウム・ルトリアリウム（Pythium lutriarium）、ピチウム・シルバチウム（Pythium sylvatium）、ベン���ュリア属種（Venturia spp.）、ベンチュリア・イネキュアリス（Venturia inaequalis）、バーチシリウム属種（Verticillium spp.）、ウスチラゴ属種（Ustilago spp.）、ウスチラゴ・ヌーダ（Ustilago nuda）、ウスチラゴ・マイディス（Ustilago maydis）、ウスチラゴ・サイタミネア（Ustilago scitaminea）、クラビセプス属種（Claviceps spp.）、クラビセプス・ププレア（Claviceps puprrea）、ティレチア属種（Tilletia spp.）、ティレチア・トリチシ（Tilletia tritici）、ティレチア・ラエビス（Tilletia laevis）、ティレチア・ホリド（Tilletia horrid）、ティレチア・コントロベルサ（Tilletia controversa）、フォーマ属種（Phoma spp.）、フォーマ・グリシニコラ（Phoma glycinicola）、フォーマ・エキシグア（Phoma exigua）、フォーマ・リンガム（Phoma lingam）、コクリオボラス・サチバス（Cocliobolus sativus）、ガエウマノマイセス・ガミニス（Gaeumanomyces gaminis）、コレトトリカム属種（Colleototricum spp.）、リコスポリウム属種（Rhychosporium spp.）、リコスポリウム・セカリス（Rhychosporium secalis）、ビオポラリス属種（Biopolaris spp.）、ヘルミントスポリウム属種（Helminthosporium spp.）、ヘルミントスポリウム・セカリス（Helminthosporium secalis）、ヘルミントスポリウム・マイディス（Helminthosporium maydis）、ヘルミントスポリウム・ソラニ（Helminthosporium solai）又はヘルミントスポリウム・トリチシ−レペンチス（Helminthosporium tritici-repentis）のうちの１以上を含む、付記４５に記載の方法。
【０２００】
（付記４８）
前記第１の組成物及び前記第２の組成物は、液体、油分散体、粉剤、乾燥水和性粉末剤、展延性粒剤又は乾燥水和性粒剤の形態である、付記４４に記載の方法。
【０２０１】
（付記４９）
前記第１の組成物及び前記第２の組成物は、液体の形態であり、
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在する、
付記４４に記載の方法。
【０２０２】
（付記５０）
前記第１の組成物及び前記第２の組成物は、粉剤、乾燥水和性粉末剤、展延性粒剤又は乾燥水和性粒剤の形態であり、
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｇから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｇの量で存在する、
付記４４に記載の方法。
【０２０３】
（付記５１）
前記第１の組成物及び前記第２の組成物は、油分散体の形態であり、
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在する、
付記４４に記載の方法。
【０２０４】
（付記５２）
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、胞子又は栄養細胞の形態で存在する、付記４４に記載の方法。
【０２０５】
（付記５３）
前記第１の組成物及び前記第２の組成物は、担体、分散剤又は酵母抽出物のうちの１つ又は組み合わせを更に含む、付記４４に記載の方法。
【０２０６】
（付記５４）
前記植物は、単子葉植物、双子葉植物、穀物、コーン、スイートコーン、ポップコーン、シードコーン、サイレージコーン、フィールドコーン、米、小麦、大麦、ソルガム、アスパラガス、ベリー、ブルーベリー、ブラックベリー、ラズベリー、ローガンベリー、ハックルベリー、クランベリー、グーズベリー、エルダーベリー、カラント、カンベリー（Ｃａｎｅｂｅｒｒｙ）、ブッシュベリー、アブラナ科野菜、ブロッコリー、キャベツ、カリフラワー、芽キャベツ、コラード、ケール、マスタードグリーン、コールラビ、ウリ科野菜、キュウリ、カンタロープ、メロン、マスクメロン、スカッシュ、スイカ、カボチャ、ナス、球根野菜、玉ネギ、ニンニク、エシャロット、柑橘類、オレンジ、グレープフルーツ、レモン、タンジェリン