(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
被検体から核酸を分離精製するための液体が収容され、前記液体が分注ピペットチップにて分注される試薬カートリッジにおいて、
本体と、
前記本体上面に開口し前記液体を収容するウェルと、
前記本体上面に開口した開口に貼付された封止フィルムと、
前記本体上面に開口した開口に貼付された揮発防止フィルムを有し前記分注ピペットチップの先端外面に付着した余剰液を除去する余剰液除去部と、
を有し、
前記封止フィルムは、前記余剰液除去部に対して平面視して重ならないように設けられ、
前記余剰液除去部において、
前記揮発防止フィルムには、前記分注ピペットチップを挿入することにより前記分注ピペットチップの外面に接触するフィルム開口部が形成可能とされ、
前記揮発防止フィルムは積層フィルムである、
ことを特徴とする試薬カートリッジ。
【請求項２】
前記揮発防止フィルムは、シワが目視できない程度に張られた状態で貼付されることを特徴とする請求項１記載の試薬カートリッジ。
【請求項３】
前記余剰液除去部において、前記フィルム開口部が、前記分注ピペットチップ先端外径と同径またはそれより小さい径寸法に設定されることを特徴とする請求項１又は請求項２記載の試薬カートリッジ。
【請求項４】
前記余剰液除去部において、前記揮発防止フィルムが前記本体上面の開口の全周に貼付されることを特徴とする請求項１から３のいずれか記載の試薬カートリッジ。
【請求項５】
前記余剰液除去部において、前記本体上面の開口が円形とされることを特徴とする請求項４記載の試薬カートリッジ。
【請求項６】
前記液体がオイルとされて前記ウェルに収容されることを特徴とする請求項１から５のいずれか記載の試薬カートリッジ。
【請求項７】
前記余剰液除去部において、前記揮発防止フィルムが親油性を有することを特徴とする請求項６記載の試薬カートリッジ。
【請求項８】
前記試薬カートリッジは、
前記被検体を収容する被検体収容部と、
オイルを収容する液体収容部と、
前記分離精製において発生する廃液を収容する廃液収容部と、
前記被検体の前記核酸を精製する抽出フィルターカートリッジと、
を有することを特徴とする請求項１から７のいずれか記載の試薬カートリッジ。
【請求項９】
請求項１から８のいずれか記載の試薬カートリッジと、
前記分注ピペットチップを複数収容するための分注ピペットチップ収容体と、
を備えることを特徴とする核酸精製キット。
【請求項１０】
前記揮発防止フィルムに前記フィルム開口部を形成するフィルム開口部形成手段を備えることを特徴とする請求項９記載の核酸精製キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、被検体から核酸を分離精製するための試薬カートリッジ及び核酸精製キットに関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年のライフサイエンス分野において用いられている遺伝子解析操作において、患者から採取した生体試料などの被検体から核酸を抽出し、一塩基多型のような遺伝子変異の検出を行い、その結果から特定の医薬品に対する感受性を予測することで、テーラーメイド医療の実現を目指す試みが多く見られる。
【０００３】
そのような被検体から核酸を抽出する工程では、抽出処理に必要な試薬類を収容した試薬カートリッジ及び核酸精製キットなどが用いられており、その中に収容された試薬を分注ピペットチップなどで吸引・吐出を繰り返すことで、核酸抽出処理が進められる。
【０００４】
上記のような、試薬カートリッジ及び核酸精製キットに収容された試薬を分注ピペットチップなどで吸引する際に、分注ピペットチップ先端外周面に余剰な試薬が付着することがある。
【０００５】
この分注ピペットチップ先端外周面に付着した余剰な試薬により、分注ピペットチップを用いて液体を計量する精度が低下したり、分注ピペットチップの移動中に余剰な試薬が落下し、汚染（コンタミネーション）につながったりする危険性がある。
【０００６】
このような課題に対して、分注ピペットチップ先端外面に付着した液体を除去するため、特許文献１のように試薬カートリッジ及び核酸精製キットの所定箇所に、拭い部を有するものが考えられている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２０１１−７２２７６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかしながら、特許文献１に記載の拭い部は、親油性を有する拭いフィルターとこれを支持する円筒状の支持部２種の計３点の部材で構成されているため、各部材のコストや、試薬カートリッジ及び核酸精製キット製造時の上記拭い部の組み付け工程に時間が割かれてしまう点などが課題として挙げられる。
【０００９】
さらに、特許文献１に記載の拭い部材は、弾性を有する多孔性材料によって形成されているため、拭い動作によって拭い部材である多孔性材料の破片が発生し、この多孔性材料の破片が分注ピペットチップ先端に付着してしまい、オイル、試薬へのコンタミネーションの原因になる可能性があった。
【００１０】
