(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
それを必要とする温血動物または哺乳動物における身体活動エネルギーの発生および安定維持を提供するための、ならびに筋肉強度、筋肉量および精神的敏捷性を改善するための自然エネルギーエンハンサーとしての相乗的組成物であって、
マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ）およびタマラニッケイ（Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ）由来の抽出物または画分を含有する、相乗的組成物。
【請求項２】
バジリコ（Ｏｃｉｍｕｍ  ｂａｓｉｌｉｃｕｍ）、ショウガ（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）、ハマビシ（Ｔｒｉｂｕｌｕｓ  ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ）、アジョワン（Ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｍ  ａｍｍｉ）、ハッカ（Ｍｅｎｔｈａ  ａｒｖｅｎｓｉｓ）、クベバ（Ｐｉｐｅｒ  ｃｕｂｅｂａ）およびフェンネル（Ｆｏｅｎｉｃｕｌｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ）由来の抽出物または画分から選択される少なくとも１つの生物学的に活性な成分を更に含む、請求項１に記載の相乗的組成物。
【請求項３】
マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ）およびタマラニッケイ（Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ）由来の個々の抽出物または画分の濃度が、２０％〜８０％の範囲で変化する、請求項１又は２に記載の相乗的組成物。
【請求項４】
哺乳動物におけるエネルギー、筋肉強度、筋肉量および精神的敏捷性、身体活動、体力、エネルギーレベル、スタミナレベル、循環健康、血管健康の発生および安定維持のための、または良好な身体的健康および精神的健康のための、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ）およびタマラニッケイ（Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ）由来のハーブ抽出物または画分を含む、請求項１又は２に記載の相乗的組成物。
【請求項５】
マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ）およびタマラニッケイ（Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ）由来のハーブ抽出物または画分を含み、賦形剤、希釈剤、甘味料、香味料、着色料、ビタミンまたはアミノ酸、栄養素から選択される少なくとも１つの成分をさらに含有する、請求項１に記載の相乗的組成物。
【請求項６】
それを必要とする恒温動物における筋肉強度、筋肉量、身体活動、体力、精神的敏捷性、エネルギーレベル、スタミナレベル、循環健康、血管健康を増強するための、または良好な精神的健康のための、健康補助食品、食品成分製剤、例えば飲料、スナックおよびエネルギードリンクに製剤化され得る、請求項１又は２に記載の相乗的組成物。
【請求項７】
乳酸代謝に影響を与え、疲労を軽減することによって有酸素能力および有酸素容量を改善するために、ならびに限定されないが、ＡＴＰレベル／産生；一酸化窒素レベル、ＮＡＤＨバランス、レプチンレベルおよび脂肪細胞由来ペプチドを含む生物学的エネルギーマーカーの１つ以上の緩和のために有用な、請求項１又は２に記載の相乗的組成物。
【請求項８】
前記抽出物または画分が、Ｃ１−Ｃ５アルコール；Ｃ１−Ｃ７炭化水素；エステル；水およびそれらの混合物からなる群より選択される溶媒を使用して、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ）およびタマラニッケイ（Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ）から生成され得る、請求項１又は２に記載の相乗的組成物。
【請求項９】
前記抽出物または画分が、葉、果皮、頭状花、茎、根、樹皮から選択される植物部分、植物全体またはそれらの混合物の少なくとも１つから得られる、請求項１又は２に記載の相乗的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の技術分野：
本発明は、哺乳動物における身体的能力、筋肉強度およびエネルギーレベルを増強するための自然エネルギーエンハンサーとしての新規相乗的健康補助食品組成物であって、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来の抽出物および画分から選択される少なくとも２つの成分を含む新規相乗的健康補助食品組成物に関する。
【０００２】
本発明はさらに、エネルギー、筋肉強度および精神的敏捷性の発生および安定維持のための、ならびに筋力、身体活動、体力、精神的敏捷性、エネルギーレベル、スタミナレベル、循環健康、血管健康を増強するための、または良好な身体的健康および精神的健康のための食品成分製剤、例えば飲料、栄養成分製剤、スナックおよびエネルギードリンクであって、前記ハーブ成分またはその組成物を含有する食品成分製剤、例えば飲料、栄養成分製剤、スナックおよびエネルギードリンクに関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景：
人間の生活のすべての活動の背後にある基本的な力および条件は、エネルギーの存在である。エネルギーは、生命を維持するのに必要な生命力であり、生存（あらゆる行為はエネルギーを使用する）、思考、感情、歩行、飲食、夢見、呼吸などのあらゆる面で必要とされる。エネルギーは、その消費により知覚および経験される。（菓子などの）食後直ぐに経験するエネルギー、またはコーヒーの消費後に感じる興奮は、エネルギーの蓄積によるものではなく、体のエネルギー保存庫からエネルギーが消費されることによるものである。年齢、疲労およびストレスにより、人々はエネルギー不足を感じる。このエネルギー障害は、非常に多くの場合に、体の精神的敏捷性を損なう。体のエネルギー需要に適切に対処することによって、職場および個人管理の効率性を高めることができる。
【０００４】
身体的に活発な人々または脆弱な人々は、身体的能力、体力を増加させるために、健康を改善するために、または身体活動の潜在的な悪影響（例えば、傷害または慢性疲労または免疫機能の抑制）を軽減するために、健康補助食品を使用している。
【０００５】
現在、多くのエネルギー飲料、サプリメントおよび食品成分製剤が市場で入手可能であるが、二糖、炭水化物複合体、タンパク質、アミノ酸およびビタミンが多数の他の薬剤と共にそれらに満載されている。これらの製剤の多くは、非常に素早く作用するので瞬間的なエネルギーを供給することができず、一定期間にわたってそのレベルを持続しない。また、これらの製剤は、血中グルコースレベルを急激に増加させる傾向があり、この後にそれらが急速に枯渇する。これは、合併症につながる可能性もある。したがって、活力、一般的な機敏性、耐久性および精神的敏捷性を改善する天然サプリメントには大きな需要がある。上記要求に応えるために、世界中の多くの研究グループが、優れた製品の開発に取り組んでいる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
したがって、本発明は、エネルギーおよび／または精神的敏捷性を提供する抽出物、画分または組成物を提供することによって、当技術分野における既存の必要性に応えるものである。したがって、本発明は、哺乳動物においてエネルギーレベルを長期間増加させて、エネルギーレベル、筋力および精神的敏捷性を増強することができる成分および／または組成物を提供し、それによりこれらの必要性を解決する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、エネルギーレベルを長期間増加させて筋力および精神的敏捷性を改善することができる新規相乗的健康補助食品組成物であって、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来の抽出物または画分から選択される少なくとも２つの成分／要素を含む新規相乗的健康補助食品組成物を提供する。
【０００８】
