(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）に示される化合物及び成分（Ａ）を含有する医薬組成物：
成分（Ａ）：  非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物：
【化１】
0006718567.tif 000026
式（１）中、ａは０．０１以上０．７以下であり、ａ＋ｂは１であり、ｎは２５以上２５，０００以下の整数であり、各構成二糖単位の配列はランダム又はブロック状であってよく、Ｒは各構成二糖単位においてそれぞれ独立してカルボキシ基又はカルボン酸塩の基である。
【請求項２】
前記成分（Ａ）が、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、及びポリアルキレングリコールからなる群から選ばれるものである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
ポリアルキレングリコールがポリエチレングリコールである、請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
ポリエチレングリコールの重量平均分子量が２００以上６，０００以下である、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記成分（Ａ）の終濃度が、０．０１〜３０ｗｔ％である請求項１〜４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
さらに、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液及び酢酸緩衝液からなる群から選ばれる緩衝液を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
ｐＨが４．５〜７．０である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
水性組成物である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
関節疾患処置用医薬組成物である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
関節疾患が変形性関節症又はリウマチ性関節症である、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の医薬組成物が注射筒内に充填されている注射器を含む、キット。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれかに記載の医薬組成物を含むバイアル、及び注射器を含む、キット。
【請求項１３】
下記式（１）に示される化合物を含有する医薬組成物を製造する方法であって、下記式（１）に示される化合物と成分（Ａ）とを共存させる工程を含む、方法：
成分（Ａ）：  非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物：
【化１】
0006718567.tif 000027
式（１）中、ａは０．０１以上０．７以下であり、ａ＋ｂは１であり、ｎは２５以上２５，０００以下の整数であり、各構成二糖単位の配列はランダム又はブロック状であってよく、Ｒは各構成二糖単位においてそれぞれ独立してカルボキシ基又はカルボン酸塩の基である。
【請求項１４】
前記成分（Ａ）が、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、及びポリアルキレングリコールからなる群から選ばれるものである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
ポリアルキレングリコールがポリエチレングリコールである、請求項１３又は１４に記載の方法。
【請求項１６】
ポリエチレングリコールの重量平均分子量が２００以上６，０００以下である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記成分（Ａ）が、終濃度０．０１〜３０ｗｔ％で添加される、請求項１３〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
式（１）に示される化合物及び／又は成分（Ａ）が、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液及び酢酸緩衝液からなる群から選ばれる緩衝液を含む、請求項１３〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
医薬組成物のｐＨが４．５〜７．０である、請求項１３〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記医薬組成物が水性組成物である、請求項１３〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
下記式（１）に示される化合物からのジクロフェナクラクタムの生成を抑制する方法であって、下記式（１）に示される化合物と、成分（Ａ）とを共存させる工程を含む、方法：
成分（Ａ）：  非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物：
【化１】
0006718567.tif 000028
式（１）中、ａは０．０１以上０．７以下であり、ａ＋ｂは１であり、ｎは２５以上２５，０００以下の整数であり、各構成二糖単位の配列はランダム又はブロック状であってよく、Ｒは各構成二糖単位においてそれぞれ独立してカルボキシ基又はカルボン酸塩の基である。
【請求項２２】
前記成分（Ａ）が、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、及びポリアルキレングリコールからなる群から選ばれるものである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
ポリアルキレングリコールがポリエチレングリコールである、請求項２１又は２２に記載の方法。
【請求項２４】
ポリエチレングリコールの重量平均分子量が２００以上６，０００以下である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記成分（Ａ）が、終濃度０．０１〜３０ｗｔ％で添加される、請求項２１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
前記式（１）に示される化合物、及び／又は、前記成分（Ａ）が、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液及び酢酸緩衝液からなる群から選ばれる緩衝液を含むものである、請求項２１〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
ｐＨが４．５〜７．０の範囲で行われる、請求項２１〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記式（１）に示される化合物と前記成分（Ａ）とを水性溶媒中で共存させる、請求項２１〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒアルロン酸誘導体を含む医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
関節疼痛や関節変性に起因する機能障害である変形性関節症（以下、本明細書において「ＯＡ」とも称する。）は、全世界で最も一般的な関節疾患であり、特に高齢者における日常生活に支障をきたす身体的障害の主要な原因の１つとなっている。また、ＯＡと同じように関節に腫れと痛みを伴う疾患として、多発性関節炎であるリウマチ性関節症（以下、本明細書において「ＲＡ」とも称する。）が知られている。ＲＡにおいても、長期間にわたって病状が続き、症状が進行すると、軟骨や骨が破壊されて変性変形が起こり、関節を動かせる範囲が狭くなるなど日常生活に支障をきたす身体的障害がもたらされる。【０００３】
現在、変形性関節症やリウマチ性関節症等の関節症の医薬としてヒアルロン酸やその誘導体を用いた製剤が使用されている。ヒアルロン酸製剤は、通常注射剤として製剤化され、ヒアルロン酸が有する潤滑作用、衝撃吸収作用、軟骨代謝改善作用等を通じた関節症による機能障害の改善及び疼痛抑制を目的として、患部である膝、肩等の関節に直接投与される。製品化されているヒアルロン酸製剤としては、例えば精製ヒアルロン酸ナトリウムを有効成分として含むもの（例えば、アルツ（登録商標）、スベニール（登録商標））がある。当該製剤では、１週間に１回の頻度で、連続３〜５回の投与が必要とされている。
また、架橋ヒアルロン酸を有効成分とする製剤では、１週間に１回の頻度で連続３回の投与が必要とされるもの（例えば、Ｓｙｎｖｉｓｃ（登録商標））や、１回投与で治療が完結する単回投与用のもの（例えば、Ｓｙｎｖｉｓｃ−Ｏｎｅ（登録商標）、Ｇｅｌ−Ｏｎｅ（登録商標）、ＭＯＮＯＶＩＳＣ（登録商標））が知られている。【０００４】
一方、ステロイドや非ステロイド系の抗炎症化合物は、即効性のある薬剤として知られており、ＯＡやＲＡに起因した関節疼痛を緩解すること等を目的とした治療にも使用されている。例えば、ステロイドであるトリアムシノロンアセトニドは、関節リウマチなどの関節疾患を治療対象として、関節腔内注射される薬剤として市販されており、治療には１〜２週間毎の投与を必要とする。また、非ステロイド系抗炎症化合物では、例えばジクロフェナクナトリウムを有効成分として含有する軟膏や経口投与剤が知られており、抗炎症効果の発現のために１日当たり複数回の投与を必要とする。【０００５】
ヒアルロン酸又はその誘導体と、ステロイド又は非ステロイド系抗炎症化合物との混合物又は結合物を有効成分とすることも知られている。例えば架橋ヒアルロン酸とトリアムシノロンヘキサアセトニドとの混合物（ＣＩＮＧＡＬ（登録商標））が単回投与用の薬剤として製品化されている。また、ヒアルロン酸又はその誘導体と、ステロイド又は非ステロイド系抗炎症化合物とが連結した化合物も知られている。例えば特許文献１および２には、抗炎症化合物がスペーサーを介してヒアルロン酸に導入された誘導体が記載されている。これらは速効性のある疼痛緩和と機能障害の改善を通じた長期的な疼痛緩和との両方を目指したものであるが、開発の途中段階にあり、承認薬の上市には至っていない。
また、別の一例として、速効性のある疼痛緩和と機能障害の改善を通じた長期的な疼痛緩和との両方を目指し、ヒアルロン酸の糖鎖中に一定の割合で抗炎症化合物であるジクロフェナクが導入された結合体（以下、「Ｄｉｃ−ＨＡ」と言うことがある。）の開発がすすめられてきた。しかしながら、Ｄｉｃ−ＨＡについても未だ開発の途中段階にある。
ヒアルロン酸の安定化技術として、特許文献３には、ヨウ素含有還元剤及び／又は硫黄含有還元剤をヒアルロン酸に添加する方法が開示されている。また、特許文献４には、ヒアルロン酸を含む水性組成物がソルビトールによって安定化される旨の開示がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開第２００５／０６６２１４号
【特許文献２】国際公開第２０１５／００５４５８号
【特許文献３】特開平１０−２１２３０３号公報
【特許文献４】国際公開第２０１７／１３１１３０号
【発明の概要】
【０００７】
Ｄｉｃ−ＨＡから生成したジクロフェナクは低分子化合物であるため投与部位（例えば、関節内の滑膜）に溜まりにくく、早期にリンパ、血中等の投与部位外に移行する。このため、生体内への投与前の医薬組成物におけるジクロフェナクの生成は薬効の長期持続性という観点からは好ましくない。しかしながら、Ｄｉｃ−ＨＡからジクロフェナクが生成される挙動は明らかでなく、そもそも生成を阻止するだけの実用上の必要があるのか、必要があるとすれば、どのように阻止できるのか、不明であった。
本発明者らが開発を進める中で、Ｄｉｃ−ＨＡ含有組成物中にＤｉｃ−ＨＡの分解物の存在が認められた。そして、分解物を解析したところ、Ｄｉｃ−ＨＡから生成された分子は、ジクロフェナクのみならず、ジクロフェナクラクタムとして組成物中に含まれていることが判明した。また、ジクロフェナクラクタムの蓄積量が、保存期間や加熱処理等によって増大することが判明した。
本発明者らが検討を進めたところ、ジクロフェナクはそれ自体、消炎効果を有する生理活性物質であるが、そのラクタム体であるジクロフェナクラクタムは、Ｃｏｘ−２阻害活性がジクロフェナクの１／１００程度であり、生理的に活性な消炎性物質とはみなされないものであった。これにより、生理的に不活性なジクロフェナクラクタムの生成を抑制すること、及びジクロフェナクラクタムの蓄積が抑制された組成物を提供することの意義がより明確に見いだされた。
【０００８】
ヒアルロン酸の安定化技術として、特許文献３には、ヨウ素含有還元剤及び／又は硫黄含有還元剤をヒアルロン酸に添加する方法が開示されているが、これらの還元剤はヒアルロン酸の分子量低下を抑制するものであって、ヒアルロン酸結合物からのジクロフェナク成分の生成抑制に関しては記載も示唆もなされていない。また、特許文献４には、ヒアルロン酸を含む水性組成物がソルビトールによって安定化される旨の開示があるが、ここで指標とされたのは当該水性組成物の粘度低下の抑制であるから、ここで言う安定化とは、ヒアルロン酸の分子量低下の抑制であると解される。すなわち、Ｄｉｃ−ＨＡのようなヒアルロン酸結合物からのジクロフェナク成分の生成抑制に関しては記載も示唆もなされていない。
【０００９】
上記のように、ヒアルロン酸の分子量低下抑制に係る安定化技術に係る報告こそ存在しているものの、Ｄｉｃ−ＨＡの分解によるジクロフェナクラクタムの生成を抑止する技術については、知見が何ら存在していなかった。本発明者は、医薬として患者に投与する前段階ではＤｉｃ−ＨＡの分解を抑制（ジクロフェナクラクタムの蓄積を抑制）しつつ、投与後の患者の体内ではＤｉｃ−ＨＡの緩徐分解によって消炎剤としての生理活性を有するジクロフェナクを徐放したいという分解性能に関する相反する課題を見出したが、先行技術からは何ら解決指針も与えられない状態であった。
【００１０】
本発明者らは、Ｄｉｃ−ＨＡ含有組成物中において、ある種の化合物を共存させたり、Ｄｉｃ−ＨＡ含有水性組成物の濾過性を高めたりすることにより、Ｄｉｃ−ＨＡ含有組成物中のジクロフェナクラクタムの蓄積量を抑制し得ることを見出した。
