(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ．少なくとも１種の海藻種から得られた液汁と；
ｂ．少なくとも１種の海藻種のパルプから得られた加水分解物
とを含む植物体の生長を改良するための生物刺激製剤であって、
前記加水分解物が、液汁が前記パルプから抽出された後に前記パルプから得られるものであり、
前記海藻種が紅藻であり、
前記加水分解物が、４００〜１０，０００Ｄａの範囲の分子量を有する可溶性硫酸化ガラクトオリゴ糖を含む、
生物刺激製剤。
【請求項２】
前記紅藻種が、Kappaphycus striatus、Eucheuma cottonii、Eucheuma spinosum、Halymenia durvillaea、Kappaphycus alvarezii、Chondrus crispus、Halymenia durvillei、Porphyra purpurea、Eucheuma denticulatum、Eucheuma isiforme、Hypnea musciformis、Solieria filiformis、Mastocarpus stellatus、Porphyra capensis、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１に記載の生物刺激製剤。
【請求項３】
前記紅藻がKappaphycus alvareziiである、請求項２に記載の生物刺激製剤。
【請求項４】
前記紅藻がEucheuma denticulatumである、請求項２に記載の生物刺激製剤。
【請求項５】
紅藻がEucheuma denticulatumおよびKappaphycus striatusの組合せである、請求項２に記載の生物刺激製剤。
【請求項６】
前記液汁のブリックス範囲が１５〜２７Ｂｘである、請求項１に記載の生物刺激製剤。
【請求項７】
前記加水分解物が、２〜１６の範囲にある重合度を有する可溶性硫酸化ガラクトオリゴ糖を含む、請求項１に記載の生物刺激製剤。
【請求項８】
前記生物刺激製剤のブリックスが１０〜２５Ｂｘの範囲にある、請求項１に記載の生物刺激製剤。
【請求項９】
前記生物刺激製剤の炭水化物濃度が５〜１００ｍｇ／ｍｌの範囲にある、請求項１に記載の生物刺激製剤。
【請求項１０】
前記製剤における液汁と加水分解物とのｗ／ｗ比が１：９〜１５：１の範囲にある、請求項１に記載の生物刺激製剤。
【請求項１１】
適切な担体、希釈剤、および賦形剤をさらに含む、請求項１に記載の生物刺激製剤。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれかに記載の生物刺激製剤を調製する方法であって：
ａ．少なくとも１種の海藻種を得るステップと；
ｂ．前記海藻種を加工して海藻体液汁およびパルプを得るステップであって、前記パルプが液汁抽出後に得られる、ステップと；
ｃ．前記パルプを加水分解に付して加水分解物を得るステップであって、
前記加水分解が
ｉ．前記パルプを少なくとも１種の希釈剤で希釈して、５〜１５％の範囲にある重量百分率を有する懸濁固形物を得るステップと；
ｉｉ．懸濁固形物のｐＨを１〜３．５の範囲に調整するステップと；
ｉｉｉ．一定の撹拌状態で毎分１〜５℃の速度で６０℃〜１４０℃の範囲に温度を調整するステップと；
ｉｖ．温度を５〜３００分間保持して前記加水分解物を得るステップ
とを含む、ステップと；
ｄ．前記加水分解物を１７〜２４Ｂｘの範囲にある最終ブリックスに濃縮するステップ
と；
ｅ．前記液汁および前記加水分解物を混合して生物刺激製剤を得るステップ
とを含む、方法。
【請求項１３】
ａ．請求項１２に記載の方法を実施して生物刺激製剤を得るステップと；
ｂ．適切な担体、希釈剤、および賦形剤を前記生物刺激製剤に接触させるステップ
とを含む、請求項１〜１１のいずれかに記載の生物刺激製剤を調製する方法。
【請求項１４】
前記希釈剤が硬水、軟水、海水、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１２または１３に記載の方法。
【請求項１５】
ａ．請求項１〜１１のいずれかに記載の生物刺激製剤を得るステップと；
ｂ．前記生物刺激製剤を、種子を含む、植物体またはその一部と接触させるステップ
とを含む、植物体の生長を促進するために植物体を処理する方法であって、
植物体の生長を促進する、前記方法。
【請求項１６】
植物体の生長が、収量の増大、根長の長大化、葉面積の増大、シュートの生長増大、早熟、およびそれらの組合せとなることができる、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
植物体の生長を促進するのに使用するための請求項１〜１１のいずれかに記載の生物刺激製剤であって、前記植物体の生長が、収量の増大、根長の長大化、葉面積の増大、シュートの生長増大、早熟、およびそれらの組合せとなることができる、生物刺激製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は植物生物学の分野に関する。本開示は、少なくとも１種の海藻種の液汁および液汁抽出済みパルプから得られる、植物体の生長を促進するのに有用な生物刺激剤を提供する。
【背景技術】
【０００２】
植物体の生長を改良するための海藻をベースとした生物刺激剤については古くから良く知られている。海藻抽出物および懸濁液は、海藻体および海藻ミールよりも広範な用途および市場を成し遂げた。使用される海藻種はほとんど温帯性であり、より冷たい海域で生長する。いくつかの総説では、農業向けの海藻抽出物の使用についてカバーしている（Ｋｈａｎら、Ｊ．Ｐｌａｎｔ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｒｅｇｕ．ｌ（２００９）２８：３８６〜３９９；Ｃｒａｉｇｉｅら−Ｊ  Ａｐｐｌ  Ｐｈｙｃｏｌ（２０１１）２３：３７１〜３９３）。
【０００３】
生物刺激剤は現在主に褐藻から製造されているが、その種は各国間で様々である。一部については海藻体のアルカリ抽出によって製造され、溶解しないものはろ過によって除去される（例えばＭａｘｉｃｒｏｐおよびＳｅａｓｏｌ）。その他のものについては海藻体の微細粒子の懸濁液である（ＧｏｅｍｉｌｌおよびＫｅｌｐａｋ  ６６）。Ｇｏｅｍｉｌｌについては、海藻体（Ａｓｃｏｐｈｙｌｌｕｍ）を洗浄し、−２５℃にて凍結し、微粒子へと粉砕し、ホモジナイズする；産物は、６〜１０マイクロメーターの粒子を含むクリーム状製品であり、海藻体由来の全てのものが製品中に存する。他の化学物質を添加して、特定の用途向けに製品を改良することができる。Ｋｅｌｐａｋは１９８３年に初めて登場し、創始者によれば、それは熱、化学物質または脱水の使用を必要としない細胞バースト手順によってＥｃｋｌｏｎｉａ  ｍａｘｉｍａから製造されているということである。新鮮な植物体を茎（葉柄）のところで岩から裁断することによって採集し、次いでこれらを湿式粉砕装置によって漸次小粒子化する。そのような小粒子を最終的に非常に高圧下で低圧チャンバーへと送り込み、その結果、それらを剪断し崩壊させて、液体濃縮物が得られる（ＭｃＨｕｇｈ，Ｄ．２００３．Ａ  ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｓｅａｗｅｅｄ  ｉｎｄｕｓｔｒｙ  ９２ページ）。
【０００４】
