(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次のピーク（２シータ）：６．９４；９．８４；１３．９２；２０．１３；２３．３０±０．２０度を有する粉末Ｘ線回折スペクトルを有することを特徴とするヒオデオキシコール酸ナトリウムの多形形態ＦＩＩ。
【請求項２】
ピークの立ち上がりが２６３．５℃、ピークが２６８．９℃で、エンタルピーが１４．１１ジュール／ｇに等しい吸熱ピークを２６０℃に示すＤＳＣプロファイルを有する、請求項１に記載のヒオデオキシコール酸ナトリウム（ＮａＨＤＣ）の多形形態ＦＩＩ。
【請求項３】
３５０℃まで質量の有意な損失が観察されない熱重量測定プロファイルを特徴とする、請求項１に記載のヒオデオキシコール酸ナトリウムの多形形態ＦＩＩ。
【請求項４】
図８で次の周波数に次の特性ピーク：３２５４．５；２９５８．９；２９１７．３；２８７４．６；２８５１．０；１５６０．７；１４７４．９；１４５４．７；１４４３．６、１３９４．２；１３４７．４；１２９２．９；１２６１．０；１２４５．７；１２１８．６；１１６１．２；１００２．３ｃｍ-1を示すＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルを有し、各々のピークに対して示された値の誤差範囲が±１ｃｍ-1である、請求項１に記載のヒオデオキシコール酸ナトリウムの多形形態ＦＩＩ。
【請求項５】
ＮａＨＤＣ結晶の結晶形態ＦＩＩ中の水の量が１％未満であり、前記パーセントは結晶の全質量を基準とした値を指す、請求項１に記載のヒオデオキシコール酸ナトリウムの多形形態ＦＩＩ。
【請求項６】
ヒオデオキシコール酸ナトリウムを、ケトン系溶媒、エステルのカテゴリーに属する溶媒、アルコール、ニトリルのカテゴリーに属する溶媒またはそれらの混合物から選択される有機溶媒により再沈殿に供することを含む、請求項１から５までのいずれか１項に記載のヒオデオキシコール酸ナトリウムの多形形態ＦＩＩの製造方法。
【請求項７】
ケトン系溶媒が鎖Ｃ3−Ｃ6を有し、エステルのカテゴリーに属する溶媒が鎖Ｃ2−Ｃ5を有し、アルコール系溶媒が鎖Ｃ1−Ｃ5を有し、および／またはニトリルのカテゴリーに属する溶媒が鎖Ｃ2−Ｃ3を有する、請求項６に記載のヒオデオキシコール酸ナトリウムの多形形態ＦＩＩの製造方法。
【請求項８】
ケトン系溶媒がアセトン、メチル−イソ−ブチルケトン（ＭＩＢＫ）、メチル−エチル−ケトン（ＭＥＫ）もしくはそれらの混合物から選択され、エステルのカテゴリーに属する溶媒が酢酸エチル、ギ酸エチル、酢酸プロピルもしくはそれらの混合物から選択され、アルコール系溶媒がメタノール、エタノール、１−プロピルアルコール（１−プロパノール）、イソプロピルアルコール（２−プロパノール）、１−ブタノール、２−ブタノール、２−ペンタノールもしくはそれらの混合物から選択され、および／またはニトリルのカテゴリーに属する溶媒がアセトニトリル、プロピオニトリルもしくはそれらの混合物から選択される、請求項６または７に記載のヒオデオキシコール酸ナトリウムの多形形態ＦＩＩの製造方法。
【請求項９】
再沈殿が５５〜１２０℃に含まれる温度で行われる、請求項６から８までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
再沈殿が６〜１０時間に含まれる時間行われる、請求項６から９までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
以下の工程：
ａ）ヒオデオキシコール酸のアルカリ土類金属の塩の調製およびそれに続くその酸性化によって行われて精製されたヒオデオキシコール酸を得る、式ＩＩのヒオデオキシコール酸の少なくとも一回の精製工程；
【化１】
0006670744.tif 000006
ｂ）精製されたヒオデオキシコール酸の、８．５〜９．５に含まれるｐＨまでのＮａＯＨを用いた処理による、ヒオデオキシコール酸ナトリウムの調製工程；
ｃ）ケトン系溶媒、エステルのカテゴリーに属する溶媒、アルコール、ニトリルのカテゴリーに属する溶媒またはそれらの混合物から選択される有機溶媒による再沈殿によってヒオデオキシコール酸ナトリウムの多形形態ＦＩＩを得る工程
を含む、請求項６から１０までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
工程ｃ）において、ケトン系溶媒が鎖Ｃ3−Ｃ6を有し、エステルのカテゴリーに属する溶媒が鎖Ｃ2−Ｃ5を有し、アルコール系溶媒が鎖Ｃ1−Ｃ5を有し、および／またはニトリルのカテゴリーに属する溶媒が鎖Ｃ2−Ｃ3を有する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
工程ｃ）において、ケトン系溶媒がアセトン、メチル−イソ−ブチルケトン（ＭＩＢＫ）、メチル−エチル−ケトン（ＭＥＫ）もしくはそれらの混合物から選択され、エステルのカテゴリーに属する溶媒が酢酸エチル、ギ酸エチル、酢酸プロピルもしくはそれらの混合物から選択され、アルコール系溶媒がメタノール、エタノール、１−プロピルアルコール（１−プロパノール）、イソプロピルアルコール（２−プロパノール）、１−ブタノール、２−ブタノール、２−ペンタノールもしくはそれらの混合物から選択され、および／またはニトリルのカテゴリーに属する溶媒がアセトニトリル、プロピオニトリルもしくはそれらの混合物から選択される、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１４】
工程ｃ）が５５〜１２０℃に含まれる温度で実施され、および／または前記工程ｃ）が６〜１０時間に含まれる時間行われる、請求項１１から１３までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
ヒオデオキシコール酸のアルカリ土類金属の塩が式ＩＩＩのヒオデオキシコール酸のマグネシウム塩である、請求項１１から１４までのいずれか１項に記載の方法。
【化２】
0006670744.tif 000007
【請求項１６】
工程ａ）を二回繰り返す、請求項１１から１５までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
工程ａ）の終了時に得られる前記式ＩＩのヒオデオキシコール酸が９９．５％〜９９．９％に含まれる化学的純度を有する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
工程ｂ）の終了時に得られるヒオデオキシコール酸ナトリウムが９９．５％〜９９．９％に含まれる化学的純度を有する、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
工程ｃ）の終了時に得られるヒオデオキシコール酸ナトリウムの多形形態ＦＩＩが９９．５％〜９９．９％に含まれる化学的純度を有する、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
請求項１から５までのいずれか１項に記載のヒオデオキシコール酸ナトリウムの結晶多形形態ＦＩＩを含む医薬組成物。
【請求項２１】
２５μｍ〜４２５μｍに含まれる粒度分布を有するヒオデオキシコール酸ナトリウムの多形形態ＦＩＩを含む、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
経口、非経口、皮下、静脈内、筋肉内、鼻内、局所（例えば経皮もしくは経粘膜）または直腸投与用である、請求項２０または２１に記載の組成物。
【請求項２３】
アテローム性動脈硬化性疾患の治療および／または予防用医薬組成物を製造するための、請求項１から５までのいずれか１項に記載のヒオデオキシコール酸ナトリウムの多形形態ＦＩＩの使用。
【請求項２４】
アテローム性動脈硬化性疾患の治療および／または予防に使用するための、請求項２０から２２までのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の対象は、形態ＩＩ（ＦＩＩ）と命名されたヒオデオキシコール酸ナトリウム（ＮａＨＤＣ）の新しい無水多形結晶形態およびそれを調製するための方法である。
かかる方法により、無水多形結晶形態ＩＩ（ＦＩＩ）のヒオデオキシコール酸ナトリウムを高い化学的および多形純度で得ることが可能になる。
本発明はまた、形態Ｉ（ＦＩ）および形態ＩＩＩ（ＦＩＩＩ）と命名された無水多形結晶形態、それぞれ４個および８個の水分子で水和されたＮａＨＤＣの結晶形態であるＳＩおよびＳＩＩと命名されたＮａＨＤＣの水和形態、ならびに非晶質形態も記載する。
【背景技術】
【０００２】
次の化学式（式Ｉ）およびＣＡＳ  ＲＮ  １０４２１−４９−５を有するヒオデオキシコール酸ナトリウム、すなわち３α，６α−ジヒドロキシ−５β−コラン−２４−酸ナトリウムは、例えばＡｔｈｅｒｏＮｏｖａ  Ｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ  Ｉｎｃ．の米国特許第８３０４３８３号に記載されているように、アテローム性動脈硬化性疾患の治療および／または予防に特に有用である。
【化１】
0006670744.tif 000002
対応する酸、すなわち、一般にヒオデオキシコール酸（ＨＤＣＡ）と命名された、式ＩＩの３α，６α−ジヒドロキシ−５β−コラン−２４−酸は、豊富な割合という点で、ブタ胆汁中に存在する胆汁酸の総量に対しておよそ４０質量％もブタ胆汁中に存在する最も重要な胆汁酸である。
【０００３】
【化２】
0006670744.tif 000003
現在、ＨＤＣＡは、様々な工程を含むプロセスでブタ胆汁から抽出される。先ず第一に、通常糖誘導体およびタウロ誘導体の形態で胆汁中に存在する胆汁酸を脱抱合するために必要な胆汁けん化過程、すなわち水溶液中における胆汁の塩基加水分解過程を実施する。
次に、この時点では遊離のカルボン酸の形態で溶液中に存在する胆汁酸の脂肪酸からの分離工程がある。この「脂肪除去」工程は、ケトン、酢酸エステル、炭化水素、炭化水素の混合物、例えば石油エーテル、アルカン、アルケン、芳香族炭化水素の混合物、等のような溶媒を用いて実施される。
その後、ＨＤＣＡは、水溶液または含水アルコール性溶液による沈殿によってマグネシウム塩またはその他の塩の形態で分離される。これらの塩の分離に適したアルコールは鎖Ｃ１−Ｃ５を有する、例えばメタノール、エタノール、１−プロピルアルコール（１−プロパノール）、イソプロピルアルコール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、２−ペンタノール、等のようなアルコールである。
（ＨＤＣ）2Ｍｇと略記される式ＩＩＩのヒオデオキシコール酸のマグネシウム塩は、酸性化後８０〜９０％の化学的純度を有するＨＤＣＡを得ることができるために、上記のような水性または含水アルコール性溶液による様々な再沈殿工程を通してさらに精製しなければならない。
【０００４】
【化３】
0006670744.tif 000004
この手順および類似のプロセスは特許文献であるＣａｎａｄａ  Ｐａｃｋｅｒｓ  Ｌｔｄの米国特許第４１８６１４３号、Ｅｒｒｅｇｉｅｒｒｅ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａ  Ｃｈｉｍｉｃａ  Ｓ．ｐ．Ａ．の米国特許第５３４９０７４号、Ｄｉｐｈａｒｍａ  Ｓ．ｐ．Ａ．の米国特許第７９８２０６２号、Ｄａｅ  Ｗｏｏｎｇ  Ｐｈａｒｍａの国際公開第２００７／０６９８１４号および国際公開第２００７／０７８０３９号に記載されている。
従来技術はＨＤＣＡまたはその塩の結晶形態について全く記載していないし、特にヒオデオキシコール酸のナトリウム塩の多形の存在に関する情報は全く公表されていない。例えば、Ｎｏｎａｐｐａらの論文、Crystal Growth & Design, Vol 9, N. 11 (2009) p. 4710−4719は天然の胆汁酸中に見出される幾つかの多形の特性を決定しているが、市場で入手可能なＨＤＣＡのサンプルでは多形が発見されなかったことを指摘している。
【発明の概要】
【０００５】
従って、本発明の目的は、ヒオデオキシコール酸のナトリウム塩の新しい安定な多形形態（多形形態ＦＩＩ）およびＮａＨＤＣの前記形態を高い化学的および多形純度で提供することができるその調製方法を得ることである。
多形形態ＦＩＩは、ＮａＨＤＣの他の記載されている形態のいずれとも異なり、２５℃および４０℃の等温曲線において湿気収着サイクルの非常に高い安定性を有する（図１０、１１、１２および１３参照）。多形形態ＦＩＩは認められた他の全ての多形形態と異なる非吸湿性挙動を有し（図２７、２８および５８参照）、従って非常に安定であり、保管が容易である。この挙動は、高い吸湿性、従って結果としてその不安定性のために生じる保存の困難性という共通の問題を有する胆汁酸の他のナトリウム塩と完全に異なる。
多形形態ＦＩＩは２５℃および４０℃の等温曲線において湿気に対して極めて高い驚くべき安定性を有する。
【０００６】
実際、２５℃での収着においてサンプルは７０％ＲＨ（相対湿度）まで安定である（７０％ＲＨで２％未満の質量増大を示す）。７０％ＲＨを超えると湿気を吸収し、９０％ＲＨでは約３５％の質量変化がある。以下で我々はこの多形形態ＦＩＩの湿度安定性試験の結果を示す。
２５℃でのＤＶＳ（動的蒸気収着）分析から、多形形態ＦＩは多形形態ＦＩＩより安定性が低く、多形形態ＦＩＩは２５℃での収着で７０％ＲＨまで安定であるが、多形形態ＦＩは２０％ＲＨですでに約２％の質量変化を示す（図２７参照）。また、４０℃でのＤＶＳ分析から、多形形態ＦＩは多形形態ＦＩＩより安定性が低く、多形形態ＦＩＩは４０℃での収着で７０％ＲＨまで安定であるが、多形形態ＦＩは３０％ＲＨですでに約２％の質量変化を示す（図２８参照）。さらに、ＮａＨＤＣ混合物（例えば無水アセトン中で行われる最後の再沈殿の前に得られる異なる多形形態の混合物）は、２５℃でのＤＶＳ分析から多形形態ＦＩＩより安定性が低い（図５８参照）。多形形態ＦＩＩは約７０％ＲＨまで収着において安定であるが、ＮａＨＤＣ混合物は２０％ＲＨですでに約３％の質量変化を示す。
【０００７】
