(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも一種のエネルギードナー化合物と、少なくとも一種のエネルギーアクセプター化合物と、粒子とを含有する発光性粒子であって、前記エネルギードナー化合物として、少なくとも一種の下記式（４）で表される化合物を含有し、前記エネルギーアクセプター化合物として、少なくとも一種の下記式（４）で表される化合物を含有する、発光性粒子。
【化１】
0006756838.tif 000044
式中、Ｒ12〜Ｒ14はそれぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アミノ基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、又はアリールチオ基を表し、これらは置換基を有していてもよく、Ｒ12〜Ｒ14のうち少なくとも１つは水素原子以外の原子又は基を表す。Ｒ11、Ｒ15はそれぞれ独立に、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アミノ基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、又はアリールチオ基を表し、これらは置換基を有していてもよい。Ｘ1及びＸ2はそれぞれ独立に、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、アリールチオ基、エテニル基、又はエチニル基を表し、これらは置換基を有していてもよく、Ｘ1及びＸ2は互いに連結して環を形成してもよい。Ｌ21及びＬ22はそれぞれ独立に、式（Ｌ−１）で表される基を表す。Ｑ1及びＱ2はそれぞれ独立に、芳香族炭化水素環又は芳香族ヘテロ環を表し、これらは置換基を有していてもよい。Ｒ51、Ｒ52はそれぞれ独立に、アルキル基、又はアルコキシ基を表す。
【化２】
0006756838.tif 000045
【請求項２】
少なくとも一種のエネルギードナー化合物と、少なくとも一種のエネルギーアクセプター化合物と、粒子とを含有する発光性粒子であって、前記エネルギードナー化合物及び前記エネルギーアクセプター化合物の何れか一方として、下記式（１）で表される化合物を含有し、前記エネルギードナー化合物及び前記エネルギーアクセプター化合物の何れか他方として、下記式（２）で表される化合物を含有する、発光性粒子。
【化３】
0006756838.tif 000046
式中、Ｒ11〜Ｒ15はそれぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アミノ基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、又はアリールチオ基を表し、これらは置換基を有していてもよく、Ｒ11〜Ｒ15のうち少なくとも３つは水素原子以外の原子又は基を表す。Ｘ1及びＸ2はそれぞれ独立に、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、アリールチオ基、エテニル基、又はエチニル基を表し、これらは置換基を有していてもよく、Ｘ1及びＸ2は互いに連結して環を形成してもよい。Ａｒ1及びＡｒ2はそれぞれ独立に、アリール基又はヘテロ環基を表し、これらは置換基を有していてもよい。Ｌ1及びＬ2はそれぞれ独立に、式（Ｌ−１）を表す。
【化４】
0006756838.tif 000047
【化５】
0006756838.tif 000048
式（２）中、ｍ１及びｍ２はそれぞれ独立に０〜４の整数を表し、ｍ１及びｍ２の何れかは少なくとも１以上である。Ｍは半金属原子又は金属原子を表す。Ｒ1、Ｒ2及びＲ3はそれぞれ独立に水素原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、又はアリールチオ基を表し、これらは置換基を有していてもよい。Ｙ1及びＹ2はそれぞれ独立にハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、アリールチオ基、エテニル基、又はエチニル基を表し、これらは置換基を有していてもよく、Ｙ1及びＹ2は互いに連結して環を形成してもよい。Ａｒ11及びＡｒ12はそれぞれ独立に、置換基を有していてもよい芳香環を表す。Ｚ1及びＺ2はそれぞれ独立にアリール基、ヘテロ環基又はアミノ基を表し、これらは置換基を有していてもよい。ｍ１が２以上である場合、複数のＺ1は同じ基でもそれぞれ異なる基でもよく、ｍ２が２以上である場合、複数のＺ2は同じ基でもそれぞれ異なる基でもよい。
【請求項３】
前記式（１）で表される化合物が、下記式（３）で表される化合物である、請求項２に記載の発光性粒子。
【化６】
0006756838.tif 000049
式中、Ｒ11〜Ｒ15、Ｘ1、Ｘ2、Ａｒ1及びＡｒ2は式（１）における定義と同義であり、Ｌ21及びＬ22はそれぞれ独立に、式（Ｌ−１）で表される基を表わす。
【化７】
0006756838.tif 000050
【請求項４】
前記粒子がラテックス粒子である、請求項１から３の何れか一項に記載の発光性粒子。
【請求項５】
前記粒子が、カルボキシル基を有する、請求項１から４の何れか一項に記載の発光性粒子。
【請求項６】
平均粒子径が３０〜５００ｎｍである、請求項１から５の何れか一項に記載の発光性粒子。
【請求項７】
エネルギードナー化合物とエネルギーアクセプター化合物のモル比が１：１０〜１０：１である、請求項１から６の何れか一項に記載の発光性粒子。
【請求項８】
エネルギードナー化合物とエネルギーアクセプター化合物のストークスシフトが４０ｎｍ以上である、請求項１から７の何れか一項に記載の発光性粒子。
【請求項９】
発光極大波長が６５０〜９００ｎｍである、請求項１から８の何れか一項に記載の発光性粒子。
【請求項１０】
励起極大波長が６００ｎｍ〜９００ｎｍである、請求項１から９の何れか一項に記載の発光性粒子。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エネルギードナー化合物とエネルギーアクセプター化合物とを含む発光性粒子に関する。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質、酵素又は無機化合物などを定量するための高感度かつ容易な測定法として蛍光検出法が広く用いられている。蛍光検出法は、特定波長の光により励起されて蛍光を発する測定対象物質を含むと考えられる試料に上記特定波長の励起光を照射した際に発する蛍光を検出することによって測定対象物質の存在を確認する方法である。測定対象物質が蛍光体でない場合には、例えば、測定対象物質と特異的に結合する物質を蛍光色素で標識した物質を試料に接触させ、その後上記と同様にして、励起光を照射した際に発する蛍光を検出することにより、測定対象物質の存在を確認することができる。【０００３】
特許文献１には、好ましい励起ピークを有する初期供与体染料と、好ましい発光ピークを有する最終受容体染料とをポリマー微小粒子中に配合させることにより製造される蛍光微小粒子が記載されている。特許文献１では、上記染料としてポリアザインダセン染料を使用することが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特許第３４４２７７７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
生体の窓領域（生体を透過しやすい近赤外波長域である６５０〜９００ｎｍ付近）を利用したイメージングには、高い量子収率、及び大きなストークスシフトを有する発光性粒子を使用することが望ましい。ドナーの発光とアクセプターの吸収の重なりのある系ではエネルギー移動を利用することができ、ストークスシフトの増大が可能である。本発明は、発光波長が長波長であり、高い量子収率及び大きなストークスシフトを有する発光性粒子を提供することを解決すべき課題とした。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは上記課題を解決するために鋭意検討した結果、エネルギードナー化合物及びエネルギーアクセプター化合物の少なくとも一種として特定の構造を有する化合物を用いて発光性粒子を製造することによって、発光波長が長波長であり、高い量子収率及び大きなストークスシフトを有する発光性粒子を製造できることを見出し、本発明を完成するに至った。【０００７】
即ち、本発明によれば、以下の発明が提供される。
［１］  少なくとも一種のエネルギードナー化合物と、少なくとも一種のエネルギーアクセプター化合物と、粒子とを含有する発光性粒子であって、上記エネルギードナー化合物及び上記エネルギーアクセプター化合物の少なくとも一種が、下記式（１）で表される化合物である、発光性粒子。
【化１】
0006756838.tif 000002
式中、Ｒ11〜Ｒ15はそれぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アミノ基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、又はアリールチオ基を表し、これらは置換基を有していてもよく、Ｒ11〜Ｒ15のうち少なくとも３つは水素原子以外の原子又は基を表す。Ｘ1及びＸ2はそれぞれ独立に、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、アリールチオ基、エテニル基、又はエチニル基を表し、これらは置換基を有していてもよく、Ｘ1及びＸ2は互いに連結して環を形成してもよい。Ａｒ1及びＡｒ2はそれぞれ独立に、アリール基又はヘテロ環基を表し、これらは置換基を有していてもよい。Ｌ1及びＬ2はそれぞれ独立に、式（Ｌ−１）〜式（Ｌ−４）の何れかを表す。
【化２】
0006756838.tif 000003
式中、Ｒ111〜Ｒ116はそれぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アミノ基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、又はアリールチオ基を表し、これらは置換基を有していてもよい。Ａは、−Ｏ−、−Ｓ−、又は−ＮＨ−を表す。【０００８】