、タンジェロ、ブンタン、フルーツ野菜、ペッパー、トマト、グラウンドチェリー、トマティロ、オクラ、ブドウ、ハーブ／スパイス、葉野菜、レタス、セロリ、ホウレン草、パセリ、ラディッキオ、マメ科植物／野菜（多肉の乾燥した豆（ｂｅａｎ）及び鞘に入った豆（ｐｅａ））、インゲン豆（又はソラ豆）、サヤインゲン、スナップ豆、シェルビーンズ、大豆、ドライビーンズ、ガルバンゾー豆、リマ豆、エンドウ豆、ヒヨコ豆、スプリットピー、レンズ豆、油糧種子作物、キャノーラ、キャスター、ココナッツ、綿、亜麻、オイルパーム、オリーブ、ピーナッツ、菜種、ベニバナ、ゴマ、ヒマワリ、大豆、ナシ状果類、リンゴ、クラブアップル、ナシ、マルメロ、サンザシ（Ｍａｙｈａｗ）、根／塊茎及び球茎野菜、ニンジン、ジャガイモ、サツマイモ、キャッサバ（Ｃａｓｓａｖｅ）、ビーツ、ショウガ、西洋ワサビ、ダイコン、朝鮮人参、カブ、核果類、アプリコット、チェリー、ネクタリン、桃、プラム、プルーン、イチゴ、ツリーナッツ、アーモンド、ピスタチオ、ピーカン、クルミ、ハシバミ、クリ（Ｃｈｅｓｔｎｕｔ）、カシュー、ブナ（Ｂｅｅｃｈｎｕｔ）、バタグルミ（Ｂｕｔｔｅｒｎｕｔ）、マカダミア、キウイ、バナナ、（ブルー）アガペ、草（Ｇｒａｓｓ）、芝草（Ｔｕｒｆ  ｇｒａｓｓ）、観葉植物、ポインセチア、広葉樹の伐採片（Ｈａｒｄｗｏｏｄ  ｃｕｔｔｉｎｇｓ）、クリ、オーク、カエデ、サトウキビ又はテンサイを含む、付記４４に記載の方法。
【０２０７】
（付記５５）
前記植物は、大豆又はコーンを含み、
前記植物の成長の利益は、収量の増加により示される、
付記４４に記載の方法。
【０２０８】
（付記５６）
前記第１の組成物及び前記第２の組成物の１つ又は両方は、植物の成長に利益をもたらす及び／又は植物における病原体感染に対する保護を与えるのに適切な量で存在する、微生物学的、生物学的又は化学的な、殺虫剤、殺真菌剤、殺線虫剤、殺細菌剤、除草剤、植物抽出物、植物成長調整剤又は肥料のうちの１つ又は組み合わせを更に含む、付記４４に記載の方法。
【０２０９】
（付記５７）
前記殺虫剤は、ビフェントリンを含む、付記５６に記載の方法。
【０２１０】
（付記５８）
前記組成物は、液体肥料と相溶性を有する製剤中にある、付記５７に記載の方法。
【０２１１】
（付記５９）
前記組成物は、水和ケイ酸アルミニウム−マグネシウム及び少なくとも１つの分散剤を更に含む、付記５７に記載の方法。
【０２１２】
（付記６０）
前記ビフェントリン殺虫剤は、０．１ｇ／ｍｌから０．２ｇ／ｍｌの範囲の濃度で存在する、付記５７に記載の方法。
【０２１３】
（付記６１）
前記ビフェントリン殺虫剤は、約０．１７１５ｇ／ｍｌの濃度で存在する、付記５７に記載の方法。
【０２１４】
（付記６２）
植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための方法であって、当該方法は、
適切な成長培地中に植物の種子を植え付けることを含み、
前記種子は、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、及び、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、
を含む組成物で被覆されており、
前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及び前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７は、植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすのに適切な量で存在する、
方法。
【０２１５】
（付記６３）
植物の成長及び／又は植物の健康への前記利益は、収量の増加、苗木の活力の改善、根の発達の改善、植物の成長の改善、植物の健康の改善、外観の改善、植物病原体に対する抵抗性の改善、病原体感染の減少又はそれらの組み合わせを含む、付記６２に記載の方法。
【０２１６】
（付記６４）
前記植物病原体は、昆虫、線虫、植物病原性真菌又は植物病原性細菌のうちの１つ又は組み合わせを含む、付記６３に記載の方法。
【０２１７】
（付記６５）
