(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩのアミノトリオールからなる化合物であって、
【化７６】
0006784750.tif 000096
式中、Ｒが、生物学的に活性な分子を含み、Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３が、それぞれの存在毎に独立して、炭水化物、ポリペプチド、または親油性物質からなる群から選択されるリガンドを含む、化合物。
【請求項２】
式Ｉａ、Ｉｂ、またはＩｃの構造を有する、請求項１に記載の化合物。
【化７７】
0006784750.tif 000097
【請求項３】
式ＩＩａの構造を有する、請求項１に記載の化合物。
【化７８】
0006784750.tif 000098
【請求項４】
式ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、またはＩＩＩｃの構造を有する、請求項１に記載の化合物。
【化７９】
0006784750.tif 000099
【請求項５】
前記生物学的に活性な分子が、治療用分子である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
前記治療用分子が、抗体、ポリヌクレオチド、ホルモン、抗生物質、または１０００ダルトン未満の分子量を有する薬物から選択される、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
前記生物学的に活性な分子が、ＲＮＡ分子である、請求項５に記載の化合物。
【請求項８】
前記ＲＮＡ分子が、センス鎖及びアンチセンス鎖からなる、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
前記アミノトリオールが、前記センス鎖の３’末端、前記センス鎖の５’末端、前記アンチセンス鎖の３’末端、または前記センス鎖の５’末端において共有結合している、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
１つ以上のＬ１、Ｌ２、及びＬ３が、親油性物質を含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
前記親油性物質が、コレステリル、コール酸、アダマンタン酢酸、１−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、１，３−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、１，３−プロパンジオール、ヘプタデシル、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ−３−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ−３−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチル、及びフェノキサジンから選択される、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３のうちの１つ以上が、炭水化物を含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
前記炭水化物が、アロース、アルトロース、アラビノース、クラジノース、エリトロース、エリトルロース、フルクトース、Ｄ−フシトール、Ｌ−フシトール、フコサミン、フコース、フクロース、ガラクトサミン、Ｄ−ガラクトサミニトール、Ｎ−アセチル−ガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）、ガラクトース、グルコサミン、Ｎ−アセチル−グルコサミン、グルコサミニトール、グルコース、グルコース−６−ホスフェート、グロースグリセルアルデヒド、Ｌ−グリセロ−Ｄ−マンノ−ヘプトース、グリセロール、グリセロン、グロース、イドース、リキソース、マンノサミン、マンノース、マンノース−６−ホスフェート、プシコース、キノボース、キノボサミン、ラムニトール、ラムノサミン、ラムノース、リボース、リブロース、セドヘプツロース、ソルボース、タガトース、タロース、酒石酸、トレオース、キシロース、及びキシルロースから選択される単糖である、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
前記単糖が、デオキシ糖、アミノ糖、チオ糖、セレノ糖、テルロ糖、アザ糖、イミノ糖、ホスファノ糖、ホスファ糖、Ｃ−置換単糖、不飽和単糖、アルジトール、アルドン酸、ケトアルドン酸、ウロン酸、またはアルダル酸から選択される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
前記炭水化物が、アベクオース、アクラボース、アヌセトース、アミロペクチン、アミロース、アピオース、アルカノース、アスカリロース、アスコルビン酸、ボイビノース、セロビオース、セロビオース、セルロース、カコトリオース、カルコース、キチン、コリトース、シクロデキストリン、シマロース、デキストリン、２−デオキシリボース、２デオキシグルコース、ジギノース、ジギタロース、ジギトキソース、エバロース、エベミトロース、フルクトオリゴ糖、ガルト−オリゴ糖、ゲンチアノース、ゲンチオビオース、グルカン、グルコーゲン、グリコーゲン、ハマメロース、ヘパリン、イヌリン、イソレボグルコセノン、イソマルトース、イソマルトトリオース、イソパノース、コージビオース、ラクトース、ラクトサミン、ラクトセジアミン、ラミナラビオース、レボグルコサン、レボグルコセノン、β−マルトース、マルトリオース、マンナン−オリゴ糖、マンニノトノース（ｍａｎｎｉｎｏｔｎｏｓｅ）、メレジトース、メリビオース、ムラミン酸、ミカロース、ミシノース、ノイラミン酸、ニゲロース、ノジリマイシン、ノビオース、オレアンドロース、パノース、パラトース、プランテオース、ヌメベロース（ｐｎｍｅｖｅｒｏｓｅ）、ラフィノース、ロジノース、ルチノース、サルメントース、セドヘプツロース、セドヘプツロサン、ソラトリオース、ソフォロース、スタキオース、ストレプトース、スクロース、アム−トレハロース、トレハロサミン、ツラノース、チベロース、キシロビオース、またはウンベリフェロースを含む二糖、三糖、または多糖である、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１６】
前記炭水化物が、ＧａｌＮＡｃまたはガラクトースである、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１７】
及びＬ１、Ｌ２、及び／またはＬ３が、ポリペプチドを含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項１８】
前記ポリペプチドが、細胞受容体のリガンドである、請求項１７に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｌ２もしくはＬ３、または両方が、ポリエチレングリコールを含むリンカーを含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｌ２もしくはＬ３、または両方が、アミド結合を含むリンカーを含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｌ２もしくはＬ３、または両方が、−Ｏ（ＣＨ２）４（ＣＯ）ＮＨ（ＣＨ２）３ＮＨ（ＣＯ）（ＣＨ２）２Ｏ−を含むリンカーを含み、前記リガンドが、ＧａｌＮＡｃである、請求項１に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｌ１が、−Ｏ（ＣＨ２）１０Ｏ−を含むリンカーを含み、前記リガンドが、コレステロールである、請求項１に記載の化合物。
【請求項２３】
式４５のマルチリガンド化合物の作製プロセスであって、
【化８１】
0006784750.tif 000100
ｉ．以下の構造のアミノトリオール化合物を、
【化８２】
0006784750.tif 000101
親油性物質４２と反応させるステップと、
【化８３】
0006784750.tif 000102
ｉｉ．ステップｉの生成物からヒドロキシル保護基を除去するステップと、
ｉｉｉ．ステップｉｉの生成物を、ＮａＯＨ中の（ＣＨ２ＣＨ）ＣＯＯ−ｔ−ブチルと反応させるステップと、
ｉｖ．ステップｉｉｉの生成物にアミノ保護基を付加するステップと、
ｖ．ステップｉｖの生成物を、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド−塩酸塩（ＥＤＣ）及びヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）を用いて、ＢｏｃＮ（ＣＨ２）３ＮＨ２と反応させるステップと、
ｖｉ．ステップｖの生成物をＧａｌＮＡｃ酸と、
【化８４】
0006784750.tif 000103
ＥＤＣ、ＨＯＢＴ、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを用いて反応させるステップと、を含む、プロセス。
【請求項２４】
前記アミノトリオール化合物が、式１、５、または９の化合物からなる、請求項２３に記載のプロセス。
【化８５】
0006784750.tif 000104
【請求項２５】
式５４のマルチリガンド化合物の作製プロセスであって、
【化８６】
0006784750.tif 000105
ｉ．以下の構造を有するアミノトリオール化合物を、
【化８７】
0006784750.tif 000106
ｎ−Ｂｕ４ＮＦと反応させるステップと、
ｉｉ．ステップｉの生成物を、ＣＨ３Ｃ（ＯＣＨ３）２ＣＨ３及びｐ−トルエンスルホン酸と反応させるステップと、
ｉｉｉ．ステップｉｉの生成物を、ＬｉＢＨ４と反応させるステップと、
ｉｖ．ステップｉｉｉの生成物を、親油性物質４２と反応させるステップと、
【化８８】
0006784750.tif 000107
ｖ．ステップｖの生成物からヒドロキシル保護基を除去するステップと、
ｖｉ．ステップｖの生成物を、ＮａＯＨ中の（ＣＨ２ＣＨ）ＣＯＯ−ｔ−ブチルと反応させるステップと、
ｖｉｉ．ｖｉの生成物にアミノ保護基を付加するステップと、
ｖｉｉｉ．ステップｖｉｉｉの生成物を、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド−塩酸塩（ＥＤＣ）及びヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）を用いて、ＢｏｃＮ（ＣＨ２）３ＮＨ２と反応させるステップと、
ｉｘ．ステップｉｘの生成物をＧａｌＮＡｃ酸と、
【化８９】
0006784750.tif 000108
ＥＤＣ、ＨＯＢＴ、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを用いて反応させるステップと、を含む、プロセス。
【請求項２６】
前記アミノトリオール化合物が、式１３、１９、または３０の化合物からなる、請求項２５に記載のプロセス。
【化９０】
0006784750.tif 000109
【請求項２７】
式６６のマルチリガンド化合物の作製プロセスであって、
【化９１】
0006784750.tif 000110
ｉ．式３８を有するアミノトリオール化合物を、
【化９２】
0006784750.tif 000111
親油性物質４２と反応させるステップと、
【化９３】
0006784750.tif 000112
ｉｉ．ステップｉの生成物からヒドロキシル保護基を除去するステップと、
ｉｉｉ．ステップｉｉの生成物を、ＮａＯＨ中の（ＣＨ２ＣＨ）ＣＯＯ−ｔ−ブチルと反応させるステップと、
ｉｖ．ステップｉｉｉの生成物にアミノ保護基を付加するステップと、
ｖ．ステップｉｖの生成物を、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド−塩酸塩（ＥＤＣ）及びヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）を用いて、ＢｏｃＮ（ＣＨ２）３ＮＨ２と反応させるステップと、
ｖｉ．ステップｖの生成物をＧａｌＮＡｃ酸と、
【化９４】
0006784750.tif 000113
ＥＤＣ、ＨＯＢＴ、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを用いて反応させるステップと、を含む、プロセス。
【請求項２８】
請求項１に記載の化合物を含む、薬学的組成物。
【請求項２９】
薬学的に許容される対イオンまたは薬学的に許容される賦形剤をさらに含む、請求項２８に記載の薬学的組成物。
【請求項３０】
前記生物学的に活性な分子が、ＲＮＡである、請求項２８に記載の薬学的組成物。
【請求項３１】
前記リガンドが、炭水化物である、請求項２８に記載の薬学的組成物。
【請求項３２】
前記炭水化物が、ＧａｌＮＡｃまたはガラクトースである、請求項３１に記載の薬学的組成物。
【請求項３３】
疾患を処置する際に使用するための請求項１に記載の化合物を含む、薬学的組成物であって、疾患の処置を必要とする被験体への投与に好適である、薬学的組成物。
【請求項３４】
前記生物学的に活性な分子が、ＲＮＡ分子である、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３５】
前記組成物が、皮下投与に好適である、請求項３３に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年７月３１日出願の米国特許出願第６２／１９９，５７７号の利益を主張し、その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
技術分野
生物学的に活性な治療用分子の細胞内送達を促進する分子剤が記載される。分子剤は、生物学的に活性な分子及び少なくとも２つのリガンドに共有結合した合成Ｃ４またはＣ６環式アミノトリオールからなる。分子剤は、標的細胞へのリガンドの立体特異的提示に好適である。分子剤を含む薬学的組成物は、治療上有効な量の生物学的に活性な分子を患者の細胞に送達するために有用である。
【背景技術】
【０００３】
背景
被験体への治療用化合物の送達は、その治療効果にとって重要であり、通常、それは化合物が標的化された細胞及び組織に到達する能力が限られていることにより妨げられる。そのような化合物が多種多様な送達手段によって組織の標的化された細胞に入るための改善は、極めて重要である。
【０００４】
患者の組織に対する有効な標的化がしばしば達成されない生物学的に活性な分子の例としては、免疫グロブリンタンパク質を含む多数のタンパク質、ゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡ、ｍＲＮＡ、およびｓｉＲＮＡなどのポリヌクレオチド、アンチセンスポリヌクレオチド、ならびに合成または天然由来の多くの低分子量化合物、例えばペプチドホルモン及び抗生物質などが挙げられる。
【０００５】
インビボでの細胞への効率的な送達は、標的化リガンドを生物学的に活性な分子に複合することによって提供されるような特異的標的化を必要とする。標的化リガンドは、必要とされる標的細胞または組織における受容体結合を援助することによって特異性を提供する。標的化リガンドはまた、標的部位において受容体媒介性エンドサイトーシスを媒介し得、それにより膜受容体に結合された生物学的に活性な分子は、膜によって膜構造の陥入を介して、または送達系と細胞膜との融合によって封入される。受容体媒介性エンドサイトーシス系の例は、ガラクトース、マンノース、マンノース−６−ホスフェートなどの糖、またはトランスフェリン、アシアロ糖タンパク質、ビタミンＢ１２、インスリン、及び上皮成長因子などのペプチド及びタンパク質を認識するものである。
【０００６】
肝細胞上のアシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰ−Ｒ）を、それがタンパク質上でβ結合ガラクトースまたはＮ−アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）残基に結合する能力に基づいて同定し、特徴付けた。ＡＳＧＰ−Ｒは、エンドサイトーシスによって細胞形質膜を超えて大分子を移入する多種多様な多量体を形成するＡＳＧＲ１及びＡＳＧＲ２サブユニットからなり、それを肝細胞及びヘパトーム細胞への受容体媒介性薬物送達のための潜在的な標的にすることを特徴とする。いくつかのＧａｌＮＡｃ分子からなる多価リガンドは、ナノモル濃度の親和性を達成し得る。多価リガンドの糖間の空間及び配向は、結合に影響を及ぼす。コレステロールまたは脂肪酸などの親油性リガンドは、血漿タンパク質結合及び結果として循環半減期を増強し、リポタンパク質などの血漿タンパク質に結合し得る。これらのリガンドはまた、対応するリポタンパク質受容体を発現する特定の組織における取り込みを増加させることができる。
【０００７】
受容体特異的マルチリガンド送達剤、及び生物活性分子のインビボ送達を改善するためのその調製方法に対する必要性は依然として満たされていない。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本明細書に記載されるものの一態様は、式Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩのアミノトリオールからなる化合物であって、
