(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）少なくとも３つの試料受容部分を含む第一の層であって、（ｉ）血液試料を適用するまたは受けるための上部平面であって、前記試料受容部分は前記血液試料が分離部材に接触できるように構成されている上部平面、および（ｉｉ）前記分離部材と接触するように構成されている底部平面を備える、第一の層、
（ｂ）少なくとも３つの分離部材を含む第二の層であって、各分離部材は、血漿を吸収部材に通過できるように構成されており、（ｉ）前記血液試料を受ける上部平面、および（ｉｉ）前記吸収部材に接触するように構成されている盾形の底部平面を備える、第二の層、および
（ｃ）対応する各分離部材の前記底部平面から血漿を吸収するための少なくとも３つの吸収部材、および前記吸収部材を支持するように配置された裏張り部材を含む第三の層であって、各吸収部材は、前記分離部材の底部平面と接触するように構成されている上部平面を有する取り外し可能な吸収要素を備え、前記吸収要素は第三の層に取り外し可能に固定されている、第三の層を備え、
前記取り外し可能な吸収要素のそれぞれは、前記取り外し可能な吸収要素を前記第三の層に固定するための少なくとも２つの固定要素を含むことを特徴とする、多層血漿分離カード。
【請求項２】
各分離部材の前記底部平面は、血液試料の漏れを回避するためのグラウトで固められているかまたは圧縮された枠または縁を含む、請求項１に記載の多層血漿分離カード。
【請求項３】
前記吸収要素の前記固定要素は、血漿試料の漏れを回避するための遮蔽要素を含む、請求項１または２に記載の多層血漿分離カード。
【請求項４】
血漿濃度制御物質を含む追加の層を備え、前記追加の層は、前記取り外し可能な吸収要素に直接接触しているか、隣接して配置されているかのいずれかである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の多層血漿分離カード。
【請求項５】
前記試料受容部のそれぞれの寸法は、前記分離部材または吸収部材の表面のそれぞれの寸法より小さい、請求項１〜４のいずれか１項に記載の多層血漿分離カード。
【請求項６】
前記試料受容部のそれぞれに１０μｌ〜１０００μｌの全血試料が適用される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の多層血漿分離カード。
【請求項７】
前記分離部材は、非対称の血漿分離膜を含む、請求項１〜６のいずれか１項に記載の多層血漿分離カード。
【請求項８】
前記吸収部材は血漿回収材料を含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の多層血漿分離カード。
【請求項９】
前記吸収部材は、３００〜４２０μｍの平均厚みを有する綿くずから成るフリースを含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の多層血漿分離カード。
【請求項１０】
前記取り外し可能な吸収要素のそれぞれは、長手方向に折りたたまれる平面構造を含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の多層血漿分離カード。
【請求項１１】
前記取り外し可能な吸収要素は、判定のためにピンセットで容易に取り外すことができ、そして／あるいは容器に移すことができる、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の多層血漿分離カード。
【請求項１２】
（１）分離部材層、血漿分離フリースを含む吸収部材層、着点層、および接着層を調製する工程、
（２）適当な装置において前記着点層を前記接着層上に接着することにより調製された層を組み合せ、前記分離部材層が挿入され、前記接着層の着点層に接着していない面に固定され、次いで前記吸収部材層を前記分離部材層の底部平面に重ねる工程、および
（３）前記層の複合体を担持体である支持層上に長手方向に接着する工程、を含む、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の多層血漿分離カードを調製するための方法。
【請求項１３】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の多層血漿分離カードを用いて血漿試料中のＨＩＶ、ＨＣＶ、および／またはＨＢＶを検出するための方法。
【請求項１４】
密封環境内に請求項１〜１１のいずれか１項に記載の多層血漿分離カード、および乾燥剤材料を含む、包装コンセプト。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、試料回収装置の分野に関する。
【背景技術】
【０００２】
血液分析は、通常、全血試料に対して行われ、検査の大部分は腕、指、あるいは耳たぶの静脈から採血した全血に対して行われる。多数の検査と手順が開発されており、多くの場合、自動分析器などの装置でこれら検査や手順を１つの血液試料に対して同時に実行することができる。血液検査は血液細胞に関するものであることがほとんどであるが、現在の標準的な診断検査では血液細胞に代わって血漿または血清を検査することが多い。具体的には、近年、多項目の免疫化学分析および核酸分析技術が開発されてきている。例えば、特殊な検査を用いて、血漿に含まれる特定の感染に固有の物質（ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）粒子など）を検出することができる。
【０００３】
２０１３年に、世界保健機関（ＷＨＯ）は現在のＨＩＶ治療および予防ガイドラインを改訂し、ＨＩＶ陽性患者の管理におけるＨＩＶウイルス量（ＶＬ）検査の重要性を強調した。近年、ＷＨＯは、ＨＩＶウイルス量検査を用いてＨＩＶ抗レトロウイルス療法（ＡＲＴ）の治療有効性を強く推奨し、ＨＩＶ血漿ウイルス量のカットオフ値を５０００個／ｍｌから１０００個／ｍｌに下げた。すなわち、ＡＲＴを受けているＨＩＶ患者で血漿中のウイルス力価が１０００個／ｍｌを超えている場合、薬物治療の失敗とみなされる。指示遵守に関するカウンセリング、薬物耐性検査、および二次治療計画など、薬物治療の失敗に対する応答は時間と費用がかかるため、必要な場合にのみ用いるべきである。ＨＩＶウイルス量は、通常、試料の種類として血漿を用いて測定される。しかしながら、アフリカなど、資源が限られた状況では、血漿試料の入手、保存、輸送、および検査が容易ではない場合がある。乾燥血斑(dried blood spots, DBS)は、資源が限られた状況でのＨＩＶウイルス量検査に対する解決法として評価されているが、その成果は限られている。感染後、ＨＩＶウイルスは感染細胞内で自己複製を始めるだけでなく、潜伏ＨＩＶプロウイルスＤＮＡとして自分のｃＤＮＡを宿主の染色体に組み込む(Greene, W.C. Peterlin, B.M. 2002. Nat Med. 8(7): 673-80)。この追加の細胞に関連したＨＩＶ核酸により、全血を入力試料材料として用いた場合のＨＩＶのウイルス量の決定に混乱を招き、薬物治療の失敗の判定が信頼できない結果につながる場合がある。
