(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）で表される化合物：
【化１】
0006702783.tif 000007
（式（Ｉ）中、
Ｒ1は炭素数２〜１０の飽和直鎖アルキル基を示し、
Ｒ2およびＲ3は、各々独立に水素または水酸基を示すが、ただしＲ2とＲ3が同時に水酸基を示すことはない）
を有効成分として含む皮膚浸透促進剤（ただし、以下の物質を除く：ウルソール酸リン酸エステル及び／又はその塩と、紫外線吸収剤を含有する皮膚外用組成物；下記式（II）に表される化合物及び／又はそれらの薬理学的に許容される塩と紫外線吸収剤を含有する皮膚外用組成物；４−アルキルレゾルシノール及び／又はその塩と、炭素数１０〜３０のアシル基によりアシル化した蛋白加水分解物及び／又はその塩を含有する乳化剤形又は可溶化剤形の皮膚外用剤；ならびに、アルキルレゾルシノールの１種又は２種以上を含有し、多価アルコール、リン脂質及びポリグリセリン脂肪酸エステルを構成成分とする液晶相を経由して調製される乳化剤形の皮膚外用剤、
【化２】
0006702783.tif 000008
［式（II）中、Ｒ1は、水素原子、炭素数１〜８の直鎖又は分岐のアルキル基を表し、Ｒ2は、水素原子、無置換又は置換基を有する芳香族基、無置換又は置換基を有する芳香族基により置換された炭素数１〜４の脂肪族炭化水素基を表し、Ｒ3は、無置換又は置換基を有する芳香族基を表し、ｎは、１又は２の整数、ｍは、０〜３の整数を表す］）。
【請求項２】
式（Ｉ）で表される化合物：
【化３】
0006702783.tif 000009
（式（Ｉ）中、
Ｒ1は炭素数２〜１０の飽和直鎖アルキル基を示し、
Ｒ2およびＲ3は、各々独立に水素または水酸基を示すが、ただしＲ2とＲ3が同時に水酸基を示すことはない）
からなる、皮膚浸透促進剤。
【請求項３】
前記式（Ｉ）中のＲ1が炭素数４〜８の飽和直鎖アルキル基である、請求項１又は２記載の皮膚浸透促進剤。
【請求項４】
前記式（Ｉ）で表される化合物が４−ブチルレゾルシノール、４−ブチルフェノール、４−ブチルカテコールおよび４−オクチルレゾルシノールからなる群より選択される少なくとも１種である、請求項１〜３のいずれか１項記載の皮膚浸透促進剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚浸透促進剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
薬物、保湿剤、美白剤等の生理活性成分を経皮的に投与する皮膚外用組成物は、投与が簡便かつ比較的安全性が高いことから、医薬または化粧料として広く利用されている。
【０００３】
しかしながら、皮膚外用組成物には、生理活性成分の皮膚への透過性によりその効果が制限されるという問題がある。皮膚表面には角質層が存在し、この角質層は外部から異物の侵入を防ぐバリアー機能を有しているので生理活性成分を透過しにくい。とりわけ、分子量が大きいものや水溶性が高いものは、皮膚に透過し難いと考えられている。したがって一般的には、皮膚外用組成物は、生理活性成分の皮膚への透過を促進させる皮膚浸透促進剤（または経皮吸収促進剤ともいう）を含有する。従来の皮膚浸透促進剤としては、エタノール等の溶剤、界面活性剤、脂肪酸やそのエステル、有機酸、高分子などの多様な物質が使用されている。
【０００４】
４−ブチルレゾルシノール等のアルキルレゾルシノールは、皮膚美白作用および抗菌作用を有しており、これを美白または抗菌成分として含有する化粧料が提供されている（特許文献１〜３）。しかしながら、アルキルレゾルシノールは、皮膚透過性が高すぎるために皮膚内に貯留することができず、その結果、アルキルレゾルシノールを含有する化粧料を使用しても、その効果を十分に享受できないという問題があった（例えば、特許文献４〜６）。特許文献４〜６には、アルキルレゾルシノールと、架橋型シリコーン、コエンザイムＱ１０またはダイマー酸のジエステルとを併用することにより、アルキルレゾルシノールの皮膚貯留性を向上させた皮膚外用組成物を提供することが開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開平０２−４９７１５号公報
