(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
0006659841.tif 000078
（式中、
Ｒ１は、水素又はＣ１−７−アルキルであり；
Ｒ２は、水素、シアノ、Ｃ１−７−アルキル、Ｃ１−７−ハロアルキル、又はＣ３−８−シクロアルキルであり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１−７−アルキル、又はＣ３−８−シクロアルキルであり；
Ａは、Ｎ−ヘテロシクロアルキル又はＮＲ１２Ｒ１３であり、ここで、Ｎ−ヘテロシクロアルキルは、１又は２個の窒素環原子を含み、そして、場合により、Ｒ１４から選択される１、２、３、又は４個の置換基で置換されており；
Ｒ１２は、１個の窒素環原子を含むヘテロシクロアルキルであり、ここで、ヘテロシクロアルキルは、場合により、Ｒ１４から選択される１、２、３、又は４個の置換基で置換されており；
Ｒ１３は、水素、Ｃ１−７−アルキル、若しくはＣ３−８−シクロアルキルであり；
Ｒ１４は、独立して、水素、Ｃ１−７−アルキル、アミノ、アミノ−Ｃ１−７−アルキル、Ｃ３−８−シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルから選択されるか、又は２個のＲ１４は一緒に、Ｃ１−７−アルキレンを形成し；
ただし、Ａが窒素環原子を１個だけ含むＮ−ヘテロシクロアルキルである場合、少なくとも１個のＲ１４置換基がアミノ又はアミノ−Ｃ１−７−アルキルである）
の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物であって、
経口水溶液、又は経口水溶液の構成に適した乾燥粉末である、医薬組成物。
【請求項２】
Ｒ１が、水素又はＣ１−７−アルキルであり；
Ｒ２が、水素、シアノ、Ｃ１−７−アルキル、Ｃ１−７−ハロアルキル、又はＣ３−８−シクロアルキルであり；
Ｒ３が、水素、Ｃ１−７−アルキル、又はＣ３−８−シクロアルキルであり；
Ａが、１又は２個の窒素環原子を含むＮ−ヘテロシクロアルキルであり、ここで、Ｎ−ヘテロシクロアルキルは、場合により、Ｒ１４から選択される１、２、３、又は４個の置換基で置換されており；
Ｒ１４が、独立して、水素、Ｃ１−７−アルキル、アミノ、アミノ−Ｃ１−７−アルキル、Ｃ３−８−シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルから選択されるか、又は２個のＲ１４が一緒に、Ｃ１−７−アルキレンを形成し；
ただし、Ａが窒素環原子を１個だけ含むＮ−ヘテロシクロアルキルである場合、少なくとも１個のＲ１４置換基がアミノ又はアミノ−Ｃ１−７−アルキルである、
請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
Ａが
【化２】
0006659841.tif 000079
（式中、
Ｘは、Ｎ又はＣＨであり；
Ｒ４は、水素、Ｃ１−７−アルキル、若しくは−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ９Ｒ１０であり；
Ｒ５は、水素若しくはＣ１−７−アルキルであり；
Ｒ６は、水素若しくはＣ１−７−アルキルであり；
Ｒ７は、水素若しくはＣ１−７−アルキルであり；
Ｒ８は、水素若しくはＣ１−７−アルキルであり；
Ｒ９及びＲ１０は、独立して、水素、Ｃ１−７−アルキル、及びＣ３−８−シクロアルキルから選択され；
Ｒ１３は、水素、Ｃ１−７−アルキル、若しくはＣ３−８−シクロアルキルであり；
ｎは、０、１、若しくは２であり；
ｍは、０、１、２、若しくは３であるか；
又は、Ｒ４及びＲ５は一緒に、Ｃ１−７−アルキレンを形成するか；
又は、Ｒ４及びＲ７は一緒に、Ｃ１−７−アルキレンを形成するか；
又は、Ｒ５及びＲ６は一緒に、Ｃ２−７−アルキレンを形成するか；
又は、Ｒ５及びＲ７は一緒に、Ｃ１−７−アルキレンを形成するか；
又は、Ｒ５及びＲ９は一緒に、Ｃ１−７−アルキレンを形成するか；
又は、Ｒ７及びＲ８は一緒に、Ｃ２−７−アルキレンを形成するか；
又は、Ｒ７及びＲ９は一緒に、Ｃ１−７−アルキレンを形成するか；
又は、Ｒ９及びＲ１０は一緒に、Ｃ２−７−アルキレンを形成し；
ただし、ＸがＣＨである場合、Ｒ４は−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ９Ｒ１０であり；そして、
ただし、ＸがＮでありかつＲ４が−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ９Ｒ１０である場合、ｍは２又は３である）
である、
請求項１又は２のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項４】
Ａが、
【化３】
0006659841.tif 000080
（式中、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ１３は、請求項１〜３のいずれかで定義されるとおりであり、Ｒ１１は、水素又はＣ１−７−アルキルである）
の群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
Ａが、
【化４】
0006659841.tif 000081
の群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記式（Ｉ）の化合物が、
２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＲ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＳ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＲ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＳ）−８ａ−メチル−１，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＲ）−８ａ−メチル−１，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ，５Ｒ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（１，４−ジアゼパン−１−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（１，４−ジアゼパン−１−イル）−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（３Ｒ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＳ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＳ）−８ａ−メチル−１，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＲ）−８ａ−メチル−１，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ）−３−ピロリジン−１−イルピロリジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ）−３−ピロリジン−１−イルピロリジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−（３，３−ジメチルピペラジン−１−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（３，３−ジメチルピペラジン−１−イル）−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−９−メチル−７−［（３Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−９−メチル−７−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−（３，３−ジメチルピペラジン−１−イル）−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ）−３−ピロリジン−１−イルピロリジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ）−３−ピロリジン−１−イルピロリジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（３Ｓ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（３Ｒ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（３，３−ジメチルピペラジン−１−イル）−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（３Ｓ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（３Ｒ）−３−エチルピペラジン−１−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
及びこれらの薬学的に許容し得る塩
からなる群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記式（Ｉ）の化合物が、
７−［（８ａＲ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＳ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＲ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ，５Ｒ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（３Ｒ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＳ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−９−メチル−７−［（３Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（３Ｒ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
及びこれらの薬学的に許容し得る塩
からなる群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記式（Ｉ）の化合物が、７−［（８ａＲ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン又はその薬学的に許容し得る塩である、請求項１〜７のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記式（Ｉ）の化合物が、７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン又はその薬学的に許容し得る塩である、請求項１〜７のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記式（Ｉ）の化合物が、
【化５】
0006659841.tif 000082
又はその薬学的に許容し得る塩である、請求項１〜７のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記経口水溶液がpH４未満のpHを有する、請求項１〜１０のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１２】
クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩のバッファ系；或いは酒石酸を更に含む、請求項１〜１１のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１３】
ラクトース、デンプン、加水分解デンプン、マルトデキストリン、微結晶セルロース、マンニトール、ソルビトール、スクロース、デキストロース、第二リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、及びこれらの組み合わせから選択される顆粒外充填剤を更に含む、請求項１〜１２のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１４】
ラクトース、デンプン、加水分解デンプン、マルトデキストリン、微結晶セルロース、マンニトール、イソマルト、ソルビトール、スクロース、デキストロース、第二リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、及びこれらの組み合わせから選択される希釈剤を更に含む、請求項１〜１３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１５】
ラクトース、デンプン、加水分解デンプン、微結晶セルロース、マンニトール、ソルビトール、スクロース、デキストロース、第二リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、及びこれらの組み合わせから選択される希釈剤を更に含む、請求項１〜１４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１６】
ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＥ TPGS、パルミチン酸レチニル、セレン、システイン、メチオニン、クエン酸、クエン酸ナトリウム、メチルパラベン、プロピルパラベン、エデト酸二ナトリウム、ブチルヒドロキシトルオール、リボフラビン、アスコルビン酸、及びこれらの組み合わせから選択される保存剤、安定剤、又は酸化防止剤を更に含む、請求項１〜１５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１７】
ソルビン酸及び安息香酸ナトリウムから選択される保存剤を更に含む、請求項１〜１６のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１８】
アスコルビン酸から選択される酸化防止剤を更に含む、請求項１〜１７のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１９】
エチレンジアミン四酢酸二ナトリウムから選択される安定剤を更に含む、請求項１〜１８のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２０】
ポリ（エチレングリコール）から選択される滑沢剤を更に含む、請求項１〜１９のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２１】
・  １〜１０重量％の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  ５〜１５重量％のバッファ系或いはバッファ系の対応する酸のみと；
・  ４０〜７０重量％の希釈剤と；
・  １〜４重量％の酸化防止剤と；
・  ０．５〜２重量％の安定剤と；
・  ０．５〜２重量％の滑沢剤と；
・  １〜８重量％の保存剤と；
・  ０〜３重量％の甘味剤と；
・  ０〜２０重量％の香料と；
を含み；
成分の総量が１００重量％を超えない、
請求項１〜２０のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２２】
・  １〜１０重量％の７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  ５〜１５重量％のクエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩から選択されるバッファ系、或いは酒石酸のみと；
・  ４０〜７０重量％のマンニトール、又はマンニトールとイソマルトとの混合物から選択される希釈剤と；
・  １〜４重量％のアスコルビン酸と；
・  ０．５〜２重量％のエデト酸二ナトリウムと；
・  ０．５〜２重量％のPEG6000と；
・  １〜８重量％のソルビン酸又は安息香酸ナトリウムから選択される保存剤と；
・  ０〜３重量％のスクラロース又はサッカリンナトリウムから選択される甘味剤と；
・  ０〜２０重量％のイチゴ香料又はバニラ香料から選択される香料と；
を含み；
成分の総量が１００重量％を超えない、
請求項１〜２１のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２３】
経口水溶液である、請求項１〜２２のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２４】
経口水溶液の構成に適した乾燥粉末である、請求項１〜２２のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２５】
請求項２４に記載の乾燥粉末と構成用溶媒としての水とを含む医薬組成物を調製するためのキット。
【請求項２６】
医薬組成物を調製するためのキットであって、請求項１〜１０のいずれかに記載の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と、構成用ビヒクルとしての粉末ブレンドとを含み、場合により、構成用溶媒としての水とを含む、キット。
【請求項２７】
SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患の治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解において使用するための、請求項１〜２４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２８】
SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための医薬を調製するための、請求項１〜２４のいずれかに記載の医薬組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
序論
本発明は、SMN2遺伝子スプライシング調節剤である化合物を含む医薬組成物、その製造、及び脊髄性筋萎縮症（SMA）を処置、進行遅延、又は寛解するためのその使用を提供する。更に、本発明の医薬組成物は、場合により、細胞保護剤を含んでいてもよい。本発明は、更に、脊髄性筋萎縮症（SMA）の処置又は寛解において使用するためのSMN2遺伝子スプライシング調節剤及び細胞保護剤の併用に関する。
【０００２】
具体的には、本発明は、式（Ｉ）
【化１】
0006659841.tif 000002
（式中、Ａ、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、本明細書に記載されるとおりである）の化合物及びその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
脊髄性筋萎縮症（SMA）は、その最も広い意味において、筋力低下及び筋萎縮を引き起こす脊髄及び脳幹における進行性の運動ニューロン喪失を特徴とする遺伝性及び後天性の中枢神経系（CNS）疾患の集団を描写する。SMAの最も一般的な形態は、生存運動ニューロン（SMN）遺伝子における突然変異によって引き起こされ、そして、乳児から成人まで罹患する重篤度の広い範囲にわたり現れる（非特許文献１）。
【０００４】
乳児SMAは、この神経変性障害の最も重篤な形態である。症状は、筋力低下、不十分な筋緊張、弱い泣き声、弛緩又は転倒傾向、吸引又は嚥下が困難、肺又は咽頭における分泌物の蓄積、哺乳困難、及び呼吸管感染症に対する易罹患性の増大を含む。脚は、腕よりも弱い傾向があり、そして、頭を上げる又は起き上がるなどの発達の重要な段階に達することができない。一般的に、症状が現れるのが早いほど、寿命が短い。運動ニューロン細胞が劣化すると、直後に症状が現れる。該疾患の重篤な形態は、致死的であり、そして、全形態に公知の治療法がない。SMAの経過は、運動ニューロン細胞の劣化の速度及び生じる脱力の重篤度に直接関連する。重篤な形態のSMAを有する乳児は、呼吸を補助する筋肉の脱力に起因して呼吸器疾患で死亡することが多い。より軽度の形態のSMAを有する小児は、はるかに長く生存するが、特により重篤な小児は、広範囲に及ぶ医療支援を必要とする場合がある。SMA障害の臨床スペクトルは、以下の５つの群に分けられている。
（ａ）０型SMA（子宮内SMA）は、この疾患の最も重篤な形態であり、そして、出生前に始まる。通常、０型SMAの最初の症状は、妊娠３０〜３６週目に最初に観察され得る胎児の運動減少である。出生後、これら新生児はほとんど運動せず、そして、嚥下及び呼吸が困難である。
（ｂ）１型SMA（新生児型SMA又はWerdnig-Hoffmann病）は、０〜６ヶ月に症状を呈する。このSMA形態も非常に重篤である。患者は座る能力を獲得することはなく、そして、換気補助がなければ最初の２年間以内に通常死亡する。
（ｃ）２型SMA（中間型SMA）の発症年齢は７〜１８ヶ月である。患者は、支持されずに座る能力を獲得するが、独力で立ったり歩いたりすることはない。この群における予後は、呼吸器合併症の程度に大きく依存する。
（ｄ）３型SMA（若年性SMA又はKugelberg-Welander病）は、一般的に、１８ヶ月以降に診断される。３型SMAの個体は、その疾患経過中のある時点では独力で歩くことができるが、多くの場合、若年期又は成人期中に車椅子に束縛されるようになる。
（ｅ）４型SMA（成人発症SMA）。脱力は、通常、青年期後期に舌、手、又は足において始まり、次いで、身体の他の領域に進行する。成人SMAの経過ははるかに遅く、そして、平均余命にほとんど又は全く影響を有さない。
【０００５】
SMN遺伝子は、染色体５ｑにおける複合領域に対する連鎖解析によってマッピングされている。ヒトでは、この領域は約５０万塩基対（kb）の逆位重複を含み、その結果、SMN遺伝子の２つのほとんど同一のコピーが生じる。SMAは、両染色体における遺伝子のテロメアコピー（SMN1）の不活化突然変異又は欠失によって引き起こされ、その結果、SMN1遺伝子の機能が失われる。しかし、全ての患者は遺伝子のセントロメアコピー（SMN2）を保持し、そして、SMA患者におけるSMN2遺伝子のコピー数は、一般的に、疾患の重篤度と逆相関する、すなわち、重篤度の低いSMA患者は、より多くのSMN2のコピーを有する。それにもかかわらず、SMN2は、エクソン７における翻訳的にサイレントなＣからＴへの突然変異によって引き起こされるエクソン７の選択的スプライシングに起因して、SMN1機能の喪失を完全には補償することができない。その結果、SMN2から生成される転写物の大部分はエクソン７が欠失しており（Δ７ SMN2）、そして、機能障害を有しかつ急速に分解される切断型SMNタンパク質をコードしている。
【０００６】
SMNタンパク質は、RNAのプロセシング及び代謝において役割を果たしていると考えられ、snRNPと呼ばれる特定のクラスのRNA−タンパク質複合体のアセンブリを媒介する十分に特徴付けられた機能を有する。SMNは、運動ニューロンにおいて他の機能を有している可能性があるが、運動ニューロンの選択的変性の阻止におけるその役割は、十分には確立されていない。
【０００７】
ほとんどの場合、SMAは、臨床症状に基づいて、そして、SMN1遺伝子検査の少なくとも１つのコピーの存在によって診断される。しかし、症例の約５％において、SMAはSMN1の不活化以外の遺伝子の突然変異によって引き起こされ、公知のものもあれば、未だ明確になっていないものもある。場合によっては、SMN1遺伝子検査が実行不可能であるか又は何の異常も示さないとき、筋電図検査（EMG）又は筋生検などの他の検査を指示してもよい。
【０００８】
現在SMA患者に対する医療は、呼吸管理、栄養療法、及びリハビリテーション療法を含む支持療法に限定されており、この疾患の根底にある原因に対処することが知られている薬物は存在しない。SMAの現在の処置は、慢性運動単位喪失の副次的効果の予防及び管理からなる。１型SMAにおける主な管理問題は、症例の大部分において死の原因となる肺疾患の予防及び早期治療である。SMAに罹患している一部の乳児は成人になるまで成長するが、１型SMAに罹患しているものの平均余命は２年間未満である。
【０００９】
幾つかのSMAのマウスモデルが開発されている。具体的には、SMNデルタエクソン７（Δ７ SMN）モデル（非特許文献２）は、SMN2遺伝子及び数コピーのΔ７ SMN2 cDNAの両方を有し、そして、１型SMAの表現型特性の多くを再現する。Δ７ SMNモデルは、SMN2発現試験、並びに運動機能及び生存の評価の両方に用いることができる。C/C-アレルマウスモデル（Jackson Laboratory strain #008714, The Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME）は、マウスのSMN2完全長（FL SMN2）mRNA及びSMNタンパク質の両方のレベルが低下している重篤度の低いSMA疾患モデルを提供する。C/C-アレルマウスの表現型は、SMN2遺伝子及び選択的スプライシングを受けるが、明白な筋力低下は有さないハイブリッドmSMN1-SMN2遺伝子を有する。C/C-アレルマウスモデルは、SMN2発現試験のために用いられる。
【００１０】
SMAの遺伝的な根拠及び病態生理の理解が向上した結果として、処置のための幾つかのストラテジーが研究されたが、未だ病院では成功が実証されてはいない。
【００１１】
ウイルス送達ベクターを使用するSMN1の遺伝子置換及び分化したSMN1+/+幹細胞を使用する細胞置換は、SMAの動物モデルにおいて有効性が実証されている。安全性及び免疫応答を決定するために、及びこれらアプローチをヒトに適用できるようになる前に新生児期に処置を開始する必要性に対処するために、より多くの研究が必要である。
【００１２】
また、処置剤として合成核酸を使用して、培養細胞におけるSMN2の選択的スプライシングを補正することが達成されている：（ｉ）SMN2 mRNA前駆体における配列エレメントを標的とし、そして、完全長SMN2 mRNAの生成の方にスプライシング反応の結果をシフトさせるアンチセンスオリゴヌクレオチド（非特許文献３及び非特許文献４）及び（ii）スプライシング中に突然変異体断片を置換し、そして、完全長SMN1 mRNAを生成する完全に機能的なRNA配列を提供するトランススプライシングRNA分子（非特許文献５）。
【００１３】
研究中の他のアプローチは、SMNレベルを増加させるか、残存SMN機能を強化するか、又はその喪失を補償する薬物の探索を含む。アミノグリコシドは、異常な終止コドンの翻訳読み過ごしを促進することによってΔ７ SMN2 mRNAから生成される安定化SMNタンパク質の発現を強化するが、中枢神経系への侵入が不十分であり、そして、繰り返し投与した後に毒性になることが示されている。化学療法剤、例えばアクラルビシンは、細胞培養物においてSMNタンパク質を増加させることが示されているが、これら薬物の毒性プロファイルがSMA患者における長期間使用の妨げとなる。SMAを処置するための臨床試験中の幾つかの薬物は、転写活性化剤、例えばヒストンデアセチラーゼ（「HDAC」）阻害剤（例えば、酪酸塩、バルプロ酸、及びヒドロキシウレア）、及びmRNA安定剤（Repligen製のmRNAデキャッピング阻害剤RG3039）を含み、目的は、SMN2遺伝子から転写される全RNAの量を増加させることである。しかし、HDAC阻害剤又はmRNA安定剤の使用は、SMAの根底にある原因には対処せず、そして、ヒトにおいて潜在的な安全性の問題を有する、転写及び遺伝子発現を全体的に増加させ得る。
【００１４】
別のアプローチでは、オレソキシムなどの細胞保護剤が研究のために選択された。このようなストラテジーはSMAを処置するためにSMNに照準を定めたものではなく、その代わり、神経変性に起因するSMN欠失運動ニューロンだけではなく、筋肉細胞等の疾患に冒されている他の系も保護するために開発された。オレソキシムは、SMA２型（中間型SMA）及びSMA３型（若年性SMA、歩行不能）の処置において臨床的有効性が示されている。
【００１５】
SMN2遺伝子から転写されるRNAへのSMNのエクソン７の包入を増加させる化合物を同定するために設計された系、並びにそれによって同定された特定のベンゾオキサゾール及びベンゾイソキサゾールの化合物は、特許文献１に記載されている。リボソームのフレームシフトを引き起こしてΔ７ SMN2 mRNAから安定化SMNタンパク質を生成する化合物を同定するために設計された系、並びにそれによって同定された特定のイソインドリノン化合物は、特許文献２及び特許文献３に記載されている。
【００１６】
オレソキシム（コレスト−４−エン−３−オンオキシム、（EZ）−Ｎ−（コレスト−４−エン−３−イリデン）ヒドロキシルアミン、CAS登録番号２２０３３−８７−０）は、ミトコンドリア膜透過性遷移孔（mPTP）との相互作用を通して疾患に関連するストレス条件下にあるニューロン及び他の細胞型の機能及び生存を促進することが見出されている細胞保護薬である。
