(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ボツリヌス毒素(BTX)、コロイド状銀粒子及び水を含む組成物。
【請求項２】
BTXが、ボツリヌスA型神経毒素である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
BTXが、ボツリヌスB型神経毒素である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
100〜600単位のBTXを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
コロイド状銀の濃度１〜100ppmを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
コロイド状銀が、粒子径に特徴を有し、50％を超えるコロイド状銀粒子が、0.015マイクロメートル未満の最大寸法を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
コロイド状銀粒子の少なくとも90％が、0.005マイクロメートルと0.015マイクロメートルの間の直径を有する、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
コロイド状銀粒子が、式Ag(0)の金属銀及びAg(I)、Ag(II)及びAg(III)から選択される式のイオン性銀を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
銀の合計濃度が約５と約40ｐｐｍの間であり、前記銀が内部の金属銀及び外面のイオン性酸化銀を有する銀粒子の安定で無色のコロイド状懸濁液の形態であり、その銀粒子の少なくとも75％が0.005マイクロメートルと0.015マイクロメートルの間の直径を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
ボツリヌス毒素(BTX)を含む容器と、コロイド状銀粒子及び水を含む容器とを含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、2014年９月２日に出願の米国仮特許出願第62/044926号の米国特許法第119条(e)に基づく優先権の利益を主張するものであり、その出願が本明細書に全体で援用されている。
【背景技術】
【０００２】
本発明は、一般的には、医療及び化粧目的のためにコロイド状銀粒子と組み合わせたボツリヌス毒素に関する。
【０００３】
背景
1950年代において、科学者はボツリヌス毒素が筋痙攣を軽減させることができることを発見した。1960年代及び1970年代において、斜視(やぶにらみ)のための治療としてボツリヌス毒素を調べるために研究が行われた。1989年に、Allergan社、米国カリフォルニア州アーヴィンがBOTOX(登録商標)を導入し、最初のボツリヌス毒素が眼瞼痙攣(まぶたの痙攣)及び斜視を治療するためにFDAによって認可された。2000年に、FDAは、重症の異常頭位と頸痛を軽減するために頸部ジストニアに対するBOTOX(登録商標)治療を承認した。2002年に、FDAは、眉間のしわ線の軽いものから深いものまでに特定して投与するBOTOX(登録商標)化粧品(オナボツリヌス毒素A)、BOTOX(登録商標)と同じ製剤を承認した。2004年に、FDAは、局所薬剤がほとんど作用しない場合のひどい脇の下の発汗のためのBOTOXBOTOX(登録商標)化粧品(オナボツリヌス毒素A)を承認した。ボツリヌス毒素の他のいくつかの製剤も現在市販されており、いろいろな商品名で販売されている。
