(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0006654142.tif 000015
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、及びＲ１０は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、−ＯＨ、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯ−Ｍ＋、または−Ｏ−Ｍ＋であり、Ｍ＋は、ナトリウム、カリウム、またはアンモニウムイオンであるが、但し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、またはＲ１０の少なくとも３つは、−ＯＨであり、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、またはＲ１０の少なくとも１つは、−ＯＨである）の化合物。
【請求項２】
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、またはＲ１０の少なくとも２つは、−ＯＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ８は、−ＯＨであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ９、またはＲ１０のいずれも、Ｃ１−Ｃ６アルコキシではない、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
【化２】
0006654142.tif 000016
からなる群から選択される、化合物。
【請求項５】
【化３】
0006654142.tif 000017
からなる群から選択される、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
（ａ）請求項１〜５のいずれか１項に記載の抗酸化化合物と；
（ｂ）皮膚科学的に許容される担体と
を含む、パーソナルケア組成物。
【請求項７】
皮膚を処置する美容方法であって、請求項６に記載の組成物を前記皮膚に塗布することを含む前記方法。
【請求項８】
有効量の請求項６に記載の組成物を皮膚に局所投与することにより、前記皮膚中のコラーゲンの分解を阻害することを含む美容方法。
【請求項９】
請求項６に記載の組成物を処置を必要とする皮膚に塗布することにより、老化の目に見える兆候を低減することを含む美容方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、概して、パーソナルケア製剤中の抗酸化剤として有用である化合物及び組成物に関する。化合物は、ニトロン及びフェノール官能基の両方を含有する。
【背景技術】
【０００２】
パーソナルケア組成物は、ほとんどの消費者にとって重要な製品である。パーソナルケア組成物は、組成物に広範な利点を提供する様々な添加剤を含有する。
【０００３】
抗酸化剤は、パーソナルケア組成物中に一般的に使用される添加剤の１つである。抗酸化剤は、紫外線への曝露等の様々な環境ストレスによりもたらされるフリーラジカルの損傷効果から皮膚を保護するのを助ける。フリーラジカルは、例えば、一重項酸素を含む。フリーラジカルは、皮膚への損傷を引き起こし、最終的には皮膚の弾力性が失われて小皺が出現し、皮膚の早期老化がもたらされる。
【０００４】
老化プロセスの生理学的メカニズムに基づいて、特に生理学的ストレスまたは太陽紫外線により引き起こされる活性酸素種（ＲＯＳ）レベルの増加に起因する酸化ストレスは、皮膚老化を加速し得る。内因性及び外因性老化（すなわち光老化）は、いくつかの重複する生化学的及び分子メカニズムを有する証拠がある。Ｉ型コラーゲンは、真皮結合組織の主要構造成分を構成し、真皮に引張強度及び安定性を提供する。真皮中のコラーゲンの分解は、内因性老化及び光老化した皮膚において報告されている。さらに、ＲＯＳによる光老化に寄与する主要シグナル伝達経路は、マトリックスメタロプロテアーゼ−１（ＭＭＰ−１）の上方制御であり、これは、老化斑及び小皺に関連する真皮コラーゲンの分解をもたらす。したがって、保護を提供する潜在的老化防止成分として、より強い抗酸化剤が必要とされている。
