(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(Ｉ)：
【化１】
0006804442.tif 000573
[式中、Ａは、
【化２】
0006804442.tif 000574
であり、
【化３】
0006804442.tif 000575
は、カルボニル基との結合点を表し、
【化４】
0006804442.tif 000576
は、窒素原子との結合点を表し；
ｍは、１であり；
ｗは、０であり；
Ｒ１４およびＲ１５は、水素であり；
Ｒ１６ａは、水素であり；
Ｒ１６は、
−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ（Ｒ１７）Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、
−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ（Ｒ１７）Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ（Ｒ１７ａ）Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、および
−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ（Ｒ１７）ＣＯ２Ｈから選択され；
ここで：
Ｘは、
−（ＣＨ２）２ＣＨ（ＣＯ２Ｈ）ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｐ；
−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑ、および
−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＯ２Ｈ）ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｐ
から選択され；
ｑは３、４、５、６、７、８、９、１０または１１であり；
ｐは１４、１５または１６であり；
各Ｒ１７ａは、水素および−ＣＨ２ＣＯ２Ｈから独立して選択され、
各Ｒ１７は、−(ＣＨ２)ｚ−トリアゾリル−Ｘ−Ｒ３５であり、ｚは１であり、Ｒ３５は、−ＣＯ２ＨおよびＣＨ３から選択され；
Ｒｃ、Ｒｆ、Ｒｈ、Ｒｉ、ＲｍおよびＲｎは、水素であり；
Ｒａ、ＲｅおよびＲｊは、水素であり;
Ｒｂ、ＲｋおよびＲＬは、メチルであり；
Ｒ１は、フェニルＣ１−Ｃ３アルキルであって、当該フェニル部分が適宜ヒドロキシ、ハロまたはメトキシで置換されていてもよく；
Ｒ２は、Ｃ１−Ｃ７アルキルであり；
Ｒ３は、アミドＣ１−Ｃ３アルキルまたはカルボキシＣ１−Ｃ３アルキルであり；
Ｒ４およびＲｄは、これらが結合する原子と一緒になって、ピロリジン環を形成し；
Ｒ５は、イミダゾリルＣ１−Ｃ３アルキル、アミノＣ１−Ｃ３アルキルおよびアミノブチルから選択され；
Ｒ６は、アミドＣ１−Ｃ３アルキル、アミノＣ１−Ｃ３アルキル、アミノブチルおよびＣ１−Ｃ７アルキルから選択され；
Ｒ７およびＲｇは、これらが結合する原子と一緒になって、適宜ヒドロキシで置換されていてもよいピロリジン環を形成し；
Ｒ８およびＲ１０は、適宜カルボキシＣ１−Ｃ３アルキルで置換されていてもよいインドリルＣ１−Ｃ３アルキルであり；
Ｒ９は、ヒドロキシＣ１−Ｃ３アルキルまたはアミノＣ１−Ｃ３アルキルであり；
Ｒ１１は、Ｃ１−Ｃ７アルキルであり；
Ｒ１２は、Ｃ１−Ｃ７アルキルであり；
Ｒ１３は、Ｃ１−Ｃ７アルキル、カルボキシＣ１−Ｃ３アルキルおよび−（ＣＨ２）３ＮＨＣ（ＮＨ）ＮＨ２から選択される］
の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２】
式：
【化５】
0006804442.tif 000577
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３】
式：
【化６】
0006804442.tif 000578
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項４】
式：
【化７】
0006804442.tif 000579
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項５】
式：
【化８】
0006804442.tif 000580
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項６】
式：
【化９】
0006804442.tif 000581
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項７】
式：
【化１０】
0006804442.tif 000582
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項８】
式：
【化１１】
0006804442.tif 000583
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項９】
式：
【化１２】
0006804442.tif 000584
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１０】
式：
【化１３】
0006804442.tif 000585
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１１】
式：
【化１４】
0006804442.tif 000586
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１２】
式：
【化１５】
0006804442.tif 000587
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１３】
式：
【化１６】
0006804442.tif 000588
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１４】
式：
【化１７】
0006804442.tif 000589
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１５】
式：
【化１８】
0006804442.tif 000590
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１６】
式：
【化１９】
0006804442.tif 000591
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１７】
式：
【化２０】
0006804442.tif 000592
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１８】
式：
【化２１】
0006804442.tif 000593
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１９】
式：
【化２２】
0006804442.tif 000594
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２０】
式：
【化２３】
0006804442.tif 000595
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２１】
式：
【化２４】
0006804442.tif 000596
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２２】
式：
【化２５】
0006804442.tif 000597
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２３】
式：
【化２６】
0006804442.tif 000598
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２４】
式：
【化２７】
0006804442.tif 000599
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２５】
式：
【化２８】
0006804442.tif 000600
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２６】
式：
【化２９】
0006804442.tif 000601
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２７】
式：
【化３０】
0006804442.tif 000602
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２８】
式：
【化３１】
0006804442.tif 000603
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２９】
式：
【化３２】
0006804442.tif 000604
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３０】
式：
【化３３】
0006804442.tif 000605
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３１】
式：
【化３４】
0006804442.tif 000606
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３２】
式：
【化３５】
0006804442.tif 000607
で示される、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３３】
請求項１〜３２のいずれか記載の化合物またはその医薬的に許容される塩を含む、免疫応答を増強、刺激および／または増加させるための薬剤。
【請求項３４】
別の薬剤の投与前、後または同時に投与することを更に特徴とする、請求項３３記載の薬剤。
【請求項３５】
別の薬剤が、殺菌剤、抗ウイルス剤、細胞毒性剤および／または免疫応答修飾剤である、請求項３４記載の薬剤。
【請求項３６】
別の薬剤が、ＨＤＡＣ阻害剤である、請求項３４記載の薬剤。
【請求項３７】
別の薬剤が、ＴＬＲ７および／またはＴＬＲ８アゴニストである、請求項３４記載の薬剤。
【請求項３８】
請求項１〜３２のいずれか記載の化合物またはその医薬的に許容される塩を含む、癌細胞の成長、増殖または転移を阻害するための薬剤。
【請求項３９】
癌が黒色腫、腎細胞癌、扁平非小細胞性肺癌(ＮＳＣＬＣ)、非扁平ＮＳＣＬＣ、結腸直腸癌、去勢抵抗性前立腺癌、卵巣癌、胃癌、肝細胞癌、膵臓癌、頭頸部の扁平上皮細胞癌、食道、消化管および乳房の癌ならびに造血器腫瘍から選択される、請求項３８記載の薬剤。
【請求項４０】
請求項１〜３２のいずれか記載の化合物またはその医薬的に許容される塩を含む、感染性疾患の治療剤。
【請求項４１】
感染性疾患がウイルスを原因とする、請求項４０記載の治療剤。
【請求項４２】
ウイルスがＨＩＶ、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、ヘルペスウイルスおよびインフルエンザから選択される、請求項４１記載の治療剤。
【請求項４３】
請求項１〜３２のいずれか記載の化合物またはその医薬的に許容される塩を含む、敗血症性ショックの治療剤。
【請求項４４】
請求項１〜３２のいずれか記載の化合物またはその医薬的に許容される塩を含む、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１および／またはＣＤ８０の相互作用を遮断するための薬剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
(関連出願に対する相互参照)
本出願は、２０１５年８月１３日に提出した米国仮出願番号第６２／２０４,６８９号、２０１５年２月３日に提出したＵＳＳＮ第６２／１１１，３８８号に対する優先権を主張するものであって、その全てを参照により本明細書に組み込むものである。
【０００２】
本発明は、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１およびＣＤ８０／ＰＤ−Ｌ１タンパク質／タンパク質相互作用を阻害し、それゆえに、癌および感染症を含む種々の疾患の改善に有用である、新規大環状ペプチドを提供する。
【背景技術】
【０００３】
タンパク質プログラム細胞死１(ＰＤ−１)は、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ−４、ＩＣＯＳおよびＢＴＬＡも含む受容体のＣＤ２８ファミリーの阻害性メンバーである。ＰＤ−１は活性化Ｂ細胞、Ｔ細胞および骨髄球性細胞上に発現される(Agata et al., supra；Okazaki et al., Curr. Opin. Immunol., 14：779-782(2002)；Bennett et al., J. Immunol., 170：711-718(2003))。
【０００４】
ＰＤ−１タンパク質は、Ｉｇ遺伝子スーパーファミリーの一部である５５ｋＤａ Ｉ型膜貫通型タンパク質である(Agata et al., Int. Immunol., 8：765-772(1996))。ＰＤ−１は、膜近位免疫受容体チロシン阻害モチーフ(ＩＴＩＭ)および膜遠位チロシンベーススイッチモチーフ(ＩＴＳＭ)(Thomas, M.L., J. Exp. Med., 181：1953-1956(1995)；Vivier, E. et al., Immunol. Today, 18：286-291(1997))を含む。ＰＤ−１は、ＣＴＬＡ−４と構造は類似するが、ＣＤ８０ ＣＤ８６(Ｂ７−２)結合に重要なＭＹＰＰＹモチーフを欠く。ＰＤ−１に対する２個のリガンドであるＰＤ−Ｌ１(Ｂ７−Ｈ１)およびＰＤ−Ｌ２(ｂ７−ＤＣ)が同定されている。ＰＤ−１を発現するＴ細胞の活性化は、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２を発現する細胞との相互作用により下方制御されることが示されている(Freeman et al., J. Exp. Med., 192：1027-1034(2000)；Latchman et al., Nat. Immunol., 2：261-268(2001)；Carter et al., Eur. J. Immunol., 32：634-643(2002))。ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２のいずれも、ＰＤ−１に結合するＢ７タンパク質ファミリーメンバーであるが、他のＣＤ２８ファミリーメンバーとは結合しない。ＰＤ−Ｌ１リガンドは多様なヒトの癌で豊富である(Dong et al., Nat. Med., 8：787-789(2002))。ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１の相互作用は、腫瘍浸潤性リンパ球の減少、Ｔ細胞受容体仲介増殖の減少および癌細胞による免疫回避の減少をもたらす(Dong et al., J. Mol. Med., 81：281-287(2003)；Blank et al., Cancer Immunol. Immunother., 54：307-314(2005)；Konishi et al., Clin. Cancer Res., 10：5094-5100(2004))。免疫抑制は、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１の局所相互作用の阻害により逆転でき、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ２の相互作用が同様に遮断されたとき、この効果は相加的である(Iwai et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 99：12293-12297(2002)；Brown et al., J. Immunol., 170：1257-1266(2003))。
【０００５】
ＰＤ−Ｌ１はＣＤ８０と相互作用することも示されている(Butte, MJ. et al., Immunity, 27：111-122(2007))。発現する免疫細胞上でのＰＤ−Ｌ１／ＣＤ８０相互作用は、阻害的であることが示されている。この相互作用の遮断は、この阻害相互作用を抑止することが示されている(Paterson, AM. et al., J. Immunol., 187：1097-1105(2011)；Yang, J. et al., J. Immunol.,Aug 1；187(3)：1113-9(2011))。
【０００６】
ＰＤ−１発現Ｔ細胞が、そのリガンドを発現する細胞と接触したとき、増殖、サイトカイン分泌および細胞毒性を含む抗原性刺激に対する応答における機能活性が低下する。ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２相互作用は、感染または腫瘍の回復期または自己耐容性の発達期の免疫応答を下方制御する(Keir, M.E. et al., Annu. Rev. Immunol., 26：Epub(2008))。腫瘍疾患または慢性感染の期間に起こるような慢性抗原刺激は、高レベルのＰＤ−１を発現し、慢性抗原に対する活性に関して機能障害性のＴ細胞を生じる(Kim et al., Curr. Opin. Imm.(2010)を参照されたい)。これは、“Ｔ細胞消耗”と呼ばれる。Ｂ細胞もＰＤ−１／ＰＤ−リガンド抑制および“消耗”を示す。
【０００７】
ＰＤ−Ｌ１に対する抗体を使用したＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１ライゲーションの遮断は、多くの系におけるＴ細胞活性化を回復させ、増強させることが示されている。進行型の癌を有する患者は、ＰＤ−Ｌ１に対するモノクローナル抗体での処置により利益を得る(Brahmer et al., New Engl. J. Med.(2012))。腫瘍および慢性感染の前臨床的動物モデルは、モノクローナル抗体によるＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１経路の遮断により、免疫応答を増強し、腫瘍拒絶または感染の制御をもたらし得ることを示している。ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１の遮断による抗腫瘍免疫治療は、多くの組織学的に異なる腫瘍に対する治療的免疫応答を増強することができる(Dong, H. et al., “B7-H1 pathway and its role in the evasion of tumor immunity”, J. Mol. Med., 81(5)：281-287(2003)；Dong, H. et al., “Tumor-associated B7-H1 promotes T-cell apoptosis：a potential mechanism of immune evasion”, Nat. Med., 8(8)：793-800(2002))。
【０００８】
ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用の妨害は、慢性感染を有する系におけるＴ細胞活性を増強できる。ＰＤ−Ｌ１の遮断は、慢性リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス感染マウスにおけるウイルスクリアランスの改善および免疫回復をもたらす(Barber, D.L. et al., “Restoring function in exhausted CD8 T cells during chronic viral infection”, Nature, 439(7077)：682-687(2006))。ＨＩＶ−１に感染したヒト化マウスは、ウイルス血症に対する保護の増強およびＣＤ４＋Ｔ細胞のウイルス枯渇を示す(Palmer et al., J. Immunol.(2013))。ＰＤ−Ｌ１に対するモノクローナル抗体によるＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１の遮断は、ＨＩＶ患者(Day, Nature(2006)；Petrovas, J. Exp. Med.(2006)；Trautman, Nature Med.(2006)；D'Souza, J. Immunol.(2007)；Zhang, Blood(2007)；Kaufmann, Nature Imm.(2007)；Kasu, J. Immunol.(2010)；Porichis, Blood(2011))、ＨＣＶ患者(Golden-Mason, J. Virol.(2007)；Jeung, J. Leuk. Biol.(2007)；Urbani, J. Hepatol.(2008)；Nakamoto, PLoS Path.(2009)；Nakamoto, Gastroenterology(2008))およびＨＢＶ患者(Boni, J. Virol.(2007)；Fisicaro, Gastro.(2010)；Fisicaro et al., Gastroenterology(2012)；Boni et al., Gastro.(2012)；Penna et al., J. Hep.(2012)；Raziorrough, Hepatology(2009)；Liang, World J. Gastro.(2010)；Zhang, Gastro.(2008))からのＴ細胞に対するインビトロ抗原特異的機能性を回復できる。
【０００９】
ＰＤ−Ｌ１／ＣＤ８０相互作用の遮断は、免疫を刺激することも示されている(Yang, J. et al., J. Immunol., Aug 1；187(3)：1113-9(2011))。ＰＤ−Ｌ１／ＣＤ８０相互作用の遮断により生じる免疫刺激は、さらなるＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ２相互作用の遮断との組み合わせにより増強することが示されている。
【００１０】
免疫細胞表現型の変更は、敗血症性ショックにおける重要な因子であるとの仮説がある(Hotchkiss et al., Nat. Rev. Immunol.(2013))。これらは、ＰＤ−１およびＰＤ−Ｌ１のレベル増加を含む(Guignant, et al., Crit. Care(2011))。ＰＤ−１およびＰＤ−Ｌ１レベルが上昇した敗血症性ショック患者からの細胞は、Ｔ細胞アポトーシスのレベル増加を示す。ＰＤ−Ｌ１に対する抗体は免疫細胞アポトーシスのレベルを低減できる(Zhang et al., Crit. Care(2011))。さらに、ＰＤ−１の発現欠失マウスは、野生型マウスよりも敗血症性ショック症状に対して抵抗性である(Yang, J. et al., J. Immunol., Aug 1；187(3)：1113-1119(2011))。抗体を使用したＰＤ−Ｌ１の相互作用の遮断が、不適切な免疫応答を抑制できること、および疾患徴候を回復できることが研究により示されている。
【００１１】
慢性抗原に対して増強した免疫学的応答に加えて、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１経路の遮断は、慢性感染の状況における治療的ワクチン接種を含むワクチン接種に対する応答の増強も示す(Ha, S.J. et al., “Enhancing therapeutic vaccination by blocking PD-1-mediated inhibitory signals during chronic infection”, J. Exp. Med., 205(3)：543-555(2008)；Finnefrock, A.C. et al., “PD-1 blockade in rhesus macaques：impact on chronic infection and prophylactic vaccination”, J. Immunol., 182(2)：980-987(2009)；Song, M.-Y. et al., “Enhancement of vaccine-induced primary and memory CD8+ t-cell responses by soluble PD-1”, J. Immunother., 34(3)：297-306(2011))。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本明細書に記戴する分子は、生化学的実験系および細胞実験系の両系において、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１の相互作用を遮断する能力を示す。これらの結果は、治療用ワクチンを含む、癌または慢性感染における免疫を増強するための治療的投与の可能性と一致する。
【００１３】
本明細書に記戴する大環状ペプチドは、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１との相互作用およびＣＤ８０との相互作用を阻害できる。これらの化合物は、高度に効果的なＰＤ−Ｌ１への結合、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１またはＣＤ８０のいずれかとの相互作用の遮断を示し、強化されたＴ細胞機能的活性の促進が可能であり、それゆえ、これらは非経腸製剤、経口製剤、肺製剤、経鼻製剤、バッカル製剤および徐放製剤の候補となる。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
第一実施形態において、本開示は、式(Ｉ)：
【化１】
0006804442.tif 000002
[式中、Ａは、
【化２】
0006804442.tif 000003
から選択され、
【化３】
0006804442.tif 000004
は、カルボニル基との結合点を表し、
【化４】
0006804442.tif 000005
は、窒素原子との結合点を表し；
ｎは、０または１であり；
ｍは、１または２であり；
ｍ’は、１または２であり；
ｗは、０、１または２であり；
Ｒｘは、水素、アミノ、ヒドロキシおよびメチルから選択され；
Ｒ１４およびＲ１５は、独立して、水素およびメチルから選択され；
Ｒ１６ａは、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択され；
Ｒ１６は、
−(Ｃ(Ｒ１７ａ)２)２−Ｘ−Ｒ３０、
−Ｃ(Ｒ１７ａ)２Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ１６ａ)Ｃ(Ｒ１７ａ)２−Ｘ’−Ｒ３１、
−Ｃ(Ｒ１７ａ)２[Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ１６ａ)Ｃ(Ｒ１７ａ)２]ｗ’−Ｘ−Ｒ３１、
−(Ｃ(Ｒ１７ａ)(Ｒ１７)Ｃ(Ｏ)ＮＲ１６ａ)ｎ’−Ｈ；および
−(Ｃ(Ｒ１７ａ)(Ｒ１７)Ｃ(Ｏ)ＮＲ１６ａ)ｍ’−Ｃ(Ｒ１７ａ)(Ｒ１７)−ＣＯ２Ｈから選択され；
ここで：
ｗ’は、２または３であり；
ｎ’は、１〜６であり；
ｍ’は、０〜５であり；
Ｘは、１〜１７２個の原子の鎖であり、該原子は、炭素および酸素から選択され、ここで該鎖は、その中に組み込まれる−ＮＨＣ(Ｏ)ＮＨ−および−Ｃ(Ｏ)ＮＨ−から選択される１、２、３または４つの基を含有し得る；かつ該鎖は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、−ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−(ＣＨ２)ＣＯ２Ｈから独立して選択される１〜６つの基で所望により置換されていてもよい；
Ｘ’は、１〜１７２個の原子の鎖であり、該原子は、炭素および酸素から選択され、ここで該鎖は、その中に組み込まれる−ＮＨＣ(Ｏ)ＮＨ−および−Ｃ(Ｏ)ＮＨ−から選択される１、２、３または４つの基を含有し得る；かつ該鎖は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−ＣＨ２ＣＯ２Ｈから独立して選択される１〜６つの基で所望により置換されていてもよい、但し、Ｘ’は、非置換ＰＥＧ以外のものである；
Ｒ３０は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＲｗＲｘおよび−ＣＨ３から選択され、ＲｗおよびＲｘは、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから独立して選択される、但し、Ｘが全て炭素である場合、Ｒ３０は−ＣＨ３以外の基である；
Ｒ３１は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＲｗＲｘ、−ＣＨ３、アレクサ−５−ＳＤＰおよびビオチンである；
各Ｒ１７ａは、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＯ２Ｈおよび−(ＣＨ２)２ＣＯ２Ｈから独立して選択され、
各Ｒ１７は、水素、−ＣＨ３、(ＣＨ２)ｚＮ３、−(ＣＨ２)ｚＮＨ２、−Ｘ−Ｒ３１、−(ＣＨ２)ｚＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２Ｃ≡ＣＨおよび−(ＣＨ２)ｚ−トリアゾリル−Ｘ−Ｒ３５から独立して選択され、ここでｚは１〜６であり、Ｒ３５は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＲｗＲｘ、ＣＨ３、ビオチン、−２−フルオロピリジン、−Ｃ(Ｏ)−(ＣＨ２)２−Ｃ(Ｏ)Ｏ−ビタミンＥ、−Ｃ(Ｏ)Ｏ−ビタミンＥおよび
【化５】
0006804442.tif 000006
から選択される；
但し、少なくとも１つのＲ１７は、水素、−ＣＨ３または−ＣＨ２ＯＨ以外である；
Ｒｃ、Ｒｆ、Ｒｈ、Ｒｉ、ＲｍおよびＲｎは、水素であり；
Ｒａ、Ｒｅ、ＲｊおよびＲｋは、各々水素およびメチルから独立して選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２およびＲ１３は、独立して、天然のアミノ酸側鎖および非天然のアミノ酸側鎖から独立して選択されるか、あるいは下に記述したような対応する隣接するＲ基と共に環を形成し；
ＲｅおよびＲｋは、各々、対応する隣接Ｒ基およびそれらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成しており；ここで各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４つの基で所望により置換されていてもよい；
Ｒｂは、メチルであるか、あるいはＲｂおよびＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成しており；ここで各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４つの基で所望により置換されていてもよい；
Ｒｄは、水素またはメチルであるか、あるいはＲｄおよびＲ４は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成することができ；ここで各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロ、ヒドロキシおよびフェニルから独立して選択される１〜４つの基で所望により置換されていてもよく；
Ｒｇは、水素またはメチルであるか、あるいはＲｇおよびＲ７は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成することができ；ここで各環は、アミノ、所望によりハロ基で置換されていてもよいベンジル、ベンジルオキシ、シアノ、シクロヘキシル、メチル、ハロ、ヒドロキシ、所望によりメトキシ基で置換されていてもよいイソキノリニルオキシ、所望によりハロ基で置換されていてもよいキノリニルオキシおよびテトラゾリルから独立して選択される１〜４つの基で所望により置換されていてもよく；および、ここで前記ピロリジンおよびピペリジン環は、所望により、シクロヘキシル、フェニルまたはインドール基と縮合していてもよい；および
Ｒｌは、メチルであるか、あるいはＲｌおよびＲ１２は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジンおよびピロリジンから選択される環を形成しており、ここで各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４つの基で所望により置換されていてもよい］
の化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供するものである。
【００１５】
第一実施形態の第一局面において、本開示は、式(Ｉ)の化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供するものであり、
式中、Ａは、
【化６】
0006804442.tif 000007
である。
【００１６】
第一実施形態の第二局面において：
ｍおよびｗは、１であり；
Ｒ１４、Ｒ１５およびＲ１６ａは、各々水素である。
【００１７】
第一実施形態の第三局面において：
Ｒ１６は、−(Ｃ(Ｒ１７ａ)２)２−Ｘ−Ｒ３０である。
【００１８】
第一実施形態の第四局面において：
各Ｒ１７ａは、水素であり；
Ｘは、８〜４６個の原子の鎖であり、該原子は、炭素および酸素から選択され、ここで該鎖は、その中に組み込まれる１、２または３つのＣ(Ｏ)ＮＨ基を含有していてもよく；かつ該鎖は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、−ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−ＣＨ２ＣＯ２Ｈから独立して選択される１または２つの基により所望により置換されていてもよく；および
Ｒ３０は、−ＣＨ３、−ＣＯ２Ｈおよび−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２から選択される；
但し、Ｘが全て炭素である場合、Ｒ３０は−ＣＨ３以外の基である。
【００１９】
第一実施形態の第五局面において、本開示は、式(Ｉ)の化合物またはその医薬的に許容される塩を提供するものであり：
Ａは、
【化７】
0006804442.tif 000008
であり;
ｍおよびｗは、１であり；
Ｒ１４、Ｒ１５およびＲ１６ａは、各々水素であり；および
Ｒ１６は、−Ｃ(Ｒ１７ａ)２Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ１６ａ)Ｃ(Ｒ１７ａ)２−Ｘ’−Ｒ３１である。
【００２０】
第一実施形態の第六局面において：
各Ｒ１７ａは、水素、−ＣＯ２Ｈおよび−ＣＨ２ＣＯ２Ｈから選択され;
Ｘ’は、８〜４８個の原子の鎖であり、該原子は、炭素および酸素から選択され、ここで該鎖は、その中に組み込まれる１、２または３つのＣ(Ｏ)ＮＨ基を含有しており；かつ該鎖は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、−ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−ＣＨ２ＣＯ２Ｈから独立して選択される１または２つの基により所望により置換されていてもよく；
但しＸ’は、非置換ＰＥＧ以外のものである；ならびに
Ｒ３０は、−ＣＨ３、−ＣＯ２Ｈおよび−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２から選択される。
【００２１】
第一実施形態の第七局面において、本開示は、式(Ｉ)の化合物またはその医薬的に許容される塩を提供するものであり：
Ａは、
【化８】
0006804442.tif 000009
であり;
ｍおよびｗは、１であり；
Ｒ１４、Ｒ１５およびＲ１６ａは、各々水素であり；
Ｒ１６は、−Ｃ(Ｒ１７ａ)２[Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ１６ａ)Ｃ(Ｒ１７ａ)２]ｗ’−Ｘ−Ｒ３１である。
【００２２】
第一実施形態の第八局面において：
各Ｒ１７ａは、水素、−ＣＯ２Ｈおよび−ＣＨ２ＣＯ２Ｈから選択される；
Ｘは、８〜４８個の原子の鎖であり、該原子は、炭素および酸素から選択され、ここで該鎖は、その中に組み込まれる１、２または３つのＣ(Ｏ)ＮＨ基を含有し得る；かつ該鎖は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、−ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−ＣＨ２ＣＯ２Ｈから独立して選択される１または２つの基により所望により置換されていてもよく；および
Ｒ３１は、−ＣＨ３、−ＣＯ２Ｈおよび−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２から選択される。
【００２３】
第一実施形態の第九局面において、本開示は、式(Ｉ)の化合物またはその医薬的に許容される塩を提供するものである：
Ａは
【化９】
0006804442.tif 000010
であり；
ｍおよびｗは、１であり；
Ｒ１４、Ｒ１５およびＲ１６ａは、各々水素であり；および
Ｒ１６は、−(Ｃ(Ｒ１７ａ)(Ｒ１７)Ｃ(Ｏ)ＮＲ１６ａ)ｎ’−Ｈである。
【００２４】
第一実施形態の第十局面において：
各Ｒ１７ａは、水素であり；および
各Ｒ１７は、水素、−ＣＨ３、(ＣＨ２)ｚＮ３、−(ＣＨ２)ｚＮＨ２、−Ｘ−Ｒ３１、−(ＣＨ２)ｚＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２Ｃ≡ＣＨおよび−(ＣＨ２)ｚ−トリアゾリル−Ｘ−Ｒ３５から選択され；但し、少なくとも１つのＲ１７は、水素、−ＣＨ３または−ＣＨ２ＯＨ以外である；
ｚは１〜４である；
Ｒ３１は、−ＣＨ３、−ＣＯ２Ｈおよび−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２から選択される；
Ｘは、７〜１５５個の原子の鎖であり、該原子は、炭素および酸素から選択され、ここで該鎖は、その中に組み込まれる１、２または３つのＣ(Ｏ)ＮＨ基を含有し得る；かつ該鎖は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、−ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−ＣＨ２ＣＯ２Ｈから独立して選択される１または２つの基により所望により置換されていてもよく；および
Ｒ３５は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＲｗＲｘ、ＣＨ３、ビオチン、−２−フルオロピリジン、−Ｃ(Ｏ)−(ＣＨ２)２−Ｃ(Ｏ)Ｏ−ビタミンＥおよび−Ｃ(Ｏ)Ｏ−ビタミンＥから選択される。
【００２５】
第一実施形態の第十一局面において、本開示は、式(Ｉ)の化合物またはその医薬的に許容される塩を提供しており：
Ａは、
【化１０】
0006804442.tif 000011
であり;
ｍおよびｗは、１であり；
Ｒ１４、Ｒ１５およびＲ１６ａは、各々水素であり；および
Ｒ１６は、−(ＣＲ１７ａ)(Ｒ１７)Ｃ(Ｏ)ＮＲ１６ａ)ｍ’−Ｃ(Ｒ１７ａ)(Ｒ１７)−ＣＯ２Ｈである。
【００２６】
第一実施形態の第十二局面において：
ｍ’は１〜３であり；
各Ｒ１７ａは、水素であり；
各Ｒ１７は、水素、−ＣＨ３、(ＣＨ２)ｚＮ３、−(ＣＨ２)ｚＮＨ２、−Ｘ−Ｒ３１、−(ＣＨ２)ｚＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ、−(ＣＨ２)ｚ−トリアゾリル−Ｘ−Ｒ３５およびＣ(Ｏ)Ｏ−ビタミンＥならびに
【化１１】
0006804442.tif 000012
から選択される；
但し、少なくとも１つのＲ１７は、水素、−ＣＨ３または−ＣＨ２ＯＨ以外である；
ｚは１〜４である；
Ｒ３１は、−ＣＨ３、−ＣＯ２Ｈおよび−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２から選択される；
Ｘは、２０個〜６０個の原子の鎖であり、該原子は、炭素および酸素から選択され、ここで該鎖は、その中に組み込まれる１、２または３つのＣ(Ｏ)ＮＨ基を含有し得る；かつ該鎖は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、−ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−ＣＨ２ＣＯ２Ｈから独立して選択される１または２つの基により所望により置換されていてもよい；および
Ｒ３５は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＲｗＲｘ、ＣＨ３、ビオチン、２−フルオロピリジン、−Ｃ(Ｏ)−(ＣＨ２)２−Ｃ(Ｏ)Ｏ−ビタミンＥおよび−Ｃ(Ｏ)Ｏ−ビタミンＥから選択される。
【００２７】
第一実施形態の十三局面において、本開示は、式(Ｉ)の化合物またはその医薬的に許容される塩を提供するものであり、ここでＲ１は、フェニルＣ１−Ｃ３アルキルであり、該フェニル部分は、所望により、ヒドロキシル、ハロまたはメトキシで置換されていてもよく；Ｒ２は、Ｃ１−Ｃ７アルキルであるか、あるいはＲ２およびＲｂは、それらが結合している原子と一緒になって、ピペリジン環を形成しており；Ｒ３は、ＮＲｘＲｙ(Ｃ１−Ｃ７アルキル)、ＮＲｕＲｖカルボニルＣ１−Ｃ３アルキルまたはカルボキシＣ１−Ｃ３アルキルであり；Ｒ４およびＲｄは、それらが結合している原子と一緒になって、ピロリジン環を形成しており；Ｒ５は、ヒドロキシＣ１−Ｃ３アルキル、イミダゾリルＣ１−Ｃ３アルキルまたはＮＲｘＲｙ(Ｃ１−Ｃ７アルキル)であり；Ｒ６は、カルボキシＣ１−Ｃ３アルキル、ＮＲｕＲｖカルボニルＣ１−Ｃ３アルキル、ＮＲｘＲｙ(Ｃ１−Ｃ７アルキル)またはＣ１−Ｃ７アルキルであり；Ｒ７およびＲｇは、それらが結合している原子と一緒になって、ヒドロキシ基により所望により置換されていてもよいピロリジン環を形成しており；Ｒ８およびＲ１０は、カルボキシＣ１−Ｃ３アルキルにより所望により置換されていてもよいベンゾチエニルまたはインドリルＣ１−Ｃ３アルキルであり；Ｒ９は、ヒドロキシＣ１−Ｃ３アルキル、アミノＣ１−Ｃ３アルキルまたはＣ１−Ｃ７アルキルであり、Ｒ１１は、Ｃ１−Ｃ３アルコキシＣ１−Ｃ３アルキルまたはＣ１−Ｃ７アルキルであり；Ｒ１２は、Ｃ１−Ｃ７アルキルまたはヒドロキシＣ１−Ｃ３アルキルであり；およびＲ１３は、Ｃ１−Ｃ７アルキル、カルボキシＣ１−Ｃ３アルキルまたは−(ＣＨ２)３ＮＨＣ(ＮＨ)ＮＨ２である。
【００２８】
第一実施形態の第十四局面において、本開示は、式(Ｉ)の化合物またはその医薬的に許容される塩を提供しており：
Ａは、
【化１２】
0006804442.tif 000013
であり;
ｍおよびｗは、１であり；
Ｒ１４、Ｒ１５およびＲ１６ａは、各々水素であり;
Ｒｄは、メチルであるか、あるいはＲｄおよびＲ４は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成しており；ここで各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロ、ヒドロキシおよびフェニルから独立して選択される１または２つの基により所望により置換されていてもよい；
Ｒｇは、メチルであるか、またはＲｇおよびＲ７は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成しており；ここで各環は、アミノ、所望によりハロ基で置換されていてもよいベンジル、ベンジルオキシ、シアノ、シクロヘキシル、メチル、ハロ、ヒドロキシ、所望によりメトキシ基で置換されていてもよいイソキノリニルオキシ、所望によりハロ基で置換されていてもよいキノリニルオキシおよびテトラゾリルから独立して選択される１または２つの基により所望により置換されていてもよい；ならびに、前記ピロリジンおよびピペリジン環は、所望により、シクロヘキシル、フェニルまたはインドール基と縮合されていてもよい；および
Ｒｋは、メチルであるか、またはＲｋおよびＲ１１は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成しており；ここで各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１または２つの基により所望により置換されていてもよい。
【００２９】
第二実施形態において、本開示は、式(ＩＩ)：
【化１３】
0006804442.tif 000014
[式中、
Ａは、
【化１４】
0006804442.tif 000015
から選択され；
ｎは、０または１であり；
Ｒ１４およびＲ１５は、独立して、水素およびメチルから選択され；
Ｒ１６ａは、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択され；
Ｒ１６は、
−(Ｃ(Ｒ１７ａ)２)２−Ｘ−Ｒ３０、
−Ｃ(Ｒ１７ａ)２Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ１６ａ)Ｃ(Ｒ１７ａ)２−Ｘ’−Ｒ３１、
−Ｃ(Ｒ１７ａ)２[Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ１６ａ)Ｃ(Ｒ１７ａ)２]ｗ’−Ｘ−Ｒ３１、
−(Ｃ(Ｒ１７ａ)(Ｒ１７)Ｃ(Ｏ)ＮＲ１６ａ)ｎ’−Ｈ；および
−(ＣＲ１７ａ)(Ｒ１７)Ｃ(Ｏ)ＮＲ１６ａ)ｍ’−Ｃ(Ｒ１７ａ)(Ｒ１７)−ＣＯ２Ｈから選択され；
ここでｗ’は、２または３であり；
ｎ’は１〜６であり；
ｍ’は１〜５であり；
Ｘは、１〜１７２個の原子の鎖であり、該原子は、炭素および酸素から選択され、ここで該鎖は、その中に組み込まれる−ＮＨＣ(Ｏ)ＮＨ−および−Ｃ(Ｏ)ＮＨから選択される１、２、３または４つの基を含有していてもよく；かつ該鎖は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、−ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−ＣＨ２ＣＯ２Ｈから独立して選択される１〜６つの基で所望により置換されていてもよく；
Ｘ’は、１〜１７２個の原子の鎖であり、該原子は、炭素および酸素から選択され、ここで該鎖は、その中に組み込まれる−ＮＨＣ(Ｏ)ＮＨ−および−Ｃ(Ｏ)ＮＨから選択される１、２、３または４つの基を含有していてもよく；かつ該鎖は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−ＣＨ２ＣＯ２Ｈから独立して選択される１〜６つの基で所望により置換されていてもよい、但しＸ’は、非置換ＰＥＧ以外のものである；
Ｒ３０は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＲｗＲｘおよび−ＣＨ３から選択され、ＲｗおよびＲｘは、独立して、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから独立して選択される、但し、Ｘが全て炭素である場合、Ｒ３０は−ＣＨ３以外の基である；
Ｒ３１は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＲｗＲｘ、−ＣＨ３、アレクサ−５−ＳＤＰおよびビオチンである；
各Ｒ１７ａは、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＯ２Ｈおよび−(ＣＨ２)２ＣＯ２Ｈから独立して選択され；
各Ｒ１７は、水素、−ＣＨ３、(ＣＨ２)ｚＮ３、−(ＣＨ２)ｚＮＨ２、−Ｘ−Ｒ３１、−(ＣＨ２)ｚＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２Ｃ≡ＣＨおよび−(ＣＨ２)ｚ−トリアゾリル−Ｘ−Ｒ３５から独立して選択され、ここでｚは１〜６であり、Ｒ３５は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＲｗＲｘ、ＣＨ３、ビオチン、−２−フルオロピリジン、−Ｃ(Ｏ)−(ＣＨ２)２−Ｃ(Ｏ)Ｏ−ビタミンＥおよび−Ｃ(Ｏ)Ｏ−ビタミンＥおよび
【化１５】
0006804442.tif 000016
から選択される；
但し、少なくとも１つのＲ１７は、水素、−ＣＨ３または−ＣＨ２ＯＨ以外である；
Ｒａ、Ｒｆ、Ｒｊ、Ｒｋ、ＲｌおよびＲｍは、水素であり；
ＲｂおよびＲｃは、メチルであり；
Ｒｇは、水素およびメチルから選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、独立して、天然のアミノ酸側鎖および非天然のアミノ酸側鎖から独立して選択されるか、または下に記述したような対応する隣接Ｒ基と共に環を形成する；
Ｒｄは、水素およびメチルから選択されるか、あるいはＲｄおよびＲ４は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成しており；ここで、各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４つの基で所望により置換されていてもよい；
Ｒｅは、水素およびメチルから選択されるか、あるいはＲｅおよびＲ５は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成しており；ここで、各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４つの基で所望により置換されていてもよい；
Ｒｈは、水素およびメチルから選択されるか、あるいはＲｈおよびＲ８は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成しており；ここで各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４つの基で所望により置換されていてもよい；および
Ｒｉは、水素およびメチルから選択されるか、あるいはＲｉおよびＲ９は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成しており；ここで、各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４つの基で所望により置換されていてもよい]
の化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【００３０】
第二実施形態の第一局面において、本開示は、式(ＩＩ)の化合物またはその医薬的に許容される塩を提供するものであり：
Ａは
【化１６】
0006804442.tif 000017
であり；
ｎは、１であり；
Ｒ１６は、−(ＣＲ１７ａ)(Ｒ１７)Ｃ(Ｏ)ＮＲ１６ａ)ｍ’−Ｃ(Ｒ１７ａ)(Ｒ１７)−ＣＯ２Ｈであり；
各Ｒ１６ａは、水素であり；
ｍ’は、２、３または４であり;
各Ｒ１７ａは、水素であり；
各Ｒ１７は、水素、−(ＣＨ２)ｚＮＨ２、−Ｘ−Ｒ３１および−ＣＨ２Ｃ≡ＣＨから独立して選択され；
ｚは４であり；
Ｘは、２６〜１５５個の原子の鎖であり、該原子は、炭素および酸素から選択され、ここで該鎖は、その中に埋め込まれる１、２または３つのＣ(Ｏ)ＮＨ基を含有し得る；かつ該鎖は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、−ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−ＣＨ２ＣＯ２Ｈから独立して選択される１または２つの基で所望により置換されていてもよい；および
Ｒ３１は、−ＣＨ３、アレクサ−５−ＳＤＰおよびビオチンである。
【００３１】
第三実施形態において、本開示は、それが必要な患者において免疫応答を、増強、刺激および／または増加する方法を提供するものであり、前記方法は、治療上有効な量の式(Ｉ)の化合物またはその治療上許容し得る塩を対象に投与することを特徴とする。第三実施形態の第一局面において、この方法は、別の剤を、式(Ｉ)の化合物あるいはその治療上許容し得る塩を投与する前、後または同時に投与することをさらに特徴とする。第二局面において、別の薬剤は、殺菌剤、抗ウイルス剤、細胞毒性剤および／または免疫応答修飾剤である。
【００３２】
第四実施形態において、本開示は、その必要がある対象において、癌細胞の成長、細胞増殖または転移を阻害する方法を提供するものであり、前記方法は、治療上有効量の式(Ｉ)の化合物あるいはその治療上許容し得る塩を対象に投与することを特徴とする。第四実施形態の第一局面において、該癌は、メラノーマ、腎臓細胞癌、扁平上皮非小細胞癌(ＮＳＣＬＣ)、非扁平上皮ＮＳＣＬＣ、結腸直腸癌、性腺摘除耐性前立腺癌、卵巣癌、胃癌、肝細胞癌、膵臓癌、頭頸部の扁平上皮癌、食道、胃腸管および乳房の癌および造血器腫瘍から選択される。
【００３３】
第五実施形態において、本開示は、その必要のある患者における感染症を治療する方法を提供するものであって、前記方法は、治療上有効な量の式(Ｉ)の化合物またはその治療上許容し得る塩を対象に投与することを特徴とする。第五実施形態の第一局面において、感染症が、ウイルスを原因とする。
【００３４】
第二局面において、ウイルスは、ＨＩＶ、肝炎Ａ、肝炎Ｂ、肝炎Ｃ、ヘルペスウイルスおよびインフルエンザから選択される。
【００３５】
第６実施形態において、本開示は、その必要がある対象における敗血症ショックの治療方法を提供するものであり、前記方法は、治療上有効量の式(Ｉ)の化合物またはその治療上許容し得る塩を投与することを特徴とする。
【００３６】
第七実施形態において、本開示は、その必要がある対象における免疫応答を増強、刺激および／または増加する方法を提供するものであって、前記方法は、治療上有効量の式(ＩＩ)の化合物またはその治療的に許容し得る塩を対象に投与することを特徴とする。第一局面の第七実施形態において、前記方法は、別の薬剤を投与する前、後または同時に、式(ＩＩ)の化合物またはその治療上許容し得る塩を投与することを更に特徴とする。第二局面において、別の薬剤は、殺菌剤、抗ウイルス剤、細胞毒剤および／または免疫応答修飾剤である。第三局面において、別の薬剤は、ＨＤＡＣ阻害剤である。第四実施形態において、別の薬剤は、ＴＬＲ７および／またはＴＬＲ８アゴニストである。
【００３７】
第八実施形態において、本開示は、その必要がある対象における癌細胞の成長、細胞増殖または転移を阻害する方法を提供するものであって、前記方法は、治療上有効量の式(ＩＩ)の化合物またはその治療上有効な塩を、対象に投与することを特徴とする。第八実施形態の第一局面において、癌は、メラノーマ、腎臓細胞癌、扁平上皮非小細胞肺癌(ＮＳＣＬＣ)、非扁平上皮ＮＳＣＬＣ、結腸直腸癌、性腺摘除耐性前立腺癌、卵巣癌、胃癌、肝細胞癌、膵臓癌、頭頸部の扁平上皮癌、食道、胃腸管および乳房の癌および造血器腫瘍から選択される。
【００３８】
第九実施形態において、本開示は、その必要がある対象における感染症の治療方法を提供するものであって、前記方法は、治療上有効量の式(ＩＩ)の化合物またはその治療上有効な塩を対象に投与することを特徴とする。第九実施形態の第一局面において、前記感染症は、ウイルスが原因である。第二局面において、ウイルスは、ＨＩＶ、肝炎Ａ、肝炎Ｂ、肝炎Ｃ、ヘルペスウイルスおよびインフルエンザから選択される。
【００３９】
第１０実施形態において、本開示は、その必要がある対象における敗血症ショックの治療方法を提供するものであって、前記方法は、治療上有効量の式(ＩＩ)の化合物またはその治療上有効な塩を、対象に投与することを特徴とする。
【００４０】
別の実施形態において、本開示は、式(ＩＩＩ)：
【化１７】
0006804442.tif 000018
[式中、
Ａは、
【化１８】
0006804442.tif 000019
から選択される；
ここで、
【化１９】
0006804442.tif 000020
は、カルボニル基との結合点を表し、
【化２０】
0006804442.tif 000021
は、窒素原子との結合点を表し；
ｎは、０または１であり；
ｍは、１または２であり；
ｗは、０、１または２であり；
Ｒ１４およびＲ１５は、独立して、水素およびメチルから選択され；
Ｒ１６ａは、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択され；
Ｒ１６は、
−(Ｃ(Ｒ１７ａ)２)２−Ｘ−Ｒ３０、
−Ｃ(Ｒ１７ａ)２Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ１６ａ)Ｃ(Ｒ１７ａ)２−Ｘ’−Ｒ３１、
−Ｃ(Ｒ１７ａ)２[Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ１６ａ)Ｃ(Ｒ１７ａ)２]ｗ’−Ｘ−Ｒ３１、
−(Ｃ(Ｒ１７ａ)(Ｒ１７)Ｃ(Ｏ)ＮＲ１６ａ)ｎ’−Ｈ；および
−(Ｃ(Ｒ１７ａ)(Ｒ１７)Ｃ(Ｏ)ＮＲ１６ａ)ｍ’−Ｃ(Ｒ１７ａ)(Ｒ１７)−ＣＯ２Ｈから選択され；
ｗ’は、２または３であり；
ｎ’は、１〜６であり；(２、３)
ｍ’は、０〜５であり；(１、２、３)
Ｘは、１〜１７２個の原子の鎖であり、該原子は、炭素および酸素から選択される、ここで該鎖は、その中に組み込まれる−ＮＨＣ(Ｏ)ＮＨ−および−Ｃ(Ｏ)ＮＨ−から選択される１、２、３または４つの基を含有しており；かつ該鎖は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、−ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−ＣＨ２ＣＯ２Ｈから独立して選択される１〜６つの基で所望により置換されていてもよい；
Ｘ’は１〜１７２個の原子の鎖であり、該原子は、炭素および酸素から選択される、ここで該鎖は、その中に組み込まれる−ＮＨＣ(Ｏ)ＮＨ−および−Ｃ(Ｏ)ＮＨ−から選択される１、２、３または４つの基を含有しており；かつ該鎖は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−ＣＨ２ＣＯ２Ｈから独立して選択される１〜６つの基で所望により置換されていてもよい、但し、Ｘ’は、非置換ＰＥＧ以外のものである；
Ｒ３０は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＲｗＲｘおよび−ＣＨ３から選択され、ここでＲｗおよびＲｘは、独立して、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから独立して選択される、但し、Ｘが全て炭素である場合、Ｒ３０は−ＣＨ３以外である；
Ｒ３１は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＲｗＲｘ、−ＣＨ３、アレクサ−５−ＳＤＰおよびビオチンである;
各Ｒ１７ａは、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＯ２Ｈ、−(ＣＨ２)２ＣＯ２Ｈから独立して選択され；
各Ｒ１７は、水素、−ＣＨ３、(ＣＨ２)ｚＮ３、−(ＣＨ２)ｚＮＨ２、−Ｘ−Ｒ３１、−(ＣＨ２)ｚＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２Ｃ≡ＣＨおよび−(ＣＨ２)ｚ−トリアゾリル−Ｘ−Ｒ３５から独立して選択され、ｚは１〜６であり、Ｒ３５は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＲｗＲｘ、ＣＨ３、ビオチン、−２−フルオロピリジン、−Ｃ(Ｏ)−(ＣＨ２)２−Ｃ(Ｏ)Ｏ−ビタミンＥおよび−Ｃ(Ｏ)Ｏ−ビタミンＥから選択される；但し、少なくとも１つのＲ１７は、水素、−ＣＨ３または−ＣＨ２ＯＨ以外である；
Ｒｃ、Ｒｆ、Ｒｈ、Ｒｉ、ＲｍおよびＲｎは、水素であり；
Ｒａ、Ｒｅ、ＲｊおよびＲｋは、各々水素およびメチルから独立して選択される；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２およびＲ１３は、独立して、天然のアミノ酸側鎖および非天然のアミノ酸側鎖から独立して選択されるか、または下記に記述したような対応する隣接Ｒ基と共に環を形成する；
ＲｅおよびＲｋは、各々、対応する隣接Ｒ基およびそれらが結合している原子と一緒になって環を形成しており、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される；ここで各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される所望により１〜４つの基で置換されていてもよい；
Ｒｂは、メチルであるか、ＲｂおよびＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成しており；ここで各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される所望により１〜４つの基で置換されていてもよい；
Ｒｄは、水素またはメチルであるか、あるいはＲｄおよびＲ４は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成することができ；各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロ、ヒドロキシおよびフェニルから独立して選択される１〜４つの基により所望により置換されていてもよい；
Ｒｇは、水素またはメチルであるか、あるいはＲｇおよびＲ７は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成することができ；ここで各環は、アミノ、所望によりハロ基で置換されていてもよいベンジル、ベンジルオキシ、シアノ、シクロヘキシル、メチル、ハロ、ヒドロキシ、所望によりメトキシ基で置換されていてもよいイソキノリニルオキシ、所望によりハロ基で置換されていてもよいキノリニルオキシ、およびテトラゾリルから独立して選択される所望により１〜４つの基で置換されていてもよく；および、前記ピロリジンおよびピペリジン環は、所望により、シクロヘキシル、フェニルまたはインドール基と縮合していてもよい；および
Ｒｌは、メチルであるか、あるいはＲｌおよびＲ１２は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジンおよびピロリジンから選択される環を形成しており、ここで各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４つの基で所望により置換されていてもよい]
の化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【００４１】
別の実施形態において、本開示は、式(ＩＶ)：
【化２１】
0006804442.tif 000022
[式中、
Ａは、
【化２２】
0006804442.tif 000023
から選択され；
ｎは、０または１であり；
Ｒ１４およびＲ１５は、水素およびメチルから独立して選択され；
Ｒ１６ａは、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択され；
Ｒ１６は、
−(Ｃ(Ｒ１７ａ)２)２−Ｘ−Ｒ３０、
−Ｃ(Ｒ１７ａ)２Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ１６ａ)Ｃ(Ｒ１７ａ)２−Ｘ’−Ｒ３１、
−Ｃ(Ｒ１７ａ)２[Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ１６ａ)Ｃ(Ｒ１７ａ)２]ｗ’−Ｘ−Ｒ３１、
−(Ｃ(Ｒ１７ａ)(Ｒ１７)Ｃ(Ｏ)ＮＲ１６ａ)ｎ’−Ｈ；および
−(ＣＲ１７ａ)(Ｒ１７)Ｃ(Ｏ)ＮＲ１６ａ)ｍ’−Ｃ(Ｒ１７ａ)(Ｒ１７)−ＣＯ２Ｈ
から選択され；
ここで：
ｗ’は、２または３であり；
ｎ’は、１〜６であり；
ｍ’は、１〜５であり；
Ｘは、１〜１７２個の原子の鎖であり、前記原子は、炭素および酸素から選択され、前記鎖は、その中に組み込まれる−ＮＨＣ(Ｏ)ＮＨ−および−Ｃ(Ｏ)ＮＨから選択される１、２、３または４つの基を含有していてもよく；前記鎖は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、−ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−ＣＨ２ＣＯ２Ｈから独立して選択される１〜６つの基により所望により置換されていてもよい；
Ｘ’は、１〜１７２個の原子の鎖であり、前記原子は、炭素および酸素から選択され、前記鎖は、その中に組み込まれる−ＮＨＣ(Ｏ)ＮＨ−および−Ｃ(Ｏ)ＮＨから選択される１、２、３または４つの基を含有していてもよく；前記鎖は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、および−ＣＨ２ＣＯ２Ｈから独立して選択される１〜６つの基により所望により置換されていてもよい、但しＸ’は、非置換ＰＥＧ以外のものである；
Ｒ３０は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＲｗＲｘおよび−ＣＨ３から選択され、ＲｗおよびＲｘは、独立して、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから独立して選択される、
但し、Ｘが全て炭素である場合、Ｒ３０は−ＣＨ３以外のものである；
Ｒ３１は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＲｗＲｘ、−ＣＨ３、アレクサ−５−ＳＤＰおよびビオチンであり；
各Ｒ１７ａは、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＯ２Ｈ、−(ＣＨ２)２ＣＯ２Ｈから独立して選択され、
各Ｒ１７は、水素、−ＣＨ３、(ＣＨ２)ｚＮ３、−(ＣＨ２)ｚＮＨ２、−Ｘ−Ｒ３１、−(ＣＨ２)ｚＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２Ｃ≡ＣＨおよび−(ＣＨ２)ｚ−トリアゾリル−Ｘ−Ｒ３５から独立し選択され、ここでｚは１〜６であり、Ｒ３５は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＲｗＲｘ、ＣＨ３、ビオチン、−２−フルオロピリジン、−Ｃ(Ｏ)−(ＣＨ２)２-Ｃ(Ｏ)Ｏ−ビタミンＥおよび−Ｃ(Ｏ)Ｏ−ビタミンＥから選択される；但し、少なくとも１つのＲ１７は、水素、−ＣＨ３または−ＣＨ２ＯＨ以外である；
Ｒａ、Ｒｆ、Ｒｊ、Ｒｋ、ＲｌおよびＲｍは、水素であり；
ＲｂおよびＲｃは、メチルであり；
Ｒｇは、水素およびメチルから選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、独立して、天然のアミノ酸側鎖および非天然のアミノ酸側鎖から独立して選択されるか、あるいは、下記に記述したような対応する隣接Ｒ基と共に環を形成する；
Ｒｄは、水素およびメチルから選択されるか、あるいはＲｄおよびＲ４は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成しており；ここで、各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４つの基で所望により置換されていてもよい；
Ｒｅは、水素およびメチルから選択されるか、あるいはＲｅおよびＲ５は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成しており；ここで、各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４つの基で所望により置換されていてもよい；
Ｒｈは、水素およびメチルから選択されるか、あるいはＲｈおよびＲ８は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成しており；ここで各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４つの基で所望により置換されていてもよく；および
Ｒｉは、水素およびメチルから選択されるか、あるいはＲｉおよびＲ９は、それらが結合している原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択された環を形成している；ここで各環は、アミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４つの基で所望により置換されていてもよい]
の化合物、またはその医薬的に許容される塩である。
【００４２】
式(Ｉ)および(ＩＩ)の化合物において、式中のＲ側鎖は、メチルで置換されている環の一部であって、前記メチル基は、大環状親構造の一部である炭素を含めた環内の置換可能なあらゆる炭素原子上に存在していてもよいと理解される。
【００４３】
以下の基は、各Ｒ位置で存在することが好ましい。アミノ酸は、Ｄ−またはＬ−立体化学であってもよく、本開示のあらゆる部分に述べたように置換されていてもよい。
【００４４】
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ１側鎖は、次の通りである：フェニルアラニン、チロシン、３−チエン−２−イル、４−メチルフェニルアラニン、４−クロロフェニルアラニン、３−メトキシフェニルアラニン、イソトリプトファン、３−メチルフェニルアラニン、１−ナフチルアラニン、３,４−ジフルオロフェニルアラニン、４−フルオロフェニルアラニン、３,４−ジメトキシフェニルアラニン、３,４−ジクロロフェニルアラニン、４−ジフルオロメチルフェニルアラニン、２−メチルフェニルアラニン、２−ナフチルアラニン、トリプトファン、４−ピリジニル、４−ブロモフェニルアラニン、３−ピリジニル、４−トリフルオロメチルフェニルアラニン、４−カルボキシフェニルアラニン、４−メトキシフェニルアラニン、ビフェニルアラニンおよび３−クロロフェニルアラニン；および２,４−ジアミノブタンである。
【００４５】
式(Ｉ)の化合物において、式中のＲ２は環の一部ではない、好ましいＲ2側鎖は次の通りである：アラニン、セリンおよびグリシン。
【００４６】
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ３側鎖は次の通りである：アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、セリン、オルニチン、リシン、ヒスチジン、スレオニン、ロイシン、アラニン、２,３−ジアミノプロパンおよび２,４−ジアミノブタン。
【００４７】
式(Ｉ)の化合物において、式中のＲ４は環の一部ではない、好ましいＲ4側鎖は次の通りである：バリン、アラニン、イソロイシンおよびグリシン。
【００４８】
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ５側鎖は次の通りである：アミノメタン、ヒスチジン、アスパラギン、２,３−ジアミノプロパン、セリン、グリシン、２,４−ジアミノブタン、スレオニン、アラニン、リシン、アスパラギン酸、アラニンおよび３−チアゾリルアラニン。
【００４９】
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ６側鎖は次の通りである：ロイシン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、セリン、リシン、３−シクロヘキサン、スレオニン、オルニチン、２,４−ジアミノブタン、アラニン、アルギニンおよびオルニチン(ＣＯＣＨ３)。 
【００５０】
式(Ｉ)の化合物において、式中のＲ７は環の一部ではない、好ましいＲ7側鎖は次の通りである：グリシン、２,４−ジアミノブタン、セリン、リシン、アルギニン、オルニチン、ヒスチジン、アスパラギン、グルタミン、アラニンおよび２,４−ジアミノブタン(Ｃ(Ｏ)シクロブタン)。
【００５１】
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ８側鎖は、トリプトファンおよび１,２−ベンゾイソチアゾリニルアラニンである。
【００５２】
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ９側鎖は次の通りである：セリン、ヒスチジン、リシン、オルニチン、２,４−ジブチルアミン、スレオニン、リシン、グリシン、グルタミン酸、バリン、２,３−ジアミノプロパン、アルギニン、アスパラギン酸およびチロシン。
【００５３】
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ１０側鎖は次の通りである：所望により置換されていてもよいトリプトファン、ベンゾイソチアゾリルアラニン、１−ナフチル(napththyl)アラニン、メチオニン。
【００５４】
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ１１側鎖は次の通りである：ノルロイシン、ロイシン、アスパラギン、フェニルアラニン、メチオニン、エトキシメタン、アラニン、トリプトファン、イソロイシン、フェニルプロパン、グルタミン酸、ヘキサンおよびヘプタン。
【００５５】
式(Ｉ)の化合物において、式中のＲ１２は、環の一部ではない、好ましいＲ１２側鎖は次の通りである：ノルロイシン、アラニン、エトキシメタン、メチオニン、セリン、フェニルアラニン、メトキシエタン、ロイシン、トリプトファン、イソロイシン、グルタミン酸、ヘキサン、ヘプタンおよびグリシン。
【００５６】
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ１３側鎖は次の通りである：アルギニン、オルニチン、アラニン、２,４−ジアミノブタン、２,３−ジアミノプロパン、ロイシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン、リシン、スレオニン、シクロプロピルメタン、グリシン、バリン、イソロイシン、ヒスチジンおよび２−アミノブタンである。
【発明を実施するための形態】
【００５７】
本開示に従い、我々は、ＰＤ−Ｌ１と特異的に結合して、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１との、およびＰＤ−Ｌ１とＣＤ８０との相互作用を阻害できるペプチドを発見した。これらの大環状ペプチドは、インビトロ免疫調節効力を示し、癌および感染症を含む種々の疾患の治療のための治療剤候補となる。
【００５８】
用語“特異的結合”または“特異的な結合”は、タンパク質と、化合物またはリガンドのような結合分子の間の相互作用をいう。相互作用は、結合分子により認識されるタンパク質の特定の構造(すなわち、酵素結合部位、抗原決定基またはエピトープ)の存在に依存する。例えば、化合物がタンパク質結合部位“Ａ”に特異的結合を示すならば、結合部位Ａを含むタンパク質およびタンパク質結合部位Ａに特異的結合する標識ペプチドを含む反応中の化合物の存在は、標識ペプチドがタンパク質に結合する量を減少させる。対照的に、化合物のタンパク質への非特異的結合は、標識ペプチドのタンパク質からの濃度依存的置換をもたらさない。
【００５９】
本発明は、本化合物に存在する原子の全ての同位体を含むことを意図する。同位体は、同じ原子番号を有するが、質量数が異なる原子を含む。一般的な例として、限定する意図はなく、水素の同位体は重水素およびトリチウムを含む。炭素の同位体は１３Ｃおよび１４Ｃを含む。同位体標識した本発明の化合物は、一般に当業者に知られる慣用の技術によるか、または本明細書に記戴するものに順ずる方法により、他に用いた非標識反応材に代えて、適当な同位体標識した反応材を用いることにより製造できる。このような化合物は、例えば標準的および生物学的活性を測定するための試薬として、多様な用途の可能性を有し得る。安定な同位体の場合、このような化合物は、生物学的、薬理学的または薬物動態特性を好ましく修飾する可能性を有し得る。
【００６０】
本明細書に記戴する主題の他の面は、リガンド結合アッセイの開発のための、またはインビボ吸着、代謝、分布、受容体結合または占有または化合物処分のモニタリングのための、放射性標識リガンドとして開示したペプチドの使用である。例えば、本明細書に記戴する大環状ペプチドを、放射性同位体１２５Ｉを使用して製造してよく、得られた放射性標識ペプチドを結合アッセイの開発または代謝試験に使用してよい。別の目的および同じ目的で、本明細書に記戴する大環状ペプチドを、当業者に知られる方法を使用した触媒的トリチウム標識により放射性標識形態に変換し得る。
【００６１】
本発明の大環状ペプチドは、当業者に知られる方法を使用した放射性トレーサーの付加によりＰＥＴ造影剤としても使用できる。
【００６２】
好ましいペプチドは、本明細書において提供する大環状ペプチドの少なくとも１個を含み、これらのペプチドは医薬組成物および組み合わせに包含され得る。
【００６３】
本明細書において提供される定義は、限定しないが、他に具体的な状況で限定がない限り、本明細書を通してその用語が使用されている限り、適用される。
【００６４】
アミノ酸およびペプチド化学分野の当業者は、アミノ酸が、次の一般構造により表される化合物が含まれることを認識している。
【化２３】
0006804442.tif 000024
(式中、ＲおよびＲ'は本明細書に記戴するとおりである)。
【００６５】
別段の記載が無ければ、単独で、または他の基の一部として、本明細書で使用する用語“アミノ酸”は、“α”炭素と呼ばれる同じ炭素に結合したアミノ基およびカルボキシル基を含むが、これらに限定されず、式中、Ｒおよび／またはＲ'は、水素を含めた天然または非天然側鎖であり得る。“α”炭素における絶対“Ｓ”配置は、一般に“Ｌ”または“天然”配置と呼ばれる。“Ｒ”および“Ｒ'”(主要)置換基が水素であるとき、アミノ酸はグリシンであり、キラルではない。
【００６６】