残念なことに、ボツリヌス毒素の治療上及び化粧上の投与は、治療を与えるがさまざまな状態を治癒しない。従って、有益な結果を維持するために反復投与が必要である。例えば、化粧上の適用には、例えばしわ線を取り除くのに、典型的には、しわのよらない(又は軽減した)外見を達成及び維持するためにBOTOX(登録商標)を３〜６ヶ月毎に投与する。人体は、ボツリヌス毒素を分解することができ、このことによりその物質の生物学的有効性が破壊され得る。
背景の項で述べた課題の全ては、必ずしも従来技術ではなく、背景の項の説明の結果として単に従来技術であるとみなされてはならない。これらに沿って、従来技術であると特にことわらない限り背景の項で述べた又はそのような課題に関連した従来技術における問題のいかなる認識も従来技術として扱われてはならない。その代わりに、背景の項におけるいかなる課題の説明も具体的な問題への発明者の解決法の一部として扱わなければならず、それ自体も発明であり得る。
【発明の概要】
【０００４】
本開示は、コロイド状銀粒子及びボツリヌス毒素の組み合わせを提供する。例示的な態様において、本開示は、コロイド状銀粒子とボツリヌス毒素の両方を含む組成物、キット及び使用方法を提供する。例えば、一態様において、本開示は、下記の例示的実施態様が含まれる、ボツリヌス毒素及びコロイド状銀粒子を含む組成物を提供する：
１）ボツリヌス毒素(BTX)、コロイド状銀粒子及び水を含む組成物。
２）BTXがボツリヌスA型神経毒素である実施態様１の組成物。
３）BTXがボツリヌスB型神経毒素である実施態様１の組成物。
４）100〜600単位のBTXを含む実施態様１の組成物。
５）１〜100ppmの濃度のコロイド状銀を含む実施態様１の組成物
６）コロイド状銀が粒子径に特徴を有し、コロイド状銀粒子の50％を超える最大寸法が0.015マイクロメートル未満である実施態様１の組成物。
７）コロイド状銀粒子の少なくとも90％が0.005マイクロメートルと0.015マイクロメートルの間の直径を有する実施態様６の組成物。
８）コロイド状銀粒子が式Ag(0)の金属銀及びAg(I)、Ag(II)及びAg(III)から選択される式のイオン性銀を含む実施態様１の組成物。
９）銀の合計濃度が百万分の約５部と40部の間であり、前記銀が内部の金属銀と外面のイオン性酸化銀を有する銀粒子の安定で無色のコロイド状懸濁液の形態であり、銀粒子の少なくとも75％が0.005マイクロメートルと0.015マイクロメートルの間の直径を有する実施態様１の組成物。
【０００５】
他の態様においては、本開示はボツリヌス毒素とコロイド状銀粒子の両方を別個の容器で含むキットを提供する。例えば、本開示は、下記の例示的実施態様を提供する：
10）ボツリヌス毒素(BTX)を含む容器及びコロイド状銀粒子及び水を含む容器を備えるキット。
11）コロイド状銀粒子をBTXの容器へ移すのに適した針と注射器を更に含む実施態様10のキット。
他の態様において、本開示は、ボツリヌス毒素(BTX)及びコロイド状銀粒子を使用する方法を提供する。例えば、本開示は、下記の例示的実施態様を提供する：
12）ボツリヌス毒素(BTX)、コロイド状銀粒子及び水を、それを必要としている被検者に投与することを含む化粧処置(cosmetic treatment)。
13）ボツリヌス毒素(BTX)、コロイド状銀粒子及び水を、それを必要としている被検者に投与することを含む医療処置(medical treatment)。
１つ以上の態様及び実施態様の詳細は、下記の説明に記載される。一例示的実施態様に関連して例示され又は記載されている特徴は、他の実施態様の特徴と組み合わせてもよい。他の特徴、目的及び利点は、説明及び請求項から明らかである。
【０００６】
発明の詳細な説明
簡単に述べると、本発明は、キット、組成物及びその使用方法を含めた、コロイド状銀粒子及びボツリヌス毒素の組み合わせを提供する。
【０００７】
コロイド状銀粒子