本発明の方法により、特にアテローム性動脈硬化性疾患の治療および／または予防において、医薬の有効成分としてＮａＨＤＣを使用するための確定した粒度（粒度分布）および最適な化学的−物理的特性を有するＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩを得ることが可能になる。
本発明の方法のさらなる利点はその再現性、そのスケールアップ可能性、ならびに、最終のバイオアベイラビリティーに影響を及ぼす可能性がある全ての作動パラメーターに対して最適な形態（晶癖）、すなわち粉末の嵩密度（見掛け密度）、ぎっしり詰めた後の密度（タップ密度）、圧縮性、溶解速度、流動性および吸湿性を有する粉末として多形形態ＦＩＩの有効成分を得る可能性である。
本発明の方法ではヒオデオキシコール酸ナトリウムの多形形態ＦＩＩを所望の粒度分布で得ることが可能となるので、その溶解速度の増大を通してそのバイオアベイラビリティーを改善するために通常行われる有効成分の摩砕および微粒子化のような操作を好都合に回避することができる。
このように、明白な省エネルギーのみならず、生成物の化学および／または多形純度に影響を及ぼす可能性がある、例えば、すでに形成された結晶形態中に様々な割合の無定形態を潜在的に創り出す可能性がある微粒子化（公知の無定形態化過程）のような操作を回避することが可能である。
最後に、本方法では、ヒオデオキシコール酸ナトリウムの多形形態ＦＩＩを高い収率で得ることが可能となる。
【０００８】
８０〜９０％の化学的純度を有する式ＩＩの３α，６α−ジヒドロキシ−５β−コラン−２４−酸（ＨＤＣＡ）（ヒオデオキシコール酸−ＨＤＣＡ）から、９９．５％〜９９．９％の化学的純度を有する多形的に純粋な形態、多形形態ＦＩＩのヒオデオキシコール酸のナトリウム塩（ＮａＨＤＣ）に至る過程の全収率は、６５．０％〜８５．０％（質量／質量）および６２．０％〜８０．０％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）の範囲である。
ＨＤＣＡは脱イオン／飲料水または含水アルコール溶液中でマグネシウム塩（ＨＤＣ）2Ｍｇを用いた塩化によって精製される。（ＨＤＣ）2Ｍｇは沈殿するが不純物の塩は溶解したまま残る。酸官能性は、（ＨＤＣ）2Ｍｇの水性懸濁液を酸性化することによって復元される。９９．５％〜９９．９％の純度が達成されるまでこの過程を反復して繰り返す。最初の塩化過程の収率は９０％〜９５％（ｗ／ｗ、ｍｏｌ／ｍｏｌ）であり、その後の塩化過程での収率は９５％〜９８％（ｗ／ｗ、ｍｏｌ／ｍｏｌ）である。こうして精製されたＨＤＣＡを水酸化ナトリウム水溶液に溶解した後アセトンで沈殿させる。収率は８５％〜９５％（ｗ／ｗ）および８０％〜９０％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）である。この生成物（ＮａＨＤＣ）を、一旦乾燥させてから、９０％〜９５％（ｗ／ｗ、ｍｏｌ／ｍｏｌ）の収率で多形形態ＦＩＩが得られるまでアセトン中加熱下で懸濁させる。この過程の全収率は６５％〜８５％（ｗ／ｗ）および６２％〜８０％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）である。
【０００９】
本発明の多形形態対象、すなわち多形形態ＦＩＩは、無水であり、室温で熱力学的に最も安定な形態であり、本発明のプロセス条件では他の形態に相互変換しない。さらに、医薬品の処方中に入れられているとき、以下に記載されるヒオデオキシコール酸ナトリウムの他の多形形態への相互変換が観察されないので経時的に安定である。既に指摘したように、他の形態と異なり湿気に対して極めて強固で驚くべき安定性を有しており、他の全ての形態と異なり非吸湿性挙動を有している。これは、胆汁酸のカテゴリーに属するナトリウム塩として尋常ではない。
本発明において、結晶多形または多形という用語は、Ｘ線粉末回折（ＸＰＲＤ）、ＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲ分光法（フーリエ変換赤外−減衰全反射分光法）、ＦＴ−ＲＡＭＡＮ分光法、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、熱重量分析（ＴＧＡ）ならびに２５℃および４０℃での等温曲線における動的蒸気収着（ＤＶＳ）分析のような分析法によって特徴付けることができる医薬の有効成分の特定の結晶形態を指すために使用される。
【００１０】
本発明において、多形形態ＦＩＩは、区別することなく、次の用語の１つによって名付けることができる：
−  多形形態ＩＩ、または
−  多形形態ＩＩ（ＦＩＩ）、または
−  結晶多形形態ＩＩ、または
−  結晶多形形態ＩＩ（ＦＩＩ）、または
−  無水結晶多形形態ＩＩ、または
−  無水結晶多形形態ＩＩ（ＦＩＩ）、または
−  結晶形態ＦＩＩ、または
−  無水結晶形態ＦＩＩ。
【００１１】
多形形態ＦＩは、区別することなく、次の用語の１つにより名付けることができる：
−  多形形態Ｉ、または
−  多形形態Ｉ（ＦＩ）、または
−  結晶多形形態Ｉ、または
−  結晶多形形態Ｉ（ＦＩ）、または
−  無水結晶多形形態Ｉ、または
−  無水結晶多形形態Ｉ（ＦＩ）、または
−  結晶形態ＦＩ、または
−  無水結晶形態ＦＩ。
【００１２】
多形形態ＦＩＩＩは、区別することなく、次の用語の１つにより名付けることができる：
−  多形形態ＩＩＩ、または
−  多形形態ＩＩＩ（ＦＩＩＩ）、または
−  結晶多形形態ＩＩＩ、または
−  結晶多形形態ＩＩＩ（ＦＩＩＩ）、または
−  無水結晶多形形態ＩＩＩ、または
−  無水結晶多形形態ＩＩＩ（ＦＩＩＩ）、または
−  結晶形態ＦＩＩＩ、または
−  無水結晶形態ＦＩＩＩ。
【００１３】
同様に、一例として使用される水和した多形形態ＳＩに対して、区別することなく、次のタイプの用語を使用することが可能である：
−  水和多形形態ＳＩ、または
−  水和結晶多形形態ＳＩ。
一例として使用される水和した多形形態ＳＩＩに対して、区別することなく、次のタイプの用語を使用することが可能である：
−  水和多形形態ＳＩ、または
−  水和結晶多形形態ＳＩ。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＩＩ（ＦＩＩ）のＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）を示すグラフである。
【図２】無水結晶形態ＩＩ（ＦＩＩ）の図１のＸＰＲＤピークの２シータ値を対応する相対強度と共に示す表である。太字で強調表示されたピークは形態ＦＩＩの特性ピークである。
【図３】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＩＩ（ＦＩＩ）の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）プロファイルを示すグラフである。
【図４】ＮａＨＤＣの２５℃でのＸＲＰＤ無水形態ＦＩＩ、１００℃でのＸＲＰＤ無水形態ＦＩＩ、２２０℃でのＸＲＰＤ無水形態ＦＩＩ、２８０℃でのＸＲＰＤ無水形態ＦＩＩの、２５℃での無水形態Ｉ（ＦＩ）に対する比較を示すグラフである。
【図５】図４のＮａＨＤＣの２５℃での無水形態ＦＩＩ、１００℃での無水形態ＦＩＩ、２２０℃での無水形態ＦＩＩ、２８０℃での無水形態ＦＩＩのＸＲＰＤピークのリストの、２５℃でのＸＰＲＤ無水形態ＦＩに対する比較を示す表である。
【図６】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩＩの熱重量測定プロファイル（ＴＧＡ）を示すグラフである。
【図７】ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩのＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルを示すグラフである。
【図８】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩＩの図７の特性ピークＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲのｃｍ-1値を示す表である。
【図９】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩＩのＦＴ−ＲＡＭＡＮスペクトルを示すグラフである。
【図１０】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩＩの２５℃での等温曲線を示すグラフである。
【図１１】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩＩの図１０の２５℃での等温比を示す表である。
【図１２】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩＩの４０℃での等温曲線を示すグラフである。
【図１３】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩＩの図１２の４０℃での等温比を示す表である。
【図１４】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩのＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）を示すグラフである。
【図１５】無水結晶形態ＦＩの図１４のＸＰＲＤピークの２シータ値を対応する相対強度と共に示す表である。太字のピークは形態Ｉ（ＦＩＩ）に特徴的であるとして規定することができる。
【図１６】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩの示差走査熱量測定（ＤＳＣ）プロファイルを示すグラフである。
【図１７】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩの熱重量測定プロファイル（ＴＧＡ）を示すグラフである。
【図１８】ＮａＨＤＣの２５℃でのＸＲＰＤ無水結晶形態ＦＩ、１００℃でのＸＲＰＤ無水結晶形態ＦＩ、２００℃でのＸＲＰＤ無水結晶形態ＦＩおよび２８０℃でのＸＲＰＤ無水結晶形態ＦＩの比較を示すグラフである。
【図１９】図１８のＮａＨＤＣの無水形態ＦＩのピークのリスト、２５℃でのＸＲＰＤ無水形態ＦＩ、１００℃でのＸＲＰＤ無水形態ＦＩ、２００℃でのＸＲＰＤ無水形態ＦＩ、２８０℃でのＸＲＰＤ無水形態ＦＩの比較を示す表である。
【図２０】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩのＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルを示すグラフである。
【図２１】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩの図２０の特性ピークＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲのｃｍ-1値を示す表である。
【図２２】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩのＦＴ−ＲＡＭＡＮスペクトルを示すグラフである。
【図２３】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩの２５℃での等温曲線を示すグラフである。
【図２４】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩの図２３の２５℃での等温比を示す表である。
【図２５】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩの４０℃での等温曲線を示すグラフである。
【図２６】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩの図２５の４０℃での等温比を示す表である。
【図２７】ＮａＨＤＣの無水形態ＦＩおよび無水形態ＦＩＩの２５℃での等温曲線の比較を示すグラフである。
【図２８】ＮａＨＤＣの無水形態ＦＩおよび無水形態ＦＩＩの４０℃での等温曲線の比較を示すグラフである。
【図２９】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＩＩＩ（ＦＩＩＩ）のＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）を示すグラフである。
【図３０】無水結晶形態ＦＩＩＩの図２９のＸＰＲＤピークの２シータ値を対応する相対強度と共に示す。太字のピークは形態ＩＩＩ（ＦＩＩＩ）に特徴的であるとして規定することができる表である。
【図３１】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩＩＩの示差走査熱量測定（ＤＳＣ）プロファイルを示すグラフである。
【図３２】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩＩＩの熱重量測定プロファイル（ＴＧＡ）を示すグラフである。
【図３３】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩＩＩのＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルを示すグラフである。
【図３４】ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＦＩＩＩの図３３のＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲの特性ピークのｃｍ-1値を示す表である。
【図３５】ＮａＨＤＣの水和した結晶形態ＳＩのＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）を示すグラフである。