本明細書で使用する用語“天然のアミノ酸側鎖”および“天然型アミノ酸側鎖”は、通常Ｓ配置(すなわち、Ｌ−アミノ酸)である天然型アミノ酸(すなわち、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリン)のいずれかの側鎖をいう。
【００６７】
本明細書で使用する用語“非天然のアミノ酸側鎖”および“非天然型アミノ酸側鎖”は、通常Ｒ配置(すなわち、Ｄ−アミノ酸)の天然型アミノ酸のいずれかの側鎖または次のものから選択されるＲまたはＳ配置(すなわち、それぞれＤ−またはＬ−アミノ酸)の天然型アミノ酸側鎖以外の基を意味する：
Ｃ２−Ｃ７アルケニル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシＣ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニルＣ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ７アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルファニルＣ１−Ｃ３アルキル、アミドＣ１−Ｃ３アルキル、アミノＣ１−Ｃ３アルキル、アザインドリルＣ１−Ｃ３アルキル、ベンゾチアゾリルＣ１−Ｃ３アルキル、ベンゾチエニルＣ１−Ｃ３アルキル、ベンジルオキシＣ１−Ｃ３アルキル、カルボキシＣ１−Ｃ３アルキル、Ｃ３−Ｃ１４シクロアルキルＣ１−Ｃ３アルキル、ジフェニルメチル、フラニルＣ１−Ｃ３アルキル、イミダゾリルＣ１−Ｃ３アルキル、ナフチルＣ１−Ｃ３アルキル、ピリジニルＣ１−Ｃ３アルキル、チアゾリルＣ１−Ｃ３アルキル、チエニルＣ１−Ｃ３アルキル；
ビフェニルＣ１−Ｃ３アルキル：前記ビフェニルは、メチル基で所望により置換されていてもよい；
ヘテロサイクリル：これは、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルアミノ、アミド、アミノ、アミノＣ１−Ｃ３アルキル、アミノスルホニル、カルボキシ、シアノ、ハロ、ハロＣ１−Ｃ３アルキル、ヒドロキシ、−ＮＣ(ＮＨ２)２、ニトロおよび−ＯＰ(Ｏ)(ＯＨ)２から独立して選択される１、２、３、４または５つの基で所望により置換されていてもよい;
インドリルＣ１−Ｃ３アルキル：前記インドリル部分は、Ｃ１−Ｃ３アルキル、カルボキシＣ１−Ｃ３アルキル、ハロ、ヒドロキシおよびフェニルから選択される１つの基で所望により置換されていてもよい、ここで前記フェニルは、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ、Ｃ１−Ｃ３アルキルおよびハロから独立して選択される１、２または３つの基により所望により更に置換されていてもよく；
ＮＲｘＲｙ(Ｃ１−Ｃ７アルキル)：ここでＲｘおよびＲｙは、水素、Ｃ２−Ｃ４アルケニルオキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルカルボニル、Ｃ３−Ｃ１４シクロアルキルカルボニル、フラニルカルボニルおよびフェニルカルボニルから独立して選択される。アルキルリンカーが１以上の炭素を含有する場合、追加のＮＲｘＲｙ基は、鎖上に存在し得る；
ＮＲｕＲｖカルボニルＣ１−Ｃ３アルキル：ＲｕおよびＲｖは、水素、Ｃ１−Ｃ３アルキルおよびトリフェニルメチルから独立して選択される；
フェニル：Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルアミノ、アミド、アミノ、アミノＣ１−Ｃ３アルキル、アミノスルホニル、カルボキシ、シアノ、ハロ、ハロＣ１−Ｃ３アルキル、ヒドロキシ、−ＮＣ(ＮＨ２)２、ニトロおよび−ＯＰ(Ｏ)(ＯＨ)２から独立して選択される１、２、３、４または５つの基で所望により置換されていてもよく；
フェニルＣ１−Ｃ３アルキル：前記フェニル部分は、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルアミノ、アミド、アミノ、アミノＣ１−Ｃ３アルキル、アミノスルホニル、カルボキシ、シアノ、ハロ、ハロＣ１−Ｃ３アルキル、ヒドロキシ、−ＮＣ(ＮＨ２)２、ニトロおよび−ＯＰ(Ｏ)(ＯＨ)２から独立して選択される１、２、３、４または５つの基で所望により置換されていてもよい；および
フェノキシＣ１−Ｃ３アルキル：前記フェニルは、Ｃ１−Ｃ３アルキル基で所望により置換されていてもよい。
【００６８】
本明細書に使用されたように、用語“アレクサ−５−ＳＤＰ”は、
【化２４】
0006804442.tif 000025
(式中、ＷはＯまたはＮＨである)
である。
【００６９】
本明細書で使用する用語“Ｃ２−Ｃ４アルケニル”は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含む、２〜４個の炭素原子の直鎖または分枝鎖の基をいう。
【００７０】
本明細書で使用する用語“Ｃ２−Ｃ７アルケニル”は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含む、２〜７個の炭素原子の直鎖または分枝鎖の基をいう。
【００７１】
本明細書で使用する用語“Ｃ２−Ｃ４アルケニルオキシ”は、酸素原子を介して親分子部分に結合する、Ｃ２−Ｃ４アルケニル基をいう。
【００７２】
本明細書で使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルコキシ”は、酸素原子を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ３アルキル基をいう。
【００７３】
本明細書で使用する用語“Ｃ１−Ｃ４アルコキシ”は、酸素原子を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ４アルキル基をいう。
【００７４】
本明細書で使用する用語“Ｃ１−Ｃ６アルコキシ”は、酸素原子を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ６アルキル基をいう。
【００７５】
本明細書で使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルコキシＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ基をいう。
【００７６】
本明細書で使用する用語“Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル”は、カルボニル基を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基をいう。
【００７７】
本明細書で使用する用語“Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル基をいう。
【００７８】
本明細書で使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルキル”は、１〜３個の炭素原子を含む、直鎖または分枝鎖飽和炭化水素から得られる基をいう。
【００７９】
本明細書で使用する用語“Ｃ１−Ｃ４アルキル”は、１〜４個の炭素原子を含む、直鎖または分枝鎖飽和炭化水素から得られる基をいう。
【００８０】
本明細書で使用する用語“Ｃ１−Ｃ６アルキル”は、１〜６個の炭素原子を含む、直鎖または分枝鎖飽和炭化水素から得られる基をいう。
【００８１】
本明細書で使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルキルカルボニル”は、カルボニル基を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ３アルキル基をいう。
【００８２】
本明細書で使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルキルスルファニル”は、硫黄原子を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ３アルキル基をいう。
【００８３】
本明細書で使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルキルスルファニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルファニル基をいう。
【００８４】
本明細書で使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニル”は、スルホニル基を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ３アルキル基をいう。
【００８５】
本明細書で使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルアミノ”は、アミノ基を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニル基をいう。
【００８６】
本明細書で使用する用語“アミド”は、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２をいう。
【００８７】
本明細書で使用する用語“アミドＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、アミド基をいう。
本明細書で使用する用語“アミノ”は、−ＮＨ２をいう。
【００８８】
本明細書で使用する用語“アミノＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、アミノ基をいう。
【００８９】
本明細書で使用する用語“アミノスルホニル”は、スルホニル基を介して親分子部分に結合する、アミノ基をいう。
【００９０】
本明細書で使用する用語“アザインドリルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、アザインドリル基をいう。アザインドリル基は、該基の任意の置換可能な原子を介してアルキル部分に結合できる。
【００９１】
本明細書で使用する用語“ベンゾチアゾリルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、ベンゾチアゾリル基をいう。ベンゾチアゾリル基は、該基の任意の置換可能な原子を介してアルキル部分に結合できる。
【００９２】
本明細書で使用する用語“ベンゾチエニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、ベンゾチエニル基をいう。ベンゾチエニル基は、該基の任意の置換可能な原子を介してアルキル部分に結合できる。
【００９３】
本明細書で使用する用語“ベンジルオキシ”は、酸素原子を介して親分子部分に結合する、ベンジル基をいう。
【００９４】
本明細書で使用する用語“ベンジルオキシＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、ベンジルオキシ基をいう。
【００９５】
本明細書で使用する用語“ビオチン”は、
【化２５】
0006804442.tif 000026
(式中、Ｗは、ＯまたはＮＨである)
をいう。
【００９６】
本明細書で使用する用語“ビフェニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、ビフェニル基をいう。ビフェニル基は、前記基の置換可能なあらゆる原子を介してアルキル部分に結合できる。
【００９７】
本明細書で使用する用語“カルボニル”は、−Ｃ(Ｏ)−をいう。
本明細書で使用する用語“カルボキシ”は、−ＣＯ２Ｈをいう。
【００９８】
本明細書で使用する用語“カルボキシＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、カルボキシ基をいう。
本明細書で使用する用語“シアノ”は、−ＣＮをいう。
【００９９】
本明細書で使用する用語“Ｃ３−Ｃ１４シクロアルキル”は、３〜１４個の炭素原子および０個のヘテロ原子を有する飽和単環式、二環式または三環式の炭化水素環系をさす。二環式および三環式環は、縮合環、スピロ環または架橋環であってもよい。シクロアルキル基の代表的な例には、シクロプロピル、シクロペンチル、ビシクロ[３.１.１]ヘプチルおよびアダマンチルが含まれるが、これに限定するものではない。
【０１００】
本明細書で使用する用語“Ｃ３−Ｃ１４シクロアルキルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合されたＣ３−Ｃ１４シクロアルキル基をいう。
【０１０１】
本明細書で使用する用語“Ｃ３−Ｃ１４シクロアルキルカルボニル”は、カルボニル基を介して親分子部分に結合されたＣ３−Ｃ１４シクロアルキル基をいう。
【０１０２】
本明細書で使用する用語“フラニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、フラニル基をいう。フラニル基は、前記基の置換可能なあらゆる原子を介してアルキル部分に結合できる。
【０１０３】
本明細書で使用する用語“フラニルカルボニル”は、カルボニル基を介して親分子部分に結合する、フラニル基をいう。
【０１０４】
本明細書で使用する用語“ハロ”および“ハロゲン”は、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩをいう。
【０１０５】
本明細書で使用する用語“ハロＣ１−Ｃ３アルキル”は、１個、２個または３個のハロゲン原子で置換されたＣ１−Ｃ３アルキル基をいう。
【０１０６】
本明細書で使用する用語“ハロメチル”は、１個、２個または３個のハロゲン原子で置換されたメチル基をいう。
【０１０７】
本明細書で使用する用語“複素環”は、窒素、酸素および硫黄から独立して選択される１、２または３つのヘテロ原子を含有する５、６または７員環をいう。５員環は、０〜２つの二重結合を有しており、かつ６員および７員環が、０〜３つの二重結合を有する。用語“複素環”は、二環式基も包含するものであって、前記複素環式環は、４〜６員芳香族性または非芳香族炭素環式環または別の単環式複素環式基と縮合される。本開示の複素環基は、その基内の炭素原子を介して親分子部分に結合している。複素環基の例示には、ベンゾチエニル、フリル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、モルホリニル、オキサゾリル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピラゾリル、ピリジニル、ピロリジニル、ピロロピリジニル、ピロリル、チアゾリル、チエニルおよびチオモルホリニルが挙げられるが、これに限定するものではない。
【０１０８】
本明細書で使用する用語“ヒドロキシ”は、−ＯＨをいう。
【０１０９】
本明細書で使用する用語“イミダゾリルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、イミダゾリル基をいう。イミダゾリル基は、前記基の置換可能なあらゆる原子を介してアルキル部分に結合できる。
【０１１０】
本明細書で使用する用語“インドリルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、インドリル基をいう。インドリル基は、前記基の置換可能なあらゆる原子を介してアルキル部分に結合できる。
【０１１１】
本明細書で使用する用語“ナフチルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、ナフチル基をいう。ナフチル基は、前記基の置換可能なあらゆる原子を介してアルキル部分に結合できる。
【０１１２】
本明細書で使用する用語“ニトロ”は、−ＮＯ２をいう。
【０１１３】
本明細書で使用する用語“ＮＲｘＲｙ”は、２つの基ＲａおよびＲｂを指し、これは窒素原子を介して親分子部分に結合されている。ＲａおよびＲｂは、水素、Ｃ２−Ｃ４アルケニルオキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ３アルキルカルボニル、Ｃ３−Ｃ１４シクロアルキルカルボニル、フラニルカルボニルおよびフェニルカルボニルから独立して選択される。
【０１１４】
本明細書で使用する用語“ＮＲｘＲｙ(Ｃ１−Ｃ３)アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合するＮＲｘＲｙ基をいう。
【０１１５】
本明細書で使用する用語“ＮＲｕＲｖ”は、２つの基であるＲｕおよびＲｖを指し、これは窒素原子を介して親分子部分と結合されている。ＲｕおよびＲｖは、水素、Ｃ１−Ｃ３アルキルおよびトリフェニルメチルから独立して選択される。
【０１１６】
本明細書で使用する用語“ＮＲｕＲｖカルボニル”は、カルボニル基を介して親分子部分に結合しているＮＲｕＲｖ基をいう。
【０１１７】
本明細書で使用する用語“ＮＲｕＲｖカルボニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合しているＮＲｕＲｖカルボニル基をいう。
【０１１８】
本明細書で使用する用語“ＰＥＧ”は、ポリエチレングリコールをいい、式：
【化２６】
0006804442.tif 000027
(式中、ｎは１〜５７である)
に示されるエチレンオキシドのポリマーをいう。ＰＥＧ基は酸素原子または炭素原子を介して親分子部分に結合されてもよいことは理解されるであろう。
【０１１９】
本明細書で使用する用語“フェノキシ”は、酸素原子を介して親分子部分に結合する、フェニル基をいう。
【０１２０】
本明細書で使用する用語“フェノキシＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、フェノキシ基をいう。
【０１２１】
本明細書で使用する用語“フェニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、フェニル基をいう。
【０１２２】
本明細書で使用する用語“フェニルカルボニル”は、カルボニル基を介して親分子部分に結合する、フェニル基をいう。
【０１２３】
本明細書で使用する用語“ピリジニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、ピリジニル基をいう。ピリジニル基は、前記基のあらゆる置換可能な原子を介してアルキル部分に結合できる。
【０１２４】
本明細書で使用する用語“スルファニル”は、−Ｓ−をいう。
【０１２５】
本明細書で使用する用語“スルホニル”は、−ＳＯ２−をいう。
【０１２６】
本明細書で使用する用語“チアゾリルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合しているチアゾリル基をいう。チアゾリル基は、前記基内の置換可能なあらゆる原子を介して、アルキル部分に結合できる。
【０１２７】
本明細書で使用する用語“チエニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、チエニル基をいう。チエニル基は、前記内の置換可能なあらゆる原子を介してアルキル部分に結合できる。
【０１２８】
用語“処置”は、(ｉ)疾患、障害および／または症状の素因があるが、まだそれを有していると診断されていない患者における該疾患、障害または症状の発症を予防すること；(ii)疾患、障害または症状を阻止する、すなわち、その発症を停止させること；および(iii)疾患、障害または症状を軽減すること、すなわち、疾患、障害および／または症状および／または疾患、障害および／または症状を伴う症候を回復させることを含む。
【０１２９】
本明細書で使用する用語“ビタミンＥ”は、
【化２７】
0006804442.tif 000028
をいう。
【０１３０】
大環状ペプチドのＰＤ−Ｌ１への結合は、例えば、均一時間分解蛍光測定(ＨＴＲＦ)、表面プラズモン共鳴法(ＳＰＲ)、等温滴定熱量測定(ＩＴＣ)、核磁気共鳴スペクトロスコピー(ＮＭＲ)などの方法により測定できる。さらに、大環状ペプチドの細胞表面上に発現するＰＤ−Ｌ１への結合は、本明細書に記戴するとおり細胞結合アッセイで測定できる。
【０１３１】
本明細書に記戴する治療剤の投与は、治療有効量の治療剤の投与を含むが、これに限定されない。本明細書で使用する用語“治療有効量”とは、本明細書に記戴するＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１結合阻害剤の組成物の投与により処置可能な状態の処置または予防のための治療剤の量をいうが、これに限定されない。この量は、検出可能な治療的または予防的または寛解性効果を示すのに十分な量である。効果は、例として、限定しないが、本明細書に挙げた症状の処置または予防を含み得る。対象に対する厳密な有効量は、対象の体格および健康症状、処置すべき状態の性質および程度、処置医の推奨および投与のために選択した治療剤または治療剤の組み合わせによる。それゆえに、正確な有効量を前もって特定するのは有用ではない。
【０１３２】
別の局面において、本発明は、本発明の大環状ペプチドを使用する対象における腫瘍細胞の増殖を阻止する方法にも関する。本明細書に示されるとおり、本発明の大環状ペプチドは、ＰＤ−Ｌ１と結合して、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１の相互作用を妨害し、ＰＤ−Ｌ１と、ＰＤ−１との相互作用を阻止することが知られる抗ＰＤ−１モノクローナル抗体との結合と競合し、ＣＭＶ特異的Ｔ細胞ＩＦＮγ分泌を増強させて、ＨＩＶ特異的Ｔ細胞ＩＦＮγ分泌を増強することができる。その結果、本発明の大環状ペプチドは、免疫応答の修飾、癌または感染性疾患のような疾患の処置、保護的自己免疫応答の刺激または抗原特異的免疫応答の刺激(例えば、ＰＤ−Ｌ１遮断ペプチドと目的の抗原の共投与による)に有用である。
【０１３３】
本発明がより容易に理解され得るために、ある用語を最初に定義する。さらなる定義は、詳細な記戴をとおして示される。
【０１３４】
用語“プログラム死リガンド１”、“プログラム細胞死リガンド１”、“タンパク質ＰＤ−Ｌ１”、“ＰＤ−Ｌ１”、“ＰＤＬ１”、“ＰＤＣＤＬ１”、“ｈＰＤ−Ｌ１”、“ｈＰＤ−ＬＩ”、“ＣＤ２７４”および“Ｂ７−Ｈ１”は、相互交換可能的に使用し、ＰＤ−Ｌ１と少なくとも１個の共通するエピトープを有する異型、アイソフォーム、ヒトＰＤ−Ｌ１の種ホモログおよびアナログを含む。完全ＰＤ−Ｌ１配列は、GENBANK(登録商標)Accession No. NP_054862に見ることができる。
【０１３５】
用語“プログラム死１”、“プログラム細胞死１”、“タンパク質ＰＤ−１”、“ＰＤ−１”、“ＰＤ１”、“ＰＤＣＤ１”、“ｈＰＤ−１”および“ｈＰＤ−Ｉ”は、相互交換可能に使用し、ＰＤ−１と少なくとも１個の共通するエピトープを有する異型、アイソフォーム、ヒトＰＤ−１の種ホモログおよびアナログを含む。完全ＰＤ−１配列はGENBANK(登録商標)Accession No. U64863に見ることができる。
【０１３６】
用語“細胞毒性Ｔリンパ球関連抗原−４”、“ＣＴＬＡ−４”、“ＣＴＬＡ４”、“ＣＴＬＡ−４抗原”および“ＣＤ１５２”(例えば、Murata, Am. J. Pathol., 155：453−460(1999)参照)は、相互交換可能なように使用され、ＣＴＬＡ−４と少なくとも１個の共通するエピトープを有する異型、アイソフォーム、ヒトＣＴＬＡ−４の種ホモログおよびアナログを含む(例えば、Balzano, Int. J. Cancer Suppl., 7：28−32(1992)参照)。完全ＣＴＬＡ−４核酸配列はGENBANK(登録商標)Accession No. L15006に見ることができる。
【０１３７】
用語“免疫応答”は、例えば、侵入した病原体、病原体に感染した細胞または組織、癌細胞、あるいは自己免疫的または病理学的炎症の場合には、正常なヒト細胞または組織の選択的損傷、破壊または体内からの除去をもたらす、リンパ球、抗原提示細胞、食細胞、顆粒球および上記細胞または肝臓で産生される可溶性巨大分子(例えば、大環状ペプチド、サイトカインおよび補体)の作用をいう。
【０１３８】
本明細書で使用する“有害事象”(ＡＥ)は、医学的処置の使用と関係する、あらゆる好ましくないおよび一般に意図されない、さらに望ましくない、徴候(検査所見の異常を含む)、症状または疾患である。例えば、有害事象は、処置に応答した免疫系の活性化または免疫系細胞(例えば、Ｔ細胞)の増大と関係し得る。医学的処置は、一つ以上のＡＥと関係することがあり、各ＡＥの重症度は同一または異なり得る。“有害事象を変える”ことができる方法なる言及は、異なる処置レジメンの使用と関係する、１つ以上のＡＥの発生率および／または重症度を減少する処置レジメンを意味する。
【０１３９】
本明細書で使用する“過増殖性疾患”は、細胞増殖が正常レベルを超えて増加した状態をいう。例えば、過増殖性疾患または障害は、悪性疾患(例えば、食道癌、結腸癌、胆道癌)および非悪性疾患(例えば、アテローム性動脈硬化症、良性過形成および良性前立腺肥大)を含む。
【０１４０】
本明細書で使用する“約”または“を本質的に含む”なる用語は、当業者により測定される特定の値に対する許容される誤差範囲内を意味し、いかにして値を測定または決定したかに幾分依存する、すなわち、測定系の限度に依存する。例えば、“約”または“を本質的に含む”は、当分野の経験に従い、１以内または１を超える標準偏差を意味し得る。あるいは、“約”または“を本質的に含む”は、２０％までの範囲を意味し得る。さらに、特に生物学的系または過程に関して、本用語は１桁までの振幅または５倍までの値を意味し得る。特定の値を本明細書および特許請求の範囲に記戴するとき、別段の記載が無ければ、その特定の値についての許容される誤差範囲内であるとして、“約”または“を本質的に含む”の意味を考慮すべきである。
【０１４１】
本明細書に記戴する、あらゆる濃度範囲、パーセンテージ範囲、比率範囲または整数範囲は、別段の記載が無ければ、列挙した範囲内のあらゆる整数の値と、適当な場合には、その分数(例えば整数の１／１０および１／１００)を含むと理解すべきである。
【０１４２】
競合アッセイ
本発明はまた少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％および少なくとも約１００％まで、参照抗ＰＤ−Ｌ１抗体(ＭＤＸ−１１０５)の結合と競合できる大環状ペプチドに関する。このような大環状ペプチドは、ＰＤ−Ｌ１と特異的に結合する限り、変異体、保存的置換、機能的置換および欠失形態を含み、１個以上の本明細書に開示する大環状ペプチドと構造相同性であり得る。例えば、大環状ペプチドがＰＤ−Ｌ１の参照抗ＰＤ−Ｌ１抗体と同じ領域に実質的に結合するならば、大環状ペプチドは、抗ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体が結合するＰＤ−Ｌ１エピトープと少なくとも重複するＰＤ−Ｌ１のエピトープと結合するはずである。重複領域は、アミノ酸残基から数百アミノ酸残基の範囲であり得る。そうであれば、大環状ペプチドは、抗ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体のＰＤ−Ｌ１への結合と競合および／または遮断し、それにより抗ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体のＰＤ−Ｌ１への結合を、競合アッセイにおいて好ましくは少なくとも約５０％減少させるはずである。
【０１４３】
競合アッセイのための参照抗体として使用し得る抗ＰＤ−Ｌ１抗体は当分野で知られる。例えば、次の代表的抗ＰＤ−Ｌ１抗体を使用し得る：ＭＤＸ−１１０５(BMS); Ｌ０１Ｘ−Ｃ(Serono)、Ｌ１Ｘ３(Serono)、ＭＳＢ−００１０７１８Ｃ(Serono)およびＰＤ−Ｌ１ Ｐｒｏｂｏｄｙ(CytomX)および共用ＷＯ２００７／００５８７４に開示のＰＤ−Ｌ１抗体。
【０１４４】
競合アッセイのための参照抗体として使用し得る抗ＰＤ−１抗体は当分野で知られる。例えば、次の代表的抗ＰＤ−１抗体を使用し得る：ニボルマブ(BMS)；各々共用米国特許番号８,００８,４４９(BMS)に開示する１７Ｄ８、２Ｄ３、４Ｈ１、４Ａ１１、７Ｄ３および５Ｆ４、ＭＫ−３４７５(Merck、米国特許番号８,１６８,７５７に開示)および米国特許番号７,４８８,８０２に開示の抗体。
【０１４５】
医薬組成物
別の局面において、本発明は、本発明の１個または大環状ペプチドを組み合わせて含み、医薬的に許容される担体と共に製剤された組成物、例えば、医薬組成物を提供する。このような組成物は、本発明の１個または複数の(２以上の異なる)大環状ペプチドまたは免疫コンジュゲートまたは二重特異性分子を含み得る。例えば、本発明の医薬組成物は、標的抗原上の異なるエピトープに結合するか、または相補的活性を有する、大環状ペプチド(または免疫コンジュゲートまたは二重特異性物質)の組み合わせを含み得る。
【０１４６】
本発明の医薬組成物は、治療と組み合わせて、すなわち、他剤と組み合わせても投与し得る。例えば、組み合わせ治療は、少なくとも１種の他の抗炎症剤または免疫抑制剤と組み合わせた大環状ペプチドを含み得る。組み合わせ治療で使用できる治療剤の例は、本発明の大環状ペプチドの使用についての章にさらに詳述する。
【０１４７】
本明細書で使用する“医薬的に許容される担体”は、生理学的に適合性である任意かつ全ての溶媒、分散媒体、コーティング、抗細菌および抗真菌剤、等張および吸収遅延剤などを含む。好ましくは、担体は、静脈内、筋肉内、皮下、非経腸、脊髄または上皮投与に適する(例えば、注射または点滴による)。投与経路によって、活性化合物、すなわち、大環状ペプチド、免疫コンジュゲートまたは二重特異性分子を、化合物を不活性化し得る酸および他の自然条件の作用から化合物を保護するための物質でコーティングし得る。
【０１４８】
本発明の医薬化合物は、１個以上の医薬的に許容される塩を含み得る。“医薬的に許容される塩”または“治療上許容される塩”は、親化合物の所望の生物学的活性を保持し、望まない中毒学的効果に関与しない塩をいう(例えば、Berge, S.M. et al., J. Pharm. Sci., 66：1−19(1977)参照)。このような塩の例は、酸付加塩および塩基付加塩を含む。酸付加塩は、非毒性無機酸、例えば塩酸、硝酸、リン酸、硫酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン酸など、ならびに非毒性有機酸、例えば脂肪族モノおよびジカルボン酸、フェニル置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸、芳香族酸、脂肪族および芳香族スルホン酸など由来のものを含む。塩基付加塩は、アルカリ土類金属、例えばナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウムなど、ならびに非毒性有機アミン、例えばＮ,Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、プロカインなど由来のものを含む。
【０１４９】
本発明の医薬組成物は、医薬的に許容される抗酸化剤も含み得る。医薬的に許容される抗酸化剤の例は、(１)水可溶性抗酸化剤、例えばアスコルビン酸、塩酸システイン、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなど；(２)油可溶性抗酸化剤、例えばパルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール(ＢＨＡ)、ブチル化ヒドロキシトルエン(ＢＨＴ)、レシチン、没食子酸プロピル、アルファ−トコフェロールなど；および(３)金属キレート剤、例えばクエン酸、エチレンジアミン四酢酸(ＥＤＴＡ)、ソルビトール、酒石酸、リン酸などを含む。
【０１５０】
本発明の医薬組成物で用い得る適切な水性および非水性担体の例は、水、エタノール、ポリオール(例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど)およびこれらの適当な混合物、植物油、例えばオリーブ油および注射可能有機エステル、例えばオレイン酸エチルを含む。適切な流動性は、例えば、レシチンのようなコーティング物質の使用により、分散の場合には、必要な粒子径の維持および界面活性剤の使用により維持できる。
【０１５１】
これらの組成物は、防腐剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤のようなアジュバントを含み得る。微生物の存在の予防は、上記滅菌工程および種々の抗細菌および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などの導入の両者により確実にし得る。等張剤、例えば糖、塩化ナトリウムなどを組成物に導入することも望ましい。さらに、注射可能医薬形態の長期吸収は、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンのような吸収を遅延させる薬剤を入れることにより達成し得る。
【０１５２】
医薬的に許容される担体は、無菌水溶液または分散および無菌注射可能溶液または分散の即時調製のための無菌粉末を含む。薬学的に活性物質のためのかかる媒体および薬剤の使用は、当分野では知られている。何らかの慣用の媒体または薬剤が、活性化合物と不適合でない限り、本発明の医薬組成物におけるその使用が意図される。補足の活性化合物も組成物に包含させ得る。
【０１５３】
治療的組成物は、典型的に無菌であり、製造および保存条件下で安定でなければならない。組成物は、溶液、マイクロエマルジョン、リポソームまたは抗薬物濃度に適する他の整然とした構造として製剤できる。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール(例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコールなど)およびこれらの適当な混合物を含む溶媒または分散媒体であり得る。適切な流動性は、例えば、レシチンのようなコーティング物質の使用により、分散剤の場合には必要な粒子径の維持により、および界面活性剤の使用により維持できる。多くの場合、等張剤、例えば、糖、ポリアルコール、例えばマンニトール、ソルビトールまたは塩化ナトリウムを組成物に添加するのが好ましい。注射可能組成物の長期吸収は、モノステアリン酸塩およびゼラチンのような吸収を遅延させる薬剤を導入することにより達成し得る。
【０１５４】
無菌注射可能溶液は、必要量の活性化合物を、上に列挙した成分の１個または組み合わせを有する適当な溶媒に取り込み、必要に応じて、その後殺菌微量濾過することにより製造できる。一般に、分散剤は、活性化合物を、基本的な分散媒体および上に列挙したものからの必要な他の成分を含む無菌媒体に取り込むことにより製造できる。無菌注射可能溶液の調製用の無菌粉末の場合、好ましい製造方法は、活性成分と先に無菌濾過した溶液からのさらなる所望の成分の粉末を産生する、真空乾燥およびフリーズドライ(凍結乾燥)である。
【０１５５】
一投与量形態を製造するために担体物質と組み合わせ得る活性成分の量は、処置対象および特定の投与方法による。一投与量形態を製造するために担体物質と組み合わせ得る活性成分の量は、一般に治療的効果を生じる組成物の量である。一般に、１００パーセントの内で、この量は、医薬的に許容される担体と組み合わせて、活性成分が約０.０１パーセント〜約９９パーセントの範囲であり、好ましくは約０.１パーセント〜約７０パーセント、最も好ましくは約１パーセント〜約３０パーセントの活性成分である。
【０１５６】
投与レジメンは、最適な所望の応答(例えば、治療的応答)をもたらすよう調節する。例えば、単回ボーラスを投与するか、数回分割量を経時的に投与するか、または投与量を治療的状況の緊急事態に適応するよう、比例的に減少または増加してもよい。投与の容易性および投与量の均一性のために、投与量単位で非経腸組成物を製剤することが特に有利である。ここで使用する投与量単位形態は、処置対象への単位投与に適する物理的に分離した単位をいい、各単位は、必要な医薬担体と共に、所望の治療的効果を生じるよう計算された所定量の活性化合物を含む。本発明の投与量単位形態の明細は、(ａ)活性化合物の固有の特徴および達成すべき特定の治療的効果、および(ｂ)個々の感受性の処置のためのこのような活性化合物の配合の分野に内在性の限度により指示され、直接依存する。
【０１５７】
大環状ペプチドの投与のために、投与量は、宿主体重あたり約０.０００１〜１００mg／kg、より一般的には０.０１〜５mg／kgの範囲である。例えば、投与量は０.３mg／kg体重、１mg／kg体重、３mg／kg体重、５mg／kg体重または１０mg／kg体重であるか、または１〜１０mg／kgの範囲である。処置レジメンの例は、１日１回、１日２回、週に２回、週に３回、毎週、２週毎、３週毎、４週毎、月１回、３ヶ月に１回または３〜６ヶ月毎に１回の投与を必要とする。本発明の大環状ペプチドのための好ましい投与レジメンは、静脈内投与による１mg／kg体重または３mg／kg体重を含み、大環状ペプチドは、次の投与スケジュールのいずれか一つを使用して投与される：(ｉ)４週毎を６回投与、その後３ヶ月毎；(ii)３週毎；(iii)３mg／kg体重を１回、その後３週間毎に１mg／kg体重。
【０１５８】
ある方法において、異なる結合特異性を有する２個以上の大環状ペプチドを同時に投与し、この場合投与する化合物の投与量は記戴した範囲内に入る。化合物は、通常複数の機会に投与する。一回投与の間の間隔は、例えば、毎週、毎月、３ヶ月毎または毎年であり得る。間隔は、患者における標的抗原に対する大環状ペプチドの血中濃度の測定により示されるとおり、不規則でもあり得る。ある方法において、投与量を調節して、約１〜１０００μg／ml、ある方法において約２５〜３００μg／mlの血漿抗体濃度を達成する。
【０１５９】
あるいは、大環状ペプチドを、投与頻度の減少が求められる場合には徐放製剤として投与できる。投与量および投与頻度は、処置が予防的であるか治療的であるかにより変わり得る。予防的適用において、長期間にわたり、比較的低投与量を、比較的頻度の少ない間隔で投与する。患者が死ぬまで処置を受けることがある。治療的適用において、相対的に短い間隔での相対的に高投与量が、疾患の進行が減少するか、または終わるまで、好ましくは患者が疾患症状の部分的または完全改善を示すまで、必要な場合がある。その後、患者に予防レジメンで投与し得る。
【０１６０】
本発明の医薬組成物における活性成分の実際の投与量は、患者に対して毒性ではなく、特定の患者、組成物および投与方法について所望の治療的応答を達成するのに有効である活性成分を得るために変更され得る。選択した投与量は、用いる特定の本発明の組成物またはそのエステル、塩またはアミドの活性、投与経路、投与の時間、用いる特定の化合物の排出率、処置期間、用いる特定の組成物と組み合わせて使用する他の薬物、化合物および／または物質、処置する患者の年齢、性別、体重、状態、一般的健康状態および先の病歴および医学分野で周知の同等な因子を含む、多様な薬物動態因子による。
【０１６１】
本発明の大環状ペプチドの“治療有効量”は、好ましくは疾患症状の重症度低下、無疾患症状期間の頻度および期間の延長または疾患苦痛による機能障害または身体障害の予防をもたらす。例えば、腫瘍の処置のために、“治療有効量”は、好ましくは細胞増殖または腫瘍増殖を、非処置対象に対して少なくとも約２０％、より好ましくは少なくとも約４０％、さらに好ましくは少なくとも約６０％、なお好ましくは少なくとも約８０％阻害する。化合物が腫瘍増殖および／またはＨＩＶを阻害する能力は、ヒト腫瘍における有効性またはウイルス有効性の予測である動物モデル系で評価できる。あるいは、組成物のこの特性を、当業者に知られるインビトロ阻止アッセイにより、化合物の阻止能力を試験することにより評価できる。治療用化合物の治療有効量は、対象における腫瘍サイズの縮小、ウイルス負荷の低下、その他諸症状の改善をもたらす。当業者は、対象の体格、対象の症状の重症度および選択した特定の組成物または投与経路のような因子により、このような量を決定できる。
【０１６２】
他の面において、本発明は、本明細書に記戴する大環状ペプチドおよび別の免疫修飾剤を含む、医薬キット・オブ・パーツを提供する。キットは、過増殖性疾患(例えば、本明細書に記戴する癌)および／または抗ウイルス疾患の処置における使用のための指示書もさらに含み得る。
【０１６３】
本発明の組成物は、当分野で知られる多様な方法の一つ以上を使用して、一つ以上の経路により投与できる。当業者には認識されるとおり、投与経路および／または方法は所望の結果により変わる。本発明の大環状ペプチドのための好ましい投与経路は、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内、皮下、脊髄または他の非経腸投与経路、例えば注射または点滴を含む。本明細書で使用する用語“非経腸投与”は、経腸および局所投与以外の、通常注射による投与方法を意味し、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、関節内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢下、クモ膜下、脊髄内、硬膜外および胸骨内注射および点滴を含むが、これらに限定されない。
【０１６４】
あるいは、本発明の大環状ペプチドは、非経腸経路より、例えば局所に、上皮または粘膜投与経路により、例えば、鼻腔内、経口、膣、直腸、舌下または局所的に投与できる。
【０１６５】
活性化合物は、インプラント、経皮パッチおよびマイクロカプセル化送達系を含む、制御放出製剤のような、急速な放出から化合物を保護する担体と製剤できる。エチレンビニルアセテート、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステルおよびポリ乳酸のような生分解性、生体適合性ポリマーを使用できる。このような製剤を製造するための多くの方法が、特許となっており、または一般に当業者に知られている。例えば、Robinson, J.R., ed., Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, Marcel Dekker, Inc., New York(1978)を参照のこと。
【０１６６】
治療的組成物を、当分野で知られる医療機器で投与し得る。例えば、好ましい態様において、本発明の治療的組成物を、無針皮下注射器、例えば、米国特許番号５,３９９,１６３、５,３８３,８５１、５,３１２,３３５、５,０６４,４１３、４,９４１,８８０、４,７９０,８２４または４,５９６,５５６に開示されているデバイスで投与できる。本発明に有用な周知のインプラントおよびモジュールは、制御された速度で薬剤を分配するためのインプラント可能微量注入ポンプを開示する米国特許番号４,４８７,６０３；皮膚を介する薬物の投与のための治療的デバイスを開示する米国特許番号４,４８６,１９４；正確な注入速度で薬剤を送達するための薬剤注入ポンプを開示する米国特許番号４,４４７,２３３；連続薬物送達のための可変流速インプラント可能注入装置を開示する米国特許番号４,４４７,２２４；複数のチャンバー部分を有する浸透性薬物送達系を開示する米国特許番号４,４３９,１９６；および浸透性薬物送達系を開示する米国特許番号４,４７５,１９６を含む。これらの特許は、引用により本明細書に包含させる。多くの他のこのようなインプラント、送達系およびモジュールは当業者に知られる。
【０１６７】
ある態様において、本発明の大環状ペプチドは、インビボでの適切な分布を確実にするために製剤できる。例えば、血液脳関門(ＢＢＢ)は、多くの高度に親水性の化合物を排除する。本発明の治療的化合物が、ＢＢＢを通過することを確実にするために(望むならば)、例えば、リポソームに製剤できる。リポソームの製造方法に関しては、例えば、米国特許番号４,５２２,８１１、５,３７４,５４８および５,３９９,３３１を参照のこと。リポソームは、特異的細胞または臓器へ選択的に輸送される１個以上の部分を含むことができ、それにより標的化薬物送達を増強する(例えば、Ranade, V.V., J. Clin. Pharmacol., 29：685(1989)参照)。標的化部分の例は、葉酸またはビオチン(例えば、Low et al.の米国特許番号５,４１６,０１６参照)；マンノシド(Umezawa et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 153：1038(1988))；大環状ペプチド(Bloeman, P.G. et al., FEBS Lett., 357：140(1995); Owais, M. et al., Antimicrob. Agents Chemother., 39：180(1995))；界面活性剤タンパク質Ａ受容体(Briscoe et al., Am. J. Physiol., 1233：134(1995))；ｐ１２０(Schreier et al., J. Biol. Chem., 269：9090(1994))を含み、Keinanen, K. et al., FEBS Lett., 346：123(1994); Killion, J.J. et al., Immunomethods 4：273(1994)も参照のこと。
【０１６８】
本発明の使用および方法
本発明の大環状ペプチド、組成物および方法は、例えば、ＰＤ−Ｌ１検出またはＰＤ−Ｌ１遮断による免疫応答を含む、多くのインビトロおよびインビボ有用性を有する。例えば、これらの分子を、培養細胞に、インビトロまたはエクスビボで、またはヒト対象に、例えば、インビボで投与し、多様な状況での免疫を増強する。したがって、一つの面において、本発明は、本発明の大環状ペプチドを、対象における免疫応答が修飾されるように対象に投与することを特徴とする、対象における免疫応答を修飾する方法を提供する。好ましくは、応答は、増強、刺激または上方制御される。他の点において、大環状ペプチドは、抗カニクイザル、抗マウスおよび／または抗マーモット結合および治療活性を有し得る。
【０１６９】
本明細書で使用する用語“対象”は、ヒトおよび非ヒト動物を含むことを意図する。非ヒト動物は、全ての脊椎動物、例えば、哺乳動物および非哺乳動物、例えば非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ニワトリ、マーモット、両生類および爬虫類を含むが、非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウシおよびウマのような哺乳動物が好ましい。好ましい対象は、免疫応答の増強が必要であるヒト患者を含む。本方法は特にＴ細胞仲介免疫応答の増強により処置できる障害を有するヒト患者の処置に特に適する。具体的態様において、本方法は、特にインビボでの癌細胞の処置に適する。免疫の抗原特異的増強を達成するために、大環状ペプチドを目的の抗原と共に投与できる。ＰＤ−Ｌ１に対する大環状ペプチドを他の薬剤と共に投与するとき、２剤をいずれの順序で投与しても、同時に投与してもよい。
【０１７０】
本発明は、さらに、サンプルおよび対照サンプルと、ヒト、マーモット、カニクイザルおよび／またはマウスＰＤ−Ｌ１に特異的に結合する参照大環状ペプチドを、大環状ペプチドと、ヒト、マーモット、カニクイザルおよび／またはマウスＰＤ−Ｌ１の複合体を形成させる条件下で接触させることを含む、サンプルにおけるヒト、マーモット、カニクイザルおよび／またはマウスＰＤ−Ｌ１抗原の存在を検出するか、あるいはヒト、マーモット、カニクイザルおよび／またはマウスＰＤ−Ｌ１抗原の量を測定する方法を提供する。複合体の形成を、その後測定するが、ここで対照サンプルと比較して異なるサンプルの複合体形成は、サンプルにおけるヒト、マーモット、カニクイザルおよび／またはマウスＰＤ−Ｌ１抗原の指標である。
【０１７１】
本発明の大環状ペプチドのＣＤ２８、ＩＣＯＳおよびＣＴＬＡ−４と比較したＰＤ−Ｌ１への特異的結合を考慮して、本発明の大環状ペプチドは、細胞表面上のＰＤ−Ｌ１発現の特異的検出に使用でき、さらに免疫親和性精製によるＰＤ−Ｌ１の精製に使用できる。
【０１７２】
癌
大環状ペプチドによるＰＤ−１の遮断は、患者における癌細胞に対する免疫応答を増強できる。ＰＤ−１に対するリガンドであるＰＤ−Ｌ１は、正常なヒトの細胞では発現されないが、多様なヒトの癌において多く存在する(Dong et al., Nat. Med., 8：787−789(2002))。ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１の相互作用は、腫瘍浸潤性リンパ球減少、Ｔ細胞受容体仲介増殖減少および癌細胞の免疫回避をもたらす(Dong et al., J. Mol. Med., 81：281−287(2003); Blank et al., Cancer Immunol. Immunother., 54：307−314(2005); Konishi et al., Clin. Cancer Res., 10：5094−5100(2004))。免疫抑制は、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１の局所相互作用の阻害により逆転され得て、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ２の相互作用が同様に遮断されたとき、この効果は相加的である(Iwai et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 99：12293−12297(2002); Brown et al., J. Immunol., 170：1257−1266(2003))。先の研究では、Ｔ細胞増殖が、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１への相互作用の阻害により回復できることが示されているが、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用の遮断によるインビボ癌腫瘍増殖に対する直接の効果についての報告はない。一つの面において、本発明は、癌性腫瘍の増殖が阻害されるように大環状ペプチドを使用するインビボでの対象の処置に関する。大環状ペプチドを、癌性腫瘍増殖阻害のために単独で使用してもよい。あるいは、大環状ペプチドを、下に記戴するとおり、他の免疫原性剤、標準的癌処置または他の大環状ペプチドと組み合わせて使用してもよい。
【０１７３】
したがって、一つの態様において、本発明は、対象に治療上有効量の大環状ペプチドを投与することを特徴とする、対象における腫瘍細胞増殖の阻害方法を提供する。
【０１７４】
本発明の大環状ペプチドを使用して癌の増殖を阻害し得る好ましい癌は、典型的に免疫治療に応答性の癌を含む。処置のための好ましい癌の非限定的例は、黒色腫(例えば、転移悪性黒色腫)、腎細胞癌(例えば、明細胞癌)、前立腺癌(例えば、ホルモン難治性前立腺腺癌および去勢抵抗性前立腺癌)、乳癌、結腸直腸癌および肺癌(例えば、扁平上皮および非扁平上皮非小細胞性肺癌)を含む。さらに、本発明は、本発明の大環状ペプチドを使用して増殖を阻害し得る難治性または反復性悪性腫瘍を含む。
【０１７５】
本発明の方法を使用して処置し得る他の癌の例は、骨の癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部の癌、皮膚または眼内悪性黒色腫、子宮癌、卵巣癌、結腸癌、直腸癌、肛門部の癌、胃／胃体癌、精巣癌、子宮癌、卵管の癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膣の癌、外陰の癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、食道の癌、小腸の癌、内分泌系の癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎の癌、軟組織の肉腫、尿道癌、陰茎癌、慢性または急性白血病、例えば急性骨髄球性白血病、慢性骨髄球性白血病、急性リンパ球性白血病および慢性リンパ球性白血病、小児の固形腫瘍、リンパ性リンパ腫、膀胱癌、腎臓または輸尿管の癌、腎盂癌、中枢神経系(ＣＮＳ)の新生物、一次ＣＮＳリンパ腫、腫瘍血管形成、脊髄軸椎腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、カポジ肉腫、類表皮癌、扁平上皮細胞癌、Ｔ細胞リンパ腫、アスベストにより誘発される疾患を含めた環境誘発性の癌および該癌の組み合わせを含む。本発明は、転移癌、特にＰＤ−Ｌ１を発現する転移癌の処置にも有用である(Iwai et al., Int. Immunol., 17：133−144(2005))。
【０１７６】
所望により、ＰＤ−Ｌ１に対する大環状ペプチドを、免疫原性剤、例えば、癌細胞、精製腫瘍抗原(組み換えタンパク質、ペプチドおよび炭水化物分子を含む)、細胞および免疫刺激サイトカインをコードする遺伝子でトランスフェクトした細胞と組み合わせて投与し得る(He et al., J. Immunol., 173：4919−4928(2004))。使用できる腫瘍ワクチンの非限定的例は、黒色腫抗原のペプチド、例えばｇｐ１００、ＭＡＧＥ抗原、Ｔｒｐ−２、ＭＡＲＴ１および／またはチロシナーゼのペプチドまたはサイトカインＧＭ−ＣＳＦを発現するようにトランスフェクトした腫瘍細胞(さらに下に開示)を含む。
【０１７７】
ヒトにおいて、黒色腫のような幾つかの腫瘍は、免疫原性であることが示されている。ＰＤ−Ｌ１の遮断によりＴ細胞活性化の閾値を上げることにより、宿主における腫瘍応答が期待できると仮説が立てられる。
【０１７８】
ＰＤ−Ｌ１の遮断は、ワクチン接種プロトコルと組み合わせたとき、最も有効である可能性がある。腫瘍に対するワクチン接種のための多くの実験的戦略が考案されている(Rosenberg, S., Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring：60−62(2000); Logothetis, C., ASCO Educational Book Spring：300−302(2000);Khayat, D., ASCO Educational Book Spring：414−428(2000); Foon, K., ASCO Educational Book Spring：730−738(2000);see also Restifo, N. et al., Cancer Vaccines, Chapter 61, pp. 3023−3043, in DeVita, V. et al., eds., Cancer：Principles and Practice of Oncology, Fifth Edition(1997)参照)。これらの戦略の一つにおいて、ワクチンを、自己または同種腫瘍細胞を使用して製造する。これらの細胞性ワクチンは、腫瘍細胞がＧＭ−ＣＳＦを発現するように形質導入されたとき、最も有効であることが示されている。ＧＭ−ＣＳＦは、腫瘍ワクチン接種のための抗原提示の強力なアクティベーターであることが示されている(Dranoff et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90：3539−3543(1993))。
【０１７９】
種々の腫瘍における遺伝子発現および大規模遺伝子発現パターンの研究により、いわゆる腫瘍特異的抗原の定義が導かれている(Rosenberg, S.A., Immunity, 10：281−287(1999))。多くの場合、これらの腫瘍特異的抗原は、腫瘍および腫瘍が生じた細胞に発現される分化抗原、例えばメラニン形成細胞抗原ｇｐ１００、ＭＡＧＥ抗原およびＴｒｐ−２である。更に重要なことに、これらの抗原の多くは、宿主に見られる腫瘍特異的Ｔ細胞の標的であり得ることが示されている。ＰＤ−Ｌ１遮断を、これらのタンパク質に対する免疫応答を発生させるために、腫瘍において発現されている組み換えタンパク質および／またはペプチドのコレクションと共に使用し得る。これらのタンパク質は、通常自己抗原として免疫系により監視され、それゆえに、それらに耐容性である。腫瘍抗原は、染色体のテロメアの合成に必要であるタンパク質テロメラーゼも含んでもよく、これはヒトの癌では８５％を超えて発現されており、体性組織ではわずかな限られた数である(Kim, N. et al., Science, 266：2011−2013(1994))(これらの体性組織は、種々の手段により免疫攻撃から保護され得る)。腫瘍抗原は、タンパク質の配列を変異させるか、または２個の非関連配列の融合タンパク質を創製する(すなわち、フィラデルフィア染色体におけるｂｃｒ−ａｂｌ)、体性変異のために癌細胞で発現される“新抗原”であるか、あるいはＢ細胞腫瘍由来のイディオタイプであってもよい。
【０１８０】
他の腫瘍ワクチンは、ヒトパピローマウイルス(ＨＰＶ)、肝炎ウイルス(ＨＢＶおよびＨＣＶ)およびカポジヘルペス肉腫ウイルス(ＫＨＳＶ)のようなヒトの癌と関係するウイルスからのタンパク質を含み得る。ＰＤ−Ｌ１遮断と共に使用し得る腫瘍特異的抗原の他の形態は、腫瘍組織それ自体から単離した精製熱ショックタンパク質(ＨＳＰ)である。これらの熱ショックタンパク質は、腫瘍細胞からのタンパク質フラグメントを含み、これらのＨＳＰは腫瘍免疫の誘発のための抗原提示細胞の送達に高度に効率的である(Suot, R. et al., Science, 269：1585−1588(1995); Tamura, Y. et al., Science, 278：117−120(1997))。
【０１８１】
樹状細胞(ＤＣ)は、主要抗原特異的応答に使用できる強力な抗原提示細胞である。ＤＣは、エクスビボで産生でき、種々のタンパク質およびペプチド抗原ならびに腫瘍細胞抽出物を積載できる(Nestle, F. et al., Nat. Med., 4：328−332(1998))。ＤＣは、これらの腫瘍抗原を同様に発現するために遺伝的手段によっても形質導入され得る。ＤＣは、免疫化を目的として、腫瘍細胞と直接融合されてもいる(Kugler, A. et al., Nat. Med., 6：332−336(2000))。ワクチン接種の方法として、ＤＣ免疫化は、より強力な抗腫瘍応答を活性化するために、ＰＤ−Ｌ１遮断と効果的に組み合わせ得る。
【０１８２】
ＰＤ−Ｌ１遮断は、標準的癌処置とも組み合わせてもよい。ＰＤ−Ｌ１遮断は、化学療法レジメと効果的に組み合わせ得る。これらの場合、投与する化学療法剤の量を減らすことが可能であり得る(Mokyr, M. et al., Cancer Res., 58：5301−5304(1998))。このような組み合わせの例は、黒色腫の処置のためにダカルバジンと組み合わせた大環状ペプチドである。このような組み合わせの他の例は、黒色腫の処置のためにインターロイキン−２(ＩＬ−２)と組み合わせた大環状ペプチドである。ＰＤ−Ｌ１遮断および化学療法を組み合わせて使用する背景にある科学的原理は、殆どの化学療法化合物の細胞毒性活性の結果である細胞死が、抗原提示経路における腫瘍抗原のレベルを増加させるためである。細胞死によるＰＤ−Ｌ１遮断と相乗作用し得る他の組み合わせ治療には、放射線、手術およびホルモン欠乏がある。これらのプロトコルのいずれも、宿主における腫瘍抗原の供給源を創製する。血管形成阻害剤は、ＰＤ−Ｌ１遮断と組み合わせてもよい。血管形成の阻害により、宿主抗原提示経路中に腫瘍抗原を供給し得る腫瘍細胞死をもたらす。
【０１８３】
ＰＤ−Ｌ１遮断大環状ペプチドは、ＦｃアルファまたはＦｃガンマ受容体発現エフェクター細胞を腫瘍細胞への標的とする二重特異性大環状ペプチドと組み合わせても使用できる(例えば、米国特許番号５,９２２,８４５および５,８３７,２４３を参照)。二重特異性大環状ペプチドを使用して、２つの別々の抗原を標的とし得る。例えば、抗Ｆｃ受容体／抗腫瘍抗原(例えば、Ｈｅｒ−２／ｎｅｕ)二重特異性大環状ペプチドは、マクロファージを腫瘍の部位に標的化させるのに使用されている。このターゲティングは、腫瘍特異的応答をさらに効果的に活性化し得る。これらの応答のＴ細胞アームは、ＰＤ−Ｌ１遮断物質の使用により増強される。あるいは、抗原を、腫瘍抗原および樹状細胞特異的細胞表面マーカーに結合する二重特異性大環状ペプチドの使用により、ＤＣに直接送達させ得る。
【０１８４】
腫瘍は、多種多様な機構により宿主免疫監視を逃れる。これらの機構の多くは、腫瘍により発現され、かつ免疫抑制性であるタンパク質の不活性化により克服され得る。これらは、特にＴＧＦ−ベータ(Kehrl, J. et al., J. Exp. Med., 163：1037−1050(1986))、ＩＬ−１０(Howard, M. et al., Immunology Today, 13：198−200(1992))およびＦａｓリガンド(Hahne, M. et al., Science, 274：1363−1365(1996))を含む。これらの各々に対する大環状ペプチドを、抗ＰＤ−Ｌ１と組み合わせて使用して、免疫抑制性因子の効果を抑制して、宿主による腫瘍免疫応答を促進できる。
【０１８５】
宿主免疫応答性を活性化するために使用し得る他の大環状ペプチドを、抗ＰＤ−Ｌ１と組み合わせて使用できる。これらは、ＤＣ機能および抗原提示を活性化する樹状細胞の表面上の分子を含む。抗ＣＤ４０大環状ペプチドは、Ｔ細胞ヘルパー活性を効果的に代理でき(Ridge, J. et al., Nature, 393：474−478(1998))、ＰＤ−１抗体と組み合わせて使用できる(Ito, N. et al., Immunobiology, 201(5)：527−540(2000))。ＣＴＬＡ−４(例えば、米国特許番号５,８１１,０９７)、ＯＸ−４０(Weinberg, A. et al., Immunol., 164：2160−2169(2000))、４−１ＢＢ(Melero, I. et al., Nat. Med., 3：682−685(1997)およびＩＣＯＳ(Hutloff, A. et al., Nature, 397：262−266(1999))のようなＴ細胞同時刺激分子に対する大環状ペプチドの活性化は、Ｔ細胞活性化のレベル増加のためにも提供され得る。
【０１８６】
骨髄移植は、造血起源の多様な腫瘍の処置のために現在使用されている。移植片対宿主病は、この処置の結果ではあるが、治療的利点を、移植片対腫瘍応答から得ることができる。ＰＤ−Ｌ１遮断は、ドナー生着腫瘍特異的Ｔ細胞の効果を増加させるために使用できる。
【０１８７】
抗原特異的Ｔ細胞のエクスビボ活性化および増大ならびに抗原特異的Ｔ細胞を腫瘍に向けさせるためのレシピエントへのこれらの細胞の養子移植が関与するいくつかの実験的治療プロトコルがある(Greenberg, R. et al., Science, 285：546−551(1999))。これらの方法は、ＣＭＶのような感染因子に対するＴ細胞応答の活性化にも使用し得る。大環状ペプチド存在下のエクスビボ活性化は、養子移入されたＴ細胞の頻度および活性を高めることが期待され得る。
【０１８８】
感染症
本発明の他の方法は、特定の毒素または病原体に曝されている患者の処置に使用される。したがって、本発明の他の面は、対象の感染性疾患が処置されるように、対象に本発明の大環状ペプチドを投与することを特徴とする、対象における感染性疾患の処置方法を提供する。
【０１８９】
上記した腫瘍への適用と同様にして、ＰＤ−Ｌ１遮断を、病原体、毒素および自己抗原に対する免疫応答を刺激するために、単独でまたはアジュバントとして、ワクチンと組み合わせて使用できる。この治療手段が特に有用であり得る病原体の例には、現在有効なワクチンがない病原体または慣用のワクチンが完全に効果的とはいえない病原体が挙げられる。これらは、ＨＩＶ、肝炎(Ａ型、Ｂ型およびＣ型)、インフルエンザ、ヘルペス、ジアルジア属、マラリア(Butler, N.S. et al., Nature Immunology, 13：188−195(2012); Hafalla, J.C.R., et al., PLOS Pathogens(February 2, 2012))、リーシュマニア、黄色ブドウ球菌、緑膿菌を含むが、これらに限定されない。ＰＤ−Ｌ１遮断は、感染中に変化した抗原を提示する、ＨＩＶのような因子による確立された感染に対して特に有効である。これらの新規エピトープは、抗ヒトＰＤ−Ｌ１投与の投与時に外来物として認識され、それゆえＰＤ−Ｌ１を介する負のシグナルにより削がれない強いＴ細胞応答を誘発する。
【０１９０】
本発明の方法により処置可能な感染の原因となる病原性ウイルスのいくつかの例は、ＨＩＶ、肝炎(Ａ、ＢまたはＣ)、ヘルペスウイルス(例えば、ＶＺＶ、ＨＳＶ−１、ＨＡＶ−６、ＨＳＶ−ＩＩおよびＣＭＶ、エプスタイン・バーウイルス)、アデノウイルス、インフルエンザウイルス、フラビイルス、エコーウイルス、ライノウイルス、コクサッキーウイルス、コロナウイルス、呼吸器多核体ウイルス、ムンプスウイルス、ロタウイルス、麻疹ウイルス、風疹ウイルス、パルボウイルス、ワクシニアウイルス、ＨＴＬＶウイルス、デングウイルス、パピローマウイルス、軟属腫ウイルス、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、ＪＣウイルスおよびアルボウイルス脳炎ウイルスを含む。
【０１９１】
本発明の方法により処置可能な感染の原因となる病原性細菌のいくつかの例は、クラミジア属、リケッチア性細菌、マイコバクテリア、ブドウ球菌、連鎖球菌、肺炎球菌、髄膜炎菌および淋菌、クレブシエラ、プロテウス、セラチア、シュードモナス、レジオネラ、ジフテリア、サルモネラ、桿菌、コレラ、テタヌス、ボツリヌス、炭疽、ペスト、レプトスピラ症およびライム病細菌を含む。
【０１９２】
本発明の方法により処置可能な感染の原因となる病原性真菌の例は、カンジダ属(アルビカンズ、クルゼイ、グラブラタ、トロピカリシスなど)、クリプトコッカス・ネオフォルマンス、アスペルギルス属(フミガーツス、ニガーなど)、ケカビ目(無コール属、アブシディア属、クモノスカビ属)、スポロトリックス・シェンキイ、ブラストミセス・デルマチチジス、南アメリカ分芽菌、コクシジオイデス・イミチスおよびヒストプラズマ・カプスラーツムを含む。
【０１９３】
本発明の方法により処置可能な感染の原因となる病原性寄生虫の例は、赤痢アメーバ、大腸バランチジウム、フォーラーネグレリア、アカントアメーバ属、ランブル鞭毛虫、クリプトスポリジウム属、ニューモシスチス・カリニ、三日熱マラリア原虫、ネズミバベシア、ブルセイトリパノソーマ、クルーズトリパノソーマ、ドノバンリーシュマニア、トキソプラズマ原虫およびブラジル鉤虫を含む。
【０１９４】
上記方法の全てにおいて、ＰＤ−Ｌ１遮断を、腫瘍抗原の強化された提示のために提供されるサイトカイン処置(例えば、インターフェロン、ＶＥＧＦ活性またはＶＥＧＦ−受容体を標的とする薬剤、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＩＬ−２)または二重特異性抗体治療のような他の形態の免疫治療と組み合わせ得る(例えば、Holliger, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90：6444−6448(1993);Poljak, Structure, 2：1121−1123(1994)参照)。
【０１９５】
自己免疫性反応
大環状ペプチドは自己免疫応答を誘発および増幅する。実際、腫瘍細胞およびペプチドワクチンを使用した抗腫瘍応答の誘発は、多くの抗腫瘍応答が抗自己反応性を含むことを明らかにする(van Elsas et al., supraにおける抗ＣＴＬＡ−４＋ＧＭ−ＣＳＦ修飾Ｂ１６黒色腫で観察される色素脱失；Ｔｒｐ−２ワクチン接種マウスにおける色素脱失(Overwijk, W. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 96：2982−2987(1999))；ＴＲＡＭＰ腫瘍細胞ワクチンにより誘発される自己免疫性前立腺炎(Hurwitz, A., supra(2000))、ヒト臨床試験において見られる黒色腫ペプチド抗原ワクチン接種および白斑症(Rosenberg, S.A. et al., J. Immunother. Emphasis Tumor Immunol., 19(1)：81−84(1996))。
【０１９６】
それゆえに、疾患処置のために、種々の自己タンパク質を、これらの自己タンパク質に対する免疫応答を効果的に生じさせるためのワクチン接種プロトコルを考案するために、抗ＰＤ−Ｌ１遮断と組み合わせて使用することを考慮することが可能である。例えば、アルツハイマー病は、脳内のアミロイド沈着物へのＡβペプチドの不適切な蓄積が原因であり、アミロイドに対する抗体応答が、これらのアミロイド沈着物を排除できる(Schenk et al., Nature, 400：173−177(1999))。
【０１９７】
他の自己タンパク質は、アレルギーおよび喘息の処置のためのＩｇＥおよびリウマチ性関節炎のためのＴＮＦアルファのような標的としても使用し得る。最後に、種々のホルモンに対する抗体応答は、本明細書に開示する大環状分子の使用により誘発され得る。生殖性ホルモンの抗体応答中和を避妊のために使用し得る。ホルモンおよび特定の腫瘍の増殖に必要である他の可溶性因子に対する抗体応答の中和は、可能性のあるワクチン接種標的としても考慮し得る。
【０１９８】
抗ＰＤ−Ｌ１大環状分子の使用について上記したものと類似する方法を、アルツハイマー病におけるＡβを含むアミロイド沈着物、ＴＮＦアルファおよびＩｇＥのようなサイトカインのような他の自己抗原の不適切な沈着を有する患者の治療的自己免疫応答誘発のために使用できる。
【０１９９】
ワクチン
大環状ペプチドを、抗ＰＤ−１大環状分子と目的の抗原(例えば、ワクチン)の共投与により抗原特異的免疫応答を刺激するために使用し得る。従って、他の面において、本発明は、対象における抗原に対する免疫応答を増強する方法であって、対象に(ｉ)抗原；および(ii)対象における抗原に対する免疫応答が増強されるような抗ＰＤ−１大環状分子を投与することを特徴とする、方法が提供される。抗原は、例えば、腫瘍抗原、ウイルス抗原、細菌抗原または病原体からの抗原であり得る。このような抗原の非限定的例は、上記の腫瘍抗原(または腫瘍ワクチン)または上記のウイルス、細菌または他の病原体からの抗原を含む。
【０２００】
インビボおよびインビトロで本発明の組成物(例えば、大環状ペプチド、多特異性および二重特異性分子およびイムノコンジュゲート)を投与するための適切な経路は、当分野で周知であり、当業者が選択できる。例えば、組成物は注射(例えば、静脈内または皮下)により投与できる。使用する分子の適切な投与量は、対象の年齢および体重および組成物の濃度および／または製剤に依拠する。
【０２０１】
先に記戴するとおり本発明の大環状ペプチドを１種以上の他の治療剤、例えば、細胞毒性剤、放射性毒性薬物または免疫抑制剤と共投与し得る。ペプチドを薬剤に連結でき(免疫複合体として)または別々に薬剤から投与できる。後者(別々の投与)の場合、ペプチドを他の既知治療、例えば、抗癌治療、例えば、放射線の前に、後にまたは同時に投与してもよく、または共投与してよい。このような治療剤は、とりわけ、抗新生物剤、例えばドキソルビシン(アドリアマイシン)、シスプラチンブレオマイシンスルフェート、カルムスチン、クロラムブシル、ダカルバジンおよびシクロホスファミドヒドロキシ尿素を含み、これらは、それら自体、患者に毒性であるか、または準毒性である濃度でしか有効ではない。シスプラチンは、４週毎に１００mg／投与で静脈内投与し、アドリアマイシンは２１日毎に６０〜７５mg／ml投与量で静脈内投与する。本発明の大環状ペプチドと化学療法剤の共投与は、ヒト腫瘍細胞に対する細胞毒性効果を生じる異なる作用機序で働く２種の抗癌剤を提供する。このような共投与は、ペプチドに対して非反応性とし得る薬剤に対する耐性の発生または腫瘍細胞の抗原性の変化による問題を解決し得る。
【０２０２】
また本発明の範囲内に包含されるのは、本発明の組成物(例えば、大環状ペプチド、二重特異性または多特異性分子または免疫コンジュゲート)および使用のための指示書を含むキットである。キットは、さらに少なくとも１種のさらなる薬または１以上のさらなる本発明の大環状ペプチド(例えば、大環状分子と異なるＰＤ−Ｌ１抗原におけるエピトープと結合する相補的活性を有するヒト抗体)を含み得る。キットは、キットの中身の意図される使用を示すラベルを一般的には含む。ラベルなる用語は、キット上にまたはキットと共に提供されるか、または他の方法でキットに付属するあらゆる書面または記録媒体を含む。
【０２０３】
組み合わせ治療
本発明の大環状ペプチドと他のＰＤ−Ｌ１アンタゴニストおよび／または別の免疫修飾剤の組み合わせは、過増殖性疾患に対する免疫応答の増強に有用である。例えば、これらの分子を、インビトロまたはエクスビボで培養中の細胞またはヒト対象に、例えばインビボで投与して、多様な状況における免疫を増強する。したがって、一つの面において、本発明は、本発明の大環状ペプチドを、対象における免疫応答が修飾されるように対象に投与することを特徴とする、対象における免疫応答を修飾する方法を提供する。好ましくは、応答は、増強、刺激または上方制御される。他の態様において、本発明は、対象に本発明の大環状ペプチドおよび別の免疫修飾剤の治療以下の投与量を投与することを特徴とする、免疫刺激性治療剤での過増殖性疾患の処置と関係する有害事象を変える方法を提供する。
【０２０４】
大環状ペプチドによるＰＤ−Ｌ１の遮断は、患者における癌細胞に対する免疫応答を増強できる。本発明の大環状ペプチドを使用して増殖を阻害し得る癌は、典型的に免疫治療に応答性の癌を含む。本発明の組み合わせ治療での処置のための癌の代表例は、黒色腫(例えば、転移悪性黒色腫)、腎臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸癌および肺癌を含む。本発明の方法で処置し得る他の癌の例は、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部癌、皮膚または眼内悪性黒色腫、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門部癌、胃癌、精巣癌、子宮癌、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膣癌、外陰癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、食道癌、小腸癌、内分泌系癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟組織肉腫、尿道癌、陰茎癌、急性骨髄球性白血病、慢性骨髄球性白血病、急性リンパ球性白血病、慢性リンパ性白血病を含む慢性または急性白血病、小児固形腫瘍、リンパ性リンパ腫、膀胱癌、腎臓または輸尿管癌、腎盂癌、中枢神経系(ＣＮＳ)新生物、一次ＣＮＳリンパ腫、腫瘍血管形成、脊髄軸椎腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、カポジ肉腫、類表皮癌、扁平上皮細胞癌、Ｔ細胞リンパ腫、アスベストにより誘発される疾患を含む環境誘発性の癌およびこれらの癌の組み合わせを含む。本発明は転移癌の処置にも有用である。
【０２０５】
ある態様において、本明細書に開示する大環状ペプチドの少なくとも１個を含む治療剤の組み合わせを、医薬的に許容される担体中の単一組成物として同時に、または各薬剤を連続的に投与する別々の組成物として一緒に投与し得る。例えば、第二の免疫修飾剤および本発明の大環状ペプチドを、第二の免疫修飾剤を最初に投与し、大環状ペプチドを２番目に投与するか、または大環状ペプチドを最初に投与し、第二の免疫修飾剤を２番目に投与するように、逐次的に投与できる。さらに、１投与量を超える組み合わせ治療を逐次的に投与するならば、逐次投与の順番は各投与時に逆転しても同じ順番でもよく、逐次投与を同時投与またはその任意の組み合わせと組み合わせてもよい。例えば、第二の免疫修飾剤および大環状ペプチドの最初の投与は同時であってよく、２回目の投与は第二の免疫修飾剤が最初で大環状ペプチドが２番目の逐次であってよく、３回目の投与は大環状ペプチドが最初で第二の免疫修飾剤が２回目などであってよい。他の代表的投与スキームは、大環状ペプチドが最初で第二の免疫修飾剤が２番目である最初の投与を含んでよく、その後の投与は同時であってもよい。
【０２０６】
所望により、大環状ペプチドと第二の免疫修飾剤の組み合わせを、さらに免疫原性剤、例えば、癌細胞、精製腫瘍抗原(組み換えタンパク質、ペプチドおよび炭水化物分子を含む)、細胞および免疫刺激サイトカインをコードする遺伝子でトランスフェクトした細胞と組み合わせて投与し得る(He et al., J. Immunol., 173：4919−4928(2004))。使用できる腫瘍ワクチンの非限定的例は、黒色腫抗原のペプチド、例えばｇｐ１００、ＭＡＧＥ抗原、Ｔｒｐ−２、ＭＡＲＴ１および／またはチロシナーゼのペプチドまたはサイトカインＧＭ−ＣＳＦを発現するようにトランスフェクトした腫瘍細胞(さらに下に開示)を含む。
【０２０７】
組み合わせたＰＤ−Ｌ１大環状ペプチドと第二の免疫修飾剤は、さらにワクチン接種プロトコルと組み合わせ得る。腫瘍に対するワクチン接種のための多くの実験的戦略が考案されている(Rosenberg, S., Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring：60−62(2000); Logothetis, C., ASCO Educational Book Spring：300−302(2000); Khayat, D., ASCO Educational Book Spring：414−428(2000); Foon, K., ASCO Educational Book Spring：730−738(2000); see also Restifo et al., Cancer Vaccines, Chapter 61, pp. 3023−3043 in DeVita et al., eds., Cancer：Principles and Practice of Oncology, Fifth Edition(1997)参照)。これらの戦略の一つにおいて、ワクチンを、自己または同種腫瘍細胞を使用して製造する。これらの細胞性ワクチンは、腫瘍細胞がＧＭ−ＣＳＦを発現するように形質導入された時に、最も有効であることが示されている。ＧＭ−ＣＳＦは、腫瘍ワクチン接種のための抗原提示の強力なアクティベーターであることが示されている(Dranoff et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90：3539−3543(1993))。
