(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトの新生児に静脈内投与される、Ｂ型肝炎ウイルスに対する中和抗体又は当該中和抗体の活性断片を含んでいる、当該新生児の分娩を介した又は分娩後のＢ型肝炎ウイルスによる感染リスクを低減させるための薬学的組成物であって、
筋肉内投与される、Ｂ型肝炎ウイルスに対する中和抗体又は当該中和抗体の活性断片を含んでいる第２の薬学的組成物と併用されるものであり、
上記筋肉内投与は、上記静脈内投与と同時にか５時間以内に行われる、
薬学的組成物。
【請求項２】
上記新生児が、Ｂ型肝炎ウイルスに感染している母体から分娩された新生児であり、当該母体に由来するＢ型肝炎ウイルスによる当該新生児の感染リスクを低減させる、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３】
上記母体に由来するＢ型肝炎ウイルスによる上記新生児の分娩を介した感染リスクを低減させる、請求項２に記載の薬学的組成物。
【請求項４】
上記母体は、Ｂ型肝炎ウイルス  ｅ  抗原陽性である、または、血中のＢ型肝炎ウイルス量が１０１コピー／ｍｌ以上である、請求項２または３に記載の薬学的組成物。
【請求項５】
出生後の４８時間以内に上記静脈内投与がなされることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項６】
１回の投与あたり１００〜２０００単位の上記中和抗体又は当該中和抗体の活性断片が上記新生児に静脈内投与される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項７】
上記中和抗体が、抗ＨＢｓ抗体である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項８】
１回の投与あたり４００〜６００単位の上記中和抗体又は当該中和抗体の活性断片が上記新生児に静脈内投与される、請求項６または７に記載の薬学的組成物。
【請求項９】
上記Ｂ型肝炎ウイルスは、遺伝子型ＡのＢ型肝炎ウイルスである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新生児のＢ型肝炎ウイルス感染リスクを低減させる薬学的組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
日本における妊婦のＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）表面抗原（ＨＢｓＡｇ）陽性率は、０．３〜１％である。そのうち、Ｂ型肝炎ウイルス  ｅ  抗原（ＨＢｅＡｇ）陽性（Ｂ型肝炎ウイルス  ｅ  抗体（ＨＢｅＡｂ）陰性）率は、約２５％とされている。ＨＢｓＡｇ陽性の母体から分娩された新生児は、分娩時に生じた母体および新生児における傷などを介して、母体由来のＨＢＶに汚染されている可能性を有している。したがって、ＨＢｓＡｇ陽性の母体から分娩された新生児は、ＨＢＶ感染のリスクを負っているため、世界的に実施されておりかつ厚生労働省の定めるＨＢＶ感染の防止処置を受ける（非特許文献１を参照）。この防止処置によって、ＨＢｓＡｇ陽性の母体から分娩された新生児における約９５％が、感染を免れていると報告されている。
【０００３】
一例として、国立成育医療研究センターにおいて、２００２年３月から２００９年３月までの７年間に１００１２例の分娩があった。これらの例において、ＨＢｓＡｇ陽性の母体による分娩は、全体の０．５６％を占めており、当該母体から分娩された新生児に対して、厚生労働省の定める方式にしたがって、上述のようなＨＢＶ感染の防止処置が施された。ＨＢｓＡｇ陽性の母体から分娩された新生児におけるＨＢＶの非感染率は、９６．０％であり、日本国内において報告されている結果と一致している。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Mast EE, Margolis HS, Fiore AE, et al. Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP). A comprehensive immunization strategy to eliminate transmission of HBV infection in the United States: recommendations of the Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP). Part 1: immunization of infants, children, and adolescents. MMWR Recomm Rep 2005;54:1-31.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかし、ＨＢｓＡｇ陽性の母体から分娩された新生児の感染防止率は、上述の通り１００％ではない。ここで、当該新生児は、出生直後において、肝機能障害を示しておらず、ＨＢｓＡｇ陰性であった。よって、これらの新生児は、母体由来のＨＢＶに、胎内においてではなく、分娩を介して感染した可能性が高いと考えられる。したがって、分娩後に施される新生児に対する処置を検討し直すことによって、上記感染防止率をさらに高め得ると考えられる。さらに、分娩を介する、新生児へのＨＢＶの感染をより効果的に防止可能な手段が新たに見いだされれば、当該手段は、分娩を介する以外の、新生児へのＨＢＶの感染を防止可能な手段へ転用もし得るものと考えられる。