［２］  上記エネルギードナー化合物として、少なくとも一種の上記式（１）で表される化合物を含有し、上記エネルギーアクセプター化合物として、少なくとも一種の上記式（１）で表される化合物を含有する、［１］に記載の発光性粒子。
［３］  上記エネルギードナー化合物及び上記エネルギーアクセプター化合物の何れか一方として、上記式（１）で表される化合物を含有し、上記エネルギードナー化合物及び上記エネルギーアクセプター化合物の何れか他方として、下記式（２）で表される化合物を含有する、［１］に記載の発光性粒子。
【化３】
0006756838.tif 000004
式（２）中、ｍ１及びｍ２はそれぞれ独立に０〜４の整数を表し、ｍ１及びｍ２の何れかは少なくとも１以上である。Ｍは半金属原子又は金属原子を表す。Ｒ1、Ｒ2及びＲ3はそれぞれ独立に水素原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、又はアリールチオ基を表し、これらは置換基を有していてもよい。Ｙ1及びＹ2はそれぞれ独立にハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、アリールチオ基、エテニル基、又はエチニル基を表し、これらは置換基を有していてもよく、Ｙ1及びＹ2は互いに連結して環を形成してもよい。Ａｒ11及びＡｒ12はそれぞれ独立に、置換基を有していてもよい芳香環を表す。Ｚ1及びＺ2はそれぞれ独立にアリール基、ヘテロ環基又はアミノ基を表し、これらは置換基を有していてもよい。ｍ１が２以上である場合、複数のＺ1は同じ基でもそれぞれ異なる基でもよく、ｍ２が２以上である場合、複数のＺ2は同じ基でもそれぞれ異なる基でもよい。【０００９】
［４］  上記式（１）で表される化合物が、下記式（３）で表される化合物である、［１］から［３］の何れか一に記載の発光性粒子。
【化４】
0006756838.tif 000005
式中、Ｒ11〜Ｒ15、Ｘ1、Ｘ2、Ａｒ1及びＡｒ2は式（１）における定義と同義であり、Ｌ21及びＬ22はそれぞれ独立に、式（Ｌ−１）又は式（Ｌ−２）で表される基を表わす。
【化５】
0006756838.tif 000006
【００１０】
［５］  上記粒子がラテックス粒子である、［１］から［４］の何れか一に記載の発光性粒子。
［６］  上記粒子が、カルボキシル基を有する、［１］から［５］の何れか一に記載の発光性粒子。
［７］  平均粒子径が３０〜５００ｎｍである、［１］から［６］の何れか一に記載の発光性粒子。
［８］  エネルギードナー化合物とエネルギーアクセプター化合物のモル比が１：１０〜１０：１である、［１］から［７］の何れか一に記載の発光性粒子。【００１１】
［９］  エネルギードナー化合物とエネルギーアクセプター化合物のストークスシフトが４０ｎｍ以上である、［１］から［８］の何れか一に記載の発光性粒子。
［１０］  発光極大波長が６５０〜９００ｎｍである、［１］から［９］の何れか一に記載の発光性粒子。
［１１］  励起極大波長が６００ｎｍ〜９００ｎｍである、［１］から［１０］の何れか一に記載の発光性粒子。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の発光性粒子は、発光波長が長波長であり、高い量子収率及び大きなストークスシフトを有することから、各種のアッセイにおいて有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、化合物Ｄ１−４の 1Ｈ  ＮＭＲスペクトルを示す。
【図２】図２は、化合物Ｄ２−１の 1Ｈ  ＮＭＲスペクトルを示す。
【図３】図３は、化合物Ｄ２−３の 1Ｈ  ＮＭＲスペクトルを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明の実施の形態について詳細に説明する。
本明細書において「〜」を用いて示された数値範囲は、「〜」の前後に記載される数値をそれぞれ最小値及び最大値として含む範囲を意味する。
【００１５】
特許文献１には、初期供与体染料と最終受容体染料とをポリマー微小粒子中に含む蛍光微小粒子が記載されているが、量子収率が低いという問題があり、更に改善の余地があった。本発明においては、エネルギードナー化合物及びエネルギーアクセプター化合物の少なくとも一種として式（１）で表される化合物を使用することによって、特許文献１の蛍光微小粒子よりも高い量子収率を有する発光性粒子を製造することが可能になった。所定の構造の化合物を使用することによって、発光波長が長波長であり、かつ大きなストークスシフトを有することと同時に、高い量子収率を達成できることは特許文献１からは予想できない効果である。
【００１６】
[本発明の発光性粒子]
本発明の発光性粒子は、少なくとも一種のエネルギードナー化合物と、少なくとも一種のエネルギーアクセプター化合物と、粒子とを含有する発光性粒子であって、上記エネルギードナー化合物及び上記エネルギーアクセプター化合物の少なくとも一種が、下記式（１）で表される化合物である、発光性粒子である。
【化６】
0006756838.tif 000007
式（１）中の各記号の意味は、本明細書中に定義した通りである。
【００１７】
本明細書において、半金属原子とは、金属と非金属の中間の性質を示す物質を示し、ホウ素原子、ケイ素原子、ゲルマニウム原子、及びアンチモン原子が挙げられ、ホウ素原子が好ましい。
【００１８】
本明細書において、金属原子としては、銅、コバルト、鉄、アルミニウム、亜鉛等が挙げられる。
【００１９】
本明細書において、アルキル基とは、直鎖、分岐鎖、環状又はこれらの組み合わせの何れでもよく、直鎖又は分岐鎖アルキル基の炭素数は好ましくは１〜３６であり、より好ましくは１〜１８であり、さらに好ましくは１〜１２であり、特に好ましくは１〜６である。環状のアルキル基としては、例えば炭素数３〜８のシクロアルキルなどが挙げられる。アルキル基の具体例としては、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、ｉｓｏ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、ｎ−オクチル基、ｎ−ノニル基、ｎ−デシル基、ｎ−ウンデシル基、ｎ−ドデシル基、ｎ−トリデシル基、ｎ−テトラデシル基、ｎ−ペンタデシル基、ｎ−ヘキサデシル基、ｎ−ヘプタデシル基、ｎ−オクタデシル基、及びシクロヘキシル基などが挙げられる。
【００２０】
本明細書において、アリール基とは、炭素数が６〜４８のアリール基が好ましく、炭素数が６〜２４のアリール基がより好ましく、炭素数が６〜１４のアリール基がさらに好ましく、例えば、フェニル基、ナフチル基、アントリル基、ピレニル基、フェナントレニル基、ビフェニル基、フルオレニル基などが挙げられる。
【００２１】
本明細書において、ヘテロ環基としては、好ましくは５〜７員の置換もしくは無置換、飽和もしくは不飽和、芳香族もしくは非芳香族、単環もしくは縮環のヘテロ環基の何れでもよい。ヘテロ環基は、好ましくは、環構成原子が炭素原子、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選択され、かつ窒素原子、酸素原子及び硫黄原子のいずれかのヘテロ原子を少なくとも一個有するヘテロ環基であり、さらに好ましくは、炭素数３〜３０の５もしくは６員の芳香族のヘテロ環基である。ヘテロ環基としては、例えば、フリル基、ベンゾフリル基、ジベンゾフリル基、チエニル基、ベンゾチエニル基、ジベンゾチエニル基、ピリジル基、ピリミジニル基、キノリル基、イソキノリル基、アクリジニル基、フェナントリジニル基、プテリジニル基、ピラジニル基、キノキサリニル基、ピリミジニル基、キナゾリル基、ピリダジニル基、シンノリニル基、フタラジニル基、トリアジニル基、オキサゾリル基、ベンゾオキサゾリル基、チアゾリル基、ベンゾチアゾリル基、イミダゾリル基、ベンゾイミダゾリル基、ピラゾリル基、インダゾリル基、イソオキサゾリル基、ベンゾイソオキサゾリル基、イソチアゾリル基、ベンゾイソチアゾリル基、オキサジアゾリル基、チアジアゾリル基、トリアゾリル基、テトラゾリル基、フリル基、チエニル基、ピロリル基、インドリル基、イミダゾピリジニル基、カルバゾリル基等が挙げられる。
【００２２】
本明細書において、アシル基としては、好ましくは炭素数２〜１５の直鎖、又は分岐アルカノイル基であり、例えば、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、バレリル基、イソバレリル基、ピバロイル基、ヘキサノイル基、ヘプタノイル基、ベンゾイル基などが挙げられる。
【００２３】
本明細書において、アルコキシ基としては、好ましくは、炭素数１〜２０のアルコキシ基であり、例えば、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基、ヘプチルオキシ基などが挙げられる。
本明細書において、アリールオキシ基としては、好ましくは炭素数６〜１４のアリールオキシ基であり、例えば、フェノキシ基、ナフトキシ基、アントリルオキシ基などが挙げられる。
【００２４】
アルキルチオ基としては、好ましくは、炭素数１から３０のアルキルチオ基であり、例えば、メチルチオ基、エチルチオ基、ｎ−ヘキサデシルチオ基等が挙げられる。
アリールチオ基としては、好ましくは、炭素数６から３０のアリールチオ基であり、例えば、フェニルチオ基、ｐ−クロロフェニルチオ基、ｍ−メトキシフェニルチオ基等が挙げられる。
【００２５】
本明細書において、ハロゲン原子としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子及びヨウ素原子が挙げられる。
【００２６】
本明細書において、芳香環とは、ベンゼン環、ナフタレン環、アントラセン環、フェナンスレン環、ピレン環、ペリレン環及びテリレン環等の芳香族炭化水素環；インデン環、アズレン環、ピリジン環、ピラジン環、ピリミジン環、ピラゾール環、ピラゾリジン環、チアゾリジン環、オキサゾリジン環、ピラン環、クロメン環、ピロール環、ピロリジン環、ベンゾイミダゾール環、イミダゾリン環、イミダゾリジン環、イミダゾール環、ピラゾール環、トリアゾール環、トリアジン環、ジアゾール環、インドリン環、チオフェン環、チエノチオフェン環、フラン環、オキサゾール環、オキサジアゾール環、チアジン環、チアゾール環、インドール環、ベンゾチアゾール環、ベンゾチアジアゾール環、ナフトチアゾール環、ベンゾオキサゾール環、ナフトオキサゾール環、インドレニン環、ベンゾインドレニン環、ピラジン環、キノリン環及びキナゾリン環等のヘテロ芳香環；並びにフルオレン環及びカルバゾール環等の縮合型芳香環等が挙げられ、炭素数５〜１６の芳香環（芳香環及び芳香環を含む縮合環）が好ましい。
