(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式ＩＩＩａ：
【化１】
0006692826.tif 000132
の構造を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物であって、式中、Ｒ２１及びＲ２２は、独立して、Ｎ９位を介して前記構造に結合するグアニンまたはアデニンであり、ただし、Ｒ２１及びＲ２２がともにグアニンであることはない、前記化合物、またはその医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物。
【請求項２】
Ｒ２１及びＲ２２がともにアデニンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２１がアデニンであり、Ｒ２２がグアニンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
構造：
【化２】
0006692826.tif 000133
を有する化合物３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）、またはその医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物。
【請求項５】
構造：
【化３】
0006692826.tif 000134
を有する化合物３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）、またはその医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物。
【請求項６】
前記化合物が、そのナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、アルミニウム、アンモニウム、ジエチルアミン、オラミン、ベンザチン、ベネタミン、トロメタミン（２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）プロパン−１，３−ジオール）、モルホリン、エポラミン、ピペリジン、ピコリン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、２−ヒドロキシエチルアミン、トリ（２−ヒドロキシエチル）アミン、クロロプロカイン、コリン、デアノール、イミダゾール、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）、プロカイン、ジベンジルピペリジン、デヒドロアビエチルアミン、グルカミン、コリジン、キニーネ、キノロン、エルブミン、リジン、またはアルギニン塩である、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
前記化合物がそのナトリウム塩である、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
請求項１から７のいずれか一項に記載の１つ以上の化合物及び医薬的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項９】
請求項１から７のいずれか一項に記載の１つ以上の化合物、別の治療薬、及び医薬的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１０】
疾患の治療用のものである、請求項８または９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記疾患が、がんである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
放射線療法、外科手術、化学療法、または免疫療法からなる群から選択される１つ以上のがん治療と組み合わせて用いられる、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記疾患が、がん、臓器移植の急性拒絶、Ｉ型糖尿病、関節リウマチ、乾癬、クローン病、再狭窄、及びアレルギー性喘息からなる群から選択されるものである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
抗体依存性細胞傷害性を誘導する１つ以上の治療抗体と組み合わせて用いられる、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
がんの治療に用いる、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１６】
がん、臓器移植の急性拒絶、Ｉ型糖尿病、関節リウマチ、乾癬、クローン病、再狭窄、及びアレルギー性喘息からなる群から選択される疾患の治療に用いる、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１５年３月１０日に出願された米国仮出願第６２／１３１，２３５号の優先権を主張する。該仮出願は、参照することによってその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
配列表
本出願は、ＥＦＳ−Ｗｅｂを介してＡＳＣＩＩフォーマットで提出した、参照することによってその全体が本明細書に組み込まれる配列表を含む。２０１６年３月９日に作成した該ＡＳＣＩＩのコピーは、名称がＡＮＺ１００４ＰＣＴ＿ＳｅｑＬｉｓｔｉｎｇ．ｔｘｔであり、サイズは２２キロバイトである。
【背景技術】
【０００３】
本発明の背景技術に関する以下の考察は、単に読み手が本発明を理解するのを助けるために提供するに過ぎず、本発明に対し従来技術を類型化することも構成要素とすることも認めていない。
【０００４】
免疫回避の基礎となる機序に関する新たな洞察は、免疫チェックポイント阻害剤または他の治療との組み合わせにより、直接または間接的に、治療的ワクチン接種の効力を高める併用療法計画と一緒に、ワクチンまたは免疫変調成分の開発の基礎をなしている。これらのワクチンまたは免疫変調成分は、標的悪性腫瘍に対して特異的な腫瘍特異的ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞からなり、抗腫瘍反応及び臨床的利点をもたらす、有効な適応免疫反応をプライムまたはブーストすることができる。自然免疫系が標的リガンドに係合される方法は、適応反応の進行を具体化し、それ自体にワクチン及び免疫刺激剤の設計を与える（Ｒｅｅｄ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｒｅｎｄｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，  ３０：  ２３−３２，  ２００９；  Ｄｕｂｅｎｓｋｙ  ａｎｄ  Ｒｅｅｄ，  Ｓｅｍｉｎ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，  ２２：  １５５−６１，  ２０１０；  Ｋａｓｔｅｎｍｕｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．，  １２１：  １７８２−１７９６，  ２０１１；  Ｃｏｆｆｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，  ３３：  ４９２−５０３，  ２０１０）。
【０００５】
環状ジヌクレオチドＣＤＮである環状ジＡＭＰ（Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ及び他の細菌によって産生される）ならびにその類似体である環状ジＧＭＰ及び環状ＧＭＰ−ＡＭＰ（ｃＧＡＭＰ）は、病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）として宿主細胞に認識され、インターフェロン遺伝子刺激因子（ＳＴＩＮＧ）として知られる病原体認識受容体（ＰＲＲ）に結合する。ＳＴＩＮＧは、宿主である哺乳類細胞の細胞質内のアダプタータンパク質であり、ＴＡＮＫ結合キナーゼ（ＴＢＫ１）−ＩＲＦ３及びＮＦ−κＢシグナル伝達軸を活性化し、自然免疫を強く活性化するＩＦＮ−β及び他の遺伝子産物を誘導する。ＳＴＩＮＧは、宿主細胞質ゾル監視径路の構成要素であり（Ｖａｎｃｅ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００９）、これは、細胞内の病原体による感染を感知し、それに応じてＩＦＮ−βの産生を誘導し、抗原特異的ＣＤ４及びＣＤ８Ｔ細胞の両方ならびに病原体特異抗体からなる適応防御病原体特異的免疫反応の発達につながることが今や認められている。環状プリンジヌクレオチドの例は、例えば：米国特許第７，７０９４５８号及び第７，５９２，３２６号；特許出願ＷＯ２００７／０５４２７９、ＷＯ２０１４／０９３９３６、及びＷＯ２０１４／１８９８０５；並びにＹａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ．  １８：  ５６３１  （２００８）に多少詳しく述べられている。
【０００６】
ヒトオリゴアデニル酸シンターゼである環状ＧＭＰ−ＡＭＰシンターゼの触媒ドメインにかなりの構造的相同性がある未同定のマウス遺伝子が、哺乳類細胞におけるＳＴＩＮＧ結合性ＣＤＮの産生に関与する酵素であることが報告された。Ｓｕｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３３９（６１２１）：７８６−９１，  ２０１３．環状ＧＭＰ−ＡＭＰシンターゼ（ｃＧＡＳ）と呼ばれる本酵素は、ＤＮＡの存在下で、ＡＴＰとＧＴＰからのｃＧＡＭＰの合成を触媒する。このｃＧＡＭＰは次に、二次メッセンジャーとして機能し、ＳＴＩＮＧに結合し、これを活性化する。これらｃＧＡＳによって産生されるＣＤＮは、それらが独特のホスホジエステル結合を有するという点において、細菌によって産生されるＣＤＮとは構造的に異なっていた。従って、細菌によって産生されるＣＤＮがビス−３’，５’結合を２つのヌクレオチド間に含むのに対して、哺乳類のＣＤＮは１つの２’，５’結合及び１つの３’，５’結合、すなわち、いわゆる「混合結合（ＭＬ）または非標準的ＣＤＮを含んでいた。これら２’，５’−３’，５’分子は、細菌ｃ−ジ−ＧＭＰより３００倍も高いｎＭの親和性でＳＴＩＮＧに結合する。
【０００７】
ヒトＳＴＩＮＧ（ｈＳＴＩＮＧ）はまた、ビス−３’，５’（標準的）ＣＤＮには耐性であるが、２’，５’−３’，５’（非標準、混合結合）ＣＤＮにはそうではない、２３２位でヒスチジンをコードする対立遺伝子を含めた既知の多型性を有する（Ｄｉｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｐｏｒｔｓ  ３，  １３５５−６１，  ２０１３；  Ｊｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｇｅｎｅｓ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，  １２：  ２６３−９，  ２０１１）。ｈＳＴＩＮＧ遺伝子における１つのヌクレオチド多型が、細菌誘導性標準的ＣＤＮに対する反応性に影響を与えることが報告されている（Ｄｉｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１３；  Ｇａｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ  １５４，  ７４８−７６２，  ２０１３；  Ｃｏｎｌｏｎ  ｅｔ．  ａｌ．，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １９０：  ５２１６−５２２５，  ２０１３）。ｈＳＴＩＮＧの５つのハプロタイプが報告されており（ＷＴ、ＲＥＦ、ＨＡＱ、ＡＱ、及びＱ対立遺伝子）、これらは、アミノ酸の７１、２３０、２３２、及び２９３位で異なる（Ｊｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１１；  Ｙｉ  ｅｔ  ａｌ．，  ＰＬＯＳ  Ｏｎｅ  ８：  ｅ７７８４６，  ２０１３）。ｈＳＴＩＮＧを発現する細胞は、ビス−（３’，５’）結合を有する細菌ＣＤＮであるｃＧＡＭＰ、ｃ−ジ−ＡＭＰ、及びｃ−ジ−ＧＭＰでの刺激に対してほとんど反応しないが、内因的に産生されたｃＧＡＳ産物であるＭＬｃＧＡＭＰには反応すると報告されている（Ｄｉｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１３）。従って、２’，５’−３’，５’分子は、ｈＳＴＩＮＧ標的化に関してはるかに強力な生理的リガンドの典型となることが示唆されている（Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ．  ５１：２２６−３５，  ２０１３；  Ｘｉａｏ  ａｎｄ  Ｆｉｔｚｇｅｒａｌｄ，  Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ  ５１：  １３５−３９，  ２０１３）。
【０００８】
発明の概要
本発明は、疾患に対する免疫反応を調節する組成物及び方法を提供することを目的とする。本発明はさらに、哺乳類、好ましくはヒトのＳＴＩＮＧの活性化に使用する際に改良された特性を呈する環状プリンジヌクレオチド類似体を提供する組成物及び方法を提供することを目的とする。本発明はさらに、がんの治療用の組成物及び方法を提供することを目的とする。
【０００９】
第一の態様において、本発明は：インターフェロン遺伝子刺激因子（「ＳＴＩＮＧ」）に結合し、ＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロンの産生を、少なくとも１つのヒト（ｈ）ＳＴＩＮＧ対立遺伝子を用いて測定した場合に、ビス−３’，５’ｃ−ジ−ＧＭＰ（すなわち、３’３’−（Ｇ）（Ｇ））、ビス−３’，５’ｃ−ジ−ＡＭＰ（すなわち、３’３’−（Ａ）（Ａ）もしくはＣＤＡ）、またはビス−３’，５’ｃ−ＧＭＰ−ＡＭＰ（すなわち、３’３’−（Ｇ）（Ａ）もしくはｃＧＡＭＰ）の１つ以上（好ましくはそれらの各々）より少なくとも１０倍低い濃度で刺激する、１つ以上のモノ−もしくはジ−フルオロ置換ビス−３’，５’環状プリンジヌクレオチド（「モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物」）、またはそれらのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を含む組成物を提供する。好ましくは、これは、Ｉｓｈｉｋａｗａ，  Ｈ．，  ａｎｄ  Ｂａｒｂｅｒ，  Ｇ．Ｎ．  （２００８）．  Ｎａｔｕｒｅ  ４５５，  ６７４−６７８に記載のｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）対立遺伝子であって、そのタンパク質配列が、ＮＣＢＩ参照配列ＮＰ＿９３８０２３（配列番号１；図６）である対立遺伝子を用いて測定される。これは、後述するように、機能性ＳＴＩＮＧを内生的に発現しないが、ｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）対立遺伝子を安定に発現するように改変された哺乳類細胞株（例えば、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞）を用いてインビトロで最も好ましく測定される（例えば、実施例１２参照）。
【００１０】
関連する態様において、本発明は：少なくとも１つのヒトＳＴＩＮＧタンパク質を用いて測定した場合に、ビス−３’，５’ｃ−ジ−ＧＭＰ（すなわち、３’３’−（Ｇ）（Ｇ））、ビス−３’，５’ｃ−ジ−ＡＭＰ（すなわち、３’３’−（Ａ）（Ａ）もしくはＣＤＡ）、またはビス−３’，５’ｃ−ＧＭＰ−ＡＭＰ（すなわち、３’３’−（Ｇ）（Ａ）もしくはｃＧＡＭＰの１つ以上より少なくとも１０倍高い親和性で、少なくとも１つのヒトＳＴＩＮＧ対立遺伝子のタンパク質産物に結合する１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組成物を提供する。好ましくは、これは、後述するように、記載のｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）対立遺伝子（Ｉｓｈｉｋａｗａ，  Ｈ．，  ａｎｄ  Ｂａｒｂｅｒ，  Ｇ．Ｎ．  （２００８）．  Ｎａｔｕｒｅ  ４５５，  ６７４−６７８）によってコードされる単離されたタンパク質であって、そのタンパク質配列がＮＣＢＩ参照配列ＮＰ＿９３８０２３であるタンパク質を用い、視差走査蛍光分析等の方法を用いて測定される（例えば、実施例１１参照）。
【００１１】
後述するように、本発明のビス−３’，５’環状プリンジヌクレオチドの遊離の２’−ヒドロキシルの一方または両方のフルオロ置換で、ヒトＳＴＩＮＧへのそれらの結合が実質的に改良される。複数の２’−フルオロ置換ＣＤＮが本発明で用途を見出す。好ましい２’−フルオロ置換ＣＤＮとしては、ｃ−ジ−ＡＭＰ、ｃ−ジ−ＧＭＰ、ｃ−ジ−ＩＭＰ、ｃ−ＡＭＰ−ＧＭＰ、ｃ−ＡＭＰ−ＩＭＰ、ｃ−ＧＭＰ−ＩＭＰ、及び類似体、またはそれらのプロドラッグもしくは医薬的に許容される塩の２’−ヒドロキシルの一方または両方の置換によって得られるものが挙げられるがこれらに限定されない。このリストは、限定することを意図しない。モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物のさらなる態様及び実施形態は、後述する。
【００１２】
第二の態様において、本発明は、式Ｉ：
【化１】
0006692826.tif 000002
【００１３】
のモノ−またはジ−フルオロ置換３’，５’−３’，５’環状プリンジヌクレオチド（モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ）化合物、もしくはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。式中、Ｒ１及びＲ２の各々は、独立してプリンであり；Ｒ３及びＲ４の各々は、独立してＨ、ＯＨ、またはＦであり、ただし、Ｒ３及びＲ４のうちの一方または両方はＦであり；Ｒ５及びＲ６の各々は、独立してＯＨまたはＳＨである。
【００１４】
第二の態様の特定の実施形態では、Ｒ５及びＲ６の各々はＳＨである。Ｒ５及びＲ６の各々がＳＨである場合の好ましい実施形態では、該組成物は１つ以上の実質的に純粋なＳｐ，Ｓｐ、Ｒｐ，Ｒｐ、Ｓｐ，Ｒｐ、またはＲｐ，Ｓｐ立体異性体を含む。いくつかの実施形態では、該組成物は、１つ以上の実質的に純粋なＲｐ，Ｒｐ立体異性体を含む。
【００１５】
本明細書に記載の化合物で用途を見出し得るプリンＲ１及びＲ２は、以下の一般的構造を有する：
【化２】
0006692826.tif 000003
【００１６】
式中：
Ｒ７またはＲ１１の各々は、独立して−ＣＲ−または−Ｎ−であり；Ｒ８は、−Ｃ（Ｒ）２−、−Ｏ−、または−ＮＲ−であり；Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１２、Ｒ１３、またはＲ１４の各々は、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＮ、−ＯＲ、−ＳＲ、−Ｎ（Ｒ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＣＯ２Ｒ、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ，−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｎ（Ｒ）Ｎ（Ｒ）２、−Ｃ＝ＮＯＲ、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２，−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２Ｒ、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、または、任意に置換される置換基からなる群から選択され、該置換基は、Ｃ１−１２脂肪族、フェニル、３−７員の飽和もしくは部分不飽和単環式炭素環式環、７−１０員の飽和もしくは部分不飽和二環式炭素環式環、窒素、酸素、もしくはイオウから独立して選択される1−２個のヘテロ原子を有する３−７員の飽和もしくは部分不飽和ヘテロ環式環、窒素、酸素、もしくはイオウから独立して選択される1−３個のヘテロ原子を有する７−１０員の飽和もしくは部分不飽和二環式ヘテロ環式環、及び、窒素、酸素、もしくはイオウから独立して選択される1−３個のヘテロ原子を有する５−６員のヘテロアリール環からなる群から選択され、ここで、各Ｒは、独立して、Ｃ１−１２脂肪族、フェニル、３−７員の飽和もしくは部分不飽和単環式炭素環式環、７−１０員の飽和もしくは部分不飽和二環式炭素環式環、窒素、酸素、もしくはイオウから独立して選択される1−２個のヘテロ原子を有する３−７員の飽和もしくは部分不飽和ヘテロ環式環、窒素、酸素、もしくはイオウから独立して選択される1−３個のヘテロ原子を有する７−１０員の飽和もしくは部分不飽和二環式ヘテロ環式環、及び、窒素、酸素、もしくはイオウから独立して選択される1−３個のヘテロ原子を有する５−６員のヘテロアリール環からなる群から選択される、任意に置換される置換基であるか、または、同じ窒素上の２つのＲ基は、それらの介在原子と一緒になって任意に置換される３−７員の飽和、部分不飽和、もしくは窒素、酸素、もしくはイオウから独立して選択される１−４個のヘテロ原子を有するヘテロアリール環を形成する。Ｃ１−１２脂肪族、フェニル、３−７員の飽和もしくは部分不飽和単環式炭素環式環、７−１０員の飽和もしくは部分不飽和二環式炭素環式環、３−７員の飽和もしくは部分不飽和ヘテロ環式環、７−１０員の飽和もしくは部分不飽和二環式ヘテロ環式環、及び５−６員のヘテロアリール環の各々、または同じ窒素上の、一緒になって３−７員の飽和、部分不飽和、もしくはヘテロアリール環を形成する２つのＲ基は、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、＝Ｏ、−ＮＨ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ、及びＣ１−６ジアルキルアミノからなる群から選択される、１〜５、１〜４、１〜３、１〜２、もしくは１つの、独立して選択される置換基で任意に置換される。
【００１７】
第二の態様の特定の実施形態及びその実施形態では、Ｒ１及びＲ２の各々は、独立してアデニン、グアニン、イソグアニン、ヒポキサンチン、及びキサンチンまたはそれらの類似体からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ１及びＲ２の各々は、独立してアデニンまたはグアニンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１またはＲ２のうちの一方がアデニンであり、Ｒ１またはＲ２のうちの他方がグアニンであり；Ｒ１及びＲ２の各々はアデニンであり；または、Ｒ１及びＲ２の各々はグアニンであるか、もしくは、それぞれの場合でさもなければそれらの類似体である。好ましい実施形態では、Ｒ１及びＲ２は独立してアデニンまたはグアニンであり、ただし、Ｒ１及びＲ２がともにグアニンであることもその類似体であることもない。
【００１８】
第二の態様のいくつかの実施形態及びその実施形態では、Ｒ５及びＲ６の各々はＳＨであり、Ｒ１及びＲ２は独立して：
【化３】
0006692826.tif 000004
【００１９】
であり、ここで、Ｒ１５及びＲ１６は、独立してＨまたは−Ｃ（Ｏ）Ｒ’であり、Ｒ’はＣ１−６アルキルまたはフェニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１５はＨまたは−Ｃ（Ｏ）−イソプロピルであり、Ｒ１６はＨまたは−Ｃ（Ｏ）−フェニルである。
【００２０】
第二の態様のいくつかの実施形態及びその実施形態では、式Ｉの化合物は：
【化４】
0006692826.tif 000005
0006692826.tif 000006
0006692826.tif 000007
0006692826.tif 000008
からなる群から選択されるか、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物である。
【００２１】
第二の態様の好ましい実施形態及びその実施形態では、Ｒ３及びＲ４の各々はＦである。これは、本明細書では２’，２’’−ジＦまたはジ−２’Ｆと呼ばれる。
【００２２】
いくつかの実施形態では、該１つ以上の化合物は、２’，２’’−ジＦ−Ｒｐ，Ｒｐ環状プリンジヌクレオチド（例えば、Ｒ５及びＲ６の各々はＳＨである）であって、２’，２’’−ジＦ−Ｒｐ，Ｒｐ−ｃ−ジ−ＡＭＰ（本明細書では２’，２’’−ジＦ−Ｒ，Ｒ−ＣＤＡまたは３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）とも呼ばれる）、２’，２’’−ジＦ−Ｒｐ，Ｒｐ−ｃ−ジ−ＧＭＰ（本明細書では２’，２’’−ジＦ−Ｒ，Ｒ−ＣＤＧまたは３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ｇ）とも呼ばれる）、２’，２’’−ジＦ−Ｒｐ，Ｒｐ−ｃ−ジ−ＩＭＰ（本明細書では２’，２’’−ジＦ−Ｒ，Ｒ−ＣＤＩまたは３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｉ）（２’Ｆ−Ｉ）とも呼ばれる）、２’，２’’−ジＦ−Ｒｐ，Ｒｐ−ｃ−ＡＭＰ−ＧＭＰ（本明細書では２’，２’’−ジＦ−Ｒ，Ｒ−ｃＧＡＭＰまたは３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）とも呼ばれる）、２’，２’’−ジＦ−Ｒｐ，Ｒｐ−ｃ−ＡＭＰ−ＩＭＰ（本明細書では２’，２’’−ジＦ−Ｒ，Ｒ−ｃＩＡＭＰまたは３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｉ）（２’Ｆ−Ａ）とも呼ばれる）、２’，２’’−ジＦ−Ｒｐ，Ｒｐ−ｃ−ＧＭＰ−ＩＭＰ（本明細書では２’，２’’−ジＦ−Ｒ，Ｒ−ｃＧＩＭＰまたは３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ｉ）とも呼ばれる）、及びそれらの類似体が挙げられるがこれらに限定されない。
【００２３】
第二の態様の好ましい実施形態及びその任意の実施形態では、該化合物は、以下のうちの１つではない：
【化５】
0006692826.tif 000009
【００２４】
第三の態様において、本発明は、式ＩＩ：
【化６】
0006692826.tif 000010
【００２５】
のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、もしくはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。式中：
Ｒ１７及びＲ１８は、独立して、Ｎ９位を介して該構造に結合するグアニンまたはアデニンであり、アデニンの６位のアミンはベンゾイル基で任意に置換され、グアニンの２位のアミンはイソブチリル基で任意に置換され；
Ｒ１９及びＲ２０は、独立してＯＨまたはＦであり、ただしＲ１９及びＲ２０のうちの少なくとも一方はＦである。
【００２６】
第三の態様の第一の実施形態において、式ＩＩの化合物は、式ＩＩａの化合物、式ＩＩｂの化合物、または式ＩＩｃの化合物：
【化７】
0006692826.tif 000011
【００２７】
もしくはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物であり、ここで、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、及びＲ２０は式ＩＩについて定義した通りである。
【００２８】
第三の態様の第二の実施形態またはその第一の実施形態では、Ｒ１７及びＲ１８は、独立してアデニンまたはグアニンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１７及びＲ１８は、独立してアデニンまたはグアニンであり、ただし、Ｒ１７及びＲ１８がともにグアニンであることはない。いくつかの実施形態では、Ｒ１７及びＲ１８はともにアデニンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１７及びＲ１８はともにグアニンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１７及びＲ１８の一方がアデニンであり、Ｒ１７及びＲ１８の他方がグアニンである。
【００２９】
第三の態様のいくつかの実施形態及びその第一または第二の実施形態では、Ｒ１９及びＲ２０の一方はＦであり、Ｒ１９及びＲ２０の他方はＯＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ１９及びＲ２０はともにＦである。いくつかの実施形態では、Ｒ１９及びＲ２０はともにＦであり、該化合物は式ＩＩａの化合物である。
【００３０】
第三の態様のいくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は：
【化８】
0006692826.tif 000012
0006692826.tif 000013
0006692826.tif 000014
【００３１】
からなる群から選択されるか、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物である。
【００３２】
第三の態様のいくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は：
【化９】
0006692826.tif 000015
0006692826.tif 000016
【００３３】
からなる群から選択されるか、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物である。
【００３４】
第四の態様において、本発明は、式ＩＩＩ：
【化１０】
0006692826.tif 000017
【００３５】
のジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供し、ここで、Ｒ２１及びＲ２２は、独立して、Ｎ９位を介して該構造に結合するグアニンまたはアデニンである。
【００３６】
第四の態様の第一の実施形態では、式ＩＩＩの化合物は、式ＩＩＩａの化合物または式ＩＩＩｂの化合物：
【化１１】
0006692826.tif 000018
【００３７】
であるか、もしくはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物であり、式中、Ｒ２１及びＲ２２は、式ＩＩＩについて定義した通りである。
【００３８】
第四の態様の第二の実施形態またはその第一の実施形態では、Ｒ２１及びＲ２２は、独立してグアニンまたはアデニンであり、ただしＲ２１及びＲ２２がともにグアニンであることはない。いくつかの実施形態では、Ｒ２１及びＲ２２はともにアデニンである。いくつかの実施形態では、Ｒ２１はアデニンであり、Ｒ２２はグアニンである。
【００３９】
第四の態様のいくつかの実施形態またはその第一もしくは第二の実施形態では、該化合物は式ＩＩＩａの化合物である。
【００４０】
第四の態様のいくつかの実施形態では、該ジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は：
【化１２】
0006692826.tif 000019
0006692826.tif 000020
【００４１】
からなる群から選択されるか、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物である。
【００４２】
第四の態様のいくつかの実施形態では、該ジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は：
【化１３】
0006692826.tif 000021
【００４３】
からなる群から選択されるか、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物である。
【００４４】
第四の態様のいくつかの実施形態では、該ジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は：
【化１４】
0006692826.tif 000022
【００４５】
からなる群から選択されるか、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物である。
【００４６】
第四の態様のいくつかの実施形態では、該ジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は：
【化１５】
0006692826.tif 000023
【００４７】
からなる群から選択されるか、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物である。
【００４８】
第五の態様において、本発明は、式ＩＶ：
【化１６】
0006692826.tif 000024
【００４９】
のモノ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供し、式中：
Ｒ２３及びＲ２４は、独立してＮ９位を介して該構造に結合するグアニンまたはアデニンであり；
Ｒ２５及びＲ２６の一方はＯＨであり、Ｒ２５及びＲ２６の他方はＦである。
【００５０】
第五の態様の第一の実施形態では、式ＩＶの化合物は、式ＩＶａの化合物、式ＩＶｂの化合物、または式ＩＶｃの化合物：
【化１７】
0006692826.tif 000025
【００５１】
であるか、もしくはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物であり、式中、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５、及びＲ２６は、式ＩＶについて定義した通りである。
【００５２】
第五の態様の第二の実施形態またはその第一の実施形態では、Ｒ２３及びＲ２４は、独立してアデニンまたはグアニンであり、ただし、Ｒ２３及びＲ２４がともにグアニンであることはない。いくつかの実施形態では、Ｒ２３及びＲ２４はともにアデニンである。いくつかの実施形態では、Ｒ２３及びＲ２４の一方はアデニンであり、Ｒ２３及びＲ２４の他方はグアニンである。
【００５３】
第五の態様のいくつかの実施形態またはその第一もしくは第二の実施形態では、該化合物は式ＩＶａの化合物である。
【００５４】
第五の態様のいくつかの実施形態では、該モノ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は：
【化１８】
0006692826.tif 000026
0006692826.tif 000027
【００５５】
からなる群から選択されるか、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物である。
【００５６】
第六の態様において、本発明は、式Ｖ：
【化１９】
0006692826.tif 000028
【００５７】
のモノ−またはジ−Ｆ環状ジアデニン化合物、もしくはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供し、
式中：
Ｒ２７及びＲ２８は、独立してＯＨまたはＦであり、ただし、Ｒ２７及びＲ２８のうちの少なくとも一方はＦであり；
Ｒ２９及びＲ３０は、独立してＨまたはベンゾイルである。
【００５８】
第六の態様の第一の実施形態では、式Ｖの化合物は、式Ｖａの化合物または式Ｖｂの化合物：
【化２０】
0006692826.tif 000029
【００５９】
もしくはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物であり、式中、Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、及びＲ３０は式Ｖについて定義した通りである。
【００６０】
第六の態様の第二の実施形態またはその第一の実施形態では、Ｒ２９及びＲ３０はともにＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ２９及びＲ３０はともにベンゾイルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２９及びＲ３０の一方はベンゾイルであり、Ｒ２９及びＲ３０の他方はＨである。
【００６１】
第六の態様のいくつかの実施形態及びその第一または第二の実施形態では、Ｒ２７及びＲ２８はともにＦである。いくつかの実施形態では、Ｒ２７及びＲ２８の一方はＦであり、Ｒ２７及びＲ２８の他方はＯＨである。
【００６２】
第六の態様のいくつかの実施形態では、Ｒ２７及びＲ２８はともにＦであり、Ｒ２９及びＲ３０はともにＨである。いくつかの実施形態では、該化合物は式Ｖａの化合物であり、Ｒ２７及びＲ２８はともにＦであり、Ｒ２９及びＲ３０はともにＨである。
【００６３】
第六の態様のいくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ環状ジアデニン化合物は：
【化２１】
0006692826.tif 000030
0006692826.tif 000031
【００６４】
からなる群から選択されるか、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物である。
【００６５】
第六の態様のいくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ環状ジアデニン化合物は：
【化２２】
0006692826.tif 000032
【００６６】
からなる群から選択されるか、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物である。
【００６７】
第七の態様において、本発明は、式ＶＩ：
【化２３】
0006692826.tif 000033
【００６８】
のモノ−またはジ−Ｆ環状ジグアニン化合物、もしくはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供し、
式中：
Ｒ３１及びＲ３２は、独立してＯＨまたはＦであり、ただしＲ３１及びＲ３２のうちの少なくとも一方はＦであり；
Ｒ３３及びＲ３４は、独立してＨまたはブチリルである。
【００６９】
第七の態様の第一の実施形態では、式ＶＩの化合物は、式ＶＩａの化合物または式ＶＩｂの化合物：
【化２４】
0006692826.tif 000034
【００７０】
であるか、もしくはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物であり、式中、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、及びＲ３４は、式ＶＩについて定義した通りである。
【００７１】
第七の態様の第二の実施形態またはその第一の実施形態では、Ｒ３３及びＲ３４はともにＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ３３及びＲ３４はともにブチリルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３３及びＲ３４の一方はブチリルであり、Ｒ３３及びＲ３４の他方はＨである。
【００７２】
第七の態様のいくつかの実施形態及びその第一または第二の実施形態では、Ｒ３１及びＲ３２はともにＦである。いくつかの実施形態では、Ｒ３１及びＲ３２の一方はＦであり、Ｒ３１及びＲ３２の他方はＯＨである。
【００７３】
第六の態様のいくつかの実施形態では、Ｒ３１及びＲ３２はともにＦであり、Ｒ３３及びＲ３４はともにＨである。いくつかの実施形態では、該化合物は式ＶＩａの化合物であり、Ｒ３１及びＲ３２はともにＦであり、Ｒ３３及びＲ３４はともにＨである。
【００７４】
第七の態様のいくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ環状ジグアニン化合物は：
【化２５】
0006692826.tif 000035
【００７５】
からなる群から選択されるか、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物である。
【００７６】
第八の態様において、本発明は、式ＶＩＩ：
【化２６】
0006692826.tif 000036
【００７７】
のモノ−またはジ−Ｆ環状グアニン及びアデニンジヌクレオチド化合物、もしくはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供し、
式中：
Ｒ３５及びＲ３６は、独立してＯＨまたはＦであり、ただし、Ｒ３５及びＲ３６のうちの少なくとも一方はＦであり；
Ｒ３７は、Ｈまたはベンゾイルであり；
Ｒ３８は、Ｈまたはブチリルである。
【００７８】
第八の態様の第一の実施形態では、式ＶＩＩの化合物は、式ＶＩＩａの化合物、式ＶＩＩｂの化合物、または式ＶＩＩｃの化合物：
【化２７】
0006692826.tif 000037
0006692826.tif 000038
【００７９】
であるか、もしくはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物であり、式中、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ３７、及びＲ３８は式ＶＩＩについて定義した通りである。
【００８０】
第八の態様の第二の実施形態またはその第一の実施形態では、Ｒ３７及びＲ３８はともにＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ３７はベンゾイルであり、Ｒ３８はブチリルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３７はＨであり、Ｒ３８はブチリルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３７はベンゾイルであり、Ｒ３８はＨである。
【００８１】
第八の態様のいくつかの実施形態及びその第一または第二の実施形態では、Ｒ３５及びＲ３６はともにＦである。いくつかの実施形態では、Ｒ３５及びＲ３６の一方はＦであり、Ｒ３５及びＲ３６の他方はＯＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ３５及びＲ３６はともにＦであり、該化合物は式ＶＩＩａの化合物である。
【００８２】
第八の態様のいくつかの実施形態及びその第一の実施形態では、Ｒ３５及びＲ３６はともにＦであり、Ｒ３７及びＲ３８はともにＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ３５及びＲ３６はともにＦであり、Ｒ３７はＨであり、Ｒ３８はブチリルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３５及びＲ３６はともにＦであり、Ｒ３７はベンゾイルであり、Ｒ３８はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ３５及びＲ３６はともにＦであり、Ｒ３７はベンゾイルであり、Ｒ３８はブチリルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３５及びＲ３６はともにＦであり、Ｒ３７及びＲ３８はともにＨであり、該化合物は式ＶＩＩａの化合物である。
【００８３】
第八の態様のいくつかの実施形態及びその第一の実施形態では、Ｒ３５はＦであり、Ｒ３６はＯＨであり、Ｒ３７及びＲ３８はともにＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ３５はＦであり、Ｒ３６はＯＨであり、Ｒ３７はＨであり、Ｒ３８はブチリルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３５はＦであり、Ｒ３６はＯＨであり、Ｒ３７はベンゾイルであり、Ｒ３８はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ３５はＦであり、Ｒ３６はＯＨであり、Ｒ３７はベンゾイルであり、Ｒ３８はブチリルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３５はＦであり、Ｒ３６はＯＨであり、Ｒ３７及びＲ３８はともにＨであり、該化合物は式ＶＩＩａの化合物である。
【００８４】
第八の態様のいくつかの実施形態及びその第一の実施形態では、Ｒ３５はＯＨであり、Ｒ３６はＦであり、Ｒ３７及びＲ３８はともにＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ３５はＯＨであり、Ｒ３６はＦであり、Ｒ３７はＨであり、Ｒ３８はブチリルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３５はＯＨであり、Ｒ３６はＦであり、Ｒ３７はベンゾイルであり、Ｒ３８はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ３５はＯＨであり、Ｒ３６はＦであり、Ｒ３７はベンゾイルであり、Ｒ３８はブチリルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３５はＯＨであり、Ｒ３６はＦであり、Ｒ３７及びＲ３８はともにＨであり、該化合物は式ＶＩＩａの化合物である。
【００８５】
第八の態様のいくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ環状グアニン及びアデニンジヌクレオチド化合物は：
【化２８】
0006692826.tif 000039
0006692826.tif 000040
【００８６】
からなる群から選択されるか、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物である。
【００８７】
第八の態様のいくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ環状グアニン及びアデニンジヌクレオチド化合物は：
【化２９】
0006692826.tif 000041
【００８８】
からなる群から選択されるか、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物である。
【００８９】
第九の態様において、構造：
【化３０】
0006692826.tif 000042
【００９０】
を有する化合物３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【００９１】
第十の態様において、構造：
【化３１】
0006692826.tif 000043
【００９２】
を有する化合物３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【００９３】
第十一の態様において、構造：
【化３２】
0006692826.tif 000044
【００９４】
を有する化合物３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【００９５】
第十二の態様において、構造：
【化３３】
0006692826.tif 000045
【００９６】
を有する化合物３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【００９７】
第十三の態様において、構造：
【化３４】
0006692826.tif 000046
【００９８】
を有する化合物３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ｇ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【００９９】
第十四の態様において、構造：
【化３５】
0006692826.tif 000047
【０１００】
を有する化合物３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ｇ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【０１０１】
第十五の態様において、構造：
【化３６】
0006692826.tif 000048
【０１０２】
を有する化合物３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−ｉＢｕＧ）（２’Ｆ−ＢｚＡ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【０１０３】
第十六の態様において、構造：
【化３７】
0006692826.tif 000049
【０１０４】
を有する化合物３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−ｉＢｕＧ）（２’Ｆ−ＢｚＡ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【０１０５】
第十七の態様において、構造：
【化３８】
0006692826.tif 000050
【０１０６】
を有する化合物３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−ＢｚＡ）（２’Ｆ−ＢｚＡ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【０１０７】
第十八の態様において、構造：
【化３９】
0006692826.tif 000051
【０１０８】
を有する化合物３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−ｉＢｕＧ）（２’Ｆ−Ａ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【０１０９】
第十九の態様において、構造：
【化４０】
0006692826.tif 000052
【０１１０】
を有する化合物３’３’−ＲＲ−（Ａ）（２’Ｆ−Ａ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【０１１１】
第二十の態様において、構造：
【化４１】
0006692826.tif 000053
【０１１２】
を有する化合物３’３’−ＲＳ−（Ａ）（２’Ｆ−Ａ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【０１１３】
第二十一の態様において、構造：
【化４２】
0006692826.tif 000054
【０１１４】
を有する化合物３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（Ａ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【０１１５】
第二十二の態様において、構造：
【化４３】
0006692826.tif 000055
【０１１６】
を有する化合物３’３’−ＳＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（Ａ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【０１１７】
第二十三の態様において、構造：
【化４４】
0006692826.tif 000056
【０１１８】
を有する化合物３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【０１１９】
第二十四の態様において、構造：
【化４５】
0006692826.tif 000057
【０１２０】
を有する化合物３’３’−ＲＳ−（Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【０１２１】
第二十五の態様において、構造：
【化４６】
0006692826.tif 000058
【０１２２】
を有する化合物３’３’−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【０１２３】
第二十六の態様において、構造：
【化４７】
0006692826.tif 000059
【０１２４】
を有する化合物３’３’−ＲＲ−（２’βＦ−Ａ）（２’βＦ−Ａ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【０１２５】
第二十七の態様において、構造：
【化４８】
0006692826.tif 000060
【０１２６】
を有する化合物３’３’−ＲＳ−（２’βＦ−Ａ）（２’βＦ−Ａ）、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を提供する。
【０１２７】
上記態様及びその実施形態のいずれかのモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物のいずれかにおいて、該構造は、好ましくは、ホスフェートリンカーの各々がチオホスフェートであり（例えば、式ＩのＲ５及びＲ６がともにＳＨである）、より好ましくは、各リンにおける立体化学がＲであり、該化合物が実質的に純粋である。
【０１２８】
上記態様のいずれかのいくつかの実施形態及びその実施形態において、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物には、それらのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物が含まれ、それらの任意のプロドラッグの医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物が含まれ、それらの任意の医薬的に許容される塩の任意の医薬的に許容される溶媒和物もしくは医薬的に許容される水和物が含まれる。いくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物には、それらの医薬的に許容される溶媒和物、医薬的に許容される水和物、もしくは医薬的に許容される塩が含まれる。いくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、その医薬的に許容される塩、もしくは医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物である。いくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、その医薬的に許容される塩である。
【０１２９】
上記態様のいずれかのいくつかの実施形態及びその実施形態において、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物には、それらの医薬的に許容される塩が含まれる。いくつかの実施形態では、該医薬的に許容される塩は、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、アルミニウム、アンモニウム、ジエチルアミン、イソプロピルアミン、オラミン、ベンザチン、ベネタミン、トロメタミン（２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）プロパン−１，３−ジオール）、モルホリン、エポラミン、ピペリジン、ピペラジン、ピコリン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、２−ヒドロキシエチルアミン、トリ（２−ヒドロキシエチル）アミン、クロロプロカイン、コリン、デアノール、イミダゾール、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）、プロカイン、ジベンジルピペリジン、デヒドロアビエチルアミン、グルカミン、コリジン、キニーネ、キノロン、エルブミン、リジン、及びアルギニン塩からなる群から選択される。
【０１３０】
上記態様のいずれかの１つの実施形態またはその実施形態において、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、それらのジナトリウム塩として提供される。いくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、それらのジナトリウム塩、またはその医薬的に許容される溶媒和物もしくは医薬的に許容される水和物として提供される。
【０１３１】
上記態様のいずれかのいくつかの実施形態及びその実施形態において、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、１つ以上の参照化合物と比較して、ヒトＳＴＩＮＧ依存性ＩＦＮ−β産生の誘導を測定する細胞アッセイにおいて活性が高い。いくつかの実施形態では、該１つ以上の参照化合物は、３’３’−（Ｇ）（Ｇ）（すなわち、環状−［Ｇ（３’，５’）ｐ−Ｇ（３’，５’）ｐ］）、３’３’−（Ａ）（Ａ）（すなわち、環状−［Ａ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］）、３’３’−（Ｇ）（Ａ）（すなわち、環状−［Ｇ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］）、３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）（すなわち、ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［Ａ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］）、３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ｇ）（すなわち、ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［Ｇ（３’，５’）ｐ−Ｇ（３’，５’）ｐ］）、及び３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ａ）（すなわち、ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［Ｇ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、モノ−またはジ−Ｆ−ＲＲ−ＣＤＮ化合物であり、該１つ以上の参照化合物は、３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）、３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ｇ）、及び３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ａ）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、該参照化合物は、ジ−ＯＨの参照化合物である。いくつかの実施形態では、該細胞アッセイは、ｈＰＢＭＣアッセイ、例えば、実施例１３に記載のアッセイである。いくつかの実施形態では、該細胞アッセイは、ＴＨＰ１アッセイ、例えば、実施例１４に記載のアッセイである。好ましい実施形態では、該細胞アッセイは、該アッセイ細胞による該モノ−もしくはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物または参照化合物の取り込みを促進する薬剤の添加も、該アッセイ細胞への該モノ−もしくはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物または参照化合物の透過性を高める薬剤の添加もなしに行われる。いくつかの実施形態では、該細胞アッセイは、該アッセイ細胞による該モノ−もしくはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物または参照化合物の取り込みを促進する薬剤の添加も、該アッセイ細胞への該モノ−もしくはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物または参照化合物の透過性を高める薬剤の添加もなしに行われるＴＨＰ１細胞アッセイであり、この場合、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ＥＣ５０が４０μＭ未満、３０μＭ未満、２０μＭ未満、１５μＭ未満、または１０μＭ未満である。いくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ヒトＳＴＩＮＧ依存性ＩＦＮ−β産生の誘導を測定する細胞アッセイで、ＥＣ５０が４０μＭ未満、３０μＭ未満、２０μＭ未満、１５μＭ未満、または１０μＭ未満であり、該細胞アッセイは、該アッセイ細胞による該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物の取り込みを促進する薬剤の添加も、該アッセイ細胞への該モノ−もしくはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物の透過性を高める薬剤の添加もなしに行われる。１つの実施形態では、該細胞アッセイは、実施例１４に記載のＴＨＰ１細胞アッセイであり、該アッセイは、ジギトニンの添加なしに行われる。いくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ヒトＳＴＩＮＧ依存性ＩＦＮ−β産生の誘導を測定する細胞アッセイであって、好ましくは、該アッセイ細胞による該モノ−もしくはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物または参照化合物の取り込みを促進する薬剤の添加も、該アッセイ細胞への該モノ−もしくはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物または参照化合物の透過性を高める薬剤の添加もなしに行われる該アッセイで、３’３’−（Ｇ）（Ｇ）（すなわち、環状−［Ｇ（３’，５’）ｐ−Ｇ（３’，５’）ｐ］）、３’３’−（Ａ）（Ａ）（すなわち、環状−［Ａ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］）、３’３’−（Ｇ）（Ａ）（すなわち、環状−［Ｇ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］）、３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）（すなわち、ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［Ａ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］）、３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ｇ）（すなわち、ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［Ｇ（３’，５’）ｐ−Ｇ（３’，５’）ｐ］）、及び３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ａ）（すなわち、ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［Ｇ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］）からなる群から選択される１つ以上の参照化合物のＥＣ５０未満のＥＣ５０を有する。いくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、実施例１４に記載のＴＨＰ１細胞アッセイであって、好ましくはジギトニンの添加なしに行われる該アッセイで、ジ−ＯＨの参照化合物のＥＣ５０未満のＥＣ５０を有する。いくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、実施例１４に記載の該ＴＨＰ１細胞アッセイであって、ジギトニンの添加なしに行われる該アッセイで、該ジ−ＯＨの参照化合物のＥＣ５０より、少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも６倍、少なくとも７倍、または少なくとも８倍低いＥＣ５０を有する。
【０１３２】
後述するように、１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物が含まれる本発明の環状プリンジヌクレオチド組成物は、ＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を、ビス−３’，５’ｃ−ジ−ＧＭＰ（すなわち、３’３’−（Ｇ）（Ｇ））、ビス−３’，５’ｃ−ジ−ＡＭＰ（すなわち、３’３’−（Ａ）（Ａ）もしくはＣＤＡ）、またはビス−３’，５’ｃ−ＧＭＰ−ＡＭＰ（すなわち、３’３’−（Ｇ）（Ａ）もしくはｃＧＡＭＰ）（２’−Ｆ置換（複数可）を欠いていることを意味する）のうちの１つ以上より、少なくとも１０倍、５０倍、または１００倍低い濃度で、少なくとも２倍、より好ましくは５倍または１０倍、もしくはそれ以上誘導することができる。本明細書に記載されるように、最も好ましくは、該ＳＴＩＮＧは、ヒトＳＴＩＮＧである。好ましい実施形態では、本発明のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組成物は、ヒトＳＴＩＮＧを活性化するが、対応するビス−３’，５’環状プリンジヌクレオチド（同じプリンを有し２’−Ｆ置換（複数可）を欠く）は、これを活性化しない。
【０１３３】
同様に後述するのは、本発明のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組成物であって、該組成物に含まれる１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ビス−３’，５’ｃ−ジ−ＧＭＰ（すなわち、３’３’−（Ｇ）（Ｇ））、ビス−３’，５’ｃ−ジ−ＡＭＰ（すなわち、３’３’−（Ａ）（Ａ）もしくはＣＤＡ）、またはビス−３’，５’ｃ−ＧＭＰ−ＡＭＰ（すなわち、３’３’−（Ｇ）（Ａ）もしくはｃＧＡＭＰ）（２’−Ｆ置換（複数可）を欠いていることを意味する）のうちの１つ以上より、少なくとも１０倍、５０倍、または１００倍高い親和性でＳＴＩＮＧに結合する。本明細書に記載されるように、最も好ましくは、該ＳＴＩＮＧはヒトＳＴＩＮＧである。好ましい実施形態では、本発明の環状プリンジヌクレオチド組成物は、対応するビス−（３’，５’）環状プリンジヌクレオチド（同じプリンを有し２’−Ｆ置換（複数可）を欠く）より少なくとも１０倍、５０倍、または１００倍高い親和性でＳＴＩＮＧに結合する。
【０１３４】
