(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗体と、プレバイオティクスと、を有効成分とする、関節リウマチ予防用及び治療用組成物であって、
前記抗体が、ヒト病原細菌及び細菌毒素に対する抗体であり、かつ、大腸菌Ｏ−１１１、腸管出血性大腸菌Ｏ−１５７、サルモネラ菌、志賀赤痢菌、セレウス菌、リステリア菌、エルシニア菌、セラチア菌、ネズミチフス菌、サルモネラ・ミネソタＲ５９５菌、表皮ブドウ球菌、黄色ブドウ球菌、ウェルシュ菌、カンピロバクター、バクテロイデス、カンジダ菌、プロピオン酸菌、サングイス連鎖球菌、唾液連鎖球菌、ミュータンス菌、アエロゲネス菌、アルカリゲネス、エンテロバクター・クロアカ、緑膿菌、プロテウス菌、ピロリ菌、Ａ群化膿レンサ球菌１型、Ａ群化膿レンサ球菌１２型、Ａ群化膿レンサ球菌２２型、緑色レンサ球菌、肺炎レンサ球菌、肺炎桿菌及びインフルエンザ菌に対する抗体を含み、
前記プレバイオティクスが、スキムミルクである、
関節リウマチ予防用及び治療用組成物。
【請求項２】
前記抗体が、自然免疫抗体である、請求項１に記載の関節リウマチ予防用及び治療用組成物。
【請求項３】
前記抗体が、牛、ヤギ、ヒツジ、馬、鶏からなる群から選択された少なくとも１種により産生された抗体に由来するものであり、かつ、これら動物のミルク、初乳、血液、鶏卵からなる群から選択された少なくとも１種を原料として生産されたものである、請求項１又は２に記載の関節リウマチ予防用及び治療用組成物。
【請求項４】
前記抗体は、ヒト病原細菌及び細菌毒素に対する抗体価がホエイタンパク質１ｇ中に８μｇ以上である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の関節リウマチ予防用及び治療用組成物。
【請求項５】
さらに、前記プレバイオティクスとして、オリゴ糖、食物繊維、イヌリン又はこれらの混合物からなる群から選択し得る少なくとも１種を含有する、請求項１〜４のいずれか１項に記載の関節リウマチ予防用及び治療用組成物。
【請求項６】
プレバイオティクスを抗体に添加することにより、関節リウマチの予防又は治療作用を高める方法であって、
前記抗体が、ヒト病原細菌及び細菌毒素に対する抗体であり、かつ、大腸菌Ｏ−１１１、腸管出血性大腸菌Ｏ−１５７、サルモネラ菌、志賀赤痢菌、セレウス菌、リステリア菌、エルシニア菌、セラチア菌、ネズミチフス菌、サルモネラ・ミネソタＲ５９５菌、表皮ブドウ球菌、黄色ブドウ球菌、ウェルシュ菌、カンピロバクター、バクテロイデス、カンジダ菌、プロピオン酸菌、サングイス連鎖球菌、唾液連鎖球菌、ミュータンス菌、アエロゲネス菌、アルカリゲネス、エンテロバクター・クロアカ、緑膿菌、プロテウス菌、ピロリ菌、Ａ群化膿レンサ球菌１型、Ａ群化膿レンサ球菌１２型、Ａ群化膿レンサ球菌２２型、緑色レンサ球菌、肺炎レンサ球菌、肺炎桿菌及びインフルエンザ菌に対する抗体を含み、
前記前記プレバイオティクスが、スキムミルクである、
関節リウマチの予防又は治療作用を高める方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗体とプレバイオティクスとを有効成分として含有することを特徴とする、関節リウマチ予防用及び治療用組成物に関する。 
【背景技術】
【０００２】
一般に、リウマチ性疾患とは、骨や関節、筋肉など、体を支え動かす運動器官が全身的な炎症を伴って侵される病気の総称である。このうち、手や足の関節の発赤、疼痛、腫れ、に始まり、関節の破壊、変形に進み、痛みとともに関節の機能麻痺に至る炎症性の関節の疾患を関節リウマチという。
【０００３】
関節リウマチの薬物療法には炎症を止めるために、副腎皮質ホルモン剤、免疫抑制剤、酸性抗炎症剤、有機金化合物、抗サイトカイン抗体その他の薬剤の組み合わせによる治療が行われている。これらの薬物療法はいずれも所謂、対症療法である。
【０００４】
関節リウマチの病因は今日、一般的には不明とされているが、関節軟骨の主成分であるII型コラーゲンに対する自己免疫が関係するという学説に基づく研究がなされている。
【０００５】
食事中には、多くの抗原物質があるが、通常、経口摂取では、これらの抗原に対する抗体産生が起こらない。この現象は経口免疫寛容と称される。
【０００６】