なお、芳香環は置換基を有していてもよく、「芳香環」との用語は、置換基を有する芳香環、及び置換基を有さない芳香環の両方を意味する。芳香環が有する置換基としては、後記する置換基群Ａに記載の置換基が挙げられる。
【００２７】
本明細書において、アミノ基としては、アミノ基；モノ又はジメチルアミノ基、モノ又はジエチルアミノ基並びにモノ又はジ（ｎ−プロピル）アミノ基等のアルキル置換アミノ基；モノ又はジフェニルアミノ基並びにモノ又はジナフチルアミノ基等の芳香族残基で置換されたアミノ基；モノアルキルモノフェニルアミノ基等のアルキル基と芳香族残基が一つずつ置換したアミノ基；ベンジルアミノ基、アセチルアミノ基、フェニルアセチルアミノ基等が挙げられる。ここで芳香族残基とは、芳香環から水素原子１個を除いた基を意味し、芳香環は本明細書中上記した通りである。
【００２８】
Ｒ11〜Ｒ15が表すアルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アミノ基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、又はアリールチオ基は、置換基を有していてもよく、上記置換基としては、下記の置換基群Ａに記載の置換基が挙げられる。
【００２９】
置換基群Ａ：
スルファモイル基、シアノ基、イソシアノ基、チオシアナト基、イソチオシアナト基、ニトロ基、ニトロシル基、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アミノ基、メルカプト基、アミド基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、アリールチオ基、カルバモイル基、アシル基、アルデヒド基、カルボニル基、アリール基、アルキル基、ハロゲン原子で置換されたアルキル基、エテニル基、エチニル基、シリル基、及びトリアルキルシリル基（トリメチルシリル基等）。
【００３０】
Ｘ1及びＸ2が表すアルキル基、アリール基、ヘテロ環基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、アリールチオ基、エテニル基、又はエチニル基は、置換基を有していてもよく、上記置換基としては、置換基群Ａに記載の置換基が挙げられる。
【００３１】
Ａｒ1及びＡｒ2が表すアリール基又はヘテロ環基は、置換基を有していてもよく、上記置換基としては、置換基群Ａに記載の置換基が挙げられる。
Ｒ111〜Ｒ116が表すアルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アミノ基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、又はアリールチオ基は、置換基を有していてもよく、上記置換基としては、置換基群Ａに記載の置換基が挙げられる。
【００３２】
Ｒ1、Ｒ2及びＲ3が表すアルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、又はアリールチオ基は置換基を有していてもよく、上記置換基としては、置換基群Ａに記載の置換基が挙げられる。
【００３３】
Ｙ1及びＹ2が表すアルキル基、アリール基、ヘテロ環基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、アリールチオ基、エテニル基、又はエチニル基は置換基を有していてもよく、上記置換基としては、置換基群Ａに記載の置換基が挙げられる。
【００３４】
Ａｒ11及びＡｒ12が表す芳香環は、置換基を有していてもよく、上記置換基としては、置換基群Ａに記載の置換基が挙げられる。
Ｚ1及びＺ2が表すアリール基、ヘテロ環基又はアミノ基は、置換基を有していてもよく、上記置換基としては、置換基群Ａに記載の置換基が挙げられる。
【００３５】
＜式（１）で表される化合物＞
式（１）中、Ｒ11〜Ｒ15はそれぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アミノ基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、又はアリールチオ基を表し、これらは置換基を有していてもよい。Ｒ11〜Ｒ15のうち少なくとも３つは水素原子以外の原子又は基を表し、好ましくはＲ11〜Ｒ15のうち少なくとも４つは水素原子以外の原子又は基を表し、より好ましくはＲ11〜Ｒ15の全てが水素原子以外の原子又は基を表す。
【００３６】
Ｒ11及びＲ15は、同一の又は異なる原子又は基でもよいが、好ましくは同一の原子又は基である。Ｒ12及びＲ14は、同一の又は異なる原子又は基でもよいが、好ましくは同一の原子又は基である。
Ｒ11及びＲ15は、好ましくは、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、又はエチニル基を表し、これらは置換基を有していてもよい。Ｒ11及びＲ15は、アリール基、エテニル基、又はエチニル基であることが好ましく、量子収率向上の観点からは、アリール基が好ましく、長波長化の観点からは、エテニル基、エチニル基であることが好ましい。アリール基である場合、アリール基のオルト位またはメタ位に少なくとも一つ置換基を有していることが好ましく、オルト位に少なくとも一つ置換基を有していることがより好ましい。アリール基に置換する置換基の数は、１〜３つが好ましく、２つまたは３つがより好ましい。アリール基に置換する置換基としては、アルキル基であることが好ましく、メチル基、イソプロピル基、ｔ−ブチル基であることがより好ましく、メチル基であることがさらに好ましい。  Ｒ12及びＲ14は、好ましくは、アルキル基を表し、これらは置換基を有していてもよい。Ｒ12及びＲ14は、メチル基が好ましい。
Ｒ13は、好ましくは、アリール基を表し、これは置換基を有していてもよい。アリール基に置換する置換基としては、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アミノ基、シアノ基が好ましく、ハロゲン原子、アルキル基、シアノ基がより好ましく、ハロゲン原子がさらに好ましく、フッ素原子が特に好ましい。アリール基は、置換基を１〜５つ有していることが好ましく、置換基を１〜４つ有していることがより好ましく、置換基を２〜４つ有していることがさらに好ましく、置換基を３〜４つ有していることが特に好ましく、置換基を４つ有していることが特に好ましい。
【００３７】
式（１）中、Ｘ1及びＸ2はそれぞれ独立に、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、アリールチオ基、エテニル基、又はエチニル基を表し、これらは置換基を有していてもよく、Ｘ1及びＸ2は互いに連結して環を形成してもよい。
Ｘ1及びＸ2は、好ましくは、ハロゲン原子、又はアルコキシ基を表す。Ｘ1及びＸ2は、フッ素原子、メトキシ基、エトキシ基、イソプロピルオキシ基、ｔ−ブチルオキシ基であることがより好ましく、これらはフッ素原子、アルコキシ基によって置換されていることも好ましい。
【００３８】
式（１）中、Ａｒ1及びＡｒ2はそれぞれ独立に、アリール基又はヘテロ環基を表し、これらは置換基を有していてもよい。
【００３９】
式（１）中、Ｌ1及びＬ2はそれぞれ独立に、式（Ｌ−１）〜式（Ｌ−４）の何れかを表す。
【化７】
0006756838.tif 000008
式中、Ｒ111〜Ｒ116はそれぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アミノ基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、又はアリールチオ基を表し、これらは置換基を有していてもよい。Ａは、−Ｏ−、−Ｓ−、又は−ＮＨ−を表す。
Ｌ1及びＬ2は、好ましくは、式（Ｌ−１）又は式（Ｌ−２）の何れかを表す。
Ｒ111〜Ｒ116は、好ましくは水素原子である。
【００４０】
＜式（３）で表される化合物について＞
式（１）で表される化合物の好ましい例としては、下記式（３）で表される化合物が挙げられる。
【化８】
0006756838.tif 000009
式中、Ｒ11〜Ｒ15、Ｘ1、Ｘ2、Ａｒ1及びＡｒ2は式（１）における定義と同義であり、好ましい範囲も、式（１）における好ましい範囲と同じである。Ｌ21及びＬ22はそれぞれ独立に、式（Ｌ−１）又は式（Ｌ−２）で表される基を表わす。
【化９】
0006756838.tif 000010
【００４１】
式（３）で表される化合物の好ましい例としては、下記式（４）で表される化合物が挙げられる。
【化１０】
0006756838.tif 000011
【００４２】
式（４）中、Ｒ11〜Ｒ15、Ｘ1、Ｘ2、Ｌ21及びＬ22は、式（３）における定義と同義であり、好ましい範囲も、式（３）における好ましい範囲と同じである。
【００４３】
式（４）中、Ｒ51及びＲ52はそれぞれ独立に、アルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アミノ基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、又はアリールチオ基を表し、これらは置換基を有していてもよい。上記置換基としては、置換基群Ａに記載の置換基が挙げられる。Ｒ51及びＲ52はそれぞれ独立に、アルキル基、アルコキシ基であることが好ましく、量子収率向上の観点では、アルキル基であることがより好ましく、メチル基、エチル基、イソプロピル基、ｔ−ブチル基であることがさらに好ましく、メチル基であることが特に好ましい。長波長化の観点では、アルコキシ基であることがより好ましく、メトキシ基、エトキシ基、イソプロピルオキシ基、ｔ−ブチルオキシ基であることがさらに好ましく、メトキシ基であることが特に好ましい。
【００４４】