【０００４】
したがって、このような検査を行う観点から、全血試料から血漿を分離する必要性が高まっている。これら検査は精密装置を含むことが多いので、特定の分析機関に血漿を輸送する必要があるかもしれない。欧州特許ＥＰ１０９６２５４Ｂ１には、全血試料から血球（hematocrit）を分離する装置が記載されている。この装置は、前記試料を入れる導入口、反応領域、および前記導入口と前記反応領域を接続する細管経路を備える。この細管経路は、血液細胞を留めるための障害物を備え、反応領域と一体に形成されている。米国特許出願公開第２０１２／００８８２２７号には、分離部材および吸収部材を含む積層構造を用いて血漿を血液試料から分離するための装置が記載されている。McClernon and McClernon (20th Annual DART Conference, Maui/Hawaii, USA, December 6-10, 2015（第２０回ＤＡＲＴ年次総会、米国ハワイ州マウイ、２０１５年１２月６〜１０日）)に記載されたこの装置は、分離膜および血漿回収パッドを含んでおり、取扱いがより容易である。しかしながら、血漿回収パッドを取り外す際に二次汚染の危険性がある。さらに、装置から血漿回収パッド、すなわち吸着剤パッドを容易に取り外すことができること、および血漿試料が更なる加工のために十分に安定であることが求められる。上記のことに照らして、全血試料から血漿を分離するための改良された装置および方法が必要である。
【発明の概要】
【０００５】
本発明の１つ以上の態様の詳細を添付の図面および以下の記述に示す。本発明のその他の特徴、目的、および利点は、これら図面と詳細な記述、および請求項から自明である。
【０００６】
本発明のその他の目的および更なる目的、特徴、および利点は、以下の記述からより十分に明らかにされる。添付の図面は、本発明の好ましい態様、上述された一般的な記述、および以下の詳細な記述を例示するものであり、本発明の原理を説明するためのものである。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】図１は、本発明による装置の例示としての態様を示す概略分解図である。この装置は、血液試料を適用する、あるいは受けるための第一の層（着点層）２、全血から血漿を分離するための膜３、１つ以上の分離層３の底部平面と接触するようになっている吸収要素４、吸収要素４または吸収部材１６を支持する裏張り部材または材料５、吸収要素４から延びる第一の部分６および第二の部分７（ここで、第二の部分７は装置の層の何れとも接触していない、いわゆる「ハンドル」である）、第一の層（着点層）上の受容部８、血漿画分を回収するための取り外し可能な吸収部材を１つ以上含む第三の層１２、１つ以上の分離膜を含む第二の層１４、および吸収要素４、ならびに前記吸収要素から延びる第一の部分６および第二の部分７を含む吸収部材１６を備える。
【０００８】
【図２】図２は、図１の態様の構成要素を重ねて示している。
【０００９】
【図３】図３は、本発明による装置の態様の他の例を示す概略分解図である。
【００１０】
【図４】図４は、図３の態様の構成要素を重ねて示している。
【００１１】
【図５】図５は、図２の態様の側面から見た概略断面図である。
【００１２】
【図６】図６は本発明による装置の態様の他の例を示す略分解図である。この装置は、血液試料を適用する、あるいは受けるための第一の層（着点層）２、全血から血漿を分離するための膜３、血液の分布を阻害あるいは限定するための両面接着材料を含む中間層４、血漿画分を回収するための取り外し可能取り外し可能な吸収部材を１つ以上含む第三の層５、接着材料１３を含み上記装置を保護・安定させる担持層６、１つ以上の分離膜を含む第二の層７ａ、血液試料の漏れを回避するためのグラウトで固められているか、あるいは圧縮された枠または縁７ｂ、第一の層（着点層）上の受容部８、取り外し可能な吸収要素を第三の層に固定するための固定要素なしあるいは固定要素を有する取り外し可能な吸収要素を含む吸収部材９、吸収部材を支持するための裏張り部材または材料１０、第三の層から吸収部材を取り外すことができる穴あき縁１１、吸収部材９上の縦方向に折りたたまれた平面部分１２、および上記装置を固定・支持するための接着材料１３を備える。
【００１３】
【図７】図７は、図６の態様の側面から見た概略断面図である。
【００１４】
【図８ａ】図８は、血漿を含む回収材料を含む盾形領域の概略断面図であり、この盾形領域は、本発明による装置の例示的な態様内にあるか、前記態様の装置から切り離されている。図８ａは、一方は縦方向に折りたたまれた平面部分１２を含み、他方は折りたたまれていない均一な表面を有する２種類の吸収部材９を示す。図８ｂは、固定要素が、回収材料から血漿試料の漏れを回避するための遮蔽要素１４を含む一態様を示す。図８ｃは、取り外し可能な吸収要素を含む吸収部材９を示し、１６は固定要素がある場合、１５は固定要素がない場合を示す。
【図８ｂ】同上。
【図８ｃ】同上。
【００１５】
【図９】図９は、全血試料が付けられた図６の態様の側面から見た概略断面図である。全血試料は、着点層の受容部材上に付けられている。この血液試料は、毛細管力により前記装置の開口部から血漿回収材料を含む吸収部材に分布される。
【００１６】
【図１０】図１０は、実施例２に記載される１６週間に渡る試料安定性検査によるデータ（時点に対するデルタ平均対数力価）を示す。実験の開始の時点ゼロ（ＴＰ０）に対して標的のデルタ平均対数力価が０．３ｌｏｇ  ｃｐ／ｍｌ以下である場合を安定性要件として定義した。例えば、ＴＰ０−ＴＰ３Ｗは、保存３週間後の相対デルタ平均対数力価を示す。定義
【００１７】
特に断りがなければ、本明細書で用いられるすべての技術用語および科学用語は、本発明に関する分野の一般の当業者の一人によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。本質的に本明細書で記載する方法および材料に類似する任意の方法および材料を本発明の実践あるいは試験に用いてもよいが、例示的な方法および材料のみを記載する。本発明の目的のため、以下の用語を次に定義する。
