(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物と、少なくとも1つの抗癌化合物又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物との相乗的組合せを含む、癌の治療のための医薬組成物であって、
前記アミノアセトニトリル誘導体が、以下の化合物:
【化１】
0006666494.tif 000023
(ここで、上記化合物はそれぞれ、(R)-若しくは(S)-エナンチオマー又はラセミ体である)
又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物のいずれか1つから選択される医薬化合物であり、
治療されるべき癌が卵巣癌であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシン、アルベンダゾール、イマチニブ、イベルメクチン、ラパマイシン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ボルテゾミブ、コルヒチン、タモキシフェン、ミノサイクリン、パクリタキセルと組み合わせたミノサイクリン、及び、ドキソルビシンと組み合わせたミノサイクリンのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌が大腸癌であるとき、前記抗癌化合物が、フルオロウラシル(5FU)及びゲムシタビンのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌がグリア芽腫であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシン及びゲムシタビンのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌が前立腺癌であるとき、前記抗癌化合物が、フルタミドであり、
治療されるべき癌が中皮腫であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシンであり、
治療されるべき癌が肝臓癌であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシン及びパクリタキセルのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌が膵臓癌であるとき、前記抗癌化合物が、フルオロウラシル(5FU)及びゲムシタビンのいずれか1つ又は複数から選択される、
医薬組成物。
【請求項２】
医薬化合物が、(R)-若しくは(S)-エナンチオマー又はラセミ体である、請求項1に記載の医薬組成物。
【請求項３】
医薬化合物が、(S)-エナンチオマーである、請求項1又は2に記載の医薬組成物。
【請求項４】
医薬化合物が、以下の化合物:
【化２】
0006666494.tif 000024
又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物のいずれか1つから選択される、請求項1に記載の医薬組成物。
【請求項５】
医薬化合物が、MPL(N-[(1S)-1-シアノ-2-(5-シアノ-2-トリフルオロメチル-フェノキシ)-1-メチル-エチル]-4-トリフルオロメチルスルファニル-ベンズアミド):
【化３】
0006666494.tif 000025
又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物である、請求項1から4のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
抗がん化合物が、ドキソルビシンである、請求項1から5のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
5-フルオロウラシル及びゲムシタビンを含む、請求項1から5のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
ミノサイクリン及びドキソルビシンを含む、請求項1から5のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
ミノサイクリン及びパクリタキセルを含む、請求項1から5のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
癌が、卵巣の癌である、請求項1に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
抗癌レジメンにおける抗癌化合物の治療効果を増強するための、少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物を含む組成物であって、
前記アミノアセトニトリル誘導体が、以下の化合物：
【化４】
0006666494.tif 000026
(ここで、上記化合物はそれぞれ、(R)-若しくは(S)-エナンチオマー又はラセミ体である)
又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物のいずれか1つから選択される医薬化合物であり、
治療されるべき癌が卵巣癌であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシン、アルベンダゾール、イマチニブ、イベルメクチン、ラパマイシン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ボルテゾミブ、コルヒチン、タモキシフェン、ミノサイクリン、パクリタキセルと組み合わせたミノサイクリン、及び、ドキソルビシンと組み合わせたミノサイクリンのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌が大腸癌であるとき、前記抗癌化合物が、フルオロウラシル(5FU)及びゲムシタビンのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌がグリア芽腫であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシン及びゲムシタビンのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌が前立腺癌であるとき、前記抗癌化合物が、フルタミドであり、
治療されるべき癌が中皮腫であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシンであり、
治療されるべき癌が肝臓癌であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシン及びパクリタキセルのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌が膵臓癌であるとき、前記抗癌化合物が、フルオロウラシル(5FU)及びゲムシタビンのいずれか1つ又は複数から選択される、
組成物。
【請求項１２】
抗癌レジメンにおける抗癌化合物の用量を減少するための、少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物を含む組成物であって、
前記アミノアセトニトリル誘導体が、以下の化合物:
【化５】
0006666494.tif 000027
(ここで、上記化合物はそれぞれ、(R)-若しくは(S)-エナンチオマー又はラセミ体である)
又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物のいずれか1つから選択される医薬化合物であり、
治療されるべき癌が卵巣癌であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシン、アルベンダゾール、イマチニブ、イベルメクチン、ラパマイシン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ボルテゾミブ、コルヒチン、タモキシフェン、ミノサイクリン、パクリタキセルと組み合わせたミノサイクリン、及び、ドキソルビシンと組み合わせたミノサイクリンのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌が大腸癌であるとき、前記抗癌化合物が、フルオロウラシル(5FU)及びゲムシタビンのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌がグリア芽腫であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシン及びゲムシタビンのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌が前立腺癌であるとき、前記抗癌化合物が、フルタミドであり、
治療されるべき癌が中皮腫であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシンであり、
治療されるべき癌が肝臓癌であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシン及びパクリタキセルのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌が膵臓癌であるとき、前記抗癌化合物が、フルオロウラシル(5FU)及びゲムシタビンのいずれか1つ又は複数から選択される、
組成物。
【請求項１３】
抗癌レジメンにおける抗癌化合物の副作用を軽減するための、少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物を含む組成物であって、
前記アミノアセトニトリル誘導体が、以下の化合物:
【化６】
0006666494.tif 000028
(ここで、上記化合物はそれぞれ、(R)-若しくは(S)-エナンチオマー又はラセミ体である)
又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物のいずれか1つから選択される医薬化合物であり、
治療されるべき癌が卵巣癌であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシン、アルベンダゾール、イマチニブ、イベルメクチン、ラパマイシン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ボルテゾミブ、コルヒチン、タモキシフェン、ミノサイクリン、パクリタキセルと組み合わせたミノサイクリン、及び、ドキソルビシンと組み合わせたミノサイクリンのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌が大腸癌であるとき、前記抗癌化合物が、フルオロウラシル(5FU)及びゲムシタビンのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌がグリア芽腫であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシン及びゲムシタビンのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌が前立腺癌であるとき、前記抗癌化合物が、フルタミドであり、
治療されるべき癌が中皮腫であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシンであり、
治療されるべき癌が肝臓癌であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシン及びパクリタキセルのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌が膵臓癌であるとき、前記抗癌化合物が、フルオロウラシル(5FU)及びゲムシタビンのいずれか1つ又は複数から選択される、
組成物。
【請求項１４】
(a) 少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物と、
(b) 少なくとも1つの抗癌化合物又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物と
を含む、癌の治療のためのキットであって、
前記アミノアセトニトリル誘導体が、以下の化合物
【化７】
0006666494.tif 000029
(ここで、上記化合物はそれぞれ、(R)-若しくは(S)-エナンチオマー又はラセミ体である)
又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物のいずれか１つから選択される医薬化合物であり、
治療されるべき癌が卵巣癌であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシン、アルベンダゾール、イマチニブ、イベルメクチン、ラパマイシン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ボルテゾミブ、コルヒチン、タモキシフェン、ミノサイクリン、パクリタキセルと組み合わせたミノサイクリン、及び、ドキソルビシンと組み合わせたミノサイクリンのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌が大腸癌であるとき、前記抗癌化合物が、フルオロウラシル(5FU)及びゲムシタビンのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌がグリア芽腫であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシン及びゲムシタビンのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌が前立腺癌であるとき、前記抗癌化合物が、フルタミドであり、
治療されるべき癌が中皮腫であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシンであり、
治療されるべき癌が肝臓癌であるとき、前記抗癌化合物が、ドキソルビシン及びパクリタキセルのいずれか1つ又は複数から選択され、
治療されるべき癌が膵臓癌であるとき、前記抗癌化合物が、フルオロウラシル(5FU)及びゲムシタビンのいずれか1つ又は複数から選択される、
キット。
【請求項１５】
医薬化合物が、(R)-若しくは(S)-エナンチオマー又はラセミ体である、請求項11から13のいずれか一項に記載の組成物、又は請求項14に記載のキット。
【請求項１６】
医薬化合物が、(S)-エナンチオマーである、請求項11から13及び15のいずれか一項に記載の組成物、又は、請求項14若しくは15のいずれか一項に記載のキット。
【請求項１７】
医薬化合物が、以下の化合物:
【化８】
0006666494.tif 000030
又はその医薬的に許容される塩、又は溶媒和物のいずれか1つから選択される、請求項11から13、15、及び16のいずれか一項に記載の組成物、又は、請求項14から16のいずれか一項に記載のキット。
【請求項１８】
医薬化合物が、MPL(N-[(1S)-1-シアノ-2-(5-シアノ-2-トリフルオロメチル-フェノキシ)-1-メチル-エチル]-4-トリフルオロメチルスルファニル-ベンズアミド):
【化９】
0006666494.tif 000031
又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物である、請求項11から13及び15から17のいずれか一項に記載の組成物又は請求項14から17のいずれか一項に記載のキット。
【請求項１９】
少なくとも1つの抗癌化合物が、ドキソルビシンである、請求項11から13及び15から18のいずれか一項に記載の組成物、又は、請求項14から18のいずれか一項に記載のキット。
【請求項２０】
少なくとも1つの抗癌化合物が、5-フルオロウラシル及びゲムシタビンである、請求項11から13及び15から18のいずれか一項に記載の組成物、又は、請求項14から18のいずれか一項に記載のキット。
【請求項２１】
少なくとも1つの抗癌化合物が、ミノサイクリン及びドキソルビシンである、請求項11から13及び15から18のいずれか一項に記載の組成物、又は、請求項14から18のいずれか一項に記載のキット。
【請求項２２】
少なくとも1つの抗癌化合物が、ミノサイクリン及びパクリタキセルである、請求項11から13及び15から18のいずれか一項に記載の組成物、又は、請求項14から18のいずれか一項に記載のキット。
【請求項２３】
前記少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物、並びに、前記少なくとも1つの抗癌化合物又はその医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物が、別々の区画に含まれ、前記別々の区画が、剤が、他の剤の投与の前に、同時に、又は後に投与され得る形態で設けられる、請求項14から22のいずれか一項に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アミノアセトニトリル誘導体と抗がん化合物とを含む医薬の組合せに関する。更に本発明は、がんの処置に使用するための前記医薬の組合せに関する。
【背景技術】
【０００２】
アミノアセトニトリル誘導体(AAD)は、薬剤耐性線虫に対して有効なクラスの駆虫剤である。線虫、すなわち回虫には、ヒト及び家畜に対する病原体が数多く含まれる。胃腸線虫、例えばヘモンクス・コントルツス(Haemonchus contortus)は、反芻動物における主な寄生体であり、家畜生産の世界的な経済損失の実質的原因となる。
【０００３】
モネパンテル(MPL){N-[(1S)-1-シアノ-2-(5-シアノ-2-トリフルオロメチル-フェノキシ)-1-メチル-エチル]-4-トリフルオロメチルスルファニル-ベンズアミド}は、そのようなAADの1例であり、羊の胃腸寄生物を処置するための抗線虫薬として承認された。
【０００４】
【化１】
0006666494.tif 000002
【０００５】
MPLは、様々な種類の家畜病原性線虫に対して効果を有することが示されてきた。
【０００６】
驚くべきことに、アミノアセトニトリル誘導体(AAD)と他の抗がん化合物との組合せが、がんの処置における抗がん化合物の効果を顕著に増強することが見いだされた。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】欧州特許第1216053号
【特許文献２】米国特許第6,372,223号
【特許文献３】欧州特許第0399843号
【特許文献４】米国特許第7,029,678号
【特許文献５】WO2007/006939
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】H.Anselら、Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems(第6版、1995)、第196頁及び第1456〜1457頁
【非特許文献２】T. Higuchi and V. Stella、Pro-drugs as Novel Delivery Systems (1987)14 of the A.C.S. Symposium Series、及びBioreversible Carriers in Drug Design (1987) Edward B. Roche、ed.、American Pharmaceutical Association and Pergamon Press
【非特許文献３】A. Gennaro(ed.)、Remington's Pharmaceutical Sciences、第18版、(1990)、Mack Publishing Co.、Easton、Pennsylvania
【非特許文献４】Remington's Pharmaceutical Science、第15版、Mack Publishing Company、Easton、Pa.
【非特許文献５】Prescott、(Ed)、(1976)、「Methods in Cell Biology」、Volume XIV、Academic Press、New York、N.Y.、第33頁 et seq.