米国特許第６，８９３，４７９号およびその等価物には、新鮮な紅藻Ｋａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ａｌｖａｒｅｚｉｉを使用して、生長刺激剤として本紅藻の液汁部を使用することによる生物肥料を生産することができる、方法が概説されている。海藻体の固形部を乾燥し、カラギナンへと変換させる。固形残渣（カラギナン）を生物刺激剤として使用することを、この特許では想定していない。
【０００５】
米国特許出願第２０１０／１７３７７９（Ａ１）号、米国特許出願公開第２０１１／００９９８９８（Ａ１）号およびその等価物には、海藻種に由来するカラギナンから得られる概２０の硫酸化ガラクトース単位のオリゴカラギナンポリマーは、生長促進効果および病原体に対する防御を有することを示す、方法が概説されている。
【発明の概要】
【０００６】
本開示の一態様では、
ａ）少なくとも１種の海藻種から得られた液汁；および
ｂ）少なくとも１種の海藻種のパルプから得られた加水分解物
を含む植物体の生長を改良するための生物刺激製剤であって、加水分解物は、液汁がパルプから抽出された後にパルプから得られる生物刺激製剤が提供される。
【０００７】
本開示の一態様では、
ａ）少なくとも１種の海藻種から得られた液汁；および
ｂ）少なくとも１種の海藻種のパルプから得られた加水分解物
を含む生物刺激製剤を調製する方法であって、前記加水分解物は液汁がパルプから抽出された後のパルプから得られ、
ｉ）少なくとも１種の海藻種を得るステップと；
ｉｉ）前記海藻種を加工して海藻体液汁およびパルプを得るステップであって、パルプは液汁の抽出後に得られるステップと；
ｉｉｉ）パルプを加水分解に付して加水分解物を得るステップであって、
前記加水分解が
（１）パルプを少なくとも１種の希釈剤で希釈して、５〜１５％の範囲にある重量百分率を有する懸濁固形物を得るステップ、
（２）懸濁固形物のｐＨを１〜３．５の範囲に調整するステップ、
（３）一定の撹拌状態で毎分１〜５℃の速度で６０℃〜１４０℃の範囲に温度を調整するステップ、および
（４）温度を５〜３００分間保持して前記加水分解物を得るステップ
を含むステップと；
ｉｖ）加水分解物を１７〜２４Ｂｘの範囲にある最終ブリックスに濃縮するステップと；
ｖ）前記液汁および前記加水分解物を混合して生物刺激製剤を得るステップと
を含む前記方法が提供される。
【０００８】
本開示の一態様では、
ａ）
ｉ）少なくとも１種の海藻種から得られた液汁、および
ｉｉ）少なくとも１種の海藻種のパルプから得られた加水分解物であって、液汁がパルプから抽出された後にパルプから得られる加水分解物
を含む生物刺激製剤を得るステップと、
ｂ）前記生物刺激製剤を、種子を含む、植物体またはその一部と接触させるステップと
を含む、生長を促進するために植物体を処理する方法であって、
植物体の生長を促進する前記方法が提供される。
【０００９】
本開示の一態様では、
ａ）少なくとも１種の海藻種から得られた液汁；および
ｂ）少なくとも１種の海藻種のパルプから得られた加水分解物
を含む生物刺激製剤であって、
加水分解物は、液汁がパルプから抽出された後のパルプから得られる、
生物刺激製剤が提供される。
【００１０】
本発明のこのようなおよびその他の特徴、態様および利点は、以下の説明および添付の特許請求の範囲を参照することにとって一層理解されよう。本概要は単純化した形態で概念の選択を紹介するために提供するものである。本概要は、クレームする主題の主要な特徴または本質的な特徴を特定することを意図するものではなく、そしてまたクレームする主題の範囲を限定するために使用することを意図するものでもない。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
以下の図面は本明細書の一部を構成するものであり、本開示の態様をさらに説明するために含まれるものである。本開示は、本明細書に提示されている特定の実施形態に関する詳細な説明と組み合わせて図面を参照することにより、一層理解され得るであろう。
【００１２】
【図１】図１は、本開示の一実施形態による、Ｋａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ａｌｖａｒｅｚｉｉ（ｃｏｔｔｏｎｉｉ）のパルプから抽出された海藻体液汁の制御下加水分解から得られた加水分解物のクロマトグラムを示す図である。
【００１３】
【図２】図２は、本開示の一実施形態による、トウモロコシ幼植物体の根長に対する本明細書に記載の生物刺激製剤の効果に関するグラフ表示を示す図である。
【００１４】
【図３】図３は、本開示の一実施形態による、ホースグラムシードのシュート長さに対する本明細書に記載の生物刺激製剤の効果に関するグラフ表示を示す図である。
【００１５】
【図４】図４は、本開示の一実施形態による、キュウリの子葉伸展に対する本明細書に記載の生物刺激製剤の効果に関するグラフ表示を示す図である。
【００１６】
【図５】図５は、本開示の一実施形態による、ホースグラム発芽の根長に対する本明細書に記載の生物刺激製剤の効果に関するグラフ表示を示す図である。
【００１７】
【図６】図６は、本開示の一実施形態による、Ｅｕｃｈｅｕｍａ  ｄｅｎｔｉｃｕｌａｔｕｍ（ｓｐｉｎｏｓｕｍ）のパルプから抽出された液汁の制御下加水分解から得られた加水分解物のクロマトグラムを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
当業者であれば、本開示には特に記載されたもの以外にも変形および改変があることを知っているであろう。本開示にはかかる変形および改変の全てが含まれることが理解されるべきである。本開示はまた、本明細書において言及したかまたは示したかかるステップ、特徴、組成物および化合物の全てを、個々にまたは一括して含み、ならびにかかるステップまたは特徴のいずれかまたは複数のあらゆる組合せを含むものである。
【００１９】
定義
便宜上、本開示をさらに説明する前に、本明細書において用いられるある特定の用語および例がここに集約されている。それらの定義は本開示の残りの部分に照らして読むべきものであり、当業者によって理解されるべきものである。本明細書において使用される用語は、当業者にとって理解かつ知られている意味を有するものであるが、便宜性と完結性のために、特定の用語およびそれらの意味について以下に述べる。
【００２０】
冠詞「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、当該冠詞の文法的対象の１または２以上を（すなわち、少なくとも１を）指すために使用される。
【００２１】
用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」および「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」とは、追加の要素を含み得るという包含的、開放的趣旨、意味で使用される。これは「のみからなる」と解されるべきものではない。
【００２２】
本明細書の全体を通じて、文脈上他に要求されない限り、単語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」ならびに「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの変化形は、記載された要素もしくはステップまたは要素もしくはステップの群の包含を意味するもので、何ら他の要素もしくはステップまたは要素もしくはステップの群の排除を意味するものではないことが理解されよう。
【００２３】
