(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）の化合物またはその塩：
【化１】
0006672276.tif 000043
［式中、Ｒ１は、水素原子、シクロプロピル基、またはピラゾール環を表し、該ピラゾールが１個または２個のメチル基によって置換されていてもよい］。
【請求項２】
下記構造式（ＩＡ）またはその薬学的に許容可能な塩を有する、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物：
【化２】
0006672276.tif 000044
【請求項３】
Ｒ１が水素原子を表す、請求項１または２に記載の化合物またはその塩。
【請求項４】
Ｒ１がシクロプロピル基を表す、請求項１または２に記載の化合物またはその塩。
【請求項５】
Ｒ１が１Ｈ−ピラゾール基を表す、請求項１または２に記載の化合物またはその塩。
【請求項６】
Ｒ１が３−メチル−１Ｈ−ピラゾール基を表す、請求項１または２に記載の化合物またはその塩。
【請求項７】
Ｒ１が３,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール基を表す、請求項１または２に記載の化合物またはその塩。
【請求項８】
３−（３−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸：
【化３】
0006672276.tif 000045
３−（３−シクロプロピル−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸：
【化４】
0006672276.tif 000046
３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸：
【化５】
0006672276.tif 000047
３−（３−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸：
【化６】
0006672276.tif 000048
３−（３−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸：
【化７】
0006672276.tif 000049
３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−５−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸：
【化８】
0006672276.tif 000050
３−（３−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸：
【化９】
0006672276.tif 000051
３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸：
【化１０】
0006672276.tif 000052
またはこれらの薬学的に許容可能な塩から選択される、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項９】
３−（３−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸：
【化１１】
0006672276.tif 000053
またはその薬学的に許容可能な塩である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項１０】
（Ｓ）−３−（３−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸：
【化１２】
0006672276.tif 000054
またはその薬学的に許容可能な塩である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項１１】
（Ｒ）−３−（３−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸：
【化１３】
0006672276.tif 000055
またはその薬学的に許容可能な塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
３−（３−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸：
【化１４】
0006672276.tif 000056
またはその薬学的に許容可能な塩である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、１種以上の薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤とを含んでなる医薬組成物。
【請求項１４】
αｖβ６インテグリンアンタゴニストが指示される疾患または病態の治療において使用するための、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
線維性疾患の治療および／または予防において使用するための、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
特発性肺線維症の治療および／または予防において使用するための、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
αｖβ６受容体の拮抗作用が有益である障害の治療および／または予防において使用するための、請求項１３に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【発明の背景】
【０００１】
技術分野
