(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液検体と、フィブリン及びフィブリノゲン分解産物（ＦＤＰ）の測定用試薬と、を混合して測定試料を調製し、
前記測定試料を光学的に測定して得られる光学濃度値の経時的変化に基づいて、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と、前記光学濃度値の前記経時的変化を示すタイムコース曲線の湾曲度合を示す第２情報と、を取得し、
前記第１情報と前記第２情報とに基づいて、前記血液検体の線溶亢進状態を判定することを含み、
前記湾曲度合いを示す第２情報は、以下の（ａ）〜（ｆ）のいずれかである、血液検体分析方法。
（ａ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結んだ直線と、当該始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域の面積
（ｂ）前記タイムコース曲線を単調増加する曲線によって曲線近似し、得られる近似曲線の曲率半径又は曲率
（ｃ）前記タイムコース曲線を多項式近似したときの係数
（ｄ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結ぶ直線の中点から前記タイムコース曲線へ垂直に延び当該タイムコース曲線に至るまでの長さである突出量
（ｅ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結んだ直線と、当該始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域を近似する近似図形の面積
（ｆ）前記タイムコース曲線の２つの接線又は回帰直線の傾きの比率
【請求項２】
前記血液検体の前記線溶亢進状態を判定することは、前記第１情報が示すＦＤＰ濃度をＦＤＰ濃度に比例する評価関数に適用して得られる値と、前記第２情報と、を比較することを含む
請求項１記載の血液検体分析方法。
【請求項３】
前記血液検体の前記線溶亢進状態を判定することは、前記第１情報が示すＦＤＰ濃度と、閾値と、を比較することを更に含む
請求項２記載の血液検体分析方法。 
【請求項４】
血液検体と、フィブリン及びフィブリノゲン分解産物（ＦＤＰ）の測定用試薬と、を混合して測定試料を調製する試料調製部と、
前記測定試料を光学的に測定して検出信号を出力する検出部と、
前記検出信号に基づいて、前記測定試料の光学濃度値を取得する取得部と、
前記光学濃度値に基づいて、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と、前記光学濃度値の経時的変化を示すタイムコース曲線の湾曲度合を示す第２情報と、を取得し、前記第１情報と前記第２情報とに基づいて、前記血液検体の線溶亢進状態を判定する処理部と、を備え、
前記湾曲度合いを示す第２情報は、以下の（ａ）〜（ｆ）のいずれかである、血液検体分析装置。
（ａ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結んだ直線と、当該始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域の面積
（ｂ）前記タイムコース曲線を単調増加する曲線によって曲線近似し、得られる近似曲線の曲率半径又は曲率
（ｃ）前記タイムコース曲線を多項式近似したときの係数
（ｄ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結ぶ直線の中点から前記タイムコース曲線へ垂直に延び当該タイムコース曲線に至るまでの長さである突出量
（ｅ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結んだ直線と、当該始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域を近似する近似図形の面積
（ｆ）前記タイムコース曲線の２つの接線又は回帰直線の傾きの比率
【請求項５】
ＦＤＰ濃度に比例する評価関数を記憶する記憶部を更に備え、
前記処理部は、前記第１情報が示すＦＤＰ濃度を前記評価関数に適用することで得られる値と、前記第２情報と、を比較することで、前記血液検体の線溶亢進状態を判定する
請求項４記載の血液検体分析装置。
【請求項６】
コンピュータに検体分析処理を実行させるためのコンピュータプログラムであって、
前記検体分析処理は、
フィブリン及びフィブリノゲン分解産物（ＦＤＰ）の測定用試料と、血液検体と、を混合した測定試料を光学的に測定して得られる光学濃度値の経時的変化に基づいて、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と、前記光学濃度値の経時的変化を示すタイムコース曲線の湾曲度合を示す第２情報と、を取得する第１処理と、
前記第１情報と前記第２情報とに基づいて、前記血液検体の線溶亢進状態を判定する第２処理と、を含み、
前記湾曲度合いを示す第２情報は、以下の（ａ）〜（ｆ）のいずれかである、コンピュータプログラム。
（ａ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結んだ直線と、当該始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域の面積
（ｂ）前記タイムコース曲線を単調増加する曲線によって曲線近似し、得られる近似曲線の曲率半径又は曲率
（ｃ）前記タイムコース曲線を多項式近似したときの係数
（ｄ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結ぶ直線の中点から前記タイムコース曲線へ垂直に延び当該タイムコース曲線に至るまでの長さである突出量
（ｅ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結んだ直線と、当該始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域を近似する近似図形の面積
（ｆ）前記タイムコース曲線の２つの接線又は回帰直線の傾きの比率
【請求項７】
血液検体と、フィブリン及びフィブリノゲン分解産物（ＦＤＰ）の測定用試薬と、を混合して測定試料を調製し、
前記測定試料を光学的に測定して得られる光学濃度値の経時的変化に基づいて、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と、前記光学濃度値の前記経時的変化を示すタイムコース曲線の湾曲度合を示す第２情報と、を取得し、
前記第１情報と前記第２情報とに基づいて、前記血液検体のＤダイマーに関する値を取得することを含み、
前記湾曲度合いを示す第２情報は、以下の（ａ）〜（ｆ）のいずれかである、血液検体分析方法。
（ａ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結んだ直線と、当該始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域の面積
（ｂ）前記タイムコース曲線を単調増加する曲線によって曲線近似し、得られる近似曲線の曲率半径又は曲率
（ｃ）前記タイムコース曲線を多項式近似したときの係数
（ｄ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結ぶ直線の中点から前記タイムコース曲線へ垂直に延び当該タイムコース曲線に至るまでの長さである突出量
（ｅ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結んだ直線と、当該始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域を近似する近似図形の面積
（ｆ）前記タイムコース曲線の２つの接線又は回帰直線の傾きの比率
【請求項８】
Ｄダイマーに関する前記値は、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を含む
請求項７に記載の血液検体分析方法。
【請求項９】
Ｄダイマーに関する前記値は、Ｄダイマー濃度を含む
請求項７又は８に記載の血液検体分析方法。 
【請求項１０】
血液検体と、フィブリン及びフィブリノゲン分解産物（ＦＤＰ）の測定用試薬と、を混合して測定試料を調製する試料調製部と、前記測定試料を光学的に測定して検出信号を出力する検出部と、
前記検出信号に基づいて、前記測定試料の光学濃度値を取得する取得部と、
前記光学濃度値に基づいて、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と、前記光学濃度値の経時的変化を示すタイムコース曲線の湾曲度合を示す第２情報と、を取得し、前記第１情報と前記第２情報とに基づいて、前記血液検体のＤダイマーに関する値を取得する処理部と、を備え、
前記湾曲度合いを示す第２情報は、以下の（ａ）〜（ｆ）のいずれかである、血液検体分析装置。
（ａ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結んだ直線と、当該始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域の面積
（ｂ）前記タイムコース曲線を単調増加する曲線によって曲線近似し、得られる近似曲線の曲率半径又は曲率
（ｃ）前記タイムコース曲線を多項式近似したときの係数
（ｄ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結ぶ直線の中点から前記タイムコース曲線へ垂直に延び当該タイムコース曲線に至るまでの長さである突出量
（ｅ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結んだ直線と、当該始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域を近似する近似図形の面積
（ｆ）前記タイムコース曲線の２つの接線又は回帰直線の傾きの比率
【請求項１１】
コンピュータに検体分析処理を実行させるためのコンピュータプログラムであって、
前記検体分析処理は、
フィブリン及びフィブリノゲン分解産物（ＦＤＰ）の測定用試料と、血液検体と、を混合した測定試料を光学的に測定して得られる光学濃度値の経時的変化に基づいて、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と、前記光学濃度値の経時的変化を示すタイムコース曲線の湾曲度合を示す第２情報と、を取得する第１処理と、
