(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
0006732736.tif 000038
の化合物、立体異性体、薬学的に許容されるその塩、または溶媒和物であって、前記化合物は以下の群：
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＦであり、かつＲ３がＨ、ＦもしくはＣＨ３であり；
Ｒ１がＦもしくはＣＨ３であり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、かつＲ３がＨであり；
Ｒ１がＦであり、Ｒ２がＨであり、かつＲ３がＣＨ３であり；
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、かつＲ３がＨであり；
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＣｌであり、かつＲ３がＨもしくはＣＨ３であり；
Ｒ１がＦであり、Ｒ２がＦであり、かつＲ３がＨであり；または
Ｒ１がＣＨ３であり、Ｒ２がＨであり、かつＲ３がＦである
から選択される化合物、立体異性体、薬学的に許容されるその塩、または溶媒和物。
【請求項２】
以下の群：
【化２】
0006732736.tif 000039
【化３】
0006732736.tif 000040
【化４】
0006732736.tif 000041
から選択される化合物もしくはその立体異性体、薬学的に許容されるその塩、または溶媒和物。
【請求項３】
請求項１に記載の、式（Ｉ）の化合物もしくは立体異性体、薬学的に許容されるその塩、または溶媒和物を、１種以上の薬学的に許容される賦形剤、希釈剤または担体と共に含む医薬組成物。
【請求項４】
薬剤として使用するための、請求項１に記載の、式（Ｉ）の化合物もしくは立体異性体、薬学的に許容されるその塩、または溶媒和物、あるいは請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
デング熱の治療に使用するための、請求項１に記載の、式（Ｉ）の化合物もしくは立体異性体、薬学的に許容されるその塩、または溶媒和物、あるいは請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項６】
次の構造式（Ｉ）
【化５】
0006732736.tif 000042
によって示される化合物、立体異性体、薬学的に許容されるその塩、または溶媒和物であって、前記化合物が以下の群：
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＦであり、かつＲ３がＨ、ＦもしくはＣＨ３；
Ｒ１がＦもしくはＣＨ３であり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、かつＲ３がＨであり；
Ｒ１がＦであり、Ｒ２がＨであり、かつＲ３がＣＨ３であり；
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、かつＲ３がＨであり；
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＣｌであり、かつＲ３がＨもしくはＣＨ３であり；
Ｒ１がＦであり、Ｒ２がＦであり、かつＲ３がＨであり；または
Ｒ１がＣＨ３であり、Ｒ２がＨであり、かつＲ３がＦである、
から選択される化合物もしくは立体異性体、薬学的に許容されるその塩、または溶媒和物を含む医薬組成物であって、生体試料または患者におけるデングウィルスの複製を阻害するための医薬組成物。
【請求項７】
追加の治療薬と投与される、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記追加の治療薬は、抗ウィルス剤もしくはデングワクチン、またはその両方から選択される請求項７に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一または二置換インドール化合物、前記化合物を使用することによってデングウィルス感染を予防または治療する方法に関し、また、薬剤として使用するため、より好ましくはデングウィルス感染を治療または予防する薬剤として使用するための前記化合物に関する。本発明はさらに、その化合物の医薬組成物または配合剤、薬剤として使用するため、より好ましくはデングウィルス感染を予防または治療するための組成物または配合剤に関する。本発明はまた、その化合物の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
蚊またはダニによって伝播されるフラビウィルスは、脳炎や出血熱などの人の生命を脅かす感染症を引き起こす。４種のはっきりと区別されるものの、血清型が近似しているフラビウィルスデング、いわゆるＤＥＮＶ−１、ＤＥＮＶ−２、ＤＥＮＶ−３およびＤＥＮＶ−４が知られている。デングは、世界の殆どの熱帯および亜熱帯地域、主に都市部および準都市部に特有である。世界保健機関（Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ）（ＷＨＯ）によれば、２５億人（そのうちの１０億人が小児である）がＤＥＮＶ感染の危険性がある（ＷＨＯ、２００２）。毎年、世界で、推定５千万〜１億例のデング熱［ＤＦ］、５０万例の重度のデング熱疾患（すなわち、デング出血熱［ＤＨＦ］およびデング熱ショック症候群［ＤＳＳ］）、および２０，０００人を超える死者が発生している。ＤＨＦは、流行地における小児の入院および死亡の主な要因となっている。要するに、デング熱はアルボウィルス病の最大の原因である。ラテンアメリカ、東南アジアおよび西太平洋にある国々（ブラジル、プエルトリコ、ベネズエラ、カンボジア、インドネシア、ベトナム、タイなど）における最近の大流行のために、過去数年に亘って、デング熱の症例数が著しく増加している。この病気が新しい地域に広がっているため、デング熱の症例数が増加しているだけでなく、発生がより深刻化する傾向が見られる。
【０００３】
デングウィルス感染に関連する疾患の予防および／または制御のために使用可能な方法は、現在のところ、ベクターを制御する蚊の根絶戦略のみである。デングウィルスに対するワクチンの開発が進められているが、多くの困難がある。そのような困難には、抗体依存性感染増強（ＡＤＥ）と称する現象の存在が含まれる。１種の血清型による感染からの回復により、その血清型に対して生涯続く免疫が得られるが、他の３種の血清型の１種によるその後の感染に対しては、部分的で、かつ一時的な保護を与えるのみである。他の血清型に感染すると、既に存在している異種抗体が、新たに感染したデングウィルスの血清型と複合体を形成するが、その病原体を中和することはない。それどころか、細胞へのウィルスの侵入が促進され、ウィルスの無制御な複製が生じ、ウィルス力価のピークがより高くなる。一次感染および二次感染ではいずれも、ウィルス力価が高くなると、デング熱疾患はより重度となる。母親由来抗体は授乳によって容易に乳児に伝わるため、これが、重度のデング熱疾患による影響が子供の方が大人より大きいことの理由の１つであるかもしれない。
【０００４】
２種以上の血清型が同時に広まった地域は、大流行地とも呼称されるが、そこでは、２次の、より重度の感染の危険性が増大するため、重度のデング熱疾患の危険性が非常に高くなる。さらに、流行が過度に及んだ状況では、より悪性の高い株が出現する可能性が増し、これは、次には、デング出血熱（ＤＨＦ）またはデング熱ショック症候群の可能性を増大させる。
【０００５】
アエデス・アエジプチ（Ａｅｄｅｓ  ａｅｇｙｐｔｉ）およびアエデスアルボピクタス（Ａｅｄｅｓ  ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ）（ヒトスジシマカ）などの、デングウィルスを運ぶ蚊は地球上の北に移動してきている。米国疾病対策センター（Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ（ＵＳ）Ｃｅｎｔｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ａｎｄ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ（ＣＤＣ））によれば、それらの蚊はいずれも、現在、テキサス州南部に偏在している。デングウィルスを運ぶ蚊の北への広がりは、米国に限らず、ヨーロッパでも観察されている。
【０００６】
過去３０年に亘って多大な努力が続けられているが、現在のところ、デングウィルス疾患からヒトを保護するために使用可能なワクチンはない。４種の血清型の全てから同じ程度に守るワクチン（４価ワクチン）を開発することが主要な問題である。さらに、今日、デング熱ウィルス感染を治療または予防する特定の抗ウィルス薬を入手することはできない。明らかに、満たされていない、動物、特にヒトにおけるウィルス感染、特に、フラビウィルス、特にデングウィルスにより引き起こされるウィル感染を予防または治療する治療学上の大きな医療ニーズが依然としてある。良好な抗ウィルス力を有し、副作用がないか、もしくは少なく、複数のデングウィルス血清型に対し広い抗ウィルス活性スペクトルを有し、低毒性で、かつ／または良好な薬物動態特性もしくは薬理特性を有する化合物が強く求められている。
【０００７】
本発明は、今、デングウィルスの４種の血清型すべてに対して高い活性を示す化合物、一または二置換インドール誘導体を提供するものである。本発明の化合物は、また、良好な薬物動態学的プロファイルを有し、驚くべきことに、これらの特定の化合物は良好なキラル安定性を示す。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、本発明の化合物によって上記問題の少なくとも１つを解決することができるという予期しない発見に基づいている。
【０００９】
本発明は、現在知られている４種の血清型全てに対して高い抗ウィルス活性を有することが明らかとなった化合物を提供する。本発明はさらに、これらの化合物がデングウィルス（ＤＥＮＶ）の増殖を効果的に阻害することを示す。したがって、これらの化合物は、動物、哺乳動物およびヒトにおけるウィルス感染の治療および／または予防に、特にデングウィルスの感染の治療および／または予防に使用することができる有用な強力化合物群を構成する。
【００１０】
本発明はさらに、そのような化合物の医薬としての使用、ならびに、ウィルス感染、特に、動物または哺乳動物におけるデングウィルスのファミリーに属するウィルスによる感染、より特には、ヒトにおける感染を治療および／または予防する薬剤を製造するための使用に関する。本発明はまた、そのような化合物の全てを製造する方法、およびそれらを有効量含む医薬組成物に関する。
【００１１】
本発明はまた、そのような化合物の１種以上、または薬学的に許容されるその塩の有効量を、任意選択により、１種以上の他の医薬と併用して、それを必要としている患者に投与することにより、ヒトにおけるデングウィルス感染を治療または予防する方法に関する。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明の一態様は、一または二置換インドール基を含む、式（Ｉ）
【化１】
0006732736.tif 000002
の化合物、立体異性体、薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、または多形体の提供であり、前記化合物は以下の群から選択される：
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＦであり、かつＲ３がＨであり、ＦもしくはＣＨ３であり；
Ｒ１がＦもしくはＣＨ３であり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、かつＲ３がＨであり；
Ｒ１がＦであり、Ｒ２がＨであり、かつＲ３がＣＨ３であり；
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、かつＲ３がＨであり；
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＣｌであり、かつＲ３がＨもしくはＣＨ３であり；
Ｒ１がＦであり、Ｒ２がＦであり、かつＲ３がＨであり；または
Ｒ１がＣＨ３であり、Ｒ２がＨであり、かつＲ３がＦである。
【００１３】
特に、本発明の化合物もしくはその立体異性体、薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、または多形体は以下の群から選択される：
【化２】
0006732736.tif 000003
【化３】
0006732736.tif 000004
【化４】
0006732736.tif 000005
【００１４】
本発明の一部はまた、１種以上の薬学的に許容される賦形剤、希釈剤または担体と共に、式（Ｉ）の化合物もしくは立体異性体、薬学的に許容されるその塩、溶媒和物または多形体を含む医薬組成物である。
【００１５】
式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容される塩としては、その酸付加塩および塩基塩が挙げられる。好適な酸付加塩は、非毒性塩を形成する酸から形成される。好適な塩基塩は、非毒性塩を形成する塩基から形成される。
【００１６】
本発明の化合物はまた、非溶媒和形態および溶媒和形態で存在してもよい。「溶媒和物」という用語は、本発明の化合物と、１種以上の薬学的に許容される溶媒分子、例えば、エタノールとを含む分子複合体を表すために本明細書では用いられる。
【００１７】
「多形体」という用語は、本発明の化合物が２つ以上の形態または結晶構造で存在する能力を指す。
【００１８】
本発明の化合物は、結晶質または非晶質製品として投与され得る。それらは、沈澱、結晶化、凍結乾燥、噴霧乾燥、または蒸発乾燥などの方法によって、例えば、固体プラグ、粉末、またはフィルムとして得られ得る。それらは、単独で、または本発明の１種以上の他の化合物と組み合わせて、または１種以上の他の薬物と組み合わせて投与されてもよい。一般に、それらは、１種以上の薬学的に許容される賦形剤を伴って製剤として投与されるであろう。「賦形剤」という用語は、本発明の化合物以外の任意の成分を表すために本明細書では用いられる。賦形剤の選択は、特定の投与形態、溶解性および安定性への賦形剤の影響、ならびに剤形の性質などの要因に大きく依存する。
【００１９】
本発明の化合物またはその任意のサブグループは、投与目的のための様々な医薬品形態に製剤化され得る。適切な組成物として、全身投与薬物用に通常用いられる全ての組成物が挙げられ得る。本発明の医薬組成物を調製するために、活性成分としての、有効量の特定の化合物は、任意選択的に付加塩形態で、薬学的に許容される担体と組み合わせられて均質混合物になり、その担体は、投与に所望される製剤の形態に応じて、多種多様な形態をとり得る。これらの医薬組成物は望ましくは、例えば、経口または直腸投与に好適な単一の剤形にある。例えば、経口剤形の組成物を調製する際に、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤および溶液剤などの経口液体製剤の場合には、例えば、水、グリコール、油、アルコールなどの通常の医薬媒体のいずれかを使用することができ、または散剤、丸剤、カプセル剤および錠剤の場合には、デンプン、糖、カオリン、希釈剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤などの固体担体を使用することができる。投与が容易であるため、錠剤およびカプセル剤は最も有利な経口単位剤形であり、その場合、固体医薬担体が当然使用される。使用の直前に、液体形態に変換することができる固形製剤もまた含まれる。
【００２０】
投与を容易にし、投与量を均一にするために、前述の医薬組成物を単位剤形に製剤化することはとりわけ有利である。本明細書で使用されるような単位剤形は、単位投与量として好適な物理的に個別の単位を指し、各単位は、必要な医薬担体と共同して所望の治療効果を生じるように計算された所定量の活性成分を含有する。そのような単位剤形の例は、錠剤（分割錠またはコーティング錠を含む）、カプセル剤、丸剤、粉末パケット、ウエハー、坐剤、注射液または懸濁剤など、およびそれらの分離複合剤である。
【００２１】
感染症の治療の当業者は、本明細書で以下に示される試験結果から有効量を決定することができるであろう。一般に、有効な日量は、０．０１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重であろうと考えられる。必要な用量を２、３、４またはそれ以上のサブ用量として、一日の間に適切な間隔を置いて投与することが適切であり得る。前記サブ用量は、例えば、単位剤形当たり１〜１０００ｍｇ、特に５〜２００ｍｇの活性成分を含有する単位剤形として製剤化され得る。
【００２２】
正確な投与量および投与頻度は、当業者に周知のように、使用される式（Ｉ）の特定の化合物、治療される特定の病態、治療される病態の重症度、特定の患者の年齢、体重および全般的な身体状態、ならびに個人が摂取している可能性のある他の薬剤に応じて決まる。さらに、有効量は、治療される対象の応答に応じて、および／または本発明の化合物を処方する医師の評価に応じて、減少または増加させ得ることは明らかである。上述の有効量範囲はそれ故、指針にすぎず、本発明の範囲または使用を、いかなる程度であれ限定することを意図するものではない。
【００２３】
本開示はまた、本発明の化合物に含まれる原子の同位体を含むことを意図している。例えば、水素の同位体はトリチウムおよびジュウテリウムを含み、炭素の同位体は、Ｃ−１３およびＣ−１４を含む。
【００２４】
本発明に使用される本化合物は、また、それらの立体化学的な異性体で存在してもよく、同じ順序で結合している同じ原子から構成されるが、異なる三次元構造を有し、交換可能ではない全ての可能な化合物を定義する。他に特記されない限り、化合物の化学名は、上記化合物が所有し得る全ての可能な立体化学的異性型の混合物を包含する。
【００２５】
前記混合物は、前記化合物の基本分子構造の全てのジアステレオマーおよび／またはエナンチオマーを含み得る。純粋な形態または混合されている、本発明において使用される化合物の立体化学的異性体は、ラセミ混合物またはラセミ化合物を含め、全て本発明の特許請求の範囲に包含されることを意図している。
【００２６】
本明細書に記載する化合物および中間体の純粋な立体異性体は、同じ基本分子構造を有する、前記化合物または中間体の他のエナンチオマーまたはジアステレオマーを実質的に含まない異性体と定義される。特に、「立体異性として純粋な」という表現は、少なくとも８０％の立体異性体過剰率（すなわち最小９０％の１種の異性体と最大１０％の他の可能な異性体）から１００％までの立体異性体過剰率（すなわち１００％の１種の異性体で他種の異性体を全く含まない）を有する化合物または中間体、より特定すると、９０％から１００％までの立体異性体過剰率を有する、さらにより特定すると９４％から１００％までの立体異性体過剰率を有する、最も特定すると、９７％から１００％までの立体異性体過剰率を有する化合物または中間体に関する。「エナンチオマーとして純粋な」および「ジアステレオマーとして純粋な」という用語も同様に理解されるべきであるが、その場合、それらはそれぞれ、当該混合物のエナンチオマー過剰率、ジアステレオマー過剰率に関するものとする。
【００２７】
本発明において使用される化合物および中間体の純粋な立体異性形態は、当分野で知られている手順を適用することにより得ることができる。例えば、エナンチオマーは、光学的に活性な酸または塩基を用いてそれらのジアステレオマー塩を選択的に結晶化することにより互いに分離することができる。光学活性酸の例は、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジトルオイル酒石酸およびカンファースルホン酸である。あるいは、エナンチオマーは、キラル固定相を用いたクロマトグラフ法により分離することができる。前記純粋な立体化学的異性体は、適切な出発原料の対応する純粋な立体化学的異性体から誘導することもできるが、但し、反応は立体特異的に起こるものとする。好ましくは、特定の立体異性体が必要な場合、前記化合物は立体特異的な製造方法により合成されるであろう。これらの方法は、エナンチオマーとして純粋な出発原料を使用するのが有利であろう。
【００２８】
一般合成方法
一般式Ｉの化合物の合成は、スキーム１に略記したように行うことができる。２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）酢酸（ＩＩ）を、例えば、塩化チオニルなどの塩素化試薬により、対応する２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）アセチルクロリド（ＩＩＩ）に変換することができる。一般式ＩＶで示される置換インドールによる酸塩化物ＩＩＩのフリーデル・クラフツ反応は、例えば、ＣＨ２Ｃｌ２などの好適な溶媒に溶解した、例えば、Ｅｔ２ＡｌＣｌなどのルイス酸試薬を使用し、通常、冷却を含む、好適な反応条件下で行うことができ、一般式Ｖで示される３−アシル化インドールを得ることができる。一般式Ｖで示される化合物のカルボニル部分へのアルファ位のアニリン部分の導入は、例えば、ＴＨＦなどの好適な溶媒中での、例えば、フェニルトリメチルアンモニウムトリブロミドなどの試薬によるＶの臭素化を例えば含む一連の反応によって行うことができ、一般式ＶＩで示される化合物を得ることができ、その後、一般式ＶＩで示される化合物を、例えば、ＣＨ３ＣＮなどの好適な溶媒中で、２−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）エタノール（ＶＩＩ）と、通常、例えば、ＴＥＡまたはＤＩＰＥＡなどの塩基を使用して反応させることにより、一般式Ｉで示される化合物をラセミ混合物として得ることができる。一般式Ｉで示される化合物のキラル分離は、例えば、キラルクロマトグラフィーによって行うことができ、一般式ＩのエナンチオマーＡおよびＢを得ることができる。
