(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ある容積内に閉じ込められた磁性粒子の量を決定する方法であって、
ａ）前記磁性粒子を磁化するために、前記容積に第１の磁場（Ｂ０）を印加する工程であって、前記磁場（Ｂ０）は大きさおよび第１の周波数（ｆＢ０）を有する時間的に変化する磁場である、工程と、
ｂ）前記磁化された粒子の歳差運動を引き起こすために前記第１の磁場（Ｂ０）と平行ではない第２の磁場（Ｂ１）を前記容積に同時に印加する工程であって、前記第２の磁場は、前記第１の磁場（Ｂ０）に曝されたときに前記磁性粒子の電子スピンのラーモア周波数（ｆＬ）に実質的に等しく選ばれた第２の周波数（ｆＢ１）を有するＲＦ磁場である、工程と、
ｃ）検出素子を用いて合成磁化度を表す電圧信号を得ることによって前記容積から生じる前記合成磁化度（Ｍ）を測定し、その信号を決定する工程であって、前記合成磁化度（Ｍ）は前記時間的に変化する磁場によって変調される、工程と、
ｄ）前記信号に離散フーリエ変換を実行することによって、前記合成磁化度のうちの少なくとも１つの周波数成分ｆＢ１±ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．（すなわち、ｎは奇数値に等しい）を決定する工程であって、前記少なくとも１つの周波数成分は少なくとも成分ｆＢ１±ｆＢ０を含み、電力信号および／または電圧信号は前記合成磁化度を表す、工程と、
ｅ）前記合成磁化度の前記少なくとも１つの周波数成分ｆＢ１±ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．（すなわち、ｎは奇数値に等しい）の電力および／または電圧を計算し、前記電力および／または電圧から前記容積内に閉じ込められた前記磁性粒子の量を決定する工程と、を含む、方法。
【請求項２】
前記合成磁化度のうちの少なくとも１つの周波数成分ｆＢ１±ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．（すなわち、ｎは奇数値に等しい）を決定する工程は、前記合成磁化度の周波数スペクトルを決定する工程を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
少なくとも１つの周波数成分（ｆＢ１±ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．、すなわち、ｎは奇数値に等しい）を決定する工程は、前記第２の周波数から前記第１の周波数を差し引いた（ｆＢ１−ｆＢ０）周波数に等しい周波数での、もしくは前記第２の周波数に前記第１の周波数を加えた（ｆＢ１＋ｆＢ０）周波数に等しい周波数での少なくとも１つの周波数成分を決定する工程を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記電力および／または電圧から、前記容積内に閉じ込められた前記磁性粒子の量を決定する工程は、前記少なくとも１つのスペクトル成分の前記電力および／または電圧と前記磁性粒子の質量との間の線形関係に基づいて量を決定する工程を含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記電力および／または電圧から、前記容積内に閉じ込められた前記磁性粒子の量を決定する工程は、前記電力および／または電圧を既知の量の前記磁性粒子に対して決定された基準電力および／または電圧と比較する工程を含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記時間的に変化する第１の磁場は、周期的に時間的変化する磁場である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記時間的に変化する第１の磁場は、正弦波形を有する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
ある容積内に閉じ込められた磁性粒子の量を決定するシステムであって、
ａ）前記磁性粒子を磁化するために第１の磁場（Ｂ０）を発生させてそれを前記容積に印加するための、第１の信号源および第１の磁場発生素子であって、前記第１の磁場（Ｂ０）は、第１の大きさおよび第１の周波数（ｆＢ０）を有する時間的に変化する磁場である、第１の信号源および第１の磁場発生素子と、
ｂ）前記容積に、前記第１の磁場（Ｂ０）と平行ではない第２の磁場（Ｂ１）を同時に印加するように配置され、前記磁化された粒子の歳差運動を引き起こすための、前記磁性粒子のラーモア周波数（ｆＬ）に等しいかまたはそれに近い第２の周波数（ｆＢ１）を有する第２の信号源および第２の磁場発生素子と、
ｃ）合成磁化度を測定するための磁化検出素子であって、前記合成磁化度（Ｍ）は、前記時間的に変化する磁場によって変調される、磁化検出素子と、
ｄ）前記合成磁化度のうちの少なくとも１つの周波数成分ｆＢ１±ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．（すなわち、ｎは奇数値に等しい）を決定するようにプログラムされているプロセッサであって、ここで、前記少なくとも１つの周波数成分は少なくとも成分ｆＢ１±ｆＢ０を含むものであり、
さらに、前記合成磁化度のうちの前記少なくとも１つの周波数成分の電力および／または電圧を計算して前記電力および／または電圧から前記容積内に閉じ込められた前記磁性粒子の量を決定するようにプログラムされている、プロセッサと、を備える、システム。
【請求項９】
前記プロセッサは、少なくとも前記第２の周波数から前記第１の周波数を差し引いた（ｆＢ１−ｆＢ０）周波数に等しい周波数での、もしくは前記第２の周波数に前記第１の周波数を加えた（ｆＢ１＋ｆＢ０）周波数に等しい周波数での前記少なくとも１つの周波数成分を決定するためにさらにプログラムされている、請求項８に記載のシステム。
【請求項１０】
前記システムは、既知の量の前記磁性粒子に対して決定された基準電力および／または電圧を記憶するためのメモリと、前記決定された電力または電圧を、前記容積内に閉じ込められた前記磁性粒子の量を決定するために、前記基準電力および／または電圧と比較するためにプログラムされている前記プロセッサと、をさらに備える、請求項８または９に記載のシステム。
【請求項１１】
前記第１の信号源は、ほぼ数Ｈｚ〜１００ｋＨｚの範囲の周波数で周期的に変化する第１の磁場を発生するように適合されている、請求項８〜１０のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項１２】
前記プロセッサは、前記合成磁化度の周波数スペクトルを計算する手段を含む、請求項８〜１１のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項１３】
周波数スペクトルを計算するための前記手段は、（離散）フーリエ変換を実行するための手段を含む、請求項１２に記載のシステム。
【請求項１４】
前記プロセッサは、前記合成磁化度の前記周波数スペクトルにおける少なくとも１つの周波数成分の電力および／または電圧を決定するための信号アナライザを備える、請求項１２または１３に記載のシステム。
【請求項１５】
物体を画像化する方法であって、前記方法は、前記物体内の複数の位置で請求項１〜７のいずれか１項に記載の所定の容積内の磁性粒子の量を決定する方法を適用する工程を含み、前記決定は前記磁性粒子を含む希釈物を物体に投与した後に適用される、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、概して、磁性粒子、例えば常磁性粒子の特性評価の分野に関する。より具体的には、本発明は、ある容積内に存在する磁性粒子の量を決定するシステムおよび方法、ならびにそれに基づく画像化方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
電子常磁性共鳴（ＥＰＲ）は、核磁気共鳴（ＮＭＲ）で使用されるものに類似した物理的概念に基づいて物質のスペクトル分析を可能にする。ＮＭＲは非ゼロスピンを有する核種を含む物質の分析を可能にする一方で、ＥＰＲは少なくとも１つの不対電子を有する化学物質を含む物質にのみ適用可能である。ＮＭＲは、水および炭化水素中に豊富に存在する水素原子を含む物質の分析に特に有用であることを証明する。さらに、ＮＭＲに基づく画像化技術である磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）は、異なる組織における水密度および複雑なスピン−スピンおよびスピン−格子相互作用によって引き起こされる微妙なコントラストのために、医療診断において有益なツールである。
【０００３】
