(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
プテロスチルベン配糖体を含有する、幹細胞からガン幹細胞への誘導を阻害するために用いられる幹細胞用培地組成物。
【請求項２】
前記プテロスチルベン配糖体が、プテロスチルベンと糖とが、Ｏ―グリコシド結合した構造を有する、請求項１に記載する幹細胞からガン幹細胞への誘導を阻害するために用いられる幹細胞用培地組成物。
【請求項３】
前記Ｏ―グリコシド結合が、β―グリコシド結合である、請求項２に記載する幹細胞からガン幹細胞への誘導を阻害するために用いられる幹細胞用培地組成物。
【請求項４】
前記プテロスチルベン配糖体が、下記式（１）又は（２）で表される、請求項１〜３の何れかに記載する幹細胞からガン幹細胞への誘導を阻害するために用いられる幹細胞用培地組成物。；
【化１】
0006727676.tif 000009
（式中、グルコースとスチルベン骨格とのＯ―グリコシド結合は、β結合である。）。
【化２】
0006727676.tif 000010
（式中、グルコースとスチルベン骨格とのＯ―グリコシド結合は、β結合であり、グルコース間のＯ―グリコシド結合は、全てα結合であり、ｎは、０〜８の整数である。）。
【請求項５】
前記幹細胞が、ｉＰＳ細胞、胚性幹細胞、又は成体幹細胞である、請求項１〜４の何れかに記載する幹細胞からガン幹細胞への誘導を阻害するために用いられる幹細胞用培地組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
ガンを予防及び／又は治療するために用いられる組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年のガン研究において、ガン組織は、均一な性質等を有する細胞の集合体では無く、不均一な性質等を有する細胞の集合体であることが明らかとなっている。また、ガン組織にガン幹細胞が含有され、このガン幹細胞からガン細胞が分化されると共に、ガン幹細胞そのものも増殖することも知られている。
【０００３】
人工多能性幹細胞（ｉＰＳ細胞）をガン由来細胞株の培養液を使用して培養することによりガン幹細胞を誘導することができる。このように誘導されて作製されたガン幹細胞を用いて、ガン治療のための有効成分をスクリーニングする技術が知られている（特許文献１、２）。また、胚性幹細胞からガン幹細胞への誘導方法が、上記するｉＰＳ細胞からガン幹細胞への誘導方法と同じであることが、非特許文献１に開示されている。
【０００４】
スチルベン化合物は、動物が可食経験のあるブドウ等の植物体に含有される化合物であり、例えば、レスベラトロール、プテロスチルベン等のような抗酸化機能を発揮する化合物が知られている。プテロスチルベン又はその配糖体は、抗酸化機能だけではなく、美白効果（特許文献３、４）及び育毛効果（特許文献５）を発揮することが知られている。
【０００５】
ある化合物に水溶性を付与すること等を目的とした配糖化技術が開発されており、例えば、スチルベン化合物に糖を付与する技術が開発されている（特許文献６）。しかしながら、ある化合物を配糖化することにより、配糖化前の化合物が有する生理活性が失われてしまうことも知られている（非特許文献２）。故に、水溶性の付与等を所望して化合物を配糖化に供しても、そのメリットを享受できることは、ごく僅かであると理解されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開２０１４／１４８５６２
【特許文献２】特開２０１４−２０７８８９
【特許文献３】特許第６１７３５４３号
【特許文献４】特許第６２３３８２６号
【特許文献５】特許第６３６４１４３号
【特許文献６】特許第６４６７７６２号
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ａ．ＳＥＮＯ  ｅｔ  ａｌ．，ＯＮＣＯＬＯＧＹ  ＬＥＴＴＥＲＳ  １８：２７５６−２７６２，２０１９
【非特許文献２】Ｄ．Ｕｅｓｕｇｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｒｏｇｙ，ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｙ，２０１７，Ｖｏｌ．８１、Ｎｏ．２，２２６−２３０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
既存のガン治療薬を投与しても、「５年生存率」のように治療効果が表現されることからもわかるように、現実的に、ガンの根治は困難というのが一般的である。分子標的治療薬を含めた既存のガン治療薬が、ガン組織に含有される細胞集団内の特定のガン細胞にのみ効果を示し、不均一性を示す残りのガン細胞やガン幹細胞には薬効を示さないために、ガンが根治される可能性が少ないと推測される。ガンが根治できないことは、ガンに罹患する患者のみならず、その治療期間の長期化等により、患者の家族又は医療機関等にも重大な問題を及ぼす。このような事情に鑑み、本発明は、ガン幹細胞を抑制する技術を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上記する課題を検討すべく、本発明者らが鋭意検討を重ねた結果、ブドウ等に含有されるプテロスチルベン及び／又はその配糖体が、ｉＰＳ細胞からガン幹細胞への誘導を抑制することを見い出した。