上記態様のいずれかのいくつかの実施形態及びその実施形態において、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、少なくとも１つのヒトＳＴＩＮＧタンパク質を用いて測定した場合に、３’３’−（Ｇ）（Ｇ）（すなわち、環状−［Ｇ（３’，５’）ｐ−Ｇ（３’，５’）ｐ］）、３’３’−（Ａ）（Ａ）（すなわち、環状−［Ａ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］）、３’３’−（Ｇ）（Ａ）（すなわち、環状−［Ｇ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］）、３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）（すなわち、ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［Ａ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］）、３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ｇ）（すなわち、ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［Ｇ（３’，５’）ｐ−Ｇ（３’，５’）ｐ］）、及び３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ａ）（すなわち、ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［Ｇ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］）からなる群から選択される１つ以上の参照化合物より高い親和性で、少なくとも１つのヒトＳＴＩＮＧ対立遺伝子のタンパク質産物（ＷＴ、ＲＥＦ、ＨＡＱ、ＡＱ、及びＱ対立遺伝子のいずれか１つを含む）に結合する。上記態様のいずれかのいくつかの実施形態及びその実施形態において、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、少なくとも１つのヒトＳＴＩＮＧ対立遺伝子のタンパク質産物に、ジ−ＯＨの参照化合物より高い親和性で結合する。好ましくは、これは、ｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）、ｈＳＴＩＮＧ（ＨＡＱ）、またはｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）対立遺伝子によってコードされる単離されたタンパク質（Ｉｓｈｉｋａｗａ、Ｈ．、ａｎｄ  Ｂａｒｂｅｒ、Ｇ．Ｎ．  （２００８）．  Ｎａｔｕｒｅ  ４５５、６７４−６７８；  Ｙｉ  ｅｔ  ａｌ．、２０１３、ＰＬｏｓ  Ｏｎｅ  ２０１３  Ｏｃｔ  ２１、８（１０）：ｅ７７８４６；該ＲＥＦ対立遺伝子のタンパク質配列は、ＮＣＢＩ参照配列ＮＰ＿９３８０２３である）を用い、後述及び実施例１１に記載する視差走査蛍光分析（ＤＳＦ）等の方法を用いて測定される。
【０１３５】
第二十八の態様において、本発明は、上記第二から第二十七の態様及びそれらの任意の実施形態に記載の１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を、それらの任意のプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、または医薬的に許容される水和物を含めて含み、さらに、該化合物の細胞内への取り込み及び／または安定性を高める送達媒体を含む医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態では、該送達媒体は、アジュバント、脂質、リポソーム、二重層間架橋多重膜小胞（ｉｎｔｅｒｂｉｌａｙｅｒ  ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｅｄ  ｍｕｌｔｉｌａｍｅｌｌａｒ  ｖｅｓｉｃｌｅｓ）、生分解性ポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸−ｃｏ−グリコール酸）［ＰＬＧＡ］系またはポリ無水物系のナノ粒子もしくはマイクロ粒子、及びナノ多孔質粒子担持脂質二重層からなる群から選択される１つ以上の薬剤を含む。
【０１３６】
第二十九の態様において、本発明は、上記第二から第二十七の態様及びそれらの任意の実施形態に記載の１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を、それらの任意のプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、または医薬的に許容される水和物を含めて含み、さらに、医薬的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
【０１３７】
第二十九の態様の第一の実施形態では、該医薬組成物は、該１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物の細胞透過性を高める薬剤を含まない。
【０１３８】
第二十九の態様の第二の実施形態では、該医薬組成物は、該１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物の細胞内への取り込みを高める薬剤を含まない。
【０１３９】
第二十九の態様の第三の実施形態では、該医薬組成物はさらに、該化合物の細胞内への取り込み及び／または安定性を高める送達媒体を含む。いくつかの実施形態では、該送達媒体は、アジュバント、脂質、リポソーム、二重層間架橋多重膜小胞、生分解性ポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸−ｃｏ−グリコール酸）［ＰＬＧＡ］系またはポリ無水物系のナノ粒子もしくはマイクロ粒子、及びナノ多孔質粒子担持脂質二重層からなる群から選択される１つ以上の薬剤を含む。
【０１４０】
第二十八の態様のいくつかの実施形態及びその実施形態、または第二十九の態様及びその第一、第二、もしくは第三の実施形態において、該医薬組成物はさらに、免疫チェックポイント阻害剤（例えば、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、Ｔｉｍ−３、Ｖｉｓｔａ、ＢＴＬＡ、ＬＡＧ−３及びＴＩＧＩＴ経路アンタゴニスト；ＰＤ−１経路遮断薬；ＰＤ−Ｌ１阻害剤；制限なく、抗ＰＤ−１抗体ニボルマブ、ペンブロリズマブ、またはピジリズマブを含む；ＰＤ−１阻害剤ＡＭＰ−２２４；抗ＣＴＬＡ−４抗体イピリムマブ；及び抗ＰＤ−Ｌ１抗体ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ４７３６、またはアベルマブ）；ＴＬＲアゴニスト（例えば、ＣｐＧまたはモノホスホリルリピドＡ）；自然免疫を誘導する不活化または弱毒化細菌（例えば、不活化または弱毒化Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）；トール様受容体（ＴＬＲ）を介して、（ＮＯＤ）様受容体（ＮＬＲ）を介して、レチノイン酸誘導性遺伝子系（ＲＩＧ）−Ｉ様受容体（ＲＬＲ）を介して、Ｃ型レクチン受容体（ＣＬＲ）を介して、または病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）を介して、自然免疫活性化を媒介する組成物；ならびに化学療法剤からなる群から選択される、１つ以上の追加の医薬的に活性な成分を含む。いくつかの実施形態では、該免疫チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ−４経路アンタゴニスト、ＰＤ−１経路アンタゴニスト、Ｔｉｍ−３経路アンタゴニスト、Ｖｉｓｔａ経路アンタゴニスト、ＢＴＬＡ経路アンタゴニスト、ＬＡＧ−３経路アンタゴニスト、及びＴＩＧＩＴ経路アンタゴニストからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、該免疫チェックポイント阻害剤は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、抗ＴＩＭ−３抗体、抗ＢＴＬＡ抗体、または抗ＬＡＧ−３抗体である。いくつかの実施形態では、該免疫チェックポイント阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピジリズマブ、ＡＭＰ−２２４、イピリムマブ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ４７３６、及びアベルマブからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、該ＴＬＲアゴニストは、ＣｐＧまたはモノホスホリルリピドＡである。
【０１４１】
第二十八の態様または第二十九の態様のいくつかの実施形態及びその上記実施形態のいずれかにおいて、該医薬組成物はさらに、樹状細胞の誘導、動員、及び／または成熟を刺激する１つ以上のサイトカインを発現及び分泌する、またはｇｐ９６−Ｉｇ融合タンパク質を含めた１つ以上の熱ショックタンパク質を発現及び分泌する不活化腫瘍細胞を含む。いくつかの実施形態では、該１つ以上のサイトカインは、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣＣＬ２０、ＣＣＬ３、ＩＬ−１２ｐ７０、及びＦＬＴ−３リガンドからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、該腫瘍細胞は、放射線処理によって不活化される。いくつかの実施形態では、該１つ以上のサイトカインは、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣＣＬ２０、ＣＣＬ３、ＩＬ−１２ｐ７０、及びＦＬＴ−３リガンドからなる群から選択され、該腫瘍細胞は、放射線処理によって不活化される。いくつかの実施形態では、該不活化腫瘍細胞は、ｇｐ９６−Ｉｇ融合タンパク質を発現及び分泌する。
【０１４２】
第二十八の態様または第二十九の態様のいくつかの実施形態及びその上記実施形態にいずれかにおいて、該医薬組成物はさらに、１つ以上の抗原を含み、これは、該組成物が個体に投与された場合に、該１つ以上の抗原に対して免疫反応を誘導するために選択される。いくつかの実施形態では、該抗原は、組換えタンパク質抗原である。いくつかの実施形態では、該抗原は、感染性疾患、悪性腫瘍、またはアレルガン（ａｌｌｅｒｇａｎ）に関連する組換えタンパク質抗原である。いくつかの実施形態では、該１つ以上の抗原は、表１の１つ以上の抗原である。
【０１４３】
第二十八の態様または第二十九の態様のいくつかの実施形態及びその上記実施形態にいずれかにおいて、該医薬組成物は、水性または水中油型エマルションとして処方される。
【０１４４】
第三十の態様において、本発明は、がんに罹患している個体の治療方法であって、それを必要とする該個体に対して、上記第二から第二十七の態様及びそれらの任意の実施形態に記載の有効量の１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、それらの任意のプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物、または、上記第二十八ならびに第二十九の態様及びそれらの任意の実施形態に記載のそれらの組成物を投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、該１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物もしくはそれらの組成物は、非経口的でなく（ｎｏｎ−ｐａｒｅｎｔｅｒａｌｌｙ）または非経口的に投与される。いくつかの実施形態では、該投与は、皮下、筋肉内、皮内、粘膜、膣、子宮頸部、腫瘍周囲、腫瘍内、または直接、腫瘍流入領域リンパ節（複数可）に行われる。いくつかの実施形態では、該投与は、粘膜、好ましくは、経口投与である。
【０１４５】
第三十の態様の第一の実施形態では、かかる処理を受ける個体は、結腸直腸がん、気道・消化器の扁平上皮がん、肺がん、脳がん、肝臓がん、胃がん、膀胱がん、甲状腺がん、副腎がん、消化管がん、口腔咽頭がん、食道がん、頭頸部がん、卵巣がん、子宮がん、子宮頸がん、子宮体がん、乳がん、メラノーマ、前立腺がん、膵臓がん、腎臓がん、肉腫、白血病、リンパ腫、及び多発性骨髄腫からなる群から選択されるがんに罹患している場合がある。
【０１４６】
第三十の態様の第二の実施形態及びその第一の実施形態では、がんに罹患している個体の該治療方法はさらに、１つ以上のさらなるがん治療を実施することを含む。いくつかの実施形態では、該１つ以上のさらなるがん治療は、放射線療法、外科手術、化学療法、または免疫療法（例えば、制限なく、免疫刺激剤、免疫チェックポイント阻害剤、細胞免疫療法、もしくはがんワクチン）を含む。いくつかの実施形態では、該１つ以上のさらなるがん治療は、１つ以上のサイトカインまたは１つ以上の熱ショックタンパク質を発現及び分泌する不活化腫瘍細胞を含む。いくつかの実施形態では、該サイトカインは、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣＣＬ２０、ＣＣＬ３、ＩＬ−１２ｐ７０、及びＦＬＴ−３リガンドからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、該熱ショックタンパク質は、ｇｐ９６−Ｉｇタンパク質である。いくつかの実施形態では、該方法は、化学療法剤；免疫チェックポイント阻害剤；ＴＬＲアゴニスト；１つ以上のがん抗原に対する免疫反応を刺激するために選択されるワクチン、すなわち、抗体依存性細胞傷害性を誘導する治療抗体；免疫調節性細胞株；自然免疫を誘導する不活化または弱毒化細菌；免疫反応を誘導するために選択される抗原、ならびにトール様受容体（ＴＬＲ）、（ＮＯＤ）様受容体（ＮＬＲ）、レチノイン酸誘導性遺伝子系（ＲＩＧ）−Ｉ様受容体（ＲＬＲ）、Ｃ型レクチン受容体（ＣＬＲ）、または病原体関連分子パターン（「ＰＡＭＰ」）を介した自然免疫活性化を媒介する組成物からなる群から選択される１つ以上のさらなるがん治療を実施することを含む。いくつかの実施形態では、該免疫チェックポイント阻害剤は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、抗ＴＩＭ−３抗体、抗ＢＴＬＡ抗体、または抗ＬＡＧ−３抗体である。いくつかの実施形態では、該ＴＬＲアゴニストは、ＣｐＧまたはモノホスホリルリピドＡである。いくつかの実施形態では、抗体依存性細胞傷害性を誘導する該治療抗体は、リツキシマブ、イブリツモマブ、トシツモマブ、セツキシマブ、トラスツズマブ、ブレンツキシマブベドチン、アレムツズマブ、オンコリム、イビリムマブ、ビタキシン（ｖｉｔａｘｉｎ）、またはベバシズマブである。
【０１４７】
第三十の態様のいくつかの実施形態及びその第一及び第二の実施形態では、該個体は、がん抗原を発現するがんに罹患しており、該個体の治療方法はさらに、該個体に対して、該がん抗原を発現するがん細胞を除去するまたは死滅させる一次療法を実施することを含むとともに、該一次療法の実施は、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物もしくはその組成物の投与と同時、その前、またはその後である。いくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物もしくはその組成物は、該一次療法に対するネオアジュバント療法として投与される。好ましい実施形態では、該モノまたはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物もしくはその組成物は、該一次療法の後に投与される。いくつかの実施形態では、該一次療法は、当該哺乳類から該がん細胞を除去する外科手術、該哺乳類の該がん細胞を死滅させる放射線療法、または、外科手術と放射線療法の両方を含む。
【０１４８】
第三十一の態様において、本発明は、個体の疾患の治療方法であって、それを必要とする該個体に対して、ｉ）上記第二から第二十七の態様及びそれらの任意の実施形態に記載の有効量の１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、それらの任意のプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物、または、上記第二十八ならびに第二十九の態様及びそれらの任意の実施形態に記載の組成物；ならびにｉｉ）抗体依存性細胞傷害性を誘導する１つ以上の治療抗体の有効量を投与することを含む方法であって、該疾患が、がん、臓器移植の急性拒絶、Ｉ型糖尿病、関節リウマチ、乾癬、クローン病、再狭窄、及びアレルギー性喘息からなる群から選択される、該方法を提供する。いくつかの実施形態では、該がんは、リンパ腫（例えば、Ｂ細胞リンパ腫）、乳がん、慢性リンパ性白血病、結腸直腸がん、メラノーマ、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、前立腺がん、及び他の充実性腫瘍からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、該治療抗体は、ムロモナブ−ＣＤ３、インフリキシマブ、ダクリズマブ、オマリズマブ、アブシキシマブ、リツキシマブ、イブリツモマブ、トシツモマブ、セツキシマブ、トラスツズマブ、ブレンツキシマブベドチン、アレムツズマブ、オンコリム、イビリムマブ、ビタキシン、及びベバシズマブからなる群から選択される。
【０１４９】
第三十二の態様において、本発明は、Ｔｈ１からＴｈ２への免疫のシフトが臨床効果を与える疾患の治療方法であって、それを必要とする当該個体に対して、上記第二から第二十七の態様及びそれらの任意の実施形態に記載の１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、それらの任意のプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物、または、上記第二十八ならびに第二十九の態様及びそれらの任意の実施形態に記載のそれらの組成物を投与することを含む該方法を提供する。細胞性免疫（ＣＭＩ）は、サイトカインＩＬ−２、インターフェロン（ＩＦＮ）−γ、及び腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−αを産生するＴＨ１  ＣＤ４＋Ｔリンパ球と関連している。対照的に、液性免疫は、ＩＬ−４、ＩＬ−６、及びＩＬ−１０を産生するＴＨ２  ＣＤ４＋Ｔリンパ球と関連している。ＴＨ１応答への免疫偏向は、通常、細胞傷害性Ｔ細胞リンパ球（ＣＴＬ）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、マクロファージ、及び単球の活性化を引き起こす。一般に、Ｔｈ１応答は、細胞内病原体（宿主細胞内部のウイルス及び細菌）ならびに腫瘍に対してより効果的である一方、Ｔｈ２応答は、細胞外細菌、寄生蠕虫を含めた寄生生物、及び毒素に対してより効果的である。さらに、自然免疫の活性化は、Ｔヘルパー１型及び２型（Ｔｈ１／Ｔｈ２）の免疫系平衡を正常化し、免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｅ依存性のアレルギー及びアレルギー性喘息を引き起こすＴｈ２型応答の過剰反応を抑制することが期待される。
【０１５０】
上記第二から第二十七の態様及びそれらの任意の実施形態に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、それらの任意のプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物、または、上記第二十八ならびに第二十九の態様及びそれらの任意の実施形態に記載のそれらの組成物は、それを必要とする個体に対して、上記第三十から第三十二の態様及びそれらの任意の実施形態の方法に記載の通り、各種非経口及び非経口でない経路によって、医薬的に許容される賦形剤（例えば、担体、アジュバント、媒体等）を含む処方で投与され得る。好ましい非経口でない経路としては、粘膜（例えば、経口、経膣、経鼻、子宮頸部等）の経路が挙げられる。好ましい非経口経路としては、皮下、静脈内、筋肉内、動脈内、皮内、くも膜下腔内、及び硬膜外投与の１つ以上が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、投与は皮下、腫瘍内、または腫瘍周囲の経路によるものであり、より好ましくは、皮下投与である。
【０１５１】
上記第二から第二十七の態様及びそれらの任意の実施形態に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、それらの任意のプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物、または、本明細書に記載の第二十八ならびに第二十九の態様及びそれらの任意の実施形態に記載のそれらの組成物は、それを必要とする個体に対して、上記第三十から第三十二の態様及びそれらの任意の実施形態の方法に記載の通り、１つ以上のさらなる医薬的に活性な成分、例えば、アジュバント、脂質、二重層間架橋多重膜小胞、生分解性ポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸−ｃｏ−グリコール酸）［ＰＬＧＡ］系またはポリ無水物系のナノ粒子もしくはマイクロ粒子、及びナノ多孔質粒子担持脂質二重層、免疫チェックポイント阻害剤（例えば、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、Ｔｉｍ−３、Ｖｉｓｔａ、ＢＴＬＡ、ＬＡＧ−３、及びＴＩＧＩＴ経路アンタゴニスト；ＰＤ−１経路遮断薬；ＰＤ−Ｌ１阻害剤；制限なく、抗ＰＤ−１抗体ニボルマブ、ペンブロリズマブ、またはピジリズマブを含む；ＰＤ−１阻害剤ＡＭＰ−２２４；抗ＣＴＬＡ−４抗体イピリムマブ；及び抗ＰＤ−Ｌ１抗体ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ４７３６、またはアベルマブ）、自然免疫を誘導する不活化または弱毒化細菌（例えば、不活化または弱毒化Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）、トール様受容体（ＴＬＲ）、（ＮＯＤ）様受容体（ＮＬＲ）、レチノイン酸誘導性遺伝子系（ＲＩＧ）−Ｉ様受容体（ＲＬＲ）、Ｃ型レクチン受容体（ＣＬＲ）、もしくは病原体関連分子パターン（「ＰＡＭＰ」）を介して自然免疫活性化を媒介する組成物、または化学療法剤とともに投与され得る。
【０１５２】
第三十三の態様において、本発明は、治療または予防ワクチンとの併用でのアジュバント用の、上記第二から第二十七の態様及びそれらの任意の実施形態に記載の１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、それらの任意のプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物、または、上記第二十八ならびに第二十九の態様及びそれらの任意の実施形態に記載のそれらの組成物を提供する。いくつかの実施形態では、該ワクチンは、１つ以上の所定の抗原に対する免疫反応を刺激するように選択される。いくつかの実施形態では、該ワクチンは、感染性疾患、悪性腫瘍、またはアレルガン（ａｌｌｅｒｇａｎ）に関連する組換えタンパク質抗原を含めた１つ以上の抗原を含む。いくつかの実施形態では、該１つ以上のモノまたはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物もしくはその組成物は、該ワクチンと同時に、その前に、またはその後に用いられる。いくつかの実施形態では、該１つ以上のモノまたはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物もしくはその組成物は、該ワクチンと同じ組成物に処方される。
【０１５３】
第三十三の態様の第一の実施形態では、該ワクチンは、目的の該１つ以上の抗原を含む不活化もしくは弱毒化細菌もしくはウイルス、１つ以上の精製抗原、該１つ以上の抗原を発現及び／または分泌するように組換え改変された生ウイルスもしくは細菌の送達ベクター、該１つ以上の抗原をロードされた、もしくは該１つ以上の抗原をコードする核酸を含む組成物でトランスフェクトされた細胞を含む抗原提示細胞（ＡＰＣ）ベクター、リポソーム抗原送達媒体、または該１つ以上の抗原をコードする裸の核酸ベクターを含む。いくつかの実施形態では、該ワクチンは、抗細菌、抗ウイルス、または抗がん治療もしくは予防ワクチンである。いくつかの実施形態では、該１つ以上の抗原は、ウイルス抗原、細菌性抗原、及びがん抗原からなる群から選択される１つ以上の抗原である。
【０１５４】
第三十三の態様のいくつかの実施形態及びその第一の実施形態では、該ワクチンは、１つ以上のサイトカインを発現及び分泌する不活化腫瘍細胞を含む。いくつかの実施形態では、該サイトカインは、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣＣＬ２０、ＣＣＬ３、ＩＬ−１２ｐ７０、及びＦＬＴ−３リガンドからなる群から選択される。
【０１５５】
第三十三の態様のいくつかの実施形態及びその第一の実施形態では、該ワクチンは、１つ以上の熱ショックタンパク質を発現及び分泌する不活化腫瘍細胞を含む。いくつかの実施形態では、該熱ショックタンパク質はｇｐ９６−Ｉｇ融合タンパク質である。
【０１５６】
第三十四の態様において、本発明は、慢性感染性疾患に罹患している個体の治療方法であって、それを必要とする該個体に対して、有効量の上記第二から第二十七の態様及びそれらの任意の実施形態に記載の１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、それらの任意のプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物、または、上記第二十八ならびに第二十九の態様及びそれらの任意の実施形態に記載のそれらの組成物を投与することを含む該方法を提供する。いくつかの実施形態では、該１つ以上のモノまたはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物もしくはその組成物は、該慢性感染性疾患の治療用の別の薬剤との併用で投与される。いくつかの実施形態では、該慢性感染性疾患は、ＨＢＶ感染症、ＨＣＶ感染症、ＨＰＶ感染症、ＨＳＶ感染症、及び肝細胞がんからなる群から選択される。
【０１５７】
第三十五の態様において、本発明は、上記第三十から第三十四の態様のいずれか及びそれらの任意の実施形態に記載の疾患または症状の治療用の上記第二から第二十七の態様及びそれらの任意の実施形態に記載の１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、それらの任意のプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物、または、上記第二十八ならびに第二十九の態様及びそれらの任意の実施形態に記載のそれらの組成物を提供する。好ましい実施形態では、該１つ以上のモノまたはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、がんの治療用である。いくつかの実施形態では、該がんは、結腸直腸がん、気道・消化器の扁平上皮がん、肺がん、脳がん、肝臓がん、胃がん、膀胱がん、甲状腺がん、副腎がん、消化管がん、口腔咽頭がん、食道がん、頭頸部がん、卵巣がん、子宮がん、子宮頸がん、子宮体がん、乳がん、メラノーマ、前立腺がん、膵臓がん、腎臓がん、肉腫、白血病、リンパ腫、及び多発性骨髄腫からなる群から選択される。
【０１５８】
第三十六の態様において、本発明は、上記第三十から第三十四の態様のいずれか及びそれらの任意の実施形態に記載の疾患または症状の治療用の薬剤の調製用の上記第二から第二十七の態様及びそれらの任意の実施形態に記載の１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、それらの任意のプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物、または、上記第二十八ならびに第二十九の態様及びそれらの任意の実施形態に記載のそれらの組成物を提供する。好ましい実施形態では、該１つ以上のモノまたはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、がんの治療用の薬剤の調製用である。いくつかの実施形態では、該がんは、結腸直腸がん、気道・消化器の扁平上皮がん、肺がん、脳がん、肝臓がん、胃がん、膀胱がん、甲状腺がん、副腎がん、消化管がん、口腔咽頭がん、食道がん、頭頸部がん、卵巣がん、子宮がん、子宮頸がん、子宮体がん、乳がん、メラノーマ、前立腺がん、膵臓がん、腎臓がん、肉腫、白血病、リンパ腫、及び多発性骨髄腫からなる群から選択される。
【０１５９】
第三十七の態様において、本発明は、上記第二から第二十七の態様及びそれらの任意の実施形態に記載の１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、それらの任意のプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物、または、上記第二十八ならびに第二十九の態様及びそれらの任意の実施形態に記載のそれらの組成物を含むキットを提供する。いくつかの実施形態では、１つ以上のモノまたはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物もしくはその組成物は、例えば、バイアル、ボトル、または同様の容器に包装され、これはさらに、例えば、箱、エンベロープ、または同様の容器内に包装されてもよい。いくつかの実施形態では、１つ以上のモノまたはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物もしくはその組成物は、哺乳類、例えばヒトへの投与に対して、米国食品医薬品局または同様の規制機関によって承認される。１つの実施形態では、かかるキットには、使用のための取扱説明書及び／または、該１つ以上のモノまたはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物もしくはその組成物が哺乳類、例えば、適切な疾患または状態に対して、ヒトへの投与に適している、または該投与に対して承認されているという他の表示が含まれる。いくつかの実施形態では、該化合物または組成物は、単位用量または単回用量形態、例えば、単回用量錠剤、カプセル剤、または同種のものに包装される。
【０１６０】
上記第二十八ならびに第二十九の態様及びそれらの任意の実施形態の医薬組成物、上記第三十から第三十四の態様のいずれか及びそれらの任意の実施形態に記載の疾患または症状の治療方法、ならびに上記第三十五の態様に記載の疾患の治療用または第三十六の態様に記載の薬剤の調製用の該化合物のいくつかの実施形態において、該化合物は：
【化４９】
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からなる群から選択される化合物、またはそのプロドラッグ、医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物である。
【図面の簡単な説明】
【０１６１】
【図１】３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）（ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［２’Ｆ−Ｇ（３’，５’）ｐ−２Ｆ’−Ａ（３’，３’）ｐ］）についてのＮＭＲ解析データ、及び、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）（ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［２’Ｆ−Ｇ（３’，５’）ｐ−２Ｆ’−Ａ（３’，３’）ｐ］）についてのＬＣ解析データを示す。
【図２】モノまたはジ−Ｆ  ＣＤＮのヒトＳＴＩＮＧ  ＲＥＦタンパク質への結合を示す。
【図３】モノまたはジ−Ｆ  ＣＤＮのヒトＳＴＩＮＧ  ＷＴタンパク質への結合を示す。
【図４】ｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）のタンパク質配列を示す。
【図５Ａ】ＣＤＮの用量範囲にわたる、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞におけるｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）によるＩＦＮβのルシフェラーゼレポーター誘導比を示す。
【図５Ｂ】ＣＤＮ６．２５μＭでの、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞におけるｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）によるＩＦＮβのルシフェラーゼレポーター誘導比を示す。
【図６Ａ】ＣＤＮの用量範囲にわたる、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞におけるｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）によるＩＦＮβのルシフェラーゼレポーター誘導比を示す。
【図６Ｂ】ＣＤＮ６．２５μＭでの、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞におけるｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）によるＩＦＮβのルシフェラーゼレポーター誘導比を示す。
【図７Ａ】ＣＤＮの用量範囲にわたる、ＳＴＩＮＧＷＴ／ＷＴｈＰＢＭＣによる相対ＩＦＮβ発現を示す。
【図７Ｂ】ＣＤＮ６．２５μＭでの、ＳＴＩＮＧＷＴ／ＷＴｈＰＢＭＣによる相対ＩＦＮβ発現を示す。
【図８Ａ】ＣＤＮの用量範囲にわたる、ＳＴＩＮＧＲＥＦ／ＲＥＦｈＰＢＭＣによる相対ＩＦＮβ発現を示す。
【図８Ｂ】ＣＤＮ６．２５μＭでの、ＳＴＩＮＧＲＥＦ／ＲＥＦｈＰＢＭＣによる相対ＩＦＮβ発現を示す。
【図９Ａ】ＣＤＮで処理されたｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）を用いたｈＰＢＭＣにおける標準化ＩＦＮβ発現を示す。
【図９Ｂ】ＣＤＮで処理されたＲＥＦ  ｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）を用いたｈＰＢＭＣにおける標準化ＩＦＮβ発現を示す。
【図１０Ａ】ＣＤＮで処理されたｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）を用いたｈＰＢＭＣにおける標準化ＴＮＦα発現を示す。
【図１０Ｂ】ＣＤＮで処理されたＲＥＦ  ｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）を用いたｈＰＢＭＣにおける標準化ＴＮＦα発現を示す。
【図１１Ａ】ＣＤＮで処理されたｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）を用いたｈＰＢＭＣにおける標準化ＩＬ−６発現を示す。
【図１１Ｂ】ＣＤＮで処理されたＲＥＦ  ｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）を用いたｈＰＢＭＣにおける標準化ＩＬ−６発現を示す。
【図１２Ａ】ＣＤＮで処理されたｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）を用いたｈＰＢＭＣにおける標準化ＩＦＮγ発現を示す。
【図１２Ｂ】ＣＤＮで処理されたＲＥＦ  ｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）を用いたｈＰＢＭＣにおける標準化ＩＦＮγ発現を示す。
【図１３Ａ】ＣＤＮで処理されたｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）を用いたｈＰＢＭＣにおける標準化ＩＬ−１２ｐ４０発現を示す。
【図１３Ｂ】ＣＤＮで処理されたＲＥＦ  ｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）を用いたｈＰＢＭＣにおける標準化ＩＬ−１２ｐ４０発現を示す。
【図１４Ａ】Ｂ１６−ＳＩＹメラノーママウスモデルにおけるＣＤＮの腫瘍内注入後の腫瘍体積を示す。
【図１４Ｂ】Ｂ１６−ＳＩＹメラノーママウスモデルにおけるＣＤＮの腫瘍内注入後のＳＩＹ＋ＣＤ８＋Ｔ細胞の割合を示す。
【図１５Ａ】Ｂ１６メラノーママウスモデルにおけるＣＤＮの腫瘍内注入後の腫瘍体積を示す。
【図１５Ｂ】ＭＣ３８結腸がんマウスモデルにおけるＣＤＮの腫瘍内注入後の腫瘍体積を示す。
【図１６Ａ】ＣＤＮ及びＨＩＶｇａｇ  ｐ５５タンパク質を注入されたマウスにおける、ＨＩＶｇａｇ  ｐ５５抗原特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞反応を示す。
【図１６Ｂ】ＣＤＮ及びＨＩＶｇａｇ  ｐ５５タンパク質を注入されたマウスにおける、ＣＤ８＋Ｔ細胞反応を示す。
【発明を実施するための形態】
【０１６２】
発明の詳細な説明
本発明は、ＳＴＩＮＧ（インターフェロン遺伝子刺激因子）として知られる細胞質受容体を介してＤＣを活性化する、モノ−またはジ−フルオロ置換ビス−３’，５’環状ジヌクレオチド（モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ）免疫促進剤の製造及び使用に関する。特に、本発明のＣＤＮは、１つ以上のモノまたはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、最も好ましくは、１つ以上のジチオＲｐ，Ｒｐジ−Ｆ−ＣＤＮを含む組成物の形態で提供される。
【０１６３】
病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）として知られる保存微生物構造は、宿主細胞のパターン認識受容体（生殖細胞コード化特異性を備えたＰＲＲ）によって感知され、サイトカイン及びケモカインの誘導ならびに特異的な適応免疫反応の開始をもたらす下流シグナル伝達カスケードを始動させる（Ｉｗａｓａｋｉ  ａｎｄ  Ｍｅｄｚｈｉｔｏｖ，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３２７，  ２９１−５，  ２０１０）。自然免疫系が感染性因子から提示されるＰＡＭＰに係合される方法は、侵入病原体が疾患を引き起こすことに対抗するためにふさわしい適応反応の進行を具体化する。
【０１６４】
免疫変調成分及びアジュバントの設計における一つの目的は、指定されたＰＲＲを活性化し、所望の反応を開始する明白なＰＡＭＰまたは合成分子を選択することである。モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）及びＣｐＧ等のアジュバントは、トール様受容体（ＴＬＲ）、すなわち、ＭｙＤ８８及びＴＲＩＦアダプター分子を介してシグナルを送り、ＮＦ−κＢ依存性炎症性サイトカインの誘導を媒介するＰＲＲの類によって認識される微生物由来のＰＡＭＰである（Ｐａｎｄｅｙ  ｅｔ．  ａｌ．，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔ  Ｂｉｏｌ  ２０１５；７：  ａ０１６２４６）。ＭＰＬ（ＴＬＲ−４アゴニスト）及びＣｐＧ（ＴＬＲ−９アゴニスト）は、臨床的に最も進歩したアジュバントであり、ＦＤＡによって承認された、または承認待ちのワクチンの成分である（Ｅｉｎｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｕｍａｎ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ，  ５：  ７０５−１９，  ２００９；  Ａｈｍｅｄ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １２：  ５０９−１７，  ２０１１）。細胞表面（例えば、ＴＬＲ−４）及びエンドソーム（例えば、ＴＬＲ−９）上に存在するＴＬＲは、細胞外及び液胞の病原体を感知するが、ウイルス及び細胞内細菌を含めた複数の病原体の増殖サイクルは、細胞質ゾル内で生じる。細胞外、液胞、及び細胞質のＰＲＲの局在化は、自然免疫系が、細胞質ゾルを監視することによって生産的に複製する病原微生物を感知することができるという仮説を導いた（Ｖａｎｃｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ  Ｈｏｓｔ  ＆  Ｍｉｃｒｏｂｅ  ６：  １０−２１，  ２００９）。このことは、該細胞質の監視径路を含むＰＲＲを活性化し、細胞性免疫、すなわち、細胞内病原体に対する防御及びがんの治療効果と相関する免疫を引き出すために有効なワクチン設計のための効果的な方法となり得るアゴニストの使用に対する論拠を提供する。
【０１６５】
Ｉ型インターフェロン（ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β）は、２つの異なるＴＬＲ非依存性細胞質シグナル伝達経路によって誘導されるシグネチャーサイトカインである。第一の経路において、様々な形態の一本鎖及び二本鎖（ｄｓ）ＲＮＡが、レチノイン酸誘導性遺伝子Ｉ（ＲＩＧ−Ｉ）及びメラノーマ分化関連遺伝子５（ＭＤＡ−５）を含めたＲＮＡヘリカーゼによって感知され、ＩＦＮ−βプロモーター刺激因子１（ＩＰＳ−１）アダプタータンパク質を介してＩＲＦ−３転写因子のリン酸化を媒介し、ＩＦＮ−βの誘導に至る（Ｉｒｅｔｏｎ  ａｎｄ  Ｇａｌｅ，  Ｖｉｒｕｓｅｓ  ３：  ９０６−１９，  ２０１１）。ＩＰＳ−１−／−欠損マウスは、ＲＮＡウイルスによる感染症に対して感受性が高い。該ＩＰＳ−１経路を介してシグナルを送るセンサーは、様々なウイルスタンパク質による不活化の直接の標的とされ、ウイルスの増殖感染を制御するこの細胞質の宿主防御経路の必要性を実証する。合成ｄｓＲＮＡ、例えば、ポリイノシン：ポリシチジル酸（ポリ（Ｉ：Ｃ）及びポリＩＣＬＣ、すなわち、ＲＮアーゼ消化に侵されないようにポリＬリジンとともに処方される類似体は、ＴＬＲ３及びＭＤＡ５の両方の経路に対するアゴニストであり、ＩＦＮ−βの強力な誘導因子であり、現在いくつかの広範な臨床設定で評価中である（Ｃａｓｋｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｅｘｐ．  Ｍｅｄ．  ２０８：  ２３５７−７７，  ２０１１）。
【０１６６】
ＳＴＩＮＧ（インターフェロン遺伝子刺激因子）は、感染性病原体または異常宿主細胞（損傷関連分子パターン、ＤＡＭＰ）由来の細胞質二本鎖（ｄｓ）ＤＮＡの感知に反応して、１型インターフェロンを始動させる第二の細胞質経路のための中心的メディエーターである（Ｂａｒｂｅｒ，  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｒｅｖ  ２４３：  ９９−１０８，  ２０１１）。代替的にＴＭＥＭ１７３、ＭＩＴＡ、ＥＲＩＳ、及びＭＰＹＳとして知られるＳＴＩＮＧは、マクロファージ、樹状細胞（ＤＣ）、及び線維芽細胞で発現されるＭｙＤ８８非依存性宿主細胞防御因子が、単純ヘルペスウイルスの感染に反応して、細胞質ＤＮＡの感知に反応してＩＦＮ−β及びＮＦ−κＢ依存性炎症性サイトカインの発現を誘導することが分かるにつれ、ｃＤＮＡ発現クローニング法を用いて発見された（Ｉｓｈｉｋａｗａ  ａｎｄ  Ｂａｒｂｅｒ，  Ｎａｔｕｒｅ  ４５５：  ６７４−７９，  ２００８）。
【０１６７】
環状ジヌクレオチド（ＣＤＮ）は、運動性及びバイオフィルム形成を含めた多様な過程を調節する細菌によって合成される、遍在する小分子二次メッセンジャーとして研究されている（Ｒｏｍｌｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｉｃｒｂ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  Ｒｅｖ．，  ７７：  １−５２，  ２０１３）。ＣＤＮは、ＳＴＩＮＧのリガンドでもある（Ｂｕｒｄｅｔｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  ４７８：  ５１５−１８，  ２０１１）。ＣＤＮの結合に反応して、ＳＴＩＮＧは、ＴＢＫ−１／ＩＲＦ−３軸及びＮＦ−κＢ軸を介したシグナル伝達を活性化し、ＩＦＮ−β及び他の共調節された遺伝子の発現を誘導する（Ｂｕｒｄｅｔｔｅ  ａｎｄ  Ｖａｎｃｅ，  Ｎａｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １４：  １９−２６，  ２０１３；  ＭｃＷｈｉｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｅｘｐ．  Ｍｅｄ．  ２０６：  １８９９−１９１１，  ２００９）。マウスのリステリア症モデルにおいて、環状（ｃ）−ジＡＭＰは、多剤耐性排出ポンプによって、細胞内細菌Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓから、感染宿主の抗原提示細胞の細胞質ゾル内に分泌され、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞媒介防御と関連している（Ｗｏｏｄｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３２８，  １７０３−０５，  ２０１０；  Ｃｒｉｍｍｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  １０５：  １０１９１−１０１９６，  ２００８）。Ｌｍ感染マクロファージにおけるＩＦＮ−βの誘導は、該ＳＴＩＮＧのシグナル伝達経路の活性化に依存し、ＭｙＤ８８−／−Ｔｒｉｆ−／−またはＣ５７ＢＬ／６親マウス由来のマクロファージのｃ−ジＡＭＰによって誘導されるＩ型ＩＦＮのレベルは区別ができない（Ｌｅｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ＰＬｏＳ  Ｐａｔｈｏｇ  ４（１）：  ｅ６．  ｄｏｉ：１０．１３７１，  ２００８；  Ｗｉｔｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，  ｍＢｉｏ  ４：  ｅ００２８２−１３，  ２０１２）。対照的に、ＩＦＮ−βは、非機能的変異ＳＴＩＮＧタンパク質をコードするゴールデンチケット（ｇｔ）マウス由来のマクロファージでは、ＣＤＮによって誘導されない（Ｓａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｆｅｃｔ．  Ｉｍｍｕｎ．  ７９：  ６８８−９４，  ２０１１）。細胞外細菌Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａは、ハイブリッドｃ−ＧＭＰ−ＡＭＰ（ｃＧＡＭＰ）分子を産生し、これはまた、ＳＴＩＮＧ経路を誘導する（Ｄａｖｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ  １４９：  ３５８−７０，  ２０１２）。これらの遍在する二次メッセンジャーでの自然免疫の活性化は、ＣＤＮの感知が、細菌感染に対する宿主防御に不可欠であり得ることを示唆する。
【０１６８】
ＳＴＩＮＧが、単純ヘルペスウイルスによる感染に反応してＩＦＮ−βの産生を誘導する重要なセンサーであることが見出されたが、このウイルス病原体由来のＤＮＡがどのようにして細胞質内で検出されるかは、当初分かっていなかった。この難問は、ｄｓＤＮＡに直接結合し、それに応じて二次メッセンジャーである環状ＧＭＰ−ＡＭＰ（ｃＧＡＭＰ）を合成し、これがＳＴＩＮＧ経路を活性化し、ＩＦＮ−βの発現を誘導する、宿主細胞のヌクレオチジルトランスフェラーゼである環状ＧＭＰ−ＡＭＰシンターゼ（ｃＧＡＳ）の発見によって解決した（Ｓｕｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３３９：  ７８６−９１，  ２０１３；  Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３３９：  ８２６−３０，  ２０１３）。機能的ｃＧＡＳを有さない細胞は、細胞質ＤＮＡによる刺激に反応してＩＦＮ−βを発現することはできない。特定のＳＴＩＮＧ対立遺伝子を発現する細胞は、ＣＤＮによる刺激に反応しないが、ｄｓＤＮＡによる刺激には、ｃＧＡＳ依存的及びＴＬＲ９（ＭｙＤ８８）非依存的に反応することが後に示された（Ｄｉｎｅｒら、２０１３年）。この観察は、細胞質ｄｓＤＮＡの感知に反応してＳＴＩＮＧ活性化ＣＤＮリガンドを合成するｃＧＡＳによって定義される機序とは矛盾した。この明白な矛盾は、何人かの独立した研究者によって解決された。この研究者らは、ｃＧＡＳが非標準的ＣＤＮ（ｃ−ＧＭＰ−ＡＭＰ；ｃＧＡＭＰ）を産生し、これが、標準的ＣＤＮに反応しないＳＴＩＮＧ対立遺伝子を活性化することを論証した（Ｃｉｖｒｉｌ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  ４９８：  ３３２−３７，  ２０１３，  Ｄｉｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１３，  Ｇａｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１３，  Ａｂｌａｓｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  ４９８：  ３８０−８４，  ２０１３，  Ｋｒａｎｚｕｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｐｏｒｔｓ  ３：  １３６２−６８，  ２０１３，  Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ．  ５１：  ２２６−３５，  ２０１３）。ｃＧＡＭＰは従って、ＳＴＩＮＧに結合し、これを活性化する二次メッセンジャーとして機能する。２つのプリンヌクレオシドがビス−（３’，５’）結合でリン酸架橋によって結合される、細菌が産生するＣＤＮの二次メッセンジャーとは異なり、ｃＧＡＳによって合成される環状ＧＭＰ−ＡＭＰにおけるヌクレオチド間のリン酸架橋は、ｃ［Ｇ（２’，５’）ｐＡ（３’，５’）ｐ］で表される、非標準的２’，５’及び３’，５’結合（または、「混合」結合もしくはＭＬと呼ばれる）によって結合される。これらの２’，５’−３’，５’分子は、細菌ｃ−ジ−ＧＭＰより３００倍も高いｎＭの親和性でＳＴＩＮＧに結合する。従って、２’，５’−３’，５’分子は、ＳＴＩＮＧ標的化に関してはるかに強力な生理的リガンドの典型となることが示唆されている。Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１３；  Ｘｉａｏ  ａｎｄ  Ｆｉｔｚｇｅｒａｌｄ，  Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ  ５１：  １３５−３９，  ２０１３も参照のこと。細菌［標準的ビス−（３’，５’）結合］及び宿主細胞のｃＧＡＳ（非標準的２’，５’及び３’，５’結合）によって産生されるＣＤＮ間のヌクレオチド間リン酸架橋構造の違いは、細菌または宿主細胞���ｃＧＡＳによって産生されるＣＤＮを区別するようにＳＴＩＮＧ受容体が進化したことを示す。
【０１６９】
ヒトＳＴＩＮＧは、標準的ＣＤＮには反応しないが、非標準的ＣＤＮにはそうではない、２３２位でヒスチジンをコードする対立遺伝子を含めた既知の多型性を有する（Ｄｉｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１３；  Ｊｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１１）。ｈＳＴＩＮＧ遺伝子における１つのヌクレオチド多型が、細菌誘導性標準的ＣＤＮに対する反応性に影響を与えることが報告されている（Ｄｉｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１３；  Ｇａｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１３；  Ｃｏｎｌｏｎ  ｅｔ．  ａｌ．，  ２０１３）。ｈＳＴＩＮＧの５つのハプロタイプが報告されており（ＷＴ、ＲＥＦ、ＨＡＱ、ＡＱ、及びＱ対立遺伝子）、これらは、アミノ酸の７１、２３０、２３２、及び２９３位で異なる（Ｊｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１１；  Ｙｉ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１３）。ｈＳＴＩＮＧを発現する細胞は、ビス−（３’，５’）結合を有する細菌ＣＤＮであるｃＧＡＭＰ、ｃ−ジ−ＡＭＰ、及びｃ−ジ−ＧＭＰでの刺激に対してほとんど反応しないが、内因的に産生されるｃＧＡＳ産物であるＭＬ  ｃＧＡＭＰには反応する（Ｄｉｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１３）。意外にも、本発明のモノまたはジ−フルオロ置換ビス−３’，５’結合ＣＤＮ，特にジ−Ｆ−ＣＤＮは、内因的に産生されたＭＬ  ｃＧＡＭＰと同じ程度にｈＳＴＩＮＧ  ＲＥＦ対立遺伝子を刺激する。環状プリンジヌクレオチドの例は、例えば、米国特許第７，７０９４５８号及び第７，５９２，３２６号；ＷＯ２００７／０５４２７９、ＷＯ２０１４／０９３９３６、及びＷＯ２０１４／１８９８０５；並びにＹａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ．  １８：  ５６３１  （２００８）に多少詳しく述べられている。
【０１７０】
天然のＣＤＮ分子は、宿主細胞、例えば、該天然のＣＤＮ分子を含むワクチン処方を取り込む抗原提示細胞に含まれるホスホジエステラーゼによって分解されやすい。規定のアジュバントの効力は、かかる分解によって弱められる場合があり、該アジュバントはその規定のＰＲＲ標的に結合することもこれを活性化することもできなくなる。アジュバントの効力の低下は、例えば、弱いワクチン効力と相関している自然免疫のシグネチャー分子（例えば、ＩＦＮ−β）の誘導発現量の低下によって測定することができ、測定される抗原特異的免疫反応の大きさによって定義される。
【０１７１】
本発明では、実質的に純粋なモノ−またはジ−フルオロＣＤＮ、特にモノ−またはジ−フルオロＣＤＮのジチオジホスフェート誘導体を提供する。ｃ−ジ−ＡＭＰ、ｃ−ＧＡＭＰ、及びｃ−ジ−ＧＭＰ分子の該ジチオジホスフェート誘導体の合成法は、Ｒｐ，Ｒｐ、Ｓｐ，Ｓｐ、ＳｐＲｐ、及びＲｐ，Ｓｐジチオジホスフェート分子を含めたジアステレオマーの混合物をもたらす。これらの個々の種を分離してもよく、これらはこれらの医薬的特性の実質的な違いを呈し得、その場合、Ｒｐ，Ｒｐジアステレオマーが好ましい。
【０１７２】
定義
ヒト、哺乳類、哺乳類対象、動物、獣医学的対象、プラセボ対象、研究用対象、実験用対象、細胞、組織、器官、または生物学的流体に関して本明細書で用いられる「投与」とは、制限なく、外因性リガンド、試薬、プラセボ、小分子、医薬品、治療薬、診断薬、または組成物の、該対象、細胞、組織、器官、または生物学的流体等への接触を指す。「投与」は、例えば治療的、薬物動態学的、診断的、研究的、プラセボ、及び実験的方法を指すことができる。細胞の処理には、該細胞への試薬の接触、ならびに流体への試薬の接触が包含され、この場合、該流体は該細胞と接触している。「投与」には、試薬、診断、結合組成物による、または別の細胞による、例えば細胞のインビトロ及びエキソビボの処理も包含される。「ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ  ｔｏｇｅｔｈｅｒ（一緒に投与される）」または「ｃｏ−ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ（併用される）」とは、２つ以上の薬剤が単一の組成物として投与されるという意味を含むことを意図しない。単一組成物としての投与は本発明で企図されるものの、かかる薬剤は、別個の投与として単一の対象に送達される場合があり、これは、同時または異なる時点の場合があり、また、同一の投与経路または異なる投与経路の場合がある。「同時に投与される」とは、２つ以上の薬剤が基本的に同時に投与されるという意味を含むことを意図するが、必ずしも単一の組成物として、または同一の投与経路によって投与されるとは限らない。
【０１７３】
リガンド及び受容体に関する「アゴニスト」は、該受容体を刺激する分子、分子の組合せ、複合体、または試薬の組合せを含む。例えば、顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）受容体のアゴニストは、ＧＭ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦの突然変異タンパク質もしくは誘導体、ＧＭ−ＣＳＦのペプチド模倣物、ＧＭ−ＣＳＦの生物学的機能を模倣する小分子、またはＧＭ−ＣＳＦ受容体を刺激する抗体を包含し得る。
【０１７４】
リガンド及び受容体に関する「アンタゴニスト」は、該受容体を抑制し、これと反対に作用し、これを下方制御し、及び／またはこれを脱感作する分子、分子の組合せ、または複合体を含む。「アンタゴニスト」は、受容体の構成的活性を抑制する任意の試薬を包含する。構成的活性は、リガンド／受容体相互作用の非存在下で現れるものである。「アンタゴニスト」はまた、受容体の活性刺激（または制御）を抑制または防止する任意の試薬も包含する。例として、ＧＭ−ＣＳＦ受容体のアンタゴニストとしては、いかなる限定も意味することなく、該リガンド（ＧＭ−ＣＳＦ）と結合し、それが該受容体と結合するのを防ぐ抗体、または該受容体と結合し、該リガンドが該受容体と結合するのを防ぐ抗体、もしくは、該抗体が不活性な立体配座で該受容体を固定する場合が挙げられる。
【０１７５】
本明細書で用いられる「抗体」という用語は、免疫グロブリン遺伝子もしくは複数の免疫グロブリン遺伝子もしくはその断片に由来する、それをモデルとする、またはそれによって実質的にコードされる、抗原もしくはエピトープを特異的に結合することが可能なペプチドまたはポリペプチドを指す。例えば、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，  ３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｗ．Ｅ．  Ｐａｕｌ，  ｅｄ．，  Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｎ．Ｙ．  （１９９３）；  Ｗｉｌｓｏｎ  （１９９４；  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  １７５：２６７−２７３；  Ｙａｒｍｕｓｈ  （１９９２）  Ｊ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２５：８５−９７を参照のこと。抗体という用語は、抗原結合能を保持する抗原結合部分、すなわち、「抗原結合部位」（例えば、断片、部分列、相補性決定領域（ＣＤＲ））を含み、（ｉ）Ｆａｂ断片、すなわち、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、及びＣＨ１ドメインからなる一価の断片；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２断片、すなわち、ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって結合された２つのＦａｂ断片を含む二価の断片；（ｉｉｉ）該ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームの該ＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，  （１９８９）  Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６）；ならびに（ｖｉ）分離した相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。一本鎖抗体もまた、参照することによって「抗体」という用語に含まれる。
【０１７６】
本明細書で用いられる「ジ−ＯＨの参照化合物」という用語は、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物の任意の２’及び／または２’’フルオロ置換を欠き、代わりにこれらの位置に−ＯＨ置換基を有する既知のＣＤＮ化合物を指す。好ましくは、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物に対する該既知のジ−ＯＨの参照化合物は、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物と同じ塩基を有し、かつ同じホスホジエステル結合を有する（例えば、ホスホジエステルまたはチオホスフェート類似体）。例えば、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（Ａ）、３’３’−ＲＲ−（Ａ）（２’Ｆ−Ａ）、及び３’３’−ＲＲ−（２’βＦ−Ａ）（２’βＦ−Ａ）に対するジ−ＯＨの参照化合物は、３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）であり；３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）、及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（Ａ）に対するジ−ＯＨの参照化合物は、３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ａ）であり；３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ｇ）に対するジ−ＯＨの参照化合物は、３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ｇ）である。該ジ−ＯＨの参照化合物３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）、３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ａ）、及び３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ｇ）は、例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１４／０９３９３６号に記載されている。
【０１７７】
本明細書で用いられる、細胞透過性または細胞による化合物の取り込みに関する「透過性を高める薬剤」または「取り込みを促進する薬剤」とは、インビトロまたインビボのいずれかで、化合物への細胞の透過性を高める、または該細胞による化合物の取り込みを促進する薬剤である。本明細書に記載のモノ−もしくはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、またはジ−ＯＨの参照化合物は、インビトロ細胞アッセイで比較することができ、この場合、該アッセイは、該細胞によって該化合物を取り込ませる、ジギトニン等の薬剤の有無にかかわらず実行され得る。本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、当該細胞の透過性を高める、または該細胞による該化合物の取り込みを促進するかかる薬剤を必要とせずにかかる細胞アッセイ、例えば、本明細書に記載のＴＨＰ−１細胞アッセイにおいて、意外にも活性である。本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組成物は、当該細胞の透過性を高める、または該細胞による該化合物の取り込みを促進する薬剤なしに、例えば、当該細胞の透過性を高める、または細胞の取り込みを促進する送達媒体なしで、処方され得る。かかる添加剤または送達媒体としては、制限なく、脂質もしくは脂質様アジュバント、リポソーム、二重層間架橋多重膜小胞、ナノ担体、ナノ粒子等、例えば、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、及び／またはそれらのコポリマーを含むナノ粒子、例えば、生分解性ポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸−ｃｏ−グリコール酸）［ＰＬＧＡ］系またはポリ無水物系のナノ粒子もしくはマイクロ粒子等が挙げられる。
【０１７８】
本発明のＣＤＮに関して「実質的に精製された」とは、特定の種が、組成物に含まれるＣＤＮ活性の少なくとも５０重量％を占める、より頻繁には、少なくとも６０重量％を占める、一般的には少なくとも７０重量％を占める、より一般的には少なくとも７５重量％を占める、最も一般的には少なくとも８０重量％を占める、通常は少なくとも８５重量％を占める、より通常は、少なくとも９０重量％を占める、最も通常は少なくとも９５重量％を占める、慣例的には少なくとも９８重量％またはそれ以上を占めることを意味する。水、緩衝剤、塩、界面活性剤、還元剤、プロテアーゼ阻害剤、安定剤（アルブミン等の添加タンパク質を含む）、及び賦形剤の重量は一般に純度の決定には用いない。
【０１７９】
リガンド／受容体、核酸／相補的核酸、抗体／抗原、または他の結合対（例えば、サイトカイン対サイトカイン受容体）（本明細書では各々概して「標的生体分子」または「標的」と呼ぶ）に言及する場合、「特異的」または「選択的」に結合するとは、不均一なタンパク質及び他の生物製剤の集団中の該標的の存在に結び付く結合反応を示す。特異的結合とは、例えば、企図される方法の結合化合物、核酸リガンド、抗体、または抗体の抗原結合部位由来の結合組成物が、その標的に、非標的分子に対する親和性より、多くは少なくとも２５％高い、より多くは少なくとも５０％高い、最も多くは少なくとも１００％（２倍）高い、通常は少なくとも１０倍高い、より通常は少なくとも２０倍高い、最も通常は少なくとも１００倍高い親和性で結合することを意味し得る。
【０１８０】
「リガンド」とは、標的生体分子と結合する小分子、核酸、ペプチド、ポリペプチド、糖、多糖、グリカン、糖タンパク質、糖脂質、またはそれらの組合せを指す。かかるリガンドは、受容体のアゴニストまたはアンタゴニストである場合があるが、リガンドはまた、アゴニストでもアンタゴニストでもなく、アゴニスト特性もアンタゴニスト特性も有さない結合剤も包含する。その同族の標的に対するリガンドの特異的結合は、多くの場合、「親和性」を用いて表される。好ましい実施形態では、本発明のリガンドは、約１０４Ｍ−１〜約１０８Ｍ−１の親和性で結合する。親和性は、Ｋｄ＝ｋｏｆｆ／ｋｏｎ（ｋｏｆｆは解離速度定数であり、Ｋｏｎは会合速度定数であり、Ｋｄは平衡定数である）として算出される。
【０１８１】
親和性は、様々な濃度（ｃ）で標識化リガンドの結合割合（ｒ）を測定することによって、平衡状態で測定され得る。データは、スキャッチャード方程式：ｒ／ｃ＝Ｋ（ｎ−ｒ）を用いてグラフ化される：式中、ｒ＝平衡状態での結合リガンドのモル数／受容体のモル数；ｃ＝平衡状態での遊離リガンド濃度；Ｋ＝平衡会合定数；及びｎ＝受容体１分子当たりのリガンド結合部位の数。グラフ分析により、ｒ／ｃをＸ軸上のｒに対してＹ軸上にプロットし、その結果としてスキャッチャードプロットを作り出す。スキャッチャード分析による親和性測定は、当技術分野で周知である。例えば、ｖａｎ  Ｅｒｐ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ  １２：４２５−４３，１９９１；Ｎｅｌｓｏｎ  ａｎｄ  Ｇｒｉｓｗｏｌｄ，Ｃｏｍｐｕｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｐｒｏｇｒａｍｓ  Ｂｉｏｍｅｄ．２７：６５−８，１９８８を参照のこと。別の方法として、親和性は、等温滴定熱量測定（ＩＴＣ）によって測定することができる。通常のＩＴＣ実験では、リガンドの溶液は、その同族標的の溶液中に滴定される。それらの相互作用時に放出される熱（ΔＨ）は、経時的に観察される。該リガンドの連続量がＩＴＣ細胞中に滴定される場合、吸収または放出される熱の量は、結合の量と正比例する。系が飽和に達すると、希釈熱しか観察されなくなるまで、熱シグナルは減少する。次に、細胞中のリガンド及び結合パートナーの比に対する各注入からの熱のプロットから結合曲線が得られる。該結合曲線は、適切な結合モデルで分析され、ＫＢ、ｎ及びΔＨを確定する。ＫＢ＝１／Ｋｄということに留意されたい。
【０１８２】