【非特許文献６】Gilmanら(Eds)、(1990)、「Goodman And Gilman's: The Pharmacological Bases of Therapeutics」、Pergamon Press
【非特許文献７】Finglら(1975)、「The Pharmacological Basis of Therapeutics」、第1章、第1頁
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の第1の態様によれば、少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグと、少なくとも1つの抗がん化合物又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグとの相乗的組合せを含む医薬組成物が提供される。
【００１０】
本発明の第2の態様によれば、がんの処置のための、本発明の第1の態様による医薬組成物が提供される。
【００１１】
本発明の第3の態様によれば、がんを処置するための方法であって、治療有効量の本発明の第1の態様による医薬組成物を、処置を必要とする患者に投与する工程を含む、方法が提供される。
【００１２】
本発明の第4の態様によれば、がんの処置のための薬剤を製造するための、本発明の第1の態様による医薬組成物の使用が提供される。
【００１３】
本発明の第5の態様によれば、抗がんレジメンにおける抗がん化合物の治療効果を増強するための、少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグの使用が提供される。
【００１４】
本発明の第6の態様によれば、抗がんレジメンにおける抗がん化合物の用量を減少するための、少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグの使用が提供される。
【００１５】
本発明の第7の態様によれば、抗がんレジメンにおける抗がん化合物の副作用を軽減するための、少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグの使用が提供される。
【００１６】
本発明の第8の態様によれば、抗がんレジメンにおける抗がん化合物の治療効果を増強するための方法であって、治療有効量の少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグを投与する工程を含む、方法が提供される。
【００１７】
本発明の第9の態様によれば、抗がんレジメンにおける抗がん化合物の用量を減少するための方法であって、治療有効量の少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグを投与する工程を含む、方法が提供される。
【００１８】
本発明の第10の態様によれば、抗がんレジメンにおける抗がん化合物の副作用を軽減するための方法であって、治療有効量の少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグを投与する工程を含む、方法が提供される。
【００１９】
本発明の第11の態様によれば、抗がんレジメンにおける抗がん化合物の治療効果を増強するための薬剤の製造における、少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグの使用が提供される。
【００２０】
本発明の第12の態様によれば、抗がんレジメンにおける抗がん化合物の用量を減少するための薬剤の製造における、少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグの使用が提供される。
【００２１】
本発明の第13の態様によれば、抗がんレジメンにおける抗がん化合物の副作用を軽減するための薬剤の製造における、少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグの使用が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】図1は、A2780細胞の細胞増殖に対するドキソルビシンとMPLとの組合せ効果を示す。5μMのMPLは、ドキシサイクリン処置スケジュールに添加することにより、IC50値を500nMから1nM(近似値)に減少させた。MPL(5μM)の存在下のドキソルビシン(10nM)は、MPL非存在下でのドキソルビシン1000nMと同等である。
【図２】図2は、A2780細胞に対するMPLとシスプラチンとによる72時間の処置のSRBアッセイを示す。
【図３】図3は、A2780細胞に対するMPLとエトポシドとによる72時間の処置のSRBアッセイを示す。
【図４】図4は、A2780細胞に対するMPLとシメチジンとによる72時間の処置のSRBアッセイを示す。
【図５】図5は、A2780細胞に対するMPLとミフェプリストンとによる72時間の処置のSRBアッセイを示す。
【図６】図6は、A2780細胞に対するMPLとイマチニブとによる72時間の処置のSRBアッセイを示す。
【図７】図7は、OVCAR-3細胞に対するMPLとカフェインとによる72時間の処置のSRBアッセイを示す。
【図８】図8は、OVCAR-3細胞に対するMPLとL-ヒスチジンとによる72時間の処置のSRBアッセイを示す。
【図９】図9は、OVCAR-3細胞に対するMPLとDL-ヒスチジンとによる72時間の処置のSRBアッセイを示す。
【図１０】図10は、OVCAR-3細胞に対するMPLとグリシン塩酸塩とによる72時間の処置のSRBアッセイを示す。
【図１１】図11は、A2780細胞に対するMPLとマイトマイシンとによる72時間の処置のSRBアッセイを示す。
【図１２】図12は、A2780細胞に対するMPLとビンクリスチンとによる72時間の処置のSRBアッセイを示す。
【図１３】図13は、A2780細胞に対するMPLとパクリタキセルとによる72時間の処置のSRBアッセイを示す。
【図１４】図14は、MPLとアルベンダゾール(ABZ)とを併用したA2780細胞(72時間処置)を示す。
【図１５】図15は、MPLとイベルメクチンとを併用したA2780細胞(72時間処置)を示す。
【図１６】図16は、MPLとレバミソールとを併用したOVCAR-3(72時間処置)を示す。
【図１７】図17は、MPLとラパマイシンとによるA2780細胞(72時間処置)の処置のSRBアッセイを示す。
【図１８】図18は、MPLとエベロリムスとによるA2780細胞(72時間処置)の処置のSRBアッセイを示す。
【図１９】図19は、MPLとイマチニブとを併用したA2780細胞(72時間処置)を示す。
【図２０】図20は、LNCAP-1悪性細胞及びHOSE非悪性細胞に対する、MPLとフルタミドとの相互作用を示す。
【図２１】図21は、LN18及びU87悪性細胞に対する、MPLとドキソルビシン又はゲムシタビンとの相互作用を示す。
【図２２】図22は、A2780及びOVCAR-3悪性細胞並びにHOSE非悪性細胞に対する、MPLとドキソルビシン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、オキサリプラチン又はパクリタキセルとの相互作用を示す。
【図２３】図23は、AsPC-1及びCFPAC-1悪性細胞に対する、MPLとドキソルビシン、フルオロウラシル又はゲムシタビンとの相互作用を示す。
【図２４】図24は、Hep3B悪性細胞及びHOSE非悪性細胞に対する、MPLとシスプラチン、ドキソルビシン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、オキサリプラチン又はパクリタキセルとの相互作用を示す。
【図２５】図25は、PET、REN及びYOU悪性細胞に対する、MPLとドキソルビシン又はゲムシタビンとの相互作用を示す。
【図２６】図26は、A2780及びOVCAR-3悪性細胞並びにHOSE非悪性細胞に対する、MPLとボルテゾミブ(bortezimib)、コルヒチン、レバミソール又はタモキシフェンとの相互作用を示す。
【図２７】図27は、C170及びHT29悪性細胞に対する、MPLとフルオロウラシル、ゲムシタビン、若しくはフルオロウラシル及びゲムシタビンの両方との組合せ、並びにMPLとフルオロウラシル、オキサリプラチン、若しくはフルオロウラシル及びオキサリプラチンの両方との組合せの相互作用を示す。
【図２８】図28は、OVCAR-3及びSKOV-1悪性細胞並びにHOSE非悪性細胞に対する、MPLとミノサイクリン、ドキソルビシン、若しくはミノサイクリン及びドキソルビシンの両方との組合せ、並びにMPLとミノサイクリン、パクリタキセル、若しくはミノサイクリン及びパクリタキセルの両方との組合せの相互作用を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
本発明により用いられうるアミノアセトニトリル誘導体(AAD)は、以下の構造を有する:
【００２４】
【化２】
0006666494.tif 000003
【００２５】
好ましくは、R1は、-CN、H又はハロゲンである。より好ましくは、R1は、-CNである。好ましくは、R2は、H又はハロゲンであり、より好ましくはHである。好ましくは、R3は、-CF3又はハロゲンであり、より好ましくは-CF3である。好ましくは、R4は、-SCF3、-SOCF3、-SO2CF3、-OCF3、又は-CF3である。より好ましくは、R4は、-SCF3又は-SO2CF3である。好ましくは、R5は、Hである。好ましくは、R6は、アルキルであり、より好ましくはCH3である。好ましくは、Xは、Oである。好ましくは、nは、1〜15、1〜10、1〜5、1〜2、又は1である。最も好ましくは、nは、1である。好ましくは、R4は、アミド部分に対してパラ位に配置されている。
【００２６】
式(I)の化合物は、(R)-若しくは(S)-エナンチオマー又はラセミ体でありうる。
【００２７】
式(I)の化合物は、以下の化合物:
【００２８】
【化３−１】
0006666494.tif 000004
【化３−２】
0006666494.tif 000005
【化３−３】
0006666494.tif 000006
【００２９】
(ここで、上記化合物はそれぞれ、(R)-若しくは(S)-エナンチオマー又はラセミ体である)
又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグのいずれか1つから選択してもよい。
【００３０】
好ましくは、式(I)の化合物は、以下の化合物:
【００３１】
【化４】
0006666494.tif 000007
【００３２】
(ここで、上記化合物はそれぞれ、{別途特定しない限り}(R)-若しくは(S)-エナンチオマー又はラセミ体である)
又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグのいずれか1つから選択してもよい。
【００３３】
より好ましくは、式(I)の化合物は、MPL(N-[(1S)-1-シアノ-2-(5-シアノ-2-トリフルオロメチル-フェノキシ)-1-メチル-エチル]-4-トリフルオロメチルスルファニル-ベンズアミド):
【００３４】
【化５】
0006666494.tif 000008
【００３５】
又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグである。
【００３６】
更に、式(I)の化合物は、MPLの代謝物であるモネパンテルスルホン(MPL-SO2):
【００３７】
【化６】
0006666494.tif 000009
【００３８】
又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグであってもよい。
【００３９】
上記に例示した本発明による式(I)のAAD化合物は、Table 1(表1)及び式(Ia):
【００４０】
【化７】
0006666494.tif 000010
【００４１】
により要約されうる。
【００４２】
【表１】
0006666494.tif 000011
【００４３】
「MPL-(R)」は、N-[(1R)-1-シアノ-2-(5-シアノ-2-トリフルオロメチル-フェノキシ)-1-メチル-エチル]-4-トリフルオロメチルスルファニル-ベンズアミド)を指し、「MPL-(S)」は、N-[(1S)-1-シアノ-2-(5-シアノ-2-トリフルオロメチル-フェノキシ)-1-メチル-エチル]-4-トリフルオロメチルスルファニル-ベンズアミド)を指す。
【００４４】
本発明の医薬の組合せは、少なくとも1つの抗がん化合物を含む。例えば抗がん化合物は、がん細胞の増殖を変化させる又は遅延させる任意の薬物であってよく、細胞増殖抑制剤、細胞毒性剤{例えば、制限されないが、DNA相互作用剤(例えば、シスプラチン又はドキソルビシン)};タキサン類(例えば、タキソテール、タキソール);トポイソメラーゼII阻害剤(例えば、エトポシド);トポイソメラーゼI阻害剤{例えば、イリノテカン(若しくはCPT-11)、カンプト(camptostar)、又はトポテカン};チューブリン相互作用剤(例えば、パクリタキセル、ドセタキセル、又はエポチロン);ホルモン剤(例えば、タモキシフェン);チミジン合成酵素阻害剤(例えば、5-フルオロウラシル);代謝拮抗物質{例えば、メトトレキサート(methoxtrexate)};アルキル化剤{例えば、テモゾロマイド[TEMODAR(商標)、Schering-Plough Corporation社、Kenilworth、New Jersey]、シクロホスファミド};ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤{例えば、SARASAR(商標)(4-[2-[4-[(11R)-3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ[1,2-b]ピリジン-11-イル-]-1-ピペリジニル]-2-オキソエチル(oxoehtyl)]-1-ピペリジンカルボキサミド、又はSCH66336(Schering-Plough Corporation社、Kenilworth、New Jersey)、チピファミブ[Zamestra(登録商標)又はR115777、Janssen Pharmaceuticals社]、L778.123(ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、Merck&Company社、Whitehouse Station、New Jersey)、BMS214662(ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、Bristol-Myers Squibb Pharmaceuticals社、Princeton、New Jersey)};シグナル伝達阻害剤{例えば、イレッサ(Astra Zeneca Pharmaceuticals社、England)、タルセバ(EGFRキナーゼ阻害剤)、EGFRに対する抗体(例えば、C225)、GLEEVEC(商標)(C-ablキナーゼ阻害剤、Novartis Pharmaceuticals社、East Hanover、New Jersey)};インターフェロン、例えばイントロン(Schering-Plough Corporation社)、Peg-lntron(Schering-Plough Corporation社)等;ホルモン療法の組合せ;アロマターゼの組合せ;ara-C、アドリアマイシン、シトキサン、ゲムシタビン及びニトロソ尿素を含む群から選択してもよい。
【００４５】
好ましくは、本発明の医薬の組合せにおける抗がん化合物は、ドキソルビシン、シスプラチン、5-フルオロウラシル、エトポシド、イマチニブ、マイトマイシンC、ビンクリスチン、パクリタキセル、タモキシフェン、ミノサイクリン、アルベンダゾール、レバミソール、フルタミド、タモキシフェン、ウォルトマンニン、オキサリプラチン、ボルテゾミブ、アミロライド、EGTA、エナラプリル、Mg132、カプトプリル、シメチジン、ミフェプリストン、グリベンクラミド、トリフルオペラジン、セロトニン、クロザピン、ゲムシタビン、イベルメクチン、コルヒチン、ラパマイシン及びエベロリムスの少なくとも1つから選択される。
【００４６】
更に、本発明の医薬の組合せの抗がん化合物は、シクロホスファミド、メトトレキサート、シタラビン、ダウノルビシン、ブレオマイシン、ビンブラスチン、及びビンデシンから選択することができる。
【００４７】
より好ましくは、本発明の医薬の組合せにおける抗がん化合物は、ドキソルビシン、シスプラチン、5-フルオロウラシル、エトポシド、イマチニブ、マイトマイシン、ビンクリスチン、パクリタキセル、タモキシフェン、アルベンダゾール、レバミソール、フルタミド、ゲムシタビン、オキサリプラチン、タモキシフェン、コルヒチン、及びミノサイクリンの少なくとも1つから選択される。
【００４８】
一実施形態において、本発明の医薬の組合せにおける抗がん化合物は、ドキソルビシンである。
【００４９】
一実施形態によれば、本発明は、式Iによる化合物又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグと、ドキソルビシン、フルタミド、ゲムシタビン、5-フルオロウラシル、オキサリプラチン、パクリタキセル、タモキシフェン、コルヒチン、及びミノサイクリンのいずれか1つ又は複数との相乗的組合せを含む医薬組成物を提供する。
