(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）式２ａ、２ｂのジアステレオ異性体の混合物を、塩基の存在下で、塩基性複素環式アルデヒド化合物及び光学活性アミンと反応させ、
【化１】
0006775009.tif 000038
ｂ）酸抽出によって工程ａ）の生成物から式２ａの化合物を分離することを含み、
前記塩基性複素環アルデヒド化合物は、４−ピリジンカルボキシアルデヒドであり、
前記光学活性アミンは、（Ｒ）−２−（ジフェニルメチル）ピロリジンを含む、式２ａの化合物またはその塩または溶媒和物の製造方法。
【請求項２】
式２ａの化合物を９８％のエナンチオマー過剰で製造する請求項１に記載の製造方法。
【請求項３】
前記塩基が４−メチルモルホリン、Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、トリメチルアミン、トリブチルアミン、Ｎ−メチルピロール、Ｎ−メチルピロリジン、Ｎ−メチルピペラジン、ピリジン、４−ピコリン、２，６−ルチジン、Ｎ−メチルイミダゾール、Ｎ、Ｎ−ジエチルアニリン、リン酸カリウム、１，８−ジアザビシクロ［５，４，０］ウンデカ−７−エンおよび１，４−ジアゾビシクロ［２，２，２］オクタンからなる群から選択される請求項１に記載の製造方法。
【請求項４】
前記塩基が４−メチルモルホリンである請求項３に記載の製造方法。
【請求項５】
前記式２ａ、２ｂのジアステレオ異性体の混合物に対する塩基性複素環アルデヒド化合物の化学量論比が０．５：１〜２：１の範囲である請求項１に記載の製造方法。
【請求項６】
式２ａ、２ｂのジアステレオ異性体の混合物、塩基性複素環アルデヒド化合物および光学活性アミンの間の反応が１５〜２４時間の期間にわたって温度３０〜６０℃の範囲で行われる請求項１に記載の製造方法。
【請求項７】
式２ａ、２ｂのジアステレオ異性体の混合物に対する光学活性アミンの化学量論比は、０．０１：０．３である請求項１に記載の製造方法。
【請求項８】
式２ａ、２ｂのジアステレオ異性体の混合物、塩基性複素環アルデヒド化合物および光学活性アミンの間の反応が溶媒中で行われる請求項１に記載の製造方法。
【請求項９】
前記溶媒が１−メチル−２−ピロリジノンを含む請求項８に記載の製造方法。
【請求項１０】
酸抽出は、溶媒および水の存在下、塩酸または硫酸を用いて行われる請求項１に記載の製造方法。
【請求項１１】
式２ａ、２ｂのジアステレオ異性体の混合物がラセミ混合物である請求項１に記載の製造方法。
【請求項１２】
式２ａ、２ｂのジアステレオ異性体の混合物と式１３の塩基性複素環式アルデヒド化合物及び光学活性アミンとの反応生成物が、式１４の化合物の混合物である請求項１に記載の製造方法。
【化２】
0006775009.tif 000039
（式中、Ｒ１は水素またはＣ１−６アルキルを表し、Ｒ２は水素またはＣ１−６アルコキシを表す。）
【化３】
0006775009.tif 000040
（式中、Ｙは、＝ＣＨ−（４−ピリジル）または−ＣＨ（ＯＨ）−（４−ピリジル）を表す。）
【請求項１３】
式１の化合物又は式１の化合物のアミン基の加水分解性カルバミン酸塩であるプロドラッグを製造する方法であって、
【化４】
0006775009.tif 000041
式２ａ、２ｂのジアステレオ異性体の混合物を、光学活性アミンとして（Ｒ）−２−（ジフェニルメチル）ピロリジンおよび塩基の存在下で塩基性複素環アルデヒド化合物として４−ピリジンカルボキシアルデヒドと反応させることにより、式２ａの化合物を分離する工程を含み、式２ａの化合物を分離した後、
【化５】
0006775009.tif 000042
式２ａの化合物を塩基の存在下で二重結合形成試薬と反応させて、式５の化合物を得る工程、
【化６】
0006775009.tif 000043
式５の化合物を、塩基の存在下で、ニトロメタンと反応させて、式６の化合物を得る工程、
【化７】
0006775009.tif 000044
式６の化合物を、任意に触媒の存在下、昇温して、アジド化合物と反応、つまり、環形成反応させ、式７の化合物を得る工程、
【化８】
0006775009.tif 000045
式７の化合物を還元して式１の化合物を製造する工程を含む式１の化合物又は式１の化合物のアミン基の加水分解性カルバミン酸塩であるプロドラッグを製造する製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、光学活性二環式γ-アミノテトラゾール誘導体またはその薬理学的に許容される塩、特にα2δ配位子としての活性を有する化合物の製造に有用な光学活性中間体化合物の製造方法、テトラゾール誘導体。
【背景技術】
【０００２】
電位依存性カルシウムチャネルは、細孔形成iサブユニットと補助タンパク質α2δ、βおよびγとの組み合わせによって形成される（Caterall（2000）Annu。 Rev. Cell Dev。 Biol。16：521-555）。α2δタンパク質は、カルシウムチャネル密度およびこれらのチャネルの電位依存性動力学の両方を調節することが知られている（Felixら（1997）J.Neuroscience 17：6884-6891; Klugbauerら（1999）J.Neuroscience 19：684-691 ; Hobomら（2000）Eur. J.Neuroscience 12：1217-1226;およびQinら（2002）Mol. Pharmacol. 62：485-496）。ガバペンチン（GBP）は、高親和性でカルシウムチャネルα2δサブユニットα2δ1およびα2δ2のサブタイプに結合する、抗てんかん薬、抗痛覚過敏薬および抗不安薬である。ＧＢＰはもともとてんかんのために開発されたもので、痛みや不安の治療にも応用されている（Taylor et al（1998）Epilepsy Res。 