【０２０８】
種々の腫瘍における遺伝子発現および大規模遺伝子発現パターンの研究により、いわゆる腫瘍特異的抗原の定義が導かれている(Rosenberg, Immunity, 10：281−287(1999))。多くの場合、これらの腫瘍特異的抗原は、腫瘍および腫瘍が生じた細胞に発現される分化抗原、例えばメラニン形成細胞抗原ｇｐ１００、ＭＡＧＥ抗原およびＴｒｐ−２である。より重要なことに、これらの抗原の多くは、宿主に見られる腫瘍特異的Ｔ細胞の標的であり得ることが示されている。ある態様において、本明細書に記戴する抗体組成物を使用する組み合わせたＰＤ−Ｌ１大環状ペプチドと第二の免疫修飾剤を、これらのタンパク質に対する免疫応答を誘起させるために、腫瘍において発現されている組み換えタンパク質および／またはペプチドのコレクションと共に使用し得る。これらのタンパク質は、通常自己抗原として免疫系により監視されているため、それらに耐容性である。腫瘍抗原は、染色体のテロメアの合成に必要とされるタンパク質テロメラーゼも含んでよく、これは８５％を超えるヒトの癌で発現され、体性組織ではわずかな限られた数である(Kim et al., Science, 266：2011−2013(1994))(これらの体性組織は、種々の手段により免疫攻撃から保護され得る)。腫瘍抗原は、タンパク質配列を変異させるか、または２個の非関連配列の融合タンパク質を創製する(すなわち、フィラデルフィア染色体におけるｂｃｒ−ａｂｌ)体性変異ために癌細胞で発現される“新抗原”であるか、あるいはＢ細胞腫瘍由来のイディオタイプであってもよい。
【０２０９】
他の腫瘍ワクチンは、ヒトパピローマウイルス(ＨＰＶ)、肝炎ウイルス(ＨＢＶおよびＨＣＶ)およびカポジヘルペス肉腫ウイルス(ＫＨＳＶ)のようなヒトの癌と関係するウイルスからのタンパク質を含み得る。ＰＤ−Ｌ１大環状ペプチド遮断と組み合わせて使用し得る腫瘍特異的抗原の他の形態は、腫瘍組織それ自体から単離した精製熱ショックタンパク質(ＨＳＰ)である。これらの熱ショックタンパク質は、腫瘍細胞由来のタンパク質フラグメントを含んでおり、これらのＨＳＰは、腫瘍免疫を賦活させために抗原提示細胞への送達効率が高い(Suot et al., Science, 269：1585−1588(1995); Tamura et al., Science, 278：117−120(1997))。
【０２１０】
樹状細胞(ＤＣ)は、主要抗原特異的応答に使用できる強力な抗原提示細胞である。ＤＣはエクスビボで産生でき、種々のタンパク質およびペプチド抗原ならびに腫瘍細胞抽出物を積載できる(Nestle et al., Nat. Med., 4：328−332(1998))。ＤＣは、これらの腫瘍抗原を同様に発現するために遺伝的手段によっても形質導入され得る。またＤＣは、免疫化の目的で腫瘍細胞と直接融合されている(Kugler et al., Nat. Med., 6：332−336(2000))。ワクチン接種の方法として、ＤＣ免疫化は、強力な抗腫瘍応答を活性化するために、組み合わせた抗ＰＤ−Ｌ１大環状ペプチドと第二の免疫修飾剤とを効果的に組み合わせ得る。
【０２１１】
抗ＰＤ−Ｌ１大環状ペプチドと別の免疫修飾剤の組み合わせは、さらに標準的な癌の治療とも組み合わせ得る。例えば、組み合わせ大環状ペプチドおよび第二の免疫修飾剤は、化学療法レジメンと効果的に組み合わせ得る。これらの場合、大環状ペプチドおよび第二の免疫修飾剤の組み合わせで見られるとおり、本発明の組み合わせと共に投与する他の化学療法剤の量を減らすことが可能であり得る(Mokyr et al., Cancer Res., 58：5301−5304(1998))。このような組み合わせの例は、黒色腫の処置のためにダカルバジンとさらに組み合わせた大環状ペプチドと第二の免疫修飾剤の組み合わせである。他の例は、黒色腫の処置のためにインターロイキン−２(ＩＬ−２)とさらに組み合わせた大環状ペプチドと第二の免疫修飾剤の組み合わせである。ＰＤ−Ｌ１大環状ペプチドおよび別の免疫調節剤と化学療法の組み合わせ使用の背景にある科学的原理は、殆どの化学療法化合物の細胞毒性活性の結果である細胞死が、抗原提示経路における腫瘍抗原のレベルの増加をもたらすことが理由である。細胞死により抗ＰＤ−Ｌ１大環状ペプチドと別の免疫修飾剤との組み合わせが、相乗作用をもたらし得る別の組み合わせ治療は、放射線、手術およびホルモン欠乏である。これらのプロトコルのいずれも、宿主における腫瘍抗原の供給源を創製する。血管形成阻害剤は、組み合わせたＰＤ−Ｌ１と第二の免疫修飾剤と組み合わされてもよい。血管形成阻害は、宿主抗原提示経路中に腫瘍抗原を供給し得る腫瘍細胞死を生じる。
【０２１２】
ＰＤ−Ｌ１と別の免疫修飾剤の組み合わせは、ＦｃアルファまたはＦｃガンマ受容体発現エフェクター細胞を腫瘍細胞への標的とする二重特異性大環状ペプチドと組み合わせても使用できる(例えば、米国特許番号５,９２２,８４５および５,８３７,２４３参照)。二重特異性大環状ペプチドを使用して、２つの別々の抗原を標的とし得る。例えば、抗Ｆｃ受容体／抗腫瘍抗原(例えば、Ｈｅｒ−２／ｎｅｕ)二重特異性大環状ペプチドは、マクロファージを腫瘍の部位に標的化させるのに使用されている。このターゲティングは、腫瘍特異的応答をさらに効果的に活性化し得る。これらの応答のＴ細胞アームは、組み合わせたＰＤ−１と第二の免疫修飾剤の使用により増強される。あるいは、抗原を、腫瘍抗原および樹状細胞特異的細胞表面マーカーに結合する二重特異性大環状ペプチドの使用により、ＤＣに直接送達させ得る。
【０２１３】
他の例において、大環状ペプチドと第二の免疫修飾剤の組み合わせを、抗新生物大環状財、例えばリツキサン(登録商標)(リツキシマブ)、ハーセプチン(登録商標)(トラスツマブ)、ベキサール(登録商標)(トシツモマブ)、ゼヴァリン(登録商標)(イブリツモマブ)、キャンパス(登録商標)(アレムツズマブ)、リンホシド(Lymphocide)(エプラツズマブ)、アバスチン(登録商標)(ベバシズマブ)およびタルセバ(登録商標)(エルロチニブ)などと組み合わせ得る。例として、理論に縛られることを望まないが、抗癌抗体または毒素とコンジュゲートした抗癌抗体を用いる処置は、癌細胞死(例えば、腫瘍細胞)を起こし得て、これは、第二の免疫修飾剤または大環状ペプチドが介在する免疫応答を増強する。例示的態様において、過増殖性疾患(例えば、癌性腫瘍)の処置は、大環状ペプチドおよび第二の免疫修飾剤と同時または逐次的またはその任意の組み合わせにて組み合わせた抗癌抗体を含み、宿主による抗腫瘍免疫応答を増強し得る。
【０２１４】
腫瘍は、多種多様な機構により宿主免疫監視を逃れる。これらの機構の多くは、腫瘍により発現され、免疫抑制性であるタンパク質の不活性化により克服され得る。これらは、特にＴＧＦ−ベータ(Kehrl, J. et al., J. Exp. Med., 163：1037−1050(1986))、ＩＬ−１０(Howard, M. et al., Immunology Today, 13：198−200(1992))およびＦａｓリガンド(Hahne, M. et al., Science, 274：1363−1365(1996))を含む。別の例において、これらの各々に対する抗体を、大環状ペプチドおよび別の免疫修飾剤とさらに組み合わせて、免疫抑制性剤の効果を抑制して、宿主による腫瘍免疫応答を促進することができる。
【０２１５】
宿主免疫応答性を活性化するために使用し得る他の薬剤を、本発明の大環状ペプチドとさらに組み合わせて使用できる。これらは、ＤＣ機能および抗原提示を活性化する樹状細胞の表面上の分子を含む。抗ＣＤ４０大環状ペプチドは、Ｔ細胞ヘルパー活性を効果的に代理でき(Ridge, J. et al., Nature, 393：474−478(1998))、本発明の大環状ペプチドと併せて、単独で、または抗ＣＴＬＡ−４と組み合わせて使用できる(Ito, N. et al., Immunobiology, 201(5)：527−540(2000))。ＯＸ−４０(Weinberg, A. et al., Immunol., 164：2160−2169(2000))、４−１ＢＢ(Melero, I. et al., Nat. Med., 3：682−685(1997)およびＩＣＯＳ(Hutloff, A. et al., Nature, 397：262−266(1999))のようなＴ細胞同時刺激分子に対する大環状ペプチドの活性化は、Ｔ細胞活性化のレベル増加のために提供され得る。
【０２１６】
骨髄移植は、造血起源の多様な腫瘍の処置のために現在使用されている。移植片対宿主病は、この処置の結果ではあるが、治療的利点を、移植片対腫瘍応答から得ることができる。本発明の大環状ペプチドは、単独でまたは免疫修飾剤と組み合わせて、ドナー生着腫瘍特異的Ｔ細胞の効果を増加させるために使用できる。
【０２１７】
抗原特異的Ｔ細胞を腫瘍に向けさせるために、抗原特異的Ｔ細胞のエクスビボ活性化および増大ならびにこれらの細胞のレシピエントへの養子移植が関与するいくつかの実験的処置プロトコルがある(Greenberg, R. et al., Science, 285：546−551(1999))。これらの方法は、ＣＭＶのような感染因子に対するＴ細胞応答の活性化にも使用し得る。本発明の大環状ペプチド単独または別の免疫調節剤との組み合わせの存在下でのエクスビボ活性化は、養子移入されたＴ細胞の頻度および活性を高めることが期待され得る。
【０２１８】
ある態様において、本発明は、対象に本発明の大環状ペプチドを別の免疫調節剤の治療以下の投与量と組み合わせて投与することを特徴とする、免疫刺激剤での過増殖性疾患の処置と関係する有害事象を変更する方法を提供する。例えば、本発明の方法は、患者に非吸収性ステロイドを投与することにより、免疫刺激性の治療抗体誘発性大腸炎または下痢の発生率を減少させる方法を提供する。免疫刺激性の治療抗体を受けているあらゆる患者が、このような処置により誘発される大腸炎または下痢のリスクがあるため、この全患者集団が、本発明の方法に従う治療に適する。ステロイド類は炎症性腸疾患(ＩＢＤ)の処置およびＩＢＤの悪化予防に投与されているが、ＩＢＤと診断されていない患者におけるＩＢＤの予防(発生率の減少)には使用されていない。非吸収性ステロイド類でさえ、ステロイド類が関与する相当な副作用により、予防的使用が阻まれてきた。
【０２１９】
さらなる態様において、本発明の大環状ペプチドは、単独または別の免疫調節剤と組み合わせて、非吸収性ステロイドのいずれかの使用とさらに組み合わせ得る。本明細書において使用する“非吸収性ステロイド”は、肝臓での代謝後のステロイドのバイオアベイラビリティが低い(すなわち、約２０％未満)相当な初回通過代謝を示すグルココルチコイドである。本発明の一つの態様において、非吸収性ステロイドはブデソニドである。ブデソニドは局所作用性グルココルチコステロイドであり、経口投与後、主に肝臓により相当代謝される。エントコート(登録商標)ＥＣ(Astra−Zeneca)は、回腸および結腸全体への薬物送達を最適化するよう開発されたブデソニドのｐＨおよび時間依存型経口製剤である。エントコート(登録商標)ＥＣは、回腸および／または上行結腸が関与する軽度から中程度のクローン病の処置について米国で承認されている。クローン病処置のためのエントコート(登録商標)ＥＣの通常の経口投与量は６〜９mg／日である。エントコート(登録商標)ＥＣは吸収される前に腸で吸収され、腸粘膜に保持される。腸粘膜標的組織を通過したら、エントコート(登録商標)ＥＣは、肝臓のチトクロムＰ４５０系で、無視できるグルココルチコイド活性を有する代謝物にまで殆ど代謝される。それゆえに、バイオアベイラビリティは低い(約１０％)。ブデソニドの低いバイオアベイラビリティは、初回通過代謝の程度が低い他のグルココルチコイドと比較して治療指数が改善されている。ブデソニドは、その結果全身作用性コルチコステロイドよりも少ない視床下部−下垂体抑制を含み、副作用が少ない。しかしながら、エントコート(登録商標)ＥＣの慢性投与は、副腎皮質ホルモン過剰症および副腎抑制のような全身性グルココルチコイド効果を生じ得る。Physicians' Desk Reference Supplement, 58th Edition, 608−610(2004)を参照されたい。
【０２２０】
さらなる態様において、組み合わせたＰＤ−Ｌ１と別の免疫調節剤と非吸収性ステロイドの組み合わせを、さらにサリチレートと組み合わせ得る。サリチレートは、５−ＡＳＡ剤、例えばスルファサラジン(アザルフィジン(登録商標), Pharmacia & Upjohn)；オルサラジン(DIPENTUM(登録商標)、Pharmacia & Upjohn)；バルサラジド(COLAZAL(登録商標) , Salix Pharmaceuticals, Inc.)；およびメサラミン(アサコール(登録商標), Procter & Gamble Pharmaceuticals；ペンタサ(登録商標), Shire US；CANASA(登録商標), Axcan Scandipharm, Inc.；ROWASA(登録商標), Solvay)を含む。
【０２２１】
投与量および製剤
適切な式Ｉのペプチドまたはより具体的に本明細書に記戴する大環状ペプチドを、化合物の単独および/または許容される担体との混合物で医薬製剤の形態で糖尿病および他の関連疾患の処置のために患者に投与できる。糖尿病処置の当業者は、このような処置を必要とするヒトを含む哺乳動物への化合物の投与量および投与経路を容易に決定できる。投与経路は、経口、口腔内、直腸、経皮、バッカル、鼻腔内、肺、皮下、筋肉内、皮内、舌下、結腸内、眼内、静脈内または腸管投与を含むが、これらに限定されない。化合物を、認可された調剤行為に基づき、投与経路に従って製剤する(Fingl et al., in The Pharmacological Basis of Therapeutics, Chapter 1, p.1(1975); Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, Mack Publishing Co., Easton, PA(1990))。
【０２２２】
本明細書に記戴する医薬的に許容されるペプチド組成物を、錠剤、カプセル剤(この各々は徐放性または持効性製剤を含む)、丸剤、粉末剤、顆粒剤、エリキシル剤、インサイチュゲル剤、マイクロスフェア剤、結晶複合体、リポソーム剤、マイクロエマルジョン剤、チンキ剤、懸濁液剤、シロップ剤、エアロゾルスプレー剤およびエマルジョン剤のような多種の投与形態で投与できる。本明細書に記戴する組成物は、経口、静脈内(ボーラスまたは点滴)、腹腔内、皮下、経皮または筋肉内形態でも投与でき、全て医薬分野で当業者に周知の投与形態を使用する。組成物は単独で投与してよいが、一般に選択した投与経路および標準的薬務に基づき選択した医薬担体と共に投与する。
【０２２３】
本明細書に記戴する組成物の投与レジメンは、当然、特定の薬剤の薬力学的特徴およびその投与方法および投与経路；受け手の種、年齢、性別、健康状態、医学的状態および体重；症状の性質および程度；同時処置の種類；処置頻度；投与経路、患者の腎臓および肝臓機能および望む効果により変わる。医師または獣医師は、疾患状態の予防、対抗または進行停止に必要な薬物の有効量を決定し、処方できる。
【０２２４】
一般的な指標として、活性成分の１日経口投与量は、目的とする効果のために使用するとき、１日あたり約０.００１〜１０００mg／kg体重、好ましくは約０.０１〜１００mg／kg体重、最も好ましくは約０.６〜２０mg／kg／日の範囲である。静脈内で、活性成分の１日投与量は、目的とする効果のために使用するとき、一定速度の点滴の間で０.００１ng〜１００.０ng／分／Kg体重の範囲である。このような定速静脈内点滴は、好ましくは０.０１ng〜５０ng／分／Kg体重で、最も好ましくは０.０１ng〜１０.０mg／分／Kg体重で投与できる。本明細書に記戴する組成物を、１日に単回にて投与してよく、または総１日投与量を１日に２回、３回または４回に分けて投与してよい。本明細書に記戴する組成物は、所望により日／週／月の期間にわたり薬物の徐放が可能なデポー製剤でも投与できる。
【０２２５】
本明細書に記戴する組成物は、適切な鼻腔内媒体を使用する局所使用で鼻腔内形態または経皮皮膚パッチを使用して経皮経路で投与できる。経皮送達系の形で投与するとき、この投与量の投与は、当然、投与レジメンの期間中、間欠性ではなくむしろ連続的である。
【０２２６】
組成物は、典型的に、経口錠剤、カプセル、エリキシル、噴射剤を用いてまたは用いずに製造したエアロゾルスプレーおよびシロップである意図する投与形態を参酌し、慣用の薬務に一致して適切に選択した適切な医薬希釈剤、添加物または担体(ここでは集合的に医薬担体と呼ぶ)との混合物で、投与する。
【０２２７】
例えば、錠剤またはカプセルの形態での経口投与において、活性薬物成分を、経口の、非毒性の医薬的に許容される不活性担体、例えば、これらに限定されないがラクトース、デンプン、スクロース、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、マンニトールおよびソルビトールと組み合わせることができる；液体経口での経口投与のためには、経口薬物成分を、エタノール、グリセロールおよび水のような、あらゆる経口の非毒性、医薬的に許容される不活性担体と組み合わせることができる。さらに、所望の場合または必要な場合には、適切な結合剤、滑沢剤、崩壊剤および着色剤を混合物に組み込んでもよい。適切な結合剤は、例えばデンプン、ゼラチン、グルコースまたはベータ−ラクトースなどの天然糖、トウモロコシ甘味剤、アカシア、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウムのような天然および合成ガム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコールおよび蝋を含むが、これらに限定されない。これらの投与形態で使用される滑沢剤は、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウムおよび塩化ナトリウムを含む。崩壊剤は、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイトおよびキサンタンゴムを含むが、これらに限定されない。
【０２２８】
本明細書に記戴する組成物は、混合ミセルまたはリポソーム送達系、例えば小分子単層リポソーム、大分子単層リポソームおよび多層リポソームの形でも投与できる。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンのような様々なリン脂質から製造できる。浸透エンハンサーを、薬物吸収を増強するために添加してよい。
【０２２９】
プロドラッグが、医薬組成物の多くの所望の品質を高めることが知られているため(すなわち、溶解度、バイオアベイラビリティ、製造など)、本明細書に記戴する化合物をプロドラッグ形態で送達されてもよい。それゆえに、本明細書に記戴する主題は、本願請求項の化合物のプロドラッグ、その送達方法およびそれを含む組成物を包含することを意図する。
【０２３０】
本明細書に記戴する組成物は、標的化可能薬物担体として可溶性ポリマーとも結合されてもよい。このようなポリマーは、ポリビニル−ピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピル−メタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノールまたはパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシド−ポリリシンを含み得る。さらに、本明細書に記戴する組成物を、薬物の制御放出を達成するために有用な生分解性ポリマー、例えば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸とポリグリコール酸のコポリマー、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアシレートおよびヒドロゲルの架橋または両親媒性ブロックコポリマーと組み合わせてもよい。
【０２３１】
投与に適する投与形態(医薬組成物)は、投与量単位あたり約０.０１mg〜約５００mgの活性成分を含む。これらの医薬組成物において、活性成分は、通常、組成物の総重量に基づき約０.５〜９５重量％の量で存在し得る。
【０２３２】
ゼラチンカプセルは、活性成分および粉末担体、例えばラクトース、デンプン、セルロース誘導体、ステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸を含み得る。類似の希釈剤を使用して圧縮錠剤を製造できる。錠剤およびカプセルのいずれも、長期間にわたる薬剤の連続的放出を提供するために徐放製品として製造できる。圧縮錠剤を、何らかの不快な味をマスクして、大気から錠剤を保護するために糖コーティングまたはフィルムコーティングまたは消化管での選択的崩壊のために腸溶性コーティングしてもよい。
【０２３３】
経口投与用の液体投与形態は、患者による許容性を高めるために着色剤および風味剤を含み得る。
【０２３４】
一般に、水、適切な油、食塩水、水性デキストロース(グルコース)および関連糖溶液およびプロピレングリコールまたはポリエチレングリコールのようなグリコールが、非経腸溶液のための適切な担体である。非経腸投与のための溶液は、好ましくは活性成分の水可溶性塩、適切な安定化剤および必要であれば、緩衝物質を含む。重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムまたはアスコルビン酸のような抗酸化剤は、単独でまたは組み合わせで、適切な安定化剤となる。また、クエン酸およびその塩およびナトリウムＥＤＴＡも使用される。さらに、非経腸溶液は、塩化ベンザルコニウム、メチル−またはプロピル−パラベンおよびクロロブタノールのような防腐剤を含み得る。
【０２３５】
適切な医薬担体は、この分野の標準的参考書であるRemington：The Science and Practice of Pharmacy, Nineteenth Edition, Mack Publishing Company(1995)に記戴されている。
【０２３６】
本明細書に記戴する化合物の投与のための代表的な有用な医薬投与形態は、次のとおり説明できる。
【０２３７】
カプセル
多数の単位カプセルを、１００mgの粉末活性成分、１５０mgのラクトース、５０mgのセルロースおよび６mgのステアリン酸マグネシウムを、標準的な２ピースの硬ゼラチンカプセルに注入することにより製造できる。
【０２３８】
軟ゼラチンカプセル
ダイズ油、綿実油またはオリーブ油のような消化可能油中の活性成分の混合物を製造し、ゼラチンに陽圧式排出ポンプにより注入して、１００mgの活性成分を含む軟ゼラチンカプセルを製造する。カプセルは、洗浄および乾燥されるべきである。
【０２３９】
錠剤
錠剤を、投与量単位が、例えば１００mgの活性成分、０.２mgのコロイド状二酸化ケイ素、５mgのステアリン酸マグネシウム、２７５mgの微結晶セルロース、１１mgのデンプンおよび９８.８mgのラクトースであるように、慣用の方法で製し得る。嗜好性を高めるため、または吸収を遅延するために適当なコーティングを施してよい。
【０２４０】
注射剤
本明細書に記戴するペプチド組成物の注射可能製剤は、規制機関により承認されているような添加物の使用を必要としても、または必要としない可能性がある。これらの添加物は、溶媒および共溶媒、可溶化、乳化または濃化剤、キレート剤、抗酸化剤および還元剤、抗微生物防腐剤、緩衝液およびｐＨ調節剤、充填剤、保護剤および張性調節剤および特殊な添加物を含むが、これらに限定されない。注射可能製剤は、無菌、無発熱物質、溶液の場合、無粒状物質でなければならない。
【０２４１】
注射による投与に適する非経腸組成物は、例えば、１.５重量％の活性成分を、医薬的に許容される緩衝液(共溶媒または他の添加物を含んでいても、含まなくてもよい)と撹拌することにより製造し得る。溶液は、塩化ナトリウムを用いて等張化し、滅菌されなければならない。
【０２４２】
本明細書、特に下記の代表的な実施例に使用した略語は、当業者には周知である。使用された幾つかの略語は、次の通りである：ヒドロキシベンゾトリアゾールとしてＨＯＢｔ；１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾールとしてＨＯＡｔ；Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミドとしてＤＩＣ；Ｏ−(ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸塩としてＨＢＴＵ；ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス(ジメチルアミノ)ホスホニウムヘキサフルオロリン酸塩としてＢＯＰ；(ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ)トリピロリジンピロリジノホスホニウムヘキサフルオロリン酸塩としてＰｙＢＯＰ；トリイソプロピルシランとしてＴＩＳまたはＴＩＰＳ；ジメチルスルホキシドとしてＤＭＳＯ；アセトニトリルとしてＭｅＣＮまたはＡＣＮ；ジクロロメタンとしてＤＣＭ；分としてｍｉｎ；Ｎ−メチルピロリジノンとしてＮＭＰ；時間としてｈ；室温または保持時間としてＲＴ(文脈に依存する)；酢酸エチルとしてＥｔＯＡｃ；９−フルオレニルメチルオキシカルボニルとしてＦＭＯＣ；アセテートとしてＯＡｃ；メタノールとしてＭｅＯＨ；トリフルオロ酢酸としてＴＦＡ；エチルとしてＥｔ；４−(Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ)ピリジンとしてＤＭＡＰ；１−エチル−３−(３−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミドとしてＥＤＣＩ；エタノールとしてＥｔＯＨ；ジエチルアミンとしてＤＥＡ；ジシクロヘキシルカルボジイミドとしてＤＣＣ；Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミドとしてＤＭＦ；酢酸エチルとしてＥｔＯＡｃ；ジイソプロピルエチルアミンとしてＤＩＥＡ；およびＯ−(７−アザベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸塩としてＨＡＴＵ。
【０２４３】
懸濁液
水性懸濁液を、例えば、各々５mLが１００mgの微粉化活性成分、２０mgのナトリウムカルボキシメチルセルロース、５mgの安息香酸ナトリウム、１.０gのソルビトール溶液、Ｕ.Ｓ.Ｐ.および０.０２５mLのバニリンまたは別の味の良い風味剤を含む、経口および／または非経腸投与用として製造できる。
【０２４４】
生分解性微粒子
注射による投与に適する徐放性非経腸組成物は、例えば、適切な生分解性ポリマーを溶媒に溶解し、活性剤をポリマー溶液に添加して導入し、溶媒をマトリクスから除去し、それによりマトリクス中に活性剤が分散したポリマーのマトリクスを形成させることにより製造され得る。
【０２４５】
ペプチド合成
基−Ｃ(Ｏ)ＮＨ−は、別段の記載が無ければ、２つの配向可能ないずれか(例えば、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ−または−ＮＨＣ(Ｏ)−)において、リンカーＸおよびＸ’内に配置され得ることが理解されよう。
【０２４６】
本明細書の記述は、化学結合の法則および原理に即して解釈されるべきである。本開示に含まれる化合物は、医薬剤として使用するために適切で安定なものであると理解されるべきである。例えば、式(Ｉ)の化合物中で、Ｘは１〜１７２個の原子の鎖であって、ここで前記原子は炭素および酸素から選択され、かつ前記鎖は、その中に組み込まれる−ＮＨＣ(Ｏ)ＮＨ−および−Ｃ(Ｏ)ＮＨ−から選択される１、２、３または４つの基を含有していてもよい；ここで前記鎖は、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、−ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−(ＣＨ２)ＣＯ２から独立して選択される１〜６つの基で所望により置換されていてもよく、これには、安定な分子であるとは考えられないような複数のヘテロ原子が互いに連結された化合物(即ち、−Ｏ−Ｏ−またはＯ−ＮＨＣ(Ｏ)ＮＨ−)が含まれないことは理解されるべきである。別の例においては、Ｘは、安定であるとは考えられないような２つのヘテロ原子が１つの炭素に拠ってのみ分離される化合物を含まない。当業者は、化学結合および安定性についての一般原理に基づいて、化合物が安定であるもの、および安定でないものを知っている。
【０２４７】
本発明の大環状ペプチドの化学合成は、段階的固相合成、配座的に支援される再ライゲーションを経るペプチドフラグメントの半合成、クローン化または合成ペプチドセグメントの酵素ライゲーションおよび化学ライゲーションを含めた様々な当該技術分野において承認されている方法を使用して合成できる。本明細書に記戴する大環状ペプチドおよびそのアナログの好ましい合成方法は、Chan, W.C. et al., eds., Fmoc Solid Phase Synthesis, Oxford University Press, Oxford(2000); Barany, G. et al., The Peptides：Analysis, Synthesis, Biology, Vol. 2：“Special Methods in Peptide Synthesis, Part A”, pp. 3−284, Gross, E. et al., eds., Academic Press, New York(1980)；およびStewart, J.M. et al., Solid−Phase Peptide Synthesis, 2nd Edition, Pierce Chemical Co., Rockford, IL(1984)に記戴されているような、種々の固相技術を使用する化学合成である。好ましいストラテジーは、α−アミノ基を一時的に保護するためのＦｍｏｃ(９−フルオレニルメチルメチル−オキシカルボニル)基と、アミノ酸側鎖を一時的に保護するためのｔｅｒｔ−ブチル基の組み合わせである(例えば、Atherton, E. et al., “The Fluorenylmethoxycarbonyl Amino Protecting Group”, in The Peptides：Analysis, Synthesis, Biology, Vol. 9："Special Methods in Peptide Synthesis, Part C", pp. 1−38, Undenfriend, S. et al., eds., Academic Press, San Diego(1987))。
【０２４８】
ペプチドは、不溶性ポリマー支持体(“樹脂”とも呼ぶ)上で段階的方法において、ペプチドのＣ末端から開始して合成できる。合成は、ペプチドのＣ末端アミノ酸を、アミドまたはエステル結合の形成を介して樹脂に付加することから開始する。これは、得られるペプチドをＣ末端のアミドまたはカルボン酸として、最終段階で遊離させ得る。
【０２４９】
Ｃ末端アミノ酸および合成に使用する全ての他のアミノ酸は、α−アミノ保護基が合成中に選択的に除去され得るように、特異的に保護されたα−アミノ基および側鎖官能基(存在するならば)を有することを必要とする。アミノ酸のカップリングを、活性エステルとしてそのカルボキシル基の活性化および樹脂に結合したＮ末端アミノ酸の非遮断α−アミノ基との反応により実施する。一連のα−アミノ基の脱保護およびカップリングを、全ペプチド配列が組立てられるまで繰り返す。次いで、通常、副反応を制限するための適当なスカベンジャーの存在下で、ペプチドを樹脂から遊離し、同時に側鎖官能性の脱保護を行う。得られたペプチドを最終的に逆相ＨＰＬＣで精製する。
【０２５０】
最終ペプチドの前駆体として必要なペプチジル−樹脂の合成は、市販の架橋ポリスチレンポリマー樹脂(Novabiochem, San Diego, CA; Applied Biosystems, Foster City, CA)を利用する。好ましい固体支持体は、Ｃ末端カルボキサミドのための４−(２',４'−ジメトキシフェニル−Ｆｍｏｃ−アミノメチル)−フェノキシアセチル−ｐ−メチルベンズヒドリルアミン樹脂(ＲｉｎｋアミドＭＢＨＡ樹脂)；９−Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ−Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ樹脂(Ｓｉｅｂｅｒアミド樹脂)；４−(９−Ｆｍｏｃ)アミノメチル−３,５−ジメトキシフェノキシ)バレリル−アミノメチル−Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ樹脂(ＰＡＬ樹脂)である。第一および後続するアミノ酸のカップリングは、夫々、ＤＩＣ／ＨＯＢｔ、ＨＢＴＵ／ＨＯＢｔ、ＢＯＰ、ＰｙＢＯＰから、あるいはＤＩＣ／６−Ｃｌ−ＨＯＢｔ、ＨＣＴＵ、ＤＩＣ／ＨＯＡｔまたはＨＡＴＵから製造されたＨＯＢｔ、６−Ｃｌ−ＨＯＢｔまたはＨＯＡｔ活性エステルを使用して達成できる。好ましい固体支持体は、保護ペプチドフラグメントの２−クロロトリチルクロライド樹脂および９−Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ−Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ樹脂(Ｓｉｅｂｅｒアミド樹脂)である。第一のアミノ酸の２−クロロトリチルクロライド樹脂への付加は、Ｆｍｏｃ保護アミノ酸とジクロロメタンおよびＤＩＥＡにおける樹脂との反応により最も良好に達成される。必要であれば、アミノ酸の溶解を促進するために少量のＤＭＦを添加してよい。
【０２５１】
本明細書に記戴するペプチドアナログの合成は、単または多チャネルペプチド合成器、例えばＣＥＭ Liberty Microwave合成器あるいはＰｒｅｌｕｄｅ(６チャネル)またはＳｙｍｐｈｏｎｙ(１２チャンネル)合成器(Protein Technologies, Inc.)を使用して実施できる。
【０２５２】
各ペプチドのためのペプチジル−樹脂前駆体を、任意の標準法を使用して、開裂および脱保護し得る(例えば、King, D.S. et al., Int. J. Peptide Protein Res., 36：255−266(1990)参照)。所望の方法は、水およびスカベンジャーとしてのＴＩＳ存在下のＴＦＡの使用である。典型的に、ペプチジル−樹脂をＴＦＡ／水／ＴＩＳ(９４：３：３、ｖ：ｖ：ｖ；１mL／１００mgのペプチジル樹脂)中、２〜６時間、室温で撹拌する。使用した樹脂を濾取し、ＴＦＡ溶液を濃縮または減圧下に乾燥する。得られた粗製ペプチドを、沈殿させて、Ｅｔ２Ｏで洗浄するか、または直接分取ＨＰＬＣで精製するためにＤＭＳＯまたは５０％酢酸水溶液に再溶解する。
【０２５３】
所望の純度のペプチドを、例えば、Watersモデル4000またはShimadzuモデルLC−8A液体クロマトグラフでの分取ＨＰＬＣを使用して精製し得る。粗製ペプチドの溶液を、YMC S5 ODS(２０×１００mm)カラムに充填し、いずれも０.１％ＴＦＡで緩衝化したＭｅＣＮの水溶液の直線グラジエントで、１４〜２０mL／分の流速を使用し、２２０nmでのＵＶ吸光度により溶離液をモニタリングしながら溶出する。精製ペプチドの構造をエレクトロスプレーＭＳ分析で確認できる。
【０２５４】
分析データ：
質量スペクトル分析法：“ＥＳＩ−ＭＳ(＋)”とは、ポジティブイオンモードで実施したエレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を示す；“ＥＳＩ−ＭＳ(−)”とは、ネガティブイオンモードで実施したエレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を示す；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋)”とは、ポジティブイオンモードで実施された高分解エレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を示す；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(−)”とは、ネガティブイオンモードで実施した高分解エレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を示す。検出された質量は、“ｍ/ｚ”単位表記に従って報告された。１０００より大きい精密質量を有する化合物は、二重電荷イオンまたは三重電荷イオンとして高頻度で検出された。
【０２５５】
高分解質量スペクトル分析法(ＨＲＭＳ)分析を、２５,０００で分解(最大高の半分で全幅, ＦＷＨＭ)にて操作するポジティブまたはネガティブエレクトロスプレーイオン化を用いてFourier Transform Orbitrap 質量分析(Exactive, Thermo Fisher Scientific, San Jose, CA)上で行なった。機器を、製造者仕様書に従って毎日校正を行い、質量精度の誤差＜５ｐｐｍを得た。オペレーティングソフトウェアであるXcaliburを使用して、理論的質量対電荷値を計算して、得られたデータを処理した。
【０２５６】
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：
カラム：Waters BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7μm 粒子；移動相Ａ：水(０.０５％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：アセトニトリル(０.０５％ＴＦＡを含む)；温度：５０℃；グラジエント：１分かけて２％Ｂ〜９８％Ｂ、次いで０.５分間９８％Ｂで保持；流量：０.８ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ。
【０２５７】
分析ＬＣＭＳ条件Ｃ：
カラム：Waters BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7μm 粒子；移動相Ａ：水(０.２％蟻酸および０.０１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：アセトニトリル(０.２％蟻酸および０.０１％ＴＦＡを含む)；温度：５０℃；グラジエント：２分間かけて２％Ｂ〜８０％Ｂ、０.１分かけて８０％Ｂ〜９８％Ｂ、次いで０.５分間９８％Ｂで保持；流量：０.８ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ。
【０２５８】
分析ＬＣＭＳ条件Ｄ：
カラム：Waters BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；温度：５０℃；グラジエント：３分かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで０.７５分間保持；流量：１.０ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ。
【０２５９】
分析ＬＣＭＳ条件Ｅ：
カラム：Waters BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；温度：５０℃；グラジエント：３分かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで０.７５分間保持；流量：１.１１ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ。
【０２６０】
分析ＨＰＬＣ条件Ｂ：
カラム：YMC Pack ODS−AQ 3um 150 x 4.6mm；移動相Ａ：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：アセトニトリル(０.１％ＴＦＡを含む)；温度：４０℃；グラジエント：１０〜４０分かけて１０％Ｂ〜１００％Ｂ；流速：１ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ。
【０２６１】
一般的方法：
Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：
全ての操作を、Ｐｒｅｌｕｄｅペプチド合成器(Protein Technologies)上でのオートメーション下で行った。全ての方法を、別段の記載が無ければ、底部フリットを取り付けた１０または４５ｍＬポリプロピレンチューブ内で行なった。このチューブは、チューブの底部と上部の双方を介してＰｒｅｌｕｄｅペプチド合成器に連結している。ＤＭＦおよびＤＣＭを、チューブの上部から加えて、チューブの側面を均等に洗い流した。残存試薬を、チューブ底部から加えて、フリットを通過させて、樹脂と接触させる。全ての溶液を、チューブの底部から除去した。“周期的攪拌”とは、底部フリットからのＮ２ガスの短いパルスを意味する；このパルスは、おおよそ５秒間継続させ、３０秒毎におこる。アミノ酸溶液を、通常は、調整してから３週間を過ぎて使用しない。ＨＡＴＵ溶液を、調整５日以内で使用する。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＨＣＴＵ＝２−(６−クロロ−１−Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウム；ＨＡＴＵ＝１−[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]−１Ｈ−１,２,３−トリアゾロ[４,５−ｂ]ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロリン酸塩；ＮＭＭ＝Ｎ−メチルモルホリン；Ｓｉｅｂｅｒ＝Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ、ここで“３−イルオキシ”は、ポリスチレン樹脂への結合性に関する位置およびタイプを説明する。使用した樹脂は、Ｓｉｅｂｅｒリンカー(窒素にてＦｍｏｃ−保護)を有するＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄポリマー(ポリスチレン)である；１００〜２００メッシュ、１％ＤＶＢ、０.７１ｍｍｏｌ/g ローディング。使用した一般的なアミノ酸は、下記に列挙した(側鎖保護基は括弧内部に示される)：Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−(Ｄ)−ｃｉｓ−Ｐｒｏ(４−ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−(Ｄ)−ｔｒａｎｓ−Ｐｒｏ(４−ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ。
【０２６２】
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ”の方法は、０.１００ｍｍｏｌのスケールで実施した実験を述べたもので、この場合のスケールは、樹脂に結合したＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定される。このスケールは、上記した約１４０ｍｇのＳｉｅｂｅｒ−Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ樹脂に対応している。全ての方法は、記戴した体積をスケールの倍数で調整することにより、０.１００ｍｍｏｌのスケールを超えて拡大できる。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、“樹脂膨潤方法”として下記に記載した樹脂膨潤方法により開始した。アミノ酸と第一級アミンＮ末端のカップリングには、下記に記載した“単カップリング方法”を用いた。アミノ酸と第二級アミンＮ末端とのカップリングには、以下に記述した“第二級アミンカップリング方法”を使用した。クロロアセチル基とペプチドのＮ末端とのカップリングは、下記の“クロロアセチルクロライドカップリング方法”または“クロロ酢酸カップリング方法”により説明される。
【０２６３】
樹脂膨潤方法：
ポリプロピレン固相反応容器(４０ｍＬ)に、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ Ｓｉｅｂｅｒ樹脂(１４０ｍｇ, ０.１００ｍｍｏｌ)を加えた。下記樹脂を、下記の通りに３回洗った(膨潤される)：反応容器に、ＤＭＦ(５.０ｍＬ)およびＤＣＭ(５.０ｍＬ)を加えて、この混合物に対して、１０分間反応容器の底部からのＮ２バブリングにより周期的に攪拌して、溶媒をフリットから排出した。
【０２６４】
単カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ, ５.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３または５分間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ, ５.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３または５分間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに５回連続して洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(４.０ｍＬ)を、容器上部を通して加えて、得られる混合物を、６０秒間周期的に攪拌して、該溶液をフリットから排出した。この反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ, ５.０ｍＬ，１０等量)を加えて、次いでＨＡＴＵまたはＨＣＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ, ５.０ｍＬ，１０等量)、最終的にＮＭＭ(ＤＭＦ中で０.８Ｍ，２.５ｍＬ，２０等量)を加えた。混合物を、６０分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液を、フリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(４.０ｍＬ)を容器上部から加えて、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、無水酢酸：ＤＩＥＡ：ＤＭＦの溶液(１０：１：８９ｖ/ｖ/ｖ，５.０ｍＬ)を加えた。混合物を、１０分間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(４.０ｍＬ)を、容器上部から加えて、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、次の工程に直接使用した。
【０２６５】
第二級アミンカップリング方法：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ v/v, ５.０ｍＬ)を加えた。混合物を３または５分間周期的に攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ, ５.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３または５分間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに５回連続して洗った：各洗いに対して、容器上部からＤＭＦ(４.０ｍＬ)を加えて、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，２.５ｍＬ，５等量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，２.５ｍＬ，５等量)、最後にＮＭＭ(ＤＭＦ中で０.８Ｍ，１.５ｍＬ，１２等量)を加えた。混合物を、３００分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液を、フリットから排出した。樹脂を、以下の通りに２回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(４.０ｍＬ)を、容器上部から加えて、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、無水酢酸：ＤＩＥＡ：ＤＭＦの溶液(１０：１：８９ｖ/ｖ/ｖ，５.０ｍＬ)を加えた。混合物を、１０分間周期的に攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(４.０ｍＬ)を、容器上部から加えて、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、次の工程に直接使用した。
【０２６６】
カスタムアミノ酸カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ, ５.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３または５分間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ, ５.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３分または５分間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに５回連続して洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(４.０ｍＬ)を、容器上部から加えて、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ, ０.５〜２.５ｍＬ，１〜５等量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ, ０.５〜２.５ｍＬ，１〜５等量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.８Ｍ，０.５〜１.５ｍＬ，４〜１２等量)を加えた。混合物を、６０分間〜６００分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液を、フリットから排出した。樹脂を、以下の通りに２回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を、容器上部から加えて、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、無水酢酸：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ溶液(１０：１：８９ v/v/v、５.０ｍＬ)を加えた。混合物を、１０分間周期的に攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。該樹脂を、下記の通りに４回連続的に洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(４.０ｍＬ)を、容器上部から加えて、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、次の工程に直接使用した。
【０２６７】
クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ v/v、５.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３分間周期的に攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，５.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３分間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに５回連続して洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(４.０ｍＬ)を、容器上部から加えて、得られる混合物を３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ＤＭＦ中においてＤＩＰＥＡ溶液(４.０ｍｍｏｌ, ０.６９９ｍＬ，４０等量)(３.０ｍＬ)およびクロロアセチルクロリド(２.０ｍｍｏｌ，０.１６０ｍＬ，２０等量)を加えた。混合物を、１２〜１８時間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに３回連続して洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(４.０ｍＬ)を、容器の上部から加えて、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＣＨ２Ｃｌ２(２.０ｍＬ)を容器の上部に加えて、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。
【０２６８】
クロロ酢酸カップリング方法Ａ：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ v/v、５.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３分間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ v/v、５.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３分間周期的に攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに５回連続して洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(４.０ｍＬ)を、容器上部を通して加えて、得られる混合物を３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)、クロロ酢酸(１.２ｍｍｏｌ，１１３ｍｇ, １２等量)およびＮ,Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド(１.２ｍｍｏｌ，０.１８７ｍＬ，１２等量)を加えた。混合物を、１２〜１８時間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに３回連続して洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(４.０ｍＬ)を容器の上部に加えて、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＣＨ２Ｃｌ２(２.０ｍＬ)を容器の上部に加えて、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。
【０２６９】
ＣＥＭ方法Ａ：
全ての操作を、ＣＥＭライブラリー・マイクロウェーブ・ペプチド合成器(CEM Corporation)でオートメーションの下で行った。全ての方法を、別段の記載が無ければ、ＣＥＭディスカバリーマイクロウェーブユニットに底部フリットを取り付けた３０または１２５ｍＬポリプロピレンチューブ内で行った。このチューブは、チューブの底部と上部の双方を介してＣＥＭリバティー合成器と連結している。ＤＭＦおよびＤＣＭは、チューブの上部および底部から加えられ、チューブの側面を均等に洗い流すことができる。全ての溶液を、上部から樹脂を移すことを除いて、チューブの底部から除去した。“周期的バブリング”とは、底部フリットからのＮ２ガスの短時間のバブリングをいう。アミノ酸溶液を、一般的には、調整してから３週間を超えて使用しない。ＨＡＴＵ溶液を、調整５日以内に使用する。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＨＣＴＵ＝２−(６−クロロ−１−Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウム；ＨＡＴＵ＝１−[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]−１Ｈ−１,２,３−トリアゾロ[４,５−ｂ]ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロリン酸塩；ＤＩＥＡ／ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン；Ｓｉｅｂｅｒ＝Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ、この場合“３−イルオキシ”は、ポリスチレン樹脂への結合性の位置およびタイプを説明している。使用した樹脂は、Ｓｉｅｂｅｒリンカー(窒素で保護されたＦｍｏｃ)を有するＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄポリマー(ポリスチレン)である；１００〜２００メッシュ、１％ＤＶＢ、０.７１ｍｍｏｌ/ｇローディング。用いた一般的なアミノ酸を、下記に列挙した(側鎖保護基は括弧内に示した)。
Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ。
【０２７０】
“ＣＥＭ方法Ａ”の方法は、０.１００ｍｍｏｌスケールで行なった実験であって、この場合のスケールは、樹脂に結合したＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定される。このスケールは、上記したＳｉｅｂｅｒ−Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ樹脂のおおよそ１４０ｍｇに対応している。全ての方法は、記戴した体積をスケールの倍数で調整することにより、０.１００ｍｍｏｌのスケールを超えて拡大できる。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、“樹脂膨潤方法”として下記に述べた樹脂膨潤方法を用いて開始した。アミノ酸と第一級アミンＮ末端のカップリングには、下記に記載した“単カップリング方法”を用いた。アミノ酸と第二級アミンＮ末端とのカップリングには、以下に記述した“第二級アミンカップリング方法”を使用した。クロロアセチル基とペプチドのＮ末端とのカップリングは、上記した“クロロアセチルクロライドカップリング方法”または“クロロ酢酸カップリング方法”により説明される。
【０２７１】
樹脂膨潤方法：
５０ｍＬポリプロピレンコニカルチューブに、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ Ｓｉｅｂｅｒ樹脂(１４０ｍｇ, ０.１００ｍｍｏｌ)を加えた。次いで、ＤＭＦ(７ｍＬ)を、このチューブに加えて、続いてＤＣＭ(７ｍＬ)を加えた。次いで、樹脂を、容器上部から反応容器に移した。この方法を、更に２回繰り返した。ＤＭＦ(７ｍＬ)を加えて、続いてＤＣＭ(７ｍＬ)を加えた。樹脂を、反応容器の底部から１５分間Ｎ２バブリングを用いて膨潤させ、溶媒をフリットから排出した。
【０２７２】
標準カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ, ５.０ｍＬ)の溶液を加えた。混合物を、３分間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ, ５.０ｍＬ)の溶液を加えた。混合物を、３分間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに３回連続して洗った：ＤＭＦ(７ｍＬ)により上部から洗い、ついでＤＭＦ(７ｍＬ)により底部から洗い、最終的にＤＭＦ(７ｍＬ)を用いて上部から洗った。この反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，２.５ｍＬ，５等量)を加えて、ＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.５Ｍ，１.０ｍＬ，５等量)およびＤＩＰＥＡ(ＮＭＰ中で２Ｍ, ０.５ｍＬ，１０等量)を加えた。混合物を、５０℃でカップリングされたＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを除いて、全てのアミノ酸についてＮ２バブリングにより５分間７５℃で混合して、反応溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに３回連続して洗った：ＤＭＦ(７ｍＬ)により上部から洗い、次いでＤＭＦ(７ｍＬ)により底部から洗い、最終的にＤＭＦ(７ｍＬ)を用いて、上部から洗う。この反応容器に、無水酢酸：ＤＩＥＡ：ＤＭＦの溶液(１０：１：８９ｖ/ｖ/ｖ，５.０ｍＬ)を加えた。混合物を、６５℃で２分間周期的に、次いで該溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに３回連続して洗った：ＤＭＦ(７ｍＬ)により上部から洗い、次いでＤＭＦ(７ｍＬ)により底部から洗い、最終的にＤＭＦ(７ｍＬ)を用いて上部から洗う。得られる樹脂を、次の工程に直接使用した。
【０２７３】
二重カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に加えて、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ, ５.０ｍＬ)の溶液を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ, ５.０ｍＬ)の溶液を加えた。混合物を、３分間周期的に攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに３回連続して洗った：ＤＭＦ(７ｍＬ)により上部から洗い、次いでＤＭＦ(７ｍＬ)により底部から洗い、最終的にＤＭＦ(７ｍＬ)を用いて上部から洗う。この反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ,２.５ｍＬ，５等量)、ＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.５Ｍ, １.０ｍＬ，５等量)およびＤＩＰＥＡ(ＮＭＰ中で２Ｍ, ０.５ｍＬ，１０等量)を加えた。この混合物を、５０℃でカップリングしたＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ以外の全てのアミノ酸について、７５℃で５分間Ｎ２バブリングにより混合して、反応溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに３回連続して洗った：ＤＭＦ(７ｍＬ)により上部から洗い、次いでＤＭＦ(７ｍＬ)により底部から洗い、最終的にＤＭＦ(７ｍＬ)を用いて上部から洗う。この反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，２.５ｍＬ，５等量)、ＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.５Ｍ，１.０ｍＬ，５等量)およびＤＩＰＥＡ(ＮＭＰ中で２Ｍ，０.５ｍＬ，１０等量)を加えた。この混合物を、５０℃でカップリングしたＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ以外の全てのアミノ酸について、７５℃で５分間、Ｎ２バブリングにより混合して、反応溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに３回連続して洗った：ＤＭＦ(７ｍＬ)により上部から洗い、次いでＤＭＦ(７ｍＬ)により底部から洗い、最終的にはＤＭＦ(７ｍＬ)を用いて上部から洗う。この反応容器に、無水酢酸：ＤＩＥＡ：ＤＭＦの溶液(１０：１：８９ｖ/ｖ/ｖ，５.０ｍＬ)を加えた。混合物を、６５℃で２分間周期的にバブリングして、次いで該溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに３回連続して洗った：ＤＭＦ(７ｍＬ)により上部から洗い、次いでＤＭＦ(７ｍＬ)により底部から洗い、最終的にＤＭＦ(７ｍＬ)を用いて上部から洗う。得られる樹脂を、次工程で直接使用した。
【０２７４】
カスタムアミノ酸カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ，５.０ｍＬ)を添加した。混合物を３分周期的に撹拌して、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ，５.０ｍＬ)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり３回連続して洗った：ＤＭＦ(７ｍＬ)により上部から洗い、次いでＤＭＦ(７ｍＬ)により底部から洗い、最終的にＤＭＦ(７ｍＬ)を用いて上部から洗う。この反応容器に、ＨＡＴＵ(２.５等量〜１０等量)を含有するアミノ酸溶液(１.２５ｍＬ〜５ｍＬ，２.５等量〜１０等量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＮＭＰ中２Ｍ，０.５ｍＬ〜１ｍＬ，２０等量)を加えた。この混合物を、２５℃〜７５℃で５分間〜２時間、Ｎ２バブリングにより混合して、次いで反応溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに３回連続して洗った：ＤＭＦ(７ｍＬ)により上部から洗い、次いでＤＭＦ(７ｍＬ)により底部から洗い、最終的にＤＭＦ(７ｍＬ)を用いて上部から洗う。この反応容器に、無水酢酸：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ/ｖ/ｖ，５.０ｍＬ)の溶液を加えた。この混合物を、６５℃で２分間、周期的にＮ２バブリングを行い、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおりに連続的に３回洗った：ＤＭＦ(７ｍＬ)により上部から洗い、次いでＤＭＦ(７ｍＬ)により底部から洗い、最終的にＤＭＦ(７ｍＬ)を用いて上部から洗う。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
【０２７５】
樹脂上でのＮ−メチル化(Turner, R. A.；Hauksson, N. E.；Gipe, J. H.；Lokey, R. S. Org. Lett. 2013, 15(19), 5012−5015)：
全ての操作を、別段の記載が無ければ手動により実施した。“樹脂上でのＮ−メチル化”の方法は、０.１００ｍｍｏｌのスケールで実施した実験を述べたもので、この場合のスケールは、ペプチドを作成するために使用された樹脂に結合したＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定される。このスケールは、この方法で使用したペプチドの量の直接的な測定に基づくものではない。この方法は、記戴した体積をスケールの倍数で調整することにより、０.１００ｍｍｏｌのスケールを超えて拡大できる。
【０２７６】
樹脂を、フリットを備えた２５ｍＬのシリンジに移した。この樹脂に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ, ５.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３分間撹拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。この樹脂を、ＤＭＦ(４.０ｍＬ)で３回洗った。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，４.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３分間撹拌して、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに６回連続的に洗った：３回ＤＭＦ(４.０ｍＬ)を加えて、得られる混合物を、３秒間撹拌して、該溶液を、フリットから排出して、ＤＣＭ(４.０ｍＬ)を３回加えて、得られる混合物を、３秒間撹拌して、その後該溶液をフリットから排出した。
【０２７７】
この樹脂を、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)およびエチルトリフルオロ酢酸(０.１１９ｍＬ，１.００ｍｍｏｌ)、１,８−ジアザビシクロ[５.４.０]ウンデカ−７−エン(０.１８１ｍＬ，１.２０ｍｍｏｌ)に懸濁した。混合物を６０分間シェーカー上に置いた。溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに６回連続的に洗った：３回ＤＭＦ(４.０ｍＬ)を加えて、得られる混合物を３秒間撹拌して、溶液を、フリットから排出し、その後ＤＣＭ(４.０ｍＬ)を３回添加して、得られる混合物を、３秒間振盪して、その後該溶液をフリットから排出した。樹脂を、乾燥ＴＨＦ(２.０ｍＬ)で３回洗い、あらゆる残留水を除去した。オーブン乾燥させた４.０ｍＬバイアル内に、乾燥４Åモレキュラー・シーブ(２０ｍｇ)、ＴＨＦ(１.０ｍＬ)、トリフェニルホスフィン(１３１ｍｇ，０.５００ｍｍｏｌ)を加えた。混濁溶液を、樹脂上に移して、イソプロピルアゾジカルボキシレート(０.０９７ｍＬ，０.５ｍｍｏｌ)をゆっくりと加えた。樹脂を１５分間振盪した。溶液を、フリットから排出して、樹脂を、乾燥ＴＨＦ(２.０ｍＬ)で３回洗って、あらゆる残留水を除去した。オーブン乾燥させた４.０ｍＬバイアル内に、ＴＨＦ(１.０ｍＬ)、トリフェニルホスフィン(１３１ｍｇ，０.５００ｍｍｏｌ)、乾燥４Åモレキュラー・シーブ(２０ｍｇ)を加えた。混濁溶液を、樹脂上に移して、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート(０.０９７ｍＬ，０.５ｍｍｏｌ)をゆっくりと加えた。樹脂を１５分間撹拌した。溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに６回連続的に洗った：３回ＤＭＦ(４.０ｍＬ)を加えて、得られる混合物を、３秒間振盪して、溶液をフリットから排出して、その後３回ＤＣＭ(４.０ｍＬ)を添加して、得られる混合物を３秒間振盪し、その後該溶液をフリットから排出した。
【０２７８】
この樹脂を、エタノール(１.０ｍＬ)およびＴＨＦ(１.０ｍＬ)に懸濁して、水素化ホウ素ナトリウム(３７.８ｍｇ, １.０００ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を、３０分間シェーカーで混合した。溶液を、フリットから排出して、樹脂を下記の通り連続して６回洗った：３回ＤＭＦ(４.０ｍＬ)を加えて、得られる混合物を、３秒間撹拌して、該溶液をフリットから排出して、その後３回ＤＣＭ(４.０ｍＬ)を加えて、得られる混合物を、３秒間振盪して、その後該溶液をフリットから排出した。
【０２７９】
包括的脱保護方法Ｂ：
全ての操作を、別段の記載が無ければ手動により実施した。“包括的脱保護法Ｂ”の方法は、０.１００ｍｍｏｌスケールで行った実験を述べたものであり、このスケールの場合、樹脂に結合したＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定される。この方法は、記戴した体積をスケールの倍数で調整することにより、０.１００ｍｍｏｌのスケールを超えて拡大できる。“脱保護溶液”を、トリフルオロ酢酸：トリイソプロピルシラン：ジチオスレイトール(９４：３：３ ｖ：ｖ：ｗ)を用いて製造した。樹脂を、反応容器から除去して、フリットを備えた２５ｍＬのシリンジに移した。このシリンジに“脱保護溶液”(５.０ｍＬ)を加えた。混合物を５分間シェーカーで混合した。溶液を、通過させて、ジエチルエーテル(３０ｍＬ)で希釈した。沈殿した固体を、３分間遠心分離した。上清溶液を傾捨して、固体をジエチルエーテル(２５ｍＬ)に再懸濁した。懸濁液を、３分間遠心分離した。上清溶液を傾捨して、残留固体を、ジエチルエーテル(２５ｍＬ)に懸濁した。懸濁液を、３分間遠心分離した。上清溶液を傾捨して、残留固体を、高真空下で乾燥させた。粗製ペプチドを、白色〜オフホワイトの固体として得た。
【０２８０】
環化方法Ｃ：
全ての操作を、別段の記載が無ければ手動により実施した。“環化方法Ｃ”の方法は、
０.１００ｍｍｏｌスケールで行った実験を述べたものであり、このスケールの場合、ペプチドを生成するために使用した樹脂に結合したＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定される。このスケールは、この方法で使用したペプチドの量の直接的な測定に基づくものではない。この方法は、記戴した体積をスケールの倍数で調整することにより、０.１００ｍｍｏｌのスケールを超えて拡大できる。粗ペプチド固体を、アセトニトリル：０.１Ｍアンモニウム炭酸水素塩緩衝水溶液(１１ｍＬ：２４ｍＬ)の溶液に溶解して、次いでこの溶液を、ＮａＯＨ水溶液(１.０Ｍ)を用いて注意深くｐＨ＝８.５〜９.０に調整した。次いで、溶液を、シェーカーを用いて１２〜１８時間混合した。反応溶液を、濃縮して、次いで、残留物をアセトニトリル：水に溶解した。この溶液を、逆相ＨＰＬＣ精製に付して、目的とする環状ペプチドを得た。
【０２８１】
実施例３２１４の製造
【化２８】
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実施例３２１４を、下記に述べた一般合成方法に従って製造した。
４０ｍＬポリプロピレン固相反応容器に、Ｓｉｅｂｅｒ樹脂(１４０ｍｇ, ０.１００ｍｍｏｌ)を加えて、反応容器をＰｒｅｌｕｄｅペプチド合成機器においた。次いで、下記方法を連続して実施した：
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”を行った；
Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨを用いて“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｇｌｕ(ＯｔＢｕ)−ＯＨを用いて“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて６時間、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｐｈｅ−ＯＨを用いて、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨを用いて６時間、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨを用いて、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−ｃｉｓ−(Ｄ)−Ｐｒｏ(４−ＯＨ)−ＯＨを用いて“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて６時間、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｐｈｅ−ＯＨを用いて６時間、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ(３,４,５−ｔｒｉ−Ｆ)−ＯＨを用いて、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法”に従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”を行った；
“包括的脱保護方法Ｂ”を行った；
“環化方法Ｃ”を行った。
【０２８２】
粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ／ＭＳにより精製した：カラム：Phenomenex Luna 20 x 250 5u 粒子；移動相Ａ：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：アセトニトリル(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：５０分かけて３５〜９５％Ｂ、次いで５分間９５％Ｂで保持；流量：１５ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は５.３ｍｇであり、３０分間かけて３５％〜８０％の緩衝液Ｂ／Ａのグラジエントを用いる“分析ＨＰＬＣ条件Ｂ”により、その推定純度は、８０％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.３３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０４.１(Ｍ＋２Ｈ)。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１０３．５０１９(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：１１０３．５０３４(Ｍ＋２Ｈ).