Ｑ1及びＱ2はそれぞれ独立に、芳香族炭化水素環又は芳香族ヘテロ環を表し、これらは置換基を有していてもよい。上記置換基としては、置換基群Ａに記載の置換基が挙げられる。Ｑ1及びＱ2は、芳香族炭化水素環であることが好ましく、ベンゼン環、ナフタレン環、アントラセン環、フェナンスレン環、ピレン環であることがより好ましく、ベンゼン環、ナフタレン環であることがさらに好ましく、ベンゼン環であることが特に好ましい。Ｒ51を含みＱ1を形成する基、および、Ｒ52を含みＱ1を形成する基としては、トリル基、キシリル基、メシチル基が好ましく、キシリル基、メシチル基であることがより好ましく、Ｌ1あるいはＬ2との結合位置に対してオルト位の両方にメチル基を有するキシリル基、Ｌ1あるいはＬ2との結合位置に対してオルト位の両方およびパラ位にメチル基を有するメシチル基であることがさらに好ましく、Ｌ1あるいはＬ2との結合位置に対してオルト位の両方およびパラ位にメチル基を有するメシチル基であることが特に好ましい。
【００４５】
＜式（５）で表される化合物について＞
式（４）で表わされる化合物は、下記式（５）で表わされる化合物であることがより好ましい。
【化１１】
0006756838.tif 000012
式（５）中、Ｒ11〜Ｒ15、Ｘ1、Ｘ2、Ｌ21及びＬ22、Ｑ1及びＱ2は、式（４）における定義と同義であり、好ましい範囲も、式（３）における好ましい範囲と同じである。
Ｒ31〜Ｒ35はそれぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アミノ基、アシル基、シアノ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、又はアリールチオ基を表し、これらは置換基を有していてもよく、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アミノ基、シアノ基が好ましく、ハロゲン原子、アルキル基、シアノ基がより好ましく、ハロゲン原子がさらに好ましく、フッ素原子が特に好ましい。Ｒ31〜Ｒ35のいずれか一つは水素原子であることが好ましく、１〜３つが水素原子であることがより好ましく、１つまたは２つが水素原子であることがさらに好ましく。１つが水素原子であることが特に好ましい。
【００４６】
＜式（１）又は式（３）〜式（５）で表される化合物の具体例＞
式（１）又は式式（３）〜式（５）で表される化合物の具体例を以下に記載する。Ｍｅはメチル基を示し、Ｅｔはエチル基を示し、ｉＰｒはイソプロピル基を示す。
【００４７】
【化１２】
0006756838.tif 000013
【００４８】
【化１３】
0006756838.tif 000014
【００４９】
【化１４】
0006756838.tif 000015
【００５０】
【化１５】
0006756838.tif 000016
【００５１】
＜エネルギードナー化合物とエネルギーアクセプター化合物の組み合わせについて＞
本発明の一例においては、発光性粒子は、エネルギードナー化合物として、少なくとも一種の式（１）で表される化合物を含有し、エネルギーアクセプター化合物として、少なくとも一種の式（１）で表される化合物を含有する。
【００５２】
本発明の別の例においては、発光性粒子は、エネルギードナー化合物及びエネルギーアクセプター化合物の何れか一方として、式（１）で表される化合物を含有し、エネルギードナー化合物及びエネルギーアクセプター化合物の何れか他方として、後記する式（２）で表される化合物を含有する。即ち、発光性粒子としては、エネルギードナー化合物として式（１）で表される化合物を含有し、エネルギーアクセプター化合物として式（２）で表される化合物を含有する発光性粒子でもよいし、エネルギーアクセプター化合物として式（１）で表される化合物を含有し、エネルギードナー化合物として式（２）で表される化合物を含有する発光性粒子でもよい。
【００５３】
＜式（２）で表される化合物＞
【化１６】
0006756838.tif 000017
【００５４】
式（２）中、ｍ１及びｍ２はそれぞれ独立に０〜４の整数を表し、ｍ１及びｍ２の何れかは少なくとも１以上である。Ｍは半金属原子又は金属原子を表す。Ｒ1、Ｒ2及びＲ3はそれぞれ独立に水素原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、又はアリールチオ基を表し、これらは置換基を有していてもよい。Ｙ1及びＹ2はそれぞれ独立にハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、アリールチオ基、エテニル基、又はエチニル基を表し、これらは置換基を有していてもよく、Ｙ1及びＹ2は互いに連結して環を形成してもよい。Ａｒ11及びＡｒ12はそれぞれ独立に、置換基を有していてもよい芳香環を表す。Ｚ1及びＺ2はそれぞれ独立にアリール基、ヘテロ環基又はアミノ基を表し、これらは置換基を有していてもよい。ｍ１が２以上である場合、複数のＺ1は同じ基でもそれぞれ異なる基でもよく、ｍ２が２以上である場合、複数のＺ2は同じ基でもそれぞれ異なる基でもよい。
【００５５】
式（２）中、ｍ１及びｍ２はそれぞれ独立に０〜４の整数を表し、好ましくは、ｍ１及びｍ２は共に１以上である。ｍ１及びｍ２は同一でも異なる整数でもよいが、好ましくは同一の整数である。好ましくは、ｍ１及びｍ２はそれぞれ独立に１又は２であり、より好ましくは、ｍ１及びｍ２は共に１又は共に２であり、特に好ましくはｍ１及びｍ２は共に１である。
【００５６】
式（２）中、Ｍは半金属原子又は金属原子を表し、好ましくは半金属原子を表し、特に好ましくは、ホウ素原子を示す。
【００５７】
式（２）中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3はそれぞれ独立に水素原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、又はアリールチオ基を表し、これらは置換基を有していてもよい。
好ましくは、Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立に、アリール基又はヘテロ環基であり、これらは置換基を有していてもよい。
Ｒ1及びＲ2はそれぞれ同一でも異なっていてもよいが、好ましくは同一である。
Ｒ1及びＲ2は、連結して環を形成することはない。
好ましくは、Ｒ3は、水素原子、アルキル基、アリール基又はヘテロ環基であり、これらは置換基を有していてもよい。より好ましくは、Ｒ3は、水素原子である。
【００５８】
式（２）中、Ｙ1及びＹ2はそれぞれ独立にハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、アリールチオ基、エテニル基、又はエチニル基を表し、これらは置換基を有していてもよく、Ｙ1及びＹ2は互いに連結して環を形成してもよい。
好ましくは、Ｙ1及びＹ2はそれぞれ独立に、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、又はアリールオキシ基を表し、これらは置換基を有していてもよく、Ｙ1及びＹ2は互いに連結して環を形成してもよい。
より好ましくは、Ｙ1及びＹ2はそれぞれ独立に、ハロゲン原子である。
さらに好ましくは、Ｙ1及びＹ2はフッ素原子である。
Ｙ1及びＹ2はそれぞれ同一でも異なっていてもよいが、好ましくは同一である。
【００５９】
式（２）中、Ａｒ1及びＡｒ2はそれぞれ独立に、置換基を有していてもよい芳香環を表す。
好ましくは、Ａｒ1及びＡｒ2はベンゼン環を表す。
【００６０】
式（２）中、Ｚ1及びＺ2はそれぞれ独立に、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、アリールチオ基、又はアミノ基を表し、これらは置換基を有していてもよい。ｍ１が２以上である場合、複数のＺ1は同じ基でもそれぞれ異なる基でもよく、ｍ２が２以上である場合、複数のＺ2は同じ基でもそれぞれ異なる基でもよい。
好ましくは、Ｚ1及びＺ2は、それぞれ独立に、置換基を有していてもよいアリール基を表す。
より好ましくは、Ｚ1及びＺ2は、それぞれ独立に、フェニル基、ナフチル基、又はアントリル基を表し、これらは置換基を有していてもよい。
好ましくは、ｍ１が２以上である場合、複数のＺ1は同じ基である。
好ましくは、ｍ２が２以上である場合、複数のＺ2は同じ基である。
式（２）で表される化合物は、分子内に、カルボン酸基、リン酸基、スルホン酸基などの酸性基を有さないことが好ましい。
【００６１】
＜式（２Ａ）で表される化合物について＞
式（２）で表される化合物の好ましい例としては、下記式（２Ａ）で表される化合物が挙げられる。
【化１７】
0006756838.tif 000018
【００６２】
式（２Ａ）中、Ｙ1及びＹ2はそれぞれ独立にハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、アリールチオ基、エテニル基、又はエチニル基を表し、これらは置換基を有していてもよい。上記置換基としては、置換基群Ａに記載の置換基が挙げられる。
好ましくは、Ｙ1及びＹ2はそれぞれ独立にハロゲン原子を表す。
特に好ましくは、Ｙ1及びＹ2はフッ素原子である。
【００６３】
式（２Ａ）中、Ｒ3は水素原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、又はアシル基を表し、これらは置換基を有していてもよい。
好ましくは、Ｒ3は、水素原子、アルキル基、アリール基又はヘテロ環基であり、これらは置換基を有していてもよい。
より好ましくは、Ｒ3は、水素原子である。
【００６４】
式（２Ａ）中、Ａｒ3及びＡｒ4はそれぞれ独立にアリール基又はヘテロ環基を表し、これらは置換基を有していてもよい。上記置換基としては、置換基群Ａに記載の置換基が挙げられる。
【００６５】
式（２Ａ）中、Ｒ34〜Ｒ41はそれぞれ独立に水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、アリールチオ基、又はアミノ基を表し、これらは置換基を有していてもよい。上記置換基としては、置換基群Ａに記載の置換基が挙げられる。
【００６６】
式（２Ａ）中、好ましくは、Ｒ34〜Ｒ41の少なくとも１つ以上が、置換基を有していてもよいアリール基である。
さらに好ましくは、Ｒ34〜Ｒ37の少なくとも１つ以上が、置換基を有していてもよいアリール基であり、Ｒ38〜Ｒ41の少なくとも１つ以上が、置換基を有していてもよいアリール基である。
