(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
液状の検体を流通させるための第一流路と、当該第一流路を流通する検体から特定の成分を分離するための複数の第二流路と、前記検体から分離された特定の成分が充填される測定部とを内部に有する板状体よりなり、
前記複数の第二流路の各々は、前記第一流路を形成する流路形成面に開口して当該第一流路と連通されると共に前記測定部に接続された、検体中の排除すべき成分の当該第二流路に対する進入を阻止することが可能な寸法の幅を有する溝からなり、
前記測定部は、面方向の一方向に向かうに従って徐々に隙間が小さくなるくさび状空間と、当該くさび状空間と連続する前記一方向においてほぼ同一の空間形状を有する定容積空間とを有しており、
前記定容積空間の前記一方向に垂直な断面において表わされる互いに連続する２つの定容積空間形成面がなす角をγ、前記くさび状空間の面方向からの側面視にて表わされる互いに対向する一対のくさび状空間形成面がなす角をαとしたとき、前記くさび状空間は、α＜γの関係を満足する空間形状を有することを特徴とするマイクロ流路チップ。
【請求項２】
前記くさび状空間の厚み方向からの平面視にて表わされる互いに対向する一対のくさび状空間形成面がなす角をβとしたとき、前記くさび状空間は、β＜γの関係を満足する空間形状を有することを特徴とする請求項１に記載のマイクロ流路チップ。
【請求項３】
前記第一流路の幅が１０μｍ以上１０００μｍ以下であり、前記第二流路の幅が０．１μｍ以上１．２μｍ以下であることを特徴とする請求項１または請求項２に記載のマイクロ流路チップ。
【請求項４】
前記測定部には、厚み方向における寸法が一定の大きさとされた測定領域を有しており、当該測定領域の厚み方向における寸法が１０〜１０００μｍであることを特徴とする請求項１乃至請求項３のいずれかに記載のマイクロ流路チップ。
【請求項５】
前記第二流路を形成する流路形成面の親水性が、前記第一流路を形成する流路形成面の親水性より低いことを特徴とする請求項１乃至請求項４のいずれかに記載のマイクロ流路チップ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マイクロ流路チップに関する。更に詳しくは、血液などの検体から血漿成分などの特定の成分を分離することが可能なマイクロ流路チップに関する。
【背景技術】
【０００２】
血清（血漿）の色の主体成分であるビリルビンは、主に赤血球内のヘモグロビンの崩壊によって生じる。このビリルビンが体内で増加すると、体全体の皮膚が黄染して黄疸となる。一般に、新生児期に現れる黄疸（新生児の９０％程度）の多くは、生理的な症状であり、生後３〜５日で自然に消失する。しかし、生理的黄疸の範囲を超える病的黄疸（黄疸が現れた新生児の２０％程度）は、中枢神経障害をもたらす「核黄疸」に進行し、脳性まひ、難聴、知的障害等の重篤な後遺症に帰結する可能性があり、死亡につながる場合がある。これを未然に防ぐために、ＮＩＣＵ（新生児集中治療室）や産科では、黄疸が現れた新生児について、血中のビリルビンを定量的に測定して総ビリルビン濃度によってスクリーニングを行い、総ビリルビン濃度の高い新生児に対しては、光線治療が行われている。そして、ビリルビンを定量的に測定する方法としては、主に比色法が採用されている。
【０００３】
比色法によるビリルビンの定量測定方法としては、血漿について、互いに異なる２つの波長における光の吸光度を測定することによって、血漿中に含まれるビリルビンの濃度を測定する、２波長測光による方法が知られている（例えば非特許文献１参照。）。
この２波長測光によるビリルビンの定量測定方法について、具体的に説明すると、以下の通りである。
【０００４】
血液から抽出された血漿中には、ビリルビンの他に、溶血ヘモグロビン（損傷した赤血球内部より漏出したヘモグロビン）が含まれる場合がある。このような場合には、血漿の分光吸収曲線を測定すると、図１５に示すように、血漿の吸収曲線は、ビリルビンの吸収曲線と溶血ヘモグロビンと吸収曲線とが合成された吸収曲線となる。図１５において、実線は、抽出された血漿の吸収曲線、破線はビリルビンの吸収曲線、一点鎖線は溶血ヘモグロビンの吸収曲線である。
【０００５】
図１５から理解されるように、ビリルビンによる吸収ピークは波長４５５ｎｍである。しかしながら、波長４５５ｎｍにおける血漿による吸収には、ビリルビンによる吸収の他に、溶血ヘモグロビンによる吸収が含まれており、従って、波長４５５ｎｍにおける血漿の吸光度Ｂ1 は、ビリルビンの吸光度Ｂ2 と溶血ヘモグロビンの吸光度Ｈ2 との和である。このため、吸光度Ｂ1 のみからビリルビンの濃度を求めることができない。
一方、血漿の吸収曲線において、ビリルビンによる吸収がなく、溶血ヘモグロビンによる吸収のみがある波長５７５ｎｍに着目すると、血漿の吸光度Ｈ1 の値は、波長４５５ｎｍにおける溶血ヘモグロビンの吸光度Ｈ2 の値と近似している。
そこで、波長４５５ｎｍにおける吸光度Ｂ1 の値から、波長５７５ｎｍにおける吸光度Ｈ1 の値を減じることにより、ビリルビンの吸光度Ｂ2 の値に近似した値が得られ、この値から、ビリルビンの濃度を求めることが可能となる。
【０００６】
また、血液中のビリルビンの濃度を測定するためには、血液からビリルビンを含む血漿を抽出することが必要である。血液から血漿を抽出する方法としては、毛細管内に封入した血液を、遠心分離処理することにより、血液中の血漿と血球とを分離する方法が知られている（例えば特許文献１参照。）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】小川善資、「比色分析装置の基礎」、生物試料分析、生物試料分析科学会、２０１３年、第３６巻、第３号、ｐ．２７３−２８０
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開平６−４３１５８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
しかしながら、血液から血漿を分離するために遠心分離を利用する場合には、比較的多量の血液が必要とされ、また、遠心分離機を使用するため、大型の装置を構成することが必要となる、という問題がある。このため、遠心分離を利用せずに、微量の血液から血漿成分を分離することができる手段が望まれている。
【００１０】
そこで、本発明の目的は、外部から遠心力などの運動学的作用を加えることなしに、微量の検体から特定の成分を分離することができ、必要量の特定成分が測定部に充填された状態を短時間で得ることのできるマイクロ流路チップを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明のマイクロ流路チップは、液状の検体を流通させるための第一流路と、当該第一流路を流通する検体から特定の成分を分離するための複数の第二流路と、前記検体から分離された特定の成分が充填される測定部とを内部に有する板状体よりなり、