一方、ＥＰＲは、最も安定した化合物中のすべての電子が対になっているため、過去に応用が少ないことがわかっている。しかし、ＥＰＲの強さはその高い特異性にある。ＥＰＲは、組織中のフリーラジカルの検出および画像化に容易に使用することができ、特異的スピン標識生物学的トレーサ分子の開発は、生物学と医学における多様な生理学的機能の分析に対して、ＥＰＲの使用の機会、および特にＥＰＲに基づく画像化技術の使用を生み出した。これは、従来の手段では研究できない生物学的メカニズムに特有の新たなトレーサのための道を開き、放射性核種によって引き起こされる暗に含まれる放射線被ばくを伴わずに、核医学で使用されるトレーサの代替物への道を開く。
【０００４】
ＥＰＲは、典型的には、非ゼロ電子スピンを有する粒子の磁気分極を引き起こすために、５ｍＴ〜１．２５Ｔ、またはそれより高いＤＣ磁場を使用する。狭帯域無線周波数波は、磁化を乱し、共鳴を引き起こすために使用される。ラーモア歳差運動周波数と呼ばれる、共鳴が起こる周波数は、印加される磁場強度および特定の材料特性に依存し、低磁場強度の場合は２００ＭＨｚから強磁場の場合は３５ＧＨｚ以上に及ぶことがある。低磁場（＜３０ｍＴ）の低周波（＜１ＧＨｚ）領域は、組織における誘電損失の減少のために、生物学および医学における用途にとって特に重要である。
【０００５】
磁性、例えば常磁性のＥＰＲ信号を使用する粒子の総計の定量化は、従来のＥＰＲ測定を用いて得られたＥＰＲ信号に対して直接的に実施することができる。それにもかかわらず、広範囲の濃度に対処し、正確な定量化を行うためにはまだ改良の余地がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許出願第ＵＳ２０１４／００９１５９号
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｂ．ＧｌｅｉｃｈおよびＪ．Ｗｅｉｚｅｎｅｃｋｅｒ、磁性粒子の非線形応答を用いた断層撮像、Ｎａｔｕｒｅ，４３５：１２１４−１２１７，２００５
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の実施形態の目的は、ある対象内の磁性粒子、例えば常磁性粒子を定量するための方法およびシステムを提供することである。本発明の実施形態の利点は、広範囲の濃度の磁性粒子、例えば常磁性粒子に対して、電子常磁性共鳴（ＥＰＲ）測定に基づいて、ある対象内の磁性粒子、例えば常磁性粒子を正確に定量化するための方法およびシステムを提供することである。本発明の実施形態の利点は、所与の媒体および容積中で、量の正確な決定を行うことができる磁性粒子、例えば常磁性粒子に基づく鉄を使用することである。本発明の実施形態の利点は、生体内と非生命体の特徴付けに関しての両方で、多数の用途と互換性のある粒子を使用することができることである。
【０００９】
本発明による実施形態の利点は、磁気粒子、例えば常磁性粒子の常磁性共鳴を検出するためのＥＰＲベースの画像化技術を使用して高速画像化および／または容積測定画像化を得ることができることであり、これを正確かつ効率的な方法で行うことである。
【００１０】
本目的は、本発明の実施形態による方法および装置によって達成される。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、ある容積内に閉じ込められた磁性粒子、例えば常磁性粒子の量を決定する方法に関し、
ａ）該磁性粒子、例えば常磁性粒子を磁化するために、容積に第１の磁場（Ｂ０）を印加する工程であって、該磁場（Ｂ０）は、第１の大きさおよび第１の周波数（ｆＢ０）を有する時間的に変化する磁場である、工程と、
ｂ）磁化された粒子の歳差運動を引き起こすために第１の磁場（Ｂ０）と平行ではない第２磁場（Ｂ１）を該容積に同時に印加する工程であって、第２の磁場は第１の磁場（Ｂ０）に曝されたときに該特定の素子のラーモア周波数（ｆＬ）に実質的に等しく選ばれた第２の周波数（ｆＢ１）を有するＲＦ磁場である、工程と、
ｃ）該容積から生じる合成磁化度（Ｍ）を測定する工程であって、合成磁化度（Ｍ）は時間的に変化する磁場によって変調される、工程と、
ｄ）合成磁化度のうちの少なくとも１つの周波数成分ｆＢ１±ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．（すなわち、ｎは奇数値に等しい）を決定する工程と、
ｅ）合成磁化度のうちの少なくとも１つの周波数成分ｆＢ１±ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．（すなわち、ｎは奇数値に等しい）の電力および／またはそれぞれ電圧を計算し、該電力および／または電圧から、該容積中に閉じ込められた磁性粒子、例えば常磁性粒子の量を決定する工程と、を含む、方法。
【００１２】
合成磁化度の変調は、時間的に変化する磁場による振幅変調であってもよいが、時間的に変化する磁場による任意の別のタイプの変調であってもよい。
【００１３】
「量」は、原子の数、細胞の数、または質量として、あるいは（該容積における）濃度として、もしくは他の方法で表すことができる。
【００１４】
ＥＰＲを使用する本発明の実施形態の利点は、確実に検出することができる比較的高い信号を提供することである。本発明の実施形態の利点は、送信側と受信側を並列にしないことにより、より多くの増幅をそれぞれの部分に適用できることである。
【００１５】
本発明の実施形態の利点は、変調信号を使用することであり、特定のスペクトル成分を有するスペクトルを提供し、そこから該量を導き出すことができる。変調の１つの有利な例は、本発明の実施形態で容易に実施することができる振幅変調である。
【００１６】
本発明による方法の実施形態の利点は、それが数桁にわたって極めて敏感である点である。システムおよび環境における異なる電子部品のノイズ寄与を正確に制御できるならば、例えば、１ナノグラム（ｎｇ）またはそれ以下の範囲の質量を決定することができる。いくつかの実施形態においては、検出され得る質量は、例えば約３０〜約１５０μｌの容積において、少なくとも９ｎｇ〜４５００μｇの範囲である。
【００１７】
磁性粒子は例えばＦｅ２Ｏ３またはＦｅ３Ｏ４であってもよく、その電子常磁性挙動は当業者に知られている。そのようなタイプの粒子はまた広く応用がきき、例えば特性評価実験や医療分野での使用に適している。本発明の実施形態の利点は、粒子（例えば、２０ｎｍ〜５００ｎｍの範囲の平均直径を有するナノ粒子）のサイズまたは形状にかかわらず、量を正確に決定することができることである。
【００１８】
具体例では、常磁性粒子は鉄関連であり、第１の周波数は約２００Ｈｚであり、第１の磁場の大きさは約１０．７ｍＴピークであり、第２の周波数（ラーモア周波数）は約３００ＭＨｚである。
【００１９】
完全な飽和が必要でないことは、本発明の実施形態の利点である。参考文献Ｂ．ＧｌｅｉｃｈおよびＪ．Ｗｅｉｚｅｎｅｃｋｅｒ、磁性粒子の非線形応答を用いた断層撮像、Ｎａｔｕｒｅ，４３５：１２１４−１２１７，２００５（非特許文献１）と比較すると、ここでは飽和が必要である。
【００２０】
合成磁化度のうちの少なくとも１つの周波数成分ｆＢ１±ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．（すなわち、ｎは奇数値に等しい）を決定することは、合成磁化度の周波数スペクトルを決定することを含んでもよい。
【００２１】
合成磁化度のうちの少なくとも１つの周波数成分ｆＢ１±ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．（すなわち、ｎは奇数値に等しい）を決定することは、第２の周波数ｆＢ１から第１の周波数ｆＢ０（すなわち、ｆＢ１−ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．、すなわちｎは奇数値に等しい）を引いたものに等しい周波数で、もしくは第２の周波数ｆＢ１に第１の周波数ｆＢ０（すなわち、ｆＢ１＋ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．、すなわちｎは奇数値に等しい）を加えたものに等しい周波数で少なくとも１つの周波数成分を決定することを含んでもよい。
【００２２】
周波数ｆＢ１＋ｎｆＢ０は、「上側波帯」としても知られており、周波数ｆＢ１−ｎｆＢ０は、「下側波帯」としても知られている。これらの周波数は、変調波形の第１の上側波帯および第１の下側波帯に対応する。
【００２３】
該電力および／または電圧から、容積中に閉じ込められた磁性粒子、例えば常磁性粒子の量を決定することは、該少なくとも１つのスペクトル成分の電力および／または電圧と該磁性粒子、例えば常磁性粒子の質量との間の線形関係に基づいて量を決定することを含んでもよい。
【００２４】
該電力および／または電圧から、容積中に閉じ込められた磁性粒子、例えば常磁性粒子の量を決定することは、該電力および／または電圧を既知の量の該磁性粒子、例えば常磁性粒子に対して決定された基準電力と比較することを含んでもよい。
【００２５】
