(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＧＳＴ−πを抑制する薬物と、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物とを有効成分として含む、がん細胞の細胞死誘導剤であって、
ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記恒常性維持関連タンパク質は、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１、ＭＹＬＫ、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２、ＭＹＯ１８Ａ、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質であり、
ＧＳＴ−πを抑制する上記薬物が、ＧＳＴ−πをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド及びこれらのうち少なくとも１種を発現するベクターからなる群から選択される物質である、
上記細胞死誘導剤。
【請求項２】
ＧＳＴ−πを抑制する薬物と、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物とを有効成分として含む、がん細胞の細胞増殖抑制剤であって、
ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記恒常性維持関連タンパク質は、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１、ＭＹＬＫ、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２、ＭＹＯ１８Ａ、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質であり、
ＧＳＴ−πを抑制する上記薬物が、ＧＳＴ−πをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド及びこれらのうち少なくとも１種を発現するベクターからなる群から選択される物質である、
上記細胞増殖抑制剤。
【請求項３】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する上記薬物が、上記恒常性維持関連タンパク質をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、これらのうち少なくとも１種を発現するベクター、上記恒常性維持関連タンパク質の抗体及び上記恒常性維持関連タンパク質のドミナントネガティブ変異体からなる群から選択される物質であることを特徴とする請求項１又は２記載の剤。
【請求項４】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する上記薬物が、ＮＳＣ９５３９７又はＳＣ ａｌｐｈａ ａｌｐｈａ ｄｅｌｔａ０９であるＣＤＣ２５Ａの活性を抑制する薬物；ｂｕｔｙｒｏｌａｃｔｏｎｅ Ｉ、ｑｕｅｔｉａｐｉｎｅ、Ｓｏｒａｆｅｎｉｂ及びＵＣ２２８８からなる群から選択されるｐ２１の活性を抑制する薬物；ＨＡ−１００ Ｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ、Ｃａｌｐｈｏｓｔｉｎ Ｃ、Ｐｉｃｅａｔａｎｎｏｌ、Ａ−３ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｈ−７ Ｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｈ−９ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｗ−５、Ｗ−７、Ｗ−１３ Ｉｓｏｍｅｒ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、ＭＬ−７ Ｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、ＭＬ−９、Ｍｙｒｉｃｅｔｉｎ、Ｅ６ Ｂｅｒｂａｍｉｎｅ、Ｋ−２５２ａ、Ｋ−２５２ｂ及びＡｌｔｅｎｕｓｉｎからなる群から選択されるＭＹＬＫの活性を抑制する薬物；ＳｙｎｒｉｂｏであるＭＣＬ１の活性を抑制する薬物；Ｒａｐａｍｙｃｉｎ、Ｅｖｅｒｏｌｉｍｕｓ、ＢＥＺ２３５、ＡＺＤ８０５５、ＰＩ−１０３、Ｎｉｃｌｏｓａｍｉｄｅ、ＰＰ２４２、Ｔｉｍｏｓａｐｏｎｉｎ ＡＩＩＩ、ＫＵ ００６３７９４、ＡＺＤ２０１４、Ｔｅｍｓｉｒｏｌｉｍｕｓ、Ｐａｌｏｍｉｄ ５２９、Ｆｉｓｅｔｉｎ、ＳＦ１１２６、ＣＨ５１３２７９９、ＷＹＥ−３５４、Ｃｏｍｐｏｕｎｄ ４０１、Ｒｉｄａｆｏｒｏｌｉｍｕｓ、ＧＳＫ １０５９６１５、ＰＦ−０４６９１５０２、ＰＰ１２１、ＯＳＩ−０２７、ＷＹＥ−１２５１３２、Ｕｍｉｒｏｌｉｍｕｓ、ＷＡＹ−６００、ＷＹＥ−６８７、ＰＫＩ−１７９、ＰＦ−０５２１２３８４、ＣＡＹ１０６２６、ＮＶＰ−ＢＧＴ２２６、ＸＬ−１４７ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ １、ＸＬ ３８８及びＴｏｒｉｎ １からなる群から選択されるＭＴＯＲの活性を抑制する薬物；Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ−Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ−Ｋｉｎａｓｅ−１／４ ＩｎｈｉｂｉｔｏｒであるＩｒａｋ１の活性を抑制する薬物；ＭｙＤ８８ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｐｅｐｉｎｈ−ＭＹＤ又はＴＪ−Ｍ２０１０であるＭＹＤ８８の活性を抑制する薬物；ＢＡＹ １１−７０８５、Ｈｅｌｅｎａｌｉｎ、Ｃａｆｆｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｐｈｅｎｅｔｈｙｌ Ｅｓｔｅｒ、ＮＦκＢ Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ＩＩ, ＪＳＨ−２３、ＱＮＺ、Ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ、Ｃｕｒｃｕｍｉｎ、Ｓｕｌｆａｓａｌａｚｉｎｅ、Ｒｏｃａｇｌａｍｉｄｅ、ＳＭ ７３６８、Ｓｕｌｉｎｄａｃ Ｓｕｌｆｉｄｅ、Ｔｒｉｃｈｏｄｉｏｎ、ＣＨＳ−８２８、Ｚ−ＶＲＰＲ−ＦＭＫ、Ｓｏｄｉｕｍ Ｓａｌｉｃｙｌａｔｅ、４−Ａｍｉｎｏｓａｌｉｃｙｌｉｃ Ａｃｉｄ、Ｅｔｈｙｌ ３，４−Ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｃｉｎｎａｍａｔｅ、ＣＡＹ１０５１２、、Ｎ−Ｓｔｅａｒｏｙｌ Ｐｈｙｔｏｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ、Ｐａｌｍｉｔｉｃ Ａｃｉｄ Ｍｅｔｈｙｌ Ｅｓｔｅｒ、９−Ｍｅｔｈｙｌｓｔｒｅｐｔｉｍｉｄｏｎｅ、Ｒｏｃａｇｌａｏｌ及びＢＡＹ １１−７０８２からなる群から選択されるＮＦＫＢ１の活性を抑制する薬物；ＣＵＤＣ−９０７、ＰＫＩ−４０２、ＰＦ−０４６９１５０２、ＮＶＰ−ＢＧＴ２２６、ＩＰＩ−１４５、ＳＡ���２４５４０９、ＺＳＴＫ４７４、ＶＳ−５５８４、ＡＳ−６０５２４０、ＰＩＫ−９０、ＰＦ−４９８９２１６、ＴＧ１００−１１５、ＢＫＭ１２０、ＢＥＺ２３５ Ｔｏｓｙｌａｔｅ、ＬＹ２９４００２、ＰＩ−１０３、ＸＬ１４７、ＡＳ−２５２４２４、ＡＳ−２５２４２４、ＣＡＹ１０５０５、ＣＨ５１３２７９９、ＢＡＹ ８０−６９４６、ＧＤＣ−００３２、ＧＳＫ１０５９６１５、ＣＡＬ−１３０及びＸＬ７６５からなる群から選択されるＰＩＫ３ＣＧの活性を抑制する薬物；ＮＳＣ２３７６６又はＷ５６であるＲＡＣ１の活性を抑制する薬物；４ＥＧＩ−１であるＥＩＦ４Ｅの活性を抑制する薬物；Ｃｐｄ ２２又はＱＬＴ０２６７であるＩＬＫの活性を抑制する薬物；ＨＳ−１７３、ＣＵＤＣ−９０７、ＰＫＩ−４０２、ＰＦ−０４６９１５０２、ＮＶＰ−ＢＧＴ２２６、ＢＹＬ７１９、ＳＡＲ２４５４０９、ＺＳＴＫ４７４、ＶＳ−５５８４、PIK-75、ＰＩＫ−９０、ＣＮＸ１３５１、ＰＦ−４９８９２１６、ＢＫＭ１２０、ＢＥＺ２３５ Ｔｏｓｙｌａｔｅ、ＬＹ２９４００２、ＰＩ−１０３、ＸＬ１４７、ＣＨ５１３２７９９、ＢＡＹ ８０−６９４６、ＧＤＣ−００３２及びＸＬ７６５からなる群から選択されるＰＩＫ３ＣＡの活性を抑制する薬物；又は、ＣＣＧ−１４２３又はＣＣＧ−１００６０２であるＳＲＦの活性を抑制する薬物であることを特徴とする請求項１又は２記載の剤。
【請求項５】
上記恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物が、当該恒常性維持関連タンパク質に作用する化合物であることを特徴とする請求項１又は２記載の剤。
【請求項６】
アポトーシスを誘導することを特徴とする請求項１記載の剤。
【請求項７】
上記がん細胞は、ＧＳＴ−πを高発現するがん細胞であることを特徴とする請求項１又は２記載の剤。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか一項記載の剤を含む、細胞の増殖異常に起因する疾患の治療用医薬組成物。
【請求項９】
上記疾患ががんであることを特徴とする請求項８記載の医薬組成物。
【請求項１０】
上記がんはＧＳＴ−πを高発現するがんであることを特徴とする請求項９記載の医薬組成物。
【請求項１１】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物を選択することを含む、ＧＳＴ−πを抑制する薬物とともに使用される、がん細胞の細胞死誘導剤及び/又は細胞増殖抑制剤のスクリーニング方法であって、
ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記恒常性維持関連タンパク質は、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１、ＭＹＬＫ、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２、ＭＹＯ１８Ａ、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質である、
上記スクリーニング方法。
【請求項１２】
がん細胞に対して被検物質を接触させる工程と、上記細胞における上記恒常性維持関連タンパク質の発現量を測定する工程と、被検物質の非存在下において測定した場合と比較して、当該発現量が低下した場合に上記恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物として選択する工程とを含む請求項１１記載のスクリーニング方法。
【請求項１３】
ＧＳＴ−πを抑制する薬物を含む、がん細胞の細胞死誘導剤であって、
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物と組み合わせて使用され、
ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記恒常性維持関連タンパク質は、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１、ＭＹＬＫ、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２、ＭＹＯ１８Ａ、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質であり、
ＧＳＴ−πを抑制する上記薬物が、ＧＳＴ−πをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド及びこれらのうち少なくとも１種を発現するベクターからなる群から選択される物質である、
上記細胞死誘導剤。
【請求項１４】
ＧＳＴ−πを抑制する薬物を含む、がん細胞の細胞増殖抑制剤であって、
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物と組み合わせて使用され、
ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記恒常性維持関連タンパク質は、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１、ＭＹＬＫ、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２、ＭＹＯ１８Ａ、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質であり、
ＧＳＴ−πを抑制する薬物が、ＧＳＴ−πをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド及びこれらのうち少なくとも１種を発現するベクターからなる群から選択される物質である、
上記細胞増殖抑制剤。
【請求項１５】
請求項１３又１４に記載の剤を含む、細胞の増殖異常に起因する疾患の治療用医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、がん細胞に対する細胞死誘導剤、細胞増殖抑制剤、細胞増殖異常に起因する疾患の治療用医薬組成物に関し、更に細胞死誘導剤及び/又は細胞増殖抑制剤をスクリーニングする方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞増殖の異常に起因する疾患としては、典型的な例としてがんを挙げることができる。がんは、遺伝子の突然変異やエピジェネティックな異常などにより、細胞が無制御に増殖する疾患である。がんにおける遺伝子異常としてはすでに数多くのものが報告されており（例えば、非特許文献１など）、その多くが、細胞の増殖、分化、生存に関するシグナル伝達に何らかの関連を有していると考えられている。また、かかる遺伝子異常により、正常な分子で構成される細胞内のシグナル伝達が異常を来し、これが特定のシグナルカスケードの活性化や不活性化をもたらし、最終的に細胞の異常増殖を引き起す一因となることもある。
【０００３】
初期のがん治療は、細胞増殖自体の抑制に主眼がおかれていたが、かかる治療は生理的に正常細胞の増殖をも抑制してしまうため、脱毛、消化器障害、骨髄抑制などの副作用を伴っていた。そこで、かかる副作用を抑えるため、がん特有の遺伝子異常や、シグナル伝達の異常を標的とした分子標的薬などの新たな発想に基づくがん治療薬の開発が進められている。
【０００４】
がんは、様々ながん遺伝子、がん抑制遺伝子、ＤＮＡ修復酵素遺伝子等の異常が同一細胞に蓄積することにより発生すると考えられている。がん遺伝子としては、ＲＡＳ遺伝子、ＦＯＳ遺伝子、ＭＹＣ遺伝子及びＢＣＬ−２遺伝子等が知られている。がんに特有の遺伝子異常のなかでも、膵臓がんの約９５％、大腸がんの約４５％、その他、多くのがんにおいて高頻度でＫＲＡＳ遺伝子に変異が見られる。ＫＲＡＳタンパク質は、細胞膜の内側に局在しているＧタンパク質である。ＫＲＡＳ等のＲＡＳは、Ｃ−ＲＡＦやＢ−ＲＡＦ等のＲＡＦを活性化し、ＲＡＦは引き続きＭＥＫを、ＭＥＫはＭＡＰＫを活性化するというカスケードを形成している。ＫＲＡＳに点突然変異が起こると、ＧＴＰａｓｅ活性が低下し、ＧＴＰが結合した活性型を維持することで下流へのシグナルが恒常的に持続する結果、細胞増殖に異常が生じる。ＫＲＡＳ遺伝子に代表されるように、がん遺伝子により細胞増殖に異常が生じることで細胞のがん化、そして、疾患としてのがんへと進行する。
【０００５】
ところで、グルタチオン包含を触媒する酵素の１つであるグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）は、薬剤等の物質をグルタチオン（ＧＳＨ）と共役させ、水溶性の物質とする酵素として知られている。ＧＳＴは、アミノ酸配列に基づいて、代表的なものとして、α、μ、ω、π、θ及びζの６種類のアイソザイムに分類される。なかでも、特にＧＳＴ−π（glutathione S-transferase pi、ＧＳＴＰ１ともいう）の発現が、種々のがん細胞において増大しており、これが一部の抗がん剤に対する耐性の一因となっている可能性が指摘されている。実際、ＧＳＴ−πを過剰発現しており、薬物耐性を示すがん細胞系に、ＧＳＴ−πに対するアンチセンスＤＮＡやＧＳＴ−π阻害剤を作用させると、薬剤耐性が抑制されることが知られている（非特許文献２〜４）。さらに、最近の報告では、ＧＳＴ−πを過剰発現するアンドロゲン非依存性前立腺がん細胞系にＧＳＴ−πに対するｓｉＲＮＡを作用させるとその増殖が抑制され、アポトーシスが増大することが報告されている（非特許文献５）。
【０００６】
また、ＧＳＴ−πについては、ｃ−Ｊｕｎ  Ｎ末端キナーゼ（ＪＮＫ）と複合体を形成し、ＪＮＫ活性を阻害することが知られている（非特許文献６）。さらに、ＧＳＴ−πについては、細胞のストレス応答に関連するタンパク質のS-グルタチオン化に関与することが知られている（非特許文献７）。さらにまた、ＧＳＴ−πについては、活性酸素種（ＲＯＳ）によって誘導される細胞死に対する保護作用に寄与することが知られている（非特許文献８）。このように、ＧＳＴのなかでもＧＳＴ−πは、様々な特徴・機能を有していることが理解できる。
【０００７】
ＫＲＡＳに変異を有するがん細胞系にＧＳＴ−πに対するｓｉＲＮＡを作用させると、Ａｋｔの活性化が抑制され、オートファジーが増大するが、アポトーシスの誘導は中程度となることが報告されている（非特許文献９）。特許文献１には、ＧＳＴ−πを抑制する薬物と、３−メチルアデニン等のオートファジー阻害剤とを活性成分とすることで、がん細胞のアポトーシスを誘導できることが開示されている。さらに、特許文献２には、ＧＳＴ−πとＡｋｔ等の発現を同時に阻害すると、細胞増殖が抑制され、細胞死が誘導されること、ＧＳＴ−πの発現阻害により誘導されたオートファジーが、Ａｋｔ等の発現を同時に阻害することにより顕著に抑制されることが開示されている。
【０００８】
しかしながら、がん細胞において、ＧＳＴ−πの発現と細胞増殖或いは細胞死との関係や、シグナル伝達に関するＧＳＴ−πの役割等について十分に解明されたとは言えない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】WO2012/176282
【特許文献２】WO2014/098210
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Futreal et al., Nat Rev Cancer. 2004;4(3):177-83
【非特許文献２】Takahashi and Niitsu, Gan To Kagaku Ryoho. 1994;21(7):945-51
【非特許文献３】Ban et al., Cancer Res. 1996;56(15):3577-82
【非特許文献４】Nakajima et al., J Pharmacol Exp Ther. 2003;306(3):861-9
【非特許文献５】Hokaiwado et al., Carcinogenesis. 2008;29(6):1134-8
【非特許文献６】Adler et.al, EMBO J. 1999, 18, 1321-1334
【非特許文献７】Townsend, et.al, J. Biol. Chem. 2009, 284, 436-445
【非特許文献８】Yin et.al, Cancer Res. 2000 60, 4053-4057
【非特許文献９】Nishita et al., AACR 102nd Annual Meeting, Abstract No. 1065
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
そこで、本発明は、がん細胞に対して、細胞死誘導作用及び/又は細胞増殖抑制作用を有する剤を提供し、細胞増殖異常に起因する疾患の治療用医薬組成物を提供し、細胞死誘導剤及び/又は細胞増殖抑制剤をスクリーニングする方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
上述した目的に鑑み、本発明者らが鋭意検討した結果、がん細胞において、ＧＳＴ−πを抑制するとともに、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制すると、いずれか一方を抑制した場合と比較して、細胞死をより強く誘導すること、細胞増殖がより強力に抑制されることを見いだし、本発明を完成するに至った。本発明は以下を包含する。
【００１３】
（１）ＧＳＴ−πを抑制する薬物と、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物とを有効成分として含む、がん細胞の細胞死誘導剤。
（２）ＧＳＴ−πを抑制する薬物と、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物とを有効成分として含む、がん細胞の細胞増殖抑制剤。
（３）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記恒常性維持関連タンパク質は、細胞周期調節タンパク質、抗アポトーシス関連タンパク質及びＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質からなる群から選ばれるタンパク質であることを特徴とする（１）又は（２）記載の剤。
（４）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記細胞周期調節タンパク質は、ＡＴＭ、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１及びＭＹＬＫからなる群から選ばれる少なくとも１つの細胞周期調節タンパク質であることを特徴とする（３）記載の剤。
（５）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記細胞周期調節タンパク質は、ｐ２１、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３及びＭＣＭＤＣ１からなる群から選ばれる少なくとも１つのタンパク質であることを特徴とする（３）記載の剤。
（６）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記抗アポトーシス関連タンパク質は、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２及びＭＹＯ１８Ａからなる群から選ばれる少なくとも１つの抗アポトーシス関連タンパク質であることを特徴とする（３）記載の剤。
（７）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記ＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質は、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦからなる群から選ばれる少なくとも１つのＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質であることを特徴とする（３）記載の剤。
（８）上記薬物が、ＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド及びこれらのうち少なくとも１種を発現するベクターからなる群から選択される物質であることを特徴とする（１）又は（２）記載の剤。
（９）上記恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物が、当該恒常性維持関連タンパク質に作用する化合物であることを特徴とする（１）又は（２）記載の剤。
（１０）アポトーシスを誘導することを特徴とする（１）記載の剤。
（１１）上記がん細胞は、ＧＳＴ−πを高発現するがん細胞であることを特徴とする（１）又は（２）記載の剤。
【００１４】
（１２）上記（１）〜（１１）のいずれかに記載の剤を含む、細胞の増殖異常に起因する疾患の治療用医薬組成物。
（１３）上記疾患ががんであることを特徴とする（１２）記載の医薬組成物。
（１４）上記がんはＧＳＴ−πを高発現するがんであることを特徴とする（１３）記載の医薬組成物。
【００１５】
（１５）ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物を選択することを含む、ＧＳＴ−πを抑制する薬物とともに使用される、がん細胞の細胞死誘導剤及び/又は細胞増殖抑制剤のスクリーニング方法。
（１６）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記恒常性維持関連タンパク質は、細胞周期調節タンパク質、抗アポトーシス関連タンパク質及びＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質からなる群から選ばれるタンパク質であることを特徴とする（１５）記載のスクリーニング方法。
（１７）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記細胞周期調節タンパク質は、ＡＴＭ、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１及びＭＹＬＫからなる群から選ばれる少なくとも１つのタンパク質であることを特徴とする（１６）記載のスクリーニング方法。
（１８）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記細胞周期調節タンパク質は、ｐ２１、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３及びＭＣＭＤＣ１からなる群から選ばれる少なくとも１つのタンパク質であることを特徴とする（１６）記載のスクリーニング方法。
（１９）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記抗アポトーシス関連タンパク質は、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２及びＭＹＯ１８Ａからなる群から選ばれる少なくとも１つの抗アポトーシス関連タンパク質であることを特徴とする（１６）記載のスクリーニング方法。
（２０）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記ＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質は、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦからなる群から選ばれる少なくとも１つのＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質であることを特徴とする（１６）記載のスクリーニング方法。
（２１）がん細胞に対して被検物質を接触させる工程と、上記細胞における上記恒常性維持関連タンパク質の発現量を測定する工程と、被検物質の非存在下において測定した場合と比較して、当該発現量が低下した場合に上記恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物として選択する工程とを含む（１５）乃至（２０）いずれかに記載のスクリーニング方法。
【００１６】
（２２）ＧＳＴ−πを抑制する薬物を選択することを含む、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物とともに使用される、がん細胞の細胞死誘導剤及び/又は細胞増殖抑制剤のスクリーニング方法。
（２３）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記恒常性維持関連タンパク質は、細胞周期調節タンパク質、抗アポトーシス関連タンパク質及びＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質からなる群から選ばれるタンパク質であることを特徴とする（２２）記載のスクリーニング方法。
（２４）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記細胞周期調節タンパク質は、ＡＴＭ、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１及びＭＹＬＫからなる群から選ばれる少なくとも１つのタンパク質であることを特徴とする（２３）記載のスクリーニング方法。
（２５）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記細胞周期調節タンパク質は、ｐ２１、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３及びＭＣＭＤＣ１からなる群から選ばれる少なくとも１つのタンパク質であることを特徴とする（２３）記載のスクリーニング方法。
（２６）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記抗アポトーシス関連タンパク質は、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２及びＭＹＯ１８Ａからなる群から選ばれる少なくとも１つの抗アポトーシス関連タンパク質であることを特徴とする（２３）記載のスクリーニング方法。
（２７）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記ＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質は、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦからなる群から選ばれる少なくとも１つのＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質であることを特徴とする（２３）記載のスクリーニング方法。
（２８）がん細胞に対して被検物質を接触させる工程と、上記細胞におけるＧＳＴ−πの発現量を測定する工程と、被検物質の非存在下において測定した場合と比較して、当該発現量が低下した場合にＧＳＴ−πを抑制する薬物として選択する工程とを含む（２２）乃至（２７）いずれかに記載のスクリーニング方法。
【００１７】
（２９）ＧＳＴ−π及びＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物を選択することを含む、細胞死誘導剤及び/又は細胞増殖抑制剤のスクリーニング方法。
（３０）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記恒常性維持関連タンパク質は、細胞周期調節タンパク質、抗アポトーシス関連タンパク質及びＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質からなる群から選ばれるタンパク質であることを特徴とする（２９）記載のスクリーニング方法。
（３１）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記細胞周期調節タンパク質は、ＡＴＭ、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１及びＭＹＬＫからなる群から選ばれる少なくとも１つのタンパク質であることを特徴とする（３０）記載のスクリーニング方法。
（３２）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記細胞周期調節タンパク質は、ｐ２１、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３及びＭＣＭＤＣ１からなる群から選ばれる少なくとも１つのタンパク質であることを特徴とする（３０）記載のスクリーニング方法。