【化２】
0006659841.tif 000003
【００１７】
特許文献４には、患者において神経保護を提供するためのオレソキシムの使用について記載されており、そして、特許文献５には、それを含む医薬組成物が記載されている。
【００１８】
ｄ６−コレステノンのオキシム及びオレソキシムを合成する方法は、例えば、Nobel prize laureate Adolf Friedrich Johann Butenandt（非特許文献６）又はPonsold K. et al.（非特許文献７）によって記載されている。
【００１９】
オレソキシムの作用機序、その毒性、代謝、及び薬力学は、Martin L.J.（非特許文献８）に記載されている。インビボにおいて、オレソキシムは、新生児ラットにおける神経病変によって誘導される細胞死から運動ニューロンを救済し、そして、成体マウスにおける神経挫滅後の神経再生を促進する。軸索再生及び運動ニューロンの生存の両方を促進することによって、オレソキシムは、SMAに対する一つの合理的な処置アプローチである。更に、SMAの非臨床モデルにおける機能改善のエビデンスが存在する。
【００２０】
分子レベルでは、結合データは、ミトコンドリア膜透過性遷移孔複合体（mPTP）の開口を調節すると考えられる２つのミトコンドリア外膜タンパク質とオレソキシムが相互作用することを示した。これらタンパク質に結合することによって、オレソキシムは、ストレスを受けたニューロンにおけるカルシウム緩衝等のミトコンドリアの必須機能を保存して、細胞の変性及び死を低減することができる。生理学的ストレスに曝された一次ニューロン、アントラサイクリン毒性に曝された一次心筋細胞、そして、Fas誘導性アポトーシスを受けたマウス肝細胞においても細胞保護効果が観察された。したがって、オレソキシムは、神経細胞及び非神経細胞において、生理学的、ストレス誘導性アポトーシスを低減する能力を有する。したがって、これらの結合部位は、オレソキシムの神経、細胞、及び組織の保護作用において役割を果たしている可能性があるが、その理由は、ストレス誘導性ミトコンドリア機能不全が大部分の神経変性疾患に関与しているためである。インビボにおいて、オレソキシム処置で観察された運動ニューロンの救済及び神経再生の促進は、オレソキシムが運動ニューロン細胞体レベル、軸策レベルの両方で作用し、そして、潜在的に、筋肉に対する保護効果を有することを確認する（非特許文献９）。
【００２１】
オレソキシムは、２型及び３型のSMAを処置するために開発された。オレソキシムの臨床開発プログラムは、２年間の観察期間にわたる運動機能の維持を実証することを目的としていた。SMAにおけるオレソキシムの臨床開発は、２つの臨床試験、硬カプセル製剤を使用する第Ib相PK及び安全性試験（TRO19622CLEQ1115-1）及び経口懸濁剤製剤を使用する第II相試験（TRO19622CLEQ1275-1）を含む。プラセボ対照第II相試験（TRO19622CLEQ1275-1）は、これまでのところ、この適応症のために実施された最大かつ最長の臨床試験である。この試験は、報告されている自然な疾患進行（非特許文献１０）と一致して、プラセボ群において主要評価項目（運動機能尺度［MFM］）が約２ポイント低下したのに比べて、オレソキシム群では２年間の処置期間にわたって運動機能の維持を示した。第II相試験は、２型及び３型のSMAの患者の処置について、オレソキシムの正のベネフィット−リスクプロファイルを実証した。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２２】
【特許文献１】国際公開第２００９／１５１５４６号
【特許文献２】国際公開第２０１０／０１９２３６号
【特許文献３】国際公開第２０１３／１１９９１６号
【特許文献４】国際公開第２００４７０８２５８１号
【特許文献５】国際公開第２００８／１４２２３１号
【非特許文献】
【００２３】
【非特許文献１】Crawford and Pardo, Neurobiol. Dis., 1996, 3:97
【非特許文献２】Le et al., Hum. Mol. Genet., 2005, 14:845
【非特許文献３】Passini et al., Sci. Transl. Med., 2011, 3:72ra18
【非特許文献４】Hua et al., Nature, 2011, 478:123
【非特許文献５】Coady and Lorson, J Neurosci., 2010, 30:126
【非特許文献６】Butenandt A. et al., Berichte der Deutschen Chemischen Gesellschaft (1936), 69B, 882-8
【非特許文献７】Journal fuer Praktische Chemie (1964), 23(3-4), 173-6
【非特許文献８】IDrugs (2010) 13(8):568-80
【非特許文献９】Pathak D et al. J Biological Chemistry (2015) 290(37):22325-36
【非特許文献１０】Vuillerot C et al. Arch Phys Med Rehabil (2013) 94(8):1555-61
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２４】
SMAの遺伝的な根拠及び病態生理の理解が進んだにもかかわらず、最もひどい小児期の神経系疾患のうちの１つである脊髄性筋萎縮症の経過を変化させる化合物及び化合物の組み合わせ、並びにその好適な投与形態を同定することが依然として必要とされている。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（実施例２０）は、インビトロにおいてSMN mRNA及びタンパク質の生成を増加させる。  （Ａ）SMA１型の線維芽細胞におけるSMN2スプライシング。（Ｂ）SMA１型の線維芽細胞におけるSMNタンパク質。（Ｃ）SMA１型の運動ニューロンにおけるSMNタンパク質。（Ｄ）HV由来の全血におけるSMN1及びSMN2のスプライシング。実施例２０の化合物の存在下、SMA１型患者由来の線維芽細胞を２４時間（Ａ）又は４８時間（Ｂ）培養し；SMA１型患者由来の運動ニューロンiPSC（誘導多能性幹細胞）を７２時間（Ｃ）培養し、そして、健常ボランティア（HV）由来の全血細胞を４時間（Ｄ）培養した。SMNスプライシングをRT-PCRによって評価し、そして、線維芽細胞溶解物では均質時間分解蛍光（HTRF）によって、そして、運動ニューロンではSMNの免疫染色によって、SMNタンパク質レベルを評価した。データは、データ点当たり３回の評価の平均±標準誤差（SEM）を表し、そして、未処理対照に対する倍数変化として表される。
【図２】７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（実施例２０）は、インビボにおいてSMNタンパク質発現を誘導する。  （Ａ）C/C-アレルマウスの脳におけるSMNタンパク質。（Ｂ）SMNΔ７マウスの脳におけるSMNタンパク質。（Ｃ）C/C-アレルマウスの大腿四頭筋におけるSMNタンパク質。（Ｄ）SMNΔ７マウスの大腿四頭筋におけるSMNタンパク質。C/C-アレルマウス及びSMNΔ７マウスを実施例２０の化合物で処置した。最後の投与の１時間後、脳及び大腿四頭筋を回収し、そして、SMNタンパク質のレベルをHTRFによって評価した。データは、１群当たり５〜６頭の動物の平均±SEMを表し、そして、ビヒクル処置対照に対する倍数変化として表される。未処置対照に対して*＝ｐ＜０．０５、**＝ｐ＜０．０１、***＝ｐ＜０．００１。
【図３】７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（実施例２０）によるSMNΔ７マウスの処置のインビボにおける効果。  SMNΔ７マウスをＰ３から実施例２０の化合物で処置し、そして、動物の生存（Ａ）及び体重（Ｂ）をＰ１００まで毎日評価した。データは、１群当たり１０〜１２頭のマウスの平均±SEMを表す。HET＝ヘテロ接合体同腹仔。
【図４】インビボにおける、SMNΔ７マウスにおける７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（実施例２０）による運動回路及び筋萎縮の保護。  SMNΔ７マウスをＰ３からＰ１４まで実施例２０の化合物で処置し、そして、神経筋結合性及び筋萎縮を免疫細胞化学によって評価した。（Ａ）Ｌ３〜５脊髄におけるvGlut1陽性固有受容性入力。（Ｂ）Ｌ３〜５脊髄における腹部運動軸索。（Ｃ）最長筋へのNMJ神経支配。（Ｄ）EDL筋肉の断面積。データは、１群当たり４〜５頭のマウスの平均±SEMを表す。ビヒクル処置SMNΔ７マウスに対して*＝ｐ＜０．０５；**＝ｐ＜０．０１；***＝ｐ＜０．００１。
【図５】インビトロにおけるFoxM1の選択的スプライシング  SMA１型患者の線維芽細胞を実施例２０の化合物で２４時間処理し、そして、FoxM1完全長（FL）及びエクソン９欠失（Δ９）のmRNAをRT-qPCRによって分析した。データは、６回の繰り返しの平均±SEMを表し、そして、未処理対照に対する倍数変化として表される。
【図６】水中油型エマルジョン  酒石酸塩バッファ溶液（組成物５Ａ）の添加前（Ａ）及び２０％（Ｂ）又は３０％（Ｃ）を添加して油中水型エマルジョンが生じた直後の組成物４Ａの写真。
【図７】水中油型エマルジョンの安定性  構成の１５分間後（Ａ）（１０回振盪）及び構成の３０分間後（Ｂ）（１０回振盪）の、７０％ 組成物４Ａ及び３０％ 組成物５Ａを含む油中水型エマルジョンの写真。
【図８】水中油型エマルジョン  酒石酸塩バッファ溶液（組成物５Ａ）の添加前（Ａ）及び２０％（Ｂ、左）、２５％（Ｂ、中央）、又は３０％（Ｂ、右）を添加して油中水型エマルジョンが生じた直後の組成物４Ｆの写真。
【図９】水中油型エマルジョンの安定性  構成の１５分間後（Ａ）（１０回振盪）及び構成の３０分間後（Ｂ）（１０回振盪）の、７０％ 組成物４Ｆ及び３０％ 組成物５Ａを含む油中水型エマルジョンの写真。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
発明の詳細な説明
特に定義しない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に記載するものと類似又は等価な方法及び材料を本発明の実施又は試験で用いることができるが、好適な方法及び材料について以下に記載する。
【００２７】
本明細書において言及する全ての刊行物、特許出願、特許、及び他の参照文献は、その全体が参照により援用される。
【００２８】
本願において用いられる命名は、特に指定しない限り、IUPAC体系的命名法に基づく。
【００２９】
本明細書における構造中の炭素、酸素、硫黄、又は窒素の原子に存在する任意の空の原子価は、特に指定しない限り、水素の存在を示す。
【００３０】
本明細書に記載する定義は、問題の用語が単独で用いられるか組み合わせて用いられるかに関係なく適用される。本明細書に記載する定義は、例えば、「ヘテロシクロアルキルアリール」、「ハロアルキルヘテロアリール」、「アリールアルキルヘテロシクロアルキル」、又は「アルコキシアルキル」等、付加して化学的に関連する組み合わせを形成する場合もあることが企図される。組み合わせの最後の要素は、分子の残部に結合しているラジカルである。組み合わせの他の要素は、文献上の配列に関して逆の順序で結合ラジカルに結合し、例えば、アミノ−Ｃ１−７−アルキルの組み合わせは、アミノによって置換されているＣ１−７−アルキルを指し、又は例えば、アリールアルキルヘテロシクロアルキルという組み合わせは、アリールによって置換されているアルキルによって置換されているヘテロシクロアルキルラジカルを指す。
【００３１】
用語「部分」とは、１個以上の化学結合によって別の原子又は分子に結合して分子の一部を形成している原子又は化学的に結合している原子の群を指す。例えば、式（Ｉ）の可変部Ａ、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、共有結合によって式（Ｉ）のコア構造に結合している部分を指す。
【００３２】
置換基の数を指定するとき、用語「１つ以上」とは、１つの置換基から可能最大数の置換基、すなわち、置換基による１つの水素の置換から全ての水素の置換までの範囲を指す。
【００３３】
用語「任意の」又は「場合により」とは、その後に記載する事象又は状況が生じる場合もあるが、必ずしもそうではないこと、そして、その記載が、該事象又は状況が生じる場合及び生じない場合を含むことを意味する。
【００３４】
用語「置換基」とは、親分子における水素原子に置き換わる原子又は原子の群を意味する。
【００３５】
用語「置換されている」とは、指定の基が１つ以上の置換基を有していることを意味する。任意の基が複数の置換基を保有し得、そして、様々な可能な置換基が提供されている場合、該置換基は独立して選択され、そして、同じである必要はない。用語「置換されていない」とは、指定の基が置換基を有さないことを意味する。用語「場合により置換されている」とは、指定の基が置換されていないか、又は可能な置換基の群から独立して選択される１つ以上の置換基により置換されていることを意味する。置換基の数を指定するとき、用語「１つ以上」とは、１つの置換基から可能最大数の置換基、すなわち、置換基による１つの水素の置換から全ての水素の置換までを意味する。
【００３６】
用語「本発明の化合物」とは、本明細書に開示する化合物、並びにその立体異性体、互変異性体、溶媒和物、及び塩（例えば、薬学的に許容し得る塩）を指す。
【００３７】
本発明の化合物が固体であるとき、これら化合物並びにその溶媒和物及び塩は、様々な固体形態、具体的には様々な結晶形態で存在し得、その全てが本発明及び指定の式の範囲内であることを意図することが当業者によって理解される。
【００３８】
用語「薬学的に許容し得る塩」とは、生物学的にも又は他の点でも望ましくなくはない塩を指す。「薬学的に許容し得る塩」は、酸付加塩及び塩基付加塩の両方を含む。
【００３９】
用語「薬学的に許容し得る酸付加塩」とは、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、炭酸、リン酸等の無機酸、並びにギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸（maloneic acid）、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、グルタミン酸、アントラニル酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、エンボニン酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、及びサリチル酸等の有機酸の脂肪族、脂環式、芳香族、芳香族脂肪族、複素環式、カルボン酸、及びスルホン酸のクラスから選択される有機酸と共に形成される薬学的に許容し得る塩を意味する。
【００４０】
用語「薬学的に許容し得る塩基付加塩」とは、有機塩基又は無機塩基と共に形成される薬学的に許容し得る塩を意味する。許容し得る無機塩基の例は、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、及びアルミニウムの塩を含む。薬学的に許容し得る有機非毒性塩基に由来する塩は、一級、二級、及び三級のアミン、天然の置換アミンを含む置換アミン、環状アミン、及び塩基性イオン交換樹脂、例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２−ジエチルアミノエタノール、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペリジン、ピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、及びポリアミン樹脂の塩を含む。
【００４１】
本明細書で使用する立体化学的な定義及び慣行は、一般的に、S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York；及びEliel, E. and Wilen, S., “Stereochemistry of Organic Compounds”, John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994に従う。光学活性化合物の記載において、接頭辞Ｄ及びＬ又はＲ及びＳは、そのキラル中心を中心とする分子の絶対配置を示すために用いられる。検討中のキラル中心に結合している置換基は、Cahn、Ingold、及びPrelogの順位規則に従って順位付けされる（Cahn et al. Angew. Chem. Inter. Edit. 1966, 5, 385; errata 511）。接頭辞Ｄ及びＬ又は（＋）及び（−）は、化合物による平面偏光の回転記号を示すために用いられ、（−）又はＬは、該化合物が左旋性であることを示す。（＋）又はＤが前に記載されている化合物は、右旋性である。
【００４２】
用語「不斉中心」とは、４つの非同一の置換基に結合している炭素原子を意味する。用語「キラル」とは、鏡像と重ねることができない能力を意味し、一方、用語「アキラル」とは、その鏡像と重ねることができる実施態様を指す。キラル分子は、光学的に活性である、すなわち、平面偏光の平面を回転させる能力を有する。
【００４３】
本発明の化合物は、１つ以上の不斉中心を有し得、そして、光学的に純粋な鏡像異性体、鏡像異性体の混合物（例えば、ラセミ体等）、光学的に純粋なジアステレオ異性体、ジアステレオ異性体の混合物、ジアステレオ異性体のラセミ体、又はジアステレオ異性体のラセミ体の混合物の形態で存在することができる。化学構造中に不斉中心が存在する場合は常に、その不斉中心に関連する全ての立体異性体が本発明に包含されることを意図する。
【００４４】
用語「ハロ」、「ハロゲン」、及び「ハロゲン化物」は、本明細書において互換的に用いられ、そして、フルオロ、クロロ、ブロモ、又はヨードを意味する。ハロゲンの１つの具体例は、フルオロである。
【００４５】
用語「アルキル」は、１〜１２個の炭素原子の一価の直鎖又は分枝状の飽和炭化水素基を意味する。具体的な実施形態では、アルキルは、１〜７個の炭素原子、そして、より具体的な実施形態では、１〜４個の炭素原子を有する。アルキルの例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、sec−ブチル、又はtert−ブチルを含む。アルキルの具体例は、メチル及びエチルである。
【００４６】
用語「ハロアルキル」は、アルキル基の水素原子のうちの少なくとも１つが同じ又は異なるハロゲン原子、具体的にはフルオロ原子によって置換されているアルキル基を意味する。ハロアルキルの例は、モノフルオロ−、ジフルオロ−、又はトリフルオロ−メチル、−エチル、又は−プロピル、例えば、３，３，３−トリフルオロプロピル、２−フルオロエチル、２，２，２−トリフルオロエチル、フルオロメチル、又はトリフルオロメチル等を含む。用語「ペルハロアルキル」は、アルキル基の全ての水素原子が同じ又は異なるハロゲン原子によって置換されているアルキル基を意味する。
【００４７】
用語「二環式環系」とは、共通の単結合又は二重結合を介して（縮環二環式環系）、一連の３つ以上の共通原子を介して（架橋二環式環系）、又は共通の単一原子を介して（スピロ二環式環系）、互いに縮合している２つの環を意味する。二環式環系は、飽和、部分不飽和、不飽和、又は芳香族であってよい。二環式環系は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択されるヘテロ原子を含んでよい。
【００４８】
用語「シクロアルキル」は、３〜１０個の環炭素原子の飽和の単環式又は二環式の炭化水素基を意味する。具体的な実施形態では、シクロアルキルは、３〜８個の環炭素原子の一価飽和単環式炭化水素基を意味する。二環式とは、共通の１つ以上の炭素原子を有する２つの飽和炭素環からなることを意味する。具体的なシクロアルキル基は、単環式である。単環式シクロアルキルの例は、シクロプロピル、シクロブタニル、シクロペンチル、シクロヘキシル、又はシクロヘプチルである。二環式シクロアルキルの例は、ビシクロ［２．２．１］ヘプタニル又はビシクロ［２．２．２］オクタニルである。シクロアルキルの１つの具体例は、シクロプロピルである。
【００４９】
用語「ヘテロシクロアルキル」とは、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１、２、又は３個の環ヘテロ原子を含み、残りの環原子が炭素である、３〜９個の環原子の飽和又は部分不飽和の単環式、二環式、又は三環式の環系を意味する。特定の実施態様では、ヘテロシクロアルキルは、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１、２、又は３個の環ヘテロ原子を含み、残りの環原子が炭素である、４〜７個の環原子の一価飽和単環式環系である。単環式飽和ヘテロシクロアルキルの例は、アジリジニル、オキシラニル、アゼチジニル、オキセタニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、ピラゾリジニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、イソキサゾリジニル、チアゾリジニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、１，１−ジオキソ−チオモルホリン−４−イル、アゼパニル、ジアゼパニル、ホモピペラジニル、又はオキサゼパニルである。二環式飽和ヘテロシクロアルキルの例は、８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクチル、キヌクリジニル、８−オキサ−３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクチル、９−アザ−ビシクロ［３．３．１］ノニル、３−オキサ−９−アザ−ビシクロ［３．３．１］ノニル、又は３−チア−９−アザ−ビシクロ［３．３．１］ノニルである。部分不飽和ヘテロシクロアルキルの例は、ジヒドロフリル、イミダゾリニル、ジヒドロオキサゾリル、テトラヒドロピリジニル、又はジヒドロピラニルである。ヘテロシクロアルキルの具体例は、１，４−ジアゼパニル、ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、及びピロリジニルである。ヘキサシクロアルキルのより具体的な例は、ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジニル及びピペラジニルである。
【００５０】
用語「Ｎ−ヘテロシクロアルキル」とは、少なくとも１つの窒素環系を含有するヘテロシクロアルキルラジカルを意味し、そして、この場合、該ヘテロシクロアルキルラジカルの分子の残部への結合点は窒素環原子を介している。Ｎ−ヘテロシクロアルキルの具体例は、１，４−ジアゼパニル、ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、及びピロリジニルである。Ｎ−ヘキサシクロアルキルのより具体的な例は、ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジニル及びピペラジニルである。
【００５１】
化合物に関連する用語「塩基性度」は、本明細書では共役酸の酸性度定数の１０を底とする対数の負数によって表される（pKa＝-log Ka）。共役酸のpKaが大きいほど、塩基性が強い（pKa＋pKb＝１４）。本願では、原子又は官能基は、それがプロトンを受容するのに好適である場合及びその共役酸のpKa計算値が少なくとも７である場合、より具体的には、その共役酸のpKa計算値が少なくとも７．８である場合、最も具体的には、その共役酸のpKa計算値が少なくとも８である場合「塩基性」であるといわれる。pKa値は、F. Milletti et al., J. Chem. Inf. Model (2007) 47:2172-2181に記載のとおり、インシリコで計算した。
【００５２】
用語「アルキレン」は、１〜７個の炭素原子の直鎖飽和二価炭化水素基又は３〜７個の炭素原子の二価分枝状飽和炭化水素基を意味する。アルキレン基の例は、メチレン、エチレン、プロピレン、２−メチルプロピレン、ブチレン、２−エチルブチレン、ペンチレン、ヘキシレンを含む。アルキレンの具体例は、エチレン、プロピレン、及びブチレンである。
【００５３】
用語「アミノ」は、式−ＮＲ’Ｒ’’（式中、Ｒ’及びＲ’’は、独立して、水素、アルキル、アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、又は本明細書に記載されるとおりである）の基を意味する。或いは、Ｒ’及びＲ’’は、これらが結合している窒素と共に、ヘテロシクロアルキルを形成し得る。用語「一級アミノ」とは、Ｒ’及びＲ’’が両方水素である基を意味する。用語「二級アミノ」とは、Ｒ’が水素であり、そして、Ｒ’’が水素以外の基である基を意味する。用語「三級アミノ」とは、Ｒ’及びＲ’’の両方が水素以外である基を意味する。具体的な二級及び三級のアミンは、メチルアミン、エチルアミン、プロピルアミン、イソプロピルアミン、フェニルアミン、ベンジルアミン、ジメチルアミン、ジエチルアミン、ジプロピルアミン、及びジイソプロピルアミンである。
【００５４】
用語「活性医薬成分」（又は「API」）は、特定の生物活性を有する医薬組成物中の化合物又は分子を意味する。
【００５５】
用語「医薬組成物」及び「医薬製剤」（又は「製剤」）は、互換的に使用され、そして、薬学的に許容し得る賦形剤と共に哺乳類、例えば、それを必要としているヒトに投与される処置的に有効な量の活性医薬成分を含む混合物又は溶液を意味する。
【００５６】
用語「薬学的に許容し得る」とは、一般的に安全であり、非毒性であり、そして、生物学的にも他の点でも望ましくなくない医薬組成物の調製において有用であり、そして、獣医学的使用に加えてヒトの薬学的使用についても許容し得る物質の属性を意味する。
【００５７】
用語「薬学的に許容し得る賦形剤」、「薬学的に許容し得る担体」、及び「処置的に不活性な賦形剤」は、互換的に用いることができ、そして、医薬品の製剤化において用いられる崩壊剤、結合剤、充填剤、溶媒、バッファ、等張化剤、安定剤、酸化防止剤、界面活性剤、担体、希釈剤、又は滑沢剤等の、処置活性を有さず、そして、投与される対象に対して非毒性である医薬組成物中の任意の薬学的に許容し得る成分を意味する。
【００５８】
用語「個体」又は「対象」は、哺乳類を指す。哺乳類は、家畜動物（例えば、ウシ、ヒツジ、ネコ、イヌ、及びウマ）、霊長類（例えば、ヒト、及びサル等の非ヒト霊長類）、ウサギ、及びげっ歯類（例えば、マウス及びラット）を含むが、これらに限定されない。特定の実施態様では、個体又は対象はヒトである。
【００５９】
用語「処置的に有効な量」は、対象に投与されたとき、（ｉ）特定の疾患、病態、若しくは障害を治療若しくは予防する、（ii）特定の疾患、病態、若しくは障害の１つ以上の症状を減弱、回復、若しくは排除する、又は（iii）本明細書に記載する特定の疾患、病態、若しくは障害の１つ以上の症状の発生を予防若しくは遅延させる、本発明の化合物又は分子の量を意味する。「処置的に有効な量」は、化合物、処置される疾患状態、処置される疾患の重篤度、対象の年齢及び相対健康、投与の経路及び形態、医師又は獣医の判断、並びに他の要因に依存して変動する。
【００６０】
疾患状態を「処置する」又は疾患状態の「処置」という用語は、該疾患状態を阻害する、すなわち、該疾患状態若しくはその臨床症状の発現を停止させる、又は該疾患状態を軽減する、すなわち、該疾患状態若しくはその臨床症状を一時的若しくは永続的に後退させることを含む。
【００６１】
用語「脊髄性筋萎縮症」（又はSMA）は、両染色体におけるSMN1遺伝子の不活化突然変異又は欠失によって引き起こされ、その結果、SMN1遺伝子の機能が失われる疾患に関する。
【００６２】
SMAの症状は、筋力低下、不十分な筋緊張、弱い泣き声、弱い咳、弛緩又は転倒傾向、吸引又は嚥下が困難、呼吸困難、肺又は咽頭における分泌物の蓄積、手の汗ばみを伴う固めたこぶし、舌のちらつき／振動、頭が頻繁に片側に傾く、更に横たわったときでさえも、腕よりも弱い傾向がある足、足が頻繁に「かえる足」の位置をとる、哺乳困難、呼吸管感染症に対する易罹患性の増大、腸／膀胱の衰弱、体重が正常よりも少ない、支持されずに座ることができない、歩行できない、徐行できない、及び低血圧、反射消失、及び前角細胞（anterior hom cells）の喪失に関連する多発性先天性拘縮（関節拘縮症）を含む。
【００６３】
用語「脊髄性筋萎縮症（SMA）を処置する」又は「脊髄性筋萎縮症（SMA）の処置」は、以下の効果のうちの１つ以上を含む：（ｉ）SMAの重篤度の低減若しくは回復；（ii）SMAの発症の遅延；（iii）SMAの進行の阻害；（iv）対象の入院加療の低減；（ｖ）対象の入院加療長さの低減；（vi）対象の生存の延長；（vii）対象の生活の質の改善；（viii）SMAに関連する症状の数の低減；（ix）SMAに関連する１つ以上の症状の重篤度の低減若しくは回復；（ｘ)SMAに関連する症状の期間の低減；（xi）SMAに関連する症状の再発の予防；（xii）SMAの症状の発現若しくは発症の阻害；及び／又は（xiii）SMAに関連する症状の進行の阻害。