前記第１情報と前記第２情報とに基づいて、前記血液検体のＤダイマーに関する値を取得する第２処理と、を含み、
前記湾曲度合いを示す第２情報は、以下の（ａ）〜（ｆ）のいずれかである、コンピュータプログラム。
（ａ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結んだ直線と、当該始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域の面積
（ｂ）前記タイムコース曲線を単調増加する曲線によって曲線近似し、得られる近似曲線の曲率半径又は曲率
（ｃ）前記タイムコース曲線を多項式近似したときの係数
（ｄ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結ぶ直線の中点から前記タイムコース曲線へ垂直に延び当該タイムコース曲線に至るまでの長さである突出量
（ｅ）前記タイムコース曲線において前記光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、当該始点と終点とを結んだ直線と、当該始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域を近似する近似図形の面積
（ｆ）前記タイムコース曲線の２つの接線又は回帰直線の傾きの比率
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液検体分析方法、血液検体分析装置、及びコンピュータプログラムに関する。
【背景技術】
【０００２】
播種性血管内凝固症候群（ＤＩＣ）には、凝固活性が優位なＤＩＣのほかに、線溶亢進型ＤＩＣが知られている。特に、急性前骨髄性白血病（ＡＰＬ）に合併したＤＩＣでは、線溶亢進型になると言われている。線溶亢進型ＤＩＣでは、血栓が形成される以上に溶解する作用が亢進し、出血症状を示すものがある。しかし、従来のＤＩＣの療法は、血栓溶解のためのヘパリンを投与する抗凝固療法であり、この療法は、線溶亢進型ＤＩＣには適さない場合がある。また、基礎疾患によっても症状が異なるため、ＤＩＣを、凝固活性が優位なＤＩＣと線溶亢進型ＤＩＣとに分類して、治療方針を決定することが重要になってきている。
【０００３】
例えば、非特許文献１は、線溶亢進型ＤＩＣの判定に、フィブリン及びフィブリノゲンの分解産物（ＦＤＰ）濃度と、ＦＤＰ／Ｄダイマー比と、を用いることを開示している。より具体的には、非特許文献１は、線溶亢進型ＤＩＣの病態診断を行うための指針における検査所見として、以下の条件を開示している。なお、以下において、ＤＤとは、Ｄダイマーの意である。
検査所見：下記のうち２つ以上を満たす。
１）ＦＤＰ  ≧  ８０μｇ／ｍｌ
２）フィブリノゲン  ＜  １００ｍｇ／ｄｌ
３）ＦＤＰ／ＤＤ比の高値（ＤＤ／ＦＤＰ比の低値）
【０００４】
線溶亢進型ＤＩＣの病態診断が、少なくとも上記の３）を満たすか否かの判断を含む場合、ＦＤＰ／ＤＤ比を得るため、ＦＤＰ測定とＤダイマー測定とが必要となる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許出願公開第２０１３／０１４３２４３
【特許文献２】米国特許出願公開第２０１２／００２８３７０
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】朝倉英策ほか、”３．抗線溶薬（止血薬，抗線溶薬の適応と使用法）”，日本血栓止血学会誌Ｖｏｌ．２０（２００９）、日本血栓止血学会
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
特許文献１及び２に示すように、ＦＤＰ測定は、ＦＤＰ測定用試薬を用いて行われ、Ｄダイマー測定は、Ｄダイマー測定用試薬を用いて行われる。このように、ＦＤＰ測定とＤダイマー測定とは異なる試薬が用いられるため、これらの測定は別々に行われる。
【０００８】
非特許文献１記載の線溶亢進型ＤＩＣの診断指針では、前述のように、ＦＤＰ測定とＤダイマー測定とが必要となる。このため、少なくとも２回の測定が必要であり、煩雑で、コスト高を招く。
【０００９】
また、検査施設によっては、ＦＤＰ測定及びＤダイマー測定を同時に行わないことがあり、ＦＤＰ測定は行うがＤダイマー測定を行わないこともある。この場合、線溶亢進型ＤＩＣの判定のように、Ｄダイマー測定が必要な検体分析を行うのに手間取ることがあった。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明の一の態様は、血液検体と、フィブリン及びフィブリノゲン分解産物（ＦＤＰ）の測定用試薬と、を混合して測定試料を調製し、測定試料を光学的に測定して得られる光学濃度値の経時的変化に基づいて、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と、光学濃度値の経時的変化を示すタイムコース曲線の湾曲度合を示す第２情報と、を取得し、第１情報と第２情報とに基づいて、血液検体の線溶亢進状態を判定することを含み、湾曲度合いを示す第２情報は、以下の（ａ）〜（ｆ）のいずれかである、血液検体分析方法である。
（ａ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結んだ直線と、始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域の面積
（ｂ）タイムコース曲線を単調増加する曲線によって曲線近似し、得られる近似曲線の曲率半径又は曲率
（ｃ）タイムコース曲線を多項式近似したときの係数
（ｄ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結ぶ直線の中点からタイムコース曲線へ垂直に延びタイムコース曲線に至るまでの長さである突出量
（ｅ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結んだ直線と、始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域を近似する近似図形の面積
（ｆ）タイムコース曲線の２つの接線又は回帰直線の傾きの比率
【００１１】
本発明の他の態様は、血液検体と、フィブリン及びフィブリノゲン分解産物（ＦＤＰ）の測定用試薬と、を混合して測定試料を調製する試料調製部と、測定試料を光学的に測定して検出信号を出力する検出部と、検出信号に基づいて、測定試料の光学濃度値を取得する取得部と、光学濃度値に基づいて、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と、光学濃度値の経時的変化を示すタイムコース曲線の湾曲度合を示す第２情報と、を取得し、第１情報と第２情報とに基づいて、血液検体の線溶亢進状態を判定する処理部と、を備え、湾曲度合いを示す第２情報は、以下の（ａ）〜（ｆ）のいずれかである、血液検体分析装置である。
（ａ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結んだ直線と、始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域の面積
（ｂ）タイムコース曲線を単調増加する曲線によって曲線近似し、得られる近似曲線の曲率半径又は曲率
（ｃ）タイムコース曲線を多項式近似したときの係数
（ｄ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結ぶ直線の中点からタイムコース曲線へ垂直に延びタイムコース曲線に至るまでの長さである突出量
（ｅ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結んだ直線と、始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域を近似する近似図形の面積
（ｆ）タイムコース曲線の２つの接線又は回帰直線の傾きの比率
【００１２】
本発明の他の態様は、コンピュータに検体分析処理を実行させるためのコンピュータプログラムであって、検体分析処理は、フィブリン及びフィブリノゲン分解産物（ＦＤＰ）の測定用試料と、血液検体と、を混合した測定試料を光学的に測定して得られる光学濃度値の経時的変化に基づいて、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と、光学濃度値の経時的変化を示すタイムコース曲線の湾曲度合を示す第２情報と、を取得する第１処理と、第１情報と第２情報とに基づいて、血液検体の線溶亢進状態を判定する第２処理と、を含み、湾曲度合いを示す第２情報は、以下の（ａ）〜（ｆ）のいずれかである、コンピュータプログラムである。
（ａ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結んだ直線と、始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域の面積
（ｂ）タイムコース曲線を単調増加する曲線によって曲線近似し、得られる近似曲線の曲率半径又は曲率
（ｃ）タイムコース曲線を多項式近似したときの係数
（ｄ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結ぶ直線の中点からタイムコース曲線へ垂直に延びタイムコース曲線に至るまでの長さである突出量
（ｅ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結んだ直線と、始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域を近似する近似図形の面積
（ｆ）タイムコース曲線の２つの接線又は回帰直線の傾きの比率
【００１３】
本発明の他の態様は、血液検体と、フィブリン及びフィブリノゲン分解産物（ＦＤＰ）の測定用試薬と、を混合して測定試料を調製し、測定試料を光学的に測定して得られる光学濃度値の経時的変化に基づいて、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と、光学濃度値の経時的変化を示すタイムコース曲線の湾曲度合を示す第２情報と、を取得し、第１情報と第２情報とに基づいて、血液検体のＤダイマーに関する値を取得することを含み、湾曲度合いを示す第２情報は、以下の（ａ）〜（ｆ）のいずれかである、血液検体分析方法である。
（ａ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結んだ直線と、始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域の面積
