(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
乾燥重量基準で、少なくとも６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）又は少なくとも９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）のタンパク質含有量を有する大豆タンパク質生成物を製造する方法であって、
（ａ）水を用いて大豆タンパク質源を６〜１１のｐＨにて抽出して、タンパク源から大豆タンパク質の可溶化を引き起きして、そして、大豆タンパク質水溶液を形成する工程、
（ｂ）残留大豆タンパク質源から、大豆タンパク質水溶液を少なくとも部分的に分離する工程、
（ｃ）大豆タンパク質水溶液のｐＨを１．５〜３．６のｐＨに調整して、酸性化大豆タンパク質溶液を製造する工程、
（ｄ）酸性化大豆タンパク質溶液から酸不溶性固形物質を分離する工程、
（ｅ）任意選択により、選択膜技術によって、酸性化大豆タンパク質溶液を濃縮する工程、
（ｆ）任意選択で濃縮した大豆タンパク質溶液を任意選択により透析濾過する工程、
（ｇ）任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過した大豆タンパク質溶液を任意選択により乾燥する工程
を含み、
タンパク源材料からのタンパク質を抽出において、あるいは、その他の加工工程においても、カルシウム塩又はその他の塩の直接的な添加及び使用を含まないプロセスである、
方法。
【請求項２】
前記酸不溶性固形物質を任意選択により乾燥して、タンパク質含有量が乾燥量基準で少なくとも６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）の大豆タンパク質生成物を形成する；
前記任意選択の乾燥工程の前に、酸不溶性物質のｐＨを、８．０未満、６．０〜８．０若しくは６．５〜７．５の値に調整する、又は
前記任意選択の乾燥工程の前に、前記酸不溶性固形物質を、ｐＨ１．５〜３．６若しくは酸不溶性物質とほぼ同じｐＨを有する１〜２０容の水と混合することによって洗浄し、次いで、洗浄水から分離する
ことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
任意選択の乾燥工程の前に、洗浄した酸不溶性物質のｐＨを、８．０未満、６．０〜８．０及び６．５〜７．５の値に調整する
ことを特徴とする、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
洗浄水を工程（ｄ）の酸性化大豆タンパク質溶液と合わせ、工程（ｅ）〜（ｇ）のうちの少なくとも一つに記載の処理を施す
ことを特徴とする、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記抽出工程（ａ）を、１℃〜１００℃、１５℃〜６５℃、又は２０℃〜３５℃の温度で実施する；
６〜１１又は７〜８．５のｐＨで抽出が実行されるように、前記抽出工程（ａ）に使用される水は、ｐＨ調整剤を含有しており、
ｐＨ調整剤は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムまたはこれらの組み合わせであり、そして、
前記大豆タンパク質水溶液は、５〜５０ｇ／Ｌ又は１０〜５０ｇ／Ｌのタンパク質濃度
を有する
ことを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
乾燥工程（ｇ）前に、任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過した酸性化大豆タンパク質溶液のｐＨを、８．０未満、６．０〜８．０または６．５〜７．５の値に調整する
ことを特徴とする、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記濃縮及び透析濾過した酸性化大豆タンパク質溶液を、乾燥工程（ｇ）にかけて、少なくとも９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有する大豆タンパク質単離物を提供する
ことを特徴とする、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記酸性化大豆タンパク質水溶液を濃縮工程（ｅ）にかけて、５０〜３００ｇ／Ｌ又は１００〜２００ｇ／Ｌのタンパク質濃度を有する、濃縮酸性化大豆タンパク質溶液を製造する、
前記濃縮工程（ｅ）は、１，０００〜１，０００，０００ダルトン又は１，０００〜１００，０００ダルトンの分画分子量を有する膜を使用した限外濾過によって実施される；
酸性化大豆タンパク質溶液、部分的に濃縮した酸性化大豆タンパク質溶液、または、濃縮酸性化大豆タンパク質溶液は、任意選択により、透析濾過工程（ｆ）にかけられる、
前記透析濾過工程（ｆ）は、水又は酸性化水を使用して、
１〜４０容又は２〜２５容の透析濾過溶液を使用して、有意な更なる量の不純物又は目に見える色が透過画分中に存在しなくなるまで、および／または、少なくとも９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量が有する、大豆タンパク質単離物が提供されるように、残余画分が十分精製されるまで、実施される、そして、
前記透析濾過工程（ｆ）は、１，０００〜１，０００，０００ダルトン又は１，０００〜１００，０００ダルトンの分画分子量を有する膜を使用して、該透析濾過工程（ｆ）の少なくとも一部の間、透析濾過媒体中に酸化防止剤を存在させて、実施される、
前記濃縮工程（ｅ）及び任意選択の透析濾過工程（ｆ）は、２℃〜６５℃または５０℃〜６０℃の温度で実施される
ことを特徴とする、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
少なくとも６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有している、大豆タンパク質生成物であって、
−  大豆タンパク質源からのタンパク質の抽出において、カルシウム又はその他の塩を使用することなく、６〜１１のｐＨで調製されており、
−  ４．０〜５．０のｐＨでのタンパク質沈降を要する処理工程を用いることなく、調製されており、
−  大豆の風味をほとんど有していない又は全く有していない
ことを特徴とする、大豆タンパク質生成物。
【請求項１０】
以下のパラメーター：
（ａ）その製造において酵素を必要としない
（ｂ）１．５ｗｔ％ｄ．ｂ．より多いフィチン酸含有量、
（ｃ）少なくとも９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量、
ならびに
（ｄ）低いトリプシン阻害剤活性、
のうちの少なくとも１つを具えている
ことを特徴とする、請求項９に記載の大豆タンパク質生成物。
【請求項１１】
少なくとも６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有している、大豆タンパク質生成物であって、
（ａ）
ｐＨ２の水中において、４５％〜６５％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
ｐＨ３の水中において、４１％〜６５％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
ｐＨ４の水中において、３５％未満の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
ｐＨ５の水中において、２７％未満の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
ｐＨ６の水中において、３１％〜５５％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、および
ｐＨ７の水中において、３６％〜６５％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性
を有している；
または、
（ｂ）
２ｗｔ％を超えるフィチン酸含有量、ならびに、
ｐＨ２の水中において、１０％〜３５％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
ｐＨ３の水中において、４０％未満の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
ｐＨ４および５の水中において、３０％未満の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
ｐＨ６の水中において、４０％未満の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、および
ｐＨ７の水中において、２０％〜４０％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性
を有している
ことを特徴とする、大豆タンパク質生成物。
【請求項１２】
少なくとも６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量、および
２．０ｗｔ％ｄ．ｂ．を超える、および３．０ｗｔ％ｄ．ｂ．を超える、からなる群から選択されるフィチン酸含有量を有する、大豆タンパク質生成物であって、
０．４８ｇのタンパク質を供給するために十分なタンパク質粉末を１５ｍｌの水中に溶解することによって調製される溶液において、６０を超えるＬ＊読み取り値、
０．４８ｇのタンパク質を供給するために十分なタンパク質粉末を１５ｍｌの水中に溶解することによって調製される溶液において、２６未満のｂ＊読み取り値を有しており；
ｐＨ６の水中において、３０％〜５０％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、ならびに
ｐＨ２の水中において、４０％〜７０％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性を有している
ことを特徴とする、大豆タンパク質生成物。
【請求項１３】
大豆タンパク質生成物であって、
（ａ）
２．３ｗｔ％ｄ．ｂ．を超えるフィチン酸含有量、ならびに、
ｐＨ３の水中において、３８％〜６５％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、および
ｐＨ７の水中において、３５％を超える、１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性を有しており；そして、
移動相０．０５Ｍリン酸塩／０．１５Ｍ  ＮａＣｌ、ｐＨ６を、乾燥大豆タンパク質試料を溶解するために、そして、該大豆タンパク質試料の分析用の移動相として、使用した、サイズ排除クロマトグラフィーによって決定される、下記からなる、分子量プロファイルを有する：
１１〜３５％が、１００，０００Ｄａを超え、
１９〜３９％が、１５，０００〜１００，０００Ｄａの間であり、
９〜２８％が、５，０００〜１５，０００Ｄａの間であり、及び
２１〜３８％が、１，０００〜５，０００Ｄａの間である
ことを特徴とする、大豆タンパク質生成物。
【請求項１４】
少なくとも６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量、ならびに、
２．０ｗｔ％を超える、フィチン酸含有量を有する、大豆タンパク質生成物であって、
水溶液中において、３．６未満の本来のｐＨを持っており、
０．４８ｇのタンパク質を供給するために十分なタンパク質粉末を１５ｍｌの水中に溶解することによって調製される溶液において、９０未満のＬ＊読み取り値、ならびに、
ｐＨ２および３の水中において、４５％を超える、１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
ｐＨ４の水中において、２５％未満の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
ｐＨ５の水中において、３０％未満の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
ｐＨ６の水中において、１２％〜６５％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、および
ｐＨ７の水中において、５８％を超える、１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性を有している
ことを特徴とする、大豆タンパク質生成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、新規且つ独創的な大豆タンパク質生成物及び新規且つ独創的な大豆タンパク質生成物の調製方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
