(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
カルボプラチン（ＣＢＰ）及びＮ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）を含む共結晶であって、カルボプラチンとＮ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）が、１：１の比で結合される、共結晶。
【請求項２】
共結晶が、１６．０°の回折角２−シータでのピーク及び２４．５°±０．２の回折角２−シータでのピークを含むＸ線回折パターンを有する、請求項１に記載の共結晶。
【請求項３】
共結晶の固体状態が、いかなる結晶多形形態も含む、請求項１に記載の共結晶。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれかに記載の共結晶を含む医薬組成物。
【請求項５】
少なくとも一種の治療薬又はアジュバント療法薬をさらに含む、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
治療薬又はアジュバント療法薬が、葉酸、補酵素Ｑ１０、クルクミン、グルタチオン（ＧＳＨ）、アロエ、オリザノール、５−フルオロウラシル、及びボルテゾミブからなる群から選択される、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
対象における疾患をその必要において治療するための医薬組成物であって、疾患が、がん及びウイルス感染からなる群から選択され、医薬組成物が、請求項４〜６のいずれかに記載のものであり、医薬組成物中の共結晶が、治療有効量である、医薬組成物。
【請求項８】
がんが、前立腺がん、大腸がん、腎臓腺がん、及び白血病からなる群から選択される、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
ウイルス感染が、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、又はハンターンウイルスによって起こされる、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
共結晶の治療有効量が、０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重である、請求項７〜９のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１１】
医薬組成物が、請求項２に記載の共結晶の有効量、及び医薬的に許容可能な担体又は水性媒体に溶解又は分散された少なくとも一種の治療薬又はアジュバント療法薬の医薬的に許容可能な量を含む水性組成物である、請求項７〜９のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１２】
（ｉ）カルボプラチンとＮ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）を適切な溶媒中で混合し；（ｉｉ）工程（ｉ）からの混合物を十分な時間期間スラリー化又は攪拌し；そして（ｉｉｉ）それによって形成された共結晶を単離することを含む、請求項１の共結晶を製造する方法。
【請求項１３】
カルボプラチンとＮ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）のモル比が１：１〜１：２０である、請求項１２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、環状アミドとカルボプラチンの一連の共結晶、及びこれらの共結晶の医薬的用途に関する。本発明の共結晶は、がんのような様々な疾患の治療又は予防に使用されることができる。本発明はまた、かかる共結晶を製造する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
医薬的な共結晶化は、新しい機能材料を作るために結晶工学での二種以上の純粋化合物の共結晶化によって多大な学術的、工業的、及び治療的関心を引き付けている。特に、医薬的な共結晶は、ターゲット分子又はイオンが活性医薬成分（ＡＰＩ）であり、かつそれが水素結合によって共結晶形成体に結合する「共結晶」として規定される（Ａｌｍａｒｓｓｏｎ  Ｍ．  ａｎｄ  Ｚａｗｏｒｏｔｋｏ  Ｊ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２００４：１８８９）。医薬的な共結晶は、ノニオン性超分子錯体であり、活性医薬成分（ＡＰＩ）の化学組成を変更せずに医薬開発において溶解性、安定性、及び生物学的利用能のような生理化学的な特性の問題を改良するために使用されることができる。
【０００３】
カルボプラチンは、プラチンアナログの第二世代抗腫瘍薬の一つであるが、シスプラチンと比較して低い毒性のため世界中で認められ、使用されている。不幸にも、カルボプラチンは、第一世代プラチンと比較して穏やかな毒性であるが、骨髄機能抑制のような多数の副作用をなお生じる。さらに、カルボプラチンは、限定された範囲のがんに対してのみ使用されることができる。それゆえ、毒性が少なく、小さい薬剤耐性しか起こさず、多用性を与える、経口的に活性なカルボプラチンアナログ化合物に対する探索が継続している。
【０００４】
結果として、共結晶化技術でシスプラチン、カルボプラチン、及び他のプラチンの生理化学的及び治療的特性を改良することが望ましい。ある場合には、ＡＰＩとしてプラチンの基本構造を変える必要はないが、溶解性、安定性、透過性、及び生物学的利用能のような特性が改良されることができる。例えば、共結晶が特定の使用環境において治療効果的であり、かつ長い時間期間にわたってレベルを維持することができるように、共結晶化でプラチンＡＰＩの生物学的利用能を有意に強めることが可能であるだろう。
【０００５】
本発明は、カルボプラチンの一連の共結晶を提供し、共結晶の形成体の一つは、環状アミドである。本発明の共結晶は、高められた溶解性、安定性、及び生物学的利用能、並びに医薬用途における多用性のような一つ以上の限定されない目的を満足するものである。
【発明の概要】
【０００６】
本発明は、各々がカルボプラチン（ＣＢＰ）と環状アミドを共結晶形成体として含む一連の共結晶、及びそれを作りかつ使用する方法を提供する。
【０００７】
ある実施形態では、環状アミド共結晶形成体は、表１のＣＦ−０１からＣＦ−１４までで選択され、式中、Ｒは、水素、ハロゲン、アミノ基、Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル基、シアニド基、ヒドロキシル基、アシル基、ホスホリル基、ホスホロアミド基、ヒドロキシルカルボキシル基、フェニル基、又は脂肪族基を表わす。
【０００８】
0006768716.tif 000002
【０００９】
ある実施形態では、共結晶は、カルボプラチンと表１からのＣＦ−０５を含み、一つの特定の実施形態では、Ｒはメチル基である。特に、本発明の共結晶は、カルボプラチンとＮ−メチルー２−ピロリドン（ＮＭＰ）を含むことができ、それらは、１：１の比で結合される。かかる共結晶は、ＣＢＰ−ＮＭＰと称される。ある実施形態では、本発明のＣＢＰ−ＮＭＰ共結晶は、１６．０°の回折角２−シータでのピーク及び２４．５°±０．２の回折角２−シータでのピークを含むＸ線回折パターンを有することができ、前記ピークは、図１０に記載される。
【００１０】
一つの側面では、本発明の共結晶が形成され、そこではカルボプラチン、活性医薬成分（ＡＰＩ）、及び環状アミド（共結晶形成体）が水素結合によって一緒に結合されている。ある実施形態では、他の非共有相互作用もまた、共結晶にありうる。ある実施形態では、他の非共有及び共有相互作用もまた、共結晶に存在しうる。
【００１１】
別の側面では、本発明は、カルボプラチン及び共結晶形成体環状アミドを含む共結晶の化合物を含む医薬組成物を提供する。医薬組成物のある実施形態では、カルボプラチンは、ＡＰＩである。
【００１２】
本発明の一つの側面は、医薬用途において治療的に有効であるのに十分なレベルの生物学的利用能を与え、かつ治療的に有効な期間、そのレベルを維持するカルボプラチンベースの共結晶に関する。
【００１３】
本発明の別の側面は、ある適応症においてカルボプラチンベースの共結晶（例えば式Ｉの共結晶）の使用を提供することである。ある実施形態では、共結晶の使用は、単独でのカルボプラチンの使用を超えて広がる。ある実施形態では、本発明は、式Ｉの共結晶を含む医薬組成物を対象に投与することを含む、必要とする対象において疾患を治療又は予防することに関し、そこでは共結晶は、治療有効量である。ある実施形態では、疾患は、がんであり、他の実施形態では、疾患は、ウイルス感染である。
【００１４】