【００１１】
本発明の一側面は、下記式（１）に示される化合物を含有し、さらに非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物である成分（Ａ）を含有する医薬組成物に関する。当該医薬組成物は局所投与用の処置剤（例えば、抗炎症剤、疼痛抑制剤）として好適に用いられ、特にＯＡ、ＲＡ等の関節疾患処置用組成物として好ましく使用される。本発明の別の側面は、当該医薬組成物を製造する方法であって、下記式（１）に示される化合物、及び、前記成分（Ａ）を共存させる工程を含む方法に関する。本発明のまた別の側面は、下記式（１）に示される化合物からのジクロフェナクラクタムの生成を抑制する方法であって、下記式（１）に示される化合物に対して、前記成分（Ａ）を共存させる工程を含む方法に関する。本発明のまた別の側面は、下記式（１）に示される化合物からのジクロフェナク成分の生成を抑制する方法であって、下記式（１）に示される化合物に対して、前記成分（Ａ）を共存させる工程を含む方法に関する。
本発明の別の側面は、下記式（１）に示される化合物を含み、最大処理量（Ｖｍａｘ）が１．０ｇ／ｃｍ２以上である、水性組成物に関する。
【００１２】
【化１】
0006718567.tif 000002
【００１３】
ただし、式（１）中、ａは０．０１以上０．７以下であり、ａ＋ｂは１であり、ｎは２５以上２５，０００以下の整数であり、各構成二糖単位の配列はランダム又はブロック状であってよく、Ｒは各構成二糖単位においてそれぞれ独立してカルボキシ基又はカルボン酸塩の基である。
【００１４】
本明細書において、上記式（１）に示される化合物を「ヒアルロン酸誘導体」と表現することもある。また、式（１）においてａの割合で存在する構成二糖単位を「ジクロフェナク導入構成二糖単位」と、ｂの割合で存在する構成二糖単位を「ヒアルロン酸構成二糖単位」（すなわち、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンとＤ−グルクロン酸又はその塩とがβ１，３結合した構造）とも称する。また、「ジクロフェナク導入構成二糖単位」とヒアルロン酸構成二糖単位」とを特に区別することなく、単に「構成二糖単位」とも称する。
本明細書において、成分（Ａ）及び濾過性向上剤を総称して「付加成分」とも称する。
【００１５】
より具体的な例として、本発明は次の［１］から［２３］に関する。
［１］式（１）に示される化合物、及び、成分（Ａ）を含有する医薬組成物であって、前記成分（Ａ）は非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物である、医薬組成物。
［２］関節疾患処置用である、前記［１］に記載の医薬組成物。
【００１６】
［３］前記［１］又は［２］に記載の医薬組成物が注射筒内に充填されている注射器を含む、キット。
［４］前記［１］又は［２］に記載の医薬組成物を含むバイアル、及び注射器を含む、キット。
【００１７】
［５］式（１）に示される化合物を含有する医薬組成物を製造する方法であって、式（１）に示される化合物と、前記成分（Ａ）とを共存させる工程を含む、方法。
【００１８】
［６］式（１）に示される化合物からのジクロフェナクラクタムの生成を抑制する方法であって、式（１）に示される化合物に対して、前記成分（Ａ）を共存させる工程を含む、方法。
【００１９】
［７］成分（Ａ）の、式（１）に示される化合物を含有する医薬組成物の製造における使用であって、前記成分（Ａ）と前記式（１）に示される化合物とを共存させる工程を含み、前記医薬組成物は関節疾患処置用であり、前記成分（Ａ）は、式（１）に示される化合物からのジクロフェナクラクタムの生成を抑制する化合物である、使用。
【００２０】
［８］ヒトの関節疾患処置における使用のための成分（Ａ）であり、かつ、式（１）に示される化合物と共に関節疾患処置用医薬組成物の構成成分として使用されるものである、成分（Ａ）。
【００２１】
［９］ヒトの関節疾患処置方法であって、医薬組成物を関節疾患患者の関節に投与する工程を含み、前記医薬組成物は、有効量の式（１）に示される化合物、及び、成分（Ａ）を含有する医薬組成物である、方法。
【００２２】
［１０］式（１）に示される化合物を含み、最大処理量（Ｖｍａｘ）が１．０ｇ／ｃｍ２以上である水性組成物、ただし、前記最大処理量（Ｖｍａｘ）は、孔径０．２２μｍのポリフッ化ビニリデン濾過膜を用いて、液温７０℃の前記水性組成物を０．６ＭＰａの加圧下で濾過し、有効濾過面積当たりの総濾過量を、流量が濾過開始時の１／１０以下になるまで３０秒毎に測定し、これによって得られた測定値を下記計算式ＡおよびＢに適用して導かれる値である：
【００２３】
【数１】
0006718567.tif 000003
【００２４】
【数２】
0006718567.tif 000004
ただし、上記計算式Ａ及びＢにおいて、ｔは濾過時間（分）であり、Ｖは有効濾過面積当たりの総濾過量（ｇ／ｃｍ２）であり、ａは計算式Ａの傾きであり、ｂは計算式Ａの切片である。
［１１］濾過性向上剤を更に含む、前記［１０］に記載の水性組成物。
［１２］前記濾過性向上剤が、ポリアルキレングリコール、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、及びこれらの塩、からなる群から選ばれる、前記［１１］に記載の水性組成物。
［１３］下記条件にて測定されるジクロフェナクラクタムの相対量が、０．９以下（例えば０．８以下、または０．７５以下）である、前記［１１］又は［１２］に記載の水性組成物：
式（１）に示される化合物と濾過性向上剤とを共存させた試験組成物と、濾過性向上剤を含まない以外は上記と同一組成の対照組成物を、それぞれ、６０℃の恒温槽にて１週間保存した後、試験組成物及び対照組成物中に蓄積したジクロフェナクラクタムの量を高速液体クロマトグラフィーで測定し、試験組成物中に蓄積したジクロフェナクラクタム量を、対照組成物中に蓄積したジクロフェナクラクタム量を１としたときの相対量として算出する。
［１４］下記条件にて測定されるジクロフェナクの相対量は、１未満（例えば０．９５以下、または０．９以下）である、前記［１１］〜［１３］のいずれかに記載の水性組成物：
式（１）に示される化合物と濾過性向上剤とを共存させた試験組成物と、濾過性向上剤を含まない以外は上記と同一組成の対照組成物を、それぞれ、６０℃の恒温槽にて１週間保存した後、試験組成物及び対照組成物中に蓄積したジクロフェナクの量を高速液体クロマトグラフィーで測定し、試験組成物中に蓄積したジクロフェナク量を、対照組成物中に蓄積したジクロフェナク量を１としたときの相対量として算出する。
［１５］関節疾患処置用である、前記［１０］〜［１４］のいずれかに記載の水性組成物。
［１６］式（１）に示される化合物を０．０１ｗ／ｖ％以上８０ｗ／ｖ％以下、０．１ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％以下、０．５ｗ／ｖ％以上５ｗ／ｖ％以下、または１ｗ／ｖ％の濃度で含有する、前記［１０］〜［１５］のいずれかに記載の水性組成物。
［１７］濾過性向上剤を０．０１ｗ／ｖ％以上６０ｗ／ｖ％以下、０．１ｗ／ｖ％以上３０ｗ／ｖ％以下、１ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下、または２ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％未満の濃度で含有する、前記［１１］〜［１６］のいずれかに記載の水性組成物。
［１８］水を１０ｗ／ｖ％以上９９．９８ｗ／ｖ％以下、６０ｗ／ｖ％以上９９．８ｗ／ｖ％以下、８０ｗ／ｖ％以上９８．５ｗ／ｖ％以下、または８９ｗ／ｖ％を超えて９７ｗ／ｖ％以下の濃度で含有する、前記［１０］〜［１７］のいずれかに記載の水性組成物。  
【００２５】
［１９］前記［１０］〜［１８］のいずれかに記載の水性組成物が注射筒内に充填されている注射器を含む、キット。
［２０］前記［１０］〜［１８］のいずれかに記載の水性組成物を含むバイアル、及び注射器を含む、キット。
【００２６】
［２１］式（１）に示される化合物を含有する医薬組成物を製造する方法であって、式（１）に示される化合物と、濾過性向上剤とを共存させる工程を含む、方法。
【００２７】
［２２］式（１）に示される化合物の濾過性を向上させる方法であって、式（１）に示される化合物に対して、濾過性向上剤を共存させる工程を含む、方法。
【００２８】
［２３］前記［１０］〜［１８］のいずれかに記載の水性組成物を関節疾患患者の関節に投与する工程を含む、ヒトの関節疾患処置方法。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本発明によれば、ジクロフェナクラクタムの蓄積量が抑制されたＤｉｃ−ＨＡ含有医薬組成物が提供される。
【００３０】
以下、本発明を実施するための形態について、例を挙げて説明する。
本発明の一側面は、下記式（１）に示される化合物と、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物である成分（Ａ）とを含有する医薬組成物：
【００３１】
【化１】
0006718567.tif 000005
【００３２】
（式（１）中、ａは０．０１以上０．７以下であり、ａ＋ｂは１であり、ｎは２５以上２５，０００以下の整数であり、各構成二糖単位の配列はランダム又はブロック状であってよく、Ｒは各構成二糖単位においてそれぞれ独立してカルボキシ基又はカルボン酸塩の基である）
に関する。
【００３３】
本発明の別の側面は、式（１）に示される化合物及び付加成分を含有する、ジクロフェナクの生成及び／又は蓄積が抑制された医薬組成物である。
【００３４】
本発明の別の側面は、式（１）に示される化合物を含有する医薬組成物を製造する方法であって、式（１）に示される化合物と、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物である成分（Ａ）とを共存させる工程を含む、方法に関する。
【００３５】
本発明の別の側面は、式（１）に示される化合物からのジクロフェナクラクタムの生成を抑制する方法であって、式（１）に示される化合物に対して、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の共存させる工程を含む、方法に関する。
【００３６】
本発明のさらに別の側面は、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の物質の、式（１）に示される化合物を含有する医薬組成物の製造における使用であって、前記医薬組成物は関節疾患処置用であり、前記少なくとも１種の物質は式（１）に示される化合物からのジクロフェナクラクタムの生成を抑制する化合物である、使用に関する。
【００３７】
本発明のさらに別の側面は、ヒトの関節疾患処置における使用のための少なくとも１種の化合物であり、前記少なくとも１種の化合物は、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれるものであり、かつ、式（１）に示される化合物と共に関節疾患処置用医薬組成物の構成成分として使用されるものである、少なくとも１種の化合物に関する。
【００３８】
本発明のさらに別の側面は、ヒトの関節疾患処置方法であって、医薬組成物を関節疾患患者の関節に投与する工程を含み、前記医薬組成物は、有効量の式（１）に示される化合物、及び、少なくとも１種の化合物を含有する医薬組成物であって、前記少なくとも１種の化合物は非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれるものであり、かつ式（１）に示される化合物からのジクロフェナク成分の生成を抑制するものである、方法に関する。
【００３９】
本発明の別の側面は、式（１）に示される化合物の保存方法であって、保存中のジクロフェナクラクタムの生成及び／又は蓄積が抑制された医薬組成物であって、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる化合物を含む、医薬組成物の保存方法に関する。
【００４０】
本発明のさらに別の側面は、式（１）に示される化合物、及び、少なくとも１種の化合物を含有する医薬組成物であって、少なくとも１種の化合物は非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれるものであり、かつ式（１）に示される化合物からのジクロフェナク成分の生成を抑制するものである、医薬組成物、並びに、注射器を含む、キットに関する。
【００４１】
本発明の一側面によれば、式（１）に示される化合物を含有する医薬組成物において、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類、及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物を共存させることで、式（１）に示される化合物から生成されるジクロフェナクラクタムが前記医薬組成物の保存中に蓄積することを抑制することができる。
本発明の一側面によれば、式（１）に示される化合物を含有する医薬組成物において、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物を共存させることで、式（１）に示される化合物から生成されるジクロフェナクが前記医薬組成物の保存中に蓄積することを抑制することができる。
本発明の一側面によれば、長期の安定性に優れ、保存可能期間が延長された医薬組成物が提供される。当該医薬組成物は、注射用の水性組成物として容器（例えば、バイアル、注射筒等の）中で保存可能であり、保存期間におけるジクロフェナクラクタムの経時的な蓄積が抑制されたものである。これにより、医薬組成物の供給が効率化され、製造・保管等に係るコストが低減することとなり、結果として当該医薬組成物の需要者である患者にとっての福音となる。
【００４２】
本明細書において「カルボン酸塩の基」とは、カルボキシレート［-C(=O)-O−］とカチオンとが塩を形成した構造であり、薬学的に許容される塩の形態であり得る。カルボン酸塩を形成するカチオンはカルボキシレート［-C(=O)-O−］と塩を形成可能であれば特に限定されないが、例えば、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン等を例示できる。好ましい一実施形態では、カルボン酸塩の基は、−ＣＯ２Ｎａで表される（すなわち、カチオンがナトリウムイオンである）。