【００１８】
用語「血漿分離」は、例えば、特定の感染に固有の物質（例えば、ＨＩＶ粒子など）が検出される分容積の血漿および分容積の細胞成分（血球）を含む全血試料から血漿を分離することを指す。
【００１９】
用語「着点層」すなわち「層２」は、約１００〜４００μｍ、好ましくは１５０〜２５０μｍの厚みを有する好適なフィルム材料製の血漿分離カード（plasma separation card, PSC）の上層を指す。着点層を作製するための好適な材料は、例えば、ポリエチレンテレフタラート（ＰＥＴ）またはそれに関連するプラスチック材料である。
【００２０】
用語「受容部材」は、１つ以上の「試料受容部」または「受容部」を含む第一の層（一般的に上層である着点層）を指す。この１つ以上の試料受容部により、前記血液試料は分離層と接触するようになっている。試料受容部は、血液試料を付けて、直接、血液試料を効率的に分布させることができる三次元領域開口部、例えば実質的に円形の開口部であってもよい。一態様では、試料受容部は、打ち抜き加工またはレーザー切断された円形あるいは楕円形の穴である。他の態様では、各受容部の三次元領域の側壁は高さが０．１〜０．５ｍｍ、好ましくは約０．１５〜０．２ｍｍである。各試料受容部の寸法は、通常、以下の分離層の「分離部材」または「吸収部材」の表面の寸法より小さい（例えば、直径が約１０ｍｍ）。態様によっては、このような受容部が、１個のＰＳＣあたり２〜６個、好ましくは２または３個設けられている。
【００２１】
用語「分離部材」は、着点層の開口部に付けられた全血の細胞成分を効率的に除去することができる１つ以上の血漿分離膜領域でできた第二の層、すなわち分離層を指す。好適な血漿分離膜は、例えば、非対称ポリスルホン材料（Vivid（登録商標）膜（米国ニューヨーク州ポートワシントンのPall Corp.から入手可能）などの膜）製である。一般に、光沢のある面と光沢のない（または粗い）面を有する非対称膜が好適である。光沢のない面が上面、すなわち、液体試料を加える表面である。１つの分離部材は、開口部（例えば、試料受容部）から付けられた血液試料から血漿を濾過するための盾形の上部平面、およびＰＳＣの第三の層に接触するようになっている盾形の底部平面を含むことが好ましい。上記１つ以上の分離部材の盾形表面は、型押しされていてもよい。例えば、膜を盾形表面の枠または縁領域で封をして、血液などの液体試料の漏れを防止または回避するのに好適な円形またはほぼ円形の液密枠とする。枠または縁領域の封印は、機械的な力を加える、例えば、膜を元の厚みの約３０〜４０％に圧縮する、あるいは膜の表面をレーザーで処理して達成してもよい（得られる枠または縁の幅は０．５〜２．０ｍｍ、好ましくは０．８〜１．２ｍｍである）。熱機械的に圧縮する、または切断することにより、枠または縁の幅は２．０ｍｍ以下である封印が得られる。好ましいのは、切断端そのものが封印として用いられることであり、その結果、枠または縁領域がなくなる。１つの分離部材の盾形の平面の面積は、通常、１００〜３００ｍｍ2、好ましくは約２００ｍｍ2である。
【００２２】
用語「吸収部材」は、第二の層の１つ以上の分離部材の底部平面を形成するようになっている第三の層上の領域を指す。この吸収部材は、分離部材の底部平面と接触するようになっている上部平面および任意で吸収要素に隣接する非吸収性のハンドルを備える「吸収要素」を含む取り外し可能なストリップを含んでいてもよい。非吸収性のハンドルは、吸収要素を取り外す際に吸収要素を支持する。この吸収部材は、盾形の上部平面を有する取り外し可能な吸収要素を含む盾形領域の形態であってもよい。吸収要素は、例えば、第三の層に取り外し可能な吸収要素を固定するための接続部または固定要素として機能する少なくとも２個の要素など、第三の層に吸着要素を取り外し可能に固定するための手段を含んでいてもよい。これら接続部または固定要素は、遮蔽要素または密封要素を含んでいてもよい。例えば、疎水性遮蔽要素またはＵＶ接着処理した遮蔽要素は、血漿などの液体試料の漏れを防止または回避するための好適な手段である。吸収要素は、縦方向に折りたたまれた二次元構造または縦方向に折りたたまれた平面部分を含む。縦方向に折りたたまれた平らな構造または二次元構造を有する吸着要素の利点の１つは、試料の通過効率が上がることである。盾形の形態および／または縦方向に折りたたまれた平らな構造または二次元構造を有する吸収要素の他の利点は、前記要素が例えば、インキュベーションおよび分析など、更なる処理のために試験管に移すのが容易であることである。この吸収部材は、血漿回収フリースまたは材料（例えば、綿くずでできた平均厚みが３００〜４２０μｍのフリース、Whatman（登録商標）９０３（登録商標）紙に用いられるフリース、例えば、Hahnemuhle GmbH（ドイツ国ダセル）から入手可能な、ＦＰ２９９２、ＦＰ２３１６、またはＩＳＰ７２１６として知られているフリースなど）、あるいは水または緩衝液を含む溶液に溶けない血漿回収材料（例えば、Diomics Corp.（米国カリフォルニア州サンディエゴ）、またはVWR Internationalから市販されている網材料、格子材料、または膜材料）でできていることが好ましい。
【００２３】
用語「裏張り部材」は、吸収部材を支持するように配置された吸収部材の外側に設けられた第三の層の領域を指す。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
例示として、本発明が実践されてもよい特定の例示的な態様を記述する。図１〜１０を参照して、概略図により、全血試料から血漿を分離するための装置の例示的態様を説明する。したがって、一般に参照符号１で表す全血試料から血漿を分離するための装置は、多層血漿分離カードの形態を含む。
【００２５】
図１は、多層の血漿分離カード（ＰＳＣ）の一態様を示している。第一の層２は、血液試料を適用する（受ける）ものである。この第一の層２は、血液試料を適用する（受ける）上部平面、および分離部材３と接触するようになっている底部平面を有する。一態様では、上記血液試料は試料受容部８に付けられる。他の態様では、試料受容部８は、前記血液試料を分離部材に接触させるようになっている。例えば、試料受容部８は、血液試料を直接分離部材３に付けることができる第一の層２の開口部（例えば、実質的に円形の開口部）であってもよい。一態様では、試料受容部８は、円形の打ち抜き穴である。