基準値は、典型的には、該素子の既知の量を有するサンプル容積を用いたキャリブレーションによって得られた値である。そのようなキャリブレーションは、未知サンプルの測定時に実行されてもよいが、その結果が複数のさらなる測定のために再使用することができる記憶されたキャリブレーション測定値であってもよい。
【００２６】
時間的に変化する第１の磁場は、周期的な時間的に変化する磁場であってもよい。
【００２７】
時間的に変化する第１の磁場は、正弦波形を有してもよい。
【００２８】
時間的に変化する第２の磁場は、周期的な時間的に変化する磁場であってもよい。
【００２９】
時間的に変化する第２の磁場は、正弦波形を有してもよい。
【００３０】
第１の磁場Ｂ０の周波数は、ほぼＤＣ〜数ｋＨｚまでの周波数であることができる。例えば、第１の磁場の周波数は、１０Ｈｚ〜３００００Ｈｚの範囲の周波数、好ましくは７０Ｈｚ〜４００Ｈｚの範囲の周波数、例えば約２００Ｈｚとすることができる。
【００３１】
第２の磁場Ｂ１の周波数は、ほぼ２、３ＭＨｚ〜数ＧＨｚまでの周波数であることができる。例えば、第２の磁場の周波数は、好ましくは５０ＭＨｚ〜１０００ＭＨｚの範囲の周波数、例えば約３００ＭＨｚとすることができる。
【００３２】
周波数、ｎ＝１のｆＢ１±ｎｆＢ０を使用する利点は、他の周波数、ｎ＝３、５、．．．のｆＢ１±ｎｆＢ０よりも電力および／または電圧がはるかに高いことである。参考文献Ｂ．ＧｌｅｉｃｈおよびＪ．Ｗｅｉｚｅｎｅｃｋｅｒ、磁性粒子の非線形応答を用いた断層撮像、Ｎａｔｕｒｅ，４３５：１２１４−１２１７，２００５と比較すると、ここでは、ｎ＝３のｎｆＢ０が測定され、パワー含有量がｎ＝１のｎｆＢ０よりもはるかに低い。
【００３３】
スペクトル成分が容易に識別可能であるという点で、第１の信号源および第２の信号源に対して１音の正弦波形を使用することに利点がある。
【００３４】
最終的に、測定器を構築するための要件は、ＳＵＴ（試験体）なしシステム自体が線形時不変システムであることである。ＳＵＴ自体は非線形であってもよい。
【００３５】
本発明はまた、ある容積内に閉じ込められた磁性粒子、例えば常磁性粒子の量を決定するシステムにも関するもので、そのシステムは、
ａ）該磁性粒子、例えば常磁性粒子を磁化するために第１の磁場（Ｂ０）を発生させてそれを該容積に印加するための、第１の信号源および第１の磁場発生素子であって、第１の磁場（Ｂ０）は、第１の大きさおよび第１の周波数（ｆＢ０）を有する時間的に変化する磁場である、第１の信号源および第１の磁場発生素子と、
ｂ）該容積に、第１の磁場（Ｂ０）と平行ではない第２の磁場（Ｂ１）を同時に印加するように配置され、磁化された粒子の歳差運動を引き起こすための、該磁性粒子、例えば常磁性粒子のラーモア周波数（ｆＬ）に等しい近い周波数（ｆＢ１）を有する第２の信号源および第２の磁場発生素子と、
ｃ）合成磁化度を測定するための検出素子であって、合成磁化度（Ｍ）は、時間的に変化する磁場によって変調、例えば振幅変調される、検出素子と、
ｄ）合成磁化度のうちの少なくとも１つの周波数成分ｆＢ１±ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．（すなわち、ｎは奇数値に等しい）を決定するようにプログラムされ、合成磁化度のうちの少なくとも１つの周波数成分ｆＢ１±ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．（すなわち、ｎは奇数値に等しい）の電力および／または電圧を計算し、該電力および／または電圧から容積内に閉じ込められた磁性粒子、例えば常磁性粒子の量を決定するためにさらにプログラムされているプロセッサと、を備える。
【００３６】
本発明の実施形態の利点は、磁性粒子、例えば常磁性粒子の広範囲の濃度にわたって正確な、磁性粒子、例えば常磁性粒子の総計を定量化する正確なシステムが提供されることである。
【００３７】
Ｂ０として、電圧制御電流源を使用することができるが、電圧制御電圧源、電流制御電流源などの任意の他の組み合わせも使用できることに留意すべきである。
【００３８】
プロセッサは、少なくとも第２の周波数から第１の周波数を差し引いた（ｆＢ１−ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．、すなわちｎ＝奇数値）周波数に等しい周波数での、もしくは第２の周波数に第１の周波数を加えた（ｆＢ１＋ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．、すなわちｎ＝奇数値）周波数に等しい周波数での少なくとも１つの周波数成分を決定するためにさらにプログラムされてもよい。
【００３９】
システムはさらに、既知の量の該磁性粒子、例えば常磁性粒子に対して決定された基準電力および／または電圧を記憶するためのメモリと、決定された電力または電圧を、容積内に閉じ込められた磁性粒子、例えば常磁性粒子の量を決定するための基準電力および／または電圧と比較するためにプログラムされているプロセッサを備えてもよい。
【００４０】
第１の信号源は、ほぼ数Ｈｚ〜数ｋＨｚの範囲の周波数で周期的に変化する第１の磁場を発生するように適合されてもよい。
【００４１】
プロセッサは、合成磁化度の周波数スペクトルを計算する手段を備えてもよい。
【００４２】
周波数スペクトルを計算するための該手段は、例えば、高速フーリエ変換またはゲルツェルアルゴリズムを使用して、（離散）フーリエ変換を実行するための手段を含んでもよい。
【００４３】
プロセッサは、合成磁化度の周波数スペクトルにおける少なくとも１つの周波数成分ｆＢ１±ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．（すなわち、ｎは奇数値に等しい）の電力および／または電圧を決定するための信号アナライザを備えてもよい。
【００４４】
プロセッサは、システムに組み込まれた特定の処理ユニットの一部であってもよく、または測定システムに組み込まれていない別個の処理ユニットであってもよい。
【００４５】
本発明はまた、物体を画像化する方法に関し、本方法は、物体内の複数の位置で上述したような所与の容積内の磁性粒子、例えば常磁性粒子の量を決定する方法を適用する工程を含み、この決定は、該磁性素子、常磁性を含む希釈物を物体に投与した後に適用される。本発明の特定の好ましい態様は、添付の独立請求項および従属請求項に提示される。従属請求項の特徴は、適切に、独立請求項の特徴と、および他の従属請求項の特徴と組み合わせてもよく、請求項に明示的に提示されているだけではない。
【００４６】
本発明のこれらおよび他の態様は、以下に記載される実施形態を参照してはっきりし、明瞭になるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００４７】
【図１】本発明による方法の実施形態を例示するフローチャートである。
【図２】本発明によるシステムの概略ブロック図である。
【図３】ランジュバン理論および電子常磁性共鳴効果によって説明でき、本発明の実施形態で使用することができる、磁場中の超常磁性粒子の挙動の図式表現を示す。
【図４】本発明による実施形態で使用される「歳差運動」の現象を例示する。
【図５】本発明の実施形態で使用することができる典型的なセットアップの例を示す。
【図６】本発明の実施形態による方法を使用して得られる周波数スペクトル（ヘテロダイン受信機フロントエンドを有するスペクトラムアナライザで測定された）を示す。
【図７】本発明の実施形態を例示しており、４５００μｇ（マイクログラム）のＦｅを含有する「Ｒｉｅｎｓｏ（登録商標）希釈Ａ、すなわちＲｉｅＡ」サンプルを含有する容積に対する、周波数スペクトル（ヘテロダイン受信機フロントエンドを有するスペクトラムアナライザで測定された）の例を示し、該スペクトルは測定信号のスペクトルである。
【図８】２．１９７３μｇ（マイクログラム）のＦｅを含有する「Ｒｉｅｎｓｏ（登録商標）希釈Ｌ、すなわちＲｉｅＬ」サンプルを含有する容積に対する、測定信号の周波数スペクトル（ｔｙｐ．ヘテロダイン受信機フロントエンドを有するスペクトラムアナライザで測定された）の例を示す。
【図９】ラーモア周波数、ｆＬ＝ｆＢ１付近の周波数スペクトルの上側波帯と第１の下側波帯を例示する。
【図１０】Ｒｉｅｎｓｏ（登録商標）サンプルＡ（４５００マイクロｇ  Ｆｅ）からＲｉｅｎｓｏ（登録商標）サンプルＬ（２．１９７３マイクロｇ  Ｆｅ）に対して、実際のＦｅ含有量、ならびにスペクトラムアナライザ（左：標準スケール、右：拡大スケール）を使用して、本発明の方法および／またはシステムによって決定された含有量を示す。
【図１１】本発明の一実施形態によるアンダーサンプリングを使用して測定された信号に対してＦＦＴを使用して計算された周波数スペクトルを示す。
【図１２】本発明の実施形態による方法を実行するためのシステムを示す。
【図１３】本発明の実施形態で使用することができる、標準的なヘテロダインベースの受信機部を示す。
【図１４】本発明の実施形態で使用することができる、図１３のヘテロダインベースの受信機部に対応する周波数スペクトルを例示する。