用語「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」は、「含むが、それらに限定されないが（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ  ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｌｉｍｉｔｅｄ  ｔｏ）」を意味するように使用される。「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）および「含むが、それらに限定されないが（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ  ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｌｉｍｉｔｅｄ  ｔｏ）」は同義的に使用される。
【００２４】
特に定義されない限り、本明細書において使用される全ての技術用語および科学用語は、本開示が属する技術分野の通常の当業者によって一般的に理解されるものと同一の意味を有する。本明細書に記載のものに類似のまたは等価のあらゆる方法および材料は本開示の実践でまたは試験する上で使用し得るが、好ましい方法および材料についてここに説明する。本明細書に記載の全ての出版物が、参照することにより本明細書に組み込まれる。
【００２５】
「相乗活性」を含む組成物または「相乗作用組成物」とは、個々の化合物の生物学的活性または機能活性を非線形的倍数で増大した生物学的活性または機能活性を呈する、化合物の組合せである。すなわち、試験予定の２種以上の化合物の合わせた生物学的活性または機能活性は、別々に試験された化合物の個別の効果に基づいて予測された結果よりも、著しく高い。相乗作用は、ある範囲または濃度のみにおいて明白となり得る。また、化合物の相乗作用組合せは、試験される各種の生物学的効果  −  例えば、シュート長さの長大化、根長の長大化もしくは葉の伸展または収量等に対して様々であり得る。
【００２６】
用語「液汁抽出済みパルプ」とは、従来方法もしくは本開示に記載の方法のいずれかまたは組合せによって、海藻体から液汁を抽出した後に残っている海藻体パルプを指す。
【００２７】
本開示は、本明細書に記載の特定の実施形態による範囲に限定されるものではなく、それらの実施形態は例示することのみを目的とするものである。機能的に等価である製品、組成物、および方法は、本明細書に記載の通り、明瞭に本開示の範囲内にある。
【００２８】
本開示の一実施形態では、
ａ）少なくとも１種の海藻種から得られた液汁；および
ｂ）少なくとも１種の海藻種のパルプから得られた加水分解物
を含む植物体の生長を改良するための生物刺激製剤であって、加水分解物は、液汁がパルプから抽出された後にパルプから得られる生物刺激製剤が提供される。
【００２９】
本開示の一実施形態では、前記海藻種が紅藻である、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００３０】
本開示の一実施形態では、前記海藻体が、Ｋａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ｓｔｒｉａｔｕｓ、Ｅｕｃｈｅｕｍａ  ｃｏｔｔｏｎｉｉ、Ｅｕｃｈｅｕｍａ  ｄｅｎｔｉｃｕｌａｔｕｍ  （ｓｐｉｎｏｓｕｍ）、Ｈａｌｙｍｅｎｉａ  ｄｕｒｖｉｌｌａｅａ、Ｋａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ａｌｖａｒｅｚｉｉ、Ｃｈｏｎｄｒｕｓ  ｃｒｉｓｐｕｓ、Ｈａｌｙｍｅｎｉａ  ｄｕｒｖｉｌｌｅｉ、Ｐｏｒｐｈｙｒａ  ｐｕｒｐｕｒｅａ、Ｅｕｃｈｅｕｍａ  ｄｅｎｔｉｃｕｌａｔｕｍ、Ｅｕｃｈｅｕｍａ  ｉｓｉｆｏｒｍｅ、Ｈｙｐｎｅａ  ｍｕｓｃｉｆｏｒｍｉｓ、Ｓｏｌｉｅｒｉａ  ｆｉｌｉｆｏｒｍｉｓ、Ｍａｓｔｏｃａｒｐｕｓ  ｓｔｅｌｌａｔｕｓ、Ｐｏｒｐｈｙｒａ  ｃａｐｅｎｓｉｓ、Ｇｒａｃｉｌｌａｒｉａ  ｓｐおよびそれらの組合せからなる群から選択される、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００３１】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＨａｌｙｍｅｎｉａ  ｄｕｒｖｉｌｌａｅａである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００３２】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＫａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ａｌｖａｒｅｚｉｉである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００３３】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＣｈｏｎｄｒｕｓ  ｃｒｉｓｐｕｓである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００３４】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＨａｌｙｍｅｎｉａ  ｄｕｒｖｉｌｌｅｉである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００３５】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＰｏｒｐｈｙｒａ  ｐｕｒｐｕｒｅａである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００３６】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＥｕｃｈｅｕｍａ  ｄｅｎｔｉｃｕｌａｔｕｍである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００３７】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＥｕｃｈｅｕｍａ  ｉｓｉｆｏｒｍｅである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００３８】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＨｙｐｎｅａ  ｍｕｓｃｉｆｏｒｍｉｓである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００３９】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＳｏｌｉｅｒｉａ  ｆｉｌｉｆｏｒｍｉｓである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００４０】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＭａｓｔｏｃａｒｐｕｓ  ｓｔｅｌｌａｔｕｓである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００４１】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＰｏｒｐｈｙｒａ  ｃａｐｅｎｓｉｓである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００４２】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＫａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ｓｔｒｉａｔｕｓである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００４３】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＥｕｃｈｅｕｍａ  ｃｏｔｔｏｎｉｉである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００４４】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＥｕｃｈｅｕｍａ  ｓｐｉｎｏｓｕｍである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００４５】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＥｕｃｈｅｕｍａ  ｄｅｎｔｉｃｕｌａｔｕｍおよびＫａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ｓｔｒｉａｔｕｓの組合せである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００４６】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＫａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ｓｔｒｉａｔｕｓ、Ｅｕｃｈｅｕｍａ  ｃｏｔｔｏｎｉｉ、Ｅｕｃｈｅｕｍａ  ｓｐｉｎｏｓｕｍ、Ｈａｌｙｍｅｎｉａ  ｄｕｒｖｉｌｌａｅａ、Ｋａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ａｌｖａｒｅｚｉｉ、Ｃｈｏｎｄｒｕｓ  ｃｒｉｓｐｕｓ、Ｈａｌｙｍｅｎｉａ  ｄｕｒｖｉｌｌｅｉ、Ｐｏｒｐｈｙｒａ  ｐｕｒｐｕｒｅａ、Ｅｕｃｈｅｕｍａ  ｄｅｎｔｉｃｕｌａｔｕｍ、Ｅｕｃｈｅｕｍａ  ｉｓｉｆｏｒｍｅ、Ｈｙｐｎｅａ  ｍｕｓｃｉｆｏｒｍｉｓ、Ｓｏｌｉｅｒｉａ  ｆｉｌｉｆｏｒｍｉｓ、Ｍａｓｔｏｃａｒｐｕｓ  ｓｔｅｌｌａｔｕｓ、およびＰｏｒｐｈｙｒａ  ｃａｐｅｎｓｉｓ、Ｇｒａｃｉｌｌａｒｉａ種からなる群から選択される海藻の組合せである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００４７】
本開示の一実施形態では、前記液汁のブリックス範囲が１５〜２７Ｂｘである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００４８】
本開示の一実施形態では、前記液汁のブリックス範囲が２０〜２７Ｂｘである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００４９】
本開示の一実施形態では、前記液汁のブリックスが２５Ｂｘである、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００５０】
本開示の一実施形態では、前記製剤において、カリウム（Ｋ）とナトリウム（Ｎａ）とのイオンｗ／ｗ比が１．５：１〜１５：１の範囲にある、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００５１】
本開示の一実施形態では、前記製剤におけるカリウム（Ｋ）とナトリウム（Ｎａ）とのイオンｗ／ｗ比が少なくとも２：１である、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００５２】
本開示の一実施形態では、前記製剤におけるカリウム（Ｋ）とナトリウム（Ｎａ）とのイオンｗ／ｗ比が２．７：１である、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００５３】
本開示の一実施形態では、前記製剤におけるカリウム（Ｋ）とナトリウム（Ｎａ）とのイオンｗ／ｗ比が４．８：１である、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００５４】
本開示の一実施形態では、前記加水分解物が、４００〜１０，０００Ｄａの範囲の分子量を有する可溶性硫酸化ガラクトオリゴ糖を含む、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００５５】
本開示の一実施形態では、前記加水分解物が、４００〜５，０００Ｄａの範囲の分子量を有する可溶性硫酸化ガラクトオリゴ糖を含む、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００５６】
本開示の一実施形態では、前記加水分解物が、２〜１６の範囲にある重合度を有する可溶性硫酸化ガラクトオリゴ糖を含む、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００５７】
本開示の一実施形態では、前記生物刺激製剤のブリックスが１０〜２５Ｂｘの範囲にある、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００５８】
本開示の一実施形態では、前記生物刺激製剤の総炭水化物濃度が５〜１００ｍｇ／ｍｌの範囲にある、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００５９】
本開示の一実施形態では、前記製剤における液汁と加水分解物とのｗ／ｗ比が１：１〜９：１の範囲にある、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００６０】
本開示の一実施形態では、前記製剤における液汁と加水分解物とのｗ／ｗ比が４：１である、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００６１】
本開示の一実施形態では、適切な担体、希釈剤、および賦形剤をさらに含む、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００６２】
本開示の一実施形態では、前記適切な担体、希釈剤、および賦形剤は、それらに限定されないが、塩化カリウム、硫酸カリウム、クエン酸カリウム、硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムなどの塩、マルトデキストリン、石膏、ベントナイト、水、糖、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、エタノール、ブタノール、イソプロピルアルコール、酢酸、乳酸、およびそれらの組合せとすることができる、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００６３】
本開示の一実施形態では、前記製剤が液体の形態である、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００６４】
本開示の一実施形態では、前記製剤が粉末形態である、本明細書に記載の生物刺激製剤が提供される。
【００６５】
本開示の一実施形態では、本明細書に記載の生物刺激製剤を調整する方法であって、
ａ）少なくとも１種の海藻種を得るステップと；
