(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
日本型亜種の難消化性澱粉含量の推定式が、試料が精米粉の場合、
【数１】
0006650555.tif 000032
であることを特徴とする米澱粉特性評価方法。
【請求項２】
日本型亜種の難消化性澱粉含量の推定式が、試料が米澱粉の場合、
【数２】
0006650555.tif 000033
であることを特徴とする米澱粉特性評価方法。
【請求項３】
アミロペクチンのグルコース重合度１３以上の中長鎖画分含量の推定式が、
【数３】
0006650555.tif 000034
であることを特徴とする米澱粉特性評価方法。
【請求項４】
日本型亜種のアミロース含量の推定式が、試料が精米粉の場合、
【数４】
0006650555.tif 000035
であることを特徴とする米澱粉特性評価方法。
【請求項５】
日本型亜種のアミロース含量の推定式が、試料が米澱粉の場合、
【数５】
0006650555.tif 000036
であることを特徴とする米澱粉特性評価方法。
【請求項６】
硬質米の難消化性澱粉含量の推定式が、試料が米澱粉の場合、
【数６】
0006650555.tif 000037
であることを特徴とする米澱粉特性評価方法。
【請求項７】
硬質米のアミロース含量の推定式が、試料が米澱粉の場合、
【数７】
0006650555.tif 000038
であることを特徴とする米澱粉特性評価方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、米澱粉の糊化粘度特性に基づいて、日本型米、インド型米などの同一亜種同士や硬質米同士といった近縁種同士でも識別可能とするための、難消化性澱粉含量、アミロース含量、あるいは難消化性澱粉と密接な関係のあるアミロペクチン中長鎖画分含量などの澱粉特性を簡易迅速かつ高精度で評価する技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、わが国は少子高齢化社会となり、機能性成分を多く含む食事によって健康の維持増進、疾病予防を図る必要がある。
【０００３】
澱粉のアミロース含量の高い米やアミロペクチン長鎖の多い米は、難消化性であり、食後の血糖上昇が緩やかで、糖尿病発症の予防が期待されている（非特許文献１、非特許文献２）ことから、各種の米の難消化性澱粉及び関連糖鎖画分含量を簡易迅速かつ高精度に測定する技術の開発はきわめて重要である。
【０００４】
従来、米澱粉のアミロペクチン鎖長分布は、イソアミラーゼによって枝切りした後に高速液体クロマトグラフによって測定されてきた（非特許文献３）。
【０００５】
また、蛍光標識ゲルろ過法によって分析した米澱粉のアミロース分子量分布やアミロペクチン鎖長分布が米澱粉の熱糊化特性や食味に影響することが報告されている（非特許文献４）。
【０００６】
これらの従来の測定方法は、アミロペクチン鎖長分布などの正確な測定値が得られるものの、米澱粉における疾病予防機能の期待される難消化性澱粉含量を測定するものではない上に、時間と労力を要し、高速液体クロマトグラフなどの高価な装置を必要とするためにコストのかかる方法であり、育種選抜や食品加工の分野で簡易迅速かつ低コストで高精度に米澱粉の難消化性澱粉含量あるいは難消化性澱粉含量と関係の深い糖鎖画分含量を評価するためには、新たな測定方法が必要とされていた。
【０００７】
また、本発明者は穀類の食品物性値を表示する糊化特性測定装置が知られている（特許文献１）。
【０００８】
しかし、この糊化特性測定装置は、糊化特性を変数とする推定式を用いるものであるが、推定の対象が米における米飯物性や小麦における生麺の硬さなどの食品物性であり、難消化性澱粉含量や難消化性澱粉と密接に関係するアミロペクチン中長鎖画分含量等の機能性成分含量を推定するものではなかった。
【０００９】
また、米澱粉の糊化粘度特性に基づいて、米のアミロース含量、難消化性澱粉含量、アミロペクチン糖鎖画分含量等を推定する米澱粉特性の評価方法も知られている（特許文献２）。この評価方法は、日本型米とインド型米を含む広範な試料米同士で高い識別を可能とするものである。
【００１０】
しかしながら、この評価方法によっても、現在、わが国の生産米の９９％以上を占める日本型米同士、あるいは逆に、インドやタイなどの南アジア各国で大部分を占めるインド型米同士、あるいは硬質米同士といった、近縁種同士での識別は、きわめて必要性が高いにもかかわらず困難であるという問題が残されていた。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】特許第３９０８２２７号公報
【特許文献２】特開２０１５−５５５４８号公報
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】大坪研一、中村澄子、宇都宮一典、増田泰伸、辻  啓介：硬質米と糖尿病発症予防、実用化に向けた取り組み．食品工業, 53(14), 46-51, 2010.