（３３）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記抗アポトーシス関連タンパク質は、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２及びＭＹＯ１８Ａからなる群から選ばれる少なくとも１つの抗アポトーシス関連タンパク質であることを特徴とする（３０）記載のスクリーニング方法。
（３４）ＧＳＴ−πの抑制とともに合成致死性を示す上記ＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質は、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦからなる群から選ばれる少なくとも１つのＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質であることを特徴とする（３０）記載のスクリーニング方法。
（３５）がん細胞に対して被検物質を接触させる工程と、上記細胞におけるＧＳＴ−πの発現量及びＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質の発現量を測定する工程と、被検物質の非存在下において測定した場合と比較して、ＧＳＴ−πの発現量及びＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質の発現量がともに低下した場合にＧＳＴ−π及びＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物として選択する工程とを含む（２９）乃至（３４）いずれかに記載のスクリーニング方法。
【発明の効果】
【００１８】
本発明に係る細胞死誘導剤によれば、がん細胞に対して非常に強力に細胞死を誘導することができる。よって、本発明に係る細胞死誘導剤は、がん細胞の増殖異常に起因する疾患の治療用の医薬組成物として非常に高い薬効を奏することが可能となる。
【００１９】
また、本発明に係る細胞増殖抑制剤によれば、がん細胞に対して非常に強力に細胞増殖を抑制することができる。よって、本発明に係る細胞増殖抑制剤は、がん細胞の増殖異常に起因する疾患の治療用の医薬組成物として非常に高い薬効を奏することが可能となる。
【００２０】
さらに、本発明に係るスクリーニング方法によれば、がん細胞に対して非常に強力に細胞死を誘導する及び/又は細胞増殖を抑制する薬剤を選択することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】ＧＳＴ−πの発現を抑制するｓｉＲＮＡ及び/又はｐ２１の発現を抑制するｓｉＲＮＡを作用させたときの、変異型ＫＲＡＳを発現する細胞におけるＧＳＴ−πのｍＲＮＡ及びｐ２１のｍＲＮＡを測定した結果を示す特性図である。
【図２】ＧＳＴ−πをともにノックダウンしたときのｐ２１のｍＲＮＡを経時的に定量した結果を示す特性図である。
【図３】ＧＳＴ−π及びｐ２１をともにノックダウンしたときの細胞数を測定した結果を示す特性図である。
【図４】ＧＳＴ−π及びｐ２１をともに３回ノックダウンしたときの細胞数を測定した結果を示す特性図である。
【図５】ＧＳＴ−π及びｐ２１をともに３回ノックダウンしたときの細胞数を測定した結果を示す特性図である。
【図６】ＧＳＴ−π及びｐ２１をともに３回ノックダウンしたときのＡ５４９細胞の位相差像を撮像した写真である。
【図７】ＧＳＴ−π及びｐ２１をともに３回ノックダウンしたときのＭＩＡＰａＣａ−２細胞の位相差像を撮像した写真である。
【図８】ＧＳＴ−π及びｐ２１をともに３回ノックダウンしたときのＰＡＮＣ−１細胞の位相差像を撮像した写真である。
【図９】ＧＳＴ−π及びｐ２１をともに３回ノックダウンしたときのＨＣＴ１１６細胞の位相差像を撮像した写真である。
【図１０】ＧＳＴ−πを３回ノックダウンし、β-ガラクトシダーゼ染色したときのＭ７６０９細胞の位相差像を撮像した写真である。
【図１１】ＧＳＴ−π及びｐ２１をともにノックダウンしたときのＰＵＭＡ遺伝子の発現を定量した結果を示す特性図である。
【図１２】ＧＳＴ−π及び合成致死性を示す候補タンパク質（細胞周期調節タンパク質）をそれぞれ単独でノックダウンしたとき、及びともにノックダウンしたときの相対生存率を比較した結果を示す特性図である。
【図１３】ＧＳＴ−π及び合成致死性を示す候補タンパク質（抗アポトーシス関連タンパク質）をそれぞれ単独でノックダウンしたとき、及びともにノックダウンしたときの相対生存率を比較した結果を示す特性図である。
【図１４】ＧＳＴ−π及び合成致死性を示す候補タンパク質（ＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質）をそれぞれ単独でノックダウンしたとき、及びともにノックダウンしたときの相対生存率を比較した結果を示す特性図である。
【図１５】ＧＳＴ−π及びＭＹＬＫをそれぞれ単独でノックダウンしたとき、及びともにノックダウンしたときの相対生存率を比較した結果を示す特性図である。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本発明に係る細胞死誘導剤及び細胞増殖抑制剤は、ＧＳＴ−πを抑制する薬物と、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物とを有効成分として含む。本発明に係る細胞死誘導剤及び細胞増殖抑制剤は、がん細胞に対して細胞死誘導効果及び細胞増殖抑制効果を示すものである。ここで、がん細胞とは、遺伝子（がん関連遺伝子）に起因して増殖異常を示す細胞である。
【００２３】
例えば、がん関連遺伝子のうち、がん遺伝子としては、ＫＲＡＳ遺伝子、ＦＯＳ遺伝子、ＭＹＣ遺伝子、ＢＣＬ−２遺伝子及びＳＩＳ遺伝子等を挙げることができる。また、がん関連遺伝子のうち、がん抑制遺伝子としては、ＲＢ遺伝子、ｐ５３遺伝子、ＢＲＣＡ１遺伝子、ＮＦ１遺伝子及びｐ７３遺伝子等を挙げることができる。ただし、がん細胞としては、これら具体的ながん関連遺伝子が関与したがん細胞に限定されるものではなく、広く細胞増殖異常を示す細胞に適用することができる。
【００２４】
特に、本発明に係る細胞死誘導剤及び細胞増殖抑制剤は、がん細胞のうちＧＳＴ−πを高発現するがん細胞に適用することが好ましい。ここで、ＧＳＴ−πを高発現するがん細胞とは、細胞増殖異常を示す細胞（いわゆるがん細胞）のうち、ＧＳＴ−πの発現量が正常細胞と比較して有意に高い細胞を意味する。なおＧＳＴ−πの発現量は、ＲＴ−ＰＣＲやマイクロアレイ等、定法に従って測定することができる。
【００２５】
多くの場合、ＧＳＴ−πを高発現するがん細胞とは、一例としては変異型ＫＲＡＳを発現するがん細胞を挙げることができる。すなわち、本発明に係る細胞死誘導剤及び細胞増殖抑制剤は、変異型ＫＲＡＳを発現するがん細胞に適用することが好ましい。
【００２６】
変異型ＫＲＡＳとは、野生型ＫＲＡＳのアミノ酸配列に欠失、置換、付加、挿入といった変異が導入されたアミノ酸配列を有するタンパク質を意味する。なお、ここで、変異型ＫＲＡＳにおける変異は、いわゆる機能獲得性変異（gain of function）である。すなわち、変異型ＫＲＡＳを発現する細胞は、これら変異に起因して、例えばＧＴＰａｓｅ活性が低下し、ＧＴＰが結合した活性型を維持することで下流へのシグナルが恒常的に持続する結果、野生型ＫＲＡＳを発現する細胞と比較して細胞増殖に異常が生じる。変異型ＫＲＡＳをコードする遺伝子としては、野生型ＫＲＡＳ遺伝子におけるコドン１２、コドン１３及びコドン６１のうち少なくとも１箇所に変異を有する遺伝子が挙げられる。特に、変異型ＫＲＡＳとしては、コドン１２及び１３の変異が好ましい。具体的には、ＫＲＡＳ遺伝子のコドン１２がコードするグリシンがセリン、アスパラギン酸、バリン、システイン、アラニン又はアルギニンに置換する変異、ＫＲＡＳ遺伝子のコドン１３がコードするグリシンがアスパラギン酸に変わる変異が挙げられる。
【００２７】
本明細書で用いる場合、ＧＳＴ−πは、ＧＳＴＰ１遺伝子によりコードされる、グルタチオン抱合を触媒する酵素を指す。ＧＳＴ−πはヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_000852（NP_000843）、ラット：NM_012577（NP_036709）、マウス：NM_013541（NP_038569）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、データベースに登録されているヒトＧＳＴ−π遺伝子のコーディング領域の塩基配列を配列番号１に示し、当該ヒトＧＳＴ−π遺伝子がコードするヒトＧＳＴ−πタンパク質のアミノ酸配列を配列番号２に示す。
【００２８】
本明細書で用いる場合、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質は、がん細胞においてＧＳＴ−πを単独で抑制したときの致死率と比較して、がん細胞においてＧＳＴ−πとともに抑制したときに致死率が有意に大となるタンパク質であり、細胞の恒常性（ホメオスタシス）に関与する機能を有するタンパク質である。ここで、合成致死性とは、synthetic lethalityと称され、単独遺伝子欠損では細胞や個体に対する致死性を示さない或いは致死性が低いのに、複数の遺伝子の欠損が共存すると致死性を発揮する或いは致死性が有意に高まる現象を意味する。特に、本明細書において、合成致死性とは、がん細胞に対する致死性を意味する。
【００２９】
本明細書において、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質としては、例えば、細胞周期調節タンパク質、抗アポトーシス関連タンパク質及びＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質を挙げることができる。細胞周期調節タンパク質とは、細胞周期を調節する機能を有するタンパク質である。抗アポトーシス関連タンパク質とは、アポトーシスに対して抑制的に関与する機能を有するタンパク質である。ＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質とは、ＰＩ３Ｋ/ＡＫＴシグナル伝達経路に関与するタンパク質のうちＡｋｔ１を除くタンパク質である。
【００３０】
また、細胞周期を調節する機能を有するタンパク質とは、Ｇ１期（ＤＮＡ複製前の静止期）、Ｓ期（ＤＮＡ合成期）、Ｇ２（細胞分裂前の静止期）及びＭ期（細胞分裂期）からなる細胞周期に関与するあらゆるタンパク質を包含する意味である。より具体的に、細胞周期の調節とは、Ｇ１期→Ｓ期→Ｇ２期→Ｍ期を順序良く進める機構の調節、Ｇ１期で行われるＳ期への進行調節及びＧ２期で行われるＭ期への進行の調節という各イベントを挙げることができる。したがって、細胞周期調節タンパク質とは、例えば、細胞周期におけるこれらのイベントの進行に関与するタンパク質及びこれらのイベントを正又は負に調節するタンパク質とすることができる。さらに具体的には、細胞周期調節タンパク質としては、Ｓ期及びＭ期の開始に必須なサイクリン依存性キナーゼ（Ｃｙｃｌｉｎ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ，ＣＤＫ）等が挙げられる。サイクリン依存性キナーゼの活性は、サイクリン（Ｃｙｃｌｉｎ）の結合によって正に調節されている。また、サイクリン依存性キナーゼの活性は、ｐ２１（ＣＩＰ１／ＷＡＦ１）などのサイクリン依存性キナーゼ阻害因子（Ｃｙｃｌｉｎ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｋｉｎａｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ＣＫＩ）及びチロシンキナーゼによって負に制御されている。したがって、サイクリン依存性キナーゼの活性を制御する、これらサイクリン、ｐ２１等のサイクリン依存性キナーゼ阻害因子及びチロシンキナーゼもまた細胞周期調節タンパク質に含まれる。
【００３１】
具体的に、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質は、ＡＴＭ、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１及びＭＹＬＫからなる群から選ばれる少なくとも１つの細胞周期調節タンパク質を挙げることができる。これら１５種類の細胞周期調節タンパク質のうち、１種類の細胞周期調節タンパク質をＧＳＴ−πとともに抑制しても良いし、２種類以上の細胞周期調節タンパク質をＧＳＴ−πとともに抑制しても良い。
【００３２】
特に、細胞周期調節タンパク質としては、ｐ２１、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３及びＭＣＭＤＣ１からなる群から選ばれる少なくとも１つの細胞周期調節タンパク質をＧＳＴ−πとともに抑制することが好ましい。これら６種類の細胞周期調節タンパク質は、それぞれ単独で抑制した場合には、細胞増殖抑制率が比較的に低く、ＧＳＴ−πとともに抑制してはじめて、著しく高い細胞増殖抑制効果を示すものである。すなわち、これら６種類の細胞周期調節タンパク質を抑制する薬剤は、単独では安全性に優れると言える。したがって、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質としてはこれら６種類の細胞周期調節タンパク質とすることが好ましい。
【００３３】
ｐ２１は、ＣＤＫＮ１Ａ遺伝子によりコードされるＣＩＰ／ＫＩＰファミリーに属する細胞周期調節蛋白質であり、サイクリン−ＣＤＫ複合体に結合して複合体の作用を阻害することによって、Ｇ１期及びＧ２／Ｍ期において細胞周期進行を阻害する働きをもつ。具体的には、ｐ２１は、ｐ５３（がん抑制遺伝子の一つ）によって活性化を受ける遺伝子であり、ＤＮＡ損傷などによってｐ５３が活性化されると、ｐ２１を活性化し、細胞周期をＧ１期及びＧ２／Ｍ期にて停止させることが報告されている。加えて、ｐ２１は、アポトーシスを阻害する機能も有しており、インビトロ及び動物試験において、化学療法剤などによって誘導されるアポトーシスから細胞を保護する作用をもつことが報告されている（Gartel and Tyner,2002; Abbs and Dutta,2009）。ｐ２１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_000389.4、NM_078467.2、NM_001291549.1、NM_001220778.1、NM_001220777.1（NP_001207707.1、NP_001278478.1、NP_001207706.1、NP_510867.1、NP_000380.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_000389.4としてデータベースに登録されているヒトＣＤＫＮ１Ａ遺伝子の塩基配列を配列番号３に示し、当該ヒトＣＤＫＮ１Ａ遺伝子がコードするヒトｐ２１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号４に示す。なお、本明細書において、ｐ２１は、配列番号３の塩基配列によりコードされる配列番号４のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ｐ２１については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号３の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００３４】
ＲＮＰＣ１は、ＲＮＰＣ１遺伝子によりコードされるＲＮＡ結合タンパク質であり、ｐ５３のターゲットとなるタンパク質を指す。ＲＮＰＣ１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_017495.5、NM_183425.2、NM_001291780.1、XM_005260446.1（XP_005260503.1、NP_059965.2、NP_906270.1、NP_001278709.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基酸配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_017495.5としてデータベースに登録されているヒトＲＮＰＣ１遺伝子の塩基配列を配列番号５に示し、当該ヒトＲＮＰＣ１遺伝子がコードするヒトＲＮＰＣ１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号６に示す。なお、本明細書において、ＲＮＰＣ１は、配列番号５の塩基配列によりコードされる配列番号６のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＲＮＰＣ１については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号５の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００３５】
ＣＣＮＬ１は、ＣＣＮＬ１遺伝子によりコードされるサイクリン−Ｌ１を指す。ＣＣＮＬ１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_020307.2、XM_005247647.2、XM_005247648.1、XM_005247649.1、XM_005247650.1、XM_005247651.1、XM_006713710.1、XM_006713711.1（XP_005247704.1、XP_005247705.1、XP_005247706.1、XP_005247707.1、XP_005247708.1、XP_006713773.1、NP_064703.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_020307.2としてデータベースに登録されているヒトＣＣＮＬ１遺伝子の塩基配列を配列番号７に示し、当該ヒトＣＣＮＬ１遺伝子がコードするヒトＣＣＮＬ１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号８に示す。なお、本明細書において、ＣＣＮＬ１は、配列番号７の塩基配列によりコードされる配列番号８のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＣＣＮＬ１については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号７の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００３６】
ＭＣＭ８は、ＭＣＭ８遺伝子によりコードされるミニ染色体維持タンパク質８（Mini-chromosome maintenance 8）を指す。ＭＣＭ８は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_032485.5、NM_182802.2、NM_001281520.1、NM_001281521.1、NM_001281522.1、XM_005260859.1（XP_005260916.1、NP_115874.3、NP_001268449.1、NP_877954.1、NP_001268450.1、NP_001268451.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_032485.5としてデータベースに登録されているヒトＭＣＭ８遺伝子の塩基配列を配列番号９に示し、当該ヒトＭＣＭ８遺伝子がコードするヒトＭＣＭ８タンパク質のアミノ酸配列を配列番号１０に示す。なお、本明細書において、ＭＣＭ８は、配列番号９の塩基配列によりコードされる配列番号１０のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＭＣＭ８については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号９の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００３７】
ＣＣＮＢ３は、ＣＣＮＢ３遺伝子によりコードされるサイクリン−Ｂ３を指す。ＣＣＮＢ３は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_033670.2、NM_033031.2、XM_006724610.1（NP_391990.1、NP_149020.2、XP_006724673.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_033670.2としてデータベースに登録されているヒトＣＣＮＢ３遺伝子の塩基配列を配列番号１１に示し、当該ヒトＣＣＮＢ３遺伝子がコードするヒトＣＣＮＢ３タンパク質のアミノ酸配列を配列番号１２に示す。なお、本明細書において、ＣＣＮＢ３は、配列番号１１の塩基配列によりコードされる配列番号１２のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＣＣＮＢ３については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号１１の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００３８】
ＭＣＭＤＣ１は、ＭＣＭＤＣ１遺伝子によりコードされるミニ染色体維持欠損ドメイン１（Mini-chromosome maintenance deficient domain containing 1）を指す。ＭＣＭＤＣ１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_017696.2、NM_153255.4（NP_060166.2、NP_694987.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_017696.2としてデータベースに登録されているヒトＭＣＭＤＣ１遺伝子の塩基配列を配列番号１３に示し、当該ヒトＭＣＭＤＣ１遺伝子がコードするヒトＭＣＭＤＣ１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号１４に示す。なお、本明細書において、ＭＣＭＤＣ１は、配列番号１３の塩基配列によりコードされる配列番号１４のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＭＣＭＤＣ１については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号１３の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００３９】
ＡＴＭは、ＡＴＭ遺伝子によりコードされるＡＴＭセリン／スレオニンリン酸化酵素（ATM Serine/Threonine Kinase）であり、ＰＩ３／ＰＩ４リン酸化酵素ファミリーに属するタンパク質を指す。ＡＴＭは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_000051.3、XM_005271561.2、XM_005271562.2、XM_005271564.2、XM_006718843.1、XM_006718844.1、XM_006718845.1（NP_000042.3、XP_005271618.2、XP_005271619.2、XP_005271621.2、XP_006718906.1、XP_006718907.1、XP_006718908.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_000051.3としてデータベースに登録されているヒトＡＴＭ遺伝子の塩基配列を配列番号１５に示し、当該ヒトＡＴＭ遺伝子がコードするヒトＡＴＭタンパク質のアミノ酸配列を配列番号１６に示す。なお、本明細書において、ＡＴＭは、配列番号１５の塩基配列によりコードされる配列番号１６のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＡＴＭについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号１５の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００４０】
ＣＤＣ２５Ａは、ＣＤＣ２５Ａ遺伝子によりコードされるＣＤＣ２５ファミリーに属する脱リン酸化酵素であり、ＣＤＣ２を脱リン酸化することで活性化するタンパク質を指す。ＣＤＣ２５Ａは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_001789.2、NM_201567.1、XM_006713434.1、XM_006713435.1、XM_006713436.1（NP_001780.2、NP_963861.1、XP_006713497.1、XP_006713498.1、XP_006713499.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_001789.2としてデータベースに登録されているヒトＣＤＣ２５Ａ遺伝子の塩基配列を配列番号１７に示し、当該ヒトＣＤＣ２５Ａ遺伝子がコードするヒトＣＤＣ２５Ａタンパク質のアミノ酸配列を配列番号１８に示す。なお、本明細書において、ＣＤＣ２５Ａは、配列番号１７の塩基配列によりコードされる配列番号１８のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＣＤＣ２５Ａについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号１７の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００４１】
ＰＲＫＤＣは、ＰＲＫＤＣ遺伝子によりコードされるＤＮＡ依存的蛋白質リン酸化酵素（DNA-dependent Protein Kinase）の触媒サブユニット蛋白質であり、ＰＩ３／ＰＩ４リン酸化酵素ファミリーに属するタンパク質を指す。ＰＲＫＤＣは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_006904.6、NM_001081640.1（NP_008835.5、NP_001075109.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基酸配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_006904.6としてデータベースに登録されているヒトＰＲＫＤＣ遺伝子の塩基配列を配列番号１９に示し、当該ヒトＰＲＫＤＣ遺伝子がコードするヒトＰＲＫＤＣタンパク質のアミノ酸配列を配列番号２０に示す。なお、本明細書において、ＰＲＫＤＣは、配列番号１９の塩基配列によりコードされる配列番号２０のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＰＲＫＤＣについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号１９の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００４２】
ＲＢＢＰ８は、ＲＢＢＰ８遺伝子によりコードされるレチノブラストーマ結合蛋白質８（Retinoblastoma Binding Protein 8）であり、レチノブラストーマ蛋白質と直接結合する核内タンパク質を指す。ＲＢＢＰ８は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_002894.2、NM_203291.1、NM_203292.1、XM_005258325.1、XM_005258326.1、XM_006722519.1、XM_006722520.1、XM_006722521.1、XM_006722522.1（NP_002885.1、NP_976036.1、NP_976037.1、XP_005258382.1、XP_005258383.1、XP_006722582.1、XP_006722583.1、XP_006722584.1、XP_006722585.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_002894.2としてデータベースに登録されているヒトＲＢＢＰ８遺伝子の塩基配列を配列番号２１に示し、当該ヒトＲＢＢＰ８遺伝子がコードするヒトＲＢＢＰ８タンパク質のアミノ酸配列を配列番号２２に示す。なお、本明細書において、ＲＢＢＰ８は、配列番号２１の塩基配列によりコードされる配列番号２２のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＲＢＢＰ８については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号２１の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００４３】
ＳＫＰ２は、ＳＫＰ２遺伝子によりコードされるＳ期キナーゼ関連蛋白質（S-phase Kinase-associated Protein 2）であり、Ｅ３ユビキチン蛋白質リガーゼの４サブユニットの一つであるＦｂｏｘ蛋白質に属するタンパク質を指す。ＳＫＰ２は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_005983.3、NM_032637.3、NM_001243120.1、XM_006714487.1（NP_005974.2、NP_116026.1、NP_001230049.1、XP_006714550.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_005983.3としてデータベースに登録されているヒトＳＫＰ２遺伝子のコーディング領域の塩基配列を配列番号２３に示し、当該ヒトＳＫＰ２遺伝子がコードするヒトＳＫＰ２タンパク質のアミノ酸配列を配列番号２４に示す。なお、本明細書において、ＳＫＰ２は、配列番号２３の塩基配列によりコードされる配列番号２４のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＳＫＰ２については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号２３の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００４４】
ＭＣＭ１０は、ＭＣＭ１０遺伝子によりコードされるミニ染色体維持タンパク質１０（Mini-Chromosome Maintenance 10）を指す。ＭＣＭ１０は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_182751.2、NM_018518.4（NP_877428.1、NP_060988.3）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_182751.2としてデータベースに登録されているヒトＭＣＭ１０遺伝子の塩基配列を配列番号２５に示し、当該ヒトＭＣＭ１０遺伝子がコードするヒトＭＣＭ１０タンパク質のアミノ酸配列を配列番号２６に示す。なお、本明細書において、ＭＣＭ１０は、配列番号２５の塩基配列によりコードされる配列番号２６のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＭＣＭ１０については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号２５の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００４５】
