(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式によって表される化合物：
【化１】
0006755859.tif 000096
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５は（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒ６は−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒｃは置換又は非置換のアリールである。
【請求項２】
Ｒａが２−アルケン−１−イルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２が２−アルケン−１−イルである、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ３が置換又は非置換のアリールである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒｃが置換又は非置換のフェニルである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項６】
ＲｂがＣ１〜Ｃ６アルキルである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒａが２−アルケン−１−イルであり；Ｒ２が２−アルケン−１−イルであり；Ｒ３が置換又は非置換のアリールであり；Ｒｃが置換又は非置換のフェニルであり；ＲｂがＣ１〜Ｃ６アルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒａが２−プロペン−１−イルである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ２が２−プロペン−１−イルである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ３がｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ６がｐ−ニトロベンゾイルである、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ５がジエチルイソプロピルシリルである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１３】
下記式によって表される、請求項１に記載の化合物：
【化２】
0006755859.tif 000097
式中、ＰＭＰはｐ−メトキシフェニルを表し、ＤＥＩＰＳはジエチルイソプロピルシリルを表す。
【請求項１４】
Ｃ２’エピＡｍＢの製造方法であって、
【化３】
0006755859.tif 000098
下記工程を含む、方法：
【化４】
0006755859.tif 000099
ここで、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５は（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒ６は−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒｃは置換又は非置換のアリールであり；
ＲｄはＣ１〜Ｃ６アルキル又はアリールであり；
溶媒７は非極性非プロトン性溶媒である。
【請求項１５】
Ｒ６が置換されたアリーロイルである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
Ｒｄがアリールである、請求項１４又は１５に記載の方法。
【請求項１７】
Ｒ６が置換されたアリーロイルであり；Ｒｄがアリールである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
Ｒ６がｐ−ニトロベンゾイルである、請求項１４〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
Ｒｄがフェニルである、請求項１４〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
溶媒７がベンゼンである、請求項１４〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
ジ（アルキル）アゾジカルボキシレートが、ジ（イソプロピル）アゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）又はジ（エチル）アゾジカルボキシレート（ＤＥＡＤ）である、請求項１４〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
Ｒ６がｐ−ニトロベンゾイルであり；ジ（アルキル）アゾジカルボキシレートが、ジ（イソプロピル）アゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）であり；Ｒｄがフェニルである、請求項１４に記載の方法。
【請求項２３】
Ｒ６がｐ−ニトロベンゾイルであり；ジ（アルキル）アゾジカルボキシレートが、ジ（イソプロピル）アゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）であり；Ｒｄがフェニルであり；溶媒７がベンゼンである、請求項１４に記載の方法。
【請求項２４】
下記式によって表される化合物：
【化５】
0006755859.tif 000100
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５は（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【請求項２５】
下記式によって表される、請求項２４に記載の化合物:
【化６】
0006755859.tif 000101
式中、ＰＭＰはｐ−メトキシフェニルを表し、ＤＥＩＰＳはジエチルイソプロピルシリルを表す。
【請求項２６】
下記式によって表される化合物：
【化７】
0006755859.tif 000102
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【請求項２７】
下記式によって表される、請求項２６に記載の化合物:
【化８】
0006755859.tif 000103
式中、ＰＭＰはｐ−メトキシフェニルを表す。
【請求項２８】
下記工程をさらに含む、請求項１４〜２３のいずれか一項に記載の方法：
【化９】
0006755859.tif 000104
ここで、
Ｍは、アルカリ金属カチオン又はアルカリ土類金属カチオンであり；
溶媒８は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である。  
【請求項２９】
下記工程をさらに含む、請求項２８に記載の方法：
【化１０】
0006755859.tif 000105
ここで、
フッ化物試薬は、フッ化テトラアルキルアンモニウム及びフッ化塩からなる群より選択され；
溶媒９は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である。
【請求項３０】
下記工程をさらに含む、請求項２９に記載の方法：
【化１１】
0006755859.tif 000106
ここで、存在ごとに独立して、
Ｐｄ試薬はＰｄ（０）又はＰｄ（ＩＩ）であり；
リガンドは（Ｒｅ）３Ｐであり；
ＲｅはＣ１〜Ｃ６アルキル又はアリールであり；
ＲｆはＣ１〜Ｃ６アルキル又はアリールであり；
溶媒１０は極性非プロトン性溶媒である。
【請求項３１】
下記工程をさらに含む、請求項３０に記載の方法：
【化１２】
0006755859.tif 000107
ここで、
酸はブレンステッド酸であり；
溶媒１１は、水と極性非プロトン性溶媒の混合物である。
【請求項３２】
下記工程をさらに含む、請求項１４〜２３及び２８〜３１のいずれか一項に記載の方法：
【化１３】
0006755859.tif 000108
ここで、
Ｒ４は−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｍは、アルカリ金属カチオン又はアルカリ土類金属カチオンであり；
溶媒６は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である。
【請求項３３】
下記工程をさらに含む、請求項３２に記載の方法：
【化１４】
0006755859.tif 000109
ここで、
Ｘ５はハライド又はスルホン酸であり；
溶媒５は、極性非プロトン性溶媒、非極性非プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である。
【請求項３４】
下記工程をさらに含む、請求項３３に記載の方法：
【化１５】
0006755859.tif 000110
ここで、
Ｒ４は置換又は非置換のアリーロイルであり；
Ｘ４は、ハライド、スクシンイミジル、ヒドロキシスクシンイミジル、アジド、アルケンオキシル、及びアリールオキシルからなる群より選択され；
溶媒４は極性非プロトン性溶媒である。
【請求項３５】
下記工程をさらに含む、請求項３４に記載の方法：
【化１６】
0006755859.tif 000111
ここで、
Ｘ１はハライド又はスルホン酸であり；
Ｘ２は、ハライド、スクシンイミジル、ヒドロキシスクシンイミジル、アジド、アルケンオキシル、及びアリールオキシルからなる群より選択され；
Ｘ３は−ＣＨ（ＯＲ）２であり；
ＲはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
溶媒１は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物であり；
溶媒２は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物であり；
溶媒３は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の相互参照】
【０００１】
本出願は、参照することによって本願に援用される、２０１４年１０月１７日出願の米国仮特許出願第６２／０６５，３３０号の利益を主張する。
【政府の支援】
【０００２】
本発明は、アメリカ国立衛生研究所によって承認された許可番号第ＧＭ０８０４３６号の下、米国政府の支援により成された。米国政府は本発明において一定の権利を有する。
【背景技術】
【０００３】
ポリエン・マクロライド天然物であるアムホテリシンＢ（ＡｍＢ）は、生細胞においてイオンチャネルを形成する小分子、ならびに微生物耐性を本質的に生じにくい抗生物質の両方についての典型である。ＡｍＢはまた、残念なことに、毒性が強く、この毒性は、生命を脅かす全身性真菌感染に対する最後の防御線としてのその有効利用をしばしば制限する。そのような真菌感染症の発生、ならびに他のすべての種類の抗真菌剤に対する耐性の両方が上昇傾向にあるため、ＡｍＢの治療指数を改善する方法を見出すことが、ますます重要な課題となっている。リポソーム製剤を用いてある程度の進展があったが、それらは、多くの場合、ひどく高価であり、かつ、実質的な毒性は残されたままである。５０年もの間の世界的中での大規模な努力にもかかわらず、治療指数が改善されたＡｍＢの臨床的に実現可能な誘導体は未だ出現していない。
【０００４】
本発明者らは、最近、ＡｍＢのＣ２’ヒドロキシル基のエピマー化が、ＡｍＢの臨床的に実現可能な治療的代替物としての顕著な可能性を示す、有効な非毒性のＡｍＢ誘導体であるＣ２’エピＡｍＢをもたらすことを見出した。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
ＡｍＢから開始して、Ｃ２’エピＡｍＢの合成方法を集合的に構成する、簡易化された、容易に規模変更可能(scalable)な一連の個々の方法を提供する。また、本発明の一連の方法に基づき、中間体も提供する。
【０００６】
全体的な方法は以下のように要約することができる：
【化１】
0006755859.tif 000002
本発明のある態様は、Ｃ２’エピＡｍＢの製造方法であって、
【化２】
0006755859.tif 000003
下記工程を含み、
【化３】
0006755859.tif 000004
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５は（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒ６は−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及び、ベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒｃは置換又は非置換のアリールであり；
ＲｄはＣ１〜Ｃ６アルキル又はアリールであり；
溶媒７は非極性非プロトン性溶媒である。
【０００７】
ある特定の実施形態では、Ｒ６はｐ−ニトロベンゾイルであり；ジ（アルキル）アゾジカルボキシレートは、ジ（イソプロピル）アゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）であり；Ｒｄはフェニルであり；溶媒７はベンゼンである。
【０００８】
ある実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルであり；Ｒ２は２−プロペン−１−イルであり；Ｒ３はｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）であり；Ｒ５はジエチルイソプロピルシリルであり；Ｒ６はｐ−ニトロベンゾイルであり；ジ（アルキル）アゾジカルボキシレートは、ジ（イソプロピル）アゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）であり；Ｒｄはフェニルであり；溶媒７はベンゼンである。
【０００９】
ある特定の実施形態では、本方法は、以下の工程をさらに含み、
【化４】
0006755859.tif 000005
ここで、
Ｍは、アルカリ金属カチオン又はアルカリ土類金属カチオンであり；
溶媒８は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である。
ある特定の実施形態では、ＭはＫであり；溶媒８は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である。
【００１０】
ある特定の実施形態では、本方法は以下の工程をさらに含み、
【化５】
0006755859.tif 000006
ここで、
フッ化物試薬は、フッ化テトラアルキルアンモニウム及びフッ化塩からなる群より選択され；
溶媒９は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である。
【００１１】
ある特定の実施形態では、フッ化物試薬はフッ化水素−ピリジンであり；溶媒９はテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）である。
【００１２】
ある特定の実施形態では、本方法は以下の工程をさらに含み、
【化６】
0006755859.tif 000007
式中、存在ごとに独立して、
Ｐｄ試薬はＰｄ（０）又はＰｄ（ＩＩ）であり；
リガンドは（Ｒｅ）３Ｐであり；
ＲｅはＣ１〜Ｃ６アルキル又はアリールであり；
ＲｆはＣ１〜Ｃ６アルキル又はアリールであり；
溶媒１０は極性非プロトン性溶媒である。
【００１３】
ある特定の実施形態では、Ｐｄ試薬はＰｄ（０）であり；リガンドは（ＰＰｈ３）４であり；上記ＲｆＣＯ２Ｈ又は１，３−ジケトンはチオサリチル酸であり；溶媒１０はジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）である。
【００１４】
ある特定の実施形態では、本方法は以下の工程をさらに含み、
【化７】
0006755859.tif 000008
ここで、
酸はブレンステッド酸であり；
溶媒１１は、水と極性非プロトン性溶媒の混合物である。
【００１５】
ある特定の実施形態では、酸はカンファースルホン酸（ＣＳＡ）である。
【００１６】
ある特定の実施形態では、溶媒１１は、水とＭｅＣＮの混合物である。
【００１７】
ある特定の実施形態では、酸はカンファースルホン酸（ＣＳＡ）であり；溶媒１１は、水とＭｅＣＮの混合物である。
【００１８】
ある特定の実施形態では、本方法は以下の工程をさらに含み、
【化８】
0006755859.tif 000009
ここで、
Ｒ４は−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｍは、アルカリ金属カチオン又はアルカリ土類金属カチオンであり；
溶媒６は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である。
【００１９】
ある特定の実施形態では、Ｍはアルカリ金属カチオンである。
【００２０】
ある特定の実施形態では、溶媒６は、極性非プロトン性溶媒と極性プロトン性溶媒の混合物である。
【００２１】
ある特定の実施形態では、Ｒ４はｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルであり；ＭはＫであり；溶媒６は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である。
【００２２】
ある特定の実施形態では、本方法は以下の工程をさらに含み、
【化９】
0006755859.tif 000010
ここで、
Ｘ５はハライド又はスルホン酸であり；
溶媒５は、極性非プロトン性溶媒、非極性非プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である。
【００２３】
ある特定の実施形態では、Ｒ５−Ｘ５は、トリフルオロメタンスルホン酸ジエチル（イソプロピル）シリルであり；溶媒５は、ジクロロメタン（ＤＣＭ）とヘキサンの混合物である。
【００２４】
ある特定の実施形態では、本方法は以下の工程をさらに含み、
【化１０】
0006755859.tif 000011
ここで、
Ｒ４は置換又は非置換のアリーロイルであり；
Ｘ４は、ハライド、スクシンイミジル、ヒドロキシスクシンイミジル、アジド、アルケンオキシル、及びアリールオキシルからなる群より選択され；
溶媒４は極性非プロトン性溶媒である。
【００２５】
ある特定の実施形態では、Ｒ４は置換されたアリーロイルである。
【００２６】
ある特定の実施形態では、Ｒ４−Ｘ４はｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルクロリドであり；溶媒４はテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）である。
【００２７】
ある特定の実施形態では、本方法は以下の工程をさらに含み、
【化１１】
0006755859.tif 000012
ここで、
Ｘ１はハライド又はスルホン酸であり；
Ｘ２は、ハライド、スクシンイミジル、ヒドロキシスクシンイミジル、アジド、アルケンオキシル、及びアリールオキシルからなる群より選択され；
Ｘ３は−ＣＨ（ＯＲ）２であり；
ＲはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
溶媒１は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物であり；
溶媒２は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物であり；
溶媒３は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である。
【００２８】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルであり；Ｘ１はスクシンイミジルであり；Ｒ２は２−プロペン−１−イルであり；Ｘ２はハライドであり；Ｒ３はｐ−メトキシフェニルであり；溶媒１は、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）とＭｅＯＨの混合物であり；溶媒２は、ＤＭＦとＭｅＯＨの混合物であり；溶媒３は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である。
【００２９】
本発明のある態様は、下記によって表される化合物であって、
【化１２】
0006755859.tif 000013
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【００３０】
ある実施形態では、化合物は、下記によって表される：
【化１３】
0006755859.tif 000014
本発明のある態様は、下記によって表される化合物であって、
【化１４】
0006755859.tif 000015
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ４は−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒｃは置換又は非置換のアリールである。
【００３１】
ある実施形態では、化合物は、下記によって表される：
【化１５】
0006755859.tif 000016
本発明のある態様は、下記によって表される化合物であって、
【化１６】
0006755859.tif 000017
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ４は−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｒ５は（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒｃは置換又は非置換のアリールである。
【００３２】
ある実施形態では、化合物は、下記によって表される：
【化１７】
0006755859.tif 000018
本発明のある態様は、下記によって表される化合物であって、
【化１８】
0006755859.tif 000019
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５は（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【００３３】
ある実施形態では、化合物は、下記によって表される：
【化１９】
0006755859.tif 000020
本発明のある態様は、下記によって表される化合物であって、
【化２０】
0006755859.tif 000021
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５は（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒ６は−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒｃは置換又は非置換のアリールである。
【００３４】
ある実施形態では、化合物は、下記によって表される：
【化２１】
0006755859.tif 000022
本発明のある態様は、下記によって表される化合物であって、