【非特許文献２】Ken’ichi Ohtsubo, Sumiko Nakamura, Keisuke Tsuji, Kazunori Utsunomiya, Yasunobu Masuda, Mineo Hasegawa: Possibility of diabetes prevention by high-amylose rice. Rice studies, present and future, Sankyosyuppan Inc., pp.109-115, 2012.
【非特許文献３】Masako Asaoka, Kazutoshi Okuno, Yasumi Sugimoto, Masahiro Yano, Takeshi Omura, and Hidetsugu Fuwa: Structure and properties of endosperm starch and wated soluble polysaccharides from sugary mutant of rice, Starch, 37, 364-366(11), 1985.
【非特許文献４】Toshinari Igarashi, Isao Hanashiro, and Yasuhito Takeda: Molecular structures and some properties of rice starches from Hokkaido cultivars. J. Applied Glycoscience, 55, 5-12, 2008.
【非特許文献５】Toshinari Igarashi, Masafumi Kinoshita, Hideki Kanda, Tomoko Nakamori, and Toshimi Kusume: Evaluation of hardness of waxy rice cake based on the amylopectin chain-length distribution. J. Applied Glycoscience, 55, 13-19, 2008.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
そこで、本発明は、試料が近縁種同士の場合でも、難消化性澱粉含量など、機能性に関係する亜種別の米澱粉の特性を、糊化粘度特性に基づいて、簡易迅速、低コスト、かつ高精度に評価する方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
上記の課題を解決すべく、本発明者らは鋭意検討した結果、精米粉あるいは米澱粉試料の糊化粘度特性値そのものではなく、それらの比率を変数とする多変量解析を行い、その解析値を、本発明者らが新たに見いだした推定式に当てはめることによって、難消化性澱粉含量、アミロース含量、あるいは難消化性澱粉含量と関係の深いアミロペクチン中長鎖画分含量を簡易迅速、低コスト、かつ高精度に推定することができることを見いだし、本発明に想到した。
【００１５】
すなわち、本発明は、重回帰分析の説明変数として、最高粘度、最低粘度、最終粘度、ブレークダウン、セットバック、コンシステンシーからなる糊化特性値の比率および糊化開始温度を使用し、亜種別の米澱粉特性を評価することを特徴とする米澱粉特性評価方法である。
【００１６】
また、米澱粉特性が難消化性澱粉含量であることを特徴とする。
【００１７】
また、米澱粉特性がアミロペクチンのグルコース重合度が１３以上の中長鎖画分含量であることを特徴とする。
【００１８】
また、米澱粉特性がアミロース含量であることを特徴とする。
【００１９】
また、日本型亜種の難消化性澱粉含量の推定式が、試料が精米粉の場合、
【００２０】
【数１】
0006650555.tif 000002
【００２１】
であることを特徴とする。
【００２２】
また、日本型亜種の難消化性澱粉含量の推定式が、試料が米澱粉の場合、
【００２３】
【数２】
0006650555.tif 000003
