(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
直井白芝の培養菌糸体及び／又はその処理物から分離した水可溶性成分から成ることを特徴とする尿酸値上昇抑制剤。
【請求項２】
直井白芝の培養菌糸体及び／又はその処理物から分離した水可溶性成分を用いて成ることを特徴とする尿酸値上昇抑制用飲食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は尿酸値上昇抑制剤及び尿酸値上昇抑制作用を有する飲食品に関する。近年、生活が豊かになり、プリン体（核蛋白）を多く含む肉類、レバー、いわし、干し椎茸、真あじ干物、真がき、するめいか、車海老、大豆等、またアルコール、特にビール等を大量に長期間摂取するようになってきている。このような食物に由来する外因性の高プリン体や高カロリーの過剰摂取が、肥満や痛風の原因となり、血中や尿中の尿酸値を上昇させることが問題視されている。本発明は、かかる尿酸値の上昇を抑制する尿酸値上昇抑制剤及び飲食品に関し、更に詳しくは直井白芝の子実体、直井白芝の培養菌糸体及び／又はこれらの処理物から分離した水可溶性成分を活性成分とする尿酸値上昇抑制剤及びかかる水可溶性成分を含有する尿酸値上昇抑制作用を有する飲食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、尿酸値上昇抑制剤については多くの報告がある（例えば、特許文献１〜３参照）。また霊芝についても、これに含まれる成分の中性脂肪蓄積抑制作用、高血圧抑制作用、抗癌作用等について多くの報告がある（例えば、特許文献４〜６及び非特許文献１参照）。更に直井霊芝については、３種類の子実体の混合物から分離した水可溶性成分に、尿酸値上昇抑制作用のあることが報告されている（例えば、特許文献７）。しかし、特許文献７のような従来の報告には、尿酸値上昇抑制作用があるとはいうものの、使用量の割にはその効果が低いという問題がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００９−１４３８２０号公報
【特許文献２】特開２０１０−１７３９６８号公報
【特許文献３】特開２０１１−０１２０２２号公報
【特許文献４】特開２００７−０６３２０６号公報
【特許文献５】特開２００８−２５５０４１号公報
【特許文献６】特開２０１１−０９８９２２号公報
【特許文献７】特開２０１３−１４２０７４号公報
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｍｉｅ  Ｍｅｄ．Ｊ．２６，１４７−１５２（１９７７）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、前記した従来の報告より使用量が少なくても、発現する効果が著しく高い尿酸値上昇抑制剤及び尿酸値上昇抑制作用を有する飲食品を提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
しかして本発明者らは、品種が分類固定されている直井霊芝に着目して新規の尿酸値上昇抑制剤及び尿酸値上昇抑制作用を有する飲食品を得るべく研究した結果、直井霊芝のなかでも直井白芝の子実体、直井白芝の培養菌糸体及び／又はこれらの処理物から分離した水可溶性成分が正しく好適であり、最も簡便にはかかる水可溶性成分を飲食品に用い得ることを見出した。
【０００７】
すなわち本発明は、直井白芝の子実体、直井白芝の培養菌糸体及び／又はこれらの処理物から分離した水可溶性成分から成ることを特徴とする尿酸値上昇抑制剤に係る。また本発明は、直井白芝の子実体、直井白芝の培養菌糸体及び／又はこれらの処理物から分離した水可溶性成分を用いて成ることを特徴とする尿酸値上昇抑制作用を有する飲食品に係る。
【０００８】