【００１０】
本発明は、斯かる知見に基づいて完成されたものであり、以下に示す態様の発明を広く包含する。
【００１１】
Ｉ．組成物
Ｉ―１  プテロスチルベン及びその配糖体からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、幹細胞からガン幹細胞への誘導を抑制するために用いられる組成物。
【００１２】
Ｉ−２  前記プテロスチルベン配糖体が、プテロスチルベンに糖がグリコシド結合した化学構造を有する、上記Ｉ―１に記載する組成物。
【００１３】
Ｉ―３  前記グリコシド結合が、Ｏ―グリコシド結合である、上記Ｉ―２に記載する組成物。
【００１４】
Ｉ―４  前記Ｏ―グリコシド結合が、（１―４）―Ｏ―グリコシド結合である、上記Ｉ―３に記載する組成物。
【００１５】
Ｉ―５  前記Ｏ―グリコシド結合が、β―Ｏ―グリコシド結合である、上記Ｉ―３又はＩ―４に記載する組成物。
【００１６】
Ｉ―６  前記糖が、単糖又は多糖である、上記Ｉ―２〜Ｉ−５のいずれかに記載する組成物。
【００１７】
Ｉ―７  前記単糖が、オシキロース環、オキセトース環、ピラノース環、フラノース環、セプタノース環、又はオクタノース環構造の何れかの構造を取り得る、アルドース、ケトース、又はこれらの酸化物若しくは還元化物からなる群より選択される少なくとも一種の単糖である、上記Ｉ―６に記載する組成物。
【００１８】
Ｉ―８  前記単糖が、グルコースである、上記Ｉ―６に記載する組成物。
【００１９】
Ｉ―９  前記多糖が、オシキロース環、オキセトース環、ピラノース環、フラノース環、セプタノース環、又はオクタノース環構造の何れかの構造を取り得る、アルドース、ケトース、デオキシ糖、又はこれらの酸化物若しくは還元化物からなる群より選択される少なくとも２種以上の単糖が、互いにグリコシド結合した構造を有する多糖である、上記Ｉ―６〜１−８のいずれかに記載する組成物。
【００２０】
Ｉ―１０  前記多糖を構成する単糖が、全てグルコースである、上記Ｉ―９に記載する組成物。
【００２１】
Ｉ―１１  前記プテロスチルベン配糖体が、下記式（１）又は（２）で表される化合物である、上記Ｉ―１〜Ｉ―１０の何れかに記載する組成物；
【００２２】
【化１】
0006727676.tif 000002
【００２３】
（式中、グルコースとスチルベン骨格とのＯ−グリコシド結合は、β結合である。）。
【００２４】
【化２】
0006727676.tif 000003
【００２５】
（式中、グルコースとスチルベン骨格とのＯ―グリコシド結合は、β結合であり、グルコース間のＯ―グリコシド結合は、全てα結合であり、ｎは、０〜８の整数である。）。
【００２６】
Ｉ―１２  前記幹細胞が、ｉＰＳ細胞、胚性幹細胞、又は成体幹細胞の何れかである、上記Ｉ―１〜Ｉ−１１に記載する組成物。
【００２７】
ＩＩ．飲食品組成物
ＩＩ―１  上記Ｉ―１〜Ｉ―１２の何れかに記載する組成物を含有する飲食品組成物。
【００２８】
ＩＩ―２  ガンの予防及び／又は治療のために使用される、上記ＩＩ―１に記載する飲食品組成物。
【００２９】
ＩＩＩ．医薬組成物
ＩＩＩ―１  上記Ｉ―１〜Ｉ―１２の何れかに記載する組成物を含有する医薬組成物。
【００３０】
ＩＩＩ―２  ガンの予防及び／又は治療のために使用される、上記ＩＩＩ―１に記載する医薬組成物。
【００３１】
ＩＶ．幹細胞用培地組成物
ＩＶ―１  上記Ｉ―１〜Ｉ―１２の何れかに記載する組成物を含有する、ガン幹細胞の誘導を阻害するために用いられる幹細胞用培地組成物。
【００３２】
ＩＶ−２  前記幹細胞が、ｉＰＳ細胞、胚性幹細胞、又は成体幹細胞の何れかである、上記ＩＶ―１に記載する幹細胞用培地組成物。
【００３３】
Ｖ．予防及び／又は治療方法
Ｖ―１  ガンの罹患に対して予防を所望する生体に、プテロスチルベン及びその配糖体からなる群より選択される少なくとも一種を含有する組成物を投与する工程を含む、ガンの予防方法。
【００３４】
Ｖ―２  ガンに罹患した生体に、プテロスチルベン及びその配糖体からなる群より選択される少なくとも一種を含有する組成物を投与する工程を含む、ガンの治療方法。
【発明の効果】
【００３５】
本発明の組成物はプテロスチルベン及び／又はその配糖体を含有しており、ｉＰＳ細胞、体性幹細胞、又は胚性幹細胞等に代表される幹細胞から、ガン幹細胞への誘導を抑制する効果を発揮する。
【００３６】
ガン細胞は、ガン幹細胞から分化するので、幹細胞からガン幹細胞への誘導を阻害する効果を発揮する本発明の組成物は、ガンを治療する効果を発揮する。このような効果は、ガン細胞を分化させる基となるガン幹細胞への誘導を阻害することで奏される効果であることから、ガンの根治も期待できる効果であると言える。また、このようなメカニズムに鑑みると、本発明の組成物は、ガン細胞を発生させない効果、すなわち、ガンの予防効果を発揮する。これらの効果を期待して、本発明の組成物を、飲食品又は医薬の分野に採用することができる。
【００３７】
