(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
必要とするヒト対象においてタウオパチーを処置するための医薬組成物であって、該医薬組成物は固定用量の７００ｍｇの抗Ｔａｕ抗体で該ヒト対象に投与され、該抗Ｔａｕ抗体は免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）および免疫グロブリン重鎖可変領域（ＶＨ）を含み、該ＶＨは配列番号３７に記載されるアミノ酸配列からなり、該ＶＬは配列番号４１に記載されるアミノ酸配列からなる、医薬組成物。
【請求項２】
抗Ｔａｕ抗体がヒト対象に静脈内に投与される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
抗Ｔａｕ抗体が４週毎に１回の固定用量の７００ｍｇでヒト対象に投与される、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
タウオパチーが慢性タウオパチーである、請求項１から３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項５】
慢性タウオパチーが、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン型認知症複合、好銀顆粒性認知症、英国型アミロイド血管症、大脳アミロイド血管症、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルト・ヤコブ病、ボクサー認知症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、ダウン症候群、前頭側頭骨性認知症(FTD)、１７番染色体に関連するパーキンソン症状がみられる前頭側頭骨性認知症、前頭側頭葉変性症、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、ハラーフォルデン−シュパッツ疾患、封入体筋炎、多系統萎縮症、筋緊張性ジストロフィー、ニーマン・ピック病Ｃ型、神経原線維変化を伴う非グアマニアン(non-Guamanian)運動神経疾患、ピック病、脳炎後のパーキンソン症状、プリオンタンパク質脳アミロイドアンギオパチー、進行性皮質下神経膠症、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型老年認知症、または多発梗塞性認知症である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
慢性タウオパチーがアルツハイマー病である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項７】
慢性タウオパチーが進行性核上性麻痺である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項８】
タウオパチーが急性タウオパチーである、請求項１から３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項９】
急性タウオパチーが、卒中、慢性外傷性脳症、外傷性脳損傷、脳震盪、発作、癲癇または急性鉛毒性脳症である、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ヒト対象においてタウオパチーを処置することにおける使用のための医薬組成物であって、該医薬組成物は抗Ｔａｕ抗体を含み、該処置は該抗Ｔａｕ抗体を単回ボーラス注射においてヒト対象に投与することを含み、該抗Ｔａｕ抗体は免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）および免疫グロブリン重鎖可変領域（ＶＨ）を含み、該ＶＨは配列番号３７に記載されるアミノ酸配列からなり、該ＶＬは配列番号４１に記載されるアミノ酸配列からなる、医薬組成物。
【請求項１１】
抗Ｔａｕ抗体が複数回用量で投与される、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
抗Ｔａｕ抗体の任意の２用量が、互いに５日以内、７日以内、２週間以内、４週間以内、２ヶ月以内またはそれ以上の期間内に投与される、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
ヒト対象においてタウオパチーを処置することにおける使用のための医薬組成物であって、該医薬組成物は抗Ｔａｕ抗体を含み、該処置は抗Ｔａｕ抗体の任意の２用量を互いに５日以内、４週間以内または２ヶ月以内にヒト対象に投与することを含み、該抗Ｔａｕ抗体は免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）および免疫グロブリン重鎖可変領域（ＶＨ）を含み、該ＶＨは配列番号３７に記載されるアミノ酸配列からなり、該ＶＬは配列番号４１に記載されるアミノ酸配列からなる、医薬組成物。
【請求項１４】
抗Ｔａｕ抗体が、皮下投与、髄腔内投与、または静脈内投与により投与される、請求項１０から１３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１５】
タウオパチーが、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン型認知症複合、好銀顆粒性認知症、英国型アミロイド血管症、大脳アミロイド血管症、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルト・ヤコブ病、ボクサー認知症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、ダウン症候群、前頭側頭骨性認知症(FTD)、１７番染色体に関連するパーキンソン症状がみられる前頭側頭骨性認知症、前頭側頭葉変性症、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、ハラーフォルデン−シュパッツ疾患、封入体筋炎、多系統萎縮症、筋緊張性ジストロフィー、ニーマン・ピック病Ｃ型、神経原線維変化を伴う非グアマニアン(non-Guamanian)運動神経疾患、ピック病、脳炎後のパーキンソン症状、プリオンタンパク質脳アミロイドアンギオパチー、進行性皮質下神経膠症、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型老年認知症、または多発梗塞性認知症である、請求項１０から１４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１６】
タウオパチーがアルツハイマー病である、請求項１０から１５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１７】
タウオパチーが進行性核上性麻痺である、請求項１０から１５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１８】
タウオパチーが、卒中、慢性外傷性脳症、外傷性脳損傷、脳震盪、発作、癲癇または急性鉛毒性脳症である、請求項１０から１５のいずれかに記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、米国仮特許出願第６１／９０９，９６５(２０１３年１１月２７日出願)に基づく優先権を主張し、それは引用により本明細書に包含される。
【背景技術】
【０００２】
背景
微小管結合タンパク質Ｔａｕは、中枢神経系に豊富に存在し、主にニューロンにより産生される。Ｔａｕの主な機能は、微小管の安定化である。６種のＴａｕイソ型が成人の脳に存在する。Ｔａｕイソ型は、単一遺伝子からの選択的スプライシングの産物である。
【０００３】
タウオパチーは、いわゆる脳内の神経原線維のもつれ(tangle)（ＮＦＴ）におけるＴａｕタンパク質の病的凝集の結果生じる神経変性疾患の１つである。タウオパチーのいくつかの例には、前頭側頭骨性認知症（ＦＴＤ）、アルツハイマー病、進行性核上性麻痺、大脳皮質基底核変性症、および前頭側頭葉変性症が含まれる。
【０００４】
当技術分野では、タウオパチーの処置方法が必要とされている。
【発明の概要】
【０００５】
概要
本発明は、個体にけるタウオパチー(例えば、急性タウオパチー)の処置方法を提供する。
【０００６】
従って、一面において、個体における急性タウオパチーの処置方法が提供され、該方法は、個体の細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを顕著に減少するのに有効量の抗Ｔａｕ抗体を該抗体に投与することを含む。
【０００７】
一態様において、抗Ｔａｕ抗体は、該抗Ｔａｕ抗体の投与後７２時間以内に細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを顕著に低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、該抗Ｔａｕ抗体の投与後４８時間以内に細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを顕著に低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、該抗Ｔａｕ抗体の投与後３６時間以内に細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを顕著に低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、該抗Ｔａｕ抗体の投与後２４時間以内に細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを顕著に低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、該抗Ｔａｕ抗体の投与後１２時間以内に細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを顕著に低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、該抗Ｔａｕ抗体の投与後８時間以内に細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを顕著に低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、該抗Ｔａｕ抗体の投与後７時間以内に細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを顕著に低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、該抗Ｔａｕ抗体の投与後４時間以内に細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを顕著に低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、該抗Ｔａｕ抗体の投与後２時間以内に細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを顕著に低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、該抗Ｔａｕ抗体の投与後１時間以内に細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを顕著に低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、該抗Ｔａｕ抗体の投与後３０分以内に細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを顕著に低減するのに有効である。
【０００８】
別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約１０％低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約１５％低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約２０％低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約２５％低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約３０％低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約３５％低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約４０％低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約４５％低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約５０％低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約５５％低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約６０％低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約６５％低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約７０％低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約７５％低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約８０％低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約８５％低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを少なくとも約９０％低減するのに有効である。
【０００９】
別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを検出不可能なレベルに低減するのに有効である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを正常レベルに低減するのに有効である。別の態様において、低減された遊離Ｔａｕレベルが、該抗Ｔａｕ抗体の投与後少なくとも２時間維持される。別の態様において、低減された遊離Ｔａｕレベルが、該抗Ｔａｕ抗体の投与後少なくとも５時間維持される。別の態様において、低減された遊離Ｔａｕレベルが、該抗Ｔａｕ抗体の投与後少なくとも１０時間維持される。別の態様において、低減された遊離Ｔａｕレベルが、該抗Ｔａｕ抗体の投与後少なくとも２４時間維持される。別の態様において、低減された遊離Ｔａｕレベルが、該抗Ｔａｕ抗体の投与後少なくとも７日間維持される。ある態様において、低減された遊離Ｔａｕレベルが、該抗Ｔａｕ抗体の投与後少なくとも２週間維持される。
【００１０】
一態様において、細胞外液は血漿である。別の態様において、細胞外液は脳脊髄液である。別の態様において、細胞外液は間質液である。別の態様において、細胞外液は血液である。
【００１１】
抗Ｔａｕ抗体は、好適な手段で投与され得る。例えば、抗Ｔａｕ抗体は、皮下投与、髄腔内投与または静脈内投与により投与され得る。
【００１２】
一態様において、抗Ｔａｕ抗体は、体重１ｋｇ当たり約０．１ｍｇから約５０ｍｇの量で投与される。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は単回ボーラス注射により投与される。
【００１３】
別の態様において、複数回用量の抗Ｔａｕ抗体が投与される(例えば、２、３、４、５、６、７、８または９回用量)。一態様において、複数回用量の抗Ｔａｕ抗体が投与されるとき、抗Ｔａｕ抗体の任意の２つの用量は、互いに３日以内に投与される。別の態様において、複数回用量の抗Ｔａｕ抗体が投与されるとき、抗Ｔａｕ抗体の任意の２つの用量は、互いに５日以内に投与される。別の態様において、複数回用量の抗Ｔａｕ抗体が投与されるとき、抗Ｔａｕ抗体の任意の２つの用量は、互いに７日以内に投与される。別の態様において、複数回用量の抗Ｔａｕ抗体が投与されるとき、抗Ｔａｕ抗体の任意の２つの用量は、互いに２週間以内に投与される。別の態様において、複数回用量の抗Ｔａｕ抗体が投与されるとき、抗Ｔａｕ抗体の任意の２つの用量は、互いに４週間以内に投与される。別の態様において、複数回用量の抗Ｔａｕ抗体が投与されるとき、抗Ｔａｕ抗体の任意の２つの用量は、互いに２ヶ月以内に投与される。
【００１４】
本発明はまた、個体における急性タウオパチーの処置方法を提供し、該方法は、個体の脳脊髄液(ＣＳＦ)中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度を提供するのに有効量の抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含む。一態様において、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度が、抗Ｔａｕ抗体の投与後１時間以内に達成される。別の態様において、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度が、少なくとも２０ｎｇ／ｍｌである。別の態様において、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度が、少なくとも３０ｎｇ／ｍｌである。別の態様において、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度は、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体：Ｔａｕのモル比が少なくとも２：１である。別の態様において、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度は、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体：Ｔａｕのモル比が少なくとも２．５：１である。
【００１５】
上記または本明細書に記載の態様のいずれかにおいて、急性タウオパチーは、外傷性脳損傷(例えば、びまん性軸索損傷、脳震盪、挫傷、真撃−反衝損傷（Coup-Contrecoup injury)、セカンドインパクト症候群、穿通損傷、乳幼児揺さぶられ症候群、および閉じ込め症候群）であり得る。上記または本明細書に記載の態様のいずれかにおいて、急性タウオパチーは卒中であり得る。上記または本明細書に記載の態様のいずれかにおいて、急性タウオパチーは、慢性外傷性脳症である。
【００１６】
本発明はさらに、個体における外傷性脳損傷の処置法、個体の細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを顕著に低減するのに有効量の抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含む方法を提供する。ある態様において、該抗体は、外傷性脳損傷の４８時間以内に投与される。ある態様において、該抗体は、単回用量で投与される。ある態様において、該抗体は、多数回用量で投与される。ある態様において、該抗体は、毎週、２週間毎、４週間毎、６週間毎、８週間毎、３ヶ月毎、または６ヶ月毎に投与される。
【００１７】
本発明はまた、個体における卒中の処置法、個体の細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを顕著に低減するのに有効量の抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含む方法を提供する。ある態様において、該抗体は、卒中の４８時間以内に投与される。ある態様において、該抗体は、単回用量で投与される。ある態様において、該抗体は、多数回用量で投与される。ある態様において、該抗体は、毎週、２週間毎、４週間毎、６週間毎、８週間毎、３ヶ月毎、または６ヶ月毎に投与される。
【００１８】
本発明はさらに、個体における急性タウオパチーの処置法、個体の細胞外液中の遊離Ｔａｕレベルを、該細胞外液中のＡβレベルを低減するのに十分な期間の間、顕著に低減するのに有効な量で該個体に投与することを含む方法を提供する。一態様において、該抗体は、単回用量で投与される。別の態様において、該抗体は、多数回用量で投与される。別の態様において、該抗体は、毎週、２週間毎、４週間毎、６週間毎、８週間毎、３ヶ月毎、または６ヶ月毎に投与される。
【００１９】
上記または本明細書に記載の態様のいずれかにおいて、Ａβレベルは、抗Ｔａｕ抗体の投与後、約５日から約１５日の期間内、顕著に減少する。
【００２０】
何れかの好適な抗Ｔａｕ抗体を、本明細書に記載の方法に使用可能である。抗Ｔａｕ抗体の一例は、配列番号３７および４１にそれぞれ示される配列を有する重鎖および軽鎖、またはその抗原結合フラグメントおよび変異体を含む、hu-IPN002 (IPN007およびIPN002変異体2としても知られている)である。hu-IPN002は、細胞外Ｔａｕに結合する、ヒト化免疫グロブリン(IgG4)モノクローナル抗体である。
【００２１】
一態様において、抗体は、hu-IPN002の重鎖および軽鎖ＣＤＲ（相補性決定領域）または可変領域を含む。従って、一態様において、抗体は、配列番号３７に記載の配列を有するhu-IPN002のＶＨ領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３ドメイン、ならびに配列番号４１に記載の配列を有するhu-IPN002のＶＬ領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３ドメインを含む。別の態様において、抗体は、配列番号１０、１１および１２にそれぞれ記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメイン、ならびに配列番号７、８および９にそれぞれ記載される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメインを含む。別の態様において、抗体は、配列番号３７および／または配列番号４１にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を有するＶＨ領域および／またはＶＬ領域を含む。別の態様において、抗体は、配列番号２９および／または配列番号３３にそれぞれ記載の核酸配列によりコード化される重鎖可変(ＶＨ)領域および／または軽鎖可変(ＶＬ)領域を含む。別の態様において、抗体は、上記の抗体と結合について競合し、および／または上記の抗体と同じＴａｕ上のエピトープに結合する。別の態様において、抗体は、上記の抗体と、可変領域アミノ酸配列の少なくとも約９０％の同一性を有する(例えば、配列番号３７または配列番号４１と少なくとも約９０％、９５％または９９％の可変領域の同一性を有する)。
【００２２】
別の態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、２Ｎ４Ｒ Ｔａｕのアミノ酸１−１５８内のエピトープに特異的に結合し得る。別の態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、Ｔａｕのアミノ酸２−１８内のエピトープに特異的に結合し得る。別の態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、Ｔａｕのアミノ酸７−１３内、またはアミノ酸２５−３０内のエピトープに特異的に結合し得る。別の態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、Ｔａｕのアミノ酸１５−２４内のエピトープに特異的に結合し得る。別の態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、２Ｎ４Ｒ Ｔａｕのアミノ酸２８−１２６内のエピトープに特異的に結合し得る。別の態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、２Ｎ４Ｒ Ｔａｕのアミノ酸１５０−１５８内のエピトープに特異的に結合し得る。別の態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、線形エピトープに結合し得る。別の態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、図９に記載のｅＴａｕ4 アミノ酸配列と少なくとも９５％のアミノ酸配列同一性を有するＴａｕポリペプチド内にあるエピトープに結合し得る。
【００２３】
別の態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、a) (i) 配列番号１または配列番号７のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ１、(ii) 配列番号２または配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ２、および(iii) 配列番号３または配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ３、を含む軽鎖領域、ならびに b) (i) 配列番号４または配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ１、(ii) 配列番号５または配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ２、および(iii) 配列番号６または配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ３を含む抗体、を含む重鎖領域、を含む抗体と結合について競合する抗Ｔａｕ抗体であり得る。
【００２４】
別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、a) (i) 配列番号１または配列番号７のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ１、(ii) 配列番号２または配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ２、および(iii) 配列番号３または配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ３、を含む軽鎖領域、ならびに b) (i) 配列番号４または配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ１、(ii) 配列番号５または配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ２、および(iii) 配列番号６または配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ３を含む抗体、を含む重鎖領域、を含む抗Ｔａｕ抗体である。
【００２５】
別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、エピトープ内のアミノ酸のリン酸化とは独立してエピトープに特異的に結合する抗Ｔａｕ抗体である。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、ヒト化抗Ｔａｕ抗体である。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】図１は、カニクイザルにIPN002を単回注射後の、血漿および脳脊髄液(ＣＳＦ)中のIPN002レベルを示す。
【図２】図２は、IPN002で処理したカニクイザルのＣＳＦ中のＴａｕレベルに対するIPN002の効果を示す。
【図３】図３は、IPN002で処理したカニクイザルのＣＳＦ中のＡβタンパク質のレベルに対するIPN002の効果を示す。
【図４】図４Ａおよび４Ｂは、５ｍｇ／ｋｇ (図４Ａ)または２０ｍｇ／ｋｇ (図４Ｂ)のhu-IPN002で処理された非ヒト哺乳動物の血清中のhu-IPN002レベルを示す。
【図５】図５Ａおよび５Ｂは、５ｍｇ／ｋｇ (図５Ａ)または２０ｍｇ／ｋｇ (図５Ｂ)のhu-IPN002で処理された非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中のhu-IPN002レベルを示す。
【図６】図６は、図４Ａおよび４Ｂならびに図５Ａおよび５Ｂに示される薬物動態データのまとめを示す。
【図７】図７は、５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002抗体で処理された非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中の遊離Ｔａｕレベルに対する、hu-IPN002抗体の投与の効果を示す。
【図８】図８は、５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002抗体で処理された非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中のＡβ４０レベルに対するhu-IPN002抗体の投与の効果を示す。
【図９】図９は、ｅＴａｕ４(配列番号７１)と整列させた、２Ｎ４Ｒ Ｔａｕ (配列番号７２)のアミノ酸配列を提供する。
【図１０】図１０は、慢性外傷性脳症の可能性のある個体からのＣＳＦ中のＴａｕフラグメントの存在を示す。
【図１１】図１１Ａおよび１１Ｂは、IPN001 ＶＨ (図１１Ａ)およびＶＬ (図１１Ｂ)のアミノ酸配列を提供する。相補性決定領域(ＣＤＲ)を太字および下線で示す。
【図１２】図１２Ａおよび１２Ｂは、IPN002 ＶＨ (図１２Ａ)およびＶＬ (図１２Ｂ)のアミノ酸配列を提供する。相補性決定領域(ＣＤＲ)を太字および下線で示す。
【図１３】図１３は、ヒト化IPN002 ＶＨ 変異体１のアミノ酸配列ならびに該アミノ酸配列にコード化されるヌクレオチド配列を示す。
【図１４】図１４は、ヒト化IPN002 ＶＨ 変異体２のアミノ酸配列ならびに該アミノ酸配列のヌクレオチド配列を示す。
【図１５】図１５は、ヒト化IPN002 ＶＨ 変異体３のアミノ酸配列ならびに該アミノ酸配列のヌクレオチド配列を示す。
【図１６】図１６は、ヒト化IPN002 ＶＨ 変異体４のアミノ酸配列ならびに該アミノ酸配列のヌクレオチド配列を示す。
【図１７】図１７は、ヒト化IPN002 Ｖκ 変異体１のアミノ酸配列ならびに該アミノ酸配列のヌクレオチド配列を示す。
【図１８】図１８は、ヒト化IPN002 Ｖκ 変異体２のアミノ酸配列ならびに該アミノ酸配列のヌクレオチド配列を示す。
【図１９】図１９は、ヒト化IPN002 Ｖκ 変異体３のアミノ酸配列ならびに該アミノ酸配列のヌクレオチド配列を示す。
【図２０】図２０は、ヒト化IPN002 Ｖκ 変異体４のアミノ酸配列ならびに該アミノ酸配列のヌクレオチド配列を示す。
【図２１】図２１は、種々の細胞外Ｔａｕポリペプチドのアミノ酸配列を示す(上からそれぞれ配列番号７３−７８)。
【図２２】図２２は、５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002で処理された非ヒト哺乳動物の血清中のhu-IPN002レベルを処理後５６日まで示す。
【図２３】図２３は、５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002で処理された非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中のhu-IPN002レベルを処理後５６日まで示す。
【図２４】図２４は、５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002で処理された非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中の遊離Ｔａｕレベルを、処理後５６日まで示す。
【図２５】図２５は、５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002で処理された非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中のＡβレベルを、処理後５６日まで示す。
【図２６】図２６は、０．５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002で処理された非ヒト哺乳動物の血清中のhu-IPN002レベルを、処理後５７日まで示す。
【図２７】図２７は、０．５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002で処理された非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中のhu-IPN002レベルを、処理後５７日まで示す。
