(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
３ＨＢ（３ヒドロキシ酪酸単量体）の塩基性アミノ酸塩を主成分として含有する栄養剤組成物の製造方法であって、
３ＨＢ（３ヒドロキシ酪酸単量体）生産性のハロモナス菌を原料液に添加し、好気発酵を行った後、中和剤としてアルギニンを用いて嫌気発酵を行って３ＨＢのアルギニン誘導体塩を含む発酵液を生産する工程と、
前記発酵液から前記３ＨＢのアルギニン誘導体塩を精製する工程と、
精製した前記３ＨＢのアルギニン誘導体塩を含有させる工程とを行う、栄養剤組成物の製造方法。
【請求項２】
請求項１記載の栄養剤組成物の製造方法により製造した栄養剤組成物を含有させる工程を行う、栄養補助食品の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、栄養剤組成物及び栄養補助食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
３ヒドロキシ酪酸やその塩（以下３ＨＢと称する、また、３ＨＢと称する場合、特にその単量体を指すものとする）は、もともと人の体内に存在する物質であるため生体親和性が高く、糖質に代わる画期的なエネルギー源として期待されている。また、３ＨＢは単なるエネルギー源という役割だけでなく、様々な遺伝子の発現やタンパク質の活性に影響するシグナル伝達物質としての作用があることがわかってきた。３ＨＢは、例えば、遺伝子発現調節作用によって、ヒストン脱アセチル化酵素を阻害することによって認知機能や、長期持続記憶を改善することが知られ、アルツハイマーの予防に有効性が確認されている。例えば、ココナツオイルに多く含まれる中鎖脂肪酸の摂取および体内での代謝により生成される３ＨＢが、脳や体内において糖質をうまく利用できないアルツハイマー病、糖尿病の患者の症状を改善させる効果を持つことが知られている。また、３ＨＢは体内において糖質よりも速やかにエネルギーに変換されること、細胞への脂肪や糖の吸収を抑制する効果を有することから、アスリート向けのエネルギー物質、ダイエット・健康食品分野への応用が期待できる。
【０００３】
このような３ＨＢは、各種微生物にポリ３ヒドロキシ酪酸（以下ＰＨＢと称する）を生産させたのち、得られたＰＨＢを酵素等により分解することにより得ることができる（特許文献１）。
【０００４】
また、３ＨＢを人に投与可能な形態としては、３ＨＢをオリゴマーとして静脈投与可能にすることが知られている（特許文献２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２０１０−１６８５９５号公報
【特許文献２】特開平０６−３２１７７８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかし、３ＨＢは、酸性であるため人が経口摂取するには抵抗が大きく、そのまま大量に摂取することは困難である。また、酸性度を低減すべく、金属塩として摂取することも考えられるが、このような場合、金属成分の過剰摂取が懸念され、特にナトリウム成分の取りすぎは、高血圧症や肝臓疾患等の原因となりうるので、経口摂取できたとしても大量摂取を避けたいものとなっている。
また、オリゴマーとして静脈投与する場合、経口投与に比べて侵襲性が高く、より一層人が摂取するのに抵抗が大きく、さらに、オリゴマーがアミノ酸塩とされているものの、オリゴマーが分解されつつ代謝される過程は非常に遅く、３ＨＢのエネルギー変換についての即効性に欠けるため、用途が大きく限定されるという欠点があった。
【０００７】
したがって、本発明は上記実状に鑑み、３ＨＢを経口投与しやすく、かつ人体への悪影響を抑制し、即効性のある優良なエネルギー源として利用可能な形態で提供しうる栄養剤組成物および栄養補助食品を提供する点にある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記目的を達成するための本発明の栄養剤組成物の製造方法の特徴構成は、３ＨＢ（３ヒドロキシ酪酸単量体）の塩基性アミノ酸塩を主成分として含有する栄養剤組成物の製造方法であって、
３ＨＢ（３ヒドロキシ酪酸単量体）生産性のハロモナス菌を原料液に添加し、好気発酵を行った後、中和剤としてアルギニンを用いて嫌気発酵を行って３ＨＢのアルギニン誘導体塩を含む発酵液を生産する工程と、
前記発酵液から前記３ＨＢのアルギニン誘導体塩を精製する工程と、
精製した前記３ＨＢのアルギニン誘導体塩を含有させる工程とを行う点にある。
【０００９】