重要な態様では、本発明は、哺乳動物におけるエネルギー、筋肉強度および精神的敏捷性の発生および安定維持のための、ならびに筋力、筋肉量、身体活動、体力、精神的敏捷性、エネルギーレベル、スタミナレベル、循環健康、血管健康を増強するための、または良好な身体的健康および精神的健康のための新規相乗的健康補助食品組成物であって、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来の抽出物または画分から選択される少なくとも２つの成分／要素を含む新規相乗的健康補助食品組成物を提供する。
【０００９】
別の態様では、本発明は、エネルギーおよび精神的敏捷性の発生および安定維持のための健康補助食品、食品成分製剤、例えば飲料、スナックおよびエネルギードリンクであって、上記成分またはその組成物を含有する健康補助食品、食品成分製剤、例えば飲料、スナックおよびエネルギードリンクを提供する。前記製剤は、哺乳動物における筋力、身体活動、体力、精神的敏捷性、筋肉量、エネルギーレベル、スタミナレベル、循環健康、血管健康を増強するために、または良好な身体的健康および精神的健康のために有用である。
【００１０】
さらに別の態様では、本発明は、活性化合物、植物化学物質、治療的な健康効果が証明された植物、動物または微生物由来のもの；薬学的または栄養的に許容され得る薬剤、有効成分、ビタミン、アミノ酸およびミネラルから選択される少なくとも１つの成分と場合により組み合わせて、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来の抽出物および画分から選択される少なくとも２つの成分を含む新規相乗的健康補助食品組成物を提供する。
【００１１】
さらに別の態様では、本発明は、それを必要とする温血動物におけるエネルギー；筋肉強度、精神的敏捷性の発生および安定維持のための、ならびに筋力、筋肉量、身体活動、体力、精神的敏捷性、エネルギーレベル、スタミナレベル、循環健康、血管健康を増強するための、または良好な精神的健康のための組成物であって、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来の組成物を含む。
【００１２】
さらに別の態様では、本発明は、哺乳動物においてエネルギーを増加させて、エネルギー、筋肉強度および精神的敏捷性の発生および安定維持を提供する方法であって、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来の抽出物および画分から選択される少なくとも２つの成分を含む組成物を前記哺乳動物に補給するか、または前記組成物によって前記哺乳動物を処置することを含む方法を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
発明の詳細な説明：
本発明の様々な態様がより詳細に理解および認識され得るように、特定の好ましい実施形態および任意選択的な実施形態に関して本発明を詳細に説明する。しかしながら、当業者であれば、このような実施形態が実際に推定され得る程度を認識するであろう。
【００１４】
植物材料の供給源：
本発明で使用される植物、すなわち、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓおよびＯｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍはインド原産の植物から収集したものであり、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａは東南アジア原産（ほとんどがインドネシア産）のものであった。現在では、それは南インドで栽培されている。
【００１５】
ＮＯアッセイ、ＡＴＰアッセイおよびタンパク質アッセイを実施する論理的根拠
人間の生活のすべての活動の背後にある基本的な力および条件は、エネルギーの存在である。したがって、運動時には、筋肉を動かす際に血液循環の増強を通じてより多くの栄養および酸素を必要とすることが必須である。血管内皮細胞によって産生される一酸化窒素は、強力な血管拡張因子として公知であり、血管を拡張することにより、運動時により多くの酸素および栄養を筋細胞に供給する。したがって、それは、運動および身体活動時において耐久性を持続させるのに役立つ。
【００１６】
アデノシン三リン酸またはＡＴＰは、筋肉活動を促す化学エネルギーを供給する。筋力の最初の５秒間または６秒間において、筋肉活動は、筋肉細胞中に既に存在するＡＴＰのプールに依存する。この時間を超えると、より長くより活発な身体活動をサポートするのに必要な筋肉収縮の活性化を可能にするためには、新たな量のＡＴＰが形成されなければならない。したがって、耐久運動中またはより長期の集中的な身体活動期間では、細胞内エネルギー源またはＡＴＰ含量を増加させることが必須である。
【００１７】
タンパク質は、体内のあらゆる細胞の重要な要素である。タンパク質は、ｍＲＮＡの翻訳過程を通じてアミノ酸を利用して細胞内で合成される。それは、筋肉、骨および軟骨の主要なビルディングブロックであり、筋肉の成長および修復に必須である。したがって、筋肉タンパク質合成の刺激は、筋肉量を増加させるための非常に重要かつ決定的な因子である。
【００１８】
上記に基づいて、本発明者らは、内皮細胞における一酸化窒素合成を増強し、ＡＴＰ含量を増加させ、骨格筋細胞におけるタンパク質合成を引き起こし得るハーブ抽出物、画分またはそれらの組成物／製剤が、ボディビルダー、アスリートなどのフィジカルパフォーマーにおけるエネルギーおよび耐久性レベルおよび筋肉量を増加させるために理想的で有望であると仮説した。したがって、本発明者らは、ハーブ抽出物およびそれらの組成物をスクリーニングして、内皮細胞における一酸化窒素、骨格筋細胞における細胞内ＡＴＰおよびタンパク質の合成を増加させる能力を評価した。
【００１９】
本発明では、細胞ベースのアッセイを使用して、一酸化窒素、ＡＴＰおよびタンパク質の合成の調節について、植物材料由来の多数の抽出物をスクリーニングした。本試験において、驚くべきことに、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓおよびＯｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍ由来の抽出物または画分は、一酸化窒素（表１）、ＡＴＰ（表６）およびタンパク質の合成（表７）を強力に調節することが見出された。活性が改善された生成物をさらに得るために、上記植物の抽出物または画分を様々な比で組み合わせ、このようにして得られた組成物を、一酸化窒素、ＡＴＰおよびタンパク質の合成の調節について試験した。驚くべきことに、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａまたはＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来の少なくとも２つの抽出物を含む組成物は、一酸化窒素、ＡＴＰおよびタンパク質の合成の相乗的増強を示すことが見出された。Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ抽出物（ＬＩ３４１０３）と組み合わせたＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ抽出物（ＬＩ１２５００）およびその組成物（ＬＩ１２５２２Ｆ２）；Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ抽出物（ＬＩ０９７０３）と組み合わせたＣｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ抽出物（ＬＩ０５７０４）およびその組成物（ＬＩ８９０３２Ｆ３）、ならびにＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ抽出物（ＬＩ３３６０３）と組み合わせたＧａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ抽出物（ＬＩ８００１３）およびその組成物（ＬＩ８００２０Ｆ３）を、Ｌ６ラット骨格筋細胞を使用したタンパク質アッセイでは、エネルギーブースターおよび筋肉増強健康補助食品としての有効性について評価し、ＥＣＶ３０４ヒト内皮細胞における硝酸アッセイを使用して、一酸化窒素エンハンサーとしての有効性について評価し、Ｌ６ラット骨格筋細胞におけるＡＴＰアッセイを使用して、ＡＴＰエンハンサーとしての有効性について評価した。驚くべきことに、組成物ＬＩ１２５２２Ｆ２、ＬＩ８９０３２Ｆ３およびＬＩ８００２０Ｆ３は、それらの個々の各成分と比較して優れた有効性を示したことから、相乗的であることが見出された。
【００２０】
