(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造式が［９９ｍＴｃ‐（ＣＮＤＧ）６］＋である９９ｍＴｃ標識イソシアニド含有グルコース誘導体。上記構造式は下記の通りである：
0006770207.tif 000012
当該構造式では、９９ｍＴｃ＋核を中心核とし、ＣＮＤＧにおけるイソシアニドの炭素原子と９９ｍＴｃ（I）が配位結合して六配位の［９９ｍＴｃ‐（ＣＮＤＧ）６］＋錯体を形成し、ｎが２〜５の整数である。
【請求項２】
下記の調製ステップを含む、請求項１に記載の９９ｍＴｃ標識イソシアニド含有グルコース誘導体の調製方法。
ａ：配位子ＣＮＤＧの合成：
化合物（II）の構造式は下記の通りである。
0006770207.tif 000013
適量のグルコサミン塩酸塩を秤量した２５ｍＬの丸底フラスコに、無水メタノールを加えて溶解させ、その後適量のＮａＯＨを加え、室温で撹拌して３０ｍｉｎ反応させる。その後、フラスコを氷浴に置いて、撹拌しながら適量の化合物（II）含有メタノール溶液をゆっくり滴下する。滴下終了後、続いて氷浴で３ｈ反応させ、反応終了後、減圧蒸留して溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィーにより精製を行い、配位子ＣＮＤＧを得る。
具体的な合成経路は下記の通りである：
0006770207.tif 000014
ｂ：［９９ｍＴｃ‐（ＣＮＤＧ）６］＋錯体の調製：
ＣＮＤＧ凍結乾燥キットの調製：ＣＮＤＧ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ、クエン酸ナトリウムを適量の再蒸留水に溶かし、ｐＨを５−６にし、十分に溶かした後１ｍＬずつ清潔なペニシリンバイアルに分注する。１本あたりＣＮＤＧ１．０ｍｇ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ０．０３ｍｇ及び適量のクエン酸ナトリウムが含まれ、それを凍結乾燥しておく。
適量の洗いたてのＮａ９９ｍＴｃＯ４をＣＮＤＧ凍結乾燥キットに加え、均一になるように十分に振盪し、固体が完全に溶けた後、沸騰水浴で２０ｍｉｎ加熱することで前記［９９ｍＴｃ‐（ＣＮＤＧ）６］＋錯体が得られる。
【請求項３】
請求項１に記載の９９ｍＴｃ標識イソシアニド含有グルコース誘導体の核医学イメージング分野での腫瘍イメージング剤の調製における使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は放射性医薬品化学及び臨床核医学の技術分野に属し、具体的には、９９ｍＴｃ標識イソシアニド含有グルコース誘導体及びその調製方法と応用に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、臨床医学分野において、悪性腫瘍は人間の健康や生命を脅かすファーストキラーとなっており、腫瘍の年間罹患率と死亡率は依然として上昇する傾向にある。腫瘍の早期診断、早期治療及び個別化治療は腫瘍の死亡率を低下させる最も有効な対策である。伝統的で非侵襲的な腫瘍検査であるイメージング法、例えばＸ線検査法、ＣＴ、ＭＲＩ等は、主に病的状態における臓器の形態と構造を画像化するものであるが、核医学分子イメージング技術、例えば陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）と単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）は、分子レベルで腫瘍の生理、病理、代謝および機能の変化を反映できるものである。現在、ＰＥＴ／ＣＴ、ＰＥＴ／ＭＲおよびＳＰＥＣＴ／ＣＴ等のイメージング技術の有機的融合が、腫瘍の早期診断と個別化治療においてますます重要な作用を奏するのに伴い、核医学分子イメージング技術の臨床診断・治療での幅広い応用と迅速な発展の需要に適応するため、当該技術が依存する腫瘍の放射性分子プローブに関する研究が、極めて緊急且つ重要になっている。
【０００３】