【図３６】水和した結晶形態ＳＩの図３５のＸＰＲＤピークの２シータ値を対応する相対強度と共に示す表である。太字のピークは形態ＳＩ（ＳＩ）に特徴的であるとして規定することができる。
【図３７】ＮａＨＤＣの水和した結晶形態ＳＩ（ＳＩ）の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）プロファイルを示すグラフである。
【図３８】ＮａＨＤＣの水和した結晶形態ＳＩの熱重量測定プロファイル（ＴＧＡ）を示すグラフである。
【図３９】ＮａＨＤＣの水和した結晶形態ＳＩのＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルを示すグラフである。
【図４０】ＮａＨＤＣの水和した結晶形態ＳＩＩ（ＳＩＩ）のＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）を示すグラフである。
【図４１】水和した結晶形態ＳＩＩの図４０のＸＰＲＤピークの２シータ値を対応する相対強度と共に示す表である。太字のピークは形態ＳＩＩ（ＳＩＩ）に特徴的であるとして規定することができる。
【図４２】ＮａＨＤＣの水和した結晶形態ＳＩＩの示差走査熱量測定（ＤＳＣ）プロファイルを示すグラフである。
【図４３】ＮａＨＤＣの水和した結晶形態ＳＩＩの熱重量測定プロファイル（ＴＧＡ）を示すグラフである。
【図４４】ＮａＨＤＣの水和した結晶形態ＳＩＩ（ＳＩＩ）のＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルを示すグラフである。
【図４５】ＮａＨＤＣの非晶質形態のＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）を示すグラフである。
【図４６】ＮａＨＤＣの非晶質形態の図４５のＸＰＲＤピークの２シータ値を対応する相対強度と共に示す表である。太字のピークは非晶質形態に特徴的であるとして規定することができる。
【図４７】ＮａＨＤＣの非晶質形態の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）プロファイルを示すグラフである。
【図４８】ＮａＨＤＣの非晶質形態の熱重量測定プロファイル（ＴＧＡ）を示すグラフである。
【図４９】ＮａＨＤＣの非晶質形態のＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルを示すグラフである。
【図５０】ＮａＨＤＣの非晶質形態の図４９のＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲの特性ピークのｃｍ-1値を示す表である。
【図５１】ＮａＨＤＣの非晶質形態の２５℃での等温曲線を示すグラフである。
【図５２】ＮａＨＤＣの非晶質形態の図５１の２５℃での等温比を示す表である。
【図５３】ＮａＨＤＣ混合物のＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）を示すグラフである。
【図５４】ＮａＨＤＣ混合物の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）プロファイルを示すグラフである。
【図５５】ＮａＨＤＣ混合物の熱重量測定プロファイル（ＴＧＡ）を示すグラフである。
【図５６】ＮａＨＤＣ混合物の２５℃での等温曲線を示すグラフである。
【図５７】ＮａＨＤＣ混合物の図５６の２５℃での等温比を示す表である。
【図５８】ＮａＨＤＣ混合物およびＮａＨＤＣの無水形態ＦＩＩの２５℃での等温曲線比較を示すグラフである。
【図５９】ＨＤＣＡとして酸形態にあるＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩのＨＰＬＣ（クロマトグラム）プロファイルを示すグラフである。
【図６０】ＨＤＣＡとしての酸形態のＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩの純度を分析するためのＨＰＬＣ法および機器条件を示す表である。
【図６１】酢酸エチル中で４８時間２５℃の温度で再沈殿した後ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩおよびＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩを１：１の割合（ｗ／ｗ）で混合することにより得られたＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩのＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）を示すグラフである。
【図６２】ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩの図６１のＸＰＲＤピークの２シータ値を対応する相対強度と共に示す表である。太字のピークは形態ＩＩ（ＦＩＩ）に特徴的であるとして規定することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
従って、本発明の対象は多形形態ＦＩＩのヒオデオキシコール酸ナトリウムである。ＮａＨＤＣ結晶多形形態ＦＩＩ内の水の量は１％未満、好ましくは０．６％未満、さらにより好ましくは０．４％未満であり、ここで前記パーセントは結晶の全質量に対する。
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩは、図１に一例として示されているようなＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）プロファイルにより、および／または図３に一例として示されているような示差走査熱量測定（ＤＳＣ）プロファイルにより、および／または図６に一例として示されているような熱重量測定プロファイル（ＴＧＡ）により、および／または図７に示されているＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルにより、図９に一例として示されているようなＦＴ−ＲＡＭＡＮスペクトルにより、図１０に一例として示されているような２５℃における等温曲線での動的蒸気収着（ＤＶＳ）分析により、および図１２に一例として示されているような４０℃における等温曲線での動的蒸気収着（ＤＶＳ）分析により特徴付けられる。
【００１６】
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩは図１に示されているＸＰＲＤプロファイルにより特徴付けられ、その特性ピークは図２の次の２シータ位置に見られる：６．９４；９．８４；１３．９２；２０．１３；２３．３０度。ここで各々のピークに対して示された値の誤差範囲は±０．２０度２シータである。
図２は、多形形態ＦＩＩの前述のＸＰＲＤピークの値を対応する相対強度と共に示す。
【００１７】
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩは図３に示されているＤＳＣプロファイルによって特徴付けられる。かかるグラフで、様々な温度でのＸ線粉末回折（ＸＰＲＤ）分析により確認される通り（図４、５参照）ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩの多形形態ＦＩへの固体−固体相転移に基づく吸熱ピークを２６０℃に見ることが可能であり、ピークの立ち上がりは２６３．５℃、ピークは２６８．９℃にあり、エンタルピーは１４．１１ジュール／ｇに等しい。従って、多形形態ＦＩＩは融解せず、２６０℃まで安定であり、２８０℃では以下に記載される結晶形態ＦＩに変換する。図３で観察することができる第２のピークは、３１０℃でのＮａＨＤＣの多形形態ＦＩの融解に基づく吸熱ピークであり、ピークの立ち上がりは３１１．６℃、ピークは３１４．２℃、融解のエンタルピーは６７．４ジュール／ｇに等しい。
【００１８】
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩは図６に示されているＴＧＡプロファイルにより特徴付けられる。ＴＧＡプロファイルは、約４０℃で浸潤水に帰すことができるおよそ０．４％の初期質量損失を示し、その後は３５０℃までそれ以上の質量の損失は観察されず、かかる形態がその「無水」形態にあるという事実を実験的に確認している。
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩは図７に示されているＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルにより特徴付けられ、その特性ピークは図８において次の周波数で見られる：３２５４．５；２９５８．９；２９１７．３；２８７４．６；２８５１．０；１５６０．７；１４７４．９；１４５４．７；１４４３．６；１３９４．２；１３４７．４；１２９２．９；１２６１．０；１２４５．７；１２１８．６；１１６１．２；１００２．３ｃｍ-1。ここで、各々のピークについて示されている値の誤差範囲は±１ｃｍ-1である。
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩは図９に示されているＦＴ−ＲＡＭＡＮスペクトルにより特徴付けられる。
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩは、図１０に一例として示されているような２５℃±０．１での等温曲線におけるＤＶＳグラフにより、そして図１１に示されているように％で表わされる対応する値により特徴付けられる。
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩは、図１２に一例として示されているような４０℃±０．１での等温曲線におけるＤＶＳグラフにより、そして図１３に示されているように％で表わされる対応する値により特徴付けられる。
【００１９】
多形形態ＦＩＩは、ＮａＨＤＣの全ての他の記載されている形態と異なり、２５℃および４０℃での等温曲線の湿気収着サイクルにおいて極めて高い安定性を有する（図１０、１１、１２、１３参照）。既に上で指摘したように、多形形態ＦＩＩは見出された全ての他の多形形態（図２７、２８、５８参照）と異なって非吸湿性挙動を有し、従って非常に安定であり、保管が容易である。この挙動は、高い吸湿性という共通の問題を有し、従って結果として生じるその不安定性に起因する保存の困難性を有する胆汁酸の他のナトリウム塩にとって完全に異常である。
多形形態ＦＩＩは２５℃および４０℃での等温曲線において湿気に対して非常に高い驚くべき安定性を有する。
【００２０】
実際、２５℃での収着においてサンプルは７０％ＲＨまで安定である（７０％ＲＨにおいて、２％未満の質量増加を示す）。７０％ＲＨを超えると湿気を吸収し、９０％ＲＨにおいては約３５％の質量変化がある。２５℃での脱着においてサンプルは５０％ＲＨまで安定であり、約３４％の質量の変化（約８個の水分子に対応する）を維持する。およそ４０％ＲＨで変曲を見ることができ、この時点でサンプルはまだ約１８％の水（約４個の水分子に対応する）を含有しているようである。０％ＲＨで質量変化はゼロである。４０℃での収着においてサンプルは６０％ＲＨまで安定である（７０％ＲＨでは２％未満の質量増加を示す）。９０％ＲＨでは約４５％の質量変化がある（おそらくサンプルは潮解性になる）。４０℃での脱着において、５０〜４０％ＲＨで曲線はおそらくサンプルの固化でプラトーを示す。０％ＲＨで質量変化は約６％である。
【００２１】
２５℃でのＤＶＳ分析から、多形形態ＦＩは多形形態ＦＩＩより安定性が低い。すなわち、多形形態ＦＩＩは２５℃での収着において約７０％ＲＨまで安定であるが、多形形態ＦＩはすでに２０％ＲＨでおよそ２％の質量の変化を示す（図２７参照）。４０℃でのＤＶＳ分析から、多形形態ＦＩは多形形態ＦＩＩより安定性が低い。すなわち、多形形態ＦＩＩは４０℃での収着において約７０％ＲＨまで安定であるが、多形形態ＦＩはすでに３０％ＲＨで約２％の質量の変化を示す（図２８参照）。さらに、ＮａＨＤＣ混合物（例えば無水アセトン中の最後の再沈殿の前に得られる異なる多形形態の混合物）は、２５℃でのＤＶＳ分析から多形形態ＦＩＩより安定性が低い（図５８参照）。多形形態ＦＩＩは収着において約７０％ＲＨまで安定であるが、ＮａＨＤＣ混合物はすでに２０％ＲＨで約３％の質量の変化を示す。
多形形態ＦＩのヒオデオキシコール酸ナトリウムはもう１つ別の無水結晶形態である。この結晶中の水の量は１％未満、好ましくは０．６％未満、さらにより好ましくは０．４％未満であり、ここでパーセントは結晶の全質量に対するものである。
【００２２】
ＮａＨＤＣの多形の結晶形態ＦＩは、図１４に一例として示されているようなＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）プロファイルにより、および／または図１６に一例として示されているような示差走査熱量測定（ＤＳＣ）プロファイルにより、および／または図１７に一例として示されているような熱重量測定プロファイル（ＴＧＡ）により、および／または図２０に示されているＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルにより、図２２に一例として示されているようなＦＴ−ＲＡＭＡＮスペクトルにより、図２３に一例として示されているような２５℃での等温曲線における動的蒸気収着（ＤＶＳ）分析により、そして図２５に一例として示されているような４０℃での等温曲線における動的蒸気収着（ＤＶＳ）分析により特徴付けられる。
さらに、図２７および２８に一例として示されているような多形形態ＦＩおよび多形形態ＦＩＩの２５℃および４０℃での等温曲線における動的蒸気収着（ＤＶＳ）分析の比較について記載する。
【００２３】
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩは図１４に示されているＸＰＲＤプロファイルにより特徴付けられ、その特性ピークは図１５で次の２シータ位置：６．１７；７．８２；９．５０；１１．７７；１２．３５；１７．０３；１７．７８；１９．６３；２１．７１；２５．５３度に見られ、各々のピークについて示された値の誤差範囲は±０．２０度２シータである。