本発明は、上記の事情に鑑みてなされたもので、試薬カートリッジ及び核酸精製キットに収容された試薬を、分注ピペットチップにて吸引後、分注ピペットチップ先端外周面に付着した余剰液をより容易かつ低コストで除去可能で、コンタミネーションを防止可能な試薬カートリッジ及び核酸精製キットを提供するという目的を達成しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明の試薬カートリッジは、被検体から核酸を分離精製するための液体が収容され、前記液体が分注ピペットチップにて分注される試薬カートリッジにおいて、
本体と、
前記本体上面に開口し前記液体を収容するウェルと、
前記本体上面に開口した開口に貼付された封止フィルムと、
前記本体上面に開口した開口に貼付された揮発防止フィルムを有し前記分注ピペットチップの先端外面に付着した余剰液を除去する余剰液除去部と、
を有し、
前記封止フィルムは、前記余剰液除去部に対して平面視して重ならないように設けられ、
前記余剰液除去部において、
前記揮発防止フィルムには、前記分注ピペットチップを挿入することにより前記分注ピペットチップの外面に接触するフィルム開口部が形成可能とされ、
前記揮発防止フィルムは積層フィルムである、
ことにより上記課題を解決した。
本発明の前記揮発防止フィルムは、シワが目視できない程度に張られた状態で貼付されることが可能である。
本発明の前記余剰液除去部において、前記フィルム開口部が、前記分注ピペットチップ先端外径と同径またはそれより小さい径寸法に設定されることが好ましい。
本発明の前記余剰液除去部において、前記揮発防止フィルムが前記本体上面の開口の全周に貼付されることができる。
本発明の前記余剰液除去部において、前記本体上面の開口が円形とされることができる。  本発明において、前記液体がオイルとされて前記ウェルに収容される手段か、前記余剰液除去部において、前記揮発防止フィルムが親油性を有する手段を採用することができる。
本発明の試薬カートリッジにおいて、前記試薬カートリッジは、
前記被検体を収容する被検体収容部と、
オイルを収容する液体収容部と、
前記分離精製において発生する廃液を収容する廃液収容部と、
前記被検体の前記核酸を精製する抽出フィルターカートリッジと、
を有することができる。
本発明の核酸精製キットは、上記のいずれか記載の試薬カートリッジと、
前記分注ピペットチップを複数収容するための分注ピペットチップ収容体と、
を備えることができる。
本発明の核酸精製キットは、前記揮発防止フィルムに前記フィルム開口部を形成するフィルム開口部形成手段を備えることが好ましい。
【００１２】
本発明の試薬カートリッジは、被検体から核酸を分離精製するための液体が収容され、前記液体が分注ピペットチップにて分注される試薬カートリッジにおいて、
本体と、
前記本体上面に開口し前記液体を収容するウェルと、
前記本体上面に開口した開口に貼付された封止フィルムと、
前記本体上面に開口した開口に貼付された揮発防止フィルムを有し前記分注ピペットチップの先端外面に付着した余剰液を除去する余剰液除去部と、
を有し、
前記封止フィルムは、前記余剰液除去部に対して平面視して重ならないように設けられ、
前記余剰液除去部において、
前記揮発防止フィルムには、前記分注ピペットチップを挿入することにより前記分注ピペットチップの外面に接触するフィルム開口部が形成可能とされ、
前記揮発防止フィルムは積層フィルムである、
ことにより、本体上面に開口した開口に分注ピペットチップの先端を挿入することにより、この分注ピペットチップの先端外面の周囲を開口に貼付された揮発防止フィルムに接触させることで、開口に貼付された揮発防止フィルムによって分注ピペットチップの先端外周面に付着した余剰液を拭いとることができる。
【００１３】
開口に貼付された状態である揮発防止フィルムにフィルム開口部を形成して、このフィルム開口部に分注ピペットチップの先端を挿入することが可能となり、これにより、揮発防止フィルムによる分注ピペットチップの先端外周面に付着した余剰液を拭いとる拭い動作をおこなうことが可能となる。
【００１４】
本発明の前記余剰液除去部において、前記フィルム開口部が、前記分注ピペットチップ先端外径と同径またはそれより小さい径寸法に設定されることにより、フィルム開口部の内側端部が分注ピペットチップ先端外周面の全周に接触可能とすることができ、分注ピペットチップ先端外周面の全周において付着した余剰液を拭いとる拭い動作をおこなうことが可能となる。
なお、分注ピペットチップが先端側から基端側に拡径していた場合には、前記分注ピペットチップにおいて前記液体が接触可能な領域の最大外形よりも小さい内径を有するフィルム開口部とすることが好ましい。
さらに、前記フィルム開口部の内側端部が前記領域の全域において前記分注チップの外周面に密着可能であってもよい。
【００１５】
本発明の前記余剰液除去部において、前記揮発防止フィルムが前記本体上面の開口の全周に貼付されることにより、余剰液を拭いとる拭い動作において、分注ピペットチップ先端外周面において、周方向に均等な状態でフィルム開口部を接触させるようにフィルムのテンションを制御することが容易となる。
【００１６】