ＣＥＮＰＨは、ＣＥＮＰＨ遺伝子によりコードされるセントロメア蛋白質Ｈ（Centromere Protein H）であり、セントロメア上に配置される活性化キネトコアを構成する蛋白質の一つを指す。ＣＥＮＰＨは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_022909.3（NP_075060.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_022909.3としてデータベースに登録されているヒトＣＥＮＰＨ遺伝子の塩基配列を配列番号２７に示し、当該ヒトＣＥＮＰＨ遺伝子がコードするヒトＣＥＮＰＨタンパク質のアミノ酸配列を配列番号２８に示す。なお、本明細書において、ＣＥＮＰＨは、配列番号２７の塩基配列によりコードされる配列番号２８のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＣＥＮＰＨについては複数の転写バリアントが存在している可能性がある。配列番号２７の塩基配列は、一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００４６】
ＢＲＳＫ１は、ＢＲＳＫ１遺伝子によりコードされるセリン／スレオニンリン酸化酵素であり、ＤＮＡ損傷における細胞周期チェックポイントにて作用するリン酸化酵素を指す。ＢＲＳＫ１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_032430.1、XM_005259327.1、XR_430213.1（NP_115806.1、XP_005259384.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_032430.1としてデータベースに登録されているヒトＢＲＳＫ１遺伝子の塩基配列を配列番号２９に示し、当該ヒトＢＲＳＫ１遺伝子がコードするヒトＢＲＳＫ１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号３０に示す。なお、本明細書において、ＢＲＳＫ１は、配列番号２９の塩基配列によりコードされる配列番号３０のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＢＲＳＫ１については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号２９の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００４７】
ＭＹＬＫ（myosin light chain kinase）は、カルシウム/カルモジュリン依存性酵素であるミオシン軽鎖キナーゼであり、ミオシン制御軽鎖をリン酸化してミオシンのアクチンフィラメントへの相互作用を促進して収縮活動を作り出す。ＭＹＬＫをコードする遺伝子は、平滑筋及び非筋肉性アイソドームの両方をコードしている。ＭＹＬＫは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_053028.3, NM_053026.3, NM_053027.3, NM_053025.3, NM_053031.2, NM_053032.2, XM_011512862.1, XM_011512861.1, XM_011512860.1（NP_444256.3, NP_444254.3, NP_444255.3, NP_444253.3, NP_444259.1, NP_444260.1, XP_011511164.1, XP_011511163.1, XP_011511162.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_053028.3としてデータベースに登録されているヒトＭＹＬＫ遺伝子の塩基配列を配列番号４１に示し、当該ヒトＭＹＬＫ遺伝子がコードするヒトＭＹＬＫタンパク質のアミノ酸配列を配列番号４２に示す。なお、本明細書において、ＭＹＬＫは、配列番号４１の塩基配列によりコードされる配列番号４２のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＭＹＬＫについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号４１の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００４８】
一方、アポトーシスに対して抑制的に関与する機能を有するタンパク質とは、核凝集、細胞収縮、膜ブレブ形成及びDNAの断片化等のメカニズムを抑制することで、アポトーシスを阻害する機能を有するタンパク質を意味する。アポトーシスに対して抑制的に関与する機能とは、アポトーシスを阻害する機能及びアポトーシスを促進する因子を阻害する機能のいずれも含む意味である。アポトーシスを促進する因子としては、例えば、カスパーゼや、Ｆａｓ、ＴＮＦＲ等の多くの因子を挙げることができる。
【００４９】
具体的に、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質は、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２及びＭＹＯ１８Ａからなる群から選ばれる少なくとも１つの抗アポトーシス関連タンパク質を挙げることができる。これら２０種類の抗アポトーシス関連タンパク質のうち、１種類の抗アポトーシス関連タンパク質をＧＳＴ−πとともに抑制しても良いし、２種類以上の抗アポトーシス関連タンパク質をＧＳＴ−πとともに抑制しても良い。
【００５０】
ＡＡＴＦは、細胞アポトーシスに関連するとされるプロテインキナーゼＭＡＰ３Ｋ１２／ＤＬＫと相互作用するものとして同定されている。ＡＡＴＦは、転写因子の特徴的なモチーフであるロイシンジッパーを含み、Ｇａｌ４  ＤＮＡ結合ドメインと融合したときに強い転写活性化が起こることが示されている。また、ＡＡＴＦをコードする遺伝子の過剰発現により、ＭＡＰ３Ｋ１２誘導性のアポトーシスを阻害することが知られている。ＡＡＴＦは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_012138.3, XM_011546799.1, XM_011524611.1, XR_951958.1, XR_934439.1（NP_036270.1, XP_011545101.1, XP_011522913.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_012138.3としてデータベースに登録されているヒトＡＡＴＦ遺伝子の塩基配列を配列番号３９に示し、当該ヒトＡＡＴＦ遺伝子がコードするヒトＡＡＴＦタンパク質のアミノ酸配列を配列番号４０に示す。なお、本明細書において、ＡＡＴＦは、配列番号３９の塩基配列によりコードされる配列番号４０のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＡＡＴＦについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号３９の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００５１】
ＡＬＯＸ１２は、アラキドン酸-12-リポキシゲナーゼであり、アテローム性動脈硬化や骨粗しょう症等に関与することが知られている。ＡＬＯＸ１２は、血管内皮増殖因子の発現を制御することで血管形成を正に制御すること、血管平滑筋細胞等の生存を促進してアポトーシスプロセスに関与することが知られている。ＡＬＯＸ１２は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_000697.2, XM_011523780.1（NP_000688.2, XP_011522082.1, AAH69557.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_000697.2としてデータベースに登録されているヒトＡＬＯＸ１２遺伝子の塩基配列を配列番号４３に示し、当該ヒトＡＬＯＸ１２遺伝子がコードするヒトＡＬＯＸ１２タンパク質のアミノ酸配列を配列番号４４に示す。なお、本明細書において、ＡＬＯＸ１２は、配列番号４３の塩基配列によりコードされる配列番号４４のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＡＬＯＸ１２については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号４３の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００５２】
ＡＮＸＡ１は、リン脂質に結合する膜局在タンパク質である。ＡＮＸＡ１は、ホスホリパーゼＡ２を阻害し、抗炎症活性を有する。ＡＮＸＡ１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_000700.2, XM_011518609.1, XM_011518608.1（NP_000691.1, AAH34157.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_000700.2としてデータベースに登録されているヒトＡＮＸＡ１遺伝子の塩基配列を配列番号４５に示し、当該ヒトＡＮＸＡ１遺伝子がコードするヒトＡＮＸＡ１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号４６に示す。なお、本明細書において、ＡＮＸＡ１は、配列番号４５の塩基配列によりコードされる配列番号４６のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＡＮＸＡ１については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号４５の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００５３】
ＡＮＸＡ４は、カルシウム依存性リン脂質結合性タンパク質であるアネキシンファミリーに属し、ＡＴＰと相互作用する可能性があり、インビトロで抗凝固活性を示し、ホスホリパーゼＡ２を阻害することが知られている。ＡＮＸＡ４は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_001153.3, XM_011532805.1（NP_001144.1, XP_011531107.1, AAH63672.1, AAH00182.1, AAH11659.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_001153.3としてデータベースに登録されているヒトＡＮＸＡ４遺伝子の塩基配列を配列番号４７に示し、当該ヒトＡＮＸＡ４遺伝子がコードするヒトＡＮＸＡ４タンパク質のアミノ酸配列を配列番号４８に示す。なお、本明細書において、ＡＮＸＡ４は、配列番号４７の塩基配列によりコードされる配列番号４８のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＡＮＸＡ４については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号４７の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００５４】
ＡＰＩ５は、アポトーシス阻害タンパク質であり、その発現により成長因子欠乏の後にアポトーシスを止めることが知られている。ＡＰＩ５は、転写因子Ｅ２Ｆ１誘導性アポトーシスを抑制し、アポトーシスにおけるＤＮＡ断片化に関与する核因子であるＡｃｉｎｕｓと相互作用するとともにこれを負に制御する。ＡＰＩ５は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_001142930.1, NM_006595.3, NM_001243747.1, NM_001142931.1, XM_006718359.2, NR_024625.1（NP_001136402.1, NP_001136403.1, NP_001230676.1, NP_006586.1, XP_006718422.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_001142930.1としてデータベースに登録されているヒトＡＰＩ５遺伝子の塩基配列を配列番号４９に示し、当該ヒトＡＰＩ５遺伝子がコードするヒトＡＰＩ５タンパク質のアミノ酸配列を配列番号５０に示す。なお、本明細書において、ＡＰＩ５は、配列番号４９の塩基配列によりコードされる配列番号５０のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＡＰＩ５については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号４９の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００５５】
ＡＴＦ５は、ヒトＴ細胞白血病ウイルスタイプ１を原因とする疾患に関与することが知られている。ＡＴＦ５は、多くのウイルスプロモーター等に存在するｃＡＭＰ応答エレメント（ＣＲＥ）に結合する転写活性化因子であり、神経前駆細胞からニューロンへの分化を阻害することが知られている。ＡＴＦ５は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_012068.5, NM_001193646.1, NM_001290746.1, XM_011526629.1（NP_036200.2, NP_001277675.1, NP_001180575.1, XP_011524931.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_012068.5としてデータベースに登録されているヒトＡＴＦ５遺伝子の塩基配列を配列番号５１に示し、当該ヒトＡＴＦ５遺伝子がコードするヒトＡＴＦ５タンパク質のアミノ酸配列を配列番号５２に示す。なお、本明細書において、ＡＴＦ５は、配列番号５１の塩基配列によりコードされる配列番号５２のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＡＴＦ５については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号５１の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００５６】
ＡＶＥＮは、アポトーシス、カスパーゼ活性化阻害因子として知られるタンパク質であり、分裂病質人格障害や無感情症に関与することが知られている。ＡＶＥＮは、Ａｐａｆ１を介したアポトーシスを阻害することが知られている。ＡＶＥＮは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_020371.2, XM_011521820.1, XM_005254563.2, XM_011521819.1, XM_011521818.1（NP NP_065104.1, XP_011520122.1, XP_011520121.1, XP_011520120.1, XP_005254620.1, AAH63533.1, AAF91470.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_020371.2としてデータベースに登録されているヒトＡＶＥＮ遺伝子の塩基配列を配列番号５３に示し、当該ヒトＡＶＥＮ遺伝子がコードするヒトＡＶＥＮタンパク質のアミノ酸配列を配列番号５４に示す。なお、本明細書において、ＡＶＥＮは、配列番号５３の塩基配列によりコードされる配列番号５４のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＡＶＥＮについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号５３の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００５７】
ＡＺＵ１は、アズール顆粒に含まれるタンパク質であり、単球走化及び抗菌活性を有している。ＡＺＵ１は、重要な多機能炎症性メディエーターである。ＡＺＵ１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_001700.3（NP_001691.1, EAW69592.1, AAH93933.1, AAH93931.1, AAH69495.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_001700.3としてデータベースに登録されているヒトＡＺＵ１遺伝子の塩基配列を配列番号５５に示し、当該ヒトＡＺＵ１遺伝子がコードするヒトＡＺＵ１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号５６に示す。なお、本明細書において、ＡＺＵ１は、配列番号５５の塩基配列によりコードされる配列番号５６のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＡＺＵ１については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号５５の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００５８】
ＢＡＧ１は、アポトーシスやプログラム細胞死を導く経路を阻害する膜タンパク質であるＢＣＬ２に結合する。ＢＡＧ１は、ＢＣＬ２の抗アポトーシス作用を増強し、増殖因子受容体と抗アポトーシスメカニズムとの間のリンクを表している。ＢＡＧ１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_004323.5, NM_001172415.1（NP_004314.5, NP_001165886.1, AAH14774.2）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_004323.5としてデータベースに登録されているヒトＢＡＧ１遺伝子の塩基配列を配列番号５７に示し、当該ヒトＢＡＧ１遺伝子がコードするヒトＢＡＧ１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号５８に示す。なお、本明細書において、ＢＡＧ１は、配列番号５７の塩基配列によりコードされる配列番号５８のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＢＡＧ１については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号５７の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００５９】
ＢＣＬ２Ｌ１は、ＢＣＬ２タンパク質ファミリーに属し、ヘテロ又はホモダイマーを形成して細胞質内の活性に広く関与し、抗アポトーシス制御又はアポトーシス促進制御因子となる。ＢＣＬ２Ｌ１は、ミトコンドリア外膜に存在し、ミトコンドリア外膜チャンネルを開放制御することが示されている。ＢＣＬ２Ｌ１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_138578.1, NM_001191.2, XM_011528966.1, XM_011528965.1, XM_011528961.1, XM_011528960.1, XM_011528964.1, XM_011528963.1, XM_011528962.1, XM_005260487.3, XM_005260486.2（NP_612815.1, NP_001182.1, AAH19307.1, XP_011527268.1, XP_011527267.1, XP_011527266.1, XP_011527265.1, XP_011527264.1, XP_011527263.1, XP_011527262.1, XP_005260544.1, XP_005260543.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_138578.1としてデータベースに登録されているヒトＢＣＬ２Ｌ１遺伝子の塩基配列を配列番号５９に示し、当該ヒトＢＣＬ２Ｌ１遺伝子がコードするヒトＢＣＬ２Ｌ１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号６０に示す。なお、本明細書において、ＢＣＬ２Ｌ１は、配列番号５９の塩基配列によりコードされる配列番号６０のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＢＣＬ２Ｌ１については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号５９の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００６０】
ＢＦＡＲは、二元機能アポトーシス制御因子であり、細胞死受容体を介して誘因されるアポトーシス及びミトコンドリア因子を介して誘因されるアポトーシスの両方に対する抗アポトーシス活性を有している。ＢＦＡＲは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_016561.2, XM_006725196.2, XM_011546704.1, XM_005255350.2, XM_011522520.1（NP_057645.1, XP_011545006.1, XP_011520822.1, XP_006725259.1, XP_005255407.1, AAH03054.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_016561.2としてデータベースに登録されているヒトＢＦＡＲ遺伝子の塩基配列を配列番号６１に示し、当該ヒトＢＦＡＲ遺伝子がコードするヒトＢＦＡＲタンパク質のアミノ酸配列を配列番号６２に示す。なお、本明細書において、ＢＦＡＲは、配列番号６１の塩基配列によりコードされる配列番号６２のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＢＦＡＲについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号６１の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００６１】
ＣＦＬＡＲは、アポトーシスの制御因子であり、カスパーゼ８と構造が類似していることが知られている。ただし、ＣＦＬＡＲは、カスパーゼ活性を有しておらず、カスパーゼ８により２つのペプチドに分解される。ＣＦＬＡＲは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_003879.5, NM_001202519.1, NM_001202518.1, NM_001308043.1, NM_001308042.1, NM_001202517.1, NM_001202516.1, NM_001127184.2, NM_001202515.1, NM_001127183.2, XM_011512100.1（NP_003870.4, NP_001294972.1, NP_001294971.1, NP_001189448.1, NP_001189446.1, NP_001189445.1, NP_001189444.1, NP_001120656.1,  XP_011510402.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_003879.5としてデータベースに登録されているヒトＣＦＬＡＲ遺伝子の塩基配列を配列番号６３に示し、当該ヒトＣＦＬＡＲ遺伝子がコードするヒトＣＦＬＡＲタンパク質のアミノ酸配列を配列番号６４に示す。なお、本明細書において、ＣＦＬＡＲは、配列番号６３の塩基配列によりコードされる配列番号６４のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＣＦＬＡＲについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号６３の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００６２】
ＩＬ２は、Ｔ及びＢリンパ球の増殖に重要な分泌サイトカインであるインターロイキン２である。ＩＬ２は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_000586.3（NP_000577.2）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_000586.3としてデータベースに登録されているヒトＩＬ２遺伝子の塩基配列を配列番号６５に示し、当該ヒトＩＬ２遺伝子がコードするヒトＩＬ２タンパク質のアミノ酸配列を配列番号６６に示す。なお、本明細書において、ＩＬ２は、配列番号６５の塩基配列によりコードされる配列番号６６のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＩＬ２については複数の転写バリアントが存在している可能性がある。配列番号６５の塩基配列は、一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００６３】
ＭＡＬＴ１は、粘膜関連リンパ組織リンパ腫において、バキュロウイルスＩＡＰ反復タンパク質３（アポトーシス阻害因子２）とイムノグロブリン重鎖座位との間の染色体転座で再構成される遺伝子によりコードされる。ＭＡＬＴ１は、ＮＦκBを活性化すると考えられている。ＭＡＬＴ１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_173844.2、NM_006785.3、XM_011525794.1（NP_776216.1、NP_006776.1、XP_011524096.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_006785.3としてデータベースに登録されているヒトＭＡＬＴ１遺伝子の塩基配列を配列番号６７に示し、当該ヒトＭＡＬＴ１遺伝子がコードするヒトＭＡＬＴ１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号６８に示す。なお、本明細書において、ＭＡＬＴ１は、配列番号６７の塩基配列によりコードされる配列番号６８のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＭＡＬＴ１については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号６７の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００６４】
ＭＣＬ１は、Ｂｃｌ−２ファミリーのメンバーである抗アポトーシスタンパク質である。ＭＣＬ１遺伝子については、選択的スプライシングによるバリアントのうち最も長いものはアポトーシスを阻害して細胞の生存を高め、より短いバリアントはアポトーシスを誘因して細胞死を誘導する。ＭＣＬ１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_021960.4、NM_001197320.1、NM_182763.2（NP_068779.1、NP_001184249.1、NP_877495.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_021960.4としてデータベースに登録されているヒトＭＣＬ１遺伝子の塩基配列を配列番号６９に示し、当該ヒトＭＣＬ１遺伝子がコードするヒトＭＣＬ１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号７０に示す。なお、本明細書において、ＭＣＬ１は、配列番号６９の塩基配列によりコードされる配列番号７０のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＭＣＬ１については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号６９の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００６５】
ＭＫＬ１は、平滑筋細胞分化の有用な制御因子である転写因子ミオカルディンと相互作用することが知られている。ＭＫＬ１は、大部分が核に存在し、細胞骨格から核へのシグナル伝達を助けている。ＭＫＬ１遺伝子は、ＲＮＡ結合モチーフタンパク質１５遺伝子と融合する転座に関与している。ＭＫＬ１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_001282662.1、NM_001282660.1、NM_020831.4、NM_001282661.1、XM_011530287.1、XM_011530286.1、XM_011530285.1、XM_011530284.1、XM_011530283.1、XM_005261691.3（NP_001269591.1、NP_001269589.1、NP_065882.1、NP_001269590.1、XP_011528589.1、XP_011528588.1、XP_011528587.1、XP_011528586.1、XP_011528585.1、XP_005261751.1、XP_005261749.1、XP_005261748.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_001282662.1としてデータベースに登録されているヒトＭＫＬ１遺伝子の塩基配列を配列番号７１に示し、当該ヒトＭＫＬ１遺伝子がコードするヒトＭＫＬ１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号７２に示す。なお、本明細書において、ＭＫＬ１は、配列番号７１の塩基配列によりコードされる配列番号７２のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＭＫＬ１については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号７１の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００６６】
ＭＰＯは、骨髄分化の間に合成されるヘムタンパク質であるミエロペルオキシダーゼであり、好中球アズール顆粒の主成分を構成している。ＭＰＯは、好中球における殺菌活性に中心的役割を果たす次亜ハロゲン酸を生成する。ＭＰＯは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_000250.1、XM_011524823.1、XM_011524822.1、XM_011524821.1（NP_000241.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_000250.1としてデータベースに登録されているヒトＭＰＯ遺伝子の塩基配列を配列番号７３に示し、当該ヒトＭＰＯ遺伝子がコードするヒトＭＰＯタンパク質のアミノ酸配列を配列番号７４に示す。なお、本明細書において、ＭＰＯは、配列番号７３の塩基配列によりコードされる配列番号７４のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＭＰＯについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号７３の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００６７】