【図１５】本発明の実施形態で使用することができる、標準的なアンダーサンプリング受信機部を例示する。
【図１６】本発明の実施形態で使用することができる、図１５のアンダーサンプリング受信機部に対応する周波数スペクトルを例示する。
【図１７】本発明の実施形態で使用することができる、システムをキャリブレーションする方法の一例を例示する。
【図１８】本発明の実施形態で使用して得ることができる、位相シフトキャリブレーションの一例を例示する。
【図１９】実際のＦｅ含有量、ならびに図１２および図１５に基づくシステムを使用し、図１６のＰ１＿ＵＳＢ（ｎｆＢ０、ｎ＝１）の測定によって、かつ図１７および図１８にそれぞれ記載されているような起動シーケンスおよびキャリブレーション手順を実行することによって、Ｒｉｅｎｓｏ（登録商標）サンプルＯ（２７５ｎｇ）〜Ｒｉｅｎｓｏ（登録商標）サンプルＴ（９ｎｇ）に対してアンダーサンプリング法で決定されたＦｅ含有量を示す。
【００４８】
図面は概略的なものに過ぎず、限定的ではない。図面では、要素のいくつかのサイズは、説明のために誇張されており、縮尺通りに描かれていない場合がある。
【００４９】
特許請求の範囲の参照符号は、その範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。
【００５０】
異なる図面において、同じ参照符号は、同じまたは類似の要素を指す。
【発明を実施するための形態】
【００５１】
本発明は、特定の実施形態に関して、および特定の図面を参照して記載されるが、本発明はそれに限定されず、請求項によってのみ限定される。記載された図面は概略的なものに過ぎず、限定的ではない。図面では、要素のいくつかのサイズは、説明のために誇張されており、縮尺通りに描かれていない場合がある。寸法および相対的な寸法は、本発明の実施の実際の縮小に対応しない。
【００５２】
さらに、説明書および特許請求の範囲における第１、第２などの用語は、類似の要素を区別するために使用され、必ずしも、時間的、空間的、ランク付け、または他の方法での順序を記述するためではない。そのように使用される用語は、適切な状況下で交換可能であり、本明細書に記載された本発明の実施形態は、本明細書に記載または図示されている以外の順序で動作可能であることを理解するべきである。
【００５３】
さらに、説明書および特許請求の範囲における用語「上部」、「下部」などは、説明目的で使用され、必ずしも相対的な位置を説明するためではない。そのように使用される用語は、適切な状況下で交換可能であり、本明細書に記載された本発明の実施形態は、本明細書に記載または図示されている以外の方向で動作可能であることを理解するべきである。
【００５４】
特許請求の範囲で使用される用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、その後列挙される手段に限定されるものとして解釈されるべきではないことに留意すべきで、他の要素または工程を除外するものではない。したがって、参照される述べられた特徴、整数、工程または構成要素の存在を指定するものとして解釈されるべきであり、１つ以上の他の特徴、整数、工程または構成要素、またはそれらのグループの存在または追加を排除するものではない。したがって、「手段ＡおよびＢを含む装置」という表現の範囲は、成分ＡおよびＢのみからなる装置に限定されるべきではない。それは、本発明に関して、装置のただ関連する構成要素がＡおよびＢであることを意味する。
【００５５】
本明細書を通じて、「一実施形態」または「実施形態」への言及は、実施形態に関連して説明される特定の特徴、構造または特性が、本発明の少なくとも１つの実施形態に含まれることを意味する。したがって、本明細書を通じて様々な箇所における「一実施形態では」または「実施形態では」という言葉づかいの出現は、必ずしもすべてが同じ実施形態を指しているわけではないが、そうであってもよい。さらに、本開示から当業者に明らかであるように、特定の特徴、構造または特性は、１つ以上の実施形態において任意の適切な方法で組み合わせることができる。
【００５６】
同様に、本発明の例示的な実施形態の説明では、開示を合理化し、１つ以上の様々な発明的態様の理解を助ける目的で、本発明の様々な特徴が、単一の実施形態、図、またはその説明で一緒にグループ化されることがあることを理解すべきである。しかしながら、この開示の方法は、請求された発明が各請求項に明示的に列挙されているより多くの特徴を必要とするという意図を反映していると解釈されるべきではない。むしろ、以下の特許請求の範囲が反映するように、発明的態様は、単一の前述の開示された実施形態のすべての特徴よりも少ない。したがって、詳細な説明に続く請求項は、この詳細な説明に明示的に組み込まれ、各請求項は、本発明の独立した実施形態として独自の立場にある。
【００５７】
さらに、本明細書で説明されるいくつかの実施形態は、他の実施形態に含まれるいくつかの特徴を含み他の特徴は含まないが、当業者に理解されるように、異なる実施形態の特徴の組み合わせは、本発明の範囲内にあることを意味し、異なる実施形態を形成する。例えば、以下の特許請求の範囲において、請求された実施形態のいずれかは、任意の組み合わせで使用することができる。
【００５８】
本明細書で提供される説明では、多数の特定の詳細が明記される。しかしながら、本発明の実施形態は、これらの特定の詳細なしに実施されてもよいことが理解される。他の例では、周知の方法、構造および技術は、この説明の理解を不明瞭にしないために詳細に示されていない。本発明の実施形態では、磁気特性を示す粒子を含む被検体に関する情報を収集するための方法およびシステムが提供される。これらの粒子は、例えば投与、混合、注ぎ込みなどのような任意の適切な方法で導入されてもよい。磁気特性を示す粒子は、例えば、磁性粒子、磁気ナノ粒子、標的特定酸化鉄粒子および磁気造影剤、ハイパーサーミアおよび熱アブレーションのための磁性薬物キャリア粒子、予め標識された細胞、治療用細胞および幹細胞であってもよく、および／または常磁性粒子、超常磁性酸化鉄（ＳＰＩＯ）および超小型酸化鉄粒子（ＵＳＰＩＯ）であってもよい。
【００５９】
本発明による実施形態では第１の磁場が参照される場合、検討中の粒子の磁化の向きを誘起する磁場が参照される。このような配向磁場は、従来のＥＰＲ測定において検討中の粒子の磁化を配向させるために典型的に使用される古典的な静磁場に対応する。それにもかかわらず、本発明の実施形態のように、本実施例における第１の磁場は一定ではなく、時間的に変化する磁場である。
【００６０】
本発明の実施形態において、被検体内で電子常磁性共鳴（ＥＰＲ）を発生させる周波数でのＲＦ場が参照される場合、典型的には例えば１ＭＨｚと１ＧＨｚとの間のオーダーの周波数、例えば、６０ＭＨｚと５００ＭＨｚとの間のオーダーの周波数を有するＲＦ励起が参照される。
【００６１】
本出願の実施形態において、用語ナノ粒子が使用される場合、例えば、直径が１ｎｍ〜１０００ｎｍの範囲の臨界寸法を有する粒子が参照される。いくつかの実施形態では、粒子のサイズは提供される範囲内にさらに特定される。ナノ粒子または磁性ナノ粒子は、単一ドメイン粒子であってもよい。
【００６２】
本発明による実施形態において、研究対象の物体が参照される場合、そのような物体は、非生物体であってもよく、または生物体であってもよい。本発明はそれに限定されないが、いくつかの実施形態では、対象物は、例えば動物または人間の体のような、生き物の身体であってもよい。本発明の実施形態による研究対象物は、常磁性物体である。本発明の実施形態は、試験管内の試験、例えば磁性物体にリンクされた細胞の定量化にも使用することができる。本発明の実施形態は、高い感度と精度で磁性物体を定量化することを可能にする。用途の例には、純粋な定量化から３Ｄ画像化が含まれるが、これに限定されない。研究対象は、自然界の常磁性体であってもよく、または、物体に磁気ナノ粒子などの磁性粒子を、例えば投与を通して加えることによる少なくとも部分的に磁性を持ったものでもよい。投与の工程は、研究中の対象物の電子磁気共鳴を検出するために、本発明の実施形態による方法の適用に先立って実行されてもよい。
【００６３】
本発明による方法の実施形態において、研究対象の物体と１つ以上の発生された場との間の相互作用を参照してもよく、物体と磁場またはＲＦエネルギーとの間の相互作用は、本方法の一部でなくてもよい。したがって、本発明による方法の実施形態は、相互作用時に検出する工程、または場を発生し、相互作用時に検出する工程のみを含むことができる。
【００６４】
