(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式:
0006639512.tif 000094
により表される、不純物を実質的に含まない化合物またはその塩。
【請求項２】
少なくとも60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%または99.9%純粋である、請求項1記載の化合物。
【請求項３】
少なくとも60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%または99.9%光学的に純粋である、請求項2記載の化合物。
【請求項４】
標識されている、請求項1〜3のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５】
請求項1〜4のいずれか一項記載の化合物、ならびに
対象由来の生体サンプルにおいて検出された該化合物のレベルに基づき対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断および/またはモニタリングするための使用説明書
を含む、キット。
【請求項６】
疾患または障害に関連する1つまたは複数のさらなるバイオマーカーを含む、請求項5記載のキット。
【請求項７】
1つまたは複数のさらなるバイオマーカーが、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)、リノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)、オレイン酸塩、4-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、パントテン酸塩(ビタミンB5)、β-ヒドロキシ酪酸塩(BHBA)およびセリンからなる群より選択される、請求項6記載のキット。
【請求項８】
3-メチル-2-オキソ-酪酸、α-ケトグルタン酸塩、クレアチン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、ロイシン、オレオイルリゾホスファチジルコリン、フェニルアラニン、トリゴネリン、チロシン、バリン、ヒドロ桂皮酸、キサンチン、マンノース、3-メチル-2-オキソ吉草酸塩、グリセロールホスホリルコリン、アドレネート、3-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、2-メチルコハク酸塩、1-オクタデカノール、2-アミノアジピン酸塩、3-ヒドロキシイソ酪酸塩、α-トコフェロール、アルギニン、ベタイン、デカノイルカルニチン、ドコサテトラエン酸、グルタミン酸、リノール酸、リノレン酸、マルガリン酸、N-アセチルグリシン、オクタノイルカルニチン、パルミチン酸塩、パルミトレイン酸、パルミトイルリゾホスファチジルコリン、ステアリン酸塩、トレオニンおよびトリプトファンからなる群より選択される1つまたは複数のさらなるバイオマーカーをさらに含む、請求項5〜7のいずれか一項記載のキット。
【請求項９】
(1) マラバルニワウルシ(Ailanthus triphysa)から式3の化合物:
0006639512.tif 000095
を単離する段階;
(2) 式3の化合物を酸化試薬と反応させて式4の化合物:
0006639512.tif 000096
を生ずる段階;
(3) 式4の化合物を還元試薬と反応させて式5の化合物:
0006639512.tif 000097
を生ずる段階;
(4) 式5の化合物を硫酸と反応させて式(VII)の化合物を生ずる段階
を含む、以下の式:
0006639512.tif 000098
により表される化合物またはその塩を調製する方法。
【請求項１０】
式3の化合物が、マラバルニワウルシの樹脂を有機溶媒で抽出することによって単離される、請求項9記載の方法。
【請求項１１】
有機溶媒がヘキサンである、請求項10記載の方法。
【請求項１２】
酸化試薬がPCCである、請求項9〜11のいずれか一項記載の方法。
【請求項１３】
還元試薬がLiAlH4またはNaBH4である、請求項9〜12のいずれか一項記載の方法。
【請求項１４】
式（VII）の化合物が標識されている、請求項9〜13のいずれか一項記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の参照
本出願は、2015年2月6日付で出願された米国仮特許出願第62/113,113号の、米国特許法第119条(e)の下での、出願日の恩典を主張するものであり、その内容全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
糖尿病は1型(早期発症型)または2型(成人発症型)のいずれかに分類され、糖尿病の症例の90〜95%を2型が占めている。糖尿病は、糖尿病の診断が下されるよりずっと前に個体に影響を与え始める疾患過程の最終段階である。2型糖尿病は、10年から20年かけて発症し、インスリン感受性の障害(インスリン抵抗性)に起因するグルコース利用能(グルコース利用)の不全の結果として生じる。
【０００３】
前糖尿病では、インスリンが、組織がグルコースを代謝するのを助ける効果が低くなる。前糖尿病は、糖尿病の症状が明白になる20年前ほども早期に検出可能でありうる。患者は症状をほとんど示さないが、この段階で長期にわたる生理学的損傷が既に起きていることが研究により示されている。これらの個体のうち最大で60%が10年以内に2型糖尿病に進行する。
【０００４】
米国糖尿病協会(ADA)は、前糖尿病を有する患者を検出する日常的なスクリーニングを推奨している。前糖尿病の現行のスクリーニング方法には、空腹時血漿グルコース(FPG)、経口グルコース負荷試験(OGTT)、ヘモグロビンA1c、空腹時インスリンおよび高インスリン正常血糖クランプ(HIクランプ)が含まれる。最初の3つの方法は臨床で使用されるのに対し、後者の2つの試験は研究では広く使用されるものの臨床での使用は稀である。さらに、空腹時グルコースおよびインスリンレベルを併せて勘案する数学的手段(例えば、HOMA、QUICKI)が提案されている。しかしながら、通常、血漿インスリン濃度は、個体間で、および1日を通して個体内で大きく変動する。さらに、これらの方法ではばらつきが生じ、および検査組織間で方法論が異なり、HIクランプ試験と厳密に相関しない。
【０００５】
世界中で、推定1億9400万人の成人が2型糖尿病を抱えており、この数は、主として西洋化した社会での肥満のまん延のために、2025年までに3億3300万人に増加すると予想されている。米国では、インスリン抵抗性のレベルに応じて、5400万人超の成人が前糖尿病であると推定されている。米国では1年に2型糖尿病の新たな症例がおよそ150万例ある。糖尿病に対する年間の米国医療費は、1740億ドルと見積もられている。この数字は、2002年以来32%超に上昇した。米国のような先進国では、医療費の約25%が血糖管理に対処し、50%が糖尿病に伴う全般的医療に関連し、残りの費用25%が長期合併症、主として心血管疾患を処置するのに回される。医療費の分配ならびにインスリン抵抗性が心血管疾患および糖尿病の進行における直接の原因因子であるという事実を考慮すると、心血管疾患が糖尿病患者に見られる死亡率の70〜80%を占めることは驚くにはあたらない。2型糖尿病を検出および予防することは、医療の重大な優先事項になっている。
【０００６】
糖尿病は、他の疾患もしくは状態の発症につながることもあり、または代謝症候群および心血管疾患のような状態の発症における危険因子である。代謝症候群は、個体における一連の危険因子のクラスタリングである。米国心臓協会によると、これらの危険因子には腹部肥満、グルコースを適切に処理する能力の低下(インスリン抵抗性またはグルコース不耐性)、脂質異常症(高トリグリセリド、高LDL、低HDLコレステロール)、高血圧、血栓形成促進状態(血中の高フィブリノゲンまたはプラスミノゲン活性化因子阻害剤-1)および炎症反応促進状態(血中のC反応性タンパク質の上昇)が含まれる。代謝症候群は、X症候群、インスリン抵抗性症候群、肥満症候群、代謝異常症候群およびリーベン(Reaven's)症候群としても知られている。代謝症候群と診断された患者は、糖尿病、心疾患および血管疾患を発症する危険性が高い。米国では、成人の20% (5000万人超)が代謝症候群を有すると推定される。代謝症候群はどの年齢の人にも影響を与える可能性があるが、発症率は年齢の増加とともに、および非活動的で、かなり太り過ぎである、特に過剰な腹部脂肪を有する個体で増加する。
【０００７】
2型糖尿病は、米国において最も一般的な形態の糖尿病である。米国糖尿病財団によると、米国の糖尿病患者のうち90%超が2型糖尿病を患っている。2型糖尿病を有する個体は、インスリン抵抗性の上昇とインスリン分泌の低下との組み合わせを有し、これらが合併して高血糖症を引き起こす。2型糖尿病を有するほとんどの人は、代謝症候群を有する。
【０００８】
代謝症候群の診断は、個体において3つ以上の危険因子をクラスタ化することに基づくものである。代謝症候群を診断するための広く受け入れられた基準は存在していない。全米コレステロール教育プログラム(NCEP)の成人処置パネルIII (ATP III)により提案されている基準にわずかに変更を加えたものが現在推奨されており、広く使用されている。
【０００９】
米国心臓協会および国立心肺血液研究所は、次の構成要素: 胴囲増加(男性の場合、40インチ(102 cm)以上、女性の場合、35インチ(88 cm)以上); 高トリグリセリド(150 mg/dL以上);低 HDL(「善玉」)コレステロール(男性の場合、40 mg/dL未満、女性の場合、50 mg/dL未満); 高血圧(130/85 mm Hg以上); 高空腹時グルコース(100 mg/dL以上)のうち3つ以上が存在するものとして代謝症候群を特定することを推奨している。
【００１０】
2型糖尿病は緩徐に発症し、別の状態に関してのまたは定期健康診断の一環としての血液検査を受けることにより、2型糖尿病であることを初めて知る人が多い。一部の症例では、2型糖尿病は、眼、腎臓または他の器官に障害が生じるまで検知されない場合もある。代謝症候群または2型糖尿病を発症する危険性がある個体を特定するために、プライマリケア提供者により実施することのできる、客観的な生化学的評価(例えば、臨床検査)が必要とされている。
【００１１】
前糖尿病および糖尿病の有病率が世界的規模で上昇し流行していることから、前糖尿病および糖尿病への病態生理学的な進行機序を反映する、最新の、さらに革新的な分子診断法が必要とされている。それぞれ同様にして、肥満、前糖尿病および糖尿病のほとんどは予防可能であるものの、臨床的疾患に進行するまで無症状であるという性質に起因し、多くの場合、診断未確定となり、または診断が遅れることになる。
【００１２】
それゆえ、2型糖尿病を発症する危険性がある前糖尿病患者を特定し、インスリン抵抗性を有する対象における疾患進行の危険性を判定することができる診断バイオマーカーおよび試験の必要性は満たされていない。インスリン抵抗性バイオマーカーおよび診断試験は、前糖尿病対象における糖尿病発症の危険性をより良好に特定かつ判定することができ、疾患の発症ならびに進行および/または退行をモニターすることができ、新しい治療的処置を開発させることができ、前糖尿病の逆進および/または糖尿病の予防に対する有効性について治療剤を試験するために用いることができる。さらに、前糖尿病および糖尿病の治療候補の有効性および安全性をより効果的に評価するための診断用バイオマーカーが必要とされている。
【発明の概要】
【００１３】
本発明は、新規の化合物(例えば、式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)により表される化合物もしくは化合物Aまたは薬学的に許容されるその塩)およびそれを含む薬学的組成物を提供する。さらに、本発明は、本明細書において記述される化合物(例えば、式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)の化合物もしくは化合物Aまたはその塩もしくは薬学的に許容される塩)がインスリン活性の変化に関連する前糖尿病、糖尿病、インスリン抵抗性または代謝障害の予後診断または診断上の指標としての役割を果たす、診断方法を提供する。
【００１４】
1つの態様において、本発明は、対象由来の生体サンプルにおける、式(IV):
0006639512.tif 000002
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階を含み、化合物のレベルがクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定され、正常対照サンプルにおける化合物のレベルと比較して生体サンプルにおける化合物のレベル上昇が、対象における疾患または障害を示す、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断するための方法を提供する。
【００１５】
1つの態様において、本発明は、対象由来の生体サンプルにおける、式(VI):
0006639512.tif 000003
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階を含み、化合物のレベルがクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定され、正常対照サンプルにおける化合物のレベルと比較して生体サンプルにおける化合物のレベル上昇が、対象における疾患または障害を示す、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断するための方法を提供する。
【００１６】
別の態様において、本発明は、
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(IV):
0006639512.tif 000004
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階；
(2) 第1の時点よりも遅い第2の時点で対象から得られた第2の生体サンプルにおける化合物のレベルを判定する段階
を含み、
化合物のレベルの変化が対象における疾患の進行または退行を示し、化合物のレベルがクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される、
対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害の進行または退行をモニタリングするための方法を提供する。
【００１７】
別の態様において、本発明は、
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(VI):
0006639512.tif 000005
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階；
(2) 第1の時点よりも遅い第2の時点で対象から得られた第2の生体サンプルにおける化合物のレベルを判定する段階
を含み、
化合物のレベルの変化が対象における疾患の進行または退行を示し、化合物のレベルがクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される、
対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害の進行または退行をモニタリングするための方法を提供する。
【００１８】
さらに別の態様において、本発明は、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための治療法の有効性をモニタリングするための方法であって、
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(IV):
0006639512.tif 000006
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階;
(2) インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病に対する治療法で対象を処置する段階;
(3) 処置後の時点で対象から得られた、対象由来の第2の生体サンプルを分析して、化合物のレベルを判定する段階; および
(4) 第1のサンプルにおける化合物のレベルを第2のサンプルにおける化合物のレベルと比較して、インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための処置の有効性を評価する段階
を含み、化合物のレベルが、クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される、該方法を提供する。
【００１９】
さらに別の態様において、本発明は、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための治療法の有効性をモニタリングするための方法であって、
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(VI):
0006639512.tif 000007
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階;
(2) インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病に対する治療法で対象を処置する段階;
(3) 処置後の時点で対象から得られた、対象由来の第2の生体サンプルを分析して、化合物のレベルを判定する段階; および
(4) 第1のサンプルにおける化合物のレベルを第2のサンプルにおける化合物のレベルと比較して、インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための処置の有効性を評価する段階
を含み、化合物のレベルが、クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される、該方法を提供する。
【００２０】
別の態様において、本発明は、正常対照の対象と比較して、以下の式:
0006639512.tif 000008
により表される化合物またはその塩のレベル上昇を有する対象に、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法を提供する。
【００２１】
さらに別の態様において、本発明は、正常対照の対象と比較して、以下の式:
0006639512.tif 000009
により表される化合物またはその塩のレベル上昇を有する対象に、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法を提供する。
【００２２】
本発明は同様に、
(1) クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、または他の免疫化学的方法により対象由来の生体サンプルにおいて、以下の式:
0006639512.tif 000010
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階; および
(2)正常対照サンプルにおける化合物のレベルと比較して対象が化合物のレベル上昇を有する場合に、対象に疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階
を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法を提供する。
【００２３】
本発明は同様に、
(1) クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、または他の免疫化学的方法により対象由来の生体サンプルにおいて、以下の式:
0006639512.tif 000011
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階; および
(2)正常対照サンプルにおける化合物のレベルと比較して対象が化合物のレベル上昇を有する場合に、対象に疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階
を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法を提供する。
【００２４】
1つの態様において、本発明は、不純物を実質的に含まない、以下の式:
0006639512.tif 000012
により表される化合物またはその塩を対象とする。
【００２５】
さらに別の態様において、本発明は、不純物を実質的に含まない、以下：
0006639512.tif 000013
により表される化合物またはその塩を対象とする。
【００２６】
さらに別の態様において、本発明は、以下の式:
0006639512.tif 000014
により表される化合物またはその塩を提供する。
【００２７】
本発明は同様に、本発明の少なくとも1つの化合物ならびに対象由来の生体サンプルにおいて検出された化合物のレベルに基づき対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断および/またはモニタリングするための使用説明書を含むキットを提供する。
【００２８】
本発明の化合物を調製する方法も提供される。
【００２９】
1つの態様において、本発明は、式(I):
0006639512.tif 000015
による化合物またはその塩(例えば、薬学的に許容される塩)を提供し、式中:
環A、BおよびCは、ハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、-OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルからなる群より選択される1つもしくは複数の置換基で置換されてもよく;
Z1は、-OH、-ORa、-OSO3H、-OPO(OH)2、-OC(=O)Rb、-OC(=O)NRcRdもしくは=Oであり;
R1は、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
R2は、H、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
R3は、H、-C(=O)Rb、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
またはOR3はR2と一緒になって、=O、(C1〜C6)アルキル、-OHもしくは-ORaで置換されてもよい3〜9員環を形成し;
Raは、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
Rbは、Hもしくは(C1〜C6)アルキルであり;
RcおよびRdは、各々独立してHもしくは(C1〜C6)アルキルであり; ならびに
Re、Rf、RgおよびRhは、各々独立してHもしくは(C1〜C6)アルキルであり;
式中、上記の(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニル基の各々が、ハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、-OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、ハロ(C1〜C6)アルキルおよびヒドロキシル(C1〜C6)アルキルからなる群より独立して選択される1〜5個の置換基で置換されてもよい。
【００３０】
本発明の別の態様は、薬学的に許容される担体または希釈剤および構造式(I)により表される化合物または薬学的に許容されるその塩を含む薬学的組成物である。
【００３１】
本発明の別の態様は、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を診断する方法である。本方法は、対象由来の生体サンプルにおける式(I)、(II)または(III)の化合物のレベルを判定する段階; および生体サンプルにおける化合物のレベルを、正常対照サンプルにおける化合物のレベルと比較する段階を含み、生体サンプルにおける化合物のレベル変化が対象における疾患または障害を示す。
【００３２】
本発明の別の態様は、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病より選択される疾患または障害の進行または退行をモニタリングするための方法である。本方法は、対象から第1の時点で得られた第1の生体サンプルにおける式(I)、(II)または(III)の化合物のレベルを判定する段階; 第1の時点よりも遅い第2の時点で対象から得られた第2の生体サンプルにおける化合物のレベルを判定する段階; および第2の生体サンプルにおける化合物のレベルを、第1の生体サンプルにおける化合物のレベルと比較する段階を含み、化合物のレベルの変化が対象における疾患または障害の進行または退行を示す。
【００３３】