より具体的には、用語「SMAを処置する」とは、以下の有益な効果のうちの１つ以上を意味する：（ｉ）筋力の喪失の低減；（ii）筋力の増大；（iii）筋萎縮の低減；（iv）運動機能の喪失の低減；（ｖ）運動ニューロンの増加；（vii）運動ニューロンの喪失の低減；（viii）SMN欠失運動ニューロンの変性からの保護；（ix）運動機能の増大；（ｘ）肺機能の増大；及び／又は（xi）肺機能の喪失の低減。
更に詳細には、用語「SMAを処置する」とは、ヒトの乳児又はヒトの幼児が独力で起き上がる、ヒトの乳児、ヒトの幼児、ヒトの小児、又はヒトの成人が独力で立ち上がる、独力で歩く、独力で走る、独力で呼吸する、独力で寝返りを打つ、又は独力で嚥下する機能的能力又は機能的能力の保持を指す。
【００６４】
用語「完全長SMN2ミニ遺伝子mRNAの生成についてのEC1.5x濃度」（又は「EC1.5xミニ遺伝子」）は、完全長SMN2ミニ遺伝子mRNAの量をビヒクル処理細胞に対して１．５倍多いレベルに増加させるのに有効な試験化合物の濃度として定義される。
【００６５】
用語「SMNタンパク質発現についてのEC1.5x濃度」（又は「EC1.5xSMNタンパク質」）は、ビヒクル対照から生成される量と比べてSMA患者の線維芽細胞におけるSMNタンパク質を１．５倍の量生成するのに有効な試験化合物の濃度と定義される。
【００６６】
用語「最大半量有効濃度」（EC50）は、インビボにおいて特定の効果の最大の５０％を得るのに必要な特定の化合物又は分子の血漿濃度を意味する。
【００６７】
「薬学的に許容し得る担体」とは、対象に対して非毒性である、医薬組成物中の活性成分以外の成分を指す。薬学的に許容し得る担体は、バッファ又は酸性化剤、賦形剤、安定剤、又は保存剤を含むが、これらに限定されない。
【００６８】
用語「バッファ」又は「バッファ系」とは、医薬製剤のpHを安定化する、薬学的に許容し得る賦形剤又は賦形剤混合物を意味する。好適なバッファは、当技術分野において周知であり、そして、文献中に見出すことができる。具体的な薬学的に許容し得るバッファは、クエン酸バッファ、リンゴ酸塩バッファ、マレイン酸塩バッファ、又は酒石酸塩バッファ、最も具体的には、酒石酸塩バッファを含む。本発明の具体的なバッファ系は、有機酸とその選択される塩との組み合わせ、例えば、三塩基性クエン酸ナトリウム及びクエン酸、リンゴ酸及びリンゴ酸ナトリウム、酒石酸カリウムナトリウム及び酒石酸、又は酒石酸二ナトリウム及び酒石酸、具体的には酒石酸カリウムナトリウム及び酒石酸。或いは、有機酸（具体的には酒石酸）を、酸と対応する塩との組み合わせの代わりに「酸性化剤」として単独で使用してもよい。用いられるバッファとは別に、当技術分野において公知の酸又は塩基、例えば、塩酸、酢酸、リン酸、硫酸、及びクエン酸、水酸化ナトリウム及び水酸化カリウムを用いてpHを調整することができる。具体的な酸性化剤は、酒石酸である。
【００６９】
用語「酸化防止剤」は、活性医薬成分の酸化を防ぐ、薬学的に許容し得る賦形剤を意味する。酸化防止剤は、アスコルビン酸、グルタチオン、システイン、メチオニン、クエン酸、EDTAを含む。
【００７０】
用語「界面活性剤」は、撹拌及び剪断等の機械的ストレスに対してタンパク質組成物を保護するために使用される、薬学的に許容し得る賦形剤を意味する。薬学的に許容し得る賦形剤の例は、ポロキサマー、ポリソルベート、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（BRIJ（登録商標））、アルキルフェニルポリオキシエチレンエーテル（TRITON-X（登録商標））、又はドデシル硫酸ナトリウム（SDS）を含む。
【００７１】
用語「ポロキサマー」は、ポリ（エチレンオキシド）（PEO）の２本の親水鎖に隣接する中央のポリ（プロピレン）オキシド（PPO）の疎水鎖で構成される非イオン性トリブロックコポリマーを意味し、各PPO又はPEOの鎖は異なる分子量の鎖であってよい。また、ポロキサマーは、商品名Pluronicsとしても知られている。具体的なポロキサマーは、PPO鎖の分子質量が１８００ｇ／モルであり、そして、PEO含量が８０％（w/w）であるポロキサマーであるPoloxamer 188である。
【００７２】
用語「ポリソルベート」は、典型的にはエチレンオキシドと共重合しているソルビトールのオレイン酸エステル及びその無水物を意味する。具体的なポリソルベートは、Polysorbate 20（ポリ（エチレンオキシド）（２０）ソルビタンモノラウラート、TWEEN 20（登録商標））又はPolysorbate 80（ポリ（エチレンオキシド）（８０）ソルビタンモノラウラート、TWEEN 80（登録商標））である。
【００７３】
「親水性−親油性バランス」（HLB）値は、非イオン性界面活性剤の親水性の程度を意味する。HLB値は、Griffin W.C., Journal of the Society of Cosmetic Chemists (1949) 1:311に記載のとおり、界面活性剤の親水性部分の分子質量とその全体の分子質量との間の比によって決定される。
【００７４】
用語「親水性」は、極性溶媒、特に水、若しくは水素結合によって駆動される他の極性部分との相互作用、双極子−イオン相互作用、及び／又は双極子−双極子相互作用をする分子又は分子の一部の能力を意味する。
【００７５】
用語「親油性」及び「疎水性」は、互換的に使用することができ、そして、ロンドン分散力によって駆動される脂肪、油、及び非極性溶媒等の非極性環境において溶解する分子又は分子の一部の傾向を意味する。
【００７６】
「logP」値は、分配係数Ｐの１０を底とする対数を意味し、そして、中性無電荷化合物の親油性の尺度である。本願では、分配係数Ｐは、平衡状態における有機相、具体的には１−オクタノール中の溶質の濃度と、水相中の該溶質の濃度との間の比によって決定される。
【００７７】
式（Ｉ）の化合物
詳細には、本発明は、式（Ｉ）
【化３】
0006659841.tif 000004
（式中、
Ｒ１は、水素又はＣ１−７−アルキルであり；
Ｒ２は、水素、シアノ、Ｃ１−７−アルキル、Ｃ１−７−ハロアルキル、又はＣ３−８−シクロアルキルであり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１−７−アルキル、又はＣ３−８−シクロアルキルであり；
Ａは、Ｎ−ヘテロシクロアルキル又はＮＲ１２Ｒ１３であり、ここで、Ｎ−ヘテロシクロアルキルは、１又は２個の窒素環原子を含み、そして、場合により、Ｒ１４から選択される１、２、３、又は４個の置換基で置換されており；
Ｒ１２は、１個の窒素環原子を含むヘテロシクロアルキルであり、ここで、ヘテロシクロアルキルは、場合により、Ｒ１４から選択される１、２、３、又は４個の置換基で置換されており；
Ｒ１３は、水素、Ｃ１−７−アルキル、又はＣ３−８−シクロアルキルであり；
Ｒ１４は、独立して、水素、Ｃ１−７−アルキル、アミノ、アミノ−Ｃ１−７−アルキル、Ｃ３−８−シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルから選択されるか、又は２個のＲ１４は一緒に、Ｃ１−７−アルキレンを形成し；
ただし、Ａが窒素環原子を１個だけ含むＮ−ヘテロシクロアルキルである場合、少なくとも１個のＲ１４置換基がアミノ又はアミノ−Ｃ１−７−アルキルである）
の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物であって、
経口水溶液、又は経口水溶液の構成に適した乾燥粉末である医薬組成物に関する。
【００７８】
本発明の特定の実施態様は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物である。
【００７９】
更に、本明細書に開示される特定のＡ、Ｒ１、Ｒ２、又はＲ３に関連する全ての実施態様を、本明細書に開示される別のＡ、Ｒ１、Ｒ２、又はＲ３に関連する任意の他の実施態様と組み合わせてよいことを理解すべきである。
【００８０】
本発明の特定の実施態様では、
Ｒ１は、水素又はＣ１−７−アルキルであり；
Ｒ２は、水素、シアノ、Ｃ１−７−アルキル、Ｃ１−７−ハロアルキル、又はＣ３−８−シクロアルキルであり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１−７−アルキル、又はＣ３−８−シクロアルキルであり；
Ａは、１又は２個の窒素環原子を含むＮ−ヘテロシクロアルキルであり、ここで、Ｎ−ヘテロシクロアルキルは、場合により、Ｒ１４から選択される１、２、３、又は４個の置換基で置換されており；
Ｒ１４は、独立して、水素、Ｃ１−７−アルキル、アミノ、アミノ−Ｃ１−７−アルキル、Ｃ３−８−シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルから選択されるか、又は２個のＲ１４は一緒に、Ｃ１−７−アルキレンを形成し；
ただし、Ａが窒素環原子を１個だけ含むＮ−ヘテロシクロアルキルである場合、少なくとも１個のＲ１４置換基がアミノ又はアミノ−Ｃ１−７−アルキルである。
【００８１】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ１は、Ｃ１−７−アルキル、具体的にはメチルである。
【００８２】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ２は、水素又はＣ１−７−アルキル、具体的には水素又はメチルである。
【００８３】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ3は、水素又はＣ１−７−アルキル、具体的には水素又はメチルである。
【００８４】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ１２は、場合により、Ｒ１４から選択される１、２、３、又は４個の置換基で置換されているピペリジニルである。
【００８５】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ13は、水素又はＣ１−７−アルキル、具体的には水素又はメチルである。
【００８６】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ１４は、独立して、Ｃ１−７−アルキル及びヘテロシクロアルキルから選択されるか、又は２個のＲ１４は一緒に、Ｃ１−７−アルキレンを形成する。
【００８７】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ１４は、独立して、メチル、エチル、及びピロリジニルから選択されるか、又は２個のＲ１４は一緒に、エチレンを形成する。
【００８８】
本発明の特定の実施態様では、Ａは、１又は２個の窒素環原子を含む飽和の単環式又は二環式のＮ−ヘテロシクロアルキルであり、そして、場合により、Ｒ１４から選択される１、２、３、又は４個の置換基で置換されている。
【００８９】
本発明の特定の実施態様では、本明細書に定義されるＡにおけるＮ−ヘテロシクロアルキル又はＲ１２におけるヘテロシクロアルキルは、Ｒ１４から選択される１又は２個の置換基で置換されている。
【００９０】
本発明の特定の実施態様では、本明細書に定義されるＡにおけるＮ−ヘテロシクロアルキルは、１個の環窒素原子が塩基性であることを更に特徴とする。
【００９１】
本発明の特定の実施態様では、Ａは、
【化４】
0006659841.tif 000005
（式中、
Ｘは、Ｎ又はＣＨであり；
Ｒ４は、水素、Ｃ１−７−アルキル、若しくは−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ９Ｒ１０であり；
Ｒ５は、水素若しくはＣ１−７−アルキルであり；
Ｒ６は、水素若しくはＣ１−７−アルキルであり；
Ｒ７は、水素若しくはＣ１−７−アルキルであり；
Ｒ８は、水素若しくはＣ１−７−アルキルであり；
Ｒ９及びＲ１０は、独立して、水素、Ｃ１−７−アルキル、及びＣ３−８−シクロアルキルから選択され；
Ｒ１３は、水素、Ｃ１−７−アルキル、若しくはＣ３−８−シクロアルキルであり；
ｎは、０、１、若しくは２であり；
ｍは、０、１、２、若しくは３であるか；
又は、Ｒ４及びＲ５は一緒に、Ｃ１−７−アルキレンを形成するか；
又は、Ｒ４及びＲ７は一緒に、Ｃ１−７−アルキレンを形成するか；
又は、Ｒ５及びＲ６は一緒に、Ｃ２−７−アルキレンを形成するか；
又は、Ｒ５及びＲ７は一緒に、Ｃ１−７−アルキレンを形成するか；
又は、Ｒ５及びＲ９は一緒に、Ｃ１−７−アルキレンを形成するか；
又は、Ｒ７及びＲ８は一緒に、Ｃ２−７−アルキレンを形成するか；
又は、Ｒ７及びＲ９は一緒に、Ｃ１−７−アルキレンを形成するか；
又は、Ｒ９及びＲ１０は一緒に、Ｃ２−７−アルキレンを形成し；
ただし、ＸがＣＨである場合、Ｒ４は−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ９Ｒ１０であり；そして、
ただし、ＸがＮでありかつＲ４が−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ９Ｒ１０である場合、ｍは２又は３である）
である。
【００９２】
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８のうちの少なくとも１個が水素ではないとき、脳透過性が改善されることが見出された。
【００９３】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８のうちの少なくとも１個が水素以外である。
【００９４】
本発明の特定の実施態様では、ＸはＮである。
【００９５】
本発明の特定の実施態様では、ｎは１である。
【００９６】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ４は、水素、メチル、又は−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ９Ｒ１０であり、より具体的には、水素である。
【００９７】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ５は、水素、メチル、又はエチル、より具体的には、メチルである。
【００９８】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ６は、水素又はメチル、より具体的には、水素である。
【００９９】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ７は、水素又はメチルである。
【０１００】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ８は、水素である。
【０１０１】
本発明の特定の実施態様では、ｍは、０である。
【０１０２】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ４及びＲ５は一緒に、プロピレンを形成する。
【０１０３】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ５及びＲ６は一緒に、エチレンを形成する。
【０１０４】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ９及びＲ１０は一緒に、ブチレンを形成する。
【０１０５】
本発明の特定の実施態様では、Ａは、
【化５】
0006659841.tif 000006
（式中、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ１３は、本明細書に定義されるとおりであり、Ｒ１１は、水素又はＣ１−７−アルキルである）
の群から選択される。
【０１０６】
本発明の特定の実施態様では、Ａは、ピペラジニル、ジアゼパニル、ピロリジニル、及びヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジニルの群から選択され、それぞれ場合により、本明細書に定義されるＲ１４から選択される１、２、３、又は４個の置換基で置換されている。
【０１０７】
本発明の特定の実施態様では、Ａは、ピペラジン−１−イル、１，４−ジアゼパン−１−イル、ピロリジン−１−イル、及びヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（１Ｈ）−イルの群から選択され、それぞれ場合により、本明細書に定義されるＲ１４から選択される１又は２個の置換基で置換されている。
【０１０８】
本発明の特定の実施態様では、Ａは、ＮＲ１２Ｒ１３（式中、Ｒ１２及びＲ１３は、本明細書に定義するとおりである）である。
【０１０９】
本発明の特定の実施態様では、Ａは、
【化６】
0006659841.tif 000007
の群から選択される。
【０１１０】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ１は、メチルであり、Ｒ２は、水素又はメチルであり、Ｒ３は、水素であり、そして、Ａは、
【化７】
0006659841.tif 000008
である。
【０１１１】
本発明の特定の実施態様では、Ｒ１は、メチルであり、Ｒ２は、メチルであり、Ｒ３は、水素であり、そして、Ａは、
【化８】
0006659841.tif 000009
である。
【０１１２】
本発明の特定の実施態様では、式（Ｉ）の化合物は、
２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＲ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＳ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＲ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＳ）−８ａ−メチル−１，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＲ）−８ａ−メチル−１，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ，５Ｒ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（１，４−ジアゼパン−１−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（１，４−ジアゼパン−１−イル）−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（３Ｒ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＳ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＳ）−８ａ−メチル−１，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＲ）−８ａ−メチル−１，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ）−３−ピロリジン−１−イルピロリジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ）−３−ピロリジン−１−イルピロリジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−（３，３−ジメチルピペラジン−１−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（３，３−ジメチルピペラジン−１−イル）−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−９−メチル−７−［（３Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−９−メチル−７−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−（３，３−ジメチルピペラジン−１−イル）−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ）−３−ピロリジン−１−イルピロリジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ）−３−ピロリジン−１−イルピロリジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（３Ｓ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（３Ｒ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（３，３−ジメチルピペラジン−１−イル）−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（３Ｓ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（３Ｒ）−３−エチルピペラジン−１−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
及びこれらの薬学的に許容し得る塩
からなる群から選択される。
【０１１３】
本発明の特定の実施態様では、式（Ｉ）の化合物は、
７−［（８ａＲ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＳ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＲ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ，５Ｒ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（３Ｒ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（８ａＳ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−９−メチル−７−［（３Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−［（３Ｒ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン；
及びこれらの薬学的に許容し得る塩
からなる群から選択される。
【０１１４】
本発明の式（Ｉ）の特定の化合物は、７−［（８ａＲ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン又はその薬学的に許容し得る塩である。
【０１１５】
本発明の特定の実施態様は、７−［（８ａＲ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物に関する。
【０１１６】
本発明の式（Ｉ）の特定の化合物は、７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン又はその薬学的に許容し得る塩である。
【０１１７】
本発明の特定の実施態様は、７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物に関する。
【０１１８】
製造プロセス
上に定義された式（Ｉ）の化合物及びその薬学的に許容し得る塩は、当技術分野において公知の標準的な方法に従って調製することができる。
【０１１９】
スキーム１に示すとおり、市販されている式（II）のアミノ−ピリジンをマロン酸エステルと反応させて、式（III）の中間体（式中、Ｙ及びＲ３は、本明細書に記載されるとおりであり、そして、Ｒは、Ｃ１−２−アルキル、具体的にはメチルである）を得ることができる。次いで、式（III）の化合物を塩素化試薬（例えば、POCl3等）で処理して、式（IV）の化合物を得る。次いで、触媒（例えば、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）パラジウム（II）ジクロリド（Pd(dppf)Cl2）等）及び塩基（例えば、K2CO3等）の存在下、好適な溶媒（例えば、DMF等）中で、式（IV）の化合物を式（Ｖ）の化合物（式中、Ｒ１及びＲ２は、本明細書に記載されるとおりであり、そして、Ｚは、Ｂ（ＯＨ）２又はＣ１−７−アルキルボロン酸エステル、例えば、４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イルである）と鈴木クロスカップリング反応で反応させて、式（VI）の化合物を得る。最後に、溶媒（例えば、ジメチルスルホキシド（DMSO）、Ｎ−メチルピロリドン（NMP）、又はジメチルホルムアミド（DMF））中、
ａ）８０℃〜２００℃の温度で加熱することによる、芳香族求核置換反応（具体的には、Ｙがフルオロである場合）；又は
ｂ）２０℃〜１００℃の温度で加熱することによる、パラジウム触媒（例えば、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（Pd(PPh3)4）若しくはビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（Pd(dba)2）の存在下におけるBuchwald-Hartwigアミノ化反応；
のいずれかで、式（VI）の化合物を化合物Ｍ−Ａと反応させて、式（Ｉ）の化合物を得る（式中、Ａは、本明細書に定義されるとおりであり、Ｍは、水素、ナトリウム、又はカリウム、具体的には水素であり、そして、Ｍは、Ａの窒素原子を介してＡに結合している）。
【化９】
0006659841.tif 000010
【０１２０】
スキーム１．
一実施態様では、本発明は、上に定義された式（Ｉ）の化合物及びその薬学的に許容し得る塩を製造するプロセスであって、溶媒（例えば、ジメチルスルホキシド（DMSO）、Ｎ−メチルピロリドン（NMP）、又はジメチルホルムアミド（DMF））中、
ａ）８０℃〜２００℃の温度で加熱することによる、芳香族求核置換反応（具体的には、Ｙがフルオロである場合）；又は
ｂ）２０℃〜１００℃の温度で加熱することによる、パラジウム触媒（例えば、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（Pd(PPh3)4）若しくはビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（Pd(dba)2）の存在下におけるBuchwald-Hartwigアミノ化反応；
のいずれかで、式（VI）の化合物を化合物Ｍ−Ａと反応させることを含み、Ａ、Ｙ、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３が、本明細書に定義されるとおりであり、Ｍが、水素、ナトリウム、又はカリウム、具体的には水素であり、そして、Ｍが、Ａの窒素原子を介してＡに結合しているプロセスに関する。
【化１０】
0006659841.tif 000011
【０１２１】
本発明の特定の実施態様は、上に定義された式（Ｉ）の化合物及びその薬学的に許容し得る塩を調製するためのプロセスであって、溶媒中で加熱することによる、上記の式（VI）の化合物と式Ｍ−Ａの化合物との間の芳香族求核置換反応を含み、Ａ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、及びＹが、上に定義されたとおりであり、Ｍが、水素、ナトリウム、又はカリウムであり、そして、Ｍが、Ａの窒素原子を介してＡに結合しているプロセスに関する。
【０１２２】
本発明の特定の実施態様は、上に定義された式（Ｉ）の化合物及びその薬学的に許容し得る塩を調製するためのプロセスであって、芳香族求核置換反応が８０℃〜２００℃の温度で実施されるプロセスに関する。
【０１２３】
本発明の特定の実施態様は、上に定義された式（Ｉ）の化合物及びその薬学的に許容し得る塩を調製するためのプロセスであって、芳香族求核置換反応の溶媒が、ジメチルスルホキシド（DMSO）、Ｎ−メチルピロリドン（NMP）、及びジメチルホルムアミド（DMF）から選択されるプロセスに関する。
【０１２４】
本発明の特定の実施態様は、上に定義された式（Ｉ）の化合物及びその薬学的に許容し得る塩を調製するためのプロセスであって、Ｍが水素であるプロセスに関する。
【０１２５】
具体的には、式（Ｉ）の化合物及びその薬学的に許容し得る塩は、本明細書の実施例に記載される方法に従って調製することができる。
【０１２６】
医学的用途
上記のとおり、式（Ｉ）の化合物及びその薬学的に許容し得る塩は、有用な薬理学的特性を有し、そして、SMN1及び／又はSMN2の遺伝子から転写されるmRNA中へのSMN1及び／又はSMN2のエクソン７の包入を強化し、それによって、それを必要としているヒト対象におけるSMNタンパク質の発現を増加させることが判明した。
【０１２７】