【００２４】
であることを特徴とする。
【００２５】
また、アミロペクチンのグルコース重合度１３以上の中長鎖画分含量の推定式が、
【００２６】
【数３】
0006650555.tif 000004
【００２７】
であることを特徴とする。
【００２８】
また、日本型亜種のアミロース含量の推定式が、試料が精米粉の場合、
【００２９】
【数４】
0006650555.tif 000005
【００３０】
であることを特徴とする。
【００３１】
また、日本型亜種のアミロース含量の推定式が、試料が米澱粉の場合、
【００３２】
【数５】
0006650555.tif 000006
【００３３】
であることを特徴とする。
【００３４】
また、硬質米の難消化性澱粉含量の推定式が、試料が米澱粉の場合、
【００３５】
【数６】
0006650555.tif 000007
【００３６】
であることを特徴とする。
【００３７】
また、硬質米のアミロース含量の推定式が、試料が米澱粉の場合、
【００３８】
【数７】
0006650555.tif 000008
【００３９】
であることを特徴とする。
【００４０】
また、日本型米のアミロース含量、アミロペクチン中長鎖含量あるいは難消化性澱粉含量を目的変数とし、ラピッドビスコアナライザーで測定する精米試料懸濁液の一定時間ごとの粘度を説明変数とし、最小二乗法によって誤差を最小とする推定式を作成することを特徴とする糊化粘度特性に基づく日本型米のアミロース含量、アミロペクチン中長鎖含量あるいは難消化性澱粉含量の推定方法である。
【発明の効果】
【００４１】
本発明によって、人の食後血糖上昇を緩やかにすることで糖尿病発症予防や肥満予防などの機能性が期待される難消化性澱粉の、日本型米同士あるいはインド型米同士といった近縁亜種別の米や硬質米同士といった近縁種の米同士における含量を、糊化粘度測定装置のみを必要とする精米粉あるいは米澱粉の糊化粘度測定によって、簡易迅速、高精度、かつ低コストで測定することができる。
【００４２】
また、本発明により、米粉あるいは米澱粉の糊化粘度測定によって、近縁の米でもアミロペクチンのグルコース重合度１３以上の中長鎖画分の含量を推定することが可能となり、当該米試料の機能性や利用特性について簡易かつ高精度に推定することができる。
【００４３】
さらに、簡易な糊化粘度測定によって、近縁の米のアミロース含量についても推定式が確立されたため、当該試料米の品質特性を簡易かつ高精度に推定することも可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】ラピッドビスコアナライザーによる糊化粘度特性の測定例と各糊化特性値を示すグラフである。
【図２】精米粉末を試料とする日本型米の難消化性澱粉含量の推定式および未知試料による検定結果を示すグラフである。
【図３】精米粉末を試料とする日本型米の難消化性澱粉含量の推定式および未知試料による検定結果（比較例）を示すグラフである。
【図４】米澱粉を試料とする日本型米の難消化性澱粉含量の推定式および未知試料による検定結果を示すグラフである。
【図５】米澱粉を試料とする日本型米の難消化性澱粉含量の推定式および未知試料による検定結果（比較例）を示すグラフである。
【図６】米澱粉を試料とする日本型米のアミロペクチン中長鎖含量（Fb1+2+3）の推定を示すグラフである。
【図７】精米粉末を試料とする日本型米のアミロース含量の推定および未知試料による検定結果を示すグラフである。
【図８】精米粉末を試料とする日本型米のアミロース含量の推定および未知試料による推定式の検定結果（比較例）を示すグラフである。
【図９】米澱粉を試料とする日本型米のアミロース含量の推定および未知試料による推定式の検定結果を示すグラフである。
【図１０】米澱粉を試料とする日本型米のアミロース含量の推定および未知試料による推定式の検定結果（比較例）を示すグラフである。
【図１１】精米粉末を試料とする硬質米の難消化性澱粉含量の推定式および未知試料による検定結果を示すグラフである。