【図２８】図２８は、０．５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002で処理された非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中の遊離Ｔａｕレベルを、処理後５７日まで示す。
【図２９】図２９Ａ−２９Ｂは、０．５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002で処理された非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中の遊離Ｔａｕレベルを、処理後５７日まで比較したものである。
【図３０】図３０Ａ−３０Ｂは、０．５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002で処理した非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中のＡβ４０レベルを、処理後５７日まで、インハウスアッセイを用いて評価して、比較したものである。
【図３１】図３１Ａ−３１Ｂは、０．５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、または２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002で処理した非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中のＡβ４０レベルを、処理後５７日まで、Milliporeアッセイを用いて評価して、比較したものである。
【図３２】図３２は、hu-IPN002の多数回用量レジメンで処理した非ヒト哺乳動物の血清中のhu-IPN002レベル（１日目）を示す。
【図３３】図３３は、hu-IPN002の多数回用量レジメンで処理した非ヒト哺乳動物の血清中のhu-IPN002レベル（２９日目）を示す。
【図３４】図３４は、hu-IPN002の多数回用量レジメンで処理した非ヒト哺乳動物の血清中のhu-IPN002レベル（５７日目）を示す。
【図３５】図３５は、hu-IPN002の多数回用量レジメンで処理した非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中のhu-IPN002レベル（１日目）を示す。
【図３６】図３６は、hu-IPN002の多数回用量レジメンで処理した非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中のhu-IPN002レベル（２９日目）を示す。
【図３７】図３７は、hu-IPN002の多数回用量レジメンで処理した非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中のhu-IPN002レベル（５７日目）を示す。
【図３８】図３８は、hu-IPN002の多数回用量レジメンで処理した非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中の遊離Ｔａｕレベルを、１１２日まで示す。
【図３９】図３９は、対照(グループ１)と比較した、１日目、２９日目および５７日目（グループ２）に２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002の多数回用量で処理された非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中の、１６９日までの、遊離Ｔａｕレベルを示す。
【図４０】図４０は、hu-IPN002の多数回用量レジメンで処理された非ヒト哺乳動物のＣＳＦ中のAβレベルを、１１２日まで示す。
【図４１】図４１は、１０mpkの静脈注入（IV infusion）後の、刺激した血清中およびＣＳＦ中の、ヒトにおける遊離hu-IPN002および遊離ｅＴａｕの濃度を示す。
【図４２】図４２は、７００ｍｇ Q4W (破線)および７００ｍｇローディング用量＋２８０ｍｇ Q4W 投薬レジメン (点線)後の、予測されるヒト血漿濃度−時間プロファイルを示す。
【図４３】図４３は、７００ｍｇ Q4W (破線)および７００ｍｇ ローディング用量＋２８０ｍｇ Q4W (点線) 投薬レジメン後の、予測されるヒト血漿 ｅＴａｕ 濃度−時間プロファイルを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
定義
用語“抗体”および“免疫グロブリン”には、抗体または何れかのアイソタイプの免疫グロブリン、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、およびＦｄフラグメント、キメラ抗体、ヒト化抗体、一本鎖抗体、二重特異性抗体、および抗体の抗原結合部分と非抗体タンパク質を含む融合タンパク質を含むが、これらに限定されない、抗原への特異的結合性を有する抗体のフラグメントが含まれる。抗体は、例えば、放射性同位体で、検出可能な産物、蛍光タンパク質を生じる酵素などで検出可能に標識することができる。抗体は、特異的結合対のメンバー、例えば、ビオチン（ビオチン−アビジン特異的結合対のメンバー）などのような他の部分とさらに結合していてもよい。抗体はまた、ポリスチレンプレートまたはビーズなどを含むが、これらに限定されない、固体支持体に結合していてもよい。該用語はまた、Ｆａｂ’、Ｆｖ、Ｆ（ａｂ’）２、および／または抗原への特異的結合性を有する他の抗体フラグメント、およびモノクローナル抗体を包含する。抗体は、一価でも二価でもよい。
【００２８】
本明細書に用いる用語“ヒト化免疫グロブリン”は、異なる起源の免疫グロブリンの複数部分を含む免疫グロブリンであって、少なくとも１つの部分がヒト起源のアミノ酸配列を含む免疫グロブリンを意味する。例えば、ヒト化抗体は、例えばマウスのような、必要な特異性を有する非ヒト起源の免疫グロブリンに由来する複数部分、およびヒト起源の免疫グロブリン配列に由来する部分を含み（例えば、キメラ免疫グロブリン）、それらは、従来技術（例えば、合成）により化学的に共に結合されるか、または遺伝子操作技術を用いて（例えば、キメラ抗体のタンパク質部分をコード化するＤＮＡが発現されて、隣接するポリペプチド鎖を生じる）、隣接するポリペプチドとして製造される。ヒト化免疫グロブリンの別の例は、非ヒト起源の抗体に由来するＣＤＲおよびヒト起源の軽鎖および／または重鎖に由来するフレームワーク領域を含む、１つまたはそれ以上の免疫グロブリン鎖を含む免疫グロブリン（例えば、フレームワーク変化を有する、または有しないＣＤＲ移植抗体）である。キメラまたはＣＤＲ移植一本鎖抗体はまた、用語ヒト化免疫グロブリンに包含される。一本鎖抗体に関して、例えば、Cabillyらの、米国特許番号第4,816,567号；Cabillyらの、欧州特許番号第0,125,023 B1号；Bossらの、米国特許番号第4,816,397号；Bossらの、欧州特許番号第0,120,694 B1号；Neuberger, M. S.らの、WO 86/01533；Neuberger, M. S. らの、欧州特許番号第0,194,276 B1号；Winterの、米国特許番号第5,225,539号；Winterの、欧州特許番号第0,239,400 B1号；Padlan, E. A. らの、欧州特許出願番号第0,519,596 A1号を参照のこと。また、adnerらの、米国特許番号第4,946,778号；Hustonの米国特許番号第5,476,786号；および Bird, R. E. et al., Science, 242：423−426 (1988))を参照のこと。
【００２９】
例えば、ヒト化免疫グロブリンは、合成および／または組み換え核酸を用いて製造され、所望のヒト化鎖をコードする遺伝子（例えば、ｃＤＮＡ）を製造することができる。例えば、ヒト化可変領域をコードする核酸（例えば、ＤＮＡ）配列は、ＰＣＲ変異導入法を用いて構築され、改変前のヒト化可変領域をＤＮＡテンプレートのようなヒトまたはヒト化鎖をコードするＤＮＡ配列に改変することができる(例えば、Kamman, M., et al., Nucl. Acids Res., 17：5404 (1989))；Sato, K., et al., Cancer Research, 53：851−856 (1993)；Daugherty, B. L. et al., Nucleic Acids Res., 19(9)：2471−2476 (1991);および、Lewis, A. P. and J. S. Crowe, Gene, 101：297−302 (1991)を参照のこと)。これらの、または他の好適な方法を用いて、変異体を容易に製造することも可能である。例えば、クローン化された可変領域に変異導入することができ、所望の特異性を有する変異体をコードする配列を選択することができる（例えば、ファージライブラリから；例えば、Krebber et al., U.S. Pat. No. 5,514,548；Hoogenboom et al., WO 93/06213, 1993年4月1日公表)を参照のこと）。
【００３０】
“抗体フラグメント”は、無傷（インタクト）抗体の一部、例えば、インタクト抗体の抗原結合領域または可変領域を含む。抗体フラグメントの例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖフラグメント；二重特異性抗体；直鎖状抗体(Zapata et al., Protein Eng. 8(10)：1057−1062 (1995)）；一本鎖抗体分子；ならびに、抗体フラグメントから形成される多重特異性抗体が含まれる。抗体のパパイン消化により、“Ｆａｂ”フラグメントと呼ばれる２つの同一の抗原結合フラグメント（それぞれが１つの抗原結合部位を有する）、および残りの“Ｆｃ”フラグメント(容易に結晶化する能力によりそのように呼ばれる)を生じる。ペプシン処理によって、２つの抗原結合部位を有し、かつ依然として抗原と結合することができるＦ（ａｂ’）２フラグメントを生じる。
【００３１】
“Ｆｖ”は、完全な抗原認識部位および抗原結合部位を含む最小限の抗体フラグメントである。この領域は、強力な非共有結合で連結した１つの重鎖可変ドメインと１つの軽鎖可変ドメインの二量体から構成される。それぞれの可変ドメインの３つのＣＤＲが相互作用して、ＶＨ−ＶＬ二量体の表面に抗原結合部位を画定する構造をとる。すなわち、６つのＣＤＲが抗体に抗原結合特異性を付与する。しかしながら、単一の可変ドメイン（または、抗原に特異性のある３つのＣＤＲのみを含む半分のＦｖ）でさえも、抗原を認識し結合する能力を有するが、結合部位全体よりも親和性は低い。
【００３２】
“Ｆａｂフラグメント”もまた、軽鎖の定常ドメインと重鎖の第１定常ドメイン（ＣＨ１）を含む。Ｆａｂフラグメントは、抗体ヒンジ領域由来の１つまたはそれ以上のシステインを含む重鎖ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端にいくつかの残基を付加することによって、Ｆａｂ’フラグメントとは異なる。Ｆａｂ’−ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基(複数)が１つの遊離チオール基を有するＦａｂ’の本明細書における名称である。Ｆ（ａｂ’）２抗体フラグメントは、元々、Ｆａｂ’フラグメント間にヒンジシステインを有する一対のＦａｂ’フラグメントとして産生された。抗体フラグメントの他の化学的結合も知られている。
【００３３】
任意の脊椎動物種由来の抗体（免疫グロブリン）の“軽鎖”を、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）およびラムダ（λ）と呼ばれる、明確に区別される２つの型のうちの１つに割り当てることができる。免疫グロブリンは、それらの重鎖定常ドメインのアミノ酸配列によって種々のクラスに分類される。免疫グロブリンには５つの主なクラス、IｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭがあり、これらのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、およびＩｇＡ２にさらに分類され得る。
【００３４】
“一本鎖Ｆｖ”または“ｓＦｖ”抗体フラグメントは、抗体のＶＨおよびＶＬドメインを含み、これらのドメインは、単一のポリペプチド鎖に存在する。ある態様において、Ｆｖポリペプチドは、ＶＨとＶＬドメインの間にあるポリペプチドリンカーをさらに含み、これは、抗原結合のためにｓｃＦｖが所望の構造に形成することを可能にする。ｓｃＦｖについての検討は、Pluckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., Springer−Verlag, New York, pp. 269−315 (1994)を参照のこと。
【００３５】
用語“二重特異性抗体”は、２つの抗原結合部位を有する小型抗体フラグメントであり、該フラグメントは、同じポリペプチド鎖において軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に結合している重鎖可変ドメイン（ＶＨ）（ＶＨ−ＶＬ）を含む。同じ鎖内で２つのドメイン間の対合を可能にするには短すぎるリンカーを使用することにより、該ドメインは別の鎖の相補ドメインと対を形成して、２つの抗原結合部位を作り出す。二重特異性抗体は、例えば、ＥＰ４０４，０９７；ＷＯ９３／１１１６１；およびHollinger et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90：6444−6448においてより詳細に記載されている。
【００３６】
本明細書で用いる用語“親和性”は、２つの物質（例えば、抗体および抗原）の可逆的結合の平衡定数を意味し、解離定数（Ｋｄ）として示される。親和性は、関係のないアミノ酸配列に対する抗体の親和性より高く、少なくとも１倍以上、少なくとも２倍以上、少なくとも３倍以上、少なくとも４倍以上、少なくとも５倍以上、少なくとも６倍以上、少なくとも７倍以上、少なくとも８倍以上、少なくとも９倍以上、少なくとも１０倍以上、少なくとも２０倍以上、少なくとも３０倍以上、少なくとも４０倍以上、少なくとも５０倍以上、少なくとも６０倍以上、少なくとも７０倍以上、少なくとも８０倍以上、少なくとも９０倍以上、少なくとも１００倍以上、または少なくとも１０００倍以上、またはそれ以上であり得る。標的タンパク質に対する抗体の親和性は、例えば、約１００ナノモル（ｎＭ）ないし約０．１ｎＭ、約１００ｎＭないし約１ピコモル（ｐＭ）、または約１００ｎＭないし約１フェムトモル（ｆＭ）またはそれ以上であり得る。本明細書で用いる用語“親和力(avidity)”は、２種以上の物質の複合体の希釈後の解離に対する抵抗性を意味する。用語“免疫反応性”および“特異的結合(preferentially bind)”は、本明細書中、抗体および／または抗原結合フラグメントに対して互換的に用いられている。
【００３７】
用語“結合”は、例えば、塩架橋および水架橋のような相互作用を含む、共有結合、静電的結合、疎水性結合、ならびにイオン結合および／または水素結合相互作用による、２つの分子間の直接結合を意味する。好適な抗Ｔａｕ抗体は、Ｔａｕポリペプチド内のエピトープに特異的に結合する。非特異的結合は、約１０−７Ｍ未満の親和性での結合、例えば、１０−６Ｍ、１０−５Ｍ、１０−４Ｍなどの親和性での結合を意味し得る。
【００３８】
本明細書で用いる用語“ＣＤＲ”または“相補性決定領域”は、重鎖および軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内に見出される不連続な抗原結合部位を意味することが意図される。ＣＤＲは、Kabat et al., J. Biol. Chem. 252：6609−6616 (1977)；Kabat et al., U.S. Dept. of Health and Human Services, “Sequences of proteins of immunological interest” (1991)；Chothia et al., J. Mol. Biol. 196：901−917 (1987)；および、MacCallum et al., J. Mol. Biol.  262：732−745 (1996)に記載されており、ここでは、定義は、互いを比較したとき、アミノ酸残基の重複または一部を含む。しかしながら、抗体もしくは移植抗体またはその変異体のＣＤＲについての定義の適用は、本明細書で定義され、かつ使用される用語の範囲内であることが意図される。上記の文献の何れかに定義されるＣＤＲを含むアミノ酸残基は、以下の表１に比較して記載される。
【００３９】
【表１】
0006629201.tif 000002
【００４０】
本明細書で用いる用語“フレームワーク”は、抗体の可変領域に関して用いるとき、抗体の可変領域内のＣＤＲ領域の外側の全てのアミノ酸残基を意味することを意図する。可変領域フレームワークは、一般的に、約１００−１２０個のアミノ酸長の不連続なアミノ酸配列であるが、ＣＤＲの外側のアミノ酸のみを意味することが意図される。本明細書で用いる用語“フレームワーク領域”は、ＣＤＲにより分断されるフレームワークの各ドメインを意味することが意図される。
【００４１】
“単離された”抗体とは、天然環境の成分から同定、分離および／または回収されたものである。天然環境の混入成分は、抗体の診断用途または治療用途を妨げる物質であり、酵素、ホルモン、および他のタンパク質性もしくは非タンパク質性溶質を含み得る。ある態様において、抗体は、（１）ローリー法で決定したとき、抗体が９０重量％以上、９５重量％以上、または９８重量％以上、例えば、９９重量％を越えるまで精製され、（２）スピニングカップシーケネーター（spinning cup sequenator）の使用によってＮ末端もしくは内部のアミノ酸配列の少なくとも１５残基を得るのに十分な程度まで精製され、または（３）クマシーブルーまたは銀染色を用いる還元または非還元条件下のドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）で均質になるまで精製される。単離された抗体には、抗体の天然環境の少なくとも１つの成分も存在しないので、組換え細胞内に存在する抗体が含まれる。ある例において、単離された抗体は、少なくとも１つの精製ステップによって調製され得る。
【００４２】
用語“エピトープ”または“抗原決定基”とは、免疫グロブリンまたは抗体が特異的に結合する抗原上の部位を意味する。エピトープは、連続するアミノ酸から、またはタンパク質の三次構造フォールディングによって近接される非連続のアミノ酸の両方から形成され得る。連続するアミノ酸から形成されるエピトープは、典型的には、変性溶媒への暴露に対して保持されるが、三次構造フォールディングによって形成されるエピトープは、一般的には、変性溶媒での処理時に失われる。エピトープは、一般的に、固有の空間的立体構造中に少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４または１５個のアミノ酸を含む。所定の抗体によって結合されるエピトープを決定する方法（すなわち、エピトープマッピング)は、当技術分野で周知であり、例えば、イムノブロッティングおよび免疫沈降アッセイが含まれ、ここで、Ｔａｕからの重複ペプチドまたは隣接ペプチドを、所定の抗Ｔａｕ抗体との反応性について試験する。エピトープの空間的立体構造を決定する方法は、当技術分野の技術および本明細書に記載の技術を含み、例えば、Ｘ線結晶学および２次元核磁気共鳴（例えば、Epitope Mapping Protocols in Methods in Molecular Biology, Vol. 66, G. E. Morris, Ed. (1996))を含む。
【００４３】
他の技術は、例えば、エピトープの原子分解能を提供する抗原：抗体複合体の結晶のＸ線分析のような、エピトープマッピング法が含まれる。他の方法は、抗原フラグメントまたは抗原の変異したバリエーションへの抗体の結合をモニタリングすることであり、ここで、抗原配列内のアミノ酸残基の修飾による結合の喪失は、エピトープ成分の指標とみなされることが多い。さらに、エピトープマッピングのためのコンピュータ上で行うコンビナトリアル計算法を使用することもできる。これらの方法は、コンビナトリアルファージディスプレイペプチドライブラリーから特定の短いペプチドを親和性により単離するための目的の抗体の能力に依存する。その後、ペプチドは、ペプチドライブラリーをスクリーニングするために使用される抗体に対応するエピトープを定義するためのリード（lead）とみなされる。エピトープマッピングのために、コンホメーションの不連続なエピトープをマッピングして示す、計算アルゴリズムもまた開発されている。
【００４４】
用語“エピトープマッピング”とは、抗体−抗原認識のための分子決定基を同定するプロセスを意味する。
【００４５】
２以上の抗体について、用語“同じエピトープに結合する”とは、同じ、重複する、または包含される、アミノ酸の連続または不連続セグメントに結合する抗体を意味する。当業者は、用語“同じエピトープに結合する”が、該抗体が正確に同じアミノ酸に結合することを必ずしも意味するものではないことを理解する。抗体が結合する正確なアミノ酸は異なっていてよい。例えば、一次抗体は、二次抗体が結合するアミノ酸のセグメントに完全に包含されるアミノ酸のセグメントに結合し得る。別の例において、一次抗体は、二次抗体が結合する１つまたはそれ以上のセグメントを有意に重複するアミノ酸の１つまたはそれ以上のセグメントに結合する。本発明の目的のために、かかる抗体は、“同じエピトープに結合する”と考えられる。
【００４６】
従って、本明細書に記載の特定の抗体によって認識されるエピトープの全てまたは一部を含むＴａｕ上のエピトープに結合する抗体もまた、本発明に包含される（例えば、同一または重複領域または領域間もしくはスパニング領域）。
【００４７】
本明細書に記載の抗体とＴａｕへの結合について競合する抗体もまた、本発明に包含される。結合について競合する抗体は、常套技術を用いて同定され得る。かかる技術には、例えば、標的抗原への別の抗体の結合を遮断する一の抗体の能力を示す免疫アッセイ、すなわち、競合的結合アッセイが含まれる。競合的結合は、試験下での免疫グロブリンが、Ｔａｕのような共通の抗原への対照抗体の特異的結合を阻止するアッセイにおいて決定される。多数の競合的結合アッセイが知られており、例えば、固相直接もしくは間接ラジオイムノアッセイ(RIA)、固相直接もしくは間接酵素免疫アッセイ(EIA)、サンドイッチ競合アッセイ(Stahli et al., Methods in Enzymology 9:242 (1983)参照)、固相直接ビオチン−アビジンEIA (Kirkland et al., J. Immunol. 137:3614 (1986)参照)、固相直接標識アッセイ、固相直接標識サンドイッチアッセイ (Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press (1988)参照)、I-125標識を用いる固相直接標識 RIA (Morel et al., Mol. Immunol. 25(1):7 (1988)参照)、固相直接ビオチン−アビジンEIA (Cheung et al., Virology 176:546 (1990))、ならびに直接標識RIA (Moldenhauer et al., Scand. J. Immunol. 32:77 (1990))が知られている。一般的に、かかるアッセイは、これらの、非標識試験免疫グロブリンおよび標識対照免疫グロブリンのいずれかを有する固体表面または細胞に結合した精製抗原の使用を含む。競合的阻害は、試験免疫グロブリンの存在下で固体表面または細胞に結合した標識の量を決定することにより測定される。通常、試験免疫グロブリンは過剰に存在する。通常、競合抗体が過剰に存在するとき、共通抗原に対する対照抗体の特異的結合が、少なくとも５０から５５％、５５から６０％、６０から６５％、６５から７０％、７０から７５％またはそれ以上阻害され得る。
【００４８】
本明細書中、互換的に用いられる用語“ポリペプチド”、“ペプチド”および“タンパク質”は、何れかの長さのアミノ酸の多量体形態を意味し、それには、遺伝子的にコード化されたおよび非遺伝子的にコード化されたアミノ酸、化学的または生化学的に修飾または誘導化されたアミノ酸、ならびに修飾ペプチド主鎖を有するポリペプチドが含まれ得る。該用語は、融合タンパク質を含み、異種アミノ酸配列を含む融合タンパク質、異種および同種リーダー配列を含む融合タンパク質、Ｎ末端メチオニン残基を有する、または有しないもの、免疫学的タグ付加タンパク質などを含むがこれらに限定されない。
【００４９】
本明細書で用いる用語“処置”、“処置する”などは、所望の薬理学的および／もしくは生理学的効果を得ることを意味する。該効果は、疾患またはその症状の完全または部分的な防止という点で予防的であってよく、かつ／または、疾患および／もしくは該疾患に起因する有害作用に関する部分的または完全な治癒という点で治療的であってもよい。本明細書で用いる“処置”とは、哺乳動物、特にヒトにおける疾患の全ての処置を包含し、以下の段階を含む。（ａ）疾病の素因を持ち得るが、それを有するとまだ診断されていない対象において、疾病の発症を防止する段階、（ｂ）疾病を阻害する、すなわち、その進行を阻止する段階、および（ｃ）疾病を緩和する、すなわち、疾病を緩解させる段階。
【００５０】
本明細書中、互換的に用いられる用語“個体”、“対象”、“宿主”および“患者”は、マウス（ラット、マウス）、非ヒト哺乳動物、ヒト、イヌ科、ネコ科、有蹄動物（例えば、ウマ、ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ）などを含むがこれらに限定されない哺乳動物を意味する。
【００５１】
“治療的有効量”または“有効量”は、疾患の処置のために哺乳動物または他の対象に投与されるとき、疾患のそのような処置に有効である十分量、抗Ｔａｕ抗体の量を意味する。“治療的有効量”は、抗Ｔａｕ抗体、疾患およびその重篤度ならびに処置される対象の年齢、体重などによって変わり得る。
【００５２】
本明細書で用いる用語“固定用量”、“均一な用量”および“均一な固定用量”は、互換的に用いられ、患者の体重および体表面積（ＢＳＡ）に関係なく該患者に投与される用量を意味する。従って、固定用量または均一な用量は、体重１ｋｇ当たりのｍｇとしてではなく、むしろ薬剤(例えば、抗Ｔａｕ抗体)の絶対量として提供される。
【００５３】
本明細書で用いる“体表面積（ＢＳＡ）に基づく用量”は、個々の患者の体表面積（ＢＳＡ）に対して調整される、(例えば、抗Ｔａｕ抗体)の用量を意味する。ＢＳＡに基づく用量は、体重１ｋｇ当たりのｍｇとして提供され得る。種々の計算が、直接計測することなくＢＳＡに達するために公開されており、そのうち最も広く使用されているのが、デュ・ボアの式(Du Bois D, Du Bois EF (Jun 1916) Archives of Internal Medicine 17 (6): 863-71; および、 Verbraecken, J. et al. (Apr 2006)。Metabolism - Clinical and Experimental 55 (4): 515-24)である。他の例示的なＢＳＡ式には、モステラー式(Mosteller RD. N Engl J Med., 1987; 317:1098)、ヘイコック式(Haycock GB, et al., J Pediatr 1978, 93:62-66)、ゲーハン（Gehan）およびジョージの式 (Gehan EA, George SL, Cancer Chemother Rep 1970, 54:225-235)、ボイド式(Current, JD (1998), The Internet Journal of Anesthesiology 2 (2);および、Boyd, Edith (1935), University of Minnesota. The Institute of Child Welfare, Monograph Series, No. x. London: Oxford University Press)、藤本式 (Fujimoto S, et al., Nippon Eiseigaku Zasshi 1968;5:443-50)、高平式 (Fujimoto S, et al., Nippon Eiseigaku Zasshi 1968;5:443-50)、およびシュリック式(Schlich E, et al., Ernauhrungs Umschau 2010;57:178-183)が含まれる。
【００５４】
“生物学的サンプル”は、個体から得られる種々のサンプルタイプを包含し、診断またはモニタリングアッセイで使用され得る。定義は、生物学的起源の血液および他の液状サンプル、生検標本または組織培養物もしくはそれらに由来する細胞およびその子孫細胞のような固体組織サンプルを包含する。定義はまた、それらを入手後に何れかの方法、例えば、試薬での処理、可溶化、またはポリヌクレオチドのようなある成分の富化により、操作されたサンプルを包含する。用語“生物学的サンプル”は、臨床サンプルを包含し、また、培養細胞、細胞上清、細胞溶解物、血清、血漿、生物学的液体、および組織サンプルを包含する。用語“生物学的サンプル”は、尿、唾液、脳脊髄液、血漿および血清のような血液画分などを含む。
【００５５】
本明細書で用いる用語“急性タウオパチー”は、対象の細胞外液 (例えば、脳脊髄液 (ＣＳＦ)、間質液(ＩＳＦ)、血液、または血液画分 (例えば、血清または血漿のような血液画分)中の異常に上昇した (例えば、正常の、対照レベルのＴａｕと比較して上昇した) Ｔａｕ、例えば、対象の脳および／または中枢神経系の関連組織に対する物理的な暴行による傷害後の細胞外液中の上昇したＴａｕの突然の発症に関連する疾患、障害または病状を意味する。かかる傷害の後には、一般的に、比較的短期間の、例えば数週間または数ヶ月（またはより短い期間）以内の、細胞外液(例えば、ＣＳＦ、ＩＳＦ、血液および／または血液画分(例えば、血漿))中のＴａｕの上昇がある。かかる傷害の例には、物理的外傷(例えば、頭部損傷) および卒中が含まれるが、これに限定されない。急性タウオパチーの非限定的な例としては、卒中、慢性外傷性脳症、外傷性脳損傷、脳震盪、発作、癲癇(例えば、ドラベ症候群 (乳児の重症ミオクロニー癲癇(SMEI)としても知られている)、および急性鉛毒性脳症がある。
【００５６】
用語“外傷性脳損傷”(“ＴＢＩ”としても知られている)は、外傷が脳に損傷を起こした時に生じる、後天性の脳損傷の形態 (例えば、外的な力により引き起こされる脳への損傷)である。例えば、ＴＢＩは、頭部を突然激しく物に打ち付けたとき (例えば、落下時、自動車事故、スポーツイベント、または任意の数の異なる方法)、または物が頭蓋骨を貫通し、脳組織へ到達したときに、生じ得る。両タイプのＴＢＩが原因で、脳組織の打撲、脳内の出血、脳の大きなまたは小さな裂傷、および／または剪断力による神経損傷が引き起こされ得る。脳はまた、多数の二次性の損傷、例えば腫れ、発熱、痙攣、または神経学的化学物質の不均衡などを経験し得る。ＴＢＩの症状は 脳への損傷の程度によって、軽度、中程度または重度であり得る。軽度のＴＢＩを有するヒトは、意識があるか、または数秒もしくは数分間の意識喪失を経験し得る。軽度のＴＢＩの他の症状には、頭痛、混乱、立ちくらみ、めまい、視力障害もしくは疲れ眼、耳鳴り、口の中の不快な味、疲労もしくは無気力、睡眠パターンの変化、行動もしくは気分の変化、および記憶、集中、注意もしくは思考のトラブルが含まれる。中程度または重度のＴＢＩを有するヒトは、これらの同じ症状を示し得るが、悪化したか、もしくは治まらない頭痛、繰り返す嘔吐もしくは悪心、痙攣もしくは発作、睡眠からの覚醒不能、一方もしくは両方の瞳孔の散大、不明瞭な発語（slurred speech）、四肢の筋力低下またはしびれ、協調性の喪失、および増加した混乱、落ち着きのなさ、または動揺などを有していてよい。ＴＢＩの例としては、びまん性軸索損傷、脳震盪、挫傷、真撃−反衝損傷（Coup-Contrecoup injury)、セカンドインパクト症候群、穿通損傷、乳幼児揺さぶられ症候群、および閉じ込め症候群が含まれるが、これらに限定されない。
【００５７】