本明細書で用いられる「プロドラッグ」という用語は、企図される化合物の変性を指し、この場合、該変性化合物は、薬理活性が低く（該変性化合物と比較して）、該変性化合物は、体内で（例えば、標的細胞または標的器官内で）酵素反応または非酵素的反応を介して未変性の形態に戻る。特定の実施形態では、１つのリボース上のヒドロキシルがプロドラッグの脱離基を構成する。プロドラッグは、薬物の物理化学的、生物薬剤学的、及び薬物動態学的特性を変更することができる。従来のプロドラッグは、インビボで活性薬物を形成する変換を受けることによって活性化される薬物に分類される。プロドラッグの発展の理由は、一般的に、親薬物に関連する不十分な水溶性、化学的不安定性、低経口バイオアベイラビリティ、血液脳関門透過性の欠如、及び高初回通過代謝である。適切なプロドラッグ部分は、例えば、“Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”  Ｊ．  Ｒａｕｔｉｃｏ，  Ｅｄ．，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  ２０１１に記載されている。例としては、細胞のエステラーゼによって除去される脱離基、Ｃ６〜Ｃ１８脂肪酸エステル、ミリストイルエステル、ペンタノイルエステル、ヘキサノイルエステル、及びヘプタノイルエステルが挙げられるがこれらに限定されない。例えば、本明細書に記載のモノ−２’Ｆ−ＣＤＮ化合物は、残りの２’ヒドロキシルで置換を含んでかかるエステルを形成することができる。
【０１８３】
本明細書中で用いられる「対象」または「個体」という用語は、ヒトまたは非ヒト生物体を指す。従って、本明細書に記載の方法及び組成物は、ヒト及び獣医学的疾患の両方に適用可能である。特定の実施形態では、対照は「患者」、すなわち、疾患または状態のための医療を受けている生きているヒトである。これには、明白な疾病がなく、病態の兆候を検査されている者が含まれる。好ましいのは、本発明の組成物及び方法によって標的化される特定のがんの現在の診断を有する対象である。本明細書中に記載の組成物での治療に適したがんとしては、前立腺がん、腎臓がん、メラノーマ、膵臓がん、子宮頸がん、卵巣がん、結腸がん、頭頸部がん、肺がん、及び乳がんが挙げられるがこれらに限定されない。
【０１８４】
「治療有効量」は、患者の利益を示すために、すなわち、治療される状態の症状の減少、予防、または軽快を引き起こすのに十分な試薬または医薬組成物の量として定義される。該薬剤または医薬組成物が診断薬を含む場合、「診断有効量」は、シグナル、画像、または他の診断パラメーターをもたらすのに十分な量と定義される。該製剤処方の有効量は、当該個体の感受性の程度、該個体の年齢、性別、及び体重、ならびに該個体の特異体質反応等の因子によって変わる。「有効量」は、制限なく、医学的状態または障害もしくはその原因となる過程の症状もしくは兆候を軽快、逆転、緩和、予防、もしくは診断できる量を包含する。別段の、明白な、または状況による指示のない限り、「有効量」は、状態を軽減するのに十分な最少量に限定されない。
【０１８５】
「ｔｒｅａｔｍｅｎｔ（治療）」または「ｔｒｅａｔｉｎｇ（治療すること）」(状態または疾患に関して)とは、好ましくは臨床結果を含めた有益な、または所望の結果を得るための方法である。本発明の目的のために、疾患に関する有益な、または所望の結果としては、以下のうちの１つ以上が挙げられるがこれらに限定されない：疾患を予防すること、疾患に関連した症状を改善すること、疾患を治癒すること、疾患の重症度を低減すること、疾患の進行を遅らせること、疾患に関連した１つ以上の症状を軽減すること、疾患に罹患している者の生活の質を上げること、及び／または生存を延長すること。同様に、本発明の目的のために、状態に関する有益な、または所望の結果としては、以下のうちの１つ以上が挙げられるがこれらに限定されない：状態を予防すること、状態を改善すること、状態を治癒すること、状態の重症度を低減すること、状態の進行を遅らせること、状態に関連した１つ以上の症状を軽減すること、状態に罹患している者の生活の質を上げること、及び／または生存を延長すること。例えば、本明細書に記載の組成物ががんの治療のために用いられる実施形態では、該有益な、または所望の結果としては、以下のうちの１つ以上が挙げられるがこれらに限定されない：新生物またはがん性細胞の増殖を低減すること(または破壊すること)、がんに見出される新生細胞の転移を低減すること、腫瘍のサイズを縮小すること、がんに起因する症状を減少させること、がんに罹患している者の生活の質を上げること、疾患を治療するために必要とされる他の医薬品の用量を減少させること、がんの進行を遅らせること、及び／またはがんを有する患者の生存を延長すること。状況に応じて、対象の「治療」は、該対象が治療を必要としている、例えば、試薬の投与によって軽減されると予期される障害を該対象が含む状況であるということを意味し得る。
【０１８６】
「ワクチン」は予防ワクチンを包含する。ワクチンはまた、治療ワクチン、例えば、当該ワクチンによってもたらされる抗原またはエピトープに関連する状態または障害を含む哺乳類に投与されるワクチンも包含する。
【０１８７】
環状プリンジヌクレオチド
【０１８８】
原核ならびに真核細胞は、細胞のシグナル伝達ならびに細胞内及び細胞間伝達用に様々な小分子を使用する。ｃＧＭＰ、ｃＡＭＰ等の環状ヌクレオチドは、原核ならびに真核細胞の制御及び開始活性を有することが知られている。真核細胞とは異なり、原核細胞は調節分子として環状プリンジヌクレオチドも使用する。原核生物では、２つのＧＴＰ分子の縮合は、酵素ジグアニル酸シクラーゼ（ＤＧＣ）によって触媒され、細菌の重要な調節因子を代表するｃ−ジＧＭＰが得られる。
【０１８９】
最近の研究によって、環状ジＧＭＰまたはその類似体はまた、患者の免疫または炎症反応を刺激もしくは促進することもでき、ワクチンに対する該免疫反応を哺乳類におけるアジュバントとなることによって促進することもできることが示唆されている。病原体由来ＤＮＡの細胞質内検出は、ＴＡＮＫ結合キナーゼ１（ＴＢＫ１）及びその下流転写因子、ＩＦＮ調節因子３（ＩＲＦ３）を介したシグナル伝達を要する。ＳＴＩＮＧ（ＩＦＮ遺伝子刺激因子；ＭＩＴＡ、ＥＲＩＳ、ＭＰＹＳ、及びＴＭＥＭ１７３としても知られる）と呼ばれる膜貫通タンパク質は、これらの環状プリンジヌクレオチドのためのシグナル伝達受容体として機能し、ＴＢＫ１−ＩＲＦ３シグナル伝達軸及びＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン応答性を刺激する。例えば、図１を参照のこと。Ｂｕｒｄｅｔｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  ４７８：  ５１５−１８，  ２０１１では、ＳＴＩＮＧは直接環状ジグアニル酸モノリン酸に結合するが、他の無関係のヌクレオチドにも核酸にも結合しないことが実証された。
【０１９０】
本発明のＣＤＮを誘導するための前駆体として用いる環状プリンジヌクレオチドは、例えば、Ｇａｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ  （２０１３）  １５３：  ｄｏｉ：  １０．１０１６／ｊ．ｃｅｌｌ．２０１３．０４．０４６；  米国特許第７，７０９４５８号及び７，５９２，３２６号；ＷＯ２００７／０５４２７９，ＷＯ２０１４／０９３９３６及びＷＯ２０１４／１８９８０５；ならびにＹａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ．  １８：  ５６３１  （２００８）に多少詳しく述べられている。これらのＣＤＮは、標準的な有機化学手法を用いて変性し、本発明のＣＤＮを製造してもよい。
【０１９１】
本明細書に記載の本発明のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、強力なＳＴＩＮＧアゴニストであり、既知の非フルオロ置換ＣＤＮ化合物、例えば、ＲＲ−（Ａ）（Ａ）、または内生的に産生されるｃＧＡＳ産物であるＭＬ  ｃＧＡＭＰを超える予想外の改善を示す。本発明のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、２’及び２’’位の置換が異なる既知の化合物、例えば、３’３’−（Ａ）（Ａ）、３’３’−（Ｇ）（Ａ）、３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）、または３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ａ）等のジ−ＯＨの参照化合物と比較される。該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物の特性は、下記実施例１１〜１７に示され、そこで該化合物は、ｉ）実施例１１に記載の通り、ｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）、ｈＳＴＩＮＧ（ＨＡＱ）、もしくはｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）のうちの１つ以上についてのＤＳＦアッセイにおける、より高いＴｍシフト；ｉｉ）実施例１３に記載の通り、ｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）、ｈＳＴＩＮＧ（ＨＡＱ）、もしくはｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）のうちの１つ以上についてのｈＰＢＭＣアッセイにおける、ＩＦＮ−β転写産物のより高い相対発現；または、ｉｉｉ）実施例１４に記載の通り、好ましくはジギトニンの非存在下で行われる、ＴＨＰ１細胞アッセイでのより低いＥＣ５０のうちの１つ以上を有するとして、該ジ−ＯＨの参照化合物を超える改善を示す。いくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮは、ｉ）実施例１４に記載の通り、ｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）、ｈＳＴＩＮＧ（ＨＡＱ）、もしくはｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）のうちの１つ以上についてのＤＳＦアッセイにおける、より高いＴｍシフト；ｉｉ）実施例１３に記載の通り、ｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）、ｈＳＴＩＮＧ（ＨＡＱ）、もしくはｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）のうちの１つ以上についてのｈＰＢＭＣアッセイにおける、ＩＦＮ−β転写産物のより高い相対発現；または、ｉｉｉ）実施例１４に記載の通り、好ましくはジギトニンの非存在下で行われる、ＴＨＰ１細胞アッセイでのより低いＥＣ５０のうちの２つ以上を有するとして、該ジ−ＯＨの参照化合物を超える改善を示す。いくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ｉ）実施例１１に記載の通り、ｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）、ｈＳＴＩＮＧ（ＨＡＱ）、もしくはｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）のうちの１つ以上についてのＤＳＦアッセイにおける、より高いＴｍシフト；ｉｉ）実施例１３に記載の通り、ｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）、ｈＳＴＩＮＧ（ＨＡＱ）、もしくはｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）のうちの１つ以上についてのｈＰＢＭＣアッセイにおけるＩＦＮ−β転写産物のより高い相対発現；または、ｉｉｉ）実施例１４に記載の通り、好ましくはジギトニンの非存在下で行われる、ＴＨＰ１細胞アッセイでのより低いＥＣ５０の各々を有するとして、該ジ−ＯＨの参照化合物を超える改善を示す。本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物のいくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ｈＳＴＩＮＧ  ＲＥＦ対立遺伝子についての実施例１３に記載のｈＰＢＭＣアッセイにおけるＩＦＮ−β転写産物の相対発現が、３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）と比較して、少なくとも２倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも５０倍、少なくとも１００倍、少なくとも５００倍、または少なくとも１０００倍高い。いくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ジギトニンの添加なしの実施例１４に記載のＴＨＰ１アッセイでのＥＣ５０が、ジ−ＯＨの参照化合物のＥＣ５０より、少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも６倍、少なくとも７倍、または少なくとも８倍低い。いくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、該化合物の細胞に対する透過性を高める薬剤、または該細胞による該化合物の取り込みを促進する薬剤の添加なしでのＴＨＰ１細胞アッセイにおけるＥＣ５０が、４０μＭ未満、３０μＭ未満、２０μＭ未満、１５μＭ未満、または１０μＭ未満である。いくつかの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ジギトニンの添加なしでの実施例１４に記載のＴＨＰ１アッセイにおけるＥＣ５０が、４０μＭ未満、３０μＭ未満、２０μＭ未満、１５μＭ未満、または１０μＭ未満である。
【０１９２】
好ましい環状プリンジヌクレオチドは、本明細書で「チオホスフェート」と呼ばれるホスホロチオエート類似体である。ホスホロチオエートは、非架橋酸素の１つがイオウに置換される標準ヌクレオチドの変異体である。ヌクレオチド間結合の硫化は、５’から３’及び３’から５’のＤＮＡ  ＰＯＬ１エキソヌクレアーゼ、ヌクレアーゼＳ１及びＰ１、ＲＮアーゼ、血清ヌクレアーゼ、ならびにヘビ毒ホスホジエステラーゼを含めたエンド及びエキソヌクレアーゼの作用を劇的に低減する。加えて、脂質二重膜を横断する能力は増大する。
【０１９３】
ホスホロチオエート結合は、本質的にキラルである。当業者であれば、本構造のホスフェートが、各々Ｒ型でもＳ型でも存在し得ることが理解されよう。従って、式Ｉ及びそのすべての下位式の化合物に対して、Ｒｐ，Ｒｐ、Ｓｐ，Ｓｐ、Ｓｐ，Ｒｐ、及びＲｐ，Ｓｐ型が可能である。上記のように、本発明の環状プリンジヌクレオチドは、２’−Ｆ置換型のＣＤＮ、特にＣＤＮチオホスフェートを含む。従って、２’−Ｆ置換Ｒｐ，Ｒｐ、Ｓｐ，Ｓｐ、Ｓｐ，Ｒｐ、及びＲｐ，Ｓｐ型が同様に得られる場合がある。好ましいプリンとしては、アデニン、グアニン、イノシン、ヒポキサンチン、キサンチン、イソグアニン等が挙げられるが、これらに限定されない。本発明のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮは、好ましくは、実質的に純粋なそれらのＳｐ，Ｓｐ、Ｒｐ，Ｒｐ、ＳｐＲｐ、またはＲｐ，Ｓｐ立体異性体を含めたホスホロチオエート類似体であり、最も好ましくは、実質的に純粋なそれらのＲｐ，Ｒｐ立体異性体である。
【０１９４】
本明細書で用いられる「アルキル」という用語は、２４個以下の炭素原子を含む飽和直鎖または分岐炭化水素ラジカルを指す。アルキル基の例としては、制限なく、メチル、エチル、プロピル、ブチル、イソプロピル、ｎ−ヘキシル、オクチル、デシル、ドデシル等が挙げられる。アルキル基は一般的に１〜約２４個の炭素原子、より一般的には１〜約１２個の炭素原子、より好ましくは１〜約６個の炭素原子を含む。本明細書で用いられる「低級アルキル」という用語は、１〜約６個の炭素原子を含む。本明細書で用いられるアルキル基は、任意に１つ以上のさらなる置換基を含んでよい。
【０１９５】
本明細書で用いられる「アルケニル」という用語は、２４個以下の炭素原子を含み、少なくとも１つの炭素間二重結合を有する直鎖または分岐炭化水素鎖ラジカルを指す。アルケニル基の例としては、制限なく、エテニル、プロペニル、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イル、１，３−ブタジエン等のジエン等が挙げられる。アルケニル基は一般的に２〜約２４個の炭素原子、より一般的には２〜約１２個の炭素原子、より好ましくは２〜約６個の炭素原子を含む。本明細書で用いられるアルケニル基は、任意に１つ以上のさらなる置換基を含んでよい。
【０１９６】
本明細書で用いられる「アルキニル」という用語は、２４個以下の炭素原子を含み、少なくとも１つの炭素間三重結合を有する直鎖または分岐炭化水素ラジカルを指す。アルキニル基の例としては、制限なく、エチニル、１−プロピニル、１−ブチニル等が挙げられる。アルキニル基は一般的に２〜約２４個の炭素原子、より一般的には２〜約１２個の炭素原子、より好ましくは２〜約６個の炭素原子を含む。本明細書で用いられるアルキニル基は、任意に１つ以上のさらなる置換基を含んでよい。
【０１９７】
本明細書で用いられる「アシル」という用語は、有機酸からヒドロキシル基を除去することによって生じるラジカルを指し、一般式−Ｃ（Ｏ）−Ｘを有し、Ｘは通常、脂肪族、脂環式、または芳香族である。例としては、脂肪族カルボニル、芳香族カルボニル、脂肪族スルホニル、芳香族スルフィニル、脂肪族スルフィニル、芳香族ホスフェート、脂肪族ホスフェート等が挙げられる。本明細書で用いられるアシル基は、任意にさらなる置換基を含んでよい。
【０１９８】
「脂環式」という用語は、環が脂肪族である環式環系を指す。該環系は、少なくとも１つの環が脂肪族である１つ以上の環を含み得る。好ましい脂環式は、当該環内に約５〜約９個の炭素原子を有する環を含む。本明細書で用いられる脂環式は、任意にさらなる置換基を含んでよい。
【０１９９】
本明細書で用いられる「脂肪族」という用語は、２４個以下の炭素原子を含み、任意の２炭素原子間の飽和状態が単結合、二重結合、もしくは三重結合である直鎖または分岐炭化水素ラジカルを指す。脂肪族基は、好ましくは、１から約２４個の炭素原子、より一般的には１〜約１２個の炭素原子、より好ましくは１〜約６個の炭素原子を含む。脂肪族基の直鎖または分岐鎖は、窒素、酸素、イオウ、及びリンを含めた１つ以上のヘテロ原子で中断されてもよい。かかるヘテロ原子で中断された脂肪族基としては、制限なく、ポリアルキレングリコール等のポリアルコキシ、ポリアミン、及びポリイミンが挙げられる。本明細書で用いられる脂肪族基は、任意にさらなる置換基を含んでよい。
【０２００】
本明細書で用いられる「アルコキシ」という用語は、アルキル基と酸素原子の間で形成され、該酸素原子が当該アルコキシ基を親分子へ結合させるために使用されるラジカルを指す。アルコキシ基の例としては、制限なく、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、ネオペントキシ、ｎ−ヘキソキシ等が挙げられる。本明細書で用いられるアルコキシ基は、任意にさらなる置換基を含んでよい。
【０２０１】
本明細書で用いられる「アミノアルキル」という用語は、アミノ置換Ｃ＼−Ｃｎアルキルラジカルを指す。該ラジカルのアルキル部分は、親分子と共有結合を形成する。該アミノ基は、任意の位置に位置することができ、該アミノアルキル基は、該アルキル及び／またはアミノ部分でさらなる置換基で置換され得る。
【０２０２】
本明細書で用いられる「アラルキル」及び「アリールアルキル」という用語は、Ｃ＼−Ｃｎアルキルラジカルに共有結合される芳香族基を指す。得られるアラルキル（またはアリールアルキル）基のアルキルラジカル部分は、親分子と共有結合を形成する。例としては、制限なく、ベンジル、フェネチル等が挙げられる。本明細書で用いられるアラルキル基は、該ラジカル基を形成するアルキル基、アリール基、またはその両方の基に結合するさらなる置換基を任意に含んでよい。
【０２０３】
本明細書で用いられる「アリール」及び「芳香族」という用語は、１つ以上の芳香環を有する単環式または多環式炭素環式環系ラジカルを指す。アリール基の例としては、制限なく、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、イデニル（ｉｄｅｎｙｌ）等が挙げられる。好ましいアリール環系は、１つ以上の環内に約５〜約２０個の炭素原子を有する。本明細書で用いられるアリール基は、任意にさらなる置換基を含んでよい。
【０２０４】
本明細書で用いられる「ハロ」及び「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素から選択される原子を指す。
【０２０５】
本明細書で用いられる「ヘテロアリール」及び「ヘテロ芳香族」という用語は、単環式または多環式芳香環、環系、もしくは縮合環系を含み、少なくとも１つの環が芳香族でかつ１つ以上のヘテロ原子を含むラジカルを指す。ヘテロアリールはまた、縮合環のうちの１つ以上がヘテロ原子を含まない系を含めた縮合環系を含めることも意図する。ヘテロアリール基は、通常、イオウ、窒素、または酸素から選択される１つの環原子を含む。ヘテロアリール基の例としては、制限なく、ピリジニル、ピラジニル、ピリミジニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、チオフェニル、フラニル、キノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、キノキサリニル等が挙げられる。ヘテロアリールラジカルは、親分子に直接、または脂肪族基もしくはヘテロ原子等の連結部分を介して結合することができる。本明細書で用いられるヘテロアリール基は、任意にさらなる置換基を含んでよい。
【０２０６】
本明細書で用いられる「ヘテロアリールアルキル」という用語は、共有結合されたＣ１−Ｃ１２アルキルラジカルをさらに含む、先に定義されたヘテロアリール基を指す。得られるヘテロアリールアルキル基のアルキルラジカル部分は、親分子と共有結合を形成することが可能である。例としては、制限なく、ピリジニルメチル、ピリミジニルエチル、ナフチリジニルプロピル（ｎａｐｔｈｙｒｉｄｉｎｙｌｐｒｏｐｙｌ）等が挙げられる。本明細書で用いられるヘテロアリールアルキル基は、該ヘテロアリールまたはアルキル部分の一方もしくは両方に、任意にさらなる置換基を含んでよい。
【０２０７】
上記のように、該モノ−またはジ−Ｆ  ＣＤＮ化合物はまた、該ＣＤＮのプロドラッグ形態、特にＣＤＮチオホスフェートを含む。プロドラッグは、薬物の物理化学的、生物薬剤学的、及び薬物動態学的特性を変更することができる。従来のプロドラッグは、インビボで活性薬物を形成する変換を受けることによって活性化される薬物に分類される。プロドラッグの発展の理由は、一般的に、親薬物に関連する不十分な水溶性、化学的不安定性、低経口バイオアベイラビリティ、血液脳関門透過性の欠如、及び高初回通過代謝である。適切なプロドラッグ部分は、例えば、“Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”  Ｊ．  Ｒａｕｔｉｃｏ，  Ｅｄ．，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  ２０１１に記載されている。
【０２０８】
ジチオジホスフェートの環状プリンジヌクレオチドに関して本明細書で用いられる「実質的に純粋な」という用語は、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＲＲ−ＣＤＮ化合物、例えば、式ＩＩの化合物に示されるリンのキラル中心での他の可能な立体化学に対して少なくとも７５％の純度であるＲｐ，ＲｐまたはＲｐ，Ｓｐ型を指す。例として、「実質的に純粋な３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）」は、Ｒｐ，Ｓｐ及びＳｐ，Ｓｐ型に関して、すなわち、３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）及び３’３’−ＳＳ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）に関して少なくとも７５％の純度である。好ましい実施形態では、実質的に純粋な環状プリンジヌクレオチドは、少なくとも８５％の純度、少なくとも９０％の純度、少なくとも９５％の純度、少なくとも９７％の純度、及び少なくとも９９％の純度である。本発明の実質的に純粋な環状プリンジヌクレオチド調製物は「立体化学的に純粋」であるが、これらのキラル中心で特定の立体化学を有する調製物内のすべてのＣＤＮが他の点でも同一であることを示すことを意図しない。例えば、実質的に純粋な環状プリンジヌクレオチド調製物は、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）の組合せを含む場合があってもなお実質的に純粋な環状プリンジヌクレオチド調製物である。かかる調製物はまた、該調製物内のすべてのＣＤＮがこれらのキラル中心で特定の立体化学を有するという条件の下、患者の治療に効果的な後述する他の成分を含んでよい。
【０２０９】
本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物及びそれらの組成物は、宿主に対して、単独で、または医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて、適切な免疫反応を誘導、修飾、または刺激するのに十分な量投与することができる。該免疫反応は、制限なく、特異的免疫反応、非特異的免疫反応、特異的及び非特異的反応の両方、自然反応、一次免疫反応、適応免疫、二次免疫反応、記憶免疫反応、免疫細胞活性化、免疫細胞増殖、免疫細胞分化、ならびにサイトカイン発現を含むことができる。特定の実施形態では、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物及びそれらの組成物は、１つ以上の所定の抗原；アジュバント；ＣＴＬＡ−４及びＰＤ−１経路のアンタゴニスト、脂質、リポソーム、化学療法剤、免疫調節性細胞株等に対する免疫反応を刺激する目的のワクチンを含む１つ以上のさらなる組成物と併用して投与される。
【０２１０】
本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物及びそれらの組成物は、さらなる治療または予防組成物もしくは方法の前、後、及び／またはそれと同時に投与してよい。これらとしては、制限なく、Ｂ７副刺激分子、インターロイキン−２、インターフェロン−γ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣＴＬＡ−４アンタゴニスト、ＯＸ−４０／ＯＸ−４０リガンド、ＣＤ４０／ＣＤ４０リガンド、サルグラモスチム、レバミゾール、ワクシニアウイルス、カルメット・ゲラン桿菌（ＢＣＧ）、リポソーム、ミョウバン、フロイントの完全または不完全アジュバント、解毒エンドトキシン、鉱油、界面活性物質、例えば、リポレシチン（ｌｉｐｏｌｅｃｉｔｈｉｎ）、プルロニックポリオール、ポリアニオン、ペプチド、及び油または炭化水素エマルジョンが挙げられる。抗体反応に対して優先的に細胞傷害性Ｔ細胞反応を刺激するＴ細胞の免疫反応を誘導する担体が好ましいが、両方の型の反応を刺激するものも同様に使用することができる。該薬剤がポリペプチドの場合、該ポリペプチドをそれ自体、または該ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを投与することができる。該担体は、細胞、例えば、抗原提示細胞（ＡＰＣ）または樹状細胞の場合がある。抗原提示細胞としては、マクロファージ、樹状細胞、及びＢ細胞等の細胞型が挙げられる。他の専門的な抗原提示細胞としては、単球、辺縁帯クッパー細胞、ミクログリア、ランゲルハンス細胞、櫛形樹状細胞、濾胞樹状細胞、及びＴ細胞が挙げられる。通性抗原提示細胞も使用することができる。通性抗原提示細胞の例としては、星状細胞、濾胞細胞、内皮、及び線維芽細胞が挙げられる。該担体は、ポリペプチドを発現するように形質転換された細菌細胞でもよいし、ワクチン接種された個体の細胞で後に発現されるポリヌクレオチドを送達するように形質転換された細菌細胞でもよい。水酸化アルミニウムまたはリン酸アルミニウム等のアジュバントを添加して、免疫反応を始動、増強、または延長するワクチンの能力を高めることができる。別々に、または該記載の組成物と組み合わせて使用されるさらなる物質、例えば、サイトカイン、ケモカイン、及び細菌の核酸配列、例えばＣｐＧ、トール様受容体（ＴＬＲ）９アゴニストならびにＴＬＲ２、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９に対するさらなるアゴニスト、リポタンパク質、ＬＰＳ、モノホスホリルリピドＡ、リポテイコ酸、イミキモド、レシキモド、ならびにさらにレチノイン酸誘導性遺伝子Ｉ（ＲＩＧ−Ｉ）アゴニスト、例えばポリＩ：Ｃもまた潜在的なアジュバントである。他の代表的なアジュバントの例としては、Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ及びＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐａｒｖｕｍの外皮から精製される均一なサポニンを含む合成アジュバントＱＳ−２１が挙げられる（ＭｃＣｕｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ，  １９７９；  ４３：１６１９）。アジュバントは最適化の対象であることが理解されよう。換言すれば、当業者は、通常の実験を行って、使用するために最良のアジュバントを決定することができる。
【０２１１】
さらなる治療薬との併用方法は、当技術分野で周知である（Ｈａｒｄｍａｎ，  ｅｔ  ａｌ．  （ｅｄｓ．）  （２００１）  Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，  １０ｔｈ  ｅｄ．，  ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ；  Ｐｏｏｌｅ  ａｎｄ  Ｐｅｔｅｒｓｏｎ  （ｅｄｓ．）  （２００１）  Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ｆｏｒ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  Ｐｈｉｌａ．，  ＰＡ；  Ｃｈａｂｎｅｒ  ａｎｄ  Ｌｏｎｇｏ  （ｅｄｓ．）  （２００１）  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ，  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  Ｐｈｉｌａ．，  ＰＡ）。一般に、併用または一緒の投与とは、２つ以上の薬剤で対象を治療することを示し、該薬剤は同時に投与することも、異なる時間に投与することもできる。例えば、かかる薬剤は、基本的に同時でも異なる時間でもよく、投与経路が同じでも異なってもよい個別の投与として単一の対象に送達され得る。かかる薬剤は、それらが同じ投与経路で同時に投与されるように、同じ投与（例えば、同じ処方）で単一の対象に送達してもよい。
【０２１２】
本発明の化合物のアジュバント特性のため、それらの使用はまた、他のワクチン、アジュバント、抗原、抗体、及び免疫変調成分を含めた他の治療法と組み合わせてもよい。例を以下に示す。
【０２１３】
アジュバント
本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物及びそれらの組成物に加えて、本発明の組成物または方法はさらに、それらの性質のために免疫系を刺激またはさもなければ利用するように作用して標的腫瘍細胞（複数可）上に存在するがん抗原に応答することができる１つ以上のさらなる物質を含み得る。かかるアジュバントとしては、脂質、リポソーム、自然免疫を誘導する不活化細菌（例えば、不活化または弱毒化Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）、トール様受容体（ＴＬＲ）、（ＮＯＤ）様受容体（ＮＬＲ）、レチノイン酸誘導性遺伝子系（ＲＩＧ）−Ｉ様受容体（ＲＬＲ）、Ｃ型レクチン受容体（ＣＬＲ）、及び／または病原体関連分子パターン（「ＰＡＭＰ」）を介して自然免疫活性化を媒介する組成物が挙げられるがこれらに限定されない。ＰＡＭＰの例としては、リポタンパク質、リポポリペプチド、ペプチドグリカン、ザイモサン、リポ多糖、ナイセリア・ポリン、フラジェリン、プロフィリン、ガラクトセラミド、ムラミルジペプチドが挙げられる。ペプチドグリカン、リポタンパク質、及びリポテイコ酸は、グラム陽性の細胞壁成分である。リポ多糖は、ほとんどの細菌によって発現され、ＭＰＬは１つの例である。フラジェリンは、病原性及び共生細菌によって分泌される細菌性鞭毛の構造成分を指す。α−ガラクトシルセラミド（α−ＧａｌＣｅｒ）は、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞の活性化因子である。ムラミルジペプチドは、すべての細菌に共通の生物活性ペプチドグリカンモチーフである。このリストは限定することを意図しない。好ましいアジュバント組成物を以下に記載する。
【０２１４】
免疫チェックポイント阻害剤
本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ＣＴＬＡ−４経路アンタゴニスト、ＰＤ−１経路アンタゴニスト、Ｔｉｍ−３経路アンタゴニスト、Ｖｉｓｔａ経路アンタゴニスト、ＢＴＬＡ経路アンタゴニスト、ＬＡＧ−３経路アンタゴニスト、またはＴＩＧＩＴ経路アンタゴニストからなる群から選択される免疫チェックポイント阻害剤等の免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて使用することができる。いくつかの実施形態では、該免疫チェックポイント阻害剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗Ｔｉｍ−３抗体、抗Ｖｉｓｔａ抗体、抗ＢＴＬＡ抗体、抗ＬＡＧ−３抗体、または抗ＴＩＧＩＴ抗体からなる群から選択される。
【０２１５】
本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ＣＴＬＡ−４経路アンタゴニストと組み合わせて使用することができる。いくつかの実施形態では、該組合せは、充実性腫瘍または血液悪性腫瘍を治療するために用いられる。ＣＴＬＡ−４は、適応免疫反応の重要な負の調節因子であると考えられる。活性化Ｔ細胞はＣＴＬＡ−４を上方制御し、これが抗原提示細胞上のＣＤ８０及びＣＤ８６にＣＤ２８より高い親和性で結合し、ひいてはＴ細胞刺激、ＩＬ−２遺伝子発現、及びＴ細胞増殖を抑制する。ＣＴＬＡ４遮断の抗腫瘍効果は、マウスの結腸がん、転移性前立腺がん、及び転移性メラノーマのモデルで認められている。いくつかの実施形態では、ＣＴＬＡ−４経路アントゴニスト（ａｎｔｏｇｏｎｉｓｔ）は、トレメリムマブ及びイピリムマブからなる群から選択される抗ＣＴＬＡ−４抗体分子である。いくつかの実施形態では、該抗ＣＴＬＡ−４抗体は、例えば、米国特許第５，８１１，０９７号に開示の抗ＣＴＬＡ−４抗体である。
【０２１６】
イピリムマブ（Ｙｅｒｖｏｙ（商標）、ＣＴＬＡ−４抗体、ＭＤＸ−０１０としても知られる、ＣＡＳ番号４７７２０２−００−９）及びトレメリムマブ（かつてはチシリムマブとして知られていた、Ｐｆｉｚｅｒより入手可能なＩｇＧ２モノクローナル抗体、ＣＰ−６７５，２０６）は、ヒト化モノクローナル抗体であり、ヒトＣＴＬＡ４に結合し、そのＣＤ８０及びＣＤ８６との相互作用を妨害する。イピリムマブ及びトレメリムマブを用いたフェーズＩ及びＩＩの試験でがん患者での臨床活性が実証された。同様の方法で標的化され得る他の負の免疫調節因子としては、プログラム細胞死１（ＰＤ−１）、Ｂ及びＴリンパ球アッテネーター（Ｂ  ａｎｄ  Ｔ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  ａｔｔｅｎｕａｔｏｒ）、形質転換成長因子ベータβ、インターロイキン−１０、ならびに血管内皮増殖因子が挙げられる。
【０２１７】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、抗ＣＴＬＡ−４抗体及び抗ＰＤ−１抗体と組み合わせて使用することができる。１つの実施形態では、該組合せは、例えば本明細書に記載の抗ＰＤ−１抗体分子、及び抗ＣＴＬＡ−４抗体、例えばイピリムマブを含む。使用することができる例示的な用量としては、抗ＰＤ−１抗体分子の用量約１〜１０ｍｇ／ｋｇ、例えば、３ｍｇ／ｋｇ、及び抗ＣＴＬＡ−４抗体、例えばイピリムマブの用量約３ｍｇ／ｋｇが挙げられる。
【０２１８】
本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ＰＤ−１経路アンタゴニストと組み合わせて使用することができる。いくつかの実施形態では、該組合せは、充実性腫瘍または血液悪性腫瘍を治療するために用いられる。ＰＤ−１は、活性化Ｔ細胞上で発現される適応免疫反応の別の負の調節因子である。ＰＤ−１は、Ｂ７−Ｈ１及びＢ７−ＤＣに結合し、ＰＤ−１の該結合がＴ細胞活性化を抑制する。抗腫瘍効果は、ＰＤ−１経路遮断で実証されている。抗ＰＤ−１抗体分子（例えば、ニボルマブ（Ｏｐｄｉｖｏ（商標）、ペンブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ（商標））、及びピジリズマブ）、ならびにＡＭＰ−２２４は、ＰＤ−１経路遮断剤の例であることが文献に報告されており、本発明で用途を見出し得る。いくつかの実施形態では、該ＰＤ−１経路アンタゴニストは、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、またはピジリズマブからなる群から選択される抗ＰＤ−１抗体分子である。
【０２１９】
いくつかの実施形態では、該抗ＰＤ−１抗体はニボルマブである。ニボルマブの代替名には、ＭＤＸ−１１０６、ＭＤＸ−１１０６−０４、ＯＮＯ−４５３８、またはＢＭＳ−９３６５５８が含まれる。いくつかの実施形態では、該抗ＰＤ−１抗体はニボルマブ（ＣＡＳ登録番号：９４６４１４−９４−４）である。ニボルマブは、完全ヒトＩｇＧ４モノクローナル抗体であり、ＰＤ１を特異的に遮断する。ニボルマブ（クローン５Ｃ４）及び特異的にＰＤ１に結合する他のヒトモノクローナル抗体は、ＵＳ８，００８，４４９及びＷＯ２００６／１２１１６８に開示されている。１つの実施形態では、ＰＤ−１の阻害剤はニボルマブであり、本明細書に開示の配列（または、それと実質的に同一またはそれに類似した配列、例えば、指定の配列に対して、少なくとも８５％、９０％、９５％同一のもしくはそれより高い水準の配列）を有する。
【０２２０】
ニボルマブの重鎖アミノ酸配列は以下の通りである：
0006692826.tif 000062
【０２２１】
ニボルマブの軽鎖アミノ酸配列は以下の通りである：
0006692826.tif 000063
【０２２２】
いくつかの実施形態では、該抗ＰＤ−１抗体はペンブロリズマブである。ペンブロリズマブ（ランブロリズマブ、ＭＫ−３４７５、ＭＫ０３４７５、ＳＣＨ−９００４７５、またはＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）とも呼ばれる；Ｍｅｒｃｋ）は、ＰＤ−１に結合するヒト化ＩｇＧ４モノクローナル抗体である。ペンブロリズマブ及び他のヒト化抗ＰＤ−１抗体は、Ｈａｍｉｄ，  Ｏ．  ｅｔ  ａｌ．  （２０１３）  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ３６９  （２）：  １３４−４４，ＵＳ８，３５４，５０９、及びＷＯ２００９／１１４３３５に開示されている。１つの実施形態では、ＰＤ−１の該阻害剤は、ペンブロリズマブであり、本明細書に開示の配列（または、それと実質的に同一またはそれに類似した配列、例えば、指定の配列に対して、少なくとも８５％、９０％、９５％同一のもしくはそれより高い水準の配列）を有する。
【０２２３】
ペンブロリズマブの重鎖アミノ酸配列は以下の通りである：
0006692826.tif 000064
【０２２４】
ペンブロリズマブの軽鎖アミノ酸配列は以下の通りである：
0006692826.tif 000065
【０２２５】
いくつかの実施形態では、該ＰＤ−１抗体はピジリズマブである。ピジリズマブ（ＣＴ−０１１；Ｃｕｒｅ  Ｔｅｃｈ）は、ＰＤ−１に結合するヒト化ＩｇＧ１ｋモノクローナル抗体である。ピジリズマブ及び他のヒト化抗ＰＤ−１モノクローナル抗体は、ＷＯ２００９／１０１６１１に開示されている。
【０２２６】
いくつかの実施形態では、該抗ＰＤ−１抗体はＡＭＰ５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、またはＵＳ８，６０９，０８９、ＵＳ２０１００２８３３０、及び／またはＵＳ２０１２０１１４６４９に開示の抗ＰＤ−１抗体である。
【０２２７】
いくつかの実施形態では、該ＰＤ−１経路アンタゴニストは、２０１５年７月３０日公開の「Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｔｏ  ＰＤ−１  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」と題されたＵＳ２０１５／０２１０７６９に開示されている抗ＰＤ−１抗体分子である。
【０２２８】
１つの実施形態では、該抗ＰＤ−１抗体分子には、少なくとも１つまたは２つの重鎖可変ドメイン（任意に定常領域を含む）、少なくとも１つまたは２つの軽鎖可変ドメイン（任意に定常領域を含む）、またはその両方が含まれ、これには、ＢＡＰ０４９−クローン−Ａ、ＢＡＰ０４９−クローン−Ｂ、ＢＡＰ０４９−クローン−Ｃ、ＢＡＰ０４９−クローン−Ｄ、もしくはＢＡＰ０４９−クローン−Ｅのアミノ酸配列；またはＵＳ２０１５／０２１０７６９の表１に記載の、もしくはその表１中のヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列；または上記配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）の配列が含まれる。該抗ＰＤ−１抗体分子は、任意に、ＵＳ２０１５／０２１０７６９の表４に示される、重鎖、軽鎖、もしくはその両方からのリーダー配列；またはそれと実質的に同一の配列を含む。ＵＳ２０１５／０２１０７６９の開示は、その表４のアミノ酸配列及びヌクレオチド配列に関して、参照することによって本明細書に組み込まれる。
【０２２９】
さらに別の実施形態では、該抗ＰＤ−１抗体分子は、ＵＳ２０１５／０２１０７６９に記載の抗体、例えば、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０１、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０２、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０３、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０４、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０５、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０６、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０７、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０８、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０９、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１０、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１１、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１２、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１３、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１４、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１５、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１６、ＢＡＰ０４９−クローン−Ａ、ＢＡＰ０４９−クローン−Ｂ、ＢＡＰ０４９−クローン−Ｃ、ＢＡＰ０４９−クローン−Ｄ、またはＢＡＰ０４９−クローン−Ｅのいずれかから選択される抗体の重鎖可変領域及び／または軽鎖可変領域から少なくとも１、２、または３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）；またはその中の表１に記載の、もしくはその中の表１中のヌクレオチド配列によってコードされるもの；または上記配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％またはそれ以上同一）の配列を含む。
【０２３０】
さらに別の実施形態では、該抗ＰＤ−１抗体分子には、ＵＳ２０１５／０２１０７６９の表１に示される、またはその表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域から少なくとも１、２、または３つのＣＤＲ（もしくは集合的にすべてのＣＤＲ）が含まれる。１つの実施形態では、該ＣＤＲ（もしくは集合的にすべてのＣＤＲ）の１つ以上は、表１に示される、またはその中の表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列に対して、１、２、３、４、５、６、またはそれ以上の変化、例えばアミノ酸の置換または欠失を有する。
【０２３１】
さらに別の実施形態では、該抗ＰＤ−１抗体分子には、ＵＳ２０１５／０２１０７６９の表１に示される、またはその表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域から少なくとも１、２、または３つのＣＤＲ（もしくは集合的にすべてのＣＤＲ）が含まれる。１つの実施形態では、該ＣＤＲ（もしくは集合的にすべてのＣＤＲ）の１つ以上は、その中の表１に示される、またはその表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列に対して、１、２、３、４、５、６、またはそれ以上の変化、例えばアミノ酸の置換または欠失を有する。特定の実施形態では、該ＰＤ−１抗体分子は、軽鎖ＣＤＲに置換、例えば、該軽鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及び／またはＣＤＲ３に１つ以上の置換を含む。１つの実施形態では、該抗ＰＤ−１抗体分子は、該軽鎖ＣＤＲ３に、該軽可変領域の１０２位で置換、例えば、表１の該軽可変領域の１０２位でシステインからチロシン、またはシステインからセリン残基への置換を含む（例えば、マウスもしくはキメラ、未修飾に対して配列番号１６もしくは２４；または、修飾配列に対して配列番号３４、４２、４６、５４、５８、６２、６６、７０、７４、もしくは７８のいずれか）。
【０２３２】
別の実施形態では、該抗ＰＤ−１抗体分子は、ＵＳ２０１５／０２１０７６９の表１に示される、またはその表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖可変領域から少なくとも１、２、３、４、５、もしくは６つのＣＤＲ（もしくは集合的にすべてのＣＤＲ）を含む。１つの実施形態では、該ＣＤＲ（もしくは集合的にすべてのＣＤＲ）の１つ以上は、その中の表１に示される、またはその表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列に対して、１、２、３、４、５、６、またはそれ以上の変化、例えばアミノ酸の置換または欠失を有する。
【０２３３】
１つの実施形態では、該抗ＰＤ−１抗体分子は：（ａ）各々がＵＳ２０１５／０２１０７６９の表１に開示されている、配列番号４のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに配列番号１３のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；（ｂ）各々がＵＳ２０１５／０２１０７６９の表１に開示されている、配列番号１から選択されるＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列；配列番号２のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列；及び配列番号３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ；ならびに配列番号１０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬ；（ｃ）各々がＵＳ２０１５／０２１０７６９の表１に開示されている、配列番号２２４のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ；ならびに配列番号１３のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬ；または（ｄ）各々がＵＳ２０１５／０２１０７６９の表１に開示されている、配列番号２２４のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列；配列番号２のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列；及び配列番号３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ；ならびに配列番号１０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
【０２３４】
別の実施形態では、該抗ＰＤ−１抗体分子は、各々がＵＳ２０１５／０２１０７６９の表１に開示されている、（ｉ）配列番号１、配列番号４、または配列番号２２４から選択されるＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列；配列番号２または配列番号５のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列；及び配列番号３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに（ｉｉ）配列番号１０または配列番号１３のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１１または配列番号１４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３２または配列番号３３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
【０２３５】
いくつかの実施形態では、該ＰＤ−１経路アンタゴニストは、イムノアドヘシン（例えば、定常領域（例えば、免疫グロブリン配列のＦｃ領域）に融合するＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２の細胞外もしくはＰＤ−１結合部分を含むイムノアドヘシン）である。いくつかの実施形態では、該ＰＤ−１阻害剤は、ＡＭＰ−２２４（Ｂ７−ＤＣＩｇ；Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ；例えば、ＷＯ２０１０／０２７８２７及びＷＯ２０１１／０６６３４２に開示されている）であり、ＰＤ−１とＢ７−Ｈ１間の相互作用を阻害するＰＤ−Ｌ２Ｆｃ融合可溶性受容体である。
【０２３６】
いくつかの実施形態では、該ＰＤ−１経路アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２阻害剤である。いくつかの実施形態では、該ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２阻害剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体または抗ＰＤ−Ｌ２抗体である。いくつかの実施形態では、該ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ−００１０７１８Ｃ、またはＭＤＸ−１１０５から選択される。いくつかの実施形態では、該ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体ＭＳＢ００１０７１８Ｃである。ＭＳＢ００１０７１８Ｃ（Ａ０９−２４６−２とも呼ばれる；Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ）は、ＰＤ−Ｌ１に結合するモノクローナル抗体である。ＭＳＢ００１０７１８Ｃ及び他のヒト化抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＷＯ２０１３／０７９１７４に開示されており、そこに開示の配列（または、それと実質的に同一もしくはそれに類似した配列、例えば、指定の配列に対して、少なくとも８５％、９０％、９５％同一のもしくはそれより高い水準の配列）を有する。
【０２３７】
ＭＳＢ００１０７１８Ｃの重鎖アミノ酸配列（ＷＯ２０１３／０７９１７４に開示の配列番号２４）は少なくとも以下を含む：
0006692826.tif 000066
【０２３８】
ＭＳＢ００１０７１８Ｃの軽鎖アミノ酸配列（ＷＯ２０１３／０７９１７４に開示の配列番号２５）は少なくとも以下を含む：
0006692826.tif 000067
【０２３９】
１つの実施形態では、該ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０である。該ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０抗体は、ＷＯ２０１０／０７７６３４に記載の抗ＰＤ−Ｌ１抗体（それぞれ配列番号２０及び２１に示される重鎖及び軽鎖可変領域）であり、そこに開示の配列（または、それと実質的に同一またはそれに類似した配列、例えば、指定の配列に対して、少なくとも８５％、９０％、９５％同一のもしくはそれより高い水準の配列）を有する。
【０２４０】
１つの実施形態では、該ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＭＤＸ−１１０５である。ＢＭＳ−９３６５５９としても知られるＭＤＸ−１１０５は、ＷＯ２００７／００５８７４に記載の抗ＰＤ−Ｌ１抗体であり、そこに開示の配列（または、それと実質的に同一またはそれに類似した配列、例えば、指定の配列に対して、少なくとも８５％、９０％、９５％同一のもしくはそれより高い水準の配列）を有する。
【０２４１】
１つの実施形態では、該ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＭＤＰＬ３２８０Ａ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）である。ＭＤＰＬ３２８０Ａは、ＰＤ−Ｌ１に結合するヒトＦｃ最適化ＩｇＧ１モノクローナル抗体である。ＭＤＰＬ３２８０Ａ及び他のＰＤ−Ｌ１に対するヒトモノクローナル抗体は、米国特許第７，９４３，７４３号及び米国公開第２０１２００３９９０６号に開示されている。
【０２４２】
他の実施形態では、該ＰＤ−Ｌ２阻害剤はＡＭＰ−２２４である。ＡＭＰ−２２４は、ＰＤ１とＢ７−Ｈ１間の相互作用を阻害するＰＤ−Ｌ２Ｆｃ融合可溶性受容体である（Ｂ７−ＤＣＩｇ；Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ；例えば、ＷＯ２０１０／０２７８２７及びＷＯ２０１１／０６６３４２に開示されている。
【０２４３】
本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ＴＩＭ−３経路アンタゴニストと組み合わせて使用することができる。いくつかの実施形態では、該組合せは、充実性腫瘍または血液悪性腫瘍の治療に用いられる。いくつかの実施形態では、該ＴＩＭ−３経路アンタゴニストは、抗ＴＩＭ−３抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＭ−３抗体分子は、２０１５年８月６日公開の「Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｔｏ  ＴＩＭ−３  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」と題されたＵＳ２０１５／０２１８２７４に開示されている。
【０２４４】
１つの実施形態では、該抗ＴＩＭ−３抗体分子は、少なくとも１つまたは２つの重鎖可変ドメイン（任意に定常領域を含む）、少なくとも１つまたは２つの軽鎖可変ドメイン（任意に定常領域を含む）、またはその両方を含み、それらは、ＡＢＴＩＭ３、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０１、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０２、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０３、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０４、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０５、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０６、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０７、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０８、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０９、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１０、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１１、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１２、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１３、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１４、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１５、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１６、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１７、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１８、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１９、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ２０、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ２１、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ２２、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ２３のアミノ酸配列；またはＵＳ２０１５／０２１８２７４の表１〜４に記載の、もしくはその表１〜４中のヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列；または上記配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％またはそれ以上同一）の配列が含まれる。該抗ＴＩＭ−３抗体分子は、任意に、ＵＳ２０１５／０２１８２７４に示される重鎖、軽鎖、またはその両方からのリーダー配列；または実質的にそれと同一の配列を含む。ＵＳ２０１５／０２１８２７４の開示は、その表１〜４のアミノ酸配列及びヌクレオチド配列に関して、参照することによって本明細書に組み込まれる。
【０２４５】
さらに別の実施形態では、該抗ＴＩＭ−３抗体分子は、ＵＳ２０１５／０２１８２７４に記載の抗体、例えば、ＡＢＴＩＭ３、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０１、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０２、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０３、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０４、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０５、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０６、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０７、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０８、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ０９、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１０、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１１、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１２、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１３、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１４、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１５、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１６、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１７、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１８、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ１９、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ２０、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ２１、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ２２、ＡＢＴＩＭ３−ｈｕｍ２３のいずれかから選択される抗体の重鎖可変領域及び／または軽鎖可変領域から少なくとも１、２、または３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）；もしくは、ＵＳ２０１５／０２１８２７４の表１〜４に記載の、もしくはその表１〜４中のヌクレオチド配列によってコードされるもの；または上記配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％またはそれ以上同一）の配列を含む。
【０２４６】
さらに別の実施形態では、該抗ＴＩＭ−３抗体分子は、ＵＳ２０１５／０２１８２７４の表１〜４に示される、またはその表１〜４に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域から少なくとも１、２、または３つのＣＤＲ（もしくは集合的にすべてのＣＤＲ）を含む。１つの実施形態では、該ＣＤＲ（もしくは集合的にすべてのＣＤＲ）の１つ以上は、その中の表１〜４に示される、またはその表１〜４に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列に対して、１、２、３、４、５、６、またはそれ以上の変化、例えばアミノ酸の置換または欠失を有する。
【０２４７】
さらに別の実施形態では、該抗ＴＩＭ−３抗体分子は、ＵＳ２０１５／０２１８２７４の表１〜４に示される、またはその表１〜４に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域から少なくとも１、２、または３つのＣＤＲ（もしくは集合的にすべてのＣＤＲ）を含む。１つの実施形態では、該ＣＤＲ（もしくは集合的にすべてのＣＤＲ）の１つ以上は、その中の表１〜４に示される、またはその表１〜４に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列に対して、１、２、３、４、５、６、またはそれ以上の変化、例えばアミノ酸の置換または欠失を有する。特定の実施形態では、該抗ＴＩＭ−３抗体分子は、軽鎖ＣＤＲに置換、例えば、該軽鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及び／またはＣＤＲ３に１つ以上の置換を含む。
【０２４８】
別の実施形態では、該抗ＴＩＭ−３抗体分子は、ＵＳ２０１５／０２１８２７４の表１〜４に示される、またはその表１〜４に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖可変領域から少なくとも１、２、３、４、５、または６つのＣＤＲ（もしくは集合的にすべてのＣＤＲ）を含む。１つの実施形態では、該ＣＤＲ（もしくは集合的にすべてのＣＤＲ）の１つ以上は、その中の表１〜４に示される、またはその表１〜４に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列に対して、１、２、３、４、５、６、またはそれ以上の変化、例えばアミノ酸の置換または欠失を有する。
【０２４９】