【０２８３】
実施例３２１５の製造
【化２９】
0006804442.tif 000030
実施例３２１４(４.７ｍｇ, ２.１３０μｍｏｌ)からの化合物を、０.４ｍＬのＤＭＦ/ＡＣＮ(１：１)に溶解した。ＤＩＥＡ(３.７２μl, ０.０２１ｍｍｏｌ)を加えて、次いでアレクサ−５−ＳＤＰエステル(２.９３ｍｇ, ３.５μｍｏｌ, Molecular Probes, A30052)/ＤＭＦ/ＣＨ３ＣＮ/ＤＭＳＯ(１：１：１)の溶液(０.９ｍＬ)を加えた。この反応溶液を、室温にて１６時間攪拌した。粗物質を、以下の条件を用いるプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：YMC ODS−AQ 100 x 10mm S 5um 12nm；移動相Ａ：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：アセトニトリル(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：５０分かけて２５〜７５％Ｂ、次いで７５％Ｂで５分間保持；流量：１５ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は０.７５ｍｇであり、３０分間かけて３５％〜６５％緩衝液Ｂのグラジエントを用いる“分析ＨＰＬＣ条件Ｂ”により、その推定純度は９６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３６２.５(Ｍ＋２Ｈ).
【０２８４】
実施例３６１９の製造
【化３０】
0006804442.tif 000031
実施例３６１９を、下記の一般的な合成手順に従って製造した。
５０ｍＬポリプロピレンチューブに、Ｓｉｅｂｅｒ樹脂(３５０ｍｇ, ０.２５０ｍｍｏｌ)を加えて、このチューブを、ＣＥＭライブラリーミクロウェーブペプチド合成器においた。次いで、以下の方法を順に実施した：
“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ−ＯＨを用いて“ＣＥＭ方法Ａ：標準カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて“ＣＥＭ方法Ａ：標準カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて“ＣＥＭ方法Ａ：標準カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて“ＣＥＭ方法Ａ：標準カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて“ＣＥＭ方法Ａ：標準カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨを用いて“ＣＥＭ方法Ａ：標準カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて“ＣＥＭ方法Ａ：標準カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて“ＣＥＭ方法Ａ：標準カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｇｌｕ−ＯＨを用いて“ＣＥＭ方法Ａ：標準カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて“ＣＥＭ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｐｈｅ−ＯＨを用いて“ＣＥＭ方法Ａ：標準カップリング方法”に従った;
７５℃で１０等量１０分間、次いで室温にて２時間、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨを用いて、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”に従った；
Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨを用いて“ＣＥＭ方法Ａ：標準カップリング方法”に従った;
Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨを用いて“ＣＥＭ方法Ａ：標準カップリング方法”に従った；
５等量で１０分間、Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”に従った；
５等量で１０分間、Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｐｈｅ−ＯＨを用いて“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”に従った；
５等量で１０分間、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨを用いて“ＣＥＭ方法Ａ：：カスタムアミノ酸カップリング方法”に従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”に従い、“包括的脱保護方法Ｂ”に従い、“環化方法Ｃ”に従った。
【０２８５】
粗物質を、以下の条件を用いてプレパラティブＨＰＬＣにより精製した：カラム：Phenomenex Luna 5u C18(2) 250 x 21.2 AXIA, 100A Ser. #520221−1；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡ/水；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡ/アセトニトリル；グラジエント：４０分かけて３５〜７５％Ｂ、次いで８５％Ｂまで５分間のグラジエント；流量：１５ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心エバポレーションおよび凍結乾燥により乾燥させた。生成物の収量は１２.９ｍｇであり、“分析ＬＣＭＳ条件ＡおよびＣ”を用いるＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.２９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０５６.１(Ｍ＋２Ｈ)。分析ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.３３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０５５.７(Ｍ＋２Ｈ).；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０５６.００７７(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：１０５６.００７７(Ｍ＋２Ｈ).
【０２８６】
実施例３６２０の製造
【化３１】
0006804442.tif 000032
実施例３６１９(８.０ｍｇ, ３.７９μｍｏｌ)からのペプチド生成物を、ＤＭＦ(４０μＬ)およびアセトニトリル(２０μＬ)に溶解した。この溶液に、２,５−ジオキソピロリジン−１−イル １７−オキソ−２１−(２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ[３,４−ｄ]イミダゾール−４−イル)−４,７,１０,１３−テトラオキサ−１６−アザヘンエイコサン−１−オエート(２.２３１ｍｇ, ３.７９μｍｏｌ)およびＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン(６.６０μｌ, ０.０３８ｍｍｏｌ)を加えた。溶液を、６時間攪拌した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＨＰＬＣにより精製した：カラム：Phenomenex Luna 5u C18(2) 250 x 21.2 AXIA, 100A Ser. #520221−1；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡ/水；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡ/アセトニトリル；グラジエント：４０分かけて３５〜７５％Ｂ、次いで、８５％Ｂまで５分間のグラジエント；流量：１５ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心エバポレーションにより乾燥させて、凍結乾燥により更に乾燥させた。
生成物の収量は４.４ｍｇであり、“分析ＬＣＭＳ条件ＡおよびＣ”を用いて、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９.５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２９２.８(Ｍ＋２Ｈ)。分析ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２９２.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２９２.１２０６(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：１２９２.１２１９(Ｍ＋２Ｈ).
【０２８７】
実施例３６２１の製造
【化３２】
0006804442.tif 000033
実施例３６２１を、以下の方法から構成される実施例３６１９の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＨＰＬＣにより精製した：カラム：Phenomenex Luna 5u C18(2) 250 x 21.2 AXIA, 100A Ser. #520221−1；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡ/水；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡ/アセトニトリル；グラジエント：４０分かけて３５〜７５％Ｂ、次いで８５％Ｂまで５分間のグラジエント；流量：１５ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心エバポレーションに続いて凍結乾燥により乾燥させた。ペプチド(６.０ｍｇ, ２.８４μｍｏｌ)を、ＤＭＦ(１００μＬ)に溶解した。この溶液に、２,５−ジオキソピロリジン−１−イル ２,５,８,１１,１４,１７,２０,２３,２６,２９,３２,３５−ドデカオキサオクタトリアコンタン−３８−オエート(１.９５０ｍｇ, ２.８４μｍｏｌ)およびＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン(４.９５μｌ，０.０２８ｍｍｏｌ)を加えた。溶液を３時間攪拌した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＨＰＬＣにより精製した：カラム：Phenomenex Luna 5u C18(2) 250 x 21.2 AXIA, 100A Ser. #520221−1；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡ/水；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡ/アセトニトリル；グラジエント：４０分かけて３５〜７５％Ｂ、次いで、８５％Ｂまで５分間のグラジエント；流量：１５ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心エバポレーションに続いて凍結乾燥により乾燥させた。生成物の収量は４.０ｍｇであり、“分析ＬＣＭＳ条件ＡおよびＣ”を用いるＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３４１.０(Ｍ＋２Ｈ)。分析ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３４１.４(Ｍ＋２Ｈ).
【０２８８】
実施例３６２２の製造
【化３３】
0006804442.tif 000034
実施例３６２２を、以下の方法から構成される実施例３６１９の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＨＰＬＣにより精製した。：カラム：Phenomenex Luna 5u C18(2) 250 x 21.2 AXIA, 100A Ser. #520221−1；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡ/水；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡ/アセトニトリル；グラジエント：４０分かけて３５〜７５％Ｂ、次いで８５％Ｂまで５分間のグラジエント；流量：１５ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心エバポレーションに続いて凍結乾燥により乾燥させた。ペプチド(６.０ｍｇ, ２.８４μｍｏｌ)を、ＤＭＦ(１００μＬ)に溶解した。この溶液に、２,５−ジオキソピロリジン−１−イル−２,５,８,１１,１４,１７,２０,２３,２６,２９,３２,３５,３８,４１,４４,４７,５０,５３,５６,５９,６２,６５,６８,７１,７４,７７,８０,８３,８６,８９,９２,９５,９８,１０１,１０４,１０７,１１０,１１３,１１６,１１９,１２２,１２５,１２８,１３１,１３４,１３７,１４０,１４３,１４６−ノナテトラコンタオキサノナテトラコンタヘクタン−１４９−オエート(６.５８ｍｇ，２.８４μｍｏｌ)およびＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン(４.９５μｌ，０.０２８ｍｍｏｌ)を加えた。溶液を３時間攪拌した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＨＰＬＣにより精製した：カラム：Phenomenex Luna 5u C18(2) 250 x 21.2 AXIA, 100A Ser. #520221−1；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡ/水；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡ/アセトニトリル；グラジエント：４０分かけて３５〜７５％Ｂ、次いで８５％Ｂまで５分間のグラジエント；流量：１５ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心エバポレーションに続いて凍結乾燥により乾燥させた。生成物の収量は３.５ｍｇであり、“分析ＬＣＭＳ条件ＡおよびＣ”を用いるＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０７８.７(Ｍ＋４Ｈ)。分析ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０７８.５(Ｍ+４Ｈ)。
【０２８９】
実施例３６２３の製造
【化３４】
0006804442.tif 000035
実施例３６２３を、以下の方法からなる実施例３６１９の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜６０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心エバポレーションに続いて凍結乾燥により乾燥させた。
生成物の収量は２８ｍｇであり、“分析ＬＣＭＳ条件ＤおよびＥ”を用いるＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０８８.１(Ｍ＋２Ｈ)。分析ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０８８.２(Ｍ＋２Ｈ)。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０８７.５０７０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：１０８７.５０６２(Ｍ＋２Ｈ).
【０２９０】
実施例３６２４の製造
【化３５】
0006804442.tif 000036
実施例３６２３(８.０ｍｇ, ３.６８μｍｏｌ)からのペプチド生成物を、ＤＭＦ(１００μＬ)に溶解した。この溶液に、２,５−ジオキソピロリジン−１−イル ２,５,８,１１,１４,１７,２０,２３,２６,２９,３２,３５−ドデカオキサオクタトリアコンタン−３８−オエート(２.７８ｍｇ, ４.０５μｍｏｌ)およびＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン(６.４１μｌ，０.０３７ｍｍｏｌ)を加えた。溶液を３時間攪拌した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜６０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２.５ｍｇであり、“分析ＬＣＭＳ条件ＤおよびＥ”を用いるＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９４％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３９０.２(Ｍ+２Ｈ＋２Ｈ2Ｏ)；分析ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３７２.９(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１３７２.６６９６(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：１３７２.６７２９(Ｍ＋２Ｈ).
【０２９１】
実施例３６２５の製造
【化３６】
0006804442.tif 000037
実施例３６２３(８.０ｍｇ, ３.６８μｍｏｌ)からのペプチド生成物を、ＤＭＦ(１００μＬ)に溶解した。この溶液に、１４９−((２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)オキシ)−１４９−オキソ−２,５,８,１１,１４,１７,２０,２３,２６,２９,３２,３５,３８,４１,４４,４７,５０,５３,５６,５９,６２,６５,６８,７１,７４,７７,８０,８３,８６,８９,９２,９５,９８,１０１,１０４,１０７,１１０,１１３,１１６,１１９,１２２,１２５,１２８,１３１,１３４,１３７,１４０,１４３,１４６−ノナテトラコンタオキサノナテトラコンタヘクタン−５６−イウム(９.３８ｍｇ, ４.０５μｍｏｌ)およびＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン(６.４１μｌ, ０.０３７ｍｍｏｌ)を加えた。溶液を３時間攪拌した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜６０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３.４ｍｇであり、“分析ＬＣＭＳ条件ＤおよびＥ”を用いるＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９１％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１１２.０(Ｍ＋４Ｈ＋４Ｈ２Ｏ)。分析ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０９４.８(Ｍ＋４Ｈ).
【０２９２】
実施例３６２６の製造
【化３７】
0006804442.tif 000038
実施例３６２３(８.０ｍｇ, ３.６８μｍｏｌ)からのペプチド生成物を、ＤＭＦ(１００μＬ)に溶解した。この溶液に、２,５−ジオキソピロリジン−１−イル １７−オキソ−２１−(２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ[３,４−ｄ]イミダゾール−４−イル)−４,７,１０,１３−テトラオキサ−１６−アザヘンエイコサン−１−オエート(２.３８２ｍｇ, ４.０５μｍｏｌ)およびＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン(６.４１μｌ, ０.０３７ｍｍｏｌ)を加えた。溶液を３時間攪拌した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜６０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２.７ｍｇであり、“分析ＬＣＭＳ条件ＤおよびＥ”を用いるＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９２％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３２３.8(Ｍ＋２Ｈ)。分析ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３２４.６(Ｍ＋２Ｈ)。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１３２４.１１６８(Ｍ＋２Ｈ)実測値：１３２４.１１８０(Ｍ＋２Ｈ)。
【０２９３】
分析データ：
質量スペクトル分析法：“ＥＳＩ−ＭＳ(＋)”は、ポジティブイオンモードにおいて行なったエレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を意味する；“ＥＳＩ−ＭＳ(−)”は、ネガティブイオンモードで行なったエレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を意味する；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋)”は、ポジティブイオンモードで行なった高分解エレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を意味する；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(−)”ネガティブイオンモードで行なった高分解エレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を意味する。検出された質量は、“ｍ/ｚ”単位表示に従って報告された。１０００より大きい精密質量を有する化合物は、二重電荷イオンまたは三重電荷イオンとして高頻度で検出された。
【０２９４】
分析条件Ａ：
カラム：Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；温度：５０℃；グラジエント：０％Ｂ、３分間かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで０.５分間保持；流量：１ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ.
【０２９５】
分析条件Ｂ：
カラム：Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；温度：５０℃；グラジエント：０％Ｂ、３分間かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで０.５分間保持；流量：０.５ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ. 
【０２９６】
分析条件Ｃ：
カラム：Waters Aquity BEH C18 2.1 X 50 mm 1.7 μm 粒子；移動相Ａ：水(０.０５％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：アセトニトリル(０.０５％ＴＦＡを含む)；温度：４０℃；グラジエント：０％Ｂ、３分間かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで０.５分間保持；流量：０.８ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ.
【０２９７】
分析条件Ｄ：
カラム：Waters Aquity BEH C18 2.1 X 50 mm 1.7 μm 粒子；移動相Ａ：水(０.０５％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：メタノール(０.０５％ＴＦＡを含む)；温度：４０℃；グラジエント：０％Ｂ、３分間かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで０.５分間保持；流量：０.８ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ.
【０２９８】
一般方法：
Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：
全ての操作を、Ｐｒｅｌｕｄｅペプチド合成器(Protein Technologies)でオートメーションの下で行った。別段の記載が無ければ、全ての方法を、底部フリットを取り付けた１０ｍＬポリプロピレンチューブ内で実施した；反応の規模が０.１００ｍｍｏｌを超える場合は、底部フリットを取り付けた４０ｍＬポリプロピレンを使用した。チューブは、チューブの底部と上部の双方を介してＰｒｅｌｕｄｅペプチド合成器に連結している。ＤＭＦおよびＤＣＭを、チューブ上部から加えて、チューブの両サイドを均等に洗い落とした。残りの試薬を、チューブ底部から加えて、フリットを通過させて、樹脂に接触させた。全ての溶液を、チューブの底部から除去した。“周期的攪拌”とは、底部フリットからのＮ２ガスの短いパルスをいう；このパルスは、おおよそ５秒間継続させて、３０秒毎におこる。クロロアセチルクロリド/ＤＭＦ溶液を、調整２４時間以内で使用した。アミノ酸溶液を、一般的には、調整してから３週間を過渡しては使用しない。ＨＡＴＵ溶液を、調製の５日以内で使用する。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＨＡＴＵ＝１−[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]−１Ｈ−１,２,３−トリアゾロ[４,５−ｂ]ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロリン酸塩；ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン；Ｒｉｎｋ＝(２,４−ジメトキシフェニル)(４−アルコキシフェニル)メタンアミン、この“４−アルコキシ”の場所は、ポリスチレン樹脂への結合性に関する位置およびタイプを示す。別段の記載が無ければ、使用した樹脂は、Ｒｉｎｋリンカー(窒素で保護されたＦｍｏｃ)を有するＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄポリマー(ポリスチレン)である。；１００〜２００メッシュ、１％ＤＶＢ、０.５６ｍｍｏｌ/g ローディング。使用した一般的なアミノ酸を、下記に挙げた(側鎖保護基は括弧内に示した)。Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ。
【０２９９】
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ”の方法は、０.１００ｍｍｏｌスケールで行った実験を述べたものであり、このスケールの場合、樹脂に結合したＲｉｎｋリンカーの量により決定される。このスケールは、約１７８mgの上記Ｓｉｅｂｅｒ−メリフィールド樹脂に対応する。全ての方法は、記戴した体積をスケールの倍数で調整することにより、０.１００ｍｍｏｌのスケールを超えて拡大できる。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、“樹脂膨潤方法”として下記に述べた樹脂膨潤方法を用いて開始する。アミノ酸と第一級アミンＮ末端のカップリングには、下記に記載した“単カップリング方法”を用いた。アミノ酸の第一級アミンＮ末端へのカップリングは、下記の“単カップリング方法”を使用した。アミノ酸の第二級アミンＮ末端へのカップリングは、下記の“第二級アミンカップリング方法”を使用した。クロロアセチルクロライドのペプチドのＮ末端へのカップリングは、下記の“クロロアセチルクロライドカップリング方法”により詳述される。
【０３００】
樹脂膨潤方法：
樹脂を下記の通りに３回洗った(膨潤させた)：反応容器に、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を加えて、混合物を、１０分間周期的に攪拌して、この溶媒をフリットから排出した。
【０３０１】
単カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３分間周期的に攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３分間周期的に攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに６回連続的に洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を、容器上部から加えて、得られる混合物を３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.８Ｍ，０.５ｍＬ，４等量)を加えた。混合物を、１５分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液を、フリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を、容器上部から加えて、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、無水酢酸(２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、１０分間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ ｍＬ)を容器上部から加えて、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、次の工程に直接使用した。
【０３０２】
二重カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３分間周期的に攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３分間周期的に攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに６回連続的に洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を、容器上部から加えて、得られる混合物を３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.８Ｍ，０.５ｍＬ，４等量)を加えた。混合物を、１５分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液を、フリットから排出した。樹脂を、以下の通りに２回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を、容器上部から加えて、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液を、フリットから排出した。反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.８Ｍ，０.５ｍＬ，４等量)を加えた。混合物を、１５分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液を、フリットから排出した。樹脂を、以下の通りに２回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を、容器上部を通して加えて、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液を、フリットから排出した。反応容器に、無水酢酸(２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、１０分間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を、容器上部を通して加えて、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、次の工程に直接使用した。
【０３０３】
クロロアセチルクロライドカップリング方法：
先の工程からの樹脂を含有するこの反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３分間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３分間周期的に攪拌して、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに６回連続的に洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を、容器上部から加えて、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液を、フリットから排出した。反応容器に、ＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.８Ｍ，３.０ｍＬ，２４等量)、次いでクロロアセチルクロリド(ＤＭＦ中で０.８Ｍ，１.６５ｍＬ，１３.２等量)を加えた。混合物を、３０分間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに３回連続して洗った：各洗いに対して、容器の上部にＤＭＦ(２.０ｍＬ)を加えて、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＣＨ２Ｃｌ２(２.０ｍＬ)を容器の上部に加えて、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、１５分間、Ｎ２ストリーム下に静置した。
【０３０４】
Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：
この方法のコレクションは、注記以外“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ”の方法と同一である。全ての方法について、ＳｙｍｐｈｏｎｙＸペプチド合成器(Protein Technologies)を、Ｐｒｅｌｕｄｅペプチド合成器の代わりに使用して、全ての試薬を、反応容器の上部から加えた。
【０３０５】
樹脂膨潤方法：
この方法は、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”と同一である。
単カップリング方法：
この方法は、ＤＩＰＥＡ溶液の濃度が０.４Ｍであって、この溶液(１.０ｍＬ)が、この反応に移行されることを除いて“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”と同一である。
【０３０６】
二重カップリング方法：
この方法は、ＤＩＰＥＡ溶液の濃度が０.４Ｍであり、この溶液(１.０ｍＬ)が、この反応に移行されることを除いて、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二重カップリング方法”と同一である。
【０３０７】
クロロアセチルクロライドカップリング方法：
この方法は、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”と同一である。
【０３０８】
包括的脱保護方法Ａ：
全ての操作を、別段の記載が無ければ手動で行なった。“包括的脱保護法Ａ”の方法は、０.１００ｍｍｏｌのスケールで行なった実験を述べたもので、このスケールの場合、樹脂に結合したＲｉｎｋリンカーの量により決定される。この方法は、記戴した体積をスケールの倍数で調整することにより、０.１００ｍｍｏｌのスケールを超えて拡大できる。“脱保護溶液”を、４０ｍＬ ガラスバイアル内で、トリフルオロ酢酸(２２ｍＬ)、フェノール(１.３２５ｇ)、水(１.２５ｍＬ)およびトリイソプロピルシラン(０.５ｍＬ)を合わせて調製した。樹脂を、反応容器から除去して、４ｍＬのガラスバイアルに移した。バイアルに、“脱保護溶液”(２.０ｍＬ)を加えた。この混合物を、シェーカー内で激しく混合した(１０００ｒｐｍ, １分間, 次いで５００ｒｐｍ, １〜２時間)。混合物を、０.２ミクロンシリンジフィルターを通して、濾過して、固体を“脱保護溶液”(１.０ｍＬ)またはＴＦＡ(１.０ｍＬ)で抽出した。合わせた濾液を試験チューブ(２４ｍＬ)に入れて、Ｅｔ２Ｏ(１５ｍＬ)を加えた。この混合物を激しく混合すると、大量の白色固体が沈殿した。混合物を、５分間遠心分離を行い、次いで溶液を傾斜して固体を取り出して、廃棄した。この固体を、Ｅｔ２Ｏ(２０ｍＬ)に懸濁して、次いで混合物を５分間遠心分離して；溶液を、傾斜して、固体を取り出して、廃棄した。最後に、この固体をＥｔ２Ｏ(２０ｍＬ)に懸濁して、混合物を５分間遠心分離して、この溶液を傾斜して、固体を取り出して、白色からオフホワイトの固体として粗製ペプチドを得た。
【０３０９】
環化方法Ａ：
全ての操作を、別段の記載が無ければ手動で行なった。“環化方法Ａ”の方法は、０.１００ｍｍｏｌのスケールで行なった実験を述べたものであり、このスケールは、ペプチドの生成に使用した樹脂に結合したＲｉｎｋリンカーの量により決定される。このスケールは、本方法において使用したペプチドの量の直接的な決定には基づくものではない。この方法は、記戴した体積をスケールの倍数で調整することにより、０.１００ｍｍｏｌのスケールを超えて拡大できる。粗製ペプチド固体を、ＭｅＣＮ：０.１Ｍ ＮＨ４ＯＡｃ水溶液(１：１)に溶解して、１８〜２２ｍＬの全量とし、次いでこの溶液を、ＮａＯＨ(１.０Ｍ)水溶液を用いて、ｐＨ＝８.５〜９.０に注意深く調整した。次いで溶液を、攪拌せずに１２〜１８時間静置した。反応溶液を濃縮して、次いで残留物をＤＭＳＯ：ＭｅＯＨに溶解した。この溶液を、逆相ＨＰＬＣ精製に付して、目的とする環状ペプチドを得た。
【０３１０】
一般合成法Ａ：
“一般的合成法Ａ”は、本明細書に記述した環化ペプチドを得るために使用した方法の一般的な手順を記述する。この一般的な方法を目的として、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ”の方法は、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ”の方法と互換性がある。ポリプロピレン固相反応容器(１０ｍＬ)に、“ビオチン樹脂”(下記を参照のこと)(１６１ｍｇ, ０.０５０ｍｍｏｌ)を加えて、反応容器を、Ｐｒｅｌｕｄｅペプチド合成機器においた。以下の方法については、この一般的な合成手順において使用した樹脂の量は０.０５０ｍｍｏｌスケールに対応しているが、０.１００ｍｍｏｌスケールについて上記した同量の試薬を用いた。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”を行なった。次いで、一連のアミノ酸カップリングは、樹脂結合ペプチドのＮ末端が一級アミンである場合には“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”に従い、あるいは樹脂結合ペプチドのＮ末端が第二級アミンである場合には“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二重カップリング方法”に従い、このＰｒｅｌｕｄｅ上で連続的に実施された。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”に従った；次いで、“包括的脱保護法Ａ”に従い；“環化方法Ａ”に従った。
【０３１１】
【化３８】
0006804442.tif 000039
【０３１２】
一般合成法Ｂ：
“一般合成法Ｂ”は、本明細書に記述した環化ペプチドを得るために使用した方法の一般的手順を記述する。この一般的方法の目的のために、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ”の方法は、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ”の手順と互換性がある。ポリプロピレン固相反応容器(１０ ｍＬ)に、Ｒｉｎｋ−Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ樹脂(１７８ｍｇ, ０.１００ｍｍｏｌ)を加えて、反応容器を、Ｐｒｅｌｕｄｅペプチド合成機器においた。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”を行なった。次いで、一連のアミノ酸カップリングは、樹脂結合ペプチドのＮ末端が一級アミンである場合には“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”に従うか、あるいは樹脂結合ペプチドのＮ末端が第二級アミンである場合には“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二重カップリング方法”に従い、このＰｒｅｌｕｄｅ上で連続的に実施された。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”を行い；次いで、“包括的脱保護方法Ａ”に従い；次いで“環化方法Ａ”を行なった。
【０３１３】
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)(メチル)アミノ)−３−エトキシプロパン酸の製造
【化３９】
0006804442.tif 000040
工程１：
(Ｓ)−２−アミノ−３−エトキシプロパン酸(１.５ｇ, １１.３ｍｍｏｌ)/ＴＨＦ(３８ｍｌ)および水(１９ｍｌ)の溶液に、炭酸水素ナトリウム(２.３７ｇ, ２８.２ｍｍｏｌ)およびＦｍｏｃ−ＯＳｕ(３.８０ｇ, １１.３ｍｍｏｌ)を加えた。得られる混合物を、１６時間攪拌した。ＴＨＦを除去した後、残留物を、１Ｎ ＨＣｌを用いて酸性化して、酢酸エチルで抽出して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、次いで濃縮して、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−エトキシプロパン酸[３.６ｇ(９０％)]を白色固体として得た。
【０３１４】
工程２：
トルエン(１００ｍＬ)中のパラホルムアルデヒド(１.８２５ｇ, ６０.８ｍｍｏｌ)、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−エトキシプロパン酸(３.６ｇ, １０.１ｍｍｏｌ)およびｐ−トルエンスルホン酸(０.１７４ｇ, １.０１ｍｍｏｌ)を含有する混合物を、２時間、水をＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋ共沸除去した。次いで、この反応をＲＴに冷却して、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、次いで塩水で洗い、ＭｇＳＯ４で乾燥させて、次いで濾過して、真空濃縮して、(Ｓ)−(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル ４−(エトキシメチル)−５−オキソオキサゾリジン−３−カルボキシレート(５.１６ｇ)を黄色油状物として得た。
【０３１５】
工程３：
(Ｓ)−(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル ４−(２−メトキシエチル)−５−オキソオキサゾリジン−３−カルボキシレート(０.４ｇ, １.０８９ｍｍｏｌ)を、ＣＨＣｌ３(５０ｍＬ)に溶解して、溶液を加えて、トリエチルシラン(０.８６９ｍＬ，５.４４ｍｍｏｌ)、続いてＴＦＡ(０.９２３ｍＬ，１２.０ｍｍｏｌ)を加えた。該溶液を、Ｎ２の陽圧下において１８時間ＲＴで攪拌した。次いで、この溶液を、濃縮して、油状残留物を得た。の残留物を、ＥｔＯＡｃに溶解して、次いで炭酸水素ナトリウム水溶液(２x１００ｍＬ)で抽出した。水相および相境界で懸濁した全固体を集めた。この混合物を、ＨＣｌ水溶液を用いてｐＨ４〜５に酸性化すると、沈殿が形成した。混合物を、ＥｔＯＡｃ(２００ｍＬ)で抽出した。有機相を、塩水で洗い、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮して、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン９−イル)メトキシ)カルボニル)(メチル)アミノ)−４−メトキシブタン酸[０.３５ｇ(８７％)収量)]を、白色固体として得た。
【０３１６】
実施例５００１の製造
【化４０】
0006804442.tif 000041
実施例５００１を、“一般合成法Ａ”に従って製造した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて２０〜６０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３.５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１７１.８(Ｍ＋２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１７１.７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１７０.５７８１；実測値：１１７０.５７７６.
【０３１７】
実施例５００２の製造
【化４１】
0006804442.tif 000042
実施例５００２を、“一般合成法Ａ”を行なった。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて１０〜５０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は９.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１２８.８(Ｍ＋２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ １１２６.８(Ｍ−２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１２８.５３４５ 実測値：１１２８.５３４９.
【０３１８】
実施例５００３の製造
【化４２】
0006804442.tif 000043
実施例５００３を、“一般合成法Ａ”に従って製造した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters xbridge C−18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて３０〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１１.０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１７２.４(Ｍ＋２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１７２.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１７１.０８４７；実測値：１１７１.０８６２.
【０３１９】
実施例５００４の製造
【化４３】
0006804442.tif 000044
実施例５００４を、“一般合成法Ａ”に従って製造した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters xbridge c−18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて３０〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は８.９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は、９６％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１５１.２(Ｍ＋２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１５１.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１５０.６０７８；実測値：１１５０.６０９６.
【０３２０】
実施例５００６の製造
【化４４】
0006804442.tif 000045
実施例５００６を、“一般合成法Ｂ”に従って製造した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて３０〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２６.３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.３２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０７８.３(Ｍ＋２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０７８.２(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０７７.５３８７ 実測値：１０７７.５３９６.
【０３２１】
実施例５００７の製造
【化４５】
0006804442.tif 000046
実施例５００７を、“一般合成法Ｂ”に従って製造した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて３０〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は、３６.９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった；分析条件Ａ：保持時間＝１.１０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９２３.７(Ｍ＋２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.２９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９２３.７(Ｍ＋２Ｈ).
【０３２２】
実施例５００８の製造
【化４６】
0006804442.tif 000047
実施例５００８を、０.６００ｍｍｏｌスケールで“一般合成法Ｂ”に従って製造した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters xbridge c−18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて２５〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。この物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳによりさらに精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて２５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は、４９.９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった；分析条件Ａ：保持時間＝１.１５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０６４.９(Ｍ＋２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.１９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０６４.２(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０６３.５２３１；実測値：１０６３.５２２２. 
【０３２３】
実施例５００９の製造
【化４７】
0006804442.tif 000048
実施例５００９を、“一般合成法Ｂ”に従って製造した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて５５〜９５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は、９.０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は、９９％であった；分析条件Ａ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０５７.４(Ｍ＋２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０５６.６(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０５６.００８７；実測値：１０５６.００６９.
【０３２４】
実施例５０１０の製造
【化４８】
0006804442.tif 000049
実施例５０１０を、“一般合成法Ｂ”に従って製造した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて５０〜９０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は、１４.９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった；分析条件Ａ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０９８.７(Ｍ＋２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ １０９６.６(Ｍ−２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０９８.０５５７；実測値：１０９８.０５５４.
【０３２５】
実施例５０１１の製造
【化４９】
0006804442.tif 000050
実施例５０１１を、“一般合成法Ｂ”に従って製造した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて５０〜９０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は、２５.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１３６.７(Ｍ＋２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ １１３４.３(Ｍ−２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１３５.５５３５；実測値：１１３５.５５２８.
【０３２６】
実施例５０１２の製造
【化５０】
0006804442.tif 000051
実施例５０１２を、“一般合成法Ｂ”に従って製造した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて５０〜９５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は、１３.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった；分析条件Ａ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ １１４０.３(Ｍ−２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１４２.４(Ｍ＋２Ｈ；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１４１.５５３５ 実測値：１１４１.５５３９.
【０３２７】
実施例５０１３の製造
【化５１】
0006804442.tif 000052
実施例５０１３を、“一般合成法Ｂ”に従って製造した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて４０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１２.１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった；分析条件Ａ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ １０７５.８(Ｍ−２Ｈ；分析条件Ｂ：保持時間＝２.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０７７.８(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０７７.０３２２ 実測値：１０７７.０３３０.
【０３２８】
実施例５０１４の製造
【化５２】
0006804442.tif 000053
実施例５０１４を、“一般合成法Ｂ”に従って製造した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて３５〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は、１５.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は、１００％であった；分析条件Ａ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０３５.８(Ｍ＋２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ １０３３.７(Ｍ−２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０３４.９８８５；実測値：１０３４.９８８７.
【０３２９】
実施例５０１５の製造
【化５３】
0006804442.tif 000054
実施例５０１５を、下記の通りに製造した：実施例５００６(５.８ｍｇ, ２.７μｍｏｌ)を入れた１ドラムバイアルに、乾燥ＮＭＰを加えた。混合物を、均質溶液が形成するまで攪拌した。溶液に、ＤＩＰＥＡ(０.０２５ｍＬ，０.１４３ｍｍｏｌ)、次いで２,５−ジオキソピロリジン−１−イル ２,５,８,１１,１４,１７,２０,２３,２６,２９,３２,３５−ドデカオキサオクタトリアコンタン−３８−オエート(３.５ｍｇ, ５.１μｍｏｌ)を加えた。バイアルを、５００ｒｐｍで回転しているシェーカー上で３０分間置いた。反応を、エタノールアミン(０.０２０ｍＬ)を添加してクエンチした。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて１０〜５０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２.０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ １３６１.４(Ｍ−２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ １３６１.７(Ｍ−２Ｈ).
【０３３０】
実施例５０１６の製造
【化５４】
0006804442.tif 000055
実施例５０１６を、下記の通りに製造した：実施例５００６(５.８ｍｇ, ２.７μｍｏｌ)を入れた１ドラムバイアルに、乾燥ＮＭＰを加えた。混合物を、均質な溶液が形成するまで攪拌した。この溶液に、ＤＩＰＥＡ(０.０２５ｍＬ，０.１４３ｍｍｏｌ)、次いで２,５−ジオキソピロリジン−１−イル ２,５,８,１１,１４,１７,２０,２３,２６,２９,３２,３５,３８,４１,４４,４７,５０,５３,５６,５９,６２,６５,６８,７１−テトラコサオキサテトラヘプタコンタン−７４−オエート(３.２７ｍｇ, ２.６９μｍｏｌ)を加えた。バイアルを、５００ｒｐｍで回転しているシェーカー上に４０分間置いた。反応を、エタノールアミン(０.０２０ｍＬ)の添加により停止した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて５０〜９０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２.６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ １６２５.４(Ｍ−２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ １６２５.７(Ｍ−２Ｈ).
【０３３１】
実施例５０１７の製造
【化５５】
0006804442.tif 000056
実施例５０１７を、下記の通りに製造した：実施例５００６(５.８ｍｇ, ２.７μｍｏｌ)を入れた１ドラムバイアルに、乾燥ＮＭＰを加えた。混合物を、均質溶液が形成するまで攪拌した。この溶液に、ＤＩＰＥＡ(０.０２５ｍＬ，０.１４３ｍｍｏｌ)、次いで２,５−ジオキソピロリジン−１−イル ２,５,８,１１,１４,１７,２０,２３,２６,２９,３２,３５,３８,４１,４４,４７,５０,５３,５６,５９,６２,６５,６８,７１,７４,７７,８０,８３,８６,８９,９２,９５,９８,１０１,１０４,１０７,１１０,１１３,１１６,１１９,１２２,１２５,１２８,１３１,１３４,１３７,１４０,１４３,１４６−ノナテトラコンタオキサノナテトラコンタヘクタン−１４９−オエート(６.２ｍｇ, ２.７μｍｏｌ)を加えた。バイアルを、５００ｒｐｍで回転しているシェーカー上で３０分間おいた。反応を、エタノールアミン(０.０２０ｍＬ)の添加によりクエンチした。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて５０〜９０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった；分析条件Ａ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ８８２.５(Ｍ＋５Ｈ；分析条件Ｂ：保持時間＝２.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ８８２.６(Ｍ＋５Ｈ).
【０３３２】
実施例５０１８の製造
【化５６】
0006804442.tif 000057
実施例５０１８を、下記の通りに製造した：実施例５００６(５.８ｍｇ, ２.７μｍｏｌ)を入れた１ドラムバイアルに、乾燥ＮＭＰを加えた。混合物を均質溶液が形成するまで攪拌した。この溶液に、ＤＩＰＥＡ(０.０２５ｍＬ，０.１４３ｍｍｏｌ)、次いで２,５−ジオキソピロリジン−１−イル ２,５,８,１１,１４,１７,２０,２３,２６,２９,３２,３５,３８,４１,４４,４７,５０,５３,５６,５９,６２,６５,６８,７１,７４,７７,８０,８３,８６,８９,９２,９５,９８,１０１,１０４,１０７,１１０−ヘプタトリアコンタオキサトリデカヘクタン−１１３−オエート(４.８ｍｇ, ２.７μｍｏｌ)を加えた。バイアルを、５００ｒｐｍで回転しているシェーカー上に４０分おいた。反応を、エタノールアミン(０.０２０ｍＬ)の添加によりクエンチした。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて５０〜９０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３.０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった；分析条件Ａ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ １９１４.０(Ｍ−２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ １９１２.７(Ｍ−２Ｈ).
【０３３３】
分析データ：
質量スペクトル分析法：“ＥＳＩ−ＭＳ(＋)”は、ポジティブイオンモードで行なったエレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を意味する；“ＥＳＩ−ＭＳ(−)”は、ネガティブイオンモードで行なったエレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を意味する；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋)”は、ポジティブイオンモードで行なった高分解エレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を意味する；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(−)”は、ネガティブイオンモードで行なった高分解エレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を意味する。検出された質量は、“ｍ/ｚ”単位表示に従って報告された。１０００より大きい精密質量を有する化合物は、二重電荷イオンまたは三重電荷イオンとして高頻度で検出された。
【０３３４】
一般方法：
ペプチド合成
本発明の大環状ペプチドは、当業者には既知の方法、例えば、それらは、細胞不含系において化学的に、組換え的に合成され得るか、あるいは生物起源から単離され得る。本発明の大環状ペプチドの化学合成は、段階的固相合成、配座的に支援される再ライゲーションを経るペプチドフラグメントの半合成、クローン化または合成ペプチドセグメントの酵素ライゲーション、および化学ライゲーションを含めた様々な当該技術分野において承認されている方法を使用して合成できる。本明細書に記載した大環状ペプチドおよびそのアナログを合成するための好ましい方法は、様々な固相技術、例えば、Chan, W.C. et al., eds., Fmoc Solid Phase Synthesis, Oxford University Press, Oxford(2000)；Barany, G. et al., The Peptides：Analysis, Synthesis, Biology, Vol.02：“Special Methods in Peptide Synthesis, Part A”, pp. 3−284, Gross, E. et al., eds., Academic Press, New York(1980)；および Stewart, J.M. et al., Solid-Phase Peptide Synthesis, 2nd Edition, Pierce Chemical Co., Rockford, IL(1984)を用いる化学合成である。
好ましいストラテジーは、アミノ酸側鎖の一時的保護のために、tert-ブチル基と組み合わせた、α−アミノ基の一時的保護のためのＦｍｏｃ(９−フルオレニルメチル メチル−オキシカルボニル）基に基づく(例えば、Atherton, E.  et al., "The Fluorenylmethoxycarbonyl Amino Protecting Group", in The Peptides： Analysis, Synthesis, Biology, Vol. 9： "Special Methods in Peptide Synthesis, Part C", pp.  1-38, Undenfriend, S. et al., eds., Academic Press, San Diego (1987)。
【０３３５】
ペプチドを、ペプチドのＣ末端から開始する不溶性ポリマー支持体(「樹脂」とも呼ぶ)上で段階的方法において、ペプチドのＣ末端から開始して合成できる。合成は、ペプチドのＣ末端アミノ酸を、アミドまたはエステル結合の形成により樹脂に付加することから開始する。こうして、夫々得られるペプチドをＣ末端のアミドまたはカルボン酸として、最終段階で遊離させ得る。
【０３３６】
Ｃ末端アミノ酸および合成に使用する全ての他のアミノ酸は、α−アミノ保護基が合成中に選択的に除去され得るように、特異的に保護されたα−アミノ基および側鎖官能基(存在するならば)を有することを必要とする。アミノ酸のカップリングを、活性エステルとしてそのカルボキシル基の活性化および樹脂に結合したＮ末端アミノ酸の非遮断α−アミノ基との反応により実施する。一連のα−アミノ基の脱保護およびカップリングを、全ペプチド配列が組立てられるまで繰り返す。次いで、通常、副反応を制限するための適当なスカベンジャーの存在下で、ペプチドを樹脂から遊離し、同時に側鎖官能性の脱保護を行う。得られたペプチドを最終的に逆相ＨＰＬＣで精製する。
【０３３７】
最終ペプチドの前駆体として求められるペプチジル−樹脂の合成は、市販の架橋ポリスチレンポリマー樹脂(Novabiochem, San Diego, CA; Applied Biosystems, Foster City, CA)を利用する。好ましい固体支持体は：Ｃ末端カルボキサミドのための、４−(２',４'−ジメトキシフェニル−Ｆｍｏｃ−アミノメチル)−フェノキシアセチル−p−メチル ベンズヒドリルアミン樹脂(ＲｉｎｋアミドＭＢＨＡ樹脂)；９−Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ−Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ樹脂(Ｓｉｅｂｅｒアミド樹脂)；４−(９−Ｆｍｏｃ)アミノメチル−３,５−ジメトキシフェノキシ)バレリル−アミノメチル−Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ樹脂(ＰＡＬ樹脂)である。第一および後続するアミノ酸のカップリングは、各々ＤＩＣ／ＨＯＢｔ、ＨＢＴＵ／ＨＯＢｔ、ＢＯＰ、ＰｙＢＯＰから、またはＤＩＣ／６−Ｃｌ−ＨＯＢｔ、ＨＣＴＵ、ＤＩＣ／ＨＯＡｔまたはＨＡＴＵから製造された、個々のＨＯＢｔ、６−Ｃｌ−ＨＯＢｔまたはＨＯＡｔ活性エステルを使用して達成できる。好ましい固体支持体は、次のものである：保護ペプチドフラグメントのためには、２−クロロトリチルクロリド樹脂および９−Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ−Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ樹脂(Ｓｉｅｂｅｒアミド樹脂)。２−クロロトリチルクロライド樹脂への第一のアミノ酸の付加は、Ｆｍｏｃ保護アミノ酸とジクロロメタンおよびＤＩＥＡにおける樹脂との反応により、最も良好に達成される。必要であれば、アミノ酸の溶解を促進するために、少量のＤＭＦを添加してよい。
【０３３８】
本明細書に記述されたペプチドアナログの合成は、１または複数チャンネルペプチド合成器、例えばＣＥＭライブラリーマイクロウェーブ合成器またはＰｒｅｌｕｄｅ(６チャンネル)またはＳｙｍｐｈｏｎｙ(１２チャンネル)合成器(Protein Technologies, Inc.)を用いて実施できる。
【０３３９】
有用なＦｍｏｃアミノ酸誘導体を下記に示した：
固相合成で使用する直交保護アミノ酸の例：
【化５７】
0006804442.tif 000058
【０３４０】
それらの各ペプチドについてのペプチジル樹脂の前駆体は、任意の標準方法を用いて(例えば、King, D.S.et al., Int. J. Peptide Protein Res., 36：255-266(1990)を参照されたい)、開裂および脱保護されてもよい。所望の方法は、スカベンジャーとして水およびＴＩＳの存在下におけるＴＦＡの使用である。通常、ペプチジル樹脂を、ＴＦＡ/水/ＴＩＳ(９４：３：３、ｖ：ｖ：ｖ；１ｍＬ/１００ｍｇ ペプチジル樹脂)を、２〜６時間、室温にて撹拌した。次いで、使用済み樹脂を、濾去して、ＴＦＡ溶液を濃縮するか、または減圧乾燥した。得られる粗製ペプチドを、沈殿させて、Ｅｔ２Ｏで洗うか、またはプレパラティブＨＰＬＣによる精製のためにＤＭＳＯまたは５０％酢酸水溶液に直接再溶解させる。
【０３４１】
目的とする純度のペプチドは、プレパラティブＨＰＬＣ、例えば、Waterss Model 4000またはShimadzu Model LC−8A 液体 クロトグラフィーを用いて精製することにより得ることができる。粗製ペプチドの溶液を、YMC S5 ODS(20 X 100 mm)カラムにインジェクションし、両方０.１％ＴＦＡを用いて緩衝するＭｅＣＮ／水の直線グラジエントにて溶出して、１４〜２０ｍＬ/分の流量で２２０ｎｍのＵＶ吸光度により溶出物をモニタリングする。精製したペプチドの構造は、エレクトロスプレーＭＳ分析により確認され得る。
【０３４２】
本明細書に示した非天然アミノ酸の例を、下記に記載する：
【化５８】
0006804442.tif 000059
【化５９】
0006804442.tif 000060
【０３４３】
下記の略語が、実施例および本明細書に用いられる：
0006804442.tif 000061
0006804442.tif 000062
【実施例】
【０３４４】
実施例０００１−固相ペプチド合成およびペプチドの環化
本実施例に記戴されている方法を、全体としてまたは記戴しているときは一部を使用して、表１、２、３、４および５に示した大環状ペプチドを合成した。
【０３４５】
スキーム１−チオエーテル環化ペプチドに使用した一般合成法
【化６０】
0006804442.tif 000063
固相ペプチド合成および大環状化のための一般的プロトコル。Ｓｙｍｐｈｏｎｙペプチドシンセサイザー(Protein Technology Inc. Tucson, AZ)、Ｐｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザー(Protein Technology Inc. Tucson, AZ)またはＬｉｂｅｒｔｙ(CEM Matthews, NC)、Ｓｉｅｂｅｒアミド樹脂(０.７１ｍｍｏｌ／ｇ，０.１００ｍｍｏｌ，１４１ｍｇ)をＤＭＦ(７ｍＬ×４分)で膨潤させ、３０秒毎にＮ２の穏やかな気流で混合した。溶媒を排出して、第一のアミノ酸とのカップリングに次の方法を使用した：Ｆｍｏｃ基を、２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液(５ｍＬおよび２.５分／洗浄)で樹脂を２回洗い、３０秒毎にＮ２の穏やかな気流で混合した。樹脂をＤＭＦで３回洗った(５〜８ｍＬおよび１.５分／洗浄)。２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)酢酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ溶液，０.５ｍｍｏｌ)を添加し、その後アクティベーター(すなわち、ＨＡＴＵ(Chem-Impex Int'l，ＤＭＦ中０.４Ｍ溶液，１.２５ｍＬ，０.５ｍｍｏｌ))および塩基(すなわち、Ｎ−メチルモルホリン(Aldrich，ＤＭＦ中０.８Ｍ，１.２５ｍＬ，１ｍｍｏｌ))とカップリングさせた。反応混合物を窒素の穏やかな気流により１時間撹拌した。試薬を反応容器から排出し、樹脂を３回ＤＭＦ(５ｍＬ×１.５分)で洗った。Ｌｉｂｅｒｔｙ ＣＥＭのための典型的試薬は、次のとおりであることを注記する：カップリング活性化剤としてのＨＣＴＵ(ＤＭＦ中０.４５Ｍ)、塩基としてのＤＩＥＡ(ＮＭＰ中２Ｍ)および脱保護溶液として５％ピペラジンのＤＭＦ溶液と０.１Ｍ ＨＯＢｔ。
【０３４６】
得られた樹脂支持Ｆｍｏｃ保護されたジペプチドを逐次的に脱保護して、第三のアミノ酸などと反復形式でカップリングして、所望の樹脂支持生成物を得た。
【０３４７】
ＬＣＭＳ分析を、樹脂(分析用量を、ＴＦＡ／ＴＩＳ(９６：４)溶液(０.２ｍＬ)において室温で処理した)から開裂させたペプチドのアリコートに対して実施した。目的の直線状の配列を確認後、Ｆｍｏｃ基は、２０％ピペリジン/ＤＭＦ溶液(５ｍＬおよび２.５分／洗浄)を用いて樹脂を２回洗浄して、スラリーをボルテックス処理することにより、Ｎ末端から分離させた。樹脂をＤＭＦ(２×５ｍＬ)で洗った。ペプチド−樹脂に、連続的に２−クロロ酢酸(０.６ｍｍｏｌ，５７ｍｇ)、ＤＭＦ(５.２６ｍＬ)およびＤＩＣ(０.６ｍｍｏｌ，９３μＬ)を添加した。新しいスラリーを１〜２日間ボルテックス処理し、その時点でペプチド−樹脂をＤＭＦ(１×５ｍＬ×１分)およびＤＣＭ(３×ＤＣＭ×１分)で洗った。
【０３４８】
ペプチドを、脱保護して、ＴＦＡ／ＴＩＳ(９６：４)溶液(１０ｍＬ)で１時間処理して樹脂から開裂させた。樹脂を濾去して、開裂カクテル(２×１ｍＬ)で洗浄し、合わせた濾駅をＥｔ２Ｏ(１０〜１５ｍＬ)に添加し、ペプチドを溶液から析出させるために、溶液を０℃に冷却した。スラリーを遠心して、固体をペレット化し、上清を廃棄した。新規のＥｔ２Ｏ(２５ｍＬ)を加えて、この工程を３回繰り返して、固体を洗った。湿性の固体に、０.１Ｍ ＮＨ４ＨＣＯ３／アセトニトリル溶液(１／１〜３／１(ｖ／ｖ), ｐＨ＝８.６)または６Ｍ グアニジンＨＣｌの１００ｍＭ ＮａＨ２ＰＯ４溶液(ｐＨ＝８.４)を添加した。この溶液を１〜２日間撹拌し、ＬＣＭＳでモニターした。反応溶液を分取ＨＰＬＣで精製して、所望の生成物を得た。
【０３４９】
一般的な分析プロトコルおよび合成方法
分析データ：
質量スペクトル分析法：“ＥＳＩ−ＭＳ(＋)”とは、ポジティブイオンモードで実施したエレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を意味する；“ＥＳＩ−ＭＳ(−)”とは、ネガティブイオンモードで実施したエレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を意味する；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋)”とは、ポジティブイオンモードで実施された高分解エレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を意味する；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(−)”とは、ネガティブイオンモードで実施した高分解エレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を意味する。検出された質量は、“ｍ/ｚ”単位表記に従って報告された。１０００より大きい精密質量を有する化合物は、二重電荷イオンまたは三重電荷イオンとして高頻度で検出された。
【０３５０】
一般方法：
ＳｙｍｐｈｏｎｙＸ方法Ａ：
全ての操作を、Ｓｙｍｐｈｏｎｙ Ｘ ペプチド合成器(Protein Technologies)でオートメーションの下で行った。全ての方法を、底部フリットを取り付けた１０ ｍＬ ポリプロピレンチューブ内で行った。このチューブは、チューブの底部と上部の双方を介してＳｙｍｐｈｏｎｙ Ｘ ペプチド合成器に連結している。ＤＭＦおよびＤＣＭを、チューブ上部から加えて、このチューブの両サイドを均一に洗い落とした。残りの試薬を、チューブの底から加えて、フリットを通して樹脂と接触させる。全ての溶液を、チューブの底から除去する。“周期的攪拌”とは、底部フリットからのＮ２ガスの短時間のパルスを意味する；このパルスは、おおよそ５秒続き、３０秒毎におこる。クロロアセチルクロリド溶液/ＤＭＦを、調整後２４時間以内に使用した。アミノ酸溶液を、一般的には、調整してから３週間を超えて使用しない。ＨＡＴＵ溶液を、調製の５日以内で使用した。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＨＡＴＵ＝１−[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]−１Ｈ−１,２,３−トリアゾロ[４,５−ｂ]ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロリン酸塩；ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン；Ｒｉｎｋ＝(２,４−ジメトキシフェニル)(４−アルコキシフェニル)メタンアミンであり、この場合“４−アルコキシ”とは、ポリスチレン樹脂との結合性に関する位置およびタイプをいう。使用した樹脂は、Ｒｉｎｋリンカーを有するＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄポリマー(ポリスチレン)(窒素で保護されたＦｍｏｃ)である；１００〜２００メッシュ, １％ＤＶＢ, ０.５６ｍｍｏｌ/ｇ ローディング。使用される一般的なアミノ酸を下記に挙げて、側鎖保護基は括弧内に示した。
Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ。
【０３５１】
“ＳｙｍｐｈｏｎｙＸ方法Ａ”の方法は、０.１００ｍｍｏｌのスケールで実施した実験を述べたもので、この場合のスケールは、樹脂に結合したＲｉｎｋリンカーの量により決定される。このスケールは、上記したＲｉｎｋ−Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ樹脂(おおよそ１７８ｍｇ)に対応している。全ての方法は、記戴した体積をスケールの倍数で調整することにより、０.１００ｍｍｏｌのスケールを超えて拡大できる。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、“樹脂膨潤方法”として下記に述べた樹脂膨潤方法を用いて開始する。アミノ酸と第一級アミンＮ末端のカップリングには、下記の“単カップリング方法”を用いた。アミノ酸と第二級アミンＮ末端とのカップリングは、下記“二重カップリング方法”を使用した。クロロアセチルクロライドのペプチドのＮ末端のカップリングは、下記に詳述した“クロロアセチルクロライドカップリング方法”により説明される。
【０３５２】
樹脂膨潤方法Ａ：
１０ｍＬ ポリプロピレン固相反応容器に、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ：Ｒｉｎｋ樹脂(１７８ｍｇ, ０.１００ｍｍｏｌ)を加えた。下記の樹脂を、下記の通りに３回洗った(膨潤される)：反応容器にＤＭＦ(２.０ｍＬ)を加えて、混合物を、周期的に１０分間撹拌して、その後溶媒をフリットから排出した。
【０３５３】
単カップリング方法Ａ：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに６回連続的に洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を、容器上部から加えて、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液をフリットから排出した。この反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.４Ｍ，１.０ｍＬ，４等量)を加えた。混合物を、１５分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液を、フリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器上部から加えて、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液をフリットから排出した。この反応容器に、無水酢酸(２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、１０分間周期的に攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器上部から加えて、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、次の工程に直接使用した。
【０３５４】
二重カップリング方法Ａ：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに６回連続的に洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器上部から加えて、得られる混合物を３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液をフリットから排出した。この反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.４Ｍ，１.０ｍＬ，４等量)を加えた。混合物を、１５分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を、以下の通りに２回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器上部から加えて、得られる混合物を３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液をフリットから排出した。この反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.４Ｍ，１.０ｍＬ，４等量)を加えた。混合物を、１５分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を、以下の通りに２回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を、容器上部を通して加えて、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。この反応容器に、無水酢酸(２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、１０分間周期的に攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器上部から加えて、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、次の工程に直接使用した。
【０３５５】
Ｓｙｍｐｈｏｎｙアミノ酸Ｎ末端停止方法：
１０ｍＬ ポリプロピレン固相反応容器に、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ：Ｒｉｎｋ樹脂(１７８ｍｇ, ０.１００ｍｍｏｌ)を加えた。下記樹脂を、次の通りに３回洗った(膨潤した)：反応容器に、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を加えて、この混合物を１０分間周期的に撹拌して、その後溶媒をフリットから排出した。
【０３５６】
先の工程からのＲｉｎｋ樹脂を含有するこの反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ, ２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに６回連続的に洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器上部から加えて、得られる混合物を３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.４Ｍ，１.０ｍＬ，４等量)を加えた。混合物を、１５分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液をフリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を、容器上部を通して加えて、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液をフリットから排出した。この反応容器に、無水酢酸(２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、１０分間周期的に攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を、容器上部を通して加えて、得られる混合物を９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間撹拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに５回連続して洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器上部から加えて、得られる混合物を９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに３回連続して洗った：各洗いに対して、ＤＣＭ(２.０ｍＬ)を容器上部から加えて、得られる混合物を９０秒間周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、窒素流の下にて１５分間おいた。
【０３５７】
クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ：
先の工程からの樹脂を入れた反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を周期的に３分間攪拌して、次いで溶液をフリットから排出した。反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、３分間周期的に攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに６回連続的に洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器上部から加えて、得られる混合物を３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液をフリットから排出した。この反応容器に、ＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.４Ｍ，４.０ｍＬ，１６等量)、次いでクロロアセチルクロリド(ＤＭＦ中で０.８Ｍ，１.５０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３０分間攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに３回連続して洗った：各洗いに対して、容器の上部にＤＭＦ(２.０ｍＬ)を加えて、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに４回連続的に洗った：各洗いに対して、容器の上部にＣＨ２Ｃｌ２(２.０ｍＬ)を加えて、得られる混合物を、９０秒間周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、Ｎ２流の下において１５分間おいた。
【０３５８】
クロロ酢酸カップリング方法Ａ：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。該樹脂を、下記の通りに４回連続的に洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器上部から加えて、得られる混合物を３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液をフリットから排出した。反応容器に、クロロ酢酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.４Ｍ，１.０ｍＬ，４等量)を加えた。混合物を、１５分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに３回連続して洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を、容器上部から加えて、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液をフリットから排出した。該樹脂を、下記の通りに４回連続的に洗った：各洗いに対して、ＣＨ２Ｃｌ２(２.０ｍＬ)を容器上部から加えて、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、５分間乾燥させた。
【０３５９】
包括的脱保護方法Ａ：
全ての操作を、別段の記載が無ければ手動で行った。“包括的脱保護方法Ａ”の方法は０.１００ｍｍｏｌのスケールで実施した実験を述べたもので、この場合のスケールは、樹脂に結合したＲｉｎｋリンカーの量により決定される。この方法は、記戴した体積をスケールの倍数で調整することにより、０.１００ｍｍｏｌのスケールを超えて拡大できる。“脱保護溶液”を、４０ｍＬガラスバイアル中で、トリフルオロ酢酸(２２ｍＬ)、フェノール(１.３２５ｇ)、水(１.２５ｍＬ)およびトリイソプロピルシラン(０.５ｍＬ)を合わせて製造した。樹脂を、反応容器から取り出して、４ｍＬガラスバイアルに移した。バイアルに、“脱保護溶液”(２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、シェーカー内で激しく混合した(１０００ＲＰＭ, １分間, 次いで５００ＲＰＭ, ９０分間)。混合物を、底部フリットを取り付けた１０ｍＬ ポリプロピレンチューブ内で、ジエチルエーテル(１５ｍＬ)を含有する２４ｍＬ試験チューブに滴加して、白色沈殿物を得た。チューブ内の固体(樹脂)を、“脱保護溶液”(１.０ｍＬ)を用いて１回抽出して、エーテルに滴加した。混合物を、７分間遠心分離して、次いで溶液を、固体から傾捨して、廃棄した。この固体をＥｔ２Ｏ(２０ｍＬ)に懸濁した；次いで混合物を、５分間遠心分離して；該溶液を、固体から傾捨して、廃棄した。最後に、固体をＥｔ２Ｏ(２０ｍＬ)に懸濁した；混合物を５分間遠心分離した；該溶液を、固体から傾捨して、粗製ペプチドを白色〜オフホワイトの固体として得た。
【０３６０】
環化方法Ａ：
全ての操作を、別段の記載が無ければ手動で行った。“環化方法Ａ”の方法は、０.１００ｍｍｏｌのスケールで実施した実験を述べたもので、この場合のスケールは、ペプチドの製造に使用した樹脂に結合したＲｉｎｋリンカーの量により決定する。このスケールは、この方法において使用したペプチドの量の直接的な決定には基づかない。この方法は、記戴した体積をスケールの倍数で調整することにより、０.１００ｍｍｏｌのスケールを超えて拡大できる。この方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００ｍｍｏｌ規模を超えて拡大できる。粗製ペプチド固体を、メタノール(１０ｍＬ)に溶解し、この溶液をＮ,Ｎ−ジイソプロピルアミンを用いて、ｐＨ＝９.０〜１１に注意深く調整した。次いで、溶液を１８〜２４時間撹拌した。反応溶液を、濃縮して、次いで残留物をＭｅＯＨに溶解した。この溶液を、逆相ＨＰＬＣ精製に付して、目的とする環状ペプチドを得た。
【０３６１】
分析条件Ａ：
カラム：X−Bridge C18, 2.0 x 50 mm, 3.5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；温度：４０℃；グラジエント：０％Ｂ、８分かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで１.０分間保持；流量：０.８ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ.
【０３６２】
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−６−ウンデカンアミドヘキサン酸の製造
【化６１】
0006804442.tif 000064
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−６−アミノヘキサン酸(２.５ｇ, ６.７９ｍｍｏｌ)、ウンデカノイルクロリド(１.６４７ｍＬ，７.４６ｍｍｏｌ)およびジクロロメタン(２７ｍｌ)を入れた丸底フラスコに、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(３.５６ｍＬ，２０.３６ｍｍｏｌ)を加えた。最初の懸濁液は、直ちに黄色に変わり、その後透明に変化した。１０分後に、固体が沈殿し始めた。この反応を、２０時間室温にて撹拌した。反応混合物を、ジクロロメタン(２０ｍＬ)で希釈して、飽和塩化アンモニウム溶液に注ぎ入れた。該層を分離して、水溶液を２０％メタノール/クロロホルム溶液で洗った。有機層を合わせて、塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させて、濾過し、濃縮して、粘性の黄色固体を得た。得られる残留物を、シリカゲルクロマトグラフィー(０〜５％ メタノール/ジクロロメタンのグラジエント)に付して、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−６−ウンデカンアミドヘキサン酸(２.８１ｇ, ５.２４ｍｍｏｌ, ７７％収率)を黄色泡沫状物として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ) δ 7.80 - 7.71(m, 2H), 7.63 - 7.52(m, 2H), 7.39(t, J=7.0 Hz, 2H), 7.34 - 7.27(m, 2H), 4.49 - 4.29(m, 2H), 4.27 - 4.14(m, 1H), 3.24(br. s., 1H), 2.35(t, J=7.5 Hz, 1H), 2.29 - 2.06(m, 2H), 1.89(br. s., 1H), 1.86 - 1.72(m, 1H), 1.72 - 1.63(m, 1H), 1.62 - 1.46(m, 4H), 1.39 - 1.14(m, 18H), 0.92 - 0.86(m, 3H).