本明細書で用いる“慢性タウオパチー”は、一般的に、対象の細胞外液中の上昇したＴａｕ、例えば、比較的長期間、例えば数十年間の、細胞外液 (例えば、ＣＳＦ、ＩＳＦ、血液、および／または血液画分 (例えば、血漿))中のＴａｕの蓄積の、漸進的発症に関連する状態を意味する。慢性タウオパチーには、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン型認知症複合、好銀顆粒性認知症、英国型アミロイド血管症、大脳アミロイド血管症、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルト・ヤコブ病、ボクサー認知症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、ダウン症候群、前頭側頭骨性認知症(FTD)、１７番染色体に関連するパーキンソン症状がみられる前頭側頭骨性認知症、前頭側頭葉変性症、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、ハラーフォルデン−シュパッツ疾患、封入体筋炎、多系統萎縮症、筋緊張性ジストロフィー、ニーマン・ピック病Ｃ型、神経原線維変化を伴う非グアマニアン(non-Guamanian)運動神経疾患、ピック病、脳炎後のパーキンソン症状、プリオンタンパク質脳アミロイドアンギオパチー、進行性皮質下神経膠症、進行性核上非性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型老年認知症、および多発梗塞性認知症が含まれるが、これらに限定される必要はない。
【００５８】
本発明をさらに記載する前に、本発明は、ここに記載される特定の態様に限定されるべきものではなく、言うまでもなくその態様が変更されていてもよいことが理解されるべきである。また、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によってのみ限定され得るものであるため、本明細書で用いる用語は、特定の態様のみを記載する目的で使用されており、本発明の範囲を限定する意図を有していないことが理解されるべきである。
【００５９】
数値の範囲が記載されるているとき、他に明確にこれと異なる記載がなされない限り、下限の単位の、各１０分の１まで、その範囲の上限と下限の間の各中間値、および所定範囲内の任意の他の記載値または中間値は、本発明に包含される。これらのより小さい範囲の上限および下限は、その小さい範囲に独立して包含され得て、また、本発明の範囲内に包含されても、所定の範囲から除外されてもよい。所定の範囲が、限界の一方または両方を包含するとき、それが包含される限界の一方または両方を除外する範囲もまた、本発明に包含される。
【００６０】
他に特記されない限り、本明細書に用いる全ての技術用語および科学用語は、本発明の属する技術分野の当業者に通常理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に記載の方法および物質と同様のまたは均等な方法および物質もまた、本発明の実施または試験に使用され得るが、好ましい方法および物質が本明細書中に記載される。本明細書に記載の全ての文献は、引用により、その文献が引用される事柄に関する方法および／または物質についての開示および記載が本明細書中に包含される。
【００６１】
本明細書中、他に明確に記載がない限り、本明細書中および添付の特許請求の範囲における単数表記は、複数の意味を含むことが注意されるべきである。従って、例えば、単数で記載された抗Ｔａｕ抗体は、複数のそのような抗Ｔａｕ抗体を包含し、タウオパチーという記載は、１種またはそれ以上のタウオパチーおよび当業者に知られているそれらと同等の疾患が包含される。さらに、特許請求の範囲は、何か任意の要素を除くように記載され得ることが注意される。そのような場合、この記載は、だけ、のみなどの排他的用語の使用および特許請求の範囲の要素の記載に関して同様の使用、または否定的な限定の使用に対する先行記載となることが意図される。
【００６２】
明確にするために、本明細書中、別個の態様で記載される本発明の一定の特徴はまた、単一の態様の組み合わせで提示され得る。逆に、簡単にするために、一態様で記載される本発明の種々の特徴はまた、別個に、または任意の好適な下位の組み合わせで提示され得る。全ての本発明に関する態様の組み合わせは、特に本発明に包含され、各々のおよび全ての組み合わせが、個々に、そして明確に記載されているように、本明細書に記載される。さらに、種々の態様およびその要素の全ての下位の組み合わせもまた、本発明に特に包含され、各々のおよび全てのかかる下位の組み合わせが、個々に、および明確に記載されているように、本明細書に含まれる。
【００６３】
本明細書に記載の文献は、本出願の出願日前にそれらの開示内容を単に提供するにすぎない。それらの何れも、本発明が、先行発明として、かかる文献に先行しないと認めるとの認識と解されるべきではない。さらに、提供される文献の出版日は、実際の出版日とは異なり得るので、個々に確認される必要がある。
【００６４】
詳細な説明
本発明は、個体におけるタウオパチーの処置のための方法を提供する。
【００６５】
タウオパチーの処置法
本発明は、タウオパチー、例えば、急性タウオパチーの処置法を提供する。この方法は、一般的に、有効量の抗Ｔａｕ抗体、または抗Ｔａｕ抗体を含む医薬組成物を、それを必要とする個体に投与することを含む。ある態様において、抗Ｔａｕ抗体は、ＴａｕのＮ末端領域内のエピトープに特異的に結合する。ある態様において、抗Ｔａｕ抗体は、細胞外Ｔａｕ (ｅＴａｕ) のＮ末端領域内のエピトープに特異的に結合する。ある態様において、抗体はヒト化されている。ある態様において、細胞外液は、脳脊髄液（ＣＳＦ)、間質液（ＩＳＦ）、血液、または血液画分 (例えば、血清または血漿のような血液画分)である。ある態様において、タウオパチーは、急性タウオパチーであり、例えば、卒中、慢性外傷性脳症、外傷性脳損傷、脳震盪、発作、癲癇(例えば、ドラベ症候群 (乳児の重症ミオクロニー癲癇(SMEI)としても知られる)、および急性鉛毒性脳症である。Gheyaraらにより記載される通り、Ｔａｕの減少は、ドラベ症候群および他の難治性の遺伝性てんかんに治療上有益であり得る (Ann Neurol. 2014 Sep;76(3):443-56)。従って、本明細書に記載の方法は、例えば、癲癇 (例えば、ドラベ症候群)を含む、任意の急性タウオパチーを処置するのに有用であり得る。
【００６６】
ある態様において、遊離Ｔａｕレベルが低減される。“遊離Ｔａｕ”とは、抗Ｔａｕ抗体に結合していないＴａｕポリペプチドを意味する。一態様において、遊離Ｔａｕは、細胞外Ｔａｕ (ｅＴａｕ)である。総Ｔａｕには、遊離Ｔａｕおよび抗Ｔａｕ抗体に結合されているＴａｕが含まれる。ある態様において、総Ｔａｕのレベルが低減される。ある態様において、細胞外液中の結合したＴａｕ (抗Ｔａｕ抗体に結合しているＴａｕ)のレベルが増加する。
【００６７】
本発明は、個体のタウオパチー（例えば、急性タウオパチー）を処置する方法、個体の細胞外液 (例えば、ＣＳＦ、ＩＳＦ、血液、または血液画分 (例えば、血清または血漿))中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含む方法を提供する。いくつかの態様において、Ｔａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルは、抗Ｔａｕ抗体の投与後３６時間以内に顕著に低減される。例えば、ある態様において、有効量の抗Ｔａｕ抗体は、抗Ｔａｕ抗体の投与後４８時間以内、３６時間以内、２４時間以内、１２時間以内、８時間以内、４時間以内、２時間以内、１時間以内、３０分以内、１５分以内または５分以内に、細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルを顕著に低減するのに有効な量である。例えば、ある態様において、有効量の抗Ｔａｕ抗体は、５分から約１０分、約１０分から約１５分、約１５分から約３０分、約３０分から約１時間、約１時間から約２時間、約２時間から約４時間、約４時間から約８時間、約８時間から約１２時間、約１２時間から約２４時間、約２４時間から約３６時間、約２４時間から約４８時間、または約３６時間から約４８時間以内に、細胞外液中のＴａｕ(例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルを顕著に低減させるのに有効な量である。
【００６８】
個体の細胞外液 (例えば、ＣＳＦ、ＩＳＦ、血液、または血液画分 (例えば、血清または血漿))中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルの顕著な低減とは、少なくとも１０％の減少、少なくとも１５％の減少、少なくとも２０％の減少、少なくとも２５％の減少、少なくとも３０％の減少、少なくとも４０％の減少、少なくとも４５％の減少、少なくとも５０％の減少、少なくとも７５％の減少、少なくとも８０％の減少、少なくとも８５％の減少、少なくとも９０％の減少、少なくとも９５％の減少、または９０％以上の減少である。いくつかの態様において、細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルは、正常な、対照レベル(例えば、約１００ｐｇ／ｍｌ)まで低減される。いくつかの態様において、細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルは、検出不可能なレベルに低減される。ある態様において、細胞外液はＣＳＦである。他の場合に、細胞外液は間質液(ＩＳＦ)である。他の場合に、細胞外液は血漿である。他の場合に、細胞外液は全血である。他の場合に、細胞外液は血清である。
【００６９】
本発明は、個体におけるタウオパチー(例えば、急性タウオパチー)の処置法を提供する。該方法は、一般的に、個体の細胞外液 (例えば、ＣＳＦ、ＩＳＦ、血液、または血液画分 (例えば、血清または血漿))中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含む。
【００７０】
個体の細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルの顕著な低減とは、少なくとも１０％の減少、少なくとも１５％の減少、少なくとも２０％の減少、少なくとも２５％の減少、少なくとも３０％の減少、少なくとも３５％の減少、少なくとも４０％の減少、少なくとも４５％の減少、少なくとも５０％の減少、少なくとも５５％の減少、少なくとも６０％の減少、少なくとも６５％の減少、少なくとも７０％の減少、少なくとも７５％の減少、少なくとも８０％の減少、少なくとも８５％の減少、少なくとも９０％の減少、少なくとも９５％の減少、または９０％以上の減少である。いくつかの態様において、細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルは、正常な、対照レベル(例えば、約１００ｐｇ／ｍｌ)まで低減される。いくつかの態様において、細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルは、検出不可能なレベルに低減される。ある態様において、細胞外液はＣＳＦである。他の場合に、細胞外液は間質液(ＩＳＦ)である。他の場合に、細胞外液は血漿である。他の場合に、細胞外液は血清である。他の場合に、細胞外液は全血である。
【００７１】
ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)の処置法は、個体の細胞外液 (例えば、ＣＳＦ、ＩＳＦ、血液、または血液画分 (例えば、血清または血漿))中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、該抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルを、抗Ｔａｕ抗体の投与後４８時間以内に顕著に低減するのに有効である。例えば、ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)の処置法は、個体の細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、該抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルを、抗Ｔａｕ抗体の投与後４８時間以内、３６時間以内、２４時間以内、１２時間以内、８時間以内、４時間以内、２時間以内、１時間以内、または３０分以内 (または３０分未満)に顕著に低減するのに有効である。例えば、ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)の処置法は、個体の細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、該抗Ｔａｕ抗体は、細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルを、約１５分から約３０分以内、約３０分から約１時間、約１時間から約２時間、約２時間から約４時間、約４時間から約８時間、約８時間から約１２時間、約１２時間から約２４時間、約２４時間から約３６時間、または約３６時間から約４８時間以内の間、顕著に低減するのに有効である。
【００７２】
ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)の処置法は、個体の細胞外液 (例えば、ＣＳＦ、ＩＳＦ、血液、または血液画分 (例えば、血清または血漿))中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、該Ｔａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)の低減レベルは、抗Ｔａｕ抗体の投与後、少なくとも２時間に亘って維持される。例えば、ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー) の処置法は、個体の細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を投与することを含み、ここで、Ｔａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)の低減レベルは、該抗Ｔａｕ抗体の投与後、少なくとも２時間、少なくとも４時間、少なくとも８時間、少なくとも１２時間、少なくとも２４時間、少なくとも３６時間、少なくとも４８時間、少なくとも７２時間、少なくとも９６時間、少なくとも１２０時間、少なくとも１４４時間、少なくとも１６８時間、または１６８時間以上に亘って維持される。例えば、ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)の処置法は、個体の細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、Ｔａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)の低減レベルは、約２時間から約４時間、約４時間から約８時間、約８時間から約１２時間、約１２時間から約２４時間、約２４時間から約３６時間、約３６時間から約４８時間、約４８時間から約７２時間、約７２時間から約９６時間、約９６時間から約１２０時間、約１２０時間から約１４４時間、約１４４時間から約１６８時間、または１６８時間以上 (例えば、８日、１０日、１４日、または１４日以上)に亘って維持される。ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)の処置法は、個体の細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、Ｔａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)の低減レベルは、少なくとも７日、少なくとも１０日、少なくとも２週間、または少なくとも４週間に亘って維持される。例えば、ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー) の処置法は、個体の細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、Ｔａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)の低減レベルは、約７日から約１０日、約１０日から約２週間、または約２週間から約４週間、または４週間以上 (例えば、３ヶ月、４ヶ月、６ヶ月、または６ヶ月以上)に亘って維持される。
【００７３】
ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー) の処置法は、個体の細胞外液 (例えば、ＣＳＦ、ＩＳＦ、血液、または血液画分 (例えば、血清または血漿)) 中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、Ｔａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) の低減レベルは、細胞外液 (例えば、ＣＳＦ、ＩＳＦ、血液、または血液画分 (例えば、血清または血漿))中のＡβレベルの低下をもたらす期間に亘って維持される。例えば、いくつかの態様において、細胞外液中のＡベータ (Ａβ)は、抗Ｔａｕ抗体の投与後約１日から約２５日の期間に亘って顕著に低減される。例えば、いくつかの態様において、細胞外液中のＡβレベルは、抗Ｔａｕ抗体の投与後、約１日から約５日、約５日から約１０日、約１０日から約１５日、約１５日から約２０日、または約２０日から約２５日の期間に亘って顕著に低減される。抗Ｔａｕ抗体は、Ａβレベルをある期間に亘って継続的に抑制するために投与され得る。Ａβは、Ａβ４０およびＡβ４２を含む。ある態様において、Ａβ４０レベルが低減される。ある態様において、Ａβ４２レベルが低減される。ある態様において、Ａβ４２およびＡβ４０の両レベルが低減される。Ａβレベルの“顕著な減少”とは、抗Ｔａｕ抗体を投与しないときのＡβレベルと比較して(例えば、抗Ｔａｕ抗体の投与前のＡβレベルと比較して)、Ａβレベルの、少なくとも５％の減少、少なくとも１０％の減少、少なくとも１５％の減少、少なくとも２０％の減少、少なくとも２５％の減少、少なくとも３０％の減少、少なくとも４０％の減少、少なくとも４５％の減少、少なくとも５０％の減少、または５０％以上の減少である。
【００７４】
ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)の処置法は、個体の細胞外液 (例えば、ＣＳＦ、ＩＳＦ、血液、または血液画分 (例えば、血清または血漿)) 中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、細胞外液はＣＳＦである。ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)の処置法は、個体の細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、細胞外液はＩＳＦである。ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー) の処置法は、個体の細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、細胞外液は血漿である。
【００７５】
ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)の処置法は、個体の細胞外液 (例えば、ＣＳＦ、ＩＳＦ、血液、または血液画分 (例えば、血清または血漿))中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、抗Ｔａｕ抗体は、皮下投与により、例えば、皮下注射により投与される。ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)の処置法は、個体の細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、抗Ｔａｕ抗体は髄腔内投与により投与される。ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー) の処置法は、個体の細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、抗Ｔａｕ抗体は、静脈内投与、例えば、静脈内注射により投与される。
【００７６】
ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー) の処置法は、個体の細胞外液 (例えば、ＣＳＦ、ＩＳＦ、血液、または血液画分 (例えば、血清または血漿)) 中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、抗Ｔａｕ抗体は、体重１ｋｇ当たり、約０．１ｍｇから約５０ｍｇの量で投与される。例えば、ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)の処置法は、個体の細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、抗Ｔａｕ抗体は、体重１ｋｇ当たり、約０．１ｍｇから約０．５ｍｇ、約０．５ｍｇから約１ｍｇ、約１ｍｇから約５ｍｇ、約５ｍｇから約１０ｍｇ、約１０ｍｇから約１５ｍｇ、約１５ｍｇから約２０ｍｇ、約２０ｍｇから約２５ｍｇ、約２５ｍｇから約３０ｍｇ、約３０ｍｇから約３５ｍｇ、約３５ｍｇから約４０ｍｇ、約４０ｍｇから約４５ｍｇ、または約４５ｍｇから約５０ｍｇ、または５０ｍｇ以上の量で投与される。
【００７７】
ある態様において、抗Ｔａｕ抗体は、体重１ｋｇ当たり、約０．１ｍｇから約０．５ｍｇ、約０．５ｍｇから約１ｍｇ、約１ｍｇから約５ｍｇ、約５ｍｇから約１０ｍｇ、約１０ｍｇから約１５ｍｇ、約１５ｍｇから約２０ｍｇ、約２０ｍｇから約２５ｍｇ、約２５ｍｇから約３０ｍｇ、約３０ｍｇから約３５ｍｇ、約３５ｍｇから約４０ｍｇ、約４０ｍｇから約４５ｍｇ、または約４５ｍｇから約５０ｍｇ、または５０ｍｇ以上の量で投与され、そして該抗Ｔａｕ抗体は単回用量で投与される。
【００７８】
ある態様において、抗Ｔａｕ抗体は、体重１ｋｇ当たり、約０．１ｍｇから約０．５ｍｇ、約０．５ｍｇから約１ｍｇ、約１ｍｇから約５ｍｇ、約５ｍｇから約１０ｍｇ、約１０ｍｇから約１５ｍｇ、約１５ｍｇから約２０ｍｇ、約２０ｍｇから約２５ｍｇ、約２５ｍｇから約３０ｍｇ、約３０ｍｇから約３５ｍｇ、約３５ｍｇから約４０ｍｇ、約４０ｍｇから約４５ｍｇ、または約４５ｍｇから約５０ｍｇ、または５０ｍ以上の量で投与され、そして該抗Ｔａｕ抗体は、多数回 (２回またはそれ以上) の用量で投与される。
【００７９】
ある態様において、抗Ｔａｕ抗体は、体重１ｋｇ当たり、約０．１ｍｇから約０．５ｍｇ、約０．５ｍｇから約１ｍｇ、約１ｍｇから約５ｍｇ、約５ｍｇから約１０ｍｇ、約１０ｍｇから約１５ｍｇ、約１５ｍｇから約２０ｍｇ、約２０ｍｇから約２５ｍｇ、約２５ｍｇから約３０ｍｇ、約３０ｍｇから約３５ｍｇ、約３５ｍｇから約４０ｍｇ、約４０ｍｇから約４５ｍｇ、または約４５ｍｇから約５０ｍｇ、または５０ｍｇ以上の量で投与され、そして該抗Ｔａｕ抗体は、多数回用量で投与され、例えば、抗Ｔａｕ抗体は、１時間に１回、２時間に１回、３時間に１回、４時間に１回、５時間に１回、６時間に１回、７時間に１回、８時間に１回、９時間に１回、１０時間に１回、１２時間に１回、２４時間に１回、４８時間に１回、３日に１回、４日に１回、５日に１回、６日に１回、７日に１回、２週間に１回、１ヶ月に１回、２ヶ月に１回、４ヶ月に１回、６ヶ月に１回、または１年に１回投与される。
【００８０】
ある態様において、抗Ｔａｕ抗体は、体重１ｋｇ当たり、約０．１ｍｇから約０．５ｍｇ、約０．５ｍｇから約１ｍｇ、約１ｍｇから約５ｍｇ、約５ｍｇから約１０ｍｇ、約１０ｍｇから約１５ｍｇ、約１５ｍｇから約２０ｍｇ、約２０ｍｇから約２５ｍｇ、約２５ｍｇから約３０ｍｇ、約３０ｍｇから約３５ｍｇ、約３５ｍｇから約４０ｍｇ、約４０ｍｇから約４５ｍｇ、または約４５ｍｇから約５０ｍｇ、または５０ｍｇ以上の量で投与され、そして該抗Ｔａｕ抗体は多数回用量で投与され、例えば、抗Ｔａｕ抗体の初回用量は、上昇したＴａｕレベルをもたらす対象の脳および／または中枢神経系の関連組織への物理的攪乱に起因する損傷の、３０分以内、１時間以内、２時間以内、４時間以内、８時間以内、１２時間以内、２４時間以内、２日以内、４日以内、１週間以内、２週間以内、４週間以内、または２ヶ月以内に投与され、そして抗Ｔａｕ抗体のその後の用量は、抗Ｔａｕ抗体の初回用量の投与後、約１時間から約１年もしくはそれ以上(例えば、約１時間から約４時間、約４時間から約８時間、約８時間から約１２時間、約１２時間から約２４時間、約２４時間から約２日、約２日から約４日、約４日から約７日、約１週間から約２週間、約２週間から約４週間、約４週間から約２ヶ月、約２ヶ月から約４ヶ月、約４ヶ月から約６ヶ月、約６ヶ月から約１年、または１年以上)の時点で投与される。
【００８１】
ある態様において、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)の処置法は、個体の細胞外液 (例えば、ＣＳＦ、ＩＳＦ、血液、または血液画分 (例えば、血清または血漿)) 中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、抗Ｔａｕ抗体は、単回のボーラス注射で投与される。
【００８２】
他の場合に、本発明のタウオパチー (例えば、急性タウオパチー) の処置法は、個体の細胞外液 (例えば、ＣＳＦ、ＩＳＦ、血液、または血液画分 (例えば、血清または血漿)) 中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、抗Ｔａｕ抗体は、多数回用量 (例えば、２、３、４、５、またはそれ以上の用量)で投与される。多数回用量が投与されるとき、投与間隔は、１時間毎、２時間毎、３時間毎、４時間毎、５時間毎、６時間毎、７時間毎、８時間毎、９時間毎、１０時間毎、１２時間毎、２４時間毎、４８時間毎、３日毎、４日毎、５日毎、６日毎、７日毎などであり得る。
【００８３】
本発明は、個体におけるタウオパチー (例えば、急性タウオパチー) の処置法を提供し、ここで、該方法は、個体の脳脊髄液 (ＣＳＦ)中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度を提供するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含む。ある態様において、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度は、抗Ｔａｕ抗体の投与の３０分以内に達成される。ある態様において、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度は、抗Ｔａｕ抗体の投与の１時間以内に達成される。ある態様において、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度は、抗Ｔａｕ抗体の投与の、４８時間以内、３６時間以内、２４時間以内、１２時間以内、８時間以内、４時間以内、２時間以内、１時間以内、または３０分以内 (または３０分未満)で達成される。ある態様において、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度は、約１５分から約３０分、約３０分から約１時間、約１時間から約２時間、約２時間から約４時間、約４時間から約８時間、約８時間から約１２時間、約１２時間から約２４時間、約２４時間から約３６時間、または約３６時間から約４８時間の時間内に達成される。
【００８４】
ある態様において、個体においてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー) を処置するための本発明の方法は、個体のＣＳＦにおいて抗Ｔａｕ抗体の最小濃度を提供するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度は、少なくとも２０ｎｇ／ｍｌである。例えば、ある態様において、個体においてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー) を処置するための本発明の方法は、個体のＣＳＦにおいて抗Ｔａｕ抗体の最小濃度を提供するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度は、少なくとも２０ｎｇ／ｍｌ、少なくとも２５ｎｇ／ｍｌ、少なくとも３０ｎｇ／ｍｌ、少なくとも４０ｎｇ／ｍｌ、少なくとも５０ｎｇ／ｍｌ、少なくとも６０ｎｇ／ｍｌ、少なくとも７５ｎｇ／ｍｌ少なくとも１００ｎｇ／ｍｌ、少なくとも１２５ｎｇ／ｍｌ、少なくとも１５０ｎｇ／ｍｌ、少なくとも１７５ｎｇ／ｍｌ、少なくとも２００ｎｇ／ｍｌ、少なくとも２５０ｎｇ／ｍｌ、少なくとも３００ｎｇ／ｍｌ、少なくとも３５０ｎｇ／ｍｌ、少なくとも４００ｎｇ／ｍｌ、少なくとも４５０ｎｇ／ｍｌ、少なくとも５００ｎｇ／ｍｌ、少なくとも５５０ｎｇ／ｍｌ、少なくとも６００ｎｇ／ｍｌ、少なくとも６５０ｎｇ／ｍｌ、少なくとも７００ｇ／ｍｌ、少なくとも７５０ｎｇ／ｍｌ、または少なくとも８００ｎｇ／ｍｌである。例えば、ある態様において、個体においてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー) を処置するための本発明の方法は、個体のＣＳＦにおいて抗Ｔａｕ抗体の最小濃度を提供するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度は、約２０ｎｇ／ｍｌから約３０ｎｇ／ｍｌ、約３０ｎｇ／ｍｌから約４０ｎｇ／ｍｌ、約４０ｎｇ／ｍｌから約５０ｎｇ／ｍｌ、約５０ｎｇ／ｍｌから約６０ｎｇ／ｍｌ、約６０ｎｇ／ｍｌから約７５ｎｇ／ｍｌ、約７５ｎｇ／ｍｌから約１００ｎｇ／ｍｌ、約１００ｎｇ／ｍｌから約１５０ｎｇ／ｍｌ、約１５０ｎｇ／ｍｌから約２００ｎｇ／ｍｌ、約２００ｎｇ／ｍｌから約２５０ｎｇ／ｍｌ、約２５０ｎｇ／ｍｌから約３００ｎｇ／ｍｌ、約３００ｎｇ／ｍｌから約３５０ｎｇ／ｍｌ、約３５０ｎｇ／ｍｌから約４００ｎｇ／ｍｌ、約４００ｎｇ／ｍｌから約４５０ｎｇ／ｍｌ、約４５０ｎｇ／ｍｌから約５００ｎｇ／ｍｌ、約５００ｎｇ／ｍｌから約５５０ｎｇ／ｍｌ、約５５０ｎｇ／ｍｌから約６００ｎｇ／ｍｌ、約６００ｎｇ／ｍｌから約７００ｎｇ／ｍｌ、約７００ｎｇ／ｍｌから約８００ｎｇ／ｍｌ、または８００ｎｇ／ｍｌ以上である。
【００８５】
ある態様において、個体においてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー) を処置するための本発明の方法は、個体のＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度を提供するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度は、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体：Ｔａｕのモル比が少なくとも２：１である。例えば、ある態様において、個体においてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置するための本発明の方法は、個体のＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度を提供するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度は、ＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体：Ｔａｕのモル比が、少なくとも２：１、少なくとも２．５：１、少なくとも３：１、少なくとも３．５：１、少なくとも４：１、少なくとも４．５：１、少なくとも５：１、少なくとも６：１、少なくとも７：１、少なくとも８：１、少なくとも９：１、または少なくとも１０：１である。
【００８６】
ある態様において、タウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置するための本発明の方法は、個体のＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度を提供するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、急性タウオパチーは外傷性脳損傷である。ある態様において、タウオパチー (例えば、急性タウオパチー) を処置するための本発明の方法は、個体のＣＳＦ中の抗Ｔａｕ抗体の最小濃度を提供するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含み、ここで、急性タウオパチーは卒中である。
【００８７】
本発明は、個体における外傷性脳損傷(ＴＢＩ) の処置法を提供し、該方法は、一般的に、個体の細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ) のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含む。ある態様において、抗体は、外傷性脳損傷の４８時間以内に投与される。ある態様において、抗体は、ＴＢＩの４８時間以内、３６時間以内、２４時間以内、１２時間以内、８時間以内、４時間以内、２時間以内、１時間以内、または３０分以内 (または、３０分未満)に投与される。
