(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
豆乳を酵母の一種であるガラクトミセス  ゲオトリクム（Ｇａｌａｃｔｏｍｙｃｅｓ  ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）で発酵させることで得られる豆乳発酵物。
【請求項２】
請求項１に記載の豆乳発酵物を含有することを特徴とする化粧料。
【請求項３】
請求項１に記載の豆乳発酵物を含有することを特徴とする線維芽細胞増殖剤。
【請求項４】
請求項１に記載の豆乳発酵物を含有することを特徴とする表皮角化細胞増殖剤
【請求項５】
請求項１に記載の豆乳発酵物を含有することを特徴とするコラーゲン産生促進剤。
【請求項６】
請求項１に記載の豆乳発酵物を含有することを特徴とするヒアルロン酸産生促進剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、線維芽細胞増殖剤、表皮角化細胞増殖剤、コラーゲン産生促進剤、ヒアルロン酸産生促進剤、および化粧料として有用である、豆乳発酵物に関する。
【背景技術】
【０００２】  豆乳発酵物は、従来より化粧品の材料として使用されており、保湿、肌荒れ防止、育毛等の多様な効果が見込まれている（例えば、特許文献１〜４）。これらの特許文献１〜３に記載される豆乳発酵物は、乳酸菌により豆乳を発酵させたものであり、また、特許文献４に記載される豆乳発酵物は、リゾーブス属に属する真菌により豆乳を発酵させたものである。発酵させる菌種により得られる効果や、効果の高さが異なっているのが現状であり、豆乳発酵物としてさらに高い効果が求められている。【０００３】
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平１０−２８７５４０
【特許文献２】特開２００６−０２２０５０
【特許文献３】特開２０１２−１７６９３１
【特許文献４】特開平０１−１０２０１１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】  本発明は、特定の微生物として酵母の一種であるガラクトミセス  ゲオトリクム（Ｇａｌａｃｔｏｍｙｃｅｓ  ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）で豆乳を発酵させた豆乳発酵物、およびそれを含有する化粧料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】  本発明の豆乳発酵物は、酵母の一種であるガラクトミセス  ゲオトリクムで豆乳を発酵させたことを特徴としている。
また、上記豆乳発酵物は、化粧料に配合され、線維芽細胞増殖剤、表皮角化細胞増殖剤、コラーゲン産生促進剤、ヒアルロン酸産生促進剤の有効成分として配合され得る。
【発明の効果】
【０００７】  本発明のガラクトミセス  ゲオトリクムで豆乳を発酵させた豆乳発酵物により、有用な線維芽細胞増殖剤、表皮角化細胞増殖剤、コラーゲン産生促進剤、ヒアルロン酸産生促進剤、および化粧料を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【０００８】  以下、本発明の実施形態について説明する。
【０００９】  本発明の豆乳発酵物は、酵母の一種であるガラクトミセス  ゲオトリクム（Ｇａｌａｃｔｏｍｙｃｅｓ  ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）で豆乳を発酵させたものである。
上記豆乳発酵物は、線維芽細胞増殖剤、表皮角化細胞増殖剤、コラーゲン産生促進剤、ヒアルロン酸産生促進剤として有用である。
また、本発明の化粧料は、上記豆乳発酵物を含有することを特徴とする。
【００１０】  豆乳発酵物の原料として用いる豆乳としては、例えば、予め水に浸漬しておいた大豆に水や熱水を加えて磨砕や圧搾し、ろ過することによりおからを除去した後、得られたろ液を加熱滅菌する方法で得られる豆乳が挙げられる。