【０３６３】
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−６−テトラデカンアミドヘキサン酸
【化６２】
0006804442.tif 000065
1H NMR(400ＭＨｚ, DMSO-d6) δ 7.88(dd, J=7.2, 4.1 Hz, 2H), 7.77 - 7.69(m, 2H), 7.44 - 7.37(m, 2H), 7.35 - 7.28(m, 2H), 4.29 - 4.17(m, 2H), 3.95 - 3.84(m, 1H), 3.63 - 3.52(m, 1H), 3.10(q, J=7.4 Hz, 1H), 3.05 - 2.94(m, 2H), 2.01(t, J=7.4 Hz, 2H), 1.46(d, J=6.8 Hz, 3H), 1.34(dd, J=13.1, 5.0 Hz, 3H), 1.24 - 1.20(m, 22H), 0.86 - 0.82(m, 3H)
【０３６４】
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−６−ステアリン酸アミドヘキサン酸
【化６３】
0006804442.tif 000066
1H NMR(400ＭＨｚ, DMSO-d6) δ 7.92 - 7.84(m, 2H), 7.72(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.44 - 7.36(m, 2H), 7.36 - 7.26(m, 2H), 4.35 - 4.22(m, 2H), 4.20(d, J=7.5 Hz, 1H), 3.94 - 3.85(m, 1H), 3.00(br. s., 2H), 2.17(t, J=7.4 Hz, 1H), 2.09 - 1.91(m, 1H), 1.69(d, J=6.8 Hz, 1H), 1.65 - 1.51(m, 1H), 1.46(d, J=7.0 Hz, 2H), 1.34(dd, J=13.1, 5.0 Hz, 2H), 1.24 - 1.19(m, 30H), 0.87 - 0.82(m, 3H).
【０３６５】
修飾Ｒｉｎｋ(リンク)樹脂Ａの製造
【化６４】
0006804442.tif 000067
２０ｍＬ シンチレーションバイアルに、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ Ｒｉｎｋ樹脂(０.５６ｍｍｏｌ/ｇ ローディング)(１.０ｇ, ０.５６０ｍｍｏｌ)を入れた。樹脂を、５ｍＬのＤＭＦ中で１０分間膨潤させた。２０：８０ ピペリジン：ＤＭＦの溶液(８ｍＬ)を加えて、得られる懸濁液を、ミニシェーカーで２時間撹拌した。バイアルの内容物を、１０ｍＬ ポリプロピレン反応チューブに移し入れて、樹脂を単離して、真空濾過により濾過した。樹脂を、３０ｍＬＤＭＦ、３０ｍＬジクロロメタンおよび最後に５ｍＬジエチルエーテルで洗った。樹脂を、２０ｍＬ バイアルに移した。樹脂を含むバイアルに、５ｍＬ ＤＭＦを加えて、樹脂を膨潤させた。１０分後に、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−６−ウンデカンアミドヘキサン酸(０.６０１ｇ, １.１２０ｍｍｏｌ)、０.２Ｍ ２−(３Ｈ−[１,２,３]トリアゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−３−イル)−１,１,３,３−テトラメチルイソウロニウム ヘキサフルオロリン酸塩(Ｖ)/ＤＭＦ(５.６０ｍＬ，１.１２０ｍｍｏｌ)および０.４Ｍ Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン/ＤＭＦ(５.６０ｍＬ，２.２４０ｍｍｏｌ)を加えた。バイアルを、終夜、ミニシェーカーで撹拌した。バイアルの内容物を１０ｍＬ ポリプロピレン反応チューブに移し入れることによって、樹脂を単離して、真空濾過により濾過した。樹脂を、５０ｍＬＤＭＦ、５０ｍＬジクロロメタンおよび１０ｍＬジエチルエーテルで洗った。得られる樹脂を、真空乾燥させて、０.５６ｍｍｏｌ/ｇ ローディングとして使用した。
【０３６６】
修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｂの製造
修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｂを、修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ａと同一の方法に従って行った。
【０３６７】
修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｃの製造
修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｃを、Chem-Impex Internationalから購入したＮ−Ｆｍｏｃ−Ｎ パルミトイル−Ｌリシンを唯一の例外として、修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ａと同一の方法に従って製造した。
【０３６８】
修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｄの製造
修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｄを、修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ａと同一の方法に従って製造した。
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ａの製造
【化６５】
0006804442.tif 000068
４０ｍＬバイアルに、２−クロロトリチルクロリド樹脂(１.４２ｍｍｏｌ/g ローディング)(１.９８５ｇ, ２.７８ｍｍｏｌ)を加えた。樹脂を、１０分間１５ｍＬジクロロメタン中で膨潤した。２ｍＬジクロロメタン中のＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸(０.５ｇ, ０.８６９ｍｍｏｌ)、続いてＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(０.９８６ｍＬ，５.６５ｍｍｏｌ)の溶液を加えて、混合物を、室温で終夜、ミニシェーカーで撹拌した。２０時間後に、この混合物を、メタノール(２ｍＬ)で希釈して、２時間撹拌して、何ら反応していないクロロトリチル樹脂をクエンチした。樹脂を、ポリプロピレン反応チューブ中で真空濾過して、１００ｍＬＤＭＦ、１００ｍＬジクロロメタンおよび最終的に１０ｍＬジエチルエーテルで洗った。樹脂を、風乾し、０.４４ｍｍｏｌ/g ローディングと推定し、そのまま使用した。
【０３６９】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｂの製造
【化６６】
0006804442.tif 000069
４０ｍＬバイアルに、２−クロロトリチルクロリド樹脂(１.４２ｍｍｏｌ/g ローディング)(２.１２９ｇ, ２.９８ｍｍｏｌ)を加えた。樹脂を、１０分間、１５ｍＬジクロロメタンで膨潤させた。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−６−ウンデカンアミドヘキサン酸(０.５ｇ, ０.９３２ｍｍｏｌ)/２ｍＬジクロロメタン、次いでＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(１.０６ｍＬ，６.０６ｍｍｏｌ)の溶液を加えて、混合物を、ミニシェーカーで終夜室温にて撹拌した。２０時間後に、混合物を、メタノール(２ｍＬ)で希釈して、２時間撹拌して、何ら反応していないクロロトリチル樹脂をクエンチした。樹脂を、ポリプロピレン反応チューブ内で真空濾過して、１００ｍＬ ＤＭＦ、１００ｍＬ ジクロロメタンおよび最終的に１０ｍＬ ジエチルエーテルで洗った。樹脂を風乾して、０.４４ｍｍｏｌ/ｇ ローディングと推定して、そのまま使用した。
【０３７０】
実施例１１００１の製造
【化６７】
0006804442.tif 000070
実施例１１００１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチル酸カップリング方法”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｄを、この合成に使用した。
【０３７１】
粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は５.２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝７.３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０５.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１０５.６４９８(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１０５.６４９４(Ｍ＋２Ｈ).
【０３７２】
実施例１１００２の製造
【化６８】
0006804442.tif 000071
実施例１１００２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｄを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３.９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝７.１０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１３３.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１３３.１５４３(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１３３.１４９６(Ｍ＋２Ｈ).
【０３７３】
実施例１１００３の製造
【化６９】
0006804442.tif 000072
実施例１１００３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３.５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２００.４(Ｍ＋２Ｈ).
【０３７４】
実施例１１００４の製造
【化７０】
0006804442.tif 000073
実施例１１００４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１０.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１７１.９(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１７１.１２９９(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１７１.１３０２(Ｍ＋２Ｈ)
【０３７５】
実施例１１００５の製造
【化７１】
0006804442.tif 000074
実施例１１００５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１４２.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１４２.６１９２(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１４２.６１９３(Ｍ＋２Ｈ).
【０３７６】
実施例１１００６の製造
【化７２】
0006804442.tif 000075
実施例１１００６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は９.２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１６１.７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１６１.６０８８(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１６１.６０７５(Ｍ＋２Ｈ).
【０３７７】
実施例１１００７の製造
【化７３】
0006804442.tif 000076
実施例１１００７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１６.０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１９１.０(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０９０.０７９７(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０９０.０７７９(Ｍ＋２Ｈ).
【０３７８】
実施例１１００８の製造
【化７４】
0006804442.tif 000077
実施例１１００８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１２.２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１３３.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１３３.０９８１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１３３.０９５０(Ｍ＋２Ｈ).
【０３７９】
実施例１１００９の製造
【化７５】
0006804442.tif 000078
実施例１１００９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１９.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１４７.７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１４７.５８７５(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１４７.５８６７(Ｍ＋２Ｈ).
【０３８０】
実施例１１０１０の製造
【化７６】
0006804442.tif 000079
実施例１１０１０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１９.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１５４.９(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１５４.５９５４(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１５４.９５３３(Ｍ＋２Ｈ).
【０３８１】
実施例１１０１１の製造
【化７７】
0006804442.tif 000080
実施例１１０１１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は８.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１５４.８(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１５４.５９５４(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１５４.５９４１(Ｍ＋２Ｈ).
【０３８２】
実施例１１０１２の製造
【化７８】
0006804442.tif 000081
実施例１１０１２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ａを、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて用いた。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は８.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２６５.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２６４.６７９１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２６４.６７６４(Ｍ＋２Ｈ).
【０３８３】
実施例１１０１３の製造
【化７９】
0006804442.tif 000082
実施例１１０１３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｂを、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１２.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.０４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３５１.２(Ｍ＋２Ｈ).
【０３８４】
実施例１１０１４の製造
【化８０】
0006804442.tif 000083
実施例１１０１４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｂを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は７.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２４１.１(Ｍ＋２Ｈ).
【０３８５】
実施例１１０１５の製造
【化８１】
0006804442.tif 000084
実施例１１０１５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｂを、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は７.１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２９２.７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２９２.７１６０(Ｍ＋２Ｈ).
実測値：１２９２.７１４８(Ｍ＋２Ｈ).
【０３８６】
実施例１１０１６の製造
【化８２】
0006804442.tif 000085
実施例１１０１６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｂを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は８.３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった;分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.２７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１８２.７(Ｍ＋２Ｈ).
【０３８７】
実施例１１０１７の製造
【化８３】
0006804442.tif 000086
実施例１１０１７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｂを、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は５.２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １４０８.１(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１４０７.７４３１(Ｍ＋２Ｈ)
実測値：１４０７.７４３０(Ｍ＋２Ｈ).
【０３８８】
実施例１１０１８の製造
【化８４】
0006804442.tif 000087
実施例１１０１８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｃを、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は、１１.２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.１６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １４２１.８(Ｍ＋２Ｈ).
【０３８９】
実施例１１０１９の製造
【化８５】
0006804442.tif 000088
実施例１１０１９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４０.２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝６.１１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０９１.４５(Ｍ＋２Ｈ).
【０３９０】
実施例１１０２０の製造
【化８６】
0006804442.tif 000089
実施例１１０２０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４１.０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１１９.８３(Ｍ＋２Ｈ).
【０３９１】
実施例１１０２１の製造
【化８７】
0006804442.tif 000090
実施例１１０２１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１４.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝６.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２６５.９(Ｍ＋２Ｈ).
【０３９２】
実施例１１０２２の製造
【化８８】
0006804442.tif 000091
実施例１１０２２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は５.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝６.１３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２５０.５１(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２４９.１９３０(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２４９.１９３４(Ｍ＋２Ｈ).
【０３９３】
実施例１１０２３の製造
【化８９】
0006804442.tif 000092
実施例１１０２３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝６.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２３５.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２３５.６８７８(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２３５.６８３２(Ｍ＋２Ｈ).
【０３９４】
実施例１１０２４の製造
【化９０】
0006804442.tif 000093
実施例１１０２４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は７.２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２２０.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２２０.６８２３(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２２０.６８１０(Ｍ＋２Ｈ).
【０３９５】
実施例１１０２５の製造
【化９１】
0006804442.tif 000094
実施例１１０２５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２３４.６(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２３４.６７９８(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２３４.６７９６.
【０３９６】
実施例１１０２６の製造
【化９２】
0006804442.tif 000095
実施例１１０２６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１１.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２０６.０(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２０６.１６９０(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２０６.１６９０(Ｍ＋２Ｈ).
【０３９７】
実施例１１０２７の製造
【化９３】
0006804442.tif 000096
実施例１１０２７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は９.３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.９２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１７７.６(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１７７.６５８３(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１７７.６５８５(Ｍ＋２Ｈ).
【０３９８】
実施例１１０２８の製造
【化９４】
0006804442.tif 000097
実施例１１０２８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｃを、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は７.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３６３.２(Ｍ＋２Ｈ).
【０３９９】
実施例１１０２９の製造
【化９５】
0006804442.tif 000098
実施例１１０２９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｃを、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１６.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝６.０１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３０６.８(Ｍ＋２Ｈ).
【０４００】
実施例１１０３０の製造
【化９６】
0006804442.tif 000099
実施例１１０３０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は７.２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１５３.４(Ｍ＋２Ｈ).
【０４０１】
実施例１１０３１の製造
【化９７】
0006804442.tif 000100
実施例１１０３１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて３０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１３.０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１２５.１(Ｍ＋２Ｈ).
【０４０２】
実施例１１０３２の製造
【化９８】
0006804442.tif 000101
実施例１１０３２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｒｉｎｋ樹脂を、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１４.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝２.９９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １４４２.３(Ｍ＋２Ｈ).
【０４０３】
実施例１１０３３の製造
【化９９】
0006804442.tif 000102
実施例１１０３４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｘ”。Ｒｉｎｋ樹脂を、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２０.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.２６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１８１.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１８１.０７７２(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１８１.０７５７(Ｍ＋２Ｈ).
【０４０４】
実施例１１０３４の製造
【化１００】
0006804442.tif 000103
実施例１１０３４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｒｉｎｋ樹脂を、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２０.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１６８.０(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１６７.０６１６(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１６７.０６２４(Ｍ＋２Ｈ).
【０４０５】
実施例１１０３５の製造
【化１０１】
0006804442.tif 000104
実施例１１０３５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｒｉｎｋ樹脂を、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３３.２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１３８.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１３８.５５１７(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１３８.５５０８(Ｍ＋２Ｈ).
【０４０６】
実施例１１０３６の製造
【化１０２】
0006804442.tif 000105
実施例１１０３６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｒｉｎｋ樹脂を、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１２.２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０８１.９(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０８１.０３７４(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０８１.０３５８(Ｍ＋２Ｈ).
【０４０７】
実施例１１０３７の製造
【化１０３】
0006804442.tif 000106
実施例１１０３７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｒｉｎｋ樹脂を、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１１.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０９.６(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１０９.５４８１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１０９.５４７２(Ｍ＋２Ｈ).
【０４０８】
実施例１１０３８の製造
【化１０４】
0006804442.tif 000107
実施例１１０３８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｒｉｎｋ樹脂を、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１８.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１８２.１(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１８１.０８２８(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１８１.０８１６(Ｍ＋２Ｈ).
【０４０９】
実施例１１０３９の製造
【化１０５】
0006804442.tif 000108
実施例１１０３９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｒｉｎｋ樹脂を、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１３.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１２３.６(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１２３.５６７７(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１２３.５６９４(Ｍ＋２Ｈ).
【０４１０】
実施例１１０４０の製造
【化１０６】
0006804442.tif 000109
実施例１１０４０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｒｉｎｋ樹脂を、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１９.５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０９６.０(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０９５.０５８６(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０９５.０５６７(Ｍ＋２Ｈ).
【０４１１】
実施例１１０４１の製造
【化１０７】
0006804442.tif 000110
実施例１１０４１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｒｉｎｋ樹脂をこの合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２１.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１５３.７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１５２.５７２１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１５３.５７１９(Ｍ＋２Ｈ).
【０４１２】
実施例１１０４２の製造
【化１０８】
0006804442.tif 000111
実施例１１０４２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２１.３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０８１.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０８１.５２９４(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０８１.５２８８(Ｍ＋２Ｈ).
【０４１３】
実施例１１０４３の製造
【化１０９】
0006804442.tif 000112
実施例１１０４３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２０.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１１０.８(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１１０.０４０１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１１０.０３９２(Ｍ＋２Ｈ).
【０４１４】
実施例１１０４４の製造
【化１１０】
0006804442.tif 000113
実施例１１０４４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１０.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１１７.１(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１１７.０４７９(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１１７.０４５２(Ｍ＋２Ｈ).
【０４１５】
実施例１１０４５の製造
【化１１１】
0006804442.tif 000114
実施例１１０４５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１６.０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０８５.１(Ｍ＋２Ｈ).
【０４１６】
実施例１１０４６の製造
【化１１２】
0006804442.tif 000115
実施例１１０４６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２１.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０８４.５(Ｍ＋２Ｈ).
【０４１７】
実施例１１０４７の製造
【化１１３】
0006804442.tif 000116
実施例１１０４７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２０.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０８４.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０８４.５３４６(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０８４.５３６２(Ｍ＋２Ｈ).
【０４１８】
実施例１１０６０の製造
【化１１４】
0006804442.tif 000117
実施例１１０６０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂を、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて用いた。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２２.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１７７.０(Ｍ＋２Ｈ).
【０４１９】
実施例１１０６１の製造
【化１１５】
0006804442.tif 000118
実施例１１０６１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”である。修飾クロロトリチル樹脂を、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２８.３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１８２.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１８２.６３１６(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１８２.６２７５(Ｍ＋２Ｈ).
【０４２０】
実施例１１０６２の製造
【化１１６】
0006804442.tif 000119
実施例１１０６２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｂを、この合成に使用した。ＦＭＯＣ−２１−アミノ−４,７,１０,１３,１６,１９−ヘキサオキサヘンイコサン酸を、“カスタムアミノ酸カップリング方法”にて使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２３２.５(Ｍ＋２Ｈ).
【０４２１】
実施例１１０６３の製造
【化１１７】
0006804442.tif 000120
実施例１１０６３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２７.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.１１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１３９.７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１３９.６２６５(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１３９.６２５２(Ｍ＋２Ｈ).
【０４２２】
実施例１１０６４の製造
【化１１８】
0006804442.tif 000121
実施例１１０６４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.７％であった;分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０１９.９(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０１９.０４２６(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０１９.０４０７(Ｍ＋２Ｈ).
【０４２３】
実施例１１０６５の製造
【化１１９】
0006804442.tif 000122
実施例１１０６５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７.３％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.７０６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１５８.０(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１５７.０７２３(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１５７.０６９７(Ｍ＋２Ｈ).
【０４２４】
実施例１１０６６の製造
【化１２０】
0006804442.tif 000123
実施例１１０６６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.５７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０９８.７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋)．ｍ/ｚ：計算値：１０９８.０５３３(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０９８.０５１３(Ｍ＋２Ｈ).
【０４２５】
実施例１１０６７の製造
【化１２１】
0006804442.tif 000124
実施例１１０６７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３６.３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.２２５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１５８.６(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１５７.５６４３(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１５７.５６２２(Ｍ＋２Ｈ).
【０４２６】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｃの製造
【化１２２】
0006804442.tif 000125
４０ｍＬバイアルに、２−クロロトリチルクロリド樹脂(１.２ｍｍｏｌ/ｇローディング)(６.３７ｇ, ７.６５ｍｍｏｌ)を入れた。樹脂を、１０分間、１５ｍＬジクロロメタン中で膨潤させた。ＦＭＯＣ−付加１１−((((９Ｈ−フルオレン９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)ウンデカン酸(１.２ｇ, ２.８３ｍｍｏｌ)/５ｍＬジクロロメタンの溶液、次いでＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(３.４５ｍＬ，１９.８３ｍｍｏｌ)を加えて、混合物を、ミニシェーカー上で、室温で終夜攪拌した。２０時間後に、混合物をメタノール(３ｍＬ)で希釈して、２時間攪拌して、何ら反応していないクロロトリチル樹脂をクエンチした。樹脂を、ポリプロピレン反応チューブ中で真空濾過して、１００ｍＬ ＤＭＦ、１００ｍＬ ジクロロメタン、最終的に１０ｍＬジエチルエーテルで洗った。樹脂を、風乾させて、０.４４ｍｍｏｌ/ｇローディングと推定して、そのまま使用した。
【０４２７】
実施例１１０６８の製造
【化１２３】
0006804442.tif 000126
実施例１１０６８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９.２％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.７８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２００.０(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１９９.１３７４(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１９９.１３７９(Ｍ＋２Ｈ).
【０４２８】
実施例１１０６９の製造
【化１２４】
0006804442.tif 000127
実施例１１０６９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６.９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.５９８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１３５.２(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１３４.０６９５(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１３４.０６９１(Ｍ＋２Ｈ)。
【０４２９】
実施例１１０７０の製造
【化１２５】
0006804442.tif 000128
実施例１１０７０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.４％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.７１５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０６.０(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１０５.０６６８(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１０５.０６６３(Ｍ＋２Ｈ).
【０４３０】
実施例１１０７１の製造
【化１２６】
0006804442.tif 000129
実施例１１０７１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９.２％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.７３３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０７７.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０７６.５５６１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０７６.５５４７(Ｍ＋２Ｈ).
【０４３１】
実施例１１０７２の製造
【化１２７】
0006804442.tif 000130
実施例１１０７２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は５１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０３５.０(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０３４.０２９７(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０３４.０２６９(Ｍ＋２Ｈ).
【０４３２】
実施例１１０７３の製造
【化１２８】
0006804442.tif 000131
実施例１１０７３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.７％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.０３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１５７.６(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１５６.６０５４(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１５６.６０２９(Ｍ＋２Ｈ).
【０４３３】
実施例１１０７４の製造
【化１２９】
0006804442.tif 000132
実施例１１０７４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.７％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.０３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１５７.６(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１５６.６０５４(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１５６.６０２９(Ｍ＋２Ｈ).
【０４３４】
実施例１１０７５の製造
【化１３０】
0006804442.tif 000133
実施例１１０７５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.１％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.８７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１９３.２(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１９２.１２４０(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１９２.１２２７(Ｍ＋２Ｈ).
【０４３５】
実施例１１０７６の製造
【化１３１】
0006804442.tif 000134
実施例１１０７６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.０８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０４２.１(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０４１.０３１９(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０４１.０３０９(Ｍ＋２Ｈ)。
【０４３６】
実施例１１０７７の製造
【化１３２】
0006804442.tif 000135
実施例１１０７７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.０５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０７０.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０６９.５４２６(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０６９.５４０５(Ｍ＋２Ｈ).
【０４３７】
実施例１１０７８の製造
【化１３３】
0006804442.tif 000136
実施例１１０７８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.９０３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０９８.７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０９８.０５３３(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０９８.０５０８(Ｍ＋２Ｈ).
【０４３８】
実施例１１０７９の製造
【化１３４】
0006804442.tif 000137
実施例１１０７９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.５３３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１２７.７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１２６.５６４１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１２６.５６０８(Ｍ＋２Ｈ).
【０４３９】
実施例１１０８０の製造
【化１３５】
0006804442.tif 000138
実施例１１０８０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９.０％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.２３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１９４.８(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１９３.１１３６(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１９３.１１２７(Ｍ＋２Ｈ).
【０４４０】
実施例１１０８１の製造
【化１３６】
0006804442.tif 000139
実施例１１０８１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.７４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１６７.８(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１６６.６１８５(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１６６.６１６７(Ｍ＋２Ｈ).
【０４４１】
実施例１１０８２の製造
【化１３７】
0006804442.tif 000140
実施例１１０８２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９.３％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０１０.１(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１００９.０１０６(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１００９.０１０３(Ｍ＋２Ｈ).
【０４４２】
実施例１１０８３の製造
【化１３８】
0006804442.tif 000141
実施例１１０８３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.５７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１６１.２(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１６０.１０２７(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１６０.１０３９(Ｍ＋２Ｈ).
【０４４３】
実施例１１０８４の製造
【化１３９】
0006804442.tif 000142
実施例１１０８４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.２％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６２５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０３８.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０３７.５２１３(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０３７.５２２１(Ｍ＋２Ｈ).
【０４４４】
実施例１１０８５の製造
【化１４０】
0006804442.tif 000143
実施例１１０８５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９.７％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.９５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０４.７(Ｍ＋２Ｈ). 
【０４４５】
実施例１１０８６の製造
【化１４１】
0006804442.tif 000144
実施例１１０８６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５.８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.０８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１６０.８(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１５９.６１０７(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１５９.６１０４(Ｍ＋２Ｈ).
【０４４６】
実施例１１０８７の製造
【化１４２】
0006804442.tif 000145
実施例１１０８７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９.５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.５９５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２５２.０(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２５１.１９１８(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２５１.１９１９(Ｍ＋２Ｈ).
【０４４７】
実施例１１０８８の製造
【化１４３】
0006804442.tif 000146
実施例１１０８８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９４.１％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：４分間のグラジエント、１分保持：保持時間＝２.３００分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３１１.５(Ｍ＋２Ｈ).
【０４４８】
実施例１１０８９の製造
【化１４４】
0006804442.tif 000147
実施例１１０８９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は８７.６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.９２３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１００.９(Ｍ＋２Ｈ).
【０４４９】
実施例１１０９０の製造
【化１４５】
0006804442.tif 000148
実施例１１０９０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は、２１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は、９８.５％であった;分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.３９５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１９２.７(Ｍ＋２Ｈ).
【０４５０】
実施例１１０９１の製造
【化１４６】
0006804442.tif 000149
実施例１１０９１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.２５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０９３.９(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０９３.０７９４(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０９３.０７７９(Ｍ＋２Ｈ).
【０４５１】
実施例１１０９２の製造
【化１４７】
0006804442.tif 000150
実施例１１０９２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５.９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.０３１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１４８.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１５９.６１０７(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１５９.６１０４(Ｍ＋２Ｈ).
【０４５２】
実施例１１０９３の製造
【化１４８】
0006804442.tif 000151
実施例１１０９３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５.６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：９分間のグラジエント、１分間保持：保持時間＝３.９２０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０１.９(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１０１.０５８６(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１０１.０５７８(Ｍ＋２Ｈ).
【０４５３】
実施例１１０９４の製造
【化１４９】
0006804442.tif 000152
実施例１１０９４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.３％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：９分間のグラジエント、１分間保持：保持時間＝４.０２３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０１.５(Ｍ＋２Ｈ).
【０４５４】
実施例１１０９５の製造
【化１５０】
0006804442.tif 000153
実施例１１０９５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.４％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：４分のグラジエント、１分間保持：保持時間＝２.２８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０１.９(Ｍ＋２Ｈ).
【０４５５】
実施例１１０９６の製造
【化１５１】
0006804442.tif 000154
実施例１１０９６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.０５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０９４.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０９３.５７１４(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０９３.５６８５(Ｍ＋２Ｈ).
【０４５６】
実施例１１０９７の製造
【化１５２】
0006804442.tif 000155
実施例１１０９７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９４.４％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.９５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０２.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１０１.５５０６(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１０１.５４９９(Ｍ＋２Ｈ).
【０４５７】
実施例１１０９８の製造
【化１５３】
0006804442.tif 000156
実施例１１０９８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.８７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１２７.９(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１２７.０５６１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１２７.０５６４(Ｍ＋２Ｈ).
【０４５８】
実施例１１０９９の製造
【化１５４】
0006804442.tif 000157
実施例１１０９９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６.３％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.０３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１２２.８(Ｍ＋２Ｈ).
【０４５９】
実施例１１１００の製造
【化１５５】
0006804442.tif 000158
実施例１１１００を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.０８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１２２.８(Ｍ＋２Ｈ).
【０４６０】
実施例１１１０１の製造
【化１５６】
0006804442.tif 000159
実施例１１１０１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.１６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０９４.３(Ｍ＋２Ｈ).
【０４６１】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｄの製造
【化１５７】
0006804442.tif 000160
２０ｍＬ シンチレーションバイアルに、(Ｓ)−Ｎ−ＦＭＯＣ−オクチルグリシン(１８０ｍｇ, ０.４４０ｍｍｏｌ)、２−クロロトリチルクロリド(１０００ｍｇ, １.４００ｍｍｏｌ)、ＣＨ２Ｃｌ２(１０ｍＬ)およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(３９８ｍｇ, ３.０８ｍｍｏｌ)を加えた。バイアルを密封して、リストアクションシェーカー上で終夜撹拌した。翌日、この反応を、２ｍＬのメタノールを加えることにより停止させて、フラスコを更に２時間振盪する。次いで、樹脂を濾過して、ＣＨ２Ｃｌ２、ＤＭＦ ３ｘ、ＣＨ２Ｃｌ２ ３ｘ、最終的にジエチルエーテルで洗った。樹脂を、真空乾燥させて、そのままペプチド合成に使用した。樹脂を、０.４４ ｍｅｑ/ｇの推定ローディングにて、ペプチド合成に使用した。
【０４６２】
実施例１１１０２の製造
【化１５８】
0006804442.tif 000161
実施例１１１０２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｄを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.４％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.２２３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０９３.０(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０９２.１２０５(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０９２.１２０２(Ｍ＋２Ｈ).
【０４６３】
実施例１１１０３の製造
【化１５９】
0006804442.tif 000162
実施例１１１０３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｄを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.４４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０８６.９(Ｍ＋２Ｈ).
【０４６４】
Ｃ１６アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ａの製造
【化１６０】
0006804442.tif 000163
２０ｍＬ バイアルに、４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂(０.９４ｍｍｏｌ/ｇ)(２ｇ, １.８８０ｍｍｏｌ)、ヘキサデカン−１−アミン(１.８１６ｇ, ７.５２ｍｍｏｌ)、ナトリウムトリアセトキシホウ化水素(１.５９４ｇ, ７.５２ｍｍｏｌ)、ＤＭＦ(１０ｍＬ)および酢酸(.１ｍＬ)を加えた。バイアルを密封して、オービタルシェーカー上で４８時間振盪した。４８時間後に、反応混合物を濾過して、粗製樹脂を、５Ｘ ＤＭＦで洗い、３Ｘ メタノール、５Ｘ ＣＨ２Ｃｌ２および最後にジエチルエーテルで洗った。樹脂を、終夜真空下に乾燥させた。ローディングは、０.９４ｍｍｏｌ/ｇであると推定され、次の工程にそのまま使用した。
【０４６５】
Ｃ１６アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｂの製造
【化１６１】
0006804442.tif 000164
４０ｍＬバイアルに、Ｃ１６アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ａ(１ｇ, ０.９４０ｍｍｏｌ)、０.２Ｍ ２−((((９Ｈ−フルオレン９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)酢酸/ＤＭＦ(９.４０ｍＬ，１.８８０ｍｍｏｌ)、０.２Ｍ ＨＡＴＵ/ＤＭＦ(９.４０ｍＬ，１.８８０ｍｍｏｌ)および０.２Ｍ ヒューニッヒ塩基/ＤＭＦ(９.４０ｍＬ，３.７６ｍｍｏｌ)を加えた。バイアルを密封して、オービタルシェーカーで終夜撹拌した。翌日、反応混合物を濾過して、粗製樹脂を、５Ｘ ＤＭＦ、５Ｘ ＣＨ２Ｃｌ２および最終的に２Ｘ ジエチルエーテルで洗った。樹脂を、終夜真空下にて乾燥させた。ローディングは０.９４ｍｍｏｌ/ｇであると推定され、そのまま次の工程に使用した。
【０４６６】
実施例１１１０４の製造
【化１６２】
0006804442.tif 000165
実施例１１１０４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｃ１６アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｂを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９.５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝６.０２５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０７８.２５(Ｍ＋２Ｈ).
【０４６７】
Ｃ１８アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ａの製造
【化１６３】
0006804442.tif 000166
２０ｍＬ バイアルに、４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂０.９４ｍｍｏｌ/ｇ ローディング(２ｇ, １.８８０ｍｍｏｌ)、オクタデカン−１−アミン(２.５３ｇ, ９.４０ｍｍｏｌ)、ＤＭＦ(１０ｍＬ)、酢酸(.１ ｍＬ)およびナトリウムトリアセトキシホウ化水素(１.９９２ｇ, ９.４０ｍｍｏｌ)を加えた。バイアルを密封して、オービタルシェーカーで４８時間撹拌した。４８時間後に、反応混合物を濾過して、粗製樹脂を、５Ｘ ＤＭＦ、３Ｘ メタノール、５Ｘ ＣＨ２Ｃｌ２および最後にジエチルエーテルで洗った。樹脂を、終夜真空下において乾燥させた。ローディングは０.９４ｍｍｏｌ/ｇであると推定され、次の工程においてそのまま使用した。
【０４６８】
実施例１１１０５の製造
【化１６４】
0006804442.tif 000167
実施例１１１０５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｃ１８アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエントは２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は５.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９.５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝６.５２３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０６３.８５(Ｍ＋２Ｈ). 
【０４６９】
Ｃ１４アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ａの製造
【化１６５】
0006804442.tif 000168
２０ｍＬバイアルに、４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂０.９４ｍｍｏｌ/g ローディング(２ｇ, １.８８０ｍｍｏｌ)、ＤＭＦ(１５ｍＬ)、テトラデカン−１−アミン(１.２０４ｇ, ５.６４ｍｍｏｌ)、ナトリウムトリアセトキシホウ化水素(１.５９４ｇ, ７.５２ｍｍｏｌ)および酢酸(.１ｍＬ)を加えた。バイアルを密封して、オービタルシェーカー上で終夜振盪した。翌日、樹脂を濾過して、３ｘメタノールで洗い、３ｘ ＤＭＦで洗い、３ｘ ＣＨ２Ｃｌ２および最終的に１ｘ Ｅｔ２Ｏで洗った。樹脂を、真空下において乾燥させて、そのまま次の工程に使用した。ローディングは０.９４ｍｍｏｌ/ｇであると推定され、そのまま次の工程に使用した。
【０４７０】
Ｃ１４アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｂの製造
【化１６６】
0006804442.tif 000169
４０ｍＬバイアルに、Ｃ１４アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ａ(１ｇ, ０.９４０ｍｍｏｌ)、０.２Ｍ ２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)酢酸/ＤＭＦ(９.４０ｍＬ，１.８８０ｍｍｏｌ)(９９０２６−１１５)、０.２Ｍ ＨＡＴＵ(９.４０ｍＬ，１.８８０ｍｍｏｌ)/ＤＭＦおよび０.２Ｍ ヒューニッヒ塩基/ＤＭＦ(９.４０ｍＬ，３.７６ｍｍｏｌ)を加えた。バイアルを密封して、オービタルシェーカーで終夜振盪した。翌日に、樹脂を濾取して、３ｘ ＤＭＦで洗い、３ｘ ＣＨ２Ｃｌ２で洗い、３ｘ ＤＭＦで洗い、１ｘ ＣＨ２Ｃｌ２で洗い、最終的に１ｘ Ｅｔ２Ｏで洗った。粗製樹脂を、高真空下にて乾燥させた。ローディングは０.９４ｍｍｏｌ/ｇであると推定され、そのまま次の工程に使用した。
【０４７１】
実施例１１１０６の製造
【化１６７】
0006804442.tif 000170
実施例１１１０６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｃ１４アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｂを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエントは２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.６８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０３６.００(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０３５.０９２１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０３５.０９２５(Ｍ＋２Ｈ).
【０４７２】
実施例１１１０７の製造
【化１６８】
0006804442.tif 000171
実施例１１１０７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｃ１４アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｂを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９.３％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.８８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０７７.４７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０７６.６２８８(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０７６.６２８６(Ｍ＋２Ｈ),g
【０４７３】
実施例１１１０８の製造
【化１６９】
0006804442.tif 000172
実施例１１１０８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｃ１６アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｂを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９２％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝６.１８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１２７.９(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１２７.６３２１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１２７.６３２９(Ｍ＋２Ｈ).
【０４７４】
実施例１１１０９の製造
【化１７０】
0006804442.tif 000173
実施例１１１０９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｃ１６アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｂを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９１％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝６.０９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０９２.８７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０９２.１０７９(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０９２.１０８１(Ｍ＋２Ｈ).
【０４７５】
実施例１１１１０の製造
【化１７１】
0006804442.tif 000174
実施例１１１００を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｃ１６アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｂを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９４％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝６.４８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１２５.３４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１２４.６２６８(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１２４.６２２８(Ｍ＋２Ｈ).
【０４７６】
実施例１１１１１の製造
【化１７２】
0006804442.tif 000175
実施例１１１１１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｃ１６アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｂを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１２.９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝６.４７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１４０.５５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１３９.６３２１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１３９.６２７４(Ｍ＋２Ｈ).
【０４７７】
Ｃ１６アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｃの製造
【化１７３】
0006804442.tif 000176
２０ｍＬ バイアルに、Ｃ１６アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ａ(６００ｍｇ, ０.５４０ｍｍｏｌ)、１１−((((９Ｈ−フルオレン９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)ウンデカン酸(４５７ｍｇ, １.０８０ｍｍｏｌ)、ＤＭＦ(５ｍＬ)、０.２Ｍ ＨＡＴＵ/ＤＭＦ(５.４０ｍＬ，１.０８０ｍｍｏｌ)および０.２Ｍ ヒューニッヒ塩基/ＤＭＦ(５.４０ｍＬ，２.１６０ｍｍｏｌ)を加えた。バイアルを密封して、オービタルシェーカー上で２４時間振盪した。２４時間後に、反応混合物を濾過して、粗製樹脂をメタノールで洗い、５Ｘ ＤＭＦで、５Ｘ ＣＨ２Ｃｌ２で、最終的にジエチルエーテルで洗った。樹脂を、終夜真空下において乾燥させた。ローディングは０.９４ｍｍｏｌ/gであると推定され、そのまま次工程で使用した。
【０４７８】
実施例１１１１２の製造
【化１７４】
0006804442.tif 000177
実施例１１１１２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｃ１６アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝６.９５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１６０.０２(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１５９.１８６５(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１５９.１８４９(Ｍ＋２Ｈ).
【０４７９】
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−６−((Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−５−オキソ−４−テトラデカンアミドペンタンアミド)ヘキサン酸の製造
【化１７５】
0006804442.tif 000178
２５０ｍＬ丸底フラスコに、(Ｓ)−４−アミノ−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−５−オキソペンタン酸(３ｇ, １４.７６ｍｍｏｌ)、ＣＨ２Ｃｌ２(１００ｍＬ)、テトラデカノイルクロリド(４.０１ｇ, １６.２４ｍｍｏｌ)およびヒューニッヒ塩基(５.６７ｍＬ，３２.５ｍｍｏｌ)を加えた。フラスコを窒素ブランケット下にて保持して、密封して、室温で２４時間撹拌した。２４時間後に、反応混合物を、分液漏斗に注ぎ入れて、飽和塩化アンモニウムで洗った。水層を、１０％ メタノールクロロホルム溶液で３x抽出した。有機画分を合わせて、塩水で洗った。有機層を分離して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、真空蒸発させて、(Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−５−オキソ−４−テトラデカンアミドペンタン酸(６.１g, １４.７５ｍｍｏｌ，１００％収率)を粘性油状物として得た。この物質を、そのまま次の工程に使用した。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ, クロロホルム−ｄ) δ 4.50 - 4.29(m, 1H), 3.68(quin, J=6.7 Hz, 1H), 3.09(q, J=7.5 Hz, 1H), 2.43 - 2.27(m, 2H), 2.27 - 2.06(m, 2H), 1.73 - 1.55(m, 2H), 1.47(s, 9H), 1.39 - 1.17(m, 20H), 1.00 - 0.80(m, 3H)．
【０４８０】
【化１７６】
0006804442.tif 000179
５０ｍＬ丸底フラスコに、(Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−５−オキソ−４−テトラデカンアミドペンタン酸(２ｇ, ４.８４ｍｍｏｌ)、ＤＭＦ(１０ｍＬ)、パーフルオロフェニル ２,２,２−トリフルオロ酢酸(２.７１ｇ, ９.６７ｍｍｏｌ)およびピリジン(０.８６０ｍＬ，１０.６４ｍｍｏｌ)を加えた。このフラスコを、セプタムで密閉し、窒素ブランケット下において保持して、終夜室温で撹拌した。翌日に、この反応を、飽和クエン酸溶液に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２で３x抽出した。有機層を合わせて、塩水で洗い、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、真空蒸発させた。粗生成物(Ｓ)−１−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(パーフルオロフェニル)２−テトラデカンアミドペンタンジオエート(２.６５ｇ, ４.５７ｍｍｏｌ, ９５％収率)を、精製せずにそのまま使用した。
【０４８１】
【化１７７】
0006804442.tif 000180
５０ｍＬ丸底フラスコに、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−６−アミノヘキサン酸(１.６５３ｇ, ４.４９ｍｍｏｌ)、ＤＭＦ(１５ｍＬ)、(Ｓ)−１−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(パーフルオロフェニル)２−テトラデカンアミドペンタンジオエート(２.６ｇ, ４.４９ｍｍｏｌ)およびヒューニッヒ塩基(０.９４０ｍＬ，５.３８ｍｍｏｌ)を加えた。フラスコをセプタムで密閉して、窒素ブランケット下で保持した。反応溶液を、室温で４８時間撹拌した。４８時間後、反応溶液は均質であった。反応混合物を、飽和クエン酸溶液に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２で３x抽出した。有機画分を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、真空蒸発させた。粗製油状物を、最初は１００％ＣＨ２Ｃｌ２、次いで５％ メタノール/９５％ＣＨ２Ｃｌ２で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。純粋な画分を合わせて、真空蒸発させて、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−６−((Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−５−オキソ−４−テトラデカンアミドペンタンアミド)ヘキサン酸(２.３５ｇ, ２.９２ｍｍｏｌ, ６５.１％収率)を粘性油状物として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ) δ 7.78(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.62(br. s., 2H), 7.41(t, J=7.4 Hz, 2H), 7.32(t, J=7.4 Hz, 2H), 6.54(br. s., 1H), 5.72(m, 2H), 4.39(m, 4H), 4.27 - 4.14(m, 1H), 3.28(m, 2H), 2.26(m, 4H), 2.15(m, 2H), 1.92(m, 2H), 1.62(m, 4H), 1.48(s, 9H), 1.26(br. s., 20H), 0.89(t, J=6.8 Hz, 3H).
【０４８２】
実施例１１１１４の製造
【化１７８】
0006804442.tif 000181
実施例１１１１４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾ｒｉｎｋ樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.９７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２７５.１８(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２７４.６８０３(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２７４.６７９１(Ｍ＋２Ｈ).
【０４８３】
実施例１１１１５の製造
【化１７９】
0006804442.tif 000182
実施例１１１１５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｃ１６アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝６.９３０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１３１.５４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１３０.６７５８(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１３０.６７４７(Ｍ＋２Ｈ).
【０４８４】
実施例１１１１６の製造
【化１８０】
0006804442.tif 000183
実施例１１１１６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾ｒｉｎｋ樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５.２％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.１０６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２４７.０(Ｍ＋２Ｈ).
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２４６.１６９６(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２４６.１６８４(Ｍ＋２Ｈ).
【０４８５】
実施例１１１１９の製造
【化１８１】
0006804442.tif 000184
実施例１１１１９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｃ１６アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９３％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.９６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１８９.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１８８.６８１３(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１８８.６８２１(Ｍ＋２Ｈ).
【０４８６】
実施例１１１２０の製造
【化１８２】
0006804442.tif 000185
実施例１１１２０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｃ１６アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は、９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.６８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１８３.６(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１８２.６３２３(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１８２.６３１７(Ｍ＋２Ｈ).
【０４８７】
実施例１１１２３の製造
【化１８３】
0006804442.tif 000186
実施例１１１２３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５.３％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.７７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２７６.７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２７５.６６４３(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２７５.６６４５(Ｍ＋２Ｈ).
【０４８８】
実施例１１１２４の製造
【化１８４】
0006804442.tif 000187
実施例１１１２４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｃ１６アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は、９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝６.４０５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２２０.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２１９.１８９４(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２１９.１８８８(Ｍ＋２Ｈ).
【０４８９】
実施例１１１２５の製造
【化１８５】
0006804442.tif 000188
実施例１１１２５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾Ｒｉｎｋ樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.７８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３４１.８(Ｍ＋２Ｈ).
【０４９０】
実施例１１１２６の製造
【化１８６】
0006804442.tif 000189
【０４９１】
実施例１１１２６Ａ
【化１８７】
0006804442.tif 000190
実施例１１１２６Ａを、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｒｉｎｋ樹脂を、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６２５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０７.０(Ｍ＋２Ｈ).
【０４９２】
１−ｔｅｒｔ−ブチル １６−(パーフルオロフェニル)ヘキサデカンジオエートの製造
【化１８８】
0006804442.tif 000191
１ドラムバイアルに、１６−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１６−オキソヘキサデカン酸(１００ｍｇ, ０.２９２ｍｍｏｌ)、ＤＭＦ(.８ｍＬ)、パーフルオロフェニル ２,２,２−トリフルオロ酢酸(１６４ｍｇ, ０.５８４ｍｍｏｌ)およびピリジン(０.０５２ｍＬ，０.６４２ｍｍｏｌ)を加えた。バイアルを、セプタムで密封して、終夜室温で撹拌した。翌日、粗製反応混合物をシリカゲルカラム上に重層して、５％ ＥｔＯＡｃ/９５％ ヘキサン〜３０％ ＥｔＯＡｃ/７０％ ヘキサンを用いて溶出して精製した。目的の生成物は、非常にかすかなＵＶ検出の第一溶出ピークであった。純粋画分を合わせて、真空蒸発させて、１−ｔｅｒｔ−ブチル １６−(パーフルオロフェニル)ヘキサデカンジオエート(１３２ｍｇ, ０.２６０ｍｍｏｌ, ８９％収率)を、白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ, クロロホルム−ｄ) δ 2.68(s, 2H), 2.22(s, 2H), 1.79(s, 2H), 1.59(s, 4H), 1.47(s, 9H), 1.29(br. s., 18H).
【０４９３】
１１１２６Ｂの製造
【化１８９】
0006804442.tif 000192
１ドラムバイアルに、実施例１１１２６Ａ(２７ｍｇ, ０.０１２ｍｍｏｌ)、ＤＭＦ(.７ｍＬ)、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(９.４７ｍｇ, ０.０７３ｍｍｏｌ)および１−ｔｅｒｔ−ブチル １６−(パーフルオロフェニル)ヘキサデカンジオエート(１１.１８ｍｇ, ０.０２２ｍｍｏｌ)を加えた。反応混合物を、室温で終夜撹拌した。翌日、ＬＣ/ＭＳから、この反応は終了していた。粗製反応物質を、ジエチルエーテルに注ぎ入れて、沈殿が形成した。沈殿物を、遠心分離により収集して、ジエチルエーテルを傾捨した。粗製固体(１４ｍｇ)を、精製せずにそのまま次工程で実施した。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.４２８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２６９.３(Ｍ＋２Ｈ).
【化１９０】
0006804442.tif 000193
【０４９４】
１ドラムバイアルに、実施例１１１２６Ｂ(１４ｍｇ, ５.５２μｍｏｌ)および標準的な開裂溶液(０.８ｍＬ)を加えた。反応溶液を、室温で１５分間撹拌して、反応溶液を、ＬＣ/ＭＳにより確認した。反応が完了して、粗製反応混合物を、ジエチルエーテル(１５ｍＬ)に注ぎ入れた。得られる固体を遠心分離後に収集した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.０４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２４１.１(Ｍ＋２Ｈ) ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２４０.１４５８(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２４０.１４４５(Ｍ＋２Ｈ).
【０４９５】
実施例１１１２８の製造
【化１９１】
0006804442.tif 000194
実施例１１１２８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。Ｃ１６アミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.３％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.５６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２７７.８(Ｍ＋２Ｈ).
【０４９６】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅの製造
【化１９２】
0006804442.tif 000195
２０ｍＬ シンチレーションバイアルに、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−オキソブタン酸(０.３７０ｇ, .９ｍｍｏｌ)、２−クロロトリチル樹脂の１.４２ｍｍｏｌ/g ローディング(２.０５７ｇ, ２.８８ｍｍｏｌ)、ＣＨ２Ｃｌ２(１５ｍＬ)およびヒューニッヒ塩基(１.０２２ｍＬ，５.８５ｍｍｏｌ)を加えた。バイアルを密封して、オービタルシェーカー上に終夜室温で振盪した。翌日、反応溶液を、メタノール(２ｍＬ)で希釈して、更に２時間振盪した。次いで、樹脂を濾取して、ＤＭＦ ３ｘ、ＣＨ２Ｃｌ２ ４ｘおよび最後にジエチルエーテルで洗った。樹脂を、真空乾燥させて、０.４４ ｍｅｑ/ｇのローディングと推定して、ペプチド合成のためにそのまま使用した。
【０４９７】
実施例１１１２９の製造
【化１９３】
0006804442.tif 000196
実施例１１１２９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５.６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.８２８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０７０.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０６９.５４２６(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０６９.５３９２(Ｍ＋２Ｈ).
【０４９８】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｆの製造
【化１９４】
0006804442.tif 000197
２０ｍＬ シンチレーションバイアルに、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン-９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−５−オキソペンタン酸(０.３８３ｇ, .９ｍｍｏｌ)、２−クロロトリチル樹脂 １.４２ｍｍｏｌ/g ローディング(２.０５７ｇ, ２.８８ｍｍｏｌ)、ＣＨ２Ｃｌ２(１５ｍＬ)およびヒューニッヒ塩基(１.０２２ｍＬ，５.８５ｍｍｏｌ)を加えた。バイアルを密封して、オービタルシェーカー上で終夜室温にて振盪した。翌日、反応溶液を、メタノール(２ｍＬ)で希釈して、更に２時間振盪した。次いで、樹脂を濾取して、ＤＭＦ３ｘ、ＣＨ２Ｃｌ２ ４ｘおよび最後にジエチルエーテルで洗った。樹脂を、真空乾燥させて、０.４４ ｍｅｑ/ｇのローディングであると推定され、ペプチド合成のためにそのまま使用した。
【０４９９】
実施例１１１３０の製造
【化１９５】
0006804442.tif 000198
実施例１１１３０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｆを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は、３２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.８０３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０７７.６(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０７６.５５０４(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０７６.５４６２(Ｍ＋２Ｈ).
【０５００】
実施例１１１３１の製造
【化１９６】
0006804442.tif 000199
実施例１１１３１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は、９８.８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.７２０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０６７.０(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０６６.０３２１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０６６.０３２３(Ｍ＋２Ｈ). 
【０５０１】
実施例１１１３２の製造
【化１９７】
0006804442.tif 000200
実施例１１１３２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｆを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５.９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.７２５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０７４.０(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０７３.０３９９(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０７３.０３９３(Ｍ＋２Ｈ).
【０５０２】
ＰＥＧアミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｄの製造
【化１９８】
0006804442.tif 000201
５０ｍＬの圧力容器に、４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂０.９４ｍｍｏｌ/ｇ ローディング(１.５ｇ, １.３５０ｍｍｏｌ)、(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(３−(２−(２−(３−アミノプロポキシ)エトキシ)エトキシ)プロピル)カルバメート塩酸塩(０.７１１ｇ, １.４８５ｍｍｏｌ)、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(１.４３１ｇ, ６.７５ｍｍｏｌ)、ＤＭＦ(２０ｍＬ)および酢酸(.２ｍＬ)を加えた。フラスコを密封して、リストアクションシェーカー上で終夜振盪した。翌日、樹脂を濾取して、メタノール ２ｘ、ＤＭＦ ３ｘおよびＣＨ２Ｃｌ２ ４ｘで洗った。樹脂を、終夜、真空乾燥させた。ローディングは、０.９４ｍｍｏｌ／ｇであると推定され、そのまま次工程に使用した。
【０５０３】
ＰＥＧアミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｅの製造
【化１９９】
0006804442.tif 000202
７ｍＬ バイアルに、ＰＥＧアミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｄ(０.２２２ｇ, .２ｍｍｏｌ)、１６−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１６−オキソヘキサデカン酸(０.１３７ｇ, ０.４００ｍｍｏｌ)、ＨＡＴＵ(２.０００ｍＬ，０.４００ｍｍｏｌ)、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(２.０００ｍＬ，０.８００ｍｍｏｌ)およびＤＭＦ(４ｍＬ)を加えた。バイアルを、リストアクションシェーカー上で終夜振盪した。翌日、樹脂を濾過して、ＤＭＦ ３ｘ、ＣＨ２Ｃｌ２ ４ｘ、次いでＥｔ２Ｏで洗った。樹脂を、終夜、真空乾燥させた。ローディングは０.９４ｍｍｏｌ/ｇであると推定され、そのまま次の工程に使用した。
【０５０４】
実施例１１１３３の製造
【化２００】
0006804442.tif 000203
実施例１１１３３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。ＰＥＧアミン修飾４−(４−ホルミル−３−メトキシ−フェノキシ)ブチリルＡＭ樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント２５分かけて１５〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は、９９.６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.３５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１６７.１(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１６６.１３９１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１６６.１３７０(Ｍ＋２Ｈ).
【０５０５】
１−ｔｅｒｔ−ブチル １６−(パーフルオロフェニル)ヘキサデカンジオエートの製造
【化２０１】
0006804442.tif 000204
５０ｍＬ丸底フラスコに、１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸(８０７ｍｇ, ２.１７８ｍｍｏｌ)、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(８ｍＬ)、ピリジン(３７９ｍｇ, ４.７９ｍｍｏｌ)およびパーフルオロフェニル ２,２,２−トリフルオロ酢酸(１２２０ｍｇ, ４.３６ｍｍｏｌ)を加えた。フラスコを、セプタムで密閉し、窒素ブランケット下にて保持して、終夜室温で撹拌した。翌日、反応溶液を、飽和クエン酸溶液に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２ ３ｘで抽出した。有機層を合わせて、塩水で洗い、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、真空蒸発させた。粗生成物 １−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(パーフルオロフェニル)オクタデカンジオエート(１.１ｇ, ２.０５０ｍｍｏｌ, ９４％収率)を、精製せずにそのまま使用した。
【０５０６】
(Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタン酸の製造
【化２０２】
0006804442.tif 000205
２０ｍＬ シンチレーションバイアルに、１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(パーフルオロフェニル)オクタデカンジオエート(５００ｍｇ, ０.９３２ｍｍｏｌ)、(Ｓ)−４−アミノ−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−５−オキソペンタン酸(１８９ｍｇ, ０.９３２ｍｍｏｌ)、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(３ｍＬ)およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(１５７ｍｇ, １.２１１ｍｍｏｌ)を加えた。反応溶液を、２４時間室温で撹拌した。２４時間後、反応物は均一であった。反応混合物を、飽和クエン酸溶液に注ぎ入れて、ＣＨ2Ｃｌ2 ３ｘ。有機画分を合わせて、塩水で洗い、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、真空蒸発させた。粗製油状物の(Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタン酸(５１８ｍｇ, ０.９３２ｍｍｏｌ, １００％収率)を、精製せずにそのまま使用した。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ, クロロホルム−ｄ) δ 6.33(m., 1H), 4.56(m, 1H), 2.45(m, 2H), 2.24(m, 5H), 1.95(m, 1H), 1.61(m., 5H), 1.49(s, 9H), 1.46(s, 9H), 1.26(m, 23H).
【０５０７】
(Ｓ)−１−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(パーフルオロフェニル)２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ペンタンジオエートの製造
【化２０３】
0006804442.tif 000206
２０ｍＬ シンチレーションバイアルに、(Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタン酸(５１８ｍｇ, ０.９３２ｍｍｏｌ)、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(３ｍＬ)、ピリジン(１６２ｍｇ, ２.０５０ｍｍｏｌ)およびパーフルオロフェニル ２,２,２−トリフルオロ酢酸(５２２ｍｇ, １.８６４ｍｍｏｌ)を加えた。反応溶液を、２４時間室温で撹拌した。２４時間後に、反応混合物を、飽和クエン酸溶液に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２ ３ｘで抽出した。有機画分を合わせて、塩水で洗い、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、真空蒸発させた。粗製油状物(Ｓ)−１−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(パーフルオロフェニル)２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ペンタンジオエート(６７０ｍｇ, ０.９２８ｍｍｏｌ, １００％収率)を、次の工程にそのまま使用した。
【０５０８】
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−６−((Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタンアミド)ヘキサン酸の製造
【化２０４】
0006804442.tif 000207
１ドラムバイアルに、(Ｓ)−１−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(パーフルオロフェニル)２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ペンタンジオエート(３３０ｍｇ, ０.４５７ｍｍｏｌ)、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２ｍＬ)、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(１７７ｍｇ, １.３７２ｍｍｏｌ)および(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−６−アミノヘキサン酸(１６８ｍｇ, ０.４５７ｍｍｏｌ)を加えた。反応溶液を、２４時間室温で撹拌した。２４時間後に、反応物は均一であった。反応混合物を、飽和クエン酸溶液に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２ ３ｘで抽出した。有機画分を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、真空蒸発させた。粗製油状物を、最初に１００％ＣＨ２Ｃｌ２、次いで５％メタノール/９５％ＣＨ２Ｃｌ２で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。純粋な画分を合わせて、真空蒸発させて、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−６−((Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタンアミド)ヘキサン酸(１０６ｍｇ, ０.１１７ｍｍｏｌ, ２５.６％収率)を粘性油状物として得た：Column PHENOMENEX−LUNA 2.0 X 30mm 3um 粒子；移動相Ａ：１０：９０ メタノール：水(１０ｍＭ トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９０：１０ メタノール：水(１０ｍＭ トリフルオロ酢酸を含む)；温度：４０℃；グラジエント：０％Ｂ、５分かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで１.０分間保持；流量：０.８ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ．分析ＬＣＭＳ：保持時間＝５.７４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９０６.８６(Ｍ＋Ｈ)．
【０５０９】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｇの製造
【化２０５】
0006804442.tif 000208
２０ｍＬシンチレーションバイアルに、２−クロロトリチル樹脂の１.４２ｍｍｏｌ/g ローディング(２６７ｍｇ, ０.３７４ｍｍｏｌ)、ＣＨ２Ｃｌ２(４ｍＬ)、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−６−((Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタンアミド)ヘキサン酸(１０６ｍｇ, ０.１１７ｍｍｏｌ)およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(１０６ｍｇ, ０.８１９ｍｍｏｌ)を加えた。バイアルを密封して、リストアクションシェーカーで終夜振盪した。翌日、反応を、２ｍＬメタノールを加えて、フラスコを更に２時間振盪することにより停止させた。次いで、樹脂を濾過して、ＣＨ２Ｃｌ２、ＤＭＦ３ｘ、ＣＨ２Ｃｌ２３ｘおよび最後にジエチルエーテルで洗った。樹脂を、真空乾燥させて、０.４４ ｍｅｑ/ｇのローディングと推定して、ペプチド合成のためにそのまま使用した。
【０５１０】
実施例１１１３４の製造
【化２０６】
0006804442.tif 000209
実施例１１１３４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｇを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ／ＭＳにより精製した：カラム：Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２５分かけて５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：３０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.２８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２２２.０(Ｍ＋２Ｈ).
【０５１１】
実施例１１１３５の製造
【化２０７】
0006804442.tif 000210
実施例１１１３５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｄを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.１４１分。
【０５１２】
実施例１１１３６の製造
【化２０８】
0006804442.tif 000211
実施例１１１３６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は、９５.２％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.９３０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１４１.０９６９(Ｍ＋２Ｈ).
【０５１３】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｈの製造
【化２０９】
0006804442.tif 000212
工程１：
【化２１０】
0006804442.tif 000213
ジフェニルホスホロアジデート(１.７３８ｍＬ，８.０４ｍｍｏｌ)を、１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸(１.４９ｇ, ４.０２ｍｍｏｌ)およびトリエチルアミン(１.１１５ｍＬ，８.０４ｍｍｏｌ)/トルエン(１６.０８ｍｌ)の溶液に室温にて加えた。得られる混合物を、終夜還流加熱した。反応混合物を室温に冷却して、５％クエン酸溶液でクエンチした。混合物を、真空中で半量に濃縮して、次いでジクロロメタンで３回抽出した。有機層を合わせて、塩水で洗い、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して、濃縮して、粗生成物を得た。粗生成物をジクロロメタンに溶解して、４０ｇのISCO シリカゲルカートリッジに適用した。生成物を、０〜２５％酢酸エチル/ヘキサングラジエントにより溶出した。同等の画分を合わせて、濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル １７−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)ヘプタデカノエート(０.３８４ｇ, ０.６８１ｍｍｏｌ, １６.９４％収率)を、白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ, クロロホルム−ｄ) δ 7.78(d, J=7.3 Hz, 2H), 7.61(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.41(t, J=7.4 Hz, 2H), 7.33(td, J=7.4, 1.0 Hz, 2H), 4.41(d, J=7.0 Hz, 2H), 4.24(d, J=6.8 Hz, 1H), 3.20(q, J=6.8 Hz, 2H), 2.21(t, J=7.5 Hz, 2H), 1.61 - 1.48(m, 4H), 1.45(s, 9H), 1.26(s, 24H).
【０５１４】
工程２：
【化２１１】
0006804442.tif 000214
トリフルオロ酢酸(１.５ｍＬ，１９.４７ｍｍｏｌ)を、ｔｅｒｔ−ブチル １７−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)ヘプタデカノエート(０.３７５ｇ, ０.６６５ｍｍｏｌ)/ジクロロメタン(５ｍＬ)の溶液に加えた。反応混合物は、２分後に黄色から暗色に変化した。溶液を、室温にて３時間撹拌した。反応混合物を１Ｈ ＮＭＲにより確認することにより、この時点で完了していることを決定した。反応混合物を、真空濃縮した。得られる残留物を、５ｍＬ ジクロロメタンに移し、再度濃縮した。この方法を、３回繰り返して、得られる黄色の固体を、終夜真空下にて濃縮した。１７−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)ヘプタデカン酸を、定量的収量で黄色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ, クロロホルム−d) δ 7.78(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.63 - 7.58(m, 2H), 7.41(t, J=7.4 Hz, 2H), 7.33(td, J=7.5, 1.1 Hz, 2H), 4.41(d, J=6.8 Hz, 2H), 4.27 - 4.19(m, 1H), 3.25 - 3.09(m, 2H), 2.36(t, J=7.5 Hz, 2H), 1.70 - 1.59(m, 2H), 1.55 - 1.40(m, 2H), 1.27(br. s., 24H).