【００５０】
別の実施形態によれば、本発明は、式Iによる化合物又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグと、5-フルオロウラシルと、ゲムシタビンとの相乗的組合せを含む医薬組成物を提供する。
【００５１】
別の実施形態によれば、本発明は、式Iによる化合物又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグと、ミノサイクリンと、ドキソルビシンとの相乗的組合せを含む医薬組成物を提供する。
【００５２】
別の実施形態によれば、本発明は、式Iによる化合物又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグと、ミノサイクリンと、パクリタキセルとの相乗的組合せを含む医薬組成物を提供する。
【００５３】
好ましくは、がんは、膀胱癌、乳癌、結腸癌、中皮腫、腎臓癌、肝臓癌、小細胞肺がん及び非小細胞肺癌を含む肺癌、頭頚癌、食道癌、胆嚢癌、卵巣癌、膵臓癌、胃癌、子宮頸癌、甲状腺癌、前立腺癌、扁平上皮癌を含む皮膚癌を含む癌;白血病、急性リンパ性白血病、急性リンパ芽球性白血病、B細胞リンパ腫、T細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、毛様細胞リンパ腫、外套細胞リンパ腫、ミエローマ及びバーケットリンパ腫を含むリンパ性造血器腫瘍;急性及び慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群及び前骨髄球白血病を含む骨髄性造血器腫瘍;線維肉腫及び横紋筋肉腫を含む間葉系腫瘍;星状細胞腫、神経芽細胞腫、神経膠腫及びシュワン腫を含む中枢及び末梢神経系腫瘍;並びに黒色腫、精上皮腫、奇形癌、骨肉腫、色素性乾皮症、ケラトアカントーマ、甲状腺濾胞がん及びカポジ肉腫を含む他の腫瘍から選択される。
【００５４】
好ましくは、処置されるがんは、卵巣、乳房、前立腺のがん、又は中皮腫がんから選択され、最も好ましくは、処置されるがんは、卵巣のがんである。
【００５５】
ドキソルビシン(商標Doxil;ヒドロキシダウノルビシンとしても知られる)は、がん化学療法で使用される薬物である。ドキソルビシンは、アントラサイクリン系抗生物質であり、天然産物ダウノマイシンと近似関係にある。ドキソルビシンは、多種多様ながん、例えば、血液悪性腫瘍、多種の癌及び軟組織肉腫の処置において一般的に使用されている。
【００５６】
シスプラチン{シスプラチナム又はcis-ジアミンジクロロ白金(II)}は、化学療法薬である。シスプラチンは、白金含有抗がん薬物クラスの初期のメンバーであり、現在、このクラスにはカルボプラチンとオキサリプラチンも含まれる。これらの白金錯体類は、DNAと生体内で反応し、DNAに結合し、DNAの架橋反応を引き起こし、最終的にアポトーシス(プログラム化された細胞死)を引き起こす。
【００５７】
フルオロウラシル(又は5-FU)は、化学療法薬であり、主にチミジル酸合成酵素阻害剤として作用する。この酵素の作用を中断させることにより、DNA複製に必要なヌクレオシドであるピリミジンチミジンの合成が阻止される。チミジル酸合成酵素は、デオキシウリジンモノホスフェート(dUMP)を、チミジンモノホスフェート(dTMP)にメチル化する。5-FUの投与は、dTMPの不足を引き起こし、分裂が急速ながん細胞はチミン飢餓死により細胞死する。
【００５８】
エトポシドは、DNA及びトポイソメラーゼII酵素(DNAの巻戻しを助ける酵素)と三元複合体を形成してDNA鎖の再連結を阻害し、それによりDNA鎖の破壊を引き起こす。がん細胞は、より急速に分裂することから、この酵素への依拠が健常細胞より大きい。したがって、がん細胞のDNA合成におけるエラーが引き起こされ、アポトーシスが促進される。
【００５９】
イマチニブ[Novartis社によりGleevec(米国)又はGlivec(ヨーロッパ/オーストラリア/ラテンアメリカ)として販売されており、治験名STI-571で呼ばれることもある]は、複数のがんの処置、最も著名にはフィラデルフィア染色体陽性(Ph+)慢性骨髄性白血病(CML)の処置に使用されるチロシン-キナーゼ阻害剤である。全てのチロシン-キナーゼ阻害剤と同様に、イマチニブは、チロシンキナーゼ酵素、この場合はBCR-Abl、の後続タンパク質のリン酸化及びがんの進行に必要なシグナル伝達カスケードの開始を阻害し、それによりがん細胞の成長を阻害して、アポトーシスによるがん細胞の死を引き起こす。BCR-Ablチロシンキナーゼ酵素は、がん細胞にのみ存在し、健常細胞には存在しないので、イマチニブは標的療法の一形態として機能し、がん細胞のみがこの薬物の作用によって殺傷される。この点において、イマチニブは、そのような標的作用の可能性を示す初期のがん治療薬の1つであり、がん治療学における研究のパラダイムとしてしばしば引用される。
【００６０】
ヒトにおいて、カフェインは、中枢神経系の刺激剤として作用し、一時的に眠気を除き、注意力を回復させる。カフェインは、中毒量(平均的な成人に対して1グラム超)が、通常使用される量(500ミリグラム未満)よりもかなり高いことから、食品医薬品局により、GRAS(一般に安全と認められる)として分類されている。通常の消費では、数年続けても健康へのリスクは低く、いくつかの疾患、例えばパーキンソン病及び特定の種類のがんに対して適度な保護効果も奏しうる。カフェインは、不安障害に対して、ポジティブ及びネガティブの両方の作用を奏しうる。
【００６１】
マイトマイシン(又はマイトマイシンC)は、緑内障手術に用いられる化学療法剤である。更にマイトマイシンは有力なDNA架橋剤である。ゲノムあたり1つの架橋が、微生物の殺傷に有効であることが示されている。この架橋は、還元による活性化とその後の2つのN-アルキル化により達成される。どちらのアルキル化も、5'-CpG-3'配列内のグアニンヌクレオシドに対して配列特異的である。
【００６２】
チューブリンは重合して微小管となる構造タンパク質である。特に細胞の細胞骨格及び紡錘体は微小管で作られる。ビンクリスチンは、チューブリン二量体に結合し、微小管構造の集合を阻害する。微小管の破壊により中期の有糸分裂が停止する。したがって、ビンカアルカロイドは、がん細胞を含む急速に分裂する全ての細胞種に作用し、腸上皮及び骨髄における細胞種にも影響を及ぼす。
【００６３】
パクリタキセルは、がん化学療法で使用される有糸分裂阻害剤である。
【００６４】
タモキシフェンは、その活性代謝物であるヒドロキシタモキシフェンを介して、乳組織におけるエストロゲン受容体のアンタゴニストとなる。子宮内膜等の他の組織では、タモキシフェンはアゴニストとして作用し、混合アゴニスト/アンタゴニストとして特徴づけされることもある。タモキシフェンは、更年期前の女性におけるホルモン受容体陽性乳がんに対する一般的内分泌(抗エストロゲン)治療薬であり、閉経後の女性における標準治療薬でもある。
【００６５】
シメチジンは、FDAにより胃酸分泌の抑制に関して承認されており、いくつかの皮膚科学疾患に向けても提唱されている。シメチジンは、ヒスタミンH2受容体拮抗薬の原型であり、後にシメチジンからこのクラスのメンバーがいくつか開発された。
【００６６】
ミフェプリストンは、医薬品として使用される合成ステロイド化合物である。妊娠初期の数カ月の間に堕胎薬として及び低用量で緊急避妊薬として使用されるプロゲステロン受容体アンタゴニストである。ミフェプリストンも、強力なグルココルチコイド受容体アンタゴニストであり、不応性クッシング症候群(転位/新生物ACTH/コルチゾール分泌による)において時々使用される。初期の治験の間は、RU-38486又は単にRU-486として知られていた。商品名Korlym及びMifeprexで市販されている。
【００６７】
本発明において、一定の抗がん化合物の細胞毒性が、アミノアセトニトリル誘導体、例えばMPLの添加によって増強される。これは、以下の理由で重要である:
【００６８】
・抗がん薬物の用量が減少されると、より安全になり、患者に対する利点も大きくなり、化学療法における副作用の軽減に至る(例えば、ドキソルビシンの活性が心臓毒性を伴うことなく増強される);
【００６９】
・MPLは毒性を有さず、したがって、その増強は、2種の抗がん薬の併用でみられる増強とは大きく異なる;
【００７０】
・MPL又は薬物を、臓器の血管を通して選択的に腫瘍に投与することができ、局所的な様式で(特に脳又は肝組織に関連)、細胞毒性を最大限増強することができる;及び
【００７１】
・MPLの使用は、薬物耐性が現れ、化学療法の用量を通常では増加させることができない状況において、特に適切でありうる。
【００７２】
過去50年に医学において最も難関であったことの1つは、正常組織を傷つけることなく、腫瘍細胞を効果的に死滅させる薬物を同定することである。ほとんど全ての既知のクラスの抗がん薬における副作用プロファイルにより、がん患者を処置する医者の能力は、特に薬物の耐性が生じることが多い後期段階において、実質的に制限される。そのような薬物耐性において、細胞毒性のある化学療法の用量を増加させる選択肢は、正常組織への毒性によって制限される。本発明に記載のAADの使用を通して、既知の化学療法剤の比活性を100倍まで増強することによって、関連する副作用なしに化学療法薬を増強するという選択肢が医者に与えられる。別言すると、本発明の医薬組成物は、抗がん化合物の毒性を同程度に増強させずに、抗がん化合物の活性を100倍まで増強する。
【００７３】
したがって、本発明は、化学療法薬の抗がん活性を選択的に増強し、正常組織に細胞毒性作用を及ぼすことなく、化学療法剤と関連した有害作用を減少させる。そのような有害作用としては、以下が挙げられる:
・免疫抑制及び骨髄抑制
・盲腸炎
・胃腸不快感
・貧血
・疲労
・化学療法誘発性の吐き気及び嘔吐
・脱毛
・二次新生物
・不妊症
・胎児催奇形性
・神経学的有害作用
・腫瘍崩壊症候群
・臓器障害
・悪液質
・体重減少
・心毒性
【００７４】
AADによって細胞毒性の増強がもたらされるのは、化学療法で従来使用されている抗がん薬に限定されない。代謝に干渉する他の薬物も、顕著な増強により利益を得ることが示された。
【００７５】
観察される増強の程度は、抗がん化合物の性質及び作用機序によって定まる。AADと抗がん化合物との組合せ使用は、2種の薬物の混合物の投与によって、又は個々の連続的投与を通して、達成することができる。
【００７６】
AADは、がん細胞における化学療法薬の細胞毒性活性を顕著に増強することができるが、この細胞毒性の増強は正常細胞ではみられない。そのように本発明は、がん、薬剤耐性がん及び化学療法の副作用軽減のための処置自体に向けられる。そのため、正常細胞に対する毒性を増強させることなく、通常の処方よりはるかに少ない用量で化学療法薬のがんに対する細胞毒性を維持することによって、がん療法における薬剤誘発副作用を除去することができる。
【００７７】
本発明によれば、がん細胞代謝が干渉する化学療法又は薬物を用いるがんの処置で最適な治療指数を達成できる処置レジメンを開発しうる。更に、AADを用いる処置の時系列を最適化する処置レジメン及びがん処置薬を開発しうる。
【００７８】
定義
「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素を意味し、好ましくはフッ素又は塩素を意味する。
【００７９】
「アルキル」は、直鎖状又は分岐状であって、鎖内に約1〜約20個の炭素原子を含みうる脂肪族炭化水素基を意味する。好ましいアルキル基は、鎖内に約1〜約12個の炭素原子を含有する。より好ましいアルキル基は、鎖内に約1〜約6個の炭素原子を含有する。分岐状とは、1つ又は複数の低級アルキル基、例えば、メチル、エチル又はプロピル基が、直鎖状アルキル鎖に結合していることを意味する。「低級アルキル」とは、直鎖状又は分岐鎖状でありうる、鎖内に約1〜約6個の炭素原子を有する基を意味する。「アルキル」は、非置換でもよく又は場合に応じて1つ若しくは複数の同一若しくは異なる置換基で置換されていてもよく、置換基は、それぞれ独立して、ハロ、アルキル、アリール、シクロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルチオ、アミノ、-NH(アルキル)、-NH(シクロアルキル)、-N(アルキル)2、カルボキシ及び-C(O)O-アルキルからなる群から選択される。適切なアルキル基の非限定的な例としては、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル及びt-ブチルが挙げられる。
【００８０】
「アリール」は、それ自体又は別の置換体の一部として、芳香族環状炭化水素ラジカルを意味する。好ましいアリール基は、6〜10個の炭素原子を有する。用語「アリール」には、単環系だけでなく多環系も含まれる。本発明で使用するために好ましいアリール基としては、フェニル及びナフチルが挙げられる。用語「アリール」は、部分的に芳香族炭化水素である(すなわち、縮合環の1つが芳香族環であり、他が非芳香族環である)縮合環状炭素環を含む。部分的に芳香族であるアリール基の例は、インダニルである。
【００８１】
「ヘテロアリール」は、それ自体又は別の置換体の一部として、C、N、O及びSから選択される5〜12個の環原子を有し、少なくとも1つの環ヘテロ原子がO、N又はSであり、少なくとも1つの構成要素の環が芳香族環である単環式又は多環式基を意味する。本発明において使用するための例示的なヘテロアリール基は、例えば、カルバゾリル、カルボリニル(carbolinlyl)、クロメニル、シンノリニル、フラニル、ベンゾフラニル、ベンゾフラザニル、イソベンゾフラニル、イミダゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾイミダゾロニル、インダゾリル、インドリル、イソインドリル、インドリニル、インドラジニル、インジニル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、ベンゾオキサゾリル、イソオキサゾリル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリル、ベンゾピラゾリル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリル、キノリル、イソキノリル、テトラゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、チエニル、ベンゾチオエニル、ベンゾチアゾリル、キノキサリニル、トリアジニル、及びトリアゾリル、並びにそれらのN-酸化物が挙げられる。
【００８２】
ヘテロアリール基の1つのサブグループは、5つの環原子を有する。この実施形態における例示的なヘテロアリール基は、ピラゾリル、ピリジル、チアゾリル及びイミダゾリルである。
【００８３】
ヘテロアリール基の別のサブグループは、6つの環原子を有する。この実施形態における例示的なヘテロアリール基は、ピリジニル及びピリミジニルである。
【００８４】
用語「ヘテロアリール」は、部分的に芳香族である縮合環状複素環式環(すなわち、縮合環の1つが芳香族環であり、他が非芳香族環である)を含む。部分的に芳香族である例示的なヘテロアリール基は、ベンゾジオキソールである。
【００８５】
本明細書で定義されるヘテロアリール基が置換されているとき、置換基は、ヘテロアリール基の環炭素原子に結合してもよく、置換できる原子価を有する環ヘテロ原子(すなわち、窒素、酸素、又は硫黄)に結合してもよい。好ましくは、置換基は、環炭素原子に結合している。同様に、ヘテロアリール基が本明細書で置換基として定義されているとき、結合点は、ヘテロアリール基の環炭素原子にあってもよく、結合できる原子価を有する環ヘテロ原子(すなわち、窒素、酸素、又は硫黄)にあってもよい。好ましくは、結合は、環炭素原子にある。
【００８６】
「ヘテロ原子」は、N、O、P及びSから選択される原子を意味する。必要な場合、任意の指定されない原子価は、独立してH、OH、カルボニル、n-アルキル又はアルコキシから選択される。
【００８７】
「n」は、1〜20、好ましくは1〜10、より好ましくは1〜6、最も好ましくは1〜4でありうる。
【００８８】
「アルコキシ」は、アルキル基が前述の基であるアルキル-O-基を意味する。適切なアルコキシ基の非限定的な例としては、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、イソプロポキシ、及びn-ブトキシが挙げられる。母体部分への結合はエーテル酸素による。
【００８９】
