(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
【化１】
0006789288.tif 000013
である化合物。
【請求項２】
結晶形態である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
治療上有効な量の請求項１または請求項２に記載の化合物と、薬学上許容可能な賦形剤とを含んでなる、医薬組成物。
【請求項４】
経口投与のための、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
抗ＳＡＰ抗体の１以上の投与形と、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物または医薬組成物の１以上の投与形とを含んでなる、パーツのキット。
【請求項６】
請求項１または２に記載の化合物を含んでなる、医薬組成物。
【請求項７】
ＳＡＰ枯渇において使用するための、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の処置において使用するための、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記疾患または障害が、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択される、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記疾患または障害がアミロイドーシスである、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記疾患または障害が全身性アミロイドーシスである、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
抗ＳＡＰ抗体と組み合わせて用いるための、請求項１０または１１に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、化合物（（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボニル）オキシ）メチル）  １，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）、それを含んでなる医薬組成物、および血清アミロイドＰ成分(serum amyloid P component)（ＳＡＰ）の枯渇が有益である疾患または障害の処置のためのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
血清アミロイドＰ成分（ＳＡＰ）は、もっぱら肝臓により産生される、正常な、構造上一様の、可溶性、非線維性の構成血漿糖タンパク質であり、分子量は１２７，３１０Ｄａである。ＳＡＰは、円盤様構造の環状五量体シンメトリーと非共有結合的に会合した５つの同一の２５，４６２Ｄａプロトマーから構成される。各サブユニットは、β鎖を連結する強固に係留されたループを有する平坦なβ−ゼリーロールから構成され、無傷の五量体の平面のＢ（結合）面に単一のカルシウム依存性リガンド結合部位を含有する。ＳＡＰは全てのタイプのアミロイド原線維と、多価相互作用によって付与される高いアビディティで結合する。この厳密にカルシウム依存性の相互作用が、総てのタイプの総てのヒトアミロイド沈着物におけるヒトＳＡＰの普遍的存在、ゆえにそのタンパク質の名称の要因であり、ここで、Ｐは、アミロイドのこの成分の供給源である血漿を表す。特定のリガンドに対する特定のカルシウムに依存的な結合に関するその能力に加え、ヒトＳＡＰの重要な特性は、そのタンパク質自体がタンパク質分解に対して本質的に耐性があるということである。アミロイド原線維に対するその旺盛な結合は、相互に安定化し、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいてタンパク質分解および貪食分解から原線維を強く保護し１、ならびにｉｎ  ｖｉｖｏにおいてアミロイドの持続に有意に寄与している２。これらの所見は、アミロイドーシスにおける治療標的としてのＳＡＰの妥当性の確認を基礎とする（MB Pepys & TL Blundell、米国特許第６１２６９１８号、２０００年１０月３日）。さらに、ＳＡＰと新生アミロイド原線維の結合は、アミロイド原線維形成を強く促進する３−５。欧州特許出願ＥＰ０９１５０８８には、ＳＡＰとアミロイド原線維の結合の競合的阻害剤である化合物、ならびにそれらの製造のための方法が開示されている。本明細書に開示される化合物の１つは、（Ｒ）−１−［６−［（Ｒ）−２−カルボキシ−ピロリジン−１−イル］−６−オキソ−ヘキサノイル］ピロリジン−２−カルボン酸（ＣＰＨＰＣ）である。
【０００３】
ＳＡＰのこれらのパリンドローム二価リガンドの投与は、ＷＯ２００３／０１３５０８、米国特許第７，０４５，４９９号；米国特許第７，６９１，８９７号；および米国特許第８，１７３，６９４号に記載されるように、化合物が投与される限り、循環からのＳＡＰの急速かつほぼ完全な枯渇を招く６，７。この処置はまた、アミロイド沈着物に関連するＳＡＰの量を低減するが、総てのＳＡＰを除くわけではない７。
【０００４】
アミロイドは、豊富なプロテオグリカンおよびグリコサミノグリカンとともに、主として特徴的なタンパク質原線維からなる異常な不溶性の細胞外沈着物である８。約２５の異なる無関連の、本来可溶性の、球状タンパク質が種々のタイプの全身性アミロイドーシスを引き起こすアミロイド原線維を形成するが、総てのアミロイド原線維が極めてよく似た形態および同じ交差βコア構造を有する。この構造は、アミロイドのゴールドスタンダーの診断基準である強い交差偏光における特徴的な赤緑複屈折を作り出すコンゴレッド色素分子の配向アレイと結合する。アミロイド沈着物中には特定の可溶性、非原線維性血漿タンパク質も存在し得るが、総てのタイプのアミロイド原線維へのその旺盛な特異的カルシウム依存性結合のために、唯一、血清アミロイドＰ成分（ＳＡＰ）が総てのヒトアミロイド沈着物に普遍的である。
【０００５】
アミロイド沈着物は、影響を受けた組織および器官の構造および機能を破壊し、重度の疾患であるアミロイドーシスを引き起こす。全身性アミロイドーシスは、体中の結合組織および血管壁ならびに主要器官の実質に存在し得るが脳質それ自体には決して存在しないアミロイド沈着物により引き起こされる稀で致命的病態である。限局性アミロイドーシスでは、アミロイド沈着物は、単一の解剖学的位置または単一の器官／組織系に制限される。
【０００６】
脳血管壁に限局されるアミロイド沈着を伴う脳アミロイドアンギオパチーは、限局性アミロイドーシスの最も一般的かつ重要な形態である。脳アミロイドアンギオパチーは、認知症アルツハイマー病患者と非認知症の個人の両方で、実質的割合の脳内出血の原因であり、従って、それ自体、認知症の原因である。
【０００７】
全身性アミロイドーシス患者のＣＰＨＰＣでの処置は、この薬物が投与される限り、循環ＳＡＰのほぼ完全な枯渇をもたらしたが、アミロイド沈着物に結合したＳＡＰを総て除去するわけではなかった７。これらの患者は、処置されている間は臨床上安定に留まり、新たなアミロイド蓄積はなく、それらの器官の機能は維持されたが、おそらくはアミロイド結合ＳＡＰの完全な除去ができないために、アミロイドの退縮は全く見られなかった。組織中のアミロイド沈着物が疾患の直接的原因であるので、それらが排除されるべきことが極めて望ましい。このまだ満たされていない重要な医学的必要が、アミロイド沈着物に結合したＳＡＰが抗ヒトＳＡＰ抗体の標的として使用されるアミロイドーシスの処置のための新規アプローチの発明に至った。このような抗体は血漿中のＳＡＰと結合して組織傷害性の免疫複合体を形成し、これらの抗体はこの過程で消費されてそれらをアミロイド中のＳＡＰとの結合に利用不能とするので、これらの抗体は正常なＳＡＰ循環濃度を有する患者には安全にまたは効果的に投与することはできなかった。しかしながら、ＣＰＨＰＣの事前投与は循環からＳＡＰを枯渇させ、その結果、抗ＳＡＰ抗体は安全に注入でき、アミロイド沈着物内に残った残留ＳＡＰと結合するために利用可能なままとなり得る。これらの抗体とアミロイド会合ＳＡＰとの結合は補体系を活性化し、マクロファージに貪食させ、アミロイド沈着物を破壊し、臨床利益につながる。
【０００８】
国際特許出願ＷＯ２００９／０００９２６は、アミロイドーシスの潜在的処置のための、ＳＡＰに特異的な抗体と併用投与される、循環からＳＡＰを枯渇させる化合物の使用を開示している。
【０００９】
国際特許出願ＷＯ２００９／１５５９６２は、マウスモノクローナル抗体Ａｂｐ１を開示し、アミロイドーシスの処置における潜在的使用のための、循環からＳＡＰを枯渇させる化合物と併用投与され得る種々のマウスモノクローナル抗体に関する結合および有効性データを提供している。
【００１０】
国際特許出願ＷＯ２０１１／１０７４８０は、ＳＡＰに特異的な抗原結合タンパク質、特に、ヒト化抗体、およびアミロイド沈着に関連する疾患の処置におけるそれらの潜在的使用を開示している。
【００１１】
組織構造および機能を破壊する細胞外アミロイド沈着によって明確に直接引き起こされるアミロイドーシスの稀な臨床病態に加え、アミロイド沈着物はまた、２つの極めて一般的な重要疾患であるアルツハイマー病および２型糖尿病にも存在する。これら後者の疾患では、アミロイド沈着物は顕微鏡的であり、それぞれ脳およびランゲルハンス島に限局され、それらがそれぞれ神経変性および糖尿病の病因に寄与しているかどうか、またはどのように寄与しているかは知られていない。従って、アルツハイマー病および２型糖尿病はアミロイドーシスの形態としては分類不能であるが、アミロイド関連疾患と見なされるべきである。しかしながらやはり、アミロイド沈着物はそれらに常に存在し、それらの沈着物もまた常にＳＡＰを含有する１５−１９。アルツハイマー病の脳もまた、神経原線維錯綜として知られる、別のタイプの異常な不溶性原線維タンパク質凝集塊を含有し、ＳＡＰが、それがアミロイドに結合するのと同様にこれらに旺盛に結合している１５−１９。ＳＡＰを保持する、アミロイドではなく神経原線維錯綜が、前頭側頭骨認知症を含む他のタイプの認知症の脳に存在する。
【００１２】
アミロイドーシスにおけるその役割に加え、それとは全く独立に、ヒトＳＡＰは大脳ニューロンに結合して侵入し、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏでニューロンのアポトーシスを引き起こす９−１３。ユニークな製薬等級の純粋ヒトＳＡＰ１４はシナプス伝達を混乱させ、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ器官型齧歯類脳切片において異常なペアパルス比(paired pulse ratio)および長期増強を引き起こすことが示されている。
【００１３】
従って、ヒトＳＡＰの大脳神経毒性は、ヒトにおいておそらく神経変性に寄与する９−１２, ２０。認知症の一般的なリスク因子のほとんどが脳のＳＡＰ暴露を増すという事実はこの概念と一致する。よって、重要なリスク因子である年齢は、加齢している脳の、通常のＳＡＰ濃度への長期暴露に関連し、一方、非穿通性頭部外傷および脳出血の主要なリスク因子は、脳に血液を流入させ、急激に脳のＳＡＰ含量を高める。アルツハイマー病では、ＳＡＰの脳含量は、アミロイド沈着物および神経原線維錯綜へのその結合のために異常に高い１５−１９。アミロイド沈着物ではなく神経原線維錯綜を伴う他の認知症の場合でもおそらくそうである。重要なこととしては、剖検時にプラークおよび錯綜が共存するまたはしない場合で、死亡時に認知機能が保たれていた高齢者よりも認知症アルツハイマー病患者でより高い脳ＳＡＰ含量が報告されている２０。脳のＳＡＰ含量と認知症の間の有意な正の相関２０は、ＳＡＰの原因としての役割と一致する。
【００１４】