前記複数の第二流路の各々は、前記第一流路を形成する流路形成面に開口して当該第一流路と連通されると共に前記測定部に接続された、検体中の排除すべき成分の当該第二流路に対する進入を阻止することが可能な寸法の幅を有する溝からなり、
前記測定部は、面方向の一方向に向かうに従って徐々に隙間が小さくなるくさび状空間と、当該くさび状空間と連続する前記一方向においてほぼ同一の空間形状を有する定容積空間とを有しており、
前記定容積空間の前記一方向に垂直な断面において表わされる互いに連続する２つの定容積空間形成面がなす角をγ、前記くさび状空間の面方向からの側面視にて表わされる互いに対向する一対のくさび状空間形成面がなす角をαとしたとき、前記くさび状空間は、α＜γの関係を満足する空間形状を有することを特徴とする。
【００１３】
また、本発明のマイクロ流路チップにおいては、前記くさび状空間の厚み方向からの平面視にて表わされる互いに対向する一対のくさび状空間形成面がなす角をβとしたとき、前記くさび状空間は、β＜γの関係を満足する空間形状を有することが好ましい。
【００１４】
さらにまた、本発明のマイクロ流路チップにおいては、前記第一流路の幅が１０μｍ以上１０００μｍ以下であり、前記第二流路の幅が０．１μｍ以上１．２μｍ以下であることが好ましい。
また、前記測定部には、厚み方向における寸法が一定の大きさとされた測定領域を有しており、当該測定領域の厚み方向における寸法が１０〜１０００μｍであることが好ましい。
【００１５】
さらにまた、本発明のマイクロ流路チップにおいては、前記第二流路を形成する流路形成面の親水性が、前記第一流路を形成する流路形成面の親水性より低いことが好ましい。
【発明の効果】
【００１６】
本発明のマイクロ流路チップによれば、第二流路は、第一流路を流通する検体における排除すべき成分の当該第二流路に対する進入を阻害することが可能な幅を有するため、外部から遠心力などの運動学的作用を加えることなしに、検体から特定の成分を分離することができる。
【００１７】
また、測定部の一部が特定の空間形状を有するくさび状空間により形成された構成とされていることにより、第二流路によって分離されて測定部に流入される特定の成分を、くさび状空間による毛細管力によって当該くさび状空間の狭小方向に集中させることができる。このため、必要量の特定の成分が測定部に充填された状態を短時間で得ることができる。
【００１８】
さらにまた、第二流路を形成する流路形成面の親水性が、第一流路を形成する流路形成面の親水性より低い構成とされていることにより、第二流路による毛細管力が高くなりすぎることを抑制することができる。このため、検体が血液である場合において、排除すべき成分である血球が溶血することを確実に回避することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】本発明のマイクロ流路チップの一例における構成を示す平面図である。
【図２】図１における二点鎖線で囲まれた領域を示す説明図であり、（ａ）は平面図、（ｂ）は側面図である。
【図３】図２（ａ）におけるＡ−Ａ断面端面図である。
【図４】図２（ａ）におけるＢ−Ｂ断面端面図である。
【図５】測定部の空間形状を概略的に示す説明図であって、（ａ）斜視図、（ｂ）ｚ方向から見た平面図、（ｃ）定容積空間のｙｚ平面による断面図、（ｄ）ｙ方向から見た側面図である。
【図６】第二流路による検体（血液）の分離機能を説明するための図である。
【図７】検体から分離された特定の成分が測定部に流入された状態を概略的に示す説明図である。
【図８】本発明のマイクロ流路チップの他の例における要部の構成を示す平面図である。
【図９】本発明のマイクロ流路チップのさらに他の例における構成を示す平面図である。
【図１０】本発明のマイクロ流路チップの他の例における、第一流路、第二流路および測定部の各々の空間形状を概略的に示す説明図である。
【図１１】本発明のマイクロ流路チップを用いた検体濃度測定装置の一例における構成を概略的に示す説明図である。
【図１２】本発明のマイクロ流路チップを用いた検体濃度測定装置の他の例における構成を概略的に示す説明図である。
【図１３】実施例において作製した複数のマイクロ流路チップＡ〜Ｄの各々について得られた、溶血ヘモグロビンの吸光度（溶血強度）と第二流路の親水性との関係を示す図である。
【図１４】実施例において作製したマイクロ流路チップＡおよび比較用のマイクロ流路チップについての、試験用流体の測定部に対する貯留長の経時的変化を示す図である。
【図１５】血漿成分、ビリルビンおよび溶血ヘモグロビンの各々の分光吸収スペクトルを示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
以下、本発明のマイクロ流路チップの実施の形態について説明する。
図１は、本発明のマイクロ流路チップの一例における構成を示す平面図である。図２は、図１における二点鎖線で囲まれた領域を示す説明図であり、（ａ）は平面図、（ｂ）は側面図である。図３は、図２（ａ）におけるＡ−Ａ断面端面図、図４は、図２（ａ）におけるＢ−Ｂ断面端面図である。
このマイクロ流路チップ１０は、液状の検体を流通させるための第一流路２０と、第一流路２０を流通される検体から特定の成分を分離抽出するための複数の第二流路２５と、検体から分離された特定の成分が充填される測定部３０とを内部に有する板状体よりなるチップ基体１１を有する。
【００２１】
図示の例では、チップ基体１１は、第一基板１２と第二基板１５とが接合されて構成されており、第一流路２０、第二流路２５および測定部３０は、チップ基体１１の厚み方向に垂直な平面に沿って二次元的に形成されている。
測定部３０は、チップ基体１１の厚み方向に垂直な面方向の一方向に伸びる状態で形成されており、第三流路２７を介して第二排出部２８に接続されている。
第一流路２０は、測定部３０を挟んだ両側の位置において測定部３０に沿って伸びる直線状流路部分２０ａ，２０ｂを有している。第一流路２０における検体流通方向の上流側端は、検体導入部２１から導入された検体を貯留する検体貯留部２２に接続されている。第一流路２０における検体流通方向の下流側端は、第一排出部２３に接続されている。
複数の第二流路２５の各々は、第一流路２０を形成する流路形成面に開口して当該第一流路２０と連通されると共に測定部３０を構成する空間に接続された、第一流路２０に対して垂直方向に伸びる溝からなる。第二流路２５は、上流端側が第一流路２０の底壁面２０ｃに開口しており、第二流路２５の開口は、例えば第一流路２０の幅方向の全域にわって伸びるよう形成されている。