エネルギーおよび耐久性（ｅｄｕｒａｎｃｅ）の増強について、組成物ＬＩ１２５２２Ｆ２、ＬＩ８９０３２Ｆ３およびＬＩ８００２０Ｆ３の有効性を動物試験でさらに評価した。ビヒクルまたは１５０ｍｇ／ｋｇのＬＩ８９０３２Ｆ３もしくはＬＩ１２５２２Ｆ２もしくはＬＩ８００２０Ｆ３または１５０ｍｇｌｋｇのＬ−カルニチンまたは１０ｍｇ／ｋｇのカフェインによって、スイスアルビノマウスを２１日間経口処置した。２１日目において、処置の１時間後に、マウスに一定の負荷をかけて（体重の１０％の重りを尾に取り付けて）水を充填したアクリルシリンダー内で遊泳させた。ＳＭＡＲＴビデオ追跡システム（Ｐａｎｌａｂ  Ｓ．Ｌ．Ｕ）を使用して、この試験を１０分間モニタリングした。様々な遊泳パラメータを記録し、ｓｍａｒｔソフトウェアによって分析した。表８に要約されているように、組成物によって処置した動物は、対照処置動物と比較して、休息時間の減少、ならびに低速移動時間、高速移動時間、総移動時間、遊泳経路長および平均速度の増加を示した。
【００２１】
同様に、処置の２１日後に、握力計（ＵｇｏＢａｓｉｌｅ，Ｉｔａｌｙ）を使用することによって、マウスの握力を測定した。５日間にわたって動物を訓練し、実験環境および条件に馴化させた。各マウスに握り棒を握らせ、引張力が動物の握力を超えるまで力を徐々に増加させて、握り棒を尾と水平に徐々に引き戻した。マウスが握り棒を手放した際に適用した力を握力としてグラム単位で記録した。表９に要約されているように、組成物ＬＩ８９０３２Ｆ３またはＬＩ１２５２２Ｆ２またはＬＩ８００２０Ｆ３を補給した動物は、対照または陽性対照（Ｌ−カルニチンまたはカフェイン）によって処置した動物と比較して、握力の改善を示した。
【００２２】
したがって、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来の抽出物または画分ならびにそれらの組成物（ＬＩｌ２５２２Ｆ２、ＬＩ８９０３２Ｆ３およびＬＩ８００２０Ｆ３）の補給は、エネルギーレベルおよび耐久能力を増加させ得ることが明白である。
【００２３】
上記事項は、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ抽出物と組み合わせたＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ抽出物およびその組成物（ＬＩ１２５２２Ｆ２）；Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ抽出物と組み合わせたＣｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ抽出物およびその組成物（ＬＩ８９０３２Ｆ３）、ならびにＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ抽出物と組み合わせたＧａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ抽出物およびその組成物（ＬＩ８００２０Ｆ３）が、ヒトおよび動物におけるエネルギー、筋肉強度、身体的耐久性および精神的敏捷性の発生、安定維持を提供するための強力な天然サプリメントであり得ることを実証している。
【００２４】
したがって、好ましい実施形態では、本発明は、長期間にわたってエネルギーレベルおよび精神的敏捷性を増加させて、筋肉強度を増加させることができる新規相乗的組成物であって、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来の少なくとも２つの抽出物または画分を含む新規相乗的組成物を開示する。
【００２５】
別の実施形態では、本発明は、エネルギー、筋肉強度および精神的敏捷性の発生および安定維持のための組成物であって、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来のハーブ抽出物または画分から選択される少なくとも２つの成分を含む組成物を開示し、前記ハーブ抽出物または画分およびそれらの組成物は、哺乳動物における筋肉強度、身体活動、体力、精神的敏捷性、エネルギーレベル、スタミナレベル、循環健康、血管健康を増強するために、または良好な身体的健康および精神的健康のために有用である。
【００２６】
別の実施形態では、本発明は、それを必要とする温血動物または哺乳動物におけるエネルギー、筋肉強度および精神的敏捷性の発生および安定維持を提供するための自然エネルギーエンハンサーとしてのハーブ抽出物または画分およびそれらの組成物であって、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａに由来し、Ｏｃｉｍｕｍ  ｂａｓｉｌｉｃｕｍ、Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ、Ｔｒｉｂｕｌｕｓ  ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ、Ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｍ  ａｍｍｉ、Ｍｅｎｔｈａ  ａｒｖｅｎｓｉｓ、Ｐｉｐｅｒ  ｃｕｂｅｂａ、Ｆｏｅｎｉｃｕｌｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅの抽出物、ビタミン、アミノ酸、タウリン、Ｇｉｎｋｇｏ  ｂｉｌｏｂａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａの抽出物、ならびにｇｕａｒａｎａの抽出物、メラトニン緑茶から選択される少なくとも１つの生物学的に活性な成分を場合により含有するハーブ抽出物または画分およびその組成物を開示する。
【００２７】
さらに別の実施形態では、本発明は、哺乳動物における身体的能力または精神的能力を増強するための、身体活動、体力、精神的敏捷性、エネルギーレベル、スタミナレベル、循環健康、血管健康を増強するエネルギーの発生および安定維持のための、または良好な精神的健康のための自然エネルギーエンハンサーとしての組成物であって、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来のハーブ抽出物または画分から選択される少なくとも２つの成分を含み、賦形剤、希釈剤、甘味料、香味料、着色料、ビタミンまたはアミノ酸から選択される少なくとも１つの成分を場合によりさらに含有する組成物を開示する。
【００２８】
別の実施形態では、身体的能力の改善の例としては、スタミナの増加、およびスピード、強度、力、耐久性、柔軟性、機敏性、バランス、焦点調整、反応時間、疲労回復の改善、およびさらにはセックススタミナの増加が挙げられる。精神的能力の改善の例としては、鋭敏感、注意持続時間、精神的敏捷性、認知機能の改善、気分の高揚、および（例えば、激しい身体的運動後の）精神的疲労の回復または軽減が挙げられる。
【００２９】
別の実施形態では、本発明は、それを必要とする恒温動物における筋肉強度、身体活動、体力、精神的敏捷性、エネルギーレベル、スタミナレベル、循環健康、血管健康を増強するための、または良好な精神的健康のための健康補助食品、食品成分製剤、例えば飲料、スナックおよびエネルギードリンクであって、上記成分またはその組成物を含有する健康補助食品、食品成分製剤、例えば飲料、スナックおよびエネルギードリンクを含む。
【００３０】
別の実施形態では、本発明は、哺乳動物において自然エネルギーを増加させて、エネルギーおよび精神的敏捷性の発生および安定維持を提供する方法であって、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来の抽出物または画分から選択される少なくとも２つの成分を含む組成物を前記哺乳動物に補給するか、または前記組成物によって前記哺乳動物を処置することを含む方法を提供する。
【００３１】
さらに別の実施形態では、本発明は、それを必要とする恒温動物における瞬間的なエネルギー、筋力および身体的能力の自然エンハンサーとしての組成物であって、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来のハーブ抽出物または画分から選択される少なくとも２つの成分を含む組成物を提供する。
【００３２】
さらに別の実施形態では、本発明は、抽出物、画分、活性化合物、植物化学物質；治療的な健康効果が証明された植物、動物または微生物由来の粉末；薬学的または栄養的に許容され得る薬剤、有効成分、ビタミン、アミノ酸またはミネラルから選択される１つ以上の要素と組み合わせて、前記生物学的に活性な成分を含む組成物を提供する。
【００３３】