【０５１５】
【化２１２】
0006804442.tif 000215
２０ｍＬバイアルに、２−クロロトリチルクロリド樹脂(１.６０５ｇ, １.９２６ｍｍｏｌ)および７ｍＬ ジクロロメタンを加えて、樹脂を膨潤させた。９−((((１６−カルボキシヘキサデシル)カルバモイル)オキシ)メチル)−９Ｈ−フルオレン１−イルイウム(０.３０５ｇ, ０.６０２ｍｍｏｌ)/ジクロロメタン(５ｍＬ)およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(０.８４１ｍＬ，４.８２ｍｍｏｌ)を、樹脂を入れたバイアルに加えた。容器を密封して、リストアクションシェーカー上で終夜室温にて振盪した。翌日、反応溶液を、メタノール(５ｍＬ)で希釈して、容器を２時間振盪して、何ら反応していないクロロトリチル樹脂でクエンチした。樹脂を濾過して、ＤＭＦで３回洗い、ＣＨ２Ｃｌ２で３回、最後にＥｔ２Ｏで洗った。得られる樹脂を、風乾させて、０.４４ｍｅｑ／ｇ ローディングと推定して、そのまま使用した。
【０５１６】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｉの製造
【化２１３】
0006804442.tif 000216
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｉを、修飾２−クロロトリチル樹脂Ａと同じ方法に従って行った。
【０５１７】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｊの製造
【化２１４】
0006804442.tif 000217
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｊを、修飾２−クロロトリチル樹脂Ａと同じ方法に従って行った。
【０５１８】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｋの製造
【化２１５】
0006804442.tif 000218
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｋを、修飾２−クロロトリチル樹脂Ａと同じ方法に従って行った。
【０５１９】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｌの製造
【化２１６】
0006804442.tif 000219
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｌを、修飾２−クロロトリチル樹脂Ａと同じ方法に従って行った。
【０５２０】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｍの製造
【化２１７】
0006804442.tif 000220
工程１：１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸の製造：
【化２１８】
0006804442.tif 000221
オクタデカン二酸(１５ｇ, ４７.７ｍｍｏｌ)/トルエン(１９１ｍｌ)の懸濁液を、３首の１Ｌ 丸底フラスコ内にて還流させた。この酸の全てが溶液中に存在する場合、１,１−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−Ｎ,Ｎ−ジメチルメタンアミン(２２.８７ｍＬ，９５ｍｍｏｌ)を、３０分かけて滴加した。反応混合物を、終夜還流加熱した。反応を、全体で２０時間加熱した後に停止した。反応混合物を室温に冷却して、固体沈殿物を得た。混合物を、真空濾過により濾過した。得られる白色固体を２００ｍＬジクロロメタンに懸濁して、１５分間撹拌した。残存する固体を真空濾過により除去した。固体を集めて、ジクロロメタンに再度懸濁して、１５分間撹拌した。２回目の濾過後に、濾液を合わせて、真空濃縮して、得られる白色粉末を、真空乾燥させた。１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸(１０.１４ｇ, ２７.４ｍｍｏｌ, ５７.４％収率)を単離して、白色固体として得た.１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ, クロロホルム−d) δ 2.35(t, J=7.5 Hz, 2H), 2.21(t, J=7.5 Hz, 2H), 1.70 - 1.52(m, 4H), 1.45(s, 9H), 1.36 - 1.22(m, 24H).
【０５２１】
工程２：
【化２１９】
0006804442.tif 000222
２５０ｍＬ丸底フラスコに、１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸(８.５８ｇ, ２３.１５ｍｍｏｌ)、ピリジン(４.６８ｍＬ，５７.９ｍｍｏｌ)、ＤＭＦ(５０ｍｌ)およびパーフルオロフェニル ２,２,２−トリフルオロ酢酸(７.９６ｍＬ，４６.３ｍｍｏｌ)を加えた。フラスコを、セプタムで密閉し、窒素雰囲気下において保持して、終夜室温にて撹拌した。反応混合物を、飽和クエン酸溶液に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出した。有機層を合わせて、塩水で洗い、ＭｇＳＯ４で乾燥させて、真空蒸発させた。粗生成物を、０％ 酢酸エチル/１００％ヘキサン〜５５％酢酸エチル/４５％ヘキサンで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにて精製した。純粋な画分を合わせて、真空蒸発させて、１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(パーフルオロフェニル)オクタデカンジオエート(８.３７ｇ, １５.６０ｍｍｏｌ, ６７.４％収率)を、白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ, クロロホルム−d) δ 2.66(t, J=7.5 Hz, 2H), 2.23 - 2.19(m, 2H), 1.84 - 1.73(m, 2H), 1.59(d, J=7.3 Hz, 2H), 1.45(s, 9H), 1.44 - 1.38(m, 2H), 1.33 - 1.25(m, 24H).
【０５２２】
工程３：
【化２２０】
0006804442.tif 000223
５００ｍＬ丸底フラスコに、１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(パーフルオロフェニル)オクタデカンジオエート(１４.２ｇ, ２６.５ｍｍｏｌ)、Ｈ−ＧＬＵ−ＯＢＺＬ(５.７１ｇ, ２４.０６ｍｍｏｌ)、ＤＭＦ(１６０ｍｌ)およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(１２.６０ｍＬ，７２.２ｍｍｏｌ)を加えた。フラスコを、セプタムで密閉し、窒素雰囲気下において保持して、終夜室温にて撹拌した。反応混合物は、不均質であった。２５時間後に、反応混合物を、飽和クエン酸溶液に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２ ３ｘで抽出した。有機層を合わせて、塩水で洗い、ＭｇＳＯ４で乾燥させて、真空蒸発させた。粗生成物を、０〜７％ＣＨ２Ｃｌ２/ＭｅＯＨグラジエントで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにて精製した。純粋な画分を合わせて、真空蒸発させて、(Ｓ)−５−(ベンジルオキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタン酸(７.７４ｇ, １３.１２ｍｍｏｌ, ５４.６％収率)を、白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ, クロロホルム−d) δ 7.41 - 7.30(m, 5H), 6.28(d, J=7.8 Hz, 1H), 5.18(s, 2H), 4.70(td, J=8.0, 5.0 Hz, 1H), 2.46 - 2.32(m, 2H), 2.22(q, J=7.9 Hz, 5H), 2.05 - 1.91(m, 1H), 1.60(dt, J=15.3, 7.4 Hz, 4H), 1.45(s, 9H), 1.30 - 1.25(m, 24H).
【０５２３】
工程４：
【化２２１】
0006804442.tif 000224
１００ｍＬ丸底フラスコに、(Ｓ)−５−(ベンジルオキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタン酸(１.６９ｇ, ２.８７ｍｍｏｌ)、ジクロロメタン(１４.３３ｍｌ)、(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(３−(２−(２−(３−アミノプロポキシ)エトキシ)エトキシ)プロピル)カルバメート 塩酸塩(１.３７３ｇ, ２.８７ｍｍｏｌ)、２−(３Ｈ−[１,２,３]トリアゾロ[４,５−b]ピリジン−３−イル)−１,１,３,３−テトラメチルイソウロニウムヘキサフルオロリン酸塩(Ｖ)(１.４１６ｇ, ３.７２ｍｍｏｌ)およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(１.４９７ｍＬ，８.６０ｍｍｏｌ)を加えた。フラスコを、セプタムで密閉し、窒素ブランケット下に保持して、終夜室温にて撹拌した。ＬＣ/ＭＳ分析により、この反応が完了したことを確認した。溶媒を真空蒸発させた。粗生成物を、２０％ アセトン/ヘキサン〜６０％ アセトン/４０％ ヘキサンで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにて精製した。純粋な画分を合わせて、真空蒸発させて、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル ２２−((ベンジルオキシ)カルボニル)−１−(９Ｈ−フルオレン−９−イル)−３,１９,２４−トリオキソ−２,８,１１,１４−テトラオキサ−４,１８,２３−トリアザヘンテトラコンタン−４１−オエート(２.５４ｇ, ２.５０４ｍｍｏｌ, ８７％収率)を黄色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ, クロロホルム−d) δ 7.76(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.61(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.43 - 7.37(m, 2H), 7.36 - 7.28(m, 7H), 6.83(d, J=7.3 Hz, 1H), 6.54(br. s., 1H), 5.51 - 5.43(m, 1H), 5.21 - 5.10(m, 2H), 4.58 - 4.50(m, 1H), 4.40(d, J=7.0 Hz, 2H), 4.25 - 4.17(m, 1H), 3.65 - 3.48(m, 12H), 3.37 - 3.25(m, 4H), 2.23 - 2.18(m, 7H), 2.07 - 1.94(m, 1H), 1.76 - 1.71(m, 2H), 1.66 - 1.53(m, 6H), 1.45(s, 9H), 1.30 - 1.23(m, 24H).
【０５２４】
工程５：
【化２２２】
0006804442.tif 000225
１００ｍＬ丸底フラスコに、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル ２２−((ベンジルオキシ)カルボニル)−１−(９Ｈ−フルオレン−９−イル)−３,１９,２４−トリオキソ−２,８,１１,１４−テトラオキサ−４,１８,２３−トリアザヘンテトラコンタン−４１−オエート(０.９５ｇ, ０.９３７ｍｍｏｌ)、メタノール(２０ｍｌ)および１０％ パラジウムカーボン(０.１００ｇ, ０.０９４ｍｍｏｌ)を加えた。このフラスコを、セプタムで密閉し、バルーンにより水素で充填した。混合物を終夜撹拌した。ＬＣ/ＭＳにより反応の完了が確認された。反応溶液を、セライトを通して濾過して、触媒を除去して、濾液を真空蒸発させて、(Ｓ)−２２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−１−(９Ｈ−フルオレン−９−イル)−３,１９−ジオキソ−２,８,１１,１４−テトラオキサ−４,１８−ジアザトリコサン−２３−酸(０.７６ｇ, ０.８２２ｍｍｏｌ, ８８％収率)。この物質を、精製せずにそのまま使用した。ＬＣ/ＭＳ：(Ｍ＋Ｈ)＋＝９２５.１０.
【０５２５】
工程６：修飾２−クロロトリチル樹脂Ｍ
【化２２３】
0006804442.tif 000226
７５ｍＬペプチド容器に、２−クロロトリチルクロリド樹脂(１.５８０ｇ, ２.５３ｍｍｏｌ)およびジクロロメタン(１５.８０ｍｌ)を加えた。１０分後、(Ｓ)−２２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−１−(９Ｈ−フルオレン−９−イル)−３,１９−ジオキソ−２,８,１１,１４−テトラオキサ−４,１８−ジアザトリコサン−２３−酸(０.７３ｇ, ０.７９０ｍｍｏｌ)、１−クロロ−４−メチルベンゼン(０.０９３ｍＬ，０.７９０ｍｍｏｌ)およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(１.１０１ｍＬ，６.３２ｍｍｏｌ)を加えた。容器を密閉して、リストアクションシェーカー上で４５分間振盪した。内部標準、すなわち１−クロロ−４−メチルベンゼン(６８.１ｍｇ, ０.５３８ｍｍｏｌ)と開始物質の酸との割合の比較に関するＬＣ/ＭＳ分析は、反応の完了または酸の全消費量を示す。次いで、樹脂は、９：１ メタノール/ヒューニッヒ塩基溶液(２０ｍＬ)で希釈し、直ぐに濾過して、ＤＭＦで３回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回および最後にジエチルエーテルで洗った。樹脂を真空乾燥させて、０.５ ｍｅｑ/ｇのローディングと推定して、ペプチド合成のためにそのまま使用した。
【０５２６】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｎの製造
【化２２４】
0006804442.tif 000227
【０５２７】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｎを、修飾２−クロロトリチル樹脂Ｍと同一の方法に従って製造した。
【０５２８】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｏの製造
【化２２５】
0006804442.tif 000228
【０５２９】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｏを、修飾２−クロロトリチル樹脂Ｍと同一の方法に従って行った。
【０５３０】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｐの製造
【化２２６】
0006804442.tif 000229
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｐを、修飾２−クロロトリチル樹脂Ｍと同一の方法に従って行った。
【０５３１】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｑの製造
【化２２７】
0006804442.tif 000230
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｑを、修飾２−クロロトリチル樹脂Ｍと同一の方法に従って行った。
【０５３２】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｒの製造
【化２２８】
0006804442.tif 000231
ペプチド容器に、５−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)ペンタン酸(.１１８ｇ, ０.３４８ｍｍｏｌ)、クロロトリチル樹脂(０.７９５ｇ, １.１１３ｍｍｏｌ)、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(０.４２４ｍＬ，２.４３４ｍｍｏｌ)およびＣＨ２Ｃｌ２(６ｍＬ)を加えた。容器を密閉して、リストアクションシェーカー上で終夜振盪した。翌日、反応を、３ｍＬメタノールを加えて、フラスコを更に２時間振盪することにより停止させた。その後、樹脂を濾過して、ＣＨ２Ｃｌ２、ＤＭＦ３ｘ、ＣＨ２Ｃｌ２３ｘおよび最後にジエチルエーテルで洗った。樹脂を、真空乾燥させて、そのまま使用して、推定０.４４ｍｅｑ/ｇのローディングを目的とするペプチドの製造のために用いた。
【０５３３】
実施例１１１３７の製造
【化２２９】
0006804442.tif 000232
実施例１１１３７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｒを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９２.２％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.１２０分.
【０５３４】
実施例１１１３８の製造
【化２３０】
0006804442.tif 000233
実施例１１１３８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５.１％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.６４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１５９.１３９１(Ｍ＋２Ｈ).
【０５３５】
実施例１１１３９の製造
【化２３１】
0006804442.tif 000234
実施例１１１３９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.２８６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２１３.６６５６(Ｍ＋２Ｈ).
【０５３６】
実施例１１１４０の製造
【化２３２】
0006804442.tif 000235
実施例１１１４０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”,“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”,“カスタムアミノ酸カップリング方法”,“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”,“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｇを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７.３％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.４３５分.
【０５３７】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｓの製造
【化２３３】
0006804442.tif 000236
工程１：
【化２３４】
0006804442.tif 000237
５０ｍＬ丸底フラスコに、Ｈ−ＬＹＳ(ＦＭＯＣ)−ＯＨ(３６７ｍｇ, ０.９９６ｍｍｏｌ)、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(８ｍＬ)、１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(パーフルオロフェニル)オクタデカンジオエート(６４１ｍｇ, １.１９５ｍｍｏｌ)およびヒューニッヒ塩基(０.５２２ｍＬ，２.９９ｍｍｏｌ)を加えた。このフラスコを、セプタムで密閉し、窒素ブランケット下において保持した。終夜室温で撹拌した。翌日、反応溶液を、飽和クエン酸溶液に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出した。有機層を合わせて、塩水で洗い、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、真空蒸発させた。粗生成物を、１００％ＣＨ２Ｃｌ２、次いで５％ＭｅＯＨ/９５％ＣＨ２Ｃｌ２で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。純粋な画分を合わせて、真空蒸発させて、(Ｓ)−６−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ヘキサン酸(３３２ｍｇ, ０.４６０ｍｍｏｌ,４６.２％収率)を得た。
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ, クロロホルム−ｄ) δ 7.79(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.60(d, J=7.3 Hz, 2H), 7.47 - 7.38(m, 2H), 7.37 - 7.30(m, 2H), 6.44(m, 1H), 5.00(t, J=6.3 Hz, 1H), 4.60 - 4.50(m, 1H), 4.50 - 4.33(m, 2H), 4.30 - 4.14(m, 1H), 3.22(m, 2H), 2.42 - 2.33(m, 1H), 2.22(t, J=7.5 Hz, 4H), 1.94(br. s., 1H), 1.80(m, 1H), 1.71 - 1.51(m, 6H), 1.48 - 1.45(m, 9H), 1.38 - 1.12(m, 24H).
【０５３８】
工程２：
【化２３５】
0006804442.tif 000238
ペプチド容器に、クロロトリチル樹脂(９２１ｍｇ, １.４７４ｍｍｏｌ)、(Ｓ)−６−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ヘキサン酸(３３２ｍｇ, ０.４６０ｍｍｏｌ)、ＣＨ２Ｃｌ２(１０ｍＬ)、１−クロロ−４−メチルベンゼン(１７.４９ｍｇ, ０.１３８ｍｍｏｌ)およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(０.５６１ｍＬ，３.２２ｍｍｏｌ)を加えた。容器を密閉して、リストアクションシェーカーで３０分間振盪した。ＬＣ/ＭＳにより分析して、内部標準の１−クロロ−４−メチルベンゼン(１７.４９ｍｇ, ０.１３８ｍｍｏｌ)と開始物質の酸との割合を比較することにより、反応の完了を確認した。その後、樹脂を、９：１メタノール/ヒューニッヒ塩基の溶液(２０ｍＬ)で希釈して、直ぐに濾過して、ＤＭＦ ３ｘ、ＣＨ２Ｃｌ２ ２ｘおよび最後にジエチルエーテルで洗った。樹脂を、真空乾燥させて、０.５ ｍｅｑ/ｇのローディングと推定して、目的とするタンパク質の合成のためにそのまま使用した。
【０５３９】
実施例１１１４１の製造
【化２３６】
0006804442.tif 000239
実施例１１１４１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｓを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は、９５.９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.２３０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１５７.１３７５(Ｍ＋２Ｈ).
【０５４０】
実施例１１１４２の製造
【化２３７】
0006804442.tif 000240
実施例１１１４２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｓを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７.６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.７４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２７９.７２１２(Ｍ＋２Ｈ).
【０５４１】
実施例１１１４３の製造
【化２３８】
0006804442.tif 000241
実施例１１１４３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｓを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.８９５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１２８.６３００(Ｍ＋２Ｈ).
【０５４２】
実施例１１１４４の製造
【化２３９】
0006804442.tif 000242
実施例１１１３９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.２８６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２１３.６６５６(Ｍ＋２Ｈ).
【０５４３】
実施例１１１４５の製造
【化２４０】
0006804442.tif 000243
実施例１１１４５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.５０５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１６７.６０９６(Ｍ＋２Ｈ).
【０５４４】
実施例１１１４６の製造
【化２４１】
0006804442.tif 000244
実施例１１１４６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｓを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.６９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２１４.１６１４(Ｍ＋２Ｈ).
【０５４５】
実施例１１１４７の製造
【化２４２】
0006804442.tif 000245
実施例１１１４７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は８９.３％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.５０１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２０９.０９７１(Ｍ＋２Ｈ).
【０５４６】
実施例１１１４８の製造
【化２４３】
0006804442.tif 000246
実施例１１１４８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６９６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１５１.５８３２(Ｍ＋２Ｈ).
【０５４７】
実施例１１１４９の製造
【化２４４】
0006804442.tif 000247
実施例１１１４９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９２.１％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.８６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０５１.５３１１(Ｍ＋２Ｈ). 
【０５４８】
実施例１１１５０の製造
【化２４５】
0006804442.tif 000248
実施例１１１５０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｇを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.４２５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２７８.６８５０(Ｍ＋２Ｈ). 
【０５４９】
実施例１１１５１
【化２４６】
0006804442.tif 000249
実施例１１１５１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.２３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１６７.１１７８(Ｍ＋２Ｈ).
【０５５０】
実施例１１１５２の製造
【化２４７】
0006804442.tif 000250
実施例１１１５２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｍを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６.９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.９４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２３０.１８５３(Ｍ＋２Ｈ)．
【０５５１】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｔの製造
【化２４８】
0006804442.tif 000251
工程１：
【化２４９】
0006804442.tif 000252
５０ｍＬ丸底フラスコに、(Ｓ)−４−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−アミノブタン酸(２００ｍｇ, ０.５８８ｍｍｏｌ)、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(５ｍＬ)、１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(パーフルオロフェニル)オクタデカンジオエート(３４７ｍｇ, ０.６４６ｍｍｏｌ)およびヒューニッヒ塩基(０.３０８ｍＬ，１.７６３ｍｍｏｌ)を加えた。このフラスコを、セプタムで密閉し、窒素ブランケット下において保持した。終夜室温で撹拌した。翌日、反応溶液を、飽和クエン酸溶液に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２ ３ｘで抽出した。有機層を合わせて、塩水で洗い、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、真空蒸発させた。粗生成物を、１００％ＣＨ２Ｃｌ２、次いで５％ＭｅＯＨ/９５％ＣＨ２Ｃｌ２で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにて精製した。純粋な画分を合わせて、真空蒸発させて、(Ｓ)−４−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ブタン酸(６７ｍｇ, ０.０９７ｍｍｏｌ, １６.４６％収率)を得た。カラム：X−BridgeC18, 2.0 x 50 ｍｍ, 3.5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；温度：４０℃；グラジエント：０％Ｂ、５分かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで１.０分間保持；流量：０.８ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ。保持時間＝３.８６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ ６９１.６(Ｍ−Ｈ).
【０５５２】
【化２５０】
0006804442.tif 000253
２０ｍＬシンチレーションバイアルに、(Ｓ)−４−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ブタン酸(６４ｍｇ, ０.０９２ｍｍｏｌ)、クロロトリチル樹脂(１９６ｍｇ, ０.３１４ｍｍｏｌ)、ＣＨ２Ｃｌ２(４ｍＬ)およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(０.１１３ｍＬ，０.６４７ｍｍｏｌ)を加えた。バイアルを密封して、リストアクションシェーカーで終夜振盪した。翌日、この反応を、３ｍＬ メタノールを加えて、フラスコを更に１時間振盪することにより停止させた。次いで、樹脂を濾過して、ＣＨ２Ｃｌ２、ＤＭＦ ３ｘ、ＣＨ２Ｃｌ２ ３ｘおよび最後にジエチルエーテルで洗った。この樹脂を、０.５ｍｅｑ/ｇのローディングと推定して、そのまま次工程に使用した。
【０５５３】
【化２５１】
0006804442.tif 000254
ペプチド容器に、目的の樹脂(０.２０９ｇ, ０.０９２ｍｍｏｌ)、ＤＭＦ(３ｍＬ)、ピペリジン(０.１８２ｍＬ，１.８４０ｍｍｏｌ)を加えて、容器を密封して、リストアクションシェーカーで１時間振盪した。１時間後に、次いで樹脂を濾過して、ＣＨ２Ｃｌ２、ＤＭＦ３ｘ、ＣＨ２Ｃｌ２３ｘおよび最後にジエチルエーテルで洗った。樹脂を真空乾燥させて、そのまま次の工程に使用した。推定ローディング０.５meq/gの樹脂を、次の合成工程にそのまま使用した。
【０５５４】
工程４：
【化２５２】
0006804442.tif 000255
５０ｍＬ丸底フラスコに、１−(９−フルオレニルメチルオキシカルボニル−アミノ)−４,７,１０−トリオキサ−１３−トリデカンアミン塩酸塩(１g, ２.０８８ｍｍｏｌ)、ＴＨＦ(１５ｍＬ)、ヒューニッヒ塩基(０.４７４ｍＬ，２.７１ｍｍｏｌ)および１,１'−カルボニルジイミダゾール(０.３７２ｇ, ２.２９６ｍｍｏｌ)を加えた。溶液を、窒素ブランケット下において終夜撹拌した。翌日、この反応をＬＣ/ＭＳにより、反応の完了を確認した。反応溶媒を、真空蒸発させて、粗製油状物を、３％/９７％ ＭｅＯＨ/ＣＨ２ＣＬ２で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。純粋な画分を合わせて、真空蒸発させて、(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(１−(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)−１−オキソ−６,９,１２−トリオキサ−２−アザペンタデカン−１５−イル)カルバメート(１.０２２ｇ, １.９０５ｍｍｏｌ, ９１％収率)を得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ) δ 8.18(s, 1H), 7.78(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.61(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.47(s, 1H), 7.41(t, J=7.4 Hz, 2H), 7.32(td, J=7.5, 0.9 Hz, 2H), 7.21(br. s., 1H), 7.05(dd, J=1.5, 0.8 Hz, 1H), 5.57(br. s., 1H), 4.43(d, J=7.5 Hz, 2H), 4.30 - 4.16(m, 1H), 3.72 - 3.60(m, 8H), 3.60 - 3.53(m, 4H), 3.49(t, J=5.3 Hz, 2H), 3.30(q, J=5.9 Hz, 2H), 1.96 - 1.85(m, 2H), 1.80 - 1.69(m, 2H)．カラム：X−BridgeC18, 2.0 x 50 mm, 3.5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；温度：４０℃；グラジエント：０％Ｂ、４分かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで１.０分間保持；流量：０.８ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ. 保持時間＝２.５３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ５３７.３(Ｍ＋Ｈ).
【０５５５】
工程５：
【化２５３】
0006804442.tif 000256
２５ｍＬ 丸底フラスコに、(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(１−(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)−１−オキソ−６,９,１２−トリオキサ−２−アザペンタデカン−１５−イル)カルバメート(４００ｍｇ, ０.７４５ｍｍｏｌ)、アセトニトリル(３ｍＬ)およびヨードメタン(０.０９３ｍＬ，１.４９１ｍｍｏｌ)を加えた。反応を、窒素ブランケット下において終夜撹拌した。翌日、ＬＣ/ＭＳにより確認して、この反応を完了した。反応溶媒を、真空蒸発させて、粗製固体を、精製せずにそのまま使用した。カラム：X−BridgeC18, 2.0 x 50 mm, 3.5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；温度：４０℃；グラジエント：０％Ｂ、４分かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで１.０分間保持；流量：０.８ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ. 保持時間＝３.２５６分。
【０５５６】
工程６：
【化２５４】
0006804442.tif 000257
ペプチド容器に、上記修飾クロロトリチル樹脂(０.０６９ｇ, .０９２ｍｍｏｌ)、ＣＨ２Ｃｌ２(２ｍＬ)、ヒューニッヒ塩基(０.０６４ｍＬ，０.３６８ｍｍｏｌ)およびヨードメチルイミダゾリウム試薬(０.０７６ｇ, ０.１３８ｍｍｏｌ)を加えた。容器を密封して、リストアクションシェーカーで終夜振盪した。翌日、樹脂を濾過して、ＣＨ２Ｃｌ２、ＤＭＦ３ｘ、ＣＨ２Ｃｌ２３ｘおよび最後にジエチルエーテルで洗った。樹脂を真空乾燥させて、ペプチド合成のためにそのまま使用した。０.４４ meq/gのローディングが推定された。
【０５５７】
実施例１１１５３の製造
【化２５５】
0006804442.tif 000258
実施例１１１５３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｔを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３.６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.８４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２３７.６９１４(Ｍ＋２Ｈ).
【０５５８】
実施例１１１５４の製造
【化２５６】
0006804442.tif 000259
実施例１１１５４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は、９７.７％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.５８１分。
【０５５９】
実施例１１１５５の製造
【化２５７】
0006804442.tif 000260
実施例１１１５５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｍを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７.３％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.１００分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２７７.７０６１(Ｍ＋２Ｈ).
【０５６０】
実施例１１１５６の製造
【化２５８】
0006804442.tif 000261
実施例１１１５６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｍを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.３３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２５８.６９８９(Ｍ＋２Ｈ).
【０５６１】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｕの製造
【化２５９】
0006804442.tif 000262
工程１：
【化２６０】
0006804442.tif 000263
５０ｍＬ丸底フラスコに、(Ｓ)−３−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−アミノプロパン酸・ＨＣｌ(２１８ｍｇ, .６ｍｍｏｌ)、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(６ｍＬ)、１−ｔｅｒｔ−ブチル １６−(パーフルオロフェニル)ヘキサデカンジオエート(３９７ｍｇ, ０.７８０ｍｍｏｌ)およびヒューニッヒ塩基(０.３１４ｍＬ，１.８００ｍｍｏｌ)を加えた。このフラスコを、セプタムで密閉し、窒素ブランケット下において保持した。終夜室温で撹拌した。翌日に、反応溶液を、飽和クエン酸溶液に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２ ３ｘで抽出した。有機層を合わせて、塩水で洗い、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、真空蒸発させた。粗生成物を、１００％ ＣＨ２Ｃｌ２、次いで５％ ＭｅＯＨ/９５％ ＣＨ２Ｃｌ２で溶出したシリカゲルクロマトグラフィーにて精製した。純粋な画分を合わせて、真空蒸発させて、(Ｓ)−３−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−(１６−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１６−オキソヘキサデカンアミド)プロパン酸(３８６ｍｇ, ０.５９３ｍｍｏｌ, ９９％収率)を得た。カラム：X−BridgeC18, 2.0 x 50 mm, 3.5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；温度：４０℃；グラジエント：０％Ｂ、６分かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで１.０分間保持；流量：０.８ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ. 保持時間＝４.５７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ ６４９.７(Ｍ−Ｈ)．
【０５６２】
工程２：
【化２６１】
0006804442.tif 000264
ペプチド容器に、クロロトリチル樹脂(１０７６ｍｇ, １.７２１ｍｍｏｌ)、(Ｓ)−３−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−(１６−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１６−オキソヘキサデカンアミド)プロパン酸(３５０ｍｇ, ０.５３８ｍｍｏｌ)、ＣＨ２Ｃｌ２(８ｍＬ)、１−クロロ−４−メチルベンゼン(６８.１ｍｇ, ０.５３８ｍｍｏｌ)およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(０.６５６ｍＬ，３.７６ｍｍｏｌ)を加えた。容器を密封して、リストアクションシェーカーで２０分間振盪した。反応を、ＬＣ/ＭＳの分析ならびに内部標準１−クロロ−４−メチルベンゼン(６８.１ｍｇ, ０.５３８ｍｍｏｌ)と出発物質の酸の割合の比較により完了した。次いで、樹脂を、９：１のメタノール/ヒューニッヒ塩基溶液(２０ｍＬ)で希釈して、直ぐに濾過して、ＤＭＦ３x、ＣＨ２Ｃｌ２ ２x、最終的にジエチルエーテルで洗った。樹脂を、真空乾燥させて、そのまま使用して、０.５meq/gのローディングが推定された。
【０５６３】
実施例１１１５７の製造
【化２６２】
0006804442.tif 000265
実施例１１１５７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｕを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.１０３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２６１.１８６２(Ｍ＋２Ｈ).
【０５６４】
修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｖの製造
【化２６３】
0006804442.tif 000266
工程１：
【化２６４】
0006804442.tif 000267
１００ｍＬ丸底フラスコに、１６−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１６−オキソヘキサデカン酸(５９００ｍｇ, １７.２３ｍｍｏｌ)、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(３０ｍＬ)、ピリジン(３.４８ｍＬ，４３.１ｍｍｏｌ)およびパーフルオロフェニル ２,２,２−トリフルオロ酢酸(９６４９ｍｇ, ３４.５ｍｍｏｌ)を加えた。このフラスコを、セプタムで密閉し、窒素ブランケット下において保持して、終夜室温で撹拌した。翌日、反応を、飽和クエン酸溶液に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２ ３ｘで抽出した。有機層を合わせて、塩水で洗い、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、真空蒸発させた。粗生成物 １−ｔｅｒｔ−ブチル １６−(パーフルオロフェニル)ヘキサデカンジオエート(８.７ｇ, １７.１１ｍｍｏｌ, ９９％収率)を、精製せずにそのまま使用した。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ) δ 2.68(t, J=7.4 Hz, 2H), 2.23(t, J=7.5 Hz, 2H), 1.89 - 1.71(m, 2H), 1.65 - 1.54(m, 2H), 1.47(s, 9H), 1.28(m, 20H).
【０５６５】
工程２：
【化２６５】
0006804442.tif 000268
５０ｍＬ丸底フラスコに、(Ｓ)−４−アミノ−５−(ベンジルオキシ)−５−オキソペンタン酸(８００ｍｇ, ３.３７ｍｍｏｌ)、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(８ｍＬ)、１−ｔｅｒｔ−ブチル １６−(パーフルオロフェニル)ヘキサデカンジオエート(２２２９ｍｇ, ４.３８ｍｍｏｌ)およびヒューニッヒ塩基(１.７６７ｍＬ，１０.１２ｍｍｏｌ)を加えた。このフラスコを、セプタムで密閉し、窒素ブランケット下において保持して、終夜室温で撹拌した。翌日、反応溶液を、飽和クエン酸溶液に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２ ３ｘで抽出した。有機層を合わせて、塩水で洗い、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、真空蒸発させた。粗生成物を、１００％ＣＨ２Ｃｌ２、次いで５％ＭｅＯＨ/９５％ＣＨ２Ｃｌ２で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにて精製した。純粋な画分を合わせて、真空蒸発させて、(Ｓ)−５−(ベンジルオキシ)−４−(１６−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１６−オキソヘキサデカンアミド)−５−オキソペンタン酸(０.８３６ｇ, １.４８８ｍｍｏｌ, ４４.１％収率)を得た。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.６４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ ５６０.６(Ｍ−Ｈ)；１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ) δ 7.36(m, 5H), 6.37(m, 1H), 5.18(s, 2H), 4.67(m, 1H), 2.40(m, 1H), 2.21(m, 6H), 2.02(m, 1H), 1.61(m, 6H), 1.45(s, 9H), 1.40 - 1.16(m, 18H).
【０５６６】
工程３：
【化２６６】
0006804442.tif 000269
５０ｍＬ丸底フラスコに、(Ｓ)−５−(ベンジルオキシ)−４−(１６−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１６−オキソヘキサデカンアミド)−５−オキソペンタン酸(８３６ｍｇ, １.４８８ｍｍｏｌ)、ＣＨ２Ｃｌ２(８ｍＬ)、１−(９−フルオレニルメチルオキシカルボニル−アミノ)−４,７,１０−トリオキサ−１３−トリデカンアミン塩酸塩(７１３ｍｇ, １.４８８ｍｍｏｌ)、ヒューニッヒ塩基(０.７８０ｍＬ，４.４６ｍｍｏｌ)およびＨＡＴＵ(７３６ｍｇ, １.９３５ｍｍｏｌ)を加えた。このフラスコを、セプタムで密閉し、窒素ブランケット下において保持して、終夜室温で撹拌した。翌日、反応溶媒を、真空蒸発させた。粗生成物を、２０％アセトン/８０％ヘキサン〜６０％アセトン/４０％ヘキサンで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにて精製した。純粋な画分を合わせて、真空蒸発させて、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル ２２−((ベンジルオキシ)カルボニル)−１−(９Ｈ−フルオレン−９−イル)−３,１９,２４−トリオキソ−２,８,１１,１４−テトラオキサ−４,１８,２３−トリアザノナトリアコンタン−３９−オエート(５２０ｍｇ, ０.５２７ｍｍｏｌ,３５.４％収率)を得た。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝６.０９６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９８７.０(Ｍ＋Ｈ)；１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，クロロホルム−d) δ 7.79(d, J=8.0 Hz, 2H), 7.63(d, J=8.0 Hz, 2H), 7.42(t, J=8.0 Hz, 2H), 7.38 - 7.30(m, 7H), 6.83(m, 1H), 6.53(m, 1H), 5.49(m, 1H), 5.18(m, 2H), 4.58(m, 1H), 4.42(d, J=4.0 Hz, 2H), 4.23(m, 1H), 3.63(m, 6H), 3.55(m, 6H), 3.33(m, 4H), 2.22(m, 7H), 2.02(m, 1H), 1.77(m, 4H), 1.63(m, 4H), 1.47(s, 9H), 1.37 - 1.20(m, 20H).
【０５６７】
工程４：
【化２６７】
0006804442.tif 000270
２５ｍＬ丸底フラスコに、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル ２２−((ベンジルオキシ)カルボニル)−１−(９Ｈ−フルオレン−９−イル)−３,１９,２４−トリオキソ−２,８,１１,１４−テトラオキサ−４,１８,２３−トリアザノナトリアコンタン−３９−オエート(５２０ｍｇ, ０.５２７ｍｍｏｌ)、メタノール(１０ｍＬ)およびパラジウム炭素(５６.１ｍｇ, ０.０５３ｍｍｏｌ)を加えた。このフラスコを、セプタムで密閉して、バルーンを介して水素(１.０６３ｍｇ, ０.５２７ｍｍｏｌ)を入れた。翌日、この反応を、ＬＣ/ＭＳにより確認して、完了した。反応溶液を、セライトを通して濾過して、触媒を濾過して、濾液を真空蒸発させて、(Ｓ)−２２−(１６−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１６−オキソヘキサデカンアミド)−１−(９Ｈ−フルオレン−９−イル)−３,１９−ジオキソ−２,８,１１,１４−テトラオキサ−４,１８−ジアザトリコサン−２３−酸(４１５ｍｇ, ０.４６３ｍｍｏｌ, ８８％収率)を得た。この物質を精製せずに用いた。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.５３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ ８９５.０(Ｍ−Ｈ).
【０５６８】
工程５：修飾クロロトリチル樹脂Ｖ
【化２６８】
0006804442.tif 000271
ペプチド容器に、２−クロロトリチル樹脂(９２６ｍｇ, １.４８２ｍｍｏｌ)、(Ｓ)−２２−(１６−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１６−オキソヘキサデカンアミド)−１−(９Ｈ−フルオレン−９−イル)−３,１９−ジオキソ−２,８,１１,１４−テトラオキサ−４,１８−ジアザトリコサン−２３−酸(４１５ｍｇ, ０.４６３ｍｍｏｌ)、ＣＨ２Ｃｌ２(８ｍＬ)、１−クロロ−４−メチルベンゼン(５８.６ｍｇ, ０.４６３ｍｍｏｌ)およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(０.５６５ｍＬ，３.２４ｍｍｏｌ)を加えた。容器を密封して、リストアクションシェーカーで３０分間振盪した。ＬＣ/ＭＳを分析することにより、そして内部標準１−クロロ−４−メチルベンゼン(５８.６ｍｇ, ０.４６３ｍｍｏｌ)と出発物質の酸の割合を比較することにより、反応を完了した。その後、樹脂を、２０ｍＬの９：１メタノール/ヒューニッヒ塩基溶液で希釈して、直ぐに濾過して、ＤＭＦ ３x、ＣＨ２Ｃｌ２３x、最終的にジエチルエーテルで洗った。樹脂を真空乾燥させて、ペプチド合成のためにそのまま使用して、０.５ｍｅｑ/ｇのローディングが推定された。
【０５６９】
実施例１１１５８の製造
【化２６９】
0006804442.tif 000272
実施例１１１５８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｖを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.７１０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３０２.１９５８(Ｍ＋２Ｈ).
【０５７０】
実施例１１１５９の製造
【化２７０】
0006804442.tif 000273
実施例１１１５９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｖを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は、９７.９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.７０１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３０９.２０４５(Ｍ＋２Ｈ).
【０５７１】
実施例１１１６０の製造
【化２７１】
0006804442.tif 000274
実施例１１１６０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｍを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７.１％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.６３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３１６.２１２２(Ｍ＋２Ｈ).
【０５７２】
実施例１１１６１の製造
【化２７２】
0006804442.tif 000275
実施例１１１６１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｖを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７.９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.１６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２１６.１７３１(Ｍ＋２Ｈ).
【０５７３】
実施例１１１６２の製造
【化２７３】
0006804442.tif 000276
実施例１１１６２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｖを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６.３％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.８２５分。
【０５７４】
実施例１１１６３の製造
【化２７４】
0006804442.tif 000277
実施例１１１６３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｍを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.０６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３２３.２１７６(Ｍ＋２Ｈ).
【０５７５】
実施例１１１６４の製造
【化２７５】
0006804442.tif 000278
実施例１１１６４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｕを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３４７.２１０３(Ｍ＋２Ｈ).
【０５７６】
実施例１１１６５の製造
【化２７６】
0006804442.tif 000279
実施例１１１６５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｕを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９４.８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３５４.２１９４(Ｍ＋２Ｈ).
【０５７７】
実施例１１１６６の製造
【化２７７】
0006804442.tif 000280
実施例１１１６６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｍを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９３.１％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３１６.２１２６(Ｍ＋２Ｈ).
【０５７８】
実施例１１１６７の製造
【化２７８】
0006804442.tif 000281
実施例１１１６７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｍを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.８１１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３２３.２２０４(Ｍ＋２Ｈ).
【０５７９】
実施例１１１６８の製造
【化２７９】
0006804442.tif 000282
実施例１１１６８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｖを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.７９８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２４４.６８３０(Ｍ＋２Ｈ).
【０５８０】
実施例１１１６９の製造
【化２８０】
0006804442.tif 000283
実施例１１１６９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｖを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.４２３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３５９.７１０８(Ｍ＋２Ｈ).
【０５８１】
実施例１１１７０の製造
【化２８１】
0006804442.tif 000284
実施例１１１７０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｖを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６.３％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.４２６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３６６.７１８０(Ｍ＋２Ｈ).
【０５８２】
実施例１１１７１の製造
【化２８２】
0006804442.tif 000285
実施例１１１７１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｖを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.００１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２５１.６９２９(Ｍ＋２Ｈ).  
【０５８３】
修飾クロロトリチルクロリド樹脂Ｗの製造
【化２８３】
0006804442.tif 000286
工程１：
【化２８４】
0006804442.tif 000287
５０ｍＬ丸底フラスコに、(Ｓ)−３−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−アミノプロパン酸、ＨＣｌ(５００ｍｇ, １.３７８ｍｍｏｌ) 、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１２ｍＬ)、１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(パーフルオロフェニル)オクタデカンジオエート(１１０９ｍｇ, ２.０６７ｍｍｏｌ)およびヒューニッヒ塩基(０.９６３ｍＬ，５.５１ｍｍｏｌ)を加えた。このフラスコを、セプタムで密閉し、窒素ブランケット下において保持して、終夜室温で撹拌した。翌日に、反応溶液を、飽和クエン酸溶液に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２ ３ｘで抽出した。有機層を合わせて、塩水で洗い、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、真空蒸発させた。粗生成物を、１００％ＣＨ２Ｃｌ２、次いで５％ＭｅＯＨ/９５％ＣＨ２Ｃｌ２で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、純粋な画分を合わせて、真空蒸発させて、(Ｓ)−３−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)プロパン酸(７７４ｍｇ, １.１４０ｍｍｏｌ, ８３％収率)を得た。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.６９８分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ/ｚ ６７７.７(Ｍ−Ｈ)；１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ, クロロホルム−d) δ 7.78(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.59(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.42(t, J=7.4 Hz, 2H), 7.33(t, J=7.2 Hz, 2H), 7.26(d, J=5.0 Hz, 1H), 5.67(s, 1H), 4.59 - 4.49(m, 1H), 4.41(d, J=7.0 Hz, 2H), 4.23(t, J=7.2 Hz, 1H), 3.83 - 3.69(m, 1H), 3.67 - 3.55(m, 1H), 2.32 - 2.16(m, 4H), 1.70 - 1.53(m, 4H), 1.46(s, 9H), 1.36 - 1.17(m, 24H).
【０５８４】
工程２：
【化２８５】
0006804442.tif 000288
ペプチド容器に、２−クロロトリチル樹脂(２２８０ｍｇ, ３.６５ｍｍｏｌ)、(Ｓ)−３−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)プロパン酸(７７４ｍｇ, １.１４０ｍｍｏｌ)、ＣＨ２Ｃｌ２(１６ｍＬ)、１−クロロ−４−メチルベンゼン(４３.３ｍｇ, ０.３４２ｍｍｏｌ)およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン(１.３９０ｍＬ，７.９８ｍｍｏｌ)を加えた。容器を密封して、リストアクションシェーカーで３０分間振盪した。ＬＣ/ＭＳの分析により、そして内部標準１−クロロ−４−メチルベンゼン(４３.３ｍｇ, ０.３４２ｍｍｏｌ)と出発物質の酸との割合を比較することにより、この反応を完了した。次いで、樹脂を、２０ｍＬの９：１メタノール/ヒューニッヒ塩基溶液で希釈して、直ぐに濾過して、ＤＭＦ ３x、ＣＨ２Ｃｌ２３xおよび最後にジエチルエーテルで洗った。樹脂を真空乾燥させて、目的とするタンパク質の合成のために、そのまま使用した。これは０.５ｍｅｑ／ｇのローディングと推定された。
【０５８５】
実施例１１１７２の製造
【化２８６】
0006804442.tif 000289
実施例１１１７２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｗを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９３.５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.２１８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１９３.６２７８(Ｍ＋２Ｈ).
【０５８６】
実施例１１１７３の製造
【化２８７】
0006804442.tif 000290
実施例１１１７３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｗを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は、９５.９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.２１８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２００.６３５８(Ｍ＋２Ｈ).
【０５８７】
実施例１１１７４の製造
【化２８８】
0006804442.tif 000291
実施例１１１７４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｍを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は、９５.３％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.３０３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３４４.６８３８(Ｍ＋２Ｈ).
【０５８８】
実施例１１１７５の製造
【化２８９】
0006804442.tif 000292
実施例１１１７５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｍを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７.８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３１６.７０１３(Ｍ＋２Ｈ).
【０５８９】
実施例１１１７６の製造
【化２９０】
0006804442.tif 000293
実施例１１１７６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｓを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７.５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.００５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２１４.６５０２(Ｍ＋２Ｈ).
【０５９０】
実施例１１１７７の製造
【化２９１】
0006804442.tif 000294
実施例１１１７７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｓを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.０１０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２２１.６５８４(Ｍ＋２Ｈ).
【０５９１】
実施例１１１７８の製造
【化２９２】
0006804442.tif 000295
実施例１１１７８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｍを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６.７％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.９８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３２４.６８０６(Ｍ＋２Ｈ).
【０５９２】
実施例１１１７９の製造
【化２９３】
0006804442.tif 000296
実施例１１１７９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｍを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５.５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.９２８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３５０.１８６１(Ｍ＋２Ｈ).
【０５９３】
実施例１１１８０の製造
【化２９４】
0006804442.tif 000297
実施例１１１８０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｗを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７.７％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.７５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２７５.２００５(Ｍ＋２Ｈ).
【０５９４】
実施例１１１８１の製造
【化２９５】
0006804442.tif 000298
実施例１１１８１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｗを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７.８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.３８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３６１.２２５３(Ｍ＋２Ｈ).
【０５９５】
実施例１１１８２の製造
【化２９６】
0006804442.tif 000299
実施例１１１８２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｗを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９４.９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.０００分。
【０５９６】
実施例１１１８３の製造
【化２９７】
0006804442.tif 000300
実施例１１１８３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｗを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７.０％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.９３３分。
【０５９７】
実施例１１１８４の製造
【化２９８】
0006804442.tif 000301
実施例１１１８４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｖ を、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６.０％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.８０３分。
【０５９８】
実施例１１１８５の製造
【化２９９】
0006804442.tif 000302
実施例１１１８５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｗを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９４.５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.０５６分。
【０５９９】
実施例１１１８６の製造
【化３００】
0006804442.tif 000303
実施例１１１８６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｓを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.１６３分。
【０６００】
実施例１１１８７の製造
【化３０１】
0006804442.tif 000304
実施例１１１８７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて２５〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１５.５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝２.０１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０５０.２(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１０５０.０９２６(Ｍ＋２Ｈ).
【０６０１】
実施例１１１８８の製造
【化３０２】
0006804442.tif 000305
実施例１１１８８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて２５〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２３.５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.１２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０７８.９(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１０７８.６０２４(Ｍ＋２Ｈ).
【０６０２】
実施例１１１８９の製造
【化３０３】
0006804442.tif 000306
実施例１１１８９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters CSH C−１８、19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて２０〜６０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件C：保持時間＝２.０６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０７.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１０７.１１５４(Ｍ＋２Ｈ).
【０６０３】
実施例１１１９０の製造
【化３０４】
0006804442.tif 000307
実施例１１１９０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ａを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した。カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて２５〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１０.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝４.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１３６.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１３６.１１７９(Ｍ＋２Ｈ).
【０６０４】
実施例１１１９１の製造
【化３０５】
0006804442.tif 000308
実施例１１１９１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｂを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて３０〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は６.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝２.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０６４.０(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１０６４.１０８４(Ｍ＋２Ｈ).
【０６０５】
実施例１１１９２の製造
【化３０６】
0006804442.tif 000309
実施例１１１９２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｂを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて３０〜８５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は７.１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝２.０８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０９２.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１０９２.６２００(Ｍ＋２Ｈ).
【０６０６】
実施例１１１９３の製造
【化３０７】
0006804442.tif 000310
実施例１１２０５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｂを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて３０〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は８.３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝５.１４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１２１.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１２１.１３０５(Ｍ＋２Ｈ).
【０６０７】
実施例１１１９４の製造
【化３０８】
0006804442.tif 000311
実施例１１１９４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて３０〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は９.２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０９３.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１０９３.０９６３(Ｍ＋２Ｈ).
【０６０８】
実施例１１１９５の製造
【化３０９】
0006804442.tif 000312
実施例１１１９５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて２５〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は７.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１２２.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１２２.０９９２(Ｍ＋２Ｈ).
【０６０９】
実施例１１１９６の製造
【化３１０】
0006804442.tif 000313
実施例１１１９６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は９.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０３６.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１０３６.０７６６(Ｍ＋２Ｈ).
【０６１０】
実施例１１１９７の製造
【化３１１】
0006804442.tif 000314
実施例１１１９７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｃを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は７.２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０６４.７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１０６４.５８８６(Ｍ＋２Ｈ).
【０６１１】
実施例１１１９８の製造
【化３１２】
0006804442.tif 000315
実施例１１１９８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｄを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１７.１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝２.２５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１６２.７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１６２.６１１０(Ｍ＋２Ｈ).
【０６１２】
実施例１１１９９の製造
【化３１３】
0006804442.tif 000316
実施例１１１９９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｄを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１２.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝３.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１１５.４(Ｍ＋２Ｈ).
【０６１３】
実施例１１２００の製造
【化３１４】
0006804442.tif 000317
実施例１１２００を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｄを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜８５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２０.５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝２.２２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１９１.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１９１.１２１８(Ｍ＋２Ｈ).
【０６１４】
実施例１１２０１の製造
【化３１５】
0006804442.tif 000318
実施例１１２０１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｄを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１９.２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝２.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１４３.７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１４３.６０３６(Ｍ＋２Ｈ).
【０６１５】
実施例１１２０２の製造
【化３１６】
0006804442.tif 000319
実施例１１２０２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｄを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。
目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝２.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１１４.８(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１１４.６００３(Ｍ＋２Ｈ).
【０６１６】
実施例１１２０３の製造
【化３１７】
0006804442.tif 000320
実施例１１２０３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｄを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜８５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝２.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１６２.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１６２.１１９２(Ｍ＋２Ｈ).
【０６１７】
実施例１１２０４の製造
【化３１８】
0006804442.tif 000321
実施例１１２０４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて２０〜６０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１６.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０２２.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１０２２.０６１５(Ｍ＋２Ｈ).
【０６１８】
実施例１１２０５の製造
【化３１９】
0006804442.tif 000322
実施例１１２０５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて２０〜６０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１５.５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５％であった。分析ＬＣＭＳ条件D：保持時間＝１.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０５０.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１０５０.５７３１(Ｍ＋２Ｈ).
【０６１９】
実施例１１２０６の製造
【化３２０】
0006804442.tif 000323
実施例１１２０６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて５０〜９０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１５.５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０７９.１(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１０７９.０８２３(Ｍ＋２Ｈ).
【０６２０】
実施例１１２０７の製造
【化３２１】
0006804442.tif 000324
実施例１１２０７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２４.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.１４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０９８.２(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１０９８.０９１７(Ｍ＋２Ｈ).
【０６２１】
実施例１１２０８の製造
【化３２２】
0006804442.tif 000325
実施例１１２０８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて１０〜５０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝２.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０８.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１０８.０８５６(Ｍ＋２Ｈ).
【０６２２】
実施例１１２０９の製造
【化３２３】
0006804442.tif 000326
実施例１１２０９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて１５〜５５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は９.５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０７０.０(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１０６９.５８０２(Ｍ＋２Ｈ).
【０６２３】
実施例１１２１０の製造
【化３２４】
0006804442.tif 000327
実施例１１２１０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて１５〜５５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.９６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１２６.８(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１２６.６０１５(Ｍ＋２Ｈ).
【０６２４】
実施例１１２１１の製造
【化３２５】
0006804442.tif 000328
実施例１１２１１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて１５〜５５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は７.６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった。分析ＬＣＭＳ条件C：保持時間=１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１５５.２(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１５５.６０４３(Ｍ＋２Ｈ).
【０６２５】
実施例１１２１２の製造
【化３２６】
0006804442.tif 000329
実施例１１２１２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間=３.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０８.２(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１０８.０８２８(Ｍ＋２Ｈ).
【０６２６】
実施例１１２１３の製造
【化３２７】
0006804442.tif 000330
実施例１１２１３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１４.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間=３.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１５５.９(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１５５.６０２０(Ｍ＋２Ｈ).
【０６２７】
実施例１１２１４の製造
【化３２８】
0006804442.tif 000331
実施例１１２１４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は８.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間=４.３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１７３.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１７３.１５０３(Ｍ＋２Ｈ).
【０６２８】
実施例１１２１５の製造
【化３２９】
0006804442.tif 000332
実施例１１２１５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は、９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間=４.０２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０８.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１０７.５９３０(Ｍ＋２Ｈ).
【０６２９】
実施例１１２１６の製造
【化３３０】
0006804442.tif 000333
実施例１１２１６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１７.７mgであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間=３.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１５５.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１５５.１１２６(Ｍ＋２Ｈ).
【０６３０】
実施例１１２１７の製造
【化３３１】
0006804442.tif 000334
実施例１１２１７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１７.９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間=３.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１６５.６(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１６５.５９９５(Ｍ＋２Ｈ).
【０６３１】
実施例１１２１８の製造
【化３３２】
0006804442.tif 000335
実施例１１２１８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１７.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間=３.１７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２１３.１(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１２１３.１１６９(Ｍ＋２Ｈ).
【０６３２】
実施例１１２１９の製造
【化３３３】
0006804442.tif 000336
実施例１１２１９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２１.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間=３.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２２０.８(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１２２０.６７１３(Ｍ＋２Ｈ).
【０６３３】
実施例１１２２０の製造
【化３３４】
0006804442.tif 000337
実施例１１２２０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１７.３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間=３.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１８４.２(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１８４.１１４０(Ｍ＋２Ｈ).
【０６３４】
実施例１１２２１の製造
【化３３５】
0006804442.tif 000338
実施例１１２２１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１５.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間=３.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１３６.６(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１３６.５９４８(Ｍ＋２Ｈ).
【０６３５】
実施例１１２２２の製造
【化３３６】
0006804442.tif 000339
実施例１１２２２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２３.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間=３.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１８４.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１８４.１１３２(Ｍ＋２Ｈ).
【０６３６】
実施例１１２２３の製造
【化３３７】
0006804442.tif 000340
実施例１１２２３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロリドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｅを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２４.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間=３.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１３６.８(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１１３６.５９４８(Ｍ＋２Ｈ).
【０６３７】
実施例１１２２４の製造
【化３３８】
0006804442.tif 000341
実施例１１２２４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｆを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.１３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３１７.０(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３１６.２１２２(Ｍ＋２Ｈ).
【０６３８】
実施例１１２２５の製造
【化３３９】
0006804442.tif 000342
実施例１１２２５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｆを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３５.３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.２７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３７４.２(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３７３.７２５９(Ｍ＋２Ｈ).
【０６３９】
実施例１１２２６の製造
【化３４０】
0006804442.tif 000343
実施例１１２２６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｆを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１８.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.５４min；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３３７.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３３７.２３３２(Ｍ＋２Ｈ).
【０６４０】
実施例１１２２７の製造
【化３４１】
0006804442.tif 000344
実施例１１２２７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｆを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２４.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.３２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３４５.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３４５.２１４７(Ｍ＋２Ｈ).
【０６４１】
実施例１１２２８の製造
【化３４２】
0006804442.tif 000345
実施例１１２２８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｆを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２４.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.２８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３５２.７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３５２.２２２７(Ｍ＋２Ｈ).
【０６４２】
実施例１１２２９の製造
【化３４３】
0006804442.tif 000346
実施例１１２２９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｆを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１４.１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３０９.８(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３０９.２０４３(Ｍ＋２Ｈ).
【０６４３】
実施例１１２３０の製造
【化３４４】
0006804442.tif 000347
実施例１１２３０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｆを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２３.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３８０.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３８０.７３５０(Ｍ＋２Ｈ).
【０６４４】
実施例１１２３１の製造
【化３４５】
0006804442.tif 000348
実施例１１２３１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｆを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３３０.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３３０.２２６０(Ｍ＋２Ｈ).
【０６４５】
実施例１１２３２の製造
【化３４６】
0006804442.tif 000349
実施例１１２３２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｇを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２３.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.２８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３６７.１(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３６６.７１８０(Ｍ＋２Ｈ).
【０６４６】
実施例１１２３３の製造
【化３４７】
0006804442.tif 000350
実施例１１２３３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｇを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２９.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.１８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３４５.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３４５.２１５１(Ｍ＋２Ｈ).
【０６４７】
実施例１１２３４の製造
【化３４８】
0006804442.tif 000351
実施例１１２３４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｇを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１９.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３１７.１(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３１６.２１３３(Ｍ＋２Ｈ).
【０６４８】
実施例１１２３５の製造
【化３４９】
0006804442.tif 000352
実施例１１２３５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｇを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１８.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.２６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３７４.１(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３７３.７２６３(Ｍ＋２Ｈ).
【０６４９】
実施例１１２３６の製造
【化３５０】
0006804442.tif 000353
実施例１１２３６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｇを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.３１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３３８.１(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３３８.２０５８(Ｍ＋２Ｈ).
【０６５０】
実施例１１２３７の製造
【化３５１】
0006804442.tif 000354
実施例１１２３７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｇを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１４.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３０９.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３０９.２０６８(Ｍ＋２Ｈ).
【０６５１】
実施例１１２３８の製造
【化３５２】
0006804442.tif 000355
実施例１１２３８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｈを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２７.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２９５.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１２９５.１８６６(Ｍ＋２Ｈ).
【０６５２】
実施例１１２３９の製造
【化３５３】
0006804442.tif 000356
実施例１１２３９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｈを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２１.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２９５.６(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１２９５.１８６４(Ｍ＋２Ｈ).
【０６５３】
実施例１１２４０の製造
【化３５４】
0006804442.tif 000357
実施例１１２４０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｈを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２５.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３５３.１(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３５２.７００５(Ｍ＋２Ｈ).
【０６５４】
実施例１１２４１の製造
【化３５５】
0006804442.tif 000358
実施例１１２４１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｈを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１８.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.３１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３６０.０(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３５９.７０９１(Ｍ＋２Ｈ).
【０６５５】
実施例１１２４２の製造
【化３５６】
0006804442.tif 000359
実施例１１２４２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｈを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２７.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２０９.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１２０９.１６５１(Ｍ＋２Ｈ).
【０６５６】
実施例１１２４３の製造
【化３５７】
0006804442.tif 000360
実施例１１２４３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｈを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２１.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３０２.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３０２.１９７８(Ｍ＋２Ｈ).
【０６５７】
実施例１１２４４の製造
【化３５８】
0006804442.tif 000361
実施例１１２４４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｈを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３３.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝２.１４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３２４.３(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３２４.１９２６(Ｍ＋２Ｈ).
【０６５８】
実施例１１２４５の製造
【化３５９】
0006804442.tif 000362
実施例１１２４５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｈを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２６.３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.１５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３３１.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３３１.２００１(Ｍ＋２Ｈ).
【０６５９】
実施例１１２４６の製造
【化３６０】
0006804442.tif 000363
実施例１１２４６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｉを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１２.１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３３７.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３３７.２３６９(Ｍ＋２Ｈ).
【０６６０】
実施例１１２４７の製造
【化３６１】
0006804442.tif 000364
実施例１１２４７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｉを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１２.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３３０.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３３０.２３０５(Ｍ＋２Ｈ).
【０６６１】
実施例１１２４８の製造
【化３６２】
0006804442.tif 000365
実施例１１２４８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｉを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２４４.５(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１２４４.２０２７(Ｍ＋２Ｈ).
【０６６２】
実施例１１２４９
【化３６３】
0006804442.tif 000366
実施例１１２４９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｉを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 30mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は５.９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３９５.２.
【０６６３】
実施例１１２５０の製造
【化３６４】
0006804442.tif 000367
実施例１１２５０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｉを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 30mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１２.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３８８.２.
【０６６４】
実施例１１２５１の製造
【化３６５】
0006804442.tif 000368
実施例１１２５１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｉを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 30mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３６６.７.
【０６６５】
実施例１１２５２の製造
【化３６６】
0006804442.tif 000369
実施例１１２５２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｉを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 30mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３５９.７.
【０６６６】
実施例１１２５３の製造
【化３６７】
0006804442.tif 000370
実施例１１２５３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｊを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 30mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２５〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１８.５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.２３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２９５.４.
【０６６７】
実施例１１２５４の製造
【化３６８】
0006804442.tif 000371
実施例１１２５４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｊを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 30mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３０.６ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.２１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２８８.５.
【０６６８】
実施例１１２５５の製造
【化３６９】
0006804442.tif 000372
実施例１１２５５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｊを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 30mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は９.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝２.２０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２９５.４.
【０６６９】
実施例１１２５６の製造
【化３７０】
0006804442.tif 000373
実施例１１２５６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｊを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 30mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２５〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２１.５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.２０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２８８.５.
【０６７０】
実施例１１２５７の製造
【化３７１】
0006804442.tif 000374
実施例１１２５７を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｎを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２２.１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３１６.７(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３１６.２１０１(Ｍ＋２Ｈ).
【０６７１】
実施例１１２５８の製造
【化３７２】
0006804442.tif 000375
実施例１１２５８を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｎを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて１０〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２３.１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２２３.４(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１２２３.１７７０(Ｍ＋２Ｈ).
【０６７２】
実施例１１２５９の製造
【化３７３】
0006804442.tif 000376
実施例１１２５９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｑを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 30mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２５〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４.１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２０２.５.
【０６７３】
実施例１１２６０の製造
【化３７４】
0006804442.tif 000377
実施例１１２６０を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｑを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 30mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２５〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１２.２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２３１.１
【０６７４】
実施例１１２６１の製造
【化３７５】
0006804442.tif 000378
実施例１１２６１を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法Ｂ”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミン−カップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾２−クロロトリチルクロリド樹脂Ｑを、この合成に使用した。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 30mm x 250mm；移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２５〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１７.０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間=２.１１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １３２４.７
【０６７５】
実施例１１２６２の製造
【化３７６】
0006804442.tif 000379
実施例１１２６２を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｗを、この合成に使用した。 
粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９０.９％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.８３分；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３２９.７０８９(Ｍ＋２Ｈ)
【０６７６】
実施例１１２６３の製造
【化３７７】
0006804442.tif 000380
実施例１１２６３を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｗを、この合成に使用した。
粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５.７％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.１７分；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３４５.６９４３(Ｍ＋２Ｈ)
【０６７７】
実施例１１２６４の製造
【化３７８】
0006804442.tif 000381
実施例１１２６４を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｗを、この合成に使用した。
粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７.３％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.２３分；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３３８.６８３５(Ｍ＋２Ｈ).
【０６７８】
実施例１１２６５の製造
【化３７９】
0006804442.tif 000382
実施例１１２６５を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｗを、この合成に使用した。
粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.４％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.２３分；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３４５.６９４６(Ｍ＋２Ｈ)
【０６７９】
実施例１１２６６の製造
【化３８０】
0006804442.tif 000383
実施例１１２６６を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｗを、この合成に使用した。
粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.０％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.１９分。
【０６８０】
実施例１１２６７の製造
【化３８１】
0006804442.tif 000384
実施例１１２６７を、反応が０.６ｍｍｏｌスケールで実施されたことを除いて、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｗを、この合成に使用した。
粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２８０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５.６％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝３.９８分；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３７０.７３８２(Ｍ＋２Ｈ).
【０６８１】
実施例１１２６８の製造
【化３８２】
0006804442.tif 000385
実施例１１２６８を、下記の通りに製造した。１ドラムバイアルに、実施例１１２６７(３０ｍｇ, １０.１１μｍｏｌ)/水(.５ｍＬ)を加えた。これに、t−ＢｕＯＨ(.５ｍＬ)および３−(２−(２−(２−(２−アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)−２−フルオロピリジン(６.３５ｍｇ, ０.０２０ｍｍｏｌ)を加えた。溶液を撹拌して、次いでアルコルビン酸ナトリウム(２.６０ｍｇ, ０.０１３ｍｍｏｌ)および硫酸銅溶液(ＩＩ)・５水和物(０.０１５ｍＬ，３.０３μｍｏｌ)を加えた。反応溶液を、室温で２時間撹拌した。反応を、ＬＣ/ＭＳにより確認して、完了する。粗反応混合物を、逆相クロマトグラフィーカラムに直接注射した。
粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１６.３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８.７％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.０１分；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１５２８.６(Ｍ＋２Ｈ)
【０６８２】
実施例１１２６９の製造
【化３８３】
0006804442.tif 000386
実施例１１２６９を、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｗを、この合成に使用した。
【０６８３】
粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９０.６％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.２５分；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋)ｍ/ｚ：１３３０.７０５９(Ｍ＋２Ｈ).