本発明の実施形態において、本発明の枠組みにおける電子常磁性共鳴が参照される場合、さらなるデータ分析を必要としない直接測定技術であるＥＰＲ技術が参照される。従来のＥＰＲとは対照的に、本発明の実施形態では、使用されるＥＰＲは、時にはｐＥＰＲまたは粒子ＥＰＲとも呼ばれる、低磁場で低周波数のＥＰＲ技術であり、摂動する電磁場が連続的方法（ＣＷ）で印加される。示されているように、本発明の実施形態で使用されるＥＰＲ技術は、さらなるデータ分析を必要としない直接測定である。これは、データが、印加された場に対する吸収パワーの一次導関数であるスペクトルの吸収から推測され、サンプル中の電子スピンに比例する数を得るためにそこから二重積分が計算される従来のＥＰＲ方法とは対照的である。第１の態様では、本発明は、例えば所与の容積に包まれた常磁性粒子、例えば常磁性ナノ粒子のような磁性粒子の量（例えば、細胞の質量、濃度または数の点から表現される量）を決定することに関する。一例では、粒子は酸化鉄ナノ粒子であってもよいが、実施形態はこれに限定されない。
【００６５】
第１の態様の実施形態による方法は、該磁性粒子を磁化するために該容積に第１の磁場（Ｂ０）を印加する工程を含み、第１の磁場（Ｂ０）は、第１の大きさおよび第１の周波数（ｆＢ０）を有する時間的に変化する磁場である。同時に、第１の磁場に平行ではない第２の磁場（Ｂ１）が、磁化された粒子の歳差運動を引き起こすために該容積に印加され、第２の磁場は、第１の磁場（Ｂ０）に曝されたときに磁性粒子の電子スピンのラーモア周波数（ｆＬ）に実質的に等しく選ばれた第２の周波数（ｆＢ１）を有するＲＦ磁場である。
【００６６】
最適には、第２の周波数（ｆＢ１）の周波数はラーモア周波数に等しいが、何らかの偏差が存在し得る。しかも、差が大きくなればなるほど、感度の低い技術となる。
【００６７】
ＲＦ場Ｂ１は、上述したようにラーモア周波数で時間的に変化する。有利なことに、第２の磁場（Ｂ１）は、第１の磁場（Ｂ０）に対して実質的に直交または直交している。そのような直交配向は、電子的および／または機械的な方法で得ることができる。
【００６８】
本発明の実施形態によれば、使用される第１の周波数は、従来のＥＰＲシステムよりも大幅に低くすることができる。低周波数は、例えば、ｆＢ０については１０Ｈｚ〜３００００Ｈｚの範囲にあり、ｆＢ１については５０ＭＨｚ〜１０００ＭＨｚの範囲にあることができる。一例では、ｆＢ１に使用される周波数は、例えば、３００ＭＨｚであることができる。本発明の実施形態の利点は、これらの低周波数では、組織内の減衰があまり顕著でないことである。後者は、この技術が生体内システムに関して使用される場合に有利である。
【００６９】
いくつかの実施形態では、Ｂ０場周波数は、振幅ｖ１およびＤＣ値ｖ０を有し、振幅は次式で与えられる。
【数１】
0006757324.tif 000002
【００７０】
典型的な設定では、ＤＣ値はゼロ、ｖ０＝０である。しかしながら、ｖ０は０と異なり、ＤＣ値、例えば１００ｍＶであってもよい。
【００７１】
粒子がＢ０場に持ち込まれると、ラーモア周波数で歳差運動が粒子に誘発される。続いて、場Ｂ１がオンになり、図４のΦが増加し、これはＢ１の印加振幅に依存する。この結果、例えばコイルなどの検出素子を使用してＭ０を測定することができる。Ｂ１は、横方向場の増加を引き起こす。
【００７２】
ここで言う歳差運動は、外部磁場Ｂ０（電子スピン）に対する磁気モーメントの歳差運動である。
【００７３】
容積から生じる合成磁化度（Ｍ）が測定され、そこで合成磁化度（Ｍ）は時間的に変化する磁場Ｂ０によって変調、例えば振幅変調されている。磁化ベクトルは、すべての磁気モーメントの合計である。磁化の大きさは、磁性粒子の濃度と相関する。
【００７４】
離散フーリエ変換が、磁化度を表す検出素子に誘起された電圧上で実行される。誘起電圧は、次式で与えられる。
【数２】
0006757324.tif 000003
ここで、
【数３】
0006757324.tif 000004
は、受信コイル感度を示し、それは検出素子のすべての幾何学的パラメータを包含し、例えば検出素子はコイルであってもよい。
【００７５】
本発明の実施形態によれば、合成磁化度を表す誘起電圧の少なくとも１つの周波数成分ｆＢ１±ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．（すなわち、ｎは奇数値に等しい）は、次に離散フーリエ変換に基づいて決定される。そのような少なくとも１つの周波数成分ｆＢ１±ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．（すなわち、ｎは奇数値に等しい）は、周波数スペクトルであってもよいが、実施形態はこれに限定されない。少なくとも１つの周波数成分ｆＢ１±ｎｆＢ０から、電力および／または電圧が計算され、電力に基づいて容積内に閉じ込められた磁性粒子の量が決定される。
【００７６】
本発明の実施形態において、ある量が参照される場合、磁性粒子の総計が参照される。
【００７７】
本発明の有利な実施形態では、検出素子によって得られた信号が測定され、離散フーリエ変換が適用される。システムが理想的であり、粒子が存在しない場合、信号は変調されていない信号である。粒子が存在する場合、信号は変調信号である。変調された信号は磁性粒子の情報を含有する。ナイキスト−シャノンサンプリング定理が満たされるように選択されたサンプリング周波数ｆｓを有する高速ＡＤＣシステムが使用される場合、情報は、離散フーリエ変換を実行することによって直接抽出することができる。ＤＦＴの結果は１セットの周波数をもたらし、一周波数成分は存在する鉄の量に関する情報を決定するために使用される。
【００７８】
代わりに、エンベロープ信号が抽出され、エンベロープ信号上のＤＦＴが実行される復調技術を使用することができる。ＤＦＴの結果は１セットの周波数をもたらし、一周波数成分は存在する鉄の量に関する情報を決定するために使用される。システムが理想的であれば粒子を含まないサンプルを測定し、エンベロープはＤＣ値であり、粒子を有するサンプルを測定する場合、エンベロープはランジュバンおよびＥＰＲの寄与の結果である。エンベロープ信号は磁性粒子の情報を含む。エンベロープ信号の決定は、複数の方法、例えばプロダクト検波器またはエンベロープ復調回路を使用して、もしくはデジタル信号処理技術を使用して実行することができる。代わりに、アンダーサンプリングが実行されるとき、エンベロープは実行された測定の直接の結果である。
【００７９】
本発明の実施形態の利点は、例えば米国特許出願第ＵＳ２０１４／００９１５９号（特許文献１）と比較して、磁場の異なる向きが必要とされないことである。有利なことに、完全な信号が測定され、正確な測定を得るために、測定の開始時にトリガリングが必要なだけである。この方法では、正確なトリガは必要ではない。トリガリングは、ソフトウェアトリガであっても、またはハードウェアトリガであってもよい。
【００８０】
本発明の実施形態の利点は、ＤＦＴを実行する前に特別のデジタルフィルタリングを追加することによってＥＭＩノイズをフィルタリングすることができるため、本技術がＥＭＩ影響に対してあまり敏感でないことである。後者は、例えば米国特許出願第ＵＳ２０１４／００９１５９号（特許文献１）と比較して、信号の完全な情報が利用可能であるために可能である。
【００８１】
いくつかの実施形態では、ＲＦ場Ｂ１は、振幅および／または周波数で変調することができる。Ｂ０の振幅は変化し得るので、ラーモア周波数も変化し得る。この変動に依存して、Ｂ１の周波数は変化することができ、例えば数Ｈｚから３００ＭＨｚの間の変動を実施することができる。いくつかの実施形態では、そのような変動は、例えば、
【数４】
0006757324.tif 000005
ここでΔｆはシステムの帯域幅に等しい。
【００８２】
第２の磁場Ｂ１の強度は、以下の手順に従って選択してもよい。
Ｂ１信号のパワーが増加すると同時に、スペクトル成分の振幅が測定される。スペクトル成分は、ヘテロダインベースのシステムの場合はｆＢ１＋ｆＢ０またはｆＩＦ＋ｆＢ０であり、アンダーサンプリング受信機の場合はｆＢ０である。Ｂ１の強度の最適値は、スペクトル成分のパワーが最大である値である。システムは、依然として線形時間不変システムとして動作するように注意する。
【００８３】
図３に示すように、磁気共鳴の概念は、粒子磁化の飽和効果（ランジュバン関数を用いてモデル化されている）と組み合わされる。
【００８４】
本発明の実施形態のさらなる特徴および利点を、図面および特定の実施形態を参照して、以下に例示するが、本発明はこれに限定されない。
【００８５】
本発明の実施形態の利点は、磁性粒子量が直接的に測定され、内在性粒子、例えば内在性鉄ではなく、すなわち、生物内から生じ、生体組織および流体中に存在するものが測定される。したがって、内在性粒子を抽出するための追加の測定を必要としないことは実施形態の利点である。
【００８６】
本発明の実施形態の利点は、ＥＰＲを単一の温度で行うことができる（すなわち、異なる温度で測定する必要がない）ことである。本発明の実施形態におけるＥＰＲ測定は、例えば室温で、または例えば約３７℃、すなわち動物または人体の温度に近い温度で実行することができる。必須ではないが、温度の関数としての粒子効果の研究もなお可能である。本発明は、例えば、磁気ナノ粒子、標的特定酸化鉄粒子および磁気造影剤、ハイパーサーミアおよび熱アブレーションのための磁性薬物キャリア粒子、予め標識された細胞、治療用細胞および幹細胞を含む常磁性粒子などの磁性粒子に応用可能であり、かつ／または超常磁性酸化鉄（ＳＰＩＯ）および超小型酸化鉄粒子（ＵＳＰＩＯ）といった常磁性粒子であってもよい。