「医薬的に許容される塩」は、本発明の化合物の生物学的効果及び特性を保持し、適切な非毒性の有機若しくは無機酸類又は有機若しくは無機塩基類から形成される従来の酸付加塩又は塩基付加塩を指す。酸付加塩の例としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸及び硝酸のような無機酸に由来する酸付加塩、並びにp-トルエンスルホン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、コハク酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸等の有機酸に由来する酸付加塩が挙げられる。塩基付加塩の例としては、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、第4級アンモニウムヒドロキシド類、例えば、テトラメチルアンモニウムヒドロキシドが挙げられる。製薬化合物(すなわち、薬物)の塩への化学的修飾は、化合物の改善された物理的及び化学的安定性、吸湿性、流動性、及び可溶性を改善するために、製薬分野の化学者にとって周知の技術である。例えば、H.Anselら、Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems(第6版、1995)、第196頁及び第1456〜1457頁を参照。
【００９０】
「医薬的に許容される」例えば医薬的に許容される担体、賦形剤等は、薬理学的に許容されること及び特定の化合物が投与される対象に対して実質的に非毒性であることを意味する。
【００９１】
置換アルキル等における「置換」は、置換が1つ以上の位置で生じてもよく、他に明記しない限り、各置換部位における置換は独立して特定の選択肢から選択され、2以上の置換基が様々な部位で同時に存在してもよいことを意味する。
【００９２】
本発明の化合物の「プロドラッグ」及び「溶媒和物」も本明細書で企図されている。プロドラッグの詳細は、T. Higuchi and V. Stella、Pro-drugs as Novel Delivery Systems (1987)14 of the A.C.S. Symposium Series、及びBioreversible Carriers in Drug Design (1987) Edward B. Roche、ed.、American Pharmaceutical Association and Pergamon Pressに提供されている。用語「プロドラッグ」は、in vivoで変換されて、本発明の化合物又はその化合物の代謝物、医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物を生じる化合物(例えば、薬物前駆体)を意味する。変換は、様々な機構により(例えば、代謝的又は化学的プロセスによって)生じうる。プロドラッグの使用の詳細は、T. Higuchi and W. Stella、「Prodrugs as Novel Delivery Systems」、Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series、及びBioreversible Carriers in Drug Design、ed. Edward B. Roche、American Pharmaceutical Association and Pergamon Press、1987で示されている。
【００９３】
本発明の化合物の「代謝物」は、代謝の中間体及び生成物を指す。
【００９４】
式(I)の化合物は、非対称又はキラル中心を含有し、したがって異なる立体異性形態で存在しうる。式(I)の化合物の立体異性体形態並びにそれらの混合物の全て、例えば混合物が、本発明の一部を形成することが意図されている。更に本発明は、全ての幾何異性体及び位置異性体を包含する。ジアステレオマー混合物は、その物理化学的差異に基づき、当業者に周知の方法、例えば、クロマトグラフィー及び/又は分別結晶によって、個々のジアステレオマーに分離することができる。エナンチオマーは、エナンチオマー混合物を、適切な光学活性化合物(例えば、キラルアルコール又はMosher酸塩化物等のキラル補助剤)を用いた反応によりジアステレオマー混合物に変換し、ジアステレオマーを分離し、個々のジアステレオマーを変換(例えば、加水分解)して、対応する純粋なエナンチオマーとすることにより、分離することができる。エナンチオマーは、キラルHPLCカラムの使用によって分離することもできる。本発明のキラル中心は、IUPAC 1974によって定義されるS又はR配置を有しうる。
【００９５】
用語「塩」、「溶媒和物」又は「プロドラッグ」等の使用は、本発明の化合物のエナンチオマー、立体異性体、回転異性体、互変異性体、位置異性体、ラセミ化合物又はプロドラッグの塩、溶媒和物及びプロドラッグに対しても同等に適用されることが意図されている。
【００９６】
用語「相乗」、「相乗的」、「相乗効果」及び「相乗的組合せ」は、本明細書で使用するとき、2種以上の別個の薬剤の混合物であって、組み合わせたときに、例えば抗増殖活性又は細胞毒性等が、前記薬剤の予測される追加の効果を上回る抗がん活性の程度を示す混合物を指す。更にこの用語は、1つの治療剤のある量の投与が、その治療薬を単独で投与したときは顕著な応答を生じないが、別の治療化合物と組み合わせて投与したとき、その第2の化合物が単独で生じる効果よりも顕著に優れた全体的応答を生じさせる組合せ効果を指す。
【００９７】
用語「抗がん」は、本明細書において使用するとき、がん細胞の形成又は増殖を抑制し、がん細胞を殺傷し、又はがん細胞の転移を阻害若しくは阻止する活性を指し、がん細胞の転移の阻害、並びにがんの予防及び処置の意味を包含することが意図される。
【００９８】
本出願で使用するとき、単数形「a」、「an」及び「the」は、文脈が明らかに他のことを指示していない限り、複数の参照物を含む。
【００９９】
本明細書で使用するとき、用語「含む(comprising)」は、「含む(including)」を意味する。単語「含む(comprising)」の変化形、例えば「含む(comprise)」及び「含む(comprises)」は、対応して変化した意味を有する。したがって、例えば、式(I)の化合物を「含む」医薬組成物は、排他的にその化合物からなるものでもよく、又は1つ若しくは複数の追加成分(例えば、医薬的に許容される担体、賦形剤及び/又は希釈剤)を含むものでもよい。
【０１００】
本明細書で使用するとき、用語「複数」は、2以上を意味する。一定の特定の態様又は実施形態において、複数は、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、又はそれ以上、及びこれらから誘導可能な任意の整数及びこれらから誘導可能な任意の範囲を意味することができる。
【０１０１】
「治療有効量」は、ヒト腫瘍細胞、例えばヒト腫瘍細胞株の増殖を実質的に阻害する及び/又は分化を抑制する少なくとも1つの本発明の化合物又はその代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグの量を意味する。用語「治療有効量」は、本明細書で使用するとき、本発明での使用において非毒性であるが所望の治療的効果を提供するために十分である作用剤又は組成物の量をその意味に含む。必要とされる正確な量は、例えば、処置される種、対象の年齢及び全身状態、処置される状態の重症度、投与される特定の作用剤、投与の様式等の因子に応じて対象ごとに変動する。したがって、全ての実施形態に適用可能な正確な「有効量」を特定することは可能ではない。しかしながら、任意の所与の事例に対する適切な「有効量」は、当業者が通常の実験のみを使用して決定することができる。
【０１０２】
詳細な説明
AAD{例えば、式(I)}は、通常の有機合成技術を使用して合成しうるクラスの化合物である。例えば、AADは、フェノールのクロロアセトンによる誘導体化、Strecker反応、及び得られたアミンを塩化アロイルでアシル化することにより、合成することができる(スキーム1に示される)。必要な場合、特定のエナンチオマーを、例えば、その後のキラル分割によって取得してもよい(スキーム2に示される)。
【０１０３】
【化８】
0006666494.tif 000012
【０１０４】
【化９】
0006666494.tif 000013
【０１０５】
組成物、薬剤及びキット
本発明は、少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又は前記化合物の代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグと、更に少なくとも1つの抗がん化合物又は前記化合物の代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグと、少なくとも1つの医薬的に許容される担体とを含む、医薬組成物、薬剤及びキットを提供する。本発明で記載された化合物からの医薬組成物の調製について、不活性で医薬的に許容される担体は、固体でも液体でもよい。固体形態の調製物としては、粉末、錠剤、分散性顆粒、カプセル、カシェ、及び坐剤が挙げられる。粉末及び錠剤は、約5〜約95%の有効成分を含みうる。適切な固体担体は、当該分野で公知であり、例えば、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、又はラクトースが挙げられる。錠剤、粉末、カシェ、及びカプセルは、経口投与に適した固体投薬形態として使用することができる。医薬的に許容される担体及び様々な組成物の製造方法の例は、A. Gennaro(ed.)、Remington's Pharmaceutical Sciences、第18版、(1990)、Mack Publishing Co.、Easton、Pennsylvaniaに見いだしうる。
【０１０６】
本発明の組成物及び薬剤は、注射による(例えば、皮下、筋肉内、腹腔内、又は静脈内注射を含む非経口投与のため)、経口投与による(例えば、カプセル、錠剤、カプレット剤及びエリキシル剤)、局所投与による(例えば、軟膏、クリーム若しくはローションの形態、又は点眼薬としての送達に適切な形態)、又は鼻腔内吸入による(例えば、エアロゾルの形態)投与のために適切な形態をとることができる。
【０１０７】
液体形態調製物としては、溶液、懸濁液、及び乳液、例えば、非経口注射のための又は甘味料の添加のための水又は水-プロピレングリコール溶液、並びに経口溶液、懸濁液及び乳液用の乳白液が挙げられる。液体形態調製物は、鼻腔内投与のための溶液を含んでもよい。
【０１０８】
吸入に適したエアロゾル調製物としては、溶液及び粉末形態の固体が挙げられ、それらは医薬的に許容される担体、例えば窒素等の不活性圧縮ガスとの組合せでありうる。更に、使用直前に経口又は非経口投与のための液体形態調製物に変換することが意図された固体形態調製物も含まれる。そのような液体形態としては、溶液、懸濁物、及び乳液が挙げられる。
【０１０９】
本発明の医薬の組合せは、経皮送達されてもよい。経皮組成物は、クリーム、ローション、エアロゾル及び/又は乳剤の形態をとることができ、この目的のために従来使用されているマトリックス又は貯蔵型の経皮パッチに含めてもよい。
【０１１０】
本発明の医薬の組合せは、皮下送達されてもよい。
【０１１１】
一実施形態において、本発明の医薬の組合せは、体内に腹腔内投与される。
【０１１２】
本発明の組成物及び薬剤は、医薬的に許容される担体、アジュバント、賦形剤及び/又は希釈剤を含んでもよい。担体、希釈剤、賦形剤及びアジュバントは、組成物又は薬剤の他の成分と適合性があり、そのレシピエントに対して全体的に有害でないという観点において「許容される」ものでなければならない。医薬的に許容される担体又は希釈剤の非限定的な例としては、脱塩水若しくは蒸留水、食塩水、植物油、例えば、ピーナッツ油、サフラワー油、オリーブ油、綿実油、トウモロコシ油、ゴマ油、例えば、ピーナッツ油、サフラワー油、オリーブ油、綿実油、トウモロコシ油、ゴマ油、落花生油、若しくはココナツ油;シリコーン油、例えば、ポリシロキサン、例えば、メチルポリシロキサン、フェニルポリシロキサン及びメチルフェニルポリソルポキサン;揮発性シリコーン;鉱油、例えば流動パラフィン、軟パラフィン又はスクアラン;セルロース誘導体、例えばメチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム又はヒドロキシルプロピルメチルセルロース;低級アルカノール、例えばエタノール又はイソプロパノール;低級アラルカノール(aralkanol);低級ポリアルキレングリコール又は低級アルキレングリコール、例えば、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、1,3-ブチレングリコール又はグリセリン;脂肪酸エステル、例えば、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル又はオレイン酸エチル;ポリビニルピロリドン;寒天;トラガカントガム又はアラビアガム、及びワセリンが挙げられる。通常、担体は、組成物又は薬剤の約10〜約99.9質量%を形成する。
【０１１３】
注射用溶液又は懸濁液の投与に関し、非毒性の非経口的に許容される希釈剤又は担体としては、リンゲル液、等張食塩水、リン酸緩衝食塩水、エタノール及び1,2-プロピレングリコールが挙げられうる。非経口的に投与可能な組成物及び薬剤の調製方法は、当業者に明らかであり、より詳細には、例えば、Remington's Pharmaceutical Science、第15版、Mack Publishing Company、Easton、Pa.に記載されている。
【０１１４】
経口投与に関し、いくつかの適切な担体、希釈剤、賦形剤及びアジュバントの例としては、ピーナッツ油、流動パラフィン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、アラビアガム、トラガカントガム、ブドウ糖、ショ糖、ソルビトール、マンニトール、ゼラチン及びレシチンが挙げられる。更に、これらの経口製剤は、適切な芳香剤及び着色剤を含有してもよい。カプセル形態で使用するとき、カプセルは、崩壊を遅延させる化合物、例えば、モノステアリン酸グリセリル又はステアリン酸グリセリルで被覆してもよい。アジュバントとしては、典型的には、皮膚軟化剤、乳化剤、増粘剤、防腐剤、殺菌剤及び緩衝剤が挙げられる。
【０１１５】
経口投与のための固体形態は、ヒト及び獣医学的医薬実務で許容される結合剤、甘味料、崩壊剤、希釈剤、芳香剤、コーティング剤、保存料、潤滑剤及び/又は遅延剤を含有してもよい。適切な結合剤としては、アラビアガム、ゼラチン、コーンスターチ、トラガカントガム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース又はポリエチレングリコールが挙げられる。適切な甘味料としては、スクロース、ラクトース、グルコース、アスパルテーム又はサッカリンが挙げられる。適切な崩壊剤としては、コーンスターチ、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、グアーガム、キサンタンガム、ベントナイト、アルギン酸又は寒天が挙げられる。適切な希釈剤としては、ラクトース、ソルビトール、マンニトール、ブドウ糖、カオリン、セルロース、炭酸カルシウム、ケイ酸カルシウム又はリン酸二カルシウムが挙げられる。適切な芳香剤としては、ハッカ油、ウインターグリーン油、チェリー、オレンジ又はラズベリー芳香剤が挙げられる。適切なコーティング剤としては、アクリル酸及び/若しくはメタクリル酸の重合体若しくは共重合体及び/又はそれらのエステル、ワックス、脂肪アルコール、ゼイン、セラック又はグルテンが挙げられる。適切な保存料としては、安息香酸ナトリウム、ビタミンE、α-トコフェロール、アスコルビン酸、メチルパラベン、プロピルパラベン、又は重亜硫酸ナトリウムが挙げられる。適切な潤滑剤としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、オレイン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、又はタルクが挙げられる。適切な遅延剤としては、モノステアリン酸グリセリル又はジステアリン酸グリセリルが挙げられる。
【０１１６】
経口投与のための液体形態は、上記薬剤に加えて、液体担体を含有してもよい。適切な液体担体としては、水、油、例えば、オリーブ油、ピーナッツ油、ゴマ油、ヒマワリ油、サフラワー油、落花生油、ココナツ油、流動パラフィン、エチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、グリセリン、脂肪アルコール、トリグリセリド又はその混合物が挙げられる。
【０１１７】
経口投与のための懸濁液は、更に、分散剤及び/又は懸濁化剤を含んでもよい。適切な懸濁化剤としては、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル-セルロース、ポリ-ビニル-ピロリドン、アルギン酸ナトリウム又はアセチルアルコールが挙げられる。適切な分散剤としては、レシチン、脂肪酸、例えばステアリン酸のポリオキシエチレンエステル、ポリオキシエチレンソルビトールモノ-若しくはジ-オレエート、-ステアレート若しくは-ラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノ-若しくはジ-オレエート、-ステアレート若しくは-ラウレート等が挙げられる。
【０１１８】
経口投与のための製剤は、1つ又は複数の乳化剤を含んでもよい。適切な乳化剤としては、上記に例示される分散剤又は天然ガム、例えばグアーガム、アラビアガム若しくはトラガカントガム等が挙げられる。