本発明は、αｖβ６インテグリンアンタゴニストであるピロリジン化合物、そのような化合物を含んでなる医薬組成物および療法、特にαｖβ６インテグリンアンタゴニストが指示される病態の治療におけるそれらの使用、αｖβ６インテグリンのアンタゴニストが指示される病態の治療のための薬剤の製造における化合物の使用、およびヒトにおけるαｖβ６インテグリンの拮抗作用が指示される障害の治療または予防のための方法に関する。
【０００２】
背景技術
インテグリンスーパーファミリータンパク質は、αおよびβサブユニットからなるヘテロ二量体の細胞表面受容体である。少なくとも１８種のαサブユニットと８種のβサブユニットが報告されており、それらは、２４種の異なるα／βヘテロ二量体を形成することが実証されている。各鎖は、鎖１本当たり２０前後のアミノ酸の膜貫通領域を備えた大きな細胞外ドメイン（βサブユニットでは６４０を越えるアミノ酸、αサブユニットでは９４０を越えるアミノ酸）と、一般に、鎖１本当たり３０〜５０アミノ酸の短い細胞質テールを含んでなる。種々のインテグリンが、細胞外マトリックスとの細胞接着、細胞−細胞相互作用、ならびに細胞の遊走、増殖、分化および生存に対する作用を含む多くの細胞生物学に関与していることが示されている(Barczyk et al, Cell and Tissue Research, 2010, 339, 269)。
【０００３】
インテグリン受容体は、短いタンパク質−タンパク質結合界面を介して結合タンパク質と相互作用する。インテグリンファミリーは、そのようなリガンドにおける類似の結合認識モチーフを共有するサブファミリーに分類され得る。主なサブファミリーは、ＲＧＤ−インテグリンであり、これはそれらのタンパク質配列内にＲＧＤ（アルギニン−グリシン−アスパラギン酸）モチーフを含有するリガンドを認識する。このサブファミリーには、８種のインテグリン、すなわち、αｖβ１、αｖβ３、αｖβ５、αｖβ６、αｖβ８、αＩＩｂβ３、α５β１、α８β１が存在し、命名は、αｖβ１、αｖβ３、αｖβ５、αｖβ６、およびαｖβ８が、βサブユニットは異なるが、共通のαｖサブユニットを有し、αｖβ１、α５β１およびα８β１が、αサブユニットは異なるが、共通のβ１サブユニットを有することを示している。β１サブユニットは、１１種の異なるαサブユニットと対を成し、そのうち、上記に列挙した３種のみが、ＲＧＤペプチドモチーフを共通に認識することが示されている(Humphries et al, Journal of Cell Science, 2006, 119, 3901)。
【０００４】
８種のＲＧＤ結合インテグリンは、異なるＲＧＤ含有リガンドに対して、異なる結合親和性および特異性を有する。リガンドには、フィブロネクチン、ビトロネクチン、オステオポンチン、ならびにトランスフォーミング増殖因子β１およびβ３（ＴＧＦβ１およびＴＧＦβ３）の潜伏関連ペプチド（ＬＡＰ）などのタンパク質が含まれる。ＴＧＦβ１およびＴＧＦβ３のＬＡＰと結合するインテグリンは、いくつかのシステムで、ＴＧＦβ１およびＴＧＦβ３生物活性の活性化、およびその後のＴＧＦβ駆動性の生物学を可能にすることが示されている(Worthington et al, Trends in Biochemical Sciences, 2011, 36, 47)。このようなリガンドの多様性は、ＲＧＤ結合インテグリンの発現パターンと相まって、疾患介入のための多くの機会を作り出す。このような疾患には、線維性疾患（線維症）（Margadant et al, EMBO reports, 2010, 11, 97)、炎症性障害、癌(Desgrosellier et al, Nature Reviews Cancer, 2010, 10, 9)、再狭窄、および血管形成要素を有する他の疾患(Weis et al, Cold Spring. Harb. Perspect. Med. 2011, 1, a 006478)が含まれる。
【０００５】
阻害性の抗体、ペプチドおよび小分子を含め相当な数のαｖインテグリンアンタゴニスト(Goodman et al, Trends in Pharmacological Sciences, 2012, 33, 405)が文献に開示されている。抗体では、これらには、ｐａｎ−αｖアンタゴニストのインテツムマブおよびアビツズマブ(Gras, Drugs of the Future, 2015, 40, 97)、選択的αｖβ３アンタゴニストのエタラシズマブ、および選択的αｖβ６アンタゴニストのＳＴＸ−１００が含まれる。シレンジタイドは、αｖβ３およびαｖβ５の両方を阻害する環状ペプチドアンタゴニストであり、ＳＢ−２６７２６８は、αｖβ３およびαｖβ５の両方を阻害する化合物の例である(Wilkinson-Berka et al, Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 2006, 47, 1600)。種々の組合せのαｖインテグリンのアンタゴニストとして作用する化合物を発明することで、新規薬剤を、特定の疾患兆候のために作出、適合させることが可能となる。
【０００６】
肺線維症は、特発性間質性肺炎を含むいくつかの間質性肺疾患の最終段階であり、肺間質内での細胞外マトリックスの過剰な沈積を特徴とする。特発性間質性肺炎のうち、特発性肺線維症（ＩＰＦ）は、診断後３〜５年の典型的生存期間を有する最も一般的かつ最も致命的な病態である。ＩＰＦにおける線維症は、一般に、進行性で、現行の薬理学的介入に不応であり、無情にも機能性肺胞単位の閉塞のために呼吸不全につながる。ＩＰＦは米国および欧州の約５００，０００人を侵している。
【０００７】