【００１１】  本発明の豆乳発酵物の製造方法としては、例えば、前培養した菌（ガラクトミセス  ゲオトリクム）の菌液（スターター）を豆乳に接種した後、３０℃〜４５℃で１０時間〜３０時間培養する方法を採用することができる。菌の増殖や発酵を促すために、スクロース、グルコース、フルクトース、転化糖などの糖類、肉エキス、ペプトン、酵母エキスなどを必要に応じて豆乳に添加してもよい。また、豆乳のｐＨを調整するために、塩酸などの無機酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、酢酸などの有機酸、水酸化ナトリウムなどのアルカリを必要に応じて豆乳に添加してもよい。所定の条件のもとでの発酵を行った後は、菌を死滅させるための加熱殺菌やろ過殺菌を行うことが好ましい。また、得られた豆乳発酵物は、そのまま液として使用してもよいし、凍結乾燥等により乾燥させて粉末にしてもよい。液として用いる場合には、防腐剤や溶媒と混合して使用することが好ましい。
【００１２】  本発明の化粧料の形態は特に限定されるものではないが、例えばクリーム、乳液、化粧水、エッセンス、洗顔料、クレンジング料、パックなどの基礎化粧料、口紅、ファンデーション、アイカラーなどのメイクアップ化粧料、ボディソープ、石鹸、シャンプー、リンス、コンデッショナーなどのトイレタリー製品、毛髪用セット剤などの毛髪用化粧料等、任意の形態が挙げられる。
【００１３】  また、本発明の化粧料には、例えば一般に化粧料で用いられている賦形剤、香料などをはじめ、油脂類、界面活性剤、保湿剤、美白剤、ｐＨ調整剤、多価アルコール類、精油及び香料類、増粘剤、防腐剤、本発明の抗酸化剤以外の抗酸化剤、紫外線吸収剤、顔料、植物粉砕物及び生薬類、無機塩類及び無機酸類、洗浄剤、乳化剤などの各種化粧料成分を適宜配合することができる。
【００１４】  前記油脂類としては、一般に化粧料で汎用されている、例えば大豆油、アーモンド油、パラフィン、セタノール、アボガド油、オリーブ油、ホホバ油、ヤシ油、パーム油、ヌカ油、ホホバ油、卵黄油、ひまし油、スクワラン、アボガド油、ラノリン、流動パラフィン、白色ワセリンなどの植物性油脂；牛脂、豚脂、馬脂、タートル油、ミンク油、パーセリン油、スクワランなどの動物性油脂；メチルポリシロキサン、ベヘニルアルコール、トリカプリン酸グリセリル、トリオクタン酸グリセリル、流動パラフィンなどの合成油脂などが挙げられる。
【００１５】  前記界面活性剤としては、例えばラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸トリエタノールアミン、ラウリン酸ジエタノールアミドなどの陰イオン性界面活性剤；ステアリルトリメチルアンモニウムクロライド、セチルトリメチルアンモニウムクロライド、塩化ベンザルコニウムなどの陽イオン性界面活性剤；グリセリルモノステアレート、ソルビタンモノステアレート、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ショ糖エステル、脂肪酸アミドなどの非イオン性界面活性剤などが挙げられる。
【００１６】  前記保湿剤としては、例えばグリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ポリオキシグリセリン（２６Ｅ．Ｏ）、ピロリドンカルボン酸ソーダ、パンテテイン−Ｓスルホン酸塩などの合成保湿剤；ヒアルロン酸、エラスチン、ケラチン、デルマタン硫酸、コラーゲン、胎盤抽出液、ローヤルゼリー、微生物発酵液、例えばキチン、キトサン、ペクチンなどや、その他の植物や動物由来の抽出液などの天然保湿剤などが挙げられる。
【００１７】  前記美白剤としては、例えば、アスコルビン酸、アルブチンやこれらの誘導体などのほかにも、胎盤抽出液、その他の植物や動物由来の抽出液などが挙げられる。
【００１８】  前記ｐＨ調整剤としては、例えばクエン酸、乳酸、サリチル酸、酒石酸、りんご酸、クエン酸、安息香酸、クエン酸ナトリウム、フマル酸、リン酸一水素ナトリウム、リン酸二水素カリウム、などの有機酸、無機酸及びその塩類などが挙げられる。
【００１９】  前記多価アルコール類としては、グリセリン、プロピレングリコール、ソルビトール、ポリエチレングリコール、１，３−ブチレングリコールなどが挙げられる。