【０００６】
日本では、母体のＨＢＶ持続感染率が低下してきているが、発展途上国におけるＨＢＶ持続感染率は依然として高い。よって、分娩を介した新生児のＨＢＶ感染をより確実に防止し得る手段の開発は世界的に有用である。また、慢性化しやすい遺伝子型ＡのＨＢＶの新たな感染拡大、およびＨＢｓ抗体陽性者（ＨＢＶ持続感染症患者においてウイルスの活動の終息を示す）における、免疫抑制によるウイルスの活動の再燃などが問題視されてきている。これらの防止策の１つとして、分娩を介した新生児のＨＢＶ感染の防止が重要である。ＨＢＶ持続感染症は、急性肝炎、肝硬変または肝がんの原因となる感染症として知られており、その病原性および感染力という観点からＨＢＶは、ヒトの接触し得るウイルスにおいて最も強い部類に属する。したがって、ＨＢＶ感染症の防止策は、感染源、感染経路および非感染者を対象として広く行われている。感染源の１つである持続感染している母体からの分娩を介した新生児のＨＢＶ感染は後に、（成長した）当該新生児からの水平感染につながり得る。
【０００７】
本発明は、上記の問題点に鑑みてなされたものであり、その目的は、分娩を介した新生児のＨＢＶ感染リスクをさらに低減させる対策を提供することにある。また、他の目的としては、ここで得られた対策を、分娩を介する以外の新生児へのＨＢＶの感染防止にも適用することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記の課題を解決するために、本発明は、以下の何れかの構成を有している。
１）新生児に静脈内投与される、Ｂ型肝炎ウイルスに対する中和抗体又は当該中和抗体の活性断片を含んでいる、当該新生児の分娩を介した又は分娩後のＢ型肝炎ウイルスによる感染リスクを低減させるための薬学的組成物。
２）新生児が、Ｂ型肝炎ウイルスに感染している母体から分娩された新生児であり、当該母体に由来するＢ型肝炎ウイルスによる新生児の感染リスクを低減させる、１）に記載の薬学的組成物。
３）母体に由来するＢ型肝炎ウイルスによる新生児の分娩を介した感染リスクを低減させる、２）に記載の薬学的組成物。
４）母体は、Ｂ型肝炎ウイルス  ｅ  抗原陽性である、または、血中のＢ型肝炎ウイルス量が１０１コピー／ｍｌ以上である、２）または３）に記載の薬学的組成物。
５）新生児はヒトである、１）〜４）のいずれかに記載の薬学的組成物。
６）筋肉内投与される、Ｂ型肝炎ウイルスに対する中和抗体又は当該中和抗体の活性断片を含んでいる第２の薬学的組成物と併用される、１）〜５）のいずれかに記載の薬学的組成物。
７）出生後の４８時間以内に投与がなされることを特徴とする、１）〜６）のいずれかに記載の薬学的組成物。
８）１回の投与あたり１００〜２０００単位の中和抗体又は当該中和抗体の活性断片が新生児に静脈内投与される、１）〜７）のいずれかに記載の薬学的組成物。
９）中和抗体が、抗ＨＢｓ抗体である、１）〜８）のいずれかに記載の薬学的組成物。
【発明の効果】
【０００９】
本発明は、分娩を介した又は分娩後における新生児のＨＢＶ感染リスクをさらに低減させる対策を提供することが出来るという効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】ＨＢＶに持続感染している母親から生まれた新生児を２群にわけて、ＨＢＩＧを共投与（静脈内および筋肉内）および筋肉内投与した後における、血清中のＨＢｓ抗体力価、および総ＩｇＧ抗体レベルを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
〔１．薬学的組成物〕
（本発明の薬学的組成物の基本構成）
本発明の一局面は、新生児の分娩を介した又は分娩後のＢ型肝炎ウイルス（以下、「ＨＢＶ」）による感染リスクを低減させるための薬学的組成物を提供する。より詳細には、当該薬学的組成物は、新生児の静脈内に投与され、かつＨＢＶに対する中和抗体（以下「ＨＢＶ中和抗体」）又はこの中和抗体の活性断片を含んでいる、薬学的組成物である。
【００１２】
まずここで、感染性および病原性が同じであれば、一次感染時のＨＢＶのウイルス粒子の数によって発病後の予後が大きく左右されると予測される。したがって、ウイルス粒子が体内へ侵入してから標的細胞に至って感染が成立するまでの間に、ウイルス粒子の感染性を消失させる（例えば、抗体によって中和させる）ことが、ＨＢＶ感染の防止にとって重要な点として本発明者らは着目した。
【００１３】
本発明の薬学的組成物を用いれば、ＨＢＶ中和抗体又はこの活性断片を新生児の血中に直接的に導入し得る。したがって、投与直後に、新生児の血液は、ＨＢＶ感染防御に十分な抗体価を示す。分娩（帝王切開を包含している）において、母体は出血を生じ得る。例えば、通常分娩において母体の産道を通過する新生児との擦過によって、母子ともに出血をともなう損傷を受け得る。新生児に生じた当該損傷や、新生児の目、鼻、口、尿道、膣または肛門などへの母体血液の接触、流入の結果として、母体の血中に存在していたＨＢＶが新生児の血中に侵入し得る。したがって、本発明の一局面において、本発明の薬学的組成物は、分娩からの時間の経過とともに増大する新生児のＨＢＶ感染のリスクを、適切な時点で（例えば、新生児へのＨＢＶの侵入直後および侵入前に）低減させる手段として極めて有効である。