【化１】
0006784750.tif 000002
式中、Ｒが、生物学的に活性な分子を含み、Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３が、それぞれの存在毎に独立して、炭水化物、ポリペプチド、または親油性物質からなる群から選択されるリガンドを含む。式Ｉのアミノトリオールは、式Ｉａ、Ｉｂ、またはＩｃの構造を有し得る。
【化２】
0006784750.tif 000003
式ＩＩのアミノトリオールは、式ＩＩａの構造を有し得る。
【化３】
0006784750.tif 000004
式ＩＩＩのアミノトリオールの式ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、またはＩＩＩｃの構造。
【化４】
0006784750.tif 000005
【０００９】
生物学的に活性な分子は、好ましくは治療用分子であり、より好ましくは、抗体、ポリヌクレオチド、ホルモン、抗生物質、または１０００ダルトン未満の分子量を有する薬物から選択される。最も好ましくは、生物学的に活性な分子は、ＲＮＡ分子である。ＲＮＡ分子は、センス鎖及びアンチセンス鎖からなり得る。アミノトリオールは、センス鎖の３’末端、センス鎖の５’末端、アンチセンス鎖の３’末端、またはセンス鎖の５’末端において共有結合し得る。ＲＮＡ分子は、修飾ヌクレオチド、例えば少なくとも１つのＵＮＡを含み得る。
【００１０】
Ｒは、好ましくは、構造−Ｏ−Ｐ（Ｚ’）（Ｚ”）−Ｏ−を有するホスフェート部分をさらに含み、式中、Ｚ’及びＺ”が、それぞれの存在毎に独立して、ＯまたはＳであり、ホスフェート部分は、ＲＮＡ分子の３’末端または５’末端に共有結合している。Ｒ、Ｌ１、Ｌ２、またはＬ３のうちの１つ以上は、以下の構造を含むリンカーをさらに含み、
【化５】
0006784750.tif 000006
式中、
Ａ、Ｄ１、Ｄ１’、Ｄ２、Ｄ２’が、それぞれの存在毎に独立して、非存在であるか、ＣＯ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＯＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）、ＣＨ２、ＣＨ２ＮＨ、またはＣＨ２Ｏであり、
Ｂ１及びＢ２が、それぞれの存在毎に、非存在であるか、アルキレン、置換アルキレンであり、ここで、１つ以上のメチレンが、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ２、Ｎ（ＲＮ）、Ｃ（Ｒ’）＝Ｃ（Ｒ”）、Ｃ≡Ｃ、またはＣ（Ｏ）のうちの１つ以上によって中断または終端され得、式中、Ｒ’及びＲ”がそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＯＨ、ＳＨ、またはＮ（ＲＮ）２であり、ＲＮが、それぞれの存在毎に独立して、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルであり、
Ｚが、非存在であるか、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣＨ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（Ｒａ）ＮＨ、ＣＯ、ＣＨ＝ＮＯ、またはヘテロシクリルであり、式中、Ｒａが、Ｈまたはアミノ酸側鎖であり、
Ｅが、−ＣＨ２Ｎ（ＥＬ）ＣＨ２−であり、式中、ＥＬが、−Ｄ３−Ｂ３−Ｄ３’−Ｒｘであり、Ｄ３及びＤ３’が、それぞれの存在毎にそれぞれ独立して、非存在であるか、ＣＯ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＯＣ（Ｏ）、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ、ＣＨ２、ＣＨ２ＮＨ、またはＣＨ２Ｏであり、Ｒｘが、コレステリルまたはカチオン性脂質であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。
上記のＲ、Ｌ１、Ｌ２、またはＬ３のうちの１つ以上のリンカーは、式ＩＶ、Ｖ、またはＶＩのアミノトリオールをさらに含み得、
【化６】
0006784750.tif 000007
式中、Ｌ４、Ｌ５、Ｌ６、及びＬ７が、それぞれの存在毎に独立して、以下の構造を含み、
【化７】
0006784750.tif 000008
式中、
Ａ、Ｄ１、Ｄ１’、Ｄ２、Ｄ２’が、それぞれの存在毎に独立して、非存在であるか、ＣＯ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＯＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）、ＣＨ２、ＣＨ２ＮＨ、またはＣＨ２Ｏであり、
Ｂ１及びＢ２が、それぞれの存在毎に、非存在であるか、アルキレン、置換アルキレンであり、ここで、１つ以上のメチレンが、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ２、Ｎ（ＲＮ）、Ｃ（Ｒ’）＝Ｃ（Ｒ”）、Ｃ≡Ｃ、またはＣ（Ｏ）のうちの１つ以上によって中断または終端され得、式中、Ｒ’及びＲ”がそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＯＨ、ＳＨ、またはＮ（ＲＮ）２であり、ＲＮが、それぞれの存在毎に独立して、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルであり、
Ｚが、非存在であるか、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣＨ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（Ｒａ）ＮＨ、ＣＯ、ＣＨ＝ＮＯ、またはヘテロシクリルであり、式中、Ｒａが、Ｈまたはアミノ酸側鎖であり、
Ｅが、−ＣＨ２Ｎ（ＥＬ）ＣＨ２−であり、式中、ＥＬが、−Ｄ３−Ｂ３−Ｄ３’−Ｒｘであり、Ｄ３及びＤ３’が、それぞれの存在毎にそれぞれ独立して、非存在であるか、ＣＯ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＯＣ（Ｏ）、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ、ＣＨ２、ＣＨ２ＮＨ、またはＣＨ２Ｏであり、Ｒｘが、コレステリルまたはカチオン性脂質であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。
【００１１】
Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３のうちの１つ以上は、親油性物質を含み得る。親油性物質は、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、１−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、１，３−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、１，３−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ−３−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ−３−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチル、及びフェノキサジンから選択される。好ましい親油性物質は、コレステリル、例えばコレステロールである。
【００１２】
Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３のうちの１つ以上は、炭水化物を含む。炭水化物は、好ましくは、Ｎ−アセチル−ガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）、アロース、アルトロース、アラビノース、クラジノース、エリトロース、エリトルロース、フルクトース、Ｄ−フシトール、Ｌ−フシトール、フコサミン、フコース、フクロース、ガラクトサミン、Ｄ−ガラクトサミニトール、ガラクトース、グルコサミン、Ｎ−アセチル−グルコサミン、グルコサミニトール、グルコース、グルコース−６−ホスフェート、グロースグリセルアルデヒド、Ｌ−グリセロ−Ｄ−マンノス−ヘプトース（L-glycero-D-mannos-heptose）、グリセロール、グリセロン、グロース、イドース、リキソース、マンノサミン、マンノース、マンノース−６−ホスフェート、プシコース、キノボース、キノボサミン、ラムニトール、ラムノサミン、ラムノース、リボース、リブロース、セドヘプツロース、ソルボース、タガトース、タロース、酒石酸、トレオース、キシロース、及びキシルロースから選択される単糖である。単糖は、好ましくは、Ｄ配置またはＬ配置である。好ましくは、炭水化物は、ＧａｌＮＡｃまたはＤ−ガラクトースである。
【００１３】
単糖は、デオキシ糖、アミノ糖、チオ糖、セレノ糖、テルロ糖、アザ糖、イミノ糖、ホスファノ糖、ホスファ糖、Ｃ−置換単糖、不飽和単糖、アルジトール、アルドン酸、ケトアルドン酸、ウロン酸、またはアルダル酸から選択され得る。
【００１４】
炭水化物は、アベクオース、アクラボース、アヌセトース、アミロペクチン、アミロース、アピオース、アルカノース、アスカリロース、アスコルビン酸、ボイビノース、セロビオース、セロビオース、セルロース、カコトリオース、カルコース、キチン、コリトース、シクロデキストリン、シマロース、デキストリン、２−デオキシリボース、２デオキシグルコース、ジギノース、ジギタロース、ジギトキソース、エバロース、エベミトロース、フルクトオリゴ糖、ガルト−オリゴ糖、ゲンチアノース、ゲンチオビオース、グルカン、グルコーゲン、グリコーゲン、ハマメロース、ヘパリン、イヌリン、イソレボグルコセノン、イソマルトース、イソマルトトリオース、イソパノース、コージビオース、ラクトース、ラクトサミン、ラクトセジアミン、ラミナラビオース、レボグルコサン、レボグルコセノン、β−マルトース、マルトリオース、マンナン−オリゴ糖、マンニノトノース（ｍａｎｎｉｎｏｔｎｏｓｅ）、メレジトース、メリビオース、ムラミン酸、ミカロース、ミシノース、ノイラミン酸、ニゲロース、ノジリマイシン、ノビオース、オレアンドロース、パノース、パラトース、プランテオース、ヌメベロース（ｐｎｍｅｖｅｒｏｓｅ）、ラフィノース、ロジノース、ルチノース、サルメントース、セドヘプツロース、セドヘプツロサン、ソラトリオース、ソフォロース、スタキオース、ストレプトース、スクロース、アム−トレハロース、トレハロサミン、ツラノース、チベロース、キシロビオース、またはウンベリフェロースを含む二糖、三糖、または多糖であってよい。
【００１５】
Ｌ１、Ｌ２、及び／またはＬ３は、ポリペプチドを含み得る。ポリペプチドは、細胞受容体のリガンドであり得、例えば、アルギニルグリシルアスパラギン酸（ＲＧＤ）またはトランスフェリンのＴｆＲ結合ドメインを含むトランスフェリン受容体（ＴｆＲ）のリガンドである。ポリペプチドは、抗体であり得る。
【００１６】
Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３は独立して、以下からなるリンカーを含み得、
【化８】
0006784750.tif 000009
式中、
Ａ及びＤが、それぞれの存在毎に独立して、非存在であるか、ＣＯ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＯＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）、ＣＨ２、ＣＨ２ＮＨ、またはＣＨ２Ｏであり、
Ｂが、非存在であるか、アルキレン、置換アルキレンであり、ここで、１つ以上のメチレンが、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ２、Ｎ（ＲＮ）、Ｃ（Ｒ’）＝Ｃ（Ｒ”）、Ｃ≡Ｃ、またはＣ（Ｏ）のうちの１つ以上によって中断または終端され得、式中、Ｒ’及びＲ”がそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＯＨ、ＳＨ、またはＮ（ＲＮ）２であり、ＲＮが、それぞれの存在毎に独立して、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルであり、
Ｚが、非存在であるか、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣＨ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（Ｒａ）ＮＨ、ＣＯ、ＣＨ＝ＮＯ、またはヘテロシクリルであり、式中、Ｒａが、Ｈまたはアミノ酸側鎖であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。
【００１７】
Ｌ２もしくはＬ３、または両方は、ポリエチレングリコールを含むリンカーを含み得る。好ましくは、Ｌ２もしくはＬ３、または両方は、アミド結合を含むリンカーを含む。より好ましくは、Ｌ２もしくはＬ３、または両方は、−Ｏ（ＣＨ２）４（ＣＯ）ＮＨ（ＣＨ２）３ＮＨ（ＣＯ）（ＣＨ２）２Ｏ−を含むリンカーを含み、リガンドは、ＧａｌＮＡｃである。好ましくは、Ｌ１は、−Ｏ（ＣＨ２）１０Ｏ−を含むリンカーを含み、リガンドは、コレステロールである。最も好ましくは、Ｌ１は、−Ｏ（ＣＨ２）１０Ｏ−を含むリンカーを含み、Ｌ１リガンドは、コレステロールであり、Ｌ２及びＬ３はともに、−Ｏ（ＣＨ２）４（ＣＯ）ＮＨ（ＣＨ２）３ＮＨ（ＣＯ）（ＣＨ２）２Ｏ−を含むリンカーを含み、関連リガンドは、ＧａｌＮＡｃである。
【００１８】
本説明の別の態様は、式４５に示されるマルチリガンド化合物の作製プロセスであり、
【化９】
0006784750.tif 000010
このプロセスは、
ｉ．アミノトリオール化合物を、
【化１０】
0006784750.tif 000011
親油性物質４２と反応させるステップと、
【化１１】
0006784750.tif 000012
ｉｉ．ステップｉの生成物からヒドロキシル保護基を除去するステップと、
ｉｉｉ．ステップｉｉの生成物を、ＮａＯＨ中の（ＣＨＣＨ）ＣＯＯ−ｔ−ブチルと反応させるステップと、
ｉｖ．ステップｉｉｉの生成物にアミノ保護基を付加するステップと、
ｖ．ステップｉｖの生成物を、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド−塩酸塩（ＥＤＣ）及びヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）を用いて、ＢｏｃＮ（ＣＨ２）３ＮＨ２と反応させるステップと、
ｖｉ．ステップｖの生成物をＧａｌＮＡｃ酸と、
【化１２】
0006784750.tif 000013
ＥＤＣ、ＨＯＢＴ、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを用いて反応させるステップと、を含む。
このプロセスの出発物質は、好ましくは、式１、５、または９の構造を有するアミノトリオールである。
【化１３】
0006784750.tif 000014
【００１９】
本説明の別の態様は、式５３に示されるマルチリガンド化合物の作製プロセスであり、
【化１４】
0006784750.tif 000015
このプロセスは、
ｉ．アミノトリオール化合物を、
【化１５】
0006784750.tif 000016
ｎ−Ｂｕ４ＮＦと反応させるステップと、
ｉｉ．ステップｉの生成物を、ＣＨ３Ｃ（ＯＣＨ３）２ＣＨ３及びｐ−トルエンスルホン酸と反応させるステップと、
ｉｉｉ．ステップｉｉの生成物を、ＬｉＢＨ４と反応させるステップと、
ｉｖ．ステップｉｉｉの生成物を、親油性物質４２と反応させるステップと、
【化１６】
0006784750.tif 000017
ｖ．ステップｉｖの生成物からヒドロキシル保護基を除去するステップと、
ｖｉ．ステップｖの生成物を、ＮａＯＨ中の（ＣＨＣＨ）ＣＯＯ−ｔ−ブチルと反応させるステップと、
ｖｉｉ．ｖｉの生成物にアミノ保護基を付加するステップと、
ｖｉｉｉ．ステップｖｉｉｉの生成物を、ＥＤＣ及びＨＯＢＴを用いて、ＢｏｃＮ（ＣＨ２）３ＮＨ２と反応させるステップと、
ｉｘ．ステップｉｘの生成物をＧａｌＮＡｃ酸と、
【化１７】
0006784750.tif 000018
ＥＤＣ、ＨＯＢＴ、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを用いて反応させるステップと、を含む。
このプロセスは、好ましくは、式１３、１９、または３０の構造を有するアミノトリオール化合物で開始する。
【化１８】
0006784750.tif 000019
【００２０】
本説明の別の態様は、式４５に示されるマルチリガンド化合物の作製プロセスであり、
【化１９】
0006784750.tif 000020
このプロセスは、