本発明の別の態様は、対象におけるインスリン抵抗性処置、代謝障害処置、糖尿病処置または前糖尿病処置の有効性をモニタリングする方法であって、対象由来の生体サンプルにおける式(I)、(II)または(III)の化合物のレベルを判定する段階; インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病について対象を処置する段階; 処置後の第2の時点で対象から得られた、対象由来の第2の生体サンプルを分析して、式(I)、(II)または(III)の化合物のレベルを判定する段階; および第1のサンプルにおける式(I)、(II)または(III)の化合物のレベルを第2のサンプルにおける式(I)、(II)または(III)の化合物のレベルと比較して、インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための処置の有効性を評価する段階を含む、該方法である。
[本発明1001]
対象由来の生体サンプルにおける、式(IV):
0006639512.tif 000016
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階
を含み、
該化合物のレベルがクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定され、正常対照サンプルにおける該化合物のレベルと比較して生体サンプルにおける該化合物のレベル上昇が、対象における疾患または障害を示す、
対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断するための方法。
[本発明1002]
対象由来の生体サンプルにおける、式(VI):
0006639512.tif 000017
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階
を含み、
該化合物のレベルがクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定され、正常対照サンプルにおける該化合物のレベルと比較して生体サンプルにおける該化合物のレベル上昇が、対象における疾患または障害を示す、
対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断するための方法。
[本発明1003]
正常対照サンプルにおける化合物のレベルと比較して生体サンプルにおいて化合物のレベル上昇が存在する場合に、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法で対象を処置する段階をさらに含む、本発明1001または1002の方法。
[本発明1004]
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(IV):
0006639512.tif 000018
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階；
(2) 第1の時点よりも遅い第2の時点で対象から得られた第2の生体サンプルにおける該化合物のレベルを判定する段階
を含み、
該化合物のレベルの変化が対象における疾患の進行または退行を示し、該化合物のレベルがクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される、
対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害の進行または退行をモニタリングするための方法。
[本発明1005]
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(VI):
0006639512.tif 000019
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階；
(2) 第1の時点よりも遅い第2の時点で対象から得られた第2の生体サンプルにおける該化合物のレベルを判定する段階
を含み、
該化合物のレベルの変化が対象における疾患の進行または退行を示し、該化合物のレベルがクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される、
対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害の進行または退行をモニタリングするための方法。
[本発明1006]
化合物のレベルの増加が、疾患の進行を示す、本発明1004または1005の方法。
[本発明1007]
疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法で対象を処置する段階をさらに含む、本発明1004、1005または1006の方法。
[本発明1008]
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(IV):
0006639512.tif 000020
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階;
(2) インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病に対する治療法で対象を処置する段階;
(3) 処置後の時点で対象から得られた、対象由来の第2の生体サンプルを分析して、該化合物のレベルを判定する段階; および
(4) 第1のサンプルにおける該化合物のレベルを第2のサンプルにおける該化合物のレベルと比較して、インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための処置の有効性を評価する段階
を含み、
該化合物のレベルが、クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される、
対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための治療法の有効性をモニタリングするための方法。
[本発明1009]
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(VI):
0006639512.tif 000021
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階;
(2) インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病に対する治療法で対象を処置する段階;
(3) 処置後の時点で対象から得られた、対象由来の第2の生体サンプルを分析して、該化合物のレベルを判定する段階; および
(4) 第1のサンプルにおける該化合物のレベルを第2のサンプルにおける該化合物のレベルと比較して、インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための処置の有効性を評価する段階
を含み、
該化合物のレベルが、クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される、
対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための治療法の有効性をモニタリングするための方法。
[本発明1010]
第1のサンプルと比較して第2のサンプルにおける化合物のレベルの減少は、用いられる治療法が対象を処置するのに有効であることを示す、本発明1008または1009の方法。
[本発明1011]
対象を処置する段階が、疾患または障害を処置するのに適した治療剤の有効量を対象に投与することを含む、本発明1003および1007〜1010のいずれかの方法。
[本発明1012]
治療剤が抗糖尿病薬または抗肥満薬である、本発明1011の方法。
[本発明1013]
治療剤が、メトホルミン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、アカルボース、テトラヒドロリプスタチン、フェンテルミン/トピラメート、ブプロピオン/ナルトレキソン、ロルカセリン、リラグルチド、およびカナグリフロジンを含む群より選択される、本発明1011の方法。
[本発明1014]
対象を処置する段階が、対象の生活様式の改変を含む、本発明1003および1007〜1010のいずれかの方法。
[本発明1015]
生活様式の改変が食事の改変および/または活動もしくは運動の増加を含む、本発明1014の方法。
[本発明1016]
化合物のレベルがタンデム液体クロマトグラフィー - 質量分析(LC-MS/MS)によって判定される、本発明1001〜1015のいずれかの方法。
[本発明1017]
生体サンプルを分析して、疾患または障害に関連する1つまたは複数のさらなるバイオマーカーのレベルを判定する段階をさらに含む、本発明1001〜1016のいずれかの方法。
[本発明1018]
1つまたは複数のさらなるバイオマーカーが、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)、リノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)、オレイン酸塩、4-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、パントテン酸塩 (ビタミンB5)、β-ヒドロキシ酪酸塩(BHBA)およびセリンからなる群より選択される、本発明1017の方法。
[本発明1019]
生体サンプルを分析して、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)およびリノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)のレベルを判定する段階をさらに含む、本発明1018の方法。
[本発明1020]
生体サンプルを分析して、3-メチル-2-オキソ-酪酸、α-ケトグルタン酸塩、クレアチン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、ロイシン、オレオイルリゾホスファチジルコリン、フェニルアラニン、トリゴネリン、チロシン、バリン、ヒドロ桂皮酸、キサンチン、マンノース、3-メチル-2-オキソ吉草酸塩、グリセロールホスホリルコリン、アドレネート、3-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、2-メチルコハク酸塩、1-オクタデカノール、2-アミノアジピン酸塩、3-ヒドロキシイソ酪酸塩、α-トコフェロール、アルギニン、ベタイン、デカノイルカルニチン、ドコサテトラエン酸、グルタミン酸、リノール酸、リノレン酸、マルガリン酸、N-アセチルグリシン、オクタノイルカルニチン、パルミチン酸塩、パルミトレイン酸、パルミトイルリゾホスファチジルコリン、ステアリン酸塩、トレオニンおよびトリプトファンからなる群より選択される1つまたは複数のさらなるバイオマーカーのレベルを判定する段階をさらに含む、本発明1017〜1019のいずれかの方法。
[本発明1021]
年齢、性別、家族歴、体型指数(BMI)、胴囲、体重、空腹時グルコース、空腹時インスリン、プロインスリン、C-ペプチド、C-反応性タンパク質、ヘモグロビンA1c (HbA1c、A1c)、LDL-C、HDL-C、遊離脂肪酸(FFA)、1,5-Ag (Glycomark)、トリグリセリド、ペプチドYYおよびグルコース処理速度(Rd, M)より選択される他の臨床的および人口学的パラメータを判定する段階をさらに含む、本発明1001〜1020のいずれかの方法。
[本発明1022]
生体サンプルを分析して、空腹時グルコースレベルを判定する段階をさらに含む、本発明1001〜1020のいずれかの方法。
[本発明1023]
生体サンプルが血液、血漿、血清または尿である、本発明1001〜1022のいずれかの方法。
[本発明1024]
生体サンプルが血漿である、本発明1023の方法。
[本発明1025]
正常対照の対象と比較して、以下の式:
0006639512.tif 000022
により表される化合物またはその塩のレベル上昇を有する対象に、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法。
[本発明1026]
正常対照の対象と比較して、以下の式:
0006639512.tif 000023
により表される化合物またはその塩のレベル上昇を有する対象に、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法。
[本発明1027]
化合物のレベルが、対象から生体サンプルを得ることによって、およびクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合または他の免疫化学的方法により該化合物のレベルを判定することによって判定される、本発明1025または1026の方法。
[本発明1028]
(1) クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、または他の免疫化学的方法により対象由来の生体サンプルにおいて、以下の式:
0006639512.tif 000024
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階; および
(2)正常対照サンプルにおける該化合物のレベルと比較して対象が該化合物のレベル上昇を有する場合に、対象に疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階
を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法。
[本発明1029]
(1) クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、または他の免疫化学的方法により対象由来の生体サンプルにおいて、以下の式:
0006639512.tif 000025
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階; および
(2)正常対照サンプルにおける該化合物のレベルと比較して対象が該化合物のレベル上昇を有する場合に、対象に疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階
を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法。
[本発明1030]
生体サンプルが血液、血漿、血清または尿である、本発明1027、1028または1029の方法。
[本発明1031]
生体サンプルが血漿である、本発明1030の方法。
[本発明1032]
対象を処置する段階が、疾患または障害を処置するのに適した治療剤の有効量を対象に投与することを含む、本発明1025〜1031のいずれかの方法。
[本発明1033]
治療剤が抗糖尿病薬または抗肥満薬である、本発明1032の方法。
[本発明1034]
治療剤が、メトホルミン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、アカルボース、テトラヒドロリプスタチン、フェンテルミン/トピラメート、ブプロピオン/ナルトレキソン、ロルカセリン、リラグルチド、およびカナグリフロジンを含む群より選択される、本発明1032の方法。
[本発明1035]
対象を処置する段階が、対象の生活様式の改変を含む、本発明1025〜1031のいずれかの方法。
[本発明1036]
生活様式の改変が食事の改変および/または活動の増加を含む、本発明1035の方法。
[本発明1037]
化合物のレベルがタンデム液体クロマトグラフィー - 質量分析(LC-MS/MS)によって判定される、本発明1025〜1036のいずれかの方法。
[本発明1038]
生体サンプルを分析して、疾患または障害に関連する1つまたは複数のさらなるバイオマーカーのレベルを判定する段階をさらに含む、本発明1025〜1037のいずれかの方法。
[本発明1039]
1つまたは複数のさらなるバイオマーカーが、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)、リノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)、オレイン酸塩、4-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、パントテン酸塩 (ビタミンB5)、β-ヒドロキシ酪酸塩(BHBA)およびセリンからなる群より選択される、本発明1038の方法。
[本発明1040]
生体サンプルを分析して、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)およびリノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)のレベルを判定する段階をさらに含む、本発明1039の方法。
[本発明1041]
生体サンプルを分析して、3-メチル-2-オキソ-酪酸、α-ケトグルタン酸塩、クレアチン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、ロイシン、オレオイルリゾホスファチジルコリン、フェニルアラニン、トリゴネリン、チロシン、バリン、ヒドロ桂皮酸、キサンチン、マンノース、3-メチル-2-オキソ吉草酸塩、グリセロールホスホリルコリン、アドレネート、3-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、2-メチルコハク酸塩、1-オクタデカノール、2-アミノアジピン酸塩、3-ヒドロキシイソ酪酸塩、α-トコフェロール、アルギニン、ベタイン、デカノイルカルニチン、ドコサテトラエン酸、グルタミン酸、リノール酸、リノレン酸、マルガリン酸、N-アセチルグリシン、オクタノイルカルニチン、パルミチン酸塩、パルミトレイン酸、パルミトイルリゾホスファチジルコリン、ステアリン酸塩、トレオニンおよびトリプトファンからなる群より選択される1つまたは複数のさらなるバイオマーカーのレベルを判定する段階をさらに含む、本発明1038〜1040のいずれかの方法。
[本発明1042]
年齢、性別、家族歴、体型指数(BMI)、胴囲、体重、空腹時グルコース、空腹時インスリン、プロインスリン、C-ペプチド、C-反応性タンパク質、ヘモグロビンA1c (HbA1c、A1c)、LDL-C、HDL-C、遊離脂肪酸(FFA)、1,5-Ag (Glycomark)、トリグリセリド、ペプチドYYおよびグルコース処理速度(Rd, M)より選択される他の臨床的および人口学的パラメータを判定する段階をさらに含む、本発明1025〜1041のいずれかの方法。
[本発明1043]
生体サンプルを分析して、空腹時グルコースレベルを判定する段階をさらに含む、本発明1025〜1041のいずれかの方法。
[本発明1044]
疾患または障害が2型糖尿病である、本発明1001〜1043のいずれかの方法。
[本発明1045]
疾患または障害が前糖尿病である、本発明1001〜1043のいずれかの方法。
[本発明1046]
前糖尿病が、単独の空腹時グルコース障害(IFG)、単独のグルコース耐性障害(IGT)、IFGおよびIGTの組み合わせ、高ヘモグロビンA1Cレベル、またはそれらの組み合わせで特徴付けられる、本発明1045の方法。
[本発明1047]
前糖尿病が5.7%〜6.4%のヘモグロビンA1Cレベルで特徴付けられる、本発明1046の方法。
[本発明1048]
少なくとも60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%または99.9%純粋である、以下の式:
0006639512.tif 000026
により表される化合物またはその塩。
[本発明1049]
以下の式:
0006639512.tif 000027
またはその塩により表される、本発明1048の化合物。
[本発明1050]
少なくとも60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%または99.9%光学的に純粋である、本発明1049の化合物。
[本発明1051]
不純物を実質的に含まない、以下の式:
0006639512.tif 000028
により表される化合物またはその塩。
[本発明1052]
少なくとも60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%または99.9%純粋である、本発明1051の化合物。
[本発明1053]
少なくとも60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%または99.9%光学的に純粋である、本発明1051の化合物。
[本発明1054]
以下の式:
0006639512.tif 000029
により表される化合物またはその塩。
[本発明1055]
不純物を実質的に含まない、本発明1054の化合物。
[本発明1056]
少なくとも60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%または99.9%純粋である、本発明1054の化合物。
[本発明1057]
少なくとも60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%または99.9%光学的に純粋である、本発明1056の化合物。
[本発明1058]
放射性標識されている、本発明1048〜1057のいずれかの化合物。
[本発明1059]
本発明1048〜1058のいずれかの化合物、ならびに
対象由来の生体サンプルにおいて検出された該化合物のレベルに基づき対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断および/またはモニタリングするための使用説明書
を含む、キット。
[本発明1060]
本発明1054〜1058のいずれかの化合物、ならびに
対象由来の生体サンプルにおいて検出された、以下の式:
0006639512.tif 000030
により表される化合物またはその塩のレベルに基づき対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断および/またはモニタリングするための使用説明書
を含む、キット。
[本発明1061]
本発明1054〜1058のいずれかの化合物、ならびに
対象由来の生体サンプルにおいて検出された、以下の式:
0006639512.tif 000031
により表される化合物またはその塩のレベルに基づき対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断および/またはモニタリングするための使用説明書
を含む、キット。
[本発明1062]
本発明1054〜1058のいずれかの化合物が放射性標識されている、本発明1060または1061のキット。
[本発明1063]
疾患または障害に関連する1つまたは複数のさらなるバイオマーカーを含む、本発明1059〜1062のいずれかのキット。
[本発明1064]
1つまたは複数のさらなるバイオマーカーが、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)、リノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)、オレイン酸塩、4-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、パントテン酸塩(ビタミンB5)、β-ヒドロキシ酪酸塩(BHBA)およびセリンからなる群より選択される、本発明1063のキット。
[本発明1065]
さらなるバイオマーカーとして2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)およびリノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)をさらに含む、本発明1064のキット。
[本発明1066]
3-メチル-2-オキソ-酪酸、α-ケトグルタン酸塩、クレアチン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、ロイシン、オレオイルリゾホスファチジルコリン、フェニルアラニン、トリゴネリン、チロシン、バリン、ヒドロ桂皮酸、キサンチン、マンノース、3-メチル-2-オキソ吉草酸塩、グリセロールホスホリルコリン、アドレネート、3-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、2-メチルコハク酸塩、1-オクタデカノール、2-アミノアジピン酸塩、3-ヒドロキシイソ酪酸塩、α-トコフェロール、アルギニン、ベタイン、デカノイルカルニチン、ドコサテトラエン酸、グルタミン酸、リノール酸、リノレン酸、マルガリン酸、N-アセチルグリシン、オクタノイルカルニチン、パルミチン酸塩、パルミトレイン酸、パルミトイルリゾホスファチジルコリン、ステアリン酸塩、トレオニンおよびトリプトファンからなる群より選択される1つまたは複数のさらなるバイオマーカーをさらに含む、本発明1059〜1065のいずれかのキット。
[本発明1067]
以下の式:
0006639512.tif 000032
により表される化合物またはその塩に結合する、抗体または抗体断片。
[本発明1068]
以下の式:
0006639512.tif 000033
により表される化合物またはその塩に結合する、抗体または抗体断片。
[本発明1069]
本発明1067または1068の抗体のVH配列およびVL配列を含む、ポリペプチド。
[本発明1070]
融合タンパク質である、本発明1069のポリペプチド。
[本発明1071]
本発明1067もしくは1068の抗体もしくは抗体断片または本発明1069もしくは1070のポリペプチドを産生する、細胞。
[本発明1072]
(1) 本発明1071の細胞を培養する段階; および