脳脊髄液中のおよび脳内アミロイド沈着物および神経原線維錯綜に結合したＳＡＰの量は、それぞれ全身性細胞外液中の量および全身性アミロイド沈着物上の量よりも劇的に少ない。アルツハイマー病患者において、通常の２０〜５０ｍｇ／Ｌから＜０．１ｍｇ／Ｌへの、ＣＰＨＰＣによる血漿ＳＡＰの枯渇は、ＣＳＦ  ＳＡＰ濃度を２〜３０μｇ／Ｌから＜０．１μｇ／Ｌへ低下させる２１。ヒトＳＡＰは肝臓によってのみ産生され、血液を介して脳に届く２２。従って、ＣＰＨＰＣ処置は脳脊髄液から事実上総てのＳＡＰを除去し、ＳＡＰ結合は完全に可逆的であるので、脳内アミロイド沈着物および神経原線維錯綜からもそれを除去する。さらに、アルツハイマー病患者では、ＣＰＨＰＣは脳脊髄液に入り２１、そこでそれは遊離のＳＡＰの、アミロイド原線維、神経原線維錯綜および大脳ニューロンへの結合も遮断することができる。総てのアミロイド原線維タイプがｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいてプロテアーゼおよび貪食細胞によって分解され得１、全身性アミロイド沈着物は、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、それらの個々の原線維前駆体タンパク質の存在量が十分に低下されていると自発的にゆっくり退縮する８。従って、アミロイドクリアランスの機構はｉｎ  ｖｉｖｏにおいて機能する。ヒトＳＡＰが、そのアミロイドとの結合には依存せずにそれ自体で神経細胞傷害性がある９−１３という確証は、ＳＡＰ枯渇の潜在的、付加的な直接的利益を実証する。
【００１５】
総ての血漿タンパク質はｉｎ  ｖｉｖｏにおいて罹患または損傷関節に入るが、様々な異なる関節症を有する患者では、臨床上検出可能な滲出を示さなかった一部の関節への放射性標識ＳＡＰの取り込みが見られた。さらに、滑膜滲出液中のＳＡＰの濃度は、ＳＡＰの分子サイズから予測されるものよりも実質的に低く、シンチグラフィー的に可視化したＳＡＰは溶液中で遊離状態ではなく、実際には関節内の固形構造に結合していたことを示す。高齢者の関節軟骨および／または関節包は、骨関節炎の範囲または重篤度よりもむしろ年齢に関連した顕微鏡的アミロイド沈着物を含有する場合が多く、これらの沈着物はＳＡＰの限局性を説明し得る。ＳＡＰはまた、ｉｎ  ｖｉｖｏならびにｉｎ  ｖｉｔｒｏで、露出したＤＮＡおよびクロマチン、またアポトーシス細胞に旺盛に結合する。従って、骨関節炎の関節における細胞死の増加はＳＡＰ沈着の配位子を提供し得る。ＷＯ２００４／１０８１３１は、骨関節炎症状の緩和をもたらすＣＰＨＰＣ（（Ｒ）−１−［６−［（Ｒ）−２−カルボキシ−ピロリジン−１−イル］−６−オキソ−ヘキサノイル］ピロリジン−２−カルボン酸）の注射による骨関節炎患者の処置を開示している。
【００１６】
ヒトＳＡＰは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏの両方で、あらゆる形態の遊離ＤＮＡに、またクロマチンにも旺盛に結合する。実際に、ＳＡＰは、カルシウム依存性相互作用でＤＮＡと特異的に結合する唯一の正常ヒト血漿タンパク質である２３，２４。これに対して、マウスおよびウマを含むいくつかの他種に由来するＳＡＰは、たとえ結合するにしてもＤＮＡには弱く結合するだけで、イヌおよびウサギはＳＡＰ遺伝子を持ってさえおらず、従ってＳＡＰを産生しない。免疫誘導が免疫原自体の注射によるのではなく免疫原をコードするＤＮＡの注射によって達成されるＤＮＡワクチン接種が、感染に対する防御免疫の誘導のための極めて望ましいアプローチとして、また、癌における潜在的免疫療法的介入として鋭意検討されている。しかしながら、ＤＮＡワクチン接種はマウス、イヌ、ウサギおよびウマにおいては有効であるものの、ヒト、また、ヒトと同様にＤＮＡに旺盛に結合するＳＡＰを有するウシでも、一貫して失敗してきた。ＤＮＡワクチン接種が機能する種では、ＳＡＰはＤＮＡに結合しないかまたは存在しない。さらに、ヒトＳＡＰのトランスジェニック発現を伴うマウスでの、それを枯渇させるためのＣＰＨＰＣを用いた実験により、ヒトＳＡＰの存在がＤＮＡワクチン接種の有効性を妨げることが確認される２５，２６。
【００１７】
ＳＡＰはいくつかの細菌種に結合するが、他には結合しない。ＳＡＰが結合する病原性細菌については、ＳＡＰはｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏにおいて有力な抗オプソニン効果を有し、貪食作用を低下させ、その生物を死に至らせ、従って、宿主の自然免疫系からそれらを保護する２７。感染力および毒性を増進するこの効果は、ＳＡＰの細菌への結合を阻害するためのＣＰＨＰＣの投与によって排除される２７。ＳＡＰはまた、侵襲性カンジダ症患者の組織の真菌細胞の表面に結合して存在する２８。この結合は、病原性生物の表面における、真菌タンパク質から形成されるアミロイド原線維の存在を反映している２８。
【００１８】
ＣＰＨＰＣは薬理学的に有効であるが、その経口バイオアベイラビリティは約３〜５％と極めて低くかつ変動し、従って、静注または皮下注射による非経口投与のみが所望のＳＡＰ枯渇を達成するために最適である。しかしながら、治療的ＳＡＰ枯渇に対する既存の、また潜在的な適応のほとんどは長期投与を要する。長期静脈内投与は実用的ではない。長期皮下投与は実現可能ではあるが、注射は針で刺す不快感を生じ得るので、忍容されない患者もいる７。
【００１９】
ＷＯ２００３／０５１８３６は、ＳＡＰ枯渇が有益な効果を持つ疾患の処置に有用なＤ−プロリンプロドラッグを開示している。そこに開示されている２５の例は主として油状物として得られたものであり、そのうち５つだけが固体であった。欧州特許庁での手続きにおいて、ＷＯ２００３／０５１８３６に対する欧州均等物に対する分割出願が、（Ｒ）−１−（６−｛（Ｒ）−２−［１−（２，２−ジメチル−プロピオニルオキシ）−エトキシカルボニル］−ピロリジン−１−イル｝−６−オキソ−ヘキサノイル）−ピロリジン−２−カルボン酸  １−（２，２−ジメチル−プロピオニルオキシ）−エチルエステルに対するクレームを伴って出願された。本出願の出願時に、グラクソスミスクライングループ社（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｉｍｉｔｅｄ）は、ＥＰ０９１５０８８およびＷＯ２００３／０５１８３６、ならびにそれらの対応する出願に対するライセンスを含む、Ｐｅｎｔｒａｘｉｎ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  Ｌｉｍｉｔｅｄ社とライセンスおよび研究提携を結んでいる。
【００２０】
医薬開発に好適な物理化学的特性を有しつつ、経口投与後に十分にＳＡＰを枯渇させ得る量でＣＰＨＰＣを生成できる化合物の必要がある。
【発明の概要】
【００２１】
驚くべきことに、式（Ｉ）の化合物（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボニル）オキシ）メチル）  １，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）は医薬開発に好適な物理化学的特性を有し、かつ、経口投与後に十分にＳＡＰを枯渇させ得る量でＣＰＨＰＣを生成できることが見出された。
【００２２】
よって、第１の態様において、本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
0006789288.tif 000002
に従う、化合物（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボニル）オキシ）メチル）  １，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）を提供する。
【００２３】
式（Ｉ）の化合物は、以下「本発明の化合物」とも呼ばれる。
【００２４】
本発明の化合物は、良好な物理化学的特性を呈し、かつ、経口投与後に十分にＳＡＰを枯渇させ得る量でＣＰＨＰＣを生成することができる。
【００２５】
式（Ｉ）の化合物は良好なｐＨ溶液安定性および腸ミクロソーム安定性、ならびに低い肝ミクロソーム安定性を有し、容易にＣＰＨＰＣを生成し、式（Ｉ）の化合物は、ヒトにおいて経口投与した際に循環レベルのＣＰＨＰＣを容易に生成することが示唆される。また、式（Ｉ）の化合物は、シトクロムｐ４５０とのいずれの相互作用も示さず、式（Ｉ）の化合物はＣＹＰ４５０により媒介される薬物−薬物相互作用(drug-drug interactions)（ＤＤＩ）を示さないことが示唆される。加えて、式（Ｉ）の化合物は高結晶性であり、このことは有効物質の調剤および医薬製剤製造の生存に関して有利である。
【００２６】
この特性を有する化合物の使用は、ＳＡＰの枯渇（血清アミロイドＰ成分）が有益である疾患または障害、例えば、アミロイドーシス（全身性アミロイドーシスおよび限局性アミロイドーシスを含む）、アルツハイマー病、ＩＩ型糖尿病、骨関節炎、細菌感染、侵襲性カンジダ症(invasive candidiasis)およびその他の真菌感染の処置において、ＤＮＡワクチンの投与と組み合わせて優位性をもたらし得る。
【００２７】
さらなる態様において、本発明は、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物と１種類以上の薬学上許容可能な担体とを含んでなる医薬組成物を提供する。
【００２８】
さらなる態様では、被験体における循環ＳＡＰの枯渇のための式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物が提供される。
【００２９】
さらなる態様では、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の処置において使用するための式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物が提供される。
【００３０】
さらなる態様では、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の処置方法が提供される。
【００３１】
さらなる態様では、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物の使用が提供される。
【００３２】
さらなる態様では、抗ＳＡＰ抗体（特に、ＷＯ２０１１／１０７４８０に開示されている抗体）の１以上の投与形と式（Ｉ）の化合物の１以上の投与形とを含んでなるパーツのキットが提供される。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】図１：式（Ｉ）の化合物のＩ型のＸＲＰＤスペクトル。
【図２】図２：ｐＨ６、７、７．５および８のリン酸緩衝生理食塩水中での式（Ｉ）の化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏ物理的加水分解。
【図３】図３：ヒトミクロソーム中での式（Ｉ）の化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏ腸ミクロソーム安定性。「０／３／６／１２／３０分」は、分析のためにサンプルが混合物から採取された時間（分）を意味する。
【図４】図４：ヒト血液中での式（Ｉ）の化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏ血液安定性。「０／５／１０／３０／６０分」は、分析のためにサンプルが混合物から採取された時間（分）を意味する。
【図５】図５：ヒト肝ミクロソーム中での式（Ｉ）の化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏ肝ミクロソーム安定性。「０／３／６／１２／３０分」は、分析のためにサンプルが混合物から採取された時間（分）を意味する。
【発明の具体的説明】
【００３４】
定義