ｉ．式３８を有するアミノトリオール化合物を、
【化２０】
0006784750.tif 000021
親油性物質４２と反応させるステップと、
【化２１】
0006784750.tif 000022
ｉｉ．ステップｉの生成物からヒドロキシル保護基を除去するステップと、
ｉｉｉ．ステップｉｉの生成物を、ＮａＯＨ中の（ＣＨＣＨ）ＣＯＯ−ｔ−ブチルと反応させるステップと、
ｉｖ．ステップｉｉｉの生成物にアミノ保護基を付加するステップと、
ｖ．ステップｉｖの生成物を、ＥＤＣ及びＨＯＢＴを用いて、ＢｏｃＮ（ＣＨ２）３ＮＨ２と反応させるステップと、
ｖｉ．ステップｖの生成物をＧａｌＮＡｃ酸と、
【化２２】
0006784750.tif 000023
ＥＤＣ、ＨＯＢＴ、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを用いて反応させるステップと、を含む。
【００２１】
本説明の別の態様は、式Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩのアミノトリオールからなる化合物を含む薬学的組成物であって、
【化２３】
0006784750.tif 000024
式中、Ｒが、治療用分子を含み、Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３が、それぞれの存在毎に独立して、炭水化物、ポリペプチド、または親油性物質からなる群から選択されるリガンドを含む。薬学的組成物は、薬学的に許容される対イオンまたは薬学的に許容される賦形剤をさらに含み得る。好ましくは、治療用分子は、ＲＮＡであり、より好ましくは、二本鎖ｓｉＲＮＡである。二本鎖ｓｉＲＮＡは、ＵＮＡを含み得る。好ましくは、Ｌ２及びＬ３リガンドは、炭水化物であり、最も好ましくは、ＧａｌＮＡｃまたはガラクトースである。
【００２２】
本説明の別の態様は、疾患の治療方法であり、式Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩのアミノトリオールからなる化合物を含む、治療上有効な量の薬学的組成物を投与することを含み、
【化２４】
0006784750.tif 000025
式中、Ｒが、治療用分子を含み、Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３が、それぞれの存在毎に独立して、炭水化物、ポリペプチド、または親油性物質からなる群から選択されるリガンドを含む。この化合物は、標的遺伝子、例えば第ＶＩＩ因子、Ｅｇ５、ＰＣＳＫ９、ＴＰＸ２、ａｐｏＢ、ＳＡＡ、ＴＴＲ、ＲＳＶ、ＰＤＧＦβ、Ｅｒｂ−Ｂ、Ｓｒｃ、ＣＲＫ、ＧＲＢ２、ＲＡＳ、ＭＥＫＫ、ＪＮＫ、ＲＡＦ、Ｅｒｋ１／２、ＰＣＮＡ（ｐ２１）、ＭＹＢ、ＪＵＮ、ＦＯＳ、ＢＣＬ−２、Ｃｙｃｌｉｎ  Ｄ、ＶＥＧＦ、ＥＧＦＲ、Ｃｙｃｌｉｎ  Ａ、Ｃｙｃｌｉｎ  Ｅ、ＷＮＴ−１、β−カテニン、ｃ−ＭＥＴ、ＰＫＣ、ＮＦＫＢ、ＳＴＡＴ３、サバイビン、Ｈｅｒ２／Ｎｅｕ、トポイソメラーゼＩ、もしくはトポイソメラーゼＩＩα；またはｐ７３、ｐ２１（ＷＡＦ１／ＣＩＰ１）、ｐ２７（ＫＩＰ１）、ＰＰＭ１Ｄ、ＲＡＳ、カベオリンＩ、ＭＩＢＩ、ＭＴＡＩ、Ｍ６８、もしくはｐ５３腫瘍抑因子の変異体遺伝子の発現をノックダウンするＲＮＡを含み得る。薬学的組成物は、好ましくは皮下に投与される。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】式ＩＩＩａのアミノトリオールの合成を示す。
【図２】式ＩＩＩｂのアミノトリオールの合成を示す。
【図３】式ＩＩＩｃのアミノトリオールの合成を示す。
【図４】式Ｉａのアミノトリオールの合成を示す。
【図５】式Ｉｂのアミノトリオールの合成を示す。
【図６】式Ｉｂのアミノトリオールの合成を示す。
【図７】式Ｉｃのアミノトリオールの合成を示す。
【図８】化合物１の合成を示す。
【図９】化合物５の合成を示す。
【図１０】化合物９の合成を示す。
【図１１】中間物５〜７の合成を示す。
【図１２】中間物５〜７の加水分解の生成物を示す。
【図１３】式ＩＩａのアミノトリオールの合成を示す。
【図１４】コレステロールリンカー断片４２の調製を示す。
【図１５】アゼチジン系／コレステロール結合体４５の合成を示す。
【図１６】アゼチジン系／コレステロール結合体４８の合成を示す。
【図１７】アゼチジン系／コレステロール結合体５１の合成を示す。
【図１８】ピペリジン系／コレステロール結合体５４の合成を示す。
【図１９】ピペリジン系／コレステロール結合体５７の合成を示す。
【図２０】ピペリジン系／コレステロール結合体６０の合成を示す。
【図２１】ピペリジン系／コレステロール結合体６３の合成を示す。
【図２２】シクロヘキサン系／コレステロール結合体６６の合成を示す。
【図２３】初期コレステロール付加物の、図１５〜２２において参照される結合体４５、４８、５１、５４、５７、６０、６３、及び６６への変換に用いられる残りのステップを示す。
【図２４Ａ】図１５〜１７のアゼタジン系／コレステロール結合体にＲＮＡを導入する液相合成を示す。
【図２４Ｂ】図２４Ａに示される液相合成の続きである。
【図２５Ａ】図１５〜１７のアゼタジン系／コレステロール結合体にＲＮＡを導入する固相合成を示す。
【図２５Ｂ】図２５Ａに示される固相合成の続きである。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
皮下投与に続いて、被験体の体内の標的細胞に治療用分子を送達するためのマルチリガンド剤が、本明細書に記載されている。
【００２５】
マルチリガンド剤は、治療用分子を共有結合した置換基として含む。好ましい治療用分子は、生物学的に活性なポリヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド、例えばゲノムＤＮＡの断片、ｍＲＮＡ、ｍＲＮＡのＤＮＡコピー（ｃＤＮＡ）、二本鎖低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、部分的二本鎖短ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、一本鎖アンチセンスＲＮＡ、またはマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）である。より好ましくは、治療用分子は、ｓｉＲＮＡの１本の鎖の配列と相補的であるｍＲＮＡをコードする標的遺伝子を発現する細胞への進入時にｍＲＮＡ機能を干渉することによって標的遺伝子の発現をノックダウンすることが可能なｓｉＲＮＡである。オリゴヌクレオチドは、１０〜１０，０００ヌクレオチド長（ｎｔ）、１０〜１，０００ｎｔ、１０〜５００ｎｔ、好ましくは１５〜１００ｎｔ、最も好ましくは１５〜３５ｎｔであり得る。
【００２６】
マルチリガンド剤はまた、リガンドの組を含む。生化学及び薬理学において、リガンドは、生物学的目的を果たす生体分子との複合体を形成する物質である。タンパク質−リガンド結合において、リガンドは、通常、標的タンパク質上の部位に結合するシグナルトリガー分子である。結合は、イオン結合、水素結合、及びファン・デル・ワールス力などの分子間力によって起こる。ドッキング（会合）は通常、可逆的であり（解離）、解離定数（ＫＤ）によって特徴付けられる。ＫＤの値は、リガンドと受容体との間の結合強度（親和性）に逆関連し、それにより、ＫＤの値が小さいほど、受容体へのリガンドの親和性が高くなる。リガンドは、基剤、阻害剤、活性剤、及び神経伝達物質を含む。リガンド結合は、しばしば解離定数に関連するがそれとは異なる、ＩＣ５０として知られる受容体結合部位の半数が占有されるリガンドの濃度に関して特徴付けられる。複数のリガンドを有することによって、マルチリガンド剤は、単一リガンド単独よりもはるかに強力に結合する（すなわち、より低いＫＤ値を有する）。マルチリガンド剤の親和性の増加は、モノリガンドよりも実質的に大きい。
【００２７】
本明細書に記載されるマルチリガンド剤は、式Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩのアミノトリオールからなる化合物であって、
【化２５】
0006784750.tif 000026
式中、Ｒが、生物学的に活性な分子を含み、Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３が、それぞれの存在毎に独立して、炭水化物、ポリペプチド、または親油性物質からなる群から選択されるリガンドを含む。
【００２８】
式Ｉのアミノトリオールは、式Ｉａ、Ｉｂ、またはＩｃの構造を有し得る。
【化２６】
0006784750.tif 000027
【００２９】
式ＩＩのアミノトリオールは、式ＩＩａの構造を有し得る。
【化２７】
0006784750.tif 000028
【００３０】
式ＩＩＩのアミノトリオールの式ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、またはＩＩＩｃの構造。
【化２８】
0006784750.tif 000029
【００３１】
生物学的に活性な分子は、好ましくは治療用分子であり、より好ましくは、抗体、ポリヌクレオチド、ホルモン、抗生物質、または１０００ダルトン未満の分子量を有する薬物から選択される。最も好ましくは、生物学的に活性な分子は、ＲＮＡ分子である。ＲＮＡ分子は、センス鎖及びアンチセンス鎖からなり得る。アミノトリオールは、センス鎖の３’末端、センス鎖の５’末端、アンチセンス鎖の３’末端、またはセンス鎖の５’末端において共有結合し得る。ＲＮＡ分子は、修飾ヌクレオチド、例えば少なくとも１つのＵＮＡを含み得る。
【００３２】
Ｒは、好ましくは、構造−Ｏ−Ｐ（Ｚ’）（Ｚ”）−Ｏ−を有するホスフェート部分をさらに含み、式中、Ｚ’及びＺ”が、それぞれの存在毎に独立して、ＯまたはＳであり、ホスフェート部分は、ＲＮＡ分子の３’末端または５’末端に共有結合している。Ｒ、Ｌ１、Ｌ２、またはＬ３のうちの１つ以上は、好ましくは、以下の構造を含むリンカーをさらに含み、
【化２９】
0006784750.tif 000030
式中、
Ａ、Ｄ１、Ｄ１’、Ｄ２、Ｄ２’が、それぞれの存在毎に独立して、非存在であるか、ＣＯ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＯＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）、ＣＨ２、ＣＨ２ＮＨ、またはＣＨ２Ｏであり、
Ｂ１及びＢ２が、それぞれの存在毎に、非存在であるか、アルキレン、置換アルキレンであり、ここで、１つ以上のメチレンが、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ２、Ｎ（ＲＮ）、Ｃ（Ｒ’）＝Ｃ（Ｒ”）、Ｃ≡Ｃ、またはＣ（Ｏ）のうちの１つ以上によって中断または終端され得、式中、Ｒ’及びＲ”がそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＯＨ、ＳＨ、またはＮ（ＲＮ）２であり、ＲＮが、それぞれの存在毎に独立して、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルであり、
Ｚが、非存在であるか、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣＨ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（Ｒａ）ＮＨＣＯ、ＣＨ＝ＮＯ、またはヘテロシクリルであり、式中、Ｒａが、Ｈまたはアミノ酸側鎖であり、
Ｅが、−ＣＨ２Ｎ（ＥＬ）ＣＨ２−であり、式中、ＥＬが、−Ｄ３−Ｂ３−Ｄ３’−Ｒｘであり、Ｄ３及びＤ３’が、それぞれの存在毎にそれぞれ独立して、非存在であるか、ＣＯ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＯＣ（Ｏ）、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ、ＣＨ２、ＣＨ２ＮＨ、またはＣＨ２Ｏであり、Ｒｘが、コレステリルまたはカチオン性脂質であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。
【００３３】
リンカーは、式ＩＶ、Ｖ、またはＶＩのアミノトリオールをさらに含み得、
【化３０】
0006784750.tif 000031
式中、Ｌ４、Ｌ５、Ｌ６、及びＬ７が、それぞれの存在毎に独立して、以下の構造を含み、
【化３１】
0006784750.tif 000032
式中、
Ａ、Ｄ１、Ｄ１’、Ｄ２、Ｄ２’が、それぞれの存在毎に独立して、非存在であるか、ＣＯ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＯＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）、ＣＨ２、ＣＨ２ＮＨ、またはＣＨ２Ｏであり、
Ｂ１及びＢ２が、それぞれの存在毎に、非存在であるか、アルキレン、置換アルキレンであり、ここで、１つ以上のメチレンが、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ２、Ｎ（ＲＮ）、Ｃ（Ｒ’）＝Ｃ（Ｒ”）、Ｃ≡Ｃ、またはＣ（Ｏ）のうちの１つ以上によって中断または終端され得、式中、Ｒ’及びＲ”がそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＯＨ、ＳＨ、またはＮ（ＲＮ）２であり、ＲＮが、それぞれの存在毎に独立して、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルであり、
Ｚが、非存在であるか、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣＨ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（Ｒａ）ＮＨ、ＣＯ、ＣＨ＝ＮＯ、またはヘテロシクリルであり、式中、Ｒａが、Ｈまたはアミノ酸側鎖であり、
Ｅが、−ＣＨ２Ｎ（ＥＬ）ＣＨ２−であり、式中、ＥＬが、−Ｄ３−Ｂ３−Ｄ３’−Ｒｘであり、Ｄ３及びＤ３’が、それぞれの存在毎にそれぞれ独立して、非存在であるか、ＣＯ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＯＣ（Ｏ）、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ、ＣＨ２、ＣＨ２ＮＨ、またはＣＨ２Ｏであり、Ｒｘが、コレステリルまたはカチオン性脂質であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。
【００３４】
Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３のうちの１つ以上は、親油性物質を含み得る。親油性物質は、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、１−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、１，３−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、１，３−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ−３−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ−３−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチル、及びフェノキサジンから選択される。好ましい親油性物質は、コレステリル、例えばコレステロールである。
【００３５】
Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３のうちの１つ以上は、炭水化物を含む。炭水化物は、好ましくは、ＧａｌＮＡｃ、アロース、アルトロース、アラビノース、クラジノース、エリトロース、エリトルロース、フルクトース、Ｄ−フシトール、Ｌ−フシトール、フコサミン、フコース、フクロース、ガラクトサミン、Ｄ−ガラクトサミニトール、ガラクトース、グルコサミン、Ｎ−アセチル−グルコサミン、グルコサミニトール、グルコース、グルコース−６−ホスフェート、グロースグリセルアルデヒド、Ｌ−グリセロ−Ｄ−マンノ−ヘプトース、グリセロール、グリセロン、グロース、イドース、リキソース、マンノサミン、マンノース、マンノース−６−ホスフェート、プシコース、キノボース、キノボサミン、ラムニトール、ラムノサミン、ラムノース、リボース、リブロース、セドヘプツロース、ソルボース、タガトース、タロース、酒石酸、トレオース、キシロース、及びキシルロースから選択される単糖である。単糖は、好ましくは、Ｄ配置またはＬ配置である。単糖は、デオキシ糖、アミノ糖、チオ糖、セレノ糖、テルロ糖、アザ糖、イミノ糖、ホスファノ糖、ホスファ糖、Ｃ−置換単糖、不飽和単糖、アルジトール、アルドン酸、ケトアルドン酸、ウロン酸、またはアルダル酸から選択され得る。炭水化物は、アベクオース、アクラボース、アヌセトース、アミロペクチン、アミロース、アピオース、アルカノース、アスカリロース、アスコルビン酸、ボイビノース、セロビオース、セロビオース、セルロース、カコトリオース、カルコース、キチン、コリトース、シクロデキストリン、シマロース、デキストリン、２−デオキシリボース、２デオキシグルコース、ジギノース、ジギタロース、ジギトキソース、エバロース、エベミトロース、フルクトオリゴ糖、ガルト−オリゴ糖、ゲンチアノース、ゲンチオビオース、グルカン、グルコーゲン、グリコーゲン、ハマメロース、ヘパリン、イヌリン、イソレボグルコセノン、イソマルトース、イソマルトトリオース、イソパノース、コージビオース、ラクトース、ラクトサミン、ラクトセジアミン、ラミナラビオース、レボグルコサン、レボグルコセノン、β−マルトース、マルトリオース、マンナン−オリゴ糖、マンニノトノース、メレジトース、メリビオース、ムラミン酸、ミカロース、ミシノース、ノイラミン酸、ニゲロース、ノジリマイシン、ノビオース、オレアンドロース、パノース、パラトース、プランテオース、ヌメベロース、ラフィノース、ロジノース、ルチノース、サルメントース、セドヘプツロース、セドヘプツロサン、ソラトリオース、ソフォロース、スタキオース、ストレプトース、スクロース、アム−トレハロース、トレハロサミン、ツラノース、チベロース、キシロビオース、またはウンベリフェロースを含む二糖、三糖、または多糖であり得る。好ましくは、炭水化物は、ＧａｌＮＡｃまたはＤ−ガラクトースである。