(2) 該培養細胞から抗体もしくはその抗原結合断片、またはポリペプチドを単離する段階
を含む、本発明1067もしくは1068の抗体もしくはその抗原結合断片または本発明1069もしくは1070のポリペプチドを産生する方法。
[本発明1073]
細胞が真核細胞である、本発明1072の方法。
[本発明1074]
以下の式:
0006639512.tif 000034
により表される化合物またはその塩を調製する方法であって、ヒト血漿から該化合物を単離する段階を含む、方法。
[本発明1075]
以下の式:
0006639512.tif 000035
により表される化合物またはその塩を調製する方法であって、ヒト血漿から該化合物を単離する段階を含む、方法。
[本発明1076]
(1) 有機溶媒をヒト血漿に添加して沈殿物を生ずる段階; ならびに
(2) 沈殿物を除去し、かつ前記化合物を含む得られた溶液を回収する段階
を含む、本発明1074または1075の方法。
[本発明1077]
段階(1)における有機溶媒がメタノールである、本発明1076の方法。
[本発明1078]
段階(1)後の血漿溶液を遠心分離し、ろ過して沈殿物を除去する、本発明1076または1077の方法。
[本発明1079]
酸を添加して第1の溶液を得ることにより段階(2)で得られた溶液を酸性化する段階をさらに含む、本発明1076〜1078のいずれかの方法。
[本発明1080]
第1の溶液を陰イオン交換クロマトグラフィーに供し、得られた溶出液を回収する、本発明1079の方法。
[本発明1081]
得られた溶出液中の溶媒を除去して、前記化合物を含む第1の精製混合物を得る、本発明1080の方法。
[本発明1082]
第1の精製混合物を、非極性有機溶媒による溶媒抽出によりさらに精製して、前記化合物を含む第2の精製混合物を得る、本発明1081の方法。
[本発明1083]
第1の精製混合物をメタノールに溶解し; 得られたメタノール溶液をシクロヘキサンで抽出し; かつ第2の精製混合物を含むメタノール層を回収する、本発明1081の方法。
[本発明1084]
第2の精製混合物を溶媒抽出によりさらに精製して、前記化合物を含む第3の精製混合物を得る、本発明1082または1083の方法。
[本発明1085]
第2の精製混合物を1-ブタノールに溶解し; 得られた溶液を水で抽出し; かつ第3の精製混合物を含む有機層を回収する、本発明1084の方法。
[本発明1086]
第3の精製混合物を溶媒抽出によりさらに精製して、前記化合物を含む第4の精製混合物を得る、本発明1084または1085の方法。
[本発明1087]
第3の精製混合物を水に溶解し; この水溶液を酢酸エチルで抽出し; かつ第4の精製混合物を含む水層を回収する、本発明1086の方法。
[本発明1088]
第4の精製混合物をシリカカラムクロマトグラフィーによりさらに精製する、本発明1086または1087の方法。
[本発明1089]
シリカカラムがC18逆相シリカカラムである、本発明1088の方法。
[本発明1090]
(1) マラバルニワウルシ(Ailanthus triphysa)から式3の化合物:
0006639512.tif 000036
を単離する段階;
(2) 式3の化合物を酸化試薬と反応させて式4の化合物:
0006639512.tif 000037
を生ずる段階;
(3) 式4の化合物を還元試薬と反応させて式5の化合物:
0006639512.tif 000038
を生ずる段階;
(4) 式5の化合物を硫酸と反応させて式(VII)の化合物を生ずる段階
を含む、以下の式:
0006639512.tif 000039
により表される化合物またはその塩を調製する方法。
[本発明1091]
式3の化合物が、マラバルニワウルシの樹脂を有機溶媒で抽出することによって単離される、本発明1090の方法。
[本発明1092]
有機溶媒がヘキサンである、本発明1091の方法。
[本発明1093]
酸化試薬がPCCである、本発明1090〜1092のいずれかの方法。
[本発明1094]
還元試薬がLiAlH4またはNaBH4である、本発明1090〜1093のいずれかの方法。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】正常(NFG/NGT)対象および高血糖対象(IFG/NGT、NFG/IGT、IFG/IGTおよびT2D)由来のサンプルにおいて測定されたX12063および3-ヒドロキシ酪酸の血漿レベルの例を提供する。NFG/NGTは正常空腹時グルコースおよび正常グルコース耐性を示し; IFG/NGTは空腹時グルコース障害および正常グルコース耐性を示し; NFG/IGTは正常空腹時グルコースおよびグルコース耐性障害を示し; IFG/IGTは空腹時グルコース障害およびグルコース耐性障害を示し; ならびにT2Dは2型糖尿病を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
発明の詳細な説明
定義
別段の指定がない限り、本明細書において用いられる以下の用語は、以下のように定義される。
【００３６】
以下で定義する基(group)、基(radical)または部分において、炭素原子の数は、基の前に示されることが多い。例えば、(C1〜C6)アルキルは、1〜6個の炭素原子を有するアルキル基(group)または基(radical)を意味する。一般に、2つ以上の部分基を含む基について、最後に命名される部分基は基(radical)の付着点である。例えば、置換基「アリール(C1〜C3)アルキル」は、(C1〜C3)アルキル基に結合しているアリール基を意味し、その後者は、置換基が付着しているコアまたは基に結合している。
【００３７】
「アルキル」は、指定された数の炭素原子を有する飽和脂肪族分枝鎖または直鎖の一価炭化水素基(radical)を意味する。例えば、「(C1〜C6)アルキル」は、直鎖状または分枝状の配置で1〜6個の炭素原子を有する基を意味する。「(C1〜C6)アルキル」は、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、およびヘキシルを含む。
【００３８】
「アルケニル」は、少なくとも1つの二重結合を含有し、指定された数の炭素原子を有した分枝鎖または直鎖の一価炭化水素基(radical)を意味する。アルケニルは、一価または多価不飽和であってもよく、EまたはZ立体配置で存在してもよい。例えば、「(C2〜C6)アルケニル」は、直鎖状または分枝状の配置で2〜6個の炭素原子を有する基(radical)を意味する。
【００３９】
「アルキニル」は、少なくとも1つの三重結合を含有し、指定された数の炭素原子を有した分枝鎖または直鎖の一価炭化水素基(radical)を意味する。例えば、「(C2〜C6)アルキニル」は、直鎖状または分枝状の配置で2〜6個の炭素原子を有する基(radical)を意味する。
【００４０】
「シクロアルキル」は、指定された数の炭素原子を有する飽和脂肪族環状炭化水素基(radical)を意味する。これは単環式、二環式、多環式(例えば、三環式)であっても、縮合されても、架橋されても、またはスピロであってもよい。例えば、単環式(C3〜C8)シクロアルキルは、単環式環に配置された3〜8個の炭素原子を有する基(radical)を意味する。単環式(C3〜C8)シクロアルキルは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクタンを含むが、これらに限定されることはない。
【００４１】
単環式環系は、単環構造を有する。それらには、指定された数の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和脂肪族環状炭化水素環または芳香族炭化水素環が含まれる。単環式環系は環構造中に1〜3個のヘテロ原子を任意で含有していてもよく、各ヘテロ原子はO、NおよびSからなる群より独立して選択される。ヘテロ原子が他の環原子に単結合のみによって連結された環窒素原子である場合、それは置換されることができる。例示的な置換基は、別段の指示がない限り、-H、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル(好ましくは、-H、(C1〜C6)アルキル、ハロ(C1〜C6)アルキルまたは(C1〜C3)アルキルカルボニル)を含み、これらの各々がハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルキル、アルキルなどで置換されてもよい。ヘテロ原子がSである場合、それは任意で一酸素または二酸素添加されていてもよい(すなわち-S(O)-または-S(O)2-)。単環式環系の例としては、単環式シクロアルキル(例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクタン)、部分的に不飽和のシクロアルキル; 単環式ヘテロシクロアルキル(例えば、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、ヘキサヒドロピリミジン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、オキセパン、テトラヒドロチオフェン、テトラヒドロチオピラン、イソオキサゾリジン、1,3-ジオキソラン、1,3-ジチオラン、1,3-ジオキサン、1,4-ジオキサン、1,3-ジチアン、1,4-ジチアン、モルホリン、チオモルホリン、チオモルホリン1,1-ジオキシド、テトラヒドロ-2H-1,2-チアジン、テトラヒドロ-2H-1,2-チアジン1,1-ジオキシド、およびイソチアゾリジン1,1-ジオキシド、テトラヒドロチオフェン1-オキシド、テトラヒドロチオフェン1,1-ジオキシド、チオモルホリン1-オキシド、チオモルホリン1,1-ジオキシド、テトラヒドロ-2H-1,2-チアジン1,1-ジオキシド、およびイソチアゾリジン1,1-ジオキシド、ピロリジン-2-オン、ピペリジン-2-オン、ピペラジン-2-オン、およびモルホリン-2-オン); 単環式アリール(例えば、フェニル)および単環式ヘテロアリール(以下の説明を参照のこと)が挙げられるが、これらに限定されることはない。
【００４２】
二環式環系は、少なくとも1つの環原子を共有する2つの環を有する。二環式環系は、縮合、架橋およびスピロ環系を含む。2つの環は、ともに脂肪族(例えば、シクロアルキルもしくはシクロヘテロアルキル)であることができ、ともに芳香族(例えば、アリールもしくはヘテロアリール)、またはそれらの組み合わせであることができる。二環式環系は環構造中に1〜3個のヘテロ原子を任意で含有していてもよく、各ヘテロ原子はO、NおよびSからなる群より独立して選択される。ヘテロ原子が他の環原子に単結合のみによって連結された環窒素原子である場合、それは置換されることができる。例示的な置換基は、別段の指示がない限り、H、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル(好ましくは、-H、(C1〜C6)アルキル、ハロ(C1〜C6)アルキルまたは(C1〜C3)アルキルカルボニル)を含み、これらの各々がハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルキル、アルキルなどで置換されてもよい。ヘテロ原子がSである場合、それは任意で一酸素または二酸素添加されていてもよい(すなわち-S(O)-または-S(O)2-)。
【００４３】
縮合二環式環系は、2つの隣接する環原子を共有する2つの環を有する。2つの環は、ともに脂肪族(例えば、シクロアルキルもしくはシクロヘテロアルキル)であることができ、ともに芳香族(例えば、アリールもしくはヘテロアリール)、またはそれらの組み合わせであることができる。例えば、第1の環は単環式シクロアルキルまたは単環式シクロヘテロアルキルであることができ、第2の環はシクロアルキル、部分不飽和炭素環、アリール、ヘテロアリールまたは単環式シクロヘテロアルキルであることができる。例えば、第2の環は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルのような、(C3〜C6)シクロアルキルであることができる。あるいは、第2の環はアリール環、例えばフェニルであることができる。縮合二環式環系の例としては、6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン、2,3-ジヒドロ-1H-インデン、オクタヒドロ-1H-インデン、テトラヒドロナフタレン、デカヒドロナフタレン、インドリン、イソインドリン、2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール、2,3-ジヒドロベンゾ[d]オキサゾール、2,3-ジヒドロベンゾ[d]チアゾール、オクタヒドロベンゾ[d]オキサゾール、オクタヒドロ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール、オクタヒドロベンゾ[d]チアゾール、オクタヒドロシクロペンタ[c]ピロール、3-アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン、3-アザビシクロ[3.2.0]ヘプタン、5,6,7,8-テトラヒドロキノリンおよび5,6,7,8-テトラヒドロイソキノリンならびに2,3,4,5-テトラヒドロベンゾ[b]オキセピンが挙げられるが、これらに限定されることはない。
【００４４】
スピロ二環式環系は、1つの環原子のみを共有する2つの環を有する。2つの環は、ともに脂肪族(例えば、シクロアルキルまたはシクロヘテロアルキル)であることができる。例えば、第1の環は単環式シクロアルキルまたは単環式シクロヘテロアルキルであることができ、第2の環はシクロアルキル、部分不飽和炭素環または単環式シクロヘテロアルキルであることができる。スピロ(spiral)二環式環系の例としては、スピロ[2.2]ペンタン、スピロ[2.3]ヘキサン、スピロ[3.3]ヘプタン、スピロ[2.4]ヘプタン、スピロ[3.4]オクタン、スピロ[2.5]オクタン、アザスピロ[4.4]ノナン、7-アザスピロ[4.4]ノナン、アザスピロ[4.5]デカン、8-アザスピロ[4.5]デカン、アザスピロ[5.5]ウンデカン、3-アザスピロ[5.5]ウンデカンおよび3,9-ジアザスピロ[5.5]ウンデカンが挙げられるが、これらに限定されることはない。
【００４５】
架橋二環式環系は、3つ以上の隣接する環原子を共有する2つの環を有する。例えば、第1の環は単環式シクロアルキルまたは単環式シクロヘテロアルキルであることができ、他の環はシクロアルキル、部分不飽和炭素環または単環式シクロヘテロアルキルである。架橋二環式環系の例としては、ビシクロ[1.1.0]ブタン、ビシクロ[1.2.0]ペンタン、ビシクロ[2.2.0]ヘキサン、ビシクロ[3.2.0]ヘプタン、ビシクロ[3.3.0]オクタン、ビシクロ[4.2.0]オクタン、ビシクロ[2.2.1]ヘプタン、ビシクロ[2.2.2]オクタン、ビシクロ[3.2.1]オクタン、ビシクロ[3.2.2]ノナン、ビシクロ[3.3.1]ノナン、ビシクロ[3.3.2]デカン ビシクロ[3.3.3]ウンデカン、アザビシクロ[3.3.1]ノナン、3-アザビシクロ[3.3.1]ノナン、アザビシクロ[3.2.1]オクタン、3-アザビシクロ[3.2.1 ]オクタン、6-アザビシクロ[3.2.1]オクタンおよびアザビシクロ[2.2.2]オクタン、2-アザビシクロ[2.2.2]オクタンおよび2-オキサビシクロ[2.2.2]オクタンが挙げられるが、これらに限定されることはない。
【００４６】
多環式環系は、3つ以上の環(例えば、三環式環系を生じる3つの環)および少なくとも1つの環原子を共有する隣接環を有する。多環式環系は、縮合、架橋およびスピロ環系を含む。縮合多環式環系は、2つの隣接する環原子を共有する少なくとも2つの環を有する。スピロ多環式環系は、1つの環原子のみを共有する少なくとも2つの環を有する。架橋多環式環系は、3つ以上の隣接する環原子を共有する少なくとも2つの環を有する。多環式環系の例としては、トリシクロ[3.3.1.03,7]ノナン(ノルアダマンタン)およびトリシクロo[3.3.1.13,7]デカン(アダマンタン)ならびに2,3-ジヒドロ-1H-フェナレンが挙げられるが、これらに限定されることはない。
【００４７】
「ヘテロ環」は、N、OまたはSから独立して選択される1つまたは複数のヘテロ原子を含有する飽和、不飽和、または芳香族単環式または多環式環系を意味する。ヘテロ原子がNである場合、別段の指示がない限り、それは置換されることができる。例示的な置換基は、H、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル(好ましくは、-H、(C1〜C6)アルキル、ハロ(C1〜C6)アルキルまたは(C1〜C3)アルキルカルボニル)を含み、これらの各々がハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルキル、アルキルなどで置換されてもよい。ヘテロ原子がSである場合、別段の指示がない限り、それは任意で一酸素または二酸素添加されていてもよい(すなわち-S(O)-または-S(O)2-)。ヘテロ環は、ヘテロアリール環またはヘテロシクロアルキル環であることができる。
【００４８】
「シクロヘテロアルキル」または「ヘテロシクロアルキル」は、指定された数の環炭素原子を有する飽和または部分飽和4〜12員環基(radical)を意味する。シクロヘテロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは、N、OまたはSから選択される、同一のものまたは異なるものであってよい、1〜4個の環ヘテロ原子を含有する。シクロヘテロアルキルまたはヘテロシクロアルキル環は、1つまたは複数の二重結合を任意で含有していてもよい。これは単環式、二環式、三環式であっても、縮合されても、架橋されても、またはスピロであってもよい。例えば、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキルは、3〜9個の環炭素原子を含有する環基(radical)を意味する。「シクロヘテロアルキル」または「ヘテロシクロアルキル」という用語は、全ての可能な異性体を含むよう意図される。ヘテロ原子が他の環原子に単結合のみによって連結された環窒素原子である場合、それは置換されることができる。例示的な置換基は、別段の指示がない限り、H、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル(好ましくは、-H、(C1〜C6)アルキル、ハロ(C1〜C6)アルキルまたは(C1〜C3)アルキルカルボニル)を含み、これらの各々がハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルキル、アルキルなどで置換されてもよい。ヘテロ原子がSである場合、それは任意で一酸素または二酸素添加されていてもよい(すなわち-S(O)-または-S(O)2-)。
【００４９】
ハロアルキルおよびハロシクロアルキルは、ハロゲンがフッ素、塩素および臭素から独立して選択されるモノ、ポリおよびペルハロアルキル基を含む。
【００５０】
「ヘテロアリール」、「ヘテロアリール基」、「ヘテロアリール環」、「ヘテロ芳香族」、「ヘテロ芳香族基」および「ヘテロ芳香族環」は、本明細書において互換的に用いられる。「ヘテロアリール」は、一価のヘテロ芳香族単環式または多環式環基(radical)を意味する。単環式ヘテロアリール環は、N、OおよびSから独立して選択される1〜4個のヘテロ原子を含有する5員および6員芳香族複素環であり、フラン、チオフェン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、1,2,3-トリアゾール、1,2,4-トリアゾール、1,3,4-オキサジアゾール、1,2,5-チアジアゾール、1,2,5-チアジアゾール1-オキシド、1,2,5-チアジアゾール1,1-ジオキシド、1,3,4-チアジアゾール、ピリジン、ピリジン-N-オキシド、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、1,2,4-トリアジン、1,3,5-トリアジン、およびテトラゾールを含むが、これらに限定されることはない。二環式ヘテロアリール環は、N、OおよびSから独立して選択される1〜4個のヘテロ原子を含有するビシクロ[4.4.0]およびビシクロ[4,3.0]縮合環系であり、インドリジン、インドール、イソインドール、ベンゾ[b]フラン、ベンゾ[b]チオフェン、インダゾール、ベンズイミダゾール、ベンズチアゾール、プリン、4H-キノリジン、キノリン、イソキノリン、シンノリン、フタラジン、キナゾリン、キノキサリン、1,8-ナフチリジンおよびプテリジンを含む。「アルコキシ」は、酸素連結原子を通じて付着されたアルキル基(radical)を意味する。「(C1〜C4)-アルコキシ」は、メトキシ、エトキシ、プロポキシおよびブトキシを含む。
【００５１】
「芳香族」、「芳香族基」、「芳香族環」、「アリール」、「アリール基」および「アリール環」は、本明細書において互換的に用いられる。
【００５２】
「アリール」は、芳香族単環式または多環式炭化水素環系を意味する。アリール系は、フェニル、ナフタレニル、フルオレニル、インデニル、アズレニルおよびアントラセニルを含むが、これらに限定されることはない。
【００５３】
「ヘテロ」は、環系中の少なくとも1つの炭素原子成員を、N、SおよびOから選択される少なくとも1つのヘテロ原子で置換することをいう。ヘテロ環は、ヘテロ原子によって置換された1、2、3または4つの炭素原子成員を有しうる。
【００５４】
本明細書において用いられる「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素をいう。
【００５５】
「炭素環」は、3〜14員の飽和または不飽和の脂肪族環式炭化水素環を意味する。
【００５６】
「シクロアルケン」は、指定された数の炭素原子を有する不飽和および非芳香族の脂肪族環式炭化水素基(radical)を意味する。これは単環式、二環式、三環式であっても、縮合されても、架橋されても、またはスピロであってもよい。したがって、(C3〜C8)シクロアルケンは、環内に配置された3〜8個の炭素原子を有する基(radical)を意味する。(C3〜C8)シクロアルケンは、シクロブテン、シクロペンテン、シクロヘキセン、シクロヘプテンおよびシクロオクテンを含む。
【００５７】
本発明の化合物は、塩の形態で存在してもよい。任意の適当な有機塩または無機塩が本発明に含まれる。ある種の態様において、本発明の化合物の塩は、非毒性の「薬学的に許容される塩」をいう。「薬学的に許容される」という語句は、適切な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー応答、またはその他の問題もしくは合併症を伴うことなくヒトおよび動物の組織と接触させて用いるのに適しており、妥当なリスク/ベネフィット比に見合う化合物、材料、組成物および/または剤形をいうように本明細書において利用される。
【００５８】
本明細書において用いられる場合、「薬学的に許容される塩」は、親化合物がその酸塩または塩基塩を作製することによって修飾されている開示化合物の誘導体をいう。薬学的に許容される塩形態は、薬学的に許容される酸性/アニオン塩または塩基性/カチオン塩を含む。薬学的に許容される塩の例としては、アミンのような塩基性残基の無機塩または有機酸塩; カルボン酸のような酸性残基のアルカリ塩または有機塩などが挙げられるが、これらに限定されることはない。
【００５９】
例えば、そのような塩は、酢酸塩、アスコルビン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、重炭酸塩、重酒石酸塩、臭化物塩、エデト酸カルシウム、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エタンジスルホン酸塩、エストール酸塩、エシル酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコール酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物塩、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩、メシル酸塩、メチル臭化物塩、メチル硝酸塩、メチル硫酸塩、ムチン酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、パントテン酸塩、フェニル酢酸塩、リン酸塩/二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、スルファミド、硫酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、トリエチオダイド、アンモニウム、ベンザチン、クロロプロカイン、コリン(colline)、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミンおよびプロカイン塩を含む。さらなる薬学的に許容される塩は、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、亜鉛などのような金属由来のカチオンで形成することができる。(Pharmaceutical salts, Birge, S.M. et al., J. Pharm. Sci., (1977), 66, 1-19も参照のこと)。
【００６０】