図１５は、多形形態ＦＩの前述のＸＰＲＤピークの値を、対応する相対強度と共に示す。
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩは図１６に示されているＤＳＣプロファイルにより特徴付けられる。かかるグラフで吸熱ピークは３１０℃に観察することができ、ピークの立ち上がりは３０６．５℃、ピークは３０９．７℃にあり、無水形態ＦＩの融解に基づく融解のエンタルピーは５４．８４ジュール／ｇに等しい。さらに、回折分析（ＸＰＲＤ）を様々な温度で行ったところ（図１８、１９参照）、２８０℃まで安定であることが立証された。
【００２４】
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩは図１７に示されているＴＧＡプロファイルにより特徴付けられる。このＴＧＡプロファイルは約５０℃で浸潤水に帰すことができる約１％の初期質量損失を示し、それ以上の質量の損失は３５０℃まで観察されず、かかる形態がその「無水」形態にあることが実験的に確認される。これは、様々な温度での回折分析（ＸＰＲＤ）によって確認されている。既に上で示されたように、多形形態ＦＩは図１８、１９に示されているように２８０℃まで安定であり、その後図１６に示されているように融解する。
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩは図２０に示されているＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルにより特徴付けられ、その特性ピークは図２１で次の周波数：３２５９．０；２９３２．５；２９１６．１；２８９３．２；２８６７．４；２８４８．１；１５５７．５；１４５４．８；１４３５．３；１４２１．５；１４０５．８；１３８７．１；１３３４．２；１３１１．５；１０８４．６；１０６０．３ｃｍ-1に見られ、各々のピークについて示されている値の誤差範囲は±１ｃｍ-1である。
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩは図２２に示されているＦＴ−ＲＡＭＡＮスペクトルにより特徴付けられる。
【００２５】
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩは、図２３に一例として示されているような２５℃±０．１での等温曲線におけるＤＶＳグラフにより、そして図２４に示されている％で表わされた対応する値により特徴付けられる。
収着において、３０％ＲＨで、サンプルは約２％の質量変化を示し、７０％ＲＨでは１５％である。９０％ＲＨでは約３５％の質量変化がある。
脱着においてサンプルは５０％ＲＨまで安定であり、約３４％の質量変化（約８個の水分子に対応する）を維持する。
約４０％ＲＨでは変曲を見ることができ、この時点でサンプルはまだ約１８％の水（約４個の水分子に対応する）を含有するようである。０％ＲＨで質量変化はゼロである。
【００２６】
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩは、図２５に一例として示されているような４０℃±０．１での等温曲線におけるＤＶＳグラフにより、そして図２６に示されている％で表わされた対応する値により特徴付けられる。
収着において、３０％ＲＨで、サンプルは約２％の質量変化を示し、７０％ＲＨでは８％である。９０％ＲＨでは約４３％の質量変化がある。脱着において５０〜４０％ＲＨで曲線はプラトーを示し、サンプルは約１７％の質量の変化を示す。０％ＲＨで質量変化はゼロである。
さらに、図２７および２８に示されているＮａＨＤＣの多形形態ＦＩおよび多形形態ＦＩＩの２５℃および４０℃での等温曲線において比較した。
【００２７】
本発明で特性が決定されたＮａＨＤＣのさらなる多形形態は、さらなる多形形態ＦＩＩＩ、それぞれ４個および８個の水分子で水和されたＮａＨＤＣの形態であるＳＩおよびＳＩＩと命名されたＮａＨＤＣの水和した多形形態、ならびに非晶質形態である。
多形形態ＦＩＩＩのヒオデオキシコール酸ナトリウムはもう１つ別の無水結晶形態である。この結晶中の水の量は１％未満、好ましくは０．６％未満、さらにより好ましくは０．４％未満であり、ここでパーセントは結晶の全質量に対するものである。
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩＩは、図２９に一例として示されているようなＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）プロファイルにより、および／または図３１に一例として示されているような示差走査熱量測定（ＤＳＣ）プロファイルにより、および／または図３２に一例として示されているような熱重量測定プロファイル（ＴＧＡ）により、および／または図３３に示されているＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルにより特徴付けられる。
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩＩは図２９に示されているＸＰＲＤプロファイルにより特徴付けられ、その特性ピークは図３０で次の２シータ位置：５．５４；１０．２０；１１．２４；１２．６３；１４．６３；１４．９６；１５．７８；１６．９１；１８．１３；１８．６２；１９．１６；２２．２２；２４．２４度に見られ、各々のピークについて示された値の誤差範囲は±０．２０度２シータである。
【００２８】
図３０は、多形形態ＦＩＩＩの前述のＸＰＲＤピークの値を、対応する相対強度と共に示す。
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩＩは図３１に示されているＤＳＣプロファイルにより特徴付けられる。かかるグラフにおいて２９０℃に吸熱ピークを見ることが可能であり、ピークの立ち上がりは２９２．２℃、ピークは３０２．５℃、そして無水形態ＦＩＩＩの融解に基づく融解のエンタルピーは５０．１５ジュール／ｇに等しい。
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩＩは図３２に示されているＴＧＡプロファイルにより特徴付けられる。このＴＧＡプロファイルは約５０℃で浸潤水に帰すことができる約１％の初期質量損失を示し、その後それ以上の質量損失は３５０℃まで観察されず、かかる形態がその「無水」形態にあるということが実験的に確認される。
【００２９】
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩＩは図３３に示されているＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルにより特徴付けられ、その特性ピークは図３４で次の周波数：２９２９．５；２８６３．５；１５５６．８；１４０８．０；１３７３．６；１０３８．２；１０２７．８；９９７．７；８５２．１；９１７．４ｃｍ-1に見られ、各々のピークについて示された値の誤差範囲は±１ｃｍ-1である。
水和した多形形態ＳＩのヒオデオキシコール酸ナトリウムは約４個の水分子で水和された水和形態である。
【００３０】
ＮａＨＤＣの水和した多形形態ＳＩは、図３５に一例として示されているようなＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）プロファイルにより、および／または図３７に一例として示されているような示差走査熱量測定（ＤＳＣ）プロファイルにより、および／または図３８に一例として示されているような熱重量測定プロファイル（ＴＧＡ）により、および／または図３９に示されているＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルにより特徴付けられる。
ＮａＨＤＣの水和した多形形態ＳＩは図３５に示されているＸＰＲＤプロファイルにより特徴付けられ、その特性ピークは図３６で次の２シータ位置：４．９２；１２．３４；１４．８９；１５．７０；１６．４６；１７．７２；２１．０１；２５．７８；２９．９３度に見られ、各々のピークについて示された値の誤差範囲は±０．２０度２シータである。
図３６は、水和した多形形態ＳＩの前述のＸＰＲＤピークの値を、対応する相対強度と共に示す。
【００３１】
ＮａＨＤＣの水和した多形形態ＳＩは図３７に示されているＤＳＣプロファイルにより特徴付けられる。かかるグラフにおいて、約５０〜７０℃に水の損失を伴う吸熱事象（複合ピーク５４．９℃および７８．６℃）、および約３１０℃にピークの立ち上がりが３１０．４℃、ピークが３１６．２℃であり、そして水和形態ＳＩが相互変換する無水形態ＦＩの融解に基づく融解のエンタルピーが６８．２３ジュール／ｇに等しい吸熱ピークを見ることが可能である。
ＮａＨＤＣの水和した多形形態ＳＩは図３８に示されているＴＧＡプロファイルにより特徴付けられる。このＴＧＡプロファイルは約７０℃で、かかる形態の水の損失に帰すことができる約１９％の初期質量損失を示す。
ＮａＨＤＣの水和した多形形態ＳＩは図３９に示されているＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルにより特徴付けられる。
水和した多形形態ＳＩＩのヒオデオキシコール酸ナトリウムは約８個の水分子で水和された水和形態である。
【００３２】
ＮａＨＤＣの水和した多形形態ＳＩＩは、図４０に一例として示されているようなＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）プロファイルにより、および／または図４２に一例として示されているような示差走査熱量測定（ＤＳＣ）プロファイルにより、および／または図４３に一例として示されているような熱重量測定プロファイル（ＴＧＡ）により、および／または図４４に示されているＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルにより特徴付けられる。
ＮａＨＤＣの水和した多形形態ＳＩＩは図４０に示されているＸＰＲＤプロファイルにより特徴付けられ、その特性ピークは図４１で次の２シータ位置：４．８８；８．８１；１２．８２；１５．３０；１５．４７；１６．２４；１７．４５；１９．１２；１９．５２；２０．０５；２０．８３；２１．６８；２２．３２；２２．９５；２５．３０；２６．６４；２７．３３；２７．６４；２８．０７；２９．７５度に見られ、各々のピークについて示された値の誤差範囲は±０．２０度２シータである。
【００３３】
図４１は、水和した多形形態ＳＩＩの前述のＸＰＲＤピークの値を、対応する相対強度と共に示す。
ＮａＨＤＣの水和した多形形態ＳＩＩは図４２に示されているＤＳＣプロファイルにより特徴付けられる。かかるグラフにおいて、吸熱事象を約５０℃に（複合ピークの立ち上がり３８．８℃、ピーク５０．２℃、エンタルピー５５０．８ジュール／ｇ、水の損失を伴う）、また吸熱ピークを約３１０℃に（ピークの立ち上がりは３０７．８℃、ピークは３１２．３℃、水和形態ＳＩＩが相互変換する無水形態ＦＩの融解に基づく融解のエンタルピーは４６．６７ジュール／ｇに等しい）見ることが可能である。
ＮａＨＤＣの水和した多形形態ＳＩＩは図４３に示されているＴＧＡプロファイルにより特徴付けられる。このＴＧＡプロファイルは約１００℃で、かかる形態の水の損失に帰すことができる約２５％の初期質量損失を示す。
ＮａＨＤＣの水和した多形形態ＳＩＩは図４４に示されているＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルにより特徴付けられる。
【００３４】
非晶質形態のヒオデオキシコール酸ナトリウム。
ＮａＨＤＣの非晶質形態は、図４５に一例として示されているようなＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）プロファイルにより、および／または図４７に一例として示されているような示差走査熱量測定（ＤＳＣ）プロファイルにより、および／または図４８に一例として示されているような熱重量測定プロファイル（ＴＧＡ）により、および／または図４９に示されているＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルにより、図５１に一例として示されているような２５℃での等温曲線における動的蒸気収着（ＤＶＳ）分析により特徴付けられる。
ＮａＨＤＣの非晶質形態は図４５に示されているＸＰＲＤプロファイルにより特徴付けられ、その特性ピークは図４６で次の２シータ位置：５．５４；１５．５８度に見られ、各々のピークについて示された値の誤差範囲は±０．２０度２シータである。
【００３５】
図４６は、非晶質形態の前述のＸＰＲＤピークの値を、対応する相対強度と共に示す。
ＮａＨＤＣの非晶質形態は図４７に示されているＤＳＣプロファイルにより特徴付けられる。かかるグラフにおいて、約５０℃に吸熱事象（水の損失を伴う複合ピーク５６．０℃）を見ることが可能である。さらに、２００℃を超えるとおそらく無定形態の再結晶化に伴う２つの発熱ピーク（複合ピーク２０３．９℃および２４４．７℃）ならびに約３００℃に融解に基づく吸熱事象（ピークの立ち上がり２８７．２℃、ピーク２９６．３℃）がある。
ＮａＨＤＣの非晶質形態は図４８に示されているＴＧＡプロファイルにより特徴付けられる。このＴＧＡプロファイルは約８０℃に水の損失に帰すことができる約８％の初期質量損失を示す。
ＮａＨＤＣの非晶質形態は図４９に示されているＦＴ−ＩＲ／ＡＴＲスペクトルにより特徴付けられ、その特性ピークは図５０の次の周波数：３３１６．７；２９２８．４；２８６３．６；１５５７．３；１４４６．２；１４０４．４；１３７４．４；１３３４．４；１３１６．９；１０３８．４；１０２９．３；９９８．７．１；９５２．８；９１２．２ｃｍ-1に見られ、各々のピークについて示された値の誤差範囲は±１ｃｍ-1である。