第一基板１２および第二基板１５の各々の厚みは、特に限定されるものではないが、例えば０．１ｍｍ以上５．０ｍｍ以下である。
【００２２】
図示の例では、第一流路２０は、第一基板１２に形成された第一流路用溝１３ａの内壁面と、第二基板１５とによって区画されることにより形成されている。また、第二流路２５は、第二基板１５に形成された第二流路用溝１６の内壁面と、第一基板１２とによって区画されることにより形成されている。また、測定部３０は、第一基板１２に形成された測定部用凹所１３ｂの内壁面と、第二基板１５とによって区画されることにより形成されている。なお、第一流路用溝１３ａ、第二流路用溝１６および測定部用凹所１３ｂの全てが、第一基板１２および第二基板１５のいずれか一方に形成されていてもよい。
【００２３】
第一流路２０は、液状の検体（例えば血液）を流通させることが可能な幅を有する。本発明において、流路の「幅」とは、流路における当該流路が伸びる方向に垂直な断面において、当該流路の最も小さい幅を意味する。図示の例の第一流路２０および第二流路２５においては、マイクロ流路チップ１０の厚み方向の幅が最も小さい幅である。
このような第一流路２０の幅は、１０μｍ以上１０００μｍ以下であることが好ましく、より好ましくは５０μｍ以上１００μｍ以下である。第一流路２０の幅が過小である場合には、第一流路２０において、流路抵抗が大きくなることによって検体の流量が低下し、第二流路２５への特定の成分（例えば血漿成分）の供給量が不足する虞がある。一方、第一流路２０の幅が過大である場合には、要求される検体の量が増大する虞がある。また毛細管力が小さくなるため、第一流路２０を流れる検体の流速が小さくなり、特定の成分が測定部３０に到達するのに相当に長い時間を要する虞がある。
また、第一流路２０の上流側端から第二流路２５との分岐点までの長さは、特に限定されるものではないが、例えば１０ｍｍ以上１００ｍｍ以下である。
【００２４】
第二流路２５は、第一流路２０を流通する検体（例えば血液）から特定の成分（例えば血漿成分）を分離して排除すべき成分（例えば血球）の当該第二流路２５に対する導入を阻止することが可能な寸法の幅を有する。
このような第二流路２５の幅は、０．１μｍ以上１．２μｍ以下であることが好ましく、より好ましくは１μｍ以上１．２μｍ以下である。第二流路２５の幅が過小である場合には、測定部３０に供給することができる特定の成分の量が少なくなり、特定の成分の抽出に相当に長い時間を要する虞がある。一方、第二流路２５の幅が過大である場合には、検体中における特定の成分以外の成分（例えば赤血球などの血球成分）が混入してしまい分離機能を示さない虞がある。
また、第二流路２５の長さは、特に限定されるものではないが、例えば０．１ｍｍ以上１ｍｍ以下である。
また、第二流路２５の数は、例えば１００本以上１００００本以下である。
【００２５】
測定部３０は、当該測定部３０を形成する空間の少なくとも一部が、一方向に向かうに従って徐々に隙間が小さくなるくさび状空間により形成されている。
【００２６】
図示の例では、測定部３０における当該測定部３０が伸びる方向の一端部分がくさび状空間により形成されている。すなわち、測定部３０は、図５にも示すように、くさび状空間３５と、くさび状空間３５に連続する定容積空間３１とにより構成されている。
以下においては、くさび状空間３５（測定部３０）が伸びる方向を「ｘ方向」、チップ基体１１の厚み方向を「ｚ方向」とするｘｙｚ直交座標を定義して、測定部３０の空間形状について具体的に説明する。
【００２７】
測定部３０における定容積空間３１は、ｘ方向においてほぼ同一の空間形状を有しており、ｙｚ断面の断面形状が矩形状とされている。定容積空間３１のｙｚ断面において表わされる連続する２つの定容積空間形成面がなす角γは、いずれも例えば４５°以上９０°以下である。
図示の例では、定容積空間３１は、各々ｘｙ平面に沿って伸びる上底面３０ａおよび下底面３０ｂと、下底面３０ｂに対して傾斜する一対の定容積空間形成面３２ａ，３２ｂとにより形成されており、ｙｚ断面における断面形状が台形状とされた空間形状を有する。そして、定容積空間３１のｙｚ断面において表わされるｙ方向において互いに対向する一対の定容積空間形成面３２ａ，３２ｂがｘｙ平面に沿った下底面３０ｂに対してなす角γ１，γ２が、例えば４５°以上９０°以下とされている。γ１，γ２は、互いに同一の大きさであっても異なる大きさであってもよい。
【００２８】
くさび状空間３５は、ｙ方向からの平面視にて表わされるｚ方向において互いに対向する一対のくさび状空間形成面がくさび状をなす部分を有すると共に、ｚ方向からの平面視にて表わされるｙ方向において互いに対向する一対のくさび状空間形成面がくさび状をなす部分を有する空間形状とされていることが好ましい。
具体的には、ｙ方向からの平面視にて表わされる一対のくさび状空間形成面がなす角（以下、「くさび状空間の先端傾斜角」という。）をαとしたとき、くさび状空間３５は、α＜γ１、α＜γ２の関係を満足する空間形状を有することが好ましい。また、ｚ方向からの平面視にて表わされる一対のくさび状空間形成面がなす角（以下、「くさび状空間の開き角」という。）をβとしたとき、くさび状空間３５は、β＜γ１、β＜γ２の関係を満足する空間形状を有する空間形状を有することが好ましい。
【００２９】
図示の例では、くさび状空間３５は、ｘｙ平面に沿った上底面３０ａおよび下底面３０ｂと、ｘ方向一端側に向かって互いに接近する、下底面３０ｂに対して傾斜する一対のくさび状空間形成面３６ａ，３６ｂとによって形成されている。
そして、図５（ｄ）に示すように、ｙ方向からの平面視にて表わされる一対のくさび状空間形成面３６ａ，３６ｂの稜線Ｃと下底面３０ｂとがなすくさび状空間３５の先端傾斜角αが、定容積空間形成面３２ａ，３２ｂの下底面３０ｂに対する傾斜角γ１、γ２より小さい状態とされている。また、図５（ｂ）に示すように、ｚ方向からの平面視にて表わされる一対のくさび状空間形成面３６ａ，３６ｂがなすくさび状空間３５の開き角βが、定容積空間形成面３２ａ，３２ｂの下底面３０ｂに対する傾斜角γ１、γ２より小さい状態とされている。
なお、くさび状空間３５の空間形状は、例えば四角錐状であってもよい。
【００３０】
くさび状空間３５の開き角αは、例えば１５°以上４５°以下であることが好ましい。また、くさび状空間３５の先端傾斜角βは、例えば５°以上４５°以下であることが好ましい。
くさび状空間３５による毛細管力Ｐは、表面張力をＦ、液体の接触角をθ、液面の曲率半径をＲとしたとき、Ｐ＝２Ｆｃｏｓα＋（θ／Ｒ）、もしくは、Ｐ＝２Ｆｃｏｓβ＋（θ／Ｒ）により算出される。従って、くさび状空間の開き角αの大きさ、もしくは、くさび状空間の先端傾斜角βの大きさによって毛細管力Ｐが決定されることとなる。
