(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験体におけるがんの結果の処置または改善における使用のための組成物であって、
式（Ｉ）：
【化１９】
0006786529.tif 000032
または薬学的に許容されるその塩の選択的ＰＩ３Ｋγ阻害剤である第１の薬剤と、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、ニボルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ペンブロリズマブ（Ｍｅｒｃｋ）、ピジリズマブ（Ｃｕｒｅｔｅｃｈ）、ＡＭＰ−２２４（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ／Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（Ｒｏｃｈｅ）、ＭＤＸ−１１０５（Ｍｅｄａｒｅｘ，Ｉｎｃ．／Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ−４７３６（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、アレルマブ（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ）、イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ、（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、トレメリムマブ（Ｐｆｉｚｅｒ）、ピジリズマブ（ＣｕｒｅＴｅｃｈ，Ｌｔｄ．）、ＩＭＰ３２１（Ｉｍｍｕｔｅｐ  Ｓ．Ａ．）、ＭＧＡ２７１（Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ）、ＢＭＳ−９８６０１６（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、リリルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ウレルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＰＦ−０５０８２５６６（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＩＰＨ２１０１（Ｉｎｎａｔｅ  Ｐｈａｒｍａ／Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ−６４６９（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＣＰ−８７０，８９３（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、モガムリズマブ（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｉｒｉｎ）、バルリルマブ（ＣｅｌｌＤｅｘ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、アベルマブ（ＥＭＤ  Ｓｅｒｏｎｏ）、ガリキシマブ（Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ）、ＡＭＰ−５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＡＵＮＰ  １２（Ａｕｒｉｇｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｉｅｒｒｅ  Ｆａｂｒｅ）、インドキシモド（ＮｅｗＬｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＮＬＧ−９１９（ＮｅｗＬｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＩＮＣＢ０２４３６０（Ｉｎｃｙｔｅ）およびこれらの組合せからなる群から選択される免疫チェックポイント阻害剤である第２の薬剤とを含む組成物。
【請求項２】
式（Ｉ）：
【化２１】
0006786529.tif 000033
または薬学的に許容されるその塩の選択的ＰＩ３Ｋγ阻害剤である第１の薬剤と、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、ニボルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ペンブロリズマブ（Ｍｅｒｃｋ）、ピジリズマブ（Ｃｕｒｅｔｅｃｈ）、ＡＭＰ−２２４（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ／Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（Ｒｏｃｈｅ）、ＭＤＸ−１１０５（Ｍｅｄａｒｅｘ，Ｉｎｃ．／Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ−４７３６（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、アレルマブ（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ）、イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ、（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、トレメリムマブ（Ｐｆｉｚｅｒ）、ピジリズマブ（ＣｕｒｅＴｅｃｈ，Ｌｔｄ．）、ＩＭＰ３２１（Ｉｍｍｕｔｅｐ  Ｓ．Ａ．）、ＭＧＡ２７１（Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ）、ＢＭＳ−９８６０１６（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、リリルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ウレルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＰＦ−０５０８２５６６（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＩＰＨ２１０１（Ｉｎｎａｔｅ  Ｐｈａｒｍａ／Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ−６４６９（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＣＰ−８７０，８９３（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、モガムリズマブ（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｉｒｉｎ）、バルリルマブ（ＣｅｌｌＤｅｘ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、アベルマブ（ＥＭＤ  Ｓｅｒｏｎｏ）、ガリキシマブ（Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ）、ＡＭＰ−５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＡＵＮＰ  １２（Ａｕｒｉｇｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｉｅｒｒｅ  Ｆａｂｒｅ）、インドキシモド（ＮｅｗＬｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＮＬＧ−９１９（ＮｅｗＬｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＩＮＣＢ０２４３６０（Ｉｎｃｙｔｅ）およびこれらの組合せからなる群から選択される免疫チェックポイント阻害剤である第２の薬剤とを、これらの使用のための指示とともに含む、がんの結果の処置または改善における使用のためのキット。
【請求項３】
式（Ｉ）の前記選択的ＰＩ３Ｋγ阻害剤が、実質的に純粋なそのＲ−エナンチオマー、実質的に純粋なそのＳ−エナンチオマー、ならびに該Ｒ−エナンチオマーおよびＳ−エナンチオマーのラセミ混合物からなる群から選択される、請求項１に記載の使用のための組成物または請求項２に記載のキット。
【請求項４】
式（Ｉ）の前記選択的ＰＩ３Ｋγ阻害剤が、実質的に純粋なＲ−エナンチオマー：
【化２０】
0006786529.tif 000034
または薬学的に許容されるその塩である、請求項３に記載の使用のための組成物またはキット。
【請求項５】
前記免疫チェックポイント阻害剤が、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される、請求項１に記載の使用のための組成物または請求項２に記載のキット。
【請求項６】
前記免疫チェックポイント阻害剤が、ニボルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ペンブロリズマブ（Ｍｅｒｃｋ）、ピジリズマブ（Ｃｕｒｅｔｅｃｈ）、ＡＭＰ−２２４（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ／Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（Ｒｏｃｈｅ）、ＭＤＸ−１１０５（Ｍｅｄａｒｅｘ，Ｉｎｃ．／Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ−４７３６（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、アレルマブ（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ）、イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ、（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、トレメリムマブ（Ｐｆｉｚｅｒ）、ピジリズマブ（ＣｕｒｅＴｅｃｈ，Ｌｔｄ．）、ＩＭＰ３２１（Ｉｍｍｕｔｅｐ  Ｓ．Ａ．）、ＭＧＡ２７１（Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ）、ＢＭＳ−９８６０１６（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、リリルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ウレルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＰＦ−０５０８２５６６（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＩＰＨ２１０１（Ｉｎｎａｔｅ  Ｐｈａｒｍａ／Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ−６４６９（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＣＰ−８７０，８９３（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、モガムリズマブ（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｉｒｉｎ）、バルリルマブ（ＣｅｌｌＤｅｘ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、アベルマブ（ＥＭＤ  Ｓｅｒｏｎｏ）、ガリキシマブ（Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ）、ＡＭＰ−５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＡＵＮＰ  １２（Ａｕｒｉｇｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｉｅｒｒｅ  Ｆａｂｒｅ）、インドキシモド（ＮｅｗＬｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＮＬＧ−９１９（ＮｅｗＬｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＩＮＣＢ０２４３６０（Ｉｎｃｙｔｅ）およびこれらの組合せからなる群から選択される、請求項１に記載の使用のための組成物または請求項２に記載のキット。
【請求項７】
前記第１および第２の薬剤が、単一の単位用量として投与されることとなる、または前記第１および第２の薬剤が、共投与されることとなる、請求項１に記載の使用のための組成物または請求項２に記載のキット。
【請求項８】
請求項２に記載のキットであって、がんの処置における使用のためのキット。
【請求項９】
前記がんが、膀胱がん、乳がん、子宮頸部がん、結腸がん、食道がん、子宮内膜がん、胃がん、神経膠芽腫、頭部および頸部がん、肝細胞癌、白血病、肺がん、リンパ腫、黒色腫、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、神経内分泌がん、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、腎細胞癌、ラブドイドがん、肉腫および尿路がんからなる群から選択される、請求項１に記載の使用のための組成物、または請求項２に記載のキット。
【請求項１０】
前記がんが、膀胱がん、結腸がん、肺がん、リンパ腫、および膵臓がんからなる群から選択される、請求項１に記載の使用のための組成物、または請求項２に記載のキット。
【請求項１１】
前記被験体が、哺乳動物であり、該哺乳動物が、好ましくは、ヒト、霊長動物、農場動物、および飼育動物からなる群から選択され、該哺乳動物が、より好ましくは、ヒトである、請求項１に記載の使用のための組成物。
【請求項１２】
薬学的に許容できるキャリアまたは希釈剤をさらに含む医薬組成物である、請求項１に記載の使用のための組成物。
【請求項１３】
前記第１および第２の薬剤が、別個の単位剤形中にある、または前記第１および第２の薬剤が、単一の単位剤形中にある、請求項１に記載の使用のための組成物、または請求項２に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２０１５年６月２９日に出願された米国仮出願第６２／１８６，１５７号の利益を主張する。上記出願の内容全体は、本明細書に全体が引用されるように、参照によって組み込まれる。
【０００２】
本開示は、一般に、がんおよびがん治療の分野に関する。より具体的には、本開示は、がんの処置のためのＰＩ３Ｋγ阻害剤と少なくとも１種の免疫チェックポイント阻害剤との組合せを含む組成物および方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
がんと炎症の間には周知の関連がある。慢性の炎症性疾患は、腫瘍を発症するリスクを増大させることが公知であり、腫瘍は、免疫系による検出および破壊を避けるために複数の炎症反応を誘発する（Pardoll、２０１２年；Grivennikovら、２０１０年）。がんは、血管新生、免疫抑制および転移を促進する、調節性免疫系のメカニズムを利用することができる（Duら、２００８年；Linら、２００６年；Bronteら、２０００年；Buntら、２００６年；Kimら、２００９年）。これらの調節メカニズムとしては、骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）および免疫チェックポイント経路の活性化が挙げられる（Kormanら、２００６年；Nagarajら、２０１３年；TalmadgeおよびGabrilovich、２０１３年）。
【０００４】
ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ−１（ＰＤ１）および細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原−４（ＣＴＬＡ−４）に対する抗体を使用する、これらの受容体を含む免疫チェックポイントの破壊は、最近の臨床試験において、患者のサブセットで有望な応答を示した（Hodiら、２０１０年；Topalianら、２０１２年；Brahmerら、２０１２年；Wolchokら、２０１３年）。しかしながら、これらの試験における患者および腫瘍型の大半は、この免疫療法に無応答のままである。Kimら（２０１４年）による研究は、ＭＤＳＣの上昇したレベルが、ＣＤ８＋Ｔ細胞の機能を直接阻害することにより、チェックポイント阻害剤による処置を妨害しうることを示した。先に、自然発生乳がんのモデルにおいて、ＰＩ３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）アイソフォームｐ１１０γの遮断が、ＭＤＳＣを抑制することにより腫瘍の炎症、成長および転移を阻害しうることが報告された（Schmid、２０１１年）。
【０００５】
１つの報告によって、ｐａｎ−ＰＩ３Ｋ阻害剤とＰＤ１／ＣＴＬＡ４に対する免疫チェックポイントブロッカーとの間の相乗作用の証拠が提供される（Kimら、２０１４年）。その報告は、同系マウス乳房腫瘍モデルおよび結腸腫瘍モデルにおいて、ＰＩ３Ｋの阻害を介するＭＤＳＣの低減が、チェックポイントの遮断との相乗作用に寄与することを実証した。ｐａｎ−ＰＩ３Ｋ阻害剤は、最近、臨床試験において試験されたが、これらはすべてのＰＩ３Ｋアイソフォームを広く阻害し、多くの有害な副作用を有することが示された（ClearyおよびShapiro、２０１０年）。
【０００６】
上述のことを考慮すると、免疫チェックポイントの遮断の間にＭＤＳＣを低減するための、新しくより優れた組成物の開発が必要とされている。本発明は、これらの必要および他の必要を満たすことを対象とする。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