（ｂ）タイムコース曲線を単調増加する曲線によって曲線近似し、得られる近似曲線の曲率半径又は曲率
（ｃ）タイムコース曲線を多項式近似したときの係数
（ｄ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結ぶ直線の中点からタイムコース曲線へ垂直に延びタイムコース曲線に至るまでの長さである突出量
（ｅ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結んだ直線と、始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域を近似する近似図形の面積
（ｆ）タイムコース曲線の２つの接線又は回帰直線の傾きの比率
【００１４】
本発明の他の態様は、血液検体と、フィブリン及びフィブリノゲン分解産物（ＦＤＰ）の測定用試薬と、を混合して測定試料を調製する試料調製部と、測定試料を光学的に測定して検出信号を出力する検出部と、検出信号に基づいて、測定試料の光学濃度値を取得する取得部と、光学濃度値に基づいて、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と、光学濃度値の経時的変化を示すタイムコース曲線の湾曲度合を示す第２情報と、を取得し、第１情報と第２情報とに基づいて、血液検体のＤダイマーに関する値を取得する処理部と、を備え、湾曲度合いを示す第２情報は、以下の（ａ）〜（ｆ）のいずれかである、血液検体分析装置である。
（ａ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結んだ直線と、始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域の面積
（ｂ）タイムコース曲線を単調増加する曲線によって曲線近似し、得られる近似曲線の曲率半径又は曲率
（ｃ）タイムコース曲線を多項式近似したときの係数
（ｄ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結ぶ直線の中点からタイムコース曲線へ垂直に延びタイムコース曲線に至るまでの長さである突出量
（ｅ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結んだ直線と、始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域を近似する近似図形の面積
（ｆ）タイムコース曲線の２つの接線又は回帰直線の傾きの比率
【００１５】
本発明の他の態様は、コンピュータに検体分析処理を実行させるためのコンピュータプログラムであって、検体分析処理は、フィブリン及びフィブリノゲン分解産物（ＦＤＰ）の測定用試料と、血液検体と、を混合した測定試料を光学的に測定して得られる光学濃度値の経時的変化に基づいて、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と、光学濃度値の経時的変化を示すタイムコース曲線の湾曲度合を示す第２情報と、を取得する第１処理と、第１情報と第２情報とに基づいて、血液検体のＤダイマーに関する値を取得する第２処理と、を含み、湾曲度合いを示す第２情報は、以下の（ａ）〜（ｆ）のいずれかである、コンピュータプログラムである。
（ａ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結んだ直線と、始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域の面積
（ｂ）タイムコース曲線を単調増加する曲線によって曲線近似し、得られる近似曲線の曲率半径又は曲率
（ｃ）タイムコース曲線を多項式近似したときの係数
（ｄ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結ぶ直線の中点からタイムコース曲線へ垂直に延びタイムコース曲線に至るまでの長さである突出量
（ｅ）タイムコース曲線において光学濃度値が単調増加する期間内において始点及び終点を設定し、始点と終点とを結んだ直線と、始点から終点までの範囲のタイムコース曲線とで囲まれた領域を近似する近似図形の面積
（ｆ）タイムコース曲線の２つの接線又は回帰直線の傾きの比率
【発明の効果】
【００１６】
本発明によれば、ＦＤＰ測定により、これまでＤダイマー測定が必要であった検体分析を行うことができる。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】検体分析処理手順を示すフローチャートである。
【図２】血液検体分析装置の構成図である。
【図３】タイムコース曲線を示す図である。
【図４】タイムコース曲線の湾曲度を示す指標のバリエーション図である。
【図５】ＦＤＰ濃度と凸状エリア面積との２次元空間での線溶亢進状態判定の説明図である。
【図６】第１設定例におけるＲＯＣ曲線である。
【図７】第１設定例におけるプロット結果と線溶亢進判定ラインを示す図である。
【図８】第２設定例におけるＲＯＣ曲線である。
【図９】第２設定例におけるプロット結果と線溶亢進判定ラインを示す図である。
【図１０】第３設定例におけるＲＯＣ曲線である。
【図１１】第３設定例におけるプロット結果と線溶亢進判定ラインを示す図である。
【図１２】第４設定例におけるＲＯＣ曲線である。
【図１３】第４設定例におけるプロット結果と線溶亢進判定ラインを示す図である。
【図１４】第５設定例におけるＲＯＣ曲線である。
【図１５】第５設定例におけるプロット結果と線溶亢進判定ラインを示す図である。
【図１６】第６設定例におけるＲＯＣ曲線である。
【図１７】第６設定例におけるプロット結果と線溶亢進判定ラインを示す図である。
【図１８】ＦＤＰ濃度と凸状エリア面積との関係を示す図である。
【図１９】ＦＤＰ濃度と凸状エリア面積との関係を示す図である。
【図２０】ＦＤＰ／Ｄダイマー比と凸状エリア面積との関係を示す図である。
【図２１】ウェスタンブロッティングの結果を示す図である。
【図２２】図９のプロット点のうちウェスタンブロッティングによる検証対象となった検体Ａ〜Ｋを示す図である。
【図２３】凸状エリア面積／ＦＤＰ濃度とＦＤＰ／Ｄダイマー比との関係を示す図である。
【図２４】Ｄダイマー実測値とＦＤＰタイムコース解析によるＤダイマー推定値との関係を示す図である。
【図２５】結果表示画面を示す図である。
【図２６】詳細表示画面を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
［１．検体分析方法及び検体分析装置の概要］
実施形態に係る検体分析方法は、図１に示すステップＳ１１からステップＳ１５を含む。ステップＳ１１からステップＳ１５は、図２に示す血液検体分析装置１０によって実行される。血液検体分析装置１０は、被験者から採取された血液検体を、免疫比濁法等によって測定し、血液検体の分析を行う。分析対象となる血液検体は、例えば、血漿である。血液検体は、血清又は全血であってもよい。
【００１９】
血液検体分析装置１０は、測定装置２０と、処理装置３０と、を備えている。測定装置２０は、血液検体を含む測定試料を測定する。処理装置３０は、測定装置２０から取得した測定結果を分析する。
【００２０】
測定装置２０は、試料調製部２１と、検出部２２と、制御部２３と、を備えている。試料調製部２１は、キュベット保持部２４と、試薬セット部２８と、試薬分注部２９ａと、検体分注部２９ｂと、を備えている。キュベット保持部２４は、キュベット２５を保持する。キュベット２５は、測定試料を調製するための容器である。試薬セット部２８は、試薬を収容した試薬容器２７がセットされる。試薬分注部２９ａは、試薬セット部２８にセットされた試薬容器２７から試薬を吸引し、キュベット２７に試薬を分注する。検体分注部２９ｂは、検体容器２６から血液検体を吸引し、キュベット２７に血液検体を分注する。なお、検体容器２６は、図示しない搬送装置によって検体分注部２９ｂによる検体吸引位置に搬送される。
【００２１】
試薬容器２７に収容された試薬は、ＦＤＰ測定用の試薬を含む。ＦＤＰ測定用の試薬としては、市販されている各種のＦＤＰ測定用試薬が利用可能であり、例えば、シスメックス株式会社製のＦＤＰ測定キット・リアスオートＰ−ＦＤＰ試薬及び株式会社ＬＳＩメディエンス製のエルピアＦＤＰ−Ｐ試薬などが利用可能である。
【００２２】
図１のステップＳ１１において、試料調製部２１は、キュベット２５に分注された血液検体と試薬とを混合し、ＦＤＰ測定用の測定試料（以下、単に「測定試料」という場合「ＦＤＰ測定用の測定試料」を指す）を調製する。試料調製部２１による試料調製のための動作は、制御部２３によって制御される。
【００２３】
検出部２２は、光源２２ａと、受光部２２ｂと、を有して構成されている。光源２２ａは、キュベット２５中の測定試料に光を照射するよう設けられる。光源２２ａは、例えば、ハロゲンランプ又はＬＥＤを含んで構成される。光源２２ａから照射される光の波長は、測定に適した波長を用いればよく、例えば、８００ｎｍ、５７５ｎｍ、又は７３０ｎｍである。
【００２４】
受光部２２ｂは、測定試料からの透過光又は散乱光を受光して、受光した光量に応じた電気信号である検出信号を測定結果として出力する。受光部２２ｂは、例えば、フォトダイオードを含んで構成される。
【００２５】
図１のステップＳ１２において、検出部２２は、測定試料の濁度を測定し、測定試料の濁度の経時的変化を示す検出信号を出力する。検出信号は、測定試料を透過した透過光又は散乱光の経時的変化を示す信号であってもよい。例えば、免疫比濁法によって測定試料の濁度を測定する場合、受光部２２ｂは、光源２２ａから照射された測定試料を透過した光を受光する。測定試料において免疫複合体の凝集反応が進むと、測定試料の濁度が上昇するため、透過光の光量は減少し、電気信号の出力レベルが時間経過に従って低下する。したがって、受光部２２ｂから出力される検出信号は、測定試料の濁度の経時的変化を示す。
【００２６】
制御部２３は、検出部２２から検出信号を受信し、検出信号に基づいて光学的情報を算出する。制御部２３は、光学的情報を取得する取得部として機能する。光学的情報は、例えば、光学濃度（Optical Density :OD）値である。ＯＤ値は、検出信号が示す濁度の増加速度に基づいて算出される。ＯＤ値は、濁度ではなく、例えば、透過光強度から算出されてもよい。制御部２３は、測定開始から測定完了までの期間の検出信号に基づいて、測定開始から測定完了までの期間のＯＤ値の時系列データを算出する。ＯＤ値の時系列データは、ＯＤ値の経時的変化、すなわち時間の経過によって現れるＯＤ値の変化を示すデータであり、測定試料の光学的情報のタイムコース曲線を示す。制御部２３は、算出したＯＤ値の時系列データを、処理装置３０へ送信する。