【図１２】米澱粉を試料とする硬質米のアミロース含量の推定式および未知試料による検定結果を示すグラフである。
【図１３】最小二乗法（ＰＬＳ法）によるアミロース含量および難消化性澱粉の推定式およびその検定結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００４５】
本発明は、精米粉あるいは米澱粉の糊化粘度特性に基づいて、試料が近縁の米同士でも、難消化性澱粉含量および難消化性澱粉と密接な関係のある糖鎖画分含量などの澱粉特性を簡易迅速かつ高精度で評価する技術に関する。
【００４６】
本発明は、推定式の説明変数として糊化粘度パラメーターそのものではなく、糊化粘度パラメーターの比を採用することによって、日本型米同士やインド型米同士、あるいは硬質米同士といった近縁種の米同士でも高精度の識別を可能とし、同時に、精米粉を試料とする糊化粘度測定結果に基づく高精度の推定をも可能とするものである。
【００４７】
また、本発明は、日本型米同士、インド型米同士といった近縁種同士の難消化性澱粉やアミロー素含量、アミロペクチン中長鎖含量等を目的変数とし、これらを近縁種同士で高精度に識別するための第２の方法として、糊化粘度特性を測定する際の一定時間ごとの全ての粘度を説明変数とし、予測誤差を最小とするための重回帰分析を行うものである。
【００４８】
ここで、本発明における精米粉とは、一般の日本型米あるいはインド型米、最近新たに育成された新形質米、さらにはアミロペクチン長鎖型の米の精米を、衝撃式粉砕機やロール式粉砕機あるいは気流粉砕機などを用いて粉砕することによって粉末化したものを指す。
【００４９】
本発明における米澱粉とは、精米試料を脱脂・除タンパクしたものであり、低温下で希アルカリによってタンパク質を除去し、続いてエタノール及びアセトンによって脱脂したものを指すが、アルカリに替えてプロテアーゼなどによって除タンパクしても良く、熱ブタノールやヘキサンなどによって脱脂しても良い。
【００５０】
本発明における糊化粘度特性は、米粉あるいは米澱粉を試料とし、パーテン製のラピッドビスコアナライザー（ＲＶＡ）やブラベンダー製のアミログラフ、微量ビスコグラフ、アントンパール製のレオメーターなど、一般の回転式粘度測定装置を使用し、水または他の分散媒中に試料を懸濁し、撹拌しながら温度を上昇、保持、あるいは下降させ、その間の溶液または懸濁液の粘度を回転抵抗値として検出することによって測定され、糊化開始温度、最高粘度、最低粘度、最終粘度あるいはブレークダウン（最高粘度と最低粘度の差）、セットバック（最終粘度と最高粘度の差）、コンシステンシー（最終粘度と最低粘度の差）などのパラメーターとして表現される特性を指す。
【００５１】
パーテン製ラピッドビスコアナライザーによって測定した糊化特性値の例を図１に示す。
【００５２】
なお、この明細書や図面などにおいて、糊化開始温度をＰＴ、最高粘度をＶＭＡＸ、最低粘度をＶＭＩＮ、最終粘度をＶＦＩＮ、ブレークダウンをＢＤ、セットバックをＳＢ２、コンシステンシーをＣと表記する場合がある。
【００５３】
本発明における重回帰分析とは、１つの目的変数を複数の説明変数で予測しよう多変量解析の１種であり、重回帰分析によれば、どの説明変数が、どの程度目的変数に影響を与えているかを知ることができる。たとえばｎ個の独立変数がある場合、重回帰式は
【００５４】
【数８】
0006650555.tif 000009
【００５５】
となる。それぞれの独立変数にかかっている係数を「偏回帰係数」と呼ぶ。モデルの適合性は決定係数（重相関係数の２乗）で表され、分散分析で検定できる。
【００５６】
本発明における澱粉特性とは、澱粉の機能上の特性を指し、たとえば摂食後の消化吸収性のような生理機能上の特性や、糊化澱粉の粘度特性のような物理的な特性を指す。
【００５７】