29：223-249）。ＧＢＰの行動の根底にあるメカニズムはまだほとんど理解されていない。ＧＢＰはもともと親油性のγ-アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）類似体として設計されていたが、ＧＡＢＡ代謝経路のいずれの酵素とも相互作用しないことが示されており、ＧＡＢＡＡまたはＧＡＢＡＢ受容体と直接相互作用しない。しかし、それはＬ系アミノ酸トランスポーターを介して血液脳関門を効率的に横切ることができる。プレガバリン（ＰＧＢ）は、上記のものと同じ条件の治療のためのＧＢＰの第２世代で、より強力な後継機種である。それぞれ、１４０および８０ｎＭのＩＣ５０値でα２δ−１サブユニットに結合する（下記の構造ＧＢＰ、下記の構造ＧＢＰ）およびＰＧＢ（以下の構造ＰＧＢ）は、Dolphin（2013）Bioch Biophys Acta 1828：1541-1549）。
【化１】
0006775009.tif 000002
【０００３】
ＧＢＰは、臨床的に適切な用量で毒性の副作用がある場合はそれを示している。しかし、これはおそらく非常に高い水溶性およびインビボでのタンパク質結合の明らかな欠如のために、比較的短い半減期を有し、未変化で排泄される。軽度の鎮静、めまいおよび運動失調が主な用量制限副作用であり、これらは中心的に媒介されると考えられている。ＧＢＰおよびＰＧＢは、他の多くの中枢作用性薬物と異なり、中性ｐＨで親水性および二重性であり、細胞膜などの脂質に不溶性である。しかし、両方の化合物は、Ｌ−ロイシン、Ｌ−イソロイシンおよびＬ−バリンのような内因性アミノ酸も輸送する特殊なトランスポーター系（系Ｌ）を介して、腸、血液脳関門および細胞膜の膜障壁を横切るように見える（Suら（2005）J. Pharm. Exp.Ther. 313, 1-10）。
哺乳類では、α2δタンパク質の４つの関連するサブタイプがあり、それぞれ異なる遺伝子によってコードされている。 各タンパク質サブタイプは約１５０キロダルトン（ｋＤ）の分子量を有し、９９７〜１１５０個のアミノ酸残基からなる。α２δサブタイプ１および２のみが高親和性でＰＧＢに結合する。サブタイプ３および４は、有意な薬物結合を欠いている（Finkら（2002）Neuropharmacology, 42, 229-236）。ＰＧＢの結合親和性は組換えα２δ１型および２型タンパク質で類似しており、ＰＧＢはサブタイプ選択性ではないことが実証されている（Piechanら（2004）Soc. Neuroscience Abstr. 11（プログラム番号115））。
【０００４】
国際公開第２０１５／０９１４６３号パンフレットには、痛みの治療に有用な化合物である、式１の二環式γ−アミノテトラゾール誘導体およびその製造方法が開示されている。
【化２】
0006775009.tif 000003
ＵＳ  ２０１２／００７１６８５は、式２ａ、２ｂの化合物のジアステレオマー混合物を含む、α２δリガンドおよびその中間体としての活性を有する二環式γ−アミノ酸誘導体の製造に関するものである。
【化３】
0006775009.tif 000004
しかし、このジアステレオ異性体混合物２ａ、２ｂは個々の異性体には分離されていない。
【０００５】
ＵＳ２０１４／００９４６２３は、式Ａの化合物および式Ｂの化合物をそれらの混合物から製造するための３工程の方法を開示しており、
【化４】
0006775009.tif 000005
（ａ）ビスアリルアセタールを酸または酸無水物と酸と反応させて酸を生成させてクライゼン転位によりアルデヒドを生成すること、（b）工程（a）の生成物をマロン酸で加熱してα-β不飽和酸を生成すること、および（c）工程（b）の生成物を酸無水物および第３級アミンで加熱して、［２＋２］付加環化反応により４−５二環系を生成する工程。式Ａまたは式Ｂの上記で同定された化合物のそれらのジアステレオ異性体混合物からの分離は、２０１５化合物を分離するための酵素的方法を開示している米国特許出願公開第００３８７３８号およびジアステレオ異性体混合物と酸性ベンズアルデヒド試薬、光学活性アミンおよび溶媒との反応を利用するＵＳ２０１４／０２９６５６９に記載されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
（Ｉ）技術的問題
本発明の目的は、α2δリガンドとして優れた活性を有する式１の二環式γ-アミノテトラゾール誘導体及びその製造中間体ならびにその薬理学的に許容される塩の製造方法を提供することである。
【化５】
0006775009.tif 000006
従来の製造方法では、式１の化合物は、スキーム１に示すようなキラル高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を使用して最終工程として追加の光学分割を行い、式２ａおよび２ｂのラセミケトンから７つの合成の工程で製造されていた（ＷＯ２０１５／０９１４６３およびＵＳ２００２／００７１６８５参照）。
【化６】
0006775009.tif 000007
【０００７】
（ＩＩ）課題の解決
本発明が解決しようとする技術的課題は、式１の化合物の製造において、化学式１の化合物を光学活性化合物として製造する際に中間体を製造した後、より少ない合成変換を行う製造方法を開発することである。
しかし、本発明者らは、より早い段階で光学分割を行い、式１の化合物をより効率的に生成する後続の合成変換の使用によって、より効率的な製造方法が確立されると仮定した。この方法により、全４合成工程で、式１の化合物を生成することができる。
以下、本発明について説明する。
この方法は、合成順序の初期に行われる光学的速度論的分離によって、式１の化合物またはその塩を生成する。本発明者らは、化学式２ａの化合物の製造方法において、不斉炭素の立体制御方法に着目し、その有効な方法を開発するために鋭意研究を続けた.