本発明の組成物は、プテロスチルベン及び／又はその配糖体を有効成分とする。プテロスチルベン及び／又はその配糖体は、ブドウ等の植物体に含有される成分であることから、生体が摂食経験のある成分ということができる。そのため、幹細胞からガン幹細胞への誘導の阻害を目的としてこれを摂食した生体が、その生命の危機に晒される程度の副作用を生じる可能性は、極めて低い。
【００３８】
ｉＰＳ細胞に代表される幹細胞は、再生医療の分野にて用いられる各種の臓器を製造するための原料として極めて優れた素材であるものの、幹細胞から製造された臓器はガン化しやすいと指摘されることがある。本発明の組成物は、幹細胞を原料に製造される各種の臓器のガン化を抑制するためにも使用することができる。よってこの観点から、再生医療の分野にも採用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１】図１は、実施例１のガン幹細胞誘導抑制試験結果を示す。（Ａ）は、プテロスチルベン（アグリコン）、（Ｂ）は、プテロスチルベンーα―モノグルコシド、（Ｃ）は、プテロスチルベンーβ―モノグルコシド、（Ｄ）は、プテロスチルベンジグルコシド、（Ｅ）は、プテロスチルベントリグルコシド、（Ｆ）は、プテロスチルベン配糖体の混合物、（Ｇ）は、ＰＤ０３２５９０１（ガン幹細胞誘導促進剤）、（Ｈ）は、ＡＴＲＡ（Ａｌｌ−ｔｒａｎｃｅ  ｒｅｔｉｎｏｉｃ  ａｃｉｄ；ガン幹細胞誘導阻害剤）をサンプルとする結果である。各グラフの縦軸は、ＧＦＰの相対強度（％）であり、横軸は、上記各サンプルの濃度（μｇ／ｍｌ）である。
【図２】図２は、実施例２のＭＴＴアッセイの結果を示す。各グラフの（Ａ）〜（Ｈ）は、それぞれ図１と同じサンプルである。各グラフの縦軸は、細胞の生存率（％）であり、横軸は、上記各サンプルの濃度（μｇ／ｍｌ）である。
【発明を実施するための形態】
【００４０】
以下、本発明について、更に詳細に説明する。以下の説明にて使用する用語「含む」又は「含有する」は、「本質的にからなる」及び、「からなる」と意味を包含する。なお、用語「質量」は、「重量」と読み替えることができる。
【００４１】
１．組成物
本発明の組成物は、プテロスチルベン及びその配糖体からなる群より選択される少なくとも一種を含有する。また、本発明の組成物は、幹細胞からガン幹細胞への誘導を抑制するために用いることができる。
【００４２】
プテロスチルベンとは、トランス―１―（３，５―ジメトキシフェニル）―２―（４―ヒドロキシフェニル）エチレン又は４’―ヒドロキシ―３，５―ジメトキシ―トランス―スチルベンとも呼ばれるスチルベン化合物である。プテロスチルベンは、スチルベン骨格を有するポリフェノールであり、ブドウ等に含有されている。
【００４３】
本発明の組成物に含有されるプテロスチルベンの配糖体は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。例えば、プテロスチルベンと糖とが、グリコシド結合した化合物を挙げることができる。斯かる配糖体は、生体適合性を有するリンカー等を介してグリコシド結合したものも包含する。
【００４４】
上記するグリコシド結合は、Ｏ―グリコシド結合には限定されず、Ｃ―グリコシド結合、Ｎ―グリコシド結合、又はＳ―グリコシド結合等を挙げることができる。上記する糖が入手しやすいこと又はプテロスチルベンを比較的簡便に配糖化できること等を理由に、上記するグリコシド結合は、Ｏ―グリコシド結合であることが好ましい。すなわち、プテロスチルベンが有する水酸基を介したグリコシド結合であることが好ましい。
【００４５】
上記するプテロスチルベンの配糖体において、糖とプテロスチルベンとのグリコシド結合におけるアノマーの結合態様は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。例えば、α―グリコシド結合であっても、β―グリコシド結合であってもよい。本発明の効果をより発揮することができる観点から、上記するアノマーの結合態様は、β―グリコシド結合であることが好ましい。
【００４６】
上記するプテロスチルベンの配糖体において、プテロスチルベンに結合する糖は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。例えば、単糖であっても、多糖であってもよい。
【００４７】
上記する単糖は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。例えば、オシキロース環、オキセトース環、ピラノース環、フラノース環、セプタノース環、又はオクタノース環構造を取り得る、アルドース又はケトース等を挙げることができる。斯かる単糖として、具体的に、グルコース、マルトース、又はガラクトース等を挙げることができ、グルコースが好ましい。なお、上記するアルドース又はケトースの酸化体であるウロン酸、アルドン酸、若しくはアルダル酸、又は還元化体であるアルジトール若しくは糖アルコール等も、上記する単糖に包含することができる。
【００４８】
上記する単糖の立体構造は、特に限定されることはない、例えば、Ｄ体、Ｌ体、又はラセミ体とすることもできる。上記する糖が入手しやすいこと又はプテロスチルベンを比較的簡便に配糖化できること等を理由に、上記する単糖の立体構造は、Ｄ体であることが好ましい。