【化２２】
0006755859.tif 000023
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５は（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【００３５】
ある実施形態では、化合物は、下記によって表される：
【化２３】
0006755859.tif 000024
本発明のある態様は、下記によって表される化合物であって、
【化２４】
0006755859.tif 000025
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【００３６】
ある実施形態では、化合物は、下記によって表される：
【化２５】
0006755859.tif 000026
本発明のある態様は、下記によって表される化合物であって、
【化２６】
0006755859.tif 000027
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【００３７】
ある特定の実施形態では、Ｒ３は置換又は非置換のアリールである。
【００３８】
ある実施形態では、化合物は、下記によって表される：
【化２７】
0006755859.tif 000028
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１】アムホテリシンＢのＣ２’エピマー（Ｃ２’エピＡｍＢ）の規模変更可能な合成スキームの一部を表わす。アムホテリシンＢ（ＡｍＢ）から化合物４へと進行する工程が示されている。ＤＣＭ：ジクロロメタン；ＤＥＩＰＳＯＴｆ：トリフルオロスルホン酸ジエチル（イソプロピル）シリル；ＤＩＥＰＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン；ＤＭＡＰ：４−（ジメチルアミノ）ピリジン；ＰＭＰ：ｐ−メトキシフェニル；ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
【図２】Ｃ２’エピＡｍＢの規模変更可能な合成スキームの一部を表わす。化合物４から化合物６へと進行する工程が示されている。ＤＥＩＰＳ：ジエチル（イソプロピル）シリル；ＤＩＡＤ：ジ（イソプロピル）アゾジカルボキシレート；ＰＭＰ：ｐ−メトキシフェニル；ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
【図３】Ｃ２’エピＡｍＢの規模変更可能な合成キームの一部を表わす。化合物６からＣ２’エピＡｍＢへと進行する工程が示されている。ＣＳＡ：カンファースルホン酸；ＤＥＩＰＳ：ジエチル（イソプロピル）シリル；ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド；ＨＦ−ｐｙｒ：ＨＦ−ピリジン；ＰＭＰ：ｐ−メトキシフェニル；ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
【発明を実施するための形態】
【００４０】
アムホテリシンＢ（ＡｍＢ）は、臨床的に重要な抗真菌剤であるが、その毒性によって使用が制限される。エルゴステロールとの結合は、チャネル形成とは無関係に、ＡｍＢが酵母を死滅させる主要機構であり、コレステロールとの結合は、ヒト細胞に対する毒性の主な要因でありうる。先導的な構造モデルは、マイコサミン付加物上のＣ２’ヒドロキシル基が、両ステロールとの結合の鍵であると予測している。
【００４１】
ＡｍＢは、概して、ストレプトマイセス・ノドサス（Streptomyces nodosus）株から得られる。このＡｍＢは、全身性カンジダ症、アスペルギルス症、クリプトコッカス症、ブラストミセス症、コクシジオイデス症、ヒストプラスマ症、及びムコール菌症などの感染症を含む、進行性の生命を脅かす可能性のある真菌感染症の治療に関して、現在、米国において臨床用途に承認されている。ＡｍＢは、通常、静脈注射用に調合される。アムホテリシンＢは、例えば、Ｆｕｎｇｉｚｏｎｅ（登録商標）（Ｓｑｕｉｂｂ社）、Ａｍｐｈｏｃｉｎ（登録商標）（Ｐｆｉｚｅｒ社）、Ａｂｅｌｃｅｔ（登録商標）（Ｅｎｚｏｎ社）、及びＡｍｂｉｓｏｍｅ（登録商標）（Ａｓｔｅｌｌａｓ社）として市販されている。その望ましくない毒性副作用のため、投与量は通常、最大で約１．０ｍｇ／ｋｇ／日に制限され、全累積投与量は、ヒトにおいて、約３ｇを超えないように制限される。
【００４２】
ＡｍＢは、膜透過化によって、酵母及びヒト細胞の両方を主に死滅させるものとして、何十年もの間、広く受け入れられてきた。このモデルに導かれて、ヒト細胞に対して酵母のイオンチャネルを選択的に形成する誘導体の開発に焦点を当てて、努力が積み重ねられてきた。
【００４３】
この古典的なモデルとは対照的に、最近になって、ＡｍＢが自己組織化して膜外の『ステロール−スポンジ』を形成し、これが、マイコサミンに依存する態様でステロールに結合して抜き取ることによって、細胞を主に死滅させることが発見された。証拠は、マイコサミン付加物上のＣ２’−ＯＨ及びＣ３’−ＮＨ３＋が、エルゴステロール（Ｅｒｇ）及びコレステロール（Ｃｈｏｌ）の両方の結合を可能にするＡｍＢの基底状態の立体配座の安定化に関与している、すなわち、チャネル形成を必要としない、というモデルを裏付けている。Ｃ２’−ＯＨ又はＣ３’−ＮＨ３＋のいずれかが取り除かれると、ＡｍＢは依然としてＥｒｇに結合するが、Ｃｈｏｌにはもはや結合できない。これらの結果は、Ｃ２’−ＯＨ及びＣ３’−ＮＨ３＋が、ステロールに直接的には結合しないが、アロステリック修飾の可能性のある部位であることを示唆している。さらに、ステロール結合性におけるこのシフトは、ヒト細胞に対する実際の毒性の実質的な低下と直接的に相関する。このことは、単にコレステロールに結合することが、代わりに、ヒト細胞に対するＡｍＢの毒性の原因となりうること、並びに、この臨床的に重要な抗真菌剤の治療指数を改善するための努力を、コレステロールと比較した、エルゴステロールへの相対的な結合親和性を最大限にするという非常に単純な課題に注力してよいことを示唆している。
【００４４】
先導的な既存の構造モデルでは、ＡｍＢは、ＡｍＢのＣ２’ヒドロキシル基が各ステロール上の３−ｂヒドロキシル基との重要な水素結合を形成する類似の複合体を介して、エルゴステロール及びコレステロールの両方に結合する。しかしながら、この仮説についての強力な証拠又は反証が欠けていた。例えば、コンピュータシミュレーションは、そのような水素結合が、エルゴステロールに結合するのに重要な役割を果たすが、コレステロールとの結合ではそうではないことを示唆している。あるいは、ＡｍＢの立体配座的に制限された誘導体の膜透過化活性(membrane permeabilizing activities)を比較する以前の研究は、このような水素結合が、両方のステロールで重要な役割を果たすと結論付けた。これら先行研究のいずれも、ステロールの結合を直接的に評価していなかった。
【００４５】
本発明者らは、インビトロ及びマウスにおいて強力な抗真菌活性を保持するが、天然物よりも実質的に毒性が低い、Ｃ２’エピＡｍＢと呼ばれるアムホテリシンＢ（ＡｍＢ）の誘導体の１１工程合成を見出した。この合成は、先進的な前臨床／臨床開発及び／又は臨床供給を可能にするこのリード候補の大規模生産に適している。
【００４６】
本発明者らは、この合成の開始時及び最後にそれぞれ、容易に導入及び除去されるＡｍＢのための新しい保護基の群(collection)を見出した。これら保護基のこの容易な付加及び除去は、この経路の規模変更可能性にとって重要である。
【００４７】
本発明者らはまた、ＡｍＢへの５つの異なる保護基（Ｃ３’−ａｌｌｏｃカルバメート、Ｃ４１−アリルエステル、Ｃ１３ヘミケタール、Ｃ３，５−ＰＭＰケタール、及びＣ９，１１−ＰＭＰケタール）の付加を包含する、開始の保護手順（opening protection sequence）が、マルチグラムスケールにおいて、１つの順相クロマトグラフィー工程とともに、僅か３工程で進行できることも発見した。
【００４８】
本発明者らはさらに、開始の保護手順における３つの工程すべてをクエンチし、比較的非極性の溶媒（Ｅｔ２Ｏ又はＥｔ２Ｏ：ヘキサン  １：１）でトリチュレートし、その後に濾過することによって、過剰の試薬及び溶媒が除去されることを発見した。この手順により、すべての中間体が自由流動性(free-flowing)の黄色粉末として生成される。集合的なプロセスの「清浄度(cleanliness)」及び全体的な収率は注目に値する。
【００４９】
定義
便宜上、明細書、実施例、及び添付の特許請求の範囲で用いられる、ある特定の用語をここに集める。
【００５０】
冠詞「ａ」及び「ａｎ」は、本明細書では、冠詞の文法上の目的語の１つ又は１つ以上（すなわち、少なくとも１つ）を指すために用いられる。例として、「１つの（ａｎ）要素」は、１つの要素又は１つ以上の要素を意味する。
【００５１】
用語「ヘテロ原子」は、当技術分野で認識されており、炭素及び水素以外の任意の元素の原子を指す。実例となるヘテロ原子としては、ホウ素、窒素、酸素、リン、硫黄及びセレンが挙げられる。
【００５２】
用語「アルキル」は、１〜１０個の炭素原子を含む、直鎖又は分岐鎖の炭化水素を意味する。アルキルの代表的な例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、及びｎ−ヘキシルが挙げられるが、それらに限られない。
【００５３】
用語「シクロアルキル」は、各々が３〜１２個の炭素原子を有する、単環式又は二環式又は架橋した飽和炭素環を意味する。好ましいシクロアルキルは、それらの環構造内に５〜１２個の炭素原子を有し、さらに好ましくは、その環構造内に６〜１０個の炭素を有する。
【００５４】
用語「アルコキシ」は、酸素原子を通じて親分子部分に付加する、本明細書に定義されるアルキル基を意味する。アルコキシの代表的な例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、２−プロポキシ、ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ペンチルオキシ、及びヘキシルオキシが挙げられるが、それらに限られない。
【００５５】
用語「アルコキシカルボニル」は、本明細書に定義されるＣ（＝Ｏ）−で表されるカルボニル基を通じて親分子部分に付加する、本明細書に定義されるアルコキシ基を意味する。アルコキシカルボニルの代表的な例としては、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、及びｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルが挙げられるが、それらに限られない。
【００５６】
用語「アルキルカルボニル」は、本明細書で用いられる場合、本明細書に定義されるカルボニル基を通じて親分子部分に付加する、本明細書に定義されるアルキル基を意味する。アルキルカルボニルの代表的な例としては、アセチル、１−オキソプロピル、２，２−ジメチル−１−オキソプロピル、１−オキソブチル、及び１−オキソペンチルが挙げられるが、それらに限られない。
【００５７】
用語「アルキルカルボニルオキシ」及び「アリールカルボニルオキシ」は、本明細書で用いられる場合、酸素原子を通じて親分子部分に付加する、本明細書に定義されるアルキルカルボニル又はアリールカルボニル基を意味する。アルキルカルボニルオキシの代表的な例としては、アセチルオキシ、エチルカルボニルオキシ、及びｔｅｒｔ−ブチルカルボニルオキシが挙げられるが、それらに限られない。アリールカルボニルオキシの代表的な例としては、フェニルカルボニルオキシが挙げられるが、それに限られない。
【００５８】
用語「アルキルチオ」は、本明細書で用いられる場合、硫黄原子を通じて親分子部分に付加する、本明細書に定義されるアルキル基を意味する。アルキルチオの代表的な例としては、メチルチオ、エチルチオ、ｔｅｒｔ−ブチルチオ、及びヘキシルチオが挙げられるが、それらに限られない。用語「アリールチオ」、「アルケニルチオ」及び「アリールアルキルチオ」は、例えば、同様に定義される。
【００５９】
用語「アミド」は、本明細書で用いられる場合、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−を意味し、アミド基は窒素を通じて親分子部分に結合する。アミドの例としては、ＣＨ３Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｈ）−及びＣＨ３ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｈ）−などのアルキルアミドが挙げられる。
【００６０】
用語「アミノ」は、本明細書で用いられる場合、窒素原子を通じて親分子部分に付加する、非置換アミン及び置換アミンの両方の基を指す。２つの基は、各々独立して、水素、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルスルホニル、アリールカルボニル、又はホルミルである。代表的な例としては、メチルアミノ、アセチルアミノ、及びアセチルメチルアミノが挙げられるが、それらに限られない。
【００６１】
用語「アルケニル」は、特定の炭素原子数を有する、又は、炭素原子数の制限が明記されていない場合には最大で２６個までの炭素原子を有し；かつ、その部分に１つ以上の二重結合を有する、環式又は非環式の、分岐した又は分岐していない不飽和炭素鎖部分のことを指す。６〜２６個の炭素原子のアルケニルは、さまざまな異性体型における、ヘキセニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル、ウンデセニル、ドデニル、トリデセニル、テトラデセニル、ペンタデセニル、ヘキサデセニル、ヘプタデセニル、オクタデセニル、ノナデセニル、エイコセニル、ヘンエイコセニル、ドコセニル、トリコセニル、及びテトラコセニルによって例示され、ここで、不飽和結合は、その部分内のどこかに位置づけられてよく、かつ、二重結合に対して（Ｚ）又は（Ｅ）配置のいずれかを有しうる。
【００６２】
用語「アルケンオキシ」又は「アルケンオキシル」は、酸素原子を通じて親分子部分に付加する、本明細書に定義されるアルケニル基を意味する。アルケンオキシルの代表的な例としては、２−プロペン−１−オキシル（すなわち、ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＨ２−Ｏ−）及びビニルオキシ（すなわち、ＣＨ２＝ＣＨ−Ｏ−）が挙げられるが、それらに限られない。
【００６３】
用語「芳香（族）」は、４ｎ＋２の電子を含む環状共役分子部分によって特徴づけられる平面構造又は多環構造のことを指し、ここでｎは整数の絶対値である。縮合した又は連結した環を含む芳香族分子もまた、二環式の芳香環と称される。例えば、炭化水素の環構造内にヘテロ原子を含む二環式の芳香環は、二環式のヘテロアリール環と称される。
【００６４】
用語「アリール」は、本明細書で用いられる場合、フェニル基又はナフチル基を意味する。本発明のアリール基は、アルケニル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシスルホニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アルキルスルホニル、アルキルチオ、アルキニル、アミド、アミノ、カルボキシ、シアノ、ホルミル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、メルカプト、ニトロ、ホスフィニル、シリル及びシリルオキシからなる群より独立して選択される、１、２、３、４又は５の置換基で必要に応じて置換されうる。
【００６５】
用語「アリーレン」は、当技術分野で認識されており、本明細書で用いられる場合、上記定義されるアリール環の２つの水素原子を除去することによって得られる二座部分に関連する。
【００６６】
用語「アリールアルキル」又は「アラルキル」は、本明細書で用いられる場合、本明細書に定義されるアルキル基を通じて親分子部分に付加する、本明細書に定義されるアリール基を意味する。アリールアルキルの代表的な例としては、ベンジル、２−フェニルエチル、３−フェニルプロピル、及び２−ナフト−２−イルエチルが挙げられるが、それらに限られない。
【００６７】
用語「アリールオキシ」又は「アリールオキシル」は、酸素原子を通じて親分子部分に付加する、本明細書に定義されるアリール基を意味する。アリールオキシの代表的な例としては、フェノキシ及び１−ナフチルオキシが挙げられるが、それらに限られない。
【００６８】
用語「アリールカルボニル」又は「アリーロイル」は、本明細書で用いられる場合、本明細書に定義されるカルボニル基を通じて親分子部分に付加する、本明細書に定義されるアリール基を意味する。アリールカルボニルの代表的な例としては、ベンゾイル及び（２−ピリジニル）カルボニルが挙げられるが、それらに限られない。
【００６９】
用語「アジド（azide, azido）」は、本明細書で用いられる場合、−Ｎ３基を意味する。
【００７０】
用語「カルボニル」は、本明細書で用いられる場合、−Ｃ（＝Ｏ）−基を意味する。
【００７１】
用語「カルボキシ」は、本明細書で用いられる場合、−ＣＯ２Ｈ基を意味する。
【００７２】
用語「シアノ」は、本明細書で用いられる場合、−ＣＮ基を意味する。
【００７３】
用語「ハライド」、「ハロ」、又は「ハロゲン」は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、又は−Ｉを意味する。
【００７４】
用語「ハロアルキル」は、本明細書に定義されるアルキル基を通じて親分子部分に付加する、本明細書に定義される少なくとも１つのハロゲンを意味する。ハロアルキルの代表的な例としては、クロロメチル、２−フルオロエチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、及び２−クロロ−３−フルオロペンチルが挙げられるが、それらに限られない。
【００７５】
用語「ヘテロシクリル」は、本明細書で用いられる場合、完全に飽和されうる、又は１つ以上の不飽和単位を含みうる（疑義を避けるために、不飽和の程度は結果的に芳香環系を生じない）、かつ、窒素、酸素、又は硫黄などの少なくとも１つのヘテロ原子を含む３〜１２個の原子を有する、単環式、二環式及び三環式環を含むがそれらに限られない、非芳香族の環系を含む。本発明の範囲を限定するように解釈されるべきではないが、例示の目的で、複素環の例を次に挙げる：アゼピン、アゼチジニル、モルホリニル、オキソピペリジニル、オキソピロリジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、キニクルジニル、チオモルホリニル、テトラヒドロピラニル及びテトラヒドロフラニル。ヘテロシクリル基は、アルケニル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシスルホニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アルキルスルホニル、アルキルチオ、アルキニル、アミド、アミノ、カルボキシ、シアノ、ホルミル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、メルカプト、ニトロ、ホスフィニル、シリル及びシリルオキシから独立して選択される、０、１、２、３、４又は５の置換基で置換されうる。
【００７６】
用語「ヘテロアリール」は、本明細書で用いられる場合、単環式、二環式及び三環式環を含むが、それらに限られず、かつ、窒素、酸素、又は硫黄などの少なくとも１つのヘテロ原子を含む３〜１２個の原子を有する、芳香環系を含む。本発明の範囲を限定するように解釈されるべきではないが、例示の目的で：アザインドリル、ベンゾ（ｂ）チエニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾオキサジアゾリル、フラニル、イミダゾリル、イミダゾピリジニル、インドリル、インドリニル、インダゾリル、イソインドリニル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、イソキノリニル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、プリニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリジニル、ピリミジニル、ピロリル、ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジニル、ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジニル、キノリニル、キナゾリニル、トリアゾリル、チアゾリル、チオフェニル、テトラヒドロインドリル、テトラゾリル、チアジアゾリル、チエニル、チオモルホリニル、トリアゾリル又はトロパニル。ヘテロアリール基は、アルケニル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシスルホニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アルキルスルホニル、アルキルチオ、アルキニル、アミド、アミノ、カルボキシ、シアノ、ホルミル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、メルカプト、ニトロ、ホスフィニル、シリル及びシリルオキシから独立して選択される、０、１、２、３、４又は５の置換基で置換されうる。
【００７７】
用語「ヘテロアリーレン」は、当技術分野で認識されており、本明細書で用いられる場合、上記定義されるヘテロアリール環の２つの水素原子を除去することによって得られる二座部分に関連する。
【００７８】
用語「ヘテロアリールアルキル」又は「ヘテロアラルキル」は、本明細書で用いられる場合、本明細書に定義されるアルキル基を通じて親分子部分に付加する、本明細書に定義されるヘテロアリールを意味する。ヘテロアリールアルキルの代表的な例としては、ピリジン−３−イルメチル及び２−（チエン−２−イル）エチルが挙げられるが、それらに限られない。
【００７９】
用語「ヒドロキシル」は、本明細書で用いられる場合、−ＯＨ基を意味する。
【００８０】
用語「ヒドロキシアルキル」は、本明細書で用いられる場合、本明細書に定義されるアルキル基を通じて親分子部分に付加する、本明細書に定義される少なくとも１つのヒドロキシ基を意味する。ヒドロキシアルキルの代表的な例としては、ヒドロキシメチル、２−ヒドロキシエチル、３−ヒドロキシプロピル、２，３−ジヒドロキシペンチル、及び２−エチル−４−ヒドロキシヘプチルが挙げられるが、それらに限られない。
【００８１】
用語「メルカプト」は、本明細書で用いられる場合、−ＳＨ基を意味する。
【００８２】
用語「ニトロ」は、本明細書で用いられる場合、−ＮＯ２基を意味する。
【００８３】