一つの側面では、本発明は、共結晶の有効量と悪性細胞を接触することによってがんを患っている対象において悪性細胞を殺傷するための本発明の共結晶の化合物を含む医薬組成物の使用に関連する。
【００１５】
一つの側面では、本発明は、本発明の共結晶の一つの化合物の有効量を単独で、又は少なくとも一種の治療薬もしくはアジュバント療法薬と組み合わせて、がん細胞を治療するために本発明の共結晶の一つの化合物を含む医薬組成物の使用に関する。ターゲットとするがんは、前立腺がん、大腸がん、腎臓腺がん、及び白血病を含むが、これらに限定されない。
【００１６】
がんの治療のある実施形態では、化合物の治療有効量は、約０．０１〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重、ある特定の実施形態では、約０．０１〜約５ｍｇ／ｋｇ体重である。
【００１７】
ウイルス疾患の治療のある実施形態では、化合物の治療有効量は、約０．０１〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重、ある特定の実施形態では、約０．０１〜約５ｍｇ／ｋｇ体重である。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図１は、ＰＣ−３前立腺がん細胞株におけるＣＢＰ−ＮＭＰ及び対照化学薬品ドセタキセルとシスプラチンのＩＣ５０値を示す。
【００１９】
【図２】図２は、ＬＮＣａＰ前立腺がん細胞株におけるＣＢＰ−ＮＭＰ及び対照化学薬品ドセタキセルとシスプラチンのＩＣ５０を示す。
【００２０】
【図３】図３は、胎児肝細胞ＨＬ−７００２におけるＣＢＰ−ＮＭＰ及び対照化学薬品ドセタキセルとシスプラチンのＩＣ５０を示す。
【００２１】
【図４】図４は、ヒト胎児由来腎臓細胞株ＨＥＫ２９３におけるＣＢＰ−ＮＭＰ及び対照化学薬品ドセタキセルとシスプラチンのＩＣ５０を示す。
【００２２】
【図５】図５は、大腸がん細胞株ＨＣＴ−１１６におけるＣＢＰ−ＮＭＰ及び対照化学薬品オキサリプラチン及び５−ＦＵのＩＣ５０を示す。
【００２３】
【図６】図６は、大腸がん細胞株ＨＴ−２９におけるＣＢＰ−ＮＭＰ及び対照化学薬品オキサリプラチン及び５−ＦＵのＩＣ５０を示す。
【００２４】
【図７】図７は、胎児肝細胞ＨＬ−７００２におけるＣＢＰ−ＮＭＰ及び対照化学薬品オキサリプラチン及び５−ＦＵのＩＣ５０を示す。
【００２５】
【図８】図８は、ヒト胎児由来腎臓細胞株ＨＥＫ２９３におけるＣＢＰ−ＮＭＰ及び対照化学薬品オキサリプラチン及び５−ＦＵのＩＣ５０を示す。
【００２６】
【図９】図９は、ＤＣＰのＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン、及びＮＭＰにおけるＤＣＰの混合物からの新結晶（８０４６０９−３８−Ａ９）を示す。
【００２７】
【図１０】図１０は、異なる混合物からのＣＢＰ−ＮＭＰ試料のＸＲＰＤパターンを示す。
【００２８】
【図１１】図１１は、ＣＢＰ−ＮＭＰ試料（８０４６０９−４４−Ｂ）の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を示す。
【００２９】
【図１２】図１２は、ＣＢＰ−ＮＭＰ試料（８０４６０９−４４−Ｂ）のプロトン核磁気共鳴（１Ｈ−ＮＭＲ）スペクトルを示す。
【００３０】
【図１３】図１３は、処理後のＣＢＰ−ＮＭＰ試料（８０４６０９−４４−Ｂ）のＸＲＰＤを示す。
【００３１】
【図１４】図１４は、２１０℃に加熱した後のＣＢＰ−ＮＭＰ試料（８０４６０９−４４−Ｂ）の１Ｈ−ＮＭＲを示す。
【００３２】
【図１５】図１５は、ＣＢＰ−ＮＭＰ試料の走査電子顕微鏡写真（ＳＥＭ）結果を示す。
【００３３】
【図１６】図１６は、ＣＢＰ−ＮＭＰ試料のＳＥＭ結果を示す。
【００３４】
【図１７】図１７は、ＣＢＰ−ＮＭＰ試料のＳＥＭ結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
特定の実施形態の以下の記述は、本来的に例示のためだけにすぎず、いかなる点でも本発明やその適用や用途を制限することを意図しない。本明細書中で使用されるとき、範囲は、その範囲内にあるそれぞれのかつ全ての値を記述するための簡略システムとして使用される。範囲内のいかなる値も、この範囲の境界として選択されることができる。さらに、本明細書中で引用された全ての参照物は、それらの全体を参考として本明細書中に含まれる。本明細書中の定義と引用された参考文献中の定義が相反する場合は、本明細書中の定義が優先される。別途定義されない限り、本明細書中で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明の属する技術分野の当業者によって一般的に理解される意味と同じ意味を有する。本明細書中で言及される全ての特許及び文献は、それらの全体を参照によって本明細書に組み入れられる。
【００３６】
用語「有効量」又は「治療有効量」は、意図される用途を達成する（これは、疾患を予防又は治療することを含むが、これらに限定されない）のに十分な、本明細書中に記述される単一の化合物又は複数の化合物の組み合わせの量を意味する。治療有効量は、意図される用途（インビトロ又はインビボ）、治療される対象及び疾患状態（例えば、対象の体重、年齢及び性別）、疾患状態の重症度、投与形態などに応じて変化することがあり得、当業者によって容易に決定されることができる。この用語はまた、標的細胞及び／又は組織において特定の反応（例えば、細胞増殖の減少及び／又は組織の形態学的変化）を誘導する用量にも当てはまる。特定の用量は、選択された特定の化合物、後に続く投与療法、化合物が他の化合物との組み合わせで投与されるかどうか、投与のタイミング、投与される組織、及び化合物が担持される物理的送達システムに応じて変化することがあり得る。
【００３７】
本明細書において使用される用語「治療効果」は、治療的な利益及び／又は予防的な利益を包含する。「予防効果」（例えば、「予防」、「防止」及び「発展の確率を減少させる」などの用語）は、疾患もしくは症状の開始の前に医薬を投与することによって、疾患もしくは症状の出現を遅延させるかもしくは排除すること、疾患もしくは症状の徴候の開始を遅延させるかもしくは排除すること、疾患もしくは症状の進行を遅くするか、中止させるか、もしくは逆転させること、又はそれらのいかなる組み合わせも含む。「治療効果」（例えば、「治療」及び「処置」などの用語）は、疾患もしくは症状の開始の後に医薬を投与することによって、疾患もしくは症状の出現を減少させるかもしくは排除すること、疾患もしくは症状の徴候を減少させるかもしくは排除すること、疾患もしくは症状の進行を遅くするか、中止させるか、もしくは逆転させること、又はそれらのいかなる組み合わせを含む。
【００３８】
本明細書において使用される用語「対象」は、ヒト又は非ヒト動物を意味する。ある実施形態では、対象は哺乳動物である。ある実施形態では、対象はヒトである。
【００３９】
範囲が本明細書中で例えば物理的又は化学的特性（分子量や化学式など）を記述するために使用される場合、範囲の全ての組み合わせ及び副組み合わせ、並びにその中の特定の実施形態を含むことを意図される。数値又は数値範囲に言及する場合、用語「約」は、言及される数値又は数値範囲が、実験的な変動性の範囲内の（又は統計学的な実験誤差の範囲内の）近似であることを意味する。従って、数値又は数値範囲は、変動しうる。ある実施形態では、変動は、言及されている数値又は数値範囲の０％〜１５％であり、ある実施形態では、０％〜１０％であり、他の実施形態では、０％〜５％である。用語「含む」（及び「有する」又は「含有する」などの関連用語）は、記述された特徴「からなる」又はこれらの特徴「から本質的になる」いかなる組成物、方法、又はプロセスの実施形態などの実施形態を含む。
【００４０】
本発明で使用される化合物は、これらの化合物の結晶形及び非結晶形も含み、例えば多形、擬似多形、溶媒和物、水和物、非溶媒和多形（無水物を含む）、配座多形、及び化合物の非結晶形、並びにそれらの混合物を含む。「共結晶の化合物」は、共結晶から作られた結晶及び非結晶形態を示し、「から作られた」は、溶解、凝縮、結晶分裂、乾燥、粉砕、圧縮、及びポリマー膜被覆のような限定されない既知の方法で処理されるか、又は変わらないままであることを意味する。「結晶形」及び「多形」は、化合物の全ての結晶形及び非結晶形も含むことを意図され、特定の結晶形又は非結晶形が言及されない限り、例えば多形、擬似多形、溶媒和物、水和物、非溶媒和多形（無水物を含む）、配座多形、及び非結晶形、並びにそれらの混合物を含む。
【００４１】
本発明は、カルボプラチン（ＣＢＰ）及び環状アミドを含む共結晶に関する。ある実施形態では、本発明の共結晶は、以下の式Ｉの構造を有する：
0006768716.tif 000003