【００１４】
続いて、これまで出生直後の新生児に対して行われているＨＢＶ感染の防止処置は、Ｂ型肝炎ウイルス免疫グロブリン（以下、「ＨＢＩＧ」）の筋肉内投与（以前の厚生省および現状の厚生労働省の方式）のみである。この防止処置では、ＨＢＩＧの血中濃度がピークに達するまでに２〜４日を要する上に、ＨＢＩＧが血中に送達される量は、投与された量の約４０％に過ぎない。よって、上記防止処置に対して、次の２点の問題が考えられる。
１．分娩時における新生児の体内へのウイルス粒子の侵入から、投与されたＨＢＩＧが、血中に送達されて、ウイルス粒子を中和するまでに時間を要する。
２．ＨＢＩＧが血中に送達される量が少なく（血中における抗体価が低く）、新生児の体内に侵入したウイルス粒子の数が多い場合に、すべてのウイルス粒子を中和できずに、感染が成立してしまう。
これらの問題に対しても、本発明の薬学的組成物は、次のような利点を有していると考えられる。
【００１５】
静脈内投与される本発明の薬学的組成物は、当然のことながらすべて血中に送達される。つまり、本発明の薬学的組成物を用いれば、安全性を考慮しつつ、所望される血中における抗体価を、容易に実現し得る。したがって、分娩を通じて（分娩中および分娩後に）新生児の体内に侵入したＨＢＶ粒子の数が多くとも、標的細胞（すなわち肝細胞）に到達する前に、ＨＢＶを十分に中和化し得る。
【００１６】
さらに、後述の実施例にも示す通り、本発明の薬学的組成物の静脈内投与は、予想に反して、新生児の総ＩｇＧ量にほとんど影響せず、安全性にも優れていることが明らかになった。成体と比較して新生児（特に分娩から間もない新生児）は個体の大きさが非常に小さい。また、新生児における免疫系の活動は、成人のそれとは、非常に大きく異なり、不活発である。したがって、静脈内投与された本発明の薬学的組成物に含まれているＨＢＶ中和抗体又はこの活性断片が個体にいかなる影響を及ぼすのかは、不明である。従来の方法では、筋肉内投与によってＨＢＩＧが緩やかに血中に送達される一方で、本発明の薬学的組成物は、静脈内投与される。このため、本発明の薬学的組成物は、新生児の総ＩｇＧ量に大きな影響を与えるおそれがあり、投与直後の血液における粘度症候群（例えば、高γグロブリン血漿による血栓症または梗塞）の発生が懸念されていた。
【００１７】
以上の通り、本発明の薬学的組成物は、新生児のＨＢＶ感染のリスクを、適切に低減させ得る。本発明の薬学的組成物についての詳細およびさらなる利点などについて以下に説明する。
【００１８】
（ＨＢＶ）
本明細書に使用されるとき、ＨＢＶという用語はその遺伝子型に関わらずＨＢＶに分類されるウイルス全てを包含し、より具体的には、ＨＢＶ遺伝子型Ａ、ＨＢＶ遺伝子型Ｂ、ＨＢＶ遺伝子型Ｃ、ＨＢＶ遺伝子型Ｄ、ＨＢＶ遺伝子型Ｅ、ＨＢＶ遺伝子型Ｆ、ＨＢＶ遺伝子型ＧまたはＨＢＶ遺伝子型Ｈ等が挙げられる。日本土着のＨＢＶの中では、ＨＢＶ遺伝子型ＢおよびＨＢＶ遺伝子型Ｃが、日本土着でないＨＢＶの中ではＨＢＶ遺伝子型Ａが特に重要である。
【００１９】
（感染）
本明細書に使用されるとき、「ＨＢＶに感染している」は、一時的にか持続的にかを問わず、個体の肝臓（の細胞）へＨＢＶが感染している状態を意味する。「ＨＢＶに持続感染している」は、個体の肝臓（の細胞）におけるＨＢＶの感染が持続している状態を意味する。持続感染している個体は、少なくともＨＢＶ  表面抗原（ＨＢｓＡｇ）陽性である。ここで、持続感染している個体は、ＨＢＶ感染にともなう症状を呈しているか、または呈していない（後者の個体をキャリアとも称する）。また、持続感染している個体において、ＨＢＶは、複製されているか、または複製されていない。個体におけるＨＢＶ複製は、ＨＢＶ  ｅ  抗原（ＨＢｅＡｇ）陽性、または、血中のＨＢＶ量が多いときに活発であるとみなされる。
【００２０】
ＨＢＶ  表面抗原（ＨＢｓＡｇ）は、ＨＢＶのエンベロープを構成している、抗原性を有するタンパク質を意味する。ＨＢｓＡｇは、肝臓において多量に発現されると、血中に放出される。よって、個体から採取された血液におけるＨＢｓＡｇの存在は、当該個体が少なくともＨＢＶに持続感染していることを示している。
【００２１】
ＨＢＶ  ｅ  抗原（ＨＢｅＡｇ）を含んでいるタンパク質は、ウイルス粒子において、ＨＢＶのカプソメア（カプシドの構成単位）と会合して、カプシドの内部に存在するタンパク質である。カプシドタンパク質が多量に産生されると、上記タンパク質の一部が分解を受けて、ＨＢｅＡｇが血中に放出される。よって、個体から採取された血液におけるＨＢｅＡｇの存在は、当該個体における活発なＨＢＶ複製を表している。
【００２２】
（対象となるＨＢＶ感染の形態）
本発明において、感染リスクを低減させる対象となる、「新生児の分娩を介した又は分娩後のＨＢＶによる感染」には、少なくとも以下の３つの態様が含まれる。この態様のうち（１）と（２）とを合わせて「母子感染」と総称する場合があり、（２）と（３）とを合わせて「分娩後の（ＨＢＶによる）感染、或いは、分娩に起因しない感染」と総称する場合がある。本発明においては、この態様の中では（１）と（２）とがより重要であり、（１）が特に重要である。