特定の理論に拘束されることを望むものではないが、ｐａｎ−ＰＩ３Ｋ分子は、ＰＩ３Ｋγアイソフォームによるシグナル伝達の破壊によりＭＤＳＣを低減すると考えられている。ＰＩ３Ｋγ阻害剤は、腫瘍細胞に直接的に影響を及ぼすことなく、腫瘍の炎症および血管新生を阻害することによって、腫瘍の成長を遮断することができる（Schmidら、２０１１年）。本発明において、選択的ＰＩ３Ｋγ阻害剤を、免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて、相乗的抗腫瘍効果を生じさせる。
【０００８】
したがって、本発明は、被験体における障害の結果（effect）を処置または改善するための方法であって、有効量の式（Ｉ）：
【化１】
0006786529.tif 000002
の化合物または薬学的に許容されるその塩である第１の薬剤と、免疫チェックポイント阻害剤である第２の薬剤とを被験体に投与するステップを含む方法を提供する。
【０００９】
本発明は、被験体におけるがんの結果を処置または改善するための方法であって、有効量の式（Ｉ）：
【化２】
0006786529.tif 000003
の化合物または薬学的に許容されるその塩を被験体に投与するステップを含む方法も提供する。
【００１０】
本発明は、がんの間質微小環境を調節するための方法であって、がんの間質微小環境を、式（Ｉ）：
【化３】
0006786529.tif 000004
の化合物または薬学的に許容される塩と接触させるステップを含む方法も提供する。
【００１１】
本発明は、被験体における障害の結果を処置または改善するための組成物であって、式（Ｉ）：
【化４】
0006786529.tif 000005
の化合物または薬学的に許容されるその塩である第１の薬剤と、免疫チェックポイント阻害剤である第２の薬剤とを含む組成物も提供する。
【００１２】
本発明は、式（Ｉ）：
【化５】
0006786529.tif 000006
の化合物または薬学的に許容されるその塩である第１の薬剤と、免疫チェックポイント阻害剤である第２の薬剤とを、これらの使用のための指示とともに含むキットも提供する。
【００１３】
以下の図面は、本明細書の一部を形成し、本発明のある特定の態様をさらに示すために組み入れられる。本発明は、本明細書で提示される具体的な実施形態についての詳細な記載と組み合わせて、これらの図面のうちの１または複数を参照することにより、よりよく理解することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１は、インタクトな免疫系を有する同系マウス結腸がんモデル（Ｃｏｌｏｎ２６）におけるビヒクルおよびチェックポイント阻害剤対照群についての腫瘍体積中央値のグラフを示す。５７日間の処置についてのデータを示す。第１群のマウス（ｎ＝１０）に、ビヒクルを３日目からエンドポイントまで１日２回経口で、および、ハムスターポリクローナルＩｇＧを腹腔内に（ｉ．ｐ．）（１００μｇ／動物、８日目；５０μｇ／動物、１１および１４日目）与えた。第２群（ｎ＝１０）は、抗ＣＴＬＡ−４をｉ．ｐ．で受けた（１００μｇ／動物、８日目；５０μｇ／動物、１１および１４日目）。第３群（ｎ＝１０）は、抗ＰＤ−１をｉ．ｐ．で受けた（３日目から開始して、週に２回、１００μｇ／動物）。第４群（ｎ＝５）は、抗ＰＤ−１をｉ．ｐ．で（３日目から開始して、週に２回、１００μｇ／動物）および抗ＣＴＬＡ−４をｉ．ｐ．で（１００μｇ／動物、８日目；５０μｇ／動物、１１および１４日目）受けた。
【００１５】
【図２】図２は、Ｃｏｌｏｎ２６マウスにおける、７５日間までの処置についての平均腫瘍体積のグラフを示す。第１〜４群は、比較のために図１から繰り返した対照群である。第１１群のマウスに、ＬＰＴ−７２３（ＭＲ２３７）を３日目からエンドポイントまで１日２回、１０ｍｇ／ｋｇ、経口で与えた。第１２群のマウスに、ＬＰＴ−７２３を３日目からエンドポイントまで１日２回、３０ｍｇ／ｋｇ、経口で与えた。第１３群は、ＬＰＴ−７２３を３日目からエンドポイントまで１日２回、１０ｍｇ／ｋｇ、経口で、および抗ＣＴＬＡ−４をｉ．ｐ．で（１００μｇ／動物、８日目；５０μｇ／動物、１１および１４日目）受けた。第１４群は、ＬＰＴ−７２３を３日目からエンドポイントまで１日２回、３０ｍｇ／ｋｇ、経口で、および抗ＣＴＬＡ−４をｉ．ｐ．で（１００μｇ／動物、８日目；５０μｇ／動物、１１および１４日目）受けた。第１５群は、ＬＰＴ−７２３を３日目からエンドポイントまで１日２回、１０ｍｇ／ｋｇ、経口で、および抗ＰＤ−１をｉ．ｐ．で（３日目から開始して、週に２回、１００μｇ／動物）受けた。第１６群は、ＬＰＴ−７２３を３日目からエンドポイントまで１日２回、３０ｍｇ／ｋｇ、経口で、および抗ＰＤ−１をｉ．ｐ．で（３日目から開始して、週に２回、１００μｇ／動物）受けた。すべての群についてＮ＝１０。
【００１６】
【図３】図３は、７５日間の処置についての、第１〜３群および第１１〜１６群のＫａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒ生存プロットを示す。第１３〜１６群は、ＬＰＴ−７２３および免疫チェックポイント阻害剤抗体を受け、グラフでは矢印で強調される。グラフは、生存している動物のパーセンテージを示し、いずれかの処置単独では存在しない、ＬＰＴ−７２３とチェックポイント阻害剤抗体との間の相乗作用の証拠を提供する。
【００１７】
【図４】図４は、試験の経過の間の、第２群からの個別の動物における腫瘍体積を示すグラフである。これらの動物は、抗ＣＴＬＡ−４をｉ．ｐ．で（１００μｇ／動物、８日目；５０μｇ／動物、１１および１４日目）受けた。
【００１８】
【図５】図５は、試験の経過の間の、第３群からの個別の動物における腫瘍体積を示すグラフである。これらの動物は、抗ＰＤ−１をｉ．ｐ．で（３日目に開始して、週に２回、１００μｇ／動物）受けた。
【００１９】
【図６】図６は、試験の経過の間の、第４群からの個別の動物における腫瘍体積を示すグラフである。これらの動物は、抗ＣＴＬＡ−４をｉ．ｐ．で（１００μｇ／動物、８日目；５０μｇ／動物、１１および１４日目）および抗ＰＤ−１をｉ．ｐ．で（３日目に開始して、週に２回、１００μｇ／動物）受けた。
【００２０】
【図７】図７は、試験の経過の間の、第１１群からの個別の動物における腫瘍体積を示すグラフである。これらの動物は、ＬＰＴ−７２３を３日目からエンドポイントまで１日２回、１０ｍｇ／ｋｇ、経口で受けた。
【００２１】
【図８】図８は、試験の経過の間の、第１２群からの個別の動物における腫瘍体積を示すグラフである。これらの動物は、ＬＰＴ−７２３を３日目からエンドポイントまで１日２回、３０ｍｇ／ｋｇ、経口で受けた。
【００２２】
【図９】図９は、試験の経過の間の、第１３群からの個別の動物における腫瘍体積を示すグラフである。これらの動物は、ＬＰＴ−７２３を３日目からエンドポイントまで１日２回、１０ｍｇ／ｋｇ、経口で、抗ＣＴＬＡ−４をｉ．ｐ．で（１００μｇ／動物、８日目；５０μｇ／動物、１１および１４日目）受けた。
【００２３】
【図１０】図１０は、試験の経過の間の、第１４群からの個別の動物における腫瘍体積を示すグラフである。これらの動物は、ＬＰＴ−７２３を３日目からエンドポイントまで１日２回、３０ｍｇ／ｋｇ、経口で、抗ＣＴＬＡ−４をｉ．ｐ．で（１００μｇ／動物、８日目；５０μｇ／動物、１１および１４日目）受けた。
【００２４】
【図１１】図１１は、試験の経過の間の、第１５群からの個別の動物における腫瘍体積を示すグラフである。これらの動物は、ＬＰＴ−７２３を３日目からエンドポイントまで１日２回、１０ｍｇ／ｋｇ、経口で、抗ＰＤ−１をｉ．ｐ．で（３日目に開始して、週に２回、１００μｇ／動物）受けた。
【００２５】
【図１２】図１２は、試験の経過の間の、第１６群からの個別の動物における腫瘍体積を示すグラフである。これらの動物は、ＬＰＴ−７２３を３日目からエンドポイントまで１日２回、１０ｍｇ／ｋｇ、経口で、抗ＰＤ−１をｉ．ｐ．で（３日目に開始して、週に２回、１００μｇ／動物）受けた。
【００２６】
【図１３】図１３は、治療的Ｃｏｌｏｎ２６がんモデルにおける１５日間にわたる腫瘍体積中央値を示す。紫色の線は、ＬＰＴ−７２３（１日目に開始して１日２回、３０ｍｇ／ｋｇ）および抗ＰＤ−１抗体の組合せの相乗効果を実証する。１群当たりＮ＝１０匹の動物。
【００２７】
【図１４】図１４は、Ｌｅｗｉｓ肺がん（ＬＬＣ）同系マウスモデルにおける腫瘍体積中央値のグラフである。抗ＰＤ１と組み合わせたＬＰＴ−７２３（２日目に開始して、１日２回、３０ｍｇ／ｋｇ）は、抗ＰＤ−１単独と比較して有意に腫瘍成長を阻害した。１群当たりＮ＝１０匹の動物。
【００２８】
【図１５】図１５は、ＬＬＣ同系マウスモデルにおける腫瘍体積中央値のグラフである。抗ＣＴＬＡ−４と組み合わせたＬＰＴ−７２３（２日目に開始して、１日２回、３０ｍｇ／ｋｇ）は、抗ＣＴＬＡ−４単独と比較して有意に腫瘍成長を阻害した。１群当たりＮ＝１０匹の動物。
【００２９】
【図１６−１】図１６Ａ〜図１６Ｂは、Ｐａｎ０２膵臓がん同系マウスモデルにおけるＬＰＴ−７２３の効果を示す。図１６Ａは、ＬＰＴ−７２３単独療法および抗ＰＤ−１との併用療法についての、２４日間にわたる腫瘍体積中央値を示すグラフである。第１群（ビヒクル）は、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）を毎週２回、ｉ．ｐ．で、および、脱イオン（ＤＩ）水中、０．２％  ＭＣ／１％  ＳＬＳを毎日２回、経口で受けた。第２群は、抗ＰＤ−１を毎週２回、ｉ．ｐ．で１０ｍｇ／ｋｇ受けた。第３群は、ＬＰＴ−７２３を１日２回、口から３０ｍｇ／ｋｇ受けた。第４群は、上記用量で、ＬＰＴ−７２３および抗ＰＤ−１を受けた。体重の有意な変化はなかった。１群当たりＮ＝１０匹の動物。図１６Ｂは、ＬＰＴ−７２３が直接的にＰａｎ０２細胞を殺滅しないこと（ＩＣ５０＝２６．５７μＭ）を示す、ｉｎ  ｖｉｔｒｏの細胞生存アッセイを示す。
【図１６−２】図１６Ａ〜図１６Ｂは、Ｐａｎ０２膵臓がん同系マウスモデルにおけるＬＰＴ−７２３の効果を示す。図１６Ａは、ＬＰＴ−７２３単独療法および抗ＰＤ−１との併用療法についての、２４日間にわたる腫瘍体積中央値を示すグラフである。第１群（ビヒクル）は、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）を毎週２回、ｉ．ｐ．で、および、脱イオン（ＤＩ）水中、０．２％  ＭＣ／１％  ＳＬＳを毎日２回、経口で受けた。第２群は、抗ＰＤ−１を毎週２回、ｉ．ｐ．で１０ｍｇ／ｋｇ受けた。第３群は、ＬＰＴ−７２３を１日２回、口から３０ｍｇ／ｋｇ受けた。第４群は、上記用量で、ＬＰＴ−７２３および抗ＰＤ−１を受けた。体重の有意な変化はなかった。１群当たりＮ＝１０匹の動物。図１６Ｂは、ＬＰＴ−７２３が直接的にＰａｎ０２細胞を殺滅しないこと（ＩＣ５０＝２６．５７μＭ）を示す、ｉｎ  ｖｉｔｒｏの細胞生存アッセイを示す。
【００３０】
【図１７−１】図１７Ａ〜図１７Ｂは、Ａ２０リンパ腫がん同系モデルにおけるＬＰＴ−７２３単独療法および併用療法を示す。図１７Ａは、図１６におけるマウスと同じ投薬スケジュールの第１〜４群についての腫瘍体積中央値を示す。体重の有意な変化はなかった。１群当たりＮ＝１０匹の動物。図１７Ｂは、ＬＰＴ−７２３が直接的にＡ２０細胞を殺滅しないこと（ＩＣ５０＝８４．１μＭ）を示す、ｉｎ  ｖｉｔｒｏの細胞生存アッセイを示す。
【図１７−２】図１７Ａ〜図１７Ｂは、Ａ２０リンパ腫がん同系モデルにおけるＬＰＴ−７２３単独療法および併用療法を示す。図１７Ａは、図１６におけるマウスと同じ投薬スケジュールの第１〜４群についての腫瘍体積中央値を示す。体重の有意な変化はなかった。１群当たりＮ＝１０匹の動物。図１７Ｂは、ＬＰＴ−７２３が直接的にＡ２０細胞を殺滅しないこと（ＩＣ５０＝８４．１μＭ）を示す、ｉｎ  ｖｉｔｒｏの細胞生存アッセイを示す。
【００３１】
【図１８−１】図１８Ａ〜図１８Ｂは、ＭＢＴ−２膀胱がん同系モデルにおけるＬＰＴ−７２３単独療法および併用療法を示す。図１８Ａは、図１６におけるマウスと同じ投薬スケジュールの第１〜４群についての腫瘍体積中央値を示す。体重の有意な変化はなかった。１群当たりＮ＝１０匹の動物。図１８Ｂは、ＬＰＴ−７２３が直接的にＭＢＴ−２細胞を殺滅しないこと（ＩＣ５０＝４５．４９μＭ）を示す、ｉｎ  ｖｉｔｒｏの細胞生存アッセイを示す。
【図１８−２】図１８Ａ〜図１８Ｂは、ＭＢＴ−２膀胱がん同系モデルにおけるＬＰＴ−７２３単独療法および併用療法を示す。図１８Ａは、図１６におけるマウスと同じ投薬スケジュールの第１〜４群についての腫瘍体積中央値を示す。体重の有意な変化はなかった。１群当たりＮ＝１０匹の動物。図１８Ｂは、ＬＰＴ−７２３が直接的にＭＢＴ−２細胞を殺滅しないこと（ＩＣ５０＝４５．４９μＭ）を示す、ｉｎ  ｖｉｔｒｏの細胞生存アッセイを示す。
【００３２】
【図１９−１】図１９Ａ〜図１９Ｂは、ビヒクルおよびＬＰＴ−７２３（３０ｍｇ／ｋｇ）のみを用いて試験したＨＣＴ１１６結腸異種移植モデルにおけるＬＰＴ−７２３単独療法を示す。ｉｎ  ｖｉｔｒｏで培養中のＨＣＴ１１６細胞に対しては、３０μＭまでＬＰＴ−７２３は活性がなかったが（図１９Ｂ）、ＬＰＴ−７２３単独療法の活性は、４５％の腫瘍成長阻害を実証した（図１９Ａ）。腫瘍成長阻害の結果は、ＬＰＴ−７２３が、直接的な腫瘍細胞効果を介して作用するのではなく、腫瘍間質微小環境を調節することを示唆する。
【図１９−２】図１９Ａ〜図１９Ｂは、ビヒクルおよびＬＰＴ−７２３（３０ｍｇ／ｋｇ）のみを用いて試験したＨＣＴ１１６結腸異種移植モデルにおけるＬＰＴ−７２３単独療法を示す。ｉｎ  ｖｉｔｒｏで培養中のＨＣＴ１１６細胞に対しては、３０μＭまでＬＰＴ−７２３は活性がなかったが（図１９Ｂ）、ＬＰＴ−７２３単独療法の活性は、４５％の腫瘍成長阻害を実証した（図１９Ａ）。腫瘍成長阻害の結果は、ＬＰＴ−７２３が、直接的な腫瘍細胞効果を介して作用するのではなく、腫瘍間質微小環境を調節することを示唆する。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
本発明の一実施形態は、被験体における障害の結果を処置または改善するための方法であって、有効量の式（Ｉ）：
【化６】
0006786529.tif 000007
の化合物または薬学的に許容されるその塩である第１の薬剤と、免疫チェックポイント阻害剤である第２の薬剤とを被験体に投与するステップを含む方法である。
【００３４】
本明細書で使用される「〜を処置する」、「〜を処置すること」、「処置」という用語、およびこれらの文法的変化形は、個別の被験体を、その被験体、例えば、患者における生理学的応答または生理学的転帰を得ることが所望される、プロトコール、レジメン、プロセス、または治療に供することを意味する。特に、本発明の方法および組成物を使用して、疾患症状の発症を緩徐化するか、または疾患もしくは状態の発症を遅延させるか、または疾患発症の進行を止めることができる。しかし、処置されたどの被験体も、特定の処置プロトコール、処置レジメン、処置過程、または処置治療に応答しない場合があるため、処置することは、所望の生理学的応答または生理学的転帰が、各被験体において、かつ、どの被験体においても、または被験体集団、例えば、患者集団においても達成されることを必要としない。したがって、所与の被験体または被験体集団、例えば、患者集団は、処置に応答しない場合もあり、処置への応答が不十分な場合もある。
【００３５】
本明細書で使用される「〜を改善する」、「〜を改善すること」という用語、およびこれらの文法的変化形は、被験体における疾患の症状の重症度を低下させることを意味する。
【００３６】
本発明の組合せに関して本明細書で使用される「投与すること」、「投与」という用語、およびこれらの変形（特に、化合物を「投与すること」）は、このような処置を必要とする、ヒトなどの被験体の体の中へ成分を導入することを意味する。
【００３７】
このおよび他の実施形態の一部の態様では、第１および第２の薬剤は単一の単位用量として投与される。他の態様では、第１および第２の薬剤は、共投与される。さらに他の態様では、第１の薬剤は、第２の薬剤の前に投与される。さらに他の態様では、第２の薬剤は、第１の薬剤の前に投与される。
【００３８】
このおよび他の実施形態の一部の態様では、第１および第２の薬剤の被験体への投与は、障害の処置において相乗効果を提供する。
【００３９】
本明細書で使用される「被験体」とは、哺乳動物、好ましくは、ヒトである。ヒトに加えて、本発明の範囲内の哺乳動物の類別は、例えば、農場動物（ｆａｒｍ  ａｎｉｍａｌ）、家庭動物（ｄｏｍｅｓｔｉｃ  ａｎｉｍａｌ）、実験動物などを含む。農場動物の一部の例は、ウシ、ブタ、ウマ、ヤギなどを含む。家庭動物の一部の例は、イヌ、ネコなどを含む。実験動物の一部の例は、霊長動物、ラット、マウス、ウサギ、モルモットなどを含む。
【００４０】
このおよび他の実施形態の一部の態様では、被験体は哺乳動物である。好ましくは、哺乳動物は、ヒト、霊長動物、農場動物および飼育動物からなる群から選択される。より好ましくは、哺乳動物はヒトである。
【００４１】
本発明において、本明細書で開示される薬剤、モノクローナル抗体もしくはその断片または化合物または組成物の「有効量」または「治療有効量」は、被験体に投与された場合に、本明細書で記載されている、有益な結果または所望の結果をもたらすのに十分な、このような材料の量である。有効な剤形、投与方式および投与量は、経験的に決定することができ、このような決定を下すことは、当技術分野における技術の範囲内にある。当業者により、投与量は、投与経路、排出速度、処置期間、投与される他の任意の薬物の種類（ｉｄｅｎｔｉｔｙ）、哺乳動物、例えば、ヒト患者の年齢、サイズおよび種ならびに、医学および獣医学の技術分野で周知の類似の因子で変化することが理解される。一般に、本明細書で開示される任意の活性剤またはこれを含有する組成物の適切な用量は、活性剤または組成物の量であり、その量は、所望の効果を提供するのに有効な最低用量である。
【００４２】