【化５】
0006732736.tif 000006
【００２９】
代替の方法として、一般式Ｖで示される中間体はまた、スキーム２に略記したように製造することができる：一般式ＶＩＩＩで示されるＮ−Ｂｏｃ保護置換インドール−３−カルバルデヒドは、例えば、シアン化ナトリウムおよび亜硫酸水素ナトリウムなどの試薬の存在下、例えば、水と、例えばジオキサンなどの水に混合可能な有機溶媒との混合物などの好適なような田舎で、モルホリンと反応させることにより、対応する一般式ＩＸで示されるストレッカー型中間体に変換することができる。一般式ＩＸで示される化合物の４−クロロ−２−メトキシ−ベンジルクロリドによるアルキル化は、例えば、ヘキサメチルジシラザンカリウムなどの塩基の存在下、例えば、ＤＭＦなどの好適な溶媒中で行うことができ、一般式Ｘで示される化合物を得ることができる。一般式Ｘで示される化合物を、例えば、高温下、塩酸水溶液で処理するなど、好適な水性酸性加水分解条件に置くことにより、一般式Ｖで示される中間体を得ることができる。
【化６】
0006732736.tif 000007
【実施例】
【００３０】
ＬＣ／ＭＳ法
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）測定は、それぞれの方法に明記されるようなＬＣポンプ、ダイオードアレイ（ＤＡＤ）検出器またはＵＶ検出器およびカラムを使用して行った。必要ならば、追加の検出器を含めた（下の方法の表を参照されたい）。
【００３１】
カラムからの流れを、大気圧イオン源を配置構成した質量分析計（ＭＳ）に導入した。化合物の公称モノアイソトピック分子量（ＭＷ）の特定を可能にするイオンを得るために、調整パラメータ（例えば、走査範囲、データ収集時間（ｄｗｅｌｌ  ｔｉｍｅ）など）を設定することは当業者の知識の範囲内である。データ取得は、適切なソフトウェアを用いて行った。
【００３２】
化合物は、それらの実測保持時間（Ｒｔ）およびイオンで表される。データの表に別段記載されていなければ、報告された分子イオンは、［Ｍ＋Ｈ］＋（プロトン化分子）および／または［Ｍ−Ｈ］−（脱プロトン化分子）に相当する。化合物が直接イオン化できなかった場合、付加物の種類を記載する（すなわち、［Ｍ＋ＮＨ４］＋、［Ｍ＋ＨＣＯＯ］−など）。複数の同位体パターンを有する分子（Ｂｒ、Ｃｌ）では、報告する値は最も低い同位体質量について得られた値である。得られた結果には全て、使用した方法に通常関連する実験による不確かさを伴った。
【００３３】
以下、「ＳＱＤ」はシングル四重極検出器を意味し、「ＭＳＤ」は質量選択検出器を意味し、「ＲＴ」は室温を意味し、「ＢＥＨ」は架橋エチルシロキサン／シリカハイブリッドを意味し、「ＤＡＤ」はダイオードアレイ検出器を意味し、「ＨＳＳ」は高強度シリカを意味する。
【００３４】
ＬＣ／ＭＳ法コード（流速はｍＬ／分で表し、カラム温度（Ｔ）は℃で表し、分析時間は分で表す）。
【００３５】
【表１】
0006732736.tif 000008
【００３６】
ＳＦＣ−ＭＳ法
ＳＦＣ測定は、二酸化炭素（ＣＯ２）を送るバイナリポンプ、および改質器、オートサンプラ、カラムオーブン、立ち上がりから４００ｂａｒまでの高圧フローセルを備えたダイオードアレイ検出器で構成される分析超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）システムを使用して行った。質量分析計（ＭＳ）が配置されている場合、カラムからの流れを（ＭＳ）に導入した。化合物の公称モノアイソトピック分子量（ＭＷ）の特定を可能にするイオンを得るために、調整パラメータ（例えば、走査範囲、データ収集時間（ｄｗｅｌｌ  ｔｉｍｅ）など）を設定することは当業者の知識の範囲内である。データ取得は、適切なソフトウェアを用いて行った。
【００３７】
分析ＳＦＣ−ＭＳ法（流速はｍＬ／分で表し、カラム温度（Ｔ）は℃で表し、分析時間は分で表し、背圧（ＢＰＲ）はｂａｒで表す。
【００３８】
【表２】
0006732736.tif 000009
【００３９】
融点
値はピーク値または融解範囲の何れかであり、この分析的方法に一般的に付随する実験的な不確実性を伴って得られる。
【００４０】
ＤＳＣ８２３ｅ（ＤＳＣとして示す）
多くの化合物について、ＤＳＣ８２３ｅ（Ｍｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ）で融点を測定した。融点は、１０℃／分の温度勾配で測定した。最高温度は３００℃であった。
【００４１】
旋光度
旋光度は、ナトリウムランプを備えたＰｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  ３４１旋光計で測定し、次のように報告した。［α］°（λ、ｃｇ／１００ｍｌ、溶媒、Ｔ℃）。
【００４２】
［α］λＴ＝（１００α）／（ｌ×ｃ）：式中、ｌは経路長（単位：ｄｍ）であり、ｃは温度Ｔ（℃）および波長λ（単位：ｎｍ）における試料の濃度（単位：ｇ／１００ｍｌ）である。使用した光の波長が５８９ｎｍ（ナトリウムＤ線）である場合、代わりに記号Ｄを使用することができる。旋光度の符号（＋または−）は常に記載されるべきである。この式を用いる場合、濃度および溶媒を旋光度の後に括弧内で常に提供する。旋光度は度を用いて報告し、濃度の単位は記載しない（それは、ｇ／１００ｍｌであると見なされる）。
【００４３】
実施例１：２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物１）の合成、ならびにエナンチオマー１Ａおよび１Ｂのキラル分離。
【化７】
0006732736.tif 000010
【００４４】
中間体１ａの合成：
２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）酢酸［ＣＡＳ  １７０７３７−９５−８］（５．８ｇ、２８．９ｍｍｏｌ）を塩化チオニル（５０ｍＬ）に少量ずつ添加し、得られた溶液を終夜６０℃で撹拌した。溶媒を減圧濃縮し、トルエンと同時蒸発させて、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）アセチルクロリド１ａ（６．５ｇ）を油状残留物として得、さらに精製することなく次の工程に使用した。
【００４５】
中間体１ｂの合成：
ジエチルアルミニウムクロリドの１Ｍヘキサン（３７．１ｍＬ、３７．１４ｍｍｏｌ）溶液を０℃で、６−フルオロ−１Ｈ−インドール［ＣＡＳ  ３９９−５１−９］（３．３４ｇ、２４．７６ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）溶液に滴下した。３０分間０℃に保持した後、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）アセチルクロリド１ａ（６．３ｇ、２８．７６ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）溶液を０℃で徐々に添加した。反応物を０℃で３時間撹拌した。氷水を添加し、沈澱物を濾別し、水および少量のＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。固形物を７０℃で終夜、真空乾燥させて、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン１ｂ（４．９ｇ）を得た。
【００４６】
中間体１ｃの合成：
０℃で、フェニルトリメチルアンモニウムトリブロミド［ＣＡＳ  ４２０７−５６−１］（５．８ｇ、１５．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６５ｍＬ）溶液を、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン１ｂ（４．９ｇ、１５．４ｍｍｏｌ）とＴＨＦ（６０ｍＬ）の混合物に滴下した。この混合物を０℃で１時間、および室温で２．５時間撹拌した。沈殿物を濾別し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃに取り、水で洗浄した。有機層中に生じた沈殿物を濾別し、乾燥して、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン１ｃ（４．６ｇ）の第１のバッチを得た。有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧蒸発させた。残留物をＥｔＯＡｃで結晶化し、沈殿物を濾別し、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、真空乾燥して、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン１ｃ（１．６ｇ）の第２の画分を得た。
【００４７】
化合物１の合成、ならびにエナンチオマー１Ａおよび１Ｂのキラル分離：
ＣＨ３ＣＮ（１６ｍＬ）中に、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン１ｃ（２．１ｇ、５．３ｍｍｏｌ）、２−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）エタノール［ＣＡＳ  ７２５２３７−１６−１］（９２４ｍｇ、５．０５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．４７ｍＬ、１０．６ｍｍｏｌ）を含む混合物を管に入れて密閉し、０〜４００Ｗの範囲の出力（固定ホールド時間）を有するマイクロウェーブＢｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  ＥＸＰ  ６０を用いて１００℃で３０分間加熱した。反応物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、有機層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧濃縮した。残留物をシリカゲル（１５〜４０μｍ、８０ｇ）のフラッシュクロマトグラフィーにより、ヘプタン／ＥｔＯＡｃの５０／５０から０／１００への勾配を用いて精製した。純粋な画分を回収し、濃縮して、１．１ｇの化合物１を得た。この画分を、他のバッチの０．９３ｇの化合物１と合わせ、その後、アキラル（固定相：ＣＹＡＮＯ  ６μｍ  １５０×２１．２ｍｍ、移動相：７５％ＣＯ２、２５％ＭｅＯＨ）により精製して、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物１、１．３６ｇ）をラセミ混合物として得た。
【００４８】
化合物１（１．３６ｇ）のエナンチオマーを、キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｃｅｌ（登録商標）ＯＪ  ２０×２５０ｍｍ、移動相：６０％ＣＯ２、４０％ＭｅＯＨ）により分離して、第１の溶出エナンチオマー６１１ｍｇおよび第２の溶出エナンチオマー５８６ｍｇを得た。第１の溶出エナンチオマーをＣＨ３ＣＮ／ジイソプロピルエーテル／ヘプタンに取った。沈殿物を濾別し、乾燥して、エナンチオマー１Ａ（４９６ｍｇ）を非晶質粉末として得た。第２の溶出エナンチオマーをＣＨ３ＣＮ／ジイソプロピルエーテル／ヘプタンに取った。沈殿物を濾別し、乾燥して、エナンチオマー１Ｂ（４５８ｍｇ）を非晶質粉末として得た。
【００４９】
化合物１：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．６１（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｑ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ）３．７７−３．８８（ｍ，２Ｈ）３．９６（ｓ，３Ｈ）４．７８（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）５．７１（ｔ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）５．９３（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，２Ｈ）６．１５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．４０（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．９６（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．０２−７．０８（ｍ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．２７（ｄｄ，Ｊ＝９．６，２．４Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）８．１３（ｄｄ，Ｊ＝８．８，５．７Ｈｚ，１Ｈ）８．４３（ｓ，１Ｈ）１１．９６−１２．１７（ｍ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ２．９５ｍｉｎ、ＭＨ＋４９９
【００５０】
エナンチオマー１Ａ：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．５７−３．６８（ｍ，５Ｈ）３．７７−３．８９（ｍ，２Ｈ）３．９６（ｓ，３Ｈ）４．７３−４．８７（ｍ，１Ｈ）５．７１（ｔ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）５．９１−５．９６（ｍ，２Ｈ）６．１５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．３９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．９６（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．０１−７．１１（ｍ，２Ｈ）７．２７（ｄｄ，Ｊ＝９．６，２．４Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）８．１３（ｄｄ，Ｊ＝９．６，５．７Ｈｚ，１Ｈ）８．４３（ｓ，１Ｈ）１１．４５−１２．３１（ｍ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ２．９５、ＭＨ＋４９９
［α］Ｄ２０：＋１１２．１°（ｃ０．２８１、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｃ）：Ｒｔ３．１７ｍｉｎ、ＭＨ＋４９９、キラル純度１００％。
【００５１】
エナンチオマー１Ｂ：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．５７−３．６７（ｍ，５Ｈ）３．７４−３．９０（ｍ，２Ｈ）３．９６（ｓ，３Ｈ）４．７８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）５．７０−５．７４（ｍ，１Ｈ）５．９３（ｓ，２Ｈ）６．１５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．４０（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．９６（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．０２−７．０８（ｍ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．２７（ｄｄ，Ｊ＝９．６，２．４Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）８．１３（ｄｄ，Ｊ＝９．６，５．５Ｈｚ，１Ｈ）８．４３（ｓ，１Ｈ）１１．６３−１２．４７（ｍ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ２．９５、ＭＨ＋４９９
［α］Ｄ２０：−１１３．９°（ｃ０．２８、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｃ）：Ｒｔ４．１２ｍｉｎ、ＭＨ＋４９９、キラル純度１００％。
【００５２】
実施例１．１：ｐＨ７．４におけるエナンチオマー１Ａのキラル安定性
ｐＨ７．４の緩衝液中、４０℃および６０℃で２４時間および４８時間インキュベートした後、エナンチオマー過剰率（ｅｅ％）を測定することによって、エナンチオマー１Ａ（Ｒ＝ＯＭｅ）のキラル安定性を評価した。エナンチオマー１Ａ（Ｒ＝ＯＭｅ）のメトキシ置換基の、ラセミ化に対する安定性への影響を評価するため、エナンチオマー１’Ａ（Ｒ＝Ｈ）のキラル安定性を同じ条件で試験した。
【００５３】
この目的のために、１Ａまたは１’Ａの１００μＭのＤＭＳＯ溶液２５μＬを、４７５μＬの水性緩衝液ｐＨ７．４と混合することによって、１Ａおよび１’Ａの５μＭ緩衝（ｐＨ＝７．４）液を調製した。４０℃および６０℃Ｃで２４時間および４８時間インキュベートした後、試料を採取した。分析試料を  キラルＳＦＣ（ＭＳ検出）により分析し、キラル純度をエナンチオマー過剰率（ｅｅ％＝％エナンチオマーＡ−％エナンチオマーＢ）として示した。インキュベートする前、エナンチオマー１Ａおよび１’Ａはいずれも、キラル純度１００％であった。
【化８】
0006732736.tif 000011
【００５４】
【表３】
0006732736.tif 000012
【００５５】
実施例２：２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−フルオロ−７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物２）の合成、ならびにエナンチオマー２Ａおよび２Ｂのキラル分離。
【化９】
0006732736.tif 000013
【００５６】
中間体２ａの合成：
６−フルオロ−７−メチル−１Ｈ−インドール［ＣＡＳ  ５７８１７−１０−４］（１．１０ｇ、７．３７ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）溶液を、Ｎ２をフローしながら氷浴で冷却した。ジエチルアルミニウムクロリドの１Ｍヘキサン（１０ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）溶液を１５分かけて滴下した。０℃で１５分間さらに撹拌した後、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）アセチルクロリド１ａ（２．０６ｇ、９．４２ｍｍｏｌ、合成：実施例１を参照）のＣＨ２Ｃｌ２（３５ｍＬ）溶液を０℃で７５分かけて添加した。反応物を０℃で１時間撹拌し、その後、酒石酸カリウムナトリウム４水和物（ロッシェル塩）［ＣＡＳ  ６１００−１６−９］（４．２４ｇ、１５ｍｍｏｌ）の水（１０ｍＬ）溶液を徐々に添加して反応を停止させた。添加する間、混合物の内部温度を１０℃未満に保持した。氷浴を取り除き、２−メチル−ＴＨＦ（１６０ｍＬ）およびＮａ２ＳＯ４（６０ｇ）を加え、得られた混合物を室温で終夜撹拌した。混合物をｄｉｃａｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、濾過ケーキをＴＨＦで複数回、洗浄した。濾液をまとめ、減圧蒸発し、残留物を少量のＣＨ２Ｃｌ２で沈殿させた。固形物を濾液から分離し、真空乾燥させて、−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−フルオロ−７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン２ａ（１．９ｇ）を白色粉末として得た。
【００５７】
化合物２の合成、ならびにエナンチオマー２Ａおよび２Ｂのキラル分離：
２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−フルオロ−７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン２ａ（１．９ｇ、５．７３ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（６０ｍＬ）溶液を、Ｎ２−をフローしながら、氷浴上で冷却した。０℃で、フェニルトリメチルアンモニウムトリブロミド［ＣＡＳ  ４２０７−５６−１］（２．３ｇ、５．９１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液を１時間かけて滴下し、この混合物を０℃で、さらに１．５時間撹拌した。臭素化された粗中間体２ｂを含む反応混合物を減圧濃縮し、ＣＨ３ＣＮ（１００ｍＬ）に溶解した。２−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）エタノール［ＣＡＳ  ７２５２３７−１６−１］（２．１１ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（２ｍＬ、１１．６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で３日間撹拌した。水（３５０ｍＬ）を加え、反応生成物を２−メチル−ＴＨＦで抽出した（３×１００ｍＬ）。有機層をまとめ、０．５Ｍ  ＨＣｌ（２００ｍＬ）および水（３×３００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧乾燥した。残留物（２．４８ｇ）をカラムクロマトグラフィー（固定相：シリカ４０ｇ、ＨＰ−Ｓｐｈｅｒ（登録商標）４０μｍ；移動相：ヘプタン／ＥｔＯＡｃ勾配  １００／０〜０／１００）により精製した。反応生成物を含む化区分をまとめ、減圧蒸発した。残留物を少量のＥｔＯＡｃ／ヘプタン（１／１）混合物で沈澱させ、固形物を濾別し、真空乾燥して、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−フルオロ−７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物２、１．３８ｇ）をラセミ混合物として得た。