ＭＴＬ５は、メタロチオネイン様タンパク質であり、マウスの精巣及び卵巣で特異的に発現していることが示されている。なお、メタロチオネインは、細胞増殖及び分化の制御に中心的な役割があると考えられ、精子形成に関与すると考えられている。ＭＴＬ５は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_004923.3、NM_001039656.1、XM_011545404.1、XM_011545403.1、XM_011545402.1（NP_001034745.1、NP_004914.2、XP_011543706.1、XP_011543705.1、XP_011543704.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_004923.3としてデータベースに登録されているヒトＭＴＬ５遺伝子の塩基配列を配列番号７５に示し、当該ヒトＭＴＬ５遺伝子がコードするヒトＭＴＬ５タンパク質のアミノ酸配列を配列番号７６に示す。なお、本明細書において、ＭＴＬ５は、配列番号７５の塩基配列によりコードされる配列番号７６のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＭＴＬ５については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号７５の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００６８】
ＭＹＢＬ２は、転写因子であるＭＹＢファミリーに属する核タンパク質であり、細胞周期の進行に関与している。ＭＹＢＬ２は、Ｓ期においてサイクリンＡ/サイクリン依存性キナーゼ２によりリン酸化され、活性化因子及び抑制因子の両方の活性を有している。ＭＹＢＬ２は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_001278610.1、NM_002466.3（NP_001265539.1、NP_002457.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_002466.3としてデータベースに登録されているヒトＭＹＢＬ２遺伝子の塩基配列を配列番号７７に示し、当該ヒトＭＹＢＬ２遺伝子がコードするヒトＭＹＢＬ２タンパク質のアミノ酸配列を配列番号７８に示す。なお、本明細書において、ＭＹＢＬ２は、配列番号７７の塩基配列によりコードされる配列番号７８のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＭＹＢＬ２については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号７７の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００６９】
ＭＹＯ１８Ａは、ミオシン１８Ａであり、８ｐ１１骨髄増殖性症候群に関与することが知られている。ＭＹＯ１８Ａは、運動活性及びＡＴＰａｓｅ活性を有している。ＭＹＯ１８Ａは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_203318.1、NM_078471.3（NP_976063.1、NP_510880.2）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_078471.3としてデータベースに登録されているヒトＭＹＯ１８Ａ遺伝子の塩基配列を配列番号７９に示し、当該ヒトＭＹＯ１８Ａ遺伝子がコードするヒトＭＹＯ１８Ａタンパク質のアミノ酸配列を配列番号８０に示す。なお、本明細書において、ＭＹＯ１８Ａは、配列番号７９の塩基配列によりコードされる配列番号８０のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＭＹＯ１８Ａについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号７９の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００７０】
一方、ＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質とは、ＰＩ３Ｋ/ＡＫＴシグナル伝達経路に関与するタンパク質のうちＡｋｔ１を除くタンパク質であり、換言すると、Ａｋｔ１を除いたＰＩ３Ｋ/ＡＫＴシグナル伝達経路関連タンパク質である。なお、ＰＩ３Ｋ/ＡＫＴシグナル伝達経路については、例えば、Cell 2007 Jun 29;129(7):1261-74に開示されている。
【００７１】
具体的に、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示すＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質は、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦからなる群から選ばれる少なくとも１つのＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質を挙げることができる。これら１４種類のＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質のうち、１種類のＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質をＧＳＴ−πとともに抑制しても良いし、２種類以上のＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質をＧＳＴ−πとともに抑制しても良い。
【００７２】
特に、ＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質としては、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ及びＲＡＣ１からなる群から選ばれる少なくとも１つのＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質をＧＳＴ−πとともに抑制することが好ましい。これら７種類のＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質は、それぞれ単独で抑制した場合やＧＳＴ−πを単独で抑制した場合と比較して、著しく高い細胞増殖抑制効果を示すものである。したがって、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示すＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質としてはこれら７種類のＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質から選択することが好ましい。
【００７３】
ＭＴＯＲ（mechanistic target of rapamycin）は、ラパマイシンの標的タンパク質であり、セリン・スレオニンキナーゼの一種として知られている。ＭＴＯＲは、フォスファチジルイノシトールキナーゼ関連キナーゼに属し、ＤＮＡ損傷及び栄養枯渇といったストレスへの細胞反応を媒介することがしあれている。ＭＴＯＲは、細胞周期停止及びＦＫＢＰ１２-ラパマイシン複合体による免疫抑制効果のターゲットとして作用することが知られている。ＭＴＯＲは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_004958.3, XM_005263438.1, XM_011541166.1（NP_004949.1, XP_005263495.1, XP_005263495.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_004958.3としてデータベースに登録されているヒトＭＴＯＲ遺伝子の塩基配列を配列番号８１に示し、当該ヒトＭＴＯＲ遺伝子がコードするヒトＭＴＯＲタンパク質のアミノ酸配列を配列番号８２に示す。なお、本明細書において、ＭＴＯＲは、配列番号８１の塩基配列によりコードされる配列番号８２のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＭＴＯＲについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号８１の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００７４】
ＩＲＡＫ１（interleukin 1 receptor associated kinase 1）は、インターロイキン１受容体関連キナーゼ１であり、刺激によりインターロイキン１受容体に作用するセリン・スレオニンキナーゼの一つである。ＩＲＡＫ１は、転写因子ＮＦκＢに関するＩＬ１誘導性アップレギュレーションの部分的な原因となる。ＩＲＡＫ１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_001025243.1, NM_001025242.1, NM_001569.3, XM_011531158.1, XM_005274668.2（NP_001020414.1, NP_001020413.1, NP_001560.2, XP_011529460.1, XP_005274725.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_001025243.1としてデータベースに登録されているヒトＩＲＡＫ１遺伝子の塩基配列を配列番号８３に示し、当該ヒトＩＲＡＫ１遺伝子がコードするヒトＩＲＡＫ１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号８４に示す。なお、本明細書において、ＩＲＡＫ１は、配列番号８３の塩基配列によりコードされる配列番号８４のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＩＲＡＫ１については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号８３の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００７５】
ＩＲＳ１（insulin receptor substrate 1）は、インスリン受容体チロシンキナーゼによりリン酸化されるタンパク質として知られている。ＩＲＳ１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_005544.2（NP_005535.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_005544.2としてデータベースに登録されているヒトＩＲＳ１遺伝子の塩基配列を配列番号８５に示し、当該ヒトＩＲＳ１遺伝子がコードするヒトＩＲＳ１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号８６に示す。なお、本明細書において、ＩＲＳ１は、配列番号８５の塩基配列によりコードされる配列番号８６のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＩＲＳ１については、複数の転写バリアントが存在している可能性がある。配列番号８５の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００７６】
ＭＹＤ８８（myeloid differentiation primary response 88）は、先天性及び適応性免疫応答の主要な役割を果たす細胞質アダプタータンパク質である。ＭＹＤ８８は、インターロイキン１及びＴｏｌｌ様受容体シグナル経路における必須なシグナル伝達物質として機能する。これらのシグナル経路は、多くの炎症性遺伝子の活性化を制御している。ＭＹＤ８８は、Ｎ末端の死ドメインとＣ末端のＴｏｌｌ−インターロイキン１受容体ドメインを有している。ＭＹＤ８８は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_001172567.1, NM_002468.4, NM_001172569.1, NM_001172568.1, NM_001172566.1, XM_005265172.1, XM_006713170.1（NP_001166038.1, NP_002459.2, NP_001166040.1, NP_001166039.1, NP_001166037.1, XP_005265229.1, XP_006713233.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_001172567.1としてデータベースに登録されているヒトＭＹＤ８８遺伝子の塩基配列を配列番号８７に示し、当該ヒトＭＹＤ８８遺伝子がコードするヒトＭＹＤ８８タンパク質のアミノ酸配列を配列番号８８に示す。なお、本明細書において、ＭＹＤ８８は、配列番号８７の塩基配列によりコードされる配列番号８８のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＭＹＤ８８については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号８７の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００７７】
ＮＦＫＢ１（nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells 1）は、105kDのタンパク質であり、26Sプロテアソームにより翻訳時プロセッシングを受けて50kDのタンパク質となる。その105kDのタンパク質は、Ｒｅｌタンパク質特異的転写阻害剤であり、その50kDのタンパク質は、ＮＦκ-Ｂタンパク質（ＮＦＫＢ）複合体におけるＤＮＡ結合サブユニットである。ＮＦＫＢ１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_003998.3, NM_001165412.1, XM_011532006.1, XM_011532007.1, XM_011532008.1, XM_011532009.1（NP_003989.2, NP_001158884.1, XP_011530308.1, XP_011530309.1, XP_011530310.1, XP_011530311.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_003998.3としてデータベースに登録されているヒトＮＦＫＢ１遺伝子の塩基配列を配列番号８９に示し、当該ヒトＮＦＫＢ１遺伝子がコードするヒトＮＦＫＢ１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号９０に示す。なお、本明細書において、ＮＦＫＢ１は、配列番号８９の塩基配列によりコードされる配列番号９０のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＮＦＫＢ１については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号８９の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００７８】
ＰＩＫ３ＣＧ（phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase, catalytic subunit gamma）は、他のクラス１触媒サブユニット（ｐ１１０−α、ｐ１１０−β及びｐ１１０−δ）と同様に、ｐ８５制御サブユニットに結合してＰＩ３Ｋを形成することが知られている。ＰＩＫ３ＣＧは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_001282426.1, NM_001282427.1, NM_002649.3, XM_011516316.1, XM_011516317.1, XM_005250443.2（NP_001269355.1, NP_001269356.1, NP_002640.2, XP_011514618.1, XP_011514619.1, XP_005250500.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_001282426.1としてデータベースに登録されているヒトＰＩＫ３ＣＧ遺伝子の塩基配列を配列番号９１に示し、当該ヒトＰＩＫ３ＣＧ遺伝子がコードするヒトＰＩＫ３ＣＧタンパク質のアミノ酸配列を配列番号９２に示す。なお、本明細書において、ＰＩＫ３ＣＧは、配列番号９１の塩基配列によりコードされる配列番号９２のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＰＩＫ３ＣＧについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号９１の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００７９】
ＲＡＣ１（ras-related C3 botulinum toxin substrate 1 (rho family, small GTP binding protein Rac1)）は、小ＧＴＰ結合性タンパク質におけるＲＡＳスーパーファミリーに属するＧＴＰａｓｅであることが知られている。当該スーパーファミリーに属する因子は、成長、細胞骨格再構築及びタンパク質キナーゼの活性化を含む多種多様な細胞内事象を制御している。ＲＡＣ１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_018890.3, NM_006908.4（NP_061485.1, NP_008839.2）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_018890.3としてデータベースに登録されているヒトＲＡＣ１遺伝子の塩基配列を配列番号９３に示し、当該ヒトＲＡＣ１遺伝子がコードするヒトＲＡＣ１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号９４に示す。なお、本明細書において、ＲＡＣ１は、配列番号９３の塩基配列によりコードされる配列番号９４のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＲＡＣ１については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号９３の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００８０】
ＡＫＴ３（v-akt murine thymoma viral oncogene homolog 3）は、ＰＫＢとも呼称される、セリン・スレオニンタンパク質キナーゼファミリーであるＡＫＴのメンバーとして知られている。ＡＫＴキナーゼは、インスリン及び成長因子に応答する細胞シグナル系における制御因子であることが知られている。これらは、グリコーゲン合成及びグルコース取り込みに限らず、細胞増殖、分化、アポトーシス及び腫瘍形成といった様々な生物学的過程に関与している。このキナーゼは、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、インスリン及びインスリン様成長因子１（ＩＧＦ１）により刺激を受けることが示されている。ＡＫＴ３は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_181690.2, NM_001206729.1, NM_005465.4, XM_005272995.2, XM_011544011.1, XM_005272994.3, XM_005272997.3, XM_011544014.1, XM_011544012.1, XM_011544013.1, XM_006711726.2（NP_859029.1, NP_001193658.1, NP_005456.1, XP_005273052.1, XP_011542313.1, XP_005273051.1, XP_005273054.1, XP_011542316.1, XP_011542314.1, XP_011542315.1, XP_006711789.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_181690.2としてデータベースに登録されているヒトＡＫＴ３遺伝子の塩基配列を配列番号９５に示し、当該ヒトＡＫＴ３遺伝子がコードするヒトＡＫＴ３タンパク質のアミノ酸配列を配列番号９６に示す。なお、本明細書において、ＡＫＴ３は、配列番号９５の塩基配列によりコードされる配列番号９６のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＡＫＴ３については、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号９５の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００８１】
ＥＩＦ４Ｂ（eukaryotic translation initiation factor 4B）は、ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔシグナル経路及びＧＰＣＲによるシグナルに関与するタンパク質であることが知られている。ＥＩＦ４Ｂは、ｍＲＮＡがリボソームに結合するのに必要であり、ＥＩＦ４−Ｆ及びＥＩＦ４−Ａと密接に関連する機能を有しており、ＥＩＦ４−Ｆ及びＡＴＰの存在下においてｍＲＮＡの５’末端キャップ近郷に結合し、ＡＴＰａｓｅの活性を促進し、ＥＩＦ４−Ａ及びＥＩＦ４−ＦのＡＴＰ依存型ＲＮＡ巻き戻し活性を促進することが知られている。ＥＩＦ４Ｂは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_001300821.1, NM_001417.5, XM_006719274.1（NP_001287750.1, NP_001408.2, XP_006719337.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_001300821.1としてデータベースに登録されているヒトＥＩＦ４Ｂ遺伝子の塩基配列を配列番号９７に示し、当該ヒトＥＩＦ４Ｂ遺伝子がコードするヒトＥＩＦ４Ｂタンパク質のアミノ酸配列を配列番号９８に示す。なお、本明細書において、ＥＩＦ４Ｂは、配列番号９７の塩基配列によりコードされる配列番号９８のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＥＩＦ４Ｂについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号９７の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００８２】
ＥＩＦ４Ｅ（eukaryotic translation initiation factor 4E）は、ｍＲＮＡの５’末端における７−メチルグアノシンンキャップ構造を認識する真核生物翻訳開始因子４Ｆ複合体を構成するタンパク質であることが知られている。ＥＩＦ４Ｅは、リボソームを５’末端キャップ構造に集めることで翻訳開始を補助する。ＥＩＦ４Ｅの４Ｆ複合体に対する結合は、翻訳開示における律速段階となる。ＥＩＦ４Ｅは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_001968.3, NM_001130679.1, NM_001130678.1, XM_006714126.2, XM_006714127.2（NP_001959.1, NP_001124151.1, NP_001124150.1, XP_006714189.1, XP_006714190.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_001968.3としてデータベースに登録されているヒトＥＩＦ４Ｅ遺伝子の塩基配列を配列番号９９に示し、当該ヒトＥＩＦ４Ｅ遺伝子がコードするヒトＥＩＦ４Ｅタンパク質のアミノ酸配列を配列番号１００に示す。なお、本明細書において、ＥＩＦ４Ｅは、配列番号９９の塩基配列によりコードされる配列番号１００のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＥＩＦ４Ｅについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号９９の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００８３】
ＩＬＫ（integrin linked kinase）は、キナーゼ様ドメイン及び４つのアンキリン様リピートを有するタンパク質であり、βインテグリンの細胞質ドメインと細胞膜にて結合することでインテグリン介在シグナル伝達を制御することが知られている。ＩＬＫは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_004517.3, NM_001278441.1, NM_001014794.2, NM_001278442.1, NM_001014795.2, XM_005252904.3, XM_005252905.1, XM_011520065.1（NP_004508.1, NP_001265370.1, NP_001014794.1, NP_001265371.1, NP_001014795.1, XP_005252961.1, XP_005252962.1, XP_011518367.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_004517.3としてデータベースに登録されているヒトＩＬＫ遺伝子の塩基配列を配列番号１０１に示し、当該ヒトＩＬＫ遺伝子がコードするヒトＩＬＫタンパク質のアミノ酸配列を配列番号１０２に示す。なお、本明細書において、ＩＬＫは、配列番号１０１の塩基配列によりコードされる配列番号１０２のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＩＬＫについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号１０１の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００８４】
ＭＴＣＰ１（mature T-cell proliferation 1）は、成熟Ｔ細胞の増殖に関連する幾つかのt(X;14)転座との関連で同定されたことが知られている。この領域は、共通プロモーターと、２つの異なるタンパク質をコードする２つの異なる３’エクソンにスプライシングされる５’エクソンとを有する複雑な構造を有している。上流13kDのタンパク質は、ＴＣＬ１ファミリーに属し、白血病誘発に関与すると考えられている。ＭＴＣＰ１は、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_001018025.3（NP_001018025.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_001018025.3としてデータベースに登録されているヒトＭＴＣＰ１遺伝子の塩基配列を配列番号１０３に示し、当該ヒトＭＴＣＰ１遺伝子がコードするヒトＭＴＣＰ１タンパク質のアミノ酸配列を配列番号１０４に示す。なお、本明細書において、ＭＴＣＰ１は、配列番号１０３の塩基配列によりコードされる配列番号１０４のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＭＴＣＰ１については、複数の転写バリアントが存在している可能性がある。配列番号１０３の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００８５】
ＰＩＫ３ＣＡ（phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase, catalytic subunit alpha）は、フォスファチジルイノシトール３−キナーゼにおける110kDの触媒サブユニットであり、ＡＴＰを利用してＰｔｄＩｎｓ、ＰｔｄＩｎｓ４Ｐ及びＰｔｄＩｎｓ（４，５）Ｐ２をリン酸化する。ＰＩＫ３ＣＡは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_006218.2, XM_006713658.2, XM_011512894.1（NP_006209.2, XP_006713721.1, XP_011511196.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_006218.2としてデータベースに登録されているヒトＰＩＫ３ＣＡ遺伝子の塩基配列を配列番号１０５に示し、当該ヒトＰＩＫ３ＣＡ遺伝子がコードするヒトＰＩＫ３ＣＡタンパク質のアミノ酸配列を配列番号１０６に示す。なお、本明細書において、ＰＩＫ３ＣＡは、配列番号１０５の塩基配列によりコードされる配列番号１０６のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＰＩＫ３ＣＡについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号１０５の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００８６】
ＳＲＦ（serum response factor）は、細胞増殖及び分化を促進する普遍的核タンパク質であることが知られている。ＳＲＦは、転写因子のＭＡＤＳ（MCM1, Agamous, Deficiens, and SRF）ボックススーパーファミリに属している。ＳＲＦは、標的遺伝子のプロモーター領域において血清応答因子（ＳＲＥ）に結合する。ＳＲＦは、ｃ−ｆｏｓといった多くの前初期遺伝子の活性化を制御し、これにより細胞周期制御、アポトーシス、細胞成長及び細胞分化に関与する。ＳＲＦは、ヒトを含む種々の動物に存在し、その配列情報も公知である（例えば、ヒト：NM_003131.3, NM_001292001.1（NP_003122.1, NP_001278930.1）など。番号はＮＣＢＩデータベースのアクセッション番号を示し、括弧外は塩基配列、括弧内はアミノ酸配列の番号である）。一例として、NM_003131.3としてデータベースに登録されているヒトＳＲＦ遺伝子の塩基配列を配列番号１０７に示し、当該ヒトＳＲＦ遺伝子がコードするヒトＳＲＦタンパク質のアミノ酸配列を配列番号１０８に示す。なお、本明細書において、ＳＲＦは、配列番号１０７の塩基配列によりコードされる配列番号１０８のアミノ酸配列からなるタンパク質に限定されるものではない。ＳＲＦについては、上述のように複数のアクセッション番号で配列情報が登録されており、複数の転写バリアントが存在している。配列番号１０７の塩基配列は、そのうちの一つの転写バリアントの塩基配列を示している。