【００８７】
本発明の実施形態の利点は、使用されるＥＰＲ技術がキャビティを使用しないことである。これは、生体内システムに関連する技術およびシステムに使用するために利点となる。
【００８８】
本発明の実施形態の根底にある原理が以下でさらに説明され、根底にある原理を説明することができるいくつかの数学的考察が使用される。それでも、本発明の実施形態は、これらの数学的／理論的考察に限定されず、後者は、本発明による方法およびシステムの利点を説明するための可能な方法としてのみ提供される。
【００８９】
本発明によって提案される測定の原理は、印加磁場Ｂ０における磁性粒子および／または常磁性粒子の非線形挙動に基づいており、ランジュバン理論および磁気ＲＦ場に対する電子常磁性共鳴応答によって説明される。
【００９０】
磁性粒子および／または常磁性粒子が静磁場Ｂ０内に置かれると、この場Ｂ０に従って整列する。次に、粒子が、静磁場Ｂ０に直交するように配向され、（該静磁場Ｂ０内の対象とする粒子、例えば鉄のラーモア周波数ｆＬに等しいかまたはほぼ等しいように選択された）周波数ｆＢ１を有するＲＦ磁場Ｂ１（ｔ）によって追加的に励磁されると、磁場Ｂ０の軸を中心としてその周りに鉄粒子の磁気ベクトルＭの歳差運動が生じる。この現象自体は当技術分野で知られており、図４に図示されており、ここで黒ベクトルＭは、磁性粒子、常磁性粒子の磁化ベクトルＭを表し、このベクトルは、各原子に特有の角速度ωＬでＺ軸の周りを回転する。理想的には、角度Φが９０°になるようにＴｘコイルに印加される電力は最大である。
【００９１】
しかしながら、一定の磁場Ｂ０ではなく、時間的に変化する磁場Ｂ０（ｔ）、例えば磁場Ｂ０（ｔ）が印加されると、磁化度ベクトルＭの向きだけでなく、大きさも変化する。大きさの変化は、ランジュバンとＥＰＲ共鳴関数を組み合わせた結果であるべき級数展開（式［１］）で記述することができ、次式で表すことができる。
【数５】
0006757324.tif 000006
ここで
【数６】
0006757324.tif 000007
【００９２】
磁化度ベクトルＭの大きさの変化は、検出素子を使用して変調信号として（時間領域で）観測することができ、数学的には次式で記述できる。
【数７】
0006757324.tif 000008
ここで、ＲＦ信号
【数８】
0006757324.tif 000009
の減衰され、位相シフト（Φ）されたバージョンであるフィードスルー信号
【数９】
0006757324.tif 000010
は、変調項、例えば振幅変調項である。
【００９３】
式［２］は、時間領域における振幅変調信号であり、図６に示すような周波数スペクトルを有する。本発明者らは、第１の下側波帯の第１のスペクトル成分、（周波数ｆＢ１−ｆＢ０の）ＬＳＢ、の電力および／または電圧、および第１の上側波帯の第１のスペクトル成分、（周波数ｆＢ１＋ｆＢ０の）ＵＳＢ、の電力および／または電圧は、所定の媒体および容積中の磁性粒子、常磁性酸化鉄ナノ粒子の量に関係していることを示す。さらに、関係は線形であり、すなわち、一般に、ＬＳＢまたはＵＳＢの不均一スペクトル成分（ｆＢ１±ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．）の電力および／または電圧は、測定されたサンプル中の鉄素子の量に比例する。
【００９４】
次に、本発明による方法およびシステムの実施形態が、いくらかより詳細に説明される。
【００９５】
図１は、本発明による方法の一実施形態のフローチャートを示し、図２は、本発明の一実施形態によるシステムの概略ブロック図を示す。未知の特定の常磁性粒子（例えば、酸化鉄）の総計を含む容積２が提供されていて、その容積中の鉄の総計が決定されることになっていると仮定する。（総計または量は、質量、濃度、細胞数、または他の適切な方法で表すことができる）。
【００９６】
図１および図２を参照して、第１の工程３１０において、周波数ｆＢ０（例えば、約２００Ｈｚ）を有し、第１の方向に配向された第１の磁場Ｂ０（ｔ）が容積２に印加される。磁場の大きさは、例えば１０．７ｍＴ（ｆＢ１＝３００ＭＨｚに対して）であってもよい。本発明の実施形態によれば、第１の磁場はしたがって時間的に変化する磁場である。周波数ｆＢ０は、数Ｈｚから１００ｋＨｚ超までの範囲内とすることができる。受信機にあって雑音は主に１／ｆ挙動によって支配されるので、より高い周波数の方が利点を有するが、粒子は有限の緩和時間を有するので、すなわち粒子は特定の周波数までの変動にしか追従できないので、この周波数はあまり高くすることはできない。比吸収率（ＳＡＲ）に関連する制限もあり、これは動物および人間を磁場に曝す場合に重要となる。ＳＡＲは磁場の振幅および周波数の２乗に比例する。
【００９７】
第２の工程３２０において、磁場Ｂ０に直交する向きを持ち、対象粒子（この例では、鉄）のラーモア周波数に実質的に等しい周波数ｆＢ１を有する第２の磁場Ｂ１（ｔ）が、容積２に同時に印加される。周波数ｆＢ１＝ｆＬは、例えば３００ＭＨｚであってもよい。例として、Ｒｉｅｎｓｏ（登録商標）が使用される場合、磁場強度は３００ＭＨｚの励磁の場合には７ｍＴまでずっと低くてもよい。印加された第１および第２の磁場Ｂ０およびＢ１のために、磁性粒子、例えば常磁性粒子は、２つの効果の組み合わせである磁化度Ｍを示し、ここで第１の効果はランジュバン方程式で説明でき、第２の効果はＥＰＲ吸収によって説明することができる。これは図３に図示されている。図３から見ることができるように、測定された信号は、ＥＰＲとランジュバンの寄与の組み合わせを直接的に示す。この技術およびシステムはまた、粒子のヒステリシス効果を測定することを可能にする。こうして、この技術およびシステムは、粒子挙動についての多くの情報を抽出することを可能にする。
【００９８】
第３の工程３３０において、この磁化度信号Ｍ（ｔ）は検出素子を用いて測定される。測定された信号は、使用される時間的に変化する第１の磁場のために変調される。
【００９９】
第４の工程３４０において、少なくとも１つの周波数成分（ｆＢ１＋ｎｆＢ０、ｎ＝１）、しかし任意選択でこの信号の全周波数スペクトル（ｆＢ１±ｎｆＢ０、ｎ＝１、３、５、．．．）が決定される（例えば、計算される）。少なくとも１つの周波数成分は、例えばスペクトラムアナライザで決定されてもよく、または例えばコンピュータプログラムまたは適切にプログラムされたデジタル信号プロセッサ（ＤＳＰ）またはフィールドプログラマブルゲートアレイ（ＦＰＧＡ）のような（離散）フーリエ変換を実行することができる他の手段によって決定されてもよい。そのようなスペクトルの一例が図６に示され、３００ＭＨｚでメインピークを示し、メインピークの左側と右側に（この例では２００Ｈｚの倍数である距離に）いくつかの小さなピークが現れている。
【０１００】
最後に、第５の工程３５０において、鉄の量が、少なくとも１つの周波数成分、ｎ＝１のｆＢ１＋ｎｆＢ０、の電力および／または電圧に基づいて計算される。一例では、計算は、容積２に存在する磁性ナノ粒子および／または常磁性ナノ粒子の質量に関連するｆＢ１＋ｆＢ０における第１の上側波帯Ｐ１＿ＵＳＢの電力、および／またはｆＢ１−ｆＢ０における第１の下側波帯Ｐ１＿ＬＳＢの電力に基づいてもよい。ｆＢ１＋ｆＢ０またはｆＢ１−ｆＢ０周波数成分を取ることが好ましく、ここには最大電力成分がある。それでも、例えばｎ＝３のｆＢ１±ｎｆＢ０のような他の周波数成分も使用することができる。
【０１０１】
得られた結果は、例えば、ルックアップテーブルを使用して、アルゴリズムを使用して、等々、キャリブレーション方法と比較することによって、理論的に期待される結果に基づいて評価されてもよい。キャリブレーションが使用されるいくつかの実施形態では、少なくとも１つの周波数成分の電力、例えば、既知のサンプル、例えばＲｉｅｎｓｏ（登録商標）Ａサンプル（さらに４５００マイクログラムのＦｅを有するＲｉｅ  Ａと略記する）のＰ１＿ＵＳＢおよび／またはＰ１＿ＬＳＢにおけるピークを基準値として使用することができる。そのような場合、以下の実験結果によって明らかになるように、未知の標本に存在する磁性粒子、例えば常磁性粒子の総計（例えば、量または質量または濃度）を決定することができる。
【０１０２】
本発明のいくつかの実施形態では、本方法はキャリブレーション段階を含む。測定を開始する前に、有利なことに、キャリブレーション工程を含む始動シーケンスを実行することができ、結果として最適検出限界を得る。そのようなシーケンスの一例が図１７に示され、システムの電源投入、システムの初期化、およびシステムウォームアップ後のキャリブレーション段階、そしてその後システムは測定の準備が整うことを図示している。