（１）分娩を介した感染（母子感染の一形態）
「分娩を介した感染」は、ＨＢＶに感染（好ましくは持続感染）している母体から新生児の体内に、分娩に起因して侵入したＨＢＶの、当該個体（当該新生児がより成長した個体も含む）における肝細胞への侵入を意味する。例えば、通常分娩において、ＨＢＶは、母体の子宮、子宮頚、膣または膣口などからの分娩時における出血を介して、新生児の体内に侵入し得る。分娩時における母体からの出血の結果として成立する感染を、経産道感染などと呼ぶ。帝王切開による分娩においては、ＨＢＶは、例えば、手術時における出血を介して、新生児の体内に侵入し得る。ＨＢＶ感染は、個体の体内へのＨＢＶの単なる侵入を意味しておらず、ＨＢＶにとっての感染標的細胞である肝細胞への、ＨＢＶの侵入によって成立し得る。
（２）分娩後の母子感染
ＨＢＶに感染（好ましくは持続感染）している母体から新生児の体内に、分娩に起因せずかつ分娩後に侵入したＨＢＶの、当該個体（当該新生児がより成長した個体も含む）における肝細胞への侵入を意味する。例えば、分娩後の授乳期での母乳を介して、或いは、分娩に起因しない母体からの出血を介して、新生児の体内に侵入したＨＢＶによって感染が成立することを意味する。母乳を介した感染成立の典型的な一例としては、新生児の吸啜によって母体から出血し、この血液が混入した母乳を新生児が飲むことが挙げられる。
（３）分娩後の非母子感染（水平感染）
新生児の体内に、分娩後に侵入した母体以外に由来するＨＢＶの、当該個体（当該新生児がより成長した個体も含む）における肝細胞への侵入を意味する。例えば、ＨＢＶに感染している母体以外の個体からの出血を介して、新生児の体内に侵入したＨＢＶによって感染が成立することを意味する。
【００２３】
（ＨＢＶの感染リスクを低減させる）
本発明において、「ＨＢＶの感染リスクを低減させる」又はこれと類似する表現は、本発明の薬学的組成物を投与しない場合と比較して、新生児におけるＨＢＶの感染の可能性がより低くなることを意味し、特に好ましくは新生児におけるＨＢＶの感染を完全に防止することを意味する。ＨＢＶの感染の予防、すなわち、新生児の体内に実際にＨＢＶが侵入するか否かに関わらずＨＢＶの感染を防止すること、も含む概念である。
【００２４】
なお、本発明の薬学的組成物による効果は、ＨＢＶゲノムのリアルタイムＰＣＲなどによっても評価され得る。評価方法の詳細は、よく知られている技術であるので、詳述しない。
【００２５】
（ＨＢＶ中和抗体又はこの活性断片）
本明細書に使用されるとき、「ＨＢＶ中和抗体」は、ＨＢＶ粒子に由来する抗原を特異的に認識し、ＨＢＶを不活性化してその感染力を減退または消失させる抗体を意味する。ＨＢＶ中和抗体は、好ましくはＨＢｓＡｇを特異的に認識し、ＨＢＶを不活性化する抗体（抗ＨＢｓ抗体）を意味する。ＨＢＶ中和抗体の一例として、ＨＢＩＧ、または、改変型のＨＢＩＧが挙げられる。改変型のＨＢＩＧとしては、例えば、ポリエチレングリコール化（ＰＥＧ化）処理が施されたＨＢＩＧ等が挙げられる。ＨＢＩＧは、血漿分画として入手が可能である。投与の対象となる新生児がヒトの場合は、ヒトＨＢＩＧを原料としてＨＢＶ中和抗体を準備することが好ましい。
【００２６】
本発明に使用されるとき、「ＨＢＶ中和抗体の活性断片」は、上述したＨＢＶ中和抗体の断片であって、ＨＢＶ粒子に由来する抗原を特異的に認識し、ＨＢＶを不活性化してその感染力を減退または消失させる機能を有した断片を指す。
【００２７】
（新生児）
本明細書に使用されるとき、「新生児」は、４週齢未満の個体を指し、好ましくは３日齢未満、２日齢未満、または１日齢未満、より好ましくは生後１２時間未満、最も好ましくは生後６時間以内の個体を意味する。本発明の薬学的組成物の投与を受けるのは、哺乳動物の新生児である。哺乳動物としては、ヒトおよびヒト以外の動物が挙げられる。ヒト以外の動物としては、家畜（例えば、ウシ、ウマ、ブタおよびヒツジなど）および愛玩動物（例えば、イヌ、ネコ、ウサギ、モルモット、マウス、およびラットなど）が挙げられる。本発明の薬学的組成物の投与を受けるのは、ヒトの新生児であることが好ましい。
【００２８】
（母体側の特性）
感染リスクを低減させる対象がＨＢＶの母子感染である場合、一実施形態において、上記母体はＨＢｅＡｇ陽性であることが好ましい。その理由を以下に述べる。
【００２９】
背景技術の項に述べた場合と異なり、ＨＢｅＡｇ陽性（ＨＢｅＡｂ陰性）の母体から分娩された新生児を母集団にすると、当該新生児（この新生児がより成長した個体も含む）におけるＨＢＶの非感染率は、８４．６％（１１／１３）まで低下していた。すなわち、上記新生児のうち約１５％が、ＨＢＶに持続感染していた。このように、ＨＢＶ感染の防止を要する最も重要な対象は、ＨＢｅＡｇ陽性の母体から分娩された新生児である。母体におけるＨＢｅＡｇの存在は、ＨＢＶの複製が活発に起こっていることを表している。これにもかかわらず、ＨＢｅＡｇ陽性の母体から分娩された新生児を母集団に絞って、当該新生児のＨＢＶ感染率を調査した報告は、少ない。
【００３０】