【０１１９】
本発明の局所製剤は、活性成分と、1つ若しくは複数の許容される担体、及び必要に応じて任意の他の成分を含むことができる。局所投与に適した製剤としては、処置が必要な部位に向けて皮膚を通過することに適した液体又は半液体調製物、例えば、リニメント、ローション、クリーム、軟膏又はペースト、及び眼、耳又は鼻への投与に適切な点滴薬が挙げられる。
【０１２０】
本発明による点滴薬は、無菌の水性又は油性の溶液又は懸濁液を含んでもよい。これらは、抗生剤及び/又は抗菌剤及び/又は任意の他の適切な保存剤の水性溶液に、必要に応じて界面活性剤を含めて、有効成分を溶解させることにより、調製することができる。得られた溶液は、濾過によって清澄化し、適切な容器に移して殺菌してもよい。殺菌は、オートクレーブ若しくは90℃〜100℃で30分間維持又は濾過し、続けて無菌技術を用いて容器に移すことにより達成しうる。点滴薬に含めることが適切な抗生剤及び抗菌剤の例は、硝酸フェニル水銀若しくは酢酸塩(0.002%)、塩化ベンザルコニウム(0.01%)及びクロルヘキシジン酢酸塩(0.01%)である。油性溶液の調製に適切な溶剤としては、グリセリン、希釈アルコール及びプロピレングリコールが挙げられる。
【０１２１】
本発明によるローションとしては、皮膚又は眼への適用に適したローションが挙げられる。眼へのローションとしては、必要に応じて抗生剤を含有する滅菌水溶液を含むことができ、上記で点滴薬の調製に関して記載した方法と同様の方法で調製することができる。皮膚に適用するためのローション又はリニメントには、乾燥を早める及び皮膚を冷却するための作用剤、例えばアルコール又はアセトン、並びに/又はグリセリン等の湿潤剤、又はヒマシ油又は落花生油等の油を含んでもよい。
【０１２２】
本発明によるクリーム、軟膏又はペーストは、外用の有効成分の半固形製剤である。それらは、有効成分を、細かく分割された又は粉末化された形態で、単独で又は水性若しくは非水性流体の溶液若しくは懸濁液と共に、油性若しくは非油性基剤と混合することにより作製してもよい。基剤は、炭化水素、例えば硬、軟若しくは流動パラフィン、グリセリン、ミツロウ、金属石鹸;ゴム糊;天然由来の油、例えば、アーモンド油、トウモロコシ油、落花生油、ヒマシ油若しくはオリーブ油、羊毛脂若しくはその誘導体、又はステアリン酸若しくはオレイン酸等の脂肪酸を、プロピレングリコール若しくはマクロゴール等のアルコールと共に含んでもよい。
【０１２３】
本発明による組成物及び薬剤は、任意の適切な界面活性剤、例えば、陰イオン性、陽イオン性若しくは非イオン性界面活性剤、例えば、ソルビタンエステル若しくはそのポリオキシエチレン誘導体を組み入れてもよい。懸濁化剤、例えば、天然ガム、セルロース誘導体又は無機物質、例えば、ケイ素質シリカ、及び他の成分、例えばラノリンを含めてもよい。
【０１２４】
本発明の組成物及び薬剤は、リポソームの形態で投与することもできる。リポソームを形成するために適切な方法は当該分野で公知であり、この点に関して、特にPrescott、(Ed)、(1976)、「Methods in Cell Biology」、Volume XIV、Academic Press、New York、N.Y.、第33頁et seq.が参照される。
【０１２５】
補足的有効成分、例えば、アジュバント又は生物学的応答調節剤を、本発明の組成物又は薬剤に組み入れてもよい。
【０１２６】
任意の適切なアジュバントを、本発明の組成物及び薬剤に含めてもよい。例えば、アルミニウム系アジュバントを用いてもよい。適切なアルミニウム系アジュバントとしては、限定されないが、水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウム、及びそれらの組合せが挙げられる。利用しうる他の適切なアルミニウム系アジュバントの例は、欧州特許第1216053号及び米国特許第6,372,223号に記載されている。他の適切なアジュバントとしては、フロイントの不完全アジュバント及び完全アジュバント(Difco Laboratories社、Detroit、Mich.);メルクアジュバント65(Merck and Company社、Inc.、Rahway、N.J.);AS-2(SmithKline Beecham社、Philadelphia、Pa.);アルミニウム塩類、例えば水酸化アルミニウムゲル(alum)又はリン酸アルミニウム;カルシウム、鉄又は亜鉛の塩類;アシル化チロシンの不溶性懸濁液:アシル化糖;陽イオン又は陰イオン誘導体化多糖;ポリホスファゼン;生物分解性マイクロスフェア;モノホスホリル脂質A及びquil A;水中油型エマルジョン、例えば欧州特許第0399843号、米国特許第7,029,678号、及びPCT公開WO2007/006939;並びに/又は補足的サイトカイン、例えばGM-CSF若しくはインターロイキン-2、-7若しくは-12、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子(GM-CSF)、モノホスホリル脂質A(MPL)、コレラ毒素(CT)又はその構成サブユニット、易熱性毒素(LT)又はその構成サブユニット、toll様受容体リガンドアジュバント、例えばリポ多糖(LPS)及びその誘導体(例えばモノホスホリル脂質A及び3-脱アセチル化モノホスホリル脂質A)、ムラミルジペプチド(MDP)、並びに呼吸器合胞体ウイルス(RSV)のFタンパク質が挙げられる。
【０１２７】
本発明の別の態様は、治療有効量の少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又は前記化合物の代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグと、少なくとも1つの抗がん化合物又は前記化合物の代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグと、医薬的に許容される担体、ビヒクル又は希釈剤とを含むキットである。
【０１２８】
本発明の別の態様は、一定量の少なくとも1つのアミノアセトニトリル誘導体又は前記化合物の代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグと、少なくとも1つの抗がん化合物又は前記化合物の代謝物、医薬的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグと、一定量の少なくとも1つ上記に列挙した抗がん治療薬を含み、2種以上の成分の量により所望の治療効果が得られるキットである。
【０１２９】
本発明のキットは、本発明の方法の実施を補助する成分、例えば、投与デバイス、緩衝剤、及び/又は希釈剤を含んでもよい。キットは、様々な成分を収容するための容器、及び本発明の方法のキット成分を使用するための指示書を含んでもよい。
【０１３０】
ある特定の実施形態において、キットは組合せキットであってもよい。
【０１３１】
他の実施形態において、キットは個別化されたキットでもよい。
【０１３２】
投薬量及び投与経路
作用剤、組成物及び薬剤は、レシピエントに、標準的な経路、例えば限定されないが、非経口経路(例えば、静脈内、髄腔内、皮下又は筋肉内)、経口、局所又は粘膜経路(例えば、鼻腔内)で投与することができる。いくつかの実施形態において、作用剤、組成物及び薬剤は、レシピエントに、単独で又は他の追加の治療薬剤と組み合わせて投与してもよい。そのような実施形態において、投与は同時又は連続的であってもよい。
【０１３３】
一般に、作用剤、組成物及び薬剤は、投与経路及びレシピエントの身体的特徴(健康状態を含む)に適合する様式で、並びに所望の効果を誘発させる(すなわち、治療的に効果がある、免疫原性がある及び/又は防御的である)様式で投与することができる。例えば、適切な投薬量は、様々な因子、例えば限定されないが、対象の身体的特徴(例えば、年齢、体重、性別)、作用剤、組成物又は薬剤が単剤として又はアジュバント療法として使用されるか、処置されるがんの進行状態(すなわち、病理学的状態)、並びに当業者であればすぐに明らかとなる他の因子等に依存しうる。
【０１３４】
作用剤、組成物及び薬剤の適切な用量を決定するときの様々な一般的注意事項は、例えば、Gennaroら(Eds)、(1990)、「Remington's Pharmaceutical Sciences」、Mack Publishing Co.、Easton、Pennsylvania、USA、及びGilmanら(Eds)、(1990)、「Goodman And Gilman's: The Pharmacological Bases of Therapeutics」、Pergamon Pressに記載されている。
【０１３５】
式(I)の化合物は、一般的に低い毒性を示す。例えば、MPLは、体重1kgあたり2000mgを超える量で単回用量毒性を有する。
【０１３６】
更に、式(I)の化合物は、がんの処置に対して、全体的に高い臨床的忍容性を有する。例えば、体重1kgあたり24時間あたり1000mgのMPLの投与量が、哺乳類において十分寛容である。
【０１３７】
一般的に、有効投与量は、体重1kgあたり24時間あたり約0.0001mg〜約1000mgの有効成分;典型的には体重1kgあたり24時間あたり約0.001mg〜約750mg;体重1kgあたり24時間あたり約0.01mg〜約500mg;体重1kgあたり24時間あたり約0.1mg〜約500mg;体重1kgあたり24時間あたり約0.1mg〜約250mg;又は体重1kgあたり24時間あたり約1.0mg〜約250mgの範囲と推定される。より典型的には、有効用量の範囲は、体重1kgあたり24時間あたり約1.0mg〜約200mg;体重1kgあたり24時間あたり約1.0mg〜約100mg;体重1kgあたり24時間あたり約1.0mg〜約50mg;体重1kgあたり24時間あたり約1.0mg〜約25mg;体重1kgあたり24時間あたり約5.0mg〜約50mg;体重1kgあたり24時間あたり約5.0mg〜約20mg;又は体重1kgあたり24時間あたり約5.0mg〜約15mgの範囲と推定される。
【０１３８】
例えば好ましい投与量は、体重1kgあたり24時間あたり約1〜100mg、50mg、2.5〜10mgの式(I)の化合物の標準的治療用量又は範囲でありうる。がん治療において現在使用されている抗がん化合物の採用される治療用量は、がん及び治療薬物に応じて様々に変動されうる。AADの存在下における抗がん化合物の用量の最適化は、内科医によって事例ごとに判断されうる。
【０１３９】
典型的に、治療適用において、処置はがんの存続期間にわたりうる。更に、最適な量及び個別の投与間隔が、処置される疾患段階又は状態の性質及び程度、投与の形態、経路及び部位、並びに処置される特定の対象の性質によって定まりうることは、当業者にとって明らかである。最適投与量は、従来の技術を使用して決定されうる。
【０１４０】
抗がん化合物は、通常使用される種類のがんを処置するために使用すること、例えば第一選択及び第二選択標準治療薬であることが意図されている。一実施形態において、抗がん化合物は、通常の用量で提供又は投与され、この場合に、本明細書に記載のAADの提供又は投与は、主に前記薬剤の治療効果を増強する。
【０１４１】
一実施形態において、抗がん化合物の治療効果は、約10%〜約2000%増強されうる。一実施形態において、治療的効果は、約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、150%、200%、250%、300%、350%、400%、450%、500%、550%、600%、650%、700%、750%、800%、850%、900%、950%、1000%、1050%、1100%、1150%、1200%、1250%、1300%、1350%、1400%、1450%、1500%、1550%、1600%、1650%、1700%、1750%、1800%、1850%、1900%、1950%、又は約2000%増強されうる。
【０１４２】
好ましい実施形態において、ドキソルビシン、シスプラチン、5-フルオロウラシル、エトポシド、イマチニブ、マイトマイシンC、ビンクリスチン、パクリタキセル、タモキシフェン、ミノサイクリン、アルベンダゾール、レバミソール、フルタミド、タモキシフェン、ウォルトマンニン、オキサリプラチン、ボルテゾミブ、アミロライド、EGTA、エナラプリル、Mg132、カプトプリル、シメチジン、ミフェプリストン、グリベンクラミド、トリフルオペラジン、セロトニン、クロザピン、ゲムシタビン、イベルメクチン、コルヒチン、ラパマイシン及びエベロリムスの少なくとも1つの治療効果(efficacyt)が増強される。
【０１４３】
別の実施形態において、抗がん化合物の用量は、AADと組み合わせたとき、減少した用量で提供又は投与されうる。そのような抗がん化合物の用量減少又は治療効果の増強は、特定の抗がん化合物を、現在では標準治療となっていないがんの処置に適用することを可能にしうる。AADとの相乗的組合せにおける抗がん化合物の用量減少は、抗がん化合物の副作用も軽減しうる。
【０１４４】
本発明の相乗的組合せにおいて存在する又は抗がんレジメンで使用される抗がん化合物の用量の一実施形態において、約2倍〜約100倍まで減少されうる。一実施形態において、用量の減少は、約2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60、70、80、90又は約100倍である。
【０１４５】
好ましい実施形態において、ドキソルビシン、シスプラチン、5-フルオロウラシル、エトポシド、イマチニブ、マイトマイシンC、ビンクリスチン、パクリタキセル、タモキシフェン、ミノサイクリン、アルベンダゾール、レバミソール、フルタミド、タモキシフェン、ウォルトマンニン、オキサリプラチン、ボルテゾミブ、アミロライド、EGTA、エナラプリル、Mg132、カプトプリル、シメチジン、ミフェプリストン、グリベンクラミド、トリフルオペラジン、セロトニン、クロザピン、ゲムシタビン、イベルメクチン、コルヒチン、ラパマイシン及びエベロリムスの少なくとも1つの用量が減少される。
【０１４６】
多くの実例(例えば、予防適用)において、本発明の作用剤、組成物又は薬剤は、数回又は複数回投与することが所望されることがあり、例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、又はより多くの回数、投与されうる。投与には、約1〜約12週間の間隔があってもよく、特定の実施形態では、約1〜約4週間の間隔がありうる。周期的な再投与も企図される。
【０１４７】
最適な投与過程が、従来の処置過程の判定試験により確認できることも、当業者には明らかである。
【０１４８】
2以上の実体(例えば、作用剤又は薬剤)が対象に「一緒に」投与されるとき、それらは単一の組成物で同時に投与されてもよく、又は別個の組成物で同時に、若しくは別個の組成物で適度に離れた時間で投与されてもよい。
【０１４９】
本発明の一定の実施形態には、複数回の別個の用量での作用剤、組成物、又は薬剤の投与も含まれる。したがって、本明細書に記載の予防的及び治療的処置のための方法は、所定の期間にわたって、複数回の別個の用量を対象に投与することを包含する。したがって、いくつかの実施形態においては、方法は、初回用量を投与し、続けて追加刺激用量を投与することも含む。追加刺激は、ワクチン再接種を目的としたものでもよい。様々な実施形態において、作用剤、組成物、又は薬剤は、少なくとも1回、2回、3回又はそれ以上投与される。
【０１５０】
作用剤、組成物、又は薬剤は、一般的に意図する目的を達成するために有効な量で投与されうる。より詳細には、それらは、標的とする疾患又は状態の発症を予防するため又は既存の徴候を緩和するために有効な量を意味する治療有効量で投与されうる。有効量の決定は、十分に当業者の能力の範囲内である。例えば、作用剤、組成物、及び薬剤の治療有効量は、最初に細胞培養アッセイから見積もることができる。例えば、細胞培養で決定されたIC50を含む循環濃度範囲を達成するような用量を動物モデルにおいて組立ててもよい。そのような情報を利用することにより、ヒト及び他の哺乳類対象に有用な用量を、より正確に決定することができる。
【０１５１】
治療有効用量は、処置を受けている対象の徴候の発症を予防する、徴候を改善する、及び/又は生存期間を延長させる作用剤、組成物又は薬剤の量を指す。作用剤、組成物及び薬剤の毒性及び治療効果は、細胞培養及び/又は実験動物における標準的な医薬アッセイにより{例えば、LD50(集団の50%の致死用量)及びED50(集団の50%の治療有効量)の測定により}決定することができる。毒性効果と治療効果との間の用量比は治療指数となり、LD50とED50との比として表すことができる。高い治療指数を示す作用剤、組成物及び薬剤が好ましい。そのような細胞培養アッセイ及び/又は動物実験から得られるデータを使用して、ヒト又は他の哺乳類に使用する用量の範囲を設定することができる。そのような化合物の投与量は、好ましくは、毒性がほとんどない又は全くないED50を含む循環濃度の範囲内である。投与量は、採用する投与形態及び利用する投与経路に応じて、この範囲内で変動しうる。正確な処方、投与経路及び投与量は、個々の内科医が対象の状態を考慮して困難なく選択することができる{例えば、Finglら、(1975)、「The Pharmacological Basis of Therapeutics」、第1章、第1頁参照}。投与量及び投与間隔は、所望の治療的効果及び/又は最小有効濃度(MEC)を達成及び維持するのに十分な有効剤の血漿レベルが提供されるように個々に調節することができる。MECを達成するために必要な投与量は、投与経路及び他の個々の特徴に依存する。バイオアッセイ及び/又はHPLCアッセイを使用して血漿濃度を決定してもよい。