【０１０３】
システムの初期化中に、正しい信号が必要な場所に印加されるように個々の構成要素は正しい値に設定される。
【０１０４】
システムウォームアップの後、キャリブレーション工程において、ナノ粒子を含まないサンプルが検出ゾーンに挿入され、Ｂ１の位相が修正される。この位相シフトは、デジタル方式、アナログ方式または組み合わせで行うことができる。目標は、Ｐ１＿ＵＳＢ（またはＰ１＿ＬＳＢ）における受信電力または電圧が最小になるように、すなわちシステムのノイズフロアに可能な限り近づけるように最適点（ＯＰ）を設定することである。位相最適化の一例を図１８に示す。このキャリブレーション工程は、システムの感度（すなわち、検出限界）および最終結果の正確さおよび精度を改善する。このキャリブレーション工程は、非直交コイルシステム、すなわち、Ｔｘコイル、Ｒｘコイル、およびヘルムホルツコイルが電気的に直交していない場合において特に意味がある。最適な点は（熱）ドリフトに対して敏感であり、最も正確な結果を得るために熱ドリフトを最小限に抑える必要があり、キャリブレーション工程は定期的に繰り返される必要があることに留意すべきである。キャリブレーションが実行されると、システムは測定の準備が整う。
【０１０５】
第２の態様において、本発明はまた、物体内の磁性粒子、例えば常磁性粒子の量を決定するためのシステムにも関する。そのようなシステムは、第１の態様で説明した方法を実行するために有利に適合させることができるが、これに限定されるものではない。実施形態によるシステムは、該磁性粒子、例えば常磁性粒子を磁化するために該容積に第１の磁場（Ｂ０）を発生して印加するための第１の信号源および第１の磁場誘起素子、例えばコイルを備え、第１の磁場（Ｂ０）は、第１の大きさおよび第１の周波数（ｆＢ０）を有する時間的に変化する磁場である。システムはまた、磁化された粒子の歳差運動を引き起こすために、該第１の磁場（Ｂ０）に直交し、前記磁性粒子、例えば常磁性粒子のラーモア周波数（ｆＬ）に等しい周波数ｆＢ１を有する第２の磁場（Ｂ１）を該容積に同時に印加するように配置された第２の信号源および第２の磁場誘起素子、例えばコイルを備える。システムはまた、合成磁化度を測定するための測定ユニット、例えばコイルを備え、合成磁化度（Ｍ）は、時間的に変化する磁場によって変調、例えば振幅変調されている。システムはさらに、合成磁化度のうちの少なくとも１つの周波数成分、ｎ＝１のｆＢ１＋ｎｆＢ０またはｎ＝１のｆＢ１−ｎｆＢ０を決定するようにプログラムされ、合成磁化度のうちの少なくとも１つの周波数成分の電力を計算し、該電力から、容積中に閉じ込められた磁性粒子、例えば常磁性粒子の量を決定するためにさらにプログラムされているプロセッサを備える。測定ユニットは、磁化度の測定を可能にする任意の適切なセンサであるとよい。
【０１０６】
図１１は、高速フーリエ変換を使用して計算された周波数スペクトルを示す。この例では、ソフトウェアツールＭａｔｌａｂ  ２０１２ｂが使用された。信号はアンダーサンプリング法またはバンドパスサンプリング法を用いて測定され、７５ＭＳＰＳのＡＤＣサンプリングを使用した。特定の例では、ＤＡＣ／ＡＤＣ  ＦＭＣカード（ＦＭＣ１７６）のシェルフソリューションと高度なデジタル信号処理による高性能および複数のＩ／Ｏオプション（ＰＣ７２０）が使用された。図１１に示す実験および表２に記載の実験に見られるように、使用された特定のケーブルは特定の損失を生じ、異なる測定に対して起こり得る小さな差異を生じさせている。
【０１０７】
図１２は、図１１に示す周波数スペクトルを測定するために使用されるシステムを示す。測定に要する時間は、粒子濃度に依存し、より低い濃度はより長い測定時間を必要とする。実施された実験では、典型的な実験測定時間は２５〜６０秒であった。
【０１０８】
図１２に示す例示的なシステムは、本発明の一実施形態によるシステムのいくつかの標準およびオプションの構成要素を示す。本システムは、磁場Ｂ０発生部１２１０を備える。典型的には、そのような部分は、波形発生器および磁場Ｂ０源を備えることができる。波形発生器は、基準信号としての共通クロック信号が備わっている。波形発生器は別個のブロックであってもよいし、Ｂ０源の一部であってもよい。システムはまた、コイル部１２２０を備え、ヘルムホルツ型コイルにＢ０発生部からの磁場信号が供給され、送信コイルが設けられ、検出素子が設けられている。サンプルホルダとサンプルがその中に配置される。コイル部は、典型的には、シールドされたエンクロージャであってもよく、温度制御された環境になるように構成されてもよい。システムはまた、ＲＦ部１２３０を備え，送信コイルに給電するための送信部と、検出素子に給電する受信部とが設けられている。システムはさらに、信号発生、データ取得、およびデジタル信号処理用に構成された信号処理部１２４０を備える。信号処理部１２４０は、典型的には、波形発生器と同じ基準クロックが供給されてもよい。信号処理部１２４０はまた、波形発生器信号を得られた結果とリンクさせるためのトリガ素子を備えてもよい。信号処理部１２４０は、典型的には、１つ以上のアナログ／デジタル変換器および／またはデジタル／アナログ変換器を備える。さらに、ＦＰＧＡおよび／またはデジタル信号処理ブロック、ＦＩＦＯ−ＲＡＭおよび可能なファームウェアを備えたメモリブロックを備える。信号処理部１２４０は、送信コイルへの印加電力を制御および／または掃引するための電力を測定するための電力センサを備えてもよい。バス、例えば高速バスをコンピューティングシステムとの通信を提供するために使用してもよい。そのようなコンピューティングシステムは、マザーボード、プロセッサ、ランダムアクセスメモリなどのメモリといった通常の構成要素を提供することができる。固体デバイスメモリまたはハードディスクメモリも設けられてもよい。キーボードのような入力装置、スクリーンのような出力装置、およびビデオカードなどの他の構成要素も存在してもよい。
【０１０９】
本発明のいくつかの実施形態では、受信機部は、ヘテロダイン受信機部であってもよい。ヘテロダインベースの受信機では、周波数ｆＢ１＋ｎｆＢ０とｆＬＯの信号が混合され、和周波数（ｆＢ１±ｎｆＢ０＋ｆＬＯ）および差周波数（ｆＢ１±ｎｆＢ０−ｆＬＯ）を生み出し、その２つのうちの１つのみ、すなわちｆＢ１±ｎｆＢ０−ｆＬＯ＝ｆＩＦ±ｎｆＢ０（ｆＩＦ＝中間周波数）のみが使用され、他方はフィルタリングされる。ヘテロダインベースのシステムでは、スペクトル成分はｆＩＦの周りでダウンコンバートされる。ＩＦ信号は、ＡＤＣ（アナログ／  デジタル変換器）を用いてデジタル化される。ＡＤＣサンプリング周波数ｆｓは、ナイキスト−  シャノンサンプリング定理が満たされるように、すなわち高域カットオフ周波数の最低２倍に選択される。ヘテロダイン受信機の一例を図１３に示し、対応する周波数スペクトルを図１４に示す。
【０１１０】
本発明のいくつかの実施形態では、受信機部はアンダーサンプリングシステムであってもよい。アンダーサンプリングシステムでは、Ｂ１信号は、ナイキストレートより下のサンプルレートでデジタル化さる。この特許に記載されたシステムの場合、サンプリングレートは、ｆｓ＝ｆＢ１／Ｎとなるように取られる。標準値は、Ｎ＝４でｆｓ＝７５Ｍｓｐｓである。この場合、ｆＢ１±ｎｆＢ０はＤＣにダウンコンバートされ、ｆＢ１の周りのスペクトル成分±ｎｆＢ０はダウンコンバージョンの後、ＤＣ値の周りにある。信号をＡＤＣに印加する前にＢ１の高調波が十分に抑制されるように、帯域幅の狭いバンドパスフィルタが使用される。アンダーサンプリングベースの受信機の一例を図１５に示し、対応する周波数スペクトルを図１６に示す。図１９は、アンダーサンプリングベースの受信機を用いた鉄の測定量を示す。
【０１１１】
本発明の実施形態は、画像化および／またはボリューメトリック画像化の目的に適合された磁場勾配発生装置を備えてもよい。そのような実施形態は、被検体の画像および／またはボリューメトリック画像表現の形の検出信号を組み合わせるように適合された行列ユニットをさらに備えてもよい。
【０１１２】
例示として、本発明の実施形態はこれに限定されるものではなく、一例では、画像化は、サンプルの上に磁場勾配を誘起することによって行うことができる。例えば、１次元の場合、サンプルの上（例えば、２ｃｍの視野）に磁場勾配（例えば、０→１０ｍＴ）を印加すると、スピンは、（ランジュバン方程式に対応して）それらの位置に応じて異なる応答を与える。異なる磁場勾配（例えば、０→５ｍＴ、１０→０ｍＴ、．．．、０→−１０ｍＴ、−１０→０ｍＴ、０→−５ｍＴ）を印加すると、個々の位置のそれぞれで濃度を分解すること可能にする一連の方程式が得られる。後者は２次元または３次元に拡張することができる。別の例では、共鳴条件は１つの位置でのみ生み出され、ある場所では±１０ｍＴ、他のすべての場所では０ｍＴである。
【０１１３】
実験