【００４９】
上記する多糖は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。例えば、オシキロース環、オキセトース環、ピラノース環、フラノース環、セプタノース環、又はオクタノース環構造を取り得る、アルドース又はケトースより選択される少なくとも２個以上の単糖が、互いにグリコシド結合した構造を有する多糖を挙げることができる。斯かる多糖を構成する単糖は、全て同一であっても、それぞれ異なっていてもよい。上記するプテロスチルベンを比較的簡便に配糖化できることを理由に、多糖を構成する単糖は、全て同一であることが好ましい。
【００５０】
上記する多糖を構成する単糖は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。例えば、上記するプテロスチルベンの配糖体において、プテロスチルベンに結合する単糖と同じ単糖を挙げることができる。
【００５１】
上記する多糖における、２個以上の単糖間のグリコシド結合の態様は、Ｏ―グリコシド結合には限定されず、Ｃ―グリコシド結合、Ｎ―グリコシド結合、又はＳ−グリコシド結合を挙げることができる。上記する糖が入手しやすいこと又はプテロスチルベンを比較的簡便に配糖化できること等を理由に、２個以上の単糖間のグリコシド結合の態様は、Ｏ―グリコシド結合であることが好ましい。また、これらのグリコシド結合の態様は、全てが同一である必要はなく、それぞれ異なった態様であってもよい。上記するプテロスチルベンを比較的簡便に配糖化できる事等を理由に、上記する２個以上の単糖間のグリコシド結合の態様は、全て同一であることが好ましい。
【００５２】
上記する多糖における、２個以上の単糖間のグリコシド結合のアノマー結合態様は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。例えば、α―グリコシド結合であっても、β―グリコシド結合であってもよい。上記するプテロスチルベンを比較的簡便に配糖化できる事等を理由に、２個以上の単糖間のグリコシド結合のアノマー結合態様は、α―グリコシド結合であることが好ましい。また、これらのアノマー結合態様は、全てが同一である必要はなく、それぞれ異なったアノマー結合態様であってもよい。上記するプテロスチルベンを比較的簡便に配糖化できる事等を理由に、上記する多糖における、２個以上の単糖間のグリコシド結合のアノマー結合態様は、全て同一であることが好ましい。
【００５３】
上記する多糖における、２個以上の単糖間のグリコシド結合における単糖の炭素番号間の結合態様は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。例えば、（１―１）グリコシド結合、（１―２）グリコシド結合、（１―３）グリコシド結合、（１―４）グリコシド結合、又は（１―６）グリコシド結合を挙げることができる。上記する糖が入手しやすいこと又はプテロスチルベンを比較的簡便に配糖化できること等を理由に、（１−４）グリコシド結合であることが好ましい。また、これらの結合態様は、全て同一である必要はなく、それぞれ異なった単糖の炭素番号間の結合態様とすることもできる。上記するプテロスチルベンを簡便に配糖化することに鑑みて、２個以上の単糖間のグリコシド結合における単糖の炭素番号間の結合態様は、全て同一であることが好ましい。
【００５４】
上記するプテロスチルベンの好ましい態様として、例えば、下記式（１）又は（２）に示す化合物を挙げることかできる。
【００５５】
【化３】
0006727676.tif 000004
【００５６】
（式中、グルコースとスチルベン骨格とのＯ−グリコシド結合は、α結合又はβ結合である。）。
【００５７】
【化４】
0006727676.tif 000005
【００５８】
（式中、グルコースとスチルベン骨格とのＯ−グリコシド結合は、α結合又はβ結合であり、グルコース間のＯ−グリコシド結合は、全てα結合であり、ｎは、０〜８の整数である。）。
【００５９】
式（１）で表される化合物として、Ｏ−グリコシド結合は、β結合であることが、さらに好ましい。
【００６０】
なお、本発明の組成物に式（２）で表される化合物が含有される場合、ｎが、異なる整数の化合物から構成される混合物として含有されることもできる。このような混合物を構成する、それぞれ式（２）で表される化合物の含有比率は特に限定されない。例えば、ｎが大きい整数の化合物になるにつれて、その含有比率が少なくなる傾向とすることができる。また、本発明の組成物に上記する混合物が含有される場合、式（１）で表される化合物も含有されることもできる。
【００６１】
このようなプテロスチルベンの配糖体は、市場から入手することもできるし、特許文献１〜４等に記載の方法を採用して作成することもできる。
【００６２】