【００２６】
他の一態様では、ＰＳＣは、２つ以上の分離部材３でできた第二の層１４を有する。他の態様では、第二の層１４は、少なくとも２つ、３つ、４つ、または５つの分離部材３を有する。分離部材３は、血漿分離膜（例えば、Vivid（登録商標）膜）を含む。一態様では、分離部材３は、２つの面を有する非対称膜である。例えば、Vivid（登録商標）膜は、光沢のある面と、光沢のない（すなわち、粗い）面を有する。光沢のない面が上面、すなわち液体試料を付ける表面である。他の態様では、分離部材３は、例えば、第一の層２の開口部（例えば、試料受容部８）に付けた血液試料から血漿を濾過するための上部平面、および前記ＰＳＣの第三の層１２と接触するようになっている底部平面を含む。
【００２７】
他の態様では、前記ＰＳＣは、２つ以上の吸収部材１６、および吸収部材１６を支持するように配置された裏張り部材５を含む第三の層１２を有する。態様によっては、第三の層１２は、少なくとも２つ、３つ、４つ、または５つの吸収部材１６を有する。吸収部材１６は、（ｉ）１つ以上の分離層３の底部平面と接触するようになっている吸収要素すなわち領域４、および（ｉｉ）吸収要素４に隣接して、第一の部分６と第二の部分７でできた非吸収要素を含むストリップの形態である。一態様では、非吸収要素の第一の部分６は、１つ以上の分離層３の底部平面と接触するように構成されており、非吸収要素の第二の部分７は、１つ以上の分離層３の底部平面と接触しないようになっている。この非吸収要素は、液体、例えば、血漿または血液を吸収しない要素を指す。一態様では、少なくとも非吸収要素の第二の部分７の部分は、第一の層２、第二の層１４、および第三の層１２のいずれかまたはすべてと接触していない。この第二の部分７が「接触していない」構成を図２および図５に示す。
【００２８】
好ましい一態様では、吸収要素すなわち領域４は、血漿回収材料（例えば、Whatman（登録商標）９０３（登録商標）カード）でできている。他の態様では、吸収要素４は血漿安定剤を含む。
【００２９】
他の側面では、血漿分離カードの各層は、取り外し可能な接着剤で固定されている。一態様では、この接着剤は、いずれのＰＳＣの層も実質的に破損させずにＰＳＣのある層を他の層から取り外すことができる。図５は、そのような接着剤の配置の一例を示している。他の態様では、取り外し可能な接着剤１７を用いて、第一の層２の底部平面を１つ以上の分離要素３の上部平面に固定する。他の態様では、取り外し可能な接着剤１７は、前記カードの第一の層２の底部平面の外縁に沿って設けられている。一態様では、取り外し可能な接着剤１７は分離要素３に重なるように設けられている。他の一態様では、取り外し可能な接着剤は、第一の層２の打ち抜き穴に対応する穴を含む。更なる一態様では、取り外し可能な接着剤１７を用いて各分離要素３の底部平面を各吸収部材４の上部平面に固定する。
【００３０】
他の態様では、第一の層２は、特定の長さと幅（例えば、第三の層１２の上面の第一の領域と同じ長さ、同じ幅）を有する厚紙でできていてもよい。
【００３１】
図２は、図１の血漿分離カード（ＰＳＣ）の組立て図である。
【００３２】
図３は、多層ＰＳＣの他の態様を示す。第一の層２は、血液試料を適用する（受ける）ものである。第一の層２は、血液試料を適用する（受ける）上部平面、および分離部材３と接触するようになっている底部平面を有する。一態様では、この血液試料は、試料受容部８に付けられる。他の態様では、試料受容部８により、前記血液試料は分離部材に接触するようになっている。例えば、試料受容部８は、血液試料を直接分離部材３に付けることができる第一の層２の開口部（例えば、実質的に円形の開口部）であってもよい。
【００３３】
他の一態様では、ＰＳＣは、２つ以上の分離部材３でできた第二の層１４を有する。他の態様では、第二の層１４は、少なくとも２つ、３つ、４つ、または５つの分離部材３を有する。分離部材３は、血漿分離膜（例えば、Vivid（登録商標）膜）を含む。一態様では、分離部材３は、２つの面を有する非対称膜である。例えば、Vivid（登録商標）膜は、光沢のある面と、光沢のない（すなわち、粗い）面を有する。光沢のない面が上面、すなわち液体試料を付ける表面である。他の態様では、分離部材３は、例えば、第一の層２の開口部に付けた血液試料から血漿を濾過するための上部平面、および吸収部材４と接触するようになっている底部平面を含む。
【００３４】
他の態様では、上記ＰＳＣは、２つ以上の吸収部材１１、および吸収部材１１を支持するように配置された裏張り部材５を含む第三の層１２を有する。態様によっては、第三の層１２は、少なくとも２つ、３つ、４つ、または５つの吸収部材１１を有する。吸収部材１１は、第三の層１２から取り外し可能なストリップの形態を取る。このストリップは、（ｉ）１つ以上の分離層３の底部平面と接触するようになっている吸収要素すなわち領域４、および（ｉｉ）吸収要素４に隣接して第一の部分６および第二の部分７でできたハンドルを含む。好ましい一態様では、吸収部材１１は、第三の層１２あるいは他の吸収部材１１の残りの部分を破損させずに第三の層１２から取り外すことができる穴あきの縁６を有する。
【００３５】
一態様では、少なくとも１つの分離要素３は、少なくとも１つの吸収要素４を完全にあるいは部分的に覆うように重ねられている。他の態様では、ハンドルの第一の部分６は１つ以上の分離層３の底部平面と接触するようになっており、ハンドルの第二の部分７の少なくともある領域は１つ以上の分離層３の底部平面に接触しないようになっている。
【００３６】
他の態様では、穴あきの縁６は、第三の層１２の少なくとも１つの端に延びている（図３を参照のこと）。
【００３７】
一態様では、吸収部材１１は、分離部材３の底部平面を通った血漿を吸収するようになっている吸収要素４、および第一の部分６に隣接する第二の部分７を有するハンドルを含む。第二の部分７は、第三の層１２から吸収部材１１を取り外すのに用いられる。例えば、第二の部分７を、例えば、ピンセットでつまんで、穴あきの縁６に沿って吸収部材１１を引き剥がすのに用いてもよい。好ましい一態様では、吸収要素すなわち領域４は、血漿回収材料（例えば、Whatman（登録商標）９０３（登録商標）カード）でできている。他の態様では、（ｉ）穴あきの縁６によって規定された吸収要素１１および／または（ｉｉ）第三の層１２の全体が血漿回収材料（例えば、Whatman（登録商標）９０３（登録商標）カード）でできている。他の態様では、吸収要素４は血漿安定剤を含む。
図４は、図３のＰＳＣの組立て図である。
【００３８】