米国特許第8563071号及び同第8691318号、ならびに、２０１３年８月１日に出願された米国特許出願第13/879418号（２０１３年１１月２８日に公開された米国特許公開第2013-0316069号）（「Ｓ７０１」）は、本出願の譲受人に譲渡されており、それらの開示は参照によって本願明細書に組み込まれる。これらの中には、大豆の痕跡を残していない、雑味のない風味は勿論、優れた可溶性、熱安定性及び低ｐＨ溶液中での透明性を具える、タンパク質生成物を調製するための手順が記載されている。
【０００３】
２０１３年６月２４日に出願された米国特許出願第13/924860号（２０１４年１月９日に公開された米国特許公開第2014-0010940号）（「Ｓ７０１Ｎ２」）及び２０１０年１２月２２日に出願された米国特許出願第12/975805号（２０１１年７月７日に公開された米国特許公開第2011-0165314号）及び２０１２年９月５日に出願された同第13/518217号（米国特許公開第2012-0322980号）は、本出願の譲受人に譲渡されており、それらの開示は参照によって本願明細書に組み込まれる。これらの中には、上記の大豆タンパク質生成物の中性又は中性に近いｐＨの形態の提供について記載されている。雑味のない風味を具えている、これらの生成物は、中性又は中性近くのｐＨを有する食品組成物に有用である。溶解性は依然として望ましいが、中性又は中性近くのｐＨの食品への応用例は、通常、不透明であり、したがって、水中での完全な溶解性及び透明性は必ずしも必要条件ではない。
【０００４】
前述の米国特許第8563071号及び同第8691318号、ならびに、米国特許出願第13/879418号、同第13/924860号、同第12/975805号及び同第13/518217号に記載の手順においては、タンパク質の抽出は、カルシウム塩溶液を用いて実施されている。カルシウム塩溶液は、タンパク源由来のタンパク質の可溶化を助け、その一方では、沈降し、また、残留タンパク質源と一緒に残る、フィチン酸から、タンパク質を分離させる。タンパク質抽出溶液を、任意選択により水で希釈し、そして、ｐＨを約１．５〜約４．４に調整して、透明な酸性化タンパク質溶液を供給している。いかなる特定の理論にも束縛されることを望まないが、これらの手順によって得られる大豆タンパク質生成物の雑味のない風味は、好ましくは、引き続く、任意選択の膜処理工程と組み合わせて、試料の低ｐＨ処理によって、促進されていると考えられている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許第8,563,071号
【特許文献２】米国特許第8,691,318号
【特許文献３】米国特許公開第2013-0316069号
【特許文献４】米国特許公開第2014-0010940号
【特許文献５】米国特許公開第2011-0165314号
【特許文献６】米国特許公開第2012-0322980号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
前述の米国特許第8563071号及び同第8691318号、ならびに、米国特許出願第13/879418号、同第13/924860号、同第12/975805号及び同第13/518217号に記載の手順に伴う、一つ潜在的な心配事は、タンパク質抽出工程を行うために必要なカルシウム塩の量、ならびに、プロセスの廃棄物流中のカルシウム塩の回収又は廃棄は勿論、プロセスに導入されている、多量の塩の排出とその費用である。カルシウム塩の低減又は排除は、結果として、タンパク質生成物の加工ならびに製造の費用を大幅に節約できる。
【０００７】
本発明は、大豆臭の痕跡が非常に少ない又は全くない、食品及び飲料製品の強化に有用であり、プロセス中、塩を使用せずに調製される、大豆タンパク質生成物を対象とする。本発明の大豆タンパク質生成物は、水を用いて大豆タンパク質源を抽出して大豆タンパク質水溶液を形成し、大豆タンパク質水溶液を残留大豆タンパク質源から少なくとも部分的に分離し、大豆タンパク質水溶液のｐＨを約１．５〜約３．６のｐＨに調整して、タンパク質の少なくとも一部を可溶化し、酸性化大豆タンパク質溶液を形成し、次いで、酸性化大豆タンパク質溶液を酸不溶性固形物質から分離することによって得られる。酸性化大豆タンパク質溶液を、任意選択の濃縮及び透析濾過の後に、乾燥して、単離物であり得る、大豆タンパク質生成物を形成することができる。酸不溶性固形物質を酸性化水で洗浄し、次いで乾燥して、別の大豆タンパク質生成物を形成することもできる。これらの生成物は、これらを調製した酸性のｐＨで乾燥することができ、あるいは、乾燥前にｐＨを調整することもできる。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
発明の概要
本発明は、大豆臭の痕跡が非常に少ない、又は実質に全くない、新規且つ独創的な大豆タンパク質生成物、ならびに、タンパク源材料からのタンパク質を抽出において、あるいは、その他の加工工程においても、カルシウム塩又はその他の塩の直接的な添加及び使用を含まないプロセスである、新規且つ独創的な調製プロセスに関する。
【０００９】
従って、本発明の一形態では、
乾燥重量基準で、少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）、好ましくは少なくとも約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）のタンパク質含有量を有する、大豆タンパク質生成物を製造する方法であって、
（ａ）水を用いて大豆タンパク質源を抽出して、タンパク質源からの大豆タンパク質の可溶化を引き起こし、そして、大豆タンパク質水溶液を形成する工程、
（ｂ）残留大豆タンパク質源から、大豆タンパク質水溶液を少なくとも部分的に分離する工程、
（ｃ）大豆タンパク質水溶液のｐＨを約１．５〜約３．６のｐＨに調整して、酸性化大豆タンパク質溶液を製造する工程、
（ｄ）酸性化大豆タンパク質溶液から酸不溶性固形物質を分離する工程、
（ｅ）任意選択により、選択膜技術によって、酸性化大豆タンパク質溶液を濃縮する工程、
（ｆ）任意選択で濃縮した大豆タンパク質溶液を任意選択により透析濾過する工程、
（ｇ）任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過した大豆タンパク質溶液を任意選択により乾燥する工程
を含む、方法が、提供される。
【００１０】
本発明の一実施態様において、低いｐＨで調製された際には、本発明の大豆タンパク質生成物は、低いｐＨを有する食品応用における使用によく適している。
【００１１】
本発明の一実施態様では、酸性化大豆タンパク質溶液又は任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過した酸性化大豆タンパク質溶液のｐＨを、任意選択の乾燥工程に先立ち、約８．０未満に調整する。本発明の別の実施態様では、酸性化大豆タンパク質溶液又は任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過した酸性化大豆タンパク質溶液のｐＨを、任意選択の乾燥工程に先立ち、約６．０〜約８．０に調整する。本発明の別の実施態様では、酸性化大豆タンパク質溶液又は任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過した酸性化大豆タンパク質溶液のｐＨを、任意選択の乾燥工程に先立ち、約６．５〜約７．５に調整する。
【００１２】
本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物が中性又は中性に近いｐＨで提供される際には、中性飲料又はバー等、中性又は中性に近い食品応用における使用に適した形状である。
【００１３】
本発明の一実施態様では、本発明のプロセスから生じ、そして、上記の工程（ｄ）に記載のように、収集された酸不溶性固形物質を、更に加工して、別の大豆タンパク質生成物を与える。酸性化大豆タンパク質溶液由来の生成物と比べて、この生成物は、一般的に、より低い純度と、また、高レベルの大豆臭を有することがある。しかし、酸不溶性固形物質由来の生成物の純度及び風味は、食品及び飲料応用における使用に、依然として適している程度である。
【００１４】
本発明の実施態様では、酸不溶性固形物質を任意選択により乾燥して、乾燥重量基準で少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）のタンパク質含有量を有する大豆タンパク質生成物を形成する。
【００１５】
本発明の実施態様では、酸不溶性固形物質のｐＨを、任意選択の乾燥工程に先立ち、約８．０未満に調整する。本発明の別の実施態様では、酸不溶性物質のｐＨを、任意選択の乾燥工程に先立ち、約６．０〜約８．０に調整する。本発明の別の実施態様では、酸不溶性物質のｐＨを、任意選択の乾燥工程に先立ち、約６．５〜約７．５に調整する。
【００１６】
本発明の実施態様では、約１．５〜約３．６及び酸不溶性物質のｐＨとほぼ同じｐＨからなる群から選択されるｐＨを有する、約１〜約２０容の水と混合することによって、酸不溶性固形物質を洗浄し、その後、任意選択による乾燥工程に先立ち、洗浄水から分離する。
【００１７】
本発明の実施態様では、洗浄済の酸不溶性物質のｐＨを、任意選択の乾燥工程に先立ち、約８．０未満に調整する。本発明の別の実施態様では、洗浄済の酸不溶性物質のｐＨを、任意選択の乾燥工程に先立ち、約６．０〜約８．０に調整する。本発明の別の実施態様では、洗浄済の酸不溶性物質のｐＨを、任意選択の乾燥工程に先立ち、約６．５〜約７．５に調整する。
【００１８】
本発明の実施態様では、洗浄水を、分離工程（ｄ）の酸性化大豆タンパク質溶液と組み合わせて、そして、工程（ｅ）、（ｆ）及び／又は（ｇ）に記載の処理を施す。
【００１９】
本発明の実施態様では、抽出工程（ａ）は、約１℃〜約１００℃の温度で実行される。本発明の別の実施態様では、抽出工程（ａ）は、約１５℃〜約６５℃の温度で実行される。本発明の別の実施態様では、抽出工程（ａ）は、約５０℃〜約６０℃の温度で実行される。
【００２０】
本発明の実施態様では、約６〜約１１のｐＨで抽出が実施されるように、抽出に使用される水はｐＨ調整剤を含有する。本発明の別の実施態様では、約７〜約８．５のｐＨで抽出が実施されるように、抽出に使用される水はｐＨ調整剤を含有する。本発明の別の実施態様では、ｐＨ調整剤は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、又はいずれかのその他の従来の食品用アルカリ、ならびに、これらの組み合わせである。
【００２１】
本発明の一実施態様では、抽出に使用される水は酸化防止剤を含有する。
【００２２】
本発明の一実施態様では、分離工程（ｂ）から生じる大豆タンパク質水溶液は、約５〜約５０ｇ／Ｌのタンパク質濃度を有する。本発明の別の実施態様では、大豆タンパク質水溶液は、約１０〜約５０ｇ／Ｌのタンパク質濃度を有する。
【００２３】
本発明の実施態様では、分離工程（ｂ）後、酸性化工程（ｃ）前に、大豆タンパク質水溶液を吸着剤で処理して、タンパク質水溶液から色及び／又は臭気化合物を除去する。
【００２４】
本発明の一実施態様では、分離工程（ｂ）後、酸性化工程（ｃ）前に、大豆タンパク質水溶液を約１〜約３５℃の温度に調整する。別の実施態様では、大豆タンパク質水溶液の温度を、約１５〜約３５℃に調整する。
【００２５】
本発明の実施態様では、酸性化工程（ｃ）において、前記大豆タンパク質水溶液のｐＨを、約２．０〜約２．５に調整する。
【００２６】
本発明の実施態様では、分離工程（ｄ）に続いて、酸性化タンパク質水溶液を加熱処理工程にかける。本発明の実施態様では、加熱処理工程は、熱不安定性の抗栄養因子を不活性化するために実行する。本発明の実施態様では、抗栄養因子は、熱不安定性トリプシン阻害剤である。本発明の別の実施態様では、加熱処理工程は、酸性化タンパク質水溶液を低温殺菌するために実行する。
【００２７】
本発明の実施態様では、加熱処理は、約７０℃〜約１６０℃の温度で約１０秒間〜約６０分間、実施する。本発明の別の実施態様では、加熱処理は、約８０℃〜約１２０℃の温度で約１０秒間〜約５分間、実施する。本発明の別の実施態様では、加熱処理は、約８５℃〜約９５℃の温度で約３０秒間〜約５分間、実施する。
【００２８】
本発明の実施態様では、加熱処理した酸性化大豆タンパク質溶液を、約２℃〜約６５℃の温度に冷却する。本発明の別の実施態様では、加熱処理した酸性化大豆タンパク質溶液を、約５０℃〜約６０℃の温度に冷却する。
【００２９】