【特許文献２】特開平０４−１６９５１６号公報
【特許文献３】特開平０４−１６９５１１号公報
【特許文献４】特開２００６−２２５３０８号公報
【特許文献５】特開２００４−１０７２１０号公報
【特許文献６】特開２００７−３３２１１５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、皮膚への生理活性成分の浸透を促進する物質に関する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、４−アルキルレゾルシノールまたはその類縁体に、他の物質の皮膚浸透を促進するというこれまで知られていなかった新たな作用があることを見出し、本発明を完成した。
【０００８】
したがって、本発明は、式（Ｉ）で表される化合物：
【化１】
0006702783.tif 000002
（式中、
Ｒ1は炭素数２〜１０の飽和直鎖アルキル基を示し、
Ｒ2およびＲ3は、各々独立に水素または水酸基を示すが、ただしＲ2とＲ3が同時に水酸基を示すことはない）
を含む皮膚浸透促進剤を提供する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、生理活性成分の皮膚浸透性が向上した、より有効性の高い皮膚外用組成物を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
皮膚浸透促進剤は、それ自身以外の他の化合物の皮膚への浸透（あるいは経皮吸収ということもできる）を促進する物質である。すなわち、ある生理活性成分を皮膚浸透促進剤とともに皮膚に塗布した場合、該皮膚浸透促進剤と併用しない場合と比較して、該生理活性成分の皮膚への浸透量は向上する。ところで、４−ブチルレゾルシノール等のアルキルレゾルシノールは、従来、化粧料などの皮膚外用組成物において、該組成物に美白作用などの生理活性を付与するための生理活性成分として使用されていた。しかしながら、それ自身以外の他の生理活性成分の皮膚浸透促進を目的として使用されたことはなかった。すなわち、４−アルキルレゾルシノールまたはその類縁体に皮膚浸透促進剤としての作用があることは、これまで知られていなかった。
【００１１】
本発明は、目的物質の皮膚浸透促進のために使用するという、４−アルキルレゾルシノールまたはその類縁体の新たな用途を提供する。
【００１２】
したがって、本発明は、下記式（Ｉ）で表される化合物（以下、式（Ｉ）化合物とも称する）を有効成分として含む皮膚浸透促進剤を提供する。
【化２】
0006702783.tif 000003
【００１３】
上記式（Ｉ）中、Ｒ1は炭素数２〜１０の飽和直鎖アルキル基を示し、好ましくは炭素数４〜８の飽和直鎖アルキル基を示す。Ｒ1としては、エチル基、ｎ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、ｎ−オクチル基、ｎ−ノニル基、およびｎ−デシル基が挙げられ、好ましくはｎ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基およびｎ−オクチル基が挙げられる。
【００１４】
上記式（Ｉ）中、Ｒ2およびＲ3は、各々独立に水素または水酸基を示す。ただしＲ2とＲ3が同時に水酸基を示すことはない。したがって、Ｒ2が水素の場合、Ｒ3は水素または水酸基であり、Ｒ2が水酸基の場合、Ｒ3は水素である。
【００１５】