「コロイド状銀粒子」又は「コロイド状銀」という用語は、粒子が銀を全体にあるいは部分的に含み、水性媒体においてコロイド的に懸濁している粒子を意味する。組成物におけるコロイド状銀粒子の合計量は、典型的には１ppmと100ppmの間である。任意の実施態様において、組成物におけるコロイド状銀粒子の含有量は、約30±5ppm、25±5ppm、20±5ppm、15±5ppm又は10±5ppmである。粒子がより小さくなるにつれて、粒子の所定の濃度はより多数の粒子を表す。更に、所定の粒子濃度の全表面積も増加する。それ故、粒子サイズ及び粒子サイズの範囲は、本発明の組成物を更に特徴づけることになる。更なる実施態様において、本開示は、粒子の50％を超える最大寸法が0.015マイクロメートル未満であること；粒子の75％を超える最大寸法が0.015マイクロメートル未満であること；粒子の90％を超える最大寸法が0.02マイクロメートル未満であること；粒子の75％を超える最小寸法が0.005マイクロメートルより大きいこと；又は粒子の90％を超える最小寸法が0.005マイクロメートルより大きいことを提供する。
粒子は、銀の原子価によって任意に特徴づけられてもよい。一実施態様において、銀粒子には、[Ag(0)]として表されるゼロ価状態の銀、すなわち、金属銀と、Ag(I)、Ag(II)及びAg(III)から選択されるイオン性酸化状態での銀コーティングの両方が含まれる。任意により、粒子には、酸化銀、例えば、AgOが含まれてもよい。例えば、一実施態様において、粒子はAg(0)及びAgOを含み、AgOは粒子上のコーティングとして存在する。一実施態様において、粒子における酸化銀は、少なくとも部分的にAg4O4、すなわち、酸化銀IIの形態であり得る。この物質の分子において、銀原子のうちの２つは1+状態(銀I)であり、その他の２つの銀分子は3+状態(銀III)である。ある状態下ではこれらの分子は、2+状態(銀II)の銀原子を生じることができる。従って、本開示は、金属銀及び酸化銀を含み、その酸化銀がAgO及びAg4O4から選択される銀粒子を提供する。
【０００８】
本発明の任意の実施態様において、これらの粒子は、サイズが１〜100ナノメートル、１〜10ナノメートル又は５〜７ナノメートルの範囲にあることができる。更に、好ましい実施態様においては、粒子は、Ag4O4分子から構成される多価酸化銀コーティングによって包囲されている。
コロイド状銀粒子を含む例示的な水性組成物は、米国特許第6,214,299号；米国特許第6,743,348号；米国特許第7,135,195号；及び米国特許第8,535,728号ならびに米国特許出願公開第2011/0262556号に記載されており、これらに開示された技術によって調製され得る。例えば、コロイド状銀粒子を含む組成物の調製は、電極を含む電気化学セルを用いてもよい。プロセスは、(a)銀電極を高純度水の量と接触させて配置する工程；(b)銀電極を通って電流を伝達して、このことにより水の中で懸濁した銀粒子の生成を引き起こすのに充分な方法で前記銀電極から銀粒子を分離する工程；及び(c)懸濁した銀粒子の前記生成の間、水を撹拌して、このことによりバッチ当たりより多量のコロイド状銀粒子を生成させることができるように前記水中でより一様な濃度に銀粒子を分散させる工程を含んでいる。
【０００９】
他の例として、コロイド状銀粒子を含む組成物の調製は、(a)電源、及び前記電源に電気的に接続された第１の導体及び前記電源に電気的に接続された第２の導体を備える電気回路を設置し、前記第１の導体が前記第２の導体から間隔をあけて配置され、導体の少なくとも１つが元素の銀でできている工程；(b)第１の導体及び第２の導体を流体抵抗と連通して配置することによって回路を閉鎖する工程；(c)電源を作動させて、第1の導体及び第2の導体に同時に交流を供給して電圧が交互タンデムで第１導体と第２の導体の中で増減し、このことにより第1の電極から銀粒子を分離し、流体抵抗に入り、かつ前記流体抵抗内に懸濁して配置される工程；及び(d)電極を流体抵抗の方へ移動させることによって選択的に調整して、そこから銀粒子を徐々に分離するため電極長の減少を補償して、このことにより電極と前記流体抵抗の間に生じるアーク放電を防止する工程が含まれ得る。