本発明の実施態様では、酸性化大豆タンパク質水溶液を乾燥して、少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有する、大豆タンパク質生成物を与える。
【００３０】
本発明の一実施態様では、酸性化大豆タンパク質水溶液を、濃縮工程（ｅ）にかける。本発明の別の実施態様では、酸性化大豆タンパク質水溶液を、濃縮工程（ｅ）にかけて、約５０〜約３００ｇ／Ｌのタンパク質濃度を有する、濃縮した酸性化大豆タンパク質溶液を製造する。
【００３１】
本発明の別の実施態様では、酸性化大豆タンパク質水溶液を、濃縮工程（ｅ）にかけて、約１００〜約２００ｇ／Ｌのタンパク質濃度を有する、濃縮した酸性化大豆タンパク質溶液を製造する。
【００３２】
本発明の実施態様では、濃縮工程（ｅ）は、約１，０００〜約１，０００，０００ダルトンの分画分子量を有する膜を使用する、限外濾過によって、実施される。本発明の別の実施態様では、濃縮工程（ｅ）は、約１，０００〜１００，０００ダルトンの分画分子量を有する膜を使用する限外濾過によって、実施される。
【００３３】
本発明の一実施態様では、酸性化大豆タンパク質溶液を、透析濾過工程（ｆ）にかける。本発明の一実施態様では、透析濾過工程（ｆ）は、濃縮工程（ｅ）無しで、または、その前、あるいは、その部分的若しくは完全な濃縮後に、酸性化大豆タンパク質水溶液に対して、水又は酸性化水を使用して実施される。
【００３４】
本発明の実施態様では、透析濾過工程（ｆ）は、約１〜約４０容の透析濾過溶液を使用し実行される。本発明の別の実施態様では、透析濾過工程（ｆ）は、約２〜約２５容の透析濾過溶液を使用して実行される。
【００３５】
本発明の実施態様では、透析濾過工程（ｆ）は、有意な更なる量の不純物又は目に見える色が、浸透液中に存在しなくなるまで、実行される。
【００３６】
本発明の実施態様では、透析濾過工程（ｆ）は、少なくとも約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有する、大豆タンパク質単離物を与えるように、濃縮液が十分に精製されるまで、実施される。
【００３７】
本発明の実施態様では、透析濾過工程（ｆ）は、約１，０００〜約１，０００，０００ダルトンの分画分子量を有する膜を使用して、実行される。本発明の別の実施態様では、透析濾過工程（ｆ）は、約１，０００〜約１００，０００ダルトンの分画分子量を有する膜を使用して、実行される。
【００３８】
本発明の実施態様では、透析濾過工程（ｆ）の少なくとも一部の間、酸化防止剤が透析濾過媒体中に存在する。
【００３９】
本発明の実施態様では、濃縮工程（ｅ）及び／又は透析濾過工程（ｆ）は、約２℃〜約６５℃の温度で実施される。本発明の別の実施態様では、濃縮工程（ｅ）及び／又は透析濾過工程（ｆ）は、約５０℃〜約６０℃の温度で実施される。
【００４０】
本発明の一実施態様では、任意選択で部分的若しくは完全に濃縮及び任意選択で透析濾過した酸性化大豆タンパク質溶液を、加熱処理工程にかける。本発明の一実施態様では、加熱処理工程は、熱不安定性トリプシン阻害剤等の熱不安定性の抗栄養因子を不活性化するために実行する。
【００４１】
本発明の実施態様では、加熱処理は、約７０℃〜約１６０℃の温度で、約１０秒間〜約６０分間、実施される。本発明の別の実施態様では、加熱処理は、約８０℃〜約１２０℃の温度で、約１０秒間〜約５分間、実施される。本発明の別の実施態様では、加熱処理は、約８５℃〜約９５℃の温度で、約３０秒間〜約５分間、実施される。
【００４２】
本発明の実施態様では、加熱処理した大豆タンパク質溶液を、約２℃〜約６５℃の温度に冷却する。本発明の別の実施態様では、加熱処理した大豆タンパク質溶液を、約５０℃〜約６０℃の温度に冷却する。
【００４３】
本発明の実施態様では、任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過した酸性化タンパク質溶液を吸着剤で処理して、色及び／又は臭気化合物を除去する。
【００４４】
本発明の実施態様では、乾燥に先立ち、任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過した酸性化タンパク質溶液を低温殺菌する。
【００４５】
本発明の実施態様では、低温殺菌工程は、約５５℃〜約７５℃の温度で、約１５秒間〜約６０分間、実施される。
【００４６】
本発明の実施態様では、任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過した酸性化大豆タンパク質溶液を乾燥工程（ｇ）にかけて、少なくとも約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有する、大豆タンパク質単離物を提供する。出願人は、この大豆タンパク質単離物を、Ｓ８１０と名付けている。
【００４７】
本発明の実施態様では、任意選択の乾燥工程（ｇ）に先立ち、任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過した酸性化大豆タンパク質溶液のｐＨを約８．０未満に調整している。本発明の別の実施態様では、任意選択の乾燥工程（ｇ）に先立ち、任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過した酸性化大豆タンパク質溶液のｐＨを約６．０〜約８．０に調整している。本発明の別の実施態様では、任意選択の乾燥工程（ｇ）に先立ち、任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過した酸性化大豆タンパク質溶液のｐＨを約６．５〜約７．５に調整している。
【００４８】
本発明の一実施態様では、任意選択の濃縮及び／又は任意選択の透析濾過工程は、トリプシン阻害剤の除去に好適な様式で操作する。
【００４９】
本発明の一実施態様では、抽出工程（ａ）の間、還元剤を存在させる。本発明の別の実施態様では、任意選択の濃縮工程（ｅ）及び／又は任意選択の透析濾過工程（ｆ）の間、還元剤を存在させる。本発明の別の実施態様では、乾燥工程（ｇ）に先立ち、任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過した大豆タンパク質溶液に、及び／又は乾燥済の大豆タンパク質生成物に、還元剤を添加する。本発明の一実施態様では、還元剤は、亜硫酸ナトリウム、システイン、Ｎ−アセチルシステイン及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。本発明の実施態様では、還元剤の存在は、トリプシン阻害剤のジスルフィド結合を開裂又は再配置して、トリプシン阻害剤活性の低下を実現することを意図している。
【００５０】
従って、本発明の別の形態では、塩の直接的な添加を必要とするプロセス工程を及び約４．０〜約５．０のｐＨでのタンパク質沈降を伴うプロセス工程を用いることなく、調製され、大豆臭さがほとんどない又は全くない、少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有する、大豆タンパク質生成物が提供される。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物の製造は、酵素の使用を必要としない。本発明の別の実施態様では、大豆タンパク質生成物は、約１．５ｗｔ％ｄ．ｂ．を超えるフィチン酸を含有する。本発明の別の実施態様では、大豆タンパク質生成物は、少なくとも約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有する。本発明の別の実施態様では、大豆タンパク質生成物は、低いトリプシン阻害剤活性を有している。
【００５１】
従って、本発明の別の形態では、本発明の大豆タンパク質生成物を含有するように調合された食品が提供される。本発明の一実施態様では、食品は飲料である。
【００５２】
従って、本発明の別の形態では、
少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量、ならびに、
約２のｐＨの水中において、約４５％〜６６％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
約３のｐＨの水中において、約３５％〜６５％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
約４のｐＨの水中において、約３５％未満の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
約５のｐＨの水中において、３０％未満の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
がであり、
約６のｐＨの水中において、約２５％〜約５５％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、および、
約７のｐＨの水中において、約３６％〜約６５％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性を有している、大豆タンパク質生成物が提供されている。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物の溶解性は、例６の方法によって決定される。
【００５３】
従って、本発明の別の形態では、
少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量、ならびに、
３．０ｍｌ／ｇを超える、水分結合能、
約２及び約３のｐＨの水中において、約４５％を超える、１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
約４のｐＨの水中において、約２５％未満の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
約５のｐＨの水中において、約３０％未満の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
約６のｐＨの水中において、６５％未満の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、および、
約７のｐＨの水中において、約５８％を超える、１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性を有している、大豆タンパク質生成物が提供されている。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物の溶解性は、例６の方法によって決定される。本発明の別の実施態様では、水分結合能は、例１０の方法によって決定される。
【００５４】
従って、本発明の別の形態では、
少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量、ならびに、
１．５ｗｔ％を超える、フィチン酸含有量、
約２のｐＨの水中において、約１０％〜約３５％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
約３のｐＨの水中において、約４０％未満の１％タンパク質ｗ／ｖでの溶解性、
約４及び約５のｐＨの水中において、約３０％未満の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、
約６のｐＨの水中において、約４０％未満の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性、  約７のｐＨの水中において、約１５％から約４０％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性を有している、大豆タンパク質生成物が提供される。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物の溶解性は、例６の方法によって決定される。
【００５５】
従って、本発明の別の形態では、
約２６〜約４２％が、約１００，０００Ｄａを超え、
約３１〜約５２％が、約１５，０００〜約１００、０００Ｄａの間であり、
約４〜約２１％が、約５，０００〜約１５，０００Ｄａの間であり、及び
約３〜約２５％が、約１，０００〜約５、０００Ｄａの間である
からなる分子量プロファイルを有する、大豆タンパク質生成物が提供される。本発明の一実施態様では、前記分子量プロファイルは、
約３１〜約３７％が、約１００，０００Ｄａを超え、
約３６〜約４７％が、約１５，０００〜約１００，０００Ｄａの間であり、
約９〜約１６％が、約５，０００〜約１５，０００Ｄａの間であり、及び