抗体産生は、抗体産生の促進に働くリンパ球（ヘルパーＴ細胞、Ｔｈ）と、抑制的に働くリンパ球（サプレッサーＴ細胞、Ｔｓ）により調節されている。サプレッサーＴ細胞が優位な状態では抗体産生は抑制されることから、II型コラーゲンに対する自己抗体の産生を抑制するために、II型コラーゲンに対するサプレッサーＴ細胞を賦活する意図で、動物由来のII型コラーゲン由来のペプチド、II型コラーゲンの変性物を投与する試みがなされている。この例として、例えば特許文献１〜３が挙げられ、これらはいずれも経口免疫寛容を意図した特許である。
【０００７】
本発明者らは、関節リウマチの予防・治療に資するため、病因の解明をおこなってきた。関節リウマチの病因は、内的要因として、患者の体質的、遺伝的要因として、関節リウマチ患者では経口免疫の破綻があること、外的要因として、食物中の異種動物由来のII型コラーゲン、および、細菌内毒素の消化管からの吸収が原因となっていると考えられている。
【０００８】
細菌内毒素は別称エンドトキシン、リポポリサッカライド、ＬＰＳなどと称され、グラム陰性菌の細胞壁の構成成分であるが、細菌細胞の分解などにより菌体から遊離して、生体に多様な毒作用を示す。ヒト、動物の腸内には大腸菌などのグラム陰性が常在し、糞便１ｇ中のＬＰＳ濃度は数十マイクログラムに達する。
【０００９】
経口免疫の破綻とは以下の状態である。経口摂取された抗原に対しては、経口免疫寛容が正常の免疫応答であるが、内因的、体質的、環境的要因により、正常な免疫寛容を誘導し得なくなり、自己抗体を産生するに至るという考えである。この仮説の検証のために、マウスにおけるコラーゲン関節炎に関して、類似抗原および細菌内毒素の関節炎誘発活性について、マウスを用いて検討した。ＤＢＡ/１系マウスはII型コラーゲン関節炎を容易に発症する遺伝形質を有するマウスである。このマウスにニワトリ由来II型コラーゲン、あるいは熱変性させたものを経口的に与えると、マウスの血液中にはマウスのII型コラーゲンに対する抗体が産生されるとともに、関節炎が発症した。この関節炎は細菌内毒素（別称リポポリサッカライドまたはＬＰＳ）の併用で増悪した。またニワトリ由来II型コラーゲンを除いた、細菌内毒素のみの長期投与でも関節炎を発症した（非特許文献１）。
【００１０】
これらの結果はII型コラーゲンに対する抗体とともに、細菌内毒素による自然免疫系の非特異的賦活ないし疲弊が関節リウマチの発症に関与すること、さらに、経口免疫寛容が成立しない場合のあることを示している。この実験においては、前記特許文献１〜３で示された、免疫寛容を意図して調製した熱変性II型コラーゲンについても免疫寛容を誘導できないことがあることが示された。
【００１１】
また、本発明者らは、ウシ、ニワトリ、羊、ヤギ等の家畜をII型コラーゲン、グラム陰性細菌のホルマリン処理ないし加熱死菌をワクチンとして免疫して、乳、血清または卵から分離して得られた抗ＩＩ型コラーゲン抗体及び／又は抗細菌内毒素抗体を有効成分とする、関節リウマチを予防するための経口投与用組成物を提案した（特許文献４）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】特開平０７−１３８１８７号公報
【特許文献２】特開平０９−０５９１７６号公報
【特許文献３】特開平０９−２５５５８１号公報
【特許文献４】特開２００６−１５１９１４号公報
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】K. Terato et al. Br. J. Rheum. 35,828-838, 1996
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
本発明は、抗体を有効成分とする関節リウマチ予防用及び治療用組成物よりも効果の高い関節リウマチ予防用及び治療用組成物の提供を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明者らは抗体の摂取効果について種々検討を行っている中で、偶然にも、抗体とプレバイオティクスとを含む組成物が関節リウマチの予防及び治療に効果的であることを見出した。そして、抗体とプレバイオティクスとの間に相乗効果が認められることを確認し、本発明を完成させた。
【００１６】
本発明はかかる知見に基づきなされたものであり、抗体と、プレバイオティクスと、を有効成分とする、関節リウマチ予防用及び治療用組成物を提供するものである。
【発明の効果】
【００１７】