前記植物病原体は、植物真菌病原体、植物細菌病原体、さび病菌、ボトリチス属種（Botrytis spp.）、ボトリチス・シネレア（Botrytis cinerea）、ボトリチス・スクアモサ（Botrytis squamosa）、エルウィニア属種（Erwinia spp.）、エルウィニア・カロトボラ（Erwinia carotovora）、エルウィニア・アミロボラ（Erwinia amylovora）、フザリウム属種（Fusarium spp.）、フザリウム・コルモラム（Fusarium colmorum）、フザリウム・グラミネアラム（Fusarium graminearum）、フザリウム・オキシスポラム（Fusarium oxysporum）、フザリウム・オキシスポラムｆ属種キューベンセ（Fusarium oxysporum f. sp. Cubense）、フザリウム・オキシスポラムｆ属種リコペルシシ（Fusarium oxysporum f. sp. Lycopersici）、フザリウム・ビルグリフォルメ（Fusarium virguliforme）、キサントモナス属種（Xanthomonas spp.）、キサントモナス・アクソノポディス（Xanthomonas axonopodis）、キサントモナス・カンペストリス・パソバー・カロテ（Xanthomonas campestris pv. carotae）、キサントモナス・プルニ（Xanthomonas pruni）、キサントモナス・アルボリコラ（Xanthomonas arboricola）、キサントモナス・オリゼ・パソバー・オリゼ（Xanthomonas oryzae pv. oryzae）、シュードモナス属種（Pseudomonas spp.）、シュードモナス・シリンゲ・パソバー・トマト（Pseudomonas syringae pv. Tomato）、フィトフトラ属種（Phytophthora spp.）、フィトフトラ・インフェスタンス（Phytophthora infestans）、フィトフトラ・パラシチカ（Phytophthora parasitica）、フィトフトラ・ソジェ（Phytophthora sojae）、フィトフトラ・カプシシ（Phytophthora capsici）、フィトフトラ・シナモン（Phytophthora cinnamon）、フィトフトラ・フラガリエ（Phytophthora fragariae）、フィトフトラ属種（Phytophthora spp.）、フィトフトラ・ラモラム（Phytophthora ramorum）、フィトフトラ・パルミバラ（Phytophthora palmivara）、フィトフトラ・ニコチアネ（Phytophthora nicotianae）、リゾクトニア属種（Rhizoctonia spp.）、リゾクトニア・ソラニ（Rhizoctonia solani）、リゾクトニア・ゼエ（Rhizoctonia zeae）、リゾクトニア・オリゼ（Rhizoctonia oryzae）、リゾクトニア・カリテ（Rhizoctonia caritae）、リゾクトニア・セレアリス（Rhizoctonia cerealis）、リゾクトニア・クロコラム（Rhizoctonia crocorum）、リゾクトニア・フラガリエ（Rhizoctonia fragariae）、リゾクトニア・ラミコラ（Rhizoctonia ramicola）、リゾクトニア・ルビ（Rhizoctonia rubi）、リゾクトニア・レグミニコラ（Rhizoctonia leguminicola）、マクロフォミナ・ファソリナ（Macrophomina phaseolina）、マグナオルテ・オリゼ（Magnaorthe oryzae）、ピチウム属種（Pythium spp.）、ピチウム・ウルチマム（Pythium ultimum）、ピチウム・アファニデルマタム（Pythium aphanidermatum）、ピチウム・イレギュラウム（Pythium irregularum）、ピチウム・ウロサム（Pythium ulosum）、ピチウム・ルトリアリウム（Pythium lutriarium）、ピチウム・シルバチウム（Pythium sylvatium）、ウスチラゴ属種（Ustilago spp.）、ウスチラゴ・ヌーダ（Ustilago nuda）、ウスチラゴ・マイディス（Ustilago maydis）、ウスチラゴ・サイタミネア（Ustilago scitaminea）、クラビセプス属種（Claviceps spp.）、クラビセプス・ププレア（Claviceps puprrea）、ティレチア属種（Tilletia spp.）、ティレチア・トリチシ（Tilletia tritici）、ティレチア・ラエビス（Tilletia laevis）、ティレチア・ホリド（Tilletia horrid）、ティレチア・コントロベルサ（Tilletia controversa）、フォーマ属種（Phoma spp.）、フォーマ・グリシニコラ（Phoma glycinicola）、フォーマ・エキシグア（Phoma exigua）、フォーマ・リンガム（Phoma lingam）、コクリオボラス・サチバス（Cocliobolus sativus）、ガエウマノマイセス・ガミニス（Gaeumanomyces gaminis）又はコレトトリカム属種（Colleototricum spp.）のうちの１以上を含む、付記６３に記載の方法。