【００８８】
本発明は、個体における卒中の処置法を提供し、該方法は、一般的に、個体の細胞外液中のＴａｕ (例えば、総Ｔａｕおよび／または遊離Ｔａｕ)のレベルを顕著に低減するのに有効な量で抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含む。ある態様において、抗体は、卒中の４８時間以内に投与される。ある態様において、抗体は、卒中の４８時間以内、３６時間以内、２４時間以内、１２時間以内、８時間以内、４時間以内、２時間以内、１時間以内、または３０分以内 (または、３０分未満)に投与される。
【００８９】
細胞外液中の抗ｅＴａｕ 抗体に結合していない遊離Ｔａｕ、例えば、遊離細胞外Ｔａｕ (ｅＴａｕ)の量を、以下の通りに決定することができる。遊離Ｔａｕの量は、ａ）固定化抗体を個体から得られた細胞外液 (例えば、ＣＳＦ、ＩＳＦ、血清、血液または血漿) のサンプルと接触させ（ここで、固定化抗体は、個体に投与された抗ｅＴａｕ抗体とｅＴａｕへの結合について競合し、接触は、固定化抗体への結合していないｅＴａｕの結合に適する条件下で行う。）、そしてｂ）固定化抗体に結合したｅＴａｕの量を決定することを含む方法により決定され得る。固定化抗体に結合したｅＴａｕの量は、サンプル中の抗Ｔａｕ抗体に結合していないｅＴａｕの量の指標である。ある態様において、固定化抗体に結合したｅＴａｕの量は、抗体ｅＴａｕへの結合について固定化抗体と競合しない、検出可能に標識された第三の抗体を用いて決定される。
【００９０】
抗体
本発明での使用に適する抗Ｔａｕ抗体 (または、ＶＨ/ＶＬドメインもしくはそれに由来するＣＤＲ)は、当技術分野で周知の方法を用いて作製することができる。あるいは、当技術分野において承認されている抗Ｔａｕ抗体を使用可能である。同じエピトープに結合する抗体および／またはＴａｕへの結合についてこれらの当技術分野において承認されている抗体のいずれかと競合する抗体もまた、使用可能である。
【００９１】
抗Ｔａｕ抗体の一例は、配列番号３７および４１にそれぞれ示される配列を有する重鎖および軽鎖を含むhu-IPN002 (IPN007およびIPN002 変異体2としても知られる)、またはその抗原結合フラグメントおよび変異体である。hu-IPN002は、細胞外Ｔａｕに結合するヒト化免疫グロブリン (IgG4) モノクローナル抗体である。
【００９２】
他の態様では、抗体は、hu-IPN002の重鎖および軽鎖ＣＤＲまたは可変領域を含む。従って、一態様において、抗体は、配列番号３７に記載される配列を有するhu-IPN002のＶＨ領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメイン、ならびに配列番号４１に記載される配列を有するhu-IPN002のＶＬ領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメインを含む。別の態様において、抗体は、配列番号１０、１１および１２にそれぞれ記載される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメイン、ならびに配列番号７、８および９にそれぞれ記載される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメインを含む。別の態様において、抗体は、配列番号３７および／または配列番号４１にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を有するＶＨおよび／またはＶＬ領域を含む。別の態様において、抗体は、配列番号２９および／または配列番号３３にそれぞれ記載される核酸によりコード化される重鎖可変 (ＶＨ)および／または軽鎖可変 (ＶＬ) 領域を含む。 別の態様において、抗体は、上記の抗体と結合について競合し、および／または上記の抗体と同じＴａｕ上のエピトープに結合する。別の態様において、抗体は、上記の抗体と少なくとも約９０％の可変領域アミノ酸配列同一性 (例えば、配列番号３７または配列番号４１と少なくとも約９０％、９５％または９９％の可変領域の同一性)を有する。
【００９３】
一態様において、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、そしてタウオパチー(例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適する抗体は、Ｔａｕのアミノ酸２−１７６内、例えば、Ｔａｕのアミノ酸２−１５、アミノ酸１５−２４、アミノ酸２４−５０、アミノ酸２−２５、アミノ酸１５−５０、アミノ酸５０−７５、アミノ酸４０−６０、アミノ酸７５−１００、アミノ酸６０−８０、アミノ酸１００−１２５、アミノ酸８０−１１５、アミノ酸１２５−１５０、アミノ酸１１５−１４０、アミノ酸１５０−１７６、またはアミノ酸１４０−１６０内の、Ｔａｕのエピトープに結合する抗体である。例示的Ｔａｕポリペプチドを図９に示す。個体におけるタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置するのに適する抗体は、図９に示されるＴａｕポリペプチド中のエピトープに特異的に結合するヒト化抗体であり得る。図２１は、ｅＴａｕポリペプチドの例を示す。個体におけるタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)の処置に適する抗体は、図２１に示すＴａｕポリペプチド中のエピトープに特異的に結合するヒト化抗体であり得る。
【００９４】
ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、そしてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適するヒト化抗体は、Ｔａｕのアミノ酸２−１７６内、例えば、Ｔａｕのアミノ酸２−１５、アミノ酸１５−２４、アミノ酸２４−５０、アミノ酸２−２５、アミノ酸１５−５０、アミノ酸５０−７５、アミノ酸４０−６０、アミノ酸７５−１００、アミノ酸６０−８０、アミノ酸１００−１２５、アミノ酸８０−１１５、アミノ酸１２５−１５０、アミノ酸１１５−１４０、アミノ酸１５０−１７６、またはアミノ酸１４０−１６０内の、Ｔａｕのエピトープに結合するヒト化抗体である。例示的Ｔａｕポリペプチドを図９に示す。ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、そしてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適する抗体は、図９に示されるＴａｕポリペプチド中のエピトープに特異的に結合するヒト化抗体であり得る。
【００９５】
ある態様において、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、そしてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適する抗体は、Ｔａｕのアミノ酸１５−２４内のエピトープに結合するヒト化抗Ｔａｕ抗体である。
【００９６】
ある態様において、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、そしてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適する抗体は、Ｔａｕのアミノ酸１−１５８内、例えば、Ｔａｕのアミノ酸１−１５、アミノ酸７−１３、アミノ酸２−１８、アミノ酸１５−２４、アミノ酸１９−４６、アミノ酸２４−５０、アミノ酸２−２５、アミノ酸２５−３０、アミノ酸１５−５０、アミノ酸２８−１２６、アミノ酸５０−７５、アミノ酸４０−６０、アミノ酸７５−１００、アミノ酸６０−８０、アミノ酸１００−１２５、アミノ酸８０−１１５、アミノ酸１２５−１５０、アミノ酸１１５−１４０、またはアミノ酸１５０−１５８内の、Ｔａｕのエピトープに結合する抗体である（ここで、アミノ酸の番号付けは、２Ｎ４Ｒ Ｔａｕのアミノ酸番号に基づく。例えば、図９に記載の通り。）。ある態様において、抗体はヒト化されている。
【００９７】
ある態様において、本発明は、抗Ｔａｕ抗体を投与することによりタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置することを含み、ここで、該抗体が結合するエピトープにはＴａｕのアミノ酸１−１５８内のアミノ酸残基が含まれ、該アミノ酸番号は図９に記載の２Ｎ４Ｒ Ｔａｕアミノ酸配列に基づく。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体はＴａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは、Ｔａｕのアミノ酸２−１８内のアミノ酸残基を含む。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体はＴａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは線形エピトープであり、該抗体が結合するエピトープは、Ｔａｕのアミノ酸２−６８内のアミノ酸残基を含む。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、配列番号７１に記載のアミノ酸配列に少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するＴａｕ４ポリペプチドに特異的に結合する。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、Ｔａｕポリペプチド内の線形エピトープに特異的に結合し、ここで、該エピトープは、Ｔａｕのアミノ酸２−６８内にある。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、Ｔａｕポリペプチド内の線形エピトープに特異的に結合し、ここで、該エピトープは、Ｔａｕのアミノ酸１５−２４内にある。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、Ｔａｕに特異的に結合し、該抗体が結合するエピトープは、Ｔａｕのアミノ酸７−１３内のアミノ酸残基、例えば、アミノ酸ＥＦＥＶＭＥＤ（配列番号２１）を含む。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体はＴａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは、Ｔａｕのアミノ酸２５−３０内のアミノ酸残基、例えば、アミノ酸ＤＱＧＧＹＴ（配列番号２２）を含む。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体はＴａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは、Ｔａｕのアミノ酸２８−１２６内のアミノ酸残基を含み、該アミノ酸番号は、図９に記載の２Ｎ４Ｒ Ｔａｕアミノ酸配列に基づく。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体はＴａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは、Ｔａｕのアミノ酸１５０−１５８内のアミノ酸残基を含み、アミノ酸番号は、図９に記載の２Ｎ４Ｒ Ｔａｕアミノ酸配列に基づく。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体はＴａｕに特異的に結合し、該抗体が結合するエピトープは、Ｔａｕのアミノ酸１９−４６内のアミノ酸残基を含み、アミノ酸番号は、図９に記載の２Ｎ４Ｒ Ｔａｕアミノ酸配列に基づく。
【００９８】
ある態様において、本発明の方法は、細胞外Ｔａｕ (ｅＴａｕ) に特異的に結合する抗体を投与することによりタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置することを含み、ここで、該抗体が結合するエピトープにはＴａｕのアミノ酸１−１５８内のアミノ酸残基が含まれ、該アミノ酸番号は図９に記載の２Ｎ４Ｒ Ｔａｕアミノ酸配列に基づく。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体はｅＴａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは、ｅＴａｕのアミノ酸２−１８内のアミノ酸残基を含む。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体はｅＴａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは線形エピトープであり、該抗体が結合するエピトープは、ｅＴａｕのアミノ酸２−６８内のアミノ酸残基を含む。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、配列番号７１に記載のアミノ酸配列に少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するｅＴａｕ４ポリペプチドに特異的に結合する。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、ｅＴａｕ４ポリペプチド内の線形エピトープに特異的に結合し、ここで、該エピトープは、ｅＴａｕ４のアミノ酸２−６８内にある。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、ｅＴａｕ４ポリペプチド内の線形エピトープに特異的に結合し、ここで、該エピトープは、ｅＴａｕ４のアミノ酸１５−２４内にある。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体は、ｅＴａｕに特異的に結合し、該抗体が結合するエピトープは、ｅＴａｕのアミノ酸７−１３内のアミノ酸残基、例えば、アミノ酸ＥＦＥＶＭＥＤ（配列番号２１）を含む。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体はｅＴａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは、ｅＴａｕのアミノ酸２５−３０内のアミノ酸残基、例えば、アミノ酸ＤＱＧＧＹＴ（配列番号２２）を含む。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体はｅＴａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは、ｅＴａｕのアミノ酸２８−１２６内のアミノ酸残基を含み、該アミノ酸番号は、図９に記載の２Ｎ４Ｒ Ｔａｕアミノ酸配列に基づく。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体はｅＴａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは、ｅＴａｕのアミノ酸１５０−１５８内のアミノ酸残基を含み、アミノ酸番号は、図９に記載の２Ｎ４Ｒ Ｔａｕアミノ酸配列に基づく。ある態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体はｅＴａｕに特異的に結合し、該抗体が結合するエピトープは、ｅＴａｕのアミノ酸１９−４６内のアミノ酸残基を含み、アミノ酸番号は、図９に記載の２Ｎ４Ｒ Ｔａｕアミノ酸配列に基づく。
【００９９】
本発明は、個体におけるタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)の処置法を提供する。該方法は、一般的に、ａ）ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合する、有効量の抗体 (例えば、モノクローナル抗体)であって、所望によりヒト化抗体であってもよい抗体、またはｂ）該ヒト化抗体を含む医薬組成物を、該個体に投与することを含む。
【０１００】
Ｔａｕポリペプチド (所望により、ヒト化抗体、例えば、モノクローナル抗体)のＮ末端領域に結合し、そしてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適する抗体は、Ｔａｕのアミノ酸１−１５８内、例えば、Ｔａｕのアミノ酸１−１５、アミノ酸７−１３、アミノ酸２−１８、アミノ酸１５−２４、アミノ酸１９−４６、アミノ酸２４−５０、アミノ酸２−２５、アミノ酸２５−３０、アミノ酸１５−５０、アミノ酸２８−１２６、アミノ酸５０−７５、アミノ酸４０−６０、アミノ酸７５−１００、アミノ酸６０−８０、アミノ酸１００−１２５、アミノ酸８０−１１５、アミノ酸１２５−１５０、アミノ酸１１５−１４０、またはアミノ酸１５０−１５８内の、Ｔａｕのエピトープに結合する抗体であって、ここで、アミノ酸の番号付けは、例えば、図９に記載の、２Ｎ４Ｒ Ｔａｕのアミノ酸番号に基づく。ある態様において、抗体はヒト化されている。
【０１０１】
ある態様において、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、そしてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適する抗体は、本明細書に記載のヒト化抗Ｔａｕ抗体である。ある態様において、抗体は、Ｔａｕのアミノ酸１５−２４内のエピトープ (例えば、線形エピトープ)に結合するヒト化抗体である。
【０１０２】
ある態様において、個体におけるタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)の処置法は、Ｔａｕに結合するのにＴａｕの２Ｎインサートの存在を必要としない、有効量の抗Ｔａｕ抗体の該個体への投与を伴う。ある態様において、タウオパチーを処置する本発明の方法における使用に適する抗Ｔａｕ抗体により認識されるエピトープは、Ｔａｕの２Ｎインサート内にはない。Ｔａｕの２Ｎインサートは、図９に記載の２Ｎ４Ｒ アミノ酸配列のアミノ酸４５−１０２を含む。
【０１０３】
ある態様において、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、タウオパチー (例えば、急性タウオパチー) を処置する本発明の方法における使用に適する抗Ｔａｕ抗体は、Ｔａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは、Ｔａｕのアミノ酸２−６８内のアミノ酸残基を含む。ある態様において、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、タウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適する抗Ｔａｕ抗体は、細胞外Ｔａｕ（ｅＴａｕ）に特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは、ｅＴａｕのアミノ酸２−６８内のアミノ酸残基を含む。ある態様において、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、タウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適する抗Ｔａｕ抗体は、ｅＴａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは線形エピトープであり、該抗体が結合するエピトープは、ｅＴａｕのアミノ酸２−６８内のアミノ酸残基を含む。ある態様において、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、タウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適する抗Ｔａｕ抗体は、配列番号４８に記載のアミノ酸配列に少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するｅＴａｕ４ポリペプチドに特異的に結合する。ある態様において、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、タウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適する抗Ｔａｕ抗体は、ｅＴａｕ４ポリペプチド内の線形エピトープに特異的に結合し、ここで、該エピトープは、ｅＴａｕ４のアミノ酸２−６８内にある。上記の態様のいずれかにおいて、抗体はヒト化されていてよい。
【０１０４】
ある態様において、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、そしてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適する抗体は、Ｔａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは、Ｔａｕのアミノ酸１−１５８内のアミノ酸残基を含み、ここで、アミノ酸の番号付けは、例えば、図９に記載の、Ｔａｕの２Ｎ４Ｒ形態に基づく。これらの態様のいくつかにおいて、抗体はヒト化されている。これらの態様のいくつかにおいて、エピトープは線形エピトープである。
【０１０５】
ある態様において、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、そしてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適する抗体は、Ｔａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは、Ｔａｕのアミノ酸２−１８内のアミノ酸残基を含み、ここで、アミノ酸の番号付けは、例えば、図９に記載の、Ｔａｕの２Ｎ４Ｒ形態に基づく。これらの態様のいくつかにおいて、抗体はヒト化されている。これらの態様のいくつかにおいて、エピトープは線形エピトープである。
【０１０６】
ある態様において、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、そしてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適する抗体は、Ｔａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは、Ｔａｕのアミノ酸７−１３内のアミノ酸残基を含み、ここで、アミノ酸の番号付けは、例えば、図９に記載の、Ｔａｕの２Ｎ４Ｒ形態に基づく。これらの態様のいくつかにおいて、抗体はヒト化されている。これらの態様のいくつかにおいて、エピトープは線形エピトープである。
【０１０７】
ある態様において、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、そしてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適する抗体は、Ｔａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは、Ｔａｕのアミノ酸２５−３０内のアミノ酸残基を含み、ここで、アミノ酸の番号付けは、例えば、図９に記載の、Ｔａｕの２Ｎ４Ｒ形態に基づく。これらの態様のいくつかにおいて、抗体はヒト化されている。これらの態様のいくつかにおいて、エピトープは線形エピトープである。
【０１０８】
ある態様において、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、そしてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適する抗体は、Ｔａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは、Ｔａｕのアミノ酸２８−１２６内のアミノ酸残基を含み、ここで、アミノ酸の番号付けは、例えば、図９に記載の、Ｔａｕの２Ｎ４Ｒ形態に基づく。これらの態様のいくつかにおいて、抗体はヒト化されている。これらの態様のいくつかにおいて、エピトープは線形エピトープである。
【０１０９】
ある態様において、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域に結合し、そしてタウオパチー (例えば、急性タウオパチー)を処置する本発明の方法における使用に適する抗体は、Ｔａｕに特異的に結合し、ここで、該抗体が結合するエピトープは、Ｔａｕのアミノ酸１５０−１５８内のアミノ酸残基を含み、ここで、アミノ酸の番号付けは、例えば、図９に記載の、Ｔａｕの２Ｎ４Ｒ形態に基づく。これらの態様のいくつかにおいて、抗体はヒト化されている。これらの態様のいくつかにおいて、エピトープは線形エピトープである。
【０１１０】
ある態様において、本明細書に記載の方法における使用に適する抗Ｔａｕ抗体は、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域内のエピトープ (例えば、Ｔａｕのアミノ末端（Ｎ末端）部分内、例えば、Ｔａｕのアミノ酸１−２５内、Ｔａｕのアミノ酸１−１８内、Ｔａｕのアミノ酸９−１８内 (ここで、Ｔａｕのアミノ酸１−１８は、ＭＡＥＰＲＱＥＦＥＶＭＥＤＨＡＧＴＹ；配列番号２３である。)、Ｔａｕのアミノ酸１５−４４内、Ｔａｕのアミノ酸１３−２４内、またはＴａｕのアミノ酸１５−２４内 (ここで、Ｔａｕのアミノ酸１５−２４は、ＡＧＴＹＧＬＧＤＲＫ (配列番号２４)である。) の線形エピトープ)に特異的に結合する抗Ｔａｕ抗体である。ある例において、抗体はヒト化されており、例えば、重鎖可変領域および／または軽鎖可変領域の１つまたはそれ以上のフレームワーク領域は、ヒト免疫グロブリンフレームワークに由来する配列を含む。
【０１１１】
ある態様において、本発明の方法における使用に適するヒト化モノクローナル抗体は、Ｔａｕポリペプチドのアミノ酸１５−２４内のエピトープに特異的に結合する。ある態様において、エピトープは、リン酸化アミノ酸を含まない。ある場合において、エピトープは、ニトロ化アミノ酸を含まない。ある場合において、エピトープはリン酸化アミノ酸、ニトロ化アミノ酸、またはリン酸化アミノ酸およびニトロ化アミノ酸の両方を含む。
【０１１２】
ある態様において、本発明の方法における使用に適する抗体はヒト化されている。フレームワーク領域（複数可）のヒト化は、ヒトにおけるヒト−抗マウス−抗体（ＨＡＭＡ）応答を誘発する抗体の危険性を低減する。免疫応答を決定する当業者に認められる方法は、特定の患者または臨床試験中の患者におけるＨＡＭＡ応答をモニターすることで実行され得る。ヒト化抗体を投与される患者は、治療開始時および投与期間中に免疫原性評価をされ得る。ＨＡＭＡ応答は、例えば、表面プラズモン共鳴技術（ＢＩＡＣＯＲＥ）および／または固相酵素免疫定量法（ＥＬＩＳＡ）分析を含む当業者に知られる方法を用いて、患者からの血清サンプル中、ヒト化治療用薬剤に対する抗体を検出することにより、測定される。多くの場合に、好適なヒト化抗Ｔａｕ抗体は、ヒト対象におけるＨＡＭＡ応答を実質的に誘発しない。ある態様において、好適なヒト化抗Ｔａｕ抗体は、ＣＤ８＋欠失末梢血単核細胞を用いて行われるＥｐｉＳｃｒｅｅｎ（商標）アッセイにより決定されるとおり、免疫原性を低減させた。ある態様において、好適なヒト化抗Ｔａｕ抗体は、２．０未満の刺激指数を示す。
【０１１３】
ヒト可変領域フレームワーク残基由来の任意のアミノ酸は、それらのＣＤＲ立体構造への考えられる影響および／または抗原への結合性に基づいて置換のために選択される。ヒト可変フレームワーク領域を含むマウスＣＤＲ領域の天然では生じない並置は、天然では生じない立体構造制限を生じることがあり、この制限は所定のアミノ酸残基の置換により修正されない限り、結合親和性の損失をもたらす。
【０１１４】
置換されるアミノ酸残基の選択は、１つには、コンピューターモデリングを用いて決定され得る。免疫グロブリン分子の３次元画像を作成するためのコンピューターハードウェアおよびソフトウェアが、当技術分野で知られている。一般的に、分子モデルは、免疫グロブリン鎖またはそのドメインに関する解明された構造から出発して生成される。モデリングされる鎖は、該鎖のアミノ酸配列の、解明された３次元構造の鎖またはドメインとの類似性が比較され、最大の配列類似性を示す鎖またはドメインが、分子モデル構成の出発点として選択される。少なくとも５０％の配列同一性を共有する鎖またはドメインが、モデリングのために選択され、例えば、少なくとも６０％、７０％、８０％、９０％、または９０％以上の配列を共有するものがモデリングのために選択される。解明された出発構造は、モデリングされている免疫グロブリン鎖またはドメイン内の実際のアミノ酸と、出発構造内のアミノ酸との差異を許容するよう修飾される。次いで、修飾構造は、複合体免疫グロブリンに組み立てられる。最終的に、モデルは、エネルギー最小化し、また全ての原子が互いから適切な距離内に存在し、結合の長さと角度とが化学的に許容される限界内にあることを検証することにより精密化される。
【０１１５】
ＣＤＲおよびフレームワーク領域は、Kabatの、Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1987 および 1991)により定義される。別の構造的定義が、Chothiaらの、J. Mol. Biol. 196：901 (1987)；Nature 342：878 (1989)；および、J. Mol. Biol. 186：651 (1989)（まとめて、“Chothia”と言う）により提案されている。上記のKabatに定義されるフレームワーク残基が、上記のChothiaに定義される構造的ループ残基を構成するとき、マウス抗体中に存在するアミノ酸は、ヒト化抗体への置換のために選択され得る。“ＣＤＲ領域に隣接する”残基は、ヒト化免疫グロブリン鎖の一次配列中の１つまたはそれ以上のＣＤＲ、例えば、Kabatにより定義されるＣＤＲ、またはChothiaにより定義されるＣＤＲに直接隣接する位置のアミノ酸残基を含む（例えば、Chothia and Lesk JMB 196：901 (1987)を参照のこと）。これらのアミノ酸は、アクセプターから選択されたとき、特にＣＤＲ内のアミノ酸と相互作用し、ドナーＣＤＲを変形させ、親和性を低減させる。さらに、隣接アミノ酸は、抗原と直接的に相互作用することができ（Amit et al., Science, 233：747 (1986)）、これらのアミノ酸をドナーから選択することは、元々の抗体に親和性を提供する全ての抗原接点を維持するために望ましい。
【０１１６】
本発明の方法における使用に適する抗体は、ヒト化軽鎖フレームワーク領域およびヒト化重鎖フレームワーク領域を含む単離された抗体を提供し、ここで、単離された抗体は、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域内のエピトープへの結合を、ａ）ｉ）配列番号１または配列番号７のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ１、（ｉｉ）配列番号２または配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ２、および（ｉｉｉ）配列番号３または配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ３、を含む軽鎖領域、ならびにｂ）（ｉ）配列番号４または配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ１、（ｉｉ）配列番号５または配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ２、および（ｉｉｉ）配列番号６または配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ３、を含む重鎖領域、を含む抗体と競合する。ある場合において、軽鎖領域および重鎖領域は、別個のポリペプチド中に存在する。他の場合において、軽鎖領域および重鎖領域は、単一のポリペプチド中に存在する。単離された抗体は、アイソタイプＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４の定常領域を含む重鎖を含む。他の場合において、抗体は、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、またはＦａｂ’である。抗体は、共有結合した非ペプチド合成ポリマーを含んでいてよく、例えば、合成ポリマーは、ポリ（エチレングリコール）ポリマーである。ある場合において、単離された抗体は、血液脳関門の通過を促進する担体分子、ペプチドまたはタンパク質に直接またはリンカーを介して結合されている。ある場合において、単離された抗体により結合されるエピトープは、Ｔａｕポリペプチドのアミノ酸１５−２４内である。単離された抗体のヒト化軽鎖フレームワーク領域は、表３に記載の１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個のアミノ酸置換を含み得る。単離された抗体のヒト化重鎖フレームワーク領域は、表２に記載の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２個のアミノ酸置換を含む。