本発明者らは、式２ａの化合物を生成するそのような方法は、スキーム２に示すような式１の化合物を製造する方法において価値があることを見出した。
【化７】
0006775009.tif 000008
従って、本発明は、式２ａの化合物又は塩あるいはその溶媒和物を単離するための方法を提供する。
【化８】
0006775009.tif 000009
その方法は、
ａ）式２ａ、２ｂのジアステレオ異性体の混合物を、塩基の存在下で、光学活性アミン及び塩基性複素環式アルデヒド化合物と反応させ、
【化９】
0006775009.tif 000010
ｂ）酸抽出によって工程ａ）の生成物から式２ａの化合物を分離することを含む。
この方法は、９０％より多い、好ましくは９５％より多い、より好ましくは９８％より多いエナンチオマー過剰で式２ａの化合物を生成することができる。
【０００８】
以下、本発明の好ましい態様について説明する。
この方法は、式２ａおよび２ｂのジアステレオ異性体の混合物、特に、式２ａおよび２ｂの化合物のラセミ混合物と、光学活性アミンおよび塩基の存在下で、塩基性複素環アルデヒド化合物と反応を含む。
【化１０】
0006775009.tif 000011
本発明による方法では、式２ｂの化合物が、光学活性アミンの存在下で塩基性複素環アルデヒド化合物と反応して複素環式アリール誘導体を生成すると考えられているが、式２ａの化合物は未反応のままである。式２ａの化合物は、従来の酸抽出技術によって容易に分離することができる。
【０００９】
塩基性複素環アルデヒド化合物は、好ましくは、式１２の化合物である。
【化１１】
0006775009.tif 000012
式中、Ａｒは、Ｃ１−６アルキルおよびＣ１−６アルコキシから選択される１または２の置換基で置換されていてもよい複素環式５または６員ヘテロアリール環構造を表す。好ましくは、Ａｒは、イミダゾリルまたはピリジル環構造を表す。典型的な例としては、１−メチル−５−イミダゾールカルボアルデヒド、１−メチル−４−イミダゾールカルボアルデヒド、３−ピリジンカルボキシアルデヒドおよび２−ピリジンカルボキシアルデヒドなどの化合物が挙げられるが、これらに限定されない。さらに好ましくは、塩基性複素環アルデヒド化合物は、４−ピリジンカルボキシアルデヒドなどのような、式１３の化合物である。
【化１２】
0006775009.tif 000013
式中、Ｒ１は水素またはＣ１−６アルキルを表し、Ｒ２は水素またはＣ１−６アルコキシを表す。反応が式１３の化合物で行われる場合、式２ｂの化合物は、式１４の化合物（下記のスキーム３の式３および４によって表される）の混合物によって示される付加物に変換される。
【化１３】
0006775009.tif 000014
式中、Ｙは、＝ＣＨ−（４−ピリジル）または−ＣＨ（ＯＨ）−（４−ピリジル）を表す。
【００１０】
その後、式１４の化合物は、スキーム３に例示される酸性分配相分離技術によって、式２ａの未反応化合物から効率的に分離することができる。この分離プロセスは、特に、光学活性アミンが（Ｒ）−２−（ジフェニルメチル）ピロリジンを含み、塩基が４−メチルモルホリンを含む場合、塩基性ピリジン官能性が分離を容易にするために、式１３の化合物を用いて好適に実施される。好ましくは、本発明による方法において、式２ａ、２ｂのジアステレオ異性体の混合物に対する塩基性複素環アルデヒド化合物の化学量論比は、０．５：１〜２：１の範囲、より好ましくは１：１である。典型的には、式２ａ、２ｂのジアステレオ異性体の混合物、塩基性複素環アルデヒド化合物および光学活性アミンの間の反応は、２４時間以内、一般に１５〜２４時間にわたって、周囲温度８０℃以下、より詳細には３０〜６０℃の範囲である。好ましい実施形態では、反応は３５〜４５℃で１５〜２０時間行われる。
【００１１】
光学活性アミンは、好適には第２級アミンである。光学活性アミンの典型的な例として、限定されないが、（Ｒ、Ｒ）−２，５−ビス（メトキシメチル）ピロリジン、（Ｒ）−（２−ピロリジニル）−１Ｈ−テトラゾール、（Ｒ）−２−（メトキシメチル）ピロリジン、（Ｒ）−２−（エトキシメチル）ピロリジン、（Ｒ）−２−（イソプロポキシメチル）ピロリジン、（Ｒ）−２−（ｔ−ブトキシメチル）ピロリジン、Ｎ−［（２Ｒ）−２−ピロリジニルメチル］−トリフルオロメタンスルホンアミド、（Ｒ）−２−［ビス（４−メチルフェニル）メチル］ピロリジン、（Ｒ）−２−［ビス（３，５−ジフルオロフェニル）メチル］ピロリジン、（Ｒ）−２−［ビス（４−フルオロフェニル）メチル］ピロリジンおよび（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−ジナフト［２，１−ｃ：１’、２’−ｅ］アゼピン−２，６−ジイルビス（ジフェニルメタノール）が挙げられる。好ましい光学活性アミンは、（Ｒ）−２−（ジフェニルメチル）ピロリジン、（Ｒ）−２−［ビス（４−メチルフェニル）メチル］ピロリジン、（Ｒ）−２−［ビス（３，５−ジメチルフェニル）メチル］ピロリジンおよび（Ｒ）−２−［ビス（４−フルオロフェニル）メチル］ピロリジンである。特に好ましい光学活性アミンは、（Ｒ）−２−（ジフェニルメチル）ピロリジンである。
好ましくは、式２ａ、２ｂのジアステレオ異性体の混合物に対する光学活性アミンの化学量論比は、０．０１：１〜１：１、より好ましくは０．０１：０．３の範囲である。
塩基の典型的な例には、４−メチルモルホリン、Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、トリメチルアミン、トリブチルアミン、Ｎ−メチルピロール、Ｎ−メチルピロリジン、Ｎ−メチルピペラジン、ピリジン、４−ピコリン、２，６−ルチジン、Ｎ−メチルイミダゾール、Ｎ、Ｎ−ジエチルアニリン、リン酸カリウム、１，８−ジアザビシクロ［５，４，０］ウンデカ−７−エンおよび１，４−ジアゾビシクロ［２，２，２］オクタンが挙げられる。好ましい塩基は、４−メチルモルホリンである。
好ましくは、式２ａ、２ｂのジアステレオ異性体の混合物に対する塩基の化学量論比は、０．５：１〜１：１．５、より好ましくは０．８：１〜１：１．３の範囲である。
【００１２】
この反応は、有利には溶媒、特に極性溶媒の存在下で行うことができる。 典型的な例には、限定されないが、１−メチル−２−ピロリジノン、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ、Ｎ−ジメチルアセトアミド、アセトニトリル、２−プロパノール、テトラヒドロフラン、１，２−ジメトキシエタンおよびジメチルスルホキシドが挙げられる。特に好ましい溶媒は、１−メチル−２−ピロリジノンである。
本発明のさらに好ましい態様において、塩基性複素環アルデヒド化合物、塩基および光学活性アミンは、酸相抽出によって未反応の式２ａの化合物から分離される。本発明の特に好ましい態様では、４−メチルモルホリン（塩基）、未反応の４−ピリジンカルボキシアルデヒド（塩基性複素環アルデヒド）及び残存する（Ｒ）−２−（ジフェニルメチル）ピロリジン（光学活性アミン）を未反応の化合物酸性抽出によって式２ａの化合物を得る。典型的には、酸抽出は、周囲温度で酸の水溶液、例えば、塩酸、硫酸、リン酸、クエン酸、シュウ酸または酒石酸を用いて行われる。適切には、酸抽出は、溶媒および水の存在下、塩酸または硫酸を用いて行われる。溶媒としては、ジエチルエーテル、ｔ−ブチルメチルエーテル、酢酸エチル、２−メチルテトラヒドロフラン、イソヘキサン、ジクロロメタンが挙げられる。攪拌後、相分離するという効果があり、式２ａの化合物を含む相が収集される。
