(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式：
【化１】
0006794583.tif 000032
の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは水和物。
【請求項２】
次式：
【化２】
0006794583.tif 000033
の請求項１に記載の化合物もしくは塩、またはその水和物。
【請求項３】
次式：
【化３】
0006794583.tif 000034
の請求項１または請求項２のいずれかに記載の化合物もしくは塩、またはその水和物。
【請求項４】
次式：
【化４】
0006794583.tif 000035
である、請求項３に記載の化合物または塩。
【請求項５】
次式：
【化５】
0006794583.tif 000036
である、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンヒドロクロリドである、請求項１に記載の化合物、またはその水和物。
【請求項７】
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンヒドロクロリドモノハイドレートである、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
前記化合物が、結晶質である、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
０．２度の回折角の許容差を伴って、１３．８°、２２．２°、１９．７°、２１．３°、１４．１°、および２５．４°からなる群から選択される１つ以上のピークと組み合わせた、２６．３°の回折角２θにおけるＸ線粉末回折スペクトルのピークを特徴とする、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンヒドロブロミドである、請求項１に記載の化合物、またはその水和物。
【請求項１１】
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンヒドロブロミドモノハイドレートある、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
前記化合物が、結晶質である、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
０．２度の回折角の許容差を伴って、１３．９°、２２．１°、８．７°、１９．５°、１８．８°からなる群から選択される１つ以上のピークと組み合わせた、２６．１°の回折角２θにおけるＸ線粉末回折スペクトルのピークを特徴とする、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物もしくは塩、またはその水和物を含む、患者の片頭痛を治療する薬学的組成物。
【請求項１５】
治療に使用するための、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物もしくは塩、またはその水和物。
【請求項１６】
片頭痛の治療に使用するための、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物もしくは塩、またはその水和物。
【請求項１７】
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物もしくは塩、またはその水和物を、１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤とともに含む、薬学的組成物。
【請求項１８】
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物もしくは塩、またはその水和物を、１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤と混合することを含む、薬学的組成物を調製するためのプロセス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特定の新規カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）受容体アンタゴニスト化合物、該化合物を含む薬学的組成物、片頭痛など特定の生理障害を予防または治療するために該化合物を使用する方法、ならびに該化合物の合成に有用な中間体およびプロセスに関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明は、片頭痛ならびにＣＧＲＰによって媒介されると考えられる他の神経疾患および神経障害の予防および治療の分野にある（例えば、Ｓ．Ｂｅｎｅｍｅｉ，ｅｔ．ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，９，９−１４（２００９）を参照のこと）。片頭痛は、世界中で何百万人もの人々が患っている衰弱性疾患である。片頭痛の治療選択肢には、スマトリプタンやゾルミトリプタンなどのトリプタンが含まれる。残念ながら、現在患者に利用可能である承認された薬剤は、常に有効な治療を提供するわけではなく、これらの薬剤は、めまい、知覚異常、および胸部不快感などのさまざまな有害な副作用を伴い得る。さらに、トリプタンには、実質的な基礎心血管疾患または制御不能な高血圧を患っている患者には禁忌となる特定の心血管の懸念がある（Ｔ．Ｗ．Ｈｏ，ｅｔ．ａｌ．，Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ，３７２，２１１５−２１２３（２００８）を参照のこと）。したがって、片頭痛の予防および治療には満たされていない重要なニーズがある。新しいＣＧＲＰ受容体アンタゴニストは、片頭痛などの特定の神経疾患の治療または予防を提供することが所望される。
【０００３】
米国特許公開第２０１７／００４４１３８Ａ１号および第２０１７／００４４１６３号は、それぞれ、片頭痛の治療または予防に有用な特定のＣＧＲＰ受容体アンタゴニスト化合物を開示する。米国特許第６，６８０，３８７号は、ＩＩ型糖尿病、アテローム性動脈硬化症、高コレステロール血症、および高脂血症の治療のための特定の５−ベンジル−または５−ベンジリデン−チアゾリジン−２，４−ジオンを開示する。
【発明の概要】
【０００４】
本発明は、ＣＧＲＰ受容体のアンタゴニストである特定の新規化合物を提供する。本発明はまた、中枢浸透性であるＣＧＲＰ受容体のアンタゴニストも提供する。
【０００５】
したがって、本発明は、式Ｉの化合物：
【化１】
0006794583.tif 000002
またはその薬学的に許容される塩もしくは水和物を提供する。
【０００６】
本発明はさらに、式ＩＩの化合物：
【化２】
0006794583.tif 000003
またはその薬学的に許容される塩もしくは水和物を提供する。
【０００７】
本発明はまた、患者における片頭痛を予防する方法であって、それを必要とする患者に、有効量の式Ｉもしくは式ＩＩの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む方法も提供する。
【０００８】
本発明はさらに、患者における片頭痛を治療する方法であって、それを必要とする患者に、有効量の式Ｉもしくは式ＩＩの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む方法を提供する。本発明はまた、患者におけるＣＧＲＰ受容体をアンタゴナイズする方法であって、それを必要とする患者に、有効量の式Ｉもしくは式ＩＩの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む方法も提供する。
【０００９】
さらに、本発明は、治療法、特に片頭痛の治療に使用するための、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。加えて、本発明は、片頭痛の予防における使用のための、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。さらにまた、本発明は、片頭痛の治療のためのまたは片頭痛を予防するための医薬を製造のための、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【００１０】
本発明はさらに、１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤とともに、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物、またはこれらの薬学的に許容される塩を含む、薬学的組成物を提供する。本発明はさらに、１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤とともに、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物、またはその薬学的に許容される塩を混合することを含む、薬学的組成物を調製するためのプロセスを提供する。本発明はまた、式Ｉおよび式ＩＩの化合物の合成のための新規の中間体およびプロセスも包含する。例えば、本発明はさらに、以下の中間体：
【化３】
0006794583.tif 000004
を提供し、式中、ＰＧは好適な保護基である。好適な保護基の例は、トリフェニルメチル、ｐ−メトキシベンジルなどである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本明細書で使用される場合、「治療すること」、「治療」、または「治療する」という用語は、既存の症状または障害の進行または重症度を抑制すること、遅延させること、阻止すること、または改善することを含む。
【００１２】
本明細書で使用される場合、「予防すること」または「予防」という用語は、片頭痛などの特定の疾患または障害を起こしやすいが、現在、片頭痛の症状などの疾患または障害の症状を患っていない患者を保護することを指す。
【００１３】
本明細書で使用される場合、「患者」という用語は、哺乳類、特にヒトを指す。
【００１４】
本明細書で使用される場合、「有効量」という用語は、患者に単回または複数回投与されると、診断中または治療中の患者に所望の効果を提供する、本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩の量または投与量を指す。
【００１５】
有効量は、既知技法の使用によって、および同様の状況下で得られた結果を観察することによって、当業者により容易に決定され得る。患者のための有効量を決定する際には、患者の種、そのサイズ、年齢、および全体的な健康状態、関与する特定の疾患または障害、疾患または障害の程度または関与または重症度、個々の患者の応答、投与される特定の化合物、投与の様式、投与される製剤の生物学的利用率特性、選択された投与レジメン、付随する薬物の使用、ならびにその他の関連する状況を含むが、これらに限定されない、多数の要因が担当診断医によって考慮される。
【００１６】
本発明の化合物は、約０．０１〜約２０ｍｇ／体重ｋｇの範囲内の１日当たりの投与量で有効である。ある場合には、前述の範囲の下限よりも低い投与量レベルが十分以上である場合があり、他の場合には、許容される副作用を伴って、さらに多い用量が用いられてもよく、したがって、前述の投与量範囲は、決して本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【００１７】
本発明の化合物は、経口および経皮経路を含む、化合物を生体利用可能にする任意の経路によって投与される薬学的組成物として製剤化される。より好ましくは、そのような組成物は経口投与用である。このような薬学的組成物およびこれを調製するためのプロセスは、当技術分野で周知である（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｌ．Ｖ．Ａｌｌｅｎ，Ｅｄｉｔｏｒ，２２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，２０１２を参照されたい）。
【００１８】
式Ｉおよび式ＩＩの化合物、またはその薬学的に許容される塩は、本発明の予防方法および治療方法において特に有用であるが、ある特定の立体配置が好ましい。以下の段落では、このような好ましい立体配置について説明する。本発明は、すべての個々のエナンチオマーおよびジアステレオマー、ならびにラセミ体を含む上記化合物のエナンチオマー混合物を企図するが、以下に記載の絶対配置を有する化合物が特に好ましい。これらの選好が、本発明の予防方法および治療方法ならびに新規化合物の両方に適用可能であることが理解されるであろう。
【００１９】