本発明の化合物は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するために、単独で又は他の薬物と組み合わせて使用することができる。これら疾患は、脊髄性筋萎縮症（SMA）を含むが、これに限定されるわけではない。
【０１２８】
本発明の特定の実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための、具体的には、SMAを治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための、上に定義された式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と１つ以上の薬学的に許容し得る賦形剤とを含む医薬組成物に関する。
【０１２９】
本発明の特定の実施態様は、処置活性物質として使用するための、特にSMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための、具体的には、脊髄性筋萎縮症（SMA）を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための処置活性物質として使用するための、上に定義された式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物に関する。
【０１３０】
本発明の特定の実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患の治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解において使用するための、具体的には、脊髄性筋萎縮症（SMA）の治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解において使用するための、上に定義された式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物に関する。
【０１３１】
本発明の特定の実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための方法、具体的には、脊髄性筋萎縮症（SMA）を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための方法であって、上に定義された式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物を対象に投与することを含む方法に関する。
【０１３２】
本発明の特定の実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための、具体的には、脊髄性筋萎縮症（SMA）を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための、上に定義された式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物の使用に関する。
【０１３３】
本発明の特定の実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための、具体的には、脊髄性筋萎縮症（SMA）を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための医薬を調製するための、上に定義された式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物の使用に関する。このような医薬は、上に定義された式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む。
【０１３４】
組み合わせ
細胞保護剤（例えば、オレソキシム）及びSMN2遺伝子スプライシング調節剤（例えば、式（Ｉ）の化合物）は、脊髄性筋萎縮症（SMA）の処置に対する補完的なアプローチである。併用処置としての細胞保護剤とSMN2遺伝子スプライシング調節剤との共投与（co-administration）が、全ての種類のSMA患者に更なる利益を与えることを示唆する裏付けとなるエビデンスが存在する。付加される利益の程度は、SMAマウスモデルにおける併用処置の研究を通して定量され得る。
【０１３５】
本発明の具体的なSMN2遺伝子スプライシング調節剤は、本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩である。
【０１３６】
本発明の具体的な細胞保護剤は、オレソキシムである。
【０１３７】
全身的に低レベルのSMNタンパク質がSMAを引き起こす。脊髄のα−運動ニューロンは、この遺伝障害において特に脆弱であると考えられ、そして、その機能不全及び喪失は、進行性の筋力低下、麻痺、そして、最終的には罹患個体の早死を引き起こす。したがって、SMAは歴史的に運動ニューロン自律性疾患であると考えられていた。しかし、正常マウスの運動ニューロンにおいてSMNを枯渇させても非常に軽度の表現型しか誘発されなかった（Park et al, J Neurosci. 2010 Sep 8;30(36):12005-19）。逆に、SMAマウスモデルにおいてSMNを運動ニューロンに回復させても、SMA表現型及び生存に対して非常にわずかな効果しか有していなかった（Hua et al Nature. 2011 Oct 5;478(7367):123-6）。まとめると、これら結果は、更なる細胞型がSMAの発症機序の原因であることを示唆しており、そして、有効な療法を開発するために非自律性要件の理解が不可欠である。
【０１３８】
現在の研究は、多細胞、多組織、多臓器の障害としてのSMAに焦点を当てている。様々な組織、例えば、求心性神経、筋肉、血管系、脳、心臓、及び膵臓がSMAに罹患することを示す幾つかのインビトロ、インビボにおける研究、及びヒト症例研究が存在する（Hamilton and Gillingwater, et al, Trends Mol Med. 2013 Jan;19(1):40-50。例えば、SMAにおける筋肉固有の欠陥を示す一連の研究が存在し、これは、SMNが筋肉の発生及び再生において役割を果たしていることを示す（Boyer et al, Front Physiol. 2013 Dec 18;4:356.；Hayhurst M et al., Dev Biol. 2012 Aug 15;368(2):323-34；Briccino et al, Hum Mol Genet. 2014 Sep 15;23(18):4745-57.；Shafey et al, Exp Cell Res. 2005 Nov 15;311(1):49-61.、Cifuentes-Diaz et al, J Cell Biol. 2001 Mar 5;152(5):1107-14.；Martinez et al J Neurosci. 2012 Jun 20;32(25):8703-15.。これは、SMA患者のための筋肉を標的とする処置の重要性を強調する。多くの処置ストラテジーは、SMNタンパク質の回復を標的とする。アンチセンスオリゴヌクレオチド及び遺伝子療法の潜在的処置は、CNS組織のみでSMNを増加させることを標的とする。他の重要な罹患細胞及び組織に対して有効な標的処置は、依然として課題である。
【０１３９】
細胞保護剤オレソキシム及び式（Ｉ）のSMN2遺伝子スプライシング調節剤は、いずれも経口投与することができ、全身的に分布させられる。更に、これらは補完的作用機序を有する。オレソキシムは、ミトコンドリア膜を保存し、そして、SMAにおける疾患の病態生理の重要な要素であるミトコンドリア機能不全を予防することによって細胞を保護する。ミトコンドリアは、いずれもSMAにおける標的処置組織として同定されている運動ニューロン及び筋肉細胞等のエネルギー要求細胞において特に大量に存在する。式（Ｉ）のSMN2遺伝子スプライシング調節剤は、全身的にSMNタンパク質を増加させることを標的とする。
【０１４０】
式（Ｉ）のSMN2遺伝子スプライシング調節剤は、SMN mRNA前駆体のミススプライシングの補正を通してRNAレベルでSMNタンパク質を補正する。未処理細胞を超えるSMA運動ニューロン及び線維芽細胞におけるSMNタンパク質の最大増加の結果、両方の細胞タイプにおいて同様の増加が生じた（６０〜８０％）。更に、SMAの重篤及び軽度のモデルの両方において、式（Ｉ）のSMN2遺伝子スプライシング調節剤で処置されたマウスはSMNタンパク質が増加し、ヘテロ接合体マウスにおけるタンパク質レベルの約４３％（脳）及び５５％（筋肉）に達した。タンパク質の増加は、実質的な利益を与える（神経筋接合部（NMJ）における結合性を回復させる、及び式（Ｉ）の化合物で処置された重篤マウスにおける生存率に対して）のに十分であった。タンパク質の増加がヘテロ接合体マウス又は野性型マウスの１００％には補正されないことに鑑みて、共処置、特に、疾患の他の発症機序を標的とする処置によって更に改善され得ると考えるのが合理的である。
【０１４１】
インビトロ結合試験及び酸化的ストレスアッセイは、細胞保護剤オレソキシムが、ミトコンドリア機能不全のエビデンスがある疾患（SMA）においてミトコンドリア膜を保存し、それによって、細胞死を防ぐことを示す。インビトロ蛍光イメージング実験は、オレソキシムがニューロンにおけるミトコンドリアの膜レベルで蓄積することを示した。更に、オレソキシム処置SOD1マウス（重篤な家族性ALSモデル）では、早期に処置されたとき、神経筋接合部（NMJ）が保存された。したがって、オレソキシムは、ミトコンドリア及び細胞保護の機序を通して更なる、そして、補完的な利益を与えることができた。
【０１４２】
細胞保護剤オレソキシム及び式（Ｉ）のSMN2遺伝子スプライシング調節剤の併用処置の更なる利益は、軽度のSMAのマウスモデルにおいて確認されつつある。軽度モデルは、低用量のSMNスプライシング調節剤で重篤なSMAΔ７マウスモデルを処置することによって作製された。この研究では、細胞保護剤オレソキシム及び式（Ｉ）のSMN2遺伝子スプライシング調節剤を、単独で、そして、組み合わせて試験する。マウスNMJに対する処理の影響は、この表現型の重要性に鑑みて、これら研究の主要評価項目である。筋肉組織における酸化的ストレスマーカーについても評価する。
【０１４３】
式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩は、１つの医薬組成物中でオレソキシムと組み合わせてもよく（例えば、一定用量の組み合わせ）、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩とオレソキシムとを交互に逐次共投与してもよい。
【０１４４】
本明細書に記載されるとおり、式（Ｉ）の化合物とオレソキシムとの共投与は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための、及び付加的には、該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するための、具体的には、脊髄性筋萎縮症（SMA）を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための有益かつ相乗的な効果を有し得る。
【０１４５】
本発明の状況では、２つのAPIの「共投与」という用語は、同時であってもよく、ほぼ同時であってもよく、又は数日間若しくは数週間、例えば、最長４若しくは５週間遅れてもよい。
【０１４６】
本発明の化合物は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するために、及び付加的には、該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するために、細胞保護剤、例えばオレソキシムと併用することができる。これら疾患は、脊髄性筋萎縮症（SMA）を含むが、これに限定されるわけではない。
【０１４７】
特定の実施態様において、本発明は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患の治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解において、及び付加的には、該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するために、具体的には、脊髄性筋萎縮症（SMA）を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するために、単独で又はこれらの組み合わせにおいて式（Ｉ）の化合物とオレソキシムとの組み合わせの相乗効果を示すであろう。
【０１４８】
本発明の特定の実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異又は欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患の治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解において使用するための、及び付加的には、該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するための、具体的には、SMAを治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と、オレソキシムと、１つ以上の薬学的に許容し得る賦形剤とを含む医薬組成物に関する。
【０１４９】
本発明の特定の実施態様は、処置活性物質として使用するための、特にSMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための、及び付加的には、該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するための、具体的には、脊髄性筋萎縮症（SMA）を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための、処置活性物質として使用するための、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩とオレソキシムとを含む医薬組成物に関する。
【０１５０】
本発明の特定の実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患の治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解において使用するための、及び付加的には、該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するための、具体的には、脊髄性筋萎縮症（SMA）の治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解において使用するための、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩とオレソキシムとを含む医薬組成物に関する。
【０１５１】
本発明の特定の実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための方法、そして、更には、該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するための方法、具体的には、脊髄性筋萎縮症（SMA）を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための方法であって、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩とオレソキシムとを含む医薬組成物を対象に投与することを含む方法に関する。
【０１５２】
本発明の特定の実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための、及び付加的には、該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するための、具体的には、脊髄性筋萎縮症（SMA）を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩とオレソキシムとを含む医薬組成物の使用に関する。
【０１５３】
本発明の特定の実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための、及び付加的には、該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するための、具体的には、脊髄性筋萎縮症（SMA）を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための医薬を調製するための、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩とオレソキシムとの使用に関する。このような医薬は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩とオレソキシムとを含む。
【０１５４】
したがって、本発明は、また、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩とオレソキシムとを含む医薬組成物を調製するキットも包含する。
【０１５５】
一実施態様では、本発明は、（ａ）処置的に有効な量の（ｉ）式（Ｉ）の化合物及び（ii）薬学的に許容し得る担体を含む第１の医薬組成物と、（ｂ）（ｉ）オレソキシム及び（ii）薬学的に許容し得る担体を含む第２の医薬組成物と、（ｃ）処方情報と、（ｄ）容器とを含むキットであって、該処方情報が、２つのAPIの共投与に関する患者へのアドバイスを含むキットを提供する。
【０１５６】
別の実施態様では、本発明は、処置的に有効な量の式（Ｉ）の化合物及びオレソキシムを含む組成物と、「リーフレット」としても知られている処方情報と、ブリスターパッケージ又は瓶（HDPE又はガラス）と、容器とを含むキットを提供する。
【０１５７】
用語「キット」とは、本明細書で使用するとき、別々に又は単一の容器内に提供され得る前述の構成要素の集合体を指す。容器は、場合により、本開示の方法を実行するための指示書を含む。
【０１５８】
本発明の一実施態様は、SMN2遺伝子スプライシング調節剤と細胞保護剤との組み合わせ物を提供する。
【０１５９】
本発明の一実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患の治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解において使用するための並びに／或いは該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するための、SMN2遺伝子スプライシング調節剤と細胞保護剤との組み合わせ物を提供する。
【０１６０】
本発明の一実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患の治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解において使用するための並びに／或いは該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するための、請求項１〜９のいずれかに記載の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩とオレソキシムとの組み合わせ物を提供する。
【０１６１】
本発明の一実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための並びに／或いは該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するための方法であって、SMN2遺伝子スプライシング調節剤と細胞保護剤との組み合わせ物を対象に投与することを含む方法を提供する。
【０１６２】
本発明の一実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための並びに／或いは該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するための方法であって、請求項１〜９のいずれかに記載の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩とオレソキシムとの組み合わせ物を対象に投与することを含む方法を提供する。
【０１６３】
本発明の一実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための並びに／或いは該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するための、SMN2遺伝子スプライシング調節剤と細胞保護剤との組み合わせ物の使用を提供する。
【０１６４】
本発明の一実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための並びに／或いは該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するための、請求項１〜９のいずれかに記載の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩とオレソキシムとの組み合わせ物の使用を提供する。
【０１６５】
本発明の一実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための並びに／或いは該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するための医薬を調製するための、SMN2遺伝子スプライシング調節剤と細胞保護剤との組み合わせ物の使用を提供する。
【０１６６】
本発明の一実施態様は、SMN1遺伝子における不活化突然変異若しくは欠失によって引き起こされる及び／又はSMN1遺伝子の機能の喪失若しくは欠陥に関連する疾患を治療、予防、進行遅延、及び／又は寛解するための並びに／或いは該疾患の病態生理に関与する細胞を保護するための医薬を調製するための、請求項１〜９のいずれかに記載の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩とオレソキシムとの組み合わせ物の使用を提供する。
【０１６７】
医薬組成物
本発明の式（Ｉ）の化合物は、高い水溶解度を有することが見出された。SMA患者の全ての年齢群で嚥下に障害があるため、溶液の投与が好ましいことが見出された。
【０１６８】
式（Ｉ）の化合物は、十分に高い薬物濃度を提供するために、pH４未満、具体的にはpH３．８未満、より具体的にはpH３．６未満、最も具体的にはpH３．４のバッファ系、例えば、クエン酸バッファ系、リンゴ酸塩バッファ系、マレイン酸塩バッファ系、又は酒石酸塩バッファ系、最も具体的には酒石酸塩バッファ系に原薬を溶解させることによって、経口水溶液として製剤化することができる。
【０１６９】
式（Ｉ）の化合物の製剤の長期安定性は、経口溶液を構成するための乾燥粉末又は顆粒を調製することによって得ることができる。微粉末として有機酸及びその塩、例えば、三塩基性クエン酸ナトリウム及びクエン酸、リンゴ酸二ナトリウム及びリンゴ酸、酒石酸カリウムナトリウム及び酒石酸、又は酒石酸二ナトリウム及び酒石酸、特に、酒石酸カリウムナトリウム及び酒石酸を選択することによって、バッファ系を乾燥製剤に組み込むことができる。或いは、酸と対応する塩との組み合わせの代わりに、有機酸（具体的には酒石酸）を「酸性化剤」として単独で使用してもよい。
【０１７０】
式（Ｉ）の化合物を含む粉末又は顆粒は、希釈剤、例えば、ソルビトール、イソマルト、又は具体的にはマンニトール、及びこれらの組み合わせを含み得、これらは、経口溶液の構成中に粉末ブレンドが速やかに溶解することを保証する。充填剤の導入においては、流動性を改善し、そして、ロバストな均一性を保証するために、粉末ブレンドを乾式圧縮によって顆粒化してもよい。
【０１７１】
式（Ｉ）の化合物のための溶媒系を構成するための成分は、別々の製剤として製剤化することができる。構成された溶媒は、経口溶液の使用期間の開始時に瓶内で式（Ｉ）の化合物を溶解させるために使用することができる。
【０１７２】
本発明の特定の実施態様は、経口溶液を構成するための粉末形態の、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物に関する。
【０１７３】
本発明の特定の実施態様では、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物を、経口ディスペンサーを使用するためのアダプタを備える多用量瓶に充填する。このような経口ディスペンサーを使用するためのアダプタを備える多用量瓶は、投薬の柔軟性を高めることができ、例えば、体重によって投薬を調整することができるようになり、そして、安全かつ便利な用量投与を提供することが判明した。
【０１７４】
本発明の特定の実施態様では、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物は、ローラー圧縮により乾式造粒することを通して調製され、続いて、瓶に充填される。このような加工は、分離を防ぐために（具体的には、水溶性充填剤にとって）有益であることが見出された。
【０１７５】
本発明の特定の実施態様は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物であって、経口水溶液、又は経口水溶液の構成に適した乾燥粉末である医薬組成物に関する。
【０１７６】
本発明の特定の実施態様は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物であって、エアゾールも経口水溶液の構成に適した乾燥粉末も含まない経口水溶液である医薬組成物に関する。
【０１７７】
本発明の特定の実施態様では、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物は、エアゾールではない。
【０１７８】
本発明の特定の実施態様では、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物は、等張化剤、例えば、塩化ナトリウム等の塩を含まない。
【０１７９】
本発明の特定の実施態様は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物であって、経口水溶液、又は経口水溶液の構成に適した乾燥粉末であり、そして、該経口水溶液が、pH４未満、具体的にはpH３．８未満、より具体的にはpH３．６未満、最も具体的にはpH３．４のpHを有する医薬組成物に関する。
【０１８０】
本発明の特定の実施態様は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩のバッファ系、具体的には、リンゴ酸塩又は酒石酸塩のバッファ系、最も具体的には、酒石酸塩のバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸とを含む医薬組成物であって、経口水溶液、又は経口水溶液の構成に適した乾燥粉末である医薬組成物に関する。
【０１８１】
本発明の特定の実施態様は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物であって、経口水溶液である医薬組成物に関する。
【０１８２】
本発明の特定の実施態様は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物であって、pH４未満、具体的にはpH３．８未満、より具体的にはpH３．６未満、最も具体的にはpH３．４のpHのバッファ系中の経口水溶液である医薬組成物に関する。
【０１８３】
本発明の特定の実施態様は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物であって、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩のバッファ系、具体的には、リンゴ酸塩又は酒石酸塩のバッファ系、最も具体的には、酒石酸塩のバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸中の経口水溶液である医薬組成物に関する。
【０１８４】
本発明の特定の実施態様は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物であって、経口水溶液の構成に適した乾燥粉末である医薬組成物に関する。
【０１８５】
本発明の特定の実施態様は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物であって、pH４未満、具体的にはpH３．８未満、より具体的にはpH３．６未満、最も具体的にはpH３．４のpHの経口水溶液の構成に適したバッファ系を含む乾燥粉末である医薬組成物に関する。
【０１８６】