くさび状空間３５が上記のような空間形状を有することにより、第二流路２５によって分離されて測定部３０に流入される特定の成分を確実にくさび状空間３５の狭小方向に優先的に貯留させることができる。
【００３１】
また、くさび状空間３５は、ｙ方向またはｚ方向における寸法が一定の大きさとされた測定領域を有する構成とされていることが好ましい。
図示の例では、ｚ方向における寸法（厚み）が一定の大きさとされた測定領域３８がくさび状空間３５におけるｘ方向他端側部分に形成されている。
このような構成とされていることにより、後述する特定の成分の吸光度に基づく濃度測定において、光路長を一定の大きさとすることができるため、検体における特定の成分について信頼性の高い濃度測定を行うことができる。
【００３２】
以上において、測定部３０の定容積空間３１およびくさび状空間３５の測定領域３８におけるｚ方向の寸法Ｄは、例えば１０μｍ以上１０００μｍ以下であることが好ましく、より好ましくは１００μｍ以上５００μｍ以下である。当該寸法Ｄが過小である場合には、後述する吸光度測定において必要とされる大きさの光路長を確保することができないため、特定の成分の濃度測定を行うことができなくなる。一方、当該寸法Ｄが過大である場合には、要求される検体の量が増大する虞がある。また毛細管力が小さくなるため、特定の成分が測定部３０に到達するのに相当に長い時間を要する虞がある。
また、測定部３０の定容積空間３１における面方向（ｙ方向）の寸法Ｗ１は、１００μｍｍ以上１０００μｍ以下であることが好ましい。
【００３３】
而して、上記のマイクロ流路チップ１０においては、第一流路２０を形成する流路形成面（内壁面）および第二流路２５の各々を形成する流路形成面（内壁面）並びに測定部３０を形成する測定部形成面（測定部３０の内壁面）には、親水化処理が施されていることが好ましい。具体的には、第一流路２０、第二流路２５および測定部３０の各々の内壁面における水の接触角が９０°未満であることが好ましく、より好ましくは５０°以下である。
また、第二流路２５を形成する流路形成面の親水性が、第一流路２０を形成する流路形成面の親水性より低いことが好ましい。具体的には、第二流路２５を形成する流路形成面における水の接触角は、７０°以上９０°未満であること（弱親水性）が好ましく、第一流路２０を形成する流路形成面における水の接触角は、１０°以下であること（強親水性）が好ましい。第二流路２５の内壁面における親水性が高い場合には、第二流路２５の幅が狭いことから、後述する実施例の結果に示されるように、第二流路２５による毛細管力が大きくなりすぎるため、検体が血液である場合には、排除すべき成分である血球が容易に溶血しやすくなる。
【００３４】
親水化処理の方法としては、例えば、親水性薄膜を形成する方法、真空紫外線を照射することによって表面処理する方法などを利用することができる。
親水性薄膜としては、例えば貴金属薄膜と、この貴金属薄膜上に形成された親水性分子による自己組織化単分子膜（ＳＡＭ）とよりなる積層膜により構成することができる。貴金属薄膜としては、例えば白金膜などを挙げることができる。また、親水性分子としては、例えばスルホン酸チオールなどを挙げることができる。親水性の調整は、貴金属薄膜の厚みにより制御することができる。すなわち、第二流路２５における内壁面に形成される貴金属薄膜の厚みを第一流路２０における内壁面に形成される貴金属薄膜の厚みより小さくすることにより、第二流路２５の内壁面における親水性を低くすることができる。
また、真空紫外線を照射することによって表面活性化処理を行う場合においては、紫外線光源としては、例えば中心波長が１７２ｎｍの真空紫外線を放射するキセノンエキシマランプを用いることができる。例えば、第一基板１２における第一流路用溝１３ａの内壁面と、当該内壁面と共に第一流路２０を形成する第二基板１５の表面に対する紫外線照射条件の一例を示すと、紫外線照度が３０ｍＷ／ｃｍ2 、照射時間が１０分間である。また、第二基板１５に形成された第二流路用溝１６の内壁面と、当該内壁面と共に第二流路２５を形成する第一基板１２の表面に対する紫外線照射条件の一例を示すと、紫外線照度が３０ｍＷ／ｃｍ2 、照射時間が１分間である。
なお、第二流路２５を形成するｘ方向において互いに対向する一対の内壁面の、ｘｙ平面に沿って延びる底壁面に対する傾斜角を、部分的に変化させることによっても、第二流路２５の親水性を調整することもできる。
【００３５】
〈チップ基体の構成材料〉
チップ基体１１（第一基板１２および第二基板１５）を構成する材料としては、後述する検体濃度測定装置における光源部からの光を透過し得るもの、例えば樹脂材料を用いることができる。
樹脂材料としては、例えばアクリル樹脂、ポリスチレン樹脂、ＣＯＰ樹脂（シクロオレフィンポリマー樹脂）などを用いることができるが、以下に示す樹脂組成物を用いることが好ましい。
【００３６】
チップ基体１１の構成材料として用いられる樹脂組成物は、荷重たわみ温度が４０℃以上１００℃以下、ガラス転移温度が−４０℃以上−２０℃以下であるものであることが好ましい。
ここで、樹脂組成物の荷重たわみ温度およびガラス転移温度は、ＪＩＳ  Ｋ７１９１およびＪＩＳ  Ｋ７１２１に規定される方法で測定されるものをいう。
【００３７】
このような樹脂組成物としては、ポリプロピレン系樹脂と、ポリプロピレン系樹脂に相溶しないポリマーブロックＸ（以下、単に「ポリマーブロックＸ」という。）および共役ジエンによるエラストマー性のポリマーブロックＹ（以下、単に「ポリマーブロックＹ」という。）よりなるブロックコポリマー（以下、「特定のブロックコポリマー」という。）の水素添加誘導体（以下、「特定の水素添加誘導体」という。）とを含有してなる、自己融着性を示す樹脂組成物（以下、「特定の樹脂組成物」という。）を用いることが好ましい。
【００３８】
〈ポリプロピレン系樹脂〉
ポリプロピレン系樹脂としては、プロピレンのホモポリマーや、プロピレンと、エチレン、またはブテン−１、ヘキセン−１などのプロピレン以外のα―オレフィンとのランダムコポリマーを用いることができる。具体的には例えば、市販の「マイクロレシコ」（登録商標）（株式会社リッチェル製）などを用いることができる。
【００３９】
〈特定のブロックコポリマー〉
特定のブロックコポリマーは、それぞれ１つ以上、好ましくは１つ以上５つ以下のポリマーブロックＸおよびポリマーブロックＹを有するものであればよく、具体的な構造は、（Ｘ−Ｙ）n （但し、ｎ＝１〜５）で表される構造、Ｘ−Ｙ−Ｘで表される構造、Ｙ−Ｘ−Ｙで表される構造などのいずれであってもよい。
【００４０】
〈ポリマーブロックＸ〉
