(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
腎臓機能を高めることを必要とする被験者の腎臓機能を高めるための組成物であって、抗ＧＤＦ１５抗体を含み、それにより前記被験者の腎臓機能を高めるものであり、前記抗体は、
（ａ）（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号４のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域、ならびに（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む抗体；
（ｂ）（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域、ならびに（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む抗体；
（ｃ）（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域、ならびに（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む抗体；
（ｄ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｅ）配列番号３９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｆ）配列番号４０のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｇ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｈ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｉ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｊ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｋ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｌ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｍ）配列番号４７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号３０のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；ならびに
（ｎ）配列番号４８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体
から選択される、組成物。
【請求項２】
腎臓障害又は腎機能不全を有しかつ高い血中尿素窒素（ＢＵＮ）レベルを有する被験者のＢＵＮレベルを低減するための組成物であって、抗ＧＤＦ１５抗体を含み、それにより前記被験者のＢＵＮレベルを低減するものであり、前記抗体は、
（ａ）（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号４のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域、ならびに（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む抗体；
（ｂ）（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域、ならびに（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む抗体；
（ｃ）（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域、ならびに（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む抗体；
（ｄ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｅ）配列番号３９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｆ）配列番号４０のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｇ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｈ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｉ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｊ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｋ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｌ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｍ）配列番号４７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号３０のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；ならびに
（ｎ）配列番号４８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体
から選択される、組成物。
【請求項３】
治療を必要とする、腎臓障害又は腎機能不全を有する被験者を治療するための組成物であって、抗ＧＤＦ１５抗体を含み、それにより前記腎臓障害又は腎機能不全の症状を改善するものであり、前記抗体は、
（ａ）（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号４のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域、ならびに（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む抗体；
（ｂ）（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域、ならびに（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む抗体；
（ｃ）（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域、ならびに（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む抗体；
（ｄ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｅ）配列番号３９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｆ）配列番号４０のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｇ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｈ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｉ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｊ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｋ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｌ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｍ）配列番号４７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号３０のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；ならびに
（ｎ）配列番号４８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体
から選択される、組成物。
【請求項４】
腎臓縮小の軽減又は逆転を必要とする被験者の腎臓縮小を軽減又は逆転するための組成物であって、ここで、前記被験者は、慢性腎臓病の１つ以上の症状を有し、前記組成物は、抗ＧＤＦ１５抗体を含み、それにより前記被験者の腎臓縮小を軽減又は逆転するものであり、前記抗体は、
（ａ）（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号４のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域、ならびに（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む抗体；
（ｂ）（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域、ならびに（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む抗体；
（ｃ）（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域、ならびに（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む抗体；
（ｄ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｅ）配列番号３９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｆ）配列番号４０のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｇ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｈ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｉ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｊ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｋ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｌ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｍ）配列番号４７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号３０のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；ならびに
（ｎ）配列番号４８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体
から選択される、組成物。
【請求項５】
前記被験者が、高いＧＤＦ１５活性を有する、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
慢性腎臓病（ＣＫＤ）の治療又は予防を必要とする被験者のＣＫＤを治療又は予防するための組成物であって、抗ＧＤＦ１５抗体を含み、それにより前記被験者のＣＫＤを治療又は予防するものであり、前記抗体は、
（ａ）（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号４のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域、ならびに（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む抗体；
（ｂ）（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域、ならびに（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む抗体；
（ｃ）（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域、ならびに（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む抗体；
（ｄ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｅ）配列番号３９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｆ）配列番号４０のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｇ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｈ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｉ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｊ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｋ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｌ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；
（ｍ）配列番号４７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号３０のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体；ならびに
（ｎ）配列番号４８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む抗体
から選択される、組成物。
【請求項７】
前記被験者が、高い血中レベルのＧＤＦ１５を有する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