現在、臨床で最も応用されている腫瘍イメージング剤は１８Ｆ‐フルオロデオキシグルコース（１８Ｆ‐ＦＤＧ）であり、そのイメージング効果は良いが、高価な診断料がその幅広い応用をある程度抑制しており、特に経済発展が途上にある国と地域での応用がまだ普及されていない。９９ｍＴｃは、適宜な半減期（Ｔ１／２＝６．０２ｈ）、１４０ｋｅｖのγ単一光子放射等のメリットを有し、さらに、９９ＭＯ‐９９ｍＴｃジェネレータの普及応用により、９９ｍＴｃ放射性医薬品の調製が簡単になり、キット化が可能となって、値段が安くて取得しやすく、品質が信頼できるため、臨床応用の価値がある新たな９９ｍＴｃ標識グルコース系腫瘍イメージング剤の開発は重要な現実的な意味を持っている。イソシアニドは一般式がＲＮＣである有機化合物であり、そのうち、窒素原子が一部の正電荷を帯び、炭素原子が一部の負電荷を帯びている。研究により、イソシアニドにおける炭素原子が９９ｍＴｃ（Ｉ）と配位結合して、正一価の［９９ｍＴｃ‐（ＣＮＲ）６］＋錯体を形成できることが明らかとなっており、そのうち、９９ｍＴｃ‐メトキシイソブチルイソニトリル（９９ｍＴｃ‐ＭＩＢＩ）は心筋灌流イメージング剤として臨床で広く応用されており、臨床において当該イメージング剤がある程度の腫瘍親和作用（ｏｎｃｏｔｒｏｐｉｃ  ｅｆｆｅｃｔ）をも有することが分かった。本発明の腫瘍分子プローブにおいて、イソシアニド分子は９９ｍＴｃと糖分子とを繋げるもので、双官能リンカー（ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｌｉｎｋｅｒ）として役割を果たし、腫瘍親和性を有するグルコースの代謝機能と９９ｍＴｃトレーサ機能とを一体化させるものとなっている。以上の背景に基づき、性能が優れる９９ｍＴｃ標識グルコース系腫瘍分子プローブを研究・開発し、グルコサミンをイソシアニド含有グルコース誘導体（単に「ＣＮＤＧ」と称する。）に変換させ、そして、イソシアニド配位子における炭素原子を用いて９９ｍＴｃと配位結合することにより、安定な９９ｍＴｃ標識イソシアニド含有グルコース誘導体を得て腫瘍イメージング剤として使用することは、重要な科学的な意味と幅広い応用前景を持っており、本分野が直面する重要な課題でもある。
【発明の概要】
【０００４】
本発明は、安定性が良好で、調製が簡単である、腫瘍イメージング剤に用いられる９９ｍＴｃ標識イソシアニド含有グルコース誘導体を提供し、それと同時にその調製方法を提供することを目的とする。
【０００５】
上記の目的を達成するために、本発明は以下の技術案を採用している：
構造式が［９９ｍＴｃ‐（ＣＮＤＧ）６］＋である９９ｍＴｃ標識イソシアニド含有グルコース誘導体。その構造式は下記の通りである：
0006770207.tif 000002
【０００６】
当該構造式では、９９ｍＴｃ＋核を中心核とし、ＣＮＤＧにおけるイソシアニドの炭素原子が９９ｍＴｃ（Ｉ）に配位結合して六配位の［９９ｍＴｃ‐（ＣＮＤＧ）６］＋錯体を形成し、ｎが２〜５の整数である。
【０００７】
以下の調製ステップを含む、９９ｍＴｃ標識イソシアニド含有グルコース誘導体の調製方法。
ａ: 配位子ＣＮＤＧの合成：
化合物（II）の構造式は下記の通りである：
0006770207.tif 000003
【０００８】
適量のグルコサミン塩酸塩を秤量した２５ｍＬの丸底フラスコに、無水メタノールを加えて溶解させ、その後適量のＮａＯＨを加え、室温で撹拌して３０ｍｉｎ反応させる。その後、フラスコを氷浴に置いて、撹拌しながら適量の化合物（II）含有メタノール溶液をゆっくり滴下する。滴下終了後、続いて氷浴で３ｈ反応させ、反応終了後、減圧蒸留して溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィーにより精製を行い（塩化メチレン‐メタノール）、配位子ＣＮＤＧを得る。
【０００９】
具体的な合成経路は下記の通りである：
0006770207.tif 000004
ｂ: ［９９ｍＴｃ‐（ＣＮＤＧ）６］＋錯体の調製：
【００１０】
ＣＮＤＧ凍結乾燥キットの調製：ＣＮＤＧ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ、クエン酸ナトリウム等を適量の再蒸留水に溶かし、ｐＨを５〜６にし、十分に溶かした後１ｍＬずつ清潔なペニシリンバイアルに分注する。１本あたりＣＮＤＧ１．０ｍｇ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ０．０３ｍｇ及び適量のクエン酸ナトリウムが含まれ、それを凍結乾燥しておく。
【００１１】
適量の洗いたてのＮａ９９ｍＴｃＯ４をＣＮＤＧ凍結乾燥キットに加え、均一になるように十分に振盪し、固体が完全に溶けた後、沸騰水浴で２０ｍｉｎ加熱することで前記［９９ｍＴｃ‐（ＣＮＤＧ）６］＋錯体が得られる。
【００１２】
具体的な調製ステップは下記の通りである：
１．ＣＮ２ＤＧの合成