さらなる例示的な実施形態では、本発明の組成物は、非限定的な要素、例えばビタミンＢから選択されるビタミン、例えばチアミン、リボフラビン、ナイアシン、パントテン酸、ピリドキシン、ビオチン、シアノコバラミン、コリンおよび／または葉酸、例えば還元型葉酸、例えば限定されないが、フォリン酸、葉酸カルシウムおよびメチルテトラヒドロフォレートの１つ以上を場合によりさらに含有し得る。また、ビタミンＢ群は水溶性ビタミンであり、エネルギーを体に提供するための炭水化物のグルコースへの分解、神経系の正常な機能を助けるための脂肪およびタンパク質の分解、ならびに胃腸管における筋緊張を助ける。組成物中の特定のビタミンＢとしては、ｄ−パントテン酸カルシウム、ナイアシンアミド、塩酸ピリドキシンおよび硝酸チアミン；またはアミノ酸が挙げられ得る。
【００３４】
別の実施形態では、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来の少なくとも２つのハーブ抽出物または画分を含む組成物は、循環、代謝効率を増加させ、神経伝達物質を調節し、脳内酸素レベルを高める。脳内循環の増強の利点としては、短期記憶および長期記憶の改善、反応時間の増加、ならびに精神的な明晰さの改善が挙げられる。
【００３５】
別の実施形態では、前記ハーブ抽出物もしくは画分またはそれらの組成物は、精神的敏捷性、スタミナレベル、筋肉強度、体力を増加させるために、ならびにエネルギー、筋肉強度の発生および安定維持を維持するために、例えば、パフォーマンスアスリート（耐久スポーツおよび複数の規律スポーツに携わっている者）、高齢者および病人によって摂取され得る。本成分および本組成物は、朝食として摂取可能な「フィットネスドリンク」として、またはこのようなドリンクを定期的に使用可能な濃縮物の形態で製剤化され得る。
【００３６】
組成物において、組成物中のＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来の成分の濃度は、０．０１％〜９９．９９％で個別にまたは共同して変化する。
【００３７】
組成物において、組成物中のＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｂａｓｉｌｉｃｕｍ、Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ、Ｔｒｉｂｕｌｕｓ  ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ、Ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｍ  ａｍｍｉ、Ｍｅｎｔｈａ  ａｒｖｅｎｓｉｓ、Ｐｉｐｅｒ  ｃｕｂｅｂａおよびＦｏｅｎｉｃｕｌｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ由来の成分の濃度は、２０％〜８０％で個別にまたは共同して変化する。
【００３８】
別の実施形態では、本発明のハーブ抽出物もしくは画分または組成物は、乳酸代謝に影響を与え、疲労を軽減することによって、有酸素能力および有酸素容量を改善するために、ならびに限定されないが、ＡＴＰレベル／産生；一酸化窒素レベル、ＮＡＤＨバランス、レプチンレベルおよび脂肪細胞由来ペプチドを含む生物学的エネルギーマーカーの１つ以上の緩和のために有用である。
【００３９】
別の実施形態では、ＡＴＰ、一酸化窒素、ｅ．Ｎｏｓ、ＭＡＯ、ＡＣＨＥ、筋肉タンパク質、ミオゲニンから選択されるバイオマーカーを改善し、筋細胞増殖を増強する方法であって、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来のハーブ抽出物もしくは画分または組成物を含み、Ｏｃｉｍｕｍ  ｂａｓｉｌｉｃｕｍ、Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ、Ｔｒｉｂｕｌｕｓ  ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ、Ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｍ  ａｍｍｉ、Ｍｅｎｔｈａ  ａｒｖｅｎｓｉｓ、Ｐｉｐｅｒ  ｃｕｂｅｂａおよびＦｏｅｎｉｃｕｌｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ由来の抽出物または画分から選択される少なくとも１つの生物学的に活性な成分を場合により含有する治療有効量の組成物を被験体または哺乳動物または温血動物に投与することを含む方法。
【００４０】
別の実施形態では、ハーブ抽出物もしくは画分または組成物は、抗糖尿病薬、抗脂質異常症薬、抗肥満薬、抗高血圧薬、抗血小板凝集薬、抗感染症薬、抗アテローム性動脈硬化症薬、抗炎症薬、抗酸化剤および生体増強活性を含む１つ以上の生物学的に活性な成分とさらに組み合わされ得る。
【００４１】
さらなる例示的な実施形態では、組成物は、許容され得る食事由来の酸および塩基を含む発泡剤をさらに含有して、水との接触時にＣＯ２ガスを生成し得る。
【００４２】
別の例示的な実施形態では、組成物は、水に、または食用に適切な他の液体に溶解され得る。
【００４３】
本発明の別の実施形態では、ハーブＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａの抽出物および画分を調製するために、またはこれらを抽出もしくは分画するために使用され得る様々な適切な溶媒としては、限定されないが、エタノール、メタノールのようなＣ１−Ｃ５アルコール；水およびそれらの混合物；ヘキサンなどのＣ１−Ｃ７炭化水素；酢酸エチルのようなエステルなどおよびそれらの混合物が挙げられる。
【００４４】
本発明の別の実施形態では、抽出物を調製するための植物部分は、葉、茎、果実、果皮（ｆｒｕｉｔ  ｒｉｎｇ）、頭状花、根、樹皮または植物全体またはそれらの混合物から選択され得る。
【００４５】
別の実施形態では、本発明の抽出物もしくは画分または組成物は、乾燥形態、液体形態、食品、健康補助食品または任意の適切な形態、例えば錠剤、カプセルまたはソフトチューで製剤化され得る。
【００４６】
別の実施形態では、抽出物もしくは画分または組成物は、ナノテクノロジー、マイクロカプセル化、コロイド担体システムおよび他の薬物送達システムを含む技術によって、放出制御ポリマー系コーティング剤を使用して、放出制御錠剤の形態で送達され得る。
【００４７】
本発明の別の実施形態では、抽出物もしくは画分または組成物、栄養補助食品／健康補助食品が提供され、これらは、健康食品または特定保健用食品、例えば固体食品、例えばチョコレートまたは栄養バー、半固体食品、例えばクリームまたはジャム、またはゲルおよびさらには飲料など、例えばリフレッシュ飲料、乳酸菌飲料、ドロップ、キャンディー、チューインガム、グミキャンディ、ヨーグルト、アイスクリーム、プディング、水羊羹、ゼリー、クッキー、茶、ソフトドリンク、ジュース、牛乳、コーヒー、シリアル、スナックバーなどの剤形で企図／作製され得る。
【００４８】
組成物中に含められ得る香味料は、本明細書に開示される発明概念に関係するものではなく、当業者であれば、広範囲の利用可能な香味料を熟知している。したがって、任意の適切な天然および／または人工の香味料または香味料の組み合わせが、本開示の企図される範囲内である。
【００４９】
別の例示的な実施形態では、組成物は、その組成物を用いて調製されるドリンクの外観を改善するための食品着色料をさらに含み得る。
【００５０】
他の実施形態では、本発明の抽出物もしくは画分または組成物は、ヒトおよび動物の両方におけるミトコンドリア欠損を治療するのに有用である。それはまた、身体的能力または精神的能力を増強または維持するために、激しい身体的運動から身体的ストレスを受けたアスリートまたは非アスリートにおける感染症を軽減するために使用され得る。また、それは、サーチュインの活性化因子であり得る。
【００５１】
別の例示的な実施形態では、生物学的に許容され得る成分または組成物は、グルコース、フルクトース、スクロース、マルトース、黄色デキストリン、白色デキストリン、アエロジル、微結晶性セルロース、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ソルビトール、ステビオシド、コーンシロップ、ラクトース、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、Ｌ−アスコルビン酸、ｄｌ−α−トコフェロール、グリセリン、プロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、スクロース脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、アカシア、カラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ペクチン、寒天、ビタミンＢ群、ニコチンアミド、パントテン酸カルシウム、アミノ酸、カルシウム塩、色素、香味料、保存剤、蒸留水、生理食塩水、グルコース水溶液、アルコール、プロピレングリコールおよびポリエチレングリコール、様々な動物油および植物油、白色軟パラフィン、パラフィンおよびワックスを含む１つ以上の薬学的または栄養的に許容され得る賦形剤、担体および希釈剤とさらに組み合わせられ得る。