式（Ｉ）化合物の例としては、４−エチルレゾルシノール、４−プロピルレゾルシノール、４−ブチルレゾルシノール（ルシノール）、４−ペンチルレゾルシノール、４−ヘキシルレゾルシノール、４−ヘプチルレゾルシノール、４−オクチルレゾルシノール、４−ノニルレゾルシノール、および４−デシルレゾルシノールから選択される４−アルキルレゾルシノール化合物；４−エチルフェノール、４−プロピルフェノール、４−ブチルフェノール、４−ペンチルフェノール、４−ヘキシルフェノール、４−ヘプチルフェノール、４−オクチルフェノール、４−ノニルフェノール、および４−デシルフェノールから選択される４−アルキルフェノール化合物；ならびに４−エチルカテコール、４−プロピルカテコール、４−ブチルカテコール、４−ペンチルカテコール、４−ヘキシルカテコール、４−ヘプチルカテコール、４−オクチルカテコール、４−ノニルカテコール、および４−デシルカテコールから選択される４−アルキルカテコール化合物が挙げられる。
【００１６】
上記式（Ｉ）化合物のうち、より好ましい例としては、４−ブチルレゾルシノール、４−ペンチルレゾルシノール、４−ヘキシルレゾルシノール、４−ヘプチルレゾルシノール、４−オクチルレゾルシノール、４−ブチルフェノール、４−ペンチルフェノール、４−ヘキシルフェノール、４−ヘプチルフェノール、４−オクチルフェノール、４−ブチルカテコール、４−ペンチルカテコール、４−ヘキシルカテコール、４−ヘプチルカテコール、および４−オクチルカテコールが挙げられ、さらに好ましい例としては、４−ブチルレゾルシノール、４−ブチルフェノール、４−ブチルカテコールおよび４−オクチルレゾルシノールが挙げられる。
【００１７】
本発明の皮膚浸透促進剤は、皮膚浸透促進のための有効成分として、上記に挙げた式（Ｉ）化合物のいずれか１種または２種以上を含有することができる。好ましくは、本発明の皮膚浸透促進剤は、皮膚浸透促進のための有効成分として、４−ブチルレゾルシノール、４−ブチルフェノール、４−ブチルカテコールおよび４−オクチルレゾルシノールからなる群より選択される化合物のうちのいずれか１種または２種以上を含有する。
【００１８】
後記実施例に示すように、上記式（Ｉ）化合物を、皮膚浸透性の向上が所望される目的物質と併用して皮膚に外用投与すれば、該目的物質の皮膚浸透が促進される。併用の際は、該目的物質の皮膚浸透が促進される限り、該式（Ｉ）化合物と目的物質は同時にまたは別々に投与することができ、かつ投与の順序も限定されない。なお、目的物質の皮膚浸透の促進は、Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ皮膚透過試験の方法等で求めることができる。
【００１９】
本発明の皮膚浸透促進剤は、皮膚外用組成物に添加されると、該組成物に含まれる生理活性成分の皮膚への浸透を促進する。したがって、本発明はまた、本発明の皮膚浸透促進剤を含有する皮膚外用組成物を提供する。該皮膚外用組成物は、本発明の皮膚浸透促進剤によって生理活性成分の皮膚浸透性が向上しているため、より高い生理活性を発揮する。
【００２０】
本発明の皮膚外用組成物における上記式（Ｉ）化合物の含有量は、それが４−アルキルカテコール化合物以外の場合、好ましくは０．００１質量％以上、より好ましくは０．００５質量％以上、さらに好ましくは０．０１質量％以上、なお好ましくは０．０５質量％以上、なお好ましくは０．１質量％以上であり、かつ、好ましくは１０質量％以下、より好ましくは５質量％以下、さらに好ましくは２質量％以下、さらにより好ましくは１質量％以下、なお好ましくは０．５質量％以下、なお好ましくは０．１質量％以下である。あるいは、該皮膚外用組成物における４−アルキルカテコール化合物以外の上記式（Ｉ）化合物の含有量は、好ましくは０．００１〜１０質量％、０．００１〜５質量％、０．００１〜２質量％、０．００１〜１質量％、０．００１〜０．５質量％、０．００１〜０．１質量％、０．００５〜１０質量％、０．００５〜５質量％、０．００５〜２質量％、０．００５〜１質量％、０．００５〜０．５質量％、０．００５〜０．１質量％、０．０１〜１０質量％、０．０１〜５質量％、０．０１〜２質量％、０．０１〜１質量％、０．０１〜０．５質量％、０．０１〜０．１質量％、０．０５〜１０質量％、０．０５〜５質量％、０．０５〜２質量％、０．０５〜１質量％、０．０５〜０．５質量％、０．０５〜０．１質量％、０．１〜１０質量％、０．１〜５質量％、０．１〜２質量％、０．１〜１質量％、または０．１〜０．５質量％である。