ｂ）前記海藻種を加工して海藻体液汁およびパルプを得るステップであって、パルプは液汁抽出後に得られるステップと；
ｃ）パルプを加水分解に付して加水分解物を得るステップであって、
前記加水分解が
（ｉ）パルプを少なくとも１種の希釈剤で希釈して、５〜１５％の範囲にある重量百分率を有する懸濁固形物を得るステップ、
（ｉｉ）懸濁固形物のｐＨを１〜３．５の範囲に調整するステップ、
（ｉｉｉ）一定の撹拌状態で毎分１〜５℃の速度で６０℃〜１４０℃の範囲に温度を調整するステップ、および
（ｉｖ）温度を５〜３００分間保持して前記加水分解物を得るステップ
を含むステップと；
ｄ）加水分解物を１７〜２４Ｂｘの範囲にある最終ブリックスに濃縮するステップと；
ｅ）前記液汁および前記加水分解物を混合して生物刺激製剤を得るステップと
を含む、方法が提供される。
【００６６】
本開示の一実施形態では、海藻体の前記種が紅藻である、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００６７】
本開示の一実施形態では、海藻体の前記種が、Ｋａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ｓｔｒｉａｔｕｓ、Ｅｕｃｈｅｕｍａ  ｃｏｔｔｏｎｉｉ、Ｅｕｃｈｅｕｍａ  ｓｐｉｎｏｓｕｍ、Ｈａｌｙｍｅｎｉａ  ｄｕｒｖｉｌｌａｅａ、Ｋａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ａｌｖａｒｅｚｉｉ、Ｃｈｏｎｄｒｕｓ  ｃｒｉｓｐｕｓ、Ｈａｌｙｍｅｎｉａ  ｄｕｒｖｉｌｌｅｉ、Ｐｏｒｐｈｙｒａ  ｐｕｒｐｕｒｅａ、Ｅｕｃｈｅｕｍａ  ｄｅｎｔｉｃｕｌａｔｕｍ、Ｅｕｃｈｅｕｍａ  ｉｓｉｆｏｒｍｅ、Ｈｙｐｎｅａ  ｍｕｓｃｉｆｏｒｍｉｓ、Ｓｏｌｉｅｒｉａ  ｆｉｌｉｆｏｒｍｉｓ、Ｍａｓｔｏｃａｒｐｕｓ  ｓｔｅｌｌａｔｕｓ、Ｐｏｒｐｈｙｒａ  ｃａｐｅｎｓｉｓ、およびそれらの組合せからなる群から選択される、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００６８】
本開示の一実施形態では、海藻体の前記種がＫａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ｓｔｒｉａｔｕｓである、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００６９】
本開示の一実施形態では、海藻体の種がＥｕｃｈｅｕｍａ  ｃｏｔｔｏｎｉｉである、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００７０】
本開示の一実施形態では、海藻体の前記種がＥｕｃｈｅｕｍａ  ｓｐｉｎｏｓｕｍである、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００７１】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＨａｌｙｍｅｎｉａ  ｄｕｒｖｉｌｌａｅａである、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００７２】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＫａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ａｌｖａｒｅｚｉｉである、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００７３】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＣｈｏｎｄｒｕｓ  ｃｒｉｓｐｕｓである、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００７４】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＨａｌｙｍｅｎｉａ  ｄｕｒｖｉｌｌｅｉである、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００７５】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＰｏｒｐｈｙｒａ  ｐｕｒｐｕｒｅａである、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００７６】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＥｕｃｈｅｕｍａ  ｄｅｎｔｉｃｕｌａｔｕｍである、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００７７】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＥｕｃｈｅｕｍａ  ｉｓｉｆｏｒｍｅである、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００７８】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＨｙｐｎｅａ  ｍｕｓｃｉｆｏｒｍｉｓである、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００７９】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＳｏｌｉｅｒｉａ  ｆｉｌｉｆｏｒｍｉｓである、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００８０】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＭａｓｔｏｃａｒｐｕｓ  ｓｔｅｌｌａｔｕｓである、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００８１】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＰｏｒｐｈｙｒａ  ｃａｐｅｎｓｉｓである、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００８２】
本開示の一実施形態では、前記海藻体がＥｕｃｈｅｕｍａ  ｄｅｎｔｉｃｕｌａｔｕｍおよびＫａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ｓｔｒｉａｔｕｓの組合せである、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００８３】
本開示の一実施形態では、液汁濃度が１５〜２７Ｂｘ範囲にある、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００８４】
本開示の一実施形態では、液汁濃度が２０〜２７Ｂｘ範囲にある、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００８５】
本開示の一実施形態では、液汁の濃度が２５Ｂｘである、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００８６】
本開示の一実施形態では、懸濁固形物濃度が５〜１５％の範囲にある、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００８７】