以下の用語は、それとともに以下に示される意味を有するものとし、本発明の説明および範囲を理解する上で有用である。
【００３５】
「薬学上許容可能な」とは、米国連邦政府の規制当局または米国以外の諸国の対応する部局（例えば、ＥＭＡ、欧州医薬品庁）によって承認もしくは認可されていること、または米国薬局方または欧州薬局方（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）に列挙されていることを意味する。
【００３６】
「治療上有効な量」とは、疾患または障害を処置するために被験体に投与された際に、その疾患に対してそのような処置を果たすために十分な化合物の量を意味する。
【００３７】
用語「抗体」は、免疫グロブリン様ドメインを有する分子を意味して最も広い意味で使用され、モノクローナル抗体、組換え抗体、ポリクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、二重特異性抗体および異種コンジュゲート抗体、ならびに抗原結合フラグメントを含む。本発明による抗体はヒト補体系を活性化し、かつ／またはアミロイド沈着物の退縮をもたらす。
【００３８】
「処置」という場合には急性処置もしくは予防および確立された症状の緩和、ならびに／または疾患もしくは障害の進行の遅延を含み、無症候患者における症状再発の抑制を含み得ることが認識されるであろう。
【００３９】
「抗体」に関する用語「抗ＳＡＰ」、すなわち、「抗ＳＡＰ抗体」は、Ｃ反応性タンパク質(C-reactive protein)（ＣＲＰ）などの近縁分子を含む他のいずれのタンパク質とも全くまたは有意に結合せずに、ヒトＳＡＰと結合する抗体を意味する。
【００４０】
用語「ＣＤＲ」は、相補性決定領域を意味する。抗体のＣＤＲは、本明細書で使用する場合、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭおよびｃｏｎｔａｃｔ法を含む周知のＣＤＲナンバリング法のいずれかを用いて決定されるＣＤＲを意味する。
【００４１】
「循環ＳＡＰ」は、ｉｎ  ｖｉｖｏおよびｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて血漿中に遊離型で存在し、組織内のアミロイド沈着物と会合していないＳＡＰを意味する。
【００４２】
医薬組成物、投与経路および用量
式（Ｉ）の化合物を療法において使用するために、それは通常、標準的な製薬実務に従って医薬組成物へと処方される。
【００４３】
よって、本発明は、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物と１種類以上の薬学上許容可能な担体とを含んでなる医薬組成物を提供する。
【００４４】
本発明はまた、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物と１種類以上の薬学上許容可能な担体を混合することを含んでなる、医薬組成物の製造方法も提供する。
【００４５】
本発明はまた、本発明の医薬組成物を含んでなる投与形も提供する。
【００４６】
好適には周囲温度および大気圧で混合することにより製造され得る本発明の医薬組成物は、通常、経口投与に適合され、従って、錠剤、カプセル剤、経口液体製剤、散剤、顆粒剤、またはトローチ剤の形態であり得る。
【００４７】
一つの実施態様では、経口投与用の本発明の医薬組成物が提供される。
【００４８】
経口投与用の錠剤およびカプセル剤は単位用量形態であってよく、結合剤（例えば、アルファ化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）；増量剤（例えば、ラクトース、微晶質セルロースまたはリン酸水素カルシウム）；打錠滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルクまたはシリカ）；崩壊剤（例えば、ジャガイモデンプンまたはグリコール酸ナトリウムデンプン）；および許容可能な湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）などの従来の担体を含有し得る。錠剤は、通常の製薬実務で周知の方法に従ってコーティングしてもよい。
【００４９】
経口液体製剤は、例えば、油性懸濁液、非水溶液、エマルション、シロップまたはエリキシルの形態であってよく、または投与直前に好適な水性もしくは非水性ビヒクルで再構成するための乾燥製品の形態であってもよい。このような液体製剤は、沈殿防止剤（例えば、ソルビトールシロップ、セルロース誘導体または水素化食用脂）、乳化剤（例えば、レシチンまたはアラビアガム）、非水性ビヒクル（食用油、例えば、扁桃油、油性エステル、エチルアルコールまたは精留植物油を含み得る）、保存剤（例えば、メチルまたはプロピル−ｐ−ヒドロキシベンゾエートまたはソルビン酸）、および所望により従来の香味剤または着色剤、適当であればバッファー塩および甘味剤などの従来の添加剤を含み得る。経口投与用の製剤は、有効化合物の放出制御を与えるように適宜処方してもよい。
【００５０】
別の実施態様では、投与形は錠剤またはカプセル剤である。
【００５１】
本組成物は、投与方法に応じて０．１％〜９９重量％、好ましくは１０〜６０重量％の有効物を含有し得る。前述の障害の処置において使用される化合物の用量は、通常、障害の重篤度、患者の体重、および他の類似の因子によって異なる。しかしながら、一般的な指針として、好適な単位用量は０．０５〜５０００ｍｇ、１．０〜１０００ｍｇ、または１００〜６００ｍｇ、例えば、１００、２００または３００ｍｇであってよく、このような単位用量は１日２回以上、例えば、１日２回または３回投与されてよい。このような療法は数日、数週間、数か月または数年にわたり得る。
【００５２】
本発明はさらに、療法において使用するための式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【００５３】
よって、式（Ｉ）の化合物は、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患の処置において使用するためのものである。
【００５４】
本発明はさらに、ＳＡＰ枯渇において使用するための式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【００５５】
本発明はさらに、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の処置において使用するための式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【００５６】
さらなる態様では、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物の投与を含んでなる、ＳＡＰ枯渇が有益である被験体における疾患または障害の処置方法が提供される。
【００５７】
さらなる態様では、治療上有効な量の本明細書に記載の医薬組成物の投与を含んでなる、ＳＡＰ枯渇が有益である被験体における疾患または障害の処置方法が提供される。
【００５８】
本発明はさらに、被験体に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物を投与することを含んでなる、被験体におけるＳＡＰ枯渇の方法を提供する。
【００５９】
本発明はさらに、被験体に治療上有効な量の本明細書に記載の医薬組成物を投与することを含んでなる、被験体におけるＳＡＰ枯渇の方法を提供する。
【００６０】
伝達性海綿状脳症（プリオン病）の多くの形態は脳内のアミロイド沈着物に関連し、よって、本発明は、ヒトの変異型クロイツフェルト・ヤコブ病、クロイツフェルト・ヤコブ病自体、クールー病および様々な他の形態のヒトプリオン病、また、ウシ海綿状脳症、ミュールジカおよびヘラジカの慢性消耗病、ならびにミンクの伝達性脳症を含む、これら総ての疾患または障害に関する。
【００６１】
本発明はさらに、被験体における疾患または障害の処置方法であって、前記疾患または障害がアミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病、骨関節炎、細菌感染、侵襲性カンジダ症(invasive candidiasis)、伝達性海綿状脳症、ヒトの変異型クロイツフェルト・ヤコブ(Creutzfeld-Jakob)病、クロイツフェルト・ヤコブ(Creutzfeld-Jakob)病、クールー病、その他のヒトプリオン病、ウシ海綿状脳症、ミュールジカおよびヘラジカの慢性消耗病、ならびにミンクの伝達性脳症からなる群から選択され、被験体に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００６２】
本発明はさらに、被験体における疾患または障害の処置方法であって、前記疾患または障害がアミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病、骨関節炎、細菌感染、侵襲性カンジダ症(invasive candidiasis)、伝達性海綿状脳症、ヒトの変異型クロイツフェルト・ヤコブ(Creutzfeld-Jakob)病、クロイツフェルト・ヤコブ(Creutzfeld-Jakob)病、クールー病、その他のヒトプリオン病、ウシ海綿状脳症、ミュールジカおよびヘラジカの慢性消耗病、ならびにミンクの伝達性脳症からなる群から選択され、被験体に治療上有効な量の本明細書に記載の医薬組成物を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００６３】
本発明はさらに、被験体における疾患または障害の処置方法であって、前記疾患または障害が伝達性海綿状脳症、ヒトの変異型クロイツフェルト・ヤコブ病、クロイツフェルト・ヤコブ病、クールー病、ウシ海綿状脳症、ミュールジカおよびヘラジカの慢性消耗病、ならびにミンクの伝達性脳症からなる群から選択され、被験体に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００６４】
本発明はさらに、被験体における疾患または障害の処置方法であって、前記疾患または障害が伝達性海綿状脳症、ヒトの変異型クロイツフェルト・ヤコブ病、クロイツフェルト・ヤコブ病、クールー病、ウシ海綿状脳症、ミュールジカおよびヘラジカの慢性消耗病、ならびにミンクの伝達性脳症からなる群から選択され、被験体に治療上有効な量の本明細書に記載の医薬組成物を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００６５】
本発明はさらに、被験体における疾患または障害の処置方法であって、前記疾患または障害がアミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択され、被験体に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００６６】
本発明はさらに、被験体における疾患または障害の処置方法であって、前記疾患または障害がアミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択され、被験体に治療上有効な量の本明細書に記載の医薬組成物を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００６７】
本発明はさらに、被験体における疾患または障害の処置方法であって、前記疾患または障害がアルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択され、被験体に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００６８】
本発明はさらに、被験体における疾患または障害の処置方法であって、前記疾患または障害がアルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択され、被験体に治療上有効な量の本明細書に記載の医薬組成物を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００６９】