【００３６】
Ｌ１、Ｌ２、及び／またはＬ３は、ポリペプチドを含み得る。ポリペプチドは、細胞受容体のリガンドであり得、例えば、ＲＧＤまたはトランスフェリンのＴｆＲ結合ドメインを含むＴｆＲのリガンドである。ポリペプチドは、抗体であり得る。
【００３７】
Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３は独立して、以下からなるリンカーを含み得、
【化３２】
0006784750.tif 000033
式中、
Ａ及びＤが、それぞれの存在毎に独立して、非存在であるか、ＣＯ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＯＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）、ＣＨ２、ＣＨ２ＮＨ、またはＣＨ２Ｏであり、
Ｂが、非存在であるか、アルキレン、置換アルキレンであり、ここで、１つ以上のメチレンが、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ２、Ｎ（ＲＮ）、Ｃ（Ｒ’）＝Ｃ（Ｒ”）、Ｃ≡Ｃ、またはＣ（Ｏ）のうちの１つ以上によって中断または終端され得、式中、Ｒ’及びＲ”がそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＯＨ、ＳＨ、またはＮ（ＲＮ）２であり、ＲＮが、それぞれの存在毎に独立して、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルであり、
Ｚが、非存在であるか、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣＨ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（Ｒａ）ＮＨ、ＣＯ、ＣＨ＝ＮＯ、またはヘテロシクリルであり、式中、Ｒａが、Ｈまたはアミノ酸側鎖であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。
【００３８】
Ｌ２もしくはＬ３、または両方は、ポリエチレングリコールを含むリンカーを含み得る。好ましくは、Ｌ２もしくはＬ３、または両方は、アミド結合を含むリンカーを含む。より好ましくは、Ｌ２もしくはＬ３、または両方は、−Ｏ（ＣＨ２）４（ＣＯ）ＮＨ（ＣＨ２）３ＮＨ（ＣＯ）（ＣＨ２）２Ｏ−を含むリンカーを含み、リガンドは、ＧａｌＮＡｃである。好ましくは、Ｌ１は、−Ｏ（ＣＨ２）１０Ｏ−を含むリンカーを含み、リガンドは、コレステロールである。最も好ましくは、Ｌ１は、−Ｏ（ＣＨ２）１０Ｏ−を含むリンカーを含み、Ｌ１リガンドは、コレステロールであり、Ｌ２及びＬ３はともに、−Ｏ（ＣＨ２）４（ＣＯ）ＮＨ（ＣＨ２）３ＮＨ（ＣＯ）（ＣＨ２）２Ｏ−を含むリンカーを含み、関連リガンドは、ＧａｌＮＡｃである。
定義
【００３９】
「少なくとも１つ」は、１つ以上（例えば、１〜３、１〜２、または１）を意味する。
【００４０】
「組成物」は、指定された成分を指定された量で含む生成物、ならびに指定された成分を指定された量で組み合わせることによって直接的または間接的に生じる任意の生成物を含む。
【００４１】
本発明の処置方法において、他の医薬との式１、Ｉ、及びＩＩの化合物の投与を記載するのに使用される「と組み合わせて」は、式１、Ｉ、及びＩＩの化合物と他の医薬が、個別の剤形で逐次的にもしくは同時に投与されるか、または同じ剤形で同時に投与されることを意味する。
【００４２】
「哺乳動物」は、ヒトもしくはその他の哺乳動物を意味するか、または人間を意味する。
【００４３】
「患者」は、ヒト及び他の哺乳動物の両方を含み、好ましくはヒトを含む。
【００４４】
「アルキル」は、飽和または不飽和、直鎖または分岐した炭化水素鎖である。多様な実施形態において、アルキル基は、１〜１８個の炭素原子を有する、すなわち、Ｃ１〜Ｃ１８基であるか、またはＣ１〜Ｃ１２基、Ｃ１〜Ｃ６基、またはＣ１〜Ｃ４基である。独立して、多様な実施形態において、アルキル基は、０個の分岐（すなわち、直鎖である）、１個の分岐、２個の分岐、または２個より多い分岐を有する。「アルケニル」は、１個の二重結合、２個の二重結合、２個より多い二重結合を有し得る不飽和アルキルである。「アルキナール（Ａｌｋｙｎａｌ）」は、１個の三重結合、２個の三重結合、または２個より多い三重結合を有し得る不飽和アルキルである。アルキル鎖は、１個の置換基（すなわち、アルキル基は一置換されている）、または１〜２個の置換基、または１〜３個の置換基、または１〜４個の置換基等で、任意選択で置換されていてもよい。置換基は、ヒドロキシ、アミノ、アルキルアミノ、ボロニル、カルボキシ、ニトロ、およびシアノなどからなる群から選択され得る。アルキル基が１個以上のヘテロ原子を取り込んでいる場合、そのアルキル基は本明細書でヘテロアルキル基と称される。アルキル基上の置換基が炭化水素である場合、生じた基は単に置換アルキルと称される。多様な態様において、置換基を含むアルキル基は、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、または７個未満の炭素を有する。
【００４５】
「低級アルキル」は、鎖が直鎖であっても分岐していてもよい、その鎖中に１〜６個の炭素原子を有する基を意味する。適切なアルキル基の非限定的な例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、及びヘキシルが挙げられる。
【００４６】
「アルコキシ」は、アルキル−Ｏ−基（式中、アルキルは上で定義した通りである）を意味する。アルコキシ基の非限定的な例としては、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ及びヘプトキシが挙げられる。親部分への結合はエーテル酸素を介する。
【００４７】
「アルコキシアルキル」は、アルコキシ−アルキル基（式中、アルコキシ及びアルキルは前述した通りである）を意味する。好ましいアルコキシアルキルは、低級アルキル基を含む。親部分への結合はアルキルを介する。
【００４８】
「アルキルアリール」は、アルキル−アリール基（式中、アルキル及びアリールは前述した通りである）を意味する。好ましいアルキルアリールは低級アルキル基を含む。親部分への結合はアリールを介する。
【００４９】
「アミノアルキル」は、アルキル基を介して親部分に結合している、ＮＨ２−アルキル基（式中、アルキルは上で定義した通りである）を意味する。
【００５０】
「カルボキシアルキル」は、アルキル基を介して親部分に結合している、ＨＯＯＣ−アルキル基（式中、アルキルは上で定義した通りである）を意味する。
【００５１】
「市販の化学物質」及び本明細書に示す実施例で使用した化学物質は、標準的な商業的供給源から入手することができる。
【００５２】
「化学文献に記載された化合物」は、当業者に公知の、化合物及び化学反応を対象とする参考図書及びデータベースによって同定することができる。本明細書に開示の化合物の調製に有用な反応物の合成を詳述する、または本明細書に開示の化合物の調製を記載する論文への参照を提供する適切な参考図書及び専門書には、例えば、Ｗａｇｎｅｒ，ＳＹＮＴＨＥＴＩＣ  ＯＲＧＡＮＩＣ  ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ，ＮＹ，１９５３、Ｓａｎｄｌｅｒ，ＯＲＧＡＮＩＣ  ＦＵＮＣＴＩＯＮＡＬ  ＧＲＯＵＰ  ＰＲＥＰＡＲＡＴＩＯＮＳ，２ｎｄ  Ｅｄ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ，１９８３、Ｈｏｕｓｅ，ＭＯＤＥＲＮ  ＳＹＮＴＨＥＴＩＣ  ＲＥＡＣＴＩＯＮＳ，２ｎｄ  Ｅｄ．，ＷＡ  Ｂｅｎｊａｍｉｎ，Ｍｅｎｌｏ  Ｐａｒｋ，ＣＡ，１９７２、Ｇｌｉｃｈｒｉｓｔ，ＨＥＴＥＲＯＣＹＣＬＩＣ  ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ，２ｎｄ  Ｅｄ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，ＮＹ，１９９２、Ｍａｒｃｈ，ＡＤＶＡＮＣＥＤ  ＯＲＧＡＮＩＣ  ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ：ＲＥＡＣＴＩＯＮＳ，ＭＥＣＨＡＮＩＳＭＳ  ＡＮＤ  ＳＴＲＵＣＴＵＲＥ，５ｔｈ  Ｅｄ．，Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，ＮＹ，２００１が挙げられる。
【００５３】
「ハロ」は、フルオロ基、クロロ基、ブロモ基、またはヨード基を意味する。好ましくは、フルオロ、クロロまたはブロモであり、より好ましくは、フルオロ及びクロロである。
【００５４】
「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素を意味する。好ましくは、フッ素、塩素及び臭素である。
【００５５】
「ヘテロアルキル」は、飽和または不飽和、直鎖または分岐した、炭素及び少なくとも１個のヘテロ原子を含む鎖である。ヘテロアルキル基は、多様な実施形態において、１個のヘテロ原子（on  heteroatom）、または１〜２個のヘテロ原子、または１、２、もしくは３個のヘテロ原子、または１、ｅ、３、もしくは４個のヘテロ原子を有し得る。一態様において、ヘテロアルキル鎖は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、または１８（すなわち、１〜１８）員の原子（炭素及びヘテロ原子）を含み、多様な実施形態において、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、もしくは１２（１〜１２）、または１〜６、または１〜４員の原子を含む。独立して、多様な実施形態において、ヘテロアルキル基は、分岐を有しない（すなわち、直鎖である）、１個の分岐、２個の分岐、または２個より多い分岐を有する。独立して、一実施形態において、ヘテロアルキル（ｈｅｔｅｒｅｏａｌｋｙｌ）基は飽和している。別の実施形態において、ヘテロアルキル基は不飽和である。多様な実施形態において、不飽和ヘテロアルキル（ｈｅｔｅｒｏｌｋｙｌ）は、１個の二重結合、２個の二重結合、２個より多い二重結合、及び／または１個の三重結合、２個の三重結合、もしくは２個より多い三重結合を有し得る。ヘテロアルキル鎖は置換であっても非置換であってもよい。一実施形態において、ヘテロアルキル鎖は非置換である。別の実施形態において、ヘテロアルキル鎖は置換されている。置換ヘテロアルキル鎖は、１個の置換基（すなわち、一置換によって）を有し得るか、例えば１〜２個の置換基、または１〜３個の置換基、または１〜４個の置換基を有し得る。例示的なヘテロアルキル置換基としては、エステル（−Ｃ（Ｏ）ＯＲ）及びカルボニル（−Ｃ（Ｏ）−）が挙げられる。
【００５６】
「ヒドロキシアルキル」は、ＨＯ−アルキル基（式中、アルキルは先に定義した通りである）を意味する。好ましいヒドロキシアルキルは低級アルキルを含む。適切なヒドロキシアルキル基の非限定的な例としては、ヒドロキシメチル及び２−ヒドロキシエチルが挙げられる。
【００５７】
「水和物」は、溶媒分子がＨ２Ｏである溶媒和物である。
【００５８】
「親油性分子」及び「脂質」は、脂肪酸のエステルを含む有機化合物を意味し、水に不溶性であるが、多くの有機溶媒に可溶性であることを特徴とする。脂質は、通常、少なくとも３つのクラス、（１）脂肪、及び油、ならびにワックスを含む「単純脂質」、（２）リン脂質及び糖脂質を含む「複合脂質」、ならびに（３）ステロイドなどの「誘導脂質」に分けられる。
【００５９】
「溶媒和物」は、本開示の化合物と１つ以上の溶媒分子との物理的会合を意味する。この物理的会合は、様々な程度のイオン結合及び共有結合を伴い、これには水素結合が含まれる。ある特定の例では、例えば１つ以上の溶媒分子が結晶性固体の結晶格子中に取り込まれたとき、溶媒和物は単離することができる。「溶媒和物」は、溶液相及び単離可能な溶媒和物の両方を包含する。適切な溶媒和物の非限定的な例としては、エタノレート、およびメタノレートなどが挙げられる。
【００６０】
「脂質封入」は、完全に封入された、部分的に封入された、またはそれらの両方のｍＲＮＡなどの治療用核酸を提供する脂質粒子を意味し得る。好ましい実施形態では、核酸（例えば、ｍＲＮＡ）は、脂質粒子中に完全に封入される。
【００６１】
「脂質結合体」は、脂質粒子の凝集を阻害する結合体化脂質を意味する。そのような脂質結合体としては、例えば、ジアルキルオキシプロピルにカップリングされたＰＥＧ（例えば、ＰＥＧ−ＤＡＡ結合体）、ジアシルグリセロールにカップリングされたＰＥＧ（例えば、ＰＥＧ−ＤＡＧ結合体）、コレステロールにカップリングされたＰＥＧ、ホスファチジルエタノールアミンにカップリングされたＰＥＧ、及びセラミドに結合体化されたＰＥＧ、カチオン性ＰＥＧ脂質、ポリオキサゾリン（ＰＯＺ）−脂質結合体、ポリアミドオリゴマー（例えば、ＡＴＴＡ−脂質結合体）、ならびにそれらの混合物などのＰＥＧ−脂質結合体が挙げられるが、これらに限定されない。ＰＥＧまたはＰＯＺは、脂質と直接的に結合体化し得るか、またはリンカー部分を介して脂質に連結され得る。例えば、非エステル含有リンカー部分及びエステル含有リンカー部分を含む、ＰＥＧまたはＰＯＺを脂質にカップリングするのに適切ないかなるリンカー部分も使用され得る。ある特定の好ましい実施形態では、アミドまたはカルバミン酸などの非エステル含有リンカー部分が使用される。
【００６２】
「置換」という用語は、水素以外の指定された基での、または同一であっても異なっていてもよい、それぞれが例えば独立して選択される、１つもしくは複数の基、部分、もしくはラジカルでの置換を意味する。
【００６３】
「ヌクレオチド」とは、本明細書で使用する場合、当技術分野において認識されるように、当技術分野において周知の天然塩基（標準）、及び修飾塩基を含むものである。そのような塩基は、一般に、ヌクレオチド糖部分の１’位に位置している。ヌクレオチドは一般に塩基、糖、及びリン酸基を含む。ヌクレオチドは、非修飾であり得るか、または糖、ホスフェート、及び／または塩基部分において修飾され得る（互換的に、ヌクレオチド類似体、修飾ヌクレオチド、非天然ヌクレオチド、非標準ヌクレオチドなどとも称される）。核酸分子に導入することができる塩基修飾の非限定的な例のいくつかとして、イノシン、プリン、ピリジン−４−オン、ピリジン−２−オン、フェニル、シュードウラシル、２，４，６−トリメトキシベンゼン、３−メチルウラシル、ジヒドロウリジン、ナフチル、アミノフェニル、５−アルキルシチジン（例えば、５−メチルシチジン）、５−アルキルウリジン（例えば、リボチミジン）、５−ハロウリジン（例えば、５−ブロモウリジン）または６−アザピリミジンもしくは６−アルキルピリミジン（例えば、６−メチルウリジン）、およびプロピンなどが挙げられる。「修飾塩基」とは、本態様では、１’位におけるアデニン、グアニン、シトシン、及びウラシル以外のヌクレオチド塩基またはそれらの同等物を意味する。
【００６４】
「核酸」は、デオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチド及び一本鎖または二本鎖形態のそれらのポリマーを指す。この用語は、合成、天然由来及び非天然由来の、参照核酸と類似の結合特性を有し、参照ヌクレオチドと類似の様式で代謝される、公知のヌクレオチド類似体または修飾された主鎖残基もしくは連結を含む核酸を包含する。そのような類似体の例としては、限定されないが、ホスホロチオエート、ホスホルアミデート、メチルホスホネート、キラル−メチルホスホネート、２’−Ｏ−メチルリボヌクレオチド、ペプチド−核酸（ＰＮＡ）が挙げられる。
【００６５】