１つの実施形態では、該抗ＴＩＭ−３抗体分子は：（ａ）各々がＵＳ２０１５／０２１８２７４の表１〜４に開示されている、配列番号９から選択されるＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列；配列番号１０のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列；及び配列番号５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに配列番号１２のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１３のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号１４のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；（ｂ）各々がＵＳ２０１５／０２１８２７４の表１〜４に開示されている、配列番号３から選択されるＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列；配列番号４のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列；及び配列番号５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ；ならびに配列番号６のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号７のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号８のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬ；（ｃ）各々がＵＳ２０１５／０２１８２７４の表１〜４に開示されている、配列番号９から選択されるＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２５のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ；ならびに配列番号１２のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１３のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号１４のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬ；（ｄ）各々がＵＳ２０１５／０２１８２７４の表１〜４に開示されている、配列番号３から選択されるＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列；配列番号２４のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列；及び配列番号５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ；ならびに配列番号６のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号７のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号８のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬ；（ｅ）各々がＵＳ２０１５／０２１８２７４の表１〜４に開示されている、配列番号９から選択されるＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列；配列番号３１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列；及び配列番号５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ；ならびに配列番号１２のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１３のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号１４のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬ；または（ｆ）各々がＵＳ２０１５／０２１８２７４の表１〜４に開示されている、配列番号３から選択されるＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列；配列番号３０のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列；及び配列番号５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ；ならびに配列番号６のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号７のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号８のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
【０２５０】
いくつかの実施形態では、該ＴＩＭ−３経路アンタゴニストは、米国特許第８，５５２，１５６号、ＷＯ２０１１／１５５６０７、ＥＰ２５８１１１３、または米国公開第２０１４／０４４７２８に開示の抗ＴＩＭ−３抗体である。
【０２５１】
本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ＬＡＧ−３経路アンタゴニストと組み合わせて使用することができる。いくつかの実施形態では、該組合せは、充実性腫瘍または血液悪性腫瘍の治療に用いられる。いくつかの実施形態では、該ＬＡＧ−３経路アンタゴニストは抗ＬＡＧ−３抗体である。いくつかの実施形態では、該抗ＬＡＧ−３抗体分子は、２０１５年３月１３日に出願され、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｔｏ  ＬＡＧ−３  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」と題されたＵＳ２０１５／０２５９４２０に開示されている。
【０２５２】
１つの実施形態では、該抗ＬＡＧ−３抗体分子は、少なくとも１つまたは２つの重鎖可変ドメイン（任意に定常領域を含む）、少なくとも１つまたは２つの軽鎖可変ドメイン（任意に定常領域を含む）、またはその両方を含み、それらは、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０１、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０２、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０３、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０４、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０５、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０６、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０７、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０８、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０９、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１０、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１１、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１２、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１３、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１４、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１５、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１６、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１７、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１８、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１９、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ２０、ｈｕＢＡＰ０５０（Ｓｅｒ）（例えば、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０１−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０２−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０３−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０４−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０５−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０６−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０７−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０８−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０９−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１０−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１１−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１２−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１３−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１４−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１５−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１８−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１９−Ｓｅｒ、もしくはＢＡＰ０５０−ｈｕｍ２０−Ｓｅｒ）、ＢＡＰ０５０−クローン−Ｆ、ＢＡＰ０５０−クローン−Ｇ、ＢＡＰ０５０−クローン−Ｈ、ＢＡＰ０５０−クローン−Ｉ、もしくはＢＡＰ０５０−クローン−Ｊのいずれかのアミノ酸配列；またはＵＳ２０１５／０２５９４２０の表１に記載の、もしくはその表１中のヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列；または上記配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）の配列を含む。ＵＳ２０１５／０２５９４２０の開示は、その表１のアミノ酸配列及びヌクレオチド配列に関して、参照することによって本明細書に組み込まれる。
【０２５３】
さらに別の実施形態では、該抗ＬＡＧ−３抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０１、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０２、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０３、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０４、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０５、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０６、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０７、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０８、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０９、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１０、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１１、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１２、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１３、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１４、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１５、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１６、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１７、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１８、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１９、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ２０、ｈｕＢＡＰ０５０（Ｓｅｒ）（例えば、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０１−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０２−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０３−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０４−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０５−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０６−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０７−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０８−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ０９−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１０−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１１−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１２−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１３−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１４−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１５−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１８−Ｓｅｒ、ＢＡＰ０５０−ｈｕｍ１９−Ｓｅｒ、もしくはＢＡＰ０５０−ｈｕｍ２０−Ｓｅｒ）、ＢＡＰ０５０−クローン−Ｆ、ＢＡＰ０５０−クローン−Ｇ、ＢＡＰ０５０−クローン−Ｈ、ＢＡＰ０５０−クローン−Ｉ、もしくはＢＡＰ０５０−クローン−Ｊのいずれかから選択される抗体の重鎖可変領域及び／または軽鎖可変領域から少なくとも１、２、または３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）；もしくは、ＵＳ２０１５／０２５９４２０の表１に記載の、もしくはその表１中のヌクレオチド配列によってコードされるもの；または上記配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％またはそれ以上同一）の配列を含む。
【０２５４】
さらに別の実施形態では、該抗ＬＡＧ−３抗体分子は、ＵＳ２０１５／０２５９４２０の表１に示される、またはその表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域から少なくとも１、２、もしくは３つのＣＤＲ（もしくは集合的にすべてのＣＤＲ）を含む。１つの実施形態では、該ＣＤＲ（もしくは集合的にすべてのＣＤＲ）の１つ以上は、その中の表１に示される、またはその表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列に対して、１、２、３、４、５、６、もしくはそれ以上の変化、例えばアミノ酸の置換または欠失を有する。
【０２５５】
さらに別の実施形態では、該抗ＬＡＧ−３抗体分子は、ＵＳ２０１５／０２５９４２０の表１に示される、またはその表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域から少なくとも１、２、もしくは３つのＣＤＲ（もしくは集合的にすべてのＣＤＲ）を含む。１つの実施形態では、該ＣＤＲ（もしくは集合的にすべてのＣＤＲ）の１つ以上は、その中の表１に示される、またはその表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列に対して、１、２、３、４、５、６、もしくはそれ以上の変化、例えばアミノ酸の置換または欠失を有する。特定の実施形態では、該抗ＰＤ−Ｌ１抗体分子は、軽鎖ＣＤＲに置換、例えば、該軽鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及び／またはＣＤＲ３に１つ以上の置換を含む。
【０２５６】
別の実施形態では、該抗ＬＡＧ−３抗体分子は、ＵＳ２０１５／０２５９４２０の表１に示される、またはその表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖可変領域から少なくとも１、２、３、４、５、もしくは６つのＣＤＲ（または集合的にすべてのＣＤＲ）を含む。１つの実施形態では、該ＣＤＲ（または集合的にすべてのＣＤＲ）の１つ以上は、その中の表１に示される、またはその表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列に対して、１、２、３、４、５、６、またはそれ以上の変化、例えばアミノ酸の置換または欠失を有する。
【０２５７】
１つの実施形態では、該抗ＬＡＧ−３抗体分子は、各々がＵＳ２０１５／０２５９４２０の表１に開示されている、（ｉ）配列番号１、配列番号４、または配列番号２８６から選択されるＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列；配列番号２のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列；及び配列番号３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに（ｉｉ）各々がＵＳ２０１５／０２５９４２０の表１に開示されている、配列番号１０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号１２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
【０２５８】
別の実施形態では、該抗ＬＡＧ−３抗体分子は、各々がＵＳ２０１５／０２５９４２０の表１に開示されている、（ｉ）配列番号１、配列番号４、または配列番号２８６から選択されるＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列；配列番号５のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列；及び配列番号３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに（ｉｉ）各々がＵＳ２０１５／０２５９４２０の表１に開示されている、配列番号１３のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号１５のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
【０２５９】
１つの実施形態では、該抗ＬＡＧ−３抗体分子は、ＵＳ２０１５／０２５９４２０の表１に開示されている配列番号１のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列を含む。別の実施形態では、該抗ＬＡＧ−３抗体分子は、ＵＳ２０１５／０２５９４２０の表１に開示されている配列番号４のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列を含む。さらに別の実施形態では、該抗ＬＡＧ−３抗体分子は、ＵＳ２０１５／０２５９４２０の表１に開示されている配列番号２８６のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列を含む。
【０２６０】
いくつかの実施形態では、該抗ＬＡＧ−３抗体は、ＢＭＳ−９８６０１６である。ＢＭＳ−９８６０１６（ＢＭＳ９８６０１６とも呼ばれる；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）は、ＬＡＧ−３に結合するモノクローナル抗体である。ＢＭＳ−９８６０１６及び他のヒト化抗ＬＡＧ−３抗体は、ＵＳ２０１１／０１５０８９２、ＷＯ２０１０／０１９５７０、及びＷＯ２０１４／００８２１８に開示されている。
【０２６１】
Ｔ細胞受容体アゴニスト
本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、Ｔ細胞受容体アゴニスト、例えば、ＣＤ２８アゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＧＩＴＲアゴニスト、ＣＤ１３７アゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、またはＨＶＥＭアゴニストと組み合わせて使用することができる。
【０２６２】
本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ＣＤ２７アゴニストと組み合わせて使用することができる。例示的なＣＤ２７アゴニストとしては、抗ＣＤ２７アゴニスト抗体、例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１２／００４３６７号に記載のものが挙げられる。
【０２６３】
本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ＧＩＴＲアゴニストと組み合わせて使用することができる。いくつかの実施形態では、該組合せは、充実性腫瘍または血液悪性腫瘍の治療に用いることができる。例示的なＧＩＴＲアゴニストとしては、例えば、ＧＩＴＲ融合タンパク質及び抗ＧＩＴＲ抗体（例えば、二価抗ＧＩＴＲ抗体）、例えば、米国特許第６，１１１，０９０号、欧州特許第０９２０５０５Ｂ１号、米国特許第８，５８６，０２３号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／００３１１８号及び第ＷＯ２０１１／０９０７５４号に記載のＧＩＴＲ融合タンパク質、または、例えば、米国特許第７，０２５，９６２号、欧州特許第１９４７１８３Ｂ１号、米国特許第７，８１２，１３５号、米国特許第８，３８８，９６７号、米国特許第８，５９１，８８６号、欧州特許第ＥＰ１８６６３３９号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１１／０２８６８３号、米国特許第８，７０９，４２４号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１３／０３９９５４号、国際公開第ＷＯ２０１３／０３９９５４号、米国公開第ＵＳ２０１４／００７２５６６号、国際公開第ＷＯ２０１５／０２６６８４号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００５／００７１９０号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／１３３８２２号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００５／０５５８０８号、ＰＣＴ公開第ＷＯ９９／４０１９６号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００１／０３７２０号、ＰＣＴ公開第ＷＯ９９／２０７５８号、米国特許第６，６８９，６０７号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００６／０８３２８９号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００５／１１５４５１号、米国特許第７，６１８，６３２号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１１／０５１７２６号、国際公開第ＷＯ２００４０６０３１９号、及び国際公開第ＷＯ２０１４０１２４７９号に記載の抗ＧＩＴＲ抗体が挙げられる。
【０２６４】
１つの実施形態では、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、例えば、ＷＯ２０１５／０２６６８４に記載の通り、ＰＤ−１阻害剤と組み合わせて使用されるＧＩＴＲアゴニストと組み合わせて使用される。
【０２６５】
別の実施形態では、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、例えば、ＷＯ２００４０６０３１９及び国際公開第ＷＯ２０１４０１２４７９号に記載の通り、ＴＬＲアゴニストと組み合わせて使用されるＧＩＴＲアゴニストと組み合わせて使用される。
【０２６６】
ＴＬＲアゴニスト
【０２６７】
本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、トール様受容体アゴニストと組み合わせて使用することができる。本明細書で用いられる「トール様受容体」（または「ＴＬＲ」）という用語は、微生物産物を感知及び／または適応免疫反応を開始するトール様受容体タンパク質ファミリーの成員またはその断片を指す。１つの実施形態では、ＴＬＲは樹状細胞（ＤＣ）を活性化する。トール様受容体（ＴＬＲ）は、微生物病原体を認識する自然免疫系のセンサーとして当初特定されたパターン認識受容体のファミリーである。ＴＬＲは、ロイシンリッチリピートのエクトドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞内ＴＩＲ（トール／ＩＬ−１Ｒ）ドメインを含む保存膜貫通分子のファミリーを含む。ＴＬＲは、しばしば「ＰＡＭＰ」（病原体関連分子パターン）と呼ばれる微生物中の独特な構造を認識する。ＴＬＲに対するリガンドの結合は、炎症及び免疫に関与する因子の産生を誘導する細胞内シグナル伝達経路のカスケードを発動させる。
【０２６８】
ヒトでは、１０種のＴＬＲが特定されている。細胞表面で発現されるＴＬＲには、ＴＬＲ−１、−２、−４、−５、及び−６が含まれ、一方、ＴＬＲ−３、−７／８、及び−９はＥＲ区画で発現される。ヒト樹状細胞のサブセットは、独特なＴＬＲ発現パターンに基づいて同定することができる。例として、骨髄のまたは「従来の」ＤＣのサブセット（ｍＤＣ）は、刺激時、ＴＬＲ１−８を発現し、活性化マーカー（例えば、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＭＨＣクラスＩ及びＩＩ、ＣＣＲ７）、炎症性サイトカイン、ならびにケモカインのカスケードが引き起こされる。この刺激及び得られる発現の効果は、抗原特異的ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞プライミングである。これらのＤＣは、抗原の取り込み能が向上しており、それらをＴ細胞に対して適切な形で提示する。対照的に、形質細胞様ＤＣのサブセット（ｐＤＣ）は、活性化時、ＴＬＲ７及びＴＬＲ９のみ発現し、ＮＫ細胞ならびにＴ細胞の活性化をもたらす。死にかけた腫瘍細胞はＤＣの機能に悪影響を与え得るため、ＴＬＲアゴニストでＤＣを活性化させることは、がん治療に対する免疫治療法において抗腫瘍免疫のプライミングにとって有益であり得ることが示唆されている。また、放射線及び化学療法を用いる乳がんの成功的治療は、ＴＬＲ４の活性化を要することが示唆されている。
【０２６９】
当技術分野で知られ、本発明で用途を見出すＴＬＲアゴニストとしては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：
Ｐａｍ３Ｃｙｓ、ＴＬＲ−１／２アゴニスト；
ＣＦＡ、ＴＬＲ−２アゴニスト；
ＭＡＬＰ２、ＴＬＲ−２アゴニスト；
Ｐａｍ２Ｃｙｓ、ＴＬＲ−２アゴニスト；
ＦＳＬ−１、ＴＬＲ−２アゴニスト；
Ｈｉｂ−ＯＭＰＣ、ＴＬＲ−２アゴニスト；
ポリリボシニック（ｐｏｌｙｒｉｂｏｓｉｎｉｃ）：ポリリボシチジン酸（ｐｏｌｙｒｉｂｏｃｙｔｉｄｉｃ  ａｃｉｄ）（ポリＩ：Ｃ）、ＴＬＲ−３アゴニスト；
ポリアデノシン−ポリウリジル酸（ポリＡＵ）、ＴＬＲ−３アゴニスト；
ポリＬ−リジン及びカルボキシメチルセルロース（Ｈｉｌｔｏｎｏｌ（登録商標））で安定化されたポリイノシン−ポリシチジル酸、ＴＬＲ−３アゴニスト；
モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）、ＴＬＲ−４アゴニスト；
ＬＰＳ、ＴＬＲ−４アゴニスト；
細菌フラジェリン、ＴＬＲ−５アゴニスト；
シアリルＴｎ（ＳＴｎ）、複数のヒトがん細胞上のＭＵＣ１ムチンに伴う炭水化物及びＴＬＲ−４アゴニスト；
イミキモド、ＴＬＲ−７アゴニスト；
レシキモド、ＴＬＲ−７／８アゴニスト；
ロキソリビン、ＴＬＲ−７／８アゴニスト；ならびに
非メチル化ＣｐＧジヌクレオチド（ＣｐＧ−ＯＤＮ）、ＴＬＲ−９アゴニスト。
【０２７０】
それらのアジュバント品質のため、ＴＬＲアゴニストは、好ましくは他のワクチン、アジュバント、及び／または免疫変調成分と組み合わせて使用され、様々な組合せで組み合わせてよい。従って、特定の実施形態では、ＳＴＩＮＧに結合し、ＳＴＩＮＧ依存性ＴＢＫ１活性化を誘導するモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、ならびに本明細書に記載の樹状細胞の誘導、動員、及び／または成熟を刺激する１つ以上のサイトカインを発現及び分泌する不活化腫瘍細胞は、治療目的で１つ以上のＴＬＲアゴニストと一緒に投与することができる。
【０２７１】
抗体療法
【０２７２】
本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、治療抗体と組み合わせて使用することができる。いくつかの実施形態では、該治療抗体の作用機序は、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）である。ＡＤＣＣは、免疫系のエフェクター細胞が、膜表面抗原が特異抗体と結合された標的細胞を能動的に溶解する細胞媒介性免疫防御機構である。これは、抗体が液性免疫反応の一部として、感染を制限し阻止するように作用することができる機序の１つである。古典的なＡＤＣＣは、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞によって媒介され；マクロファージ、好中球、及び好酸球もまたＡＤＣＣを媒介することができる。ＡＤＣＣは、トラスツズマブ及びリツキシマブを含めた腫瘍に対する治療用モノクローナル抗体の重要な作用機序である。本発明の化合物は、ＡＤＣＣを促進するように作用し得る。
【０２７３】
以下は、本発明のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物と一緒に使用され得る抗体の例示的なリストである。
【０２７４】
ムロモナブＣＤ３：臓器、例えば、腎臓の移植組織の急性拒絶を防ぐために使用される。ヒト化型は、１型糖尿病におけるベータ細胞の自己免疫性破壊の阻害に効果を発揮する。
【０２７５】
インフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ（登録商標））及びアダリムマブ（Ｈｕｍｉｒａ（登録商標））：腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）に結合する。関節リウマチ、乾癬、クローン病などのいくつかの炎症性疾患に使用される。
【０２７６】
オマリズマブ（Ｘｏｌａｉｒ（登録商標））。ＩｇＥに結合し、結果としてＩｇＥが肥満細胞に結合できないようにする。アレルギー性喘息に対して使用される。
【０２７７】
ダクリズマブ（Ｚｅｎａｐａｘ（登録商標））。活性化Ｔ細胞の表面で露出されるＩＬ−２受容体の一部に結合する。移植された腎臓の急性拒絶を防ぐために使用される。
【０２７８】
リツキシマブ（商品名＝Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標））。ほとんどのＢ細胞に見られるＣＤ２０分子に結合し、Ｂ細胞リンパ腫を治療するために使用される。
【０２７９】
イブリツモマブ（商品名＝Ｚｅｖａｌｉｎ（登録商標））。これは、Ｂ細胞（及びリンパ腫）上のＣＤ２０分子に対するモノクローナル抗体であり、同位体に結合している。Ｒｉｔｕｘａｎが補充されたリンパ腫患者に投与される。
【０２８０】
トシツモマブ（Ｂｅｘｘａｒ（登録商標））。これは、ＣＤ２０に対するモノクローナル抗体及び放射性同位体ヨウ素１３１（１３１Ｉ）の複合体である。
【０２８１】
セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））。一部の腫瘍細胞（一部の乳がん、リンパ腫）に見られる上皮成長因子（ＥＧＦ）に対する受容体であるＨＥＲ１を阻害する。
【０２８２】
トラスツズマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標））。乳がんの約２０％で過剰発現する成長因子受容体であるＨＥＲ２を阻害する。
【０２８３】
Ａｄｃｅｔｒｉｓ（登録商標）。一部のリンパ腫の細胞によって発現されるが、骨髄を再増殖させるために必要な正常幹細胞には見られない細胞表面分子であるＣＤ３０に結合するモノクローナル抗体の複合体。
【０２８４】
アレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ−１Ｈ（登録商標））。リンパ球上に見られる分子であるＣＤ５２に結合し、Ｔ細胞及びＢ細胞をともに枯渇させる。慢性リンパ球性白血病の完全寛解をもたらし、腎臓移植組織の拒絶の予防に効果を発揮する。
【０２８５】
Ｌｙｍ−１（Ｏｎｃｏｌｙｍ（登録商標））。リンパ腫細胞上に高レベルで発現され得るＨＬＡ−ＤＲコード化組織適合抗原に結合する。
【０２８６】
イピリムマブ（Ｙｅｒｖｏｙ（登録商標））。腫瘍に対する自分の体の免疫反応を高めるように作用する。
【０２８７】
ビタキシン。腫瘍の血管に見られるが正常組織を供給する血管には見られない血管インテグリン（アルファ−ｖ／ベータ−３）に結合する。フェーズＩＩの臨床試験では、ビタキシンは、有害な副作用なしに充実性腫瘍の縮小にいくらかの効果を発揮している。
【０２８８】
ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））。血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）に結合し、これがその受容体に結合できないようにする。結腸直腸がんの治療に使用される。
【０２８９】
アブシキシマブ（ＲｅｏＰｒｏ（登録商標））。血小板の凝集を、通常はフィブリノゲンによって結合されるそれらの表面の受容体に結合することによって阻害する。血管形成術を受けた患者における冠動脈の再閉塞の予防に役立つ。
【０２９０】
本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物と組み合わせて使用され得るさらなる治療抗体としては、プロラクチン受容体（ＰＲＬＲ）阻害剤、例えば、米国特許第７，８６７，４９３号に開示のもの、ＨＥＲ３阻害剤、例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１２／０２２８１４号に開示のもの、ＥＧＦＲ２及び／またはＥＧＦＲ４阻害剤、例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１４／１６０１６０号に開示のもの、Ｍ−ＣＳＦ阻害剤、例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００４／０４５５３２号に開示のもの、抗ＡＰＲＩＬ抗体、例えば、米国特許第８，８９５，７０５号に開示のもの、または、抗ＳＩＲＰαもしくは抗ＣＤ４７抗体、例えば、米国特許第８，７２８，４７６号及び米国特許第８，５６２，９９７号に開示のものが挙げられる。
【０２９１】
１つの実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、プロラクチン受容体（ＰＲＬＲ）阻害剤、米国特許第７，８６７，４９３号に開示のヒトモノクローナル抗体分子（化合物Ａ２６））との組合せで使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＰＲＬＲ阻害剤は、ＵＳ７，８６７，４９３に開示のヒトモノクローナル抗体（化合物Ａ２６）である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、米国特許第７，８６７，４９３号に記載のヒトモノクローナル抗体分子（化合物Ａ２６）との組み合わせで使用され、がん、前立腺がん、または乳がん等の障害を治療する。
【０２９２】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＨＥＲ３阻害剤、化合物Ａ３１、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１２／０２２８１４号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＨＥＲ３阻害剤は、化合物Ａ３１またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１２／０２２８１４号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、化合物Ａ３１、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１２／０２２８１４号に開示の化合物と組み合わせて使用され、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）、食道がん、頭頸部がん、扁平上皮がん、胃がん（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、乳がん（例えば、転移性乳がん）、または消化器／消化管がん等の障害を治療する。いくつかの実施形態では、化合物Ａ３１は、ヒトモノクローナル抗体分子である。１つの実施形態では、該ＨＥＲ３阻害剤または化合物Ａ３１は、約３、１０、２０、または４０ｍｇ／ｋｇの用量を例えば、週１回（ＱＷ）投与される。１つの実施形態では、該化合物は、約３〜１０、１０〜２０、または２０〜４０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【０２９３】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＦＧＦＲ２及び／またはＦＧＦＲ４阻害剤、化合物Ａ３２、または出版物ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１４／１６０１６０号に開示の化合物（例えば、ＦＧＦＲ２及び／またはＦＧＦＲ４に対する抗体分子薬物複合体、例えば、その中に記載のｍＡｂ１２４２５）と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＦＧＦＲ２及び／またはＦＧＦＲ４阻害剤は、化合物Ａ３２または出版物ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１４／１６０１６０号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、化合物Ａ３２と組み合わせて、または、さらに表２に記載の化合物と組み合わせて使用され、がん、胃がん、乳がん、横紋筋肉腫、肝臓がん、副腎がん、肺がん、食道がん、結腸がん、または子宮内膜がん等の障害を治療する。いくつかの実施形態では、化合物Ａ３２は、ＦＧＦＲ２及び／またはＦＧＦＲ４に対する抗体分子薬物複合体、例えば、ｍＡｂ１２４２５である。
【０２９４】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、Ｍ−ＣＳＦ阻害剤、化合物Ａ３３、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００４／０４５５３２に開示の化合物（例えば、Ｍ−ＣＳＦに対する抗体分子またはＦａｂ断片）と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該Ｍ−ＣＳＦ阻害剤は、化合物Ａ３３またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００４／０４５５３２に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、化合物Ａ３３、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００４／０４５５３２に開示の化合物と組み合わせて使用され、がん、前立腺がん、乳がん、または色素性絨毛結節性滑膜炎（ＰＶＮＳ）等の障害を治療する。実施形態では、化合物Ａ３３は、Ｍ−ＣＳＦに対するモノクローナル抗体分子またはその断片（例えば、Ｆａｂ断片）である。実施形態では、該Ｍ−ＣＳＦ阻害剤または化合物Ａ３３は、平均用量約１０ｍｇ／ｋｇで投与される。
【０２９５】
送達剤
リポソームは、１層（「単層」）または複層（「多重膜」）のリン脂質から形成される小胞である。該リン脂質構成要素の両親媒性の性質のため、リポソームは通常、親水性の外面を提示し、親水性のコアを包み込む親水性層を含む。親水性／疎水性成分の組み込みにおけるリポソームの多様性、それらの非毒性、生分解性、生体適合性、アジュバント性、細胞性免疫の誘導、徐放性、及びマクロファージによる速やかな摂取は、それらを抗原の送達用の魅力的な候補にしている。
【０２９６】
ＷＯ２０１０／１０４８３３は、適切なリポソーム製剤を記載している。かかるリポソーム製剤は、前記の「免疫原性ポリペプチド（複数可）または炭水化物（複数可）」の有無にかかわらず、本明細書ではＶｅｓｉＶａｘ（登録商標）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｅｘｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）と呼ばれ、ペプチドグリカン、リポペプチド、リポ多糖、モノホスホリルリピドＡ、リポテイコ酸、レシキモド、イミキモド、フラジェリン、非メチル化ＣｐＧモチーフを含むオリゴヌクレオチド、ベータガラクトシルセラミド、ムラミルジペプチド、オールトランスレチノイン酸、二本鎖ウイルスＲＮＡ、熱ショックタンパク質、ジオクタデシルジメチルアンモニウムブロミド、カチオン性界面活性剤、トール様受容体アゴニスト、ジミリストイルトリメチルアンモニウムプロパン、及びＮＯＤ様受容体アゴニスト等の１つ以上のさらなる成分を含むことができる。有利には、これらのリポソーム製剤を用いて、本発明に従って本明細書に記載される１つ以上のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物及びそれらの組成物を送達することができる。
【０２９７】
さらに、上記リポソーム製剤は、「ステロイド誘導体」を免疫原性ポリペプチドまたは炭水化物をリポソームに結合させるためのアンカーとして使用するが、該ステロイドは、単にコレステロール等の非結合ステロイドとして提供されてもよい。
【０２９８】
脂質混合物からリポソームを調製するのに適切な方法は、当技術分野では周知である。例えば、Ｂａｓｕ  ＆  Ｂａｓｕ，  Ｌｉｐｏｓｏｍｅ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  （Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ），  Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，  ２００２；  Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ，  Ｌｉｐｏｓｏｍｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，  ３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｉｎｆｏｒｍａ  ＨｅａｌｔｈＣａｒｅ，  ２００６を参照のこと。好ましい方法としては、本明細書に記載の押出し、均質化、及び超音波処理法が挙げられる。脂質混合物を乾燥し、続いて水性媒体中で水和し、超音波処理してリポソームを形成することを含む、本明細書で用いるリポソームの例示的な調製方法は、ＷＯ２０１０／１０４８３３に記載されている。
【０２９９】
特定の実施形態では、該リポソームは、特定の平均サイズ範囲内で提供される。リポソームのサイズは、例えば、リポソームを含む水性媒体の予め選択された細孔径を有する膜を通した押出し、及び該膜を通って出てくる該材料を捕集することによって選択することができる。好ましい実施形態では、該リポソームは、実質的に直径５０〜５００ｎｍ、より好ましくは実質的に直径５０〜２００ｎｍ、最も好ましくは実質的に直径５０〜１５０ｎｍであるように選択される。本明細書で用いられる「実質的に」という用語は、この状況では、該リポソームの少なくとも７５％、より好ましくは８０％、最も好ましくは少なくとも９０％が指定された範囲内であることを意味する。
【０３００】
本発明で用途を見出し得る他の脂質及び脂質様アジュバントとしては、水中油型（ｏ／ｗ）エマルション（例えば、Ｍｕｄｅｒｈｗａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．  Ｓｃｉ．  ８８：  １３３２−９，  １９９９）参照）、ＶｅｓｉＶａｘ（登録商標）ＴＬＲ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｅｘｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）、ジギトニン（例えば、米国特許第５，６９８，４３２号参照）、及びグルコピラノシル脂質（例えば、米国特許出願第２０１００３１０６０２号参照）が挙げられる。
【０３０１】
ナノ粒子もまた、ほとんどの投与経路に適する薬物送達系を代表する。長年にわたり、様々な天然及び合成ポリマーがナノ粒子の調製のために検討されているが、その中でポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、及びそれらのコポリマー（ＰＬＧＡ）は、それらの生体適合性及び生分解性のために幅広く研究されている。ナノ粒子及び他のナノ担体は、いくつかの種類の薬物、例えば、抗がん剤、降圧剤、免疫刺激剤、及びホルモン；ならびに高分子、例えば、核酸、タンパク質、ペプチド、及び抗体の潜在的な担体として作用する。例えば、Ｃｒｉｔ．  Ｒｅｖ．  Ｔｈｅｒ．  Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓｔ．  ２１：３８７−４２２，  ２００４；  Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ：  Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １：２２−３０，  ２００５を参照のこと。
【０３０２】
化学療法剤
本明細書に記載の方法のさらなる実施形態において、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、化学療法剤（例えば、小分子医薬化合物）と組み合わせて使用される。従って、該方法はさらに、当該対象に対して、有効量の１つ以上の化学療法剤を追加治療または併用治療として投与することを含む。特定の実施形態では、該１つ以上の化学療法剤は、酢酸アビラテロン、アルトレタミン、無水ビンブラスチン、アウリスタチン、ベキサロテン、ビカルタミド、ＢＭＳ  １８４４７６、２，３，４，５，６−ペンタフルオロ−Ｎ−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）ベンゼンスルホンアミド、ブレオマイシン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｌ−バリル−Ｌ−バリル−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリル−１−Ｌプロリン−ｔ−ブチルアミド、カケクチン、セマドチン、クロラムブシル、シクロホスファミド、３’，４’−ジデヒドロ−４’−デオキシ−８’−ノルビンカロイコブラスチン、ドセタキソル（ｄｏｃｅｔａｘｏｌ）、ドキセタキセル（ｄｏｘｅｔａｘｅｌ）、シクロホスファミド、カルボプラチン、カルムスチン、シスプラチン、クリプトフィシン、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン（ＤＴＩＣ）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デシタビンドラスタチン、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、エトポシド、５−フルオロウラシル、フィナステリド、フルタミド、ヒドロキシ尿素及びヒドロキシ尿素タキサン類、イホスファミド、リアロゾール、ロニダミン、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、エンザルタミド、メクロレタミン（ナイトロジェンマスタード）、メルファラン、イセチオン酸ミボブリン、リゾキシン、セルテネフ（ｓｅｒｔｅｎｅｆ）、ストレプトゾシン、マイトマイシン、メトトレキサート、タキサン類、ニルタミド、オナプリストン、パクリタキセル、プレドニムスチン、プロカルバジン、ＲＰＲ１０９８８１、リン酸ストラムスチン（ｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、タモキシフェン、タソネルミン、タキソール、トレチノイン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、硫酸ビンデシン、ならびにビンフルニンからなる群から選択される。
【０３０３】
さらなる実施形態では、本明細書に記載の方法、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、本明細書の方法に記載の適応症の治療用の化学療法剤及び／または追加の薬剤と組み合わせて使用される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ソトラスタウリン、ニロチニブ、５−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピルフェニル）−Ｎ−エチル−４−（４−（モルホリノメチル）フェニル）イソオキサゾール−３−カルボキサミド、ダクトリシブ、８−（６−メトキシピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチルフェニル）−１，３−ジヒドロイミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシフェニル）−１−（６−（（４−（４−エチルピペラジン−１−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−１−メチル尿素、ブパルリシブ（ｂｕｐａｒｌｉｓｉｂ）、８−（２，６−ジフルオロ−３，５−ジメトキシフェニル）−Ｎ−（４−（（ジメチルアミノ）メチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）キノキサリン−５−カルボキサミド、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド、（Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）−７−イソプロポキシ−６−メトキシ−２−（４−（メチル（（（１ｒ，４Ｓ）−４−（４−メチル−３−オキソピペラジン−１−イル）シクロヘキシル）メチル）アミノ）フェニル）−１，２−ジヒドロイソキノリン−３（４Ｈ）−オン、デフェラシロックス、レトロゾール、（４Ｓ，５Ｒ）−３−（２’−アミノ−２−モルホリノ−４’−（トリフルオロメチル）−［４，５’−ビピリミジン］−６−イル）−４−（ヒドロキシメチル）−５−メチルオキサゾリジン−２−オン、（Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−イソプロピル−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン、４−（（２−（（（１Ｒ，２Ｒ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ）ベンゾ［ｄ］チアゾール−６−イル）オキシ）−Ｎ−メチルピコリンアミド、イマチニブメシル酸塩、２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−（７−（キノリン−６−イルメチル）イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）ベンズアミド、ルキソリチニブ、パノビノスタット、ｏｓｉｌｏｄｒｏｓｔａｔ、（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−（（Ｓ）−２−（４−（４−フルオロベンゾイル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２−（メチルアミノ）プロパンアミド、（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−（（Ｓ）−２−（４−（４−フルオロベンゾイル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２−（メチルアミノ）プロパンアミド、ソニデジブリン酸塩、セリチニブ、７−シクロペンチル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−（（５−（ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド、Ｎ−（４−（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−アミノ−５−メチルシクロヘキシル）ピリジン−３−イル）−６−（２，６−ジフルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド、２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、エンコラフェニブ、７−シクロペンチル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−（（５−（（１Ｒ，６Ｓ）−９−メチル−４−オキソ−３，９−ジアザビシクロ［４．２．１］ノナン−３−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド、ビニメチニブ、ミドスタウリン、エベロリムス、１−メチル−５−（（２−（５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピリジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−アミン、パシレオチドジアスパルタート、ドビチニブ、（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド、Ｎ６−（２−イソプロポキシ−５−メチル−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）フェニル）−Ｎ４−（２−（イソプロピルスルホニル）フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４，６−ジアミン、３−（４−（４−（（５−クロロ−４−（（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−２−イル）アミノ）−５−フルオロ−２−メチルフェニル）ピペリジン−１−イル）チエタン１，１−ジオキシド、５−クロロ−Ｎ２−（２−フルオロ−５−メチル−４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピペリジン−４−イル）フェニル）−Ｎ４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン、５−クロロ−Ｎ２−（４−（１−エチルピペリジン−４−イル）−２−フルオロ−５−メチルフェニル）−Ｎ４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン、バルスポダール、及びコハク酸バタラニブからなる群から選択される１つ以上の薬剤と組み合わせて使用される。
【０３０４】
１つの実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＰＫＣ阻害剤、ソトラスタウリン（化合物Ａ１）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００５／０３９５４９号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＰＫＣ阻害剤は、ソトラスタウリン（化合物Ａ１）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００５／０３９５４９号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ソトラスタウリン（化合物Ａ１）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００５／０３９５４９号に記載の化合物と組み合わせて使用され、がん、メラノーマ、非ホジキンリンパ腫、炎症性腸疾患、移植片拒絶反応、眼科疾患、または乾癬等の障害を治療する。特定の実施形態では、ソトラスタウリン（化合物Ａ１）は、用量約２０〜６００ｍｇ、例えば、約２００〜約６００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約４５０ｍｇ、約１００ｍｇ〜４００ｍｇ、約１５０ｍｇ〜３５０ｍｇ、または約２００ｍｇ〜３００ｍｇ、例えば、約５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、または６００ｍｇで投与される。投薬スケジュールは、例えば、１日おきから毎日、１日２回または３回まで様々でよい。
【０３０５】
１つの実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＢＣＲ−ＡＢＬ阻害剤、タシグナ（化合物Ａ２、ニロチニブ）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００４／００５２８１号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＢＣＲ−ＡＢＬ阻害剤はタシグナ、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００４／００５２８１号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、タシグナ（化合物Ａ２）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００４／００５２８１号に記載の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、リンパ性白血病、パーキンソン病、神経学的がん、メラノーマ、消化器／消化管がん、結腸直腸がん、骨髄性白血病、頭頸部がん、または肺高血圧症を治療する。１つの実施形態では、該ＢＣＲ−ＡＢＬ阻害剤またはタシグナは、用量約３００ｍｇ（例えば、１日２回、例えば、新たに診断されたＰｈ＋ＣＭＬ−ＣＰに対して）、または約４００ｍｇ、例えば、１日２回、例えば、耐性もしくは不耐性Ｐｈ＋ＣＭＬ−ＣＰ及びＣＭＬ−ＡＰに対して）で投与される。ＢＣＲ−ＡＢＬ阻害剤または化合物Ａ２は、用量約３００〜４００ｍｇで投与される。
【０３０６】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＨＳＰ９０阻害剤、例えば、５−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピルフェニル）−Ｎ−エチル−４−（４−（モルホリノメチル）フェニル）イソオキサゾール−３−カルボキサミド（化合物Ａ３）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／０６０９３７号もしくは第ＷＯ２００４／０７２０５１号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＨＳＰ９０阻害剤は、５−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピルフェニル）−Ｎ−エチル−４−（４−（モルホリノメチル）フェニル）イソオキサゾール−３−カルボキサミド（化合物Ａ３）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／０６０９３７号もしくは第ＷＯ２００４／０７２０５１号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、５−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピルフェニル）−Ｎ−エチル−４−（４−（モルホリノメチル）フェニル）イソオキサゾール−３−カルボキサミド（化合物Ａ３）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／０６０９３７号もしくは第ＷＯ２００４／０７２０５１号に記載の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、がん、多発性骨髄腫、非小細胞肺がん、リンパ腫、胃がん、乳がん、消化器／消化管がん、膵臓がん、結腸直腸がん、充実性腫瘍、または造血障害を治療する。
【０３０７】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＰＩ３Ｋ阻害剤及び／またはｍＴＯＲ、ダクトリシブ（化合物Ａ４）もしくは８−（６−メトキシピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチルフェニル）−１，３−ジヒドロイミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン（化合物Ａ４１）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００６／１２２８０６号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＰＩ３Ｋ及び／またはｍＴＯＲ阻害剤は、ダクトリシブ（化合物Ａ４）、８−（６−メトキシピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチルフェニル）−１，３−ジヒドロイミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン（化合物Ａ４１）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００６／１２２８０６号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ダクトリシブ（化合物Ａ４）、８−（６−メトキシピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチルフェニル）−１，３−ジヒドロイミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン（化合物Ａ４１）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００６／１２２８０６号に記載の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、がん、前立腺がん、白血病（例えば、リンパ性白血病）、乳がん、脳がん、膀胱がん、膵臓がん、腎臓がん、充実性腫瘍、または肝臓がんを治療する。
【０３０８】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＦＧＦＲ阻害剤、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシフェニル）−１−（６−（（４−（４−エチルピペラジン−１−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−１−メチル尿素（化合物Ａ５）、または米国特許第８，５５２，００２号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＦＧＦＲ阻害剤は、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシフェニル）−１−（６−（（４−（４−エチルピペラジン−１−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−１−メチル尿素（化合物Ａ５）または米国特許第８，５５２，００２号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、化合物Ａ５、またはＵＳ８，５５２，００２に記載の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、消化器／消化管がん、血液がん、または充実性腫瘍を治療する。１つの実施形態では、該ＦＧＦＲ阻害剤または３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシフェニル）−１−（６−（（４−（４−エチルピペラジン−１−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−１−メチル尿素（化合物Ａ５）は、用量約１００〜１２５ｍｇ（例えば、１日当たり）、例えば、約１００ｍｇまたは約１２５ｍｇで投与される。