【０００５】
ＷＯ２０１２／１５０３７０において開示されているように、研究されている１つのそのような抗酸化剤は、レスベラトロール（３，５，４’−トリヒドロキシ−ｔｒａｎｓ−スチルベン）である。レスベラトロールは、ブドウ及び他の果物の皮に見られる自然発生的ポリフェノール化合物である。この化合物は、脳機能、心臓疾患、及びがんに関連する、紫外線曝露からの皮膚損傷に対する、及びＲＯＳ誘引損傷に対するその潜在的化学予防特性に関して調査されている。しかしながら、レスベラトロールの天然存在度は低く、したがってこれは非常に高価である。
【０００６】
結果として、皮膚中のコラーゲンの分解を軽減する組成物を含む、パーソナルケアにおける使用のための新たな抗酸化組成物を開発することが必要である。
【発明の概要】
【０００７】
我々は、ここで、式（Ｉ）のニトロン化合物が、従来の抗酸化剤と比較して、より低い濃度でラジカルスカベンジャーとしての同等の有効性（抗酸化保護の期間により測定される）を有する、または同等の濃度でより高い有効性（より少ない酸化損傷及び／もしくはより長い抗酸化保護）を有することを見出した。また、ニトロンの性能は、例えば１つはフェノール官能基を有し、もう１つはニトロン官能基を有する２種の異なる抗酸化剤を添加するだけでは達成され得ないことが見出された。むしろ、同じ分子中に両方の官能基が存在することが、その有利な性能の重要な態様である。
【０００８】
したがって、本発明の一態様は、式（Ｉ）：
【０００９】
【化１】
0006654142.tif 000002
【００１０】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、及びＲ１０は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、−ＯＨ、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯ−Ｍ＋、または−Ｏ−Ｍ＋であり、Ｍ＋は、ナトリウム、カリウム、またはアンモニウムイオンであるが、但し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、またはＲ１０の少なくとも１つは、−ＯＨである）の化合物を提供する。ある特定の好ましい実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、またはＲ１０の少なくとも２つは、−ＯＨである。
【００１１】
本発明の別の態様は、（ａ）式（Ｉ）の抗酸化化合物と、（ｂ）皮膚科学的に許容される担体とを含むパーソナルケア組成物を提供する。
【００１２】
別の態様において、本発明は、皮膚を処置する美容方法であって、本明細書に記載のような組成物を皮膚に塗布することを含む方法を提供する。
【００１３】
さらなる態様において、コラーゲンの分解を阻害するための方法であって、有効量の本明細書に記載のような組成物を皮膚に局所投与することを含む方法が提供される。
【００１４】
さらなる態様において、老化の目に見える兆候を低減するための方法であって、本明細書に記載のような組成物を、そのような処置を必要とする皮膚に塗布することを含む方法が提供される。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
別段に指定されない限り、例えば「２から１０」の場合のような数値範囲は、範囲を画定する数（例えば２及び１０）を含む。
【００１６】
別段に指定されない限り、比、パーセンテージ、部等は、重量基準である。
【００１７】
「室温」は、本明細書において使用される場合、周囲温度、例えば２０〜２５℃である。
【００１８】