前記被験者が、９０ｍｌクレアチニン／分／１．７３ｍ２体表面積未満の糸球体濾過量（ＧＦＲ）を呈示する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
前記被験者が、アルブミン尿を呈示する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記被験者が、１日当たり３０ｍｇ、尿１リットル当たり３０ｍｇ、及び／又は３０μｇ／ｍｇ尿中クレアチニンを超えるアルブミンの尿中排出量を呈示する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記被験者が、高尿酸血症を呈示する、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記被験者が、少なくとも６．３ｍｇ／ｄＬの血清尿酸レベルを呈示する、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記被験者が、鉄欠乏症を呈示する、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記被験者が、２５％未満のトランスフェリン飽和及び低フェリチンレベルを呈示する、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記被験者が、慢性腎臓病を有すると診断されている、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１６】
前記抗ＧＤＦ１５抗体が、ヒト化抗体又はヒト抗体である、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１７】
前記抗ＧＤＦ１５抗体が、配列番号４８のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１８】
前記抗ＧＤＦ１５抗体が、（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域、ならびに（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２０１４年６月２０日に提出された米国仮特許出願第６２／０１５，２４２号明細書に対する優先権を請求する。尚、この文献は、参照によりその全体を本明細書に組み込むものとする。
【０００２】
本発明は、腎臓障害若しくは腎機能不全、特に、慢性腎臓病、急性、慢性若しくは末期腎不全、糸球体腎炎、貧血、糖尿病性腎障害及びインスリン抵抗性を有する被験者を治療するためのＧＤＦ１５調節剤を用いる方法、及びそれを含有する組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
腎臓疾患は、一般的で、しかも費用のかかる疾病であり、ヒトの罹病及び死亡の主な原因である。臨床的視点から、腎臓疾患は、急性腎障害（ＡＫＩ）と慢性腎臓病（ＣＫＤ）に分類することができる。ＡＫＩは、急性腎不全又は急性腎不全とも呼ばれ、腎機能の急速な喪失であり、最後には正常な腎機能が完全、部分的に回復するか、又は全く回復しない場合もある。ＡＫＩは、突然（４８時間以内）の腎機能低下であり、これは、少なくとも０．３ｍｇ／ｄｌの血清クレアチニンの絶対的増加、少なくとも５０％の血清クレアチニン増加率（％）、又は６時間超にわたる１時間当たり０．５ｍｌ／ｋｇの尿量減少を含み得る。Ｍｅｔｈａ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，ＣＲＩＴＩＣＡＬ  ＣＡＲＥ，１１：Ｒ３１を参照されたい。疫学的に、ＡＫＩは、内因性又は外因性塊のいずれかによる集尿系の閉塞のために、腎後性であると考えられる。あるいは、ＡＫＩは、糸球体、尿細管、血管、若しくは間質などの腎単位の構造の障害、又はそれらに影響を与える傷害によって、腎臓系内で発生することもある。
【０００４】
ＣＫＤは、長期にわたる進行性の機能喪失である。腎機能が回復しないＡＫＩ患者がＣＫＤに進行し得る。さらに、ＣＫＤ患者は、ＡＫＩ様事象に罹患しやすい。
【０００５】
増殖分化因子１５（ＧＤＦ１５）は、タンパク質のトランスフォーミング増殖因子−β（ＴＧＦ−β）スーパーファミリーのメンバーであり、細胞増殖及び分化の調節因子の役割を果たす多機能タンパク質の大きな群を含む。このファミリーの重要なメンバーとしては、ＴＧＦ−β１〜５、アクチビン、骨、軟骨及びその他の組織タイプの調節因子の役割を果たす骨形成タンパク質（ＢＭＰ）、並びに細胞調節に関与する他のタンパク質、例えば、グリア細胞株由来の神経栄養因子（ＧＤＮＦ）、及びミオスタチン（ＧＤＦ−８としても知られる）が挙げられる。ＧＤＦ１５は、初め、前立腺癌及び胎盤などの組織から単離されたが、別名：マクロファージ阻害サイトカイン１（若しくはＭＩＣ１）、ＮＳＡＩＤ活性化遺伝子１タンパク質（若しくはＮＡＧ１）、ＮＳＡＩＤ調節遺伝子１タンパク質（若しくはＮＲＧ−１）、胎盤ＴＧＦ−β（若しくはＰＴＧＦＢ）、胎盤骨形成タンパク質（若しくはＰＬＡＢ）、及び前立腺分化因子（若しくはＰＤＦ）によって知られている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
これまで達成された進歩にもかかわらず、急性腎障害及び慢性腎臓病などの腎臓病及び障害を検出、予防、及び／又は治療する新規の方法並びに組成物が依然として求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、腎臓又は腎組織の疾患、機能不全、肥大若しくは縮小を含む病状及び障害を検出、予防、及び治療する上で有用な方法及び組成物を提供する。こうした病状として、例えば、慢性腎不全若しくは末期腎不全、尿毒症症候群、貧血及び／又は腎臓からのエリスロポエチン産生減少、糖尿病、インスリン抵抗性並びに腎機能低下若しくは腎臓サイズの縮小が挙げられる。
【０００８】
本発明者らは、中でも、慢性腎臓病などの腎臓病及び障害に罹患している被験者であって、現在利用可能な方法で有効又は最適に治療されない被験者が、ＧＤＦ１５活性を選択的に低減又は阻害する組成物によって有効に治療され得ることを見出した。本発明は、例えば、ＧＤＦ１５が内在性結合パートナー（また、同族受容体若しくは結合パートナーとも呼ばれる）に結合する能力を低減することにより、例えば、ＧＤＦ１５若しくは内在性結合パートナーに競合的に結合することにより、又はＧＤＦ１５の活性を中和することにより、ＧＤＦ１５の活性を低減若しくは阻害する組成物を含む。いくつかの実施形態では、こうした組成物は、ＧＤＦ１５若しくは内在性結合パートナーに結合する抗体、並びにそのような抗体を含むペプチド又は融合分子を含み得る。いくつかの実施形態では、組成物は、例えば、ＧＤＦ１５又は内在性結合パートナーに競合的に結合して、例えば、ＧＤＦ１５がその内在性結合パートナーに結合する能力を低減若しくは阻害するか、あるいはそうでなければ、ＧＤＦ１５の活性を中和することにより、ＧＤＦ１５の活性を低減若しくは阻害するペプチド又は小分子を含んでもよい。
【０００９】
一態様では、本発明は、治療を必要とする被験者の腎臓機能を高める方法を提供し、この方法は、被験者の腎臓機能を高めるために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含む。腎臓機能は、以下に論じる生化学的及び生理学的パラメータのいずれかを含み得る。
【００１０】
別の態様では、本発明は、腎臓障害又は腎機能不全を有する被験者を治療する方法を提供し、この方法は、腎臓障害又は腎機能不全の症状を改善するために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含む。症状は、以下に論じる生化学的及び生理学的パラメータのいずれかを含み得る。
【００１１】
別の態様では、本発明は、治療を必要とする被験者の腎臓縮小を軽減又は逆転する方法を提供し、ここで、被験者は、慢性腎臓病の１つ又は複数の症状を有し、この方法は、被験者の腎臓縮小を軽減又は逆転するために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含む。症状は、以下に論じる生化学的及び生理学的パラメータのいずれかを含み得る。
【００１２】
別の態様では、本発明は、治療を必要とする被験者の慢性腎臓病（ＣＫＤ）を治療又は予防する方法を提供し、この方法は、被験者のＣＫＤを治療又は予防するために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で被験者に投与するステップを含む。
【００１３】
いくつかの実施形態では、被験者は、９０ｍｌクレアチニン／分／１．７３ｍ２体表面積未満の糸球体濾過量（ＧＦＲ）を呈示する。いくつかの実施形態では、被験者は、アルブミン尿（例えば、１日当たり３０ｍｇ、尿１リットル当たり３０ｍｇ、又は３０μｇ／ｍｇ尿中クレアチニンを超えるアルブミンの尿中排出量）を呈示する。いくつかの実施形態では、被験者は、高尿酸血症を呈示する、少なくとも６．３ｍｇ／ｄＬの血清尿酸レベルを呈示する、鉄欠乏症を呈示するか、又は２５％未満のトランスフェリン飽和及び低フェリチンレベルを呈示する。いくつかの実施形態では、被験者は、慢性腎臓病を有すると診断されている。
【００１４】
いくつかの実施形態では、本発明のＧＤＦ１５調節剤は、被験者のＧＤＦ１５活性を低減又は阻害することができる。一部の実施形態では、ＧＤＦ１５調節剤は、ＧＤＦ１５の活性、発現又はその同族受容体との結合を阻害する。一部の実施形態では、ＧＤＦ１５調節剤は、抗ＧＤＦ１５抗体であってよく、これは、ヒト化又はヒト抗体のいずれであってもよい。
【００１５】
他の実施形態では、本発明は、下記の特徴の１つ又は複数を呈示する被験者を治療する方法を含み、これらの特徴は、慢性腎臓病などの腎機能不全又は疾患を示し得る。こうした腎臓関連特徴として、以下のものが挙げられる：
（１）被験者が、低い、又は正常に満たない糸球体濾過量（ＧＦＲ）を呈示する；
（２）被験者が、アルブミン尿（微量アルブミン尿又は顕性アルブミン尿）を呈示する；
（３）被験者が、高い、又は正常レベルを超える血清クレアチニン（ＳＣｒ）を呈示する；
（４）被験者が、低い、又は正常レベルに満たない尿量を呈示する；
（５）被験者が、高い、又は正常を超える好中球ゼラチナーゼ結合性リポカリン（ＮＧＡＬ）の尿中排出量を呈示する；
（６）被験者が、３．５ｇ／日を超える量で、アルブミン、２マクログロブリン又はＩｇＧなどのタンパク尿（尿中タンパク質）の徴候を呈示する；
（７）被験者が、高血糖、高尿酸血症又は脂質異常症を呈示する；
（８）被験者が、貧血又はエリスロポエチン産生低下を呈示する；
（９）被験者が、鉄欠乏症を呈示する；
（１０）被験者が、濾過過剰を呈示する；
（１１）被験者が、腎不全を経験したことがあるか、又は腎不全を経験するリスクがあると診断されている；
（１２）被験者が、腎臓移植若しくは透析などの腎臓介入治療を受けたことがあるか、又はその必要があると診断されている；
（１３）被験者が、腎臓肥大又は腎臓縮小を呈示する；
（１４）被験者が、腎機能不全を示すレベルの１つ又は複数のバイオマーカを呈示する。
【００１６】
いくつかの実施形態では、腎機能不全を示す有用なバイオマーカは、以下に挙げるものの１つ又は複数を含む：尿又は血漿中のシスタチンＣ；尿中Ｃ反応性タンパク質（ｕＣＲＰ）；尿中レチノール結合タンパク質（ｕＲＢＰ）；好中球ゼラチナーゼ結合リポカリン（ＮＧＡＬ）；ヘプシジン；クレアチニン；ヘモジュベリン；尿酸及び／又は尿素；βトレースタンパク質；腎障害分子１（ＫＩＭ−１）；尿中Ｎ−アセチル−β−（Ｄ）−グルコサミニダーゼ（ＮＡＧ）；尿中インターロイキン−１８（ｕＩＬ−１８）；肝臓脂肪酸結合タンパク質１（Ｌ−ＦＡＢＰ−１）；血中尿素窒素（ＢＵＮ）；ミクロ−ＲＮＡ２１（ｍｉＲＮＡ−２１）；及び電解質物質。
【００１７】
異常レベルの上記バイオマーカを有する被験者は、ＧＤＦ１５調節剤による治療の候補となり得る。一部の実施形態では、臨床医は、前述した特徴の１つ又は複数を、他の所見、例えば、腎臓疾患の家族歴、又は被験者が、腎臓移植若しくは透析などの腎臓介入治療を受けたことがあるか、又はそれを必要とすると診断されているかどうかなどと組み合わせて使用する。
【００１８】
さらに、前述の腎臓関連特徴及びバイオマーカは、本発明のＧＤＦ１５調節剤による治療に対する被験者の応答の経過をモニターするために、また、臨床的に適切と考えられる場合、投与計画を変更するために使用することもできる。いくつかの実施形態では、慢性腎不全（ＣＫＤ）などの腎臓障害を有する被験者は、以前既知の腎臓治療（透析など）を受けたことがあるが、前述した特徴の少なくとも１つを依然として呈示している。そのような症例において、本発明は、前述した腎臓関連特徴の少なくとも１つの発生及び／又は重症度を回避若しくは軽減するための方法及び組成物を提供し、さらに本発明は、ＧＤＦ１５阻害剤を被験者に投与することによって、それ以上の腎臓治療の必要を回避又は軽減し得る。
【００１９】
また別の態様では、本発明は、被験者における下記の特徴の少なくとも１つを改善する方法を含み、ここで、被験者は、慢性腎臓病を発症していると診断されているか、又はそれを発症するリスクがあると考えられる：
（１）低い、又は正常に満たない糸球体濾過量（ＧＦＲ）；
（２）高い、又は正常レベルを超える血清クレアチニン（ＳＣｒ）；
（３）低い、又は正常レベルに満たない尿量；
（４）高い、又は正常を超える好中球ゼラチナーゼ結合性リポカリン（ＮＧＡＬ）の尿中排出量；
（５）３．５ｇ／日を超える量の、アルブミン、２マクログロブリン又はＩｇＧなどのタンパク尿（尿中タンパク質）の徴候；
（６）高血糖、高尿酸血症又は脂質異常症；
（７）貧血又はエリスロポエチン産生低下；
（８）鉄欠乏症；
（９）濾過過剰；あるいは、
（１０）腎不全を経験したことがあるか、又は腎不全を経験するリスクがあると診断されている；
（１１）腎臓移植若しくは透析などの腎臓介入治療を受けたことがあるか、又はその必要があると診断されている；
（１２）腎臓肥大又は腎臓縮小；
（１３）腎機能不全を示すレベルの１つ又は複数のバイオマーカ。
【００２０】
いくつかの実施形態では、本発明のＧＤＦ１５調節剤は、被験者におけるＧＤＦ１５活性を低減又は阻害することができる。いくつかの実施形態では、ＧＤＦ１５調節剤は、ＧＤＦ１５の活性、発現又はその同族受容体との結合を阻害する。ＧＤＦ１５調節剤は、抗ＧＤＦ１５抗体であってよく、これは、ヒト化又はヒト抗体のいずれであってもよい。