【００６７】
より好ましくは、Ｒ34〜Ｒ41の少なくとも１つ以上が、式（４）で表される基である。さらに好ましくは、Ｒ34〜Ｒ37の少なくとも１つ以上が、式（４）で表される基であり、Ｒ38〜Ｒ41の少なくとも１つ以上が、式（４）で表される基である。
【化１８】
0006756838.tif 000019
式（４）中、Ｒ201〜Ｒ205は水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、アシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルチオ基、アリールチオ基、又はアミノ基であり、Ｒ201及びＲ205の少なくとも一方は水素原子以外の原子又は基である。Ｒ201とＲ202は互いに連結して環を形成してもよく、Ｒ202とＲ203は互いに連結して環を形成してもよく、Ｒ203とＲ204は互いに連結して環を形成してもよく、Ｒ204とＲ205は互いに連結して環を形成してもよい。
【００６８】
別の好ましい態様によれば、Ｒ34〜Ｒ41の少なくとも１つ以上が、式（５）で表される基である。さらに好ましくは、Ｒ34〜Ｒ37の少なくとも１つ以上が、式（５）で表される基であり、Ｒ38〜Ｒ41の少なくとも１つ以上が、式（５）で表される基である。
【化１９】
0006756838.tif 000020
式（５）中、Ｒ101は、水素原子、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基、エテニル基、エチニル基、又はアシル基を表し、これらは置換基を有していてもよい。上記置換基としては、置換基群Ａに記載の置換基が挙げられる。Ａｒ101はアリール基、又はヘテロ環基を表し、これらは置換基を有していてもよい。上記置換基としては、置換基群Ａに記載の置換基が挙げられる。Ａｒ101とＲ101は互いに連結して環を形成してもよい。
式（２Ａ）で表される化合物は、分子内に、カルボン酸基、リン酸基、スルホン酸基などの酸性基を有さないことが好ましい。
【００６９】
＜式（２）又は式（２Ａ）で表される化合物の具体例＞
式（２）又は式（２Ａ）で表される化合物の具体例を以下に記載する。Ｍｅはメチル基を示し、Ｂｕはｎ−ブチル基を示し、Ｐｈはフェニル基を示す。
【００７０】
【化２０】
0006756838.tif 000021
【００７１】
【化２１】
0006756838.tif 000022
【００７２】
【化２２】
0006756838.tif 000023
【００７３】
【化２３】
0006756838.tif 000024
【００７４】
【化２４】
0006756838.tif 000025
【００７５】
【化２５】
0006756838.tif 000026
【００７６】
【化２６】
0006756838.tif 000027
【００７７】
【化２７】
0006756838.tif 000028
【００７８】
＜エネルギードナー化合物とエネルギーアクセプター化合物の組み合わせの具体例について＞
エネルギードナー化合物とエネルギーアクセプター化合物の組み合わせの具体例を以下に記載する。
【００７９】
【表１】
0006756838.tif 000029
【００８０】
【表２】
0006756838.tif 000030
【００８１】
エネルギードナー化合物とエネルギーアクセプター化合物の選択に関しては、吸収が短波長の化合物がエネルギードナー化合物であり、吸収が長波長の化合物がエネルギーアクセプター化合物であり、エネルギードナー化合物の発光とエネルギーアクセプター化合物の吸収が少しでも重なっている場合には、本発明の発光性粒子において使用できる可能性がある。エネルギーアクセプター化合物の吸収の極大波長が、エネルギードナー化合物の吸収の波長より１０〜１００ｎｍ程度長波長側にある場合が好ましい。エネルギーアクセプター化合物の吸収の極大波長が、エネルギードナー化合物の吸収の波長より１０〜７０ｎｍ長波長側にある場合がより好ましい。
【００８２】
エネルギードナー化合物の発光が吸収のどの程度長波長に出るか（ストークスシフトの大きさ）は化合物によって異なるため、一概には言えないが、式（１）で表される化合物では吸収極大波長＋３０ｎｍ程度に発光の極大があり、そこから＋１００ｎｍ程度までは発光スペクトルが存在するため、その付近に吸収を持つアクセプター化合物を併用することによりエネルギー移動の系が実現できることが想定される。
【００８３】
なお、各化合物の吸収波長に関しては、化合物を合成して測定するだけでなく、Ｇａｕｓｓｉａｎ等による計算から予測することも可能であり、計算値の関係から、エネルギードナー化合物とエネルギーアクセプター化合物の組み合わせを推定することもできる。
【００８４】
本発明においては、ストークスシフトの大きさが、好ましくは２５ｎｍ以上であり、より好ましくは３０ｎｍ以上であり、より一層好ましくは３５ｎｍ以上であり、さらに好ましくは４０ｎｍ以上であり、さらに一層好ましくは４５ｎｍ以上であり、特に好ましくは５０ｎｍ以上であり、最も好ましくは６０ｎｍ以上である。ストークスシフトの大きさの上限は特に限定されないが、一般的には、１５０ｎｍ以下である。
【００８５】
＜式（１）で表される化合物の使用量＞
本発明で用いる粒子（即ち、エネルギードナー化合物とエネルギーアクセプター化合物を添加する前の粒子）に対するエネルギードナー化合物とエネルギーアクセプター化合物の総量は、本発明の効果を損なわない限り特に限定されないが、好ましくは２μｍｏｌ／ｇ〜５００μｍｏｌ／ｇであり、より好ましくは２μｍｏｌ／ｇ〜４００μｍｏｌ／ｇであり、さらに好ましくは４μｍｏｌ／ｇ〜３００μｍｏｌ／ｇであり、特に好ましくは６μｍｏｌ／ｇ〜２００μｍｏｌ／ｇである。本発明で用いる粒子（即ち、エネルギードナー化合物とエネルギーアクセプター化合物を添加する前の粒子）に対する式（１）で表されるエネルギードナー化合物と式（１）で表されるエネルギーアクセプター化合物の総量は、本発明の効果を損なわない限り特に限定されないが、好ましくは０．１質量％〜３０質量％であり、より好ましくは０．２質量％〜２５質量％であり、さらに好ましくは０．３質量％〜２０質量％であり、特に好ましくは０．５質量％〜１５質量％である。
【００８６】
エネルギードナー化合物とエネルギーアクセプター化合物のモル比は、１：１０〜２０：１であることが好ましく、１：５〜１０：１であることがより好ましい。
【００８７】
エネルギーアクセプター化合物として二種以上の化合物を使用してもよく、またエネルギーアクセプター化合物として二種以上の化合物を使用してもよい。上記の場合、使用される化合物の合計量が、上記の範囲内となることが好ましい。
【００８８】
＜式（１）で表される化合物の製造方法＞
式（１）で表される化合物は、例えば、後記する実施例に示す合成スキームにより製造することができる。
【００８９】
一例として、化合物Ｄ１−１の合成の概要を以下に示す。２，３，５，６−テトラフルオロベンズアルデヒド及びジクロロメタンの混合物に、３−エチル−２，４−ジメチルピロール及びトリフルオロ酢酸を加えて撹拌し、次いで、クロラニルを加えて撹拌する。その後、ジイソプロピルエチルアミンを滴下し、撹拌する。続いて、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体を滴下し、撹拌して反応を行うことにより、化合物１−Ａを製造する。
化合物１−Ａ、２，４，６−トリメチルベンズアルデヒド、及び脱水トルエンの混合物に、ピペリジン及びｐ−トルエンスルホン酸１水和物を加えて、溶媒を留去しながら撹拌して反応を行うことにより、化合物Ｄ１−１を製造することができる。
【００９０】
化合物Ｄ１−１は、式（１）で表される化合物の定義の範囲内である。化合物Ｄ１−１以外の式（１）で表される化合物についても、反応に使用する化合物を、所望の式（１）で表される目的化合物に対応する置換基を有する化合物に置き換えることによって、製造することができる。
【００９１】
＜式（２）で表される化合物の製造方法＞
式（２）で表される化合物は、例えば、以下に示す合成スキームにより製造することができる。
【００９２】
【化２８】
0006756838.tif 000031
【００９３】
上記合成スキームにおけるＲ1及びＺ1の定義は、式（２）におけるＲ1及びＺ1の定義と同義である。
化合物Ａ−１０と化合物Ａ−２０とをＭａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ２０１０、４３、１９３−２００に記載の方法に従って反応させることにより、化合物Ａ−３０を合成することができる。次いで、化合物Ａ−３０、式：Ｚ1−Ｂ（ＯＨ）2で表される化合物、及びフッ化セシウム（ＣｓＦ）をジメトキシエタン（ＤＭＥ）と水の混合溶液に加え、真空引き、窒素置換を繰り返して脱気を行う。酢酸パラジウム（Ｐｄ（ＯＡｃ）2）、及び２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’、６’−ジメトキシビフェニル（ＳＰｈｏｓ）を加え、昇温し、還流下、所定の時間（例えば、２〜２４時間）反応させることにより、化合物Ｄ−１０を製造することができる。
【００９４】
化合物Ｄ−１０は、式（２）で表される化合物の定義の範囲内である。化合物Ｄ−１０以外の式（２）で表される化合物についても、化合物Ａ−１０、化合物Ａ−２０、及び式：Ｚ1−Ｂ（ＯＨ）2で表される化合物の何れか一種以上の化合物を、対応する化合物に置き換えることによって、製造することができる。
【００９５】
＜粒子＞
本発明の発光性粒子は、粒子を含む。粒子の材質及び形態は特に限定されず、例えば、ポリスチレンビーズなどの有機高分子粒子、又はガラスビーズ等の無機粒子を用いることができる。粒子の材質の具体例としては、スチレン、メタクリル酸、グリシジル（メタ）アクリレート、ブタジエン、塩化ビニル、酢酸ビニルアクリレート、メチルメタクリレート、エチルメタクリレート、フェニルメタクリレート、又はブチルメタクリレートなどのモノマーを重合させたホモポリマー、並びに２種以上のモノマーを重合させたコポリマーなどが挙げられ、上記のホモポリマー又はコポリマーを均一に懸濁させたラテックスでもよい。また、粒子としては、その他の有機高分子粉末、無機物質粉末、微生物、血球、細胞膜片、リポソーム、マイクロカプセルなどが挙げられる。粒子としては、ラテックス粒子が好ましい。