本発明における難消化性澱粉とは、摂食後に人の胃や小腸で消化・吸収されにくい澱粉を指し、澱粉分子が共有結合によって相互に架橋されている場合や、化学的に修飾されている場合、水素結合によって結晶化している場合、澱粉分子が構造的に他の素材で被覆されている場合、糊化澱粉が老化したものなどが挙げられ、食後血糖上昇が緩やかになる、食物繊維と同様に整腸効果があるなどと報告されている澱粉を指し、たとえば、メガザイム社製の酵素キットによって測定することができる。
【００５８】
本発明におけるアミロペクチンの中長鎖画分とは、澱粉の主成分であるアミロペクチンを構成するグルコースの重合体であって、イソアミラーゼによるα―１，６結合を枝切りした後のゲルろ過クロマトグラフィーによって、分子量の大小による分離・分画を行った場合に、グルコース重合度１３以上の長い分子からなる糖鎖画分を指す。
【実施例】
【００５９】
以下に実施例に基づいて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に何ら限定されるものではない。
【００６０】
＜実施例１＞（試料米の難消化性澱粉含量の測定）
各種の試料精米２ｇをそれぞれ１０ｍＬの０．１％水酸化ナトリウム水溶液に懸濁し、４℃で３時間、振とうし、除タンパクした。軽く遠心し、沈殿を３回純水で洗浄し、２回９９％エタノールで洗浄し、次いでアセトンで洗浄して風乾し、試料澱粉とした。
【００６１】
乾物重量１００ｍｇの澱粉試料を試験管に取り、ヨード比色定量法によってアミロース含量を測定した結果を表１、表２、表３、表４および表６に示す。
【００６２】
また、同じ試料を用いて、メガザイム社製レジスタントスターチ測定用キットを用いて、難消化性澱粉含量を測定した結果は表１、表２、表３、表４および表６に示すとおりであり、ＥＭ１０（表１の試料米番号１）、ＥＭ７２（表１の試料米番号４）、ＥＭ１７４（表１の試料米番号７）などが高い値を示した。
【００６３】
＜実施例２＞（鎖長の異なる糖鎖画分の定量）
実施例１で調製した澱粉試料４ｍｇを蒸留水１．６ｍＬに懸濁し、１００℃で澱粉を糊化し、１Ｍ酢酸緩衝液ｐＨ３．５を１６μＬ加え、ｐＨ３．５に調製した後、イソアミラーゼ（林原生化学研究所製）０．６７μＬ（０．０３Ｕ／ｍｇ）を加え、４５℃で１５時間反応させ、澱粉の１，６グルコシド結合を枝切りした。次いで、１００℃で１０分間加熱して酵素を失活させ、水中で冷却し、遠心濃縮機（トミー製ＣＣ−１０５）で乾燥試料とした。
【００６４】
この試料にジメチルスルホキシド１１１μＬを加えて加熱溶解した。これに蒸留水８９μＬと２−アミノピリジン２００μＬを加えて良く混合し、暗所で６０℃、１時間インキュベートした。その後、シアノ水素化ホウ素ナトリウムを２００μＬ加え、２４時間インキュベートし、ＨＰＬＣ用試料とした。次にこの試料をメンブレンフィルター（ミリポア製、ポアサイズ０．２μｍ）で濾過し、濾液２０μＬを日本分光製ＨＰＬＣに注入して分析を行った。カラムはＳＨＯＤＥＸＯＨＰＡＫＳＢ−８０３ＨＱとＳＨＯＤＥＸＯＨＰＡＫＳＢ―８０２．５を連結し、蛍光検出器ＬＰ２０２０で検出した。米試料澱粉のアミロペクチン鎖長分布の測定結果を表１、表５および表６に示す。
【００６５】
＜実施例３＞（米澱粉あるいは精米粉末の糊化粘度特性の測定）
米澱粉あるいは精米粉末の乾物３ｇに２５ｍＬの純水を加え、以下の測定条件により粘度特性を測定した。すなわち５０℃で１分間攪拌した後、４分間で５０℃から９３℃まで昇温し、９３℃で７分間攪拌後、９３℃から５０℃まで４分間降温し、５０℃で３分間攪拌後の粘度を測定しました。最高粘度と最低粘度の差をブレークダウンとし、最終粘度と最低粘度の差をコンシステンシーとし、最高粘度と最終粘度の差をセットバックとした。
【００６６】
表１および表７にラピッドビスコアナライザー（ＲＶＡ）による各試料米の糊化特性値を示す。最高粘度においては、高アミロース米の越のかおり（表１の試料米番号２６）、越佳香（表１の試料米番号２３）、良食味米のゆめぴりか（表  １の試料米番号１３）等が高い値を示し、超硬質米のＥＭ１０（表１の試料米番号１）、ＥＭ１４５（表１の試料米番号８）、もち米（表１の試料米番号１０、１１，１２）は低い値を示した。これらの結果は澱粉を用いた糊化特性試験のため、各酵素活性およびタンパク、脂質の影響を受けず、アミロースとアミロペクチンの澱粉特性の影響によるものと推定される。