グルコサミン塩酸塩９１ｍｇ（０．４２３ｍｍｏｌ）を秤量した２５ｍＬの丸底フラスコに、無水メタノール３ｍＬを加えて溶解させ、その後ＮａＯＨ１７ｍｇ（０．４２３ｍｍｏｌ）を加え、室温で撹拌して３０ｍｉｎ反応させる。その後、フラスコを氷浴に置いて、ゆっくり撹拌しながら１１４ｍｇ（０．４６６ｍｍｏｌ）II（ｎ＝２）を溶解したメタノール溶液１ｍＬを一滴ずつ滴下する。滴下終了後、続いて氷浴で３ｈ反応させ、反応終了後、減圧蒸留してメタノール溶媒を除去し、残った固体をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝５：１）に付して分離精製を行い、乾燥した後ＣＮ２ＤＧを得る。
【００１３】
２．ＣＮ３ＤＧの合成
グルコサミン塩酸塩１１７ｍｇ（０．５４４ｍｍｏｌ）を秤量した２５ｍＬの丸底フラスコに、無水メタノール３ｍＬを加えて溶解させ、その後ＮａＯＨ２２ｍｇ（０．５４４ｍｍｏｌ）を加え、室温で撹拌して３０ｍｉｎ反応させる。その後、フラスコを氷浴に置いて、ゆっくり撹拌しながら１５６ｍｇ（０．５９８ｍｍｏｌ）II（ｎ＝３）を溶解したメタノール溶液１ｍＬを一滴ずつ滴下する。滴下終了後、続いて氷浴で３ｈ反応させ、反応終了後、減圧蒸留してメタノール溶媒を除去し、残った固体をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝ ５：１）に付して分離精製を行い、乾燥した後ＣＮ３ＤＧを得る。
【００１４】
３．ＣＮ４ＤＧの合成
グルコサミン塩酸塩１２９ｍｇ（０．６００ｍｍｏｌ）を秤量した２５ｍＬの丸底フラスコに、無水メタノール３ｍＬを加えて溶解させ、その後ＮａＯＨ２４ｍｇ（０．６００ｍｍｏｌ）を加え、室温で撹拌して３０ｍｉｎ反応させる。その後、フラスコを氷浴に置いて、ゆっくり撹拌しながら１８２ｍｇ（０．６６０ｍｍｏｌ）II（ｎ＝４）を溶解したメタノール溶液１ｍＬを一滴ずつ滴下する。滴下終了後、続いて氷浴で３ｈ反応させ、反応終了後、減圧蒸留してメタノール溶媒を除去し、残った固体をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝５：１）に付して分離精製を行い、乾燥した後ＣＮ４ＤＧを得る。
【００１５】
４．ＣＮ５ＤＧの合成
グルコサミン塩酸塩１４７ｍｇ（０．６８４ｍｍｏｌ）を秤量した２５ｍＬの丸底フラスコに、無水メタノール３ｍＬを加えて溶解させ、その後ＮａＯＨ２７ｍｇ（０．６８４ｍｍｏｌ）を加え、室温で撹拌して３０ｍｉｎ反応させる。その後、フラスコを氷浴に置いて、ゆっくり撹拌しながら２１７ｍｇ（０．７５２ｍｍｏｌ）II（ｎ＝５）を溶解したメタノール溶液１ｍＬを一滴ずつ滴下する。滴下終了後、続いて氷浴で３ｈ反応させ、反応終了後、減圧蒸留してメタノール溶媒を除去し、残った固体をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝５：１）に付して分離精製を行い、乾燥した後ＣＮ５ＤＧを得る。
【００１６】
５．［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ２ＤＧ）６］＋、［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ３ＤＧ）６］＋、［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ４ＤＧ）６］＋および［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ５ＤＧ）６］＋の合成
ＣＮ２ＤＧ凍結乾燥キットの調製：ＣＮ２ＤＧ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ、クエン酸ナトリウム等を適量の再蒸留水に溶かし、ｐＨを５〜６にし、十分に溶かした後１ｍＬずつ清潔なペニシリンバイアルに分注する。１本あたりＣＮ２ＤＧ１．０ｍｇ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ０．０３ｍｇ及び適量のクエン酸ナトリウムが含まれ、それを凍結乾燥しておく。
【００１７】
洗いたてのＮａ９９ｍＴｃＯ４１‐５ｍＬをＣＮ２ＤＧ凍結乾燥キットに加え、均一になるように十分に振盪し、固体が完全に溶けた後、沸騰水浴で２０ｍｉｎ加熱することで前記［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ２ＤＧ）６］＋錯体が得られる。
【００１８】
ＣＮ３ＤＧ凍結乾燥キットの調製：ＣＮ３ＤＧ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ、クエン酸ナトリウム等を適量の再蒸留水に溶かし、ｐＨを５〜６にし、十分に溶かした後１ｍＬずつ清潔なペニシリンバイアルに分注する。１本あたりＣＮ３ＤＧ１．０ｍｇ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ０．０３ｍｇ及び適量のクエン酸ナトリウムが含まれ、それを凍結乾燥しておく。