本発明はさらに、被験体における疾患または障害の処置方法であって、前記疾患または障害がアミロイドーシスであり、被験体に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００７０】
本発明はさらに、被験体における疾患または障害の処置方法であって、前記疾患または障害がアミロイドーシスであり、前記被験体に治療上有効な量の本明細書に記載の医薬組成物を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００７１】
本発明はさらに、ヒトＤＮＡワクチンの有効性の改善方法であって、前記被験体に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００７２】
本発明はさらに、ヒトＤＮＡワクチンの有効性の改善方法であって、前記被験体に治療上有効な量の本明細書に記載の医薬組成物を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００７３】
本発明はさらに、ＤＮＡワクチンと組み合わせた式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００７４】
本発明はさらに、ＤＮＡワクチンと組み合わせた本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【００７５】
本発明はさらに、ヒトＤＮＡワクチンの有効性の改善において使用するための式（Ｉ）の化合物を提供する。
【００７６】
本発明はさらに、ヒトＤＮＡワクチンの有効性の改善において使用するための本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【００７７】
本発明はさらに、ヒトＤＮＡワクチンの有効性の改善における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００７８】
本発明はさらに、ヒトＤＮＡワクチンの有効性の改善における本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【００７９】
本発明はさらに、ヒトＤＮＡワクチンの有効性の改善において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００８０】
「ヒトＤＮＡワクチンの有効性の改善」とは、ＤＮＡワクチンがヒトＤＮＡワクチンによりコードされる免疫原に対する免疫防御性免疫応答を誘導することを可能とすることを意味する。
【００８１】
被験体は哺乳類であり得る。被験体は一般にヒトである。
【００８２】
用語「アミロイドーシス」は、全身性アミロイドーシス（限定されるものではないが、ＡＬ型アミロイドーシス、ＡＡ型アミロイドーシス、透析アミロイドーシス、ＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシス、遺伝性全身性アミロイドーシスを含む）と限局性アミロイドーシス（限定されるものではないが、脳アミロイドアンギオパチーを含む）の両方を包含する。
【００８３】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の処置において使用するための式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【００８４】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰ枯渇において使用するための式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【００８５】
一つの実施態様では、本発明は、ｉｎ  ｖｉｖｏでＳＡＰ枯渇において使用するための式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【００８６】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択される疾患または障害の処置において使用するための式（Ｉ）の化合物を提供する。
【００８７】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択される疾患または障害の処置において使用するための本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【００８８】
一つの実施態様では、本発明は、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択される疾患または障害の処置において使用するための式（Ｉ）の化合物を提供する。
【００８９】
一つの実施態様では、本発明は、アミロイドーシスの処置において使用するための式（Ｉ）の化合物を提供する。
【００９０】
別の態様では、本発明は、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択される疾患または障害の処置において使用するための本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【００９１】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの処置において使用するための本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【００９２】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の処置における式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【００９３】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰの枯渇における式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【００９４】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択される疾患または障害の処置における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００９５】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択される疾患または障害の処置における本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【００９６】
別の態様では、本発明は、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択される疾患または障害の処置における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００９７】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの処置における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００９８】
別の態様では、本発明は、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択される疾患または障害の処置における本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【００９９】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの処置における本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【０１００】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１０１】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰ枯渇において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１０２】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択される疾患または障害の処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１０３】
別の態様では、本発明は、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択される疾患または障害の処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１０４】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１０５】
アミロイドーシスの処置のために使用される場合、式（Ｉ）の化合物は抗ＳＡＰ抗体とともに投与され得る。
【０１０６】
ある実施態様では、抗ＳＡＰ抗体はヒトＳＡＰのＡ面と結合する。ある実施態様では、抗ＳＡＰ抗体は、ＷＯ１１／１０７４８０の配列番号２８内に存在する重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）と配列番号３５内に存在する軽鎖ＣＤＲを含んでなる。
【０１０７】
ある実施態様では、抗ＳＡＰ抗体は、ＷＯ１１／１０７４８０の配列番号２８の重鎖可変領域と配列番号３５の軽鎖可変領域を含んでなる。
【０１０８】
ある実施態様では、抗ＳＡＰ抗体は、ヒトＩｇＧｌまたはＩｇＧ３ヒト定常ドメインを含んでなる。
【０１０９】
ある実施態様では、抗ＳＡＰ抗体は、ＷＯ１１／１０７４８０の配列番号６２の重鎖と配列番号６４の軽鎖を含んでなる。
【０１１０】
ある実施態様では、抗ＳＡＰ抗体は、ＷＯ１１／１０７４８０内に配列番号１、配列番号２および配列番号３、配列番号４、配列番号５および配列番号６として記載される重鎖および軽鎖ＣＤＲを含んでなる。
【０１１１】
よって、さらなる態様では、本発明は、抗ＳＡＰ抗体との併用投与において、被験体に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物を投与することを含んでなる、アミロイドーシスの処置方法を提供する。
【０１１２】
一つの実施態様では、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物の投与は逐次的である。
【０１１３】
このような逐次投与は、時間的に近接していても（例えば、同時）時間的に離れていてもよい。さらに、これらの化合物が同じ投与形で投与されるかどうかは問題ではなく、例えば、一方の化合物を静脈内に投与して、他方の化合物を経口投与してもよい。
【０１１４】
さらなる実施態様では、式（Ｉ）の化合物をまず投与する。さらなる実施態様では、被験体の循環ＳＡＰレベルが２ｍｇ／Ｌ未満のレベルまで低下した際に抗ＳＡＰ抗体が投与される。一つの実施態様では、循環ＳＡＰレベルは１ｍｇ／Ｌ以下のレベルまで低減されている。さらなる実施態様では、循環ＳＡＰレベルは０．５ｍｇ／Ｌ以下のレベルまで低減されている。
【０１１５】
循環ＳＡＰのレベルは、市販のＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着アッセイ）キット（例えば、Ｈｙｃｕｌｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈ社からのＨＫ３３１ヒトＳＡＰ  ＥＬＩＳＡキット）を用いて測定することができる。
【０１１６】