特定のブロックコポリマーにおいて、ポリマーブロックＸとしては、ポリプロピレン系樹脂に相溶しないものであれば特に限定されず、例えばビニル芳香族モノマー（例えばスチレン）、エチレンまたはメタクリレート（例えばメチルメタクリレート）等を重合して得られるポリマーブロックを用いることができる。具体的なポリマーブロックＸの例としては、ポリスチレン系のものや、ポリオレフィン系のものが挙げられる。
【００４１】
ポリスチレン系のポリマーブロックＸの例としては、スチレン、α−メチルスチレン、ο−メチルスチレン、ｍ−メチルスチレン、ｐ−メチルスチレン、２，４−ジメチルスチレン、ビニルナフタレン、ビニルアントラセンから選択された１種または２種以上のビニル芳香族化合物を重合して得られるポリマーブロックが挙げられる。
【００４２】
また、ポリオレフィン系のポリマーブロックＸの他の例としては、エチレンと炭素数３〜１０のα−オレフィンとを共重合して得られるポリマーブロックが挙げられる。このポリマーブロックには、非共役ジエンが共役重合されていてもよい。
前記α−オレフィンの具体例としては、プロピレン、１−ブテン、３−メチル−１−ブテン、１−ペンテン、４−メチル−１−ペンテン、１−ヘキセン、１−ペンテン、１−オクテン、１−デセンなどが挙げられる。
前記非共役ジエンの具体例としては、１，４−ヘキサジエン、５−メチル−１，５−ヘキサジエン、１，４−オクタジエン、シクロヘキサジエン、シクロオクタジエン、シクロペンタジエン、５−エチリデン−２−ノルボネル、５−ブチリデン−２−ノルボネル、２−イソプロペニル−５−ネルボルネンなどが挙げられる。
ポリオレフィン系のポリマーブロックＸの具体例としては、エチレン−プロピレン共重合体ブロック、エチレン−１−ブテン共重合体ブロック、エチレン−１−オクテン共重合体ブロック、エチレン−プロピレン−１，４−ヘキサジエン共重合体ブロック、エチレン−プロピレン−５−エチリデン−２−ノルボルネン共重合体ブロックなどが挙げられる。
【００４３】
特定のブロックコポリマーにおいて、ポリマーブロックＸの含有率は、例えば１０質量％以上２０質量％以下である。
【００４４】
〈ポリマーブロックＹ〉
ポリマーブロックＹとしては、水素添加前のものとして、２−ブテン−１，４−ジイル基およびビニルエチレン基からなる群から選択される少なくとも１種の基よりなる構造単位によって構成されるポリブタジエンブロック、２−メチル−２−ブテン−１，４−ジイル基、イソプロペニルエチレン基および１−メチル−１−ビニルエチレン基からなる群から選択される少なくとも１種の基よりなる構造単位によって構成されるポリイソプレンブロックが挙げられる。
更に、水素添加前のポリマーブロックＹとして、イソプレン単位が２−メチル−２−ブテン−１，４−ジイル基、イソプロペニルエチレン基および１−メチル−１−ビニルエチレン基からなる群から選択される少なくとも１種の基よりなる構造単位であり、ブタジエン単位が２−ブテン−１，４−ジイル基および／またはビニルエチレン基よりなる構造単位によって構成されるイソプレン／ブタジエン共重合体ブロックなどが挙げられる。イソプレン／ブタジエン共重合体ブロックにおけるイソプレンに由来の構造単位とブタジエンに由来の構造単位との配置は、ランダム状、ブロック状、テーパブロック状のいずれの形態であってもよい。
【００４５】
また、ポリマーブロックＹは、ビニル芳香族化合物が共重合されてなるものであってもよい。このようなポリマーブロックＹとしては、ビニル芳香族化合物に由来の単位が、スチレン、α−メチルスチレン、ｏ−メチルスチレン、ｍ−メチルスチレン、ｐ−メチルスチレン、２，４−ジメチルスチレン、ビニルナフタレン、ビニルアントラセンのうちから選択された１種のモノマー単位であり、共役ジエン単位が、２−ブテン１，４−ジイル基および／またはビニルエチレン基である共重合体ブロックを用いることができる。また、ビニル芳香族化合物に由来の構造単位と共役ジエン由来の構造単位の配置は、ランダム状、ブロック状、テーパブロック状のいずれの形態であってもよい。
【００４６】
〈特定の水素添加誘導体〉
特定の水素添加誘導体は、上記の特定のブロックコポリマーを水素添加することによって得られる。特定の水素添加誘導体における水素添加の状態は、部分水素添加であっても、また完全水素添加であってもよい。
このような特定の水素添加誘導体としては、水素添加する前の特定のブロックコポリマーにおいて、ポリマーブロックＸがポリスチレンブロックであり、ポリマーブロックＹが、１，２結合、３，４結合および／または１，４結合のポリイソプレンブロックであるもの、或いは、ポリマーブロックＸがポリスチレンブロックであり、ポリマーブロックＹが、１，２結合および／または１，４結合のポリブタジエンブロックであるものが、容易に入手可能である。
また、ポリスチレンブロックは、ポリプロピレン系樹脂との相溶しにくいため、ポリスチレンブロックの割合が高い特定の水素添加誘導体を用いる場合には、特定の樹脂組成物の調製（特定の水素添加誘導体とポリプロピレン系樹脂と混合）に長い時間を要するので、マスターバッチ化することなどによって、予め十分に混合しておくことが好ましい。
【００４７】
上記のマイクロ流路チップ１０は、例えば、第一流路２０を形成するための第一流路用溝１３ａおよび測定部３０を形成するための測定部用凹所１３ｂが形成された第一基板１２、並びに、第二流路２５を形成するための第二流路用溝１６が形成された第二基板１５を作製し、第一基板および第二基板を接合することにより製造することができる。
第一基板１２および第二基板１５は、例えば、マイクロ流路チップ製造用金型を製造し、このマイクロ流路チップ製造用金型を用い、例えば上記の樹脂材料を射出成形法によって成形することにより、作製することができる。マイクロ流路チップ製造用金型は、例えば、シリコンウエハを異方性エッチング加工することにより、もしくは感光性樹脂の傾斜露光や多段プロセスにより得られたものに対して電鋳処理を行うことにより製造することができる。
【００４８】
上記のマイクロ流路チップ１０においては、液状の検体例えば血液が検体導入部２１から導入されることにより、当該検体が検体貯留部２２に貯留される。検体貯留部２２に貯留された検体は、毛細管現象によって第一流路２０を流通し、第二流路２５との分岐点に到達する。そして、この分岐点においては、図６に示すように、検体（図６において斜線を付した矢印で示す。）中における第二流路２５の幅より大きいサイズの成分、例えば血球成分ＢＣは、第二流路２５に対する進入が阻害されるため、第一流路２０を下流側に向かって流通する（図６において塗りつぶした矢印で示す。）。一方、検体中における第二流路２５の幅より小さいサイズの特定の成分、例えば血漿成分（図６において白抜きの矢印で示す。）ＰＬは、第二流路２５に進入することができるため、第二流路２５による毛細管力によって第二流路２５を流通し、測定部３０に流入する。図７に示すように、測定部３０に流入した特定の成分ＰＬは、測定部３０におけるくさび状空間３５による毛細管力によって、チップ基体１１における測定部３０を形成する内壁面に沿ってくさび状空間３５の狭小方向に流れる。このため、特定の成分ＰＬはくさび状空間３５内に集中してくさび状空間３５から優先的に充填されることとなる。