【００１９】
洗いたてのＮａ９９ｍＴｃＯ４１‐５ｍＬをＣＮ３ＤＧ凍結乾燥キットに加え、均一になるように十分に振盪し、固体が完全に溶けた後、沸騰水浴で２０ｍｉｎ加熱することで前記［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ３ＤＧ）６］＋錯体が得られる。
【００２０】
ＣＮ４ＤＧ凍結乾燥キットの調製：ＣＮ４ＤＧ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ、クエン酸ナトリウム等を適量の再蒸留水に溶かし、ｐＨを５〜６にし、十分に溶かした後１ｍＬずつ清潔なペニシリンバイアルに分注する。１本あたりＣＮ４ＤＧ１．０ｍｇ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ０．０３ｍｇ及び適量のクエン酸ナトリウムが含まれ、それを凍結乾燥しておく。
【００２１】
洗いたてのＮａ９９ｍＴｃＯ４１‐５ｍＬをＣＮ４ＤＧ凍結乾燥キットに加え、均一になるように十分に振盪し、固体が完全に溶けた後、沸騰水浴で２０ｍｉｎ加熱することで前記［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ４ＤＧ）６］＋錯体が得られる。
【００２２】
ＣＮ５ＤＧ凍結乾燥キットの調製：ＣＮ５ＤＧ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ、クエン酸ナトリウム等を適量の再蒸留水に溶かし、ｐＨを５〜６にし、十分に溶かした後１ｍＬずつ清潔なペニシリンバイアルに分注する。１本あたりＣＮ５ＤＧ１．０ｍｇ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ０．０３ｍｇ及び適量のクエン酸ナトリウムが含まれ、それを凍結乾燥しておく。
【００２３】
洗いたてのＮａ９９ｍＴｃＯ４１‐５ｍＬをＣＮ５ＤＧ凍結乾燥キットに加え、均一になるように十分に振盪し、固体が完全に溶けた後、沸騰水浴で２０ｍｉｎ加熱することで前記［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ５ＤＧ）６］＋錯体が得られる。
【００２４】
本発明に記載の化学合成試薬の原料はいずれも市販品であり、広範囲の供給源がある。上述した方法で調製した［９９ｍＴｃ‐（ＣＮＤＧ）６］＋錯体は、放射化学的純度が９０％を超えており、親水性物質であって、体外安定性が良好である。それの担がんマウスの腫瘍部位での摂取が高く、滞留も良好であり、腫瘍／筋肉と腫瘍／血液の比率が良く、肝臓、腎臓、肺等の非標的臓器における摂取値が低く、性能が優れる腫瘍イメージングに使用可能な新たな９９ｍＴｃ標識イソシアニド含有グルコース誘導体であり、発明の目的を達成できる。
【００２５】
本発明の［９９ｍＴｃ‐（ＣＮＤＧ）６］＋の性能の測定：
１．［９９ｍＴｃ‐（ＣＮＤＧ）６］＋錯体のクロマトグラフィー解析
薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を採用して標識物の放射化学的純度を測定した。用いられる展開システムがメタノール／ポリアミドフィルムシートであり、このようなシステムにおいて、各放射性成分のＲｆ値を以下の表に示した。
0006770207.tif 000005
上述したクロマトグラフィー解析により測定された標識物の放射化学的純度はいずれも９０％を超えていた。
【００２６】
２．脂質‐水分配係数（ｌｉｐｉｄ−ｗａｔｅｒ  ｐａｒｔｉｔｉｏｎ  ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ）の測定
生理食塩水で希釈した標識溶液１００μＬ（５０μＣｉ）を２ｍＬの遠心チューブに入れ、その後遠心チューブにオクタノール８００μＬとＰＢＳ７００μＬを加え、蓋をして３ｍｉｎ（２５００ｒ／ｍｉｎ）遠心させ、溶液が二層に分かれるまで静置する。その後、遠心機で３ｍｉｎ（３０００ｒ／ｍｉｎ）遠心させ、上層の有機相１００μＬ及び下層の水相１００μＬをそれぞれ三部採集し、γ‐ｃｏｕｎｔｅｒで有機相と水相の放射線量（ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ  ｃｏｕｎｔｓ）を測定し、脂質‐水分配係数Ｐ＝有機相放射線量／水相放射線量、一般的にＬｏｇＰを脂質‐水分配係数として表示する。