【００５２】
また別の実施形態では、本発明は、ヒトおよび動物における身体的能力または精神的能力の増強、エネルギー、身体的耐久性、筋肉量、筋肉強度および精神的敏捷性の安定維持の方法であって、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ、Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来のハーブ抽出物または画分から選択される少なくとも２つの成分を含む有効量の組成物を、それを必要とする被験体に投与することを含む方法を特徴とする。身体的能力の改善の例としては、スタミナの増加、およびスピード、強度、力、耐久性、柔軟性、機敏性、バランス、焦点調整、反応時間、疲労回復の改善、およびさらにはセックススタミナの増加が挙げられる。精神的能力の改善の例としては、鋭敏感、注意持続時間、精神的敏捷性、認知機能の改善、気分の高揚、および（例えば、激しい身体的運動後の）精神的疲労の回復または軽減が挙げられる。
【００５３】
本発明のさらに別の実施形態では、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａおよびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ由来の抽出物および画分から選択される少なくとも２つの成分を含む組成物は、ヒトおよび動物における身体的能力または精神的能力の増強、エネルギー、筋肉強度、身体的耐久性および精神的敏捷性の安定維持に有用な医薬の調製に使用され得る。
【００５４】
当業者であれば、その広い発明概念から逸脱することなく、上記実施形態を変更し得ることを認識するであろう。したがって、本発明は、開示される特定の実施形態および実施例に限定されず、本明細書に定義される本発明の目的および範囲内の改変を包含するものであると理解される。本実施例は本発明を例証するが、決して本発明の範囲を限定するとみなされるべきではない。
【実施例】
【００５５】
実施例１：Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａのメタノール抽出物（ＬＩ８００１３）の調製：Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａの果皮（１ｋｇ）を微粉化し、その粉末をＲＢフラスコに入れ、メタノール（１０Ｌ）によって温度８０℃で２時間抽出した。抽出物をろ過し、使用済み原料を同様の条件下でメタノール（２×６Ｌ）によって２回再抽出した。合わせた抽出物を精密ろ過し、クライミングフィルムエバポレーターで濃縮して、残留物（ＬＩ８００１３）を得た。
【００５６】
同様の手順を使用して、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓの葉、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａの根、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの頭状花、Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａの葉、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓの果皮、およびＯｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍの植物全体のメタノール抽出物を調製した。
【００５７】
実施例２：Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの酢酸エチル抽出物（ＬＩ１２５００）：Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの頭状花（２．２ｋｇ）をパイロット抽出器に充填し、酢酸エチル（２２Ｌ）によって還流温度で２時間抽出した。抽出物をろ過し、使用済み原料を同様の条件下で酢酸エチル（２×１３Ｌ）によって２回再抽出した。合わせた抽出物を精密ろ過し、クライミングフィルムエバポレーターで濃縮して、残留物（１７４ｇ）を得た。
【００５８】
同様の手順を使用して、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓの葉、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａの根、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａの果皮、Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａの葉、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓの果皮、およびＯｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍの植物全体の酢酸エチル抽出物を調製した。
【００５９】
実施例３：Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ（ＬＩ０５７０４）のエタノール抽出物の調製
Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓの茎（ｌｋｇ）を微粉化し、その粉末をＲＢフラスコに入れ、エタノール（８Ｌ）によって温度８０℃で２時間抽出した。抽出物をろ過し、使用済み原料を同様の条件下でエタノール（２×６Ｌ）によって２回再抽出した。合わせた抽出物を精密ろ過し、クライミングフィルムエバポレーターで濃縮して、残留物（９６ｇ）としてＬＩ０５７０４を得た。
【００６０】
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの頭状花、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓの葉、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａの根、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａの果皮、Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａの葉、Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓの果皮、およびＯｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍの植物全体といった他のハーブの植物材料を同様の抽出手順に供して、それらのエタノール抽出物を得た。同様の手順を使用して、水およびヒドロアルコール抽出物も調製した。
【００６１】
実施例４：組成物
組成物−１（ＬＩ１２５２２Ｆ２）：Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓのメタノール抽出物（ＬＩ１２５００）およびＣｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓのメタノール抽出物（ＬＩ３４１０３）を２：１の比で組み合わせることによって、組成物−１（ＬＩ１２５２２Ｆ２）を調製した。
【００６２】
組成物−２（ＬＩ８９０３２Ｆ３）：Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓのエタノール抽出物（ＬＩ０５７０４）およびＣｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａのメタノール抽出物（ＬＩ０９７０３）を１：２の比で組み合わせることによって、組成物−２（ＬＩ８９０３２Ｆ３）を調製した。
【００６３】
組成物−３（ＬＩ８００２０Ｆ３）：Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａのメタノール抽出物（ＬＩ８００１３）およびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａのメタノール抽出物（ＬＩ３３６０３）を１：２の比で組み合わせることによって、組成物−３（ＬＩ８００２０Ｆ３）を調製した。
【００６４】