【００４９】
以上のように、上記のマイクロ流路チップ１０によれば、第二流路２５は、第一流路２０を流通する検体（例えば血液）から特定の成分（例えば血漿成分ＰＬ）を分離して排除すべき成分（例えば血球ＢＣ）の当該第二流路２５に対する進入を阻止することが可能な寸法の幅を有するため、外部から遠心力などの運動学的作用を加えることなしに、微量の検体から特定の成分を分離することができる。
【００５０】
また、上記のマイクロ流路チップ１０によれば、第二流路２５によって分離されて測定部３０に流入される特定の成分を、くさび状空間３５による毛細管力によって当該くさび状空間３５の狭小方向に集中させることができる。すなわち、測定部３０の空間形状が例えば角柱状である構成のものにおいては、測定部３０に流入した特定の成分は、連続する２つの測定部形成面（例えば底面と側壁面）の境界部分において生じる毛細管力によって、測定部形成面近傍位置において保持される。つまり、特定の成分は、測定部形成面近傍位置から徐々に充填されていくこととなるため、例えば濃度測定において必要とされる量の特定成分を充填するために、特定の成分の抽出量が膨大となり、長時間の時間を要する。また、特定の成分は、測定部形成面を伝って排出部（第二排出部２８）にも到達し、測定部３０内の空気の排出を阻害する。
然るに、測定部３０を形成する空間の一部がくさび状空間３５により形成されていることにより、上記のマイクロ流路チップ１０によれば、必要量の特定の成分を効率よく検体から抽出することができ、後述する吸光度に基づく濃度測定において必要とされる光路長（測定部３０に充填された特定の成分の厚みが例えば１００μｍ）が確保される状態を短時間で得ることができる。
【００５１】
さらにまた、上記のマイクロ流路チップ１０によれば、第二流路２５を形成する流路形成面の親水性が第一流路２０を形成する流路形成面の親水性より低いことにより、第二流路２５による毛細管力によって、排除すべき成分である血球が溶血することを回避することができる。
【００５２】
以上、本発明のマイクロ流路チップの実施の形態について説明したが、本発明は上記の実施形態に限定されるものではなく、種々の変更を加えることができる。
例えば、上記のマイクロ流路チップにおいては、第二流路は、測定部における当該測定部が伸びる方向の全域にわたって形成されている必要はなく、例えば図８（ａ）および図８（ｂ）に示すように、測定部３０における定容積空間３１の部分のみに形成された構成とされていてもよい。このような構成によっても、測定部３０に流入した特定の成分をくさび状空間３５の狭小方向に集中させることができる。また、チップ基体におけるくさび状空間を形成する内壁面（くさび状空間形成面）は、平坦面である必要はなく、図８（ｂ）に示すように、内面形状が階段状に形成されていてもよい。さらにまた、図９に示すように、第二流路２５は、面方向における測定部３０の一側のみに形成された構成、すなわち、第一流路２０における検体流通方向上流側に位置される直線状流路部分２０ａと測定部３０とを連通させる第二流路２５のみが形成された構成とされていてもよい。さらにまた、第二流路は、第一流路を形成するいずれの流路形成面（内壁面）に開口していてもよく、例えば図１０に示すように、第二流路２５は、第一流路２０を形成する側壁面に開口していてもよい。
さらにまた、上記のマイクロ流路チップにおいては、チップ基体の面方向に伸びる測定部の一端部分にくさび状空間が形成された構成とされているが、測定部の空間形状は、特に限定されるものではなく、くさび状空間は、例えば、面方向のいずれの方向に伸びるよう形成されていてもよく、また厚み方向に伸びるよう形成されていてもよい。
さらにまた、チップ基体は、複数の基板が接合されて構成され、第一流路、第二流路および測定部が三次元的に形成された構成とされていてもよい。
【００５３】
以下、本発明のマイクロ流路チップを用いた検体濃度測定装置について説明する。
図１１は、本発明のマイクロ流路チップを用いた検体濃度測定装置の一例における構成を示す説明図である。
この検体濃度測定装置は、例えば、液状の検体である血液から検査対象成分であるビリルビンを含む血漿を分離してビリルビンの濃度を測定するものである。
【００５４】
図１１に示す検査対象測定装置は、図１乃至図５に示す構成のマイクロ流路チップ１０と、このマイクロ流路チップ１０の測定部３０における測定領域３８に対して当該マイクロ流路チップ１０の厚み方向に光を照射する光源４０と、マイクロ流路チップ１０における測定部３０を含む領域の画像を撮像する撮像手段５０と、撮像手段５０によって撮像された画像に係る画像データに基づいて検査対象成分の濃度を算出する機能を有する制御機構６０とを備えてなる。
【００５５】
光源４０とマイクロ流路チップ１０との間の光路上には、透過する光の波長域を制限する光学フィルタ４５が配置されている。光学フィルタ４５とマイクロ流路チップ１０との間には、入射される光を平行化するレンズ４８が配置されている。マイクロ流路チップ１０と撮像手段５０との間には、光源４０から放射された光よりなる光像を拡大して撮像手段５０に投影するレンズ５１が配置されている。また、光源４０は、当該光源４０に電気を供給する電源４１に電気的に接続されている。この電源４１は、制御機構６０に電気的に接続されている。
【００５６】
光源４０としては、検査対象成分の濃度を測定するために必要な波長域を含む光を放射するものが用いられている。この例においては、血漿に含まれるビリルビンの濃度を測定するために必要な４５５ｎｍ近傍の波長域および５７５ｎｍ近傍の波長域を含む光を放射する光源４０が用いられている。
このような光源４０の具体例としては、互いに異なる波長域の光を放射する２種のＬＥＤ素子、例えばピーク発光波長４５０ｎｍのＬＥＤ素子とピーク発光波長５７０ｎｍのＬＥＤ素子とにより構成されたものが挙げられる。
【００５７】
光学フィルタ４５としては、透過する光の波長域を、検査対象成分の濃度を測定するために必要な波長域に制限するバンドパスフィルタが用いられている。この例においては、光学フィルタ４５として、透過する光の波長域を、血漿に含まれるビリルビンの濃度を測定するために必要な４５５ｎｍ近傍の波長域および５７５ｎｍ近傍の波長域に制限するマルチバンドパスフィルタが用いられている。光学フィルタ４５を透過する４５５ｎｍ近傍の波長域および５７５ｎｍ近傍の波長域のバンド幅は、それぞれ半値幅で１０ｎｍ以上１５ｎｍ以下である。
【００５８】