【００９６】
ラテックス粒子を使用する場合、ラテックスの材質の具体例としては、ポリスチレン、スチレン−アクリル酸共重合体、スチレン−メタクリル酸共重合体、スチレン−グリシジル（メタ）アクリレート共重合体、スチレン−スチレンスルホン酸塩共重合体、メタクリル酸重合体、アクリル酸重合体、アクリロニトリル−ブタジエン−スチレン共重合体、塩化ビニル−アクリル酸エステル共重合体、ポリ酢酸ビニルアクリレートなどが挙げられる。ラテックスとしては、単量体としてスチレンを少なくとも含む共重合体が好ましく、スチレンと、アクリル酸又はメタクリル酸との共重合体が特に好ましい。ラテックスの作製方法は特に限定されず、任意の重合方法により作製することができる。但し、本発明の発光性粒子に抗体を標識して使用する場合には、界面活性剤が存在すると抗体固定化が困難となるため、ラテックスの作製には、無乳化剤乳化重合、即ち界面活性剤などの乳化剤を用いない乳化重合を用いるか、界面活性剤などの乳化剤を用いた乳化重合によりラテックスを作製したのちに精製により界面活性剤を除去あるいは低減するのが好ましい。界面活性剤の除去あるいは低減をするための方法としては特に限定されないが、遠心分離によりラテックスを沈降させた後に上澄みを除去する操作を繰り返す精製方法が好ましい。
ラテックスの作製において、無乳化剤乳化重合を用いる場合、反応温度、モノマー組成比（例えば、スチレンとアクリル酸の比）、重合開始剤の量を変更することで、平均粒径を８０〜３００ｎｍの範囲で制御することができる。
ラテックスの作製において、界面活性剤（例えばドデシル硫酸ナトリウムなど）を用いた乳化重合を用いる場合、界面活性剤の量、反応温度、モノマー組成比（例えば、スチレンとアクリル酸の比）、重合開始剤の量を変更することで、平均粒径を３０〜１５０ｎｍの範囲で制御することができる。
【００９７】
＜発光性粒子＞
本発明の発光性粒子は、式（１）で表される化合物を含むことにより、発光波長が長波長であること、並びに高い量子収率及び大きなストークスシフトを有することを達成している。
【００９８】
発光性粒子の励起極大波長とは、励起スペクトルで蛍光強度の最も大きい波長である。発光性粒子の発光極大波長とは、蛍光スペクトルで蛍光強度の最も大きい波長のことである。また、励起スペクトルは、蛍光強度の励起波長依存性を示し、蛍光スペクトルは、蛍光強度の蛍光波長依存性を示す。
本発明の発光性粒子の励起極大波長は、好ましくは６００ｎｍ〜９００ｎｍであり、より好ましくは６３０ｎｍ〜９００ｎｍであり、さらに好ましくは６５０ｎｍ〜９００ｎｍである。
本発明の発光性粒子の発光極大波長は、好ましくは６５０ｎｍ〜９００ｎｍであり、より好ましくは６８０ｎｍ〜９００ｎｍであり、さらに好ましくは７００ｎｍ〜９００ｎｍであり、特に好ましくは７２０ｎｍ〜９００ｎｍである。
【００９９】
本発明の発光性粒子の励起極大波長、及び発光極大波長は、市販の蛍光分光光度計を使用して測定することができ、例えば、島津製作所製の蛍光分光光度計ＲＦ−５３００ＰＣを使用して測定することができる。
【０１００】
発光性粒子の量子収率とは、発光性粒子が吸収した光子数に対する蛍光として発光した光子数の割合のことである。
本発明の発光性粒子が示す量子収率は、好ましくは０．２５以上であり、より好ましくは０．３０以上であり、さらに好ましくは０．３５以上であり、特に好ましくは０．４０以上である。量子収率の上限は特に限定されないが、一般的には、１．０以下である。
本発明の発光性粒子の量子収率は、市販の量子収率測定装置を使用して測定することができ、例えば、浜松ホトニクス社製の絶対ＰＬ量子収率測定装置Ｃ９９２０−０２を使用して測定することができる。
【０１０１】
（発光性粒子の平均粒径（平均粒子径）の測定方法）
本発明の発光性粒子の平均粒径は、粒子の材質や被検物質を測定する濃度範囲、測定機器などによって異なるが、０．００１〜１０μｍ（より好ましくは０．０１〜１μｍ）の範囲が好ましく、３０〜５００ｎｍの範囲がより好ましく、５０〜３００ｎｍの範囲がさらに好ましく、８０〜２００ｎｍの範囲が特に好ましく、１００〜１５０ｎｍの範囲が最も好ましい。本発明に用いることが可能な発光性粒子の平均粒径は、市販の粒度分布計等で計測することができる。粒度分布の測定方法としては、光学顕微鏡法、共焦点レーザー顕微鏡法、電子顕微鏡法、原子間力顕微鏡法、静的光散乱法、レーザー回折法、動的光散乱法、遠心沈降法、電気パルス計測法、クロマトグラフィー法、超音波減衰法等が知られており、それぞれの原理に対応した装置が市販されている。これらの測定方法のうち、粒子径範囲及び測定の容易さから、動的光散乱法を用いて発光性粒子の平均粒径を測定することが好ましい。動的光散乱を用いた市販の測定装置としては、ナノトラックＵＰＡ（日機装（株））、動的光散乱式粒径分布測定装置ＬＢ−５５０（（株）堀場製作所）、濃厚系粒径アナライザーＦＰＡＲ−１０００（大塚電子（株））等が挙げられる。本発明では、平均粒径は、２５℃にて、粘度０．８８７２ＣＰ、水の屈折率１．３３０の条件で測定したメジアン径（ｄ＝５０）として求めるものとする。
【０１０２】
＜発光性粒子の製造方法＞
本発明の発光性粒子の製造方法は特に限定されないが、少なくとも一種のエネルギードナー化合物と、少なくとも一種のエネルギーアクセプター化合物と粒子とを混合することによって製造することができる。例えば、ラテックス粒子などの粒子に、エネルギードナー化合物とエネルギーアクセプター化合物を添加することによって、本発明の発光性粒子を作製することができる。より具体的には、水及び水溶性有機溶剤（テトラヒドロフラン、メタノール等）の何れか一種以上を含む粒子の溶液に、エネルギードナー化合物とエネルギーアクセプター化合物を含む溶液を添加して攪拌することにより、本発明の発光性粒子を製造することができる。
【０１０３】
本発明の発光性粒子は、分散液の形態で使用してもよい。
分散液は、本発明の発光性粒子を分散媒に分散することにより製造することができる。分散媒としては、水、有機溶媒、又は水と有機溶媒との混合物等が挙げられる。有機溶媒としては、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール、テトラヒドロフラン等のエーテル系溶媒などを使用することができる。
分散液における発光性粒子の固形分濃度は特に限定されないが、一般的には０．１〜２０質量％であり、好ましくは０．５〜１０質量％であり、より好ましくは１〜５質量％である。
【０１０４】
＜発光性粒子の利用＞
本発明の発光性粒子は、具体的な蛍光検出法の一例としては、タンパク質、酵素又は無機化合物などを定量するための蛍光検出法において使用することができる。
【０１０５】
以下に、本発明の実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明する。なお、以下の実施例に示される材料、使用量、割合、処理内容、処理手順等は、本発明の趣旨を逸脱しない限り適宜変更することができる。したがって、本発明の範囲は以下に示す具体例により限定的に解釈されるべきものではない。
【実施例】
【０１０６】
用語は以下の意味を示す。
ＭＳ：質量分析 (mass spectrometry)
ＥＳＩ：エレクトロスプレーイオン化（electrospray ionization）
ＮＭＲ：核磁気共鳴（nuclear magnetic resonance）
Ｍｅ：メチル
Ｅｔ：エチル
iＰｒ：イソプロピル
ＰＬ：フォトルミネッセンス
ＴＥＡ：トリエチルアミン
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ｖ／ｖ：容量／容量【０１０７】
【化２９】
0006756838.tif 000032
【０１０８】
【化３０】
0006756838.tif 000033
【０１０９】
［化合物（Ｄ１−３）の合成］
【化３１】
0006756838.tif 000034
【０１１０】
＜化合物（３−Ａ）の合成＞
１Ｌ三ツ口フラスコに、窒素雰囲気下、３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド１６．２２ｇ、ジクロロメタン２００ｍＬを導入し、室温で撹拌した。水冷しながら２，４−ジメチルピロール１５．７５ｇを滴下し、続いて、トリフルオロ酢酸を５滴加えた後、室温で３０分間撹拌した。水冷しながらクロラニル１９．４５ｇを加え、室温で３０分間撹拌した後、水冷しながらジイソプロピルエチルアミン８０ｍＬを滴下し、室温で３０分間撹拌した。続いて、水冷しながら三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体８５ｍＬを滴下し、室温で３０分間撹拌した。飽和炭酸水素ナトリウム４００ｍＬを滴下し、抽出・分液して得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで予備乾燥した後、減圧濃縮した。この粗生成物をシリカゲルカラムクロマグラフィー（展開溶媒：ヘキサン／酢酸エチル）で精製した後、エタノールで再結晶することにより、化合物（３−Ａ）を４．４０ｇ得た。【０１１１】
＜化合物（３−Ｂ）の合成＞
３００ｍＬ三ツ口フラスコに、化合物（３−Ａ）を３．０５ｇ、１，１，１，３，３，３−ヘキサフルオロ−２−プロパノール６０ｍＬを導入し、室温で撹拌した。Ｎ−ヨードスクシンイミド（ＮＩＳ）３．６０ｇを導入し、室温で１時間半撹拌した。反応液を減圧濃縮した後、チオ硫酸ナトリウム水溶液５０ｍＬ（チオ硫酸ナトリウム１０ｇ溶解）、塩化メチレン１００ｍＬを加え、抽出・分液して得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで予備乾燥した後、減圧濃縮した。この粗生成物をエタノールで再結晶することにより、化合物（３−Ｂ）を３．９０ｇ得た。【０１１２】
＜化合物（３−Ｃ）の合成＞
１００ｍＬ三ツ口フラスコに、化合物（３−Ｂ）を２．２ｇ、２，４，６−トリメチルベンズアルデヒド２．６ｇ、脱水トルエン４０ｍＬを導入し、室温で撹拌した。ピペリジン４ｍＬを導入して６５℃で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮して得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマグラフィー（展開溶媒：ヘキサン／酢酸エチル）で精製した後、エタノールで再結晶することにより、化合物（３−Ｃ）を２．４ｇ得た。【０１１３】