本明細書で開示される、本発明の化合物およびモノクローナル抗体、または抗原結合断片の投薬量の適切で非限定的な例は、１日当たり、約５０ｍｇ／ｋｇ〜約１２００ｍｇ／ｋｇを含む、１日当たり、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１２００ｍｇ／ｋｇなどの１日当たり、約１ｍｇ／ｋｇ〜約２４００ｍｇ／ｋｇである。このような薬剤の他の代表的な投薬量は、１日当たり、約５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、４５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、７０ｍｇ／ｋｇ、８０ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、１２５ｍｇ／ｋｇ、１５０ｍｇ／ｋｇ、１７５ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ、２５０ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｋｇ、６００ｍｇ／ｋｇ、７００ｍｇ／ｋｇ、８００ｍｇ／ｋｇ、９００ｍｇ／ｋｇ、１０００ｍｇ／ｋｇ、１１００ｍｇ／ｋｇ、１２００ｍｇ／ｋｇ、１３００ｍｇ／ｋｇ、１４００ｍｇ／ｋｇ、１５００ｍｇ／ｋｇ、１６００ｍｇ／ｋｇ、１７００ｍｇ／ｋｇ、１８００ｍｇ／ｋｇ、１９００ｍｇ／ｋｇ、２０００ｍｇ／ｋｇ、２１００ｍｇ／ｋｇ、２２００ｍｇ／ｋｇおよび２３００ｍｇ／ｋｇを含む。本明細書で開示される化合物、抗体および抗体断片の有効用量は、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、またはこれを超える部分用量（sub-dose）であって、１日を通して、適切な間隔で、個別に投与される部分用量として投与することができる。
【００４３】
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される塩」は、本発明の化合物の塩であって、本明細書で定義されるとおりに薬学的に許容でき、所望の薬理学的活性を有する塩を意味する。このような塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、およびリン酸などの無機酸により形成されるか；または酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ｏ−（４−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、４−メチルビシクロ［２．２．２］オクタ−２−エン−１−カルボン酸、グルコヘプトン酸、４，４’−メチレンビス（３−ヒドロキシ−２−エン−１−カルボン酸）、３−フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、第三級ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、およびムコン酸などの有機酸により形成される酸付加塩を含む。薬学的に許容される塩は、存在する酸性プロトンが無機または有機塩基と反応することができる場合に形成されうる塩基付加塩も含む。許容できる無機塩基は、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アルミニウムおよび水酸化カルシウムを含む。許容できる有機塩基は、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、およびＮ−メチルグルカミンなどを含む。
【００４４】
本明細書で使用される「免疫チェックポイント阻害剤」という用語は、免疫応答を減弱することに関与する分子の活性を遮断する物質を指す。免疫チェックポイント阻害剤の例としては、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＬＡＧ−３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＭ３、Ａ２ＡＲおよびＩＤＯの阻害剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４５】
このおよび他の実施形態の一部の態様では、免疫チェックポイント阻害剤は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体およびこれらの組合せからなる群から選択される。好ましくは、免疫チェックポイント阻害剤は、ニボルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ペンブロリズマブ（Ｍｅｒｃｋ）、ピジリズマブ（Ｃｕｒｅｔｅｃｈ）、ＡＭＰ−２２４（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ／Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（Ｒｏｃｈｅ）、ＭＤＸ−１１０５（Ｍｅｄａｒｅｘ，Ｉｎｃ．／Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ−４７３６（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、アレルマブ（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ）、イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ、（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、トレメリムマブ（Ｐｆｉｚｅｒ）、ピジリズマブ（ＣｕｒｅＴｅｃｈ，Ｌｔｄ．）、ＩＭＰ３２１（Ｉｍｍｕｔｅｐ  Ｓ．Ａ．）、ＭＧＡ２７１（Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ）、ＢＭＳ−９８６０１６（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、リリルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ウレルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＰＦ−０５０８２５６６（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＩＰＨ２１０１（Ｉｎｎａｔｅ  Ｐｈａｒｍａ／Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ−６４６９（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＣＰ−８７０，８９３（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、モガムリズマブ（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｉｒｉｎ）、バルリルマブ（ＣｅｌｌＤｅｘ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、アベルマブ（ＥＭＤ  Ｓｅｒｏｎｏ）、ガリキシマブ（Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ）、ＡＭＰ−５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＡＵＮＰ  １２（Ａｕｒｉｇｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｉｅｒｒｅ  Ｆａｂｒｅ）、インドキシモド（ＮｅｗＬｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＮＬＧ−９１９（ＮｅｗＬｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＩＮＣＢ０２４３６０（Ｉｎｃｙｔｅ）およびこれらの組合せからなる群から選択される。
【００４６】
本明細書で使用される場合、「抗体」および「その抗原結合断片」は、天然に存在する免疫グロブリン（例えば、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、ＩｇＥなど）だけでなく、例えば、単鎖抗体、キメラ抗体（例えば、ヒト化マウス抗体）、ヘテロコンジュゲート抗体（例えば、二重特異性抗体）、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ、ＦｖおよびｒＩｇＧを含む天然に存在しない免疫グロブリンを包含する。例えば、Pierce  CatalogおよびHandbook、１９９４〜１９９５年、（Pierce  Chemical  Co.、Rockford、Ill.）；Kubyら、１９９８年を参照されたい。本明細書で使用される場合、「抗原結合断片」は、抗原を特異的に認識する能力を保持する完全長抗体の部分だけでなく、このような部分の様々な組合せである。
【００４７】
天然に存在しない抗体は、固相ペプチド合成を使用して構築することができ、組換えにより産生することができ、または例えば、参照により本明細書に組み込まれるHuseら、Science、２４６巻：１２７５〜１２８１頁（１９８９年）により記載されているような、可変の重鎖および可変の軽鎖からなるコンビナトリアルライブラリーをスクリーニングすることにより得ることができる。例えば、キメラ抗体、ヒト化抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、単鎖抗体および二機能性抗体を作製するこれらおよび他の方法は、当業者に周知である（そのそれぞれが参照により本明細書に組み込まれるWinterおよびHarris、Immunol.  Today、１４巻：２４３〜２４６頁、（１９９３年）;  Wardら、Nature、３４１巻:５４４〜５４６頁、（１９８９年）；  HarlowおよびLane、上記、１９８８年；Hilyardら、Protein  Engineering:  A  practical  approach  （IRL  Press、１９９２年）；Borrabeck、Antibody  Engineering、２版（Oxford  University  Press、１９９５年）。
【００４８】
完全長抗体は、タンパク質分解により、抗原を認識する能力を保持する別々の数個の機能的抗体断片に消化することができる。例えば、完全長免疫グロブリンを２つのＦａｂ断片およびＦｃ断片に切断するために、酵素パパインを使用することができる。したがって、Ｆａｂ断片は、典型的に、重鎖および軽鎖由来の２つの可変ドメインと２つの定常ドメインから構成される。Ｆｖ領域は、通常、Ｆａｂ領域の成分と認識され、典型的に１つが、重鎖（本明細書で使用される、ＶＨ「重鎖可変領域」）および軽鎖（本明細書で使用される、ＶＬ「軽鎖可変領域」）の各々に由来する２つの可変ドメインを含む。酵素ペプシンがヒンジ領域の下で切断して、Ｆ（ａｂ’）２断片とｐＦｃ’断片を形成する。Ｆ（ａｂ’）２断片は、消化されて、定常（Ｆｃ）領域が除去されたインタクトな抗体である。次いで、２つのＦａｂ’断片が、Ｆ（ａｂ’）２断片のさらなる消化の結果として生じうる。抗体結合断片の例としては、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、ダイアボディ、トリボディ、ｓｃＦｖおよびシングルドメイン抗体（ｄＡｂ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４９】
典型的に、完全長抗体は、少なくとも１つの重鎖および少なくとも１つの軽鎖を有する。各重鎖は、可変ドメイン（ＶＨ）および典型的に３つまたはそれを超える定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３など）を含有するが、各軽鎖は、可変ドメイン（ＶＬ）および定常ドメインＣＬを含有する。軽鎖および重鎖の可変領域は、「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」とも呼ばれる３つの超可変領域が間に挿入された（interrupted）、４つの「フレームワーク」領域を含有する。フレームワーク領域およびＣＤＲの範囲は定義されている。例えば、Kabatら、U.S.  Dept.  of  Health  and  Human  Services,  Sequences  of  Proteins  of  Immunological  Interest、（１９８３年）およびChothiaら、J.  Mol.  Biol.、１９６巻；９０１〜９１７頁（１９８７年）を参照されたい。異なる軽鎖または重鎖のフレームワーク領域の配列は、種内で比較的保存されている。抗体のフレームワーク領域、すなわち、構成要素である軽鎖および重鎖の組み合わされたフレームワーク領域は、三次元空間においてＣＤＲの位置を定め、それを整列させる役目を果たす。
【００５０】
ＣＤＲは、主に、抗原のエピトープへの結合に関与する。各鎖のＣＤＲは、典型的に、Ｎ末端から始まって連続的に番号付けされてＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３と呼ばれ、典型的に、特定のＣＤＲが位置する鎖によっても同定される。したがって、ＶＨ  ＣＤＲ３は、抗体の重鎖の可変ドメインに位置するが、ＶＬ  ＣＤＲ１は、抗体の軽鎖の可変ドメイン由来のＣＤＲ１である。
【００５１】
本明細書で使用される「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体の集団から得られた抗体を指し、すなわち、集団を構成する個別の抗体は、微量に存在しうる、天然に存在する可能性のある変異以外は同一である。モノクローナル抗体は、特異性が高く、単一の抗原エピトープに対するものである。修飾語「モノクローナル」は、実質的に均一な抗体の集団から得られたという抗体の特徴を示し、いかなる特定の方法による抗体の産生を要求するとも解釈されるべきでない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、例えば、最初にKohlerら、Nature、２５６巻：４９５頁、（１９７５年）に記載され、上述の体細胞ハイブリダイゼーション方法により改変された、ハイブリドーマ方法によって作製しうるか；または他の組換えＤＮＡ方法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照されたい）により作製しうる。
【００５２】
本発明のモノクローナル抗体の一部でありうる追加の種類の抗体としては、キメラ抗体、ヒト化抗体およびヒト抗体が挙げられるが、これらに限定されない。ヒトにおける適用のためには、マウスのような他の種に起源を有する抗体の免疫原性を低減することが望ましいことが多い。これは、キメラ抗体の構築により、または「ヒト化」と呼ばれるプロセスによって行われうる。これに関連して、「キメラ抗体」は、異なる種（例えば、ヒト）に由来するドメイン（例えば、定常ドメイン）に融合された１つの種（例えば、マウス）に由来するドメイン（例えば、可変ドメイン）を含む抗体であると理解される。
【００５３】
本明細書で使用される場合、「ヒト化抗体」という用語は、非ヒト（例えば、マウス）抗体だけでなく、ヒト抗体に由来する配列を含有する抗体の形態を指す。このような抗体は、非ヒト免疫グロブリン由来の最小配列を含有するキメラ抗体である。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的にすべてを含み、その中で非ヒト免疫グロブリンの超可変ループに対応する超可変ループのすべてまたは実質的にすべてと、フレームワーク（ＦＲ）領域のすべてまたは実質的にすべてがヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体は、任意選択で、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部（Ｆｃ）、典型的には、ヒト免疫グロブリンのそれも含む（Jonesら、Nature、３２１巻：５２２〜５２５頁（１９８６年）；Riechmannら、Nature、３３２巻：３２３〜３２９頁（１９８８年）；およびPresta、Curr.  Op.  Struct.  Biol、２巻：５９３〜５９６頁（１９９２年））。ヒト化は、例えば、Winterおよび共同研究者らの方法（Jonesら、Nature、３２１巻：５２２〜５２５頁（１９８６年）；Riechmannら、Nature、３３２巻：３２３〜３２７頁（１９８８年）；Verhoeyenら、Science、２３９巻、１５３４〜１５３６頁（１９８８年））に従って、げっ歯類ＣＤＲまたはＣＤＲ配列でヒト抗体の対応する配列を置換することによって、本質的に実施することができる。
【００５４】
さらに、例えば、ファージディスプレイによりまたはトランスジェニック動物を使用して、ヒトゲノム由来の配列に基づいて抗体を作製するための技術が開発された（例えば、国際公開第ＷＯ９０／０５１４４号；D.  Marks、H.  R.  Hoogenboom、T.  P.  Bonnert、J.  McCafferty、A.  D.  GriffithsおよびG.  Winter、（１９９１年）「By-passing  immunisation.  Human  antibodies  from  V-gene  libraries  displayed  on  phage.」、J.  Mol.  Biol.、２２２巻、５８１〜５９７頁；Knappikら、J.  Mol.  Biol.、２９６巻：５７〜８６頁、２０００年；S.  CarmenおよびL.  Jermutus、「Concepts  in  antibody  phage  display」、Briefings  in  Functional  Genomics  and  Proteomics、２００２年、１巻（２号）：１８９〜２０３頁；Lonberg  N、Huszar  D.、「Human  antibodies  from  transgenic  mice」、Int  Rev  Immunol.、１９９５年；１３巻（１号）：６５〜９３頁；Bruggemann  M、Taussig  M  J.、「Production  of  human  antibody  repertoires  in  transgenic  mice」、Curr  Opin  Biotechnol.、１９９７年８月；８巻（４号）：４５５〜８頁を参照されたい）。このような抗体は、本発明との関連において「ヒト抗体」である。