用語「シリル」は、本明細書で用いられる場合、シリル（Ｈ３Ｓｉ−）基（すなわち、（ヒドロカルビル）３Ｓｉ−）のヒドロカルビル誘導体を含み、ここで、ヒドロカルビル基は、例えば、エチル、フェニルなどの炭化水素から１つの水素原子を除去することによって形成される１価の基である。ヒドロカルビル基は、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル（ＴＢＤＰＳ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ／ＴＢＤＭＳ）、トリイソプロピルシリル（ＴＩＰＳ）、及び［２−（トリメチルシリル）エトキシ］メチル（ＳＥＭ）などの数多くのシリル基を提供するために、変化させて良い、異なる基の組合せでありうる。
【００８４】
用語「シリルオキシ」は、本明細書で用いられる場合、酸素原子を通じて親分子に付加する、本明細書に定義されるシリル基を意味する。
【００８５】
用語「スルホン酸（sulfonate）」は、当技術分野で認識されており、式：
【化２８】
0006755859.tif 000029
によって表すことができる部分を含み、式中、Ｒ７は、電子対、水素、アルキル、シクロアルキル、又はアリールである。
【００８６】
用語トリフリル、トシル、メシル、及びノナフリルは、当技術分野で認識されており、それぞれ、トリフルオロメタンスルホニル、ｐ−トルエンスルホニル、メタンスルホニル、及びノナフルオロブタンスルホニル基を指す。用語トリフラート、トシラート、メシラート、及びノナフラートは、当技術分野で認識されており、それぞれ、トリフルオロメタンスルホン酸エステル、ｐ−トルエンスルホン酸エステル、メタンスルホン酸エステル、及びノナフルオロブタンスルホン酸エステルの官能基、並びに、これらの基を含む分子のことを指す。
【００８７】
略語Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｈ、Ｔｆ、Ｎｆ、Ｔｓ、及びＭｓは、それぞれ、メチル、エチル、フェニル、トリフルオロメタンスルホニル、ノナフルオロブタンスルホニル、ｐ−トルエンスルホニル及びメタンスルホニルを表す。当技術分野における通常の知識を有する有機化学者によって用いられる略語のさらに包括的なリストは、「Journal of Organic Chemistry」の各巻の創刊号に掲載されている；このリストは、典型的には、「Standard List of Abbreviations」という名称が付された表に提示されている。
【００８８】
例えば、アルキル、ｍ、ｎ等の各表現の定義は、構造内に１か所以上存在する場合には、同一構造内の他の場所におけるその定義とは独立していることが意図されている。
【００８９】
「置換」又は「〜で置換された」は、このような置換が、置換された原子及び置換基の許容される価数に従い、かつ、置換の結果、例えば、転位、環化、脱離、又は他の反応などによって自発的に変換を被らない、安定な化合物を生じるという暗黙の条件を含むものと解される。
【００９０】
用語「置換された」には、有機化合物のすべての許容される置換基が含まれることも予定されている。広範な態様において、許容される置換基としては、有機化合物の非環式及び環式の、分岐及び非分岐の、炭素環式及び複素環式の、芳香族及び非芳香族の置換基が挙げられる。実例となる置換基としては、例えば、上述のものなどが挙げられる。許容される置換基は、適切な有機化合物に対して、１つ又はそれ以上であってよく、また、同一であっても異なっていてもよい。本発明の目的では、窒素などのヘテロ原子は、水素置換基、及び／又は、ヘテロ原子の価数を満たす、本明細書に記載される有機化合物の許容される任意の置換基を有しうる。本発明は、いかなる方法であっても、有機化合物の許容される置換基によって限定されることは意図されていない。
【００９１】
「保護基」という句は、本明細書で用いられる場合、潜在的に反応性の官能基を、望ましくない化学的変換から保護する、一時的な置換基を意味する。このような保護基の例としては、それぞれ、カルボン酸のエステル、アルコールのシリルエーテル、並びに、アルデヒド及びケトンのアセタール及びケタールが挙げられる。保護基化学の分野は見直されている（Greene, T.W.; Wuts, P.G.M. Protective Groups in Organic Synthesis, 2nd ed.; Wiley:New York, 1991）。本発明の化合物の保護された形態は、本発明の範囲内に含まれる。
【００９２】
本発明の目的では、化学元素は、化学及び物理学ハンドブック第６７版（１９８６−８７）ＣＡＳバージョン（CAS version, Handbook of Chemistry and Physics, 67th Ed., 1986-87）、の裏表紙の元素周期表に従って特定される。
【００９３】
本明細書で用いられる場合、プロトン性溶媒は、酸素（ヒドロキシル基など）又は窒素（アミン基など）に結合した水素原子を有する溶媒である。一般的な用語において、不安定なＨ＋を含む溶媒はプロトン性溶媒と呼ばれる。このような溶媒の分子は、プロトン（Ｈ＋）を試薬に容易に供与する。対照的に、非プロトン性溶媒は、酸素（ヒドロキシル基など）又は窒素（アミン基など）に結合した水素原子を有しない溶媒であり、水素を供与できない。
【００９４】
本明細書で用いられる場合、極性プロトン性溶媒は、多くの塩を溶解するプロトン性溶媒である。概して、これらの溶媒は、高い誘電率及び高い極性を有する。極性プロトン性溶媒の非限定的な例としては、酢酸、アンモニア、エタノール、ギ酸、イソプロパノール、メタノール、ｎ−ブタノール、ニトロメタン、ｎ−プロパノール、ｔ−ブタノール、及び水が挙げられる。
【００９５】
本明細書で用いられる場合、極性非プロトン性溶媒は、多くの塩を溶解するが、酸性水素を欠いている溶媒である；これらの溶媒は、概して、中間〜高い誘電率及び極性を有する。極性非プロトン性溶媒の非限定的な例としては、アセトン、アセトニトリル、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、酢酸エチル、ヘキサメチルリン酸トリアミド（ＨＭＰＴ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、及びテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）が挙げられる。
【００９６】
本明細書で用いられる場合、非極性非プロトン性溶媒は、あまり塩を溶解せず、酸性水素を欠いている溶媒である；これらの溶媒は、概して、低い誘電率及び極性を有する。非極性非プロトン性溶媒の非限定的な例としては、ベンゼン、クロロホルム、シクロヘキサン、ジエチルエーテル、ヘキサン、ペンタン、及びトルエンが挙げられる。
【００９７】
本発明の化合物
本発明のある態様は、下記によって表される化合物であって、
【化２９】
0006755859.tif 000030
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【００９８】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−アルケン−１−イルである。
【００９９】
ある特定の実施形態では、Ｒ２は２−アルケン−１−イルである。
【０１００】
ある特定の実施形態では、Ｒ３は置換又は非置換のアリールである。
【０１０１】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−アルケン−１−イルであり；Ｒ２は２−アルケン−１−イルであり；Ｒ３は置換又は非置換のアリールである。
【０１０２】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルである。
【０１０３】
ある特定の実施形態では、Ｒ２は２−プロペン−１−イルである。
【０１０４】
ある特定の実施形態では、Ｒ３はｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）である。
【０１０５】
ある実施形態では、化合物は、下記によって表される：
【化３０】
0006755859.tif 000031
本発明のある態様は、下記によって表される化合物であって、
【化３１】
0006755859.tif 000032
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ４は−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒｃは置換又は非置換のアリールである。
【０１０６】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−アルケン−１−イルである。
【０１０７】
ある特定の実施形態では、Ｒ２は２−アルケン−１−イルである。
【０１０８】
ある特定の実施形態では、Ｒ３は置換又は非置換のアリールである。
【０１０９】
ある特定の実施形態では、Ｒｃは置換又は非置換のフェニルである。
【０１１０】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−アルケン−１−イルであり；Ｒ２は２−アルケン−１−イルであり；Ｒ３は置換又は非置換のアリールであり；Ｒｃは置換又は非置換のフェニルである。
【０１１１】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルである。
【０１１２】
ある特定の実施形態では、Ｒ２は２−プロペン−１−イルである。
【０１１３】
ある特定の実施形態では、Ｒ３はｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）である。
【０１１４】
ある特定の実施形態では、Ｒ４はｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルである。
【０１１５】
ある実施形態では、化合物は、下記によって表される：
【化３２】
0006755859.tif 000033
本発明のある態様は、下記によって表される化合物であって、
【化３３】
0006755859.tif 000034
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ４は−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｒ５は（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒｃは置換又は非置換のアリールである。
【０１１６】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−アルケン−１−イルである。
【０１１７】
ある特定の実施形態では、Ｒ２は２−アルケン−１−イルである。
【０１１８】
ある特定の実施形態では、Ｒ３は置換又は非置換のアリールである。
【０１１９】
ある特定の実施形態では、Ｒｃは置換又は非置換のフェニルである。
【０１２０】
ある特定の実施形態では、ＲｂはＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１２１】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−アルケン−１−イルであり；Ｒ２は２−アルケン−１−イルであり；Ｒ３は置換又は非置換のアリールであり；Ｒｃは置換又は非置換のフェニルであり；ＲｂはＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１２２】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルである。
【０１２３】
ある特定の実施形態では、Ｒ２は２−プロペン−１−イルである。
【０１２４】
ある特定の実施形態では、Ｒ３はｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）である。
【０１２５】
ある特定の実施形態では、Ｒ４はｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルである。
【０１２６】
ある特定の実施形態では、Ｒ５はジエチルイソプロピルシリルである。
【０１２７】
ある実施形態では、化合物は、下記によって表される：
【化３４】
0006755859.tif 000035
本発明のある態様は、下記によって表される化合物であって、
【化３５】
0006755859.tif 000036
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５は（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１２８】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−アルケン−１−イルである。
【０１２９】
ある特定の実施形態では、Ｒ２は２−アルケン−１−イルである。
【０１３０】
ある特定の実施形態では、Ｒ３は置換又は非置換のアリールである。
【０１３１】
ある特定の実施形態では、ＲｂはＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１３２】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−アルケン−１−イルであり；Ｒ２は２−アルケン−１−イルであり；Ｒ３は置換又は非置換のアリールであり；ＲｂはＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１３３】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルである。
【０１３４】
ある特定の実施形態では、Ｒ２は２−プロペン−１−イルである。
【０１３５】
ある特定の実施形態では、Ｒ３はｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）である。
【０１３６】
ある特定の実施形態では、Ｒ５はジエチルイソプロピルシリルである。
【０１３７】
ある実施形態では、化合物は、下記によって表される：
【化３６】
0006755859.tif 000037
本発明のある態様は、下記によって表される化合物であって、
【化３７】
0006755859.tif 000038
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５は（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒ６は−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒｃは置換又は非置換のアリールである。
【０１３８】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−アルケン−１−イルである。
【０１３９】
ある特定の実施形態では、Ｒ２は２−アルケン−１−イルである。
【０１４０】
ある特定の実施形態では、Ｒ３は置換又は非置換のアリールである。
【０１４１】
ある特定の実施形態では、Ｒｃは置換又は非置換のフェニルである。
【０１４２】
ある特定の実施形態では、ＲｂはＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１４３】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−アルケン−１−イルであり；Ｒ２は２−アルケン−１−イルであり；Ｒ３は置換又は非置換のアリールであり；Ｒｃは置換又は非置換のフェニルであり；ＲｂはＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１４４】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルである。
【０１４５】
ある特定の実施形態では、Ｒ２が２−プロペン−１−イルである。
【０１４６】
ある特定の実施形態では、Ｒ３はｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）である。
【０１４７】
ある特定の実施形態では、Ｒ６はｐ−ニトロベンゾイルである。
【０１４８】
ある特定の実施形態では、Ｒ５はジエチルイソプロピルシリルである。
【０１４９】
ある実施形態では、化合物は、下記によって表される：
【化３８】
0006755859.tif 000039
本発明のある態様は、下記によって表される化合物であって、
【化３９】
0006755859.tif 000040
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５は（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１５０】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−アルケン−１−イルである。
【０１５１】
ある特定の実施形態では、Ｒ２は２−アルケン−１−イルである。
【０１５２】
ある特定の実施形態では、Ｒ３は置換又は非置換のアリールである。
【０１５３】
ある特定の実施形態では、ＲｂはＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１５４】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−アルケン−１−イルであり；Ｒ２は２−アルケン−１−イルであり；Ｒ３は置換又は非置換のアリールであり；ＲｂはＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１５５】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルである。
【０１５６】
ある特定の実施形態では、Ｒ２は２−プロペン−１−イルである。
【０１５７】
ある特定の実施形態では、Ｒ３はｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）である。
【０１５８】
ある特定の実施形態では、Ｒ５はジエチルイソプロピルシリルである。
【０１５９】
ある実施形態では、化合物は、下記によって表される：
【化４０】
0006755859.tif 000041
本発明のある態様は、下記によって表される化合物であって、
【化４１】
0006755859.tif 000042
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１６０】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−アルケン−１−イルである。
【０１６１】
ある特定の実施形態では、Ｒ２は２−アルケン−１−イルである。
【０１６２】
ある特定の実施形態では、Ｒ３は置換又は非置換のアリールである。
【０１６３】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−アルケン−１−イルであり；Ｒ２は２−アルケン−１−イルであり；Ｒ３は置換又は非置換のアリールである。
【０１６４】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルである。
【０１６５】
ある特定の実施形態では、Ｒ２は２−プロペン−１−イルである。
【０１６６】
ある特定の実施形態では、Ｒ３はｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）である。
【０１６７】
ある実施形態では、化合物は、下記によって表される：
【化４２】
0006755859.tif 000043
本発明のある態様は、下記によって表される化合物であって、
【化４３】
0006755859.tif 000044
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１６８】
ある特定の実施形態では、Ｒ３は置換又は非置換のアリールである。
【０１６９】
ある実施形態では、化合物は、下記によって表される：
【化４４】
0006755859.tif 000045
本発明のある態様は、下記によって表される化合物である：
【化４５】
0006755859.tif 000046
【０１７０】
本発明の方法
本発明のある態様は、２’エピＡｍＢの製造方法であって、
【化４６】
0006755859.tif 000047
下記工程を含み、
【化４７】
0006755859.tif 000048
ここで、存在ごとに独立して、
Ｒ１はＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２は、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３は、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５は（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒ６は−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｒａは、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂは、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒｃは置換又は非置換のアリールであり；
ＲｄはＣ１〜Ｃ６アルキル又はアリールであり；
溶媒７は非極性非プロトン性溶媒である。
【０１７１】
ある特定の実施形態では、Ｒ６は置換されたアリーロイルである。
【０１７２】
ある特定の実施形態では、Ｒｄはアリールである。
【０１７３】
ある特定の実施形態では、Ｒ６は置換されたアリーロイルであり；Ｒｄはアリールである。
【０１７４】
ある特定の実施形態では、Ｒ６はｐ−ニトロベンゾイルである。
【０１７５】
ある特定の実施形態では、Ｒｄはフェニルである。
【０１７６】
ある特定の実施形態では、溶媒７はベンゼンである。
【０１７７】
ある特定の実施形態では、ジ（アルキル）アゾジカルボキシレートは、ジ（イソプロピル）アゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）又はジ（エチル）アゾジカルボキシレート（ＤＥＡＤ）である。
【０１７８】
ある特定の実施形態では、Ｒ６はｐ−ニトロベンゾイルであり；ジ（アルキル）アゾジカルボキシレートは、ジ（イソプロピル）アゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）であり；Ｒｄはフェニルである。
【０１７９】
ある特定の実施形態では、Ｒ６はｐ−ニトロベンゾイルであり；ジ（アルキル）アゾジカルボキシレートは、ジ（イソプロピル）アゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）であり；Ｒｄはフェニルであり；溶媒７はベンゼンである。
【０１８０】
ある実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルであり；Ｒ２は２−プロペン−１−イルであり；Ｒ３はｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）であり；Ｒ５はジエチルイソプロピルシリルであり；Ｒ６はｐ−ニトロベンゾイルであり；ジ（アルキル）アゾジカルボキシレートは、ジ（イソプロピル）アゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）であり；Ｒｄはフェニルであり；溶媒７はベンゼンである。