他の適切なコロイド状銀粒子及びそれらの調製は、例えば、PCT公報国際公開第2009/009143号及び米国特許出願公開第2010/0187091号に記載されている。コロイド状銀は、例えば、American Biotech Labs of Alpine、米国ユタ州から商業的に入手可能である。
一実施態様において、コロイド状銀粒子は、界面活性剤などを含まずに本質的に純粋な水に安定である。更に又は他の実施態様において、コロイド状銀粒子の溶液は、本質的に無色である。コロイド状銀は、ヒドロゾルで存在してもよい。
【００１０】
BTX
本明細書に使用される「BTX」という用語は、一般に、ボツリヌス毒素を表すために使用される。ボツリヌス毒素は、後述するように種々の細菌、例えば、クロストリジウム・ボツリヌム(Clostridium botulinum)によって天然に産生された神経毒タンパク質である。少なくとも８種の異なる血清型のBTXが認識されており、一般に、A、B、C1、C2、D、E、F及びGと呼ばれる。例示的なBTX源は、C.アルゲンチネンス(argentinense)、C.バラチイ(baratii)、C.ボツリヌム(botulinum)及びC.ブチリカム(butyricum)である。一実施態様において、BTXは、BTX-Aである。一実施態様において、BTXは、BTX-Bである。
BTX-A及びBTX-Bの各々は、いくつかの適応症に対してFDAによってヒト使用が認可されており、いくつかの供給源から市販されている。例えば、BOTOX(登録商標)は、Allergan社、米国カリフォルニア州アーバインから入手可能である。DYSPORT(登録商標)は、Valeant Pharmaceuticals Int'l.社、カナダケベック州ラヴァルから入手可能である。NEUROBLOC(登録商標)とMYOBLOC(登録商標)は共にSolstice Neurosciences社、米国ペンシルバニア州モルバーンから入手可能である。XEOMIN(登録商標)はMerz Pharma GmbH & Co.ドイツフランクフルト・アム・マインKGaAから入手可能である。
【００１１】
BTXは、凍結乾燥粉末として商業的供給源から入手し得る(例えば、米国特許出願公開第2014/0086900号を参照のこと)。それは、その意図した化粧上又は医療上の使用に適した濃度で、水又は生理的pHの食塩水と組み合わせてもよい。BTX濃度は、一般に、マウス単位によって表される。１単位は、腹腔内に注入されるときに18〜22gのSwiss Websterマウス群の50％が死亡するBTX量に等しい。異なるBTX材料は、１単位当り異なる質量のBTXを有する。実際に、BTX物質の異なる製剤は、１単位当り異なる質量のBTXを有し得る。100単位未満のBOTOX(登録商標)注射は、通常、化粧のために使用され、他のためには300〜600単位未満が使用される。凍結乾燥されたBTXに添加される水溶液の量は、意図した目的次第である。１〜10mLの希釈剤において一般に100単位が再構成される。一例として、まぶたのためには、100単位のBTX当たり１mLの希釈剤を使用し得る。他の例として、皮膚科及び形成外科のためには、100単位当たり１〜４mLの範囲が使用され得る。他の例として、100単位のBTXが、銀ナノ粒子を約１〜約50ppmの濃度で含む約１mLの水性組成物で希釈されて、眉間線のようなしわを治療するために患者に注射され得る組成物を提供する。水相が注射器によって粉末状のBTXのバイアルに穏やかに注入されてもよい。バイアルは典型的には製造業者によって負圧を有することになるので、注入時にバイアルの中へ流体が入っていく。再構成後、水性BTX組成物は、貯蔵の間、２〜８℃に維持されることが好ましい。
あるいは、BTXは、ナノエマルジョンとして製剤化され得る、例えば、米国特許出願公開第2014/0099342号；米国特許出願公開第2012/0064136号参照のこと。