約８〜約２０％が、約１，０００〜約５，０００Ｄａの間である、からなる。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物の分子量プロファイルは、約３．５のｐＨで決定される。本発明の実施態様では、大豆タンパク質生成物の分子量プロファイルは、例７の方法によって決定される。本発明の一実施態様では、上記の分子量プロファイルのうちの１つを有する大豆タンパク質生成物は、約１．５ｗｔ％を超える、フィチン酸含有量を有している。
【００５６】
従って、本発明の別の形態では、
約２２〜約８５％が、約１００，０００Ｄａを超え、
約８〜約５０％が、約１５,０００〜約１００，０００Ｄａの間であり、
約０〜約２３％が、約５，０００〜約１５，０００Ｄａの間であり、及び
約０〜約１８％が、約１，０００〜約５，０００Ｄａの間である
からなる分子量プロファイルを有する、大豆タンパク質生成物が提供される。本発明の一実施態様では、前記分子量プロファイルは、
約２７〜約８０％が、約１００，０００Ｄａを超え、
約１３〜約４５％が、約１５，０００〜約１００，０００Ｄａの間であり、
約４〜約１８％が、約５，０００〜約１５，０００Ｄａの間であり、及び
約２〜約１３％が、約１，０００〜約５，０００Ｄａの間である、からなる。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物の分子量プロファイルは、約３．５のｐＨで決定される。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物の分子量プロファイルは、例７の方法によって決定される。本発明の一実施態様では、上記の分子量プロファイルのうちの１つを有する大豆タンパク質生成物は、約１．５ｗｔ％を超える、フィチン酸含有量を有している。本発明の一実施態様では、上記の分子量プロファイルのうちの１つを有する大豆タンパク質生成物は、約２．０ｗｔ％を超える、フィチン酸含有量を有している。
【００５７】
従って、本発明の別の形態では、
約４〜約３４％が、約１００，０００Ｄａを超え、
約１０〜約４２％が、約１５，０００〜約１００，０００Ｄａの間であり、
約２〜約２２％が、約５，０００〜約１５，０００Ｄａの間であり、及び
約２２〜約７２％が、約１，０００〜約５，０００Ｄａの間である
からなる分子量プロファイルを有する、大豆タンパク質生成物が提供される。本発明の実施態様では、前記分子量プロファイルは、
約９〜約２９％の約１００，０００Ｄａを超え、
約１５〜約３７％の約１５，０００〜約１００，０００Ｄａの間であり、
約７〜約１７％の約５，０００〜約１５，０００Ｄａの間であり、及び
約２７〜約６７％の約１，０００〜約５，０００Ｄａの間である、からなる。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物の分子量プロファイルは、約３．５のｐＨで決定される。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物の分子量プロファイルは、例７の方法によって決定される。本発明の一実施態様では、上記の分子量プロファイルのうちの１つを有する大豆タンパク質生成物は、約１．５ｗｔ％を超える、フィチン酸含有量を有している。本発明の別の実施態様では、上記の分子量プロファイルのうちの１つを有する大豆タンパク質生成物のフィチン酸含有量は、約２．０ｗｔ％を超える。
【００５８】
従って、本発明の別の形態では、
約１１〜約３５％が、約１００，０００Ｄａを超え、
約１９〜約３９％が、約１５，０００〜約１００，０００Ｄａの間であり、
約９〜約２８％が、約５,０００〜約１５，０００Ｄａの間であり、及び
約１９〜約３８％が、約１，０００〜約５，０００Ｄａの間である
からなる分子量プロファイルを有する、大豆タンパク質生成物が提供される。本発明の一実施態様では、前記分子量プロファイルは、
約１６〜約３０％が、約１００，０００Ｄａを超え、
約２４〜約３４％が、約１５，０００〜約１００，０００Ｄａの間であり、
約１４〜約２３％が、約５，０００〜約１５，０００Ｄａの間であり、及び
約２１〜約３３％が、約１，０００〜約５，０００Ｄａの間である、からなる。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物の分子量プロファイルは、約６のｐＨで決定される。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物の分子量プロファイルは、例１１の方法によって決定される。本発明の実施態様では、大豆タンパク質生成物は、約１．５ｗｔ％を超える、フィチン酸含有量を有している。
【００５９】
従って、本発明の別の形態では、
約２〜約３２％が、約１００，０００Ｄａを超え、
約１７〜約４２％が、約１５，０００〜約１００，０００Ｄａの間であり、
約８〜約３８％が、約５，０００〜約１５，０００Ｄａの間であり、及び
約１９〜約４６％が、約１０００〜約５０００Ｄａの間である
からなる分子量プロファイルを有する、大豆タンパク質生成物が提供される。本発明の一実施態様では、前記分子量プロファイルは、
約７〜約２７％が、約１００，０００Ｄａを超える、
約２２〜約３７％が、約１５，０００〜約１００，０００Ｄａの間であり、
約１３〜約３３％が、約５，０００〜約１５，０００Ｄａの間であり、及び
約２４〜約４１％が、約１，０００〜約５，０００Ｄａの間である、からなる。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物の分子量プロファイルは、約６のｐＨで決定される。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物の分子量プロファイルは、例１１の方法によって決定される。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物は、約１．５ｗｔ％を超える、フィチン酸含有量を有している。本発明の別の実施態様では、大豆タンパク質生成物は、約２．０ｗｔ％を超える、フィチン酸含有量を有している。
【００６０】
従って、本発明の別の形態では、
約１〜約３０％が、約１００，０００Ｄａを超え、
約２７〜約５０％が、約１５，０００〜約１００，０００Ｄａの間であり、
約６〜約３６％が、約５，０００〜約１５，０００Ｄａの間であり、及び
約１４〜約４９％が、約１，０００〜約５，０００Ｄａの間である
からなる分子量プロファイルを有する、大豆タンパク質生成物が提供される。本発明の一実施態様では、前記分子量プロファイルは、
約６〜約２５％が、約１００，０００Ｄａを超え、
約３２〜約４５％が、約１５，０００〜約１００，０００Ｄａの間であり、
約１１〜約３１％が、約５，０００〜約１５，０００Ｄａの間であり、及び
約１９〜約４４％が、約１，０００〜約５，０００Ｄａの間である、からなる。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物の分子量プロファイルは、約６のｐＨで決定される。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物の分子量プロファイルは、例１１の方法によって決定される。本発明の一実施態様では、大豆タンパク質生成物は、約１．５ｗｔ％を超える、フィチン酸含有量を有している。本発明の別の実施態様では、大豆タンパク質生成物は、約２．０ｗｔ％を超える。フィチン酸含有量を有している。
【００６１】
従って、本発明の別の形態では、
０．４８ｇのタンパク質を供給するために十分なタンパク質粉末を１５ｍｌの水中に溶解することによって調製される溶液において、約６０を超える、Ｌ＊読み取り値、及び、
０．４８ｇのタンパク質を供給するために十分なタンパク質粉末を１５ｍｌの水中に溶解することによって調製される溶液において、約２６未満のｂ＊読み取り値、ならびに、
約６のｐＨの水中において、約１０％〜約５０％の間の１％タンパク質ｗ／ｖでのタンパク質溶解性を有しており、
少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量、ならびに、約２．０ｗｔ％を超える、フィチン酸含有量を有する、大豆タンパク質生成物が提供される。本発明の別の実施態様では、前述のＬ＊及びｂ＊読み取り値を有する溶液を提供し、かつ、約６のｐＨの水中において、前述の溶解性を有する、大豆タンパク質生成物は、約３．０％を超える、フィチン酸含有量を有している。
【００６２】
本明細書中に開示する、本発明のプロセスによって製造された大豆タンパク質生成物は、これらに限定されないが、加工食品及び飲料のタンパク質強化、並びに、食品及び飲料中の機能性成分をはじめとする、広範囲な従来のタンパク質生成物の応用における用途に適している。本発明の大豆タンパク質生成物のその他の用途は、ペットフード、動物飼料、並びに、産業及び化粧品での応用、そして、パーソナルケア生成物中である。
【図面の簡単な説明】
【００６３】
【図１】図１は、本発明のプロセスの一実施態様の模式的なフローシートである。
【発明を実施するための形態】
【００６４】
発明の全般的な説明
本発明の大豆タンパク質生成物の製造プロセスの最初の工程は、大豆タンパク質源からの大豆タンパク質を可溶化する過程を伴っている。大豆タンパク質源は、大豆、若しくは、任意の大豆生成物、あるいは、これらに限定されないが、脱脂大豆かす、大豆フレーク、大豆グリット、及び大豆粉をはじめとする、大豆の加工から分取された副産物であってもよい。大豆タンパク質源は、脂肪分が高い形態、部分的に脱脂した形態、又は完全に脱脂した形態で使用することができる。大豆タンパク質源が相当量の脂肪を含有している場合、一般的には、プロセス中に、油の除去工程が必要とされる。大豆タンパク質源から回収される大豆タンパク質は、大豆中に天然に存在するタンパク質であってよい、あるいは、該タンパク性材料は、遺伝子操作によって修飾されているが、天然タンパク質の特徴的な疎水性及び極性の特性を有している、タンパク質であってもよい。
【００６５】
本発明の大豆タンパク質生成物は、バッチ法又は連続法若しくは半連続法のいずれかによって大豆タンパク質源から調製することができる。大豆タンパク質源材料からのタンパク質の可溶化は、水を使用して実施する。使用される水は、飲料水又は異なる純度のレベルを有する水であってよい。逆浸透（ＲＯ）純水が好ましい。
【００６６】
抽出液のｐＨは、約６〜約１１、好ましくは、約７．０〜約８．５とすることができる。食品グレード水酸化ナトリウム、水酸化カリウム又はその他の任意の従来の食品グレードアルカリ、ならびにこれらの組み合わせを、水に添加して、要求される抽出液のｐＨに調整してもよい。タンパク質の可溶化は、約１℃〜約１００℃、好ましくは約１５℃〜約６５℃、より好ましくは約５０℃〜約６０℃の温度で、好ましくは、通常約１〜約６０分間である、可溶化時間を短縮するため、同時に攪拌しつつ、実施する。全体的に高生成収率を提供するように、実質的に、実現可能な限り、多量のタンパク質を、大豆タンパク質源から抽出するため、可溶化を実施することが好ましい。
【００６７】
大豆タンパク質源からのタンパク質の抽出は、連続的に操作する場合、大豆タンパク質源からのタンパク質の連続的抽出の実施と両立する、任意の様式で実施する。一実施態様において、大豆タンパク質源を水と連続的に混合し、そして、本明細書に記載のパラメーターに従って所望の抽出を行うために十分な滞留時間のための長さ及び流量を有するパイプ又はコンジットを通じて、該混合物を搬送する。
【００６８】
可溶化工程中の、水中での大豆タンパク質源の濃度は、広範に分布してもよい。典型的な濃度値は、約５〜約１５％ｗ／ｖである。
【００６９】
タンパク質の抽出工程は、大豆タンパク質源中に存在している脂肪を可溶化する付加的な効果を有しており、その結果、その後、水性相中に脂肪が存在している。
【００７０】
該抽出工程から得られるタンパク質溶液は、一般的に、約５〜約５０ｇ／Ｌ、好ましくは約１０〜約５０ｇ／Ｌのタンパク質濃度を有する。
【００７１】
抽出の水は、酸化防止剤を含有することができる。酸化防止剤は、亜硫酸ナトリウム又はアスコルビン酸等の、任意の従来の酸化防止剤であってよい。用いる酸化防止剤の量は、溶液の約０．０１から約１ｗｔ％まで増減することができ、好ましくは約０．０５ｗｔ％である。酸化防止剤は、タンパク質溶液中の任意のフェノール性物質の酸化を阻害するのに役立つ。
【００７２】