「アルキル」は、本明細書において使用される場合、示された数の炭素原子を有する直鎖及び分岐鎖脂肪族炭化水素基を包含する。数が示されていない場合、１〜６個のアルキル炭素が企図される。別段に指定されない限り、アルキル基は、本明細書に記載の合成に適合する、１つ、２つ、または３つ、好ましくは１つまたは２つ、より好ましくは１つの置換基で任意選択で置換されている。そのような置換基は、ニトロ、ハロゲン、カルボン酸（例えば、Ｃ０−Ｃ６−ＣＯＯＨ）、Ｃ２−Ｃ６アルケン、シアノ、アミド、及び／またはエステルを含むが、それらに限定されない。別段に指定されない限り、上記置換基は、それ自体はさらに置換されていない。
【００１９】
上述のように、一態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物を提供する。別の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物と、皮膚科学的に許容される担体とを含む組成物を提供する。
【００２０】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物中のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、またはＲ１０の少なくとも３つは、−ＯＨである。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物中のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、またはＲ１０の少なくとも４つは、−ＯＨである。
【００２１】
いくつかの実施形態において、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、またはＲ１０の少なくとも２つは、−ＯＨである。
【００２２】
いくつかの実施形態において、Ｒ８は、−ＯＨであり、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ９またはＲ１０の少なくとも１つは、−ＯＨである。
【００２３】
いくつかの実施形態において、Ｒ８は、−ＯＨであり、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ９またはＲ１０の少なくとも１つは、−ＯＨであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ９、またはＲ１０のいずれも、Ｃ１−Ｃ６アルコキシではない。
【００２４】
いくつかの実施形態において、Ｒ１またはＲ５の少なくとも１つは、−ＯＨである。
【００２５】
いくつかの実施形態において、Ｒ６、Ｒ８、またはＲ１０の少なくとも１つは、−ＯＨである。
【００２６】
いくつかの実施形態において、Ｒ２及び／またはＲ４は、Ｈ、ＯＨ、またはＣ１−Ｃ６アルコキシ（好ましくはメトキシ）である。
【００２７】
本発明の組成物のいくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、表１に示される通りである。
【００２８】
【表１】
0006654142.tif 000003
【００２９】
当業者は、必要に応じて該当分野の一般的知識及び慣例的実験を組み合わせることで、本明細書に記載の利益（例えば、フリーラジカル捕捉及びコラーゲン分解の阻害）を提供するために特定の組成物中に使用されるべき式（Ｉ）の抗酸化化合物の有効量を容易に決定することができる。限定されない例として、本発明の組成物中の式（Ｉ）の化合物の量は、組成物の総重量を基準として、０．０１から５重量％、好ましくは０．０５から３重量％、より好ましくは０．１から１重量％の範囲内であってもよい。
【００３０】
式（Ｉ）の化合物は、既知の合成技術を使用して当業者により容易に調製され得る。例えば、化合物は、フェニルアルデヒド化合物（フェニル上に１つ以上のヒドロキシル基を含有する、例えば４−ヒドロキシベンズアルデヒド）とフェニルヒドロキシルアミン化合物（同じくフェニル上に１つ以上のヒドロキシル基を含有する、例えば３，４−ジヒドロキシベンジルヒドロキシルアミン）との反応、続いて所望の生成物の単離おより精製により調製され得る。