【００４３】
本明細書において「薬学的に許容される塩」とは、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、バリウム塩のような金属塩；アンモニウム塩；メチルアミン塩、ジエチルアミン塩、エチレンジアミン塩、シクロヘキシルアミン塩、エタノールアミン塩のようなアミン塩；塩酸塩、硫酸塩、硫酸水素塩、硝酸塩、リン酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩のような無機酸塩；酢酸塩、フタル酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩、コハク酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、酒石酸塩、酒石酸水素塩、リンゴ酸塩のような有機酸塩等が例示できるが、これらに限定されない。
【００４４】
本明細書において「ジクロフェナク成分」とは、ジクロフェナク及びジクロフェナクラクタムを個別に又は総称して指すものとして用いられる。ジクロフェナク成分量は、実施例に記載される高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いた手法により測定される。
【００４５】
本明細書において、成分（Ａ）は、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物である。成分（Ａ）を含有することにより、ジクロフェナクラクタムの生成及び／又は蓄積が抑制された医薬組成物が提供される。
【００４６】
本明細書において、「共存させる」とは、対象物質同士を接触し得る状態におくことを意味する。例えば、式（１）に示される化合物に成分（Ａ）を添加することにより行うことも可能であり、成分（Ａ）に、式（１）に示される化合物を添加することにより行うことも可能である。また、式（１）に示される化合物と成分（Ａ）とを混合させることにより行うことも可能である。
【００４７】
成分（Ａ）として用いられる塩は、上記「薬学的に許容される塩」と同様、特に限定されないが、例えば、上記したような薬学的に許容される塩等を例示できる。
【００４８】
一実施形態では、成分（Ａ）は、例えば、式（１）に示される化合物を含む組成物において、ジクロフェナクラクタムの蓄積及び／又は生成を抑制する機能を有する。
好ましい一実施形態では、成分（Ａ）は、さらに、式（１）に示される化合物を含む組成物において、ジクロフェナクの蓄積及び／又は生成を抑制するものが採用される。
【００４９】
本明細書において、ジクロフェナク成分の生成及び蓄積の「抑制」とは、ジクロフェナク成分の生成量及び／又は蓄積量を減少させることを意味する。
【００５０】
ジクロフェナク成分の蓄積及び／又は生成は、式（１）に示される化合物と成分（Ａ）とを共存させた水性組成物を６０℃の恒温槽にて１週間保存した後、水性組成物中に蓄積したジクロフェナク成分の量を測定することにより求めることができる。成分（Ａ）によるジクロフェナク成分の蓄積抑制効果及び／又は生成抑制効果は、実施例においてより具体的に記載される通り、成分（Ａ）を含まない以外は同一組成の水性組成物を同一条件で保存し、当該水性組成物に蓄積したジクロフェナク成分量を１としたときの相対量として試験水性組成物中のジクロフェナク成分量を算出することにより評価できる（当該相対量が１より小さい場合には、ジクロフェナク成分の蓄積及び／又は生成が抑制されている。）。この方法により、式（１）に示される化合物を含む水性組成物が、ジクロフェナク成分の蓄積及び／又は生成が抑制されているかどうか判断可能である。
【００５１】
上記条件で算出されるジクロフェナクラクタムの相対量は、０．９以下であることが好ましく、０．８以下であることがより好ましく、０．７５以下であることが更に好ましい。また、上記条件で算出されるジクロフェナクの相対量は、１未満であることが好ましく、０．９５以下であることがより好ましく、０．９以下であることが更に好ましい。
【００５２】
組成物は、成分（Ａ）の一種を単独で、又は二種以上を含んでいてもよい。
二種以上含む場合の成分（Ａ）の組み合わせも特に限定されないが、例えば、ポリアルキレングリコールと非イオン性界面活性剤、ポリアルキレングリコールとヒドロキシアルキル化シクロデキストリンといった二種類の成分（Ａ）を組み合わせたもの、ポリアルキレングリコール、非イオン性界面活性剤及びヒドロキシアルキル化シクロデキストリンの三種類の成分（Ａ）を組み合わせたものが挙げられる。後述する実施例のとおり、複数の成分（Ａ）を共存させることにより、より高いジクロフェナク成分の抑制効果が期待できる。
また、本発明の別の側面は、式（１）に示される化合物とジクロフェナク成分の蓄積及び／又は生成を抑制する成分とを共存させた水性組成物であって、６０℃の恒温槽にて１週間保存した後のジクロフェナクラクタムの相対量が０．９以下、より好ましくは該相対量が０．７５以下である水性組成物である。ただし、前記相対量はジクロフェナク成分の蓄積及び／又は生成を抑制する当該成分を含まない以外は同一の水性組成物（対照組成物）を同一条件で保存し、当該対照組成物に蓄積したジクロフェナクラクタムの量を１としたときの値である。
本発明者らの検討により、成分（Ａ）は、ジクロフェナク成分の生成抑制剤、組成物中のジクロフェナクラクタムの蓄積抑制剤、又は後述のように式（１）に示される化合物を含有する水性組成物の濾過性向上剤としても利用することもできることが明らかとなった。
一実施態様において、成分（Ａ）は、組成物において０．０１ｗ／ｖ％以上６０ｗ／ｖ％以下、好ましくは０．１ｗ／ｖ％以上３０ｗ／ｖ％以下、より好ましくは１ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下、特に好ましくは２ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％未満の割合で含有させることができる。
【００５３】
ここで、ジクロフェナクは下記の式（２）で示される構造を有するものであり、ジクロフェナクラクタムは下記の式（３）で示される構造を有するものである。
【００５４】
【化２】
0006718567.tif 000006
【００５５】
【化３】
0006718567.tif 000007
【００５６】
本明細書において、「非イオン性界面活性剤」とは、当業者が通常理解する非イオン性界面活性剤が意図される。
非イオン性界面活性剤の非限定的な例として、ポリソルベート（ポリソルベート２０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０等）、アルキルフェノールエトキシレート（オクチルフェノールエトキシレート（Ｔｒｉｔｏｎ（商標）Ｘ−１００）、ノニルフェノールエトキシレート等）、アルキルグルコシド（デシルグルコシド、ラウリルグルコシド、オクチルグルコシド等）、ポリオキシエチレングリコールエーテル（オクタエチレングリコールモノドデシルエーテル、ペンタエチレンモノドデシルエーテル、ポリオキシエチレンドデシルエーテル、ポリオキシエチレンヘキサデシルエーテル等）、ポリオキシエチレングリコールアルキルフェノールエーテル（ポリオキシエチレングリコールオクチルフェノールエーテル、ポリオキシエチレングリコールノニルフェノールエーテル等）、ポリオキシエチレンラウリルエーテル、ポリオキシプロピレングリコールアルキルエーテル、グリセロールアルキルエステル、ポリオキシエチレングリコールソルビタンアルキルエステル、モノデカノイルスクロース、コカミド、ドデシルジメチルアミンオキシド、及び、アルコキシ化アルコール（エトキシ化アルコール、プロポキシ化アルコール、エトキシ化プロポキシル化アルコール等）、及び薬学的に許容されるこれらの塩を挙げることができる。
一実施態様において、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ＴｒｉｔｏｎＸ−１００、オクチルグルコシド、及び薬学的に許容されるこれらの塩が好ましい非イオン性界面活性剤として使用される。
【００５７】
本明細書において、「ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン」とは、当業者が通常理解するヒドロキシアルキル化されたシクロデキストリンが意図される。
ヒドロキシアルキル化シクロデキストリンの非限定的な例として、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン（ＨＥ−β−ＣＤ）、及びヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）を挙げることができる。一実施態様において、ＨＥ−β−ＣＤ及びＨＰ−β−ＣＤは、それぞれ好ましいヒドロキシアルキル化シクロデキストリンとして使用される。
【００５８】
本明細書において、「Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール」とは、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール等の、炭素数１〜３のモノアルコールを意味する。
一実施態様において、エタノールが好ましいＣ１〜Ｃ３モノアルコールとして使用される。
【００５９】
本明細書において、「Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール」とは、１，２−エタンジオール、プロピレングリコール等の、炭素数２〜３のジアルコールを意味する。
一実施態様において、プロピレングリコールが好ましいＣ２〜Ｃ３ジアルコールとして使用される。
【００６０】
本明細書において、「Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール」とは、グリセリン、１，２，３−ブタントリオール、Ｄ−グルカール等の、炭素数３〜６のトリアルコールを意味する。
一実施態様において、グリセリン、１，２，３−ブタントリオール、及びＤ−グルカールは、それぞれ、好ましいＣ３〜Ｃ６トリアルコールとして使用される。
【００６１】
本明細書において、「ポリアルキレングリコール」とは、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール等の、アルキレングリコールのポリマーを意味する。ポリエチレングリコールの非限定的な例として、ＰＥＧ１００〜１００００（例えば、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ５００、ＰＥＧ６００、ＰＥＧ４０００及びＰＥＧ６０００）を挙げることができる。これらの例は、いずれも、本発明の一実施態様において好ましいポリアルキレングリコールとして使用される。
好ましい一実施形態において、重量平均分子量が２００以上６，０００以下のポリエチレングリコールが用いられる。
より好ましい一実施形態体において、重量平均分子量が４００以上６，０００以下のポリエチレングリコールが用いられる。
【００６２】
本明細書において、「γ−ラクトン」とは、当業者が通常理解する５員環を有するラクトンが意図される。
γ−ラクトンの非限定的な例として、Ｄ-エリスロノラクトン、エリソルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸、グルクロノラクトン、及び薬学的に許容されるこれらの塩を挙げることができる。
一実施態様において、Ｄ-エリスロノラクトン、エリソルビン酸ナトリウム、グルクロノラクトン、及び薬学的に許容されるこれらの塩は、それぞれ、好ましいγ−ラクトンとして使用される。
【００６３】
本明細書において、「クロロゲン酸類」とは、クロロゲン酸、フェロイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及び薬学的に許容されるこれらの塩等のクロロゲン酸又はその類似化合物を意味する。
一実施態様において、クロロゲン酸及びその薬学的に許容される塩は好ましいクロロゲン酸類として使用される。
【００６４】
本明細書において、「アルキル硫酸エステル」とは、アルキル基としてオクチル基、ノニル基、デシル基、ドデシル基等を有する硫酸エステル、及びその薬学的に許容される塩
が意図される。代表的なアルキル硫酸エステルとして、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）を挙げることができる。
一実施態様において、ＳＤＳは好ましいアルキル硫酸エステルとして使用される。
【００６５】
組成物におけるジクロフェナクの生成及び／又は蓄積が抑制されるという観点から、好ましい一実施形態では、成分（Ａ）は、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物が使用される。
組成物のフィルター濾過性が優れるという観点から、好ましい一実施形態では、成分（Ａ）は、ポリアルキレングリコール、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、及びヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、並びにこれらの塩からなる群から選ばれる化合物が使用される。
【００６６】
本発明において、医薬組成物は、好ましくはヒトの関節疾患の処置に使用されるものである。本明細書において「関節疾患」とは、膝関節、肩関節、首関節、股関節、脊椎関節、顎関節、指関節、肘関節、手関節、足関節等の各種関節における疾患である。関節疾患としては、より具体的には、変形性関節症、関節リウマチ、関節軟骨損傷、膝関節骨壊死症、大腿骨壊死症、肩関節炎、細菌性関節炎、ウイルス性関節炎、神経病性関節症等が例示できる。本発明にかかる関節疾患処置用の組成物は、好ましくは変形性関節症又は関節リウマチに用いられ、より好ましくは変形性関節症に用いられる。
【００６７】