上記構成によると、栄養剤組成物の製造方法によって製造された３ＨＢは、塩基性アミノ酸により中和された形態となっており、直接摂取しても酸味が少ないので、人が経口摂取するうえで大きな抵抗にはなりにくくなっている。また、金属塩ではないため、金属成分（たとえばナトリウム）の過剰摂取の問題もない。加えて、３ＨＢ塩基性アミノ酸塩が体内で分解されて生じる塩基性アミノ酸は人体に良好な効果を発揮することが知られているので、３ＨＢと塩基性アミノ酸との両者の人体に対する効果をともに得られる点で好ましいと考えられる。また、この３ＨＢの塩基性アミノ酸塩は、３ヒドロキシ酪酸の単量体（モノマー）と塩基性アミノ酸との塩であるから低分子量であり、オリゴマーやポリマーを用いるのに比べて、分解速度が比較的早く、経口摂取でも短時間で血中ケトン濃度が上昇しうることが実験的に明らかになっている。
【００１０】
塩基性アミノ酸による好ましい効果としては、たとえば、栄養剤組成物が３ＨＢのアルギニン誘導体塩を主成分として含有する場合、血流改善効果などが期待できる。また、このような塩基性アミノ酸自体、高ｐＨであるため、経口摂取するには抵抗が大きいものの、３ＨＢの塩とすることで、お互いに相乗的に摂取抵抗を抑制できる利点もある。
【００１１】
塩基性アミノ酸としてのアルギニン誘導体としては、アルギニン、シトルリンが挙げられ、他に塩基性アミノ酸として、ヒスチジン、リシン等が挙げられる。
【発明の効果】
【００１２】
したがって、本発明の栄養剤組成物の製造方法によって製造された栄養剤組成物は、即効性のある優良なエネルギー源として利用可能であるとともに、十分量の経口摂取が容易なものとなっている。そのため、粉末、顆粒、錠剤、タブレット、等の健康補助食品や、クッキー、ビスケット、グミ、チョコレート、ガムなどの機能性食品等に例示される栄養補助食品として３ＨＢを含有させて利用することができ、３ＨＢの利用可能性を大きく高めることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】経口摂取試験の結果を示すグラフ
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下に、本発明の実施形態にかかる栄養剤組成物及び栄養補助食品を説明する。尚、以下に好適な実施形態を記すが、これら実施形態はそれぞれ、本発明をより具体的に例示するために記載されたものであって、本発明の趣旨を逸脱しない範囲において種々変更が可能であり、本発明は、以下の記載に限定されるものではない。
【００１５】
〔３ＨＢ〕
３ＨＢは、３ＨＢ生産性のハロモナス菌を添加した発酵プロセスを行い、得られた発酵液からハロモナス菌を分離除去し、精製することにより得られる。発酵プロセスは、果汁等の糖質栄養源を含有する原料液に、３ＨＢ生産性のハロモナス菌をそのまま添加し、好気発酵、嫌気発酵を順に行うプロセス（特開２０１３−０８１４０３号公報等参照）として実施することができる。これにより、糖質が３ＨＢに変換され、発酵液中に生産されることになる。
【００１６】
〔３ＨＢアルギニン塩〕
３ＨＢの塩基性アミノ酸塩としての３ＨＢアルギニン塩（３ＨＢのアルギニン誘導体塩の一例）は、上記３ＨＢの生成プロセスにおける嫌気発酵の工程において、３ＨＢの生成とともにｐＨの低下する発酵液を中和する中和剤として、アルギニンを用いることにより３ＨＢアルギニン塩の形で溶解した発酵液として生産することができる（嫌気発酵の工程はアルカリ性での嫌気発酵４〜８時間で終了）。発酵液は、膜分離により菌体を除去することで約１０％の３ＨＢアルギニン塩を含有する上清が分離され、この上清から溶媒を留去することにより、粉末状の３ＨＢアルギニン塩として精製される。または、３ＨＢの生成とともにｐＨの低下する発酵液を中和する中和剤として水酸化カルシウムを用い、嫌気発酵後に膜分離により菌体を除去したのちに、硫酸を添加してカルシウムを硫酸カルシウム塩として沈殿除去したものに、アルギニンを添加、溶媒を留去することにより、粉末状の３ＨＢアルギニン塩として精製される。
【００１７】
〔栄養剤組成物〕
本実施形態にかかる栄養剤組成物は、得られた粉末状の３ＨＢアルギニン塩をそのまま錠剤化して、栄養剤組成物あるいは、栄養剤組成物を含有する栄養補助食品として提供することができる。また、錠剤化にあたっては、調剤用助剤等の他の成分の添加を妨げるものではない。また栄養補助食品として提供する場合には、小麦粉、砂糖などの他の食品成分とともに加工して、クッキー、ビスケット、グミ、チョコレート、ガムなどの形態とすることができる。
【００１８】
〔経口摂取試験〕
６０ｋｇの体重あたり１５ｇとなるように換算して、モニタとなる人に３ＨＢアルギニン塩を食前に経口摂取して、継時的に血中の３ＨＢ濃度を計測した。その結果、図１に示すように、３０分後には０．６ｍＭ、４５分後には１ｍＭに達し、経口摂取で短時間で３ＨＢの血中濃度が上昇した。特許文献２では、ラット血中で３０分後に７００μｍｏｌ／Ｌに達したが、ヒトに換算すると１２０分後に相当し、血中濃度の上昇に時間がかかるのに対し、非常に素早く血中濃度が上昇し即効性が高いことが分かった。