ＮａＨＤＣの非晶質形態は、図５１に一例として示されているような２５℃±０．１での等温曲線におけるＤＶＳグラフにより、および図５２に示されている％で表わされた対応する値により特徴付けられる。
【００３６】
収着において、３０％ＲＨで、サンプルは約６％の質量変化を示し、７０％ＲＨで２２％である。９０％ＲＨでは約３５％の質量変化がある。脱着においてサンプルは５０％ＲＨまで安定であり、約３４％の質量変化（約８個の水分子に対応する）を維持する。約４０％ＲＨで変曲を見ることが可能であり、この時点でサンプルはまだ約１７％の水（約４個の水分子に対応する）を含有するようである。０％ＲＨでサンプルは開始質量より少ない質量を示す。
例えばアセトン中加熱下で行われる最後の再沈殿段階の前に得られるヒオデオキシコール酸ナトリウムは、記載されている異なる形態の複雑な混合物である。ＮａＨＤＣ結晶混合物中の水の量は５％未満、好ましくは３％未満、さらにより好ましくは２％未満であり、ここで前記パーセントは結晶の全質量に対するものである。
【００３７】
ＮａＨＤＣのかかる混合物は、図５３に一例として示されているようなＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）プロファイルにより、および／または図５４に一例として示されているような示差走査熱量測定（ＤＳＣ）プロファイルにより、および／または図５５に一例として示されているような熱重量測定プロファイル（ＴＧＡ）により、および／または図５６に一例として示されているような２５℃での等温曲線における動的蒸気収着（ＤＶＳ）分析により特徴付けられる。さらに、図５８に一例として示されているように、異なる形態の混合物および無水結晶形態ＦＩＩの２５℃での等温曲線における動的蒸気収着（ＤＶＳ）分析の比較について記載する。
ＮａＨＤＣの形態のかかる混合物は図５３に示されているＸＰＲＤプロファイルにより特徴付けられる。ＮａＨＤＣの形態の混合物は図５４に示されているＤＳＣプロファイルにより特徴付けられる。かかるグラフにおいて、約５０℃に水の損失を伴う吸熱事象（複合ピーク４７．５℃）、２００℃を超えておそらく無定形態の再結晶化に伴う２つの発熱事象、および３１０℃より高い温度で融解に基づく二重のピーク（複合ピークの立ち上がり３１２．３℃、ピーク３１４．３℃、ピーク３１９．３℃）により特徴付けられる吸熱事象を見ることが可能である。
【００３８】
ＮａＨＤＣの形態の混合物は図５５に示されているＴＧＡプロファイルにより特徴付けられる。このＴＧＡプロファイルは約７０℃で水に帰すことができる約８％の初期質量損失を示す。
ＮａＨＤＣの形態の混合物は、図５６に一例として示されているような２５℃±０．１での等温曲線におけるＤＶＳグラフにより、および図５７に示されている％で表わされた対応する値により特徴付けられる。サンプルは収着において２０％ＲＨで約３％、７０％ＲＨで１５％の質量変化を示す。９０％ＲＨでは約３５％の質量変化がある。脱着においてサンプルは５０％ＲＨまで安定であり、約３４％の質量増加を有し（約８個の水分子に対応する）、約４０％ＲＨを過ぎて変曲を見ることが可能であり、サンプルは約１８％の水を含有するようである（約４個の水分子に対応する）。
【００３９】
さらに、図５８に示されているように、ＮａＨＤＣの形態の混合物と多形形態ＦＩＩとの２５℃での等温曲線において比較を行った。比較の目的で、図５８は、説明されているように、９９．５％の化学的純度を有する、異なる形態の複雑で再現不可能な混合物である未精製ＮａＨＤＣのＤＶＳプロファイルを示す。この混合物は工業的に、加熱下における反応塊の、例えばアセトン中での還流しながらの最後の再沈殿の前に得られる。
かかる未精製のＮａＨＤＣは無水および水和の多形形態ならびに潜在的に測定不可能な割合の非晶質部分の混合物である。多形形態、水和物および非晶質の混合物は、医薬の商業化の前に行われる臨床試験で使用される一義的な製品を得るようには処方することができない。従って、本発明は、医薬製剤に適した高い化学的および多形純度を有するＮａＨＤＣの新しい安定な無水多形形態、すなわち多形形態ＦＩＩを提供するという利点を有する。
【００４０】
実験の欄に一例として示されているように、多形形態ＦＩＩは、その経時的安定性および温度に対する安定性（２６０℃まで安定）のおかげもあって、有効成分として処方するのに好ましい形態であり、新しい医薬化合物の安定性試験を２５℃／６０％ＲＨおよび４０℃／７５％ＲＨで行うための指針ＩＣＨ  Ｑ１Ａ（４版、２００３年２月６日）に従って行われた試験により立証されるように、（既に記載したように）室温で最も熱力学的に安定であり湿気に対して最も安定で２５℃および４０℃の両方で湿気に対して驚くべき予見できない安定性を有する形態である。
さらに、以下に記載されるＮａＨＤＣの新しい多形形態ＦＩＩの合成方法により、かかる有効成分を医薬製剤として最適な粒度で得ることが可能になり、従って摩砕、微粒子化または篩い分けのような粒度を調節するための加工処理の必要性を回避することが可能になる。このような加工処理は、これらの操作に関与する大量のエネルギーのために多形形態ＦＩＩの多形純度および化学的純度を落とす可能性がある。
【００４１】
本発明のＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩの合成方法は、ケトン系溶媒、エステルのカテゴリーに属する溶媒、アルコール、ニトリルのカテゴリーに属する溶媒またはそれらの混合物から選択される有機溶媒による最後の再沈殿工程を含む。
好ましくは、ケトン系溶媒は炭素鎖Ｃ3−Ｃ6を有し、エステルのカテゴリーに属する溶媒は鎖Ｃ2−Ｃ5を有し、アルコール系溶媒は鎖Ｃ1−Ｃ5を有し、および／またはニトリルのカテゴリーに属する溶媒は鎖Ｃ2−Ｃ3を有する。
より好ましくは、ケトン系溶媒はアセトン、メチル−イソ−ブチルケトン（ＭＩＢＫ）、メチル−エチル−ケトン（ＭＥＫ）もしくはそれらの混合物から選択され、エステルのカテゴリーに属する溶媒は酢酸エチル、ギ酸エチル、酢酸プロピルもしくはそれらの混合物から選択され、アルコール系溶媒はメタノール、エタノール、１−プロピルアルコール（１−プロパノール）、イソプロピルアルコール（２−プロパノール）、１−ブタノール、２−ブタノール、２−ペンタノールもしくはそれらの混合物から選択され、および／またはニトリルのカテゴリーに属する溶媒はアセトニトリル、プロピオニトリルもしくはそれらの混合物から選択される。
好ましい有機溶媒はケトンであり、さらにより好ましいのは加熱下のアセトンである。
【００４２】
ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＩＩの再沈殿を行うのに好ましい温度は５５〜１２０℃の範囲に含まれる。一般に、各溶媒の還流温度に近い温度を使用するのが好ましい。
アセトンを使用するとき、好ましい温度は５５〜６０℃に含まれ、さらにより好ましくは５５〜５６℃に含まれる。
再沈殿は６〜１０時間、より好ましくは６〜８時間の時間行われる。
ケトン系溶媒が好ましく、これらの中でアセトンが好ましい溶媒である。
特に、ＮａＨＤＣと溶媒（好ましくはケトン系、さらにより好ましくは無水アセトン）との好ましい比は１対８（ＮａＨＤＣの質量対溶媒の体積）、さらにより好ましくは１対６（ＮａＨＤＣの質量対溶媒の体積）である。
【００４３】
好ましい実施形態において、本発明の方法は次の工程を含む：
ａ）ヒオデオキシコール酸のアルカリ土類金属の塩の調製およびそれに続くその酸性化によって行われて精製されたＨＤＣＡを得る、式ＩＩのＨＤＣＡの少なくとも一回の精製工程；
ｂ）精製されたＨＤＣＡの、８．５〜９．５に含まれるｐＨまでのＮａＯＨを用いた処理による、ＮａＨＤＣの調製工程；
ｃ）ケトン系溶媒、エステルのカテゴリーに属する溶媒、アルコール、ニトリルのカテゴリーに属する溶媒またはそれらの混合物から選択される有機溶媒による再沈殿によってＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩを得る工程。
好ましくは、上記工程ｃ）において、ケトン系溶媒は鎖Ｃ3−Ｃ6を有し、エステルのカテゴリーに属する溶媒は鎖Ｃ2−Ｃ5を有し、アルコール系溶媒は鎖Ｃ1−Ｃ5を有し、および／またはニトリルのカテゴリーに属する溶媒は鎖Ｃ2−Ｃ3を有する。
【００４４】
より好ましくは、上記工程ｃ）において、ケトン系溶媒はアセトン、メチル−イソ−ブチルケトン（ＭＩＢＫ）、メチル−エチル−ケトン（ＭＥＫ）もしくはそれらの混合物から選択され、エステルのカテゴリーに属する溶媒は酢酸エチル、ギ酸エチル、酢酸プロピルもしくはそれらの混合物から選択され、アルコール系溶媒はメタノール、エタノール、１−プロピルアルコール（１−プロパノール）、イソプロピルアルコール（２−プロパノール）、１−ブタノール、２−ブタノール、２−ペンタノールもしくはそれらの混合物から選択され、および／またはニトリルのカテゴリーに属する溶媒はアセトニトリル、プロピオニトリルもしくはそれらの混合物から選択される。
上述した本発明の方法のより好ましい実施形態において、工程ｃ）は５５〜１２０℃の温度で、６〜１０時間の時間行われる。
【００４５】
工程ａ）で使用されるヒオデオキシコール酸のアルカリ土類金属の好ましい塩は式ＩＩＩのヒオデオキシコール酸のマグネシウム塩（（ＨＤＣ）2Ｍｇ）である。
工程ａ）で行われる精製は塩基を用いたＨＤＣＡの塩化によって行われ、ヒオデオキシコール酸のアルカリ土類金属の塩、好ましくは式ＩＩＩの（（ＨＤＣ）2Ｍｇ）を得、その酸性化により精製されたＨＤＣＡを得る。
好ましくは、段階ａ）の出発ＨＤＣＡは８０〜９０％の化学的純度を有し、従来技術の方法に従って得ることができる。
好ましくは、工程ａ）の終了時に得られるＨＤＣＡは９９．５％〜９９．９％の最終化学的純度を有する。
工程ａ）は二回繰り返すのが好ましい。
この最後の場合、８０〜９０％の化学的純度のＨＤＣＡから出発して、最初の精製の後９８．５％〜９９．０％の化学的純度のＨＤＣＡが得られ、第２の精製の後９９．５％〜９９．９％の化学的純度が得られる。
工程ｂ）では、好ましくは、９９．５％〜９９．９％の化学的純度を有するＮａＨＤＣが得られる。
工程ｃ）では、好ましくは９９．５％〜９９．９％の化学的純度を有するＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩが得られる。
工程ａ）において本発明で使用される塩基は好ましくは例えばＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＮＨ3のような無機塩基、または例えば第一級、第二級もしくは第三級アミン、例えばイソプロピルアミン、ジメチルアミン、トリエチルアミン等のような有機塩基である。
【００４６】
本発明の方法の好ましい実施形態において、工程ａ）の出発ＨＤＣＡは、脱イオンもしくは飲料水自体、または例えばメタノール、エタノール、１−プロピルアルコール（１−プロパノール）、イソプロピルアルコール（２−プロパノール）、１−ブタノール、２−ブタノール、２−ペンタノール等のような鎖Ｃ1−Ｃ5を有するアルコール、好ましくはエタノールとの混合物に加えられる。
水とアルコールの混合物は、そのうちの好ましいものは水とエタノールであるが、７〜２（体積／体積）で変化することができる比を有する。
これらの水とアルコールの混合物で、そのうちの好ましいものは水とエタノールであるが、溶媒（水およびアルコール）の全体積に対するＨＤＣＡの質量の比は１：９〜１：２５で変化する。水とアルコールの前記混合物は室温（２０〜２５℃）で使用するのが好ましい。
【００４７】
その後、塩基を加えるが、これは上述したように無機または有機の塩基であることができる。
工程ａ）において塩基は化学量論量で、好ましくはＨＤＣＡの各当量に対して１〜１．３当量、さらにより好ましくは出発ＨＤＣＡの各当量に対して１．０〜１．１当量の量で加えられる。おそらくは水自体または上述したようなアルコールとの混合物に加えられる、ＨＤＣＡおよび選択された塩基を用いて得られる懸濁液は、好ましくは３０〜６０分の時間、好ましくは６０〜９０℃の温度で、好ましくは６．５〜８．５、さらにより好ましくは７．５のｐＨを有する「溶液Ａ」と名付けられる澄んだ溶液が得られるまで撹拌下に放置される。
【００４８】
もう１つ別の反応器で、化学量論量のアルカリ土類金属、好ましくはマグネシウムの塩を、好ましくは出発ＨＤＣＡの各当量に対して１〜１．３当量、さらにより好ましくは１〜１．１当量の量で、室温において、アルカリ土類金属の塩の乾燥質量に対して１０〜１５体積の脱イオンまたは飲料水の量の水に加える。こうして、「溶液Ｂ」と名付けられる澄んだ溶液が得られる。
水に加えられるアルカリ土類金属、好ましくはマグネシウムの塩は、例えば、例えば硫酸マグネシウム七水和物、塩化マグネシウム、等のような硫酸塩または塩酸塩であることができる。
溶液Ａへの溶液Ｂの添加は好ましくは６０〜９０℃の温度で、好ましくは２０〜５０分の時間行われ、これによりヒオデオキシコール酸のアルカリ土類金属、好ましくはマグネシウムの塩の水性または含水アルコール性懸濁液を得ることが可能になる。
この懸濁液の最終ｐＨは５〜７に含まれるのが好ましい。
この懸濁液をさらに３０〜６０分の時間６０〜９０℃の温度に保った後、２〜４時間で室温に冷却し、ヒオデオキシコール酸のアルカリ土類金属、好ましくはマグネシウムの塩を、例えばろ過により、白色の固体として回収する。
その後ヒオデオキシコール酸のアルカリ土類金属の塩、好ましくは式ＩＩＩのマグネシウム塩を、１対５〜１対１０の比（水の体積に対するＨＤＣＡの質量）で、水中に懸濁させ、続いて撹拌下で、好ましくは６０〜８０℃まで軽く加熱し、さらに１〜２のｐＨになるまで鉱酸を添加することにより、１〜２時間の時間で室温に冷却した後、精製されたＨＤＣＡを、例えばろ過により白色の固体として得ることが可能になる。
【００４９】
特に好ましい鉱酸は塩酸、硫酸またはリン酸等であり、使用される鉱酸の好ましい量は式ＩＩＩのマグネシウム塩の各当量に対して１〜１．５当量、さらにより好ましくは１〜１．３当量に含まれる。
精製されたＨＤＣＡを好ましくはろ過により回収し、フィルター上の残渣を水で中性のｐＨになるまで洗浄して残留する酸性度を除く。