好ましい実施形態では、反応混合物を塩酸（典型的には１Ｍ）、水およびブラインおよびジエチルエーテルで洗浄する。水層をイソヘキサンでさらに洗浄し、式２ａの化合物のさらなる試料を回収してもよい。
【００１３】
本発明の好ましい実施形態は、以下のスキーム３によって表わされる。
【化１４】
0006775009.tif 000015
【００１４】
本発明のさらなる態様において、式１
【化１５】
0006775009.tif 000016
の化合物又はそのプロドラッグを製造する方法であって、
式２ａ、２ｂ
【化１６】
0006775009.tif 000017
のジアステレオ異性体の混合物を、光学活性アミンおよび塩基の存在下で塩基性複素環アルデヒド化合物と反応させることにより、式２ａ
【化１７】
0006775009.tif 000018
の化合物分離する工程を含み、式２ａの化合物を分離した後、式２ａの化合物を式１の化合物に変換する。
好ましい実施形態では、前記変換は、式２ａの化合物を塩基の存在下で二重結合形成試薬と反応させて、式５の化合物
【化１８】
0006775009.tif 000019
と反応させることを含む。
好ましくは、適切な二重結合形成試薬は、例えば、ジエチルメチルホスフェートジエチルを含み、適切な塩基は、例えば、カリウムtert-ブトキシドを含む。この反応は、好適には、０℃〜周囲温度の温度範囲で、好適な溶媒、例えば、テトラヒドロフラン中で行われる。
【００１５】
前記変換は、式５の化合物
【化１９】
0006775009.tif 000020
を、塩基の存在下で、ニトロメタンと反応させて、式６
【化２０】
0006775009.tif 000021
の化合物を得る工程をさらに含んでいてもよい。
前記変換は、さらに、式６の化合物
【化２１】
0006775009.tif 000022
を、任意に触媒の存在下、昇温して、アジド化合物と反応、つまり、環形成反応させ、式７
【化２２】
0006775009.tif 000023
の化合物を得る工程をさらに含んでいてもよい。
【００１６】
適切なアジドは、例えば、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ−メチル２−ピロリドン（ＮＭＰ）又はトルエン等の溶媒中、ジブチルスズオキシド、ピリジン塩酸塩、トリエチルアミン塩酸塩または塩化アンモニウムなどの一般に知られている適切な触媒とともに、ナトリウム−、カリウム−又はトリメチルシシル−アジドを用いることができる。反応は、６０℃〜１２０℃の範囲の高温で行うことができる。
【００１７】
前記変換は、式７
【化２３】
0006775009.tif 000024
の化合物と反応させて式１
【化２４】
0006775009.tif 000025
の化合物を製造する工程をさらに含んでいてもよい。
【００１８】
適切な還元剤は、水またはエタノール中の塩酸、硫酸、酢酸または塩化アンモニウムなどの適切な酸および溶媒の存在下、０℃〜周囲温度で、亜鉛、鉄またはスズなどの適切な金属の混合物を使用することが挙げられる。
あるいは、適切な還元剤には、エタノールと水の混合物などの適切な溶媒中のラネーニッケルのような金属の存在下でヒドラジン水和物が含まれる。 好ましい実施形態は、０℃〜３５℃の温度で亜鉛および濃塩酸を使用することを含む。
有利には、プロドラッグは、式１の化合物のアミン基の加水分解性カルバメートとすることができる。
さらなる態様において、本発明は、式１４の化合物を製造する方法を提供する。
【化２５】
0006775009.tif 000026
式中、Ｙは、＝ＣＨ−（４−ピリジル）または−ＣＨ（ＯＨ）−（４−ピリジル）であり、この方法は、式２ａ、２ｂ
【化２６】
0006775009.tif 000027
のジアステレオ異性体の混合物を、上記のように、光学活性なアミンと塩基の存在下で、式１３の塩基性複素環式アルデヒド化合物で処理することを含む。
【化２７】
0006775009.tif 000028
【発明の効果】
【００１９】
本発明の製造方法によれば、α２δ配位子としての優れた活性を有する式１の二環系γ−アミノテトラゾール誘導体、その製造中間体又はそれらの塩を提供することができる。さらに、４−ピリジンカルボキシアルデヒドなどの塩基性複素環アルデヒドは、式２ｂの望ましくない異性体と反応して、塩基性誘導体、例えば、Ｙが＝ＣＨ−（４−ピリジル）または−ＣＨ（ＯＨ）−（４−ピリジル）であり、これは、酸性相分離技術によって効率的に除去され、スキーム３に要約されているエナンチオマー過剰率（ｅｅ）＞９８を有する所望の式２ａの化合物を生成する。４つの合成工程におけるその後の修飾は、スキーム２に要約されるような式１の化合物を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本明細書中で使用される場合、用語「式１の化合物」は、薬学的に許容される塩およびその溶媒和物を含む。 中間体化合物への言及には、その塩および溶媒和物も含まれる。本発明の化合物の薬学的に許容される塩は、化合物の塩基付加塩を含むことができる。そのような塩は、薬学的に許容されるカチオンを与える無機塩基、例えば、ナトリウムまたはカリウム塩などのアルカリ金属塩、またはカルシウムまたはマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩で形成することができる。 本発明の薬学的に許容される塩は、酸付加塩も含むことができる。そのような塩は、薬学的に許容されるアニオンを与える無機酸または有機酸、例えば、塩化物塩または臭化物塩等の水素ハロゲン化物、硫酸塩またはリン酸塩、または有機酸塩、例えば、酢酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、乳酸塩、クエン酸塩、ピルビン酸塩、コハク酸塩、シュウ酸塩、メタンスルホン酸塩またはｐ−トルエンスルホン酸塩等が挙げられる。
「溶媒和物」という用語は、固体状態の本発明の化合物を指し、適切な溶媒の分子が結晶格子に組み込まれる。 治療的投与のための適切な溶媒は、投与される投与量で生理的に許容される。 治療的投与のための適切な溶媒の例は、エタノールおよび水である。水が溶媒である場合、溶媒和物は水和物と呼ばれる。 一般に、溶媒和物は、化合物を適切な溶媒に溶解し、冷却または貧溶媒を用いて溶媒和物を単離することによって形成される。 溶媒和物は、典型的には周囲条件下で乾燥または共沸させる。 典型的な溶媒和物には、一水和物、二水和物または三水和物のような水和物が含まれる。
【００２１】
本発明は、さらに、式１の化合物のプロドラッグ、例えば、式１の化合物のアミノ官能基上のインビボ加水分解性カルバメートの製造方法に関する。 カルボキシ、エーテルまたはヒドロキシ基を含有する式１の化合物の生体内加水分解性カルバメートは、例えば、ヒトまたは動物の体内で切断されて親アミンを生成する薬学的に許容されるカルバメートである。そのようなカルバメートは、例えば、試験動物に、試験化合物を静脈内投与し、続いて試験動物の体液を検査することによって同定することができる。
【００２２】
典型的な医薬組成物は、治療有効量の式１の化合物を、薬学的に許容される担体とともに含む。式１の化合物は、被験体、特に疼痛状態に罹患しているヒト被験体における神経因性疼痛を治療、軽減または緩和するのに有効な量で使用される。このような疼痛の治療は、中枢神経系（ＣＮＳ）または末梢神経系（ＰＮＳ）障害と関連している場合とされていない場合がある。また、式１の化合物は、任意の他の疼痛に関連しないＣＮＳ障害を治療、軽減または緩和するのに有効である。組成物は、一般に式１の化合物を０．１〜９５％ｗ／ｗの範囲で含むが、活性の正確な性質および投与方式に依存する、治療有効量の式１の化合物を含む。典型的には、活性剤の正確な性質および投与方式に依存して、活性剤の用量は、単回用量または分割用量として０．１〜５００ｍｇの範囲である。