【００２７】
制御部２３は、ＣＰＵ２３ａ及びメモリ（記憶部）２３ｂを備えている。制御部２３は、メモリ２３ｂに格納されたコンピュータプログラムをＣＰＵ２３ａによって実行することで、制御部２３としての機能を発揮する。
【００２８】
処理装置３０は、ＣＰＵ３１と、メモリ（記憶部）３２と、表示部３３と、を備えている。処理装置３０は、メモリ３２に格納されたコンピュータプログラムをＣＰＵ３１によって実行することで、処理装置３０としての機能を発揮する。
【００２９】
処理装置３０は、制御部２３から、ＯＤ値の時系列データを受信する。図１のステップＳ１３において、処理装置３０は、ＯＤ値の時系列データから、第１情報及び第２情報を算出する。第１情報はＦＤＰ濃度を示す情報である。第２情報は、測定試料のＯＤ値のタイムコース曲線の湾曲度合を示す情報である。
【００３０】
ステップＳ１４において、処理装置３０は、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と湾曲度合を示す第２情報とに基づいて、血液検体の線溶亢進状態の判定をする。また、処理装置３０は、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と湾曲度合を示す第２情報とに基づいて、Ｄダイマーに関する値を求める。Ｄダイマーに関する値は、例えば、Ｄダイマー濃度の推定値又はＤダイマー濃度から算出される値である。Ｄダイマー濃度から算出される値は、例えば、ＦＤＰ／Ｄダイマー比である。
【００３１】
処理装置３０のメモリ３２は、線溶亢進状態の判定及びＤダイマーに関する値を求めるための分析用情報３２ａ，３２ｂ，３２ｃ，３３ｄ，３４ｅを有している。分析用情報３２ａ，３２ｂ，３２ｃ，３３ｄ，３４ｅは、それぞれ後述の式（１）から式（５）に対応する。処理装置３０のＣＰＵ３０は、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と湾曲度合を示す第２情報と、メモリ３２に格納された分析用情報と、を用いて、線溶亢進状態の判定し、Ｄダイマーに関する値を求める。各式（１）から式（５）については後述する。
【００３２】
ステップＳ１５において、処理装置３０は、結果表示画面を、表示部３３に表示させる。結果表示画面は、線溶亢進状態の判定結果、及びＤダイマーに関する値、並びにその他の測定結果を表示することができる。結果表示画面についても後述する。
【００３３】
［２．処理装置による検体分析処理］
［２．１  ＦＤＰ濃度］
処理装置３０は、測定試料のＯＤ値のタイムコース曲線を示すＯＤ値の時系列データから、ＦＤＰ濃度を示す第１情報を算出する。ＦＤＰ濃度は、ＦＤＰ測定に使用されたＦＤＰ測定試薬の添付文書に記載のＦＤＰ濃度算出手順に従って算出される。具体的には、処理装置３０は、光学的情報であるＯＤ値の所定時間（例えば、１分間）当たりの変化量を求め、求めた変化量をキャリブレータから得られる検量線に適用して、測定試料中のＦＤＰ濃度を算出する。
【００３４】
ＦＤＰ濃度を示す第１情報は、ＦＤＰ濃度を直接的に示す情報であってもよいし、ＦＤＰ濃度に相関するパラメータのようにＦＤＰ濃度を間接的に示す情報であってもよい。ＦＤＰ濃度を直接的に示す情報は、例えば、上記のＦＤＰ濃度算出手順に従って算出されたＦＤＰ濃度である。ＦＤＰ濃度を間接的に示す情報は、例えば、ＯＤ値の所定時間当たりの変化量である。ＯＤ値の所定時間当たりの変化量は、ＦＤＰ濃度の算出に用いられることからも明らかなように、ＦＤＰ濃度と相関するので、ＦＤＰ濃度を間接的に示す。
【００３５】
［２．２  タイムコース曲線の湾曲度合の算出と線溶亢進］
非特許文献１記載の指針に従って、ＦＤＰ／ＤＤ比を用いて、血液検体の線溶亢進状態を判定するには、ＦＤＰ測定と、Ｄダイマー測定と、が必要である。しかし、本発明者は、驚くべきことにＤダイマー測定を行わなくてもＦＤＰ測定によって、これまでＤダイマー測定が必要であった線溶亢進状態判定を行えることを見出した。
【００３６】
より具体的には、本発明者は、測定試料の光学的情報のタイムコース曲線の形状と、線溶亢進状態と、の間に相関があることを見出した。本発明者の見出した相関は、測定試料の光学的情報の経時的変化を示すタイムコース曲線の湾曲度合が、線溶亢進状態に関連している、というものである。この相関を利用することにより、ＦＤＰ測定の結果に基づいて、線溶亢進状態判定を行うことができる。
【００３７】
測定試料の光学的情報とは、測定試料を光学的に測定して得られる情報であり、例えば、光学濃度（ＯＤ）値である。測定試料の光学的情報のタイムコース曲線とは、ＦＤＰ測定用試料を用いて調製された測定試料の光学的情報の経時的変化を示す曲線であり、概ね、図３のような曲線Ｃとなる。タイムコース曲線は、処理装置３０が取得したＯＤ値の時系列データに基づいて描かれる。
【００３８】
図３において、横軸は、測定試料の測定開始からの経過時間を示し、縦軸は、測定試料のＯＤ値を示す。タイムコース曲線の湾曲度合とは、経時的に増加する光学的情報のタイムコース曲線の曲がり具合である。ここで、ＯＤ値は、微弱な増減を繰り返しながら増加するが、微弱な増減によるタイムコース曲線の変動は考慮せず、タイムコース曲線をマクロ的に見た場合のタイムコース曲線の湾曲を考える。
【００３９】
測定試料のＯＤ値のタイムコース曲線は、多くの場合、測定開始（経過時間＝０ｓｅｃ）から数十秒程度までの第１期間Ｔ１の曲線部分Ｃ１と、第１期間Ｔ１に続き測定終了までの第２期間Ｔ２の曲線部分Ｃ２と、を含む。第１期間Ｔ１は、例えば３０秒である。ＯＤ値は、第２期間Ｔ２においては単調増加するが、第１期間Ｔ１においては、測定試料の濁度が安定せず、ＯＤ値の大きな増加及び減少が生じることがある。このような第１期間Ｔ１は、ＯＤ値の経時的変化を適切に示しているわけではないので、タイムコース曲線Ｃの湾曲度合を算出する際には、第１期間Ｔ１を除外したほうが、湾曲度合を精度よく求めることができる。なお、ＯＤ値が第１期間Ｔ１においても安定的に単調増加する場合には、第１期間Ｔ１における曲線部分Ｃ１を、タイムコース曲線Ｃの湾曲度合を算出する際に考慮してもよい。
【００４０】
例えば、図３のタイムコース曲線Ｃの第２期間Ｔ２の始点ＴＡから終点ＴＢの範囲で、タイムコース曲線Ｃの湾曲度合を考える場合、始点ＴＡから終点ＴＢを結ぶ直線Ｌからのタイムコース曲線Ｃの上方への突出量Ｈが大きいほど、曲線は大きく曲がり、湾曲度合が大きくなる。逆に、突出量Ｈが小さいほど、湾曲度合が小さくなる。
【００４１】
多くの場合、ＯＤ値のタイムコース曲線は、図３に示すように、第２期間Ｔ２において上方凸状の曲線となり、突出量Ｈが正の値となる。ただし、Ｄダイマーを形成する因子が欠損している被験者から採取された血液検体などの場合、直線Ｌに対して下方凸状になることもあり、この場合、湾曲度合及び突出量Ｈは負の値となる。
【００４２】
処理装置３０は、ＯＤ値の時系列データから、タイムコース曲線の湾曲度合を示す第２情報を算出する。湾曲度合は、様々な指標によって示すことができる。
【００４３】
［２．３  湾曲度合を示す指標のバリエーション］
図４は、湾曲度合を示す第２情報のバリエーションを示している。湾曲度合を示す第２情報の第１例は、タイムコース曲線の凸状エリア面積である。図４（ａ）に示すように、凸状エリア面積は、タイムコース曲線において面積算出の対象期間の始点ＴＡから終点ＴＢを結んだ直線Ｌとタイムコース曲線Ｃとで囲まれた領域の大きさとして算出される。算出の対象期間の始点ＴＡから終点ＴＢは、図３の第２期間Ｔ２のように、測定試料のＯＤ値が単調増加する期間内に設定すると湾曲度合を精度よく求めることができる。なお、直線Ｌよりも上のエリアの面積は正の値として扱い、直線Ｌよりも下のエリアの面積は負の値として扱うのが好ましい。
【００４４】
直線Ｌからみて上方への湾曲度合が大きいほど、凸状エリア面積は大きくなり、上方への湾曲度合が小さいほど、凸状エリア面積は小さくなる。
【００４５】
湾曲度合を示す第２情報の第２例は、タイムコース曲線Ｃの曲率半径又は曲率である。タイムコース曲線を単調増加する曲線等によって曲線近似し、その近似曲線の曲率半径又は曲率をタイムコース曲線の曲率半径又は曲率とすることができる。タイムコース曲線Ｃを曲線近似することで、微弱な増減によるタイムコース曲線の変動を無視して、タイムコース曲線をマクロ的にとらえることができる。
【００４６】
なお、タイムコース曲線Ｃが上方凸状の場合の曲率半径又は曲率を正の値として扱い、下方凸状の場合の曲率半径又は曲率を負の値として扱うのが好ましい。また、曲率半径又は曲率の算出対象範囲の始点ＴＡから終点ＴＢまでの間において、曲率半径又は曲率が変化する場合には、図４（ｂ）に示すように、対象期間内の複数の点Ｐ１，Ｐ２，Ｐ３，Ｐ４の曲率半径の平均又は曲率の平均を第２情報として求めても良い。
【００４７】
湾曲度合を示す第２情報の第３例は、タイムコース曲線Ｃを多項式近似したときの係数である。例えば、ａｘ２＋ｂｘ＋ｃの２次関数でタイムコース曲線を近似したときの係数ａを第２情報とすることができる。
【００４８】
湾曲度合を示す第２情報の第４例は、タイムコース曲線の突出量Ｈである。図４（ｃ）に示すように、突出量Ｈは、突出量Ｈの算出対象範囲の始点ＴＡから終点ＴＢを結ぶ直線Ｌの中点Ｐからタイムコース曲線Ｃ側へ垂直に延び、タイムコースコース曲線Ｃに至るまでの長さとして算出される。タイムコース曲線Ｃが上方凸状の場合の突出量Ｈを正の値として扱い、下方凸状の場合の突出量Ｈを負の値として扱うのが好ましい。
【００４９】
なお、突出量Ｈは、図４（ｄ）に示すように、直線Ｌと並行な線Ｌ’であって、突出量Ｈの算出対象範囲の始点ＴＡから終点ＴＢまでのタイムコース曲線Ｃの接線となる線Ｌ’と、直線Ｌとの間隔であってもよい。
【００５０】
湾曲度合を示す第２情報の第５例は、凸状エリアの近似図形の面積である。凸状エリアの近似図形の面積は、第１例における凸状エリア面積の大きさを示す情報のバリエーションの一つである。凸状エリアの近似図形は、例えば、図４（ｅ）に示すように、面積算出の対象範囲の始点ＴＡから終点ＴＢを結んだ直線Ｌとタイムコース曲線Ｃとで囲まれた領域を近似する三角形とすることができる。近似図形は、半円又は任意の多角形とすることができる。
【００５１】