以下の化合物：
【化４】
0006794583.tif 000005
ならびにその薬学的に許容される塩および水和物が好ましい。
【００２０】
以下の化合物：
【化５】
0006794583.tif 000006
およびその薬学的に許容される塩がより好ましい。
【００２１】
以下の化合物：
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオン、
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンヒドロクロリド、
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンヒドロブロミド、
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンヒドロブロミドモノハイドレート、および
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンヒドロクロリドモノハイドレートが特に好ましい。
【００２２】
以下の調製に記載される特定の中間体は、１つ以上の窒素保護基を含んでもよい。保護基は、特定の反応条件および実施される特定の変換に応じて、当業者によって認識されるように変化し得ることが理解される。保護および脱保護条件は、当業者に周知であり、文献（例えば、”Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｆｏｕｒｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ｂｙ  Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．２００７を参照のこと）に記載されている。
【００２３】
個々の異性体、エナンチオマー、およびジアステレオマーは、選択的結晶化技術またはキラルクロマトグラフィーなどの方法によって、本発明の化合物の合成における都合の良い時点で、当業者により分離または分解され得る（例えば、Ｊ．Ｊａｃｑｕｅｓ，ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ，ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ”，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９８１、およびＥ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ  ａｎｄ  Ｓ．Ｈ．Ｗｉｌｅｎ，”Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ”，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，１９９４を参照のこと）。
【００２４】
本発明の化合物の薬学的に許容される塩は、例えば、当技術分野で周知の標準的な条件下で、本発明の化合物の適切な遊離塩基、および好適な溶媒（ジエチルエーテルなど）中の適切な薬学的に許容される酸の反応によって形成され得る。加えて、そのような塩の形成は、窒素保護基の脱保護と同時に起こり得る。そのような塩の形成は、当技術分野で周知であり、また理解されている。例えば、Ｇｏｕｌｄ，Ｐ．Ｌ．，“Ｓａｌｔｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｂａｓｉｃ  ｄｒｕｇｓ，”Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，３３：２０１−２１７（１９８６）、Ｂａｓｔｉｎ，Ｒ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．“Ｓａｌｔ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ  ｆｏｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｎｅｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｅｎｔｉｔｉｅｓ，”  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，４：４２７−４３５（２０００）、およびＢｅｒｇｅ，Ｓ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ，”Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，６６：１−１９，（１９７７）を参照されたい。
【００２５】
特定の略語は次のように定義される。「ＡＣＮ」は、アセトニトリルを指す。「ｃ−Ｐｒ」は、シクロプロピルを指す。「ＤＣＭ」は、ＤＣＭまたは塩化メチレンを指す。「ＤＭＥＡ」は、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチルアミンを指す。「ＤＩＰＥＡ」は、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを指す。「ＤＭＦ」は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを指す。「ＤＭＳＯ」は、ジメチルスルホキシドを指す。「Ｅｔ」は、エチルを指す。「Ｅｔ２Ｏ」は、ジエチルエーテルを指す。「ＥｔＯＡｃ」は、酢酸エチルを指す。「ＥｔＯＨ」は、エタノールを指す。「ｇ」は、遠心分離に関連して使用される場合、相対的な遠心力を指す。「ＨＰＬＣ」は、高速液体クロマトグラフィーを指す。「ＨＯＢｔ」は、ヒドロキシベンゾトリアゾールを指す。「ｈｒ」は時間（ｈｏｕｒ）または時間（ｈｒ）を指す。「ＨＡＴＵ」は、１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェートまたはＮ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２、３−トリアゾロ−［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルメチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ−オキシドを指す。「ＨＴＲＦ」は、均一時間分解蛍光を指す。「ＩＣ５０」は、その薬剤に対して可能な最大の阻害反応の５０％を生じる薬剤の濃度を指す。「ｋＰａ」は、キロパスカルを指す。「ｋＶ」はキロボルトを指す。「ＬＡＨ」は、水素化アルミニウムリチウムを指す。「ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ」は、液体クロマトグラフィーエレクトロスプレー質量分析法を指す。「ＬＤＡ」は、リチウムジイソプロピルアミドを指す。「ｍＡ」は、ミリアンペアを指す。「ＭＤＣＫ」は、Ｍａｄｉｎ−Ｄａｒｂｙのイヌ腎上皮細胞を指す。「ｍｉｎ」は、分を指す。「Ｍｅ」は、メチルを指す。「ＭｅＯＨ」は、メタノールまたはメチルアルコールを指す。「ＭＴＢＥ」は、メチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテルを指す。「ＮａＨＭＤＳ」は、ビス（トリメチルシリル）アミドナトリウムを指す。「ｎ−ＢｕＬｉ」は、ｎ−ブチルリチウムを指す。「ｐｓｉ」は、ポンド／平方インチを指す。「ｒｐｍ」は毎分回転数を指す。「ＲＴ」は室温を指す。「ＳＥＭ」とは、平均の標準誤差を指す。「ＳＦＣ」は、超臨界流体クロマトグラフィーを指す。「Ｔ３Ｐ」は、２，４，６−トリプロピル−１，３，５，２，４，６−トリオキサトリホスホリナン−２，４，６−三酸化物溶液を指す。「ｔ−ＢｕＯＨ」は、ｔｅｒｔ−ブタノールを指す。「ＴＥＡ」は、トリエチルアミンを指す。「ＴＦＡ」はトリフルオロ酢酸を指す。「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフランを指す。「ＴＭＥＤＡ」は、テトラメチルエチレンジアミンを指す。「ｔＲ」は、保持時間を指す。「Ｕ／ｍＬ」は、ミリリットルあたりの単位を指す。
【００２６】
本発明の化合物またはその塩は、当技術分野の当業者に既知のさまざまな手順によって調製されてもよく、そのうちのいくつかが、以下のスキーム、調製法、および実施例で説明されている。当業者は、本発明の化合物またはその塩を調製するために、記載される経路のそれぞれに対する特定の合成ステップを、異なる様式で組み合わるか、または異なるスキームのステップと併せることができることを認識している。以下のスキームにおける各ステップの生成物は、抽出、蒸発、沈殿、クロマトグラフィー、濾過、粉砕、および結晶化を含む、当技術分野で周知の従来の方法によって回収することできる。以下のスキームにおいて、すべての置換基は、別途指示のない限り、すでに定義されたとおりである。試薬および出発材料は、当業者であれば容易に入手可能なものである。以下のスキーム、調製法、実施例、およびアッセイは、本発明をさらに説明するものであるが、決して本発明の範囲を限定すると解釈されるべきではない。
【化６】
0006794583.tif 000007
【００２７】
スキーム１は、（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンの合成を示す。スキーム１、ステップＡにおいて、イソプロピル（Ｅ）−ブタ−２−エノエートの不斉アリール化は、当技術分野で十分に説明されているように、ロジウムなどの遷移金属触媒を使用する結合条件下で達成され得る。一般に、アリールボロン酸は、イソプロピル（Ｅ）−ブタ−２−エノエートに結合されて、高いエナンチオ選択性を持つロジウム触媒生成物のイソプロピル（３Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）ブタノエートを得ることができる。例えば、約１．０５〜１．１当量の４−ブロモペニルボロン酸を、約０．０１当量のロジウム触媒、具体的にはビス（ノルボルナジエン）ロジウム（Ｉ）テトラフルオロボレートで処理した後、０．０１〜０．０１５当量の（Ｒ）−（＋）−２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル、約１当量のＴＥＡ、および約１当量のイソプロピル（Ｅ）−ブタ−２−エノエートなどの適切なキラルリガンドを湿潤１，４−ジオキサンまたはＴＨＦと水（約８：１）などの適切な溶媒混合液中に加えた。得られた反応混合物を約４０℃で約１８時間加熱することができる。次いで、抽出方法およびクロマトグラフィーなどの当技術分野において周知の技術を利用して、生成物を単離および精製することができる。例えば、反応混合物を水で希釈し、ＭＴＢＥまたはＤＣＭなどの適切な非極性有機溶媒で抽出することができる。有機抽出物を合わせ、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、ステップＡの粗生成物を得ることができる。次いで、粗生成物は、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ勾配などの好適な溶離液を伴うシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーで精製して、ステップＡの精製生成物、イソプロピル（３Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）ブタノエートを高鏡像体過剰率で得ることができる。
【００２８】
スキーム１、ステップＢにおいて、スキーム１のステップＡの生成物の加水分解は、当技術分野で周知のけん化条件下で達成され得る。例えば、イソプロピル（３Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）ブタノエートは、ＭｅＯＨなどの適切なアルコール溶媒に溶解し、ＮａＯＨなどの過剰の無機塩基水溶液で処理することができる。約１時間加熱した後、生成物は、抽出、粉砕、および蒸発法などの当技術分野で周知の技術を利用して単離および精製することができる。例えば、反応混合物をＤＣＭなどの適切な有機溶媒で抽出し、得られた分離水層を濃ＨＣｌなどの過剰の鉱酸で処理してｐＨを約４にすることができる。次いで、酸性化した水層を、ＤＣＭなどの適切な有機溶媒で抽出することができる。有機抽出物を合わせ、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、ステップＢの粗生成物を得ることができる。粗生成物をヘプタンなどの非極性有機溶媒で粉砕することができ、得られた沈殿物をろ別し、濾液を減圧下で濃縮して、非常に高い鏡像体過剰率で、ステップＢの生成物、（３Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）ブタン酸を得ることができる。