【００１２】
BTX/Ag組成物
一実施態様において、本開示は、水、BTX及びコロイド状銀粒子を含む組成物を提供する。他の実施態様において、本開示は、水、BTX及びコロイド状銀を含む組成物を製造する方法を提供する。これらの組成物は、再構成されたBTXをコロイド状銀粒子と組み合わせ、その組み合わせを充分に混合して、均一な組成物を得ることによって調製され得る。組成物におけるBTXの量又は濃度は、組成物の意図した医療上又は化粧上の使用に適していなければならない。望ましい濃度のBTXを得るために、凍結乾燥されたBTXが望ましい水相の合計量より少ない量で再構成されてもよく、次に再構成されたBTXに水性コロイド状銀粒子の容積を添加して、望ましい濃度のBTXを得てもよい。
本明細書においてBBと呼ばれるBTX/Ag組成物は、10〜600単位、50〜600単位、100〜600単位、10〜400単位、50〜400単位、100〜400単位、10〜200単位、50〜200単位、100〜200単位又は約100単位のBTXを有し得る。銀粒子が懸濁されている水の質量に基づく銀粒子の濃度は、1〜100ppm、1〜50ppm、1〜30ppm、5〜50ppm、5〜40ppm、5〜30ppm、10〜100ppm、10〜50ppm又は10〜30ppmの範囲にあり得る。上述したように、最終組成物における銀の濃度は、例えば、1〜100ppmの範囲になる。
【００１３】
キット
他の態様において、本開示はボツリヌス毒素とコロイド状銀粒子の両方を別個の容器に含むキットを提供する。例えば、本開示は、ボツリヌス毒素(BTX)を保持する容器及びコロイド状銀粒子と任意により水も保持する容器を備えるキットを提供する。キットは、任意により、BTXとコロイド状粒子の投与を援助する更なる成分を含有してもよい。例えば、キットは、コロイド状銀粒子をBTXの容器へ移すために使用され得る注射器と針を含有し得る。更に、キットは、そのBTXが粉末状の形態である場合には、BTXを再構成するために使用し得る食塩水又は水性緩衝液を含有し得る。キットには、また、キットにおける成分の使用及び患者にBTXとコロイド状銀粒子の投与のための使用説明書が含まれ得る。
任意により、キットは、１〜500単位、10〜250単位又は約100単位のBTX及びコロイド状銀を約１〜50ppm、約5〜40ppm又は約10〜30ppmの濃度で含む別個の容器を備えていてもよい。BTXを保持する容器が約100単位のBTXを有する場合には、任意により、コロイド状銀を保持する容器が約1mLの水を約1〜50ppmのコロイド状銀と共に有してもよい。キットは、任意により、コロイド状銀を含まない水、例えば、緩衝溶液を含む更に他の容器を備えてもよい。
【００１４】
使用方法
本開示の組成物は、医療又は化粧的目的に使用し得る。例えば、これらは、斜視、顔半側痙攣、頚部ジストニア及び眼瞼痙攣の治療のために使用し得る。本開示の組成物は、鼻炎の治療のために使用し得る、PCT公報国際公開第2014/066916号及び国際公開第2014/037531号を参照のこと。本開示の組成物は、早漏の治療のために使用し得る、例えば、国際公開第2014/031809号を参照のこと。本発明の組成物は、脳血管障害の治療のために使用し得る、例えば、米国特許出願公開第2014/0105883号を参照のこと。本開示の組成物は、片頭痛の治療のために使用し得る、PCT公報国際公開第2013/137969号を参照のこと。本開示の組成物は、自律神経系障害の治療のために使用し得る、PCT公報国際公開第2013/009625号を参照のこと。本開示の組成物は、食道痙攣の治療のために使用し得る、PCT公報国際公開第2013/009584号を参照のこと。本開示の組成物は、持続性性喚起症候群の治療のために使用し得る、米国特許出願公開第2012/0282241号を参照のこと。本開示の組成物は、感覚障害の治療のために使用し得る、PCT公報国際公開第2012/134897号を参照のこと。本開示の組成物は、筋又は外分泌腺の機能亢進によって生じるか又はそれに関連した疾患又は状態の治療のために使用し得る、例えば、PCT公報国際公開第2011/160826号を参照のこと。