さらなる実施態様では、式（Ｉ）の化合物は、５〜８日間かまたは被験体のＳＡＰ循環レベルが２ｍｇ／Ｌ未満のレベルにまで低減されるか、どちらか長い方で投与される。一つの実施態様では、被験体のＳＡＰ循環レベルは１ｍｇ／Ｌ以下まで低減されている。さらなる実施態様では、被験体のＳＡＰ循環レベルは０．５ｍｇ／Ｌ以下まで低減されている。さらなる実施態様では、式（Ｉ）の化合物の投与は、２００〜２０００ｍｇ（好ましくは２５０〜１０００ｍｇ、より好ましくは２５０〜６００ｍｇ）の単回用量の抗ＳＡＰ抗体が投与される間とその後４〜６日間続けられる。これは「治療コース」を形成し、患者は所望の治療効果を達成するために数コースを必要とし得る。患者はまた間欠的反復処置を必要とする場合もある。一つの実施態様では、治療コースは必要に応じて３〜６週間隔で少なくとも１回反復される。さらなる実施態様では、治療コースは３〜６週間隔で少なくとも１回反復された後、必要に応じて６〜１２か月間隔で少なくとも１回の治療コースが実施される。
【０１１７】
さらなる態様では、ＳＡＰ枯渇が有益である被験体における疾患または障害の処置方法であって、抗ＳＡＰ抗体との併用投与において、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物の投与を含んでなる方法が提供される。
【０１１８】
さらなる態様では、ＳＡＰ枯渇が有益である被験体における疾患または障害の処置方法であって、抗ＳＡＰ抗体との併用投与において、治療上有効な量の本明細書に記載の医薬組成物の投与を含んでなる方法が提供される。
【０１１９】
さらなる態様では、抗ＳＡＰ抗体との併用投与において、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物の投与を含んでなる、ＳＡＰ枯渇の方法が提供される。
【０１２０】
さらなる態様では、抗ＳＡＰ抗体との併用投与において、治療上有効な量の本明細書に記載の医薬組成物の投与を含んでなる、ＳＡＰ枯渇の方法が提供される。
【０１２１】
本発明はさらに、被験体における疾患または障害の処置方法であって、前記疾患または障害がアミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択され、抗ＳＡＰ抗体との併用投与において、前記被験体に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物を投与することを含んでなる方法を提供する。
【０１２２】
本発明はさらに、被験体における疾患または障害の処置方法であって、前記疾患または障害がアミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択され、抗ＳＡＰ抗体との併用投与において、前記被験体に治療上有効な量の本明細書に記載の医薬組成物を投与することを含んでなる方法を提供する。
【０１２３】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【０１２４】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰ枯渇において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【０１２５】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択される疾患または障害の処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１２６】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１２７】
一つの実施態様では、本発明は、全身性アミロイドーシスの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１２８】
一つの実施態様では、本発明は、ＡＬ型アミロイドーシスの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１２９】
一つの実施態様では、本発明は、ＡＡ型アミロイドーシスの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１３０】
一つの実施態様では、本発明は、透析アミロイドーシスの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１３１】
一つの実施態様では、本発明は、ＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシスの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１３２】
一つの実施態様では、本発明は、遺伝性全身性アミロイドーシスの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１３３】
一つの実施態様では、本発明は、限局性アミロイドーシスの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１３４】
一つの実施態様では、本発明は、脳アミロイドアンギオパチーの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１３５】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択される疾患または障害の処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【０１３６】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【０１３７】
一つの実施態様では、本発明は、全身性アミロイドーシスの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【０１３８】
一つの実施態様では、本発明は、ＡＬ型アミロイドーシスの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【０１３９】
一つの実施態様では、本発明は、ＡＡ型アミロイドーシスの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【０１４０】
一つの実施態様では、本発明は、透析アミロイドーシスの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【０１４１】
一つの実施態様では、本発明は、ＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシスの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【０１４２】
一つの実施態様では、本発明は、遺伝性全身性アミロイドーシスの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【０１４３】
一つの実施態様では、本発明は、限局性アミロイドーシスの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【０１４４】
一つの実施態様では、本発明は、脳アミロイドアンギオパチーの処置において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【０１４５】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【０１４６】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰの枯渇において使用するための、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【０１４７】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択される疾患または障害の処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１４８】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１４９】
一つの実施態様では、本発明は、全身性アミロイドーシスの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１５０】
一つの実施態様では、本発明は、ＡＬ型アミロイドーシスの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１５１】
一つの実施態様では、本発明は、ＡＡ型アミロイドーシスの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１５２】
一つの実施態様では、本発明は、透析アミロイドーシスの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１５３】
一つの実施態様では、本発明は、ＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシスの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１５４】
一つの実施態様では、本発明は、遺伝性全身性アミロイドーシスの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１５５】
一つの実施態様では、本発明は、限局性アミロイドーシスの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１５６】
一つの実施態様では、本発明は、脳アミロイドアンギオパチーの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１５７】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択される疾患または障害の処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【０１５８】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【０１５９】
一つの実施態様では、本発明は、全身性アミロイドーシスの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【０１６０】
一つの実施態様では、本発明は、ＡＬ型アミロイドーシスの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【０１６１】
一つの実施態様では、本発明は、ＡＡ型アミロイドーシスの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【０１６２】
一つの実施態様では、本発明は、透析アミロイドーシスの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【０１６３】
一つの実施態様では、本発明は、ＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシスの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【０１６４】
一つの実施態様では、本発明は、遺伝性全身性アミロイドーシスの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【０１６５】
一つの実施態様では、本発明は、限局性アミロイドーシスの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【０１６６】