【００２１】
前述の腎臓関連特徴はまた、本発明のＧＤＦ１５結合阻害剤での治療に対する被験者の経過を確認するために、また、臨床的に適切と考えられる場合、投与計画を変更するために、モニターすることができる。いくつかの実施形態では、慢性腎臓病（ＣＫＤ）などの腎臓障害を有する被験者は、以前既知の腎臓治療を受けたことがあるが、前述した特徴の少なくとも１つを依然として呈示している。そのような症例において、本発明は、前述した特徴の少なくとも１つの発生及び／又は重症度を回避若しくは軽減するための方法及び組成物を提供し、さらに本発明は、前述した腎臓介入治療の１つの必要を回避するか、軽減することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】４０μｇの組換えマウスＦｃ−ＧＤＦ１５タンパク質又はリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）の腹腔内投与のマウスに対する作用を示すグラフであり、体重は、ｍＦＣ−ＧＤＦ１５（■）で処置したマウスにおいて有意に減少したが、ＰＢＳ（●）では減少しなかった。
【図２】マウスに腹腔内注射した単一用量４０μｇのマウスＦｃ−ＧＤＦ１５組換えタンパク質の作用を示す棒グラフであり、生殖腺（図２Ａ）及び腓腹筋（図２Ｂ）いずれの重量も有意に減少した。各々の時点について、左側の棒はＰＢＳであり、右側の棒は、ｍＦｃ−ＧＤＦ１５である。
【図３】組換えマウスＦｃ−ＧＤＦ１５の注射後、マウスに対する作用を示す棒グラフである。各マーカ（例えば、ＡＬＴ）について、左側の棒は、ナイーブ、右側の棒は、ＧＤＦ１５である。ＧＤＦ１５で処置したマウスは、より低レベルの肝臓酵素アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）；アラニンホスファターゼ（ＡＬＫ）と共に、腎臓障害のマーカである血中尿素レベル（尿素窒素）の増加を呈示した。
【図４】２ｍｇ／ｋｇの抗ＧＤＦ１５抗体（０１Ｇ０６）の投与後に、ＨＴ−１０８０繊維肉腫異種移植片モデルを担持する免疫不全マウス（ＩＣＲ−ＳＣＩＤ）における体重減少が逆転することを示すグラフである。矢印は、抗体の腹腔内注射を示す。抗ＧＤＦ１５抗体の投与により、陰性対照（マウスＩｇＧ（●）及びベースライン（１日目）と比較して、臓器重量（肝臓、心臓、脾臓、腎臓）が増加すると共に、組織重量（生殖腺及び腓腹筋）が増加したことを示す棒グラフである。
【図５】ＨＴ−１０８０繊維肉腫異種移植片を担持するＩＣＲ  Ｓｃｉｄマウスに対する抗ＧＤＦ１５抗体（Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７）の全身投与の効果を示すグラフである。こうしたマウスは、有意な体重減少を呈示する。抗ＧＤＦ１５抗体（▲）の投与によって体重減少が逆転したが、ヒトＩｇＧ（■）では逆転しなかった。抗ＧＤＦ１５抗体の投与によって生殖腺重量が回復したが、ヒトＩｇＧでは回復しなかったことを示す棒グラフである。
【図６】ＧＤＦ１５に対する抗体の投与後、尿素窒素の血清レベルに対する効果を示すグラフである。ＨＴ−１０８０ヒト腫瘍異種移植片を担持するマウスは、腎臓障害のマーカである血清尿素窒素のレベル増加を示した。この増加は、抗ＧＤＦ１５抗体の投与によって逆転した。棒は、左から右に、偽（ＳＨＡＭ）、ベースライン（９３％）、ｈＩｇＧ  １０ｍｐｋ、及びＨｕ０１Ｇ０６−１２７  １０ｍｐｋである。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
本発明は、いくつかの腎臓関連又は肝臓病態のいずれかを有する被験者、例えば、慢性腎臓病、末期腎不全、糖尿病、インスリン抵抗性、腎臓肥大、腎臓縮小、多発性嚢胞腎、タンパク尿、高血糖、高尿酸血症、尿毒症症候群、痛風、腎臓結石、高血圧若しくは高血圧性腎症、脂質異常症、貧血及び／又はエリスロポエチン産生低下；鉄欠乏症若しくは濾過過剰（こうした病態は、腎障害に関連する）を有する被験者を治療する方法及び組成物を提供する。これらの方法及び組成物は、前述の病態に起因すると考えられる慢性腎臓病を有する被験者、又は慢性腎臓病、腎不全、尿毒症症候群、腎性異栄養症、その他の腎臓病若しくは障害、慢性腎臓障害、急性腎臓病、又は急性腎不全、例えば、閉塞性腎症を招く有害な臨床転帰の症状である、少なくとも１つの特徴を呈示する被験者を治療する上で有用であると考えられ、こうした特徴は、以下に挙げるものの１つ又は複数を含む：
（１）低い、又は正常に満たない糸球体濾過量（ＧＦＲ）；
（２）高い、又は正常レベルを超える血清クレアチニン（ＳＣｒ）；
（３）低い、又は正常レベルに満たない尿量；
（４）高い、又は正常を超える好中球ゼラチナーゼ結合性リポカリン（ＮＧＡＬ）の尿中排出量；
（５）３．５ｇ／日を超える量の、アルブミン、２マクログロブリン又はＩｇＧなどのタンパク尿（尿中タンパク質）の徴候；
（６）高血糖、高尿酸血症又は脂質異常症；
（７）貧血又は低いエリスロポエチン産生；
（８）鉄欠乏症；
（９）濾過過剰；あるいは、
（１０）腎不全を経験したことがあるか、又は腎不全を経験するリスクがあると診断されている；
（１１）腎臓移植若しくは透析などの腎臓介入治療を受けたことがあるか、又はその必要があると診断されている；
（１２）腎臓肥大又は腎臓縮小；
（１３）腎機能不全を示すレベルの１つ又は複数のバイオマーカ。
【００２４】
本発明の特定の実施形態では、被験者は、慢性腎臓病（ＣＫＤ）を呈示する。従って、ＣＫＤの症状を呈示するか、又はＣＫＤを有する、若しくはＣＫＤを有するリスクがあると診断されている、ＣＫＤ又は別の腎臓関連疾患若しくは障害を有する被験者は、任意選択で、既存の療法で治療しなくてもよい。こうした症例において、本発明の方法及び組成物による治療は、前述した特徴の１つ又は複数を改善する上で特に有益となり得る。特定の実施形態では、被験者は、被験者がＣＫＤを有すると考えられる、又はＣＫＤに罹患すると考えられるような特徴、被験者が、本発明の治療から利益を受けられるような特徴の１つ又は複数を呈示する。本願全体を通して、「ＣＫＤを有すると考えられる」又は「ＣＫＤに罹患すると考えられる」という用語は、本願の開示内容に従って、当業者が、本発明のＧＤＦ１５阻害剤の投与から被験者が利益を受けるであろうと予想し得ることを意味する。被験者はまた、資格を持つ臨床専門家が、被験者に関する情報を調べた後、被験者が、現時点でＣＫＤに罹患していると専門的な判断又は診断をした場合に、「ＣＫＤを有すると考えられる」か、又は「ＣＫＤに罹患していると考えられる」。「ＣＫＤを発症するリスクがあると考えられる」という用語は、本願の開示内容に従って、当業者が、本発明のＧＤＦ１５阻害剤の予防的又は治療的投与から利益を受けるであろうと予想し得ることを意味する。被験者はまた、資格を持つ臨床専門家が、被験者に関する情報を調べた後、被験者が、現時点で予防的又は治療的介入の根拠となるのに十分なＣＫＤを発症するリスクがあると専門的な判断又は診断をした場合に、「ＣＫＤを発症するリスクがあると考えられる」。
【００２５】
本明細書で使用されるとき、「治療する」、「治療すること」及び「治療」は、哺乳動物、例えば、ヒトの疾患の治療を意味する。これは、（ａ）疾患を阻害すること、すなわち、その発症を停止すること；並びに（ｂ）疾患を軽減する、すなわち、病態の退行を起こすことを包含する。
【００２６】
Ｉ．慢性腎臓病、腎不全又は腎機能不全の症状 
慢性腎臓病について被験者を分類、診断及びモニターする上で有用である主要な基準は、糸球体濾過量（ＧＦＲ）である。全米腎臓基金（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ）は、被験者が、１つ又は複数のＣＫＤリスク因子を有するＣＫＤの定義のための基準を確立した。一般に、ＧＦＲは、１．７３ｍ２体表面積当たり毎分クレアチニンｍｌのクリアランス又は濾過に関して測定される。しかし、ＣＫＤ予後の別のマーカであるシスタチンＣは、ＧＦＲを推定するための血清クレアチニンに代わり得る候補である。Ｉｎｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，Ｎ．Ｅ．Ｊ．ＭＥＤＩＣＩＮＥ，３６７：２０−２９を参照されたい。
【００２７】
９０未満のＧＦＲを呈示する被験者は、ＣＫＤを有すると考えられる。９０（ｍｌ／分／１．７３ｍ２体表面積）以上のＧＦＲを呈示する被験者は、ＣＫＤの他の指標を考慮に入れた後、ＣＫＤステージ１であるか、又はＣＫＤの高いリスクがあると考えられ得る。例えば、ＣＫＤリスク因子の指標として、正常レベルを超える血中クレアチニン又は尿素、尿中血液又はタンパク質、並びに多発性嚢胞腎の家族歴が挙げられる。ＧＦＲが６０〜８９ｍｌ／分／１．７３ｍ２体表面積の腎臓障害を呈示する被験者は、ＣＫＤステージ２であると考えられる。３０〜５９ｍｌ／分／１．７３ｍ２体表面積のＧＦＲを呈示する被験者は、ＣＫＤステージ３であると考えられ、この段階で、多くの臨床医は、腎臓介入治療の可能性を考慮する。介入治療として、厳しい食事療法があり、その場合、リン、カルシウム、炭水化物及びナトリウムの１日摂取量が推奨され得る。また、タンパク質、水溶性ビタミンＢ複合体、及びビタミンＣによる食事の補足も推奨され得る。１５〜２９ｍｌ／分／１．７３ｍ２体表面積のＧＦＲを呈示する被験者は、ＣＫＤステージ４であると考えられ、この段階で、多くの臨床医は、透析及び／又は腎代替療法の準備を考慮する。１５ｍｌ／分／１．７３ｍ２体表面積未満のＧＦＲを呈示する被験者は、ＣＫＤステージ５、すなわち腎不全であると考えられ、特に尿毒症が存在する場合、腎代替療法などの介入治療が緊急に必要とされ得る切迫した段階である。ＣＫＤステージ１〜５を呈示する被験者は、腎機能喪失を完全若しくは部分的に回復するために、又は腎機能のそれ以上の悪化を遅延させる、若しくは阻止するために、本発明の療法から利益を受けると考えられる。
【００２８】
被験者は、その尿中ＮＧＡＬレベルが５０μｇ／Ｌを超える場合、慢性腎臓病に罹患していると考えられ；血漿ＮＧＡＬレベルが１００μｇ／Ｌを超えると、さらに重症のＣＫＤに罹患していると考えられる。Ｌｉｐｐｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，ＣＬＩＮ  ＣＨＥＭ  ＬＡＢ  ＭＥＤ，５０（９）：１５８１−１５８４；Ｂｏｌｉｇｎａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，ＡＭＥＲＩＣＡＮ  Ｊ．ＯＦ  ＫＩＤＮＥＹ  ＤＩＳＥＡＳＥＳ，５２：５９５−６０５。
【００２９】
被験者は、微量アルブミン尿：１日当たり３０ｍｇ、尿１リットル当たり３０ｍｇ、又は３０μｇ／ｍｇ尿中クレアチニンを超えるアルブミンの尿中排出量を呈示する場合、慢性腎臓病に罹患していると考えられる。被験者は、顕性アルブミン尿を呈示する：そのアルブミンの尿中排出量が、１日当たり３００ｍｇ以上、尿１リットル当たり３００ｍｇ以上であるか、又は３００μｇ／ｍｇ尿中クレアチニン以上である場合、重症のＣＫＤに罹患していると考えられる。Ｌｅｖｅｙ及びＣｏｒｅｓｈ，２０１２，ＴＨＥ ＬＡＮＣＥＴ，３７９：１６５−１８０を参照されたい。
【００３０】
本発明の目的のために、被験者は、女性の場合、５３０ミクロモル／Ｌ（６ｍｇ／ｄＬ）超、また男性の場合には、６１９ミクロモル／Ｌ（７ｍｇ／ｄＬ）超の血中尿酸を呈示するか、又は腎臓結石を患っている場合に、慢性腎臓病に罹患していると考えられる。また、ｐｅａｋ  ＶＯ２、Ｊａｌａｌ ｅｔ  ａｌ．，２０１２，Ａｍ．Ｊ．ｏｆ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓｅａｓｅ，６２：１３４−１４６も参照されたい。
【００３１】
本発明の目的のために、被験者は、鉄欠乏症、特に、低フェリチン（透析患者では、＜２００ｎｇ／ｍＬ；非透析患者では、＜１００ｎｇ／ｍＬ）を伴う低トランスフェリン飽和（＜２５％）を呈示する場合、慢性腎臓病に罹患していると考えられる。Ｌａｒｓｏｎ及びＣｏｙｎｅ，２０１３，ＫＩＤＮＥＹ  ＲＥＳＥＡＲＣＨ  ＡＮＤ  ＣＬＩＮＩＣＡＬ  ＰＲＡＣＴＩＣＥ，３２：１１−１５を参照されたい。
【００３２】
本発明の目的のために、被験者は、基礎疾患に起因する、腎若しくは腎臓肥大、過形成、又は腎臓重量の増加を経験する場合、慢性腎臓病に罹患していると考えられる。腎臓肥大は、腎臓組織機能の喪失に対する代償性であり得る。例えば、肥大は、機能的単腎の患者に観察されることが多い。Ｋｒｉｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，Ｊ．ＵＲＯＬＯＧＹ，１８８ｓｕｐｐ：１６１３−１６１７。細胞肥大は、全タンパク質／細胞及び電子量によって評価することができる。Ｈｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４，ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＡＮＤ  ＣＥＬＬＵＬＡＲ  ＥＮＤＯＣＲＩＮＯＬＯＧＹ，３９０：４５−５３を参照されたい。
【００３３】
本発明の目的のために、被験者は、腎臓縮小、形成不全、又は腎臓重量の有意な減少を経験する場合、慢性腎臓病に罹患していると考えられる。腎臓縮小は、例えば、磁気共鳴イメージングによって評価することができる。Ｃｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｊ．ＵＲＯＬＯＧＹ，１７８：２５５０−２５５４を参照されたい。
【００３４】
本発明の具体的実施形態では、被験者は、慢性腎臓病の１つ又は複数の別の症状を呈示する。これは、慢性腎臓病、腎不全又は腎機能不全の下記指標の１つ又は複数を含み得る：血清クレアチニンレベル増加、血清ビリルビンレベル減少、尿中アルブミン濃度増加、尿中クレアチニンレベル増加、尿中アルブミン／クレアチニン比の増加（女性は２５ｍｇ／ｇ以上、男性は１７ｍｇ／ｇ以上のアルブミン／クレアチニン比、３０ｍｇ／ｇの値が重症ＣＫＤを示す）、尿中タンパク質／クレアチニン比の増加（２００ｍｇ／ｇのタンパク質／クレアチニン比は、高すぎると考えられ、ＣＫＤを示す）、高血圧（収縮期血圧１４０ｍｍＨｇ以上；拡張期血圧９０ｍｍＨｇ以上；又は現在降圧薬での治療中として定義される）、糖尿病（空腹時血糖値１２６ｍｇ／ｄＬ以上；又はインスリン若しくは経口血糖降下薬の使用として定義される）；尿若しくは血漿中のシスタチンＣの出現、尿中Ｃ反応性タンパク質（ｕＣＲＰ）、尿中レチノール結合タンパク質（ｕＲＢＰ）、ヘプシジン、クレアチニン、ヘモジュベリンの血清レベル増加；尿酸及び／又は尿素；βトレースタンパク質；腎臓障害分子−１（ＫＩＭ−１）；尿中Ｎ−アセチル−β−（Ｄ）−グルコサミナーゼ（ＮＡＧ）；尿中インターロイキン−１８（ｕＩＬ−１８）；肝臓脂肪酸結合タンパク質１（Ｌ−ＦＡＢＰ−１）；血液尿素窒素（ＢＵＮ）；ミクロＲＮＡ２１（ｍｉＲＮＡ−２１）；及び／又は電解質物質。