本発明によれば、抗体とプレバイオティクスとを併用することにより、抗体単独又はプレバイオティクス単独で使用するよりもより効果的に関節リウマチを予防及び治療することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】ミルク抗体の抗関節リウマチ効果のプレバイオティクスによる増強効果を検討した結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明に係る関節リウマチ予防用及び治療用組成物について説明する。本実施形態に係る関節リウマチ予防用及び治療用組成物は、抗体とプレバイオティクスとを有効成分とし、関節リウマチを予防及び／又は治療するために使用されるものである。
【００２０】
本実施形態において使用される抗体は、生体にとって異物である病原菌やその構成成分に結合して、異物を体外に排除し、無害化する作用を有する免疫システムの産物で、化学的には免疫グロブリンである。
【００２１】
抗体の選択は、ウシ、水牛、ウマ、ブタ、ヤギ、ウサギ、ウサギなどの家畜の血漿、初乳、生乳、ニワトリなどの卵が関節リウマチ予防用及び治療用組成物作成の出発原料となる。抗体の濃度を高めるために、各種ヒト病原細菌をワクチンとして接種することもできる。出発原料は、さらに、血漿の場合は脱繊維素処理後凍結乾燥、噴霧乾燥が、初乳、生乳の場合は乳脂肪、乳糖、カゼインを除去後、限外濾過による水分除去と濃縮、無菌濾過、さらに凍結乾燥、噴霧乾燥により粉末化する。これらの技術はすでに確立され、実施されている。
【００２２】
抗体は液体状態では加熱により急速に活性が失われるので、加熱による殺菌に当たっては殺菌と抗体熱変性防止の両面を満足する管理が必要である。関節リウマチ予防用及び治療用組成物の実用形態は水溶液または乾燥粉末である。
【００２３】
品質の評価は抗体の定量によりなされる。総抗体量の測定はテキストに従って、例えば二重抗体酵素免疫測定法、免疫拡散法、プロテインＡまたはプロテインＧカラム法などが推奨される。また、特定の細菌や細菌毒素に対する抗体の測定には酵素免疫測定法により測定する。
【００２４】
血液と糞便中のエンドトキシンの低下機能を有する組成物の機能を確保するためには、抗体の抗原特異性のチェックが重要である。即ち、エンドトキシン産生細菌に対する抗体とヒト由来病原細菌、エンドトキシンに対する抗体、エキソトキシンに対する抗体を含むことが必須の要件となる。
【００２５】
エンドトキシン産生菌に対する抗体は、エンドトキシン産生細菌を腸管から排泄させることにより除去を促進し、エンドトキシンに対する抗体は、エンドトキシンに結合して、体内移行の阻止に働く。
【００２６】
一方、エンドトキシンを産生しないグラム陽性ヒト病原菌（ウェルシュ菌、ブドウ球菌など）は、エキソトキシンを産生して消化管のバリヤーを破壊し、エンドトキシンの体内移行を高めるため、これをエキソトキシンに対する抗体がエキソトキシンに結合して、エンドトキシンの体内移行を阻止する。
【００２７】
エンドトキシン産生細菌としては以下に示す属に該当する細菌である。例えば、フソバクテリム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ベイヨネラ（Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ）、メガスフェラ（Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ）、ナイセリア（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）、モラクセラ（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ）、ブランハメラ（Ｂｒａｎｈａｍｅｌｌａ）、アシネトバクター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）、シトロバクター（Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ）、エンテロバクター（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）、ハフニア（Ｈａｆｎｉａ）、クレブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）、モルガネラ（Ｍｏｒｇａｎｅｌｌａ）、プロテウス（Ｐｒｏｔｅｕｓ）、プロビデンシア（Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ）、サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、セラチア（Ｓｅｒｒａｔｉａ）、シゲラ（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