【０１８１】
ある特定の実施形態では、先行する実施形態のいずれか１つに従った方法は、次の工程をさらに含み：
【化４８】
0006755859.tif 000049
ここで、
Ｍは、アルカリ金属カチオン又はアルカリ土類金属カチオンであり；
溶媒８は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である。
【０１８２】
ある特定の実施形態では、Ｍはアルカリ金属カチオンである。
【０１８３】
ある特定の実施形態では、ＭはＫである。
【０１８４】
ある特定の実施形態では、溶媒８は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である。
【０１８５】
ある特定の実施形態では、ＭはＫであり；溶媒８は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である。
【０１８６】
ある実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルであり；Ｒ２は２−プロペン−１−イルであり；Ｒ３はｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）であり；Ｒ５はジエチルイソプロピルシリルであり；Ｒ６はｐ−ニトロベンゾイルであり；ＭはＫであり；溶媒８は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である。
【０１８７】
ある特定の実施形態では、先行する実施形態のいずれか１つに従った方法は、次の工程をさらに含み：
【化４９】
0006755859.tif 000050
ここで、
フッ化物試薬は、フッ化テトラアルキルアンモニウム及びフッ化塩からなる群より選択され；
溶媒９は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である。
【０１８８】
ある特定の実施形態では、フッ化物試薬はフッ化塩である。
【０１８９】
ある特定の実施形態では、フッ化物試薬はフッ化水素−ピリジンである。
【０１９０】
ある特定の実施形態では、溶媒９はテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）である。
【０１９１】
ある特定の実施形態では、フッ化物試薬はフッ化水素−ピリジンであり；溶媒９はテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）である。
【０１９２】
ある実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルであり；Ｒ２は２−プロペン−１−イルであり；Ｒ３はｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）であり；Ｒ５はジエチルイソプロピルシリルであり；フッ化物試薬はフッ化水素−ピリジンであり；溶媒９はテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）である。
【０１９３】
ある特定の実施形態では、先行する実施形態のいずれか１つに従った方法は、次の工程をさらに含み：
【化５０】
0006755859.tif 000051
ここで、存在ごとに独立して、
Ｐｄ試薬はＰｄ（０）又はＰｄ（ＩＩ）であり；
リガンドは（Ｒｅ）３Ｐであり；
ＲｅはＣ１〜Ｃ６アルキル又はアリールであり；
ＲｆはＣ１〜Ｃ６アルキル又はアリールであり；
溶媒１０は極性非プロトン性溶媒である。
【０１９４】
ある特定の実施形態では、Ｐｄ試薬はＰｄ（０）である。
【０１９５】
ある特定の実施形態では、Ｒｅはアリールである。
【０１９６】
ある特定の実施形態では、Ｒｆはアリールである。
【０１９７】
ある特定の実施形態では、上記ＲｆＣＯ２Ｈ又は１，３−ジケトンはＲｆＣＯ２Ｈである。
【０１９８】
ある特定の実施形態では、Ｐｄ試薬はＰｄ（０）であり；Ｒｅはアリールであり；Ｒｆはアリールであり；上記ＲｆＣＯ２Ｈ又は１，３−ジケトンはＲｆＣＯ２Ｈである。
【０１９９】
ある特定の実施形態では、リガンドは（ＰＰｈ３）４である。
【０２００】
ある特定の実施形態では、上記ＲｆＣＯ２Ｈ又は１，３−ジケトンはチオサリチル酸である。
【０２０１】
ある特定の実施形態では、溶媒１０はジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）である。
【０２０２】
ある特定の実施形態では、Ｐｄ試薬はＰｄ（０）であり；リガンドは（ＰＰｈ３）４であり；上記ＲｆＣＯ２Ｈ又は１，３−ジケトンはチオサリチル酸である。
【０２０３】
ある特定の実施形態では、Ｐｄ試薬はＰｄ（０）であり；リガンドは（ＰＰｈ３）４であり；上記ＲｆＣＯ２Ｈ又は１，３−ジケトンはチオサリチル酸であり；溶媒１０はジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）である。
【０２０４】
ある実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルであり；Ｒ２は２−プロペン−１−イルであり；Ｒ３はｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）であり；Ｐｄ試薬はＰｄ（０）であり；リガンドは（ＰＰｈ３）４であり；上記ＲｆＣＯ２Ｈ又は１，３−ジケトンはチオサリチル酸であり；溶媒１０はジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）である。
【０２０５】
ある特定の実施形態では、先行する実施形態のいずれか１つに従った方法は、次の工程をさらに含み：
【化５１】
0006755859.tif 000052
ここで、
酸はブレンステッド酸であり；
溶媒１１は、水と極性非プロトン性溶媒の混合物である。
【０２０６】
ある特定の実施形態では、酸はカンファースルホン酸（ＣＳＡ）である。
【０２０７】
ある特定の実施形態では、溶媒１１は、水とＭｅＣＮの混合物である。
【０２０８】
ある特定の実施形態では、酸はカンファースルホン酸（ＣＳＡ）であり；溶媒１１は、水とＭｅＣＮの混合物である。
【０２０９】
ある実施形態では、Ｒ３はｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）であり；酸はカンファースルホン酸（ＣＳＡ）であり；溶媒１１は、水とＭｅＣＮの混合物である。
【０２１０】
ある特定の実施形態では、先行する実施形態のいずれか１つに従った方法は、次の工程をさらに含み：
【化５２】
0006755859.tif 000053
ここで、
Ｒ４は−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｍは、アルカリ金属カチオン又はアルカリ土類金属カチオンであり；
溶媒６は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である。
【０２１１】
ある特定の実施形態では、Ｍはアルカリ金属カチオンである。
【０２１２】
ある特定の実施形態では、溶媒６は、極性非プロトン性溶媒と極性プロトン性溶媒の混合物である。
【０２１３】
ある特定の実施形態では、Ｒ４はｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルである。
【０２１４】
ある特定の実施形態では、ＭはＫである。
【０２１５】
ある特定の実施形態では、Ｒ４はｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルであり；ＭはＫである。
【０２１６】
ある特定の実施形態では、溶媒６は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である。
【０２１７】
ある特定の実施形態では、Ｒ４はｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルであり；ＭはＫであり；溶媒６は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である。
【０２１８】
ある実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルであり；Ｒ２は２−プロペン−１−イルであり；Ｒ３はｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）であり；Ｒ４はｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルであり；ＭはＫであり；溶媒６は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である。
【０２１９】
ある特定の実施形態では、先行する実施形態のいずれか１つに従った方法は、次の工程をさらに含み：
【化５３】
0006755859.tif 000054
ここで、
Ｘ５はハライド又はスルホン酸であり；
溶媒５は、極性非プロトン性溶媒、非極性非プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である。
【０２２０】
ある特定の実施形態では、ＲｂはＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０２２１】
ある特定の実施形態では、Ｘ５はスルホン酸である。
【０２２２】
ある特定の実施形態では、ＲｂはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；Ｘ５はスルホン酸である。
【０２２３】
ある特定の実施形態では、溶媒５は、極性非プロトン性溶媒と非極性非プロトン性溶媒の混合物である。
【０２２４】
ある特定の実施形態では、溶媒５は、ジクロロメタン（ＤＣＭ）とヘキサンの混合物である。
【０２２５】
ある特定の実施形態では、Ｒ５−Ｘ５は、トリフルオロメタンスルホン酸ジエチル（イソプロピル）シリルである。
【０２２６】
ある特定の実施形態では、Ｒ５−Ｘ５は、トリフルオロメタンスルホン酸ジエチル（イソプロピル）シリルであり；溶媒５は、ジクロロメタン（ＤＣＭ）とヘキサンの混合物である。
【０２２７】
ある実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルであり；Ｒ２は２−プロペン−１−イルであり；Ｒ３はｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）であり；Ｒ４はｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルであり；Ｒ５−Ｘ５は、トリフルオロメタンスルホン酸ジエチル（イソプロピル）シリルであり；溶媒５は、ジクロロメタン（ＤＣＭ）とヘキサンの混合物である。
【０２２８】
ある特定の実施形態では、先行する実施形態のいずれか１つに従った方法は、次の工程をさらに含み：
【化５４】
0006755859.tif 000055
ここで、
Ｒ４は置換又は非置換のアリーロイルであり；
Ｘ４は、ハライド、スクシンイミジル、ヒドロキシスクシンイミジル、アジド、アルケンオキシル、及びアリールオキシルからなる群より選択され；
溶媒４は極性非プロトン性溶媒である。
【０２２９】
ある特定の実施形態では、Ｒ４は置換されたアリーロイルである。
【０２３０】
ある特定の実施形態では、Ｘ４はハライドである。
【０２３１】
ある特定の実施形態では、Ｒ４は置換されたフェニルであり；Ｘ４はハライドである。
【０２３２】
ある特定の実施形態では、Ｒ４−Ｘ４はｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルクロリドである。
【０２３３】
ある特定の実施形態では、溶媒４はテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）である。
【０２３４】
ある特定の実施形態では、Ｒ４−Ｘ４はｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルクロリドであり；溶媒４はテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）である。
【０２３５】
ある実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルであり；Ｒ２は２−プロペン−１−イルであり；Ｒ３はｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）であり；Ｒ４はｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルであり；Ｒ４−Ｘ４はｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルクロリドであり；溶媒４はテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）である。
【０２３６】
ある特定の実施形態では、先行する実施形態のいずれか１つに従った方法は、次の工程をさらに含み：
【化５５】
0006755859.tif 000056
ここで、
Ｘ１はハライド又はスルホン酸であり；
Ｘ２は、ハライド、スクシンイミジル、ヒドロキシスクシンイミジル、アジド、アルケンオキシル、及びアリールオキシルからなる群より選択され；
Ｘ３は−ＣＨ（ＯＲ）２であり；
ＲはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
溶媒１は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物であり；
溶媒２は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物であり；
溶媒３は、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である。
【０２３７】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−アルケン−１−イルである。
【０２３８】
ある特定の実施形態では、Ｘ１はスクシンイミジルである。
【０２３９】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−アルケン−１−イルであり；Ｘ１はスクシンイミジルである。
【０２４０】
ある特定の実施形態では、Ｒ２は２−アルケン−１−イルである。
【０２４１】
ある特定の実施形態では、Ｘ２はハライドである。
【０２４２】
ある特定の実施形態では、Ｒ２は２−アルケン−１−イルであり；Ｘ２はハライドである。
【０２４３】
ある特定の実施形態では、Ｒ３は置換されたアリールである。
【０２４４】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルである。
【０２４５】
ある特定の実施形態では、Ｒ２は２−プロペン−１−イルである。
【０２４６】
ある特定の実施形態では、Ｒ３はｐ−メトキシフェニルである。
【０２４７】
ある特定の実施形態では、溶媒１は、極性非プロトン性溶媒と極性プロトン性溶媒の混合物である。
【０２４８】
ある特定の実施形態では、溶媒２は、極性非プロトン性溶媒と極性プロトン性溶媒の混合物である。
【０２４９】
ある特定の実施形態では、溶媒３は、極性非プロトン性溶媒と極性プロトン性溶媒の混合物である。
【０２５０】
ある特定の実施形態では、溶媒１は、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）とＭｅＯＨの混合物である。
【０２５１】
ある特定の実施形態では、溶媒２は、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）とＭｅＯＨの混合物である。
【０２５２】
ある特定の実施形態では、溶媒３は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である。
【０２５３】
ある特定の実施形態では、ブレンステッド酸は、カンファースルホン酸（ＣＳＡ）である。
【０２５４】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルであり；Ｘ１はスクシンイミジルであり；Ｒ２は２−プロペン−１−イルであり；Ｘ２はハライドであり；Ｒ３はｐ−メトキシフェニルである。
【０２５５】
ある特定の実施形態では、Ｒａは２−プロペン−１−イルであり；Ｘ１はスクシンイミジルであり；Ｒ２は２−プロペン−１−イルであり；Ｘ２はハライドであり；Ｒ３はｐ−メトキシフェニルであり；溶媒１は、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）とＭｅＯＨの混合物であり；溶媒２は、ＤＭＦとＭｅＯＨの混合物であり；溶媒３は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である。
【０２５６】
一実施形態において、第２工程のＣ４１−カルボキシレートのアリルエステル化は、分析的ＨＰＬＣで判定して、所与の反応条件下で清浄な方式で達成される。Ｅｔ２Ｏ：ヘキサンの１：１溶液でトリチュレートし、Ｅｔ２Ｏですすいだ後に濾過することによって、過剰のアリル化試薬が最も効果的に除去され、無臭かつ自由流動性の黄色粉末を提供する。以前の合成は、Ｃ４１−アリルエステル保護基を最後に導入し、水性ワークアップが必要な状況を作り出した（非極性のＡｍＢ誘導体は非極性溶媒中で拉げられない）。Ｃ４１−カルボン酸を保護しないと、先の工程に、複雑な順相フラッシュクロマトグラフィー精製を生じさせた。
【０２５７】
本発明に関連して、第３工程における３つのケタールすべての同時導入を、高濃度のＭｅＯＨ溶液中、マルチグラムスケールで効率的に行うことができることもさらに発見された。驚くべきことに、最良の反応時間は非常に短く（３０分間）、これは、生成物への最も清浄な変換を可能にすることも見出された。通常のＭｅＯＨ：ＴＨＦ条件下では、反応はより長く、より多くの分解を伴い、かつ、過剰当量のケタール試薬を必要とする。
【０２５８】
トリエチルアミンでクエンチの後、反応を効果的にトリチュレートするためには、高濃度のＭｅＯＨ溶液を、ＴＨＦを用いて０．０３Ｍまで希釈しなければならないことが分かった。これにより、ヘキサン中へのトリチュレーションにより、細かい黄色粉末の形成が可能となる。セミクルードの生成物を濾過により一旦回収した後、次に、順相シリカゲルクロマトグラフィーによって精製する。水性抽出を除去することに加えて、セミクルードの乾燥黄色粉末が、著しい分解なしに、アルゴン下、冷凍庫内で最長で少なくとも１カ月間保管できることは特筆すべきである。このことによって、クロマトグラフィー工程に移行する前に、より初期段階の物質の集中的な備蓄が可能になる。
【０２５９】
本発明者らは、異なるアムホテリシンＢ中間体のＣ２’部位選択的なアシル化について以前に報告したが、非常に異なる群の保護基が付加されたこの誘導体に、類似した部位選択性が観察されるか否かは明らかではなかった。結果的に、新規中間体１のＣ２’位置の高度に部位選択的なアシル化が、高効率で進行し、かつ容易に規模変更可能であることを発見した。この反応は、８ｇスケールで首尾よく進行した。
【０２６０】
本発明によれば、Ｃ２’−ベンゾエート中間体３の第１のＫＣＮ介在性の選択的加水分解が、非常に効率的に進行し、６ｇスケールで首尾よく進行することが見出された。
【０２６１】
本発明によれば、４から５への効率の良い、かつ、規模変更可能な方式での変換を促進する条件も見出された。光延反応の条件を最適化し、ミリグラムスケールからマルチグラムスケールへと成功裏に規模を拡大した。この規模の拡大は、反応温度を２３℃まで下げ、かつ、溶媒をトルエンからベンゼンに変更することによって達成された。
【０２６２】
Ｃ２’−ニトロベンゾエート５の第２のＫＣＮ介在性の選択的加水分解による６の生成は、驚くべきことに効率的であり、この反応はマルチグラムスケールで首尾よく進行した。反応時間も短縮された。
【０２６３】
驚くべきことに、Ｃ４１−アリルエステルとＣ３’ａｌｌｏｃカルバメートは、両方とも、必要な化学的工程をすべて耐え抜く。とりわけ、Ｃ４１−アリルエステルは、驚くべきことに、両方のＫＣＮ介在性の選択的Ｃ２’−ベンゾエート加水分解工程に対して非反応性である。
【０２６４】
一連の最終的な脱保護が、非常に少ない工程及びＨＰＬＣ精製で進行することも見出された。本発明によれば、Ｃ４１カルボン酸及びＣ３’アミンが保護されていない場合、ケタールは、はるかに容易に開裂されることが発見された。この発見を利用して、これらの反応を以下の順序で行うことによって、一連の最終的な脱保護の効率を最大化した：
１．ＨＦ−ピリジンの脱シリル化；次いで
２．Ｃ４１−アリルエステルとＣ３’−ａｌｌｏｃカルバメートの両方の同時除去；次いで
３．全体的なケタール加水分解
【０２６５】
ＤＥＩＰＳ基のＨＦ−ピリジン除去により、適度な量のモノ−ＰＭＰケタール化生成物混合物とともに、所望の生成物が清浄に生成される。生成物とモノ−ＰＭＰケタール化生成物混合物の両方を、首尾よくクロマトグラフィーにかけて、順相フラッシュクロマトグラフィーによって精製することができる。さらには、モノ−ＰＭＰケタール化混合物を、それに続く工程に首尾よく供して、所望の最終生成物を首尾よく生成することができる。
【０２６６】
Ｃ４１−アリルエステルとＣ３’ａｌｌｏｃカルバメートは、両方とも、同一のパラジウム介在性の条件下、単一工程で容易に除去される。両性イオン生成物が、分析的ＨＰＬＣによる単一ピークとして清浄に生成される。驚くべきことに、Ｅｔ２Ｏを用いた簡単なトリチュレーション、濾過、及び過剰のＥｔ２Ｏを用いた洗浄によって、その反応をワークアップすることができる。驚くべきことに、セミクルードの最後から２番目の物質を、さらなる精製なしに、最終工程に首尾よく使用することができる。
【０２６７】
最後の脱保護工程を、数百ミリグラム及びグラムスケールで行った。分析的ＨＰＬＣによれば、出発原料の完全な消費及び所望の生成物への良好な変換が達成される。
【０２６８】
本発明のある態様は、Ｃ２’エピＦＡｍＢ：
【化５６】
0006755859.tif 000057
の製造方法であって、該方法は、４ｇｅｎ又はそれらの開示される種と、ジ（アルキル）アゾジカルボキシレート、（Ｒｄ）３Ｐ、求核性のフッ化物試薬、及び溶媒７とを合わせ、それによって、５ｇｅｎ又はそれらの開示される種の変形を形成する工程を含み、ここで、フッ素原子が、５ｇｅｎ又はそれらの開示される種におけるＲ６Ｏ−に代わる。言い換えれば、Ｃ２’エピＦＡｍＢの製造方法は、求核性のフッ化物試薬（例えばフッ化テトラアルキルアンモニウム（例えばＴＢＡＦ）、アルカリ金属フッ化物（例えばＣｓＦ又はＫＦ）、アルカリ土類フッ化物、遷移金属フッ化物（例えばＡｇＦ）、ジエチルアミノサルファートリフルオリド（ＤＡＳＴ）、モルホリノサルファートリフルオリド、アリールサルファトリフルオリド（arylsulfur trifluoride）、アミノサルファートリフルオリド、トリエチルアミントリハイドロフルオリド、又はＨＦ／ピリジン）が４ｇｅｎからの５ｇｅｎの調製においてＲ６ＯＨの代わりに用いられることを除いて、Ｃ２’エピＡｍＢの製造に関する上述の方法と類似している。Ｃ２’エピＦＡｍＢの製造方法は、Ｃ２’エピＡｍＢの製造方法における４ｇｅｎからの５ｇｅｎの調製の前後のいずれかにおいて、上述の１つ以上の他の工程のうちのいずれか１つをさらに含みうる。