【００１５】
従って、本開示は、BTX及びコロイド状銀粒子を含む医薬組成物であり、その医薬組成物が滅菌したものである組成物を提供する。
本開示の組成物は、化粧のために、例えば、老化と関連した外見変化を軽減するために、すなわち、老化防止効果のために使用し得る、例えば、PCT公報国際公開第2011/154126号を参照のこと。老化は、化学線による損傷、重力の影響、睡眠ライン及び筋肉の動きによって生じる線及びしわの発生と関係している。顔面表情筋肉組織は、過緊張性の引っ張りに起因する肥大を受け得る。BTX注射は、過緊張性筋によって生じる顔のしわの線を軽減する。これらは、また、眉のような顔の輪郭の形を形成するために使用される。本開示の組成物は、BTXが使用される化粧のために使用され得る。本開示の組成物は、眼の下のくまを治療するために使用し得る、例えば、米国特許出願公開第2012/0115792号を参照のこと。
医療又は化粧的処置を必要としている被検者への本開示の組成物の投与は、BTX投与の標準法に従うことになる。例えば、PCT公報国際公開第2012/103415号に開示されているプロトコールを参照のこと。被検者はヒトでもよく、被検者はヒト以外の哺乳類又は鳥類でもよい。
【００１６】
分析法
本発明の組成物における銀含有量の分析は、原子吸光(AA)、誘導結合プラズマ/原子発光(ICP/AES)又は適切な濃度範囲で銀に感受性のある当業者に知られた他の技術によって行われ得る。銀組成物の粒子が小さく一様なサイズ(例えば、0.01マイクロメートル以下)である場合には、コロイドを直接AA又はICP/AESで行うことによってかなり正確な分析を得ることになる。これは、AAのための試料調製が銀の本質的に全てをイオン化させて、その即時検出を可能とするからである。組成物が0.2マイクロメートル程度の大きさの粒子を含む場合には、消化法を使用することが好ましい。消化法は、微粉化した銀と反応し得るハライド又は他のアニオン種と接触して製造され又は貯蔵され得る銀組成物、又はタンパク質若しくは他のゼラチン状材料と組み合わされ得る銀組成物には必ずしも理想的でない。
消化法の実施態様は、以下の通りである：(a)10mlのアリコートの分析される充分に混合又は振盪された銀組成物を取り、それをぴったり合う蓋を有する清潔なポリカーボネートびん又は適切な材料の他の容器(一般にびん)に入れる。30〜100mlのサイズが好ましい；(b)マイクロピペット又はスポイトで、0.1mlの硝酸、試薬用をびん中の銀組成物に添加する；(c)ぴったりとびんの蓋をして、組成物を銀が溶解するのに充分な時間穏やかに撹拌しながら80℃に加熱する--溶解は本質的に瞬時である；(d)得られた混合物を、蓋をしたまま室温に冷却する。充分にびんを振盪する；(e)AA、ICP/AES又は同等手段を用いて、組成物の銀含有量を分析する。好ましくは、必要に応じて適切に希釈した、新たに調製された標準、好ましくは機器製造業者の使用説明書に従って調製されものを用いる。結果を報告するときに、硝酸の添加によって生じる１％希釈度が含まれる、調製の間のすべての希釈を考慮しなければならない。
【００１７】
組成物における銀の物理的及び化学的形態の分析は、飛行時間型二次イオン質量分析(TOF-SIMS)によって行われ得る。TOF-SIMS技術は、未知試料の組成物を同定するために測定ツールとして適切に使用される。それは、適切なミクロ分析標準がキャリブレーションに利用できる場合には定量化が可能である。TOF-SIMS分析を行うために、数滴の銀含有組成物を周囲温度でシリコン基質上に蒸発乾固する。残渣をTOF-SIMSによって分析する。参照物質酸化銀(II)(AgO)は、シリコン基質上に供給業者から受け取ったままの参照粉末の少しの粒子を置くことによって分析し、参照として示す。飛行時間型二次イオン質量分析技術(TOF-SIMS)は、固体試料を一次イオンのパルス化微細焦束ビームと衝突させ、次に試料の表面から生じた二次イオンを飛行時間型質量分析器によって分析する原理に基づく。この分析技術は、表面感受性であり、表面の約20〜40オングストローム下までの層からその情報を誘導する。