化合物２のエナンチオマー（１．３８ｇ）を分取ＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）Ｄｉａｃｅｌ  ＡＳ  ２０×２５０ｍｍ、移動相：ＣＯ２、０．４％ｉＰｒＮＨ２を含むＥｔＯＨ）により分離した。第１の溶出エナンチオマーをＭｅＯＨ（５０ｍＬ）と水（２０ｍＬ）との混合物に溶解し、この混合物を減圧蒸発して（２００ｍｂａｒ、水浴４０℃）、残留量２０ｍｌとした。得られた懸濁液を水２０ｍｌで希釈し、室温で３時間撹拌した。白色固体を濾別し、水で洗浄し、室温で真空乾燥してエナンチオマー２Ａ（６３１ｍｇ）を非晶質の白色粉末として得た。第２の溶出エナンチオマーをＭｅＯＨ（５０ｍＬ）と水（２０ｍＬ）との混合物に溶解し、この混合物を減圧蒸発して（２００ｍｂａｒ、水浴４０℃、残留量２０ｍｌとした。得られた懸濁液を水２０ｍｌで希釈し、室温で３時間撹拌した。白色固体を濾別し、水で洗浄し、室温で真空乾燥してエナンチオマー２Ｂ（６２５ｍｇ）を非晶質の白色粉末として得た。
【００５８】
化合物２：
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２．３７（ｂｒ  ｓ，３Ｈ）３．６０（ｓ，３Ｈ）３．６３（ｑ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ）３．７６−３．８９（ｍ，２Ｈ）３．９６（ｓ，３Ｈ）４．７６（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）５．７１（ｔ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ）５．９４（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，２Ｈ）６．１６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．３６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．９５（ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．０Ｈｚ，１Ｈ）７．００（ｄｄ，Ｊ＝１０．１，８．８Ｈｚ，１Ｈ）７．０８（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）７．９５（ｄｄ，Ｊ＝８．７，５．２Ｈｚ，１Ｈ）８．４１（ｓ，１Ｈ）１２．１７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ１．１９ｍｉｎ、ＭＨ＋５１３
【００５９】
エナンチオマー２Ａ：
１Ｈ  ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２．３８（ｓ，３Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．６２−３．６７（ｍ，２Ｈ）３．８２（ｄｄｔ，Ｊ＝１５．４，１０．２，５．１，５．１Ｈｚ，２Ｈ）３．９７（ｓ，３Ｈ）４．８１（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）５．７１（ｂｒ  ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）５．９５（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，２Ｈ）６．１７（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）６．４０（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．９６（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１．８Ｈｚ，１Ｈ）７．０２（ｂｒ  ｄｄ，Ｊ＝１０．１，９．０Ｈｚ，１Ｈ）７．１０（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）７．９６（ｄｄ，Ｊ＝８．６，５．３Ｈｚ，１Ｈ）８．４４（ｓ，１Ｈ）１２．２２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ１．２０、ＭＨ＋５１３
［α］Ｄ２０：＋８３．３°（ｃ０．３６、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｆ）：Ｒｔ２．０５ｍｉｎ、ＭＨ＋５１３、キラル純度１００％
【００６０】
エナンチオマー２Ｂ：
１Ｈ  ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２．３８（ｓ，３Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．６２−３．６７（ｍ，２Ｈ）３．８３（ｑｔ，Ｊ＝１０．２，５．１Ｈｚ，２Ｈ）３．９７（ｓ，３Ｈ）４．８０（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）５．７１（ｂｒ  ｔ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）５．９５（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ）６．１７（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．４０（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．９６（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１．８Ｈｚ，１Ｈ）７．０２（ｄｄ，Ｊ＝１０．２，８．８Ｈｚ，１Ｈ）７．１０（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）７．９６（ｄｄ，Ｊ＝８．６，５．３Ｈｚ，１Ｈ）８．４４（ｓ，１Ｈ）１２．２１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ１．２０、ＭＨ＋５１３
［α］Ｄ２０：−８１．９°（ｃ０．５１５、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｆ）：Ｒｔ３．２８ｍｉｎ、ＭＨ＋５１３、キラル純度１００％
【００６１】
実施例３：２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−クロロ−７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物３）の合成、ならびにエナンチオマー３Ａおよび３Ｂのキラル分離。
【化１０】
0006732736.tif 000014
【００６２】
中間体３ａの合成：
ジエチルアルミニウムクロリドの１Ｍヘキサン（１８．１ｍＬ、１８．１ｍｍｏｌ）溶液を０℃で、６−クロロ−７−メチル−１Ｈ−インドール［ＣＡＳ  ５７８１７−０９−１］（２ｇ、１２．０８ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍＬ）溶液に滴下した。３０分間０℃に保持した後、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）アセチルクロリド１ａ（３．２１ｇ、１４．６６ｍｍｏｌ、合成：実施例１を参照）のＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍＬ）溶液を０℃で徐々に加えた。反応物を０℃で３時間撹拌した。氷水を添加し、沈殿物を濾別し、水で洗浄した。固形物を真空乾燥して、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−クロロ−７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン３ａ（３．２ｇ）を得た。
【００６３】
中間体３ｂの合成：
０℃で、フェニルトリメチルアンモニウムトリブロミド［ＣＡＳ  ４２０７−５６−１］（３．６３ｇ、９．６５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８５ｍＬ）溶液を、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−クロロ−７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン３ａ（３．２ｇ、９．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８５ｍＬ）溶液に滴下した。混合物を０℃で１時間、および室温で２．５時間撹拌した。沈殿物を濾別し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。残留物を最小限のＣＨ３ＣＮ／ジイソプロピルエーテルに取った。沈殿物を濾別し、真空乾燥して２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−クロロ−７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン３ｂ（４．１ｇ）を得た。
【００６４】
化合物３の合成、ならびにエナンチオマー３Ａおよび３Ｂのキラル分離：
ＣＨ３ＣＮ／ＴＨＦ（１／１）（１２０ｍＬ）中の、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−クロロ−７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン  ３ｂ（３．１ｇ、７．２６ｍｍｏｌ）、２−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）エタノール［ＣＡＳ  ７２５２３７−１６−１］（１．３３ｇ、７．２６ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．９ｍＬ、１０．９ｍｍｏｌ）を７０℃で２４時間撹拌した。この混合物を減圧濃縮した。残留物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌで洗浄した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧蒸発させた。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９９．５／０．５）中）により精製した。純粋な画分を回収し、減圧蒸発した（２．３ｇ）。少量をＥｔ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮから結晶化して、分析試料の２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−クロロ−７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物３）をラセミ化合物として得た。
【００６５】
化合物３のエナンチオマー（２．２ｇ）を分取キラルＳＦＣ（固定相：（Ｓ，Ｓ）Ｗｈｅｌｋ−Ｏ  １  ５μｍ  ２５０×２１．１ｍｍ、移動相：４５％ＣＯ２、５５％ＥｔＯＨ（＋２％ＣＨ２Ｃｌ２））により分離して、１．１１ｇの第１の溶出エナンチオマーと１．０７ｇの第２の溶出エナンチオマーとを得た。第１の溶出エナンチオマーをＣＨ３ＣＮ／Ｅｔ２Ｏ／ヘプタンから固化して、エナンチオマー３Ａ（４６１ｍｇ）を非晶質の白色粉末として得た。第２の溶出エナンチオマーをＣＨ３ＣＮ／Ｅｔ２Ｏ／ヘプタンから固化して、エナンチオマー３Ｂ（８７２ｍｇ）を非晶質の白色粉末として得た。
【００６６】
化合物３：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １２．２６（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ）８．４６（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ）７．９７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．２２（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）６．９６（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．９Ｈｚ，１Ｈ）６．４０（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．１８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）５．９５（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，２Ｈ）５．７１（ｔ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）４．７９（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）３．９６（ｓ，３Ｈ）３．７７−３．８９（ｍ，２Ｈ）３．５８−３．６７（ｍ，５Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ３．２８ｍｉｎ、ＭＨ＋５２９
融点：２２０℃
【００６７】
エナンチオマー３Ａ：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １２．２６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）８．４６（ｓ，１Ｈ）７．９７（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．２１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．１０（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）６．９６（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．９Ｈｚ，１Ｈ）６．４０（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．１８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）５．９５（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，２Ｈ）５．７１（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）４．７９（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）３．９７（ｓ，３Ｈ）３．７７−３．８９（ｍ，２Ｈ）３．５９−３．６７（ｍ，５Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ３．２７  ｍｉｎ、ＭＨ＋５２９
［α］Ｄ２０：＋８８．８°（ｃ０．２６９１、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｅ）：Ｒｔ３．４０ｍｉｎ、ＭＨ＋５２９、キラル純度１００％。
【００６８】
エナンチオマー３Ｂ：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １２．２６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）８．４５（ｓ，１Ｈ）７．９７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．２１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）６．９６（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．９Ｈｚ，１Ｈ）６．４０（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．１８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）５．９５（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，２Ｈ）５．７１（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）４．７９（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）３．９７（ｓ，３Ｈ）３．７６−３．９０（ｍ，２Ｈ）３．６０−３．６６（ｍ，５Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ３．２７ｍｉｎ、ＭＨ＋５２９
［α］Ｄ２０：−８７．４°（ｃ０．２５６４、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｅ）：Ｒｔ４．１９ｍｉｎ、ＭＨ＋５２９、キラル純度１００％。
【００６９】
実施例４：１−（６−クロロ−１Ｈ−インドール―３−イル）−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物４）の合成、ならびにエナンチオマー４Ａおよび４Ｂのキラル分離。
【化１１】
0006732736.tif 000015
【００７０】
中間体４ａの合成：
ジエチルアルミニウムクロリドの１Ｍヘキサン（１９．８ｍＬ、１９．８ｍｍｏｌ）溶液を０℃で、６−クロロ−１Ｈ−インドール［ＣＡＳ  １７４２２−３３−２］（２ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（４５ｍＬ）溶液に滴下した。３０分間０℃に保持した後、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）アセチルクロリド１ａ（３．３６ｇ、１５．３ｍｍｏｌ、合成：実施例１を参照）のＣＨ２Ｃｌ２（４５ｍＬ）溶液を０℃で徐々に加えた。反応物を０℃で３時間撹拌した。氷水を加え、沈殿物を濾別し、水および最小限のＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。固形物を真空乾燥して、１−（６−クロロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）エタノン４ａ（２．６８ｇ）を得た。
【００７１】
中間体４ｂの合成：
０℃で、フェニルトリメチルアンモニウムトリブロミド［ＣＡＳ  ４２０７−５６−１］（３．１６５ｇ、８．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液を、１−（６−クロロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）エタノン４ａ（２．６８ｇ、８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液に滴下した。この混合物を０℃で１時間、および室温で２．５時間撹拌した。沈殿物を濾別し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、水で洗浄した。沈殿物が生じ、固形物を濾別し、真空乾燥して２−ブロモ−１−（６−クロロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）エタノン４ｂ（２．７５ｇ）を得た。
【００７２】
化合物４の合成、ならびにエナンチオマー４Ａおよび４Ｂのキラル分離：
ＣＨ３ＣＮ／ＴＨＦ（１／１）（１４０ｍＬ）中に、２−ブロモ−１−（６−クロロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）エタノン４ｂ（２．３ｇ、５．６ｍｍｏｌ）、２−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）エタノール［ＣＡＳ  ７２５２３７−１６−１］（１．５３ｇ、８．４ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（２．４ｍＬ、１３．９ｍｍｏｌ）を含む混合物を、５０℃で１２時間撹拌した。この混合物を減圧濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌで洗浄し、その後、水で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧蒸発させた。粗化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９９．５／０．５）中）により精製した。純粋な画分を回収し、減圧蒸発した。少量をＥｔ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮから結晶化して、分析試料の１−（６−クロロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物４）をラセミ混合物として得た。残りの化合物４（２．１ｇ）をさらに分取ＬＣ（固定相：不定形ベアシリカ１５０ｇ、移動相：トルエン／ｉＰｒＯＨ  ９５／５）により精製した。