【００２９】
スキーム１、ステップＣにおいて、スキーム１のステップＢの生成物のエステル化は、当技術分野で周知の広範囲の酸性／塩基性エステル化方法の下で、またはジアゾメタンでの直接エステル化によって実施することができる。例えば、ＭｅＯＨなどの適切なアルコール溶媒に溶解した（３Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）ブタン酸を、濃Ｈ２ＳＯ４などの過剰の鉱酸で処理することができる。得られた混合物を約２時間加熱し、次いで抽出などの当技術分野で周知の技術を利用して生成物を単離することができる。反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣を水とＭＴＢＥなどの好適な有機溶媒との間で分配することができる。有機抽出物を合わせ、水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、追加精製不要で使用に好適な、ステップＣの生成物、メチル（３Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）ブタノエートを得ることができる。
【００３０】
スキーム１、ステップＤにおいて、スキーム１のステップＣの生成物のアルキル化は、文献で周知のさまざまなアルキル化条件を使用して達成することができる。例えば、メチル（３Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）ブタノエートのメチル化は、無水ＴＨＦなどの適切な溶媒中のｎ−ＢｕＬｉなどの約１．５〜１．７５当量の非求核性塩基で、低温で処理し、続いて、得られたアニオンを約１．５〜１．６当量のＣＨ３Ｉでクエンチすることにより達成できる。次いで、抽出などの当技術分野で周知の技術を利用することにより、生成物を単離することができる。反応混合物を水とＭＴＢＥなどの適切な有機溶媒との間で分配することができる。合わせた有機抽出物を水、飽和ＮａＣｌ水溶液で順次洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、ステップＤの生成物である（３Ｓ、２Ｒ／Ｓ）−メチル３−（４−ブロモフェニル）−２−メチルブタノエートを、追加精製不要で使用に好適なジアステレオマーの混合物として得ることができる。
【００３１】
スキーム１、ステップＥにおいて、ジアステレオマーの混合物としてのスキーム１のステップＤの生成物、（３Ｓ、２Ｒ／Ｓ）−メチル３−（４−ブロモフェニル）−２−メチルブタノエートを、低温で無水ＴＨＦなどの適切な有機溶媒中のｎ−ブチルリチウムなどの約１当量の有機塩基で処理することができる。次いで、得られた混合物を、約０．９当量のｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモアセテートの溶液で処理することができる。次いで、抽出などの当技術分野で周知の技術を利用することにより、生成物を単離することができる。反応混合物を水とＭＴＢＥなどの適切な有機溶媒との間で分配することができ、合わせた有機抽出物を水および飽和ＮａＣｌ水溶液で順次洗浄することができる。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、ステップＥの生成物である４−（ｔｅｒｔ−ブチル）１−メチル（Ｓ／Ｒ）−２−（（Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル）−２−メチルスクシナートを、追加精製不要で使用に好適なジアステレオマーの混合物として得ることができる。
【００３２】
スキーム１、ステップＦにおいて、スキーム１のステップＥの生成物のジアステレオマーエステルの混合物は、先行技術で周知の条件下で加水分解され得る。例えば、４−（ｔｅｒｔ−ブチル）１−メチル（Ｓ／Ｒ）−２−（（Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル）−２−メチルスクシナートは、ＤＣＭなどの適切な有機溶媒に溶解し、ＴＦＡなどの過剰な有機酸で処理することができる。得られた混合物を室温で約１８時間撹拌し、次いで抽出などの当技術分野で周知の技術を利用して生成物を単離することができる。反応混合物を水および飽和ＮａＣｌ水溶液で順次洗浄し、有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、ステップＦの生成物である（３Ｓ／Ｒ、４Ｒ）−４−（４−ブロモフェニル）−３−（メトキシカルボニル）−３−メチルペンタン酸を、追加精製不要で使用に好適なジアステレオマー混合物として得ることができる。
【００３３】
スキーム１、ステップＧにおいて、スキーム１のステップＦのジアステレオマーの混合物である、（３Ｓ／Ｒ、４Ｒ）−４−（４−ブロモフェニル）−３−（メトキシカルボニル）−３−メチルペンタン酸は、無水ＤＭＦなどの適切な極性有機溶媒中で溶解でき、約３当量のＴＥＡまたはＤＩＰＥＡなどの非求核性塩基、約１．２当量のＨＡＴＵなどのアミドカップリング試薬、および過剰のメタノール性アンモニア溶液で順次処理することができる。得られた混合物を室温で約２〜１２時間撹拌し、次いで抽出などの当技術分野で周知の技術を利用することによって、生成物を単離することができる。反応混合物を水とＤＣＭなどの適切な有機溶媒との間で分配し、層を分離し、合わせた有機抽出物を水および飽和ＮａＣｌ水溶液で順次洗浄することができる。次いで、抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、ステップＧの生成物であるメチル（２Ｓ／Ｒ）−４−アミノ−２−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−２−メチル−４−オキソ−ブタノエートを、追加精製不要で使用に好適なジアステレオマーの混合物として得ることができる。
【００３４】
スキーム１、ステップＨにおいて、スキーム１のステップＧのジアステレオマー生成物の混合物を、非求核性塩基の存在下で加熱することにより環化し、続いてキラルクロマトグラフィー条件下でジアステレオマーを分離することができる。例えば、メチル（２Ｓ／Ｒ）−４−アミノ−２−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−２−メチル−４−オキソ−ブタノエートを、ＴＨＦ／水の混合液（約１：１）に溶解し、炭酸ナトリウムなどの約２．５当量の非求核性塩基で処理し、得られた混合物を約６０℃で約２時間加熱することができる。次いで、生成物は、抽出後のキラルクロマトグラフィー条件下でのジアステレオマーの分離など、当技術分野で周知の技術を利用することにより単離することができる。例えば、反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、ジアステレオマーの粗混合物を得る。ジアステレオマーは、Ｎ，Ｎ−ジエチルメチルアミン／ＣＯ２（約１：９）などの少量の非求核性アミンを含むＥｔＯＨのアイソクラティック溶媒系を使用して、キラルＳＦＣ技術により分離し、ステップＨの分離生成物である、（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンおよび（３Ｒ）−３−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンを得ることができる。
【００３５】
スキーム１、ステップＩにおいて、ステップＨの生成物は、当技術分野で十分に説明されている条件下でカルボニル化することができる。例えば、約１当量の（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンは、約０．０３〜０．０４当量の酢酸パラジウム（ＩＩ）などの遷移金属試薬、約０．１０〜０．１５当量のブチル−ジ−１−アダマンチル−ホスフィンなどの好適なホスフィンリガンド試薬、およびわずかに過剰のＴＭＥＤＡなどの非求核性塩基とともに、トルエンなどの好適な非極性有機溶媒中で、一酸化炭素／水素の雰囲気下で約７５ｐｓｉに加圧された密閉反応容器内で加熱することができる。得られた混合物を約９５℃で約１６時間加熱し、次いで室温に冷却し、珪藻土の床で濾過し、減圧下で濃縮することができる。次いで、生成物は、クロマトグラフィーなどの当技術分野で周知の技術を利用することにより単離することができる。例えば、溶媒蒸発後に得られた粗残渣を、ヘキサン／酢酸エチルなどの好適な有機溶媒混合液で溶出する、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、ステップＩの生成物、４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３−メチル−２，５−ジオキソ−ピロリジン−３−イル］エチル］ベンズアルデヒドを得ることができる。
【００３６】
４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３−メチル−２，５−ジオキソ−ピロリジン−３−イル］エチル］ベンズアルデヒドのスクシンイミド窒素は、スキーム１、ステップＪに示す当技術分野に既知の条件下で、好適な保護基「ＰＧ」で保護することができる。例えば、ＰＧ＝トリチルの場合、スキーム１、ステップＩの生成物である約１当量の４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３−メチル−２，５−ジオキソ−ピロリジン−３−イル］エチル］−ベンズアルデヒドを、室温で約４〜６時間、ＤＭＦなどの好適な極性有機溶媒中のＣｓ２ＣＯ３などの約１．５当量の適切な塩基、および約１．２当量の塩化トリフェニルメチルで処理することができる。生成物は、抽出法およびクロマトグラフィーなどの当技術分野で周知の技術を利用することにより単離することができる。例えば、粗反応混合物を水で希釈し、ＤＣＭまたはＥｔＯＡｃなどの好適な有機溶媒で抽出し、得られた層を分離し、有機抽出物を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮することができる。得られた粗生成物を、ヘキサン／酢酸エチルなどの好適な有機溶媒混合物で溶出する、シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、ステップＪの生成物、４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３−メチル−２，５−ジオキソ−１−トリチル−ピロリジン−３−イル］エチル］ベンズアルデヒドを得ることができる。
【００３７】
スキーム１、ステップＫにおいて、スキーム１のステップＪのＮ−保護ベンズアルデヒド生成物は、当技術分野で十分に説明されている広範な条件下で還元することができる。例えば、スキーム１、ステップＪの生成物である、約１当量の４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３−メチル−２，５−ジオキソ−１−トリチル−ピロリジン−３−イル］エチル］−ベンズアルデヒドは、ＥｔＯＨなどの好適なアルコール溶媒に懸濁するか、またはＴＨＦもしくは１，４−ジオキサンなどの好適な極性有機溶媒に溶解し、約１．５当量の水素化ホウ素ナトリウムの全量をもしくは少しずつ添加して、約３０〜６０分間、約０°Ｃで処理することができる。生成物は、抽出法およびクロマトグラフィーなどの当技術分野で周知の技術を利用することにより単離することができる。粗反応混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃなどの好適な極性有機溶媒で抽出し、得られた層を分離し、有機抽出物を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、ヘキサン／酢酸エチルなどの好適な有機溶媒混合物で溶出する、シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、ステップＫの生成物、（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］−３−メチル−１−トリチル−ピロリジン−２，５−ジオンを得ることができる。
【００３８】