【００２０】  前記精油及び香料類としては、ラベンダー油、ジャスミン油、ローズ油、レモン油、オレンジ油、ハッカ油、タイム油、ショウブ油、ウイキョウ油、スギ油、ヒバ油、ヒノキ油、バラ油、ユーカリ油、カンファー、ペパーミント油、スペアミント油、ゲラニオール、ミカン油、トウヒ、シトロネロール等の天然及び合成香料などが挙げられる。
【００２１】  前記増粘剤としては、例えばカルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースＮａ、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシビニルポリマー、カルボマー、ポリビニルアルコール、アルギン酸ナトリウム、カラギーナン、キサンタンガム、ベントナイトなどが挙げられる。
【００２２】  前記防腐剤としては、例えばメチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベンなどのパラオキシ安息香酸エステル、フェノキシエタノール、エタノール、デヒドロ酢酸などが挙げられる。
【００２３】  前記抗酸化剤としては、例えばアルコルビン酸、ＥＤＴＡ４Ｎａ，ＥＤＴＡ２Ｎａ、ジブチルヒドロキシトルエンなどが挙げられる。
【００２４】  前記紫外線吸収剤としては、紫外線を選択的に吸収する性質を有するものであれば特に限定されることはないが、例えば、オキシベンゾン、オキシベンゾンスルホン酸、テトラヒドロキシベンゾフェノン、ジヒドロキジメトキシベンゾフェノンスルホン酸ナトリウム、ジヒドロキジメトキシベンゾフェノン、ジヒドロキベンゾフェノン、シノキサート、ジイソプロピルケイ皮酸メチル、メトキシケイ皮酸オクチル、パラアミノ安息香酸グリセリル、パラアミノ安息香酸オクチル等が挙げられる。
【００２５】  前記顔料としては、例えばベンガラ、黄酸化鉄、黒酸化鉄、酸化チタン、ナイロンパウダー、酸化亜鉛、セリサイト、マイカ、タルクなどが挙げられる。
【００２６】  前記植物粉砕物及び生薬類としては、レモンの皮、海藻、ヒノキ、ヒバ、フッカス、米ヌカ、シュウブ、ショウキョウ、カンゾウ、チンピ、トウヒ、ユズ、トウキ、ニンジン、ハッカ、ケイヒ、ウバイ、ヨモギ、ドクダミ、モモノハ、カミツレ、アロエ、ジャスミン、ローズヒップ、ラベンダー、グァバ、オウゴン、クコ、レイシ、ニワトコ、アシタバ、ウコギ、ゴボウ、黒ゴマ、黒米等の粉砕物及びその抽出液などが挙げられる。
【００２７】  無機塩類及び無機酸類として、塩化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、ホウ酸、ほう砂、硫酸ナトリウム、硫化ナトリウム、硫化カリウム、硝酸ナトリウム、硝酸カルシウム、硫酸アンモニウム、チオ硫酸ナトリウム、リン酸水素カルシウム、塩化カリウム、塩化アンモニウム、リン酸ナトリウム、次亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸カルシウム、硫黄、セスキ炭酸ナトリウム、硫酸マグネシウム、無水ケイ酸、メタケイ酸、ホウ酸などが挙げられる。
【００２８】  前記洗浄剤としては、例えば、脂肪酸石鹸、カルボン酸型界面活性剤、アルキル硫酸エステル型界面活性剤、スルホサクシネート型界面活性剤、タウレート系、アシルサルコシン系、アシル−β−アラニン系等のアシル化アミノ酸型界面活性剤、リン酸エステル型界面活性剤等のアニオン界面活性剤、イミダゾリン型、アルキルベタイン型、アルキルアミドベタイン型、アルキルスルホベタイン型の両性界面活性剤やアルキルサッカライド類、ＥＯ付加型界面活性剤等などが挙げられる。