【００７３】
化合物４のエナンチオマー（１．９ｇ）を分取キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＣ  ５μｍ  ２５０×３０ｍｍ，移動相：６０％ＣＯ２、４０％ＭｅＯＨ）により分離して、８７０ｍｇの第１の溶出エナンチオマーおよび８７０ｍｇの第２の溶出エナンチオマーを得た。２つのエナンチオマーを再びシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、２４ｇ  ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９９．５／０．５）中）により精製した。第１の溶出エナンチオマー（８００ｍｇ）をＣＨ３ＣＮ／Ｅｔ２Ｏから固化して、エナンチオマー４Ａ（６９３ｍｇ）を非晶質の白色粉末として得た。第２の溶出エナンチオマーをＣＨ３ＣＮ／Ｅｔ２Ｏから固化して、エナンチオマー４Ｂ（６１９ｍｇ）を非晶質の白色粉末として得た。
【００７４】
化合物４：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．６０（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ）３．７５−３．８８（ｍ，２Ｈ）３．９５（ｓ，３Ｈ）４．３８−５．０９（ｍ，１Ｈ）５．７１（ｔ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）５．９３（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，２Ｈ）６．１３−６．１８（ｍ，１Ｈ）６．３５−６．４６（ｍ，１Ｈ）６．９７（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）７．２１（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）７．５３（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）８．１３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）８．４６（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ）１２．１３（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ３．１１ｍｉｎ、ＭＨ＋５１５
融点：１５４℃
【００７５】
エナンチオマー４Ａ：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．６０（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｑ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ）３．７４−３．８８（ｍ，２Ｈ）３．９５（ｓ，３Ｈ）４．７９（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，１Ｈ）５．７１（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）５．９３（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）６．１５（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．４１（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．９７（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．２１（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．５３（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）８．１３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）８．４６（ｓ，１Ｈ）１２．１２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ３．１３ｍｉｎ、ＭＨ＋５１５
［α］Ｄ２０：＋１１１．６°（ｃ０．２８４、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ａ）：Ｒｔ３．６８ｍｉｎ、ＭＨ＋５１５、キラル純度１００％。
【００７６】
エナンチオマー４Ｂ：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．６１（ｓ，３Ｈ）３．６２−３．６８（ｍ，２Ｈ）３．７６−３．８９（ｍ，２Ｈ）３．９５（ｓ，３Ｈ）４．７４−４．８３（ｍ，１Ｈ）５．７２（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）５．９３（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）６．１５（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．４２（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．９７（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．２１（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．５３（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）８．１３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）８．４６（ｓ，１Ｈ）１２．１３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ３．１４ｍｉｎ、ＭＨ＋５１５
［α］Ｄ２０：−１１３．９°（ｃ０．２８８、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ａ）：Ｒｔ５．０４ｍｉｎ、ＭＨ＋５１５、キラル純度１００％。
【００７７】
実施例５：２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）−１−（６−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン（化合物５）の合成、ならびにエナンチオマー５Ａおよび５Ｂのキラル分離。
【化１２】
0006732736.tif 000016
【００７８】
中間体５ａの合成：
ｔｅｒｔ−ブチル３−ホルミル−６−メトキシ−１Ｈ−インドール−１−カロキシレート［ＣＡＳ  ８４７４４８−７３−１］（１０ｇ、３６．３ｍｍｏｌ）のジオキサン（４５ｍＬ）溶液を撹拌しながら、ＮａＨＳＯ３（５．７ｇ、５４．５ｍｍｏｌ）の水（４５ｍＬ）溶液を添加した。１５分後、モルホリン（４．８ｍＬ、５４．５ｍｍｏｌ）を添加し、その３５分後、シアン化ナトリウム（ＮａＣＮ）（１．９６ｇ、４０ｍｍｏｌ）を添加した。反応が完了するまで、得られた懸濁液を室温で３日間撹拌した。生成物を濾別し、ジオキサン／水の１／１混合液で洗浄し（３×３５ｍＬ）、次いで、水で洗浄（３×４５ｍＬ）し、６０℃で真空乾燥した。固形物をＥｔ２Ｏ（１２５ｍＬ）中で撹拌し、濾別し、Ｅｔ２Ｏ（３×）で洗浄し、５０℃で真空乾燥して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（シアノ（モルホリノ）メチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート５ａ（１２．３ｇ）を得た。
【００７９】
中間体５ｂの合成：
ｔｅｒｔ−ブチル３−（（シアノ（モルホリノ）メチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート５ａ（６．０ｇ、１６．２ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（８０ｍＬ）中に含む混合物を、Ｎ２雰囲気下、氷浴で冷却しながら撹拌した。ＫＨＭＤＳの０．５Ｍトルエン（３５．５ｍＬ、１７．８ｍｍｏｌ）溶液を１０分かけて滴下した。さらに１０分間撹拌した後、４−クロロ−１−（クロロメチル）−２−メトキシベンゼン［ＣＡＳ  １０１０７９−８４−９］（３．０９ｇ、１６．２ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で２０時間撹拌した。この撹拌混合物を冷水（４００ｍＬ）に注ぎ、生成物をＥｔ２Ｏで抽出した（２×）。有機層をまとめて塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧蒸発し、キシレンと同時蒸発した。残留物を（固定相：Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｇｒａｃｅ  Ｒｅｖｅｌｅｒｉｓ  Ｓｉｌｉｃａ  １２０ｇ、移動相：ヘプタン／ＥｔＯＡｃ勾配  １００／０〜２０／８０）により精製した。所望の画分をまとめ、減圧蒸発し、ジオキサンと同時蒸発して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−シアノ−１−モルホリノエチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート５ｂ（７．７５ｇ）を得た。
【００８０】
中間体５ｃの合成：
ジオキサン（４０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）中の、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−シアノ−１−モルホリノエチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート５ｂ（７．７５ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）懸濁液に、ＨＣｌの６Ｍイソプロパノール（３６．８ｍＬ、２２０ｍｍｏｌ）を、撹拌しながら添加した。得られた混合物を６０℃で４時間撹拌し、次いで、８０℃で１時間撹拌した。室温に冷却後、混合物を２０時間静置して、反応生成物を結晶化させた。生成物を濾別し、ｉＰｒＯＨ／Ｈ２Ｏ／ジオキサンの１／１／１混合液で洗浄し（２×１５ｍＬ）、５０℃で真空乾燥して、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン５ｃ（３．６７ｇ）を得た。
【００８１】
化合物５の合成、ならびにエナンチオマー５Ａおよび５Ｂのキラル分離：
２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン５ｃ（２．３５ｇ、７．１３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１００ｍＬ）中に含む混合物を撹拌しながらＮ２雰囲気下、氷浴で冷却した。フェニルトリメチルアンモニウムトリブロミド［ＣＡＳ  ４２０７−５６−１］（２．８１ｇ、７．４８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を０℃で１時間、その後、室温で１．５時間撹拌した。２−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）エタノール［ＣＡＳ  ７２５２３７−１６−１］（２．６１ｇ、１４．３ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（２．４６ｍＬ、１４．３ｍｍｏｌ）およびＣＨ３ＣＮ（１００ｍＬ）を添加し、反応混合物を添加し、反応混合物を室温で１８時間および５５℃で２時間撹拌した。反応混合物を元の体積の５０％まで減圧濃縮した。２−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）エタノール［ＣＡＳ  ７２５２３７−１６−１］（１ｇ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．５ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温で６５時間撹拌した。反応混合物を水（４００ｍＬ）に注ぎ、生成物を２−ＭｅＴＨＦで抽出した（２×）。有機層をまとめて塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。残留物（７ｇ）をフラッシュクロマトグラフィー（固定相：Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｇｒａｃｅ  Ｒｅｖｅｌｅｒｉｓ  Ｓｉｌｉｃａ  １２０ｇ、移動相：ヘプタン／ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ勾配  １００／０／０〜５０／３７／１３）により精製した。所望の画分をまとめ、減圧蒸発した。残留物（５．８ｇ）をさらに分取ＨＰＬＣ（固定相：Ｕｐｔｉｓｐｈｅｒｅ（登録商標）Ｃ１８  ＯＤＢ−１０μｍ、２００ｇ、５ｃｍ、移動相：０．２５％ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液、ＣＨ３ＣＮ）により精製した。生成物画分をまとめ、減圧蒸発した。残留物をＭｅＯＨ（２０ｍＬ）に溶解し、４時間静置して結晶化させた。固形物を濾別し、ＭｅＯＨ（３×５ｍＬ）で洗浄し５０℃で真空乾燥して、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）−１−（６−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン（化合物５、２．０６ｇ）をラセミ混合物として得た。
【００８２】
化合物５（２ｇ）のキラル分離を順相キラル分離（固定相：ＡＤ−Ｈ、移動相：５０％メタノール、５０％エタノール）により行った。生成物画分をまとめ、減圧蒸発した。水（３ｍＬ）を添加することによって、ＭｅＯＨ（１３ｍＬ）の撹拌溶液から第１の溶出エナンチオマーを結晶化した。終夜撹拌した後、固形物を濾別し、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏの３／１混合物で洗浄し（４×３ｍＬ）、５０℃で真空乾燥して、エナンチオマー５Ａ（４７６ｍｇ）を得た。水（３ｍＬ）を添加することによって、ＭｅＯＨ（１３ｍＬ）の撹拌溶液から第２の溶出エナンチオマーを結晶化した。終夜撹拌した後、固形物を濾別し、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏの３／１混合物で洗浄し（４×３ｍＬ）、５０℃で真空乾燥して、エナンチオマー５Ｂ（３６２ｍｇ）を得た。
【００８３】
化合物５：
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．６１（ｓ，３Ｈ）３．６５（ｑ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ）３．７７（ｓ，３Ｈ）３．７８−３．９０（ｍ，２Ｈ）３．９７（ｓ，３Ｈ）４．７７（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ）５．７１（ｔ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ）５．９３（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，２Ｈ）６．１３（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．３６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．８３（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．３Ｈｚ，１Ｈ）６．９２−７．００（ｍ，２Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）８．０１（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）８．２９（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）１１．８１（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｂ）：Ｒｔ１．９３、ＭＨ＋５１１
【００８４】
エナンチオマー５Ａ：
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．６１（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｑ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ）３．７７（ｓ，３Ｈ）３．７８−３．９０（ｍ，２Ｈ）３．９７（ｓ，３Ｈ）４．７７（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）５．７１（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）５．９３（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）６．１３（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．３６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．８３（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．３Ｈｚ，１Ｈ）６．９２−６．９９（ｍ，２Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）８．０１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）８．２９（ｄ，Ｊ＝３．１Ｈｚ，１Ｈ）１１．８１（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ１．０８、ＭＨ＋５１１
［α］Ｄ２０：＋１０９．３°（ｃ０．６１、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｇ）：Ｒｔ１．７８ｍｉｎ、ＭＨ＋５１１、キラル純度１００％
【００８５】
エナンチオマー５Ｂ：
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．６１（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｑ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ）３．７７（ｓ，３Ｈ）３．７８−３．８９（ｍ，２Ｈ）３．９７（ｓ，３Ｈ）４．７７（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ）５．７１（ｔ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ）５．９３（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）６．１２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．３５（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．８２（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．３Ｈｚ，１Ｈ）６．９１−７．０１（ｍ，２Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）８．０１（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ１．０８、ＭＨ＋５１１
［α］Ｄ２０：−１０８．９°（ｃ０．５２、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｇ）：Ｒｔ２．１９ｍｉｎ、ＭＨ＋５１１、キラル純度１００％
【００８６】
実施例６：２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）−１−（６−メトキシ−５−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン（化合物６）の合成、ならびにエナンチオマー６Ａおよび６Ｂのキラル分離。