【００５０】
この最初の精製の後、８０〜９０％の化学的純度を有する出発ＨＤＣＡの場合、９８．５％〜９９．０％の化学的純度を有するＨＤＣＡが得られる。
好ましくはその好ましい形態において、最初の精製の後得られた９８．５％〜９９．０％の化学的純度のＨＤＣＡに対して行われる工程ａ）の反復により、９９．５％〜９９．９％の化学的純度を有する最終のＨＤＣＡを工程ａ）で得ることが可能になる。
次の工程、すなわち工程ｂ）は、精製されたＨＤＣＡの塩基による処理を介するＮａＨＤＣの調製を意図している。好ましくは、工程ａ）に由来する精製されたＨＤＣＡは９９．５％〜９９．９％の化学的純度を有する。
本発明の方法の好ましい実施形態において、工程ａ）に由来する精製されたＨＤＣＡは、撹拌下、室温（２０〜２５℃）で、水が１対４〜１対８の比で存在する（水の体積に対するＨＤＣＡの質量）水、好ましくは脱イオン水に加えられる。
【００５１】
脱イオン水のこの工程における使用により、活性医薬成分（ＡＰＩ）の分類のために必要とされる仕様に準拠したＮａＨＤＣを得ることが可能になる。
工程ｂ）で、塩基ＮａＯＨは化学量論量、好ましくはＨＤＣＡの各当量に対して１〜１．１当量の量で加えられる。
得られた懸濁液は、８．５〜９．５の最終ｐＨを有する澄んだ溶液が得られるまで、撹拌下、好ましくは３０〜６０分の時間、４０〜７０℃の温度に放置される。
存在する水の真空蒸留は、極めて粘稠な油性の残渣が得られるまで、周囲圧力に対して−１／−０．９バールで行われる。
次に、油性の残渣に有機溶媒を、３〜６時間の時間、１対６〜１対８の比（溶媒の体積に対するＨＤＣＡの質量）、好ましくは１対６の比（溶媒の体積に対するＨＤＣＡの質量）で、好ましくは４５〜５０℃の温度で加え、こうしてやや曇った溶液を得る。
【００５２】
好ましくは、段階ｂ）のこの部分で使用される溶媒は、例えば、好ましくは例えばアセトン、メチル−イソ−ブチルケトン（ＭＩＢＫ）、メチル−エチル−ケトン（ＭＥＫ）、等のような鎖Ｃ3−Ｃ6を有するケトン系溶媒、好ましくは例えば酢酸エチル、ギ酸エチル、酢酸プロピル等のような鎖Ｃ2−Ｃ5を有するエステルのカテゴリーに属する溶媒、好ましくは例えばメタノール、エタノール、１−プロピルアルコール（１−プロパノール）、イソプロピルアルコール（２−プロパノール）、１−ブタノール、２−ブタノール、２−ペンタノール等のような鎖Ｃ1−Ｃ5を有するアルコール、例えばアセトニトリル、プロピオニトリル等のような鎖Ｃ2−Ｃ3を有するニトリルのような有機溶媒である。
【００５３】
ＮａＨＤＣの沈殿が起こる好ましい温度は５５〜１２０℃の範囲に含まれる。
好ましい溶媒は無水アセトンであり、この場合好ましい温度は５５〜６０℃に含まれ、さらにより好ましくは５５〜５６℃に含まれる。
少し加熱した後、溶液を３〜６時間の時間で室温に冷却する。
その後８〜１０時間の時間ＮａＨＤＣの沈殿が観察される。これは、使用される好ましくはケトン系の溶媒がこの化合物に対して非溶媒であるからである。
ＮａＨＤＣ生成物をろ過により回収し、フィルター上の残渣をアセトン／水の８０：２０（ｖ／ｖ）、好ましくはアセトン／水の９０：１０（ｖ／ｖ）溶液、より好ましくは無水アセトンで洗浄し、その後乾燥に供する。
こうして得られるＮａＨＤＣは上記の６つの多形形態、すなわち多形形態ＦＩ、ＦＩＩ、ＦＩＩＩ、ＳＩ、ＳＩＩおよび非晶質形態の混合物であり、今後「ＮａＨＤＣ混合物」と略記される。
乾燥後のＮａＨＤＣ混合物中に存在する水の量は５％未満、好ましくは３％未満、さらにより好ましくは２％未満であり、前記パーセントはＮａＨＤＣ混合物結晶の全質量に対するものである。
【００５４】
好ましくは、工程ｂ）の終了時に得られるＮａＨＤＣ混合物は９９．５％〜９９．９％の化学的純度を有する。
図５４は、使用されたケトン系溶媒が無水アセトンである場合に沈殿により得られ、乾燥されたＮａＨＤＣ混合物生成物のさらなる最終の再沈殿を行っていないＮａＨＤＣ混合物のＤＳＣプロファイルを示す。
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩは、工程ｂ）で得られたＮａＨＤＣ混合物の有機溶媒、好ましくはケトン系による処理を介して工程ｃ）で得られる。
ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩを再沈殿するのに使用され、すなわち非溶媒として作用する有機溶媒の例は、例えば、好ましくは鎖Ｃ3−Ｃ6を有する、例えばアセトン、メチル−イソ−ブチルケトン（ＭＩＢＫ）およびメチル−エチル−ケトン（ＭＥＫ）のようなケトン系溶媒、好ましくは鎖Ｃ2−Ｃ5を有する、例えば酢酸エチル、ギ酸エチルおよび酢酸プロピルのようなエステル系溶媒、好ましくは鎖Ｃ1−Ｃ5を有する、例えばメタノール、エタノール、１−プロピルアルコール（１−プロパノール）、イソプロピルアルコール（２−プロパノール）、１−ブタノール、２−ブタノールおよび２−ペンタノールのようなアルコール系溶媒、および／または、好ましくは鎖Ｃ2−Ｃ3を有する、例えばアセトニトリルおよびプロピオニトリルのようなニトリルのカテゴリーに属する溶媒から選択される有機溶媒である。
【００５５】
ＮａＨＤＣの無水結晶形態ＩＩの再沈殿が行われる好ましい温度は５５〜１２０℃の範囲に含まれる。
アセトンを使用するとき、好ましい温度は５５〜６０℃に含まれ、さらにより好ましくは５５〜５６℃に含まれる。
再沈殿は６〜１０時間、より好ましくは６〜８時間の時間起こる。
ケトン系溶媒が好ましく、これらのうちでアセトンが好ましい溶媒である。
特に、ＮａＨＤＣと溶媒、好ましくはケトン系、さらにより好ましくは無水アセトンとの好ましい比は１〜８（ＮａＨＤＣの質量対溶媒の体積）、さらにより好ましくは１〜６である（ＮａＨＤＣの質量対溶媒の体積）。
【００５６】
懸濁液が得られ、これを溶媒の還流温度にゆっくり加熱する。
溶媒がアセトンである場合は５５〜６０℃、好ましくは５５〜５６℃の温度まで加熱される。
次に、懸濁液を３〜６時間の時間で２５℃に冷却する。
生成物をろ過により回収し、フィルター上の残渣をアセトン／水（８０：２０（ｖ／ｖ））、好ましくはアセトン／水（９０：１０（ｖ／ｖ））の溶液、より好ましくは無水アセトンで洗浄する。
こうして得られるＮａＨＤＣは、好ましくは９９．５％〜９９．９％の化学的純度を有するＮａＨＤＣの無水多形形態ＦＩＩである。
【００５７】
ＮａＨＤＣの形態ＦＩＩ結晶中の水の量は１％未満、好ましくは０．６％未満、さらにより好ましくは０．４％未満であり、前記パーセントは結晶の全質量に対するものである。
好ましくは、本発明のＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩは非晶質のＮａＨＤＣを含有しない。
さらに、本発明のＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩは上に記載したＮａＨＤＣの他の多形形態をいずれも含有しない。
無水のＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩは純粋な多形であり、ここで「純粋」という用語は無水のＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩが好ましくは１％未満、さらにより好ましくは０．７％未満、さらにより好ましくは０．５％未満の不純物含有率を有することを意味し、これらのパーセントは結晶の全質量に対するものである。
好ましくは、ＮａＨＤＣの多形ＦＩＩ中の各単一の不純物の量は０．５％未満、より好ましくは０．３％未満、さらにより好ましくは０．１％未満であり、ここでパーセントは結晶の全質量に対するものである。
【００５８】
ＮａＨＤＣの多形ＦＩＩ中の不純物は、表１に記載されているように決定され、表１に示されているケノデオキシコール酸（３α，７α−ジヒドロキシ−５β−コラン−２４−酸、ＣＤＣＡと略記される）およびヒオコール酸（３α，６α，７α−トリヒドロキシ−５β−コラン−２４−酸、ＨＣＡと略記される）のような既知の不純物、ならびに結晶の全質量に対して０．０１％未満のパーセント量または検出可能性の限界の知られていない不純物（未知）であることが立証された。
化学的純度プロファイルは図５９に記載されている。
本発明の方法で得られたＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩの純度を、図６０に記載されている分析法を用いてＨＰＬＣ／ＲＩ（高性能液体クロマトグラフィー／屈折率検出器）によって評価して、次の表１に示されている結果を得た：
【００５９】
【表１】
0006670744.tif 000005
上に記載したその他の多形形態は以下に概説する方法に従って得られた。
多形形態ＦＩは、凍結乾燥器５ＰａｓｃａｌモデルＬＩＯ１００Ｐを用いて凍結乾燥過程によって得られた。
【００６０】
特に、工程ａ）およびｂ）に記載したプロセスに従って得られたＮａＨＤＣ混合物を３０〜４０℃の温度で脱イオン水に溶解し、澄んだ溶液を得る。これは２５℃の温度で２４時間後そのままである。次に、溶液を−２０℃の一定の温度で７２時間にわたって凍結乾燥し、凍結乾燥の終了時に５×１０-2ミリバールの圧力をかける。この凍結乾燥過程によってＮａＨＤＣの結晶形態ＦＩが非常に微細な白色の結晶性固体として得られる。かかるＮａＨＤＣの結晶形態Ｉは上記の分析法によって特性を決定した。
多形形態ＦＩＩＩを得るために、上で工程ａ）およびｂ）に記載したプロセスに従って得られたＮａＨＤＣ混合物を５０℃の温度で脱イオン水に溶解した。得られた澄んだ溶液をゆっくり室温に冷却する。白色の沈殿が得られ、これをろ過し、ストーブで２３０℃において１５時間乾燥する。かかる沈殿は上に記載した分析法によってＮａＨＤＣの結晶形態ＩＩＩとして特性が決定された。
水和多形形態ＳＩを得るために、上で工程ａ）およびｂ）に記載したプロセスに従って得られたＮａＨＤＣ混合物を５０℃の温度で脱イオン水に溶解した。得られた澄んだ溶液をゆっくり室温に冷却する。白色の沈殿が得られ、これをろ過し、２４時間空気中に放置して乾燥する。かかる沈殿は、上に記載した分析法によってＮａＨＤＣの結晶形態ＳＩとして特性が決定された。
【００６１】
水和多形形態ＳＩＩは、上で工程ａ）およびｂ）に記載したプロセスに従って得られたＮａＨＤＣ混合物を２５℃の一定の温度で９０％の相対湿度（ＲＨ）に２日間放置することによって得られた。
かかるＮａＨＤＣの水和多形形態ＳＩＩは、上に記載した分析法によって特性が決定された。
ＮａＨＤＣの非晶質形態は、上で工程ａ）およびｂ）に記載したプロセスに従って得られたＮａＨＤＣ混合物を室温で脱イオン水に溶解することによって得られた。
噴霧乾燥機のＢｕｃｈｉミニスプレードライヤーＢ−２９０を用いた溶液の噴霧化および乾燥によって粉末が得られた。
水和多形形態ＳＩおよびＳＩＩは３１０℃を超える温度に加熱することにより多形形態ＦＩに相互変換することも観察された。
【００６２】
また、例６に示されているように、多形形態ＦＩと多形形態ＦＩＩの混合物（１：１質量／質量）は、酢酸エチル中における再沈殿により４８時間後室温（２０〜２５℃）で、完全に多形形態ＦＩＩに変換することも観察された。従って前記形態は上で示された分析により既に指摘されたように室温から２６０℃まで最も熱力学的に安定なものである。
このように、本発明の方法によって、化学的かつ多形的に純粋なＮａＨＤＣの新規な多形形態ＦＩＩを好都合に得ることが可能になる。
本方法の利点は、確定した粒度（粒度分布）を有し、かつ活性な医薬成分として、特にアテローム性動脈硬化性疾患の治療および／または予防においてＮａＨＤＣを使用するのに最適な化学的−物理的特性を有するＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩを得ることである。
従って、既に上で指摘したように、均質化のために、または対象の多形形態を変化させる可能性がある粒度を定めるために、いかなる処理も必要ない。
【００６３】
本発明の方法で得られるＮａＨＤＣ粉末多形形態ＦＩＩは２５μｍ〜４２５μｍ、好ましくは２５μｍ〜２５０μｍ、さらにより好ましくは７５μｍ〜２５０μｍの粒度分布を有する。
特に、本発明の方法で得られるＮａＨＤＣ粉末多形形態ＦＩＩの６０〜８０質量％は７５μｍ〜４２５μｍの粒度分布を有し、１５〜２０質量％は２５０μｍ未満の粒度分布を有し、９５質量％は２５μｍ超の粒度分布を有する。
【００６４】
従って、本発明の対象は、ＮａＨＤＣの多形ＦＩＩを含む、好ましくは経口、非経口、皮下、静脈内、筋肉内、鼻内、局所（例えば経皮もしくは経粘膜）または直腸投与用の医薬組成物である。
特に、例えば粉末、細粒、顆粒、カプセル、丸薬、ボーラス、錠剤、カプレット、カシェ剤、液体製剤、好ましくは溶液、シロップ、懸濁液、乳剤の形態のような経口投与用の医薬形態が好ましい。
本発明の組成物はＮａＨＤＣの多形ＦＩＩを１またはそれ以上の医薬として許容される賦形剤と共に含むことができる。
ＮａＨＤＣの多形ＦＩＩはアテローム性動脈硬化性疾患の治療および／または予防に使用するのに適している。
従って、本発明のさらなる対象は、ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩを含むことを特徴とする、アテローム性動脈硬化性疾患の治療および／または予防に使用するための医薬製剤である。
【００６５】
材料および方法
記載されている多形形態の熱的性質は示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって得た。ＤＳＣプロファイルは熱流機器ＤＳＣ  ２００  Ｆ３  Ｍａｉａ（登録商標）（Ｎｅｔｚｓｃｈ）を用いて得た。ＤＳＣ  ２００  Ｆ３  Ｍａｉａ（登録商標）機器は、温度およびエンタルピーに関して、インジウム標準（融点：１５６．６℃；ΔＨｆ＝２８．４５Ｊｇ-1）を用いて較正した。サンプルは次の条件に従って分析した：
−  温度範囲：２５〜３５０℃；
−  加熱速度：１０℃／分；
−  サンプルホルダー：有孔アルミニウムるつぼ；