本発明の特定の実施態様は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物であって、経口水溶液の構成に適した、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩のバッファ系、具体的には、リンゴ酸塩又は酒石酸塩のバッファ系、最も具体的には、酒石酸塩のバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸を含む乾燥粉末である医薬組成物に関する。
【０１８７】
本発明の一実施態様では、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物は、場合により、顆粒外充填剤、例えば、ラクトース、デンプン、加水分解デンプン、マルトデキストリン、微結晶セルロース、マンニトール、ソルビトール、スクロース、デキストロース、第二リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、又はこれらの組み合わせを更に含む。
【０１８８】
本発明の特定の実施態様では、顆粒外充填剤は、ソルビトール、イソマルト、マンニトール、又はこれらの組み合わせ、具体的にはマンニトール、より具体的には結晶質マンニトール、最も具体的には、平均直径１６０μmの結晶質マンニトール（Pearlitol（登録商標）160C）である。
【０１８９】
希釈剤の導入においては、流動性を改善し、そして、ロバストな均一性を保証するために、粉末ブレンドを乾式圧縮によって顆粒化してもよい。
【０１９０】
本発明の一実施態様では、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物は、場合により、希釈剤、例えば、ラクトース、デンプン、加水分解デンプン、マルトデキストリン、微結晶セルロース、マンニトール、イソマルト（Ｅ９５３、（２ξ）−６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−アラビノ−ヘキシトール）、ソルビトール、スクロース、デキストロース、第二リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、又はこれらの組み合わせを更に含む。
【０１９１】
本発明の一実施態様では、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物は、場合により、希釈剤、例えば、ラクトース、デンプン、加水分解デンプン、微結晶セルロース、マンニトール、ソルビトール、スクロース、デキストロース、第二リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、又はこれらの組み合わせを更に含む。
【０１９２】
本発明の特定の実施態様では、希釈剤は、マンニトール、具体的には、直接圧縮に好適なＤ−マンニトール、例えば、Parteck（登録商標）M100である。
【０１９３】
本発明の特定の実施態様では、希釈剤は、マンニトール及びイソマルト、具体的には、Ｄ−マンニトール及び（２ξ）−６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−アラビノ−ヘキシトール）の混合物である。
【０１９４】
第２の希釈剤としてのイソマルトは、顆粒の特性を改善することが本発明者らによって見出された。
【０１９５】
バッファ中の式（Ｉ）の化合物の構成された経口溶液は、保存剤、安定剤、及び酸化防止剤、例えば、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＥ TPGS、パルミチン酸レチニル、セレン、システイン、メチオニン、クエン酸、クエン酸ナトリウム、メチルパラベン、プロピルパラベン、エデト酸二ナトリウム、ブチルヒドロキシトルオール、リボフラビン、アスコルビン酸、又はこれらの組み合わせを使用することによって、２週間超の使用時間を提供することができる。
【０１９６】
バッファ中の式（Ｉ）の化合物の構成された経口溶液は、保存剤、安定剤、及び酸化防止剤、例えば、ビタミンＥ TPGS、エデト酸二ナトリウム、ブチルヒドロキシトルオール、リボフラビン、アスコルビン酸、又はこれらの組み合わせを使用することによって、２週間超の使用時間を提供することができる。
【０１９７】
本発明の一実施態様では、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物は、場合により、保存剤、酸化防止剤、及び／又は安定剤、例えば、ビタミンＥ TPGS（Ｄ−アルファトコフェリルポリエチレングリコール１０００スクシナート）、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（エデト酸二ナトリウム、Na2 EDTA）、ブチルヒドロキシトルオール、リボフラビン、アスコルビン酸、又はこれらの組み合わせを更に含む。保存剤、酸化防止剤、及び／又は安定剤は、多用量容器における使用時間を延長するために、又は使用期間にわたって溶液中の薬物安定性を改善するために有益であり得ることが見出された。
【０１９８】
本発明の特定の実施態様では、保存剤は、ソルビン酸又は安息香酸ナトリウム（E211）、具体的には、安息香酸ナトリウムである。
【０１９９】
小児用製剤については、含まれる保存剤の量をできる限り少なくしなければならない。保存剤濃度がわずか１重量％である本発明の組成物は、安定な溶液が得られることが見出された。
【０２００】
本発明の特定の実施態様では、酸化防止剤は、アスコルビン酸（（５Ｒ）−［（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−３，４−ジヒドロキシフラン−２（５Ｈ）−オン）である。
【０２０１】
本発明の特定の実施態様では、安定剤は、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（エデト酸二ナトリウム、Na2 EDTA）である。
【０２０２】
本発明の一実施態様では、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物は、場合により、滑沢剤を更に含む。滑沢剤は、ローラー圧縮のための加工助剤として使用できることが見出された。更に、滑沢剤は、外観の許容性を確保するためにPEG等の水溶性成分に用いることができる。
【０２０３】
本発明の特定の実施態様では、滑沢剤は、ポリ（エチレングリコール）、具体的には、数平均分子量Mnが６，０００であるポリ（エチレングリコール）（PEG 6000）である。
【０２０４】
本発明の一実施態様では、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物は、場合により、嗜好性を改善するために甘味剤及び／又は香料を更に含む。
【０２０５】
本発明の特定の実施態様では、香料は、イチゴ香料又はバニラ香料である。
【０２０６】
本発明の特定の実施態様では、甘味剤は、スクラロース（１，６−ジクロロ−１，６−ジデオキシ−β−Ｄ−フルクトフラノシル−４−クロロ−４−デオキシ−α−Ｄ−ガラクトピラノシド、Ｅ９５５）又はサッカリンナトリウムである。
【０２０７】
本発明の特定の実施態様では、式（Ｉ）の化合物は、７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンである。
【０２０８】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と
を含む。
【０２０９】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  バッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと
を含む。
【０２１０】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと
を含む。
【０２１１】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  バッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  酸化防止剤、具体的にはアスコルビン酸と；
・  安定剤、具体的にはエデト酸二ナトリウムと
を含む。
【０２１２】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  バッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと；
・  酸化防止剤、具体的にはアスコルビン酸と；
・  安定剤、具体的にはエデト酸二ナトリウムと
を含む。
【０２１３】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  バッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと；
・  酸化防止剤、具体的にはアスコルビン酸と；
・  安定剤、具体的にはエデト酸二ナトリウムと；
・  滑沢剤、具体的にはPEG6000と
を含む。
【０２１４】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  バッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと；
・  酸化防止剤、具体的にはアスコルビン酸と；
・  安定剤、具体的にはエデト酸二ナトリウムと；
・  滑沢剤、具体的にはPEG6000と；
・  保存剤、具体的にはソルビン酸又は安息香酸ナトリウム、最も具体的には安息香酸ナトリウムと
を含む。
【０２１５】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  バッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと；
・  酸化防止剤、具体的にはアスコルビン酸と；
・  安定剤、具体的にはエデト酸二ナトリウムと；
・  滑沢剤、具体的にはPEG6000と；
・  保存剤、具体的にはソルビン酸又は安息香酸ナトリウム、最も具体的には安息香酸ナトリウムと；
・  場合により、甘味剤、具体的にはスクラロース又はサッカリンナトリウム、最も具体的にはスクラロースと；
・  場合により、香料、具体的にはイチゴ香料又はバニラ香料と
を含む。
【０２１６】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  １〜１０重量％の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  ５〜１５重量％のバッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  ４０〜７０重量％の希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと；
・  １〜４重量％の酸化防止剤、具体的にはアスコルビン酸と；
・  ０．５〜２重量％の安定剤、具体的にはエデト酸二ナトリウムと；
・  ０．５〜２重量％の滑沢剤、具体的にはPEG6000と；
・  １〜８重量％の保存剤、具体的にはソルビン酸又は安息香酸ナトリウム、最も具体的には安息香酸ナトリウムと；
・  ０〜３重量％の甘味剤、具体的にはスクラロース又はサッカリンナトリウム、最も具体的にはスクラロースと；
・  ０〜２０重量％の香料、具体的にはイチゴ香料又はバニラ香料と
を含み、
成分の総量は１００重量％を超えない。
【０２１７】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  ２〜６重量％の７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  ９〜１３重量％の酒石酸塩バッファ系と；
・  ４５〜５５重量％の第１の希釈剤としてのマンニトール及び８〜１０重量％の第２の希釈剤としてのイソマルトと；
・  １〜３重量％の酸化防止剤としてのアスコルビン酸と；
・  ０．５〜２重量％の安定剤としてのエデト酸二ナトリウムと；
・  ０．５〜２重量％の滑沢剤としてのPEG6000と；
・  １〜７重量％の保存剤としての安息香酸ナトリウムと；
・  １．５〜２重量％の甘味剤としてのスクラロースと；
・  １３〜１７重量％のイチゴ香料と
を含み、
成分の総量は１００重量％を超えない。
【０２１８】
本発明の別の実施態様は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物を調製するためのキットであって、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む粉末ブレンドと；
・  構成用溶媒としての水と
を含むキットに関する。
【０２１９】
本発明の別の実施態様は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む医薬組成物を調製するためのキットであって、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  構成用ビヒクルとしての粉末ブレンドと；
・  場合により、構成用溶媒としての水と
を含むキットに関する。
【０２２０】
別の実施態様は、本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩の構成に適したビヒクルとしての粉末ブレンドであって、
・  バッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと
を含む粉末ブレンドに関する。
【０２２１】
別の実施態様は、本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩の構成に適したビヒクルとしての粉末ブレンドであって、
・  バッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと；
・  酸化防止剤、具体的にはアスコルビン酸と；
・  安定剤、具体的にはエデト酸二ナトリウムと；
・  滑沢剤、具体的にはPEG6000と；
・  保存剤、具体的にはソルビン酸又は安息香酸ナトリウム、最も具体的には安息香酸ナトリウムと
を含む粉末ブレンドに関する。
【０２２２】
別の実施態様は、本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩の構成に適したビヒクルとしての粉末ブレンドであって、
・  バッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと；
・  酸化防止剤、具体的にはアスコルビン酸と；
・  安定剤、具体的にはエデト酸二ナトリウムと；
・  滑沢剤、具体的にはPEG6000と；
・  保存剤、具体的にはソルビン酸又は安息香酸ナトリウム、最も具体的には安息香酸ナトリウムと；
・  場合により、甘味剤、具体的にはスクラロース又はサッカリンナトリウム、最も具体的にはスクラロースと；
・  場合により、香料、具体的にはイチゴ香料又はバニラ香料と
を含む粉末ブレンドに関する。
【０２２３】
別の実施態様は、本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩の構成に適したビヒクルとしての粉末ブレンドであって、
・  ４〜１５重量％のバッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  ４０〜７０重量％の希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと；
・  １〜４重量％の酸化防止剤、具体的にはアスコルビン酸と；
・  ０．２〜２重量％の安定剤、具体的にはエデト酸二ナトリウムと；
・  ０．５〜２重量％の滑沢剤、具体的にはPEG6000と；
・  １〜８重量％の保存剤、具体的にはソルビン酸又は安息香酸ナトリウム、最も具体的には安息香酸ナトリウムと；
・  ０〜３重量％の甘味剤、具体的にはスクラロース又はサッカリンナトリウム、最も具体的にはスクラロースと；
・  ０〜２０重量％の香料、具体的にはイチゴ香料又はバニラ香料と
を含み、
成分の総量が１００重量％を超えない粉末ブレンドに関する。
【０２２４】
別の実施態様は、本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩の構成に適したビヒクルとしての粉末ブレンドであって、
・  ９〜１３重量％の酒石酸塩バッファ系又は酒石酸と；
・  ４５〜５５重量％の第１の希釈剤としてのマンニトール及び８〜１０重量％の第２の希釈剤としてのイソマルトと；
・  １〜３重量％の酸化防止剤としてのアスコルビン酸と；
・  ０．３〜０．９重量％の安定剤としてのエデト酸二ナトリウムと；
・  ０．５〜２重量％の滑沢剤としてのPEG6000と；
・  ３〜７重量％の保存剤としての安息香酸ナトリウムと；
・  ０．８〜２．０重量％の甘味剤としてのスクラロースと；
・  ７．５〜１９重量％のイチゴ香料と
を含み、
成分の総量が１００重量％を超えない粉末ブレンドに関する。
【０２２５】
本発明の特定の実施態様は、本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩及び更にオレソキシムを含む医薬組成物に関する。
【０２２６】
本発明の特定の実施態様では、オレソキシムは、２００μmよりも小さいd90値、具体的には１００μmよりも小さいd90値、より具体的には５０〜１００μmのd90値を有する粒径分布を有する。
【０２２７】
用語「d90値」とは、集団の粒子のうちの９０重量％がその値よりも小さな等価球径を有する直径を意味する。
【０２２８】
本発明の特定の実施態様は、本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と、オレソキシムと、ゴマ油、オリーブ油、ダイズ油、綿実油、ヒマシ油（castor oril）、ナッツ油、菜種油、コーン油、アーモンド油、ヒマワリ油、及びこれらの組み合わせから選択される油とを含む医薬組成物に関する。
【０２２９】
本発明の特定の実施態様は、本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；オレソキシムと；ゴマ油、オリーブ油、ダイズ油、綿実油、ヒマシ油、ナッツ油、菜種油、コーン油、アーモンド油、ヒマワリ油、及びこれらの組み合わせから選択される油と；グリセリルモノオレアート（Peceol（商標）、Inwitor 948（商標）、Capmul GMO（商標））、グリセリルモノリノレアート（Maisine 35-1（商標））、ソルビタンモノオレアート（Span 80（商標））、オレイン酸、及びこれらの組み合わせから選択される乳化及び／又は親油性可溶化剤と；場合により、極性界面活性剤、具体的には、７未満のHLB値を有する界面活性剤、より具体的にはポリソルベート８０（Tween 80（商標））、カプリロカプロイルポリオキシルグリセリド（Labrasol（商標））、及びこれらの組み合わせとを含む医薬組成物に関する。
【０２３０】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  オレソキシムと；
・  油、具体的には、ゴマ油、オリーブ油、ダイズ油、綿実油、ヒマシ油、ナッツ油、菜種油、コーン油、アーモンド油、ヒマワリ油、又はこれらの組み合わせ、最も具体的にはゴマ油と；
・  乳化及び／又は親油性可溶化剤、具体的にはグリセリルモノオレアート（Peceol（商標）、Inwitor 948（商標）、Capmul GMO（商標））、グリセリルモノリノレアート（Maisine 35-1（商標））、ソルビタンモノオレアート（Span 80（商標））、オレイン酸、又はこれらの組み合わせと；
・  場合により、極性界面活性剤、具体的には、７未満のHLB値を有する界面活性剤、より具体的にはポリソルベート８０（Tween 80（商標））、カプリロカプロイルポリオキシルグリセリド（Labrasol（商標））、又はこれらの組み合わせと
を含む。
【０２３１】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  バッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと；
・  オレソキシムと；
・  油、具体的には、ゴマ油、オリーブ油、ダイズ油、綿実油、ヒマシ油、ナッツ油、菜種油、コーン油、アーモンド油、ヒマワリ油、又はこれらの組み合わせ、最も具体的にはゴマ油と；
・  乳化及び／又は親油性可溶化剤、具体的にはグリセリルモノオレアート（Peceol（商標）、Inwitor 948（商標）、Capmul GMO（商標））、グリセリルモノリノレアート（Maisine 35-1（商標））、ソルビタンモノオレアート（Span 80（商標））、オレイン酸、又はこれらの組み合わせと；
・  場合により、極性界面活性剤、具体的には、７未満のHLB値を有する界面活性剤、より具体的にはポリソルベート８０（Tween 80（商標））、カプリロカプロイルポリオキシルグリセリド（Labrasol（商標））、又はこれらの組み合わせと
を含む。
【０２３２】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと；
・  オレソキシムと；
・  油、具体的には、ゴマ油、オリーブ油、ダイズ油、綿実油、ヒマシ油、ナッツ油、菜種油、コーン油、アーモンド油、ヒマワリ油、又はこれらの組み合わせ、最も具体的にはゴマ油と；
・  乳化及び／又は親油性可溶化剤、具体的にはグリセリルモノオレアート（Peceol（商標）、Inwitor 948（商標）、Capmul GMO（商標））、グリセリルモノリノレアート（Maisine 35-1（商標））、ソルビタンモノオレアート（Span 80（商標））、オレイン酸、又はこれらの組み合わせと；
・  場合により、極性界面活性剤、具体的には、７未満のHLB値を有する界面活性剤、より具体的にはポリソルベート８０（Tween 80（商標））、カプリロカプロイルポリオキシルグリセリド（Labrasol（商標））、又はこれらの組み合わせと
を含む。
【０２３３】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  バッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  酸化防止剤、具体的にはアスコルビン酸と；
・  安定剤、具体的にはエデト酸二ナトリウムと；
・  オレソキシムと；
・  油、具体的には、ゴマ油、オリーブ油、ダイズ油、綿実油、ヒマシ油、ナッツ油、菜種油、コーン油、アーモンド油、ヒマワリ油、又はこれらの組み合わせ、最も具体的にはゴマ油と；
・  乳化及び／又は親油性可溶化剤、具体的にはグリセリルモノオレアート（Peceol（商標）、Inwitor 948（商標）、Capmul GMO（商標））、グリセリルモノリノレアート（Maisine 35-1（商標））、ソルビタンモノオレアート（Span 80（商標））、オレイン酸、又はこれらの組み合わせと；
・  場合により、極性界面活性剤、具体的には、７未満のHLB値を有する界面活性剤、より具体的にはポリソルベート８０（Tween 80（商標））、カプリロカプロイルポリオキシルグリセリド（Labrasol（商標））、又はこれらの組み合わせと
を含む。
【０２３４】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  バッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと；
・  酸化防止剤、具体的にはアスコルビン酸と；
・  安定剤、具体的にはエデト酸二ナトリウムと；
・  オレソキシムと；
・  油、具体的には、ゴマ油、オリーブ油、ダイズ油、綿実油、ヒマシ油、ナッツ油、菜種油、コーン油、アーモンド油、ヒマワリ油、又はこれらの組み合わせ、最も具体的にはゴマ油と；
・  乳化及び／又は親油性可溶化剤、具体的にはグリセリルモノオレアート（Peceol（商標）、Inwitor 948（商標）、Capmul GMO（商標））、グリセリルモノリノレアート（Maisine 35-1（商標））、ソルビタンモノオレアート（Span 80（商標））、オレイン酸、又はこれらの組み合わせと；
・  場合により、極性界面活性剤、具体的には、７未満のHLB値を有する界面活性剤、より具体的にはポリソルベート８０（Tween 80（商標））、カプリロカプロイルポリオキシルグリセリド（Labrasol（商標））、又はこれらの組み合わせと
を含む。
【０２３５】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  バッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと；
・  酸化防止剤、具体的にはアスコルビン酸と；
・  安定剤、具体的にはエデト酸二ナトリウムと；
・  滑沢剤、具体的にはPEG6000と；
・  オレソキシムと；
・  油、具体的には、ゴマ油、オリーブ油、ダイズ油、綿実油、ヒマシ油、ナッツ油、菜種油、コーン油、アーモンド油、ヒマワリ油、又はこれらの組み合わせ、最も具体的にはゴマ油と；
・  乳化及び／又は親油性可溶化剤、具体的にはグリセリルモノオレアート（Peceol（商標）、Inwitor 948（商標）、Capmul GMO（商標））、グリセリルモノリノレアート（Maisine 35-1（商標））、ソルビタンモノオレアート（Span 80（商標））、オレイン酸、又はこれらの組み合わせと；
・  場合により、極性界面活性剤、具体的には、７未満のHLB値を有する界面活性剤、より具体的にはポリソルベート８０（Tween 80（商標））、カプリロカプロイルポリオキシルグリセリド（Labrasol（商標））、又はこれらの組み合わせと
を含む。
【０２３６】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  バッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと；
・  酸化防止剤、具体的にはアスコルビン酸と；
・  安定剤、具体的にはエデト酸二ナトリウムと；
・  滑沢剤、具体的にはPEG6000と；
・  保存剤、具体的にはソルビン酸又は安息香酸ナトリウム、最も具体的には安息香酸ナトリウムと；
・  オレソキシムと；
・  油、具体的には、ゴマ油、オリーブ油、ダイズ油、綿実油、ヒマシ油、ナッツ油、菜種油、コーン油、アーモンド油、ヒマワリ油、又はこれらの組み合わせ、最も具体的にはゴマ油と；
・  乳化及び／又は親油性可溶化剤、具体的にはグリセリルモノオレアート（Peceol（商標）、Inwitor 948（商標）、Capmul GMO（商標））、グリセリルモノリノレアート（Maisine 35-1（商標））、ソルビタンモノオレアート（Span 80（商標））、オレイン酸、又はこれらの組み合わせと；
・  場合により、極性界面活性剤、具体的には、７未満のHLB値を有する界面活性剤、より具体的にはポリソルベート８０（Tween 80（商標））、カプリロカプロイルポリオキシルグリセリド（Labrasol（商標））、又はこれらの組み合わせと
を含む。
【０２３７】
本発明の特定の実施態様では、医薬組成物は、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  バッファ系、具体的には、クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩、より具体的にはリンゴ酸塩又は酒石酸塩、最も具体的には酒石酸塩から選択されるバッファ系；或いは酸性化剤としてバッファ系の対応する酸のみ、具体的には酒石酸と；
・  希釈剤、具体的にはマンニトール又はマンニトールとイソマルトとの混合物、より具体的にはマンニトールと；
・  酸化防止剤、具体的にはアスコルビン酸と；
・  安定剤、具体的にはエデト酸二ナトリウムと；
・  滑沢剤、具体的にはPEG6000と；
・  保存剤、具体的にはソルビン酸又は安息香酸ナトリウム、最も具体的には安息香酸ナトリウムと；
・  場合により、甘味剤、具体的にはスクラロース又はサッカリンナトリウム、最も具体的にはスクラロースと；
・  場合により、香料、具体的にはイチゴ香料又はバニラ香料と；
・  オレソキシムと；
・  油、具体的には、ゴマ油、オリーブ油、ダイズ油、綿実油、ヒマシ油、ナッツ油、菜種油、コーン油、アーモンド油、ヒマワリ油、又はこれらの組み合わせ、最も具体的にはゴマ油と；
・  乳化及び／又は親油性可溶化剤、具体的にはグリセリルモノオレアート（Peceol（商標）、Inwitor 948（商標）、Capmul GMO（商標））、グリセリルモノリノレアート（Maisine 35-1（商標））、ソルビタンモノオレアート（Span 80（商標））、オレイン酸、又はこれらの組み合わせと；
・  場合により、極性界面活性剤、具体的には、７未満のHLB値を有する界面活性剤、より具体的にはポリソルベート８０（Tween 80（商標））、カプリロカプロイルポリオキシルグリセリド（Labrasol（商標））、又はこれらの組み合わせと