【００５５】
本明細書で使用される場合、「組換え」抗体は、その産生が、所望の抗体構造をコードする非天然のＤＮＡ配列の生物体における発現を含む、任意の抗体である。本発明において、組換え抗体は、タンデムｓｃＦｖ（ｔａＦｖまたはｓｃＦｖ２）、ダイアボディ、ｄＡｂ２／ＶＨＨ２、ノブ・イントゥ・ホールズ（ｋｎｏｂ−ｉｎｔｏ−ｈｏｌｅｓ）誘導体、ＳＥＥＤ−ＩｇＧ、ヘテロＦｃ−ｓｃＦｖ、Ｆａｂ−ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−Ｊｕｎ／Ｆｏｓ、Ｆａｂ’−Ｊｕｎ／Ｆｏｓ、トリボディ、ＤＮＬ−Ｆ（ａｂ）３、ｓｃＦｖ３−ＣＨ１／ＣＬ、Ｆａｂ−ｓｃＦｖ２、ＩｇＧ−ｓｃＦａｂ、ＩｇＧ−ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−ＩｇＧ、ｓｃＦｖ２−Ｆｃ、Ｆ（ａｂ’）２−ｓｃＦｖ２、ｓｃＤＢ−Ｆｃ、ｓｃＤｂ−ＣＨ３、Ｄｂ−Ｆｃ、ｓｃＦｖ２−Ｈ／Ｌ、ＤＶＤ−Ｉｇ、ｔａｎｄＡｂ、ｓｃＦｖ−ｄｈｌｘ−ｓｃＦｖ、ｄＡｂ２−ＩｇＧ、ｄＡｂ−ＩｇＧ、ｄＡｂ−Ｆｃ−ｄＡｂおよびこれらの組合せを含む。
【００５６】
抗体の可変領域は、典型的に、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）またはＦａｂ断片として単離される。ｓｃＦｖ断片は、短い１０〜２５アミノ酸リンカーにより連結されたＶＨドメインおよびＶＬドメインから構成される。単離されると、ｓｃＦｖ断片は、例えば、Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒなどの１または複数のリピートなどのフレキシブルなペプチドリンカーと遺伝的に連結することができる。結果として得られたペプチド、タンデムｓｃＦｖ（ｔａＦｖまたはｓｃＦｖ２）は、ｔａＦｖの各ｓｃＦｖについてＶＨ−ＶＬまたはＶＬ−ＶＨの順序に様々な方法で配置することができる。（Kontermann,  R.E.  In：Bispecific  Antibodies.  Kontermann  RE（編）、Springer  Heidelberg  Dordrecht  London  New  York、１〜２８頁、（２０１１年））。
【００５７】
本明細書で使用される場合、「エピトープ」という用語は、抗体または抗原結合断片により認識される、抗原の一部を指す。（抗原ポリペプチドなどの）単一の抗原は、１つより多いエピトープを有しうる。エピトープは、構造的エピトープまたは機能的エピトープとして定義しうる。機能的エピトープは、一般に、構造的エピトープのサブセットであり、相互作用の親和性に直接寄与する残基を有する。エピトープは、立体構造エピトープである、すなわち、非線状アミノ酸から構成されることもある。ある特定の実施形態では、エピトープは、アミノ酸、糖側鎖、ホスホリル基またはスルホニル基などの分子の化学的に活性な表面基群（ｓｕｒｆａｃｅ  ｇｒｏｕｐｉｎｇｓ）である決定基を含むことができ、ある特定の実施形態では、特定の三次元構造特性および／または特定の荷電特性を有することができる。隣接するアミノ酸から形成されるエピトープは、典型的に、変性溶媒への曝露において保持されるが、三次フォールディングにより形成されたエピトープは、典型的に、変性溶媒による処理で失われる。
【００５８】
このおよび他の実施形態の一部の態様では、式（Ｉ）の化合物は、実質的に純粋なそのＲ−エナンチオマー、実質的に純粋なそのＳ−エナンチオマー、ならびにＲ−エナンチオマーおよびＳ−エナンチオマーのラセミ混合物からなる群から選択される。
【００５９】
好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、実質的に純粋なＲ−エナンチオマー：
【化７】
0006786529.tif 000008
または薬学的に許容されるその塩である。
【００６０】
本明細書における化合物の開示は、その化合物のすべての立体異性体を包含すると理解される。本明細書で使用される場合、「立体異性体」という用語は、同じ結合により結合された同じ原子から作られるが、互換的でない異なる三次元構造を有する化合物を指す。三次元構造は立体配置と呼ばれる。立体異性体は、エナンチオマー、光学異性体およびジアステレオマーを含む。
【００６１】
「ラセミ化合物」または「ラセミ混合物」という用語は、等量のエナンチオマーの混合物を指す。「キラル中心」という用語は、４つの異なる基がそこに結合した炭素原子を指す。本明細書で使用される「エナンチオマー富化」という用語は、他方のエナンチオマーと比較した一方のエナンチオマーの量の増加を指す。
【００６２】
キラル中心を有する本発明の化合物が、光学活性体およびラセミ体で存在し、その形態で単離されうることが理解される。一部の化合物は多形を示しうる。本発明が、本明細書に記載されている有用な性質を有する、本発明の化合物の任意のラセミ体、光学活性体、ジアステレオマー体、多形体または立体異性体、あるいはその混合物を包含することは理解されるべきであり、光学活性体を調製する方法（例えば、再結晶化技術によるラセミ体の分割による、光学活性を有する出発材料からの合成による、キラル合成による、またはキラル固定相を使用するクロマトグラフィー分離による）は当技術分野において周知である。
【００６３】
光学活性材料を得る方法の例としては、当技術分野で公知であり、少なくとも以下が挙げられる：
ｉ）結晶の物理的分離  −−  個別のエナンチオマーの巨視的結晶が手動で分離される技術。この技術は、別個のエナンチオマーの結晶が存在する場合、すなわち、材料が集合体であり、結晶が視覚的にはっきり見える場合に、使用できる；
ｉｉ）同時結晶化  −−  個別のエナンチオマーがラセミ化合物の溶液から個別に結晶化される技術であり、後者が固体状態において集合体である場合にのみ可能である；
ｉｉｉ）酵素的分割  −−  酵素とエナンチオマーの反応の異なる速度に基づいて、ラセミ化合物が部分的または完全に分離される技術；
ｉｖ）酵素的不斉合成  −−  鏡像異性的に純粋なまたは富化された、所望のエナンチオマーの合成前駆体を得るために、合成の少なくとも１つのステップが酵素反応を使用する合成技術；
ｖ）化学的不斉合成  −−  生成物において非対称（すなわち、キラリティー）を生じさせる条件下で、アキラルな前駆体から所望のエナンチオマーが合成される、本明細書でより詳細に開示されるキラル触媒またはキラル補助剤を使用して達成されうる合成技術；
ｖｉ）ジアステレオマー分離  −−  ラセミ化合物を鏡像異性的に純粋な試薬（キラル補助剤）と反応させて、個別のエナンチオマーをジアステレオマーに変換する技術。結果として生じるジアステレオマーは、次いで、それらの今やより明確なこれらの構造的相違に基づいて、クロマトグラフィーまたは結晶化により分離され、キラル補助剤は後に除去されて、所望のエナンチオマーを得る；
ｖｉｉ）一次および二次不斉変換  −−  ラセミ化合物からのジアステレオマーが平衡化して、所望のエナンチオマーからのジアステレオマーの溶液中の優位がもたらされるか、または最終的に、原則としてすべての材料が所望のエナンチオマーから結晶性ジアステレオマーに変換されるように、所望のエナンチオマーからのジアステレオマーの優先的な結晶化が平衡を撹乱させる技術。次いで、所望のエナンチオマーはジアステレオマーから放出される；
ｖｉｉｉ）速度論的分割  −−  この技術は、速度論的条件下での、キラルな、非ラセミ試薬または触媒とエナンチオマーとの一様でない反応速度に基づいて、ラセミ化合物の部分的または完全な分割の（または部分的に分割された化合物のさらなる分割の）達成を指す；
ｉｘ）非ラセミ前駆体からのエナンチオ特異的な合成  −−  所望のエナンチオマーが非キラル出発材料から得られ、立体化学的完全性が、合成の経過にわたって損なわれないかまたは最小限に損なわれる合成技術；
ｘ）キラル液体クロマトグラフィー  −−  ラセミ化合物のエナンチオマーが、固定相とのそれらの異なる相互作用に基づいて、液体移動相において分離される技術。固定相がキラル材料から作られるか、または移動相が異なる相互作用を引き起こすための追加のキラル材料を含有することができる；
ｘｉ）キラルガスクロマトグラフィー  −−  ラセミ化合物が揮発し、固定された非ラセミキラル吸収相を含有するカラムとの気体移動相におけるそれらの異なる相互作用に基づいて、エナンチオマーが分離される技術；
ｘｉｉ）キラル溶媒による抽出  −−  １つのエナンチオマーの特定のキラル溶媒への優先的な溶解に基づいて、エナンチオマーが分離される技術；
ｘｉｉｉ）キラル膜を横切る輸送  −−  ラセミ化合物を薄膜障壁と接触させる技術。障壁は、典型的に、一方がラセミ化合物を含有する２つの混和性の流体を分離し、濃度または圧力の差異などの推進力が、膜障壁を横切る優先的な輸送を引き起こす。分離は、ラセミ化合物のただ１つのエナンチオマーが通過することを可能とする、膜の非ラセミのキラル的性質の結果として起こる。
【００６４】
立体異性体は、塩基またはこれらの塩の分別結晶化またはＬＣもしくはフラッシュクロマトグラフィーなどのクロマトグラフィー技術を含む、当業者に公知の通常の技術によっても分離しうる。（＋）エナンチオマーは、J.  Jacquesら、antiomers,  Racemates,  and  Resolutions」、John  Wiley  and  Sons,  Inc.、１９８１年により記述されたものなどの当技術分野で周知の技術および手順を使用して、（−）エナンチオマーから分離しうる。例えば、エタノール／アセトニトリルなどの適切な有機溶媒およびＣｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤパッキング、２０ミクロンを用いるキラルクロマトグラフィーも、エナンチオマーの分離をもたらすために利用しうる。
【００６５】
式（Ｉ）の化合物は、「ＬＰＴ−７２３」と互換的に呼ばれる。本発明が、ＬＰＴ−７２３の他のエナンチオマー型およびラセミ混合物も含むことは理解される。Ｒ異性体が好ましい薬剤である。
【００６６】
このおよび他の実施形態の一部の態様では、障害はがんである。好ましくは、がんは、膀胱がん、乳がん、子宮頸部がん、結腸がん、食道がん、子宮内膜がん、胃がん、神経膠芽腫、頭部および頸部がん、肝細胞癌、白血病、肺がん、リンパ腫、黒色腫、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、神経内分泌がん、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、腎細胞癌、ラブドイドがん、肉腫および尿路がん（urinary  track  cancer）からなる群から選択される。より好ましくは、がんは、膀胱がん、結腸がん、肺がん、リンパ腫および膵臓がんからなる群から選択される。
【００６７】
本発明の別の実施形態は、被験体におけるがんの結果を処置または改善するための方法であって、有効量の式（Ｉ）：
【化８】
0006786529.tif 000009
の化合物または薬学的に許容されるその塩を被験体に投与するステップを含む方法である。
【００６８】
このおよび他の実施形態の一部の態様では、がんは、膀胱がん、乳がん、子宮頸部がん、結腸がん、食道がん、子宮内膜がん、胃がん、神経膠芽腫、頭部および頸部がん、肝細胞癌、白血病、肺がん、リンパ腫、黒色腫、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、神経内分泌がん、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、腎細胞癌、ラブドイドがん、肉腫および尿路がんからなる群から選択される。好ましくは、がんは結腸がんである。
【００６９】
本発明の別の実施形態は、がんの間質微小環境を調節するための方法であって、がんの間質微小環境を、式（Ｉ）：
【化９】
0006786529.tif 000010
の化合物または薬学的に許容される塩と接触させるステップを含む方法である。
【００７０】
本明細書で使用される場合、「腫瘍」および「がん」は、互換的に使用される。腫瘍は、良性または悪性でありうる。本明細書で使用される場合、「間質微小環境」は、腫瘍細胞の微小環境中にあり、腫瘍細胞の成長を支援する間質細胞を含む。
【００７１】
この実施形態では、「接触させること」は、例えば、免疫チェックポイント阻害剤、ＬＰＴ−７２３および／または１もしくは複数の追加的治療剤を、間質微小環境にごく接近させることを意味する。これは、例えば、免疫チェックポイント阻害剤、ＬＰＴ−７２３および／または１または複数の追加的治療剤を、哺乳動物への薬物送達の従来技術を使用して、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏの状況においてがん細胞が位置する培地に提供することにより、達成しうる。
【００７２】
本発明の別の実施形態は、被験体における障害の結果を処置または改善するための組成物であって、式（Ｉ）：
【化１０】
0006786529.tif 000011
の化合物または薬学的に許容されるその塩である第１の薬剤と、免疫チェックポイント阻害剤である第２の薬剤とを含む組成物である。
【００７３】
このおよび他の実施形態の一部の態様では、組成物は、薬学的に許容されるキャリアまたは希釈剤をさらに含む医薬組成物である。本発明において、すべての化合物は、薬学的に許容されるキャリアまたは希釈剤と組み合わせることができる。
【００７４】
本発明の組成物および医薬組成物は、任意の所望される効果的な方式で：経口服用のために、または軟膏もしくは眼への局所投与のための点眼薬として、または非経口投与もしくは他の投与のために、腹腔内投与、皮下投与、局部投与、皮内投与、吸入投与、肺内投与、直腸投与、膣投与、舌下投与、筋内投与、静脈内投与、動脈内投与、髄腔内投与またはリンパ内投与など、任意の適切な方式で投与することができる。さらに、本発明の組成物および医薬組成物は、他の処置とともに投与することができる。本発明の各組成物および医薬組成物は、所望の場合、カプセル化することもでき、あるいは、胃分泌物または他の分泌物に対して他の形で保護することもできる。
【００７５】
本発明の組成物および医薬組成物は、１または複数の有効成分を、１または複数の薬学的に許容される希釈剤またはキャリア、ならびに、任意選択で、１または複数の他の化合物、薬物、成分、および／または材料と混合して含み得る。選択される投与経路に関わらず、本発明の薬剤／化合物は、当業者に公知の従来の方法により、薬学的に許容される剤形へと製剤化される。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ、Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（２１版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ．）を参照されたい。
【００７６】
当技術分野では、薬学的に許容される希釈剤またはキャリアが周知であり（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ、Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（２１版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ．）およびＴｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ、Ｄ．Ｃ．）を参照されたい）、糖（例えば、ラクトース、スクロース、マンニトール、およびソルビトール）、デンプン、セルロース調製物、リン酸カルシウム（例えば、リン酸二カルシウム、リン酸三カルシウム、およびリン酸水素カルシウム）、クエン酸ナトリウム、水、水溶液（例えば、食塩液、塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、デキストロース注射液、デキストロースおよび塩化ナトリウム注射液、乳酸加リンゲル注射液）、アルコール（例えば、エチルアルコール、プロピルアルコール、およびベンジルアルコール）、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、およびポリエチレングリコール）、有機エステル（例えば、オレイン酸エチルおよびトリグリセリド）、生体分解性ポリマー（例えば、ポリラクチド−ポリグリコリド、ポリ（オルトエステル）、およびポリ酸（無水物））、エラストマーマトリックス、リポソーム、マイクロスフェア、油（例えば、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、ゴマ油、綿実油、および落花生油）、ココアバター、蝋（例えば、坐剤用蝋）、パラフィン、シリコーン、滑石、サリチル酸塩（ｓｉｌｉｃｙｌａｔｅ）などを含む。本発明の医薬組成物において使用される、各薬学的に許容される希釈剤またはキャリアは、製剤の他の成分に対して適合性であり、被験体に対して傷害性でないという意味で「許容可能」でなければならない。当技術分野では、選択された剤形および意図された投与経路に適する希釈剤またはキャリアが周知であり、選ばれた剤形および投与法のための許容可能な希釈剤またはキャリアは、当技術分野における通常の技術を使用して決定することができる。
【００７７】