他の側面では、血漿分離カードの各層は、取り外し可能な接着剤で固定されれている。一態様では、この接着剤は、ＰＳＣの層のいずれも実質的に破損させずにＰＳＣのある層を他の層から取り外すことができる。例えば、図５はそのような取り外し可能な接着剤の配置の一例を示している。他の態様では、取り外し可能な接着剤１７を用いて、第一の層２の底部平面を１つ以上の分離要素３の上部平面に固定する。他の態様では、取り外し可能な接着剤１７は、前記カードの第一の層２の底部平面の外縁に沿って設けられている。一態様では、取り外し可能な接着剤１７は分離要素３に重なるように設けられている。他の一態様では、取り外し可能な接着剤は、第一の層２の打ち抜き穴に対応する穴を含む。
【００３９】
他の態様では、第一の層２は、特定の長さと幅（例えば、第三の層１２の上面の第一の領域と同じ長さ、同じ幅）を有する厚紙からできていてもよい。更なる一態様では、第一の層２の上部平面は、各試料受容部８に対応する１つ以上の円形の印を含む。
【００４０】
図６は、多層血漿分離カード（ＰＳＣ）の一態様を示す。第一の層２は、血液試料を適用する（受ける）もの（着点層）である。第一の層２は、血液試料を適用する（受ける）上部平面、および分離部材７と接触するようになっている底部平面を有する。一態様では、血液試料は１つ以上の試料受容部８に付けられる。１つ以上の試料受容部８は、例えば、毛細管力効果で前記血液試料を１つ以上の分離部材７と接触するようになっている。例えば、各試料受容部８は、血液試料を付けて、直接血液試料を分離部材７に効率的に分布させることができる第一の層２の三次元領域を有する開口部（例えば、実質的に円形の開口部）であってもよい。一態様では、試料受容部８は、打ち抜き円形または楕円形の穴である。他の態様では、各受容部８の三次元領域の側壁は、高さが０．１〜０．５ｍｍ、好ましくは約０．１５〜０．２ｍｍである。
【００４１】
一態様では、上記ＰＳＣは、２つ以上の分離部材７（分離層）でできた第二の層３を有する。他の態様では、第二の層３は、少なくとも２つ、３つ、４つ、または５つの分離部材７を含む。分離層３または分離部材７は、全血の細胞成分を効率的に除去する血漿分離膜を含む。非対称ポリスルホン材料製の好適な血漿分離膜は、例えば、Vivid（登録商標）膜（米国ニューヨーク州ポートワシントンのPall Corp.から入手可能）などの膜である。一態様では、分離層３または分離部材７は、２つの面を有する非対称膜である。非対称膜、例えば、Vivid（登録商標）膜は光沢のある面、および光沢のない（あるいは粗い）面を有する。光沢のない面が上面、すなわち液体試料を付ける表面である。他の態様では、分離部材７は、第一の層２の開口部（例えば、試料受容部８）に付けられた血液試料から血漿を濾過するための盾形の上部平面、およびＰＳＣの第三の層５と接触するようになっている盾形の底部平面を含む。他の一態様では、１つの分離部材７の盾形の平面の面積は、１００〜３００ｍｍ2、好ましくは約２００ｍｍ2である。各試料受容部８の寸法は、通常、分離部材７または吸収部材の表面の寸法（例えば、約２００ｍｍ2）よりも小さい（例えば、直径が約１０ｍｍ）。
【００４２】
更なる一態様では、１つ以上の分離部材の盾形表面の端は、型押しされている。一態様では、膜を盾形表面の枠または縁領域で封をして、血液などの液体試料の漏れを防止または回避するのに好適な円形またはほぼ円形の液密枠とする。枠または縁領域の封印は、機械的な力を加える、例えば、膜を元の厚みの約３０〜４０％に圧縮する、あるいは膜の表面をレーザーで処理して達成してもよい（得られる枠または縁の幅は０．５〜２．０ｍｍ、好ましくは０．８〜１．２ｍｍである）。熱機械的に圧縮する、または切断することにより、枠または縁の幅は２．０ｍｍ以下である封印が得られる。好ましいのは、切断端そのものが封印として用いられることであり、その結果、枠または縁領域がなくなる。
【００４３】
上記ＰＳＣの特定の態様は、第一の層２（着点層）と第二の層３（分離層）の間に中間層、すなわちスペーサー層４を含む。前記スペーサー層４は、一方が第一の層２の試料受容部、他方が第二の層３の分離部材７に対応して設けられた開口部を含む。一態様では、スペーサー層４の開口部は、第二の層３の１つ以上の分離部材７のそれぞれの盾形の平面の形態に対して設けられた打ち抜き穴である。スペーサー層４、例えば、接着材料、例えば、両面粘着テープを含む。この両面粘着テープは、０．０５〜０．３ｍｍ、好ましくは０．１〜０．２ｍｍの厚みを有する。
【００４４】
他の態様では、上記ＰＳＣは、２つ以上の吸収部材９、および吸収部材９を支持するように配置された裏張り部材１０を含む第三の層５を有する。態様によっては、第三の層５は、少なくとも２つ、３つ、４つ、または５つ、特に３つの吸収部材９を有する。各吸収部材９は、１つ以上の分離部材７の底部平面に接触するようになっている盾形の上部平面を有する取り外し可能な吸収要素を含む盾形領域、すなわちストリップの形態を取る。この吸収要素は、吸収要素を第三の層５に取り外し可能に固定するための手段を含む。一態様では、この取り外し可能な吸収要素は、取り外し可能な吸収要素を第三の層５に固定するための少なくとも２つの要素を含む。他の一態様では、取り外し可能な吸収要素は、気泡の形成を回避または低減するようになっており、例えば、この吸収要素は縦方向に折りたたまれた二次元構造を有する、あるいは縦方向に折りたたまれた平面部分を含む。縦方向に折りたたまれた平面構造または二次元構造を有する吸収要素の更なる利点は、試料の通過効率が上がることである。盾形形態および／または縦に折りたたまれた平らな構造または二次元構造を有する吸収要素のその他の利点は、前記要素が、例えば、インキュベーションおよび分析など、更なる処理のために試験管に移すのが容易であることである。
【００４５】
特定の一態様では、吸収部材９の取り外し可能な吸収要素は、（例えば、綿くずでできた平均の厚みが３００〜４２０μｍのフリース、Whatman（登録商標）９０３（登録商標）紙に用いられるフリース、適切なフリース材料（例えば、Hahnemuhle GmbH（ドイツ国ダセル）から入手可能なＦＰ２９９２、ＦＰ２３１６、またはＩＳＰ７２１６）でできている。他の態様では、この吸収要素は、水または緩衝液を含む溶液に溶けない血漿回収材料（例えば、Diomics Corp.（米国カリフォルニア州サンディエゴ）、またはVWR Internationalから市販されている網、格子、または膜材料）でできている。更なる一態様では、吸収部材９の吸収要素は血漿安定剤を含む。
【００４６】