ＴＧＦ−β１の活性化における上皮限定インテグリンαｖβ６の重要な役割を裏付けるｉｎ  ｖｉｔｒｏの実験的動物およびＩＰＦ患者の免疫組織化学データが存在する。このインテグリンの発現は、正常な上皮組織では低く、ＩＰＦにおける活性化上皮を含む、損傷および炎症上皮において有意にアップレギュレートされる。従って、このインテグリンを標的とすることで、より広いＴＧＦβ恒常性の役割に干渉する理論的可能性が低くなる。抗体遮断によるαｖβ６インテグリンの部分的阻害は、炎症を悪化させることなく、肺線維症を予防することが示されている(Horan GS et al Partial inhibition of integrin αvβ6 prevents pulmonary fibrosis without exacerbating inflammation. Am J Respir Crit Care Med  2008 177: 56-65)。肺線維症の他、αｖβ６はまた、肝臓および腎臓を含む他の器官の線維性疾患の重要な促進因子と考えられ(Reviewed in Henderson NC et al Integrin-mediated regulation of TGFβ in Fibrosis, Biochimica et Biophysica Acta - Molecular Basis of Disease 2013 1832:891-896)、このことは、αｖβ６アンタゴニストが複数の器官の線維性疾患を治療する上で有効であり得ることを示唆している。
【０００８】
いくつかのＲＧＤ結合インテグリンがＴＧＦβと結合してこれを活性化し得るという所見と一致して、種々のαｖインテグリンが最近、線維性疾患に関連付けられている(Henderson NC et al Targeting of αv integrin identifies a core molecular pathway that regulates fibrosis in several organs Nature Medicine 2013 Vol 19, Number 12: 1617-1627; Sarrazy V et al Integrins αvβ5 and αvβ3 promote latent TGF-β1 activation by human cardiac fibroblast contraction Cardiovasc Res 2014 102:407-417; Minagawa S et al Selective targeting of TGF-β activation to treat fibroinflammatory airway disease Sci Transl Med  2014 Vol 6, Issue 241: 1-14; Reed NI et al.  The αvβ1 integrin plays a critical in vivo  role in tissue fibrosis Sci Transl Med  2015 Vol 7, Issue 288: 1-8)。従って、ＲＧＤ結合インテグリンファミリーの特定のメンバーに対する、またはＲＧＤ結合インテグリンファミリー内の特定の選択的フィンガープリントを有する阻害剤は、複数の器官の線維性疾患を治療する上で有効であり得る。
【０００９】
αｖβ３  αｖβ５、αｖβ６およびαｖβ８に対する一連のインテグリンアンタゴニストのＳＡＲ関係が記載されている(Macdonald, SJF et al. Structure activity relationships of αv integrin antagonists for pulmonary fibrosis by variation in aryl substituents. ACS MedChemLett 2014, 5, 1207-1212. 19 Sept 2014)。
【００１０】
本発明の目的は、好ましくはαｖβ１、αｖβ３、αｖβ５またはαｖβ８などの他のαｖインテグリンに対して活性を有する、αｖβ６アンタゴニストを提供することである。
【発明の概要】
【００１１】
本発明の第１の側面では、式（Ｉ）の化合物またはその塩、より詳しくは、その薬学的に許容可能な塩：
【化１】
0006672276.tif 000002
［式中、Ｒ１は、水素原子、シクロプロピル基、またはピラゾール環を表し、該ピラゾールが１個または２個のメチル基によって置換されていてもよい］
が提供される。
【００１２】
式（Ｉ）の化合物およびそれらの塩は、αｖβ６インテグリンアンタゴニスト活性を有し、特定の障害の治療または予防に使用される可能性があると考えられる。用語αｖβ６アンタゴニスト活性には、本明細書ではαｖβ６阻害剤活性を含む。
【００１３】
本発明の第２の側面では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、１種以上の薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤とを含んでなる医薬組成物が提供される。
【００１４】
本発明の第３の側面では、療法において、特に、αｖβ６インテグリンアンタゴニストが指示される疾患または病態の治療において使用するための式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩が提供される。
【００１５】
本発明の第４の側面では、それを必要とするヒトにおけるαｖβ６インテグリンアンタゴニストが指示される疾患または病態の治療または予防方法が提供され、その方法は、それを必要とするヒトに治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる。
【００１６】
本発明の第５の側面では、αｖβ６インテグリンアンタゴニストが指示される疾患または病態の治療のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩の使用が提供される。
【００１７】
本発明の第６の側面では、式（ＸＶ）の化合物：
【化２】