湾曲度合を示す第２情報の第６例は、タイムコース曲線Ｃの接線Ｌ１，Ｌ２，Ｌ３又は回帰直線の傾きのうち、任意の２つの比率である。図４（ｆ）に示すように、接線又は回帰直線の傾きは、例えば、タイムコース曲線の序盤（例えば、始点ＴＡ又はその近傍）における接線Ｌ１又は回帰直線の傾き、タイムコース曲線の中盤（例えば、始点ＴＡと終点ＴＢの間の点Ｐ１）における接線Ｌ２又は回帰直線の傾き、又は、タイムコース曲線の終盤（例えば、終点ＴＢ又はその近傍）における接線Ｌ３又は回帰直線の傾きとして算出される。このようにして算出された任意の２つの接線Ｌ１，Ｌ２，Ｌ３又は回帰直線の傾きの比を第２情報として算出できる。第２情報は、例えば、Ｌ１の傾き／Ｌ２の傾き、Ｌ２の傾き／Ｌ１の傾き、又は、Ｌ３の傾き／Ｌ１の傾きである。複数の接線又は回帰直線を２つの群にわけ、それぞれの群で、傾きの合計又は平均を算出し、２つの群の傾きの合計又は平均の比を第２情報として算出してもよい。例えば、タイムコース曲線の前半で、３つの接線それぞれの傾きを算出し、それらの第１平均値を算出する。タイムコース曲線の後半でも、同様に、３つの接線それぞれの傾きを算出し、それらの第２平均値を算出する。第１平均値と第２平均値との比率を第２情報として算出できる。
【００５２】
［２．４  凸状エリア面積の算出例］
以下では、湾曲度合を示す第２情報として、第１例の凸状エリア面積を採用する。処理装置３０は、ＯＤ値の時系列データから次の式（１）を用いて、凸状エリア面積を算出する。式（１）は、メモリ３２に、分析用情報３２ａとして格納されている。
【数１】
0006640494.tif 000002
ここで、ｔは、タイムコース曲線における時刻［ｓｅｃ］である。ＯＤ（ｔ）は、時刻ｔ秒におけるＯＤ値である。ａ×ｔ−ｂは、タイムコース曲線において湾曲度合算出の始点ＴＡから湾曲度算出の終点ＴＢを結ぶ直線の回帰式である。ここでの始点ＴＡは、測定開始（ｔ＝０）から３０秒の時点におけるＯＤ値であり、終点ＴＢは、測定開始から１５０秒の時点におけるＯＤ値である。なお、始点ＴＡは、始点基準時（例えば、３０秒）付近の期間（例えば、２７．５から３２．５秒）の間のＦＤＰ濃度の平均値でもよいし、終点ＴＢは、終点基準時（例えば、１５０秒）付近の期間（例えば、１４７．５から１５２．５秒）の間のＦＤＰ濃度の平均値でもよい。希釈測定の場合には、式（１）を用いて算出された凸状エリア面積に、希釈倍率を掛けた値を、凸状エリア面積とすることができる。
【００５３】
［２．５  線溶亢進状態判定］
処理装置３０は、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と、タイムコース曲線の湾曲度合を示す第２情報と、に基づいて、線溶亢進状態を判定する。図５は、横軸をＦＤＰ濃度とし、縦軸を凸状エリア面積とした２次元空間を示している。図５の２次元空間に、第１情報及び第２情報によって特定される点をプロットすると、線溶亢進型の検体から得られた第１情報及び第２情報の点の分布と、非線溶亢進型の検体から得られた第１情報及び第２情報の点の分布には、違いが生じることを本発明者は見出した。すなわち、線溶亢進型検体は、概ね、図５の２次元空間の右下側に多く分布し、非線溶亢進型検体は、概ね、図５の２次元空間の左側又は左上側に多く分布する。
【００５４】
したがって、血液検体の線溶亢進状態の判定は、ＦＤＰ濃度と凸状エリア面積とがわかれば、従来のようにＦＤＰ／Ｄダイマー比を求めなくても、線溶亢進状態の判定が行える。血液検体の線溶亢進状態の判定は、例えば、ＦＤＰ濃度を示す第１情報を評価関数に適用して得られる値Ｖ１と、第２情報である凸状エリア面積と、を比較する判定を含むことができる。評価関数は、例えば、ＦＤＰ濃度に比例する関数であり、ＦＤＰ濃度×Ａ＋Ｂで示される。ここで、Ａ，Ｂは、タイムコース曲線取得の条件により定まる係数である。Ａ，Ｂの値の例は、後述する。評価関数を用いた判定条件は、以下の式（２）で表される。以下では、式（２）による判定を第１判定という。評価関数を含む式（２）は、メモリ３２に分析用情報３２ｂとして格納されている。
【数２】
0006640494.tif 000003
【００５５】
式（２）を満たすか否かの判定は、処理装置３０によって算出されたＦＤＰ濃度と凸状エリア面積を図５にプロットした場合に、プロットした点が、図５において式（２）に対応する判定ラインＶ１＝ＦＤＰ濃度×Ａ＋Ｂに一致する又は判定ラインＶ１よりも下に位置するか否かの判定と等価である。処理装置３０は、式（２）が満たされた場合、検体を線溶亢進型であると判定する。
【００５６】
血液検体の線溶亢進状態の判定は、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と、閾値Ｃと、を比較することを更に含んでも良い。ここで、閾値Ｃは、ＦＤＰ測定用試薬における線溶亢進型検体を捉える強さを考慮して決定される値である。閾値Ｃを用いた判定条件は、以下の式（３）で表される。以下では、式（３）による判定を第２判定という。式（３）は、メモリ３２に分析用情報３２ｃとして格納されている。
【数３】
0006640494.tif 000004
【００５７】
処理装置３０は、式（２）に加えて、式（３）をも満たす場合に、検体を線溶亢進型であると判定することで、より精度良く判定が行える。
【００５８】
なお、血液検体の線溶亢進状態の判定は、式（２）（３）で示される判定条件を用いるものに限られない。例えば、図５に示す２次元空間において線溶亢進型検体が属するべきエリアを予め分画しておき、分析対象の検体から得られた第１情報及び第２情報で示される２次元空間座標が、線溶亢進型検体が属すべきエリアに属するか否かで、判定してもよい。
【００５９】
［２．６  係数Ａ，Ｂ及び閾値Ｃの設定例］
［２．６．１  第１設定例と判定性能の検証結果］
第１設定例では、凸状エリア面積を用いた場合の線溶亢進状態の判定として、式（２）で示される第１判定のみを行う。したがって、第１設定例において設定される値は、係数Ａ，Ｂであり、閾値Ｃは設定されない。第１設定例での判定性能の検証のため、ここでは、ＦＤＰ測定のほか、Ｄダイマー測定も行う。第１設定例の判定性能の検証のため、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定結果との対比において、第１設定例での感度と特異度とを求めた。第１設定例の検証のために使用した血液検体は、凍結血漿検体であり、全３７例である。
【００６０】
ＦＤＰ測定試料は、検体に、ＦＤＰ測定用試薬を混合して調製した。使用したＦＤＰ測定用試薬は、シスメックス株式会社製のリアスオートＰ−ＦＤＰである。ＦＤＰ濃度が１２０μｇ／ｍＬを超える検体は、シスメックス株式会社製の線溶系希釈液により８倍希釈測定を行い、凸状エリア面積は、式（１）で求めた値を８倍して得た。
【００６１】
Ｄダイマー測定試料は、検体に、Ｄダイマー測定用試薬を混合して調製した。使用したＤダイマー測定用試薬は、シスメックス株式会社製のＤダイマー測定キット・リアスオートＤダイマー・ネオである。
【００６２】
第１設定例での判定性能の検証のため、上記のように調製されたＦＤＰ測定試料とＤダイマー測定試料とを、それぞれ、シスメックス株式会社製全自動血液凝固測定装置ＣＳ２０００ｉにより測定し、各測定試料のＯＤ値のタイムコース曲線を得た。使用した試料の添付文書に従い、得られたタイムコース曲線から、ＦＤＰ濃度及びＤダイマー濃度を算出した。さらに、ＦＤＰ濃度及びＤダイマー濃度から、それらの比であるＦＤＰ／Ｄダイマー比を算出した。
【００６３】
第１設定例及び後述の第２設定例では、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定基準として、ＦＤＰ／Ｄダイマー比≧２．５を陽性、すなわち線溶亢進状態と判定する、という基準を採用し、ＦＤＰ濃度の大きさは考慮しないものとする。
【００６４】
凸状エリア面積を用いた場合における線溶亢進状態の判定のため、ＦＤＰ測定試料のＯＤ値のタイムコース曲線から、式（１）によって凸状エリア面積を求めた。そして、凸状エリア面積を用いた場合の線溶亢進状態の判定として、式（２）で示される第１判定を行い、図６に示すＲＯＣ曲線を得た。図６のＲＯＣ曲線は、式（２）の右辺の評価関数に含まれる係数Ａ，Ｂのうち、係数Ｂを−２．６に設定し、係数Ａを２．０から０．０までの範囲で変化させた場合のＲＯＣ曲線である。図６において、横軸は、偽陽性率であり、縦軸は感度である。図６のＲＯＣ曲線のＲＯＣ曲線下面積は０．６１である。
【００６５】
図６のＲＯＣ曲線から、係数Ａの値を決定した。決定される係数Ａの値は、図６のＲＯＣ曲線において、（偽陽性率，感度）＝（０％，０％）の点から（偽陽性率，感度）＝（１００％，１００％）の点を結ぶ直線から左上方に最も離れた点における係数Ａの値である。ここでは、Ａ＝０．２９とした。
【００６６】
以下の表１は、Ａ＝０．２９，Ｂ＝−２．６である評価関数に、算出されたＦＤＰ濃度を代入して得られた値Ｖ１と、凸状エリア面積と、を比較して得られた線溶亢進型状態の判定結果を示す。
【表１】
0006640494.tif 000005
【００６７】
また、図７は、３７検体それぞれのＦＤＰ測定試料から得られたＦＤＰ濃度及び凸状エリア面積をプロットした結果を示す。図７において、白丸のプロットは、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定によって、非線溶亢進検体と判定されたものを示し、黒丸のプロットは、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定によって、線溶亢進検体と判定されたものを示す。プロット近傍の数値は、ＦＤＰ濃度及びＤダイマー濃度から算出されたＦＤＰ／Ｄダイマー比を示す。図７には、式（２）の右辺の評価関数に対応する判定ライン５０が示されている。図７の判定ライン５０は、Ａ＝０．２９，Ｂ＝−２．６である評価関数に対応する。図７において、判定ライン５０と一致するプロット及び判定ライン５０よりも下のプロットは、式（２）で示す第１判定によって線溶亢進型であると判定される。
【００６８】
表１及び図７から明らかなように、式（２）で示す第１判定によって線溶亢進型であると判定された検体数は１５であり、非線溶亢進型であると判定された検体数は２２である。一方、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定によって線溶亢進型であると判定された検体数は１４であり、非線溶亢進型であると判定された検体数は２３である。表１によれば、真陽性検体は９例であり、偽陽性検体は６例であり、偽陰性検体は５例であり、真陰性検体は１７例である。
【００６９】
第１設定例によれば、式（２）で示す第１判定による線溶亢進状態判定の感度＝真陽性検体９例÷陽性検体１４例＝６４％であり、特異度＝真陰性検体１７例÷陰性検体２３例＝７４％となる。
【００７０】
［２．６．２  第２設定例と判定性能の検証結果］