【００６７】
また、糊化開始温度においては、超硬質米（表１の試料米番号１〜９）は非常に高い値を示し、続いて高アミロース米の越のかおり（表１の試料米番号２６）と日印交雑種のスーパーハイブリッド米（表１の試料米番号３１）が高い値を示した。また、最高粘度／最低粘度においては、超硬質米（表１の試料米番号１〜９）は非常に低い値を示し、インディカ米（表１の試料米番号２２５〜３２）も比較的低い値を示したが、インディカ米の中でも高アミロース米のハイブリッド米（表１の試料米番号３１）は高い値を示した。良食味米（表１の試料米番号１３〜１７）、一般汎用米（表１の試料米番号１８〜２０）はほぼ高い値を示した。次に、老化の指標とされているコンシステンシーの値においては、インド型の夢十色（表１の試料米番号３２）、超硬質米（表１の試料米番号１〜９）が高く、次にインディカのホシユタカ（表１の試料米番号２５）、日本型硬質米のカルナローリ（表１の試料米番号２４）、インディカ高アミロース米の越のかおり（表１の試料米番号２６）が高い値を示した。
【００６８】
＜実施例４＞（日本型米の精米粉末の糊化特性を変数とする難消化性澱粉含量の推定式の作成と未知試料による検定）
図２のＡに示すように、２１品種の日本型米の精米粉末の糊化特性値（表７）を説明変数に、目的変数を難消化性澱粉含量（ＲＳ）とし、重回帰分析により、ＰＴとＳＢ２／Ｃ、ＶＭＡＸ／ＶＭＩＮおよびＶＭＡＸ／ＶＦＩＮを変数とする推定式を作成した。
【００６９】
【数９】
0006650555.tif 000010
【００７０】
この推定式の決定係数（重相関係数の２乗）は０．８０を示し、図２のＢに示すように、未知試料１７品種による検定では、決定係数は０．７２を示し、Ａの推定式は、未知試料に対しても非常に高い相関を示し、適用性の広い推定式であることが明らかになった。
【００７１】
＜比較例１＞（日本型米の精米粉末の糊化特性を変数とする難消化性澱粉含量の推定式の作成と未知試料による検定）
図３のＡに示すように、実施例４と同じ２１品種の日本型米の精米粉末の糊化特性値（表７）を説明変数に、目的変数を難消化性澱粉含量とし、重回帰分析により、ＰＴとＶＭＩＮを変数とする推定式を作成した。
【００７２】
【数１０】
0006650555.tif 000011
【００７３】
この推定式の決定係数は０．７９を示したが、図３のＢに示すように、未知試料１７品種による検定では、決定係数は０．５５を示し、Ａの推定式は、未知試料に対する相関と適用性において、実施例４の推定式に比べ著しく劣る推定式であることが明らかになった。
【００７４】
＜実施例５＞（日本型米の澱粉の糊化特性を変数とする難消化性澱粉含量の推定式の作成と未知試料による検定）
図４のＡに示すように、日本型米１１品種の澱粉の糊化特性値（表８）を説明変数に、目的変数を難消化性澱粉含量とし、重回帰分析により、ＳＢ２／Ｃ、ＶＭＡＸ／ＶＦＩＮおよびＶＭＡＸ／ＶＭＩＮを変数に用いた推定式を作成した。
【００７５】
【数１１】
0006650555.tif 000012
【００７６】
この推定式の決定係数は１．００を示し、図４のＢに示すように、未知試料１２品種の検定では決定係数は０．８３を示し、Ａの推定式は、未知試料に対しても高い相関を示し、適用性の広い推定式であることが明らかになった。
【００７７】
＜比較例２＞（日本型米の澱粉の糊化特性を変数とする難消化性澱粉含量の推定式の作成と未知試料による検定）
図５のＡに示すように、日本型米１１品種の澱粉の糊化特性値（表８）を説明変数に、目的変数を難消化性澱粉含量とし、重回帰分析により、ブレークダウン（ＢＤ）を変数に用いた推定式を作成した。
【００７８】
【数１２】
0006650555.tif 000013
【００７９】