本発明では、原料として、品種が分離固定されている直井霊芝のなかでも、直井白芝の子実体、直井白芝の培養菌糸体及び／又はこれらの処理物を用いる。サルノコシカケ科のマンネンタケ（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｄｕｍ）の子実体である霊芝は、その色の違いによって赤芝、黒芝、青芝、白芝、黄芝、紫芝等、多種類に区別されている。これらのなかで、直井霊芝は、直井幸男により、五岳霊芝ＧＹ（瑶輪）系に属し、品種が分類固定されている霊芝であるが、本発明では、かかる直井霊芝のなかでも直井白芝を用いる。直井白芝それ自体は、独立行政法人製品評価技術基盤機構の特許微生物寄託センターに寄託されている（識別の表示：ＧＹＧ２０１３、受託番号：ＮＩＴＥ  Ｐ−０１７５８）。本発明において原料として用いるのは、かかる直井白芝の子実体、直井白芝の培養菌糸体及び／又はこれらの磨砕物、その乾燥物又はその乾燥粉砕物等の処理物である。
【０００９】
詳しくは実施例の欄で後述するように、直井白芝の子実体、直井白芝の培養菌糸体及び／又はこれらの処理物から分離した水可溶性成分は、直井赤芝や直井黄芝等、他の直井霊芝の子実体等から分離した水可溶性成分に比べ、少ない使用量で著しく高い尿酸性上昇抑制作用を示す。
【００１０】
本発明では直井白芝の子実体、直井白芝の培養菌糸体及び／又はこれらの処理物を水抽出する。用いる水は、冷水でもよいが、４０〜８０℃程度の温水が好ましく、９０℃以上の熱水がより好ましい。抽出は、直井白芝の子実体、直井白芝の培養菌糸体及び／又はこれらの処理物に少なくともこれらが浸漬される程度の水を加えて加熱するか又は熱水を加え、緩やかに撹拌しながら９０℃以上の温度で数時間行なうのが好ましい。かくして水抽出した後、全体を濾過又は遠心分離すると、抽出液が得られる。目的とする活性成分の水可溶性成分はこの抽出液に含まれてくる。かかる抽出液はそのままでも使用することができるが、その減圧濃縮液又はその凍結乾燥物を使用するのが好ましい。
【００１１】
直井白芝の子実体の乾燥粉砕物に少なくともこれが浸漬される程度の水を加え、緩やかに撹拌しながら加熱して、９０℃で２時間熱水抽出し、遠心分離して熱水抽出液を得た後、この熱水抽出液を減圧濃縮し、更に凍結乾燥して得られる水可溶性成分は、その一例を挙げると、次のような化学的組成を有する。粗灰分２．１％（質量％、以下同じ）、粗蛋白７．４％、粗脂質３．０％、粗繊維３５．１％、可溶性炭水化物２０．４％、水溶性全糖３０．７％、エルゴステロール１．３％。
【００１２】
直井白芝の子実体の乾燥粉砕物から熱水抽出した前記の水可溶性成分について、エタノール沈澱、透析、イオン交換クロマト法により分画と精製を繰り返して得られる水溶性の多糖体は、ガラクトース、マンノース、アラビノース等を含むヘテロ糖鎖を有するグルカンであり、このグルカンは、ＩＲスペクトル、ＮＭＲ及び比旋光度測定のデータからα−グルカンの一種であった。
【００１３】
前記のような化学的組成及び多糖体組成を有する水可溶性成分は一定の分解点、融点を示さず、強熱により炭化するが、著しく安定である。室温では少なくとも１年間は安定であり、１２０℃×１０分間の滅菌処理を行なっても活性の低下は殆ど見られない。
【００１４】
本発明は以上説明したような水可溶性成分から成る尿酸値上昇抑制剤に係り、またかかる水可溶性成分を用いて成る尿酸値上昇抑制作用を有する飲食品に係る。本発明に係る尿酸値上昇抑制剤を最も簡便に経口投与する方法はかかる水可溶性成分を飲食品として供する方法である。
【００１５】
直井白芝の子実体、直井白芝の培養菌糸体及び／又はこれらの処理物から分離した水可溶性成分を飲食品として供する方法には下記のような各種の方法がある。
１）前記したような熱水抽出液、その濃縮液又はその凍結乾燥物をそのままふりかけとして、又はティーパックやカプセルの中に充填して使用する方法。
２）前記したような熱水抽出液又は減圧濃縮液に糖類、酸類、塩類及び香料類等を調合して使用する方法。
３）前記したような熱水抽出液、その減圧濃縮液又はその凍結乾燥物をベイク品、発酵品、練り製品、乳製品、油脂製品、調味料、菓子等の食品、又はコーヒー、ココア、茶、果実ジュース、野菜ジュース、発酵飲料、清涼飲料等の飲料の製造工程で添加して使用する方法。
【発明の効果】
【００１６】
本発明によると、少量の経口投与により高い尿酸値上昇抑制作用を示し、その具体的使用に際して誠に簡便であるという効果がある。
【実施例】
【００１７】