【０３０９】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ブパルリシブ（化合物Ａ６）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／０８４７８６号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＰＩ３Ｋ阻害剤は、ブパルリシブ（化合物Ａ６）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／０８４７８６号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ブパルリシブ（化合物Ａ６）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／０８４７８６号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、前立腺がん、非小細胞肺がん、内分泌がん、白血病、卵巣がん、メラノーマ、膀胱がん、乳がん、女性生殖器系のがん、消化器／消化管がん、結腸直腸がん、多形性膠芽腫、充実性腫瘍、非ホジキンリンパ腫、造血障害、または頭頸部がんを治療する。１つの実施形態では、該ＰＩ３Ｋ阻害剤またはブパルリシブ（化合物Ａ６）は用量約１００ｍｇ（例えば、１日当たり）で投与される。
【０３１０】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＦＧＦＲ阻害剤、８−（２，６−ジフルオロ−３，５−ジメトキシフェニル）−Ｎ−（４−（（ジメチルアミノ）メチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）キノキサリン−５−カルボキサミド（化合物Ａ７）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００９／１４１３８６号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＦＧＦＲ阻害剤は、８−（２，６−ジフルオロ−３，５−ジメトキシフェニル）−Ｎ−（４−（（ジメチルアミノ）メチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）キノキサリン−５−カルボキサミド（化合物Ａ７）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００９／１４１３８６号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該ＦＧＦＲ阻害剤は、８−（２，６−ジフルオロ−３，５−ジメトキシフェニル）−Ｎ−（４−（（ジメチルアミノ）メチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）キノキサリン−５−カルボキサミド（化合物Ａ７）である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、８−（２，６−ジフルオロ−３，５−ジメトキシフェニル）−Ｎ−（４−（（ジメチルアミノ）メチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）キノキサリン−５−カルボキサミド（化合物Ａ７）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００９／１４１３８６号に開示の化合物と組み合わせて使用され、血管形成を特徴とするがん等の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＦＧＦＲ阻害剤または８−（２，６−ジフルオロ−３，５−ジメトキシフェニル）−Ｎ−（４−（（ジメチルアミノ）メチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）キノキサリン−５−カルボキサミド（化合物Ａ７）は、一人１日当たり、用量、例えば、約３ｍｇ〜約５ｇ、より好ましくは約１０ｍｇ〜約１．５ｇで、任意に、例えば同じサイズでよい、１〜３の１回量に分けて投与される。
【０３１１】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＰＩ３Ｋ阻害剤、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド（化合物Ａ８）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／０２９０８２号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＰＩ３Ｋ阻害剤は、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド（化合物Ａ８）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／０２９０８２号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド（化合物Ａ８）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／０２９０８２号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、胃がん、乳がん、膵臓がん、消化器／消化管がん、充実性腫瘍、及び頭頸部がんを治療する。１つの実施形態では、該ＰＩ３Ｋ阻害剤または（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イルチアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド（化合物Ａ８）は、用量約１５０〜３００、２００〜３００、２００〜４００、または３００〜４００ｍｇ（例えば、１日当たり）、例えば、約２００、３００、または４００ｍｇで投与される。
【０３１２】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、シトクロムＰ４５０の阻害剤（例えば、ＣＹＰ１７阻害剤）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／１４９７５５号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該シトクロムＰ４５０阻害剤（例えば、該ＣＹＰ１７阻害剤）は、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／１４９７５５号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／１４９７５５号に開示の化合物と組み合わせて使用され、前立腺がんを治療する。
【０３１３】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＨＤＭ２阻害剤、（Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）−７−イソプロポキシ−６−メトキシ−２−（４−（メチル（（（１ｒ，４Ｓ）−４−（４−メチル−３−オキソピペラジン−１−イル）シクロヘキシル）メチル）アミノ）フェニル）−１，２−ジヒドロイソキノリン−３（４Ｈ）−オン（化合物Ａ１０）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１１／０７６７８６号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する）。１つの実施形態では、該ＨＤＭ２阻害剤は、（Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）−７−イソプロポキシ−６−メトキシ−２−（４−（メチル（（（１ｒ，４Ｓ）−４−（４−メチル−３−オキソピペラジン−１−イル）シクロヘキシル）メチル）アミノ）フェニル）−１，２−ジヒドロイソキノリン−３（４Ｈ）−オン（化合物Ａ１０）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１１／０７６７８６号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、（Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）−７−イソプロポキシ−６−メトキシ−２−（４−（メチル（（（１ｒ，４Ｓ）−４−（４−メチル−３−オキソピペラジン−１−イル）シクロヘキシル）メチル）アミノ）フェニル）−１，２−ジヒドロイソキノリン−３（４Ｈ）−オン（化合物Ａ１０）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１１／０７６７８６号に開示の化合物と組み合わせて使用され、充実性腫瘍等の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＨＤＭ２阻害剤または（Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）−７−イソプロポキシ−６−メトキシ−２−（４−（メチル（（（１ｒ，４Ｓ）−４−（４−メチル−３−オキソピペラジン−１−イル）シクロヘキシル）メチル）アミノ）フェニル）−１，２−ジヒドロイソキノリン−３（４Ｈ）−オン（化合物Ａ１０）は、用量約４００〜７００ｍｇで投与し、例えば、週３回、２週間投与し、１週間は休む。いくつかの実施形態では、該用量は、約４００、５００、６００、または７００ｍｇ；約４００〜５００、５００〜６００、または６００〜７００ｍｇで、例えば、週３回投与される。
【０３１４】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、鉄キレート剤、デフェラシロックス（ＥＸＪＡＤＥとしても知られる；化合物Ａ１１）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ１９９７／０４９３９５号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該鉄キレート剤は、デフェラシロックスまたはＰＣＴ公開第ＷＯ１９９７／０４９３９５号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該鉄キレート剤はデフェラシロックス（化合物Ａ１１）である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、デフェラシロックス（化合物Ａ１１）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ１９９７／０４９３９５号に開示の化合物と組み合わせて使用され、鉄過剰、ヘモクロマトーシス、または骨髄異形成を治療する。
【０３１５】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、アロマターゼ阻害剤、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡとしても知られる；化合物Ａ１２）、またはＵＳ４，９７８，６７２に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該アロマターゼ阻害剤はレトロゾール（化合物Ａ１２）または米国特許第４，９７８，６７２号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、レトロゾール（化合物Ａ１２）、または米国特許第４，９７８，６７２号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、がん、平滑筋肉腫、子宮内膜がん、乳がん、女性生殖器系のがん、またはホルモン欠乏を治療する。
【０３１６】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＰＩ３Ｋ阻害剤、例えば、ｐａｎ−ＰＩ３Ｋ阻害剤、（４Ｓ，５Ｒ）−３−（２’−アミノ−２−モルホリノ−４’−（トリフルオロメチル）−［４，５’−ビピリミジン］−６−イル）−４−（ヒドロキシメチル）−５−メチルオキサゾリジン−２−オン（化合物Ａ１３）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１３／１２４８２６号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＰＩ３Ｋ阻害剤は、（４Ｓ，５Ｒ）−３−（２’−アミノ−２−モルホリノ−４’−（トリフルオロメチル）−［４，５’−ビピリミジン］−６−イル）−４−（ヒドロキシメチル）−５−メチルオキサゾリジン−２−オン（化合物Ａ１３）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１３／１２４８２６号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、（４Ｓ，５Ｒ）−３−（２’−アミノ−２−モルホリノ−４’−（トリフルオロメチル）−［４，５’−ビピリミジン］−６−イル）−４−（ヒドロキシメチル）−５−メチルオキサゾリジン−２−オン（化合物Ａ１３）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１３／１２４８２６号に開示の化合物と組み合わせて使用され、がんや進行性充実性腫瘍等の障害を治療する。
【０３１７】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ｐ５３及び／またはｐ５３／Ｍｄｍ２相互作用の阻害剤、（Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−イソプロピル−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン（化合物Ａ１４）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１３／１１１１０５号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ｐ５３及び／またはｐ５３／Ｍｄｍ２相互作用の阻害剤は、（Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−イソプロピル−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン（化合物Ａ１４）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１３／１１１１０５号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、（Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−イソプロピル−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン（化合物Ａ１４）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１３／１１１１０５号に開示の化合物と組み合わせて使用され、がんや軟部組織肉腫等の障害を治療する。
【０３１８】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＣＳＦ−１Ｒチロシンキナーゼ阻害剤、４−（（２−（（（１Ｒ，２Ｒ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ）ベンゾ［ｄ］チアゾール−６−イル）オキシ）−Ｎ−メチルピコリンアミド（化合物Ａ１５）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００５／０７３２２４号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＣＳＦ−１Ｒチロシンキナーゼ阻害剤は、４−（（２−（（（１Ｒ，２Ｒ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ）ベンゾ［ｄ］チアゾール−６−イル）オキシ）−Ｎ−メチルピコリンアミド（化合物Ａ１５）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００５／０７３２２４号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、４−（（２−（（（１Ｒ，２Ｒ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ）ベンゾ［ｄ］チアゾール−６−イル）オキシ）−Ｎ−メチルピコリンアミド（化合物Ａ１５）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００５／０７３２２４号に開示の化合物と組み合わせて使用され、がん等の障害を治療する。
【０３１９】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、アポトーシス誘導物質及び／または血管新生阻害物質、例えば、イマチニブメシル酸塩（ＧＬＥＥＶＥＣとしても知られる；化合物Ａ１６）またはＰＣＴ公開第ＷＯ１９９９／００３８５４に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該アポトーシス誘導物質及び／または血管新生阻害物質は、イマチニブメシル酸塩（化合物Ａ１６）またはＰＣＴ公開第ＷＯ１９９９／００３８５４に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、イマチニブメシル酸塩（化合物Ａ１６）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ１９９９／００３８５４に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、がん、多発性骨髄腫、前立腺がん、非小細胞肺がん、リンパ腫、胃がん、メラノーマ、乳がん、膵臓がん、消化器／消化管がん、結腸直腸がん、多形性膠芽腫、肝臓がん、頭頸部がん、喘息、多発性硬化症、アレルギー、アルツハイマー型認知症、筋萎縮性側索硬化症、または関節リウマチを治療する。特定の実施形態では、イマチニブメシル酸塩（化合物Ａ１６）は、用量約１００〜１０００ｍｇ、例えば、約２００ｍｇ〜８００ｍｇ、約３００ｍｇ〜７００ｍｇ、または約４００ｍｇ〜６００ｍｇ、例えば、約２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、または７００ｍｇで投与される。該投薬スケジュールは、例えば、１日おきから毎日、１日２回または３回まで様々でよい。１つの実施形態では、イマチニブメシル酸塩は、１日経口用量約１００ｍｇ〜６００ｍｇ、例えば、１日約１００ｍｇ、２００ｍｇ、２６０ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、または６００ｍｇで投与される。
【０３２０】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＪＡＫ阻害剤、２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−（７−（キノリン−６−イルメチル）イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）ベンズアミド（化合物Ａ１７）、もしくはその二塩酸塩、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／０７０５１４号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＪＡＫ阻害剤は、２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−（７−（キノリン−６−イルメチル）イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）ベンズアミド（化合物Ａ１７）、もしくはその二塩酸塩、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／０７０５１４号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−（７−（キノリン−６−イルメチル）イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）ベンズアミド（化合物Ａ１７）、もしくはその二塩酸塩、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／０７０５１４号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、結腸直腸がん、骨髄性白血病、血液がん、自己免疫疾患、非ホジキンリンパ腫、または血小板血症を治療する。１つの実施形態では、該ＪＡＫ阻害剤、または２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−（７−（キノリン−６−イルメチル）イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）ベンズアミド（化合物Ａ１７）、もしくはその二塩酸塩は、用量約４００〜６００ｍｇ（例えば、１日当たり）、例えば、約４００、５００、もしくは６００ｍｇ、または約４００〜５００もしくは５００〜６００ｍｇで投与される。
【０３２１】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＪＡＫ阻害剤、ルキソリチニブリン酸塩（ＪＡＫＡＦＩとしても知られる；化合物Ａ１８）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／０７０５１４号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＪＡＫ阻害剤は、ルキソリチニブリン酸塩（化合物Ａ１８）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／０７０５１４号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ルキソリチニブリン酸塩（化合物Ａ１８）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／０７０５１４号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、前立腺がん、リンパ性白血病、多発性骨髄腫、リンパ腫、肺がん、白血病、悪液質、乳がん、膵臓がん、関節リウマチ、乾癬、結腸直腸がん、骨髄性白血病、血液がん、自己免疫疾患、非ホジキンリンパ腫、または血小板血症を治療する。１つの実施形態では、該ＪＡＫ阻害剤またはルキソリチニブリン酸塩（化合物Ａ１８）は、用量約１５〜２５ｍｇ、例えば、１日２回投与される。いくつかの実施形態では、該用量は、約１５、２０、もしくは２５ｍｇ、または約１５〜２０もしくは２０〜２５ｍｇである。
【０３２２】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤と組み合わせて使用される。いくつかの実施形態では、該ＨＤＡＣ阻害剤は、パノビノスタット、ボリノスタット、ロミデプシン、チダミド（ｃｈｉｄａｍｉｄｅ）、バルプロ酸、ベリノスタット、ピロキサミド、モセチノスタット、アベキシノスタット、エンチノスタット、プラシノスタット、レスミノスタット、ギビノスタット、キシノスタット、リコリノスタット、ＣＵＤＣ−１０１、ＡＲ−４２、ＣＨＲ−２８４５、ＣＨＲ−３９９６、４ＳＣ−２０２、及びＣＧ２００７４５からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤、パノビノスタット（化合物Ａ１９）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１４／０７２４９３号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＨＤＡＣ阻害剤は、パノビノスタット（化合物Ａ１９）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１４／０７２４９３号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、パノビノスタット（化合物Ａ１９）、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１４／０７２４９３号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、小細胞肺がん、呼吸器／胸部がん、前立腺がん、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、骨がん、非小細胞肺がん、内分泌がん、リンパ腫、神経がん、白血病、ＨＩＶ／ＡＩＤＳ、免疫障害、移植片拒絶反応、胃がん、メラノーマ、乳がん、膵臓がん、結腸直腸がん、多形性膠芽腫、骨髄性白血病、血液がん、腎臓がん、非ホジキンリンパ腫、頭頸部がん、造血障害、または肝臓がんを治療する。１つの実施形態では、該ＨＤＡＣ阻害剤またはパノビノスタット（化合物Ａ１９）は、用量約２０ｍｇ（例えば、１日当たり）で投与される。
【０３２３】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、シトクロムＰ４５０（例えば、１１Ｂ２）、アルドステロン、または血管形成のうちの１つ以上の阻害剤、Ｏｓｉｌｏｄｒｏｓｔａｔ（化合物Ａ２０）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／０２４９４５号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該シトクロムＰ４５０（例えば、１１Ｂ２）、アルドステロン、または血管形成のうちの１つ以上の阻害剤は、Ｏｓｉｌｏｄｒｏｓｔａｔ（化合物Ａ２０）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／０２４９４５号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、Ｏｓｉｌｏｄｒｏｓｔａｔ（化合物Ａ２０）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／０２４９４５号に開示の化合物と組み合わせて使用され、クッシング症候群、高血圧症、または心不全の治療等の障害を治療する。
【０３２４】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＩＡＰ阻害剤、（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−（（Ｓ）−２−（４−（４−フルオロベンゾイル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２−（メチルアミノ）プロパンアミド（化合物Ａ２１）またはＵＳ８，５５２，００３に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＩＡＰ阻害剤は、（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−（（Ｓ）−２−（４−（４−フルオロベンゾイル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２−（メチルアミノ）プロパンアミド（化合物Ａ２１）または米国特許第８，５５２，００３号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−（（Ｓ）−２−（４−（４−フルオロベンゾイル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２−（メチルアミノ）プロパンアミド（化合物Ａ２１）、または米国特許第８，５５２，００３号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、多発性骨髄腫、乳がん、卵巣がん、膵臓がん、または造血障害を治療する。１つの実施形態では、該ＩＡＰ阻害剤または（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−（（Ｓ）−２−（４−（４−フルオロベンゾイル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２−（メチルアミノ）プロパンアミド（化合物Ａ２１）もしくはＵＳ８，５５２，００３に開示の化合物は、用量約１８００ｍｇで、例えば週１回投与される。
【０３２５】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、スムーズンド（ＳＭＯ）阻害剤、ソニデジブリン酸塩（化合物Ａ２２）、（Ｒ）−２−（５−（４−（６−ベンジル−４，５−ジメチルピリダジン−３−イル）−２−メチルピペラジン−１−イル）ピラジン−２−イル）プロパン−２−オール（化合物Ａ２５）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／１３１２０１もしくは第ＷＯ２０１０／００７１２０号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＳＭＯ阻害剤は、ソニデジブリン酸塩（化合物Ａ２２）、（Ｒ）−２−（５−（４−（６−ベンジル−４，５−ジメチルピリダジン−３−イル）−２−メチルピペラジン−１−イル）ピラジン−２−イル）プロパン−２−オール（化合物Ａ２５）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／１３１２０１もしくは第ＷＯ２０１０／００７１２０号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ソニデジブリン酸塩（化合物Ａ２２）、（Ｒ）−２−（５−（４−（６−ベンジル−４，５−ジメチルピリダジン−３−イル）−２−メチルピペラジン−１−イル）ピラジン−２−イル）プロパン−２−オール（化合物Ａ２５）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／１３１２０１号もしくは第ＷＯ２０１０／００７１２０号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、がん、髄芽腫、小細胞肺がん、前立腺がん、基底細胞がん、膵臓がん、または炎症を治療する。特定の実施形態では、ソニデジブリン酸塩（化合物Ａ２２）は、用量約２０〜５００ｍｇ、例えば、約４０ｍｇ〜４００ｍｇ、約５０ｍｇ〜３００ｍｇ、または約１００ｍｇ〜２００ｍｇ、例えば、約５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、または３００ｍｇで投与される。該投薬スケジュールは、例えば、１日おきから毎日、１日２回または３回まで様々でよい。
【０３２６】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、Ａｌｋ阻害剤、セリチニブ（ＺＹＫＡＤＩＡとしても知られる；化合物Ａ２３）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／１３１２０１号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該Ａｌｋ阻害剤は、セリチニブ（化合物Ａ２３）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／１３１２０１号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、セリチニブ（化合物Ａ２３）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／１３１２０１号に開示の化合物と組み合わせて使用され、非小細胞肺がんや充実性腫瘍等の障害を治療する。１つの実施形態では、該Ａｌｋ阻害剤またはセリチニブ（化合物Ａ２３）は、用量約７５０ｍｇで、例えば１日１回投与される。
【０３２７】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＪＡＫ及び／またはＣＤＫ４／６阻害剤、７−シクロペンチル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−（（５−（ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（化合物Ａ２４）、または米国特許第８，４１５，３５５号もしくは米国特許第８，６８５，９８０号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＪＡＫ及び／またはＣＤＫ４／６阻害剤は、７−シクロペンチル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−（（５−（ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（化合物Ａ２４）、または米国特許第８，４１５，３５５号もしくは米国特許第８，６８５，９８０号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、７−シクロペンチル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−（（５−（ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（化合物Ａ２４）、またはＵＳ８，４１５，３５５もしくはＵＳ８，６８５，９８０に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、リンパ腫、神経学的がん、メラノーマ、乳がん、または充実性腫瘍を治療する。１つの実施形態では、該ＪＡＫ及び／またはＣＤＫ４／６阻害剤または７−シクロペンチル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−（（５−（ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（化合物Ａ２４）は、例えば１日当たり、用量約２００〜６００ｍｇで投与される。１つの実施形態では、該化合物は、用量約２００、３００、４００、５００、もしくは６００ｍｇ、または約２００〜３００、３００〜４００、４００〜５００、もしくは５００〜６００ｍｇで投与される。
【０３２８】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＰＩＭキナーゼ阻害剤、Ｎ−（４−（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−アミノ−５−メチルシクロヘキシル）ピリジン−３−イル）−６−（２，６−ジフルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド（化合物Ａ２７）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／０２６１２４号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＰＩＭキナーゼ阻害剤は、Ｎ−（４−（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−アミノ−５−メチルシクロヘキシル）ピリジン−３−イル）−６−（２，６−ジフルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド（化合物Ａ２７）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／０２６１２４号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、Ｎ−（４−（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−アミノ−５−メチルシクロヘキシル）ピリジン−３−イル）−６−（２，６−ジフルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド（化合物Ａ２７）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／０２６１２４号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、骨髄性白血病、または非ホジキンリンパ腫を治療する。
【０３２９】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、Ｗｎｔシグナル伝達阻害剤、２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド（化合物Ａ２８）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／１０１８４９号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該Ｗｎｔシグナル伝達阻害剤は、２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド（化合物Ａ２８）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／１０１８４９号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該Ｗｎｔシグナル伝達阻害剤は、２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド（化合物Ａ２８）である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド（化合物Ａ２８）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／１０１８４９号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、充実性腫瘍（例えば、頭頸部がん、扁平上皮がん、乳がん、膵臓がん、または結腸がん）を治療する。特定の実施形態では、２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド（化合物Ａ２８）は、用量約１〜５０ｍｇ、例えば、約２ｍｇ〜４５ｍｇ、約３ｍｇ〜４０ｍｇ、約５ｍｇ〜３５ｍｇ、５ｍｇ〜１０ｍｇ、または約１０ｍｇ〜３０ｍｇ、例えば、約２ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ、３０ｍｇ、または４０ｍｇで投与される。該投薬スケジュールは、例えば、１日おきから毎日、１日２回または３回まで様々でよい。
【０３３０】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＢＲＡＦ阻害剤、エンコラフェニブ（化合物Ａ２９）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１１／０２５９２７号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＢＲＡＦ阻害剤は、エンコラフェニブ（化合物Ａ２９）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１１／０２５９２７号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、エンコラフェニブ（化合物Ａ２９）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１１／０２５９２７号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、非小細胞肺がん、メラノーマ、または結腸直腸がんを治療する。１つの実施形態では、該ＢＲＡＦ阻害剤またはエンコラフェニブ（化合物Ａ２９）は、例えば、１日当たり、用量約２００〜３００、２００〜４００、または３００〜４００ｍｇで投与される。１つの実施形態では、該化合物は、用量約２００、約３００、または約４００ｍｇで投与される。
【０３３１】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＣＤＫ４／６阻害剤、７−シクロペンチル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−（（５−（（１Ｒ，６Ｓ）−９−メチル−４−オキソ−３，９−ジアザビシクロ［４．２．１］ノナン−３−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（化合物Ａ３０）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１１／１０１４０９号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＣＤＫ４／６阻害剤は、７−シクロペンチル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−（（５−（（１Ｒ，６Ｓ）−９−メチル−４−オキソ−３，９−ジアザビシクロ［４．２．１］ノナン−３−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（化合物Ａ３０）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１１／１０１４０９号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、７−シクロペンチル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−（（５−（（１Ｒ，６Ｓ）−９−メチル−４−オキソ−３，９−ジアザビシクロ［４．２．１］ノナン−３−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（化合物Ａ３０）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１１／１０１４０９号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、がん、マントル細胞リンパ腫、脂肪肉腫、非小細胞肺がん、メラノーマ、食道扁平上皮がん、または乳がんを治療する。
【０３３２】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＭＥＫ阻害剤、ビニメチニブ（化合物Ａ３４）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００３／０７７９１４号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＭＥＫ阻害剤は、ビニメチニブ（化合物Ａ３４）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００３／０７７９１４号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ビニメチニブ（化合物Ａ３４）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００３／０７７９１４号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、非小細胞肺がん、多系統遺伝性疾患、メラノーマ、卵巣がん、消化器／消化管がん、関節リウマチ、または結腸直腸がんを治療する。１つの実施形態では、該ＭＥＫ阻害剤またはビニメチニブ（化合物Ａ３４）は、例えば、１日２回、用量約４５ｍｇで投与される。
【０３３３】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ｃ−ＫＩＴ、ヒスタミン遊離、Ｆｌｔ３（例えば、ＦＬＫ２／ＳＴＫ１）またはＰＫＣのうちの１つ以上の阻害剤、ミドスタウリン（化合物Ａ３５）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００３／０３７３４７号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該阻害剤は、ミドスタウリン（化合物Ａ３５）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００３／０３７３４７号に開示の化合物である。１つの実施形態では、ｃ−ＫＩＴ、ヒスタミン遊離、Ｆｌｔ３（例えば、ＦＬＫ２／ＳＴＫ１）またはＰＫＣのうちの該１つ以上の阻害剤はミドスタウリンである。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ミドスタウリン（化合物Ａ３５）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００３／０３７３４７号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、がん、結腸直腸がん、骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、加齢黄斑変性、糖尿病性合併症、または皮膚疾患を治療する。
【０３３４】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＴＯＲ阻害剤（例えば、ｍＴＯＲ阻害剤）、エベロリムス（ＡＦＩＮＩＴＯＲとしても知られる；化合物Ａ３６）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１４／０８５３１８号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する）。１つの実施形態では、該ＴＯＲ阻害剤は、エベロリムス（化合物Ａ３６）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１４／０８５３１８号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、エベロリムス（化合物Ａ３６）と組み合わせて使用され、障害、例えば、間質性肺炎、小細胞肺がん、呼吸器／胸部がん、前立腺がん、多発性骨髄腫、肉腫、加齢黄斑変性、骨がん、結節硬化、非小細胞肺がん、内分泌がん、リンパ腫、神経障害、星細胞腫、子宮頸がん、神経学的がん、白血病、免疫疾患、移植片拒絶反応、胃がん、メラノーマ、てんかん、乳がん、または膀胱がんを治療する。１つの実施形態では、該ＴＯＲ阻害剤またはエベロリムスは（化合物Ａ３６）、用量約２．５〜２０ｍｇ／日で投与される。１つの実施形態では、該化合物は、用量約２．５、５、１０、または２０ｍｇ／日、例えば、約２．５〜５、５〜１０、または１０〜２０ｍｇ／日で投与される。
【０３３５】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＶＥＧＦＲ−２、ＰＤＧＦＲベータ、ＫＩＴまたはＲａｆキナーゼＣのうちの１つ以上の阻害剤、１−メチル−５−（（２−（５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピリジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−アミン（化合物Ａ３７）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／０３０３７７号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、ＶＥＧＦＲ−２、ＰＤＧＦＲベータ、ＫＩＴまたはＲａｆキナーゼＣのうちの該１つ以上の阻害剤は、１−メチル−５−（（２−（５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピリジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−アミン（化合物Ａ３７）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／０３０３７７号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、１−メチル−５−（（２−（５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピリジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−アミン（化合物Ａ３７）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／０３０３７７号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、がん、メラノーマ、または充実性腫瘍を治療する。
【０３３６】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ソマトスタチンアゴニスト及び／または成長ホルモン放出阻害剤、パシレオチドジアスパルタート（ＳＩＧＮＩＦＯＲとしても知られる；化合物Ａ３８）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００２／０１０１９２号もしくは米国特許第７，４７３，７６１号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ソマトスタチンアゴニスト及び／または成長ホルモン放出阻害剤は、パシレオチドジアスパルタート（化合物Ａ３８）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００２／０１０１９２号もしくは米国特許第７，４７３，７６１号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、パシレオチドジアスパルタート（化合物Ａ３８）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００２／０１０１９２号もしくは米国特許第７，４７３，７６１号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、前立腺がん、内分泌がん、神経学的がん、皮膚がん（例えば、メラノーマ）、膵臓がん、肝臓がん、クッシング症候群、胃腸障害、末端肥大症、肝胆道障害、または肝硬変を治療する。
【０３３７】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、シグナル伝達調節因子及び／または血管形成阻害剤、ドビチニブ（化合物Ａ３９）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００９／１１５５６２号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該シグナル伝達調節因子及び／または血管形成阻害剤は、ドビチニブ（化合物Ａ３９）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００９／１１５５６２号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ドビチニブ（化合物Ａ３９）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００９／１１５５６２号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、がん、呼吸器／胸部がん、多発性骨髄腫、前立腺がん、非小細胞肺がん、内分泌がん、または遺伝性神経疾患を治療する。
【０３３８】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＥＧＦＲ阻害剤、（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（化合物Ａ４０）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１３／１８４７５７号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＥＧＦＲ阻害剤は、（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（化合物Ａ４０）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１３／１８４７５７号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（化合物Ａ４０）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１３／１８４７５７号に開示の化合物と組み合わせて使用され、がん、例えば、充実性腫瘍等の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＥＧＦＲ阻害剤または（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（化合物Ａ４０）は、例えば、１日当たり、用量１５０〜２５０ｍｇで投与される。１つの実施形態では、該化合物は、用量約１５０、２００、もしくは２５０ｍｇ、または約１５０〜２００もしくは２００〜２５０ｍｇで投与される。
【０３３９】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＡＬＫ阻害剤、Ｎ６−（２−イソプロポキシ−５−メチル−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）フェニル）−Ｎ４−（２−（イソプロピルスルホニル）フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４，６−ジアミン（化合物Ａ４２）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００８／０７３６８７号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＡＬＫ阻害剤は、Ｎ６−（２−イソプロポキシ−５−メチル−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）フェニル）−Ｎ４−（２−（イソプロピルスルホニル）フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４，６−ジアミン（化合物Ａ４２）またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００８／０７３６８７号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、Ｎ６−（２−イソプロポキシ−５−メチル−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）フェニル）−Ｎ４−（２−（イソプロピルスルホニル）フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４，６−ジアミン（化合物Ａ４２）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２００８／０７３６８７号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、がん、未分化大細胞リンパ腫（ＡＬＣＬ）、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、または神経芽細胞腫を治療する。
【０３４０】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＩＧＦ−１Ｒ阻害剤、３−（４−（４−（（５−クロロ−４−（（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−２−イル）アミノ）−５−フルオロ−２−メチルフェニル）ピペリジン−１−イル）チエタン１，１−ジオキシド（化合物Ａ４３）、５−クロロ−Ｎ２−（２−フルオロ−５−メチル−４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピペリジン−４−イル）フェニル）−Ｎ４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン（化合物Ａ４４）、または５−クロロ−Ｎ２−（４−（１−エチルピペリジン−４−イル）−２−フルオロ−５−メチルフェニル）−Ｎ４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン（化合物Ａ４５）もしくはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／００２６５５号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＩＧＦ−１Ｒ阻害剤は、３−（４−（４−（（５−クロロ−４−（（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−２−イル）アミノ）−５−フルオロ−２−メチルフェニル）ピペリジン−１−イル）チエタン１，１−ジオキシド（化合物Ａ４３）、５−クロロ−Ｎ２−（２−フルオロ−５−メチル−４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピペリジン−４−イル）フェニル）−Ｎ４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン（化合物Ａ４４）、５−クロロ−Ｎ２−（４−（１−エチルピペリジン−４−イル）−２−フルオロ−５−メチルフェニル）−Ｎ４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン（化合物Ａ４５）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／００２６５５号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、３−（４−（４−（（５−クロロ−４−（（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−２−イル）アミノ）−５−フルオロ−２−メチルフェニル）ピペリジン−１−イル）チエタン１，１−ジオキシド（化合物Ａ４３）、５−クロロ−Ｎ２−（２−フルオロ−５−メチル−４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピペリジン−４−イル）フェニル）−Ｎ４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン（化合物Ａ４４）、５−クロロ−Ｎ２−（４−（１−エチルピペリジン−４−イル）−２−フルオロ−５−メチルフェニル）−Ｎ４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン（化合物Ａ４５）、またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／００２６５５に開示の化合物と組み合わせて使用され、がんや肉腫等の障害を治療する。
【０３４１】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、Ｐ糖タンパク質１阻害剤、バルスポダール（Ｖａｌｓｐｏｄａｒ）（ＡＭＤＲＡＹとしても知られる；化合物Ａ４６）またはＥＰ２９６１２２に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該Ｐ糖タンパク質１阻害剤は、バルスポダール（Ｖａｌｓｐｏｄａｒ）（化合物Ａ４６）またはＥＰ２９６１２２に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、バルスポダール（Ｖａｌｓｐｏｄａｒ）（化合物Ａ４６）、またはＥＰ２９６１２２に開示の化合物と組み合わせて使用され、がんや薬剤耐性腫瘍等の障害を治療する。
【０３４２】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＶＥＧＦＲ阻害剤、コハク酸バタラニブ（化合物Ａ４７）またはＷＯ９８／３５９５８に開示の化合物のうちの１つ以上と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＶＥＧＦＲ阻害剤は、コハク酸バタラニブ（化合物Ａ４７）またはＷＯ９８／３５９５８に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、コハク酸バタラニブ（化合物Ａ４７）、またはＥＰ２９６１２２に開示の化合物と組み合わせて使用され、がんを治療する。
【０３４３】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＩＤＨ阻害剤またはＷＯ２０１４／１４１１０４に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＩＤＨ阻害剤はＰＣＴ公開第ＷＯ２０１４／１４１１０４号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ＷＯ２０１４／１４１１０４に開示の化合物と組み合わせて使用され、がん等の障害を治療する。
【０３４４】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＢＣＬ−ＡＢＬ阻害剤またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１３／１７１６３９号、第ＷＯ２０１３／１７１６４０号、第ＷＯ２０１３／１７１６４１号、もしくは第ＷＯ２０１３／１７１６４２号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＢＣＬ−ＡＢＬ阻害剤は、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１３／１７１６３９号、第ＷＯ２０１３／１７１６４０号、第ＷＯ２０１３／１７１６４１号、または第ＷＯ２０１３／１７１６４２号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１３／１７１６３９号、第ＷＯ２０１３／１７１６４０号、第ＷＯ２０１３／１７１６４１号、または第ＷＯ２０１３／１７１６４２号に開示の化合物と組み合わせて使用され、がん等の障害を治療する。
【０３４５】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ｃ−ＲＡＦ阻害剤またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１４／１５１６１６号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ｃ−ＲＡＦ阻害剤は、化合物Ａ５０またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１４／１５１６１６号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１４／１５１６１６に開示の化合物と組み合わせて使用され、がん等の障害を治療する。
【０３４６】
別の実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、ＥＲＫ１／２  ＡＴＰ拮抗阻害剤またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１５／０６６１８８号に開示の化合物と組み合わせて使用され、障害、例えば、本明細書に記載の障害を治療する。１つの実施形態では、該ＥＲＫ１／２  ＡＴＰ拮抗阻害剤はＰＣＴ公開第ＷＯ２０１５／０６６１８８号に開示の化合物である。１つの実施形態では、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、化合物Ａ５１またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１５／０６６１８８号に開示の化合物と組み合わせて使用され、がん等の障害を治療する。いくつかの実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、及び化合物Ａ５１もしくはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１５／０６６１８８号に開示の化合物を含む組合せは、化合物Ａ８、化合物Ａ１７、化合物Ａ２３、化合物Ａ２４、化合物Ａ２７、化合物Ａ２９、及び化合物Ａ３３から選択される１つ以上の薬剤と組み合わせて投与される。
【０３４７】
いくつかの実施形態では、該組合せ、例えば、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物を含む組合せは、免疫細胞アッセイ、例えば、当技術分野で既知であり、当該化合物が免疫反応を阻害しないことを実証する（すなわち、かかるアッセイでほとんど阻害しないことを実証する）ために使用することができるｈｕＭＬＲアッセイ、Ｔ細胞増殖アッセイ、及びＢ細胞増殖アッセイのうちの１つ以上で既知の活性を有する抗がん剤と組み合わせて投与される。かかるアッセイにおけるＩＣ５０は、該モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物と組み合わせて使用される当該化合物に対して測定され得る。実施形態では、該抗がん剤は、ＩＣ５０が、例えば、＞１μＭ、１〜４μＭであるか、または４μＭより高く、例えば、４〜１０μＭもしくは４〜２０μＭであるか、もしくは２０μＭより高い。実施形態では、該第二の治療薬は：化合物Ａ９、化合物Ａ１６、化合物Ａ１７、化合物Ａ２１、化合物Ａ２２、化合物Ａ２５、化合物Ａ２８、化合物Ａ４８、及び化合物Ａ４９のうちの１つ以上から選択される。
【０３４８】
いくつかの実施形態では、該化合物Ａ２８（または化合物Ａ２８に関連する化合物）は、用量約５〜１０または１０〜３０ｍｇで投与される。いくつかの実施形態では、該化合物Ａ２２（または化合物Ａ２２に関連する化合物）は、用量約２００ｍｇで投与される。いくつかの実施形態では、該化合物Ａ１７（または化合物Ａ１７に関連する化合物）は、用量約４００〜６００ｍｇで投与される。いくつかの実施形態では、該化合物Ａ１６（または化合物Ａ１６に関連する化合物）は、用量約４００〜６００ｍｇＰＯ  ｑＤａｙで投与される。いくつかの実施形態では、該化合物Ａ２９（または化合物Ａ２９に関連する化合物）は、用量約２００〜４００または３００〜４００ｍｇで投与される。いくつかの実施形態では、該化合物Ａ２４（または化合物Ａ２４に関連する化合物）は、用量約２００〜６００ｍｇで投与される。いくつかの実施形態では、該化合物Ａ２３（セリチニブ）（またはセリチニブに関連する化合物）は、用量約７５０ｍｇで１日１回投与される。いくつかの実施形態では、該化合物Ａ８（または化合物Ａ８に関連する化合物）は、用量約２００〜４００または３００〜４００ｍｇで投与される。いくつかの実施形態では、該化合物Ａ５（または化合物Ａ５に関連する化合物）は、用量約１００〜１２５ｍｇで投与される。いくつかの実施形態では、該化合物Ａ６（または化合物Ａ６に関連する化合物）は、用量約１００ｍｇで投与される。いくつかの実施形態では、該化合物Ａ１（または化合物Ａ１に関連する化合物）は、用量約２００〜３００または２００〜６００ｍｇで投与される。いくつかの実施形態では、該化合物Ａ４０（または化合物Ａ４０に関連する化合物）は、用量約１５０〜２５０ｍｇで投与される。実施形態では、該化合物Ａ１０（または化合物Ａ１０に関連する化合物）は、用量約４００〜７００ｍｇで投与され、例えば、週３回、２週間投与し、１週間は休む。実施形態では、該ＢＣＲ−ＡＢＬ阻害剤は、用量約２０ｍｇ  ｂｉｄ〜８０ｍｇ  ｂｉｄで投与される。
【０３４９】
表２．本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物と組み合わせて投与することができる治療薬。