を含む。
【０２３８】
本発明の別の実施態様は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩とオレソキシムとを含む医薬組成物を調製するためのキットであって、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む粉末ブレンドと；
・  構成用溶媒としての水と；
・  オレソキシムと；
・  油、具体的には、ゴマ油、オリーブ油、ダイズ油、綿実油、ヒマシ油、ナッツ油、菜種油、コーン油、アーモンド油、ヒマワリ油、又はこれらの組み合わせ、最も具体的にはゴマ油と；
・  乳化及び／又は親油性可溶化剤、具体的にはグリセリルモノオレアート（Peceol（商標）、Inwitor 948（商標）、Capmul GMO（商標））、グリセリルモノリノレアート（Maisine 35-1（商標））、ソルビタンモノオレアート（Span 80（商標））、オレイン酸、又はこれらの組み合わせと；
・  場合により、極性界面活性剤、具体的には、７未満のHLB値を有する界面活性剤、より具体的にはポリソルベート８０（Tween 80（商標））、カプリロカプロイルポリオキシルグリセリド（Labrasol（商標））、又はこれらの組み合わせと
を含むキットに関する。
【０２３９】
本発明の別の実施態様は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩とオレソキシムとを含む医薬組成物を調製するためのキットであって、
・  式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩と；
・  構成用ビヒクルとしての粉末ブレンドと；
・  場合により、構成用溶媒としての水と；
・  オレソキシムと；
・  油、具体的には、ゴマ油、オリーブ油、ダイズ油、綿実油、ヒマシ油、ナッツ油、菜種油、コーン油、アーモンド油、ヒマワリ油、又はこれらの組み合わせ、最も具体的にはゴマ油と；
・  乳化及び／又は親油性可溶化剤、具体的にはグリセリルモノオレアート（Peceol（商標）、Inwitor 948（商標）、Capmul GMO（商標））、グリセリルモノリノレアート（Maisine 35-1（商標））、ソルビタンモノオレアート（Span 80（商標））、オレイン酸、又はこれらの組み合わせと；
・  場合により、極性界面活性剤、具体的には、７未満のHLB値を有する界面活性剤、より具体的にはポリソルベート８０（Tween 80（商標））、カプリロカプロイルポリオキシルグリセリド（Labrasol（商標））、又はこれらの組み合わせと
を含むキットに関する。
【実施例】
【０２４０】
本発明は、以下の実施例を参照することによってより十分に理解される。しかし、これらは、本発明の範囲を制限するものと解釈されるべきではない。
【０２４１】
使用される略記
ACN：アセトニトリル；  CH2Cl2：ジクロロメタン（DCM）；  DIPEA：ジイソプロピルエチルアミン；  DMA：ジメチルアセトアミド；  TEA：トリエチルアミン；  RT：室温；  B2(pin)2：ビス（ピナコラト）ジボロン；  Pd(dppf)Cl2：（１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）パラジウム（II）ジクロリド；  PPTS：ｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム。
【０２４２】
中間体１
７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【０２４３】
ａ）  ２−クロロ−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化１１】
0006659841.tif 000012
２−アミノ−５−フルオロピリジン（１１．２０ｇ、０．１０mol）及びマロン酸ジメチル(５７．０mL、０．５０mol）の混合物を２３０℃で１．５時間加熱した。室温に冷却した後、沈殿物を濾過し、そして、ACNで洗浄（３×）して、暗色の固体として７−フルオロ−２−ヒドロキシ−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（１４ｇ）を得、これを次の工程でそのまま使用した。MS m/z 181.3 [M+H]+。
【０２４４】
POCl3（５０mL）及びDIPEA（１３．３mL、７７mmol）中の粗７−フルオロ−２−ヒドロキシ−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（１４ｇ、およそ７７mmol）の暗色の混合物を１１０℃で１５時間加熱した。溶媒を除去し、そして、暗色の残渣を氷水で処理し、水で洗浄（３×）し、そして、乾燥させて、茶色の固体を得た。茶色の粗固体をクロマトグラフィーに供し（CH2Cl2中５％ MeOH）て、黄色の固体として２−クロロ−７−フルオロ−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（９．８４ｇ、５０％、２段階）を得た、MS m/z 199.2 [M+H]+。
【０２４５】
ｂ）  ２−メチル−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン
【化１２】
0006659841.tif 000013
ジオキサン（５０mL）中の６−クロロ−２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン（９００mg、５．３７mmol）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．３６ｇ、５．３７mmol、１．０当量）、KOAc（１．０５ｇ、１０．７mmol）、及びPd(dppf)Cl2・CH2Cl2（３９３mg、０．５４mmol）の混合物を脱気し、そして、Ｎ２下９５℃で加熱した。１５時間後、混合物をEtOAcで希釈し、celiteで濾過し、そして、減圧下で濃縮して、２−メチル−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジンを得、これを次の工程でそのまま使用した。
【０２４６】
ｃ）  ７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化１３】
0006659841.tif 000014
ACN（３６mL）中の２−クロロ−７−フルオロ−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（７５０mg、３．７８mmol）の溶液に、２−メチル−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン（１．１７ｇ、４．５３mmol、Eq：１．２）、Pd(Ph3P)4（２１８mg、０．１８９mmol、０．０５当量）、及びK2CO3水溶液（３．７８mL、７．５５mmol、２．０当量）を添加した。混合物を脱気し、そして、アルゴン下、１０５℃で一晩加熱した。反応物をRTに冷却し、そして、濾過した。沈殿物をEt2O、次いで水で洗浄し、減圧中で乾燥させて、薄茶色の固体として７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン ２５０mg（２２％）を得た。MS m/z 296.1 [M+H]+。
【０２４７】
中間体２
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【０２４８】
ａ）  ２，８−ジメチル−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン
【化１４】
0006659841.tif 000015
密封フラスコ中、３，６−ジクロロ−４−メチルピリダジン（２７ｇ、１６１mmol）をアンモニア水（２５％、３００mL）に懸濁させた。反応混合物を１１０℃で４８時間加熱した（１時間後に溶液になった）。室温に冷却した後、反応物をCH2Cl2に注ぎ、そして、有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧下で濃縮して、２２．４ｇの６−クロロ−４−メチル−ピリダジン−３−アミン及び６−クロロ−５−メチル−ピリダジン−３−アミンを位置異性体の混合物として得、これらを次の工程でそのまま使用した。
【０２４９】
位置異性体６−クロロ−４−メチル−ピリダジン−３−アミン及び６−クロロ−５−メチル−ピリダジン−３−アミンの混合物（２２．４ｇ）を２−プロパノール（３００mL）に懸濁させた。１−ブロモ−２，２−ジメトキシプロパン（３６．０ｇ、２６．６mL、１９３mmol、１．２当量）及びPPTS（２．９６ｇ、１１．６mmol、０．０７２５当量）を添加し、そして、得られた溶液を１０５℃で一晩加熱した。溶媒を減圧中で除去し、そして、残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、減圧中で濃縮し、そして、薄茶色の粗固体をクロマトグラフィー（EtOAc／ヘプタン １／２〜１／１）に供して、白色の固体として６−クロロ−２，８−ジメチル−イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン MS m/z 182.1 [M+H]+ ６．１ｇ(２１％）及び白色の固体として６−クロロ−２，７−ジメチル−イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン MS m/z 182.1 [M+H]+ ５．９ｇ(２０％）を別々に得た。
【０２５０】
ジオキサン（５０mL）中の６−クロロ−２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン（０．９ｇ、４．９６mmol）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．２６ｇ、４．９６mmol、１．０当量）、KOAc（０．９７ｇ、９．９１mmol）、及びPd(dppf)Cl2・CH2Cl2（３６３mg、０．４９mmol）の混合物を脱気し、そして、Ｎ２下１１０℃で加熱した。１５時間後、混合物をEtOAcで希釈し、celiteで濾過し、そして、減圧下で濃縮して、２，８−ジメチル−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジンを得、これを次の工程でそのまま使用した。
【０２５１】
ｂ）  ２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化１５】
0006659841.tif 000016
ACN（３６mL）中の２−クロロ−７−フルオロ−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（７５０mg、３．７８mmol、本明細書に上記）の溶液に、２，８−ジメチル−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン（１．２４ｇ、４．５３mmol、１．２当量）、Pd(Ph3P)4（２１８mg、０．１８９mmol、０．０５当量）、及びK2CO3水溶液（３．７８mL、７．５５mmol、２．０当量）を添加した。混合物を脱気し、そして、アルゴン下、１００℃で６時間加熱した。反応物をRTに冷却し、そして、濾過した。沈殿物をEt2O、次いで水で洗浄し、減圧中で乾燥させて、薄茶色の固体として２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン ７００mg（６０％）を得た。MS m/z 310.1 [M+H]+。
【０２５２】
中間体３
７−フルオロ−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【０２５３】
ａ）  ２−クロロ−７−フルオロ−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化１６】
0006659841.tif 000017
５−フルオロ−３−メチルピリジン−２−アミン（３．３ｇ、２６．２mmol）及びマロン酸ジメチル(１５．０mL、０．１３mol、５．０当量）の混合物を２１０℃で１．５時間加熱した。室温に冷却した後、沈殿物を濾過し、そして、ACNで洗浄（３×）して、暗色の固体として７−フルオロ−２−ヒドロキシ−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（２．３ｇ）を得、これを次の工程でそのまま使用した。MS m/z 195.1 [M+H]+。
【０２５４】
POCl3（７．７mL、８２．９mmol）及びDIEA（２．０７mL、１１．８mmol）中の粗７−フルオロ−２−ヒドロキシ−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（２．３ｇ、１１．８mmol）の混合物を１１０℃で１５時間加熱した。溶媒を除去し、そして、残渣を氷水で処理し、水で洗浄（３×）し、そして、乾燥させて、茶色の固体を得た。茶色の粗固体をクロマトグラフィー(CH2Cl2中５% MeOH）に供して、黄色の固体として２−クロロ−７−フルオロ−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（１．７７ｇ、２段階にわたって７０％）を得た、MS m/z 213.1 [M+H]+。
【０２５５】
ｂ）  ７−フルオロ−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化１７】
0006659841.tif 000018
ACN（８０mL）中の２−クロロ−７−フルオロ−９−メチル−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（２．２ｇ、１０．３mmol）の溶液に、２−メチル−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン(３．２２ｇ、１２．４mmol、１．２当量、本明細書に上記）、Pd(Ph3P)4（１．２０ｇ、１．０３mmol、０．１当量）、及びK2CO3水溶液(１０．３mL、２０．７mmol、２．０当量）を添加した。混合物を脱気し、そして、アルゴン下、１００℃で６時間加熱した。反応物をRTに冷却し、そして、濾過した。沈殿物をEt2O、次いで水で洗浄し、減圧中で乾燥させて、薄茶色の固体として７−フルオロ−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン １．８０ｇ（５６％）を得た。MS m/z 310.1 [M+H]+。
【０２５６】
中間体４
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化１８】
0006659841.tif 000019
ACN（５０mL）中の２−クロロ−７−フルオロ−９−メチル−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（０．９８ｇ、４．６１mmol、本明細書に上記）の溶液に、２，８−ジメチル−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン（１．５１ｇ、５．５３mmol、１．２当量、本明細書に上記）、Pd(Ph3P)4（０．３２ｇ、０．２７７mmol、０．０６当量）、及びK2CO3水溶液(４．６１mL、９．２２mmol、２．０当量）を添加した。混合物を脱気し、そして、アルゴン下、１００℃で６時間加熱した。反応物をRTに冷却し、そして、濾過した。沈殿物をEt2O及び水で洗浄し、次いで、減圧中で乾燥させて、薄茶色の固体として２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン ０．８９g（６０％）を得た。MS m/z 324.4 [M+H]+。
【０２５７】
実施例１
２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化１９】
0006659841.tif 000020
密封チューブ中、７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体１；３５mg、０．１１９mmol）及び１−メチルピペラジン（４７．５mg、０．４７４mmol、４当量）をDMSO（１mL）中、１２０℃で一晩撹拌した。LC-MSは、全て変換されたことを示した。高減圧下で溶媒を除去した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９／１）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(２５mg、５６％）を得た。MS m/z 376.3 [M+H+]。
【０２５８】
実施例２
７−［（８ａＲ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化２０】
0006659841.tif 000021
密封チューブ中、７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体１；１２５mg、０．４２６mmol）及び（Ｒ）−オクタヒドロピロロ−［１，２−ａ］ピラジン（１６０mg、１．２７mmol、３当量）をDMSO（５mL）中、１２５℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９８／２→９５／５）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(６５mg、３８％）を得た。MS m/z 402.5 [M+H+]。
【０２５９】
実施例３
７−［（８ａＳ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化２１】
0006659841.tif 000022
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体２；２００mg、０．６４７mmol）及び（Ｓ）−オクタヒドロピロロ−［１，２−ａ］ピラジン（２８６mg、２．２６mmol、３．５当量）をDMSO（５mL）中、１２５℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９８／２→９５／５）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(１１５mg、４３％）を得た。MS m/z 416.3 [M+H+]。
【０２６０】
実施例４
７−［（８ａＲ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化２２】
0006659841.tif 000023
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体２；２００mg、０．６４７mmol）、DIPEA（０．１１３mL、０．６７mmol、１当量）、及び（Ｒ）−オクタヒドロピロロ−［１，２−ａ］ピラジン（２４５mg、１．９５mmol、３．０当量）をDMSO（２．５mL）中、１２５℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９８／２→９５／５）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(１３２mg、４９％）を得た。MS m/z 416.3 [M+H+]。
【０２６１】
実施例５
７−［（８ａＳ）−８ａ−メチル−１，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化２３】
0006659841.tif 000024
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体２；９０mg、０．２９１mmol）、DIPEA（０．０５mL、０．２９mmol、１当量）、及び（Ｓ）−８ａ−メチルオクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（８１mg、０．５８mmol、２．０当量）をDMSO（２．５mL）中、１２５℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(５５mg、４４％）を得た。MS m/z 430.3 [M+H+]。
【０２６２】
実施例６
７−［（８ａＲ）−８ａ−メチル−１，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化２４】
0006659841.tif 000025
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体２；９０mg、０．２９１mmol）、DIPEA（０．０５mL、０．２９mmol、１当量）、及び（Ｒ）−８ａ−メチルオクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン(８１mg、０．５８mmol、２．０当量）をDMSO（２．５mL）中、１２５℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(５０mg、４０％）を得た。MS m/z 430.4 [M+H+]。
【０２６３】
実施例７
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ，５Ｒ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化２５】
0006659841.tif 000026
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体２；５０mg、０．１６２mmol）及びシス−２，６−ジメチルピペラジン（７４mg、０．６４７mmol、４．０当量）をDMSO（１．５mL）中、１１０℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(３２mg、４９％）を得た。MS m/z 404.4 [M+H+]。
【０２６４】
実施例８
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化２６】
0006659841.tif 000027
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体２；３３mg、０．１０７mmol）及び（Ｓ）−２−メチルピペラジン（４３mg、０．４２７mmol、４．０当量）をDMSO（２mL）中、１２０℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(１８mg、４３％）を得た。MS m/z 390.3 [M+H+]。
【０２６５】
実施例９
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化２７】
0006659841.tif 000028
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体２；８５mg、０．２７５mmol）及び（Ｒ）−２−メチルピペラジン（１１０mg、１．１０mmol、４．０当量）をDMSO（５mL）中、１２０℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(３５mg、３３％）を得た。MS m/z 390.3 [M+H+]。
【０２６６】
実施例１０
７−（１，４−ジアゼパン−１−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化２８】
0006659841.tif 000029
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体２；３３mg、０．１０７mmol）及び１，４−ジアゼパン（３２mg、０．３２０mmol、３．０当量）をDMSO（２mL）中、１２０℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(２０mg、４８％）を得た。MS m/z 390.3 [M+H+]。
【０２６７】
実施例１１
２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化２９】
0006659841.tif 000030
密封チューブ中、７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体１；５０mg、０．１６９mmol）及び（Ｓ）−２−メチルピペラジン（６８mg、０．６７７mmol、４．０当量）をDMSO（２mL）中、１１０℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(４０mg、６３％）を得た。MS m/z 376.2 [M+H+]。
【０２６８】
実施例１２
２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化３０】
0006659841.tif 000031
密封チューブ中、７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体１；５０mg、０．１６９mmol）及び（Ｒ）−２−メチルピペラジン（６８mg、０．６７７mmol、４．０当量）をDMSO（２mL）中、１１０℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(４８mg、７５％）を得た。MS m/z 376.3 [M+H+]。
【０２６９】
実施例１３
７−（１，４−ジアゼパン−１−イル）−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化３１】
0006659841.tif 000032
密封チューブ中、７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体１；５０mg、０．１６９mmol）及び１，４−ジアゼパン（６８mg、０．６７７mmol、４．０当量）をDMSO（２mL）中、１１０℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(４１mg、６５％）を得た。MS m/z 376.2 [M+H+]。
【０２７０】
実施例１４
７−［（３Ｒ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化３２】
0006659841.tif 000033
密封チューブ中、７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体１；５０mg、０．１６９mmol）及びシス−２，６−ジメチルピペラジン（７７mg、０．６７７mmol、４．０当量）をDMSO（２mL）中、１１０℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(４１mg、６２％）を得た。MS m/z 390.3 [M+H+]。
【０２７１】
実施例１５
７−［（８ａＳ）−３，４，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化３３】
0006659841.tif 000034
密封チューブ中、７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体１；５０mg、０．１６９mmol）及び（Ｓ）−オクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（８５mg、０．６７７mmol、４．０当量）をDMSO（２mL）中、１２５℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(３６mg、５３％）を得た。MS m/z 402.3 [M+H+]。
【０２７２】
実施例１６
７−［（８ａＳ）−８ａ−メチル−１，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化３４】
0006659841.tif 000035
密封チューブ中、７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体１；５０mg、０．１６９mmol）及び（Ｓ）−８ａ−メチルオクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（９５mg、０．６７７mmol、４．０当量）をDMSO（２mL）中、１２５℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(４５mg、６４％）を得た。MS m/z 416.3 [M+H+]。
【０２７３】
実施例１７
７−［（８ａＲ）−８ａ−メチル−１，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化３５】
0006659841.tif 000036