本明細書において「処置」とは、疾患それ自体に対する処置（例えば、疾患における器質的病変を治癒又は改善させる処置）であっても、疾患に伴う諸症状（例えば、疼痛、こわばり、関節機能（例えば、日常行動の困難性（階段の昇降や乗用車の乗降等に代表される）によって評価され得る）など関節に起因するＡＤＬの低下）に対する処置であってもよい。また、「処置」は、完全な治癒のみならず、疾患の一部又は全部の症状の改善、および疾患の進行の抑制（維持および進行速度の低下を含む）ならびに予防を含む。ここで予防とは、例えば関節における器質的病変が認められるものの関節の機能的障害、疼痛および／又はこわばりといった関節疾患に伴う諸症状が生じていない場合において、当該諸症状の発生を未然に防ぐことを含む。また、予防とは、例えば関節における明確な器質的病変が認められていないものの、関節の機能的障害、疼痛および／又はこわばりといった関節疾患に伴う諸症状が生じている場合において、当該器質的な病変の発生を未然に防ぐことや当該諸症状のうち顕在化していない症状の発展を抑制することを含む。組成物は、好ましくは関節疾患における症状の改善、治癒、又は進行の抑制に用いられ、より好ましくは症状の改善又は治癒に用いられ得る。一実施形態では、組成物は、関節痛の改善、治癒もしくは進行の抑制、又は関節機能の改善に好適に用いられ得る。
【００６８】
本明細書において「有効量」とは、合理的なリスク／ベネフィット比に見合って、過度の有害副作用（毒性、刺激性およびアレルギー反応など）を有さずに、所望の応答を得るのに十分な成分の量を意味する。当該「有効量」は、投与対象となる患者の症状、体格、年齢、性別等の諸要素によって変化し得る。しかしながら、当業者であれば、諸要素の組み合わせのそれぞれについての個別の試験を要するまでもなく、一又は複数の具体的な試験例の結果と技術常識に基づいて、他の場合における有効量をも決定することができる。
【００６９】
ヒアルロン酸は、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンとＤ−グルクロン酸又はその塩とがβ１，３結合した構造を二糖単位（ヒアルロン酸構成二糖単位）とし、当該ヒアルロン酸構成二糖単位が繰り返しβ１，４結合した基本骨格により構成されたグリコサミノグリカンを含み、当該基本骨格により構成されたグリコサミノグリカンである。また、ヒアルロン酸は、動物由来、又は微生物由来の精製物、化学的合成等の合成物など、いずれの手法により得られたものであっても用いることが可能である。
【００７０】
ヒアルロン酸及び式（１）に示される化合物の質量平均分子量は特に限定されないが、１０，０００以上１０，０００，０００以下が例示され、好ましくは５００，０００以上５，０００，０００以下、より好ましくは６００，０００以上３，０００，０００以下、さらに好ましくは６００，０００以上１，２００，０００以下である。なお、本明細書において、ヒアルロン酸及び式（１）に示される化合物の「質量平均分子量」は、極限粘度法により測定した値であり、これらの化合物の「重量平均分子量」と同義である。
【００７１】
ヒアルロン酸及び式（１）に示される化合物は、塩を形成していない状態でも良く、また塩を形成した状態でも良い。かような塩としては、上記したような薬学的に許容される塩が例示できる。
【００７２】
式（１）に示される化合物は、ヒアルロン酸に対して、２−ブロモエチルアミン臭化水素酸塩や２−アミノエタノール等をスペーサー化合物として用いてジクロフェナクと共有結合させることにより得られる。
【００７３】
式（１）に示される化合物において、ジクロフェナクとスペーサーとはエステル結合で連結され、スペーサーとヒアルロン酸とはアミド結合で連結されてなる。
また、各構成二糖単位は、式（１）に示される化合物において、それぞれａ及びｂの比率でランダム又はブロック状に連結され得る。すなわち、ジクロフェナク導入構成二糖単位及びヒアルロン酸構成二糖単位は、ランダム又はブロックの形態で互いにβ１，４結合によって結合される。
式（１）に示される化合物の末端は、水素原子又は水酸基である。
【００７４】
式（１）において、ａは全構成二糖単位の数に対するジクロフェナク導入構成二糖単位の数の割合であり、ｂは全構成二糖単位の数に対するヒアルロン酸構成二糖単位の数の割合であり、ａ＋ｂは１である。式（１）においてａとして示される割合をモル分率で表現した場合には、当該モル分率の値を本明細書では「導入率」と言う。式（１）において、ａは０．０１以上０．７以下（導入率として１モル％以上７０モル％以下、ｂは０．３以上０．９９以下）であり、０．１以上０．２以下（１０モル％以上２０モル％以下、ｂは０．８以上０．９以下）が好ましい。
【００７５】
式（１）におけるａや導入率の値は、ヒアルロン酸へのジクロフェナクの導入反応工程において、縮合剤、縮合補助剤、スペーサー化合物の反応当量、ジクロフェナクの反応当量等を変えることにより調整可能である。
ここで、本明細書における「導入率」は、下記計算式１にて算出される値であり、吸光度測定により求めることができる。
【００７６】
【数３】
0006718567.tif 000008
【００７７】
導入率は、より具体的には、ジクロフェナク特有の吸収度をカルバゾール吸光度法により測定し、予め作成したジクロフェナクの検量線を用いて、上記式により算出可能である。
【００７８】
式（１）に示される化合物において、ｎは全構成二糖単位の数を示し、下記計算式２又は３から計算することができる。
原料のヒアルロン酸の質量平均分子量からｎを求める場合は、下記計算式２にて算出できる。
【００７９】
【数４】
0006718567.tif 000009
式（１）に示される化合物の質量平均分子量、並びに式（１）におけるａ及びｂからｎを求める場合は、下記計算式３にて算出できる。
【００８０】
【数５】
0006718567.tif 000010
ｎは２５以上２５，０００以下の整数であり、好ましくは１，２５０以上１２，５００以下の整数であり、より好ましくは１，５００以上７，５００以下、さらに好ましくは１，５００以上３，０００以下の整数である。
【００８１】
ヒアルロン酸にスペーサーおよびジクロフェナクを導入する方法は、スペーサーを導入したヒアルロン酸にジクロフェナクを導入してもよく、予めスペーサーを導入したジクロフェナクをヒアルロン酸と反応させてもよい。例えば特許文献１や特許文献２等を参照することにより、当業者であれば適宜実施をすることができる。
【００８２】
一実施形態では、組成物は、式（１）に示される化合物を０．０１ｗ／ｖ％以上８０ｗ／ｖ％以下の濃度で含有する。好ましい実施形態では、０．１ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％以下、より好ましくは０．５ｗ／ｖ％以上５ｗ／ｖ％以下、特に好ましくは１ｗ／ｖ％の式（１）に示される化合物を含有する。
【００８３】
組成物は、式（１）に示される化合物に加えて、薬学上許容される担体を含み得る。当該薬学上許容される担体としては、注射用水、生理食塩水、リンゲル液等の水性溶媒が好ましく例示される。一実施形態では、医薬組成物は水性組成物である。一実施形態では、組成物は、当該薬学上許容される担体と式（１）に示される化合物とを混合することにより調製される。必要に応じ、緩衝剤などのような添加物を組成物に添加してもよい。また、組成物は、各成分の混合後に、例えばフィルター濾過等により、除塵、除菌、滅菌等の処理を行ってもよい。
【００８４】
一般に、医薬組成物等の組成物を生体（哺乳動物、特にヒトが好ましい）に適用する場合、除塵及び滅菌が必要となる。水性組成物の場合、成分の安定性や簡便性の観点から、除塵及び滅菌工程を濾過によって行うことが好ましい。組成物をフィルター濾過によって滅菌処理等を行う場合は、市販のメンブレンフィルター、滅菌済容器、滅菌済注射器・注射筒などが適宜使用できる。例えば、メンブレンフィルターとして、孔径０．２２μｍのメンブレンフィルターが使用できる。式（１）に示される化合物を含む水性組成物は高い粘性を有するので、実施態様によっては濾過性の低さから水性組成物の調製、特に濾過滅菌の際に困難が生じるおそれがある。
ここで、式（１）に示される化合物を含む水性組成物は濾過性が乏しい。特許文献１には、Ｄｉｃ−ＨＡを含む溶液をアルカリ処理することにより、濾過フィルターの通過性を有する透明な溶液となり得ることが、示されている。しかしながら、発明者らが検討を進めたところ、Ｄｉｃ−ＨＡを含む水性組成物をアルカリ処理すると、ジクロフェナク成分の生成が進むことが分かった。一方、式（１）に示される化合物を含む水性組成物の滅菌を、フィルター滅菌に代えて加熱滅菌で行うと、やはりジクロフェナク成分の生成が進んでしまうことが分かった。
【００８５】
本発明のある側面は、式（１）に示される化合物を含み、以下の算出方法において最大処理量（Ｖｍａｘ）が１．０ｇ／ｃｍ２以上を示す水性組成物に関する。かような水性組成物によれば、フィルター濾過が可能であるため、除塵及び滅菌工程におけるジクロフェナク成分の生成を防止／抑制できる。
最大処理量（Ｖｍａｘ）の算出は、より具体的には、以下のように行う。すなわち、孔径０．２２μｍのポリフッ化ビニリデン濾過膜を用いて、液温７０℃の前記水性組成物を０．６ＭＰａの加圧下で濾過する。このとき、濾過膜の有効濾過面積当たりの総濾過量（Ｖ）を、流量（Ｑ）が濾過開始時の１／１０以下になるまで３０秒毎に測定する。横軸に濾過時間（t）をとり、縦軸にｔ／Ｖをとって測定結果をプロットし、ｔ／Ｖの推移が安定した測定点の範囲で下記式Ａを算出する。最大処理量（Ｖｍａｘ）は、計算式Ａの傾きａの逆数（すなわち、下記計算式Ｂ）から求められる。なお、流量（Ｑ）は単位時間当たりの濾過量（すなわち、Q＝ｄV／ｄｔ）である。
【００８６】
【数１】
0006718567.tif 000011
【００８７】
【数２】
0006718567.tif 000012
上記計算式Ａ及びＢにおいて、ｔは濾過時間（分）であり、Ｖは有効濾過面積当たりの総濾過量（ｇ／ｃｍ２）であり、ａは計算式Ａの傾きであり、ｂは計算式Ａの切片である。
最大処理量（Ｖｍａｘ）が大きくなるほど（すなわちフィルター濾過性が高いほど）、フィルターの目詰まりが起こりにくく濾過に必要な時間が減少する。
なお、Ｖｍａｘ自体は、濾過フィルターの選定や最適化において用いられている評価指標である（要すれば、小林公彦著、「Ｖｍａｘ試験  フィルターの選定および最適化方法」、バイオプロセス・テクニカルシート  基礎技術Ｎｏ．２、日本ミリポア、１９９７年８月参照）。
【００８８】
式（１）に示される化合物を含み、最大処理量（Ｖｍａｘ）が１．０ｇ／ｃｍ２以上である水性組成物は、医薬組成物又はその中間体として有用である。最大処理量（Ｖｍａｘ）は、好ましくは６．０ｇ／ｃｍ２以上であり、より好ましくは８．０ｇ／ｃｍ２以上であり、更に好ましくは１０ｇ／ｃｍ２以上であり、更により好ましくは１５ｇ／ｃｍ２以上であり、特に好ましくは２０ｇ／ｃｍ２以上である。最大処理量（Ｖｍａｘ）の上限は特に制限されないが、例えば２０００ｇ／ｃｍ２以下（１５００ｇ／ｃｍ２以下、１２００ｇ／ｃｍ２以下、１０００ｇ／ｃｍ２以下、８００ｇ／ｃｍ２以下、５００ｇ／ｃｍ２以下、２００ｇ／ｃｍ２以下）である。例えば、１．０ｇ／ｃｍ２以上２０００ｇ／ｃｍ２以下、６．０ｇ／ｃｍ２以上１５００ｇ／ｃｍ２以下、８．０ｇ／ｃｍ２以上１０００ｇ／ｃｍ２以下、１０ｇ／ｃｍ２以上８００ｇ／ｃｍ２以下、１５ｇ／ｃｍ２以上５００ｇ／ｃｍ２以下又は１５ｇ／ｃｍ２以上２００ｇ／ｃｍ２以下であってもよい。
【００８９】
一実施形態では、水性組成物は、濾過性向上剤を更に含む。本発明において、「濾過性向上剤」とは、式（１）に示される化合物を含む水性組成物の濾過性、すなわち最大処理量（Ｖｍａｘ）、を向上させるものであれば特に限定されない。濾過性向上剤の具体例としては、例えば上記の成分（Ａ）が例示できるが、これらに限定されない。
一実施形態では、濾過性向上剤は、上記したようなポリアルキレングリコール、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、及びヒドロキシアルキル化シクロデキストリンからなる群から選ばれる。
濾過性の観点から、好ましい一実施形態では、ＰＥＧ２００〜６０００、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、及びヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンが濾過性向上剤として使用される。
より好ましい一実施形態では、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ４０００、エタノール及びヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンからなる群から選ばれる化合物が、濾過性向上剤として組成物に使用できる。
一実施態様として、ＰＥＧ４００を含む場合には、濾過性が著しく向上することから、濾過性向上剤として特に好ましく使用できる。
【００９０】
水性組成物は、濾過性向上剤の一種を単独で、又は二種以上を含んでいてもよい。
一実施態様において、水性組成物において０．０１ｗ／ｖ％以上６０ｗ／ｖ％以下、好ましくは０．１ｗ／ｖ％以上３０ｗ／ｖ％以下、より好ましくは１ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下、特に好ましくは２ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％未満の割合で濾過性向上剤を含有させることができる。
本明細書において、「水性組成物」は、水を１０ｗ／ｖ％以上９９．９８ｗ／ｖ％以下含有する組成物である。水性組成物は溶液、懸濁液、又はゲル状であってもよい。水性組成物の調製に用いる水としては、例えば注射用水、精製水、蒸留水などが例示できる。水性組成物中の水の含有量は、好ましくは６０ｗ／ｖ％以上９９．８ｗ／ｖ％以下、より好ましくは８０ｗ／ｖ％以上９８．５ｗ／ｖ％以下、特に好ましくは８９ｗ／ｖ％を超えて９７ｗ／ｖ％以下である。
【００９１】
一実施形態では、式（１）に示される化合物を含む水性組成物の最大処理量（Ｖｍａｘ）が１．０ｇ／ｃｍ２以上であり、且つジクロフェナクラクタムの相対量が０．９以下である。好ましい一実施形態では、式（１）に示される化合物を含む水性組成物の最大処理量（Ｖｍａｘ）が６．０ｇ／ｃｍ２以上であり、且つジクロフェナクラクタムの相対量が０．８以下である。より好ましい一実施形態では、式（１）に示される化合物を含む水性組成物の最大処理量（Ｖｍａｘ）が８．０ｇ／ｃｍ２以上であり、且つジクロフェナクラクタムの相対量が０．７５以下である。なお、ジクロフェナクラクタムの相対量は、式（１）に示される化合物と濾過性向上剤とを共存させた試験組成物と、濾過性向上剤を含まない以外は前記と同一組成の対照組成物とを６０℃の恒温槽にて１週間保存した後、試験組成物及び対照組成物中に蓄積したジクロフェナクラクタムの量を高速液体クロマトグラフィーで測定し、対照組成物に蓄積したジクロフェナクラクタム量を１としたときの相対量として算出する。