本発明の薬学的に許容される塩は、塩基性部分または酸性部分を含有する親化合物から、従来の化学的方法によって合成することができる。一般に、そのような塩は、これらの化合物の遊離酸または塩基形態を、水中あるいはエーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールもしくはアセトニトリルのような有機希釈剤、またはそれらの混合物中の十分な量の適切な塩基または酸と反応させることによって調製することができる。
【００６１】
例えば、本発明の化合物(例えば、トリフルオロ酢酸塩)を精製または単離するのに有用な、上記のもの以外の酸の塩も本発明の一部に含まれる。
【００６２】
本発明の化合物は、個々の異性体として異性体特異的合成により調製されてもよく、または異性体混合物から分離されてもよい。従来の分離技法は、光学活性酸を用いて異性体対の各異性体の遊離塩基の塩を形成させること(その後に遊離塩基の分別結晶および再生を行うこと)、光学活性アミンを用いて異性体対の各異性体の酸形態の塩を形成させること(その後に遊離酸の分別結晶および再生を行うこと)、光学的に純粋な酸、アミンもしくはアルコールを用いて異性体対の異性体の各々のエステルもしくはアミドを形成させること(その後にクロマトグラフィー分離およびキラル補助基の除去を行うこと)、またはさまざまな周知のクロマトグラフィー法を用いて出発材料もしくは最終生成物の異性体混合物を分離することを含む。
【００６３】
開示された化合物の立体化学が構造によって命名されまたは描写される場合、命名されまたは描写された立体異性体は、他の立体異性体に対して少なくとも60重量%、70重量%、80重量%、90重量%、95重量%、99重量%または99.9重量%純粋である。単一の鏡像異性体が構造によって命名されまたは描写される場合、描写されまたは命名された鏡像異性体は、少なくとも60重量%、70重量%、80重量%、90重量%、95重量%、99重量%または99.9重量%光学的に純粋である。光学純度の重量パーセントは、鏡像異性体の重量の、鏡像異性体の重量に加えてその光学異性体の重量に対する比である。
【００６４】
開示された化合物が立体化学を示さず構造により命名されまたは描写され、化合物が少なくとも1つのキラル中心を有する場合、その名称または構造は、対応する光学異性体を含まない化合物の一方の鏡像異性体、化合物のラセミ混合物および対応するその光学異性体と比べて一方の鏡像異性体が富化された混合物を包含するものと理解されるべきである。
【００６５】
開示された化合物が立体化学を示さず構造により命名されまたは描写され、少なくとも2つのキラル中心を有する場合、その名称または構造は、他のジアステレオ異性体を含まないジアステレオ異性体、他のジアステレオ異性体対を含まないジアステレオ異性体対、ジアステレオ異性体の混合物、ジアステレオ異性体対の混合物、1つのジアステレオ異性体が他のジアステレオ異性体と比べて富化されているジアステレオ異性体の混合物、および1つのジアステレオ異性体対が他のジアステレオ異性体対と比べて富化されているジアステレオ異性体対の混合物を包含するものと理解されるべきである。
【００６６】
1つまたは複数の立体中心を有する化合物が少なくとも1つの立体中心について特定の立体化学で描写される場合、本発明は、対応する立体中心で反対の立体化学を有する化合物および対応する立体中心で特定の立体化学を有しない化合物も含む。
【００６７】
本明細書において用いられる場合、「疾患または障害を処置するのに適した治療法」という用語は、疾患または障害の処置に有効な処置計画を意味する。適当な治療法には、治療剤の使用が含まれうる。インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病を処置するための例示的な治療剤としては、メトホルミン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、アカルボース、テトラヒドロリプスタチン、フェンテルミン/トピラメート(すなわち、フェンテルミンおよびトピラメートの組み合わせ)、ブプロピオン/ナルトレキソン(すなわち、ブプロピオンおよびナルトレキソンの組み合わせ)、ロルカセリン、リラグルチド、ならびにカナグリフロジンが挙げられるが、これらに限定されることはない。あるいは、適当な治療法は、本明細書において記述される生活様式の改善を含むことができる。
【００６８】
ある状態または疾患を「処置すること」は、その状態または疾患の少なくとも1つの症状を治癒することおよび改善することをいう。
【００６９】
本明細書において用いられる場合、「対象」という用語は、任意の動物を意味するが、しかし好ましくは、例えばヒト、サル、非ヒト霊長類、ラット、マウス、ウシ、イヌ、ネコ、ブタ、ウマまたはウサギのような、哺乳動物である。
【００７０】
本明細書において用いられる場合、「有効量」は、対象において所望の生物学的応答を誘発する活性な化合物薬剤の量を意味する。そのような応答は、処置される疾患または障害の症状の緩和を含む。そのような治療方法における本発明の化合物の有効量は、約0.01 mg/kg/日〜約1000 mg/kg/日または約0.1 mg/kg/日〜約100 mg/kg/日である。
【００７１】
本明細書において用いられる「代謝障害」は、代謝作用(同化作用および/または異化作用)の変化に起因する恒常性の正常な生理学的状態の撹乱を引き起こす障害または疾患をいう。代謝作用の変化は、分解されるべき物質(例えばフェニルアラニン)を分解(異化)できず、結果として物質および/もしくは中間物質が毒性レベルにまで増大することから生じ、またはいくつかの必須物質(例えばインスリン)を産生(同化)できないことから生じうる。
【００７２】
本明細書において用いられる「糖尿病」は、インスリン分泌もしくは作用の欠陥、またはその両方から生じる高血糖(グルコース)レベルによって特徴付けられる一群の代謝性疾患をいう。
【００７３】
本明細書において用いられる「2型糖尿病」は、2つの主要なタイプの糖尿病のうちの1つであって、少なくとも疾患の初期段階で、膵臓のβ細胞はインスリンを産生するが、しかし身体は、身体の細胞がインスリンの作用に抵抗性であるため、インスリンを効果的に使用することができないタイプのものをいう。疾患の後期段階では、β細胞はインスリンの産生を停止させうる。2型糖尿病は、インスリン抵抗性糖尿病、インスリン非依存性糖尿病および成人発症糖尿病としても知られている。
【００７４】
本明細書において用いられる「前糖尿病」は、1つまたは複数の初期糖尿病状態をいう。前糖尿病状態の例としては、グルコース利用の障害、空腹時グルコースレベルの異常または障害、グルコース耐性の障害、インスリン感受性の障害およびインスリン抵抗性が挙げられるが、これらに限定されることはない。前糖尿病は、正常よりも高いヘモグロビンA1cレベル(例えば、ヘモグロビンA1c試験において5.7%〜6.4%)によって特徴付けることもできる。前糖尿病は、ヘモグロビンA1c試験、空腹時血漿グルコース(FPG)試験および経口グルコース負荷試験(OGTT)のような、さまざまな血液検査によって診断することができる。
【００７５】
本明細書において用いられる「インスリン抵抗性」は、細胞へのグルコースの取り込みを調節するインスリン-aホルモンの作用に対して細胞が抵抗性になる場合の状態、または正常なグルコースレベルを維持するには産生されるインスリンの量が不十分である場合の状態をいう。細胞は、血液から筋肉および他の組織への糖グルコースの輸送を促進する上でインスリンの作用に応答する能力が損なわれる(すなわち、インスリンに対する感受性が低下する)。最終的に、膵臓は正常よりもはるかに多くのインスリンを産生し、細胞は引き続き抵抗性である。この抵抗性を克服するのに十分なインスリンが産生される限り、血中グルコースレベルは正常のままである。膵臓がもはや追いつくことができなくなると、血中グルコースが上昇し始め、糖尿病を引き起こす。インスリン抵抗性は正常(インスリン感受性)からインスリン抵抗性(IR)に及ぶ。
【００７６】
本明細書において用いられる「インスリン抵抗性障害」は、インスリン抵抗性によって引き起こされるか、またはインスリン抵抗性が寄与する任意の疾患または状態をいう。例としては、糖尿病、肥満、代謝症候群、インスリン抵抗性症候群、X症候群、インスリン抵抗性、高血圧、高血圧症、高血中コレステロール、脂質異常症、高脂血症、脂質異常症、脳卒中、冠動脈疾患または心筋梗塞を含むアテローム性動脈硬化症、高血糖症、高インスリン血症および/または高プロインスリン血症、グルコース耐性の障害、遅延インスリン放出、冠動脈心疾患、狭心症、うっ血性心不全、脳卒中、認知症における認知機能、網膜症、末梢神経障害、腎症、糸球体腎炎、糸球体硬化症、ネフローゼ症候群、高血圧性腎硬化症を含む、糖尿病性合併症、いくつかのタイプのがん(子宮内膜がん、乳がん、前立腺がんおよび結腸がんのような)、妊娠合併症、女性の生殖的健康状態の不良(poor female reproductive health) (月経不順、不妊、不規則排卵、多嚢胞性卵巣症候群(PCOS)のような)、脂肪異栄養症、胆石、胆嚢炎および胆石症のような、コレステロール関連障害、痛風、閉塞性睡眠時無呼吸および呼吸障害、変形性関節症、ならびに骨欠損、例えば骨粗鬆症の予防および処置が挙げられる。
【００７７】
本明細書において用いられる場合、「バイオマーカー」という用語は、第1の表現型(例えば、疾患を有すること)を有する対象または対象の群由来の生体サンプルにおいて、第2の表現型(例えば、疾患を有しないこと)を有する対象または対象の群由来の生体サンプルと比較して、差次的に存在する(すなわち、増加または減少している)化合物、好ましくは代謝産物を意味する。バイオマーカーは、任意のレベルで差次的に存在しうるが、一般に、少なくとも5%だけ、少なくとも10%だけ、少なくとも15%だけ、少なくとも20%だけ、少なくとも25%だけ、少なくとも30%だけ、少なくとも35%だけ、少なくとも40%だけ、少なくとも45%だけ、少なくとも50%だけ、少なくとも55%だけ、少なくとも60%だけ、少なくとも65%だけ、少なくとも70%だけ、少なくとも75%だけ、少なくとも80%だけ、少なくとも85%だけ、少なくとも90%だけ、少なくとも95%だけ、少なくとも100%だけ、少なくとも110%だけ、少なくとも120%だけ、少なくとも130%だけ、少なくとも140%だけ、少なくとも150%もしくはそれ以上だけ増加したレベルで存在し; または一般に、少なくとも5%だけ、少なくとも10%だけ、少なくとも15%だけ、少なくとも20%だけ、少なくとも25%だけ、少なくとも30%だけ、少なくとも35%だけ、少なくとも40%だけ、少なくとも45%だけ、少なくとも50%だけ、少なくとも55%だけ、少なくとも60%だけ、少なくとも65%だけ、少なくとも70%だけ、少なくとも75%だけ、少なくとも80%だけ、少なくとも85%だけ、少なくとも90%だけ、少なくとも95%だけもしくは100%だけ(すなわち、存在しない)減少したレベルで存在する。バイオマーカーは、好ましくは、統計的に有意なレベル(例えば、ウェルチ(Welch)のT検定またはウイルコクソン(Wilcoxon)の順位和検定のいずれかを用いて判定される場合に0.05未満のp値および/または0.10未満のq値)で差次的に存在する。あるいは、バイオマーカーは、前糖尿病、または前糖尿病の特定のレベルとの相関を示す。可能な相関の範囲は、負(-)1〜正(+)1である。負(-)1の結果は完全な負の相関を意味し、正(+)1は完全な正の相関を意味し、0は全く相関なしを意味する。「実質的な正の相関」は、障害とのまたは臨床的測定値(例えば、Rd)との+0.25から+1.0までの相関を有するバイオマーカーをいい、その一方で「実質的な負の相関」は、所与の障害または臨床的測定値との-0.25から-1.0までの相関をいう。「有意な正の相関」は、所与の障害または臨床的測定値(例えば、Rd)との+0.5から+1.0までの相関を有するバイオマーカーをいい、その一方で「有意な負の相関」は、所与の障害または臨床的測定値との-0.5から-1.0までの障害に対する相関をいう。
【００７８】
本明細書において用いられる場合、「代謝産物」または「小分子」という用語は、細胞内に存在する有機分子および無機分子を意味する。この用語は、大きなタンパク質(例えば、2,000、3,000、4,000、5,000、6,000、7,000、8,000、9,000もしくは10,000を超える分子量を有するタンパク質)、大きな核酸(例えば、2,000、3,000、4,000、5,000、6,000、7,000、8,000、9,000もしくは10,000を超える分子量を有する核酸)、または大きな多糖類(例えば、2,000、3,000、4,000、5,000、6,000、7,000、8,000、9,000もしくは10,000を超える分子量を有する多糖類)のような、大きな巨大分子を含まない。細胞の小分子は一般に、細胞質内またはミトコンドリアのような他の細胞小器官内で溶液中に遊離した状態で見出され、その場所でそれらは中間体のプールを形成し、これらがさらに代謝されて、または使用されて、巨大分子と呼ばれる、大きな分子を生成する。「小分子」という用語は、食物から導出されるエネルギーを使用可能な形態へ変換する化学反応におけるシグナル伝達分子および中間体を含む。小分子の例としては、糖、脂肪酸、アミノ酸、ヌクレオチド、細胞プロセス中に形成される中間体、および細胞内に見出される他の小分子が挙げられる。
【００７９】
本明細書において用いられる場合、「代謝プロファイル」または「小分子プロファイル」という用語は、標的細胞、組織、器官、生物またはそれらの画分(例えば、細胞区画)内の小分子の完全または部分的なリストを意味する。リストには、存在する小分子の量および/またはタイプが含まれうる。「小分子プロファイル」は、単一の技法または複数の異なる技法を用いて判定されうる。
【００８０】
本明細書において用いられる場合、1つまたは複数のバイオマーカーの「レベル」という用語は、サンプル中のバイオマーカーの絶対的または相対的な量または濃度を意味する。
【００８１】
本明細書において用いられる場合、「サンプル」または「生体サンプル」または「試料」という用語は、対象から単離された生体材料を意味する。生体サンプルは、所望のバイオマーカーを検出するのに適した任意の生体材料を含んでもよく、対象由来の細胞性および/または非細胞性材料を含んでもよい。サンプルは、例えば、脂肪組織、大動脈組織、肝臓組織、血液、血漿、血清または尿のような任意の適当な生体組織または生体液から単離することができる。
【００８２】
「空腹時グルコース障害(IFG)」および「グルコース耐性障害(IGT)」は、「前糖尿病」の臨床的定義である。IFGは空腹時血中グルコース濃度100〜125 mg/dLと定義される。IGTは食後(食事後)の血中グルコース濃度140〜199 mg/dLと定義される。IFGおよびIGTは、必ずしも同じ前糖尿病集団を検出するとは限らないことが知られている。2つの集団の間にはおよそ60%の重複が観察される。空腹時血漿グルコースレベルは、患者の膵臓機能またはインスリン分泌を推測するいっそう効率的な手段である一方で、食後グルコースレベルは、インスリン感受性または抵抗性のレベルを推測することにいっそう高い頻度で関連する。IGTは、IFGと比べてさらに高い割合の前糖尿病集団を同定することが知られている。IFG状態はいっそう低いインスリン分泌に関連するが、IGT状態はインスリン抵抗性に強く関連することが知られている。正常なFPG値を有するIGT個体は、心血管疾患の危険性が高いことを示す多数の研究が行われている。正常なFPG値を有する患者は、異常な食後グルコース値を有しうるが、前糖尿病、糖尿病、および心血管疾患のその危険性に気付いていないことが多い。
【００８３】
「空腹時血漿グルコース(FPG)試験」は、8時間の絶食後の血中グルコースレベルを測定する簡単な試験である。ADAによれば、血中グルコース濃度100〜125 mg/dLはIFGとみなされ、前糖尿病を規定し、その一方で126 mg/dL以上は糖尿病を規定する。ADAで述べられているように、FPGは、その使い易さ、患者の受け入れ可能性、低コスト、および相対的な再現性のために、糖尿病および前糖尿病を診断するための好ましい試験である。FPG試験の弱点は、空腹時グルコースレベルが変化する前には患者が2型糖尿病へかなり進行していることである。
【００８４】
グルコースの動的測定である「経口的グルコース負荷試験(OGTT)」は、75 gのグルコース飲料の経口摂取後の患者の血中グルコースレベルの食後測定である。従来の測定には、試験開始時の空腹時血液サンプル、1時間時点の血液サンプル、および2時間時点の血液サンプルが含まれる。2時間の時点での患者の血中グルコース濃度は、グルコース耐性のレベル: 正常グルコース耐性(NGT) ≦140 mg/dLの血中グルコース; グルコース耐性障害(IGT) = 140〜199 mg/dLの血中グルコース; 糖尿病 ≧ 200 mg/dLの血中グルコースを規定する。ADAで述べられているように、OGTTは前糖尿病および糖尿病の診断でいっそう高感度かつ特異的であることが知られているが、その再現性が低く、実際に行うのが困難なため日常的な臨床使用には推奨されない。
【００８５】
「A1C試験」または「グリコヘモグロビン試験」としても知られる「ヘモグロビンA1c (HbA1c)試験」は過去3ヶ月間の、血糖とも呼ばれる、人の平均的な血中グルコースレベルに関する情報を提供する血液試験である。A1C試験は、酸素を運搬する赤血球中のタンパク質であるヘモグロビンへのグルコースの付着に基づく。体内で、赤血球は絶えず形成し死滅しているが、典型的には、それらは約3ヶ月間生存する。したがって、A1C試験は過去3ヶ月間の人の血中グルコースレベルの平均を反映する。A1C試験の結果は割合として報告される。割合が高いほど、人の血中グルコースレベルは高くなる。正常なA1Cレベルは5.7パーセント未満である。5.7〜6.4パーセントのA1Cレベルは、「前糖尿病」と見なされる。6.5パーセント以上のレベルは、糖尿病を示唆する。
【００８６】
本発明は、本発明の非限定的な態様を例示することを意図する以下の詳細な説明および実施例を参照することにより、さらに十分に理解することができる。
【００８７】
化合物および組成物
本発明は、新規な化合物、組成物、ならびに診断方法および処置方法におけるそれらの使用を提供する。
【００８８】
第1の態様において、本発明の化合物は式(I):
0006639512.tif 000040
またはその塩(例えば、薬学的に許容される塩)により表され、式中、変数は上記の通りである。
【００８９】
第2の態様において、本発明の化合物は式(II):
0006639512.tif 000041
またはその塩(例えば、薬学的に許容される塩)により表され、式中、Z1は-ORa、-OSO3H、-OPO(OH)2、-OC(=O)Rbまたは-OC(=O)NRcRdであり、残りの変数は第1の態様において上述した通りである。
【００９０】
第3の態様において、本発明の化合物は式(III):
0006639512.tif 000042
またはその塩(例えば、薬学的に許容される塩)により表され、式中:
R4、R5、R6およびR7は、各々独立して、-H、ハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、-OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルからなる群より選択され;
式中、上記の(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニル基の各々が、ハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、-OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、ハロ(C1〜C6)アルキルおよびヒドロキシル(C1〜C6)アルキルからなる群より独立して選択される1〜5個の置換基で置換されてもよく、残りの変数は、第1または第2の態様において上述した通りである。
【００９１】
第4の態様において、式(I)、(II)および(III)により表される化合物について、R1は(C1〜C6)アルキルであり、残りの変数は、第1、第2または第3の態様において上述した通りである。
【００９２】
第5の態様において、式(I)、(II)および(III)により表される化合物について、R1はメチルであり、変数の残りは、第1、第2または第3の態様において上述した通りである。
【００９３】
第6の態様において、式(III)により表される化合物について、R4、R5、R6およびR7は、各々独立して-H、ハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、-OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、ハロ(C1〜C6)アルキルおよび(C1〜C3)アルコキシ(C1〜C6)アルキルであり、残りの変数は、第1、第2、第3、第4または第5の態様において上述した通りである。
【００９４】
第7の態様において、式(III)により表される化合物について、R4、R5、R6およびR7は、各々独立して(C1〜C6)アルキルまたはハロ(C1〜C6)アルキルであり、残りの変数は、第1、第2、第3、第4または第5の態様において上述した通りである。
【００９５】
第8の態様において、式(III)により表される化合物について、R4、R5、R6およびR7は各々メチルであり、変数の残りは、第1、第2、第3、第4または第5の態様において上述した通りである。
【００９６】
第9の態様において、本発明の化合物は、以下：
0006639512.tif 000043
またはその塩(例えば、薬学的に許容される塩)である。
【００９７】
第10の態様において、本発明の化合物は、以下：
0006639512.tif 000044
または薬学的に許容されるその塩である。
【００９８】
第11の態様において、本発明の化合物は、以下：
0006639512.tif 000045
またはその塩(例えば、薬学的に許容される塩)である。
【００９９】
第12の態様において、本発明の化合物は、以下：
0006639512.tif 000046
またはその塩(例えば、薬学的に許容される塩)である。
【０１００】
第13の態様において、本発明の化合物は、以下：
0006639512.tif 000047
またはその塩(例えば、薬学的に許容される塩)である。
【０１０１】
さまざまな態様において、本明細書において記述される本発明の化合物(例えば、式(V)、(VI)もしくは(VII)により表される化合物または化合物Aあるいはその塩)は、少なくとも60%光学的に純粋、少なくとも70%光学的に純粋、少なくとも80%光学的に純粋、少なくとも90%光学的に純粋、少なくとも95%光学的に純粋、または少なくとも99%光学的に純粋である。
【０１０２】
さまざまな態様において、本明細書において記述される本発明の化合物(例えば、式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)もしくは(VII)により表される化合物または化合物Aあるいはその塩)は、不純物を実質的に含まない。
【０１０３】
さまざまな態様において、本明細書において記述される本発明の化合物(例えば、式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)もしくは(VII)により表される化合物または化合物Aあるいはその塩)は、少なくとも60%純粋、少なくとも70%純粋、少なくとも80%純粋、少なくとも90%純粋、少なくとも95%純粋または少なくとも99%純粋である。
【０１０４】
式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)もしくは(VII)の化合物または化合物Aあるいはその塩(例えば、薬学的に許容される塩)のような上記の化合物は、本明細書において記述される方法のいずれかにおいて用いることができる。
【０１０５】
特定の態様において、本発明は、薬学的に許容される担体または希釈剤および本明細書において開示される化合物(例えば、式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)もしくは(VII)により表される化合物または化合物Aあるいはその塩(例えば、薬学的に許容される塩))を含む薬学的組成物を提供する。
【０１０６】
1つの態様において、本発明の組成物は、約80重量%より多く、より好ましくは約90重量%より多く、さらにより好ましくは約95重量%より多く、および最も好ましくは約97重量%より多くの、本明細書において記述される化合物(例えば、式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)もしくは(VII)の化合物または化合物Aあるいはその塩(例えば、薬学的に許容される塩))を含有する。
【０１０７】
1つの態様において、本明細書において記述される薬学的組成物は、少なくとも約80重量%、85重量%、90重量%、95重量%、98重量%または99重量%の、本明細書において記述される化合物を含有する。
【０１０８】
「薬学的に許容される担体」は、本発明の組成物の製剤で用いるのに十分な純度および品質のものであって、動物またはヒトに適切に投与された場合、有害反応を生じない、化合物および組成物を意味する。
【０１０９】
ある種の態様において、本明細書において記述される化合物は、例えばトリチウム(3H)または炭素14 (14C)などで、放射性標識される。本発明の化合物を放射性標識するための任意の適当な方法を用いることができる。