第２設定例でも、第１設定例と同様に、凸状エリア面積を用いた場合の線溶亢進状態の判定として、式（２）で示される第１判定のみを行う。したがって、第２設定例として設定される値も、係数Ａ，Ｂである。
【００７１】
第１設定例と第２設定例で異なる点は、第１設定例では、血液検体が凍結血漿検体であったのに対して、第２設定例では、血液検体が新鮮血漿検体であることである。第２設定例では、５４例の新鮮血漿検体を用いた。また、第２設定例では、ＦＤＰ測定試料とＤダイマー測定試料とを、それぞれ、シスメックス株式会社製全自動血液凝固測定装置ＣＳ５１００により測定し、各測定試料のＯＤ値のタイムコース曲線を得た。使用した試料の添付文書に従い、得られたタイムコース曲線から、ＦＤＰ濃度及びＤダイマー濃度を算出した。さらに、ＦＤＰ濃度及びＤダイマー濃度から、それらの比であるＦＤＰ／Ｄダイマー比を算出した。なお、ＦＤＰ／Ｄダイマー比は、ＦＤＰ濃度÷Ｄダイマー濃度によって算出される。
【００７２】
第２設定例では、第１設定例と同様の条件で判定性能を検証した。算出された凸状エリア面積を用いた場合の線溶亢進状態の判定として、式（２）で示される第１判定を行い、図８に示すＲＯＣ曲線を得た。図８のＲＯＣ曲線は、式（２）の右辺の評価関数に含まれる係数Ａ，Ｂのうち、係数Ｂは−２．６に設定し、係数Ａを２．０から０．０までの範囲で変化させた場合のＲＯＣ曲線である。図８において、横軸は、偽陽性率であり、縦軸は感度である。図８のＲＯＣ曲線のＲＯＣ曲線下面積は０．７７である。
【００７３】
図８のＲＯＣ曲線から、第１設定例と同様に、係数Ａの値を決定した。ここでは、Ａ＝０．２９とした。
【００７４】
以下の表２は、Ａ＝０．２９，Ｂ＝−２．６である評価関数に、算出されたＦＤＰ濃度を代入して得られた値Ｖ１と、凸状エリア面積と、を比較して得られた線溶亢進型状態の判定結果を示す。
【表２】
0006640494.tif 000006
【００７５】
また、図９は、５４検体それぞれのＦＤＰ測定試料から得られたＦＤＰ濃度及び凸状エリア面積をプロットした結果を示す。図９において、白丸のプロットは、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定によって、非線溶亢進検体と判定されたものを示し、黒丸のプロットは、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定によって、線溶亢進検体と判定されたものを示す。プロット近傍の数値は、ＦＤＰ濃度及びＤダイマー濃度から算出されたＦＤＰ／Ｄダイマー比を示す。図９には、式（２）の右辺の評価関数に対応する判定ライン５０が示されている。図９の判定ライン５０は、Ａ＝０．２９，Ｂ＝−２．６である評価関数に対応する。図９において、判定ライン５０と一致するプロット及び判定ライン５０よりも下のプロットは、式（２）で示す第１判定によって線溶亢進型であると判定される。
【００７６】
表２及び図９から明らかなように、式（２）で示す第１判定によって線溶亢進型であると判定された検体数は２０であり、非線溶亢進型であると判定された検体数は３４である。一方、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定によって線溶亢進型であると判定された検体数は１６であり、非線溶亢進型であると判定された検体数は３８である。表２によれば、真陽性検体は１２例であり、偽陽性検体は８例であり、偽陰性検体は４例であり、真陰性検体は３０例である。
【００７７】
第２設定例によれば、感度＝真陽性検体１２例÷陽性検体１６例＝７５％であり、特異度＝真陰性検体４０例÷陰性検体３０例＝７９％となる。
【００７８】
第１設定例及び第２設定例からわかるように、血液検体が凍結検体であっても、新鮮検体であっても、式（２）で示す第１判定による線溶亢進状態判定は、ある程度良好な感度及び特異度が得られる。
【００７９】
［２．６．３  第３設定例と判定性能の検証結果］
第３設定例でも、第１設定例及び第２設定例と同様に、凸状エリア面積を用いた場合の線溶亢進状態の判定として、式（２）で示される第１判定のみを行う。したがって、第３設定例として決定される値も、係数Ａ，Ｂである。
【００８０】
第３設定例では、第１設定例及び第２設定例とは、使用される試薬が異なる。第３設定例において使用したＦＤＰ測定試料は、株式会社ＬＳＩメディエンス製のエルピアＰＤＰ−Ｐである。ＦＤＰ濃度が８０μｇ／ｍＬを超える検体は、株式会社ＬＳＩメディエンス製の共通希釈液ＩＩ（Ｓ）により８倍希釈測定を行い、凸状エリア面積は、式（１）で求めた値を８倍して得た。
【００８１】
第３設定例において使用したＤダイマー測定試料は、株式会社ＬＳＩメディエンス製のエルピアエースＤ−ＤダイマーＩＩである。
【００８２】
第３設定例では、ＦＤＰ測定試料とＤダイマー測定試料とを、それぞれ、シスメックス株式会社製全自動血液凝固測定装置ＣＳ５１００により測定し、各測定試料のＯＤ値のタイムコース曲線を得た。使用した試料の添付文書に従い、得られたタイムコース曲線から、ＦＤＰ濃度及びＤダイマー濃度を算出した。さらに、ＦＤＰ濃度及びＤダイマー濃度から、それらの比であるＦＤＰ／Ｄダイマー比を算出した。
【００８３】
第３設定例で用いた血液検体は、新鮮血漿検体６２例である。第３設定例でも、第１設定例及び第２設定例と同様の条件で判定性能を検証した。ただし、第３設定例では、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定基準として、ＦＤＰ／Ｄダイマー比≧２．０を陽性、すなわち線溶亢進状態と判定する、という基準を採用する。第３設定例でも、ＦＤＰ濃度の大きさは考慮しないものとする。
【００８４】
算出された凸状エリア面積を用いた場合の線溶亢進状態の判定として、式（２）で示される第１判定を行い、図１０に示すＲＯＣ曲線を得た。図１０のＲＯＣ曲線は、式（２）の右辺の評価関数に含まれる係数Ａ，Ｂのうち、係数Ｂは−０．９７に設定し、係数Ａを２．０から−１．０までの範囲で変化させた場合のＲＯＣ曲線である。図１０において、横軸は、偽陽性率であり、縦軸は感度である。図１０のＲＯＣ曲線のＲＯＣ曲線下面積は０．８６である。
【００８５】
図１０のＲＯＣ曲線から、第１設定例及び第２設定例と同様に、係数Ａの値を決定した。ここでは、Ａ＝０．０８８とした。
【００８６】
以下の表３は、Ａ＝０．０８８，Ｂ＝−０．９７である評価関数に、算出されたＦＤＰ濃度を代入して得られた値Ｖ１と、凸状エリア面積と、を比較して得られた線溶亢進型状態の判定結果を示す。
【表３】
0006640494.tif 000007
【００８７】
また、図１１は、６２検体それぞれのＦＤＰ測定試料から得られたＦＤＰ濃度及び凸状エリア面積をプロットした結果を示す。図１１において、白丸のプロットは、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定によって、非線溶亢進検体と判定されたものを示し、黒丸のプロットは、ＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定によって、線溶亢進検体と判定されたものを示す。プロット近傍の数値は、ＦＤＰ濃度及びＤダイマー濃度から算出されたＦＤＰ／Ｄダイマー比を示す。図１１には、式（２）の右辺の評価関数に対応する判定ライン５０が示されている。図１１の判定ライン５０は、Ａ＝０．０８８７，Ｂ＝−０．９７である評価関数に対応する。図１１において、判定ライン５０と一致するプロット及び判定ライン５０よりも下のプロットは、式（２）で示す第１判定によって線溶亢進型であると判定される。
【００８８】
表３及び図１１から明らかなように、式（２）で示す第１判定によって線溶亢進型であると判定された検体数は１５であり、非線溶亢進型であると判定された検体数は４７である。一方、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定によって線溶亢進型であると判定された検体数は１５であり、非線溶亢進型であると判定された検体数は４７である。表３より、真陽性検体は１３例であり、偽陽性検体は２例であり、偽陰性検体は２例であり、真陰性検体は４５例である。
【００８９】
第３設定例によれば、感度＝真陽性検体１３例÷陽性検体１５例＝８７％であり、特異度＝真陰性検体４５例÷陰性検体４７例＝９６％となる。
【００９０】
第１設定例から第３設定例によれば、式（２）で示す第１判定による線溶亢進状態判定は、使用されるＦＤＰ測定用試薬にかかわらず、有用であることがわかる。
【００９１】
［２．６．４  第４設定例と判定性能の検証結果］
第４設定例では、凸状エリア面積を用いた場合の線溶亢進状態の判定として、式（２）で示される第１判定に加えて、式（３）で示される第２判定も行い、式（２）に加えて、式（３）をも満たす場合に、検体を線溶亢進型であると判定する。したがって、第４設定例として設定される値は、係数Ａ，Ｂ及び閾値Ｃである。第４設定例では、第１設定例において得られた３７検体の測定結果を用いて、第１判定及び第２判定により線溶亢進状態の判定を行う。第４設定例では、係数Ｂ＝−２．６とし、閾値Ｃ＝８０μｇ／ｍＬとした。
【００９２】
第４設定例における係数Ａの決定のため、図１２に示すＲＯＣ曲線を得た。図１２のＲＯＣ曲線は、式（２）の係数Ａを２．０から−１．０までの範囲で変化させた場合のＲＯＣ曲線である。図１４において、横軸は、偽陽性率であり、縦軸は感度である。図１４のＲＯＣ曲線のＲＯＣ曲線下面積は１．０である。図１２のＲＯＣ曲線から、第１設定例と同様に、係数Ａの値を決定した。ここでは、Ａ＝０．１８６とした。
また、第４設定例及び後述の第５設定例では、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定基準として、ＦＤＰ／Ｄダイマー比≧２．５かつＦＤＰ濃度≧８０μｇ／ｍＬを陽性、すなわち線溶亢進状態と判定する、という基準を採用する。
【００９３】
以下の表４は、第１判定及び第２判定により得られた線溶亢進型状態の判定結果を示す。第１判定は、Ａ＝０．１８６，Ｂ＝−２．６である評価関数に、算出されたＦＤＰ濃度を代入して得られた値Ｖ１と、凸状エリア面積と、を比較することで行われる。
【表４】
0006640494.tif 000008
【００９４】