【０１５２】
投与間隔は、MEC値を使用して決定することもできる。一般に作用剤、組成物及び薬剤は、MECを超える血漿レベルを所定時間の約10%〜90%、好ましくは30%〜90%、より好ましくは約50%〜90%維持するレジメンを使用して投与されうる。局所投与又は選択的取込みを利用する実施形態においては、薬物の局所有効濃度は血漿濃度と関連しない場合がある。
【０１５３】
本発明の組合せは、放射線療法等の抗がん処置の1つ又は複数と組み合わせて(同時又は連続的に投与)使用してもよい。
【０１５４】
対象
本発明の予防的及び治療的方法は、任意の適切な対象に適用することができる。いくつかの実施形態において、対象は、哺乳類対象である。例えば、対象は、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウシ、ヒツジ、ウマ、又は社会上、経済上若しくは研究上重要な任意の他の哺乳類でありうる。したがって、対象は、哺乳類、例えばヒト又は非ヒト哺乳類でありうる。
【０１５５】
当業者であれば、特定の実施形態に開示される本発明に、広く記載された本発明の趣旨又は範囲を逸脱することなく、数々の変化及び/又は変更を為すことができることが理解できる。それゆえ、本実施形態は、全ての点で例証的であって限定的なものではないと考えるべきである。
【０１５６】
以下、本発明を、特定の実施例を参照して説明するが、これらの実施例はいかなる意味でも限定的に解釈すべきでない。
【実施例】
【０１５７】
(実施例1)
様々な悪性及び非悪性細胞株に対するモネパンテル(MPL)の効果
材料及び方法
【０１５８】
細胞株及び細胞培養
本明細書に記載の全ての細胞株はATCCから購入した。細胞は、製造業者の指示に従ってTable 2(表2)(下記)に列挙した培地及び5%FBSで培養した。細胞を96ウェルプレート(2,000〜3,000細胞/ウェル)に播種し、一晩培養した後、MPLで処置した。対照培養物は、エタノールのみで処置した。
【０１５９】
【表２】
0006666494.tif 000014
【０１６０】
培養及び細胞毒性アッセイ
細胞毒性はスルホローダミンB(SRB)アッセイを使用して評価し、50%阻害濃度として示した{IC50;Table 3(表3)}。細胞を96ウェルプレート(2,000〜3,000細胞/ウェル)に播種し、示した化合物を用いて72時間処置し、固定し、洗浄し、100μlの0.4%(w/v)SRB溶解1%酢酸で染色した。結合しなかった染料を1%酢酸で5回洗浄することにより除去した後、風乾した。結合したSRBを100μlの10mM Tris塩基(pH10.5)に溶解させて、吸光度を570nmで読み取った。
【０１６１】
結果
本発明者は、MPL(0、5、10、25、50及び100μmol/L)を、(i)28種の悪性細胞集団、(ii)4種の不死化細胞集団、及び(iii)3種の初期又は初代継代非悪性細胞集団、並びに健常細胞集団の培養物に加え、上記のようにSRBアッセイを使用して細胞毒性を評価した。示す場合、主代謝物MPL-SO2の対応する細胞毒性も試験した。悪性細胞株は以下を含んだ:(i)乳房[MCF-7、MDA-MB-231、T47-D]、(ii)頸部[HeLa]、(iii)結腸直腸[C170、HCT-116、HT-29、HT-295m11]、(iv)グリア[LN-18、T98G、U87、U251]、(v)肝臓[Hep3B](vi)間葉(肉腫):線維肉腫及び脂肪肉腫[HT-1080、SW-876]、(vii)中皮腫[PET、YOU]、(viii)卵巣[1A9、A2780、IGROV-1、OVCAR-3、SKOV-3]、(ix)膵臓[AsPC-1、CFPAC-1]、及び(x)前立腺[DU-145、LNCaP、PC-3]。不死化細胞株は以下を含んだ:(i)上皮[HaCat]、(ii)間葉[3T3]、(iii)腎臓[HEK]、及び(iv)卵巣[CHO]。非悪性初代/初期継代細胞の種類は以下を含んだ:(i)内皮[ヒト臍静脈内皮細胞;HUVEC]、(ii)グリア[ヒト胎児星状細胞]、及び(iii)卵巣[ヒト卵巣表層上皮;HOSE]。HUVEC、ヒト胎児星状細胞及びHOSE細胞は、非形質転換、非不死化、及び非悪性であって、外見上健常な非疾患組織からの新たに単離/低継代した細胞集団である。これらの健常な細胞集団は、特異的毒性のない対照として一連の実験に含めた。MPL及びMPL-SO2はいずれもエタノールに懸濁し、最終濃度0.5〜1%エタノールで各培養培地に適用した。
【０１６２】
【表３】
0006666494.tif 000015
【０１６３】
MPLは、わずかに感受性が低かった{2μM<IC50増殖<25μM;Table 3(表3)} 膵臓CFPAC-1並びにp53-変異及び化学療法耐性卵巣SKOV-3細胞株を除いて、試験した28種の悪性細胞株全てに対して選択的で比較的高い細胞毒性効果を示した。全ての不死化細胞株並びにCFPAC-1及びSKOV-3細胞株は、MPLに対して中程度の感受性を示した{12μM<IC50増殖<35μM;Table 3(表3)}。対照的に3つの初期/初代継代細胞集団:HUVEC、ヒト胎児星状細胞及びHOSE細胞は全てMPLに対して比較的低い感受性を示した{IC50増殖>85μM;Table 3(表3)}。一連の実験で試験した全ての細胞株及び細胞に対するMPL-SO2の細胞毒性は、親化合物MPLと全体的に同等であった。
【０１６４】
(実施例2)
卵巣がん細胞株におけるモネパンテル(MPL)と他の抗がん化合物との医薬の組合せの効果
【０１６５】
材料及び方法
細胞株
ヒト卵巣がん細胞株OVCAR-3及びA2780、並びに正常非悪性ヒト卵巣表層上皮(HOSE)細胞株は、全てアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション(ATCC)から取得し、その指示書に従って維持した。
【０１６６】
生存率及び増殖アッセイ
確立された薬物のin vitro有効性に対するMPLの効果を評価するために、細胞生存率及び細胞増殖アッセイにより評価した。細胞生存率は、標準トリパンブルー法に従って実施した。細胞増殖は、スルホローダミンB(SRB)アッセイにより評価した。生存率実験においては細胞を6ウェルプレートに播種し、増殖アッセイにおいては細胞を96ウェルプレートで成長させた。一晩接着させた後、細胞を、意図した薬物単独又はモネパンテル(MPL)との組合せで様々な濃度で用いて72時間処置した。これと並行して、MPL単独で処置した細胞も、比較の目的のために展開した。標準細胞培養インキュベータで72時間培養した後、単独及び組合せ薬物処置の細胞生存率及び/又は細胞増殖に対する効果を、それぞれトリパンブルー又はSRBアッセイを用いて評価した。
【０１６７】
生存率アッセイについては、処置期間の最後に細胞をPBSで洗浄し、トリプシン処置し、トリパンブルー及び血球計数計を使用して計数した。SRBアッセイについては、細胞を固定し、洗浄し、100μlの0.4%(w/v)SRB溶解1%酢酸を用いて染色した。結合しなかった染料を1%酢酸で5回洗浄することにより除去した後、風乾した。結合したSRBを、100μlの10mM Tris塩基(pH10.5)に溶解させて、吸光度を570nmで読み取った。モネパンテル(Novartis社、Basel、Switzerlandより供与)を、100%エタノールに溶解し、細胞培養培地で希釈した。試験に用いた他の薬剤は、Sigma Australia社又はSapphire Australia社のいずれかから購入し、供給者の指示書に従って細胞培養で使用するために調製し、保存した。
【０１６８】
統計分析
全てのデータは、少なくとも2つの独立した実験からの平均±標準誤差(S.E.M.)として報告された。MPL処置群と対照群との間の細胞増殖の差異を、一元配置分散分析とTukey多重比較検定を用いて分析した。
【０１６９】
結果
【０１７０】
【表４Ａ】
0006666494.tif 000016
【０１７１】
【表４Ｂ】
0006666494.tif 000017
【０１７２】
【表５】
0006666494.tif 000018
【０１７３】
ドキソルビシンからのデータは、細胞毒性が100倍増強され、特に顕著であった。
【０１７４】
図1及び図22は、MPLとドキソルビシン、特に低濃度のドキソルビシンとの間に相乗があることを示す。ドキソルビシンは、ヒトにおける毒性により投与量が制限されるため、このことは重要である。
【０１７５】
図2は、シスプラチンの効果が、非常に低用量のMPLの添加により、いくらか増加したことを示す(DNA架橋剤はアポトーシスを生じさせる)。
【０１７６】
図22は、5FUにMPLを併用した効果(抗-代謝物、チミジル酸合成酵素の不可逆的阻害)並びにタモキシフェン/MPLの組合せの効果の顕著な増加を示す。低用量のゲムシタビンにおいて、MPL/ゲムシタビンの組合せは、ゲムシタビンの効果を顕著に増加させることを示す(ゲムシタビンは、ヌクレオチド還元酵素阻害剤であり、膵臓、肺及び他のがんを処置するために使用される)。
【０１７７】
図3は、エトポシドとMPLとの間にいくらか相乗効果があることを示す。
【０１７８】
図4〜図6は、シメチジンとMPL、ミフェプリストンとMPL、及びイマチニブとMPLの組合せによる顕著な相乗効果を示す。
【０１７９】
図11は、マイトマイシンCとMPLとの組合せにより、マイトマイシンC活性の効果的な増強が得られたことを示す。
【０１８０】
図12は、ビンクリスチン/MPLの組合せで示された相乗効果を示す。
【０１８１】
図14は、アルベンダゾール/MPLの組合せが良好な相乗効果を示すことを示す(アルベンダゾールは、様々な抗がん効果を有することが示されているベンゾイミダゾールカルバメートである)。
【０１８２】
図15は、イベルメクチン/MPLの組合せが相乗効果を示したことを示す。がんの処置におけるイベルメクチンの効果は大部分が未知であるが、イベルメクチンはA2780(卵巣)を阻害した。
【０１８３】
図16は、OVCAR-3細胞におけるMPLとレバミソールとの顕著な相乗効果を示す。
【０１８４】
図26は、MPLとコルヒチンとの相乗効果を示す。
【０１８５】
MPLは、グリシン、L-ヒスチジン又はDL-ヒスチジンの活性に影響を及ぼさない。
図7〜図10は、カフェイン/MPL、ヒスチジン/MP、DLヒスチジン/MPL、及びグリシン/MPLの組合せが相乗効果を示さないことを示す。
【０１８６】
図13は、A2780細胞を投与したとき、パクリタキセル/MPLの組合せが、相乗効果を示さないことを示す。しかしながら、図22に描かれるように、OVCAR-3細胞及び非悪性HOSE細胞のいずれにおいても、相乗的阻害が観察された。
【０１８７】
(実施例3)
モネパンテル(MPL)と様々な第一選択及び第二選択標準治療化学療法薬との2種組合せによる医薬の組合せの効果
本発明者らは、MPLと、様々な第一及び第二選択標準治療化学療法薬との2種組合せで、SRBアッセイを用いて悪性細胞に対する細胞毒性の相乗的相互作用を試験した。
【０１８８】
材料及び方法
細胞株は全てアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション(ATCC)から取得し、実施例1で概説したように維持した。細胞毒性アッセイも、上記実施例1で概説したように実施した。
【０１８９】
統計分析
全てのデータは、少なくとも2つの独立した実験による平均±標準誤差(S.E.M.)として報告される。MPL処置群と対照群との間の細胞増殖の差異を、一元配置分散分析とTukey多重比較検定を用いて分析した。
【０１９０】
結果
本発明者らは、シスプラチン、ドキソルビシン、フルオロウラシル、フルタミド、ゲムシタビン、ミノサイクリン、オキサリプラチン及びパクリタキセルを含む8種の薬物を一連の濃度でMPLと組み合わせて添加する試験を行った。これまで試験した悪性細胞株には、LN18及びU87グリア芽腫;Hep3B肝臓癌;PET、REN及びYOU中皮腫;AsPC-1及びCFPAC-1膵臓腺癌;A2780及びOVCAR-3、それぞれ卵巣の癌及び腺癌;並びにLNCaP前立腺悪性腫瘍細胞株由来のヒト細胞株が含まれる。MPLのいずれかの将来的臨床適用では全身投与を含むと考えられることから、この点を考慮して、非悪性健常HOSE細胞をこれらの組合せのそれぞれに対する細胞毒性対照として含めた。ミノサイクリン及びタモキシフェンを使用して、より制限された試験(包括性の低い濃度範囲)で得られた補足的データを下記実施例4に記載する。更にC170及びHT29結腸直腸細胞並びにSKOV-1卵巣細胞をより制限された試験(包括性の低い薬物濃度範囲)で評価し、更に下記実施例4に記載する。
【０１９１】
【表６】
0006666494.tif 000019
【０１９２】
使用した細胞株/名称と薬物組合せとの対比。処置は、5μMのMPLと薬物との組合せを用いて72時間行った。但し、Hep3B細胞は48時間処置を行った。対応するHOSEに対する48時間処置時間を、図24に示す。「組合せ薬物」の欄において、√は、相乗的阻害を示し、一方、×は、相乗効果がないことを示す。1x=事象の数、X=実験の数。2一実験(オキサリプラチン)において、Tukey事後検定はp>0.05であり、Newman-Keuls事後検定はp<0.05であった。3HOSE対照細胞は全体的にMPLの投与に対して非感受性であったが、2つの実験において細胞毒性が低レベルで記録され、それぞれ5及び3%であった(オキサリプラチン及びフルタミド実験、下記図21及び図22参照)。4相乗は、HOSE細胞に対して、高MPL濃度でのみ観察された(下記図22参照)。5HOSE細胞に対する相乗により、中程度のHOSE細胞の生存低下が生じた(下記図22参照)。648時間処置後に、HOSE細胞に対する相乗効果は観察されなかった:この時間後に観察された細胞毒性は、組合せ薬物の効果に起因するもののみであった(下記図23参照)。
【０１９３】
図20において、MPL及びフルタミドは、LNCAP-1細胞に対して相乗的相互作用を示すが、試験した濃度でHOSE細胞に対しては相乗的相互作用を示さない。*は、薬物を単独又は組合せで使用して試験した全ての用量のうちの最大有効用量を示す。最大有効用量は、最も低い薬物試験濃度で最も高い細胞毒性効果を与えた。**は、相乗を示す。
【０１９４】
図21において、MPL及びドキソルビシンは、LN18及びU87グリア細胞に対して、相乗的相互作用を示す。MPL及びゲムシタビンは、LN18細胞に対して相乗的相互作用を示す。*は最大有効用量を示し、**は相乗を示す。
【０１９５】
図22において、MPL及びドキソルビシンは、低ドキソルビシン濃度でA2780及びOVCAR細胞に対して、並びに高ドキソルビシン濃度でA2780、OVCAR及びHOSE対照細胞に対して、相乗的相互作用を示した。MPL及びフルオロウラシルは、A2780悪性細胞及びHOSE対照細胞のいずれにも相乗的相互作用を示す。ゲムシタビン及びMPLは、A2780細胞に対して強力な相乗的相互作用を示すが、HOSE対照細胞に対して同様の相乗的相互作用は示さない。MPL及びオキサリプラチンは、A2780細胞に対して強力な相乗的相互作用を示すが、HOSE対照細胞に対しては比較的小さい相乗的相互作用を示す。MPL及びパクリタキセルは、OVCAR-3及びHOSE細胞に対して相乗的相互作用を示す。MPL単独は、列2(フルオロウラシル)及び列5(パクリタキセル)におけるHOSE細胞に対して小さいが有意な細胞毒性効果を示す(図示せず)。*は最大有効用量を示し、**は相乗を示し、Δは細胞保護効果を示す。
【０１９６】
図23において、MPL及びドキソルビシンは、AsPC-1細胞に対して相乗的相互作用を示さない。MPL及びゲムシタビンは、AsPC-1細胞に対して強力な相乗的相互作用を示し、これらの濃度でHOSE対照細胞に対しては相乗的相互作用を示さない(図22参照:HOSE細胞に対する細胞毒性は、ゲムシタビンの使用に起因するにすぎない)。同様に、フルオロウラシル又はゲムシタビンと組み合わせたMPLは、CFPAC-1細胞に対して、相乗的相互作用を示す。低濃度の5-FUでは、HOSE細胞に対する相乗は観察されないが、高濃度では観察される(図22参照)。*は最大有効用量を示し、**は相乗を示す。
【０１９７】
図24において、2.5μM用量のMPL単独は、Hep3B細胞に対して、48時間の処置後、細胞毒性効果を示さない。5μMのMPL単独は、5回の試験中5回で、Hep3B細胞に対して、48時間の処置後、顕著な細胞毒性効果を示す。5μMのMPLは、Hep3B細胞に対し、ドキソルビシン又はパクリタキセルとの組合せで、48時間の処置後、相乗的な細胞毒性を示す。5μMのMPLは、HOSE細胞に対し、シスプラチン、ドキソルビシン、オキサリプラチン又はパクリタキセルとの組合せでの48時間の処置後において、相乗的な細胞毒性を示さない。*は最大有効用量を示し、**は相乗を示す。