【化１３】
0006732736.tif 000017
【００８７】
中間体６ａの合成：
ジエチルアルミニウムクロリドの１Ｍヘキサン（１３．５ｍＬ、１３．５ｍｍｏｌ）溶液を、０℃で、６−メトキシ−５−メチル−１Ｈ−インドール［ＣＡＳ  １０７１９７３−９５−９］（１．４５ｇ、９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（４５ｍＬ）溶液に滴下した。３０分間０℃に保持した後、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）アセチルクロリド１ａ（２．４ｇ、１０．９ｍｍｏｌ、合成：実施例１を参照）のＣＨ２Ｃｌ２（４５ｍＬ）溶液を０℃で徐々に添加した。反応物を０℃で３時間撹拌した。氷水を加え、沈殿物を濾別し、水で洗浄した。固形物を真空乾燥して２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−メトキシ−５−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン６ａ（２．１ｇ）を得た。
【００８８】
中間体６ｂの合成：
０℃で、フェニルトリメチルアンモニウムトリブロミド［ＣＡＳ  ４２０７−５６−１］（２．４ｇ、６．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６５ｍＬ）溶液を、ＴＨＦ（６０ｍＬ）中に２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−メトキシ−５−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン６ａ（２．１ｇ、６．１ｍｍｏｌ）を含む混合物に滴下した。この混合物を０℃で１時間、および室温で２．５時間撹拌した。沈殿物を濾別し、沈殿物をＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。残留物を最小限のジイソプロピルエーテルに取った。沈殿物を濾別し、真空乾燥して、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−メトキシ−５−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン６ｂ（２．３６ｇ）を得た。
【００８９】
化合物６の合成、ならびにエナンチオマー６Ａおよび６Ｂのキラル分離：
ＣＨ３ＣＮ／ＴＨＦ（１／１）（８０ｍＬ）中に２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−メトキシ−５−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン６ｂ（１．３５ｇ、３．２ｍｍｏｌ）、２−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）エタノール［ＣＡＳ  ７２５２３７−１６−１］（０．５８５ｇ、３．２ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．８３ｍＬ、４．８ｍｍｏｌ）を含む混合物を７０℃で２４時間撹拌した。混合物を減圧濃縮した。残留物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌおよび水で洗浄した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧蒸発させた。粗化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９９．５／０．５）中）により精製した。少量をＥｔ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮから結晶化して、分析試料の２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）−１−（６−メトキシ−５−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン（化合物６）をラセミ混合物として得た。残りの粗化合物６を他のバッチと混合し（合計量１．１９ｇ）、分取ＬＣ（固定相：不定形ベアシリカ１５０ｇ、移動相：ＣＨ２Ｃｌ２Ｈ（９８／２）、その後、トルエン／ｉＰｒＯＨ（９５／５）によりさらに精製した。
【００９０】
化合物６のエナンチオマー（９５０ｍｇ）を分取キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＣ  ５μｍ  ２５０×３０ｍｍ、移動相：５０％ＣＯ２、５０％ＭｅＯＨ）により分離して、４８５ｍｇの第１の溶出エナンチオマーおよび４８０ｍｇの第２の溶出エナンチオマーを得た。第１の溶出エナンチオマーをＣＨ３ＣＮ／Ｅｔ２Ｏから固化して、エナンチオマー６Ａ（４０６ｍｇ）を非晶質の白色粉末として得た。第２の溶出エナンチオマーをＣＨ３ＣＮ／Ｅｔ２Ｏから固化して、エナンチオマー６Ｂ（４３６ｍｇ）を非晶質の白色粉末として得た。
【００９１】
化合物６：
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２．２１（ｓ，３Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．６２−３．６８（ｍ，２Ｈ）３．７４−３．９０（ｍ，５Ｈ）３．９７（ｓ，３Ｈ）４．７６（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ）５．６８−５．７４（ｍ，１Ｈ）５．９３（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，２Ｈ）６．１１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）６．３１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）６．９２（ｓ，１Ｈ）６．９５（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１．８Ｈｚ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）７．８９（ｓ，１Ｈ）８．２２（ｓ，１Ｈ）１１．７３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ３．０２ｍｉｎ、ＭＨ＋５２５
【００９２】
エナンチオマー６Ａ：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２．２０（ｓ，３Ｈ）３．６０（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｑ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ）３．７５−３．８８（ｍ，５Ｈ）３．９７（ｓ，３Ｈ）４．７８（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ）５．７０（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）５．９２（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）６．１１（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．３３（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．９２（ｓ，１Ｈ）６．９５（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．８８（ｓ，１Ｈ）８．２３（ｓ，１Ｈ）１１．７５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ３．０４ｍｉｎ、ＭＨ＋５２５
［α］Ｄ２０：＋１１６．８°（ｃ０．４５３６、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｂ）：Ｒｔ２．４０ｍｉｎ、ＭＨ＋５２５、キラル純度１００％。
【００９３】
エナンチオマー６Ｂ：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２．２０（ｓ，３Ｈ）３．６０（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｑ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ）３．７７−３．８８（ｍ，５Ｈ）３．９７（ｓ，３Ｈ）４．７８（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）５．７０（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）５．９２（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）６．１１（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．３３（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．９２（ｓ，１Ｈ）６．９５（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．８８（ｓ，１Ｈ）８．２３（ｓ，１Ｈ）１１．７５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ３．０４ｍｉｎ、ＭＨ＋５２５
［α］Ｄ２０：−１２１．９°（ｃ０．３８５５、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｂ）：Ｒｔ３．７５ｍｉｎ、ＭＨ＋５２５、キラル純度９９．８６％。
【００９４】
実施例７：２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５−フルオロ−６−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物７）の合成、ならびにエナンチオマー７Ａおよび７Ｂのキラル分離。
【化１４】
0006732736.tif 000018
【００９５】
中間体７ａの合成：
ジエチルアルミニウムクロリドの１Ｍヘキサン（１５．７ｍＬ、１５．７ｍｍｏｌ）溶液を０℃で、５−フルオロ−６−メトキシ−１Ｈ−インドール［ＣＡＳ  １２１１５９５−７２−０］（２ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）溶液に滴下した。３０分間０℃に保持した後、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）アセチルクロリド１ａ（３．２ｇ、１４．６ｍｍｏｌ、合成：実施例１を参照）のＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）溶液を０℃で徐々に加えた。反応物を０℃で３時間撹拌した。氷水を加え、沈殿物を濾別し、水および最小限のＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。固形物を真空乾燥して、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５−フルオロ−６−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン７ａ（２．８２ｇ）を得た。
【００９６】
中間体７ｂの合成：
０℃で、フェニルトリメチルアンモニウムトリブロミド［ＣＡＳ  ４２０７−５６−１］（３．５ｇ、８．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５−フルオロ−６−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン７ａ（２．８２ｇ、８．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４６ｍＬ）溶液に滴下した。この混合物を０℃で１時間、および室温で４時間撹拌した。沈殿物を濾別し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、水で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧蒸発させた。残留物を最小限のＥｔＯＡｃに取った。沈殿物を濾別し、真空乾燥して、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５−フルオロ−６−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン７ｂ（２．５ｇ）を得た。
【００９７】
化合物７の合成、ならびにエナンチオマー７Ａおよび７Ｂのキラル分離：
ＣＨ３ＣＮ／ＴＨＦ（１／１）（４８ｍＬ）中に、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５−フルオロ−６−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン  ７ｂ（２．４ｇ、５．６ｍｍｏｌ）、２−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）エタノール［ＣＡＳ  ７２５２３７−１６−１］（１．５ｇ、８．２ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．４５ｍＬ、８．４ｍｍｏｌ）を含む混合物を５０℃で１２時間撹拌した。この混合物を減圧濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌおよび水で洗浄した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧蒸発させた。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９９．５／０．５）中）により精製した。純粋な画分を回収し、減圧蒸発した。少量をＥｔ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮから固化して、分析試料の２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５−フルオロ−６−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物７）をラセミ混合物として得た。
【００９８】
化合物７のエナンチオマー（１．６ｇ）を分取キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＣ  ５μｍ  ２５０×３０ｍｍ、移動相：５５％ＣＯ２、４５％ＭｅＯＨ）により分離して、６８０ｍｇの第１の溶出エナンチオマーおよび７２０ｍｇの第２の溶出エナンチオマーを得た。第１の溶出エナンチオマーをＣＨ３ＣＮ／Ｅｔ２Ｏから固化して、エナンチオマー７Ａ（６０３ｍｇ）を非晶質の白色粉末として得た。第２の溶出エナンチオマーをＣＨ３ＣＮ／Ｅｔ２Ｏから固化して、エナンチオマー７Ｂ（５０５ｍｇ）を非晶質の白色粉末として得た。
【００９９】
化合物７：
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．６０（ｓ，３Ｈ）３．６２−３．６７（ｍ，２Ｈ）３．７４−３．８８（ｍ，５Ｈ）３．９６（ｓ，３Ｈ）４．７７（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ）５．６６−５．７５（ｍ，１Ｈ）５．９２（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ）６．１２（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．３７（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．９６（ｄｄ，Ｊ＝８．１，１．８Ｈｚ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）７．１４（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）７．８１（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ）８．３３（ｓ，１Ｈ）１１．９４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ２．９０ｍｉｎ、ＭＨ＋５２９
【０１００】
エナンチオマー７Ａ：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．６０（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｑ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ）３．７６−３．８８（ｍ，５Ｈ）３．９６（ｓ，３Ｈ）４．７９（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）５．７１（ｔ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）５．９２（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，２Ｈ）６．１２（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．３９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．９６（ｄｄ，Ｊ＝８．２，２．０Ｈｚ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．１４（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．８１（ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ）８．３４（ｓ，１Ｈ）１１．９５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ２．９０ｍｉｎ、ＭＨ＋５２９
［α］Ｄ２０：＋８６．２°（ｃ０．２３２、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｂ）：Ｒｔ２．２８ｍｉｎ、ＭＨ＋５２９、キラル純度１００％。
【０１０１】
エナンチオマー７Ｂ：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．６０（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｑ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ）３．７６−３．８８（ｍ，５Ｈ）３．９６（ｓ，３Ｈ）４．７９（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）５．７１（ｔ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）５．９２（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，２Ｈ）６．１２（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．３９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．９６（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．１４（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．８１（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ）８．３４（ｓ，１Ｈ）１１．９５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ２．９０ｍｉｎ、ＭＨ＋５２９
［α］Ｄ２０：−８８．７°（ｃ０．３、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｂ）：Ｒｔ４．０４ｍｉｎ、ＭＨ＋５２９、キラル純度１００％。
【０１０２】
実施例８：２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５−フルオロ−７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物８）の合成、ならびにエナンチオマー８Ａおよび８Ｂのキラル分離。
【化１５】
0006732736.tif 000019
【０１０３】
中間体８ａの合成：