測定により、［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ２ＤＧ）６］＋、［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ３ＤＧ）６］＋、［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ４ＤＧ）６］＋および［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ５ＤＧ）６］＋のＬｏｇＰ値がぞれぞれ‐４．２６±０．１２、‐４．０１±０．１７、‐３．８４±０．０６、‐３．５７±０．３５であり、標識物がいずれも水溶性物質であって、ｎ値が大きくになるにつれ、標識物の親水性が低下することが証明された。
【００２７】
３．安定性の測定
標識物をそれぞれ室温と３７℃で、マウスの血清において異なる時間（１、２、３、４時間）放置した後、その放射化学的純度を測定した。実験結果により、各標識物を室温と３７℃で、マウスの血清において４時間放置した後、放射化学的純度がいずれも９０％を超えていることが明らかとなり、これは良好な体外安定性を有することを表している。
【００２８】
４． 担がんマウスにおける生体内分布（ｂｉｏ−ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ）の測定
標識溶液（０．１ｍＬ、７４ＫＢｑ）を尾静脈によりマウスの体内に注入し、注射時間を記録した後、異なる時相（３０ｍｉｎ、６０ｍｉｎ、１２０ｍｉｎ）でマウスを頸椎脱臼により殺し（時相ごとにマウス５匹）、解剖して心臓、肝臓、肺、腎臓、脾臓、胃、筋肉、血液、腫瘍等の関心のある器官を取り出し、γ‐ｃｏｕｎｔｅｒで各臓器の放射線量をそれぞれ測定し、各臓器の質量換算により各臓器の摂取値（％ＩＤ／ｇを単位とする）を算出し、各標識物の担がんマウスにおける生体内分布の結果を表１‐表４に示した。
【００２９】
0006770207.tif 000006
【００３０】
0006770207.tif 000007
【００３１】
0006770207.tif 000008
【００３２】
0006770207.tif 000009
【００３３】
［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ２ＤＧ）６］＋、［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ３ＤＧ）６］＋、［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ４ＤＧ）６］＋および［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ５ＤＧ）６］＋と、すでに第III相臨床試験に入った９９ｍＴｃ‐ＥＣＤＧ（Ｄａｖｉｄ Ｊ．ｅｔ ａｌ Ｉｍａｇｉｎｇ  ｗｉｔｈ ９９ｍＴｃ‐ＥＣＤＧ Ｔａｒｇｅｔｅｄ ａｔ ｔｈｅ Ｍｕｌｔｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｇｌｕｃｏｓｅ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ Ｓｙｓｔｅｍ：Ｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙ Ｓｔｕｄｙ ｗｉｔｈ Ｒｏｄｅｎｔｓ ［Ｊ］．Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ，２００３，２２６（２）：４６５−４７３）との担がんマウスにおける生体内分布のデータを比較し、その結果を表５に示した。
【００３４】
表５．注射０．５ｈ後の［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ２ＤＧ）６］＋、［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ３ＤＧ）６］＋、［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ４ＤＧ）６］＋および［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ５ＤＧ）６］＋と、９９ｍＴｃ‐ＥＣＤＧとの担がんマウスにおける生体内分布のデータの比較（％ＩＤ／ｇ）
0006770207.tif 000010
【００３５】