他の側面では、血漿分離カードのそれぞれの層は、取り外し可能な接着剤で固定されている。一態様では、この接着剤は、いずれのＰＳＣの層も実質的に破損させずにＰＳＣのある層を他の層から取り外すことができる手段である。図６、図７、および図９はそれぞれ、そのような接着剤の配置の一例を示している。他の態様では、取り外し可能な接着剤４を用いて、第一の層２の底部平面を１つ以上の分離部材７の上部平面に固定する。他の態様では、取り外し可能な接着剤４は、カードの第一の層２の底部平面の外縁に沿って設けられている。一態様では、取り外し可能な接着剤４は、分離部材７に重なるように設けられている。他の一態様では、取り外し可能な接着剤４は、第一の層２の打ち抜き穴に対応する開口部を含む。更なる一態様では、取り外し可能な接着剤を用いて、各分離部材７の底部平面を各吸収部材９の上部平面に固定する。
【００４７】
他の態様では、第一の層２は、特定の長さと幅（例えば、第三の層５の上面の第一の領域と同じ長さ、同じ幅）を有する厚紙でできていてもよい。
【００４８】
図７および図９はそれぞれ、図６のＰＳＣの態様を側面から見た概略断面図である。
【００４９】
他の一態様では、上記ＰＳＣは、２つ以上の分離部材７（分離層）でできている第二の層３を有する。他の態様では、第二の層３は、少なくとも２つ、好ましくは３つの分離部材７を有する。この分離層は血漿分離膜（例えば、ポリスルホン系の非対称膜であるVivid（登録商標）膜）である。一態様では、この分離部材は、２つの異なる面を有する非対称膜である。例えば、Vivid（登録商標）膜は、光沢のある面と、光沢のない（すなわち、粗い）面を有する。光沢のない面が上面、すなわち液体試料を付ける表面である。他の態様では、分離部材７は、例えば、第一の層２の開口部に付けられた血液試料から血漿を濾過するための盾形の上部平面、および吸収部材９と接触するようになっている盾形の底部平面を含む。
【００５０】
他の態様では、上記ＰＳＣは、２つ以上の吸収部材９、および吸収部材９を支持するように配置された裏張り部材１０を含む第三の層５を有する。態様によっては、第三の層５は少なくとも２つ、好ましくは３つの吸収部材９を有する。各吸収部材９は、１つ以上の分離層の底部平面に接触するようになっている盾形の上部平面を有する取り外し可能な吸収要素を含む盾形領域の形態を取る。好ましい一態様では、吸収部材９は、第三の層５またはその他の吸収部材９の残りの部分を破損させずに第三の層５から取り外すことができる穴あきの縁１１を有する。
【００５１】
他の態様では、穴あきの縁１１は、第三の層５の少なくとも１つの端に延びている（図６を参照のこと）。
【００５２】
一態様では、吸収部材９は、毛細管力効果により駆動されて分離部材７の底部平面から血漿を吸収するようになっている吸収要素を含む。好ましい一態様では、この吸収要素は、少なくとも１５０ｇ／ｍ2、好ましくは２００〜４００ｇ／ｍ2の吸引力を有する血漿回収材料（例えば、綿くずでできている平均の厚みが３００〜４２０μｍのフリース、Whatman（登録商標）９０３（登録商標）紙に用いられるフリース、例えば、Hahnemuhle GmbH（ドイツ国ダセル）から入手可能な、ＦＰ２９９２、ＦＰ２３１６、またはＩＳＰ７２１６として知られているフリースなど）でできている。他の態様では、（ｉ）吸収部材９のそれぞれを覆う吸収要素および／または（ｉｉ）第三の層５は血漿回収材料（例えば、上記の血漿回収材料の１つ）でできている。他の態様では、吸収要素は、血漿を安定させる物質または混合物を含む。
【００５３】
他の側面では、血漿分離カードのそれぞれの層は、取り外し可能な接着材料で固定されている。一態様では、接着材料は、いずれのＰＳＣの層も実質的に破損させずにあるＰＳＣ層を他のＰＳＣ層から取り外すことができるものである。更なる一態様では、取り外し可能な吸収材料または要素は、吸収要素を第三の層に固定するための少なくとも２つの要素を含む。態様によっては、取り外し可能な吸収要素は、前記要素を第三の層に固定するための３つ、４つ、または５つの要素を含む。
【００５４】
図６は、このような取り外し可能な接着剤４および１３の配置の一例を示す。一態様では、取り外し可能な接着剤を用いて、第一の層２の底部平面を１つ以上の分離部材７の上部平面に固定する。他の態様では、取り外し可能な接着剤は、前記カードの第一の層２の底部平面の外縁に沿って設けられている。一態様では、この取り外し可能な接着剤は、分離部材７に重なるように設けられている。他の一態様では、取り外し可能な接着剤は、第一の層２の打ち抜き穴に対応する穴を含む。更なる一態様では、取り外し可能な接着剤は、第四の層上に設けられている。第四の層６は、血漿分離カードを支持し、安定させる働きをする。特定の一態様では、取り外し可能な接着剤は、支持層すなわち担持体６の長辺側にそれぞれ設けられている。担持体６は、堅い材料、例えば、丈夫な紙または３５０μｍの厚みを有するポリエチレンテレフタラート製フィルム（例えば、HOSTAPHAN（登録商標） RN350.MED）でできていてもよい。あるいは活性化可能な粘着層で被覆されたフィルム（例えば、活性化可能な接着剤または粘着層で被覆され、約１００〜４００μｍの範囲、例えば、３５０μｍの厚みを有するポリスチレン製フィルム）を用いてもよい。この粘着層は、熱により活性化されてもよく、例えば、超音波により接合、あるいは圧力により活性化されてもよい。フリース層が血漿受容部の印の外側にのみ選択的に接合されるように担持体を固定してもよい。したがって、「接着剤ストリップ１３」は省略される。
【００５５】
一態様では、上記ＰＳＣは、前記第三の層５と担持体すなわち支持層６の間にいわゆる血漿濃度制御層をさらに含む。血漿濃度制御物質を含む血漿濃度制御層は、血漿画分を回収するための取り外し可能な吸収材料（例えば、フリース）と直接接触しているか、あるいはこれに隣接する位置に設けられているかのいずれかである。他の態様では、支持層６（担持体）および血漿濃度制御層はいずれも透明である。ｐＨ指示薬（例えば、ブロモチモールブルー）、あるいはｐＨ非依存性感水紙（例えば、ドイツ国イェーナのQuantifoil Instruments GmbHより市販されている）は、血漿濃度制御物質として好適である。ｐＨ指示薬を用いる場合、血漿を加えるとｐＨ値がアルカリ性領域の方にシフトして、色を変化させる。感水紙を含む血漿濃度制御層を用いる場合、血漿を加えると紙の色が変化し、その結果は数秒後に目に見えるようになる。血漿濃度制御層により、特に検査に十分な血漿が存在することを保証され、かつ所定量の開始材料が付いている場合の検査結果の一貫性を確実になる。
【００５６】