【０１９８】
図25において、MPL及びドキソルビシンは、PET、REN及びYOU中皮腫細胞に対して、相乗的相互作用を示す。MPL及びゲムシタビンは、PET、REN及びYOU中皮腫細胞に対して、相乗的相互作用を示さない。*は最大有効用量を示し、**は相乗を示す。
【０１９９】
本発明者らは、72時間の処置後、MPLが、(i)フルタミドとの組合せにおいて、LNCaP前立腺細胞株の生存率を相乗的に阻害し、(ii)ゲムシタビンとの組合せにおいて、LN18グリア芽腫、A2780卵巣及びAsPC-1膵臓悪性細胞株の生存率を相乗的に阻害し、一方、同じ濃度で非悪性HOSE対照細胞には相乗的相互作用を示さないことを示している{Table 6(表6);LNCAP-1-図20;LN18-図21;A2780及びHOSE-図22;並びにAsPC1及びC-図23}。更に、48時間の処置後、ドキソルビシン又はパクリタキセルとの組合せにおいて、MPLは、Hep3B細胞の生存率を相乗的に阻害したが、同じ濃度において、非悪性の健常HOSE対照細胞に対しては相乗的相互作用を示さない{Table 6(表6);図24}。それぞれの場合において、HOSE細胞に対して観察された細胞毒性は、MPLではなく、ドキソルビシン、フルタミド、ゲムシタビン又はパクリタキセルの存在にのみ起因した。72時間後、並びに、比較的低濃度のドキソルビシンとの組合せにおいて、MPLは、(i)LN18及びU87グリア芽腫;(ii)A2780及びOVCAR-3卵巣悪性腫瘍細胞株、並びに(iii)PET、REN及びYOU中皮腫の生存率の相乗的阻害を示すが、非悪性HOSE細胞の生存率に対しては相乗的阻害を示さない{Table 6(表6);LN18-図21;A2780、OVCAR-3及びHOSE-図22;PET、REN及びYOU-図25}。すなわち、これらの低ドキソルビシン濃度において、HOSE細胞に対して観察された細胞毒性は、ドキソルビシンの存在にのみ起因する。比較的低い濃度のオキサリプラチンとの組合せにおいて、MPLは、A2780悪性細胞株の生存率に対する相乗的阻害を示したが、非悪性HOSE細胞に対しては示さなかった。(i)フルオロウラシル、及び(ii)パクリタキセルとの組合せにおいて、MPLは、(i)A2780卵巣及び(ii)OVCAR-3卵巣悪性細胞株それぞれの生存率に対して、並びに非悪性HOSE細胞生存率に対して、相乗的阻害を示す。MPLとフルオロウラシル及びパクリタキセルとを組み合わせた作用が前臨床レベルで顕著でありうるかは更なる調査を必要とする。
【０２００】
Hep3B細胞に対する48時間の処置後のMPLの薬物組合せの効果を更に分析すると、5μMのMPLが単独で、コンビナトリアルな薬物組合せに関係なく、強力な効果を有することが実証される(12回の実験中12回)。上述のように、5μMのMPLとドキソルビシン又はパクリタキセルとの組合せは、Hep3B細胞生存率に相乗的細胞毒性を示し、またこれらの実験において、MPLは単独で強い細胞毒性効果を示す。しかしながら、シスプラチン、ゲムシタビン又はオキサリプラチンとの組合せでは、5μMのMPL単独の細胞毒性が高いために、相乗は観察されない。更に各場合において、5μMのMPLは、シスプラチン、ドキソルビシン、オキサリプラチン又はパクリタキセルのいずれかと組み合わせたとき、試験した濃度で、48時間の処置後において、HOSE細胞に対して何ら更なる細胞毒性効果は示さない。MPL(2.5μM)は、本明細書に記載の実験において、Hep3B細胞に対して細胞毒性効果を示さない(6回の実験中6回)。
【０２０１】
上記に列挙した細胞毒性薬に加えて、更に4種の別個の細胞毒性薬を、対応するHOSE対照を用いて試験した(Table 7(表7)、図26参照)。
【０２０２】
【表７】
0006666494.tif 000020
【０２０３】
Table 7(表7)において、薬物組合せに対して使用される細胞株/名称。処置は、5μMのMPL及び薬物組合せを用いて72時間行った。「組合せ薬物」の欄において、√は、相乗的阻害を示し、一方、×は、相乗効果がないことを示す。1x=事象の数、X=実験の数。2ボルテゾミブは、二相性の応答を示し、5μMのMPLとの併用において0.01、2.5、5及び10nMで相乗的作用を示したが、0.05、0.1又は0.5nMでは示さなかった(2つの別個の実験)。3この実験を繰り返した。4タモキシフェン実験では、2.5μMのMPLを使用した。最も効率的(efficient)な用量は測定されなかった。HOSE細胞に対する相乗は、2.5、5、10及び20nMのボルテゾミブでは試験しなかった。(Bort=ボルテゾミブ、Col=コルヒチン、Lev=レバミソール、Tam-タモキシフェン)。
【０２０４】
図26において、処置時間は全て72時間であった。5μMのMPLは単独で、試験された全ての悪性腫瘍細胞に対して顕著な細胞毒性効果を示す。5μMのMPLは、A2780細胞に対して、ボルテゾミブ又はコルヒチンのいずれとの組合せにおいても相乗的細胞毒性を示す。MPLは5μMでレバミソールとの組合せにおいて、A2780細胞に対して相乗的細胞毒性を示さないが、レバミソール(10μM)及びMPL(5若しくは10μM)を用いた場合、OVCAR-3細胞に対しては相乗的細胞毒性を示す。図16及びTables 4及び7(表4及び表7)参照。タモキシフェンは、ここでのOVCAR-3細胞に対して、MPLと共に相乗的細胞毒性を示す。MPLとの組合せにおいて、ボルテゾミブとタモキシフェンは、HOSE細胞に対して相乗的細胞毒性を示すが、ここでのコルヒチン又はレバミソールとの組合せは示さない。HOSE細胞に対するタモキシフェンとの組合せにおいて、5μMでなく2.5μMのMPLを使用していることに留意されたい。*は最大有効用量を示し、**は相乗を示す。レバミソールの用量は増加させることができた。
【０２０５】
ボルテゾミブは、A2780細胞に対して、明白な二相性の応答を示し、5μMのMPLとの併用において0.01、2.5、5及び10nMで相乗的作用を示したが、0.05、0.1又は0.5nMでは示さなかった(2つの別個の実験)。HOSE細胞を5μMのMPLと0.01、0.05、0.1及び0.5nMのボルテゾミブで処置すると、0.01及び0.05nMのボルテゾミブで相乗的細胞毒性が示されたが、0.1又は0.5nMのボルテゾミブでは示されなかった。より高い濃度のボルテゾミブは、HOSE細胞に対して試験しなかった。コルヒチンとMPLとの組合せは、試験した濃度でA2780悪性細胞に対して細胞毒性効果を示したが、非悪性HOSE細胞に対しては示さなかった。ここでレバミソールはMPLとの組合せで、A2780細胞に対して相乗効果を示さなかったが、より高濃度のレバミソールとMPLとの組合せではA2780細胞に対して相乗的細胞毒性効果を奏しうることが予測される。MPLとタモキシフェンとは、試験した全ての濃度でOVCAR-3細胞に対して相乗効果を示した。同様に、MPL及びタモキシフェンは、HOSE細胞に対して相乗効果を示したが、半分の濃度のMPLでOVCAR-3細胞に対して試験した。更に18種の別個の細胞毒性薬を、MPLとの2種組合せで、同等のHOSE対照は用いず、同じ濃度で別のより限定された試験において試験した{Table 8(表8)参照}。1つを除いて全てで、試験した細胞株に対し、試験した濃度で、MPLとの相乗的相互作用が示された。
【０２０６】
【表８】
0006666494.tif 000021
【０２０７】
Table 8(表8)において、薬物組合せに対して使用される細胞株/名称。処置は、5又は10μMのMPLと薬物との組合せを用いて72時間行った。「組合せ薬物」の欄において、√は、相乗的阻害を示し、一方、×は、相乗効果がないことを示す。1x=事象の数、X=実験の数。2MPL単独を、同じ実験のセロトニン及びウォルトマンニンに対する対照として使用した。
【０２０８】
(実施例4)
モネパンテル(MPL)と、様々な第一選択及び第二選択標準治療化学療法薬との3種組合せによる医薬の組合せの効果
本発明者らは、MPLを、様々な第一選択及び第二選択標準治療化学療法薬との3種組合せで、悪性細胞に対する細胞毒性の相乗的相互作用を、SRBアッセイを用いて試験した。
【０２０９】
材料及び方法
細胞株は全てアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション(ATCC)から取得し、実施例1で概説したように維持した。細胞毒性アッセイも、上記実施例1で概説したように、実施した。MPL(5μM)及び組合せ薬物は、特に示していない場合、72時間適用した。
【０２１０】
結果
CFPAC-1膵臓癌細胞:MPL、ゲムシタビン及びフルオロウラシル
CFPAC-1細胞は、転移後の嚢胞性線維症患者の肝臓から単離した膵管腺癌細胞株を表す。CFPAC-1細胞毒性を、SRBアッセイによって、5μMのMPL単独、並びにMPLとゲムシタビン又はフルオロウラシルとの2種組合せを用いた処置に続いて評価した{Tables 3、6(表3、表6);図22参照}。MPL(5μM)単独では、CFPAC-1細胞に対して、10回の実験中1回で、顕著な細胞毒性効果を奏した。ゲムシタビン及びフルオロウラシルとの2種組合せにおいて、MPLは、CFPAC-1細胞に対して低濃度で、相乗的に細胞毒性効果を奏した。したがって、MPLを、より高い濃度で(10μM)、並びにこのより高い濃度でのゲムシタビン及びフルオロウラシルとの2種及び3種組合せで、更に試験した。MPL(10μM)は、単独及び72時間の処置で、CFPAC-1細胞に対して、9回の実験中4回で(データ示さず)、細胞毒性効果を奏した。ゲムシタビン又はフルオロウラシルとの組合せにおいて、10μMのMPLは、上記で観察されたように、CFPAC-1細胞に対して低濃度で相乗的に細胞毒性効果を奏した(データ示さず、図23参照)。CFPAC-1細胞毒性に対する更なる相乗は、MPL、ゲムシタビン及びフルオロウラシルの3種組合せからは観察されなかった。
【０２１１】
Hep3B肝臓癌細胞:MPL、ミノサイクリン、オキサリプラチン及びゲムシタビン
Hep3B細胞は、肝細胞癌細胞株を含有するB型肝炎である。Hep3B細胞毒性を、SRBアッセイによって、5μMのMPL単独、並びにMPLとシスプラチン、ドキソルビシン、ゲムシタビン、オキサリプラチン及びパクリタキセルとの2種組合せ{Tables 3、6(表3、表6);図24参照}を用いた処置に続いて評価した。MPL(5μM)は単独で、12回の実験中12回で、Hep3B細胞に対して顕著な細胞毒性効果を奏し{Table 6(表6)}、MPLとドキソルビシン及びパクリタキセルとの組合せはいずれもHep3B細胞に対して相乗的細胞毒性があった(図24)。相乗は、シスプラチン、ゲムシタビン又はオキサリプラチンとの組合せでは観察されなかった。MPL単独での細胞毒性効果は、組合せでの細胞毒性効果と同程度の強さであった。
【０２１２】
MPL(5μM)とミノサイクリン(5μM)との2種組合せは、48時間の培養後、2回の実験中1回で、Hep3B細胞に対して相乗的細胞毒性を奏した。MPLと、(i)ミノサイクリン(5μM)及びオキサリプラチン(1μM)、又は(ii)ミノサイクリン(5μM)及びゲムシタビン(0.01μM)のいずれかとの3種組合せは、MPL単独又は2種の薬物の組合せでそれぞれ観察された細胞毒性に対して更なる細胞毒性は示さなかった(データ示さず)。
【０２１３】
C170及びHT29結腸直腸癌細胞:MPL、フルオロウラシル、オキサリプラチン及びゲムシタビン
C170
C170細胞株は原発性腫瘍に由来する結腸直腸細胞株である。MPL(5μM)単独は、C170細胞に対して、2回の実験のうちの1回で、顕著な細胞毒性効果を誘発した(図27及びデータ示さず)。5-FU(20μM;n=2)又はゲムシタビン(0.5μM;n=1)との2種組合せにおいて、MPL(5μM)は、C170細胞に対して、相乗的細胞毒性を奏した(図27)。相乗効果は、オキサリプラチンとの2種組合せでは観察されなかった(1μM;n=1;図27)。5-FU(20μM)及びゲムシタビン(0.5μM)との3種組合せにおいて、MPL(5μM)は、C170細胞に対して、更なる相乗的細胞毒性を奏した(図27)。MPL(5μM)の更なる相乗的細胞毒性は、5-FU(20μM)及びオキサリプラチン(1μM)との3種組合せでは、C170細胞に対して観察されなかった。
【０２１４】
HT29
HT29細胞株は原発性腫瘍に由来する結腸直腸細胞株である。MPL(5μM)単独は、HT29細胞に対して、2回の実験において、顕著な細胞毒性効果は誘発しなかった(図27及びデータ示さず)。5-FU(20μM;n=1/2)又はゲムシタビン(0.5μM;n=1)との2種組合せにおいて、MPL(5μM)は、HT29細胞に対して、相乗的細胞毒性を奏した(図27)。相乗効果は、オキサリプラチンとの2種組合せでは観察されなかった(1μM;n=1;図27)。5-FU(20μM)及びゲムシタビン(0.5μM)との3種組合せにおいて、MPL(5μM)は、HT29細胞に対して、更なる相乗的細胞毒性を奏した(図27)。MPL(5μM)の更なる相乗的細胞毒性は、5-FU(20μM)及びオキサリプラチン(1μM)との3種組合せでは、HT29細胞に対して観察されなかった。
【０２１５】
図27において、MPL、5-FU及びオキサリプラチンの組合せの最大有効用量は決定されなかった。*は最大有効用量を示し、**は相乗を示す。
【０２１６】
OVCAR-3及びSKOV-1悪性並びにHOSE非悪性卵巣細胞:MPL、ミノサイクリン、タモキシフェン、パクリタキセル及びドキソルビシン
【０２１７】
【表９】
0006666494.tif 000022
【０２１８】
MPLと薬物組合せを用いた処置は、72時間行った。√は、相乗的阻害を示し、一方、×は、相乗効果がないことを示す。細胞あたりの√又は×の数は、特定の薬物の組合せを使用して実施した実験の数に相当する。
【０２１９】
OVCAR-3
MPLは、5μM単独(6回の実験中6回)で、OVCAR-3細胞に対して顕著な細胞毒性効果を誘発するが、2.5μM単独(1回の実験中1回)では誘発しない{Table 9(表9);図28}。MPLと、ミノサイクリン、タモキシフェン、タキソール(パクリタキセル)及びドキソルビシンとの2種組合せは、OVCAR-3細胞に対して相乗的な細胞毒性効果を奏しうる{Table 9(表9);図28}。MPLと、(i)ミノサイクリン及びパクリタキセル、又は(ii)ミノサイクリン及びドキソルビシンとの3種組合せは、OVCAR-3細胞に対して相乗的な毒性効果を奏しうる{Table 9(表9);図28}。
【０２２０】
SKOV-1細胞
MPLは、5μM単独(3回の実験中3回)で、SKOV-1細胞に対して顕著な細胞毒性効果を誘発した{Table 9(表9);図28}。MPLと、ミノサイクリン(3回の実験中1回)及びタモキシフェン(1回の実験中1回)との2種組合せは、SKOV-1細胞に対して相乗的な細胞毒性効果を奏しうる{Table 9(表9);図28}。ここで研究されたMPLの3種組合せ処置では、SKOV-3細胞に対して相乗的細胞毒性は観察されなかった{Table 9(表9);図28}。
【０２２１】
HOSE細胞
ここでMPLは、5μM単独(3回の実験中3回)で、及び2.5μM単独(1回の実験中1回)で、HOSE細胞に対して顕著な細胞毒性効果を誘発しなかった{Table 9(表9);図28}。MPLと、ミノサイクリン及びドキソルビシンとの2種組合せは、HOSE細胞に対して相乗的な細胞毒性効果を奏しうる{Table 9(表9);図28}。ここで研究されたMPLの3種組合せ処置では、HOSE細胞に対して相乗的細胞毒性は観察されなかった{Table 9(表9);図28}。
【０２２２】
図28において、MPL(5μM)と、(i)ミノサイクリン又は(ii)ドキソルビシンとの組合せは、OVCAR-3細胞に対して相乗的相互作用を示すが、SKOV-1細胞に対しては示さない。MPL(5μM)と、ドキソルビシンではなくミノサイクリンとの組合せが、HOSE細胞に対して相乗的相互作用を示す。MPL(2.5μM)と、(i)ミノサイクリン又は(ii)パクリタキセルのいずれかとの組合せは、OVCAR-3細胞に対して相乗的相互作用を示すが、HOSE細胞に対しては示さない。MPLと、ミノサイクリン及び(i)ドキソルビシン又は(ii)パクリタキセルとの組合せはいずれも、OVCAR-3細胞に対しては相乗的相互作用を示すが、HOSE細胞に対しては示さない。MPLとミノサイクリン(monocycline)とドキソルビシンとの組合せのSKOV-1細胞における最大有効用量は決定されなかった。**は、相乗を示す。
【０２２３】
議論
MPLは、in vitroで及び単独で、試験した28種の悪性株全てに対して選択的な阻害効果を示した(実施例1参照)。対照のHOSE、ヒト胎児星状細胞及びHUVEC細胞は、MPL誘発細胞毒性に対して比較的非感受性であった。MPLは、in vitroで及び既知の化学療法薬との2種組合せにおいて、試験した全ての悪性細胞株の生存率への相乗的阻害を示した(実施例3参照)。対照HOSE細胞は、MPLと、試験した濃度のコルヒチン、フルタミド及びゲムシタビン、並びに低濃度のドキソルビシン及びオキサリプラチンとの組合せに対して、非感受性であった。MPLは、in vitroで及び既知の化学療法薬との3種組合せにおいて、C170及びHT29結腸直腸(MPL/フルオロウラシル/ゲムシタビン)並びにOVCAR-3膵臓(MPL/ミノサイクリン/パクリタキセル及びMPL/ミノサイクリン/ドキソルビシン)悪性細胞株に対して相乗的阻害を示した(実施例4参照)。これらのデータは、下記に示す多くの理由により、今日までに研究された個々の悪性細胞の種に対して重要な意義を有する。