以上の結果により、［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ２ＤＧ）６］＋、［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ３ＤＧ）６］＋、［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ４ＤＧ）６］＋および［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ５ＤＧ）６］＋は、腫瘍における摂取及び腫瘍／血液、腫瘍／肝臓の比率がいずれも９９ｍＴｃ−ＥＣＤＧより優れていて、肝臓、腎臓等の臓器における摂取がいずれも９９ｍＴｃ−ＥＣＤＧより低く、性能が優れる新たな腫瘍イメージング剤として広く応用できることが明らかとなっている。
【００３６】
５．ＳＰＥＣＴ撮影による測定
調製した［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ３ＤＧ）６］＋或いは［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ５ＤＧ）６］＋（０．２ｍＬ、７００μＣｉ）を尾静脈により担がんマウスの体内に注入し、ＳＰＥＣＴ撮影を１ｈ行った。ＳＰＥＣＴ撮影の結果は、両者とも腫瘍部位で明らかに集まるとともに、腎臓においても比較的に高い濃度で集まっているが、ほかの器官における摂取が低いことを示し、それらが性能の優れる腫瘍イメージング剤となる可能性があることを表している。
【発明を実施するための形態】
【００３７】
以下、実施例により、本発明について詳細に説明する。
構造式が［９９ｍＴｃ‐（ＣＮＤＧ）６］＋である９９ｍＴｃ標識イソシアニド含有グルコース誘導体。その調製ステップは下記の通りである：
ａ：配位子ＣＮＤＧの合成：
適量のグルコサミン塩酸塩を秤量した２５ｍＬの丸底フラスコに、無水メタノールを加えて溶解させ、その後適量のＮａＯＨを加え、室温で撹拌して３０ｍｉｎ反応させた。その後、フラスコを氷浴に置いて、撹拌しながら適量の化合物（II）含有メタノール溶液をゆっくり滴下した。滴下終了後、続いて氷浴で３ｈ反応させ、反応終了後、減圧蒸留して溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィーにより精製を行い（塩化メチレン‐メタノール）、配位子ＣＮＤＧを得た。
【００３８】
具体的な合成経路は以下の通りである：
0006770207.tif 000011
ｂ：［９９ｍＴｃ‐（ＣＮＤＧ）６］＋錯体の調製、具体的な調製ステップは下記の通りである：
１．ＣＮ２ＤＧの合成
グルコサミン塩酸塩９１ｍｇ（０．４２３ｍｍｏｌ）を秤量した２５ｍＬの丸底フラスコ内に、無水メタノール３ｍＬを加えて溶解させ、その後ＮａＯＨ１７ｍｇ（０．４２３ｍｍｏｌ）を加え、室温で撹拌して３０ｍｉｎ反応させた。その後、フラスコを氷浴に置いて、ゆっくり撹拌しながら１１４ｍｇ（０．４６６ｍｍｏｌ）II（ｎ＝２）を溶解したメタノール溶液１ｍＬを一滴ずつ滴下した。滴下終了後、続いて氷浴で３ｈ反応させ、反応終了後、減圧蒸留してメタノール溶媒を除去し、残った固体をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝５：１）に付して分離精製を行い、乾燥した後ＣＮ２ＤＧ生成物８３ｍｇを得、生成率が７５％であった。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ（ｐｐｍ）３．６５−３．８９（ｍ，７Ｈ），３．３４‐３．４４（ｍ，２Ｈ），２．６５（ｔ，２Ｈ）。ＨＲＭＳ Ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ，Ｃ１０Ｈ１６Ｎ２Ｏ６Ｎａ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ２８３．０９１１，ｆｏｕｎｄ ２８３．０９０６。ＩＲ（ＫＢｒ）／ｃｍ-１：３３０３．２４（−ＯＨ），２９３３．８５，２１４９．７６（−ＮＣ），１６４７．２８（−Ｃ＝Ｏ），１５６０．４８，１３０３．０３，５８６．３９。
【００３９】
２． ＣＮ３ＤＧの合成