図１３は、図７と同様のプロット結果に、第４設定例に従った判定ライン５０を描いたものを示している。図１３の判定ライン５０は、式（２）に示す第１判定に対応する第１部分ライン５１と、式（３）で示す第２判定に対応する第２部分ライン５２と、を有して構成されている。図１３において、第１部分ライン５１と一致するプロット又は第１部分ライン５１よりも下のプロットであり、かつ、第２部分ライン５２と一致するプロット又は第２部分ライン５２よりも右側のプロットは、第１判定及び第２判定によって、線溶亢進型であると判定される。図１３に示すように、第４設定例では、図７に示す第１設定例よりも係数Ａが小さくなっている。係数Ａが小さい場合、式（２）で示される第１判定だけであると、第１設定例よりも感度及び特異度が低下してしまうおそれがある。しかし、係数Ａが小さくても、式（３）で示される第２判定をも行うことで、第１設定例よりも感度及び特異度を良好にすることができる。したがって、第２判定を導入することで、係数Ａの設定の自由度を高くすることができる。同様に、第２判定の導入によって、係数Ｂの設定の自由度も高くすることができる。
【００９５】
表４及び図１３から明らかなように、式（２）で示す第１判定によって線溶亢進型であると判定された検体数は４であり、非線溶亢進型であると判定された検体数は３３である。一方、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定によって線溶亢進型であると判定された検体数は４であり、非線溶亢進型であると判定された検体数は３３である。表４によれば、真陽性検体は４例であり、偽陽性検体は０例であり、偽陰性検体は０例であり、真陰性検体は３３例である。
【００９６】
第１設定例によれば、式（２）で示す第１判定による線溶亢進状態判定の感度＝真陽性検体４例÷陽性検体４例＝１００％であり、特異度＝真陰性検体３３例÷陰性検体３３例＝１００％となる。
【００９７】
［２．６．５  第５設定例と判定性能の検証結果］
第５設定例では、第２設定例において得られた５４検体の測定結果を用いて、第４設定例と同様に第１判定及び第２判定により線溶亢進状態の判定を行う。第５設定例では、係数Ｂ＝−２．６とし、閾値Ｃ＝８０μｇ／ｍＬとした。
【００９８】
第５設定例における係数Ａの決定のため、図１４に示すＲＯＣ曲線を得た。図１４のＲＯＣ曲線は、式（２）の係数Ａを２．０から−１．０までの範囲で変化させた場合のＲＯＣ曲線である。図１４において、横軸は、偽陽性率であり、縦軸は感度である。図１４のＲＯＣ曲線のＲＯＣ曲線下面積は１．０である。
【００９９】
図１４のＲＯＣ曲線から、第１設定例と同様に、係数Ａの値を決定した。ここでは、Ａ＝０．２２とした。
【０１００】
以下の表５は、第１判定及び第２判定により得られた線溶亢進型状態の判定結果を示す。第１判定は、Ａ＝０．２２，Ｂ＝−２．６である評価関数に、算出されたＦＤＰ濃度を代入して得られた値Ｖ１と、凸状エリア面積と、を比較することで行われる。表５の判定では、５４検体のうち、ＦＤＰ濃度が８０μｇ／ｍＬ未満の３８検体を除いた１６検体を判定対象としている。
【表５】
0006640494.tif 000009
【０１０１】
図１５は、図９と同様のプロット結果に、第５設定例に従った判定ライン５０を描いたものを示している。図１５の判定ライン５０は、式（２）に示す第１判定に対応する第１部分ライン５１と、式（３）で示す第２判定に対応する第２部分ライン５２と、を有して構成されている。図１５において、第１部分ライン５１と一致するプロット又は第１部分ライン５１よりも下のプロットであり、かつ、第２部分ライン５２と一致するプロット又は第２部分ライン５２よりも右側のプロットは、第１判定及び第２判定によって、線溶亢進型であると判定される。表５及び図１５から明らかなように、式（２）で示す第１判定及び式（３）で示す第２判定によって線溶亢進型であると判定された検体数は９であり、非線溶亢進型であると判定された検体数は７である。一方、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定によって線溶亢進型であると判定された検体数は９であり、非線溶亢進型であると判定された検体数は７である。表５によれば、真陽性検体は９例であり、偽陽性検体は０例であり、偽陰性検体は０例であり、真陰性検体は７例である。
【０１０２】
第５設定例によれば、第１判定及び第２判定による線溶亢進状態判定の感度＝真陽性検体９例÷陽性検体９例＝１００％であり、特異度＝真陰性検体７例÷陰性検体７例＝１００％となる。このように、第５設定例では、第２判定があることで、第２設定例に比べて判定性能が高まる。
【０１０３】
［２．６．６  第６設定例と判定性能の検証結果］
第６設定例では、第３設定例において得られた６２検体の測定結果を用いて、第４設定例及び第５設定例と同様に第１判定及び第２判定により線溶亢進状態の判定を行う。ただし、第６設定例では、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定基準として、ＦＤＰ／Ｄダイマー比≧２．０かつＦＤＰ濃度≧５０μｇ／ｍＬを陽性、すなわち線溶亢進状態と判定する、という基準を採用する。
【０１０４】
第６設定例では、係数Ｂ＝−０．９７とし、閾値Ｃ＝５０μｇ／ｍＬとした。第６設定例における係数Ａの決定のため、図１６に示すＲＯＣ曲線を得た。図１６のＲＯＣ曲線は、式（２）の係数Ａを２．０から−１．０までの範囲で変化させた場合のＲＯＣ曲線である。図１６において、横軸は、偽陽性率であり、縦軸は感度である。図１６のＲＯＣ曲線のＲＯＣ曲線下面積は０．９７である。
【０１０５】
図１６のＲＯＣ曲線から、第１設定例と同様に、係数Ａの値を決定した。ここでは、Ａ＝０．０７６とした。
【０１０６】
以下の表６は、第１判定及び第２判定により得られた線溶亢進型状態の判定結果を示す。第１判定は、Ａ＝０．０７６，Ｂ＝−０．９７である評価関数に、算出されたＦＤＰ濃度を代入して得られた値Ｖ１と、凸状エリア面積と、を比較することで行われる。表６の判定では、６２検体のうち、ＦＤＰ濃度が５０μｇ／ｍＬ未満の４６検体を除いた１６検体を判定対象としている。
【表６】
0006640494.tif 000010
【０１０７】
図１７は、図１１と同様のプロット結果に、第６設定例に従った判定ラインを描いたものを示している。図１７判定ライン５０は、式（２）に示す第１判定に対応する第１部分ライン５１と、式（３）で示す第２判定に対応する第２部分ライン５２と、を有して構成されている。図１７において、第１部分ライン５１と一致するプロット又は第１部分ライン５１よりも下のプロットであり、かつ、第２部分ライン５２と一致するプロット又は第２部分ライン５２よりも右側のプロットは、第１判定及び第２判定によって、線溶亢進型であると判定される。表６及び図１７から明らかなように、式（２）で示す第１判定及び式（３）で示す第２判定によって線溶亢進型であると判定された検体数は１１であり、非線溶亢進型であると判定された検体数は５である。一方、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた場合の線溶亢進状態の判定によって線溶亢進型であると判定された検体数は１０であり、非線溶亢進型であると判定された検体数は６である。したがって、真陽性検体は１０例であり、偽陽性検体は１例であり、偽陰性検体は０例であり、真陰性検体は５例である。
【０１０８】
よって、第６設定例によれば、第１判定及び第２判定による線溶亢進状態判定の感度＝真陽性検体１０例÷陽性検体１０例＝１００％であり、特異度＝真陰性検体５例÷陰性検体６例＝８３％となる。このように、第６設定例では、第２判定があることで、第３設定例に比べて判定性能が高まる。
【０１０９】
［３．検証］
［３．１  第１検証実験］
線溶亢進状態判定に用いられるＦＤＰ濃度とタイムコース曲線の凸状エリア面積との関係を検証するため、第１検証実験を行った。第１検証実験では、ＦＤＰ／Ｄダイマー比が所定の値に調製された人工ＦＤＰ試料を希釈して、ＦＤＰ濃度がそれぞれ３０μｇ／ｍＬ、６０μｇ／ｍＬ、１２０μｇ／ｍＬである３種類の検証用検体を作成した。人工ＦＤＰ試料としては、ＦＤＰ／Ｄダイマー比＝２に調製されたシスメックス株式会社製のＰＤ−ＦＤＰ標準品を使用した。人工ＦＤＰ試料の希釈には、同社製の線溶系希釈液を用いた。ＦＤＰ濃度が異なる３つの検証用検体それぞれを、シスメックス株式会社製のＦＤＰ測定用試薬であるリアスオートＰ−ＦＤＰと混合し、３つの測定試料を調製した。３つの測定試料は、それぞれ、ＦＤＰ／Ｄダイマー比は同じであるが、ＦＤＰ濃度が異なる。
【０１１０】
３つの測定試料を、シスメックス株式会社製全自動血液凝固測定装置ＣＳ２０００ｉにより測定し、各測定試料のＯＤ値のタイムコース曲線を得た。図１８は、ＦＤＰ濃度が異なる３つの測定試料から得られたタイムコース曲線を示す。図１８に示すタイムコース曲線によれば、ＦＤＰ／ＤＤ比が一定であれば、ＦＤＰ濃度に比例して、タイムコース曲線の湾曲度が大きくなり、凸状エリア面積が大きくなることがわかる。
【０１１１】
さらに、上記と同様の方法で、ＦＤＰ濃度が、５μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬ、３０μｇ／ｍＬ、６０μｇ／ｍＬ、８０μｇ／ｍＬ、１２０μｇ／ｍＬの５種類の検証用検体を作成した。５種類の検証用検体それぞれを３つの異なるロットのリアスオートＰ−ＦＤＰと混合し測定試料を調製した。なお、３つの異なるロットそれぞれを、第１ロット、第２ロット、及び第３ロットという。各測定試料を、上記と同様に測定して、各測定試料のタイムコース曲線を得た。得られたタイムコース曲線から、式（１）によって凸状エリア面積を算出した。ロット毎にＦＤＰ濃度と凸状エリア面積をプロットし回帰線を描いた図１９から明らかなように、ＦＤＰ／Ｄダイマー比が一定であれば、ＦＤＰ濃度と凸状エリア面積との間には、凸状エリア面積＝ＦＤＰ濃度×Ａ＋Ｂに示す直線的な関係が成り立つことがわかる。
【０１１２】
なお、第１ロットについての図１９（ａ）において、Ａ＝０．２１８３，Ｂ＝−０．０７９１であり、相関係数ｒ＝０．９９８８となった。第２ロットについての図１９（ｂ）において、Ａ＝０．２０３１，Ｂ＝０．４９２４であり、相関係数ｒ＝０．９９８３となった。第３ロットについての図１９（ｃ）において、Ａ＝０．２４７２８，Ｂ＝０．１１８７１であり、相関係数ｒ＝０．９９８５となった。
【０１１３】
［３．２  第２検証実験］
ＦＤＰ濃度が一定の場合における、ＦＤＰ／Ｄダイマー比と凸状エリア面積との関係を検証するため、第２検証実験を行った。第２検証実験では、ＦＤＰ濃度が４０μｇ／ｍＬで一定となり、ＦＤＰ／Ｄダイマー比がそれぞれ１．０，２．０，４．０となる３つの検証用検体を作成した。検証用検体は、人工Ｄダイマー試料と人工フィブリノゲン分解産物試料とを混合することにより得た。３つの検証用検体それぞれを、シスメックス株式会社製のＦＤＰ測定用試薬であるリアスオートＰ−ＦＤＰと混合し、３つの測定試料を調製した。３つの測定試料は、それぞれ、ＦＤＰ濃度は同じであるが、ＦＤＰ／Ｄダイマー比が異なる。