【０３５０】
【表１】
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【０３５１】
免疫調節性細胞株
「不活化腫瘍細胞」とは、当該細胞の分裂を防ぐように処理された腫瘍細胞（当該患者にとって「自己」または「同種異系」のいずれか）を意味する。本発明の目的のため、かかる細胞はそれらの免疫原性及びそれらの代謝活性を保つ。かかる腫瘍細胞は、がん治療の一部として、患者内で発現される導入遺伝子を発現するように遺伝子操作される。従って、本発明の組成物またはワクチンは、治療を受ける患者にとって自己または同種異系の新生（例えば、腫瘍）細胞を含み、最も好ましくは、該患者を苦しめているのと同じ一般型の腫瘍細胞である。例えば、メラノーマに罹患している患者は通常、メラノーマ由来の遺伝子操作された細胞を投与される。本発明で使用される腫瘍細胞の不活化方法、例えば、照射の使用は、当技術分野では周知である。
【０３５２】
いくつかの実施形態では、本発明の不活化腫瘍細胞は、１つ以上の熱ショックタンパク質を発現及び分泌するように操作される。例えば、ｇｐ９６−Ｉｇ融合タンパク質が、免疫反応を刺激するために発現及び分泌される場合がある（Ｙａｍａｚａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，  １９９９，  １６３：５１７８−５１８２；  Ｓｔｒｂｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｒｅｓ．  ２０１３  Ｄｅｃ；５７（１−３）：３１１−２５）。いくつかの実施形態では、該不活化腫瘍細胞は、ｇｐ９６−Ｉｇ融合タンパク質を発現及び分泌するように操作される。
【０３５３】
本発明の不活化腫瘍細胞は、１つ以上の副刺激分子や薬剤と一緒に当該患者に投与される。好ましい副刺激剤は、樹状細胞の誘導、動員、及び／または成熟を刺激する１つ以上のサイトカインを含む。かかる副刺激剤を評価する方法は、文献で周知である。ＤＣの誘導及び成熟は、通常、刺激後のＣＤ８０及びＣＤ８６等の特定の膜分子の発現の増加によって、及び／またはＩＬ−１２及びＩ型インターフェロン等の炎症性サイトカインの分泌によって評価される。
【０３５４】
好ましい実施形態では、該不活化腫瘍細胞自体は、樹状細胞の誘導、動員、及び／または成熟を刺激する１つ以上のサイトカインを発現及び分泌するように操作される。本発明は、模範的な面で、ＧＭ−ＣＳＦの使用に関して記載される。従って、例として、該腫瘍細胞は、米国特許第５，６３７，４８３号、第５，９０４，９２０号、第６，２７７，３６８号、及び第６，３５０，４４５号、ならびに米国特許出願第２０１００１５０９４６号に記載の通り、ＧＭ−ＣＳＦをコードする導入遺伝子を発現し得る。膵臓がんの治療用のＧＭ−ＣＳＦ発現遺伝子操作がん細胞または「サイトカイン発現細胞ワクチン」の形態は、米国特許第６，０３３，６７４号及び第５，９８５，２９０号に記載されている。
【０３５５】
ＧＭ−ＣＳＦの代わりに、またはそれと一緒に、かかる不活化腫瘍細胞及び／またはバイスタンダー細胞によって発現され得る他の適切なサイトカインとしては、１つ以上のＣＤ４０リガンド、ＦＬＴ−３リガンド、ＩＬ−１２、ＣＣＬ３、ＣＣＬ２０、及びＣＣＬ２１が挙げられるがこれらに限定されない。このリストは、限定することを意図しない。
【０３５６】
当該対象に投与される該不活化腫瘍細胞は、１つ以上の目的のサイトカインを発現することが好ましいが、該腫瘍細胞株は、樹状細胞の誘導、動員、及び／または成熟を刺激する１つ以上のサイトカインを発現及び分泌する不活化バイスタンダー細胞株を伴う場合がある。該バイスタンダー細胞株は、樹状細胞の誘導、動員、及び／または成熟を刺激するサイトカインのすべてを与える場合があるか、または、該不活化腫瘍細胞によって発現及び分泌される、樹状細胞の誘導、動員、及び／または成熟を刺激するサイトカインを補う場合がある。例として、免疫調節性サイトカイン発現バイスタンダー細胞株は、米国特許第６，４６４，９７３号及び第８，０１２，４６９号、Ｄｅｓｓｕｒｅａｕｌｔ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｎ．  Ｓｕｒｇ．  Ｏｎｃｏｌ．  １４：  ８６９−８４，  ２００７，ならびにＥａｇｅｒ  ａｎｄ  Ｎｅｍｕｎａｉｔｉｓ，  Ｍｏｌ．  Ｔｈｅｒ．  １２：  １８−２７，  ２００５に開示されている。
【０３５７】
「顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）ポリペプチド」とは、免疫調節活性を有し、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＡ５２１２２．１と少なくとも約８５％のアミノ酸配列同一性を有するサイトカインまたはその断片を意味する。
【０３５８】
ワクチン
特定の実施形態では、該ＣＤＮ組成物は、１つ以上の所定の抗原に対する免疫反応を刺激することを目的とする１つ以上のワクチンとともに投与される。本発明で用途を見出し得る標的抗原の例を以下の表に記載する。該標的抗原はまた、該表に記載の抗原の免疫学的に活性な部分を含む断片または融合ポリペプチドであってもよい。このリストは、限定することを意図しない。
表１．抗原
【０３５９】
【表２】
0006692826.tif 000079
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【０３６０】
当技術分野で適切な抗原が知られる他の生物としては、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ（Ａ群連鎖球菌）、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａ（Ｂ群連鎖球菌）、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｅａｅ、Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ種（ｔｙｐｈｉ、ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ等）、エンテリカ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｏｒ  ｐｙｌｏｒｉ  Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｆｌｅｘｎｅｒｉ及び他のＤ群ｓｈｉｇｅｌｌａ種等）、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｍａｌｌｅｉ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ種（Ｃ．  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ等）、Ｖｉｂｒｉｏ  ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ、ならびにＶ．  ｖｕｌｎｉｆｉｃｕｓが挙げられるがこれらに限定されない。このリストは、限定することを意図しない。
【０３６１】
医薬組成物
【０３６２】
本明細書で用いられる「医薬」という用語は、疾患の治癒、治療、または予防に使用するための化学物質を指し、これは、処方薬または店頭薬として米国食品医薬品局（または非米国の同様のもの）による承認審査方式の対象である。かかる組成物の処方及び投与技術の詳細は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ２１ｓｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  （Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，  Ｅａｓｔｏｎ，  ＰＡ）及びＮｉｅｌｌｏｕｄ  ａｎｄ  Ｍａｒｔｉ−Ｍｅｓｔｒｅｓ，  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ：  ２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  （Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，  Ｉｎｃ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）に見出され得る。
【０３６３】
本開示の目的のため、該医薬組成物は、非経口でない、非経口、吸入噴霧経由、局所的、または直腸内等の様々な方法によって、医薬的に許容される担体、アジュバント、及び媒体を含む処方で投与され得る。「非経口でない投与」は、経口、口腔、舌下、局所、経皮、眼、耳、鼻、直腸、子宮頸部、肺、粘膜、及び膣経路を包含する。本明細書で用いられる非経口という用語は、様々な注入技術での皮下、静脈内、筋肉内、動脈内、皮内、髄腔内、及び硬膜外注射を含むがこれらに限定されない。本明細書で用いられる動脈内及び静脈内注射には、カテーテルを通した投与が含まれる。冠動脈内ステント及び冠動脈内リザーバーを介した投与もまた企図される。本発明の化合物の腫瘍内（直接腫瘍塊内）または腫瘍周囲（腫瘍塊の周り）への投与は、局部浸潤性ＤＣを直接活性化する場合、腫瘍細胞のアポトーシスを直接促進する場合、または細胞毒性薬に対して腫瘍細胞を過敏にする場合がある。本明細書で用いられる経口という用語は、経口摂取、または舌下もしくは口腔経路による送達を含むがこれに限定されない。経口投与には、錠剤処方だけでなく、液体飲料、エネルギーバーも含まれる。
【０３６４】
医薬組成物は、意図した投与方法に適する任意の形態でよい。経口用に使用される場合、例えば、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性もしくは油性懸濁液、分散性粉末もしくは顆粒、エマルション、硬もしくは軟カプセル、シロップまたはエリキシル剤が調製され得る。経口用の組成物は、当技術分野で知られる医薬組成物の任意の製造方法に従って調製され得るとともに、かかる組成物は、口当たりの良い製剤を提供するために、甘味剤、香味剤、着色剤、及び保存剤が挙げられる１つ以上の薬剤を含んでもよい。錠剤の製造に適した非毒性の医薬的に許容される賦形剤との混合で薬剤化合物を含む錠剤が好ましい。これらの賦形剤は、例えば、不活性希釈剤、例えば、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウム；造粒剤及び崩壊剤、例えば、トウモロコシデンプン、もしくはアルギン酸；結合剤、例えば、デンプン、ゼラチンまたはアカシア；ならびに滑沢剤；例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクでよい。錠剤は素錠でも、消化管での崩壊及び吸収を遅らせるため及び／または、長期間にわたって持続作用をもたらすための腸溶性コーティング、結腸コーティング、またはマイクロカプセル化等の既知の技術によってコートされてもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリルやジステアリン酸グリセリル等の遅延材料を単独で、またはワックスとともに使用してもよい。
【０３６５】
経口用処方はまた、薬剤化合物が不活性固体希釈剤、例えば、リン酸カルシウムもしくはカオリンと混合される硬ゼラチンカプセルとして、または活性成分が水もしくは油媒体、例えば、落花生油、流動パラフィンもしくはオリーブ油と混合される軟ゼラチンカプセルとして提供されてもよい。
【０３６６】
医薬組成物は、水性懸濁液の製造に適した賦形剤と混合して水性懸濁液として処方され得る。かかる賦形剤としては、懸濁剤、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴム及びアカシアゴム、ならびに分散剤または湿潤剤、例えば、天然に存在するホスファチド（例えば、レシチン）、アルキレンオキシドと脂肪酸の縮合物（例えば、ポリオキシエチレンステアレート）、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールの縮合物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、エチレンオキシドと、脂肪酸と無水ヘキシトールから得られる部分エステルとの縮合物（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート）が挙げられる。該水性懸濁液はまた、１つ以上の保存剤、例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルまたはｐ−ヒドロキシ安息香酸ｎ−プロピル、１つ以上の着色剤、１つ以上の香味剤、及び１つ以上の甘味剤、例えば、スクロースまたはサッカリンを含んでよい。
【０３６７】
油性懸濁液は、活性成分を植物油、例えば、落花生油、オリーブ油、ゴマ油、もしくはココナッツ油、または鉱油、例えば、流動パラフィンに懸濁することによって処方され得る。該経口懸濁液は、増粘剤、例えば、蜜蝋、固形パラフィン、またはセチルアルコールを含んでよい。甘味剤、例えば、上記のもの、及び香味剤を添加して口当たりの良い経口製剤を提供してもよい。これらの組成物は、アスコルビン酸等の酸化防止剤の添加によって保存され得る。
【０３６８】
水の添加による水性懸濁液の調製に適する本開示の分散性粉末及び顆粒は、活性成分を分散剤または湿潤剤、懸濁剤、及び１つ以上の保存剤との混合で提供する。適切な分散剤または湿潤剤及び懸濁剤は、上記に開示のもので例示される。さらなる賦形剤、例えば、甘味、香味、及び着色剤もまた含まれ得る。
【０３６９】
本開示の医薬組成物は、水中油型エマルションの形でもよい。該油相は、植物油、例えば、オリーブ油もしくは落花生油、鉱油、例えば流動パラフィン、またはそれらの混合物でよい。適切な乳化剤としては、天然に存在するゴム、例えば、アカシアゴム及びトラガカントゴム、天然に存在するホスファチド、例えば、大豆レシチン、脂肪酸と無水ヘキシトールから得られるエステルまたは部分エステル、例えば、ソルビタンモノオレエート、ならびにこれらの部分エステルとエチレンオキシドとの縮合物、例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートが挙げられる。該エマルションはまた、甘味及び香味剤を含んでよい。
【０３７０】
シロップ及びエリキシル剤は、甘味剤、例えば、グリセロール、ソルビトール、またはスクロースとともに処方され得る。かかる処方はまた、粘滑薬、保存剤、香味剤、または着色剤を含んでよい。
【０３７１】
本開示の医薬組成物は、滅菌注射用製剤、例えば、滅菌注射用水性または油性懸濁液の形でもよい。この懸濁液は、既知の技術に従って、上述した適切な分散剤または湿潤剤、及び懸濁剤を用いて処方され得る。該滅菌注射用製剤はまた、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶剤の滅菌注射用溶液もしくは懸濁液、例えば、１，３−ブタンジオール溶液でもよいし、凍結乾燥粉末として調製されてもよい。使用され得る許容される媒体及び溶剤の中には、水、リンガー溶液、及び等張塩化ナトリウム溶液が含まれる。さらに、滅菌固定油は便宜上溶剤または懸濁媒体として使用され得る。このために、合成モノ−またはジグリセリドを含めた任意の無味の固定油が使用され得る。さらに、オレイン酸等の脂肪酸も同様に注射物質の調製に使用され得る。
【０３７２】
１つの剤形を製造するために担体物質と組み合わせることができる活性成分の量は、治療される宿主及び個別の投与方法に応じて異なる。例えば、ヒトへの経口投与用の徐放性処方は、組成物全体の約５〜約９５％まで様々でよい適切かつ便宜的な量の担体材料と配合される、約２０〜５００ｍｇの活性物質を含み得る。容易に測定可能な投与量を与える医薬組成物が調製されることが好ましい。通常、有効全身投与量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇであり、例えば、当該対象（例えば、ヒト等の哺乳類）の年齢及び体重、治療を必要としている正確な状態及びその重症度、投与経路を含めた複数の要因に依存し、最終的には主治医または獣医の裁量であろう。しかしながら、当業者にはよく理解されるように、任意の特定の患者に特異的な用量レベルは、使用される特定の化合物の活性、治療される個体の年齢、体重、全身状態、性別、及び食事；投与の時間及び経路；排せつ率；以前に投与された他の薬物；ならびに治療を受けている特定の状態の重症度を含めた様々な要因に依存することが理解されよう。
【０３７３】
上述したように、経口投与に適した本開示の処方は、それぞれが所定量の活性成分を粉末もしくは顆粒として；水性もしくは非水性液体の溶液もしくは懸濁液として、または水中油型液体エマルションもしくは油中水型液体エマルションとして含む別々の単位、例えば、カプセル、カシェー、または錠剤として提供され得る。該医薬組成物はまた、ボーラス、舐剤、またはペーストとしても投与され得る。
【０３７４】
錠剤は、圧縮または成形によって、任意に１つ以上の補助成分とともに製造され得る。圧縮錠は、任意に結合剤（例えば、ポビドン、ゼラチン、ヒドロキシプロピルエチルセルロース）、滑沢剤、不活性希釈剤、保存剤、崩壊剤（例えば、デンプングリコール酸ナトリウム、架橋ポビドン、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）、界面活性剤もしくは分散剤と混合される粉末または顆粒等の自由流動形態の該活性成分を適切な機械で圧縮することによって調製され得る。成形錠は、不活性希釈液で湿らせた該化合物粉末の混合物を用いて、適切な機械にて製造され得る。該錠剤は、任意に被覆または分割されてもよく、また、所望の放出特性を得るため、その中の該活性成分の持続もしくは制御放出をもたらすように、例えば、様々な割合でヒドロキシプロピルメチルセルロースを用いて処方されてもよい。錠剤は任意に、胃以外の腸の一部で放出させる腸溶性または結腸コーティングを設けられてもよい。これは特に、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物が酸加水分解されやすい場合にかかる化合物に都合がよい。
【０３７５】
口内の局所投与に適した処方としては、香味基材、通常スクロース及びアカシアまたはトラガカント中に該活性成分を含むロゼンジ；不活性基材、例えば、ゼラチン及びグリセリン、またはスクロース及びアカシア中に該活性成分を含む錠剤；ならびに適切な液体担体中に該活性成分を含むマウスウォッシュが挙げられる。
【０３７６】
直腸投与用の処方は、例えば、ココアバターまたはサリシレートを含む適切な基材での坐剤として提供され得る。
【０３７７】
膣内投与に適した処方は、該活性成分に加えて当技術分野で適切であることが既知であるような担体を含む、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム、またはスプレー処方として提供され得る。
【０３７８】
非経口投与に適した処方としては、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤、及び該処方を意図するレシピエントの血液と等張にする溶質を含んでよい水性ならびに非水性等張滅菌注射液；ならびに懸濁剤及び増粘剤を含んでよい水性ならびに非水性滅菌懸濁液が挙げられる。該処方は、単位用量または多用量の密閉容器、例えば、アンプル及びバイアルに含まれてもよいし、また、使用の直前に滅菌液体担体、例えば注射用の水の添加のみしか必要としないフリーズドライ（凍結乾燥）の状態で保存されてもよい。注射溶液及び懸濁液は、先に記載の滅菌粉末、顆粒、及び錠剤から調製され得る。
【０３７９】
開示の化合物またはその塩が命名または構造で描写される場合、該化合物または塩は、その溶媒和物（特に水和物）を含めて結晶形、非結晶形、またはそれらの混合物で存在し得ることを理解されたい。該化合物または塩、もしくはその溶媒和物（特に水和物）はまた、多形（すなわち、異なる結晶形で存在する能力）を呈し得る。これらの異なる結晶形は通常、「多形体」として知られる。命名または構造で描写される場合、本開示の化合物またはその溶媒和物（特に水和物）はまた、そのすべての多形体を含むことを理解されたい。多形体は、同じ化学組成を有するが、該結晶性固体状態の充填、幾何学的配置、及び他の記述的特性が異なる。多形体は、異なる物性、例えば、密度、形状、硬度、安定性、及び溶解特性を有し得る。多形体は、通常、異なる融点、ＩＲスペクトル、及びＸ線粉末回折図形を呈し、これらは同定に用いられる場合がある。当業者であれば、異なる多形体が、例えば、該化合物の結晶化または再結晶の際に用いられる条件を変更または調整することによって製造され得ることが理解されよう。
【０３８０】
結晶形の本発明の化合物の溶媒和物またはそれらの塩に関しては、当業者には、結晶化の間に溶媒分子が当該結晶格子に組み込まれる、医薬的に許容される溶媒和物が形成され得ることが理解されよう。溶媒和物は、非水性溶媒、例えば、エタノール、イソプロパノール、ジメチルスルホキシド、酢酸、エタノールアミン、及び酢酸エチルを含む場合も、水を当該結晶格子に組み込まれる溶媒として含む場合もある。水が当該結晶格子に組み込まれる溶媒である溶媒和物は、通常「水和物」と呼ばれる。水和物には、化学量論的水和物も可変量の水を含む組成物も含まれる。本発明は、すべてのかかる溶媒和物を含む。
【０３８１】
それらの医薬に利用できる可能性のため、本発明の化合物の塩は、医薬的に許容されるのが好ましい。適切な医薬的に許容される塩としては、Ｐ．  Ｈｅｉｎｒｉｃｈ  Ｓｔａｈｌ  ａｎｄ  Ｃａｍｉｌｌｅ  Ｇ．  Ｗｅｒｍｕｔｈ  ｉｎ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，  ａｎｄ  Ｕｓｅ，  ２ｎｄ  ｅｄ．  （Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ：  ２０１１）、また、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  １８ｔｈ  ｅｄ．  （Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，  Ｅａｓｔｏｎ  ＰＡ：  １９９０）、同様にＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，  １９ｔｈ  ｅｄ．  （Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，  Ｅａｓｔｏｎ  ＰＡ：  １９９５）に記載のものが挙げられる。「医薬的に許容される塩」という用語に包含される塩は、本発明の化合物の非毒性の塩を指す。
【０３８２】
塩基性アミンまたは他の塩基性官能基を含む本発明の化合物の塩は、当該遊離塩基を無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等、または有機酸、例えば、酢酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、コハク酸、マンデル酸、フマル酸、マロン酸、ギ酸、アルギン酸、ピルビン酸、シュウ酸、グリコール酸、サリチル酸、ピラノシルジル酸（ｐｙｒａｎｏｓｉｌｄｙｌ  ａｃｉｄ）、例えば、グルクロン酸またはガラクツロン酸、アルファヒドロキシ酸、例えば、クエン酸または酒石酸、アミノ酸、例えば、アスパラギン酸またはグルタミン酸、芳香族酸、例えば、安息香酸または桂皮酸、スルホン酸、例えば、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸等で処理することを含む、当技術分野で既知の任意の適切な方法によって調製され得る。医薬的に許容される塩の例としては、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、リン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオール酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−１，４−二酸塩、ヘキシン−１，６−二酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニルブトレート（ｐｈｅｎｙｌｂｕｔｒａｔｅ）、クエン酸塩、乳酸塩、グリコール酸塩、樹脂酸塩、乳酸塩、カンシル酸塩、酒石酸塩、マンデル酸塩、並びにスルホン酸塩、例えばキシレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、及びナフタレン−２−スルホン酸塩が挙げられる。
【０３８３】
リン酸ジエステル、ホスホロチオエートジエステル、または他の酸性官能基を含む本発明の化合物の塩は、適切な塩基と反応させることによって調製することができる。医薬的に許容される塩としては、酢酸塩、ピリジン、アンモニウム、ピペラジン、ジエチルアミン、ニコチンアミド、ギ酸、尿素、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、リチウム、桂皮酸、メチルアミノ、メタンスルホン酸、ピクリン酸、酒石酸、トリエチルアミノ、ジメチルアミノ、及びトリス（ヒドキシメチル）アミノメタン（ｔｒｉｓ（ｈｙｄｏｘｙｍｅｔｈｙｌ）ａｍｉｎｏｍｅｔｈａｎｅ）が挙げられるがこれらに限定されない。さらなる医薬的に許容される塩は、当業者には既知である。
【０３８４】
かかる医薬的に許容される塩は、医薬的に許容されるカチオンを提供する塩基から製造される場合があり、アルカリ金属塩（特にナトリウム及びカリウム）、アルカリ土類金属塩（特にカルシウム及びマグネシウム）、アルミニウム塩及びアンモニウム塩、亜鉛、ならびに生理的に許容される有機塩基、例えば、ジエチルアミン、イソプロピルアミン、オラミン、ベンザチン、ベネタミン、トロメタミン（２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）プロパン−１，３−ジオール）、モルホリン、エポラミン、ピペリジン、ピペラジン、ピコリン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、２−ヒドロキシエチルアミン、トリ（２−ヒドロキシエチル）アミン、クロロプロカイン、コリン、デアノール、イミダゾール、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）、プロカイン、ジベンジルピペリジン、デヒドロアビエチルアミン、グルカミン、コリジン、キニーネ、キノロン、エルブミン、ならびに塩基性アミノ酸、例えば、リジン及びアルギニンから製造される塩を含む。
【０３８５】
塩を含む本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物は、当該ホスフェートまたはチオホスフェート結合の−ＳＨまたは−ＯＨ（例えば、本明細書に記載の式Ｉの化合物のＲ５またはＲ６）が、本明細書に記載の化合物の塩を形成するための対応するカチオンとともに−Ｓ−または−Ｏ−で表される構造によって表現することができる。例えば、本明細書に記載の第三の態様の式ＩＩの化合物の塩は、以下の構造：
【化５０】
0006692826.tif 000098
【０３８６】
で表すことができる。式中、Ａｙ＋は、１価または多価塩カチオンを表し、ｎ及びｍは、所与のｙに対して、可能な限り小さい整数である。例えば、Ａｙ＋が１価、すなわち、ｙが１、例えば、Ｎａ＋、Ｋ＋、ＮＨ４＋、ＴＥＡＨ＋等の場合、ｎは１でありかつｍは２であり；ｙが２、例えば、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋等の場合、ｎは１でありかつｍは１であり；ｙが３、例えば、Ａｌ３＋等の場合、ｎは３でありかつｍは２である。例えば、１価または２価塩のカチオンの塩はそれぞれ、
【化５１】
0006692826.tif 000099
【０３８７】
で表すことができ、または、ｎ＝１の場合、これらは角括弧なしに、例えば、
【化５２】
0006692826.tif 000100
【０３８８】
として表すことができる。別の方法として、１価の塩は、−Ｓ−または−Ｏ−の各々に隣接するＡ＋で示すことができる。例えば、本明細書に記載の式ＩＩのモノ−またはジ−Ｆ−ＲＲ−ＣＤＮ化合物のナトリウム塩は、
【化５３】
0006692826.tif 000101
【０３８９】
として示すことができる。
【０３９０】
場合によっては、該化合物は、２’ＯＨ基の塩を同様に含んでよく、例えば、式ＩＩの化合物であって、例えばＲ１９がＦでありかつＲ２０がＯＨの化合物のトリストリエチルアンモニウム塩は、
【化５４】
0006692826.tif 000102
【０３９１】
として表される構造を有し得る。
【０３９２】
他の非医薬的に許容される塩、例えば、トリフルオロ酢酸塩またはトリエチルアンモニウム塩は、例えば、本発明の化合物を単離する際に用いられる場合があり、本発明の範囲内に含まれる。
【０３９３】
本発明は、その範囲内に、本発明の化合物のすべての可能な化学量論及び非化学量論塩形態を含む。
【０３９４】
塩基性アミンまたは他の塩基性官能基を含む本発明の化合物が塩として単離される場合、その化合物の対応する遊離塩基形態は、該塩を無機または有機塩基、好適には該化合物の当該遊離塩基形態より高いｐＫａを有する無機または有機塩基で処理することを含めた当技術分野で既知の任意の適切な方法によって調製され得る。同様に、ホスフェートジエステル、ホスホロチオエートジエステル、または他の酸性官能基を含む本発明の化合物が塩として単離される場合、その化合物の対応する遊離酸形態は、該塩を無機または有機酸、好適には該化合物の当該遊離酸形態より低いｐＫａを有する無機または有機酸で処理することを含めた当技術分野で既知の任意の適切な方法によって調製され得る。
【０３９５】
本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、もしくはその医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物の特定の患者に対する有効量は、治療される状態、該患者の健康全般、投与経路及び用量、ならびに副作用の重症度等の要因に応じて変化し得る。治療方法及び診断方法に関するガイダンスが入手可能である（例えば、Ｍａｙｎａｒｄ，  ｅｔ  ａｌ．  （１９９６）  Ａ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  ＳＯＰｓ  ｆｏｒ  Ｇｏｏｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，  Ｉｎｔｅｒｐｈａｒｍ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，  ＦＬ；  Ｄｅｎｔ  （２００１）  Ｇｏｏｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ａｎｄ  Ｇｏｏｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，  Ｕｒｃｈ  Ｐｕｂｌ．，  Ｌｏｎｄｏｎ，  ＵＫ参照）。
【０３９６】
有効量は単回投与で与えられる場合があるが、単回投与に限定されない。従って、該投与は、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、もしくはその医薬的に許容される塩、医薬的に許容される溶媒和物、もしくは医薬的に許容される水和物を含む医薬組成物の２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、１１回、１２回、１３回、１４回、１５回、１６回、１７回、１８回、１９回、２０回、またはそれ以上の投与の場合がある。本方法において医薬組成物の２回以上の投与がある場合、該投与は、１分、２分、３、４、５、６、７、８、９、１０分、またはそれ以上の時間間隔、約１時間、２時間、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４時間等の間隔をあけることができる。時間との関連において、「約」という用語は、任意の時間間隔プラスマイナス３０分以内を意味する。該投与はまた、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、２１日、及びそれらの組合せの時間間隔をあけることができる。本発明は、等間隔の投与間隔に限定されず、非等間隔での投与を包含する。
【０３９７】
本発明に関して、例えば、１回／週、２回／週、３回／週、４回／週、５回／週、６回／週、７回／週、隔週、３週間に１回、４週間に１回、５週間に１回等の投与スケジュールが利用可能である。該投与スケジュールは、合計期間が例えば、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、及び１２ヶ月の投与を包含する。
【０３９８】
上記投与スケジュールのサイクルを提供する。該サイクルは、およそ、例えば、７日ごと；１４日ごと；２１日ごと；２８日ごと；３５日ごと；４２日；４９日ごと；５６日ごと；６３日ごと；７０日ごと等に繰り返すことができる。非投与の間隔がサイクル間に生じる場合があり、該間隔はおよそ、例えば、７日；１４日；２１日；２８日；３５日；４２日；４９日；５６日；６３日；７０日等の場合がある。この関連において、「およそ」という用語は、プラスマイナス１日、プラスマイナス２日、プラスマイナス３日、プラスマイナス４日、プラスマイナス５日、プラスマイナス６日、またはプラスマイナス７日を意味する。
【０３９９】
さらなる治療薬との併用方法は、当技術分野で周知である（Ｈａｒｄｍａｎ，  ｅｔ  ａｌ．  （ｅｄｓ．）  （２００１）  Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，  １０ｔｈ  ｅｄ．，  ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ；  Ｐｏｏｌｅ  ａｎｄ  Ｐｅｔｅｒｓｏｎ  （ｅｄｓ．）  （２００１）  Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ｆｏｒ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  Ｐｈｉｌａ．，  ＰＡ；  Ｃｈａｂｎｅｒ  ａｎｄ  Ｌｏｎｇｏ  （ｅｄｓ．）  （２００１）  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ，  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  Ｐｈｉｌａ．，  ＰＡ）。一般に、併用または一緒に投与とは、対象を２つ以上の薬剤で治療することを指し、この場合、該薬剤は同時に、または異なる時間で投与することができる。例えば、かかる薬剤は、基本的に同時でも異なる時間でもよく、投与経路が同じでも異なってもよい個別の投与として単一の対象に送達され得る。かかる薬剤は、それらが同じ投与経路で同時に投与されるように、同じ投与（例えば、同じ処方）で単一の対象に送達してもよい。
【０４００】
述べたように、本発明の組成物は、好ましくは、非経口または経腸送達用の医薬組成物として処方される。動物対象への投与用の典型的な医薬組成物は、医薬的に許容される媒体、例えば、水溶液、塩を含めた非毒性賦形剤、保存剤、緩衝剤等を含む。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  １５ｔｈ  Ｅｄ．，  Ｅａｓｔｏｎ  ｅｄ．  ，  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，  ｐｐ  １４０５−１４１２及び１４６１−  １４８７  （１９７５）；  Ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ  ＸＩＶ，  １４ｔｈ  Ｅｄ．，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，  ＤＣ  （１９７５）を参照のこと。非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油、及び注射用有機エステル、例えばオレイン酸エチルである。水性担体としては、水、アルコール／水溶液、生理食塩水、非経口媒体、例えば、塩化ナトリウム、リンゲルデキストロース等が挙げられる。静注媒体としては、流体及び栄養補給剤が挙げられる。保存剤としては、抗菌剤、酸化防止剤、キレート剤、及び不活性ガスが挙げられる。該医薬組成物のｐＨ及び種々の成分の正確な濃度は、当技術分野で通常行われる技術に従って調整される。
【０４０１】
特定のワクチンの反復投与（同種ブースティング）は、液性反応を高めるのに有効であると証明されている。かかる方法は、当該ベクターに先立つ免疫が、強い抗原提示及び適切な炎症シグナルの生成を損なう傾向があるため、細胞性免疫を高めるには有効でない場合がある。この問題を回避する１つの方法は、異なる抗原送達システムを用いるワクチンの連続投与（異種ブースティング）であった。異種ブースティングレジメンでは、少なくとも１つのプライムまたはブーストの送達は、不活化腫瘍細胞／本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物またはその組成物の送達を含む。該レジメンの異種治療群は、以下の方法の１つ以上を用いる抗原の送達を含み得る：
目的の抗原を含む不活化もしくは弱毒化細菌またはウイルスであって、これらは、これらを病原性侵襲の開始に無効または非効率的にするためのある変性条件で処理された粒子である；
精製抗原、これらは、通常、当該病原体の細胞培養もしくは当該病原体を含む組織試料から精製される自然に産生される抗原、または、それらの組換え型である；
組み換え技術によって、当該対象の宿主細胞で抗原を発現及び／または分泌するように作られた生ウイルスまたは細菌送達ベクター。これらの方法は、当該ウイルスまたは細菌ベクターを非病原性及び非毒性に弱毒化する（例えば、遺伝子操作によって）ことに依存している；
抗原提示細胞（ＡＰＣ）ベクター、例えば、樹状細胞（ＤＣ）ベクター、これらは、抗原を負荷された細胞、または該抗原をコードする核酸を含む組成物でトランスフェクトされた細胞を含む（例えば、去勢抵抗性転移性前立腺がんの治療用のＰｒｏｖｅｎｇｅ（登録商標）（Ｄｅｎｄｒｅｏｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ））；
リポソーム抗原送達媒体；ならびに
遺伝子銃、エレクトロポレーション、細菌ゴースト、ミクロスフェア、微粒子、リポソーム、ポリカチオン性ナノ粒子等によって投与され得る裸のＤＮＡベクター及び裸のＲＮＡベクター。
【０４０２】
プライムワクチン及びブーストワクチンは、以下の経路のいずれか１つまたはそれらの組合せによって投与することができる。１つの態様において、該プライムワクチン及びブーストワクチンは、同じ経路によって投与される。１つの態様において、該プライムワクチン及びブーストワクチンは、異なる経路によって投与される。「異なる経路」という用語は、体の異なる部位、例えば、口腔、非口腔、腸内、非経口、直腸、節内（リンパ節）、静脈内、動脈内、皮下、筋肉内、腫瘍周囲、腫瘍内、輸液、粘膜、鼻、脳脊髄空間、または脳脊髄液等の部位、ならびに異なる手段、例えば、経口、静脈内、及び筋肉内を包含するがこれらに限定されない。
【０４０３】
プライムまたはブーストワクチンの有効量は、単回投与で与えられる場合があるが、単回投与に限定されない。従って、該投与は、該ワクチンの２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、１１回、１２回、１３回、１４回、１５回、１６回、１７回、１８回、１９回、２０回、またはそれ以上の投与の場合がある。ワクチンの２回以上の投与がある場合、該投与は、１分、２分、３、４、５、６、７、８、９、１０分、またはそれ以上の時間間隔、約１時間、２時間、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４時間等の間隔をあけることができる。時間との関連において、「約」という用語は、任意の時間間隔プラスマイナス３０分以内を意味する。該投与はまた、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、２１日、及びそれらの組合せの時間間隔をあけることができる。本発明は、等間隔の投与間隔に限定されず、非等間隔での投与を包含し、例えば、非限定的な例を挙げると、プライミングスケジュールは、１日目、４日目、７日目、及び２５日目での投与からなる。
【実施例】
【０４０４】
以下の実施例は、本発明を説明する役割を果たす。これらの実施例は、本発明の範囲を一切限定するものではない。
【０４０５】
一般的方法
液相オリゴヌクレオチド合成に適した無水溶媒及び試薬は、商業的供給業者（Ａｌｄｒｉｃｈ，ＣｈｅｍＧｅｎｅｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、米国マサチューセッツ州ウィルミントン）から入手し、無水技術を用いて乾燥アルゴンまたは窒素下で取り扱った。ホスホラミダイトカップリング反応及びＨ−ホスホネート環化は、乾燥アルゴンまたは窒素下で、無水アセトニトリルまたはピリジン中で行った。特に断りのない限り、乾燥ピリジン中でのすべての反応用の出発物質は、ピリジンからの濃縮（３回）によって乾燥した。クロマトグラフィー条件は、下記実施例で特に断りのない限り、以下の通りであった。分取シリカゲルフラッシュクロマトグラフィーは、中圧クロマトグラフィー（ＭＰＬＣ）下、ＲｅｄｉＳｅｐ  Ｒｆシリカカラム（Ｔｅｌｅｄｙｎｅ  Ｉｓｃｏ、ネブラスカ州リンカーン）を用い、Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ  Ｒｆ＋ＵＶ−Ｖｉｓ（Ｔｅｌｅｄｙｎｅ  Ｉｓｃｏ）にて、ジクロロメタン中のメタノール勾配を用いて行った。逆相分取クロマトグラフィーは、ＭＰＬＣ条件下、ＲｅｄｉＳｅｐ  Ｒｆ  Ｃ１８  Ａｑカラム（Ｔｅｌｅｄｙｎｅ  Ｉｓｃｏ）を用い、Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ  Ｒｆ＋ＵＶ−Ｖｉｓにて、１０ｍＭのＴＥＡＡ水溶液中のアセトニトリル勾配を用いて実行した。分析用高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  ＨＰＬＣシステムと、２つのＬＣ−２０ＡＤポンプ、及び２５４ｎｍで監視するＳＰＤ−Ｍ３０Ａフォトダイオードアレイ検出器にて行った。アセトニトリル中１０ｍＭのＴＥＡＡまたはアセトニトリル中２０ｍＭのＮＨ４ＯＡｃの勾配は、５ミクロン（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ａｃｃｌａｉｍ  １２０）Ｃ−１８カラム（４．６×２５０ｍｍ）または１０ミクロン（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｈｙｐｅｒｓｉｌ）Ｃ−１８カラム（４．０×２５０ｍｍ）のいずれかとともに室温で用いた。分取ＨＰＬＣは、２５４ｎｍで監視するＳＰＤ−２０Ａ  ＵＶ／Ｖｉｓ検出器を備えたＳｈｉｍａｄｚｕ分取ＬＣ２０−ＡＰ  ＨＰＬＣシステムにて、Ｖａｒｉａｎ  Ｍｉｃｒｏｓｏｒｂ  ６０−８  Ｃ−１８  ４１．６×２５０ｍｍカラムで、１０ｍＭのＴＥＡＡ及びアセトニトリルの勾配を流量５０ｍｌ／分で用いて行った。Ｃ−１８  Ｓｅｐ−Ｐａｋ（Ｗａｔｅｒｓ）を用いた固相抽出は、３％（ｗｔ／ｗｔ）のローディングで行った。分析用ＬＣＭＳは、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＬＣＭＳ−２０２０シングル四重極型質量分析計に連結されたＰｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  ＨＰＬＣを用いたＳｈｉｍａｄｚｕ  ＬＣＭＳシステムを用い、エレクトロスプレーイオン化源（ＥＳＩ）を用いて記録した。
【０４０６】
１Ｈ  ＮＭＲ、１９Ｆ  ＮＭＲ、３１Ｐ  ＮＭＲ、及び１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルは、ＣＤＣｌ３、ｄ６−ＤＭＳＯ、ＣＤ３ＯＤ、またはＤ２Ｏ溶媒中で記録した。動作周波数は、１Ｈについては４００ＭＨｚであり、１９Ｆについては３７６ＭＨｚであり、３１Ｐについては１６２ＭＨｚであり、１３Ｃについては１００ＭＨｚであった。特に断りのない限り、すべてのスペクトルは、周囲温度（２０〜２５℃）で記録した。可変温度実験用の温度は、Ｃ．  Ａｍｍａｎ，  Ｐ．  Ｍｅｉｅｒ  ａｎｄ  Ａ．  Ｅ．  Ｍｅｒｂａｃｈ，  Ｊ．  Ｍａｇｎ．  Ｒｅｓｏｎ．  １９８２，  ４６，  ３１９−３２１に記載のエチレングリコール法を用いて１ヶ月または２ヶ月に一度較正した。
【０４０７】
最終化合物は、トリエチルアンモニウム（ＴＥＡＨ＋またはＥｔ３ＮＨ＋）塩として存在し、これは、標準的なイオン交換技術または他の周知の方法を用いて他の塩の形（ナトリウム（Ｎａ＋）またはアンモニウム（ＮＨ４＋）が挙げられるがこれらに限定されない））に変換することができる。
【０４０８】
リンでの立体化学の分析は、文献に記載の方法（Ｚｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．  Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ，  Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ，  ａｎｄ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  ２８９：３５２−３７８，  ２００９）と同様に、または下記実施例で論じる通りにした。
【０４０９】
化合物名は、ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、米国  ０２１４０  マサチューセッツ州ケンブリッジ、１００  ＣａｍｂｒｉｄｇｅＰａｒｋ  Ｄｒｉｖｅ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃａｍｂｒｉｄｇｅｓｏｆｔ．ｃｏｍ）から入手可能なＣｈｅｍＢｉｏＤｒａｗ  Ｕｌｔｒａ  Ｖ  １４．０ソフトウェアプログラムを用いて作成した。実施例で用いる化合物の簡略名、または参照化合物も同様に以下の表３に示す。参照化合物である３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ａ）、３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ｇ）、及び３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）は、かかる合成に関して参照することによって組み込まれるＰＣＴ公開第ＷＯ２０１４／０９３９３６号に記載の方法に従って調製した。実施例における構造はまた、塩として、例えば、Ａ＋が該塩のカチオンである−Ｏ−Ａ＋または−Ｓ−Ａ＋として表される場合がある。
【０４１０】
表３：簡略化合物名及び構造
【０４１１】
【表３】
0006692826.tif 000103
0006692826.tif 000104
0006692826.tif 000105
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0006692826.tif 000112
0006692826.tif 000113
【０４１２】
略語及び頭字語。ＳａｌＰＣｌ＝サリチルクロロホスファイト（２−クロロ−４Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−４−オン）．ＤＣＡ＝ジクロロ酢酸．ＤＤＴＴ＝３−（（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチリデン）アミノ）−３Ｈ−１，２，４−ジチアゾール−５−チオン．ＤＡＳＴ＝ジエチルアミノサルファートリフルオリド．ＮａＨＣＯ３＝重炭酸ナトリウム．ＤＣＭ＝ＣＨ２Ｃｌ２＝ジクロロメタン．ＥｔＯＨ＝エタノール．ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル．ＫＯＡｃ＝酢酸カリウム．ＭｅＣＮ＝アセトニトリル．ＭｅＯＨ＝メタノール．ＮＨ４ＯＡｃ＝酢酸アンモニウム．ＤＭＡＰ＝Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン．ＤＭＯＣＰ＝２−クロロ−５，５−ジメチル−１，３，２−ジオキサホスホリナン−２−オキシド．ＤＭＴＣｌ＝４，４’−ジメトキシトリチルクロリド．ＤＭＴ＝４，４−ジメトキシトリチル．Ｎ−フェニルトリフラミド＝１，１，１−トリフルオロ−Ｎ−フェニル−Ｎ−（（トリフルオロメチル）スルホニル）メタンスルホンアミド．ＴＢＡＦ＝テトラブチルアンモニウムフルオリド．ＴＢＳ＝ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル．ＴＥＡＡ＝トリエチルアンモニウムアセテート．ＴＥＡ＝トリメチルアミン．ＴＥＡＨ＋＝トリエチルアンモニウム．ＴＥＡＢ＝トレイチルアンモニウムバイカーボネート（ｔｒｅｉｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ  ｂｉｃａｒｂｏｎａｔｅ）．ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸．ＴＭＳＣｌ＝トリメチルシリルクロリド．ＨＦ＝フッ化水素酸．ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン．Ｇ＝グアニン．Ｇｉｂ＝イソブチリルグアニン．Ａ＝アデニン．ＡＢｚ＝ベンゾイルアデニン．ＡＭＡ＝水酸化アンモニウム／４０％メチルアミン水溶液．
【０４１３】
実施例１：３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）（６）及び３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）（６ａ）の合成
３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）またはジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれる（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｒ，１４ａＲ）−２，９−ビス（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−３，１０−ジフルオロ−５，１２−ジメルカプトオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン５，１２−ジオキシド（６）、及び（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｓ，１４ａＲ）−２，９−ビス（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−３，１０−ジフルオロ−５，１２−ジメルカプトオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン５，１２−ジオキシド（６ａ）、３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）、またはジチオ−（Ｒｐ，Ｓｐ）−環状−［２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ］は、以下のスキーム１に従って調製した。
【化５５】
0006692826.tif 000114
0006692826.tif 000115
【０４１４】
ステップ１：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（６−ベンズアミド−９Ｈ−プリン−９−イル）−４−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３−イルハイドロジェンホスホネート（２）の調製：Ｎ−（９−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−３−フルオロ−４−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−イル）ベンズアミド（１、２．０ｇ、３．０ｍｍｏｌ、ＣｈｅｍＧｅｎｅｓ）の１，４−ジオキサン（２５ｍＬ）及びピリジン（８ｍＬ）の溶液に、ＳａｌＰＣｌ（０．８４ｇ、４．１ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１２ｍＬ）溶液を加えた。３０分後、この攪拌反応混合物に、室温で水（４ｍＬ）を導入し、得られた混合物を１ＮのＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）に注入した。この水性混合物をＥｔＯＡｃで抽出し（３×１００ｍＬ）、これらの層を分割した。これらのＥｔＯＡｃ抽出物を合わせ、真空中で無色のフォームとして濃縮乾固した。この無色のフォームをＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）に溶解し、無色の溶液を得た。この溶液に、水（０．５ｍＬ）及び６％（ｖ／ｖ）のＤＣＡのＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）溶液を加えた。室温で１０分間攪拌後、この赤色溶液にピリジン（３．５ｍＬ）を充填した。得られた白色混合物を真空中で濃縮し、水をＭｅＣＮ（３０ｍＬ）との濃縮後の共沸混合物として除去した。この共沸混合物過程をさらに２回、ＭｅＣＮ（３０ｍＬ）で繰り返した。最後のエバポレーションで、得られた化合物２の白色スラリーをＭｅＣＮ（１５ｍＬ）中に入れたままにした。
【０４１５】
ステップ２：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（６−ベンズアミド−９Ｈ−プリン−９−イル）−２−（（（（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（６−ベンズアミド−９Ｈ−プリン−９−イル）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−フルオロテトラヒドロフラン−３−イル）オキシ）（２−シアノエトキシ）ホスホロチオイル）オキシ）メチル）−４−フルオロテトラヒドロフラン−３−イルハイドロジェンホスホネート（４）の調製：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（６−ベンズアミド−９Ｈ−プリン−９−イル）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−フルオロテトラヒドロフラン−３−イル（２−シアノエチル）ジイソプロピルホスホラミダイト（３、２．５ｇ、２．９ｍｍｏｌ、ＣｈｅｍＧｅｎｅｓ）のＭｅＣＮ（２０ｍＬ）溶液を真空中で濃縮乾固した。この過程をさらに２回繰り返し、水を共沸混合物として除去した。最後の共沸混合物の状態で、化合物３のＭｅＣＮ（７ｍＬ）溶液に、１０個の３Åモレキュラーシーブを導入し、この溶液を窒素雰囲気下で保存した。化合物２と残余のピリジン−１−イウムジクロロアセテートの混合物の攪拌ＭｅＣＮ（１５ｍＬ）溶液に、化合物３のＭｅＣＮ（７ｍＬ）溶液を加えた。５分後、この攪拌混合物に、ＤＤＴＴ（６５０ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、この黄色混合物を真空中で濃縮し、化合物４を黄色油として得た。
【０４１６】
ステップ３：Ｎ，Ｎ’−（（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｒ，１４ａＲ）−５−（２−シアノエトキシ）−３，１０−ジフルオロ−１２−メルカプト−１２−オキシド−５−スルフィドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２，９−ジイル）ビス（９Ｈ−プリン−９，６−ジイル））ジベンズアミド（５）の調製：化合物４のＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍＬ）溶液に、水（０．３５ｍＬ）及び６％（ｖ／ｖ）のＤＣＡのＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍＬ）溶液を加えた。室温で１０分後、この赤色溶液にピリジン（２０ｍＬ）を加えた。得られた黄色混合物を真空中でこの黄色混合物が約２０ｍＬになるまで濃縮した。この黄色混合物に、ピリジン（２０ｍＬ）を導入し、この混合物を真空中でこの黄色混合物が約２０ｍＬになるまで濃縮した。この黄色混合物に、ピリジン（３０ｍＬ）を加え、この混合物を真空中でこの黄色混合物が約３０ｍＬになるまで濃縮した。この黄色混合物の攪拌ピリジン（３０ｍＬ）溶液に、ＤＭＯＣＰ（１．６ｇ、８．４ｍｍｏｌ）を加えた。７分後、この暗橙色溶液に水（１．４ｍＬ）を加え、直後に３Ｈ−１，２−ベンゾジチオール−３−オン（０．７１ｍｇ、４．２ｍｍｏｌ）を導入した。５分後、この暗橙色溶液を１ＮのＮａＨＣＯ３水溶液（４００ｍＬ）に注入した。１０分後、この二相混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）及びジエチルエーテル（２００ｍＬ）で抽出した。分離後、この水層をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）及びジエチルエーテル（２００ｍＬ）で逆抽出した。これらの有機抽出物を合わせ、真空中で濃縮した。この濃縮黄色油に、トルエン（７５ｍＬ）を加え、この混合物を真空中でエバポレートし、残余のピリジンを除去した。この手順をトルエン（７５ｍＬ）で２回繰り返した。得られた油をシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中０％−１０％のＭｅＯＨ）で精製し、化合物５（６７ｍｇ、収率２．５％）をオレンジ色油として得た。
【０４１７】
ステップ４：３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）（６）及び３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）（６ａ）の調製：化合物５（６５ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）の攪拌ＭｅＯＨ（０．９ｍＬ）溶液に、水酸化アンモニウム水溶液（０．９ｍＬ）を加え、このオレンジ色のスラリーを５０℃で加熱した。２時間後、このオレンジ色の溶液を冷却し、真空中で濃縮した。このオレンジ色の残渣を逆相シリカゲルクロマトグラフィー（１０ｍＭのＴＥＡＡ水溶液中０％−３０％のＭｅＣＮ）によって精製し、凍結乾燥後、化合物６（１８ｍｇ、収率３８％）を白色のモノトリエチルアンモニウム塩として得た。ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ６９３．２５ ［Ｍ−Ｈ］− （Ｃ２０Ｈ２２Ｆ２Ｎ１０Ｏ８Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ６９４．３０５）； Ｒｔ： １６．６９８’分 ＨＰＬＣ条件（１０ ｍＭ ＴＥＡＡ， ２％ − ２０％）による； Ｒｔ： ２０．０２６’．分 ＬＣＭＳ条件（２０ ｍＭ ＮＨ４ＯＡｃ， ２％ − ２０％）による。  １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．４４ （ｓ， ２Ｈ）， ８．２４ （ｓ， ２Ｈ）， ６．５２ （ｄ， Ｊ ＝ １６．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．８０ （ｄ， Ｊ ＝ ３．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６７ （ｄ， Ｊ ＝ ４．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３７−５．２６ （ｍ， ２Ｈ）， ４．７７−４．６５ （ｍ， ４Ｈ）， ４．２２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．４ Ｈｚ， ６．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．３４ （ｑ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ６Ｈ）， １．４３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ９Ｈ）．  １９Ｆ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ −２００．７４ − −２００．９８ （ｍ）．  ３１Ｐ ＮＭＲ （４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ５４．４６。スキーム１に示すこの化合物の立体化学は、野生型ＳＴＩＮＧタンパク質に結合した共結晶構造によって確認された。
【０４１８】
化合物６のナトリウム塩もまた調製した。Ｂｉｏ−Ｒａｄ（Ｂｉｏ−Ｓｐｉｎ、カタログ番号７３２−６００８）の小マイクロカラム（容量１ｍＬ）に、Ｂｉｏ−ＲａｄのＡＧ（登録商標）５０Ｗ−Ｘ２樹脂（カタログ１４３−５２４１、バイオテクノロジーグレード、１００−２００メッシュ、水素型、ＣＡＳ６９０１１−２０−７）を、このマイクロカラムの０．２の目印までロードした。この樹脂をミリポア濾過水（０．５ｍＬ）で５回浸漬し、得られた水洗浄液を重力下で流した。この洗浄液は廃棄した。この樹脂を１Ｎの水酸化ナトリウム水溶液２ｍＬで処理した。その後、この縮合樹脂をミリポア濾過水２ｍＬで６回洗浄した。化合物６のＴＥＡＨ＋塩（５ｍｇ）をミリポア濾過水２ｍＬに溶解し、この樹脂の上にロードした。この樹脂をミリポア濾過水２ｍＬで６回洗浄し、所望の生成物を溶出画分から回収し、一夜凍結乾燥して化合物６のナトリウム塩（３ｍｇ）を得た。
【０４１９】
Ｒｐ，Ｓｐ異性体もまた、逆相クロマトグラフィーステップでの精製後に単離し、凍結乾燥後に化合物６ａ（９．０ｍｇ、９９％）をビストリエチルアンモニウム塩として得た。ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ６９３．３０ ［Ｍ−Ｈ］− （Ｃ２０Ｈ２２Ｆ２Ｎ１０Ｏ８Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ６９４．０５）； Ｒｔ １３．８３０’分 ＨＰＬＣ条件（１０ ｍＭ ＴＥＡＡ， ２％ − ２０％）による。  Ｒｔ １５．０３２’分 ＬＣＭＳ条件（２０ ｍＭ ＮＨ４ＯＡｃ， ２％ − ２０％）による。  １Ｈ ＮＭＲ。 （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．６５ （ｓ， １Ｈ）， ８．５０ （ｓ， １Ｈ）， ８．３４ （ｓ， １Ｈ）， ８．２６ （ｓ， １Ｈ）， ６．５８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １６．４， ２．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．００ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５１．２， ３．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５１．２， ３．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３２−５．１５ （ｍ， ２Ｈ）， ４．７７−４．６７ （ｍ， ３Ｈ）， ４．６１ （ｄ， Ｊ ＝ １２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．８， ４．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．３３ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １２Ｈ）， １．４３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １８Ｈ）。  １９Ｆ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ −２００．７５ − −２０１．３１ （ｍ）．  ３１Ｐ ＮＭＲ （４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ５４．６９， ５４．６４。
【０４２０】
３’３’−ＲＲ−（２’βＦ−Ａ）（２’βＦ−Ａ）またはジチオ（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［２’βＦ−Ａ（３’，５’）ｐ−２’βＦ−ａ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれる化合物（２Ｒ，３Ｓ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｓ，１０ａＲ，１２Ｒ，１４ａＲ）−２，９−ビス（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−３，１０−ジフルオロ−５，１２−ジメルカプトオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン５，１２−ジオキシド（７）、及び、３’３’−ＲＳ−（２’βＦ−Ａ）（２’βＦ−Ａ）またはジチオ（Ｒｐ，Ｓｐ）−環状−［２’βＦ−Ａ（３’，５’）ｐ−２’βＦ−Ａ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれる（２Ｒ，３Ｓ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｓ，１０ａＲ，１２Ｓ，１４ａＲ）−２，９−ビス（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−３，１０−ジフルオロ−５，１２−ジメルカプトオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン５，１２−ジオキシド（７ａ）、
【化５６】
0006692826.tif 000116
【０４２１】
をスキーム１の方法と同様にして調製した。その際、Ｎ−（９−（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−３−フルオロ−４−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−イル）ベンズアミド（０．４ｇ、０．６ｍｍｏｌ、Ｇｌｅｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、バージニア州スターリング）をステップ１で化合物１の代わりに使用し、（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−（６−ベンズアミド−９Ｈ−プリン−９−イル）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−フルオロテトラヒドロフラン−３−イル（２−シアノエチル）ジイソプロピルホスホラミダイト（０．５ｇ、０．６ｍｍｏｌ、Ｇｌｅｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）をステップ２で化合物３の代わりに使用した。化合物７（６．４ｍｇ、純度９７％）及び化合物７ａ（５．０ｍｇ、純度９３％）は、逆相ＨＰＬＣによる精製及び凍結乾燥後ビストリエチルアンモニウム塩として得た。