本開示の一実施形態では、懸濁固形物濃度が１０％である、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００８８】
本開示の一実施形態では、懸濁固形物ｐＨのｐＨが４未満である、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００８９】
本開示の一実施形態では、懸濁固形物ｐＨが３未満である、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００９０】
本開示の一実施形態では、懸濁固形物ｐＨのｐＨが１．５〜２の範囲にある、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００９１】
本開示の一実施形態では、懸濁固形物の保持温度が９０℃〜９５℃の範囲にある、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００９２】
本開示の一実施形態では、懸濁固形物の保持温度が１４０℃である、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００９３】
本開示の一実施形態では、懸濁固形物の保持温度が６０℃である、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００９４】
本開示の一実施形態では、懸濁固形物の温度が１〜５℃／分の速度で保持温度に上昇される、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００９５】
本開示の一実施形態では、懸濁固形物の初期温度が２０〜２５℃の範囲にある、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００９６】
本開示の一実施形態では、１２０℃にある懸濁固形物がｐＨ２．８にて２０分間保持される、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００９７】
本開示の一実施形態では、９０〜９５℃にある懸濁固形物がｐＨ３．２にて１２０分間保持される、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００９８】
本開示の一実施形態では、６０℃にある懸濁固形物がｐＨ３．５未満にて１８０分間保持される、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【００９９】
本開示の一実施形態では、前記少なくとも１種の希釈剤が軟水、硬水、海水、およびそれらの組合せからなる群から選択される、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【０１００】
本開示の一実施形態では、前記少なくとも１種の希釈剤が軟水である、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【０１０１】
本開示の一実施形態では、前記少なくとも１種の希釈剤が硬水である、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【０１０２】
本開示の一実施形態では、前記少なくとも１種の希釈剤が海水である、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【０１０３】
本開示の一実施形態では、前記少なくとも１種の希釈剤が軟水、硬水、および海水の混合物である、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【０１０４】
本開示の一実施形態では、前記加水分解物が、４００〜１０，０００Ｄａの範囲の分子量を有する可溶性硫酸化ガラクトオリゴ糖を含む、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【０１０５】
本開示の一実施形態では、前記加水分解物が、４００〜５，０００Ｄａの範囲の分子量を有する可溶性硫酸化ガラクトオリゴ糖を含む、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【０１０６】
本開示の一実施形態では、前記加水分解物が、２〜１６の範囲にある重合度を有する可溶性硫酸化ガラクトオリゴ糖を含む、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【０１０７】
本開示の一実施形態では、液汁と加水分解物とのｗ／ｗ比が１：９〜１５：１の範囲にある、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【０１０８】
本開示の一実施形態では、液汁と加水分解物とのｗ／ｗ比が４：１である、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【０１０９】
本開示の一実施形態では、前記生物刺激製剤が適切な担体、希釈剤、および賦形剤をさらに含む、本明細書に記載の生物刺激製剤を調製する方法が提供される。
【０１１０】
本開示の一実施形態では、
（ａ）本明細書に記載の生物刺激製剤を得るステップ；および
（ｂ）前記生物刺激製剤を、種子を含む、植物体またはその一部と接触させるステップを含む、生長を促進するために植物体を処理する方法であって、
植物体の生長を促進する前記方法が提供される。
【０１１１】
本開示の一実施形態では、生長を促進するために植物体を処理する方法であって、収量を増大させる前記方法が提供される。
【０１１２】
本開示の一実施形態では、生長を促進するために植物体を処理する方法であって、根長を長大化させる前記方法が提供される。
【０１１３】
本開示の一実施形態では、生長を促進するために植物体を処理する方法であって、シュート長さを長大化させる前記方法が提供される。
【０１１４】
本開示の一実施形態では、生長を促進するために植物体を処理する方法であって、葉面積を増大させる前記方法が提供される。
【０１１５】
本開示の一実施形態では、生長を促進するために植物体を処理する方法であって、植物体の成熟を早める前記方法が提供される。
【０１１６】
本開示の一実施形態では、植物体の生長を促進するのに使用するための本明細書に記載の生物刺激製剤が提供され、植物体の生長とは、収量の増大、根長の長大化、葉面積の増大、シュートの生長増大、早熟、およびそれらの組合せとすることができる。
【０１１７】
本発明をそのある特定の好ましい実施形態を参照することでかなり詳細に説明してきたが、その他の実施形態が可能である。
【実施例】
【０１１８】
これより本開示について実用的な実施例により説明するが、これは開示の実施を説明することを意図するものであって、本開示の範囲への何らかの制限を意味するように限定的にとらえることを意図するものではない。特に定義されない限り、本明細書において使用される全ての技術用語および科学用語は、本開示が属する技術分野の通常の当業者によって一般的に理解されるものと同一の意味を有する。本明細書に記載のものに類似のまたは等価の方法および材料は、本開示の方法および組成物の実践で使用し得るが、例示的方法、装置および材料についてここに説明する。記載されてある特定の方法および実験条件は変化し得るので、本開示はかかる方法および条件に限定されるものではないことが理解されるべきである。
【０１１９】
実施例１
液汁と液汁抽出済みパルプとへのＫａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ｓｔｒｉａｔｕｓ  （ｓａｃｏｌ）海藻体の分離