ジエチルアルミニウムクロリドの１Ｍヘキサン（１５．０ｍＬ、１５．０ｍｍｏｌ）溶液を０℃で、５−フルオロ−７−メチル−１Ｈ−インドール［ＣＡＳ  １０８２０４１−５２−８］（１．４９ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）溶液に滴下した。３０分間０℃に保持した後、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）アセチルクロリド１ａ（３．２８ｇ、１５．０ｍｍｏｌ、合成：実施例１を参照）のＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）溶液を０℃で徐々に添加した。反応物を０℃で３時間撹拌した。１Ｍロッシェル塩溶液を添加し、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。生成された固形物を濾別し、ＥｔＯＡｃと１Ｎ  ＨＣｌの間で分配した。これらの相を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機相をまとめ、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５−フルオロ−７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン８ａ（２．０３ｇ）を得た。
【０１０４】
中間体８ｂの合成：
フェニルトリメチルアンモニウムトリブロミド［ＣＡＳ  ４２０７−５６−１］（２．５３ｇ、６．７２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を０℃で、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５−フルオロ−７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン８ａ（２．０３ｇ、６．１１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液に滴下した。反応混合物を室温で終夜撹拌した。沈殿物を濾別し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。残留物を最小限のアセトニトリルに取った。沈殿物を濾別し、アセトニトリルで洗浄し、真空乾燥して、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５−フルオロ−７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン８ｂ（２．００ｇ）を得た。
【０１０５】
化合物８の合成、ならびにエナンチオマー８Ａおよび８Ｂのキラル分離：
ＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）中に２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５−フルオロ−７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン８ｂ（１．７０ｇ、４．１４ｍｍｏｌ）および２−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）エタノール［ＣＡＳ  ７２５２３７−１６−１］（２．２８ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）を含む混合物を、室温で３日間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃと１Ｎ  ＨＣｌの間で分配した。これらの相を分離した。有機相を１Ｎ  ＨＣｌで２回洗浄し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液および塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４濾過し、減圧濃縮した。残留物を最小限の量のアセトニトリルに取った。沈殿物を濾別し、真空乾燥して、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５−フルオロ−７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物８、１．２３ｇ）をラセミ混合物として得た。
【０１０６】
化合物８のエナンチオマー（１．１７ｇ）を順相キラル分離（固定相：Ｄａｉｃｅｌ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＯＤ−Ｈ、移動相：８０％ヘプタン、２０％エタノール）により分離した。第１の溶出生成物をフラッシュクロマトグラフィー（固定相：Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｇｒａｃｅ  Ｒｅｖｅｌｅｒｉｓ  Ｓｉｌｉｃａ  １２ｇ、移動相：ヘプタン／ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ勾配  １００／０／０〜４０／４５／１５）によりさらに精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発させた。生成物をＭｅＯＨ（４ｍＬ）および水（１ｍＬ）の混合物から終夜結晶化し、濾別し、ＭｅＯＨで洗浄し（３×）、５０℃で真空乾燥して、エナンチオマー８Ａ（３７ｍｇ）を得た。第２の溶出生成物をフラッシュクロマトグラフィー（固定相：Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｇｒａｃｅ  Ｒｅｖｅｌｅｒｉｓ  Ｓｉｌｉｃａ  １２ｇ、移動相：ヘプタン／ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ勾配  １００／０／０〜４０／４５／１５）によりさらに精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発させた。生成物をＭｅＯＨおよびＨ２Ｏの混合物から結晶化し、濾別し、ＭｅＯＨで洗浄し、５０℃で真空乾燥して、エナンチオマー８Ｂ（１７７ｍｇ）を得た。
【０１０７】
化合物８：
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２．４８（ｓ，３Ｈ）３．５６−３．７１（ｍ，５Ｈ）３．７４−３．９２（ｍ，２Ｈ）３．９７（ｓ，３Ｈ）４．７９（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）５．７２（ｓ，１Ｈ）５．９５（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，２Ｈ）６．１７（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．４０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）６．８７−７．０１（ｍ，２Ｈ）７．１０（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）７．６５（ｄｄ，Ｊ＝９．８，２．３Ｈｚ，１Ｈ）８．４６（ｓ，１Ｈ）１２．２２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｄ）：Ｒｔ１．５２ｍｉｎ、ＭＨ＋５１３
【０１０８】
エナンチオマー８Ａ：
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．６１（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｑ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ）３．７７（ｓ，３Ｈ）３．７８−３．８９（ｍ，２Ｈ）３．９７（ｓ，３Ｈ）４．７７（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ）５．７１（ｔ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ）５．９３（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）６．１２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．３５（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．８２（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．３Ｈｚ，１Ｈ）６．９１−７．０１（ｍ，２Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）８．０１（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）８．２９（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）１１．８１（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ１．１２ｍｉｎ、ＭＨ＋５１３
［α］Ｄ２０：−８３．８°（ｃ０．４７２５、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｇ）：Ｒｔ２．３２ｍｉｎ、ＭＨ＋５１３、キラル純度１００％
【０１０９】
エナンチオマー８Ｂ：
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２．４７（ｓ，３Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．６５（ｑ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ）３．７７−３．９０（ｍ，２Ｈ）３．９７（ｓ，３Ｈ）４．７７（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ）５．７２（ｔ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ）５．９５（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）６．１６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．３７（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．９２（ｄｄ，Ｊ＝１０．１，２．０Ｈｚ，１Ｈ）６．９６（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．１０（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）７．６５（ｄｄ，Ｊ＝９．７，２．４Ｈｚ，１Ｈ）８．４５（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ）１２．２０（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ１．１４ｍｉｎ、ＭＨ＋５１３
［α］Ｄ２０：＋８６．６°（ｃ０．４８０５ｗ／ｖ％、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｇ）：Ｒｔ１．４４ｍｉｎ、ＭＨ＋５１３、キラル純度１００％
【０１１０】
実施例９：２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５，６−ジフルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物９）の合成、ならびにエナンチオマー９Ａおよび９Ｂのキラル分離。
【化１６】
0006732736.tif 000020
【０１１１】
中間体９ａの合成：
ジエチルアルミニウムクロリドの１Ｍヘキサン（１４．９ｍＬ、１４．９ｍｍｏｌ）溶液を０℃で、５，６−ジフルオロ−１Ｈ−インドール［ＣＡＳ  １６９６７４−０１−５］（１．５０ｇ、９．８ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）溶液に滴下した。３０分間０℃に保持した後、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）アセチルクロリド１ａ（３．２２ｇ、１４．７ｍｍｏｌ、合成：実施例１を参照）のＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）溶液を０℃で徐々に添加した。反応物を０℃で２時間撹拌した。１Ｍロッシェル塩溶液を添加し、反応混合物を室温で２時間激しく撹拌した。沈殿物を濾別し、ＥｔＯＡｃと１Ｎ  ＨＣｌの間で分配した。これらの相を分離した。水層をＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機相をまとめ、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残留物を最小限のアセトニトリルに取った。沈殿物を濾別し、真空乾燥して、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５，６−ジフルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン９ａ（２．７３ｇ）を得た。
【０１１２】
中間体９ｂの合成：
フェニルトリメチルアンモニウムトリブロミド［ＣＡＳ  ４２０７−５６−１］（３．３６ｇ、８．９４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液を０℃で、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５，６−ジフルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）エタノン９ａ（２．７３ｇ、８．１３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８０ｍＬ）溶液に滴下した。反応混合物を０℃で１５分間、および室温で２時間撹拌した。沈殿物を濾別しＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。残留物を最小限のアセトニトリルに取った。沈殿物を濾別し、真空乾燥して、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５，６−ジフルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン９ｂ（３．００ｇ）を得た。
【０１１３】
化合物９の合成、ならびにエナンチオマー９Ａおよび９Ｂのキラル分離：
ＴＨＦ（９ｍＬ）およびＣＨ３ＣＮ（９ｍＬ）中に、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５，６−ジフルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン９ｂ（１．８０ｇ、４．３４ｍｍｏｌ）および２−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）エタノール［ＣＡＳ  ７２５２３７−１６−１］（２．３９ｇ、１３．０ｍｍｏｌ）を含む混合物を、室温で６５時間撹拌した。１Ｎ  ＨＣｌを添加し、反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。これらの相を分離した。有機相を１Ｎ  ＨＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮した。残留物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィーにより、ＥｔＯＡｃ（１５％〜７０％）／ジクロロメタンの勾配を用いて精製した。純粋な画分をまとめ、減圧濃縮して、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５，６−ジフルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物９、１．２０ｇ）をラセミ混合物として得た。純粋でない画分をまとめ、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィーにより、エチルアセテート（１５％〜７０％）／ジクロロメタンの勾配を用いて、第２のバッチの化合物９（０．２９０ｇ）をラセミ混合物として得た。
【０１１４】
化合物９のエナンチオマー（１．４ｇ）を順相キラル分離（固定相：Ｄａｉｃｅｌ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＯＤ−Ｈ、移動相：８０％ヘプタン、２０％エタノール）により分離した。第１の溶出生成物をフラッシュクロマトグラフィー（固定相：Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｇｒａｃｅ  Ｒｅｖｅｌｅｒｉｓ  Ｓｉｌｉｃａ  １２ｇ、移動相：ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ勾配  １００：０〜９０：１０）によりさらに精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発させ、ＭｅＯＨと同時蒸発させた。残留物をＣＨ３ＣＮ（４．５ｍＬ）と水（２．５ｍＬ）との溶媒混合物から凍結乾燥させ、４５℃で真空乾燥して、エナンチオマー９Ａ（４０９ｍｇ）を得た。第２の溶出生成物をフラッシュクロマトグラフィー（固定相：Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｇｒａｃｅ  Ｒｅｖｅｌｅｒｉｓ  Ｓｉｌｉｃａ  １２ｇ、移動相：ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ勾配  １００／０〜９０／１０）によりさらに精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発させ、ＭｅＯＨと同時蒸発させた。残留物をＣＨ３ＣＮ（５ｍＬ）と水（３ｍＬ）との溶媒混合物から凍結乾燥させ、４５℃で真空乾燥して、エナンチオマー９Ｂ（３８８ｍｇ）を得た。
【０１１５】
化合物９：
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．６１（ｓ，３Ｈ）３．６２−３．７０（ｍ，２Ｈ）３．７５−３．９０（ｍ，２Ｈ）３．９５（ｓ，３Ｈ）４．７９（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ）５．７２（ｔ，Ｊ＝  ２．１Ｈｚ，１Ｈ）５．９３（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）６．１５（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．４２（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．９７（ｄｄ，Ｊ＝８．２，２．２Ｈｚ，１Ｈ）７．１０（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）７．５４（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，７．０Ｈｚ，１Ｈ）７．９９（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，８．２Ｈｚ，１Ｈ）８．４８（ｓ，１Ｈ）１２．１９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｄ）：Ｒｔ１．４４ｍｉｎ、ＭＨ＋５１７
【０１１６】
エナンチオマー９Ａ：
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．６１（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｑ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ）３．７７−３．８９（ｍ，２Ｈ）３．９５（ｓ，３Ｈ）４．７７（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）５．７２（ｔ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ）５．９３（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）６．１４（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．３９（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．９７（ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．０Ｈｚ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）７．５３（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，７．０Ｈｚ，１Ｈ）７．９９（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，８．１Ｈｚ，１Ｈ）８．４７（ｓ，１Ｈ）１２．１６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ１．１５ｍｉｎ、ＭＨ＋５１７
［α］Ｄ２０：−９８．９°（ｃ０．４４５、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｇ）：Ｒｔ１．９２ｍｉｎ、ＭＨ＋５１７、キラル純度１００％