次いで、抽出工程から得られる水性相を、例えば、デカンター遠心分離を採用して、任意の従来の方法で、残留大豆タンパク質源の塊から分離することができる。好ましくは、微細な残留大豆タンパク質源材料が、大豆タンパク質溶液中に残こっているが、要望に応じて、こうした微細固形物を、ディスク遠心分離及び／又は濾過等により、任意の従来の手法で除去することができる。分離工程は、抽出工程と同じ温度で、あるいは、約１℃〜約１００℃、好ましくは約１５℃〜約６５℃、より好ましくは約５０℃〜約６０℃の範囲内の任意の温度で実施することができる。分離した残留大豆タンパク質源材料を、廃棄又は更なる加工のために乾燥し、例えば、残留タンパク質を回収することができる。残留タンパク質は、分離した残留大豆タンパク質源を清水で再抽出することによって回収することができ、そして、下記の更なる加工のため、清澄化で得られるタンパク質溶液は、最初のタンパク質溶液と合わされる。向流抽出の手順を利用してよい。その代わりに、分離される残留大豆タンパク質源を、残留タンパク質を回収するため、任意の他の従来の手順によって加工することもできる。
【００７３】
大豆タンパク質水溶液を、任意の好適な食品グレード非シリコーン系消泡剤等の消泡剤で処置して、更なる加工時に形成される泡の容量を低減することができる。用いる消泡剤の量は、一般的に、約０．０００３％ｗ／ｖを超える。あるいは、抽出工程中に、記載される量の消泡剤を添加することもできる。
【００７４】
分離された大豆タンパク質水溶液を、要望又は必要に応じて、脱脂操作にかけてよい。分離した大豆タンパク質水溶液の脱脂は、任意の従来の手順によって達成できる。
【００７５】
大豆タンパク質水溶液を、粒状活性炭等の吸着剤で処理して、色及び／又は臭気化合物を除去することができる。このような吸着剤処理は、一般的に分離したタンパク質水溶液の周囲温度で、任意の通常の条件下で実施することができる。
【００７６】
次いで、大豆タンパク質溶液のｐＨを、塩酸、リン酸、又はその他の任意の従来の食品グレード酸及びこれらの組み合わせ等の、任意の従来の食品用酸の添加によって、約１．５〜約３．６、好ましくは約２．０〜約２．５に調整する。大豆タンパク質の場合、通常、約４．５のｐＨで等電沈殿がなされる。本発明のプロセスにおいて、ｐＨをより低い値に調整することによって、大部分のタンパク質、好ましくは有意な部分のタンパク質、例えば約２５ｗｔ％またはそれ以上、好ましくは約６０ｗｔ％またはそれ以上、より好ましくは約８０ｗｔ％またはそれ以上のタンパク質が、酸性化溶液中で、溶解性である。任意の従来の手段によって、例えば、ディスクスタック遠心分離を用いることによって、酸性化大豆タンパク質溶液から除去され、下記のように更に加工される、酸不溶性固形物質と呼ばれるものの中に、残存タンパク質は含有されている。ｐＨの調整は、大豆タンパク質溶液の温度で行うこともできるが、大豆タンパク質は低温の酸性化タンパク質溶液中に高比率で溶解するため、ｐＨの調整のためには、大豆タンパク質溶液の温度は、１℃〜３５℃、より好ましくは１５℃〜３５℃であることが好ましい。要望に応じて、上記の酸性化工程に先立ち、大豆タンパク質溶液を水で希薄することができる。
【００７７】
要望に応じて、酸性化タンパク質溶液のｐＨを、更なる加工に先立ち、更に低下させることができる。酸性化タンパク質溶液の調整されたｐＨは、依然として、約１．５〜約３．６、好ましくは約２．０〜約２．５の範囲であるべきである。
【００７８】
抽出工程中に大豆タンパク質源材料からの抽出の結果、該溶液中に存在している、トリプシン阻害剤等の熱不安定性の抗栄養因子を不活性化するため、酸性化大豆タンパク質水溶液を加熱処理にかけることができる。このような加熱工程は、微生物負荷を低減する追加のメリットをももたらす。一般的に、タンパク質溶液は、約７０℃〜約１６０℃、好ましくは約８０℃〜約１２０℃、より好ましくは約８５℃〜約９５℃の温度で、約１０秒間〜約６０分間、好ましくは約１０秒間〜約５分間、より好ましくは約３０秒間〜約５分間、加熱する。次いで、加熱処理済の酸性化大豆タンパク質溶液を、下記する更なる加工のために、約２℃〜約６５℃、好ましくは約５０℃〜約６０℃の温度に冷却することができる。
【００７９】
結果として得られる酸性化大豆タンパク質水溶液は、大豆タンパク質生成物を製造するため、直接乾燥することができる。低減された不純物含有量を有する、大豆タンパク質生成物、例えば大豆タンパク質単離物を提供するために、乾燥工程に先立ち、酸性化大豆タンパク質水溶液を下記のように処理することができる。下記する更なる処理は、また、生成物の風味に対して、有益な効果があると考えられる。
【００８０】
酸性化大豆タンパク質水溶液を濃縮して、約５０〜約３００ｇ／Ｌ、好ましくは約１００〜約２００ｇ／Ｌのタンパク質濃度を有する、濃縮大豆タンパク質溶液を提供することができる。
【００８１】
濃縮工程は、連続的操作の場合、タンパク質水溶液が膜を通過する際、所望する程度の濃度となるように、寸法を定めている、異なる膜の素材ならびに構成に考慮が払われている、例えば約１，０００〜約１，０００，０００ダルトン、好ましくは約１，０００〜約１００，０００ダルトン等の、好適な分画分子量を有する、中空糸膜又は螺旋巻き膜（spiral-wound membranes）等の膜を使用する、限外濾過法又は透析濾過法等の任意の従来の選択膜技術を採用することで、バッチ操作又は連続的操作と両立する、任意の従来の方法で実施することができる。
【００８２】
周知されている通り、限外濾過法又は同様の選択膜技術は、高分子量種の通過を防止する一方で、低分子量種の通過を許容している。低分子量種には、源材料から抽出される低分子量物質、例えば、炭水化物、顔料、低分子量タンパク質、及び、例えば、それ自体、低分子量タンパク質である、トリプシン阻害剤等の、抗栄養因子が含まれている。異なる膜の材量及び構成を考慮して、不純物の通過を許容するとともに、溶液中のかなりの割合のタンパク質の保持を保証するように、通常、膜の分画分子量が選択される。
【００８３】
次いで、濃縮済の大豆タンパク質溶液を、水を使用する透析濾過工程にかけることができる。透析濾過の水は、好ましくは、透析濾過するタンパク質溶液のｐＨと等しいｐＨとされる。該透析濾過を、約１〜約４０容の透析濾過溶液、好ましくは約２〜約２５容の透析濾過溶液を使用して実施することができる。透析濾過の操作において、透過画分とともに、膜を通過させることによって、更なる量の不純物が、大豆タンパク質水溶液から除去される。これは、タンパク質水溶液を精製し、そして、その粘性を低減させることができる。有意な更なる量の不純物若しくは目に見える色が透過画分中に存在しなくなるまで、あるいは、乾燥した際、少なくとも約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を具える大豆タンパク質単離物が提供されるように、残余画分が十分に精製されるまで、透析濾過の操作を実施することができる。かかる透析濾過は、濃縮工程と同じ膜を使用して実施することができる。しかし、要望に応じて、透析濾過工程を、異なる膜の材料及び構成が考慮されている、異なる分画分子量を有する別個の膜、例えば、約１，０００〜約１，０００，０００ダルトン、好ましくは約１，０００〜約１００、０００ダルトンの範囲の分画分子量を有する膜を使用して実施することができる。
【００８４】
あるいは、透析濾過工程は、濃縮工程に先立ち、酸性化タンパク質水溶液に適用しても、または、部分的に濃縮した酸性化タンパク質水溶液に適用してもよい。また、透析濾過は、濃縮過程の間の複数の時点で適用してもよい。透析濾過を、濃縮工程に先立ち、または、部分的に濃縮した溶液に適用する場合、その後、結果として得られる透析濾過溶液を更に濃縮することができる。タンパク質溶液が濃縮されるに従って、複数回の透析濾過は、より濃厚に最終的な、十分に濃縮されたタンパク質濃縮の達成を可能とすることができる。これは、乾燥される材料の容量を減少させる。
【００８５】
濃縮工程及び透析濾過工程を、本明細書中において、その後に回収される豆類タンパク質生成物は、約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．未満のタンパク質、例えば、少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質を含有するように、実施することができる。大豆タンパク質水溶液を部分的に濃縮及び／又は部分的に透析濾過することによって、ごく一部だけ不純物を除去することが可能である。その後、このタンパク質溶液を乾燥して、低レベルの純度を有する大豆タンパク質生成物を提供することができる。
【００８６】
透析濾過工程の少なくとも一部の間、透析濾過水中に、酸化防止剤が存在していてよい。酸化防止剤は、亜硫酸ナトリウム又はアスコルビン酸等の、任意の従来の酸化防止剤でよい。透析濾過水中で用いられる酸化防止剤の量は、用いられる材料に依存し、そして、約０．０１ｗｔ％から約１ｗｔ％まで増減することができ、好ましくは約０．０５ｗｔ％である。酸化防止剤は、タンパク質溶液中の任意のフェノール性物質の酸化を阻害するのに役立つ。
【００８７】
任意選択の濃縮工程及び任意選択の透析濾過工程は、任意の通常の温度、一般的には、約２℃〜約６５℃、好ましくは、約５０℃〜約６０℃で、そして、所望の程度の濃縮及び透析濾過を実施する時間、実施することができる。ある程度、使用される温度及びその他の条件は、膜処理を実施するために使用される膜装置、溶液の所望されるタンパク質濃度、及び、不純物の透過画分中への除去効率に依存する。
【００８８】
前にも示唆したように、大豆は、抗栄養トリプシン阻害剤を含有している。最終的な大豆タンパク質生成物のトリプシン阻害剤活性レベルは、様々なプロセス変量の操作により制御することが可能である。
【００８９】
上述したように、熱不安定性のトリプシン阻害剤を不活性化するために、酸性化大豆タンパク質水溶液の加熱処理を利用することができる。また、部分的に濃縮した又は完全に濃縮した酸性化大豆タンパク質溶液を加熱処理して、熱不安定性のトリプシン阻害剤を不活性化することもできる。部分的に濃縮した酸性化大豆タンパク質溶液に加熱処理を施す場合、その後、結果として得られる加熱処理済溶液を、更に濃縮することができる。
【００９０】
加えて、濃縮及び／又は透析濾過工程は、その他の不純物と一緒に、透過画分中のトリプシン阻害剤の除去に好都合な方法で実行することができる。トリプシン阻害剤の除去は、３０，０００〜１，０００，０００Ｄａ等の、大きな孔径の膜を使用し、約３０℃〜約６５℃、好ましくは約５０℃〜約６０℃等の高温で膜を運用し、そして、１０〜４０容等の大容量の透析濾過媒体を用いることによって、促進される。
【００９１】
約３〜約３．６等の、より高いｐＨでの溶液の処理と比べて、約１．５〜約３等の、より低いｐＨでの大豆タンパク質溶液の酸性化及び膜処理は、トリプシン阻害剤活性を低下することができる。該ｐＨ範囲の下限値において、タンパク質溶液を濃縮及び／又は透析濾過する場合、乾燥工程に先立ち、溶液のｐＨを上げることが望ましいことがある。水酸化ナトリウム、水酸化カリウム及びこれらの組み合わせ等の、任意の従来の食品グレードアルカリの添加によって、濃縮及び／又は透析濾過タンパク質溶液のｐＨを、所望の値、例えば約３のｐＨに上げることができる。
【００９２】
更には、トリプシン阻害剤活性の低下は、該阻害剤のジスルフィド結合を切断又は再配置する、還元剤に、大豆材料を曝すことにより達成できる。好適な還元剤には、亜硫酸ナトリウム、システイン、Ｎ−アセチルシステイン、その他の任意の従来の還元剤、及びこれらの組み合わせが含まれる。
【００９３】
該還元剤の添加は、全プロセスの種々の段階で実施することができる。還元剤は、抽出工程において、大豆タンパク質源材料と一緒に添加してもよく、残留大豆タンパク質源材料を除去した後に、大豆タンパク質水溶液に添加してもよく、乾燥に先立ち、透析濾過した残余画分に添加してもよく、あるいは、乾燥済の大豆タンパク質生成物に乾燥ブレンドしてもよい。還元剤の添加は、上述するように、加熱処理工程及び膜処理工程と組み合わせてもよい。
【００９４】
タンパク質溶液中に活性トリプシン阻害剤を保持することが望ましい場合、これは、加熱処理工程の強さを抑える、または、除去する、還元剤を利用しない、該ｐＨ範囲の上限値、例えば約３〜約３．６において、小孔径の濃縮及び透析濾過用の膜を利用し、より低温で膜を運用し、少量の透析濾過媒体を採用して、任意選択の濃縮工程及び任意選択の透析濾過工程を実行することによって、達成することが可能である。
【００９５】
任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過したタンパク質溶液を、必要に応じて、更に脱脂操作にかけることができる。任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過したタンパク質溶液の脱脂は、任意の従来の手順によって達成することができる。
【００９６】
任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過したタンパク質水溶液を、粒状活性炭等の吸着剤で処理して、色及び／又は臭気化合物を除去することができる。該吸着剤による処理は、任意の通常の条件下、一般的に、タンパク質溶液の周囲温度で実施することができる。