スキーム１、ステップＬにおいて、スキーム１のステップＫのアルコール生成物は、当技術分野で周知の一連の条件下で、ハロゲン化アルキル、アルキルメシレート、またはアルキルトシレートなどの好適な脱離基に変換することができる。例えば、スキーム１、ステップＫの生成物である、約１当量の（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］−３−メチル−１−トリチル−ピロリジン−２，５−ジオンは、ＤＣＭなどの好適な有機溶媒に溶解し、約０℃まで冷却し、ＴＥＡなどの約１．５当量の適切な非求核性塩基、および約１．２当量のメタンスルホニルクロリドで順次処理することができる。生成物は、抽出方法などの当技術分野で周知の技術を利用することにより単離することができる。反応混合物を水およびＤＣＭで希釈し、得られた層を分離し、有機抽出物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液および飽和ＮａＣｌ水溶液で順次洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、ステップＬの粗生成物、［４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３−メチル−２，５−ジオキソ−１−トリチル−ピロリジン−３−イル］エチル］フェニル］メチルメタンスルホナート（追加精製せずにその後の使用に十分な純度のもの）を得ることができる。
【００３９】
スキーム１、ステップＬの生成物は、当技術分野で十分に説明されている広範な条件下でさまざまな求核剤で処理することができる。例えば、スキーム１、ステップＭにおいて、ＤＭＦなどの適切な極性有機溶媒中の約１当量の（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）−オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−１−トリチル−ピロリジン−２，５−ジオン溶液を、ＤＭＦまたはＡＣＮなどの好適な有機溶媒中の約０．７５〜０．９５当量の２−シクロプロピル−６−メチル−ピリジン−４−オールのスラリー、および約０．７５〜０．９５当量のＮａＨまたはＮａＨＭＤＳに、約０℃〜室温で加えることができる。得られた混合物を約１６時間撹拌し、抽出法およびクロマトグラフィーなどの当技術分野で周知の技術を利用して生成物を単離することができる。反応混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃなどの好適な極性有機溶媒で抽出し、層を分離し、有機抽出物を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮することができる。得られた粗生成物を、ヘキサン／酢酸エチルなどの好適な有機溶媒混合物で溶出する、シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、ステップＭの生成物、（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−１−トリチル−ピロリジン−２，５−ジオンを得ることができる。
【００４０】
スキーム１、ステップＮは、スクシンイミド窒素の脱保護を示し、当技術分野で周知のとおり、保護基に特異的な広範な条件下で達成することができる。例えば、ＰＧ＝トリチルの場合、スキーム１、ステップＭの生成物である、約１当量の（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−１−トリチル−ピロリジン−２，５−ジオンは、ＤＣＭなどの好適な有機溶媒に溶解し、過剰のＴＦＡで約１２〜２４時間処理することができる。反応混合物は、１ＮのＮａＯＨ水溶液でｐＨを約６に調整することができる。生成物は、抽出方法およびクロマトグラフィーなどの当技術分野で周知の技術を利用することにより単離することができる。反応混合物を水で希釈し、ＤＣＭで抽出し、層を分離し、有機抽出物を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮することができる。得られた粗生成物を、ＤＣＭ中のＭｅＯＨなどの適切な溶媒混合物で溶出する、シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、ステップＮの生成物、（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンを得ることができる。
【化７】
0006794583.tif 000008
【００４１】
スキーム２は、４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３−メチル−２，５−ジオキソ−１−トリチル−ピロリジン−３−イル］エチル］ベンズアルデヒドの合成を示す。スキーム２、ステップＡにおいて、スキーム１ステップＨの生成物である（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンのスクシンイミド窒素を、スキーム１ステップＪに記載されている手順と本質的に同様の様式で、トリチル化することによって保護することができる。例えば、約１当量の（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンは、ＤＭＦなどの好適な極性有機溶媒中、Ｃｓ２ＣＯ３などの約１．５当量の適切な塩基および約１．２当量の塩化トリフェニルメチルで、室温で約４時間、処理することができる。生成物は、濾過などの当技術分野で周知の技術を利用することにより単離することができる。例えば、反応混合物を水で希釈し、約０℃に冷却することができる。得られた沈殿物を濾過により回収し、熱いＭｅＯＨで再構成し、室温に冷却し、生じた沈殿物を濾過により回収して、ステップＡの生成物、（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−３−メチル−１−トリチル−ピロリジン−２，５−ジオンを得ることができる。スキーム２、ステップＢにおいて、この物質は、スキーム１のステップＩに記載されている手順と本質的に同様の様式でカルボニル化して、４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３−メチル−２、５−ジオキソ−１−トリチル−ピロリジン−３−イル］エチル］ベンズアルデヒドを得ることができる。スキーム１、ステップＫ〜Ｎにすべて記載のとおり、その後の還元、メシレートへの変換、２−シクロプロピル−６−メチル−ピリジン−４−オールによるエーテル化、および脱保護によって、（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンを得ることができる。
【実施例】
【００４２】
調製法および実施例
以下の調製法および実施例は、本発明をさらに説明し、本発明の化合物の典型的な合成を表す。試薬および出発材料は、当業者によって容易に入手可能であるか、または容易に合成され得る。調製法および実施例は限定ではなく例示として説明され、当業者によりさまざまな変更が行われ得ることを理解すべきである。
【００４３】
本発明の化合物のＲまたはＳ配置は、Ｘ線分析およびキラルＨＰＬＣの保持時間との相関などの標準技術により決定され得る。
【００４４】
ＬＣ−ＥＳ／ＭＳは、ＡＧＩＬＥＮＴ（登録商標）ＨＰ１１００液体クロマトグラフィーシステムにおいて行われる。エレクトロスプレー質量分析測定（ポジティブおよび／またはネガティブモードで取得される）は、ＨＰ１１００ＨＰＬＣと連動するＭａｓｓ  Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ四重極質量分析計で行われる。ＬＣ−ＭＳ条件（低ｐＨ）：カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ（登録商標）ＧＥＭＩＮＩ（登録商標）ＮＸ  Ｃ−１８  ２．１×５０ｍｍ  ３．０μｍ、勾配：５〜１００％Ｂで３分間、次に１００％Ｂで０．７５分間、カラム温度：５０℃＋／−１０℃、流速：１．２ｍＬ／分、溶媒Ａ：０．１％ＨＣＯＯＨ含有脱イオン水、溶媒Ｂ：０．１％ギ酸含有ＡＣＮ、波長２１４ｎｍ。代替ＬＣ−ＭＳ条件（高ｐＨ）：カラム：ＸＴＥＲＲＡ（登録商標）ＭＳ  Ｃ１８カラム２．１×５０ｍｍ、３．５μｍ、勾配：５％の溶媒Ａで０．２５分間、勾配：５％〜１００％の溶媒Ｂで３分間、および１００％の溶媒Ｂで０．５分間または１０％〜１００％の溶媒Ｂで３分間、および１００％の溶媒Ｂで０．７５分間、カラム温度：５０℃＋／−１０℃、流速：１．２ｍＬ／分、溶媒Ａ：１０ｍＭのＮＨ４ＨＣＯ３  ｐＨ９、溶媒Ｂ：ＡＣＮ、波長：２１４ｎｍ。
【００４５】
分取逆相クロマトグラフィーは、Ｍａｓｓ  Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ質量分析計およびＬＥＡＰ（登録商標）自動回収装置／自動分取装置を備えたＡＧＩＬＥＮＴ（登録商標）１２００ＬＣ−ＥＳ／ＭＳで行われる。高ｐＨ法は、７５×３０ｍｍのＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ（登録商標）ＧＥＭＩＮＩ（登録商標）−ＮＸ、１０×２０ｍｍのガードを備えた５μｍ粒径カラムで実行される。流速８５ｍＬ／分。溶離液は、アセトニトリル中１０ｍＭの重炭酸アンモニウム（ｐＨ１０）である。
【００４６】
ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＶＩＩＩ  ＨＤ４００ＭＨｚ  ＮＭＲ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒで実施し、残留溶媒［ＣＤＣｌ３、７．２６ｐｐｍ、（ＣＤ３）２ＳＯ、２．５０ｐｐｍ］を参照標準として使用して、ｐｐｍで報告されるＣＤＣｌ３溶液または（ＣＤ３）２ＳＯ溶液として得る。ピーク多重度を報告する場合、次の略語を使用することができる。ｓ（一重線）、ｄ（二重線）、ｔ（三重線）、ｑ（四重線）、ｍ（多重線）、ｂｒ−ｓ（ブロード一重線）、ｄｄ（二重線の二重線）、ｄｔ（三重線の二重線）。結合定数（Ｊ）は、報告される場合、ヘルツ（Ｈｚ）で報告される。
【００４７】
調製法１
イソプロピル（３Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）ブタノエート
【化８】
0006794583.tif 000009
スキーム１、ステップＡ：Ｎ２雰囲気下、１，４−ジオキサン（７５０ｍＬ）中の（４−ブロモフェニル）ボロン酸（１１０ｇ、５４７．７３ｍｍｏｌ）の脱酸素溶液に、ビス（ノルボルナジエン）ロジウム（Ｉ）テトラフルオロボレート（２ｇ、５．１３ｍｍｏｌ）、続いて（Ｒ）−（＋）−２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル（４．５ｇ、７．２ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温で１時間熟成した後、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）、ＴＥＡ（７０ｍＬ、５０２ｍｍｏｌ）、およびイソプロピル（Ｅ）−ブタ−２−エノエート（６５ｇ、５０７．１４ｍｍｏｌ）を添加する。得られた赤色溶液を４０℃で１８時間加熱する。反応混合物を減圧下で半分の体積に濃縮し、５００ｍＬのＭＴＢＥで希釈する。有機溶液を水５００ｍＬで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮乾固させる。粗生成物を、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（勾配１：０〜９：１）で溶出する、シリカのフラッシュクロマトグラフィーにより精製する。純粋なクロマトグラフィー画分を合わせ、減圧下で濃縮して、表題化合物を得る（１４４ｇ、９４．６％収率、９４．５％ｅｅ）。主エナンチオマーｔＲ＝２．２０分、副エナンチオマーｔＲ＝２．６９分（キラルＳＦＣ  Ｌｕｘ  Ａｍｙｌｏｓｅ−２、５％のＭｅＯＨ／ＣＯ２、５ｍＬ／分、２２５ｎｍ）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．０５（ｄ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、３Ｈ）、１．１０（ｄ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、３Ｈ）、１．１９（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、３Ｈ）、２．４８−２．５９（ｍ、２Ｈ）、３．０８−３．１９（ｍ、１Ｈ）、４．７４−４．８４（ｍ、１Ｈ）、７．２０−７．２４（ｍ、２Ｈ）、７．４４−７．４８（ｍ、２Ｈ）。
【００４８】
調製法２
（３Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）ブタン酸
【化９】