【００３１】
本発明の組成物はまた、皮膚科学的に許容される担体を含む。そのような材料は、典型的には、皮膚に著しい刺激をもたらさず、また組成物中の活性薬剤（複数種を含む）の活性及び特性を無効化しない担体または希釈剤として特徴付けられる。本発明において有用である皮膚科学的に許容される担体の例は、限定されることなく、エマルション、クリーム、水溶液、オイル、軟膏、ペースト、ゲル、ローション、乳剤、フォーム、懸濁液、粉末、またはそれらの混合物を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、組成物の総重量を基準として、約９９．９９〜約５０重量％の皮膚科学的に許容される担体を含有する。
【００３２】
本発明の皮膚科学的に許容される担体はまた、例えば、水、増粘剤、軟化剤、乳化剤、保湿剤、界面活性剤、懸濁剤、塗膜形成剤、起泡剤、保存剤、消泡剤、香料、低級モノアルコールポリオール、高沸点溶媒、噴射剤、着色剤、顔料、グリセリン、ミネラルオイル、シリコン感覚調整剤、保存剤、軟化剤、またはそれらの混合物を含み得る。
【００３３】
他の添加剤、例えば、これらに限定されないが、研磨剤、吸収剤、美的成分、例えば香料、顔料、着色料／着色剤、エッセンシャルオイル、皮膚知覚調整剤（ｓｋｉｎ  ｓｅｎｓａｔｅｓ）、収斂剤（例えば、丁子油、メントール、樟脳、ユーカリ油、オイゲノール、乳酸メンチル、アメリカマンサク蒸留物）、固結防止剤、消泡剤、抗菌剤（例えば、ヨードプロピルブチルカルバメート）、他の抗酸化剤、結合剤、生物学的添加剤、緩衝剤、増量剤、キレート剤、化学添加剤、着色剤、美容収斂剤、美容殺生物剤、変性剤、薬物収斂剤、外用鎮痛薬、組成物の塗膜形成特性及び持続性を補助するための塗膜形成剤または材料、例えばポリマー（例えば、エイコセン及びビニルピロリドンのコポリマー）、乳白剤、ｐＨ調整剤、噴射剤、還元剤、金属イオン封鎖剤、皮膚漂白及び増白剤（例えば、ヒドロキノン、コウジ酸、アスコルビン酸、リン酸アスコルビルマグネシウム、アスコルビルグルコサミン）、皮膚調整剤（例えば、種々の、及び閉塞性を含む保湿剤）、皮膚沈静及び／または治癒剤（例えば、パンテノール及び誘導体（例えば、エチルパンテノール）、アロエベラ、パントテン酸及びその誘導体、アラントイン、ビサボロール、及びグリチルリチン酸２カリウム）、皮膚処置剤、増粘剤、ならびにビタミン（例えばビタミンＣ）及びそれらの誘導体等が本発明の組成物中に含まれてもよい。
【００３４】
本発明の組成物は、例えば、オイル、ゲル、固形スティック、ローション、クリーム、乳剤、エアロゾル、噴霧剤、フォーム、ムース、軟膏もしくは油性軟膏、または粉末の形態であってもよい。
【００３５】
本発明の組成物は、様々なパーソナルケア用途において、例えば美容及びスキンケア（例えば、ローション、クリーム、オイル、局所医薬品、及び日焼け止め）において使用され得る。
【００３６】
本発明の組成物は、当該技術分野において周知のプロセスにより、例えば、従来の混合、溶解、造粒、乳化、カプセル化、捕捉または凍結乾燥プロセスを用いて製造され得る。
【００３７】
上述のように、式（Ｉ）の化合物を含有する本発明の組成物は、ラジカルスカベンジャーとして極めて効果的である。それらは、従来知られているパーソナルケア用途の抗酸化剤と比較して、大幅に良好な抗酸化属性を示す。さらに、フェノール基を有するニトロンの性能は、１つはフェノール官能基を有し、もう１つはニトロン官能基を有する２種の異なる抗酸化剤を添加するだけでは達成され得ないことが見出された。むしろ、同じ分子中に両方の官能基が存在することが、その有利な性能の重要な態様である。
【００３８】
本発明の美容組成物は、例えば、ＵＶＡ及びＵＶＢ線等の紫外線、ならびに長波長赤外線等の他の有害な形態の放射線への曝露により引き起こされるフリーラジカルからの皮膚の処置及び保護に有用である。