【００２９】  前記乳化剤は、化粧品原料として公知の物質を用いることができる。特に好ましいものとして、ショ糖ラウリン酸エステル、ショ糖ミリスチン酸エステル、ショ糖パルミチン酸エステル、ショ糖ステアリン酸エステル、ショ糖オレイン酸エステル、ショ糖エルカ酸エステル等のショ糖脂肪酸エステル、テトラグリセリンモノステアリン酸エステル、テトラグリセリンモノオレイン酸エステル、テトラグリセリントリステアリン酸エステル、ヘキサグリセリンモノラウリン酸エステル、ヘキサグリセリンモノミリスチン酸エステル、ヘキサグリセリンモノステアリン酸エステル、ヘキサグリセリントリステアリン酸エステル、デカグリセリンモノラウリン酸エステル、デカグリセリンモノミリスチン酸エステル、デカグリセリンモノステアリン酸エステル、デカグリセリンジステアリン酸エステル、デカグリセリントリステアリン酸エステル、デカグリセリンペンタステアリン酸エステル、デカグリセリンモノイソステアリン酸エステル、デカグリセリンジイソステアリン酸エステル、デカグリセリンペンタイソステアリン酸エステル、デカグリセリンモノオレイン酸エステル、デカグリセリントリオレイン酸エステル、デカグリセリンペンタオレイン酸エステル等のポリグリセリン脂肪酸エステル、モノイソステアリン酸ソルビタン、セスキイソステアリン酸ソルビタン、トリイソステテアリン酸ソルビタン等のソルビタン分岐脂肪酸エステル、大豆レシチン、卵黄レシチン、水素添加大豆レシチン、水素添加卵黄レシチン、更にこれらのレシチン類を酵素処理によりモノアシル体としたリゾレシチン及び／または水素添加リゾレシチン、ヒドロキシル化したヒドロキシレシチン等のレシチン類、モノイソステアリン酸グリセリル、セスキイソステアリン酸グリセリル、ジイソステアリン酸グリセリル等のグリセリン分岐脂肪酸エステル等を挙げることができる。
【００３０】  さらに、本発明の化粧料は、前記のもの以外にも、必要に応じてその他の成分として、乳糖、牛乳、練乳、チタン、タルク等の無機顔料、イソプロピルメチルフェノール、塩酸クロロロヘキシジン、グルコン酸クロロヘキシジンなどの殺菌剤、ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２，ビタミンＢ６、ビタミンＰ、ＣｏＱ１０、ＣｏＱ９、ＣｏＱ８などのビタミン類及び補酵素、無水珪酸、合成珪酸アルミニウム等流動化剤及び医薬品組成物、医薬部外品並びに化粧料用タール系色素等を適宜配合してよい。
【００３１】  本発明の化粧料は、必要に応じて、他の有効成分や、化粧成分を組みあわせて、常法により製造することができる。
【００３２】  当該化粧料における豆乳発酵物の含有量は、固形分濃度として、０．０００１〜１０質量％が好ましく、０．００１〜５質量％がより好ましい。
【００３３】
【実施例】
【００３４】  以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、これらは本発明の範囲を限定するものではない。【００３５】  〔製造例１〕豆乳発酵物の製造
酵母の一種であるガラクトミセス  ゲオトリクムを、豆乳に対し１０４個／ｍＬになるように播種し、２５℃で２日間振とう培養した。得られた培養物を８０℃で２時間処理し、発酵を停止させた後、ろ紙およびメンブランフィルターでろ過し、豆乳発酵液を得た。さらに、この豆乳発酵液を、凍結乾燥機で乾燥させて本発明の豆乳発酵物を得た。【００３６】＜試験例１＞正常ヒト皮膚線維芽細胞を用いた検討
〔試験１−１〕正常ヒト皮膚線維芽細胞増殖作用
９６ウェルプレートに正常ヒト皮膚線維芽細胞をウェルあたり５，０００個播種し、２４時間培養後に試料添加培地と交換、さらに３日間培養した。培養後、細胞数をＣｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  Ｋｉｔ（同仁化学研究所）にて測定した。なお、試料添加培地における豆乳発酵物の固形分濃度および測定結果は、表１に示す。【００３７】
【表１】
0006722376.tif 000002
【００３８】〔試験１−２−１〕コラーゲン産生作用（細胞内コラーゲン量）
９６ウェルプレートに正常ヒト皮膚線維芽細胞をウェルあたり５，０００個播種し、２４時間培養後に試料添加培地と交換、さらに５日間培養した。培養後、細胞内コラーゲン量を染色法にて測定した。なお、試料添加培地における豆乳発酵物の固形分濃度および測定結果は、表２に示す。【００３９】
【表２】
0006722376.tif 000003
【００４０】〔試験１−２−２〕コラーゲン産生作用（細胞外（放出）コラーゲン量）