【００２１】
本発明の皮膚外用組成物に含まれる上記式（Ｉ）化合物が４−ブチルカテコール等の４−アルキルカテコール化合物の場合、本発明の皮膚外用組成物におけるその含有量は、好ましくは０．００１質量％以上、より好ましくは０．０１質量％以上、さらに好ましくは０．０２質量％以上、さらにより好ましくは０．０５質量％以上、なお好ましくは０．１質量％以上であり、かつ、好ましくは１０質量％以下、より好ましくは５質量％以下、さらに好ましくは２質量％以下、さらにより好ましくは１質量％以下、なお好ましくは０．５質量％以下である。あるいは、上記式（Ｉ）化合物が４−ブチルカテコール等の４−アルキルカテコール化合物の場合、該皮膚外用組成物におけるその含有量は、好ましくは０．００１〜１０質量％、０．００１〜５質量％、０．００１〜２質量％、０．００１〜１質量％、０．００１〜０．５質量％、０．０１〜１０質量％、０．０１〜５質量％、０．０１〜２質量％、０．０１〜１質量％、０．０１〜０．５質量％、０．０２〜１０質量％、０．０２〜５質量％、０．０２〜２質量％、０．０２〜１質量％、０．０２〜０．５質量％、０．０５〜１０質量％、０．０５〜５質量％、０．０５〜２質量％、０．０５〜１質量％、０．０５〜０．５質量％、０．１〜１０質量％、０．１〜５質量％、０．１〜２質量％、０．１〜１質量％、または０．１〜０．５質量％である。
【００２２】
好ましい詳細な例において、本発明の皮膚外用組成物における上記式（Ｉ）化合物の含有量は：上記式（Ｉ）化合物が４−ブチルレゾルシノールの場合、好ましくは０．００１〜１０質量％、より好ましくは０．０１〜１質量％、さらに好ましくは０．０２５〜０．５質量％であり；上記式（Ｉ）化合物が４−ブチルフェノールの場合、好ましくは０．００１〜１０質量％、より好ましくは０．００１〜０．１質量％、さらに好ましくは０．００２〜０．０５質量％であり；上記式（Ｉ）化合物が４−ブチルカテコールの場合、好ましくは０．００１〜１０質量％、より好ましくは０．０２〜１質量％、さらに好ましくは０．０５〜０．５質量％であり；上記式（Ｉ）化合物が４−オクチルレゾルシノールの場合、好ましくは０．００１〜１０質量％、より好ましくは０．１〜１０質量％、さらに好ましくは０．１〜５質量％である。
【００２３】
本発明の皮膚外用組成物は、上記皮膚浸透促進剤以外に、生理活性または薬効をもたらす生理活性成分を含有する。該生理活性成分は、皮膚外用組成物に使用され得るものであれば特に制限されず、水溶性成分でも脂溶性成分でもよい。好適には、該生理活性成分は、水オクタノール分配係数（Ｌｏｇ  Ｋｏ／ｗ）が、好ましくは−１０〜＋５の範囲であり、より好ましくは−７〜＋４の範囲である。さらに本発明の皮膚外用組成物は、所望する効能に応じて、１種または２種以上の有効成分を含有することができる。
【００２４】
本発明の皮膚外用組成物に含有され得る上記生理活性成分の例としては、消炎・鎮痛剤、抗炎症剤、抗菌剤、ホルモン剤、抗ヒスタミン剤、ステロイド剤、抗アレルギー剤、血管拡張剤、強心剤、抗不整脈剤、抗狭心症剤、抗高血圧剤、インスリン製剤、金属イオン封鎖剤、ビタミン類、皮膚軟化剤、保湿剤、美白剤、抗シワ剤、収斂剤、紫外線吸収剤、発毛・育毛剤、発汗防止剤、防臭剤などが挙げられるが、これらに限定されない。上記生理活性成分のより具体的な例としては、限定ではないが、アンチピリン等の消炎・鎮痛剤、アスコルビン酸もしくはその誘導体（アスコルビン酸グルコシド、アスコルビン酸エチル等）およびアルブチン等の美白剤、リボフラビン等のビタミン剤、トランス−３，４’−ジメチル−３−ヒドロキシフラバノン等の発毛もしくは育毛剤、イソプロピルメチルフェノール等の殺菌剤、などを挙げることができる。本発明の皮膚外用組成物におけるこれらの生理活性成分の含有量は、その種類、または皮膚外用組成物の剤型もしくは所望される効能などに依存して適宜変更され得るが、例えば０．０００３〜１０質量％が好ましく、０．００１〜５質量％がより好ましい。