日本国の旧厚生省の定める方式は、２０１４年に改訂されて、米国疾病管理予防センター（ＣＤＣ）方式に準ずる分娩時感染防止方法に切り替えられたが、感染防止の成績は、ＣＤＣ方式（１９７０年代から行われている防止方法）を行っている諸外国と同様である。つまり、ＨＢｅ抗原陽性の母体から分娩された新生児におけるＨＢＶの感染率に変化はないと想定される。以下にＣＤＣ方式に準ずる分娩時感染防止に基づく、各国における既報のまとめを示す。
【００３１】
ＨＢｅＡｇ陽性の母体からの感染率は、１９９１年の台湾において９．６％（５／５２）（文献２）、１９９７年のオランダにおいて６．８％（８／１１８）（文献３）、２００２年のアメリカにおいて９．６％（文献４）、２００７年の韓国において２１．０％（１７／８１）（文献５）、２００９年のオーストラリアにおいて６．７％（４／６０）（文献６）、２０１０年のイランにおいて１７．７％（６／３４）（文献７）、２０１３年の台湾において１１．５％（１０／８７）（文献８）、２０１３年のアメリカにおいて３．４％（２１／６２４）（文献９）と報告されている。
【００３２】
これらの報告の詳細を本発明者らがまとめた結果を表１に示す。
【００３３】
【表１】
0006757015.tif 000002
【００３４】
以上の観点から、感染リスクを低減させる対象がＨＢＶの母子感染である場合、ＨＢｅＡｇ陽性の母体から分娩された新生児に対して、本発明の薬学的組成物を静脈内投与することが非常に好ましい。
【００３５】
感染リスクを低減させる対象がＨＢＶの母子感染である場合、他の実施形態において、上記母体はＨＢＶ遺伝子型Ａに感染（好ましくは持続感染）していることが好ましい。
【００３６】
さらに他の実施形態において、感染リスクを低減させる対象がＨＢＶの母子感染である場合、後述する（投与対象となる新生児のスクリーニング工程）欄にも記載の通り、母体は、血中においてＨＢＶを高濃度で有することが好ましい。
【００３７】
（剤型、ＨＢＶ中和抗体以外の成分など）
一実施形態において、本発明の薬学的組成物は、薬学的に許容可能な添加剤を含んでいる。当該添加剤は、結果として得られる薬学的組成物を静脈内投与製剤として適切な性質を付与し得る剤（例えば、安定化剤、ｐＨ調整剤、薬学的担体など）であれば特に限定されない。安定化剤としては、例えばＤ−ソルビトールが挙げられる。ｐＨ調整剤としては、塩基（例えば水酸化ナトリウム）および酸（例えば塩酸）が挙げられる。薬学的担体としては、薬学的に許容される液状担体等が挙げられる。
【００３８】
一実施形態において、本発明の薬学的組成物は、静脈注射用の液剤、および使用前に適切な溶液において所望の濃度に溶解される固体（例えば、乾燥された粉末または凍結乾燥固体）などであり得る。静脈注射用の液剤である場合、特に限定されないが、ＨＢＶ中和抗体又はこの活性断片は、例えば、５０〜２０００単位／ｍｌ、好ましくは１００〜３００単位／ｍｌの濃度で含まれている。
【００３９】
（本発明の薬学的組成物の製造）
例えば、活性成分となるＨＢＶ中和抗体（又はこの活性断片）、及び、必要に応じて用いられるＨＢＶ中和抗体（又はこの活性断片）以外の成分を混合して、静脈注射用の剤として適当な方法に従って、本発明の薬学的組成物を製造することができる。
【００４０】
（静脈投与のタイミング）
一実施形態において、本発明の薬学的組成物は、新生児に対して、分娩から４８時間以内、好ましくは１２時間以内、より好ましくは６時間以内、さらに好ましくは３時間以内、最も好ましくは出生直後に投与される。投与の効果は長期（例えば、約２か月以上）にわたり維持可能であるため、このタイミングで投与した場合には、分娩を介したＨＢＶによる感染リスク、及び、分娩後のＨＢＶによる感染リスクの双方を低減させる効果を奏する。
【００４１】
さらに、上記タイミングでの投与（「初回投与」と称する）の後に、必要に応じて、適切な間隔をおいて、２回目以降の投与を行うこともできる。２回目以降の投与を行うことで、特に、分娩後のＨＢＶによる感染リスクをより一層低減させる効果を奏する。
【００４２】
（静脈投与の投与量）
一実施形態において、本発明の薬学的組成物は、１回の投与あたり、例えば、１００〜２０００単位（中和抗体価の単位）の範囲内で投与される。本発明の薬学的組成物は、１回の投与あたり、１５０〜１８００単位の範囲内で投与されることが好ましく、１５０〜１０００単位の範囲内で投与されることがより好ましく、２００〜１０００単位の範囲内で投与されることがさらに好ましく、２００〜８００単位、又は５００〜１０００単位、又は３００〜７００単位、又は４００〜６００単位の範囲内で投与されることが特に好ましい。なお、ここに示す投与量は、体重が３ｋｇ程度の新生児を想定したものであり、仮に新生児の体重が３ｋｇから大きくかけ離れている場合は、上記した投与量を１／３した量（ｋｇ体重あたり投与量）に対象となる新生児の体重を乗算して、投与量を調整してもよい。
【００４３】
（他の薬学的組成物（第２の薬学的組成物と称する）との併用）
（１）筋肉内投与される、ＨＢＶ中和抗体（又はこの活性断片）との併用