治療的使用において、式１の化合物は、経口、直腸、非経口または局所的に投与することができる。 医薬組成物は、薬学の分野で周知の担体を用いて、当業者に知られている経口、直腸、非経口または局所組成物の形態を採ることができる。 このような組成物は、一般に、単位剤形で製造される。 経口投与のための組成物は、固体剤形、例えば、錠剤、カプセルまたはカプレット、または液体剤形、例えば、シロップおよび水性または油性懸濁剤を含むことができる。 錠剤およびカプレットのような固体剤形は、崩壊剤および潤滑剤のような他の製剤助剤の存在下で、式１の化合物を不活性希釈剤と混合することによって製造することができる。 カプセル剤は、硬カプセル剤、例えば、硬ゼラチンカプセル剤、または活性剤が担体中に組み込まれてカプセル化されている慣用の方法によって製造される軟カプセル剤の形態であってもよい。任意に、そのような用量は、放出速度を改変するために使用することができる慣用の手順に従って製造される腸溶コーティングまたは遅延放出または持続放出組成物を提供するために放出を遅延させる賦形剤を含むことができる。
液体剤形は、活性物質を水または油性賦形剤などの適切な液体担体に、任意に１以上の溶解剤、界面活性剤および/または懸濁助剤の存在下で溶解させることによって製造することができる。直腸投与のための組成物は、そのような投与のための既知の医薬形態であり、例えば、ワックス状またはポリエチレングリコールベースの坐剤である。
また、非経口投与のための組成物は、このような投与のための既知の医薬形態であり、例えば、適切な溶媒系中の滅菌溶液または懸濁液である。
局所投与のための組成物は、組成物を患部に直接適用することによって、または組成物を経皮パッチのようなビヒクル中に、または組成物をビヒクル中に含有させることによって投与することができるクリーム、ローション、軟膏、痛みを伴う局所への適用のための透過性膜が挙げられる。鉱物油およびワックスのような慣用の水性および非水性担体は、クリーム、ローションまたは軟膏を調製するために単独または組み合わせて使用することができる。ゲルは、式１の化合物をゲル化剤、例えば、水の存在下でカルボマーを含む局所ビヒクルと混合することによって製造することができる。 必要に応じて、経皮促進剤などのさらなる製剤助剤、増粘剤を組み込んでもよい。 別の実施形態では、本発明の化合物は、背痛の局所治療のための適切な医薬賦形剤と組み合わせて使用することができる。 化合物と薬学的賦形剤との組み合わせは、ゲルの形態であってもよく、ゲルは、痛みを伴う被験体の皮膚上に配置されるように成形され適合される。別の実施形態では、化合物と薬学的賦形剤との組み合わせをパッチの布地に組み込むことができ、パッチは痛みのある被験体の皮膚に配置および/または接着するように成形され適合される。より好ましい態様において、化合物は、パッチの布地内の医薬賦形剤からゆっくりと放出される。
【００２３】
式１の化合物は、以下に列挙する病態において有用な医薬組成物中に組み込むことができる。
本開示は、式１の化合物が、神経因性疼痛の治療のための臨床的状況において使用され得ることを意図する。別の実施形態において、化合物は、中枢神経系（ＣＮＳ）における疼痛の治療のために使用することができる。Ｓらに別の実施形態において、式１の化合物は、ＣＮＳに関連しない疼痛の治療に使用することができる。さらなる実施形態において、式１の化合物は、末梢神経系（ＰＮＳ）に関連する疼痛の治療に使用することができる。さらに別の実施形態において、式１の化合物は、ＣＮＳ障害の治療に使用することができる。一実施形態において、ＣＮＳ障害は、てんかん、虚血性脳血管疾患、脳卒中、脳腫瘍、アルツハイマー病、ピック病、ハンチントン病、痴呆、パーキンソン病および他の錐体外路障害、筋萎縮性側索硬化症および他の運動ニューロン脳膿瘍、硬膜下膿瘍、硬膜外膿瘍、化膿性頭蓋内血栓性静脈炎、髄脊髄炎および根髄炎、ウイルス性中枢神経系疾患、プリオン病などの炎症性疾患の治療に有用である。神経線維腫症、結節性硬化症、小脳辺縁血管芽細胞腫症、脳脊髄髄膜症候群、精神遅滞および他の発達障害を含む、神経系の栄養障害および代謝疾患を含む、慢性疲労症候群脳性麻痺、自律神経系障害、脳神経障害、脊髄疾患、筋ジストロフィーおよび他の神経筋障害、末梢神経系障害、皮膚筋炎および多発性筋炎、遺伝性、代謝性、内分泌系などの中枢神経系の腺腫季節性情動障害（ＳＡＤ）、アカゲザル、記憶喪失、疲労障害、糖尿病性神経障害、遅発性ジスキネジー、ジストニア症、精神病性精神病、帯状疱疹後神経痛、トゥレット症候群を含む精神障害進行性核上麻痺、大脳皮質基底核変性症、および家族性前頭側頭型痴呆が挙げられる。
別の実施形態において、式１の化合物は、ＣＮＳにおける疼痛（例えば、頭痛および片頭痛が挙げられるが、これらに限定されない）の治療に使用することができる。
別の実施形態では、式１の化合物は、背痛の局所治療のための医薬製剤中の適切なローションと組み合わせて使用することができる。別の実施形態において、本発明の化合物は、関節痛の局所治療に使用することができる。
【実施例】
【００２４】
式２ａおよび２ｂの化合物の光学分割
ステップ１：（１Ｒ、５Ｓ）−３−エチルビシクロ［３．２．０］ヘプタ−３−エン−６−オン（２ａ）
【化２８】
0006775009.tif 000029
室温で１−メチル−２−ピロリジノン（１８８ｍＬ）中の４−ピリジンカルボキシアルデヒド（５９．２９ｇ、５５４ｍｍｏｌ）および４−メチルモルホリン（５５．９ｇ、５５３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、３−エチルビシクロ（Ｒ）−２−（ジフェニルメチル）ピロリジン（１３．１１ｇ、５５．３ｍｍｏｌ）の［３．２．０］ヘプト−３−エン−６−オン（ＷＯ２０１．２１６９４７５）（７５．３４ｇ、５５３ｍｍｏｌ）１−メチル−２−ピロリジノン（３７．７ｍＬ）を加えた。混合物を４０℃で１８時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、次いでジエチルエーテル（９６０ｍＬ）を添加した。次いで、混合物を１Ｍ  ＨＣｌ（２×８２０ｍＬ）、水（６００ｍＬ）およびブライン（６００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。  得られた溶液を濾過し、減圧下（２００ｍｂａｒ、浴温２８℃）で蒸発させて、２６．４ｇの油を得た。水相をイソヘキサン（３００ｍＬ）でさらに抽出し、続いて水（１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。  得られた溶液を前に乾燥し、蒸発させ、残渣を生成物の第一バッチと合わせて、エナンチオ濃縮（１Ｒ、５Ｓ）−３−エチルビシクロ［３．２．０］ヘプタ−３−エン−６−オン（２８．８ｇ、３９％）を無色油状物として得た。
1H NMR（300MHz、CDCl 3）：δ5.21（1H、m）、4.23-4.14（1H、m）、3.30-3.12（1H,m）、2.85-2.70（3H、m）、2.38-2.25 m）、2.13（2H、q、J = 7.4）、1.06（3H、t、J =7.4）。
【００２５】