【００９７】
乾燥又は更なる処理に先立ち、任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過した大豆タンパク質水溶液を、低温殺菌することができる。該低温殺菌は、任意の通常の低温殺菌の条件下で実施することができる。一般的には、任意選択で濃縮及び任意選択で透析濾過した大豆タンパク質溶液を、約５５℃〜約７５℃の温度に約１５秒間〜約６０分間加熱する。その後、低温殺菌済の大豆タンパク質溶液を、好ましくは約２０℃〜約３５℃の温度に、冷却することができる。
【００９８】
次いで、任意選択で濃縮、任意選択で透析濾過、及び任意選択で低温殺菌した大豆タンパク質溶液を、噴霧乾燥又は凍結乾燥等の、任意の従来の手段によって乾燥して、大豆タンパク質生成物を提供することができる。あるいは、乾燥に先立ち、任意選択で濃縮、任意選択で透析濾過、及び任意選択で低温殺菌した大豆タンパク質溶液のｐＨを、約８．０未満、好ましくは約６．０〜約８．０、より好ましくは約６．５〜約７．５の値に調整することができる。例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム又はいずれかのその他の従来の食品用アルカリ溶液、ならびにこれらの組み合わせの添加による、任意の従来の方法で、ｐＨを上げることができる。ｐＨを調整する前にタンパク質溶液が低温殺菌されていない場合、上記の条件を用いてｐＨを調整した後に、低温殺菌を実施することができる。
【００９９】
大豆タンパク質生成物（乾燥前にｐＨ調整工程を経て調製したもの又は該ｐＨ調整工程を省いて調製したもの）は、約６０ｗｔ％ｄ．ｂ．を超えるタンパク質含有量を有する。好ましくは、大豆タンパク質生成物は、約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．を超えるタンパク質含有量を有する、単離物である。
【０１００】
本発明の別の形態によれば、大豆タンパク質溶液のｐＨを約１．５〜約３．６、好ましくは約２．０〜約２．５の範囲に調整した後に捕集される酸不溶性固形物質を、任意選択によりＲＯ水で希釈し、その後、乾燥して、少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量が有する、大豆タンパク質生成物を形成することができる。あるいは、少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有する、大豆タンパク質生成物を形成するための任意選択による乾燥に先立ち、任意選択で希釈された酸不溶性固形物質のｐＨを、例えば、水酸化ナトリウム溶液、水酸化カリウム溶液、又はいずれかのその他の従来の食品用アルカリ溶液、及びこれらの組み合わせの添加による、任意の従来の手段によって、約８．０未満、好ましくは約６．０〜約８．０、より好ましくは約６．５〜約７．５の値に上げることができる。好ましくは、酸不溶性固形物質を洗浄して、不純物を除去し、生成物の純度及び風味を改善する。酸不溶性固形物質は、ｐＨが約１．５〜約３．６の範囲、好ましくは酸不溶性固形物質のｐＨに相当しているｐＨを有する、ＲＯ水約１〜約２０容、好ましくは約１〜約１０容中に、該固形物を懸濁させることによって洗浄することができる。洗浄工程は、約１５℃〜約３５℃等の、任意の通常の温度で実施することができる。酸不溶性固形物質を、任意の通常の長さの時間、好ましくは約１５分間またはそれ以下、洗浄溶液と混合する。その後、洗浄された酸不溶性固形物質を、ディスクスタック遠心分離機を用いた遠心分離等による、任意の従来の手段によって、酸洗浄溶液から分離することができる。酸洗浄溶液は、上で詳説したように、更なる処理のために酸性化タンパク質溶液に添加することができる。洗浄した酸不溶性固形物質を、任意選択によりＲＯ水で希釈し、その後、噴霧乾燥又は凍結乾燥等の任意の従来の手段によって乾燥して、少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有する大豆タンパク質生成物を提供することができる。あるいは、任意選択の乾燥に先立ち、任意選択で希釈した洗浄酸不溶性固形物質のｐＨを、例えば、水酸化ナトリウム溶液、水酸化カリウム溶液、又はいずれかのその他の従来の食品用アルカリ溶液、及びこれらの組み合わせの添加による、任意の従来の手段によって、約８．０未満、好ましくは約６．０〜約８．０、より好ましくは約６．５〜約７．５の値に調整することができる。酸溶解性タンパク質画分を処理することによって調製される生成物と比較して、酸不溶性固形物質から分取される生成物の風味は、一般的に、大豆臭がより高くなることがある。しかし、酸不溶性固形物質から分取される生成物の風味は、該生成物が、食品及び飲料での応用における用途に適するものである。
【０１０１】
任意選択の乾燥工程に先立ち、任意選択により希釈した酸不溶性固形物質又は任意選択により希釈した洗浄酸不溶性固形物質に対して、低温殺菌工程を採用することができる。該低温殺菌は、任意の通常の低温殺菌条件下で実施することができる。一般的には、任意選択により希釈した酸不溶性固形物質又は任意選択により希釈した洗浄酸不溶性固形物質を、約５５℃〜約７５℃の温度に、約１５秒間〜約６０分間、加熱する。その後、低温殺菌済の任意選択で希釈した酸不溶性固形物質又は任意選択で希釈し洗浄した酸不溶性固形物質を、好ましくは約２０℃〜約３５℃の温度に冷却することができる。ｐＨ調整の前に、任意選択で希釈した酸不溶性固形物質又は任意選択で希釈し洗浄した酸不溶性固形物質を低温殺菌していない場合、低温殺菌を、上記の条件を利用して、ｐＨを調整した後に実施することができる。
【０１０２】
ここで、本発明の一形態にかかるプロセス１０を示す、図１を参照すると、１２では、ｐＨ約６〜約１１、好ましくは約７．０〜約８．５において、大豆タンパク質源を、水による最初の抽出にかける。次いで、１４では、残留大豆タンパク質源の除去によって、タンパク質抽出溶液は、完全に又は部分的に浄化され、１６では、除去された固形物が収集される。次いで、２０では、タンパク質抽出溶液１８は、約１．５〜約３．６、好ましくは約２．０〜約２．５に、ｐＨの調整がなされる。２２では、遠心分離により酸不溶性物質が除去され、２４の酸不溶性固形物質及び２６の酸性化タンパク質溶液がもたらされる。
【０１０３】
２８では、回収された酸不溶性固形物質を、固形物と同じｐＨ、すなわち、約１．５〜約３．６、好ましくは約２．０〜約２．５のｐＨを有する水で任意選択により洗浄することができ、そして、任意選択により洗浄した固形物３４は、任意選択により、約６．０未満の値に、ｐＨの調整がなされ、その後、４８では、乾燥され、５０で、少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有する、Ｓ８１０ＰＡと称する大豆タンパク質生成物を提供することができる。
【０１０４】
あるいは、３６において、任意選択により洗浄した固形物３４は、通常、約６〜約８、好ましくは、約６．５〜約７．５のｐＨに調整され、そして、３８では、乾燥されて、４０において、少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有する、Ｓ８１０ＰＮと称する大豆タンパク質生成物を提供する。
【０１０５】
任意選択の洗浄工程２８からの洗浄遠心分離液（centrate）３０は、酸性化タンパク質溶液２６に添加することができる。６０では、可溶性タンパク質の溶液は、約１．５〜約３．６、好ましくは約２．０〜約２．５の範囲内のｐＨに低下させることができる。次いで、６２において、可溶性タンパク質の溶液は、濃縮及び任意選択で透析濾過にかかられる。濃縮工程及び任意選択の透析濾過工程からの残余画分６４は、任意選択により、約６．０未満の値にｐＨが調整され、次いで、７８では、乾燥され、８０において、少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有する、Ｓ８１０Ａと称する大豆タンパク質生成物を提供する。好ましくは、Ｓ８１０Ａ生成物は、少なくとも約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有する、単離物である。あるいは、６６において、濃縮工程及び任意選択の透析濾過工程からの残余画分６４は、通常、約６．０〜約８．０のｐＨに調整され、次いで、６８では、乾燥されて、７０において、少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有する、Ｓ８１０Ｎと称する豆類タンパク質生成物を提供する。好ましくは、Ｓ８１０Ｎ生成物は、少なくとも約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有する、単離物である。
【０１０６】
Ｓ８１０Ａ及びＳ８１０ＰＡタンパク質生成物は、それら自体で使用しても、あるいは、８４において、乾燥ブレンドにより、組み合わせることもできる。あるいは、組み合わされたＳ８１０Ａ／Ｓ８１０ＰＡ生成物は、４６において、任意選択で洗浄した任意選択によりｐＨを約６．０未満に調整した酸不溶性固形物質を、濃縮／任意選択で透析濾過し、７６において、任意選択により約６．０未満のｐＨに調整された残余画分と混合され、そして、混合物８６を乾燥することによって形成することができる。Ｓ８１０Ｎ及びＳ８１０ＰＮタンパク質生成物は、それら自体で使用しても、８４において、乾燥ブレンドにより組み合わせることもできる。あるいは、組み合わせたＳ８１０Ｎ／Ｓ８１０ＰＮ生成物は、任意選択で洗浄し、３６において、約６．０〜約８．０、好ましくは約６．５〜約７．５のｐＨに調整された酸不溶性固形物質を、任意選択で濃縮／任意選択で透析濾過し、６６において、約６．０〜約８．０、好ましくは約６．５〜約７．５のｐＨに調整されている残余画分と混合し、そして、該混合物８２を乾燥することによって形成することができる。
【実施例】
【０１０７】
例
例１
本例は、本発明の方法の一実施態様にかかる、大豆タンパク質生成物の調製を記載する。
【０１０８】
「ｂ」Ｌの逆浸透純水に、「ａ」ｋｇの脱脂大豆フレークを、十分なＮａＯＨ溶液（５０％  ｗ／ｗ）と一緒に添加して、ｐＨを標的の８．５に調整した。混合物を周囲温度で３０分間攪拌して、タンパク質水溶液を提供した。抽出時間中ずっと、定期的にｐＨを調べ、そして、約８．５に修正した。デカンター遠心分離機を使用する、遠心分離によって、より粒の粗い懸濁固形物を除去した。「ｃ」ｇの消泡剤を添加し、次いで、ディスクスタック遠心分離機を使用して、より微細な固形物を除去し、タンパク質含有量が「ｅ」重量％の「ｄ」Ｌのタンパク質溶液を生産した。次いで、ＨＣｌ溶液（２２ＢＥ  ＨＣｌを、等容量の水で希釈）を添加することによって、タンパク質溶液のｐＨを、標的ｐＨ「ｆ」に低下し、そして、ディスクスタック遠心分離機を使用して溶液を遠心分離して、ｐＨ「ｈ」の酸性化タンパク質溶液「ｇ」Ｌ、ならびに、酸不溶性固形物質「ｉ」ｋｇが提供された。
【０１０９】
「ｊ」ｗｔ％のタンパク質含有量を有する、酸性化タンパク質溶液を温め、次いで、約「ｍ」℃の温度で運用されている、１００，０００ダルトンの分画分子量を有する、ポリエーテルスルホン膜上で濃縮することによって、容量を「ｋ」Ｌから「ｌ」Ｌに減少させた。「ｎ」ｗｔ％のタンパク質含有量の、濃縮タンパク質溶液を、約「ｑ」℃で実行される透析濾過の操作により、ｐＨ「ｐ」のＲＯ水、「ｏ」Ｌを用いて、同じ膜上で透析濾過した。次いで、「ｒ」ｗｔ％のタンパク質含有量を有する、透析濾過したタンパク質溶液を、「ｓ」ｗｔ％のタンパク質含有量まで更に濃縮した。「ｔ」の透析濾過且つ濃縮したタンパク質溶液が得られ、そして、酸性化工程前のタンパク質溶液中、「ｕ」％のタンパク質の収率に相当していた。「ｖ」ｋｇの透析濾過且つ濃縮したタンパク質溶液を噴霧乾燥して、「ｗ」％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量有することが見出された、生成物がもたらされた。該生成物を、「ｘ」Ｓ８１０Ａと名付けた。「ａａ」のＮａＯＨ／ＫＯＨ溶液を使用して、「ｙ」ｋｇの透析濾過且つ濃縮したタンパク質溶液を、「ｚ」に調整した。次いで、「ａｂ」ｋｇのｐＨを調整した溶液を、「ａｃ」Ｌの水で希釈し、そして、「ａｄ」のｐＨを有する、溶液を噴霧乾燥して、「ａｅ」％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有することが見出された、生成物が産せられた。該生成物を、「ｘ」Ｓ８１０Ｎと名付けた。
【０１１０】