【００２５】
さらに、本発明の皮膚外用組成物は、皮膚外用組成物に一般的に使用される基剤を含有することができる。基剤としては、パラフィン、スクワラン、ワセリン等の炭化水素、シリコーン油、動物もしくは植物性油脂、アルコール、多糖類、エステル類、水などが挙げられるが、これらに限定されず、生理活性成分の種類、または皮膚外用組成物の剤型もしくは効能などに依存して適宜変更され得る。
【００２６】
さらに、本発明の皮膚外用組成物は、皮膚外用組成物に一般的に使用される薬学的にまたは化粧料に許容される担体または添加剤、例えば、酸化防止剤、界面活性剤、紫外線吸収剤、増粘剤、保存剤、ｐＨ調整剤、安定化剤、防腐剤、着色剤、香料などを含有することができる。
【００２７】
本発明の皮膚外用組成物の剤型は、特に限定されないが、例えば、液剤、懸濁剤、乳剤、クリーム剤、軟膏剤、ゲル剤、ローション剤、エアゾール剤、リニメント剤、貼付剤などが挙げられる。これらの皮膚外用組成物の剤型は、本発明の皮膚浸透促進剤、生理活性成分、および適切な担体または添加剤を用いて、定法に従い適宜調製することができる。
【００２８】
あるいは、本発明の皮膚外用組成物の例としては、顔またはボディ用の化粧水、乳液、ジェル、クリーム、美容液、日焼け止め、シェービングジェル、シェービングクリーム、パック、マスク、シート等の基礎化粧料、洗顔料、メイク落とし、ボディーシャンプー等の洗浄料、シャンプー、リンス、コンディショナー、トリートメント、整髪料等の髪用化粧料、およびメイクアップ化粧料、などが挙げられる。
【００２９】
本発明はまた、例示的実施形態として以下の物質、製造方法、用途または方法を包含する。但し、本発明はこれらの実施形態に限定されない。
【００３０】
〔１〕下記式（Ｉ）で表される化合物を有効成分として含む皮膚浸透促進剤。
〔２〕皮膚浸透促進剤の製造のための、下記式（Ｉ）で表される化合物の使用。
〔３〕目的物質の皮膚浸透促進のための、下記式（Ｉ）で表される化合物の使用。
〔４〕目的物質の皮膚浸透促進に使用するための、下記式（Ｉ）で表される化合物。
〔５〕目的物質および下記式（Ｉ）で表される化合物を皮膚に外用投与することを含む、該目的物質の皮膚浸透促進方法。
【化３】
0006702783.tif 000004
（式中、
Ｒ1は炭素数２〜１０の飽和直鎖アルキル基を示し、
Ｒ2およびＲ3は、各々独立に水素または水酸基を示すが、ただしＲ2とＲ3が同時に水酸基を示すことはない）
【００３１】
〔６〕上記式（Ｉ）で表される化合物を有効成分として含む皮膚浸透促進剤を含有する、皮膚外用組成物。
〔７〕好ましくは生理活性成分をさらに含有する、〔６〕記載の皮膚外用組成物。
〔８〕好ましくは、上記生理活性成分が、消炎・鎮痛剤、抗炎症剤、抗菌剤、ホルモン剤、抗ヒスタミン剤、ステロイド剤、抗アレルギー剤、血管拡張剤、強心剤、抗不整脈剤、抗狭心症剤、抗高血圧剤、インスリン製剤、金属イオン封鎖剤、ビタミン類、皮膚軟化剤、保湿剤、美白剤、抗シワ剤、収斂剤、紫外線吸収剤、発毛・育毛剤、発汗防止剤、および防臭剤からなる群より選択される少なくとも１種である、〔７〕記載の皮膚外用組成物。
〔９〕好ましくは、顔またはボディ用の化粧水、乳液、ジェル、クリーム、美容液、日焼け止め、シェービングジェル、シェービングクリーム、パック、マスク、シート、洗顔料、メイク落とし、ボディーシャンプー、シャンプー、リンス、コンディショナー、トリートメント、整髪料、およびメイクアップ化粧料からなる群より選択される少なくとも１種である、〔６〕〜〔８〕のいずれか１項記載の皮膚外用組成物。