【０４２２】
化合物７：ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ６９５．７５ ［Ｍ＋Ｈ］＋ （Ｃ２０Ｈ２２Ｆ２Ｎ１０Ｏ８Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ６９４．０５）； Ｒｔ １６．７７９’分 ＨＰＬＣ条件（１０ ｍＭ ＴＥＡＡ， ２％ − ２０％）による．  Ｒｔ ７．６１６’分 ＬＣＭＳ条件（２０ ｍＭ ＮＨ４ＯＡｃ， ２％ − ５０％）による。 １Ｈ ＮＭＲ。 （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．６５ （ｓ， ２Ｈ）， ８．４９ （ｓ， ２Ｈ）， ６．７９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．４， ４．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．８６ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ５．７４ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ５．５２−５．４４ （ｍ， ２Ｈ）， ４．５９ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ４．５１−４．４０ （ｍ， ４Ｈ）， ３．３９ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １２Ｈ）， １．４８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １８Ｈ）。  １９Ｆ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ −１９６．４７ − −１９６．７０ （ｍ）。
【０４２３】
化合物７ａ：ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ６９５．７５ ［Ｍ＋Ｈ］＋（Ｃ２０Ｈ２２Ｆ２Ｎ１０Ｏ８Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ６９４．０５）； Ｒｔ １４．２１６’分 ＨＰＬＣ条件（１０ ｍＭ ＴＥＡＡ， ２％ − ２０％）による。  Ｒｔ ８．１０６’分 ＬＣＭＳ条件（２０ ｍＭ ＮＨ４ＯＡｃ， ２％ − ５０％）による。 １Ｈ ＮＭＲ。 （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．６５ （ｓ， １Ｈ）， ８．６１ （ｓ， １Ｈ）， ８．４４ （ｓ， ２Ｈ）， ６．７３ （ｄ， Ｊ ＝ １４．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．８８−５．６４ （ｍ， ２Ｈ）， ５．４８−５．４１ （ｍ， ２Ｈ）， ４．５７ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ４．４６−４．３５ （ｍ， ４Ｈ）， ３．３４ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １２Ｈ）， １．４３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １８Ｈ）。  １９Ｆ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ −１９６．９８ − −１９７．６１ （ｍ）。  ３１Ｐ ＮＭＲ （４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ５７．２８， ５５．１６， ５５．０９。
【０４２４】
実施例２：３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）（１４）及び３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）（１４ａ）の合成
３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）またはジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［２’Ｆ−Ｇ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれる２−アミノ−９−（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｒ，１４ａＲ）−９−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−３，１０−ジフルオロ−５，１２−ジメルカプト−５，１２−ジオキシドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２−イル）−１，９−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−オン（１４）及び３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）またはジチオ−（Ｒｐ，Ｓｐ）−環状−［２’Ｆ−Ｇ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれる２−アミノ−９−（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｓ，１４ａＲ）−９−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−３，１０−ジフルオロ−５，１２−ジメルカプト−５，１２−ジオキシドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２−イル）−１，９−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−オン（１４ａ）を、以下のスキーム２に従って調製した。
【化５７】
0006692826.tif 000117
0006692826.tif 000118
【０４２５】
ステップ１：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−フルオロ−５−（２−イソブチラミド−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフラン−３−イルハイドロジェンホスホネート（９）の調製：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−フルオロ−５−（２−イソブチラミド−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフラン−３−イル（２−シアノエチル）ジイソプロピルホスホラミダイト（８、１ｇ、ＣｈｅｍＧｅｎｅｓ）のアセトニトリル（５ｍＬ）及び水（３６μＬ）の溶液に、ピリジニウムトリフルオロアセテート（２３２ｍｇ）を加えた。この反応物を１分間攪拌し、その後ｔｅｒｔ−ブチルアミン（５ｍＬ）を加えた。この反応を１０分間継続し、真空中で濃縮し、真空中でアセトニトリルとともにエバポレートし（２×１０ｍＬ）、化合物９及び１０の約（４：１）の混合物を得た。この混合物を無水１，４−ジオキサン（９ｍＬ）に取り、その後無水ピリジン（３ｍＬ）及びＳａｌＰＣｌ（２１０ｍｇ）の１，４−ジオキサン（４．５ｍＬ）溶液を加えた。１５分間攪拌後、この反応混合物を水（１．５ｍＬ）でクエンチし、続いて飽和ＮａＨＣＯ３溶液（６０ｍＬ）を加えた。この混合物をＥｔＯＡｃ３×６０ｍＬで抽出し、合わせた有機層を真空中で濃縮し、大部分が化合物９の粗混合物（６：１）１．７ｇを得た。
【０４２６】
ステップ２：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）−５−（２−イソブチラミド−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフラン−３−イルハイドロジェンホスホネート（１１）の調製：化合物９（１．７ｇ）及びＤＣＭ（１２ｍＬ）の溶液に、水（０．１８ｍＬ）に続いて６％ＤＣＡのＤＣＭ（１２ｍＬ）溶液を加えた。１０分後、この反応混合物をピリジン（１．４ｍＬ）でクエンチし、その後真空中で濃縮した。この原料を真空中、無水アセトニトリル３×６．６ｍＬとともにエバポレートし、１．４ｍＬの化合物１１を残した。
【０４２７】
ステップ３：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（６−ベンズアミド−９Ｈ−プリン−９−イル）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−フルオロテトラヒドロフラン−３−イル）オキシ）（２−シアノエトキシ）ホスホロチオイル）オキシ）メチル）−４−フルオロ−５−（２−イソブチラミド−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフラン−３−イルハイドロジェンホスホネート（１２）の調製：化合物３（真空中無水アセトニトリル３×６．６ｍＬとともにエバポレートし、４ｍＬ残した）の４ｍＬ無水アセトニトリル溶液を加え、化合物１１の溶液１．４ｍＬ及びこの反応物を２分間攪拌した。ＤＤＴＴ（０．２２６ｇ）を加え、この反応を３０分間継続し、その後真空中で濃縮乾固し、化合物１２を３．６ｇ得た。
【０４２８】
ステップ４：Ｎ−（９−（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｒ，１４ａＲ）−５−（２−シアノエトキシ）−３，１０−ジフルオロ−９−（２−イソブチラミド−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）−１２−メルカプト−１２−オキシド−５−スルフィドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−イル）ベンズアミド（１３）の調製：化合物１２（１．８ｇ）のＤＣＭ（１２ｍＬ）溶液に、水（６０μＬ）に続いて６％のＤＣＡのＤＣＭ（１２ｍＬ）溶液を加えた。１０分後、この反応混合物をピリジン（５ｍＬ）でクエンチし、真空中で濃縮してＤＣＭを除去した。追加量のピリジン（１５ｍＬ）を加え、この混合物を真空中で１０ｍＬに濃縮した。ＤＭＯＣＰ（２９２ｍｇ）を加え、この反応物を３分間攪拌し、その後、水（２６６μＬ）に続いて３−Ｈ−１，３−ベンゾジチオール−３−オン（１３０ｍｇ）を加えた。５分後、この反応物をＮａＨＣＯ３の飽和溶液（７５ｍＬ）でクエンチし、エチルエーテルとＥｔＯＡｃの１：１混合物で抽出した。この水層をさらに追加のエチルエーテルとＥｔＯＡｃの１：１混合物２５ｍＬで抽出した。合わせた有機層を真空中で濃縮し、１．２ｇの粗化合物１３を得た。順相シリカゲル精製（１００％ＤＣＭ−９０ＤＣＭ：１０ＭｅＯＨ）で、５０ｍｇの化合物１３を白色固体（ＲｐＲｐジアステレオマーが濃縮された）として、及び２０ｍｇのＲｐＳｐジアステレオマーが濃縮されたＮ−（９−（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｓ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｒ，１４ａＲ）−５−（２−シアノエトキシ）−３，１０−ジフルオロ−９−（２−イソブチラミド−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）−１２−メルカプト−１２−オキシド−５−スルフィドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−イル）ベンズアミド（１３ａ）を得た。
【０４２９】
ステップ５：ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）（１４）及び３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）（１４ａ）の調製：ＲｐＲｐ濃縮化合物１３（５０ｍｇ）のＡＭＡ（０．８４ｍＬ）及びＥｔＯＨ（０．３６ｍＬ）の溶液を５０℃に４時間加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、アルゴンで１０分間スパージし、その後真空中で濃縮した。逆相Ｃ１８ＭＰＬＣ及び分取ＨＰＬＣによる精製で９ｍｇの化合物１４をトリストリエチルアンモニウム塩として得た。ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ７１１．３０ ［Ｍ＋Ｈ］＋ （Ｃ２０Ｈ２２Ｆ２Ｎ１０Ｏ９Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ７１０．０５）； Ｒｔ： １２．７ 分 （２−５０ ％ ＭｅＣＮ／ ＮＨ４ＯＡｃ （２０ ｍＭ）緩衝液， ２０ 分， １ ｍＬ／分， ５ μｍ Ａｃｃｌａｉｍ １２０）。  １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．５３ （ｓ， １Ｈ）， ８．３５ （ｓ， １Ｈ）， ８．１０ （ｓ， １Ｈ）， ５．７２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．０， ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．５８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．０， ４，０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３１−５．２２ （ｍ， ２Ｈ）， ４．７０−４．５９ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２４−４．１９ （ｍ）， ３．２６ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２１Ｈ）， ２．０５ （ｓ， １．７Ｈ）， １．４０ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３２Ｈ）。  １９Ｆ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ −１９９．２ （ｔｄ， Ｊ ＝ ５６， ２４ Ｈｚ）， ２００．１ （ｔｄ， Ｊ ＝ ５６， ２４， ２０ Ｈｚ）， ３１Ｐ ＮＭＲ （４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ５４．９１； ５４．６５。図１参照。
【０４３０】
ＲＳ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）（１４ａ）を同様に調製し、ＲｐＳｐジアステレオマーが濃縮された化合物１３ａから精製した。化合物１３ａ（２０ｍｇ）のＡＭＡ（０．４２ｍＬ）及びＥｔＯＨ（０．１８ｍＬ）の溶液を５０℃に４時間加熱した。この反応混合物を室温に冷却し、アルゴンで１０分間スパージし、その後真空中で濃縮した。逆相Ｃ１８ＭＰＬＣ及び分取ＨＰＬＣによる精製で、６．９ｍｇの化合物１４ａをテトラトリエチルアンモニウム塩として得た。ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ７１１．２５ ［Ｍ＋Ｈ］＋ （Ｃ２０Ｈ２２Ｆ２Ｎ１０Ｏ９Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ７１０．０５）； Ｒｔ： ８．７ 分 （２−５０ ％ ＭｅＣＮ／ ＮＨ４ＯＡｃ （２０ ｍＭ）緩衝液， ２０ 分， １ ｍＬ／分， ５ μｍ Ａｃｃｌａｉｍ １２０）。  １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．５３ （ｓ， １Ｈ）， ８．３７ （ｓ， １Ｈ）， ８．２３ （ｓ， １Ｈ）， ６．６２ （ｄ， Ｊ ＝ １７．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．４２ （ｄ， Ｊ ＝ １７．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．９７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５１．６， ４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５１．６， ４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２７−５．２５ （ｍ， ２Ｈ）， ４．６４−４．５２ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２４ （ｔｄ， Ｊ ＝ １０．８ Ｈｚ， ３．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．２７ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２４Ｈ）， ２．０５ （ｓ， ２Ｈ）， １．４０ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３６Ｈ）。  １９Ｆ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ −１９９．８ （ｔｄ， Ｊ ＝ ５３， １８ Ｈｚ）， −２００．９−２０１．１ （ｍ）， ３１Ｐ ＮＭＲ （４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ５５．３； ５４．６２。
【０４３１】
実施例３：３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ｇ）（１７）及び３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ｇ）（１７ａ）の合成
３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ｇ）またはジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［２’Ｆ−Ｇ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−Ｇ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれる９，９’−（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｒ，１４ａＲ）−３，１０−ジフルオロ−５，１２−ジメルカプト−５，１２−ジオキシドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２，９−ジイル）ビス（２−アミノ−１，９−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−オン）（１７）、及び３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ｇ）またはジチオ−（Ｒｐ，Ｓｐ）−環状−［２’Ｆ−Ｇ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−Ｇ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれる９，９’−（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｓ，１４ａＲ）−３，１０−ジフルオロ−５，１２−ジメルカプト−５，１２−ジオキシドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２，９−ジイル）ビス（２−アミノ−１，９−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−オン）（１７ａ）を、以下のスキーム３に従って調製した。
【化５８】
0006692826.tif 000119
【０４３２】
ステップ１：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−フルオロ−５−（２−イソブチラミド−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフラン−３−イル）オキシ）（２−シアノエトキシ）ホスホロチオイル）オキシ）メチル）−４−フルオロ−５−（２−イソブチラミド−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフラン−３−イルハイドロジェンホスホネート（１５）の調製：化合物８（ＣｈｅｍＧｅｎｅｓ、無水ＭｅＣＮ３×１３ｍＬとともにエバポレートした）の無水ＭｅＣＮ８ｍＬ溶液を、化合物１１（３ｍＬのＭｅＣＮ溶液、３．４ｇの化合物９からスキーム２に従って調製した）に加え、この反応物を２分間攪拌した。ＤＤＴＴ（０．４５２ｇ）を加え、この反応を３０分間継続し、その後真空中で濃縮乾固し、化合物１５を８．１４ｇ得た。
【０４３３】
ステップ２：Ｎ，Ｎ’−（（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｒ，１４ａＲ）−５−（２−シアノエトキシ）−３，１０−ジフルオロ−１２−メルカプト−１２−オキシド−５−スルフィドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２，９−ジイル）ビス（６−オキソ−６，９−ジヒドロ−１Ｈ−プリン−９，２−ジイル））ビス（２−メチルプロパンアミド）（１６）の調製：粗化合物１５（８．４ｇ）のＤＣＭ（４８ｍＬ）溶液に、水（２４０μＬ）に続いて６％のＤＣＡのＤＣＭ（４８ｍＬ）溶液を加えた。１０分後、この反応混合物をピリジン（２０ｍＬ）でクエンチし、真空中で濃縮してＤＣＭを除去した。追加量のピリジン（６０ｍＬ）を加え、この混合物を真空中で２０ｍＬに濃縮した。ＤＭＯＣＰ（１．２ｇ）を加え、この反応物を３分間攪拌し、その後、水（１ｍＬ）に続いて３−Ｈ−１，３−ベンゾジチオール−３−オン（５２０ｍｇ）を加えた。５分後、この反応物をＮａＨＣＯ３の飽和溶液（３００ｍＬ）でクエンチし、エチルエーテルとＥｔＯＡｃの１：１混合物で抽出した。この水層をさらにＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を真空中で濃縮し、粗化合物１６を得た。順相シリカゲル精製（１００％ＤＣＭ−９０ＤＣＭ：１０ＭｅＯＨ）で、１５０ｍｇの１６を白色固体（ＲｐＲｐジアステレオマーが濃縮された）として及び２６０ｍｇのＲｐＳｐジアステレオマーが濃縮されたＮ，Ｎ’−（（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｓ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｒ，１４ａＲ）−５−（２−シアノエトキシ）−３，１０−ジフルオロ−１２−メルカプト−１２−オキシド−５−スルフィドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２，９−ジイル）ビス（６−オキソ−６，９−ジヒドロ−１Ｈ−プリン−９，２−ジイル））ビス（２−メチルプロパンアミド）（１６ａ）を得た。
【０４３４】
ステップ３：３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ｇ）（１７）の調製：化合物１６（７５ｍｇ）のＡＭＡ（１．３ｍＬ）及びＥｔＯＨ（０．５４ｍＬ）の溶液を５０℃に４時間加熱した。この反応混合物を室温に冷却し、アルゴンで１０分間スパージし、その後真空中で濃縮した。逆相Ｃ１８ＭＰＬＣ及び分取ＨＰＬＣによる精製で、１９ｍｇの化合物１７をビストリエチルアンモニウム塩として得た。ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ７２５．２５ ［Ｍ−Ｈ］− （Ｃ２０Ｈ２２Ｆ２Ｎ１０Ｏ１０Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ７２６．０４）； Ｒｔ： １０．４４ 分 （２−５０ ％ ＭｅＣＮ／ ＮＨ４ＯＡｃ （２０ ｍＭ） 緩衝液， ２０ 分， １ ｍＬ／分， ５ μｍ Ａｃｃｌａｉｍ １２０）。  １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．１５ （ｓ， ２Ｈ）， ６．４０ （ｄ， Ｊ ＝ １８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．６７ （ｄ， Ｊ ＝ ５２．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．３４−５．２６ （ｍ， ２Ｈ）， ４．６６−４．６１ （ｍ， ４Ｈ）， ４．２２−４．１８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３６ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １０Ｈ）， １．４３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １５Ｈ）  １９Ｆ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ −１９９．２ − −１９９．４ （ｍ）， ３１Ｐ ＮＭＲ （４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ５４．７。
【０４３５】
３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ｇ）（１７ａ）を同様に調製した。化合物１６ａ（１６０ｍｇ）のＡＭＡ（１．３ｍＬ）及びＥｔＯＨ（０．５４ｍＬ）の溶液を５０℃に４時間加熱した。この反応混合物を室温に冷却し、アルゴンで１０分間スパージし、その後真空中で濃縮した。逆相Ｃ１８ＭＰＬＣ及び分取ＨＰＬＣによる精製で、６．５ｍｇの化合物１７ａをアンモニウム塩として得た。ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ７２５．２５ ［Ｍ−Ｈ］− （Ｃ２０Ｈ２２Ｆ２Ｎ１０Ｏ１０Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ７２６．０４）； Ｒｔ： ９．１７ 分 （２−５０ ％ ＭｅＣＮ／ ＮＨ４ＯＡｃ （２０ ｍＭ） 緩衝液， ２０ 分， １ ｍＬ／分， ５ μｍ Ａｃｃｌａｉｍ １２０）。  １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．３３ （ｓ， １Ｈ）， ８．１５ （ｓ， １Ｈ）， ６．４０ （ｄｄ． Ｊ ＝ １７．６， ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．０２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５１．６， ３．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５１．２， ３．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３９−５．２９ （ｍ， ２Ｈ）， ４．６６−４．５２ （ｍ， ４Ｈ）， ４．２５−４．１７ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１５ （ｓ， １．４Ｈ）。
【０４３６】
実施例４：３’３’−ＲＲ−（Ａ）（２’Ｆ−Ａ）（２２）及び３’３’−ＲＳ−（Ａ）（２’Ｆ−Ａ）（２２ａ）の合成
３’３’−ＲＲ−（Ａ）（２’Ｆ−Ａ）またはジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［Ａ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれる（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＳ，１２Ｒ，１４ａＲ）−２，９−ビス（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−３−フルオロ−１０−ヒドロキシ−５，１２−ジメルカプトオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン５，１２−ジオキシド（２２）、及び３’３’−ＲＳ−（Ａ）（２’Ｆ−Ａ）またはジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［Ａ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれる（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｓ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＳ，１２Ｒ，１４ａＲ）−２，９−ビス（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−３−フルオロ−１０−ヒドロキシ−５，１２−ジメルカプトオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン５，１２−ジオキシド（２２ａ）を、以下のスキーム４に従って調製した。
【化５９】
0006692826.tif 000120
【０４３７】
ステップ１：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（６−ベンズアミド−９Ｈ−プリン−９−イル）−４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３−イルハイドロジェンホスホネート（１９）の調製：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（６−ベンズアミド−９Ｈ−プリン−９−イル）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）テトラヒドロフラン−３−イル（２−シアノエチル）ジイソプロピルホスホラミダイト（１８、２．０ｇ、２．０ｍｍｏｌ、ＣｈｅｍＧｅｎｅｓ）のＭｅＣＮ（１０ｍＬ）溶液に、水（０．０７ｍＬ）に続いてピリジニウムトリフルオロアセテート（０．４７ｇ、２．４ｍｍｏｌ、１．２当量、Ａｌｄｒｉｃｈ）を加えた。８分間攪拌後、この無色反応物に、ｔｅｒｔ−ブチルアミン（１０ｍＬ、９５ｍｍｏｌ、４７当量、Ａｌｄｒｉｃｈ）を導入した。１０分後、この無色溶液を、真空下濃縮し、ＭｅＣＮ（３０ｍＬ）でさらに３回濃縮後に共沸混合物として水を除去して無色のフォームを得た。この無色のフォームをＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）に溶解し、無色溶液を得た。この無色溶液に、水（０．３６ｍＬ）及び６％（ｖ／ｖ）のＤＣＡのＣＨ２Ｃｌ２（２４ｍＬ）溶液を加え、これがこの無色溶液を鮮紅色溶液にした。室温で１０分間攪拌後、この赤色溶液にピリジン（３ｍＬ）を導入した。得られた白色混合物を真空中で濃縮し、水をＭｅＣＮ（３０ｍＬ）と濃縮後共沸混合物として除去した。この共沸混合物過程をＭｅＣＮ（３０ｍＬ）でさらに３回繰り返した。最後のエバポレーションで、得られた化合物１９の白色スラリーをＭｅＣＮ（１５ｍＬ）中に保持した。
【０４３８】
ステップ２：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（６−ベンズアミド−９Ｈ−プリン−９−イル）−２−（（（（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（６−ベンズアミド−９Ｈ−プリン−９−イル）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル−４−フルオロテトラヒドロフラン−３−イル）オキシ）（２−シアノエトキシ）ホスホロチオイル）オキシ）メチル）−４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）テトラヒドロフラン−３−イルハイドロジェンホスホネート（２０）の調製：化合物３（１．８ｇ、２．０ｍｍｏｌ、ＣｈｅｍＧｅｎｅｓ）のＭｅＣＮ（２０ｍＬ）溶液を真空中で濃縮乾固した。この過程をＭｅＣＮ（２０ｍＬ）でさらに２回繰り返して水を共沸混合物として除去した。最後の共沸混合物の状態で、化合物３のＭｅＣＮ（６ｍＬ）溶液に、６個の３Åモレキュラーシーブを加え、この溶液を窒素雰囲気下で保存した。化合物１９と残余のピリジン−１−イウムジクロロアセテートの混合物の攪拌ＭｅＣＮ（１５ｍＬ）溶液に、化合物３のＭｅＣＮ（６ｍＬ）溶液を導入した。１０分後、この攪拌混合物に、ＤＤＴＴ（４６０ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、この黄色混合物を真空中で濃縮し、化合物２０を黄色油として得た。
【０４３９】
ステップ３：Ｎ，Ｎ’−（（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｒ，１４ａＲ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１２−（２−シアノエトキシ）−１０−フルオロ−５−メルカプト−５−オキシド−１２−スルフィドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２，９−ジイル）ビス（９Ｈ−プリン−９，６−ジイル））ジベンズアミド（２１）及びＮ，Ｎ’−（（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｓ，１４ａＲ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１２−（２−シアノエトキシ）−１０−フルオロ−５−メルカプト−５−オキシド−１２−スルフィドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２，９−ジイル）ビス（９Ｈ−プリン−９，６−ジイル））ジベンズアミド（２１ａ）の調製：化合物２０のＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）淡黄色溶液に、水（０．２４ｍＬ）及び６％（ｖ／ｖ）のＤＣＡのＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）溶液を導入し、赤色溶液を得た。室温で１０分間攪拌後、この赤色溶液にピリジン（１５ｍＬ）を加えた。得られた黄色混合物を真空中でこの黄色混合物が約２５ｍＬになるまで濃縮した。この黄色混合物に、さらにピリジン（５０ｍＬ）を加え、この混合物を真空中でこの黄色混合物が約３０ｍＬになるまで濃縮した。この過程をピリジン（５０ｍＬ）でさらに一度、この黄色混合物が３０ｍＬになるまで繰り返した。この黄色混合物の攪拌ピリジン（３０ｍＬ）溶液に、ＤＭＯＣＰ（１．１ｇ、６．０ｍｍｏｌ、３当量、Ａｌｄｒｉｃｈ）を導入した。５分間の攪拌後、この暗橙色溶液に水（１．０ｍＬ）を加え、直後に３Ｈ−１，２−ベンゾジチオール−３−オン（０．５ｇ、３．０ｍｍｏｌ、１．５当量、Ａｌｄｒｉｃｈ）を加えた。５分間の攪拌後、この暗橙色溶液を１ＮのＮａＨＣＯ３水溶液（４００ｍＬ）に注入した。１０分間の攪拌後、この二相混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）及びＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）で抽出した。これらの層の分離後、この水層をＣＨ２Ｃｌ２（４００ｍＬ）でさらに２回逆抽出した。これらの有機抽出物を合わせ、真空中で濃縮した。この濃縮黄色油に、トルエン（１００ｍＬ）を導入し、残余のピリジンを真空中で除去した。この手順をトルエン（１００ｍＬ）でさらに１回繰り返した。得られた黄色油をシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中０％−１０％のＭｅＯＨ）で精製し、化合物２１（２７０ｍｇ、１３％）を黄色固体として、及び化合物２１ａ（１２０ｍｇ）を得た。
【０４４０】
ステップ４：３’３’−ＲＲ−（Ａ）（２’Ｆ−Ａ）（２２）及び３’３’−ＲＳ−（Ａ）（２’Ｆ−Ａ）（２２ａ）の調製：Ｒｐ，Ｒｐジアステレオマーが濃縮された化合物２１（１５０ｍｇ）の攪拌ＭｅＯＨ（２．０ｍＬ）溶液に、３０％水酸化アンモニウム水溶液（２．０ｍＬ）を導入し、この黄色スラリーを５０℃で加熱した。２時間後、この黄色溶液を室温に冷却し、この黄色溶液を真空中で濃縮した。残った固体に、トリエチルアミントリハイドロフルオライド（１．２ｍＬ、Ａｌｄｒｉｃｈ）を加え、この黄色溶液を４０℃に加熱した。２時間後、この黄色溶液を室温に冷却した。この黄色溶液を、氷水浴中で冷却した１ＭのＴＥＡＢ（６ｍＬ）及びＴＥＡ（１．０ｍＬ）の溶液にゆっくりと導入した。得られた黄色混合物を３０分間攪拌した。この黄色混合物をＣ１８カラム（１０ｍＭのＴＥＡＡ水溶液中０％−２０％のＭｅＣＮ）での逆相クロマトグラフィーによって精製し、凍結乾燥後、化合物２２（２４ｍｇ、２３％）を純度９６％で白色のトリストリエチルアンモニウム塩として得た。ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ６９３．２５ ［Ｍ＋Ｈ］＋ （Ｃ２０Ｈ２３ＦＮ１０Ｏ９Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ６９２．０６）； Ｒｔ １２．３３９’分 ＨＰＬＣ条件（１０ ｍＭ ＴＥＡＡ， ２％ − ２０％）による。  Ｒｔ ７．６２５’分 ＬＣＭＳ条件（２０ ｍＭ ＮＨ４ＯＡｃ， ２％ − ２０％）による。  １Ｈ ＮＭＲ。 （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．６５ （ｓ， １Ｈ）， ８．５６ （ｓ， １Ｈ）， ８．３７ （ｓ， １Ｈ）， ８．２７ （ｓ， １Ｈ）， ６．５８ （ｄ， Ｊ ＝ １６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．３３ （ｓ， １Ｈ）， ５．６９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５１．６， ３．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３６−５．２７ （ｍ， １Ｈ）， ５．２１ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１１−５．０５ （ｍ， １Ｈ）， ４．７６−４．６５ （ｍ， ３Ｈ）， ４．６０ （ｄ， Ｊ ＝ １２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．８， ４．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．２４ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １８Ｈ）， １．３７ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２７Ｈ）。  １９Ｆ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ −２００．７３ − −２００．９３ （ｍ）。  ３１Ｐ ＮＭＲ （４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ５４．７９。
【０４４１】
ＲｐＳｐジアステレオマーが濃縮された化合物２１ａを同様に反応させ、逆相クロマトグラフィーによる精製及び凍結乾燥後、化合物２２ａ（２９ｍｇ、３４％）を純度９５％で白色ペンタキストリエチルアンモニウム塩として得た。ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ６９１．２５ ［Ｍ−Ｈ］− （Ｃ２０Ｈ２３ＦＮ１０Ｏ９Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ６９２．０６）； Ｒｔ １０．３９９’分 ＨＰＬＣ条件（１０ ｍＭ ＴＥＡＡ， ２％ − ２０％）による。  Ｒｔ １０．２３６’分 ＬＣＭＳ条件（２０ ｍＭ ＮＨ４ＯＡｃ， ２％ − ２０％）による。  １Ｈ ＮＭＲ。 （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．７４ （ｓ， １Ｈ）， ８．６９ （ｓ， １Ｈ）， ８．３７ （ｓ， １Ｈ）， ８．３３ （ｓ， １Ｈ）， ６．６２ （ｄ， Ｊ ＝ １６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．３６ （ｓ， １Ｈ）， ５．９３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５１．６， ２．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３１−５．２３ （ｍ， １Ｈ）， ５．１９ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１３−５．０７ （ｍ， １Ｈ）， ４．７７−４．６５ （ｍ， Ｈ）， ４．６２−４．５９ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２９−４．２５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３４ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３０Ｈ）， １．４３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ４５Ｈ）。  １９Ｆ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ −２０１．５８ − −２０１．７８ （ｍ）。  ３１Ｐ ＮＭＲ （４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ５５．００。
【０４４２】
実施例５：３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（Ａ）（２３）及び３’３’−ＳＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（Ａ）（２３ａ）の合成
３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（Ａ）またはジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［２’Ｆ−Ｇ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれる２−アミノ−９−（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＳ，１２Ｒ，１４ａＲ）−９−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−３−フルオロ−１０−ヒドロキシ−５，１２−ジメルカプト−５，１２−ジオキシドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２−イル）−１，９−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−オン（２３）、及び３’３’−ＳＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（Ａ）またはジチオ−（Ｓｐ，Ｒｐ）−環状−［２’Ｆ−Ｇ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれる２−アミノ−９−（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｓ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＳ，１２Ｒ，１４ａＲ）−９−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−３−フルオロ−１０−ヒドロキシ−５，１２−ジメルカプト−５，１２−ジオキシドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２−イル）−１，９−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−オン（２３ａ）
【化６０】
0006692826.tif 000121
【０４４３】
を実施例４、スキーム４の方法に従って調製した。化合物１８（２．０ｇ、２．０ｍｍｏｌ、ＣｈｅｍＧｅｎｅｓ）をステップ１で使用し、化合物８（２．０ｇ、２．３ｍｍｏｌ、ＣｈｅｍＧｅｎｅｓ）をステップ２で化合物３の代わりに使用し、ステップ４では、水酸化アンモニウム水溶液を同じ割合のＡＭＡで置き換え、逆相分取ＨＰＬＣによる精製及び凍結乾燥後、化合物２３（３３ｍｇ、純度９９％）をビストリエチルオアンモニウム（ｂｉｓ−ｔｒｉｅｔｈｙｌｏａｍｍｏｎｉｕｍ）塩として、また、化合物２３ａ（５０ｍｇ、純度９８％）をトリストリエチルアンモニウム塩として得た。
【０４４４】
化合物２３：ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ７０７．８０ ［Ｍ−Ｈ］＋ （Ｃ２０Ｈ２３ＦＮ１０Ｏ１０Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ７０８．０５）； Ｒｔ １４．３１０’分 ＨＰＬＣ条件（１０ ｍＭ ＴＥＡＡ， ２％ − ２０％）による。  Ｒｔ ７．２７４’分 ＬＣＭＳ条件（２０ ｍＭ ＮＨ４ＯＡｃ， ２％ − ５０％）による。 １Ｈ ＮＭＲ。 （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．５６ （ｓ， １Ｈ）， ８．３５ （ｓ， １Ｈ）， ８．１２ （ｓ， １Ｈ）， ６．３９ （ｄ， Ｊ ＝ １８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．３１ （ｓ， １Ｈ）， ５．６９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５１．６， ４．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３８−５．３０ （ｍ， １Ｈ）， ５．１９−５．１４ （ｍ， １Ｈ）， ４．９１ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６５−４．６３ （ｍ， ４Ｈ）， ４．２３−４．１８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３４ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １２Ｈ）， １．４１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １８Ｈ）。  １９Ｆ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ −１９９．４７ − −１９９．７２ （ｍ）。  ３１Ｐ ＮＭＲ （４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ５４．７０， ５４．５２。
【０４４５】
化合物２３ａ：ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ７０９．８０ ［Ｍ＋Ｈ］＋ （Ｃ２０Ｈ２３ＦＮ１０Ｏ１０Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ７０８．０５）； Ｒｔ １７．３４８’分 ＨＰＬＣ条件（１０ ｍＭ ＴＥＡＡ， ２％ − ２０％）による。  Ｒｔ ６．３５４’分 ＬＣＭＳ条件（２０ ｍＭ ＮＨ４ＯＡｃ， ２％ − ５０％）による。 １Ｈ ＮＭＲ。 （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．７４ （ｓ， １Ｈ）， ８．３６ （ｓ， １Ｈ）， ８．１２ （ｓ， １Ｈ）， ６．４１ （ｄ， Ｊ ＝ １９．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．３３ （ｓ， １Ｈ）， ５．９８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５１．６， ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．４１−５．２９ （ｍ， １Ｈ）， ５．１９−５．１３ （ｍ， １Ｈ）， ４．８９ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６３ （ｄ， Ｊ ＝ ９．２ Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．５７ （ｄ， Ｊ ＝ １２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２８−４．１８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３４ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １８Ｈ）， １．４２ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２７Ｈ）。  １９Ｆ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ −２００．１１ − −２００．３６ （ｍ）。  ３１Ｐ ＮＭＲ （４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ５５．３２， ５５．２５， ５４．６６。
【０４４６】
実施例６：３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）（２４）及び３’３’−ＲＳ−（Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）（２４ａ）の合成
３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）またはジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［Ｇ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれる２−アミノ−９−（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＳ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｒ，１４ａＲ）−９−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−１０−フルオロ−３−ヒドロキシ−５，１２−ジメルカプト−５，１２−ジオキシドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２−イル）−１，９−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−オン（２４）及び３’３’−ＲＳ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）またはジチオ−（Ｒｐ，Ｓｐ）−環状−［Ｇ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれる２−アミノ−９−（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＳ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｓ，１４ａＲ）−９−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−１０−フルオロ−３−ヒドロキシ−５，１２−ジメルカプト−５，１２−ジオキシドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２−イル）−１，９−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−オン（２４ａ）
【化６１】
0006692826.tif 000122
【０４４７】
を実施例４、スキーム４の方法に従って調製した。化合物３（２．１ｇ、２．４ｍｍｏｌ、ＣｈｅｍＧｅｎｅｓ）をステップ１で化合物１８の代わりに使用し、（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−５−（２−イソブチラミド−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフラン−３−イル（２−シアノエチル）ジイソプロピルホスホラミダイト（１．６ｇ、１．６ｍｍｏｌ、ＣｈｅｍＧｅｎｅｓ）をステップ２で化合物３の代わりに使用し、逆相分取ＨＰＬＣによる精製及び凍結乾燥後、化合物２４（１０ｍｇ、純度９４％）及び化合物２４ａ（５０ｍｇ、純度９６％）をペンタキストリエチルアンモニウム塩として得た。
【０４４８】
化合物２４：ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ７０８．００ ［Ｍ−Ｈ］＋ （Ｃ２０Ｈ２３ＦＮ１０Ｏ１０Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ７０８．０５）； Ｒｔ １４．８７８’分 ＨＰＬＣ条件（１０ ｍＭ ＴＥＡＡ， ２％ − ２０％）による。  Ｒｔ ７．３８１’分 ＬＣＭＳ条件（２０ ｍＭ ＮＨ４ＯＡｃ， ２％ − ５０％）による。 １Ｈ ＮＭＲ。 （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．５２ （ｓ， １Ｈ）， ８．３４ （ｓ， １Ｈ）， ８．１２ （ｓ， １Ｈ）， ６．６０ （ｄ， Ｊ ＝ １６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．１３ （ｄ， Ｊ ＝ １．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５１．６， ４．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３９−５．２５ （ｍ， １Ｈ）， ５．２１−５．１５ （ｍ， １Ｈ）， ４．９０ （ｄ， Ｊ ＝ ２．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７０−４．６３ （ｍ， ２Ｈ）， ４．６１−４．５７ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２３−４．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３４ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３０Ｈ）， １．４３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ４５Ｈ）。  １９Ｆ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ −２００．１２ − −２００．３１ （ｍ）。  ３１Ｐ ＮＭＲ （４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ５４．９， ５４．４。
【０４４９】
化合物２４ａ：ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ７１０．１０ ［Ｍ＋Ｈ］＋ （Ｃ２０Ｈ２３ＦＮ１０Ｏ１０Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ７０８．０５）； Ｒｔ １２．６３３’分 ＨＰＬＣ条件（１０ ｍＭ ＴＥＡＡ， ２％ − ２０％）による。  Ｒｔ ８．６６２’分 ＬＣＭＳ条件（２０ ｍＭ ＮＨ４ＯＡｃ， ２％ − ５０％）による。 １Ｈ ＮＭＲ。 （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．６３ （ｓ， １Ｈ）， ８．４７ （ｓ， １Ｈ）， ８．３４ （ｓ， １Ｈ）， ６．７２ （ｄ， Ｊ ＝ １７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．２３ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．０５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５１．６， ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．４７−５．３２ （ｍ， １Ｈ）， ５．３１−５．２４ （ｍ， １Ｈ）， ４．９８−４．９０ （ｍ， １Ｈ）， ４．８７−４．８５ （ｍ， １Ｈ）， ４．８４−４．７８ （ｍ， １Ｈ）， ４．６９−４．６５ （ｍ， １Ｈ）， ４．６３−４．５６ （ｍ， １Ｈ）， ４．３８−４．２８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３４ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３０Ｈ）， １．４７ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ４５Ｈ）。  １９Ｆ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ −２００．９１ − −２０１．１１ （ｍ）。  ３１Ｐ ＮＭＲ （４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ５５．６， ５５．５， ５４．５。
【０４５０】
実施例７：３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−ｉＢｕＧ）（２’Ｆ−ＢｚＡ）（２５）及び３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−ｉＢｕＧ）（２’Ｆ−ＢｚＡ）（２５ａ）の合成
３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−ｉＢｕＧ）（２’Ｆ−ＢｚＡ）またはジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［２’Ｆ−ｉＢｕＧ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−ＢｚＡ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれるＮ−（９−（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｒ，１４ａＲ）−３，１０−ジフルオロ−９−（２−イソブチラミド−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）−５，１２−ジメルカプト−５，１２−ジオキシドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−イル）ベンズアミド（２５）、及び３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−ｉＢｕＧ）（２’Ｆ−ＢｚＡ）またはジチオ−（Ｒｐ，Ｓｐ）−環状−［２’Ｆ−ｉＢｕＧ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−ＢｚＡ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれるＮ−（９−（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｓ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｒ，１４ａＲ）−３，１０−ジフルオロ−９−（２−イソブチラミド−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）−５，１２−ジメルカプト−５，１２−ジオキシドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−イル）ベンズアミド（２５ａ）は、以下のスキーム５に従って調製した。
【化６２】
0006692826.tif 000123
【０４５１】
化合物１３’（１５５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌｅ、１当量、ジアステレオマー１３及び１３ａの混合物、実施例２参照）のＭｅＣＮ（０．８３ｍＬ）溶液に、ｔｅｒｔ−ブチルアミン（０．８２ｍＬ、７．８ｍｍｏｌ、４７当量）を加えた。この反応を１０分間継続し、真空中で濃縮した。逆相Ｃ１８ＭＰＬＣによる精製で５７ｍｇの化合物２５ａをトリエチルアンモニウム塩として、また、４１ｍｇの化合物２５をトリエチルアンモニウム塩として得た。
【０４５２】
化合物２５：ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ８８３．３５ ［Ｍ−Ｈ］− （Ｃ３１Ｈ３２Ｆ２Ｎ１０Ｏ１１Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ８８４．１１）； Ｒｔ： ５．４２ 分 （２０−１００ ％ ＭｅＣＮ／ ＮＨ４ＯＡｃ （２０ ｍＭ） 緩衝液， １０ 分， １ ｍＬ／分， ５ μｍ Ａｃｃｌａｉｍ １２０）。  １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．８５ （ｓ， １Ｈ）， ８．８０ （ｓ， １Ｈ）， ８．３１ （ｓ， １Ｈ）， ８．１３ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．８２ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．７４ （ｄ， Ｊ ＝ １６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．５０ （ｓ， Ｊ ＝ １９．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．８４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．４， ４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．６， ４，０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３６−５．２１ （ｍ， ２Ｈ）， ４．６４−４．６２ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２３ （ｔｄ， Ｊ ＝ １２， ４．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．３５ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １２Ｈ）， ２．７８−２．７２ （ｍ， １Ｈ）， ２．０５ （ｓ， ０．２Ｈ）， １．４０ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １８Ｈ）， １．１９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２．４ Ｈｚ， ６Ｈ）。
【０４５３】
化合物２５ａ：ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ８８３．３０ ［Ｍ−Ｈ］− （Ｃ３１Ｈ３２Ｆ２Ｎ１０Ｏ１１Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ８８４．１１）； Ｒｔ： ５．１６ 分 （２０−１００ ％ ＭｅＣＮ／ ＮＨ４ＯＡｃ （２０ ｍＭ） 緩衝液， １０ 分， １ ｍＬ／分， ５ μｍ Ａｃｃｌａｉｍ １２０）。 １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．９１ （ｓ， １Ｈ）， ８．８５ （ｓ， １Ｈ）， ８．３６ （ｓ， １Ｈ）， ８．１４ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．８３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７２ （ｔ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．７５ （ｄ， Ｊ ＝ １６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．５０ （ｄ， Ｊ ＝ ２０．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．０５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５０．８ Ｈｚ， ３．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５２．０ Ｈｚ， ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．４１−５．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ４．８１−４．７６ （ｍ， ２Ｈ）， ４．６３−４．４２ （ｍ， ２Ｈ）， ４．３０−４．２２ （ｍ，２Ｈ）， ３．３５ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ９Ｈ）， ２．５２−２．４３ （ｍ， １Ｈ）， ２．０５ （ｓ， ０．５Ｈ）， １．４０ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １２Ｈ）， １．１９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５９．２ Ｈｚ， ６．８ Ｈｚ， ６Ｈ）。
【０４５４】
実施例８：３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−ｉＢｕＧ）（２’Ｆ−Ａ）（２６）の合成
ＲＲ−（２’Ｆ−ｉＢｕＧ）（２’Ｆ−Ａ）またはジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［２’Ｆ−ｉＢｕＧ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれるＮ−（９−（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｒ，１４ａＲ）−９−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−３，１０−ジフルオロ−５，１２−ジメルカプト−５，１２−ジオキシドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２−イル）−６−オキソ−６，９−ジヒドロ−１Ｈ−プリン−２−イル）イソブチラミド（２６）を、以下のスキーム６に従って調製した。