0006672276.tif 000003
［式中、
Ｒ１は、上記に定義される通りであり、
Ｘ１は、ヒドロキシルまたはヒト身体の代謝によって加水分解されてＸ１が−ＯＨである式（Ｉ）の対応する酸化合物を形成し得る部分を表し、
Ｙ１は、水素またはヒト身体の代謝によって加水分解されてＹ１が水素である式（Ｉ）の対応するアミノ化合物を形成し得る部分を表し、
ただし、Ｘ１がヒドロキシルである場合には、Ｙ１は水素でない］
が提供される。
【発明の具体的説明】
【００１８】
本発明の第１の側面では、式（Ｉ）の化合物またはその塩、より詳しくは、その薬学的に許容可能な塩：
【化３】
0006672276.tif 000004
［式中、
Ｒ１は、水素原子、シクロプロピル基、またはピラゾール環を表し、該ピラゾールが１個または２個のメチル基によって置換されていてもよい］
が提供される。
【００１９】
いくつかの態様では、式（Ｉ）の化合物またはその塩は、構造式（ＩＡ）を有する。
【化４】
0006672276.tif 000005
【００２０】
他の態様では、式（Ｉ）の化合物またはその塩は、構造式（ＩＢ）を有する。
【化５】
0006672276.tif 000006
【００２１】
本発明は本明細書に記載された特定の好ましい基のあらゆる組合せを包含すると理解されるべきである。
【００２２】
いくつかの態様では、Ｒ１は、水素原子を表す。
【００２３】
いくつかの態様では、Ｒ１は、シクロプロピルを表す。
【００２４】
いくつかの態様では、Ｒ１は、１Ｈ−ピラゾール環を表す。
【００２５】
いくつかの態様では、Ｒ１は、３−メチル−１Ｈ−ピラゾール環を表す。
【００２６】
いくつかの態様では、Ｒ１は、３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール環を表す。
【００２７】
一態様では、本化合物は、
（Ｓ）−３−（３−モルホリノフェニル））−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸、
（Ｓ）−３−（３−シクロプロピル−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸、
（Ｓ）−３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸、
（Ｓ）−３−（３−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸、および
（Ｓ）−３−（３−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸、またはその薬学的に許容可能な塩、
（Ｓ）−３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−５−フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸、
（Ｓ）−３−（３−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸、
（Ｓ）−３−（３−モルホリノ−５−（−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸
から選択される。
【００２８】
一態様では、本化合物は、
３−（３−モルホリノフェニル））−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸またはその薬学的に許容可能な塩である。
【００２９】
式（Ｉ）または（ＩＡ）または（ＩＢ）の化合物は、塩基性アミン基とカルボン酸基の両方を有し、結果として内部塩、すなわち、両性イオンまたは分子内塩を形成し得る。従って、ある態様では、式（Ｉ）の化合物は両性イオン塩形態にある。別の態様では、式（ＩＡ）の化合物は両性イオン塩形態にある。別の態様では、式（ＩＢ）の化合物は両性イオン塩形態にある。
【００３０】
本発明は親化合物としてのおよびその塩としての、例えば、その薬学的に許容可能な塩としての式（Ｉ）の化合物を包含することが認識されるであろう。１つの態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。
【００３１】
好適な塩の総説としては、Berge et al., J. Pharm. Sci., 66:1-19, (1977)を参照のこと。好適な薬学的に許容可能な塩は、P H Stahl and C G Wermuth編, Handbook of Pharmaceutical Salts; Properties, Selection and Use, Weinheim/Surich: Wiley- VCH/VHCA, 2002に列挙されている。好適な薬学的に許容可能な塩には、例えば、塩酸、臭化水素酸、オルトリン酸、硝酸、リン酸、もしくは硫酸などの無機酸、または例えば、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酢酸、プロピオン酸、乳酸、クエン酸、フマル酸、リンゴ酸、コハク酸、サリチル酸、マレイン酸、グリセロリン酸、酒石酸、安息香酸、グルタミン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸などのナフタレンスルホン酸、ヘキサン酸、もしくはアセチルサリチル酸などの有機酸との酸付加塩が含まれ得る。一般に、薬学的に許容可能な塩は、適当であれば所望の酸または塩基を使用することによって容易に調製することができる。得られた塩は、溶液から沈澱させ、濾取することができるか、または溶媒の蒸発により回収することができる。
【００３２】
他の薬学上許容されない塩、例えば、ギ酸塩、シュウ酸塩またはトリフルオロ酢酸塩も、式（Ｉ）の化合物を単離する際に使用することができ、本発明の範囲内に含まれる。