「ＲＮＡ」とは、少なくとも１つのリボヌクレオチド残基を含む分子を意味する。「リボヌクレオチド」とは、β−Ｄ−リボ−フラノース部分の２’位にヒドロキシル基を有するヌクレオチド、または非環式類似体（β−Ｄ−リボ−フラノースのＣ２’−Ｃ３’結合は非存在である（ＵＮＡ））を意味する。この用語は、二本鎖ＲＮＡ、一本鎖ＲＮＡ、単離ＲＮＡ、例えば、部分的に精製されたＲＮＡ、本質的に純粋なＲＮＡ、合成ＲＮＡ、組換え作製ＲＮＡ、ならびに１つ以上のヌクレオチドの付加、欠失、置換及び／または改変によって天然由来ＲＮＡとは異なる改変ＲＮＡを含む。そのような改変には、例えば干渉ＲＮＡの末端（複数可）への、または内部への、例えばＲＮＡの１つ以上のヌクレオチドでの、非ヌクレオチド材料の付加が含まれ得る。本発明のＲＮＡ分子中のヌクレオチドは、非天然由来ヌクレオチドもしくは化学合成ヌクレオチドまたはデオキシヌクレオチドなどの非標準ヌクレオチドも含み得る。これらの改変ＲＮＡは、類似体または天然由来ＲＮＡの類似体と称され得る。本明細書で使用する場合、「リボ核酸」及び「ＲＮＡ」という用語は、少なくとも１つのリボヌクレオチド残基を含む分子を指し、これには、ｓｉＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、一本鎖ＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ノンコーディングＲＮＡ、及び多価ＲＮＡが含まれる。
【００６６】
本明細書で使用する場合、相補的なヌクレオチド塩基は、互いに水素結合を形成するヌクレオチド塩基の対である。アデニン（Ａ）はチミン（Ｔ）またはＲＮＡではウラシル（Ｕ）と対を形成し、グアニン（Ｇ）はシトシン（Ｃ）と対を形成する。核酸の相補的セグメントまたは鎖は、互いにハイブリダイズする（水素結合によって連結する）。「相補的」とは、核酸が、伝統的なワトソン−クリックまたは他の非伝統的な結合様式によって別の核酸配列と水素結合（複数可）を形成し得ることを意味する。
【００６７】
「アンチセンス核酸」とは、ＲＮＡ−ＲＮＡ相互作用またはＲＮＡ−ＤＮＡ相互作用またはＲＮＡ−ＰＮＡ（タンパク質核酸）相互作用によって標的ＲＮＡに結合し、標的ＲＮＡの活性を変える非酵素的核酸分子を意味する。典型的には、アンチセンス分子は、アンチセンス分子の単一の連続配列に沿って、標的配列と相補的である。しかしながら、ある特定の実施形態では、アンチセンス分子は、基質分子がループを形成するように基質に結合し得る、かつ／またはアンチセンス分子は、アンチセンス分子がループを形成するように結合し得る。したがって、アンチセンス分子は、２つの（もしくはさらに多くの）非連続の基質配列と相補的であり得るか、またはアンチセンス分子の２つの（もしくはさらに多くの）非連続の配列部分が標的配列と相補的であり得るか、あるいはこの両方であり得る。さらに、アンチセンスＤＮＡは、ＤＮＡ−ＲＮＡ相互作用によってＲＮＡを標的とすることによってＲＮａｓｅ  Ｈを活性化するのに使用することができ、そのＲＮａｓｅ  Ｈは二本鎖中の標的ＲＮＡを消化する。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、標的ＲＮＡのＲＮａｓｅ  Ｈ切断を活性化することができる、１つ以上のＲＮａｓｅ  Ｈ活性化領域を含み得る。アンチセンスＤＮＡは、化学合成することができるか、一本鎖ＤＮＡ発現ベクターまたはその同等物を使用することによって発現することができる。「アンチセンスＲＮＡ」は、標的遺伝子ｍＲＮＡと相補的な配列を有するＲＮＡ鎖であり、標的遺伝子ｍＲＮＡに結合することによってＲＮＡｉを誘導し得る。「アンチセンスＲＮＡ」は、標的遺伝子ｍＲＮＡと相補的な配列を有するＲＮＡ鎖であり、標的遺伝子ｍＲＮＡに結合することによってＲＮＡｉを誘導すると考えられる。「センスＲＮＡ」はアンチセンスＲＮＡと相補的な配列を有しており、その相補的アンチセンスＲＮＡにアニールしてｉＮＡを形成する。これらのアンチセンスＲＮＡ及びセンスＲＮＡはＲＮＡシンセサイザーで従来合成されてきた。
【００６８】
マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）は、遺伝子発現を調節する、長さ２１〜２３のヌクレオチドの一本鎖ＲＮＡ分子であり、ｍｉＲＮＡは、ＤＮＡから転写される遺伝子によりコードされるが、タンパク質に翻訳されない（ノンコーディングＲＮＡ）；その代わり、ｍｉＲＮＡは、ｐｒｉ−ｍｉＲＮＡとして公知の一次転写産物から、ｐｒｅ−ｍｉＲＮＡと呼ばれる短いステム−ループ構造物にプロセシングされ、最終的に機能性ｍｉＲＮＡにプロセシングされる。成熟ｍｉＲＮＡ分子は１つ以上のメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）分子と部分的に相補的であり、その主な機能は遺伝子発現を下方制御することである。
【００６９】
本明細書で使用する場合、短鎖干渉ＲＮＡまたはサイレンシングＲＮＡとして時に知られる、「低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）」という用語は、生物学において多種多様な役割を果たす、長さ１６〜４０ヌクレオチドの、二本鎖ＲＮＡ分子のクラスを指すのに用いられる。最も注目すべきことに、ｓｉＲＮＡはＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）経路に関与し、特定の遺伝子の発現に干渉する。ＲＮＡｉ経路におけるそれらの役割に加えて、ｓｉＲＮＡは、例えば、抗ウイルス機構として、ＲＮＡｉ関連経路においても、またはゲノムのクロマチン構造を形成するのにおいても作用し、これらの経路の複雑さが現在解明されているのみである。
【００７０】
本明細書で使用する場合、ＲＮＡｉという用語は、ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）により制御され、細胞内の短い二本鎖ＲＮＡ分子により開始されるＲＮＡ依存性遺伝子サイレンシング過程を指し、ここで短い二本鎖ＲＮＡ分子は、触媒ＲＩＳＣ成分アルゴノートと相互作用する。二本鎖ＲＮＡまたはＲＮＡ様ｉＮＡまたはｓｉＲＮＡが外来性である場合（ＲＮＡゲノムをもつウイルスによる感染またはトランスフェクトしたｉＮＡもしくはｓｉＲＮＡに由来する）、ＲＮＡまたはｉＮＡは細胞質に直接移入され、酵素ダイサーにより短い断片に切断される。開始ｄｓＲＮＡは、ゲノム中のＲＮＡコード遺伝子から発現されるｐｒｅ−マイクロＲＮＡにおけるように、内在性（細胞起源）でもあり得る。そのような遺伝子からの一次転写産物は、まずプロセシングされて核内でｐｒｅ−ｍｉＲＮＡの特徴的なステム−ループ構造物を形成し、次いで細胞質に輸送され、ダイサーにより切断される。したがって、外来性及び内在性の２つのｄｓＲＮＡ経路は、ＲＩＳＣ複合体に集中する。ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）の活性成分は、アルゴノートタンパク質と呼ばれるエンドヌクレアーゼであり、それらが結合したｓｉＲＮＡまたはｉＮＡと相補的な標的ｍＲＮＡ鎖を切断する。ダイサーにより生成される断片は二本鎖であるので、それらはそれぞれ理論上では機能性ｓｉＲＮＡまたはｉＮＡを生成し得る。しかしながら、２つの鎖のうち一本のみが、ガイド鎖として知られており、アルゴノートタンパク質と結合し、遺伝子サイレンシングを誘導する。他方のアンチガイド鎖またはパッセンジャー鎖は、ＲＩＳＣ活性化中に分解される。
【００７１】
また、本開示の化合物の多形も本開示の範囲内である（すなわち、式Ｉの化合物の多形は、本開示の範囲内である）。
【００７２】
本発明の化合物のすべての立体異性体（例えば、幾何異性体、および光学異性体など）（化合物の塩、溶媒和物、及びプロドラッグのもの、ならびにプロドラッグの塩及び溶媒和物のものを含めて）は、例えば、多様な置換基上の不斉炭素によって存在し得るものなど、エナンチオマー形態（不斉炭素が存在しなくても存在し得る）、回転異性体形態、アトロプ異性体及びジアステレオマー形態を含めて、本開示の範囲内であると企図される。本開示の化合物の個々の立体異性体は、例えば、他の異性体を実質的に含まなくてもよく、例えば、ラセミ体として、またはすべての他の、もしくは他の選択された立体異性体と混合されていてもよい。本明細書の化合物のキラル中心は、ＳまたはＲ配置を有し得る。「塩」、および「溶媒和物」などの用語の使用は、本開示の化合物のエナンチオマー、立体異性体、回転異性体、互変異性体、ラセミ体またはプロドラッグの塩及び溶媒和物にも等しく当てはまることが意図される。
【００７３】
化学療法剤（抗新生物剤）として使用することができる化合物のクラスには、アルキル化剤、代謝拮抗物質、天然生成物及びそれらの誘導体、ホルモン及びステロイド（合成類似体を含む）ならびに合成物質が含まれる。これらのクラス内の化合物の例を下に示す。
合成のプロセス
【００７４】
本説明の別の態様は、式４５に示されるマルチリガンド化合物の作製プロセスであり、
【化３３】
0006784750.tif 000034
このプロセスは、
ｉ．アミノトリオール化合物を、
【化３４】
0006784750.tif 000035
親油性物質４２と反応させるステップと、
【化３５】
0006784750.tif 000036
ｉｉ．ステップｉの生成物からヒドロキシル保護基を除去するステップと、
ｉｉｉ．ステップｉｉの生成物を、ＮａＯＨ中の（ＣＨＣＨ）ＣＯＯ−ｔ−ブチルと反応させるステップと、
ｉｖ．ステップｉｉｉの生成物にアミノ保護基を付加するステップと、
ｖ．ステップｉｖの生成物を、ＥＤＣ及びＨＯＢＴを用いて、ＢｏｃＮ（ＣＨ２）３ＮＨ２と反応させるステップと、
ｖｉ．ステップｖの生成物をＧａｌＮＡｃ酸と、
【化３６】
0006784750.tif 000037
ＥＤＣ、ＨＯＢＴ、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを用いて反応させるステップと、を含む。
このプロセスの出発物質は、好ましくは、式１、５、または９の構造を有するアミノトリオールである。
【化３７】
0006784750.tif 000038
【００７５】
本説明の別の態様は、式５３に示されるマルチリガンド化合物の作製プロセスであり、
【化３８】
0006784750.tif 000039
このプロセスは、
ｉ．アミノトリオール化合物を、
【化３９】
0006784750.tif 000040
ｎ−Ｂｕ４ＮＦと反応させるステップと、
ｉｉ．ステップｉの生成物を、ＣＨ３Ｃ（ＯＣＨ３）２ＣＨ３及びｐ−トルエンスルホン酸と反応させるステップと、
ｉｉｉ．ステップｉｉの生成物を、ＬｉＢＨ４と反応させるステップと、
ｉｖ．ステップｉｉｉの生成物を、親油性物質４２と反応させるステップと、
【化４０】
0006784750.tif 000041
ｖ．ステップｉｖの生成物からヒドロキシル保護基を除去するステップと、
ｖｉ．ステップｖの生成物を、ＮａＯＨ中の（ＣＨＣＨ）ＣＯＯ−ｔ−ブチルと反応させるステップと、
ｖｉｉ．ｖｉの生成物にアミノ保護基を付加するステップと、
ｖｉｉｉ．ステップｖｉｉｉの生成物を、ＥＤＣ及びＨＯＢＴを用いて、ＢｏｃＮ（ＣＨ２）３ＮＨ２と反応させるステップと、
ｉｘ．ステップｉｘの生成物をＧａｌＮＡｃ酸と、
【化４１】
0006784750.tif 000042
ＥＤＣ、ＨＯＢＴ、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを用いて反応させるステップと、を含む。
このプロセスは、好ましくは、式１３、１９、または３０の構造を有するアミノトリオール化合物で開始する。
【化４２】
0006784750.tif 000043
【００７６】
本説明の別の態様は、式４５に示されるマルチリガンド化合物の作製プロセスであり、
【化４３】
0006784750.tif 000044
このプロセスは、
ｉ．式３８を有するアミノトリオール化合物を、
【化４４】
0006784750.tif 000045
親油性物質４２と反応させるステップと、
【化４５】
0006784750.tif 000046
ｉｉ．ステップｉの生成物からヒドロキシル保護基を除去するステップと、
ｉｉｉ．ステップｉｉの生成物を、ＮａＯＨ中の（ＣＨＣＨ）ＣＯＯ−ｔ−ブチルと反応させるステップと、
ｉｖ．ステップｉｉｉの生成物にアミノ保護基を付加するステップと、
ｖ．ステップｉｖの生成物を、ＥＤＣ及びＨＯＢＴを用いて、ＢｏｃＮ（ＣＨ２）３ＮＨ２と反応させるステップと、
ｖｉ．ステップｖの生成物をＧａｌＮＡｃ酸と、
【化４６】
0006784750.tif 000047
ＥＤＣ、ＨＯＢＴ、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを用いて反応させるステップと、を含む。
投与のための組成物及び製剤
【００７７】
本明細書における説明の別の態様は、式Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩのアミノトリオールからなる化合物を含む薬学的組成物であって、
【化４７】
0006784750.tif 000048
式中、Ｒが、治療用分子を含み、Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３が、それぞれの存在毎に独立して、炭水化物、ポリペプチド、または親油性物質からなる群から選択されるリガンドを含む。薬学的組成物は、薬学的に許容される対イオンまたは薬学的に許容される賦形剤をさらに含み得る。好ましくは、治療用分子は、ＲＮＡであり、より好ましくは、二本鎖ｓｉＲＮＡである。二本鎖ｓｉＲＮＡは、ＵＮＡを含み得る。好ましくは、Ｌ２及びＬ３リガンドは、炭水化物であり、最も好ましくは、１’−Ｏ−（Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトシルアミン）または１’−Ｏ−（Ｄ−ガラクトース）である。
【００７８】
本明細書における説明の組成物は、多様な経路により、例えば、全身送達を実施するために静脈内経路、非経口経路、腹腔内経路または局所経路を介して投与することができる。一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡは、例えば、肺もしくは肝臓などの標的組織の細胞において、または炎症組織において、細胞内に送達され得る。一部の実施形態では、本開示は、インビボでｓｉＲＮＡを送達するための方法を提供する。核酸−脂質組成物は、被験体に静脈内、皮下、または腹腔内投与することができる。一部の実施形態では、本開示は、哺乳動物の被験体の肺に干渉ＲＮＡをインビボで送達するための方法を提供する。
【００７９】
本開示の組成物及び方法は、経口、直腸、膣、鼻内、肺内、または経皮もしくは皮膚送達、あるいは目、耳、皮膚または他の粘膜表面への局所送達を含む多種多様な粘膜投与様式によって被験体に投与することができる。本開示の一部の態様では、粘膜組織層は、上皮細胞層を含む。上皮細胞は、肺、気管、気管支、肺胞、鼻、頬、表皮、または胃腸のものであり得る。本開示の組成物は、機械的噴霧デバイスなどの従来のアクチュエータ、ならびに加圧式、電気作動式または他の種類のアクチュエータを使用して投与することができる。組成物は、好ましくは注入によって皮下に投与される。
【００８０】
いくつかの実施形態では、本開示は、本開示の組成物を含有する溶液、及び肺、粘膜、または鼻内スプレーまたはエアロゾル用のアクチュエータを含む医薬品である。
【００８１】
本開示の組成物の剤形は、液滴もしくはエマルションの形態の、またはエアロゾルの形態の液体であり得る。
【００８２】
本開示の組成物の剤形は、投与前に液体中で再構成することができる、固体であり得る。固体は粉末として投与することができる。固体はカプセル剤、錠剤またはゲル剤の形態であり得る。
【００８３】
生物学的に活性な薬剤は、基剤またはビヒクルに分散してもよく、これは活性な薬剤及び任意の所望の添加剤を分散する能力を有する親水性化合物を含み得る。基剤は、ポリカルボン酸またはその塩、カルボン酸無水物（例えば、無水マレイン酸）の他のモノマー（例えば、メチル（メタ）アクリレート、アクリル酸等）とのコポリマー、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン等の親水性ビニルポリマー、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等のセルロース誘導体など、及びキトサン、コラーゲン、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、ヒアルロン酸等の天然ポリマー、ならびにこれらの無毒性の金属塩を含むがこれらに限定されない、広範囲の適切な担体から選択することができる。しばしば、生分解性ポリマーが基剤または担体として選択され、例えば、ポリ乳酸、ポリ（乳酸−グリコール酸）コポリマー、ポリヒドロキシ酪酸、ポリ（ヒドロキシ酪酸−グリコール酸）コポリマー及びこれらの混合物である。代替的にまたは加えて、ポリグリセリン脂肪酸エステル、スクロース脂肪酸エステル等の合成脂肪酸エステルなどを担体として採用することができる。親水性ポリマー及び他の担体を単独でまたは組み合わせて使用することができ、部分結晶化、イオン結合、および架橋などによって、担体に増強した構造的一体性を付与することができる。担体は、流体または粘性溶液、ゲル、ペースト、粉末、マイクロスフェア、及び鼻粘膜への直接適用のためのフィルムを含む多種多様な形態で提供することができる。本文脈における選択された担体の使用は、生物学的に活性な薬剤の吸収の促進をもたらし得る。