【０１１７】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ａ）ｉ）IPN001抗体の１、２または３個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む軽鎖領域を含み、ここで、該ＣＤＲは、Ｋａｂａｔに定義の通りである（例えば、上記の表１、およびKabat et al., U.S. Dept. of Health and Human Services, “Sequences of proteins of immunological interest” (1991)を参照のこと）。
【０１１８】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ａ）ｉ）IPN001抗体の１、２または３個のＶＬ ＣＤＲ、およびｉｉ）ヒト化軽鎖フレームワーク領域、を含む軽鎖領域、ならびにｂ）ｉ）IPN001抗体の１、２または３個のＶＨ ＣＤＲ、およびｉｉ）ヒト化重鎖フレームワーク領域、を含む重鎖領域を含み、ここで、該ＶＨおよびＶＬ ＣＤＲは、Ｋａｂａｔに定義の通りである（例えば、上記の表１、およびKabat et al., U.S. Dept. of Health and Human Services, “Sequences of proteins of immunological interest” (1991)を参照のこと）。これらの態様のいくつかにおいて、抗Ｔａｕ抗体は、ヒト化ＶＨおよび／またはＶＬ フレームワーク領域を含む。
【０１１９】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ａ）ｉ）IPN001抗体の１、２または３個のＶＬ ＣＤＲ、およびｉｉ）ヒト化軽鎖フレームワーク領域、を含む軽鎖領域、ならびにｂ）ｉ）IPN001抗体の１、２または３個のＶＨ ＣＤＲ、およびｉｉ）ヒト化重鎖フレームワーク領域、を含む重鎖領域を含み、ここで、該ＶＨおよびＶＬ ＣＤＲは、Chothiaに定義の通りである（例えば、上記の表１、およびChothia et al., J. Mol. Biol. 196：901−917 (1987)を参照のこと）。
【０１２０】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ａ）ｉ）IPN002抗体の１、２または３個のＶＬ ＣＤＲ、およびｉｉ）ヒト化軽鎖フレームワーク領域、を含む軽鎖領域、ならびにｂ）ｉ）IPN002抗体の１、２または３個のＶＨ ＣＤＲ、およびｉｉ）ヒト化重鎖フレームワーク領域、を含む重鎖領域を含み、ここで、該ＶＨおよびＶＬ ＣＤＲは、Ｋａｂａｔに定義の通りである（例えば、上記の表１、および Kabat et al., U.S. Dept. of Health and Human Services, “Sequences of proteins of immunological interest” (1991)を参照のこと）。
【０１２１】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ａ）ｉ）IPN002抗体の１、２または３個のＶＬ ＣＤＲ、およびｉｉ）ヒト化軽鎖フレームワーク領域、を含む軽鎖領域、ならびにｂ）ｉ）IPN002抗体の１、２または３個のＶＨ ＣＤＲ、およびｉｉ）ヒト化重鎖フレームワーク領域、を含む重鎖領域を含み、ここで、該ＶＨおよびＶＬ ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａに定義の通りである（例えば、上記の表１、およびChothia et al., J. Mol. Biol. 196：901−917 (1987)を参照のこと）。
【０１２２】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ａ）ｉ）配列番号１、配列番号２、および配列番号３から選択される１、２または３個のＣＤＲ、およびｉｉ）ヒト化軽鎖フレームワーク領域、を含む軽鎖領域、ならびにｂ）ｉ）配列番号４、配列番号５、および配列番号６から選択される１、２または３個のＣＤＲ、およびｉｉ）ヒト化重鎖フレームワーク領域、を含む重鎖領域を含む。
【０１２３】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ａ）ｉ）配列番号７、配列番号８、および配列番号９から選択される１、２または３個のＣＤＲ、およびｉｉ）ヒト化軽鎖フレームワーク領域、を含む軽鎖領域、ならびにｂ）ｉ）配列番号１０、配列番号１１、および配列番号１２から選択される１、２または３個のＣＤＲ、およびｉｉ）ヒト化重鎖フレームワーク領域、を含む重鎖領域を含む。
【０１２４】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ａ）ｉ）配列番号１または配列番号７のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ１、（ｉｉ）配列番号２または配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ２、および（ｉｉｉ）配列番号３または配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ３、および（ｉｖ）ヒト化軽鎖フレームワーク領域、を含む軽鎖領域、ならびにｂ）（ｉ）配列番号４または配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ１、（ｉｉ）配列番号５または配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ２、および（ｉｉｉ）配列番号６または配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ３、およびｉｖ）ヒト化重鎖フレームワーク領域、を含む重鎖領域、を含む。
【０１２５】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、配列番号４、５および６の１つまたはそれ以上から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲの１、２または３個、ならびにヒト化されている１、２、３または４個のＦＲ領域（フレームワーク領域）を含む重鎖可変領域を含む。例えば、ある態様において、好適な抗体は、Ｎ末端からＣ末端まで順番に：ヒト化重鎖ＦＲ１；配列番号４に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；ヒト化重鎖ＦＲ２；配列番号５に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；ヒト化重鎖ＦＲ３；配列番号６に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３；および、ヒト化重鎖ＦＲ４を含む、重鎖可変領域を含む。
【０１２６】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、配列番号１、２および３の１つまたはそれ以上から選択されるポリペプチド配列を有する１、２または３個の軽鎖ＣＤＲ、およびヒト化されている１、２、３または４個のＦＲ領域、を含む軽鎖可変領域を含む。例えば、ある態様において、好適な抗体は、Ｎ末端からＣ末端まで順番に：ヒト化軽鎖ＦＲ１；配列番号１に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；ヒト化軽鎖ＦＲ２；配列番号２に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；ヒト化軽鎖ＦＲ３；配列番号３に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、ならびにヒト化軽鎖ＦＲ４、を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１２７】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、配列番号１０、１１および１２の１つまたはそれ以上から選択されるアミノ酸配列を有する１、２または３個の重鎖ＣＤＲ、ならびに１、２、３または４個のヒト化されているＦＲ領域、を含む重鎖可変領域を含む。例えば、ある態様において、好適な抗体は、Ｎ末端からＣ末端まで順に、ヒト化重鎖ＦＲ１；配列番号１０に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；ヒト化重鎖ＦＲ２；配列番号１１に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；ヒト化重鎖ＦＲ３；配列番号１２に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３；ならびに、ヒト化重鎖ＦＲ４を含む重鎖可変領域を含む。
【０１２８】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、配列番号７、８および９の１つまたはそれ以上から選択されるポリペプチド配列を有する１、２または３個の軽鎖ＣＤＲ；ならびに、１、２、３または４個のヒト化されているＦＲ領域、を含む軽鎖可変領域を含む。例えば、ある態様において、好適な抗体は、Ｎ末端からＣ末端まで順に、ヒト化軽鎖ＦＲ１；配列番号７に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；ヒト化軽鎖ＦＲ２；配列番号８に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；ヒト化軽鎖ＦＲ３；配列番号９に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３；ならびに、ヒト化軽鎖ＦＲ４を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１２９】
IPN001のＶＨおよびＶＬアミノ酸配列は、図１１Ａおよび１１Ｂに記載される。ＣＤＲ（Ｋａｂａｔにより定義される）は、太字および下線で示される。IPN002のＶＨおよびＶＬアミノ酸配列は、図１２Ａおよび１２Ｂに示される。ＣＤＲ（Ｋａｂａｔにより定義される）は、太字および下線で示される。
【０１３０】
配列番号１−１２は、下記の通りである。
ＲＳＳＱＴＩＬＨＳＮＧＮＴＹＬＥ  （配列番号１）；
ＫＶＳＫＲＦＳ  （配列番号２）；
ＦＱＧＳＬＶＰＷＡ  （配列番号３）；
ＳＹＧＭＳ  （配列番号４）；
ＴＩＳＳＳＧＳＲＴＹＦＰＤＳＶＫＧ  （配列番号５）；
ＴＷＤＧＡＭＤＹ  （配列番号６）；
ＫＳＳＱＳＩＶＨＳＮＧＮＴＹＬＥ  （配列番号７）；
ＫＶＳＮＲＦＳ  （配列番号８）；
ＦＱＧＳＬＶＰＷＡ  （配列番号９）；
ＫＹＧＭＳ  （配列番号１０）；
ＴＩＳＳＳＧＳＲＴＹＹＰＤＳＶＫＧ  （配列番号１１）；
ＳＷＤＧＡＭＤＹ  （配列番号１２）。
【０１３１】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、図１１Ｂおよび配列番号１３に記載の配列と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み得る。
【０１３２】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、図１１Ａおよび配列番号１４に記載の配列と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み得る。
【０１３３】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、図１２Ｂおよび配列番号１５に記載の配列と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み得る。
【０１３４】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、図１２Ａおよび配列番号１６に記載の配列と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み得る。
【０１３５】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、図１３に記載の配列（ＶＨ変異体１）と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み得る。
【０１３６】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、図１４に記載の配列（ＶＨ変異体２）と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み得る。
【０１３７】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、図１５に記載の配列（ＶＨ変異体３）と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み得る。
【０１３８】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、図１６に記載の配列（ＶＨ変異体４）と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み得る。
【０１３９】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、図１７に記載の配列（Ｖｋ変異体１）と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み得る。
【０１４０】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、図１８に記載の配列（Ｖｋ変異体２）と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み得る。
【０１４１】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、図１９に記載の配列（Ｖｋ変異体３）と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み得る。
【０１４２】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、図２０に記載の配列（Ｖｋ変異体４）と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み得る。
【０１４３】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、表２に示すIPN002親抗体ＦＲアミノ酸配列と比較して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２個のフレームワーク（ＦＲ）アミノ酸置換を含む重鎖可変領域を含み得る。
【０１４４】
【表２】
0006629201.tif 000003
【０１４５】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ＶＨ  ＦＲ１中のアミノ酸位置３におけるＨ→Ｑ置換および／またはＶＨ  ＦＲ１中のアミノ酸位置１９におけるＫ→Ｒ置換を含む重鎖可変領域を含み得る。
【０１４６】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ＶＨ  ＦＲ２中のアミノ酸位置４０におけるＴ→Ａ置換および／またはＶＨ  ＦＲ２中のアミノ酸位置４２におけるＤ→Ｇ置換および／またはＶＨ  ＦＲ２中のアミノ酸位置４４におけるＲ→Ｇ置換を含む重鎖可変領域を含み得る。
【０１４７】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ＶＨ  ＦＲ３中のアミノ酸位置６６におけるＱ→Ｒ置換および／またはＶＨ  ＦＲ３中のアミノ酸位置８３におけるＳ→Ｎ置換および／またはＶＨ  ＦＲ３中のアミノ酸位置８５におけるＬ→Ｓ置換および／またはＦＲ３中のアミノ酸位置８６におけるＫ→Ｒ置換および／またはＶＨ  ＦＲ３中のアミノ酸位置８７におけるＳ→Ａ置換および／またはＶＨ  ＦＲ３中のアミノ酸位置９３におけるＳ→Ａ置換を含む重鎖可変領域を含み得る。
【０１４８】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ＶＨ  ＦＲ４中のアミノ酸位置１０８におけるＳ→Ｔ置換を含む重鎖可変領域を含み得る。
【０１４９】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、Ｎ末端からＣ末端まで順に、ＥＶＸ１ＬＶＥＳＧＧＡＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＳＦＳ（配列番号２５）；図２Ａに示すＶＨ  ＣＤＲ１；ＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡ（配列番号２６）；図２Ａに示すＶＨ  ＣＤＲ２；ＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＸ２ＳＸ３Ｘ４Ｘ５ＥＤＴＡＭＹＹＣＸ６Ｉ（配列番号２７）；図２Ａに示すＶＨ  ＣＤＲ３；ＷＧＱＧＴＸ７ＶＴＶＳＳ（配列番号４４）（式中、Ｘ１はＨまたはＱであり、Ｘ２はＳまたはＮであり、Ｘ３はＳまたはＬであり、Ｘ４は、ＫまたはＲであり、Ｘ５は、ＳまたはＡであり、Ｘ６はＳまたはＡであり、Ｘ７はＳまたはＴである。）を含むＶＨ領域を含み得る。
【０１５０】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、表３に示す、IPN002親抗体ＦＲアミノ酸配列と比較して、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個のフレームワーク（ＦＲ）アミノ酸置換を含む軽鎖可変領域を含み得る。
【０１５１】
【表３】
0006629201.tif 000004
【０１５２】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ＶＬ  ＦＲ１中のアミノ酸位置３におけるＬ→Ｖ置換および／またはＶＬ  ＦＲ１中のアミノ酸位置７におけるＴ→Ｓ置換および／またはＶＬ  ＦＲ１中のアミノ酸位置１４におけるＳ→Ｔ置換および／またはＶＬ  ＦＲ１中のアミノ酸位置１７におけるＤ→Ｑ置換および／またはＶＬ  ＦＲ１中のアミノ酸位置１８におけるＱ→Ｐ置換を含む軽鎖可変領域を含み得る。
【０１５３】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ＶＬ  ＦＲ２中のアミノ酸位置４５におけるＫ→Ｑ置換および／またはＶＬ  ＦＲ２中のアミノ酸位置４８におけるＶ→Ｉ置換を含む軽鎖可変領域を含み得る。
【０１５４】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ＶＬ  ＦＲ３のアミノ酸位置８３におけるＬ→Ｖ置換および／またはＶＬ  ＦＲ３中のアミノ酸位置８５におけるＴ→Ｖ置換を含む軽鎖可変領域を含み得る。
【０１５５】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ＶＬ  ＦＲ４中のアミノ酸位置１０４におけるＬ→Ｖ置換を含む軽鎖可変領域を含み得る。
【０１５６】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、Ｎ末端からＣ末端まで順に、ＤＶＸ１ＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣ（配列番号４５）；図１２Ｂに示すＶＬ  ＣＤＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＸ２Ｙ（配列番号４６）；図１２Ｂに示すＶＬ  ＣＤＲ２；ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＸ３ＹＹＣ（配列番号４７）；図１２Ｂに示すＶＬ  ＣＤＲ３；ＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号４８）（式中、Ｘ１はＬまたはＶであり、Ｘ２はＶまたはＩであり、そしてＸ３はＴまたはＶである。）を含むＶＬ領域を含み得る。
【０１５７】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、
ａ）図１３に示すアミノ酸配列を含むＶＨ変異体１、および図１７に示すアミノ酸配列を含むＶｋ変異体１；
ｂ）図１３に示すアミノ酸配列を含むＶＨ変異体１、および図１８に示すアミノ酸配列を含むＶｋ変異体２；
ｃ）図１３に示すアミノ酸配列を含むＶＨ変異体１、および図１９に示すアミノ酸配列を含むＶｋ変異体３；
ｄ）図１３に示すアミノ酸配列を含むＶＨ変異体１、および図２０に示すアミノ酸配列を含むＶｋ変異体４；
ｅ）図１４に示すアミノ酸配列を含むＶＨ変異体２、および図１７に示すアミノ酸配列を含むＶｋ変異体１；
ｆ）図１４に示すアミノ酸配列を含むＶＨ変異体２、および図１８に示すアミノ酸配列を含むＶｋ変異体２；
ｇ）図１４に示すアミノ酸配列を含むＶＨ変異体２、および図１９に示すアミノ酸配列を含むＶｋ変異体３；
ｈ）図１４に示すアミノ酸配列を含むＶＨ変異体２、および図２０に示すアミノ酸配列を含むＶｋ変異体４；
ｉ）図１５に示すアミノ酸配列を含むＶＨ変異体３、および図１７に示すアミノ酸配列を含むＶｋ変異体１；
ｊ）図１５に示すアミノ酸配列を含むＶＨ変異体３、および図１８に示すアミノ酸配列を含むＶｋ変異体２；
ｋ）図１５に示すアミノ酸配列を含むＶＨ変異体３、および図１９に示すアミノ酸配列を含むＶｋ変異体３；
ｌ）図１５に示すアミノ酸配列を含むＶＨ変異体３、および図２０に示すアミノ酸配列を含むＶｋ変異体４；
ｍ）図１６に示すアミノ酸配列を含むＶＨ変異体４、および図１７に示すアミノ酸配列を含むＶｋ変異体１；
ｎ）図１６に示すアミノ酸配列を含むＶＨ変異体４、および図１８に示すアミノ酸配列を含むＶｋ変異体２；
ｏ）図１６に示すアミノ酸配列を含むＶＨ変異体４、および図１９に示すアミノ酸配列を含むＶｋ変異体３；または
ｐ）図１６に示すアミノ酸配列を含むＶＨ変異体４、および図２０に示すアミノ酸配列を含むＶｋ変異体４
を含む。
【０１５８】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、抗Ｔａｕ重鎖ＣＤＲおよび抗Ｔａｕ軽鎖ＣＤＲの一本鎖ポリペプチドを含み、例えば、ある態様において、本発明の抗体はｓｃＦｖである。ある態様において、好適な抗体は、Ｎ末端からＣ末端の順に、約５アミノ酸から約２５アミノ酸長の第一のアミノ酸配列；配列番号１に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；約５アミノ酸から約２５アミノ酸長の第二のアミノ酸配列；配列番号２に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；約５アミノ酸から約２５アミノ酸長の第三のアミノ酸配列；配列番号３に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３；約５アミノ酸から約２５アミノ酸長の第四のアミノ酸配列；配列番号４に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；約５アミノ酸から約２５アミノ酸長の第五のアミノ酸配列；配列番号５に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；約５アミノ酸から約２５アミノ酸長の第六のアミノ酸配列；配列番号６に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３；および、約５アミノ酸から約２５アミノ酸長の第七のアミノ酸配列を含む。
【０１５９】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、Ｎ末端からＣ末端の順に、軽鎖ＦＲ１領域；配列番号１に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；軽鎖ＦＲ２領域；配列番号２に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；軽鎖ＦＲ３領域；配列番号３に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３；所望により、軽鎖ＦＲ４領域；リンカー領域；所望により、重鎖ＦＲ１領域；配列番号４に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；重鎖ＦＲ２領域；配列番号５に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；重鎖ＦＲ３領域；配列番号６に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３；および、重鎖ＦＲ４領域を含む。これらの態様のいくつかは、１つまたはそれ以上のＦＲ領域がヒト化ＦＲ領域である。これらの態様のいくつかが、各ＦＲ領域がヒト化ＦＲ領域である。リンカー領域は、約５アミノ酸から約５０アミノ酸長、例えば、約５ａａから約１０ａａ長、約１０ａａから約１５ａａ長、約１５ａａから約２０ａａ長、約２０ａａから約２５ａａ長、約２５ａａから約３０ａａ長、約３０ａａから約３５ａａ長、約３５ａａから約４０ａａ長、約４０ａａから約４５ａａ長、または約４５ａａから約５０ａａ長であり得る。
【０１６０】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、Ｎ末端からＣ末端の順に、重鎖ＦＲ１領域；配列番号４に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；重鎖ＦＲ２領域；配列番号５に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；重鎖ＦＲ３領域；配列番号６に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３；所望により、重鎖ＦＲ４領域；リンカー；所望により、軽鎖ＦＲ１領域；配列番号１に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；軽鎖ＦＲ２領域；配列番号２に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；軽鎖ＦＲ３領域；配列番号３に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３；および、軽鎖ＦＲ４領域、を含む。これらの態様のいくつかにおいて、ＦＲ領域の１つまたはそれ以上は、ヒト化ＦＲ領域である。これらの態様のいくつかにおいて、各ＦＲ領域はヒト化ＦＲ領域である。リンカー領域は、約５アミノ酸から約５０アミノ酸長、例えば、約５ａａから約１０ａａ長、約１０ａａから約１５ａａ長、約１５ａａから約２０ａａ長、約２０ａａから約２５ａａ長、約２５ａａから約３０ａａ長、約３０ａａから約３５ａａ長、約３５ａａから約４０ａａ長、約４０ａａから約４５ａａ長、または約４５ａａから約５０ａａ長であり得る。
【０１６１】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、Ｎ末端からＣ末端の順に、軽鎖ＦＲ１領域；配列番号７に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；軽鎖ＦＲ２領域；配列番号８に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；軽鎖ＦＲ３領域；配列番号９に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３；所望により、軽鎖ＦＲ４領域；リンカー領域；所望により、重鎖ＦＲ１領域；配列番号１０に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；重鎖ＦＲ２領域；配列番号１１に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；重鎖ＦＲ３領域；配列番号１２に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３；および、重鎖ＦＲ４領域を含む。これらの態様のいくつかにおいて、ＦＲ領域の１つまたはそれ以上は、ヒト化ＦＲ領域である。これらの態様のいくつかにおいて、各ＦＲ領域はヒト化ＦＲ領域である。リンカー領域は、約５アミノ酸から約５０アミノ酸長、例えば、約５ａａから約１０ａａ長、約１０ａａから約１５ａａ長、約１５ａａから約２０ａａ長、約２０ａａから約２５ａａ長、約２５ａａから約３０ａａ長、約３０ａａから約３５ａａ長、約３５ａａから約４０ａａ長、約４０ａａから約４５ａａ長、または約４５ａａから約５０ａａ長であり得る。
【０１６２】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、Ｎ末端からＣ末端の順に、重鎖ＦＲ１領域；配列番号１０に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；重鎖ＦＲ２領域；配列番号１１に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；重鎖ＦＲ３領域；配列番号１２に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３；所望により、重鎖ＦＲ４領域；リンカー；所望により、軽鎖ＦＲ１領域；配列番号７に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；軽鎖ＦＲ２領域；配列番号８に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；軽鎖ＦＲ３領域；配列番号９に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３；および、軽鎖ＦＲ４領域を含む。これらの態様のいくつかにおいて、ＦＲ領域の１つまたはそれ以上は、ヒト化ＦＲ領域である。これらの態様のいくつかにおいて、各ＦＲ領域はヒト化ＦＲ領域である。リンカー領域は、約５アミノ酸から約５０アミノ酸長、例えば、約５ａａから約１０ａａ長、約１０ａａから約１５ａａ長、約１５ａａから約２０ａａ長、約２０ａａから約２５ａａ長、約２５ａａから約３０ａａ長、約３０ａａから約３５ａａ長、約３５ａａから約４０ａａ長、約４０ａａから約４５ａａ長、または約４５ａａから約５０ａａ長であり得る。
【０１６３】
抗体への使用に好適なリンカーは、“可動性リンカー”を含む。リンカー分子は、それが存在するとき、一般的に、結合された領域間の柔軟な動きを可能にするのに充分な長さである。リンカー分子は一般的に、約６〜５０個の原子の長さである。これらのリンカー分子はまた、例えば、アリールアセチレン、２〜１０のモノマー単位を含むエチレングリコールオリゴマー、ジアミン、二酸、アミノ酸、またはそれらの組み合わせであることもできる。ポリペプチドに結合し得る他のリンカー分子は、本明細書に記載の長さで使用することができる。
【０１６４】
好適なリンカーは、容易に選択することができ、かつ１アミノ酸（例えば、Ｇｌｙ）から２０アミノ酸長、２アミノ酸から１５アミノ酸長、３アミノ酸から１２アミノ酸長、４アミノ酸から１０アミノ酸長、５アミノ酸から９アミノ酸長、６アミノ酸から８アミノ酸長、または７アミノ酸から８アミノ酸長のようないずれかの好適な異なる長さであってよく、１、２、３、４、５、６または７アミノ酸長であり得る。
【０１６５】
可動性リンカーの例には、グリシンポリマー（Ｇ）ｎ、グリシン−セリンポリマー（例えば、（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号４９）および（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５０）、ここで、ｎは少なくとも１の整数である）、グリシン−アラニンポリマー、アラニン−セリンポリマー、および当技術分野で知られている他の可動性リンカーが含まれる。グリシンおよびグリシン−セリンポリマーは、それらが両方とも比較的構造化されておらず(unstructured)、そのため成分間のニュートラルなテザーとして機能することができるため興味深い。グリシンポリマーは、グリシンが、アラニンよりも有意にｐｈｉ−ｐｓｉ空間に到達し、より長い側鎖を有する残基よりも制限されないため、特に興味深い（Scheraga, Rev. Computational Chem. 11173−142 (1992)を参照のこと）。可動性リンカーの例には、ＧＧＳＧ（配列番号５１）、ＧＧＳＧＧ（配列番号５２）、ＧＳＧＳＧ（配列番号５３）、ＧＳＧＧＧ（配列番号５４）、ＧＧＧＳＧ（配列番号５５）、ＧＳＳＳＧ（配列番号５６）などが含まれるが、これらに限定されない。当業者は、上記の何れかの成分に結合するペプチドの設計が、全体または部分的に可動性のリンカーを含み得ることを認識し得る。例えば、該リンカーは、可動性リンカー、ならびにより柔軟性に劣る構造を与える１またはそれ以上の部分を含み得る。