一つの実施態様では、本発明は、脳アミロイドアンギオパチーの処置における、抗ＳＡＰ抗体との併用投与における本明細書に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【０１６７】
当業者ならば、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物と抗ＳＡＰ抗体の併用投与は循環ＳＡＰレベルが好適なレベルまで低減された際にのみ行うべきであることを理解するであろう。
【０１６８】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１６９】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰの枯渇において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１７０】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型糖尿病および骨関節炎からなる群から選択される疾患または障害の処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１７１】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１７２】
一つの実施態様では、本発明は、全身性アミロイドーシスの処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１７３】
一つの実施態様では、本発明は、ＡＬ型アミロイドーシスの処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１７４】
一つの実施態様では、本発明は、ＡＡ型アミロイドーシスの処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１７５】
一つの実施態様では、本発明は、透析アミロイドーシスの処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１７６】
一つの実施態様では、本発明は、ＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシスの処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１７７】
一つの実施態様では、本発明は、遺伝性全身性アミロイドーシスの処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１７８】
一つの実施態様では、本発明は、限局性アミロイドーシスの処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１７９】
一つの実施態様では、本発明は、脳アミロイドアンギオパチーの処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１８０】
一つの実施態様では、疾患または障害はアミロイドーシスである。
【０１８１】
さらなる実施態様では、疾患または障害は全身性アミロイドーシスである。
【０１８２】
さらなる実施態様では、疾患または障害はＡＬ型アミロイドーシスである。
【０１８３】
さらなる実施態様では、疾患または障害はＡＡ型アミロイドーシスである。
【０１８４】
さらなる実施態様では、疾患または障害は透析アミロイドーシスである。
【０１８５】
さらなる実施態様では、疾患または障害はＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシスである。
【０１８６】
さらなる実施態様では、疾患または障害は遺伝性全身性アミロイドーシスである。
【０１８７】
別の実施態様では、疾患または障害は限局性アミロイドーシスである。
【０１８８】
さらなる実施態様では、疾患または障害は脳アミロイドアンギオパチーである。
【０１８９】
一つの実施態様では、疾患または障害はアルツハイマー病である。
【０１９０】
一つの実施態様では、疾患または障害は２型糖尿病である。
【０１９１】
一つの実施態様では、疾患または障害は骨関節炎である。
【０１９２】
本発明の別の実施態様では、アミロイドーシスの処置に有用な、１以上の単位用量の抗ＳＡＰ抗体と１以上の単位用量の式（Ｉ）の化合物を含有する製品または「パーツのキット」が提供される。
【０１９３】
一つの実施態様では、パーツのキットは、１単位用量の抗ＳＡＰ抗体と１以上の単位用量の式（Ｉ）の化合物を含んでなる。
【０１９４】
好適には、パーツのキットは、１以上の単位用量の式（Ｉ）の化合物および単位用量の抗ＳＡＰ抗体の個別または逐次投与用に処方される。
【０１９５】
一つの実施態様では、パーツのキットは、１以上の単位用量の式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物と単位用量の抗ＳＡＰ抗体を含んでなる容器を含んでなる。
【０１９６】
別の実施態様では、パーツのキットは、１以上の単位用量の式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物を含んでなる第１の容器と単位用量の抗ＳＡＰ抗体を含んでなる第２の容器を含んでなる。
【０１９７】
パーツのキットは、アミロイドーシスを治療または予防するための、１以上の単位用量の式（Ｉ）の化合物と単位用量の抗ＳＡＰ抗体の投与に関する指示をさらに含んでなり得る。
【０１９８】
本発明の別の実施態様では、１以上の単位用量の式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物と１以上の単位用量のＤＮＡワクチンを含有する製品または「パーツのキット」が提供される。
【０１９９】
好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、シリンジおよびブリスターパックなどが含まれる。
【０２００】
ＷＯ２０１１／１３９９１７は、トランスサイレチンの発現の調節、およびトランスサイレチンアミロイドーシスの治療、予防、遅延または緩和に潜在的に有用な抗トランスサイレチン（抗ＴＴＲ）アンチセンスオリゴヌクレオチドを開示している。
【０２０１】
別の態様では、本発明は、ＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシスの処置方法であって、ｉ）被験体に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物を抗ＳＡＰ抗体との併用投与において投与すること、およびｉｉ）被験体に治療上有効な量の抗ＴＴＲアンチセンスオリゴヌクレオチドを投与することを含んでなる方法を提供する。
【０２０２】
本発明の一つの実施態様では、抗ＴＴＲアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＩＳＩＳ４２０９１５である。
【０２０３】
一つの実施態様では、工程ｉ）およびｉｉ）は逐次に行われる。
【０２０４】
一つの実施態様では、工程ｉｉ）は、工程ｉ）の後に行われる。
【０２０５】
ＷＯ２００９／０４０４０５は、トランスサイレチンミロイドーシスの治療または予防に有用な四量型のトランスサイレチンを安定化させるための薬剤を開示している。
【０２０６】
よって、別の態様では、本発明は、ＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシスの処置方法であって、ｉ）被験体に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載の医薬組成物を抗ＳＡＰ抗体との併用投与において投与すること、およびｉｉ）被験体に治療上有効な量のＷＯ２００９／０４０４０５に記載の薬剤を投与することを含んでなる方法を提供する。
【０２０７】
一つの実施態様では、工程ｉ）およびｉｉ）は逐次に行われる。
【０２０８】
一つの実施態様では、工程ｉｉ）は、工程ｉ）の後に行われる。
【０２０９】
一般合成経路
式（Ｉ）の化合物は、反応スキーム１に実質的に従って合成され得る。
【０２１０】
式（Ｉ）の化合物は、溶媒（例えば、１，４−ジオキサン）、塩基（例えば、炭酸カリウム）および触媒量のＴＢＡＩ（テトラブチルヨウ化アンモニウム）の存在下での、式（ＩＩ）のカルボン酸クロロメチルとＣＰＨＰＣの反応により製造され得る。
【０２１１】
式（ＩＩ）のカルボン酸クロロメチルは、溶媒（例えば、水、ジエチルエーテルまたはジクロロメタン）および塩基（例えば、テトラブチル臭化アンモニウム、炭酸ナトリウム、ピリジンまたはジメチルアミノピリジン）の存在下での、クロロメチルスルホクロリデートとテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボン酸の反応により製造され得る。
【０２１２】
クロロメチルスルホクロリデート（クロロ硫酸クロロメチルとしても知られる）およびテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボン酸は市販されている（例えば、Ｓｉｇｍａ  ＡｌｄｒｉｃｈまたはＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから）。
【０２１３】
【化２】
0006789288.tif 000003
【０２１４】
ＣＰＨＰＣは、ＥＰ０９１５０８８に開示されている実験手順に従って合成され得る。
【実施例】
【０２１５】
以下の実施例は本発明を説明する。この実施例は本発明の範囲を限定することを意図せず、本発明の化合物、組成物、および方法を製造および使用するために当業者に指針を与える。本発明の特定の実施態様が記載されるが、当業者ならば、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく様々な変更および修飾が行えることを認識するであろう。
【０２１６】
限定されるものではないが、特許および特許出願を含め、本明細書に引用されている総ての刊行物は、各個の刊行物が、あたかも完全に示されているかのように引用することにより本明細書の一部とされることが具体的かつ個々に示されている場合と同様に、引用することにより本明細書の一部とされる。
【０２１７】
以下の中間体および実施例は本発明の化合物の製造を説明する。
【０２１８】
略語
ａｑ．        水性
ＤＣＭ        ジクロロメタン／塩化メチレン
ＥｔＯＡｃ    酢酸エチル
ｈ            時間
ＨＣｌ        塩酸
ＨＰＬＣ      高速液体クロマトグラフィー
ｉＰｒ２Ｏ    イソプロピルエーテル
ｍｉｎ        分
ＭＳ          質量分析
Ｎａ２ＳＯ４    硫酸ナトリウム
ＮＭＲ        核磁気共鳴
ＲＴ          室温
ＴＢＡＩ      テトラブチルヨウ化アンモニウム
ＴＯＦ        タイムオブフライト
【０２１９】
１Ｈおよび１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  ３００または４００ＭＨｚ  ＮＭＲ分光計で記録した。化学シフトは１００万分の１（単位ｐｐｍ）で記録した。高分解能マススペクトルは、分析的高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）と連結したＭｉｃｒｏｍａｓｓ  ＬＣＴ（ＴＯＦ）分光計にて記録した。ＨＰＬＣは、水中０．０１Ｍ酢酸アンモニウム（溶媒Ａ）および１００％アセトニトリル（溶媒Ｂ）にて、以下の溶出勾配０〜０．５分  ５％Ｂ、０．５〜３．７５分  ５％から１００％Ｂ、３．７５〜４．５  １００％Ｂ、４．５〜５  １００％から５％Ｂ、５〜５．５  ５％Ｂを用い、流速１．３ｍＬ／分、４０℃で溶出するＷａｔｅｒｓ  Ｘ−Ｔｅｒｒａ  ＭＳ  Ｃ１８カラム（３．５μｍ  ３０×４．６ｍｍ内径）で行った。マススペクトル（ＭＳ）は、Ｗａｔｅｒｓ  ＬＣＴ質量分析計にて、エレクトロスプレーポジティブイオン化［ＭＨ＋分子イオンを得るためのＥＳ＋ｖｅ］またはエレクトロスプレーネガティブイオン化［（Ｍ−Ｈ）−分子イオンを得るためのＥＳ−ｖｅ］モードを用いて記録した。