【０２２４】
乳がんMCF-7、MDA-MB-231及びT47-D
乳がんは、最も高い頻度で診断されるがんであり(2012年にはおよそ170万例)、世界的に女性におけるがん死の主要原因である。最も効果的な処置は、早期検出であり、併せて腫瘍サイズを縮小するための放射線療法及び化学療法を行ってから外科手術を行うことである。早期乳がんの処置が改善されているにもかかわらず、多くの女性が最終的に転移性乳がん(MBC)を発症する。MBCは本質的に不治の疾患であり、過去10年間で予後はほとんど変わらず、患者の大半が診断から2年以内にこの病気が原因で死亡する。乳がんを標的とした化学療法薬としては、タモキシフェン(エストロゲン受容体[ER]アンタゴニスト)、並びにトラスツズマブ、ado-tトラスツズマブエムタンシン、ペルスツズマブ及びラパチニブ(lapitinib)(Herceptin;HER-2上皮成長因子[EGF]受容体アンタゴニスト)が挙げられる。現行のレジメンのほとんどには、アントラサイクリン類及びタキサン類も包含されており、連続的な設計で適用されることも多い。MBCが依然として本質的に不治の疾患であるという事実は、新規クラスの治療薬が必要であることを示している。
【０２２５】
MCF-7及びT47-Dは、ER陽性、プロゲステロン受容体[PR]陽性及びHER2陰性の抗エストロゲン応答性乳管癌株である。MDA-MB-231は、ER/PR/HER-2三種陰性基底B型乳腺癌細胞株であり、既知の化学療法に対して比較的抵抗性である。試験した3つの乳がん細胞株は全て、MPL投与に対して比較的感受性であり、IC50はそれぞれ15.5、23.8及び5.3μMであった{Table 3(表3)参照}。三種陰性腫瘍は、全ての乳がんの15〜25%を占め、かなり高い再発率を有する。MDA-MB-231が、MPLの投与に対して高感受性を示すことを実証したことは、MPLが、そのような化学療法耐性三種陰性提示腫瘍に対する代替的な後期選択治療薬の良好な候補となることを示唆する。特にMCF-7及びT47-D株の高感受性が実証されたことは、MPLが、そのようなエストロゲン感受性腫瘍に対して有効な追加的又は後期代替的治療となりうることを同様に示唆している。
【０２２６】
子宮頸がん:HeLa
子宮頸がんは、3番目に一般的な婦人科系がんであり、毎年500000例の新たな診断があり、女性における全てのがん死の1.2%を占める。局所的に進行した子宮頸がんを有する患者の5年生存率は過去20〜30年でおよそ70%を超え、新規クラスの治療薬が切望されている。白金系化学療法を放射線療法に加えることにより、放射線療法単独と比較して結果は改善されるが、全ての患者の30%〜50%が、処置に応答しないか疾患を再発する。これらの患者に対して標準的な処置選択肢はないが、白金系化学療法がしばしば使用され、治験が継続中である。
【０２２７】
HeLa腺癌子宮頸がん細胞は、MPL投与に対して比較的感受性であり、IC50は15.8μMである。このことは、MPLが有効な追加的又は代替的治療選択肢となりうることを示唆する。
【０２２８】
結腸直腸がん:C170、HCT116、HT29及びHT-29 5m11
結腸直腸がん(CRC)は、2番目に最も頻繁に報告されるがんであり、2012年には世界中でおよそ140万例があり、全ての患者の50%が、経時的に関連する転移性進行(mCRC)を有する。1995年から2006年の間に、mCRCに対する治療選択肢は、切除及び5-FUに基づく治療から、イリノテカン、フォリニン酸、オキサリプラチン、ベバシズマブ、セツキシマブ及びパニツムマブ処置を含む治療へと進展した。5-FU、フォリニン酸及びオキサリプラチン(FOLFOX)の3種組合せが、ステージIIIの結腸がんを有する患者の追加的標準治療となっている。そのような選択肢を含めることにより、診断からの生存期間中央値は増加したが、公開された治験によれば、治療なしでは最大およそ9カ月から20カ月にすぎないことを意味する。そのような進展の結果、mCRCは、現在では、急性疾患よりはむしろ慢性疾患として分類されるが、セツキシマブ処置に関連する予測的Krasバイオマーカー試験を例外として、これらの処置は、費用効果性と実用性により、依然として次善策にすぎないか又は懐疑的なままである。患者の生存期間を最小の副作用で著しく改善させる費用効果的処置が求められている事例であることは明らかである。
【０２２９】
HT29及びHT-29 5m11は野生型結腸腺癌細胞株であり、一方、HCT116はKras変異結腸直腸癌である。各細胞株は、MPLに比較的高い感受性であり、それぞれLC50が5.9、10.4及び10.5μMである。したがってセツキシマブ及びパニツムマブがKras結腸直腸腫瘍に対してほとんど効果を示さず、Folfox、イリノテカン及びベバシズマブが十分な効力を示していない事例において、MPLは、有効な更なる治療選択肢を提供しうる。
【０２３０】
グリア芽腫:LN18、T98G、U87及びU251
神経膠腫は、中枢神経系(CNS)を支援するグリア細胞から発症する神経上皮性腫瘍であり、100000人あたりおよそ2又は3例の発症率を有する。グリア腫瘍の例としては、星状細胞腫、乏突起膠細胞腫、混合型乏突起星細胞系腫瘍、及び混合型グリア神経細胞系腫瘍が挙げられる。グリア芽腫(GBM)多形の星状細胞腫は、脳における最も一般的で最も侵襲性の悪性腫瘍であり、全ての神経膠腫の60〜70%を占め、巨細胞GBM及び神経膠肉腫の2つの変形型がある。処置なしでは、GBM多形の診断からの生存期間中央値は4.5カ月である。標準治療の放射線及びテモゾロミド(TMZ)化学療法を用いた場合の生存期間中央値は14.6カ月であり、外科手術及び放射線療法を用いた場合の生存期間中央値は12.1カ月である。全体として、TMZ組合せ試験において、ある特定の化学療法薬組合せレジメンが、TMZ単独の投与よりも優れた生存期間中央値を提供することは、現在示唆されていない。腫瘍再発が原発部位手術後の症例の90%を占め、代替となる治療薬クラスは現在のところ欠失している。
【０２３１】
U87及びU251GBM細胞株はTPZ感受性であり、LN18及びT98G GBM細胞株は比較的TPZ-不感受性である。しかしTPZ感受性にかかわらず、試験した4つのGBM株の全てが比較的高いMPL感受性を示し、一方で非悪性HOSE、ヒト胎児星状細胞及びHUVEC対照細胞はMPLに対して比較的非感受性であった。更に、MPLと第2ラウンド標準治療化学療法薬のドキソルビシン及びゲムシタビンとの組合せは、LN18及びU87GBM細胞株に対して相乗的細胞毒性効果を示す一方、HOSE細胞に対してはそれぞれ効果を奏するための閾値が高いか又は全く効果がない。これらのデータは、MPLが、TMZが奏効しないときの有効な独立した又はGMB複合治療薬となりうることを示唆する。
【０２３２】
肝臓癌:Hep3B
肝細胞癌(HCC)は、世界中で5番目に一般的な腫瘍であり、世界中での年間死亡数は250,000〜100万例となり、発症率も増加している。切除又は肝移植がHCCの第一選択処置であり、ラジオ波焼灼術も選択肢であり、全生存(OS)中央値は49カ月であるが、局所再発率が高い。ソラフェニブは、転移したか局所的に制御不能なHCCの唯一の承認された処置であり、プラセボと比較してOS中央値を7.9〜10.7カ月間延長する。
【０２３３】
Hep3Bは、p53変異型で悪性のソラフェニブ感受性ヒト肝細胞癌であり、HCCと同様に、従来の化学療法剤、例えば、5-FU、シスプラチン及びパクリタキセルに対して比較的耐性である。Hep3B細胞は、MPL単独処置に対して比較的高い感受性を示し、MPLをドキソルビシン、ミノサイクリン、パクリタキセルと組み合わせたとき、相乗的細胞毒性効果が観察された。進行中の研究ではMPL組合せ治療の健常組織への細胞毒性をより正確に決定する必要があるが、これらのデータは、MPLが、特定のHCC症例に対するソラフェニブの有効な代替的又は補足的治療薬となりうることを示唆する。
【０２３４】
間葉系軟組織腫瘍:線維肉腫及び脂肪肉腫:HT-1080及びSW-872
軟組織肉腫(STS)は、身体全体にわたる広範囲の間葉系細胞から生じる稀有で不均一な悪性腫瘍の一群である。外科手術が、治癒のための唯一の機会であり、局所的に進行した切除できない転移性の疾患は一般的に不治とみなされる。全身的ドキソルビシン及びイフォスファミド(isosfamide)が、30年以上にわたる進行段階の転移性腫瘍に対する標準的第一選択化学療法であり、およそ12〜16カ月のOSを与える。進行した疾患を有する患者の生存率を改善させる新たな処置が至急必要とされている。
【０２３５】
成人型線維肉腫は、稀な侵襲性の軟組織肉腫であり、全ての軟組織肉腫の1%足らずを占めると推定されている。外科的切除及び放射線療法により50%〜80%の5年生存率がもたらされるが、残余若しくは転移性細胞に対する化学療法は細胞毒性剤に対する高い耐性率により確立されていない。脂肪肉腫は最も一般的な軟組織肉腫であり、米国では2009年に推定で2600人が軟組織肉腫と診断され、成人における全ての肉腫の20〜25%を占める。脂肪肉腫は、3つの主なタイプ:高分化型/脱分化型脂肪肉腫(WD/DDLPS)、粘液型/円形細胞型脂肪肉腫(MLPS)、及び未分化高悪性度多形脂肪肉腫(PLPS)によって代表される。PLPSは、脂肪肉腫の5%を占め、高い転移傾向がある。局所病変の早期検出、外科的切除及び放射線療法以外に利用可能な治療的選択肢はほとんどない。現状において結果に関する臨床的又は病理学的予測因子は存在しない。
【０２３６】
HT-1080線維肉腫及びSW-872脂肪肉腫細胞株は、ドキソルビシン、シスプラチン及びビンクリスチン感受性細胞株である。HT-1080及びSW-872細胞はいずれも、MPL処置に応答し、それぞれEC50は、17.2μM及び14.7μMであった。これらのデータは、MPLが、軟組織肉腫に対して臨床的に有意な効果を与えうることを示唆する。
【０２３７】
5.7  中皮腫:PET、REN及びYOU
米国では、毎年、3300例の悪性胸膜中皮腫と、2500を超える関連する死亡例が報告されている。この疾患には、アスベストの曝露からおよそ20〜40年間に及ぶ疾患進行潜在期間が関わる。9/11のテロ攻撃により、400,000トンのアスベストがニューヨークに堆積し、中皮腫の事例が相応して増加すると考えられている。治癒のための現行の最良の選択肢は、広範囲の外科的切除である。しかしながら、ほとんどの症例(およそ80%)は、後期段階であり、外科的治療が可能な対象でない。化学療法的選択肢は、次善的なものに留まり、シスプラチンとペメトレキセド/ラルチトレキセドとの組合せによる第一選択標準治療は、患者の15〜20%に退縮をもたらすが、再発することが多く、生存期間中央値は12カ月にすぎない。更に第二選択治療は失望的なものである。
【０２３８】
中皮腫株PET、REN及びYOUのMPLに対する相対的感受性及び観察されるMPLとドキソルビシンとの相乗的細胞毒性効果は、MPLが、単独で又は組合せで、比較的稀な破壊的疾患に臨床的に重要な効果をもたらしうることを示唆する。
【０２３９】
卵巣がん:1A9、A2780、IGROV-1、OVCAR-3及びSKOV-3
上皮卵巣がん(EOC)は、2番目に一般的な婦人科系悪性腫瘍であり、女性の婦人科系死亡における主要原因であり、米国だけで年間20000件の死亡を生じる。外科手術及び白金系化学療法が疾患の初期段階において治療可能性を有するが、進行EOCと診断された後の5年生存率は患者の40〜50%にすぎず、大多数がこの疾患により死亡する。EOC罹患患者のおよそ70〜75%が、進行段階で診断され、外科手術並びにカルボプラチン/シスプラチン及びパクリタキセル/ドセキタセルを含む化学療法を用いた処置に応答する。白金系療法とタキサン系療法との組合せは、白金系療法のみでもたらされる24カ月のOSと比較して、36カ月のOS増加をもたらす。リポソームドキソルビシン、トポテカン、ゲムシタビン、シクロホスファミド、及びエトポシドも、白金不感受性、患者の病歴、毒性、費用及び/又は再発に応じて使用されうる。しかしながら、患者の大半は薬剤耐性を発症し、白金耐性患者はその後の治療に十分応答せず、OS中央値は12カ月未満である。4つの重要なフェーズIII治験におけるベバシズマブの使用並びに抗血管新生及びPARP阻害ストラテジーは、無増悪生存率(PFS)を増加させたが、OS中央値の顕著な改善はそれほど生じていない[例えば、28.8カ月  対  ベバシズマブ有で36.6カ月]。このように新規クラスの有効なEOC治療薬が明らかに必要とされている。
【０２４０】
シスプラチン感受性A2780及びIGROV-1並びにシスプラチン非感受性1A29及びOVCAR-3悪性細胞株は全て、MPLに対して比較的高い感受性を示した。タキソール感受性並びにシスプラチン-及び5-FU-非感受性p53変異体SKOV3細胞株は、MPL誘発細胞毒性に対して比較的高い耐性を示すが、依然として感受性は非悪性対照細胞よりもかなり高かった。MPLと、(i)ドキソルビシン、フルオロウラシル、ゲムシタビン及びオキサリプラチン、並びに(ii)ドキソルビシン及びパクリタキセルとの組合せは、A2780及びOVCAR-3細胞に対してそれぞれ相乗的な細胞毒性効果を示した。MPLと17種の様々な既知の細胞毒性薬物との更なる組合せは、A2780及びOVCAR-3細胞に対して相乗的細胞毒性効果を示した{Table 8(表8)参照}。これらのデータは、MPLが、あまり効果的でないクラスの治療薬に対して、実効性のある代替的又は補足的治療薬をもたらしうることを示唆する。
【０２４１】
興味深いことに、高悪性度漿液性腺癌(HGSC)は、EOCの最も一般的な組織学的亜種であり、新薬開発経路には(i)G1細胞周期チェックポイント及び(ii)PI3Kシグナル伝達が含まれ、それぞれ症例の67%及び45%で変化している。MPLは、PI3Kシグナル伝達経路を標的とし、したがってそのような欠失したクラスにおける治療薬の開発に向けた将来的分子標的アプローチの候補をもたらしうる。
【０２４２】
膵臓がん:AsPC-1
初期の膵臓がんは一般的に無症候性であり、したがって診断は多くが局所的に進行した又は転移した段階である。完全切除が、長期生存のための唯一可能性のある処置である。1997年以降、切除に続くフルオロウラシル及び/又はゲムシタビンに基づく化学療法が化学療法剤の標準的治療となり、OS中央値を4〜7カ月間増加させている。しかしながら、それらの導入以降、OSの帰結に関する実際的進歩は得られていない。
【０２４３】
AsPC-1は、化学療法耐性転移ヒト膵臓腺癌の腹水に由来する。AsPC-1細胞は、in vitroでMPLに高感受性であり、標準的第一選択治療であるゲムシタビン処置において、更に高い感受性と相乗的細胞毒性を示す。HOSE対照細胞はゲムシタビンに対して感受性があり、一方、MPLは、ゲムシタビンによって誘発される細胞毒性を増強した。これらのデータは、MPLが、不応性転移性膵臓腺癌に対するゲムシタビンの有効な代替的又は補足的治療薬を提供しうること、更に既存のゲムシタビン療法が存在する場合でも、追加的な細胞毒性を生じさせずに代替的又は補足的治療薬を提供しうることを示唆する。
【０２４４】
前立腺がん:DU-145、LNCaP、PC-3
早期検出のための定期的なPSA試験の導入と、局所性疾患の外科手術的及び放射線療法的処置の改善により、1994年以降、前立腺がんの死亡率は顕著に減少してきた。しかしながら、初期診断の30%で手術及び放射線療法にかかわらず再発が生じ、転移性疾患を有する症例のおよそ80%が処置できないままである。そのように前立腺がんは依然として男性における全てのがん死の原因の10%に相当し、2014年に米国で30000件の死亡の原因になると予測されている。
【０２４５】
アンドロゲン除去療法が、外科手術的及び放射線療法的不応性疾患のために通常利用され、2〜3年間有効であり、その後は、アビラテロン及びsupuleucel-Tを用いた化学療法が使用され、およそ4カ月の生存期間の延長がもたらされうる。DU145細胞及びPC3細胞は、転移性のアンドロゲン非依存性悪性前立腺細胞株であるが、一方でLNCaP細胞株は、転移性のアンドロゲン応答性悪性前立腺細胞株である。
【０２４６】
PC3細胞及びDU145細胞はいずれもMPL単独に対して感受性があり、LNCaP細胞はMPL単独に対して比較的高い感受性がある。抗アンドロゲン薬であるフルタミドとの組合せで、MPLは、強力な相乗的細胞毒性効果を示したが、フルタミドによって引き起こされるHOSE細胞の細胞毒性に対して特に更なる作用は及ぼさなかった。したがって、MPLはアンドロゲン感受性、更には感受性のない疾患の処置に対する有効な代替的又は補足的治療薬となりうる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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