この推定式の決定係数は０．７２を示し、図５のＢに示すように、未知試料１２品種の検定では決定係数は０．１６を示し、Ａの推定式は、実施例５の推定式に比べて著しく劣る推定式であることが明らかになった。
【００８０】
＜実施例６＞（日本型米の米澱粉の糊化特性を変数とするアミロペクチン中長鎖の推定式の作成と未知試料による検定）
表５に示す１０品種の日本型米の澱粉のアミロペクチンのグルコース重合度１３以上の中長鎖画分含量（ＡＰＬ）を目的変数とし、表１に示す糊化特性値のＳＢ２／Ｃ、ＶＭＡＸ／ＶＦＩＮおよびＶＭＡＸ／ＶＭＩＮを説明変数として重回帰分析を行い、推定式を作成した。
【００８１】
【数１３】
0006650555.tif 000014
【００８２】
その結果、図６のＡに示すように、この推定式の決定係数は０．９９を示し、表１に示す日本型米６品種の米澱粉のアミロペクチン中長鎖における決定係数は０．９７を示し、Ａの推定式は、未知試料に対しても高い相関を示し、適用性の広い推定式であることが明らかになった。
【００８３】
＜実施例７＞（日本型米の精米粉末の糊化特性を変数とするアミロース含量の推定式の作成と未知試料による検定）
２１品種の日本型米の精米粉末の糊化特性値（表７）を説明変数に、目的変数をアミロース含量（ＡＣ）とし、重回帰分析により、ＰＴとＳＢ２／Ｃ、ＶＭＡＸ／ＶＭＩＮおよびＶＭＡＸ／ＶＦＩＮを変数とする推定式を作成した。
【００８４】
【数１４】
0006650555.tif 000015
【００８５】
図７のＡに示すように、この推定式の決定係数は０．８９を示し、図７のＢに示すように、未知試料１７品種による検定では、決定係数は０．７１を示し、Ａの推定式は、未知試料に対しても非常に高い相関を示し、適用性の広い推定式であることが明らかになった。
【００８６】
＜比較例３＞（日本型米の精米粉末の糊化特性を変数とするアミロース含量の推定式の作成と未知試料による検定）
実施例７と同じ２１品種の日本型米の精米粉末の糊化特性値（表７）を説明変数に、目的変数をアミロース含量とし、重回帰分析により、ＰＴおよびＣを変数とする推定式を作成した。
【００８７】
【数１５】
0006650555.tif 000016
【００８８】
図８のＡに示すように、この推定式の決定係数は０．８７を示したが、図８のＢに示すように、未知試料１７品種による検定では、決定係数は０．３０を示し、Ａの推定式は、未知試料に対する相関と適用性において、実施例７の推定式に比べて著しく劣る推定式であることが明らかになった。
【００８９】
＜実施例８＞（日本型米の澱粉の糊化特性を変数とするアミロース含量の推定式の作成と未知試料による検定）
日本型米１１品種の澱粉の糊化特性値（表８）を説明変数に、目的変数をアミロース含量とし、重回帰分析により、ＳＢ２／Ｃ、ＶＭＡＸ／ＶＦＩＮおよびＶＭＡＸ／ＶＭＩＮを変数に用いた推定式を作成した。
【００９０】
【数１６】
0006650555.tif 000017
【００９１】
その結果、図９のＡに示すように、この推定式の決定係数は０．８６を示し、図９のＢに示すように、未知試料１２品種の検定では決定係数は０．７６を示し、Ａの推定式は、未知試料に対しても高い相関を示し、適用性の広い推定式であることが明らかになった。
【００９２】
＜比較例４＞（日本型米の澱粉の糊化特性を変数とするアミロース含量の推定式の作成と未知試料による検定）
日本型米１１品種の澱粉の糊化特性値（表８）を説明変数に、目的変数をアミロース含量とし、重回帰分析により糊化開始温度（ＰＴ）を変数に用いた推定式を作成した。
【００９３】
【数１７】
0006650555.tif 000018
【００９４】
その結果、図１０のＡに示すように、この推定式の決定係数は０．３７を示し、図１０のＢに示すように、未知試料１２品種の検定では決定係数は０．１６を示し、Ａの推定式は、実施例８の推定式に比べて著しく劣る推定式であることが明らかになった。
【００９５】
＜実施例９＞（硬質米の精米粉末の糊化特性を変数とする難消化性澱粉含量の推定式の作成と未知試料による検定）