他の態様では、第一の層２は、特定の長さおよび幅（例えば、第三の層５の上面の第一の領域と同じ長さ、同じ幅）を有する厚紙からできていてもよい。更なる一態様では、第一の層２の上部平面は、各試料受容部８に対応する１つ以上の円形の印を含む。
【００５７】
本発明による好ましい多層血漿分離カードは、
（ａ）（ｉ）障壁要素で縁取られた、血液試料を適用する（受ける）上部平面、および（ｉｉ）分離部材と接触するようになっている底部平面を含み、毛細管力で前記血液試料を前記分離部材に接触するようになっている試料受容部を含む第一の層、
（ｂ）血漿を吸収部材に通過させるようになっており、（ｉ）前記血液試料を受ける盾形の上部平面、および（ｉｉ）前記吸収部材と接触するようになっている盾形の底部平面を含む少なくとも２つの分離部材を含む第二の層、および
（ｃ）分離部材の盾形の底部平面に接触するようになっている盾形の上部平面を有し、第三の層に取り外し可能に固定されている取り外し可能な吸収要素を含み、対応するそれぞれの分離部材の盾形の底部平面から血漿を吸収する少なくとも２つの吸収部材、および前記吸収部材を支持するように配置された裏張り部材を含む第三の層を含む。
【００５８】
一態様では、上記多層血漿分離カードは、第三の層を含み、前記吸収要素は、取り外し可能な吸収要素を第三の層に固定するための少なくとも２つの要素を含む。他の態様では、上記多層血漿分離カードは、第三の層に結合された血漿濃度制御層を含む。
【００５９】
一態様では、上記多層血漿分離カードは、試料受容部を含み、これら試料受容部は、それぞれ打ち抜き円形または楕円形の穴である。他の態様では、試料受容部のそれぞれの寸法は、分離部材または吸収部材の盾形表面のそれぞれの寸法（例えば、２００ｍｍ2）よりも小さい（例えば、直径が約１０ｍｍ）。更なる一態様では、各試料受容部には、１０μｌ〜１０００μｌ、好ましくは５０μｌ〜５００μｌ、より好ましくは１００μｌの全血試料を付ける。一態様では、１つ以上の分離部材は血漿分離膜（例えば、Vivid膜）を含む。他の態様では、多層血漿分離カードの吸収部材は、血漿回収材料（例えば、綿くずでできている平均の厚みが３００〜４２０μｍのフリース、Whatman（登録商標）９０３（登録商標）紙に用いられるフリース、適切なフリース材料（例えば、Hahnemuhle GmbH（ドイツ国ダセル）から入手可能なＦＰ２９９２、ＦＰ２３１６、またはＩＳＰ７２１６））からできており、血漿安定剤を含んでいてもよい。好ましい一態様では、吸収要素のそれぞれは、縦方向に折りたたまれた平面部分を含む。他の好ましい一態様では、吸収要素は、判定のため、例えば、ピンセットで容易に取り外す、または容器に移すことができる。
【００６０】
本発明の更なる目的は、多層血漿分離カードを調製するための方法であって、この方法は、（１）分離部材層、血漿分離フリースを含む吸収部材層、着点層、および接着層を準備する工程、（２）好適な装置で着点層を接着層に接着して、分離膜層を挿入して、接着層の着点層に接着していない面にグラウトで固定し、次いで吸収膜層を分離膜層上に重ねて準備した層を結合する工程、および（３）これらの層の複合体を担持体である支持層上に長手方向に接着する工程を含む。
【００６１】
一態様では、多層血漿分離カードを調製するための方法は、以下の工程を含む。
（１）機械による打ち抜きまたはレーザーによる切り抜きで所望の形態、例えば、盾形領域の形態にした１つ以上の分離膜（例えば、ポリスルホン製の非対称膜、Vivid（登録商標）膜）を準備し、機械的力および／または熱的力で枠と縁領域を膜の元の厚みの約１／３に圧縮して、約１ｍｍの幅を有する円形の枠を得る工程、
（２）機械による打ち抜きまたはレーザーによる切り抜きで所望の形態にした裏打ち材料上に血漿回収フリースを含む吸収部材層を準備する工程（ここで、プレスで縦方向に折りたたまれた部分すなわちノッチが血漿回収フリース領域にエンボス加工されている。あるいは、超音波またはキスカット加工技術により折りたたみおよび折り目加工が施されてもよい）、
（３）切り抜きおよび／または打ち抜きにより、血液試料を適用するための１つ以上の穴または部分を有する厚紙でできた着点層を準備する工程、
（４）着点層（３）の打ち抜き穴に対応する穴すなわち開口部を含み、１つ以上の分離膜（１）の形態に対応する両面接着材料でできた層を準備する工程、
（５）支持層の各長辺に設けられた両面接着材料を含む担持体である支持層を準備する工程、および
（６）好適な装置を用いて工程（３）で得られた着点層を工程（４）で得られた接着層上に接着し、工程（１）で得られた分離膜を挿入して、接着層の着点層と接着していない面にグラウトで固定し、次いで工程（２）で得られたフリース層を分離膜上に重ねることにより、工程（１）〜（５）により得られた層を結合させる工程。次いで、工程（１）〜（４）で得られた層の複合体を担持体である支持層に長手方向に接着する。
【００６２】
本発明は、更に多層血漿分離カードを供給するための包装コンセプトに関する。一態様では、上記包装コンセプトは、多層分離カードおよび乾燥剤（単一カード包装）を含む、不浸透性、耐湿性で、化学的に不活性な袋（例えばアルミ箔またはアルミニウムで被覆したプラスチックフィルムの袋）を含む。血漿分離カード、および例えば乾燥剤を含む多層血漿分離カードの寸法に本質的に合わせた寸法を有する袋は、通常、使用するために開けるまで密封されている。有用な一態様では、上記包装コンセプトは、使用後に多層血漿分離層（血漿試料を含むことを意味する）を挿入および輸送するための、口を閉じることができる不浸透性で化学的に不活性な第二の袋、および任意で血液試料を採取するための手段をさらに含む。血液試料を採取するための好適な手段は、例えば、ランセットなどの使い捨て器具である。上記包装コンセプトを備えた未使用の多層分離カードの保存可能期間は、温度が１８〜４５℃、相対湿度が８５％までで少なくとも２４ヶ月である。口を閉じた不浸透性で化学的に不活性な袋に入れた多層分離カードに付けられた血漿試料は、温度が１８〜４５℃、相対湿度が８５％までで少なくとも１２週間安定である。
【００６３】
本発明のその他の目的は、本発明による多層血漿分離カードを用いることを含む血漿試料中のＨＩＶ、ＨＣＶ、および／またはＨＢＶを検出する方法である。
【実施例】
【００６４】
実施例１：多層血漿分離カードの調製