１ｋｇの新鮮なＫａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ｓｔｒｉａｔｕｓ  （ｓａｃｏｌ）海藻体をインドネシアのＭａｋａｓｓａｒ島から調達し、ラボ用遠心分離ジューサー（ｌａｂ  ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ  ｊｕｉｃｅｒ）により加工した。この遠心分離ジューサー（ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ  ｊｕｉｃｅｒ）は鋭い歯を有する回転有孔壁ボウルを備えている。全海藻体は回転ボウルと接触し、中間スラリーを形成すること無く液汁と液汁抽出済みパルプとに即座に分離する。海藻体液汁抽出済みパルプおよび海藻体液汁を、装置の２つの異なる出口から連続して別々に採取した。採取した液汁抽出済みパルプの量は３５０ｇであり、採取した液汁の量は６５０ｇであった。液汁抽出済みパルプの水分含量は８０％、液汁のブリックスは５％であった。
【０１２０】
実施例２
液汁と液汁抽出済みパルプとへのＳｐｉｎｏｓｕｍ海藻体の分離
１ｋｇのＥｕｃｈｅｕｍａ  ｄｅｎｔｉｃｕｌａｔｕｍ  （Ｓｐｉｎｏｓｕｍ）をタンザニアのＺａｎｚｉｂａｒ島から得、透明プラスチックバッグにパックし、４〜１０ｈ間太陽に曝露した。バイオマスより滲出した液汁をバッグに採取し、その結果、そのままの全海藻体が後に残ったがスラリーの形成は無かった。１ｋｇの新鮮なｓｐｉｎｏｓｕｍから、８００ｇの液汁抽出済みパルプおよび２００ｇの液汁が得られた。
【０１２１】
実施例３
海藻体液汁（ＳＷＪ）の濃縮
実施例２由来の１５０ｍｌの新鮮なＳｐｉｎｏｓｕｍ海藻体液汁（およそ４．５Ｂｘ）を、ロータリーエバポレーターを使用して６８０ｍｍＨｇの真空下でおよそ３０ｍｌに濃縮した。蒸発フラスコを６５℃に維持し、垂直凝縮器を、チラーを通す循環水により４℃に維持した。最終濃縮液汁のブリックスは２２Ｂｘであった。類似の別の実験では、１ｋｇのＫａｐｐａｐｙｃｕｓ  Ａｌｖａｒｅｚｉｉ  （ｃｏｔｔｏｎｉｉ）海藻体を液汁とパルプとへ実施例１における方法により分離した。２５０ｍｌの液汁（およそ５Ｂｘ）をロータリー真空エバポレーター中で最終Ｂｘ２５に濃縮した。
【０１２２】
ｓｐｉｎｏｓｕｍおよびｃｏｔｔｏｎｉｉ双方の濃縮液汁を元素分析に送ったところ、表１（ｇ／Ｋｇ）に下記に示すように以下の組成を示した。
【表１】
0006744331.tif 000002
【０１２３】
上の分析から、海藻種にかかわらず、カリウムが濃縮液汁中に最も豊富に存する元素であることが分かり得る。カリウムの割合は次に最も豊富な元素ナトリウムのそれの２倍超であることも分かり得る。
【０１２４】
実施例４
液汁濃縮物の安定性
単純濃度の液汁（５Ｂｘ）および実施例３に由来する濃縮液汁（２５Ｂｘ）の双方を１００ｍｌのスクリューキャップ付きのエルレンマイヤーフラスコに一定量分取した。フラスコを２５℃にて１００ｒｐｍに設定した回転振とう器でインキュベートした。１週間のインキュベートの後、単純濃度の液汁は悪臭を発し、微生物汚染によるその腐敗を示していた。しかし、濃縮液汁は悪臭を発せず、安定であることを示した。
【０１２５】
実施例５
液汁抽出済みパルプの制御下加水分解
インドネシアのＭａｋａｓｓａｒ島から得た１ｋｇの新鮮なＫａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ａｌｖａｒｅｚｉｉ  （ｃｏｔｔｏｎｉｉ）を実施例１に記載のように加工した。液汁抽出後に得られたパルプを水と混合して、濃度が１０％である懸濁固形物を得た。海藻体パルプのｐＨを酸を使用して２．５へと低下させ、温度をオートクレーブを使用して段階的に約１２１℃に徐々に上昇させた。混合物を１２０〜１２２℃の間に、一定の撹拌状態で約１５分間保持した。加水分解を反応混合物を冷却することにより停止させた。サンプルをＨＰＬＣに注入し、図１に示すように、オリゴ糖の梯子状のパターンが得られた。
【０１２６】
別の実験では、実施例２に概略してあるように得られた、Ｅｕｃｈｅｕｍａ  ｄｅｎｔｉｃｕｌａｔｕｍ  （ｓｐｉｎｏｓｕｍ）のパルプ（液汁抽出後）の１０％乾燥固形物当量の懸濁液を調製した。懸濁液のｐＨを０．０５ＭのＨＣｌを使用して３．５に低下させ、懸濁液を９３℃に徐々に加熱し、９０と９５℃の間に５時間保持した。混合物のサンプルを一定時間間隔で採取し、ＨＰＬＣシステムを使用してアッセイした。加水分解を反応混合物を冷却することにより停止させた。図６に示すように、オリゴ糖の梯子状のパターンが検出された。
【０１２７】
実施例６
海藻体パルプ（液汁抽出済み）加水分解物をチェックする分析手順
実施例５において上に記載の加水分解方法から得られたサンプルを遠心分離し、その上澄みについて、ゲルろ過カラム（ＴＳＫｇｅｌ  Ｇ２０００ＳＷＸＬ、Ｔｏｓｈｏ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社）および屈折率検出器を備えたＨＰＬＣシステム（Ｉｎｆｉｎｉｔｙ  １２００、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を使用して分析した。移動相、０．２Ｍ酢酸アンモニウム（ｐＨ５．０）を流速０．５ｍｌ／ｍｉｎで使用した。図１に示すようにオリゴ糖の梯子状のパターンが得られた。このパターンは、ＨＰＬＣ分析の条件下で１９分から２４分まで一定間隔にある一連のピークに当たる。これらのピークは、高重合度から低重合度までの範囲の、オリゴ糖の鎖長の長大化を表す。
【０１２８】
オリゴ糖の分子量を決定するために、カラムをＤｅｘｔｒａｎ  ＧＰＣ標準物質（Ｓｉｇｍａ社、Ｃａｔ  ｎｏ．３１４１６、３１４１７および３１４１８）で較正した。標準曲線の精度を既知の分子量の硫酸化オリゴ糖（ネオカラビオース−４−Ｏ−スルファートナトリウム塩；ネオカラテトラオース−４１，４３−ジ−Ｏ−スルファートナトリウム塩、英国のＤｅｘｔｒａ社から入手）を使用して試験した。標準曲線を使用して導き出された分子量は約±１５％で正確であった。クロマトグラムの重要なピークの全ては２０分後に存在し、これは分子量が８，５００Ｄａ未満であることを示すことが、わかった。
【０１２９】
実施例７
海藻体液汁抽出済みパルプの加水分解物の濃縮（ＳＷＯ）
実施例５から得られた、３００ｍｌのオリゴ糖含有加水分解物（一般には７Ｂｘ）を、６８０ｍｍＨｇの真空下に維持したロータリーエバポレーターを使用して、およそ１００ｍｌに濃縮した。蒸発フラスコを６５℃に維持し、垂直凝縮器をチラーを通す循環水により４℃に維持した。濃縮加水分解物のブリックスは２１Ｂｘであった。
【０１３０】
実施例８
トウモロコシ幼植物体の根長バイオアッセイ
トウモロコシ幼植物体を、ｗ／ｗ比が４：１（０．８ｍｌ／Ｌの液汁濃度、および０．２ｍｌ／Ｌの加水分解物濃度）である濃縮海藻体液汁（ＳＷＪ）と液汁抽出済み海藻体パルプの濃縮加水分解物（ＳＷＯ）との混合物で処理したか、または
濃縮海藻体液汁（０．８ｍｌ／Ｌ）もしくは液汁抽出済み海藻体パルプの濃縮加水分解物（０．８ｍｌ／Ｌ）で個別的に処理した。対照として水を使用した。結果を表形式で表２中において下記に、およびグラフ形式で図２に示す。
【表２】
0006744331.tif 000003
【０１３１】