上記生成物のエナンチオマー純度の測定は、（１Ｒ、５Ｓ）−３−エチルビシクロ［３．２．０］ヘプタ−３−エン−６−オンと（２Ｒ、５Ｓ）−（−）−２，３−ブタンジオールとの反応に由来する、対応する１，３−ジオキソランの製造によって行った。１Ｈ−ＮＭＲシグナルの積分は、エナンチオマー過剰率（ｅｅ）が＞９８％であり、以下に記載するようにＧＣ−ＭＳ分析によって確認した。
【００２６】
（１Ｒ，５Ｓ）−３−エチルビシクロ［３．２．０］３−エン−６−オンのエナンチオマー純度の測定
ラセミ（１ＲＳ，５ＲＳ）−３−エチルビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エン−６−オンと（２Ｒ，３Ｒ）−（−）−２，３ブタンジオールとの反応から誘導された２つのジアステレオ異性体の１，３−ジオキソランも合成した。
比較および１Ｈ−ＮＭＲシグナルの積分により、エナンチオマー過剰（ｅｅ）が＞９８であることが示された。
【００２７】
（１’Ｒ、４Ｒ、５Ｒ、５’Ｓ）−３’−エチル−４，５−ジメチル−スピロ［１，３−ジオキソラン−２，６’−ビシクロ［３．２．０］エン］（単一エナンチオマー）
【化２９】
0006775009.tif 000030
（１Ｒ，５Ｓ）−３−エチルビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エン−６−オン（１００ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）、（２Ｒ、３Ｒ）−（−）−２，３−ブタンジオール（１３１ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）および／４オングストロームモレキュラーシーブを含むトルエン（２ｍＬ）中のα−トルエンスルホン酸一水和物（１４ｍｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）の混合物を１２０℃で１時間加熱した。室温に冷却後、大部分の溶媒を蒸発させた。
残渣をシリカ（５％ジエチルエテニルヘキサン）でのクロマトグラフィーにより精製して、（１Ｒ、４Ｒ、５Ｒ、５’Ｓ）−３’−エチル−４，５−ジメチル−スピロ［１，３−ジオキソラン−２，６’−ビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エン］。
1H NMR（300MHz、CDCl 3）：δ5.33（1H、m）、3.58-3.72（2H、m）、3.37-3.43（1H、m）、2.48-2.59（3H、m）、2.05-2.20 m）、1.31（3H、d、J = 6.0）、1.25（3H、d、J =6.0）、1.09（3H、t、J = 7.4）。
【００２８】
１Ｈ−ＮＭＲシグナルの積分は、エナンチオマー過剰（ｅｅ）が＞９８であることを示した。
ＧＣＭＳ（Ｈｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋａｒｄ  ５９７２、ＨＰ−５ＭＳ  ２５Ｍ×０．２５ｍｍ×０．２５μｍ、ヘリウムキャリアガス（ＧＣオーブン温度６０℃で１分間、次いで勾配６０〜３００℃で２４分間、次に３００℃で２０分間））。１０．３６分でｍ／ｚ（ＥＩ）２０８[M]+
【００２９】
（１’Ｓ、４’Ｒ、５Ｒ、５’Ｒ）−３’−エチル−４，５−ジメチル−スピロ［１，３−ジオキソラン−２，６’−ビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エン］及び(１’Ｒ、４Ｒ、５Ｒ、５Ｓ）−３’−エチル−４，５−ジメチル−スピロ［１，３−ジオキソラン−２，６’−ビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エン］（２つのジアステレオ異性体の１：１混合物）
【化３０】
0006775009.tif 000031
（１ＲＳ、５ＲＳ）−３−エチルビシクロ［３．２．０］ヘプタ−３−エン−６−オン（１００ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）、（２Ｒ、３Ｒ）−（−）−ブタンジオール（１３１ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）および／４オングストロームモレキュラーシーブを含むトルエン（２ｍＬ）中のα−トルエンスルホン酸一水和物（１４ｍｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）の混合物を１２０℃で１時間加熱した。室温に冷却後、大部分の溶媒を蒸発させた。残渣をシリカ（５％ジエチルエテニルヘキサン）でのクロマトグラフィーにより精製して、１’Ｓ、４’Ｒ、５Ｒ、５’Ｒ）−３’−エチル−４，５−ジメチル−スピロ［１，３−ジオキソラン−２，６’−ビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エン］及び(１’Ｒ、４Ｒ、５Ｒ、５Ｓ）−３’−エチル−４，５−ジメチル−スピロ［１，３−ジオキソラン−２，６’−ビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エン］の１：１混合物を提供する。
1H NMR（300MHz、CDCl 3）：δ5.37（0.5H、m）、5.33（0.5H、m）、3.58-3.72（2H、m）、3.49-3.54（0.5H、m）3.37-3.43 （3H、m）、2.42-2.60（3H、m）、2.02-2.21（4H、m）、1.30-1.32（3H、m）、1.23-1.26（3H、m）、1.09（3H、t、J=7.4)。
1H-NMRシグナルの積分はジアステレオ異性体の1：1比を示した。
GCMS（Hewlett-Packard 5972、HP-5MS 25M×0.25mm×0.25μm、ヘリウムキャリアガス（GCオーブン温度60℃で1分間、次いで勾配60〜300℃で24分間、次に300℃で20分間）を行った。10.28分および10.36分でm / z（EI）208 [M] +（ジアステレオ異性体の1：1比）。
【００３０】
式１の化合物の製造
ステップ２：
（２Ｅ／Ｚ）−２−（（１Ｒ、５５）−３−エチル−６−ビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エニリデン）アセトニトリル
【化３１】
0006775009.tif 000032