【０２１８】
（付記６６）
前記組成物は、植物の成長に利益をもたらす及び／又は感受性植物における病原体感染に対する保護を与えるのに適切な量で存在する、微生物学的、生物学的又は化学的な、殺虫剤、殺真菌剤、殺線虫剤、殺細菌剤、除草剤、植物抽出物、植物成長調整剤又は肥料のうちの１つ又は組み合わせを更に含む、付記６２に記載の方法。
【０２１９】
（付記６７）
前記殺虫剤は、ビフェントリンを含む、付記６６に記載の方法。
【０２２０】
（付記６８）
前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７及び前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１の各々は、約１．０×１０２ＣＦＵ／種子から約１．０×１０９ＣＦＵ／種子の範囲の量で存在する、付記６２に記載の方法。
【０２２１】
（付記６９）
前記植物の種子は、単子葉植物、双子葉植物、穀物、コーン、スイートコーン、ポップコーン、シードコーン、サイレージコーン、フィールドコーン、米、小麦、大麦、ソルガム、アブラナ科野菜、ブロッコリー、キャベツ、カリフラワー、芽キャベツ、コラード、ケール、マスタードグリーン、コールラビ、球根野菜、玉ネギ、ニンニク、エシャロット、フルーツ野菜、ペッパー、トマト、グラウンドチェリー、トマティロ、オクラ、ブドウ、ハーブ／スパイス、ウリ科野菜、キュウリ、カンタロープ、メロン、マスクメロン、スカッシュ、スイカ、カボチャ、ナス、葉野菜、レタス、セロリ、ホウレン草、パセリ、ラディッキオ、マメ科植物／野菜（多肉の乾燥した豆（ｂｅａｎ）及び鞘に入った豆（ｐｅａ））、インゲン豆（又はソラ豆）、サヤインゲン、スナップ豆、シェルビーンズ、大豆、ドライビーンズ、ガルバンゾー豆、リマ豆、エンドウ豆、ヒヨコ豆、スプリットピー、レンズ豆、油糧種子作物、キャノーラ、キャスター、綿、亜麻、ピーナッツ、菜種、ベニバナ、ゴマ、ヒマワリ、大豆、根／塊茎及び球茎野菜、ニンジン、ジャガイモ、サツマイモ、ビーツ、ショウガ、西洋ワサビ、ダイコン、朝鮮人参、カブ、サトウキビ、テンサイ、草（Ｇｒａｓｓ）又は芝草（Ｔｕｒｆ  ｇｒａｓｓ）の種子を含む、付記６２に記載の方法。
【０２２２】
（付記７０）
前記植物の種子は、大豆又はコーンを含み、
前記植物の成長の利益は、収量の増加により示される、
付記６２に記載の方法。
【０２２３】
（付記７１）
植物の成長に利益をもたらすための組成物であって、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、
ビフェントリン殺虫剤、を含む、
組成物。
【０２２４】
（付記７２）
植物の成長に利益をもたらすための組成物であって、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、
ビフェントリン殺虫剤、を含み、
当該組成物は、液体肥料と相溶性を有する製剤中にある、
組成物。
【０２２５】
（付記７３）
前記組成物は、水和ケイ酸アルミニウム−マグネシウム及び少なくとも１つの分散剤を更に含む、付記７２に記載の組成物。
【０２２６】
（付記７４）
前記ビフェントリン殺虫剤は、０．１ｇ／ｍｌから０．２ｇ／ｍｌの範囲の濃度で存在する、付記７２に記載の組成物。
【０２２７】
（付記７５）
前記ビフェントリン殺虫剤は、約０．１７１５ｇ／ｍｌの濃度で存在する、付記７２に記載の組成物。
【０２２８】
（付記７６）
植物の成長に利益をもたらすための組成物であって、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、
ルピナス・アルブス・ドーセ（Lupinus albus doce）由来の抽出物、ＢＬＡＤポリペプチド又はＢＬＡＤポリペプチドの断片のうちの１つ又は組み合わせを含む殺真菌剤、を含む、
組成物。
【０２２９】
（付記７７）
前記組成物は、前記ＢＬＡＤポリペプチド又は前記ＢＬＡＤポリペプチドの断片を約２０％含む、付記７６に記載の組成物。
【０２３０】
（付記７８）
植物の成長及び／又は植物の健康に利益をもたらすための組成物で被覆された植物種子であって、
前記組成物は、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物の胞子、及び、
ビフェントリン殺虫剤、を含む、