【００１９】
〔官能試験〕
（方法）
アルギニン（市販品）、３ＨＢ（精製品）、３ＨＢアルギニン塩（上記実施例）について、それぞれ苦み、酸味および旨みに関して順位法（酸味、苦み、旨みが少ないと感じたのが１、また苦み、酸味、旨みが多いと感じたものが４の４段階表示）で評価し、比較した。３ＨＢは、ｐＨ調整に従来通りＮａＯＨを用いて最終３ＨＢＮａ塩として回収したものを、電気透析、イオン交換により脱塩して精製し、単離したものを使用した。
アルギニン、３ＨＢ、３ＨＢアルギニン塩を各１００ｍｇ秤量し１ｍｌの水に溶解して、各パネラーにより苦み、酸味および旨みについてそれぞれ官能試験を実施した。
【００２０】
（結果）
表１（苦み）、表２（酸味）、表３（旨み）に関する官能試験結果を示す。表１、表２、表３の結果をもとに苦み、酸味、旨みの評価を実施した。アルギニンは酸味が無いが苦みが高く、一方３ＨＢは苦みが無いが酸味が高い結果が得られた。しかし、３ＨＢアルギニン塩は酸味、苦みを感じず、旨みを感じる結果が得られ、明らかな有意差が認められ、手軽に食べられることがわかった。
【００２１】
【表１】
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【００２２】
【表２】
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【００２３】
【表３】
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【００２４】
また、３ＨＢはアルツハイマーの予防、癌の予防、アスリート向けのエネルギー物質として有効性が認められているが、現在は３ＨＢ塩もしくはエステルとして摂取する必要がある。３ＨＢの金属塩では、金属成分の取りすぎになるし、エステルは製造プロセスが複雑でありまた体内での酵素分解が必要で即効性に乏しい。本発明では、アミノ酸塩として摂取できることから、金属成分（特にナトリウム）の取り過ぎが無く、摂取し易い。また、体内で３ＨＢとアミノ酸に分かれてそれぞれ効果が期待できる。例えば、塩基性アミノ酸のアルギニンは、血流向上機能がある。
さらに、アルギニンは、摂取すると一酸化窒素が増えて、血管を拡張させる作用が知られている。一酸化窒素は、活性酸素が存在すると活性酸素の還元に使われ、その効果が消失するため、アルギニンを摂取する場合は、抗酸化剤（還元剤）との同時接種が好ましい。
また、３ＨＢは体内ではアセト酢酸に変換するが、その際に補酵素のＮＡＤを必要とし、ＮＡＤＨができる。ＮＡＤＨは還元力があり、３ＨＢアルギニンとして摂取することで、アルギニンの酸化を抑制し、アルギニン単体よりも、血管拡張効果を高めることが可能となり相乗効果があると考えられる。
【００２５】
〔別実施形態〕
下記の別実施形態は、矛盾が生じない限り、複数を組み合わせて上記実施形態に適用できる。なお、本発明の範囲は、これら実施形態に限定されるものではない。
【００２６】
（１）
上記実施形態においては、３ＨＢの発酵プロセスによる製造過程で中和剤としてアルギニンを用いることでアルギニン塩を製造したが、これに限らず、精製された３ＨＢをアルギニンと反応させて３ＨＢアルギニンとすることもできるし、中和剤として水酸化カルシウムを用いて３ＨＢカルシウム塩とした後、アルギニン硫酸塩を反応させて３ＨＢアルギニンを得ることもできる。いずれも簡便な方法で３ＨＢアルギニンを製造することができ好ましい。
【００２７】
また、上述の例では３ＨＢアルギニンを例示したが、他の塩基性アミノ酸塩であってもよく、このような場合、上述の実施の形態におけるアルギニンに代えて、他の塩基性アミノ酸としてのシトルリン、ヒスチジン、リシンを用いることで、３ＨＢシトルリン、３ＨＢヒスチジン、３ＨＢリシンが得られることは明らかである。これらは、３ＨＢアルギニンと同様に、３ＨＢの酸性度が緩和されるとともに、経口摂取するうえでの抵抗となりにくくなり、また、３ＨＢと、シトルリン、ヒスチジン、リシンそれぞれの固有の効果を同時に発現させられる効果が期待される。
【産業上の利用可能性】
【００２８】
本発明の栄養剤組成物は、即効性のある優良なエネルギー源として利用可能であるとともに、経口摂取容易なものとなっているので、粉末、顆粒、錠剤、タブレット、等の健康補助食品や、クッキー、ビスケット、グミ、チョコレート、ガムなどの機能性食品等に例示される栄養補助食品に含有させて利用することができ、３ＨＢの利用可能性を大きく高めることができる。
【図１】
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