【００３９】
したがって、例えば、美容組成物は、コラーゲンの分解を阻害するための方法において使用され得る。そのような方法によれば、有効量の組成物が、そのような処置を必要とする皮膚に局所投与され得る。
【００４０】
組成物はまた、そのような処置を必要とする皮膚に組成物を塗布することにより、皮膚中のコラーゲンのラジカル誘引分解から生じ得る老化の目に見える兆候を低減するための方法において使用され得る。老化の目に見える兆候は、例えば、組織の不連続性、例えば小皺及び粗く深い皺、皮膚の線、割れ目、隆起部、大きな毛穴、または不均一性または粗さの増加、微細な線の低減、皮膚の弾力性の喪失（機能的な皮膚エラスチンの喪失及び／または不活性化）、たるみ（目及び顎の領域における腫脹を含む）、皮膚のハリの喪失、皮膚の締まりの喪失、変形からの皮膚の回復の喪失、変色（目の下のくまを含む）、しみ、黄ばみ、色素過剰の皮膚領域、例えば老化斑及びそばかす、角質、異常分化、過剰角質化、弾性線維症、ならびに、角質層、真皮、表皮、皮膚血管系（例えば、毛細管拡張症またはクモ状血管）、及び下層組織、特に皮膚に近い組織における他の組織学的変化を含み得る。
【００４１】
本発明の方法の実践において、美容組成物は、一般に、皮膚に組成物を塗布または伸ばすことにより、局所投与される。当業者は、美容組成物が塗布されるべき頻度を容易に決定することができる。頻度は、例えば、個人が所与の日に遭遇する可能性のある日光の量、及び／または日光に対する個人の感受性に依存し得る。限定されない例として、１日に少なくとも１回の頻度での投与が望ましくなり得る。
【００４２】
ここで、以下の実施例において、本発明のいくつかの実施形態を詳細に説明する。
【実施例】
【００４３】
実施例１
オキシム前駆体３，４−ジヒドロキシベンズアルデヒドオキシム（３４ＤＨＢｚＯｘ）の合成
【００４４】
【化２】
0006654142.tif 000004
【００４５】
１００ｍＬの３口フラスコに、磁気撹拌器、還流冷却器、添加用漏斗、熱電対、氷浴、及び窒素ブランケットを取り付けた。フラスコに、１３．８１グラム（０．１０モル）の３，４−ジヒドロキシベンズアルデヒド及び５０ｍＬの１００％エタノールを投入した。混合物を窒素下で室温で撹拌すると、透明暗褐色溶液が得られた。溶液を＜１５℃に冷却した。添加用漏斗に、６．６３グラム（０．１０モル）の５０ｗｔ．％ヒドロキシルアミン水溶液を投入した。ヒドロキシルアミン溶液を、冷却されたアルデヒド溶液に、約４５分の期間にわたり添加した。添加中、反応混合物温度を＜２０℃に維持した。ヒドロキシルアミン溶液添加の完了後、ＧＣ分析によりアルデヒドが本質的に消失したことが示されるまで（約７時間）、反応混合物を５５℃で加熱した。回転蒸発により反応混合物から溶媒を除去すると、定量的収率のオキシムが褐色固体として得られた。融点：１６１〜１６３℃。ＧＣでは、＞９８％の純度が示された。ＩＲ、ＮＭＲ、及びＧＣ／ＭＳ分析により構造を確認した。
【００４６】
実施例２
ヒドロキシルアミン前駆体４−（（ヒドロキシアミノ）メチル）ベンゼン−１，３−ジオール（３４ＤＨＢｚＨＡ）の合成
【００４７】
【化３】
0006654142.tif 000005
【００４８】
１２５ｍＬの３口フラスコに、磁気撹拌器、焼結ガラス散布管、メーター付きｐＨ電極、ならびに熱電対及びガス出口を装着したクライゼンアダプタを取り付けた。フラスコに、４．５９グラム（０．０３モル）の上記の３，４−ジヒドロキシベンズアルデヒドオキシム（３４ＤＨＢｚＯｘ）、及び４０ｍＬのメタノールを投入した。混合物を室温で撹拌すると、透明褐色溶液が得られた。次いで、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（１．８９グラム、０．０３モル）を一度にオキシム溶液に添加した。塩化水素ガスのレクチャーボトルを、間に安全トラップを介して散布管に接続した。ＨＣｌボトルを、ガスの細流が反応混合物中に散布され得るだけの量となるように開いた。混合物のｐＨは、約７から＜３まで急速に低下した。