【実施例】
【０２６９】
これまで本発明を詳細に説明してきたが、本発明は、単なる例証の目的で本明細書に含まれ、本発明の範囲を限定することは意図されていない、次の実施例を参照することによってさらに明確に理解されよう。
【０２７０】
実施例１  中間体１の合成
【化５７】
0006755859.tif 000058
２３℃において、３００ｍＬの丸底フラスコ内でＤＭＦ：ＭｅＯＨ（７５ｍＬ：７５ｍＬ）中、ＡｍＢ（４．０ｇ、４．３ｍｍｏｌ、１．０当量）の攪拌懸濁液に、ピリジン（５．０ｍＬ、５０．０ｍｍｏｌ、１１．５当量）及びａｌｌｏｃ−スクシンイミド（２．４ｇ、１２．０５ｍｍｏｌ、２．８当量）を加えた。２３℃で１６時間の攪拌後、濃橙色の均質な溶液を、急速攪拌するＥｔ２Ｏ（３．５Ｌ）内にゆっくり注いだ。黄色の懸濁液を、ワットマン紙Ｎｏ．４２の濾紙（直径１１０ｍｍ）に通して濾過し、Ｅｔ２Ｏ（３×１００ｍＬ）で洗浄後にケーキを完全に乾燥させた。完全に乾燥したａｌｌｏｃ−ＡｍＢの黄色粉末（４．３ｍｍｏｌ、定量的）を、さらに精製することなく、その後の反応に用いた。
【０２７１】
２３℃において、３００ｍＬの丸底フラスコ内でＤＭＦ：ＭｅＯＨ（１０：１）中、ａｌｌｏｃ−ＡｍＢ（４．０ｇ、４．３ｍｍｏｌ、１．０当量）の攪拌懸濁液に、ヒューニッヒ塩基（３．７５ｍＬ、２１．５ｍｍｏｌ、５．０当量）及び臭化アリル（１１．２ｍＬ、１２９．０ｍｍｏｌ、３０当量）を連続的に加えた。２３℃で８時間の攪拌後、濃橙色の均質な溶液を、急速攪拌するＥｔ２Ｏ：ヘキサン（１：１、３．５Ｌ）にゆっくりと注いだ。その後の黄色の懸濁液を、ワットマン紙Ｎｏ．４２の濾紙（直径１１０ｍｍ）に通して濾過し、Ｅｔ２Ｏ（３×１００ｍＬ）で洗浄後にケーキを完全に乾燥させた。完全に乾燥したａｌｌｏｃ−アリルエステル−ＡｍＢ（４．３ｍｍｏｌ、定量的）を、黄色粉末として、さらに精製することなく、その後の反応に用いた。
【０２７２】
２３℃において、３００ｍＬの丸底フラスコ内でＭｅＯＨ（３５ｍＬ、０．１Ｍ）中、ａｌｌｏｃ−アリルエステル−ＡｍＢ（４．３ｍｍｏｌ、１．０当量）の攪拌懸濁液に、アニスアルデヒドジメチルアセタール（４．０ｍＬ、２３．５ｍｍｏｌ、５．５当量）を加え、非常に細かい均一な懸濁液が形成されるまで、１０分間攪拌した。次に、白色の結晶性固体のＣＳＡ（２５０ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ、０．２５当量）を、一度に加えた。２３℃で３０分間の攪拌後、Ｅｔ３Ｎを加え（最大１６０μＬ）、その後、ＴＨＦ（８１ｍＬ、０．０３Ｍまで希釈するため）を加えた。その反応物を、急速攪拌するヘキサン（３．５Ｌ）にゆっくりと注いだ。その後の黄色の懸濁液を、ワットマン紙Ｎｏ．４２の濾紙（直径１１０ｍｍ）に通して濾過し、Ｅｔ２Ｏ（３×１００ｍＬ）で洗浄後にケーキを完全に乾燥させた。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、勾配溶出ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：ＭｅＯＨ  ５０：４９：１からＥｔＯＡｃ：ヘキサン：ＭｅＯＨ  ７５：２４：１まで）によって精製し、１（１．５６ｇ、１．２０４ｍｍｏｌ、２８％）を橙色の固体として得た。
【０２７３】
Ｒｆ＝０．２１（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：ＭｅＯＨ  ５０：４９：１）
1H NMR:(500 MHz, CD3C(O)CD3) δ 7.43(d, J=8.5 Hz, 2H), 7.38 - 7.33(m, 2H), 6.90 - 6.82(m, 4H), 6.48 - 6.18(m, 11H), 6.05 - 5.84(m, 3H), 5.59(dd, J=14.3, 9.3 Hz, 1H), 5.52(s, 1H), 5.46(s, 1H), 5.45 - 5.38(m, 1H), 5.28 - 5.22(m, 1H), 4.71 - 4.62(m, 3H), 4.60(d, J=7.0 Hz, 1H), 4.53(q, J=7.2, 4.6 Hz, 2H), 4.17(tt, J=10.4, 6.0 Hz, 2H), 3.95(dd, J=9.9, 6.9 Hz, 3H), 3.79(d, J=2.9 Hz, 7H), 3.77 - 3.66(m, 3H), 3.61(td, J=9.0, 3.2 Hz, 1H), 3.45(d, J=8.0 Hz, 1H), 3.39(p, J=6.8 Hz, 2H), 3.33(q, J=8.6 Hz, 3H), 3.08(s, 2H), 2.36 - 2.25(m, 3H), 1.96 - 1.88(m, 2H), 1.88 - 1.78(m, 3H), 1.73(dt, J=16.4, 8.1 Hz, 3H), 1.69 - 1.42(m, 8H), 1.41 - 1.21(m, 28H), 1.19(p, J=5.2 Hz, 4H), 1.13 - 1.08(m, 5H), 1.02(d, J=7.1 Hz, 4H), 0.95(d, J=6.6 Hz, 2H), 0.87(dt, J=12.0, 7.0 Hz, 22H)
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）
Ｃ７１Ｈ９５ＮＯ２１（Ｍ＋Ｎａ）＋の計算値：１３２０．６２９４
実測値：                               １３２０．６２８５
【０２７４】
実施例２  中間体２の合成
【化５８】
0006755859.tif 000059
中間体１（４．０６ｇ、３．１２７ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ベンゼン（３×１０ｍＬ）を用いて共沸乾燥し、高真空下で一晩、５００ｍＬの丸底フラスコ内に置いた。中間体１にＴＨＦ（１０５ｍＬ）を加え、その後、ＤＩＰＥＡ（０．８７ｍＬ、５．０ｍｍｏｌ、１．６当量）を加えた。別の２００ｍＬの丸底フラスコ内に、ＴＨＦ（６４ｍＬ）、ＤＭＡＰ（６１１．２ｍｇ、５．０ｍｍｏｌ、１．６当量）、及び一滴ずつのｐ−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイルクロリド（８５５μＬ、４．３８ｍｍｏｌ、１．４当量）を連続的に加え、細かい白色の懸濁液を形成した。この懸濁液のほとんどを、ＴＬＣによる判定で出発原料の大部分が変換されるまで、最長で５０分間にわたり、ＴＨＦ、ＤＩＰＥＡ及び１の溶液にカニューレによって一滴ずつゆっくりと加えた。反応をＥｔＯＡｃで希釈し、重炭酸ナトリウムの飽和水溶液を含む分液漏斗に移し、ＥｔＯＡｃを用いて抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、勾配溶出ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：ＭｅＯＨ  ６５：３３：２  定組成）によって精製し、２（２．２８ｇ、１．５６ｍｍｏｌ、収率５０％）を橙色の固体として得た。
【０２７５】
Ｒｆ＝０．２４（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：ＭｅＯＨ  ６５：３３：２）
1H NMR:(500 MHz, CD3C(O)CD3) δ 8.07 - 7.89(m, 2H), 7.64 - 7.48(m, 2H), 7.38(ddt, J=25.4, 8.0, 2.2 Hz, 4H), 6.86(ddd, J=9.5, 4.6, 2.4 Hz, 4H), 6.46 - 6.11(m, 10H), 6.10 - 5.96(m, 3H), 5.96 - 5.82(m, 3H), 5.82 - 5.65(m, 1H), 5.58(d, J=3.7 Hz, 1H), 5.52 - 5.38(m, 2H), 5.33 - 5.18(m, 1H), 5.11(td, J=9.2, 7.5, 3.9 Hz, 1H), 4.88(s, 0H), 4.73 - 4.56(m, 2H), 4.49(t, J=5.9 Hz, 1H), 4.24 - 4.10(m, 1H), 4.01 - 3.82(m, 2H), 3.82 - 3.75(m, 4H), 3.75 - 3.63(m, 1H), 3.59(td, J=9.6, 6.1 Hz, 1H), 3.56 - 3.46(m, 1H), 3.45 - 3.34(m, 1H), 2.85(s, 1H), 2.60(s, 1H), 2.45 - 2.35(m, 1H), 2.35 - 2.23(m, 1H), 2.02 - 1.94(m, 1H), 1.91 - 1.82(m, 1H), 1.80 - 1.40(m, 6H), 1.36(d, J=3.6 Hz, 8H), 1.32 - 1.26(m, 3H), 1.22 - 1.15(m, 2H), 1.12(d, J=6.7 Hz, 2H), 1.01(d, J=7.1 Hz, 2H)
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）
Ｃ８２Ｈ１０７ＮＯ２２（Ｍ＋Ｎａ）＋の計算値：１４８０．７１８２
実測値：                                １４８０．７１７２
【０２７６】
実施例３  中間体３の合成
【化５９】
0006755859.tif 000060
中間体２（４．１５ｇ、２．８４６ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ベンゼン（３×１０ｍＬ）とともに共沸乾燥し、高真空下で一晩、３００ｍＬの丸底フラスコ内に置いた。中間体３にＤＣＭ（４８ｍＬ）及びヘキサン（４８ｍＬ）を加え、続いて、新たに蒸留した２，６−ルチジン（２．９８ｍＬ、２５．５８ｍｍｏｌ、９．１当量）を加え、０℃まで冷却した。ジエチルイソプロピルシリルトリフラート（ＤＥＩＰＳＯＴｆ；３．３９ｍＬ、１７．０５ｍｍｏｌ、６．０当量）を、１０分間かけて一滴ずつ加え、０℃でさらに１時間攪拌した。反応をＥｔ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈し、Ｅｔ２Ｏ及び重炭酸塩の飽和水溶液を含む分液漏斗に移し、Ｅｔ２Ｏで抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、勾配溶出  ＥｔＯＡｃ：ヘキサン  １：９からＥｔＯＡｘ：ヘキサン  １：４まで）によって精製し、３（４．４６ｇ、２．２８ｍｍｏｌ、収率８０％）を橙色の固体として得た。
【０２７７】
Ｒｆ＝０．２１（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン  １：４）
1H NMR:(500 MHz, CD3C(O)CD3) δ 8.07 - 7.95(m, 2H), 7.65 - 7.54(m, 2H), 7.37 - 7.31(m, 4H), 6.94 - 6.81(m, 6H), 6.41 - 6.32(m, 5H), 6.32 - 6.24(m, 3H), 6.20 - 6.13(m, 3H), 6.10 - 5.84(m, 4H), 5.72(ddd, J=21.6, 15.2, 6.4 Hz, 2H), 5.52(d, J=3.3 Hz, 1H), 5.45(q, J=1.6 Hz, 0H), 5.41(d, J=10.3 Hz, 3H), 5.34(dt, J=10.3, 1.4 Hz, 1H), 5.27(dq, J=17.3, 1.8 Hz, 1H), 5.13(dq, J=10.4, 1.5 Hz, 1H), 4.91(d, J=1.1 Hz, 1H), 4.75(s, 1H), 4.71 - 4.62(m, 2H), 4.62 - 4.55(m, 2H), 4.52(dt, J=5.6, 1.6 Hz, 2H), 4.33 - 4.25(m, 1H), 4.19 - 4.08(m, 1H), 4.07 - 3.94(m, 1H), 3.93 - 3.81(m, 3H), 3.81 - 3.73(m, 10H), 3.72 - 3.60(m, 4H), 3.51(dq, J=8.8, 6.1 Hz, 1H), 2.75(s, 3H), 2.53 - 2.39(m, 2H), 2.27(dd, J=17.7, 4.4 Hz, 1H), 2.23 - 2.11(m, 2H), 2.09(s, 7H), 1.99 - 1.94(m, 1H), 1.89(ddt, J=12.5, 8.0, 3.9 Hz, 1H), 1.78 - 1.56(m, 5H), 1.56 - 1.41(m, 4H), 1.37(d, J=3.4 Hz, 14H), 1.32 - 1.21(m, 6H), 1.21 - 1.11(m, 7H), 1.09(d, J=6.8 Hz, 3H), 1.07 - 0.76(m, 79H), 0.76 - 0.65(m, 12H), 0.61 - 0.49(m, 7H), 0.43(dqd, J=14.1, 7.9, 1.7 Hz, 5H)
13C NMR:(126 MHz, CD3C(O)CD3) δ 172.60, 170.01, 166.28, 160.93, 160.80, 157.48, 157.01, 138.66, 135.17, 134.93, 134.66, 134.40, 134.27, 134.01, 133.67, 133.05, 132.92, 132.79, 132.29, 131.26, 130.93, 130.90, 129.29, 129.12, 128.87, 128.47, 127.24, 126.28, 119.43, 117.28, 114.09, 114.08, 113.99, 102.02, 101.18, 100.78, 96.73, 81.57, 75.89, 75.03, 74.97, 74.17, 73.14, 73.02, 72.98, 68.92, 66.82, 65.95, 65.84, 58.56, 57.01, 55.68, 48.58, 43.99, 42.91, 41.29, 38.08, 36.90, 35.90, 33.75, 32.97, 31.64, 30.77, 28.14, 19.27, 18.24, 18.19, 18.07, 18.01, 17.70, 17.68, 14.19, 14.17, 14.03, 13.76, 7.94, 7.90, 7.82, 7.77, 7.72, 7.71, 7.48, 7.36, 5.21, 5.10, 4.94, 4.89, 4.69, 4.44
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）
Ｃ１１０Ｈ１７１ＮＯ２２（Ｍ＋Ｎａ）＋の計算値：１９９３．１２６８
実測値：                                 １９９３．１１８９
【０２７８】
実施例４  中間体４の合成
【化６０】
0006755859.tif 000061
中間体３（６．３９ｇ、３．２４ｍｍｏｌ、１．０当量）をベンゼン（３×１０ｍＬ）とともに共沸乾燥し、高真空下で一晩、３００ｍＬの丸底フラスコ内に置いた。中間体３にＴＨＦ（７１ｍＬ）及びＭｅＯＨ（１４０ｍＬ）を加え、続いてＫＣＮ（３１４．８ｍｇ、４．８３ｍｍｏｌ、１．５当量）を加え、Ａｒ雰囲気下に置き、密封し、４０℃まで温め、ブラスト・シールド内で４８時間攪拌した。反応を、Ｅｔ２Ｏ及び重炭酸塩の飽和水溶液を含む分液漏斗に移した。有機相を水で洗浄し、続いてブラインで洗浄した。合わせた水相をＥｔ２Ｏで抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、勾配溶出  ＥｔＯＡｃ：ヘキサン  １：９からＥｔＯＡｘ：ヘキサン  １：４まで）によって精製し、４（２．９３ｇ、１．６２ｍｍｏｌ、収率５０％）を橙色の固体として得た。
【０２７９】
Ｒｆ＝０．２２（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン  ３：７）
1H NMR:(500 MHz, CD3C(O)CD3) δ 7.43 - 7.30(m, 5H), 6.92 - 6.79(m, 5H), 6.48 - 6.14(m, 12H), 6.11(dd, J=15.0, 10.0 Hz, 1H), 6.03 - 5.89(m, 3H), 5.88 - 5.73(m, 2H), 5.43(d, J=3.6 Hz, 3H), 5.37(dq, J=21.8, 1.6 Hz, 1H), 5.33 - 5.26(m, 2H), 5.17(dq, J=10.6, 1.5 Hz, 1H), 4.79(s, 1H), 4.71 - 4.48(m, 7H), 4.27(td, J=10.6, 4.7 Hz, 1H), 4.21 - 4.11(m, 1H), 3.95 - 3.82(m, 4H), 3.79(s, 4H), 3.78(s, 4H), 3.77 - 3.63(m, 6H), 3.54(t, J=9.2 Hz, 1H), 3.38 - 3.26(m, 1H), 2.49(dd, J=17.6, 7.6 Hz, 1H), 2.43(q, J=7.1 Hz, 1H), 2.32 - 2.24(m, 3H), 1.96(s, 3H), 1.94 - 1.86(m, 2H), 1.82 - 1.67(m, 3H), 1.66 - 1.57(m, 2H), 1.58 - 1.27(m, 7H), 1.26(d, J=6.1 Hz, 4H), 1.23 - 1.10(m, 8H), 1.10 - 0.86(m, 58H), 0.86 - 0.76(m, 15H), 0.70(tdt, J=8.2, 4.4, 2.9 Hz, 11H), 0.63 - 0.48(m, 5H), 0.48 - 0.36(m, 4H)
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）
Ｃ９９Ｈ１５９ＮＯ２１（Ｍ＋Ｎａ）＋の計算値：１８３３．０３７９
実測値：                                １８３３．０３５５
【０２８０】
実施例５  中間体５の合成
【化６１】
0006755859.tif 000062
中間体４（２．９３ｇ、１．６２ｍｍｏｌ、１．０当量）をベンゼン（３×１０ｍＬ）とともに共沸乾燥し、高真空下で一晩、２５０ｍＬの丸底フラスコ内に置いた。中間体４に、ｐ−ニトロ安息香酸（１．６２ｇ、９．７ｍｍｏｌ、６．０当量）、ＰＰｈ３（２．５４ｍｇ、９．７ｍｍｏｌ、６．０当量）及びベンゼン（５４ｍＬ）を加えた。溶液を０℃まで冷却し、ＤＩＡＤ（１．９１ｍＬ、９．７ｍｍｏｌ、６．０当量）を一滴ずつ加え、０℃で１時間、攪拌した。次に、反応を２３℃で３時間攪拌した。反応を、Ｅｔ２Ｏ及び重炭酸ナトリウムの飽和水溶液を含む分液漏斗に移した。有機相を水で洗浄し、続いてブラインで洗浄した。合わせた水相をＥｔ２Ｏで抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、勾配溶出  ＥｔＯＡｃ：ヘキサン  １：９からＥｔＯＡｘ：ヘキサン  １：４まで）によって精製し、Ｃ２’エピニトロベンゾエート  ５（２．６６ｇ、１．３６ｍｍｏｌ、収率８４％）を橙色の固体として得た。
【０２８１】
Ｒｆ＝０．２（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン  １：４）
1H NMR:(500 MHz, CD3C(O)CD3) δ 8.37(s, 4H), 7.37 - 7.30(m, 4H), 6.89 - 6.81(m, 5H), 6.50(d, J=9.8 Hz, 1H), 6.45 - 6.09(m, 15H), 6.07 - 5.95(m, 1H), 5.86(ddd, J=19.1, 14.5, 5.8 Hz, 2H), 5.67(ddt, J=17.3, 10.6, 5.4 Hz, 1H), 5.47 - 5.39(m, 2H), 5.35(s, 1H), 5.30(dq, J=10.4, 1.3 Hz, 1H), 5.15(dd, J=10.4, 7.9 Hz, 1H), 5.08(dq, J=17.2, 1.7 Hz, 1H), 4.92(dq, J=10.5, 1.4 Hz, 1H), 4.82(d, J=7.8 Hz, 1H), 4.79 - 4.69(m, 2H), 4.61(qdt, J=13.1, 6.0, 1.4 Hz, 3H), 4.33(qdt, J=13.6, 5.4, 1.5 Hz, 2H), 4.18 - 4.09(m, 1H), 3.97(td, J=10.6, 4.6 Hz, 1H), 3.90 - 3.81(m, 3H), 3.77(d, J=2.9 Hz, 8H), 3.75 - 3.63(m, 7H), 3.52(dq, J=9.0, 6.1 Hz, 1H), 2.69(s, 3H), 2.53 - 2.39(m, 2H), 2.34 - 2.21(m, 1H), 2.19 - 2.07(m, 2H), 2.04 - 1.98(m, 1H), 1.88(dddd, J=12.9, 10.2, 6.6, 3.8 Hz, 1H), 1.79(d, J=15.5 Hz, 1H), 1.76 - 1.64(m, 2H), 1.61(dt, J=13.0, 2.5 Hz, 1H), 1.56 - 1.40(m, 5H), 1.37 - 1.24(m, 14H), 1.23 - 1.12(m, 8H), 1.10 - 0.95(m, 45H), 0.94 - 0.84(m, 19H), 0.84 - 0.76(m, 13H), 0.74 - 0.60(m, 15H), 0.53(dqd, J=26.8, 7.8, 3.2 Hz, 5H), 0.42 - 0.28(m, 5H)
13C NMR:(126 MHz, CD3C(O)CD3) δ 173.00, 170.05, 164.87, 160.93, 160.79, 157.06, 151.67, 138.05, 136.54, 134.87, 134.73, 134.64, 134.56, 134.45, 134.16, 133.82, 133.65, 133.35, 132.91, 132.75, 132.48, 132.40, 131.84, 130.96, 128.86, 128.47, 127.65, 124.39, 119.57, 117.11, 114.07, 113.98, 101.97, 101.21, 100.71, 98.47, 81.53, 76.09, 76.00, 75.09, 74.92, 73.67, 73.04, 72.94, 68.84, 66.84, 66.12, 65.56, 59.60, 58.12, 55.66, 55.12, 48.39, 43.94, 42.99, 41.32, 38.08, 36.35, 33.68, 32.96, 28.21, 22.01, 18.87, 18.20, 18.14, 18.00, 17.98, 17.93, 17.62, 17.60, 14.15, 14.12, 14.02, 13.67, 7.90, 7.86, 7.76, 7.73, 7.69, 7.66, 7.36, 5.15, 5.06, 4.93, 4.91, 4.88, 4.63, 4.36