【０２２０】
分析的ＨＰＬＣは、水中０．１％ギ酸（溶媒Ａ）およびアセトニトリル中０．１％ギ酸（溶媒Ｂ）にて、以下の溶出勾配  ０〜３．２分：５％から１００％Ｂ、３．２〜４．０分  １００％Ｂを用い、流速１．８ｍＬ／分、４０℃で溶出するＸＳｅｌｅｃｔ  ＸＰ  Ｃ１８カラム（２．５μｍ  ３０×４．６ｍｍ内径）で行った。マススペクトル（ＭＳ）は、Ｗａｔｅｒｓ  ＺＱ質量分析計にて、エレクトロスプレーポジティブイオン化［ＭＨ＋分子イオンを得るためのＥＳ＋］またはエレクトロスプレーネガティブイオン化［（Ｍ−Ｈ）−分子イオンを得るためのＥＳ−］モードを用いて記録した。
【０２２１】
実験
テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボン酸クロロメチル
【化３】
0006789288.tif 000004
【０２２２】
機械的撹拌機を備えた３Ｌフラスコに、水（５０ｍＬ）中、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボン酸（５０ｇ、３８４ｍｍｏｌ）の懸濁液を投入した後、水（６００ｍＬ）中、Ｎａ２ＣＯ３（１６３ｇ、１５３７ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくり加えた。この無色の水溶液を０℃に冷却し、臭化テトラブチルアンモニウム（１２．３９ｇ、３８．４ｍｍｏｌ）を加えた。ＤＣＭ（２５０ｍＬ）中、クロロメチルスルホクロリデート（１２７ｇ、７６８ｍｍｏｌ）の溶液を、激しく撹拌しながら、０℃で１時間かけて滴下した。この反応混合物を０℃で１時間撹拌した後、室温まで上昇させ、その温度で一晩撹拌した。反応中に形成した沈澱を濾去し、濾液をＤＣＭ（２×３００ｍＬ）で抽出した。有機相を集め、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。
【０２２３】
黄色の油性残渣をＤＣＭ（１００ｍＬ）に溶かし、シリカパッド（５００ｇ）に載せ、シクロヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ（１Ｌ）、次いでＤＣＭ（２５０ｍＬ）で溶出させ、標題化合物を淡黄色油状物（２４ｇ、３５％）として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.74 (s, 2 H), 3.97 (m, 2 H), 3.45 (m, 2 H), 2.64 (m, 1 H), 1.86 (m, 4 H)。
【０２２４】
副生成物の存在のためにマイナーピークが見られた。
【０２２５】
（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボニル）オキシ）メチル）  １，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート
【化４】
0006789288.tif 000005
【０２２６】
機械的撹拌機を備えた３Ｌフラスコに、１，４−ジオキサン（２００ｍＬ）中、（２Ｒ，２’Ｒ）−１，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボン酸）（３０ｇ、８８ｍｍｏｌ）の懸濁液を投入した。Ｋ２ＣＯ３（３０．５ｇ、２２０ｍｍｏｌ）を撹拌懸濁液に室温で加え、この反応混合物を室温で１０分間撹拌した後、８０℃に加熱した。１，４−ジオキサン（１００ｍＬ）に溶かしたテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボン酸クロロメチル（３６．２ｇ、２０３ｍｍｏｌ）の溶液に、ヨウ化テトラブチルアンモニウム（６．５１ｇ、１７．６３ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１０分撹拌した後、沈澱を濾過し、橙色の濾液を、上記で調製した反応混合物に３０分かけて滴下した。８０℃で８時間後、この反応混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）に取り、ＮａＨＣＯ３水溶液（１×１００ｍＬ）、亜硫酸ナトリウム水溶液（１×１００ｍＬ）、０．５Ｎ  ＨＣｌ（１×５０ｍＬ）、水（１×１００ｍＬ）およびブラインで洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過した後、木炭とともに１５分撹拌し、セライトベッドで濾過し、真空濃縮し、標題化合物を淡黄色ガムとして得、これは結晶化した。非晶質固体をｉＰｒ２Ｏに取り、濾過し、標題化合物を灰白色粉末として得た（２８ｇ、５０．９％）。
【０２２７】
結晶化
最終精製
数バッチの（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボニル）オキシ）メチル）  １，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）（１０６ｇ、１７０ｍｍｏｌ）を集め、酢酸エチル（２００ｍＬ）中で希釈し、マグネチックスターラーを含む２Ｌフラスコで加熱還流した。２０分後、固体は溶解し、フラスコを加熱システムから取り出し、濾過し、自然に室温まで冷却した。温度が５０℃まで落ちた際にいくらかの結晶が現れ始めた。結晶化工程を完了させるために、この生成物を撹拌せずに室温で一晩静置した。混合物を濾過し、ｉＰｒ２Ｏ（１×１５０ｍＬ）およびペンタン（２×１００ｍＬ）で順次洗浄した。生成物を３５℃、５ミリバールで５時間乾燥させ、生成物を白色粉末として得た（８２．５ｇ、８０％）。
LC/MS : m/z 625 [M+H]+, Rt 2.68分。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.84 (d, J = 5.5 Hz, 2 H), 5.74 (d, J = 5.5 Hz, 2 H), 4.46 (m, 2 H), 4.01-3.91 (m, 4 H), 3.70-3.59 (m, 2 H), 3.58-3.38 (m, 6 H), 2.67-2.55 (m, 2H), 2.43 - 1.54 (m, 24 H)。
【０２２８】
回転異性体の存在のためにいくつかのマイナーピークが見られた。
【０２２９】
13C NMR (100 MHz, CDCl3) 173.20, 171.41, 171.21, 79.55, 66.33, 58.53, 46.95, 33.68, 29.11, 28.53, 24.88, 24.20, 22.52。
HRMS : m/z C30H45N2O12 [M+H]+の理論値625.2972, 実測値625.3010。
【０２３０】
ＸＲＰＤデータは、ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ  Ｘ’Ｐｅｒｔ  Ｐｒｏ粉末回折装置、モデルＰＷ３０４０／６０にて、Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ検出器を用いて取得した。取得条件は、放射線：Ｃｕ  Ｋα、ジェネレーター電圧：４０ｋＶ、ジェネレーター電流：４５ｍＡ、開始角度：２．０°２θ、終了角度：４０．０°２θ、ステップサイズ：０．０１６７°２θ、ステップ当たりの時間：３１．７５秒。サンプルは、ケイ素ウエハー（ゼロバックグラウンドプレート）上に数ミリグラムのサンプル（式（Ｉ）の化合物）を載せて粉末の薄層とすることにより作製した。
【０２３１】
式（Ｉ）の化合物の結晶性固体のＸＲＰＤスペクトルを図１に示す。
【０２３２】
式（Ｉ）の化合物のＩ型    に特徴的なＸＲＰＤ角度および面間隔ｄ(d-spacing)を表１に記録する。ピーク指定のそれぞれに関して許容誤差はおよそ±０．１°２θである。ピーク強度は、優先される配向のためにサンプルごとに変動し得る。
【０２３３】
ピークの位置はＨｉｇｈｓｃｏｒｅソフトウエアを用いて測定した。
【０２３４】
【表１】
0006789288.tif 000006
【０２３５】
さらなる態様では、本発明は、結晶形態の式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０２３６】
さらなる態様では、本発明は、実質的に図１に示されるＸＲＰＤスペクトルを特徴とする結晶性固体としての式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０２３７】
さらなる態様では、本発明は、表１のピークから選択される、Ｃｕ  Ｋα線を用いて測定した場合の少なくとも９つの回折角度を含んでなるＸＲＰＤスペクトルを特徴とする結晶性固体としての式（Ｉ）の化合物を提供する。さらなる態様では、本発明は、表１のピークから選択される、Ｃｕ  Ｋα線を用いて測定した場合の少なくとも８つの回折角度または少なくとも７つの回折角度または少なくとも６つの回折角度または少なくとも５つの回折角度または少なくとも４つの回折角度を含んでなるＸＲＰＤスペクトルを特徴とする結晶性固体としての式（Ｉ）の化合物を提供する。さらなる態様では、本発明は、表１のピークから選択される、Ｃｕ  Ｋα線を用いて測定した場合の少なくとも３つの回折角度を含んでなるＸＲＰＤスペクトルを特徴とする結晶性固体としての式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０２３８】
比較化合物
以下に報告されるデータは、式（Ｉ）の化合物と（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（１−（ピバロイルオキシ）エチル）  １，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）（比較化合物）を比較する。
【０２３９】
（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（１−（ピバロイルオキシ）エチル）  １，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）（（Ｒ）−１−（６−｛（Ｒ）−２−［１−（２，２−ジメチル−プロピオニルオキシ）−エトキシカルボニル］−ピロリジン−１−イル｝−６−オキソ−ヘキサノイル）−ピロリジン−２−カルボン酸  １−（２，２−ジメチル−プロピオニルオキシ）−エチルエステルとしても知られる）は、ＷＯ２００３／０５１８３６に開示されている実験プロトコールに従って合成され得る。
【０２４０】
物理化学的特性
物理的形態
式（Ｉ）の化合物は結晶性固体として得ることができる。対照的に、比較化合物は油状物として得られる（ＷＯ２００３／０５１８３６参照）。
【０２４１】
溶解度
溶解度を決定するためのプロトコール
既知量の式（Ｉ）の化合物を好適な容器（例えば、ねじ蓋式透明ガラスバイアル）に秤量し、既知容量の必要培地を加えた（例えば、人工胃液(Simulated Gastric Fluid)ｐＨ１．６［ＳＧＦ］、人工摂食状態腸液(Simulated Fasted State Intestinal Fluid)ｐＨ６．５［ＦｅＳＳＩＦ］、人工絶食状態腸液(Simulated Fasted State Intestinal Fluid)ｐＨ６．５［ＦａＳＳＩＦ］、水［精製水］、またはブリトン−ロビンソン(Britton-Robinson)バッファー）。化合物を３０秒〜１分間ボルテックス混合することによりこれらの媒体で湿らせた。次に、サンプルを、溶けていない固体が残存しているか確認するために視覚的に確認した。サンプルを穏やかなミキサー（例えば、ローラーミキサー）に移し、所望の時点に達するまで振盪させた。適当な時点でサンプルを視覚的に再評価した。総ての固体が溶解したならば、溶解度を＞ｘｍｇ／ｍＬ（ここで、ｘは、使用した既知の重量を加えた容量で割った商である）として記録した。溶けていない固体が残っていれば、そのサンプルの一部を取り、遠心分離して固体を除去して明澄な上清を残した。この上清を好適な希釈剤で容積的に希釈して分析に好適な濃度の分析サンプルとした。次に、この希釈サンプルを既知濃度の標準品に対してＨＰＬＣなどの好適な方法により分析した。その後、この化合物の溶解度は、標準品の濃度、標準品の相対的応答（例えば、ピーク面積）および記載の分析サンプル、ならびに分析サンプルの希釈率の知見を用いて計算することができる。