サイズ/形態/組成物分析は、SEM、EDS(EDAX)及びTEMのいずれによっても行われ得る。特に、銀/水組成物を、乾燥させ、EMグリッド上に置き、SEM(すなわち、走査型電子顕微鏡)及び2種類の異なるTEM(すなわち、透過型電子顕微鏡)で調べてもよい。例えば、銀/水組成物をC-フィルム上に置き、約100kVの電力レベルを用いて約-100℃の温度でクライオTEMによって調べてもよい。それ故、本発明の銀/水組成物は、実質的に瞬時に凍結した。他の例として、TEM分析は、「SAD」方式で行われてもよい。更に他の例として、本発明の銀/水組成物から取り出した銀粒子のEDAXスペクトル(すなわち、エネルギー分散スペクトル又は「EDS」)が、金属汚染物質をチェックするために使用されてもよい。一態様において、コロイド状銀粒子は、金又は白金を含有しない。
【００１８】
実施例
背景：
ボトックス化粧品(ボツリヌス毒素A)は、100単位用量で市販されている。従来は、100単位の弱毒化ボツリヌス毒素A化粧品の容器を約1mLの不活性水性担体、典型的には食塩水で希釈し、次に穏やかに撹拌する。患者の意図した注射部位をイソプロパノールで清潔にする。望ましい量のこの希釈されたボトックス化粧品を患者に注射する。以下の実施例では、従来の食塩水担体を本明細書に記載されているようにナノ金属銀粒子の水性懸濁液と置き換え、この活性水性担体は10ppmもしくは30ppmのいずれかの銀濃度を有した。本開示のこの銀粒子含有の希釈されたボツリヌス毒素Aを便宜上本明細書ではBBと呼ぶ。ナノ金属銀水性懸濁液は、これらのHYDROSOL製品としてAmerican Biotech Labsから市販されている。更に、意図した注射部位をイソプロパノールではなく10ppmのHYDROSOLの滅菌溶液で拭いた。以下の実施例におけるあらゆる患者は、治療の実験の内容を理解し、治療のインフォームドコンセントの書類及び秘密保持契約にサインした。各注射は、10単位の希釈されたボツリヌス毒素Aを含有した。
合計1469単位の銀ナノ粒子で希釈されたボトックス(「BB」)を24ヶ月にわたって17人の異なる患者のさまざまな顔面筋に注射した。患者を注射の日に、次に注射後７日目と21日目に、その後は45日間隔で評価した。ボトックス効果の評価は、筋肉活動の可動域/量及び静的なしわもしくは機能的なしわのいずれかの有無によって示されるように注射する人によって主観的に決定された。
【００１９】
実施例１
患者No.１に30ppmのHYDROSOL懸濁液からつくられた44単位のBBを投与した。これらの単位を眼と口と前額のまわりの両側に注射した。ボトックスの効果は8.5ヶ月間持続した。患者は、注射部位にわずかに刺すような痛みと不快感を報告した。44単位のBBを投与した約10ヶ月後に、患者に10ppmのHYDROSOLからつくられた40単位のBBを投与し、これらの単位を眼のまわりの両側と前額/鼻根筋の筋肉と人中に投与した。患者は、注射からのいかなる刺すような痛みも不快感も報告しなかった。ボトックスの効果は、10ヶ月を超えて持続した。紅斑は見られなかった。
この患者は以前にこれらの同一領域に数回ボトックス治療を受けたことがあり、希釈剤が0.9％中性緩衝食塩水であった。これらの注射からのボトックス効果の平均期間は、４〜５ヶ月であった。従って、請求の範囲に記載されている本発明に従うボトックスと銀ナノ粒子の組み合わせにより、従来のボトックス注射と比較して著しく長期間のボトックス効果がもたらされる。