【００９２】
組成物に包含され得る緩衝剤は、当業者に周知のものが適宜利用できる。非限定的な例として、クエン酸緩衝液、酢酸緩衝液、リン酸緩衝液を緩衝剤として利用することが挙げられる。
一実施態様において、クエン酸緩衝液は、クエン酸として終濃度０．１ｍＭ〜５００ｍＭ（例えば、１ｍM〜５０ｍM）含まれるものが例示される。ここで、当該クエン酸緩衝液は、好ましくはｐＨ４．５〜５．５に調整されたものである。より好ましいクエン酸緩衝液のｐＨの例として、ｐＨ４．８〜ｐＨ５．４、さらにその一例としてｐＨ５．１を挙げることができる。
一実施態様において、酢酸緩衝液は、酢酸として終濃度０．１ｍＭ〜５００ｍＭ（例えば、１ｍM〜５０ｍM）含まれるものが例示される。ここで、当該酢酸緩衝液は、好ましくはｐＨ４．５〜５．５に調整されたものである。より好ましい酢酸緩衝液のｐＨの例として、ｐＨ４．８〜ｐＨ５．４、さらにその一例としてｐＨ５．１を挙げることができる。
一実施態様において、リン酸緩衝液は、リン酸として終濃度０．１ｍＭ〜５００ｍＭ（例えば、１ｍM〜５０ｍM）含まれるものが例示される。ここで、当該リン酸緩衝液は、好ましくはｐＨ６．０〜７．０に調整されたものである。より好ましいリン酸緩衝液のｐＨの例として、ｐＨ６．３〜ｐＨ６．８、さらにその一例としてｐＨ６．５を挙げることができる。
【００９３】
一実施態様において、クエン酸緩衝液は、成分（Ａ）としてＣ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、アルキル硫酸エステル、非イオン性界面活性剤、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、γ‐ラクトン、クロロゲン酸、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、及びポリビニルピロリドン、並びにこれらの塩からなる群から選ばれる一又は二以上と組み合わせて使用される。
一実施態様において、酢酸緩衝液は、成分（Ａ）としてヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、ポリアルキレングリコール、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、非イオン性界面活性剤、及びポリビニルピロリドン、並びにこれらの塩からなる群から選ばれる一又は二以上と組み合わせて使用される。
一実施態様において、リン酸緩衝液は、成分（Ａ）として、γ‐ラクトン、ポリアルキレングリコール、及びＣ３〜Ｃ６トリアルコール、並びにこれらの塩からなる群から選ばれる一又は二以上と組み合わせて使用される。
【００９４】
一実施態様において、組成物は、以下のような手順で調製される。
（工程１）クエン酸水和物、クエン酸ニナトリウム水和物、及びＰＥＧ４００の所定量を注射用水（ＷＦＩ）に溶解させる。
（工程２）工程１の溶液に式（１）に示される化合物（導入率１８モル％）の所定量を溶解させる。そして、溶解後の溶液を７０℃に加温し、減圧加温脱気する。
（工程３）工程２の溶液を孔径０．２２μｍのフィルターで濾過滅菌する。
（工程４）工程３の溶液を７０℃で加温脱気し、次いで１０℃に冷却する。
（工程５）滅菌条件下でシリンジに所定量を充填する。
上記（工程１）〜（工程５）により、ヒアルロン酸誘導体、ＰＥＧ４００及びクエン酸緩衝液を含む滅菌済医薬組成物が調製される。ここで、各成分の濃度は、ヒアルロン酸誘導体；０．５〜５ｗ／ｖ％、ＰＥＧ４００；３〜３０ｗ／ｖ％、及びリン酸緩衝液；３〜３０ｍＭ（クエン酸として）が例示されるが、医薬組成物中の各種成分の濃度は前記の各範囲に限定されるものではない。言うまでもなく、成分（Ａ）はＰＥＧ４００に限定されるものでなく、また、緩衝液はクエン酸緩衝液に限定されるものでない。ヒアルロン酸誘導体の構成やメンブレンフィルターの孔径についても同様である。
水性組成物の最大処理量（Ｖｍａｘ）が１．０ｇ／ｃｍ２以上であることにより、フィルターでの濾過滅菌の適性が高くなるため、滅菌工程でのジクロフェナクラクタム生成を抑制できる。
【００９５】
調製後の滅菌済医薬組成物は、４℃などの低温、又は常温にて保存することができる。ヒアルロン酸誘導体の分解抑制のためには、４℃のような低温保存の方が望ましい。例えば、医薬組成物中のヒアルロン酸誘導体量に対して、０．５ｗ／ｗ％のジクロフェナクラクタム蓄積量を閾値として設定し、蓄積量が当該閾値を超えた場合は医薬品としての品質不適と判断することにした場合、溶液組成が好適な条件であれば、常温（２５℃）環境下でも数ヶ月から１年程度は組成物が品質適格のまま保存可能である。当該保存期間は、下記実施例の保存試験の結果から換算して、成分（Ａ）を共存させることによって約１ヶ月〜３ヶ月超も延長可能となったものである（当該換算は、成分（Ａ）の共存によってジクロフェナクラクタムの蓄積が１０〜２５％抑制されることを前提に行った。この抑制割合は、例えば後記実施例１（（１−２）の結果等）から十分達成可能なレベルである。数ヶ月が品質適格の保存期限である医薬組成物において、その保存期限が１〜３ヶ月超延長できるとすれば、コスト低減につながることが明確であり、患者の負担を軽減し、かつ医療経済への貢献も達成されることとなる。また、調製後の滅菌済医薬組成物は、遮光条件にて保存されることがより好ましい。このような条件としては、滅菌済医薬組成物が包装されたまま冷蔵庫等で保存することが挙げられる。
【００９６】
医薬組成物の投与頻度は、患者の症状等に応じて適宜調整される。薬効の観点から、例えば、１週間に１回〜５２週間に１回の頻度が例示できる。２週間に１回〜２６週間に１回、あるいは４週間に１回〜１３週間に１回の頻度がより好ましい例として挙げられる。１回の投与で十分な寛解が得られた場合は、もちろん１回限りの投与でも良い。組成物の好ましい調製態様は注射剤用の溶液（例えば、水性組成物）である。例えば、膝関節等の患部に注射として投与される場合、患者の身体的負担や精神的負担を考慮すれば、投与間隔は長いことが望ましい。特に、注射剤として用いる場合、その溶液性状は、無色澄明であることが好ましい。
【００９７】
一実施形態では、本発明にかかる医薬組成物が注射筒内に充填されている注射器が提供される。一実施形態では、本発明にかかる医薬組成物が注射筒内に充填されている注射器を含むキットも、提供可能である。当該注射器は、薬剤押出用プランジャー等を具備し、本発明にかかる組成物が押出可能なものである。一実施形態では、注射器内に充填された組成物は、滅菌状態で提供され得る。一実施形態では、注射筒内には、１回投与量の組成物が予め充填されている。また、当該キットは、式（１）に示される化合物を、クエン酸緩衝液、酢酸緩衝液、リン酸緩衝液、生理食塩水または注射用水に溶解した溶液を注射筒に充填し、薬剤押出用プランジャーで摺動可能に密封してなる医療用注射剤を含むキットとすることが可能である。ここで溶液の浸透圧や粘性は必要に応じて適宜調製され得る。なお、薬剤押出用プランジャーは通常用いられているものを用いることが可能であるが、ゴム又は合成ゴム等の弾性体によって形成され、注射筒に摺動可能に密着状態で挿入される。また、キットには、プランジャーを押込操作し薬剤を押出する為のプランジャロッドや、取扱説明書または添付文書等が含まれていても良い。また、一実施形態では、本発明にかかる医薬組成物は、上記のように注射筒内に充填される代わりに、バイアル瓶に収容されて提供される。この場合、バイアル瓶は、滅菌された空の注射筒を含む注射器と共に提供されることもある。また、前記バイアル瓶と前記注射器を含むキットとしても提供可能である。
【００９８】
当業者に明らかであるように、本発明の一側面の好ましい性質および特徴はそれぞれ独立していてもよく、また本発明の他の側面と組み合わせて適用することもできる。
一実施形態では、ジクロフェナクラクタムの生成及び／又は蓄積を抑制し、かつ、ジクロフェナクの生成及び／又は蓄積が抑制された医薬組成物及びその製造方法が提供される。
一実施形態では、最大処理量（Ｖｍａｘ）が１．０ｇ／ｃｍ２以上を示す、ジクロフェナクラクタムの生成が抑制された水性組成物及びその製造方法が提供される。
一実施形態では、最大処理量（Ｖｍａｘ）が１．０ｇ／ｃｍ２以上を示す、ジクロフェナクの生成が抑制された水性組成物及びその製造方法が提供される。
一実施形態では、最大処理量（Ｖｍａｘ）が１．０ｇ／ｃｍ２以上を示す、ジクロフェナクラクタムの生成及びジクロフェナクの生成が抑制された水性組成物及びその製造方法が提供される。
【００９９】
具体的な一実施形態では、式（１）に示される化合物、及び非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物を含有し、ジクロフェナクラクタムの生成及び／又は蓄積が抑制され、且つジクロフェナクの生成及び／又は蓄積が抑制された医薬組成物が提供される。
具体的な一実施形態では、式（１）に示される化合物、及びポリアルキレングリコール、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、及びヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物を含有し、ジクロフェナクラクタムの生成が抑制され、最大処理量（Ｖｍａｘ）が１．０ｇ／ｃｍ２以上を示し、濾過性が向上された医薬組成物が提供される。
具体的な一実施形態では、式（１）に示される化合物、及びＣ１〜Ｃ３モノアルコール、及びヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物を含有し、ジクロフェナクの生成が抑制され、最大処理量（Ｖｍａｘ）が１．０ｇ／ｃｍ２以上を示し、濾過性が向上された医薬組成物が提供される。
具体的な一実施形態では、式（１）に示される化合物、及びＣ１〜Ｃ３モノアルコール、及びヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物を含有し、ジクロフェナクラクタムの生成及びジクロフェナクの生成が抑制され、最大処理量（Ｖｍａｘ）が１．０ｇ／ｃｍ２以上を示し、濾過性が向上された医薬組成物が提供される。
【０１００】
具体的な一実施形態では、式（１）に示される化合物と、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物を共存させる工程を含む、式（１）に示される化合物からのジクロフェナクラクタムの生成及びジクロフェナクの生成を抑制する方法が提供される。
【０１０１】
具体的な一実施形態では、式（１）に示される化合物と、ポリアルキレングリコール、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、及びヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物を共存させる工程を含む、式（１）に示される化合物からのジクロフェナクラクタムの生成を抑制し、且つ式（１）に示される化合物の濾過性を向上させる方法が提供される。
具体的な一実施形態では、式（１）に示される化合物と、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、及びヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物を共存させる工程を含む、式（１）に示される化合物からのジクロフェナクの生成を抑制し、且つ式（１）に示される化合物の濾過性を向上させる方法が提供される。
具体的な一実施形態では、式（１）に示される化合物と、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、及びヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物を共存させる工程を含む、式（１）で示される化合物からのジクロフェナクラクタムの生成及びジクロフェナクの生成を抑制し、さらに、式（１）に示される化合物の濾過性を向上させる方法が提供される。
【０１０２】
＜実施形態＞
本発明の好ましい実施形態を以下に例示する。
［１］式（１）に示される化合物及び成分（Ａ）を含有する医薬組成物：
成分（Ａ）：  非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物： 
【０１０３】
【化１】
0006718567.tif 000013
【０１０４】
式（１）中、ａは０．０１以上０．７以下であり、ａ＋ｂは１であり、ｎは２５以上２５，０００以下の整数であり、各構成二糖単位の配列はランダム又はブロック状であってよく、Ｒは各構成二糖単位においてそれぞれ独立してカルボキシ基又はカルボン酸塩の基である。
［２］前記成分（Ａ）が、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、及びポリアルキレングリコールからなる群から選ばれるものである、前記［１］に記載の医薬組成物。
［３］ポリアルキレングリコールがポリエチレングリコールである、前記［１］又は［２］に記載の医薬組成物。
［４］ポリエチレングリコールの重量平均分子量が２００以上６，０００以下である、前記［３］に記載の医薬組成物。
［５］前記式（１）に示される化合物を０．０１ｗ／ｖ％以上８０ｗ／ｖ％以下、０．１ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％以下、０．５ｗ／ｖ％以上５ｗ／ｖ％以下、または１ｗ／ｖ％の濃度で含有する、前記［１］〜［４］のいずれかに記載の医薬組成物。
［６］前記成分（Ａ）の終濃度が、０．０１ｗ／ｖ％以上６０ｗ／ｖ％以下、０．０１ｗ／ｖ％以上３０ｗｔ％以下、１ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下、または２ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％未満である前記［１］〜［５］のいずれかに記載の医薬組成物。
［７］さらに、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液及び酢酸緩衝液からなる群から選ばれる緩衝液を含む、前記［１］〜［６］のいずれかに記載の医薬組成物。