８品種の硬質米の精米粉末の糊化特性値（表７）を説明変数に、目的変数を表２の難消化性澱粉含量とし、重回帰分析により、ＳＢ２／Ｃ、ＶＭＡＸ／ＶＭＩＮおよびＶＭＡＸ／ＶＦＩＮを変数とする推定式を作成した。
【００９６】
【数１８】
0006650555.tif 000019
【００９７】
図１１のＡに示すように、この推定式の決定係数は０．８３を示し、図１１のＢに示すように、未知試料８品種による検定では、決定係数は０．６９を示し、Ａの推定式は、未知試料に対しても非常に高い相関を示し、適用性の広い推定式であることが明らかになった。
【００９８】
＜実施例１０＞（硬質米の精米粉末の糊化特性を変数とするアミロース含量の推定式の作成と未知試料による検定）
８品種の硬質米の精米粉末の糊化特性値（表７）を説明変数に、目的変数を表１のアミロース含量とし、重回帰分析により、ＳＢ２／Ｃ、ＶＭＡＸ／ＶＭＩＮおよびＶＭＡＸ／ＶＦＩＮを変数とする推定式を作成した。
【００９９】
【数１９】
0006650555.tif 000020
【０１００】
図１２のＡに示すように、この推定式の決定係数は０．８７を示し、図１２のＢに示すように、未知試料８品種による検定では、決定係数は０．７７を示し、Ａの推定式は、未知試料に対しても非常に高い相関を示し、適用性の広い推定式であることが示された。
【０１０１】
＜実施例１１＞（ＰＬＳ解析によるアミロース及び難消化性澱粉の推定式の開発）
１１点の日本型米を試料に用いて、ラピッドビスコアナライザー（ＲＶＡ）の一定時間（４秒）ごとの粘度を変数とし、試料ごとに２８４点のデータを変数とし、表２のアミロース含量および難消化性澱粉含量を目的変数として最小二乗法（ＰＬＳ法）によって推定式を作成し、日本型米の未知試料１０点を試料として適合性を検定した。
【０１０２】
【数２０】
0006650555.tif 000021
【０１０３】
とすると、各データ収集ポイントＸｎにかかる係数ｂｎは表１０のとおりである。
【０１０４】
この推定式の作成時におけるアミロース含量の推定精度は、決定係数で０．９８９９であり、未知試料の精度は、決定係数で０．８９９４であった。
【０１０５】
また、難消化性澱粉含量の推定式の決定係数は０．９６０５であり、未知試料の決定係数は0.9667であった。これらの結果は、図１３に示すように、きわめて高い推定式が得られ、未知試料に対する適用性もきわめて良好であった。
【０１０６】
【表１】
0006650555.tif 000022
【０１０７】
【表２】
0006650555.tif 000023
【０１０８】
【表３】
0006650555.tif 000024
【０１０９】
【表４】
0006650555.tif 000025
【０１１０】
【表５】
0006650555.tif 000026
【０１１１】
【表６】
0006650555.tif 000027
【０１１２】
【表７】
0006650555.tif 000028
【０１１３】
【表８】
0006650555.tif 000029
【０１１４】
【表９】
0006650555.tif 000030
【０１１５】
【表１０】
0006650555.tif 000031
【図１】
0006650555.tif 000039
【図２】
0006650555.tif 000040
【図３】
0006650555.tif 000041
【図４】
0006650555.tif 000042
【図５】
0006650555.tif 000043
【図６】
0006650555.tif 000044
【図７】
0006650555.tif 000045
【図８】
0006650555.tif 000046
【図９】
0006650555.tif 000047
【図１０】
0006650555.tif 000048
【図１１】
0006650555.tif 000049
【図１２】
0006650555.tif 000050
【図１３】
0006650555.tif 000051