【０１６６】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、抗体フラグメント、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、またはＦａｂ’である。故に、本発明は、単離された抗体であって、該抗体が、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、またはＦａｂ’であり、該抗体が、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域内のエピトープへの結合を、ａ）（ｉ）配列番号１または配列番号７のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ１、（ｉｉ）配列番号２または配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ２、および（ｉｉｉ）配列番号３または配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＣＤＲ３を含む軽鎖領域、ならびにｂ）（ｉ）配列番号４または配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ１、（ｉｉ）配列番号５または配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ２、および（ｉｉｉ）配列番号６または配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ３を含む重鎖領域、を含む抗体と競合する、抗体を提供する。これらの態様のいくつかにおいて、単離された抗体は、上記の通り、１、２、３または４個のヒト化ＶＬフレームワーク領域を含む。これらの態様のいくつかにおいて、単離された抗体は、上記の通り、１、２、３または４個のヒト化ＶＨフレームワーク領域を含む。
【０１６７】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ｓｃＦｖ抗体である。ある態様において、本発明の抗Ｔａｕ抗体は、ｓｃＦｖ多量体を含む。例えば、ある態様において、好適な抗体は、ｓｃＦｖ二量体（例えば、２つのタンデムｓｃＦｖ（ｓｃＦｖ２）を含む）、ｓｃＦｖ三量体（例えば、３つのタンデムｓｃＦｖ（ｓｃＦｖ３）を含む）、ｓｃＦｖテトラマー（例えば、４つのタンデムｓｃＦｖ（ｓｃＦｖ４）を含む）であり、または５つ以上のｓｃＦｖの多量体（例えば、タンデムで）である。ｓｃＦｖ単量体は、約２アミノ酸から約１０アミノ酸（ａａ）長、例えば、２ａａ、３ａａ、４ａａ、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、または１０ａａ長のリンカーを介してタンデムに結合されていてよい。好適なリンカーには、例えば、（Ｇｌｙ）ｘ（式中、ｘは、２から１０の整数である）が含まれる。他の好適なリンカーは、上記のものである。ある態様において、目的のｓｃＦＶ多量体における各ｓｃＦｖ単量体は、上記の通り、ヒト化されている。
【０１６８】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、免疫グロブリンの定常領域（例えば、Ｆｃ領域）を含む。Ｆｃ領域は、存在するとき、ヒトＦｃ領域であり得る。定常領域が存在するとき、抗体は、軽鎖および重鎖定常領域の両方を含み得る。好適な重鎖定常領域は、ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、ＣＨ３、およびＣＨ４領域を含む。本明細書に記載の抗体は、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＡおよびＩｇＥ、ならびにＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４を含む任意のアイソタイプを含む全タイプの定常領域を有する抗体を含む。好適な重鎖Ｆｃ領域の例は、ヒトアイソタイプＩｇＧ１ Ｆｃである。ある場合において、該重鎖領域は、アイソタイプＩｇＧ４のものである。これらの態様のいくつかにおいて、ヒンジ領域はＳ２４１Ｐ置換を含む。例えば、Angal et al. (1993) Mol. Immunol. 30：105を参照のこと。軽鎖定常領域は、λまたはκであり得る。好適な抗体（例えば、ヒト化抗体）は、２以上のクラスまたはアイソタイプ由来の配列を含み得る。抗体は、２つの軽鎖および２つの重鎖を、個別の重鎖、軽鎖として、Ｆａｂ、Ｆａｂ’Ｆ（ａｂ’）２およびＦｖとして含むテトラマーとして発現され得るか、または重鎖および軽鎖可変ドメインがスペーサーを介して結合されている一本鎖抗体として発現され得る。
【０１６９】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ヒト軽鎖定常領域およびヒト重鎖定常領域を含み、該抗体は、ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域内のエピトープへの結合を、ａ）（ｉ）配列番号１または配列番号７のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ１、（ｉｉ）配列番号２または配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ２、および（ｉｉｉ）配列番号３または配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ３を含む軽鎖領域、ならびにｂ）（ｉ）配列番号４または配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ１、（ｉｉ）配列番号５または配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ２、および（ｉｉｉ）配列番号６または配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ３を含む重鎖領域、を含む抗体と競合する、抗体を提供する。これらの態様のいくつかにおいて、単離された抗体は、上記の通り、１、２、３または４個のヒト化ＶＬフレームワーク領域を含む。これらの態様のいくつかにおいて、単離された抗体は、上記の通り、１、２、３または４個のヒト化ＶＨフレームワーク領域を含む。
【０１７０】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、カルボキシル末端に遊離チオール（−ＳＨ）基を含んでいてよく、ここで、該遊離チオール基は、第二のポリペプチド（例えば、好適な抗体を含む、別の抗体）、主鎖（scaffold）、担体などに該抗体を結合させるために用いることができる。
【０１７１】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、１つまたはそれ以上の天然に存在しないアミノ酸を含む。ある態様において、天然にコード化されないアミノ酸には、カルボニル基、アセチル基、アミノオキシ基、ヒドラジン基、ヒドラジド基、セミカルバジド基、アジド基、またはアルキレン基が含まれる。好適な天然に存在しないアミノ酸に関して、例えば、米国特許番号第７，６３２，９２４号を参照のこと。天然に存在しないアミノ酸を含むと、ポリマー、第二のポリペプチド、主鎖などへの結合が可能となる。例えば、水溶性ポリマーに結合した好適な抗体は、カルボニル基を含む水溶性ポリマー（例えば、ＰＥＧ）を抗体に反応させることにより作製可能であって、ここで、該抗体は、アミノオキシ、ヒドラジン、ヒドラジドまたはセミカルバジド基を含む天然にコード化されないアミノ酸を含む。別の例としては、水溶性ポリマーに結合した好適な抗体は、アルキレン含有アミノ酸を含む好適な抗体を、アジド基を含む水溶性ポリマー（例えば、ＰＥＧ）と反応させて製造することができる。ある態様において、該アジドまたはアルキレン基は、アミド結合を介してＰＥＧ分子に結合している。“天然にコード化されないアミノ酸”は、２０種の必須アミノ酸うちの１つまたはパイロリジン（pyrrolysine）またはセレノシステインでないアミノ酸を意味する。用語“天然にコード化されないアミノ酸”と同義に用いられ得る他の用語は、“天然ではないアミノ酸”、“非天然アミノ酸”、“天然に存在しないアミノ酸”ならびにそのハイフンでつないだ変形およびハイフンでつながない変形を含む。用語“天然にコード化されないアミノ酸”はまた、翻訳複合体によりポリペプチド鎖の伸張時に天然に挿入されないが、天然にコード化されるアミノ酸（２０個の共通アミノ酸またはパイロリジン（pyrrolysine）およびセレノシステイン）の修飾（例えば、翻訳後修飾）により生じるアミノ酸を含むが、これらに限定されない。かかる天然に存在しないアミノ酸の例には、Ｎ−アセチルグルコサミニル−Ｌ−セリン、Ｎ−アセチルグルコサミニル−Ｌ−スレオニン、およびＯ−ホスホチロシンが含まれるが、これらに限定されない。
【０１７２】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、ポリマー（例えば、ポリペプチド以外のポリマー）に結合（例えば、共有結合）している。好適なポリマーには、例えば、生体適合性ポリマー、および水溶性の生体適合性ポリマーが含まれる。好適なポリマーには、合成ポリマーおよび天然に存在するポリマーが含まれる。好適なポリマーには、例えば、置換または非置換の直鎖または分枝鎖ポリアルキレン、ポリアルケニレンまたはポリオキシアルキレンポリマー類または分枝状もしくは非分枝状ポリサッカライド類、例えばホモ−またはヘテロ−ポリサッカライドが含まれる。好適なポリマーには、例えば、エチレンビニルアルコールコポリマー（一般名ＥＶＯＨまたは商品名ＥＶＡＬとして知られる）；ポリブチルメタクリレート；ポリ（ヒドロキシバレレート）；ポリ（Ｌ−乳酸）；ポリカプロラクトン；ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）；ポリ（ヒドロキシブチレート）；ポリ（ヒドロキシブチレート−コ−バレレート）；ポリジオキサノン；ポリオルトエステル；ポリ酸無水物；ポリ（グリコール酸）；ポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸）；ポリ（グリコール酸−コ−トリメチレンカーボネート）；ポリリン酸エステル；ポリリン酸エステルウレタン；ポリ（アミノ酸）；シアノアクリレート；ポリ（トリメチレンカーボネート）；ポリ（イミノカーボネート）；コポリ（エーテル−エステル）（例えば、ポリ（エチレンオキシド）−ポリ（乳酸）（ＰＥＯ／ＰＬＡ）のコポリマー）；ポリアルキレンオキサレート；ポリホスファゼン；フィブリン、フィブリノーゲン、セルロース、デンプン、コラーゲンおよびヒアルロン酸などの生体分子；ポリウレタン；シリコン；ポリエステル；ポリオレフィン；ポリイソブチレンおよびエチレン−αオレフィンコポリマー；アクリルポリマーおよびアクリルコポリマー；ポリ塩化ビニルなどのハロゲン化ビニルポリマーおよびハロゲン化ビニルコポリマー；ポリビニルメチルエーテルなどのポリビニルエーテル類；ポリフッ化ビニリデンおよびポリ塩化ビニリデンなどのポリビニリデンハライド；ポリアクリロニトリル；ポリビニルケトン；ポリスチレンなどのポリビニル芳香族化合物；ポリビニルアセテートなどのポリビニルエステル類；エチレン−メチルメタクリレートコポリマー、アクリロニトリル−スチレンコポリマー、ＡＢＳ樹脂、およびエチレン−ビニルアセテートコポリマーなどの互いを有するビニルモノマーとオレフィンのコポリマー；ナイロン６６およびポリカプロラクタムなどのポリアミド;アルキド樹脂類；ポリカーボネート；ポリオキシメチレン；ポリイミド；ポリエーテル；エポキシ樹脂類；ポリウレタン；レーヨン；レーヨン−トリアセテート；セルロース；セルロースアセテート；セルロースブチレート；セルロースアセテートブチレート;セロファン；セルロースニトレート；セルロースプロピオネート；セルロースエーテル；アモルファステフロン；ポリ（エチレングリコール）；ならびに、カルボキシメチルセルロースが含まれる。
【０１７３】
好適な合成ポリマーには、非置換および置換の、直鎖または分枝鎖ポリ（エチレングリコール）、ポリ（プロピレングリコール）ポリ（ビニルアルコール）、およびそれらの誘導体、例えば、置換ポリ（エチレングリコール）、例えばメトキシポリ（エチレングリコール）、およびその誘導体が含まれる。好適な天然に存在するポリマーには、例えば、アルブミン、アミロース、デキストラン、グリコーゲン、およびそれらの誘導体が含まれる。
【０１７４】
好適なポリマーは、５００Ｄａから５００００Ｄａ、例えば、５０００Ｄａから４００００Ｄａ、または２５０００から４００００Ｄａの範囲の平均分子量を有し得る。例えば、ある態様において、好適な抗体が、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）またはメトキシポリ（エチレングリコール）ポリマーを含むとき、ＰＥＧまたはメトキシポリ（エチレングリコール）ポリマーは、約０．５キロダルトン（ｋＤａ）から１ｋＤａ、約１ｋＤａから５ｋＤａ、５ｋＤａから１０ｋＤａ、１０ｋＤａから２５ｋＤａ、２５ｋＤａから４０ｋＤａ、または４０ｋＤａから６０ｋＤａの範囲の分子量を有し得る。
【０１７５】
上記の通り、ある態様において、好適な抗体は、ＰＥＧポリマーに共有結合している。ある態様において、ｓｃＦｖ多量体は、ＰＥＧポリマーに共有結合している。例えば、Albrecht et al. (2006) J. Immunol. Methods 310：100を参照のこと。タンパク質のＰＥＧ化に好適な方法および反応材は、当技術分野で知られており、例えば、米国特許番号第５，８４９，８６０号に見出され得る。タンパク質との結合に好適なＰＥＧは、一般に、室温で水に可溶であり、一般式  Ｒ（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｎＯ−Ｒ（式中、Ｒは水素またはアルキルもしくはアルカノール基のような保護基であり、ｎは１から１０００までの整数である）を有する。式中、Ｒが保護基であるとき、それは一般的に、１から８個の炭素を有する。
【０１７６】
ＰＥＧと複合体形成した抗体は直鎖状であってよい。ＰＥＧと複合体形成した目的のタンパク質はまた、分枝状であってもよい。米国特許番号第５，６４３，５７５号に記載のような“ｓｔａｒ−ＰＥＧ”、およびShearwater Polymers, Inc. catalog “Polyethylene Glycol Derivatives 1997−1998.”に記載のような多分枝ＰＥＧなどの分枝状ＰＥＧ誘導体が存在し、スターＰＥＧは、例えば、米国特許番号第６，０４６，３０５号を含む、当技術分野の文献に記載されている。
【０１７７】
いくつかの態様において、本発明の方法における使用に適する抗体は、グリコシル化されていてよく、例えば、好適な抗体は、共有結合した糖または多糖部分を含み得る。抗体のグリコシル化は、典型的に、Ｎ−結合型またはＯ−結合型のいずれかである。Ｎ−結合型は、アスパラギン残基の側鎖への糖部分の結合を意味する。アスパラギン−Ｘ−セリンおよびアスパラギン−Ｘ−スレオニン（ここで、Ｘは、プロリンを除く任意のアミノ酸である）のトリペプチド配列は、アスパラギン側鎖への糖鎖部分の酵素的結合のための認識配列である。従って、ポリペプチド中にこれらのトリペプチド配列の何れかが存在すると、潜在的なグリコシル化部位が存在することになる。Ｏ−結合型グリコシル化は、ヒドロキシアミノ酸、最も一般的にはセリンまたはスレオニンに、糖類Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、またはキシロースの一つが結合することを意味するが、５−ヒドロキシプロリンまたは５−ヒドロキシリジンが用いられることもある。
【０１７８】
抗体へのグリコシル化部位の付加は、アミノ酸配列を、上記のトリペプチド配列（Ｎ−結合グリコシル化部位の場合）の１つまたはそれ以上が含まれるように変化させることによって都合よく達成することができる。この変化は、基となる抗体の配列への１つまたはそれ以上のセリンまたはスレオニン残基の付加または置換によってもなされる（Ｏ−結合グリコシル化部位の場合）。同様に、グリコシル化部位の除去は、抗体の天然のグリコシル化部位内のアミノ酸を改変することによって達成され得る。
【０１７９】
好適な抗体は、ある態様において、“放射線不透過性の”標識、例えば、Ｘ線を用いて容易に可視化できる標識を含む。放射線不透過性物質は、当業者に周知である。最も一般的な放射線不透過性物質としては、ヨウ化物、臭化物またはバリウム塩が含まれる。他の放射線不透過性物質もまた知られており、有機ビスマス誘導体（例えば、米国特許番号第５，９３９，０４５号を参照のこと）、放射線不透過性マルチウレタン（米国特許番号第５，３４６，９８１号を参照のこと）、有機ビスマス複合材料（例えば、米国特許番号第５，２５６，３３４号を参照のこと）、放射線不透過性バリウム多量体（例えば、米国特許番号第４，８６６，１３２号を参照のこと）などが含まれるが、これらに限定されない。
【０１８０】
好適な抗体は、例えば、グルタルアルデヒド、ホモ二官能性架橋剤、またはヘテロ二官能性架橋剤を用いて、第２の部分（例えば、脂質、該抗体以外のポリペプチド、合成ポリマー、糖など）と共有結合することができる。グルタルアルデヒドは、それらのアミノ部分を介してポリペプチドと結合する。ホモ二官能性架橋剤（例えば、ホモ二官能性イミドエステル、ホモ二官能性Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）エステル、またはホモ二官能性スルフヒドリル反応性架橋剤）は、２つまたはそれ以上の同一の反応性部分を含み、この架橋剤が、結合するポリペプチドの混合物を含む溶液に添加される一段階反応手順で使用することができる。ホモ二官能性ＮＨＳエステルおよびイミドエステルは、ポリペプチドを含むアミンを結合させる。穏やかなアルカリ性のｐＨでは、イミドエステルは第一級アミンとのみ反応して、イミドアミドを形成し、クロスリンクされたポリペプチドの全体的な電荷は影響を受けない。ホモ二官能性スルフヒドリル反応性架橋剤には、ビスマレイミドヘキサン（ＢＭＨ）、１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼン（ＤＦＤＮＢ）、および１，４−ジ−（３’，２’−ピリジルジチオ）プロピオアミドブタン）（ＤＰＤＰＢ）が含まれる。
【０１８１】
ヘテロ二官能性架橋剤は、２つまたはそれ以上の異なる反応性部分（例えば、アミン反応性部分およびスルフヒドリル反応性部分）を有し、アミン反応性部分またはスルフヒドリル反応性部分を介して、ポリペプチドの１つとクロスリンクされ、次いで、反応していない部分を介して他のポリペプチドと反応する。ピリジルジスルフィド架橋剤のように、複数のヘテロ二官能性ハロアセチル架橋剤が利用できる。カルボジイミドは、アミド結合をもたらす、アミンにカルボキシルをカップリングするためのヘテロ二官能性架橋剤の典型例である。
【０１８２】
好適な抗体は、ある態様において、検出可能な標識を含む。好適な検出可能な標識には、分光学的手段、光化学的手段、生化学的手段、免疫化学的手段、電気的手段、光学的手段または化学的手段により検出可能な任意の組成物が含まれる。好適なものには、磁気ビーズ（例えば、Ｄｙｎａｂｅａｄ（商標））、蛍光色素（例えば、フルオレセインイソチオシアネート、テキサスレッド、ローダミン、緑色蛍光タンパク質、赤色蛍光タンパク質、および黄色蛍光タンパク質など）、放射性標識（例えば、３Ｈ、１２５Ｉ、３５Ｓ、１４Ｃ、または３２Ｐ）、酵素（例えば、酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）で一般的に用いられる西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ルシフェラーゼ、および他の酵素）、ならびにコロイド金もしくは着色ガラスまたはプラスチック（例えば、ポリスチレン、ポリプロピレン、およびラテックスなど）のビーズなどの比色標識が含まれるが、これらに限定されない。
【０１８３】
いくつかの態様において、好適な抗体は、造影剤または放射性同位元素を含み、この造影剤または放射性同位元素は、造影、例えば、ヒトで行われる造影法で使用するのに適するものである。標識の非限定的な例としては、１２３１Ｉ（ヨウ素）、１８Ｆ（フッ素）、９９Ｔｃ（テクネチウム）、１１１Ｉｎ（インジウム）、および６７Ｇａ（ガリウム）などの放射性同位元素、ならびにガドリニウム（Ｇｄ）、ジスプロシウム、および鉄などの造影剤が含まれる。放射性Ｇｄアイソトープ（１５３Ｇｄ）も利用可能であり、非ヒト哺乳動物における造影処理に適する。好適な抗体は、標準的な技術を用いて標識することができる。例えば、好適な抗体は、クロラミンＴまたは１，３，４，６−テトラクロロ−３α，６α−ジフェニルグリコールウリルを用いてヨウ素化することができる。フッ素化では、フッ素は、フッ化物イオンの置換反応によって、合成時に抗Ｔａｕ抗体に添加される。かかる放射性同位元素を用いるタンパク質の合成の概説については、Muller−Gartner, H., TIB Tech., 16：122−130 (1998) and Saji, H., Crit. Rev. Ther. Drug Carrier Syst., 16(2)：209−244 (1999)を参照のこと。好適な抗体は、標準的な技術を介して造影剤でも標識することができる。例えば、好適な抗体は、Ｇｄジエチレントリアミン五酢酸（ＧｄＤＴＰＡ）またはＧｄテトラアザシクロドデカンテトラ酢酸（ＧｄＤＯＴＡ）などの低分子Ｇｄキレートを該抗体に結合させることによってＧｄで標識することができる。Caravan et al., Chem. Rev. 99：2293−2352 (1999) and Lauffer et al., J. Magn. Reson. Imaging, 3：11−16 (1985)を参照のこと。好適な抗体は、例えば、ポリリジン−Ｇｄキレートを本抗体に結合させることによってＧｄで標識することができる。例えば、Curtet et al., Invest. Radiol., 33(10)：752−761 (1998)を参照のこと。あるいは、好適な抗体は、アビジンを有するＧｄキレート脂質を含む常磁性の重合リポソームおよびビオチン化抗体をインキュベートすることによってＧｄで標識することができる。例えば、Sipkins et al., Nature Med., 4：623−626 (1998)を参照のこと。
【０１８４】
好適な抗体に結合することができる好適な蛍光タンパク質には、例えば、米国特許第６，０６６，４７６号、同第６，０２０，１９２号、同第５，９８５，５７７号、同第５，９７６，７９６号、同第５，９６８，７５０号、同第５，９６８，７３８号、同第５，９５８，７１３号、同第５，９１９，４４５号、同第５，８７４，３０４号に記載のオワンクラゲ由来の緑色蛍光タンパク質またはその変異体もしくは誘導体；例えば、高感度ＧＦＰ、例えば、クロンテック社から市販されている多くのそのようなＧＦＰ；赤色蛍光タンパク質；黄色蛍光タンパク質；ならびに、例えば、Matz et al. (1999) Nature Biotechnol. 17：969−973に記載の、花虫類種由来の種種の蛍光タンパク質および着色タンパク質のいずれかなどが含まれるが、これらに限定されない。
【０１８５】
ある態様において、抗体は、融合パートナー、例えば、リガンド；エピトープタグ；ペプチド；および抗体以外のタンパク質などに結合（例えば、共有結合または非共有結合）させ得る。好適な融合パートナーには、インビボでの安定性の強化（例えば、血清半減期の増加）をもたらすペプチドおよびポリペプチド；精製の容易さをもたらすペプチドおよびポリペプチド、例えば、（Ｈｉｓ）ｎ、例えば、６Ｈｉｓ（配列番号５７）など；細胞から融合タンパク質を分泌させるペプチドおよびポリペプチド；エピトープタグを提供するペプチドおよびポリペプチド、例えば、ＧＳＴ、ヘマグルチニン（ＨＡ；例えば、ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ；配列番号５８）、ＦＬＡＧ（例えば、ＤＹＫＤＤＤＤＫ；配列番号５９）、ｃ−ｍｙｃ（例えば、ＥＱＫＬＩＳＥＥＤＬ；配列番号６０）など；検出可能なシグナルを提供するペプチドおよびポリペプチド、例えば、検出可能な産物を生成する酵素（例えば、β−ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ）、またはそれ自体が検出可能であるタンパク質、例えば、緑色蛍光タンパク質、赤色蛍光タンパク質、黄色蛍光タンパク質など；ならびに、多量体化をもたらすペプチドおよびポリペプチド、例えば、免疫グロブリンのＦｃ部分などの多量体化ドメインが含まれる。
【０１８６】
融合には、例えば、同定または精製に有用な、固体支持体上に固定化されたものなどの結合パートナーと相互作用することができるペプチド配列を含む親和性ドメインも含まれ得る。ヒスチジンなどの連続した単一アミノ酸は、タンパク質と融合させると、ニッケルセファロースなどの樹脂カラムへの高親和性結合によって、この融合タンパク質の一段階精製のために用いることができる。親和性ドメインの例としては、Ｈｉｓ５（ＨＨＨＨＨ）（配列番号６１）、ＨｉｓＸ６（ＨＨＨＨＨＨ）（配列番号５７）、Ｃ−ｍｙｃ（ＥＱＫＬＩＳＥＥＤＬ）（配列番号６０）、Ｆｌａｇ（ＤＹＫＤＤＤＤＫ）（配列番号５９）、ＳｔｒｅｐＴａｇ（ＷＳＨＰＱＦＥＫ）（配列番号６２）、赤血球凝集素、例えば、ＨＡタグ（ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ；配列番号５８）、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、チオレドキシン、セルロース結合ドメイン、ＲＹＩＲＳ（配列番号６３）、Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ（配列番号６４）、キチン結合ドメイン、Ｓ−ペプチド、Ｔ７ペプチド、ＳＨ２ドメイン、Ｃ末端ＲＮＡタグ、ＷＥＡＡＡＲＥＡＣＣＲＥＣＣＡＲＡ（配列番号６５）、金属結合ドメイン、例えば、亜鉛結合ドメイン、またはカルシウム結合タンパク質、例えば、カルモジュリン、トロポニンＣ、カルシニューリンＢ、ミオシン軽鎖、リカバリン、Ｓ−モジュリン、ビジニン、ＶＩＬＩＰ、ニューロカルシン、ヒポカルシン、フリクエニン、カルトラクチン、カルパインの大サブユニット、Ｓ１００タンパク質、パルブアルブミン、カルビンジンＤ９Ｋ、カルビンジンＤ２８Ｋ、およびカルレチニン、インテイン、ビオチン、ストレプトアビジン、ＭｙｏＤ、ロイシンジッパー配列、およびマルトース結合タンパク質に由来するドメインなどのカルシウム結合ドメインが含まれる。
【０１８７】
ある態様において、好適な抗体を、内在性血液脳関門（ＢＢＢ）受容体に結合するポリペプチドに結合させる。内在性ＢＢＢ受容体に結合するポリペプチドに好適な抗体を結合すると、例えば、好適な抗体を、それを必要としている個体に投与することを含む本発明の治療法（以下参照）において、ＢＢＢの通過を促進する。内在性ＢＢＢ受容体に結合する好適なポリペプチドには、内在性ＢＢＢ受容体に特異的に結合する抗体、例えば、モノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメントが含まれる。好適な内在性ＢＢＢ受容体には、インスリン受容体、トランスフェリン受容体、レプチン受容体、リポタンパク質受容体、およびインスリン様増殖因子受容体が含まれるが、これらに限定されない。例えば、米国特許公開第２００９／０１５６４９８号を参照のこと。
【０１８８】
一例として、好適な抗Ｔａｕ抗体は、Ｔａｕポリペプチド内のエピトープに特異的に結合する第一の抗原結合部分、および内在性ＢＢＢ受容体に結合する第二の抗原結合部分を含む、二重特異性抗体であり得る。例えば、ある例において、好適な抗Ｔａｕ抗体は、Ｔａｕポリペプチド内のエピトープに特異的に結合する第一の抗原結合部分、およびトランスフェリン受容体に結合する第二の抗原結合部分を含む、二重特異性抗体である。
【０１８９】
例えば、好適な抗Ｔａｕ抗体は、ＢＢＢの通過を促進するペプチドに結合されていてよく、該ペプチドは、約１５アミノ酸から約２５アミノ酸長を有し、以下のペプチド：Ａｎｇｉｏｐｅｐ−１（ＴＦＦＹＧＧＣＲＧＫＲＮＮＦＫＴＥＥＹ；配列番号６６）；Ａｎｇｉｏｐｅｐ−２（ＴＦＦＹＧＧＳＲＧＫＲＮＮＦＫＴＥＥＹ；配列番号６７）；ｃｙｓ−Ａｎｇｉｏｐｅｐ−２（ＣＴＦＦＹＧＧＳＲＧＫＲＮＮＦＫＴＥＥＹ；配列番号６８）；Ａｎｇｉｏｐｅｐ−２−ｃｙｓ（ＴＦＦＹＧＧＳＲＧＫＲＮＮＦＫＴＥＥＹＣ；配列番号６９）；ならびに、アプロチニンフラグメント（ＴＦＶＹＧＧＣＲＡＫＲＮＮＦＫＳ；配列番号７０）のうち１つに少なくとも約８５％のアミノ酸配列の同一性を有するアミノ酸配列を含む。例えば、米国特許公開第２０１１／０２８８０１１号および同第２００９／００１６９５９号を参照のこと。ＢＢＢの通過を促進するペプチドは、抗Ｔａｕ軽鎖領域のＮ末端、抗Ｔａｕ軽鎖領域のＣ末端、抗Ｔａｕ重鎖領域のＮ末端、抗Ｔａｕ重鎖領域のＣ末端、抗Ｔａｕ一本鎖抗体のＮ末端、および抗Ｔａｕ一本鎖抗体のＣ末端などに連結されていてよい。
【０１９０】
いくつかの態様において、好適な抗体は、ポリアミン修飾を含む。好適な抗体のポリアミン修飾は、修飾された抗体のＢＢＢでの透過性を高める。好適な抗体は、天然に存在するかまたは合成のいずれかであるポリアミンで修飾することができる。例えば、米国特許第５，６７０，４７７号を参照のこと。有用な天然に存在するポリアミンには、プトレシン、スペルミジン、スペルミン、１，３−ジアミノプロパン、ノルスペルミジン、合成のホモスペルミジン、テルミン(thermine)、テルモスペルミン、カルドペンタミン、ホモカルドペンタミン、およびカナバルミンが含まれる。プトレシン、スペルミジンおよびスペルミンは、特に有用である。合成ポリアミンは、実験式ＣＸＨＹＮＺで構成され、さらに、１〜６個のＮＲ部分またはＮ（Ｒ）２部分（式中、Ｒは、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、フェニルまたはベンジルである）を含む、環式もしくは非環式の、分枝状または非分枝状の３〜１２個の炭素原子の炭化水素鎖であり得る。ポリアミンは、任意の標準的なクロスリンク法を用いて抗体に結合させることができる。
【０１９１】
ある態様において、好適な抗体は、糖部分を含むように改変され、この糖部分は本抗体に共有結合することができる。ある態様において、好適な抗体は脂質部分を含むように改変され、この脂質部分は本抗体に共有結合することができる。好適な脂質部分には、例えば、Ｎ−ラウロイル、Ｎ−オレオイルなどのＮ−脂肪酸アシル基；ドデシルアミン、オレオイルアミンなどの脂肪族アミン；およびＣ３〜Ｃ１６の長鎖脂肪族脂質などが含まれる。例えば、米国特許第６，６３８，５１３号を参照のこと。ある態様において、好適な抗体はリポソームに組み込まれている。
【０１９２】
併用療法
抗Ｔａｕ抗体は、それを必要とする個体に単独で(例えば、単剤療法として)、または１つもしくはそれ以上のさらなる治療剤と併用して投与され得る。例えば、抗Ｔａｕ抗体は、卒中またはＴＢＩの処置のための１つまたはそれ以上の治療剤と併用して投与され得る。
【０１９３】
本明細書で用いる“〜との併用”は、例えば、第一の化合物が、第二の化合物の全投与期間中に投与される；第一の化合物が、第二の化合物の投与と重複する期間に投与される、例えば第一の化合物の投与が、第二の化合物の投与前に始まり、そして第一の化合物の投与が、第二の化合物の投与終了前に終了する；第二の化合物の投与が、第一の化合物の投与前に始まり、そして第二の化合物の投与が、第一の化合物の投与終了前に終了する；第一の化合物の投与が、第二の化合物の投与開始前に始まり、そして第二の化合物の投与が、第一の化合物の投与終了前に終了する；第二の化合物の投与が、第一の化合物の投与開始前に始まり、第一の化合物の投与が、第二の化合物の投与終了前に終了する、ような使用を意味する。例えば“併用”はまた、２以上の化合物の投与を含むレジメンを意味し得る。本明細書で用いる“〜との併用”はまた、同じか、または異なる製剤において、同じか、または異なる投与経路で、そして同じか、または異なる投与量形態タイプで投与され得る、２以上の化合物の投与を意味する。