本発明のプテロスチルベン及び／又はその配糖体を含有する組成物によってガン幹細胞への誘導を抑制する対象となる幹細胞は、特に限定されることは無い。このような幹細胞として、生体（特に、哺乳類）に保持される幹細胞であることが好ましい。具体的には、胚性幹細胞及び成体幹細胞等を挙げることができる。斯かる成体幹細胞は、体性幹細胞又は組織幹細胞とも呼ばれ、ガン幹細胞への誘導能を有することが知られる幹細胞である限り、特に限定されない。具体的には、造血幹細胞、衛星細胞、腸管幹細胞、毛包幹細胞、乳腺幹細胞、間葉系幹細胞、ニューロスフェア、内皮幹細胞、嗅粘膜幹細胞、神経冠幹細胞、及び精巣細胞等を挙げることができる。
【００６３】
本発明の組成物に含有されるプテロスチルベン及び／又はその配糖体の量は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。具体的に、１００質量％の組成物に対するプテロスチルベン及び／又はその配糖体の含有量を、０．００１〜１００質量％程度とすることができる。
【００６４】
本発明の組成物に含有されるプテロスチルベン及びその配糖体は、ｉＰＳ細胞からガン幹細胞への誘導を阻害する効果を発揮する。ガン細胞は、ガン幹細胞から分化するので、本発明の組成物は、ガンの予防及び／又は治療効果を発揮する。このような効果を発揮することを期待して、本発明の組成物を、例えば、飲食品又は医薬の分野で用いることができる。
【００６５】
ｉＰＳ細胞に代表される幹細胞を原料に再生医療用の細胞、組織、及び臓器等を製造する際に、これらの細胞等のガン化が問題となっている。このような問題を解決すべく、本発明の組成物は、幹細胞を細胞、組織、又は臓器等に誘導する際のガン化を抑制するために用いることもできる。より具体的には、例えば、幹細胞を原料に再生医療用の細胞等を製造する際の使用する培地に、例えば、バッファー等の形態にして添加することができる。
【００６６】
２．飲食品組成物
本発明の飲食品組成物に含有される有効成分は、上記する本発明の組成物に含有されるプテロスチルベン及び／又はその配糖体である。プテロスチルベン及び／又はその配糖体は、幹細胞からガン幹細胞への誘導を阻害する効果を発揮するので、本発明の飲食品組成物は、ガン幹細胞を産生させない効果を発揮する飲食品組成物とすることができる。ガン細胞は、ガン幹細胞から分化するので、本発明の飲食品組成物は、ガンの予防及び／又は治療のために、好ましくはガンの予防のために用いることができる。
【００６７】
本発明の飲食品組成物に含有される有効成分の量は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。具体的に、１００質量％の飲食品組成物に対する有効成分の含有量を、０．００１〜１００質量％程度とすることができる。
【００６８】
本発明の飲食品組成物には、特定保健用食品、機能性表示食品、及び栄養機能食品等の保健機能食品（飲料を含む）；栄養補助食品、健康補助食品、及び栄養調整食品等；並びに一般食品（飲料を含む）の何れもが包含されるものとすることができる。また、本発明の飲食品組成物には、家畜用飼料、養魚用飼料、及びペットフード等の愛玩動物用飼料等の飼料も包含することができる。これらの飲食品組成物は、慣用の飲食物の形状を有していればよく、例えば、一般の食品、飲料の形態（明らか食品）のほか、幹細胞からガン幹細胞への誘導を抑制する効果を奏することを、飲食品の機能として謳うことのできる特定保健用食品、又は機能性表示食品とすることができる。具体的に、本発明の飲食品組成物は、健康維持、元気になる、毎日を元気に過ごせる、悪い酸素を消すパワー、ガンが気になるかたへ等と謳うことができる。
【００６９】
本発明の飲食品組成物の形状は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。例えば、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料；アイスクリーム、かき氷等の冷菓；ガム、チョコレート、飴、錠菓、スナック菓子、ゼリー、ジャム、クリーム、グミ等の菓子；そば、うどん、即席麺、中華麺等の麺；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産又は畜産加工食品；加工乳、発酵乳等の乳製品；サラダ油、マヨネーズ、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂、又は油脂加工食品；ソース、たれ等の調味料；スープ、サラダ、惣菜、漬物、パン、又はシリアル等を挙げることができる。
【００７０】
本発明の飲食品組成物は、例えば、粉末、顆粒、カプセル、トローチ、又は錠剤（タブレット）等の固形製剤；シロップ又はドリンク等の液体製剤等、一般にサプリメントとして提供される製剤形態とすることもできる。
【００７１】
本発明の飲食品組成物の摂取させる対象は、ガン幹細胞に誘導し得る幹細胞を保持する生体であって、幹細胞からガン幹細胞への誘導を抑制することを所望する生体である限り、特に限定されない。
【００７２】
例えば、ヒトの他、ウシ、ブタ、イノシシ、ヒツジ、ウマ、ヤギ、ロバ、クマ、トナカイ、ウサギ、トナカイ、及びカエル等の家畜；ニワトリ、アヒル、ガチョウ、シチメンチョウ、バリケン、ウズラ、ダチョウ、ハト、キジ、カモ、及びウ等の家禽；魚類、甲殻類、軟体動物等の養殖海産物；ハチ及びカイコ等の飼育昆虫；イヌ、ネコ、げっ歯類、ウサギ、サル、ブタ等、オウム、インコ、ヘビ、ワニ、カメ、サンショウウオ、観賞魚（金魚及び熱帯魚等）、カブトムシ、クワガタムシ、クモ、サソリ等の愛玩動物を挙げることができる。