【化６３】
0006692826.tif 000124
【０４５５】
２５（２０ｍｇ、実施例７、スキーム５から）のＭｅＣＮ（０．８３ｍＬ）溶液に、濃ＮＨ４ＯＨ（０．３５ｍＬ）及びＭｅＯＨ（０．３５ｍＬ）を加えた。この反応を室温で３時間継続し、真空中で濃縮した。逆相Ｃ１８ＭＰＬＣによる精製で、６．１ｍｇの化合物２６を得た。ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ７７９．９０ ［Ｍ−Ｈ］− （Ｃ２４Ｈ２８Ｆ２Ｎ１０Ｏ１０Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ７８０．０９）； Ｒｔ： ９．０１ 分 （２−５０ ％ ＭｅＣＮ／ＮＨ４ＯＡｃ （２０ ｍＭ） 緩衝液， １０ 分， １ ｍＬ／分， ５ μｍ Ａｃｃｌａｉｍ １２０）。  １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．４８ （ｓ， １Ｈ）， ８．２４ （ｓ， １Ｈ）， ８．１９ （ｓ， １Ｈ）， ６．３６ （ｄ， １６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．２３ （ｄ， Ｊ ＝ １７．６ Ｈｚ． １Ｈ） ５．６０ （ｄ， Ｊ ＝ ５１．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２０ （ｄ， Ｊ ＝ ５２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１８−５．０８ （ｍ， ２Ｈ）， ４．６１ − ４．３０ （ｍ， ４Ｈ）， ４．００ （ｓ， ３Ｈ）， ３．１７ （ｑ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １６Ｈ）， ２．７４−２．７３ （ｍ， １Ｈ）， ２．０５ （ｓ， ０．３Ｈ）， １．３０ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２４Ｈ）， １．１８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ６Ｈ）。
【０４５６】
実施例９：３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−ＢｚＡ）（２’Ｆ−ＢｚＡ）（２７）の合成
３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−ＢｚＡ）（２’Ｆ−ＢｚＡ）またはジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［２’Ｆ−ＢｚＡ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−ＢｚＡ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれるＮ，Ｎ’−（（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，５Ｒ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１２Ｒ，１４ａＲ）−３，１０−ジフルオロ−５，１２−ジメルカプト−５，１２−ジオキシドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２，９−ジイル）ビス（９Ｈ−プリン−９，６−ジイル））ジベンズアミド（２７）を以下のスキーム７に従って調製した。
【化６４】
0006692826.tif 000125
【０４５７】
化合物５（４００ｍｇ、０．４１８ｍｍｏｌｅ、１当量、例えば実施例１のスキーム１参照、ステップ３後に単離）のＭｅＣＮ（２．５ｍＬ）溶液に、ｔｅｒｔ−ブチルアミン（２．１８ｍＬ、５０当量）を加えた。この混合物に蓋をし、４５分間攪拌した。この混合物を真空中で濃縮し、２８２．１ｍｇの粗化合物２７を得た。この反応物を分取ＨＰＬＣ−Ｃ１８（７５％の１０ｍＭ  ＴＥＡＡから５５％アセトニトリル／１０ｍＭ  ＴＥＡＡ）を用いて精製し、４．９ｍｇの化合物２７（純度＞９５％）をトリエチルアンモニウム塩として得た。ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ９０３．９ ［Ｍ＋Ｈ］＋ （Ｃ３４Ｈ３０Ｆ２Ｎ１０Ｏ１０Ｐ２Ｓ２に対する計算値： ９０２．１０）； Ｒｔ： ６．７９ 分 （２−８０ ％ ＭｅＣＮ／ＮＨ４ＯＡｃ （２０ ｍＭ） 緩衝液， １０ 分， １ ｍＬ／分， ５ μｍ Ａｃｃｌａｉｍ １２０）。  １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， ＭｅＯＤ） δ ８．７６ （ｓ， ２Ｈ）， ８．７０ （ｄ， Ｊ ＝ １２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ８．０３ （ｔ， Ｊ ＝ １０ Ｈｚ， ４Ｈ）， ７．６０ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ４Ｈ）， ６．５３ （ｔ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．５９−５．４６ （ｄ， Ｊ ＝ ５２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１７−５．１１ （ｍ， １Ｈ）， ４．５１−４．３６ （ｍ， ２Ｈ）， ４．０３ （ｄ， Ｊ ＝ ９．２ Ｈｚ， ２Ｈ）。 １９Ｆ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， ＭｅＯＤ） δ −２０１．５４ − −２０１．７４， ３１Ｐ ＮＭＲ （４５ °Ｃ， ＭｅＯＤ） δ ５５．６８。
【０４５８】
実施例１０：３’３’−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）（３０）の合成
３’３’−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）または環状−［２’Ｆ−Ｇ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ］とも呼ばれる２−アミノ−９−（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１４ａＲ）−９−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−３，１０−ジフルオロ−５，１２−ジヒドロキシ−５，１２−ジオキシドオクタヒドロ−２Ｈ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２−イル）−１，９−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−オンを以下のスキーム８に従って調製した。
【化６５】
0006692826.tif 000126
【０４５９】
ステップ１：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−フルオロ−５−（２−イソブチラミド−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフラン−３−イルハイドロジェンホスホネート（９）の調製：化合物８（１０ｇ、１０ｍｍｏｌｅ、ＣｈｅｍＧｅｎｅｓ、実施例２参照）のＭｅＣＮ（５０ｍＬ）及び水（３６０μＬ）の溶液に、ピリジニウムトリフルオロアセテート（２．３２ｍｇ）を加えた。この反応物を１分間攪拌し、その後ｔｅｒｔ−ブチルアミン（５０ｍＬ）を加えた。この反応を１０分間継続し、真空中で濃縮し、真空中でアセトニトリルとともにエバポレートし（２×１００ｍＬ）、化合物９及び１０の約（４：１、実施例１参照）の混合物を得た。
【０４６０】
ステップ２：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）−５−（２−イソブチラミド−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフラン−３−イルハイドロジェンホスホネート（１１）の調製：この化合物９及び１０の粗混合物（約８．５ｇ、５ｍｍｏｌｅ）ならびにＤＣＭ（６０ｍＬ）の溶液に、水（０．０９ｍＬ）に続いて６％のＤＣＡ溶液のＤＣＭ（６０ｍＬ）溶液を加えた。１０分後、この反応混合物をピリジン（７．０ｍＬ）でクエンチし、その後真空中で濃縮した。この粗混合物を、無水ＭｅＣＮ３×３５ｍＬとともにエバポレートし、７．０ｍＬの粗化合物１１を残した。
【０４６１】
ステップ３：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（６−ベンズアミド−９Ｈ−プリン−９−イル）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−フルオロテトラヒドロフラン−３−イル）オキシ）（２−シアノエトキシ）ホスホリル）オキシ）メチル）−４−フルオロ−５−（２−イソブチラミド−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフラン−３−イルハイドロジェンホスホネート（２８）の調製：化合物３の溶液を無水ＭｅＣＮ３×３５ｍＬとともにエバポレートし、無水ＭｅＣＮを２０ｍＬ残し、これを化合物１１の粗溶液に加え、この反応物を２分間攪拌した。ｔ−ＢｕＯＯＨ（デカン中５．５Ｍ溶液２．７３ｍＬ）を加え、この反応を３０分間継続した。重亜硫酸ナトリウム水溶液（２．５ｍＬの水に１．２５ｇ）を加え、この混合物を５分間攪拌した。これをその後真空中で濃縮乾固し、２２ｇの化合物２８を得た。
【０４６２】
ステップ４：Ｎ−（９−（（２Ｒ，３Ｒ，３ａＲ，７ａＲ，９Ｒ，１０Ｒ，１０ａＲ，１４ａＲ）−５−（２−シアノエトキシ）−３，１０−ジフルオロ−１２−ヒドロキシ−９−（２−イソブチラミド−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−９Ｒ−プリン−９−イル）−５，１２−ジオキシドオクタヒドロ−２Ｒ，７Ｈ−ジフロ［３，２−ｄ：３’，２’−ｊ］［１，３，７，９］テトラオキサ［２，８］ジホスファシクロドデシン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−イル）ベンズアミド（２９）の調製：化合物２８（２２ｇ）のＤＣＭ（１２０ｍＬ）溶液に、水（６００μＬ）に続いて６％のＤＣＡのＤＣＭ（１２０ｍＬ）溶液を加えた。１０分後、この反応混合物をピリジン（５０ｍＬ）でクエンチし、真空中で濃縮してＤＣＭを除去した。追加量のピリジン（１５０ｍＬ）を加え、この混合物を真空中で１００ｍＬに濃縮した。ＤＭＯＣＰ（２．９２ｇ）を加え、この反応物を３分間攪拌し、その後、水（３．２ｍＬ）に続いてヨウ素（１．６５ｇ）を加えた。５分後、この反応物を重亜硫酸ナトリウム溶液（７００ｍＬの水に１ｇのＮａＨＳＯ３）でクエンチし、エチルエーテルとＥｔＯＡｃの１：１混合物（８００ｍＬ）で抽出した。この水層をさらに追加のＤＣＭ２００ｍＬで抽出した。合わせた有機層を真空中で濃縮し、７ｇの粗化合物２９を得た。
【０４６３】
ステップ５：３’３’−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）（３０）の調製：化合物３０（３．１５ｇ）のＡＭＡ（２２ｍＬ）及びＥｔＯＨ（９．４５ｍＬ）の溶液を５０℃に４時間加熱した。この反応混合物を室温に冷却し、アルゴンで１０分間スパージした。逆相Ｃ１８ＭＰＬＣ及び分取ＨＰＬＣによる精製で、２２ｍｇの化合物３０を得た。ＬＣＭＳ−ＥＳＩ： ６７７．３０ ［Ｍ−Ｈ］− （Ｃ２０Ｈ２２Ｆ２Ｎ１０Ｏ１１Ｐ２に対する計算値： ６７８．０９）； Ｒｔ： ８．７３ 分 （２−５０ ％ ＭｅＣＮ／ ＮＨ４ＯＡｃ （２０ ｍＭ） 緩衝液， ２０ 分， １ ｍＬ／分， ５ μｍ Ａｃｃｌａｉｍ １２０）。  １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ４５ °Ｃ， Ｄ２Ｏ） δ ８．５２ （ｓ， １Ｈ）， ８．３３ （ｓ， １Ｈ）， ８．１３ （ｓ， １Ｈ）， ６．６０ （ｄ， Ｊ ＝ １７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．４０ （ｄ， Ｊ ＝１８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６２ （ｄ， Ｊ ＝ ３．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１８−５．１０ （ｍ， ２Ｈ）， ４．６６−４．５２ （ｍ， ３Ｈ）， ４．３１−４．２５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３５ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２６Ｈ）， ２．０５ （ｓ， ６．４５Ｈ）， １．４３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３９Ｈ）。
【０４６４】
実施例１１：モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮと精製ＳＴＩＮＧタンパク質のインビトロ結合分析
アミノ酸１４０−３７９（Ｓｗｉｓｓ  Ｐｒｏｔ  Ｑ８６ＷＶ６に対応するアミノ酸ナンバリング）をコードするＤＮＡをヒトＳＴＩＮＧ対立遺伝子の完全長配列を含むプラスミドから、ポリメラーゼ連鎖反応を介して、以下のプライマーで増幅した：フォワードＴＡＣＴＴＣＣＡＡＴＣＣＡＡＴＧＣＡＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＡＧＡＴＣＴＣＴＧ（配列番号８）及びリバースＴＴＡＴＣＣＡＣＴＴＣＣＡＡＴＧＴＴＡＴＴＡＴＴＡＴＣＡＡＧＡＧＡＡＡＴＣＣＧＴＧＣＧＧＡＧ（配列番号９）。ＳＴＩＮＧの変異型対立遺伝子は、Ｙｉ，  ｅｔ  ａｌ，  （２０１３），  ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，  ８（１０），  ｅ７７８４６  （ＤＯＩ：  １０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００７７８４６に従って割り当てた。ＰＣＲ産物は、ライゲーション非依存性クローニング（Ａｓｌａｎｉｄｉｓ，  ｅｔ  ａｌ，  （１９９０）  Ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄｓ  ｒｅｓｅａｒｃｈ，  １８．２０，  ６０６９−６０７４）を用いて、Ｎ末端のヘキサヒスチジン親和性タグ（６×ＨＩＳ）に続いて、低分子ユビキチン様修飾因子（ＳＵＭＯ）溶解性配列（Ｂｕｔｔ，  ｅｔ  ａｌ，  （２００５）  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ４３．１，  １−９）及びタバコエッチ病ウイルスのプロテアーゼ切断部位（ＴＥＶ）をコードする細菌発現ベクターにクローニングした。
【０４６５】
６×ＨＩＳ−ＳＵＭＯ−ＴＥＶ−ＳＴＩＮＧアミノ酸１４０−３７９をコードするプラスミドは、タンパク質発現用のＲｏｓｅｔｔａ２（ＤＥ３）Ｅ．  ｃｏｌｉ細胞（ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に組み込んだ。細胞は、溶原培地にて３７℃で、６００ｎＭの吸光度が０．６になるまで増殖させた。細胞をその後１８℃に移し、イソプロピルβ−Ｄ−１−チオガラクトピラノシドをこの培地に濃度０．２５ｍＭで添加して、タンパク質発現を一夜誘導した。細胞は重力の６，０００倍での１０分間の遠心分離によって回収した。細胞ペレットを、５０ｍＭのトリス塩酸塩（トリス−ＨＣｌ）ｐＨ７．５、５００ｍＭの塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、２０ｍＭのイミダゾール、１０％グリセロール、１ｍＭのトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）、及びプロテアーゼ阻害剤錠（Ｐｉｅｒｃｅ）を含む緩衝液（緩衝液Ａ）中、氷上で再懸濁した。細胞をＳ−４５０Ｄソニファイアー（Ｅｍｍｅｒｓｏｎ  ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ）を用いて氷上で溶解した。細胞溶解物を重力の１５，０００倍で３０分間、４℃で遠心分離した。可溶性物質は、４℃で穏やかに振動させながら、ニッケル−ニトリロ三酢酸（Ｎｉ−ＮＴＡ）を結合したＳｅｐｈａｒｏｓｅ  ＣＬ−６Ｂ（Ｑｉａｇｅｎ）に１時間アプライした。重力流ポリプレップカラム（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）に移した後、樹脂を十分に緩衝液Ａで洗浄した。タンパク質を、２０ｍＭのトリス−ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１５０ｍＭのＮａＣｌ、３００ｍＭのイミダゾール、１０％グリセロール、及び０．５ｍＭのＴＣＥＰを含む緩衝液でこのカラムから溶出した。この６×ＨＩＳ−ＳＵＭＯタグを除去するため、溶出されたタンパク質をＴＥＶプロテアーゼ（Ｓｉｇｍａ）と１：２５０（ｗ：ｗ）の比で混合し、２０ｍＭのトリス−ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１５０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのイミダゾール、１０％グリセロール、及び０．５ｍＭのＴＣＥＰを含む緩衝液に対して一夜透析した。ＴＥＶプロテアーゼ及び６×ＨＩＳ−ＳＵＭＯタグは、Ｎｉ−ＮＴＡ樹脂（Ｑｉａｇｅｎ）をこの試料に添加することによって枯渇させ、精製ＳＴＩＮＧアミノ酸１４０−３７９を、ポリプレップカラムを用いてこの樹脂を除去することによって回収した。ＳＴＩＮＧ  ＡＡ１４０−３７９は、１０，０００ダルトン分子量カットオフ遠心濃縮器（ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）で最終濃度約１０ｍｇ／ｍｌに濃縮した。タンパク質を等分し、液体窒素中で急速冷凍し、使用まで−８０℃で保存した。
【０４６６】
視差走査蛍光分析（ＤＳＦ）は、精製タンパク質に結合し、これを安定化するリガンドの能力を測定する技術である（Ｎｉｅｓｅｎ，  ｅｔ  ａｌ，  （２００７）  Ｎａｔｕｒｅ  ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ２．９，  ２２１２−２２２１）。タンパク質を、これに結合し疎水性環境で蛍光を発する染料の存在下で加熱する。該タンパク質は加熱によって熱変性され、その結果、該変性タンパク質に対する染料の結合及び蛍光が増大する。タンパク質変性の温度中心点（Ｔｍ）は、当該変性曲線の半最大値を計算することによって確立される。リガンドの存在下での該タンパク質の温度中心点は、該タンパク質に対する該リガンドの親和性、ひいてはより高温で該タンパク質を安定化させるその能力に直接関連する。
【０４６７】
ＤＳＦは、２０ｍＭのトリス−ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１：５００希釈のＳＹＰＲＯ  Ｏｒａｎｇｅ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、１ｍｇ／ｍｌの精製されたＳＴＩＮＧ  ＡＡ１４０−３７９タンパク質、及び１ｍＭ濃度のリガンドを含む２０μＬの反応物で実施した。試料をハードシェルＰＣＲプレート（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）に入れた。温度の関数としての蛍光を、ＨＥＸチャンネルで、励起４５０−４９０、発光５６０−５８０ｎｍを読み取るＣＦＸ  ９６リアルタイムＰＣＲ装置（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）で記録した。温度勾配は、１５−８０℃で、１５秒ごとに０．５℃上げ、０．５℃ごとに記録した。タンパク質とリガンドを欠く試料からバックグラウンドシグナルを引いた後。中心点温度（Ｔｍ）は、温度の関数としての蛍光の曲線をボルツマンシグモイド関数（Ｇｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ）に適合させることによって算出した。リガンドの存在下でのＳＴＩＮＧ  ＡＡ１４０−３７９の熱安定性の変化（Ｔｍシフト）は、Ｔｍ（タンパク質のみ）からＴｍ（タンパク質及びリガンド）を引くことによって算出した。
【０４６８】
ＣＤＮ化合物である環状−［Ａ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］（ＣＤＡ、３’３’−（Ａ）（Ａ））、ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［Ａ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］（３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ））、ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ］（３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ））、環状−［Ｇ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］（ｃＧＡＭＰ、３’３’−（Ｇ）（Ａ））、環状−［Ｇ（２’，５’）ｐＡ（３’，５’）ｐ］（ＭＬ−ｃＧＡＭＰ、２’３’−（Ｇ）（Ａ））、及びジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［２’Ｆ−Ｇ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ］（３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ））を、精製ＳＴＩＮＧタンパク質に対するそれらの結合能について、ＤＳＦによって評価した。
【０４６９】
図２及び３は、フッ素置換ＣＤＮ化合物である３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）が、非フッ素置換化合物である３’３’−（Ａ）（Ａ）、３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）、３’３’−（Ｇ）（Ａ）、及び内因性細胞リガンドである２’３’−（Ｇ）（Ａ）より増加したＴｍシフトを示したことを示している。フッ素置換化合物である３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）のＴｍシフトの増加は、それらがｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）（図２）及びｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）タンパク質（図３）の両方の熱安定性を高めることを論証し、ｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）、ｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）、及びフッ素置換ＣＤＮ化合物間の強化された結合相互作用を示した。図２はさらに、２’，２’’−ジフルオロ−ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）置換との（３’，５’）ｐ（３’，５’）ｐヌクレオチド内ホスフェート結合を含むＣＤＮが、（３’，５’）ｐ（３’，５’）ｐヌクレオチド内ホスフェート結合を含む未変性ＣＤＮによって弱く結合される変異体に強く結合することができることを論証した。
【０４７０】
野生型のｈＳＴＩＮＧ、ＨＡＱ対立遺伝子ｈＳＴＩＮＧ、及びＲＥＦ対立遺伝子ｈＳＴＩＮＧの各々もまた、以下の表４に記載の各参照化合物及び本発明の化合物とともに用いた。これらの結果は、３つのすべてのｈＳＴＩＮＧにおいて、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ｇ）、及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）に対する結合の改良を、それらのＯＨ参照、すなわち、それぞれ３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）、３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ｇ）、及び３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ａ）の各々と比較して論証するとともに、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）は、天然に産生される２’３’−（Ｇ）（Ａ）よりも改良された結合を示している。ベースのアミノ基のうちの片方もしくは両方に保護基を有する化合物３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−ＢｚＡ）（２’Ｆ−ＢｚＡ）、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−ｉＢｕＧ）（２’Ｆ−ＢｚＡ）、及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−ｉＢｕＧ）（２’Ｆ−Ａ）もまた、ＲＥＦ対立遺伝子で測定した場合に３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）または３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ａ）と比較して改良された結合を示した。モノ−Ｆ誘導体である３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）もまた、３つのすべてのｈＳＴＩＮＧにおいて、そのＯＨ参照である３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ａ）と比較して改良された結合を示した。
【０４７１】
表４：ｈＳＴＩＮＧ  ＷＴ、ＨＡＱ対立遺伝子、及びＲＥＦ対立遺伝子におけるＴｍシフト
【０４７２】
【表４】
0006692826.tif 000127
【０４７３】
実施例１２：ＨＥＫ２９３Ｔ細胞における３’３’−ジ−Ｆ−ＣＤＮ誘導体分子のヒトＳＴＩＮＧシグナル伝達の活性化
２つの既知の天然ヒトＳＴＩＮＧ変異型であるｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）及びｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）の天然及びフッ素置換ＣＤＮ化合物に応答してシグナル伝達する能力を評価するため、我々は、ｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）またはｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）を安定に発現するヒト胎児腎臓（ＨＥＫ）２９３Ｔ細胞株でのＩＦＮ−βレポーターの活性を測定した。ｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）対立遺伝子の配列は、記載されており（Ｉｓｈｉｋａｗａ，  Ｈ．，  ａｎｄ  Ｂａｒｂｅｒ，  Ｇ．Ｎ．  （２００８）．  Ｎａｔｕｒｅ  ４５５，  ６７４−６７８）、ＮＣＢＩ参照配列ＮＰ＿９３８０２３（図６）を有する。ｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）及びｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）変異型対立遺伝子の配列はまた、Ｙｉ，  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１３，  ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，  ８（１０），  ｅ７７８４６  （ＤＯＩ：  １０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００７７８４６に記載されている。
【０４７４】
ＨＥＫ２９３Ｔの親細胞株は内因性機能性ＳＴＩＮＧを発現しないため、外因的に発現されたＳＴＩＮＧ対立遺伝子の各種ＣＤＮ化合物に対する反応性は、安定なＨＥＫ２９３Ｔ  ＳＴＩＮＧ発現細胞株を用いて評価することができる。これらの株は、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）を含むフレーム内でＩＲＥＳの上流にクローニングされた、ｃ末端のＨＡエピトープタグを有する完全長ＳＴＩＮＧ  ｃＤＮＡを含むＭＳＣＶ２．２レトロウイルスプラスミドで生成された。レトロウイルスベクターを、両種性Ｐｈｏｅｎｉｘパッケージ細胞株にリポフェクタミン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いてトランスフェクトした。２日後、ウイルス上清を回収し、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞の形質導入に用いた。
【０４７５】
ＧＦＰ陽性細胞を、カリフォルニア大学バークレー校がん研究所フローサイトメトリー施設（Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｆｌｏｗ  Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ  Ｆａｃｉｌｉｔｙ  ａｔ  ＵＣ  Ｂｅｒｋｅｌｅｙ）で、Ｍｏ  Ｆｌｏセルソーターを用いて選別した。１０４個のＨＥＫ２９３Ｔ  ＳＴＩＮＧ細胞を９６ウェルのプレートに播種し、ホタルルシフェラーゼレポーター遺伝子の上流にヒトＩＦＮ−βプロモーターを発現するヒトＩＦＮ−βレポータープラスミド（ｐＬｕｃ−ＩＦＮ−β）５０ｎｇ（Ｆｉｔｚｇｅｒａｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，  ４（５）：    ４９１−４９６）及び構成的に活性なチミジンキナーゼ（ＴＫ）Ｒｅｎｉｌｌａ  ｒｅｎｉｆｏｒｍｉｓルシフェラーゼレポーター遺伝子（Ｐｒｏｍｅｇａ）を発現するプラスミド１０ｎｇを標準化用に一過性にトランスフェクトした（リポフェクタミン２０００を用いて）。２４時間後、均一な取り込みを確実にするためにジギトニンによる透過化を用い、細胞を天然及び合成ＣＤＮ誘導体分子で刺激した。各ＳＴＩＮＧ細胞株は、２５ｕｌのジギトニン緩衝液（５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１００ｍＭのＫＣＬ、３ｍＭのＭｇＣｌ２、０．１ｍＭのＤＴＴ、８５ｍＭのスクロース、０．２％ＢＳＡ、１ｍＭのＡＴＰ、０．１ｍＭのＧＴＰ、１０ｕｇ／ｍｌのジギトニン）中で、以下のＣＤＮ化合物の各々の０．１μＭ〜１００μＭの２倍希釈で刺激した：環状−［Ａ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］（ＣＤＡ、３’３’−（Ａ）（Ａ））、ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［Ａ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］（３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ））、ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ］（３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ））、環状−［Ｇ（３’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］（３’３’−（Ｇ）（Ａ））、環状−［Ｇ（２’，５’）ｐ−Ａ（３’，５’）ｐ］（２’３’−（Ｇ）（Ａ））、及びジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）−環状−［２’Ｆ−Ｇ（３’，５’）ｐ−２’Ｆ−Ａ（３’，５’）ｐ］（３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ））。
【０４７６】
２０分後、これら刺激混合物を取り出し、１０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）ウシ胎児血清、１％Ｌ−グルタミン、及び１％ペニシリン／ストレプトマイシンを補充したＤＭＥＭ培地２００ｕｌを加えた。細胞をさらに６時間（３７℃、５％ＣＯ２）インキュベートし、その後細胞溶解物を調製し、レポーター遺伝子活性をＳｐｅｃｔｒａｍａｘ  Ｍ３ルミノメーターにて、Ｄｕａｌ−Ｇｌｏルシフェラーゼアッセイシステム（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｅ２９２０）を用いてメーカーによる記載の通りに測定した。ＩＦＮβホタルルシフェラーゼレポーター遺伝子活性をＴＫウミシイタケルシフェラーゼ遺伝子活性に対して標準化し、未刺激細胞における活性と比較して発光量の比（ｆｏｌｄ−ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ）としてプロットした（平均＋／−ｓ．ｅ．ｍ）。
【０４７７】
図５Ａ（用量治療単位）及び５Ｂ（６．２５μＭ  ＣＤＮ）に示すように、フッ素置換ＣＤＮ化合物３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）は、非フッ素置換化合物３’３’−（Ａ）（Ａ）及びジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）誘導体ＯＨ参照化合物、３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）より、これらの試験用量において、ｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）によるより高レベルのＩＦＮβレポーター活性を誘導した。３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）はまた、内因性細胞リガンドの２’３’−（Ｇ）（Ａ）と比較した場合、ｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）によるより高レベルのＩＦＮβレポーター活性を刺激した。フッ素置換ＣＤＮ化合物３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）はまた、ｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）によるＩＦＮβレポーター活性を強く誘導し、より低用量では、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）は、化合物３’３’−（Ｇ）（Ａ）よりも強力にｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）によるＩＦＮβレポーター活性を誘導した。６Ａ（用量治療単位）及び６Ｂ（６．２５μＭ  ＣＤＮ）に示すように、ｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）を発現するＨＥＫ２９３Ｔ細胞は、すべてが標準的な（３’，５’）ｐ（３’，５’）ｐヌクレオチド内ホスフェート結合を含む３’３’−（Ａ）（Ａ）、３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）、及び３’３’−（Ｇ）（Ａ）による刺激にほとんど反応しなかった。対照的に、フッ素置換ＣＤＮ化合物３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）は、（２’，５’）ｐ−（３’，５’）ｐヌクレオチド内ホスフェート結合を有する内因性細胞リガンドの２’３’−（Ｇ）（Ａ）と同レベルまで、強くＩＦＮβレポーター活性を誘導した。これらの結果は、２’，２’’−ジフルオロ−ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）置換を有する標準的（３’，５’）ｐ−（３’，５’）ｐヌクレオチド内ホスフェート結合を含むＣＤＮ化合物は、ｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）、すなわち、標準的（３’，５’）ｐ  （３’，５’）ｐヌクレオチド内ホスフェート結合を含むＣＤＮによる刺激に対して通常反応しない対立遺伝子を強力に活性化した。
【０４７８】
総合すれば、図５Ａ、５Ｂ、及び６Ａ、Ｂのデータは、フッ素置換ＣＤＮ、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）は、ｈＳＴＩＮＧ（ＲＥＦ）及びｈＳＴＩＮＧ（ＷＴ）を強く活性化することが可能であり、ひいてはＳＴＩＮＧの異なる変異型を発現する広範囲のヒト集団にわたってヒトＳＴＩＮＧのシグナル伝達を可能にすることを論証する。
【０４７９】
実施例１３：ＣＤＮによるＩ型インターフェロンの誘導
Ｉ型インターフェロンの誘導を、ヒト一次血中単核細胞（ｈｕｍａｎ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｂｌｏｏｄ  ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ  ｃｅｌｌ）（ｈＰＢＭＣ）中で測定し、本明細書に記載のモノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物の効力を評価した。２人の独特のドナーからのｈＰＢＭＣを用いた。一方のドナーは、野生型（ＷＴ）ＳＴＩＮＧ対立遺伝子に関してホモ接合（ＳＴＩＮＧＷＴ／ＷＴ）であり、他方のドナーは、いわゆる参照（ＲＥＦ）ＳＴＩＮＧ対立遺伝子に関してホモ接合（ＳＴＩＮＧＲＥＦ／ＲＥＦ）であった。これらのドナーのＳＴＩＮＧ遺伝子型は、ＰＣＲ増幅及びシークエンシングによって決定した。ゲノムＤＮＡは１０４個のｈＰＢＭＣから、Ｑｕｉｃｋ  Ｅｘｔｒａｃｔ  ＤＮＡ抽出溶液（Ｅｐｉｃｅｎｔｒｅ）を用いて単離し、これを用いてヒトＳＴＩＮＧ遺伝子のエキソン３、６、及び７の領域を増幅した。増幅及びシークエンシング用のプライマーは：ｈＳＴＩＮＧエキソン３Ｆ  ＧＣＴＧＡＧＡＣＡＧＧＡＧＣＴＴＴＧＧ（配列番号１０）、ｈＳＴＩＮＧエキソン３Ｒ  ＡＧＣＣＡＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＧＡ（配列番号１１）、ｈＳＴＩＮＧエキソン６Ｆ  ＧＧＣＣＡＡＴＧＡＣＣＴＧＧＧＴＣＴＣＡ（配列番号１２）、ｈＳＴＩＮＧエキソン６Ｒ  ＣＡＣＣＣＡＧＡＡＴＡＧＣＡＴＣＣＡＧＣ（配列番号１３）、ｈＳＴＩＮＧエキソン７Ｆ  ＴＣＡＧＡＧＴＴＧＧＧＴＡＴＣＡＧＡＧＧＣ（配列番号１４）、ｈＳＴＩＮＧエキソン７Ｒ  ＡＴＣＴＧＧＴＧＴＧＣＴＧＧＧＡＡＧＡＧＧ（配列番号１５）であった。ＳＴＩＮＧ変異型対立遺伝子は、Ｙｉ，  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１３，  ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，  ８（１０），  ｅ７７８４６  （ＤＯＩ：  １０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００７７８４６）に従って割り当てた。
【０４８０】
凍結保存ｈＰＢＭＣを解凍し、１０６個の細胞を未処理のままにしたか、または１０％ウシ胎児血清、１％Ｌ−グルタミン、及び１％ペニシリン／ストレプトマイシンを補充したＲＭＰＩ培地中、参照化合物３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）、３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ｇ）、２’３’−（Ｇ）（Ａ）、３’３’−（Ｇ）（Ａ）、もしくは３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ａ）、もしくはモノ−もしくはジ−Ｆ化合物３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（Ａ）、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ｇ）、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（Ａ）、及び３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）で処理した。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で、１００μＭ〜０．１μＭにわたる各ＣＤＮ濃度でインキュベートした。２時間（図７及び８）または２時間及び６時間（図９〜１３）の刺激後、細胞を遠心分離によって回収し、リン酸緩衝生理食塩水で一度洗浄した。細胞のＲＮＡはＡｕｒｕｍ  Ｔｏｔａｌ  ＲＮＡ  ９６キットを用いて単離し、ｃＤＮＡをｉＳｃｒｉｐｔ  ｃＤＮＡ合成キットを用いて合成した。標的及び参照遺伝子の発現は、ＰｒｉｍｅＰＣＲプローブアッセイ及びＣＦＸ９６遺伝子サイクラー（すべての試薬及び装置はＢｉｏＲａｄ製）を用いたリアルタイムｑＲＴ−ＰＣＲによって評価した。標準化ＩＦＮβ発現は、未処理の細胞に相対的に表した。標的遺伝子には、Ｉ型インターフェロン（ＩＦＮβ）、Ｔｈ１関連サイトカイン（ＩＦＮγ、ＩＬ−１２ｐ４０）、及びＮＦ−κＢ依存性炎症性サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＬ−６）が含まれた。参照遺伝子には、ＧＵＳＢのみ（図７及び８）またはＧＵＳＢ及びＨＳＰ９０ＡＢ１（図９〜１３）が含まれた。
【０４８１】
図７Ａ及び８Ａ（用量治療単位）ならびに７Ｂ及び８Ｂ（６．２５μＭ  ＣＤＮ）は、ＷＴ  ＳＴＩＮＧ対立遺伝子（図７Ａ、７Ｂ）またはＲＥＦ  ＳＴＩＮＧ対立遺伝子（図８Ａ、８Ｂ）に関してホモ接合のｈＰＢＭＣによる相対的標準化ＩＦＮβ発現を示す。ＳＴＩＮＧＷＴ／ＷＴｈＰＢＭＣに関しては、３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）はともに同じレベルのＩＦＮβを誘導したが；これらの誘導体の両方が、本実施例で最も弱いＷＴ  ＳＴＩＮＧアゴニストであった３’３’−（Ａ）（Ａ）化合物と比較して高いレベルのＩＦＮβ転写産物を誘導した。すべての用量で、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）は、哺乳類細胞によって自然に産生される非標準的２’３’−（Ｇ）（Ａ）と比較してＳＴＩＮＧＷＴ／ＷＴｈＰＢＭＣによる高いレベルのＩＦＮβ転写産物を刺激した。さらに、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）は、ＳＴＩＮＧＷＴ／ＷＴｈＰＢＭＣにおいてもっとも強力なＩ型インターフェロンの誘導因子であり、試験した用量範囲における親ｃＧＡＭＰ化合物と比較して約１０〜１００倍高いレベルのＩＦＮβを誘発した。ＳＴＩＮＧＲＥＦ／ＲＥＦｈＰＢＭＣに関しては、３’３’−（Ａ）（Ａ）、３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）、及び３’３’−（Ｇ）（Ａ）は、試験した用量では、ＩＦＮβ転写産物の感知できるほどのレベルの産生を刺激しなかった。対照的に、２’３’−（Ｇ）（Ａ）、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）、及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）は、ＳＴＩＮＧＲＥＦ／ＲＥＦｈＰＢＭＣによるＩＦＮβ転写産物の用量依存的産生を刺激した。
【０４８２】
図７及び８で試験した用量範囲において、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）、及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）はともに２’３’−（Ｇ）（Ａ）より強力なＩＦＮβ転写産物ＳＴＩＮＧＲＥＦ／ＲＥＦｈＰＢＭＣの誘導因子であった。３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）は、ＲＥＦ  ＳＴＩＮＧ対立遺伝子の非常に強力な刺激因子であり、ＩＦＮβ転写産物レベルは、細胞が３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）で刺激された場合、２’３’−（Ｇ）（Ａ）を同様に投与された細胞と比較して１２〜７０倍高かった。これらの結果は、ＣＤＡ及びｃＧＡＭＰの２’，２’’−ジＦ−ＲＲ誘導体は、それらの対応する親化合物または天然に産生される非標準的２’３’−（Ｇ）（Ａ）より、ＷＴまたはＲＥＦ  ＳＴＩＮＧに関するヒト細胞のホモ接合の強力な刺激因子であった。これらの結果はまた、２’，２’’−ジフルオロ−ジチオ−（Ｒｐ，Ｒｐ）変性を有する標準的Ｒ（３’，５’）ｐＲ（３’，５’）ｐヌクレオチド内ホスフェート結合を含む化合物は、標準的結合を含むＣＤＮによる刺激に通常は耐性があるＲＥＦ  ＳＴＩＮＧ対立遺伝子に関してホモ接合性のヒト細胞によるＩＦＮβ産生を刺激することができることも論証した。
【０４８３】
モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮである３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（Ａ）、３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）、及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）と参照としての３’３’−（Ｇ）（Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ａ）；３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）と参照としての３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）；ならびに３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ｇ）と参照としての３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ｇ）についての結果を図９Ａ（ＩＦＮβ、ＷＴ／ＷＴ）、図９Ｂ（ＩＦＮβ、ＲＥＦ／ＲＥＦ）、図１０Ａ（ＴＮＦα、ＷＴ／ＷＴ）、図１０Ｂ（ＴＮＦα、ＲＥＦ／ＲＥＦ）、図１１Ａ（ＩＬ−６、ＷＴ／ＷＴ）、図１１Ｂ（ＩＬ−６、ＲＥＦ／ＲＥＦ）、図１２Ａ（ＩＦＮγ、ＷＴ／ＷＴ）、図１２Ｂ（ＩＦＮγ、ＲＥＦ／ＲＥＦ）、図１３Ａ（ＩＬ−１２ｐ４０、ＷＴ／ＷＴ）、及び図１３Ｂ（ＩＬ−１２ｐ４０、ＲＥＦ／ＲＥＦ）に示す。ＳＴＩＮＧＷＴ／ＷＴｈＰＢＭＣ関しては、３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ｇ）を例外として、試験した化合物のすべてが強力な用量依存性のサイトカイン反応を誘発した。サイトカインに応じて、ＳＴＩＮＧＷＴ／ＷＴｈＰＢＭＣにおける反応は、２時間（ＩＦＮβ、ＴＮＦα）または６時間（ＩＦＮγ）の刺激で最も高かった。ＩＬ−６及びＩＬ−１２ｐ４０の反応は、両方の時点でＳＴＩＮＧＷＴ／ＷＴｈＰＢＭＣにおいて同様であった。ＳＴＩＮＧＲＥＦ／ＲＥＦｈＰＢＭＣに関しては、自然に産生された哺乳類化合物２’３’−（Ｇ）（Ａ）は、６時間の刺激でピークに達した堅牢で用量依存性の反応をすべてのこれらサイトカインに対して誘発した。３’３’−（Ｇ）（Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ａ）参照化合物と比較して、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（Ａ）、３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）、及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）は、試験したこれらサイトカインの各々のより強い用量依存性の反応を誘導した。アデニン及びグアニンの両方における２’Ｆ置換の存在が最も強い反応を与え、アデニン塩基におけるモノ２’Ｆ置換は、グアニン塩基におけるモノ２’Ｆ置換より強い反応を誘発した。３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）参照化合物と比較して、ジ−Ｆ置換の３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）は、試験したすべてのこれらサイトカインのより強い反応を誘導し、ＩＦＮβ及びＴＮＦαの反応は刺激の２時間後にピークに達した。ジ−Ｆ化合物よりは弱いが、モノ−Ｆ置換の３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（Ａ）化合物もまた、１００μＭの化合物での刺激６時間でサイトカイン反応を誘発することができた。これらモノ−及びジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物、特に３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）は、概してｈＰＢＭＣにおいて強いサイトカイン反応を示し、ＳＴＩＮＧＲＥＦ／ＲＥＦにおいてそれらのＯＨ参照化合物より強い反応であると同時に、天然に産生される２’３’−（Ｇ）（Ａ）と同等、または場合によってはそれより強い反応を示した。
【０４８４】
実施例１４：モノ−及びジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物によるＴＨＰ１細胞におけるヒトＳＴＩＮＧシグナル伝達の活性化
アジュバントの効力のシグネチャーとして、モノ−またはジ−Ｆ−ＣＤＮの各々によってヒト細胞において誘導されるＩ型インターフェロンの相対レベルを測定するため、１００，０００個のＴＨＰ１−Ｄｕａｌ細胞（５つのＩＦＮ刺激反応要素からなるプロモーターの制御下で分泌型ルシフェラーゼを発現するＩＲＦ−３誘導性分泌型ルシフェラーゼレポーター遺伝子（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）をトランスフェクトしたｈＳＴＩＮＧ  ＨＡＱ対立遺伝子を含むヒト単球細胞株）を、９６ウェルのディッシュで、３０ｎｇ／ｍｌのホルボール１２−ミリステート１３−アセテートで一夜活性化させた。細胞を新鮮な培地で洗浄し、ＰＢ緩衝液（５０ｍＭの４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸、１００ｍＭのＫＣｌ、３ｍＭのＭｇＣｌ２、０．１ｍＭジチオスレイトール、８５ｍＭスクロース、１ｍＭのＡＴＰ、０．１ｍＭのＧＴＰ、及び０．２％ウシ血清アルブミン）中、２，０００〜０．０３３８μＭの３倍滴定ステップの化合物で、３７℃、５％ＣＯ２にて３０分間インキュベートした。３０分後、細胞を洗浄し、１０％のＦＢＳを含む新鮮ＲＰＭＩ培地を加え、細胞を３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートした。一夜のインキュベート後、各試料から細胞培養上清を回収し、この細胞培養上清１０μＬをＱＵＡＮＴＩ−Ｌｕｃ試薬（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）５０μＬに加えた。Ｉ型インターフェロンの活性化は、分泌型ルシフェラーゼレベルをＳｐｅｃｔｒａＭａｘ  Ｍ３分光光度計（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）にて測定することによって決定した。ＥＣ５０値は、表５に記載の本アッセイで試験した参照化合物及び本発明の化合物の連続希釈からの１０濃度についての用量反応曲線から決定した。これらの結果は、ジＦ化合物である３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）、３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ｇ）、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）、３’３’−ＲＳ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）、及び３’３’−ＲＲ（２’Ｆ−ｉＢｕＧ）（２’Ｆ−Ａ）についての活性がそれらのＯＨ参照化合物の各々に対して改良されることを示す。モノ−Ｆ誘導体である３’３’−ＲＲ（２’Ｆ−Ｇ）（Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）もまた、ＯＨ参照化合物である３’３’−ＲＲ−（Ｇ）（Ａ）に対して改良された活性を示した。
【０４８５】
表５：ＴＨＰ１細胞（ＨＡＱ対立遺伝子）におけるジギトニンなしでのＥＣ５０
【０４８６】
【表５】
0006692826.tif 000128
【０４８７】
実施例１５：ジ−Ｆ−ＣＤＮ誘導体はＴ細胞媒介抗腫瘍免疫を誘導する
これらの誘導体分子が抗腫瘍免疫を誘発するかどうかを判断するため、６〜８週齢の雌Ｃ５７ＢＬ／６マウス（１群当たり８匹のマウス）に、Ｂ１６．ＳＩＹ細胞（１００μＬのＰＢＳ中、５×１０５細胞）を移植した。マウスを参照化合物の３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）及びジ−Ｆ化合物の３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）（総体積４０μＬのＨＢＳＳ中、５、５０、１００μｇ）、またはＨＢＳＳの溶媒対照で処理した。処理は、腫瘍移植後９日目、腫瘍が体積約１００ｍｍ３に達したときに始めた。これらのＣＤＮ化合物を、２７ゲージ針を用いて腫瘍の中心（ＩＴ）に皮下注射によって投与した。腫瘍移植後１６日目にマウスを採血し、ＰＢＭＣをフィコール勾配（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃｈ）によって単離した。１×１０５個のＰＢＭＣを抗ＣＤ１６／３２モノクローナル抗体でプレインキュベートして潜在的な非特異的結合をブロックし、ＳＩＹＲＹＹＧＬ（ＳＩＹ、配列番号１６）ペプチドに複合化したマウスＨ−２Ｋｂ、抗ＴＣＲβ−ＡＦ７００（Ｈ５７−５９７）、抗ＣＤ８−Ｐａｃｉｆｉｃ  Ｂｌｕｅ（５３−６．７）、抗ＣＤ４−Ｐａｃｉｆｉｃ  Ｏｒａｎｇｅ（ＲＭ４−５）（抗体はすべてＢｉｏＬｅｇｅｎｄ製）、及びＦｉｘａｂｌｅ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ｄｙｅ  ｅＦｌｕｏｒ  ４５０（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）からなるＰＥ−ＭＨＣクラスＩペンタマー（Ｐｒｏｉｍｍｕｎｅ）で標識した。染色された細胞は、ＦＡＣＳ  Ｖｅｒｓａサイトメーターを用い、ＦＡＣＳＤｉｖａソフトウェア（ＢＤ）で分析した。データ分析は、ＦｌｏｗＪｏソフトウェア（Ｔｒｅｅ  Ｓｔａｒ）で行った。
【０４８８】
図１４Ａに示すように、ＯＨ参照の３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）化合物と異なり、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）化合物で処理したすべてのマウスは、確立したＢ１６−ＳＩＹメラノーマの成長をすべての用量で拒絶した。この効果が、適応Ｔ細胞免疫反応によって媒介されることを実証するため、ＩＴ注入後７日目、ＰＢＭＣをＳＩＹ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞の割合についてフローサイトメトリーで評価した。図１４Ｂに示すように、ＯＨ参照化合物の３’３’−ＲＲ−（Ａ）（Ａ）またはジ−Ｆ化合物の３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）のいずれか５μｇで処理したマウスから単離したＰＢＭＣは、ＨＢＳＳ処理対照群と比較して有意にＳＩＹ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞を誘発した（＊＊Ｐ＜０．０１、スチューデントｔ検定）。これらのデータは、ジ−Ｆ誘導体化合物３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）の抗原特異的なＴ細胞媒介抗腫瘍免疫の誘発能を実証する。
【０４８９】
実施例１６：ジ−Ｆ−ＣＤＮ誘導体は多様なマウス腫瘍モデルにおいて強力な抗腫瘍効果を誘導する。
これらフッ素化誘導体化合物の多様なマウス腫瘍モデルにおける抗腫瘍免疫の促進能を評価するため、腫瘍細胞を６〜８週齢のＣ５７ＢＬ／６雌マウスの背下部に皮下移植した（ＰＢＳ１００μＬ中）。処理は、腫瘍移植後約１４日目、腫瘍が体積約１００ｍｍ３に達したときに始めた（腫瘍型、細胞数、及びＩＴ注入日については以下の表参照）。ＣＤＮ化合物はＩＴ注入（総体積４０μＬのＨＢＳＳ中、１０または１００μｇ）によって投与し、合計３回の注入を３日ごとに繰り返した。化合物３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）ならびに対照マウスは所与の媒体のみ（ＨＢＳＳ４０μＬ）を投与した。腫瘍を週に２回測定した。
【０４９０】
【表Ａ】
0006692826.tif 000129
【０４９１】
図１５Ａに示すように、悪性のＢ１６．Ｆ１０メラノーマモデルでは、これら３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）化合物は、ＨＢＳＳと比較して有意な腫瘍抑制を誘導したと同時に、この３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）分子は１００μｇ投与で完全な腫瘍退縮を誘発した。ＭＣ３８結腸がんモデルでは、図１５Ｂに示すように、ＨＢＳＳ対照と比較して、両方の化合物が試験したすべての用量で完全な腫瘍退縮を誘発した。これらのデータは、多様な腫瘍モデルにわたってこれらフッ素化誘導体の広範な抗腫瘍効果を実証する。
【０４９２】
実施例１７：ジ−Ｆ−ＣＤＮ誘導体の相対的免疫原性
フッ素化誘導体がＨＩＶｇａｇ特異的なＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞反応を誘発できるかどうかを判断するため、ＢＡＬＢ／ｃマウス（ｎ＝４）に、２％スクアレン水（Ａｄｄａ  Ｖａｘ、Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）にＨＩＶｇａｇ  ｐ５５タンパク質５μｇとともに処方されたＣＤＮ０μｇ（ＣＤＮなし）、１μｇ、または５μｇで皮下免疫を施した。このワクチン接種の７日後、これらのマウスから脾臓を採取し、脾細胞を調製した。２×１０５個の脾細胞をＩＦＮγＥＬＩＳＰＯＴアッセイで、培地のみ（非刺激）または１μＭのＨＩＶｇａｇ  ｐ５５  ＣＤ４＋及びＣＤ８＋特異的ペプチドで一夜刺激した。ＩＦＮγＥＬＩＳＰＯＴは、ＣＴＬプレートリーダー及びＩｍｍｕｎｏＳｐｏｔソフトウェアを用いて現像及び定量化した。３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）を、それらのＨＩＶｇａｇ特異的免疫反応の誘導能について評価した。
【０４９３】
図１６Ａに示すように、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ａ）（２’Ｆ−Ａ）及び３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）分子はともに、ＣＤＮなしのＡｄｄａ  Ｖａｘ＋タンパク質対照群と比較して、ＨＩＶｇａｇ  ｐ５５に対する有意なＣＤ４＋Ｔ細胞反応を誘発可能であった（＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、スチューデントｔ検定）。図１６Ｂに示すように、３’３’−ＲＲ−（２’Ｆ−Ｇ）（２’Ｆ−Ａ）化合物はまた、ＣＤＮなしの対照群と比較して、ＨＩＶｇａｇ  ｐ５５に対する有意なＣＤ８＋Ｔ細胞反応を誘発した（＊Ｐ＜０．０５、スチューデントｔ検定）。これらのデータは、これらフッ素化化合物が、関連免疫原に対するワクチン設定における強力なアジュバントとして作用する力を実証する。
【０４９４】
実施例１８：ｈＳＴＩＮＧ  ＷＴへのモノ−及びジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物の結合
モノ−及びジ−Ｆ−ＣＤＮ化合物の結合を、表面プラズモン共鳴を用いて評価し、結合定数を決定した。タンパク質配列：
0006692826.tif 000130
を含むＥ．ｃｏｌｉ発現構築物（ヒトＳＴＩＮＧ［Ｅ１４９−Ｓ３７９］Ｈ２３２Ｒ）を調製し、Ｅ．ｃｏｌｉでのヒトＳＴＩＮＧ［Ｅ１４９−Ｓ３７９］Ｈ２３２Ｒ発現を１８℃で誘導し、このタンパク質を続いてニッケルアフィニティークロマトグラフィー及びサイズ排除クロマトグラフィーの両方を用いて精製した。一定分量を調製し、−８０℃で３０ｍＭのトリスｐＨ７．５／１００ｍＭ  ＮａＣｌ／１０％グリセロール中で保存した。
【０４９５】
Ｎ末端ａｖｉタグ付きヒトＳＴＩＮＧ（Ｅ１４９−Ｓ３７９）Ｈ２３２Ｒタンパク質をＢｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）にて、１５℃でストレプトアビジンチップに固定化した（約２５００ＲＵ）。３０ｍＭトリスｐＨ７．５／５０ｍＭ  ＮａＣＬ／０．００５％Ｔｗｅｅｎ２０／１ｍＭ  ＤＴＴ／２％ＤＭＳＯ中の環状ジヌクレオチド（表６に示すＣＤＮ）の滴定をｈＳＴＩＮＧに対して１５℃でプロファイルした（３０μＬ／分、サンプルの接触に対して１８０秒／解離に対して１２０秒）。データの反応速度解析をＢｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００の評価ソフトウェアを用いて行った。データの定常状態解析は、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ６．０ソフトウェアを用い、一部位特異的結合アルゴリズム（式は、Ｙ＝Ｂｍａｘ＊Ｘ／（Ｋｄ＋Ｘ））を用いて行った。Ｋｄ（マイクロモル単位）を以下の表６に報告する。
【０４９６】
表６：表面プラズモン共鳴によって測定されたモノ−及びジ−Ｆ  ＣＤＮに対するＫｄ。
【０４９７】
【表６】
0006692826.tif 000131
【０４９８】
当業者には、本発明がその目的を達成し、上述の結果及び利点、ならびにそれに固有のそれらを獲得するのによく適合していることが容易に理解される。本明細書で提供される実施例は、好ましい実施形態を代表するものであって、例示であり、本発明の範囲を限定するものではない。
【０４９９】
本発明は、その適用において、構成の詳細、及び以下の説明に記載される、または図面に示される構成要素の配置に限定されないことを理解されたい。本発明は、記載されたものに加えて体現が可能であり、様々な方法で実践及び実行が可能である。また、本明細書ならびに要約で使用される表現及び用語は、説明の目的のためであり、限定と見なすべきでないことを理解されたい。
【０５００】
従って、当業者には、本開示が基にする概念が、本発明のいくつかの目的を実行するための他の構造、方法、及びシステムの設計の基礎として容易に利用され得ることが理解されよう。従って、特許請求の範囲は、かかる等価の構成を、それらが本発明の趣旨及び範囲から逸脱しない限り含むと見なされることが重要である。
【０５０１】
本発明は、当業者にとってそれを作製し、使用するのに十分詳しく説明し、例示してきたが、様々な代替、修正、及び改良は、本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく明らかであるとする。本明細書で提供される実施例は、好ましい実施形態を代表するものであって、例示であり、本発明の範囲を限定するものではない。その中の修正及び他の用途が当業者には思い当たるであろう。これらの修正は、本発明の趣旨の範囲内に含まれ、特許請求の範囲によって定義される。
【０５０２】
当業者には、様々な置換及び修正が、本発明の範囲及び趣旨から逸脱することなく本明細書に開示の本発明に対してなされ得ることが容易に明らかであろう。
【０５０３】
本明細書で言及されるすべての特許及び刊行物は、本発明が属する当業者のレベルを示すものである。すべての特許及び刊行物は、個々の刊行物が具体的かつ個別に、参照することによって組み込まれるように示されたものと同じ範囲まで、参照することによって本明細書に組み込まれる。
【０５０４】
本明細書に例示的に適切に記載される本発明は、本明細書で特に開示されない任意の要素または複数の要素、限定または複数の限定の非存在下で実践され得る。従って、例えば、本明細書のどの場合も、「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ（含む）」、「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ（から本質的になる）」、及び「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ（からなる）」という用語のいずれかは、他の２つの用語のいずれかと置き換えられ得る。使用された用語及び表現は、説明の用語として、かつ限定ではない用語として用いられ、かかる用語及び表現の使用において、示されかつ説明された特徴の任意の等価物もしくはその一部を除外する意図はなく、様々な修正は、請求項にかかる本発明の範囲内で可能であることが認識される。従って、本発明は、好ましい実施形態及び任意の特徴によって具体的に開示されてきたが、本明細書に開示される概念の修正及び変動は、当業者によって用いられることがあり、かかる修正及び変動は、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲内に含まれると見なされることを理解されたい。
【０５０５】
他の実施形態は、以下の特許請求の範囲に記載される。
【図１】
0006692826.tif 000135
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
0006692826.tif 000139
【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１６Ａ】
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【図１６Ｂ】
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【配列表】
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