【０１９４】
処置されるべき個体
抗Ｔａｕ抗体での処置に好適な個体には、タウオパチー(例えば、急性タウオパチー)を有すると診断されている個体；一般集団よりもタウオパチーを発症する危険性の高い個体（例えば、タウオパチーを発症する遺伝的素因を有する個体）；軍人（military personnel）などが含まれる。ある態様において、個体は、１０歳未満から１０歳まで、１０歳から約１５歳、約１５歳から約２０歳、または約２０歳から約３０歳のヒトである。ある態様において、個体は、成人である。ある場合において、成人は、約２０歳から約３０歳、３０歳もしくはそれ以上、４０歳もしくはそれ以上、５０歳もしくはそれ以上、６０歳もしくはそれ以上、７０歳もしくはそれ以上、または８０歳もしくはそれ以上である。例えば、成人は、４０歳から５０歳、５０歳から６０歳、６０歳から７０歳、または７０歳以上であってよい。ある態様において、個体は、ＴＢＩを有する者である。ある態様において、個体は、卒中を有した者である。
【０１９５】
製剤
本発明の方法において、抗Ｔａｕ抗体は、所望の治療効果または診断効果をもたらし得るいずれかの便利な手段を用いて宿主（host）に投与され得る。故に、薬物は、治療的投与のために種々の製剤に組み込まれ得る。より具体的には、抗Ｔａｕ抗体は、適当な薬学的に許容される担体または希釈剤と組み合わせて医薬組成物に剤形されてよく、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、軟膏、溶液、坐薬、注射、吸入剤およびエアロゾル剤のような固体、半固体、液体またはガス状の製剤に剤形され得る。
【０１９６】
医薬投与量形態において、抗Ｔａｕ抗体は、それらの薬学的に許容される塩の形態で投与され得るか、またはそれらは、単独でもしくは適当に、ならびに他の薬学的に活性な化合物と組み合わせて使用されてもよい。以下の方法および添加剤は、単に例示として記載され、限定を意図するものではない。
【０１９７】
経口用製剤に関して、抗Ｔａｕ抗体抗Ｔａｕ抗体は、単独で、または錠剤、散剤、顆粒剤またはカプセル剤を製造するための適当な添加剤と組み合わせて、例えば、常套の添加剤、例えばラクトース、マンニトール、コーンデンプンまたはジャガイモデンプンなど；結合剤、例えば結晶質セルロース、セルロース誘導体、アカシア、コーンデンプンまたはゼラチンなど；崩壊剤、例えば、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプンまたはカルボキシメチルセルロースナトリウムなど；滑剤、例えばタルクまたはステアリン酸マグネシウムなど；および、要すれば、希釈剤、緩衝剤、湿潤剤、防腐剤および着香剤と組み合わせて用いることができる。
【０１９８】
抗Ｔａｕ抗体は、水溶性溶媒または非水溶性溶媒、例えば、野菜もしくは他の類似の油、合成脂肪酸グリセリド、高級脂肪酸のエステルまたはプロピレングリコールなどに；および、要すれば、可溶化剤、等張剤、懸濁化剤、乳化剤、安定化剤および防腐剤などの常套の添加剤と共に、それらを溶解、懸濁または乳化することにより、注射用製剤に製剤することができる。
【０１９９】
抗Ｔａｕ抗体を含む医薬組成物は、所望の純度を有する抗体を、任意の生理的に許容される担体、添加剤、安定化剤、界面活性剤、緩衝剤および／または等張化剤と混合することにより製造される。許容される担体、添加剤および／または安定化剤は、用いる投与量および濃度で受容者（レシピエント）に毒性ではなく、リン酸、クエン酸、および他の有機酸のような緩衝剤；アスコルビン酸、グルタチオン、システイン、メチオニンおよびクエン酸を含む、抗酸化剤；防腐剤（例えば、エタノール、ベンジルアルコール、フェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クロロ−ｍ−クレゾール、メチルまたはプロピルパラベン、塩化ベンザルコニウム、またはそれらの組合せなど）；アミノ酸、例えば、アルギニン、グリシン、オルニチン、リシン、ヒスチジン、グルタミン酸、アスパラギン酸、イソロイシン、ロイシン、アラニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、メチオニン、セリン、プロリンおよびそれらの組合せなど；単糖類、二糖類および他の炭水化物；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば、ゼラチンまたは血清アルブミン；キレート剤、例えばＥＤＴＡ；糖、例えばトレハロース、スクロース、ラクトース、グルコース、マンノース、マルトース、ガラクトース、フルクトース、ソルボース、ラフィノース、グルコサミン、Ｎ−メチルグルコサミン、ガラクトサミン、およびノイラミン酸など；ならびに／または、非イオン性界面活性剤、例えば、Ｔｗｅｅｎ、Ｂｒｉｊ、プルロニック類、トライトン−Ｘ、またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などが含まれる。
【０２００】
医薬組成物は、液体形態、凍結乾燥形態または凍結乾燥形態から再構成された液体形態であってよく、ここで、凍結乾燥製剤は、投与前に滅菌溶液で再構成される。凍結乾燥組成物を再構成するための標準的方法は、（典型的に、凍結乾燥中に除かれる容量と等量の）純水を戻す方法である。しかしながら、抗菌剤を含む溶液は、非経腸投与用医薬組成物の製造に用いられ得る；Chen (1992) Drug Dev Ind Pharm 18, 1311−54もまた参照のこと。
【０２０１】
医薬組成物における抗体濃度の例は、約１ｍｇ／ｍＬから約２００ｍｇ／ｍｌまたは約５０ｍｇ／ｍＬから約２００ｍｇ／ｍＬ、または約１５０ｍｇ／ｍＬから約２００ｍｇ／ｍＬの範囲であり得る。
【０２０２】
抗体の水性製剤は、ｐＨ緩衝溶液として、例えば、約４．０から約７．０、または約５．０から約６．０の範囲のｐＨ、あるいは約５．５のｐＨで製造され得る。この範囲内のｐＨに好適な緩衝液の例には、ホスフェート−、ヒスチジン−、クエン酸−、コハク酸−、酢酸−緩衝液、および他の有機酸緩衝液が含まれる。緩衝液の濃度は、約１ｍＭから約１００ｍＭ、または約５ｍＭから約５０ｍＭであり得て、例えば、緩衝液および製剤の所望の等張性によって変わる。
【０２０３】
等張化剤は、製剤の等張性を調節するために抗体製剤に包含され得る。等張化剤の例としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム、グリセリンおよびアミノ酸群由来のいずれかの成分、糖類ならびにそれらの組合せが含まれる。ある態様において、高張性または低張性溶液が好適であり得るが、水性製剤は等張性である。用語“等張性”は、例えば、生理的な塩溶液または血清と比較される他の溶液と同程度の等張性を有する溶液を示す。等張化剤は、約５ｍＭから約３５０ｍＭの量、例えば、１００ｍＭから３５０ｎＭの量で使用され得る。
【０２０４】
界面活性剤はまた、製剤された抗体の凝集を減らす、および／または製剤中の粒子の形成を最小化する、および／または吸収を減らすために、抗体製剤に追加され得る。界面活性剤の例としては、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（Ｔｗｅｅｎ）、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ｂｒｉｊ）、アルキルフェニルポリオキシエチレンエーテル（トライトン−Ｘ）、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー（ポロキサマー、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）、およびドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）が含まれる。好適なポリオキシエチレンそるビタン−脂肪酸エステルの例は、ポリソルベート２０、（Ｔｗｅｅｎ  ２０(商標)の商品名で販売）およびポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ  ８０(商標)の商標名で販売）である。好適なポリエチレン−ポリプロピレンコポリマーの例は、商標名プルロニック（登録商標）Ｆ６８またはポロキサマー１８８(商標)で販売されるものである。好適なポリオキシエチレンアルキルエーテルの例は、商標名Ｂｒｉｊ(商標)で市販されるものである。界面活性剤の濃度の例は、約０．００１％から約１％ｗ／ｖの範囲であり得る。
【０２０５】
凍結乾燥保護剤(lyoprotectant)はまた、凍結乾燥法の間に不安定化条件から変化しやすい活性成分（例えば、タンパク質）を保護するために添加され得る。例えば、知られている凍結乾燥保護剤としては、糖類（グルコースおよびスクロースを含む）；ポリオール（マンニトール、ソルビトールおよびグリセロールを含む）；および、アミノ酸（アラニン、グリシンおよびグルタミン酸を含む）が含まれる。凍結乾燥保護剤は、約１０ｍＭから５００ｎＭの量で含まれ得る。
【０２０６】
ある態様において、好適な製剤は、抗Ｔａｕ抗体、および１つまたはそれ以上の上記の薬物（例えば、界面活性剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤）を含み、１種またはそれ以上の防腐剤、例えばエタノール、ベンジルアルコール、フェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クロロ−ｍ−クレゾール、メチルまたはプロピルパラベン、塩化ベンザルコニウム、およびそれらの組合せを基本的に含まない。他の態様において、防腐剤は、製剤、例えば、約０．００１から約２％（ｗ／ｖ）の範囲の濃度で、製剤中に含まれる。
【０２０７】
例えば、好適な製剤は、非経腸投与に好適な液体または凍結乾燥製剤であってよく、約１ｍｇ／ｍＬから約２００ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体体；約０．００１％から約１％の少なくとも１種の界面活性剤；約１ｍＭから約１００ｍＭの緩衝剤；任意に、約１０ｍＭから約５００ｍＭの安定化剤；および、約５ｍＭから約３０５ｍＭの等張化剤を含んでいてよく、約４．０から約７．０のｐＨを有する。
【０２０８】
別の例として、好適な非経腸製剤は、約１ｍｇ／ｍＬから約２００ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０４％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；２０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、２５０ｍＭ  スクロースを含み、ｐＨ５．５である、液体または凍結乾燥製剤である。
【０２０９】
別の例として、好適な非経腸製剤は、１）１５ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０４％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；２０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、２５０ｍＭ  スクロースを含み、ｐＨ５．５である凍結乾燥製剤、または２）７５ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０４％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；２０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、２５０ｍＭ  スクロースを含み、ｐＨ５．５である凍結乾燥製剤、または３）７５ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０２％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；２０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、２５０ｍＭ  スクロースを含み、ｐＨ５．５である凍結乾燥製剤、または４）７５ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０４％Ｔｗｅｅｎ  ２０ｗ／ｖ；２０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、２５０ｍＭ  トレハロースを含み、ｐＨ５．５である凍結乾燥製剤、または６）７５ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０２％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；２０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、２５０ｍＭトレハロースを含み、ｐＨ５．５である凍結乾燥製剤、を含む。
【０２１０】
別の例として、好適な非経腸製剤は、１）７．５ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０２２％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；１２０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、２５０  １２５ｍＭ  スクロースを含み、ｐＨ５．５である液体製剤、または２）３７．５ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０２％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；１０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、１２５ｍＭ  スクロースを含み、ｐＨ５．５である液体製剤、または３）３７．５ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０１％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；１０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、１２５ｍＭ  スクロースを含み、ｐＨ５．５である液体製剤、または４）３７．５ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０２％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；１０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；１２５ｍＭ  トレハロースを含み、ｐＨ５．５である液体製剤、または５）３７．５ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０１％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；１０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、１２５ｍＭ  トレハロースを含み、ｐＨ５．５である液体製剤、または６）５ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０２％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；２０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、２５０ｍＭ  トレハロースを含み、ｐＨ５．５である液体製剤、または７）７５ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０２％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；２０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、２５０ｍＭ  マンニトールを含み、ｐＨ５．５である液体製剤、または８）７５ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０２％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；２０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、１４０ｍＭ  塩化ナトリウムを含み、ｐＨ５．５である液体製剤、または９）１５０ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０２％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；２０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、２５０ｍＭ  トレハロースを含み、ｐＨ５．５である液体製剤、または１０）１５０ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０２％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；２０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、２５０ｍＭ  マンニトールを含み、ｐＨ５．５である液体製剤、または１１）１５０ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０２％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；２０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、１４０ｍＭ  塩化ナトリウムを含み、ｐＨ５．５である液体製剤、または１２）１０ｍｇ／ｍＬの抗Ｔａｕ抗体；０．０１％  Ｔｗｅｅｎ  ２０  ｗ／ｖ；２０ｍＭ  Ｌ−ヒスチジン；および、４０ｍＭ  塩化ナトリウムを含み、ｐＨ５．５である液体製剤である。
【０２１１】
抗Ｔａｕ抗体は、吸入により投与されるエアロゾル製剤に利用され得る。抗Ｔａｕ抗体は、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素などのような加圧された許容される噴射剤に製剤され得る。
【０２１２】
さらに、抗Ｔａｕ抗体は、乳化基剤または水溶性基剤のような種々の基剤と混合されて坐薬に製剤され得る。抗Ｔａｕ抗体は、坐薬の形で直腸から投与され得る。坐薬は、カカオバター、カーボワックスおよびポリエチレングリコールのようなビークルであって、体温で融解するが、室温では固化するビークルを含み得る。
【０２１３】
シロップ剤、エリクシル剤、および懸濁液のような経口または直腸投与用単位投与量形態は、各投与量単位、例えば、小さじ一杯、大さじ一杯、錠剤または坐薬が、所定の量の、１つまたはそれ以上の阻害剤を含む組成物を含むように提供され得る。同様に、注射または静脈内投与用の単位投与量形態は、滅菌水、通常の生理食塩水または別の薬学的に許容される担体中の溶液として、組成物中に抗Ｔａｕ抗体を含み得る。
【０２１４】
本明細書で用いる用語“単位投与量形態”は、ヒトおよび動物対象の単位投与量として適する、物理的に分離された単位を意味し、それぞれの単位は、薬学的に許容される希釈剤、担体またはビークルと共に、所望の効果を生じるために十分な量で計算された、事前に決定された量の抗Ｔａｕ抗体を含む。抗Ｔａｕ抗体の仕様は、用いる特定の抗体および達成する効果、ならびに宿主におけるそれぞれの抗体に関連する薬理学に左右され得る。
【０２１５】
他の投与方法はまた、本明細書に記載の方法との使用が見出され得る。例えば、好適な抗体は、坐薬に製剤され得て、いくつかの場合に、エアロゾルおよび点鼻組成物に製剤され得る。坐薬について、ビークル組成物は、従来の結合剤および例えばポリアルキレングリコール、またはトリグリセリドのような担体を含み得る。そのような坐薬は、約０．５％から約１０％（ｗ／ｗ）、例えば、約１％から約２％の範囲で活性成分を含む混合物から形成され得る。
【０２１６】
点鼻製剤は、通常、鼻粘膜に炎症を起こさせず、繊毛機能を顕著に低下させない、ビークルを含み得る。水、生理食塩水または他の既知の物質のような希釈剤が用いられ得る。鼻用製剤はまた、クロロブタノールおよび塩化ベンザルコニウムのような防腐剤を含み得るが、これらに限定されない。界面活性剤は、鼻粘膜による抗体の吸収を増強するために存在し得る。
【０２１７】
抗Ｔａｕ抗体は、注射可能製剤として投与され得る。典型的に、注射可能組成物は、液体溶液または懸濁液として製造され、注射前に液体に溶解または懸濁するのに適した固体形態としても製造することができる。該製剤を乳化すること、または該抗体をリポソームビークル中に封入されてもよい。
【０２１８】
好適な添加剤ビークルは、例えば、水、生理食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノールなど、およびそれらの組合せである。加えて、要すれば、該ビークルは、少量の補助物質、例えば湿潤剤または乳化剤またはｐＨ緩衝剤などを含み得る。そのような投与量形態を製造する実際の方法は知られており、または当業者には明らかであり得る。例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania, 17th edition, 1985を参照のこと。いずれにしても、投与される組成物または製剤は、処置されるべき対象を所望の状態にするのに充分な量の抗Ｔａｕ抗体を含み得る。
【０２１９】
薬学的に許容される添加剤、例えばビークル、アジュバント、担体または希釈剤は、容易に入手可能である。さらに、薬学的に許容される補助物質、例えばｐＨ調整剤および緩衝剤、浸透圧調節剤、安定化剤、および湿潤剤などは、容易に入手可能である。
【０２２０】
ある態様において、抗Ｔａｕ抗体を、制御放出製剤に製剤化する。持続放出製剤は、当技術分野で既知の方法を用いて製造され得る。持続放出製剤の好適な例としては、抗体を含む固体の疎水性ポリマーの半透性マトリックスが含まれ、該マトリックスは、成形品の形態、例えばフィルムまたはマイクロカプセルである。持続放出マトリックスの例としては、ポリエステル、Ｌ−グルタミン酸およびエチル−Ｌ−グルタメートのコポリマー、非分解性エチレン−酢酸ビニル、ヒドロゲル、ポリラクチド、分解性の乳酸−グリコール酸コポリマー、ならびにポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が含まれる。持続放出製剤中に含まれる抗体の生物活性を消失させ、免疫原性を変化させる可能性は、適当な補助物質を用いること、水分含量を調節すること、および特定のポリマーマトリックス組成物を開発することにより、妨げられ得る。
【０２２１】
本発明の範囲内の制御放出は、多くの持続放出投与量形態のいずれか１つを意味すると解釈することができる。以下の用語は、本発明の目的のために、制御放出と実質的に同等とみなすことができる：連続的放出、制御放出、遅延放出（delayed release）、デポー、徐放、長期放出、プログラム放出、持続放出、比例放出、遅延放出（protracted release）、持続性の、遅らせた、遅い放出、間隔をあけた放出、持続放出（sustained release）、タイムコート、持続放出（timed release）、遅延作用、延長された作用、レイヤードタイム作用、長時間作用型、持続性作用、反復作用、遅行性、持続作用（sustained action）、持続作用薬、および持続放出（extended release）。これらの用語のさらなる詳解は、Lesczek Krowczynski, Extended−Release Dosage Forms, 1987 (CRC Press, Inc.)に見出され得る。
【０２２２】
種々の制御放出技術は、非常に広い範囲の薬物投与量形態を包含する。制御放出技術には、物理システムおよび化学システムが含まれるが、これらに限定されない。
【０２２３】
物理システムには、マイクロカプセル化、マクロカプセル化、および膜システムなどの速度制御膜を含む貯蔵システム；中空繊維、超微小孔性セルローストリアセテート、および多孔質ポリマー基質および発泡体などの速度制御膜を含まない貯蔵システム；非多孔性のポリマーマトリクスまたはエラストマーマトリクス（例えば、浸食されない環境の、浸食され得る環境の、薬剤移入、および分解）に物理的に溶解されるそれらのシステム、および非多孔性のポリマーマトリクスまたはエラストマーマトリクス（例えば、浸食されない環境の、浸食され得る環境の、薬剤移入、および分解）に物理的に分散した物質を含む一体化したシステム；外側制御層に化学的に類似の、または非類似の貯蔵層を含む積層構造；ならびに、浸透圧ポンプ、またはイオン交換樹脂上の吸着などの他の物理的方法が含まれるが、これらに限定されない。
【０２２４】
化学システムには、ポリマーマトリックスの化学的浸食（例えば、不均一な浸食、もしくは均一な浸食）、またはポリマーマトリックスの生物学的浸食（例えば、不均一、もしくは均一）が含まれるが、これらに限定されない。制御放出システムのカテゴリーのさらなる詳解は、Agis F. Kydonieus, Controlled Release Technologies：Methods, Theory and Applications, 1980 (CRC Press, Inc.)中に見出され得る。
【０２２５】
経口投与用に開発される多くの制御放出製剤がある。これらには、浸透圧制御型消化管送達システム；動水圧制御型消化管送達システム；微多孔膜透過制御型消化管送達デバイスを含む膜透過制御型消化管送達システム；胃液耐性腸標的化制御放出型消化管送達デバイス；ゲル拡散制御型消化管送達システム；および、イオン交換制御型消化管送達システムが含まれるが、これらに限定されず、これらには、カチオン性薬物およびアニオン性薬物が含まれる。制御放出型薬物送達システムに関するさらなる情報は、Yie W. Chien, Novel Drug Delivery Systems, 1992 (Marcel Dekker, Inc.)中に見出され得る。
【０２２６】
処置プロトコル
ある面において、個体におけるタウオパチー (例えば、急性タウオパチー) の処置法が提供され、該方法は、抗Ｔａｕ抗体を該個体に投与することを含む。
【０２２７】
従って、一態様において、抗Ｔａｕ抗体の用量は、体重１ｋｇ当たりのｍｇで計算される。しかしながら、別の態様において、抗Ｔａｕ抗体の用量は、患者の体重に無関係の固定されたフラットな固定用量である。特定の態様において、投薬レジメンは、最適な所望の応答(例えば、効果的な応答)を提供するように調整される。
【０２２８】
別の態様において、抗Ｔａｕ抗体の用量は経時的に変化する。例えば、抗Ｔａｕ抗体は、当初は高用量で投与されてもよく、時間とともに低減され得る。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、当初には低用量で投与され、経時的に増加される。
【０２２９】
別の態様において、投与される抗Ｔａｕ抗体の量は、各用量について一定である。別の態様において、投与される抗体の量は、各用量に応じて変わる。例えば、抗体の維持（または後続の）用量は、最初に投与される負荷用量（loading dose）より高いかまたは同じであってよい。別の態様において、抗体の維持用量は、負荷用量より低いかまたはそれと同じであってもよい。
【０２３０】
一態様において、抗Ｔａｕ抗体は、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。一態様において、抗Ｔａｕ抗体は、１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。一態様において、抗Ｔａｕ抗体は４ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は一回投与される。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体の２以上の用量が投与される。
【０２３１】
他の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、臨床上の利益が観察される限り、または例えば完全な応答（complete response）もしくは手に負えない毒性（unmanageable toxicity）があるまでは、１週間に１回、２、３週間に１回、１月に１回投与される。
【０２３２】
別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、第一選択処置剤(例えば、当初または初回の処置)として投与される。別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、(例えば、再発後および／または最初の処置が失敗した後を含む、初期または初回の処置後の)第二選択処置剤として投与される。
【０２３３】
以下の実施例は、単なる例示であり、多くの変形および等価物が、本明細書の記載を読めば当業者には明らかとなるであろう任意の方法で、本明細書の記載の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。
【０２３４】
本明細書中に引用される、すべての引用文献の内容、Genbank登録番号、特許および公開された特許出願は、引用により本明細書中に明示的に包含される。
【実施例】
【０２３５】
実施例
以下の実施例は、本発明を如何に実施し、使用するかを完全な開示および説明を当業者に提供するために示され、発明者らが彼らの発明と見なすものの範囲を限定するものではなく、また、以下の実験が実行される全ての実験または唯一の実験であると示すためのものでもない。使用する数字（例えば、量、温度など）に関して正確さを確保する努力がなされたが、いくつかの実験誤差および偏差が考慮されるべきである。特に示さない限り、％は重量％であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏温度であり、圧力は大気圧またはそれに近いものである。標準的な略語、例えば、ｂｐ、塩基対（複数可）；ｋｂ、キロベース（複数可）；ｐｌ、ピコリットル（複数可）；ｓまたはｓｅｃ、秒（複数可）；ｍｉｎ、分（複数可）；ｈまたはｈｒ、時（複数可）；ａａ、アミノ酸（複数可）ｋｂ、キロベース（複数可）；ｂｐ、塩基対（複数可）；ｎｔ、ヌクレオチド（複数可）；ｉ．ｍ．、筋肉内；ｉ．ｐ．、腹腔内；およびｓ．ｃ．、皮下などを用いることができる。
【０２３６】
実施例１：ＴａｕレベルおよびＡβレベルに対するIPN002の効果
オスのカニクイザル (Macaca fascicularis) に、IPN002を２０ｍｇ／ｋｇの用量で単回遅延ボーラス注入により投与し、血漿および脳脊髄液(ＣＳＦ)サンプルを注入後の種々の時間点で集めた。サンプル(ＣＳＦおよび血漿)を、特定のＴａｕを捕捉するＥＬＩＳＡアッセイを用いて、IPN002の存在を測定した。このアッセイは、Ｔａｕに結合していないIPN002のみを検出し得る。さらに、ＴａｕおよびＡβレベルを、市販のＥＬＩＳＡアッセイを用いてＣＳＦにおいて測定した。Ｔａｕアッセイ (Invitrogen)において用いた捕捉抗体は、IPN002と競合するため、アッセイは、遊離Ｔａｕレベルのみ（すなわち、IPN002に結合していないＴａｕのみ）を報告する。
【０２３７】
図１に示すとおり、血漿中のIPN002の最大濃度は、注入直後に達成され（注入の５分後に約６６６μｇ／ｍＬ）、抗体が予期される血中動態で血漿から排出された後、８時間の間、比較的一定に維持された。驚くべきことに、IPN002は、試験した最も早い時点（１時間、図１参照）でＣＳＦ中に検出されたが、血漿中で観察されるよりも遙かに低いレベルであった。ＣＳＦ中におけるIPN002レベルは、注入後最初の２４時間は血漿レベルに追従したが、その後１６８時間は比較的一定のままであった。
【０２３８】
図１。２０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでIPN002を単回注入した後の、カニクイザルのＣＳＦおよび血漿中のIPN002の測定。IPN002を、特定のＥＬＩＳＡアッセイを用いて測定した。値は、特定の時間点で集めた全てのサンプルの平均を表す(平均±標準偏差)。
【０２３９】
IPN002がＣＳＦ中で迅速に検出可能であった観察と一致し、Ｔａｕレベルもまた、IPN002注入の１時間以内に顕著に減少した(図２)。実際に、注入の８時間後には遊離ＴａｕはＣＳＦ中で検出不可能であって、この効果は、ＣＳＦ中のIPN002の薬物動態と一致して、１６８時間持続した。
【０２４０】