一実施形態において、本発明の薬学的組成物は、筋肉内投与される、ＨＢＶ中和抗体又はこの活性断片を含んでいる第２の薬学的組成物と併用される。ここで、ＨＢＶ中和抗体又はこの活性断片の定義は、特に断りのない限り、本発明の薬学的組成物での定義と同じである。この併用によって、従来の防止処置と比較して、ＨＢＶ中和抗体（又はこの活性断片）の血中濃度の速やかな上昇、血中におけるより一層長期にわたる高レベルのＨＢＶ中和抗体（又はこの活性断片）の維持、および安定した血中の総ＩｇＧ量をいずれも実現し得る。
【００４４】
本発明の薬学的組成物および第２の薬学的組成物は、一例において、同時にか、または短時間（例えば５時間以内）に前後して投与され得る。短時間に前後して投与される場合において、その順序は、特に限定されない。
【００４５】
本発明の薬学的組成物が第２の薬学的組成物と併用される実施形態において、本発明の薬学的組成物の１回の投与あたりの投与量は、例えば、上記（静脈投与の投与量）欄の記載に従って設定することが出来る。しかしながら、第２の薬学的組成物が併用されることを考慮して、本発明の薬学的組成物の１回あたりの投与量を低減することもできる。この場合、本発明の薬学的組成物の１回あたりの投与量は、例えば、５０〜１０００単位の範囲内とすることができ、１００〜７５０単位の範囲内とすることがより好ましく、２００〜５００単位の範囲内とすることがさらに好ましい。
【００４６】
また、第２の薬学的組成物は、１回の投与あたり、１００〜１８００単位の範囲内で投与されることが好ましく、１００〜１０００単位の範囲内で投与されることがより好ましく、１００〜５００単位、又は１００〜４００単位の範囲内で投与されることがさらに好ましく、１５０〜３５０単位、又は、１５０〜２５０単位の範囲内で投与されることが特に好ましい。なお、ここに示す投与量は、体重が３ｋｇ程度の新生児を想定したものであり、仮に新生児の体重が３ｋｇから大きくかけ離れている場合は、上記した投与量を１／３した量（ｋｇ体重あたり投与量）に対象となる新生児の体重を乗算して、投与量を調整してもよい。
【００４７】
上記第２の薬学的組成物も同様に、薬学的に許容可能な添加剤を含んでいる。筋肉内投与用の添加剤としては、グリシンなどが挙げられるが、特に限定されない。また、本発明の薬学的組成物の（剤型、ＨＢＶ中和抗体以外の成分など）欄の記載も参照して、適宜、必要な添加剤を加えることもできる。
【００４８】
一実施形態において、上記第２の薬学的組成物は、筋肉内注射用の液剤、および使用前に適切な溶液において所望の濃度に溶解される固体（例えば、乾燥された粉末または凍結乾燥固体）などであり得る。筋肉内注射用の液剤である場合、特に限定されないが、ＨＢＶ中和抗体又はこの活性断片は、例えば、５０〜２０００単位／ｍｌ、好ましくは１００〜３００単位／ｍｌの濃度で含まれている。
【００４９】
（２）沈降Ｂ型肝炎ワクチンとの併用
一実施形態において、本発明の薬学的組成物は、第２の薬学的組成物としての沈降Ｂ型肝炎ワクチンと併用される。沈降Ｂ型肝炎ワクチンは、通常の用法及び用量に従って用いることができる。
【００５０】
本発明の薬学的組成物および第２の薬学的組成物は、一例において、同時にか、または短時間（例えば５時間以内）に前後して投与され得る。短時間に前後して投与される場合において、その順序は、特に限定されない。
【００５１】
（３）筋肉内投与される、ＨＢＶ中和抗体（又はこの活性断片）と、沈降Ｂ型肝炎ワクチンとの併用
一実施形態において、本発明の薬学的組成物は、第２の薬学的組成物としての、ａ）筋肉内投与される、ＨＢＶ中和抗体（又はこの活性断片）、及び、ｂ）沈降Ｂ型肝炎ワクチン、と併用される。
【００５２】
上述した（１）〜（３）の何れの場合も、一実施形態において、上記薬学的組成物および第２の薬学的組成物は、１つのキットとして提供される。当該キットは、例えば、上記薬学的組成物の入っている第１の容器および上記第２の薬学的組成物の入っている第２の容器を備えている。第１の容器および第２の容器は、例えば、バイアルまたはアンプルなどである。上記キットは、静脈注射用の器具（例えば、注射器やカテーテル）および筋肉内注射用の器具（例えば、注射器）をさらに備えている。
【００５３】
〔２．薬学的組成物を用いて、新生児のＨＢＶ感染リスクを低減させる方法〕
（静脈投与の工程）
本発明の他の局面は、新生児のＨＢＶ感染リスクを低減させる方法を提供する。当該新生児は、上述した薬学的組成物を、母体からの分娩後に静脈投与される。当該薬学的組成物の詳細、その投与方法および用量などは、〔１．薬学的組成物〕の欄でこれまでに記載した通りである。
【００５４】
（投与対象となる新生児のスクリーニング工程）
また、上述の（静脈投与の工程）に先立って、投与対象となる新生児をスクリーニングする工程を実施してもよい。一例では、感染リスクを低減させる対象がＨＢＶの母子感染である場合、１）母体がＨＢｅＡｇ陽性であるか否かを検査し、ＨＢｅＡｇ陽性の母体から分娩された新生児を、２）母体が保有するＨＢＶの遺伝子型を検査し、例えばＨＢＶ遺伝子型Ａ、ＨＢＶ遺伝子型Ｂ、又は、ＨＢＶ遺伝子型Ｃに感染（好ましくは持続感染）している母体から分娩された新生児（より好ましくは、ＨＢＶ遺伝子型Ａに感染している母体から分娩された新生児）を、及び／又は、３）血中においてＨＢＶを高濃度で有する母体から分娩された新生児を、投与対象として選択してもよい。３）の場合において、血中においてＨＢＶを高濃度で有するとは、例えば、１０1コピー／ｍｌ（血液）以上であり、１０2コピー／ｍｌ（血液）以上であることが好ましく、１０3コピー／ｍｌ（血液）以上であることがより好ましく、１０4コピー／ｍｌ（血液）以上であることがさらに好ましい。また、３）の場合において、母体はＨＢｅＡｇ陰性の母体であってもよく、及び／又は、ＨＢＶ遺伝子型Ａに感染（好ましくは持続感染）している母体であってもよい。なお、本明細書において「Ａ及び／又はＢ」とは、Ａ及びＢと、Ａ又はＢとの両方を意味しており、Ａ及びＢの少なくとも一方と同義である。