本発明の組成物および医薬組成物は、任意選択で、医薬組成物において一般に使用される、追加の成分および／または材料を含有してよい。当技術分野では、これらの成分および材料が周知であり、（１）デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、およびケイ酸などの充填剤または増量剤；（２）カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、スクロース、およびアカシアなどの結合剤；（３）グリセロールなどの保湿剤；（４）寒天、炭酸カルシウム、バレイショデンプンまたはタピオカデンプン、アルギン酸、ある特定のシリケート、デンプングリコール酸ナトリウム、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウムおよび炭酸ナトリウムなどの崩壊剤；（５）パラフィンなどの溶解遅延剤；（６）四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤；（７）セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロールなどの湿潤剤；（８）カオリン粘土およびベントナイト粘土などの吸収剤；（９）滑石、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、およびラウリル硫酸ナトリウムなどの滑沢剤；（１０）エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶セルロース、メタ水酸化アルミニウム（ａｌｕｍｉｎｕｍ  ｍｅｔａｈｙｄｒｏｘｉｄｅ）、ベントナイト、寒天、およびトラガントなどの懸濁化剤；（１１）緩衝剤；（１２）ラクトース、乳糖、ポリエチレングリコール、動物性脂肪および植物性脂肪、油、蝋、パラフィン、ココアバター、デンプン、トラガント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、滑石、サリチラート、酸化亜鉛、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム、およびポリアミド粉末などの賦形剤；（１３）水または他の溶媒などの不活性希釈剤；（１４）防腐剤（ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅ）；（１５）界面活性剤；（１６）分散剤；（１７）ヒドロキシプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、生体分解性ポリマー、リポソーム、マイクロスフェア、モノステアリン酸アルミニウム、ゼラチン、および蝋などの放出制御剤または吸収遅延剤；（１８）乳白剤；（１９）アジュバント；（２０）湿潤剤；（２１）乳化懸濁化剤；（２２）エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油（特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタンの脂肪酸エステルなどの可溶化剤および乳化剤；（２３）クロロフルオロ炭化水素、およびブタンおよびプロパンなどの揮発性非置換炭化水素などの噴射剤；（２４）抗酸化剤；（２５）糖および塩化ナトリウムなど、製剤を、意図されるレシピエントの血液と等張性とする剤；（２６）増粘剤；（２７）レシチンなどのコーティング材料；ならびに（２８）甘味剤、香味剤、着色剤、芳香剤、および防腐剤（ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅ  ａｇｅｎｔ��を含む。このような各成分または各材料は、製剤の他の成分に対して適合性であり、被験体に対して傷害性でないという意味で「許容可能」でなければならない。当技術分野では、選択された剤形および意図された投与経路に適する成分および材料が周知であり、選ばれた剤形および投与法のための許容可能な成分および材料は、当技術分野における通常の技術を使用して決定することができる。
【００７８】
経口投与に適する本発明の組成物および医薬組成物は、カプセル剤、カシェ剤、丸剤、錠剤、粉末、顆粒、水性または非水性液体の溶液または懸濁液、水中油型液体エマルジョンまたは油中水型液体エマルジョン、エリキシルまたはシロップ、トローチ、ボーラス、舐薬、またはペーストの形態でありうる。これらの製剤は、当技術分野で公知の方法により、例えば、従来のパン式コーティング工程、混合工程、造粒工程、または凍結乾燥工程を介して調製することができる。
【００７９】
経口投与用の固体剤形（カプセル剤、錠剤、丸剤、糖剤、散剤、顆粒剤など）は、例えば、有効成分（複数可）を、１または複数の薬学的に許容される希釈剤またはキャリア、ならびに、任意選択で、１または複数の充填剤、増量剤、結合剤、保湿剤、崩壊剤、溶解遅延剤、吸収促進剤、湿潤剤、吸収剤、滑沢剤、および／または着色剤と混合することにより調製することができる。適切な賦形剤を使用して、同様の種類の固体組成物を、軟質充填ゼラチンカプセル及び硬質充填ゼラチンカプセル中の充填剤としても援用することができる。錠剤は、任意選択で、１または複数の補助成分と共に、圧縮または成型により作製することができる。圧縮錠剤は、適切な結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、防腐剤、崩壊剤、界面活性剤、または分散剤を使用して調製することができる。成型錠剤は、適切な機械により成型することにより作製することができる。錠剤、ならびに、糖剤、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤など、他の固体剤形は、任意選択で、腸溶性コーティングおよび製薬技術分野で周知の他のコーティングなど、コーティングおよびシェルを伴って得られる（ｓｃｏｒｅｄ）または調製することもできる。それらはまた、その中の有効成分の遅延放出または制御放出をもたらすように製剤化することもできる。それらは、例えば、細菌保持フィルターを介する濾過により滅菌することができる。これらの組成物はまた、任意選択で、乳白剤も含有することが可能であり、有効成分を、消化管のある特定の部分だけにおいて、またはこの部分において優先的に、任意選択で、遅延式により放出するような組成物でありうる。本発明の任意の有効成分はまた、マイクロカプセル化形態でもありうる。
【００８０】
経口投与用の液体剤形は、薬学的に許容されるエマルジョン、マイクロエマルジョン、液剤、懸濁剤、シロップ剤、およびエリキシル剤を含む。液体剤形は、当技術分野で一般に使用される、適切な不活性希釈剤を含有しえる。不活性希釈剤のほかに、経口組成物はまた、湿潤剤、乳化懸濁化剤、甘味剤、香味剤、着色剤、芳香剤、および防腐剤などのアジュバントも含みうる。坐剤は、懸濁化剤を含有し得る。
【００８１】
直腸投与用または膣投与用の本発明の組成物および医薬組成物は、１または複数の有効成分を、１または複数の適切な非刺激性の希釈剤またはキャリアであって、室温では固体であるが、体温では液体であり、したがって、直腸腔または膣腔では融解し、活性化合物を放出する希釈剤またはキャリアと混合することにより調製しうる、坐剤として提供することができる。膣投与に適する本発明の組成物および医薬組成物はまた、適切であることが当技術分野で公知の、このような薬学的に許容されるキャリアを含有する、ペッサリー製剤、タンポン製剤、クリーム製剤、ゲル製剤、ペースト製剤、フォーム製剤、またはスプレー製剤も含む。
【００８２】
局所投与用または経皮投与用の剤形は、粉剤、スプレー剤、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、液剤、パッチ剤、点眼剤、および吸入剤を含む。活性薬剤（複数可）／化合物（複数可）は、滅菌条件下で、適切な薬学的に許容される希釈剤またはキャリアと混合することができる。軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、およびゲル剤は、賦形剤を含有し得る。粉剤およびスプレー剤は、賦形剤および噴射剤を含有し得る。
【００８３】
非経口投与に適する本発明の組成物および医薬組成物は、１または複数の薬学的に許容される滅菌等張性の水溶液もしくは非水溶液、分散液、懸濁液、もしくはエマルジョン、または、使用の直前に滅菌注射用溶液もしくは滅菌注射用分散液へと再構成されうる滅菌粉末であって、適切な抗酸化剤、緩衝剤、製剤を意図されるレシピエントの血液と等張性とする溶質、または懸濁化剤もしくは増粘剤を含有しうる滅菌粉末と組み合わせた、１または複数の薬剤（複数可）／化合物（複数可）を含む。適正な流体性は、例えば、コーティング材料の使用により、分散液の場合は、必要とされる粒子サイズの維持により、かつ、界面活性剤の使用により維持することができる。これらの組成物はまた、湿潤剤、乳化剤、および分散剤などの適切なアジュバントも含有しうる。また、等張剤を含むことも所望され得る。加えて、注射用医薬形態の持続性の吸収も、吸収を遅延させる剤の組入れによりもたらすことができる。
【００８４】
場合によって、薬物（例えば、本発明の組成物または医薬製剤）の作用を延ばすために、皮下注射または筋内注射からのその吸収を緩徐化することが所望される。これは、水に難溶性である結晶性材料またはアモルファス材料の液体懸濁物を使用することにより達成することができる。
【００８５】
次いで、本発明の活性な任意の活性薬剤／組成物の吸収速度は、その溶解速度に依存し、溶解速度は、さらに、結晶のサイズおよび結晶形態に依存しうる。代替的に、非経口投与された本発明の任意の活性薬剤／組成物の遅延吸収は、活性薬剤／組成物を、油ビヒクル中に溶解するかまたは懸濁することにより達成することができる。注射用デポ形態は、有効成分のマイクロカプセルマトリックス（ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌｅ  ｍａｔｒｉｃｅｓ）を、生体分解性ポリマー中で形成することにより作製することができる。ポリマーに対する有効成分の比、および採用される特定のポリマーの性質に応じて、有効成分の放出速度は制御されうる。注射用デポ製剤はまた、薬物を、体組織と適合性のリポソーム内またはマイクロエマルジョン内に封入することによっても調製される。注射用材料は、例えば、細菌保持フィルターを介する濾過により滅菌することができる。
【００８６】
製剤は、単位用量または複数回投与用用量（ｍｕｌｔｉ−ｄｏｓｅ）を密封した容器、例えば、アンプルおよびバイアル中において存在することができ、使用の直前に、滅菌の液体希釈剤または液体キャリア、例えば、注射用水の添加だけを必要とする、乾燥凍結状態で保存することができる。即席注射用溶液および即席注射用懸濁液は、上記で記載した種類の滅菌粉末、顆粒、および錠剤から調製することができる。
【００８７】
このおよび他の実施形態の一部の態様では、組成物中の第１および第２の薬剤は、別個の単位剤形中にある。他の態様では、第１および第２の薬剤は、単一の単位剤形中にある。
【００８８】
本発明の別の実施形態は、式（Ｉ）：
【化１１】
0006786529.tif 000012
の化合物または薬学的に許容されるその塩である第１の薬剤と、免疫チェックポイント阻害剤である第２の薬剤とをこれらの使用のための指示とともに含むキットである。
【００８９】
キットは、（例えば、医薬組成物の形態であることができる）本発明の各薬剤および被験体に薬剤を投与することにおける使用のための他の試薬、例えば、バッファ、平衡塩類溶液などのための適切な保存容器、例えば、アンプル、バイアル、管なども含むことができる。本発明の薬剤および他の試薬は、例えば、溶液でまたは粉末形態でなどの任意の便利な形態でキット中に存在しうる。キットは、医薬組成物および他の任意選択の試薬を収容するための１または複数の区画を任意選択で有する包装容器をさらに含むことができる。
追加的定義
【００９０】
本明細書で使用される場合、「ポリペプチド」、「ペプチド」および「タンパク質」という用語は、アミノ酸残基のポリマーを指すために本明細書中で互換的に使用される。これらの用語は、その中で１または複数のアミノ酸残基が、対応する天然に存在するアミノ酸の人工的な化学的模倣体であるアミノ酸ポリマーだけでなく、天然に存在するアミノ酸ポリマー、修飾された残基を含有するアミノ酸ポリマーおよび天然に存在しないアミノ酸ポリマーにも当てはまる。
【００９１】
「アミノ酸」という用語は、天然に存在するアミノ酸および合成アミノ酸だけでなく、天然に存在するアミノ酸に類似して機能するアミノ酸類似体およびアミノ酸模倣体を意味する。天然に存在するアミノ酸は、遺伝コードによりコードされるアミノ酸だけでなく、後に修飾されたアミノ酸、例えば、ヒドロキシプロリン、ガンマ−カルボキシグルタミン酸およびＯ−ホスホセリンである。「アミノ酸類似体」は、天然に存在するアミノ酸と同じ基本的化学構造、例えば、水素、カルボキシル基、アミノ基およびＲ基に結合した炭素を有する化合物、例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウムを意味する。このような類似体は、修飾されたＲ基（例えば、ノルロイシン）または修飾されたペプチド骨格を有することができるが、天然に存在するアミノ酸と同じ基本的化学構造を保持する。「アミノ酸模倣体」は、アミノ酸の一般化学構造とは異なる構造を有するが、天然に存在するアミノ酸に類似して機能する化合物を意味する。
【００９２】
本明細書で使用される「核酸」または「オリゴヌクレオチド」または「ポリヌクレオチド」は、一緒に共有結合で連結された少なくとも２つのヌクレオチドを意味する。核酸の多くの変異体が所与の核酸と同じ目的のために使用されうる。したがって、核酸は、実質的に同一の核酸およびその相補体も包含する。
【００９３】
核酸は、一本鎖もしくは二本鎖であることができ、または二本鎖配列および一本鎖配列両方の部分を含有することもできる。核酸は、ゲノムＤＮＡおよびｃＤＮＡ両方であるＤＮＡ、ＲＮＡ、または核酸がデオキシリボヌクレオチドおよびリボヌクレオチドの組合せならびにウラシル、アデニン、チミン、シトシン、グアニン、イノシン、キサンチン、ヒポキサンチン、イソシトシンおよびイソグアニンを含む塩基の組合せを含有しうるハイブリッドであることができる。核酸は、一本鎖分子として合成されるかまたは合成遺伝子を使用して（ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで）細胞において発現されることもできる。核酸は、化学合成方法によりまたは組換え方法により得ることができる。
【００９４】
核酸は、例えば、米国特許出願第１１／４２９，７２０号、同第１１／３８４，０４９号、同第１１／４１８，８７０号および同第１１／４２９，７２０号ならびに公開された国際出願第ＷＯ２００５／１１６２５０号および同第ＷＯ２００６／１２６０４０号に記載されたｍＲＮＡ、ｔＲＮＡ、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、転写型遺伝子サイレンシングＲＮＡ（ｐｔｇｓＲＮＡ）、Ｐｉｗｉ−相互作用ＲＮＡ（Ｐｉｗｉ−ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇ  ＲＮＡ）、ｐｒｉ−ｍｉＲＮＡ、ｐｒｅ−ｍｉＲＮＡ、マイクロ−ＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、またはアンチ−ｍｉＲＮＡ（ａｎｔｉ−ｍｉ  ＲＮＡ）などのＲＮＡであることもある。
【００９５】
核酸は、アプタマー、イントラマーまたはシュピーゲルマー（ｓｐｉｅｇｅｌｍｅｒ）でもありうる。「アプタマー」という用語は、特異的分子標的に結合する核酸またはオリゴヌクレオチド分子を指す。アプタマーは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏの進化プロセスに由来し（例えば、米国特許第５，２７０，１６３号に開示されているＳＥＬＥＸ（Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌｉｇａｎｄｓ  ｂｙ  ＥＸｐｏｎｅｎｔｉａｌ  Ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ））、これは、大きなコンビナトリアルライブラリーから標的特異的なアプタマー配列を選択する。アプタマー組成物は、二本鎖または一本鎖であることができ、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、ヌクレオチド誘導体または他のヌクレオチド様分子を含みうる。アプタマーのヌクレオチド成分は、修飾された糖基（例えば、リボヌクレオチドの２’−ＯＨ基は２’−Ｆまたは２’−ＮＨ２で置換されうる）を有することができ、これは、所望の性質、例えば、ヌクレアーゼに対する抵抗性または血中のより長い寿命、を改善しうる。アプタマーは、他の分子、例えば、高分子量キャリアにコンジュゲーションされて、循環系からのアプタマーのクリアランスを遅くすることができる。アプタマーは、例えば、架橋剤の光活性化により、これらの同族リガンドに特異的に架橋されうる（Brody,  E.  N.およびL.  Gold、（２０００年）  J.  Biotechnol.、７４巻：５〜１３頁）。
【００９６】
「イントラマー」という用語は、ｉｎ  ｖｉｖｏで発現されるアプタマーを指す。例えば、ワクシニアウイルスに基づくＲＮＡ発現系が、特定のＲＮＡアプタマーを白血球の細胞質において高レベルで発現するために使用された（Blind,  M.ら、（１９９９年）、Proc.  Natl.  Acad.  Sci.  USA、９６巻：３６０６〜３６１０頁）。
【００９７】
「シュピーゲルマー」という用語は、Ｌ−ＤＮＡ、Ｌ−ＲＮＡまたは他の左巻きヌクレオチド誘導体またはヌクレオチド様分子を含むアプタマーを指す。左巻きヌクレオチドを含有するアプタマーは、通常、右巻きヌクレオチドを含有する物質に対して作用する、天然に存在する酵素による分解に対して耐性である。
【００９８】