【００３５】
いくつかの実施形態では、腎機能不全を示す有用なバイオマーカは、以下に挙げるものの１つ又は複数を含む：尿又は血漿中のシスタチンＣ；尿中Ｃ反応性タンパク質（ｕＣＲＰ）；尿中レチノール結合タンパク質（ｕＲＢＰ）；好中球ゼラチナーゼ結合リポカリン（ＮＧＡＬ）；ヘプシジン；クレアチニン；ヘモジュベリン；尿酸及び／又は尿素；βトレースタンパク質；腎臓障害分子１（ＫＩＭ−１）；尿中Ｎ−アセチル−β−（Ｄ）−グルコサミナーゼ（ＮＡＧ）；尿中インターロイキン−１８（ｕＩＬ−１８）；肝臓脂肪酸結合タンパク質１（Ｌ−ＦＡＢＰ−１）；血液尿素窒素（ＢＵＮ）；ミクロＲＮＡ２１（ｍｉＲＮＡ−２１）；及び電解質物質。
【００３６】
さらに、リン酸塩、ジメチルアルギニン（非対称性、すなわちＡＤＭＡ、及び対称性、すなわちＳＤＭＡ）、尿酸、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、線維芽細胞増殖因子２３（ＦＧＦ２３）、β２ミクロアルブミン（Ｂ２Ｍ）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、タンパク質結合インドキシル硫酸（ＩＳ）並びにｐ−クレゾール及びそのコンジュゲート、ｐ−クレシル硫酸（ＰＣＳ）及びｐ−クレシルグルクロニド（ＰＣＧ）は、腎機能低下又は腎臓障害、例えば、「尿毒症症候群」を示し得る。Ｌｉａｂｅｕｆ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４，ＳＥＭＩＮ  ＮＥＰＨＲＯＬ，３４（２）：１６４−１７９，ｈｔｔｐ：／／ｄｘ．ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｓｅｍｎｅｐｈｒｏ．２０１４．０２．００８を参照されたい。
【００３７】
異常レベルの上記バイオマーカを有する被験者は、ＧＤＦ１５調節剤による治療の候補となり得る。一部の実施形態では、臨床医は、前述した特徴の１つ又は複数を、他の所見、例えば、腎臓疾患の家族歴、又は被験者が、腎臓移植若しくは透析などの腎臓介入治療を受けたことがあるか、又はそれを必要とすると診断されているかどうかなどと組み合わせて使用する。
【００３８】
前述の腎臓関連特徴及びバイオマーカはまた、本発明のＧＤＦ１５調節剤による治療に対する被験者の応答の経過をモニターするために、また、臨床的に適切と考えられる場合、投与計画を変更するために使用することもできる。いくつかの実施形態では、慢性腎臓病（ＣＫＤ）などの腎臓障害を有する被験者は、以前既知の腎臓治療（透析など）を受けたことがあるが、前述した特徴の少なくとも１つを依然として呈示している。そのような症例において、本発明は、前述した腎臓関連特徴の少なくとも１つの発生及び／又は重症度を回避若しくは軽減するための方法及び組成物を提供し、さらに本発明は、ＧＤＦ１５調節剤を被験者に投与することによって、それ以上の腎臓治療の必要を回避又は軽減することができる。
【００３９】
以上各々挙げた以外に、被験者は、腎臓障害又は機能不全のない被験者に存在するベースライン活性レベルに対して高レベルのＧＤＦ１５活性も呈示し得る。
【００４０】
高レベルのＧＤＦ１５活性は、被験者からのサンプル中のＧＤＦ１５のレベルを測定することによって決定することができる。「高レベル」のＧＤＦ１５とみなされる量は、目的とする特定の組織又は体液、並びに使用する特定のアッセイに応じて変動し得る。一般に、「高レベル」のＧＤＦ１５は、被験者、例えば、腎臓疾患又は機能不全、例えば、ＣＫＤのない被験者の対照分布と比較して決定することができ、例えば、７５パーセンタイル（すなわち、上位四分位点又は２５％）；９０パーセンタイル（すなわち、上位１０％）；又は９５パーセンタイル（すなわち、上位５％）の事前に指定したカットオフで決定してもよい。「高レベル」のＧＤＦ１５はまた、平均を超える事前に指定されたＧＤＦ１５レベル、例えば、平均を超える１つの標準偏差、又は腎臓疾患又は機能不全、例えば、ＣＫＤのない対照被験者の群の平均ＧＤＦ１５レベルを超える２つの標準偏差で決定してもよい。例えば、Ｂｒｏｗｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，ＴＨＥ  ＬＡＮＣＥＴ  ３５９：２１５９−２１６３；Ｋｅｍｐｆ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，ＮＡＴＵＲＥ  ＭＥＤＩＣＩＮＥ，１７：５８１−５８８を参照されたい。
【００４１】
好ましい身体サンプルは、体液、例えば、血漿のサンプルであるが、羊水、胎盤抽出物、全血、血清、バフィーコート、尿、脳脊髄液、精液、滑液、又は組織生検も好適であり得る。体液（例えば、血漿）中＞６００ｐｇ／ｍｌ、任意選択で＞８５０ｐｇ／ｍｌ、任意選択で＞１０００ｐｇ／ｍｌ、任意選択で＞１２００ｐｇ／ｍｌ、任意選択で＞１５００ｐｇ／ｍｌ、任意選択で＞１７００ｐｇ／ｍｌ、任意選択で＞１９００ｐｇ／ｍｌ、任意選択で＞２０００ｐｇ／ｍｌ、任意選択で＞２５００ｐｇ／ｍｌ、及び任意選択で＞３０００ｐｇ／ｍｌのＧＤＦ１５濃度が、高レベルのＧＤＦ１５を代表し得る。米国特許第７，９１９，０８４号明細書及びＫｅｍｐｆ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｊ．ＡＭ．ＣＯＬＬ．ＣＡＲＤＩＯＬ．５０：１０５４−１０６０を参照されたい。
【００４２】
身体サンプル中に存在するＧＤＦ１５の量は、例えば、抗ＧＤＦ１５抗体を用いた免疫アッセイ（例：体液を用いた）又は免疫組織化学（例：組織生検のサンプル切片を用いた）により容易に決定することができる。Ｔｓａｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：ｅ５５１７４を参照されたい。
【００４３】
ＩＩ．慢性腎臓病の共存症
慢性腎臓病は、共存症の発生により悪化することが多く、共存症は、程度が軽度から重度まで多様であり得る。ＧＤＦ１５の阻害によって、１種又は複数種のＣＫＤの一般的共存症の軽減も促進し得ることが、本発明の利点である。ＣＫＤの一般的共存症の中でも、悪液質、慢性又はうっ血性心不全、貧血、糖尿病及び高血圧が挙げられる。従って、本発明は、治療を必要とする被験者の腎機能を高める方法を包含し、この方法は、被験者の腎機能を高めるために、ＧＤＦ１５阻害剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含む。例えば、腎機能不全又はＣＫＤに罹患している被験者は、悪液質、慢性又はうっ血性心不全、貧血、糖尿病又は高血圧の共存症を呈示し得る。
【００４４】
ＩＩＩ．ＧＤＦ１５調節剤
本明細書で使用されるとき、「ＧＤＦ１５調節剤」は、ＧＤＦ１５活性を低減又は阻害する薬剤を意味すると理解され、これは、ＧＤＦ１５の発現、量、又は生物学的活性若しくは機能の低下の結果起こり得る。本発明の実施に有用なＧＤＦ１５調節剤又は調節物質は、抗ＧＤＦ１５抗体、抗ＧＤＦ１５応答抗体、ＧＤＦ１５がその同族受容体結合パートナーに結合するのを阻止する可溶性ＧＤＦ１５模倣物若しくは類似物を含み得る。別の例示的ＧＤＦ１５調節物質としては、ＧＤＦ１５若しくはＧＤＦ１５受容体の小分子阻害剤、内在性ＧＤＦ１５若しくはＧＤＦ１５受容体の発現を干渉する干渉核酸（例えば、干渉ＲＮＡ又はアンチセンス核酸（例えば、アンチセンスＤＮＡ若しくはＲＮＡ）が挙げられる。
【００４５】
好ましい実施形態では、ＧＤＦ１５調節物質は、抗ＧＤＦ１５抗体を含んでよく、これは、ヒト化又はヒト抗体である。本明細書で使用されるとき、別に記載のない限り、用語「抗体」は、インタクトな抗体（例えば、インタクトなモノクローナル抗体）又は抗体の抗原結合断片を意味し、最適化、改変若しくは化学的に結合された抗体のインタクトな抗体若しくは抗原結合断片（例：完全ヒト抗体、半合成抗体又は完全合成抗体を含むファージディスプレイ抗体）が含まれる。最適化された抗体の例は、親和性成熟抗体である。改変された抗体の例は、Ｆｃ最適化抗体、及び多重特異性抗体（例：二重特異性抗体）である。抗原結合断片の例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、単鎖抗体（例：ｓｃＦｖ）、ミニボディ及びダイアボディが挙げられる。毒素部分に結合した抗体は、化学的に結合した抗体の一例である。
【００４６】
いくつかの実施形態では、抗体は、以下：（ａ）構造ＣＤＲＨ１−ＣＤＲＨ２−ＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と（ｂ）免疫グロブリン軽鎖可変領域を含み、ここで、重鎖可変領域と軽鎖可変領域は一緒に、ＧＤＦ１５若しくはＧＤＦ１５受容体に結合するための単一結合部位を画定する。ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３配列は、免疫グロブリンフレームワーク（ＦＲ）配列の間に挿入されている。いくつかの他の実施形態では、抗体は、以下：（ａ）構造ＣＤＲＬ１−ＣＤＲＬ２−ＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域と（ｂ）免疫グロブリン重鎖可変領域を含み、ここで、ＩｇＧ軽鎖可変領域とＩｇＧ重鎖可変領域は一緒に、ＧＤＦ１５若しくはＧＤＦ１５受容体に結合するための単一結合部位を画定する。ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３配列は、免疫グロブリンフレームワークＦＲ配列の間に挿入されている。いくつかの他の実施形態では、抗体は、以下：（ａ）構造ＣＤＲＨ１−ＣＤＲＨ２−ＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と（ｂ）構造ＣＤＲＬ１−ＣＤＲＬ２−ＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含み、ここで、重鎖可変領域と軽鎖可変領域は一緒に、ＧＤＦ１５若しくはＧＤＦ１５受容体に結合するための単一結合部位を画定する。例示的抗ＧＤＦ１５抗体は、例えば、米国特許出願公開第２０１４−０１９３４２７−Ａ１号明細書に記載されており、その開示内容は、あらゆる目的のために、参照により本明細書に組み込まれる。
【００４７】
本発明の方法及び組成物に有用な例示的抗ＧＤＦ１５抗体は、例えば、以下の表１に記載するＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３領域配列の９つのセットのいずれか１つを含む重鎖可変領域を含む。
【００４８】
【表１】
0006768527.tif 000002
【００４９】
本発明の方法及び組成物に有用な例示的ＧＤＦ１５抗体は、例えば、以下の表２に記載するＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３領域配列の４つのセットのいずれか１つを含む軽鎖可変領域を含む。
【００５０】
【表２】
0006768527.tif 000003
【００５１】
本発明の実施に有用な例示的抗ＧＤＦ１５抗体は、米国特許出願公開第２０１４−０１９３４２７−Ａ１号明細書に記載されており、０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、１７Ｂ１１、並びにそのヒト又はヒト化形態を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される抗体（例えば、０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、若しくは１７Ｂ１１、又はそのヒト化形態）を用いて、ＣＫＤの症状を提示するか、又はＣＫＤを有する、若しくはＣＫＤを有するリスクがあると診断されているＣＫＤ又は別の腎臓関連疾患若しくは障害を治療する。一部の実施形態では、抗体は、ＣＫＤ又は別の腎臓関連疾患若しくは障害の症状又は特徴を少なくとも２％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％若しくは３５％逆転する。
【００５２】
好ましい実施形態では、本発明の実施に有用な例示的抗ＧＤＦ１５抗体は、米国特許出願公開第２０１４−０１９３４２７−Ａ１号明細書に０１Ｇ０６として示されている。０１Ｇ０６抗体のヒト化形態は、それぞれの重鎖及び軽鎖可変領域のアミノ酸配列と一緒に記載されている。例示的ヒト化抗ＧＤＦ１５抗体としては、以下のものが挙げられる：Ｈｕ０１Ｇ０６−１；Ｈｕ０１Ｇ０６−４６；Ｈｕ０１Ｇ０６−５２；Ｈｕ０１Ｇ０６−１００；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０１；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０２；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０３；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０４；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０５；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０６；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０７；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０８；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０９；Ｈｕ０１Ｇ０６−１１０；Ｈｕ０１Ｇ０６−１１１；Ｈｕ０１Ｇ０６−１１２；Ｈｕ０１Ｇ０６−１１３；Ｈｕ０１Ｇ０６−１１４；Ｈｕ０１Ｇ０６−１２２；Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７；Ｈｕ０１Ｇ０６−１３５；Ｈｕ０１Ｇ０６−１３８；Ｈｕ０１Ｇ０６−１４６；Ｈｕ０６Ｃ１１−１；Ｈｕ０６Ｃ１１−２７；Ｈｕ０６Ｃ１１−３０；Ｈｕ１４Ｆ１１−１；Ｈｕ１４Ｆ１１−２３；Ｈｕ１４Ｆ１１−２４；Ｈｕ１４Ｆ１１−３９；及びＨｕ１４Ｆ１１−４７。前述した抗体各々の重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列を以下の表３に記載する。