【０１１０】
同様に本発明に含まれるのは、本明細書において記述される化合物(例えば、式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)もしくは(VII)の化合物または化合物Aあるいはその塩(例えば、薬学的に許容される塩))に特異的に結合する抗体または抗体断片である。小分子に特異的に結合する抗体を作製するための方法は、当技術分野において公知である。上記の抗体のVH配列およびVL配列を含むポリペプチドのような、抗体誘導体も含まれる。ある種の態様において、ポリペプチドは融合タンパク質である。本発明は同様に、本明細書において記述される抗体または抗体断片および抗体誘導体を産生するための細胞を含む。
【０１１１】
方法
本発明は、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病を診断、モニタリングおよび処置するための診断方法を含む。
【０１１２】
第1の態様において、本発明は、
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、変数が上記の通りである、上記の本発明の化合物(例えば、式(I):
0006639512.tif 000048
により表される化合物またはその塩)のレベルを判定する段階; および
(2) 生体サンプルにおける化合物のレベルを、正常対照サンプルにおける化合物のレベルと比較する段階
を含み、生体サンプルにおける化合物のレベル変化が対象における疾患または障害を示す、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断するための方法を提供する。
【０１１３】
1つの態様において、上記の疾患または障害を診断するための方法は、正常対照サンプルにおける化合物のレベルと比較して生体サンプルにおいて化合物のレベル変化が存在する場合に、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法で対象を処置する段階をさらに含む。
【０１１４】
第2の態様において、本発明は、
(1) 対象から第1の時点で得られた第1の生体サンプルにおける、変数が上記の通りである、上記の本発明の化合物(例えば、式(I):
0006639512.tif 000049
により表される化合物またはその塩)のレベルを判定する段階;
(2) 第1の時点よりも遅い第2の時点で対象から得られた第2の生体サンプルにおける化合物のレベルを判定する段階; および
(3) 第2の生体サンプルにおける化合物のレベルを、第1の生体サンプルにおける化合物のレベルと比較する段階
を含み、化合物のレベルの変化が対象における疾患の進行または退行を示す、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害の進行または退行をモニタリングするための方法を提供する。
【０１１５】
1つの態様において、上記の疾患または障害の進行または退行をモニタリングするための方法は、疾患の退行が観察される場合に、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法で対象を処置する段階をさらに含む。
【０１１６】
本発明の第3の態様は、対象におけるインスリン抵抗性処置、代謝障害処置、糖尿病処置または前糖尿病処置の有効性をモニタリングする方法であって、
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(I):
0006639512.tif 000050
の化合物またはその塩のレベルを判定する段階;
(2) インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病に有効な治療法で対象を処置する段階;
(3) 処置後の第2の時点で対象から得られた、対象由来の第2の生体サンプルを分析して、式(I)の化合物のレベルを判定する段階; および
(4) 第1のサンプルにおける式(I)の化合物のレベルを第2のサンプルにおける式(I)の化合物のレベルと比較して、インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための処置の有効性を評価する段階
を含む、該方法である。
【０１１７】
さまざまな態様において、上記の方法(例えば、第1、第2または第3の態様において記述される方法)について、式(I)の化合物は式(II)、(III)もしくは(IV)または化合物Aあるいはその塩により表される。あるいは、上記の方法について、式(VI)の化合物は、上記のX12063またはその塩である。
【０１１８】
第4の態様において、本発明は、対象由来の生体サンプルにおける、式(IV):
0006639512.tif 000051
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階を含み、正常対照サンプルにおける化合物のレベルと比較して生体サンプルにおける化合物のレベル上昇が、対象における疾患または障害を示す、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断するための方法を提供する。1つの態様において、化合物のレベルは、クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される。
【０１１９】
第5の態様において、本発明は、対象由来の生体サンプルにおける、式(VI):
0006639512.tif 000052
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階を含み、正常対照サンプルにおける化合物のレベルと比較して生体サンプルにおける化合物のレベル上昇が、対象における疾患または障害を示す、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断するための方法を提供する。1つの態様において、化合物のレベルは、クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される。
【０１２０】
本明細書において用いられる場合、「正常対照サンプル」は、インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病のような、疾患または障害を有しない対象由来のサンプルまたは対象それ自体をいう。
【０１２１】
ある種の態様において、上記の方法(例えば、第4または第5の態様において記述される方法)は、正常対照サンプルにおける化合物のレベルと比較して生体サンプルにおいて化合物のレベル上昇が存在する場合に、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法で対象を処置する段階をさらに含む。
【０１２２】
第6の態様において、本発明は、
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(IV):
0006639512.tif 000053
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階；
(2) 第1の時点よりも遅い第2の時点で対象から得られた第2の生体サンプルにおける化合物のレベルを判定する段階
を含み、
化合物のレベルの変化が対象における疾患の進行または退行を示し、化合物のレベルがクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される、
対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害の進行または退行をモニタリングするための方法を提供する。1つの態様において、化合物のレベルの増加は、疾患の進行を示す。
【０１２３】
第7の態様において、本発明は、
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(VI):
0006639512.tif 000054
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階；
(2) 第1の時点よりも遅い第2の時点で対象から得られた第2の生体サンプルにおける化合物のレベルを判定する段階
を含み、
化合物のレベルの変化が対象における疾患の進行または退行を示し、化合物のレベルがクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される、
対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害の進行または退行をモニタリングするための方法を提供する。1つの態様において、化合物のレベルの増加は、疾患の進行を示す。
【０１２４】
ある種の態様において、上記の方法(例えば、第6または第7の態様において記述される方法)は、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法で対象を処置する段階をさらに含む。
【０１２５】
第8の態様において、本発明は、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための治療法の有効性をモニタリングする方法であって、
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(IV):
0006639512.tif 000055
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階;
(2) インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病に対する治療法で対象を処置する段階;
(3) 処置後の時点で対象から得られた、対象由来の第2の生体サンプルを分析して、化合物のレベルを判定する段階; および
(4) 第1のサンプルにおける化合物のレベルを第2のサンプルにおける化合物のレベルと比較して、インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための処置の有効性を評価する段階
を含み、化合物のレベルが、クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される、該方法を提供する。1つの態様において、第1のサンプルと比較して第2のサンプルにおける化合物のレベルの減少は、用いられる治療法が対象を処置するのに有効であることを示す。
【０１２６】
第9の態様において、本発明は、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための治療法の有効性をモニタリングする方法であって、
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(VI):
0006639512.tif 000056
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階;
(2) インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病に対する治療法で対象を処置する段階;
(3) 処置後の時点で対象から得られた、対象由来の第2の生体サンプルを分析して、化合物のレベルを判定する段階; および
(4) 第1のサンプルにおける化合物のレベルを第2のサンプルにおける化合物のレベルと比較して、インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための処置の有効性を評価する段階
を含み、化合物のレベルが、クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される、該方法を提供する。1つの態様において、第1のサンプルと比較して第2のサンプルにおける化合物のレベルの減少は、用いられる治療法が対象を処置するのに有効であることを示す。
【０１２７】
さまざまな態様において、本明細書において記述される方法(例えば、第1、第2、第3、第4、第5、第6、第7、第8または第9の態様において記述される方法)について、化合物のレベルは、クロマトグラフィー、質量分析、ELISA、抗体結合または酵素反応もしくはアッセイ法あるいは他の免疫化学的方法によって判定される。
【０１２８】
1つの態様において、化合物のレベルはLC-MS/MSを用いて、タンデム液体クロマトグラフィー - 質量分析(LC-MS/MS)により測定された内部標準の生成イオンのピーク面積に対する化合物の生成イオンのピーク面積の比較により、またはタンデム液体クロマトグラフィー - 質量分析(LC-MS/MS)により測定された正常サンプルもしくは集団における化合物の生成イオンのピーク面積と比べて罹患患者サンプルにおける化合物の生成イオンのピーク面積の比較により判定される。
【０１２９】
さまざまな態様において、本明細書において記述される方法(例えば、第1、第2、第3、第4、第5、第6、第7、第8または第9の態様において記述される方法)について、有効な治療法には、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療剤の使用が含まれる。
【０１３０】
本明細書において記述される方法(例えば、第1、第2、第3、第4、第5、第6、第7、第8または第9の態様において記述される方法)で用いるのに適した治療剤は、抗糖尿病薬および抗肥満薬を含むが、これらに限定されることはない。特定の態様において、本明細書において記述される方法について、治療剤は、メトホルミン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、アカルボース、テトラヒドロリプスタチン、フェンテルミン/トピラメート、ブプロピオン/ナルトレキソン、ロカルセリン、リラグルチドおよびカナグリフロジンを含むが、これらに限定されることはない。
【０１３１】
さまざまな態様において、本明細書において記述される方法(例えば、第1、第2、第3、第4、第5、第6、第7、第8または第9の態様において記述される方法)について、有効な治療法には、対象の生活様式の改変が含まれる。特定の態様において、生活様式の改変は、食事の改変および/または活動もしくは運動の増加からなる群より選択される。食事の改変には、例えば、カロリー摂取、一人分の分量、砂糖およびデンプン質の炭水化物含量の制限、ならびに/または脂肪およびカロリーが低い、かつ繊維が多い食品の選択が含まれうる。
【０１３２】
さまざまな態様において、本明細書において記述される方法(例えば、第1、第2、第3、第4、第5、第6、第7、第8または第9の態様において記述される方法)について、本方法は、生体サンプルを分析して、本発明の化合物(例えば、式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)もしくは(VII)の化合物またはその塩(例えば、薬学的に許容される塩))以外の、疾患または障害に関連する1つまたは複数のさらなるバイオマーカーのレベルを判定する段階をさらに含む。
【０１３３】
本明細書において開示される方法で用いるためのバイオマーカーは、前糖尿病および/または2型糖尿病に関連するバイオマーカーの任意の供給源から得られうる。特定の態様において、本明細書において記述される方法で用いるためのバイオマーカーは、メタボロームプロファイリング技法を用いて発見された。そのようなメタボロームプロファイリング技法は、米国特許第7,005,255号および同第7,329,489号ならびに米国特許出願第11/357,732号(公開番号2007/0026389)、同第11/301,077号(公開番号2006/0134676)、同第11/301,078号(公開番号2006/0134677)、同第11/301,079号(公開番号2006/0134678)および同第11/405,033号(公開番号US 2007/0072203)にさらに詳細に記述されており、それらの内容全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【０１３４】
特定の態様において、本明細書において記述される方法(例えば、第1、第2、第3、第4、第5、第6、第7、第8または第9の態様において記述される方法)について、さらなるバイオマーカーは、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)、リノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)、オレイン酸塩、4-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、パントテン酸塩(ビタミンB5)、β-ヒドロキシ酪酸塩(BHBA)およびセリンならびに任意で、3-メチル-2-オキソ-酪酸、α-ケトグルタン酸塩、クレアチン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、ロイシン、オレオイルリゾホスファチジルコリン、フェニルアラニン、トリゴネリン、チロシン、バリン、ヒドロ桂皮酸、キサンチン、マンノース、3-メチル-2-オキソ吉草酸塩、グリセロールホスホリルコリン、アドレネート、3-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、2-メチルコハク酸塩、1-オクタデカノール、2-アミノアジピン酸塩、3-ヒドロキシイソ酪酸塩、α-トコフェロール、アルギニン、ベタイン、デカノイルカルニチン、ドコサテトラエン酸、グルタミン酸、リノール酸、リノレン酸、マルガリン酸、N-アセチルグリシン、オクタノイルカルニチン、パルミチン酸塩、パルミトレイン酸、パルミトイルリゾホスファチジルコリン、ステアリン酸塩、トレオニンおよびトリプトファンからなる群より選択される1つまたは複数のさらなるバイオマーカーからなる群より選択される。
【０１３５】
別の態様において、本明細書において記述される方法(例えば、第1、第2、第3、第4、第5、第6、第7、第8または第9の態様において記述される方法)について、バイオマーカーとして2-メチルコハク酸塩が選択される。年齢および性別が一致する日本人対象からなるコホートにおいて非糖尿病対象と比べて2型糖尿病対象では2-メチルコハク酸塩の血漿レベルが4.21倍高かった。糖尿病と非糖尿病とを識別した代謝産物のランダムフォレストを用いた分類分析により、実験において測定された1189代謝産物のうち2-メチルコハク酸塩が最高順位を有することが示された。
【０１３６】
1つの態様において、本明細書において記述される方法(例えば、第1、第2、第3、第4、第5、第6、第7、第8または第9の態様において記述される方法)について、本方法は、生体サンプルを分析して、本発明の化合物(例えば、式(I)、(II)もしくは(III)、(IV)、(V)、(VI)もしくは(VII)の化合物またはその塩(例えば、薬学的に許容される塩))のレベル、ならびに2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)およびリノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)のレベルを判定する段階を含む。任意で、本方法は、生体サンプルを分析して、3-メチル-2-オキソ-酪酸、α-ケトグルタン酸塩、クレアチン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、オレオイルリゾホスファチジルコリン、フェニルアラニン、トリゴネリン、チロシン、バリン、ヒドロ桂皮酸、キサンチン、マンノース、3-メチル-2-オキソ吉草酸塩、グリセロールホスホリルコリン、アドレネート、3-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、2-メチルコハク酸塩、1-オクタデカノール、2-アミノアジピン酸塩、3-ヒドロキシイソ酪酸塩、α-トコフェロール、アルギニン、ベタイン、デカノイルカルニチン、ドコサテトラエン酸、グルタミン酸、リノール酸、リノレン酸、マルガリン酸、N-アセチルグリシン、オクタノイルカルニチン、パルミチン酸塩、パルミトレイン酸、パルミトイルリゾホスファチジルコリン、ステアリン酸塩、トレオニンおよびトリプトファンからなる群より選択される1つまたは複数のバイオマーカーのレベルを判定する段階をさらに含むことができる。
【０１３７】
ある種の態様において、上記の方法(例えば、第1、第2、第3、第4、第5、第6、第7、第8または第9の態様において記述される方法)は、判定された化合物のレベルおよび判定された1つまたは複数のさらなるバイオマーカーのレベルを数学的モデルにおいて用いて、インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病、前糖尿病、NGT、IGT、または2型糖尿病を有すると対象を分類する段階をさらに含む。
【０１３８】
サンプルにおける1つまたは複数のバイオマーカーのレベルを判定するために、任意の適当な方法を用いて生体サンプルを分析することができる。適当な方法は、クロマトグラフィー(例えば、HPLC、ガスクロマトグラフィー、液体クロマトグラフィー)、質量分析(例えばMS、MS/MS)、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、他の免疫化学的技法、およびそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されることはない。1つの態様において、生体サンプルをLC-MS/MSを用い分析して、バイオマーカーのレベルを判定する。さらに、1つまたは複数のバイオマーカーのレベルは、例えば、測定されることが望まれるバイオマーカーのレベルと相関する化合物のレベルを測定するアッセイ法を用いることにより、間接的に測定されうる。
【０１３９】
本明細書において記述される本発明の方法(例えば、第1、第2、第3、第4、第5、第6、第7、第8または第9の態様において記述される方法)がインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病のような、疾患もしくは状態の診断およびモニタリング、または疾患もしくは状態の診断およびモニタリングの補助、または疾患もしくは状態を処置するための治療法の有効性のモニタリングにおいて用いられる場合、本方法の結果は、対象が所与の疾患または状態を有するかどうかの臨床的判定において有用な他の方法(またはその結果)とともに用いられうる。対象がインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病のような疾患または状態を有するかどうかの臨床的判定において有用な方法は、当技術分野において公知である。例えば、対象が前糖尿病を有するかどうかの臨床的判定において有用な方法には、例えば、年齢判定、性別判定、家族歴判定、グルコース処理速度(Rd)測定、体重測定、胴囲測定、BMI判定、ペプチドYY測定、ヘモグロビンA1c測定、空腹時グルコース測定、空腹時インスリン測定、プロインスリン測定、C-ペプチド測定、C-反応性タンパク質測定、ヘモグロビンA1c (HbA1cまたはA1c)測定、LDL-C測定、HDL-C測定、遊離脂肪酸(FFA)測定、1,5-Ag (Glycomark)測定、トリグリセリド測定などが含まれる。
【０１４０】
本発明は同様に、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病を処置する方法を提供する。
【０１４１】
第10の態様において、本発明は、本明細書において記述される化合物(例えば、式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)の化合物または化合物A)のレベル上昇を有する対象に、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法を提供する。
【０１４２】
第11の態様において、本発明は、
(1) クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、または他の免疫化学的方法により対象由来の生体サンプルにおいて、本明細書において記述される化合物(例えば、式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)の化合物もしくは化合物A)またはその塩のレベルを判定する段階; および
(2)正常対照サンプルにおける化合物のレベルと比較して対象が化合物のレベル上昇を有する場合に、対象に疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階
を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法を提供する。
【０１４３】
第12の態様において、本発明は、正常対照の対象と比較して、以下の式:
0006639512.tif 000057
により表される化合物またはその塩のレベル上昇を有する対象に、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法を提供する。
【０１４４】
第13の態様において、本発明は、正常対照の対象と比較して、以下の式:
0006639512.tif 000058
により表される化合物またはその塩のレベル上昇を有する対象に、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法を提供する。