試験区分１（活性成分である水可溶性成分の分離）
実施例１
直井白芝の子実体の乾燥粉砕物３００ｇに精製水３０００ｍｌを加え、緩やかに撹拌しながら、還流下に９５℃で２時間熱水抽出した後、１２０００ｒｐｍで１０分間遠心分離して熱水抽出液を得た。得られた熱水抽出液を４０℃で減圧濃縮し、更に凍結乾燥して、水可溶性成分を得た（収率１５．１％）。
【００１８】
実施例２
直井白芝の種菌を、ブドウ糖、麦芽エキス及び寒天等を用いて調製したｐＨ６．８の液体培地に接種し、ジャーファーヌンターを用い、２８℃で１４時間、通気培養した後、濾過して、培養菌糸体を得た（収率３．８ｇ／Ｌ）。この培養菌糸体に５倍量の精製水を加え、緩やかに撹拌しながら、還流下に９５℃で２時間熱水抽出した後、濾過して、熱水抽出液を得た。この熱水抽出液を加熱して７倍に濃縮し、冷却した後、等量のエタノールを加え、８０００ｒｐｍで２０分間遠心分離して、エタノール沈殿物を分離し、更に凍結乾燥して、水可溶性成分を得た（収率８９８ｍｇ／Ｌ）。
【００１９】
参考例１
直井赤芝、直井黄芝及び直井白芝の各子実体の乾燥粉砕物を等量混合したもの３００ｇに精製水３００ｍｌを加え、緩やかに撹拌しながら、還流下に９５℃で２時間熱水抽出した後、１２０００ｒｐｍで１０分間遠心分離して熱水抽出液を得た。得られた熱水抽出液を４０℃で減圧濃縮し、更に凍結乾燥して、水可溶性成分を得た（収率１３．５％）。
【００２０】
試験区分２（食餌性高尿酸値ラットの作製）
供試したＳｌｃ：Ｗｉｓｔａｒ雄ラット（日本エスエルシー社製）は、４週齢で購入し、７日間の予備飼育の後、一般症状観察及び尿酸検査で異常が認められなかったラットを試験に供した。試験開始時のラットの体重は約１００ｇであった。ラットは温度２３±２℃、相対湿度５５±５％、１２時間暗照光、換気回数２０回／時、１２時間照明（午前７時点灯、午後７時消灯）のバリアシステムの環境下の飼育条件下で、１群５匹とし、プラスチックケージに５匹ずつ同居させて飼育した。食餌性高尿酸ラットを作製するための飼料は、クレア固型飼料（ＣＥ−７）粉末に１００％ビール酵母粉末（キリンヤクルトネクストステージ社製、蛋白質４９．３３％、核酸（ＲＮＡ）２．３３％、脂質４．４２％、糖質２．１７％、食物繊維４．１８％、その他、アミノ酸、ビタミン、ミネラルを含有）を２５％又は５０％となるよう配合し、蛋白質及び核酸含量の異なった配合飼料とした。前記のように各群５匹ずつ３群（ビール酵母粉末０％、２５％又は５０％の３群）に分け、６日間飼育し、飼料と水は自由に摂取させた。
【００２１】
尿の採取は飼育日数０日目（０〜１日）、２日目（１〜２日）、４日目（３〜４日）及び６日目（５〜６日）の午前９時から翌日午前９時までの２４時間行なった。各々トルエンを含む容器に採取した尿を５０〜１００倍に希釈し、その一定量につき尿中尿酸値の定量をした。また実験終了日（６日目）にラットをエーテルで軽麻酔し、心臓より採血した血液を遠心分離（３０００ｒｐｍ、１０分間）した血清を用いて血中（血漿）尿酸値の定量を行なった。
【００２２】
尿酸値の測定は、和光純薬工業社製の尿酸Ｃ−テストワコー（Ｌｏｔ  ＤＬ３１５）血清尿酸測定用キットを用いて、希釈尿、分離した血清１ｍｌを予備加温（３７℃、５分間）した後に、分解・発色試薬を３ｍｌ加え、３７℃で５分間加温し、分光光度計を用い、波長５５５ｎｍの吸光度によって尿酸値を求めた。分解・発色試薬にはウリカーゼ（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｃｔｅｒ属由来）０．０４単位／ｍｌ、ペルオキシダーゼ（西洋ワサビ由来）２．０単位／ｍｌ、４−アミノアンチピリン０．５９ｍｍｏｌ／ｌリポプロテインリパーゼ（Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属由来）３．９単位／ｍｌ、Ｎ−エチル−Ｎ（２−ヒドロキシ−３−スルフォプロピル）ｍ−トルイジンナトリウム（ＴＯＯＳ）０．５７ｍｍｏｌ／ｌ及びリン酸緩衝液（ｐＨ６．４）が含まれている。
【００２３】
測定値は平均値±標準偏差で示し、２群間の比較はＳｔｕｄｅｎｔ’ｓ  ｔ−ｔｅｓｔを用い、Ｐ＜０．０５を有意として＊印で示した。尿水尿酸値の測定結果を表１に示し、また血中尿酸値の測定結果を表２に示した。かっこ内の数値は上昇率を示している。