着点層２は、堅いポリエチレンテレフタラート（ＰＥＴ）材料（HOSTAPHAN（登録商標） RN350.MEDとして市販）製の厚みが３５０μｍのフィルムでできていた。一般的にロールとして供給されるこの材料から、約８５×３０ｍｍの寸法を持つ複数のストリップに切断した。３つの穴８をパンチで抜き打ちした。スペーサー４は、約０．１ｍｍの厚みを有する両面テープ（例えば、tesafix 51570またはtesafix 4959（Tesa SE（ドイツ国ハンブルグ）から市販されている））でできており、取り外し可能なフィルムで両面が保護されていた。複数のストリップをロールで供給された材料から切り取って、各ストリップの寸法を約８５×３０ｍｍとした。
【００６５】
レーザーで３つの盾形の開口部を切り抜いた。膜３として、Vivid膜ＧＲ（０．３ｍｍの厚みを有する８インチ×１１インチのシート、米国ニューヨーク州ポートワシントンのPall Corp.）を用いた。１７×２１ｍｍに近い寸法を有する盾形の部分７ａをフリース５（例えば、平均厚みが３００〜４２０μｍで吸引力が２３５〜２９０ｇ／ｍ2の綿くず）から打ち抜いた。縁７ｂは幅が１〜２ｍｍであってもよく、プレスで押さえて０．１ｍｍにした。また、レーザーまたは超音波手段により同等な結果を得てもよい。フリース材料の綿くずとしては、例えば、少量のポリアミドエピクロロヒドリン樹脂を含み、３００〜４２０μｍの平均厚みと２３５〜２９０ｇ／ｍ2の吸引力を有するものを用いた。また、３００〜４５０μｍの厚みと２００〜４００ｇ／ｍ2の吸引力を有する他のフリース材料（例えば、Hahnemuhle GmbH（ドイツ国ダセル）から市販されているＦＰ２９９２、ＦＰ２３１６、またはＩＳＰ７２１６フリース）を用いてもよい。約８５×３０ｍｍの寸法を有する複数のストリップ１０をロールで入手可能なフリース材料から切り出した。
【００６６】
レーザーを用いて、これらストリップのそれぞれから３つのスポット部９を作製した。この工程は機械的パンチを用いて行ってもよい。プレスで盾形の面積９にノッチ１２を型押しした。この工程は、レーザー、超音波、あるいはキスカット加工技術を用いて行ってもよい。担持体６は、３５０μｍの厚みを有するポリエチレンテレフタラート製のフィルム（例えば、HOSTAPHAN（登録商標） RN350.MED）でできていてもよい。このフィルム材料から約８５×５３ｍｍの寸法を有するカードを切り出した。態様によっては、担持体カードに２つの両面接着剤ストリップ１３を長手方向に付着させてもよい。
【００６７】
以下の工程では、確実に正確な組立を行うための手段と装置を用いた。両面接着材料４から保護フィルムを除去した。次いで、位置を合わせて接着材料を貼り付けて着点層２に固定した。両面接着材料４から第二の保護フィルムを除去して、着点層２とスペーサー４でできた組成物を装置内に挿入した。
【００６８】
Vivid膜を更なる装置に挿入して、着点層２に接合したスペーサー層４に接着または固定した。３つのスポット部すべてができるまで、この工程を３回繰り返した。血漿回収フリース５を含む層を更に別の装置に挿入して、爪楊枝で固定し、着点層、スペーサー層、およびVivid膜でできた組成物のVivid膜層上に置いた。粘着テープ１３から保護フィルムを除去して、着点層、スペーサー層、Vivid膜、および血漿回収フリースでできた組成物を担持体６の上面に位置を合わせて貼り付けた。
実施例２：多層血漿分離カード（ＰＳＣ）を用いた血漿試料中のＨＩＶの検出
実験作業の流れ
１）プラズマ分離カードの受容部材（着点層）の１つに所定量の全血（約１００ｕｌ）を付ける。
２）カードを室温で３〜４時間乾燥させる。
３）乾燥後、担持体から、付着させた膜を有する着点層を剥がす。ピンセットを用いて、血漿を充填させた１つ以上の盾形領域（図８ａ〜図８ｃの部材９）を取り外して、適切な試料管に移す。
４）試料事前抽出（Specimen Pre-Extraction、ＳＰＥＸ）緩衝液試薬を１１００μｌ、それぞれの試験管に加えて、１０００ｒｐｍで振とうしながら、試料を５６℃で１０〜２０分間インキュベートする。
５）血漿試料を含む試験管を装置に移す。
６）装置での作業の流れを開始して、測定する。
【００６９】
表１に、ＰＳＣの推定検出限界をCOBAS（登録商標）AmpliPrep/COBAS（登録商標）TaqMan（登録商標）HIV試験ｖ２．０およびCAP/CTMシステムと組み合わせたもの、ならびにＰＳＣの推定検出限界をCOBAS（登録商標）4800 HIV試験およびCOBAS（登録商標）4800システムと組み合わせたものを示す。検出限界および対応する信頼区間は、確立された統計法（プロビット解析）を用いて９５％で算出された。
【表１】
0006787920.tif 000002
【００７０】
表２に、ＰＳＣの推定直線性をCOBAS（登録商標）ＨＩＶおよびCOBAS（登録商標）6800/8800システム、COBAS（登録商標）AmpliPrep/COBAS（登録商標）TaqMan（登録商標）ＨＩＶ試験ｖ２．０およびCAP/CTMシステムと組み合わせたものを示す。全血中の優性遺伝型ＨＩＶ−１、Ｍ群Ｂ亜型を用いて直線性を評価した。意図した直線範囲を含む高い力価の細胞培地上澄みを連続希釈して直線性パネルを調製した。米国臨床検査標準化協会（Clinical and Laboratory Standard Institute, CLSI）ガイドラインＥＰ６−Ａに準拠して得られたデータを分析して直線範囲を同定した。直線範囲およびＲ２値を算出した。
【表２】
0006787920.tif 000003
【００７１】
図１０に示す表に、１６週間に渡る試料安定性検査のデータを示す。温度を４０℃に上げて、相対湿度１０〜４０％で濃度１２００ｃｐ／ｍｌの試料を１６週間に渡り検査した。標的のデルタ平均対数力価が、実験開始時の時点ゼロ（ＴＰ０）に対して０．３ｌｏｇ  ｃｐ／ｍｌ以下である場合を安定性要件として定義した。例えば、ＴＰ０〜ＴＰ３Ｗは、上記の条件で３週間保存した後の相対デルタ平均対数力価を示す。安定剤あり、および安定剤なしのデータを示す。
【図１】
0006787920.tif 000004
【図２】
0006787920.tif 000005
【図３】
0006787920.tif 000006
【図４】
0006787920.tif 000007
【図５】
0006787920.tif 000008
【図６】
0006787920.tif 000009
【図７】
0006787920.tif 000010
【図８ａ】
0006787920.tif 000011
【図８ｂ】
0006787920.tif 000012
【図８ｃ】
0006787920.tif 000013
【図９】
0006787920.tif 000014
【図１０】
0006787920.tif 000015