【０１４５】
本明細書において用いられる場合、「正常対照の対象」は、インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病のような、疾患または障害を有していない対象をいう。
【０１４６】
ある種の態様において、化合物のレベルは、対象から生体サンプルを得ることおよびクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合または他の免疫化学的方法により化合物のレベルを判定することによって判定される。
【０１４７】
第14の態様において、本発明は、
(1) クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、または他の免疫化学的方法により対象由来の生体サンプルにおいて、以下の式:
0006639512.tif 000059
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階; および
(2)正常対照サンプルにおける化合物のレベルと比較して対象が化合物のレベル上昇を有する場合に、対象に疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階
を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法を提供する。
【０１４８】
第15の態様において、本発明は、
(1) クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、または他の免疫化学的方法により対象由来の生体サンプルにおいて、以下の式:
0006639512.tif 000060
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階; および
(2)正常対照サンプルにおける化合物のレベルと比較して対象が化合物のレベル上昇を有する場合に、対象に疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階
を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法を提供する。
【０１４９】
ある種の態様において、本明細書において記述される方法(例えば、第1、第2、第3、第4、第5、第6、第7、第8、第9、第10、第11、第12、第13、第14または第15の態様において記述される方法)について、疾患または障害は2型糖尿病または前糖尿病である。1つの態様において、前糖尿病は、単独の空腹時グルコース障害(IFG)、単独のグルコース耐性障害(IGT)、IFGおよびIGTの組み合わせ、高ヘモグロビンA1Cレベル、またはそれらの組み合わせで特徴付けられる。1つの態様において、前糖尿病は5.7%〜6.4%のヘモグロビンA1Cレベルで特徴付けられる。
【０１５０】
キット
本発明は同様に、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断および/またはモニタリングするためのキットを含む。
【０１５１】
ある種の態様において、本発明のキットは、生体サンプル中の関連する小分子(X12063のような)を検出できる標識された化合物または薬剤およびサンプル中の関連する小分子(例えば、関連する小分子に対する抗体、別の分子の量を判定するための手段または化学センサ)を含むことができる。
【０１５２】
キットは同様に、例えば、緩衝剤、保存料、または安定化剤を含みうる。キットは同様に、アッセイすることができ、試験サンプルと比較することができる、対照サンプルまたは一連の対照サンプルを含有しうる。キットの各成分は、通常、個々の容器内に封入され、試験対象が関連する小分子に関係する障害を患っているかまたは発症する危険性があるかどうかを判定するための使用説明書とともに、さまざまな容器の全てが単一の包装内にある。
【０１５３】
1つの態様において、キットは、上記の本発明の化合物(例えば、変数が上記の通りである、式(I):
0006639512.tif 000061
により表される化合物またはその塩)、ならびに対象由来の生体サンプルにおいて検出された化合物のレベルに基づき対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断およびモニタリングするための使用説明書を含む。ある種の態様において、式(I)の化合物は式(II)、(III)、(IV)、(V)もしくは(VI)により表され、または化合物A、あるいはその塩である。
【０１５４】
別の態様において、キットは、式(IV):
0006639512.tif 000062
の化合物またはその塩、ならびに対象由来の生体サンプルにおいて検出された化合物のレベルに基づき対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断および/またはモニタリングするための使用説明書を含む。
【０１５５】
別の態様において、キットは、式(VI):
0006639512.tif 000063
の化合物またはその塩、ならびに対象由来の生体サンプルにおいて検出された化合物のレベルに基づき対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断および/またはモニタリングするための使用説明書を含む。
【０１５６】
ある種の態様において、式(VI)の化合物は、例えば、トリチウム(3H)または炭素14 (14C)で放射性標識される。
【０１５７】
別の態様において、上記のキットは、本化合物以外の1つまたは複数のさらなるバイオマーカーであって、疾患または障害に関連する該1つまたは複数のさらなるバイオマーカーを含む。本明細書において記述される任意のバイオマーカーを、本発明のキットにおいて用いることができる。
【０１５８】
さまざまな態様において、本明細書において記述されるキットについて、1つまたは複数のさらなるバイオマーカーは、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)、リノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)、オレイン酸塩、4-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、パントテン酸塩(ビタミンB5)、β-ヒドロキシ酪酸塩(BHBA)およびセリンならびに任意で、3-メチル-2-オキソ-酪酸、α-ケトグルタン酸塩、クレアチン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、ロイシン、オレオイルリゾホスファチジルコリン、フェニルアラニン、トリゴネリン、チロシン、バリン、ヒドロ桂皮酸、キサンチン、マンノース、3-メチル-2-オキソ吉草酸塩、グリセロールホスホリルコリン、アドレネート、3-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、2-メチルコハク酸塩、1-オクタデカノール、2-アミノアジピン酸塩、3-ヒドロキシイソ酪酸塩、α-トコフェロール、アルギニン、ベタイン、デカノイルカルニチン、ドコサテトラエン酸、グルタミン酸、リノール酸、リノレン酸、マルガリン酸、N-アセチルグリシン、オクタノイルカルニチン、パルミチン酸塩、パルミトレイン酸、パルミトイルリゾホスファチジルコリン、ステアリン酸塩、トレオニンおよびトリプトファンならびにそれらの組み合わせより選択される。
【０１５９】
ある種の態様において、本発明のキットは、上記の本発明の化合物、1つまたは複数のさらなるバイオマーカーとして2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)およびリノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)を含む。
【０１６０】
そのようなバイオマーカーによって、対象をインスリン抵抗性、インスリン障害またはインスリン感受性と分類することが可能になる。特定の態様において、本明細書において記述される方法およびキットで用いるためのバイオマーカーは、2-ヒドロキシ酪酸塩、リノレオイルリゾホスファチジルコリン、オレイン酸塩、セリン、グリシン、チロシン、α-ケトグルタン酸塩、パントテン酸塩、3-ヒドロキシ酪酸塩および4-メチル-2-オキソ-吉草酸塩を含む。
【０１６１】
ある種の態様において、本発明のキットは、式(VI)の化合物(すなわち、X12063)ではないクロマトグラフィーの内部標準を含む。内部標準は、試験対象の生体サンプルにおける式(IV)または(VI)の化合物のレベルを判定するためのものである。
【０１６２】
1つの態様において、内部標準は、式(IV)または(VI)の化合物と同じクロマトグラフィー溶出プロファイル(液体クロマトグラフィー溶出プロファイルのような)を有する。
【０１６３】
1つの態様において、式(IV)の化合物のレベルを判定するための内部標準は、式(VII)の化合物である。したがって、ある種の態様において、本発明のキットは以下の式:
0006639512.tif 000064
により表される化合物またはその塩、ならびに対象由来の生体サンプルにおいて検出された式(IV)の化合物のレベルに基づき対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断および/またはモニタリングするための使用説明書を含む。
【０１６４】
1つの態様において、式(VI)の化合物のレベルを判定するための内部標準は、式(VII)の化合物である。したがって、ある種の態様において、本発明のキットは以下の式:
0006639512.tif 000065
により表される化合物またはその塩、ならびに対象由来の生体サンプルにおいて検出された式(VI)の化合物のレベルに基づき対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断および/またはモニタリングするための使用説明書を含む。
【０１６５】
ある種の態様において、式(VII)の化合物は、例えば、トリチウム(3H)または炭素14 (14C)で放射性標識される。
【０１６６】
ある種の態様において、本明細書において記述されるキットは、対象における2型糖尿病または前糖尿病を診断および/またはモニタリングするためのものである。1つの態様において、前糖尿病は、単独の空腹時グルコース障害(IFG)、単独のグルコース耐性障害(IGT)、IFGおよびIGTの組み合わせ、高ヘモグロビンA1Cレベル、またはそれらの組み合わせで特徴付けられる。1つの態様において、前糖尿病は5.7%〜6.4%のヘモグロビンA1Cレベルで特徴付けられる。
【０１６７】
調製の方法
適当な合成方法については以下の、March, Advanced Organic Chemistry, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1985またはGreene and Wuts Protective groups in organic synthesis 2nd edition, John Wiley & sons 1991に記述のおよびRichard Larock, comprehensive organic transformations, 4th edition, VCH publishers Inc, 1989に記述の参考文献を参照することができる。
【０１６８】
ある種の態様において、本発明の化合物(例えば、式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)もしくは(VII)の化合物または化合物Aあるいはその塩(例えば、薬学的に許容される塩))は、ヒト血漿から単離することができる。
【０１６９】
1つの態様において、本発明は、以下の式:
0006639512.tif 000066
により表される化合物またはその塩を調製する方法であって、ヒト血漿から該化合物を単離する段階を含む、該方法を提供する。
【０１７０】
1つの態様において、本発明は、以下の式:
0006639512.tif 000067
により表される化合物またはその塩を調製する方法であって、ヒト血漿から該化合物を単離する段階を含む、該方法を提供する。
【０１７１】
式(IV)または(VI)の化合物は、陰イオン性でも親油性でもあるため、極性および非極性溶媒のさまざまな組み合わせを用いてヒト血漿から単離することができる。
【０１７２】
1つの態様において、ヒト血漿中のタンパク質をまず初めに、メタノールのような有機溶媒で沈殿させる。得られた懸濁液を次いで、遠心分離し、上清をろ過することができる。得られたろ液を次いで、酸性化し、陰イオン交換樹脂カラムに通すことができる。陰イオン交換カラムを酸性メタノール/水溶液のような酸性溶出液ですすぐことができる。次いで、塩基性メタノール溶液(例えば、メタノール/NH4OH溶液)のような塩基性有機溶液を用いることにより、式(IV)または(VI)の化合物をカラムから溶出させることができる。次いで、式(IV)または(VI)の化合物を含む溶出液を回収し、蒸発乾固させることができる。得られた塩/抽出混合物をメタノールのような有機溶媒中に懸濁させることができる。塩はろ過によって懸濁液から除去することができる。得られたろ液を次いで、シクロヘキサンのような非極性有機溶媒で抽出して、抽出物中の脂質成分を除去することができる。極性層(またはメタノール層)を回収し、蒸発乾固させることができる。得られた材料を1-ブタノールのような有機溶媒中に懸濁させ、ろ過することができる。得られた有機溶液を水で抽出して、抽出物中の非常に極性の高い化合物を除去することができる。次いで、有機層を蒸発乾固させ、水に溶解することができる。水溶液を酢酸エチルのような有機溶媒で抽出して、中度の極性を有する非イオン性化合物を除去することができる。次いで水層を回収し、蒸発乾固させて、粗生成物を得ることができ、これを液体クロマトグラフィーによってさらに精製することができる。1つの態様において、粗生成物をシリカカラム、より具体的にはC18逆相シリカカラムによって精製する。
【０１７３】
別の態様において、本発明は、式(VII)の化合物、つまりX12063 (すなわち、式(VI)の化合物)の合成異性体を調製する方法を提供する。本方法は、
(1) 常緑のマラバルニワウルシ(Ailanthus triphysa)の樹脂から式3の化合物：
0006639512.tif 000068
を単離する段階;
(2) 式3の化合物を酸化試薬と反応させて式4の化合物:
0006639512.tif 000069
を生ずる段階;
(3) 式4の化合物を還元試薬と反応させて式5の化合物:
0006639512.tif 000070
を生ずる段階;
(4) 式5の化合物を硫酸と反応させて式(VII)の化合物を生ずる段階
を含む。
【０１７４】
1つの態様において、式3の化合物は、マラバルニワウルシの樹脂をヘキサンのような有機溶媒で抽出することによって単離される。
【０１７５】
任意の適当な酸化試薬を上記方法の段階(2)において用いることができる。1つの態様において、酸化試薬はクロロクロム酸ピリジニウム(PCC)である。
【０１７６】
任意の適当な還元試薬を上記方法の段階(3)において用いることができる。1つの態様において、還元試薬は、LiAlH4およびNaBH4を含むが、これらに限定されることはない。1つの態様において、還元試薬はNaBH4である。
【０１７７】
本発明者らが成功裏にたどったX12063の異性体を得るための1つの経路は、以下の通りである。
【０１７８】
マラバリコール(Malibaricol)の単離
マラバルニワウルシ抽出物(2.0 g, Halmaddi - India, Equinox Aromatics, LLC)およびヘキサン(40 mL)をそれぞれ含有する8本の遠心分離管を、30分間ボルテックスし、5分間遠心分離した。上清を丸底フラスコに移し、溶媒を減圧下で除去して粗抽出物11 gを得た。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(60Å、230〜400メッシュ、10〜20%のヘキサン/酢酸エチルでの勾配溶出)により精製して、マラバリコール2.3 g (収率14%)を淡黄色の油状物として得た。
【０１７９】
マラバリコールの酸化
マラバリコール(2.43 g, 5.29 mmol, 1.0当量)のDCM/HOAc (3:1, 100 mL)撹拌溶液に、PCC (2.84 g, 13.2 mmol, 2.5当量)を添加した。反応混合物を50℃で1時間撹拌し、室温に冷却した。反応混合物をシリカゲル(50 g)とともに5分間撹拌し、シリカゲルのパッドを通してろ過した(DCMを用いてシリカから化合物を完全に洗浄した)。溶媒を減圧下で除去し、得られた油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(60Å、230〜400メッシュ、10〜50%のヘキサン/酢酸エチルでの勾配溶出)により精製して、ラクトン1.30 g (収率71%)を淡黄色の油状物として得た。
【０１８０】
A環ケトンの還元
0℃のケトン(250 mg, 0.722 mmol, 1.0当量)のTHF/MeOH (1:2, 7.5 mL)撹拌溶液に、NaBH4 (32 mg, 0.867 mmol, 1.2当量)を添加した。反応混合物を15分間撹拌し、10% H2SO4 (10 mL)の添加によってクエンチし、DCMで抽出した。合わせた有機抽出物をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(60Å、230〜400メッシュ、10〜50%のヘキサン/酢酸エチルでの勾配溶出)により精製して、アルコール128 mg (収率51%)を淡黄色の油状物として得た。
【０１８１】
エクアトリアルアルコールの硫酸化
室温のピリジン(1.25 mL)およびH2SO4 (40 μL, 0.75 mmol, 3.0当量)撹拌溶液に、Ac2O (70 μL, 0.75 mmol, 3.0当量)を添加した。混合物を50℃で5分間撹拌し、アルコール(87 mg, 0.25 mmol, 1.0当量)のピリジン(0.5 mL)溶液を滴下した。20分後、反応混合物を室温に冷却し、25% NH4OH (185 μL, 約0.8当量のNH3)を添加した。フラスコの底に粘着性固体が沈降した後、液体を別のフラスコに移し、さらに25% NH4OH (185 μL, 約0.8当量のNH3)を添加した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を水(約1 mL)に溶解し、真空液体クロマトグラフィー(C18逆相シリカゲル, 20〜50%のMeOH/水で溶出)によって精製した。画分を減圧下で(約50℃にて)濃縮し、約6時間保持して、硫酸アンモニウム塩63 mg (56%)を白色固体として得た。
0006639512.tif 000071
この方法の主要な参考文献はChawla, A.; Dev, S. 「A new class of triterpenoids from Ailanthus Malabarica DC derivatives of malabaricane」, Tetrahedron Lett. 1967, (48), 4837-42およびPaton, William F.; Paul, Iain C.; Bajaj, Ashok G.; Dev, Sukh. 「The structure of malabaricol」, Tetrahedron Lett. 1979, (43), 4153-4である。
【実施例】
【０１８２】
実施例1. 代謝産物レベルは前糖尿病対象において有意に上昇する
血糖管理の5つのカテゴリの対象から空腹時血漿サンプルを集めることにより、X12063 (または上記の化合物A)のレベルを測定した。カテゴリ1の対象(642名)は、正常空腹時グルコース/正常グルコース耐性(NFG/NGT)を有していた。カテゴリ2の対象(224名)は、空腹時グルコース障害/正常グルコース耐性(IFG)/NGTを有していた。カテゴリ3の対象は、正常空腹時グルコース/グルコース耐性障害(NFG/IGT)を有していた。カテゴリ4の対象(57名)は、空腹時グルコース障害/グルコース耐性障害(IFG/IGT)を有していた。カテゴリ5の対象(12名)は、2型糖尿病を有していた。空腹時血漿グルコース試験に基づいてNFG/IFG状態を判定し、経口グルコース負荷試験(OGTT)を用いてNGT/IGT状態を判定した。糖尿病を有する患者は、必ずしもIFGまたはIGTのカテゴリを経るというわけではなかった。メタノールを用い血漿サンプルからX12063 (および他のバイオマーカー)を抽出して分析サンプルを作製し、LC-MS/MSを用いて分析サンプル中のレベルを判定した。データから、X12063のレベルが対象の血糖のカテゴリを反映していることが示される。これらの対象におけるX12063および別の例示的なバイオマーカーのデータを、図1に提示する。
【０１８３】
X12063の相対的な空腹時血漿レベルは、その血糖状態に基づく健常な、非糖尿病対象のコホートにおいて増加した。コホートは、正常対象623名、単独の空腹時グルコース障害(iIFG)を有する対象220名、単独のグルコース耐性障害(iIGT)を有する対象56名、ならびに空腹時グルコース障害およびグルコース耐性障害の両方を有する対象56名からなった。単独の空腹時グルコース障害(iIFG)、単独のグルコース耐性障害(iIGT)、ならびにIFGおよびIGTの組み合わせの前糖尿病状態において、X12063レベルは正常対象のレベルと比較して有意に高かった。
【０１８４】
結果を表1に提示する。表1において、X12063の平均レベルを提示し、括弧内に標準偏差を示す。p値はウィルコクソン(Wilcoxon)試験によって判定した。FPGは空腹時血漿グルコースを意味し; 2hPGは経口グルコース負荷試験から2時間で測定された血漿グルコースのレベルを意味し; 正常は正常空腹時血漿グルコースを意味し; 正常グルコース耐性はFPG＜100および2hPG＜140 mg/dlを意味し; iIFGは、100≦FPG＜126および2hPG＜140 mg/dlである単独の空腹時グルコース障害を意味し; iIGTは、FPG＜100および140≦2hPG＜200 mg/dlである単独のグルコース耐性障害を意味し; ならびにIFGとIGTとを組み合わせたものは、100≦FPG＜126および140≦2hPG＜200 mg/dlを意味する。
【０１８５】
（表１）
0006639512.tif 000072
【０１８６】
2つの独立した研究において、X12063は、経口グルコース負荷試験(OGTT)中2時間の時点で測定されたグルコースのレベルと相関した(r=0.35, r=0.32)。これらの研究において、化合物のレベルにより、0.68〜0.70の受信者動作特性曲線(AUC)下の領域でグルコース耐性障害(IGT)を有する対象が予測された(分類された)。第1の研究は対象517名からなり、そのうちの23%がIGTであり、第2の研究は対象300名からなり、そのうちの21%がIGTであった。これらの研究において、空腹時血漿グルコースのAUCは0.59 (研究1)および0.64 (研究2)であった。
【０１８７】
一個抜き交差検証(Leave One Out Cross Validation; LOOCV)モデルは、測定値の組み合わせを用いてIGT対象を予測するために開発された。X12063 + AHB + LGPCからなるモデルのAUCは、研究1のコホートで0.766、研究2のコホートで0.797であった。X12063 + AHB + LGPC + セリン + イソロイシンからなるモデルの場合、AUCは研究1のコホートについては0.785、研究2のコホートについては0.805であった。4〜10個の変数からなる追加のモデルを作製して、研究コホートにおけるIGT対象を予測し、モデルごとにAUCを判定した。数千のモデルを作製し、その一部は0.78超のAUCを有していた。少なくとも0.800のAUCを有する例示的なモデルを表2に提示する。各モデルにおいて用いられる変数は、アスタリスクで示される。7つの変数を用いるさらなるモデルを、LOOCVを用いて作製し、AUCを判定した。実例の7変数モデルを表3に提示する。
【０１８８】
（表２）IGTを予測するための多変量モデル
0006639512.tif 000073
【０１８９】
（表３）IGTを予測するための7変数の多変量モデル
0006639512.tif 000074
【０１９０】
実施例2. X12063を用いた2型糖尿病の危険性のある対象における食事および運動療法のモニタリング
2型糖尿病への進行の危険性(前糖尿病IFGおよび/もしくはIGTのあるまたは糖尿病の危険性スコア(FINDRISC)＞12#を有する対象170名が、12週間の生活様式(食事および運動)の介入を受けた。ベースライン時に、本研究は女性49%で、平均年齢54歳および平均BMI 30.9であった。空腹時血漿X12063レベルは、生活様式の介入によって有意に低下した。
【０１９１】
（表４）12週間の変化の要約
0006639512.tif 000075
# Lindstrom J, Tuomilehto J. The diabetes risk score: a practical tool to predict type 2 diabetes risk. Diabetes Care. 2003; 26(3):725-31.