核酸は、一般に、ホスホジエステル結合を含有するが、核酸類似体には、少なくとも１つの異なる結合、例えば、ホスホルアミデート結合、ホスホロチオエート結合、ホスホロジチオエート結合またはＯ−メチルホスホロアミダイト結合ならびにペプチド核酸骨格および結合を有しうるものが含まれうる。他の類似体核酸は、米国特許第５，２３５，０３３号および同第５，０３４，５０６号に開示されたものを含む、陽性の骨格；非イオン性の骨格および非リボース骨格を有するものを含む。１または複数の天然に存在しないヌクレオチドまたは修飾されたヌクレオチドを含有する核酸も、核酸の定義のうちに含まれる。修飾されたヌクレオチド類似体は、例えば、核酸分子の５’末端および／または３’末端に位置しうる。ヌクレオチド類似体の代表例は、糖修飾されたリボヌクレオチドまたは骨格が修飾されたリボヌクレオチドから選択されうる。しかしながら、核酸塩基が修飾されたリボヌクレオチド、すなわち、５位において修飾されたウリジンまたはシチジン、例えば、５−（２−アミノ）プロピルウリジン、５−ブロモウリジン；８位において修飾されたアデノシンおよびグアノシン、例えば、８−ブロモグアノシン；デアザヌクレオチド、例えば、７−デアザ−アデノシン；Ｏ−およびＮ−アルキル化ヌクレオチド、例えば、Ｎ６−メチルアデノシンなどの、天然に存在する核酸塩基の代わりに天然に存在しない核酸塩基を含有するリボヌクレオチドが適切である点にも留意すべきである。２’−ＯＨ基は、Ｈ、ＯＲ、Ｒ、ハロ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ２、ＮＨＲ、ＮＲ２またはＣＮから選択される基により置換することができ、Ｒは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アルケニルまたはアルキニルであり、ハロは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである。修飾されたヌクレオチドは、例えば、Krutzfeldtら、Nature、（２００５年１０月３０日）、Soutschekら、Nature、４３２巻、１７３〜１７８頁、（２００４年）および米国特許出願公開第２００５０１０７３２５号に開示されているヒドロキシプロリノール結合によりコレステロールとコンジュゲーションしたヌクレオチドも含む。修飾されたヌクレオチドおよび核酸は、米国特許出願公開第２００２０１１５０８０号に開示されたロックド核酸（ＬＮＡ）も含みうる。追加の修飾されたヌクレオチドおよび核酸は、米国特許出願公開第２００５０１８２００５号に開示されている。リボース−リン酸骨格の修飾は、様々な理由、例えば、生理学的環境におけるこのような分子の安定性および半減期を増加させるため、細胞膜を横切る拡散を促進するため、またはバイオチップにおけるプローブとして、行われうる。天然に存在する核酸および類似体の混合物を作製することができ；代替的に、異なる核酸類似体の混合物および天然に存在する核酸と類似体の混合物も作製することができる。
【００９９】
本明細書で使用される専門用語は、特定の実施形態を記述する目的のみのためであり、限定的であることを意図しない。本明細書および添付された特許請求の範囲において使用される単数形「１つ（ａ）」、「１つ（ａｎ）」および「その（ｔｈｅ）」は、文脈が明らかに別段の定めのない限り、複数の指示対象を含む。
【０１００】
本明細書中の数の範囲の記述に関しては、その間に介在する同じ精度の各数値が明示的に考慮される。例えば、６〜９の範囲に関して、６および９に加えて７および８の数が考慮され、６．０〜７．０の範囲に関して、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９および７．０の数が明示的に考慮される。
【０１０１】
以下の実施例は、本発明の方法をさらに例示する目的で提示される。これらの実施例は、例示的なだけのものであり、いかなる形であれ、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【実施例】
【０１０２】
以下の実施例は、本発明のある特定の態様をさらに例示するために提供される。これらの実施例は、例示的なだけのものであり、いかなる形であれ、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
（実施例１）
予防的Ｃｏｌｏｎ２６結腸がんモデル：
【０１０３】
Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ（ＣＲ）ＢＡＬＢ／ｃマウスに、Ｃｏｌｏｎ２６マウス結腸がん細胞を１日目に移植し、対照（ビヒクル）、抗ＣＴＬＡ−４（クローン４Ｆ１０）、抗ＰＤ−１（クローンＲＭＰ１−１４）、抗ＣＴＬＡ−４／抗ＰＤ−１の組合せ、ＬＰＴ−７２３（１０ｍｐｋ、３０ｍｐｋ）、抗ＣＴＬＡ−４／ＬＰＴ−７２３（１０ｍｐｋ、３０ｍｐｋ）の組合せ、または抗ＰＤ−１／ＬＰＴ−７２３（１０ｍｐｋ、３０ｍｐｋ）の組合せを用いて、３日目に処置を開始した。抗ＣＴＬＡ−４は、ｉ．ｐ．により１００μｇ／動物の用量で８日目に、５０μｇ／動物の用量で１１および１４日目に投薬した。抗ＰＤ−１は、ｉ．ｐ．により、３日目に開始して２週間、週に２回、１００μｇ／動物の用量で投薬した。ＬＰＴ−７２３は、経口により（ｐ．ｏ．）、３日目に開始して１日２回投薬した。表１は、第１〜４群についての応答の概要を示す。
【表１】
0006786529.tif 000013
【０１０４】
以下の表２は、第１〜３群および第１１〜１６群についての応答の概要を示す。
【表２】
0006786529.tif 000014
【０１０５】
減少した腫瘍体積中央値（図１〜２）および増加した生存（図３）を示す、ＬＰＴ−７２３（２つの用量コホート）および免疫療法チェックポイント阻害剤（immunotherapy  checkpoint  inhibitor）（ＰＤ１およびＣＴＬＡ４抗体）の組合せを用いる群において、非常に有意な相乗作用を実証した。試験の終了時に、体重はベースラインの９０〜１１５％の範囲であった。対照群２〜４ならびにＬＰＴ−７２３単独療法および併用療法群１１〜１６の個別のマウスについての腫瘍体積中央値を、図４〜１２に示す。
治療的Ｃｏｌｏｎ２６結腸がんモデル：
【０１０６】
Ｃｏｌｏｎ２６マウス同系結腸がんを保有するＣＲ  ＢＡＬＢ／ｃマウスを、対照（ビヒクル）、抗ＣＴＬＡ−４（クローン９Ｈ１０）、抗ＰＤ−１（クローンＲＭＰ１−１４）、抗ＣＴＬＡ−４／抗ＰＤ−１の組合せ、ＬＰＴ−７２３（１０ｍｐｋ、３０ｍｐｋ）、抗ＣＴＬＡ−４／ＬＰＴ−７２３（１０ｍｐｋ、３０ｍｐｋ）の組合せ、抗ＰＤ−１／ＬＰＴ−７２３（１０ｍｐｋ、３０ｍｐｋ）の組合せおよび抗ＣＴＬＡ−４／抗ＰＤ−１／ＬＰＴ−７２３（１０ｍｐｋ、３０ｍｐｋ）の組合せを用いて処置した。腫瘍体積が約８０〜１２０ｍｍ３に到達したときに処置を開始した。抗ＣＴＬＡ−４は、ｉ．ｐ．により１００μｇ／動物で２日目に、５０μｇ／動物で５および８日目に投薬した。抗ＰＤ−１は、ｉ．ｐ．により、１００μｇ／動物で週に２回、２週間投薬した。ＬＰＴ−７２３は、ｐ．ｏ．により、１日目に開始して１日２回、投薬した。ＬＰＴ−７２３と抗ＰＤ−１の間の相乗効果を示す、抗ＰＤ−１、ＬＰＴ−７２３および抗ＰＤ−１／ＬＰＴ−７２３の併用療法群についての結果を示す（図１３）。
（実施例２）
Ｌｅｗｉｓ  肺がん（ＬＬＣ）モデル：
【０１０７】
Ｃ５７／ＢＬ６マウスに、Ｌｅｗｉｓ  Ｌｕｎｇマウス肺がん細胞を１日目に移植し、対照（ビヒクル）、抗ＣＴＬＡ−４（クローン９Ｈ１０）、抗ＰＤ−１（クローンＲＭＰ１−１４）、抗ＣＴＬＡ−４／抗ＰＤ−１の組合せ、ＬＰＴ−７２３（１０ｍｐｋ、３０ｍｐｋ）、抗ＣＴＬＡ−４／ＬＰＴ−７２３（１０ｍｐｋ、３０ｍｐｋ）の組合せ、抗ＰＤ−１／ＬＰＴ−７２３（１０ｍｐｋ、３０ｍｐｋ）の組合せおよび抗ＣＴＬＡ−４／抗ＰＤ−１／ＬＰＴ−７２３（１０ｍｐｋ、３０ｍｐｋ）の組合せを用いて、２日目に処置を開始した。抗ＣＴＬＡ−４は、ｉ．ｐ．により１００μｇ／動物で５日目に、５０μｇ／動物で８および１１日目に投薬した。抗ＰＤ−１は、ｉ．ｐ．により、２日目に開始して２週間、週に２回、１００μｇ／動物で投薬した。ＬＰＴ−７２３は、ｐ．ｏ．により、２日目に開始して１日２回投薬した。抗ＰＤ−１（図１４）または抗ＣＴＬＡ−４（図１５）と組み合わせた、１日２回、３０ｍｐｋのＬＰＴ−７２３は、ＬＬＣ同系マウスモデルにおいて、抗ＰＤ−１または抗ＣＴＬＡ−４単独と比較して有意に腫瘍成長を阻害した。
（実施例３）
Ｐａｎ０２膵臓がんモデル：
【０１０８】
Ｐａｎ０２マウス同系膵臓がんを保有するＣ５７／ＢＬ６マウスを、対照（ビヒクル）、抗ＰＤ−１（クローンＲＭＰ１−１４）、ＬＰＴ−７２３および抗ＰＤ−１／ＬＰＴ−７２３の組合せを用いて処置した。腫瘍体積が約８０〜１２０ｍｍ３に到達したときに処置を開始した。抗ＰＤ−１は、ｉ．ｐ．により、１０ｍｐｋで週に２回、３週間投薬した。ＬＰＴ−７２３は、ｐ．ｏ．により、１日２回、３０ｍｐｋ投薬した。
【０１０９】
ＬＰＴ−７２３単独療法および併用療法は、このモデルにおいて、６０％を超える腫瘍体積中央値の減少をもたらした（図１６Ａ）。体重における有意な変化は認められなかった。ｉｎ  ｖｉｔｒｏの細胞生存アッセイ（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ発光アッセイ）は、ＬＰＴ−７２３が、直接的にＰａｎ０２細胞を殺滅しないことを示した（図１６Ｂ、Ｐａｎ０２細胞におけるＬＰＴ−７２３についてのＩＣ５０は、２６．５７μＭであったのに対し、化学療法剤シスプラチンでは１．０９μＭであった）。
（実施例４）
Ａ２０リンパ腫がんモデル：
【０１１０】
Ａ２０マウス同系Ｂ細胞リンパ腫を保有するＢＡＬＢ／ｃマウスを、対照（ビヒクル）、抗ＰＤ−１（クローンＲＭＰ１−１４）、ＬＰＴ−７２３および抗ＰＤ−１／ＬＰＴ−７２３の組合せを用いて処置した。腫瘍体積が約８０〜１２０ｍｍ３に到達したときに処置を開始した。抗ＰＤ−１は、ｉ．ｐ．により、１０ｍｐｋで週に２回、３週間投薬した。ＬＰＴ−７２３は、ｐ．ｏ．により１日２回、３０ｍｐｋ投薬した。１５日目に、ＬＰＴ−７２３単独療法は、腫瘍体積中央値の４３％の減少をもたらし、併用療法は、７９％の減少をもたらし（図１７Ａ）、組合せの高い相乗効果を示した。体重における有意な変化は認められなかった。ｉｎ  ｖｉｔｒｏの細胞生存アッセイは、ＬＰＴ−７２３が、直接的にＡ２０細胞を殺滅しないことを示した（図１７Ｂ、Ａ２０細胞におけるＬＰＴ−７２３についてのＩＣ５０は、８４．１０μＭであったのに対し、シスプラチンについては１．０７μＭであった）。
（実施例５）
ＭＢＴ−２膀胱がんモデル：
【０１１１】
ＭＢＴ−２マウス同系膀胱がんを保有するＣ３Ｈマウスを、対照（ビヒクル）、抗ＰＤ−１（クローンＲＭＰ１−１４）、ＬＰＴ−７２３、および抗ＰＤ−１／ＬＰＴ−７２３の組合せを用いて処置した。腫瘍体積が約８０〜１２０ｍｍ３に到達したときに処置を開始した。抗ＰＤ−１は、ｉ．ｐ．により、１０ｍｐｋで週に２回、３週間投薬した。ＬＰＴ−７２３は、ｐ．ｏ．により、１日２回、３０ｍｐｋ投薬した。ＭＢＴ−２モデルにおいては１３日目に、対照に比較して、すべての治療群が少なくとも７０％の腫瘍体積中央値の低減を示した（図１８Ａ）。体重における有意な変化は認められなかった。ｉｎ  ｖｉｔｒｏの細胞生存アッセイは、ＬＰＴ−７２３が、直接的にＭＢＴ−２細胞を殺滅しないことを示した（図１８Ｂ、ＭＢＴ−２細胞におけるＬＰＴ−７２３についてのＩＣ５０は、４５．４９μＭであったのに対し、シスプラチンについては６．８６７μＭであった）。
（実施例６）
ＨＣＴ−１１６ヒト結腸直腸がん異種移植モデル：
【０１１２】
ＨＣＴ−１１６ヒト結腸異種移植片を保有するＢＡＬＢ／ｃヌードマウスを、対照（ビヒクル）およびＬＰＴ−７２３を用いて処置した。腫瘍体積が約８０〜１２０ｍｍ３に到達したときに処置を開始した。ＬＰＴ−７２３は、ｐ．ｏ．により、１日２回、３０ｍｐｋ投薬した。ＬＰＴ−７２３単独療法の活性が実証され、腫瘍成長の４５％の阻害をもたらしたが（図１９Ａ）、培養物中のＨＣＴ１１６細胞に対し、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで３０μＭの用量までＬＰＴ−７２３は活性がなかった（図１９Ｂ）。腫瘍成長阻害の結果は、ＬＰＴ−７２３が、直接的な腫瘍細胞への作用ではなく、腫瘍間質微小環境を調節することを示唆している。
（実施例７）
Ｕｐｓｔａｔｅキナーゼパネル：
【０１１３】
ＬＰＴ−７２３の阻害活性を、放射測定アッセイまたは分光測定アッセイのいずれかを使用して試験した、多くのキナーゼの残留キナーゼ活性を追跡することによって決定した。放射測定アッセイにおいて、
【化１２】
0006786529.tif 000015
由来のタンパク質、ホスホペプチドまたはリン脂質生成物に取り込まれた放射能を、時間の関数として追跡した。分光測定アッセイにおいて、ピルベートキナーゼおよびラクテートデヒドロゲナーゼを使用して、キナーゼ反応により生成したＡＤＰの各モルをＮＡＤＨから１モルのＮＡＤの生成と共役させた。
【０１１４】
ＫｉｎａｓｅＰｒｏｆｉｌｅｒ（商標）（Ｅｕｒｏｆｉｎｓ  Ｐｈａｒｍａ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）アッセイは、類似の放射測定検出アッセイを採用した。以下の表３は、各キナーゼアッセイにおいて使用したペプチド基質、その濃度、およびＡＴＰ濃度を列挙する。被験化合物を、ＤＭＳＯ溶液としてアッセイに導入した。指定の反応時間後、反応をクエンチし、生成した３３Ｐ標識ホスホペプチド／タンパク質をフィルターにトラップし、放射能計測器において定量した。毒性問題は観察されなかった。
【表３−１】
0006786529.tif 000016
【表３−２】
0006786529.tif 000017
（実施例８）
２菌株Ａｍｅｓ試験：
【０１１５】
試験系：使用した２種のテスター菌株は、Ａｍｅｓら（１９７５年）により記載されたサルモネラ・ティフィムリウム（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）ヒスチジン栄養要求株ＴＡ９８およびＴＡ１００であった。テスター菌株ＴＡ９８は、フレームシフト型変異原物質により、栄養要求性から原栄養性に復帰するが、テスター菌株ＴＡ１００は、フレームシフト変異と塩基対置換変異の両方を引き起こす変異原物質により復帰する。
【０１１６】
実験デザイン：試験系を、最初にＭｃＣａｎｎら（１９７５年）に記載され、ＭａｒｏｎおよびＡｍｅｓ（１９８３年）により改訂されたプレート組み込み方法論（ｐｌａｔｅ  ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ  ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ）を介してＬＰＴ−７２３に曝露した。手短に述べれば、適切なビヒクル対照および陽性対照とともに、ＬＰＴ−７２３を８種の用量レベルで試験した。テスター菌株ＴＡ９８およびＴＡ１００の終夜の培養物を、Ａｒｏｃｌｏｒ誘発ラット肝臓Ｓ９の存在下および非存在下で選択最小寒天（ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｍｉｎｉｍａｌ  ａｇａｒ）に蒔いた。ＬＰＴ−７２３のすべての用量レベル、ビヒクル対照および陽性対照を２つ組で蒔いた。
【０１１７】
プレーティングおよびスコアリング手順：ＬＰＴ−７２３希釈液を使用直前に調製し、黄色光の下で室温において試験系に送達した。２分の１（０．５）ミリリットルのＳ９またはシャムミックス（Ｓｈａｍ  ｍｉｘ）、１００μＬのテスター菌株および５０μＬのビヒクルまたはＬＰＴ−７２３希釈液を、４５±２℃において、２．０ｍＬの溶融した選択上層寒天（ｍｏｌｔｅｎ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｔｏｐ  ａｇａｒ）に添加した。ボルテックス後、２５ｍＬの最小下層寒天（ｍｉｎｉｍａｌ  ｂｏｔｔｏｍ  ａｇａｒ）の表面上を混合物で覆った。陽性対照を蒔く場合は、ＬＰＴ−７２３のアリコートを適切な陽性対照の５０μＬアリコートで置き換えた。重層物が固化した後、プレートを反転し、３７±２℃で約４８〜７２時間インキュベートした。インキュベーション期間の直後にプレートを計数するか、またはコロニー計数が行えるまで２〜８℃で保存した。
【０１１８】
解剖顕微鏡を使用して、バックグラウンド細菌叢の状態をＬＰＴ−７２３の毒性の証拠に関して評価した。沈殿を、拡大せずに目視検査によって評価した。各テスター菌株および活性化条件に関する復帰変異株コロニーを、プレートが毒性を示さない限り、自動コロニー計測器により全体的に、または手動で全体的に計数した。自動コロニー計数を妨害するのに十分なＬＰＴ−７２３の沈殿を有するプレートは、手動で計数した。
【０１１９】
溶解性および試験した用量レベル：標的細胞との適合性に基づいて、最適の溶媒としてジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を選択した。ＬＰＴ−７２３は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中で、０．０３〜１００ｍｇ／ｍＬの溶液を形成した。試験した最大用量は、プレート当たり５０００μｇであり、この用量を、１００ｍｇ／ｍＬの濃度および５０μＬのプレーティングアリコートを使用して達成した。試験した用量レベルは、プレート当たり、１．５、５．０、１５、５０、１５０、５００、１５００および５０００μｇであった。毒性は観察されなかった。
（実施例９）
小核アッセイ：
【０１２０】
８日目における剖検の前に、７日間の経口毒性および毒性動態（ＴＫ）試験の主要試験群のラットを小核のフロー分析の評価のために、頸静脈から出血させた。毒性は観察されなかった。血液の採取および固定のために使用した手順を以下に概説する。
【０１２１】
固定液の管の準備：採血の１日前に固定液の管（fixative  tube）を準備した。２つの１５ｍＬポリプロピレン遠心管（ＶＷＲ番号２１００８〜１０３）が試料ごとに必要であった。２ｍＬの超低温固定液−メタノールを、適切にラベルした管それぞれ（管Ｂ１およびＢ２）に添加し、キャップを元に戻した。管のラックを終夜、約−８０℃に置いて、固定液の十分な冷却を可能とした。
【０１２２】
（採血前の）抗凝固剤／希釈剤バイアルの準備：各試料のために１つのバイアル（２ｍＬのクライオバイアル（ｃｒｙｏｖｉａｌ）；ＶＷＲ番号６６００８〜７２８）が必要であった。３５０μＬの抗凝固剤／希釈剤（ＢｉｏＲｅｌｉａｎｃｅにより提供されたＬｉｔｒｏｎのＰｒｏｔｏｔｙｐｅ  Ｐｉｇ−ａ  Ｍｕｔａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ  Ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ、ロット番号１７７１６）を、適切にラベルしたバイアル（管Ａ）それぞれに無菌的にアリコートした。必要となるまでバイアルを冷蔵した（２〜８℃）。
【０１２３】
血液試料の採取：Ｋ２ＥＤＴＡ管へ、約０．３ｍＬの血液を各動物から採取した。反転することによって管をよく混合し、処理の前に最大３０分間、その管をウェットアイス（ｗｅｔ  ｉｃｅ）上に置いた。約１００μＬの体積の血液（６０〜１２０μＬが必要であった）を、Ｋ２ＥＤＴＡ管から移し、冷たい抗凝固剤を含有する管（管Ａ）に入れた。抗凝固剤および血液を含有する管（管Ａ）を反転させて穏やかに混合し、固定前に最大３０分間、ウェットアイス上に置いた。