0006794583.tif 000010
スキーム１、ステップＢ：室温で撹拌しながら、ＭｅＯＨ（８Ｌ）中のイソプロピル（３Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）ブタノエート（１０４２ｇ、３４７１．０ｍｍｏｌ）の溶液に５ＭのＮａＯＨ水溶液（２Ｌ）を加える。反応物をＮ２雰囲気下で４０分間５０℃に加熱する。３０℃に冷却した後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を２Ｌの水で希釈する。得られた水性混合物をＤＣＭ（約２Ｌ）で１回抽出する。水層を約１ｋｇの氷で処理し、濃ＨＣｌ（１Ｌ）を２０分かけてゆっくりと添加することでｐＨを約４に酸性化する。次に、濁った水層をＤＣＭ（約４Ｌ）で抽出する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、透明な褐色油とし、固化してオフホワイトの固体にした。ヘプタン（約４Ｌ）を固体に加え、得られた混合物を２時間４５℃に加熱すると、固体が沈殿する。固体を濾過により回収し、ヘプタン（２００〜２５０ｍＬ）で洗浄する。次いで、濾液を減圧下で濃縮乾固させて、表題化合物をオフホワイトの固体として得る（７７１ｇ、９１．４％収率、９９％ｅｅ）。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：２４１．０（Ｍ−Ｈ）。主エナンチオマーｔＲ＝２．３５分、副エナンチオマーｔＲ＝２．８２分（キラルＳＦＣ  Ｌｕｘ  Ａｍｙｌｏｓｅ−２、５％のＭｅＯＨ／ＣＯ２、５ｍＬ／分、２２５ｎｍ）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．１９（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、３Ｈ）、２．４８−２．５２（ｍ、２Ｈ）、３．０７−３．１７（ｍ、１Ｈ）、７．２０−７．２５（ｍ、２Ｈ）、７．４４−７．４９（ｍ、２Ｈ）、１２．０８（ｓ、１Ｈ）。
［α］Ｄ２５＋２５．０°（ｃ＝１、ＭｅＯＨ）。
【００４９】
調製法３
メチル（３Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）ブタノエート
【化１０】
0006794583.tif 000011
スキーム１、ステップＣ：濃Ｈ２ＳＯ４（４５ｍＬ、８０２ｍｍｏｌ）を（３Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）ブタン酸（４５０ｇ、１８５１．１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４．５Ｌ）溶液に加える。混合物を６５℃で２時間加熱し、室温に冷却し、減圧下で濃縮して乾燥残渣にする。固体をＭＴＢＥ（２．５Ｌ）およびＨ２Ｏ（２．５Ｌ）で希釈し、得られた混合物をＭＴＢＥ（２×２．５Ｌ）で抽出した。合わせた抽出物をＨ２Ｏ（２．５Ｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、さらなる精製をせずに使用することができる淡黄色の油（４６９．８ｇ、＞９９％収率）として表題化合物を得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：２７４．０（Ｍ＋ＮＨ４＋）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１．２７（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、３Ｈ）、２．５０−２．６２（ｍ、２Ｈ）、３．２０−３．３０（ｍ、１Ｈ）、３．６１（ｓ、３Ｈ）、７．０７−７．１２（ｍ、２Ｈ）、７．３９−７．４３（ｍ、２Ｈ）。
【００５０】
調製法４
（３Ｓ、２Ｒ）−メチル３−（４−ブロモフェニル）−２−メチルブタノエート
および
（３Ｓ、２Ｓ）−メチル３−（４−ブロモフェニル）−２−メチルブタノエート
【化１１】
0006794583.tif 000012
スキーム１、ステップＤ：ヘキサン（１２５０ｍＬ）中のｎ−ＢｕＬｉの２．５Ｍ溶液を、無水ＴＨＦ（２．３Ｌ）中のＤＩＰＥＡ（４４４ｍＬ、３１５０ｍｍｏｌ）の溶液に−４０℃で３０分かけて滴加する。３０分後、無水ＴＨＦ（３．３Ｌ）中のメチル（３Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）ブタノエート（４６８．９０ｇ、１７５０．７ｍｍｏｌ）の溶液を４０分かけて添加し、反応混合物を−４０°Ｃで４０分間熟成させる。ＣＨ３Ｉ（１７６ｍＬ、２７９８ｍｍｏｌ）を３０分かけて加え、混合物を−４０℃で１５分間撹拌する。反応混合物を、−４０℃でＭｅＯＨ（２８３ｍＬ）、続いてＨ２Ｏ（２．５Ｌ）でゆっくりクエンチし、混合物を室温まで温める。反応混合物をＨ２Ｏ（２．５Ｌ）で希釈し、得られた層を分離する。水層をさらにＭＴＢＥ（７．５Ｌ）で抽出し、合わせた有機抽出物をＨ２Ｏ（３Ｌ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（２．５Ｌ）で順次洗浄する。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物を、さらなる精製をせずに使用できるジアステレオマーの混合物（７：３）として薄茶色の油（４８９ｇ、９３％収率）として得る。主ジアステレオマーｔＲ＝１．２９分、副ジアステレオマーｔＲ＝１．３２分（ＸＢＲＩＤＧＥ（登録商標）Ｃ１８カラム、３．５μ、２．１×５０ｍｍ、１．２ｍＬ／分、５０℃、ＡＣＮ中１０〜９５％の１０ｍＭのＮＨ４ＣＯ３（ｐＨ１０））。ＥＳ／ＭＳ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒのｍ／ｚ）：２８８．０、２９０．０（Ｍ＋ＮＨ４＋）。
【００５１】
調製法５
４−（ｔｅｒｔ−ブチル）１−メチル（Ｓ）−２−（（Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル）−２−メチルスクシナート
および
４−（ｔｅｒｔ−ブチル）１−メチル（Ｒ）−２−（（Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル）−２−メチルスクシナート
【化１２】
0006794583.tif 000013
スキーム１、ステップＥ：ヘキサン（１１５０ｍＬ、２９００ｍｍｏｌ）中のｎ−ＢｕＬｉの２．５Ｍ溶液を、無水ＴＨＦ（３Ｌ）中のＤＩＰＥＡ（４１０Ｌ、２９１０ｍｍｏｌ）の溶液に−４０°Ｃで２０分かけて添加する。得られた混合物を−４０℃で３０分間撹拌し、無水ＴＨＦ（３Ｌ）中のジアステレオマー混合溶液、メチル（２Ｒ／Ｓ、３Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）−２−メチル−ブタノエート（４８８．００ｇ、１６１９．８ｍｍｏｌ）を１時間かけて添加する。反応混合物を−４０℃で４５分間熟成し、無水ＴＨＦ（２５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモアセテート（３９１ｍＬ、２５９６ｍｍｏｌ）の溶液を３０分かけて添加する。得られた混合物を−４０℃でさらに３０分間撹拌する。ＭｅＯＨ（２５０ｍＬ）を加えた後、Ｈ２Ｏ（２．５Ｌ）を加え、得られた混合物を室温まで温める。混合物をＨ２Ｏ（２．５Ｌ）で希釈し、得られた層を分離する。水層をＭＴＢＥ（５Ｌ）で抽出し、有機抽出物をＨ２Ｏ（５Ｌ）、続いて飽和ＮａＣｌ水溶液（２．５Ｌ）で順次洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物を、さらなる精製をせずに使用できるジアステレオマーの混合物として濃茶色の油（７８６ｇ、８７％収率）として得る。主ジアステレオマーｔＲ＝１．５１分、副ジアステレオマーのｔＲ＝１．５３分（ＸＢＲＩＤＧＥ（登録商標）Ｃ１８カラム、３．５μ、２．１×５０ｍｍ、１．２ｍＬ／分、５０℃、ＡＣＮ中１０〜９５％の１０ｍＭのＮＨ４ＣＯ３（ｐＨ１０））。ＥＳ／ＭＳ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒのｍ／ｚ）：３２８．８、３３０．８（Ｍ−ｔＢｕ＋Ｈ）。
【００５２】
調製法６
（３Ｓ、４Ｒ）−４−（４−ブロモフェニル）−３−（メトキシカルボニル）−３−メチルペンタン酸
および
（３Ｒ、４Ｒ）−４−（４−ブロモフェニル）−３−（メトキシカルボニル）−３−メチルペンタン酸
【化１３】
0006794583.tif 000014
スキーム１、ステップＦ：ＤＣＭ（６Ｌ）中のジアステレオマー混合溶液の４−（ｔｅｒｔ−ブチル）１−メチル（Ｒ／Ｓ）−２−（（Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル）−２−メチルスクシナート（７８５ｇ、１４０６ｍｍｏｌ）をＴＦＡ（１．０６Ｌ）で処理し、室温で１８時間撹拌する。反応混合物をＨ２Ｏ（２×５Ｌ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（５Ｌ）で順次洗浄する。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物を、さらなる精製をせずに使用できるジアステレオマーの混合物（８：２）として暗褐色のガム（６０４ｇ、９１％収率）として得る。ＥＳ／ＭＳ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒのｍ／ｚ）：３２９．０、３３１．０（Ｍ＋Ｈ）。
【００５３】
調製法７
メチル（２Ｓ）−４−アミノ−２−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−２−メチル−４−オキソ−ブタノエート
および
メチル（２Ｒ）−４−アミノ−２−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−２−メチル−４−オキソ−ブタノエート
【化１４】
0006794583.tif 000015
スキーム１、ステップＧ：０℃の無水ＤＭＦ（４Ｌ）中の（３Ｒ／Ｓ、４Ｒ）−４−（４−ブロモフェニル）−３−メトキシカルボニル−３−メチルペンタン酸（６０３ｇ、１２８２ｍｍｏｌ）とＴＥＡ（５５０ｍＬ、３８７０ｍｍｏｌ）とのジアステレオマー混合物に、ＨＡＴＵ（５９７ｇ、１５３８．６９ｍｍｏｌ）を１５分かけて添加する。反応混合物を室温で２時間熟成する。７ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ（１．８３Ｌ）の溶液を１０°Ｃで３０分かけて添加し、得られた混合物を室温に温め、１時間撹拌する。反応混合物を１０℃に冷却し、ＤＣＭ（５Ｌ）、続いてＨ２Ｏ（５Ｌ）でゆっくり希釈する。得られた層を分離し、水層をさらにＤＣＭ（２．５Ｌ）で抽出する。合わせた抽出物をＨ２Ｏ（５Ｌ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（５Ｌ）で順次洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物をさらなる精製をせずに使用できるジアステレオマーの混合物（８：２）として、暗色のガム（５２０ｇ、８７％収率）として得る。主ジアステレオマーｔＲ＝０．９７分、副ジアステレオマーのｔＲ＝０．９９分（ＸＢＲＩＤＧＥ（登録商標）Ｃ１８カラム、３．５ｍ、２．１×５０ｍｍ、１．２ｍＬ／分、５０℃、ＡＣＮ中１０〜９５％の１０ｍＭのＮＨ４ＣＯ３（ｐＨ１０））。ＥＳ／ＭＳ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒのｍ／ｚ）：３２８．０／３３０．０（Ｍ＋Ｈ／Ｍ＋Ｈ＋２）。
【００５４】
調製法８
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオン
および
（３Ｒ）−３−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオン
【化１５】
0006794583.tif 000016