［８］ｐＨが４．５〜７．０である、前記［１］〜［７］のいずれかに記載の医薬組成物。
［９］水性組成物である、前記［１］〜［８］のいずれかに記載の医薬組成物。
［１０］関節疾患処置用医薬組成物である、前記［１］〜［９］のいずれかに記載の医薬組成物。
［１１］関節疾患が変形性関節症又はリウマチ性関節症である、前記［１０］に記載の医薬組成物。
【０１０５】
［１２］前記［１］〜［１１］のいずれかに記載の医薬組成物が注射筒内に充填されている注射器を含む、キット。
［１３］前記［１］〜［１１］のいずれかに記載の医薬組成物を含むバイアル、及び注射器を含む、キット。
【０１０６】
［１４］下記式（１）に示される化合物を含有する医薬組成物を製造する方法であって、下記式（１）に示される化合物と成分（Ａ）とを共存させる工程を含む、方法：
成分（Ａ）：  非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物：
【０１０７】
【化１】
0006718567.tif 000014
【０１０８】
式（１）中、ａは０．０１以上０．７以下であり、ａ＋ｂは１であり、ｎは２５以上２５，０００以下の整数であり、各構成二糖単位の連結はランダム又はブロック状であってよく、Ｒは各構成二糖単位においてそれぞれ独立してカルボキシ基又はカルボン酸塩の基である。
［１５］前記成分（Ａ）が、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、及びポリアルキレングリコールからなる群から選ばれるものである、前記［１４］に記載の方法。
［１６］ポリアルキレングリコールがポリエチレングリコールである、前記［１４］又は［１５］に記載の方法。
［１７］ポリエチレングリコールの重量平均分子量が２００以上６，０００以下である、前記［１６］に記載の方法。
［１８］前記式（１）に示される化合物が、終濃度０．０１ｗ／ｖ％以上８０ｗ／ｖ％以下、０．１ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％以下、０．５ｗ／ｖ％以上５ｗ／ｖ％以下、または１ｗ／ｖ％の濃度で添加される、前記［１４］〜［１７］のいずれかに記載の方法。
［１９］前記成分（Ａ）が、終濃度０．０１ｗ／ｖ％以上６０ｗ／ｖ％以下、０．０１ｗ／ｖ％以上３０ｗｔ％以下、１ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下、または２ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％未満で添加される、前記［１４］〜［１８］のいずれかに記載の方法。
［２０］式（１）に示される化合物及び／又は成分（Ａ）が、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液及び酢酸緩衝液からなる群から選ばれる緩衝液を含む、前記［１４］〜［１９］のいずれかに記載の方法。
［２１］医薬組成物のｐＨが４．５〜７．０である、前記［１４］〜［２０］のいずれかに記載の方法。
［２２］前記医薬組成物が水性組成物である、前記［１４］〜［２１］のいずれかに記載の方法。
【０１０９】
［２３］下記式（１）に示される化合物からのジクロフェナクラクタムの生成を抑制する方法であって、
下記式（１）に示される化合物に対し、成分（Ａ）を共存させる工程を含む、方法：
成分（Ａ）：  非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物：
【０１１０】
【化１】
0006718567.tif 000015
【０１１１】
式（１）中、ａは０．０１以上０．７以下であり、ａ＋ｂは１であり、ｎは２５以上２５，０００以下の整数であり、各構成二糖単位の配列はランダム又はブロック状であってよく、Ｒは各構成二糖単位においてそれぞれ独立してカルボキシ基又はカルボン酸塩の基である。
［２４］前記成分（Ａ）が、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、及びポリアルキレングリコールからなる群から選ばれるものである、前記［２３］に記載の方法。
［２５］ポリアルキレングリコールがポリエチレングリコールである、前記［２３］又は［２４］に記載の方法。
［２６］ポリエチレングリコールの重量平均分子量が２００以上６，０００以下である、前記［２５］に記載の方法。
［２７］前記成分（Ａ）が、終濃度０．０１ｗ／ｖ％以上６０ｗ／ｖ％以下、０．０１ｗ／ｖ％以上３０ｗｔ％以下、１ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下、または２ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％未満で添加される、前記［２３］〜［２６］のいずれかに記載の方法。
［２８］前記式（１）に示される化合物、及び／又は、前記成分（Ａ）が、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液及び酢酸緩衝液からなる群から選ばれる緩衝液を含むものである、前記［２３］〜［２７］のいずれかに記載の方法。
［２９］ｐＨが４．５〜７．０の範囲で行われる、前記［２３］〜［２８］のいずれかに記載の方法。
［３０］前記式（１）に示される化合物と前記成分（Ａ）とを水性溶媒中で共存させる、前記［２３］〜［２９］のいずれかに記載の方法。
【０１１２】
［３１］下記式（１）に示される化合物を含む医薬組成物においてジクロフェナクラクタムの蓄積を抑制する方法であって、式（１）に示される化合物と成分（Ａ）とを共存させる工程を含む、方法：
成分（Ａ）：  非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、C２〜C３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物：
【０１１３】
【化１】
0006718567.tif 000016
【０１１４】
式（１）中、ａは０．０１以上０．７以下であり、ａ＋ｂは１であり、ｎは２５以上２５，０００以下の整数であり、各構成二糖単位の配列はランダム又はブロック状であってよく、Ｒは各構成二糖単位においてそれぞれ独立してカルボキシ基又はカルボン酸塩の基である。
［３２］前記成分（Ａ）が、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、及びポリアルキレングリコールからなる群から選ばれるものである、前記［３１］に記載の方法。
［３３］ポリアルキレングリコールがポリエチレングリコールである、前記［３１］又は［３２］に記載の方法。
［３４］ポリエチレングリコールの重量平均分子量が２００以上６，０００以下である、前記［３３］に記載の方法。
［３５］前記医薬組成物が、前記式（１）に示される化合物を０．０１ｗ／ｖ％以上８０ｗ／ｖ％以下、０．１ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％以下、０．５ｗ／ｖ％以上５ｗ／ｖ％以下、または１ｗ／ｖ％の濃度で含有するものである、前記［３１］〜［３４］のいずれかに記載の方法。
［３６］前記成分（Ａ）が、終濃度０．０１ｗ／ｖ％以上６０ｗ／ｖ％以下、０．０１ｗ／ｖ％以上３０ｗｔ％以下、１ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下、または２ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％未満で添加される、前記［３１］〜［３５］のいずれかに記載の方法。
［３７］前記式（１）に示される化合物、及び／又は、前記成分（Ａ）が、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液及び酢酸緩衝液からなる群から選ばれる緩衝液を含むものである、前記［３１］〜［３６］のいずれかに記載の方法。
［３８］ｐＨが４．５〜７．０の範囲で行われる、前記［３１］〜［３７］のいずれかに記載の方法。
［３９］前記医薬組成物が水性組成物である、前記［３１］〜［３８］のいずれかに記載の方法。
［４０］前記医薬組成物が関節疾患処置用医薬組成物である、前記［３１］〜［３９］のいずれかに記載の方法。
［４１］関節疾患が変形性関節症又はリウマチ性関節症である、前記［４０］に記載の医薬組成物。
【０１１５】
［４２］成分（Ａ）の、下記式（１）に示される化合物を含有する医薬組成物の製造における使用であって、前記成分（Ａ）は非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物であり、前記製造は前記成分（Ａ）と前記式（１）に示される化合物とを共存させる工程を含む、使用：
【０１１６】
【化１】
0006718567.tif 000017
【０１１７】
式（１）中、ａは０．０１以上０．７以下であり、ａ＋ｂは１であり、ｎは２５以上２５，０００以下の整数であり、各構成二糖単位の配列はランダム又はブロック状であってよく、Ｒは各構成二糖単位においてそれぞれ独立してカルボキシ基又はカルボン酸塩の基である。
［４３］前記成分（Ａ）が、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、及びポリアルキレングリコールからなる群から選ばれるものである、前記［４２］に記載の使用。
［４４］ポリアルキレングリコールがポリエチレングリコールである、前記［４２］又は［４３］に記載の使用。
［４５］ポリエチレングリコールの重量平均分子量が２００以上６，０００以下である、前記［４４］に記載の使用。
［４６］前記医薬組成物が、前記式（１）に示される化合物を０．０１ｗ／ｖ％以上８０ｗ／ｖ％以下、０．１ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％以下、０．５ｗ／ｖ％以上５ｗ／ｖ％以下、または１ｗ／ｖ％の濃度で含有するものである、前記［４２］〜［４５］のいずれかに記載の使用。
［４７］前記成分（Ａ）が、０．０１ｗ／ｖ％以上６０ｗ／ｖ％以下、０．０１ｗ／ｖ％以上３０ｗｔ％以下、１ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下、または２ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％未満の終濃度で添加される、前記［４２］〜［４６］のいずれかに記載の使用。
［４８］前記医薬組成物が関節疾患処置用医薬組成物である、前記［４２］〜［４７］のいずれかに記載の使用。
［４９］関節疾患が変形性関節症又はリウマチ性関節症である、前記［４８］に記載の使用。
【０１１８】
［５０］ヒトの関節疾患処置における使用のための成分（Ａ）であって、前記成分（Ａ）は非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物であり、前記処置は、前記成分（Ａ）と下記式（１）に示される化合物が共に関節疾患処置用医薬組成物の構成成分として使用されるものである、成分（Ａ）：
【０１１９】
【化１】
0006718567.tif 000018
【０１２０】
式（１）中、ａは０．０１以上０．７以下であり、ａ＋ｂは１であり、ｎは２５以上２５，０００以下の整数であり、各構成二糖単位の配列はランダム又はブロック状であってよく、Ｒは各構成二糖単位においてそれぞれ独立してカルボキシ基又はカルボン酸塩の基である。
［５１］前記成分（Ａ）が、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、及びポリアルキレングリコールからなる群から選ばれるものである、前記［５０］に記載の成分（Ａ）。
［５２］ポリアルキレングリコールがポリエチレングリコールである、前記［５０］又は［５１］に記載の成分（Ａ）。
［５３］ポリエチレングリコールの重量平均分子量が２００以上６，０００以下である、前記［５２］に記載の成分（Ａ）。
［５４］前記式（１）に示される化合物の前記医薬組成物における終濃度が、０．０１ｗ／ｖ％以上８０ｗ／ｖ％以下、０．１ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％以下、０．５ｗ／ｖ％以上５ｗ／ｖ％以下、または１ｗ／ｖ％である、前記［５０］〜［５３］のいずれかに記載の成分（Ａ）。
［５５］前記成分（Ａ）の前記医薬組成物における終濃度が、０．０１ｗ／ｖ％以上６０ｗ／ｖ％以下、０．０１ｗ／ｖ％以上３０ｗｔ％以下、１ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下、または２ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％未満である前記［５０］〜［５４］のいずれかに記載の成分（Ａ）。
［５６］関節疾患が変形性関節症又はリウマチ性関節症である、前記［５０］〜［５５］のいずれかに記載の成分（Ａ）。
【０１２１】
［５７］ヒトの関節疾患処置方法であって、医薬組成物を関節疾患患者の関節に投与する工程を含み、前記医薬組成物は、有効量の下記式（１）に示される化合物、及び、成分（Ａ）を含有するものであり、前記成分（Ａ）は非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、Ｃ２〜Ｃ３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物である、方法：
【０１２２】
【化１】
0006718567.tif 000019
【０１２３】
式（１）中、ａは０．０１以上０．７以下であり、ａ＋ｂは１であり、ｎは２５以上２５，０００以下の整数であり、各構成二糖単位の配列はランダム又はブロック状であってよく、Ｒは各構成二糖単位においてそれぞれ独立してカルボキシ基又はカルボン酸塩の基である。
［５８］前記成分（Ａ）が、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、及びポリアルキレングリコールからなる群から選ばれるものである、前記［５７］に記載の方法。
［５９］ポリアルキレングリコールがポリエチレングリコールである、前記［５７］又は［５８］に記載の方法。
［６０］ポリエチレングリコールの重量平均分子量が２００以上６，０００以下である、前記［５９］に記載の方法。