【０１２４】
試料を固定すること：固定液および固定された血液を含有する管が超低温（約−８０℃）のままであり、ドライアイスからの蒸気と接触しないことが極めて重要であった。ＣＯ２の蒸気は、カーボネーションと細胞の凝集を引き起こす。この同じ理由のために、固定液は、ドライアイスを入れた冷凍庫に保存せず、固定はドライアイス上で実施しなかった。この問題を回避するために、固定液を含有する管を、冷凍庫から直接取り出した。固定液は超低温（約−８０℃）の冷凍庫に保持した。以下のステップを（１分未満で）非常に迅速に実施し、冷凍庫の近くで実施した。各試料を２つ組で固定した。２つ組の（バックアップ）試料は、輸送の問題が起きた場合またはフローサイトメトリー分析の問題が生じた場合に重要である。
【０１２５】
固定の直前に、血液／抗凝固剤混合物を含有するバイアル（管Ａ）を反転させて、均一な懸濁液を確実にした。マイクロピペッターを使用して、１８０μＬの血液を、管Ａから超低温の固定液−メタノールを含有する２つ組の管（管Ｂ１およびＢ２）のそれぞれに移した。固定液の約１ｃｍ上方にピペッターのチップを保持した。ピペットチップが管の側面または固定液の表面に触れないことを確認しながら、１８０μＬの希釈した血液試料を固定液中へ直接的に力強く排出した。固定した血液の管にきつくキャップをして、短時間（３〜５秒のみ）ボルテックスし、超低温の冷凍庫（約−８０℃）に戻した。輸送まで、試料を約−８０℃で（ドライアイスが保存されない冷凍庫に）保存した。−７０℃またはそれ未満で固定液中に保存した（管Ｂ１およびＢ２中の）試料は、温度が維持される限り、少なくとも１年間安定である。冷たい抗凝固剤を含有する２ｍＬのクライオバイアル（管Ａ）中に残った血液は廃棄した。
【０１２６】
固定した試料のＬＴＳＳへの移動：試料が固定液中に少なくとも３日間あった後、試料をＬＴＳＳ中に移した。各クライオバイアルを適切にラベルした。凍らないが氷冷の温度を達成するために、緩衝溶液を包装して氷上に置いた（約４５分間）。氷の容器と以下で使用する緩衝溶液をアリコートするために準備のできた２５ｍＬピペットを用いて、以下のステップをできるだけ迅速に実施した（約２０秒以内）。固定した血液試料の管（管Ｂ１およびＢ２）を超低温の冷凍庫から取り出した。キャップをした管を迅速に氷上に置き、冷凍庫を閉じた。細胞を再懸濁するために、管を３〜５秒間ボルテックスし、管の上でキャップを緩めた。各管に１２ｍＬの氷冷の緩衝溶液を直ちに添加した。１つの管から別の管への試料の移動を防ぐために、管がピペットチップと触れないように注意した。キャップを締め、溶液を混合するために管を一回反転させ、すべてが処理されるまで、管を直ちに氷上に置いた。固定した細胞に緩衝溶液を添加した後に、管が氷上または２℃〜８℃のままであることが重要であった。管を約３００×ｇ〜４００×ｇで５分間遠心分離した。遠心分離が完了したら、迅速に管を取り出し、直ちに氷上に戻した。各管からの上清を吸引し、その中で細胞を再懸濁するために５０μＬ未満の上清を残した。再度管にキャップをし、直ちに氷に戻した。一度に１つの試料を扱い、ボルテックスすることにより細胞を速やかに残った上清に再懸濁した。管を氷上に戻し、残った試料を再懸濁した。１ｍＬの（ＢｉｏＲｅｌｉａｎｃｅにより提供された）長期保存溶液（ＬＴＳＳ）を各管に添加し、内容物を適切なクライオバイアルに移し、キャップを締めた。試料を発送まで約−８０℃で保存した。試験結果は、有意な毒性のないことを明らかにした。
（実施例１０）
サルの心血管（ＣＶ）試験
【０１２７】
ビヒクルおよびＬＰＴ−７２３の調製および実験デザイン：ビヒクル、（脱イオン水中）５０ｍＭ  ｐＨ５．０、クエン酸ナトリウムを含む、２％  ＴＰＧＳ／１．５％  ＨＰＭＣＡＳ−ＨＦ／１．５％  ＰＶＰ−ＶＡを、前製剤化し、各投薬日における使用のために分配した。ビヒクルを投薬のために取得するまで、琥珀色のガラス容器中、室温で撹拌しながら保存した。
【０１２８】
被験品ＬＰＴ−７２３を、２５％の薬物を負荷した、不活性賦形剤として７５％のＨＰＭＣ−ＡＳを含む噴霧乾燥分散品として製剤化した。したがって、被験品製剤の濃度は、４の補正因子を使用して遊離塩基として計算した。純度に関する調整は行わなかった。適量のＬＰＴ−７２３をビヒクルと混合して、５および８ｍｇ／ｍＬの名目上の濃度を達成した。ＬＰＴ−７２３の製剤を必要に応じて各投薬日に調製し、投薬のために取得するまで、琥珀色のガラス容器中、室温で撹拌しながら保存した。
【０１２９】
ビヒクルおよびＬＰＴ−７２３の投与：同じ３頭または４頭の雄のサルに、ビヒクル（０ｍｇ／ｋｇ）ならびに２５ｍｇ／ｋｇおよび４０ｍｇ／ｋｇの用量レベルのＬＰＴ−７２３を、５ｍＬ／ｋｇの投薬体積で経口経管栄養法により投与した（以下の表４）。１頭または２頭の動物／用量レベルに、それぞれの場合に、投与の間に７〜１４日間の休薬期間を伴い投薬する、クロスオーバーデザインに従ってすべての用量を投与した。動物番号６００２には、動物の送信機がもはや適切に機能しないため、２５ｍｇ／ｋｇでの投薬をしなかった。用量投与の間ずっと、製剤を撹拌した。各投薬後の経管栄養管の取り外し前に、管を１０ｍＬの水道水で洗い流した。投薬後のすべての心臓血管のデータおよび体温のデータは、水道水の洗い流しに基づいた。個別の用量は、直近の体重に基づいた。有意な毒性学的所見はなかった。
【表４】
0006786529.tif 000018
ラットの２８日間ＧＬＰ毒性試験：
【０１３０】
ビヒクルおよび被験品の調製：ビヒクル、脱イオン水中、５０ｍＭ  ｐＨ５．０、クエン酸ナトリウムを含む、２％  ＴＰＧＳ／１．５％  ＨＰＭＣＡＳ−ＨＦ／１．５％  ＰＶＰ−ＶＡを、毎週の使用のために調製し、使用しないときは室温で保存した。ＬＰＴ−７２３製剤を調製するとき、純度に関する調整に４の補正因子を使用した。適量のＬＰＴ−７２３をビヒクルと混合して、０．３、０．６および１．２ｍｇ／ｍＬの名目上の濃度を達成した。ＬＰＴ−７２３の製剤を毎日調製し、光から保護して室温で保存し、調製の４時間以内に投薬した。
【０１３１】
動物の取得および順化：全部で９８頭の雄性および９８頭の雌性ＣＤ（登録商標）［Ｃｒｌ：ＣＤ（登録商標）（ＳＤ）］ラット（受け入れ時に約６〜７週齢）をＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｐｏｒｔａｇｅ、Ｍｉｃｈｉｇａｎから受け入れた。１０日間の順化期間の間、全体的な健康および任意の疾患の兆候について動物を毎日観察した。試験のための選択の前に、すべての動物が詳細な臨床検査を受けた。動物に、偽用量の水道水を同じ方法および試験における使用を目的とする投薬体積で２回、投与した。
【０１３２】
無作為化、試験への割り当ておよび維持：標準的な体重による測定値の無作為化手順を使用して、８５頭の雄性および８５頭の雌性動物（無作為化にあたり、それぞれ、体重２２８〜２８３ｇおよび１７０〜２１８ｇ）を、以下の表に特定される対照群および処置群に割り当てた。
【表５】
0006786529.tif 000019
【０１３３】
ビヒクルおよびＬＰＴ−７２３の投与：ビヒクルおよびＬＰＴ−７２３を１日１回、主要試験動物について１２ｍｇ／ｋｇ／日で２２日間、ＴＫ動物について１２ｍｇ／ｋｇ／日で２３日間、および、すべての動物について０、３および６ｍｇ／ｋｇ／日で２８日間投与した。経口経管栄養法により、１０ｍＬ／ｋｇの投薬体積で動物に投薬した。対照群は、処置群と同じ方法でビヒクルを受けた。ビヒクルおよび被験品を、撹拌した製剤から、日ごとに投薬する最初の動物に基づいて、毎日およそ同じ時間に（±２時間）投薬した。個別の用量は、直近の体重に基づいた。
【０１３４】
結果：無有害量（ＮＯＡＥＬ）は、３ｍｇ／ｋｇ未満であった。ＡＵＣは、約３５であり、治療指数は４未満であった。ラットにおいて化合物は耐容性が低く：数種の臨床化学パラメーターが影響を受け、最も注目すべきは、循環好中球の大きな増加であった。増加した好中球数は、複数の器官、特に胃腸管における組織蓄積および炎症状態と相関した。
（実施例１２）
サルの７日間用量範囲設定試験：
【０１３５】
対照／ビヒクル品の調製：対照／ビヒクル品（５０ｍＭクエン酸ナトリウム緩衝液、ｐＨ５．０を含む、２％  ＴＰＧＳ／１．５％  ＨＰＭＣＡＳ−ＨＦ／１．５％  ＰＶＰ−ＶＡ）を、投薬開始の３日前に調製し、試験期間中、直接光を避けて室温で保存した。以下の指示は、２．５Ｌの最終体積の調製用であった。これらの指示は、必要に応じて調整した。
【０１３６】
適切なサイズの容器に５００ｍＬの１０％ビタミンＥ−ＴＰＧＳを添加し、撹拌を開始した。同じ容器に７５０ｍＬの５％  ＨＰＭＣＡＳ−ＨＦ／５％  ＰＶＰ−ＶＡを添加し、適切な混合を確実にするために中程度のスピードで３０分間撹拌した。１Ｌの脱イオン水を添加し、３０分間撹拌を継続した。１２５ｍＬの１Ｍクエン酸ナトリウム緩衝液と１２５ｍＬの脱イオン水を、撹拌しながら添加した。最終的なビヒクルを、中程度のスピードで１時間撹拌した。ビヒクルは、濁った溶液であって、試験期間中、直接光を避けて室温で保存した。
【０１３７】
実験デザイン：被験品目および対照／ビヒクル品目を、以下の表６に記載したとおりに経口経管栄養法により連続して７日間、１日１回投与した。各動物に投与した投薬体積は、５ｍＬ／ｋｇであった。投薬終了の１日後、主要動物を安楽死させ、８日目に剖検に供した。
【表６】
0006786529.tif 000020
*対照動物は、対照/ビヒクル品(50mMクエン酸ナトリウム緩衝液、pH5.0を含む、2%  TPGS/1.5%  HPMCAS-HF/1.5%  PVP-VA)のみを受けた。
**用量レベルおよび濃度は、活性被験品目に関して表し;その結果として、被験品目の粉末を秤量し、分配するときに、補正因子4を使用した。LPT-723は、25%の活性剤（active）および75%のHPMCAS-HFポリマーを含有する噴霧乾燥分散品(SDD)として使用した。
【０１３８】
結果：ＬＰＴ−７２３の最高用量は、最大耐用量（ＭＴＤ）を超えた。骨髄およびリンパ組織における随伴効果を伴う、用量関連のリンパ球数の減少があった。ＮＯＡＥＬを約５０  ＡＵＣと推定すると、予測される治療指数は、低用量で約５となる。
（実施例１３）
マウスの７日間用量範囲設定試験：
【０１３９】
被験品目および対照／ビヒクル品目の調製：ビヒクルは、脱イオン水中、５０ｍＭクエン酸ナトリウム（ｐＨ５．０）を含む、２％  ＴＰＧＳ／１．５％  ＨＰＭＣＡＳ−ＨＦ／１．５％  ＰＶＰ−ＶＡである。ＬＰＴ−７２３は、２５％の活性剤および７５％のＨＰＭＣＡＳ−ＨＦポリマーを含有する噴霧乾燥分散品（ＳＤＤ）である。被験品目およびビヒクル品目を、光から保護して室温で保存し、乾燥させた。用量製剤は毎日調製した。別段の指示のない限り、均一な製剤を達成するための適切な混合機を使用して、ＬＰＴ−７２３をビヒクルと混合して所望の濃度を達成した。
【０１４０】
ＬＰＴ−７２３およびビヒクルを、連続７日間、１日あたり１回投与した。試験期間の間ずっと、およそ同じ時間に（±２時間）用量を投与した。すべての主要試験動物を、８日目（最終投薬の次の日）に剖検に供した。以下の表７を参照されたい。
【表７】
0006786529.tif 000021
【０１４１】
結果：ＬＰＴ−７２３は、耐容性は良好であり、リンパ球および単球数は減少した。臨床兆候または組織病理学的所見はなかった。この試験は、実施例１１に報告した、明らかに「ラット特異的な」知見の追加的緩和措置を提供した。
引用文献
Brahmer  JR,  et  al.    Safety  and  activity  of  anti-PD-L1  antibody  in  patients  with  advanced  cancer.  N  Engl  J  Med.  2012  Jun  28;366(26):2455-65.  
Bronte  V,  et  al.  Identification  of  a  CD11b(+)/Gr-1(+)/CD31(+)  myeloid  progenitor  capable  of  activating  or  suppressing  CD8(+)  T  cells.  Blood.  2000  Dec  1;96(12):3838-46.
Bunt  SK,  et  al.  Inflammation  induces  myeloid-derived  suppressor  cells  that  facilitate  tumor  progression.  J  Immunol.  2006  Jan  1;176(1):284-90.
Cleary  JM,  Shapiro  GI.  Development  of  phosphoinositide-3  kinase  pathway  inhibitors  for  advanced  cancer.  Curr  Oncol  Rep.  2010  Mar;12(2):87-94.  
Du  R,  et  al.  HIF1alpha  induces  the  recruitment  of  bone  marrow-derived  vascular  modulatory  cells  to  regulate  tumor  angiogenesis  and  invasion.  Cancer  Cell.  2008  Mar;13(3):206-20.
Grivennikov  SI,  et  al.  Immunity,  inflammation,  and  cancer.  Cell.  2010  Mar  19;140(6):883-99.  
Hodi  FS,  et  al.  Improved  survival  with  ipilimumab  in  patients  with  metastatic  melanoma.  N  Engl  J  Med.  2010  Aug  19;363(8):711-23.  
Kim  K,  et  al.  Eradication  of  metastatic  mouse  cancers  resistant  to  immune  checkpoint  blockade  by  suppression  of  myeloid-derived  cells.  Proc  Natl  Acad  Sci  U  S  A.  2014  Aug  12;111(32):11774-9.  
Kim  S,  et  al.  Carcinoma-produced  factors  activate  myeloid  cells  through  TLR2  to  stimulate  metastasis.  Nature.  2009  Jan  1;457(7225):102-6.  
Korman  AJ,  et  al.  Checkpoint  blockade  in  cancer  immunotherapy.  Adv  Immunol.  2006;90:297-339.
Lin  EY,  et  al.    Macrophages  regulate  the  angiogenic  switch  in  a  mouse  model  of  breast  cancer.  Cancer  Res.  2006  Dec  1;66(23):11238-46.  
Maron  DM,  Ames  BN.  Revised  methods  for  the  Salmonella  mutagenicity  test.  Mutat  Res.  1983  May;113(3-4):173-215.
McCann  J,  et  al.  Detection  of  carcinogens  as  mutagens  in  the  Salmonella/microsome  test:  assay  of  300  chemicals.  Proc  Natl  Acad  Sci  U  S  A.  1975  Dec;72(12):5135-9.
Nagaraj  S,  et  al.  Reciprocal  relationship  between  myeloid-derived  suppressor  cells  and  T  cells.  J  Immunol.  2013  Jul  1;191(1):17-23.  
Pardoll  DM.  The  blockade  of  immune  checkpoints  in  cancer  immunotherapy.  Nat  Rev  Cancer.  2012  Mar  22;12(4):252-64.
Schmid  MC,  et  al.  Receptor  tyrosine  kinases  and  TLR/IL1Rs  unexpectedly  activate  myeloid  cell  PI3kγ,  a  single  convergent  point  promoting  tumor  inflammation  and  progression.  Cancer  Cell.  2011  Jun  14;19(6):715-27.  
Talmadge  JE,  Gabrilovich  DI.  History  of  myeloid-derived  suppressor  cells.  Nat  Rev  Cancer.  2013  Oct;13(10):739-52.  
Topalian  SL,  et  al.  Safety,  activity,  and  immune  correlates  of  anti-PD-1  antibody  in  cancer.  N  Engl  J  Med.  2012  Jun  28;366(26):2443-54.  
Wolchok  JD,  et  al.  Nivolumab  plus  ipilimumab  in  advanced  melanoma.  N  Engl  J  Med.  2013  Jul  11;369(2):122-33.