密封チューブ中、７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体１；１００mg、０．３３９mmol）及び（Ｒ）−８ａ−メチルオクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（１９０mg、１．３５mmol、４．０当量）をDMSO（４mL）中、１２５℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(４５mg、６４％）を得た。MS m/z 416.3 [M+H+]。
【０２７４】
実施例１８
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ）−３−ピロリジン−１−イルピロリジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化３６】
0006659841.tif 000037
マイクロ波反応装置において、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体２；４５mg、０．１４５mmol）、（Ｒ）−１，３’−ビピロリジンジヒドロクロリド（６２mg、０．２９１mmol、２．０当量）、及びDIPEA（０．２０mL、１．１６mmol、８当量）をNMP（３mL）中、２２０℃で１時間撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９８／２→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(２５mg、４０％）を得た。MS m/z 430.3 [M+H+]。
【０２７５】
実施例１９
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化３７】
0006659841.tif 000038
密封チューブ中、７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体１；５０mg、０．１６９mmol）、DIPEA（０．２４mL、１．３５mmol、８当量）、及び４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタンジヒドロクロリド（６２．７mg、０．３３９mmol、２．０当量）をDMSO（２mL）中、１２５℃で２日間撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(２２mg、３３％）を得た。MS m/z 388.3 [M+H+]。
【０２７６】
実施例２０
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化３８】
0006659841.tif 000039
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体２；５０mg、０．１６２mmol）、DIPEA（０．２２mL、１．２９mmol、４当量）、及び４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタンジヒドロクロリド（３２mg、０．３２０mmol、３．０当量）をDMSO（２mL）中、１３０℃で４８時間撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９８／２→９５／５）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(１２mg、１８％）を得た。MS m/z 402.3 [M+H+]。
【０２７７】
実施例２１
２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ）−３−ピロリジン−１−イルピロリジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化３９】
0006659841.tif 000040
密封チューブ中、７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体１；４０mg、０．１３５mmol）、DIPEA（０．１９mL、１．０８mmol、８当量）、及び（Ｒ）−１，３’−ビピロリジンジヒドロクロリド（５８mg、０．２７１mmol、２．０当量）をDMSO（４mL）中で撹拌し、そして、マイクロ波中２２０℃で４０分間加熱した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９８／２→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(３０mg、５３％）を得た。MS m/z 416.3 [M+H+]。
【０２７８】
実施例２２
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−（３，３−ジメチルピペラジン−１−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化４０】
0006659841.tif 000041
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体２；４０mg、０．１２９mmol）及び２，２−ジメチルピペラジン（５９mg、０．５１７mmol、４．０当量）をDMSO（１．６mL）中、１３０℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９／１）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(２９mg、５５％）を得た。MS m/z 404.3 [M+H+]。
【０２７９】
実施例２３
７−（３，３−ジメチルピペラジン−１−イル）−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化４１】
0006659841.tif 000042
密封チューブ中、７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体１；４０mg、０．１３５mmol）及び２，２−ジメチルピペラジン（６２mg、０．５４２mmol、４．０当量）をDMSO（２mL）中、１３０℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(２６mg、４９％）を得た。MS m/z 390.3 [M+H+]。
【０２８０】
実施例２４
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−９−メチル−７−［（３Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化４２】
0006659841.tif 000043
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体４；５０mg、０．１５５mmol）及び（Ｓ）−２−メチルピペラジン（６２mg、０．６１９mmol、４．０当量）をDMSO（２mL）中、１２５℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(４５mg、７２％）を得た。MS m/z 404.3 [M+H+]。
【０２８１】
実施例２５
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−９−メチル−７−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化４３】
0006659841.tif 000044
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体４；５０mg、０．１５５mmol）及び（Ｒ）−２−メチルピペラジン（６２mg、０．６１９mmol、４．０当量）をDMSO（２mL）中、１２５℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(４０mg、７０％）を得た。MS m/z 404.3 [M+H+]。
【０２８２】
実施例２６
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化４４】
0006659841.tif 000045
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体４；５０mg、０．１５５mmol）及びシス−２，６−ジメチルピペラジン（７０mg、０．６１９mmol、４．０当量）をDMSO（２mL）中、１２５℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(２６mg、４０％）を得た。MS m/z 418.3 [M+H+]。
【０２８３】
実施例２７
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−（３，３−ジメチルピペラジン−１−イル）−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化４５】
0006659841.tif 000046
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体４；５０mg、０．１５５mmol）及び２，２−メチルピペラジン（３５mg、０．３０９mmol、２．０当量）をDMSO（２mL）中、１２５℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(３６mg、５６％）を得た。MS m/z 418.3 [M+H+]。
【０２８４】
実施例２８
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化４６】
0006659841.tif 000047
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−９−メチル−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体４；５０mg、０．１５５mmol）、DIPEA（０．２１mL、１．２４mmol、８当量）、及び４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタンジヒドロクロリド（５７mg、０．３０９mmol、２．０当量）をDMSO（２mL）中、１２５℃で２日間撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(１７mg、２６％）を得た。MS m/z 416.3 [M+H+]。
【０２８５】
実施例２９
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化４７】
0006659841.tif 000048
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体２；５０mg、０．１６２mmol）、TEA（０．１８mL、１．２９mmol、８当量）、及び（２Ｓ，６Ｓ）−２，６−ジメチルピペラジンジヒドロクロリド（９０mg、０．４８５mmol、３．０当量）をDMSO（２mL）中、１４０℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９／１）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(２０mg、３０％）を得た。MS m/z 404.3 [M+H+]。
【０２８６】
実施例３０
２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ）−３−ピロリジン−１−イルピロリジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化４８】
0006659841.tif 000049
密封チューブ中、２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−フルオロ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体２；５０mg、０．１６２mmol）、DIPEA（０．２２mL、１．２９mmol、８当量）、及び（Ｓ）−１，３’−ビピロリジンジヒドロクロリド（１０３mg、０．４８５mmol、３．０当量）をNMP（２mL）中１４０℃で一晩撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９／１）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(２２mg、３２％）を得た。MS m/z 430.3 [M+H+]。
【０２８７】
実施例３１
２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ）−３−ピロリジン−１−イルピロリジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化４９】
0006659841.tif 000050
密封チューブ中、７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体１；７５mg、０．２５４mmol）、TEA（０．２８mL、２．０３mmol、８当量）、及び（Ｓ）−１，３’−ビピロリジンジヒドロクロリド（１６２mg、０．７６２mmol、３．０当量）をNMP（４mL）中で撹拌し、そして、マイクロ波中２２０℃で１時間加熱した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(１２mg、１１％）を得た。MS m/z 416.2 [M+H+]。
【０２８８】
実施例３２
７−［（３Ｓ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化５０】
0006659841.tif 000051
密封チューブ中、７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体１；７５mg、０．２５４mmol）、TEA（０．２８mL、２．０３mmol、８当量）、及び（２Ｓ，６Ｓ）−２，６−ジメチルピペラジンジヒドロクロリド（１４３mg、０．７６２mmol、３．０当量）をDMSO（３mL）中で撹拌し、そして、１４０℃で一晩加熱した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(１０mg、１０％）を得た。MS m/z 390.3 [M+H+]。
【０２８９】
実施例３３
９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化５１】
0006659841.tif 000052
密封チューブ中、７−フルオロ−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体３；２５０mg、０．８０８mmol）及び（Ｓ）−２−メチルピペラジン（４０５mg、４．０４mmol、５．０当量）をDMSO（６mL）中で撹拌し、そして、１３０℃で一晩加熱した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→８５／１５）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(１３５mg、４３％）を得た。MS m/z 390.3 [M+H+]。
【０２９０】
実施例３４
９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−７−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化５２】
0006659841.tif 000053
密封チューブ中、７−フルオロ−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体３；２５０mg、０．８０８mmol）及び（Ｒ）−２−メチルピペラジン（４０５mg、４．０４mmol、５．０当量）をDMSO（６mL）中で撹拌し、そして、１３０℃で一晩加熱した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→８５／１５）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(１００mg、３２％）を得た。MS m/z 390.3 [M+H+]。
【０２９１】
実施例３５
７−［（３Ｒ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化５３】
0006659841.tif 000054
密封チューブ中、７−フルオロ−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体３；２５０mg、０．８０８mmol）及び（２Ｓ，６Ｒ）−２，６−ジメチルピペラジン（４６１mg、４．０４mmol、５．０当量）をDMSO（６mL）中で撹拌し、そして、１３０℃で一晩加熱した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→８５／１５）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(１０１mg、３１％）を得た。MS m/z 404.3 [M+H+]。
【０２９２】
実施例３６
７−（３，３−ジメチルピペラジン−１−イル）−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化５４】
0006659841.tif 000055
密封チューブ中、７−フルオロ−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体３；２５０mg、０．８０８mmol）及び２，２−ジメチルピペラジン（４６１mg、４．０４mmol、５．０当量）をDMSO（６mL）中で撹拌し、そして、１３０℃で一晩加熱した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→８５／１５）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(１２０mg、３６％）を得た。MS m/z 404.3 [M+H+]。
【０２９３】
実施例３７
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化５５】
0006659841.tif 000056
密封チューブ中、７−フルオロ−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体３；１２５mg、０．４０４mmol）、K2CO3（２２３mg、１．６２mmol、４当量）、及び４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタンジヒドロクロリド（１１２mg、０．６０６mmol、１．５当量）をDMA（２mL）中で撹拌し、そして、１３０℃で一晩加熱した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(７５mg、４６％）を得た。MS m/z 402.2 [M+H+]。
【０２９４】
実施例３８
７−［（３Ｓ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化５６】
0006659841.tif 000057
密封チューブ中、７−フルオロ−９−メチル−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体３；１２５mg、０．４０４mmol）、K2CO3（２２３mg、１．６２mmol、４当量）、及び（２Ｓ，６Ｓ）−２，６−ジメチルピペラジンジヒドロクロリド（１１３mg、０．６０６mmol、１．５当量）をDMA（２mL）中で撹拌し、そして、１３０℃で一晩加熱した。高減圧下で溶媒を除去した。残渣をCH2Cl2に取り、そして、NaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機層を分離し、そして、Na2SO4で乾燥させ、そして、減圧中で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／５→９０／１０）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(５０mg、３１％）を得た。MS m/z 404.3 [M+H+]。
【０２９５】
実施例３９
７−［（３Ｒ）−３−エチルピペラジン−１−イル］−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン
【化５７】
0006659841.tif 000058
密封チューブ中、７−フルオロ−２−（２−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（中間体１；２００mg、０．６７７mmol）、K2CO3（３７４mg、２．７１mmol、４当量）、及び（Ｒ）−２−エチルピペラジンジヒドロクロリド（２３８mg、０．６０６mmol、１．５当量）をDMA（３mL）中、１００℃で４日間撹拌した。高減圧下で溶媒を除去した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（SiO2、CH2Cl2／MeOH＝９５／２→８／２）によって精製して、薄黄色の固体として標題生成物(１６８mg、６４％）を得た。MS m/z 390.2 [M+H+]。
【０２９６】
実施例４０
培養細胞におけるSMN2ミニ遺伝子mRNAスプライシングRT-qPCRアッセイ
本明細書を、より詳細に説明しその理解を支援するために、以下の非限定的な生物学的実施例を、本明細書の範囲をより十分に説明するために与え、そして、これはその範囲を具体的に限定するものと解釈されるべきではない。現在公知であってもよいし当業者の技能の範囲内で将来的に開発されるものであってもよい本明細書のそのような改変物は、本明細書の及び本明細書の以下に特許請求されるものの範囲内であると考えられる。これら実施例は、本明細書に記載される特定の化合物のインビトロ及び／又はインビボにおける試験を記載し、そして、SMN2遺伝子から転写されるmRNA中へのSMN2のエクソン７の含入を強化することによるSMAの処置についての化合物の有用性を実証する。式（Ｉ）の化合物は、SMN2遺伝子から転写されるmRNA中へのSMN2のエクソン７の含入を強化し、そして、SMN2遺伝子から生成されるSMNタンパク質のレベルを増大させるので、それを必要としているヒト対象におけるSMAを処置するために使用することができる。これら実施例は、本明細書に記載される特定の化合物のインビトロ及び／又はインビボにおける試験を更に記載し、そして、SMN1遺伝子から転写されるmRNA中へのSMNIのエクソン７の包入の強化についての化合物の有用性を実証する。したがって、式（Ｉ）の化合物は、SMN1遺伝子から転写されるmRNA中へのSMN1のエクソン７の包入も強化し、そして、SMN1遺伝子から生成されるSMNタンパク質のレベルも増大させる。
【０２９７】
逆転写定量PCRに基づく（RT-qPCR）アッセイを使用して、完全長SMN2ミニ遺伝子（本明細書では用語「FL SMN2mini」と呼ばれる）が安定的にトランスフェクトされ、試験化合物で処理された、HEK293H細胞株における、SMN2のエクソン７を含有する完全長SMN2ミニ遺伝子のmRNAのレベルを定量する。使用した材料及びそれぞれの供給元を以下の表１に列挙する。
【表１】
0006659841.tif 000059
【０２９８】
国際公開第２００９／１５１５４６号１４５頁段落［００４００］〜１４７頁段落［００４１２］（その図１及び図３を含む）に記載されるようにして、SMN2-Aミニ遺伝子コンストラクトを調製した。
【０２９９】
SMN2-Aミニ遺伝子コンストラクトが安定的にトランスフェクトされたHEK293H細胞（１０，０００細胞／ウェル）を、９６ウェル平底プレート中の細胞培養培地（DMEM＋１０％ FBS、２００μg/mL ハイグロマイシンを含む） ２００μLに播種し、そして、確実に細胞を適切に分散させ、そして、細胞の均一な単層を形成させるために、該プレートを直ちに旋回させる。細胞を６時間接着させる。試験化合物を１００％ DMSO中で３．１６倍連続希釈して、７点濃度曲線を作成する。試験化合物の溶液（１μL、DMSO中２００×）を各細胞含有ウェルに添加し、そして、細胞培養インキュベーター（３７℃、５％ ＣＯ２、相対湿度１００％）内で２４時間該プレートをインキュベートする。各試験化合物濃度につき２つのレプリケートを調製する。次いで、細胞をCells-To-Ct溶解バッファに溶解させ、そして、溶解物を−８０℃で保存する。
【０３００】
国際公開第２０１４／２０９８４１号の８０頁の表１に言及されているプライマー及びプローブを使用して、完全長SMN2-Aミニ遺伝子及びGAPDH mRNAを定量する。プライマーSMNフォワードＡ（配列番号１）は、エクソン７中のヌクレオチド配列（ヌクレオチド２２〜ヌクレオチド４０）にハイブリダイズし、プライマーSMNリバースＡ（配列番号２）は、ホタルルシフェラーゼのコード配列中のヌクレオチドにハイブリダイズし、SMNプローブＡ（配列番号３）は、エクソン７（ヌクレオチド５０〜ヌクレオチド５４）及びエクソン８（ヌクレオチド１〜ヌクレオチド２１）中のヌクレオチド配列にハイブリダイズする。これら３つのオリゴヌクレオチドの組み合わせは、SMN1又はSMN2のミニ遺伝子のみを検出し（RT-qPCR）、そして、内因性のSMN1又はSMN2の遺伝子は検出しない。
【０３０１】
SMNのフォワード及びリバースのプライマーは、最終濃度０．４μMで使用する。SMNプローブは、最終濃度０．１５μMで使用する。GAPDHプライマーは、最終濃度０．２μMで、そして、プローブは０．１５μMで使用する。
【０３０２】
２×RT-PCRバッファ ７．５μL、２５×RT-PCR酵素ミックス ０．４μL、２０×GAPDHプライマー−プローブミックス ０．７５μL、水 ４．００７５μL、１０倍希釈された細胞溶解物 ２μL 、１００μM SMNフォワードプライマー ０．０６μL、１００μM SMNリバースプライマー ０．０６μL、及び１００μM SMNプローブ ０．２２５μLを合わせることによって、SMN2ミニ遺伝子GAPDHミックス（合計容積 １５μL）を調製する。
【０３０３】
以下の温度で、示した時間、PCRを実施する：工程１：４８℃（１５分間）；工程２：９５℃（１０分間）；工程３：９５℃（１５秒間）；工程４：６０℃（１分間）；次いで、工程３及び４を合計４０サイクル繰り返す。
【０３０４】
各反応混合物は、SMN2-Aミニ遺伝子及びGAPDHプライマー／プローブセットの両方を含有するので（マルチプレックスデザイン）、２つの転写物のレベルを同時に測定することができる。
【０３０５】
ビヒクル対照で処理した細胞に対するFL SMN2mini mRNAの存在量の増加を、改変ΔΔCt法（Livak and Schmittgen, Methods, 2001, 25:402-8に記載される）を使用してリアルタイムPCRデータから決定する。FL SMN2mini及びGAPDHの増幅曲線の勾配から個々に増幅効率Ｅを計算する。次いで、FL SMN2mini及びGAPDH mRNAの存在量を、（１＋Ｅ）−Ct（式中、Ctは各アプリコンの閾値である）として計算する。FL SMN2mini mRNAの存在量をGAPDH mRNAの存在量に対して正規化する。次いで、試験化合物で処理したサンプル由来の正規化されたFL SMN2mini mRNAの存在量を、ビヒクル処理した細胞由来の正規化されたFL SMN2mini mRNAの存在量で除して、ビヒクル対照に対するFL SMN2mini mRNAのレベルを決定する。
【０３０６】
表２は、本発明の特定の化合物について上記手順に従って作成された７点濃度データから得られた、完全長SMN2ミニ遺伝子mRNAの生成についてのEC1.5x濃度を提供する。
【０３０７】
本発明の特定の化合物は、完全長SMN2ミニ遺伝子mRNAの生成についてEC1.5x濃度≦１μMを示す。
【０３０８】
本発明の更に特定の化合物は、完全長SMN2ミニ遺伝子mRNAの生成についてEC1.5x濃度≦０．１μMを示す。
【０３０９】
本発明の最も特定の化合物は、完全長SMN2ミニ遺伝子mRNAの生成についてEC1.5x濃度≦０．０２μMを示す。
【表２】
0006659841.tif 000060
【０３１０】
実施例４１
培養細胞におけるSMNタンパク質アッセイ
SMN HTRF（均一時間分解蛍光）アッセイを使用して、SMA患者の試験化合物で処理された線維芽細胞におけるSMNタンパク質のレベルを定量する。使用した材料及びそれぞれの供給元を以下の表３に列挙する。
【表３】
0006659841.tif 000061
【０３１１】