撮像手段５０としては、マイクロ流路チップ１０における測定部３０を含む領域を撮像視野とする撮像素子を具備したものが用いられる。具体的には、撮像手段５０の撮像素子の撮像視野は、マイクロ流路チップ１０の撮像素子と対向する他面における、測定部３０が位置する領域およびその周辺領域である。図示の例では、測定部３０と共に第一流路２０における直線状流路部分２０ａ，２０ｂの一部および複数の第二流路２５の各々を含む領域が撮像素子の撮像視野とされており、この撮像視野を構成する領域の全域に、光源４０からの光が放射される。
撮像手段５０としては、例えばＣＭＯＳ撮像素子を具備したＣＭＯＳカメラが用いられている。このＣＭＯＳカメラのＣＭＯＳ撮像素子の撮像視野、すなわちＣＭＯＳカメラにおいて得られる画像サイズは、６４０×４８０ピクセル（マイクロ流路チップ１０における縦横寸法１０９０×８２０μｍの領域に相当）である。
レンズ５１としては、例えばアクロマートレンズが用いられており、当該レンズ５１による光像の拡大倍率は、例えば５倍である。
【００５９】
制御機構６０は、撮像手段５０の撮像素子によって撮像された画像に係る画像データを画像処理することによって、画像中の測定部３０の位置（画素位置）の輝度を測定して血漿成分の吸光度を算出する機能を有する。また、光源４０に電気を供給する電源４１を制御する機能を有する。
この例においては、撮像手段５０によって撮像された画像を画像処理することにより得られた画像データの青色の輝度値に基づいて波長４５５ｎｍにおける吸光度Ａ455 が算出されると共に、当該画像データの緑色の輝度値に基づいて波長５７５ｎｍにおける吸光度Ａ575 が算出される。ここで、吸光度Ａ455 は、波長４５５ｎｍにおけるビリルビンの吸光度および溶血ヘモグロビンの吸光度の和とみなすことができる。一方、吸光度Ａ575 は、波長５７５ｎｍにおける溶血ヘモグロビンの吸光度とみなすことができる。そして、波長５７５ｎｍにおける溶血ヘモグロビンの吸光度は、波長４５５ｎｍにおける溶血ヘモグロビンの吸光度に近似した値であることから、吸光度Ａ455 から吸光度Ａ575 を減じた値（Ａ455 −Ａ575 ）を、波長４５５ｎｍにおけるビリルビンの吸光度とみなすことができる。そして、吸光度と濃度とが比例関係にあること（ランベルト−ベールの法則）を利用して、予め取得した検量線とＡ455 −Ａ575 の値とから、ビリルビンの濃度が算出される。
【００６０】
このような検体濃度測定装置においては、上述したように、マイクロ流路チップ１０における測定部３０（くさび状空間３５）に、液状の検体（この例では血液）から分離された特定の成分（この例では検査対象成分であるビリルビンを含む血漿）が充填される。
そして、マイクロ流路チップ１０の測定部３０に特定の成分が充填された状態において、光源４０から放射された光が、光学フィルタ４５およびレンズ４８を介して、マイクロ流路チップ１０における測定領域３８に照射される。光学フィルタ４５を透過する光、すなわちマイクロ流路チップ１０における測定領域３８に照射される光の波長域は、当該光学フィルタ４５によって４５５ｎｍ近傍の波長域および５７５ｎｍ近傍の波長域に制限される。その後、マイクロ流路チップ１０における測定領域３８を透過した光による光像が、撮像手段５０によって撮像される。そして、撮像手段５０によって得られた画像データに基づいて検査対象成分であるビリルビンの濃度が演算される。
【００６１】
上記の検体濃度測定装置によれば、マイクロ流路チップ１０において検体から分離される必要量の特定の成分を、くさび状空間３５による毛細管力によって、効率よく測定部３０における測定領域３８に貯留（充填）させることができるので、高い検査効率を得ることができる。また、光源４０からの光が照射されるマイクロ流路チップ１０の測定領域３８は、厚みが一定の大きさとされているため、光路長を一定にすることができて特定の成分の濃度を高い信頼性で測定することができる。
【００６２】
検体濃度測定装置は、上記構成のものに限定されるものではなく、図１２に示すように、例えばピーク発光波長４５０ｎｍの光を放射するＬＥＤ素子を備えた第一の光源４０ａと、例えばピーク発光波長５７０ｎｍの光を放射するＬＥＤ素子を備えた第二の光源４０ｂとが別個に設けられた構成とされていてもよい。この検体濃度測定装置においては、第一の光源４０ａは、マイクロ流路チップ１０における測定部３０に対向するよう配置され、第二の光源４０ｂは、第一の光源４０ａからの光の光路に対して垂直な方向に向いた状態で配置されている。第一の光源４０ａおよび第二の光源４０ｂは、電源４１に電気的に接続されている。第一の光源４０ａからの光の光路と第二の光源４０ｂからの光の光路との交点位置には、第一の光源４０ａからの光を透過すると共に第二の光源４０ｂからの光を反射するダイクロイックミラー４２が、第一の光源４０ａからの光の光路および第二の光源４０ｂからの光の光路の各々に対して４５°に傾斜した状態で配置されている。
【００６３】
第一の光源４０ａとダイクロイックミラー４２との間の光路上には、透過する光の波長域を制限する第一の光学フィルタ４６ａが配置されている。第一の光学フィルタ４６ａとダイクロイックミラー４２との間には、入射される光を平行化するレンズ４９ａが配置されている。第二の光源４０ｂとダイクロイックミラー４２との間の光路上には、透過する光の波長域を制限する第二の光学フィルタ４６ｂが配置されている。第二の光学フィルタ４６ｂとダイクロイックミラー４２との間には、入射される光を平行化するレンズ４９ｂが配置されている。図１２に示す検体濃度測定装置におけるその他の構成は、図１１に示す検体濃度測定装置における構成と同様である。
【００６４】
この検体濃度測定装置においては、マイクロ流路チップ１０の測定部３０に対して、第一の光源４０ａから光を照射する動作および第二の光源４０ｂから光を照射する動作は、同時に行われてもよいが、いずれか一方の動作が行われた後、他方の動作が行われてもよい。
【実施例】
【００６５】
〔マイクロ流路チップの製造例１〕
（１）第一基板および第二基板の製造
ポリプロピレン樹脂（日本ポリプロ（株）社製「ノバック（Ｒ）ＰＰ」）５０質量部と、水添スチレン・イソプレン・ブタジエンブロック共重合物（（株）クラレ社製「ハイブラー７３１１」，ポリスチレンブロックの含有率＝１２質量％）５０質量部とを、加熱混練することにより、特定の樹脂組成物を調製した。得られた特定の樹脂組成物の融点は、１４２℃、荷重たわみ温度は、４３℃、ガラス転移温度は−３５℃であった。
次いで、調製した特定の樹脂組成物を射出成形することにより、表面に第一流路用溝および測定部用凹所が形成された第一基板、並びに表面に第二流路用溝が形成された第二基板を製造した。