【００８４】
粘膜、鼻、または肺送達のための製剤は、基剤または賦形剤として親水性低分子量化合物を含有し得る。そのような親水性低分子量化合物は、水溶性の活性な薬剤、例えば生理学的に活性なペプチドまたはタンパク質が基剤から活性な薬剤が吸収される身体表面に拡散し得る通過媒体（ｐａｓｓａｇｅ  ｍｅｄｉｕｍ）を提供する。親水性低分子量化合物は、任意に粘膜または投与雰囲気から水分を吸収し、水溶性の活性ペプチドを溶解する。親水性低分子量化合物の分子量は、３，０００〜１０，０００ダルトンである。親水性低分子量化合物の例としては、ポリオール化合物、例えば、スクロース、マンニトール、ラクトース、Ｌ−アラビノース、Ｄ−エリトロース、Ｄ−リボース、Ｄ−キシロース、Ｄ−マンノース、Ｄ−ガラクトース、ラクツロース、セロビオース、ゲンチビオース、グリセリン、ポリエチレングリコール、及びこれらの混合物を含む、オリゴ、二及び単糖が挙げられる。親水性低分子量化合物のさらなる例としては、Ｎ−メチルピロリドン、アルコール（例えば、オリゴビニルアルコール、エタノール、エチレングリコール、プロピレングリコール等）、及びこれらの混合物が挙げられる。
【００８５】
本開示の組成物は、薬学的に許容される担体として、生理学的条件に近づけるのに必要な物質として、例えばｐＨ調整剤及び緩衝剤、張度調整剤、及び湿潤剤、例えば、酢酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、モノラウリン酸ソルビタン、オレイン酸トリエタノールアミン、及びこれらの混合物を代替的に含有してもよい。固体組成物には、例えば、医薬品グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルカム、セルロース、グルコース、スクロース、および炭酸マグネシウムなどを含む従来の無毒性の薬学的に許容される担体を使用することができる。
【００８６】
本明細書における説明のある特定の実施形態では、生物学的に活性な薬剤は、例えば徐放性ポリマーを含む組成物において、時限放出製剤（ｔｉｍｅ  ｒｅｌｅａｓｅ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）で投与することができる。活性な薬剤は、迅速な放出から保護する担体、例えば、ポリマー、マイクロカプセル化送達系または生体接着性ゲルなどの制御放出ビヒクルを使用して調製することができる。本開示の多様な組成物中の活性な薬剤の長時間送達は、組成物中に吸収を遅延させる剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムヒドロゲル及びゼラチンを含ませることによってもたらすことができる。
【００８７】
本明細書における説明の別の態様は、疾患の処置方法であり、式Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩのアミノトリオールからなる化合物を含む、治療上有効な量の薬学的組成物を投与することを含み、
【化４８】
0006784750.tif 000049
式中、Ｒが、治療用分子を含み、Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３が、それぞれの存在毎に独立して、炭水化物、ポリペプチド、または親油性物質からなる群から選択されるリガンドを含む。化合物は、第ＶＩＩ因子、Ｅｇ５、ＰＣＳＫ９、ＴＰＸ２、ａｐｏＢ、ＳＡＡ、ＴＴＲ、ＲＳＶ、ＰＤＧＦβ遺伝子、Ｅｒｂ−Ｂ遺伝子、Ｓｒｃ遺伝子、ＣＲＫ遺伝子、ＧＲＢ２遺伝子、ＲＡＳ遺伝子、ＭＥＫＫ遺伝子、ＪＮＫ遺伝子、ＲＡＦ遺伝子、Ｅｒｋ１／２遺伝子、ＰＣＮＡ（ｐ２１）遺伝子、ＭＹＢ遺伝子、ＪＵＮ遺伝子、ＦＯＳ遺伝子、ＢＣＬ−２遺伝子、Ｃｙｃｌｉｎ  Ｄ遺伝子、ＶＥＧＦ遺伝子、ＥＧＦＲ遺伝子、Ｃｙｃｌｉｎ  Ａ遺伝子、Ｃｙｃｌｉｎ  Ｅ遺伝子、ＷＮＴ−１遺伝子、β−カテニン遺伝子、ｃ−ＭＥＴ遺伝子、ＰＫＣ遺伝子、ＮＦＫＢ遺伝子、ＳＴＡＴ３遺伝子、サバイビン遺伝子、Ｈｅｒ２／Ｎｅｕ遺伝子、トポイソメラーゼＩ遺伝子、トポイソメラーゼＩＩα遺伝子、ｐ７３遺伝子における変異、ｐ２１（ＷＡＦｌ／ＣＩＰ１）遺伝子における変異、ｐ２７（ＫＩＰ１）遺伝子における変異、ＰＰＭ１Ｄ遺伝子における変異、ＲＡＳ遺伝子における変異、カベオリンＩ遺伝子における変異、ＭＩＢＩ遺伝子における変異、ＭＴＡＩ遺伝子における変異、Ｍ６８遺伝子における変異、腫瘍抑制遺伝子における変異、及びｐ５３腫瘍抑制遺伝子における変異からなる群から選択される標的遺伝子の発現をノックダウンするＲＮＡを含み得る。薬学的組成物は、好ましくは皮下に投与される。
【００８８】
ある特定の実施形態に関して本開示を説明し、多くの詳細を例示目的で示してきたが、本開示がさらなる実施形態を含むこと、また本明細書に記載した詳細のいくつかを本開示から逸脱することなくかなり変更し得ることが当業者には明らかであろう。本開示はそのようなさらなる実施形態、変更形態及び均等物を含む。特に、本開示は、多様な例示的な成分及び例の特徴、用語または要素の任意の組合せを含む。
【実施例】
【００８９】
本明細書に記載されるアミノトリオールは、選択的ステロイド／リンカー結合のための手段を提供する。上記の式Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｃ、ＩＩ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、及びＩＩＩｃの完全に脱保護された化合物は、図１〜７に示される反応式（equation）（１）〜（７）に記載される方法によって容易に合成する。化合物１、５、９、１３、１９、及び３０は、反応を妨げられない単一の−ＯＨ部分を有する識別された保護官能基を提供するか、または単一の−ＯＨが反応を妨げられないことを可能にするように保護官能基を操作する機会を提供するかのいずれかである。これは、反応式（１）〜（７）に記載されるように、Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３部分を選択的に導入する機会を提供する。Ｌ１は、コレステリル置換基であり、Ｌ２及びＬ３は、ＧａｌＮＡｃである。
実施例１
【化４９】
0006784750.tif 000050
【００９０】
式ＩＩＩａのアミノトリオールは、図１の反応式（１）に示される方法に従う反応により合成される。
【００９１】
反応式（１）の出発物質である化合物１は、Ｌｅｅ，２０１２，Ｊ  Ｏｒｇ  Ｃｈｅｍ，７７：３０８２−９８に記載されるように、図８に示される方法に従い作製される。既知のエポキシアセトニドから開始して、このプロセスは、（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−３−ヒドロキシアゼチジンを供給した。試薬及び条件は、以下の通りである。（ａ）ＮａＮ３、ＮＨ４Ｃｌ、２−メトキシエタノール、水９：１、還流、（ｂ）ＮａＨ、臭化ベンジル、ＴＢＡＩ、ＴＨＦ、室温、１時間、（ｃ）ＬｉＡｌＨ４、ＴＨＦ、（ｄ）塩化トシル、トリエチルアミン、ＣＨ２Ｃｌ２、室温、（ｅ）２Ｎ  ＨＣｌ：メタノール、４０℃、（ｆ）ＴＢＳＣｌ、トリエチルアミン、ＤＭＡＰ、ＣＨ２Ｃｌ２、（ｇ）ＰＰｈ３、ＤＩＡＤ、ＣＨ２Ｃｌ２、室温、（ｈ）Ｎａ、ナフタレン、ＤＭＥ、−６０℃、（ｉ）アルデヒド（ブチルアルデヒドまたはノニルアルデヒド）、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、ＣｌＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ、室温、（ｊ）ＴＢＡＦ、ＴＨＦ、室温、（ｋ）ＰｄＣｌ２、Ｈ２、メタノール。
実施例２
【化５０】
0006784750.tif 000051
【００９２】
式ＩＩＩｂのアミノトリオールは、図２の反応式（２）に示される方法に従い合成される。
【００９３】
反応式（２）の出発物質である化合物５は、Ｌｅｅに記載されるように、図９に示される方法に従い作製される。４員イミノ糖の合成は、Ｌ−グリセルアルデヒドアセトニドを、（ａ）ベンゼン中のカルベトキシメチレン−トリフェニルホスホランとの、灌流を伴うウィティッヒ反応に供することによって開始され、続いて（ｂ）アリルアルコールを供給するための、ＣＨ２Ｃｌ２中、−７８℃〜０℃での水素化ジイソブチルアルミニウム（ＤＩＢＡＬ−Ｈ）還元、（ｃ）クメンヒドロペルオキシド、（＋）−ジイソプロピルＬ−酒石酸塩（ＤＩＰＴ）、チタンテトライソプロポキシド（Ｔｉ（ＯｉＰｒ）４）、３Å分子篩、ＣＨ２Ｃｌ２を用いる−４０℃でのシャープレスエポキシ化、及び（ｄ）テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中、室温で１時間のＮａＨ、臭化ベンジル、ヨウ化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＩ）との反応によるヒドロキシル基の保護は、エポキシドを提供する。エポキシドは、（ｅ）還流下、９：１のメトキシエタノール：水中でＮＨ４Ｃｌ２を含むアジドナトリウムで開き、第二ヒドロキシル基は、（ｆ）ＮａＨ、臭化ベンジル、ＴＢＡＩ、ＴＨＦによって室温で１時間ベンジル化されてベンジルエーテルを産生する。アジド基を、（ｇ）ＴＨＦ中のＬｉＡｌＨ４で還元し、結果として得られるアミノ基を、（ｈ）トリエチルアミン及びＣＨ２Ｃｌ２中の塩化トシルと反応させてトシレートを形成する。中間物のアセトニド保護基は、（ｉ）２Ｎ  ＨＣｌ：メタノール中、４０℃で除去し、第一アルコールを（ｊ）ｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（ＴＢＳＣｌ）、トリエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、ＣＨ２Ｃｌ２中でシリルエーテル３３に変換する。４員環への閉環は、（ｋ）トリフェニル−ホスフィン、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）、ＣＨ２Ｃｌ２の室温でのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応によって達成され、これに続いて（ｌ）Ｎａ、ナフタレン、ジメトキシエタン（ＤＭＥ）による−６０℃でのＮ−トシル基の還元的除去によってアゼチジンを供給する。アゼチジンを、（ｍ）トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、ＣｌＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ中、室温でのブチルアルデヒド及びノニルアルデヒドによる還元的アミノ化に供し、続いて（ｎ）フッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）、ＴＨＦによる室温での脱シリル化によって中間物を得る。メタノール中のＰｄＣｌ２及び水素によるベンジル保護基の水素化分解（ｏ）により、目的の４員（２Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシアゼチジンを得た。
実施例３
【化５１】
0006784750.tif 000052
【００９４】
式ＩＩＩｃのアミノトリオールは、図３の反応式（３）に示される方法に従い合成される。
【００９５】
反応式（３）の出発物質である化合物９は、Ｌｅｅに記載されるように、図１０に示される方法に従い作製される。試薬及び条件：（ａ）ＮａＮ３、ＮＨ４Ｃｌ、２−メトキシエタノール、水９：１、還流、（ｂ）ＮａＨ、臭化ベンジル、ＴＢＡＩ、ＴＨＦ、室温、１時間、（ｃ）ＬｉＡｌＨ４、ＴＨＦ、（ｄ）塩化トシル、トリエチルアミン、ＣＨ２Ｃｌ２、室温、（ｅ）２Ｎ  ＨＣｌ：メタノール、４０℃、（ｆ）ＴＢＳＣｌ、トリエチルアミン、ＤＭＡＰ、ＣＨ２Ｃｌ２、（ｇ）ＰＰｈ３、ＤＩＡＤ、ＣＨ２Ｃｌ２、室温、（ｈ）Ｎａ、ナフタレン、ＤＭＥ、−６０℃、（ｉ）アルデヒド（ブチルアルデヒドまたはノニルアルデヒド）、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、ＣｌＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ、室温、（ｊ）ＴＢＡＦ、ＴＨＦ、室温、（ｋ）ＰｄＣｌ２、水素、メタノール。
実施例４
【化５２】
0006784750.tif 000053
【００９６】
式Ｉａのアミノトリオールは、図４に示される方法の反応式（４）に従い合成される。
【００９７】
反応式（４）の出発物質である化合物１３は、図１１及び１２に示されるように、Ｌｏｈｓｅ，２０００，Ｊ  Ｃｈｅｍ  Ｓｏｃ  Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ，Ｉ：６５９−６５に記載される通り調製される。図１２の３つの重要な中間物５〜７の合成は、図１１に示される方法に従う。合成のための出発物質は、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルピロカルボネートで保護された市販のエチル４−オキソピペリジン−３−カルボキシレート塩酸塩である。リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）での処理は、より反応性の５位において２−（トリメチルシリル）エトキシメチルクロリド（ＳＥＭ−Ｃ１）で選択的にアルキル化され得るジアニオンを生成する。保護基の完全な除去は、図１２に示される方法に従い、最初に反応の生成物をＣＨ２Ｃｌ２中の５０％  ＴＦＡで処理することに続いて、４Ｍ塩酸中の水性加水分解によって化合物を生じる。第２シリーズの誘導体は、最初にエステル官能基をＬｉＢＨ４で還元することに続いて、保護基の除去によって作製される。３つのビスヒドロキシメチル化合物はまた、重要な中間物の立体配置の正しい帰属の証拠として役立つ。
実施例５
【化５３】
0006784750.tif 000054
【００９８】
式Ｉｂの各異性体のアミノトリオールは、それぞれ図５及び６に示されるように、反応式（５）及び（６）の方法に従い合成される。反応式（５）及び（６）の出発物質である化合物１９は、Ｌｏｈｓｅの方法を用いて実施例４に記載される通り調製される。
実施例６
【化５４】
0006784750.tif 000055
【００９９】
式Ｉｃのアミノトリオールは、図７に示されるように、反応式（７）の方法に従い合成される。反応式（７）の出発物質である化合物３０は、Ｌｏｈｓｅの方法を用いて実施例４に記載される通り調製される。
実施例７
【化５５】
0006784750.tif 000056
【０１００】
式ＩＩａの化合物は、図１３の反応式（８）に示される方法に従い合成される。反応式（８）の出発物質である化合物３６は、Ｌｉｃｈｔｅｎｔｈａｌｅｒ，１９６８，Ｃｈｅｍ  Ｂｅｒ，１０１：１８１５−１８及びＺｅｎ，１９６９，Ｂｕｌｌ  Ｃｈｅｍ  Ｓｏｃ  Ｊａｐａｎ，４２：１７６１−６２に記載される通り、非水性条件下、ニトロエタノール（ＯＨ（ＣＨ２）２）ＮＯ２）によるグルタルアルデヒド（ＣＨＯ（ＣＨ２）３ＣＨＯ）の環化によって調製される。
【０１０１】
実施例８
標準ＧａｌＮＡｃモチーフにおける改変を用いて、標準２−アミノ、２−ヒドロキシメチル−１，３−プロパンジオールモチーフを、より剛性の立体化学的かつ立体的に定義されたアミノトリオール置換のために交換する。本明細書において、テザーされたコレステロール断片は、ステロイド部分によってもたらされる細胞特異性に関する説明の枠組内のアミノトリオール構造の例として含まれる。
【化５６】
0006784750.tif 000057
【０１０２】
反応式（１）〜（７）の化合物１、５、９、１３、１９、及び３０は、反応を妨げられない単一の−ＯＨ部分を有する識別された保護官能基を提供するか、または単一の−ＯＨが反応を妨げられないことを可能にするように保護官能基を操作する機会を提供するかのいずれかである。これは、図１〜７に示されるＬ１、Ｌ２、及びＬ３部分を選択的に導入する機会を提供する。
【０１０３】
鎖の利用可能性に基づいて、コレステロール部分とアミノトリオールとの間のテザーには、１０個の炭素の鎖長が選択された。これは、ジオールが非常に一般的であり、ビス求電子種へと比較的容易に変換され得るため、容易に想到される。コレステロール−テザー部分４２は、Ｗａｎｇ，２０１３，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ａｓｉａｎ  Ｊ，８：１０１−０７及びＷａｎｇ，２０１２，Ｊ  Ｍａｔｅｒ  Ｃｈｅｍ，２２：７５２９−３６の方法を用いてコレステロールをＫＯＨ／ＴＨＦ中のＢｒＣＨ２（ＣＨ２）８ＣＨ２Ｂｒと反応させる、図１４に示されるプロセスによって、またはＮａＯＨ／ＤＭＦもしくはＴＨＦを用いる、Ｗａｎｇ，２０１１，Ｓｔｅｒｏｉｄｓ，７６：２０４−０９及びＪｅｎｓｅｎ，２０１２，Ｊ  Ｌｉｐｏｓｏｍｅ  Ｒｅｓ，２２：２９５−３０５の方法によって生成される。
【０１０４】
実施例９