−  ガス：無水窒素、流量６０ｍＬ／分。
【００６６】
記載されている多形形態の溶媒および／または水（Ｈ2Ｏ）による質量の損失は、熱天秤ＴＧＡ／ＤＳＣ  １  Ｓｔａｒe  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｍｅｔｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏを用いて熱重量分析（ＴＧＡ）によって決定した。各サンプルについて、質量変化％を温度の関数として測定した。ＴＧＡ／ＤＳＣ  １  Ｓｔａｒe  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｍｅｔｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏは温度に関してインジウムおよびアルミニウムを用いて較正した。
サンプルは次の条件に従ってＴＧＡ／ＤＳＣで分析した：
−  温度範囲：２５〜４５０℃；
−  加熱速度：１０℃／分；
−  サンプルホルダー：有孔アルミニウムるつぼ；
−  ガス：無水窒素、流量１００ｍＬ／分。
【００６７】
Ｘ線粉末回折プロファイル（ＸＰＲＤ）を決定するために、検出器Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒならびに電流強度４０ｍＡおよび電圧４０ｋＶのＸ線管（ＰＷ３３７３／００  Ｃｕ  ＬＦＦ  ＤＫ３１２５０３）を備えた回折計Ｐａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｘ’Ｐｅｒｔ  Ｐｒｏを使用した。この機器はケイ素粉末標準ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ６４０を用いて較正した。サンプルはガラスサンプルキャリヤーに載せ、次のパラメーターを用いて分析した：
−  スキャン範囲（°）：３．００１０−３９．９９９７
−  データ取得範囲（°）：０．０１６７
−  スキャンモード：連続
−  計数時間（ｓ）：１２，７００
−  ソーラスリット（ｒａｄ）：０．０４
−  発散スリット：１／４
−  散乱防止スリット：１／２。
【００６８】
ＩＲスペクトルはＮｉｃｏｌｅｔ  ＦＴ−ＩＲ  ６７００  ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｃｈｅｒ分光計を用いて得た。スペクトルはＡＴＲモードでＺｎＳｅ結晶上で次の測定パラメーターを用いて取得した：
−  サンプル当たりのスキャン数：１６
−  分解能：４．０００
−  バックグラウンド当たりのスキャン数：１６
−  測定範囲：６４９．９−４０００．２
−  データ取得範囲：０．４８２１２４
−  検出器：ＤＴＧＳ  ＫＢｒ
−  ＤｅｔｅｃｔｏｒＢｅａｍｓｐｌｉｔｔｅｒ：ＫＢｒ
Ｒａｍａｎスペクトルは液体窒素で冷却されたＧｅ−ダイオード検出器を備えたＦＴ−Ｒａｍａｎ  Ｂｒｕｋｅｒ  ＭｕｌｔｉＲａｍ分光計で記録した。励起源は後方散乱構成（１８０°）のレーザーＮｄ３＋−ＹＡＧ（１０６４ｎｍ）である。集光レーザービームの直径は約１００μｍであり、スペクトルの分解能は４ｃｍ-1である。スペクトルは約６０ｍＷのレーザー出力で記録した。
【００６９】
サンプルの安定性を検査するために、ＤＶＳ  Ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ  ＳＭＳ機器を用いてＤＶＳ（動的蒸気収着）測定を行った。一定の温度におけるチャンバー内の湿度の変化に伴うサンプルの質量変化を決定した。各サンプルを１ｇ〜４ｇの範囲で秤量し（質量変化は±１５０ｍｇに等しく、質量分解能は±０．１μｇに等しい）、機器に入れ、２５℃±０．１および４０℃±０．１において１０％ＲＨずつ増加させて０％ＲＨ〜９０％ＲＨの相対湿度範囲（精度は±１％ＲＨに等しい）で分析した。さらに、サンプルを１０％ＲＨずつ０−９０−０％ＲＨにする。これらの段階の持続時間は質量の安定化の関数であり、質量変化が１０分間０．００２ｄｍ（％）／ｄｔ（分）未満のままであれば次の段階に進む。しかし、各々の段階の安定化が６時間より長く続くことはできず、その場合機器は次の段階に移される。最後の段階は０％ＲＨで４時間のサンプルの安定化を意図している。
一例として、本発明を限定することはないが、以下に本発明に関わる幾つかの例を掲げる。
【実施例】
【００７０】
（例１）アセトン中での再沈殿によるＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩの調製
２リットルのジャケット付反応器に、９００ｍｌのアセトン（乾燥固体装填ＮａＨＤＣ混合物に対して６体積）を装填し、メカニカルスターラーを作動させて速度を２００ｒｐｍに設定した後、１５０ｇ（０．３６２ｍｏｌ）のＮａＨＤＣ混合物をゆっくり加える。還流温度５６℃に加熱し、撹拌下に４時間放置する。
３時間の冷却ランプを用いて塊の温度を５６℃から２５℃にする。
ブフナーでろ過し、得られた白色の固体を１５０ｍｌのアセトン／水（８０／２０ｖ／ｖ）の混合物（乾燥固体装填ＮａＨＤＣ混合物に対して１体積）で洗浄する。得られた湿潤質量は１９５．６ｇに等しく、オーブン内で５０℃で１５時間乾燥する（この場合、ＮａＨＤＣ混合物を得る場合と同様に、乾燥中固体は軟化しない）。
得られた乾燥質量は１４１．０ｇに等しく、これは９４．０％ｗ／ｗ（モルでは９３．９％）に等しい収率％（ｗ／ｗ）に相当する。
この固体は０．５９％ｗ／ｗに等しい水含有率を有する。この固体は本特許出願の明細書および図に記載されている方法によって多形形態ＦＩＩとして特徴付けられた。
【００７１】
（例２）メチル−イソ−ブチルケトン（ＭＩＢＫ）中での再沈殿によるＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩの調製
２リットルのジャケット付反応器に、９００ｍｌのメチル−イソ−ブチルケトン（ＭＩＢＫ）（乾燥固体装填ＮａＨＤＣ混合物に対して６体積）を装填し、メカニカルスターラーを作動させて速度を２００ｒｐｍに設定した後、１５０ｇ（０．３６２ｍｏｌ）のＮａＨＤＣ混合物をゆっくり加える。還流温度１１０℃に加熱し、撹拌下に４時間放置する。
【００７２】
３時間の冷却ランプを用いて塊の温度を１１０℃から２５℃にする。
ブフナーでろ過し、得られた白色の固体を１５０ｍｌのＭＩＢＫ（乾燥固体装填ＮａＨＤＣ混合物に対して１体積）で洗浄する。
得られた湿潤質量は１８８．２ｇに等しく、オーブン内で５０℃で１５時間乾燥する（この場合固体は、ＮａＨＤＣ混合物を得る場合と同様に乾燥中軟化しない）。
得られた乾燥質量は１４０．３ｇに等しく、これは９３．５％ｗ／ｗ（モルでは９３．４％）に等しい収率％ｗ／ｗに相当する。
得られた固体は多形形態ＦＩＩであり、０．５％ｗ／ｗに等しい水含有率を有する。この固体は本特許出願の明細書および図に記載されている方法によって多形形態ＦＩＩとして特徴付けられた。
【００７３】
（例３）イソプロピルアルコール（２−プロパノール）中での再沈殿によるＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩの調製
２リットルのジャケット付反応器に、９００ｍｌのイソプロピルアルコール（２−プロパノール−ＩＰＡ）（乾燥固体装填ＮａＨＤＣ混合物に対して６体積）を装填し、メカニカルスターラーを作動させて速度を２００ｒｐｍに設定した後、１５０ｇ（０．３６２ｍｏｌ）のＮａＨＤＣ混合物をゆっくり加える。還流温度８０℃に加熱し、撹拌下に４時間放置する。
３時間の冷却ランプを用いて塊の温度を８０℃から２５℃にする。
ブフナー上でろ過し、得られた白色の固体を１５０ｍｌのＩＰＡ／Ｈ2Ｏ混合物（８０／２０ｖ／ｖ）（乾燥固体装填ＮａＨＤＣ混合物に対して１体積）で洗浄する。洗液中に含有される水はろ過された固体を溶解する傾向がある（この場合固体は、ＮａＨＤＣ混合物を得る場合と同様に乾燥中軟化しない）。
得られた湿潤質量は１２８．０ｇに等しく、これをオーブン内で５０℃で１５時間乾燥する。
得られた乾燥質量は９４．１ｇに等しく、これは６２．７％ｗ／ｗ（モルでは６２．７％）に等しい収率％ｗ／ｗに相当する。
得られた固体は多形形態ＦＩＩであり、０．２７％ｗ／ｗに等しい水含有率を有する。この固体は、本特許出願の明細書および図に記載されている方法によって多形形態ＦＩＩとして特徴付けられた。
【００７４】
（例４）酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）中での再沈殿によるＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩの調製
２リットルのジャケット付反応器に、９００ｍｌの酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）（乾燥固体装填ＮａＨＤＣ混合物に対して６体積）を装填し、メカニカルスターラーを作動させて速度を２００ｒｐｍに設定した後、１５０ｇ（０．３６２ｍｏｌ）のＮａＨＤＣ混合物をゆっくり加える。還流温度７４℃に加熱し、撹拌下に４時間放置する。
３時間の冷却ランプを用いて塊の温度を７４℃から２５℃にする。
ブフナー上でろ過し、得られた白色の固体を１５０ｍｌのＥｔＯＡｃ（乾燥固体装填ＮａＨＤＣ混合物に対して１体積）で洗浄する。
得られた湿潤質量は２１８．４ｇに等しく、これをオーブン内で５０℃で１５時間乾燥する（この場合固体は、ＮａＨＤＣ混合物を得る場合と同様に乾燥中軟化しない）。
得られた乾燥質量は１４５．７ｇに等しく、これは９７．１％ｗ／ｗ（モルでは９７．０％）に等しい収率％ｗ／ｗに相当する。
得られた固体は多形形態ＦＩＩであり、０．２４％ｗ／ｗに等しい水含有率を有する。この固体は本特許出願の明細書および図に記載されている方法によって多形形態ＦＩＩとして特徴付けられた。
【００７５】
（例５）アセトニトリル（ＡＣＮ）中での再沈殿によるＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩの調製
２リットルのジャケット付反応器に、９００ｍｌのアセトニトリル（ＡＣＮ）（乾燥固体装填ＮａＨＤＣ混合物に対して６体積）を装填し、メカニカルスターラーを作動させて速度を２００ｒｐｍに設定した後、１５０ｇ（０．３６２ｍｏｌ）のＮａＨＤＣ混合物をゆっくり加える。還流温度８０℃に加熱し、撹拌下に４時間放置する。
３時間の冷却ランプを用いて塊の温度を８０℃から２５℃にする。
ブフナー上でろ過し、得られた白色の固体を１５０ｍｌのＡＣＮ（乾燥固体装填ＮａＨＤＣ混合物に対して１体積）で洗浄する。
得られた湿潤質量は２２６．２ｇに等しく、これをオーブン内で５０℃で１５時間乾燥する（この場合固体は、ＮａＨＤＣ混合物を得る場合と同様に乾燥中軟化しない）。
得られた乾燥質量は１４６．２ｇに等しく、これは９７．５％ｗ／ｗ（モルでは９７．５％）に等しい収率％ｗ／ｗに相当する。
得られた固体は多形形態ＦＩＩであり、０．４７％ｗ／ｗに等しい水含有率を有する。この固体は本特許出願の明細書および図に記載されている方法によって多形形態ＦＩＩとして特徴付けられた。
【００７６】
（例６）多形形態ＦＩと多形形態ＦＩＩの１：１（質量／質量）混合物の室温（２０〜２５℃）における４８時間酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）中での再沈殿によるＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩの調製
２リットルのジャケット付反応器に、１０００ｍｌの酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）を装填し、メカニカルスターラーを作動させて速度を２００ｒｐｍに設定した後、２５ｇの多形形態ＦＩと２５ｇの多形形態ＦＩＩをゆっくり加える。これを４８時間２５℃の温度で撹拌下に放置する。
ブフナー上でろ過し、得られた白色の固体を５０ｍｌのＥｔＯＡｃ（装填された全乾燥固体ＮａＨＤＣの多形形態ＦＩおよびＮａＨＤＣの多形形態ＦＩＩに対して１体積）で洗浄する。
得られた湿潤質量は７５．１ｇに等しく、これをオーブン内で５０℃で１５時間乾燥する（この場合固体は、ＮａＨＤＣ混合物を得る場合と同様に乾燥中軟化しない）。
得られた乾燥質量は４８．５ｇに等しく、これは９７．０％ｗ／ｗ（モルでは９６．７％）に等しい収率％ｗ／ｗに相当する。
この固体は０．２６％ｗ／ｗに等しい水含有率を有する。
分析された粉末は無水形態ＦＩＩのＸＰＲＤパターンを示す（図６１、６２参照）。
従って、このように多形形態ＦＩが多形形態ＦＩＩ、すなわち室温で最も熱力学的に安定な形態に相互変換することが立証された。
【００７７】
（例７）無水アセトン中での再沈殿によるＮａＨＤＣ混合物の調製（３時間の還流および３時間の冷却）
２リットルのジャケット付反応器に、３００ｍｌの脱イオン水（乾燥固体装填ＮａＨＤＣ混合物に対して２体積）を装填し、メカニカルスターラーを作動させて速度を１８０ｒｐｍに設定した後、１５０ｇ（０．３６２ｍｏｌ）のＮａＨＤＣ混合物をゆっくり加える。これを６０℃の温度に加熱し、固体が完全に溶解するまで撹拌下に放置する。こうして得られた黄色がかった粘稠な溶液を、反応器内に最後は１３５ｍｌに等しい水含有率および２８５ｇの全質量を有する極めて粘稠な油性の残渣が得られるまで真空蒸留する。
蒸留温度は６０℃を超えない。蒸留が完了したら、温度を４５〜５０℃に下げ、９００ｍｌのアセトン（装填された乾燥固体ＮａＨＤＣに対して６体積）を３時間の間滴下する。これを５６℃に等しい還流温度に加熱し、３時間の間撹拌下に放置する。３時間の冷却ランプを用いて塊の温度を５６℃から２５℃にする。ブフナー上でろ過し、得られた白色の固体を１５０ｍｌのアセトン／水の８０／２０（ｖ／ｖ）混合物（乾燥固体装填ＮａＨＤＣ混合物に対して１体積）で洗浄する。
【００７８】
得られた湿潤質量は２３２．６ｇに等しく、これをオーブン内で真空下２５℃の温度で１５時間乾燥し、これを４時間３０℃に、その後１５時間５０℃に上昇する。