【００８７】
なお、以上のように、ＧＳＴ−π、ＡＴＭ、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＹＬＫ、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２、ＭＹＯ１８Ａ、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦについて、具体的な塩基配列及びアミノ酸配列により特定できるが、生物個体間において塩基配列やアミノ酸配列の変異が生じる可能性（多型を含む）を考慮しなければならない。
【００８８】
すなわち、ＧＳＴ−π、ＡＴＭ、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＹＬＫ、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２、ＭＹＯ１８Ａ、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦは、データベースに登録されたアミノ酸配列と同一の配列を有するタンパク質に限定されず、同配列に対し１個又は２個以上、典型的には１個又は数個、例えば、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個又は１０個のアミノ酸が相違する配列を有し、ＧＳＴ−π、ＡＴＭ、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＹＬＫ、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２、ＭＹＯ１８Ａ、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦと同等の機能を有するものも含む。
【００８９】
また、ＧＳＴ−π、ＡＴＭ、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＹＬＫ、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２、ＭＹＯ１８Ａ、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦは、上述した具体的な塩基配列に対して７０％以上、８０％以上、９０％以上、９５％以上又は９７％以上の同一性を有する塩基配列からなり、ＧＳＴ−π、ＡＴＭ、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＹＬＫ、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２、ＭＹＯ１８Ａ、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦと同等の機能を有するタンパク質をコードするものも含む。
【００９０】
なお、ＧＳＴ−π、ＡＴＭ、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＹＬＫ、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２、ＭＹＯ１８Ａ、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦの具体的機能については、上述のとおりである。
【００９１】
なお、本明細書において、「本明細書で用いる場合」、「本明細書で用いる」、「本明細書において」、「本明細書に記載される」等の句は、特に別記しない限り、これに引続く記載が本明細書に記載された全ての発明に適用されることを意味するものとする。また、他に定義されない限り、本明細書で用いる全ての技術用語及び科学用語は、当業者が通常理解しているものと同じ意味を有する。本明細書中で参照する全ての特許、公報及び他の出版物は、その全体を本明細書に援用する。
【００９２】
本明細書で用いる「ＧＳＴ−πを抑制する薬物」には、限定されずに、例えば、ＧＳＴ−πの産生及び/又は活性を抑制する薬物や、ＧＳＴ−πの分解及び/又は不活性化を促進する薬物などが含まれる。ＧＳＴ−πの産生を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えばＧＳＴ−πをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド及びこれらを発現するベクター等が挙げられる。
【００９３】
また、ＧＳＴ−πを抑制する薬物としては、ＧＳＴ−πに対して作用する如何なる化合物であっても使用することができる。このような化合物としては、有機化合物（アミノ酸、ポリペプチド又はその誘導体、低分子化合物、糖、高分子化合物等）、無機化合物等を使用することができる。また、このような化合物は、天然物質及び非天然物質のいずれであってもよい。ポリペプチドの誘導体としては、修飾基を付加して得られた修飾ポリペプチド、アミノ酸残基を改変することにより得られたバリアントポリペプチド等が挙げられる。さらに、このような化合物は、単一化合物であってもよいが、化合物ライブラリー、遺伝子ライブラリーの発現産物、細胞抽出物、細胞培養上清、発酵微生物産生物、海洋生物抽出物、植物抽出物等であってもよい。すなわち、「ＧＳＴ−πを抑制する薬物」には、ＲＮＡｉ分子等の核酸に限定されず、如何なる化合物も含まれる。
【００９４】
具体的には、ＧＳＴ−πの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＧＳＴ−πに結合する物質、例えば、グルタチオン、グルタチオンアナログ（例えば、WO 95/08563、WO 96/40205、WO 99/54346、非特許文献４等に記載のもの）、ケトプロフェン（非特許文献２）、インドメタシン（Hall et al., Cancer Res. 1989;49(22):6265-8）、エタクリン酸、ピロプロスト（Tew et al., Cancer Res. 1988;48(13):3622-5）、抗ＧＳＴ−π抗体、ＧＳＴ−πのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【００９５】
ＧＳＴ−πの産生又は活性を抑制する薬物としては、特異性の高さや、副作用の可能性の低さから、ＧＳＴ−πをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド及びこれらを発現するベクターが好ましい。
【００９６】
ＧＳＴ−πの抑制は、ＧＳＴ−π抑制剤を作用させなかった場合に比べ、細胞においてＧＳＴ−πの発現や活性が抑制されていることにより決定することができる。ＧＳＴ−πの発現は、既知の任意の手法、限定されずに、例えば、抗ＧＳＴ−π抗体を利用した免疫沈降法、ＥＩＡ、ＥＬＩＳＡ、ＩＲＡ、ＩＲＭＡ、ウェスタンブロッティング法、免疫組織化学法、免疫細胞化学法、フローサイトメトリー法、ＧＳＴ−πをコードする核酸もしくはそのユニークな断片又は該核酸の転写産物（例えば、ｍＲＮＡ）もしくはスプライシング産物に特異的にハイブリダイズする核酸を利用した、種々のハイブリダイゼーション法、ノーザンブロット法、サザンブロット法、種々のＰＣＲ法などにより評価することができる。
【００９７】
また、ＧＳＴ−πの活性は、ＧＳＴ−πの既知の活性、限定されずに、例えば、Ｒａｆ−１（特にリン酸化Ｒａｆ−１）や、ＥＧＦＲ（特にリン酸化ＥＧＦＲ）などのタンパク質との結合性などを、既知の任意の方法、例えば、免疫沈降法、ウェスタンブロッティング法、質量分析法、プルダウン法、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）法などにより解析することによって評価することができる。
【００９８】
本明細書で用いる「ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物」には、限定されずに、例えば、当該タンパク質の産生及び/又は活性を抑制する薬物や、当該タンパク質の分解及び/又は不活性化を促進する薬物などが含まれる。当該タンパク質の産生を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、当該恒常性維持関連タンパク質をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド及びこれらを発現するベクター等が挙げられる。また、当該恒常性維持関連タンパク質の活性を抑制する薬物、当該恒常性維持関連タンパク質の分解及び/又は不活性化を促進する薬物としては、当該タンパク質に対して作用する如何なる化合物であっても使用することができる。このような化合物としては、有機化合物（アミノ酸、ポリペプチド又はその誘導体、低分子化合物、糖、高分子化合物等）、無機化合物等を使用することができる。また、このような化合物は、天然物質及び非天然物質のいずれであってもよい。ポリペプチドの誘導体としては、修飾基を付加して得られた修飾ポリペプチド、アミノ酸残基を改変することにより得られたバリアントポリペプチド等が挙げられる。さらに、このような化合物は、単一化合物であってもよいが、化合物ライブラリー、遺伝子ライブラリーの発現産物、細胞抽出物、細胞培養上清、発酵微生物産生物、海洋生物抽出物、植物抽出物等であってもよい。すなわち、「ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物」には、ＲＮＡｉ分子等の核酸に限定されず、如何なる化合物も含まれる。
【００９９】
より具体的に、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質のなかでもｐ２１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ｐ２１蛋白のプロテアソーム分解を促進すると同時にＣＤＣ２、ＣＤＫ２及びＣＤＫ５の酵素活性も抑制する低分子化合物であるＢｕｔｙｒｏｌａｃｔｏｎｅ Ｉ（Sax et.al,Cell Cycle,Jan;1(1):90-6,2002）、ＣＤ−１マウスでの神経細胞や稀突起膠細胞（オリゴデンドロサイト）においてｐ２１の発現を特異的に抑制するとされている向精神薬であるクエアチピン（Kondo et.al,Transl.Psychiatry,Apr 2;3:e243,2013）、ｐ５３、ｐ２７やＡｋｔの関与なくｐ２１を特異的に阻害し、Ｒａｆ、ＶＥＧＦＲやＰＤＧＦＲなどに対するマルチキナーゼを阻害する低分子化合物であるＳｏｒａｆｅｎｉｂ（Inoue et.al,Cancer Biology & Therapy,12:9,827-836,2011）、ｐ５３やＡｋｔの関与なくｐ２１を特異的に阻害する低分子化合物であるＵＣ２２８８（Wettersten et.al,Cancer Biology & Therapy,14(3),278-285,2013）、ｐ２１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ｐ２１抗体、ｐ２１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１００】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質のなかでもＲＮＰＣ１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＲＮＰＣ１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＲＮＰＣ１抗体、ＲＮＰＣ１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１０１】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質のなかでもＣＣＮＬ１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＣＣＮＬ１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＣＣＮＬ１抗体、ＣＣＮＬ１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１０２】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質のなかでもＭＣＭ８の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＭＣＭ８をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＭＣＭ８抗体、ＭＣＭ８のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１０３】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質のなかでもＣＣＮＢ３の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＣＣＮＢ３をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＣＣＮＢ３抗体、ＣＣＮＢ３のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１０４】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質のなかでもＭＣＭＤＣ１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＭＣＭＤＣ１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＭＣＭＤＣ１抗体、ＭＣＭＤＣ１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１０５】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質のなかでもＡＴＭの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＡＴＭ及びＡＴＲのキナーゼ活性を選択的に阻害する低分子化合物であるＣＧＫ ７３３（Won et.al,Nat. Chem. Biol. 2, 369, 2006）、ＡＴＭのキナーゼ活性を選択的に阻害する低分子化合物であるであるＫＵ−５５９３３（Lau et.al, Nat. Cell Biol. 7, 493, 2005）、ＫＵ−６００１９（Zirkin et.al,J Biol Chem. Jul 26;288(30):21770-83, 2013）、ＣＰ−４６６７２２（Rainey et.al,Cancer Res. Sep 15;68(18):7466-74, 2008）、ＡＴＭをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＡＴＭ抗体、ＡＴＭのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１０６】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質のなかでもＣＤＣ２５Ａの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ヒトＣＤＣ２５Ａ，ヒトＣＤＣ２５Ｂ及びヒトＣＤＣ２５Ｃのそれぞれの脱リン酸化酵素活性を抑制する低分子化合物であるＮＳＣ９５３９７（Lazo JS et al., Mol. Pharmacol. 61:720-728, 2002）、ヒトＣＤＣ２５Ａ、ヒトＣＤＣ２５Ｂ、ヒトＣＤＣ２５Ｃ及びヒトチロシン脱リン酸化酵素であるＰＴＢ１Ｂのそれぞれの脱リン酸化酵素活性を抑制する低分子化合物であるであるＳＣ ａｌｐｈａ ａｌｐｈａ ｄｅｌｔａ ０９（Rice, R.L. et al., Biochemistry 36(50): 15965-15974, 1997）、ＣＤＣ２５ＡをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＣＤＣ２５Ａ抗体、ＣＤＣ２５Ａのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１０７】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質のなかでもＰＲＫＤＣの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＰＲＫＤＣをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＰＲＫＤＣ抗体、ＰＲＫＤＣのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１０８】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質のなかでもＲＢＢＰ８の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＰＲＢＢＰ８をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＲＢＢＰ８抗体、ＲＢＢＰ８のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１０９】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質のなかでもＳＫＰ２の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＳＫＰ２をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＳＫＰ２抗体、ＳＫＰ２のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１１０】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質のなかでもＭＣＭ１０の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＭＣＭ１０をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＭＣＭ１０抗体、ＭＣＭ１０のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１１１】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質のなかでもＣＥＮＰＨの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＣＥＮＰＨをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＣＥＮＰＨ抗体、ＣＥＮＰＨのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１１２】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質のなかでもＢＲＳＫ１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＢＲＳＫ１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＢＲＳＫ１抗体、ＢＲＳＫ１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１１３】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質のなかでもＭＹＬＫの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、各種プロテインキナーゼ（ＰＫＡ及びＰＫＣ等）の活性の阻害に加えて、ＭＹＬＫの活性も阻害する低分子化合物であるＨＡ−１００  Ｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（Gerard et.al, J Clin Invest. Jan;77(1):61-5. 1986）、各種プロテインキナーゼ（ＰＫＡ、ＰＫＣ、ＰＫＧ、ＣａＭＫ、ＣａＭＫＩＩ及びＰｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｓｅ Ｋｉｎａｓｅ等）の活性の阻害に加えて、ＭＹＬＫの活性も阻害する低分子化合物であるＳｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（Tamaoki et.al, Biochem. Biophys. Res. Commun. 135: 397-402. 1986）、ＰＫＣの選択的阻害剤であり、ＭＹＬＫの活性も阻害する低分子化合物であるＣａｌｐｈｏｓｔｉｎ Ｃ（Kobayashi et.al, Biochem. Biophys. Res. Commun. 159: 548-553. 1989）、チロシンキナーゼ阻害剤であり、ＭＹＬＫの活性も阻害する低分子化合物であるＰｉｃｅａｔａｎｎｏｌ（Oliver et.al, J. Biol. Chem. 269: 29697-29703. 1994）、各種カゼインキナーゼおよびプロテインキナーゼの活性の阻害に加えて、ＭＹＬＫの活性も阻害する低分子化合物であるＡ−３ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（Inagaki et.al, Mol. Pharmacol. 29, 577. 1986）、細胞透過性のセリン／スレオニンキナーゼ阻害剤であり、ＭＹＬＫの活性も阻害する低分子化合物であるＨ−７ Ｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（Kawamoto et.al, Biochem. Biophys. Res. Commun. 125: 258-264. 1984）、各種プロテインキナーゼ（ＰＫＡ及びＰＫＣ等）の活性の阻害に加えて、ＭＹＬＫの活性も阻害する低分子化合物であるＨ−９ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（Wolf et.al, J. Biol. Chem. 260: 15718-15722. 1985）、Ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ （ＣａＭ） Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔであり、ＭＹＬＫの活性も阻害する低分子化合物であるＷ−５（Hidaka et.al, Mol. Pharmacol. 20: 571-578. 1981）、Ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ （ＣａＭ） Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔであり、ＭＹＬＫの活性も阻害する低分子化合物であるＷ−７（Hidaka et.al, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 78: 4354-4357. 1981）、各種プロテインキナーゼ（ＰＫＡ及びＰＫＣ等）の活性の阻害に加えて、ＭＹＬＫの活性も阻害する低分子化合物であるＷ−１３  Ｉｓｏｍｅｒ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（Hidaka et.al, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 78: 4354-4357. 1981）、各種プロテインキナーゼ（ＰＫＡ及びＰＫＣ等）の活性の阻害に加えて、ＭＹＬＫの活性も阻害する低分子化合物であるＭＬ−７  Ｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（Saitoh et.al, J. Biol. Chem. 262: 7796-7801. 1987）、ＭＹＬＫ及びＣａＭＫを選択的に阻害する低分子化合物であるＭＬ−９（Saitoh et.al, Biochem. Biophys. Res. Commun. 140: 280-287. 1986）、各種カゼインキナーゼおよびプロテインキナーゼの活性の阻害に加えて、ＭＹＬＫの活性も阻害する低分子化合物であるＭｙｒｉｃｅｔｉｎ（Hagiwara et.al, Biochem. Pharmacol. 37: 2987-2992. 1988）、細胞透過性のＣａｌｍｏｄｕｌｉｎ （ＣａＭ） Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔであり、ＭＹＬＫの活性も阻害する低分子化合物であるＥ６ Ｂｅｒｂａｍｉｎｅ（Hu et.al, Biochem. Pharmacol. Oct 20;44(8):1543-7. 1992）、各種プロテインキナーゼの活性の阻害に加えて、ＭＹＬＫの活性も阻害する低分子化合物であるＫ−２５２ａ（Kase et.al, J. Antibiot. 39: 1059-1065. 1986）、各種プロテインキナーゼの活性の阻害に加えて、ＭＹＬＫの活性も阻害する低分子化合物であるＫ−２５２ｂ（Nakanishi et.al, J. Antibiot. 39: 1066-1071. 1986）、ｃ−Ｓｒｃ阻害剤であり、ＭＹＬＫの活性も阻害する低分子化合物であるＡｌｔｅｎｕｓｉｎ（Rosett et.al, Biochem. J. 67: 390-400. 1957）、ＭＹＬＫをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＭＹＬＫ抗体、ＭＹＬＫのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１１４】
一方、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＡＡＴＦの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＡＡＴＦをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＡＡＴＦ抗体、ＡＡＴＦのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１１５】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＡＬＯＸ１２の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＡＬＯＸ１２をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＡＬＯＸ１２抗体、ＡＬＯＸ１２のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１１６】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＡＮＸＡ１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＡＮＸＡ１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＡＮＸＡ１抗体、ＡＮＸＡ１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１１７】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＡＮＸＡ４の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＡＮＸＡ４をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＡＮＸＡ４抗体、ＡＮＸＡ４のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１１８】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＡＰＩ５の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＡＰＩ５をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＡＰＩ５抗体、ＡＰＩ５のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１１９】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＡＴＦ５の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＡＴＦ５をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＡＴＦ５抗体、ＡＴＦ５のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１２０】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＡＶＥＮの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＡＶＥＮをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＡＶＥＮ抗体、ＡＶＥＮのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１２１】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＡＺＵ１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＡＺＵ１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＡＺＵ１抗体、ＡＺＵ１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１２２】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＢＡＧ１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＢＡＧ１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＢＡＧ１抗体、ＢＡＧ１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１２３】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＢＣＬ２Ｌ１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＢＣＬ２Ｌ１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＢＣＬ２Ｌ１抗体、ＢＣＬ２Ｌ１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１２４】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＢＦＡＲの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＢＦＡＲをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＢＦＡＲ抗体、ＢＦＡＲのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１２５】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＣＦＬＡＲの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＣＦＬＡＲをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＣＦＬＡＲ抗体、ＣＦＬＡＲのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１２６】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＩＬ２の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＩＬ２をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＩＬ２抗体、ＩＬ２のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１２７】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＭＡＬＴ１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＭＡＬＴ１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＭＡＬＴ１抗体、ＭＡＬＴ１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１２８】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＭＣＬ１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、慢性骨髄性白血病の治療薬として承認されているＳｙｎｒｉｂｏ（オマセタキシン  