ディスクスタック遠心分離機から回収された酸不溶性固形物質は、「ａｆ」ｗｔ％のタンパク質含有量を有していた。これらの固形物の「ａｇ」ｋｇ部分を、３０分間、周囲温度で、「ａｈ」ＬのｐＨ「ａｉ」のＲＯ水と混合し、次いで、再度ディスクスタック遠心分離機を通した。「ａｋ」ｗｔ％のタンパク質含有量を有する、「ａｊ」ｋｇの洗浄済の酸不溶性固形物質が回収され、酸性化工程前のタンパク質溶液中、「ａｌ」％のタンパク質の収率に相当していた。次いで、洗浄済の酸不溶性固形物質を、約「ａｍ」℃で約「ａｎ」分間低温殺菌した。「ａｏ」ｋｇの「ａｐ」の酸不溶性固形物質を噴霧乾燥して、「ａｑ」％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量有することが見出された、生成物がもたらされた。該生成物を、「ｘ」Ｓ８１０ＰＡと名付けた。「ａｒ」ｋｇの「ａｐ」の酸不溶性固形物質のｐＨを、ＮａＯＨ／ＫＯＨ溶液を使用して、「ａｓ」まで上昇させ、そして、該試料を乾燥して、「ａｔ」％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量有することが見出された、生成物が産せられた。該生成物を、「ｘ」Ｓ８１０ＰＮと名付けた。
【０１１１】
パラメーター「ａ」〜「ａｔ」は、以下の表１中にリスト表示されている。
【０１１２】
【表１】
0006723224.tif 000002
【０１１３】
例２
本例は、本発明の方法の一実施態様にかかる、大豆タンパク質生成物の調製を記載する。
【０１１４】
「ａ」ｋｇの脱脂大豆フレークを、「ｂ」Ｌの逆浸透（ＲＯ）純水に添加し、そして、必要に応じて、ＮａＯＨ溶液（５０％  ｗ／ｗ）及びＨＣｌ溶液を使用して、ｐＨを標的の７．５に調整した。混合物を約６０℃で３０分間攪拌して、タンパク質水溶液を提供した。抽出時間中ずっと、定期的にｐＨを調べ、そして、約７．５に修正した。デカンター遠心分離機を使用する、遠心分離によって、より粒の粗い懸濁固形物を除去して、「ｃ」ｗｔ％のタンパク質含有量を有する、部分的に清澄化されたタンパク質溶液が提供され、次いで、それを約２０℃に冷却した。次いで、部分的に清澄化されたタンパク質溶液のｐＨを、ＨＣｌ溶液（２２ＢＥ  ＨＣｌを、等容量の水で希釈）の添加によって標的ｐＨの２．０に低下させ、そして、該溶液を、ディスクスタック遠心分離機を使用して遠心分離して、ｐＨ「ｅ」の酸性化タンパク質溶液「ｄ」Ｌ、ならびに、酸不溶性固形物質「ｆ」ｋｇが提供された。
【０１１５】
「ｆ」ｋｇの酸不溶性固形物質を、「ｇ」ＬのｐＨ２のＲＯ水と混合し、次いで、該試料を、ディスクスタック遠心分離機を使用して遠心分離して、「ｈ」ＬのｐＨ「ｉ」の酸性化洗浄溶液、ならびに、「ｊ」ｋｇの洗浄酸不溶性固形物質が与えられた。
【０１１６】
「ｋ」Ｌの酸性化タンパク質溶液を、「ｌ」Ｌの酸性化洗浄溶液と合わせて、膜供給溶液が提供された。「ｍ」ｗｔ％のタンパク質含有量を有している、膜供給溶液を温めて、次いで、約「ｐ」℃の温度で運用されている、１００，０００ダルトンの分画分子量を有する、ポリエーテルスルホン膜上で濃縮することによって、容量を「ｎ」Ｌから「ｏ」Ｌに減少させた。「ｑ」ｗｔ％のタンパク質含有量を具える、濃縮タンパク質溶液を、約「ｔ」℃で実行される透析濾過の操作により、ｐＨ「ｓ」のＲＯ水、「ｒ」Ｌを用いて、同じ膜上で透析濾過した。次いで、「ｕ」ｗｔ％のタンパク質含有量を有する、透析濾過したタンパク質溶液を、「ｖ」ｗｔ％のタンパク質含有量まで、更に濃縮した。「ｗ」の透析濾過且つ濃縮したタンパク質溶液が得られ、部分的に清澄化したタンパク質溶液中、「ｘ」％のタンパク質の収率に相当していた。「ｙ」の透析濾過且つ濃縮したタンパク質溶液を、「ｚ」Ｌの水で希釈し、そして、「ａａ」のｐＨが有する、該溶液を噴霧乾燥して、「ａｂ」％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有することが見出された、生成物がもたらされた。該生成物を、「ａｃ」Ｓ８１０Ａと名付けた。「ａｄ」の透析濾過且つ濃縮したタンパク質溶液のｐＨを、ＮａＯＨ／ＫＯＨ溶液を使用して、「ａｅ」に調整した。ｐＨ調整し、透析濾過且つ濃縮した溶液を、「ａｆ」Ｌの水で希釈し、「ａｇ」のｐＨが溶液を噴霧乾燥して、「ａｈ」％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有することが見出されている、生成物がもたらされた。該生成物を、「ａｃ」Ｓ８１０Ｎと名付けた。
【０１１７】
「ｊ」ｋｇの洗浄酸不溶性固形物質を、「ａｉ」ｋｇの水で希釈し、次いで、約「ａｊ」℃で「ａｋ」秒間低温殺菌した。回収された、「ａｌ」の酸不溶性固形物質は、「ａｍ」ｗｔ％のタンパク質含有量を有しており、そして、部分的に清澄化したタンパク質溶液中、「ａｎ」％のタンパク質の収率に相当していた。「ａｌ」の酸不溶性固形物質のｐＨを、ＮａＯＨ／ＫＯＨ溶液を使用して、「ａｏ」まで上昇させ、そして、該試料を噴霧乾燥して、「ａｐ」％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量有することが見出された、生成物が産せられた。該生成物を、「ａｃ」Ｓ８１０ＰＮと名付けた。
【０１１８】
パラメーター「ａ」〜「ａｐ」を、以下の表２中にリスト表示されている。
【０１１９】
【表２】
0006723224.tif 000003
【０１２０】
例３
本例は、本発明の更なる実施態様を実行するための手順を例示する。
【０１２１】
「ｂ」Ｌの逆浸透（ＲＯ）純水に「ａ」ｋｇの脱脂大豆フレークを、十分なＮａＯＨ溶液と一緒に、添加し、ｐＨを標的の７．５に調整した。混合物を約６０℃で１５分間攪拌して、タンパク質水溶液を提供した。抽出時間中ずっと、定期的にｐＨを調べ、そして、約７．５に修正した。
【０１２２】
デカンター遠心分離機を使用する、遠心分離によって、より粒の粗い懸濁固形物を除去した。「ｃ」ｗｔ％のタンパク質含有量を有する、結果的に得られた、部分的に清澄化された溶液を、「ｄ」ＬのＲＯ水で希釈し、そして、約２０℃に冷却した。次いで、タンパク質溶液のｐＨを、ＨＣｌ溶液（２２ＢＥ）の添加によって、標的のｐＨ２．０に低下し、そして、該溶液を、ディスクスタック遠心分離機を使用して遠心分離して、「ｆ」のｐＨを有する、「ｅ」Ｌの酸性化タンパク質溶液を提供した。
【０１２３】
「ｇ」ｗｔ％のタンパク質含有量を有する、酸性化タンパク質溶液を温め、次いで、約「ｊ」℃の温度で運用されている、１００，０００ダルトンの分画分子量を有する、ポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）膜上で濃縮することによって、容量を「ｈ」Ｌから「ｉ」Ｌに減少させた。濃縮工程と同時に、酸性化タンパク質溶液を「ｋ」Ｌの逆浸透純水を用いて透析濾過した。透析濾過効率は、透析濾過及び濃縮の工程中の各時点で算定した。濃縮且つ透析濾過したタンパク質溶液は、それぞれ、約「ｌ」ｗｔ％のタンパク質濃度を有する、バッチで捕集された。総合して、透析濾過且つ濃縮したタンパク質溶液は、部分的に清澄化した抽出溶液中、「ｍ」％のタンパク質の収率に相当していた。
【０１２４】
約「ｏ」×の透析濾過効率で処理された、分取量「ｎ」ｋｇの透析濾過且つ濃縮したタンパク質溶液は、「ｐ」ＬのＲＯ水で希釈し、そして、噴霧乾燥して、「ｑ」％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有する、生成物が産せられた。該生成物を、「ｒ」「ｓ」と名付けた。
【０１２５】
約「ｕ」×の透析濾過効率で処理された、第２の分取量「ｔ」ｋｇの透析濾過且つ濃縮したタンパク質溶液は、「ｖ」Ｌの逆浸透水で希釈し、そして、噴霧乾燥して、乾燥重量基準で「ｗ」％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有する、生成物が産せられた。該生成物を、「ｒ」「ｘ」と名付けた。
【０１２６】
【表３】
0006723224.tif 000004
【０１２７】
例４
本例は、前述の米国特許第8563071号及び同第8691318号並びに２０１３年８月１日に出願された米国特許出願第13/879418号（２０１３年１１月２８日に公開された米国特許公開第2013-0316069号）、（「Ｓ７０１））の方法に基づく、大豆タンパク質生成物の製造を記載する。
【０１２８】
「ａ」ｋｇの「ｂ」を、「ｅ」において、「ｃ」Ｌの「ｄ」Ｍ  ＣａＣｌ２溶液と合わせ、そして、「ｆ」分間攪拌して、タンパク質水溶液を提供した。残留固形物の塊を除去し、そして、結果的に得られるタンパク質溶液を、デカンター遠心分離機を使用する、遠心分離によって、部分的に清澄化した。この遠心分離液に、「ｇ」ｇの消泡剤を添加し、次いで、該試料を、ディスクスタック遠心分離機で遠心分離することによって、更に清澄化し、「ｉ」重量％のタンパク質含有量を有する、「ｈ」Ｌの遠心分離液が提供された。該試料を、濾過により、更に清澄化し、「ｋ」重量％のタンパク質含有量を有する、「ｊ」Ｌのタンパク質溶液を与えた。
【０１２９】
次いで、「ｌ」Ｌの清澄化したタンパク質溶液を、「ｍ」Ｌの逆浸透純水に添加し、そして、該試料のｐＨを、希釈ＨＣｌを用いて、「ｎ」に低下した。
【０１３０】
約「ｒ」℃の温度で運用されている、「ｑ」ダルトンの分画分子量を有する、ポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）膜上で濃縮することによって、希釈且つ酸性化したタンパク質抽出溶液の容量を「ｏ」Ｌから「ｐ」Ｌに減少させた。「ｓ」ｗｔ％のタンパク質含有量を具える、酸性化タンパク質溶液を、約「ｕ」℃で実行される透析濾過の操作により、「ｔ」Ｌの逆浸透純水を用いて透析濾過した。こうして得られた透析濾過タンパク質溶液に、「ｖ」がなされた。「ｗ」重量％のタンパク質含有量を有する、濃縮且つ透析濾過したタンパク質溶液は、当初の清澄化タンパク質溶液の「ｘ」ｗｔ％の収率に相当していた。「ｙ」ｋｇの濃縮且つ透析濾過したタンパク質溶液を「ｚ」Ｌの水で希釈し、次いで、「ａａ」ｋｇの試料を乾燥して、「ａｂ」％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量であることが見出された、生成物が産せられた。該生成物に、「ａｃ」Ｓ７０１の名称を付した。
【０１３１】
５回実施における、パラメーター「ａ」〜「ａｃ」を、以下の表４中に記載する。
【０１３２】
【表４】
0006723224.tif 000005
【０１３３】
例５
本例は、前述の２０１３年６月２４日に出願された米国特許出願第13/924860号（２０１４年１月９日に公開された米国特許公開第2014-0010940号）、（「Ｓ７０１Ｎ２」）の方法に基づく、大豆タンパク質生成物の製造を記載する。
【０１３４】
「ａ」ｋｇの白色脱脂大豆フレークを、約６０℃で「ｂ」Ｌの「ｃ」Ｍ  ＣａＣｌ２溶液と合わせ、そして、３０分間攪拌して、タンパク質水溶液を提供した。残留大豆フレークの塊を除去し、そして、結果的に得られるタンパク質溶液を、デカンター遠心分離機を使用する、遠心分離によって、部分的に清澄化し、「ｅ」重量％のタンパク質含有量を有する、「ｄ」Ｌの遠心分離液を製造した。この遠心分離液に、「ｇ」Ｌの水と混合されている、「ｆ」ｇの消泡剤を添加し、次いで、該試料を、ディスクスタック遠心分離機を使用する、遠心分離によって、更に清澄化して、「ｉ」重量％のタンパク質含有量を有する、「ｈ」Ｌの遠心分離液を与えた。
【０１３５】
次いで、この遠心分離液を、５０℃で「ｊ」Ｌの逆浸透純水に添加し、そして、該試料のｐＨを、水で１：１に希釈されている１００，０００ダルトンの分画分子量を有する、ポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）膜上で濃縮することによって、希釈且つ酸性化したタンパク質抽出溶液の容量を、「ｌ」Ｌから「ｍ」Ｌに減少させた。「ｏ」ｗｔ％のタンパク質含有量を具える、酸性化タンパク質溶液を、約「ｑ」℃で実行される透析濾過の操作により、「ｐ」Ｌの逆浸透純水を用いて透析濾過した。結果として得られた、透析濾過タンパク質溶液を更に濃縮して、「ｒ」重量％のタンパク質含有量を具える、溶液を提供し、次いで、「ｓ」重量％のタンパク質含有量まで水で希釈した。次いで、「ｔ」Ｌのタンパク質溶液を「ｕ」Ｌの水で更に希釈した。次いで、タンパク質溶液のｐＨを、「ｗ」溶液を用いて、約「ｖ」に調整し、次いで、「ｘ」を施した。「ｚ」のｐＨと、「ａａ」ｗｔ％のタンパク質含有量を有し、かつ、ディスクスタック後の遠心分離液の「ａｂ」ｗｔ％の収率に相当している、「ｙ」のｐＨ調整済の溶液を噴霧乾燥して、「ａｃ」ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含有量を有することが見出された生成物が産せられた。該生成物に、「ａｄ」の名称を付した。
【０１３６】