【００２４】
【表１】
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【００２５】
【表２】
0006660762.tif 000003
【００２６】
表２の尿中尿酸値の経時的変化を見ると、飼育日数０日目（０〜１日）における尿酸値の変動はほとんど認められないが、２日目で既に２５％及び５０％ビール酵母添加飼料群では、無添加飼料（ＣＥ−７）群と比較すると、それぞれ１７２．７％、２４２．１％と尿酸値が上昇した。そのレベルは以後も持続し、６日目では２５％ビール酵母添加飼料群で２６３．６％、５０％ビール酵母添加飼料群では４１５．８％と高尿酸値を示した。また表３の血中尿酸値を対照の無添加群と比較すると、２５％ビール酵母添加飼料群で１５８．６％、５０％ビール酵母添加飼料群では２１３．８％と血中尿酸値の上昇が認められた。以上の結果から、５０％ビール酵母添加飼料を６日間、経口投与することにより実験的・食餌性高尿酸ラットの作製が可能となった。
【００２７】
試験区分３（食餌性高尿酸ラットにおける尿中尿酸値及び血中尿酸値に対する水可溶性成分の作用）
試験区分２と同様にして前記のＣＥ−７粉末飼料に５０％ビール酵母粉末を配合し飼育するラットに、試験区分１で分離した実施例１、実施例２及び参考例１の水可溶性成分を表３及び表４に記載の割合で６日間、強制的に胃ゾンデにより経口投与し、尿中尿酸値を測定すると共に血中尿酸値を測定した。測定は試験区分２と同様に行ない、結果を表３及び表４に示した。
【００２８】
【表３】
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【００２９】
【表４】
0006660762.tif 000005
【００３０】
表３の尿中尿酸値の測定結果を見ると、参考例１の水可溶性成分の１５０、３００、４５０ｍｇ／ｋｇ／日の投与群では、１３．９％、２９．１％、３９．２％の上昇抑制であったが、実施例１の水可溶性成分の１００、２００、３００ｍｇ／ｋｇ／日の投与群では、３１．６％、４１．８％、５９．５％の上昇抑制を示しており、また実施例２の水可溶性成分の１５０、３００ｍｇ／ｋｇ／日の投与群では、２０．３％、４８．１％を示していて、実施例１及び２の水可溶性成分は参考例１の水可溶性成分に比べて、はるかに高い上昇抑制を示している。
【００３１】
また表４の血中尿酸値の測定結果を見ると、参考例１の水可溶性成分の１５０、３００、４５０ｍｇ／ｋｇ／日の投与群では、２２．６％、２９．０％、３８．７％の上昇抑制であったが、実施例１の水可溶性成分の１００、２００、３００ｍｇ／ｋｇ／日の投与群では、３３．９％、４１．９％、５３．２％の上昇抑制を示しており、また実施例２の水可溶性成分の１５０、３００ｍｇ／ｋｇ／日の投与群では、４０．３％、５８．１％を示していて、実施例１及び２の水可溶性成分は参考例１の水可溶性成分に比べて、はるかに高い上昇抑制を示している。
【００３２】
尚、別に行なったエームス尿検査試験紙による尿検査では、参考例１、実施例１及び実施例２の水可溶性成分を１０００ｍｇ／ｋｇ／日の割合で１０日間経口投与したいずれの投与群にも異常は認められなかった。
【００３３】
試験区分４（飲食品の製造）
実施例３
試験区分１の実施例２の場合と同様にして熱水抽出液を得た後、該熱水抽出液１ｋｇに砂糖１００ｇ、蜂蜜１５ｇ、カラメル５ｇ、アスコルビン酸０．７５ｇ、クエン酸０．３ｇ及びレモン系香料０．２ｇを調合し、健康飲料を製造した。
【００３４】
実施例４
試験区分１の実施例１の場合と同様にして熱水抽出液を得た後、該熱水抽出液を減圧濃縮し、凍結乾燥した凍結乾燥物１０ｇ及びアスコルビン酸０．５ｇをリンゴ搾汁液２ｋｇに調合してリンゴジュースを製造した。
【００３５】
実施例５
前記の実施例４の場合と同様にして凍結乾燥物を得た後、若干量の塩化カルシウム及び第三リン酸ナトリウムと共に該凍結乾燥物５ｇを、採肉し、水さらしして脱水した後、予冷した魚肉２ｋｇにそのすりつぶし工程で添加し、凍結して冷凍すり味を製造した。