式中、ｎは、１〜１２から選択される整数であり、ｎ≧２であるとき、環状アミド上の炭素原子は、単結合又は二重結合によって連結され、Ｒ１，Ｒ２、及びＲ３は、互いに同じであるか、又は異なり、各々が独立して水素、ハロゲン、アミノ基、Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル基、シアニド基、ヒドロキシル基、アシル基、ホスホリル基、ホスホロアミド基、ヒドロキシカルボキシル基、フェニル基、又は脂肪族基を表わす。
【００４２】
ある実施形態では、ｎは、２，３，４、又は５である。ある実施形態では、Ｒ１，Ｒ２、及びＲ３の各々は、独立して水素、メチル、ビニル、イソプロピル、ヒドロキシメチル、シクロヘキサンメチル、シアノメチル、及びアミノメチル基を表わす。
【００４３】
ある実施形態では、ｎは、３であり、環状アミド上の炭素原子は、単結合によって連結される。一つの特定の実施形態では、ｎは、３であり、環状アミド上の炭素原子は、単結合によって接続され、Ｒ３は、メチル、ビニル、イソプロピル、ヒドロキシメチル、シクロヘキサンメチル、シアノメチル、及びアミノメチル基のいずれか一つを表わす。
【００４４】
ある実施形態では、環状アミド共結晶形成体は、以下の構造から選択されることができる。
0006768716.tif 000004
式中、Ｒは、水素、ハロゲン、アミノ基、Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル基、シアニド基、ヒドロキシル基、アシル基、ホスホリル基、ホスホロアミド基、ヒドロキシルカルボキシル基、フェニル基、又は脂肪族基を表わす。
【００４５】
ある実施形態では、共結晶は、ＣＢＰ及びＮ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）を１：１の比で結合されて含む。かかる共結晶は、ＣＢＰ−ＮＭＰと称されることができる。ある実施形態では、共結晶は、１６．０°の回折角２−シータでのピーク及び２４．５°±０．２の回折角２−シータでのピークを含むＸ線回折パターンを有する。ある実施形態では、共結晶は、１６．０°の回折角２−シータでのピーク及び２４．５°±０．１の回折角２−シータでのピークを含むＸ線回折パターンを有する。ある実施形態では、共結晶は、１６．０°の回折角２−シータでのピーク及び２４．５°±０．０５の回折角２−シータでのピークを含むＸ線回折パターンを有する。ある実施形態では、共結晶は、図１０に示すようなピークを含むＸ線回折パターンを有する。ある実施形態では、共結晶は、図１０に示すようなパターンと実質的に同様のＸ線回折パターンを有する。
【００４６】
ある実施形態では、ＣＢＰ及びＮＭＰを含む共結晶は、以下の式ＩＩの構造を有することができる：
0006768716.tif 000005
【００４７】
ある実施形態では、本発明の共結晶は、（ｉ）共結晶形成体としての環状アミド；及び（ｉｉ）共結晶形成体及び活性医薬成分（ＡＰＩ）としてのカルボプラチンを含む。ある実施形態では、カルボプラチン及び環状アミドが１：１の比率で結合される。
【００４８】
ここで記載されるように、本発明の共結晶の固体状態は、あらゆる結晶性多形形態、又はそれらの混合物である。共結晶はまた、非晶形態に作られることができ、それは、結晶形態と組み合わされてもよい。ある実施形態では、本発明の共結晶の固体状態は、試料８０４６０９−４４−Ｂについて図１０のＸ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）に示されるように、形態Ａである。本発明におけるＣＢＰ−ＮＭＰの共結晶の形態Ａはまた、単結晶特性化及び他の決定法によって確認された。他の実施形態では、共結晶の固体状態は、非晶形態である。本発明の共結晶の異なる形態は、異なる結晶化工程によって得られることができ、共結晶は、既知の技術で非晶形態に作られることができる。
【００４９】
本発明の共結晶（例えばＣＢＰと表１の環状アミドによって形成された共結晶）は、医薬用途において治療的に有効であるために十分なレベルの生物学的利用能を示し、長期間にわたって対象においてそのレベルを維持する。
【００５０】
本発明の共結晶（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）は、（ｉ）カルボプラチンと環状アミドと適切な溶媒を与えて混合し；（ｉｉ）工程（ｉ）からの混合物を十分な時間期間スラリー化又は攪拌し；そして（ｉｉｉ）それによって形成された共結晶を単離することを含む方法によって製造されることができる。
【００５１】
この方法の特定の条件は、最適な純度、量、及び／又は生理化学特性を確保するために調整されることができる。ある実施形態では、適当な比は、１：０．１〜１：２０，１：０．２〜１：２０，１：０．３〜１：２０，１：０．４〜１：２０，１：０．５〜１：２０，１：０．６〜１：２０，１：０．７〜１：２０；１：０．８〜１：２０，１：０．９〜１：２０，１：１〜１：１．２０，１：２〜１：２０，１：３〜１：２０，１：４〜１：２０，１：５〜１：２０，１：６〜１：１８，１：７〜１：１５，１：８〜１：１３，１：９〜１：１２、又は１：１０〜１：１１のモル比である。ある実施形態では、適当な比は、約１：１（モル比）である。ある実施形態では、混合物をスラリー化又は攪拌するための時間期間は、０．１〜２４時間、０．２〜１２時間、０．２５〜６時間、０．３〜２時間、０．４〜１時間、又は０．５〜１時間の範囲であることができる。ある実施形態では、混合物をスラリー化又は攪拌するための時間期間は、約０．５時間であることができる。ある実施形態では、共結晶化合物は、乾燥、濾過、遠心分離、ピペット吸引、又はそれらの組み合わせによって得られることができる。ある実施形態では、共結晶化合物は、遠心分離によって得られることができる。
【００５２】
本発明は、本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）の医薬用途、及び対象の疾患をその必要において治療又は予防する方法に関する。ある実施形態では、前記方法は、本発明の共結晶の一種以上の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）の治療有効量を含む医薬組成物を対象に投与することを含む。
【００５３】
ある実施形態では、本発明のカルボプラチンベースの共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）は、有利な治療特性を示す。例えば、ある実施形態では、本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）は、カルボプラチン又は他の公知の薬剤と比較してがん又はウイルス感染細胞を殺すのにより有効的であることができる。他の実施形態では、本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）は、カルボプラチン又は他の公知の薬剤と比較してがん又はウイルス感染細胞を殺すのに有効性に劣るか、又は実質的に同様の効果を有することができるが、健康又は正常細胞に対する毒性が少なく、その結果、正味の健康への利益をもたらすことができる。例えば、がん細胞又はウイルス感染細胞の治療において公知のプラチンアナログと比較すると、ＣＢＰ−ＮＭＰの化合物は、シスプラチン及びカルボプラチンより毒性が少なく、ずっと安定している。ある実施形態では、ＣＢＰ−ＮＭＰの有利な効果は、少ない副作用であることができる。ある実施形態では、ＣＢＰ−ＮＭＰの化合物は、例えばカルボプラチンと比較して医薬用途における良好な融通性を示すことができる。
【００５４】
ある実施形態では、本発明のカルボプラチンベースの共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）は、有利な生理化学特性を示す。例えば、ある実施形態では、ＣＢＰ−ＮＭＰの化合物は、高い溶解性、安定性、生物学的利用能を持つことができる。例えば、カルボプラチンと比較すると、ＣＢＰ−ＮＭＰの化合物は、ずっと安定しており、様々な投与量の固体形態において安定であることができる。一方、ＣＢＰ−ＮＭＰの化合物の水溶解性は、カルボプラチン（１８ｍｇ／ｍＬ）よりずっと高く、配合及び投与の有意に高い可能性を与える。
【００５５】
ある実施形態では、ＰＣ−３細胞の数を減少するためのＣＢＰ−ＮＭＰの化合物のＩＣ５０は、約１９．１４９μＭである。別の実施形態では、ＬＮＣａＰ細胞の数を減少するためのＣＢＰ−ＮＭＰからの化合物のＩＣ５０は、約４２．２３４μＭである。さらに別の実施形態では、ＣＢＰ−ＮＭＰからの化合物は、同様条件においてシスプラチンよりずっと高いＩＣ５０（例えば約１０倍）でＨＬ−７００２細胞に対する最小の毒性を示す。さらに別の実施形態では、ＣＢＰ−ＮＭＰからの化合物は、同様条件においてシスプラチンよりずっと高いＩＣ５０（例えば約８倍）でＨＥＫ２９３細胞に対して最小の毒性を示す。ある実施形態では、ＣＢＰ−ＮＭＰからの化合物は、ＰＣ−３細胞の数を減少するための約１９．１４９μＭのＩＣ５０、ＬＮＣａＰ細胞の数を減少するための約４２．２３４μＭのＩＣ５０、ＨＫ−７００２細胞の数を減少するための約２０．５１μＭのＩＣ５０、及びＨＥＫ２９３細胞を減少するための約５５．１１９μＭのＩＣ５０を示す。