【０１１７】
エナンチオマー９Ｂ：
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．６１（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｑ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ）３．７５−３．９１（ｍ，２Ｈ）３．９５（ｓ，３Ｈ）４．７７（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ）５．７２（ｔ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ）５．９３（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，２Ｈ）６．１４（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．３９（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．９７（ｄｄ，Ｊ＝８．１，２．０Ｈｚ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）７．５３（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，７．０Ｈｚ，１Ｈ）７．９９（ｄｄ，Ｊ＝１１．１，８．３Ｈｚ，１Ｈ）８．４７（ｓ，１Ｈ）１２．１６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ１．１５ｍｉｎ、ＭＨ＋５１７
［α］Ｄ２０：＋９８．９°（ｃ０．５５５、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｇ）：Ｒｔ１．３６ｍｉｎ、ＭＨ＋５１７、キラル純度１００％
【０１１８】
実施例１０：２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（７−フルオロ−５−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物１０）の合成、ならびにエナンチオマー１０Ａおよび１０Ｂのキラル分離。
【化１７】
0006732736.tif 000021
【０１１９】
中間体１０ａの合成：
Ｎ２フロー下、ジエチルアルミニウムクロリドの１Ｍヘキサン（１６ｍＬ、１６ｍｍｏｌ）溶液を−１５℃で、７−フルオロ−５−メチル−１Ｈ−インドール［ＣＡＳ  ４４２９１０−９１−０］（１．５９ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）溶液に滴下した。１５分間−１５℃に保持した後、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）アセチルクロリド１ａ（３．２７ｇ、１４．９ｍｍｏｌ、合成：実施例１を参照）のＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）溶液を−１５℃で徐々に添加した。反応物を−１５℃で１時間、および室温で２時間撹拌した。反応混合物を氷／ロッシェル塩混合物に撹拌しながら注ぎ込んだ。ｄｉｃａｌｉｔｅ（登録商標）のショートパッドで濾過することによって反応混合物から固形物を取り除き、濾過ケーキをＴＨＦで数回洗滌した。層を分離し、水層をＤＣＭで抽出した。有機層をまとめて塩水、水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧蒸発した。固形残留物をＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）に懸濁した。固形物を濾別し、少量のＣＨ２Ｃｌ２で洗浄し、５０℃で真空乾燥して２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（７−フルオロ−５−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン１０ａ（２．２２ｇ）を得た。
【０１２０】
中間体１０ｂの合成：
フェニルトリメチルアンモニウムトリブロミド［ＣＡＳ  ４２０７−５６−１］（２．７７ｇ、７．３６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液を０℃で、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（７−フルオロ−５−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン１０ａ（２．２２ｇ、６．７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５０ｍＬ）溶液に滴下した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。沈殿物を濾別し、ＴＨＦで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。残留物を最小限のＣＨ２Ｃｌ２に取った。沈殿物を濾別し、ＣＨ２Ｃｌ２で洗浄し（２×）、５０℃で真空乾燥して、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（７−フルオロ−５−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン１０ｂ（２．５５ｇ）を得た。
【０１２１】
化合物１０の合成、ならびにエナンチオマー１０Ａおよび１０Ｂのキラル分離：
ＣＨ３ＣＮ（１００ｍＬ）中に２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（７−フルオロ−５−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン１０ｂ（２ｇ、４．８７ｍｍｏｌ）、２−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）エタノール［ＣＡＳ  ７２５２３７−１６−１］（１．６ｇ、７．３ｍｍｏｌ）および  ジイソプロピルエチルアミン（１．２６ｍＬ、７．３ｍｍｏｌ）を含む混合物を、室温で２０時間、６０℃で８時間、および再び室温で１６時間撹拌した。溶媒を減圧蒸発した。残留物をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）に溶解し、０．５Ｍ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）および水（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発した。残留物をカラムクロマトグラフィー（固定相：Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｇｒａｃｅ  Ｒｅｖｅｌｅｒｉｓ  Ｓｉｌｉｃａ  １２０ｇ、移動相：ＥｔＯＡｃ／ヘプタン勾配  ０／１００〜６０／４０）により精製した。生成物を含む画分をまとめ、蒸発し、５０℃で真空乾燥して、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（７−フルオロ−５−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物１０、１．３ｇ）を白色固体として得た。
【０１２２】
化合物１０のエナンチオマー（１．３ｇ）を順相キラル分離（固定相：ＡＤ−Ｈ、移動相：７０％エタノール、３０％メタノール）により分離して６３７ｍｇの第１の溶出エナンチオマーおよび６２８ｍｇの第２の溶出エナンチオマーを得た。第１の溶出生成物をＭｅＯＨ／水混合物から結晶化した。固形物を濾別し、ＭｅＯＨ／水（１／１）混合物で洗浄して、エナンチオマー１０Ａ（３０２ｍｇ）を白色の非晶質粉末として得た。第２の溶出生成物をフラッシュクロマトグラフィー（固定相：Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｇｒａｃｅ  Ｒｅｖｅｌｅｒｉｓ  Ｓｉｌｉｃａ  ４０ｇ、移動相：ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２勾配  ０／１００〜２／９８）によりさらに精製した。生成物を含む画分をまとめ、蒸発して、エナンチオマー１０Ｂ（３３５ｍｇ）を白色の非晶質粉末として得た。
【０１２３】
化合物１０：
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２．３８（ｓ，３Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．６２−３．６７（ｍ，２Ｈ）３．７７−３．８９（ｍ，２Ｈ）３．９５（ｓ，３Ｈ）４．７７（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）５．７２（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）５．９４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）６．１５（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．３４（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．９０（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，１Ｈ）６．９６（ｄｄ，Ｊ＝８．１，２．０Ｈｚ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）７．７７（ｓ，１Ｈ）８．３８（ｓ，１Ｈ）１２．４６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ１．１６ｍｉｎ、ＭＨ＋５１３
【０１２４】
エナンチオマー１０Ａ：
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２．３８（ｓ，３Ｈ）３．６２（ｓ，３Ｈ）３．６６（ｂｒ  ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ）３．７７−３．９２（ｍ，２Ｈ）３．９６（ｓ，３Ｈ）４．７８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）５．７３（ｓ，１Ｈ）５．９６（ｓ，２Ｈ）６．１７（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．３５（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．９１（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，１Ｈ）６．９７（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１．４Ｈｚ，１Ｈ）７．１０（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）７．７９（ｓ，１Ｈ）８．３９（ｓ，１Ｈ）１２．４７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ１．１５ｍｉｎ、ＭＨ＋５１３
［α］Ｄ２０：＋１３２．３°（ｃ０．５０５、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｆ）：Ｒｔ２．１３ｍｉｎ、ＭＨ＋５１３、キラル純度１００％
【０１２５】
エナンチオマー１０Ｂ：
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２．３８（ｓ，３Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．６３−３．６８（ｍ，２Ｈ）３．７７−３．９２（ｍ，２Ｈ）３．９６（ｓ，３Ｈ）４．７７（ｂｒ  ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ）５．７２（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）５．９５（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）６．１６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．３５（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．９１（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，１Ｈ）６．９７（ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．０Ｈｚ，１Ｈ）７．０９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）７．７８（ｓ，１Ｈ）８．３９（ｓ，１Ｈ）１２．４６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ１．１５ｍｉｎ、ＭＨ＋５１３
［α］Ｄ２０：−１４４．１°（ｃ０．４９７５、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｆ）：Ｒｔ３．１３ｍｉｎ、ＭＨ＋５１３、キラル純度１００％
【０１２６】
実施例１１：２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６，７−ジフルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物１１）の合成、ならびにエナンチオマー１１Ａおよび１１Ｂのキラル分離。
【化１８】
0006732736.tif 000022
【０１２７】
中間体１１ａの合成：
ジエチルアルミニウムクロリドの１Ｍヘキサン（１５．０ｍＬ、１５．０ｍｍｏｌ）溶液を０℃で、６，７−ジフルオロ−１Ｈ−インドール［ＣＡＳ  ２７１７８０−８４−８］（１．５３ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）溶液に滴下した。３０分間０℃に保持した後、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）アセチルクロリド１ａ（３．２８ｇ、１５．０ｍｍｏｌ、合成：実施例１を参照）のＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）溶液を０℃で徐々に添加した。反応物を０℃で３時間撹拌した。１Ｍロッシェル塩溶液を添加し、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。固形物を濾別し、ＥｔＯＡｃと１Ｎ  ＨＣｌの間で分配した。これらの相を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機相をまとめ、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６，７−ジフルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン１１ａ（２．３６ｇ）を得た。
【０１２８】
中間体１１ｂの合成：
フェニルトリメチルアンモニウムトリブロミド［ＣＡＳ  ４２０７−５６−１］（２．９０ｇ、７．０２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を０℃で、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６，７−ジフルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン１１ａ（２．３６ｇ、７．０２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液に滴下した。反応混合物を室温で終夜撹拌した。沈殿物を濾別し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。残留物を最小限のアセトニトリルに取った。沈殿物を濾別し、アセトニトリルでで洗浄し、真空乾燥して、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６，７−ジフルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン１１ｂ（２．３４ｇ）を得た。
【０１２９】
化合物１１の合成、ならびにエナンチオマー１１Ａおよび１１Ｂのキラル分離：
ＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）中に２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６，７−ジフルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタノン１１ｂ（１．７０ｇ、４．１４ｍｍｏｌ）および２−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）エタノール［ＣＡＳ  ７２５２３７−１６−１］（２．２５ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）を含む混合物を、室温で３日間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃと１Ｎ  ＨＣｌの間で分配した。これらの相を分離した。有機相を１Ｎ  ＨＣｌで２回洗浄し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液および塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４濾過し、減圧濃縮した。残留物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーにより、ＥｔＯＡｃ（２０％〜１００％）／ヘプタン勾配を用いて精製した。所期の化合物を含む画分をまとめ、減圧濃縮した。残留物をＥｔ２Ｏ、アセトニトリルおよびヘプタンから結晶化して、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６，７−ジフルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）エタノン（化合物１１、１．５４ｇ）をラセミ混合物として得た。
【０１３０】
化合物１１のエナンチオマー（１．２２ｇ）を分取キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０×３０ｍｍ、移動相：５５％ＣＯ２、４５％ＭｅＯＨ）により分離して、５５０ｍｇの第１の溶出エナンチオマーと５７０ｍｇの第２の溶出エナンチオマーを得た。第１の溶出エナンチオマーをＣＨ３ＣＮ／ジイソプロピルエーテルから固化して、エナンチオマー１１Ａ（４８７ｍｇ）を得た。第２の溶出エナンチオマーをＣＨ３ＣＮ／ジイソプロピルエーテルから固化して、エナンチオマー１１Ｂ（４６０ｍｇ）を得た。エナンチオマーはいずれも非晶質の粉末として生成した。
【０１３１】
化合物１１：
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．５６−３．６９（ｍ，５Ｈ）３．７５−３．９０（ｍ，２Ｈ）３．９５（ｓ，３Ｈ）４．７９（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）５．７３（ｓ，１Ｈ）５．９５（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，２Ｈ）６．１８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）６．４１（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）６．９７（ｄｄ，Ｊ＝８．１，１．７Ｈｚ，１Ｈ）７．１０（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．１６−７．３０（ｍ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）７．９２（ｄｄ，Ｊ＝８．７，４．５Ｈｚ，１Ｈ）８．５０（ｓ，１Ｈ）１２．７８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｄ）：Ｒｔ１．５２ｍｉｎ、ＭＨ＋５１７
【０１３２】