細胞を解凍し、そして、DMEM−１０％ FBS中で７２時間培養する。細胞をトリプシン処理し、カウントし、そして、２５，０００細胞／mLの濃度になるようにDMEM−１０％FBSに再懸濁させる。細胞懸濁液を９６ウェルマイクロタイタープレートに５，０００細胞／ウェルでプレーティングし、そして、３〜５時間インキュベートする。試験化合物を１００％ DMSO中で３．１６倍連続希釈して、７点濃度曲線を作成する。試験化合物溶液 １μLを細胞含有ウェルに移し、そして、細胞培養インキュベーター（３７℃、５％ ＣＯ２、相対湿度１００％）内で４８時間該細胞をインキュベートする。各試験化合物濃度につきトリプリケートのサンプルを設定する。４８時間後、ウェルから上清を除去し、そして、プロテアーゼ阻害剤を含有するRIPA溶解バッファ ２５μLをウェルに添加し、そして、室温で１時間、振盪しながらインキュベートする。希釈剤 ２５μLを添加し、次いで、得られた溶解物 ３５μLを、各ウェルが抗体溶液（SMN再構成バッファ中、抗SMN d2及び抗SMN kryptateの１：１００の希釈物） ５μLを含有する３８４ウェルプレートに移す。該プレートを１分間遠心分離して、該溶液をウェルの底に移動させ、次いで、室温で一晩インキュベートする。６６５nm及び６２０nmにおけるプレートの各ウェルの蛍光を、EnVisionマルチラベルプレートリーダー（Perkin-Elmer）で測定する。
【０３１２】
６６５nmにおけるシグナルを６２０nmにおけるシグナルで除すことによって、各サンプル、ブランク、及びビヒクル対照のウェルについて、正規化された蛍光シグナルを計算する。シグナルの正規化は、溶解物のマトリクス効果に起因する潜在的な蛍光消光を説明する。各サンプルウェルの正規化された蛍光からブランク対照ウェルの正規化された平均蛍光を減じ、次いで、この差を、ブランク対照ウェルの正規化された平均蛍光で除し、そして、得られた値に１００を乗じることによって、各サンプルウェルについてのΔＦ値（百分率値としてのSMNタンパク質の存在量の測定値）を計算する。各サンプルウェルのΔＦ値は、試験化合物で処理されたサンプル由来のSMNタンパク質の存在量を表す。各サンプルウェルのΔＦ値をビヒクル対照のΔＦ値で除して、ビヒクル対照に対するSMNタンパク質の存在量の増加倍数を計算する。表４は、本発明の特定の化合物について上記手順に従って作成された７点濃度データから得られた、SMNタンパク質発現についてのEC1.5x濃度を提供する。
【０３１３】
本発明の特定の化合物は、SMNタンパク質発現についてEC1.5x濃度≦１μMを示す。
【０３１４】
本発明の更に特定の化合物は、SMNタンパク質発現についてEC1.5x濃度≦１００nMを示す。
【０３１５】
本発明の最も特定の化合物は、SMNタンパク質発現についてEC1.5x濃度≦３０nMを示す。
【０３１６】
表５は、本発明の特定の化合物について上記手順に従って作成された７点濃度データから得られた、SMNタンパク質の最大増加倍数を提供する。
【０３１７】
本発明の特定の化合物は、最大増加倍数＞１．５を示す。
【０３１８】
本発明の更に特定の化合物は、最大増加倍数＞１．７を示す。
【０３１９】
本発明の最も特定の化合物は、最大増加倍数＞１．８を示す。
【表４】
0006659841.tif 000062
【表５】
0006659841.tif 000063
【０３２０】
実施例４２
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（実施例２０）のインビトロアッセイ
実施例２０の化合物は、SMAを処置するための経口的に利用可能な低分子SMN2スプライシング調節剤である。実施例２０の化合物は、選択的スプライシング反応のバランスをSMN2エクソン７の包入及び完全長mRNAの生成の方に完全にシフトさせることによって、培養患者細胞（SMA１型線維芽細胞）におけるヒトSMN2のmRNA前駆体の機能障害性のスプライシングを有効に補正することが見出された（図１Ａ：FLについてはEC50 ２９±８nM、Δ７mRNAについては１２±１nM）。実施例２０の化合物の濃度を増加させながらSMN2ミニ遺伝子を発現している細胞を処理したところ、SMN2ミニ遺伝子完全長mRNAの量が用量依存的に増加した。EC1.5xは４．７±０．７nMであり、そして、最大誘導は２０倍であった。ミニ遺伝子アッセイの結果は、実施例２０の化合物が強力なSMN2スプライシング調節剤であることを確認している。
【０３２１】
選択的スプライシングの結果としてのSMNタンパク質生成について調べるために、インビトロアッセイを実施して、SMA患者のiPSC（人工多能性幹細胞）に由来する線維芽細胞及び脊髄運動ニューロンにおけるSMNタンパク質のレベルを評価した（それぞれ、EC50 １２±３nM及びEC50 １８２±１１４nM）。未処理細胞を上回るSMNタンパク質の最大増加は、両方の細胞タイプにおいて同様のレベルの結果が得られ（６０〜８０％；図１Ｂ及び１Ｃ）、これは、SMA患者由来の異なる細胞タイプにおいて、実施例２０の化合物が、インビトロにおける機能障害性のSMN2スプライシングを補正する結果と同様に、SMNタンパク質のレベルを増加させることを示唆している。
【０３２２】
潜在的血液バイオマーカーとしてのSMN2スプライシングを更に評価するために、実施例２０の化合物で４時間処理した後（この時点で、最大スプライシング変化が達成された）に、SMN1及びSMN2のスプライシングを評価する、健常ボランティア由来の全血細胞を使用するエクスビボアッセイを開発した。SMN1スプライシングは大きな影響を受けなかったが、SMN2スプライシングは、エクソン７の包入に向かって用量依存的に変化した（図１Ｄ）。実施例２０の化合物の１００nMを上回る濃度においてスプライシングに対する効果は明白であり、これは、このアッセイを用いてSMN2スプライシングに対するインビボにおける薬力学的（PD）効果を観察するのに血液中のこれらのレベルが必要であることを示唆している。
【０３２３】
実施例４３
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（実施例２０）のインビボアッセイ
インビボにおいて、実施例２０の化合物は、ヒトSMN2トランス遺伝子を保有している、重篤なSMNΔ7モデル及びより軽度のC/C-アレルモデルの脳及び筋肉においてSMNタンパク質を増加させる。成体C/C-アレルマウスをビヒクル又は実施例２０の化合物で１０日間処置し（毎日１、３、又は１０mg/kg PO）、そして、３日齢（Ｐ３）SMNΔ７マウスをビヒクル又は実施例２０の化合物で７日間処置した（毎日０．１、０．３、１、又は３mg/kg IP）。実施例２０の化合物は、脳及び筋肉の組織においてSMNタンパク質のレベルを用量依存的に増加させ、成体C/C-アレルマウスでは１０mg/kg、そして、新生仔SMNΔ７マウスでは１〜３mg/kgで２〜３倍増加の最大効果に達した（図２）。したがって、用量１０mg/kgでのC/C-アレルマウスの筋肉において、到達したSMNレベルは、ヘテロ接合体マウスと差がなかった。SMNΔ７マウスでは、SMNタンパク質の増加は、脳及び筋肉のいずれにおいても部分的なものにすぎず、ヘテロ接合体マウスにおけるタンパク質のレベルの約４３％（脳）及び５５％（筋肉）に達した。これらデータは、実施例２０の化合物が、SMAのトランスジェニックマウスモデルの脳及び筋肉の組織のいずれにおいてもSMNタンパク質を増加させることを実証している。
【０３２４】
重篤及び軽度のSMAマウスモデルにおいて機能的効果を評価した。Ｐ３からＰ２３まではビヒクル又は実施例２０の化合物のIP注射によって１日１回、そして、Ｐ２４からは経口経管栄養によって１日１回、SMNΔ７マウスを処置した。処置期間中、体重及び動物の生存をモニタリングした。１００日間の観察期間にわたって、２匹のヘテロ接合体同腹仔しか死亡しなかった。対照的に、全てのビヒクル処置マウスはＰ２１前に死亡し、中央生存時間（MST）は１０．５日間であった。実施例２０による処置は、動物の生存を用量依存的に延長した（図３Ａ）。より低用量（Ｐ２３まで０．１mg/kg IP及びその後０．３mg/kg PO）では、MSTのＰ２６へのわずかではあるが有意な延長が観察された。中用量（Ｐ２３まで０．３mg/kg IP及びその後１mg/kg PO）、中／高用量（Ｐ２３まで１mg/kg IP及びその後３mg/kg PO）、及び高用量（Ｐ２３まで３mg/kg IP及びその後１０mg/kg PO）の処置群では、それぞれ８０％、８２％、及び７３％の動物が最長Ｐ１００まで生存し、Ｐ１００において８３％が生存していたヘテロ接合体同腹仔と差がなかった。
【０３２５】
試験全体にわたりSMNΔ７マウスの体重増加は重度に損なわれ、そして、低用量の実施例２０の化合物によって穏やかに補正されただけであった。中用量、中／高用量、及び高用量の実施例２０の化合物による処置の結果、SMA関連表現型を全く示さないヘテロ接合体同腹仔と比較して、体重増加がそれぞれ７１％、８２％、及び８５％回復した（図３Ｂ）。これらデータは、実施例２０の化合物による処置が、Ｐ３で投与を開始したときに重度に罹患しているSMNΔ７マウスにおけるSMA表現型の発現を、用量依存的に防いでいることを示唆している。
【０３２６】
最後に、実施例２０の化合物は、インビボにおいて重篤なSMAマウスモデルの神経筋結合性を改善する。Ｐ３からＰ１４まで１日１回ビヒクル又は０．１、０．３、１mg/kg 実施例２０のIP適用によって、SMNΔ７マウスを処置した。Ｐ１４において、最後の投与の１時間後、脊髄及び筋肉の組織を組織学的評価のために加工した。ヘテロ接合体同腹仔に比べて、SMNΔ７マウスは、小胞グルタミン酸輸送体１（vGlut1）固有受容性運動ニューロン入力の著しい喪失、運動軸索の喪失、最長筋における神経筋接合部（NMJ）の脱神経、及び筋萎縮を示した。実施例２０による処置は、ビヒクル処置されたSMNΔ７マウスに比べて、vGlut1入力の数、運動軸索の数、完全に神経支配されているNMJの割合、及び長指伸筋（EDL）の線維サイズを用量依存的かつ著しく増加させた（図４）。これらデータは、Ｐ３で開始したとき、実施例２０の化合物による処置が、重度に罹患しているSMNΔ７マウスにおいてNMJ脱神経の中枢及び末梢の両方の側面を保護し、筋萎縮から保護することを示唆している。
【０３２７】
実施例４４
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（実施例２０）の転写プロファイリング解析
実施例２０の化合物により選択的にスプライシングされる他の潜在的遺伝子を同定するために、転写プロファイリング解析を実施し、これによって、対照と比較して１２１nMの処置的に関連する濃度（EC90、EC50よりも１０倍高い）において幾つかの遺伝子：STRN3、SLC25A17、及びGGCTのスプライシング事象も影響を受けることが明らかになった。STRN3、SLC25A17、及びGGCTの具体的な機能並びにこれらの調節異常の結果は、これまでのところ解明されていない。また、これら３つの遺伝子は、一貫して、この化合物の最大効果を説明するために使用される用量であるより高い用量（EC90よりも５倍高い）において影響を受けることが見出されている。遺伝子FoxM1及びMADDを含む１１の遺伝子のスプライシング事象は、高用量では影響を受けたが、低用量では受けなかった。FoxM1及びMADDは、それぞれ、細胞周期の制御及びアポトーシスに関与しているものとして記載されている。SMN2スプライシング調節剤に関する最近の報告は、処置に応答してスプライシングが変化する３９の候補事象が存在する別の分子NVS-SM1に比べて、実施例２０の化合物が比較的特異的であることを示唆している［Palacino et al, Nat Chem Biol. 2015 Jul;11(7):511-7］。
【０３２８】
更に、転写プロファイリング解析は、用量１２１nMの実施例２０の化合物により処置した際、どの遺伝子の発現レベルも変化しない（ｐ<０．０１）ことを実証していた。これらのデータは、±２倍超変化した遺伝子が１７５個存在する（ｐ<０．０５）別の選択的SMN2スプライシング分子（NVS-SM1）及び２３遺伝子が著しく変化したNVS-SM3の発現レベルの変化について公開されているデータ［Palacino et al, Nat Chem Biol. 2015 Jul;11(7):511-7］と比較した、該化合物の相対的特異性を実証している。
【０３２９】
他のスプライシング調節剤化合物によって選択的スプライシングされる遺伝子であるFoxM1は、細胞周期制御因子をコードしている。ヒト及び高等霊長類のみにおいて、転写的に不活性であるFoxM1a変異体はエクソン９を含有し（FL）、そして、転写的に活性のあるFoxM1b/c変異体はエクソン９を欠失している（Δ９）［Ye et al, Future Oncol. 2007 Feb;3(1):1-3. Laoukili et al, Biochim Biophys Acta. 2007 Jan;1775(1):92-102］。FoxM1a（FL）及びFoxM1b/c（Δ９）に特異的なプライマーを用いるRT qPCRを使用して、実施例２０による処置後のFoxM1の選択的スプライシングの調節が確認された（FLについてはEC50 ６７±３２nM、Δ９ mRNAについては１３９±４３nM；図５を参照）。FoxM1Aアイソフォームの発現増加は、エクソン９を欠失しているFoxM1アイソフォームの発現低下と共に、スプライシングの変化が生物学的に有意なレベルである場合、細胞周期の進行を妨害及び阻害する能力を有する。したがって、実施例２０の化合物は、SMN2及びFoxM1のスプライシング機構に対して同様な方法で作用するが、タンパク質機能に関して及び様々な程度で、反対の結果を有する。高濃度の実施例２０の化合物を含むスプライシング調節剤によって影響を受けるものとして同定されており、アポトーシスプロセスに関与することが知られている遺伝子であるMADDについてのEC50は知られていない。
【０３３０】
実施例４６
オレソキシムを含む医薬組成物
オレソキシムを含む組成物の例は、米国特許出願公開第２０１００９９６５２号に記載されている。オレソキシムは、固体状態で安定であり（２５℃／６０％ RHで３６ヶ月間超）、長期加速ストレス条件下で純度プロファイルの変化を示さない。オレソキシムは、生理学的pH範囲にわたって低い水性溶解度（５μg/mL未満）を有する。それは、様々な非水性溶媒に、自由に溶解できるか又は可溶性である。
【０３３１】
広い年齢幅のための年齢に適した製剤を提供するために、経口液体組成物を開発した。特に有益な医薬組成物は、安定性能が優れていることから、オレソキシム粉末のゴマ油中の経口又は経胃（gastric）の懸濁液を調製することによって得ることができることを見出した。ゴマ油中のオレソキシムの溶解度（約３５mg/mL）は、対象によって吸収される油の量を制限しつつ溶液の調製を可能とするには不十分である。嗜好性（味、匂い、及び質感）は、更なる賦形剤なしに許容可能である。
【０３３２】
結晶性オレソキシム粉末 ７．５ｇ（d90値が７０〜９０μmである粒子サイズ分布）を、撹拌（例えば、振盪）により、ビヒクルとしてのゴマ油（精製）７５mL（６１．６ｇ）に懸濁させて、均質な懸濁液（最終オレソキシム濃度 １００mg/mL）を得た。このような経口懸濁液は、分解、外観、色、含量の均一性、及び微生物限度に関して、２５℃／６０％ RHで少なくとも３ヶ月間安定であることが見出された。
【０３３３】
実施例４５
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンを含む経口溶液
実施例２０の化合物である７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンは、十分に高い薬物濃度を提供するために、pH４未満、具体的にはpH３．４のpHのバッファ系、例えば、クエン酸バッファ、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、又は酒石酸塩のバッファ、より具体的には、リンゴ酸塩又は酒石酸塩のバッファ、最も具体的には酒石酸のバッファに原薬を溶解させることによって、経口水溶液として製剤化することができる。
【０３３４】
経口溶液を構成するための乾燥粉末又は顆粒を調製することによる、実施例２０の化合物の製剤の長期安定性。微結晶質粉末として有機酸及びその塩、例えば、三塩基性クエン酸ナトリウム二水和物及び無水クエン酸、リンゴ酸ナトリウム及びリンゴ酸、又は好ましくは、酒石酸カリウムナトリウム及び酒石酸を選択することによって、バッファ系を乾燥製剤に組み入れることができる。
【０３３５】
実施例２０の化合物を含む粉末又は顆粒は、顆粒外充填剤、例えば、ソルビトール、イソマルト、又はマンニトール、及びこれらの組み合わせを含み得、これらは、経口溶液の構成中に粉末ブレンドが速やかに溶解することを保証する。希釈剤の導入において、流動性を改善するために、及びロバストな均一性を保証するために、粉末ブレンドは乾式圧縮によって顆粒化され得る。
【０３３６】
実施例２０の化合物のための溶媒系を構成するための成分は、別々の製剤として製剤化することができる。構成された溶媒は、経口溶液の使用期間の開始時に瓶中で実施例２０の化合物を溶解させるために使用することができる。
【０３３７】
バッファ中の実施例２０の化合物の構成された経口溶液は、安定剤及び酸化防止剤、例えば、ビタミンE TPGS、エデト酸二ナトリウム、ブチルヒドロキシトルオール、リボフラビン、又は好ましくはアスコルビン酸、及びこれらの組み合わせを使用することによって、２週間超の使用時間を提供することができる。
【０３３８】
表６は、２週間超の溶液中安定性を提供する多数の経口溶液を提供する。
【表６】
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【０３３９】
実施例４６
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンの経口溶液を構成するためのビヒクルとしての粉末ブレンド
表７は、７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンを溶解させるのに好適であり、そして、２週間超の間安定なpH３．５の経口溶液を得るのに好適な溶媒の構成のための顆粒化粉末ブレンドを表す。該ブレンドは、水溶性滑沢剤としてのポリエチレングリコール６０００、保存剤としての安息香酸ナトリウム、甘味剤としてのスクラロース、及び特に小児患者において使用するために味を改善する目的のイチゴ香料を含有する。
【０３４０】
水 ８０mLを共に含む表７の組成物は、７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン（それぞれ８０mg、２４０mg、及び４００mg）の溶解に好適な構成溶媒を提供する。
【表７】
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【０３４１】
実施例４７
経口溶液を構成するための７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンを含む粉末ブレンド
表８は、活性化合物を溶解させるために、実施例４６で得られた構成されたビヒクル溶液を使用することによって構成された、７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンを含む経口溶液を表す。ビヒクルは、２週間超の間安定なpH３．４の経口溶液を構成するのに好適である。水 ８０mLを共に含む表８の組成物は、それぞれ１mg/mL、３mg/mL、５mg/mLの７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンを含む経口溶液を提供する。
【表８】
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【０３４２】
実施例４８
経口溶液を構成するための７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンの粉末ブレンド
表９は、水 ９０mLを共に含む経口溶液を構成するために使用され得る７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンを含む粉末ブレンドを提供する。また、表９の組成物は、ビヒクル粉末ブレンド（実施例４６と同様）から調製される溶媒から構成し、その後、APIを溶解させてもよい。
【表９】
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【０３４３】
実施例４９
経口溶液を構成するための７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンの粉末ブレンド
表１０は、水 ８０mLを共に含む経口溶液を構成するために使用され得る７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンを含む粉末ブレンドを提供する。また、表１０の組成物は、ビヒクル粉末ブレンド（実施例４６と同様）から調製される溶媒から構成し、その後、APIを溶解させてもよい。
【表１０】
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【０３４４】
実施例５０
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンの経口溶液の安定性
表１１は、API純度（パーセント）として表される、７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンの様々な溶液の安定性の比較を提供する。APIは、周囲温度、更に５℃において数週間にわたって顕著に分解することなく、試験した全ての経口溶液において安定であることが見出された。
【０３４５】
実施例４５の組成物１Ａは、酸化防止剤としてのアスコルビン酸及び安定剤としてのエデト酸二ナトリウムと共に、クエン酸塩バッファ系中０．１mg/mL APIを含む。
【０３４６】
実施例４６の組成物２Ａは、API ２００mgを溶解させるために水 ２００mLで構成された（１mg/mL）。
【０３４７】
実施例４８の組成物３Ａ及び３Ｂは、水 ９０mLと共にAPI粉末ブレンドから構成された（１mg/mL）。
【表１１】
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【０３４８】
実施例５１
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン及びオレソキシムを含む油中水型エマルジョン
１つの組成物で実施例２０の化合物をオレソキシムと共に併用投与するために、経口懸濁液の構成によって、実施例２０の化合物の水性経口溶液をオレソキシムの油性溶液と合わせることができる。（例えば、実施例４６における）オレソキシムの油性溶液を、構成された実施例２０の化合物の溶液を収容している瓶に移すことができ、続いて、５〜２０回、好ましくは１０回、密閉された瓶を手で振盪することによってエマルジョンを形成させることができる。オレソキシムの油性溶液は、実施例２０の化合物の溶液と合わせられたときに油性溶液中のオレソキシムの溶解度を増大させるための、及び、油性溶液からエマルジョンを形成することができるようにするための、乳化及び／又は親油性可溶化剤（例えば、グリセリルモノオレアート（Peceol（商標）、Inwitor 948（商標）、Capmul GMO（商標））、グリセリルモノリノレアート（Maisine 35-1（商標））、ソルビタンモノオレアート（Span 80（商標））、又はオレイン酸）を含有し得る、ゴマ油中の溶液である。構成後により高い分散性及びより長い物理的安定性をエマルジョンに提供するために、場合により熱を印加しながらオレソキシムを溶解させる前に、油性溶媒に分散している乳化剤及び可溶化剤を、７未満のHLB値を有するより極性の高い界面活性剤、例えば、ポリソルベート８０（Tween 80（商標））、カプリロカプロイルポリオキシルグリセリド（Labrasol（商標））と合わせてもよい。エマルジョンは、低HLBを有する親油性界面活性剤と高HLB値を有するより親水性の界面活性剤との間の選択された比に依存して、分散している内相として水相又は油相のいずれを有することもできる。
【０３４９】
表１２は、水相中に７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン及び脂質相にオレソキシムを含む、油中水型エマルジョンの形成に適している油性ビヒクルの２つの例を提供する。
【表１２】
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【０３５０】
組成物４Ａ及び４Ｆでは、１０回振盪後に最大３０％（w/w）までの酒石酸塩バッファ水溶液（pH３．３）をエマルジョンとして分散させることができた。該エマルジョンは、少なくとも１５分間視覚的に均質であった。
【０３５１】
表３（組成物５Ａ）は、７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンの水溶液を調製するために使用される溶液を表す。
【表１３】
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【０３５２】
図６は、酒石酸塩バッファ溶液（組成物５Ａ）の添加前（Ａ）及び２０％（Ｂ）又は３０％（Ｃ）を添加して油中水型エマルジョンが生じた直後の組成物４Ａの写真を提供する。
【０３５３】
図７は、構成の１５分間後（Ａ）（１０回振盪）及び構成の３０分間後（Ｂ）（１０回振盪）の７０％ 組成物４Ａ及び３０％ 組成物５Ａを含む油中水型エマルジョンの写真を提供する。
【０３５４】
図８は、酒石酸塩バッファ溶液（組成物５Ａ）の添加前（Ａ）及び２０％（Ｂ、左）、２５％（Ｂ、中央）、又は３０％（Ｂ、右）を添加して油中水型エマルジョンが生じた直後の組成物４Ｆの写真を提供する。
【０３５５】
図９は、構成の１５分間後（Ａ）（１０回振盪）及び構成の３０分間後（Ｂ）（１０回振盪）の７０％ 組成物４Ｆ及び３０％ 組成物５Ａを含む油中水型エマルジョンの写真を提供する。
【０３５６】
調製された全てのエマルジョンは、少なくとも３０分間安定であった。
【０３５７】
実施例５２
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン及びオレソキシムを含む油性溶液
エマルジョンの代わりに、溶媒への溶解度を改善するために、ゴマ油及び親油性界面活性剤、例えば、グリセリルモノオレアート（Peceol（商標）、Inwitor 948（商標）、Capmul GMO（商標））、グリセリルモノリノレアート（Maisine 35-1（商標））、ソルビタンモノオレアート（Span 80（商標））、又はオレイン酸を含有する油性溶媒に両原薬を溶解させることによって、実施例２０の化合物及びオレソキシムを共製剤化することができる。
【０３５８】
表１４は、両薬物の溶解度を増大させ、そして、表１５に示すとおり構成した後の使用時間中十分な安定性を導く油性溶媒系を提供する。
【表１４】
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【表１５】
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【０３５９】
実施例５３
ビヒクルの粉末ブレンド及びそれから構成される経口溶液の安定性
表１６は、pH３．４の７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンを含む経口溶液（例えば、０．２５又は１．５mg/mL）の構成に適したビヒクルの乾式造粒された粉末ブレンドを提供する。
【０３６０】
これら組成物では、標的pHに達するのに必要な酒石酸の正確な量を、酸及び対応する塩からなるバッファの代わりに使用した。表１７から分かるとおり、少なくとも１７日間の溶液の使用中安定性を実証することができた。
【表１６】
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【表１７】
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【０３６１】
実施例５４
７−（４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−７−イル）−２−（２，８−ジメチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オンの粉末ブレンド及びそれから構成される経口溶液の安定性
表１８の組成物８ａ、８ｂ、８ｃ、及び８ｄの乾式造粒された粉末ブレンドは、溶液の構成手順を簡略化するために、既にAPIを含む。組成物８ａ〜８ｄは、少ない粉末充填重量を示し、そして、顆粒特性を改善するために第２の希釈剤としてイソマルトを含有する。表１９から分かるとおり、注射用水及び飲用水の両方で、溶液中最長１ヶ月間の優れた安定性を実証することができた。
【表１８】
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【表１９】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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