【００５６】
ある実施形態では、ＨＣＴ−１１６細胞の数を減少するためのＣＢＰ−ＮＭＰからの化合物のＩＣ５０は、約６２．０２６μＭである。別の実施形態では、ＨＴ２９細胞の数を減少するためのＣＢＰ−ＮＭＰからの化合物のＩＣ５０は、約３２．０２６μＭである。別の実施形態では、ＣＢＰ−ＮＭＰからの化合物は、同様条件において５−ＦＵよりずっと高いＩＣ５０（例えば約５倍）でＨＬ−７００２細胞に対する最小の毒性を示す。さらに別の実施形態では、ＣＢＰ−ＮＭＰからの化合物は、同様条件において５−ＦＵよりずっと高いＩＣ５０（例えば約１４倍）でＨＥＫ２９３細胞に対して最小の毒性を示す。ある実施形態では、ＣＢＰ−ＮＭＰからの化合物は、ＨＣＴ−１１６細胞の数を減少するための約１８．３５７μＭのＩＣ５０、ＡＣＨＮ細胞の数を減少するための約６２．０２６μＭのＩＣ５０、ＨＬ−７００２細胞の数を減少するための約２０．５１μＭのＩＣ５０、及びＨＥＫ２９３細胞を減少するための約５５．１１９μＭのＩＣ５０を示す。
【００５７】
ある実施形態では、医薬組成物は、本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）からなることができる。ある実施形態では、医薬組成物は、本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）と、少なくとも一種の追加の治療薬又はアジュバント療法薬を含むことができる。追加の治療薬又はアジュバント療法薬は、葉酸、補酵素Ｑ１０、クルクミン、グルタチオン（ＧＳＨ）、アロエ、オリザノール、５−フルオロウラシル、ボルテゾミブ、又はそれらの組み合わせから選択されることができるが、これらに限定されない。治療されるべき特定の疾患に応じて、追加の治療薬又はアジュバント療法薬は、公知の医薬を含むことができる。ある実施形態では、追加の治療薬又はアジュバント療法薬は、疾患を治療又は予防するために臨床的に既に許容されている医薬を含むことができる。
【００５８】
ある実施形態では、医薬組成物は、本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）と、医薬的に許容可能な担体又は賦形剤を含むことができる。「医薬的に許容可能な担体」又は「医薬的に許容可能な賦形剤」は、いかなるそして全ての溶媒、分散媒体、コーティング、抗細菌及び抗真菌剤、等張及び吸収遅延剤、及び不活性成分を含むことを意図される。活性医薬成分のためのかかる医薬的に許容可能な担体又は医薬的に許容可能な賦形剤の使用は、当該技術分野では周知である。いかなる従来の医薬的に許容可能な担体又は医薬的に許容可能な賦形剤も、活性医薬成分と適合性がない限り、本発明の治療組成物におけるその使用が想定される。他の医薬などの追加の活性医薬成分は、記述された組成物及び方法の中に組み込まれることもできる。
【００５９】
さらに別の側面では、対象に投与される医薬組成物中の本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）の量は、約０．００５〜２０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００５〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００５〜５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００５〜２．５ｍｇ／ｋｇ体重、０．０１〜２０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１〜５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１〜２．５ｍｇ／ｋｇ体重、０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．１〜５ｍｇ／ｋｇ体重、又は約０．１〜２．５ｍｇ／ｋｇ体重である。共結晶の特定の量は、特に治療される特定の疾患、及び対象の特定の状態に依存する。
【００６０】
さらに別の側面では、本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）を含む医薬組成物の投与は、少なくとも１，２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，２１，２８，３５，４２，４９，５６，６３，７０，７７，８４，９１、又は９８日間続くことができる。ある実施形態では、医薬組成物の投与は、少なくとも一週間続くことができる。ある実施形態では、医薬組成物の投与は、少なくとも二週間続くことができる。具体的な投与期間は、治療される特定の疾患、及び対象の特定の状態に依存する。
【００６１】
本発明は、様々な側面及び実施形態において、様々な疾患を予防又は治療するための本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）の使用、及び本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）を含む医薬組成物を投与することによって疾患を予防又は治療するための方法を含む。治療又は予防される疾患は、がん及びウイルス感染を含むが、これらに限定されない。
【００６２】
ある実施形態では、疾患は、がんである。ある実施形態では、がんは、膀胱がん、非小細胞肺がん、子宮頸がん、肛門がん、膵臓がん、頭頸部がんを含む扁平上皮がん、腎細胞がん、基底細胞皮膚がん（ＢＣＣ）、扁平細胞皮膚がん（ＳＣＣ）、メラノーマ、卵巣がん、小細胞肺がん、子宮内膜がん、グリア芽腫、星状細胞腫、乏突起膠腫、上皮細胞腫、神経線維肉腫、髄膜腫、消化管間質腫瘍、乳がん、肺がん、大腸がん、甲状腺がん、骨肉腫、胃がん、口腔がん、口腔咽頭がん、胃がん、腎臓腺がん、肝臓がん、前立腺がん、食道がん、精巣がん、婦人科がん、結腸直腸がん、脳腫瘍、白血病（ｌｅｕｋｅｍｉａ）、白血病（ｌｅｕｃｏｃｙｔｈｅｍｉａ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、小リンパ球性白血病（ＳＬＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、バーキットリンパ腫、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症（ＷＭ）、バーキットリンパ腫、多発性骨髄腫、及び骨髄線維症から選択される。
【００６３】
ある実施形態では、本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）を含む医薬組成物は、前立腺がん、大腸がん、腎臓腺がん、又は白血病を予防又は治療するために使用されることができる。ある実施形態では、がんを予防又は治療するための本発明の共結晶の治療有効量は、約０．０１〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重である。別の実施形態では、がんを予防又は治療するための本発明の共結晶の化合物の治療有効量は、約０．０１〜約５ｍｇ／ｋｇ体重である。
【００６４】
ある実施形態では、疾患は、ウイルス感染である。ある実施形態では、ウイルスは、ＤＮＡウイルス又はＲＮＡウイルスである。例えば、ある実施形態では、ウイルスは、アデノウイルス、単純ヘルペスウイルス、ヒトパピローマウイルス、ＶＩＴＡＭＩＮ  Ｋ  ウイルス、天然痘ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、パルボウイルスＢ１９のようなＤＮＡウイルスであることができるが、これらに限定されない。他の実施形態では、ウイルスは、ヒトアストロウイルス、ノーウォークウイルス、Ａ型肝炎ウイルス（ＨＡＶ）、重症急性呼吸器症候群ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、黄熱病ウイルス、デングウイルス、ウエストナイルウイルス、ＴＢＥウイルス、風疹ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス（ＨＥＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、インフルエンザウイルス、ラッサ熱ウイルス（ＬＡＳＶ）、クリミアコンゴ出血熱ウイルス、ハンターンウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、麻疹ウイルス、ムンプスウイルス、パラインフルエンザウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、狂犬病ウイルス、Ｄ型肝炎ウイルス（ＨＤＶ）、ロタウイルス、オルビウイルス、コルチウイルス、バンナウイルスのようなＲＮＡウイルスであることができるが、これらに限定されない。