【０１４２】
上記で引用されるすべての特許、特許出願および刊行物は、本明細書に完全に記載されているように、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０１４３】
本発明はこのように記載されており、これが多くの方法で変更されうることは明らかである。このような変更は、本発明の精神および範囲を逸脱するとみなされるべきではなく、このようなすべての改変は以下の特許請求の範囲の範囲内に含まれることを意図するものである。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
被験体における障害の結果を処置または改善するための方法であって、有効量の式（Ｉ）：
【化１３】
0006786529.tif 000022
の化合物または薬学的に許容されるその塩である第１の薬剤と、免疫チェックポイント阻害剤である第２の薬剤とを該被験体に投与するステップを含む方法。
（項目２）
式（Ｉ）の前記化合物が、実質的に純粋なそのＲ−エナンチオマー、実質的に純粋なそのＳ−エナンチオマー、ならびに該Ｒ−エナンチオマーおよびＳ−エナンチオマーのラセミ混合物からなる群から選択される、項目１に記載の方法。
（項目３）
式（Ｉ）の前記化合物が、実質的に純粋なＲ−エナンチオマー：
【化１４】
0006786529.tif 000023
または薬学的に許容されるその塩である、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記免疫チェックポイント阻害剤が、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記免疫チェックポイント阻害剤が、ニボルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ペンブロリズマブ（Ｍｅｒｃｋ）、ピジリズマブ（Ｃｕｒｅｔｅｃｈ）、ＡＭＰ−２２４（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ／Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（Ｒｏｃｈｅ）、ＭＤＸ−１１０５（Ｍｅｄａｒｅｘ，Ｉｎｃ．／Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ−４７３６（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、アレルマブ（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ）、イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ、（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、トレメリムマブ（Ｐｆｉｚｅｒ）、ピジリズマブ（ＣｕｒｅＴｅｃｈ，Ｌｔｄ．）、ＩＭＰ３２１（Ｉｍｍｕｔｅｐ  Ｓ．Ａ．）、ＭＧＡ２７１（Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ）、ＢＭＳ−９８６０１６（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、リリルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ウレルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＰＦ−０５０８２５６６（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＩＰＨ２１０１（Ｉｎｎａｔｅ  Ｐｈａｒｍａ／Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ−６４６９（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＣＰ−８７０，８９３（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、モガムリズマブ（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｉｒｉｎ）、バルリルマブ（ＣｅｌｌＤｅｘ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、アベルマブ（ＥＭＤ  Ｓｅｒｏｎｏ）、ガリキシマブ（Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ）、ＡＭＰ−５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＡＵＮＰ  １２（Ａｕｒｉｇｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｉｅｒｒｅ  Ｆａｂｒｅ）、インドキシモド（ＮｅｗＬｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＮＬＧ−９１９（ＮｅｗＬｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＩＮＣＢ０２４３６０（Ｉｎｃｙｔｅ）およびこれらの組合せからなる群から選択される、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記第１および第２の薬剤が、単一の単位用量として投与される、項目１に記載の方法。
（項目７）
前記第１および第２の薬剤が、共投与される、項目１に記載の方法。
（項目８）
前記第１の薬剤が、前記第２の薬剤の前に投与される、項目７に記載の方法。
（項目９）
前記第２の薬剤が、前記第１の薬剤の前に投与される、項目７に記載の方法。
（項目１０）
前記第１および第２の薬剤の前記被験体への投与が、前記障害の処置において相乗効果を提供する、項目１に記載の方法。
（項目１１）
前記障害が、がんである、項目１に記載の方法。
（項目１２）
前記がんが、膀胱がん、乳がん、子宮頸部がん、結腸がん、食道がん、子宮内膜がん、胃がん、神経膠芽腫、頭部および頸部がん、肝細胞癌、白血病、肺がん、リンパ腫、黒色腫、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、神経内分泌がん、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、腎細胞癌、ラブドイドがん、肉腫および尿路がんからなる群から選択される、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
前記がんが、膀胱がん、結腸がん、肺がん、リンパ腫、および膵臓がんからなる群から選択される、項目１１に記載の方法。
（項目１４）
前記被験体が、哺乳動物である、項目１に記載の方法。
（項目１５）
前記哺乳動物が、ヒト、霊長動物、農場動物、および飼育動物からなる群から選択される、項目１４に記載の方法。
（項目１６）
前記哺乳動物が、ヒトである、項目１４に記載の方法。
（項目１７）
被験体におけるがんの結果を処置または改善するための方法であって、有効量の式（Ｉ）：
【化１５】
0006786529.tif 000024
の化合物または薬学的に許容されるその塩を該被験体に投与するステップを含む方法。
（項目１８）
式（Ｉ）の前記化合物が、実質的に純粋なそのＲ−エナンチオマー、実質的に純粋なそのＳ−エナンチオマー、ならびに該Ｒ−エナンチオマーおよびＳ−エナンチオマーのラセミ混合物からなる群から選択される、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
式（Ｉ）の前記化合物が、実質的に純粋なＲ−エナンチオマー：
【化１６】
0006786529.tif 000025
または薬学的に許容されるその塩である、項目１７に記載の方法。
（項目２０）
前記がんが、膀胱がん、乳がん、子宮頸部がん、結腸がん、食道がん、子宮内膜がん、胃がん、神経膠芽腫、頭部および頸部がん、肝細胞癌、白血病、肺がん、リンパ腫、黒色腫、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、神経内分泌がん、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、腎細胞癌、ラブドイドがん、肉腫および尿路がんからなる群から選択される、項目１７に記載の方法。
（項目２１）
前記がんが、結腸がんである、項目１７に記載の方法。
（項目２２）
前記被験体が、哺乳動物である、項目１７に記載の方法。
（項目２３）
前記哺乳動物が、ヒト、霊長動物、農場動物、および飼育動物からなる群から選択される、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
前記哺乳動物が、ヒトである、項目２２に記載の方法。
（項目２５）
がんの間質微小環境を調節するための方法であって、該がんの該間質微小環境を、式（Ｉ）：
【化１７】
0006786529.tif 000026
の化合物または薬学的に許容される塩と接触させるステップを含む方法。
（項目２６）
式（Ｉ）の前記化合物が、実質的に純粋なそのＲ−エナンチオマー、実質的に純粋なそのＳ−エナンチオマー、ならびに該Ｒ−エナンチオマーおよびＳ−エナンチオマーのラセミ混合物からなる群から選択される、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
式（Ｉ）の前記化合物が、実質的に純粋なＲ−エナンチオマー：
【化１８】
0006786529.tif 000027
または薬学的に許容されるその塩である、項目２５に記載の方法。
（項目２８）
前記がんが、膀胱がん、乳がん、子宮頸部がん、結腸がん、食道がん、子宮内膜がん、胃がん、神経膠芽腫、頭部および頸部がん、肝細胞癌、白血病、肺がん、リンパ腫、黒色腫、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、神経内分泌がん、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、腎細胞癌、ラブドイドがん、肉腫および尿路がんからなる群から選択される、項目２５に記載の方法。
（項目２９）
前記がんが、結腸がんである、項目２５に記載の方法。
（項目３０）
前記被験体が、哺乳動物である、項目２５に記載の方法。
（項目３１）
前記哺乳動物が、ヒト、霊長動物、農場動物、および飼育動物からなる群から選択される、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
前記哺乳動物が、ヒトである、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
被験体における障害の結果を処置または改善するための組成物であって、式（Ｉ）：
【化１９】
0006786529.tif 000028
の化合物または薬学的に許容されるその塩である第１の薬剤と、免疫チェックポイント阻害剤である第２の薬剤とを含む組成物。
（項目３４）
式（Ｉ）の前記化合物が、実質的に純粋なそのＲ−エナンチオマー、実質的に純粋なそのＳ−エナンチオマー、ならびに該Ｒ−エナンチオマーおよびＳ−エナンチオマーのラセミ混合物からなる群から選択される、項目３３に記載の組成物。
（項目３５）
式（Ｉ）の前記化合物が、実質的に純粋なＲ−エナンチオマー：
【化２０】
0006786529.tif 000029
または薬学的に許容されるその塩である、項目３４に記載の組成物。
（項目３６）
前記免疫チェックポイント阻害剤が、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される、項目３３に記載の組成物。
（項目３７）
前記免疫チェックポイント阻害剤が、ニボルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ペンブロリズマブ（Ｍｅｒｃｋ）、ピジリズマブ（Ｃｕｒｅｔｅｃｈ）、ＡＭＰ−２２４（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ／Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（Ｒｏｃｈｅ）、ＭＤＸ−１１０５（Ｍｅｄａｒｅｘ，Ｉｎｃ．／Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ−４７３６（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、アレルマブ（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ）、イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ、（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、トレメリムマブ（Ｐｆｉｚｅｒ）、ピジリズマブ（ＣｕｒｅＴｅｃｈ，Ｌｔｄ．）、ＩＭＰ３２１（Ｉｍｍｕｔｅｐ  Ｓ．Ａ．）、ＭＧＡ２７１（Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ）、ＢＭＳ−９８６０１６（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、リリルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ウレルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＰＦ−０５０８２５６６（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＩＰＨ２１０１（Ｉｎｎａｔｅ  Ｐｈａｒｍａ／Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ−６４６９（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＣＰ−８７０，８９３（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、モガムリズマブ（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｉｒｉｎ）、バルリルマブ（ＣｅｌｌＤｅｘ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、アベルマブ（ＥＭＤ  Ｓｅｒｏｎｏ）、ガリキシマブ（Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ）、ＡＭＰ−５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＡＵＮＰ  １２（Ａｕｒｉｇｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｉｅｒｒｅ  Ｆａｂｒｅ）、インドキシモド（ＮｅｗＬｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＮＬＧ−９１９（ＮｅｗＬｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＩＮＣＢ０２４３６０（Ｉｎｃｙｔｅ）およびこれらの組合せからなる群から選択される、項目３３に記載の組成物。
（項目３８）
前記第１および第２の薬剤が、単一の単位用量として投与される、項目３３に記載の組成物。
（項目３９）
前記第１および第２の薬剤が、共投与される、項目３３に記載の組成物。
（項目４０）
前記第１の薬剤が、前記第２の薬剤の前に投与される、項目３９に記載の組成物。
（項目４１）
前記第２の薬剤が、前記第１の薬剤の前に投与される、項目３９に記載の組成物。
（項目４２）
前記第１および第２の薬剤の前記被験体への投与が、前記障害の処置において相乗効果を提供する、項目３３に記載の組成物。
（項目４３）
前記障害が、がんである、項目３３に記載の組成物。
（項目４４）
前記がんが、膀胱がん、乳がん、子宮頸部がん、結腸がん、食道がん、子宮内膜がん、胃がん、神経膠芽腫、頭部および頸部がん、肝細胞癌、白血病、肺がん、リンパ腫、黒色腫、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、神経内分泌がん、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、腎細胞癌、ラブドイドがん、肉腫および尿路がんからなる群から選択される、項目４３に記載の組成物。
（項目４５）
前記がんが、膀胱がん、結腸がん、肺がん、リンパ腫、および膵臓がんからなる群から選択される、項目４３に記載の組成物。
（項目４６）
前記被験体が、哺乳動物である、項目３３に記載の組成物。
（項目４７）
前記哺乳動物が、ヒト、霊長動物、農場動物、および飼育動物からなる群から選択される、項目４６に記載の組成物。
（項目４８）
前記哺乳動物が、ヒトである、項目４６に記載の組成物。
（項目４９）
薬学的に許容できるキャリアまたは希釈剤をさらに含む医薬組成物である、項目３３に記載の組成物。
（項目５０）
前記第１および第２の薬剤が、別個の単位剤形中にある、項目３３に記載の組成物。
（項目５１）
前記第１および第２の薬剤が、単一の単位剤形中にある、項目３３に記載の組成物。
（項目５２）
式（Ｉ）：
【化２１】
0006786529.tif 000030
の化合物または薬学的に許容されるその塩である第１の薬剤と、免疫チェックポイント阻害剤である第２の薬剤とを、これらの使用のための指示とともに含むキット。
（項目５３）
式（Ｉ）の前記化合物が、実質的に純粋なそのＲ−エナンチオマー、実質的に純粋なそのＳ−エナンチオマー、ならびに該Ｒ−エナンチオマーおよびＳ−エナンチオマーのラセミ混合物からなる群から選択される、項目５２に記載のキット。
（項目５４）
式（Ｉ）の前記化合物が、実質的に純粋なＲ−エナンチオマー：
【化２２】
0006786529.tif 000031
または薬学的に許容されるその塩である、項目５２に記載のキット。
（項目５５）
前記免疫チェックポイント阻害剤が、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される、項目５２に記載のキット。
（項目５６）
前記免疫チェックポイント阻害剤が、ニボルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ペンブロリズマブ（Ｍｅｒｃｋ）、ピジリズマブ（Ｃｕｒｅｔｅｃｈ）、ＡＭＰ−２２４（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ／Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（Ｒｏｃｈｅ）、ＭＤＸ−１１０５（Ｍｅｄａｒｅｘ，Ｉｎｃ．／Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ−４７３６（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、アレルマブ（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ）、イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ、（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、トレメリムマブ（Ｐｆｉｚｅｒ）、ピジリズマブ（ＣｕｒｅＴｅｃｈ，Ｌｔｄ．）、ＩＭＰ３２１（Ｉｍｍｕｔｅｐ  Ｓ．Ａ．）、ＭＧＡ２７１（Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ）、ＢＭＳ−９８６０１６（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、リリルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ウレルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＰＦ−０５０８２５６６（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＩＰＨ２１０１（Ｉｎｎａｔｅ  Ｐｈａｒｍａ／Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ−６４６９（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＣＰ−８７０，８９３（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、モガムリズマブ（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｉｒｉｎ）、バルリルマブ（ＣｅｌｌＤｅｘ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、アベルマブ（ＥＭＤ  Ｓｅｒｏｎｏ）、ガリキシマブ（Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ）、ＡＭＰ−５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＡＵＮＰ  １２（Ａｕｒｉｇｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｉｅｒｒｅ  Ｆａｂｒｅ）、インドキシモド（ＮｅｗＬｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＮＬＧ−９１９（ＮｅｗＬｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＩＮＣＢ０２４３６０（Ｉｎｃｙｔｅ）およびこれらの組合せからなる群から選択される、項目５２に記載のキット。
（項目５７）
前記第１および第２の薬剤が、単一の単位用量として投与される、項目５２に記載のキット。
（項目５８）
前記第１および第２の薬剤が、共投与される、項目５２に記載のキット。
（項目５９）
前記第１の薬剤が、前記第２の薬剤の前に投与される、項目５８に記載のキット。
（項目６０）
前記第２の薬剤が、前記第１の薬剤の前に投与される、項目５８に記載のキット。
（項目６１）
前記第１および第２の薬剤の前記被験体への投与が、前記障害の処置において相乗効果を提供する、項目５２に記載のキット。
（項目６２）
前記障害が、がんである、項目５２に記載のキット。
（項目６３）
前記がんが、膀胱がん、乳がん、子宮頸部がん、結腸がん、食道がん、子宮内膜がん、胃がん、神経膠芽腫、頭部および頸部がん、肝細胞癌、白血病、肺がん、リンパ腫、黒色腫、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、神経内分泌がん、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、腎細胞癌、ラブドイドがん、肉腫および尿路がんからなる群から選択される、項目６２に記載のキット。
（項目６４）
前記がんが、膀胱がん、結腸がん、肺がん、リンパ腫、および膵臓がんからなる群から選択される、項目６２に記載のキット。
（項目６５）
前記被験体が、哺乳動物である、項目５２に記載のキット。
（項目６６）
前記哺乳動物が、ヒト、霊長動物、農場動物、および飼育動物からなる群から選択される、項目６５に記載のキット。
（項目６７）
前記哺乳動物が、ヒトである、項目６５に記載のキット。
（項目６８）
前記組成物が、薬学的に許容されるキャリアをさらに含む医薬組成物である、項目５２に記載のキット。
（項目６９）
前記第１および第２の薬剤が、別個の単位剤形中にある、項目５２に記載のキット。
（項目７０）
前記第１および第２の薬剤が、単一の単位剤形中にある、項目５２に記載のキット。
【図１】
0006786529.tif 000035
【図２】
0006786529.tif 000036
【図３】
0006786529.tif 000037
【図４】
0006786529.tif 000038
【図５】
0006786529.tif 000039
【図６】
0006786529.tif 000040
【図７】
0006786529.tif 000041
【図８】
0006786529.tif 000042
【図９】
0006786529.tif 000043
【図１０】
0006786529.tif 000044
【図１１】
0006786529.tif 000045
【図１２】
0006786529.tif 000046
【図１３】
0006786529.tif 000047
【図１４】
0006786529.tif 000048
【図１５】
0006786529.tif 000049
【図１６−１】
0006786529.tif 000050
【図１６−２】
0006786529.tif 000051
【図１７−１】
0006786529.tif 000052
【図１７−２】
0006786529.tif 000053
【図１８−１】
0006786529.tif 000054
【図１８−２】
0006786529.tif 000055
【図１９−１】
0006786529.tif 000056
【図１９−２】
0006786529.tif 000057