組成物−４（ＬＩ１２５３２Ｆ１）：Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓのメタノール抽出物（ＬＩ１２５００）、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓのエタノール抽出物（ＬＩ３４１０３）およびＧａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａのメタノール抽出物（ＬＩ８００１３）を３：１：１の比で組み合わせることによって、組成物−４（ＬＩ１２５３２Ｆ１）を調製した。
【００６５】
組成物−５（ＬＩ１２５３２Ｆ３）：Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓのメタノール抽出物（ＬＩ１２５００）、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓのエタノール抽出物（ＬＩ３４１０３）およびＧａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａのメタノール抽出物（ＬＩ８００１３）を２：１：２の比で組み合わせることによって、組成物−５（ＬＩ１２５３２Ｆ３）を調製した。
【００６６】
組成物−６（ＬＩ１２５３２Ｆ４）：Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓのメタノール抽出物（ＬＩ１２５００）、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓのエタノール抽出物（ＬＩ３４１０３）およびＧａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａのメタノール抽出物（ＬＩ８００１３）を１：８：１の比で組み合わせることによって、組成物−６（ＬＩ１２５３２Ｆ４）を調製した。
【００６７】
組成物−７（ＬＩ８９０３４Ｆ１）：Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓのエタノール抽出物（ＬＩ０５７０４）、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａのメタノール抽出物（ＬＩ０９７０３）およびＴｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｍ  ａｍｍｉのエタノール抽出物（ＬＩ１２３０４）を１：２：１の比で組み合わせることによって、組成物−７（ＬＩ８９０３４Ｆ１）を調製した。
【００６８】
組成物−８（ＬＩ８９０３４Ｆ２）：Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓのエタノール抽出物（ＬＩ０５７０４）、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａのメタノール抽出物（ＬＩ０９７０３）およびＴｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｍ  ａｍｍｉのエタノール抽出物（ＬＩ１２３０４）を２：１：２の比で組み合わせることによって、組成物−８（ＬＩ８９０３４Ｆ３）を調製した。
【００６９】
組成物−９（ＬＩ８９０３４Ｆ４）：Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓのエタノール抽出物（ＬＩ０５７０４）、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａのメタノール抽出物（ＬＩ０９７０３）およびＴｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｍ  ａｍｍｉのエタノール抽出物（ＬＩ１２３０４）を１：８：１の比で組み合わせることによって、組成物−９（ＬＩ８９０３４Ｆ４）を調製した。
【００７０】
組成物−１０：Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓのメタノール抽出物（ＬＩ１２５００）、Ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｍ  ａｍｍｉのエタノール抽出物（ＬＩ１２３０４）およびＧａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａのメタノール抽出物（ＬＩ８００１３）を１：８：１の比で組み合わせることによって、組成物−１０を調製した。
【００７１】
組成物−１１：Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓのメタノール抽出物（ＬＩ１２５００）、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓのエタノール抽出物（ＬＩ０５７０４）およびＧａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａのメタノール抽出物（ＬＩ８００１３）を１：８：１の比で組み合わせることによって、組成物−１０を調製した。
【００７２】
実施例５：亜硝酸アッセイ
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ抽出物（ＬＩ１２５００）およびその組成物（ＬＩ１２５２２Ｆ２およびＬＩ１２５３２Ｆ１）；Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ抽出物（ＬＩ０５７０４）およびその組成物（ＬＩ８９０３２Ｆ３およびＬＩ８９０３４Ｆ１；Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ抽出物（ＬＩ３３６０３）と組み合わせたＧａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ抽出物（ＬＩ８００１３）およびその組成物（ＬＩ８００２０Ｆ３）；Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ抽出物（ＬＩ／ＰＤ／１５１／０１Ｒ１）ならびにＯｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍ抽出物（ＬＩ／ＰＤ／０１４／０３Ｒ１）を使用して試験を行って、これらの個々の抽出物および組成物が、ヒト内皮細胞における一酸化窒素生成を誘導し得るかを評価した。試験物質によって処理した細胞由来のヒト内皮培養上清中の亜硝酸塩濃度を、対照処理細胞培養上清と比較して測定した。簡潔に言えば、同数のＥＣＶ３０４ヒト内皮細胞（１．５×１０５個）を３５ｍｍ培養皿にプレートした。細胞の付着後、ハンクス緩衝塩溶液（ＨＢＳＳ）によって培養皿を２回洗浄し、様々な濃度の抽出物および組成物の１％ＦＢＳ補充α−ＭＥＭ溶液１ｍｌによって細胞を４時間処理した。ビヒクル対照培養物には０．２％ＤＭＳＯを加えた。無細胞培養上清を回収し、グリースアッセイを使用して亜硝酸塩含量を推測した。マイクロタイタープレートの各ウェルにおいて、５０マイクロリットルの培養上清を等容量のグリース試薬（０．２％ナフチレンジアミン二塩酸塩および２％スルファニルアミドを１：１の比で含有する混合物の５％リン酸溶液）と混合し、室温でさらに１０分間インキュベートした。マイクロプレートリーダーＳｐｅｃｔｒａ  ＭａｘＭ５（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）において、発色を５５０ｎｍで測定した。既知濃度の亜硝酸ナトリウムを用いて標準曲線を作成し、データを表１に要約する。
【００７３】
【表１】
0006629595.tif 000002
【００７４】
上記亜硝酸塩濃度値（表１）は、亜硝酸塩濃度の増強について、組成物の相乗効果を明確に示している。例えば、１０μｇ／ｍｌの濃度において、Ｓ．ｉｎｄｉｃｕｓ抽出物（ＬＩ１２５００）およびＣ．ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ抽出物（ＬＩ３４１０３）は、それぞれ１０．６４％および−１．８％の亜硝酸塩濃度を示した。一方、Ｓ．ｉｎｄｉｃｕｓ抽出物（ＬＩ１２５００）およびＣ．ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ抽出物（ＬＩ３４１０３）を２：１の比で含有する組成物１（ＬＩ１２５２２Ｆ２）は、２０．８％の亜硝酸塩濃度を示した。組成物によって処理した細胞におけるこの亜硝酸塩濃度レベルは、個々の要素によって処理した細胞におけるものよりも高い。
【００７５】
【表２】
0006629595.tif 000003
【００７６】