＜化合物（Ｄ１−３）の合成＞
１００ｍＬ三ツ口フラスコに、化合物（３−Ｃ）を９６ｍｇ、２，４，６−トリメチルフェニルボロン酸６４ｍｇ、フッ化セシウム１３０ｍｇ、メトキシシクロペンタン１０ｍＬを導入し、室温で撹拌しながら、減圧脱気後、窒素雰囲気にした。ここに、ＳＰｈｏｓ  Ｐｄ  Ｇ３（Ａｌｄｒｉｃｈ製）６３ｍｇを加え、１時間加熱還流した。飽和塩化アンモニウム水溶液１０ｍＬ，酢酸エチル１０ｍＬを加え、抽出・分液して得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで予備乾燥した後、減圧濃縮した。この粗生成物を分取ＴＬＣ（展開溶媒：ヘキサン／酢酸エチル）で精製した後、エタノールで再結晶することにより、化合物（Ｄ１−３）を１６ｍｇ得た。化合物の同定は、1Ｈ−ＮＭＲとＥＳＩ−ＭＳにより行った。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ  ８．０２（ｓ，１Ｈ），８．００（ｓ，２Ｈ），７，４２（ｄ，Ｊ＝２２．４Ｈｚ，２Ｈ），６．９２（ｓ，４Ｈ），６．８０（ｓ，４Ｈ），６．６７（ｄ，Ｊ＝２２．４Ｈｚ，２Ｈ），２．２７（ｓ，６Ｈ），２．１７（ｓ，６Ｈ），２．１６（ｓ，６Ｈ），２．１１（ｓ，１２Ｈ），２．０１（ｓ，１２Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ：［Ｍ−Ｈ］-＝９５５．８【０１１４】
［化合物（Ｄ１−１）の合成］
【化３２】
0006756838.tif 000035
【０１１５】
＜化合物（１−Ａ）の合成＞
１００ｍL三ツ口フラスコに、窒素雰囲気下、２，３，５，６−テトラフルオロベンズアルデヒド１．００ｇ、ジクロロメタン２０ｍLを導入し、室温で撹拌した。水冷しながら３−エチル−２，４−ジメチルピロール０．９８ｇを滴下し、続いて、トリフルオロ酢酸を２滴加えた後、室温で１５分間撹拌した。水冷しながらクロラニル１．０ｇを加え、室温で１０分間撹拌した後、水冷しながらジイソプロピルエチルアミン３．６７ｇを滴下し、室温で１５分間撹拌した。続いて、水冷しながら三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体５．６ｍＬを滴下し、室温で６０分間撹拌した。飽和炭酸水素ナトリウムおよびトルエンを滴下し、抽出・分液して得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで予備乾燥した後、減圧濃縮した。この粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：トルエン）で精製した後、メタノールで再結晶することにより、化合物（１−Ａ）を０．７６ｇ得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ  ７．２０−７．３０（ｍ，１Ｈ），２．５４（ｓ，６Ｈ），２．３３（ｑ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，４Ｈ），１．５１（ｓ，６Ｈ），１．０１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，６Ｈ）．【０１１６】
＜化合物（Ｄ１−１）の合成＞
１００ｍＬ三ツ口フラスコに、化合物（１−Ａ）を１８１ｍｇ、２，４，６−トリメチルベンズアルデヒド２３７ｍｇ、脱水トルエン１０ｍＬを導入し、室温で撹拌した。ピペリジン２ｍＬおよびｐ−トルエンスルホン酸１水和物（和光純薬工業（株）社製、試薬特級）２片を加えて１４０℃で溶媒を留去しながら１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮して得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：トルエン）で精製した後、アセトニトリルで再結晶することにより、化合物（Ｄ１−１）を１９４ｍｇ得た。化合物の同定は、1Ｈ−ＮＭＲとＥＳＩ−ＭＳにより行った。
1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ  ７，４０（ｄ，Ｊ＝１７．２Ｈｚ，２Ｈ），７，３２（ｄ，Ｊ＝１７．２Ｈｚ，２Ｈ），７．２０−７．３０（ｍ，１Ｈ），６．９３（ｓ，４Ｈ），２．６６（ｑ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，４Ｈ），２．４４（ｓ，１２Ｈ），２．３０（ｓ，６Ｈ），１．５５（ｓ，６Ｈ），１．１９（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，６Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ：［Ｍ−Ｈ］-＝７１１．７【０１１７】
［化合物（Ｄ１−２）の合成］
化合物（Ｄ１−３）の合成において、３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドを２，３，５，６−テトラフルオロベンズアルデヒドに置き換えたこと以外は同様にして合成し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマグラフィー（展開溶媒：ヘキサン／酢酸エチル）で精製した後、メタノールで再結晶することにより、化合物（Ｄ１−２）を１６ｍｇ得た。化合物の同定は、1Ｈ−ＮＭＲとＥＳＩ−ＭＳにより行った。
1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）：δ  ７．４３（ｓ，１Ｈ），７．３９（ｓ，１Ｈ），７．２９−７．２１（ｍ，１Ｈ），６．９４（ｓ，４Ｈ），６．８０（ｓ，４Ｈ），６．６９（ｓ，１Ｈ），６．６５（ｓ，１Ｈ），２．２９（ｓ，６Ｈ），２．２３（ｓ，６Ｈ），２．０８（ｓ，１２Ｈ），２．０３（ｓ，１２Ｈ），１．３３（ｓ，６Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ：［Ｍ−Ｈ］-＝８９１．４【０１１８】
また、化合物（Ｄ１−２）は以下の合成方法によっても合成を行った。
＜化合物（Ｄ１−２）の合成＞
【化３３】
0006756838.tif 000036
【０１１９】
化合物（Ｄ１−２Ａ）の合成
５００ｍＬ三ツ口フラスコに、窒素雰囲気下、２，４−ジメチルピロール１．１６ｍｌ及びジクロロメタン１４０ｍＬを導入し、室温で撹拌した。２，３，５，６−テトラフルオロベンズアルデヒド１．０ｇ、トリフルオロ酢酸１滴を加えた後、室温で１５分間撹拌した。クロラニル（Chloranil）１．３８ｇを加え、室温で１５分間撹拌した後、水冷しながらジイソプロピルエチルアミン（ＮiＰｒ2Ｅｔ）６．８ｍＬを滴下し、室温で２０分間撹拌した。続いて、水冷しながら三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（ＢＦ3・Ｅｔ2Ｏ）７．８ｍＬを滴下し、室温で３０分間撹拌した。飽和炭酸水素ナトリウム４００ｍＬを滴下し、ジクロロメタンで抽出・分液して得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで予備乾燥した後、減圧濃縮した。この粗生成物をシリカゲルカラムクロマグラフィー（展開溶媒：ヘキサン／酢酸エチル）で精製した後、メタノールで再結晶することにより、化合物（Ｄ１−２Ａ）を３６０ｍｇ得た。【０１２０】
化合物（Ｄ１−２Ｂ）の合成
【化３４】
0006756838.tif 000037
【０１２１】
３００ｍＬ三ツ口フラスコに、化合物（Ｄ１−２Ａ）を３００ｍｇ、及び１，１，１，３，３，３−ヘキサフルオロ−２−プロパノール８ｍＬを導入し、室温で撹拌した。Ｎ−ヨードスクシンイミド４０９ｍｇを導入し、室温で１時間半撹拌した。反応液を減圧濃縮した後、塩化メチレン４０ｍＬを加え、抽出・分液して得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで予備乾燥した後、ろ過を施し減圧濃縮した。この粗生成物にエタノールを加えて分散洗浄およびろ過を施すことにより、化合物（Ｄ１−２Ｂ）を３８２ｍｇ得た。【０１２２】
化合物（Ｄ１−２Ｃ）の合成
【化３５】
0006756838.tif 000038
【０１２３】
１００ｍＬ三ツ口フラスコに、化合物（Ｄ１−２Ｂ）を２７８ｍｇ、２，４，６−トリメチルフェニルボロン酸５６４ｍｇ、フッ化セシウム６５３ｍｇ、及びメトキシシクロペンタン４３ｍＬを導入し、室温で撹拌しながら、減圧脱気後、窒素雰囲気にした。ここに、ＳＰｈｏｓ  Ｐｄ  Ｇ３（Ａｌｄｒｉｃｈ製）２６９ｍｇを加え、１時間加熱還流した。酢酸エチル２５０ｍＬを加え、抽出・分液して得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで予備乾燥した後、減圧濃縮した。この組成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：ヘキサン／酢酸エチル）で精製した後、ジクロロメタン５ｍｌに溶解させ、さらにメタノール１５ｍｌを加えた後にジクロロメタンを留去し、再沈殿させた。沈殿物をろ過し、化合物（Ｄ１−２Ｃ）２０６ｍｇを得た。【０１２４】
化合物（Ｄ１−２）の合成
【化３６】
0006756838.tif 000039
【０１２５】
１００ｍＬ三ツ口フラスコに、化合物（Ｄ１−２Ｃ）を５０ｍｇ、トルエン５ｍｌ、２，４，６−トリメチルベンズアルデヒド４６μｌ、ピペリジン４００μｌ、ｐ−トルエンスルホン酸１片を導入し、窒素下で１時間加熱還流した。２，４，６−トリメチルベンズアルデヒド４６μｌを追添して１時間加熱還流させた後、ピペリジン２００μｌを追添してさらに１時間加熱還流させた。反応終了後、減圧濃縮し、この粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：ヘキサン／トルエン）で精製した後、ジクロロメタン３ｍｌに溶解させ、メタノール１５ｍｌを加えた後にジクロロメタンを留去し、再沈殿させることにより、化合物（Ｄ１−２）を１５ｍｇ得た。化合物の同定は、1Ｈ−ＮＭＲとＥＳＩ−ＭＳにより行った。化合物の同定は、1Ｈ−ＮＭＲとＥＳＩ−ＭＳにより行った。