【００７３】
本発明の飲食品組成物の摂取量は、適用対象の性別、年齢、当該飲食品組成物の適用形態、所望する効果の程度等に基づいて適宜設定することができ、特に限定されない。例えば、体重５０ｇのマウスであれば、本発明の飲食品組成物の有効成分を、一日当たり、０．１ｍｇ〜１０００ｍｇ程度となる量で摂取させることができる。なお、マウス以外の対象に対する摂取量は、上記する数値範囲を基に、その対象の体重等を勘案して、適宜設定することができる。
【００７４】
本発明の飲食品組成物を摂取させる間隔も、適用対象の性別、年齢、当該飲食品組成物の適用形態、所望する効果の程度等に基づいて適宜設定することができ、特に限定されない。例えば、上記する本発明の飲食品組成物を、一日一回で摂取させてもよいし、２〜３回の複数回の間隔に分けて摂取させてもよい。また、数日〜数週間に一回の間隔で摂取させることもできる。
【００７５】
３．医薬組成物
本発明の医薬組成物に含有される有効成分は、上記する本発明の組成物に含有されるプテロスチルベン及び／又はその配糖体である。プテロスチルベン及び／又はその配糖体は、幹細胞からガン幹細胞への誘導を阻害する効果を発揮するので、本発明の医薬組成物は、ガン幹細胞を産生させない効果を発揮する医薬組成物とすることができる。ガン細胞は、ガン幹細胞から分化するので、本発明の医薬組成物は、ガンの予防及び／又は治療のために、好ましくはガンの予防のために用いることができる。
【００７６】
本発明の医薬組成物に含有される有効成分の量は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。具体的に、１００質量％の医薬組成物に対する有効成分の含有量を、０．００１〜１００質量％程度とすることができる。
【００７７】
本発明の医薬組成物は、上記有効成分と、薬学分野の組成物を製造する際に使用される、薬学的に許容可能な公知の担体又は添加物とを配合することによって、製造することができる。斯かる担体又は添加物は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。例えば、任意の担体、希釈剤、賦形剤、懸濁剤、潤滑剤、アジュバント、媒体、送達システム、乳化剤、錠剤分解物質、吸収剤、保存剤、界面活性剤、着色剤、香料、又は甘味料等を挙げることができる。
【００７８】
本発明の医薬組成物は、上記する担体又は添加物を適宜組み合わせた、種々の剤形とすることができる。よって、本発明の医薬組成物の剤形は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。具体的には、輸液剤、埋め込み注射剤、マイクロニードル、又は持続性注射剤等の注射剤；腹膜透析用剤又は血液透析用剤等の透析用剤；口腔内崩壊錠、チュアブル錠、発泡錠、分散錠、又は溶解錠等の錠剤；硬カプセル錠又は軟カプセル錠等のカプセル剤；発泡顆粒剤、徐放性顆粒剤、又は腸溶性顆粒剤等を含有する顆粒剤；散剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、又はリモナーデ剤等の経口液剤；シロップ剤、経口ゼリー剤、トローチ剤、舌下錠、バッカル錠、付着錠、又はガム剤等の口腔用錠剤；口腔用スプレー剤、口腔用半固形剤、含嗽剤、吸入粉末剤、吸入液剤、又は吸入エアゾール剤等の吸入剤；眼軟膏剤等の点眼剤；点耳剤；点鼻粉末剤又は点鼻液剤等の点鼻剤；坐剤、直腸用半固形剤、注腸剤、膣錠、膣用坐剤、又は外用散剤等の外用固形剤；リニメント剤又はローション剤等の外用液剤；外用エアゾール剤又はポンプスプレー剤等のスプレー剤；軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤、テープ剤、又はパップ剤等の貼付剤等を挙げることができる。
【００７９】
本発明の医薬組成物の投与方法は、上記する各剤形に最適化される公知の投与方法である限り、特に限定されない。具体的には、経口投与、筋肉内投与、静脈内投与、動脈内投与、蜘蛛膜下腔内投与、皮内投与、腹腔内投与、鼻腔内投与、肺内投与、眼内投与、腟内投与、頸部内投与、直腸内投与、又は皮下投与等を挙げることができる。
【００８０】
なお、本発明の医薬組成物の投与対象は、ガン幹細胞に誘導し得る幹細胞を保持する生体（ガンに罹患する可能性がある生体）であって、幹細胞からガン幹細胞への誘導を抑制することを所望する生体（ガンの予防及び／又は治療されることを所望する生体）である限り、特に限定されない。具体的には、上記する飲食品組成物を摂取させる対象と同様にすることができる。
【００８１】
本発明の医薬組成物の投与量は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。具体的には、適用対象の性別や年齢、当該医薬組成物の適用形態、所望する効果の程度などに基づいて、適宜設定することができる。例えば、体重５０ｇのマウスであれば、本発明の医薬組成物の有効成分を、一日当たり、０．１ｍｇ〜１０００ｍｇ程度となる量で投与することができる。なお、マウス以外の対象に対する投与量は、上記する数値範囲を基に、その対象の体重等を勘案して、適宜設定することができる。