ステロイド修飾／改変されたアミノトリオールＧａｌＮＡｃ同類物の合成は、上で説明され、かつ図１５に示される反応に従い合成される化合物においてここで示される単一の反応点に従う。特異的に保護されたアゼチジンアミノトリオール１から開始し、シリル切断（ｎＢｕ４ＮＦ）に続いてコレステロール−リンカー断片４２の導入（ＮａＨ、ＴＨＦ、またはＤＭＦ）によって４３を生じさせる。ベンジルエーテル切断は（アミノトリオールの調製において上に見られるように：水素Ｐｄ／Ｃ）、以前に遮断された第一及び第二−ＯＨ基（４４）を露出し、これが図２３に概説される化学反応を適用した後に４５の調製を可能にする。
【０１０５】
同様に、アゼチジン系の三保護されたアミノトリオール５（図１６）及び９（図１７）を反応させて、ステロイド−結合体ＧａｌＮＡｃ類似体４８（図１６）及び５１（図１７）を生じさせる。
【０１０６】
実施例１０
ピペリジン系／コレステロール結合体の合成を、図１８、１９、２０、及び２１に示す。一保護されたジオール１３（図１８）は、脱ブロックし（ｎＢｕ４ＮＦ）、ジオールは、対応するアセトニドとして保護され、１４をもたらす。エステルの還元（ＬｉＢＨ４）は、アルコールを提供し、これを４２でアルキル化して５２を提供することができる。ケタール及びＢＯＣ基を水性ＴＦＡで除去して５３を産生し、これが図２３に記載される化学反応の適用後に所望の５４をもたらす。化合物１９（図１９）を還元し、ケタール化して２１を生じさせる。これが５７の構成をもたらす。代替位置化学は、１９が最初にｎＢｕ４ＮＦで脱保護されると１９（図２０）から実現され、アセトニドとしての保護の後に２５を生じさせる。ＳＥＭエーテル（ｎＢｕ４ＮＦ）の脱保護は、アルコールを提供し、これが４２によるアルキル化の後に５８を生じさせる。ケタール及びＢＯＣ基を水性ＴＦＡで除去して５９を産生し、これが図２３に記載される化学反応の適用後に所望の６０（図２０）をもたらす。一保護されたピペリジン−ジオール３０（図２１）は還元され、ジオールは、アセトニドとして保護されて３２を生じさせる。ＳＥＭ−脱保護及び４２によるアルキル化は、６１を生じさせる。水性ＴＦＡによる処理は、ケタール及びＢＯＣ基を切断して６２をもたらし、図２３の化学反応の適用後に所望の６３を生じさせる。
【０１０７】
実施例１１
シクロヘキサン系コレステロール結合体の合成を図２２に示す。アセトニド３８を４２でアルキル化して６４を生じさせる。ケタール及びＢＯＣ基を水性ＴＦＡで除去して６５を得て、これが図２３に記載される化学反応の適用後に所望の６６をもたらす。
【０１０８】
実施例１２
ＲＮＡをアミノトリオール結合体に導入する液相合成を、図２４Ａ及び図２４Ｂに示す。アミノ保護基は、水素及びパラジウムによって除去される。結果として得られるアミノ基を、グルタル酸無水物及びトリエチルアミンと反応させて、アミド結合及び遊離カルボキシルを生成する。この生成物をペルフルオロフェニル２，２，２−トリフルオロアセテートと反応させて、ペンタフルオロフェニル脱離基を有するエステルを生成する。この生成物を５−アミノペンチルメチルホスホネートと反応させて、核酸とのライゲーションのための、遊離リン酸基を有するアミノトリオール結合体を生成する。
【０１０９】
ＲＮＡをアミノトリオール結合体に導入する固相合成を、図２５Ａ及び図２５Ｂに示す。アミノ保護基は、Ｈ２及びパラジウムによって除去される。結果として得られるアミノ基を、グルタル酸無水物及びトリエチルアミンと反応させて、アミド結合及び遊離カルボキシルを生成する。この生成物を、固相核酸シンセサイザーでの反応のために調製する。（項目１）
式Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩのアミノトリオールからなる化合物であって、
【化５７】
0006784750.tif 000058
式中、Ｒが、生物学的に活性な分子を含み、Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３が、それぞれの存在毎に独立して、炭水化物、ポリペプチド、または親油性物質からなる群から選択されるリガンドを含む、化合物。
（項目２）
式Ｉａ、Ｉｂ、またはＩｃの構造を有する、項目１に記載の化合物。
【化５８】
0006784750.tif 000059
（項目３）
式ＩＩａの構造を有する、項目１に記載の化合物。
【化５９】
0006784750.tif 000060
（項目４）
式ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、またはＩＩＩｃの構造を有する、項目１に記載の化合物。
【化６０】
0006784750.tif 000061
（項目５）
前記生物学的に活性な分子が、治療用分子である、項目１に記載の化合物。
（項目６）
前記治療用分子が、抗体、ポリヌクレオチド、ホルモン、抗生物質、または１０００ダルトン未満の分子量を有する薬物から選択される、項目５に記載の化合物。
（項目７）
前記生物学的に活性な分子が、ＲＮＡ分子である、項目５に記載の化合物。
（項目８）
前記ＲＮＡ分子が、センス鎖及びアンチセンス鎖からなる、項目７に記載の化合物。
（項目９）
前記アミノトリオールが、前記センス鎖の３’末端、前記センス鎖の５’末端、前記アンチセンス鎖の３’末端、または前記センス鎖の５’末端において共有結合している、項目８に記載の化合物。
（項目１０）
Ｒ、Ｌ１、Ｌ２、またはＬ３のうちの１つ以上が、以下の構造を含むリンカーをさらに含み、
【化６１】
0006784750.tif 000062
式中、
Ａ、Ｄ１、Ｄ１’、Ｄ２、Ｄ２’が、それぞれの存在毎に独立して、非存在であるか、ＣＯ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＯＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）、ＣＨ２、ＣＨ２ＮＨ、またはＣＨ２Ｏであり、
Ｂ１及びＢ２が、それぞれの存在毎に、非存在であるか、アルキレン、置換アルキレンであり、ここで、１つ以上のメチレンが、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ２、Ｎ（ＲＮ）、Ｃ（Ｒ’）＝Ｃ（Ｒ”）、Ｃ≡Ｃ、またはＣ（Ｏ）のうちの１つ以上によって中断または終端され得、式中、Ｒ’及びＲ”がそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＯＨ、ＳＨ、またはＮ（ＲＮ）２であり、ＲＮが、それぞれの存在毎に独立して、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルであり、
Ｚが、非存在であるか、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣＨ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（Ｒａ）ＮＨ、ＣＯ、ＣＨ＝ＮＯ、またはヘテロシクリルであり、式中、Ｒａが、Ｈまたはアミノ酸側鎖であり、
Ｅが、−ＣＨ２Ｎ（ＥＬ）ＣＨ２−であり、式中、ＥＬが、−Ｄ３−Ｂ３−Ｄ３’−Ｒｘであり、Ｄ３及びＤ３’が、それぞれの存在毎にそれぞれ独立して、非存在であるか、ＣＯ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＯＣ（Ｏ）、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ、ＣＨ２、ＣＨ２ＮＨ、またはＣＨ２Ｏであり、Ｒｘが、コレステリルまたはカチオン性脂質であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である、項目１に記載の化合物。
（項目１１）
１つ以上のＬ１、Ｌ２、及びＬ３が、親油性物質を含む、項目１に記載の化合物。
（項目１２）
前記親油性物質が、コレステリル、コール酸、アダマンタン酢酸、１−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、１，３−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、１，３−プロパンジオール、ヘプタデシル、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ−３−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ−３−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチル、及びフェノキサジンから選択される、項目１１に記載の化合物。
（項目１３）
Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３のうちの１つ以上が、炭水化物を含む、項目１に記載の化合物。
（項目１４）
前記炭水化物が、アロース、アルトロース、アラビノース、クラジノース、エリトロース、エリトルロース、フルクトース、Ｄ−フシトール、Ｌ−フシトール、フコサミン、フコース、フクロース、ガラクトサミン、Ｄ−ガラクトサミニトール、Ｎ−アセチル−ガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）、ガラクトース、グルコサミン、Ｎ−アセチル−グルコサミン、グルコサミニトール、グルコース、グルコース−６−ホスフェート、グロースグリセルアルデヒド、Ｌ−グリセロ−Ｄ−マンノ−ヘプトース、グリセロール、グリセロン、グロース、イドース、リキソース、マンノサミン、マンノース、マンノース−６−ホスフェート、プシコース、キノボース、キノボサミン、ラムニトール、ラムノサミン、ラムノース、リボース、リブロース、セドヘプツロース、ソルボース、タガトース、タロース、酒石酸、トレオース、キシロース、及びキシルロースから選択される単糖である、項目１３に記載の化合物。
（項目１５）
前記単糖が、デオキシ糖、アミノ糖、チオ糖、セレノ糖、テルロ糖、アザ糖、イミノ糖、ホスファノ糖、ホスファ糖、Ｃ−置換単糖、不飽和単糖、アルジトール、アルドン酸、ケトアルドン酸、ウロン酸、またはアルダル酸から選択される、項目１４に記載の化合物。
（項目１６）
前記炭水化物が、アベクオース、アクラボース、アヌセトース、アミロペクチン、アミロース、アピオース、アルカノース、アスカリロース、アスコルビン酸、ボイビノース、セロビオース、セロビオース、セルロース、カコトリオース、カルコース、キチン、コリトース、シクロデキストリン、シマロース、デキストリン、２−デオキシリボース、２デオキシグルコース、ジギノース、ジギタロース、ジギトキソース、エバロース、エベミトロース、フルクトオリゴ糖、ガルト−オリゴ糖、ゲンチアノース、ゲンチオビオース、グルカン、グルコーゲン、グリコーゲン、ハマメロース、ヘパリン、イヌリン、イソレボグルコセノン、イソマルトース、イソマルトトリオース、イソパノース、コージビオース、ラクトース、ラクトサミン、ラクトセジアミン、ラミナラビオース、レボグルコサン、レボグルコセノン、β−マルトース、マルトリオース、マンナン−オリゴ糖、マンニノトノース（ｍａｎｎｉｎｏｔｎｏｓｅ）、メレジトース、メリビオース、ムラミン酸、ミカロース、ミシノース、ノイラミン酸、ニゲロース、ノジリマイシン、ノビオース、オレアンドロース、パノース、パラトース、プランテオース、ヌメベロース（ｐｎｍｅｖｅｒｏｓｅ）、ラフィノース、ロジノース、ルチノース、サルメントース、セドヘプツロース、セドヘプツロサン、ソラトリオース、ソフォロース、スタキオース、ストレプトース、スクロース、アム−トレハロース、トレハロサミン、ツラノース、チベロース、キシロビオース、またはウンベリフェロースを含む二糖、三糖、または多糖である、項目１３に記載の化合物。
（項目１７）
前記炭水化物が、ＧａｌＮＡｃまたはガラクトースである、項目１４に記載の化合物。
（項目１８）
及びＬ１、Ｌ２、及び／またはＬ３が、ポリペプチドを含む、項目１に記載の化合物。
（項目１９）
前記ポリペプチドが、細胞受容体のリガンドである、項目１８に記載の化合物。
（項目２０）
Ｌ２もしくはＬ３、または両方が、ポリエチレングリコールを含むリンカーを含む、項目１に記載の化合物。
（項目２１）
Ｌ２もしくはＬ３、または両方が、アミド結合を含むリンカーを含む、項目１に記載の化合物。
（項目２２）
Ｌ２もしくはＬ３、または両方が、−Ｏ（ＣＨ２）４（ＣＯ）ＮＨ（ＣＨ２）３ＮＨ（ＣＯ）（ＣＨ２）２Ｏ−を含むリンカーを含み、前記リガンドが、ＧａｌＮＡｃである、項目１に記載の化合物。
（項目２３）
Ｌ１が、−Ｏ（ＣＨ２）１０Ｏ−を含むリンカーを含み、前記リガンドが、コレステロールである、項目１に記載の化合物。
（項目２４）
項目１に記載の化合物の作製プロセスであって、該化合物が、式４５のマルチリガンド化合物からなり、
【化６２】
0006784750.tif 000063
該プロセスが、
ｉ．以下の構造のアミノトリオール化合物を、
【化６３】
0006784750.tif 000064
親油性物質４２と反応させるステップと、
【化６４】
0006784750.tif 000065
ｉｉ．ステップｉの生成物からヒドロキシル保護基を除去するステップと、
ｉｉｉ．ステップｉｉの生成物を、ＮａＯＨ中の（ＣＨＣＨ）ＣＯＯ−ｔ−ブチルと反応させるステップと、
ｉｖ．ステップｉｉｉの生成物にアミノ保護基を付加するステップと、
ｖ．ステップｉｖの生成物を、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド−塩酸塩（ＥＤＣ）及びヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）を用いて、ＢｏｃＮ（ＣＨ２）３ＮＨ２と反応させるステップと、
ｖｉ．ステップｖの生成物をＧａｌＮＡｃ酸と、
【化６５】
0006784750.tif 000066
ＥＤＣ、ＨＯＢＴ、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを用いて反応させるステップと、を含む、プロセス。
（項目２５）
前記アミノトリオール化合物が、式１、５、または９の化合物からなる、項目２４に記載のプロセス。
【化６６】
0006784750.tif 000067
（項目２６）
項目１に記載の化合物の作製プロセスであって、該化合物が、式５３のマルチリガンド化合物からなり、
【化６７】
0006784750.tif 000068
ｉ．以下の構造を有するアミノトリオール化合物を、
【化６８】
0006784750.tif 000069
ｎ−Ｂｕ４ＮＦと反応させるステップと、
ｉｉ．ステップｉの生成物を、ＣＨ３Ｃ（ＯＣＨ３）２ＣＨ３及びｐ−トルエンスルホン酸と反応させるステップと、
ｉｉｉ．ステップｉｉの生成物を、ＬｉＢＨ４と反応させるステップと、
ｉｖ．ステップｉｉｉの生成物を、親油性物質４２と反応させるステップと、
【化６９】
0006784750.tif 000070
ｖ．ステップｖの生成物からヒドロキシル保護基を除去するステップと、
ｖｉ．ステップｖの生成物を、ＮａＯＨ中の（ＣＨＣＨ）ＣＯＯ−ｔ−ブチルと反応させるステップと、
ｖｉｉ．ｖｉの生成物にアミノ保護基を付加するステップと、
ｖｉｉｉ．ステップｖｉｉｉの生成物を、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド−塩酸塩（ＥＤＣ）及びヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）を用いて、ＢｏｃＮ（ＣＨ２）３ＮＨ２と反応させるステップと、
ｉｘ．ステップｉｘの生成物をＧａｌＮＡｃ酸と、
【化７０】
0006784750.tif 000071
ＥＤＣ、ＨＯＢＴ、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを用いて反応させるステップと、を含む、プロセス。
（項目２７）
前記アミノトリオール化合物が、式１３、１９、または３０の化合物からなる、項目２６に記載のプロセス。
【化７１】
0006784750.tif 000072
（項目２８）
項目１に記載の化合物の作製プロセスであって、該化合物が、式４５のマルチリガンド化合物からなり、
【化７２】
0006784750.tif 000073
ｉ．式３８を有するアミノトリオール化合物を、
【化７３】
0006784750.tif 000074
親油性物質４２と反応させるステップと、
【化７４】
0006784750.tif 000075
ｉｉ．ステップｉの生成物からヒドロキシル保護基を除去するステップと、
ｉｉｉ．ステップｉｉの生成物を、ＮａＯＨ中の（ＣＨＣＨ）ＣＯＯ−ｔ−ブチルと反応させるステップと、
ｉｖ．ステップｉｉｉの生成物にアミノ保護基を付加するステップと、
ｖ．ステップｉｖの生成物を、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド−塩酸塩（ＥＤＣ）及びヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）を用いて、ＢｏｃＮ（ＣＨ２）３ＮＨ２と反応させるステップと、
ｖｉ．ステップｖの生成物をＧａｌＮＡｃ酸と、
【化７５】
0006784750.tif 000076