スキーム１、ステップＨ：ＴＨＦ（４．２Ｌ）およびＨ２Ｏ（４．２Ｌ）に溶解したジアステレオマー混合物、メチル（２Ｒ／Ｓ）−４−アミノ−２−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−２−メチル−４−オキソ−ブタノエート（５１９ｇ、１１０７ｍｍｏｌ）に、Ｎａ２ＣＯ３（２９３ｇ、２７６４．４６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を６０℃で２時間加熱する。反応物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ（２．５Ｌ）で抽出する。有機層をＨ２Ｏ（３Ｌ）で洗浄する。得られた水性抽出物をＥｔＯＡｃ（５Ｌ）で抽出し、合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、ＳＦＣにより分離される２つのジアステレオマーの粗混合物を得る［カラム：ＡＳ−Ｈ、１５０×５０ｍｍ、１０％ＥｔＯＨ（０．２％ＤＥＭＡ）、３４０ｇ／分、ＢＰＲ１５０ｂａｒ、注入量：４ｍｌ、２２０ｎｍ］。（３Ｒ）−３−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオン：第１の溶出化合物（４３．８ｇ、１１％）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１．３３（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）、１．４０（ｓ、３Ｈ）、２．３４（ｄ、Ｊ＝１８．４Ｈｚ、１Ｈ）、２．８０（、Ｊ＝１８．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．２３（ｑ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．０７（ｄ、２Ｈ）、７．４０（ｄ、２Ｈ）、７．５４（ｂｒ−ｓ、１Ｈ）。ＥＳ／ＭＳ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒのｍ／ｚ）：３１３．０、３１５．０（Ｍ＋Ｈ）。（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオン：第２の溶出化合物（２４１．８ｇ、５５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１．２３（ｓ、３Ｈ）、１．３０（ｄ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、３Ｈ）、２．２１（ｄ、Ｊ＝１８．４Ｈｚ、１Ｈ）、２．９６（ｄ、Ｊ＝１８．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．１４（ｑ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．０４−７．０９（ｍ、２Ｈ）、７．４２−７．４８（ｍ、２Ｈ）、８．０９（ｂｒ−ｓ、１Ｈ）。ＥＳ／ＭＳ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒのｍ／ｚ）：３１３．０、３１５．０（Ｍ＋Ｈ）。
【００５５】
調製法９
２−シクロプロピル−６−メチル−ピリジン−４−オール
【化１６】
0006794583.tif 000017
１，２−ジメトキシエタン（１５０ｍＬ）中のＮａＨ（油中６０％、１１．６ｇ、２８９ｍｍｏｌ）の懸濁液を油浴で１１０°Ｃに加熱する。アセチルアセトン（６．０ｍＬ、５７．８ｍｍｏｌ）、メチルシクロプロパンカルボキシレート（９．０ｍＬ、８６．８ｍｍｏｌ）、および１，２−ジメトキシエタン（７５ｍＬ）の溶液を４０分かけて滴加する。さらに４時間加熱した後、懸濁液を室温まで冷却し、減圧下でＤＭＥを除去する。得られたスラリーをＥｔ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈し、氷／水浴で約５℃に冷却し、氷水（２００ｍＬ）で注意深くクエンチする。層を分離し、有機層を水（１００ｍｌ）および０．２５ＭのＮａＯＨ水溶液（１００ｍＬ）で洗浄する。合わせた水層を氷／水浴で冷却し、濃ＨＣｌ（４０ｍＬ）で慎重に処理する。酸性の水性混合物をＥｔ２Ｏ（４×２００ｍＬ）で抽出し、有機抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、淡琥珀色油を得る。得られた残渣を２８％ＮＨ４ＯＨ（１８０ｍＬ、４．６ｍｏｌ）で処理し、得られた混合物を３時間加熱還流し、続いて減圧下で濃縮した。粗生成物を、（２ＮのＮＨ３／ＭｅＯＨ）／ＤＣＭ（勾配１：９９〜１：９）で溶出する、シリカのフラッシュクロマトグラフィーにより精製する。純粋なクロマトグラフィー画分を合わせ、減圧下で濃縮して、表題化合物を得る（８．０ｇ、９０％収率）。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：１５０．０（Ｍ＋Ｈ＋）。
【００５６】
調製法１０
４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３−メチル−２，５−ジオキソ−ピロリジン−３−イル］エチル］ベンズアルデヒド
【化１７】
0006794583.tif 000018
スキーム１、ステップＩ：１００ｍｌのＰａｒｒオートクレーブに（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオン（２．４７ｇ、８．３４ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（７５ｍｇ、０．３３４ｍｍｏｌ）、ブチル−ジ−１−アダマンチル−ホスフィン（ＣａｔａＣＸｉｕｍＡ（登録商標））（３６０ｍｇ、０．９５４ｍｍｏｌ）、無水トルエン（７０ｍｌ）、およびＴＭＥＤＡ（１．３ｍｌ、８．６ｍｍｏｌ）を装填する。オートクレーブを密閉する。反応混合物を合成ガス（Ｈ２／ＣＯ（１：１））（７５ｐｓｉ）の雰囲気下に置き、９５℃に加熱し、その状態で１６時間撹拌する。混合物を冷却し、懸濁液を珪藻土のパッドで濾過する。濾過ケークをＥｔＯＡｃで洗浄し、回収した濾液を減圧下で濃縮して、琥珀色の油を得る。粗生成物を、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（勾配９：１〜２：３）で溶出する、シリカのフラッシュクロマトグラフィーにより精製する。純粋なクロマトグラフィー画分を合わせ、減圧下で濃縮して、表題化合物を得る（１．２７ｇ、６２％収率）。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：２６３．０（Ｍ＋ＮＨ４＋）。
【００５７】
調製法１１
４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３−メチル−２，５−ジオキソ−１−トリチル−ピロリジン−３−イル］エチル］ベンズアルデヒド
【化１８】
0006794583.tif 000019
スキーム１、ステップＪ：炭酸セシウム（２．２４ｇ、６．８７ｍｍｏｌ）および塩化トリフェニルメチル（１．５６ｇ、５．５０ｍｍｏｌ）を４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３−メチル−２，５−ジオキソ−ピロリジン−３−イル］エチル］ベンズアルデヒド（１．１２ｇ、４．５８ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（２５ｍｌ）の溶液に室温で撹拌しながら添加する。４．５時間撹拌した後、混合物を水（１００ｍｌ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２×７５ｍｌ）で抽出する。合わせた抽出物を水（５０ｍｌ）および飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、黄色泡沫を得る。粗生成物を、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（勾配４９：１〜７：３）で溶出する、シリカのフラッシュクロマトグラフィーにより精製する。純粋なクロマトグラフィー画分を合わせ、減圧下で濃縮して、表題化合物を得る（２．２８ｇ、１００％収率）。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：５１０．２（Ｍ＋Ｎａ＋）。
【００５８】
調製法１２
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］−３−メチル−１−トリチル−ピロリジン−２，５−ジオン
【化１９】
0006794583.tif 000020
スキーム１、ステップＫ：水素化ホウ素ナトリウム（１４７ｍｇ、３．８１ｍｍｏｌ）を単回で、氷／水浴で冷却したＥｔＯＨ（５０ｍｌ）中の４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３−メチル−２，５−ジオキソ−１−トリチル−ピロリジン−３−イル］エチル］ベンズアルデヒド（１．２４ｇ、２．５４ｍｍｏｌ）懸濁液に添加する。４０分後、反応物を水（１０ｍｌ）でクエンチし、減圧下で濃縮してＥｔＯＨを除去する。得られた濃縮物を水（５０ｍｌ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２ｘ５０ｍｌ）で抽出する。合わせた抽出物を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して白色泡沫を得る。粗生成物を、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（勾配１９：１〜１：１９）で溶出する、シリカのフラッシュクロマトグラフィーにより精製する。純粋なクロマトグラフィー画分を合わせ、減圧下で濃縮して、表題化合物を得る（１．１９ｇ、９５％収率）。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：５０７．２（Ｍ＋ＮＨ４＋）。
【００５９】
調製法１２の代替手順
オーバーヘッド撹拌機を備えた３口丸底フラスコ内の、無水ＴＨＦ（１．６Ｌ）に溶解した４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３−メチル−２，５−ジオキソ−１−トリチル−ピロリジン−３−イル］エチル］ベンズアルデヒド（１６０．７ｇ、３２９．６ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（１０ｇ、２６４．３ｍｍｏｌ）を２ｇずつ加える。反応混合物を室温で３時間撹拌し、ＥｔＡＯｃ（２Ｌ）および水（１．５Ｌ）で希釈し、得られた層を分離する。有機抽出物を水（１Ｌ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（５００ｍＬ）で順次洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。得られた残渣をＥｔＯＡｃ（１Ｌ）およびＭＴＢＥ（１Ｌ）に溶解し、水（５００ｍＬ）および１ＮのＨＣｌ水溶液（２５０ｍＬ）を加え、二相混合物を約１５分間撹拌する。有機層を分離し、飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、得られた残渣を真空オーブンで４０〜５０℃で一晩乾燥させて、表題化合物（１６４．５ｇ、９６％収率）を褐色固体として得る。
【００６０】
調製法１３
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−１−トリチル−ピロリジン−２，５−ジオン
【化２０】
0006794583.tif 000021
スキーム１、ステップＬ：氷／水浴で約５°Ｃに冷却したＤＣＭ（１５ｍＬ）中の（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］−３−メチル−１−トリチル−ピロリジン−２，５−ジオン（６３６ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）の溶液を、ＴＥＡ（２７４μＬ、１．９５ｍｍｏｌ）およびメタンスルホニルクロリド（１２２μＬ、１．５６ｍｍｏｌ）で処理する。冷浴で２時間撹拌した後、混合物をＤＣＭ（２５ｍＬ）および水（２５ｍＬ）で希釈する。層を分離し、水層をＤＣＭ（２５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液および飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製［４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３］−メチル−２，５−ジオキソ−１−トリチル−ピロリジン−３−イル］エチル］フェニル］メチルメタンスルホネートを油として得る。
【００６１】