【００５３】
【表３】
0006768527.tif 000004
【００５４】
本明細書に記載する抗体は、当技術分野で公知の技術を用いて、設計、試験、及び製剤化し得ることは理解されよう。
【００５５】
配列番号２５
【化１】
0006768527.tif 000005
【００５６】
配列番号２６
【化２】
0006768527.tif 000006
【００５７】
配列番号２７
【化３】
0006768527.tif 000007
【００５８】
配列番号２９
【化４】
0006768527.tif 000008
【００５９】
配列番号２８
【化５】
0006768527.tif 000009
【００６０】
配列番号３２
【化６】
0006768527.tif 000010
【００６１】
配列番号３３
【化７】
0006768527.tif 000011
【００６２】
配列番号３５
【化８】
0006768527.tif 000012
【００６３】
配列番号３６
【化９】
0006768527.tif 000013
【００６４】
配列番号３７
【化１０】
0006768527.tif 000014
【００６５】
配列番号３０
【化１１】
0006768527.tif 000015
【００６６】
配列番号３８
【化１２】
0006768527.tif 000016
【００６７】
配列番号３９
【化１３】
0006768527.tif 000017
【００６８】
配列番号４０
【化１４】
0006768527.tif 000018
【００６９】
配列番号４１
【化１５】
0006768527.tif 000019
【００７０】
配列番号４３
【化１６】
0006768527.tif 000020
【００７１】
配列番号４２
【化１７】
0006768527.tif 000021
【００７２】
配列番号４４
【化１８】
0006768527.tif 000022
【００７３】
配列番号４５
【化１９】
0006768527.tif 000023
【００７４】
配列番号４６
【化２０】
0006768527.tif 000024
【００７５】
配列番号４７
【化２１】
0006768527.tif 000025
【００７６】
配列番号４８
【化２２】
0006768527.tif 000026
【００７７】
配列番号４９
【化２３】
0006768527.tif 000027
【００７８】
配列番号３８
【化２４】
0006768527.tif 000028
【００７９】
配列番号５１
【化２５】
0006768527.tif 000029
【００８０】
配列番号５２
【化２６】
0006768527.tif 000030
【００８１】
配列番号５４
【化２７】
0006768527.tif 000031
【００８２】
配列番号５５
【化２８】
0006768527.tif 000032
【００８３】
配列番号５６
【化２９】
0006768527.tif 000033
【００８４】
配列番号５７
【化３０】
0006768527.tif 000034
【００８５】
配列番号５０
【化３１】
0006768527.tif 000035
【００８６】
配列番号３１
【化３２】
0006768527.tif 000036
【００８７】
配列番号５３
【化３３】
0006768527.tif 000037
【００８８】
配列番号３４
【化３４】
0006768527.tif 000038
【００８９】
抗体は、ＧＤＦ１５活性を低減する中和抗体であってもよい。例えば、抗体は、抗体の非存在下、同じ条件下で同じアッセイにより測定したＧＤＦ１５活性と比較して、ｉｎ  ｖｉｖｏアッセイ（例えば、Ｊｏｈｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，ＮＡＴＵＲＥ  ＭＥＤＩＣＩＮＥ  １３：１３３３−１３４０を参照）において、ＧＤＦ１５活性を少なくとも１０％、好ましくは２０％、３０％又は４０％、より好ましくは少なくとも約５０％、６０％、８０％、又は９０％低減し得る。抗体は、ＧＤＦ１５とその内在性受容体の結合を選択的及び／若しくは有意に低減又は阻害し得る。本明細書で使用されるとき、ＧＤＦ１５とその受容体の「結合を有意に低減又は阻害する」という用語は、抗体が、前記抗体の非存在下でのＧＤＦ１５（血清レベル／活性）の少なくとも１０％、好ましくは２０％、３０％又は４０％、より好ましくは少なくとも約５０％、６０％、８０％、又は９０％を示す能力又は阻害率（％）で、ＧＤＦ１５結合を阻害することを意味すると理解される。結合は、例えば、Ｔｓａｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：ｅ５５１７４に記載されているように、直接又はサンドイッチ酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）を用いて測定することができる。本明細書で使用されるとき、ＧＤＦ１５又はＧＤＦ１５受容体に結合する抗体に関連する用語「選択的に」は、抗体が、機能的に無関係なタンパク質又はＴＧＦ−βスーパーファミリーの別のメンバー若しくはＴＧＦ−βスーパーファミリーのメンバーの受容体に比して、少なくとも２、３、４、５若しくは１０倍高い結合親和性で、ＧＤＦ１５又はＧＤＦ１５受容体に結合することを意味すると理解される。
【００９０】
抗体及び抗体断片の抗原性を低減又は排除する方法は、当技術分野で公知である。抗体をヒトに投与しようとするとき、ヒトにおける抗原性を低減又は排除するために、抗体を「ヒト化する」のが好ましい。好ましくは、ヒト化した抗体は各々、それが由来する非ヒト化マウス抗体と同じ若しくは実質的に同じ親和性を有する。
【００９１】
１つのヒト化手法では、マウス免疫グロブリン定常領域がヒト免疫グロブリン定常領域で置換されたキメラタンパク質を作製する。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４，ＰＲＯＣ．ＮＡＴ．ＡＣＡＤ．ＳＣＩ．８１：６８５１−６８５５，Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４，ＮＡＴＵＲＥ  ３１２：６０４−６０８；米国特許第６，８９３，６２５号明細書（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ）；同第５，５００，３６２号明細書（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ）；及び同第４，８１６，５６７号明細書（Ｃａｂｉｌｌｙ）を参照されたい。
【００９２】
ＣＤＲ移植として知られる手法では、軽鎖及び重鎖可変領域のＣＤＲを別の種からのフレームワークに移植する。例えば、マウスＣＤＲをヒトＦＲに移植することができる。一部の実施形態では、抗ＧＤＦ１５抗体の軽鎖及び重鎖可変領域のＣＤＲをヒトＦＲ又は共通ヒトＦＲに移植する。共通ヒトＦＲを作製するために、複数のヒト重鎖又は軽鎖アミノ酸配列由来のＦＲをアラインメントして、共通アミノ酸配列を見出す。ＣＤＲ移植は、以下の文献に記載されている：米国特許第７，０２２，５００号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；同第６，９８２，３２１号明細書（Ｗｉｎｔｅｒ）；同第６，１８０，３７０号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；同第６，０５４，２９７号明細書（Ｃａｒｔｅｒ）；同第５，６９３，７６２号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；同第５，８５９，２０５号明細書（Ａｄａｉｒ）；同第５，６９３，７６１号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；同第５，５６５，３３２号明細書（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ）；同第５，５８５，０８９号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；同第５，５３０，１０１号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，ＮＡＴＵＲＥ  ３２１：５２２−５２５；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，ＮＡＴＵＲＥ  ３３２：３２３−３２７；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，ＳＣＩＥＮＣＥ  ２３９：１５３４−１５３６；及びＷｉｎｔｅｒ，１９９８，ＦＥＢＳ  ＬＥＴＴ  ４３０：９２−９４。
【００９３】
「ＳＵＰＥＲＨＵＭＡＮＩＺＡＴＩＯＮ（商標）」と呼ばれる手法では、ヒトＣＤＲとヒト化しようとするマウス抗体のそれとの構造的類似性に基づいて、ヒトＣＤＲ配列をヒト生殖系列遺伝子から選択する。例えば、米国特許第６，８８１，５５７号明細書（Ｆｏｏｔｅ）；及びＴａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｊ．ＩＭＭＵＮＯＬ．１６９：１１１９−１１２５を参照されたい。
【００９４】
免疫原性を低減するその他の方法として、「再構成（ｒｅｓｈａｐｉｎｇ）」、「超キメラ化（ｈｙｐｅｒｃｈｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ）」、及び「ベニヤリング（ｖｅｎｅｅｒｉｎｇ）／表面再構成（ｒｅｓｕｒｆａｃｉｎｇ）」が挙げられる。例えば、Ｖａｓｗａｍｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，ＡＮＮＡＬＳ  ＯＦ  ＡＬＬＥＲＧＹ，ＡＳＴＨＭＡ，＆  ＩＭＭＵＮＯＬ．８１：１０５；Ｒｏｇｕｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，ＰＲＯＴ．ＥＮＧＩＮＥＥＲ  ９：８９５−９０４；及び米国特許第６，０７２，０３５号明細書（Ｈａｒｄｍａｎ）を参照されたい。ベニヤリング（ｖｅｎｅｅｒｉｎｇ）／表面再構成（ｒｅｓｕｒｆａｃｉｎｇ）手法では、マウス抗体における表面接触可能アミノ酸残基が、ヒト抗体における同じ位置で、より頻繁に見出されるアミノ酸残基によって置換される。このタイプの抗体表面再構成は、例えば、米国特許第５，６３９，６４１号明細書（Ｐｅｄｅｒｓｅｎ）に記載されている。
【００９５】
ヒトへの医療用途に好適な形態にマウス抗体を変換する別の手法は、ＡＣＴＩＶＭＡＢ（商標）技術（Ｖａｃｃｉｎｅｘ，Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ，ＮＹ）であり、これは、哺乳動物細胞に抗体を発現するためのワクシニアウイルスベースのベクターを含む。ＩｇＧ重鎖及び軽鎖の高レベルの組み合わせ多様性が得られると記載されている。例えば、米国特許第６，７０６，４７７号明細書（Ｚａｕｄｅｒｅｒ）；同第６，８００，４４２号明細書（Ｚａｕｄｅｒｅｒ）；及び同第６，８７２，５１８号明細書（Ｚａｕｄｅｒｅｒ）を参照されたい。
【００９６】
ヒトに使用するのに好適な形態にマウス抗体を変換する別の手法は、ＫａｌｏＢｉｏｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．（Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ）により商業的に実施される技術である。この技術は、抗体選択のために「エピトープフォーカス」ライブラリーを作製するための、専売のヒト「アクセプター」ライブラリーの使用を含む。
【００９７】
ヒトへの医療用途に好適な形態にマウス抗体を修飾する別の手法は、ＨＵＭＡＮ  ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ（商標）技術であり、これは、ＸＯＭＡ（ＵＳ）ＬＬＣにより商業的に実施される。例えば、国際公開第９３／１１７９４号パンフレット及び米国特許第５，７６６，８８６号明細書（Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ）；同第５，７７０，１９６号明細書（Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ）；同第５，８２１，１２３号明細書（Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ）；及び同第５，８６９，６１９号明細書（Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ）を参照されたい。
【００９８】
抗体のヒト免疫原性を低減又は排除するために、前記手法のいずれかを含む任意の好適な手法を用いることができる。
【００９９】
さらに、マウスにおいて完全ヒト抗体を作製することも可能である。いずれかの非ヒト配列を欠失した完全ヒトｍＡｂは、例えば、Ｌｏｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，ＮＡＴＵＲＥ  ３６８：８５６−８５９，１９９４；Ｆｉｓｈｗｉｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，ＮＡＴＵＲＥ  ＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ  １４：８４５−８５１，１９９６；及びＭｅｎｄｅｚ  ｅｔ  ａｌ．，ＮＡＴＵＲＥ  ＧＥＮＥＴＩＣＳ  １５：１４６−１５６，１９９７で参照される技術によりヒト免疫グロブリントランスジェニックマウスから調製することができる。完全ヒトｍＡｂは、例えば、Ｋｎａｐｐｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．ＭＯＬ．ＢＩＯＬ．２９６：５７−８６，２０００；Ｋｒｅｂｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．ＩＭＭＵＮＯＬ．ＭＥＴＨ．２５４：６７−８４  ２００１）に参照されている技術によりファージディスプレイライブラリーから調製及び最適化することもできる。