同時に、反応混合物は激しく発泡し、固体が沈殿し始めた。ＨＣｌの散布を止め、ｐＨを監視した。ｐＨが≦３で１時間安定化した後、反応混合物を濾過し、白色固体をフィルタ上で少量のメタノールで洗浄した。乾燥後、１．３８グラムの白色固体が得られた。濾液及びメタノール洗浄物を合わせ、回転蒸発により溶媒を除去すると、６．２７グラムのベージュ色の固体が得られた。これらの固体を、濾過により得られた固体と合わせ、約２５ｍＬの水に溶解すると、約５のｐＨを有する透明褐色溶液が得られた。重炭酸ナトリウムの飽和水溶液を添加することにより、ｐＨを約８に上昇させた。この時点で、固体が分離し始めた。混合物を氷浴中で約１時間冷却し、次いで濾過した。固体をフィルタ上で一部の水で洗浄した。真空下で５５℃で約１時間乾燥させた後、暗褐色固体としてのヒドロキシルアミンの収量は、２．５６グラムであった（収率５５％）。融点＝１４９〜１５１℃。構造を、ＩＲ及びＮＭＲ分析により確認した。ＨＰＬＣ分析では、＞７５％の純度が示された。
【００４９】
実施例３
ニトロン１−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジリデン）メタンアミン酸化物（ＶＡＮ−３４ＤＨＢｚＨＡ）の合成
【００５０】
【化４】
0006654142.tif 000006
【００５１】
５００ｍＬの１口フラスコに、磁気撹拌器及びセプタムを取り付けた。フラスコに、７．７６グラム（０．０５モル）の３，４−ジヒドロキシベンジルヒドロキシルアミン、１７５ｍＬのメタノール、及び７．６１グラム（０．０５モル）のバニリンを投入した。反応混合物を、室温で２日間撹拌した。回転蒸発により反応混合物から溶媒を除去すると、１４．５２グラムの淡褐色固体生成物が得られた（理論値の１００％）。融点＝約１２９℃から＞１５０℃。ＨＰＬＣ分析では、約９４％の純度が示された。
【００５２】
溶出溶媒系として酢酸エチル−メタノール（９５：５、ｖ／ｖ）を使用した、１１５グラムのシリカゲル６０でのカラムクロマトグラフィーにより、４．２２グラムの粗生成物の試料を精製した。カラム分画は、ＴＬＣにより監視した。得られた精製された生成物の収量は、１．１０グラムであった（カラムへの投入量を基準として２６％）。融点＝１９０〜１９１℃。ＩＲ、ＮＭＲ、及びＧＣ／ＭＳ分析により構造を確認した。ＨＰＬＣ分析では、＞９９％の純度が示された。
【００５３】
実施例４
ニトロン１−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−Ｎ−（２−ヒドロキシベンジリデン）メタンアミンオキシド（ＳＡＬ−３４ＤＨＢｚＨＡ）の合成
【００５４】
【化５】
0006654142.tif 000007
【００５５】
２５０ｍＬの１口フラスコに、磁気撹拌器及びセプタムを取り付けた。フラスコに、３．８８グラム（０．０２５モル）の３，４−ジヒドロキシベンジルヒドロキシルアミン、７５ｍＬのメタノール、及び３．０５グラム（０．０２５モル）のサリチルアルデヒドを投入した。反応混合物を、室温で３日間撹拌した。回転蒸発により反応混合物から溶媒を除去すると、１１．８６グラムの暗褐色タール状生成物が得られた（理論値の１８０％）。粗生成物を、１００ｍＬのメタノールと共に室温で撹拌したが、生成物の全てが溶解したわけではなかった。混合物を濾過した。回転蒸発により濾液から溶媒を除去すると、７．５９グラムの褐色固体生成物が得られた（理論値の１１７％）。ＨＰＬＣ分析では、高分子量及び低分子量不純物の両方を有する約８７面積％の生成物もまた存在することが示された。
【００５６】
溶出溶媒系として酢酸エチル−メタノール（９５：５、ｖ／ｖ）を使用した、１００グラムのシリカゲル６０でのカラムクロマトグラフィーにより、４．１５グラムの粗生成物の試料を精製した。カラム分画は、ＴＬＣにより監視した。得られた精製された生成物の収量は、１．５１グラムであった（カラムへの投入量を基準として３６％）。融点＝１５７〜１６１℃。ＩＲ、ＮＭＲ、及びＧＣ／ＭＳ分析により構造を確認した。
【００５７】