【００２０】
実施例２
患者No.２に30ppmのHYDROSOL懸濁液からつくられた45単位のBBを投与した。これらの単位を眼と口と前額のまわりの両側に注射した。ボトックスの効果は7.5ヶ月間持続した。患者は、注射部位にわずかに刺すような痛みと不快感を報告した。45単位のBBを投与した約10ヶ月後に、患者に10ppmのHYDROSOLからつくられた42単位のBBを投与し、これらの単位を眼のまわりの両側と前額に投与した。患者は、注射からのいかなる刺すような痛みも不快感も報告しなかった。ボトックスの効果は、９ヶ月間持続した。
上記のようにBB注射を投与する前の５年間、この患者は以前にこれらの同一領域に多数回ボトックス治療を受けたことがあり、希釈剤が0.9％中性緩衝食塩水であった。これらの注射からのボトックス効果の平均期間は、４〜５ヶ月であった。従って、請求の範囲に記載されている本発明に従うボトックスと銀ナノ粒子の組み合わせにより、従来のボトックス注射と比較して著しく長い期間ボトックス効果がもたらされる。
【００２１】
実施例３
患者No.３に30ppmのHYDROSOL懸濁液からつくられた34単位のBBを投与した。これらの単位を眼と前額のまわりの両側に注射した。ボトックスの効果は8.5ヶ月間持続した。患者は、注射部位にわずかに刺すような痛みと不快感を報告した。34単位のBBを投与した約50週後に、患者に10ppmのHYDROSOLからつくられた50単位のBBを投与し、これらの単位を眼のまわりの両側と前額に投与した。患者は、注射部位にわずかな不快感を報告した。ボトックスの効果は、少なくとも11ヶ月間持続した。紅斑は、報告されなかった。
この患者は以前にこれらの同一領域に２回ボトックス治療を受けたことがあり、希釈剤が0.9％中性緩衝食塩水であった。これらの注射からのボトックス効果の平均期間は、５〜６ヶ月であった。従って、請求の範囲に記載されている本発明に従うボトックスと銀ナノ粒子の組み合わせにより、従来のボトックス注射と比較して著しく長い期間のボトックス効果がもたらされる。
【００２２】
実施例４
患者No.４に10ppmのHYDROSOL懸濁液からつくられた34単位のBBを投与した。これらの単位を眼と前額のまわりの両側に及び上唇の左側に注射した。ボトックスの効果は8.5ヶ月間持続した。患者は、注射部位にわずかに刺すような痛みと不快感を報告した。34単位のBBを投与した約11ヶ月後に、患者に10ppmのHYDROSOLからつくられた50単位のBBを投与し、これらの単位を眼のまわりの両側と前額に注射した。患者は、注射の部位にわずかな不快感を報告した。ボトックスの効果は、少なくとも10ヶ月間持続した。
上記のようにBB注射を投与する前に、この患者はこれらの同一領域に多数回ボトックス治療を受けたことがあり、希釈剤が0.9％中性緩衝食塩水であった。注射部位に刺すような痛みも不快感も述べられなかった。これらの注射からのボトックス効果の平均期間は、５〜６ヶ月であった。従って、請求の範囲に記載されている本発明に従うボトックスと銀ナノ粒子の組み合わせにより、従来のボトックス注射と比較して著しく長い期間ボトックス効果がもたらされる。
上記の実施例は、コロイド状銀をボツリヌス毒素Aと共に使用して、ボトックス、例示的なボツリヌス毒素の筋弛緩有効性を延長し得ることを証明している。更に、これらの検査は、コロイド状銀をイソプロパノールの代わりに使用して、注射のための滅菌皮膚表面を与え得ることを証明している。
この明細書に記載された及び/又は出願データシートに記載された米国特許、米国特許出願公開、米国特許出願、外国特許、外国特許出願及び非特許公報の全てが本明細書に全体で援用されている。
上記のことから、本発明の特定の実施態様を説明のために本明細書に記載してきたが、種々の変更が本発明の精神及び範囲から逸脱することなく行われ得ることは理解されるであろう。従って、本発明は添付の請求の範囲による以外は制限されない。