）、エルシニア（Ｙｅｒｓｉｎｉａ）、ビブリオ（Ｖｉｂｒｉｏ）、エロモナス（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ）、プレジオモナス（Ｐｌｅｓｉｏｍｏｎａｓ）、ヘモフィルス（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｌｕｓ）、パスツレラ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ）、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、レジオネラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ）などを挙げることができる。
【００２８】
エンドトキシン産生細菌のホルマリン処理ないし加熱死菌を抗体検出定量用の抗原として、必要に応じて選択する。フィンブリエ、鞭毛に対する抗体の検出定量に当たってはホルマリン処理が必要である。エンドトキシンとしては、上記の各細菌菌体をそのまま、またはこれら菌体より、成書に従ってトリクロロ酢酸法やフェノール法によりエンドトキシン（ＬＰＳ）を抽出して用いることができる。
【００２９】
抗エンドトキシン抗体の活性は、各細菌体より抽出したエンドトキシン、または、加熱ないしホルマリン処理菌体を抗原として、ＥＬＩＳＡ法による抗体量の測定による評価の他、エンドトキシン活性をリムラス法により、市販のキットを用いて、測定することができる。
【００３０】
抗エンドトキシン抗体の活性は、抗エンドトキシン抗体がエンドトキシンを中和し、エンドトキシンの活性を失わせるので、一定量の抗エンドトキシン抗体に、抗体量よりも過剰のエンドトキシンを添加し、残存したエンドトキシンをリムラス法により測定することにより、様々な抗原特異性の異なる抗体混合物のエンドトキシン中和（＝無毒化）活性の総体を定量的に測定することができる。 
【００３１】
本実施形態においては、抗体の素材として、生乳由来の自然免疫抗体を含有する乳清蛋白（ＷＰＣ）を用いることが好ましい。「自然免疫抗体」とは、ある動物の免疫系の外来抗原への暴露が自然に行われた結果、獲得された抗体をいう。ＷＰＣは、チーズ製造の副生物である乳清に含まれる蛋白を集めたもので、熱履歴の少ない製造方法を用いることにより自然免疫抗体はこのＷＰＣに濃縮される。自然免疫抗体を含有するＷＰＣとしては既に市販されているものを用いることができる。市販のＷＰＣとしては、例えば、「アサマ乳清たんぱく」（アサマ化成株式会社製）を用いることができる。
【００３２】
「アサマ乳清たんぱく」は、自然免疫抗体の中でも特に、ａ）ヒト病原細菌の内から選択した３３株の病原細菌由来のエンドトキシン、ｂ）病原性大腸菌Ｏ−２６株、Ｏ−５５株、Ｏ−１１１株由来のエンドトキシンと、サルモネラ・ミネソタ菌由来のリピッドＡの４種類のエンドトキシン、ｃ）黄色ブドウ球菌由来のエンテロトキシンＢ、ウェルシュ菌由来のエンテロトキシンの２種類のエキソトキシンを指標として選択された抗体を含む製品である（木島佳子他，日本食品化学工学会誌，２００９，５６：４７５−４８２）。従って「アサマ乳清たんぱく」は、ヒト病原細菌と細菌毒素に対する自然免疫抗体を多く含有する。これは、ＥＬＩＳＡ法に勝る高感度、高精度測定方法であるＥＬＭＢＡ法を新規に開発したことにより、ヒト病原細菌に対する抗体を含む乳清蛋白製品の選別が可能になり、その結果として得られたものである。
【００３３】
「アサマ乳清たんぱく」中のヒト病原細菌に対する３３種の自然免疫抗体とは、大腸菌Ｏ−１１１（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  Ｏ−１１１）、腸管出血性大腸菌Ｏ−１５７（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  Ｏ−１５７）、サルモネラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、志賀赤痢菌（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）、セレウス菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ）、リステリア菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａ）、エルシニア菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ）、セラチア菌（Ｓｅｒｒａｔｉａ  ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）、ネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）、サルモネラ・ミネソタＲ５９５菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｍｉｎｎｅｓｏｔａ  Ｒ５９５）、表皮ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、カンピロバクター（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ）、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、カンジダ菌（Ｃａｎｄｉｄａ）、プロピオン酸菌（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、サングイス連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｎｇｕｉｓ）、唾液連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、ミュータンス菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ）、アエロゲネス菌（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）、アルカリゲネス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）、エンテロバクター・クロアカ（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅ）、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、プロテウス菌（Ｐｒｏｔｅｕｓ）、ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ）、Ａ群化膿レンサ球菌１型（Ｇｒｏｕｐ  Ａ  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ  ｔｙｐｅ−１）、Ａ群化膿レンサ球菌１２型（Ｇｒｏｕｐ  Ａ  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ  ｔｙｐｅ−１２）、Ａ群化膿レンサ球菌２２型（Ｇｒｏｕｐ  Ａ  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ  ｔｙｐｅ−２２）、緑色レンサ球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｖｉｒｉｄａｎｓ）、肺炎レンサ球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、肺炎桿菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）及びインフルエンザ菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）に対する抗体であり、自然免疫抗体はこれ以外の抗ヒト病原細菌抗体を含むことがある。
【００３４】
「アサマ乳清たんぱく」中の細菌毒素に対する自然免疫抗体とは、病原性大腸菌Ｏ−２６株、Ｏ−５５株及びＯ−１１１株由来のエンドトキシン、サルモネラ・ミネソタ菌由来のリピッドＡ、黄色ブドウ球菌由来のエンテロトキシンＢ、ウェルシュ菌由来のエンテロトキシンに対する抗体であり、自然免疫抗体はこれ以外の抗細菌毒素抗体を含むことがある。
【００３５】
自然免疫抗体の選別は、上記ａ）については抗体価がホエイタンパク質１ｇ中に８μｇ以上である点、上記ｂ）及びｃ）については抗体価がホエイタンパク質１ｇ中に１μｇ以上である点を指標とした。
【００３６】
本実施形態に係る関節リウマチ予防用及び治療用組成物において、効果を発揮させるために必要とする抗体含有量は０．００１重量％以上であることが好ましく、より好ましくは０．０１重量％以上であることが好ましい。抗体の摂取量は、成人一日当たり１０ｍｇ以上であることが好ましく、より好ましくは１００ｍｇ以上である。
【００３７】