本発明の前記余剰液除去部において、前記本体上面の開口が円形とされることにより、余剰液を拭いとる拭い動作において、分注ピペットチップ先端外周面において、周方向に均等な状態でフィルム開口部を接触させるように揮発防止フィルムのテンションを制御することが容易に可能となる。
【００１７】
本発明において、前記液体がオイルとされて前記ウェルに収容される手段か、前記余剰液除去部において、前記揮発防止フィルムが親油性を有する手段を採用することにより、揮発防止フィルムによる分注ピペットチップの先端外周面に付着した余剰オイルを拭いとる拭い動作を効率よくおこなうことが可能となる。
さらに、前記揮発防止フィルムが揮発防止性を有することができる。
【００１８】
本発明の試薬カートリッジにおいて、前記試薬カートリッジは、
前記被検体を収容する被検体収容部と、
オイルを収容する液体収容部と、
前記分離精製において発生する廃液を収容する廃液収容部と、
前記被検体の前記核酸を精製する抽出フィルターカートリッジと、
を有することができる。
【００１９】
本発明の核酸精製キットは、上記のいずれか記載の試薬カートリッジと、
前記分注ピペットチップを複数収容するための分注ピペットチップ収容体と、
を備えることができる。
【００２０】
本発明の核酸精製キットは、前記揮発防止フィルムに前記フィルム開口部を形成するフィルム開口部形成手段を備えることにより、核酸精製キットの使用前、または、分注ピペットチップ先端外周面の全周において付着した余剰液を拭いとる拭い動作をおこなう前に、フィルム開口部を形成することが可能となる。
【発明の効果】
【００２１】
本発明によれば、分注ピペットチップ先端外周面に付着した余剰試薬を本体上面の開口にシールされた揮発防止フィルムに接触させることによって除去することができ、別途拭い部材を設けることがないため、部品点数を削減し、試薬カートリッジ製造時における工程削減を図り、製造コストを低減することが可能となり、また、コンタミネーションの可能性がある拭い部材を使用することがないため、コンタミネーションを防止することができるという効果を奏することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】本発明に係る試薬カートリッジの第１実施形態を示す斜視図である。
【図２】本発明に係る試薬カートリッジの第１実施形態を示す斜視図である。
【図３】本発明に係る試薬カートリッジの第１実施形態における液体除去部を示す断面図である。
【図４】本発明に係る試薬カートリッジの第１実施形態における抽出フィルターカートリッジを示す断面図である。
【図５】本発明に係る核酸精製キットの第１実施形態を示す斜視図である。
【図６】本発明に係る試薬カートリッジの第１実施形態における液体除去部の作用を説明するための断面図である。
【図７】本発明に係る試薬カートリッジの実施例を示す画像である。
【図８】本発明に係る試薬カートリッジの実施例を示す画像である。
【図９】本発明に係る試薬カートリッジの実施例を示す画像である。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
以下、本発明に係る試薬カートリッジ及び核酸精製キットの第１実施形態を、図面に基づいて説明する。
図１，図２は、本実施形態における試薬カートリッジを示す斜視図であり、図３は、本実施形態における試薬カートリッジにおける液体除去部を示す断面図であり、図４は、本実施形態における試薬カートリッジにおける抽出フィルターカートリッジを示す断面図であり、図５は、本実施形態における核酸精製キットを示す斜視図であり、図６は、本実施形態における試薬カートリッジおける液体除去部の作用を説明するための断面図であり、図において、符号１０は、核酸精製キット、符号１００は、試薬カートリッジである。
【００２４】
本実施形態に係る試薬カートリッジ１００は、図１〜図５に示すように、被検体から核酸を抽出するための試薬などが収容された試薬カートリッジ１００と、液体を分注するための分注ピペットチップ（分注チップ）２０１が複数収容された分注チップラック（分注チップ収容体）２００とを備えている。本実施形態では、分注チップラック２００は同形同大の分注ピペットチップ２０１を複数備えており、試薬カートリッジ１００に収容された液体は複数の分注ピペットチップ２０１のいずれかによって分注操作あるいは攪拌操作され、分注ピペットチップ２０１によって液体の間で交差汚染が生じないようになっている。また、分注チップラック２００は、使用後の分注ピペットチップ２０１を回収するための容器でもあり、核酸分析装置１における分注ピペットチップ２０１の使用終了後には感染性廃棄物として分注ピペットチップ２０１を分注チップラック２００ごと廃棄することができる。
【００２５】
試薬カートリッジ１００は、略箱状に形成された本体１０１と、本体１０１の外面から突出して形成された爪部１０２と、を有している。爪部１０２は、例えば試薬カートリッジ１００が自動分析装置などにセットされたときに、試薬カートリッジ１００が自動分析装置の一部と係合できるようになっている。試薬カートリッジ１００の転倒を防止することもできる。
【００２６】