【００６５】
ある実施形態では、医薬組成物は、ＨＢＶ，ＨＣＶ，ＨＩＶ、又はハンターンウイルスによって起こされるウイルス感染を予防又は治療するために使用されることができる。ある実施形態では、ウイルス感染を予防又は治療するための本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）の治療有効量は、約０．０１〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重である。別の実施形態では、がんを予防又は治療するための本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）の治療有効量は、約０．０１〜約５ｍｇ／ｋｇ体重である。
【００６６】
ある実施形態では、本発明は、必要性のある対象における前立腺がん、結腸直腸がん、腎臓腺がん、又は白血病の徴候を治療、予防、減少又は緩和するか、及び／又は前立腺がん、大腸がん、腎臓腺がん、又は白血病の進行を遅延させるかもしくは中止させる方法を提供し、前記方法は、本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）を含む医薬組成物の有効量を対象に投与することを含む。ある実施形態では、医薬組成物は、本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）からなる。ある実施形態では、医薬組成物は、少なくとも一種の追加の治療薬又はアジュバント療法薬をさらに含む。特定の実施形態では、追加の治療薬又はアジュバント療法薬は、葉酸、補酵素Ｑ１０、クルクミン、グルタチオン（ＧＳＨ）、アロエ、オリザノール、５−フルオロウラシル、及びボルテゾミブから選択されることができる。ある実施形態では、医薬組成物は、本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）と、医薬的に許容可能な担体又は賦形剤とを含む。
【００６７】
ある実施形態では、本発明は、必要性のある対象におけるＨＢＶ，ＨＣＶ，ＨＩＶ、又はハンターンウイルスによって起こされるウイルス感染の徴候を治療、予防、減少又は緩和するか、及び／又はＨＢＶ，ＨＣＶ，ＨＩＶ、又はハンターンウイルスによって起こされるウイルス感染の進行を遅延させるかもしくは中止させる方法を提供し、前記方法は、本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）を含む医薬組成物の有効量を対象に投与することを含む。ある実施形態では、医薬組成物は、本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）からなる。ある実施形態では、医薬組成物は、少なくとも一種の追加の治療薬又はアジュバント療法薬をさらに含む。特定の実施形態では、追加の治療薬又はアジュバント療法薬は、葉酸、補酵素Ｑ１０、クルクミン、グルタチオン（ＧＳＨ）、アロエ、オリザノール、５−フルオロウラシル、及びボルテゾミブから選択されることができる。ある実施形態では、医薬組成物は、本発明の共結晶の化合物（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）と、医薬的に許容可能な担体又は賦形剤とを含む。
【００６８】
ある実施形態では、前立腺がん、大腸がん、腎臓腺がん、又は白血病の予防又は治療のために、ＣＢＰ−ＮＭＰの化合物を含む医薬組成物は、点滴、注射によって、又は経口ルートで投与される。ある実施形態では、前立腺がん、大腸がん、腎臓腺がん、又は白血病の予防又は治療のために、ＣＢＰ−ＮＭＰの化合物を含む医薬組成物は、少なくとも１，２、又は３週間投与される。
【００６９】
ある実施形態では、ＨＢＶ，ＨＣＶ，ＨＩＶ、又はハンターンウイルスによって起こされるウイルス感染の予防又は治療のために、ＣＢＰ−ＮＭＰを含む医薬組成物は、点滴、注射によって、又は経口ルートで投与される。ある実施形態では、ＨＢＶ，ＨＣＶ，ＨＩＶ、又はハンターンウイルスによって起こされるウイルス感染の予防又は治療のために、ＣＢＰ−ＮＭＰを含む医薬組成物は、少なくとも１，２、又は３週間投与される。
【実施例】
【００７０】
特定の疾患に対する本発明の共結晶の効果は、以下の実施例によって示される。さらに、ＣＢＰ−ＮＭＰの製造方法及びＣＢＰ−ＮＭＰの生理化学特性もまた、記載される。これらの実施例は、本発明の範囲をいかなる場合にも制限しない。
【００７１】
カルボプラチンと組み合わされることができる共結晶形成体のスクリーニングを通して、環状アミドが強い候補であることを見出した。得られた共結晶は、増大した溶解性、安定性、及び生物学的利用能、並びにカルボプラチン又は他のプラチン化合物と比較した医薬用途における高い融通性のようなターゲット目標を部分的に又は完全に満たす。
【００７２】
カルボプラチンと比較して、本発明の共結晶は、より安定しており、固体形態で安定することができる。Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）と共結晶形成体カルボプラチンから作られた共結晶（ＣＢＰ−ＮＭＰと称される）は、一例として与えられる。
【００７３】
がん細胞の治療のために報告されたプラチンアナログと比較して、本発明の共結晶の一部は、シスプラチン及びカルボプラチンより毒性が低く、ずっと安定している。
【００７４】
本発明者は、結晶多形形態の形成及び形態ＩがＮＭＰとカルボプラチンの共結晶に対して確認されたことを決定した。共結晶の非晶形態及び他の形態は、異なる結晶化法を使用して存在することができる。本発明におけるＮＭＰとカルボプラチンの共結晶の形態Ｉは、ＸＲＰＤ，ＤＳＣ，ＳＥＭ、及び他の特性決定法によって確認された。
【００７５】
前立腺がん細胞に対するＣＢＰ−ＮＭＰの効果
共結晶ＣＢＰ−ＮＭＰは、ドセタキセル及びシスプラチン（前立腺がん患者のために広く許容される薬剤）と比較して前立腺がんの治療において試験された。
【００７６】
ＰＣ−３細胞は、骨への転移を有する進行した前立腺がん患者由来の細胞株であり、前立腺小細胞がんのような前立腺がんの特徴を持つ。ＰＣ−３細胞は、段階的な濃度の薬剤（ＣＢＰ−ＮＭＰ、ドセタキセル、又はシスプラチン）で処理され、細胞生存性が、Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐ．（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ、米国）からのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６  ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙで評価された。細胞増殖抑制率の指数が、陰性対照に対する治療群のＯＤ４９０データを比較することによって得られた。薬剤反応率ＩＣ５０がＳＰＳＳ  １６．０システムで計算された。結果は、図１に示される。
【００７７】
ＣＢＰ−ＮＭＰは、ドセタキセルと比較するとＰＣ−３細胞の数を減少する優れた効果を示した。特に、ＣＢＰ−ＮＭＰのＩＣ５０は、１９．１４９μＭであったが、ドセタキセル及びシスプラチンのＩＣ５０は、それぞれ４９．９２４μＭ及び２．４８９μＭであった（図１）。
【００７８】
ＬＮＣａＰ細胞は、リンパ節転移を有する進行した前立腺がん患者由来の細胞株である。ＬＮＣａＰ細胞は、段階的な濃度の薬剤（ＣＢＰ−ＮＭＰ、ドセタキセル、又はシスプラチン）で処理され、細胞生存性が、Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐ．（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ、米国）からのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６  ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙで評価された。細胞増殖抑制率の指数が、陰性対照に対する治療群のＯＤ４９０データを比較することによって得られた。薬剤反応率ＩＣ５０がＳＰＳＳ  １６．０システムで計算された。結果は、図２に示される。
【００７９】
ＬＮＣａＰ細胞に対して、ＣＢＰ−ＮＭＰのＩＣ５０は、４３．２３４μＭであり、ドセタキセル及びシスプラチンのＩＣ５０は、それぞれ４．０３４μＭ及び２．２４５μＭであった（図２）。
【００８０】