本実施形態において使用されるプレバイオティクスは、腸内のプロバイオティクス又は健康を促進する微生物の増殖を促進する、消化できない食品を意味する。プレバイオティクスは、プレバイオティクスを摂取した人の胃及び／若しくは上部腸内で分解、又は消化管内で吸収されないが、胃腸の微生物叢及び／又はプレバイオティクスによって発酵する。プレバイオティクスは、例えば、Ｇｌｅｎｎ  Ｒ．Ｇｉｂｓｏｎ及びＭａｒｃｅｌ  Ｂ．Ｒｏｂｅｒｆｒｏｉｄ、Ｄｉｅｔａｒｙ  Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｈｕｍａｎ  Ｃｏｌｏｎｉｃ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ：Ｉｎｔｒｏｄｕｃｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｃｏｎｃｅｐｔ  ｏｆ  Ｐｒｅｂｉｏｔｉｃｓ、Ｊ．Ｎｕｔｒ．１９９５  １２５：１４０１〜１４１２によって定義されている。
【００３８】
本実施形態において使用し得るプレバイオティクスは特に限定されず、腸内でプロバイオティクス又は健康を促進する微生物の増殖を促進する全ての食品が含まれる。好ましくは、プレバイオティクスは、スキムミルク、オリゴ糖（ガラクトオリゴ糖、フラクトオリゴ糖、大豆オリゴ糖、乳果オリゴ糖、キシロオリゴ糖、イソマルオリゴ糖、ラフィノース、ラクチュロース、コーヒー豆マンノオリゴ糖、グルコン酸など）や食物繊維（ポリデキストロースなど）、イヌリン、またはこれらの混合物からなる群から選択し得る。好ましいプレバイオティクスは、スキムミルク、フラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）、イソマルトオリゴ糖（ＩＯＳ）、キシロオリゴ糖（ＸＯＳ）、大豆オリゴ糖、グリコシルスクロース（ＧＳ）、ラクトスクロース（ＬＳ）、ラクツロース（ＬＡ）、パラチノースオリゴ糖（ＰＡＯ）、マルトオリゴ糖（ＭＯＳ）、ガム及び／又はその加水分解物、ペクチン及び／又はその加水分解物である。なお、スキムミルクはこれまでプレバイオティクスとしての機能は知られていなかったが、本発明者らにより、スキムミルクがプレバイオティクスとして機能しうることが明らかとなった。
【００３９】
本実施形態に係る関節リウマチ予防用及び治療用組成物において、効果を発揮させるために必要とするプレバイオティクス含有量は１０重量％以上であることが好ましく、より好ましくは２０重量％以上であることが好ましい。抗体との含有比率は、１：１〜１：１００であることが好ましく、１：５〜１：２０であることがより好ましい。
【００４０】
本実施形態に係る関節リウマチ予防用及び治療用組成物を用いて関節リウマチの予防・治療効果を更に一層有効にするために、上述した有効成分以外の成分を配合することができる。上述した有効成分以外の有効成分としては、例えば、抗酸化食品素材のグリアジン処理ＳＯＤ、プロバイオティクスなどがある。
【００４１】
グリアジン処理ＳＯＤは、メロンより抽出した活性酸素除去酵素（ＳＯＤ）に小麦不溶性蛋白質であるグリアジンを安定的に結合させたものであり、市販品としてはグリソジン（商標、ニュートリション・アクト社）が知られている。本実施形態に係る関節リウマチ予防用及び治療用組成物に添加することにより、関節リウマチの症状をより効果的に改善することができる。添加量は、関節リウマチ予防用及び治療用組成物に対し、０．１〜１０重量％であることが好ましい。
【００４２】
プロバイオティクスは、腸内微生物のバランスを改善することによって宿主に有益に働く生菌添加物であり、ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属、エンテロコッカス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）属、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属、ビフィドバクテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属などの乳酸菌（代謝産物として乳酸を産生する細菌を含む）や酪酸菌等を例示することができる。本実施形態に係る関節リウマチ予防用及び治療用組成物に添加することにより、関節リウマチの症状をより効果的に改善することができる。添加量は、関節リウマチ予防用及び治療用組成物に対し、０．１〜１０重量％であることが好ましい。
【００４３】