グルコサミン塩酸塩１１７ｍｇ（０．５４４ｍｍｏｌ）を秤量した２５ｍＬの丸底フラスコに、無水メタノール３ ｍＬを加えて溶解させ、その後ＮａＯＨ２２ｍｇ（０．５４４ｍｍｏｌ）を加え、室温で撹拌して３０ｍｉｎ反応させた。その後、フラスコを氷浴に置いて、ゆっくり撹拌しながら１５６ｍｇ（０．５９８ｍｍｏｌ）II（ｎ＝３）を溶解したメタノール溶液１ｍＬを一滴ずつ滴下した。滴下終了後、続いて氷浴で３ｈ反応させ、反応終了後、減圧蒸留してメタノール溶媒を除去し、残った固体をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝５：１）に付して分離精製を行い、乾燥した後ＣＮ３ＤＧ生成物８５ｍｇを得、生成率が５７％であった。１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ（ｐｐｍ）３．６５−３．８５（ｍ，５Ｈ），３．４２−３．４９（ｍ，４Ｈ），２．３７−２．４２（ｍ，２Ｈ），２．１９（ｔ，２Ｈ）。ＨＲＭＳ Ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ１１Ｈ１８Ｎ２Ｏ６Ｎａ［Ｍ＋Ｎａ］＋，２９７．１０５７，ｆｏｕｎｄ，２９７．１０５２。ＩＲ（ＫＢｒ）／ｃｍ-１：３２９９．３８（−ＯＨ），２９３２．８９，２１４９．７６（−ＮＣ），１６４７．２８（−Ｃ＝Ｏ），１５５８．５５，１３０３．０３，５８８．３１。
【００４０】
３．ＣＮ４ＤＧの合成
グルコサミン塩酸塩１２９ｍｇ（０．６００ｍｍｏｌ）を秤量した２５ｍＬの丸底フラスコに、無水メタノール３ｍＬを加えて溶解させ、その後ＮａＯＨ２４ｍｇ（０．６００ｍｍｏｌ）を加え、室温で撹拌して３０ｍｉｎ反応させた。その後、フラスコを氷浴に置いて、ゆっくり撹拌しながら１８２ｍｇ（０．６６０ｍｍｏｌ）II（ｎ＝４）を溶解したメタノール溶液１ｍＬを一滴ずつ滴下した。滴下終了後、続いて氷浴で３ｈ反応させ、反応終了後、減圧蒸留してメタノール溶媒を除去し、残った固体をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝５：１）に付して分離精製を行い、乾燥した後ＣＮ４ＤＧ生成物１０８ｍｇを得、生成率が６３％であった。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ（ｐｐｍ）３．６５−３．８９（ｍ，５Ｈ），３．３８−３．４４（ｍ，４Ｈ），２．２８（ｔ，２Ｈ），１．６０−１．７５（ｍ，４Ｈ）。ＨＲＭＳ Ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ１２Ｈ２１Ｎ２Ｏ６［Ｍ＋Ｈ］＋，２８９．１３９４，ｆｏｕｎｄ ２８９．１３９６。ＩＲ（ＫＢｒ）／ｃｍ-１：３２９５．５２（−ＯＨ），２９４３．５０，２１５０．７２（−ＮＣ），１６４５．３５（−Ｃ＝Ｏ），１５４２．１５，１０９３．６９，１０３３．８９，５９９．８９。
【００４１】
４． ＣＮ５ＤＧの合成
グルコサミン塩酸塩１４７ｍｇ（０．６８４ｍｍｏｌ）を秤量した２５ｍＬの丸底フラスコに、無水メタノール３ｍＬを加えて溶解させ、その後ＮａＯＨ２７ｍｇ（０．６８４ｍｍｏｌ）を加え、室温で撹拌して３０ｍｉｎ反応させた。その後、フラスコを氷浴に置いて、ゆっくり撹拌しながら２１７ｍｇ（０．７５２ｍｍｏｌ）II（ｎ＝５）を溶解したメタノール溶液１ｍＬを一滴ずつ滴下した。滴下終了後、続いて氷浴で３ｈ反応させ、反応終了後、減圧蒸留してメタノール溶媒を除去し、残った固体をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝５：１）に付して分離精製を行い、乾燥した後ＣＮ５ＤＧ生成物１６１ｍｇを得、生成率が７８％であった。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ（ｐｐｍ）３．７４−３．８２（ｍ，３Ｈ），３．６３−３．７０（ｍ，２Ｈ），３．３４−３．４０（ｍ，４Ｈ），２．２４（ｑ，２Ｈ），１．５３−１．５９（ｍ，４Ｈ），１．３３−１．３８（ｍ，２Ｈ）。ＨＲＭＳ Ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ１３Ｈ２２Ｎ２Ｏ６Ｎａ［Ｍ＋Ｎａ］＋，３２５．１３７４，ｆｏｕｎｄ ３２５．１３７０。ＩＲ（ＫＢｒ）／ｃｍ-１：３２９４．５６（−ＯＨ），２９４１．５７，２１４８．７９（−ＮＣ），１６４５．３５（−Ｃ＝Ｏ），１５３８．３０，１０９３．６９，１０３２．９３， ５９０．８５。
【００４２】
５．［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ２ＤＧ）６］＋、［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ３ＤＧ）６］＋、［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ４ＤＧ）６］＋および［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ５ＤＧ）６］＋の合成