【００８２】
本発明の飲食品組成物の投与間隔も、適用対象の性別、年齢、当該飲食品組成物の適用形態、所望する効果の程度等に基づいて適宜設定することができ、特に限定されない。例えば、上記する本発明の飲食品組成物を、一日一回の投与としてもよいし、２〜３回の複数回の間隔に分けて投与してもよい。また、数日〜数週間に一回の間隔の投与とすることもできる。
【００８３】
４．幹細胞用培地組成物
本発明の幹細胞用培地組成物に含有される有効成分は、上記する本発明の組成物に含有されるプテロスチルベン及び／又はその配糖体である。プテロスチルベン及び／又はその配糖体は、幹細胞からガン幹細胞への誘導を阻害する効果を発揮するので、本発明の幹細胞用培地組成物は、ガン幹細胞を産生させない効果を発揮する幹細胞用培地組成物とすることができる。ガン細胞は、ガン幹細胞から分化するので、本発明の幹細胞用培地組成物は、幹細胞を原料に製造される各種細胞、組織、又は臓器等のガン化を予防するために用いることができる。
【００８４】
上記する幹細胞とは、特に限定されない。例えば、ｉＰＳ細胞、胚性幹細胞、又は成体幹細胞等を挙げることができる。成体幹細胞とは、上記する１．組成物の記載を参考にすることができる。
【００８５】
本発明の幹細胞用培地組成物に含有される有効成分の量は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。具体的に、１００質量％の幹細胞用培地添加剤に対する有効成分の含有量を、０．００１〜１００質量％程度とすることができる。
【００８６】
本発明の幹細胞用培地組成物には、再生医療の分野で、幹細胞を原料に各種の臓器を培養して得るために通常使用される分化用又は増殖用培地に含有される成分を、上記する有効成分の他に含有させることができる。このような分化用又は増殖用培地に含有される成分とは、特に限定はされない。具体的には、どのような細胞、組織、又は臓器を分化させる目的の培養であるか又は培養対象とする幹細胞の種類等に鑑みて、適宜決定することができる。
【００８７】
本発明の幹細胞用培地組成物の形状は、本発明の効果を奏する範囲において、特に限定されない。具体的には、液体培地、固体培地、固形培地、半固体培地、反固形培地、二層培地等を挙げることができる。
【００８８】
５．予防及び／又は治療方法
本発明の予防方法は、ガンの罹患に対して予防を所望する生体に、プテロスチルベン及びその配糖体からなる群より選択される少なくとも一種を含有する組成物を接触させる工程を含む、ガンの予防方法である。
【００８９】
本発明の治療方法は、ガンに罹患した生体に、プテロスチルベン及びその配糖体からなる群より選択される少なくとも一種を含有する組成物を接触させる工程を含む、ガンの治療方法である。
【００９０】
プテロスチルベン及びその配糖体からなる群より選択される少なくとも一種を含有する組成物は、上記する１．組成物の記載を参考にすることができる。
【００９１】
本発明の具体的な予防及び治療方法は、上記する１．組成物、２．飲食品組成物、及び３．医薬組成物の記載を参考にすることができる。
【実施例】
【００９２】
以下に、本発明をより詳細に説明するための実施例を示す。なお、本発明が以下の実施例に記載する発明に限定されないのは言うまでもない。
【００９３】
本実施例でサンプルとして使用したプテロスチルベン又はその配糖体は、以下に示す６種類の化合物である。これらの化合物の入手先は、全てマイスターバイオ社である。
【００９４】
（サンプル）
１．プテロスチルベン（アグリコン）
２．プテロスチルベンーα―モノグルコシド
３．プテロスチルベンーβ―モノグルコシド
４．下記式（２）で表される、プテロスチルベンジグルコシド（ｎ＝０）
５．下記式（２）で表される、プテロスチルベントリグルコシド（ｎ＝１）
６．下記式（１）で表される、プテロスチルベンーβ―モノグルコシドと、下記式（２）で表されるプテロスチルベンポリグルコシド（ｎ＝０〜８）との混合物
【００９５】
【化５】
0006727676.tif 000006
【００９６】
（式中、グルコースとスチルベン骨格とのＯ−グリコシド結合は、β結合であり、グルコース間のＯ−グリコシド結合は、全てα結合である。）
フィーダレス培養に純化したマウスｉＰＳ細胞（ｉＰＳ―ＭＥＦ−ＮＧ―２０Ｄ−１７；理化学研究所ＢＲＣ）をガン幹細胞誘導培地に懸濁し、９６ウェルプレートに、ウェル当たり１０００細胞の量で播種した。ガン幹細胞誘導培地とは、ルイス肺癌細胞株（ＪＣＲＢ細胞バンク）の培養上清と、ＬＩＦを含有しないマウスｉＰＳ細胞用培地（ＤＭＥＭ  ｈｉｇｈ  ｇｌｕｃｏｓｅ（和光純薬），１５％  ＦＢＳ，０．１ｍＭ  ＮＥＡＡ，２ｍＭ  Ｌ−Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ，５０Ｕ／ｍｌ  Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ，０．１ｍＭ  ２−ｍｅｒｃａｐｔｏｅｔｈａｎｏｌ）との混合培地である。
【００９７】