【０１００】
おとりとして作用するＧＤＦ１５の変異体及び誘導体は、本発明の実施に有用であり得ると考えられる。例えば、欠失分析により、その同族受容体について内在性ＧＤＦ１５と競合するＧＤＦ１５のより小さな生物活性断片を見出すことも可能であろう。同様に、利用可能なＧＤＦの内在性ＧＤＦ１５受容体と競合するＧＤＦ１５受容体の可溶性生物活性断片を作製することもできる。例えば、「生物活性断片」として、限定はしないが、同族結合パートナー（例えば、それぞれＧＤＦ１５受容体又はＧＤＦ１５）との結合について、それぞれ内在性ＧＤＦ１５又は内在性ＧＤＦ１５受容体と競合する天然ＧＤＦ１５（若しくは相同体）又はＧＤＦ１５受容体（若しくは相同体）の断片が挙げられる。
【０１０１】
当技術分野で公知の技術を用いて、アンチセンス核酸（ＤＮＡ及びＲＮＡ）並びに干渉核酸（例えば、ｓｉＲＮＡ）を設計及び使用できることが考えられる。ＧＤＦ１５の例示的ｓｉＲＮＡ阻害剤としては、以下のものが挙げられる：Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈ製のｓｉＲＮＡ（カタログ番号ｓｃ−３９７９９、マウスＧＤＦ１５をターゲティング；及びカタログ番号ｓｃ−３９７９８、ヒトＧＤＦ１５をターゲティング）、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ製のｓｉＲＮＡ（カタログ番号ＡＭ１６７０８、４３９２４２０、及び１２９９００１，ヒトＧＤＦ１５をターゲティング；並びにカタログ番号１３２０００１及び４３９０７７１、マウスＧＤＦ１５をターゲティング；並びにカタログ番号１３３０００１及び４３９０７７１、ラットＧＤＦ１５をターゲティング）、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ製のｓｉＲＮＡ（カタログ番号ＮＣ０６８３８０７、ヒトＧＤＦ１５をターゲティング）、Ｏｒｉｇｅｎｅ（カタログ番号ＳＲ３０６３２１、ヒトＧＤＦ１５をターゲティング）、ａｍｓｂｉｏ製のｓｉＲＮＡ（カタログ番号ＳＲ５０９８００、ラット（ｒａｔｅ）ＧＤＦ１５をターゲティング）、Ｄｈａｒｍａｃｏｎ製のｓｉＲＮＡ（カタログ番号Ｄ−０１９８７５−０２、ヒトＧＤＦ１５をターゲティング）、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ製のｓｉＲＮＡ（カタログ番号ＥＨＵ０５２９０１、ヒトＧＤＦ１５をターゲティング）、並びにＫｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＣＡＮＣＥＲ  ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ，４：４８７−４９３，Ｃｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００７ ＭＯＬ．ＣＡＮＣＥＲ ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ，６：２２７１−２２７９、及びＢｏｙｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，Ｊ．ＩＮＶＥＳＴ．ＤＥＲＭＡＴＯＬ．，１２９：３８３−３９１に記載のｓｉＲＮＡ。
【０１０２】
ＩＶ．ＧＤＦ１５調節剤の製剤化及び送達
本明細書に開示するものなどのＧＤＦ１５調節剤を含有する医薬組成物は、標準的製剤化技術を用いて、剤形又は投与単位に製剤化することができる。しかし、医薬組成物は、意図する投与経路と適合性であるように製剤化すべきである。
【０１０３】
本明細書に記載する組成物は、限定はしないが、以下に挙げるいずれかの経路で被験者に投与することができる：静脈内（例えば、輸液ポンプ）、腹腔内、眼内、動脈内、肺内、経口、吸入、膀胱内、筋肉内、気管内、皮下、眼内、髄腔内、経皮、経胸膜、動脈内、局所、吸入（例えば、噴霧スプレーとして）、粘膜（鼻粘膜など）、皮下、経皮、胃腸、関節内、大槽内、心室内、直腸（すなわち、座薬により）、膣（すなわち、ペッサリーにより）、頭蓋内、尿道内、肝臓内、及び腫瘍内。一部の実施形態では、組成物を全身投与する（例えば、静脈内注射により）。一部の実施形態では、組成物を局所投与する（例えば、動脈内又は眼内注射により）。抗体などのＧＤＦ１５調節剤の好ましい投与経路は、静脈内注入によるものである。
【０１０４】
有用な製剤は、薬学の分野で公知の技術によって調製することができる。例えば、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ，１８ｔｈ  ｅｄ．（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０）を参照されたい。非経口投与に好適な製剤成分としては、注射用静菌水、生理学的食塩水、不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール又はその他の合成溶媒などの滅菌希釈剤；ベンジルアルコール又はメチルパラベンなどの抗菌剤；アスコルビン酸又は亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化剤；ＥＤＴＡなどのキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩又はリン酸塩などのバッファー；並びに塩化ナトリウム又はデキストロースなどの張性の調節のための薬剤が挙げられる。担体は、製造及び貯蔵の条件下で安定性であり、且つ、微生物から保護されなければならない。一部の実施形態では、ＧＤＦ１５調節剤（例えば、抗体）を凍結乾燥し、投与時に、緩衝食塩水中で再構成する。
【０１０５】
治療用途の場合、ＧＤＦ１５調節剤（例えば、抗体）を薬学的に許容される担体と組み合わせるのが好ましい。本明細書で用いる場合、「薬学的に許容される担体」は、過剰な毒性、刺激、アレルギー応答、又はその他の問題若しくは合併症を起こすことなく、ヒト及び動物の組織と接触させる用途に好適で、妥当な受益度／危険度比に相応するバッファー、担体、及び賦形剤を意味する。担体は、製剤の他の成分と適合性であり、且つレシピエントに対して有害ではないという意味で、「許容される」ものでなければならない。薬学的に許容される担体としては、医薬品投与と適合性のバッファー、溶媒、分散媒、コーティング剤、等張及び吸収遅延剤などが挙げられる。薬学的に活性の物質のためのこうした媒体及び薬剤の使用は当分野において公知である。
【０１０６】
医薬組成物は、滅菌されているのが好ましい。滅菌は、例えば、滅菌濾過膜を介した濾過により達成することができる。組成物が凍結乾燥されている場合、凍結乾燥及び再構成の前、又は後にフィルター滅菌を実施することができる。
【０１０７】
一般に、治療有効量の活性成分は、０．１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、例えば、１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲である。投与する量は、治療しようとする疾患若しくは適応症の種類及び程度、患者の全身の健康状態、ＧＤＦ１５調節剤（例えば、抗体）のｉｎ  ｖｉｖｏ効力、医薬製剤、及び投与経路に応じて変動し得る。最初の投与量は、所望の血液レベル又は組織レベルを迅速に達成するために、上限レベルを超えて増加することができる。あるいは、最初の投与量は、最適より少なくしてもよく、１日用量を治療の過程で段階的に増加させてもよい。ヒト投与量は、０．５ｍｇ／ｋｇから２０ｍｇ／ｋｇまで実施するように設計された従来の第Ｉ相用量漸増試験で最適化することができる。投与頻度は、投与経路、投与量、ＧＤＦ１５調節剤（例えば、抗体）の血清半減期、及び治療対象の疾患などに応じて変動し得る。例示的投与頻度は、１日１回、週１回及び隔週１回である。
【０１０８】
組成物の最適な有効量は、実験により決定することができ、疾患の種類及び重症度、投与経路、疾患の進行及び被験者の健康状態、重量及び身体部位に応じて変動し得る。こうした決定は、当業者の技術の範囲内である。本明細書に記載する方法に用いることができるＧＤＦ１５調節剤分子の投与量の例として、限定はしないが、約０．０１μｇ／ｋｇ〜約３００ｍｇ／ｋｇ、若しくは約０．１μｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇの任意の用量範囲内、又は約１μｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇの範囲内、又は約１μｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの範囲内の有効量が挙げられる。例えば、皮下投与される場合、組成物は、約０．１μｇ／ｋｇ以下、約０．０５μｇ／ｋｇ以下、又は約０．０１μｇ／ｋｇ以下などの低いマイクログラム範囲で投与してよい。
【０１０９】
いくつかの実施形態では、被験者に投与するＧＤＦ１５調節剤の量は、１用量当たり約１０μｇ〜約５００ｍｇ、例えば、１用量当たり約１０μｇ〜約５０μｇ、約５０μｇ〜約１００μｇ、約１００μｇ〜約２００μｇ、約２００μｇ〜約３００μｇ、約３００μｇ〜約５００μｇ、約５００μｇ〜約１ｍｇ、約１ｍｇ〜約１０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約５０ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約３００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約４００ｍｇ、又は約４００ｍｇ〜約５００ｍｇを含む。いくつかの実施形態では、ＧＤＦ１５調節剤は、約０．０２５ｍｇ〜約４ｍｇ、約０．０３５ｍｇ〜約２ｍｇ、約０．０５ｍｇ〜約２ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約２ｍｇ、約０．２ｍｇ〜約１ｍｇ、又は約０．２ｍｇ〜約０．８ｍｇのＧＤＦ１５調節剤を投与することができる。一実施形態では、０．５ｍｇのＧＤＦ１５調節剤を局所投与する。いくつかの実施形態では、約０．０５ｍｇ〜約２ｍｇ、約０．２ｍｇ〜約２ｍｇ、約０．０５ｍｇ〜約１．５ｍｇ、約０．１５ｍｇ〜約１．５ｍｇ、約０．４ｍｇ〜約１ｍｇ、又は約０．５ｍｇ〜約０．８ｍｇのＧＤＦ１５調節剤を局所投与する。
【０１１０】
ＧＤＦ１５調節剤は、１日の単一用量として投与してもよいし、又は１日の総用量を１日２回、３回、又は４回の分割用量として投与してもよい。組成物はまた、毎日より少ない頻度で、例えば、週６回、週５回、週４回、週３回、週２回、週１回、２週間ごとに１回、３週間毎に１回、月１回、２ヵ月に１回、３ヵ月に１回、又は６ヵ月に１回投与することもできる。さらに、組成物は、特定の時間にわたって使用する組成物を徐々に放出するインプラントなどの持続的放出製剤として投与してもよく、これにより、組成物を投与する頻度を、例えば、月１回、２〜６ヵ月に１回、年１回、又は単一回投与のように減らすことができる。持続的放出デバイス（ペレット、ナノ粒子、ミクロ粒子、ナノスフィア、マイクロスフィアなど）は、注射により投与してもよいし、又は身体の様々な位置に外科的に埋め込んでもよい。
【０１１１】
本発明のいくつかの実施形態では、ＧＤＦ１５調節剤の投与は、用量が有害な作用を軽減又は阻止し、しかも、ＧＤＦ１５の活性を完全若しくは部分的に阻害するのに十分であるように滴定する。
【０１１２】
一部の態様では、ＧＤＦ１５調節剤の活性は、アンチセンス核酸又は低分子干渉核酸を用いて、標的細胞中で調節することができる。調節は、当技術分野で公知の発現構築物、例えば、抗ＧＤＦ１５ｓｉＲＮＡ又はアンチセンス分子をコードする核酸を発現するためのネイキッドＤＮＡ構築物、ＤＮＡベクターベースの構築物、並びに／又はウイルスベクター及び／若しくはウイルスベースの構築物を用いて達成することができる。
【０１１３】
こうした構築物の例示的ＤＮＡ構築物及び治療への使用は、当業者には周知である（例えば、Ｃｈｉａｒｅｌｌａ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，ＲＥＣＥＮＴ  ＰＡＴＥＮＴＳ  ＡＮＴＩ−ＩＮＦＥＣＴ．ＤＲＵＧ  ＤＩＳＣ．，３：９３−１０１；Ｇｒａｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，ＥＸＰＥＲＴ  ＯＰＩＮ．ＢＩＯＬ．ＴＨＥＲ．，８：９１１−９２２；Ｍｅｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，ＨＵＭ．ＧＥＮＥ  ＴＨＥＲ．，１７：１１６５−１１７６）。ネイキッドＤＮＡ構築物は、典型的に、１種又は複数種の治療用核酸（例えば、ＧＤＦ１５調節剤）とプロモータ配列を含む。ネイキッドＤＮＡ構築物は、一般にｐＤＮＡと呼ばれるＤＮＡベクターであってよい。ネイキッドＤＮＡは、典型的に、染色体ＤＮＡに組み込まれない。概して、ネイキッドＤＮＡ構築物は、脂質、ポリマー、又はウイルスタンパク質の存在を必要としないか、又はそれらと一緒に使用されない。こうした構築物は、本明細書に記載する非治療成分の１つ又は複数を含んでもよい。
【０１１４】
ＤＮＡベクターは、当技術分野で公知であり、典型的に、環状二本鎖ＤＮＡ分子である。ＤＮＡベクターは、通常、３〜５キロ塩基対の範囲のサイズ（例えば、挿入された治療核酸を含む）である。ネイキッドＤＮＡと同様に、ＤＮＡベクターは、１種又は複数種の治療用タンパク質を標的細胞に送達及び発現させるために使用することができる。ＤＮＡベクターは、染色体ＤＮＡに組み込まれない。
【０１１５】