〔１０〕好ましくは、液剤、懸濁剤、乳剤、クリーム剤、軟膏剤、ゲル剤、リニメント剤、ローション剤、エアゾール剤、または貼付剤である、〔６〕〜〔８〕のいずれか１項記載の皮膚外用組成物。
〔１１〕好ましくは上記式（Ｉ）で表される化合物が４−ブチルレゾルシノールであり、かつその含有量が好ましくは０．００１〜１０質量％、より好ましくは０．０１〜１質量％、さらに好ましくは０．０２５〜０．５質量％であるか；
好ましくは上記式（Ｉ）化合物が４−ブチルフェノールであり、かつその含有量が好ましくは０．００１〜１０質量％、より好ましくは０．００１〜０．１質量％、さらに好ましくは０．００２〜０．０５質量％であるか；
好ましくは上記式（Ｉ）化合物が４−ブチルカテコールであり、かつその含有量が好ましくは０．００１〜１０質量％、より好ましくは０．０２〜１質量％、さらに好ましくは０．０５〜０．５質量％であるか；または
好ましくは上記式（Ｉ）化合物が４−オクチルレゾルシノールであり、かつその含有量が好ましくは０．００１〜１０質量％、より好ましくは０．１〜１０質量％、さらに好ましくは０．１〜５質量％である、
〔６〕〜〔１０〕のいずれか１項記載の皮膚外用組成物。
【００３２】
〔１２〕上記〔１〕〜〔１０〕のいずれか１項において、好ましくは、上記式（Ｉ）中のＲ1は炭素数４〜８の飽和直鎖アルキル基である。
〔１３〕上記〔１〕〜〔１０〕のいずれか１項において、上記式（Ｉ）で表される化合物は、
好ましくは、４−エチルレゾルシノール、４−プロピルレゾルシノール、４−ブチルレゾルシノール、４−ペンチルレゾルシノール、４−ヘキシルレゾルシノール、４−ヘプチルレゾルシノール、４−オクチルレゾルシノール、４−ノニルレゾルシノール、４−デシルレゾルシノール、４−エチルフェノール、４−プロピルフェノール、４−ブチルフェノール、４−ペンチルフェノール、４−ヘキシルフェノール、４−ヘプチルフェノール、４−オクチルフェノール、４−ノニルフェノール、４−デシルフェノール、４−エチルカテコール、４−プロピルカテコール、４−ブチルカテコール、４−ペンチルカテコール、４−ヘキシルカテコール、４−ヘプチルカテコール、４−オクチルカテコール、４−ノニルカテコール、および４−デシルカテコールからなる群より選択される少なくとも１種であり、
より好ましくは、４−ブチルレゾルシノール、４−ペンチルレゾルシノール、４−ヘキシルレゾルシノール、４−ヘプチルレゾルシノール、４−オクチルレゾルシノール、４−ブチルフェノール、４−ペンチルフェノール、４−ヘキシルフェノール、４−ヘプチルフェノール、４−オクチルフェノール、４−ブチルカテコール、４−ペンチルカテコール、４−ヘキシルカテコール、４−ヘプチルカテコール、および４−オクチルカテコールからなる群より選択される少なくとも１種であり、
さらに好ましくは、４−ブチルレゾルシノール、４−ブチルフェノール、４−ブチルカテコールおよび４−オクチルレゾルシノールからなる群より選択される少なくとも１種である。
【実施例】
【００３３】
以下、実施例に基づき本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【００３４】
実施例１  皮膚浸透性試験１
表１に示す評価物質を、表１記載の濃度でＰＢＳに添加し、さらに生理活性成分としてピリン系鎮痛解熱剤アンチピリンを試験溶液中で５ｍｇ／ｍＬとなるよう添加して、試験溶液を調製した。コントロールとして、評価物質非添加の５ｍｇ／ｍＬアンチピリン溶液を用いて、イントロテック社製経皮吸収計測システムによる皮膚浸透性試験を実施した。
皮膚サンプルとして食用豚耳介部皮膚を用い、レシーバー溶液はＰＢＳを用いた。上記試験溶液を一定量ドナーセルにアプライし、３５℃のヒートブロック上で放置した。一定時間後、レシーバー溶液を回収し、ＨＰＬＣにてアンチピリンの濃度を測定した。ＨＰＬＣによる定量条件は以下の通り：