メペサクシネート）、ＭＣＬ１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＭＣＬ１抗体、ＭＣＬ１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１２９】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＭＫＬ１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＭＫＬ１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＭＫＬ１抗体、ＭＫＬ１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１３０】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＭＰＯの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＭＰＯをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＭＰＯ抗体、ＭＰＯのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１３１】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＭＴＬ５の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＭＴＬ５をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＭＴＬ５抗体、ＭＴＬ５のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１３２】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＭＹＢＬ２の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＭＹＢＬ２をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＭＹＢＬ２抗体、ＭＹＢＬ２のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１３３】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す抗アポトーシス関連タンパク質のなかでもＭＹＯ１８Ａの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＭＹＯ１８ＡをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＭＹＯ１８Ａ抗体、ＭＹＯ１８Ａのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１３４】
一方、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示すＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質のなかでもＭＴＯＲの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、マイクロライド系の免疫抑制剤であり、ＭＴＯＲの活性を阻害する低分子化合物であるＲａｐａｍｙｃｉｎ（Chang et.al, Trends Pharmacol. Sci. 12: 218-223. 1991）、Ｒａｐａｍｙｃｉｎ由来のマイクロライド系の免疫抑制剤であり、ＭＴＯＲの活性を阻害する低分子化合物であるＥｖｅｒｏｌｉｍｕｓ（Weisblum et.al, Br. Med. Bull. 40: 47-53. 1984）、ＰＩ３Ｋチロシンキナーゼ阻害剤であり、ＭＴＯＲの活性を阻害する低分子化合物であるＢＥＺ２３５（Maira et.al, Mol. Cancer Ther. 7(7): 1851-1863. 2008）、ＭＴＯＲのキナーゼ活性を選択的阻害する低分子化合物であるＡＺＤ８０５５（Huang et.al, J Biol Chem. Nov 18;286(46):40002-12. 2011）、ピリジンフラノピリミジン化合物であり、ＤＮＡ−ＰＫ、ＰＩ３Ｋ及びＭＴＯＲのキナーゼ活性を阻害する低分子化合物であるＰＩ−１０３（Demyanets et al. 2010. Basic Res Cardiol. Mar;106(2):217-31. 2011）、及びＮｉｃｌｏｓａｍｉｄｅ（Balgi et.al, PLoS One. Sep 22;4(9):e7124. 2009）、ＰＰ２４２（Bao et al. J. Cell Biol. 210(7): 1153-64. 2015）、Ｔｉｍｏｓａｐｏｎｉｎ ＡＩＩＩ（King et.al, PLoS One. Sep 30;4(9):e7283 2009）、ＫＵ ００６３７９４（Garcia-Martinez et al. Biochem. J. 421(1): 29-42. 2009）、ＡＺＤ２０１４（Guichard et al. Mol. Cancer. Ther. 14(11): 2508-18. 2015）、Ｔｅｍｓｉｒｏｌｉｍｕｓ（Raymond et al. J. Clin. Oncol. 22: 2336-2347. 2004）、Ｐａｌｏｍｉｄ ５２９（Xue et al. Cancer Res. 68(22): 9551-7. 2008）、Ｆｉｓｅｔｉｎ（Suh et.al, Carcinogenesis. Aug;31(8):1424-33 2010）、ＧＤＣ−０９８０（Wallin et al. Mol. Cancer Ther. 10(12): 2426-36. 2011）、ＳＦ１１２６（Garlich et al. Cancer Res. 68(1): 206-15. 2008）、ＣＨ５１３２７９９（Tanaka et al. Clin Cancer Res. 17(10): 3272-81. 2011）、ＷＹＥ−３５４（Yu et al. Cancer Res. 69(15): 6232-40. 2009）、Ｃｏｍｐｏｕｎｄ ４０１（Ballou et al. J. Biol. Chem. 282, 24463. 2007）、Ｒｉｄａｆｏｒｏｌｉｍｕｓ（Gadducci et al.: Gynecol. Endocrinol. 24, 239. 2008）、ＧＳＫ １０５９６１５（Steven et al. ACS. Med. Chem. Lett. 1(1): 39-43 2010）、ＰＦ−０４６９１５０２（Yuan et al. Mol. Cancer Ther. 10(11): 2189-99. 2011）、ＰＰ１２１（Apsel et al. Nat. Chem. Biol. 4(11): 691-9. 2008）、ＯＳＩ−０２７（Bhaqwat et al. Mol. Cancer Ther. 10(8): 1394-406. 2011）、ＷＹＥ−１２５１３２（Yu et al. Cancer Res. 70(2): 621-31. 2010）、Ｕｍｉｒｏｌｉｍｕｓ（Baldo et al. 2008. Curr. Cancer Drug Targets. 8(8): 647-65. 2008）、ＷＡＹ−６００（Yu et al. Cancer Res. 69(15): 6232-40. 2009）、ＷＹＥ−６８７（Yu et al. Cancer Res. 69(15): 6232-40. 2009）、ＰＫＩ−１７９（Venkatesan et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. 20(19): 5869-73. 2010）、ＰＦ−０５２１２３８４（Akintunde et al. J. Hematol. Oncol. 6: 88. 2013）、ＣＡＹ１０６２６（Rameh et al. J. Biol. Chem. 274: 8347-8350. 1999）、ＮＶＰ−ＢＧＴ２２６（Chang et al. Clin. Cancer Res. 17(22): 7116-26. 2011）、ＸＬ−１４７ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ １（Akintunde et al. J. Hematol. Oncol. 6: 88. 2013）、ＸＬ ３８８（Eduardo et al. Mol Cancer Ther. 10(3): 395-403. 2011）、Ｔｏｒｉｎ １（Liu et al. J. Med. Chem. 53(19): 7146-55. 2010）、ＭＴＯＲをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＭＴＯＲ抗体、ＭＴＯＲのドミナ���トネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１３５】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示すＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質のなかでもＩＲＡＫ１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ベンズイミダゾール化合物であり、ＩＬ−１キナーゼの活性を特異的に阻害する低分子化合物であるＩｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ−Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ−Ｋｉｎａｓｅ−１／４ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ（Bhattacharyya et.al, Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 293, G429. 2007）、ＩＲＡＫ１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＩＲＡＫ１抗体、ＩＲＡＫ１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１３６】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示すＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質のなかでもＩＲＳ１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＩＲＳ１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＩＲＳ１抗体、ＩＲＳ１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１３７】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示すＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質のなかでもＭＹＤ８８の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ホモ２量体化を阻害するＭＹＤ８８由来の２６アミノ酸からなるペプチドであるＭｙＤ８８ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｐｅｐｉｎｈ−ＭＹＤ（Derossi et.al, J. Biol. Chem., 269: 10444-50. 1994）、ＭＹＤ８８を特異的に阻害する低分子化合物であるＴＪ−Ｍ２０１０（Li et.al, Transplant Proc.45(5): 1842-5. 2013）、ＭＹＤ８８をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＭＹＤ８８抗体、ＭＹＤ８８のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１３８】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示すＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質のなかでもＮＦＫＢ１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＮＦ−κＢの活性化及びＩκＢαのリン酸化の両方の活性を阻害する低分子化合物であるＢＡＹ １１−７０８５（Pierce et al. J. Biol. Chem. 272: 21096-21103.  1997）、アポトーシスを誘導する抗がん剤であり、ＮＦ−κＢを阻害する低分子化合物であるＨｅｌｅｎａｌｉｎ（Lyss et al. J.Biol. Chem. 273(50): 33508-16. 1998）、ＨＩＶ Ｉｎｔｅｇｒａｓｅ及びチロシンキナーゼの阻害剤であり、ＮＦ−κＢの活性を特異的に阻害する低分子化合物であるＣａｆｆｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｐｈｅｎｅｔｈｙｌ Ｅｓｔｅｒ（Sud'ina et al. FEBS Lett. Aug 23;329(1-2):21-4. 1993）、及びＮＦκＢ Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ＩＩ, ＪＳＨ−２３（Shin et al. FEBS Lett. 571: 50-54. 2004）、ＱＮＺ（Tobe et al. Bioorg. Med. Chem. 11: 3869-3878. 2003）、Ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ（Yu et al. Planta Med. Dec;69(12):1075-9. 2003）、Ｃｕｒｃｕｍｉｎ（Asai et al. J. Nutr. 131: 2932-2935. 2001）、Ａｓｐｉｒｉｎ（Kopp et al. Science. 265: 956-959. 1994）、Ｓｕｌｆａｓａｌａｚｉｎｅ（Liptay et al. Br. J. Pharmacol. 128, 1361. 1999）、Ｒｏｃａｇｌａｍｉｄｅ（Engelmeier et al. J. Agric. Food Chem. 48: 1400-1404. 2000）、ＳＭ ７３６８（Lee et al. Biochem. Biophys. Res. Commun. 336: 716-722. 2005）、Ｓｕｌｉｎｄａｃ Ｓｕｌｆｉｄｅ（Meade et al. J. Biol. Chem. 268: 6610-6614. 1993）、Ｔｒｉｃｈｏｄｉｏｎ（Erkel et al. FEBS Lett. 477, 219. 2000）、ＣＨＳ−８２８（Hovstadius et al. Clin. Cancer Res. 8(9): 2843-50. 2002）、Ｚ−ＶＲＰＲ−ＦＭＫ（Hailfinger et al. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 106(47): 19946-19951. 2009）、Ｓｏｄｉｕｍ Ｓａｌｉｃｙｌａｔｅ（Kopp et al. Science. 265: 956-959. 1994）、４−Ａｍｉｎｏｓａｌｉｃｙｌｉｃ Ａｃｉｄ（Eberhardt et al. Biochem. Biophys. Res. Commun. 200: 163-170. 1994）、Ｅｔｈｙｌ ３，４−Ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｃｉｎｎａｍａｔｅ（Nakayama et al. Biosci. Biotechnol. Biochem. 60: 316-318. 1996）、ＣＡＹ１０５１２（Heynekamp et al. J Med Chem 49 7182-7189 2006）、Ｎ−Ｓｔｅａｒｏｙｌ Ｐｈｙｔｏｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（Ryu et al. Lipids. 45(7): 613-8. 2010）、Ｐａｌｍｉｔｉｃ Ａｃｉｄ Ｍｅｔｈｙｌ Ｅｓｔｅｒ（Cai et al. Toxicology. 210: 197-204. 2005）、９−Ｍｅｔｈｙｌｓｔｒｅｐｔｉｍｉｄｏｎｅ（Ishikawa et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. 19(6): 1726-8.  2009）、Ｒｏｃａｇｌａｏｌ（Engelmeier et al. J. Agric. Food Chem. 48: 1400-1404. 2000）、ＢＡＹ １１−７０８２（Pierce et al. J. Biol. Chem. 272: 21096-21103. 1997）、ＮＦＫＢ１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＮＦＫＢ１抗体、ＮＦＫＢ１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１３９】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示すＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質のなかでもＰＩＫ３ＣＧの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＨＤＡＣ及びＰＩ３Ｋの両方の活性を特異的に阻害する低分子化合物であるＣＵＤＣ−９０７（Qian et.al, Clin Cancer Res. 18(15):4104-4113. 2012）、ＰＩ３ＫおよびｍＴＯＲの両方の活性を特異的に阻害する低分子化合物であるＰＫＩ−４０２（Dehnhardt et.al, J Med Chem. Jan 28;53(2):798-810. 2010）、ＰＩ３Ｋ及びｍＴＯＲの両方の活性を特異的に阻害する低分子化合物であるＰＦ−０４６９１５０２（Yuan et.al, Mol Cancer Ther, 10(11), 2189-2199. 2011）、ＰＩ３Ｋ及びｍＴＯＲの両方の活性を特異的に阻害する低分子化合物であるＮＶＰ−ＢＧＴ２２６（Glienke et.al, Tumor Biology, 33(3): 757-765. 2012）、及びＩＰＩ−１４５ （ＩＮＫ１１９７）（Winkler et.al, Chem Biol. 2013 Nov 21;20(11):1364-74. 2013）、ＳＡＲ２４５４０９ （ＸＬ７６５）（Dai et.al, Endocrinology. Mar;154(3):1247-592013）、ＺＳＴＫ４７４（Toyama et.al, Arthritis Res Ther. 12(3): R92. 2010）、ＶＳ−５５８４ （ＳＢ２３４３）（Hart et.al, Mol Cancer Ther. 2013 Feb;12(2):151-61. 2013）、ＡＳ−６０５２４０（Camps et.al, Nature medicine, 11(9): 936-943. 2005）、ＰＩＫ−９０（Van et.al, J Cell Biol. 2006 Jul 31;174(3):437-45. 2006）、ＰＦ−４９８９２１６（Walls et.al, Clin Cancer Res. 2014 Feb 1;20(3):631-43. 2014）、ＴＧ１００‐１１５（Walls et.al, Proc Natl Acad Sci U S A. Dec 26;103(52):19866-71. 2006）、ＢＫＭ１２０（Bendell et.al, J. Clin. Oncol. 30(3): 282-90. 2012）、ＢＥＺ２３５ Ｔｏｓｙｌａｔｅ（Maira et.al, Mol Cancer Ther 2008; 7: 1851-1863. 2008）、ＬＹ２９４００２（Maira et.al, Biochem. Soc. Trans. 37(Pt1): 265-72. 2009）、ＰＩ−１０３（Raynaud et.al, Molecular Cancer Therapeutics, 8(7): 1725-1738. 2009）、ＸＬ１４７（Shapiro et.al, Proc 97th Annu Meet AACR, 14-18. 2007）、ＡＳ−２５２４２４（Pomel et.al, J Med Chem. Jun 29;49(13):3857-71. 2006）、ＡＳ−６０４８５０（Camps et.al, Nature medicine, 11(9): 936-943. 2005）、ＣＡＹ１０５０５（Tyagi et.al, Can J Physiol Pharmacol. Jul;90(7):881-5. 2012）、ＣＨ５１３２７９９（Ohwada et.al, Bioorganic & medicinal chemistry letters, 21(6): 1767-1772. 2011）、ＢＡＹ ８０‐６９４６ （Ｃｏｐａｎｌｉｓｉｂ）（Patnaik et.al, J Clin Oncol, 29, 2011）、ＧＤＣ−００３２（Ndubaku et.al, J Med Chem. Jun 13;56(11):4597-610. 2013）、ＧＳＫ１０５９６１５（Knight et.al, ACS Medicinal Chemistry Letters, 1(1): 39-43. 2010）、ＣＡＬ−１３０（Subramaniam et.al, Cancer Cell. 21(4):459-72. 2012）、ＸＬ７６５（Laird et.al, AACR-NCI-EORTC International Conference on Molecular Targets and Cancer Therapeutics. October p.B250 2007）、ＰＩＫ３ＣＧをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＰＩＫ３ＣＧ抗体、ＰＩＫ３ＣＧのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１４０】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示すＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質のなかでもＲＡＣ１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、Ｒａｃ ＧＴＰａｓｅの活性を特異的に阻害する低分子化合物であるＮＳＣ ２３７６６（Gao et.al, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101: 7618-7623. 2004）、ＲＡＣ１のＧｕａｎｉｎｅ Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｅｘｃｈａｎｇｅ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ／ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｓｉｔｅ由来のペプチドであるＷ５６（Gao et.al, J.Biol.Chem. 276 47530. 2001）、ＲＡＣ１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＲＡＣ１抗体、ＲＡＣ１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１４１】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示すＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質のなかでもＡＫＴ３の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、Ａｋｔ１、Ａｋｔ２及びＡｋｔ３の活性を特異的に阻害する低分子化合物であるＭＫ−２２０６ Ｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（Hirai et.al, Mol. Cancer ther. 9(7): 1956-67. 2010）、Ａｋｔの活性を特異的に阻害する低分子化合物であるＴｒｉｃｉｒｉｂｉｎｅ（Moore et.al, Biochem. Pharmacol. 38: 4037-4044. 1989）、細胞透過性のｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅ化合物であり、Ａｋｔ１、Ａｋｔ２及びＡｋｔ３の活性を特異的に阻害する低分子化合物であるＡｋｔ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ＶＩＩＩ（Barnett et.al, Biochem. J. 385: 399-408. 2005）、Ａｍｉｎｏｆｕｒａｚａｎ由来の化合物であり、Ａｋｔ１、Ａｋｔ２およびＡｋｔ３の活性を特異的に阻害する低分子化合物であるＧＳＫ ６９０６９３（Rhodes et.al, Cancer Res. 68(7): 2366-2374. 2008）、Ａｋｔ１、Ａｋｔ２及びＡｋｔ３の活性を特異的に阻害する低分子化合物であるＡＴ７８６７（Grimshaw et.al, Mol. Cancer Ther. 9(5): 1100-10. 2010）、ＡＫＴ３をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＡＫＴ３抗体、ＡＫＴ３のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１４２】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示すＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質のなかでもＥＩＦ４Ｂの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＥＩＦ４ＢをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＥＩＦ４Ｂ抗体、ＥＩＦ４Ｂのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１４３】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示すＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質のなかでもＥＩＦ４Ｅの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＥＩＦ４Ｅ／ＥＩＦ４Ｇの相互作用を特異的に阻害する低分子化合物である４ＥＧＩ−１（Moerke et.al, Cell. 128: 257-267. 2007）、ＥＩＦ４ＥをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＥＩＦ４Ｅ抗体、ＥＩＦ４Ｅのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１４４】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示すＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質のなかでもＩＬＫの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、細胞透過性のピラゾール化合物であり、ＩＬＫを特異的に阻害する低分子化合物であるＣｐｄ ２２（Lee et.al, J. Med. Chem. 54, 6364. 2011）、ＩＬＫのキナーゼ活性を特異的に阻害する低分子化合物であるQLT0267（Younes et.al, Mol Cancer Ther. Aug;4(8):1146-56. 2005）、ＩＬＫをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＩＬＫ抗体、ＩＬＫのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１４５】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示すＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質のなかでもＭＴＣＰ１の活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＭＴＣＰ１をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＭＴＣＰ１抗体、ＭＴＣＰ１のドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１４６】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示すＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質のなかでもＰＩＫ３ＣＡの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、ＰＩ３Ｋを特異的に阻害する低分子化合物であるＨＳ−１７３（Lee et.al, Cancer Lett. Jan 1;328(1):152-9. 2013）、ＨＤＡＣ及びＰＩ３Ｋの両方の活性を特異的に阻害する低分子化合物であるＣＵＤＣ−９０７（Qian et.al, Clin Cancer Res. 18(15):4104-4113. 2012）、ＰＩ３Ｋ及びｍＴＯＲの両方の活性を特異的に阻害する低分子化合物であるＰＫＩ−４０２（Dehnhardt et.al, J Med Chem. Jan 28;53(2):798-810. 2010）、ＰＩ３Ｋ及びｍＴＯＲの両方の活性を特異的に阻害する低分子化合物であるＰＦ−０４６９１５０２（Yuan et.al, Mol Cancer Ther, 10(11), 2189-2199. 2011）、ＰＩ３Ｋ及びｍＴＯＲの両方の活性を特異的に阻害する低分子化合物であるＮＶＰ−ＢＧＴ２２６（Glienke et.al, Tumor Biology, 33(3): 757-765. 2012）、及びＢＹＬ７１９（Furet et.al, Bioorg Med Chem Lett 2013; 23: 3741-3748. 2013）、ＳＡＲ２４５４０９ （ＸＬ７６５）（Dai et.al, Endocrinology. Mar;154(3):1247-592013）、ＺＳＴＫ４７４（Toyama et.al, Arthritis Res Ther. 12(3): R92. 2010）、ＶＳ−５５８４ （ＳＢ２３４３）（Hart et.al, Mol Cancer Ther. 2013 Feb;12(2):151-61. 2013）、ＰＩＫ−７５（Zheng et.al, Mol Pharmacol. Oct;80(4):657-64. 2011）、ＰＩＫ−９０（Van et.al, J Cell Biol. 2006 Jul 31;174(3):437-45. 2006）、Ａ６６（Jamieson et.al, Biochem J. 438:53-62. 2011）、ＣＮＸ１３５１（Nacht et.al, J Med Chem, 56(3): 712-721. 2013）、ＰＦ−４９８９２１６（Walls et.al, Clin Cancer Res. 2014 Feb 1;20(3):631-43. 2014）、ＢＫＭ１２０（Bendell et.al, J. Clin. Oncol. 30(3): 282-90. 2012）、ＢＥＺ２３５ Ｔｏｓｙｌａｔｅ（Maira et.al, Mol Cancer Ther 2008; 7: 1851-1863. 2008）、ＬＹ２９４００２（Maira et.al, Biochem. Soc. Trans. 37(Pt1): 265-72. 2009）、ＰＩ−１０３（Raynaud et.al, Molecular Cancer Therapeutics, 8(7): 1725-1738. 2009）、ＸＬ１４７（Shapiro et.al, Proc 97th Annu Meet AACR, 14-18. 2007）、ＣＨ５１３２７９９（Ohwada et.al, Bioorganic & medicinal chemistry letters, 21(6): 1767-1772. 2011）、ＢＡＹ ８０‐６９４６ （Ｃｏｐａｎｌｉｓｉｂ）（Patnaik et.al, J Clin Oncol, 29, 2011）、ＧＤＣ−００３２（Ndubaku et.al, J Med Chem. Jun 13;56(11):4597-610. 2013）、ＸＬ７６５（Laird et.al, AACR-NCI-EORTC International Conference on Molecular Targets and Cancer Therapeutics. October p.B250 2007）、ＰＩＫ３ＣＡをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＰＩＫ３ＣＡ抗体、ＰＩＫ３ＣＡのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１４７】
ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示すＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質のなかでもＳＲＦの活性を抑制する薬物としては、これに限定するものではないが、例えば、細胞透過性のベンズアミド化合物であり、ＲＨＯシグナル経路及びＳＲＦの活性化を特異的に阻害する低分子化合物であるＣＣＧ−１４２３（Evelyn et.al, Mol. Cancer Ther. 6, 2249. 2007）、ＣＣＧ−１４２３のアナログであり、ＲＨＯシグナル経路及びＳＲＦの活性化を特異的に阻害する低分子化合物であるＣＣＧ−１００６０２（Evelyn, et.al, Bioorg Med Chem Lett 20 665-72. 2010）、ＳＲＦをコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド、及びこれらを発現するベクター、抗ＳＲＦ抗体、ＳＲＦのドミナントネガティブ変異体等が挙げられる。これらの薬物は市販されているか、公知の技術に基づいて適宜製造することができる。
【０１４８】
特に、ｐ２１等のＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質或いは抗アポトーシス関連タンパク質或いはＰＩ３Ｋシグナル伝達経路関連タンパク質の産生又は活性を抑制する薬物としては、特異性の高さや、副作用の可能性の低さから、当該タンパク質をコードするＤＮＡに対するＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチド及びこれらを発現するベクターが好ましい。
【０１４９】
当該恒常性維持関連タンパク質の抑制は、当該タンパク質に対する抑制剤を作用させなかった場合に比べ、細胞において当該タンパク質の発現や活性が抑制されていることにより決定することができる。当該タンパク質の発現は、既知の任意の手法、限定されずに、例えば、抗体を利用した免疫沈降法、ＥＩＡ、ＥＬＩＳＡ、ＩＲＡ、ＩＲＭＡ、ウェスタンブロッティング法、免疫組織化学法、免疫細胞化学法、フローサイトメトリー法、当該タンパク質をコードする核酸若しくはそのユニークな断片又は該核酸の転写産物（例えば、ｍＲＮＡ）若しくはスプライシング産物に特異的にハイブリダイズする核酸を利用した、種々のハイブリダイゼーション法、ノーザンブロット法、サザンブロット法、種々のＰＣＲ法などにより評価することができる。
【０１５０】
また、例えば、ｐ２１の活性は、ｐ２１の既知の活性、限定されずに、例えば、サイクリン−ＣＤＫ２又はサイクリン−ＣＤＫ１複合体との結合性などを、既知の任意の方法、例えば、免疫沈降法、ウェスタンブロッティング法、質量分析法、プルダウン法、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）法などにより解析することによって評価することができる。
【０１５１】
本明細書で用いる場合、ＲＮＡｉ分子は、ＲＮＡ干渉をもたらす任意の分子を指し、限定されずに、ｓｉＲＮＡ（small interfering RNA）、ｍｉＲＮＡ（micro RNA)、ｓｈＲ
ＮＡ（short hairpin RNA）、ｄｄＲＮＡ（DNA-directed RNA）、ｐｉＲＮＡ（Piwi-interacting RNA）、ｒａｓｉＲＮＡ（repeat associated siRNA）などの二重鎖ＲＮＡ及びこれらの改変体などを含む。これらのＲＮＡｉ分子は市販されているか、公知の配列情報、すなわち、配列番号１乃至３０、３９乃至１０８に示した塩基配列及び/又はアミノ酸配列に基づいて設計、作製することが可能である。
【０１５２】
また、本明細書で用いる場合、アンチセンス核酸は、ＲＮＡ、ＤＮＡ、ＰＮＡ、又はこれらの複合物を含む。
【０１５３】
本明細書で用いる場合、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチドは、限定されずに、例えば、特開2003-219893に記載の、標的遺伝子の発現を阻害するＤＮＡとＲＮＡとからなる２本鎖ポリヌクレオチドを含む。
【０１５４】
ＧＳＴ−πを抑制する薬物とＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物とは、単一の製剤に含まれていてもよいし、２個以上の製剤に別々に含まれていてもよい。後者の場合、各製剤は同時に投与されてもよいし、時間間隔をあけて投与されてもよい。時間間隔をあけて投与される場合、ＧＳＴ−πを抑制する薬物を含む製剤を、ＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物を含む製剤の前に投与してもよいし、後に投与してもよい。
【０１５５】
また、本発明に係る細胞死誘導剤及び細胞増殖抑制剤において、上述した恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物は、１種類でも良いし、２種類以上であっても良い。例えば、本発明に係る細胞死誘導剤及び細胞増殖抑制剤に含まれる、恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物としては、細胞周期関連タンパク質を抑制する薬剤を２種類以上使用しても良いし、抗アポトーシス関連タンパク質を抑制する薬剤を２種類以上使用しても良いし、１種類以上の細胞周期関連タンパク質を抑制する薬剤と１種類以上の抗アポトーシス関連タンパク質を抑制する薬剤とを使用しても良い。
【０１５６】
ところで、ＡＴＭ、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２、ＭＹＯ１８Ａ、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦは、ＧＳＴ−πとともに抑制されるとがん細胞に対して合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質である。よって、当該タンパク質を抑制する薬物は、ＧＳＴ−πを抑制する薬物による細胞死誘導及び/又は細胞増殖抑制を増強する剤又は組成物（以下、「細胞死誘導増強剤」、「細胞増殖抑制増強剤」、「細胞死誘導増強用組成物」又は「細胞増殖抑制増強用組成物」ともいう）のを有効成分となる。言い換えると、有効量の当該タンパク質を抑制する薬物を投与することによって、ＧＳＴ−πを抑制する薬物を投与することによる細胞死の誘導及び/又は細胞増殖の抑制を増強することができる。
【０１５７】
本発明の剤又は組成物における有効成分の配合量は、剤又は組成物が投与された場合に、アポトーシスといった細胞死が誘導及び/又は細胞増殖が抑制される量であってもよい。また、投与による利益を超える悪影響が生じない量が好ましい。かかる量は公知であるか、培養細胞などを用いたin vitro試験や、マウス、ラット、イヌ又はブタなどのモデル動物における試験により適宜決定することができ、このような試験法は当業者によく知られている。アポトーシスの誘導は、種々の既知の手法、例えば、ＤＮＡ断片化、アネキシンＶの細胞膜への結合、ミトコンドリア膜電位の変化、カスパーゼの活性化などのアポトーシス特有の現象の検出や、ＴＵＮＥＬ染色などにより評価することができる。また、細胞増殖の抑制は、種々の既知の手法、例えば、経時的な生細胞数の計数、腫瘍のサイズ、体積又は重量の測定、ＤＮＡ合成量の測定、ＷＳＴ−１法、ＢｒｄＵ（ブロモデオキシウリジン）法、３Ｈチミジン取込み法、などにより評価することができる。活性成分の配合量は、剤や組成物の投薬態様によって変化し得る。例えば、１回の投与に複数の単位の組成物を用いる場合、組成物１単位に配合する有効成分の量は、１回の投与に必要な有効成分の量の複数分の１とすることができる。かかる配合量の調整は当業者が適宜行うことができる。
【０１５８】
また、ＧＳＴ−πを抑制する薬物とＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物とを有効成分として配合することで、細胞死誘導剤、細胞増殖抑制剤、細胞死誘導組成物又は細胞増殖抑制組成物を製造することができる。
【０１５９】
さらに、細胞死誘導又は細胞増殖抑制に使用する、ＧＳＴ−πを抑制する薬物とＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物との組み合わせを提供することができる。さらにまた、有効量のＧＳＴ−πを抑制する薬物とＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物とを投与することを含む、細胞死の誘導方法又は細胞増殖の抑制方法を提供することができる。
【０１６０】
なお、上述したアポトーシス等の細胞死誘導又は細胞増殖抑制方法はいずれも、in vitroの方法であっても、in vivoの方法であってもよい。また、当該方法における薬物については既に上述したとおりであり、薬物の有効量は、投与した細胞において細胞死が誘導される、又は細胞増殖が抑制される量であってもよい。また、投与による利益を超える悪影響が生じない量が好ましい。かかる量は公知であるか、培養細胞などを用いたin vitro試験などにより適宜決定することができ、このような試験法は当業者によく知られている。細胞死の誘導又は細胞増殖の抑制は、上述のものを含む種々の既知の手法により評価することができる。上記有効量は、薬物を所定のがん細胞集団に投与した場合に、必ずしも同細胞集団の全ての細胞に細胞死又は増殖抑制をもたらすものでなくともよい。例えば、上記有効量は、当該細胞集団における細胞の１％以上、２％以上、３％以上、４％以上、５％以上、６％以上、８％以上、１０％以上、１２％以上、１５％以上、２０％以上、さらには２５％以上などにアポトーシス又は増殖抑制をもたらす量であってよい。
【０１６１】
本発明の細胞死誘導剤又は細胞増殖抑制剤は、がん細胞においても効果的に細胞死を誘導でき又は細胞増殖を抑制できるため、細胞の増殖異常に起因する疾患に対する医薬組成物の成分として有効である。また、ＧＳＴ−πを抑制する薬物とＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物とを有効成分として配合することで、細胞の増殖異常に起因する疾患に対する医薬組成物を製造することができる。さらに、製造された医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む、細胞の増殖異常に起因する疾患を処置・治療することができる。
【０１６２】
当該医薬組成物は、細胞の増殖異常に起因する疾患の処置、特に、変異型ＫＲＡＳを発現することで細胞死又は細胞増殖に異常を有する疾患を処置するのに有効である。
【０１６３】
変異型ＫＲＡＳを発現する細胞に起因する疾患としては、限定されずに、例えば、良性又は悪性腫瘍（がん、悪性新生物ともいう）、過形成症、ケロイド、クッシング症候群、原発性アルドステロン症、紅板症、真性多血症、白板症、過形成瘢痕、扁平苔癬及び黒子症などを含む。
【０１６４】
本発明におけるがんとしては、例えばがん、ＧＳＴ−πを高発現するがん、変異型ＫＲＡＳを発現する細胞に起因するがん（単に、ＫＲＡＳがんと称する場合もある）などが挙げられ、多くの場合ＫＲＡＳがんは、ＧＳＴ−πを高発現するがんに包含される。これらとしては、限定されずに、例えば、線維肉腫、悪性線維性組織球腫 、脂肪肉腫、横紋筋肉腫、平滑筋肉腫、血管肉腫、カポジ肉腫、リンパ管肉腫、滑膜肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫などの肉腫、脳腫瘍、頭頚部癌、乳癌、肺癌、食道癌、胃癌、十二指腸癌、虫垂癌、大腸癌、直腸癌、肝癌、膵癌、胆嚢癌、胆管癌、肛門癌、腎癌、尿管癌、膀胱癌、前立腺癌、陰茎癌、精巣癌、子宮癌、卵巣癌、外陰癌、膣癌、皮膚癌などの癌腫、さらには白血病や悪性リンパ腫などが挙げられる。なお、本発明では、「がん」は、上皮性悪性腫瘍及び非上皮性悪性腫瘍を含む。本発明におけるがんは、身体の任意の部位、例えば、脳、頭頚部、胸部、四肢、肺、心臓、胸腺、食道、胃、小腸（十二指腸、空腸、回腸）、大腸（結腸、盲腸、虫垂、直腸）、肝臓、膵臓、胆嚢、肛門、腎、尿管、膀胱、前立腺、陰茎、精巣、子宮、卵巣、外陰、膣、皮膚、横紋筋、平滑筋、滑膜、軟骨、骨、甲状腺、副腎、腹膜、腸間膜、骨髄、血液、血管系、リンパ節等のリンパ系、リンパ液などに存在し得る。
【０１６５】
医薬組成物としては、ＧＳＴ−πを抑制する薬物とＧＳＴ−πとともに抑制されると合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物以外に、他の有効成分と併用してもよい。ここで、併用するとは、例えば、他の有効成分を別々の製剤として投与すること、及び、他の有効成分を、少なくとも１種の他の薬剤との合剤として投与することなどを含む。別々の製剤として投与する場合には、他の有効成分を含む製剤を、他の製剤より前、他の製剤と同時、又は、他の製剤より後に投与してもよい。
【０１６６】
かかる他の有効成分としては、対象となる疾患の処置に有効なものが挙げられる。例えば、処置する疾患ががんである場合は、抗がん剤を併用することができる。抗がん剤の例としては、例えば、イホスファミド、塩酸ニムスチン、シクロホスファミド、ダカルバジン、メルファラン、ラニムスチン等のアルキル化剤、塩酸ゲムシタビン、エノシタビン、シタラビン・オクホスファート、シタラビン製剤、テガフール・ウラシル、テガフール・ギメラシル・オテラシルカリウム配合剤（例えば、ＴＳ−１）、ドキシフルリジン、ヒドロキシカルバミド、フルオロウラシル、メトトレキサート、メルカプトプリン等の代謝拮抗剤、塩酸イダルビシン、塩酸エピルビシン、塩酸ダウノルビシン、クエン酸ダウノルビシン、塩酸ドキソルビシン、塩酸ピラルビシン、塩酸ブレオマイシン、硫酸ペプロマイシ
ン、塩酸ミトキサントロン、マイトマイシンＣ等の抗腫瘍性抗生物質、エトポシド、塩酸イリノテカン、酒石酸ビノレルビン、ドセタキセル水和物、パクリタキセル、硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンデシン、硫酸ビンブラスチン等のアルカロイド、アナストロゾール、クエン酸タモキシフェン、クエン酸トレミフェン、ビカルタミド、フルタミド、リン酸エストラムスチン等のホルモン療法剤、カルボプラチン、シスプラチン（ＣＤＤＰ）、ネダプラチン等の白金錯体、サリドマイド、ネオバスタット、ベバシズマブ等の血管新生阻害剤、Ｌ−アスパラギナーゼなどを挙げることができる。
【０１６７】
本明細書に記載される本発明の各種の剤や組成物、処置方法等における活性成分が核酸、例えば、ＲＮＡｉ分子、リボザイム、アンチセンス核酸、ＤＮＡ／ＲＮＡキメラポリヌクレオチドなどである場合、これらは、裸の核酸としてそのまま利用することもできるが、種々のベクターに担持させることもできる。ベクターとしては、プラスミドベクター、ファージベクター、ファージミドベクター、コスミドベクター、ウイルスベクター等の公知の任意のものを利用することができる。ベクターは、担持する核酸の発現を増強するプロモーターを少なくとも含んでいることが好ましく、この場合、該核酸は、かかるプロモーターと作動可能に連結されていることが好ましい。核酸がプロモーターに作動可能に連結されているとは、プロモーターの作用により、該核酸のコードするタンパク質が適切に産生されるように、該核酸とプロモーターとが配置されていることを意味する。ベクターは、宿主細胞内で複製可能であってもなくてもよく、また、遺伝子の転写は宿主細胞の核外で行われても、核内で行われてもよい。後者の場合、核酸は宿主細胞のゲノムに組み込まれてもよい。
【０１６８】
また、有効成分は、種々の非ウイルス性脂質又はタンパク質担体に担持させることもできる。かかる担体としては、限定されずに、例えば、コレステロール、リポソーム、抗体プロトマー、シクロデキストリンナノ粒子、融合ペプチド、アプタマー、生分解性ポリ乳酸コポリマー、ポリマーなどが挙げられ、細胞内への取込み効率を高めることができる（例えば、Pirollo and Chang, Cancer Res. 2008;68(5):1247-50などを参照）。特に、カチオン性リポソームやポリマー（例えば、ポリエチレンイミンなど）が有用である。かかる担体として有用なポリマーのさらなる例としては、例えば、US 2008/0207553、US 2008/0312174等に記載のものなどが挙げられる。
【０１６９】
本明細書に記載される本発明の各種医薬組成物においては、活性成分の効果を妨げない限り、活性成分を他の任意成分と組み合わせてもよい。そのような任意成分としては、例えば、他の化学治療剤、薬理学的に許容される担体、賦形剤、希釈剤等が挙げられる。また、投与経路や薬物放出様式などに応じて、上記組成物を、適切な材料、例えば、腸溶性のコーティングや、時限崩壊性の材料で被覆してもよく、また、適切な薬物放出システムに組み込んでもよい。
【０１７０】
本明細書に記載される本発明の各種剤及び組成物（各種医薬組成物を含む）は、経口及び非経口の両方を包含する種々の経路、例えば、限定することなく、経口、静脈内、筋肉内、皮下、局所、腫瘍内、直腸、動脈内、門脈内、心室内、経粘膜、経皮、鼻内、腹腔内、肺内及び子宮内等の経路で投与してもよく、各投与経路に適した剤形に製剤してもよい。かかる剤形及び製剤方法は任意の公知のものを適宜採用することができる（例えば、標準薬剤学、渡辺喜照ら編、南江堂、２００３年などを参照）。
【０１７１】
例えば、経口投与に適した剤形としては、限定することなく、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳剤、ゲル剤、シロップ剤などが挙げられ、また非経口投与に適した剤形としては、溶液性注射剤、懸濁性注射剤、乳濁性注射剤、用時調製型注射剤などの注射剤が挙げられる。非経口投与用製剤は、水性又は非水性の等張性無菌溶液又は懸濁液の形態であることができる。
【０１７２】
本明細書に記載される本発明の各種剤又は組成物（各種医薬組成物を含む）は、特定の組織や細胞に標的化されていてもよい。標的化は、既知の任意の手法により達成することができる。がんへの送達を企図する場合は、限定されずに、例えば、製剤をＥＰＲ（enhanced permeability and retention）効果の発現に好適な直径５０〜２００μｍ、特に７５〜１５０μｍなどのサイズにすることによるパッシブターゲティングや、ＣＤ１９、ＨＥＲ２、トランスフェリン受容体、葉酸受容体、ＶＩＰ受容体、ＥＧＦＲ（Torchilin, AAPS J. 2007;9(2):E128-47）、ＲＡＡＧ１０（特表２００５−５３２０５０）、ＰＩＰＡ（特表２００６−５０６０７１）、ＫＩＤ３（特表２００７−５２９１９７）などのリガンドや、ＲＧＤモチーフやＮＧＲモチーフを有するペプチド、Ｆ３、ＬｙＰ−１（Ruoslahti et al., J Cell Biol. 2010;188(6):759-68）などを標的化剤として利用するアクティブターゲティングなどの手法を用いることができる。また、レチノイド又はその誘導体ががん細胞への標的化剤として有用であることも知られているため（WO 2008/120815）、レチノイドを標的化剤として含む担体を利用することもできる。かかる担体は、上記文献のほか、WO 2009/036368、WO 2010/014117、WO 2012/170952などに記載されている。
【０１７３】
本明細書に記載される本発明の各種剤又は組成物（各種医薬組成物を含む）はいずれの形態で供給されてもよいが、保存安定性の観点から、用時調製可能な形態、例えば、医療の現場あるいはその近傍において、医師及び／又は薬剤師、看護士、もしくはその他のパラメディカルなどによって調製され得る形態で提供してもよい。かかる形態は、本発明の剤又は組成物が、脂質やタンパク質、核酸などの安定した保存が難しい成分を含むときに特に有用である。この場合、本発明の剤又は組成物は、これらに必須の構成要素の少なくとも１つを含む１個又は２個以上の容器として提供され、使用の前、例えば、２４時間前以内、好ましくは３時間前以内、そしてより好ましくは使用の直前に調製される。調製に際しては、調製する場所において通常入手可能な試薬、溶媒、調剤器具などを適宜使用することができる。
【０１７４】
したがって、本発明は、本発明の各種剤又は組成物に含まれ得る活性成分を、単独でもしくは組み合わせて含む１個又は２個以上の容器を含む組成物の調製キット、ならびに、そのようなキットの形で提供される各種剤又は組成物の必要構成要素にも関する。本発明のキットは、上記のほか、本発明の各種剤又は組成物の調製方法や投与方法などが記載された指示、例えば説明書や、ＣＤ、ＤＶＤ等の電子記録媒体等を含んでいてもよい。また、本発明のキットは、本発明の各種剤又は組成物を完成するための構成要素の全てを含んでいてもよいが、必ずしも全ての構成要素を含んでいなくてもよい。したがって、本発明のキットは、医療現場や、実験施設などで通常入手可能な試薬や溶媒、例えば、無菌水や、生理食塩水、ブドウ糖溶液などを含んでいなくてもよい。
【０１７５】
本明細書に記載される本発明の各種処置方法における有効量とは、例えば、疾患の症状を低減し、又は疾患の進行を遅延もしくは停止する量であり、好ましくは、疾患を抑制し、又は治癒する量である。また、投与による利益を超える悪影響が生じない量が好ましい。かかる量は、培養細胞などを用いたin vitro試験や、マウス、ラット、イヌ又はブタなどのモデル動物における試験により適宜決定することができ、このような試験法は当業者によく知られている。また、本発明の処置方法に用いる薬物の用量は当業者に公知であるか、又は、上記の試験等により適宜決定することができる。
【０１７６】
本明細書に記載される本発明の処置方法において投与する活性成分の具体的な用量は、処置を要する対象に関する種々の条件、例えば、症状の重篤度、対象の一般健康状態、年齢、体重、対象の性別、食事、投与の時期及び頻度、併用している医薬、治療への反応性、剤形、及び治療に対するコンプライアンスなどを考慮して決定され得る。
【０１７７】
投与経路としては、経口及び非経口の両方を包含する種々の経路、例えば、経口、静脈内、筋肉内、皮下、局所、腫瘍内、直腸、動脈内、門脈内、心室内、経粘膜、経皮、鼻内、腹腔内、肺内及び子宮内等の経路が含まれる。
【０１７８】
投与頻度は、用いる剤や組成物の性状や、上記のものを含む対象の条件によって異なるが、例えば、１日多数回（すなわち１日２、３、４回又は５回以上）、１日１回、数日毎（すなわち２、３、４、５、６、７日毎など）、１週間毎、数週間毎（すなわち２、３、４週間毎など）であってもよい。
【０１７９】
本明細書で用いる場合、用語「対象」は、任意の生物個体を意味し、好ましくは動物、さらに好ましくは哺乳動物、さらに好ましくはヒトの個体である。本発明において、対象は健常であっても、何らかの疾患に罹患していてもよいものとするが、特定の疾患の処置が企図される場合には、典型的にはかかる疾患に罹患しているか、罹患するリスクを有する対象を意味する。
【０１８０】
また、用語「処置」は、本明細書で用いる場合、疾患の治癒、一時的寛解又は予防などを目的とする医学的に許容される全ての種類の予防的及び／又は治療的介入を包含するものとする。例えば、「処置」の用語は、疾患の進行の遅延又は停止、病変の退縮又は消失、発症の予防又は再発の防止などを含む、種々の目的の医学的に許容される介入を包含する。
【０１８１】
ところで、上述のように、ＡＴＭ、ＣＤＣ２５Ａ、ｐ２１、ＰＲＫＤＣ、ＲＢＢＰ８、ＳＫＰ２、ＭＣＭ１０、ＲＮＰＣ１、ＣＣＮＬ１、ＣＥＮＰＨ、ＢＲＳＫ１、ＭＣＭ８、ＣＣＮＢ３、ＭＣＭＤＣ１、ＡＡＴＦ、ＡＬＯＸ１２、ＡＮＸＡ１、ＡＮＸＡ４、ＡＰＩ５、ＡＴＦ５、ＡＶＥＮ、ＡＺＵ１、ＢＡＧ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＦＡＲ、ＣＦＬＡＲ、ＩＬ２、ＭＡＬＴ１、ＭＣＬ１、ＭＫＬ１、ＭＰＯ、ＭＴＬ５、ＭＹＢＬ２、ＭＹＯ１８Ａ、ＭＴＯＲ、ＩＲＡＫ１、ＩＲＳ１、ＭＹＤ８８、ＮＦＫＢ１、ＰＩＫ３ＣＧ、ＲＡＣ１、ＡＫＴ３、ＥＩＦ４Ｂ、ＥＩＦ４Ｅ、ＩＬＫ、ＭＴＣＰ１、ＰＩＫ３ＣＡ及びＳＲＦは、ＧＳＴ−πとともに抑制されるとがん細胞に対して合成致死性を示すタンパク質である。したがって、これら恒常性維持関連タンパク質に対する抑制を指標として、ＧＳＴ−πを抑制する薬物とともに使用される、がん細胞の細胞死誘導剤及び/又は細胞増殖抑制剤をスクリーニングすることができる。すなわち、これら恒常性維持関連タンパク質を抑制できる物質は、ＧＳＴ−πを抑制する薬物とともに使用される、がん細胞の細胞死誘導剤及び/又は細胞増殖抑制剤の候補物質となる。
【０１８２】
例えば、がん細胞の一例として、変異型ＫＲＡＳを発現する細胞に対して被検物質を接触させ、当該細胞における、ＧＳＴ−πとともに抑制されると変異型ＫＲＡＳを発現する細胞に対して合成致死性を示す上記恒常性維持関連タンパク質の発現量を測定する。被検物質の非存在下において測定した発現量と比較して、被検物質を接触させたときの発現量が低下した場合、当該被検物質を上記恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物の候補物質として選択することができる。
【０１８３】
一方、ＧＳＴ−πを抑制する薬物は、ＧＳＴ−πとともに抑制されるとがん細胞に対して合成致死性を示す上記恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬剤とともに抑制されると、がん細胞に対して合成致死性を示すタンパク質である。したがって、ＧＳＴ−πに対する抑制を指標として、上記恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬剤とともに使用される、がん細胞の細胞死誘導剤及び/又は細胞増殖抑制剤をスクリーニングすることができる。すなわち、ＧＳＴ−πを抑制できる物質は、上記恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物とともに使用される、がん細胞の細胞死誘導剤及び/又は細胞増殖抑制剤の候補物質となる。
【０１８４】
例えば、がん細胞の一例として、変異型ＫＲＡＳを発現する細胞に対して被検物質を接触させ、当該細胞における、ＧＳＴ−πの発現量を測定する。被検物質の非存在下において測定した発現量と比較して、被検物質を接触させたときの発現量が低下した場合、当該被検物質をＧＳＴ−πを抑制する薬物の候補物質として選択することができる。
【０１８５】
同様に、ＧＳＴ−πに対する抑制及びＧＳＴ−πとともに抑制されるとがん細胞に対して合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質に対する抑制をともに指標として、がん細胞の細胞死誘導剤及び/又は細胞増殖抑制剤をスクリーニングすることができる。すなわち、ＧＳＴ−πを抑制でき、且つ、上記恒常性維持関連タンパク質を抑制できる物質は、がん細胞の細胞死誘導剤及び/又は細胞増殖抑制剤の候補物質となる。
【０１８６】
例えば、がん細胞の一例として、変異型ＫＲＡＳを発現する細胞に対して被検物質を接触させ、当該細胞における、ＧＳＴ−πの発現量及び上記恒常性維持関連タンパク質の発現量を測定する。被検物質の非存在下において測定した各発現量と比較して、被検物質を接触させたときの各発現量がともに低下した場合、当該被検物質をＧＳＴ−πを抑制し、且つＧＳＴ−πとともに抑制されるとがん細胞に対して合成致死性を示す恒常性維持関連タンパク質を抑制する薬物の候補物質として選択することができる。
【０１８７】