植物種子。
【０２３１】
（付記７９）
ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６５として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物、及び、ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１６７として寄託されたバチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）（Bacillus amyloliquefaciens）ＲＴＩ４７７又はその全ての同定特徴を有するその突然変異体の生物学的に純粋な培養物を含む第１の組成物、
微生物学的、生物学的又は化学的な、殺虫剤、殺真菌剤、殺線虫剤、殺細菌剤、除草剤、植物抽出物、植物成長調整剤又は肥料のうちの１つ又は組み合わせを含む第２の組成物、並びに、
植物の枝葉、植物の樹皮、植物の果実、植物の花、植物の種子、植物の根、植物の切断片、植物の移植片、植物のカルス組織、植物の周囲の土壌若しくは成長培地、土壌若しくは成長培地中に植物の種子を播種する前の土壌若しくは成長培地、又は、土壌若しくは成長培地中に植物、植物切断片、植物移植片若しくは植物カルス組織を植え付ける前の土壌若しくは成長培地に、前記第１の組成物及び前記第２の組成物の組み合わせを、植物の成長に利益をもたらすのに適切な量で送達するための説明書、を含み、
前記第１の組成物及び前記第２の組成物は、別々に包装されている、
製品。
【０２３２】
（付記８０）
前記殺虫剤は、ピレスロイド、ビフェントリン、テフルトリン、ゼータ−シペルメトリン、有機リン酸塩、クロルエトキシホス、クロルピリホス、テブピリンホス、シフルトリン、フィプロール、フィプロニル、ニコチノイド又はクロチアニジンのうちの１つ又は組み合わせである、付記７９に記載の製品。
【０２３３】
（付記８１）
前記殺虫剤は、ビフェントリンを含む、付記８０に記載の製品。
【０２３４】
（付記８２）
前記第２の組成物は、液体肥料と相溶性を有する製剤中にある、付記８１に記載の製品。
【０２３５】
（付記８３）
前記第１の組成物は、担体、分散剤又は酵母抽出物のうちの１つ又は組み合わせを更に含む、付記７９に記載の製品。
【０２３６】
（付記８４）
前記第１の組成物は、液体、粉剤、展延性粒剤、乾燥水和性粉末剤又は乾燥水和性粒剤の形態である、付記７９に記載の製品。
【０２３７】
（付記８５）
前記第１の組成物は、液体の形態であり、
前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及び前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在する、
付記７９に記載の製品。
【０２３８】
（付記８６）
前記第１の組成物は、粉剤、乾燥水和性粉末剤、展延性粒剤又は乾燥水和性粒剤の形態であり、
前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及び前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｇから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｇの量で存在する、
付記７９に記載の製品。
【０２３９】
（付記８７）
前記第１の組成物は、油分散液の形態であり、
前記バチルス・ベレゼンシス（Bacillus velezensis）ＲＴＩ３０１及び前記バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＲＴＩ４７７の各々は、約１．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌから約１．０×１０１２ＣＦＵ／ｍｌの濃度で存在する、
付記７９に記載の製品。
【図１】
0006758296.tif 000011
【図２Ａ】
0006758296.tif 000012
【図２Ｂ】
0006758296.tif 000013
【図３Ａ】
0006758296.tif 000014
【図３Ｂ】
0006758296.tif 000015
【図４Ａ】
0006758296.tif 000016
【図４Ｂ】
0006758296.tif 000017
【図５Ａ】
0006758296.tif 000018
【図５Ｂ】
0006758296.tif 000019
【図６】
0006758296.tif 000020
【配列表】
0006758296000001.app