1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）：δ  ７．４３（ｓ，１Ｈ），７．３９（ｓ，１Ｈ），７．２９−７．２１（ｍ，１Ｈ），６．９４（ｓ，４Ｈ），６．８０（ｓ，４Ｈ），６．６９（ｓ，１Ｈ），６．６５（ｓ，１Ｈ），２．２９（ｓ，６Ｈ），２．２３（ｓ，６Ｈ），２．０８（ｓ，１２Ｈ），２．０３（ｓ，１２Ｈ），１．３３（ｓ，６Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ：［Ｍ−Ｈ］-＝８９１．４【０１２６】
［化合物（Ｄ１−４）の合成］
化合物（Ｄ１−１）の合成において、２，４，６−トリメチルベンズアルデヒドを２，４，６−トリメトキシベンズアルデヒドに置き換えたこと以外は同様にして合成し、化合物（Ｄ１−４）を合成した。化合物の同定は、1Ｈ−ＮＭＲとＥＳＩ−ＭＳにより行った。
ＥＳＩ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］+＝８２５．３
４００ＭＨｚ  1Ｈ−ＮＭＲスペクトルは図１に示す。【０１２７】
［化合物（Ｄ１−５）の合成］
化合物（Ｄ１−２）の合成において、２，４，６−トリメチルベンズアルデヒドを４−メトキシベンズアルデヒドに置き換えたこと以外は同様にして合成し、化合物（Ｄ１−５）を合成した。【０１２８】
［化合物（Ｄ１−６）の合成］
【化３７】
0006756838.tif 000040
【０１２９】
５０ｍＬ二口フラスコに、化合物（３−Ｃ）を９７ｍｇ、２−エチニル−１，３，５−トリメチルベンゼン５８ｍｇ、ヨウ化銅（Ｉ）３．８ｍｇ、ＴＨＦ４ｍＬ、トリエチルアミン１ｍＬを導入し、室温で撹拌しながら、減圧脱気後、窒素雰囲気にした。ここにテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（Ｐｄ（ＰＰｈ3）4）を加え、２時間加熱還流した。減圧留去で溶媒を除去し、そこにジクロロメタン３０ｍＬを加え、水２０ｍＬと飽和塩化ナトリウム水溶液２０ｍＬで洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで予備乾燥した後、減圧濃縮した。この粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：ヘキサン／トルエン）で精製した後、メタノールで再結晶することにより、化合物（Ｄ１−６）を２６ｍｇ得た。化合物の同定は、1Ｈ−ＮＭＲとＥＳＩ−ＭＳにより行った。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ  ８．６０（ｓ，１Ｈ），８．５６（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｓ，１Ｈ），７．９０（ｓ，２Ｈ），７．４１（ｓ，１Ｈ），７．３７（ｓ，１Ｈ），６．８８（ｓ，４Ｈ），６．８５（ｓ，４Ｈ），２．３６（ｓ，１２Ｈ），２．３４（ｓ，１２Ｈ），２．２８（ｓ，  ６Ｈ），２．２７（ｓ，６Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ：［Ｍ−Ｈ］-＝１００３．５【０１３０】
［化合物（Ｄ２−１）の合成］
【化３８】
0006756838.tif 000041
【０１３１】
化合物（Ｄ２−１）は上記のスキームに従って合成した。化合物（Ａ−１）はＢｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２００４、１２、２０７９−２０９８に記載の方法に従って合成した。化合物（Ａ−２）はＡｌｆａ  Ａｅｓａｒ社の市販品を使用した。化合物（Ａ−１）と化合物（Ａ−２）を出発原料としてＭａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ２０１０、４３、１９３−２００に記載の方法にしたがって化合物（Ａ−３）を合成した。化合物（Ａ−３）は質量分析により同定した。
ＭＳ（ＥＳＩ+）ｍ／ｚ：７９７．０（[Ｍ＋Ｈ]+）【０１３２】
上記で合成した化合物（Ａ−３）を用いて、化合物（Ｄ２−１）を以下の通り合成した。
化合物（Ａ−３）（６００ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）、２，４，６−トリメチルフェニルボロン酸（４９４ｍｇ、３．０１ｍｍｏｌ）、及びフッ化セシウム（１．１４ｇ、７．５０ｍｍｏｌ）をジメトキシエタン（ＤＭＥと略記する：３０ｍＬ）と水（３ｍＬ）の混合溶液に加え、真空引き、窒素置換を繰り返して脱気を行った。そこに、酢酸パラジウム（Ｐｄ（ＯＡｃ）2と略記する。３４ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’、６’−ジメトキシビフェニル（ＳＰｈｏｓ、１２３ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を加え、昇温した。還流下、１２時間反応させた後、放冷し、水を加え抽出を行った。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過、濃縮し粗体を得た。得られた粗体をシリカゲルカラム（５０容量％クロロホルム／ヘキサン）で精製し、化合物Ｄ（２−１）（３９６ｍｇ、収率６７％）を得た。得られた化合物（Ｄ２−１）は1Ｈ  ＮＭＲスペクトル、及び質量分析により同定した。1Ｈ  ＮＭＲスペクトルは図２に示す。
ＭＳ（ＥＳＩ+）ｍ／ｚ：７８１．１（[Ｍ＋Ｈ]+）【０１３３】
［化合物（Ｄ２−３）の合成］
化合物（Ｄ２−３）は、化合物（Ａ−２）の代わりに化合物（Ａ−６）を用いたこと以外は化合物Ｄ（２−１）と同様の方法で合成した。得られた化合物は1Ｈ  ＮＭＲスペクトル、及び質量分析により同定した。1Ｈ  ＮＭＲスペクトルは図３に示す。
ＭＳ（ＥＳＩ+）ｍ／ｚ：８４１．４（[Ｍ＋Ｈ]+）【０１３４】
化合物（Ａ−６）は下記スキームに従って、以下の通り合成した。
【化３９】
0006756838.tif 000042
【０１３５】
化合物（Ａ−４）（１５．０ｇ、７４，２ｍｍｏｌ）をメタノール（ＭｅＯＨとも表記する。２００ｍＬ）に加え、そこに硫酸（７．２７ｇ、７４．２ｍｍｏｌ）を滴下した。加熱還流させて５時間反応させ、放冷した後に析出した固体をろ過し、メタノールで洗浄することで化合物（Ａ−５）（１４．７ｇ、収率９２％）を得た。
化合物（Ａ−５）（６．００ｇ、２７．７ｍｍｏｌ）をエタノール（ＥｔＯＨとも表記する。１４０ｍＬ）に加え、ヒドラジン１水和物（８．３２ｇ、１６６ｍｍｏｌ）を滴下した。加熱還流させて９時間反応させ、放冷した後に析出した固体をろ過し、メタノールで洗浄することで化合物（Ａ−６）（３．６０ｇ、収率６０％）を得た。【０１３６】
化合物（Ｄ２−２）、及び化合物（Ｄ２−４）は、米国特許第５４３３８９６号に記載の方法に従って合成した。
比較化合物（Ｒ−１）はＪｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ２００４，１２６，１０６１９−１０６３１に記載の方法に従って合成した。
比較化合物（Ｒ−２）はＡｌｄｒｉｃｈ社の市販品を使用した。【０１３７】
（蛍光ラテックス分散液の作製）
蛍光ラテックス粒子の作製を行った。ラテックス粒子としてはスチレンとアクリル酸の９／１（質量比）混合物を水中に分散させた状態で重合させて作製した、平均粒径１５０ｎｍの粒子を用いた。平均粒径は動的光散乱法を用いて測定した。上記で作製した固形分２％のラテックス分散液（２５ｍＬ、固形５００ｍｇ）に対してＴＨＦ（５ｍＬ）を滴下して１０分攪拌した。そこに、化合物（Ｄ１−１）〜化合物（Ｄ１−６）、化合物（Ｄ２−１）〜化合物（Ｄ２−４）、比較化合物（Ｒ−１）及び比較化合物（Ｒ−２）から選択した２種の化合物（種類の組合わせは、下記表に示す通り）を含むＴＨＦ溶液（２．５ｍＬ）を１５分間かけて滴下した。各試料に用いた化合物の量は下記表にまとめた。表中の化合物量のμｍｏｌ／ｇはラテックスの固形１ｇに対する使用した化合物のモル数を表す。化合物の滴下終了後、３０分攪拌した後、減圧濃縮してＴＨＦを除去した。その後、遠心分離して粒子を沈殿させた後、超純水を加えて再度分散させることで固形分濃度２％の蛍光ラテックス分散液を製造した。【０１３８】
（蛍光ラテックス分散液の評価）
上記で製造した固形分濃度２質量％の蛍光ラテックス分散液の蛍光量子収率の評価を行った。ラテックス分散液を超純水で２００倍に希釈したものを用い、励起極大波長及び発光極大波長の測定には島津製作所製の蛍光分光光度計ＲＦ−５３００ＰＣを使用し、量子収率の測定には浜松ホトニクス社製の絶対ＰＬ量子収率測定装置Ｃ９９２０−０２を使用して評価を行った。以下に示す基準で評価した結果を下記表にまとめた。ストークスシフトは、発光極大波長と励起極大波長との差である。【０１３９】
励起波長の評価基準を以下に示す。
Ａ：６６０ｎｍ以上
Ｂ：６３０ｎｍ以上６６０ｎｍ未満
Ｃ：６３０ｎｍ未満【０１４０】
発光波長の評価基準を以下に示す。
Ｓ：７２０ｎｍ以上
Ａ：７００ｎｍ以上７２０ｎｍ未満
Ｂ：６８０ｎｍ以上７００ｎｍ未満
Ｃ：６５０ｎｍ以上６８０ｎｍ未満
Ｄ：６５０ｎｍ未満【０１４１】
ストークスシフトの評価基準を以下に示す。
Ａ：６０ｎｍ以上
Ｂ：４０ｎｍ以上６０ｎｍ未満
Ｃ：４０ｎｍ未満【０１４２】
量子収率の評価基準を以下に示す。
Ａ：０．４以上
Ｂ：０．２５以上０．４未満
Ｃ：０．１以上０．２５未満
Ｄ：０．１未満【０１４３】
【表３】
0006756838.tif 000043
【０１４４】
上記の結果から、本発明の発光性粒子は、比較例の発光性粒子よりも量子収率が高いことが分かる。また、上記した本発明の実施例の発光性粒子はいずれも７００ｎｍ以上の発光極大波長と、４０ｎｍ以上のストークスシフトを有している。本発明の発光性粒子は、特に生体の窓領域（生体を透過しやすい近赤外波長域である６５０〜９００ｎｍ付近）を利用したイメージングに有用な粒子である。
【図１】
0006756838.tif 000051
【図２】
0006756838.tif 000052
【図３】
0006756838.tif 000053