スキーム１、ステップＭ：別のフラスコで、水素化ナトリウム（油中６０％、７８ｍｇ、１．９５ミリモル）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中の２−シクロプロピル−６−メチル−ピリジン−４−オール（２９１ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）溶液に加える。室温で４０分間撹拌した後、ＤＭＦ（５ｍｌ）中の粗メシレートの溶液を水素化ナトリウム混合物に加え、室温で１６時間撹拌する。反応混合物を水（５０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機層を水および飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、油を得る。粗生成物を、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（勾配１９：１〜１：３）で溶出する、シリカのフラッシュクロマトグラフィーにより精製する。純粋なクロマトグラフィー画分を合わせ、減圧下で濃縮して、表題化合物を得る（５９７ｍｇ、７４％収率）。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：６２１．３（Ｍ＋Ｈ＋）。
【００６２】
調製法１３の代替手順
氷／水浴で約５℃に冷却したＤＣＭ（１．２Ｌ）中の（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］−３−メチル−１−トリチル−ピロリジン−２，５−ジオン（１２１．３ｇ、２４７．８ｍｍｏｌ）の溶液をＴＥＡ（５２ｍＬ、３７３ｍｍｏｌ）で処理し、メタンスルホニルクロリド（２３ｍＬ、２９７ｍｍｏｌ）を約１０分かけて滴加する。反応混合物を約５℃で約１時間撹拌し、水（１．２Ｌ）を加える。有機層を分離し、水（５００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、ヘキサン（５００ｍＬ）と共沸し、減圧下で濃縮して、得られた残渣を高真空に供して、［４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３−メチル−２，５−ジオキソ−１−トリチル−ピロリジン−３−イル］エチル］フェニル］メチルメタンスルホネート（１４３．６ｇ、定量的収率、ヘキサン含有生成物）を黄色固体として得る。
【００６３】
２−シクロプロピル−６−メチル−ピリジン−４−オール（５６ｇ、３７５．４ｍｍｏｌ）をＡＣＮ（１．３Ｌ）に溶解し、ＴＨＦ中の２ＭのＮａＨＭＤＳ溶液を２０分かけて滴加する。完全に添加した後、反応混合物を５５℃に加熱し、［４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３−メチル−２，５−ジオキソ−１−トリチル−ピロリジン−３］−イル］エチル］フェニル］メチルメタンスルホネート（１３３．８ｇ、２３５．７ｍｍｏｌ）をＡＣＮ（６７０ｍＬ）に溶解した溶液を５５℃で４５分かけて滴加する。反応混合物を５５℃で１時間加熱し、室温に冷却し、ＭＴＢＥ（２Ｌ）と水（２Ｌ）の混合物に注ぎ、有機層を分離し、水（５００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をＤＣＭ（３００ｍＬ）に溶解し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、珪藻土の床で濾過した。濾過ケークを追加のＤＣＭで洗浄し、濾液を減圧下で還元する。得られた残渣を、ヘキサン／アセトン（勾配９：１〜７：３）で溶出する、シリカ上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製する。純粋なクロマトグラフィー画分を合わせ、減圧下で濃縮して、表題化合物をオフホワイトの固体として得る（６２．７ｇ、４３％収率）。
【００６４】
調製法１４
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−３−メチル−１−トリチル−ピロリジン−２，５−ジオン
【化２１】
0006794583.tif 000022
スキーム２、ステップＡ：（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオン（２０１ｇ、６７８．６ｍｍｏｌ）を４Ｌの３口フラスコ内のＤＭＦ（１５００ｍＬ）に室温の窒素下で機械的に撹拌しながら溶解する。Ｃｓ２ＣＯ３（３３０ｇ、１０１２．８ｍｍｏｌ）を約５分かけて加え、混合物を室温に温め、さらに３時間撹拌する。内部温度を２０℃未満に維持しながら、反応混合物を水（１５００ｍＬ）で希釈する。得られた沈殿物を真空濾過によって回収する。濾過ケークを水（２×５００ｍＬ）で洗浄し、窒素気流下で乾燥させる。濾過ケークを機械的に撹拌しながら１２Ｌの３口に移す。ＭｅＯＨ（４Ｌ）を加え、混合物を約５分間加熱還流する。メタノール溶液を約０℃に冷却し、得られた沈殿物を真空濾過により回収し、固体を真空下で約５０℃で乾燥させて、白色固体として表題化合物（３５０．９ｇ、９６％収率）を得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ、７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）：５３８．１／５４０．１（Ｍ＋Ｈ＋）。
【００６５】
調製法１５
４−［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ）−３−メチル−２，５−ジオキソ−１−トリチル−ピロリジン−３−イル］エチル］ベンズアルデヒド
【化２２】
0006794583.tif 000023
スキーム２、ステップＢ：（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（４−ブロモフェニル）エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオン（１８５．５ｇ、０．３５ｍｏｌ）を３等分に分割して、それぞれをＰａｒｒオートクレーブ容器内に配置し、それぞれがパラジウム（ＩＩ）アセテート（０．７７ｇ、３．４ｍｍｏｌ）、ブチル−ジ−１−アダマンチル−ホスフィン（ＣａｔａＣＸｉｕｍＡ（登録商標））（５．０ｇ、０．０１４ｍｏｌ）、無水トルエン（５００ｍＬ）、およびＴＭＥＤＡ（１７．５ｍｌ、０．１２ｍｏｌ）を含有する。各容器を排気し、ＣＯ／Ｈ２の雰囲気で約７５ｐｓｉまで満たす。容器を９５℃で１６時間加熱し、室温まで冷却する。各反応物を珪藻土の床で濾過し、濾液を合わせて減圧下で濃縮する。得られた残渣をトルエン（約１Ｌ）に溶解し、２Ｌの３口フラスコに移し、活性炭（２００ｇ（２００ｇの））を加え、混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を珪藻土の床で濾過し、濾過ケークをＭＴＢＥ（１Ｌ）で洗浄し、濾液を減圧下で濃縮する。得られた残渣をＥｔＯＨ（１．３Ｌ）でスラリー化し、７５℃に加熱し、水（６４０ｍＬ）を約２０分かけて滴加する。混合物を室温に冷却し、固体を濾過により回収し、水（５００ｍＬ）ですすぎ、窒素圧下で乾燥させて、黄色固体として表題化合物（１６０．７ｇ、収率８７％）を得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：４８８．１（Ｍ＋Ｈ＋）。
【００６６】
実施例１
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオン
【化２３】
0006794583.tif 000024
スキーム１、ステップＮ：ＤＣＭ（５ｍｌ）中の（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−１−トリチル−ピロリジン−２，５−ジオン（５９７ｍｇ、０．９６１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（３ｍｌ、３８．６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１７時間撹拌する。減圧下で濃縮した後、ＤＣＭ（２０ｍｌ）と水（２０ｍｌ）を濃縮物に加え、１ＮのＮａＯＨ水溶液でｐＨ６に調整する。ＤＣＭ（２×５０ｍｌ）で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、油を得た。粗生成物を、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（勾配１：０〜９：１）で溶出する、シリカのフラッシュクロマトグラフィーにより精製する。純粋なクロマトグラフィー画分を合わせ、減圧下で濃縮して、表題化合物を得る（３３２ｍｇ、９１％収率）。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：３７９．０（Ｍ＋Ｈ＋）。［α］Ｄ２０＝−４２．１４２°（Ｃ＝０．２、ＭｅＯＨ）
【００６７】
実施例１の代替手順
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−１−トリチル−ピロリジン−２，５−ジオン（６１．７ｇ、９９．４ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２３０ｍＬ）に溶解し、約５°Ｃに冷却する。ＴＦＡ（３１０ｍＬ）を約１０分かけてゆっくり加え、反応混合物を室温に温め、一晩撹拌する。反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をＭＴＢＥ（６２０ｍＬ）と水（６２０ｍＬ）との間で分配する。混合物を約５℃に冷却し、５ＮのＮａＯＨ水溶液を加え（ｐＨ約１４）、層を分離する。水性抽出物を濃ＨＣｌで酸性化（ｐＨ約５）し、ＥｔＯＡｃ（１．２Ｌ）で抽出する。層を分離し、有機抽出物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２×５００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、約２時間高真空に供して、オフホワイトの固体として表題化合物（３１．４ｇ、８３．５％収率）を得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：３７９．０（Ｍ＋Ｈ＋）。
【００６８】
実施例１Ａ
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンヒドロブロミドモノハイドレート
【化２４】
0006794583.tif 000025
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオン（４０１ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）を６０°ＣのＥｔＯＡｃ（８ｍＬ）でスラリー化する。ＥｔＯＡｃ（２ｍＬ）に溶解した４８％臭化水素酸の溶液を加え、混合物を６０℃で１時間撹拌する。得られた白色固体を濾過により回収し、ＥｔＯＡｃですすぎ、風乾して、白色結晶固体として表題化合物（３８５ｍｇ、収率７９％）を得る。
【００６９】
実施例１Ｂ
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオンヒドロクロリドモノハイドレート
【化２５】
0006794583.tif 000026
（３Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−［４−［（２−シクロプロピル−６−メチル−４−ピリジル）オキシメチル］フェニル］エチル］−３−メチル−ピロリジン−２，５−ジオン（２５０ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）を、６０°Ｃで撹拌しながら、ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ（４：１）の混合物に溶解する。ＥｔＯＡｃ（０．７ｍＬ）中の１ＭのＨＣｌ溶液を添加し、得られた混合物を６０℃で１時間撹拌し、室温まで冷却し、淡黄色沈殿物を濾過により回収し、ＥｔＯＡｃですすぎ、風乾させて、表題化合物（１５１ｍｇ、５５％収率）を淡黄色結晶固体として得る。
【００７０】
粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）