エナンチオマー１１Ａ：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １２．７９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）８．５０（ｓ，１Ｈ）７．９２（ｄｄ，Ｊ＝８．７，４．３Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．２０−７．２７（ｍ，１Ｈ）７．１０（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）６．９７（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１．７Ｈｚ，１Ｈ）６．４２（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．１８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）５．９５（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，２Ｈ）５．７２（ｓ，１Ｈ）４．７９（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）３．９４（ｓ，３Ｈ）３．７８−３．８９（ｍ，２Ｈ）３．５９−３．６８（ｍ，５Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ３．０７ｍｉｎ、ＭＨ＋５１７
［α］Ｄ２０：−９９．６°（ｃ０．２２１８、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｄ）：Ｒｔ１．８０ｍｉｎ、ＭＨ＋５１７、キラル純度１００％。
【０１３３】
エナンチオマー１１Ｂ：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １２．７９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）８．５０（ｓ，１Ｈ）７．９１（ｄｄ，Ｊ＝８．７，４．３Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．１７−７．２８（ｍ，１Ｈ）７．１０（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）６．９７（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．９Ｈｚ，１Ｈ）６．４１（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．１８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）５．９５（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，２Ｈ）５．７２（ｔ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）４．７９（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）３．９４（ｓ，３Ｈ）３．７７−３．８８（ｍ，２Ｈ）３．５５−３．７０（ｍ，５Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒｔ３．０７ｍｉｎ、ＭＨ＋５１７
［α］Ｄ２０：＋９９．２°（ｃ０．２１２７、ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｄ）：Ｒｔ３．３８ｍｉｎ、ＭＨ＋５１７、キラル純度１００％。
【０１３４】
本発明の化合物の抗ウィルス活性
ＤＥＮＶ−２抗ウィルスアッセイ
本発明の全ての化合物について、高感度緑色蛍光タンパク質（ｅＧＰＦ）で標識したＤＥＮＶ−２  １６６８１株に対する抗ウィルス活性を試験した。培地は、最小必須培地に、２％の熱失活させたウシ胎仔血清、０．０４％のゲンタマイシン（５０ｍｇ／ｍＬ）および２ｍＭのＬ−グルタミンを加えたもので構成する。ＥＣＡＣＣから得たベロ細胞を培地に懸濁し、２５μＬを、既に抗ウィルス化合物を含む３８４ウェルプレートに加えた（２５００細胞／ウェル）。通常、これらのプレートには、４倍段階希釈で９回の希釈工程を行った、１００％ＤＭＳＯ中の最終濃度の２００倍の試験化合物が含まれる（２００ｎＬ）。さらに、各化合物濃度について４回試験する（最終濃度範囲：２５μＭ〜０．０００３８μＭ）。最終的に、各プレートには、ウィルス対照（化合物を含まず、細胞およびウィルスを含む）、細胞対照（ウィルスおよび化合物を含まず、細胞を含む）および培地対照（細胞、ウィルスおよび化合物を含まず、培地を含む）として割り当てられたウェルが含まれる。培地対照として割り当てられたウェルには、ベロ細胞に代えて、培地２５μＬを加えた。細胞をプレートに加えてすぐに、プレートを室温で３０分間インキュベートして、細胞をウェル内に均一に分布させた。次いで、プレートを、十分に加湿したインキュベータ（３７℃、５％ＣＯ２）で、翌日までインキュベートした。その後、ｅＧＦＰで標識したＤＥＮＶ−２株１６６８１を感染多重度０．５で加えた。したがって、１５μＬのウィルス懸濁液を、試験化合物を含むウェルの全てと、ウィルス対照として割り当てられたウェルとに加えた。並行して、１５μＬの培地を、培地対照および細胞対照に加えた。次いで、プレートを、十分に加湿したインキュベータ（３７℃、５％ＣＯ２）でインキュベートした。読み出し日に、自動蛍光顕微鏡を用いて、４８８ｎｍ（青レーザー）で、ｅＧＦＰの蛍光を測定した。社内ＬＩＭＳシステムを使用して、各化合物の阻害用量反応曲線を算出し、半数効果濃度（ＥＣ５０）を決定した。したがって、全ての試験濃度の阻害パーセント（Ｉ）を次式により計算した。Ｉ＝１００×（ＳＴ−ＳＣＣ）／（ＳＶＣ−ＳＣＣ）；ＳＴ、ＳＣＣおよびＳＶＣはそれぞれ、試験化合物、細胞対照およびウィルス対照のウェル中のｅＧＦＰシグナル量である。ＥＣ５０は、ｅＧＦＰ蛍光強度がウィルス対照と比較して５０％低下したことによって測定される、ウィルスの複製が５０％阻害される化合物の濃度を示す。ＥＣ５０は、線形補間によって算出される（表１）。
【０１３５】
並行して、化合物の毒性を同じプレートで評価した。ｅＧＦＰシグナルの読み出しが終わった時点で、生存細胞染色剤レサズリン１０μＬを、３８４ウェルプレートの全ウェルに加えた。このレサズリンアッセイは、細胞によって生成されるＮＡＤＨによって、青色のレサズリンは、高い蛍光産物のレゾルフィンに還元されることに基づいている。ピンク色の蛍光を発するレゾルフィンの生成は、ウェル中の生細胞の数に直接関係している。プレートを、十分に加湿したインキュベータ（３７℃、５％ＣＯ２）でさらに５時間インキュベートした。次いで、プレートを、Ｉｎｆｉｎｉｔｅリーダー（Ｔｅｃａｎ）により、励起波長５３０ｎｍを使用して測定した。レサズリン転換を細胞対照ウェルと比較して５０％低下させるのに必要な濃度と定義される、半数細胞毒性（ＣＣ５０）もまた測定した（表１）。最終的に、化合物の選択指数（ＳＩ）を求めた。それは次のように計算した：ＳＩ＝ＣＣ５０／ＥＣ５０。
【０１３６】
【表４】
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【０１３７】
四価逆転写酵素定量ＰＣＲ（ＲＴ−ｑＰＣＲ）アッセイ：プロトコルＡ。
ＲＴ−ｑＰＣＲアッセイにおいて、本発明の化合物のＤＥＮＶ−１株ＴＣ９７４♯６６６（ＮＣＰＶ）、ＤＥＮＶ−２株１６６８１、ＤＥＮＶ−３株Ｈ８７（ＮＣＰＶ）、ならびにＤＥＮＶ−４株Ｈ２４１（ＮＣＰＶ）およびＥＤＥＮ（ＳＧ／０６Ｋ２２７０ＤＫ１／２００５；；ＧｅｎＢａｎｋ登録番号ＱＧ３９８２５６）に対する抗ウィルス活性を試験した。したがって、試験化合物の存在下または非存在下で、ベロ細胞にＤＥＮＶ−１、ＤＥＮＶ−２、ＤＥＮＶ−３またはＤＥＮＶ−４を感染させた。感染３日後に、細胞を溶解し、細胞溶解物を、ウィルスターゲット（ＤＥＮＶの３’ＵＴＲ；表２）および細胞の参照遺伝子（β−アクチン、表２）の両方のｃＤＮＡの製造に使用した。その後、デュプレックスリアルタイムＰＣＲをＬｉｇｈｔｃｙｃｌｅｒ４８０インスツルメントにより行った。生成Ｃｐ値は、これらのターゲットのＲＮＡ発現量に反比例する。試験化合物によるＤＥＮＶ複製の抑制は、３’ＵＴＲ遺伝子のＣｐ値のシフトをもたらす。他方、試験化合物が細胞に毒性を有する場合、β−アクチン発現に同様の効果が観察されよう。比較ΔΔＣｐ法を使用して、ＥＣ５０を算出する。これは、細胞のハウスキーピング遺伝子（β−アクチン）で正規化したターゲット遺伝子（３’ＵＴＲ）の相対的遺伝子発に基づいている。さらに、ＣＣ５０値を、ハウスキーピング遺伝子（β−アクチン）で得たＣｐ値に基づいて決定した。
【０１３８】
【表５】
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【０１３９】
培地は、最小必須培地に、２％の熱失活ウシ胎仔血清、０．０４％のゲンタマイシン（５０ｍｇ／ｍＬ）および２ｍＭのＬ−グルタミンを加えたもので構成した。ＥＣＡＣＣから得たベロ細胞を培地に懸濁し、７５μＬ／ウェルを、既に抗ウィルス化合物を含む９６ウェルプレートに加えた（１００００細胞／ウェル）。通常、これらのプレーには、４倍段階希釈で９回の希釈工程を行った、１００％ＤＭＳＯ中の最終濃度の２００倍の試験化合物が含まれる（５００ｎＬ；最終濃度範囲：２５μＭ〜０．０００３８μＭ）。さらに、各プレートは、ウィルス対照（化合物を含まず、細胞およびウィルスを含む）および細胞対照（ウィルスおよび化合物を含まず、細胞を含む）として割り当てられたウェルを含む。細胞をプレートに加えてすぐに、プレートを、十分に加湿したインキュベータ（３７℃、５％ＣＯ２）で、翌日までインキュベートした。その後、ＤＥＮＶ−１株ＴＣ９７４♯６６６、ＤＥＮＶ−２株１６６８１、ＤＥＮＶ−３株Ｈ８７またはＤＥＮＶ−４株Ｈ２４１もしくはＥＤＥＮを加えた。したがって、ＲＴｑＰＣＲで約２２のＣｐが得られた２５μＬのウィルス懸濁液を、試験化合物を含む全ウェルと、ウィルス対照として割り当てられたウェルに加えた。並行して、２５μＬの培地を、細胞対照に加えた。次いで、プレートを、十分に加湿したインキュベータ（３７℃、５％ＣＯ２）でインキュベートした。３日後に、上清をウェルから除去し、氷のように冷却したＰＢＳ（〜１００μＬ）で細胞を２回洗浄した。９６ウェルプレート内の細胞ペレットを少なくとも１日間、−８０℃で保管した。次いで、Ｃｅｌｌｓ−ｔｏ−ＣＴＴＭ溶解キットを使用し、製造会社のガイドラインにしたがってＲＮＡを抽出した（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）。細胞溶解物は−８０℃で貯蔵するか、または、すぐに逆転写工程に使用することができる。逆転写工程の準備として、ミックスＡ（表３Ａ）を調製し、９６ウェルプレートに７．５７μＬ／ウェルで分注した。細胞溶解物５μＬを添加後、７５℃で５分間の変性工程を行った（表３Ｂ）。その後、ミックスＢを７．４３μＬ添加し（表３Ｃ）、逆転写工程を開始して（表３Ｄ）ｃＤＮＡを生成した。
【０１４０】
最終的に、ＲＴ−ｑＰＣＲミックスであるミックスＣ（表４Ａ）を調製し、９６ウェルＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ  ｑＰＣＲプレートに分注し、それに３μＬのｃＤＮＡを加え、ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ  ４８０により、表４Ｂの条件にしたがってｑＰＣＲを行った。
ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒソフトウェアおよび社内ＬＩＭＳシステムを使用して、各化合物の用量反応曲線を算出し、半数効果濃度（ＥＣ５０）および半数細胞毒性濃度（ＣＣ５０）を決定した（表６〜９）。
【０１４１】
【表６】
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【０１４２】
【表７】
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【０１４３】
【表８】
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【０１４４】
四価逆転写酵素定量ＰＣＲ（ＲＴ−ｑＰＣＲ）アッセイ：プロトコルＢ。
ベロ細胞（４×１０４）を９６ウェルプレートに播種した。１日後、細胞培地を、２×、３×または５×段階希釈した化合物（濃度範囲：それぞれ５０μｇ／ｍＬ〜０．０００３８μｇ／ｍＬ、５０μｇ／ｍＬ〜０．００７６μｇ／ｍＬ、および５０μｇ／ｍＬ〜０．０００１３μｇ／ｍＬ）を含むアッセイ培地１００μＬと、ＲＴｑＰＣＲで〜２０のＣｔが得られたデングウィルス希釈液１００μＬで置き換えた。２時間インキュベートした後、細胞単層をアッセイ培地で３回洗浄して、吸収されなかった残存ウィルスを除去し、阻害剤の存在下、培養物をさらに４日（ＤＥＮＶ−２  ＮＧＣ−Ｔｏｎｇａｌｉｋｅ）または７日（ＤＥＮＶ−１  Ｄｊｉｂｏｕｔｉ株Ｄ１／Ｈ／ＩＭＴＳＳＡ／９８／６０６、ＤＥＮＶ−３株Ｈ８７プロトタイプ、ＤＥＮＶ−４株Ｈ２４１）インキュベートした。上清を取り、ウィルスＲＮＡ量をリアルタイム定量ＲＴ−ＰＣＲにより決定した。ウィルスＲＮＡ複製を５０％阻害するのに必要な化合物濃度と定義される５０％効果濃度（ＥＣ５０）を対数補間により決定した（表７および８）。
【０１４５】
ＲＮＡを上清１００μＬから、ＮｕｃｌｅｏＳｐｉｎ  ９６  Ｖｉｒｕｓ  ｋｉｔ（Ｆｉｌｔｅｒ  Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｄｕｅｒｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）により、製造会社が説明するようにして単離した。ＴａｑＭａｎプライマー（ＤＥＮＶ−Ｆｏｒ、ＤＥＮＶ−Ｒｅｖ；表５）およびＴａｑＭａｎプローブ（ＤＥＮＶ−Ｐｒｏｂｅ  表５）の配列を、Ｐｒｉｍｅｒ  Ｅｘｐｒｅｓｓソフトウェア（ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．０；Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｌｅｎｎｉｋ、Ｂｅｌｇｉｕｍ）を使用して、それぞれフラビウィルスの非構造遺伝子３（ＮＳ３）またはＮＳ５から選択した。ＴａｑＭａｎプローブをレポーター色素として５’末端を６−カルボキシフルオレセイン（ＦＡＭ）で蛍光標識し、クエンチャーとして３’末端をマイナーグルーブバインダー（ＭＧＢ）で蛍光標識した（表５）。１３．９３７５μＬのＨ２Ｏ、６．２５μＬのｍａｓｔｅｒ  ｍｉｘ（Ｅｕｒｏｇｅｎｔｅｃ、Ｓｅｒａｉｎｇ、Ｂｅｌｇｉｕｍ）、０．３７５μＬのフォアードプライマー、０．３７５μＬのリバースプライマー、１μＬのプローブ、０．０６２５μＬの逆転写酵素（Ｅｕｒｏｇｅｎｔｅｃ）および３μＬの試料を含む全容量２５μＬで、一段定量ＲＴ−ＰＣＲを行った。ＡＢＩ  ７５００  Ｆａｓｔ  Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ  ＰＣＲ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｂｒａｎｃｈｂｕｒｇ、Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ、ＵＳＡ）を使用して、以下の条件で、ＲＴ−ＰＣＲを行った：４８℃で３０分、９５℃で１０分、その後、９５℃で１５秒および６０℃で１分を４０サイクル。データを、ＡＢＩ  ＰＲＩＳＭ  ７５００  ＳＤＳソフトウェア（ｖｅｒｓｉｏｎ  １．３．１；Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて分析した。絶対定量では、既知の濃度のテンプレート調製物の１０倍希釈を用いて標準曲線を作成した。
【０１４６】
【表９】
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【０１４７】
細胞毒性アッセイ（プロトコルＢ）
本化合物の潜在的細胞毒性効果を、感染していないベロ細胞において評価した。９６ウェルプレートに、２倍、３倍または５倍段階希釈（それぞれ、５０μｇ／ｍＬ〜０．００３８μｇ／ｍＬ、５０μｇ／ｍＬ〜０．００７６μｇ／ｍＬおよび５０μｇ／ｍＬ〜０．０００１３μｇ／ｍＬの範囲）した本化合物の存在下、細胞を４×１０４細胞／ウェルで播種し、４〜７日間インキュベートした。培地を捨て、１００μＬの、３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム／フェナジンメトサルフェート（ＭＴＳ／ＰＭＳ；Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｌｅｉｄｅｎ、Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）を含有するＰＢＳを各ウェルに加えた。３７℃で２時間インキュベートした後、吸光度を４９８ｎｍで測定した。細胞毒性活性を次式より算出した：％細胞生存率＝１００×（ＯＤ化合物／ＯＤＣＣ）（式中、ＯＤ化合物およびＯＤＣＣはそれぞれ、化合物で処理した非感染細胞培養物の４９８ｎｍの吸光度、および未処理の非感染細胞培養物の４９８ｎｍの吸光度である）。５０％細胞毒性濃度（すなわち、全細胞数を５０％減少させる濃度；ＣＣ５０）を線形補間によって算出した（表７および８）。
【０１４８】
【表１０】
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【０１４９】
【表１１】
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【０１５０】
【表１２】
0006732736.tif 000031
【０１５１】
【表１３】
0006732736.tif 000032
本発明は、以下の態様を含む。
［１］
一または二置換インドール基を含む、式（Ｉ）
【化１９】
0006732736.tif 000033
の化合物、立体異性体、薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、または多形体であって、
前記化合物は以下の群：
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＦであり、かつＲ３がＨであり、ＦもしくはＣＨ３であり；
Ｒ１がＦもしくはＣＨ３であり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、かつＲ３がＨであり；
Ｒ１がＦであり、Ｒ２がＨであり、かつＲ３がＣＨ３であり；
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、かつＲ３がＨであり；
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＣｌであり、かつＲ３がＨもしくはＣＨ３であり；
Ｒ１がＦであり、Ｒ２がＦであり、かつＲ３がＨであり；または
Ｒ１がＣＨ３であり、Ｒ２がＨであり、かつＲ３がＦである
から選択される化合物、立体異性体、薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、または多形体。
［２］
前記化合物は以下の群：
【化２０】
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【化２１】
0006732736.tif 000035
【化２２】
0006732736.tif 000036
から選択される［１］に記載の化合物もしくはその立体異性体、薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、または多形体。
［３］
［１］または［２］に記載の、式（Ｉ）の化合物もしくは立体異性体、薬学的に許容されるその塩、溶媒和物または多形体を、１種以上の薬学的に許容される賦形剤、希釈剤または担体と共に含む医薬組成物。
［４］
薬剤として使用するための、［１］に記載の、式（Ｉ）の化合物もしくは立体異性体、薬学的に許容されるその塩、溶媒和物または多形体、あるいは［３］に記載の医薬組成物。
［５］
デング熱の治療に使用するための、［１］に記載の、式（Ｉ）の化合物もしくは立体異性体、薬学的に許容されるその塩、溶媒和物または多形体、あるいは［３］に記載の医薬組成物。
［６］
一または二置換インドール基を含む、次の構造式（Ｉ）
【化２３】
0006732736.tif 000037
によって示される化合物、立体異性体、薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、または多形体であって、前記化合物が以下の群：
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＦであり、かつＲ３がＨ、ＦもしくはＣＨ３；
Ｒ１がＦもしくはＣＨ３であり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、かつＲ３がＨであり；
Ｒ１がＦであり、Ｒ２がＨであり、かつＲ３がＣＨ３であり；
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、かつＲ３がＨであり；
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＣｌであり、かつＲ３がＨもしくはＣＨ３であり；
Ｒ１がＦであり、Ｒ２がＦであり、かつＲ３がＨであり；または
Ｒ１がＣＨ３であり、Ｒ２がＨであり、かつＲ３がＦである、
から選択される化合物もしくは立体異性体、薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、または多形体の、生体試料または患者におけるデングウィルスの複製を阻害するための使用。
［７］
追加の治療薬を同時投与することをさらに含む［６］に記載の使用。
［８］
前記追加の治療薬は、抗ウィルス剤もしくはデングワクチン、またはその両方から選択される［７］に記載の使用。
【配列表】
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