ＨＬ−７００２細胞は、不死化ヒト胎児肝細胞株である。ＨＬ−７００２細胞は、段階的な濃度の薬剤（ＣＢＰ−ＮＭＰ、ドセタキセル、又はシスプラチン）で処理され、細胞生存性が、Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐ．（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ、米国）からのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６  ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙで評価された。細胞増殖抑制率の指数が、陰性対照に対する治療群のＯＤ４９０データを比較することによって得られた。薬剤反応率ＩＣ５０がＳＰＳＳ  １６．０システムで計算された。結果は、図３に示される。
【００８１】
ＨＬ−７００２細胞に対して、ＣＢＰ−ＮＭＰは、最小の毒性を持つことが検出された−同様の条件でドセタキセルの約１／２１６及びシスプラチンの約１／１０。ＣＢＰ−ＮＭＰのＩＣ５０は、２０．５１μＭであり、ドセタキセル及びシスプラチンのＩＣ５０は、それぞれ０．０９５μＭ及び２．００８μＭであった（図３）。
【００８２】
ＨＥＫ２９３細胞は、不死化ヒト胎児腎臓細胞株である。ＨＥＫ２９３細胞は、段階的な濃度の薬剤（ＣＢＰ−ＮＭＰ、ドセタキセル、又はシスプラチン）で処理され、細胞生存性が、Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐ．（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ、米国）からのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６  ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙで評価された。細胞増殖抑制率の指数が、陰性対照に対する治療群のＯＤ４９０データを比較することによって得られた。薬剤反応率ＩＣ５０がＳＰＳＳ  １６．０システムで計算された。結果は、図４に示される。
【００８３】
ＨＥＫ２９３細胞に対して、ＣＢＰ−ＮＭＰは、低いレベルの毒性を示した−同様の条件でドセタキセルの約１／３２及びシスプラチンの約１／８。ＣＢＰ−ＮＭＰのＩＣ５０の値は、５５．１１９μＭであり、一方、ドセタキセル及びシスプラチンのＩＣ５０は、それぞれ１．７４１μＭ及び６．８９９μＭであった（図４）。
【００８４】
方法及び手順：
細胞培養：前立腺がん細胞株ＬＮＣａＰ及びＰＣ−３は、ＡＴＣＣ（Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）から購入された。胎児肝細胞ＨＬ−７００２及びヒト胚腎臓細胞ＨＥＫ３９３は、ＡＴＣＣから購入された。細胞は、ＲＰＭＩ＋５％胎児ウシ血清（ＦＢＳ）で培養された。
【００８５】
薬剤治療及び細胞生存性（ＭＴＳ）分析：細胞（１０５／１００ｍＬ／ウエル）は、９６ウエルプレートで培養され、０．０１〜３００μＭの段階的な濃度で薬剤（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）で処理された。溶媒で処理された細胞は、陰性対照として使用され、シスプラチン及びドセタキセルは、陽性対照として使用された。細胞は、毎日監視され、細胞生存性は、製造者のマニュアルに従ってＰｒｏｍｅｇａ  ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６  ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ、米国）で評価された。細胞生存性は、バイオスペクトロメータ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｗａｌｔｈａｎ，ＭＡ、米国）で読むＯＤ４９０で監視された。
【００８６】
データ分析：ＯＤ４９０読み取りデータは、溶菌緩衝液の添加後の１時間から４時間で毎時間収集された。細胞増殖抑制率の指数が、陰性対照に対する治療群のＯＤ４９０データを比較することによって得られた。薬剤反応率ＩＣ５０がＳＰＳＳ  １６．０システムで計算された。
【００８７】
効果の概要：
ＰＣ−３（骨転移を有する進行した前立腺がん患者由来の細胞株）に対して、ＣＢＰ−ＮＭＰは、ドセタキセルより優れた細胞毒性を示したが、シスプラチンより弱かった。ＬＮＣａＰ（リンパ節転移を有する進行した前立腺がん患者由来の細胞株）に対して、ＣＢＰ−ＮＭＰの細胞毒性は、ドセタキセル及びシスプラチンより弱い。ＨＬ−７００２（不死化ヒト胎児肝細胞株）に対して、ＣＢＰ−ＮＭＰは、低いレベルの細胞毒性を有することが検出されたが、ドセタキセル及びシスプラチンよりずっと弱かった。ＨＥＫ２９３（不死化ヒト胎児腎臓細胞株）に対して、ＣＢＰ−ＮＭＰは、低いレベルの細胞毒性を有することが検出されたが、ドセタキセル及びシスプラチンよりずっと弱かった。
【００８８】
大腸がん細胞に対するＣＢＰ−ＮＭＰの効果
共結晶ＣＢＰ−ＮＭＰは、オキサリプラチン及びフルオロウラシル（５−ＦＵ）（大腸がん患者を治療する際に広く使用される薬剤）と比較して大腸がんの治療で試験された。
【００８９】
ＨＣＴ−１１６細胞は、大腸がん細胞株である。ＨＣＴ−１１６細胞は、段階的な濃度で薬剤（ＣＢＰ−ＮＭＰ，５−ＦＵ、又はオキサリプラチン）で処理され、細胞生存性は、Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐ．（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ、米国）からのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６  ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙで評価された。細胞増殖抑制率の指数が、陰性対照に対する治療群のＯＤ４９０データを比較することによって得られた。薬剤反応率ＩＣ５０がＳＰＳＳ  １６．０システムで計算された。結果は、図５に示される。
【００９０】
ＨＣＴ−１１６細胞に対して、ＣＢＰ−ＮＭＰによる細胞の数を減少する効果は、５−ＦＵ及びオキサリプラチンより強い。ＣＢＰ−ＮＭＰのＩＣ５０は、６２．０２６μＭであり、オキサリプラチン及び５−ＦＵのＩＣ５０は、それぞれ８．１５１μＭ及び４．２１４μＭであった（図５）。
【００９１】
ＨＴ２９細胞は、大腸がん細胞株である。ＨＴ２９細胞は、段階的な濃度で薬剤（ＣＢＰ−ＮＭＰ，５−ＦＵ、又はオキサリプラチン）で処理され、細胞生存性は、Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐ．（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ、米国）からのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６  ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙで評価された。細胞増殖抑制率の指数が、陰性対照に対する治療群のＯＤ４９０データを比較することによって得られた。薬剤反応率ＩＣ５０がＳＰＳＳ  １６．０システムで計算された。結果は、図６に示される。
【００９２】
ＨＴ２９細胞に対して、ＣＢＰ−ＮＭＰのＩＣ５０は、３６．０２６μＭであり、オキサリプラチン及び５−ＦＵのＩＣ５０は、それぞれ２９．９９３μＭ及び７．５５６μＭであった（図６）。
【００９３】
ＨＬ−７００２肝細胞株細胞は、段階的な濃度の薬剤（ＣＢＰ−ＮＭＰ，５−ＦＵ、又はシスプラチン）で処理され、細胞生存性は、Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐ．（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ、米国）からのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６  ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙで評価された。細胞増殖抑制率の指数が、陰性対照に対する治療群のＯＤ４９０データを比較することによって得られた。薬剤反応率ＩＣ５０がＳＰＳＳ  １６．０システムで計算された。結果は、図７に示される。
【００９４】
ＨＬ−７００２細胞に対して、ＣＢＰ−ＮＭＰの低レベルの毒性しか検出されなかった。同様の条件では、ＣＢＰ−ＮＭＰの毒性は、オキサリプラチンのそれの約１／５であり、５−ＦＵのそれの約１／８であった。ＣＢＣＢＰのＩＣ５０は、２０．５１μＭであり、オキサリプラチン及び５−ＦＵのＩＣ５０は、それぞれ２．４４μＭ及び４．４１８μＭであった（図７）。