５０μｇ／ｍｌの各サンプルを含有するガン幹細胞誘導培地を調製した後に２倍の系列希釈を行い、これらをそれぞれウェルに播種した細胞に曝露した。その翌日から６日目まで、同一のサンプル濃度を含有する培地を用いて、各ウェルの培養上清のハーフチェンジを行った。
【００９８】
コントロール実験として、上記のガン幹細胞誘導培地に０．０５％のＤＭＳＯを添加した実験を行った。また、上記のガン幹細胞誘導培地にする効果を発揮する０．８〜５０μｇ／ｍＬのＰＤ０３２５９０１（ガン幹細胞誘導促進剤；Ｓｔｅｍｇｅｎｔ）及び０．８〜５０μｇ／ｍＬのオールトランスレチノイン酸（ＡＴＲＡ：ガン幹細胞誘導抑制剤；Ｓｔｅｍｇｅｎｔ）を添加した培地を用い、それぞれ上記サンプル同様に、添加する最終濃度を希釈して使用した実験も行った。
【００９９】
（実施例１）蛍光強度の測定によるガン幹細胞誘導抑制の評価
マウスｉＰＳ細胞（ｉＰＳ−ＭＥＦ−Ｎｇ−２０Ｄ−１７）は、Ｎａｎｏｇ遺伝子のプロモーター下流に、ＧＦＰ遺伝子が設けられた核酸を発現する細胞であるため、細胞が未分化な状態であるとＧＦＰ蛍光が強く検出される。これを利用して、この細胞へ各サンプルを暴露した後の７日目に、１．０％のＴｗｅｅｎ２０を加えて各細胞を溶解して、それぞれのウェル内の相対ＧＦＰ蛍光強度を測定し、各細胞がどの程度の幹細胞性を示すかどうかを評価した。
【０１００】
マウスｉＰＳ細胞をガン幹細胞誘導培地において培養を継続すると、ガン幹細胞が誘導される。ガン幹細胞は、未分化細胞であることから、細胞内のＮａｎｏｇ遺伝子の発現に伴って相対ＧＦＰ蛍光が維持され、初日から比較する７日目までは測定されるＧＦＰ蛍光強度が強くなる傾向を示す。各サンプルにおける相対ＧＦＰ蛍光強度を図１に示す。
【０１０１】
図１に示すグラフは、上記サンプルの各濃度で得られた相対ＧＦＰ蛍光強度を、コントロールであるＤＭＳＯを添加したときに得られる相対ＧＦＰ蛍光強度に対して算出した数値である。
【０１０２】
ガン幹細胞の誘導を促進するＰＤ０３２５９０１は、未分化なガン幹細胞の状態を維持するため、１９．４μｇ／ｍｌ以下の添加量であっても、相対ＧＦＰ蛍光強度を１００％以上に増強した。また、それよりも少量の０．８μｇ／ｍｌの添加量であっても、相対ＧＦＰ蛍光強度は、７０％を超えていた。その一方で、ガン幹細胞の誘導を阻害するＡＴＲＡは、０．８μｇ／ｍｌとの低濃度の添加量であっても、その相対ＧＦＰ蛍光強度は、１００％を超えることなく、高濃度の添加量となるにつれて幹細胞性を保持していることを示す相対ＧＦＰ蛍光強度が下がる傾向となった。しかしながら、その強度は５０％を超えることないことから、死滅した細胞は、ほとんど無いと考られる。
【０１０３】
表１のグラフに示す結果から、１００％の相対ＧＦＰ蛍光強度を示す濃度（１００％点）と５０％の相対ＧＦＰ蛍光強度を示す濃度（５０％点）とを、各サンプル毎に算出した結果を、下記の表１に示す。
【０１０４】
【表１】
0006727676.tif 000007
【０１０５】
表１に示す結果から、各サンプルのプテロスチルベン及びその配糖体は、概ね、ｉＰＳ細胞からガン幹細胞への誘導を抑制することが明らかとなった。中でも、プテロスチルベンのアグリコン（サンプル１）、プテロスチルベンーα―モノグルコシド（サンプル２）、プテロスチルベンーβ―モノグルコシド（サンプル３）、プテロスチルベンジグルコシド（サンプル４）、及びプテロスチルベントリグルコシド（サンプル５）による効果が、より優れていることも判明した。
【０１０６】
（実施例２）増殖抑制測定によるがん幹細胞誘導抑制の評価
実施例１と同じ条件にて７日間培養したマウスｉＰＳ細胞を、ＭＴＴアッセイに供した。その結果を図２に示し、この結果から算出したＩＣ５０値を表２に示す。
【０１０７】
【表２】
0006727676.tif 000008
【０１０８】
実施例１に示す実験結果より、全ての上記サンプルは、ＡＴＡＲと同様に分化誘導能を示し、そしてｉＰＳ細胞の死滅する傾向が見受けられなかったことに鑑みると、ＭＴＴアッセイの結果は、細胞が分化することによる増殖の抑制の程度を示していると解釈できる。具体的には、ＩＣ５０値が低い方が、マウスｉＰＳ細胞の増殖が抑制されること、すなわち、ガン幹細胞への誘導を抑制する効果が高いと判断できる。
【０１０９】
そうすると、各サンプルのプテロスチルベン及びその配糖体は、概ね、ｉＰＳ細胞からガン幹細胞への誘導を抑制する効果を発揮することが明らかとなった。中でも、プテロスチルベンのアグリコン（サンプル１）、プテロスチルベンーβ―モノグルコシド（サンプル３）、及びプテロスチルベンジグルコシド（サンプル４）による効果が、より優れていることも判明した。
【要約】      （修正有）【課題】ガン幹細胞を抑制する技術を提供すること。【解決手段】プテロスチルベン及びその配糖体からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、幹細胞からガン幹細胞への誘導を抑制するために用いられる組成物の提供。【選択図】なし【図１】
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【図２】
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