【０２４２】
種々の水性媒体中での式（Ｉ）の化合物の溶解度を以下の表２に示す。
【０２４３】
【表２】
0006789288.tif 000007
【０２４４】
よって、式（Ｉ）の化合物は、生物学的に関連のある媒体中で極めて可溶性である。
【０２４５】
シトクロムｐ４５０および薬物−薬物相互作用
式（Ｉ）の化合物および比較化合物を以下のシトクロムｐ４５０（ＣＹＰ  ４５０）アッセイで評価した。結果を以下の表３に示す。
【０２４６】
このアッセイは、蛍光基質を用いて、バクトソーム源由来のシトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）３Ａ４、２Ｃ９、２Ｃ１９、１Ａ２および２Ｄ６酵素に対する阻害を評価するように設計された。化合物（式（Ｉ）の化合物または比較化合物）をメタノールに１．６５ｍＭで溶かした。娘溶液をメタノールにて６６０、２６４、１０６、４２、１７、６．８、２．７、１．１および０．４３μＭで作製した。ＮＡＤＰＨ補因子は、２％ＮａＨＣＯ３中、１ｍＬ当たりグルコース−６−リン酸（７．８ｍｇ）、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ（６単位）、ＮＡＤＰ（１．７ｍｇ）を用いて調製した。
【０２４７】
基質調製物は次の通りであった：
・７−メトキシ−４−トリフルオロメチルクマリン−３−酢酸エチルエステル（ＦＣＡ）：アセトニトリル中１２．５ｍＭ
・エトキシレゾルフィン（ＥＲ）：アセトニトリル中０．０５ｍＭ
・４−メチルアミノメチル−７−メトキシクマリン（ＭＭＣ）：メタノール中２．５ｍＭ
・３−ブチリル−７メトキシクマリン（ＢＭＣ）：ＤＭＳＯ中２．５ｍＭ
・７−ベンジルオキシキノリン（７ＢＱ）：アセトニトリル中２．５ｍＭ
・ジエトキシフルオレセイン（ＤＥＦ）：アセトニトリル中０．１ｍＭ
【０２４８】
１０ｍｇのタンパク質／ｍＬの濃度のバクトソーム（Ｃｙｐｅｘ  ｓｏｕｒｃｅ）をリン酸バッファー５０ｍＭ  ｐＨ７．４で希釈した：
・２３．８ｍＬのバッファーおよび０．１１ｍＬのＦＣＡを伴う０．３３ｍＬのバクトソームＣＹＰ２Ｃ９
・２３．６ｍＬのバッファーおよび０．２７５ｍＬのＥＲを伴う０．３３ｍＬのバクトソームＣＹＰ１Ａ２
・２３．８ｍＬのバッファーおよび０．１１ｍＬのＭＭＣを伴う０．３３ｍＬのバクトソームＣＹＰ２Ｄ６
・２３．８ｍＬのバッファーおよび０．１１ｍＬのＢＭＣを伴う０．３３ｍＬのバクトソームＣＹＰ２Ｃ１９
・２３．６ｍＬのバッファーおよび０．２７５ｍＬの７ＢＱを伴う０．３３ｍＬのバクトソームＣＹＰ３Ａ４Ｈ
・２３．６ｍＬのバッファーおよび０．２７５ｍＬのＤＥＦを伴う０．３３ｍＬのバクトソームＣＹＰ３Ａ４Ｌ
【０２４９】
プレインキュベーションは、５μＬの化合物溶液を２２０μＬの希釈バクトソームを混合すること、およびそれを３７℃で１０分間温めることからなった。インキュベーションは、２５μＬのＮＡＤＰＨの添加で開始した。次に、基質代謝産物の蛍光をＳＡＦＩＲＥ機（Ｔｅｃａｎ社から）で５分間読み取った：
・ＦＣＡ（２Ｃ９）：４１０ｎｍで励起および５１０ｎｍで蛍光
・ＥＲ（１Ａ２）：５３０ｎｍで励起および５９０ｎｍで蛍光
・ＭＭＣ（２Ｄ６）：４１０ｎｍで励起および４８５ｎｍで蛍光
・ＢＭＣ（２Ｃ１９）：４１０ｎｍで励起および４６５ｎｍで蛍光
・７ＢＱ（３Ａ４Ｈ）：４１０ｎｍで励起および５３０ｎｍで蛍光
・ＤＥＦ（３Ａ４Ｌ）：４８５ｎｍで励起および５３０ｎｍで蛍光
【０２５０】
化合物濃度に対して基質生産の阻害をプロットしてＩＣ５０値の決定を可能とした。
【０２５１】
【表３】
0006789288.tif 000008
【０２５２】
組換えヒトＣＹＰ４５０を用いた蛍光に基づくスクリーニングアッセイにおいて、式（Ｉ）の化合物およびそのモノエステル誘導体は、主要なヒト肝シトクロムＰ４５０（Ｃｙｐｅｘ）：ＣＹＰ３Ａ４−ＤＥＦおよび３Ａ４−７ＢＱの有意な阻害を示さなかった（ＩＣ５０＞３３μＭ）。他のアイソフォームも、両化合物により有意に阻害されなかった（ＩＣ５０＞３３μＭ）。対照的に、比較化合物は、ＣＹＰ３Ａ４−ＤＥＦおよびＣＹＰ３Ａ４−７ＢＱの有意な阻害を示した。
【０２５３】
全身濃度が低くなっていく化合物では、腸管阻害のみが関連するのでＣＹＰ３Ａ４阻害のみが関連する（ＣＹＰ３Ａは腸細胞に存在し、腸細胞初回通過の一因となる）。
【０２５４】
物理的安定性
物理的安定性を決定するためのプロトコール：
このアッセイは、種々のｐＨのバッファー中での化合物の物理的安定性を決定するために設計された。式（Ｉ）の化合物をＤＭＳＯに１ｍｇ／ｍＬで溶かした。リン酸バッファー（ＰＢＳ）は、Ｋ２ＨＰＯ４  ５０ｍＭ溶液とＫＨ２ＰＯ４  ５０ｍＭ溶液を混合することにより調製し、ｐＨ６．０、７．０、７．５、８．０の４種類のバッファーを得た。
【０２５５】
安定性試験は室温で行い、７９２μＬのＰＢＳ  ５０ｍＭ  ｐＨ６．０、７．０、７．５または８．０（１％ＤＭＳＯ）に８μＬのＤＭＳＯ溶液を加えることにより開始した。７５μｌの混合物を０、１、２、４および２４時間に採取し、内部標準を含有する２２５μＬのアセトニトリルを加えた。
【０２５６】
２μＬのサンプルを液体クロマトグラフィーシステムに注入し、Ａｓｃｅｎｔｉｓ  Ｃ１８カラム（５０×２．１ｍｍ内径、２．７μｍ）にて、水中０．１％ギ酸（Ａ）およびアセトニトリル中０．１％ギ酸（Ｂ）で、以下の溶出２分勾配：１．２分で５から９５％Ｂへ、０．６分９５％Ｂおよびカラムの再平衡化に０．１分を用い、０．５ｍＬ／分、５０℃で溶出させた。
【０２５７】
サンプルは、エレクトロスプレーイオン源、ポジティブモード、および以下のマストランジションを用いた質量分析により分析した：
・式（Ｉ）の化合物：６２５〜３６８
・ＣＰＨＰＣのモノエステル：４８３〜２２６
・ＣＰＨＰＣ：３４１〜２２６
【０２５８】
「ＣＰＨＰＣのモノエステル」とは、式（ＩＩＩ）の化合物（Ｒ）−１−（６−オキソ−６−（（Ｒ）−２−（（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボニル）オキシ）メトキシ）カルボニル）ピロリジン−１−イル）ヘキサノイル）ピロリジン−２−カルボン酸を意味する。
【化５】
0006789288.tif 000009
【０２５９】
式（Ｉ）の化合物の加水分解を種々のｐＨ（ｐＨ６〜ｐＨ８）で評価し、結果を図２に示す。式（Ｉ）の化合物は、７．５未満のｐＨでは加水分解に対する感受性が低いと思われた。酸性環境（７．０未満のｐＨ）では２４時間後に加水分解された式（Ｉ）の化合物は２０％未満であった。
【０２６０】
腸および肝ミクロソーム加水分解
腸および肝ミクロソームアッセイプロトコール
このアッセイは、ミクロソームマトリックス内での化合物の安定性を決定するために設計された。化合物（式（Ｉ）の化合物）をＤＭＳＯに１ｍｇ／ｍＬで溶かした。娘溶液をメタノール／水（５０／５０）中３０．３ｎｇ／ｍＬで調製した。ミクロソーム（Ｘｅｎｏｔｅｃｈ社から）をリン酸バッファー５０ｍＭ  ｐＨ７．４で、０．６２５ｍｇタンパク質／ｍＬに希釈した。
【０２６１】
プレインキュベーションは、ミクロソーム溶液３９５μＬを１００μＬ  ＮａＨＣＯ３（２％）とともに３７℃で７分間温めることからなった。インキュベーションは、５μＬの娘溶液を加えることにより開始した。混合物の５０μＬアリコートを０、３、６、１２および３０分に採取し、内部標準を含有する１５０μＬのアセトニトリルで急冷した。
【０２６２】
４０００ｒｐｍで１０分の遠心分離の後、２μＬのサンプルを液体クロマトグラフィーシステムに注入し、Ａｓｃｅｎｔｉｓ  Ｃ１８カラム（５０×２．１ｍｍ内径、２．７μｍ）にて、水中０．１％ギ酸（Ａ）およびアセトニトリル中０．１％ギ酸（Ｂ）で、以下の２分溶出勾配：１．２分で５から９５％Ｂへ、０．６分９５％Ｂおよびカラムの再平衡化に０．１分を用い、０．５ｍＬ／分、５０℃で溶出させた。
【０２６３】
サンプルは、エレクトロスプレーイオン源、ポジティブモード、および以下のマストランジションを用いた質量分析により分析した：
・式（Ｉ）の化合物：６２５〜３６８
・ＣＰＨＰＣのモノエステル：４８３〜２２６
・ＣＰＨＰＣ：３４１〜２２６
【０２６４】
親物質の消失、また、あり得る代謝産物、すなわち、モノエステルおよび二酸型の出現のパーセンテージを算出するための対照を設けた。
【０２６５】
図３から見て取れるように、式（Ｉ）の化合物は、３０分後であってもヒト腸ミクロソーム中で低率の加水分解を示し、式（Ｉ）の化合物は消化管内で過度に不安定にはならず、従って吸収に利用可能であることが示唆される。
【０２６６】
腸から、式（Ｉ）の化合物は腸壁を経て輸送され、血液および肝臓（どちらも循環ＳＡＰの場である）に送られる。
【０２６７】
血液加水分解を決定するためのプロトコール
このアッセイは、新鮮な血液中での化合物の安定性を決定するために設計された。化合物（式（Ｉ）の化合物）をＤＭＳＯに１ｍｇ／ｍＬで溶かした。娘溶液をＤＭＳＯ中１００μｇ／ｍＬで調製した。新鮮な血液を等張性バッファーｐＨ７．４で１／２希釈した。
【０２６８】
プレインキュベーションは、７９２μＬの血液を３７℃で７分間温めることからなった。インキュベーションは、５μＬの娘溶液を加えることにより開始した。５０μＬの混合物を０、５、１５、３０および６０分に採取した。５０μＬの水をサンプルに加えた後、内部標準を含有する３００μＬのアセトニトリルで急冷した。
【０２６９】
４０００ｒｐｍで１０分の遠心分離の後、２μＬのサンプルを液体クロマトグラフィーシステムに注入し、Ａｓｃｅｎｔｉｓ  Ｃ１８カラム（５０×２．１ｍｍ内径、２．７μｍ）にて、水中０．１％ギ酸（Ａ）およびアセトニトリル中０．１％ギ酸（Ｂ）で、以下の２分にわたる溶出勾配：１．２分で５から９５％Ｂへ、０．６分９５％Ｂおよびカラムの再平衡化に０．１分を用い、０．５ｍＬ／分、５０℃で溶出させた。
【０２７０】
サンプルは、エレクトロスプレーイオン源、ポジティブモード、および以下のマストランジションを用いた質量分析により分析した：
・式（Ｉ）の化合物：６２５〜３６８
・ＣＰＨＰＣのモノエステル：４８３〜２２６
・ＣＰＨＰＣ：３４１〜２２６
【０２７１】
親物質の消失、また、あり得る代謝産物、すなわち、モノエステルおよび二酸型の出現のパーセンテージを算出するための対照を設けた。
【０２７２】
ヒト血液において、式（Ｉ）の化合物のＣＰＨＰＣへの高率の加水分解が見られ（ＣＰＨＰＣへの変換率およそ７５％が６０分以内に達成された）、式（Ｉ）の化合物がひと度吸収されれば活性なＣＰＨＰＣへと切断され得ることが示唆される。
【０２７３】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ肝ミクロソーム活性を、上記で詳説したプロトコール（腸および肝ミクロソームアッセイプロトコール）を用いて評価した。
【０２７４】
ヒト肝ミクロソームでは、式（Ｉ）の化合物のＣＰＨＰＣへの高率の加水分解が見られ（ＣＰＨＰＣへの変換率およそ７０％が３０分以内に達成された）、式（Ｉ）の化合物がひと度吸収されれば活性なＣＰＨＰＣへと切断され得ることが示唆される。
【０２７５】
参照文献：
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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