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）
Ｃ１０６Ｈ１６２Ｎ２Ｏ２４Ｓｉ４（Ｍ＋Ｎａ）＋の計算値：１９８２．０４９２
実測値：                                        １９８２．０４６４
【０２８２】
実施例６  中間体６の合成
【化６２】
0006755859.tif 000063
中間体５（２．４６ｇ、１．２５ｍｍｏｌ、１．０当量）をベンゼン（３×１０ｍＬ）とともに共沸乾燥し、高真空下で一晩、２５０ｍＬのｉＣｈｅｍ内に置いた。中間体５にＴＨＦ（２７．３ｍＬ）及びＭｅＯＨ（５４．６ｍＬ）を加え、続いてＫＣＮ（１２１．８ｍｇ、１．８７μｍｏｌ、１．５当量）を加え、Ａｒ雰囲気下に置き、密封し、４０℃まで温め、ブラスト・シールド内で４８時間攪拌した。反応を、Ｅｔ２Ｏ及び重炭酸塩の飽和水溶液を含む分液漏斗に移した。有機相を水で洗浄し、続いてブラインで洗浄した。合わせた水相をＥｔ２Ｏで抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、勾配溶出  ＥｔＯＡｃ：ヘキサン  １：９からＥｔＯＡｘ：ヘキサン  １：４まで）による精製によって６（１．７２ｇ、０．９４８ｍｍｏｌ、収率７６％）を橙色の固体として得た。
【０２８３】
Ｒｆ＝０．２（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン  ３：７）
1H NMR:(500 MHz, CD3C(O)CD3) δ 7.43 - 7.32(m, 4H), 6.87(ddd, J=13.9, 8.9, 2.1 Hz, 4H), 6.47 - 6.15(m, 13H), 6.10(dd, J=15.1, 10.0 Hz, 1H), 6.06 - 5.82(m, 3H), 5.78(dd, J=15.1, 8.6 Hz, 1H), 5.43(d, J=6.0 Hz, 3H), 5.36(dt, J=31.2, 1.6 Hz, 1H), 5.31 - 5.25(m, 1H), 5.16(dt, J=10.7, 1.5 Hz, 1H), 4.81(s, 1H), 4.66 - 4.55(m, 3H), 4.51(td, J=4.9, 3.9, 1.5 Hz, 2H), 4.37(d, J=6.5 Hz, 1H), 4.33 - 4.23(m, 1H), 4.22 - 4.12(m, 1H), 4.01 - 3.82(m, 3H), 3.79(d, J=1.8 Hz, 3H), 3.78(d, J=1.9 Hz, 3H), 3.76 - 3.66(m, 4H), 3.43(tt, J=9.2, 3.9 Hz, 3H), 3.34(h, J=6.3 Hz, 1H), 3.05(d, J=1.9 Hz, 3H), 2.49(dd, J=17.6, 7.7 Hz, 1H), 2.46 - 2.38(m, 1H), 2.27(dt, J=14.3, 4.6 Hz, 3H), 2.09(d, J=1.6 Hz, 4H), 2.01 - 1.93(m, 1H), 1.93 - 1.85(m, 2H), 1.85 - 1.77(m, 1H), 1.73(q, J=10.2, 9.4 Hz, 1H), 1.68 - 1.38(m, 7H), 1.31(q, J=10.9 Hz, 5H), 1.24(t, J=5.4 Hz, 4H), 1.22 - 1.16(m, 6H), 1.10 - 0.86(m, 52H), 0.86 - 0.75(m, 14H), 0.69(dddd, J=13.6, 11.6, 8.0, 3.8 Hz, 10H), 0.63 - 0.49(m, 4H), 0.49 - 0.34(m, 4H)
13C NMR:(126 MHz, CD3C(O)CD3) δ 173.37, 170.15, 160.95, 160.81, 157.34, 137.97, 134.87, 134.84, 134.77, 134.74, 134.35, 134.15, 133.96, 133.77, 133.56, 133.36, 132.90, 132.78, 132.42, 131.08, 129.69, 128.90, 128.50, 119.55, 117.30, 114.08, 114.01, 103.12, 102.07, 101.27, 100.90, 81.60, 76.29, 76.20, 75.23, 74.59, 73.32, 73.28, 72.97, 69.07, 67.63, 66.27, 65.64, 61.38, 57.67, 55.66, 48.58, 44.14, 43.33, 41.41, 38.08, 37.66, 33.73, 32.93, 30.76, 28.33, 19.26, 19.11, 18.21, 18.14, 18.05, 18.02, 18.00, 17.69, 17.67, 14.15, 14.04, 13.72, 7.90, 7.87, 7.80, 7.78, 7.75, 7.71, 7.47, 7.45, 5.18, 5.06, 5.02, 4.96, 4.90, 4.88, 4.66, 4.43
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）
Ｃ９９Ｈ１５９ＮＯ２１Ｓｉ４（Ｍ＋Ｎａ）＋の計算値：１８３３．０３７９
実測値：                                      １８３３．０３０９
【０２８４】
実施例７  中間体７の合成
【化６３】
0006755859.tif 000064
０℃においてＭｅＯＨ（１４．５ｍＬ）を入れた３０ｍＬのテフロン（登録商標）バイアルにＨＦ−ピリジンの７０％溶液（２．０５ｍＬ）を加えた。６（１．０５ｇ、０．６５ｍｍｏｌ）を共沸乾燥した固体として含む別の１００ｍＬの「テフロン」バイアルにＴＨＦ（７．２ｍＬ）を入れ、０℃まで冷却した。最初のバイアルの内容物を、２０分間かけて、第２のバイアルにカニューレによってゆっくりと移した。この時点で氷浴を取り除き、反応を２３℃で６時間、攪拌した。完了後、反応を、０℃まで冷却し、重炭酸ナトリウムの飽和水溶液（６０ｍＬ）のゆっくりとした添加によってクエンチし、２３℃まで１時間、温めた。次に、二相性の懸濁液を、重炭酸ナトリウムの飽和水溶液及びＥｔＯＡｃを含む分液漏斗に移した。合わせた有機相を、Ｈ２Ｏ、飽和ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、勾配溶出  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ  ４９：１からＤＣＭ：ＭｅＯＨ  ９７：３を経てＤＣＭ：ＭｅＯＨ  １９：１まで）によって精製し、７（５７４ｍｇ、０．４４２ｍｍｏｌ、収率６８％）を橙色の固体として得た。
【０２８５】
Ｒｆ＝０．２（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ  １９：１）
1H NMR:(500 MHz, アセトン-d6) δ 7.48 - 7.32(m, 5H), 6.91 - 6.81(m, 5H), 6.35(dddd, J=53.1, 19.0, 13.1, 8.3 Hz, 18H), 6.06 - 5.87(m, 3H), 5.60(p, J=8.4, 7.5 Hz, 1H), 5.54 - 5.38(m, 3H), 5.35 - 5.20(m, 3H), 5.19 - 5.11(m, 1H), 4.70 - 4.56(m, 4H), 4.52(d, J=5.4 Hz, 3H), 4.38(d, J=7.5 Hz, 2H), 4.27 - 4.08(m, 3H), 4.10 - 3.90(m, 3H), 3.89 - 3.83(m, 1H), 3.77(d, J=3.6 Hz, 9H), 3.56(d, J=5.6 Hz, 1H), 3.52 - 3.33(m, 6H), 3.22 - 3.13(m, 1H), 3.08(s, 3H), 2.59(dt, J=14.5, 7.3 Hz, 1H), 2.36(tdd, J=27.1, 16.2, 7.3 Hz, 5H), 2.09(s, 1H), 2.07 - 1.99(m, 2H), 1.97(s, 1H), 1.96 - 1.82(m, 3H), 1.83 - 1.64(m, 3H), 1.62 - 1.56(m, 1H), 1.38(d, J=11.8 Hz, 1H), 1.28 - 1.19(m, 8H), 1.15(d, J=6.4 Hz, 4H), 1.04(d, J=7.0 Hz, 4H)
13C NMR:(126 MHz, アセトン) δ 206.32, 173.28, 170.86, 169.77, 160.51, 160.43, 158.26, 150.38, 137.62, 137.01, 134.35, 134.24, 134.18, 134.06, 133.88, 133.77, 133.42, 133.05, 132.81, 132.57, 132.51, 132.32, 130.13, 128.29, 128.24, 128.19, 124.55, 118.50, 117.18, 114.18, 113.87, 102.86, 101.05, 100.73, 100.55, 81.03, 77.97, 76.51, 76.34, 75.25, 73.92, 73.25, 73.19, 72.92, 70.58, 67.58, 67.10, 65.74, 65.67, 60.88, 60.46, 56.96, 55.45, 48.64, 43.54, 42.66, 41.80, 41.47, 37.89, 37.66, 33.85, 33.34, 30.58, 28.76, 23.21, 20.80, 18.99, 18.34, 17.60, 14.44, 14.32, 11.97
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）
Ｃ７１Ｈ９５ＮＯ２１（Ｍ＋Ｎａ）＋の計算値：１３２０．６２７４
実測値：                               １３２０．６２９４
【０２８６】
実施例８  中間体８の合成
【化６４】
0006755859.tif 000065
７（４７３ｍｇ、０．３６４ｍｍｏｌ、１．０当量）を入れた４０ｍＬのｉＣｈｅｍバイアルに、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１２６ｍｇ、０．１０９ｍｍｏｌ、０．３当量）、チオサリチル酸（１１２ｍｇ、０．７２６ｍｍｏｌ、２．０当量）をグローブボックス内で加え、密封した。次に、グローブボックスの外で、２３℃でＤＭＦ（１４．７ｍＬ）を加え、１時間攪拌した。次いで、反応を、攪拌しているＥｔ２Ｏ（３００ｍＬ）に一滴ずつ加えた。次に、得られた黄色の沈殿物を、ワットマン紙Ｎｏ．５０濾紙に通して濾過し、過剰のＥｔ２Ｏですすいだ。次に、濾液を濃縮し、攪拌しているＥｔ２Ｏ（１５０ｍＬ）にゆっくりと加えた。このプロセスを、沈殿物がすべて回収されるまで繰り返した。分析的ＨＰＬＣによる単一ピークとしての橙黄色の固体中間体８（３９７．４ｍｇ、０．３３９ｍｍｏｌ、９３％）を、さらに精製することなく、次の反応に使用した。
【０２８７】
Ｒｔ＝１５．９分間（Ｃ１８ＳｉＯ２，ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏ  ５：９５→９５：５，  ５ｍＭ  ＮＨ４ＯＡｃ，  １ｍＬ／分で２０分間）
1H NMR:(500 MHz, メタノール-d4) δ 7.51 - 7.39(m, 4H), 6.84 - 6.75(m, 4H), 6.32(dddd, J=36.2, 31.5, 17.4, 9.9 Hz, 13H), 6.01(dd, J=14.5, 6.0 Hz, 1H), 5.57(s, 1H), 5.52(q, J=4.5 Hz, 2H), 5.40 - 5.35(m, 1H), 5.30(s, 18H), 4.81 - 4.74(m, 1H), 4.72(d, J=7.5 Hz, 1H), 4.47(td, J=10.7, 4.6 Hz, 1H), 4.36 - 4.27(m, 2H), 4.08 - 4.00(m, 1H), 3.86 - 3.72(m, 2H), 3.69 - 3.54(m, 9H), 3.47 - 3.35(m, 3H), 3.33(dq, J=3.1, 1.4 Hz, 7H), 3.09(d, J=0.9 Hz, 3H), 2.64(dd, J=16.8, 6.6 Hz, 1H), 2.52(dd, J=13.1, 4.6 Hz, 1H), 2.49 - 2.37(m, 2H), 2.34(dd, J=16.9, 6.1 Hz, 1H), 2.15 - 2.04(m, 1H), 2.02 - 1.83(m, 5H), 1.70(q, J=11.7 Hz, 1H), 1.61 - 1.52(m, 4H), 1.44 - 1.36(m, 1H), 1.33(d, J=6.0 Hz, 3H), 1.28(dd, J=12.9, 10.4 Hz, 1H), 1.22(d, J=6.3 Hz, 3H), 1.15(d, J=6.4 Hz, 4H), 1.12 - 1.08(m, 1H), 1.06(d, J=7.0 Hz, 3H)
13C NMR:(126 MHz, CD3OD) δ 179.76, 170.66, 160.94, 160.80, 135.39, 135.30, 134.42, 134.30, 134.16, 134.40, 133.98, 133,54, 133.45, 132.89, 132.78, 132.67, 131.25, 128.72, 128.59, 114.22, 114.17, 102.51, 101.69, 101.26, 101.14, 81.52, 78.40, 77.94, 77.00, 74.38, 73.37, 73.66, 73.49, 72.28, 71.21, 68.59, 67.89, 60.19, 59.72, 55.62, 55.60, 41.82, 38.22, 33.80, 19.31, 18.29, 17.75, 12.37
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）
Ｃ６４Ｈ８８ＮＯ１９の計算値：１１７４．５９４１
実測値：                  １１７４．５９５１
【０２８８】
実施例９  Ｃ２’エピＡｍＢの合成
【化６５】
0006755859.tif 000066
共沸乾燥した８（１９７ｍｇ、０．１６８ｍｍｏｌ、１．０当量）を含む３００ｍＬの丸底フラスコに、ＭｅＣＮ（１６０ｍＬ）及び脱イオン水（８．０ｍＬ）を加えた。次に、懸濁液を０℃まで冷却してすぐに、ＣＳＡ（５．８５ｇ、２５．２ｍｍｏｌ、１５０ｍＭ）を一度に加えた。ＣＳＡを添加すると、黄橙色の懸濁液が黄橙色の透明溶液となった。時間経過とともに細かい沈殿物が生じる。０℃で３時間攪拌した後、トリエチルアミン（７．０３ｍＬ、５０．４ｍｍｏｌ、３００当量）を加えた。次に、反応を、ある程度濃縮し、分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８ＳｉＯ２、ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏ  ５：９５→９５：５、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＡｃ、１ｍＬ／分で２０分間）によって精製し、Ｃ２’エピＡｍＢ（３５．１ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ、収率２１％）を凍結乾燥した自由流動性の黄色粉末として得た。
【０２８９】
Ｒｆ＝１１．１７分間（Ｃ１８ＳｉＯ２、分析的ＨＰＬＣ、ＭｅＣＮ：ＮＨ４ＯＡｃ  ５：９５から９５：５まで（５ｍＭ）、１ｍＬ／分で２０分間）
1H NMR:(500 MHz, CD3S(O)CD3) δ 6.55 - 6.03(m, 10H), 5.97(dd, J=15.5, 8.7 Hz, 1H), 5.75(d, J=10.9 Hz, 1H), 5.44(dd, J=15.0, 10.1 Hz, 1H), 5.34(s, 1H), 5.21(d, J=7.9 Hz, 1H), 4.89 - 4.71(m, 3H), 4.62(d, J=5.7 Hz, 1H), 4.41(d, J=6.3 Hz, 1H), 4.39 - 4.30(m, 2H), 4.25(t, J=10.5 Hz, 2H), 4.06(s, 1H), 3.91(d, J=10.4 Hz, 1H), 3.49(d, J=31.6 Hz, 2H), 3.17 - 3.04(m, 2H), 3.04 - 2.84(m, 2H), 2.66(d, J=11.9 Hz, 1H), 2.40(s, 1H), 2.28(dd, J=14.6, 7.5 Hz, 1H), 2.17(t, J=8.5 Hz, 2H), 2.05 - 1.68(m, 5H), 1.65 - 1.47(m, 5H), 1.47 - 1.29(m, 7H), 1.24(q, J=5.6, 4.6 Hz, 6H), 1.20 - 1.08(m, 6H), 1.04(t, J=7.4 Hz, 3H), 0.91(d, J=7.1 Hz, 3H), 0.86(td, J=7.1, 4.2 Hz, 1H)
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）
Ｃ４７Ｈ７３ＮＯ１７（Ｍ＋Ｈ）＋の計算値：９２４．４９５７
実測値：                             ９２４．４９６０
【０２９０】
実施例１０  Ｃ２’エピＡｍＢはエルゴステロールには結合するがコレステロールには結合しない
Ｃ２’エピＡｍＢの結合能を調査し、Ｃ２’におけるエピマー化がＡｍＢのエルゴステロール結合能に影響を与えるか否かを判定した。Ｃ２’エピＡｍＢは、結合アッセイの範囲内では、エルゴステロールには結合するが、コレステロールには結合しない。
【０２９１】
Ｃ２’エピＡｍＢのＩＴＣデータは次の通りである：
ステロールなし：        総発熱量＝−６．７０±０．１１μｃａｌ
１０％エルゴステロール：総発熱量＝−１５．２４±１．６６μｃａｌ
１０％コレステロール：  総発熱量＝−６．４３±２．８０μｃａｌ
結合アッセイを行う典型的な方法を以下に説明する。
【０２９２】
等温滴定型熱量測定（ＩＴＣ）
最適化された等温滴定型熱量測定（ＩＴＣ）に基づいたアッセイにおいて、ＡｍＢの水溶液を、１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＰＯＰＣ）のみで構成される大型単層小胞（ＬＵＶ）の懸濁液で滴定し、正味の発熱量を記録した。１０％のエルゴステロールを含むＰＯＰＣのＬＵＶを使用して、滴定を繰り返した。エルゴステロール含有ＬＵＶに切り替えた場合には、正味の発熱量のかなりの増加が観察され、これは、直接的なＡｍＢ−ステロール結合相互作用を示唆している。Ｃ２’エピＡｍＢを使用して、滴定を繰り返した。正味の発熱量のかなりの増加により、エピマー誘導体のエルゴステロールに結合する能力の保持が示唆された。エルゴステロールの代わりにコレステロールを用いたＩＴＣアッセイも行った。Ｃ２’エピＡｍＢでは、コレステロールに対する結合は見られなかった。
【０２９３】
一般情報
実験は、ＮａｎｏＩＴＣ等温滴定型熱量計（ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社、米国デラウェア州ウィルミントン所在）を使用して行われた。試験される化合物の溶液は、ＤＭＳＯ中、化合物の６０．０ｍＭ原液をＫバッファー（５．０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／ＫＨＥＰＥＳ、ｐＨ＝７．４）で６００μＭまで希釈することによって調製された。溶液中の最終ＤＭＳＯ濃度は１％ｖ／ｖであった。１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＰＯＰＣ  ＬＵＶ）のみで構成される大型単層小胞を調製し、リン及びエルゴステロール含量を、後述するように定量した。ＬＵＶ溶液を、バッファー及びＤＭＳＯで希釈し、１％ＤＭＳＯ／Ｋバッファー溶液中、１２．０ｍＭの最終リン脂質濃度を得た。使用直前に、すべての溶液を、３７℃で３０分間インキュベートし、真空下、３７℃で１０分間、脱気した。機器の基準セル（容積＝０．１９０ｍＬ）に１％ｖ／ｖのＤＭＳＯ／Ｋバッファーの溶液を充填した。
【０２９４】
ＬＵＶの調製
パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）を、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ社（米国アラバマ州アラバスター所在）から、ＣＨＣｌ３中、２０ｍｇ／ｍＬの溶液として入手し、乾燥アルゴン雰囲気下、−２０℃で保管し、１カ月以内に使用した。ＣＨＣｌ３中、４ｍｇ／ｍＬのエルゴステロール溶液を毎月調製し、乾燥アルゴン雰囲気下、４℃で保管した。脂質膜の調製の前に、溶液を周囲温度まで温め、結露による溶液の汚染を防いだ。１３×１００ｍｍの試験管に、８００μＬのＰＯＰＣと２３０μＬのエルゴステロール溶液を入れた。コレステロール含有リポソームについては、１３×１００ｍｍの試験管に８００μＬのＰＯＰＣと２２４μＬのコレステロール溶液を入れた。ステロールを含まないリポソームについては、１３×１００ｍｍの試験管に８００μＬのＰＯＰＣを入れた。窒素の緩やかな流れを用いて溶媒を除去し、得られた脂質膜を、使用前に、高真空下で最低でも８時間、保管した。次に、膜を、１ｍＬのＫバッファーで水和し、およそ３分間、強くボルテックス攪拌して多層小胞（ＭＬＶ）の懸濁液を形成した。得られた脂質懸濁液を、Ｈａｍｉｌｔｏｎ社（米国ネバダ州リノ所在）の１ｍＬガスタイトシリンジ内に引き込み、シリンジをＡｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ社のＭｉｎｉ−Ｅｘｔｒｕｄｅｒ内に設置した。次に、脂質溶液を、０．２０μｍのＭｉｌｌｉｐｏｒｅ社（米国マサチューセッツ州ビレリカ所在）のポリカーボネートフィルタに２１回通し、新たに形成された大型単層小胞（ＬＵＶ）懸濁液を、ＬＵＶ溶液内へのＭＬＶのキャリーオーバーを避けるために元々のＭＬＶ懸濁液を含まないシリンジ内に回収した。
【０２９５】
リン含量の決定