９６ウェルプレートに正常ヒト皮膚線維芽細胞をウェルあたり５，０００個播種し、２４時間培養後に試料添加培地と交換、さらに５日間培養した。培養後、培養上清を回収し、上清中のコラーゲン量をＥＬＩＳＡ法にて定量した。
なお、試料添加培地における豆乳発酵物の固形分濃度および測定結果は、表３に示す。【００４１】
【表３】
0006722376.tif 000004
【００４２】〔試験１−３〕ヒアルロン酸産生作用
９６ウェルプレートに正常ヒト皮膚線維芽細胞をウェルあたり５，０００個播種し、２４時間培養後に試料添加培地と交換、さらに３日間培養した。培養後、培養上清を回収し、上清中のヒアルロン酸量をＥＬＩＳＡ法にて定量した。
なお、試料添加培地における豆乳発酵物の固形分濃度および測定結果は、表４に示す。【００４３】
【表４】
0006722376.tif 000005
【００４４】＜試験例２＞正常ヒト表皮角化細胞を用いた検討
〔試験２−１〕正常ヒト表皮角化細胞増殖作用
９６ウェルプレートに正常ヒト表皮角化細胞をウェルあたり５，０００個播種し、２４時間培養後に試料添加培地と交換、さらに３日間培養した。培養後、細胞数をＣｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  Ｋｉｔ（同仁化学研究所）にて測定した。
なお、試料添加培地における豆乳発酵物の固形分濃度および測定結果は、表５に示す。【００４５】
【表５】
0006722376.tif 000006
【００４６】〔試験２−２〕ヒアルロン酸産生作用
９６ウェルプレートに正常ヒト表皮角化細胞をウェルあたり１０，０００個播種し、２４時間培養後に試料添加培地と交換、さらに３日間培養した。培養後、培養上清を回収し、上清中のヒアルロン酸量をＥＬＩＳＡ法にて定量した。
なお、試料添加培地における豆乳発酵物の固形分濃度および測定結果は、表６に示す。【００４７】
【表６】
0006722376.tif 000007
【００４８】＜試験例３＞Ｂ１６マウスメラノーマ由来細胞を用いた検討
〔試験３−１〕メラニン産生抑制試験
培養面積７５平方センチメートルのフラスコにＢ１６マウスメラノーマ由来細胞を４０万個播種し、２４時間培養後に試料添加培地と交換し、さらに３日間培養した。培養後、細胞を収集、細胞色を比較した上で細胞からメラニンを抽出して比色法でメラニン量を定量した。
なお、試料添加培地における豆乳発酵物の固形分濃度および測定結果は、表７に示す。【００４９】
【表７】
0006722376.tif 000008
【００５０】＜試験例４＞ハムスター皮脂腺細胞を用いた検討
〔試験４−１〕皮脂産生抑制試験
２４ウェルプレートにハムスター皮脂腺細胞をウェルあたり５０，０００個播種し、コンフルエントになるまで培養後、試料添加培地と交換、さらに２週間培養した。培養後、細胞内に生成された皮脂を染色法にて定量測定し、細胞数あたりの量を算出した。
なお、試料添加培地における豆乳発酵物の固形分濃度および測定結果は、表８に示す。【００５１】
【表８】
0006722376.tif 000009
【００５２】  以上試験例１〜４より、本発明の豆乳発酵物は、市販の乳酸菌発酵させた豆乳発酵物にくらべ著しく高い、皮膚線維芽細胞増殖効果、表皮角化細胞増殖効果、コラーゲン産生効果、ヒアルロン酸産生効果を有するとともに、メラニン産生抑制効果および皮脂産生抑制効果を有することが明らかとなった。【００５３】＜試験例５＞人の肌を用いた検討
〔試験５−１〕角層水分量の測定
本発明の豆乳発酵物および比較対象の豆乳発酵物について、それぞれ固形分濃度として０．５％または１．０％の水溶液を調製した。各豆乳発酵物について、１日朝晩の２回、一滴を健常な被験者６名の前腕内側部に、２週間連続塗布し、連続塗布前後で、ＳＫＩＣＯＮ−２００ＥＸ（ＩＢＳ社製）を用いて各塗布部位の角層水分量を測定した。
予め測定していた各塗布部位の塗布前の水分量を１００％として、表９に示す。【００５４】
【表９】
0006722376.tif 000010
【００５５】  本発明の豆乳発酵液を塗布した部位は、いずれの評価濃度においても乳酸菌で発酵させた豆乳発酵物Ａ，Ｃに比べ顕著に角層水分量の上昇率が高かった。
以上の結果から、本発明の豆乳発酵物は、著しく高い保湿効果があることがわかった。