【０１９２】
実施例3 X12063を用いたIFG対象における食事、運動およびメトホルミン療法のモニタリング
IFGを有する対象33名が、生活様式(食事および運動)の変化と薬物(メトホルミン、用量: 2 g/日)療法の両方を含む12週間の介入を受けた。ベースライン時に、本研究は女性49%で、平均年齢54歳および平均BMI 30.9であった。空腹時血漿X12063レベルは、介入によって有意に低下した。
【０１９３】
（表５）12週間の変化の要約
0006639512.tif 000076
【０１９４】
実施例4. 211-023 (化合物2)の合成
化合物2はマラバリコール(化合物3)から3段階で合成された。スキーム1を参照されたい。
0006639512.tif 000077
【０１９５】
マラバリコール(化合物3)は、インド、アジア、オーストラリアの全域で生育する常緑のマラバルニワウルシ(別名アイランタス・マラバリカ(Ailanthus malabarica))の樹脂の中に見出される。樹脂のヘキサン抽出物(Srinivas)を酸化条件(Chawla)に供し、側鎖の切断およびラクトン(化合物4)の形成をもたらした。NaBH4によるケトンの還元で、エクアトリアルアルコール(化合物5)だけが得られた。次いで、標準条件下でアルコールを反応させて硫酸塩を形成し、後処理中にアンモニウム塩に変換し、上で詳述した中性逆相クロマトグラフィー条件を用いてアンモニウム塩(化合物2)として単離した。
【０１９６】
マラバリコール(化合物3)の単離
マラバルニワウルシ抽出物(2.0 g, Halmaddi, India, Equinox Aromatics LLC)およびヘキサン(40 mL)をそれぞれ含有する8本の50 mL遠心分離管を、30分間ボルテックスし、5分間遠心分離した。上清を丸底フラスコに移し、溶媒を減圧下で除去して粗抽出物11 gを得た。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(60Å、230〜400メッシュ、10から20%のヘキサン/酢酸エチルでの勾配溶出)により精製して、マラバリコール(化合物3) 2.3 g (収率14%)を淡黄色の油状物として得た。
【０１９７】
マラバリコールラクトン(化合物4)
マラバリコール(2.43 g, 5.29 mmol, 1.0当量)のDCM/HOAc (3:1, 100 mL)撹拌溶液に、PCC (2.84 g, 13.2 mmol, 2.5当量)を添加した。反応混合物を50℃で1時間撹拌し、室温に冷却した。反応混合物をシリカゲル(50 g)とともに5分間撹拌し、シリカゲルのパッドを通してろ過した(DCMを用いてシリカから化合物を完全に洗浄した)。溶媒を減圧下で除去し、得られた油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(60Å、230〜400メッシュ、10から50%のヘキサン/酢酸エチルでの勾配溶出)により精製して、ラクトン4、1.30 g (収率71%)を淡黄色の油状物として得た。1H NMRを300 MHzのVarian Inovaで記録し、CDCl3中で取った。質量スペクトルをThermo Scientific Orbitrap Elite Hybrid Ion Trap-Orbitrap質量分析計(Mass Spectrometer)で記録した。
0006639512.tif 000078
【０１９８】
マラバリコールラクトンの硫酸化アルコール(化合物2)
0℃のケトン(250 mg, 0.722 mmol, 1.0当量)のTHF/MeOH (1:2, 7.5 mL)撹拌溶液に、NaBH4 (32 mg, 0.867 mmol, 1.2当量)を添加した。反応混合物を15分間撹拌し、10% H2SO4 (10 mL)の添加によってクエンチし、DCMで数回抽出した。合わせた有機抽出物をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(60Å、230〜400メッシュ、10から50%のヘキサン/酢酸エチルでの勾配溶出)により精製して、アルコール5、128 mg (収率51%)を淡黄色の油状物として得た。次いで、ピリジン(0.5 mL)の溶液としてアルコール(87 mg, 0.25 mmol, 1.0当量)を調製した。別々に、室温でピリジン(1.25 mL)およびH2SO4 (40 μL, 0.75 mmol, 3.0当量)の撹拌溶液にAc2O (70 μL, 0.75 mmol, 3.0当量)を添加した。混合物を50℃で5分間撹拌し、アルコール/ピリジン溶液を滴下した。20分後、反応混合物を室温に冷却し、25% NH4OH (185 μL, 約0.8当量のNH3)を添加した。フラスコの底に粘着性固体が沈降した後、上清を別のフラスコに移し、さらに25% NH4OH (185 μL, 約0.8当量のNH3)を添加した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を水(約1 mL)に溶解し、真空液体クロマトグラフィー(C18逆相シリカゲル, 20から50%のMeOH/水で溶出)によって精製した。純粋な画分を減圧下で(約50℃にて)濃縮し、約6時間保持して、硫酸アンモニウム塩(2) 63 mg (56%)を白色固体として得た。
【０１９９】
実施例5. X12063の単離、精製および構造解明
1. 一般材料
血漿サンプルは、Bioreclamation, LLC. (Westbury, NY)から購入した。d7-グルコース、d3-ロイシン、d8-フェニルアラニン、d6-コレステロール、d3-メチオニン、d15-オクタン酸およびd5-トリプトファンの真正の標準物質は、Cambridge Isotope Laboratories (Andover, MA)から購入した。D19-デカン酸、d27-テトラデカン酸、d35-オクタデカン酸およびd2-エイコサン酸は、C/D/N Isotopes, Inc. (Pointe-Claire, Quebec)から調達した。ブロモフェニルアラニン、DL-4-クロロフェニルアラニン、DL-2-フルオロフェニルグリシンおよびトリデカン酸は、Sigma-Aldrich Co. LLC. (St. Louis, MO)によって提供された。分析用および半分取用C18カラムは、Waters (Milford, MA)から購入した。順相キラルカラムは、Chiral Technologies Inc. (West Chester, PA)から購入した。陰イオン交換樹脂カラムおよび樹脂(より大規模な固相抽出用)は、Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA)から購入した。
【０２００】
a) X12063の抽出
血漿中のX12063の存在量が少ないため、NMR分析に十分な材料を得るには血漿40 Lを抽出する必要があると推定された。抽出の各段階をLC-MSによってモニターし、抽出効率に向けて最適化した。抽出のため、本発明者らは、X12063の二つの物理化学的性質、つまりその陰イオン性および親油性を利用し、極性および非極性溶媒分配のさまざまな組み合わせを用いることにより抽出可能とした。
【０２０１】
計40 Lのヒトクエン酸塩処理血漿を1 Lの部分量で処理した。血漿1 Lをメタノール3 Lと激しく混合することにより、血漿をタンパク質沈殿に供した。得られた懸濁液を遠心分離した。上清をろ過し、その後、等量の脱イオン水で希釈して、血漿1 Lあたり抽出物およそ7 Lを得た。抽出物7 Lを12 N HCl (抽出物1 L当たり20 mL)で酸性化し、ロードする前に、脱イオン水2 Lですすぎ0.1 N HCl水1 Lで平衡化した陰イオン交換樹脂カラム(300 gのAmberlite IRA 96, 3”IDカラム)に通した。抽出物をロードした後に、樹脂をメタノール/水(1:3)中0.1 N HCL 1 Lですすぎ、その後、メタノール中4%のNH4OH 1 Lで溶出した。ほぼ無色の溶出液の最初の300 mLを捨てた。その後の溶出液(黄色) 700 mLを集め、ほぼ乾固するまで蒸発させた。蒸発中に塩化アンモニウムが沈殿した。抽出物/塩混合物を50 mLのメタノールに5回連続して懸濁し、ろ過した。得られたメタノール溶液をシクロヘキサン250 mLで抽出した(脂質を除去するため)。メタノール層をほぼ乾固するまで蒸発させた。再度、塩化アンモニウム塩の沈殿物が形成された。抽出物/塩混合物を50 mLの1-ブタノールに5回連続して懸濁し、ろ過した。1-ブタノール相を水250 mLで抽出した(非常に極性の高い化合物の除去)。1-ブタノール層を蒸発乾固し、水200 mLに溶解し、酢酸エチル250 mLで抽出した(中度極性の非イオン性化合物の除去)。水層を蒸発乾固させ、メタノール2 mLおよび水1 mLを順次添加することにより溶解させ、等量の水でさらに希釈した。
【０２０２】
血漿のロット5 L分からの抽出物を合わせ、C18逆相真空液体クロマトグラフィーに供した。抽出物をロードする前に、メタノール30 mLで活性化しその後水30 mLですすいだC18逆相シリカゲル(VersaFlash C18, 45〜75 μm, Supelco) 10 gを有する60 mLのポリプロピレンカラムに、抽出物をロードした。メタノール/水の段階勾配により真空下でカラム溶出を行った。10〜15 mLの画分を集め、LC-MSにより試験した。X12063含有画分(50〜60%メタノール)を合わせ、蒸発乾固させた。
【０２０３】
b) 精製
血漿のロット1×5 Lの抽出からの乾燥VLC X12063画分をメタノール/水(1:3)に溶解し、質量分析検出(HESI源を有するThermo Quantum Ultra; 陰イオンモード)を用いてゆるやかな勾配; 7分で45% Bから65% B、2分で65% Bから98% B (カラムを洗浄するため); 移動相A: 水中6.5 mMの重炭酸アンモニウム; 移動相B: 水/メタノール(1:19)中6.5 mMの重炭酸アンモニウムを使いBEH C18逆相カラム(XBridge BEH C 18, 2.5 μm, 4.6 × 150 mm, Waters)でクロマトグラフィー分離した。X12063画分の回収は、Thermo Quantum質量分析計の切替弁を利用して時間差で行った。X12063画分の分析により、アンドロステロン硫酸塩も含有する画分中にX12063が濃縮されていたことが実証された。
【０２０４】
X12063画分を蒸発乾固させ、再度、今回は質量分析検出(HESI源を有するThermo Quantum Ultra; 陰イオンモード)を用いキラルOJ-3Rカラム(2.5 μm, 2.1×100 mm, Chiral Technologies)および定組成勾配; 7分間45% B; 移動相A: 水中6.5 mMの重炭酸アンモニウム; 移動相B: 水/メタノール(1:19)中6.5 mMの重炭酸アンモニウムを使った二次精製のために、メタノール/水(1:3)に溶解した。X12063画分の回収は、Thermo Quantum質量分析計の切替弁を利用して時間差で行った。X12063画分の分析により、X12063が精製されていたことが実証された。
【０２０５】
残りの血漿ロット5 Lからの抽出物を合わせ、Scynexis Inc. (Durham, NC)によりXBridge C18逆相カラム(5 μm, 10×150 mm, Waters Corp.) 勾配; 12分間50% B、3分間で50% Bから80% B、カラムを洗浄するため0.6分間80% B; 移動相A: 水中8.2 mMの重炭酸アンモニウム; 移動相B: 水/メタノール(5:95)中8.2 mMの重炭酸アンモニウムを用いたLC-MS精製によって精製した。X12063画分を質量分離精製によって回収した。この大規模精製の後に、X12063画分を蒸発乾固させ、メタノール/水(1:3)中で再構成し、キラルOJ-3Rカラムを上記のように用いて二次精製を行った。
【０２０６】
全てのX12063画分のLC-MS分析によって各画分の純度が確認されたら、画分を合わせ、蒸発乾固して、構造解明のための精製化合物のLC-MS/MSnおよびNMR分析を可能にした。
【０２０７】
c) メタボロームプロファイリングおよび構造解明LC-MS/MS分析
LC-MS/MS分析のための血漿サンプルは、必要になるまで-80℃で保存し、その後、抽出直前に氷上で解凍した。LC-MS/MS分析のためのサンプルの抽出は、自動液体取扱ロボット(Hamilton LabStar, Hamilton Robotics, Inc., Reno, NV)を用いて実行し、ここでメタノール450 μLをサンプル100 μlに添加してタンパク質を沈殿させた。メタノールに4つの回収標準物質、つまりDL-2-フルオロフェニルグリシン、トリデカン酸、d6-コレステロールおよび4-クロロフェニルアラニンを含めて、抽出効率の確認を可能にした。各サンプルのアリコットを抽出物から採取し、乾燥させた。次いで、陰イオン分析のために、水中6.5 mMの重炭酸アンモニウム(pH 8) 50 μL中でサンプルを再構成した。再構成溶媒に装置の内部標準物質(上記で一般材料に列挙したように)を含めて、装置の性能を評価し、クロマトグラフィックアライメントのための保持指標マーカーとした。
【０２０８】
Waters Acquity UPLC (Waters, Milford, MA)を用いて、全血漿抽出物とクエン酸塩処理血漿からの精製抽出物の両方のLC分離を行った。逆相陰イオン分析では、水中6.5 mMの重炭酸アンモニウム, pH 8 (A)および95%メタノール/5%水中6.5 mMの重炭酸アンモニウム(B)からなる移動相を用いた。勾配は11分間の全実行時間に対し、4分間で0.5% Bから70% B、その後に98% Bへの0.5分間の急勾配、0.9分間98% Bで保持、次に0.2分で0.5% Bに戻し、最後に0.5% Bで5.4分間平衡というプロファイルを用い0.35 ml/分で実行した。サンプル注入量は5 μLとし、2×ニードルループオーバーフィルを用いた。分離には、40℃に保持した2.1 mm×100 mm Waters BEH C18 1.7 μmカラムを利用した。
【０２０９】
主に、ThermoFisher Scientific (Waltham, MA) Orbitrap Eliteを、定方向に断片化ラウンドを行うその能力を考慮して構造的特徴分析のために利用した。また、Q-Exactive (ThermoFisher)を用いて、1/3質量カットオフの規則に従わない四重極に基づく断片化スペクトルを生成した。構造解明のため、詳細な精密質量断片化ツリーが生成されるように、関心対象のピークを複数ラウンドの断片化に供した。モニタリングされた全ての標準物質について5 ppm未満の質量誤差を維持するために、必要に応じて質量較正を行った。
【０２１０】
d) NMR分析
入手可能な精製材料をd6-DMSOのアリコット200 μLに溶解することにより、X12063および211-023 (上記の実施例4を参照のこと)のNMR溶液を調製した。推定量はX12063の場合およそ25〜50 μgおよび211-023の場合およそ3〜5 mgであった。溶液を3 mm NMR管に移し、D2Oのアリコット20 μlを各管に添加して、交換可能なプロトンを除去した。
【０２１１】
NMRデータは、三重共鳴非放射性プローブおよび低温炭素プリアンプを備えたAgilent DD2 800 MHz NMR分光計を用いて25℃で記録した。1Hスペクトルは、水および残存DMSOピークのPURGE (Simpson)予備飽和、8 kHzのスペクトル幅(SW)、3.8秒の捕捉時間(AT)、2秒の予備飽和遅延で得て、32kポイントを用いてデジタル化した。zTOCSY (Trippleton)およびNOESY (Macura)データを、8 kHz SWおよび2Kポイントで記録した。同種核2D配列は、Agilentからの標準的な配列であり、水および残存DMSOピークのPURGE (Simpson)予備飽和で用いた。TOCSYデータは、128増分、X12063の場合は増分あたり40スキャン、211-023の場合は4スキャン、ならびにTOCSYでは30および100 ms、NOESYでは500 msの混合時間での多元法を用い位相敏感モードで集めた。また、NOESYデータは多元法を用い位相敏感モードで集めたが、200増分、および増分あたり48スキャンを用いた。最終的な2D行列は、ガウス関数重み付けを両次元で用い2K×2Kであった。
【０２１２】
単結合1H、13C 2D化学シフト相関スペクトルは、13Cデカップリング、bipまたは断熱180°パルスを両チャンネルに対して用い感度増強HSQCシーケンスを用いた1H検出、および多重度編集を使い逆モードで記録した。(Boyer, Hu) 多元位相敏感モードではt2の2Kポイントで128時間増分2セットが得られた。時間増分ごとに320スキャンを記録し、2Dデータを、ガウス関数を用いて処理し、ゼロ充填して最終サイズ2K×2Kにした。
【０２１３】
捕捉中に13Cデカップリングなく多元位相敏感モードでプロトン検出多重結合2D相関スペクトル(HMBC)(Bax)を記録した。HMBCスペクトルを混合モード[f2で絶対値(1H)およびf1で位相敏感(13C)]でプロットした。シフトされたガウス重み付け関数をf2に沿って用い、コサイン重み付け関数をf1に沿って用いた。120時間増分2セットをt2の2Kポイントで記録し、最終サイズ2K×2Kにゼロ充填した。フィルタによる遅延は140 Hzの平均1JC,Hに対応し、X12063の場合には増分あたり600過渡応答(transients)が得られ、211-023の場合には64過渡応答が得られた。83 msの遅延(6 Hz最適化)のために長距離1H-13Cカップリングを展開させることができた。
【０２１４】
プローブリングダウンを最小限に抑えるために、炭素エコータイプのパルスシーケンス(Smith)を使い48076.92 Hz SWのみを用いて1Hデカップリング13Cスペクトルを211-023について記録した。
【０２１５】
2. LC-MS/MSおよびNMR分析
抽出物のLC-MS/MSおよびNMR分析、ならびに得られたデータと、X12063の合成由来の立体異性体(211-023、実施例4参照)に対して取得されたデータとの比較から、式(VI)に示されるようにX12063の構造および立体化学の解明が可能になった。
【０２１６】
実施例6. グルコース耐性のバイオマーカーとしてのX12063
経口グルコース負荷試験(OGTT)中の時間=0の時点で採取した空腹時血漿サンプルにおいて、3組の対象でX12063レベルを測定した。対象は、インスリン感受性と心血管疾患との間の関係(Relationship between Insulin Sensitivity and Cardiovascular disease; RISC)の研究の3年間追跡調査、および糖尿病と血管健康イニシアチブ(Diabetes Mellitus and Vascular Health Initiative; DMVhi)研究の2つのサブコホートに由来した。これらの後者2つの群は、12超の、非臨床危険性評価試験FINDRISCスコア、ならびに/またはグルコース耐性障害(IGT)および/もしくは空腹時グルコース障害(IFG)を有することによって糖尿病への進行の危険性のある対象から構成された。第1は、DEXLIFE (Diet and Exercise for Life)プログラム(DEXLIFE DMVhi, n=668)の一部である観察コホートであり、第2は食事と運動介入の研究(DEXLIFE Lifestyle Intervention (DLI) n=170)である。
【０２１７】
X12063レベルは、研究対象の全3群でいくつかの人体計測および代謝のパラメータと高度に相関することが分かった(表6)。特に、X12063レベルは、BMIおよび体重と、そして、それ程ではないが、血漿インスリンと最も強く相関している。RISC研究では、X12063レベルは正常と比べて、2型糖尿病において、ならびに3つの別個の、非重複性の前糖尿病状態: 単独のIFG、単独のIGT、およびIFGとIGTとの組み合わせにおいて有意に上昇した(表7)。これらの3つの前糖尿病状態との関連性を、年齢、性別、およびBMIの補正も含めながら、X12063レベルの1標準偏差の変化に対して各状態のオッズ比対正常を計算することによってさらに分析した。この分析により、X12063は2つのIGT状態、単独のIGTおよびIFGとIGTとの組み合わせと有意に関連したが、単独のIFGとは関連しなかった。
【０２１８】
DLI研究では、12週間の介入後に体重、FPGおよび2hPGが全て有意に低減された。これには、X12063レベルの有意な低減が伴われた。対照群は体重、FPG、2hPG、またはX12063の有意な変化を有していなかった。介入中のX12063の変化は、いくつかの有効性パラメータの変化と相関していた。最も顕著なのは体重(r=0.50)およびBMI (r=0.49)の変化に対する相関であった。
【０２１９】
（表６）X12063血漿レベルとのピアソン相関
0006639512.tif 000079
＊を除き全てのp値は0.05未満
【０２２０】
（表７）血糖カテゴリによるRISCでのX12063レベル
0006639512.tif 000080
全ての値=面積比; 平均±SD; vs 正常: †ウィルコクソン検定によりp<0.0001
【０２２１】
本発明は同様に、以下の態様を提供する。
【０２２２】
態様1.