【０１１４】
３つの測定試料を、シスメックス株式会社製全自動血液凝固測定装置ＣＳ２０００ｉにより測定し、各測定試料のＯＤ値のタイムコース曲線を得た。図２０は、ＦＤＰ／Ｄダイマー比が異なる３つの測定試料から得られたタイムコース曲線を示す。図２０に示すタイムコース曲線によれば、ＦＤＰ／Ｄダイマー比が大きくなるほど、タイムコース曲線は直線的な形状を示し、湾曲度合が小さくなることがわかる。すなわち、タイムコース曲線において、３０秒の時点の始点ＴＡと１５０秒の時点の終点ＴＢとを結んだ直線Ｌよりも上に膨らんだ面積、すなわち、凸状エリア面積は、ＦＤＰ／Ｄダイマー比が大きくなるほど、小さくなることがわかる。
【０１１５】
このように、凸状エリア面積の大きさから、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を予測することが可能である。なお、Ｄダイマー濃度が非常に小さく、ＦＤＰ／Ｄダイマー比が非常に大きい場合には、直線Ｌに対して下方凸状になることもあり、この場合、タイムコース曲線の湾曲度合及び凸状エリア面積は、負の値となる。
【０１１６】
［３．３  第１検証実験及び第２検証の考察］
第１検証実験及び第２検証実験の結果によれば、ＦＤＰ濃度と凸状エリア面積とを求めることによって、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を予測することが可能となることが裏付けられる。したがって、第１判定に用いられる式（２）は、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を用いた線溶亢進状態判定の代替となり得るものであることが裏付けられる。すなわち、ＦＤＰ濃度と凸状エリア面積とを求めることによって、線溶亢進状態判定が可能である。
【０１１７】
［３．４  ウェスタンブロティングによる検証］
図１５においてプロットされた計５４検体のうち、１１検体を、ウェスタンブロッティングにより検証した。その結果を図２１に示す。
【０１１８】
ウェスタンブロッティングは、以下を用いて実施した。
Bio-Rad ReadyGel 5-20%
Dako社 A0080 抗ヒトフィブリノゲン  ポリクローナル抗体（ウサギ）
Dako社 P0448 抗ウサギ抗体-HRP（ヤギ）
Dako社 抗マウス抗体-HRP（ウサギ）
Bio-Rad社 170-6431 HRP Conjugate Substrate Kit
【０１１９】
ウェスタンブロッティングによる検証対象となった１１検体は、図２２において、ＡからＫのアルファベットで示されている。なお、図２２においても、プロット点近傍の数字は、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を示している。１１検体のうち、ＡからＦまでの６検体は、第１判定及び第２判定を用いた線溶亢進状態判定において、線溶亢進検体と判定されたものであり、ＩからＪまでの３検体は、第１判定及び第２判定を用いた線溶亢進状態判定において、非線溶亢進検体と判定されたものである。
【０１２０】
ウェスタンブロッティングによる線溶亢進状態判定では、１００ｋＤａ付近にバンドが検出されれば線溶亢進と判定した。図２１によれば、ＡからＦまでの６検体では、Ｂの検体を除いて１００ｋＤａ付近にバンドが検出されている一方、ＩからＫまでの３検体では、１００ｋＤａ付近にバンドが検出されていないことがわかった。したがって、第１判定及び第２判定を用いた線溶亢進状態判定は、ウェスタンブロッティングによる線溶亢進状態判定とは、概ね結果が一致しており良好な結果が得られた。
【０１２１】
［４．ＦＤＰ／Ｄダイマー比推定及びＤダイマー濃度推定］
［４．１  推定方法］
前述のように、処理装置１０は、図１のステップ１４にいて、線溶亢進状態を判定するのに加えて、又は代えて、Ｄダイマーに関する値を求めることができる。ここで、処理装置１０が求めるＤダイマーに関する値は、ＦＤＰ／Ｄダイマー比の推定値及び、Ｄダイマー濃度の推定値である。
【０１２２】
処理装置１０は、処理装置３０は、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と、凸状エリア面積を示す第２情報と、に基づいて、ＦＤＰ／Ｄダイマー比の推定値及び、Ｄダイマー濃度の推定値を求める。処理装置３０は、以下の式（４）を用いて、ＦＤＰ／Ｄダイマー比の推定値を算出する。式（４）は、メモリ３２に分析用情報３２ｄとして格納されている。
【数４】
0006640494.tif 000011
【０１２３】
式（４）における、ＦＤＰＦＤＰ濃度１μｇ／ｍｌあたりの凸状エリア面積は、凸状エリア面積÷ＦＤＰ濃度によって算出される。したがって、ＦＤＰ濃度１μｇ／ｍｌあたりの凸状エリア面積は、ＦＤＰ濃度を示す第１情報と、凸状エリア面積を示す第２情報と、に基づいて算出できる。
【０１２４】
処理装置３０は、ＦＤＰ／Ｄダイマー比の推定値から、以下の式（５）に基づき、Ｄダイマー濃度の推定値を算出する。式（５）は、メモリ３２に分析用情報３ｅとして格納されている。
【数５】
0006640494.tif 000012
【０１２５】
［４．２  推定方法の検証］
［４．２．１  式（４）の算出］
まず、前述の式（４）の算出手順を説明する。複数の血漿検体から作成されたＦＤＰ測定試料及びＤダイマー測定試料を用いて、ＦＤＰ測定及びＤダイマー測定を行った。それぞれの測定により、ＯＤ値のタイムコース曲線を得た。添付文書それぞれの測定により得られたタイムコース曲線から、ＦＤＰ濃度及びＤダイマー濃度を算出した。さらに、ＦＤＰ濃度及びＤダイマー濃度から、それらの比であるＦＤＰ／Ｄダイマー比を算出した。ＦＤＰ測定により得られたタイムコース曲線から式（１）に従って凸状エリア面積を算出した。凸状エリア面積とＦＤＰ濃度から、ＦＤＰ濃度１μｇ／ｍｌあたりの凸状エリア面積を算出した。
【０１２６】
算出したＦＤＰ／Ｄダイマー比と、ＦＤＰ濃度１μｇ／ｍｌあたりの凸状エリア面積と、の関係を指数関数で近似することにより、式（４）を得た。図２３は、算出したＦＤＰ／Ｄダイマー比と、ＦＤＰ濃度１μｇ／ｍｌあたりの凸状エリア面積とをプロットしたものに、式（４）で示される近似曲線を描いたものである。
【０１２７】
図２３からわかるように、ＦＤＰ／Ｄダイマー比と、ＦＤＰ濃度１μｇ／ｍｌあたりの凸状エリア面積との間には、所定の関係性がみられるため、ＦＤＰ濃度１μｇ／ｍｌあたりの凸状エリア面積が求まれば、例えば式（４）を用いて、ＦＤＰ／Ｄダイマー比の推定値を求めることができる。
【０１２８】
［４．２．２  式（４）及び式（５）の検証］
前述の第２設定例における５４検体から得たＦＤＰ濃度及び凸状エリア面積から、ＦＤＰ濃度１μｇ／ｍｌあたりの凸状エリア面積を求め、式（４）に基づいて、ＦＤＰ／Ｄダイマー比を推定した。さらに、式（５）に従い、式（４）に基づいて、ＦＤＰ濃度を、推定したＦＤＰ／Ｄダイマー比で割って、Ｄダイマー濃度の推定値を算出した。その結果を図２４に示す。図２４の横軸は、各検体のＤダイマーの実測値を示す。Ｄダイマーの実測値は、検体とＤダイマー測定用試薬とを混合して調製された試料を測定した得られたＤダイマー濃度である。図２４の縦軸は、各検体の、ＦＤＰタイムコース解析によるＤダイマー推定値を示す。ＦＤＰタイムコース解析によるＤダイマー推定値は、式（４）及び式（５）により得られたＤダイマー濃度の推定値である。
【０１２９】
図２４からわかるように、Ｄダイマー実測値とＤダイマー濃度の推定値とは高い相関（相関係数ｒ＝０．９９）を示しており、Ｄダイマー濃度の推定が良好である。また、Ｄダイマー濃度の推定が良好であることから、ＦＤＰ／Ｄダイマー比の推定も良好であることが裏付けられる。
【０１３０】
［５．検体分析結果表示］
処理装置３０は、図１のステップＳ１４までの分析処理が完了すると、図２５に示す結果表示画面１００を表示部３２に表示させる。結果表示画面１００は、検体毎に、測定日時、検体番号、ＦＤＰ濃度を示すＦＤＰ測定値のほか、線溶亢進フラグ１０１、ＦＤＰ／ＤＤ推定値１０２、及びＤＤ推定値１０３の表示領域を有する。線溶亢進フラグ１０１は、検体が線溶亢進状態と判定されたか否かを示す。線溶亢進状態と判定された検体については、線溶亢進フラグ１０１の領域において例えば、「線溶亢進」と表示される。
【０１３１】
ＦＤＰ／ＤＤ推定値１０２の領域は、ＦＤＰ／Ｄダイマー比の推定値を表示し、ＤＤ推定値１０３の領域は、Ｄダイマー濃度の推定値を表示する。
【０１３２】
処理装置３０は、結果表示画面１００における特定の検体の指定を、例えばマウスによるクリックにより、ユーザから受け付けると、その検体に関する詳細情報を表示する詳細画面１１０を表示する。図２６に示すように詳細画面１１０は、波形表示エリア１１１、検体の情報表示エリア１１２、及びＦＤＰ波形解析の結果表示エリア１１３を含む。
【０１３３】
波形表示エリア１１１は、ＦＤＰ測定用の測定試料から得られたタイムコース曲線を表示する領域である。検体の情報表示エリア１１２は、例えば、検体番号、患者名、測定日時、ＦＤＰ濃度の測定値、希釈の有無などの表示を含む。ＦＤＰ波形解析の結果表示エリア１１３は、タイムコース曲線の湾曲度合、線溶亢進判定結果、ＦＤＰ／Ｄダイマー比の推定値、Ｄダイマー濃度の推定値などを含む。このように、検体分析によって得られた情報を表示することで、医師による線溶亢進の診断を支援することができる。
【０１３４】
上記実施形態においては、Ｄダイマー測定を行わずにＦＤＰ測定によって、線溶亢進状態判定やＤダイマー濃度の推定を行ったが、さらにＤダイマー測定を行っても良い。例えば、１次スクリーニングとして、Ｄダイマー測定を行わずにＦＤＰ測定により線溶亢進状態判定を行ったのちに、二次検査として、Ｄダイマー測定を行ってＦＤＰ／Ｄダイマー比を求めて線溶亢進状態判定を行っても良い。また、Ｄダイマー測定により得られたＤダイマー濃度の値が異常な値である場合に、ＦＤＰ測定により得られたＤダイマー濃度の推定値を用いて、Ｄダイマー濃度の値が本当に異常な値かを確認してもよい。このように、本発明の実施に際して、Ｄダイマー測定を行っても良い。
【符号の説明】
【０１３５】
１０  血液検体分析装置
２０  測定装置
２１  試料調製部
２２  検出部
２３  制御部
２３ａ  ＣＰＵ
２３ｂ  メモリ
２５  キュベット
２６  検体容器
２７  試薬容器
３０  処理装置
３１  ＣＰＵ
３２  メモリ
３３  表示部
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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