図２、および表２から観察されるように、対照を超える平均根長の長大化は、ＳＷＪとＳＷＯとが混合物で使用された場合（３８．２１％）に、ＳＷＪまたはＳＷＯ単独の効果と比べて、はるかに有意に大きかった。ＳＷＪ単独では対照を超える２．９８％の長大化が得られ、一方、ＳＷＯでは対照を超える２１．４１％長大化が得られた。これらの両成分の相加的効果は理論的に２４．３９％であったが、観察されたように、これは両方が一緒に使用される場合に得られる効果よりはるかに小さく、したがって、驚くべきそして意外な相乗効果が示されている。
【０１３２】
実施例９
ホースグラムシードのシュート長さのバイオアッセイ
ホースグラムシードを、ｗ／ｗ比が４：１（０．８ｍｌ／Ｌの液汁濃度、および０．２ｍｌ／Ｌの加水分解物濃度）である濃縮海藻体液汁（ＳＷＪ）と液汁抽出済み海藻体パルプの濃縮加水分解物（ＳＷＯ）との混合物で処理したか、または濃縮海藻体液汁（０．８ｍｌ／Ｌ）もしくは液汁抽出済み海藻体パルプの濃縮加水分解物（０．８ｍｌ／Ｌ）で個別的に処理した。対照として水を使用した。結果を表形式で表３中において下記に、およびグラフ形式で図３に示す。
【表３】
0006744331.tif 000004
【０１３３】
図３、および表３から観察されるように、対照を超える平均のシュート長さの長大化は、ＳＷＪとＳＷＯとが混合物で使用された場合（９．１３％）に、ＳＷＪまたはＳＷＯ単独の効果と比べて、はるかに有意に大きかった。ＳＷＪ単独では対照と比べて負の０．４５％の長大化が得られ、一方、ＳＷＯでは対照を超える３．３４％長大化が得られた。これらの両成分の相加的効果は理論的に２．８９％であったが、観察されたように、これは両方が一緒に使用される場合に得られる効果よりはるかに小さく、したがって、驚くべきそして意外な相乗効果が示されている。
【０１３４】
実施例１０
キュウリの子葉伸展のバイオアッセイ
キュウリ子葉を、ｗ／ｗ比が４：１（０．８ｍｌ／Ｌの液汁濃度、および０．２ｍｌ／Ｌの加水分解物濃度）である濃縮海藻体液汁（ＳＷＪ）と液汁抽出済み海藻体パルプの濃縮加水分解物（ＳＷＯ）との混合物で処理したか、または濃縮海藻体液汁（０．８ｍｌ／Ｌ）もしくは液汁抽出済み海藻体パルプの濃縮加水分解物（０．８ｍｌ／Ｌ）で個別的に処理した。対照として水を使用した。結果を表形式で表４中において下記に、およびグラフ形式で図４に示す。
【表４】
0006744331.tif 000005
【０１３５】
図４、および表４から観察されるように、対照を超える平均の子葉における増大は、ＳＷＪとＳＷＯとが混合物で使用された場合（９０．３６％）に、ＳＷＪまたはＳＷＯ単独の効果と比べて、はるかに有意に大きかった。ＳＷＪ単独では対照を超える１５．６６％の長大化が得られ、一方、ＳＷＯでは対照を超える５１．８１％長大化が得られた。これらの両成分の相加的効果は理論的に６７．４７％であったが、観察されたように、これは両方が一緒に使用される場合に得られる効果よりはるかに小さく、したがって、驚くべきそして意外な相乗効果が示されている。
【０１３６】
実施例１１
粉末生物刺激剤製品を得るための噴霧乾燥
インドネシア源のＥｕｃｈｅｕｍａ  ｃｏｔｔｏｎｉｉ由来の濃縮液汁（２３Ｂｒｉｘを有する）を、次の条件：入口温度  １７４℃および出口温度  ８４℃にて、ＦＴ−８０トールフォーム噴霧乾燥機を使用して、粉末形態に変換させた。
【０１３７】
ＳＷＪおよびＳＷＯを適切な重量比で（１：１〜９：１）混ぜることで生物刺激剤を調製し、噴霧乾燥を上に記載の類似の条件で実施して、固形生物刺激製剤を得た。
【０１３８】
実施例１２
ホースグラム発芽の根長バイオアッセイ
ホースグラムシードを、ｗ／ｗ比が１２：１（４．０ｍｌ／Ｌの液汁濃度、および０．３３ｍｌ／Ｌの加水分解物濃度）である濃縮海藻体液汁（ＳＷＪ）と液汁抽出済み海藻体パルプの濃縮加水分解物（ＳＷＯ）との混合物で処理したか、または濃縮海藻体液汁（４．０ｍｌ／Ｌ）もしくは液汁抽出済み海藻体パルプの濃縮加水分解物（０．３３ｍｌ／Ｌ）で個別的に処理した。対照として水を使用した。結果を表形式で表５中において下記に、およびグラフ形式で図５に示す。
【表５】
0006744331.tif 000006
【０１３９】
図５、および表５から観察されるように、対照を超える平均の根長の長大化は、ＳＷＪとＳＷＯとが混合物で使用された場合（１６．４％）に、ＳＷＪまたはＳＷＯ単独の効果と比べて、はるかに有意に大きかった。ＳＷＪ単独では対照を超える１．８％の長大化が得られ、一方、ＳＷＯでは対照を超える１２．４％長大化が得られた。これらの両成分の相加的効果は理論的に１４．２％であったが、観察されたように、これは両方が一緒に使用される場合に得られる効果よりはるかに小さく、したがって、驚くべきそして意外な相乗効果が示されている。
【０１４０】
実施例１３
水田試験の収量結果
圃場試験を、ＳＷＪおよびＳＷＯならびに様々な比率にあるＳＷＪおよびＳＷＯの混合物を使用して実施した。種もみを苗床で２１日間発芽させ、生長した幼植物体を準備した圃場区画に移植し、移植して３０日後および６０日後の間隔で生物刺激製剤を噴霧した。典型的に得られた結果を表形式で表６中において下記に示す。
【表６】
0006744331.tif 000007
【０１４１】
これらの結果はここでも、別々ではなく、海藻体液汁（ＳＷＪ）および海藻体オリゴ糖（ＳＷＯ）を同時に使用することによって生物刺激剤効果において得られる驚くべき相乗作用を実証するのに役立っている。ＳＷＪ単独では、対照を超える約６．３％の収量増加の増大が得られる。ＳＷＯ単独では、対照を超える約１８．１％の収量増加が得られる。予測付加効果は２４．１％のはずであったが、驚くべきことに３３．９％の増大が得られた。
【０１４２】
実施例１４
ある種のＳＷＪと別種のＳＷＯとの混合
実施例１からのＫａｐｐａｐｈｙｃｕｓ  ｓｔｒｉａｔｕｓ  （ｓａｃｃｏｌ）由来の液汁を実施例３における方法によって濃縮して、海藻体液汁濃縮物（ＳＷＪ）を得た。同時に、実施例５において説明のＥｕｃｈｅｕｍａ  ｄｅｎｔｉｃｕｌａｔｕｍ  （ｓｐｉｎｓｏｕｍ）由来の液汁抽出済みパルプを制御下で加水分解したことによって得られた、オリゴ糖含有加水分解物を、実施例７において説明のように濃縮して、濃縮加水分解物（ＳＷＯ）を得た。ＳＷＪおよびＳＷＯを１：１の比率で混ぜて、生物刺激剤製品を得た。個々のＳＷＪおよびＳＷＯならびにブレンドを、試験作物としてトマト植物体を使用してポット試験において双方ともに試験した。ｓａｃｃｏｌのＳＷＪおよびｓｐｉｎｏｓｕｍのＳＷＯから製造したブレンドを使用することによって得られた収量は、個々の成分の性能による収量より有意に優れていることが、この場合もみられ、したがってＳＷＪおよびＳＷＯを混ぜることによって得られる相乗効果が、この場合も実証された。
【０１４３】
全体として、本開示は、海藻の少なくとも１種から得られた生物刺激製剤を提供し、この生物刺激製剤は、種子を含む植物体またはその一部に施用したとき、植物体の生長を促進する上で相乗効果を驚くべきことにそして予想外に示す。観察された相乗作用は一部は前記製剤の組成によるものであり、これは、特定のｗ／ｗ比で混合された海藻体液汁と液汁抽出済み海藻体パルプの加水分解物とからなる。予期せぬ相乗作用は、液汁または加水分解物単独による処理ではみられず、そしてまた、組合せについては先行技術において先に報告されていない。
【図１】
0006744331.tif 000008
【図２】
0006744331.tif 000009
【図３】
0006744331.tif 000010
【図４】
0006744331.tif 000011
【図５】
0006744331.tif 000012
【図６】
0006744331.tif 000013