実施例５
ニトロン１−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジリデン）メタンアミンオキシド（ＶＡＮ−２４ＤＨＢｚＨＡ）の合成
【００５８】
【化６】
0006654142.tif 000008
【００５９】
１００ｍＬの１口フラスコに、磁気撹拌器及びゴムセプタムを取り付けた。フラスコに、１．０５グラム（０．００６８モル）の４−（（ヒドロキシアミン）メチル）ベンゼン−２，４−ジオール、１．１グラム（０．００７２モル）のバニリン、及び２０ｍＬのメタノールを投入した。５０℃で２時間加熱した後でも、固体の全てが溶解したわけではなかった。混合物を、室温で３日間撹拌した。混合物を濾過し、固体をフィルタ上で少量のメタノールで洗浄した。空気中で数時間乾燥させた後、生成物の収量は、１．７グラムであった（収率８７％）。融点＝１７５〜１７７℃。構造を、ＩＲ及びＮＭＲ分析により確認した。
【００６０】
実施例６
ニトロンＮ−（４−ヒドロキシベンジリデン）−１−（４−ヒドロキシフェニル）メタンアミンオキシド（ｐＨＢｚ−ｐＨＢｚＨＡ）の合成
【００６１】
【化７】
0006654142.tif 000009
【００６２】
１００ｍＬの１口フラスコに、磁気撹拌器及びゴムセプタムを取り付けた。フラスコに、１．６グラム（０．０１モル）のｐ−ヒドロキシベンジルヒドロキシアミン塩酸塩、０．３６グラム（０．１モル）の水酸化ナトリウムペレット、及び１０ｍＬのメタノールを投入した。混合物を室温で撹拌すると、塩化ナトリウムが沈殿し始めた。均質な溶液が得られるまで、水を添加した。約４ｍＬが必要であった。次いで、ｐ−ヒドロキシベンズアルデヒド（１．２グラム、０．０１モル）を添加し、透明溶液を６０℃で６時間加熱した。次いで、混合物を、室温で３日間撹拌した。得られた白色スラリーを濾過し、固体をフィルタ上で少量の水で洗浄した。真空下で３５℃で乾燥させた後、生成物の収量は１．８グラムであった（収率７９．３％）。融点＝１９６〜１９６℃。構造を、ＩＲ及びＮＭＲ分析により確認した。
【００６３】
実施例７
ニトロンＮ−ベンジリデン−１−（２，４−ジヒドロキシフェニル）メタンアミンオキシド（Ｂｚ−２４ＤＨＢｚＨＡ）の合成
【００６４】
【化８】
0006654142.tif 000010
【００６５】
１００ｍＬの１口フラスコに、磁気撹拌器及びゴムセプタムを取り付けた。フラスコに、１．５５グラム（０．０１モル）の２，４−ジヒドロキシベンジルヒドロキシルアミン、１．０６グラム（０．０１モル）のベンズアルデヒド、１０ｍＬのメタノール、及び２ｍＬの水を投入した。混合物を５０℃で２時間撹拌すると、透明褐色溶液が得られた。混合物を室温で一晩撹拌した。得られたスラリーを濾過した。固体をフィルタ上で少量の温水で洗浄し、次いで真空下で３５℃で乾燥させた。生成物の収量は、１．６５グラムであった（収率６７．９％）。融点＝１５８℃。構造を、ＩＲ及びＮＭＲ分析により確認した。
【００６６】
実施例８
ニトロンＮ−ベンジリデン−１−（４−ヒドロキシフェニル）メタンアミンオキシド（Ｂｚ−ｐＨＢｚＨＡ）の合成
【００６７】
【化９】
0006654142.tif 000011
【００６８】
１００ｍＬの１口フラスコに、磁気撹拌器及びゴムセプタムを取り付けた。フラスコに、１．３９グラム（０．０１モル）のｐ−ヒドロキシベンジルヒドロキシルアミン、１．０６グラム（０．０１モル）のベンズアルデヒド、１０ｍＬのメタノール、及び２ｍＬの水を投入した。混合物を５０℃で６時間加熱し、次いで、室温で一晩撹拌した。得られた白色スラリーを濾過し、固体をフィルタ上で少量の水で洗浄した。固体を真空下で３５℃で乾燥させた。生成物の収量は、１．８グラムであった（収率７９％）。融点＝１９１℃。構造を、ＩＲ及びＮＭＲ分析により確認した。
【００６９】
実施例９
ニトロンＮ−（２，４−ジヒドロキシベンジリデン）−１−（２，４−ジヒドロキシフェニル）メタンアミンオキシド（２４ＤＨＢｚ−２４ＤＨＢｚＨＡ）の合成
【００７０】
【化１０】