図２。２０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでIPN002を単回注入した後の、カニクイザルのＣＳＦ中のIPN002およびＴａｕの測定。IPN002を、特定のＥＬＩＳＡアッセイを用いて測定した。値は、特定の時間点で集めた全てのサンプルの平均を表す(平均±標準偏差)。Ｔａｕ タンパク質を、市販のＥＬＩＳＡアッセイ (Invitrogen)を用いて測定し、値は、特定の時間点で集めた全てのサンプルの平均を表す(平均±平均値の標準誤差)。IPN002注入の７日前(−７日目)に集めたＣＳＦサンプルを、参照のためにグラフ上にプロットしていることに留意する。
【０２４１】
これとは対照的に、ＣＳＦ中のＡβタンパク質のレベルは、試験した条件下では顕著に変化しなかった（図３）。
【０２４２】
図３。２０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでIPN002を単回注入した後の、カニクイザルのＣＳＦ中のＡβおよびＴａｕの測定。ＴａｕおよびＡβタンパク質を市販のＥＬＩＳＡアッセイを用いて測定し、値は、特定の時間点で集めた全てのサンプルの平均を表す(平均±平均値の標準誤差)。IPN002注入の７日前(−７日目)に集めたＣＳＦサンプルを、参照のためにグラフ上にプロットしていることに留意する。
【０２４３】
実施例２：ＴａｕレベルおよびＡβレベルに対するhu-IPN002の効果
オスのカニクイザル (Macaca fascicularis) に、IPN002のヒト化変異体(“hu-IPN002”)を５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇの用量で単回遅延ボーラス注入により投与した。
【０２４４】
血清およびＣＳＦ中のhu-IPN002濃度分析
血清およびＣＳＦ中のhu-IPN002のレベルをアッセイした。結果を図４Ａおよび４Ｂならびに図５Ａおよび５Ｂに示す。
【０２４５】
図４Ａに示す通り、５ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002の投与により、血清中のhu-IPN002レベルは、約０．１時間以内に約２５μｇ／ｍｌであった。図４Ｂに示す通り、２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002の投与により、血清中のhu-IPN002レベルは、約０．１時間以内に約１２０μｇ／ｍｌであった。
【０２４６】
図５Ａに示す通り、５ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002の投与により、ＣＳＦ中のhu-IPN002レベルは、１０時間の時間点で約２５ｎｇ／ｍｌであった。図５Ｂに示す通り、２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002の投与により、ＣＳＦ中のhu-IPN002レベルは、１０時間の時点で約２００ｎｇ／ｍｌであった。薬物動態データを図６にまとめる。
【０２４７】
ＣＳＦ中の遊離Ｔａｕレベルの分析
ＣＳＦ中の遊離Ｔａｕレベルに対するhu-IPN002の効果を試験した。オスのカニクイザルを上記の通りに処理し、ＣＳＦ中の遊離Ｔａｕレベルを測定した。結果を図７に示す。図７に示す通り、５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002の単回注入は、ＣＳＦ中の遊離Ｔａｕレベルを低減させた。Ｔａｕレベルは、hu-IPN002 抗体の投与後１６０時間を超えて低く維持された。
【０２４８】
ＣＳＦ中のＡβレベルの分析
非ヒト哺乳動物のＣＳＦにおけるＡβレベルに対するhu-IPN002の効果を評価した。オスのカニクイザル（Macaca fascicularis）に、hu-IPN002を５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇの用量で単回遅延ボーラス注入により投与した。脳脊髄液（ＣＳＦ）サンプルを注入後の種々の時間点で集めた。ＣＳＦサンプルを、市販のＥＬＩＳＡアッセイを用いて、Ａβ４０の存在を測定した。結果を図８に示す。値は、特定の時間点で集めた全てのサンプルの平均を示す（平均±平均の標準誤差）。
【０２４９】
図８に示す通り、２０ｍｇ／ｋｇのhu-IPN002の単回注入は、約１５０時間後にＣＳＦ中のＡβ４０レベルを低減させた。ＣＳＦ中のＡβ４０レベルは、約３５０時間まで低減し続けた。
【０２５０】
実施例３：Ｔａｕフラグメントは、慢性外傷性脳症 (ＣＴＥ)を有する可能性のある個体から得られたＣＳＦ中に存在する。
ＣＳＦサンプルを、行動／認知障害を示し、ＣＴＥを有する可能性があると考えられた、ナショナルフットボールリーグの元ラインマンから入手した。ＣＳＦサンプルをｅＴａｕフラグメントの存在についてアッセイした。ｅＴａｕフラグメントは、複数の健常個体および複数のＣＴＥを有する可能性がある個体から集めたＣＳＦから親和性を利用して単離した。単離されたｅＴａｕフラグメントをポリアクリルアミドゲル電気泳動を用いて分離した。そして、分離したフラグメントを膜に移した。該膜をIPN001でプローブ化した。図１０に示す結果は、ＴａｕフラグメントがＣＴＥを有する可能性がある個体から得られたＣＳＦ中に存在することを示す。
【０２５１】
実施例４：ＴａｕレベルおよびＡβレベルに対するhu-IPN002の効果 (継続した単回静脈内投与試験−５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇ)
オスのカニクイザルに、hu-IPN002を、５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇの用量で単回遅延ボーラス注入により投与した。血清hu-IPN002の分析のために、血液を、全ての動物から、投与前、ならびに単回投与（１日目）後、０．０８３時間、０．２５時間、０．５時間、１時間、４時間、８時間、１２時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１２０時間、１６８時間、３１２時間（１４日目）、４８０時間（２１日目）、６４８時間（２８日目）、８１６時間（３５日目）、９８４時間（４２日目）、１１５２時間（４９日目）、および１３２０時間（５６日目）にて得た。ＣＳＦ hu-IPN002の分析のために、ＣＳＦを、全ての動物から、投与前、ならびに８時間、２４時間、４８時間、９６時間、１２０時間、および１６８時間、３１２時間（１４日目）、４８０時間（２１日目）、６４８時間（２８日目）、８１６時間（３５日目）、９８４時間（４２日目）、１１５２時間（４９日目）、および１３２０時間（５６日目）にて動物コホートから得た。血清およびＣＳＦ中のhu-IPN002レベルを、酵素結合免疫吸着アッセイ（ELISA）を用いてアッセイした。
【０２５２】
血清およびＣＳＦ中のhu-IPN002濃度の分析
血清 hu-IPN002についての薬物動態のまとめを以下の表４に示し、血清 hu-IPN002濃度 対 時間プロファイルを図２２に示す。
【０２５３】
【表４】
0006629201.tif 000005
【０２５４】
単回静脈内投与後、平均hu-IPN002全身曝露(AUC[0-T] および AUC[INF])は、５ｍｇ／ｋｇから２０ｍｇ／ｋｇの間でおよそ用量比例的に増加した。５および２０ｍｇ／ｋｇ用量それぞれについて、平均CL値は、１．１５および０．９６４ｍＬ／ｈ／ｋｇであり、平均Vss値は、０．２９３および０．２７１Ｌ／ｋｇであった。５および２０ｍｇ／ｋｇ用量それぞれについて、平均T-HALF値は、１７０および１５０時間であった。
【０２５５】
ＣＳＦ hu-IPN002についての薬物動態のまとめを以下の表５に示し、ＣＳＦ hu-IPN002濃度 対 時間プロファイルを図２３に示す。
【０２５６】
【表５】
0006629201.tif 000006
【０２５７】
単回静脈内投与後、hu-IPN002は、最も早い時点（投与後８時間）でサルＣＳＦ中に検出され、平均最大 ＣＳＦ hu-IPN002 濃度は、投与の２３時間後に達成された。ＣＳＦ T-HALF値は、血清中でのそれらの値と同様であった(１．２から１．３倍)。平均 ＣＳＦ hu-IPN002 暴露 (AUC[0-T]) は、５から２０ｍｇ／ｋｇの間で用量比例よりも大きく増加した。平均ＣＳＦ/血清 AUC(0-T) 比は、５および２０ｍｇ／ｋｇそれぞれについて、０．００１３および０．００３８であった。一方、ＣＳＦ AUC (INF) 値は、データ不足のために５ｍｇ／ｋｇで報告されず、２０ｍｇ／ｋｇでのＣＳＦ AUC(INF)値は、血清 AUC(INF)値に対して ０．００３９であった。
【０２５８】
ＣＳＦ中の遊離Ｔａｕレベルの分析
ＣＳＦ中の遊離Ｔａｕレベルに対するhu-IPN002の効果もまた試験した。オスのカニクイザルを上記の通りに処理し、ＣＳＦ中の遊離Ｔａｕレベルを市販のＥＬＩＳＡキットを用いて測定した。結果を図１１に示し、ＣＳＦ 遊離ｅＴａｕ レベル (ベースラインの百分率) 対 経時プロファイルで示される。
【０２５９】
図２４に示す通り、hu-IPN002を単回静脈内投与した後、ＣＳＦ 遊離 ｅＴａｕレベルは、最も早い時点（投与後８時間）で用量依存的に低減し、５および２０ｍｇ／ｋｇのそれぞれで８３％および９９％の最大減少を示した。５ｍｇ／ｋｇ用量では、最大の標的との結合（target engagement）(最小の遊離ｅＴａｕ)は、４８時間から９６時間の間に達成され、遊離ｅＴａｕレベルは、ベースラインの１７．３−２１％であった。遊離ｅＴａｕレベルは、単回静脈内投与の約４８０時間 (２１日目)後にベースラインに戻った。これとは対称的に、２０ｍｇ／ｋｇでのｅＴａｕレベルは、投与後８週間に亘りベースラインより低く維持された。２０ｍｇ／ｋｇ用量において、最大の標的との結合が８から１６８時間の間に観察され、遊離ｅＴａｕレベルは、ベースラインの１．３５−７．４４％であった。一方、遊離ｅＴａｕレベルは、１３２０時間の試験期間に亘ってベースラインと比較して低く維持され、濃度は、後の時点でベースラインに向かって増加した。
【０２６０】
ＣＳＦ中のＡβレベルの分析
オスのカニクイザル (Macaca fascicularis)のＣＳＦ中のＡβレベルに対するhu-IPN002の効果もまた評価した。オスのカニクイザルを上記の通りに処理し、ＣＳＦサンプルを注入後の種々の時間点で集めた。ＣＳＦサンプルを市販のＥＬＩＳＡアッセイを用いてＡβ４０の存在について測定した。結果を図２５に示し、ＣＳＦ Ａβ４０レベル (ベースラインの百分率) 対 経時プロファイルで示される。５ｍｇ／ｋｇ用量群では、ＣＳＦ Ａβ４０レベルに変化は観察されなかった。これとは対称的に、２０ｍｇ／ｋｇ用量群において、ＣＳＦ Ａβ４０レベルは、４８０時間の時点で、ベースラインの８２％まで平均値が低減した。８１６時間まで、および残りの実験期間中、ＣＳＦ Ａβ４０レベルはベースラインに戻った。ＣＳＦ Ａβ４０レベルは、投与の３週間後に２０ｍｇ／ｋｇ群でベースラインに対して１７％減少したが、６４８時間後にベースラインに戻った。
【０２６１】
実施例５:ＴａｕレベルおよびＡβレベルに対するhu-IPN002の効果(単回静脈内投与試験−０．５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、または２０ｍｇ／ｋｇ)
単回用量、多数回用量レベル、静脈内(IV)ボーラス注射試験を、５７日間に亘って、hu-IPN002の血清およびＣＳＦ 薬物動態学的および薬力学的プロファイルを評価するために行った。用いる用量レベルは、０．５、２、５および２０ｍｇ／ｋｇであった。薬力学的評価項目には、遊離ＣＳＦ ｅＴａｕおよびＡβ４２が含まれた。
【０２６２】
１１匹のオスのカニクイザルに、血管アクセスポート (大腿静脈および大腿動脈) および脳脊髄液 (ＣＳＦ) 腰部アクセスポート (Ｌ１で終わるカテーテル)を以前に移植していた。それぞれが、小分子薬理学的研究で以前に使用されていたが、これらの試験前に少なくとも１ヶ月の休薬期間があった。サルは、実験の開始時に、およそ５−９歳で、体重４．６−８．７ｋｇであった。サル対象は、一般的に、注入前の朝を除いて、ペアで飼育され、標準サル餌(Harlan Teklad Global 20％ protein Primate Diet 2050)を用いた。水は継続的に利用可能であり、新鮮な果物を週に２回提供した。おもちゃおよび採餌デバイスは、日常的に提供し、テレビ番組は、コロニー部屋で利用可能であった。実験動物のケアは、米国公衆衛生局実験動物の愛護管理と使用に関する方針、および実験動物の管理と使用のためのガイド(2011)に従って行った。
【０２６３】
各分析物のベースライン測定を、試験の開始に先立って、複数のＣＳＦサンプルから決定した。試験は、各動物へのビークル投与から開始した。ビークルは、静脈アクセスポートを媒介して２０分かけて６ｍｌ／ｋｇの単回遅延ボーラス用量として投与された。ビークルは、１０ｍＭ リン酸および１４０ｍＭ ＮａＣｌからなる、ｐＨ５．８のＰＢＳ中、０．０２％ Ｔｗｅｅｎ−８０であった。血液およびＣＳＦを、ビークル投与後およびhu-IPN002の投与前に少なくとも２週間採取し、hu-IPN002を以下のスケジュールで投与した。血清サンプリング時点は、投与前、動脈アクセスポートを介して注入後、０．５時間、１時間、２時間、４時間、８時間、２４時間、４８時間、７２時間、１６８時間、３３６時間 (時間は、注入終了に関係する)であった。ＣＳＦサンプリング時点は、注入後、２時間、４時間、７時間、８時間、２４時間、２５時間、４８時間、４９時間、７２時間、７３時間、１６８時間、１６９時間、３３６時間および３３７時間であった。
処置群を表６に示すように割り当てた。hu-IPN002は、静脈アクセスポートを媒介して２０分かけて６ｍｌ／ｋｇの用量を０．５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇまたは２０．０ｍｇ／ｋｇの単回遅延ボーラス用量として投与された。血清サンプリング時点は、投与前、動脈アクセスポートを介して注入後、０．５時間、１時間、２時間、４時間、８時間、２４時間、４８時間、７２時間、１６８時間、３３６時間、５０４時間、６７２時間、８４０時間、１００８時間、１１７６時間、１３４４時間および１５１２時間(時間は、注入終了に関係する)であった。ＣＳＦサンプリング時点は、注入後、２時間、４時間、７時間、８時間、２４時間、２５時間、４８時間、４９時間、７２時間、７３時間、１６８時間、１６９時間、３３６時間、３３７時間、５０４時間、５０５時間、６７２時間、６７３時間、８４０時間、８４１時間、１００８時間、１００９時間、１１７６時間、１１７７時間、１３４４時間、１３４５時間、１５１２時間および１５１３時間であった。８時間、２５時間、４９時間、７３時間、１６９時間、３３７時間、５０５時間、６７３時間、８４１時間、１００９時間、１１７７時間、１３４５時間および１５１３時間からのＣＳＦサンプルを、中間分析のために使用し、他のサンプルは、試験の終了時に単一のバッチで分析した。
【０２６４】
【表６】
0006629201.tif 000007
【０２６５】
血清およびＣＳＦ hu-IPN002 濃度の分析
hu-IPN002レベルを、血清およびＣＳＦサンプルの両方で特異的ＥＬＩＳＡを用いて測定した。図２６は、血清中のhu-IPN002の予測(fitted)データ 対 実測データを示し、図２７は、ＣＳＦ中のhu-IPN002の予測データ 対 実測データを示す。
【０２６６】
図２６に示す通り、hu-IPN002のAUC[INF]は、０．５ｍｇ／ｋｇから２０ｍｇ／ｋｇの用量比例様式で増加した(０．５、２、５および２０ｍｇ／ｋｇにてそれぞれ、４１３１、２０１９２、４７０８７および１４５３００μｇ・ｈ／ｍＬ)。平均血清半減期 [T-HALF] 値は、２１８から２７６時間の範囲であった。平均血清クリアランス [CL]は、０．１２ｍＬ／ｈ／ｋｇであると計算された。Vss値は、０．０３７から０．０５９Ｌ／ｋｇの範囲であった。
【０２６７】
図２７に示す通り、０．５ｍｇ／ｋｇ用量にて、ＣＳＦ暴露が、血清濃度により予想よりも低く現れた (ＣＳＦ中のAUC[0-T] は、血清 AUC[0-T]の０．０５％であると決定された) こと以外、ＣＳＦ中のhu-IPN002濃度もまた、用量比例様式で増加し、ここで、AUC[0-T]は、hu-IPN002の対応する血清 AUC[0-T]の０．１％であった。
【０２６８】
ＣＳＦ中の遊離Ｔａｕレベルの分析
ＣＳＦ中の遊離ｅＴａｕレベルに対するhu-IPN002の効果を、ＥＬＩＳＡを用いて測定した。図２８は、ＣＳＦ中のhu-IPN002 ｅＴａｕの予測データ 対 観測データを示す。ｅＴａｕの分解についてのKdegは、０．１１ｈ−１であると推定された。Kdは、０．１６ｎｍｏｌ／Ｌであると推定された。
【０２６９】
図２９Ａおよび２９Ｂならびに以下の表６に示す通り、hu-IPN002は、遊離ｅＴａｕの用量および時間依存的減少を誘導した。
【０２７０】
【表７】
0006629201.tif 000008
【０２７１】
図２９Ａおよび２９Ｂに示す通り、hu-IPN002は、ＣＳＦ 遊離ｅＴａｕを用量および時間依存的様式で低減させた。例えば、それぞれ０．５、２、５および２０ｍｇ／ｋｇ  ＩＶ(静脈内)用量の投与後２４時間にて、遊離ｅＴａｕレベルを、ベースラインの８６．７％、ベースラインの３７．９％、ベースラインの２０．２％およびベースラインの８．３％まで低減させた。それぞれ０．５、２、５および２０ｍｇ／ｋｇ  ＩＶ用量の投与後４８時間にて、遊離ｅＴａｕレベルを、ベースラインの７８．８％、ベースラインの２７．４％、ベースラインの１４．１％およびベースラインの８．７％まで低減させた。それぞれ０．５、２、５および２０ｍｇ／ｋｇ  ＩＶ用量の投与後７２時間にて、遊離ｅＴａｕレベルを、ベースラインの６９．３％、ベースラインの３１．５％、ベースラインの１２．８％まで、および定量下限まで低減させた。遊離ｅＴａｕレベルは、それぞれ０．５、２、５および２０ｍｇ／ｋｇ  ＩＶ用量の投与後、７２時間での６９．３％、１６８時間での２６．７％、３３６時間での１１．５％、および２４時間での＜１０％（％  ベースライン）の最小レベルまで低減された。これとは対称的に、ビークル投与動物（ｎ＝１）における遊離ｅＴａｕレベルは、８９．９％から１３０．２％の間で変化した。０．５ｍｇ／ｋｇ投与後の遊離ＣＳＦ ｅＴａｕの最大減少は、〜５０％であって、一方、２０ｍｇ／ｋｇ投与では＞９０％の減少を生じ、その中間用量では、この範囲の減少値を生じた。遊離ｅＴａｕの減少は、長時間続き、２、５および２０ｍｇ／ｋｇ用量群では、ベースラインに戻る傾向はあったが、投与後１５１２時間（５７日目）でも減少が観察された。それぞれ０．５および２ｍｇ／ｋｇ用量の投与後、遊離ＣＳＦ ｅＴａｕは、８日目および５７日目にベースラインレベルに戻り、一方、それぞれ５および２０ｍｇ／ｋｇ用量の投与後、遊離ＣＳＦ ｅＴａｕは、５７日目に〜５０％および〜７０％まで低減されたままであった。これらの結果は、ＣＳＦ中のhu-IPN002の薬力学的活性を確証する。観察された遊離ｅＴａｕの低減は、ｅＴａｕへのhu-IPN002の結合、ｅＴａｕの絶対的レベルの減少またはその両方の組み合わせを含む、複数の機序によって説明できた。
【０２７２】
ＣＳＦ中のＡβレベルの分析
ＣＳＦ中のＡβレベルに対するhu-IPN002の効果を、インハウスアッセイおよび市販のキット(Millipore)を含む、２つの異なるサンドイッチＥＬＩＳＡ法を用いて測定した。図３０Ａ−３０Ｂおよび以下の表７(インハウス アッセイ)ならびに図３１Ａ−３１Ｂおよび以下の表８ (Millipore アッセイ)に示す通り、hu-IPN002は、いずれの用量でもＣＳＦ Ａβレベルに影響を及ぼさなかった。これは、本明細書に記載の他の試験結果と一致しない。この不一致の原因は不明であるが、異なる投与レジメン (例えば、複数回投与プロトコルと単回投与プロトコル)によるものである可能性がある。
【０２７３】
【表８】
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【０２７４】
【表９】
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【０２７５】
具体的には、図３０Ａ−３０Ｂに示す通り、ＣＳＦ Ａβ４２レベルは、varied from  in theビークル投与動物でハウスアッセイを用いて、９１．７％から１１７．５％（％ベースライン）まで変化した。図３１Ａ−３１Ｂに示す通り、レベルは、Millipore アッセイを用いて、９８．６％から１２０．９％（％ベースライン）まで変化した。両アッセイにおいて、hu-IPN002投与動物におけるＣＳＦ Ａβ４２レベルは、ビークル対照と同様であった。
【０２７６】
実施例６：ＴａｕレベルおよびＡβレベルに対するhu-IPN002の効果 (多数回静脈内投与試験)
複数用量の静脈内 (ＩＶ)ボーラス注入試験を、hu-IPN002の薬物動態および薬力学を評価するために行い、オスのカニクイザルに複数回静脈内投与後、４から６ヶ月に亘って試験した。用量は、試験１日目、２９日目および５７日目に投与した。用いた用量は以下の通りである。
１．  ０ｍｇ／ｋｇ（ビークル）×３用量；
２．  ２０ｍｇ／ｋｇ×３用量；
３．  ４０ｍｇ／ｋｇ×３用量；および
４．  ６０ｍｇ／ｋｇ×１用量、その後、２０ｍｇ／ｋｇ×２用量。
【０２７７】
２０ｍｇ／ｋｇ×３用量群は、最終用量の投与後、さらに５６日間延長された。
【０２７８】
hu-IPN002レベルは、ＥＬＩＳＡを用いて血清およびＣＳＦの両サンプルで測定した。血液を、全ての動物から、１日目の投与後、０ (投与前)、０．０５、０．０８３、０．５、１、８、１２、２４、４８、７２、１２０、１６８、３３６、５０４、６４８時間、２９日目の投与後、０ (投与前)、０．０５、０．０８３、０．２５、４、８、１２、２４、４８、９６、１６８、３３６、５０４、６４８時間、そして５７日目の投与後、０ (投与前)、０．０５、０．０８３、０．５、１、８、１２、２４、４８、７２、１２０、１６８、３３６、５０４、６７２、８４０、１００８、１１７６、１３４４時間の時点で血清 hu-IPN002の分析のために採取した。さらなる血液サンプルを、血清 hu-IPN002の分析のために、２０ｍｇ／ｋｇ×３用量群において、動物から、５７日目の投与後、１５１２、１６８０、１８４８、２０１６、２１８４、２３５２、２５２０および２６８８時間にて採取した。
【０２７９】
血清 hu-IPN002 濃度の分析
初回投与後、平均hu-IPN002 全身曝露(AUC[0-672h]) は、２０から６０ｍｇ／ｋｇへおよそ用量比例的に増加した (表９；図３２)。反復投与後、５７日目（３回目の投与後）の平均hu-IPN002 全身曝露(AUC[0-672h]) もまた、２０および４０ｍｇ／ｋｇを２８日毎に投与して、用量比例的に増加した (表１１；図３４)。平均血清 T-HALF 値は、２１０から３９０時間の範囲であった。
【０２８０】
反復投与後、２０および４０ｍｇ／ｋｇを２８日毎の投与で、５７日目の３回目の投与後の平均hu-IPN002 全身暴露 (AUC[0-672h])は、初回投与後のものと同様 (０．８および０．９×)であって、２９日目の２回目の投与後の暴露と同等であった(１．０および０．９×) (表１０および１１；図３３および３４)。暴露の蓄積または喪失は観察されなかった。定常状態は、初回投与後に達成された。
【０２８１】
６０ｍｇ／ｋｇの負荷用量および２８日毎の２回の２０ｍｇ／ｋｇの維持用量の投与後、グループ４における５７日目の平均hu-IPN002全身暴露(AUC[0-672h])は、２８日毎の２０ｍｇ／ｋｇの３回投与後のグループ２における暴露と同様であって（１．１×）、このことは、負荷用量が、５７日目の血清 hu-IPN002 暴露に実質的な影響を与えなかったことを示す (表１１および図３４)。
【０２８２】
【表１０】
0006629201.tif 000011
【０２８３】
【表１１】
0006629201.tif 000012
【０２８４】
【表１２】
0006629201.tif 000013
【０２８５】
ＣＳＦ hu-IPN002 濃度の分析
ＣＳＦもまた、全ての動物から、投与前、１日目および２９日目の投与後、８、４８、１６８、３３６、５０４、６４８時間、ならびに５７日目の投与後、８、４８、１６８、３３６、５０４、６７２、８４０、１００８、１１７６および１３４４時間の時点で、ＣＳＦ hu-IPN002の分析のために採取した。さらなるＣＳＦ サンプルを、５７日目の投与後、１５１２、１６８０、１８４８、２０１６、２１８４、２３５２、２５２０および２６８８時間の時点で、ＣＳＦ hu-IPN002の分析のために、２０ｍｇ／ｋｇ ３用量群の動物から採取した。
【０２８６】
初回投与後、平均ＣＳＦ hu-IPN002曝露(AUC[0-T]) は、２０から６０ｍｇ／ｋｇへおよそ用量比例的に増加した (表１２；図３５)。反復投与後、５７日目の平均ＣＳＦ hu-IPN002曝露(AUC[0-672h]) もまた、２０および４０ｍｇ／ｋｇを２８日毎に投与して、用量比例的に増加し(表１４；図３７)、ＣＳＦ AUC(0-672h) 値は、対応する血清 AUC(0-672h)値の０．００１３から０．００１４倍であった。
【０２８７】
反復投与後、２０および４０ｍｇ／ｋｇを２８日毎の投与で、５７日目の３回目の投与後の平均ＣＳＦ hu-IPN002 暴露 (AUC[0-672h])は、初回投与後のものと同様 (１．２×)であって、２９日目の２回目の投与後の暴露と同等であった(１．２×) (表１３；図３６)。暴露の蓄積または喪失は観察されなかった。定常状態は、初回投与後に達成された。
【０２８８】
６０ｍｇ／ｋｇの負荷用量、その後の４週毎の２回の２０ｍｇ／ｋｇの用量の投与後、グループ４における５７日目の平均ＣＳＦ hu-IPN002暴露(AUC[0-672h])は、２８日毎の２０ｍｇ／ｋｇを受容したグループ２における暴露と同様であって（１．２×）、このことは、負荷用量が、血清 hu-IPN002 暴露に実質的な影響を与えなかったことを示す (表１４および図３７)。明らかなＣＳＦ T-HALF値は、２５０から３１０時間の範囲であった。
hu-IPN002は、任意の対照ＣＳＦ サンプルでは観察されなかった。
【０２８９】
【表１３】
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【０２９０】
【表１４】
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【０２９１】
【表１５】
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【０２９２】
ＣＳＦ中の遊離ｅＴａｕレベルの分析
ＣＳＦ中の遊離ｅＴａｕレベルに対するhu-IPN002の効果を、市販のＥＬＩＳＡを用いて測定した。全ての用量についての、ＣＳＦ 遊離ｅＴａｕレベル (ベースラインの百分率) 対 経時プロファイルを図３８に示す。
【０２９３】
初回投与後、ＣＳＦ 遊離ｅＴａｕレベルは、測定した最も早い時点で、８時間の時点で、３つの用量全てで、用量依存的に迅速に低減した。ＣＳＦ 遊離ｅＴａｕレベルは、４０ｍｇ／ｋｇ用量で最大限に抑制されることが明らかであったが、全ての用量が、ＣＳＦ 遊離ｅＴａｕを≧７５％まで減少させた。遊離ｅＴａｕレベルは、試験１１２日目まで、または最後の投与後５５日間、全ての用量群で、ベースラインに戻らなかった。
【０２９４】
試験を、ＣＳＦ遊離ｅＴａｕレベルがベースラインに戻るかどうかを決定するために、２０ｍｇ／ｋｇ用量について２ヶ月延長した。図３９に示す通り、３用量の最後の投与後、試験１６２−１６９日または１０５−１１２日目までに、ＣＳＦ 遊離 ｅＴａｕは、ベースライン値付近まで戻る。３用量でのほとんどの時点でのｅＴａｕの減少は、ビークルとは顕著に異なっていた(データ示さず)。ある態様において、ｐ値は、アッセイ値が検出下限以下であったため、計算できなかった。
【０２９５】
まとめると、hu-IPN002は、この反復投与、多数回用量レベルの試験において、静脈内投与後のカニクイザルＣＳＦ中の遊離ｅＴａｕの迅速かつ持続的な減少をもたらした。試験した全ての用量レベルにおいて、ＣＳＦ遊離ｅＴａｕは、３回目の投与後、試験期間(１１２日)または５５日間、減少したままであった。４０ｍｇ／ｋｇ用量レベルは、ＣＳＦ 遊離ｅＴａｕの最も持続的な減少を提供することが明らかであった。
【０２９６】
ＣＳＦ中のＡβ４２レベルの分析
全ての用量についての、ＣＳＦ Ａβ４２レベル (ベースラインの百分率) 対 経時プロファイルを図４０に示す。図４０に示す通り、hu-IPN002は、この実験においてＣＳＦ Ａβ４２を低減する。全ての用量が、初回投与後２１日でＣＳＦ Ａβ４２を低減させた。Ａβ４２の最大かつ最も持続的な（４０−５０日）減少は、３回目の投与後（５７日目）に始まった。Ａβ４２の最大減少(ベースラインの２５−５０％)は、試験７７日目または３回目の投与後２０日に生じた。全ての用量レベルで、Ａβ４２値は、試験１０６日目または３回目の投与後４９日でベースラインに戻った。hu-IPN002によって生じたＣＳＦ Ａβ４２ の減少には、わずかな用量依存性が認められた。
【０２９７】
実施例６：ヒトにおける薬物動態および有効用量の予測
Estimation of 薬物動態
Ihu-IPN002のヒト薬物動態学パラメーターを、サルから単一種のアロメトリーに基づいて予測した。ヒトのクリアランスは０．０６ｍＬ／時間／ｋｇと予測された。ヒトの定常状態（Ｖｓｓ）での分布の予測量は、０．０４１Ｌ／ｋｇである。
【０２９８】
サルにおいて見られる血清濃度プロファイルの双指数関数的な性質を捕捉するために、、ヒト薬物動態学プロファイルを、ＣＳＳ−平均滞留時間 (ＭＲＴ)法を用いて予測した。予測されるヒトプロファイルの非コンパートメント分析は、それぞれ、０．０４Ｌ／ｋｇおよび５３５時間の、容積 (Ｖｚ)および半減期 (T-HALF)を生じた。推定される薬物動態学パラメーターを以下の表１５に記載する。
【０２９９】
【表１６】
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【０３００】
モデルは、ＣＳＦ中のＴａｕの半減期について報告された文献値 (kdeg = 0.002 h-1と等しい１１日) とは異なるkdeg (0.1 h-1) を予測した (Yamada K、et al., J. Exp. Med., 2014 Mar 10;211(3):387-93)。
【０３０１】
ヒトにおける有効用量の予測
４週間のｅＴａｕ濃度の７５％の持続的低下は、ヒトにおいて有効である可能性が最も高い標的管理を提供するために選択された。
【０３０２】
１０ｍｇ／ｋｇ (７００ｍｇ)の用量は、４週間に亘ってｅＴａｕの７５％減少を達成するのに必要である。血清およびＣＳＦ中のhu-IPN002ならびにＣＳＦ中のｅＴａｕの予測される濃度−時間プロファイルもまたシミュレーションした(図４１)。
【０３０３】
定常状態のシミュレーションでは、４週毎に１回の１０ｍｇ／ｋｇ用量投与は、２４種間に亘り、遊離 ｅＴａｕ濃度の減少を維持すると予測された。１０ｍｇ／ｋｇの負荷用量の投与、その後の４週間毎の４ｍｇ／ｋｇの維持用量の投与により、hu-IPN002の全体的な血清暴露は低減され、ｅＴａｕ減少の割合は、７５％またはそれ以上に維持された(図４２−４３)。１０ｇ／ｋｇ Q4W（４週毎に１回投与）について予測される Cmaxss は、５９２ｕｇ／ｍｌと計算され、一方、１０ｍｇ／ｋｇ負荷用量の投与、その後の４ｍｇ／ｋｇ Q4Wの投与では、２４１ｕｇ／ｍｌであることが見出された。２用量レジメンについて対応するAUCSSは、それぞれ２０４，９７７μｇ＊ｈ／ｍＬおよび８４，１１４μｇ＊ｈ／ｍＬである。負荷用量および維持用量アプローチは、単一負荷用量の投与のすぐ近くで遊離 ｅＴａｕレベルの実質的な低減を可能にし、より低い維持用量を用いてｅＴａｕ レベルの減少を維持することが期待される。
【０３０４】
【表１７】
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【０３０５】
本発明は、その特定の態様を引用して記載されているが、種々の変更が行われ得て、同等物は、本発明の真の精神および範囲から逸脱することなく置き換えることができることが、当業者には理解されるべきである。さらに、多くの改良が、本発明の目的、精神および範囲に、特定の状況、材料、物質の組成、方法、一工程または複数工程を適合させて行うことができる。全てのそのような改良は、本明細書に添付した特許請求の範囲内であることが意図される。
【０３０６】
【表１８】
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【表１９】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【配列表】
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