装置：  Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０ＤＡＤ
カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ-３  ２−ｍｉｃｒｏ  ３．０×６０ｍｍ
カラム温度：４０℃
溶離液Ａ：０．１％ギ酸水
溶離液Ｂ：アセトニトリル
溶離条件：Ａ／Ｂ＝９０／１０〜６０／４０のグラディエント
流速：０．６ｍＬ／分
検出：ＵＶ（２５４ｎｍ）
コントロールでの測定値に対する各試験溶液での測定値の比を算出することにより、各試験溶液のアンチピリン皮膚浸透促進率を測定した。結果を表１に示す。
【００３５】
【表１】
0006702783.tif 000005
【００３６】
実施例２  皮膚浸透性試験２
アンチピリン以外の様々な生理活性成分を用いて、実施例１と同様の手順で皮膚浸透性を調べた。試験溶液には、４−ブチルレゾルシノールまたは４−オクチルレゾルシノールの０．２％溶液を用いた。生理活性成分の溶解性を鑑み、トランス−３，４’−ジメチル−３−ヒドロキシフラバノンとイソプロピルメチルフェノールを含む試験溶液の溶媒には５０％エタノールを用いた。結果を表２に示す。
なお、用いた生理活性成分とそれぞれの検出方法は以下の通り
（１）アスコルビン酸グルコシド（ＬＣ−ＭＳ）
装置    ３２００  Ｑ  ＴＲＡＰ
カラム  ＺＩＣ  ｐＨＩＬＩＣ  ５ｍｉｃｒｏ  ２．１×１５０ｍｍ
溶離液  Ａ：１００ｍＭ酢酸アンモニウム、Ｂ：アセトニトリル
６５％Ｂ  ｉｓｏｃｒａｔｉｃ，０．１ｍＬ／ｍｉｎ、４０℃
検出    ＥＳＩ  ｎｅｇａｔｉｖｅ（３３７．０２→１７３．９０，２７７．００）
（２）アスコルビン酸エチル（ＬＣ−ＭＳ）
装置    ３２００  Ｑ  ＴＲＡＰ
カラム  ＺＩＣ  ｐＨＩＬＩＣ  ５ｍｉｃｒｏ  ２．１×１５０ｍｍ
溶離液  Ａ：１００ｍＭ酢酸アンモニウム、Ｂ：アセトニトリル
６５％Ｂ  ｉｓｏｃｒａｔｉｃ，０．１ｍＬ／ｍｉｎ、４０℃
検出    ＥＳＩ  ｎｅｇａｔｉｖｅ（２０２．９９→８５．００，５９．２０）
（３）リボフラビン（蛍光プレートリーダー）
装置    ＥｎＶｉｓｉｏｎ
Ｅｘ  ｆｉｌｔｅｒ      ４８５ｎｍ
Ｅｍ  ｆｉｌｔｅｒ      ５３５ｎｍ
（４）アルブチン（ＬＣ−ＭＳ）
装置    ３２００  Ｑ  ＴＲＡＰ
カラム  Ｃａｐｃｅｌｌ  Ｃｏｒｅ  Ｃ１８  ２．７ｍｉｃｒｏ  ２．１×５０ｍｍ
溶離液  ０．１％ぎ酸水，ｉｓｏｃｒａｔｉｃ
０．６ｍＬ／ｍｉｎ、４０℃
検出    ＥＳＩ  ｎｅｇａｔｉｖｅ（２７１．０１→１０７．９０，１０９．１０）
ｍｉｎ      Ａ        Ｂ
０        ９０      １０
０．５    ９０      １０
３        ６０      ４０
６        ６０      ４０
（５）ＩＰＭＰ（ＨＰＬＣ）
装置    Ａｇｉｌｅｎｔ  １２６０  ＤＡＤ
カラム  Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−３  ２ｍｉｃｒｏ  ３．０×６０ｍｍ
溶離液  Ａ：０．１％ぎ酸水、Ｂ：アセトニトリル
１ｍＬ／ｍｉｎ、４０℃
検出    ＵＶ（２８０ｎｍ）
（６）ｔ−フラバノン（ＨＰＬＣ）
装置    Ａｇｉｌｅｎｔ  １２６０  ＤＡＤ
カラム  Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−３  ２ｍｉｃｒｏ  ３．０×６０ｍｍ
溶離液  Ａ：０．１％ぎ酸水、Ｂ：アセトニトリル
４０％Ｂ  ｉｓｏｃｒａｔｉｃ、０．６ｍＬ／ｍｉｎ、４０℃
検出    ＵＶ（２５４ｎｍ）
【００３７】
【表２】
0006702783.tif 000006