一般に、ＤＮＡベクターは、標的細胞における複製を可能にする少なくとも１つのプロモータ配列を含む。ＤＮＡベクターの取り込みは、ＤＮＡベクターを例えばカチオン性脂質と組み合わせて、ＤＮＡ複合体を形成することにより、促進することができる。典型的に、ウイルスベクターは、ウイルスに由来する二本鎖環状ＤＮＡ分子である。ウイルスベクターは、典型的に、ネイキッドＤＮＡ及びＤＮＡベクター構築物よりサイズが大きく、外来（すなわち、ウイルスによりコードされていない）遺伝子の導入のために、より大きな容量を有する。ネイキッドＤＮＡ及びＤＮＡベクターと同様に、ウイルスベクターを用いて、１種又は複数種の治療用核酸を標的細胞に送達及び発現させることもできる。ネイキッドＤＮＡ及びＤＮＡベクターとは異なり、いくつかのウイルスベクターは、それ自体が染色体ＤＮＡに安定に組み込まれる。典型的に、ウイルスベクターは、宿主細胞において、ベクターによりコードされた１つ又は複数の核酸、例えば、治療用核酸の複製を可能にする少なくとも１つのプロモータ配列を含む。ウイルスベクターは、任意選択で、本明細書に記載する１つ又は複数の非治療成分を含んでもよい。有利なことに、標的細胞へのウイルスベクターの取り込みは、追加成分、例えば、カチオン性脂質を必要としない。むしろ、ウイルスベクターは、標的細胞との接触後直ちに細胞をトランスフェクトするか、又は細胞に感染する。
【０１１６】
本明細書に記載する手法は、特にヒトへの、ｉｎ  ｖｉｖｏでの外性遺伝子の移入のための組換え遺伝子送達系として、レトロウイルスベクター、アデノウイルス由来のベクター、及び／又はアデノ−関連ウイルスベクターの使用を含む。組換えレトロウイルスを生成するプロトコル、及びこうしたウイルスに細胞をｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏで感染させるプロトコルは、ＣＵＲＲＥＮＴ  ＰＲＯＴＯＣＯＬＳ  ＩＮ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＢＩＯＬＯＧＹ，Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．）Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，１９８９，Ｓｅｃｔｉｏｎｓ  ９．１０−９．１４、並びにその他の標準的実験マニュアルに見出すことができる。
【０１１７】
ＤＮＡベクター及びウイルスベクターのＤＮＡの形質導入因子として用いられるウイルス、例えば、アデノウイルス、レトロウイルス、及びレンチウイルスなどを本発明の実施に使用してもよい。例示的レトロウイルスとして、限定はしないが、以下のものが挙げられる：モロニーマウス白血病ウイルス（Ｍｏｌｏｎｅｙ  ｍｕｒｉｎｅ  ｌｅｕｋｅｍｉａ  ｖｉｒｕｓ）（Ｍ−ＭｕＬＶ）、モロニーマウス肉腫ウイルス（Ｍｏｌｏｎｅｙ  ｍｕｒｉｎｅ  ｓａｒｃｏｍａ  ｖｉｒｕｓ）（ＭｏＭＳＶ）、ハーベイマウス肉腫ウイルス（Ｈａｒｖｅｙ  ｍｕｒｉｎｅ  ｓａｒｃｏｍａ  ｖｉｒｕｓ）（ＨａＭｕＳＶ）、マウス乳癌ウイルス（ｍｕｒｉｎｅ  ｍａｍｍａｒｙ  ｔｕｍｏｒ  ｖｉｒｕｓ）（ＭｕＭＴＶ）、テナガザル白血病ウイルス（ｇｉｂｂｏｎ  ａｐｅ  ｌｅｕｋｅｍｉａ  ｖｉｒｕｓ）（ＧａＬＶ）、ネコ白血病ウイルス（ｆｅｌｉｎｅ  ｌｅｕｋｅｍｉａ  ｖｉｒｕｓ）（ＦＬＶ）、スプマウイルス（ｓｐｕｍａｖｉｒｕｓ）、フレンドマウス白血病ウイルス（Ｆｒｉｅｎｄ  ｍｕｒｉｎｅ  ｌｅｕｋｅｍｉａ  ｖｉｒｕｓ）、マウス幹細胞ウイルス（Ｍｕｒｉｎｅ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉｒｕｓ）（ＭＳＣＶ）及びラウス肉腫ウイルス（Ｒｏｕｓ  Ｓａｒｃｏｍａ  Ｖｉｒｕｓ（ＲＳＶ））並びにレンチウイルス（ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓ）。本明細書で使用されるとき、用語「レンチウイルス（ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓ）」は、複合型レトロウイルスの群（又は属）を指す。例示的レンチウイルスとして、限定はしないが、以下のものが挙げられる：ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス（ｈｕｍａｎ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ）；ＨＩＶ１型、及びＨＩＶ２型を含む）；ビスナ・マエディウイルス（ｖｉｓｎａ−ｍａｅｄｉ  ｖｉｒｕｓ）（ＶＭＶ）；イヌ関節炎−脳炎ウイルス（ｃａｐｒｉｎｅ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ−ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ  ｖｉｒｕｓ）（ＣＡＥＶ）；ウマ感染性貧血ウイルス（ｅｑｕｉｎｅ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  ａｎｅｍｉａ  ｖｉｒｕｓ）（ＥＩＡＶ）；ネコ免疫不全ウイルス（ｆｅｌｉｎｅ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ）（ＦＩＶ）；ウシ免疫不全ウイルス（ｂｏｖｉｎｅ  ｉｍｍｕｎｅ  ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ）（ＢＩＶ）；及びサル免疫不全ウイルス（ｓｉｍｉａｎ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ）（ＳＩＶ）。
【０１１８】
いくつかの実施形態では、アデノウイルスは、本明細書に記載する方法に従って用いることができる。アデノウイルスのゲノムは、それが、目的の遺伝子産物をコードして、発現するが、正常な溶菌ウイルス生活環で複製するその能力に関して不活性化されるように、操作することができる。アデノウイルス株Ａｄ５型ｄｌ３２４又はその他のアデノウイルス株（例えば、Ａｄ２、Ａｄ３、Ａｄ７など）は、当業者には周知である。組換えアデノウイルス株は、それらが、非分裂細胞に感染することができず、また、上皮細胞を含む多種の細胞型を感染させるために用いることができるという点で、特定の状況では有利となり得る。さらに、ウイルス粒子は、比較的安定しており、精製及び濃縮させやすく、前述したように、感染性のスペクトルに影響するように修飾することができる。さらに、導入されたアデノウイルスＤＮＡ（及びそこに含まれる外来ＤＮＡ）は、宿主細胞のゲノム中に組み込まれていないが、エピソームのままであるため、導入されたＤＮＡが宿主細胞（例えば、レトロウイルスＤＮＡ）に組み込まれているｉｎ  ｓｉｔｕでの挿入突然変異誘発によって起こり得る潜在的問題が回避される。さらに、外来ＤＮＡについてアデノウイルスゲノムの輸送量は、他の遺伝子送達ベクターと比較して大きい（最大８キロバイト）。
【０１１９】
アデノ関連ウイルスは、効率的複製及び生産的生活環のためのヘルパーウイルスとして、アデノウイルス又はヘルペスウイルスなどの別のウイルスを必要とする、天然の欠損ウイルスである。これはまた、そのＤＮＡを非分裂細胞に組み込むことができ、高頻度の安定な組み込みを呈示する少数のウイルスの１つでもある。
【０１２０】
様々な実施形態では、治療用トランスジーン又はＧＤＦ１５調節剤をコードするトランスジーンを発現する１つ又は複数のウイルスベクターを、被験者の細胞、組織、若しくは臓器への直接注射によりｉｎ  ｖｉｖｏで投与する。様々な他の実施形態では、ウイルス中に包膜されたベクターをｉｎ  ｖｉｔｒｏ若しくはｅｘ  ｖｉｖｏで細胞に形質導入し、任意選択で、ｅｘ  ｖｉｖｏで増殖させる。その後、形質導入した細胞を被験者に投与する。形質導入に好適な細胞として、限定はしないが、幹細胞、前駆細胞、及び分化細胞が挙げられる。いくつかの実施形態では、形質導入細胞は、胚性幹細胞、骨髄幹細胞、臍帯血幹細胞、胎盤幹細胞、間葉系幹細胞、神経幹細胞、肝幹細胞、膵幹細胞、心臓幹細胞、腎幹細胞、又は造血幹細胞である。
【０１２１】
特定の実施形態では、１つ又は複数のポリペプチドを発現する本発明のウイルスベクターを形質導入した宿主細胞を、被験者に投与して、聴覚疾患、障害、若しくは病状を治療及び／又は予防する。本発明のいくつかの実施形態に従って使用され得る、ウイルスベクターの使用に関連する他の方法は、以下の文献に見出すことができる：Ｋａｙ，１９９７，ＣＨＥＳＴ，１１１（６  Ｓｕｐｐ．）：１３８Ｓ−１４２Ｓ；Ｆｅｒｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，ＨＵＭ．ＧＥＮＥ  ＴＨＥＲ．，９：１９７５−８１；Ｓｈｉｒａｔｏｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，ＬＩＶＥＲ，１９：２６５−７４；Ｏｋａ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，ＣＵＲＲ．ＯＰＩＮ．ＬＩＰＩＤＯＬ．，１１：１７９−８６；Ｔｈｕｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，ＧＥＮＥ  ＴＨＥＲ．，７：１７４４−５２；Ｙａｎｇ，１９９２，ＣＲＩＴ．ＲＥＶ．ＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬ．，１２：３３５−５６；Ａｌｔ，１９９５，Ｊ．ＨＥＰＡＴＯＬ．，２３：７４６−５８；Ｂｒｏｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，ＡＮＮ．Ｎ．Ｙ．ＡＣＡＤ．ＳＣＩ．，７１６：９０−１０１；Ｓｔｒａｙｅｒ，１９９９，ＥＸＰＥＲＴ  ＯＰＩＮ．ＩＮＶＥＳＴＩＧ．ＤＲＵＧＳ，８：２１５９−２１７２；Ｓｍｉｔｈ−Ａｒｉｃａ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，ＣＵＲＲ．ＣＡＲＤＩＯＬ．ＲＥＰ．，３：４３−４９；及びＬｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，ＮＡＴＵＲＥ，４０８：４８３−８。
【０１２２】
本発明のいくつかの実施形態は、目的のポリヌクレオチドの条件付発現を可能にする。例えば、ポリヌクレオチドを発現させるか、又は目的のポリヌクレオチドによりコードされるポリヌクレオチドの発現に増大若しくは低減を引き起こす処置又は条件に、細胞、組織、生物などを付すことによって、発現を制御する。誘導性ポリマー／誘導系の実例として、限定はしないが、以下のものが挙げられる：グルココルチコイド若しくはエストロゲン受容体をコードする遺伝子のプロモータなどのステロイド誘導性プロモータ（対応するホルモンでの処理により誘導可能）、メタロチオニンプロモータ（様々な重金属での処置により誘導可能）、ＭＸ−１プロモータ（インターフェロンにより誘導可能）、「ＧｅｎｅＳｗｉｔｃｈ」ミフェプリストン調節系（Ｓｉｒｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，ＧＥＮＥ，３２３：６７）、クメート（ｃｕｍａｔｅ）誘導性遺伝子スイッチ（国際公開第２００２／０８８３４６号パンフレット）、テトラサイクリン依存性調節系など。
【０１２３】
条件付発現はまた、部位特異的ＤＮＡリコンビナーゼを用いることによって達成することもできる。本発明のいくつかの実施形態によれば、ベクターは、部位特異的リコンビナーゼにより媒介される組換えのための、少なくとも１つ（典型的には２つ）の部位を含む。本明細書で使用するとき、用語「リコンビナーゼ」又は「部位特異的リコンビナーゼ」は、１つ又は複数の組換え部位（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、７つ、１０、１２、１５、２０、３０、４０など）を含む組換え反応に関与する切断若しくは組み込みタンパク質、酵素、補因子又は結合タンパク質を包含し、これらは、野生型タンパク質（Ｌａｎｄｙ，１９９３，ＣＵＲＲＥＮＴ  ＯＰＩＮＩＯＮ  ＩＮ  ＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ，３：６９９−７０７を参照）、又は突然変異体、誘導体（例えば、組換えタンパク質配列若しくはその断片を含有する融合タンパク質）、及びその変異体であってもよい。本発明の具体的な実施形態での使用に好適なリコンビナーゼの例として、限定はしないが、Ｃｒｅ、Ｉｎｔ、ＩＨＦ、Ｘｉｓ、Ｆｌｐ、Ｆｉｓ、Ｈｉｎ、Ｇｉｎ、ＯＣ３１、Ｃｉｎ、Ｔｎ３レゾルバーゼ、ＴｎｄＸ、ＸｅｒＣ、ＸｅｒＤ、ＴｎｐＸ、Ｈｊｃ、Ｇｉｎ、ＳｐＣＣＥｌ．及びＰａｒＡが挙げられる。
【０１２４】
ベクターは、非常に多様な部位特異的リコンビナーゼのいずれかの１つ又は複数の組換え部位を含んでもよい。部位特異的リコンビナーゼの標的部位が、ベクター（例えば、レトロウイルスベクター若しくはレンチウイルスベクター）の組換えに必要ないずれかの部位に加えて存在することは理解すべきである。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、ベクターは、選択マーカとも呼ばれる選択遺伝子を含む。典型的選択遺伝子は、下記のタンパク質をコードする：（ａ）抗生物質若しくはその他の毒素、例えば、アンピシリン、ネオマイシン、ヒグロマイシン、メトトレキサート、ゼオシン（Ｚｅｏｃｉｎ）、ブラストシジン（Ｂｌａｓｔｏｃｉｄｉｎ）、若しくはテトラサイクリンを付与するタンパク質、（ｂ）栄養要求性欠失を補足するタンパク質、又は（ｃ）複合培地から得られない重要な栄養素、例えば、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｉ）の場合、Ｄ−アラニンラセマーゼをコードする遺伝子を供給するタンパク質。形質転換した細胞株を回収するために、いくつの選択系を使用してもよい。こうした系として、限定はしないが、単純ヘルペスウイルス（ｈｅｒｐｅｓ  ｓｉｍｐｌｅｘ  ｖｉｒｕｓ）チミジンキナーゼ（Ｗｉｇｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９７７，ＣＥＬＬ，１１：２２３−２３２）及びアデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（Ｌｏｗｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，ＣＥＬＬ，２２：８１７−８２３）遺伝子が挙げられ、これらは、それぞれ、ｔｋ−又はａｐｒｔ−細胞で使用することができる。