本体１０１、分注チップラック２００等を形成する材料としては試料や試薬等に影響を与えないものであれば特に制限はないが、特にポリプロピレン、ポリカーボネート、アクリルのいずれかを含む樹脂材料を用いれば、良好な可視光透過性を確保することができ、溶液の状態を確認することができる。ポリプロピレンとしては、ホモポリプロピレンやポリプロピレンとポリエチレンとのランダム共重合体を使用することができる。また、アクリルとしては、ポリメタクリル酸メチル、または、メタクリル酸メチルとその他のメタクリル酸エステル、アクリル酸エステル、スチレンなどのモノマーとの共重合体を使用することができる。また、これらの樹脂材料を使用する場合、チップの耐熱性や強度を確保することもできる。
【００２７】
本体１０１の外面の一部には、核酸精製キット１０の使用時には取り外される薄膜状の封止フィルム１０３が貼り付けられている。封止フィルム１０３によって本体１０１の開口は封止されており、本体１０１の内部に配置された後述する抽出フィルターカートリッジ１５０などが本体１０１から落下しないように、また本体１０１内部に埃などの異物が混入することを防止できるようになっている。
【００２８】
本体１０１の内部には、生体試料などの被検体が投入されるサンプルウェル（被検体収容部）１１０と、被検体から核酸を抽出するための試薬などが収容されている試薬ウェル部１２０と、被検体から核酸を抽出する工程で分離された不要な溶液を廃棄する廃液ウェル（廃液処理部）１３０と、被検体から抽出された核酸を回収する回収ウェル１４０とが一体に形成されている。
【００２９】
また、試薬カートリッジ１００は、核酸を吸着させる担体を含有する抽出フィルターカートリッジ１５０を有し、試薬カートリッジ１００には、抽出フィルターカートリッジ１５０が収容される保持部１６０が一体に形成されている。
【００３０】
試薬ウェル部１２０は、複数の試薬ウェル（試薬収容部）１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６と、オイルウェル（オイル収容部）１２７と、余剰液除去部１２８とを有している。
試薬ウェル１２０において、複数の試薬ウェル１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、及びオイルウェル１２７の開口は、封止フィルム１０４によって封止されている。
封止フィルム１０４は、余剰液除去部１２８に対して平面視して重ならないように設けることができる。
【００３１】
封止フィルム１０４は、試薬ウェル１２１〜１２６、オイルウェル１２７の上面開口に貼付されて、これらの開口を封止可能な状態とされている。封止フィルム１０４は、気体の透過または通過が抑制されているとともに、分注ピペットチップ２０１を突き刺すことによりフィルムを破ることができる構成とすることが好ましく、例えば金属性の薄膜や、プラスチックフィルム、これらの積層フィルム等を用いることができる。
【００３２】
試薬ウェル１２０において、余剰液除去部１２８となるウェル１２８ａの開口１２８ｂには、揮発防止フィルム（フィルム）１２９が貼り付けられている。
ウェル１２８ａの開口１２８ｂは、試薬ウェル１２１〜１２６、オイルウェル１２７と面一とされることが本体１０１の形成上好ましいが、ウェル１２１〜１２７に対して低い位置あるいは高い位置に形成されることもできる。特に、揮発防止フィルム１２９に対して必要な引張力を持たせて貼り付ける際に、加熱溶融されたウェル１２８ａの開口１２８ｂの高さがウェル１２１〜１２７よりも低くなる場合がある。
ウェル１２８ａは、試薬ウェル１２１〜１２６、オイルウェル１２７と同様に底部側が閉塞しているが、本体１０１に設けた単なる開口とすることもできる。また、他のウェル１２１〜１２７と容器としての形状が異なる構成とすることもできる。
【００３３】
試薬ウェル１２１〜１２６には、細胞膜などの生体物質を溶解する溶解液１２１Ａと、前記溶解液１２１Ａで溶解しきれず担体へ目詰まりを起こしている細胞質などの生体物質を溶解する溶解液１２２Ａ、担体に吸着された核酸以外の不要物を洗い流すための洗浄液１２３Ａ、１２４Ａと、担体から核酸を溶出させる溶出液１２５Ａと、溶出液中の核酸濃度を調整するための希釈液１２６Ａがそれぞれの試薬ウェルに個別に収容されている。
また後述の使用様態では分析用の試薬は核酸分析チップに配置した構成としているが、これとは別に試薬ウェルに分析用の試薬を収容した使用方法としてもよい。
例えば、核酸に対してＰＣＲ、及びインベーダー（登録商標）法によるＳＮＰ測定を行う試薬の一部があらかじめ混合された分析試薬プレミックスと、をそれぞれの試薬ウェルに個別に収容することができる。
【００３４】
オイルウェル１２７には、例えばＰＣＲ反応において反応溶液に重層して用いられるオイル１２７Ａが収容されている。
オイル１２７Ａとしては、例えばミネラルオイルやシリコンオイルなどを好適に採用することができる。
【００３５】
余剰液除去部１２８は、分注ピペットチップ２０１の先端外面に付着した余剰液を除去するものとされ、図３に示すように、試薬カートリッジ１０１に設けられた複数の試薬ウェルまたはオイルウェルと同形状のウェル１２８ａの上面開口１２８ｂに、揮発防止フィルム１２９が貼付された構成とされている。余剰液除去部１２８は、図６に示すように、揮発防止フィルム（フィルム）１２９に分注チップ２１の外面に接触するフィルム開口部１２９Ａが形成可能となっている。