図５は、本構想の証明としての実験セットアップを記載している。第１のシールドおよび熱制御されたチャンバー７１は、安定した基準周波数（ｆ基準＝標準１０ＭＨｚ）を発生するための基準発振器を含む。非同期動作も機能することに留意すべきである。それでも、非同期動作が使用されると、システムはドリフト、すなわちＢ０場とＢ１場との間のドリフトおよび熱ドリフトに敏感になる。非同期動作により感度が低下するので、同期動作が優先される可能性がある。Ｒｘコイルは、任意の適切な向きに配向することができる。最大感度は、ＲｘコイルがＴｘコイルに対して垂直に向けられているときに得られる。
【０１１４】
同じチャンバー７１は、安定した正弦波電圧信号（この例では、ｆＢ０＝２００Ｈｚの１つのトーン）を発生するための波形発生器をさらに含む。安定した基準周波数ｆ基準が、ラーモア周波数（この例では、ｆＬ＝ｆＢ１＝３００ＭＨｚの１つのトーン）で正弦波信号を発生するために、第２のチャンバー７４内のＲＦ信号源に印加される。低ノイズ増幅およびフィルタリングの後、この信号は、シールドされ、熱制御された励起チャンバー７５内のＲＦ  Ｔｘコイルに印加される。このチャンバーはまた、時間的に変化する磁場Ｂ０（ｔ）を発生するヘルムホルツ型コイルも含む。これは、シールドおよび熱制御されたＶＣＣＳチャンバー７２内に存在する電圧制御電流源ＶＣＣＳから生じる周波数ｆＢ０を有する時間的に変化するｉ（ｔ）を利用することによって達成される。この電圧制御発振器は、安定した電圧と第１のチャンバー７１で発生された基準発振器信号を使用する。ＲＦ  Ｔｘコイルによって発生される磁場Ｂ１（ｔ）と、ヘルムホルツ型コイルによって発生される磁場Ｂ０（ｔ）は、互いに直交するように配向される。測定されるサンプルを含有する容積から生じる合成磁化度信号を測定するための、ＲＦ  Ｒｘコイルと呼ばれる第３のコイルもまた、シールドおよび熱制御された励起チャンバー７３内に存在する。このＲＦ  Ｒｘコイルの出力は、低ノイズ増幅およびフィルタリング段７５および信号アナライザ７６に印加される。この実験では、スペクトラムアナライザは標準的にヘテロダイン受信機フロントエンドを有する。
【０１１５】
サンプルは、両方ともサンプルと一緒にヘルムホルツ型コイルの内側に置かれたＴｘコイルとＲｘコイルの内側に置かれ、すべてはシールドおよび熱制御された励起チャンバー７３内に置かれる。
【０１１６】
実験では、最初に「Ｒｉｅｎｓｏ（登録商標）希釈ＡまたはＲｉｅＡ」（量Ｆｅ４５００μｇが１５０μｌの水に希釈されている）を励起チャンバーに設置し、ｆＢ１を３００ＭＨｚに設定し、Ｂ０は実効Ｂ０＝１０．７ｍＴでｆＢ０＝２００Ｈｚの正弦波形であった。図６は、信号アナライザ７６上で見ることができる信号を示し、３００ＭＨｚを中心とし、２００Ｈｚの倍数の距離に多数のピーク（側波帯とも呼ばれる）を示している。最も高いピークは、第１のコイルによって容積に印加されたラーモア周波数を表し、他のピークは、供試試料の常磁性ナノ粒子との相互作用によって引き起こされたものである。
【０１１７】
図７は、図６と同じスペクトルを示すが、約（３００ＭＨｚ−１００Ｈｚ）から約（３００ＭＨｚ＋５００Ｈｚ）までの周波数帯域で拡大している。ｎ＝１のｆＢ１＋ｎｆＢ０（矢印で示す）のパワーを測定し、（ＲｉｅＡに存在する）４５００μｇのＦｅの質量に対する基準値とする。上述のように、ｎ＝１のｆＢ１−ｎｆＢ０の電力も使用することができた。
【０１１８】
「ＲｉｅＡ」サンプルを「Ｒｉｅｎｓｏ（登録商標）希釈ＬまたはＲｉｅＬ」サンプル（２．１９７３μｇＦｅを有する）で置き換えた後、測定を繰り返し、図８に示すようなスペクトルが得られた。（図７と図８の水平スケールは同じではないことに留意すべきである）。実験は、異なる希釈度で、他のＲｉｅｎｓｏ（登録商標）サンプルについても繰り返し、その結果は以下の表１に載せられている。
【０１１９】
表からわかるように、各希釈サンプルを３回（見出しの測定値Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩで示されている）測定した。各サンプルについて、第１の上側波帯の電力（スペクトル成分Ｐ１＿ＵＳＢ）を測定（ｄＢｍで）し、その後電圧値に変換した。
【表１】
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表１（実測値）
【０１２０】
次に、表２に示すように、３回の測定の平均値（Ｍで示す）を（対数スケールとリニアスケールの両方で）算出し、そして標準偏差（σで示す）を算出した。Ｒｉｅｎｓｏ（登録商標）サンプルＡの値を基準値（電力＝０．２５１８Ｖｐｐは質量＝４５００μｇＦｅに相当する、を意味する）とした。
【表２】
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表２
【０１２１】
これらの測定では、スペクトル成分Ｐ１＿ＵＳＢの電力のみが（ｎ＝１のｆＢ１＋ｎｆＢ０で）測定されたが、ｎ＝奇数値のｆＢ１±ｎｆＢ０でのスペクトル成分の電力を使用することも可能である。
【０１２２】
例えば、ＲｉｅＢサンプルの量を決定するために、上述の２００Ｈｚと３００ＭＨｚの磁場が再び印加され、合成磁化度の測定が実行され、該磁化度のスペクトルの（ｎ＝１のｆＢ１＋ｎｆＢ０での）電力Ｐ１＿ＵＳＢが決定され、Ｖｐｐ＝０．１２９５の値となり、次にＲｉｅＢサンプル中の鉄の量を決定するために以下の計算：４５００μｇ×（０．１２９５／０．２５１８）＝２３１４．０８４μｇを使用し、これは実際の質量２２５０μｇの良好な近似値である。相対測定誤差は、（２３１４−２２５０）／２２５０＝約２．８％である。他の試料の質量も同じように測定され計算される。（上記の計算は正確さに対して最適化されておらず、本方法の実行可能性を実証するためだけであることに留意すべきである）。
【０１２３】
図１０は、実際のＦｅ含有量およびＲｉｅサンプルＡ〜Ｌに対して本発明の実施形態を使用して測定されたＦｅ含有量をグラフで表したものである。図からわかるように、３桁以上の大きさの比較的大きい範囲（４５００μｇ〜２．１９μｇ）にわたって、結果はかなり正確である。
【０１２４】
高い感度および大きなダイナミックレンジが与えられると、この測定技術は、例えば酸化鉄ナノ粒子を含有する液体を投与した後の患者の器官を画像化するのにも使用できることが意図されている。さらに別の態様では、本発明の実施形態は、上述の方法の少なくとも一部を実行するためのコンピュータ実施方法にも関する。これらの方法は、コンピューティングシステムで実施されてもよい。それらは、ソフトウェアとして、ハードウェアとして、またはそれらの組み合わせとして実施されてもよい。そのような方法は、コンピュータ上で自動化および／または自動化された方法で実行されるように適合されてもよい。ソフトウェアとして実施または部分的に実施する場合、そのようなソフトウェアは、１つ以上のプロセッサに基づいて、適切なコンピュータまたはコンピュータプラットフォーム上で走るように適合されてもよい。ソフトウェアは、例えば、Ｗｉｎｄｏｗｓ、Ｌｉｎｕｘ（登録商標）、または任意の他のオペレーティングシステムなど、任意の適切なオペレーティングシステムで使用するように適合されてもよい。コンピューティング手段は、データ処理のための処理手段またはプロセッサを含んでもよい。いくつかの実施形態によれば、処理手段またはプロセッサは、上記の方法のいずれかに従ってある容積内に閉じ込められた磁性粒子、例えば常磁性粒子の量を決定するように適合されてもよい。プロセッサの他に、コンピューティングシステムは、例えばＲＯＭまたはＲＡＭを含むメモリシステム、例えばＣＤ−ｒｏｍまたはＤＶＤドライブなどの出力システム、またはネットワークを介して情報を出力するための手段をさらに備えてもよい。例えば、キーボード、ディスプレイ、ポインティングデバイス、入力および出力ポートなどのような従来のコンピュータ部品も含まれてもよい。データ伝送は、データバスに基づいて提供されてもよい。コンピューティングシステムのメモリは、コンピューティングシステムで実施されたとき、上記の方法の標準的工程の一部またはすべてを実施させ、または任意選択的に上記の任意の工程を実施させる１セットの命令を含んでもよい。得られた結果は、例えばプロッタ、プリンタ、ディスプレイなどの出力手段を介して、または電子形式の出力データとして出力することができる。
【０１２５】
本発明の実施形態のさらなる態様は、コンピューティングデバイス上で実行するための機械可読コードを担持するキャリア媒体内で実施されるコンピュータプログラム製品、ならびにｄｖｄまたはｃｄ−ｒｏｍまたはメモリ装置などのデータキャリアのようなコンピュータプログラム製品を包含する。実施形態の態様はさらに、例えばローカルネットワークまたはワイドエリアネットワークのようなネットワークを介してコンピュータプログラム製品を送信すること、ならびにそれに対応する送信信号を包含する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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