【０１２６】
本明細書に記載する発現構築物を作製するために必要な分子生物学的技術は全て、標準的技術であり、当業者により認識されるであろう。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、ＤＮＡ送達は、例えば、米国特許第５，５４３，１５８号明細書；同第５，６４１，５１５号明細書；及び同第５，３９９，３６３号明細書（各々、その全体を参照により本明細書に組み込む）に記載されているように、非経口、静脈内、筋肉内、あるいは腹腔内でも実施することができる。遊離塩基又は薬学的に許容される塩としての活性化合物の溶液は、好適には、ヒドロキシプロピルセルロースなどの界面活性剤と好適に混合した水を用いて調製することができる。分散液はまた、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、及びそれらの混合物並びに油を用いて調製することもできる。貯蔵及び使用の通常の条件下で、これらの調製物は、微生物の増殖を阻止するために防腐剤を含有する。
【０１２８】
いくつかの実施形態では、ＤＮＡ送達は、好適な宿主細胞への本発明の組成物の導入を目的とする、リポソーム、ナノカプセル、ミクロ粒子、ミクロスフィア、脂質粒子、小胞体の使用により、任意選択で、細胞貫通ポリペプチドなどとの混合によって実施してもよい。特に、本発明の組成物は、脂質粒子、リポソーム、小胞体、ナノスフィア、ナノ粒子などのいずれかに包膜して、送達のために製剤化することができる。こうした送達ビヒクルの製剤化及び使用は、公知で一般的技術を用いて実施することができる。
【０１２９】
ｅｘ  ｖｉｖｏＤＮＡ送達のための例示的製剤はまた、リン酸カルシウム、エレクトロポレーション、熱ショック及び様々なリポソーム製剤（すなわち、脂質媒介トランスフェクション）など、当技術分野で公知の各種トランスフェクション剤の使用も含み得る。本発明の具体的な実施形態は、薬学の分野でよく知られているものなど、その他の製剤を含んでもよく、これらは、例えば、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ：ＴＨＥ  ＳＣＩＥＮＣＥ  ＡＮＤ  ＰＲＡＣＴＩＣＥ  ＯＦ  ＰＨＡＲＭＡＣＹ，２０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ．Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０００に記載されている。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、ＧＤＦ１５活性は、ＧＤＦ１５調節剤がＧＤＦ１５活性を低減又は阻害することを可能にする条件下で、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物と体液をｅｘ  ｖｉｖｏで接触させることによって阻害される。好適な体液として、血液、血漿、又はリンパ液など、個体に戻すことができるものが挙げられる。アフィニティ吸着アフェレーシスについては、Ｎｉｌｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，ＢＬＯＯＤ，５８（１）：３８−４４；Ｃｈｒｉｓｔｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，ＴＲＡＮＳＦＵＳＩＯＮ，３３：２３４−２４２；Ｒｉｃｈｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，ＡＳＡＩＯ  Ｊ．，４３（１）：５３−５９；Ｓｕｚｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，ＡＵＴＯＩＭＭＵＮＩＴＹ，１９：１０５−１１２；米国特許第５，７３３，２５４号明細書；Ｒｉｃｈｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，ＭＥＴＡＢＯＬ．ＣＬＩＮ．ＥＸＰ．，４２：８８８−８９４；及びＷａｌｌｕｋａｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，ＩＮＴ’Ｌ  Ｊ．ＣＡＲＤ．，５４：１９１０１９５に概要が記載されている。
【０１３１】
従って、本発明は、被験者における本明細書に記載の１つ又は複数の疾患を治療する方法を含み、この方法は、調節剤が被験者の血液中のＧＤＦ１５活性を低減又は阻害することを可能にする条件下で、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物で、被験者の血液を体外（すなわち、身体外部若しくはｅｘ  ｖｉｖｏで）処置するステップを含む。
【実施例】
【０１３２】
実施例１：組換えｍＦｃ−ＧＤＦ１５の投与によって、血中尿素レベルが増加する
ＩＣＲ  ＳＣＩＤ（自然突然変異体Ｔ及びＢ細胞欠損）マウスに、ＰＢＳ溶液（対照）又は４０μｇのマウス組換えＦｃ−ＧＤＦ１５タンパク質を腹腔内注射した。注射後、体重、及び筋分解の分子マーカ（アトロギン、ＭｕｒＦ１）、脂肪生成の分子マーカ（Ｇｌｕｔ４、レプチン、Ｃ／ＥＰＢβ）及び脂肪蓄積の分子マーカ（ステアロイル−ＣｏＡデサチュラーゼ、脂肪酸シンターゼ）を測定した。
【０１３３】
図１から、Ｆｃ−ＧＤＦ１５を注射したマウスが、有意な体重減少を呈示したことが明らかである。同様に、Ｆｃ−ＧＤＦ１５を注射したマウスは、生殖腺重量（図２Ａ）及び腓腹筋重量（図２Ｂ）の有意な減少も呈示した。処置マウスはまた、筋分解のマーカ（アトロギン、ＭｕｒＦ１）の上方制御、並びに脂肪生成のマーカ（Ｇｌｕｔ４、レプチン、Ｃ／ＥＰＢβ）及び脂肪蓄積のマーカ（ステアロイル−ＣｏＡデサチュラーゼ；脂肪酸シンターゼ）の下方制御も示した。
【０１３４】
Ｆｃ−ＧＤＦ１５で処置したマウスは、より低いレベルの肝酵素（アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）、アルカリホスファターゼ（ＡＬＫ）；並びに血中尿素レベル（尿素窒素、腎臓障害のマーカ）の増加（図３）も呈示し、これらは、腎機能におけるＧＤＦ１５の役割と一致している。
【０１３５】
実施例２：ＨＴ−１０８０異種移植片腫瘍モデルにおける腎臓縮小の治療
この実施例では、ＨＴ−１０８０繊維肉腫異種移植片モデルにおける抗ＧＤＦ１５抗体（０１Ｇ０６）による腎臓縮小（腎臓重量減少により示される）の治療を明らかにする。ＨＴ−１０８０細胞を、１０％ＦＢＳを含有するイーグル最小必須培地（ＡＴＣＣ、カタログ番号３０−２００３）を用いて、５％ＣＯ２を含有する大気下、３７℃での培養で増殖させた。細胞は、５０％マトリゲル中マウス当たり５×１０６個の細胞で、８週齢雌ＩＣＲ  ＳＣＩＤマウスの脇腹に皮下接種した。体重を毎日測定した。体重が８０％に達したら、マウスを５匹ずつの２群にランダムに分けた。各群は、腹腔内注射により次の処置の１つを受けた：１日目及び７日目に、２ｍｇ／ｋｇでマウスＩｇＧ対照、マウス０１Ｇ０６を投与。この実験では、５匹のマウスの群を投与の時点（ベースラインすなわち８０％体重減、処置なし）と試験終了時（ｍＩｇＧ若しくは０１Ｇ０６いずれかの投与から７日後）に犠牲にした。肝臓、心臓、脾臓、腎臓、生殖腺脂肪及び腓腹筋を外科的に摘出し、計量した。抗ＧＤＦ１５抗体０１Ｇ０６を用いた処置によって、体重は初期体重、すなわち１００％まで増加し（ｐ＜０．００１）（図４Ａ）、腎臓重量も増加した（図４Ｂ）。
【０１３６】
図４Ｂに示すように、ｍＩｇＧの投与から７日後、肝臓、心臓、脾臓、腎臓、生殖腺脂肪及び腓腹筋重量に有意な減少が観察されたが、抗ＧＤＦ１５抗体０１ｇ０６による処置群には観察されなかった。さらに、抗ＧＤＦ１５抗体０１Ｇ０６で処置したマウスは、ベースライン群と比較して、有意な肝臓及び生殖腺筋肉増量も示した（図４Ｂ）。
【０１３７】
図４Ａ〜Ｂのデータは、抗ＧＤＦ１５抗体が、ＨＴ−１０８０繊維肉腫異種移植片モデルにおける腎臓重量減少を逆転することができることを示すものである。同様に、これらの結果は、抗ＧＤＦ１５抗体が、ＨＴ−１０８０異種移植腫瘍モデルにおける腎臓重量などの臓器重量減少、筋肉重量減少、脂肪の減少及び不随意の体重減少を逆転することができることも示している。
【０１３８】
実施例３：抗ＧＤＦ１５抗体での処置は、ＨＴ−１０８０ヒト腫瘍異種移植片を担持するマウスに見られる高レベルの尿素を逆転する
実施例２に記載のように、ＨＴ−１０８０ヒト腫瘍異種移植片を担持するＩＣＲ  ＳＣＩＤ（自然突然変異体Ｔ及びＢ細胞欠損）マウスは、悪液質を呈示する。１０ｍｇ／ｋｇの抗ＧＤＦ１５抗体（Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７）の全身投与によって、ＨＴ−１０８０ヒト腫瘍異種移植片を担持するマウスに観察された体重減少（図５Ａ）、並びに生殖腺重量（図５Ｂ）が逆転したが、ヒトＩｇＧでは逆転しなかった。さらに、抗ＧＤＦ１５抗体の投与によって、ＨＴ−１０８０ヒト腫瘍異種移植片を担持するマウスに観察された高レベルの尿素も逆転した（図６）。
【０１３９】
実施例４：慢性腎臓病のｉｎ  ｖｉｖｏモデル
腎臓亜全摘は、ヒトにおける腎臓重量減少後の進行性腎不全によく似ている。Ｍａ  ａｎｄ  Ｆｏｇｏ，２００３，ＫＩＤＮＥＹ  ＩＮＴＥＲＮＡＴＩＯＮＡＬ，６４：３５０−３５５に記載されているように、片側の腎臓を摘出し、残る腎臓の約２／３を切除すると、進行性腎臓疾患に関連する腎機能低下が起こる。処置時間に抗ＧＤＦ１５抗体又は対照を動物に投与する。身体及び腎臓のサイズ及び重量、糸球体濾過量、血清クレアチニン並びに腎臓疾患の他のマーカについて、動物を評価する。
【０１４０】
実施例５：進行性腎疾患の尿管結紮モデル
Ｃｈｅｖａｌｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，ＫＩＤＮＥＹ  ＩＮＴＥＲＮＡＴＩＯＮＡＬ，７５：１１４５−１１５２に記載されているように、動物における片側尿管結紮（ＵＵＯ）は、腎線維症及び慢性腎臓障害のモデルである。片側尿管結紮は、結紮、又は可逆性閉塞の設置によって達成することができる。処置時間に抗ＧＤＦ１５抗体又は対照を動物に投与する。身体及び腎臓のサイズ及び重量、糸球体濾過量、収縮期血圧、尿細管の萎縮及び尿細管アポトーシスについて、動物を評価する。糸球体濾過量は、標準的クリアランス技術を用いて、ＵＵＯの解除後に測定することができる。
【０１４１】
実施例６：以前他の腎臓介入治療を受けた被験者の処置
以前既知の腎臓介入治療を受けたことがあるが、慢性腎臓病の少なくとも１つの特徴を呈示する、腎臓縮小を呈する被験者を抗ＧＤＦ１５抗体で治療する。抗ＧＤＦ１５抗体による処置は、３ヵ月の期間にわたって継続し、その間、一定の間隔で腎臓サイズ、クレアチンレベル、糸球体濾過量、及び腎臓出量をモニターする。
【０１４２】
参照による組み込み
本明細書で参照される特許文献及び科学論文、２０１４年６月２０日に提出された米国特許出願第６２／０１５，０９３号明細書を含む、の全開示内容は、あらゆる目的のために参照により本明細書に組み込むものとする。
【０１４３】
同等物
本発明は、その精神又は本質的特徴から逸脱することなく、他の具体的な形態で具現化され得る。そのため、前述した実施形態は、あらゆる点で、本明細書で説明する発明を制限するのではなく、例示するものと考えるべきである。従って、本発明の範囲は、以上の説明によってではなく、添付の特許請求の範囲によって示され、請求項の意味及び同等物の範囲内で生じる変更は全て、本発明の範囲に含まれるものとする。
本発明の態様として、以下のものが挙げられる。
［１］治療を必要とする被験者の腎臓機能を高める方法であって、前記被験者の腎臓機能を高めるために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含む方法。
［２］治療を必要とする、腎臓障害又は腎機能不全を有する被験者を治療する方法であって、前記腎臓障害又は腎機能不全の症状を改善するために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含む方法。
［３］治療を必要とする被験者の腎臓縮小を軽減又は逆転する方法であって、ここで、前記被験者は、慢性腎臓病の１つ又は複数の症状を有し、前記被験者の腎臓縮小を軽減又は逆転するために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含む方法。
［４］治療を必要とする被験者の慢性腎臓病（ＣＫＤ）を治療又は予防する方法であって、前記被験者のＣＫＤを治療又は予防するために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含む方法。
［５］前記被験者が、高い血中レベルのＧＤＦ１５を有する、［１］〜［４］のいずれか１項に記載の方法。
［６］前記被験者が、９０ｍｌクレアチニン／分／１．７３ｍ２体表面積未満の糸球体濾過量（ＧＦＲ）を呈示する、［１］〜［５］のいずれか１項に記載の方法。
［７］前記被験者が、アルブミン尿を呈示する、［１］〜［６］のいずれか１項に記載の方法。
［８］前記被験者が、１日当たり３０ｍｇ、尿１リットル当たり３０ｍｇ、及び／又は３０μｇ／ｍｇ尿中クレアチニンを超えるアルブミンの尿中排出量を呈示する、［７］に記載の方法。
［９］前記被験者が、高尿酸血症を呈示する、［１］〜［８］のいずれか１項に記載の方法。
［１０］前記被験者が、少なくとも６．３ｍｇ／ｄＬの血清尿酸レベルを呈示する、［９］に記載の方法。
［１１］前記被験者が、鉄欠乏症を呈示する、［１］〜［１０］のいずれか１項に記載の方法。
［１２］前記被験者が、２５％未満のトランスフェリン飽和及び低フェリチンレベルを呈示する、［１１］に記載の方法。
［１３］前記被験者が、慢性腎臓病を有すると診断されている、［１］〜［１２］のいずれか１項に記載の方法。
［１４］前記ＧＤＦ１５調節剤が、ＧＤＦ１５活性を低減又は阻害する、［１］〜［１３］のいずれか１項に記載の方法。
［１５］前記ＧＤＦ１５調節剤が、抗ＧＤＦ１５抗体である、［１］〜［１４］のいずれか１項に記載の方法。
［１６］前記抗ＧＤＦ１５抗体が、ヒト化又はヒト抗体である、［１５］に記載の方法。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【配列表】
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