【００３６】
揮発防止フィルム１２９は、分注ピペットチップ２０１または同形の貫通手段３０１を突き刺すことによりフィルムに貫通孔形成することができる構成とすることが好ましく、また、貫通時に、分注ピペットチップ２０１の外径と同径または小さい貫通孔となるフィルム開口部１２９Ａのみが形成されて、それ以外の領域以外には、亀裂・断裂などが形成されないようになっている。
【００３７】
同時にまた、揮発防止フィルム１２９は、分注ピペットチップ先端２０１Ａの外周面に付着したオイル１２７Ａを、フィルム開口部１２９Ａの外円周上に接触することにより揮発防止フィルム１２９で拭って、この余剰液を除去した後、分注ピペットチップ２０１を上昇させた際に、分注ピペットチップ２０１を挿入することで拡大したフィルム開口部１２９Ａが縮径して、分注ピペットチップ先端２０１Ａにフィルム開口部１２９Ａが接触することがないように、充分な塑性を有するフィルム特性を有するようになっている。
【００３８】
揮発防止フィルム１２９は、分注ピペットチップ２０１の先端外面を拭うために、試薬ウェル１２１〜１２６、オイルウェル１２７を封止する封止フィルム１０４よりも強度が高くなるように設定されている。具体的には、揮発防止フィルム１２９となる基材フィルムを厚くするように設定するか、基材フィルムを複数積層するか、基材フィルム表面（裏面）に、強度増大用または開口形成時の断裂防止用としてコーティングフィルムを設ける構成を採用することなどができる。
【００３９】
具体的には、揮発防止フィルム１２９は、例えばアルミニウムなどとされる金属製の薄膜や、プラスチックフィルム、これらのフィルムを貼り付けた積層フィルム等を用いることができる。
揮発防止フィルム１２９としての構成を例示すると、厚さ７μｍ〜２０μｍ程度のアルミニウム薄体と、表面にＰＥＴ（ポリエチレンテレフタレート）フィルム等がコーティングされ、裏面にはＣＰＰ（無延伸ポリプロピレン）等がコーティングされた積層体やＯＰＰ（延伸ポリプロピレン）とシールラッカー（接着剤）等がコーティングされた積層体とされる構成を示すことができる。
【００４０】
揮発防止フィルム１２９は、円形とされるウェル１２８ａ上面の開口１２８ｂにおいてその全周に貼り付けられる。また、揮発防止フィルム１２９は、その表面にシワがよらない状態とされるテンションを有するように貼り付けられる。このとき、フィルム開口部１２９Ａの形成位置からウェル１２８ａの全周に向かって、均等にテンションがかかっていることが好ましい。
揮発防止フィルム１２９とウェル１２８ａの上面開口１２８ｂとの貼り付けは、裏面にコーティングされたＣＰＰ等を用いて、ラミネート接続することが好ましい。このときの条件は、ポリプロピレンとされる本体１０１との接着性等を鑑みて、表面にシワがよらない状態とされるテンションを与えながら、１５０℃〜１６０℃で３秒〜７秒とされる条件で接着することができる。
ここで、揮発防止フィルム１２９の表面にはシワが寄らないとは、図７〜図９に示すように、貼り付けた揮発防止フィルム１２９においてウェル１２８ａの上面開口１２８ｂの内側部分に当たる領域において、シワが目視できない程度に上面開口１２８ｂに引張された状態を意味している。
【００４１】
余剰液除去部１２８において、オイルウェル１２７に収容されたオイル１２７Ａを拭う場合には、揮発防止フィルム１２９が親油性を有することができ、また、試薬ウェル１２１〜１２６に収容された各試薬を拭う場合には、揮発防止フィルム１２９が親油性を有することができる。
これらを実現するために、揮発防止フィルム１２９をアルミニウム薄膜およびラミネート層のみの構成とすることや、アルミニウム薄膜の表裏面にそれぞれ親油性を有する層と親水性を有する層とを設けることもできる。
【００４２】
このフィルム開口部１２９Ａの大きさは、分注ピペットチップ２０１の先端外径と同等またはそれより小さいものが好ましい。これは、フィルム開口部１２９Ａが大きいと分注ピペットチップ先端２０１Ａの外周面に付着した余剰液がフィルム開口部１２９Ａの内周端部に十分に接触できず余剰液の除去効率が低下してしまうためである。
【００４３】
このフィルム開口部１２９Ａは、図３に示すように、開口部のない揮発防止フィルム１２９をウェル上面の開口１２８ｂに貼付後、試薬カートリッジ１０１を使用する際に、図５に示すように、ユーザーの手作業によって針状の針部材３０１を有するフィルム開口部形成手段３００で揮発防止フィルム１２９に穴を開けることで貫通孔として形成することができる。
開口部形成手段３００における針部材３０１の径寸法φは、分注ピペットチップ２０１の先端外径と同じか、これよりも小さく設定されている。
【００４４】
また、フィルム開口部１２９Ａは、図３に示すように、開口部のない揮発防止フィルム１２９をウェル上面の開口１２８ｂに貼付後、試薬カートリッジ１０１を使用する前に、図５または図６に示すように、自動分析装置による処理工程の中で、分注ピペットチップ２０１または自動分析装置に設けられた針部材３０１を用いて、揮発防止フィルム１２９に開口部を設けたりすることができる。この場合、分注ピペットチップ２０１または同径の針部材３０１がフィルム開口部形成手段として使用される。
【００４５】