本実施形態に係る関節リウマチ予防用及び治療用組成物の摂取形態は、例えば、粉末、錠剤、カプセル、顆粒、クッキー、アイスクリーム、飲料などを挙げることができる。但し、有効成分の抗体が失活しない条件で摂取することが前提となる。
【００４４】
以下、実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【実施例】
【００４５】
１．関節リウマチ治療用組成物の調製
抗体としてアサマ乳清たんぱく（アサマ化成社製ミルク抗体、抗体量３０ｍｇ/ｇ）を用い、プレバイオティクスとしてスキムミルク（よつ葉乳業社製、乳糖５３％、蛋白質３４％、灰分８％）を用いた。これらの各３０ｋｇを１：１の割合で混合し、１包２０ｇに分包して、粉末状の関節リウマチ予防用及び治療用組成物を調製した（実施例１）。
【００４６】
なお、比較例として、ミルク抗体単独（比較例１）及びプレバイオティクス単独（比較例２）の各６０ｋｇを１包２０ｇに分包して治験用製剤とし、後述する試験に供試した。
【００４７】
２．試験方法
（１）被験者
患者は通常の関節リウマチ化学療法剤（ＤＭＡＲＤｓ）の使用により改善の見られない患者で、関節リウマチの病気の程度の指標である疾患活動性ＤＡＳ２８−ＥＳＲスコアが３．２以上の患者を対象とした。
【００４８】
（２）関節リウマチ治療用組成物の投与試験
上記のように調製した３種の製剤を、関節リウマチ患者の３２例を１群とする３群のそれぞれに一日１包を１２週間にわたり水とともに経口摂取させることにより投与した。スキムミルクのプレバイオテイクス作用を検討するため、被験者の糞便を摂取前と１２週摂取終了時に採取し、糞便の微生物分析をＰＣＲ法により行った。
【００４９】
関節リウマチの予防・治療効果については、関節リウマチの疾患活動性を示す国際的指標として使用されているＤＡＳ２８−ＥＳＲスコアを経時的に測定することにより評価した。
【００５０】
ＤＡＳ２８−ＥＳＲスコアは以下の手順で算出した。関節リウマチは手足の関節が痛みと腫れが特徴的であり、診断は両手指関節２０か所、両腕、肘、肩関節６か所、膝関節２か所の合計２８か所について、それらの腫れ具合（腫脹関節、ＳＪ）、痛み具合（関節を押さえたり動かしたときの痛む関節（圧痛関節、ＴＪ）を医師が診断して、それぞれ腫脹関節数（ＳＪＣ）、圧痛関節数（ＴＪＣ）を測定した。さらに、血液を採取して、ガラス管中に入れて立てかけ、ガラス管中での赤血球の沈殿する速度（ＥＳＲ＝赤血球沈降速度）を測定した（ｍｍ／時間ｈ）。さらに患者が関節リウマチを自己評価し、診断時の調子を０ｍｍ（最もよい）から１００ｍｍ（最も悪い）の長さで示した（患者ＶＡＳｍｍ）。以上の数値をもとに、次の式によりＤＡＳ２８−ＥＳＲスコアを算出した。
【００５１】
【数１】
0006804859.tif 000002
【００５２】
ＤＡＳ２８−ＥＳＲスコアは関節リウマチの治療効果の指標として用いられ、スコアが低くなるほど関節リウマチの治療効果が高いことを意味する。
【００５３】
３．結果
（１）スキムミルクのプレバイオテイクス作用
表１に糞便ビフィズス菌の１２週間における変化を示した。表１の如く、比較例２のスキムミルク群において、対数において０．３１、すなわち実数換算で０週値の２倍の有意な増加が認められた。ビフィズス菌は腸内細菌叢を改善に作用する代表的細菌であり、比較例２におけるビフィズス菌の１２週間後の菌数が増加したことから、スキムミルクにはプレバイオティクス効果があることが認められた。
【００５４】
【表１】
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【００５５】
（２）関節リウマチの治療効果
結果を図１に示す。実施例１はＤＡＳ２８−ＥＳＲスコアが０．５も減少することが判明した。これに対し、比較例１及び比較例２はＤＡＳ２８−ＥＳＲスコアが１２周間経過した後であってもさほど減少せず、比較例１は約０．１３、比較例２は約０．２３の減少にとどまった。この結果、実施例１は比較例１に対して３．８倍、比較例２に対して２．２倍ものＤＡＳ２８−ＥＳＲスコア減少率となり、抗体はプレバイオテオティクスとの混合により、相乗効果を示すことが明らかとなった。さらに、実施例１の組成物に含まれる量は、比較例１及び比較例２の半量の合剤であることから、コスト面からの有用性が認められた。この結果から、抗体とプレバイオティクスは、それぞれ単独で用いる場合と比べて相乗効果的に関節リウマチ予防・治療効果を高めることが判明した。
【図１】
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