【００９５】
ＨＥＫ２９３腎臓細胞株細胞は、段階的な濃度の薬剤（ＣＢＰ−ＮＭＰ，５−ＦＵ、又はオキサリプラチン）で処理され、細胞生存性は、Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐ．（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ、米国）からのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６  ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙで評価された。細胞増殖抑制率の指数が、陰性対照に対する治療群のＯＤ４９０データを比較することによって得られた。薬剤反応率ＩＣ５０がＳＰＳＳ  １６．０システムで計算された。結果は、図８に示される。
【００９６】
ＨＥＫ２９３に対して、ＣＢＰ−ＮＭＰの最小の毒性しか検出されなかった。同様の条件では、ＣＢＰ−ＮＭＰの毒性は、オキサリプラチンのそれの約１／９であり、５−ＦＵのそれの約１／５であった。ＣＢＰ−ＮＭＰのＩＣ５０は、５５．１１９μＭであり、オキサリプラチン及び５−ＦＵのＩＣ５０は、それぞれ１０．１３１μＭ及び３．７４４μＭであった（図８）。
【００９７】
方法及び手順：
細胞培養：大腸がん細胞株ＨＣＴ−１１６及びＨＴ−２９は、ＡＴＣＣ（Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）から購入された。胎児肝細胞ＨＬ−７００２及びヒト胚腎臓細胞ＨＥＫ３９３は、ＡＴＣＣから購入された。細胞は、ＲＰＭＩ＋５％胎児ウシ血清（ＦＢＳ）で培養された。
【００９８】
薬剤治療及び細胞生存性（ＭＴＳ）分析：細胞（１０５／１００ｍＬ／ウエル）は、９６ウエルプレートで培養され、０．０１〜３００μＭの段階的な濃度で薬剤（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）で処理された。溶媒で処理された細胞は、陰性対照として使用され、シスプラチン及びドセタキセルは、陽性対照として使用された。細胞は、毎日監視され、細胞生存性は、製造者の指示に従ってＰｒｏｍｅｇａ  ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６  ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ、米国）で評価された。細胞生存性は、バイオスペクトロメータ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｗａｌｔｈａｎ，ＭＡ、米国）で読むＯＤ４９０で監視された。
【００９９】
データ分析：ＯＤ４９０読み取りデータは、溶菌緩衝液の添加後の１時間から４時間で毎時間収集された。細胞増殖抑制率の指数が、陰性対照に対する治療群のＯＤ４９０データを比較することによって得られた。薬剤反応率ＩＣ５０がＳＰＳＳ  １６．０システムで計算された。
【０１００】
効果の概要：
大腸がん細胞株ＨＣＴ−１１６に対して、ＣＢＰ−ＮＭＰは、オキサリプラチン及び５−ＦＵより弱い毒性を示した。大腸がん細胞株ＨＴ−２９に対して、ＣＢＰ−ＮＭＰは、オキサリプラチンより少し弱い毒性を示し、５−ＦＵより弱い毒性を示した。ＨＬ−７００２（不死化ヒト胎児肝細胞株）に対して、ＣＢＰ−ＮＭＰは、低いレベルの毒性を有することが検出された。ＨＥＫ２９３（不死化ヒト胚腎臓細胞株）に対して、ＣＢＰ−ＮＭＰは、低いレベルの毒性を有することが検出された。
【０１０１】
共結晶を製造する方法
本発明の共結晶は、共結晶形成体としてのカルボプラチン及び環状アミドから形成された。包括的な共結晶スクリーニングは、スラリー／攪拌、加熱及び冷却、回転式蒸発、凍結乾燥、冷却、及び蒸発によって実施された。
【０１０２】
本発明の一つの共結晶（ＣＢＰ−ＮＭＰ）は、まずジシクロプラチン（ＤＣＰ）、カルボプラチン（ＣＢＰ）と１，１−シクロブタンジカルボキシレート（ＣＢＤＣＡ）から構成される超分子、及びＮ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）の混合物から見出された。Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）、熱重量分析（ＴＧＡ）、及び示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって、ＮＭＰ溶液中のＤＣＰから形成された共結晶（８０４６０９−３８−Ａ９）が新しい結晶であることが決定され、新しく形成された共結晶がカルボプラチン（ＣＢＰ）とＮＭＰの１：１のモル比の共結晶であることが確認された。
【０１０３】
ＮＭＰ溶液におけるＤＣＰから作られた新しい結晶（８０４６０９−３８−Ａ９）がＮＭＰにおけるカルボプラチンから作られた同じ共結晶（８０４６０９−４４−Ｂ）であることが後で確認された（図９）。特に、５１５ｍｇのカルボプラチンと４ｍＬのＮ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）の混合物は、約２０℃で５時間攪拌された。次いで、反応は、０〜５℃に冷却され、５時間にわたって攪拌された。得られた粗結晶は、濾過によって得られ、予備冷却されたエタノール及びヘプタンによって洗浄された。真空で乾燥された後、５０７ｍｇの純結晶（ＣＢＰ−ＮＭＰ）が得られた。それは、高性能液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）、ＭＳ，１Ｈ−ＮＭＲ，ＸＲＰＤ，ＤＳＣ、及び単結晶Ｘ線特性決定によって分析された。特性決定は、この共結晶構造においてカルボプラチンとＮ−メチル−２−ピロリドンの１：１の比を示した。
【０１０４】
ＣＢＰ−ＮＭＰ構造は、ＸＲＰＤ（図１０）、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）（図１１）、プロトン核磁気共鳴（１Ｈ−ＮＭＲ）（図１２）、及び走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）（図１５〜１７）によって特徴づけられた。図１０の８０４６０９−４４−ＢのＸＲＰＤパターンに示されるように、ＣＢＰ−ＮＭＰ共結晶の一つの形態は、形態Ａとして言及されることができる。
【０１０５】
ＣＢＰ−ＮＭＰが異なる温度で徐々に加熱されたとき、ＣＢＰ−ＮＭＰは、２１０℃でカルボプラチンに変換されることを発見した（図１３）。ＮＭＰは、この点で共結晶ＣＢＰ−ＮＭＰから除去された。さらに、ＣＢＰ−ＮＭＰを２１０℃に加熱することから形成された試料の１Ｈ−ＮＭＲの特徴づけは、変化を確認した（図１４）。
【０１０６】
多数の他の共結晶もまた、得られた。
【０１０７】
５１５ｍｇのカルボプラチン、４．２ｍＬの１−ブチルピロリジン−２−オン、及び３．０ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２の混合物を約２０℃で５時間攪拌する。次いで、反応物を０〜５℃に冷却し、５時間にわたって攪拌する。得られた粗結晶は、濾過によって得られ、予め冷却されたＣＨ２Ｃｌ２及びヘプタンによって洗浄される。真空で乾燥された後、４４３ｍｇの純結晶が得られる。それは、ＨＰＬＣ，ＭＳ、及び１Ｈ−ＮＭＲによって分析される。特性決定は、この共結晶構造においてカルボプラチンと１−ブチルピロリジン−２−オンの１：１の比を示した。
【０１０８】
５５０ｍｇのカルボプラチン、３．５ｇの１，５−ジメチル−２−ピロリジン、及び６．０ｍＬの蒸留水の混合物を約２０℃で５時間攪拌する。次いで、１５ｍＬの蒸留水を加え、混合物を溶解する。得られた溶液を０．４５μｍフィルターを通して濾過し、溶液を段階的に冷却することによって乾燥する。冷却乾燥後、得られた粗結晶をエタノール及びヘプタンで処理し、４１５ｍｇの純結晶を得る。それは、ＨＰＬＣ，ＭＳ、及び１Ｈ−ＮＭＲによって分析される。特性決定は、この共結晶構造においてカルボプラチンと１，５−ジメチル−２−ピロリジンの１：１の比を示した。
【０１０９】
５１５ｍｇのカルボプラチン、３．１ｇの１−ベンジルピペリジン−２，４−ジオン、及び３．０ｍＬのトルエンの混合物を約２０℃で５時間攪拌する。次いで、反応物を０〜５℃に冷却し、５時間にわたり攪拌する。得られた粗結晶は、濾過によって得られ、予め冷却されたトルエン及びヘプタンによって洗浄される。真空乾燥後、４７８ｍｇの純結晶が得られる。それは、ＨＰＬＣ，ＭＳ、及び１Ｈ−ＮＭＲによって分析される。特性決定は、この共結晶構造においてカルボプラチンと１−ベンジルピペリジン−２，４−ジオンの１：１の比を示した。
【０１１０】