さらに、このフィルム開口部１２９Ａは、ウェル１２８ａの開口１２８ｂ形状に対応して切断された揮発防止フィルム１２９に、あらかじめフィルム開口部１２９Ａとなる穴を開けたものをウェル１２８ａ上面の開口１２８ｂに貼付するようにしてもよい。
【００４６】
なお、このフィルム開口部１２９Ａは、円形のウェル１２８ａの開口１２８ｂ形状に対応してその中心位置に設けられることができるが、余剰液除去部１２８において、複数回分注ピペットチップ２０１の拭い動作をおこなう場合には、中心からずれた状態で、複数のフィルム開口部１２９Ａを設けることもできる。この場合、フィルム開口部１２９Ａを一回設ける場合に比べて、揮発防止フィルム１２９の厚さを厚くすることなど強度を増大した状態として設定することができる。
また、フィルム開口部１２９Ａを複数形成する場合には、円形のウェル１２８ａの開口１２８ｂの中心に対して、円形ウェル１２８ａの内径の１／２の円周上で９０°以上の間隔を開けたという位置関係に形成することができる。
【００４７】
廃液ウェル１３０は、図２に示すように、抽出フィルターカートリッジ１５０の外径形状に沿って形成された凹部で、抽出フィルターカートリッジ１５０を支持可能な形状になっている。廃液ウェル１３０に抽出フィルターカートリッジ１５０が取り付けられた状態では、抽出フィルターカートリッジ１５０は試薬カートリッジ１００内で転倒しないようになっている。
【００４８】
回収ウェル１４０は、廃液ウェル１３０と同様に抽出フィルターカートリッジ１５０を支持できるようになっている。
回収ウェル１４０の底部は、抽出フィルターカートリッジ１５０の担体から溶出液１２５Ａによって溶出された核酸溶液を貯蔵・貯溜できる容器形状を有している。
【００４９】
廃液ウェル１３０と回収ウェル１４０とは、試薬カートリッジ１００内で隣り合う位置関係に設けられている。
これは、抽出フィルターカートリッジ１５０の洗浄を廃液ウェル１３０において行った後に抽出フィルターカートリッジ１５０を回収ウェル１４０に移動させるときの抽出フィルターカートリッジ１５０の動線を短くするためである。
これにより、試薬カートリッジ１００上を通過する抽出フィルターカートリッジ１５０が試薬カートリッジ１００などを汚染する可能性を軽減することができる。
【００５０】
抽出フィルターカートリッジ１５０は、図４に示すように、抽出フィルターカートリッジの外枠となる略筒状の本体１５１と、本体１５１の内部に設けられた抽出フィルターユニット１５２を有している。
【００５１】
本体１５１は、上端１５１Ａと下端１５１Ｂとがいずれも開口している。
また、抽出フィルターユニット１５２よりも下端１５１Ｂ側において、上端１５１Ａ側の開口よりも開口径が小さくなる漏斗状に本体１５１は形成されており、下端１５１Ｂにはノズル状の排出口１５１Ｃが下方向に突出して設けられている。
上端１５１Ａ側の開口は、被検体が溶解された状態の溶解液１２１Ａや１２２Ａ、洗浄液１２３Ａ、１２４Ａ、溶出液１２５Ａなどが供給されるようになっている。
これらの液体は、フィルターユニット１５２を通過して排出口１５１Ｃから排出されるようになっている。
【００５２】
フィルターユニット１５２は、核酸を吸着する性質を有する担体を含有する吸着フィルター１５２Ａと、吸着フィルター１５２Ａよりも下端１５１Ｂ側に配置され吸着フィルター１５２Ａの変形を防止するサポート部材１５２Ｂとを有している。
【００５３】
吸着フィルター１５２Ａは、核酸を吸着可能な多孔性材料によって膜状に形成されている。吸着フィルター１５２Ａの材料としては、洗浄液１２３Ａ、１２４Ａ内では核酸が吸着状態となり、溶出液１２５Ａ内では核酸の吸着状態が弱まる性質を有する材料であることが好ましい。
また、吸着フィルター１５２Ａは、親水基として水酸基を導入した多孔性材料であることがあることが好ましい。具体的には、吸着フィルター１５２Ａは、シリカによって、あるいは他の物質上にシリカを結合させて形成されている。
【００５４】
なお、吸着フィルター１５２Ａの材料としては、有機物質の存在下で生体物質を吸着することができる材料であれば、特に限定されるものではない。
また、吸着フィルター１５２Ａは、例えばガラスウールなどの繊維材を重ね合わせて形成することで多孔性を有するようになっていてもよい。
【００５５】
サポート部材１５２Ｂは、少なくとも核酸に対する吸着性が低く、かつ被検体から核酸を抽出する反応を阻害しない材料によって形成されていることが好ましい。
例えば、サポート部材１５２Ｂは樹脂の粒を焼き固めて形成することができる。
サポート部材１５２Ｂの剛性は吸着フィルター１５２Ａよりも高くなっており、吸着フィルター１５２Ａが本体１５１内で変形することがサポート部材１５２Ｂによって抑制されている。
【００５６】
保持部１６０は、図２に示すように、試薬カートリッジ１００において抽出フィルターカートリッジ１５０が収容される初期位置になっている。
また、保持部１６０の底部には、液体を収容する図示していない吸収体を設けることができる。
この吸収体は、抽出フィルターカートリッジ１５０を保持部１６０に収容したときに抽出フィルターカートリッジ１５０の排出口１５１Ｃ側の外面に接触するようになっている。