ここで、被検物質としては、何ら限定されず、如何なる物質であってもよい。被検物質としては、単独の物質であってもよいし、複数の構成成分からなる混合物であってもよい。被検物質としては、例えば微生物若しくは培養液からの抽出物のように未同定の物質を含むような構成であってもよいし、既知の組成物を所定の組成比で含むような構成であってもよい。また、被検物質としては、タンパク質、核酸、脂質、多糖類、有機化合物及び無機化合物のいずれでもよい。
【実施例】
【０１８８】
以下、実施例により本発明を更に詳細に説明するが、本発明の技術的範囲は以下の実施例に限定されるものではない。
【０１８９】
[実験１]  siRNAによるGST-π及びP21のノックダウン
がん細胞の例として、1×105個のM7609細胞（KRAS変異ヒト大腸がん細胞）及びPANC-1細胞（KRAS変異ヒト膵臓がん細胞）を6cmシャーレに播種し、10%ウシ胎児血清(Fetal bovine serum、FBS）と0.5%L-グルタミンを添加したRoswell Park Memorial Institute 1640（RPMI 1640、Sigma社）で18時間培養した。培養条件は、特に別記しない限り37℃、5%CO2で行った。また、がん細胞の例として、0.5×105個のA549細胞（KRAS変異ヒト肺がん細胞）を6cmシャーレに播種し、10%FBSと1%L-グルタミンを添加したDulbecco’s modified Eagle’s medium（DMEM、Sigma社）で18時間培養した。さらに、がん細胞の例として、1×105個のMIA PaCa-2細胞（KRAS変異ヒト膵臓がん細胞）を6cmシャーレに播種し、10%FBSと1%L-グルタミンを添加したDMEMで18時間培養した。さらにまた、がん細胞の例として0.5×105個のHCT116細胞（KRAS変異ヒト大腸がん細胞）を6cmシャーレに播種し、10%FBSと0.5%L-グルタミンを添加したMcCoy’s 5A Medium（McCoy、Sigma社）で18時間培養した。
【０１９０】
本実験では、先ず、20〜30%コンフルエントになったPANC-1、A549又はMIA PaCa-2細胞にLipofectamine RNAiMAX（Life Technologies社）を用いて、GST-π siRNA及び/又はP21 siRNAを以下のようにトランスフェクションした。
【０１９１】
トランスフェクション用のLipofectamine/siRNA混合溶液は以下のように作製した。まず、15μLのLipofectamine RNAiMAXと485μLのOPTI-MEM（Sigma社）とを混合したLipofectamine溶液を調製した。次に、所定量の50μM siRNAをOPTI-MEMで500μLにメスアップしたsiRNA溶液を調製し（例えば、終濃度50nMの使用するsiRNA溶液を作製する場合、6μLの50μM siRNAと494μLのOPTI-MEMを混合した）、これを上記のlipofectamine溶液と混合し、15分間室温で静置した。なお、siRNAは以下のものを使用した。なお、下記記載において、大文字はRNA、小文字はDNAをそれぞれ意味する。
【０１９２】
GST-π siRNA：
センス鎖：GGGAGGCAAGACCUUCAUUtt（配列番号３１）
アンチセンス鎖：AAUGAAGGUCUUGCCUCCCtg（配列番号３２）
P21 siRNA：
センス鎖： UCCUAAGAGUGCUGGGCAUtt（配列番号３３）
アンチセンス鎖：AUGCCCAGCACUCUUAGGAtt（配列番号３４）
Control siRNA：
センス鎖： ACGUGACACGUUCGGAGAAtt（配列番号３５）
アンチセンス鎖：UUCUCCGAACGUGUCACGUtt（配列番号３６）
GST-π siRNA-2：
センス鎖：UCUCCCUCAUCUACACCAAtt（配列番号３７）
アンチセンス鎖：UUGGUGUAGAUGAGGGAGAtg（配列番号３８）
【０１９３】
GST-π siRNA及びP21 siRNAをそれぞれ50nMの終濃度で、GST-π siRNA又はP21 siRNAを50nMの終濃度で（共にControl siRNAを終濃度50nMで添加）、並びにGST-π siRNAを100nMの終濃度（Control siRNAは添加せず）で、PANC-1、MIA PaCa-2細胞又はA549細胞を含むシャーレにそれぞれ添加した。コントロールとして、Control siRNAを100nMの終濃度で添加したものを使用した。培地を交換せず1日間培養した後、GST-π mRNA量及びP21 mRNA量を、7300 Real Time PCR System（Applied Bio Systems社）を用いて、定量PCR法にて定量した。結果を図１に示す。図１に示すように、siRNAによってGST-πをノックダウンすることで、P21 mRNA量が増加することが明らかとなった。
【０１９４】
また、A549細胞又はMIA PaCa-2細胞を含むシャーレにGST-π siRNA又はControl siRNAを50nMの終濃度でそれぞれ添加したケースについて、GST-π siRNA又はControl siRNAを添加した日から4日目までP21 mRNA量を毎日同様にして定量した。結果を図２に示す。図２に示すように、siRNAによってGST-πをノックダウンすると、P21 mRNAの発現量が経時的に増加することが明らかとなった。
【０１９５】
一方、GST-π siRNA及び/又はP21 siRNAによる細胞数への影響を検証した。先ず、GST-π siRNA及びP21 siRNAをそれぞれ50nMの終濃度で、GST-π siRNA又はP21 siRNAを50nMの終濃度（共にControl siRNAを終濃度50nMで添加）で、PANC-1、MIA PaCa-2細胞又はA549細胞を含むシャーレに添加した。コントロールとして、Control siRNAを100nMの終濃度で添加したものを使用した。培地を交換せず5日間培養した後、細胞をトリプシン処理でシャーレから剥離して採取し、細胞数をカウントした。結果を図３に示す。図３に示すように、GST-π siRNA又はP21 siRNAを用いてそれぞれGST-π及びP21を単独でノックダウンした場合、細胞の増殖を抑制するものの、播種細胞数より細胞数を減少させることはできないことがわかる。しかし、GST-π siRNA及びP21 siRNAを用いて、GST-πとP21をともにノックダウンすると、変異KRASを発現するPANC-1細胞及びMIA PaCa-2細胞では増殖を抑制するのみならず、細胞死を誘導できることがわかる。
【０１９６】
なお、図３からは変異KRASを発現するA549細胞については、上述した処理によって細胞死を誘導していないと考えられた。そこで、GST-π siRNA及びP21 siRNAのトランスフェクションの回数を増やし、変異KRASを発現するA549細胞及びHCT116細胞について、GST-π siRNA及び/又はP21 siRNAによる細胞数への影響を検証した。
【０１９７】
先ず、PANC-1細胞、MIA PaCa-2細胞、HCT116細胞については、GST-π siRNA及びP21 siRNAをそれぞれ25nMの終濃度で、GST-π siRNA又はP21 siRNAを25nMの終濃度（いずれもControl siRNAを25nMの終濃度で添加）で、A549細胞については、GST-π siRNA及びP21 siRNAをそれぞれ50nMの終濃度で、GST-π siRNA又はP21 siRNAを50nMの終濃度（Control siRNAを50nMの終濃度で添加）で、それぞれシャーレに添加した。コントロールとして、Control siRNAをPANC-1細胞、MIA PaCa-2細胞、HCT116細胞については50nMの終濃度で、A549細胞については100nMの終濃度で添加した。2日後及び4日後に、培地を置換し（PANC-1細胞は10%FBS添加RPMI 1640、A549細胞及びMIA PaCa-2細胞は10%FBS添加DMEM、HCT116細胞は10%FBS添加McCoy）、再度GST-π siRNA又はP21 siRNAを、PANC-1細胞、MIA PaCa-2細胞、HCT116細胞については25nMの終濃度で（いずれもControl siRNAを25nMの終濃度で添加）、A549細胞については50nMの終濃度で（Control siRNAを50nMの終濃度で添加）、それぞれシャーレに添加した。この際も、コントロールとして、Control siRNAをPANC-1、MIA PaCa-2細胞は50nM、A549細胞は100nMの終濃度で添加した。その後、培地を交換せず培養し、細胞播種から7日後に、細胞をトリプシン処理でシャーレから剥離して採取し、細胞数をカウントした。また、本例では細胞の位相差像を撮影した。
【０１９８】
A549細胞、PANC-1細胞及びMIA PaCa-2細胞について細胞数を測定した結果を図４に示し、HCT116細胞について細胞数を測定した結果を図５に示した。また、A549細胞について撮像した位相差像を図６に示し、MIA PaCa-2細胞について撮像した位相差像を図７に示し、PANC-1細胞について撮像した位相差像を図８に示し、HCT116細胞について撮像した位相差像を図９に示した。
【０１９９】
図４及び５に示したように、GST-π siRNA及びP21 siRNAを用いて、GST-πとP21をともに3回ノックダウンすると、変異型KRASを発現する癌細胞（A549細胞、MIA PaCa-2細胞、PANC-1細胞、HCT116細胞）では、細胞播種から7日後において最初に播種した細胞数よりも減少しており、細胞死を誘導できることが明らかとなった。
【０２００】
また、図６〜９に示したように、GST-π siRNAによりGST-πをノックダウンした、変異型KRASを発現する細胞（A549細胞、MIA PaCa-2細胞、PANC-1細胞、HCT116細胞）はいずれの細胞種でも扁平で大きな細胞となることから、細胞老化が誘起されていると推測できた。さらに、GST-π siRNA及びP21 siRNAを用いて、GST-πとP21をともにノックダウンした場合には、GST-πノックダウンで見られた細胞老化様の表現型が消失していることが明らかとなった。この結果から、GST-π siRNA及びP21 siRNAを用いて、GST-πとP21をともにノックダウンした場合には、GST-πノックダウンで誘起された細胞老化をP21ノックダウンで阻害していると考えられた。
【０２０１】
なお、M7609細胞を用いてGST-πをノックダウンすることで図６〜９に示したような細胞老化を誘導できるか検証した。先ず、GST-π siRNAを30nMの終濃度でM7609細胞を含むシャーレに添加した。1日後及び2日後に、培地を置換し（10%FBS添加RPMI 1640）、再度GST-π siRNAを30nMの終濃度でM7609細胞を含むシャーレに添加した。その後1日おきに培地を交換して培養し、細胞播種から13日後に、Senescence β-Galactosidase Staining Kit (Cell Signaling社)を用いて、推奨プロトコールに従い細胞を染色し、位相差像を撮影した。結果を図１０に示す。図１０に示したように、GST-πをノックダウンしたM7609細胞は扁平で大きな細胞となり、このような表現型の細胞はβ-galactosidaseによる青色発色が観察されることから、細胞老化が誘起されていることがわかる。
【０２０２】
また、変異型KRASを発現するがん細胞において、GST-πとP21をともにノックダウンすることで誘導された細胞死がアポトーシスであるか、アポトーシス誘導因子であるPUMA遺伝子の発現量を測定することで検証した。
【０２０３】
先ず、GST-π siRNA及びP21 siRNAをそれぞれ50nMの終濃度で、GST-π siRNA又はp21 siRNAを50nMの終濃度（共にControl siRNAを終濃度50nMで添加）で、A549細胞、MIA PaCa-2細胞を含むシャーレにそれぞれ添加した。コントロールとして、Control siRNAを100nMの終濃度で添加した。培地を交換せず1日間培養した後、PUMA mRNA量を、7300 Real Time PCR System（Applied Bio Systems社）を用いて、定量PCR法にて定量した。
【０２０４】
結果を図１１に示す。図１１に示したように、GST-π siRNA及びP21 siRNAを用いて、GST-πとp21をともにノックダウンすることで、アポトーシス促進因子であるPUMAのmRNA量が大幅に増加することがわかった。この結果から、GST-πとP21をともにノックダウンすることで誘導された細胞死がアポトーシスであることが分かった。
【０２０５】
なお、細胞内にはアポトーシス関連タンパク質群が存在する。アポトーシス関連タンパク質は、アポトーシス抑制タンパク質群とアポトーシス誘導タンパク質群の２つに大別される。アポトーシス抑制タンパク質群には、Bcl-2、Bcl-XL、Bcl-W、MCL-1及びBcl-B等が含まれる。また、アポトーシス誘導タンパク質群には、Bax、Bak、BOK、BIM、BID、BAD、NOXA及びPUMA等が含まれる。一般的に、Bcl-2、Bcl-XL、MCL-1等のアポトーシス抑制タンパク質は、ミトコンドリア外壁に存在して、シトクロムＣの放出を抑制し、アポトーシスを抑制する。一方、Bax、BIM、BID及びBAD等のアポトーシス誘導タンパク質群は細胞質に存在するが、deathシグナルに応じてミトコンドリア外壁へ移行して、シトクロムＣの放出を促進し、アポトーシスを誘導する。
【０２０６】
また、p53は、DNA損傷などによって活性化されると、Bax，NOXA，PUMAの転写を促進し、アポトーシスを誘導する。特に、PUMAは、p53で活性化されるアポトーシス誘導タンパク質として単離されたタンパク質であり、PUMAがBcl-2と直接結合することで、Bcl-2のアポトーシス抑制作用を阻害し、細胞をアポトーシスへ誘導する。
【０２０７】
以上、実験１の結果から、がん細胞に対して、GST-πを抑制する薬剤とP21を抑制する薬剤とを作用させると、細胞増殖を大幅に抑制する、更には細胞死を強く誘導できることが示された。なお、がん細胞に対して、GST-πを抑制する薬剤を単独で作用させても細胞増殖を抑制できるが細胞死を誘導できず、当該細胞に対してP21を抑制する薬剤を単独で作用させても細胞増殖を僅かに抑制できる程度である。よって、これら薬剤をともに作用させることで、がん細胞について細胞死を誘導できることは驚くべき効果といえる。
【０２０８】
[実験２]
実験１ではGST-π siRNA及びP21 siRNAを用いてがん細胞に対する合成致死性について実証した。本実験２では、GST-πとともに抑制されることで合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質をスクリーニングした。
【０２０９】
先ず、1×104個/mLのMIA PaCa-2細胞懸濁液を10%FBSと1%L-グルタミンを添加したDMEMで調製し、これを96-well プレートの各wellに100μLずつ播種した後、10%FBSと1%L-グルタミンを添加したDMEMで18時間培養した。20〜30%コンフルエントになったMIA PaCa-2細胞にLipofectamine RNAiMAXを用いて、GST-π siRNA-2及び/又は標的遺伝子に対するsiRNAを以下のようにトランスフェクションした。
【０２１０】
トランスフェクション用のLipofectamine/siRNA混合溶液は以下のように作製した。まず、Human siGENOME siRNA Library - Cell Cycle Regulation - SMARTpool（Dharmacon社）に含まれる各siRNA0.1 nmolに51μLのDNase free水（Ambion社）を添加し、90分室温で静置した。このsiRNA水溶液に、19.9μLのOPTI-MEMを加えたsiRNA溶液を調製した（溶液A）。次に、50μM GST-π siRNA-2水溶液及び50μM Control siRNA水溶液をそれぞれOPTI-MEMで10倍に希釈して、GST-π siRNA-2の5μM及びControl siRNAの 5μMの希釈溶液とし（溶液B）、溶液A 31.2μLと溶液B 8.8μLを混合した（溶液C）。次に、150μLのLipofectamine RNAiMAXと2.35mLのOPTI-MEMとを混合したLipofectamine溶液を調製した（溶液D）。次に溶液C 37.5μLと溶液D 37.5μLを混合し、15分間室温で静置した（溶液E）。溶液Eを10μLずつ、MIA-PaCa-2細胞を培養している96-wellプレートの各wellに添加した。
【０２１１】
別途、50μM Control siRNA水溶液（5.5μL）にOPTI-MEM（189.5μL）を混合した溶液を調製した（溶液F）。次に、50μM Control siRNA水溶液をOPTI-MEMで10倍に希釈して、Control siRNAの 5μMの希釈溶液とし（溶液G）、溶液F 31.2μLと溶液G 8.8μLを混合した（溶液H）。次に、150μLのLipofectamine RNAiMAXと2.35mLのOPTI-MEMとを混合したLipofectamine溶液を調製した（溶液I）。次に溶液H 37.5μLと溶液I 37.5μLを混合し、15分間室温で静置した（溶液J）。溶液Jを10μLずつ、MIA-PaCa-2細胞を培養している96-wellプレートの各wellに添加し、コントロールとした。その後、10%FBSと1%L-グルタミンを添加したDMEM中で培養した。5日後、CyQUANT NF Cell Proliferation Assay Kit（Invitrogen社）を用いて、増殖評価試験を行った。
【０２１２】
まず、22μLのCyQUANT NF dye reagentに1×HBSS bufferを添加しCyQUANT NF Cell proliferation Assayの染色反応液を調製した。上記トランスフェクションを行った細胞の培地を吸引し、50μLの染色反応液を添加した。37℃で30分間静置した後、励起波長480nmで励起した際の、蛍光波長520nmを観察した。
【０２１３】
結果を図１２に示す。図１２に示すように、細胞周期調節タンパク質をコードする170種類の遺伝子についてGST-πとの合成致死性をスクリーニングした結果、実験１で実証したP21に加えて、ATM、CDC25A、PRKDC、RBBP8、SKP2、MCM10、RNPC1、CCNL1、CENPH、BRSK1、MCM8、CCNB3及びMCMDC1を、GST-πとともに抑制されることで合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質としてスクリーニングすることができた。なかでも、P21、RNPC1、CCNL1、MCM8、CCNB3及びMCMDC1については、単独で抑制された場合には細胞増殖を僅かに抑制できる程度（増殖抑制率20％未満）であり、GST-πとともの抑制されてはじめて合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質としてスクリーニングできた。よって、これらP21、RNPC1、CCNL1、MCM8、CCNB3及びMCMDC1から選ばれる細胞周期調節タンパク質を抑制する薬剤は、それ単独では毒性が非常に低く安全性に優れるといえる。
【０２１４】
[実験３]
実験２では、GST-πとともに抑制されることで合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質をスクリーニングした。本実験３では、GST-πとともに抑制されることで合成致死性を示す抗アポトーシス機能を持つタンパク質をスクリーニングした。
【０２１５】
先ず、1×104個/mLのMIA PaCa-2細胞懸濁液を10%FBSと1%L-グルタミンを添加したDMEMで調製し、これを96-well プレートの各wellに100μLずつ播種した後、10%FBSと1%L-グルタミンを添加したDMEMで18時間培養した。20〜30%コンフルエントになったMIA PaCa-2細胞にLipofectamine RNAiMAXを用いて、GST-π siRNA-2及び/又は標的遺伝子に対するsiRNAを以下のようにトランスフェクションした。
【０２１６】
トランスフェクション用のLipofectamine/siRNA混合溶液は以下のように作製した。まず、抗アポトーシス機能を有すると思われる140種類の遺伝子を独自に選抜したカスタムsiRNA library（siGENOME SMARTpool Cherry-pick Library、Dharmacon社）に含まれる各siRNA0.1 nmolに51μLのDNase free水（Ambion社）を添加し、90分室温で静置した。このsiRNA水溶液に、19.9μLのOPTI-MEMを加えたsiRNA溶液を調製した（溶液A）。次に、50μM GST-π siRNA-2水溶液及び50μM Control siRNA水溶液をそれぞれOPTI-MEMで10倍に希釈して、GST-π siRNA-2の 5μM及びControl siRNA の5μM溶液とし（溶液B）、溶液A 31.2μLと溶液B 8.8μLを混合した（溶液C）。次に、150μLのLipofectamine RNAiMAXと2.35mLのOPTI-MEMとを混合したLipofectamine溶液を調製した（溶液D）。次に溶液C 37.5μLと溶液D 37.5μLを混合し、15分間室温で静置した（溶液E）。溶液Eを10μLずつ、MIA-PaCa-2細胞を培養している96-wellプレートの各wellに添加した。
【０２１７】
別途、50μM Control siRNA水溶液（5.5μL）にOPTI-MEM（189.5μL）を混合した溶液を調製した（溶液F）。次に、50μM Control siRNA水溶液をOPTI-MEMで10倍に希釈して、Control siRNAの 5μMの希釈溶液とし（溶液G）、溶液F 31.2μLと溶液G 8.8μLを混合した（溶液H）。次に、150μLのLipofectamine RNAiMAXと2.35mLのOPTI-MEMとを混合したLipofectamine溶液を調製した（溶液I）。次に溶液H 37.5μLと溶液I 37.5μLを混合し、15分間室温で静置した（溶液J）。溶液Jを10μLずつ、MIA-PaCa-2細胞を培養している96-wellプレートの各wellに添加し、コントロールとした。その後、10%FBSと1%L-グルタミンを添加したDMEM中で培養した。5日後、CyQUANT NF Cell Proliferation Assay Kit（Invitrogen社）を用いて、増殖評価試験を行った。
【０２１８】
まず、22μLのCyQUANT NF dye reagentに11 mL の1×HBSS bufferを添加しCyQUANT NF Cell proliferation Assayの染色反応液を調製した。上記トランスフェクションを行った細胞の培地を吸引し、50μLの染色反応液を添加した。37℃で30分間静置した後、励起波長480nmで励起した際の、蛍光波長520nmを観察した。
【０２１９】
結果を図１３に示す。図１３に示すように、抗アポトーシスに関係するタンパク質をコードする140種類の遺伝子についてGST-πとの合成致死性をスクリーニングした結果、AATF、ALOX12、ANXA1、ANXA4、API5、ATF5、AVEN、AZU1、BAG1、BCL2L1、BFAR、CFLAR、IL2、MALT1、MCL1、MKL1、MPO、MTL5、MYBL2及びMYO18Aを、GST-πとともに抑制されることで合成致死性を示す抗アポトーシスに関連するタンパク質としてスクリーニングすることができた。
【０２２０】
[実験４]
実験２では、GST-πとともに抑制されることで合成致死性を示す細胞周期調節タンパク質を、実験３では、GST-πとともに抑制されることで合成致死性を示す抗アポトーシス機能を持つタンパク質をスクリーニングした。本実験４では、GST-πとともに抑制されることで合成致死性を示すPI3Kシグナル伝達経路に関係するタンパク質をスクリーニングした。
【０２２１】
先ず、1×104個/mLのMIA PaCa-2細胞懸濁液を10%FBSと1%L-グルタミンを添加したDMEMで調製し、これを96-well プレートの各wellに100μLずつ播種した後、10%FBSと1%L-グルタミンを添加したDMEMで18時間培養した。20〜30%コンフルエントになったMIA PaCa-2細胞にLipofectamine RNAiMAXを用いて、GST-π siRNA-2及び/又は標的遺伝子に対するsiRNAを以下のようにトランスフェクションした。
【０２２２】
トランスフェクション用のLipofectamine/siRNA混合溶液は以下のように作製した。まず、PI3Kシグナル伝達経路に関与すると思われる80種類の遺伝子を独自に選抜したカスタムsiRNA library（siGENOME SMARTpool Cherry-pick Library、Dharmacon社）に含まれる各siRNA0.1 nmolに51μLのDNase free水（Ambion社）を添加し、90分室温で静置した。このsiRNA水溶液に、19.9μLのOPTI-MEMを加えたsiRNA溶液を調製した（溶液A）。次に、50μM GST-π siRNA-2水溶液あるいは50μM Control siRNA水溶液をそれぞれOPTI-MEMで10倍に希釈して、GST-π siRNA-2の 5μMあるいはControl siRNA の5μM溶液とし（溶液B）、溶液A 31.2μLと溶液B 8.8μLを混合した（溶液C）。次に、150μLのLipofectamine RNAiMAXと2.35mLのOPTI-MEMとを混合したLipofectamine溶液を調製した（溶液D）。次に溶液C 37.5μLと溶液D 37.5μLを混合し、15分間室温で静置した（溶液E）。溶液Eを10μLずつ、MIA-PaCa-2細胞を培養している96-wellプレートの各wellに添加した。
【０２２３】
別途、50μM Control siRNA水溶液（5.5μL）にOPTI-MEM（189.5μL）を混合した溶液を調製した（溶液F）。次に、50μM Control siRNA水溶液をOPTI-MEMで10倍に希釈して、Control siRNAの 5μMの希釈溶液とし（溶液G）、溶液F 31.2μLと溶液G 8.8μLを混合した（溶液H）。次に、150μLのLipofectamine RNAiMAXと2.35mLのOPTI-MEMとを混合したLipofectamine溶液を調製した（溶液I）。次に溶液H 37.5μLと溶液I 37.5μLを混合し、15分間室温で静置した（溶液J）。溶液Jを10μLずつ、MIA-PaCa-2細胞を培養している96-wellプレートの各wellに添加し、コントロールとした。その後、10%FBSと1%L-グルタミンを添加したDMEM中で培養した。5日後、CyQUANT NF Cell Proliferation Assay Kit（Invitrogen社）を用いて、増殖評価試験を行った。
【０２２４】
まず、22μLのCyQUANT NF dye reagentに11 mL の1×HBSS bufferを添加しCyQUANT NF Cell proliferation Assayの染色反応液を調製した。上記トランスフェクションを行った細胞の培地を吸引し、50μLの染色反応液を添加した。37℃で30分間静置した後、励起波長480nmで励起した際の、蛍光波長520nmを観察した。
【０２２５】
結果を図１４に示す。図１４に示すように、PI3Kシグナル伝達経路に関係するタンパク質をコードする80種類の遺伝子についてGST-πとの合成致死性をスクリーニングした結果、MTOR、IRAK1、IRS1、MYD88、NFKB1、PIK3CG、RAC1、AKT3、EIF4B、EIF4E、ILK、MTCP1、PIK3CA及びSRFを、GST-πとともに抑制されることで合成致死性を示すPI3Kシグナル伝達経路に関連するタンパク質としてスクリーニングすることができた。なかでも、MTOR、IRAK1、IRS1、MYD88、NFKB1、PIK3CG及びRAC1については、GST-πとともに抑制されることで、細胞増殖抑制効果が著しく高いことが明らかとなった。
【０２２６】
[実験５]
本実験５では、細胞周期調節タンパク質であるMYLK（HEPATOLOGY, Vol. 44, No. 1, 2006, 152-163）について、GST-πとともに抑制されたときのA549細胞（KRAS変異ヒト肺がん細胞）に対する合成致死性を検討した。
【０２２７】
先ず、siRNAのトランスフェクション1日前に、0.25×105個/wellとなるようにA549細胞を、10%FBSを添加したDMEM（抗生物質不含有）2.25mLとともに各wellに播種した。なお、本実験では、6 wellのプレートを用いて、各サンプルについて三連で行った。培養したA549細胞にLipofectamine RNAiMAXを用いて、GST-π siRNA-3及び/又はMYLKに対するsiRNA（MYLKa及びMYLKbの2種類を使用）を以下のようにトランスフェクションした。
【０２２８】
トランスフェクション用のLipofectamine/siRNA混合溶液は以下のように作製した。先ず、50nMのGST-π siRNA-3溶液とMYLKに対するsiRNA溶液とを0.5μLずつ混合し、124μLのOPTI-MEMを加えたsiRNA溶液を準備した。なお、Control siRNA溶液のみ、Control siRNA溶液とGST-π siRNA-3溶液の組み合わせ、Control siRNA溶液とMYLKに対するsiRNA溶液の組み合わせについても、siRNAが同濃度となるようにsiRNA溶液を準備した。また、7.5μLのLipofectamine RNAiMAXと117.5μLのOPTI-MEMとを混合したLipofectamine溶液を準備した。そして、準備したsiRNA溶液とLipofectamine溶液とを混合し、室温で5分間静置した。
【０２２９】
得られた混合溶液を一滴ずつwellに滴下し、最終的に各wellに2.5mLとした（siRNAの最終濃度は20nM）。その後、穏やかに振盪しながら37℃で5%CO2条件下にて75時間培養した。培養終了後、実験１〜４と同様にして増殖評価試験を行った。その結果を図１５に示す。図１５に示すように、細胞周期調節タンパク質の一つであるMYLKを、GST-πとともに抑制することでがん細胞に対する合成致死性を示すことが明らかとなった。すなわち、図１５に示した結果から、GST-πを抑制する薬剤とMYLKを抑制する薬剤とをそれぞれ単独でがん細胞に作用させても細胞増殖抑制効果が僅かであるが、GST-πを抑制する薬剤とMYLKを抑制する薬剤とを共にがん細胞に作用させることで、細胞増殖を非常に強く抑制できることが明らかとなった。
【０２３０】
なお、siRNAは以下のものを使用した。なお、下記記載において、大文字はRNA、小文字はDNAをそれぞれ意味する。
GST-π siRNA-3：
センス鎖：CCUUUUGAGACCCUGCUGUtt（配列番号１０９）
アンチセンス鎖：ACAGCAGGGUCUCAAAAGGtt（配列番号１１０）
MYLKa：
センス鎖： CUGGGGAAGAAGGUGAGUAtt（配列番号１１１）
アンチセンス鎖：UACUCACCUUCUUCCCCAGtt（配列番号１１２）
MYLKb：
センス鎖： CAAGAUAGCCAGAGUUUAAtt（配列番号１１３）
アンチセンス鎖：UUAAACUCUGGCUAUCUUGtt（配列番号１１４）
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【配列表】
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