組成物−４（ＬＩ１２５３２Ｆ１）ならびにＳ．ｉｎｄｉｃｕｓ（ＬＩ１２５００）、Ｃ．ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ（ＬＩ３４１０３）およびＧ．ｍａｎｇｏｓｔａｎａ（ＬＩ８００１３）の個々の抽出物を使用して、硝酸アッセイを行った。１０および２５μｇ／ｍｌの両試験濃度において、組成物−４（ＬＩ１２５３２Ｆ１）は、相乗活性を明確に示している。この試験の結果により、組成物−４（ＬＩ１２５３２Ｆ１）は、個々の抽出物よりも大きな硝酸塩濃度増強活性を示したことが示された。例えば、表２の２５μｇ／ｍｌの濃度において、Ｓ．ｉｎｄｉｃｕｓ抽出物（ＬＩ１２５００）、Ｃ．ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ抽出物（ＬＩ３４１０３）およびＧ．ｍａｎｇｏｓｔａｎａ抽出物（ＬＩ８００１３）は、５．０８％、２１．５５％および１０９．３２％の硝酸塩濃度を示した。一方、２５μｇ／ｍｌにおいて、組成物−４（ＬＩ１２５３２Ｆ１）は、１９３．９９％の硝酸塩濃度を示した。組成物−４（ＬＩ１２５３２Ｆ１）による硝酸塩濃度増強活性は、個々の抽出物のものよりも高い。
【００７７】
【表３】
0006629595.tif 000004
【００７８】
上記亜硝酸塩濃度値（表３）は、亜硝酸塩濃度の増強について、組成物−７（ＬＩ８９０３４Ｆ１）の相乗効果を明確に示している。例えば、１μｇ／ｍｌの濃度において、Ｃ．ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ（ＬＩ０５７０４）、Ｃ．ｌｏｎｇａ（ＬＩ０９７０３）およびＴ．ａｍｍｉ（ＬＩ１２３０４）は、それぞれ−１３．１１％、３６．２５％および２０．５２％の亜硝酸塩濃度を示した。一方、Ｃ．ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ（ＬＩ０５７０４）、Ｃ．ｌｏｎｇａ（ＬＩ０９７０３）およびＴ．ａｍｍｉ（ＬＩ１２３０４）を１：２：１の比で含有する組成物−７（ＬＩ８９０３４Ｆ１）は、７９．１０％の亜硝酸塩濃度を示した。組成物−７（ＬＩ８９０３４Ｆ１）によって処理した細胞におけるこの亜硝酸塩濃度レベルは、個々の要素によって処理した細胞におけるものよりも高い。したがって、組成物−７（ＬＩ８９０３４Ｆ１）の硝酸増強活性は、個々の抽出物よりも高い。
【００７９】
実施例６：ＡＴＰアッセイ
ＡＴＰｌｉｔｅアッセイキット（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して、ラット骨格筋細胞において細胞内ＡＴＰ含量を測定した。簡潔に言えば、１０％ＦＢＳおよび５０μｇ／ｍｌのペニシリン−ストレプトマイシンを補充したＲＰＭＩを含む９６ウェルプレートにおいて、Ｌ６ラット骨格筋細胞を５％ＣＯ２、３７℃で成長させた。１６時間後、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ抽出物（ＬＩ１２５００）およびその組成物（ＬＩ１２５２２Ｆ２およびＬＩ１２５３２Ｆ１）；Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ抽出物（ＬＩ０５７０４）およびその組成物（ＬＩ８９０３２Ｆ３およびＬＩ８９０３４Ｆ１；Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ抽出物（ＬＩ３３６０３）と組み合わせたＧａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ抽出物（ＬＩ８００１３）およびその組成物（ＬＩ８００２０Ｆ３）；Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ抽出物（ＬＩ／ＰＤ／１５１／０１Ｒ１）ならびにＯｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍ抽出物（ＬＩ／ＰＤ／０１４／０３Ｒ１）を独立して含有する新鮮培地に培地を交換し、４時間インキュベートした。ビヒクル対照培養物には０．２％ＤＭＳＯのみを加えた。その後、５０μｌの細胞溶解緩衝液を各ウェルに追加し、制御振盪条件下で５分間インキュベートした。このようにして得られた様々な細胞溶解物のＡＴＰ濃度の評価を、供給業者（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）が提供する方法にしたがって行った。標準的なウェルは、１０μＭ〜０．１５μＭの範囲の様々な濃度のＡＴＰを含有する。５０マイクロリットルの基質溶液を各ウェルに追加し、暗条件下のシェーカー上で１５分間混合した。最後に、マイクロプレートリーダーＳｐｅｃｔｒａ  ＭａｘＭ５（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）において、発光強度を測定した。既知のＡＴＰ濃度から作成した標準曲線に発光強度をプロットすることによって、個々の抽出物または組成物によって処理した細胞から得られた細胞溶解物におけるＡＴＰ含量を測定した。処理サンプルにおけるＡＴＰ含量をビヒクル対照培養物におけるＡＴＰ含量と比較することによって、処理培養物における細胞内ＡＴＰ指数を計算した。ビヒクル対照培養物におけるＡＴＰ含量を１００％とした。四組のウェルにおいて、各サンプルのすべての処理濃度を処理した。
【００８０】
【表４】
0006629595.tif 000005
【００８１】
ＡＴＰｌｉｔｅアッセイキットおよびＡＴＰ濃度（％）のデータを表４に要約する。このデータにより、すべての組成物がＡＴＰ含量の増加を示し、相乗効果が有意であったことが明らかになった。本試験の結果により、抽出物の組成物は、個々の抽出物よりも高いＡＴＰ濃度を示したことが示された。例えば、１０ｐｇ／ｍｌの濃度において、Ｃ．ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ抽出物（ＬＩ０５７０４）およびＣ．ｌｏｎｇａ抽出物（ＬＩ０９７０３）は、それぞれ１２９．０４％および８５．２１％のＡＴＰ濃度を示した。一方、Ｃ．ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ抽出物（ＬＩ０５７０４）およびＣ．ｌｏｎｇａ抽出物（ＬＩ０９７０３）を１：２の比で含有する組成物２（ＬＩ８９０３２Ｆ３）は、１５７．１％のＡＴＰ濃度を示した。
【００８２】
【表５】
0006629595.tif 000006
【００８３】
Ｓ．ｉｎｄｉｃｕｓ（ＬＩ１２５００）、Ｃ．ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ（ＬＩ３４１０３）およびＧ．ｍａｎｇｏｓｔａｎａ（ＬＩ８００１３）の抽出物を使用して、ラット骨格筋細胞において細胞内ＡＴＰ含量を測定した。表５は、１０ｐｇ／ｍｌの濃度におけるＡＴＰ含量の値を示す。１０ｐｇ／ｍｌの濃度において、Ｓ．ｉｎｄｉｃｕｓ（ＬＩ１２５００）、Ｃ．ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ（ＬＩ３４１０３）およびＧ．ｍａｎｇｏｓｔａｎａ（ＬＩ８００１３）を含有する組成物−４（ＬＩ１２５３２Ｆ１）は優れた相乗活性を示し、ＡＴＰ含量は１５３．０１％増加した。一方、１０ｐｇ／ｍｌの濃度において、個々の抽出物は組成物よりも低い活性を示し、ＡＴＰ含量は、Ｓ．ｉｎｄｉｃｕｓ（ＬＩ１２５００）では８６．９３％であり、Ｃ．ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ（ＬＩ３４１０３）では９５．６５％であり、Ｇ．ｍａｎｇｏｓｔａｎａ（ＬＩ８００１３）では１２４．２４％であった。この予想外の結果は、組成物−４の相乗活性とＡＴＰ濃度の増加を明確に示している。
【００８４】
【表６】
0006629595.tif 000007
【００８５】
ＡＴＰアッセイの結果（表６）は、ＡＴＰ濃度の増強について、組成物−７（ＬＩ８９０３４Ｆ１）の相乗効果を明確に示している。例えば、１０００ｐｇ／ｍｌの濃度において、Ｃ．ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ（ＬＩ０５７０４）、Ｃ．ｌｏｎｇａ（ＬＩ０９７０３）およびＴ．ａｍｍｉ（ＬＩ１２３０４）は、それぞれ１０５．２５％、１１９．４６％および１４４．９４％のＡＴＰ濃度を示した。一方、Ｃ．ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ（ＬＩ０５７０４）、Ｃ．ｌｏｎｇａ（ＬＩ０９７０３）およびＴ．ａｍｍｉ（ＬＩ１２３０４）を１：２：１の比で含有する組成物−７（ＬＩ８９０３４Ｆ１）は、１５８．５７％のＡＴＰ濃度を示した。組成物−５によって処理した細胞におけるこのＡＴＰレベルは、個々の要素によって処理した細胞におけるものよりも高い。したがって、組成物−７（ＬＩ８９０３４Ｆ１）のＡＴＰ増加活性は、個々の抽出物よりも高い。