【００５５】
（併用療法（筋注／ワクチン）の工程）
一実施形態において、本発明の薬学的組成物の静脈投与は、第２の薬学的組成物としての、ａ）筋肉内投与される、ＨＢＶ中和抗体（又はこの活性断片）、及び／又は、ｂ）沈降Ｂ型肝炎ワクチン、の投与と併用される。第２の薬学的組成物は、一例において、本発明の薬学的組成物の静脈投与と同時にか、または短時間に前後して投与され得る。短時間に前後して投与される場合において、その順序は、特に限定されない。
【００５６】
〔３．その他〕
本発明の薬学的組成物は、幼児期以降におけるＢ型肝炎ウイルスによる感染リスクを低減させるためにも用いることができる。
【実施例】
【００５７】
〔実施例１：Ｂ型肝炎ウイルス（以下、「ＨＢＶ」）感染成立に対する、ＨＢＶ免疫グロブリン（以下、「ＨＢＩＧ」）の新生児に対する静脈内投与の影響の確認〕
（概要）
出産時におけるＨＢＶの母子感染のより優れた防止を達成するために、出生直後の新生児に投与されるＨＢＩＧの、通常の筋肉内投与をともなった静脈内投与からなる感染防止プロトコルを設計した。静脈内および筋肉内の両方においてＨＢＩＧを出産直後に共投与された新生児におけるＨＢＶ表面抗体（以下、「ＨＢｓＡｂ」）の力価を、筋肉内にのみＨＢＩＧを投与された新生児におけるＨＢｓＡｂの力価と比較した。ＨＢＶ表面抗原（以下、「ＨＢｓＡｇ」）陽性の母親から生まれた新生児を、国立成育医療研究センター（東京、日本）において、２０１１年４月〜２０１３年１２月にかけて調査した。全ての母親は、この研究に参加すること、および彼女らの血液サンプルが分析されることを書面によって同意した。本研究は、国立成育医療研究センターの倫理委員会の承認を受けた。
【００５８】
（方法）
１０人の新生児（１組の双生児を含んでいる）、ならびに遺伝子型Ｂ、ＣまたはＤのＢ型肝炎ウイルスを１０２．１〜１０９．１コピー／ｍｌ（血液）の量において有している９人の母親（１０人の新生児の母親）を、本研究の対象にした。それぞれの新生児に、出生直後（より具体的には、出生１２時間以内のできるだけ早く）にＨＢＩＧを投与した。投与経路の違いによって新生児を、以下の２群に分けた。
試験群：ＨＢＩＧの静脈内投与および筋肉内投与による共投与群（ｎ＝５）
対照群：ＨＢＩＧの筋肉内投与による単独投与群（ｎ＝５）。
【００５９】
上記試験群に対しては、新生児の静脈の血管確保を行い、生理食塩水２０ｍｌとともに１０００単位／５ｍｌの静注用注射液５００単位（２．５ｍｌ）を点滴で静脈内に投与し、同時に筋注用注射液２００単位を、日本の標準的プロトコル（文献１０）にしたがって筋肉内に投与した。上記対照群に対しては、筋注用注射液２００単位を、日本の標準的プロトコル（文献１０）にしたがって筋肉内に投与した。用いた静注用注射液は、ＨＢＩＧ静注用（ヘブスブリン（登録商標）、田辺三菱製薬、大阪、日本）であり、筋注用注射液は、ＨＢＩＧ筋注用（ヘブスブリン（登録商標）、田辺三菱製薬、大阪、日本）である。何れの注射液も抗ＨＢｓヒト免疫グロブリンを有効成分として含むものであり、ＨＢＩＧ静注用は、抗ＨＢｓヒト免疫グロブリンがＰＥＧ化されている。
【００６０】
母親の状態を確認するために、母親から１回の血液採取を行い、ＨＢｓＡｂ力価を測定するために、出生後の０日、１日、３日、５日、２週間、１か月および２か月にそれぞれ、新生児から血液採取を行った。新生児から採取した血液における、血清中のＨＢｓＡｂ力価および総ＩｇＧレベルを、それぞれＣＬＩＡ法（ルミパルスプレストHBsAb-N、富士レビオ株式会社）および免疫比濁法（N-アッセイ TIA IgG-SH ニットーボー、ニットーボーメディカル株式会社）によって測定した。また、出生後の１か月に新生児から採取した血液におけるウイルスＤＮＡのコピー数をリアルタイムＰＣＲ（コバス TaqMan（登録商標）HBV「オート」v2.0、ロッシュ・ダイアグノスティクス株式会社）によって決定した結果に基づいてＨＢＶ感染の有無を判定した。
【００６１】
（結果）
対象である新生児および母親に関する情報、ＨＢＩＧの投与経路ならびに母子感染の有無についてまとめた結果を表２に示す。
【００６２】
【表２】
0006757015.tif 000003
【００６３】
表２に示す通り、上述のいずれの群においても、母親の遺伝子型およびウイルス量に関わらず、出生後の１か月においてＭＴＣＴを生じている新生児はいなかった。
【００６４】
続いて上述の２群における、血清中のＨＢｓＡｂ力価および総ＩｇＧレベルを比較した結果を図１に示す。図１のＡは、試験群（静脈内および筋肉内の共投与：concomitant group）および対照群（筋肉内のみの投与:control group）における血清中のＨＢｓＡｂ力価の推移を示し、図１のＢおよびＣはそれぞれ、対照群および試験群における血清中の総ＩｇＧレベルを示す。