結晶固体のＸＲＰＤパターンは、３５ｋＶおよび５０ｍＡで作動する、ＣｕＫａ源（λ＝１．５４０６０Å）およびＶａｎｔｅｃ検出器を備えたＢｒｕｋｅｒ  Ｄ４  ＥｎｄｅａｖｏｒＸ線粉末回折計にて得られる。サンプルは、２θにおける０．００９°のステップサイズおよび０．５秒／ステップの走査速度で、０．６ｍｍの発散スリット、５．２８ｍｍの固定散乱防止スリット、および９．５ｍｍ検出スリットを用いて、２θにおける４および４０°で走査される。乾燥粉末を石英サンプルホルダーに充填し、ガラススライドを使用して滑らかな表面を得る。結晶形の回折パターンは、周囲温度および相対湿度で収集される。結晶学の分野において、任意の所与の結晶形に関して、結晶形態および晶癖などの要因から生じる好ましい配向に起因して、回折ピークの相対強度が変化し得ることは周知である。好ましい配向の効果が存在する場合、ピーク強度は変化するが、多形体の特徴的なピーク位置は変化しない。例えば、Ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ  ＃２３，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ＃１８，ｐａｇｅｓ  １８４３−１８４４，１９９５を参照されたい。さらに、所与の任意の結晶形について、角ピーク位置がわずかに変化し得ることも、結晶学の分野において周知である。例えば、ピーク位置は、サンプルが分析される温度もしくは湿度の変動、サンプルの変位、または内部標準の有無に起因して変動し得る。本発明の場合、２θの±０．２のピーク位置の変動は、示された結晶形の明確な同定を妨げることなくこれらの潜在的な変動を考慮する。結晶形の確認は、特徴的なピーク（°２θの単位で）、典型的にはより顕著なピークの任意の固有の組み合わせに基づいて行われ得る。周囲温度および相対湿度にて収集された結晶形の回折パターンは、°２θの８．８５および２６．７７で、ＮＩＳＴ６７５標準ピークに基づき調整する。
【００７１】
実施例１Ａの化合物のサンプルは、ＣｕＫａ放射線を用いるＸＲＤパターンによって、以下の表１に記載の回析ピーク（２θ値）を有するものとして特徴付けられる。具体的には、パターンは、回折角について±０．２度の許容差を伴って、１３．９°、２２．１°、８．７°、１９．５°、および１８．８°からなる群から選択される１つ以上のピークと組み合わせた、２６．１°におけるピークを含む。
【表１】
0006794583.tif 000027
【００７２】
実施例１Ｂの化合物のサンプルは、ＣｕＫａ放射線を用いるＸＲＤパターンによって、以下の表２に記載の回析ピーク（２θ値）を有するものとして特徴付けられる。具体的には、パターンは、回折角について±０．２度の許容差を伴って、１３．８°、２２．２°、１９．７°、２１．３°、１４．１°、および２５．４°からなる群より選択される１つ以上のピークと組み合わせた、２６．３°におけるピークを含む。
【表２】
0006794583.tif 000028
【００７３】
ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストによるｃＡＭＰ産生の阻害
ｈＣＧＲＰ（ヒトカルシトニン遺伝子関連ペプチド）受容体は、Ｇαｓタンパク質と機能的に結合する。ｈＣＧＲＰの刺激は、細胞内ｃＡＭＰの合成の増加をもたらし、受容体アンタゴニストの添加により阻止することができる。したがって、受容体活性は、細胞内に存在するｃＡＭＰ量の反映であり、標準的なｉｎ  ｖｉｔｒｏ技術を使用して検出することができる。
【００７４】
細胞培養：内因ｈＣＧＲＰ受容体を発現する培養ＳＫ−Ｎ−ＭＣ神経芽細胞腫細胞（ＡＴＣＣ）を、１０％熱不活化ウシ胎児血清（ＦＢＳ；ＧＩＢＣＯ（登録商標））、非必須アミノ酸（ＧＩＢＣＯ（登録商標））、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、２ｍＭのＬ−グルタミン、１００Ｕ／ｍＬのペニシリン、および１０μｇ／ｍＬのストレプトマイシンを補充したイーグル最小必須培地（ＨＹＣＬＯＮＥ（商標））中で約７０％コンフルエントで増殖させた。新鮮な培地を提供した後、細胞を３７℃で一晩インキュベートする。アッセイの日に、細胞をＡＣＣＵＴＡＳＥ（登録商標）（ＭＰ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ）を用いて分離し、アッセイ緩衝液［１：２で混合したＣａＣｌ２およびＭｇＣｌ２、３．３ｍＭの４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸、３．３ｍＭの４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸、０．０３％のウシ血清アルブミン、ならびに０．５ｍＭの１−メチル−３−イソブチルキサンチン各１００ミリグラム／ｍｌを含むハンクス平衡塩溶液／ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ｃＡＭＰの阻害剤として）］中に再懸濁し、３〜５Ｋ／ウェルを、３８４ウェルのポリ−Ｄ−リジンでコーティングした白色プレート（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）に播種する。
【００７５】
ｃＡＭＰ産生の阻害：用量反応試験では、化合物をジメチルスルホキシドで１：３に、次いでアッセイ緩衝液で１：１０に順次希釈する。ｈＣＧＲＰ受容体の受容体特異的アゴニストとしてのヒトＣＧＲＰ（０．８ｎＭ；Ｂａｃｈｅｍ）を希釈化合物と混合し、ＥＣ８０濃度で誘発刺激物質として細胞に添加する。
【００７６】
データ分析：細胞内ｃＡＭＰ量は、ベンダーごとの指示に従ってＨＴＲＦテクノロジー（Ｃｉｓｂｉｏ）を使用して定量化される。簡潔に、溶解緩衝液中のｃＡＭＰ−ｄ２抱合体および抗ｃＡＭＰ−クリプテート抱合体を、処理された細胞とともに室温で９０分間インキュベートする。ＨＴＲＦシグナルをＥＮＶＩＳＩＯＮ（登録商標）プレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ）を用いて直ちに検出し、６２０〜６６５ｎＭでの蛍光の比率を計算する。生データは、各実験で生成されたｃＡＭＰ標準曲線を使用して、ｃＡＭＰ量（ピコモル／ウェル）に変換される。相対ＥＣ５０値は、４パラメータロジスティック曲線フィッティングプログラム（ＡＣＴＩＶＩＴＹＢＡＳＥ（登録商標）ｖ５．３．１．２２またはＧＥＮＥＤＡＴＡ  ＳＣＲＥＥＮＥＲ（登録商標）ｖ１２．０．４）を用いて、濃度応答曲線の上下範囲から計算され、Ｋｂ値は、次式を使用してアゴニスト補正ＩＣ５０値として推定される。
【数１】
0006794583.tif 000029
推定Ｋｂ値は、平均値±ＳＥＭとして報告され、実行回数（ｎ）から平均される。
【００７７】
本質的に上記の手順に従って、実施例１の化合物は、０．５７±０．２５ｎＭ（ｎ＝１１）のヒトＣＧＲＰで測定したＫｂを有する。これは、実施例１の化合物がｉｎ  ｖｉｔｒｏでヒトＣＧＲＰ受容体のアンタゴニストであることを実証する。
【００７８】
ＡＢＣＢ１、ヒトＰ糖タンパク質（Ｐｇｐ）による流出のｉｎ  ｖｉｔｒｏ測定
細胞培養：ヒト野生型ＡＢＣＢ１（Ｐｇｐ）を安定して発現するＭＤＣＫＩＩ細胞は、Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）から入手する。ＭＤＣＫ細胞は、前述のように維持される（Ｄｅｓａｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍ１０：１２４９−１２６１，２０１３）。
【００７９】
ＭＤＣＫ細胞を通過する双方向輸送：アッセイは本質的に前述のように実施される（Ｄｅｓａｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍ１０：１２４９−１２６１，２０１３）。輸送は、１０ｍＭのＤＭＳＯ保存溶液から希釈した基質濃度５μＭ（最終ＤＭＳＯ濃度０．０５％）および単一の６０分時間間隔を使用して、非阻害および阻害細胞単層を通過して両方向で測定される。２．５μＭの実施例１の化合物を使用して、Ｐｇｐを選択的に阻害する。見かけの透過係数（Ｐａｐｐ）は、回収された総質量に対する６０分あたりの輸送質量の勾配として推定される。底部対頂部（ＢＡ）／頂部対底部（ＡＢ）Ｐａｐｐ比は、純流出率（ＮＥＲ）に対する各細胞株における阻害剤の有無で計算される。Ｐｇｐによる流出に関する実施例１の化合物のＮＥＲは、１．７であると決定される。
【００８０】
ラットにおける非結合脳−血漿分配係数（Ｋｐ，ｕｕ，ｂｒａｉｎ）のｉｎ  ｖｉｖｏ測定
非結合脳−血漿分配係数（Ｋｐ，ｕｕ，ｂｒａｉｎ）は、血液脳関門（ＢＢＢ）を通過する化合物の能力を評価するための重要な薬物動態パラメータの１つである（Ｈａｍｍａｒｌｕｎｄ−Ｕｄｅｎａｅｓ、Ｍ．；Ｆｒｉｄｅｎ、Ｍ．；Ｓｙｖａｎｅｎ、Ｓ．；Ｇｕｐｔａ、Ａ．Ｏｎ    ｔｈｅＲａｔｅ  ａｎｄ  Ｅｘｔｅｎｔ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｂｒａｉｎ．Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．２００８、２５（８）、１７３７−１７５０）。Ｋｐ，ｕｕ，ｂｒａｉｎは通常、前臨床種で次の方法論を使用して測定され、０．３を超えるＫｐ，ｕｕ，ｂｒａｉｎ値は、血漿中の非結合化合物の３０％超がＢＢＢを通過することを示す。
【００８１】
試験集団：動物研究は、Ｃｏｖａｎｃｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅによって承認されたプロトコルの下で実施される。体重２５０〜３５０ｇのオスのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットは、Ｈａｒｌａｎ  Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ  Ｉｎｃ．（Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）から入手する。動物は、試験前および試験中に自由に食物と水を摂取できる。
【００８２】
用量投与：動物はそれぞれ、精製水中の１０ｍｌ／ｋｇのヒドロキシエチルセルロース（１％ｗ／ｖ）／ポリソルベート８０（０．２５％ｖ／ｖ）／Ａｎｔｉｆｏａｍ１５１０−ＵＳ（０．０５％ｖ／ｖ）（プローブ超音波処理済み）を経口投与され、１０ｍｇ／ｋｇの実施例１のＣＧＲＰ受容体アンタゴニスト化合物を投与される。
【００８３】
薬物動態サンプリング：時点ごとに３匹の動物を使用する。血液（心臓穿刺による）および脳サンプルは、投与後０．５および２時間で採取される。血液サンプルをＫ３−ＥＤＴＡ抗凝固剤で処理し、１６００ｇで１０分間遠心分離して血漿を採取する。脳サンプルは、灌流せずに、計量および均質化する。すべてのサンプルをＬＣ−ＭＳ／ＭＳによる分析まで−７０℃で保存し、各時点で血漿および脳中の実施例１の化合物の濃度を決定する。
【００８４】
血漿および脳タンパク質結合の測定：ラット血漿および脳ホモジネートタンパク質のｉｎ  ｖｉｔｒｏ結合は、他所（Ｚａｍｅｋ−Ｇｌｉｓｚｃｚｙｎｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ，１０１：１９３２−１９４０，２０１２）に記載のように、平衡透析を使用して決定される。結果は、血漿（ｆｕ，ｐｌａｓｍａ）および脳（ｆｕ，ｂｒａｉｎ）に結合していない画分として報告され、表１に記載のＫｐ，ｕｕ，ｂｒａｉｎの計算に使用される。実施例１の化合物のラットのｆｕ，ｐｌａｓｍａおよびｆｕ，ｂｒａｉｎは、それぞれ０．０７１および０．０４３であると決定された。
【００８５】
分析および結果
Ｋｐ，ｕｕ，ｂｒａｉｎは、以下の式から各時点で計算され、上記で実行されたｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏの測定値の組み合わせから個々の成分が得られる。
【数２】
0006794583.tif 000030
式中、Ｃｔｏｔａｌ，ｂｒａｉｎ、Ｃｕ，ｂｒａｉｎ、Ｃｔｏｔａｌ，ｐｌａｓｍａ、およびＣｕ，ｐｌａｓｍａは、総脳内濃度および総血漿濃度ならびに非結合脳内濃度および非結合血漿濃度であり、ｆｕ，ｂｒａｉｎおよびｆｕ，ｐｌａｓｍａはそれぞれ、非結合脳内画分および非結合血漿画分である。
【００８６】
実施例１の化合物の血漿濃度および脳内濃度を表３に提供する。結果は、平均±標準偏差として表される。
【表３】
0006794583.tif 000031
【００８７】
オスのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットにおける１０ｍｐｋ経口投与の１時間後および３時間後の実施例１の非結合脳内濃度は、それぞれ４１±１５ｎＭおよび２２±５ｎＭであると決定される。さらに、オスのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットにおける１０ｍｐｋ経口投与の１時間後および３時間後の実施例１のＫｐ，ｕｕ，ｂｒａｉｎは、それぞれ０．８９±０．１７および０．９３±０．４３であると決定される。
全体として考慮すると、これらのデータは、実施例１の化合物が中枢浸透性化合物であることを示している。