０℃の１Ｍカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドのテトラヒドロフラン溶液（１７９ｍＬ、１７９ｍｍｏｌ）に、シアノメチルホスホン酸ジエチル（３３．１９ｇ、１８７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で１０分間撹拌し、室温に温め、さらに３０分間撹拌した。  混合物を均圧滴下漏斗に移し、（１Ｒ、５Ｓ）−３−エチルビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エン−６−オン（工程１の生成物）の溶液（２３．２３ｇ、１７０．６ミリモル）のテトラヒドロフラン（２１９．５ｍＬ）溶液に０℃で加えた。混合物を室温に温め、１８時間撹拌した。混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液（２００ｍＬ）および酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、層を分離した。水層を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を飽和重炭酸ナトリウム水溶液（７５ｍＬ）、ブライン（７５ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。ろ過および蒸発後の残渣をＮＭＲによってチェックし、エチルリン酸副生成物を含有することが示された。粗生成物をイソヘキサン（２００ｍＬ）と水（３５０ｍＬ）に分配した。  層を分離し、水性層をイソヘキサン（４×１００ｍＬ）で再抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させて、（２Ｅ／Ｚ）−２−（（１Ｒ、５５）−３−エチル−６−ビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エニリデン）Ｅ／Ｚ異性体の６０：４０混合物（５．５ｇの出発物質からの前のバッチから得られた生成物と組み合わせた場合は３１．３ｇ、９３％）。
LCMS（Agilent、Waters SunFire CI 8,4.6×30mm、Acidic（0.05％ギ酸、6分法、3-97％アセトニトリル/水）：2.88分でm / z 160.2（M + H）+（ES +）。
1H NMR（300MHz、CDCl 3）：アルケン異性体の混合物δ5.43（0.4H、m）、5.23（0.6H、m）、5.09（0.6H、m）、4.98（0.4H、m）、 4.12（0.4H、br s）、3.93（0.6H、br s）、3.19-2.90（2H、m）、2.74-2.46（2H、m）、2.29-2.07（3H、m）、1.14-1.06 、m）。
【００３１】
ステップ３：
２−（（１Ｒ、５５，６５）−３−エチル−６−（ニトロメチル）ビシクロ［３．２．０］ヘプタ−３−エン−６−イル）アセトニトリル（６）
【化３２】
0006775009.tif 000033
２−（（１Ｒ、５Ｓ）−３−エチル−６−ビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エニリデン）アセトニトリル（工程２の生成物）（３１．２ｇ、窒素下、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（３２ｍＬ、３２．５ｇ、２１３．４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１８時間撹拌した。室温で１時間。反応混合物をオルトリン酸二水素カリウム（１２７０ｍＬ）の５％水溶液に注ぎ、酢酸エチル（９５０ｍＬ）を加えた。  層を分離し、水層を酢酸エチル（２×４００ｍＬ）でさらに抽出した。  合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させて粗生成物を得た。残留物をシリカパッド（３５％酢酸エチル／ヘキサン）上でクロマトグラフィーにより精製して、２−（（１Ｒ、５Ｓ）、６５Ｓ）−３−エチル−６−（ニトロメチル）ビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エン−６−イル）アセトニトリル（３８．３８ｇ、収率８９％＋純度の低い画分３．３ｇ）をジアステレオマーの−７０：３０混合物として得た。主要なジアステレオマーのデータ：２−（（１Ｒ、５Ｓ、６５Ｓ）−３−エチル−６−（ニトロメチル）ビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エン−６−イル）アセトニトリル。
ＬＣＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ、Ｗａｔｅｒｓ  ＳｕｎＦｉｒｅ  ＣＩ  ８，４．６×３０ｍｍ、Ａｃｉｄｉｃ（０．０５％ギ酸、６分法、３−９７％アセトニトリル／水）：２．８１分でｍ／ｚ２２１（Ｍ＋Ｈ）＋（ＥＳ＋）。
1H NMR（300MHz、DMSO-d 6）：δ5.33（1H、m）、4.86（2H、s）、3.16（1H、br.s）、3.02-2.82（1H、m）、2.65（2H、s） （1H、dd、J = 12.5,7.2）、1.06（3H、m） 、t、J =7.5）ppm。
【００３２】
ステップ４：
５−（（（１Ｒ、５５，６５）−３−エチル−６−（ニトロメチル）−６−ビシクロ［３．２．０］ヘプタ−３−エニル）メチル）−１Ｈ−テトラゾール（７）
【化３３】
0006775009.tif 000034
２−（（１Ｒ、５Ｓ）、６５Ｓ）−３−エチル−６−（ニトロメチル）ビシクロ［３．２．０］ヘプタ−３−エン−６−イル）アセトニトリル（工程３）（１１ｇ、５０ｍｍｏｌ）の１−メチル−２−ピロリジノン（１５８ｍＬ）溶液にトリエチ
ルアミン塩酸塩（２６．５５ｇ、１９２ｍｍｏｌ）およびアジ化ナトリウム（１２．５４ｇ、１９２ｍｍｏｌ）を加えた。フラスコを窒素下にて１１０℃で１８時間加熱し、次いで室温に冷却した。混合物を水（２００ｍＬ）で希釈し、水性２Ｍ水酸化ナトリウム溶液を用いて注意深くｐＨ１１−１２に調整した。  得られた溶液を酢酸エチル（２×３５０ｍＬ）で抽出し、有機層を１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（２×４０ｍＬ）で逆抽出した。  合わせた塩基性水相に２０％亜硝酸ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）を加え、混合物を氷浴で冷却した。２０％硫酸水溶液を、混合物が酸性になりガスの発生が止まるまで（〜ｐＨ１〜２）滴下した（ガス発生）。次いで、混合物をさらに１時間撹拌した。得られた水溶液を酢酸エチル（３×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（３×２５０ｍＬ）およびブライン（２×１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。濾過し、蒸発させて、粗生成物を得、これをシリカクロマトグラフィー（酢酸エチル：イソヘキサン：酢酸２５０：７５０：１）で精製して、（単一ジアステレオ異性体）５−（（（１Ｒ、５Ｓ、６Ｓ）−３−エチル−６−（ニトロメチル）−６−ビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エニル）メチル）−１Ｈ−テトラゾール(4.7 g, 17.8 mmol, 35%) (さらに 再精製用のジアルテレオマーの９５：５の混合物０．５ｇ）
LCMS (Agilent, Waters SunFire CI 8, 4.6x30mm, Acidic (0.05% formic acid, 6 min method, 3-97% acetonitrile/water): m/z 264 (M+H)+ (ES+); 262 (M-H)~ (ES~), at 2.38 min.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 16.10 (1H, br. s), 5.37 (1H, d, J = 1.5), 4.79 (2H, s), 3.22 (1H, br. s), 3.02 (2H, s), 2.94 - 2.81 (1H, m), 2.48 - 2.40 (1H, m), 2.19 - 2.02 (4H, m), 1.64 (1H, dd, J = 12.4, 7.5), 1.05 (3H, t, J = 7.5) ppm. 