0006654142.tif 000012
【００７１】
１００ｍＬの１口フラスコに、磁気撹拌器及びゴムセプタムを取り付けた。フラスコに、１．５５グラム（０．０１モル）の２，４−ジヒドロキシベンジルヒドロキシルアミン、１．３８グラム（０．０１モル）の２，４−ジヒドロキシベンズアルデヒド、１０ｍＬのメタノール、及び２ｍＬの水を投入した。混合物を５０℃で６時間加熱し、次いで、室温で一晩撹拌した。得られた白色スラリーを濾過し、固体をフィルタ上で少量の水で洗浄した。固体を真空下で３５℃で乾燥させた。生成物の収量は、２．４グラムであった（収率８７％）。融点＝２０３〜２０４℃。構造を、ＩＲ及びＮＭＲ分析により確認した。
【００７２】
実施例１０
抗酸化力
抗酸化力は、酸素ラジカル吸収能（ＯＲＡＣ）プロトコルを使用して評価される。ＯＲＡＣは、水素原子移動（ＨＡＴ）機構に基づく化学的インビトロ法である（Ｎ．Ｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２６（９／１０），１２３１（１９９７）を参照されたい）。ＯＲＡＣは、ペルオキシルラジカル誘導酸化の抗酸化阻害の目安であり、したがって、Ｈ原子移動による古典的ラジカル鎖切断抗酸化活性を反映する。このアッセイにおいて、ペルオキシルラジカルは、蛍光プローブと反応して、非蛍光生成物を形成する。これは、蛍光測定を使用して定量される。抗酸化能は、経時的に形成される生成物の割合及び量の低下により決定される。このアッセイは、蛍光強度の変化をもたらす蛍光プローブへのフリーラジカル損傷に依存する。蛍光強度の変化は、フリーラジカル損傷の度合いの指標である。抗酸化剤の存在下では、フリーラジカル損傷の阻害は、より高い蛍光強度として反映され、フリーラジカルに対する抗酸化能として測定され得る。ＯＲＡＣアッセイの独自性は、反応が完了まで駆動されることである。これにより、曲線下面積（ＡＵＣ）を計算することができ、また多くの他のアッセイにおける相対的測定と対照的に、抗酸化性の絶対的定量が得られる。
【００７３】
上述のように、蛍光の低下が観察される時間が長いほど、抗酸化（ＡＯ）力が高い。所与の抗酸化剤のＡＵＣから、ブランクのＡＵＣが差し引かれて、ＯＲＡＣ値が得られる。Ｔｒｏｌｏｘと同じＡＵＣ値を得るために必要なＡＯの濃度を計算及び使用して、Ｔｒｏｌｏｘ等価ＡＯ能（ＴＥＡＣ）が示される。Ｔｒｏｌｏｘは、（（±）−６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−２−カルボン酸、ＣＡＳ＃５３１８８−０７−１）であり、内部標準として使用される。
【００７４】
ＯＲＡＣ試験は、上記表１の化合物（本発明の化合物）、ならびにビタミンＣ、ビタミンＥ、及び以下の比較化合物において行う。
【００７５】
【化１１】
0006654142.tif 000013
【００７６】
ＯＲＡＣ試験溶液中の本発明のニトロンは、３０マイクロモルの濃度であり、一方、Ｔｒｏｌｏｘ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ＢＨＴ、ＰＢＮ＋ＢＨＴ、及びＶＡＬ−ＩＰＨＡの濃度は、１００マイクロモルであった。ＯＲＡＣ値から計算されたＴＥＡＣ値を、表２に列挙する。
【００７７】
【表２】
0006654142.tif 000014
【００７８】
驚くべきことに、本発明の化合物は、既知の抗酸化剤ビタミンＥまたはＣと比較して、大幅により高いＯＲＡＣ値を示したことが分かる。また、ＢＨＴ等のフェノールＡＯ、ＶＡＬ−ＩＰＨＡ等の非芳香族ニトロン、またはＰＢＮ等の芳香族ニトロンのＴＥＡＣ値は、ポリヒドロキシスチルベノイド類似構造にフェノール及びニトロン部分の両方を含有する本発明の化合物のＴＥＡＣ値と比較して、それほど高くはないことも明らかである。芳香族ニトロン及びフェノールＡＯ（ＰＢＮ＋ＢＨＴ）の物理的ブレンドのＴＥＡＣ値もまた、比較的小さい。このことから、再生機構が生じるためには、ニトロン及びフェノール官能基が同じ分子の一部である必要があると考えられる。