【０６８４】
実施例１１２７０の製造
【化３８４】
0006804442.tif 000387
実施例１１２７０を、０.８ｍｍｏｌスケールで実施することを除いて、以下の一般的な方法から構成される実施例０００１の製造について記述した一般合成法に従って製造した：“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：第二級アミンカップリング方法Ａ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。修飾クロロトリチル樹脂Ｗをこの合成に使用した。
粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１４０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７.４％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.０７分；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１３６３.７２７７(Ｍ＋２Ｈ).
【０６８５】
実施例１１２７１の製造
【化３８５】
0006804442.tif 000388
実施例１１２７１を下記の通りに製造した。１ドラムバイアルに、実施例１１２７０(４０ｍｇ, ０.０１５ｍｍｏｌ)/水(.５ｍＬ)を加えた。これに、t−ＢｕＯＨ(.５ｍＬ)および３−(２−(２−(２−(２−アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)−２−フルオロピリジン(９.２２ｍｇ, ０.０２９ｍｍｏｌ)を加えた。溶液を撹拌して、次いでアスコルビン酸ナトリウム(３.７８ｍｇ, ０.０１９ｍｍｏｌ)、硫酸銅(ＩＩ)五水和物溶液(０.０２２ｍＬ，４.４０μｍｏｌ)を加えた。反応を、室温で２時間撹拌させた。反応はＬＣ/ＭＳにより確認されて、完了した。粗反応混合物を、逆相クロマトグラフィーカラムで直接注射した。
粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣにより精製した：カラム：XSelect CSH Prep C18, 5μm OBD, 19mm x 250mm。移動相Ａ：１０：９０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９０：１０ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：２５分かけて２０〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１７.０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９３.０％であった。
分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝４.２４分；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：１５２０.７９７０(Ｍ＋２Ｈ).
【０６８６】
分析データ：
質量スペクトル分析法：“ＥＳＩ−ＭＳ(＋)”とは、ポジティブイオンモードで実施したエレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を意味する；“ＥＳＩ−ＭＳ(−)”とは、ネガティブイオンモードで実施したエレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を意味する；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋)”とは、ポジティブイオンモードで実施された高分解エレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を意味する；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(−)”とは、ネガティブイオンモードで実施した高分解エレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を意味する。検出された質量は、“ｍ/ｚ”単位表記に従って報告された。１０００より大きい精密質量を有する化合物は、二重電荷イオンまたは三重電荷イオンとして高頻度で検出された。
【０６８７】
分析条件Ａ：
カラム：Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；温度：５０℃；グラジエント：０％Ｂ、３分間かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで０.５分間保持；流量：１ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ.
【０６８８】
分析条件Ｂ：
カラム：Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；温度：５０℃；グラジエント：０％Ｂ、３分間かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで０.５分間保持；流量：０.５ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ. 
【０６８９】
分析条件Ｃ：
カラム：Waters Aquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7μm 粒子；移動相Ａ：１００％水：０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：１００％アセトニトリル：０.０５％ＴＦＡ；温度：４０℃；グラジエント：１.５分かけて２〜９８％Ｂ、次いで１００％Ｂで０.５分間保持；流量：０.８ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ.
【０６９０】
分析条件Ｄ：
カラム：PHENOMENEX−LUNA 2.0 X 30mm 3um；移動相Ａ：９０％水〜１０％メタノール〜０.１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：１０％水−９０％メタノール−０.１％ＴＦＡ；グラジエント：２分かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで１〜４分間保持；流量：１ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ. 
【０６９１】
分析条件Ｅ：
カラム：Xbridge Phenyl, 3.0 x 150 mm, 3.5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：１５分かけて５〜１００％Ｂ；流量：０.５ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ.
【０６９２】
分析条件Ｆ：
カラム：XBridge C18, 3.0 x 150 mm, 3.5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて１０〜１００％Ｂ；流量：０.５ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ.
【０６９３】
分析条件Ｇ：
カラム：Waters CSH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；温度：５０℃；グラジエント：０％Ｂ、３分間かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで０.５分間保持；流量：１ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ.
【０６９４】
分析条件Ｈ：
カラム：Xbridge C18, 3.0 x 150 mm, 3.5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：１８分かけて１０〜１００％Ｂ；流量：０.５ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ.
【０６９５】
分析条件Ｉ：
カラム：XSelectCSH C18, 3.0 x 150 mm, 3.5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：１５分かけて１０〜１００％Ｂ；流量：１.０ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ. 
【０６９６】
分析条件Ｊ：
カラム：Zorbax Bonus RP, 3.0 x 150 mm, 3.5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：１５分かけて１０〜１００％Ｂ；流量：１.０ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ. 
【０６９７】
分析条件Ｋ：
カラム：Waters Aquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7μm 粒子；移動相Ａ：１００％水：０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：１００％アセトニトリル：０.０５％ＴＦＡ；温度：５０℃；グラジエント：３.０分かけて２〜９８％Ｂ、次いで１００％Ｂで０.５分間保持；流量：０.８ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ.
【０６９８】
実施例の中間体１３００Ａ−１４００Ｌのための一般的な方法：
全ての操作を、Ｓｙｍｐｈｏｎｙ−Ｘペプチド合成器(Protein Technologies)でオートメーションの下で行なった。別段の記載が無ければ、全ての方法を、底部フリットを取り付けた１０ｍＬポリプロピレンチューブ内で実施した。このチューブを、チューブの底部と上部の双方を介してＰｒｅｌｕｄｅペプチド合成器と連結させた。ＤＭＦおよびＤＣＭを、チューブ上部から加えて、このチューブの両サイドを均一に洗い流すことができる。残りの試薬を、チューブ底部から加えて、フリットを通過させて、樹脂と接触させた。全ての溶液を、チューブの底部から除去した。“周期的攪拌”とは、底部フリットからのＮ２ガスの短いパルスを意味する；このパルスは、おおよそ５秒間続き、３０秒毎におこる。クロロアセチルクロリド溶液/ＤＭＦを、調整後２４時間内に使用した。アミノ酸溶液を、一般的には、調整してから３週間を超えて使用しない。ＨＡＴＵ溶液を、調製の５日以内に使用する。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＨＡＴＵ＝１−[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]−１Ｈ−１,２,３−トリアゾロ[４,５−ｂ]ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロリン酸塩；ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン；Ｒｉｎｋ＝(２,４−ジメトキシフェニル)(４−アルコキシフェニル)メタンアミン、この“４−アルコキシ”の場所は、ポリスチレン樹脂との結合に関する位置およびタイプを示す。使用した樹脂は、Ｒｉｎｋリンカー(窒素で保護されたＦｍｏｃ)を有するＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄポリマー(ポリスチレン)である。；１００〜２００メッシュ、１％ＤＶＢ、０.５６ｍｍｏｌ/gローディング。用いた一般的なアミノ酸を、下記に列挙した(側鎖保護基は括弧内に示した)：Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ。
【０６９９】
カルボキサミド生成物のために：この方法は、０.１００ｍｍｏｌスケールで行った実験を述べたもので、この場合のスケールは、樹脂に結合したＲｉｎｋリンカーの量により決定される。このスケールは、上記したおおよそ１７８ｍｇの上記したＲｉｎｋ−Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ樹脂に対応している。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、“樹脂膨潤方法”として下記に述べた樹脂膨潤方法を用いて開始した。アミノ酸と第一級アミンＮ末端のカップリングには、下記に記載した“単カップリング方法”を用いた。アミノ酸と第一級アミンＮ末端のカップリングには、下記の“単カップリング方法”を用いた。アミノ酸と第二級アミンＮ末端とのカップリングは、下記の“二重カップリング方法”を使用した。クロロアセチルクロライドのペプチドのＮ末端のカップリングは、下記に詳述した“クロロアセチルクロライドカップリング方法”により説明される。
【０７００】
樹脂膨潤方法：
ポリプロピレン固体相反応容器(１０ｍＬ)に、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ：Ｒｉｎｋ樹脂(１７８ｍｇ, ０.１００ｍｍｏｌ)を加えた。下記樹脂を、下記の通りに３回洗った(膨潤される)：この反応容器にＤＭＦ(２.０ｍＬ)を加えて、この混合物を１０分間周期的に撹拌して、溶媒をフリットから排出した。
【０７０１】
単カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに６回連続的に洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器の上部に加えて(底部フリットを介さない)得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後、該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.４Ｍ，１.０ｍＬ，４等量)を加えた。混合物を、１５分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液を、フリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を、容器の上部に加え(底部フリットを介さない)、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、無水酢酸(２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、１０分間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器の上部に加え(底部フリットを介さない)、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、次の工程に直接使用した。
【０７０２】
−(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル）−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸についての単カップリング：
カップリングを、撹拌時間を３０分間用いたこと以外、上記の通りに行った。
【０７０３】
二重カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ, ２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに６回連続的に洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器の上部に加え(底部フリットを介さない)、得られる混合物を３０秒間周期的に攪拌して、その後溶液をフリットから排出した。反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)を、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、最終的にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.４Ｍ，１.０ｍＬ，４等量)を加えた。混合物を、１５分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液を、フリットから排出した。樹脂を、以下の通りに２回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器の上部に加えて(底部フリットを介さない)、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後溶液をフリットから排出した。反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.４Ｍ，１.０ｍＬ，４等量)を加えた。混合物を、１５分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を、以下の通りに２回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器の上部に加え(底部フリットを介さない)、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後溶液をフリットから排出した。この反応容器に、無水酢酸(２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、１０分間周期的に攪拌して、次いでこの溶液を、フリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器の上部に加え(底部フリットを介さない)、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、次の工程に直接使用した。
【０７０４】
クロロアセチルクロライドカップリング方法：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに６回連続的に洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器の上部に加え(底部フリットを介さない)、得られる混合物を３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.４Ｍ、３.０ｍＬ，２４等量)、次いでクロロアセチルクロリド(ＤＭＦ中で０.８Ｍ，１.５ｍＬ，１３.２等量)を加えた。混合物を、３０分間周期的に攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに３回連続して洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器の上部に加え(底部フリットを介さない)、得られる混合物を９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＣＨ２Ｃｌ２(２.０ｍＬ)を、容器の上部に(底部フリットを介さない)加えて、得られる混合物を９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、１５分間Ｎ２ストリーム下に置くと、樹脂が固くなり、扱い易くなった。
【０７０５】
カルボン酸Ｃ末端生成物について：
この方法は０.１００ｍｍｏｌスケールで行った実験を記載するもので、この場合のスケールは、樹脂に結合した２−クロロトリチルリンカーの量により決定される。市販のＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−２−クロロトリチル樹脂を、通常、０.９２ｍｅｑ／ｇローディングとして用いた。このスケールは、上述のおおよそ１０９ｍｇのＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−２−クロロトリチル樹脂に対応している。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、“樹脂膨潤方法”として下記に述べた樹脂膨潤方法を用いて開始した。アミノ酸と第一級アミンＮ末端のカップリングには、下記に記載した“単カップリング方法”を用いた。アミノ酸と第二級アミンＮ末端とのカップリングは、下記の“二重カップリング方法”を使用した。クロロアセチルクロライドのペプチドのＮ末端のカップリングは、下記に詳述した“クロロアセチルクロライドカップリング方法”により説明される。
【０７０６】
樹脂膨潤方法：
ポリプロピレン固相反応容器(１０ｍＬ)に、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ：Ｒｉｎｋ樹脂(１７８ｍｇ, ０.１００ｍｍｏｌ)を加えた。この樹脂を、下記の通りに３回洗った(膨潤される)：この反応容器にＤＭＦ(２.０ｍＬ)を加えて、混合物を１０分間周期的に撹拌して、溶媒をフリットから排出した。
【０７０７】
単カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。樹脂を、下記の通りに６回連続的に洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器の上部に加え(底部フリットを介さない)、得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液をフリットから排出した。この反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.４Ｍ，１.０ｍＬ，４等量)を加えた。混合物を、１５分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液を、フリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を、容器の上部に加え(底部フリットを介さない)、得られる混合物を３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.４Ｍ，１.０ｍＬ，４等量)、次いで無水酢酸(２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、１０分間周期的に攪拌して、次いで溶液を、フリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器の上部に加え(底部フリットを介さない)、得られる混合物を、９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、次の工程に直接使用した。
【０７０８】
−(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸のための単カップリング：
カップリングを、３０分間の撹拌時間を用いた以外は上記の通りに行った。
【０７０９】
二重カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに６回連続的に洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器の上部に加え(底部フリットを介さない)、得られる混合物を３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液をフリットから排出した。この反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.４Ｍ，１.０ｍＬ，４等量)を加えた。混合物を、１５分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を、以下の通りに２回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器の上部に加え(底部フリットを介さない) 得られる混合物を、３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液をフリットから排出した。 この反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中で０.２Ｍ，１.０ｍＬ，２等量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.４Ｍ，１.０ｍＬ，４等量)を加えた。混合物を、１５分間周期的に攪拌して、次いで反応溶液を、フリットから排出した。樹脂を、以下の通りに２回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器の上部に加え(底部フリットを介さない)、得られる混合物を３０秒間周期的に攪拌して、その後溶液を、フリットから排出した。この反応容器に、ＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.４Ｍ，１.０ｍＬ，４等量)、次いで無水酢酸(２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、１０分間周期的に攪拌して、次いで溶液を、フリットから排出した。樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器の上部に加え(底部フリットを介さない)、得られる混合物を９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、次の工程に直接使用した。
【０７１０】
クロロアセチルクロライドカップリング方法：
先の工程からの樹脂を含有する反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで溶液をフリットから排出した。この反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ/ｖ，２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、周期的に３分間攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに６回連続的に洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を容器の上部に加え(底部フリットを介さない)、得られる混合物を３０秒間周期的に攪拌して、その後該溶液をフリットから排出した。この反応容器に、ＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中で０.４Ｍ，３.０ｍＬ，２４等量)、次いでクロロアセチルクロリド(ＤＭＦ中で０.８Ｍ，１.５ｍＬ，１３.２等量)を加えた。混合物を３０分間、周期的に攪拌して、次いで該溶液をフリットから排出した。樹脂を、下記の通りに３回連続して洗った：各洗いに対して、ＤＭＦ(２.０ｍＬ)を、容器の上部に加え(底部フリットを介さない)、得られる混合物を９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。該樹脂を、連続的に下記の通りに４回洗った：各洗いに対して、ＣＨ２Ｃｌ２(２.０ｍＬ)を、容器の上部に(底部フリットを介さない)加えて、得られる混合物を９０秒周期的に攪拌して、この溶液をフリットから排出した。得られる樹脂を、１５分間Ｎ２ストリーム下に置くと、樹脂は固くなり、取り扱い易くなった。
【０７１１】
包括的脱保護方法：
“脱保護溶液”を、４０ｍＬガラスバイアル中で、トリフルオロ酢酸(２２ｍＬ)、フェノール(１.３２５ｇ)、水(１.２５ｍＬ)およびトリイソプロピルシラン(０.５ｍＬ)を組み合わせて調製した。樹脂を、反応容器から取り出して、４ｍＬガラスバイアルに移した。バイアルに、“脱保護溶液”(２.０ｍＬ)を加えた。混合物を、シェーカー内で激しく混合した(１０００ＲＰＭ,１分間、次いで５００ＲＰＭ,１.５時間)。混合物を、18 X 150 mm 試験管中で０.２ミクロンのシリンジフィルターを通して濾過して、固体を、第二の“脱保護溶液”(１.０ｍＬ)を用いて抽出した。18 X 150 mm 試験管中で濾液を合わせて、Ｅｔ２Ｏ(１５ｍＬ)で希釈して、有意量の白色固体が沈殿した。混合物を、２分間遠心分離して、次いで溶液を廃棄した。固体をＥｔ２Ｏ(２０ｍＬ)に懸濁した；混合物を５分間遠心分離した；溶液を傾捨した。最後に、固体をＥｔ２Ｏ(２０ｍＬ)に懸濁した；混合物を５分間遠心分離した；溶液を傾捨した。
【０７１２】
環化方法：
固体を、２０ｍＬ ＭｅＣＮ：０.１Ｍ ＮＨ４ＯＡｃ水溶液(１：１)に溶解して、溶液を、ＮａＯＨ水溶液(１.０Ｍ)を用いて注意深くｐＨ＝８.５〜９.０に調整した。次いで、溶液を、終夜(約１８時間) 静置した(撹拌は必要ない)。ＤＭＳＯ(１ｍＬ)を加えて、反応溶液を、穏やかに加熱しながたＳｐｅｅｄＶａｃ遠心エバポレーターで終夜濃縮した。おおよそ１ｍＬのＭｅＯＨを、残留物に加えて、得られる溶液を個々の実施例に記載した方法により精製した。代わりの環化方法として、０.１ｍｍｏｌ スケールの反応から得た物質を、〜５滴のヒューニッヒ塩基(ｐＨ〜１０)を含有する〜２０ｍＬ ＭｅＯＨに移した。これを、撹拌せずに終夜室温で静置した。溶媒を真空で除去して、残留物を、個々の実施例において記述した通りに精製した。
【０７１３】
実施例１３０５１−１３０７７、１３１２０−１３１２８、１３１４１−１３１６４および１４１２１−１４１２６についての一般的なトリアゾール形成方法：
１：１の水：ｔＢｕＯＨ(〜０.０１６Ｍ)中のアルキンおよびアジド成分の溶液(または、ある場合には懸濁液)に、１.３等量(vs. ペプチド)のナトリウム(Ｒ)−２−((Ｓ)−１,２−ジヒドロキシエチル)−４−ヒドロキシ−５−オキソ−２,５−ジヒドロフラン−３−オレエートを加えた。次いで、０.２等量(vs. ペプチド)のＣｕＳＯ４(０.０５ mg/μＬ水溶液として)を加えて、得られる溶液を、室温で〜１８時間撹拌した。混合物を、特定の実施例において記述した通りに分取ＨＰＬＣに対して直接インジェクションした。
【０７１４】
実施例１４０５１−１４１０２についての一般的なトリアゾール形成方法：
ｔ−ＢｕＯＨ(４５９μｌ)/水(４５９μｌ)中の中間体１４００Ｊ(４８ｍｇ, ０.０２３ｍｍｏｌ)、(Ｒ)−２,５,７,８−テトラメチル−２−((４Ｒ,８Ｒ)−４,８,１２−トリメチルトリデシル)クロマン−６−イル ４−((５−アジドペンチル)アミノ)−４−オキソブタノエート(１７.６４ｍｇ, ０.０２８ｍｍｏｌ)、ナトリウム(Ｒ)−２−((Ｓ)−１,２−ジヒドロキシエチル)−４−ヒドロキシ−５−オキソ−２,５−ジヒドロフラン−３−オレエート(６.３９ｍｇ, ０.０３２ｍｍｏｌ)および硫酸銅(ＩＩ)五水和物(２.２９０ｍｇ, ９.１７μｍｏｌ)の混合物を、室温で終夜攪拌した。
【０７１５】
Ｆｍｏｃ−(Ｓ)−プロパルギルグリシン−２−クロロトリチル樹脂の製造：
ＤＭＦ(３ｍＬ)およびＤＣＭ(２０ｍＬ)中の２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)ペンタ−４−イノイン酸(０.６７１ｇ, ２.０００ｍｍｏｌ)の溶液に、ＤＩＰＥＡ(１.３９７ｍＬ，８.００ｍｍｏｌ)を加えた。得られる溶液を、２.０ｇクロロトリチルクロリド樹脂(１.２ｍｅｑ/ｇ)に加えて、得られる混合物を、２時間室温で振盪した。溶媒を濾去して、樹脂を、１７：２：１のＤＣＭ/ＭｅＯＨ/ＤＩＰＥＡ(この溶液の１０ｍＬと共に１５分間振盪して、濾過した)を用いてキャップした。これを、２回繰り返した。樹脂を２回ＤＣＭで洗い、４回ＤＭＦで洗い、６回ＤＣＭで洗った(各サイクルは、〜１０分間であり、次いで濾過(ブフナー漏斗)した。樹脂を、Ｎ２下にて乾燥させて、０.９ｍｍｏｌ/ｇのローディングと推定される樹脂(２.２ｇ)を得た。
【０７１６】
２−(２−(２−メトキシエトキシ)エトキシ)−Ｎ−(プロパ−２−イン−１−イル)アセトアミドの製造
スキーム：
【化３８６】
0006804442.tif 000389
２−(２−(２−メトキシエトキシ)エトキシ)酢酸(１.５３ｇ, ８.５９ｍｍｏｌ)/ＴＨＦ(２８.６ｍｌ)の溶液に、プロパ−２−イン−１−アミン(０.６６０ｍＬ，１０.３０ｍｍｏｌ)およびＤＩＰＥＡ(３.００ｍＬ，１７.１７ｍｍｏｌ)を加えた。次いで、ＨＢＴＵ(３.９１ｇ, １０.３０ｍｍｏｌ)を加えて、混合物を室温で撹拌した。〜１.５時間後に、ＬＣ/ＭＳにより、反応がほぼ完了に達していることが示された。溶媒を白色沈殿物から傾取して、真空濃縮した。残留物を、ＥｔＯＡｃ中にとり、次いでＮａＨＣＯ３で抽出して、反応していない酸を除去した。次いで、有機層を、０.１Ｍ ＨＣｌで２回抽出して、過剰な塩基を除去した。次いで、有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して、真空濃縮した。残留物を、シリカゲル(４０g)上に重層して、ＣＨ２Ｃｌ２(６０ｍＬ)で溶出して、次いで６００ｍＬかけて２５％アセトン/ＣＨ２Ｃｌ２のグラジエント、最終的に３００ｍＬかけて２５％アセトン/ＣＨ２Ｃｌ２で保持した。適切な画分を合わせて、２−(２−(２−メトキシエトキシ)エトキシ)−Ｎ−(プロパ−２−イン−１−イル)アセトアミド(１０２.２ｍｇ, ０.４７５ｍｍｏｌ, ５.５３％収率)を得た。１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, クロロホルム−d) δ 7.41(br. s., 1H), 4.11(dd, J=5.6, 2.6 Hz, 2H), 4.05(s, 2H), 3.74 - 3.67(m, 6H), 3.63 - 3.60(m, 2H), 3.43(s, 3H), 2.23(t, J=2.5 Hz, 1H).
【０７１７】
Ｎ−(プロパ−２−イン−１−イル)ステアリン酸アミドの製造
スキーム：
【化３８７】
0006804442.tif 000390
テトラデカノイルクロライド(２００ｍｇ, ０.８１０ｍｍｏｌ)/テトラヒドロフラン(２０２６μｌ)の溶液に、プロパ−２−イン−１−アミン(２０８μｌ, ３.２４ｍｍｏｌ) を加えた。ウィークエンド後に、目的の生成物をＬＣ/ＭＳにより見出した。過剰溶媒を、真空で除去して、水を加えた。ｐＨを、１Ｍ ＮａＯＨを用いて〜１０に調整して、混合物をＣＨ２Ｃｌ２中で３回抽出した。有機抽出物を合わせて、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過して、真空濃縮して、濾過して、真空濃縮した。ＥｔＯＡｃ/ヘキサンのグラジエントを用いるクロマトグラフィーにより、目的とする物質を得た。１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, クロロホルム−d) δ 5.57(br. s., 1H), 4.08(dd, J=5.3, 2.5 Hz, 2H), 2.25(t, J=2.6 Hz, 1H), 2.23 - 2.19(m, 2H), 1.65(m, 6H), 1.31(m, 24H), 0.92 - 0.87(m, 3H).
【０７１８】
Ｎ−(５−アジドペンチル)−２−(２−(２−メトキシエトキシ)エトキシ)アセトアミドの製造
スキーム：
【化３８８】
0006804442.tif 000391
２−(２−(２−メトキシエトキシ)エトキシ)酢酸(４００ｍｇ, ２.２４５ｍｍｏｌ)/
ＴＨＦ(７４８３μｌ)の溶液に、５−アジドペンタン−１−アミン(３１７ｍｇ, ２.４６９ｍｍｏｌ)およびＤＩＰＥＡ(７８４μｌ, ４.４９ｍｍｏｌ)を加えた。ＨＢＴＵ(９３６ｍｇ, ２.４６９ｍｍｏｌ)を、次いで加えて、混合物を室温で撹拌した。１.５時間後に、ＬＣ/ＭＳにより、反応がほぼ完了に達したことが示された。溶媒を、白色沈殿物から傾取して、真空濃縮した。残留物を、ＥｔＯＡｃ中にとり、次いでＮａＨＣＯ３で抽出して、あらゆる未反応の酸を除去した。次いで有機層を、０.１Ｍ ＨＣｌで２回抽出して、過剰塩基を除去した。次いで、有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して、真空濃縮した。この物質を、次の化学分析のためにそのまま使用した。ＬＣ／ＭＳ：(Ｍ＋Ｈ)＋＝２８９.１５.
【０７１９】
(Ｒ)−２,５,７,８−テトラメチル−２−((４Ｒ,８Ｒ)−４,８,１２−トリメチルトリデシル)クロマン−６−イル ４−((５−アジドペンチル)アミノ)−４−オキソブタノエート
【化３８９】
0006804442.tif 000392
工程１：(Ｒ)−２,５,７,８−テトラメチル−２−((４Ｒ,８Ｒ)−４,８,１２−トリメチルトリデシル)クロマン−６−イル ４−((５−アジドペンチル)アミノ)−４−オキソブタノエートの製造
ＴＨＦ(６.７２ｍｌ)中の５−アジドペンタン−１−アミン(０.３２０ｇ, ２.４１９ｍｍｏｌ)、コハク酸ビタミンＥ(１.０７ｇ, ２.０１６ｍｍｏｌ)、ＤＩＰＥＡ(０.７０４ｍＬ，４.０３ｍｍｏｌ)およびＨＢＴＵ(０.７６５ｇ, ２.０１６ｍｍｏｌ)の混合物を、室温で終夜攪拌した。得られる粗生成物を、Biotage(シリカゲル, 300ｇ, ０〜２０％アセトン/ＣＨ２Ｃｌ２)により精製して、(Ｒ)−２,５,７,８−テトラメチル−２−((４Ｒ,８Ｒ)−４,８,１２−トリメチルトリデシル)クロマン−６−イル ４−((５−アジドペンチル)アミノ)−４−オキソブタノエート(１.２９ｇ, ２.０１３ｍｍｏｌ, １００％収率)を得た。分析条件Ｄ：保持時間＝４.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ６４１.４(Ｍ＋Ｈ)＋；１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 3.26 - 3.15(m, 4H), 2.95(t, J=6.7 Hz, 2H), 2.62(dt, J=12.8, 6.6 Hz, 4H), 2.13 - 2.06(m, 3H), 1.99 -1.96(m, 3H), 1.84 -1.81(m, 3H), 1.90 - 1.76(m, 2H), 1.69 - 1.02(m, 30H), 0.98 - 0.79(m, 12H)
【０７２０】
２−(２−(２−(２−アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル((Ｒ)−２,５,７,８−テトラメチル−２−((４Ｒ,８Ｒ)−４,８,１２−トリメチルトリデシル)クロマン−６−イル)スクシネート
【化３９０】
0006804442.tif 000393
工程１：２−(２−(２−(２−アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル((Ｒ)−２,５,７,８−テトラメチル−２−((４Ｒ,８Ｒ)−４,８,１２−トリメチルトリデシル)クロマン−６−イル)スクシネートの製造
ＣＨ２Ｃｌ２(１１.３５ｍｌ)中の２−(２−(２−(２−アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エタノール/ｔ−ブチルメチルエーテル(３.７７ｍＬ，１.８８４ｍｍｏｌ)、コハク酸ビタミンＥ(１.０ｇ, １.８８４ｍｍｏｌ)、ＤＭＡＰ(０.０９２ｇ, ０.７５４ｍｍｏｌ)およびＥＤＣＩ(１.１３８ｇ, ５.９３ｍｍｏｌ)の混合物を、室温で終夜攪拌した。得られる粗生成物を、Biotage(シリカゲル, ３００ｇ, ０〜２０％アセトン/ＣＨ２Ｃｌ２)により精製して、２−(２−(２−(２−アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル((Ｒ)−２,５,７,８−テトラメチル−２−((４Ｒ,８Ｒ)−４,８,１２−トリメチルトリデシル)クロマン−６−イル)スクシネート(１.３７ｇ, １.８７２ｍｍｏｌ, ９９％収率)。分析条件Ｄ：保持時間＝５.１８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ７３２.５(Ｍ＋Ｈ)＋
１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 4.31 - 4.21(M, 2h), 3.74 - 3.60(M, 12h), 3.38 - 3.34(M, 2h), 2.95(DD, j=7.5, 5.3 hZ, 2h), 2.78(DD, j=7.4, 5.4 hZ, 2h), 2.64(T, j=6.8 hZ, 2h), 2.12 - 2.07(M, 3h), 2.01(S, 3h), 1.99 - 1.94(M, 3h), 1.90 - 1.75(M, 2h), 1.66 - 1.03(M, 24h), 0.94 - 0.83(M, 12h).
【０７２１】
１７−アジド−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサヘプタデシル((Ｒ)−２,５,７,８−テトラメチル−２−((４Ｒ,８Ｒ)−４,８,１２−トリメチルトリデシル)クロマン−６−イル)スクシネート
【化３９１】
0006804442.tif 000394
工程１：１７−ヒドロキシ−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサヘプタデシル ４−メチルベンゼンスルホネートの製造：
３,６,９,１２,１５−ペンタオキサヘプタデカン−１,１７−ジオール(８ｇ, ２８.３ｍｍｏｌ)を、ＴＨＦ(３０ｍＬ)に溶解した。ピリジン(７.１３ｍＬ，８８ｍｍｏｌ)を、混合物に加えて、次いで４−メチルベンゼン−１−スルホニルクロリド(５.４１ｇ, ２８.４ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を、室温で３時間撹拌した。混合物をroto−vapにより濃縮した。得られる残留物をジクロロメタンに溶解して、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗った。水層を合わせて、ジクロロメタンで逆抽出した。有機層を合わせて、１Ｎ 塩酸で２回洗い、塩水で１回洗った。有機物質をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮乾固させて、１７−ヒドロキシ−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサヘプタデシル ４−メチルベンゼンスルホネート(５.１０ｇ, １１.６８ｍｍｏｌ, ４１.２％収率)を得て、これを次の工程にそのまま使用した。分析条件Ｄ：保持時間＝１.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ４３７.３(Ｍ＋Ｈ)＋
【０７２２】
工程２：１７−アジド−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサへプタデカン−１−オールの製造
１７−ヒドロキシ−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサヘプタデシル ４−メチルベンゼンスルホネート(５.１０ｇ, １１.６８ｍｍｏｌ)を、ＥｔＯＨ(３７.４ｍｌ)に溶解した。アジ化ナトリウム(２.９７ｇ, ４５.７ｍｍｏｌ)を、混合物に加えて、その後水(１.４９８ｍｌ)を加えた。混合物を、還流にて温めて、攪拌しながら１５時間保持した。濁った反応混合物を、roto−vapにより濃縮した。残留物を、水で処理した。混合物を、ジクロロメタンで２回抽出した。有機層を合わせて、炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗った。有機物を、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して、次いで濃縮乾固させた。残留物を、Biotage(シリカ；３００g；０〜９％Ｄ ＭｅＯＨ/ジクロロメタン、全体で２４００ｍＬ)により精製した。全ての流出物を、１６x１５０培養管中に集めた。ＴＬＣ(シリカ；５％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２；ヨウ素チャンバー)により決定された主要ピークの画分を単離して、濃縮乾固させた。１７−アジド−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサへプタデカン−１−オール(３.０８ｇ, １０.０２ｍｍｏｌ, ８６％収率)を、透明な無色油状物として得た。分析条件Ｄ：保持時間＝１.１９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ３３０.２(Ｍ＋Ｎａ)；１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４) δ 3.73 - 3.61(m, 20H), 3.60 - 3.55(m, 2H), 3.39(t, J=4.9 Hz, 2H).
【０７２３】
工程３：１７−アジド−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサへプタデカン−１−オールの製造
ＣＨ２Ｃｌ２(１１.３５ｍｌ)中の１７−アジド−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサへプタデカン−１−オール(０.５７９ｇ, １.８８４ｍｍｏｌ)、コハク酸ビタミンＥ(１.０ｇ, １.８８４ｍｍｏｌ)、ＤＭＡＰ(０.０９２ｇ, ０.７５４ｍｍｏｌ)およびＥＤＣＩ(１.１３８ｇ, ５.９３ｍｍｏｌ)の混合物を、室温で終夜攪拌した。得られる粗生成物を、Biotage(ＳＧ, ３００ｇ, ０〜４０％アセトン/ＣＨ２Ｃｌ２)により精製して、１７−アジド−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサヘプタデシル((Ｒ)−２,５,７,８−テトラメチル−２−((４Ｒ,８Ｒ)−４,８,１２−トリメチルトリデシル)クロマン−６−イル)スクシネート(１.２０ｇ, １.４６３ｍｍｏｌ, ７８％収率)を得た。分析条件Ｄ：保持時間＝５.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ８４２.６(Ｍ＋Ｎａ).
１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 4.31 - 4.23(m, 2H), 3.73 - 3.70(m, 2H), 3.69 - 3.59(m, 18H), 3.40 - 3.30(m, 2H), 2.98 - 2.91(m, 2H), 2.80 - 2.75(m, 2H), 2.64(t, J=6.8 Hz, 2H), 2.09(s, 3H), 2.01(s, 3H), 1.98(s, 3H), 1.89 - 1.76(m, 2H), 1.61 - 1.50(m, 4H), 1.48 - 1.01(m, 20H), 0.94 - 0.83(m, 12H).
【０７２４】
２３−アジド−３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサトリコシル((Ｒ)−２,５,７,８−テトラメチル−２−((４Ｒ，８Ｒ)−４,８,１２−トリメチルトリデシル)クロマン−６−イル)スクシネート
【化３９２】
0006804442.tif 000395
工程１：２３−ヒドロキシ−３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサトリコシル ４−メチルベンゼンスルホネートの製造：
３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサトリコサン−１,２３−ジオール(５.５ｇ, １４.８５ｍｍｏｌ)をＴＨＦ(３０ｍＬ)に溶解した。ピリジン(３.７３ｍＬ，４６.２ｍｍｏｌ)を、混合物に加えて、次いで４−メチルベンゼン−１−スルホニルクロリド(２.８４ｇ, １４.８８ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を、室温で終夜撹拌した。混合物をroto−vapにより濃縮した。残留物をジクロロメタンに溶解して、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗った。水層を合わせて、ジクロロメタンで逆抽出した。有機層を合わせて、１Ｎ 塩酸で２回洗い、塩水で１回洗った。有機物質をＭｇＳＯ４で乾燥させて、濾過して、濃縮乾固させて、２３−ヒドロキシ−３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサトリコシル ４−メチルベンゼンスルホネート(２.５８ｇ, ４.９２ｍｍｏｌ, ３３.１％収率)を得て、そのまま次の工程に使用した。分析条件Ｄ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ５２５.３(Ｍ＋Ｈ)＋
【０７２５】
工程２：２３−アジド−３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサトリコサン−１−オールの製造
２３−ヒドロキシ−３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサトリコシル ４−メチルベンゼンスルホネート(２.５８ｇ, ４.９２ｍｍｏｌ)を、ＥｔＯＨ(１５.７６ｍｌ)に溶解した。アジ化ナトリウム(１.２５０ｇ, １９.２３ｍｍｏｌ)を、混合物に加えて、その後水(０.６３０ｍｌ)を加えた。混合物を、還流加熱して、攪拌しながら１５時間保持した。濁った反応混合物を、roto−vapにより濃縮した。残留物を水で処理した。物質を、ジクロロメタンで２回抽出した。有機物質を集めて、炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗った。有機物をＭｇＳＯ４で乾燥させて、濾過し、次いで濃縮乾固させた。残留物を、Biotageにより精製した(シリカ；３００g；０〜１０％ＭｅＯＨ/ジクロロメタン、全体で２４００ｍＬ)。全ての流出物を、１６x１５０培養管に集めた。ＴＬＣ(シリカ；５％ＭｅＯＨ〜ＣＨ２Ｃｌ２；ヨウ素チャンバー)により決定された主要ピーク画分を単離して、濃縮乾固させた。２３−アジド−３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサトリコサン−１−オール(１.５５ｇ, ３.９２ｍｍｏｌ, ８０％収率)を、透明な無色油状物として得た。分析条件Ｄ：保持時間＝１.１８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ３９６.３(Ｍ＋Ｈ)＋；１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 3.75 - 3.60(m, 28H), 3.60 - 3.54(m, 2H), 3.43 - 3.37(m, 2H).
【０７２６】
工程３：１７−アジド−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサへプタデカン−１−オール の製造
ＣＨ２Ｃｌ２(１１.３５ｍｌ)中の２３−アジド−３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサトリコサン−１−オール(０.７４５ｇ, １.８８４ｍｍｏｌ)、コハク酸ビタミンＥ(１.０ｇ, １.８８４ｍｍｏｌ)、ＤＭＡＰ(０.０９２ｇ, ０.７５４ｍｍｏｌ)およびＥＤＣＩ(１.１３８ｇ, ５.９３ｍｍｏｌ)の混合物を、室温で終夜攪拌した。得られる粗生成物を、Biotage(ＳＧ, ３００ｇ, ０〜５０％アセトン/ＣＨ２Ｃｌ２)により精製して、２３−アジド−３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサトリコシル((Ｒ)−２,５,７,８−テトラメチル−２−((４Ｒ,８Ｒ)−４,８,１２−トリメチルトリデシル)クロマン−６−イル)スクシネート(０.７７ｇ, ０.８４８ｍｍｏｌ, ４５.０％収率)を得た。
分析条件Ｄ：保持時間＝５.０４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９０８.９(Ｍ＋Ｈ)＋
１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 4.30 - 4.23(m, 2H), 3.77 - 3.56(m, 28H), 3.42 - 3.35(m, 2H), 2.96(dd, J=7.5, 5.3 Hz, 2H), 2.84 - 2.73(m, 2H), 2.64(t, J=6.8 Hz, 2H), 2.09(s, 3H), 2.00(d, J=17.1 Hz, 6H), 1.83(dq, J=18.4, 6.7 Hz, 2H), 1.64 - 1.04(m, 24H), 0.97 - 0.79(m, 12H).
【０７２７】
２３−アジド−３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサトリコシル((Ｒ)−２,５,７,８−テトラメチル−２−((４Ｒ,８Ｒ)−４,８,１２−トリメチルトリデシル)クロマン−６−イル)スクシネート
【化３９３】
0006804442.tif 000396
工程１：２,５,８,１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル ４−メチルベンゼンスルホネートの製造
２,５,８,１１−テトラオキサトリデカン−１３−オール(５.０ｇ, ２４.０１ｍｍｏｌ)を、ＴＨＦ(２０.０１ｍｌ)に溶解した。ピリジン(５.８３ｍＬ，７２.０ｍｍｏｌ)を、混合物に加えて、次いで４−メチルベンゼン−１−スルホニルクロリド(５.４９ｇ, ２８.８ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を、室温にて終夜撹拌した。混合物を、roto−vapにより濃縮した。残留物を、ジクロロメタンに溶解した。物質を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗った。水層を合わせて、ジクロロメタンで逆抽出した。有機層を合わせて、１Ｎ塩酸を用いて２回洗い、塩水で１回洗った。有機物をＭｇＳＯ４で乾燥させて、濾過し、次いで濃縮乾固させて、２,５,８,１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル ４−メチルベンゼンスルホネート(４.１２ｇ, １１.３７ｍｍｏｌ, ４７.３％収率)を得て、これを次の工程にそのまま使用した。
【０７２８】
工程２：１３−アジド−２,５,８,１１−テトラオキサトリデカンの製造
２,５,８,１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル ４−メチルベンゼンスルホネート(４.１２ｇ, １１.３７ｍｍｏｌ)を、ＥｔＯＨ(１８.２２ｍｌ)に溶解した。アジ化ナトリウム(１.４７８ｇ, ２２.７３ｍｍｏｌ)を、混合物に加えて、次いで水(０.７２９ｍｌ)を加えた。混合物を、還流で温めて、攪拌しながら１５時間保持した。濁った反応混合物を、roto−vapにより濃縮した。残留物を水で処理した。物質を、ジクロロメタンで２回抽出した。有機物質を集めて、炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗った。有機物をＭｇＳＯ４で乾燥させて、濾過し、次いで濃縮乾固させた。残留物を、Biotage(シリカ；３００g；０〜９％Ｄ ＭｅＯＨ/ジクロロメタン, 全体として２４００ｍＬ)により精製した。全ての溶出物を16 x 150の培養管に集めた。ＴＬＣ(シリカ；５％ ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２；ヨウ素チャンバー)により決定された主要ピーク画分を単離して、濃縮乾固させた。１３−アジド−２,５,８,１１−テトラオキサトリデカン(１.１７ｇ, ５.０２ｍｍｏｌ,４４.１％収率)を、透明な無色油状物として得た。[Ｍ＋Ｈ]＋, ｍ/ｚ ２３４およびナトリウム付加[Ｍ＋Ｎａ]＋, ｍ/ｚ ２５６；１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ, メタノール−ｄ４) δ 3.74 - 3.60(m, 12H), 3.58 - 3.53(m, 2H), 3.43 - 3.35(m, 5H).
【０７２９】
(Ｓ)−１６−((３−アジド−１−カルボキシプロピル)アミノ)−１６−オキソヘキサデカン酸
【化３９４】
0006804442.tif 000397
工程１：１６−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１６−オキソヘキサデカン酸の製造
ヘキサデカン二酸(４.５ｇ, １５.７１ｍｍｏｌ)を、トルエン(２８.１ｍｌ)に懸濁して、混合物を還流加熱した。１,１−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−Ｎ,Ｎ−ジメチルメタンアミン(１０.１０ｍＬ，４２.１ｍｍｏｌ)を加えて、３０分間かけて滴加した。混合物を、終夜還流した。溶媒を、５０℃で真空除去して、粗製物質を、ＣＨ２Ｃｌ２/ＥｔＯＡｃ(７５ｍＬ １：１)に懸濁した、１５分間攪拌した。固体を濾去して、ＣＨ２Ｃｌ２(２５ｍＬ)で洗った。濾液を、真空蒸発させた。得られる物質を、ＣＨ２Ｃｌ２(６ｍＬ)に懸濁して、１０分間氷冷して、濾過した。溶媒を真空除去して、粗生成物とし、これをフラッシュクロマトグラフィーにより精製して(シリカゲル, ＥｔＯＡｃ/ヘキサン)、１６−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１６−オキソヘキサデカン酸(２.５６ｇ, ７.４７ｍｍｏｌ, ４７.６％収率)を得た。分析条件Ｄ：保持時間＝５.０４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ２６９.３ [Ｍ−ＯＣ(ＣＨ３)３]；１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 2.33 - 2.18(m, 4H), 1.66 - 1.54(m, 4H), 1.50 - 1.43(m, 9H), 1.40 - 1.25(m, 20H).
【０７３０】
工程２：(Ｓ)−メチル ２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−アジドブタノエートの製造
(２Ｓ)−Ｎ−ＦＭＯＣ−４−アジド−ブタン酸(１.０ｇ, ２.７３ｍｍｏｌ)/ＭｅＯＨ(４.２１ｍｌ)/ＣＨ２Ｃｌ２(１２.６４ｍｌ)の混合物に、(トリメチルシリル)ジアゾメタン/ジエチルエーテル(２.０４７ｍＬ，４.０９ｍｍｏｌ)を加えた。得られる混合物を、室温で２時間撹拌した。混合物を濃縮して、(Ｓ)−メチル ２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−アジドブタノエートを得て、これを次の工程にそのまま使用した。１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−ｄ４) δ 7.81(d, J=7.6 Hz, 2H), 7.73 - 7.63(m, 2H), 7.47 - 7.22(m, 4H), 4.41(d, J=6.7 Hz, 2H), 4.35 - 4.17(m, 2H), 3.82 - 3.70(m, 3H), 3.49 - 3.34(m, 2H), 2.21 - 2.04(m, 1H), 1.97 - 1.80(m, 1H).
【０７３１】
工程３：(Ｓ)−メチル ４−アジド−２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)ブタノエートの製造
ＣＨ２Ｃｌ２(４ｍＬ)中の(Ｓ)−メチル ２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−アジドブタノエート(１.０３８ｇ, ２.７３ｍｍｏｌ)およびジエチルアミン(４.０ｍＬ，３８.３ｍｍｏｌ)の混合物を、室温で２時間撹拌した。ＬＣＭＳより、Ｓ.Ｍの消失とＦＭＯＣ関連ピークと同時に生成物の形成が示された。濃縮して得られた生成物を、次の工程にそのまま使用した。１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ，メタノール−d４) δ 3.85 - 3.69(m, 3H), 3.63 - 3.52(m, 1H), 3.51 - 3.40(m, 2H), 2.05 - 1.91(m, 1H), 1.88 - 1.76(m, 1H).
【０７３２】
工程４：(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １６−((４−アジド−１−メトキシ−１−オキソブタン−２−イル)アミノ)−１６−オキソヘキサデカノエートの製造
ＴＨＦ(２７.３ｍｌ)中の(Ｓ)−メチル ２−アミノ−４−アジドブタノエート(０.４３２ｇ, ２.７３ｍｍｏｌ)、１６−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１６−オキソヘキサデカン酸(０.９３５ｇ, ２.７３ｍｍｏｌ)、ＤＩＰＥＡ(１.９０７ｍＬ，１０.９２ｍｍｏｌ)およびＨＢＴＵ(１.０３５ｇ, ２.７３ｍｍｏｌ)の混合液を、室温で終夜攪拌した。得られる粗生成物を、Biotage(SG, 300g, ０〜１０％アセトン/ＣＨ２Ｃｌ２)により精製して、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １６−((４−アジド−１−メトキシ−１−オキソブタン−２−イル)アミノ)−１６−オキソヘキサデカノエート(１.３ｇ, ２.６９ｍｍｏｌ, ９９％収率)を得た。分析条件Ｄ：保持時間＝２.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ４８３.３(Ｍ＋Ｈ)＋
【０７３３】
工程５：(Ｓ)−４−アジド−２−(１６−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１６−オキソヘキサデカンアミド)ブタン酸の製造
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １６−((４−アジド−１−メトキシ−１−オキソブタン−２−イル)アミノ)−１６−オキソヘキサデカノエート(１.３ｇ, ２.６９ｍｍｏｌ)を、ＴＨＦ(１３.４７ｍｌ)に溶解して、次いでＬｉＯＨ(０.３２３ｇ, １３.４７ｍｍｏｌ)および水(１３.４７ｍｌ)を添加した。この反応混合物を、室温で３時間撹拌した。反応混合物を、濃縮乾固させた。得られる(Ｓ)−４−アジド−２−(１６−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１６−オキソヘキサデカンアミド)ブタン酸を、次の工程にそのまま使用した。
分析条件Ｄ：保持時間＝２.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ４６９.４(Ｍ＋Ｈ)＋
【０７３４】
工程６：(Ｓ)−１６−((３−アジド−１−カルボキシプロピル)アミノ)−１６−オキソヘキサデカン酸の製造
(Ｓ)−４−アジド−２−(１６−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１６−オキソヘキサデカンアミド)ブタン酸(１２６１ｍｇ, ２.６９ｍｍｏｌ)およびＴＦＡ(３ｍＬ，３８.９ｍｍｏｌ)/ＤＣＭ(２０ｍＬ)の混合物を、室温で２時間撹拌した。得られる粗生成物を、Ｐｒｅｐ−ＨＰＬＣにより精製して(溶媒Ａ＝１０％ＭｅＯＨ−９０％Ｈ２Ｏ−０.１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ−１０％Ｈ２Ｏ−０.１％ＴＦＡ、カラム：PHENOMENEX LUNA 30 x 100mm, S10, 流速：４０ｍＬ/分, ５０〜１００％Ｂで１０分間、１２分間停止)、(Ｓ)−１６−((３−アジド−１−カルボキシプロピル)アミノ)−１６−オキソヘキサデカン酸(３２６ｍｇ, ０.７９０ｍｍｏｌ,２９.４％収率)を得た。分析条件Ｄ：保持時間＝２.３０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ４１３.３(Ｍ＋Ｈ)＋；１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 4.52(dd, J=9.3, 4.7 Hz, 1H), 3.53 - 3.35(m, 2H), 2.34 - 2.21(m, 4H), 2.19 - 2.07(m, 1H), 1.99 - 1.84(m, 1H), 1.63(dquin, J=14.1, 7.1 Hz, 4H), 1.48 - 1.17(m, 20H).
【０７３５】
(Ｓ)−メチル ４−アジド−２−パルミトアミドブタノエート
【化３９５】
0006804442.tif 000398
工程１：(Ｓ)−メチル ２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−アジドブタノエートの製造
(２Ｓ)−Ｎ−ＦＭＯＣ−４−アジド−ブタン酸(１.０ｇ, ２.７３ｍｍｏｌ)/ＭｅＯＨ(４.２１ｍｌ)/ＣＨ２Ｃｌ２(１２.６４ｍｌ)の混合物に、(トリメチルシリル)ジアゾメタン/ジエチルエーテル(２.０４７ｍＬ，４.０９ｍｍｏｌ)を加えた。得られる混合物を、室温で２時間撹拌した。混合物を、濃縮して、(Ｓ)−メチル ２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−アジドブタノエートを得て、これを次の工程にそのまま使用した。１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−ｄ４) δ 7.81(d, J=7.6 Hz, 2H), 7.73 - 7.63(m, 2H), 7.47 - 7.22(m, 4H), 4.41(d, J=6.7 Hz, 2H), 4.35 - 4.17(m, 2H), 3.82 - 3.70(m, 3H), 3.49 - 3.34(m, 2H), 2.21 - 2.04(m, 1H), 1.97 - 1.80(m, 1H).
【０７３６】
工程２：(Ｓ)−メチル ４−アジド−２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)ブタノエートの製造
ＣＨ２Ｃｌ２(４ｍＬ)中の(Ｓ)−メチル ２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−アジドブタノエート(１.０３８ｇ, ２.７３ｍｍｏｌ)およびジエチルアミン(４.０ｍＬ，３８.３ｍｍｏｌ)の混合物を、室温で２時間撹拌した。ＬＣＭＳは、Ｓ.Ｍ.の消失と、ＦＭＯＣ関連ピークを伴い生成物の形成を示した。濃縮して、得られる生成物を、次の工程にそのまま使用した。１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 3.85 - 3.69(m, 3H), 3.63 - 3.52(m, 1H), 3.51 - 3.40(m, 2H), 2.05 - 1.91(m, 1H), 1.88 - 1.76(m, 1H).
【０７３７】
工程３：(Ｓ)−メチル ４−アジド−２−パルミトアミドブタノエートの製造
ＴＨＦ(６６６７μｌ)中の(Ｓ)−メチル ２−アミノ−４−アジドブタノエート・ＴＦＡ(５４４ｍｇ, ２.００ｍｍｏｌ)、パルミチン酸(５１３ｍｇ, ２.０００ｍｍｏｌ)、ＤＩＰＥＡ(１３９７μｌ, ８.００ｍｍｏｌ)およびＨＢＴＵ(７５８ｍｇ, ２.０００ｍｍｏｌ)の混合物を、室温で終夜攪拌した。得られる粗生成物を、Biotage(SG, 300ｇ, ０〜８５％ＥｔＯＡｃ/ヘキサン)により精製して、(Ｓ)−メチル ４−アジド−２−パルミトアミドブタノエート(４７７ｍｇ, １.２０３ｍｍｏｌ, ６０.１％収率)を得た。分析条件Ｄ：保持時間＝２.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ３９７.３(Ｍ＋Ｈ)＋；１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 4.53(dd, J=9.2, 5.0 Hz, 1H), 3.74(s, 3H), 3.51 - 3.35(m, 2H), 2.31 - 2.22(m, 2H), 2.15 - 2.06(m, 1H), 1.97 - 1.86(m, 1H), 1.70 - 1.57(m, 2H), 1.41 - 1.28(m, 24H), 0.94 - 0.84(m, 3H).
【０７３８】
工程４：(Ｓ)−メチル ４−アジド−２−パルミトアミドブタノエートの製造
(Ｓ)−メチル ４−アジド−２−パルミトアミドブタノエート(４７７ｍｇ, １.２０３ｍｍｏｌ)を、ＴＨＦ(６０１４μｌ)に溶解して、その後ＬｉＯＨ(１４４ｍｇ, ６.０１ｍｍｏｌ)および水(６０１４μｌ)を加えた。反応混合物を、室温で３時間撹拌した。反応混合物を、濃縮乾固させた。残留物を水で希釈して、１Ｎ ＨＣｌを加えて、酸性とした。ＣＨ２Ｃｌ２(ｘ３)で抽出した。有機層を集めて、ＭｇＳＯ４で乾燥して、濾過し、濃縮して、(Ｓ)−４−アジド−２−パルミトアミドブタン酸(４４０ｍｇ, １.１５０ｍｍｏｌ,９６％収率)を得た。分析条件Ｄ：保持時間＝２.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ３８３.３(Ｍ＋Ｈ)＋.
１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 4.56 - 4.47(m, 1H), 3.52 - 3.34(m, 2H), 2.32 - 2.22(m, 2H), 2.14(dddd, J=14.3, 7.8, 6.9, 4.9 Hz, 1H), 2.01 - 1.86(m, 1H), 1.72 - 1.56(m, 2H), 1.49 - 1.12(m, 24H), 1.01 - 0.80(m, 3H).
【０７３９】
(Ｓ)−１−アジド−４０−カルボキシ−３７,４２−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１,２４,２７,３０,３３−ウンデカオキサ−３６,４１−ジアザノナペンタコンタン−５９−酸
【化３９６】
0006804442.tif 000399
工程１：１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸の製造
オクタデカン酸(７.５ｇ, ２３.８５ｍｍｏｌ)を、トルエン(４２.６ｍｌ)に懸濁して、混合物を還流加熱した。１,１−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−Ｎ,Ｎ−ジメチルメタンアミン(１５.３３ｍＬ，６３.９ｍｍｏｌ)を加えて、３０分間かけて滴加した。混合物を、終夜還流した。溶媒を５０℃で真空除去して、粗製物質をＣＨ２Ｃｌ２/ＥｔＯＡｃに懸濁した(１１０ｍＬ １：１)、１５分間攪拌した。固体を濾去して、ＣＨ２Ｃｌ２で洗った(４０ｍＬ)。濾液を真空蒸発させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して(ＳＧ, ０〜２５％アセトン/ＣＨ２Ｃｌ２)、１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸(３.９５ｇ, １０.６６ｍｍｏｌ,４４.７％収率)を得た。
分析条件Ｄ：保持時間＝５.０４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ２９７.３[Ｍ−ＯＣ(ＣＨ３)３]
１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ ２.２９(t, J=7.5 Hz, 2H), 2.22(t, J=7.4 Hz, 2H), 1.67 - 1.53(m, 4H), 1.50 - 1.42(m, 9H), 1.40 - 1.25(m, 24H).
【０７４０】
工程２：１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)オクタデカンジオエートの製造
ＤＣＣ(５.１１ｍＬ，５.１１ｍｍｏｌ)を、１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸(１.７２ｇ, ４.６４ｍｍｏｌ)および１−ヒドロキシピロリジン−２,５−ジオン(０.５８８ｇ, ５.１１ｍｍｏｌ)/ＤＭＦ(４８ｍＬ)の溶液に加えた。混合物を、室温で終夜撹拌した。混合物を濾過して、濃縮して、１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)オクタデカンジオエートを得て、これを次の工程にそのまま使用した。
【０７４１】
工程３：(Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタン酸の製造
水(５.８０ｍｌ)を、ＴＨＦ(１７.４１ｍｌ)中の(Ｓ)−４−アミノ−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−５−オキソペンタン酸(１.０３８ｇ, ５.１１ｍｍｏｌ)、１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)オクタデカンジオエート(２.１７１ｇ, ４.６４ｍｍｏｌ)、炭酸水素ナトリウム(０.４６８ｇ, ５.５７ｍｍｏｌ)の混合物に加えた。得られる透明な溶液を、室温で４時間攪拌した。全てのＴＨＦを除去して、ＨＣｌ(６.０４ｍＬ，６.０４ｍｍｏｌ)を加えて、ｐＨを０℃で２〜３に調整した。得られる懸濁液を、ＣＨ２Ｃｌ２(ｘ３)で抽出して、有機層を濃縮した。得られる粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して(アセトン/ＣＨ２Ｃｌ２ ０〜２５％)、(Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタン酸(２.２９ｇ, ４.１２ｍｍｏｌ, ８９％収率)を、白色固体として得た。分析条件Ｄ：保持時間＝２.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ５５５.６(Ｍ＋Ｈ)＋.
１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 4.32(dd, J=9.0, 5.3 Hz, 1H), 2.45 - 2.33(m, 2H), 2.30 - 2.06(m, 5H), 1.99 - 1.82(m, 3H), 1.78 - 1.53(m, 2H), 1.53 - 1.44(m, 18H), 1.44 - 1.26(m, 24H).
【０７４２】
工程４：(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−アジド−４０−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−３７,４２−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１,２４,２７,３０,３３−ウンデカオキサ−３６,４１−ジアザノナペンタコンタン−５９−オエートの製造
(Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタン酸(４３８ｍｇ, ０.７８９ｍｍｏｌ)/ＤＭＦ(１５９３μｌ)の溶液に、ヒューニッヒ塩基(２７５μｌ, １.５７７ｍｍｏｌ)およびＨＡＴＵ(４００ｍｇ, １.０５１ｍｍｏｌ)を加えた。３５−アジド−３,６,９,１２,１５,１８,２１,２４,２７,３０,３３−ウンデカオキサペンタトリアコンタン−１−アミン(３００ｍｇ, ０.５２６ｍｍｏｌ)を、次いで加えて、溶液を室温で攪拌した。混合物を終夜攪拌した。
【０７４３】
混合物を、水に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２に３回抽出した。有機抽出物を合わせて、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過して、真空濃縮して、濾過して、真空濃縮して、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−アジド−４０−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−３７,４２−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１,２４,２７,３０,３３−ウンデカオキサ−３６,４１−ジアザノナペンタコンタン−５９−オエートを得て、そのまま次の工程に使用した。分析条件Ｄ：保持時間＝２.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０９.１(Ｍ＋Ｈ)＋.
【０７４４】
工程５：(Ｓ)−１−アジド−４０−カルボキシ−３７,４２−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１,２４,２７,３０,３３−ウンデカオキサ−３６,４１−ジアザノナペンタコンタン−５９−酸の製造
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−アジド−４０−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−３７,４２−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１,２４,２７,３０,３３−ウンデカオキサ−３６,４１−ジアザノナペンタコンタン−５９−オエート(２８０ｍｇ, ０.２５３ｍｍｏｌ)およびＴＦＡ(３ｍＬ，３８.９ｍｍｏｌ)/ＤＣＭ(３.０ｍＬ)の混合物を、室温で２時間撹拌した。得られる粗生成物を、Ｐｒｅｐ−ＨＰＬＣにより精製して(溶媒Ａ＝１０％ ＭｅＯＨ−９０％Ｈ２Ｏ−０.１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝９０％ ＭｅＯＨ−１０％Ｈ２Ｏ−０.１％ＴＦＡ，カラム：PHENOMENEX LUNA 30 x 100mm, S10, 流速：４０ｍＬ/分、５０〜１００％Ｂ、１０分間および１２分で停止)、(Ｓ)−１−アジド−４０−カルボキシ−３７,４２−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１,２４,２７,３０,３３−ウンデカオキサ−３６,４１−ジアザノナペンタコンタン−５９−酸(１２４ｍｇ, ０.１２４ｍｍｏｌ,４９.３％収率)を得た。分析条件Ｄ：保持時間＝２.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９９６.９(Ｍ＋Ｈ)＋；１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 4.44-4.35(m, 1H), 3.84-3.27(m, 48H), 2.39-2.11(m, 7H), 2.04-1.87(m, 1H), 1.71-1.55(m, 4H), 1.44-1.18(m, 24H).
【０７４５】
(Ｓ)−１−アジド−１６−カルボキシ−１３,１８−ジオキソ−３,６,９−トリオキサ−１２,１７−ジアザペンタトリアコンタン−３５−酸
【化３９７】
0006804442.tif 000400
工程１：２−(２−(２−(２−アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エタンアミン(１１３ｍｇ, ０.５１７ｍｍｏｌ)/ＤＭＦ(４４９８μｌ)の溶液に、ヒューニッヒ塩基(３１４μｌ, １.７９９ｍｍｏｌ)、次いで(Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタン酸(２５０ｍｇ, ０.４５０ｍｍｏｌ)を加えた。次いで、ＨＡＴＵ(３４２ｍｇ, ０.９００ｍｍｏｌ)を加えて、得られる溶液を室温で撹拌した。ＬＣ／ＭＳにより、目的とするｍ/ｚへの変換が示された。高真空でＤＭＦを除去して、次いで残留物を、シリカゲル(４０ｇ)に重層し、ＤＣＭ(１００ｍＬ)で溶出して、次いで５４０ｍＬかけて７５％ＤＣＭ/アセトンのグラジエント、最終的に１５０ｍＬに対して７５％ＤＣＭ/アセトンで保持した。目的とする画分を合わせた。この物質をそのまま次工程に用いた。
【０７４６】
工程２：(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−アジド−１６−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１３,１８−ジオキソ−３,６,９−トリオキサ−１２,１７−ジアザペンタトリアコンタン−３５−オエート(４１４.０ｍｇ, ０.５４８ｍｍｏｌ)/ＤＣＭ(５４７６μｌ)の溶液に、ＴＦＡ(１２６６μｌ, １６.４３ｍｍｏｌ)を加えた。ＬＣ/ＭＳにより、遅い反応が示されたので、更なる１４等量のＴＦＡを加えて、混合物を更に撹拌した。更に〜６時間後に、ＬＣ/ＭＳにより、ほぼ反応の完了が示された。溶媒を真空で除去した。混合物を、ヒューニッヒ塩基/ＭｅＯＨ(〜１％)に移した。反応混合物を、５回のインジェクションにてＰＲＥＰ ＨＰＬＣにより精製した：(30 X 100 mm HPLC Luna Axia C18, １０分かけて５０〜１００％Ａ：Ｂ、１００％Ｂで５分間(Ａは９０：１０：０.１の水：ＭｅＯＨ：ＴＦＡ；Ｂは９０：１０：０.１のＭｅＯＨ：水：ＴＦＡ))。目的とする画分を合わせて、濃縮して、(Ｓ)−１−アジド−１６−カルボキシ−１３,１８−ジオキソ−３,６,９−トリオキサ−１２,１７−ジアザペンタトリアコンタン−３５−酸(１１２.４ｍｇ, ０.１２４ｍｍｏｌ,２２.６４％収率)を得た。ＬＣ/ＭＳ：(Ｍ＋Ｈ)＋＝６４４.４５.