ＣＮ２ＤＧ凍結乾燥キットの調製：ＣＮ２ＤＧ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ、クエン酸ナトリウム等を適量の再蒸留水に溶かし、ｐＨを５〜６にし、十分に溶かした後１ｍＬずつ清潔なペニシリンバイアルに分注した。１本あたりＣＮ２ＤＧ１．０ｍｇ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ０．０３ｍｇ及び適量のクエン酸ナトリウムが含まれ、それを凍結乾燥しておいた。
【００４３】
洗いたてのＮａ９９ｍＴｃＯ４１−５ｍＬをＣＮ２ＤＧ凍結乾燥キットに加え、均一になるように十分に振盪し、固体が完全に溶けた後、沸騰水浴で２０ｍｉｎ加熱することで前記［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ２ＤＧ）６］＋錯体が得られた。
【００４４】
ＣＮ３ＤＧ凍結乾燥キットの調製：ＣＮ３ＤＧ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ、クエン酸ナトリウム等を適量の再蒸留水に溶かし、ｐＨを５〜６にし、十分に溶かした後１ｍＬずつ清潔なペニシリンバイアルに分注した。１本あたりＣＮ３ＤＧ１．０ｍｇ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ０．０３ｍｇ及び適量のクエン酸ナトリウムが含まれ、それを凍結乾燥しておいた。
【００４５】
洗いたてのＮａ９９ｍＴｃＯ４１−５ｍＬをＣＮ３ＤＧ凍結乾燥キットに加え、均一になるように十分に振盪し、固体が完全に溶けた後、沸騰水浴で２０ｍｉｎ加熱することで前記［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ３ＤＧ）６］＋錯体が得られた。
【００４６】
ＣＮ４ＤＧ凍結乾燥キットの調製：ＣＮ４ＤＧ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ、クエン酸ナトリウム等を適量の再蒸留水に溶かし、ｐＨを５〜６にし、十分に溶かした後１ｍＬずつ清潔なペニシリンバイアルに分注した。１本あたりＣＮ４ＤＧ１．０ｍｇ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ０．０３ｍｇ及び適量のクエン酸ナトリウムが含まれ、それを凍結乾燥しておいた。
【００４７】
洗いたてのＮａ９９ｍＴｃＯ４１−５ｍＬをＣＮ４ＤＧ凍結乾燥キットに加え、均一になるように十分に振盪し、固体が完全に溶けた後、沸騰水浴で２０ｍｉｎ加熱することで前記［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ４ＤＧ）６］＋錯体が得られた。
【００４８】
ＣＮ５ＤＧ凍結乾燥キットの調製：ＣＮ５ＤＧ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ、クエン酸ナトリウム等を適量の再蒸留水に溶かし、ｐＨを５〜６にし、十分に溶かした後１ｍＬずつ清潔なペニシリンバイアルに分注した。１本あたりＣＮ５ＤＧ１．０ｍｇ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ０．０３ｍｇ及び適量のクエン酸ナトリウムが含まれ、それを凍結乾燥しておいた。
【００４９】
洗いたてのＮａ９９ｍＴｃＯ４１−５ｍＬをＣＮ５ＤＧ凍結乾燥キットに加え、均一になるように十分に振盪し、固体が完全に溶けた後、沸騰水浴で２０ｍｉｎ加熱することで前記［９９ｍＴｃ‐（ＣＮ５ＤＧ）６］＋錯体が得られた。
【００５０】
上述した前記９９ｍＴｃ標識イソシアニド含有グルコース誘導体の腫瘍イメージング剤としての核医学分野における応用。
【００５１】
以上説明した実施例は、本発明を説明するために記載されたものであって、本発明の範囲を限定するために記載されたものではない。
【産業上の利用可能性】
【００５２】
本発明は構造式が［９９ｍＴｃ‐（ＣＮＤＧ）６］＋である９９ｍＴｃ標識イソシアニド含有グルコース誘導体及びその調製方法と応用を提供する。当該誘導体は９９ｍＴｃ＋を中心核とし、ＣＮＤＧにおけるイソシアニド炭素原子は９９ｍＴｃ（I）と配位結合して六配位の［９９ｍＴｃ‐（ＣＮＤＧ）６］＋錯体を形成する。本発明が提供する誘導体は、安定性が良好で、調製が簡単であり、腫瘍部位での摂取が比較的に高くて滞留も良好であり、腫瘍／非標的器官の比率が高いものであって、性能が優れる腫瘍イメージングに使用可能な新たな９９ｍＴｃ標識イソシアニド含有グルコース誘導体であり、広く応用されやすく、良い経済的価値と応用の見通しを有する。