このため、例えば抽出フィルターカートリッジ１５０内に洗浄液１２３Ａを供給したときに排出口１５１Ｃの外面に洗浄液１２３Ａが付着した場合に、吸収体に洗浄液１２３Ａを吸収させて洗浄液１２３Ａを除去することができる。
【００５７】
以上に説明した構成の、本実施形態の試薬カートリッジ１００及び核酸精製キット１０の作用について、余剰液除去部１２８の作用を中心に説明する。
以下では、核酸精製キット１０を適用する対象となる自動分析装置として、分注ピペットチップ２０１を搬送する分注搬送機構を有し、核酸を精製した後にＰＣＲ解析をする自動分析装置を例に挙げて説明する。
【００５８】
まず、ユーザーの手作業によって図１に示す試薬カートリッジ１００の封止フィルム１０３が取り外される。
続いて、試薬カートリッジ１００のサンプルウェル１１０に例えば全血試料をユーザーの手作業によって注入する。
【００５９】
続いて、試薬ウェル１２１〜１２６に貯留された各種の試薬を所定の手順に従って自動分析装置の分注搬送機構によって分注、混合する。
これにより、サンプルウェル１１０に供給された全血試料中の細胞は溶解され細胞溶解液が得られる。
試薬ウェル１２１〜１２６から液体を分注ピペットチップ２０１内に吸引するときには、試薬ウェル１２１〜１２６を封止している封止フィルム１０４には分注ピペットチップ２０１の先端が差し込まれる。
すると、封止フィルム１０４には貫通孔が形成され、分注ピペットチップ２０１によって試薬ウェル１２１〜１２６の内部の各種試薬類を吸引できるようになる。
【００６０】
まず、廃液を集める必要がある為、抽出フィルターカートリッジ１５０を廃液ウェル１３０へ搬送する。細胞が溶解された溶液を抽出フィルターカートリッジ１５０に供給する。抽出フィルターカートリッジ１５０は上端１５１Ａから気体を送り込んで本体１５１を加圧して、吸着フィルター１５２Ａを液体が通過する速度を高めることができる。
すると、細胞が溶解された溶液は吸着フィルター１５２Ａを通過して、核酸は吸着フィルター１５２Ａに吸着される。
その後、前記溶解液１２１Ａで溶解しきれず担体へ目詰まりを起こしている細胞質などの生体物質を溶解する溶解液１２２Ａで吸着フィルター１５２Ａを洗浄する。
【００６１】
さらに、洗浄液１２３Ａ、１２４Ａを吸着フィルター１５２Ａに供給して吸着フィルター１５２Ａを洗浄液１２３Ａ、１２４Ａによって洗浄する。
その後、抽出フィルターカートリッジ１５０を回収ウェル１４０へ搬送し、溶出液１２５Ａを吸着フィルター１５２Ａに供給する。
これにより、吸着フィルター１５２Ａに吸着されていた核酸を溶出液１２５Ａにより溶出させて、核酸を含有する核酸溶液を回収ウェル１４０に回収する。
【００６２】
さらに、回収ウェル１４０内に回収された核酸を含有する核酸溶液と希釈液１２６Ａとを混ぜ合わせ、サンプルの準備が完了となる。
以上で核酸精製キット１０による核酸の分離精製は終了する。
【００６３】
続いて、核酸精製キット１０によって分離精製された核酸を用いて、核酸に対してＰＣＲ解析を行う。
自動分析装置は、分注ピペットチップ２０１によって核酸溶液を吸引し、所定の反応容器（例えばマイクロチューブなど）に核酸溶液を供給する。
続いて、分注ピペットチップ２０１を図１，図２に示す核酸精製キット１０のオイルウェル１２７に挿入して、オイルウェル１２７に収容されたオイル１２７Ａを分注ピペットチップ２０１の内部に吸引する。
このとき、オイル１２７Ａは、分注ピペットチップ２０１の素材がオイル１２７Ａとの親和性が高いため、分注ピペットチップ２０１の外周面に液滴状に付着することがある。
【００６４】
自動分析装置の分注搬送機構は、図６（Ａ）に示すように、余剰液除去部１２８へと分注ピペットチップ２０１を移動させる。
さらに、図６（Ｂ）に示すように、分注搬送機構は、余剰液除去部１２８の直上から揮発防止フィルム１２９に設けられたフィルム開口部１２９Ａに分注ピペットチップ先端２０１Ａを挿入する。
すると、分注ピペットチップ先端２０１Ａの外周面に付着したオイル１２７Ａは、フィルム開口部１２９Ａの外円周上に接触することで揮発防止フィルム１２９へ余剰液が付着し余剰液が除去される。
その後、分注ピペットチップ２０１を上昇させる際には、分注ピペットチップ２０１を挿入することで拡大したフィルム開口部１２９Ａに分注ピペットチップ先端２０１Ａが接触することなく上昇するため、揮発防止フィルム１２９へ付着した余剰液が分注ピペットチップ先端２０１Ａに再度付着することはない。
【００６５】
内部にオイル１２７Ａが保持され外周面のオイル１２７Ａが除去された分注ピペットチップ２０１によって、上述の反応容器内の核酸溶液にオイル１２７Ａが重層される。
このとき、分注ピペットチップ２０１の外周面の余剰オイルが除去されているので、反応容器の壁面などにオイルが付着することがない。
反応容器内で核酸溶液にオイル１２７Ａが重層されることで、ＰＣＲ反応において核酸溶液が蒸発することが抑制され、ＰＣＲ反応を好適に行うことができる。
【００６６】
以上、説明したように、本実施形態における試薬カートリッジ１００及び核酸精製キット１０によれば、試薬カートリッジ１００に設けられた余剰液除去部１２８のフィルム開口部１２９Ａによって分注ピペットチップ先端２０１Ａの外周面に付着したオイル１２７Ａを除去することができる。
【００６７】