【００８６】
実施例７−タンパク質アッセイ
Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ抽出物（ＬＩ３４１０３）およびＧａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ抽出物（ＬＩ８００１３）と組み合わせたＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ抽出物（ＬＩ１２５００）およびその組成物（ＬＩ１２５２２Ｆ２およびＬＩ１２５３２Ｆ１）；Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ抽出物（ＬＩＯ９７０３）およびＴｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｍ  ａｍｍｉ抽出物（ＬＩ１２３０４）と組み合わせたＣｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ抽出物（ＬＩ０５７０４）およびその組成物（ＬＩ８９０３２Ｆ３およびＬＩ８９０３４Ｆ１）；Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ抽出物（ＬＩ３３６０３）と組み合わせたＧａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ抽出物（ＬＩ８００１３）およびその組成物（ＬＩ８００２０Ｆ３）；Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ抽出物（ＬＩ／ＰＤ／１５１／０１Ｒ１）ならびにＯｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍ抽出物（ＬＩ／ＰＤ／０１４／０３Ｒ１）のタンパク質合成増強効果を、Ｌ６ラット骨格筋細胞において評価した。９６ウェル細胞培養プレートの各ウェルにおいて、同数のＬ６細胞を成長させた。翌日、様々な濃度のＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ抽出物、Ｃｏｌｅｕｓ  ａｒｏｍａｔｉｃｕｓ抽出物、Ｃｉｓｓｕｓ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｉｓ抽出物、Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ抽出物、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ抽出物およびＣｉｎｎａｍｏｍｕｍ  ｔａｍａｌａ抽出物；ならびにそれらの組成物ＬＩ８９０３２Ｆ３、ＬＩ８９０３４Ｆ１、ＬＩ１２５２２Ｆ２、ＬＩ１２５３２Ｆ１およびＬＩ８００２０Ｆ３によって細胞を処理し、処理段階を７２時間まで継続した。ビヒクル対照培養物のウェルには０．２％ＤＭＳＯのみを加えた。処理期間後、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）によって細胞を２回洗浄した。その後、細胞を１％ＳＤＳに溶解した。ＢＣＡタンパク質アッセイキット（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して、細胞溶解物におけるタンパク質含量を測定した。２５μｇ／ｍｌ〜０．７８μｇ／ｍｌの範囲の様々な濃度のウシ血清アルブミンを標準として使用した。マイクロプレートリーダーＳｐｅｃｔｒａ  ＭａｘＭ５（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）において、発色反応の吸光度を５６２ｎｍで読み取った。標準ウェルにおける既知のタンパク質濃度から作成した標準曲線に吸光度値をプロットすることによって、細胞溶解物におけるタンパク質含量を定量的に測定した。
【００８７】
【表７】
0006629595.tif 000008
【００８８】
Ｌ６ラット骨格筋細胞におけるタンパク質合成効率について、健康補助食品組成物をスクリーニングする。表７に要約されているように、試験したすべての組成物が相乗効果を示し、骨格筋細胞におけるタンパク質含量を増加させるのにより有効であった。例えば、１ｎｇ／ｍｌの濃度において、Ｇ．ｍａｎｇｏｓｔａｎａ抽出物（ＬＩ８００１３）およびＣ．ｔａｍａｌａ抽出物（ＬＩ３３６０３）は、それぞれ１０４．２３％および９０．１４％のタンパク質濃度を示した。一方、Ｇ．ｍａｎｇｏｓｔａｎａ抽出物（ＬＩ８００１３）およびＣ．ｔａｍａｌａ抽出物（ＬＩ３３６０３）を１：２の比で含有する組成物３（ＬＩ８００２０Ｆ３）は、１１５．６９％のタンパク質濃度を示した。
【００８９】
動物試験
エネルギーおよび耐久性のＦＳＴ試験手順
試験開始前に、スイスアルビノマウスを５日間馴化させた。健康なスイスアルビノマウスを選択し、異なる処置群に無作為に分けた（ｎ＝６）。ビヒクルまたは１５０ｍｇ／ｋｇのＬＩ８９０３２Ｆ３もしくはＬＩ１２５２２Ｆ２もしくはＬＩ８００２０Ｆ３または１５０ｍｇｌｋｇのＬ−カルニチンまたは１０ｍｇ／ｋｇのカフェインによって、動物を２１日間経口処置した。
【００９０】
２１日目において、処置の１時間後に、マウスに一定の負荷をかけて（体重の１０％の重りを尾に取り付けて）水を充填したアクリルシリンダー内で遊泳させた。ＳＭＡＲＴビデオ追跡システム（Ｐａｎｌａｂ  Ｓ．Ｌ．Ｕ）を使用して、この試験を１０分間モニタリングした。様々な遊泳パラメータを記録し、ｓｍａｒｔソフトウェアによって分析した。測定した遊泳パラメータとしては、休息時間、低速移動時間、高速移動時間、総移動時間、遊泳経路長および平均速度が挙げられる。結果を平均±ＳＥＭとして表し、対照群と比較して有効性を測定し、表８に要約した。
【００９１】
【表８】
0006629595.tif 000009
【００９２】
それぞれ１５０ｍｇ／ｋｇのＬＩ８９０３２Ｆ３もしくはＬＩ１２５２２Ｆ２もしくはＬＩ８００２０Ｆ３もしくはＬ−カルニチンまたは１０ｍｇ／ｋｇのカフェインの用量で、ＬＩ１２５２２Ｆ２、ＬＩ８９０３２Ｆ３、ＬＩ８００２０Ｆ３、カフェインおよびＬ−カルニチンをスイスアルビノマウスに経口投与して、これらの化合物のエネルギー耐久性および筋肉強度ポテンシャルを評価した。試験２１日目において、試験品ＬＩ１２５２２Ｆ２、ＬＩ８９０３２Ｆ３、ＬＩ８００２０Ｆ３、Ｌ−カルニチンおよび標準薬カフェインを補給した動物群は、休息時間（秒）の減少および移動距離（ｍｍ）、低速遊泳時間（秒）、高速遊泳時間（秒）の増加を示した。上記観察結果は、ＬＩ１２５２２Ｆ２、ＬＩ８９０３２Ｆ３、ＬＩ８００２０Ｆ３、カフェインおよびＬ−カルニチンによって処置した動物が、対照群と比較して、１０分間の強制遊泳期間においてより活動的かつ精力的であり、その時間の大部分で休息せずに低速遊泳または高速遊泳する傾向があり得ることを示している。２１日目の群における高速遊泳および遊泳速度の割合の増加は、処置動物が高速遊泳する傾向があり、ＬＩ１２５２２Ｆ２、ＬＩ８００２０Ｆ３、ＬＩ８９０３２Ｆ３経口投与後の最短期間に進んだ距離が、対照群と比較して長いことを示している。したがって、これらの組成物ＬＩ１２５２２Ｆ２、ＬＩ８００２０Ｆ３、ＬＩ８９０３によって処置した動物は、より精力的である。加えて、エネルギーの改善、移動距離の増加および休息時間の減少は、組成物ＬＩ１２５２２Ｆ２、ＬＩ８００２０Ｆ３、ＬＩ８９０３２Ｆ３が対照よりも高い耐久性を有することを示している。
【００９３】
握力測定
試験開始前に、スイスアルビノマウスを５日間馴化させた。健康なスイスアルビノマウスを選択し、異なる処置群に無作為に分けた（ｎ＝６）。ビヒクルまたは１５０ｍｇ／ｋｇのＬＩ８９０３２Ｆ３もしくはＬＩ１２５２２Ｆ２もしくはＬＩ８００２０Ｆ３または１５０ｍｇｌｋｇのＬ−カルニチンまたは１０ｍｇ／ｋｇのカフェインによって、動物を２１日間経口処置した。処置の２１日後に、握力計（ＵｇｏＢａｓｉｌｅ，Ｉｔａｌｙ）を使用することによって、マウスの握力を測定した。５日間にわたって動物を訓練し、実験環境および条件に馴化させた。各マウスに握り棒を握らせ、引張力が動物の握力を超えるまで力を徐々に増加させて、握り棒を尾と水平に徐々に引き戻した。マウスが握り棒を手放した際に適用した力を握力としてグラム単位で記録した。各動物について３回の試験を行い、平均握力を計算した。結果を平均±ＳＥＭとして表し、対照群と比較し、表９に要約した。
【００９４】
【表９】
0006629595.tif 000010
【００９５】
データによれば、組成物ＬＩ１２５２２Ｆ２、ＬＩ８００２０Ｆ３およびＬＩ８９０３２Ｆ２によって２１日間処置した動物群は、対照と比較して比較的優れた握力を示したことは明白である。