【００６５】
図１のＡに示す通り、血清中のＨＢｓＡｂ力価は、試験群において投与直後（出生日）において急激に上昇し、投与直後にピークに達した。試験群における力価のピークの値は、対象群におけるピークの値の約６倍に達した。試験群における力価の上昇した状態は、２か月にわたって維持され、試験群の力価は、測定期間において常に対照群の力価を上回っていた。
【００６６】
以上のことから、ＨＢＩＧを静脈内に投与することによって、ＨＢＶウイルスに持続感染している母体からの出産時に、新生児の体内にＨＢＶが侵入した場合であっても、速やかにＨＢＶを中和化し得ることが分かった。つまり、ＨＢＩＧを静脈内に投与することによって、試験群では、ＨＢＶが肝細胞に到達することによる感染の成立を容易に阻止し得る。
【００６７】
図１のＢおよびＣに示す通り、血清中の総ＩｇＧレベルは、試験群および対照群において、試験群における明らかに高い血清中のＨＢｓＡｂ力価にも関わらず、顕著な差異を示さなかった。したがって、対照群において確認されている安全性と同様に、試験群は、高γグロブリン血症による血栓症および梗塞に対する低いリスクを示した。つまり、上述の新生児に対するＨＢＩＧの静脈内投与は、すでに認可されている対照群における処置と同等の安全性を確保しつつ、投与から極めて短時間に高い血清中のＨＢｓＡｂ力価を示すことが明らかになった。さらに、例えば投与後２カ月という長期にわたり血中での十分な高抗体価を維持できる程度の量のＨＢＩＧを、静脈注射によって新生児に投与しても、血栓症および梗塞に対するリスクは低いことが示され、ＨＢＩＧの一度の投与によって、長期間効果を持続させることが可能であることも示された。なお、図１に示す結果からも、静脈注射に筋肉注射を併用した理由が、既存の方法（筋肉注射）による治療・予防効果を担保するためのみであり、静脈注射のみで十分な治療・予防効果が得られることが裏付けられている。
【００６８】
〔実施例２：Ｂ型肝炎ウイルス（以下、「ＨＢＶ」）感染成立に対する、ＨＢＶ免疫グロブリン（以下、「ＨＢＩＧ」）の新生児に対する静脈内投与の影響の確認〕
１人の新生児、ならびに遺伝子型ＡのＢ型肝炎ウイルスを１０4.3（ｌｏｇ４．３）コピー／ｍｌ（血液）の量において有している１人の母親（新生児の母親）を、本研究の対象にした。この母親は、ＨＢｓＡｇ陽性、ＨＢｓＡｂ陽性でかつ、ＨＢｅＡｇ陰性である。
【００６９】
この新生児に、実施例１における試験群の新生児に対する場合と同一の手法によって、ＨＢＩＧの静脈内投与および筋肉内投与による共投与を行い、投与の効果を確認した。その結果、出生後の１年において新生児にＭＴＣＴは生じておらず、かつ報告すべき副作用も確認されなかった。
【００７０】
遺伝子型ＡのＢ型肝炎ウイルスは、１）感染力が強く、今後、若年層での水平感染の増加が想定され、さらに、２）体内でのウイルス残存率が高く、成人における水平感染でも急性肝炎の遷延化が起こりやすく、１０％がキャリアになると言われている。従って、遺伝子型ＡのＢ型肝炎ウイルスは、本発明が適用される対象として重要性が高い。
【００７１】
なお、実施例１〜２において、ＨＢｓＡｇの基準値は０．０５未満（単位：ＩＵ/ｍＬ）、ＨＢｓＡｂの基準値は１０．０未満（単位：ＩＵ/ｍＬ）、および、ＨＢｅＡｇの値は１．００未満（単位：ＩＵ/ｍＬ）で、いずれも基準値を超える値を陽性としている。何れも、検査方法はＣＬＩＡ法である。
【００７２】
〔参考文献〕
文献１．Zou H, Chen Y, Duan Z, et al. Virologic factors associated with failure to passive-active immunoprophylaxis in infants born to HBsAg-positive mothers. J Viral Hepat 2012;19:e18-25.
文献２．Lin HH, Chang MH, Chen DS, et al. Early predictor of the efficacy of immunoprophylaxis against perinatal hepatitis B transmission: analysis of prophylaxis failure. Vaccine 1991;9:457-60.
文献３．del Canho R, Grosheide PM, Mazel JA, et al. Ten-year neonatal hepatitis B vaccination program, The Netherlands, 1982-1992: protective efficacy and long-term immunogenicity. Vaccine 1997; 15:1624-30.
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【産業上の利用可能性】
【００７３】
本発明は、医療（産婦人科に関する）、より詳細には、例えば、Ｂ型肝炎ウイルスによる母子感染のリスクを低減させるための薬学的組成物に利用することができる。
【図１】
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