このようにすることで、試薬カートリッジ１００及び核酸精製キット１０において、反応容器の壁部などに意図せずに液体が付着してしまうことが抑制され、核酸を検査するときの精度と再現性を高めることができる。
【００６８】
また、核酸を抽出するために必要な試薬や余剰液除去部１２８が試薬カートリッジ１００の内部に設けられキットとして一体化されているので、被検体をサンプルウェル１１０に添加して自動分析装置にセットする操作のみ手作業によって行えばいいので、遺伝子検査を簡便に行うことができる。
【００６９】
また、試薬カートリッジ１００に廃液ウェル１３０が一体に設けられているので、遺伝子検査が終了した後は、試薬カートリッジ１００を自動分析装置から取り外して廃棄するだけでよい。
このため、廃液処理が簡便であり、被検体などの残液によって周囲が汚染されるおそれがない。
【００７０】
本実施形態に係る試薬カートリッジ１００及び核酸精製キット１０を用いることで、分注ピペットチップ２０１先端外周面に付着した余剰液を低コストかつ簡便に除去可能であり、遺伝子検査の精度向上や汚染防止を防ぐことが期待できる。
【００７１】
以上、本実施形態について図面を参照して詳述したが、具体的な構成はこの実施形態に限られるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲の設計変更等も含まれる。
例えば、上述の実施形態では、余剰液除去部１２８は分注ピペットチップ２０１の外周面に付着したオイルを除去する例を説明したが、これに限らず、他の種類の液体に対しても分注ピペットチップ２０１の外周面に付着した液体を好適に除去することができる。
例えば、粘性が高いグリセロールや界面活性材や磁気ビーズ含有試薬などを操作する場合に本発明の余剰液除去部を好適に適用することができる。
【００７２】
これらを実現するために、揮発防止フィルム１２９をアルミニウム薄膜およびラミネート層のみの構成とすることや、アルミニウム薄膜の表面および／または裏面に液体の除去作用の高い層を設けることもできる。
【００７３】
また、揮発防止フィルム１２９を本体１０１の試薬ウェル１２１〜１２６、オイルウェル１２７の上側まで延伸して貼り付け、封止フィルム１０４の代わりに各ウェル１２１〜１２７を揮発防止フィルム１２９によって封止することも可能である。
【００７４】
さらに、揮発防止フィルム１２９の上側まで、封止フィルム１０４を延伸した状態で試薬ウェル１２１〜１２６、オイルウェル１２７の開口部分周囲に貼り付け、余剰液除去部１２８においてフィルムを二重となった状態に形成することも可能である。
【実施例】
【００７５】
本発明における実施例を図７〜図９に基づいて説明する。
まず、図７は、試薬カートリッジ本体１０１のウェル上面に封止フィルム１０４および揮発防止フィルム１２９を貼付したものを撮影した写真である。また、図８は、その後、オイルウェル１２７上面の封止フィルム１０４に大穴を、余剰液除去部１２８上面の揮発防止フィルム１２９に小穴（フィルム開口部１２９Ａ）を開けたものを撮影した写真である。
【００７６】
ここで、オイルウェル１２７に開けた大穴は、その後のオイルウェル１２７からの試薬吸引時において自動分析装置の搬送機構によって、分注ピペットチップ２０１が容易に挿入するために設けたものである。また、余剰液除去部１２８上面のフィルム開口部１２９Ａは、分注ピペットチップ先端２０１Ａの外径より小さい穴を針状のもので設けている。さらに、オイルウェル１２７には着色したグリセロール溶液１２７Ｂを注入している。これは、その後の余剰液の除去具合を観察しやすくするために、着色した擬似オイルとして用いている。
【００７７】
次に、図９は、図８の試薬カートリッジ１００を自動分析装置の搬送機構を用いて、分注ピペットチップ２０１を移動させることにより、オイルウェル１２７からの着色グリセロール溶液１２７Ｂの吸引後、余剰液除去部１２８に分注ピペットチップ２０１を挿入した後の写真である。
この写真において、揮発防止フィルム開口部１２９周辺の揮発防止フィルム１０４上に分注ピペットチップ先端２０１Ａの外周面に付着していた余剰液が付着することを確認した。また、余剰液除去部の分注ピペットチップ先端２０１Ａの外周面には着色したグリセロール溶液１２７Ｂがほぼ完全に除去されていることも合わせて確認した。
【００７８】
以上のことから、本発明における余剰液除去部１２８によって、分注ピペットチップ先端２０１Ａの外周面に付着した余剰液が簡便に除去できることを確認した。
【産業上の利用可能性】
【００７９】
本発明の活用例として、血液検体や組織断片から抽出した核酸等を含む液をバイオチップやマイクロデバイス等へ注入する遺伝子解析装置や検体処理装置がある。
【符号の説明】
【００８０】
１０…核酸精製キット
１００…試薬カートリッジ
１０１…試薬カートリッジ本体
１０４…封止フィルム
１２９…揮発防止フィルム
１２８…余剰液除去部
１２８ａ…ウェル
１２８ｂ…開口
１２９Ａ…フィルム開口部
２０１…分注ピペットチップ
２０１Ａ…分注ピペットチップ先端
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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