ＥＤＣ、ＨＯＢＴ、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを用いて反応させるステップと、を含む、プロセス。
（項目２９）
項目１に記載の化合物を含む、薬学的組成物。
（項目３０）
薬学的に許容される対イオンまたは薬学的に許容される賦形剤をさらに含む、項目２９に記載の薬学的組成物。
（項目３１）
前記治療用分子が、ＲＮＡである、項目２９に記載の薬学的組成物。
（項目３２）
前記リガンドが、炭水化物である、項目２９に記載の薬学的組成物。
（項目３３）
前記炭水化物が、ＧａｌＮＡｃまたはガラクトースである、項目３２に記載の薬学的組成物。
（項目３４）
疾患を処置する際に用いるための項目１に記載の化合物を含む、薬学的組成物であって、疾患の処置を必要とする被験体への投与に好適である、薬学的組成物。
（項目３５）
前記生物学的に活性な分子が、ＲＮＡ分子である、項目３４に記載の組成物。
（項目３６）
前記組成物が、皮下投与に好適である、項目３４に記載の組成物。
（項１）
式Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩのアミノトリオールからなる化合物であって、
【化７６】
0006784750.tif 000077
式中、Ｒが、生物学的に活性な分子を含み、Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３が、それぞれの存在毎に独立して、炭水化物、ポリペプチド、または親油性物質からなる群から選択されるリガンドを含む、化合物。
（項２）
式Ｉａ、Ｉｂ、またはＩｃの構造を有する、項１に記載の化合物。
【化７７】
0006784750.tif 000078
（項３）
式ＩＩａの構造を有する、項１に記載の化合物。
【化７８】
0006784750.tif 000079
（項４）
式ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、またはＩＩＩｃの構造を有する、項１に記載の化合物。
【化７９】
0006784750.tif 000080
（項５）
前記生物学的に活性な分子が、治療用分子である、項１に記載の化合物。
（項６）
前記治療用分子が、抗体、ポリヌクレオチド、ホルモン、抗生物質、または１０００ダルトン未満の分子量を有する薬物から選択される、項５に記載の化合物。
（項７）
前記生物学的に活性な分子が、ＲＮＡ分子である、項５に記載の化合物。
（項８）
前記ＲＮＡ分子が、センス鎖及びアンチセンス鎖からなる、項７に記載の化合物。
（項９）
前記アミノトリオールが、前記センス鎖の３’末端、前記センス鎖の５’末端、前記アンチセンス鎖の３’末端、または前記センス鎖の５’末端において共有結合している、項８に記載の化合物。
（項１０）
Ｒ、Ｌ１、Ｌ２、またはＬ３のうちの１つ以上が、以下の構造を含むリンカーをさらに含み、
【化８０】
0006784750.tif 000081
式中、
Ａ、Ｄ１、Ｄ１’、Ｄ２、Ｄ２’が、それぞれの存在毎に独立して、非存在であるか、ＣＯ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＯＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）、ＣＨ２、ＣＨ２ＮＨ、またはＣＨ２Ｏであり、
Ｂ１及びＢ２が、それぞれの存在毎に、非存在であるか、アルキレン、置換アルキレンであり、ここで、１つ以上のメチレンが、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ２、Ｎ（ＲＮ）、Ｃ（Ｒ’）＝Ｃ（Ｒ”）、Ｃ≡Ｃ、またはＣ（Ｏ）のうちの１つ以上によって中断または終端され得、式中、Ｒ’及びＲ”がそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＯＨ、ＳＨ、またはＮ（ＲＮ）２であり、ＲＮが、それぞれの存在毎に独立して、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルであり、
Ｚが、非存在であるか、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣＨ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（Ｒａ）ＮＨ、ＣＯ、ＣＨ＝ＮＯ、またはヘテロシクリルであり、式中、Ｒａが、Ｈまたはアミノ酸側鎖であり、
Ｅが、−ＣＨ２Ｎ（ＥＬ）ＣＨ２−であり、式中、ＥＬが、−Ｄ３−Ｂ３−Ｄ３’−Ｒｘであり、Ｄ３及びＤ３’が、それぞれの存在毎にそれぞれ独立して、非存在であるか、ＣＯ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＯＣ（Ｏ）、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ、ＣＨ２、ＣＨ２ＮＨ、またはＣＨ２Ｏであり、Ｒｘが、コレステリルまたはカチオン性脂質であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である、項１に記載の化合物。
（項１１）
１つ以上のＬ１、Ｌ２、及びＬ３が、親油性物質を含む、項１に記載の化合物。
（項１２）
前記親油性物質が、コレステリル、コール酸、アダマンタン酢酸、１−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、１，３−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、１，３−プロパンジオール、ヘプタデシル、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ−３−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ−３−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチル、及びフェノキサジンから選択される、項１１に記載の化合物。
（項１３）
Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３のうちの１つ以上が、炭水化物を含む、項１に記載の化合物。
（項１４）
前記炭水化物が、アロース、アルトロース、アラビノース、クラジノース、エリトロース、エリトルロース、フルクトース、Ｄ−フシトール、Ｌ−フシトール、フコサミン、フコース、フクロース、ガラクトサミン、Ｄ−ガラクトサミニトール、Ｎ−アセチル−ガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）、ガラクトース、グルコサミン、Ｎ−アセチル−グルコサミン、グルコサミニトール、グルコース、グルコース−６−ホスフェート、グロースグリセルアルデヒド、Ｌ−グリセロ−Ｄ−マンノ−ヘプトース、グリセロール、グリセロン、グロース、イドース、リキソース、マンノサミン、マンノース、マンノース−６−ホスフェート、プシコース、キノボース、キノボサミン、ラムニトール、ラムノサミン、ラムノース、リボース、リブロース、セドヘプツロース、ソルボース、タガトース、タロース、酒石酸、トレオース、キシロース、及びキシルロースから選択される単糖である、項１３に記載の化合物。
（項１５）
前記単糖が、デオキシ糖、アミノ糖、チオ糖、セレノ糖、テルロ糖、アザ糖、イミノ糖、ホスファノ糖、ホスファ糖、Ｃ−置換単糖、不飽和単糖、アルジトール、アルドン酸、ケトアルドン酸、ウロン酸、またはアルダル酸から選択される、項１４に記載の化合物。
（項１６）
前記炭水化物が、アベクオース、アクラボース、アヌセトース、アミロペクチン、アミロース、アピオース、アルカノース、アスカリロース、アスコルビン酸、ボイビノース、セロビオース、セロビオース、セルロース、カコトリオース、カルコース、キチン、コリトース、シクロデキストリン、シマロース、デキストリン、２−デオキシリボース、２デオキシグルコース、ジギノース、ジギタロース、ジギトキソース、エバロース、エベミトロース、フルクトオリゴ糖、ガルト−オリゴ糖、ゲンチアノース、ゲンチオビオース、グルカン、グルコーゲン、グリコーゲン、ハマメロース、ヘパリン、イヌリン、イソレボグルコセノン、イソマルトース、イソマルトトリオース、イソパノース、コージビオース、ラクトース、ラクトサミン、ラクトセジアミン、ラミナラビオース、レボグルコサン、レボグルコセノン、β−マルトース、マルトリオース、マンナン−オリゴ糖、マンニノトノース（ｍａｎｎｉｎｏｔｎｏｓｅ）、メレジトース、メリビオース、ムラミン酸、ミカロース、ミシノース、ノイラミン酸、ニゲロース、ノジリマイシン、ノビオース、オレアンドロース、パノース、パラトース、プランテオース、ヌメベロース（ｐｎｍｅｖｅｒｏｓｅ）、ラフィノース、ロジノース、ルチノース、サルメントース、セドヘプツロース、セドヘプツロサン、ソラトリオース、ソフォロース、スタキオース、ストレプトース、スクロース、アム−トレハロース、トレハロサミン、ツラノース、チベロース、キシロビオース、またはウンベリフェロースを含む二糖、三糖、または多糖である、項１３に記載の化合物。
（項１７）
前記炭水化物が、ＧａｌＮＡｃまたはガラクトースである、項１４に記載の化合物。
（項１８）
及びＬ１、Ｌ２、及び／またはＬ３が、ポリペプチドを含む、項１に記載の化合物。
（項１９）
前記ポリペプチドが、細胞受容体のリガンドである、項１８に記載の化合物。
（項２０）
Ｌ２もしくはＬ３、または両方が、ポリエチレングリコールを含むリンカーを含む、項１に記載の化合物。
（項２１）
Ｌ２もしくはＬ３、または両方が、アミド結合を含むリンカーを含む、項１に記載の化合物。
（項２２）
Ｌ２もしくはＬ３、または両方が、−Ｏ（ＣＨ２）４（ＣＯ）ＮＨ（ＣＨ２）３ＮＨ（ＣＯ）（ＣＨ２）２Ｏ−を含むリンカーを含み、前記リガンドが、ＧａｌＮＡｃである、項１に記載の化合物。
（項２３）
Ｌ１が、−Ｏ（ＣＨ２）１０Ｏ−を含むリンカーを含み、前記リガンドが、コレステロールである、項１に記載の化合物。
（項２４）
式４５のマルチリガンド化合物の作製プロセスであって、
【化８１】
0006784750.tif 000082
ｉ．以下の構造のアミノトリオール化合物を、
【化８２】
0006784750.tif 000083
親油性物質４２と反応させるステップと、
【化８３】
0006784750.tif 000084
ｉｉ．ステップｉの生成物からヒドロキシル保護基を除去するステップと、
ｉｉｉ．ステップｉｉの生成物を、ＮａＯＨ中の（ＣＨＣＨ）ＣＯＯ−ｔ−ブチルと反応させるステップと、
ｉｖ．ステップｉｉｉの生成物にアミノ保護基を付加するステップと、
ｖ．ステップｉｖの生成物を、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド−塩酸塩（ＥＤＣ）及びヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）を用いて、ＢｏｃＮ（ＣＨ２）３ＮＨ２と反応させるステップと、
ｖｉ．ステップｖの生成物をＧａｌＮＡｃ酸と、
【化８４】
0006784750.tif 000085
ＥＤＣ、ＨＯＢＴ、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを用いて反応させるステップと、を含む、プロセス。
（項２５）
前記アミノトリオール化合物が、式１、５、または９の化合物からなる、項２４に記載のプロセス。
【化８５】
0006784750.tif 000086
（項２６）
式５４のマルチリガンド化合物の作製プロセスであって、
【化８６】
0006784750.tif 000087
ｉ．以下の構造を有するアミノトリオール化合物を、
【化８７】
0006784750.tif 000088
ｎ−Ｂｕ４ＮＦと反応させるステップと、
ｉｉ．ステップｉの生成物を、ＣＨ３Ｃ（ＯＣＨ３）２ＣＨ３及びｐ−トルエンスルホン酸と反応させるステップと、
ｉｉｉ．ステップｉｉの生成物を、ＬｉＢＨ４と反応させるステップと、
ｉｖ．ステップｉｉｉの生成物を、親油性物質４２と反応させるステップと、
【化８８】
0006784750.tif 000089
ｖ．ステップｖの生成物からヒドロキシル保護基を除去するステップと、
ｖｉ．ステップｖの生成物を、ＮａＯＨ中の（ＣＨＣＨ）ＣＯＯ−ｔ−ブチルと反応させるステップと、
ｖｉｉ．ｖｉの生成物にアミノ保護基を付加するステップと、
ｖｉｉｉ．ステップｖｉｉｉの生成物を、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド−塩酸塩（ＥＤＣ）及びヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）を用いて、ＢｏｃＮ（ＣＨ２）３ＮＨ２と反応させるステップと、
ｉｘ．ステップｉｘの生成物をＧａｌＮＡｃ酸と、
【化８９】
0006784750.tif 000090
ＥＤＣ、ＨＯＢＴ、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを用いて反応させるステップと、を含む、プロセス。
（項２７）
前記アミノトリオール化合物が、式１３、１９、または３０の化合物からなる、項２６に記載のプロセス。
【化９０】
0006784750.tif 000091
（項２８）
式６６のマルチリガンド化合物の作製プロセスであって、
【化９１】
0006784750.tif 000092
ｉ．式３８を有するアミノトリオール化合物を、
【化９２】
0006784750.tif 000093
親油性物質４２と反応させるステップと、
【化９３】
0006784750.tif 000094
ｉｉ．ステップｉの生成物からヒドロキシル保護基を除去するステップと、
ｉｉｉ．ステップｉｉの生成物を、ＮａＯＨ中の（ＣＨＣＨ）ＣＯＯ−ｔ−ブチルと反応させるステップと、
ｉｖ．ステップｉｉｉの生成物にアミノ保護基を付加するステップと、
ｖ．ステップｉｖの生成物を、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド−塩酸塩（ＥＤＣ）及びヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）を用いて、ＢｏｃＮ（ＣＨ２）３ＮＨ２と反応させるステップと、
ｖｉ．ステップｖの生成物をＧａｌＮＡｃ酸と、
【化９４】
0006784750.tif 000095
ＥＤＣ、ＨＯＢＴ、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを用いて反応させるステップと、を含む、プロセス。
（項２９）
項１に記載の化合物を含む、薬学的組成物。
（項３０）
薬学的に許容される対イオンまたは薬学的に許容される賦形剤をさらに含む、項２９に記載の薬学的組成物。
（項３１）
前記治療用分子が、ＲＮＡである、項２９に記載の薬学的組成物。
（項３２）
前記リガンドが、炭水化物である、項２９に記載の薬学的組成物。
（項３３）
前記炭水化物が、ＧａｌＮＡｃまたはガラクトースである、項３２に記載の薬学的組成物。
（項３４）
疾患を処置する際に使用するための項１に記載の化合物を含む、薬学的組成物であって、疾患の処置を必要とする被験体への投与に好適である、薬学的組成物。
（項３５）
前記生物学的に活性な分子が、ＲＮＡ分子である、項３４に記載の組成物。
（項３６）
前記組成物が、皮下投与に好適である、項３４に記載の組成物。
【図１】
0006784750.tif 000114
【図２】
0006784750.tif 000115
【図３】
0006784750.tif 000116
【図４】
0006784750.tif 000117
【図５】
0006784750.tif 000118
【図６】
0006784750.tif 000119
【図７】
0006784750.tif 000120
【図８】
0006784750.tif 000121
【図９】
0006784750.tif 000122
【図１０】
0006784750.tif 000123
【図１１】
0006784750.tif 000124
【図１２】
0006784750.tif 000125
【図１３】
0006784750.tif 000126
【図１４】
0006784750.tif 000127
【図１５】
0006784750.tif 000128
【図１６】
0006784750.tif 000129
【図１７】
0006784750.tif 000130
【図１８】
0006784750.tif 000131
【図１９】
0006784750.tif 000132
【図２０】
0006784750.tif 000133
【図２１】
0006784750.tif 000134
【図２２】
0006784750.tif 000135
【図２３】
0006784750.tif 000136
【図２４Ａ】
0006784750.tif 000137
【図２４Ｂ】
0006784750.tif 000138
【図２５Ａ】
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【図２５Ｂ】
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