【００３３】
ステップ５
［（１Ｒ、５Ｓ，６Ｓ）−３−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）−６−ビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エニル］メタンアミン（１）
【化３４】
0006775009.tif 000035
５−（（（１Ｒ、５５，６５）−３−エチル−６−（ニトロメチル）−６−ビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エニル）メチル）−１Ｈ−テトラゾール４）（１．３７７ｇ、５．２３ｍｍｏｌ）のエタノール（２７．３ｍＬ）溶液に濃塩酸（７．８５ｍＬ）を加えた。  亜鉛末（６．０８ｇ、９３．５ｍｍｏｌ）を１０分かけて（水／氷浴中で外部冷却して、内部反応温度が３５℃を超えないようにして）部分的に加えた。  反応混合物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物を５０ｇのＳＣＸカートリッジ（メタノール２００ｍＬで予め洗浄）に注ぎ、次いでメタノール（１６０ｍＬ）で溶離し、続いて水性メタノール（１：１，１２０ｍＬ）およびメタノール（１２０ｍＬ）で溶離した。  次いで樹脂を０．７Ｍアンモニアのメタノール溶液（３６０ｍＬ）で溶出し、画分を集めた。  生成物を含有する画分を合わせ、蒸発させて、［（１Ｒ、５Ｓ、６５Ｓ）−３−エチル−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）−６−ビシクロ［３．２．０］  −３−エニル］メタンアミン（１．１５９ｇ、９５％）を白色粉末として得た。
LCMS（Agilent、Waters SunFire CI 8,4.6×30mm、Acidic（0.05％ギ酸、6分法、3-97％アセトニトリル/水）：m / z234（M + H）+（ES +） ; 0.86分で232（MH）-（ES - ）。
1H NMR（400MHz、CD 3 OD）：δ5.42（1H、br m）、3.08-3.15（3H、m）、3.07（1H、d、J = 13）、3.03（1H、d、J = 16）、2.82 （2H、q、J = 7）、2.10〜2.16（1H、br。d、J =16）、1.93（1H、m）、2.54（1H、br。dd、J = 16,8） 、ddd、J = 12,9,3）、1.63（1H、dd、J = 12,7）、1.12（3H、t、J = 8）ppm。
【００３４】
ＮＭＲ割り当て：（ＣＤ３ＯＤ）
【表１】
0006775009.tif 000036
多重度の略語：s =一重項、d =二重項、t =三重項、q =四重項、m =多重項（例：二重項のdd二重項または接頭辞br-
4.90p.p.mの残留水に関連するプロトン化学シフト
HPLC分光器を参照する内部分光器を使用して参照される炭素化学シフト：99.3％（210nmでのAuC％）。
カラム：Waters XBridge C18,150×4.6mm、3.5μ
溶媒A：水+ 0.1％TFA
溶媒B：アセトニトリル+ 0.1％TFA
流速：l。 O ml /分
温度：40℃
注射容量：アセトニトリル/水（1UV / ml）中の1mg / ml溶液5μl
波長：
溶媒
勾配：
【表２】
0006775009.tif 000037
保持力ca. 15.7分
時間：
キラルHPLC純度：> 99.9。
カラム：Daicel Chiralpak IC、250×4.6mm、5μ
移動相：イソヘキサン：エタノール（70：30）
アイソクラティック解析を実行し、30分のランタイム条件：
流速：1.5ml /分
温度：周囲
エタノール溶液中の0.5mg / ml溶液の10μl：
UV 215nm
波長：
保持所望の異性体は約40℃で溶出する。 20分
時間：望ましくない異性体は約10℃で溶出する。 10分
旋光度：[cc] D-101.5（c = EtOH（2mL）中27.4mg）融点：203-206℃
【００３５】
ラセミ混合物で例示したニトロ化（工程５）の代替手順
ラセミ体［（１Ｒ、５５，６５）−３−エチル−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）−６−ビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エニル］メタンアミン
ラセミ体の５−（（（１Ｒ、５Ｓ）、６５Ｓ）−３−エチル−６−（ニトロメチル）−６−ビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エニル）メチル）−ヒドラジン水和物（２０１μＬ、２０７ｍｇ、４．１３ｍｍｏｌ）を窒素下でエタノール（２．２ｍＬ）中の１Ｈ−テトラゾール（２７５ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）に添加した。水（６７μＬ）中のラネーニッケルスラリーを加え、混合物を室温で１時間撹拌した。ラネーニッケルスラリー（１００μＬ）およびヒドラジン水和物（２００μＬ）のさらなるアリコートを加え、混合物をさらに１８時間撹拌した。ラネーニッケルスラリー（２００μＬ）およびヒドラジン水和物（２００μＬ）のさらなるアリコートを加え、混合物をさらに２時間撹拌した後、反応混合物をセライトで濾過し、エタノールで洗浄した。得られた溶液を蒸発させ、メタノールで溶離するＳＣＸカートリッジで精製した。次いで、樹脂をメタノール溶液中の０．７Ｍアンモニアで溶出し、画分を集めた。生成物を含有する画分を合わせ、蒸発させて、ラセミ［（１Ｒ、５５，６５）−３−エチル−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）−６−ビシクロ［３．２．０］ヘプト−３−エニル］メタンアミン（２１６ｍｇ、８９％）を得た。
ＬＣＭＳおよび１  Ｈ−ＮＭＲデータは、上記のステップ５で報告されている。