(1) 対象由来の生体サンプルにおける式(I):
0006639512.tif 000081
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階であって、式中:
環A、BおよびCがハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルからなる群より選択される1つもしくは複数の置換基で置換されてもよく;
Z1が-OH、-ORa、-OSO3H、-OPO(OH)2、-OC(=O)Rb、-OC(=O)NRcRdもしくは=Oであり;
R1が(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
R2がH、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
R3がH、-C(=O)Rb、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
またはOR3がR2と一緒になって、=O、(C1〜C6)アルキル、-OHもしくは-ORaで置換されてもよい3〜9員環を形成し;
Raが(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
RbがHもしくは(C1〜C6)アルキルであり;
RcおよびRdが各々独立してHもしくは(C1〜C6)アルキルであり; ならびに
Re、Rf、RgおよびRhが各々独立してHもしくは(C1〜C6)アルキルであり;
式中で上記の(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニル基の各々が、ハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、-OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、ハロ(C1〜C6)アルキルおよびヒドロキシル(C1〜C6)アルキルからなる群より独立して選択される1〜5個の置換基で置換されてもよい、段階; ならびに
(2) 生体サンプルにおける該化合物のレベルを、正常対照サンプルにおける該化合物のレベルと比較する段階
を含み、生体サンプルにおける該化合物のレベル変化が対象における疾患または障害を示す、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断するための方法。
【０２２３】
態様2.
正常対照サンプルにおける化合物のレベルと比較して生体サンプルにおいて化合物のレベル変化が存在する場合に、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法で対象を処置する段階をさらに含む、態様1の方法。
【０２２４】
態様3.
(1) 対象から第1の時点で得られた第1の生体サンプルにおける式(I):
0006639512.tif 000082
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階であって、式中:
環A、BおよびCがハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルからなる群より選択される1つもしくは複数の置換基で置換されてもよく;
Z1が-OH、-ORa、-OSO3H、-OPO(OH)2、-OC(=O)Rb、-OC(=O)NRcRdもしくは=Oであり;
R1が(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
R2がH、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
R3がH、-C(=O)Rb、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
またはOR3がR2と一緒になって、=O、(C1〜C6)アルキル、-OHもしくは-ORaで置換されてもよい3〜9員環を形成し;
Raが(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
RbがHもしくは(C1〜C6)アルキルであり;
RcおよびRdが各々独立してHもしくは(C1〜C6)アルキルであり; ならびに
Re、Rf、RgおよびRhが各々独立してHもしくは(C1〜C6)アルキルであり;
式中で上記の(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニル基の各々が、ハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、-OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、ハロ(C1〜C6)アルキルおよびヒドロキシル(C1〜C6)アルキルからなる群より独立して選択される1〜5個の置換基で置換されてもよい、段階;
(2) 第1の時点よりも遅い第2の時点で対象から得られた第2の生体サンプルにおける該化合物のレベルを判定する段階; および
(3) 第2の生体サンプルにおける該化合物のレベルを、第1の生体サンプルにおける該化合物のレベルと比較する段階
を含み、該化合物のレベルの変化が対象における疾患の進行または退行を示す、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害の進行または退行をモニタリングするための方法。
【０２２５】
態様4.
疾患または障害の退行が観察される場合に、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法で対象を処置する段階をさらに含む、態様3の方法。
【０２２６】
態様5.
対象におけるインスリン抵抗性処置、代謝障害処置、糖尿病処置または前糖尿病処置の有効性をモニタリングする方法であって、
(1) 対象由来の生体サンプルにおける式(I):
0006639512.tif 000083
の化合物またはその塩のレベルを判定する段階であって、式中:
環A、BおよびCがハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルからなる群より選択される1つもしくは複数の置換基で置換されてもよく;
Z1が-OH、-ORa、-OSO3H、-OPO(OH)2、-OC(=O)Rb、-OC(=O)NRcRdもしくは=Oであり;
R1が(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
R2がH、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
R3がH、-C(=O)Rb、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
またはOR3がR2と一緒になって、=O、(C1〜C6)アルキル、-OHもしくは-ORaで置換されてもよい3〜9員環を形成し;
Raが(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
RbがHもしくは(C1〜C6)アルキルであり;
RcおよびRdが各々独立してHもしくは(C1〜C6)アルキルであり; ならびに
Re、Rf、RgおよびRhが各々独立してHもしくは(C1〜C6)アルキルであり;
式中で上記の(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニル基の各々が、ハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、-OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、ハロ(C1〜C6)アルキルおよびヒドロキシル(C1〜C6)アルキルからなる群より独立して選択される1〜5個の置換基で置換されてもよい、段階;
(2) インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病に有効な治療法で対象を処置する段階;
(3) 処置後の第2の時点で対象から得られた、対象由来の第2の生体サンプルを分析して、式(I)の化合物のレベルを判定する段階; ならびに
(4) 第1のサンプルにおける式(I)の化合物のレベルを第2のサンプルにおける式(I)の化合物のレベルと比較して、インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための処置の有効性を評価する段階
を含む、該方法。
【０２２７】
態様6.
対象を処置する段階が、疾患または障害を処置するのに適した治療剤の有効量を対象に投与することを含む、態様2、4および5のいずれかの方法。
【０２２８】
態様7.
治療剤が抗糖尿病薬または抗肥満薬である、態様6の方法。
【０２２９】
態様8.
治療剤が、メトホルミン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、アカルボース、テトラヒドロリプスタチン、およびフェンテルミン/トピラメートを含む群より選択される、態様6の方法。
【０２３０】
態様9.
対象を処置する段階が、対象の生活様式の改変を含む、態様2、4および5のいずれかの方法。
【０２３１】
態様10.
生活様式の改変が改変および/または活動もしくは運動の増加を含む、態様9の方法。
【０２３２】
態様11.
化合物のレベルがクロマトグラフィー、質量分析、ELISA、抗体結合または酵素反応もしくはアッセイ法によって判定される、態様1〜10のいずれかの方法。
【０２３３】
態様12.
化合物のレベルがタンデム液体クロマトグラフィー - 質量分析(LC-MS/MS)によって判定される、態様11の方法。
【０２３４】
態様13.
生体サンプルを分析して、疾患または障害に関連する1つまたは複数のさらなるバイオマーカーのレベルを判定する段階をさらに含む、態様1〜12のいずれかの方法。
【０２３５】
態様14.
1つまたは複数のさらなるバイオマーカーが、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)、リノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)、オレイン酸塩、4-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、パントテン酸塩(ビタミンB5)、β-ヒドロキシ酪酸塩(BHBA)およびセリンからなる群より選択される、態様13の方法。
【０２３６】
態様15.
生体サンプルを分析して、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)およびリノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)のレベルを判定する段階をさらに含む、態様14の方法。
【０２３７】
態様16.
生体サンプルを分析して、3-メチル-2-オキソ-酪酸、α-ケトグルタン酸塩、クレアチン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、ロイシン、オレオイルリゾホスファチジルコリン、フェニルアラニン、トリゴネリン、チロシン、バリン、ヒドロ桂皮酸、キサンチン、マンノース、3-メチル-2-オキソ吉草酸塩、グリセロールホスホリルコリン、アドレネート、3-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、2-メチルコハク酸塩、1-オクタデカノール、2-アミノアジピン酸塩、3-ヒドロキシイソ酪酸塩、α-トコフェロール、アルギニン、ベタイン、デカノイルカルニチン、ドコサテトラエン酸、グルタミン酸、リノール酸、リノレン酸、マルガリン酸、N-アセチルグリシン、オクタノイルカルニチン、パルミチン酸塩、パルミトレイン酸、パルミトイルリゾホスファチジルコリン、ステアリン酸塩、トレオニンおよびトリプトファンからなる群より選択される1つまたは複数のさらなるバイオマーカーのレベルを判定する段階をさらに含む、態様13〜15のいずれかの方法。
【０２３８】
態様17.
生体サンプルを分析して、空腹時グルコースレベルを判定する段階をさらに含む、態様13〜16のいずれかの方法。
【０２３９】
態様18.
化合物が構造式(II):
0006639512.tif 000084
またはその塩により表され、式中、Z1が-ORa、-OSO3H、-OPO(OH)2、-OC(=O)Rbまたは-OC(=O)NRcRdである、態様1〜17のいずれかの方法。
【０２４０】
態様19.
化合物が構造式(III):
0006639512.tif 000085
またはその塩により表され、式中:
R4、R5、R6およびR7が各々独立して、-H、ハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルからなる群より選択され;
式中、上記の(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニル基の各々が、ハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、-OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、ハロ(C1〜C6)アルキルおよびヒドロキシル(C1〜C6)アルキルからなる群より独立して選択される1〜5個の置換基で置換されてもよい、態様18の方法。
【０２４１】
態様20.
R1が(C1〜C6)アルキルである、態様18または19の方法。
【０２４２】
態様21.
R1がメチルである、態様20の方法。
【０２４３】
態様22.
R4、R5、R6およびR7が各々独立して-H、ハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、-OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、ハロ(C1〜C6)アルキルおよび(C1〜C3)アルコキシ(C1〜C6)アルキルである、態様19〜21のいずれかの方法。
【０２４４】
態様23.
R4、R5、R6およびR7が各々独立して(C1〜C6)アルキルまたはハロ(C1〜C6)アルキルである、態様22の方法。
【０２４５】
態様24.
R4、R5、R6およびR7が全てメチルである、態様23の方法。
【０２４６】
態様25.
化合物が構造式(IV):
0006639512.tif 000086
またはその塩により表される、態様1〜17のいずれかの方法。
【０２４７】
態様26.
化合物が以下:
0006639512.tif 000087
またはその塩である、態様1〜17のいずれかの方法。
【０２４８】
態様27.
化合物が少なくとも60%光学的に純粋である、態様26の方法。
【０２４９】
態様28.
化合物が少なくとも70%光学的に純粋である、態様26の方法。
【０２５０】
態様29.
化合物が少なくとも80%光学的に純粋である、態様26の方法。
【０２５１】
態様30.
化合物が少なくとも90%光学的に純粋である、態様26の方法。
【０２５２】
態様31.
化合物が少なくとも95%光学的に純粋である、態様26の方法。
【０２５３】
態様32.
化合物が少なくとも99%光学的に純粋である、態様26の方法。
【０２５４】
態様33.
化合物が不純物を実質的に含まない、態様1〜32のいずれかの方法。
【０２５５】
態様34.
化合物が少なくとも60%純粋である、態様33の方法。
【０２５６】
態様35.
化合物が少なくとも70%純粋である、態様33の方法。
【０２５７】
態様36.
化合物が少なくとも80%純粋である、態様33の方法。
【０２５８】
態様37.
化合物が少なくとも90%純粋である、態様33の方法。
【０２５９】
態様38.
化合物が少なくとも95%純粋である、態様33の方法。
【０２６０】
態様39.
化合物が少なくとも99%純粋である、態様33の方法。
【０２６１】
態様40.
式(I):
0006639512.tif 000088
により表される化合物またはその塩であって、式中:
環A、BおよびCがハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルからなる群より選択される1つもしくは複数の置換基で置換されてもよく;
Z1が-OH、-ORa、-OSO3H、-OPO(OH)2、-OC(=O)Rb、-OC(=O)NRcRdもしくは=Oであり;
R1が(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
R2がH、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
R3がH、-C(=O)Rb、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
またはOR3がR2と一緒になって、=O、(C1〜C6)アルキル、-OHもしくは-ORaで置換されてもよい3〜9員環を形成し;
Raが(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
RbがHもしくは(C1〜C6)アルキルであり;
RcおよびRdが各々独立してHもしくは(C1〜C6)アルキルであり; ならびに
Re、Rf、RgおよびRhが各々独立してHもしくは(C1〜C6)アルキルであり;
式中、上記の(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニル基の各々が、ハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、-OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、ハロ(C1〜C6)アルキルおよびヒドロキシル(C1〜C6)アルキルからなる群より独立して選択される1〜5個の置換基で置換されてもよい、化合物またはその塩; ならびに
対象由来の生体サンプルにおいて検出された該化合物のレベルに基づき対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断およびモニタリングするための使用説明書
を含むキット。
【０２６２】
態様41.
疾患または障害に関連する1つまたは複数のさらなるバイオマーカーを含む、態様40のキット。
【０２６３】
態様42.
1つまたは複数のさらなるバイオマーカーが、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)、リノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)、オレイン酸塩、4-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、パントテン酸塩(ビタミンB5)、β-ヒドロキシ酪酸塩(BHBA)およびセリンからなる群より選択される、態様41のキット。
【０２６４】
態様43.
キットがさらなるバイオマーカーとして2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)およびリノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)をさらに含む、態様42の方法。
【０２６５】
態様44.
3-メチル-2-オキソ-酪酸、α-ケトグルタン酸塩、クレアチン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、ロイシン、オレオイルリゾホスファチジルコリン、フェニルアラニン、トリゴネリン、チロシン、バリン、ヒドロ桂皮酸、キサンチン、マンノース、3-メチル-2-オキソ吉草酸塩、グリセロールホスホリルコリン、アドレネート、3-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、2-メチルコハク酸塩、1-オクタデカノール、2-アミノアジピン酸塩、3-ヒドロキシイソ酪酸塩、α-トコフェロール、アルギニン、ベタイン、デカノイルカルニチン、ドコサテトラエン酸、グルタミン酸、リノール酸、リノレン酸、マルガリン酸、N-アセチルグリシン、オクタノイルカルニチン、パルミチン酸塩、パルミトレイン酸、パルミトイルリゾホスファチジルコリン、ステアリン酸塩、トレオニンおよびトリプトファンからなる群より選択される1つまたは複数のさらなるバイオマーカーをさらに含む、態様41〜43のいずれかのキット。
【０２６６】
態様45.
式(I):
0006639512.tif 000089
により表される化合物または薬学的に許容されるその塩であって、式中:
環A、BおよびCがハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルからなる群より選択される1つもしくは複数の置換基で置換されてもよく;
Z1が-OH、-ORa、-OSO3H、-OPO(OH)2、-OC(=O)Rb、-OC(=O)NRcRdもしくは=Oであり;
R1が(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
R2がH、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
R3がH、-C(=O)Rb、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
またはOR3がR2と一緒になって、=O、(C1〜C6)アルキル、-OHもしくは-ORaで置換されてもよい3〜9員環を形成し;
Raが(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルであり;
RbがHもしくは(C1〜C6)アルキルであり;
RcおよびRdが各々独立してHもしくは(C1〜C6)アルキルであり; ならびに
Re、Rf、RgおよびRhが各々独立してHもしくは(C1〜C6)アルキルであり;
式中で上記の(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニル基の各々が、ハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、-OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、ハロ(C1〜C6)アルキルおよびヒドロキシル(C1〜C6)アルキルからなる群より独立して選択される1〜5個の置換基で置換されてもよい、化合物またはその塩。
【０２６７】
態様46.
構造式(II):
0006639512.tif 000090
または薬学的に許容されるその塩により表され、式中、Z1が-ORa、-OSO3H、-OPO(OH)2、-OC(=O)Rbまたは-OC(=O)NRcRdである、態様45の化合物。
【０２６８】
態様47.
構造式(III):
0006639512.tif 000091
または薬学的に許容されるその塩により表され、式中:
R4、R5、R6およびR7が各々独立して、-H、ハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニルからなる群より選択され;
式中、上記の(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C8)シクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルケニル、(C3〜C9)ヘテロシクロアルキル(C2〜C6)アルキニル、アリール、アリール(C1〜C6)アルキル、アリール(C2〜C6)アルケニル、アリール(C2〜C6)アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1〜C6)アルキル、ヘテロアリール(C2〜C6)アルケニルおよびヘテロアリール(C2〜C6)アルキニル基の各々が、ハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、-OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、ハロ(C1〜C6)アルキルおよびヒドロキシル(C1〜C6)アルキルからなる群より独立して選択される1〜5個の置換基で置換されてもよい、態様46の化合物。
【０２６９】
態様48.
R1が(C1〜C6)アルキルである、態様45〜47のいずれかの化合物。
【０２７０】
態様49.
R1がメチルである、態様48の化合物。
【０２７１】
態様50.
R4、R5、R6およびR7が各々独立して-H、ハロゲン、-CN、-NO2、-ORe、-SRe、-NRfRg、-C(=O)ORe、-OC(=O)Re、-C(=O)Re、-C(=O)NRfRg、-OC(=O)NRfRg、-NRhC(=O)Re、-NRhC(=O)ORe、(C1〜C6)アルキル、ハロ(C1〜C6)アルキルおよび(C1〜C3)アルコキシ(C1〜C6)アルキルである、態様47〜49のいずれかの化合物。
【０２７２】
態様51.
R4、R5、R6およびR7が各々独立して(C1〜C6)アルキルまたはハロ(C1〜C6)アルキルである、態様50の化合物。
【０２７３】
態様52.
R4、R5、R6およびR7が全てメチルである、態様51の化合物。
【０２７４】
態様53.
構造式(IV):
0006639512.tif 000092
または薬学的に許容されるその塩により表される、態様45の化合物。
【０２７５】
態様54.
以下:
0006639512.tif 000093
または薬学的に許容されるその塩である、態様45の化合物。
【０２７６】
態様55.
少なくとも60%光学的に純粋である、態様54の化合物。
【０２７７】
態様56.
少なくとも70%光学的に純粋である、態様54の化合物。
【０２７８】
態様57.
少なくとも80%光学的に純粋である、態様54の化合物。
【０２７９】
態様58.
少なくとも90%光学的に純粋である、態様54の化合物。
【０２８０】
態様59.
少なくとも95%光学的に純粋である、態様54の化合物。
【０２８１】
態様60.
少なくとも99%光学的に純粋である、態様54の化合物。
【０２８２】
態様61.
不純物を実質的に含まない、態様45〜60のいずれかの化合物。
【０２８３】
態様62.
少なくとも60%純粋である、態様61の化合物。
【０２８４】
態様63.
少なくとも70%純粋である、態様61の化合物。
【０２８５】
態様64.
少なくとも80%純粋である、態様61の化合物。
【０２８６】
態様65.
少なくとも90%純粋である、態様61の化合物。
【０２８７】
態様66.
少なくとも95%純粋である、態様61の化合物。
【０２８８】
態様67.
少なくとも99%純粋である、態様61の化合物。
【０２８９】
態様68.
薬学的に許容される担体または希釈剤および態様45〜67のいずれかの化合物または薬学的に許容されるその塩を含む薬学的組成物。
【図１】
0006639512.tif 000099