リンの総量の決定は、Ｃｈｅｎ及び同僚の報告を出典とした（Chen, PS et al. (1956) Anal. Chem. 28:1756）。ＬＵＶ溶液をＫバッファーで１０倍に希釈し、希釈ＬＵＶ懸濁液の３つの１０μＬ試料を、３つの別々の７ｍＬバイアルに加えた。その後、Ｎ２流を用いて溶媒を除去した。各乾燥したＬＵＶ膜と、ブランクとして用いた脂質を含まない第４のバイアルとに、４５０μＬの８．９Ｍ  Ｈ２ＳＯ４を加えた。４つの試料を、２２５℃のアルミニウム加熱ブロック内の周囲雰囲気に開かれた環境で２５分間インキュベートし、次に、２３℃の温度環境へと取り出し、５分間冷却した。冷却後、１５０μＬの３０％ｗ／ｖの過酸化水素水溶液を各試料に加え、バイアルを２２５℃の加熱ブロックに３０分間戻した。次に、試料を２３℃の温度環境へと取り出し、５分間冷却した後、３．９ｍＬの水を添加した。次いで、５００μＬの２．５％ｗ／ｖモリブデン酸アンモニウムを各バイアルに加え、次に、得られた混合物に、短時間かつ強いボルテックス攪拌を５回行った。その後、５００μＬの１０％ｗ／ｖのアスコルビン酸を各バイアルに加え、得られた混合物に、次に、短時間かつ強いボルテックス攪拌を５回行った。バイアルをＰＴＦＥで内張りしたキャップで囲み、１００℃のアルミニウム加熱ブロック内に７分間、置いた。試料を２３℃の温度環境へと取り出し、およそ１５分間冷却した後、ＵＶ／Ｖｉｓ分光法によって分析した。８２０ｎｍでの吸光度を観察し、この値を、この方法を通じて得られた標準曲線及び既知濃度の標準的なリン溶液と比較することによって、リンの総量を決定した。
【０２９６】
エルゴステロール含量の決定
エルゴステロール含量を分光光度的に決定した。５０μＬ量のＬＵＶの懸濁液を、４５０μＬのヘキサン：イソプロパノール：水  ２：１８：９  （ｖ／ｖ／ｖ）に加えた。３つの別個の試料を調製し、次に、およそ１分間、強くボルテックス攪拌した。次いで、溶液をＵＶ／Ｖｉｓ分光法で分析し、溶液中のエルゴステロール濃度を、２８２ｎｍのＵＶｍａｘで１０４００Ｌ  ｍｏｌ−１ｃｍ−１の消衰係数によって決定し、リンの濃度と比較して、ステロール含量の割合を決定した。消衰係数を、上記３元溶媒系において別個に決定した。この方法で調製したＬＵＶは、７〜１４％のエルゴステロールを含んでいた。
【０２９７】
滴定実験
２５℃における当該化合物の６００μＭ溶液を含む試料セル（容積＝０．１９１ｍＬ）内に、周囲温度でＬＵＶ懸濁液を注入することによって、滴定を行った。最初の注入の容積は０．２３μＬであった。標準的な手順（Heerklotz, H et al. (2000) Biochim. Biophys. Acta 1508:69）と一致して、一般にＩＴＣ実験の最初の注入に関連した大きな誤差の理由から、この注入の熱量は、データの分析に含めなかった。次に、ＬＵＶ懸濁液の７．４９μＬの注入を６回行った。次の注入が行われる前に、機器が安定なベースラインに戻ることを確実にするため、各注入の間の間隔は７２０秒とした。各実験の攪拌速度は３００ｒｐｍであった。
【０２９８】
データ解析
ＮａｎｏＡｎａｌｙｚｅソフトウェア（ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社）をベースラインの決定及び注入熱量の積分に使用し、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ社のＥｘｃｅｌを希釈熱の減算及び発生した全体の熱量の計算に使用した。希釈熱及び混合熱を補正するために、各実験の最後の注入の熱量を、その特定の実験の注入熱全体から減算した。例えば、te Welscher, YM et al. (2008) J. Biol. Chem. 283:6393を参照。この方法によって、実験の間に発生した全体の熱量を、次式を用いて計算した：
【数１】
0006755859.tif 000067
式中、ｉ＝注入番号、ｎ＝注入総数、Δｈｉinjection＝ｉ番目の注入の熱量、及びΔｈｎinjection＝この実験の最後の注入の熱量である。
【０２９９】
実施例１１  Ｃ２’エピＡｍＢはインビトロで抗真菌活性を発揮する
２つのエルゴステロール含有株、酵母サッカロミセス・セレビシエ（S. cerevisia）及びカンジダ・アルビカンス（C. albicans）に対するＡｍＢ及びＣ２’エピＡｍＢの活性を試験した。カンジダ・アルビカンスは、ヒトにおける生命を脅かす全身性真菌感染症の最も一般的な原因である。Ｃ２’エピＡｍＢは、サッカロミセス・セレビシエ（ＭＩＣ＝２μＭ）及びカンジダ・アルビカンス（ＭＩＣ＝２μＭ）の両方に対して強力な抗真菌活性を示した。
【０３００】
抗真菌活性アッセイの例示的な方法は、以下の通りである：
サッカロミセス・セレビシエの成長条件
１０ｇ／Ｌの酵母エキス、２０ｇ／Ｌのペプトン、２０ｇ／Ｌのデキストロース、及び２０ｇ／Ｌの固体培地用寒天からなる酵母ペプトンデキストロース（ＹＰＤ）成長培地を用いて、サッカロミセス・セレビシエを維持した。培地を、約１２１℃（華氏２５０度）で３０分間、オートクレーブにかけることによって滅菌した。その後、デキストロースを、滅菌した４０％ｗ／ｖ水溶液（デキストロース溶液をフィルタ滅菌した）として加えた。寒天（２０ｇ／Ｌ）を含む滅菌培地を、Ｃｏｒｎｉｎｇ社（米国ニューヨーク州コーニング所在）の１００×２０ｍｍのポリスチレンプレート上に注ぐことによって固体培地を調製した。液体培養培地はロータリーシェーカー上、３０℃でインキュベートし、固体培養培地はインキュベータ内で３０℃に維持した。
【０３０１】
カンジダ・アルビカンスの成長条件
液体及び固体の両方の培養培地を３７℃でインキュベートしたことを除いて、サッカロミセス・セレビシエと同様の方法でカンジダ・アルビカンスを培養した。
【０３０２】
ブロス微量希釈最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）アッセイ
ブロス微量希釈アッセイのプロトコルは、米国臨床検査標準協議会文書Ｍ２７−Ａ２を出典とした（Clinical and Laboratory Standards Institute. Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing, M27-A2, Approved Standard 2nd Ed. Vol. 22, Number 15, 2002）。５０ｍＬのＹＰＤ培地に植菌し、シェーカーインキュベータ内で３０℃（サッカロミセス・セレビシエ）又は３７℃（カンジダ・アルビカンス）のいずれかで一晩、インキュベートした。次に、細胞懸濁液を、Ｓｈｉｍａｄｚｕ社（京都府所在）のＰｈａｒｍａＳｐｅｃ  ＵＶ−１７００  ＵＶ／Ｖｉｓ分光光度計で測定して、０．１０（〜５×１０５ｃｆｕ／ｍＬ）のＯＤ６００まで、ＹＰＤを用いて希釈した。溶液を、ＹＰＤを用いて１０倍希釈し、希釈細胞懸濁液の１９５μＬアリコートを、滅菌したＦａｌｃｏｎ社（米国ニュージャージー州フランクリン・レイクス所在）のマイクロテスト９６ウェルプレートに３連で加えた。化合物を、ＤＭＳＯ中４００μＭの原液として調製し、ＤＭＳＯを用いて次の濃度まで段階希釈してもよい：１６００、１２００、８００、４００、３２０、２４０、２００、１６０、１２０、８０、４０、２０、１０及び５μＭ。各溶液の５μＬアリコートを、各列が異なる濃度の試験化合物を表すように、９６ウェルプレートに３連で加えた。各ウェル内のＤＭＳＯの濃度は２．５％であり、生存能力を確かめるために２．５％のＤＭＳＯのみを使用する対照ウェルもまた３連で実施した。この４０倍希釈により、以下の最終濃度を得た：５０、４０、３０、２０、１０、８、６、４、１、０．５、０．２５及び０．１２５μＭ。分析の前に、プレートを覆い、３０℃（サッカロミセス・セレビシエ）又は３７℃（カンジダ・アルビカンス）で２４時間インキュベートした。酵母の目視可能な成長を生じなかった化合物の濃度となるようにＭＩＣを決定した。実験は２回行っており、報告されるＭＩＣは２回の実験の平均を表している。
【０３０３】
実施例１２  Ｃ２’エピＡｍＢはインビトロにおけるヒト細胞に対して毒性ではない
ＡｍＢ及びＣ２’エピＡｍＢの活性を、ヒト細胞に対して調査した。ＡｍＢに関連する２つの最も重要な毒性副作用は、それぞれ、赤血球及び腎近位尿細管細胞への損傷を原因とする、貧血及び腎毒性である。文献の先例と一致して、ＡｍＢは、８．５μＭの濃度において、ヒト赤血球の９０％の溶血を生じる。これは、最小溶血濃度（ＭＨＣ）として定められる。全く対照的に、コレステロールに結合しない、対応するＣ２’エピＡｍＢのＭＨＣは、＞５００μＭであることが分かった。同様に、ＡｍＢは、２．４μＭの濃度（最小毒性濃度（ＭＴＣ））において初代ヒト腎近位尿細管上皮細胞の細胞生存能力の９０％損失を生じる。この場合も、ＡｍＢとは全く対照的に、Ｃ２’エピＡｍＢは、溶解性の限界に至るまで毒性の兆候を示さなかった。
【０３０４】
毒性アッセイの例示的な方法は以下の通りである：
溶血アッセイ
赤血球の調製
溶血アッセイのプロトコルは、Ｐａｑｕｅｔ及び同僚の報告を出典とした（Paquet, V et al. (2008) Chem. Eur. J. 14:2465-2481）。ヒト全血（ヘパリンナトリウム）をＢｉｏｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ  ＬＬＣ社（米国ニューヨーク州ウェストベリー所在）から購入し、４℃で保管し、受け取って２日以内に使用した。２．０ｍＬのエッペンドルフチューブに、１ｍＬのヒト全血を加え、１０，０００ｇで２分間、遠心分離した。上清を除去し、赤血球ペレットを、１ｍＬの滅菌生理食塩水で洗浄し、１０，０００ｇで２分間、遠心分離した。生理食塩水洗浄を、合計３回繰り返した。赤血球ペレットを、１ｍＬのＲＢＣバッファー（１０ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、ｐＨ７．４）に懸濁し、赤血球ストック懸濁液を形成した。
【０３０５】
最小溶血濃度（ＭＨＣ）アッセイ
ＤＭＳＯ中、１．０３ｍＭ（ＡｍＢ）又は１２．８ｍＭ（Ｃ２’エピＡｍＢ）の原液として化合物を調製し、ＤＭＳＯを用いて以下の濃度まで段階希釈した：７６８９、５１２６、２５６３、２０５０、１５３８、１０２５、７６９、５１３、３８４、２５６、２０５、１５４、１０３、７７、５１、２６μＭ。０．２ｍＬのＰＣＲチューブに、２４μＬのＲＢＣバッファー及び１μＬの化合物の原液を加え、５００、３００、２００、１００、８０、６０、４０、３０、２０、１５、１０、８、６、４、３、２、１μＭの最終濃度を得た。１μＬのＤＭＳＯをＭｉｌｌｉＱ水又はＲＢＣバッファーに加えることによって、それぞれ、０．２ｍＬのＰＣＲチューブに陽性及び陰性対照を調製した。各ＰＣＲチューブに、０．６３μＬの赤血球ストック懸濁液を加え、反転混合した。試料を３７℃で２時間、インキュベートした。試料を反転混合し、１０，０００ｇで２分間、遠心分離した。各試料に由来する１５μＬの上清を３８４ウェルプレートに加えた。Ｂｉｏｔｅｋ社（米国バーモント州ウィヌースキー所在）のＨ１  Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｈｙｂｒｉｄ  Ｒｅａｄｅｒを使用して５４０ｎｍにおいて吸光度を読み取った。実験は３回行っており、報告されるＭＨＣは、３回の実験の平均を表している。
【０３０６】
データ解析
次の方程式に従って溶血率を決定した：
【数２】
0006755859.tif 000068
濃度−対−溶血率をプロットし、ＯｒｉｇｉｎＰｒｏ  ８．６（Sebaugh, JL (2011) Pharmaceut. Statist. 10:128-134）を使用して４−パラメータロジスティック（４ＰＬ）用量応答フィットに当てはめた。ＭＨＣを、９０％の溶血を生じる濃度として定めた。
【０３０７】
ＷＳＴ−８細胞増殖アッセイ
初代腎近位尿細管上皮細胞の調製
初代ヒト腎近位尿細管上皮細胞（ＲＰＴＥＣ）をＡＴＣＣ（米国バージニア州マナサス所在）から購入し、受け取り後、すぐに培養した。腎上皮細胞基本培地（ＡＴＣＣ、ＰＣＳ−４００−０３０）、腎上皮細胞培養キット（ＡＴＣＣ、ＰＣＳ−４００−０４０）、及びペニシリン−ストレプトマイシン（１０単位／ｍＬ及び１０μｇ／ｍＬ）を使用して、完全成長培地を調製した。完全培地を暗所にて４℃で保管し、２８日以内に使用した。初代のＲＰＴＥＣを、９５％空気／５％ＣＯ２の雰囲気を用い、３７℃で、ＣＯ２インキュベータ内で成長させた。
【０３０８】
ＷＳＴ−８試薬の調製
ＷＳＴ−８細胞増殖アッセイキット（１００１０１９９）をＣａｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ社（米国ミシガン州アナーバー所在）から購入し、−２０℃で保管し、受け取って６カ月以内に使用した。ＷＳＴ−８試薬及び電子メディエータ溶液を解凍し、混合してＷＳＴ−８試薬溶液を調製した。溶液を−２０℃で保管し、１週間以内に使用した。
【０３０９】
ＷＳＴ−８アッセイ
完全成長培地中、初代のＲＰＴＥＣの懸濁液を、１×１０５細胞／ｍＬの濃度に調整した。９６ウェルプレートに９９μＬの細胞懸濁液を播種し、９５％空気／５％ＣＯ２の雰囲気内で３時間、３７℃でインキュベートした。１００μＬの細胞懸濁液又は１００μＬの完全培地を播種することによって、陽性及び陰性対照を調製した。化合物を、ＤＭＳＯ中、５ｍＭ（ＡｍＢ）及び５０ｍＭ（Ｃ２’エピＡｍＢ）の原液として調製し、ＤＭＳＯを用いて次の濃度まで段階希釈した：５００００、４００００、３００００、２００００、１００００、８０００、６０００、４０００、３０００、２０００、１５００、１０００、８００、６００、４００、３００、２００、１００、５０、２５、１０、５、２．５、１、０．５、０．２５、及び０．１μＭ。各溶液の１μＬのアリコートを、各カラムが異なる濃度の試験化合物を表す、９６ウェルプレートに３連で加えた。９６ウェルプレートを、９５％空気／５％ＣＯ２の雰囲気内で２４時間、３７℃でインキュベートした。インキュベーション後、培地を吸引し、１００μＬの血清を含まない培地を加え、各ウェルに１０μＬのＷＳＴ−８試薬溶液を加えた。９６ウェルプレートを、２００ｒｐｍで１分間、シェーカーインキュベータ内で混合し、９５％空気／５％ＣＯ２の雰囲気で２時間、３７℃でインキュベートした。インキュベーションに続いて、９６ウェルプレートを、２００ｒｐｍで１分間、シェーカーインキュベータ内で混合し、Ｂｉｏｔｅｋ社（米国バーモント州ウィヌースキー所在）のＨ１  Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｈｙｂｒｉｄ  Ｒｅａｄｅｒを使用して、吸光度を４５０ｎｍにおいて読み取った。実験は３回行なっており、報告される細胞毒性は、３回の実験の平均を表している。
【０３１０】
データ解析
以下方程式に従って溶血率を決定した：
【数３】
0006755859.tif 000069
濃度−対−溶血率をプロットし、ＯｒｉｇｉｎＰｒｏ  ８．６を使用して、４−パラメータロジスティック（４ＰＬ）用量応答フィットに当てはめた。ＭＴＣを、細胞生存能力の９０％損失を生じる濃度として定めた。
【０３１１】
顕微鏡検査
ＡＭＧ社（米国ワシントン州ボセル所在）のＥＶＯＳ  ｆｌ顕微鏡を使用して細胞を結像した。画像は、１０×対物レンズでの透過光を使用して撮像した。
【０３１２】
実施例１３  生物活性のインビボ評価
Ｃ２’エピＡｍＢの抗真菌効果を、播種性カンジダ症のマウスモデルにおいて試験した。この実験では、好中球減少マウスを、カンジダ・アルビカンスに尾静脈を介して感染させ、次いで、感染の２時間後、マウスに１６ｍｇ／ｋｇのＡｍＢ又はＣ２’エピＡｍＢの単回の腹腔内注射を行った。次に、感染後２４時間の時点で、マウスを殺処理し、腎臓に存在する真菌の量を定量した。Ｃ２’エピＡｍＢは、腎臓に存在する真菌の量の低減において、ＡｍＢよりも効果的であった。ＡｍＢと比較して、Ｃ２’エピＡｍＢは、真菌の量を０．５ｌｏｇ単位多く低減した。
【０３１３】
別の実験において、健康なマウスへのＡｍＢ又はＣ２’エピＡｍＢの単回の静脈内投与と、その後の死亡率のモニタリングによって、急性毒性を決定した。４ｍｇ／ｋｇのＡｍＢ用量群のすべてのマウスが数秒以内に死亡した。Ｃ２’エピＡｍＢは、著しく毒性が低く、１６ｍｇ／ｋｇの用量に至ってさえも死亡は観察されなかった。
【０３１４】
参照の取り込み
上記説明において言及されたすべての特許及び特許出願公開公報は、その全体が、ここに参照することによって本明細書に取り込まれる。
【０３１５】
等価物
明確な理解の目的で、これまで、例証及び実例を通して本発明を幾分詳細に説明してきたが、本発明の範囲又はそれらのいずれかの特定の実施形態に影響を与えることなく、条件、配合及び他のパラメータの幅広い及び等価の範囲内で本発明を修正または変更することによっても、同様に行われうること、及び、このような修正及び変更が、添付の特許請求の範囲内に含まれることが意図されていることは、当業者にとって明白であろう。
他の実施形態
１．下記式によって表される化合物：
【化６６】
0006755859.tif 000070
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１がＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２が、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３が、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒａが、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂが、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
２．Ｒａが２−アルケン−１−イルである、実施形態１に記載の化合物。
３．Ｒ２が２−アルケン−１−イルである、実施形態１に記載の化合物。
４．Ｒ３が置換又は非置換のアリールである、実施形態１に記載の化合物。
５．Ｒａが２−アルケン−１−イルであり；Ｒ２が２−アルケン−１−イルであり；Ｒ３が置換又は非置換のアリールである、実施形態１に記載の化合物。
６．Ｒａが２−プロペン−１−イルである、実施形態１に記載の化合物。
７．Ｒ２が２−プロペン−１−イルである、実施形態１に記載の化合物。
８．Ｒ３がｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）である、実施形態１に記載の化合物。
９．下記式によって表される、実施形態１に記載の化合物。
【化６７】
0006755859.tif 000071
１０．下記式によって表される化合物：
【化６８】
0006755859.tif 000072
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１がＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２が、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３が、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ４が−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｒａが、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂが、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒｃが置換又は非置換のアリールである。
１１．Ｒａが２−アルケン−１−イルである、実施形態１０に記載の化合物。
１２．Ｒ２が２−アルケン−１−イルである、実施形態１０に記載の化合物。
１３．Ｒ３が置換又は非置換のアリールである、実施形態１０に記載の化合物。
１４．Ｒｃが置換又は非置換のフェニルである、実施形態１０に記載の化合物。
１５．Ｒａが２−アルケン−１−イルであり；Ｒ２が２−アルケン−１−イルであり；Ｒ３が置換又は非置換のアリールであり；Ｒｃが置換又は非置換のフェニルである、実施形態１０に記載の化合物。
１６．Ｒａが２−プロペン−１−イルである、実施形態１０に記載の化合物。
１７．Ｒ２が２−プロペン−１−イルである、実施形態１０に記載の化合物。
１８．Ｒ３がｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）である、実施形態１０に記載の化合物。
１９．Ｒ４がｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルである、実施形態１０に記載の化合物。
２０．下記式によって表される、実施形態１０に記載の化合物。
【化６９】
0006755859.tif 000073
２１．下記式によって表される化合物：
【化７０】
0006755859.tif 000074
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１がＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２が、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３が、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ４が−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｒ５が（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒａが、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂが、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒｃが置換又は非置換のアリールである。
２２．Ｒａが２−アルケン−１−イルである、実施形態２１に記載の化合物。
２３．Ｒ２が２−アルケン−１−イルである、実施形態２１に記載の化合物。
２４．Ｒ３が置換又は非置換のアリールである、実施形態２１に記載の化合物。
２５．Ｒｃが置換又は非置換のフェニルである、実施形態２１に記載の化合物。
２６．ＲｂがＣ１〜Ｃ６アルキルである、実施形態２１に記載の化合物。
２７．Ｒａが２−アルケン−１−イルであり；Ｒ２が２−アルケン−１−イルであり；Ｒ３が置換又は非置換のアリールであり；Ｒｃが置換又は非置換のフェニルであり；ＲｂがＣ１〜Ｃ６アルキルである、実施形態２１に記載の化合物。
２８．Ｒａが２−プロペン−１−イルである、実施形態２１に記載の化合物。
２９．Ｒ２が２−プロペン−１−イルである、実施形態２１に記載の化合物。
３０．Ｒ３がｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）である、実施形態２１に記載の化合物。
３１．Ｒ４がｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルである、実施形態２１に記載の化合物。
３２．Ｒ５がジエチルイソプロピルシリルである、実施形態２１に記載の化合物。
３３．下記式によって表される、実施形態２１に記載の化合物。
【化７１】
0006755859.tif 000075
３４．下記式によって表される化合物：
【化７２】
0006755859.tif 000076