得られた第一基板において、第一流路用溝は、検体導入部（２１）から第一排出部（２３）までの全長が５０ｍｍ（図１参照）、第一基板の厚み方向の幅（深さ）が１００μｍ、第一基板の面方向の幅が３００μｍである。
測定部用凹所は、図２乃至図４を参照すると、全長（複数の第二流路が形成される部分の長さ）が１５ｍｍ、くさび状空間（３５）の長さ（Ｌ１）が１ｍｍ、測定領域の長さ（Ｌ２）が０．５ｍｍである。また、定容積空間（３１）を形成する部分における第一基板の厚み方向の寸法（Ｄ）が１００μｍ、開口端面における第一基板の面方向の寸法（Ｗ１）が２００μｍ、定容積形成空間を形成する一対の定容積空間形成面（３２ａ，３２ｂ）が測定部用凹所の底面に対してなす角（γ１，γ２）は、８５°である。また、くさび状空間（３５）の先端傾斜角（α）が４５°、くさび状空間（３５）の開き角（β）が１１．４°、測定領域の長さ方向の一端位置での、開口端面における第一基板の面方向の寸法（Ｗ２）が２０μｍである。
また、得られた第二基板において、第二流路用溝は、長さが０．５ｍｍ、第二基板の厚み方向の幅（深さ）が２μｍ、第二基板の面方向の幅（Ｗ３）が５０μｍであり、第二流路用溝の数は３００である。隣接する第二流路用溝間の間隔は同一の大きさ（等間隔）である。
【００６６】
（２）第一基板および第二基板の親水化処理
白金スパッタを用い、得られた第一基板における第一流路用溝および測定部用凹所の各々の内壁面、並びに第二基板との接合面に対して、所定の条件で成膜した。さらに、スルホン酸チオール水溶液に浸漬し、風乾することによって、第一流路用溝および測定部用凹所の親水化処理を行った。親水化処理が施された表面について、水の接触角を測定したところ、１４°であった。
また、白金スパッタを用い、得られた第二基板における第二流路用溝の内壁面に対して、所定の条件で成膜した。さらに、スルホン酸チオール溶液水溶液に浸漬し、風乾することによって、第一流路用溝および測定部用凹所の親水化処理を行った。親水化処理が施された表面について、水の接触角を測定したところ、８６°であった。
【００６７】
（３）マイクロ流路チップの製造
第二基板の接合面上に、第一基板を位置合わせした状態で重ね合わせて接触させた。そして、第一基板および第二基板を６０℃で加熱することにより、第一基板と第二基板とを自己融着性を利用して接合し、以て、マイクロ流路チップ（以下、「マイクロ流路チップＡ」という。）を製造した。
得られたマイクロ流路チップにおいて、第一流路の上流側端から、当該第一流路の最も上流側において分岐した第二流路との分岐点までの長さは、５ｍｍである。
また、得られたマイクロ流路チップの第二流路を顕微鏡によって観察したところ、変形等の異常は認められなかった。
【００６８】
〔マイクロ流路チップの製造例２〜製造例４〕
第二基板の親水化処理を、白金スパッタの成膜条件を適宜変更したことの他は、マイクロ流路チップの製造例１と同様にしてマイクロ流路チップ（以下、「マイクロ流路チップＢ」〜「マイクロ流路チップＤ」）を製造した。マイクロ流路チップＢにおける第二流路の内壁面についての水の接触角は５１°、マイクロ流路チップＣにおける第二流路の内壁面についての水の接触角は２４°、マイクロ流路チップＤにおける第二流路の内壁面についての水の接触角は１４°である。
【００６９】
〔マイクロ流路チップの比較製造例１〕
長さ方向においてほぼ一定の空間形状を有する測定部用凹所（くさび状空間を有さず、定容積空間のみからなる測定部用凹所）を形成したことの他は、マイクロ流路チップの製造例１において作製したものと同一の構成を有する比較用の第一基板を作製した。この比較用の第一基板における測定部用凹所は、全長（複数の第二流路が形成される部分の長さ）が２０ｍｍ、第一基板の厚み方向の寸法が１００μｍ、開口端面における第一基板の面方向の寸法が２００μｍ、一対の測定部形成面が測定部用凹所の底面に対してなす角は、８５°である。
この比較用の第一基板を用いたことの他は、マイクロ流路チップの製造例１と同様にして、比較用のマイクロ流路チップを作製した。
【００７０】
〈実施例１〉
上記のマイクロ流路チップＡ〜Ｄの各々について、ヒトの血液を導入し、１０分間放置した後、マイクロ流路チップの測定部に充填された液体における溶血ヘモグロビンの吸光度（溶血強度）を測定した。結果を図１３に示す。マイクロ流路チップＡにおいては、溶血は生じていないことが確認された。また、第二流路の内壁面における水の接触角が小さくなるに従って、溶血の程度が大きくなることが確認され、水の接触角が７０°以上、９０°未満であれば、実用上問題のない程度まで、溶血が生じることを防止することができることが確認された。
【００７１】
〈実施例２〉
上記マイクロ流路チップＡおよび比較用のマイクロ流路チップの各々に、水を試験用流体として導入し、経過時間に対する測定部への試験用流体の充填量（貯留長）を調べた。結果を図１４に示す。図１４において、曲線ａ（四角印のプロット）は、マイクロ流路チップＡについての結果であり、曲線ｂ（丸印のプロット）は、比較用のマイクロ流路チップの結果である。ここに、マイクロ流路チップＡにおいて、測定部における試験用流体の貯留長とは、くさび状空間と定容積空間との境界位置からの測定部の伸びる方向における長さをいう。
以上の結果より、本発明に係るマイクロ流路チップＡによれば、検査対象成分を短時間で測定部に充填することができることが確認された。
【符号の説明】
【００７２】
１０    マイクロ流路チップ
１１    チップ基体
１２    第一基板
１３ａ  第一流路用溝
１３ｂ  測定部用凹所
１５    第二基板
１６    第二流路用溝
２０    第一流路
２０ａ  直線状流路部分
２０ｂ  直線状流路部分
２０ｃ  底壁面
２１    検体導入部
２２    検体貯留部
２３    第一排出部
２５    第二流路
２７    第三流路
２８    第二排出部
３０    測定部
３０ａ  上底面
３０ｂ  下底面
３１    定容積空間
３２ａ  定容積空間形成面
３２ｂ  定容積空間形成面
３５    くさび状空間
３６ａ  くさび状空間形成面
３６ｂ  くさび状空間形成面
３８    測定領域
４０    光源
４０ａ  第一の光源
４０ｂ  第二の光源
４１    電源
４２    ダイクロイックミラー
４５    光学フィルタ
４６ａ  第一の光学フィルタ
４６ｂ  第二の光学フィルタ
４８    レンズ
４９ａ  レンズ
４９ｂ  レンズ
５０    撮像手段
５１    レンズ
６０    制御機構
ＢＣ    血球成分
Ｃ    稜線
ＰＬ    血漿成分（特定の成分）
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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