５１５ｍｇのカルボプラチン及び４ｍＬの１−ビニル−２−ピロリドンの混合物を約２０℃で５時間攪拌する。次いで、反応物を０〜５℃に冷却し、５時間にわたり攪拌する。得られた粗結晶は、濾過によって得られ、予め冷却されたエタノール及びヘプタンによって洗浄される。真空乾燥後、５０７ｍｇの純結晶が得られる。それは、ＨＰＬＣ，ＭＳ、及び１Ｈ−ＮＭＲによって分析される。特性決定は、この共結晶構造においてカルボプラチンと１−ビニル−２−ピロリドンの１：１の比を示した。
【０１１１】
５１５ｍｇのカルボプラチン、８１０ｍｇのＮ−ビニル−ε−カプロラクタム、及び３．０ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２の混合物を約２０℃で５時間攪拌する。次いで、反応物を０〜５℃に冷却し、５時間にわたって攪拌する。得られた粗結晶は、濾過によって得られ、予め冷却されたＣＨ２Ｃｌ２及びヘプタンによって洗浄される。真空乾燥後、５２２ｍｇの純結晶が得られる。それは、ＨＰＬＣ，ＭＳ、及び１Ｈ−ＮＭＲによって分析される。特性決定は、この共結晶構造においてカルボプラチンとＮ−ビニル−ε−カプロラクタムの１：１の比を示した。
【０１１２】
５１５ｍｇのカルボプラチン、１．２ｇのＮ−メチル−ε−カプロラクタム、及び３．０ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２の混合物を約２０℃で５時間攪拌する。次いで、反応物を０〜５℃に冷却し、５時間にわたって攪拌する。得られた粗結晶は、濾過によって得られ、予め冷却されたＣＨ２Ｃｌ２及びヘプタンによって洗浄される。真空乾燥後、４８８ｍｇの純結晶が得られる。それは、ＨＰＬＣ，ＭＳ、及び１Ｈ−ＮＭＲによって分析される。特性決定は、この共結晶構造においてカルボプラチンとＮ−メチル−ε−カプロラクタムの１：１の比を示した。
【０１１３】
５１５ｍｇのカルボプラチン、２．５ｇのラウロカプラム、及び５．０ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２の混合物を約２０℃で５時間攪拌する。次いで、混合された反応物を濃縮し、０〜５℃に冷却し、１０ｍＬのヘプタンを加え、５時間にわたって攪拌する。得られた粗結晶は、濾過によって得られ、予め冷却されたＣＨ２Ｃｌ２及びヘプタンによって洗浄される。真空乾燥後、５５３ｍｇの純結晶が得られる。それは、ＨＰＬＣ，ＭＳ、及び１Ｈ−ＮＭＲによって分析される。特性決定は、この共結晶構造においてカルボプラチンとラウロカプラムの１：１の比を示した。
【０１１４】
分析方法
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）：偏光顕微鏡写真は、室温（ＲＴ）で撮影された。Ｘ線強度データは、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＰＥＸ  ＩＩ  ＣＣＤ回折計（ＭｏＫα放射線、λ＝０．７１０７３Å）を使用して２９６（２）Ｋで収集された。ＸＲＰＤパターンは、ＲＴでＰａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｅｍｐｙｒｅａｎシステムによって収集された。Ｆ２に対して直接法構造解、差分フーリエ計算、及び完全行列最小二乗精密化が、ＳＨＥＬＸＴＬ及びＯＬＥＸ２で実施された（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ  ＧＭ．，Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  Ａ，６４：１１２−１２２，２００８；及びＯ．Ｖ．Ｄｏｌｏｍａｎｏｖら，Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｃｒｙｓｔ．４２，３３９−３４１，２００９；及びＢｒａｎｄｅｎｂｕｒｇ，Ｋ．ＤＩＡＭＯＮＤ，１９９９，Ｃｒｙｓｔａｌ  Ｉｍｐａｃｔ  ＧｂＲ，Ｂｏｎｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ参照）。分子グラフィックスは、Ｂｒａｎｄｅｎｂｕｒｇ，Ｋ．ＤＩＡＭＯＮＤ，１９９９，Ｃｒｙｓｔａｌ  Ｉｍｐａｃｔ  ＧｂＲ，Ｂｏｎｎ，ドイツに従って作られた。
【０１１５】
分析機器：Ｐａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｅｍｐｙｒｅａｎ。Ｘ線粉末回折は、結晶材料の試料をＳｉ単結晶低バックグラウンドホルダー上に装着して、顕微鏡スライドの助けを借りて試料を薄層に広げることによって行なわれた。２θ位置は、Ｐａｎａｌｙｔｉｃａｌ  ６４０  Ｓｉ粉末標準に対して校正された。４５ｋＶ及び４０ｍＡで作動する銅の長精密焦点管によって生成されたＸ線で試料は照射された。Ｋα１の波長は１．５４０５８９オングストロームであり、Ｋα２の波長は、１．５４４４２６オングストロームであった（Ｋα２／Ｋα１の強度比は、０．５０）。視準されたＸ線源は、プログラムされた１０ｍｍの発散スリットの組を通過させられ、反射された放射線は、５．５ｍｍの散乱防止スリットを通して指向された。試料は、シータ−シータモードで３°〜４０°の２シータの範囲にわたって０．０１３°の２シータ増分あたり１６．３秒間露光された（連続走査モード）。作動時間は、３分５７秒であった。機器は、ＲＴＭＳ検出器（Ｘ′Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ）を備えていた。制御及びデータ取得は、データ収集ソフトウェアを使用して作動するＤｅｌｌ  Ｏｐｔｉｐｌｅｘ  ７８０  ＸＰによって行なわれた。
【０１１６】
Ｘ線粉末回折の業界の熟練者は、ピークの相対強度が、例えば３０ミクロンより上の大きさの粒子によって影響を受けることがあること、及び非一元アスペクト比は、試料の分析に影響を与えることがあることを認識するだろう。また、Ｘ線粉末回折の業界の熟練者は、反射の位置が、試料が回折計中に位置する正確な高さ、及び回折計のゼロ校正によって影響を受けることがあることも認識するだろう。試料の表面平滑性も、限定された影響を有することがある。従って、示される回折パターンのデータは、絶対値に限定されることを意図されない。
【０１１７】
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）
ＤＳＣは、試料の温度を上昇させるために必要な熱の量の差を測定するための熱分析方法として使用された。参照は、温度の関数として測定された。ＤＳＣの一般的なプロセスは、公知である。以下の実施例で使用された特定の機器及び条件は、以下の通りである：
分析機器：ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｑ２０００  ＤＳＣ；
加熱速度：１０℃／分；及び
パージガス：窒素。
【０１１８】
熱重量分析（ＴＧＡ）
ＴＧＡは、（一定の加熱速度での）上昇する温度の関数としての、又は（一定の温度及び／又は一定の質量損失での）時間の関数としての、試料の物理的及び化学的特性の変化を測定するために使用された。ＴＧＡの一般的なプロセスは、公知である。以下の実施例で使用された特定の機器及び条件は、以下の通りである：
分析機器：ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｑ５０００  ＴＧＡ；
加熱速度：１０℃／分；及び
パージガス：窒素。
【０１１９】
共結晶を含む試料医薬組成物及びその投与
本発明の水性又は固体医薬組成物は、少なくとも一種の追加の治療薬又はアジュバント療法薬の適切な量を有して又は有さずに、有効量の本発明の共結晶（例えばＣＢＰ−ＮＭＰ）を含む。共結晶、並びに治療薬又はアジュバント療法薬は、医薬的に許容可能な担体又は水性媒体中に溶解又は分散されることができる。
【０１２０】
治療される特定のがんに依存して、本発明による医薬組成物の投与は、ターゲット組織に経路を介して到達できる限りいかなる一般的な経路を介することができる。例えば、医薬組成物は、点滴、注射、又は経口経路によって投与されることができる。
【０１２１】
多数の医薬組成物が製造された：
医薬組成物試料Ａ：７０ｇのＣＢＰ−ＮＭＰを予め処理された生理食塩水又は５％の水性グルコース（水中）に溶解し、溶液の最終体積を５．０Ｌに調整した。次いで、溶液を０．２２μｍフィルターで濾過し、アンプル瓶にそれぞれ５０ｍＬで分散した。
【０１２２】
医薬組成物試料Ｂ：７０ｇのＣＢＰ−ＮＭＰ及び２０ｇのグルタチオン（ＧＳＨ）を予め処理された生理食塩水又は５％の水性グルコース（水中）に溶解し、溶液の最終体積を５．０Ｌに調整した。次いで、溶液を０．２２μｍフィルターで濾過し、アンプル瓶にそれぞれ５０ｍＬで分散した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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