［６１］前記式（１）に示される化合物の前記医薬組成物における濃度が、０．０１ｗ／ｖ％以上８０ｗ／ｖ％以下、０．１ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％以下、０．５ｗ／ｖ％以上５ｗ／ｖ％以下、または１ｗ／ｖ％である、前記［５７］〜［６０］のいずれかに記載の方法。
［６２］前記成分（Ａ）の前記医薬組成物における濃度が、０．０１ｗ／ｖ％以上６０ｗ／ｖ％以下、０．０１ｗ／ｖ％以上３０ｗｔ％以下、１ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下、または２ｗ／ｖ％以上１０ｗ／ｖ％未満である前記［５７］〜［６１］のいずれかに記載の方法。
［６３］関節疾患が変形性関節症又はリウマチ性関節症である、前記［５７］〜［６２］のいずれかに記載の方法。
【実施例】
【０１２４】
以下、実施例を用いて本発明の好ましい実施形態についてより詳細に説明するが、本発明は下記の実施例によって何ら限定されるものではない。【０１２５】
＜合成例＞
国際公開第２００５／０６６２１４号の実施例に記載の方法に準じて、ヒアルロン酸誘導体（式（１）に示される化合物）を合成した（ａ：０．１８、ｎ：２千、ヒアルロン酸の質量平均分子量：８０万）。
より具体的には、以下の手法により合成した。
２−ブロモエチルアミン臭化水素酸塩２．１５５ｇ（１０．５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン２０ｍＬに溶解し、氷冷下でトリエチルアミン１．４６３ｍＬ（１０．５ｍｍｏｌ）を加え、さらにジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカルボナート（Ｂｏｃ２Ｏ）２．２９９ｇ（１０．５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液５ｍＬを加えて撹拌した。室温で９０分間撹拌した後、酢酸エチルを加え、５重量％クエン酸水溶液、水、飽和食塩水で順次分液洗浄した。硫酸ナトリウムで脱水後、溶媒を減圧留去し、Ｂｏｃ−アミノエチルブロマイドを得た。
上記で得られたＢｏｃ−アミノエチルブロマイド２．２８７ｇ（１０．２ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）溶液５ｍＬを氷冷し、ジクロフェナクナトリウム３．２５５ｇ（１０．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液６ｍＬを加え、室温で一晩撹拌した。６０℃で１１時間撹拌し、室温で一晩撹拌した。酢酸エチルを加え、５重量％炭酸水素ナトリウム水溶液、水、飽和食塩水で順次分液洗浄した。硫酸ナトリウムで脱水後、酢酸エチルを減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（トルエン：酢酸エチル＝２０：１（ｖ／ｖ）、０．５体積％トリエチルアミン）で精製し、Ｂｏｃ−アミノエタノール−ジクロフェナクを得た。
上記で得られたＢｏｃ−アミノエタノール−ジクロフェナク２．１０８ｇ（４．８０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン５ｍＬに溶解し、氷冷下で４Ｍ塩酸／酢酸エチル２０ｍＬを加えて２．５時間撹拌した。ジエチルエーテル、ヘキサンを加えて沈殿させ、沈殿を減圧乾燥した。これにより、アミノエタノール−ジクロフェナク塩酸塩を得た。構造は１Ｈ−ＮＭＲにて同定した：
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）＝３．１８（２Ｈ，ｔ，ＮＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−），  ３．９４（２Ｈ，ｓ，Ｐｈ−ＣＨ２−ＣＯ），  ４．３７（２Ｈ，ｔ，ＮＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−），  ６．４７−７．３１（８Ｈ，ｍ，Ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｈ，ＮＨ）。
質量平均分子量８０万のヒアルロン酸５００ｍｇ（１．２５ｍｍｏｌ／二糖単位）を水５６．３ｍＬ／ジオキサン５６．３ｍＬに溶解させた後、ヒドロキシコハク酸イミド（１ｍｍｏｌ）／水０．５ｍＬ、水溶性カルボジイミド塩酸塩（ＷＳＣＩ・ＨＣｌ）（０．５ｍｍｏｌ）／水０．５ｍＬ、上記で得られたアミノエタノール−ジクロフェナク塩酸塩（０．５ｍｍｏｌ）／（水：ジオキサン＝１：１（ｖ／ｖ）、５ｍＬ）を順次加え、一昼夜撹拌した。反応液に５重量％炭酸水素ナトリウム水溶液７．５ｍＬを加え、約４時間撹拌した。反応液に５０％（ｖ／ｖ）酢酸水溶液２１５μＬを加えて中和後、塩化ナトリウム２．５ｇを加えて撹拌した。エタノール４００ｍＬを加えて沈殿させ、沈殿物を８５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液で２回、エタノールで２回、ジエチルエーテルで２回洗浄し、室温にて一晩減圧乾燥し、ヒアルロン酸誘導体（ナトリウム塩）（式（１）に示される化合物）を得た。分光光度計により測定されたジクロフェナクの導入率は１８モル％であった。
さらに、前記合成例に沿って、導入率１８モル％のヒアルロン酸誘導体（ナトリウム塩）の乾燥物を調製した。【０１２６】
＜試験用サンプルの調製＞
・リン酸緩衝液の調製
７５ｍＭリン酸濃度のリン酸二水素ナトリウム水溶液と７５ｍＭリン酸濃度のリン酸水素二ナトリウム水溶液とを１７：１１の比率（体積比）で混合し、リン酸緩衝液を調製した。調製後のリン酸緩衝液のｐＨは６．５であった。
・クエン酸緩衝液の調製
１５ｍＭクエン酸濃度のクエン酸水溶液と１５ｍＭクエン酸濃度のクエン酸三ナトリウム水溶液とを２７：３７の比率（体積比）で混合し、クエン酸緩衝液を調製した。調製後のクエン酸緩衝液のｐＨは５．１であった。
・酢酸緩衝液の調製
１５ｍＭ酢酸濃度の酢酸水溶液と１５ｍＭ酢酸濃度の酢酸ナトリウム水溶液とを１：３の比率（体積比）で混合し、酢酸緩衝液を調製した。調製後の酢酸緩衝液のｐＨは５．１であった。また、同様の手法により４５ｍＭ酢酸濃度でｐＨ５．１の酢酸緩衝液を調製した。
・１．５重量％ヒアルロン酸誘導体溶液の調製
上記合成例のヒアルロン酸誘導体１．５ｇと上記で調製した各種緩衝液９８．５ｇとを混合し、７０℃湯浴にて２時間攪拌して１．５重量％ヒアルロン酸誘導体溶液を調製した。
・各種付加成分水溶液の調製
ヒアルロン酸誘導体溶液に添加するための付加成分水溶液は、それぞれ終濃度の３倍濃度（重量％）となるように、各種付加成分とＷＦＩを用いて調製した。
・試験用サンプルの調製
上記にて調製した１．５重量％ヒアルロン酸誘導体溶液２．０ｇと前記付加成分水溶液１．０ｇとを混合し、試験用サンプル（ヒアルロン酸誘導体の終濃度：１．０重量％）を調製した。また、付加成分水溶液１．０ｇに代えてＷＦＩを１．０ｇ混合することで、前記付加成分を含まない対照溶液を調製した。【０１２７】
実施例１  ジクロフェナク成分の蓄積に対する付加成分の影響
各種緩衝液（５０ｍＭリン酸緩衝液、１０ｍＭクエン酸緩衝液、１０ｍＭ酢酸緩衝液、又は３０ｍＭ酢酸緩衝液）を含む、上記で調製した試験用サンプルを保存試験に供した。
試験用サンプルを６０℃の恒温槽にて１週間保存した後、ジクロフェナク及びジクロフェナクラクタムの蓄積量をＨＰＬＣによりそれぞれ測定した。
ジクロフェナク量及びジクロフェナクラクタム量は、６０℃で１週間保存した対照溶液（１重量％ヒアルロン酸誘導体溶液）中に存在したジクロフェナク量及びジクロフェナクラクタム量をそれぞれ１としたときの相対値として算出した。
保存試験のより具体的な手順は次のとおりである。【０１２８】
＜保存試験＞
調製した各種試験用サンプルをスクリューバイアル(アズワン社、Ｃａｔ  Ｎｏ．：３−１５９９−０１）に充填し、６０℃にて１週間静置した。静置後の溶液中に存在したジクロフェナク量、ジクロフェナクラクタム量をＨＰＬＣにて定量分析した。
ＨＰＬＣ条件は以下のとおり。
カラム：ＴＳＧｇｅｌ  ＯＤＳ−１００Ｚ（４．６ｍｍｘ１５０ｍｍ）
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
温度：３５℃
グラジエント：アセトニトリル（Ｂ）／２０ｍＭリン酸ナトリウム（Ａ）
Ｂ  ｃｏｎｃ．（ｍＬ／ｍｉｎ）            
０．４０（０  ｍｉｎ）−０．８０（３０  ｍｉｎ）
０．８０（３３  ｍｉｎ）−０．４０（３５  ｍｉｎ）
ジクロフェナク及びジクロフェナクラクタムの溶出時間は標準物質を用いて予め測定し決定した。
なお、６０℃での１週間保存は、２５℃での１年間保存に相当する。【０１２９】
（１−１）５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）を用いた場合の保存試験
付加成分として、Ｌ−アルギニン塩酸塩（試験用サンプル中の終濃度：３重量％）、Ｌ−メチオニン、Ｌ−リジン塩酸塩（３重量％）、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、アリルオキシ−１，２−プロパンジオール、エデト酸ナトリウム（３重量％）、グリシン、ジグリセロール、チオグリコール酸ナトリウム（３重量％）、テトラキス（４−アルボキシフェニル）ポルフィリン（１．５重量％）、ニコチン酸アミド、ブチルヒドロキシアニソール、フロリジン水和物（１．５重量％）、ベンジルアルコール、ホウ酸、ポリビニルアルコール（１．５重量％）、Ｄ−エリスロノラクトン、Ｄ−グルカール、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ４０００、エリソルビン酸ナトリウム（３重量％）、及びグリセリンを用いた。濃度の記載のない付加成分は、いずれも終濃度５重量％で使用した。
＜結果＞
付加成分として、Ｌ−アルギニン塩酸塩、Ｌ−メチオニン、Ｌ−リジン塩酸塩、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、アリルオキシ−１，２−プロパンジオール、エデト酸ナトリウム、グリシン、ジグリセロール、チオグリコール酸ナトリウム、テトラキス（４−アルボキシフェニル）ポルフィリン、ニコチン酸アミド、ブチルヒドロキシアニソール、フロリジン水和物、ベンジルアルコール、ホウ酸、及びポリビニルアルコールを使用した場合、いずれもジクロフェナクラクタム量（相対値）は１を超えた。すなわち、付加成分を用いない対照と比してジクロフェナクラクタムの生成量は増大しており、ジクロフェナクラクタムの生成促進が認められた。これらの付加成分を用いた場合、ブチルヒドロキシアニソールの例を除き、ジクロフェナク量（相対値）はいずれも１を超えていた。ブチルヒドロキシアニソールの場合のジクロフェナク量（相対値）は０．９９であり、ジクロフェナクの生成に与える付加成分としての効果はほぼ認められなかった。
一方、付加成分としてＤ−エリスロノラクトン、Ｄ−グルカール、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ４０００、エリソルビン酸ナトリウム、及びグリセリンを使用した場合、いずれもジクロフェナクラクタム量（相対値）は１を下回った。すなわち、付加成分を用いない対照と比してジクロフェナクラクタムの生成量は減少しており、ジクロフェナクラクタムの生成抑制が認められた（表１）。
ＣＯＸ−２阻害剤として実用上の活性を有しないジクロフェナクラクタムの生成を抑制することから、Ｄ−エリスロノラクトン、Ｄ−グルカール、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ４０００、エリソルビン酸ナトリウム、及びグリセリンは、ジクロフェナクラクタムの蓄積を抑制できることが明らかとなった。さらに、これらのうち、Ｄ−エリスロノラクトン及びエリソルビン酸ナトリウムについては、ジクロフェナク量（相対値）も１を下回っており、ジクロフェナクの蓄積も抑制することが分かった。【０１３０】
【表１】
0006718567.tif 000020
【０１３１】
*Lac量；ジクロフェナクラクタム量の相対値
**Dic量；ジクロフェナク量の相対値【０１３２】
（１−２）１０ｍＭクエン酸緩衝液（ｐＨ５．１）を用いた場合の保存試験
付加成分として、クレアチニン（１重量％）、デオキシコール酸ナトリウム（５重量％）、１，２，３−ブタントリオール（５重量％）、ＰＥＧ４００（６．３重量％、又は１６．５重量％）、ＰＥＧ６００（１０重量％）、ＰＥＧ４０００（１０重量％）、ＰＥＧ６０００（１０重量％）、ＳＤＳ（５重量％）、ＴｒｉｔｏｎＸ−１００（５重量％）、エタノール（２６重量％）、オクチルグルコシド（５重量％）、グルクロノラクトン（０．１重量％）、クロロゲン酸（０．１重量％）、プロピレングリコール（１０重量％）、ポリソルベート２０（５重量％）、及びポリビニルピロリドン（５重量％）を用いた。
同様に付加成分として、ＰＥＧ３３５０（１０．６重量％）及びポリソルベート８０（３重量％）、並びに、ＰＥＧ３３５０（６．０重量％）及びヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（１０重量％）の２成分系、又は、ＰＥＧ３３５０（５．５重量％）、ポリソルベート８０（１重量％）及びヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（１０重量％）の３成分系の付加成分を用いた。
＜結果＞
付加成分として、クレアチニン、及びデオキシコール酸ナトリウムを使用した場合、いずれもジクロフェナクラクタム量（相対値）は１を超えた。すなわち、付加成分を用いない対照と比してジクロフェナクラクタムの生成量は増大しており、ジクロフェナクラクタムの生成促進が認められた。これらの付加成分を用いた場合、いずれもジクロフェナク量（相対値）も１を超えていた。
一方、付加成分として１，２，３−ブタントリオール、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００、ＰＥＧ４０００、ＰＥＧ６０００、ＳＤＳ、ＴｒｉｔｏｎＸ−１００、エタノール、オクチルグルコシド、グルクロノラクトン、クロロゲン酸、プロピレングリコール、ポリソルベート２０、及びポリビニルピロリドンを使用した場合、いずれもジクロフェナクラクタム量（相対値）は１を下回った。すなわち、付加成分を用いない対照と比してジクロフェナクラクタムの生成量は減少しており、ジクロフェナクラクタムの生成抑制が認められた（表２）。表２は、保管後の溶液性状も併せて示している。溶液性状は、無色澄明である場合が多く、着色のある場合でも僅かに黄色味がかる程度であり、澄明でない場合でも僅かに濁りがある程度であった。また、上記２成分系又は３成分系を使用した場合、いずれもジクロフェナクラクタム量（相対値）、ジクロフェナク量（相対値）のそれぞれが１を下回った。また、これらの２成分系、３成分系についての溶液性状はいずれも無色澄明であった（表３）。