４回実施のおける、パラメーター「ａ」〜「ａｄ」の値を、以下の表５中に提示する。
【０１３７】
【表５】
0006723224.tif 000006
【０１３８】
例６
本例は、例１〜３に記載される、本発明にかかる、塩を使用せずに調製された大豆タンパク質生成物、例４及び５に記載される、カルシウム塩を使用して調製された大豆タンパク質生成物、並びに市販の大豆タンパク質単離物Ｐｒｏ  Ｆａｍ  ８２５及び８７５（ＡＤＭ、Ｄｅｃａｔｕｒ、１Ｌ）のタンパク質溶解性を具体的に説明する。溶解性は、Morrら、J.Food Sci.,50:1715-1718の手順の修正版によって試験した。
【０１３９】
０．５ｇのタンパク質を供給するために十分なタンパク質粉末をビーカーに秤量し、次いで、少量の逆浸透（ＲＯ）純水を添加し、滑らかなペーストが形成するまで、混合物を攪拌した。次いで、追加の水を添加して、容量を約４５ｍｌとした。次いで、ビーカーの内容物を、マグネチックスターラを使用して、ゆっくり６０分間攪拌した。タンパク質を分配した直後にｐＨを測定し、そして、希釈ＮａＯＨ又はＨＣｌを用いて、適当なレベル（２、３、４、５、６又は７）に調整した。６０分間の攪拌の間、定期的に、ｐＨを測定し、そして、修正した。６０分間の攪拌後、該試料をＲＯ水で全容量５０ｍｌとし、１％ｗ／ｖのタンパク質分散液が得られた。分散液のタンパク質含有量は、Ｌｅｃｏ窒素定量測定装置を使用する、燃焼分析によって測定した。次いで、分散液の部分標本を、１０分間に７８００ｇで遠心分離し、不溶性材料を沈降させ、そして、上清を生じさせた。上清のタンパク質含有量を、Ｌｅｃｏ分析によって測定し、生成物の溶解性を以下の通りに産出した。
溶解性（％）＝（％上清中のタンパク質／％初期分散液中のタンパク質）×１００
１００％を超える計算値は、１００％として記録した。
【０１４０】
異なるｐＨ値における、様々な生成物のタンパク質溶解性を、表６中に示す。
【０１４１】
【表６】
0006723224.tif 000007
【０１４２】
表６中に表示されている結果からわかるように、すべての本発明の生成物は、４〜５のｐＨ範囲内で限定された溶解性を有していた。酸性化タンパク質溶液から分取された生成物は、酸不溶性固形物質から分取された生成物よりも、ｐＨ２〜３及びｐＨ７において、より高い溶解性であった。
【０１４３】
例７
本例は、例１〜３に記載される、本発明による、塩を使用せずに調製された大豆タンパク質生成物、例４及び５に記載される、カルシウム塩を使用して調製された大豆タンパク質生成物、並びに、市販の大豆タンパク質単離物Ｐｒｏ  Ｆａｍ  ８２５及び８７５（ＡＤＭ、Ｄｅｃａｔｕｒ、１Ｌ）の分子量プロファイルを具体的に説明する。
【０１４４】
分子量プロファイルは、３００×７．８ｍｍのＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ＢｉｏＳｅｐ  Ｓ−２０００シリーズカラムを具える、Ｖａｒｉａｎ  ＰｒｏＳｔａｒ  ＨＰＬＣシステムを使用して、サイズ排除クロマトグラフィーによって決定した。カラムには、孔径１４５オングストロームを有する、直径５ミクロンの、親水性結合シリカ剛性支持媒体を充填している。
【０１４５】
大豆タンパク質試料を分析する前に、１７，０００ダルトン（ミオグロブリン）から６７０，０００ダルトン（チログロブリン）の間の既知の分子量を有するタンパク質と、１，３５０ダルトンの低分子量マーカーとして添加されたビタミンＢ１２とを含有している、Ｂｉｏｒａｄタンパク質標準液（Ｂｉｏｒａｄ製品番号１５１−１９０１）を使用して、標準曲線を作製した。０．９％ｗ／ｖのタンパク質標準溶液を水中で調製し、孔径０．４５μｍのフィルターディスクで濾過し、そして、５０μＬの分取標本を、０．０２％アジ化ナトリウムを含有する０．０５Ｍリン酸／０．１５Ｍ  ＮａＣｌ（ｐＨ６）の移動相を使用して、カラムに載せた。移動相の流量は、１ｍＬ／分であり、２８０ｎｍでの吸光度に基づき、成分を検出した。これらの既知の分子量の分子の保持時間に基づき、分子量の自然対数を分単位の保持時間に関連付けた回帰式を開発した。
【０１４６】
保持時間（分）＝−０．９５５×ｌｎ（分子量）＋１８．５０２（ｒ２＝０．９９９）
大豆タンパク質試料の分析では、０．０２％アジ化ナトリウムを含有する０．０５Ｍ  ＮａＣｌ（ｐＨ３．５）を移動相として、また、乾燥試料の溶解にも使用した。タンパク質試料を移動相溶液と混合して１％ｗ／ｖの濃度にし、少なくとも１時間振盪機上に載せておき、次いで孔径０．４５μｍのフィルターディスクを使用して濾過した。試料注入サイズは、５０μＬだった。移動相の流量は、１ｍＬ／分であり、そして、２８０ｎｍでの吸光度に基づき、成分を検出した。
【０１４７】
分子量と保持時間を関連付ける上記の回帰式を使用して、分子量１００，０００Ｄａ、１５，０００Ｄａ、５，０００Ｄａ及び１，０００Ｄａに対応する保持時間を計算した。ＨＰＬＣ  ＰｒｏＳｔａｒシステムを使用して、これらの保持時間範囲内のピーク面積を計算し、そして、所与の分子量範囲に入るタンパク質のパーセンテージ（（範囲ピーク面積／全タンパク質ピーク面積）×１００）を算出した。データは、タンパク質の反応係数によって、補正がなされてないことに留意されたい。
【０１４８】
例１〜５に記載に従って調製された生成物及び市販製品の分子量プロファイルを、表７中に示す。
【０１４９】
【表７】
0006723224.tif 000008
【０１５０】
表７に示す結果から分かるように、本発明の生成物は、試験された市販製品とは異なる分子量プロファイルを有していた。
【０１５１】
例８
本例は、例１〜３に記載される、本発明に従って、塩を使用せずに調製された大豆タンパク質生成物、例４及び５に記載される、カルシウム塩を使用して調製された大豆タンパク質生成物、並びに、市販の大豆タンパク質単離物Ｐｒｏ  Ｆａｍ  ８２５及び８７５（ＡＤＭ、Ｄｅｃａｔｕｒ、ＩＬ）のフィチン酸含有量の評価を含む。フィチン酸含有量は、Ｌａｔｔａ及びＥｓｋｉｎの方法（J. Agric. Food Chem., 28:1313-1315）を用いて決定した。
【０１５２】
得られた結果を、以下の表８中に記載する。
【０１５３】
【表８】
0006723224.tif 000009
【０１５４】
表８中に表示されている結果から分かるように、本発明の全ての生成物のフィチン酸含有量は、カルシウム塩を用いて調製された生成物のフィチン酸含有量よりも、顕著に高く、また、市販製品のフィチン酸含有量よりも高かった。
【０１５５】
例９
本例は、例１〜３に記載される、本発明に従って、塩を使用せずに調製された大豆タンパク質生成物、例４及び５に記載される、カルシウム塩を使用して調製された大豆タンパク質生成物、並びに、市販の大豆タンパク質単離物Ｐｒｏ  Ｆａｍ  ８２５及び８７５（ＡＤＭ、Ｄｅｃａｔｕｒ、ＩＬ）の溶液中の色と、溶液のヘイズレベルの評価を含む。タンパク質生成物の溶液は、１５ｍｌのＲＯ水中に、０．４８ｇのタンパク質を供給するために十分なタンパク質粉末を溶解することによって調製した。溶液のｐＨは、ｐＨメーターで測定し、そして、色及びヘイズレベルは、透過モードで動作させた、ＨｕｎｔｅｒＬａｂ  ＣｏｌｏｒＱｕｅｓｔ  ＸＥ機器を使用して評価した。結果、を以下の表９中に示す。
【０１５６】
【表９】
0006723224.tif 000010
【０１５７】
表９中の結果から分かるように、本発明の酸性化タンパク質溶液から分取された生成物の溶液において決定されたＬ＊値は、市販の大豆タンパク質単離物の溶液よりも、明るかった。
【０１５８】
例１０
本例は、例１〜３に記載される、本発明に従って、塩を使用せずに調製された大豆タンパク質生成物、並びに、市販の大豆タンパク質単離物Ｐｒｏ  Ｆａｍ  ８２５及び８７５（ＡＤＭ、Ｄｅｃａｔｕｒ、ＩＬ）の水結合能（water binding capacity）の評価を含む。
【０１５９】
生成物の水結合能は、以下の手順によって決定した。タンパク質粉末（１ｇ）を、重量が既知の遠心分離管（５０ｍｌ）に量り取った。この粉末に、約２０ｍｌの中性ｐＨの逆浸透（ＲＯ）純水を添加した。管の内容物を、１分間、ボルテックスミキサーを穏やかな速度で使用して混合した。該試料を室温で４分間インキュベートし、次いで、３０秒間、ボルテックスにより混合した。この後に室温で４．５分間インキュベートし、次いで更に３０秒間ボルテックス混合した。次いで、試料を、１０００ｇで、１５分間、２０℃で遠心分離した。遠心分離後、上清を注意深く取り除き、管中に全ての固形物質が残留していることを保証した。次いで、遠心分離管を再度秤量し、水飽和した試料の重量を決定した。
【０１６０】
水結合能（ＷＢＣ）は、以下の通りに計算した。
ＷＢＣ（ｍｌ／ｇ）＝（水飽和した試料の質量−初期試料の質量）／（初期試料の質量×試料の全固形分含有率）
結果を、表１０中に示す。
【０１６１】
【表１０】
0006723224.tif 000011
【０１６２】
表１０中に表示されている結果から分かるように、本発明の生成物は、評価した市販製品よりも高い水結合能を有していた。
【０１６３】
例１１
本例は、例１〜３に記載される、本発明による、塩を使用せずに調製された大豆タンパク質生成物、例４及び５に記載される、カルシウム塩を使用して調製された大豆タンパク質生成物、並びに、市販の大豆タンパク質単離物Ｐｒｏ  Ｆａｍ  ８２５及び８７５（ＡＤＭ、Ｄｅｃａｔｕｒ、ＩＬ）の分子量プロファイルの別の実例である。
【０１６４】
分子量プロファイルは、３００×７．８ｍｍのＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ＢｉｏＳｅｐ  Ｓ−２０００シリーズカラムを具える、Ｖａｒｉａｎ  ＰｒｏＳｔａｒ  ＨＰＬＣシステムを使用して、サイズ排除クロマトグラフィーによって決定した。カラムには、孔径１４５オングストロームを有する、直径５ミクロンの、親水性結合シリカ剛性支持媒体を充填している。
【０１６５】
大豆タンパク質試料を分析する前に、１７，０００ダルトン（ミオグロブリン）から６７０，０００ダルトン（チログロブリン）の間の既知の分子量を有するタンパク質と、１，３５０ダルトンの低分子量マーカーとして添加されたビタミンＢ１２とを含有している、Ｂｉｏｒａｄタンパク質標準液（Ｂｉｏｒａｄ製品番号１５１−１９０１）を使用して、標準曲線を作製した。０．９％ｗ／ｖのタンパク質標準溶液を水中で調製し、孔径０．４５μｍのフィルターディスクで濾過し、そして、５０μＬの分取標本を、０．０２％アジ化ナトリウムを含有する０．０５Ｍリン酸／０．１５Ｍ  ＮａＣｌ（ｐＨ６）の移動相を使用して、カラムに載せた。移動相の流量は、１ｍＬ／分であり、２８０ｎｍでの吸光度に基づき、成分を検出した。これらの既知の分子量の分子の保持時間に基づき、分子量の自然対数を分単位の保持時間に関連付けた回帰式を開発した。
【０１６６】
保持時間（分）＝−０．８６５×ｌｎ（分子量）＋１７．１５４（ｒ２＝０．９８）
大豆タンパク質試料の分析では、０．０２％アジ化ナトリウムを含有する０．０５Ｍリン酸／０．１５Ｍ  ＮａＣｌ（ｐＨ６）を移動相として、また、乾燥試料の溶解にも使用した。タンパク質試料を移動相溶液と混合して１％ｗ／ｖの濃度にし、少なくとも１時間振盪機上に載せておき、次いで孔径０．４５μｍのフィルターディスクを使用して濾過した。試料注入サイズは、５０μＬだった。移動相の流量は、１ｍＬ／分であり、そして、２８０ｎｍでの吸光度に基づき、成分を検出した。
【０１６７】
分子量と保持時間を関連付ける上記の回帰式を使用して、分子量１００，０００Ｄａ、１５，０００Ｄａ、５，０００Ｄａ及び１，０００Ｄａに対応する保持時間を計算した。ＨＰＬＣ  ＰｒｏＳｔａｒシステムを使用して、これらの保持時間範囲内のピーク面積を計算し、そして、所与の分子量範囲に入るタンパク質のパーセンテージ（（範囲ピーク面積／全タンパク質ピーク面積）×１００）を算出した。データは、タンパク質の反応係数によって、補正がなされてないことに留意されたい。
【０１６８】
例１〜５に記載に従って調製された生成物及び市販製品の分子量プロファイルを、表１１中に示す。
【０１６９】
【表１１】
0006723224.tif 000012
【０１７０】
表１１中に示す結果から分かるように、本発明の生成物は、試験した市販製品とは異なる分子量プロファイルを有していた。
【０１７１】
開示の概要
この開示の概要として、向上された味を有する、新規且つ独創的な大豆タンパク質生成物、ならびに、大豆タンパク質源から大豆タンパク質を抽出するため、あるいは、その他の加工工程において、カルシウム塩またはその他の塩の直接的添加ならびに使用を含んでいない、向上された味を有する、大豆タンパク質生成物を製造する、新規且つ独創的な方法が提供されている。本発明の技術的範囲内で、改良することが可能である。
【図１】
0006723224.tif 000013