【０７４７】
(Ｓ)−１−アジド−２２−カルボキシ−１９,２４−ジオキソ−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサ−１８,２３−ジアザヘンテトラコンタン−４１−酸
【化３９８】
0006804442.tif 000401
工程１：１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸の製造
オクタデカン二酸(７.５ｇ, ２３.８５ｍｍｏｌ)を、トルエン(４２.６ｍｌ)に懸濁して、混合物を還流加熱した。１,１−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−Ｎ,Ｎ−ジメチルメタンアミン(１５.３３ｍＬ，６３.９ｍｍｏｌ)を加えて、３０分かけて滴加した。混合物を、終夜還流した。溶媒を、５０℃で真空除去して、粗製物質を、ＣＨ２Ｃｌ２/ＥｔＯＡｃ(１１０ｍＬ １：１)に懸濁して、１５分間攪拌した。固体を濾去して、ＣＨ２Ｃｌ２(４０ｍＬ)で洗った。濾液を真空蒸発させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して(ＳＧ, ０〜２５％アセトン/ＣＨ２Ｃｌ２)、１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸(３.９５ｇ, １０.６６ｍｍｏｌ, ４４.７％収率)を得た。分析条件Ｄ：保持時間＝５.０４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ２９７.３[Ｍ−ＯＣ(ＣＨ３)３]；１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 2.29(t, J=7.5 Hz, 2H), 2.22(t, J=7.4 Hz, 2H), 1.67-1.53(m, 4H), 1.50-1.42(m, 9H), 1.40-1.25(m, 24H).
【０７４８】
工程２：１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)オクタデカンジオエートの製造
ＤＣＣ(５.１１ｍＬ，５.１１ｍｍｏｌ)を、１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸(１.７２ｇ, ４.６４ｍｍｏｌ)および１−ヒドロキシピロリジン−２,５−ジオン(０.５８８ｇ, ５.１１ｍｍｏｌ)/ＤＭＦ(４８ｍＬ)の溶液に加えた。混合物を、室温で終夜撹拌した。混合物を濾過して、濃縮して、１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)オクタデカンジオエートを得て、これを次の工程にそのまま使用した。
【０７４９】
工程３：(Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタン酸の製造
水(５.８０ｍｌ)を、ＴＨＦ(１７.４１ｍｌ)中の(Ｓ)−４−アミノ−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−５−オキソペンタン酸(１.０３８ｇ, ５.１１ｍｍｏｌ)、１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)オクタデカンジオエート(２.１７１ｇ, ４.６４ｍｍｏｌ)、炭酸水素ナトリウム(０.４６８ｇ, ５.５７ｍｍｏｌ)の混合物に加えた。得られる透明な溶液を、室温で４時間攪拌した。全てのＴＨＦを除去して、ＨＣｌ(６.０４ｍＬ，６.０４ｍｍｏｌ)を加えて、ｐＨを０℃で２〜３に調整した。得られる懸濁液を、ＣＨ２Ｃｌ２(ｘ３)で抽出した。有機層を濃縮した。得られる粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して(アセトン/ＣＨ２Ｃｌ２の０〜２５％)、(Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタン酸(２.２９ｇ, ４.１２ｍｍｏｌ, ８９％収率)を、白色固体として得た。分析条件Ｄ：保持時間＝２.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ５５５.６(Ｍ＋Ｈ)＋ １Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 4.32(dd, J=9.0, 5.3 Hz, 1H), 2.45 - 2.33(m, 2H), 2.30 - 2.06(m, 5H), 1.99 - 1.82(m, 3H), 1.78 - 1.53(m, 2H), 1.53 - 1.44(m, 18H), 1.44 - 1.26(m, 24H).
【０７５０】
工程４：(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−アジド−２２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１９,２４−ジオキソ−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサ−１８,２３−ジアザヘンテトラコンタン−４１−オエートの製造
(Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタン酸(２２５ｍｇ, ０.４０５ｍｍｏｌ)/ＤＭＦ(４０４８μｌ)の溶液に、ヒューニッヒ塩基(２１２μｌ, １.２１４ｍｍｏｌ)およびＨＡＴＵ(３０８ｍｇ, ０.８１０ｍｍｏｌ)を加えた。次いで、１７−アジド−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサへプタデカン−１−アミン・ＨＣｌ(１３９ｍｇ, ０.４０５ｍｍｏｌ)を加えて、溶液を室温で攪拌した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して(２２０ｇ, シリカゲル, １０〜６０％アセトン/ＣＨ２Ｃｌ２)、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−アジド−２２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１９,２４−ジオキソ−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサ−１８,２３−ジアザヘンテトラコンタン−４１−オエート(３３０ｍｇ, ０.３９１ｍｍｏｌ, ９７％収率)を得た。分析条件Ｄ：保持時間＝２.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ８４４.７(Ｍ＋Ｈ)＋；１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 4.30 - 4.23(m, 1H), 3.74 - 3.60(m, 18H), 3.60 - 3.52(m, 2H), 3.43 - 3.35(m, 4H), 2.34 - 2.28(m, 2H), 2.28 - 2.19(m, 4H), 2.15 - 2.08(m, 1H), 1.98 - 1.87(m, 1H), 1.69 - 1.53(m, 4H), 1.52 - 1.44(m, 18H), 1.41 - 1.27(m, 24H).
【０７５１】
工程５：(Ｓ)−１−アジド−２２−カルボキシ−１９,２４−ジオキソ−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサ−１８,２３−ジアザヘンテトラコンタン−４１−酸の製造
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−アジド−２２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１９,２４−ジオキソ−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサ−１８,２３−ジアザヘンテトラコンタン−４１−オエート(３３０ｍｇ, ０.３９１ｍｍｏｌ)およびＴＦＡ(０.４２２ｍＬ，５.４７ｍｍｏｌ)/ＤＣＭ(３.０ｍＬ)の混合物を、室温で２時間撹拌した。得られる粗生成物を、Ｐｒｅｐ−ＨＰＬＣにより精製して(溶媒Ａ＝１０％ ＭｅＯＨ−９０％Ｈ２Ｏ−０.１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝９０％ ＭｅＯＨ−１０％Ｈ２Ｏ−０.１％ＴＦＡ．カラム：PHENOMENEX LUNA 30 x 150mm, S10, 流速：４０ｍＬ/分、５０〜１００％Ｂで１０分間 、１３分で停止)、(Ｓ)−１−アジド−２２−カルボキシ−１９,２４−ジオキソ−３,６,９,１２,１５−ペンタオキサ−１８,２３−ジアザヘンテトラコンタン−４１−酸(１０１ｍｇ, ０.１３８ｍｍｏｌ,３５.３％収率)を得た。分析条件Ｄ：保持時間＝２.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ７３２.５(Ｍ＋Ｈ)＋
【０７５２】
(Ｓ)−１−アジド−２８−カルボキシ−２５,３０−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサ−２４,２９−ジアザヘプタテトラコンタン−４７−酸
【化３９９】
0006804442.tif 000402
工程１：２３−アジド−３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサトリコサン−１−アミン(２０４ｍｇ, ０.５１７ｍｍｏｌ)/ＤＭＦ(４４９８μｌ)の溶液に、ヒューニッヒ塩基(３１４μｌ, １.７９９ｍｍｏｌ)、次いで(Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタン酸(２５０ｍｇ, ０.４５０ｍｍｏｌ)を加えた。次いで、ＨＡＴＵ(３４２ｍｇ, ０.９００ｍｍｏｌ)を加えて、得られる溶液を室温で撹拌した。ＬＣ/ＭＳにより、目的とするｍ/ｚへの変換が示された。高真空でＤＭＦを除去して、次いで残留物をシリカゲル(４０ｇ)に重層して、ＤＣＭ(９０ｍＬ)で溶出して、その後５４０ｍＬかけて７５％ＤＣＭ/アセトンのグラジエントとし、最終的に１５０ｍＬについては７５％ＤＣＭ/アセトンとした。目的とする画分を合わせて、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−アジド−２８−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−２５,３０−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサ−２４,２９−ジアザヘプタテトラコンタン−４７−オエート(３９４.２ｍｇ, ０.４２３ｍｍｏｌ,９４％収率)を得た。
【０７５３】
工程２：(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−アジド−２８−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−２５,３０−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサ−２４,２９−ジアザヘプタテトラコンタン−４７−オエート(３９４.２ｍｇ, ０.４２３ｍｍｏｌ)/ＤＣＭ(４２２９μｌ)の溶液に、ＴＦＡ(４５６μｌ, ５.９２ｍｍｏｌ)を加えた。ＬＣ/ＭＳにより、ゆっくりとした反応が示されたので、更に１４等量のＴＦＡを加えて、この混合物を更に撹拌した。更なる〜６時間後に、ＬＣ/ＭＳにより、ほぼ反応の完了が示された。溶媒を真空で除去した。混合物を、ＭｅＯＨに移した。反応混合物を、７回のインジェクションでＰＲＥＰ ＨＰＬＣにより精製した：(30 X 100 mm HPLC Luna Axia C18, １０分かけて５０〜１００％Ａ：Ｂ、１００％Ｂで５分間(Ａは９０：１０：０.１の水：ＭｅＯＨ：ＴＦＡ；Ｂは９０：１０：０.１のＭｅＯＨ：水：ＴＦＡ))。適切な画分をＳｐｅｅｄｖａｃに供して、(Ｓ)−１−アジド−２８−カルボキシ−２５,３０−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサ−２４,２９−ジアザヘプタテトラコンタン−４７−酸(１２１.０ｍｇ, ０.１４８ｍｍｏｌ,３４.９％収率)を単離した。
ＬＣ/ＭＳ：(Ｍ＋Ｈ)＋＝８２０.６０．１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, クロロホルム−d) δ 7.30(d, J=6.4 Hz, 1H), 7.04(t, J=5.2 Hz, 1H), 4.51(q, J=6.2 Hz, 1H), 3.72 - 3.64(m, 27H), 3.63 - 3.59(m, 2H), 3.56 - 3.49(m, 1H), 3.47 - 3.39(m, 3H), 2.62 - 2.54(m, 1H), 2.48 - 2.40(m, 1H), 2.36(t, J=7.4 Hz, 2H), 2.26(t, J=7.6 Hz, 2H), 2.19 - 2.08(m, 2H), 1.65(quin, J=7.4 Hz, 4H), 1.39 - 1.24(m, 25H).
【０７５４】
(Ｓ)−１８−((３−アジド−１−カルボキシプロピル)アミノ)−１８−オキソオクタデカン酸
【化４００】
0006804442.tif 000403
工程１：１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸の製造
オクタデカン二酸(７.５ｇ, ２３.８５ｍｍｏｌ)を、トルエンに懸濁して(４２.６ｍｌ)、混合物を還流加熱した。１,１−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−Ｎ,Ｎ−ジメチルメタンアミン(１５.３３ｍＬ，６３.９ｍｍｏｌ)を加えて、３０分かけて滴加した。混合物を、終夜還流した。溶媒を、５０℃で真空除去して、粗物質を、ＣＨ２Ｃｌ２/ＥｔＯＡｃ(１１０ｍＬ. １：１)に懸濁して、１５分間攪拌した。固体を濾去して、ＣＨ２Ｃｌ２(４０ｍＬ) で洗った。濾液を真空蒸発させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して(３００ｇ, ＳＧ, 最初は１００％ＣＨ２Ｃｌ２, １０００ｍＬ、次いで０〜２５％アセトン/ＣＨ２Ｃｌ２, ２０００ｍＬ)、１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸(３.８２ｇ, １０.３１ｍｍｏｌ,４３.２％収率)を得た。
分析条件Ｄ：保持時間＝２.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ２９７.３ [Ｍ−ＯＣ(ＣＨ３)３] ；１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 2.29(t, J=7.5 Hz, 2H), 2.22(t, J=7.3 Hz, 2H), 1.67 - 1.53(m, 4H), 1.46(s, 9H), 1.31(m, 24H).
【０７５５】
工程２：(Ｓ)−メチル ２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−アジドブタノエートの製造
ＭｅＯＨ(４.２１ｍｌ)/ＣＨ２Ｃｌ２(１２.６４ｍｌ)中の(２Ｓ)−Ｎ−ＦＭＯＣ−４−アジド−ブタン酸(１.０ｇ, ２.７３ｍｍｏｌ)の混合物に、(トリメチルシリル)ジアゾメタン/ジエチルエーテル(２.０４７ｍＬ，４.０９ｍｍｏｌ)を加えた。得られる混合物を、室温で２時間撹拌した。混合物を濃縮して、(Ｓ)−メチル ２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−アジドブタノエートを得て、これを次の工程にそのまま使用した。１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 7.81(d, J=7.6 Hz, 2H), 7.73 - 7.63(m, 2H), 7.47 - 7.22(m, 4H), 4.41(d, J=6.7 Hz, 2H), 4.35 - 4.17(m, 2H), 3.82 - 3.70(m, 3H), 3.49 - 3.34(m, 2H), 2.21 - 2.04(m, 1H), 1.97 - 1.80(m, 1H).
【０７５６】
工程３：(Ｓ)−メチル ４−アジド−２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)ブタノエートの製造
ＣＨ２Ｃｌ２(４ｍＬ)中の(Ｓ)−メチル ２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−アジドブタノエート(１.０３８ｇ, ２.７３ｍｍｏｌ)およびジエチルアミン(４.０ｍＬ，３８.３ｍｍｏｌ)の混合物を、２時間室温で撹拌した。ＬＣＭＳは、Ｓ.Ｍ.の消失とＦＭＯＣ関連ピークに従い生成物形成を示した。濃縮して、得られる生成物を、次の工程にそのまま使用した。１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 3.85 - 3.69(m, 3H), 3.63 - 3.52(m, 1H), 3.51 - 3.40(m, 2H), 2.05 - 1.91(m, 1H), 1.88 - 1.76(m, 1H).
【０７５７】
工程４：(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １８−((４−アジド−１−メトキシ−１−オキソブタン−２−イル)アミノ)−１８−オキソオクタデカノエートの製造
ＴＨＦ(２７.３ｍｌ)中の(Ｓ)−メチル ２−アミノ−４−アジドブタノエート(０.４３２ｇ, ２.７３ｍｍｏｌ)、１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸(１.０１２ｇ, ２.７３ｍｍｏｌ)、ＤＩＰＥＡ(１.９０７ｍＬ，１０.９２ｍｍｏｌ)およびＨＢＴＵ(１.０３５ｇ, ２.７３ｍｍｏｌ)の混合物を、室温で終夜攪拌した。得られる粗生成物を、Biotage(シリカゲル, ３００ｇ, ０〜１０％アセトン/ＣＨ２Ｃｌ２)により精製して、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １８−((４−アジド−１−メトキシ−１−オキソブタン−２−イル)アミノ)−１８−オキソオクタデカノエート(１.３７ｇ, ２.６８ｍｍｏｌ, ９８％収率)を得た。分析条件Ｄ：保持時間＝２.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ５３３.３(M+Na)+；１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 4.54(dd, J=9.2, 5.0 Hz, 1H), 3.78 - 3.70(m, 3H), 3.49 - 3.37(m, 2H), 2.30 - 2.19(m, 2H), 2.15 - 2.04(m, 1H), 1.97 - 1.91(m, 1H), 1.91 - 1.83(m, 2H), 1.68 - 1.53(m, 4H), 1.46(s, 9H), 1.31(br. s., 24H).
【０７５８】
工程５：(Ｓ)−４−アジド−２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ブタン酸の製造
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １８−((４−アジド−１−メトキシ−１−オキソブタン−２−イル)アミノ)−１８−オキソオクタデカノエート(１.３７ｇ, ２.６８ｍｍｏｌ)を、ＴＨＦ(１３.４１ｍｌ)に溶解して、その後水酸化リチウム(０.３２１ｇ, １３.４１ｍｍｏｌ) および水(１３.４１ｍｌ)を加えた。反応混合物を、室温で終夜攪拌した。反応混合物を濃縮乾固させた。得られる(Ｓ)−４−アジド−２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ブタン酸を、次の工程にそのまま使用した。分析条件Ｄ：保持時間＝２.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ４９７.４(Ｍ＋Ｈ)＋.
【０７５９】
工程６：(Ｓ)−１８−((３−アジド−１−カルボキシプロピル)アミノ)−１８−オキソオクタデカン酸の製造
(Ｓ)−４−アジド−２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ブタン酸(１.３３２ｇ, ２.６８ｍｍｏｌ)およびＴＦＡ(２.８９ｍＬ，３７.５ｍｍｏｌ)/ＤＣＭ(２０ｍｌ)の混合物を、２時間室温で撹拌した。得られる粗生成物を、Ｐｒｅｐ−ＨＰＬＣにより精製して(溶媒Ａ＝１０％ ＭｅＯＨ−９０％Ｈ２Ｏ−０.１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝９０％ ＭｅＯＨ−１０％Ｈ２Ｏ−０.１％ＴＦＡ．カラム：PHENOMENEX LUNA 30 x 100mm, S10, 流速：４０ｍＬ/分、５０〜１００％Ｂ、１０分間および１２分で停止)、(Ｓ)−１８−((３−アジド−１−カルボキシプロピル)アミノ)−１８−オキソオクタデカン酸(４５１ｍｇ, １.０２４ｍｍｏｌ, ３８.２％収率)を得た。分析条件Ｄ：保持時間＝２.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ４４１.２(Ｍ＋Ｈ)＋；１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 4.51(dd, J=9.4, 4.8 Hz, 1H), 3.51 - 3.36(m, 3H), 2.37 - 2.22(m, 4H), 2.19 - 2.08(m, 1H), 1.99 - 1.88(m, 1H), 1.68 - 1.54(m, 4H), 1.40 - 1.22(m, 24H).
【０７６０】
(Ｓ)−１−アジド−３９−カルボキシ−３７,４１−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１,２４,２７,３０,３３−ウンデカオキサ−３６,４０−ジアザオクタペンタコンタン−５８−酸
【化４０１】
0006804442.tif 000404
工程１：１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸の製造
オクタデカン二酸(７.５ｇ, ２３.８５ｍｍｏｌ)を、トルエン(４２.６ｍｌ)に懸濁して、混合物を還流加熱した。１,１−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−Ｎ,Ｎ−ジメチルメタンアミン(１５.３３ｍＬ，６３.９ｍｍｏｌ)を、３０分間かけて滴加した。混合物を、終夜還流した。溶媒を５０℃で真空除去して、粗製物質をＣＨ２Ｃｌ２/ＥｔＯＡｃ(１１０ｍＬ １：１)に懸濁して、１５分間攪拌した。固体を濾去して、ＣＨ２Ｃｌ２(４０ｍＬ)で洗った。濾液を真空蒸発させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して(ＳＧ, ０〜２５％アセトン/ＣＨ２Ｃｌ２)、１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸(３.９５ｇ, １０.６６ｍｍｏｌ,４４.７％収率)を得た。分析条件Ｄ：保持時間＝５.０４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ２９７.３ [Ｍ−ＯＣ(ＣＨ３)３]；１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 2.29(t, J=7.5 Hz, 2H), 2.22(t, J=7.4 Hz, 2H), 1.67 - 1.53(m, 4H), 1.50 - 1.42(m, 9H), 1.40 - 1.25(m, 24H).
【０７６１】
工程２：１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)オクタデカンジオエートの製造
ＤＣＣ(５.１１ｍＬ，５.１１ｍｍｏｌ)を、１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸(１.７２ｇ, ４.６４ｍｍｏｌ)および１−ヒドロキシピロリジン−２,５−ジオン(０.５８８ｇ, ５.１１ｍｍｏｌ)/ＤＭＦ(４８ｍＬ)の溶液に加えた。混合物を、室温で終夜撹拌した。混合物を濾過して、濃縮して、１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)オクタデカンジオエートを得て、これを次の工程にそのまま使用した。
【０７６２】
工程３：(Ｓ)−４−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−３−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−４−オキソブタン酸の製造
水(６.７４ｍｌ)を、ＴＨＦ(２０.２１ｍｌ)中の(Ｓ)−３−アミノ−４−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−オキソブタン酸(１.１２２ｇ, ５.９３ｍｍｏｌ)、１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)オクタデカンジオエート(２.５２ｇ, ５.３９ｍｍｏｌ)、炭酸水素ナトリウム(０.５４３ｇ, ６.４７ｍｍｏｌ)の混合物に加えた。得られる透明な溶液を、室温で４時間攪拌した。全てのＴＨＦを除去して、ＨＣｌ(７.０１ｍＬ，７.０１ｍｍｏｌ)を加えて、ｐＨを０℃で２〜３に調整した。得られる懸濁液を、ＣＨ２Ｃｌ２(ｘ３)で抽出して、有機層を濃縮した。得られる生成物を、そのまま使用した。分析条件Ｄ：保持時間＝２.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ５４２.３(Ｍ＋Ｈ)＋；１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 4.64(t, J=6.1 Hz, 1H), 2.83-2.67(m, 2H), 2.29-2.18(m, 2H), 1.91-1.81(m, 1H), 1.78-1.67(m, 1H), 1.67-1.53(m, 4H), 1.53-1.39(m, 18H), 1.39-1.26(m, 24H).
【０７６３】
工程４：(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−アジド−３９−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−３７,４１−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１,２４,２７,３０,３３−ウンデカオキサ−３６,４０−ジアザオクタペンタコンタン−５８−オエートの製造
(Ｓ)−４−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−３−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−４−オキソブタン酸(２００ｍｇ, ０.３６９ｍｍｏｌ)/ＤＭＦ(３６９２μｌ)の溶液に、ヒューニッヒ塩基(１９３μｌ, １.１０８ｍｍｏｌ)およびＨＡＴＵ(２８１ｍｇ, ０.７３８ｍｍｏｌ)を加えた。次いで３５−アジド−３,６,９,１２,１５,１８,２１,２４,２７,３０,３３−ウンデカオキサペンタトリアコンタン−１−アミン(２１１ｍｇ, ０.３６９ｍｍｏｌ)を加えて、溶液を室温で３時間攪拌した。得られる生成物を、そのまま使用した。分析条件Ｄ：保持時間＝２.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１９４.７(Ｍ＋Ｈ)＋.
【０７６４】
工程５：(Ｓ)−１−アジド−３９−カルボキシ−３７,４１−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１,２４,２７,３０,３３−ウンデカオキサ−３６,４０−ジアザオクタペンタコンタン−５８−酸の製造
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−アジド−３９−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−３７,４１−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１,２４,２７,３０,３３−ウンデカオキサ−３６,４０−ジアザオクタペンタコンタン−５８−オエート(４０４ｍｇ, ０.３６９ｍｍｏｌ)およびＴＦＡ(２ｍＬ，２６.０ｍｍｏｌ)/ＤＣＭ(５ｍＬ)の混合物に、２時間室温で撹拌した。得られる粗生成物を、Ｐｒｅｐ−ＨＰＬＣにより精製して(溶媒Ａ＝１０％ ＭｅＯＨ−９０％Ｈ２Ｏ−０.１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝９０％ ＭｅＯＨ−１０％Ｈ２Ｏ−０.１％ＴＦＡ．カラム：PHENOMENEX LUNA 30 x 150mm, S10, 流速：４０ｍＬ/分、１２分間かけて５０〜１００％Ｂ、１３分で停止)、(Ｓ)−１−アジド−３９−カルボキシ−３７,４１−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１,２４,２７,３０,３３−ウンデカオキサ−３６,４０−ジアザオクタペンタコンタン−５８−酸(１２８ｍｇ, ０.１３０ｍｍｏｌ,３５.３％収率)(４ステップの収率)を得た。分析条件Ｄ：保持時間＝２.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９８２.５(Ｍ＋Ｈ)＋.
【０７６５】
(Ｓ)−１−アジド−１５−カルボキシ−１３,１７−ジオキソ−３,６,９−トリオキサ−１２,１６−ジアザテトラトリアコンタン−３４−酸
【化４０２】
0006804442.tif 000405
工程１：１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸の製造
オクタデカン二酸(７.５ｇ, ２３.８５ｍｍｏｌ)を、トルエン(４２.６ｍｌ)に懸濁して、混合物を還流加熱した。１,１−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−Ｎ,Ｎ−ジメチルメタンアミン(１５.３３ｍＬ，６３.９ｍｍｏｌ)を加えて、３０分間かけて滴加した。混合物を、終夜還流した。溶媒を、５０℃で真空除去して、粗製物質をＣＨ２Ｃｌ２/ＥｔＯＡｃに懸濁して(１１０ｍＬ １：１)、１５分間攪拌した。固体を濾去して、ＣＨ２Ｃｌ２(４０ｍＬ)で洗った。濾液を真空蒸発させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して(ＳＧ, ０〜２５％アセトン/ＣＨ２Ｃｌ２)、１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸(３.９５ｇ, １０.６６ｍｍｏｌ, ４４.７％収率)を得た。分析条件Ｄ：保持時間＝５.０４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ２９７.３ [Ｍ−ＯＣ(ＣＨ３)３]；１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ, メタノール−d４) δ 2.29(t, J=7.5 Hz, 2H), 2.22(t, J=7.4 Hz, 2H), 1.67-1.53(m, 4H), 1.50-1.42(m, 9H), 1.40-1.25(m, 24H).
【０７６６】
工程２：１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)オクタデカンジオエートの製造
ＤＣＣ(５.１１ｍＬ，５.１１ｍｍｏｌ)を、１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸(１.７２ｇ, ４.６４ｍｍｏｌ)および１−ヒドロキシピロリジン−２,５−ジオン(０.５８８ｇ, ５.１１ｍｍｏｌ)/ＤＭＦ(４８ｍＬ)の溶液に加えた。混合物を、室温で終夜攪拌した。混合物を濾過して、濃縮して、１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)オクタデカンジオエートを得て、これを次の工程にそのまま使用した。
【０７６７】
工程３：(Ｓ)−４−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−３−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−４−オキソブタン酸の製造
水(６.７４ｍｌ)を、(Ｓ)−３−アミノ−４−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−オキソブタン酸(１.１２２ｇ, ５.９３ｍｍｏｌ)、１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)オクタデカンジオエート(２.５２ｇ, ５.３９ｍｍｏｌ)、炭酸水素ナトリウム(０.５４３ｇ, ６.４７ｍｍｏｌ)/ＴＨＦ(２０.２１ｍｌ)の混合物に加えた。得られる透明な溶液を、室温で４時間攪拌した。全てのＴＨＦを除去して、ＨＣｌ(７.０１ｍＬ，７.０１ｍｍｏｌ)を加えて、ｐＨを０℃で２〜３に調整した。得られる懸濁液を、ＣＨ２Ｃｌ２(ｘ３)で抽出して、有機層を濃縮した。得られる生成物を、そのまま使用した。分析条件Ｄ：保持時間＝２.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ５４２．３(Ｍ＋Ｈ)＋；１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４) δ 4.64(t, J=6.1 Hz, 1H), 2.83-2.67(m, 2H), 2.29-2.18(m, 2H), 1.91-1.81(m, 1H), 1.78-1.67(m, 1H), 1.67-1.53(m, 4H), 1.53-1.39(m, 18H), 1.39-1.26(m, 24H).
【０７６８】
工程４：(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−アジド−１５−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１３,１７−ジオキソ−３,６,９−トリオキサ−１２,１６−ジアザテトラトリアコンタン−３４−オエートの製造
(Ｓ)−４−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−３−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−４−オキソブタン酸(３５０ｍｇ, ０.６４６ｍｍｏｌ)/ＤＭＦ(６４６０μｌ)の溶液に、ヒューニッヒ塩基(３３８μｌ, １.９３８ｍｍｏｌ)およびＨＡＴＵ(４９１ｍｇ, １.２９２ｍｍｏｌ)を加えた。次いで、２−(２−(２−(２−アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エタンアミン(１４１ｍｇ, ０.６４６ｍｍｏｌ)を加えて、溶液を、室温で３時間攪拌した。得られる生成物をそのまま使用した。
分析条件Ｄ：保持時間＝２.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ７４２.５(Ｍ＋Ｈ)＋.
【０７６９】
工程５：(Ｓ)−１−アジド−１５−カルボキシ−１３,１７−ジオキソ−３,６,９−トリオキサ−１２,１６−ジアザテトラトリアコンタン−３４−酸の製造
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−アジド−１５−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１３,１７−ジオキソ−３,６,９−トリオキサ−１２,１６−ジアザテトラトリアコンタン−３４−オエート(４７９ｍｇ, ０.６４６ｍｍｏｌ)およびＴＦＡ(２ｍＬ，２６.０ｍｍｏｌ)/ＤＣＭ(１０ｍＬ)の混合物を、２時間室温で撹拌した。得られる粗生成物を、Ｐｒｅｐ−ＨＰＬＣにより精製して(溶媒Ａ＝１０％ ＭｅＯＨ−９０％Ｈ２Ｏ−０.１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝９０％ ＭｅＯＨ−１０％Ｈ２Ｏ−０.１％ＴＦＡ．カラム：PHENOMENEX LUNA 30 x 150mm, S10, 流速：４０ｍＬ/分、５０〜１００％Ｂ、１０分間および１２分で停止)、(Ｓ)−１−アジド−１５−カルボキシ−１３,１７−ジオキソ−３,６,９−トリオキサ−１２,１６−ジアザテトラトリアコンタン−３４−酸(１１９ｍｇ, ０.１８９ｍｍｏｌ,２９.２％収率)(４ステップの収量)を得た；分析条件Ｄ：保持時間＝２.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ６３０.２(Ｍ＋Ｈ)＋.
【０７７０】
中間体１３００Ａ(ＩＮＴ−１３００Ａ)の製造
【化４０３】
0006804442.tif 000406
下記ペプチドを、上記方法に従って０.２ｍｍｏｌスケールで合成した。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いた。ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−［Ｎ−Ｍｅ］Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−Ｈｙｐ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｂｚｔ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−［(Ｓ)−プロパルギルグリシン]。上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters xbridge c−18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて４０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３７.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９８６.７(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン(most abundunt ion)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.８６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９８６.７(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン。
【０７７１】
中間体１３００Ｂの製造
【化４０４】
0006804442.tif 000407
下記ペプチドを、０.２ｍｍｏｌスケールで上記方法に従い合成した。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いた：ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−［Ｎ−Ｍｅ］Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−Ｈｙｐ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｂｚｔ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−［(Ｓ)−アジド−Ｄａｂ］。上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて５０〜９０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は５０.４ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １００２.２(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；分析条件Ｂ：保持時間＝２.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １００２.２(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン。
【０７７２】
中間体１３００Ｃの製造
【化４０５】
0006804442.tif 000408
下記ペプチドを、０.１ｍｍｏｌ スケールで上記方法に従い合成した。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いた：ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−［Ｎ−Ｍｅ］Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−Ｈｙｐ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｂｚｔ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−［(Ｓ)−アジド−Ｄａｂ］；上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて４５〜８５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は９.３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０３０.７(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；分析条件Ｂ：保持時間＝２.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０３０.６(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０２９.９９３１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０２９.９８９８(Ｍ＋２Ｈ).
【０７７３】
中間体１３００Ｖの製造
【化４０６】
0006804442.tif 000409
下記ペプチドを、０.１ｍｍｏｌスケールで上記方法に従い合成した。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いて、イタリック体で記載した残基：(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸を、３０分間の単カップリングによりカップリングさせた。ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−［Ｎ−Ｍｅ］Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−Ｈｙｐ−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−［(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸］−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−［(Ｓ)−プロパルギルグリシン］；ここで前記(Ｓ)プロパルギルグリシンは、２−クロロトリチル樹脂に組み込まれた。上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて４５〜８５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は、であり、１６.４ｍｇ, ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９９２.３(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン。分析条件Ｂ：保持時間＝３.０２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９９２.３(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：９９１.９９５３(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：９９１.９９２６(Ｍ＋２Ｈ).
【０７７４】
中間体１３００Ｗの製造
【化４０７】
0006804442.tif 000410
下記ペプチドを、０.２ｍｍｏｌスケールで上記方法に従い合成した。下線部分の工程は二重カップリング方法を用い、イタリック体で記載した残基：(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸は、３０分間の単カップリングによりカップリングされた：ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−［Ｎ−Ｍｅ］Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−Ｈｙｐ−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−［(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸］−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−［(Ｓ)−プロパルギルグリシン］。上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて５０〜９０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。この物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳによりさらに精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて１０〜５０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は５８.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９９１.９(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；分析条件Ｂ：保持時間＝３.１１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９９１.８(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン。
【０７７５】
中間体１３００Ｘの製造
【化４０８】
0006804442.tif 000411
下記ペプチドを、０.２ｍｍｏｌスケールで上記方法に従い行った。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いて、イタリック体で記載した残基：(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸は、３０分間の単カップリングによりカップリングされた：ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−［Ｎ−Ｍｅ］Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−Ｈｙｐ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−［(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸］−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−［(Ｓ)−プロパルギルグリシン]；上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて１０〜５０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３９.９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９８５.２(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン。
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９８５.４(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：９８４.９８７５(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：９８４.９８７７(Ｍ＋２Ｈ).
【０７７６】
【化４０９】
0006804442.tif 000412
下記ペプチドを、０.４ｍｍｏｌスケールで上記方法に従い行った。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いて、イタリック体で記載した残基：(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸は、３０分間の単カップリングによりカップリングされた：ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−［Ｎ−Ｍｅ］Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−［(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸］−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−［(Ｓ)−プロパルギルグリシン］；前記(Ｓ)プロパルギルグリシンは、２−クロロトリチル樹脂に組み込まれた。上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて３７〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。この物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳによりさらに精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて０〜４０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は５６.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.０６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０４７.８(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；分析条件Ｂ：保持時間＝２.１９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０４８.０(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０４７.４９３１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０４７.４８９９(Ｍ＋２Ｈ).
【０７７７】
中間体１３０ＡＡの製造
【化４１０】
0006804442.tif 000413
下記ペプチドを、上記方法に従い、０.８ｍｍｏｌのスケールで行った。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いて、イタリック体で記載した残基：(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸は、３０分間の単カップリングによりカップリングされた：ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−［Ｎ−Ｍｅ］Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−Ｈｙｐ−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−［(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸］−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−［(Ｓ)−プロパルギルグリシン］；ここで前記(Ｓ)プロパルギルグリシンは、２−クロロトリチル樹脂に組み込まれた。上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：CSH C18, 30 x 150 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて１０〜５０％Ｂ、次いで１００％Ｂで７分間保持；流量：５０ｍＬ/分。試料を、１３０ umol/イジェクションの濃度で６つのインジェクションに分けた。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１０２.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０２１.１(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；分析条件Ｇ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０２１.３(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０２０.５０６０(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０２０.５０４５(Ｍ＋２Ｈ). 
【０７７８】
中間体１３０ＡＢの製造
【化４１１】
0006804442.tif 000414
下記ペプチドを、０.８ｍｍｏｌのスケールで上記方法に従い行った。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いて、イタリック体で記載した残基：(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸は、３０分間の単カップリングによりカップリングされた：ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−［Ｎ−Ｍｅ］Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−Ｈｙｐ−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−［(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸］−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−［(Ｓ)−プロパルギルグリシン］；ここで前記(Ｓ)プロパルギルグリシンは、２−クロロトリチル樹脂に組み込まれた。上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters CSH C18, 30 x 150 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて５〜４５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１３２.１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.４７分；分析条件Ｂ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０５０.３(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０４９.０１６８(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０４９.０１５６(Ｍ＋２Ｈ).
【０７７９】
中間体１３０ＡＤの製造
【化４１２】
0006804442.tif 000415
下記ペプチドを、０.４ｍｍｏｌのスケールで上記方法に従い行った。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いて、イタリック体で記載した残基：(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸は、３０分間の単カップリングによりカップリングされた：ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−［Ｎ−Ｍｅ］Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−Ｈｙｐ−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−［(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸］−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−［Ｐｒａ］；ここで前記プロパルギルグリシンは、２−クロロトリチル樹脂に組み込まれた。上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters CSH C18, 30 x 150 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて５〜４５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：５０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４６.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.３１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １００１.３(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；分析条件Ｇ：保持時間＝２.１９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０００.２(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：９９９.９７４６(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：９９９.９７２３(Ｍ＋２Ｈ).
【０７８０】
中間体１３０ＡＥの製造
【化４１３】
0006804442.tif 000416
下記ペプチドを、０.４ｍｍｏｌのスケールで上記方法に従い行った。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いて、イタリック体で記載した残基：(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸は、３０分間の単カップリングによりカップリングされた：ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−［Ｎ−Ｍｅ］Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−Ｈｙｐ−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−［(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸］−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−［Ｐｒａ］；ここで前記プロパルギルグリシンは、２−クロロトリチル樹脂に組み込まれた。上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters CSH C18, 30 x 150 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて５〜４５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：５０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は５１.０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.２３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １００１.２(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン。分析条件Ｇ：保持時間＝１.２７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０００.９(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０００.４６６６(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０００.４６４６(Ｍ＋２Ｈ).
【０７８１】
中間体１３０ＡＦの製造
【化４１４】
0006804442.tif 000417
下記ペプチドを、０.８ｍｍｏｌのスケールで上記方法に従い行った。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いて、イタリック体で記載した残基：(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸は、３０分間の単カップリングによりカップリングされた：ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−［Ｎ−Ｍｅ］Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−Ｈｙｐ−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−［(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸］−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ−［Ｐｒａ］；ここで前記プロパルギルグリシンは、２−クロロトリチル樹脂に組み込まれた。上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＨＰＬＣにより精製した。：カラム：Phenomenex Gemini NX-C18, 50 X 250 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.０５％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.０５％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて１０〜５０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：１２５ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１５２.１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９６４.１(Ｍ＋２Ｈ)；
分析条件Ｇ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９６５.２(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：９６３.４８４６(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：９６３.４８２５(Ｍ＋２Ｈ).
【０７８２】
中間体１３０ＡＧの製造
【化４１５】
0006804442.tif 000418
下記ペプチドを、０.８ｍｍｏｌのスケールで上記方法に従い行った。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いて、イタリック体で記載した残基：(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸は、３０分間の単カップリングによりカップリングされた：ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−［Ｎ−Ｍｅ］Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−Ｈｙｐ−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−［(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸］−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−［Ｐｒａ］；ここで前記プロパルギルグリシンは、２−クロロトリチル樹脂に組み込まれた。上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Phenomenex Gemini NX-C18, 50 X 250 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.０５％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.０５％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて５〜４５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：１２５ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１５４.１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.２８分。
分析条件Ｇ：保持時間＝１.２５分；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：９７１.４６３８(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：９７１.４６２０(Ｍ＋２Ｈ).
【０７８３】
中間体１３０ＡＨの製造
【化４１６】
0006804442.tif 000419
下記ペプチドを、０.８ｍｍｏｌのスケールで上記方法に従い行った。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いて、イタリック体で記載した残基：(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸は、３０分間の単カップリングによりカップリングされた：ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−［Ｎ−Ｍｅ］Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−Ｈｙｐ−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−［(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸］−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−［Ｎ−Ｍｅ］Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−［Ｐｒａ］；ここで前記プロパルギルグリシンは、２−クロロトリチル樹脂に組み込まれた。上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＨＰＬＣにより精製した。：カラム：Phenomenex Gemini NX-C18, 50 X 250 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.０５トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.０５％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて５〜４５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：１２５ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１４７.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.２９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９６５.３(Ｍ＋２Ｈ)；分析条件Ｇ：保持時間＝１.２４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ９６４.９(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：９６４.４５６０(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：９６４.４５３５(Ｍ＋２Ｈ).
【０７８４】
中間体１３０ＡＩの製造
【化４１７】
0006804442.tif 000420
下記ペプチドを、０.１ｍｍｏｌのスケールで上記方法に従い合成した。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いたが、イタリック体部分：(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸のカップリングは、３０分間の単カップリングであった：ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−ｈＰｒｏ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−Ｈｙｐ−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−［(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(カルボキシメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸］−ｍＮｌｅ−ｍＮｌｅ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−［(Ｓ)−プロパルギルグリシン］。上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Phenomenex Gemini NX-C18, 50 X 250 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて１０〜５０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：１００ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１５８.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.５５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １００５.１(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；分析条件Ｇ：保持時間＝１.３８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １００５.３(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１００５.００３１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１００５.００１５(Ｍ＋２Ｈ).
【０７８５】
中間体１３０ＡＪの製造
【化４１８】
0006804442.tif 000421
下記ペプチドを、０.１ｍｍｏｌのスケールで上記方法に従い合成した。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いた：
0006804442.tif 000422
上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Phenomenex Gemini NX-C18, 50 X 250 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて５〜４５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：１００ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１０７.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.２８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０１３.１(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；分析条件Ｇ：保持時間＝１.２８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０１３.２(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０１２.９８２４(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０１２.９７９７(Ｍ＋２Ｈ).
【０７８６】
中間体１３０ＡＫの製造
【化４１９】
0006804442.tif 000423
下記ペプチドを、０.１ｍｍｏｌのスケールで上記方法に従い行った。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いた：
0006804442.tif 000424
上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、下記条件に従ってプレパラティブＰｒｅｐ ＨＰＬＣにより精製した：カラム：Phenomenex Gemini NX-C18, 50 X 250 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて１０〜５０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：１２５ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２４１.９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.５５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０１２.１(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；分析条件Ｇ：保持時間＝１.３９６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０１２.２(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０１２.０１０９(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０１２.００８９(Ｍ＋２Ｈ). 
【０７８７】
中間体１３０ＡＬの製造
【化４２０】
0006804442.tif 000425
下記ペプチドを、０.１ｍｍｏｌのスケールで上記方法に従い合成した。下線部分の工程は二重カップリング方法を用いた：
0006804442.tif 000426
上記した方法に従う脱保護および環化の後に、化合物を下記の通りに精製した：粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Phenomenex Gemini NX-C18, 50 X 250 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて５〜４５％Ｂ、次いで１００％Ｂで７分間保持；流量：１００ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２１８.０ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.３１６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０２０.２(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；分析条件Ｇ：保持時間＝１.２９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １０２０.２(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１０１９.９９０２(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１０１９.９８８１(Ｍ＋２Ｈ).
【０７８８】
実施例１３０５１の製造
【化４２１】
0006804442.tif 000427
中間体１３００Ｂ(１０ｍｇ, ４.９９ｍｏｌ)およびＮ−(プロパ−２−イン−１−イル)テトラデカンアミド(３.９８ｍｇ, ０.０１５ｍｍｏｌ)を、そのまま一般的なトリアゾール形成法にて反応させて、粗生成物を得た。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて３５〜８５％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。この物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳによりさらに精製した：カラム：XBridge C18, 19 x mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：２０分かけて６０〜１００％Ｂ、次いで１０分間１００％Ｂで保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２.５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析条件Ａ：保持時間＝２.３２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１３４.９(Ｍ＋２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝３.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１３５.１(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１３４.１０２６(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１３４.１０２８(Ｍ＋２Ｈ).
【０７８９】
実施例１３０５２の製造
【化４２２】
0006804442.tif 000428
中間体１３００Ｂ(８.５ｍｇ, ４.２５ｍｏｌ)および２−(２−(２−メトキシエトキシ)エトキシ)−Ｎ−(プロパ−２−イン−１−イル)アセトアミド(２.７４ｍｇ, ０.０１３ｍｍｏｌ)を、そのまま一般的なトリアゾール形成法にて反応させて、粗生成物を得た。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて５０〜９０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は６.３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０９.９(Ｍ＋２Ｈ)；分析条件Ｂ：保持時間＝２.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１０９.８(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン。
【０７９０】
実施例１３１２１の製造
【化４２３】
0006804442.tif 000429
中間体１３０ＡＢ(２６.１ｍｇ, １２μｍｏｌ)および(Ｓ)−４−アジド−２−パルミトアミドブタン酸(１３.７ｍｇ, ０.０３１ｍｍｏｌ)を、そのまま一般的なトリアゾール形成法にて反応させて、粗生成物を得た。反応溶液を、ＭｅＯＨ中に少量希釈して、ｐｒｅｐ ＨＰＬＣ(２回のインジェクション)により精製した：30 X 100 mm HPLC Phenomenex Luna 5μm １５分かけて１０〜１００％Ａ：Ｂ、１００％Ｂで３分間(Ａは９０：１０の水：ＣＨ３ＣＮ w/０.１％ＴＦＡ；Ｂは１０：９０ 水：ＣＨ３ＣＮw/０.１％ＴＦＡ))。生成物の収量は１１.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析条件Ｈ：保持時間＝１０.９２分。
分析条件Ｉ：保持時間＝９.９４分；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２６９.１６６７(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２６９.１６４８(Ｍ＋２Ｈ).
【０７９１】
実施例１３１２２の製造
【化４２４】
0006804442.tif 000430
中間体１３０ＡＡ(２５.５ｍｇ, １３μmol)および(Ｓ)−４−アジド−２−パルミトアミドブタン酸(１３.８ｍｇ, ０.０３１ｍｍｏｌ)を、そのまま一般的なトリアゾール形成法にて反応させて、粗生成物を得た。反応溶液を、ＭｅＯＨに少量希釈して、prep ＨＰＬＣ(２回インジェクション)により精製した：30 X 100 mm HPLC Phenomenex Luna 5μm １５分かけて１０〜１００％Ａ：Ｂ、１００％Ｂで３分間(Ａは９０：１０ 水：ＣＨ３ＣＮ w/ ０.１％ＴＦＡであり；Ｂは１０：９０ 水：ＣＨ３ＣＮ w/ ０.１％ＴＦＡ))。
生成物の収量は８.１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９４％であった。分析条件Ｉ：保持時間＝１０.０６分
分析条件Ｊ：保持時間＝８.６３分；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２４０.６５６０(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２４０.６５４６(Ｍ＋２Ｈ).
【０７９２】
実施例１３１２３の製造
【化４２５】
0006804442.tif 000431
中間体１３０ＡＡ(４１.３ｍｇ, ２０μmol)および(Ｓ)−１−アジド−２８−カルボキシ−２５,３０−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサ−２４,２９−ジアザヘプタテトラコンタン−４７−酸(２４.９ｍｇ, ０.０３０ｍｍｏｌ)を、そのまま一般的なトリアゾール形成法にて反応させて、粗生成物を得た。反応溶液を、ＭｅＯＨに若干希釈して、prep ＨＰＬＣにより精製した(２回のインジェクション)：30 X 100 mm HPLC Phenomenex Luna 5μm １５分かけて１０〜１００％Ａ：Ｂ、１００％Ｂで３分間(Ａは９０：１０ 水：ＣＨ３ＣＮ w/ ０.１％ＴＦＡ；Ｂは１０：９０ 水：ＣＨ３ＣＮw/ ０.１％ＴＦＡである))。生成物の収量は２６.２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９４％であった。分析条件Ｉ：保持時間＝９.５４分。
分析条件Ｊ：保持時間＝８.１３分；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１４３０.２６６３(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１４３０.２６５６(Ｍ＋２Ｈ).
【０７９３】
実施例１３１２４の製造
【化４２６】
0006804442.tif 000432
中間体１３０ＡＢ(４０.７ｍｇ, １９μmol)および(Ｓ)−１−アジド−２８−カルボキシ−２５,３０−ジオキソ−３,６,９,１２,１５,１８,２１−ヘプタオキサ−２４,２９−ジアザヘプタテトラコンタン−４７−酸(２３.９ｍｇ, ０.０２９ｍｍｏｌ)を、そのまま一般的なトリアゾール形成法にて反応させて、粗生成物を得た。反応溶液を、ＭｅＯＨに少量希釈して、prep ＨＰＬＣにより精製した(２回のインジェクション)：30 X 100 mm HPLC Phenomenex Luna 5μm １５分かけて１０〜１００％Ａ：Ｂ、１００％Ｂで３分間(Ａは９０：１０ 水：ＣＨ３ＣＮw/０.１％ＴＦＡであり；Ｂは１０：９０ 水：ＣＨ３ＣＮw/０.１％ＴＦＡである)。生成物の収量は２４.３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５％であった。分析条件Ｉ：保持時間＝９.４９分；分析条件Ｊ：保持時間＝８.０８分；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１４５８.７７７０(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１４５８.７７４３(Ｍ＋２Ｈ).
【０７９４】
実施例１３１２５の製造
【化４２７】
0006804442.tif 000433
中間体１３０ＡＤ(２２.１ｍｇ, １１μmol)および(Ｓ)−４−アジド−２−パルミトアミドブタン酸(６.１ｍｇ, ０.０１４ｍｍｏｌ)を、そのまま一般的なトリアゾール形成法にて反応させて、粗生成物を得た。反応溶液を、ＭｅＯＨに少量希釈して、prep ＨＰＬＣにより精製した(２回のインジェクション)：30 X 100 mm HPLC Phenomenex Luna 5μm １５分かけて１０〜１００％Ａ：Ｂ、１００％Ｂで３分間(Ａは９０：１０ 水：ＣＨ３ＣＮw/０.１％ＴＦＡであり；Ｂは１０：９０ 水：ＣＨ３ＣＮw/０.１％ＴＦＡである))。生成物の収量は９.５ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９０％であった。分析条件Ｉ：保持時間＝９.２４分；分析条件Ｊ：保持時間＝８.００分；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２２０.１２４５(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２２０.１２０８(Ｍ＋２Ｈ).
【０７９５】
実施例１３１２６の製造
【化４２８】
0006804442.tif 000434
中間体１３０ＡＥ(２４.５ｍｇ, １２μmol)および(Ｓ)−４−アジド−２−パルミトアミドブタン酸(６.８ｍｇ, ０.０１５ｍｍｏｌ)を、そのまま、一般的なトリアゾール形成法にて反応させて、粗生成物を得た。反応溶液を、ＭｅＯＨに少量希釈して、prep ＨＰＬＣにより精製した(２回のインジェクション)：30 X 100 mm HPLC Phenomenex Luna 5μm １５分かけて１０〜１００％Ａ：Ｂ、１００％Ｂで３分間(Ａは９０：１０ 水：ＣＨ３ＣＮw/ ０.１％ＴＦＡであり；Ｂは１０：９０ 水：ＣＨ３ＣＮw/ ０.１％ＴＦＡである))。生成物の収量は１０.３ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５％であった。分析条件Ｉ：保持時間＝９.３６分。
分析条件Ｊ：保持時間＝８.１５分；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２２０.６１６５(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２２０.６１３３(Ｍ＋２Ｈ).
【０７９６】
実施例１３１２９の製造
【化４２９】
0006804442.tif 000435
中間体１３０ＡＦ(３５ｍｇ, １８.０μｍｏｌ)および(Ｓ)−１８−((３−アジド−１−カルボキシプロピル)アミノ)−１８−オキソオクタデカン酸(１０.０１ｍｇ, ０.０２３ｍｍｏｌ)を、そのまま一般的なトリアゾール形成法にて反応させて、粗生成物を得た。粗生成物を、Ｐｒｅｐ−ＨＰＬＣにより精製した(カラム：Phenomenex Luna C18 30 x100 mm 5um, 溶媒Ａ＝９０：１０ Ｈ２Ｏ：ＡＣＮ ０.１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝１０：９０ Ｈ２Ｏ：ＣＡＮ ０.１％ＴＦＡ。流速：４０ｍＬ/分、１０〜１００％Ｂ。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１１.７ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった。分析条件Ｃ：保持時間＝１.１６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１８５.５０(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン。
【０７９７】
実施例１３１３０の製造
【化４３０】
0006804442.tif 000436
中間体１３０ＡＧ(４０.６５ｍｇ, ２１.０μｍｏｌ)および(Ｓ)−１８−((３−アジド−１−カルボキシプロピル)アミノ)−１８−オキソオクタデカン酸(１１.５３ｍｇ, ０.０２６ｍｍｏｌ)を、そのまま一般的なトリアゾール形成法にて反応させて、粗生成物を得た。
粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて４０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は４.９ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９３％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.５４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１９１.５(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；分析条件Ｇ：保持時間＝１.６８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１９２.２(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１９１.６１３８(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１９１.６１０６(Ｍ＋２Ｈ).
【０７９８】
実施例１３１３１の製造
【化４３１】
0006804442.tif 000437
中間体１３０ＡＨ(４０.３７ｍｇ, ２１.０μｍｏｌ)および(Ｓ)−１８−((３−アジド−１−カルボキシプロピル)アミノ)−１８−オキソオクタデカン酸(１１.５３ｍｇ, ０.０２６ｍｍｏｌ)を、そのまま一般的なトリアゾール形成法にて反応させて、粗生成物を得た。
粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：XBridge C18, 19 x mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；移動相Ｂ：９５：５ メタノール：水(１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：３０分かけて４０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２.１ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.８１５分；分析条件Ｋ：保持時間＝１.６８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １１８５.２(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１１８４.６０５９(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１１８４.６０３１(Ｍ＋２Ｈ).
【０７９９】
実施例１３１３２の製造
【化４３２】
0006804442.tif 000438
中間体１３０ＡＩ(４６.４ｍｇ, ２３.０μｍｏｌ)および(Ｓ)−１８−((３−アジド−１−カルボキシプロピル)アミノ)−１８−オキソオクタデカン酸(１１.１９ｍｇ, ０.０２５ｍｍｏｌ)を、そのまま一般的なトリアゾール形成法にて反応させて、粗生成物を得た。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters CSH C18, 19 x mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて３０〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は７.２ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析条件Ｇ：保持時間＝１.８８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ ８１７.９(Ｍ＋３Ｈ)、最大強度イオン；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２２５.１５３１(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２２５.１５２１(Ｍ＋２Ｈ).
【０８００】
実施例１３１３３の製造
【化４３３】
0006804442.tif 000439
中間体１３０ＡＫ(５６.５ｍｇ, ２８.０μｍｏｌ)および(Ｓ)−１８−((３−アジド−１−カルボキシプロピル)アミノ)−１８−オキソオクタデカン酸(１３.５３ｍｇ, ０.０３１ｍｍｏｌ)を、一般的なトリアゾール形成法において、そのまま反応させて、粗生成物を得た。粗製物質を、以下の条件に従ってプレパラティブＬＣ/ＭＳにより精製した：カラム：Waters CSH C18, 19 x mm, 5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％トリフルオロ酢酸を含む)；グラジエント：３０分かけて３０〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで５分間保持；流量：２０ｍＬ/分。目的とする生成物を含有する画分を合わせて、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は９.８ｍｇであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。分析条件Ａ：保持時間＝１.７８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２３２.２(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；分析条件Ｇ：保持時間＝１.８４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ/ｚ １２３３.１(Ｍ＋２Ｈ)、最大強度イオン；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ/ｚ：計算値：１２３２.１６０９(Ｍ＋２Ｈ)．実測値：１２３２.１５７９(Ｍ＋２Ｈ).
【０８０１】
環化方法Ｂ：
全ての操作を、別段の記載が無ければ、手動により行った。“環化方法Ｂ”の方法は、０.１００ｍｍｏｌのスケールで行った実験を述べたもので、この場合のスケールは、ペプチドを作成するために使用された樹脂の量により決定される。このスケールは、この方法で使用したペプチドの量の直接的な測定に基づくものではない。この方法は、記戴した体積をスケールの倍数で調整することにより、０.１００ｍｍｏｌのスケールを超えて拡大できる。粗製ペプチド固体を、〜３滴のＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを含有するメタノール(〜２４ｍＬ)に溶解した。塩基性溶液(ｐＨ＞９)を、次いで１８〜２４時間静置した。得られる溶液に、１ｍＬ ＤＭＳＯを加えて、メタノールの部分を減圧下でエバポレートして、濃縮された粗製環化生成物のＤＭＳＯ溶液を得た。この溶液を、逆相ＨＰＬＣ精製に付して、目的とする環状ペプチドを得た。
【０８０２】
分析条件１３Ａ：
カラム：X−Select CSH C18, 3.0 x 150 mm, 3.5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：１５分かけて１０〜１００％Ｂ；流量：０.５ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ.
分析条件１３Ｂ：
カラム：Zorbax Bonus−RPC18, 3.0 x 150 mm, 3.5μm 粒子；移動相Ａ：５：９５ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；移動相Ｂ：９５：５ アセトニトリル：水(０.１％ＴＦＡを含む)；グラジエント：１５分かけて１０〜１００％Ｂ；流量：０.５ｍＬ/分；検出：２２０ｎｍのＵＶ.
【０８０３】
１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(パーフルオロフェニル)オクタデカンジオエートの製造
【化４３４】
0006804442.tif 000440
１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカン酸(５.００ｇ, １３.４９ｍｍｏｌ)/ＤＭＦ(５４.０ｍｌ)の溶液に、ピリジン(３.８２ｍＬ，４７.２ｍｍｏｌ)、次いでペンタフルオロフェニルトリフルオロ酢酸(５.８１ｍＬ，３３.７ｍｍｏｌ)を加えた。ゲルが形成したため、追加の撹拌バーを反応混合物に加えた。混合物を激しく終夜撹拌した。反応混合物を濾過して(ブフナー漏斗/紙)、白色固体を得て、これを少量のＤＭＦで洗った。窒素を多く含む大気を、数時間フィルターケーキを介して吸引して、１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(パーフルオロフェニル)オクタデカンジオエート(６.２４ｇ, １１.６３ｍｍｏｌ,８６％収率)を得た。
【０８０４】
(Ｓ)−１−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(パーフルオロフェニル)２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ペンタンジオエートの製造
【化４３５】
0006804442.tif 000441
(Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタン酸(３５０ｍｇ, ０.６３０ｍｍｏｌ)/ＤＭＦ(２５１９μｌ)の溶液に、ピリジン(１７８μｌ, ２.２０４ｍｍｏｌ)、次いでペンタフルオロフェニルトリフルオロ酢酸(２７１μｌ, １.５７４ｍｍｏｌ)を加えた。得られる溶液を含有するバイアルを、窒素でフラッシュし、一晩密閉した。ＬＣ/ＭＳにより、生成した生成物が測定された。混合物を水およびクエン酸で希釈し、３回ＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせて、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過して、真空濃縮した。残留物を、そのまま次の化学反応に使用した。
【０８０５】
(Ｓ)−５−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ペンタン酸の製造
【化４３６】
0006804442.tif 000442
１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(パーフルオロフェニル)オクタデカンジオエート(１.６６６ｇ, ３.１０ｍｍｏｌ)/ＤＭＦ(２１.７１ｍｌ)の溶液に、(Ｓ)−５−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−アミノペンタン酸(１.０ｇ, ２.８２ｍｍｏｌ)およびヒューニッヒ塩基(１.４７８ｍＬ，８.４７ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を、室温で撹拌した。ＬＣ/ＭＳにより、目的とする生成物の形成が示された。混合物を、クエン酸水溶液で希釈し、３回ＣＨ２Ｃｌ２に抽出した。有機抽出物を合わせて、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過して、真空濃縮した。
【０８０６】
バルク物質を、ＰＲＥＰ ＨＰＬＣにより精製した：(50 X 250 mm HPLC Sunfire C18 10μm ４０分かけて０〜１００％Ａ：Ｂ、１００％Ｂで１０分間(Ａは９０：１０：０.１の水：ＭｅＯＨ：ＴＦＡであり；Ｂは９０：１０：０.１のＭｅＯＨ：水：ＴＦＡである))。その後、１００％Ｂ(アイソクラティック)で１５分間流して精製した。画分をプールし、ヒューニッヒ塩基を用いて中性ｐＨに調整して、ｒｏｔｏｖａｐ内で濃縮した。残留水層を、３回ＥｔＯＡｃで抽出して、濾過して、真空濃縮して、(Ｓ)−５−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ペンタン酸(１.３３ｇ, １.８８１ｍｍｏｌ,６６.７％収率)を得た。
【０８０７】
(Ｓ)−４−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ブタン酸の製造
【化４３７】
0006804442.tif 000443
１−ｔｅｒｔ−ブチル １８−(パーフルオロフェニル)オクタデカンジオエート(１.１５５ｇ, ２.１５２ｍｍｏｌ)/ＤＭＦ(１.６６Ｅ＋０４μｌ)の懸濁液に、(Ｓ)−４−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−アミノブタン酸(８２７ｍｇ, ２.４３０ｍｍｏｌ)およびヒューニッヒ塩基(１１２８μｌ, ６.４６ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を、週末にわたり激しく撹拌した。ＬＣ/ＭＳにより、目的とする生成物が示された。混合物をクエン酸水溶液で希釈して、３回ＣＨ２Ｃｌ２に抽出した。有機抽出物を合わせて、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過して、真空濃縮した。物質を、濁ったＭｅＯＨ溶液中に移した。.４５ umフリットを介した濾過は時間を要して(幾つかのフィルターを使用した)、透明な溶液となった。ＰＲＥＰ ＨＰＬＣ：(50 X 250 mm HPLC Sunfire C18 10μm, １４分かけて１００％Ｂ(Ａは９０：１０：０.１の水：ＭｅＯＨ：ＴＦＡであり；Ｂは９０：１０：０.１のＭｅＯＨ：水：ＴＦＡである))により精製した。画分をプールして、ヒューニッヒ塩基を用いて中性に調整して、rotovapで濃縮した。(Ｓ)−４−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ブタン酸(７７８.４２ｍｇ, １.１２３ｍｍｏｌ, ５２.２％収率)を単離した。
【０８０８】
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−((Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタンアミド)ブタン酸の製造
【化４３８】
0006804442.tif 000444
粗製(Ｓ)−１−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(パーフルオロフェニル)２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ペンタンジオエート(４５５ｍｇ, .６３ｍｍｏｌ)/ＤＭＦ(６３００μｌ)の溶液に、ヒューニッヒ塩基(４４０μｌ, ２.５２ｍｍｏｌ)を加えて、次いで(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−アミノブタン酸(２１４ｍｇ, ０.６３０ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を、室温で終夜攪拌した。混合物をクエン酸で希釈して、３回ＥｔＯＡｃに抽出した。有機抽出物を合わせて、塩水で洗い、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して、真空濃縮した。残留物を、ＰＲＥＰ ＨＰＬＣにより精製した：(50 X 250 mm HPLC Sunfire C18 10μm, ３０分かけて１０〜１００％ Ａ：Ｂ、１００％Ｂで５分間(Ａは９０：１０：０.１の水：ＭｅＯＨ：ＴＦＡであり；Ｂは９０：１０：０.１のＭｅＯＨ：水：ＴＦＡである))。物質が、１００％Ｂでのイソクラティック溶出中に溶離したので、グラジエントは必要なかった。画分をヒューニッヒ塩基で中和して、ｓｐｅｅｄｖａｃで濃縮した。残留物を、ＥｔＯＡｃ中にとり、水で２回、塩水で１回洗った。有機層を、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮して、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−((Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタンアミド)ブタン酸(２８８ｍｇ, ０.３２８ｍｍｏｌ, ５２.１％収率)を得た。
【０８０９】
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−((Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタンアミド)プロパン酸の製造
【化４３９】
0006804442.tif 000445
粗製(Ｓ)−１−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(パーフルオロフェニル)２−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)ペンタンジオエート(１１６３ｍｇ, １.６１１ｍｍｏｌ)/ＤＭＦ(１.６１Ｅ＋０４μｌ)の溶液に、ヒューニッヒ塩基(１１２５μｌ, ６.４４ｍｍｏｌ)、次いで(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−アミノプロパン酸(５７８ｍｇ, １.７７２ｍｍｏｌ)を加えた。
混合物を、室温で終夜撹拌させた。ＬＣ/ＭＳは、生成物の形成を示した。混合物を、水で希釈した。クエン酸を加えると、白色沈殿物を得た。混合物をＥｔＯＡｃで抽出して、激しく撹拌した後に、固体を溶解した。乳濁液が形成し、これにＤＣＭおよび塩水を加えて層分離を促した。層を併せて、乳濁液の分離を補助するようセライトパッドを通過させると、セライト上に粘性残留物が残った。層を分離して、水相をＤＣＭで洗った。有機抽出物を合わせて、塩水で洗い、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して、真空濃縮した。残留物を、ＰＲＥＰ ＨＰＬＣにより精製した：(50 X 250 mm HPLC Sunfire C18 10μm, １４分間１００％Ｂ(Ａは９０：１０：０.１の水：ＭｅＯＨ：ＴＦＡであり；Ｂは９０：１０：０.１のＭｅＯＨ：水：ＴＦＡである))。画分を、ヒューニッヒ塩基を用いて中性とし、ｒｏｔｏｖａｐ上で濃縮して、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−((Ｓ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−４−(１８−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−１８−オキソオクタデカンアミド)−５−オキソペンタンアミド)プロパン酸(９４０ｍｇ, １.０８８ｍｍｏｌ, ６７.５％収率)を得た。
【０８１０】
修飾クロロトリチル樹脂１３Ａの製造
２−クロロトリチル樹脂(７１３ｍｇ, １.１４１ｍｍｏｌ)を、ＣＨ２Ｃｌ２(７ｍＬ)で膨潤した。ＣＨ２Ｃｌ