得られた乾燥質量は１３５．７ｇに等しく、これは９０．５％ｗ／ｗ（モルでは９０．３％）に等しい収率％ｗ／ｗに相当する。固体は２．１７％ｗ／ｗに等しい水含有率を有する。この固体は図５３−５４−５５−５６−５７−５８−５９−６０に示されているように異なる多形形態の混合物である。
【００７９】
（例８）無水アセトン中での再沈殿によるＮａＨＤＣ混合物の調製（３０分の還流および６時間の冷却）
２リットルのジャケット付反応器に、３００ｍｌの脱イオン水（乾燥固体装填ＮａＨＤＣ混合物に対して２体積）を装填し、メカニカルスターラーを作動させて速度を１８０ｒｐｍに設定した後、１５０ｇ（０．３６２ｍｏｌ）のＮａＨＤＣ混合物をゆっくり加える。これを６０℃の温度に加熱し、固体が完全に溶解するまで撹拌下に放置する。こうして得られた黄色がかった粘稠な溶液を、反応器内で最後には１３５ｍｌに等しい水含有率および２８５ｇの全質量を有する極めて粘稠な油性の残渣が得られるまで真空蒸留する。
蒸留温度は６０℃を超えない。
蒸留が完了したら、温度を４５℃〜５０℃に下げ、９００ｍｌのアセトン（装填された乾燥固体ＮａＨＤＣに対して６体積）を３時間の間滴下する。これを５６℃に等しい還流温度に加熱し、３０分の間撹拌下に放置する。
６時間の冷却ランプを用いて塊の温度を５６℃から２５℃にする。
ブフナー上でろ過し、得られた白色の固体を１５０ｍｌのアセトン／水の８０／２０（ｖ／ｖ）混合物（乾燥固体装填ＮａＨＤＣ混合物に対して１体積）で洗浄する。
得られた湿潤質量は１９１．３ｇに等しく、これをオーブン内で真空下２５℃の温度で１５時間乾燥し、３０℃に４時間、次いで５０℃に１５時間上昇する。
得られた乾燥質量は１３６．１ｇに等しく、これは９０．７％ｗ／ｗ（モルでは９０．６％）に等しい収率％ｗ／ｗに相当する。２．１３％ｗ／ｗに等しい水含有率を有する固体は、図５３−５４−５５−５６−５７−５８−５９−６０に示されているように異なる多形形態の混合物である。
【００８０】
（例９）多形形態ＦＩＩと多形形態ＦＩとの２５℃±０．１での等温曲線における動的蒸気収着（ＤＶＳ）分析の比較例
サンプルの安定性を確かめるために、ＤＶＳ  Ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ  ＳＭＳ機器を用いてＤＶＳ（動的蒸気収着）測定を実施した。一定の温度におけるチャンバー内の湿度の変化に伴うサンプルの質量変化を決定した。各サンプルを機器内に設置し、２５℃±０．１において１０％ＲＨずつ増加しながら０％〜９０％ＲＨの範囲の湿度範囲で分析した（ＲＨ精度は±１％ＲＨに等しい）。サンプルは０％ＲＨに４時間安定化する。単一の段階の持続時間は質量の安定化の関数であり、質量変化が１０分間０．００２ｄｍ（％）／ｄｔ（分）未満のままであれば、次の段階に進む。安定化は６時間を超えて続くことはできず、その場合は次の段階に移る。最後の段階は０％ＲＨで４時間のサンプルの安定化を意図している。
【００８１】
４ｇのＮａＨＤＣ多形形態ＦＩＩを正確に秤量し（質量変化は±１５０ｍｇに等しく、質量分解能は±０．１μｇに等しい）、２５℃±０．１の一定の温度でチャンバー内に配置した後、相対湿度（ＲＨ）％の変化と共に質量変化を記録する。図１０〜２７のグラフおよび図１１に％で表わされている値から見ることができるように、サンプルは７０％ＲＨまで驚くべきほどに安定である。実際、２５℃±０．１での収着において、多形形態ＦＩＩは７０％ＲＨまで安定である（７０％ＲＨで２％未満の質量増加を示す）。７０％ＲＨを超えると湿気を吸収し、９０％ＲＨでは約３５％の質量変化がある。
【００８２】
２５℃での収着における多形形態ＦＩとは異なり、すでに３０％ＲＨでサンプルは約２％の質量変化を示し、７０％ＲＨでは１５％である。９０％ＲＨでは約３５％の質量変化がある。
２５℃±０．１での脱着において、多形形態ＦＩＩは５０％ＲＨまで安定であり、約３４％の質量変化を維持する（約８個の水分子に相当する）。約４０％ＲＨで変曲を見ることが可能であり、この時点でサンプルはまだ約１８％の水を含有するようである（約４個の水分子に相当する）。０％ＲＨで質量変化はゼロである。
２５℃±０．１での脱着において、多形形態ＦＩは５０％ＲＨまで安定であり、約３４％の質量変化を維持する（約８個の水分子に相当する）。約４０％ＲＨで変曲を見ることが可能であり、この時点でサンプルはまだ約１８％の水を含有するようである（約４個の水分子に相当する）。
０％ＲＨで質量変化はゼロである。
２５℃±０．１でのＤＶＳ分析から、多形形態ＦＩは多形形態ＦＩＩより安定性が低く、多形形態ＦＩＩは２５℃での収着において約７０％ＲＨまで安定であるのに対して、多形形態ＦＩはすでに２０％ＲＨで約２％の質量の変化を示し、一方７０％ＲＨでは約１５％の水という非常に高い増大を有する（図２３、２４、２７参照）。
【００８３】
（例１０）多形形態ＦＩＩと多形形態ＦＩとの４０℃±０．１での等温曲線における動的蒸気収着（ＤＶＳ）分析の比較例
サンプルの安定性を検査するために、ＤＶＳ  Ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ  ＳＭＳ機器を用いてＤＶＳ（動的蒸気収着）測定を行った。一定の温度においてチャンバー内の湿度の変化に伴うサンプルの質量変化を決定した。各サンプルを機器内に設置し、４０℃±０．１において１０％ＲＨずつ増加しながら０％〜９０％ＲＨの湿度範囲で分析する（ＲＨの精度は±１％ＲＨに等しい）。サンプルは０％ＲＨで４時間安定化する。単一の段階の持続時間は質量の安定化の関数であり、質量変化が１０分間０．００２ｄｍ（％）／ｄｔ（分）未満のままであれば、次の段階に進む。安定化は６時間を超えて続くことはできず、その場合は次の段階に移る。最後の段階は０％ＲＨで４時間のサンプルの安定化を意図している。
４ｇのＮａＨＤＣ多形形態ＦＩＩを正確に秤量し（質量変化は±１５０ｍｇに等しく、質量分解能は±０．１μｇに等しい）、４０℃±０．１の一定の温度でチャンバー内に配置し、その後質量変化を相対湿度（ＲＨ）％の変化と共に記録する。図１２、２８のグラフおよび図１３に％で表わされている値から見ることができるように、サンプルは７０％ＲＨまで驚くべきほどに安定である。４０℃±０．１での収着において、サンプルは６０％ＲＨまで安定である（７０％ＲＨでは２％未満の質量増加を示す）。９０％ＲＨでは約４５％の質量変化がある（おそらくサンプルは潮解性になる）。４０℃±０．１での収着の場合とは異なり、多形形態ＦＩはすでに３０％ＲＨで、サンプルは約２％の質量変化を示し、７０％ＲＨでは８％である。
【００８４】
９０％ＲＨでは約４３％の質量変化がある。
４０℃±０．１での脱着において、多形形態ＦＩＩは５０〜４０％ＲＨで曲線がおそらくはサンプルの固化におけるプラトーを示す。０％ＲＨにおいて質量変化は約６％である。４０℃での脱着において多形形態ＦＩは５０〜４０％ＲＨで曲線がプラトーを示し、サンプルは約１７％の質量の変化を示す。
０％ＲＨで質量変化はゼロである。
４０℃±０．１でのＤＶＳ分析から、形態ＦＩは形態ＦＩＩより安定性が低く、形態ＦＩＩは収着において約７０％ＲＨまで安定であるのに対して、形態ＦＩはすでに３０％ＲＨで約２％の質量の変化を示す。
【００８５】
（例１１）多形形態ＦＩＩとＮａＨＤＣ混合物との２５℃±０．１での等温曲線における動的蒸気収着（ＤＶＳ）分析の比較例
サンプルの安定性を検査するために、ＤＶＳ  Ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ  ＳＭＳ機器を用いてＤＶＳ（動的蒸気収着）測定を行った。一定の温度においてチャンバー内の湿度の変化に伴うサンプルの質量変化を決定した。各サンプルを機器内に設置し、２５℃±０．１において１０％ＲＨずつ増加しながら０％ＲＨ〜９０％ＲＨの湿度範囲で分析した（精度は±１％ＲＨに等しい）。サンプルは０％ＲＨで４時間安定化する。単一の段階の持続時間は質量の安定化の関数であり、質量変化が１０分間０．００２ｄｍ（％）／ｄｔ（分）未満のままであれば、次の段階に進む。安定化は６時間を超えて続くことはできず、その場合は次の段階に移る。最後の段階は０％ＲＨで４時間のサンプルの安定化を意図している。
４ｇ／ｍｇのＮａＨＤＣ多形形態ＦＩＩを正確に秤量し（質量変化は±１５０ｍｇに等しく、質量分解能は±０．１μｇに等しい）、４０℃±０．１の一定の温度でチャンバー内に配置し、２５℃±０．１の一定の温度でチャンバー内に配置し、その後質量変化を相対湿度（ＲＨ）％の変化と共に記録する。図１０、５８のグラフおよび図１１に％で表わされている値から見ることができるように、サンプルは７０％ＲＨまで驚くほど安定である。
【００８６】
実際、２５℃±０．１での収着において、多形形態ＦＩＩは７０％ＲＨまで安定である（７０％ＲＨで２％未満の質量増加を示す）。７０％ＲＨを超えると湿気を吸収し、９０％ＲＨでは約３５％の質量変化である。２５℃±０．１での収着におけるＮａＨＤＣ混合物とは異なり、すでに２０％ＲＨで、サンプルは約３％の質量変化を示し、７０％ＲＨでは１５％である。９０％ＲＨでは約３５％の質量変化がある。
２５℃±０．１での脱着において、多形形態ＦＩＩは５０％ＲＨまで安定であり、約３４％の質量変化を維持する（約８個の水分子に相当する）。約４０％ＲＨに変曲を見ることが可能であり、この時点でサンプルはまだ約１８％の水を含有するようである（約４個の水分子に相当する）。０％ＲＨで質量変化はゼロである。
脱着においてＮａＨＤＣ混合物は５０％ＲＨまで安定で約３４％の質量増加を有し（約８個の水分子に相当する）、約４０％ＲＨを過ぎると変曲を見ることが可能であり、サンプルは約１８％の水を含有するようである（約４個の水分子に相当する）。
２５℃±０．１でのＤＶＳ分析から、ＮａＨＤＣ混合物は多形形態ＦＩＩより安定性が低く、多形形態ＦＩＩは２５℃±０．１での収着において約７０％ＲＨまで安定であるのに対して、ＮａＨＤＣ混合物はすでに２０％ＲＨで約３％の質量の変化を示し、一方７０％ＲＨでは約１５％水という非常に高い増大を有する（図５６、５７、５８参照）。
【００８７】
（例１２）多形形態ＦＩを得る
形態ＦＩは、凍結乾燥過程によって得られた。
５ＰａｓｃａｌモデルＬＩＯ１００Ｐ凍結乾燥器を用いた。
５ｇのＮａＨＤＣ混合物を３０〜４０℃の温度で９５ｍｌの脱イオンＨ2Ｏに溶解して澄んだ溶液を得たが、これは２５℃の温度で２４時間後そのままであった。
溶液を−２０℃の一定の温度で７２時間の間凍結乾燥し、凍結乾燥終了時に５．１０〜２ミリバールの圧力をかけた。極めて微細な結晶性の白色固体が得られ、これは本特許出願の明細書および図に記載されている方法によって多形形態ＦＩとして特徴付けられた。
【００８８】
（例１３）多形形態ＦＩＩＩを得る
多形形態ＦＩＩＩは、１．５ｇのＮａＨＤＣ混合物を５０℃の温度で３．５ｍｌの脱イオンＨ2Ｏに溶解することによって得られた。得られた澄んだ溶液を２５℃の温度までゆっくり冷却した。白色の沈殿が得られ、これをろ過し、オーブン内で２３０℃で１５時間乾燥した。
前記沈殿は本特許出願の明細書および図に記載されている方法によって多形形態ＦＩＩＩとして特徴付けられた。
【００８９】
（例１４）水和多形形態ＳＩを得る
水和多形形態ＳＩは、１．５ｇのＮａＨＤＣ混合物を５０℃の温度で３．５ｍｌの脱イオンＨ2Ｏに溶解することによって得られた。澄んだ溶液を２５℃の室温までゆっくり冷却した。白色の沈殿が得られ、これをろ過し、２４時間空気中に放置して乾燥した。
前記沈殿は本特許出願の明細書および図に記載されている方法によって水和多形形態ＳＩとして特徴付けられた。
【００９０】
（例１５）水和多形形態ＳＩＩを得る
水和多形形態ＳＩＩは、１ｇのＮａＨＤＣ混合物を２５℃の室温、９０％の相対湿度（ＲＨ）で２日間等温に放置することによって得られた。
【００９１】
（例１６）ＮａＨＤＣの非晶質形態を得る
非晶質形態は、２ｇのＮａＨＤＣ混合物を室温で５００ｍｌの脱イオンＨ2Ｏに溶解することによって得られた。噴霧乾燥機のＢｕｃｈｉミニスプレードライヤーＢ−２９０を用いて溶液を噴霧化および乾燥することによって粉末を得た。入口温度１４０℃、出口温度６０℃、空気流４７３Ｌ／ｈおよびポンプ速度９ｍｌ／分を使用した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９】
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【図５０】
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【図５１】
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【図５２】
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【図５３】
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【図５４】
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【図５５】
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【図５６】
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【図５７】
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【図５８】
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【図５９】
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【図６０】
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【図６１】
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【図６２】
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