ＣＯＸ−２阻害剤として実用上の活性を有しないジクロフェナクラクタムの生成を抑制することから、１，２，３−ブタントリオール、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００、ＰＥＧ４０００、ＰＥＧ６０００、ＳＤＳ、ＴｒｉｔｏｎＸ−１００、エタノール、オクチルグルコシド、グルクロノラクトン、クロロゲン酸、プロピレングリコール、ポリソルベート２０、及びポリビニルピロリドンは、ジクロフェナクラクタム蓄積抑制剤として使用できることが明らかとなった。しかも、これらを使用した場合、ジクロフェナク量（相対値）も１を下回っており、ジクロフェナクの蓄積も抑制することが分かった。【０１３３】
【表２】
0006718567.tif 000021
【０１３４】
*Lac量；ジクロフェナクラクタム量の相対値
**Dic量；ジクロフェナク量の相対値【０１３５】
【表３】
0006718567.tif 000022
【０１３６】
*Lac量；ジクロフェナクラクタム量の相対値
**Dic量；ジクロフェナク量の相対値【０１３７】
（１−３）３０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ５．１）を用いた場合の保存試験
付加成分として、没食子酸プロピル（１．５重量％）、無水乳酸（１．５重量％）、ヒドロキシプロピルセルロース（１．５重量％）、でんぷん（１．５重量％）、デキストラン（５重量％）、スクロース（５重量％）、サッカリン酸ナトリウム二水和物（５重量％）、グリシン（５重量％）、アスパラギン酸ナトリウム（１．５重量％）、Ｌ−ロイシン（１．５重量％）、Ｌ−フェニルアラニン（５重量％）、Ｌ−セリン（５重量％）、Ｄ−マンニトール（１．５重量％）、Ｄ−ソルビトール（５重量％）、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（３重量％、５重量％、１０重量％、又は１５重量％）、及びエタノール（５重量％、１０重量％、２０重量％、又は２６．３重量％）を用いた。
＜結果＞
付加成分として、没食子酸プロピル、無水乳酸、ヒドロキシプロピルセルロース、でんぷん、デキストラン、スクロース、サッカリン酸ナトリウム二水和物、グリシン、アスパラギン酸ナトリウム、Ｌ−ロイシン、Ｌ−フェニルアラニン、Ｌ−セリン、Ｄ−マンニトール、及びＤ−ソルビトールを使用した場合、いずれもジクロフェナクラクタム量（相対値）は１を超えた。すなわち、付加成分を用いない対照と比してジクロフェナクラクタムの生成量は増大しており、ジクロフェナクラクタムの生成促進が認められた。これらの付加成分を用いた場合、いずれもジクロフェナク量（相対値）も１を超えていた。
一方、付加成分としてヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）、及びエタノールを使用した場合、ジクロフェナクラクタム量（相対値）はそれぞれ１を下回った。すなわち、付加成分を用いない対照と比してジクロフェナクラクタムの蓄積量は減少しており、ジクロフェナクラクタムの蓄積抑制が認められた（表４）。
ＣＯＸ−２阻害剤として実用上の活性を有しないジクロフェナクラクタムの生成を抑制することから、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、及びエタノールは、ジクロフェナクラクタムの蓄積抑制剤として使用できることが明らかとなった。しかも、これらを使用した場合、ジクロフェナク量（相対値）も１を下回っており、ジクロフェナクの蓄積も抑制することが分かった。【０１３８】
【表４】
0006718567.tif 000023
【０１３９】
*Lac量；ジクロフェナクラクタム量の相対値
**Dic量；ジクロフェナク量の相対値【０１４０】
（１−４）１０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ５．１）を用いた場合の保存試験
付加成分として、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン（５重量％）、ＰＥＧ４００（７．５重量％）、ＰＥＧ４０００（５重量％、又は１５重量％）、エタノール（１０重量％）、オクチルグルコシド（５重量％）、ポリソルベート８０（５重量％、又は１０重量％）、及びポリビニルピロリドン（５重量％）を用いた。
＜結果＞
付加成分として、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ４０００、エタノール、オクチルグルコシド、ポリソルベート８０、及びポリビニルピロリドンを使用した場合、いずれもジクロフェナクラクタム量（相対値）は１を下回った。すなわち、付加成分を用いない対照と比してジクロフェナクラクタムの蓄積量は減少しており、ジクロフェナクラクタムの蓄積抑制が認められた（表５）。
ＣＯＸ−２阻害剤として実用上の活性を有しないジクロフェナクラクタムの生成を抑制することから、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ４０００、エタノール、オクチルグルコシド、ポリソルベート８０、及びポリビニルピロリドンは、ジクロフェナクラクタムの蓄積抑制剤として使用できることが明らかとなった。しかも、これらを使用した場合、ジクロフェナク量（相対値）も１を下回っており、ジクロフェナクの蓄積も抑制することが分かった。【０１４１】
【表５】
0006718567.tif 000024
【０１４２】
* Lac量；ジクロフェナクラクタム量の相対値
**Dic量；ジクロフェナク量の相対値【０１４３】
＜結論＞
本実施例を通じて、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ＴｒｉｔｏｎＸ−１００、オクチルグルコシド、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、エタノール、グリセリン、１，２，３−ブタントリオール、Ｄ−グルカール、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００、ＰＥＧ４０００、ＰＥＧ６０００、Ｄ−エリスロノラクトン、エリソルビン酸ナトリウム、グルクロノラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸、ＳＤＳ、及びプロピレングリコールには、ジクロフェナクラクタムの蓄積抑制効果が確認された。
よって、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ＴｒｉｔｏｎＸ−１００、オクチルグルコシド等の非イオン性界面活性剤；ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン等のヒドロキシアルキル化シクロデキストリン；エタノール等のＣ１〜Ｃ３モノアルコール；プロピレングリコール等のC２〜C３ジアルコール；グリセリン、１，２，３−ブタントリオール、Ｄ−グルカール等のＣ３〜Ｃ６トリアルコール、；ＰＥＧ２００、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００、ＰＥＧ４０００、ＰＥＧ６０００等のポリアルキレングリコール；Ｄ−エリスロノラクトン、エリソルビン酸ナトリウム、グルクロノラクトン等のγ-ラクトン；ポリビニルピロリドン；クロロゲン酸等のクロロゲン酸類及びＳＤＳ等のアルキル硫酸エステルは、ヒアルロン酸誘導体からのジクロフェナクラクタムの生成抑制剤として、また、ヒアルロン酸誘導体を含む医薬組成物におけるジクロフェナクラクタムの蓄積抑制剤として使用することができる。また、これらの薬学的に許容される塩についても、同様に使用することができる。【０１４４】
実施例２  水性組成物の濾過性の評価
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）、エタノール、ＰＥＧ４００、及びＰＥＧ４０００について、ヒアルロン酸誘導体を含有する水性組成物の濾過を検討した。
＜試験サンプルの調製＞
・１．５重量％ヒアルロン酸誘導体溶液の調製
上記で調製したヒアルロン酸誘導体と上記で調製した１５ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ５．１）とを混合し、攪拌後、静置し脱泡させることで１．５重量％ヒアルロン酸誘導体溶液を調製した。
・試験用サンプルの調製
上記で調製した１．５重量％ヒアルロン酸誘導体溶液１５０．０ｇと付加成分水溶液７５．０ｇとを混合し、試験用サンプル（ヒアルロン酸誘導体の終濃度：１．０重量％）を調製した。
また、付加成分水溶液に代えてＷＦＩを７５．０ｇ混合させた対照溶液も調製した。
＜濾過性の試験方法＞
孔径０．２２μｍのポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）膜（４７ｍｍ径、有効濾過面積：１３．８ｃｍ２、メルク社製）をセットしたステンレス製加圧フィルターホルダーに、上記で調製した試験用サンプルを２００ｍＬ加え、７０℃にて０．６ＭＰａで加圧した。フィルター通過液量を３０秒ごとに秤量し、経過時間と総濾過量との関係から最大処理量（Ｖｍａｘ）を算出した。【０１４５】
＜結果＞
付加成分を用いた場合は、いずれも、最大処理量（Ｖｍａｘ）が１．０ｇ／ｃｍ２以上であることが確認された（表６）。とりわけ、ＰＥＧ４００は最大処理量（Ｖｍａｘ）が高値であった。【０１４６】
【表６】
0006718567.tif 000025
【０１４７】
＜結論＞
フィルター濾過時において、流量が初期の１／１０になる前に濾過を中止するとフィルターが有効に使用できないし、これ以上使用すると濾過時間が長く必要になるため作業効率上好ましくない。Ｖｍａｘ値に０．６８を乗じた値（流量が初期の１／１０になった時点でのフィルター処理能力の低下率を６８％とする。）として算出されるＶ９０値は、流量が初期流量の１／１０になった時点までの処理量にあたる。濾過可能量を評価する上で、Ｖ９０値は経験的に好ましい値であることが知られている（要すれば、小林公彦著、「Ｖｍａｘ試験  フィルターの選定および最適化方法」、バイオプロセス・テクニカルシート  基礎技術Ｎｏ．２、日本ミリポア、１９９７年８月参照）。上記のような最大処理量（Ｖｍａｘ）が１．０ｇ／ｃｍ２以上である水性組成物はＶ９０値も高くなるため、フィルター濾過性に優れるといえる。つまり、このような水性組成物は、濾過時の目詰まりが起こりにくく、したがって濾過フィルターの交換や洗浄の頻度が少なくて済むなどの理由により、工業的規模での大量生産に適するものである。このため、医薬組成物として提供する場合であっても、加熱滅菌等を必要としない。したがって、ジクロフェナク成分の蓄積、とりわけジクロフェナクラクタムの蓄積量が抑制された組成物として提供し得る。【０１４８】
実施例３  医薬組成物の調製
成分（Ａ）は、ヒアルロン酸誘導体と共に医薬組成物の調製に使用される。一例として、ヒアルロン酸誘導体、ＰＥＧ４００、及びクエン酸緩衝液を含む注射用の医薬組成物の調製を示す。
（工程１）クエン酸水和物、クエン酸ニナトリウム水和物、及びＰＥＧ４００の所定量をＷＦＩに溶解させる。
（工程２）工程１の溶液にヒアルロン酸誘導体（導入率１８モル％）の所定量を溶解させる。そして、溶解後の溶液を７０℃に加温し、減圧加温脱気する。
（工程３）工程２の溶液を孔径０．２２μｍのフィルターで濾過滅菌する。
（工程４）工程３の溶液を７０℃で加温脱気し、次いで１０℃に冷却する。
（工程５）滅菌条件下でシリンジに所定量を充填する。
上記（工程１）〜（工程５）により、ヒアルロン酸誘導体、ＰＥＧ４００及びクエン酸緩衝液を含む滅菌済医薬組成物が調製される。ここで、各成分の濃度は、ヒアルロン酸誘導体；０．５〜５ｗ／ｖ％、ＰＥＧ４００；３〜３０ｗ／ｖ％、及びクエン酸緩衝液；３〜３０ｍＭ（クエン酸として）が例示されるが、医薬組成物中の各種成分の濃度は前記の各範囲に限定されるものではない。
【産業上の利用可能性】
【０１４９】
本発明は、例えば、ヒト関節疾患患者（特に、慢性的な関節疾患患者）の関節疾患に対して有意な改善効果をもたらす組成物であって、生理的に不活性な成分であるジクロフェナクラクタムの蓄積が抑制された安定性に優れた組成物を提供するものであることから、医薬産業などにおける産業上の利用可能性を有している。【０１５０】
本発明は具体的実施例と様々な実施形態とに関連して記載されているが、本明細書に記載される実施形態の多くの改変や応用が、本発明の精神および範囲を逸脱することなく可能であることは、当業者によって容易に理解される。
本出願は、２０１８年１１月１６日付で日本国特許庁に出願された特願２０１８−２１５８６７号に基づく優先権を主張し、その内容は参照によって全体として本出願に組み込まれる。
【要約】
本発明は、明細書中の式（１）で示されるヒアルロン酸誘導体又はその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物及びその製造方法、並びに、式（１）に示される化合物からのジクロフェナクラクタムの生成を抑制する方法の提供を目的とする。
明細書中の式（１）の化合物と、非イオン性界面活性剤、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリン、Ｃ１〜Ｃ３モノアルコール、C２〜C３ジアルコール、Ｃ３〜Ｃ６トリアルコール、ポリアルキレングリコール、γ‐ラクトン、ポリビニルピロリドン、クロロゲン酸類及びアルキル硫酸エステル、並びにこれらの塩、からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物である成分（Ａ）とを共存させることにより、式（１）に示される化合物からのジクロフェナクラクタムの生成が抑制する方法が提供され、また、式（１）に示される化合物及び成分（Ａ）を含有する医薬組成物の製造方法及びその製造物である医薬組成物が提供される。