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１がＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２が、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３が、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５が（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒａが、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂが、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
３５．Ｒａが２−アルケン−１−イルである、実施形態３４に記載の化合物。
３６．Ｒ２が２−アルケン−１−イルである、実施形態３４に記載の化合物。
３７．Ｒ３が置換又は非置換のアリールである、実施形態３４に記載の化合物。
３８．ＲｂがＣ１〜Ｃ６アルキルである、実施形態３４に記載の化合物。
３９．Ｒａが２−アルケン−１−イルであり；Ｒ２が２−アルケン−１−イルであり；Ｒ３が置換又は非置換のアリールであり；ＲｂがＣ１〜Ｃ６アルキルである、実施形態３４に記載の化合物。
４０．Ｒａが２−プロペン−１−イルである、実施形態３４に記載の化合物。
４１．Ｒ２が２−プロペン−１−イルである、実施形態３４に記載の化合物。
４２．Ｒ３がｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）である、実施形態３４に記載の化合物。
４３．Ｒ５がジエチルイソプロピルシリルである、実施形態３４に記載の化合物。
４４．下記式によって表される、実施形態３４に記載の化合物。
【化７３】
0006755859.tif 000077
４５．下記式によって表される化合物：
【化７４】
0006755859.tif 000078
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１がＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２が、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３が、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５が（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒ６が−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｒａが、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂが、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒｃが置換又は非置換のアリールである。
４６．Ｒａが２−アルケン−１−イルである、実施形態４５に記載の化合物。
４７．Ｒ２が２−アルケン−１−イルである、実施形態４５に記載の化合物。
４８．Ｒ３が置換又は非置換のアリールである、実施形態４５に記載の化合物。
４９．Ｒｃが置換又は非置換のフェニルである、実施形態４５に記載の化合物。
５０．ＲｂがＣ１〜Ｃ６アルキルである、実施形態４５に記載の化合物。
５１．Ｒａが２−アルケン−１−イルであり；Ｒ２が２−アルケン−１−イルであり；Ｒ３が置換又は非置換のアリールであり；Ｒｃが置換又は非置換のフェニルであり；ＲｂがＣ１〜Ｃ６アルキルである、実施形態４５に記載の化合物。
５２．Ｒａが２−プロペン−１−イルである、実施形態４５に記載の化合物。
５３．Ｒ２が２−プロペン−１−イルである、実施形態４５に記載の化合物。
５４．Ｒ３がｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）である、実施形態４５に記載の化合物。
５５．Ｒ６がｐ−ニトロベンゾイルである、実施形態４５に記載の化合物。
５６．Ｒ５がジエチルイソプロピルシリルである、実施形態４５に記載の化合物。
５７．下記式によって表される、実施形態４５に記載の化合物。
【化７５】
0006755859.tif 000079
５８．下記式によって表される化合物：
【化７６】
0006755859.tif 000080
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１がＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２が、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３が、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５が（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒａが、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂが、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
５９．Ｒａが２−アルケン−１−イルである、実施形態５８に記載の化合物。
６０．Ｒ２が２−アルケン−１−イルである、実施形態５８に記載の化合物。
６１．Ｒ３が置換又は非置換のアリールである、実施形態５８に記載の化合物。
６２．ＲｂがＣ１〜Ｃ６アルキルである、実施形態５８に記載の化合物。
６３．Ｒａが２−アルケン−１−イルであり；Ｒ２が２−アルケン−１−イルであり；Ｒ３が置換又は非置換のアリールであり；ＲｂがＣ１〜Ｃ６アルキルである、実施形態５８に記載の化合物。
６４．Ｒａが２−プロペン−１−イルである、実施形態５８に記載の化合物。
６５．Ｒ２が２−プロペン−１−イルである、実施形態５８に記載の化合物。
６６．Ｒ３がｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）である、実施形態５８に記載の化合物。
６７．Ｒ５がジエチルイソプロピルシリルである、実施形態５８に記載の化合物。
６８．下記式によって表される、実施形態５８に記載の化合物。
【化７７】
0006755859.tif 000081
６９．下記式によって表される化合物：
【化７８】
0006755859.tif 000082
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ１がＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２が、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３が、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒａが、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂが、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
７０．Ｒａが２−アルケン−１−イルである、実施形態６９に記載の化合物。
７１．Ｒ２が２−アルケン−１−イルである、実施形態６９に記載の化合物。
７２．Ｒ３が置換又は非置換のアリールである、実施形態６９に記載の化合物。
７３．Ｒａが２−アルケン−１−イルであり；Ｒ２が２−アルケン−１−イルであり；Ｒ３が置換又は非置換のアリールである、実施形態６９に記載の化合物。
７４．Ｒａが２−プロペン−１−イルである、実施形態６９に記載の化合物。
７５．Ｒ２が２−プロペン−１−イルである、実施形態６９に記載の化合物。
７６．Ｒ３がｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）である、実施形態６９に記載の化合物。
７７．下記式によって表される、実施形態６９に記載の化合物。
【化７９】
0006755859.tif 000083
７８．下記式によって表される化合物：
【化８０】
0006755859.tif 000084
式中、存在ごとに独立して、
Ｒ３が、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。
７９．Ｒ３が置換又は非置換のアリールである、実施形態７８に記載の化合物。
８０．下記式によって表される、実施形態７８に記載の化合物。
【化８１】
0006755859.tif 000085
８１．２’エピＡｍＢの製造方法であって、
【化８２】
0006755859.tif 000086
下記工程を含み、
【化８３】
0006755859.tif 000087
ここで、存在ごとに独立して、
Ｒ１がＣ（Ｏ）ＯＲａであり；
Ｒ２が、２−アルケン−１−イル、ベンジル、及び（Ｒｂ）３Ｓｉ−からなる群より選択され；
Ｒ３が、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５が（Ｒｂ）３Ｓｉ−であり；
Ｒ６が−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｒａが、２−アルケン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びベンジルからなる群より選択され；
Ｒｂが、置換又は非置換のアリール、又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒｃが置換又は非置換のアリールであり；
ＲｄがＣ１〜Ｃ６アルキル又はアリールであり；
溶媒７が非極性非プロトン性溶媒である、
方法。
８２．Ｒ６が置換されたアリーロイルである、実施形態８１に記載の方法。
８３．Ｒｄがアリールである、実施形態８１に記載の方法。
８４．Ｒ６が置換されたアリーロイルであり；Ｒｄがアリールである、実施形態８１に記載の方法。
８５．Ｒ６がｐ−ニトロベンゾイルである、実施形態８１に記載の方法。
８６．Ｒｄがフェニルである、実施形態８１に記載の方法。
８７．溶媒７がベンゼンである、実施形態８１に記載の方法。
８８．ジ（アルキル）アゾジカルボキシレートが、ジ（イソプロピル）アゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）又はジ（エチル）アゾジカルボキシレート（ＤＥＡＤ）である、実施形態８１に記載の方法。
８９．Ｒ６がｐ−ニトロベンゾイルであり；ジ（アルキル）アゾジカルボキシレートが、ジ（イソプロピル）アゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）であり；Ｒｄがフェニルである、実施形態８１に記載の方法。
９０．Ｒ６がｐ−ニトロベンゾイルであり；ジ（アルキル）アゾジカルボキシレートが、ジ（イソプロピル）アゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）であり；Ｒｄがフェニルであり；溶媒７がベンゼンである、実施形態８１に記載の方法。
９１．下記工程をさらに含み、
【化８４】
0006755859.tif 000088
ここで、
Ｍが、アルカリ金属カチオン又はアルカリ土類金属カチオンであり；
溶媒８が、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である、
実施形態８１〜９０のいずれか一項に記載の方法。
９２．Ｍがアルカリ金属カチオンである、実施形態９１に記載の方法。
９３．ＭがＫである、実施形態９１に記載の方法。
９４．溶媒８が、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である、実施形態９１に記載の方法。
９５．ＭがＫであり；溶媒８が、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である、実施形態９１に記載の方法。
９６．下記工程をさらに含み、
【化８５】
0006755859.tif 000089
ここで、
フッ化物試薬が、フッ化テトラアルキルアンモニウム及びフッ化塩からなる群より選択され；
溶媒９が、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である、
実施形態９１〜９５のいずれか一項に記載の方法。
９７．フッ化物試薬がフッ化塩である、実施形態９６に記載の方法。
９８．フッ化物試薬がフッ化水素−ピリジンである、実施形態９６に記載の方法。
９９．溶媒９がテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）である、実施形態９６に記載の方法。
１００．フッ化物試薬がフッ化水素−ピリジンであり；溶媒９がテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）である、実施形態９６に記載の方法。
１０１．下記工程をさらに含み、
【化８６】
0006755859.tif 000090
ここで、存在ごとに独立して、
Ｐｄ試薬がＰｄ（０）又はＰｄ（ＩＩ）であり；
リガンドが（Ｒｅ）３Ｐであり；
ＲｅがＣ１〜Ｃ６アルキル又はアリールであり；
ＲｆがＣ１〜Ｃ６アルキル又はアリールであり；
溶媒１０が極性非プロトン性溶媒である、
実施形態９６〜１００のいずれか一項に記載の方法。
１０２．Ｐｄ試薬がＰｄ（０）である、実施形態１０１に記載の方法。
１０３．Ｒｅがアリールである、実施形態１０１に記載の方法。
１０４．Ｒｆがアリールである、実施形態１０１に記載の方法。
１０５．前記ＲｆＣＯ２Ｈ又は１，３−ジケトンがＲｆＣＯ２Ｈである、実施形態１０１に記載の方法。
１０６．Ｐｄ試薬がＰｄ（０）であり；Ｒｅがアリールであり；Ｒｆがアリールであり；前記ＲｆＣＯ２Ｈ又は１，３−ジケトンがＲｆＣＯ２Ｈである、実施形態１０１に記載の方法。
１０７．リガンドが（ＰＰｈ３）４である、実施形態１０１に記載の方法。
１０８．前記ＲｆＣＯ２Ｈ又は１，３−ジケトンがチオサリチル酸である、実施形態１０１に記載の方法。
１０９．溶媒１０がジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）である、実施形態１０１に記載の方法。
１１０．Ｐｄ試薬がＰｄ（０）であり；リガンドが（ＰＰｈ３）４であり；前記ＲｆＣＯ２Ｈ又は１，３−ジケトンがチオサリチル酸である、実施形態１０１に記載の方法。
１１１．Ｐｄ試薬がＰｄ（０）であり；リガンドが（ＰＰｈ３）４であり；前記ＲｆＣＯ２Ｈ又は１，３−ジケトンがチオサリチル酸であり；溶媒１０がジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）である、実施形態１０１に記載の方法。
１１２．下記工程をさらに含み、
【化８７】
0006755859.tif 000091
ここで、
酸がブレンステッド酸であり；
溶媒１１が、水と極性非プロトン性溶媒の混合物である、
実施形態１０１〜１１１のいずれか一項に記載の方法。
１１３．酸がカンファースルホン酸（ＣＳＡ）である、実施形態１１２に記載の方法。
１１４．溶媒１１が、水とＭｅＣＮの混合物である、実施形態１１２に記載の方法。
１１５．酸がカンファースルホン酸（ＣＳＡ）であり；溶媒１１が、水とＭｅＣＮの混合物である、実施形態１１２に記載の方法。
１１６．下記工程をさらに含み、
【化８８】
0006755859.tif 000092
ここで、
Ｒ４が−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり；
Ｍが、アルカリ金属カチオン又はアルカリ土類金属カチオンであり；
溶媒６が、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である、
実施形態８１〜１１５のいずれか一項に記載の方法。
１１７．Ｍがアルカリ金属カチオンである、実施形態１１６に記載の方法。
１１８．溶媒６が、極性非プロトン性溶媒と極性プロトン性溶媒の混合物である、実施形態１１６に記載の方法。
１１９．Ｒ４がｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルである、実施形態１１６に記載の方法。
１２０．ＭがＫである、実施形態１１６に記載の方法。
１２１．Ｒ４がｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルであり；ＭがＫである、実施形態１１６に記載の方法。
１２２．溶媒６が、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である、実施形態１１６に記載の方法。
１２３．Ｒ４がｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルであり；ＭがＫであり；溶媒６が、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である、実施形態１１６に記載の方法。
１２４．下記工程をさらに含み、
【化８９】
0006755859.tif 000093
ここで、
Ｘ５がハライド又はスルホン酸であり；
溶媒５が、極性非プロトン性溶媒、非極性非プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である、
実施形態１１６〜１２３のいずれか一項に記載の方法。
１２５．ＲｂがＣ１〜Ｃ６アルキルである、実施形態１２４に記載の方法。
１２６．Ｘ５がスルホン酸である、実施形態１２４に記載の方法。
１２７．ＲｂがＣ１〜Ｃ６アルキルであり；Ｘ５がスルホン酸である、実施形態１２４に記載の方法。
１２８．溶媒５が、極性非プロトン性溶媒と非極性非プロトン性溶媒の混合物である、実施形態１２４に記載の方法。
１２９．溶媒５が、ジクロロメタン（ＤＣＭ）とヘキサンの混合物である、実施形態１２４に記載の方法。
１３０．Ｒ５−Ｘ５が、トリフルオロメタンスルホン酸ジエチル（イソプロピル）シリルである、実施形態１２４に記載の方法。
１３１．Ｒ５−Ｘ５が、トリフルオロメタンスルホン酸ジエチル（イソプロピル）シリルであり；溶媒５が、ジクロロメタン（ＤＣＭ）とヘキサンの混合物である、実施形態１２４に記載の方法。
１３２．下記工程をさらに含み、
【化９０】
0006755859.tif 000094
ここで、
Ｒ４が置換又は非置換のアリーロイルであり；
Ｘ４が、ハライド、スクシンイミジル、ヒドロキシスクシンイミジル、アジド、アルケンオキシル、及びアリールオキシルからなる群より選択され；
溶媒４が極性非プロトン性溶媒である、
実施形態１２４〜１３１のいずれか一項に記載の方法。
１３３．Ｒ４が置換されたアリーロイルである、実施形態１３２に記載の方法。
１３４．Ｘ４がハライドである、実施形態１３２に記載の方法。
１３５．Ｒ４が置換されたフェニルであり；Ｘ４がハライドである、実施形態１３２に記載の方法。
１３６．Ｒ４−Ｘ４がｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルクロリドである、実施形態１３２に記載の方法。
１３７．溶媒４がテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）である、実施形態１３２に記載の方法。
１３８．
Ｒ４−Ｘ４がｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゾイルクロリドであり；溶媒４がテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）である、実施形態１３２に記載の方法。
１３９．下記工程をさらに含み、
【化９１】
0006755859.tif 000095
ここで、
Ｘ１がハライド又はスルホン酸であり；
Ｘ２が、ハライド、スクシンイミジル、ヒドロキシスクシンイミジル、アジド、アルケンオキシル、及びアリールオキシルからなる群より選択され；
Ｘ３が−ＣＨ（ＯＲ）２であり；
ＲがＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
溶媒１が、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物であり；
溶媒２が、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物であり；
溶媒３が、極性非プロトン性溶媒、極性プロトン性溶媒、又はそれらの混合物である、
実施形態１３２〜１３８のいずれか一項に記載の方法。
１４０．Ｒａが２−アルケン−１−イルである、実施形態１３９に記載の方法。
１４１．Ｘ１がスクシンイミジルである、実施形態１３９に記載の方法。
１４２．Ｒａが２−アルケン−１−イルであり；Ｘ１がスクシンイミジルである、実施形態１３９に記載の方法。
１４３．Ｒ２が２−アルケン−１−イルである、実施形態１３９に記載の方法。
１４４．Ｘ２がハライドである、実施形態１３９に記載の方法。
１４５．Ｒ２が２−アルケン−１−イルであり；Ｘ２がハライドである、実施形態１３９に記載の方法。
１４６．Ｒ３が置換されたアリールである、実施形態１３９に記載の方法。
１４７．Ｒａが２−プロペン−１−イルである、実施形態１３９に記載の方法。
１４８．Ｒ２が２−プロペン−１−イルである、実施形態１３９に記載の方法。
１４９．Ｒ３がｐ−メトキシフェニルである、実施形態１３９に記載の方法。
１５０．溶媒１が、極性非プロトン性溶媒と極性プロトン性溶媒の混合物である、実施形態１３９に記載の方法。
１５１．溶媒２が、極性非プロトン性溶媒と極性プロトン性溶媒の混合物である、実施形態１３９に記載の方法。
１５２．溶媒３が、極性非プロトン性溶媒と極性プロトン性溶媒の混合物である、実施形態１３９に記載の方法。
１５３．溶媒１が、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）とＭｅＯＨの混合物である、実施形態１３９に記載の方法。
１５４．溶媒２が、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）とＭｅＯＨの混合物である、実施形態１３９に記載の方法。
１５５．溶媒３が、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である、実施形態１３９に記載の方法。
１５６．ブレンステッド酸が、カンファースルホン酸（ＣＳＡ）である、実施形態１３９に記載の方法。
１５７．Ｒａが２−プロペン−１−イルであり；Ｘ１がスクシンイミジルであり；Ｒ２が２−プロペン−１−イルであり；Ｘ２がハライドであり；Ｒ３がｐ−メトキシフェニルである、実施形態１３９に記載の方法。
１５８．Ｒａが２−プロペン−１−イルであり；Ｘ１がスクシンイミジルであり；Ｒ２が２−プロペン−１−イルであり；Ｘ２がハライドであり；Ｒ３がｐ−メトキシフェニルであり；溶媒１が、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）とＭｅＯＨの混合物であり；溶媒２が、ＤＭＦとＭｅＯＨの混合物であり；溶媒３が、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）とＭｅＯＨの混合物である、実施形態１３９に記載の方法。
【図１】
0006755859.tif 000112
【図２】
0006755859.tif 000113
【図３】
0006755859.tif 000114