【００３３】
薬学的に許容可能な塩基付加塩を、場合により好適な溶媒中で、式（Ｉ）の化合物を好適な有機塩基（例えば、トリエチルアミン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、コリン、アルギニン、リシンもしくはヒスチジン）と反応させることにより形成して塩基付加塩を得ることができ、この塩基付加塩を通常、例えば、結晶化および濾過により単離する。薬学的に許容可能な無機塩基塩には、アンモニウム塩、ナトリウムおよびカリウムの塩などのアルカリ金属塩、カルシウムおよびマグネシウムの塩などのアルカリ土類金属、ならびにイソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメチルアミン、ジシクロヘキシルアミンおよびＮ−メチル−Ｄ−グルカミンなどの第一級、第二級および第三級アミンの塩を含む有機塩基との塩が含まれる。
【００３４】
１つの態様では、式（Ｉ）の化合物は親化合物の形態である。
【００３５】
本発明は、その範囲内に、総ての可能な化学量論的および非化学量論的形態の式（Ｉ）の化合物の塩を含む。
【００３６】
多くの有機化合物は、それらが反応される、またはそれらが沈澱もしくは結晶化される溶媒と複合体を形成することができることが認識されるであろう。これらの複合体は、「溶媒和物」として知られる。例えば、水との複合体は、「水和物」として知られる。水、キシレン、Ｎ−メチルピロリジノン、メタノールおよびエタノールなどの、高沸点を有しかつ／または水素結合を形成することができる溶媒を、溶媒和物を形成するために使用することができる。溶媒和物を同定するための方法には、限定されるものではないが、ＮＭＲおよび微量分析が含まれる。結晶形態は場合により、例えば、薬学的に許容可能な溶媒和物、例えば、化学量論水和物ならびに変動量の水を含有する化合物であり得る水和物を形成するように溶媒和され得ることが認識されるであろう。溶媒和物には、化学量論溶媒和物および非化学量論的溶媒和物が含まれる。式（Ｉ）の化合物は、溶媒和形態または非溶媒和物形態で存在し得る。
【００３７】
式（Ｉ）の化合物は、結晶形または非晶質形であり得る。さらに、式（Ｉ）の化合物の結晶形の一部は多形として存在することもあり、これらも本発明の範囲内に含まれる。式（Ｉ）の化合物の多形形態は、限定されるものではないが、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン、赤外（ＩＲ）スペクトル、ラマンスペクトル、示差走査熱分析（ＤＳＣ）、熱重量分析（ＴＧＡ）、および固相核磁気共鳴（ＳＳＮＭＲ）を含むいくつかの従来の分析技術を使用して、特性評価および識別を行うことができる。
【００３８】
本明細書に記載の化合物は２個の不斉中心を含有するので、光学異性体、例えば、ジアステレオ異性体および鏡像異性体が形成され得る。従って、本発明は、他の異性体を実質的に含まないように単離された（すなわち、純粋な）個々の異性体としてであれ、または混合物としてであれ、式（Ｉ）の化合物の異性体を包含する。他の異性体を実質的に含まないように単離された（すなわち、純粋な）個々の異性体は、１０％未満、特に、約１％未満、例えば約０．１％未満の他の異性体が存在するように単離され得る。
【００３９】
当業者には、ある特定のジアステレオ異性体は他のものよりも活性が劣ることがあり、個々のジアステレオ異性体の活性は選択限界を下回ることもあることが理解されるであろう。
【００４０】
１つの態様では、化合物は（Ｓ）−３−（３−モルホリノフェニル））−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸またはその薬学的に許容可能な塩である。
【化６】
0006672276.tif 000007
【００４１】
別の態様では、化合物は（Ｒ）−３−（３−モルホリノフェニル））−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸またはその薬学的に許容可能な塩である。
【化７】
0006672276.tif 000008
【００４２】
異性体の分離は、当業者に公知の従来技術によって、例えば、分別結晶化、クロマトグラフィーまたはＨＰＬＣによって達成することができる。
【００４３】
式（Ｉ）の化合物は、いくつかの互変異性型の１つとして存在し得る。本発明は、個々の互変異性体としてであれまたはその混合物としてであれ、式（Ｉ）の化合物の総ての互変異性体を包含することが認識されるであろう。
【００４４】
以上から式（Ｉ）の化合物およびその塩の溶媒和物、異性体および多形が本発明の範囲内に含まれることが認識されるであろう。
【００４５】
本発明の第６の側面では、式（ＸＶ）の化合物
【化８】
0006672276.tif 000009
［式中、
Ｒ１は、上記で定義される通りであり、
Ｘ１は、ヒドロキシルまたはヒト身体の代謝によって加水分解されてＸ１が−ＯＨである式（Ｉ）の対応する酸化合物を形成し得る部分を表し；
Ｙ１は、水素またはヒト身体の代謝によって加水分解されてＹ１が水素である式（Ｉ）の対応するアミノ化合物を形成し得る部分を表し；
ただし、Ｘ１がヒドロキシルである場合には、Ｙ１は水素でない。］
が提供される。
【００４６】
いくつかの態様では、Ｘ１は部分−ＯＲａであり得、従って、式（Ｉ）の化合物はエステルである。
【００４７】
例えば、部分Ｒａは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル（およびその異性体）もしくはヘキシル（およびその異性体）などのＣ１−６アルキル；または２−メトキシエチル、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）エチルなどのＣ１−６アルコキシアルキル；または２−（ジメチルアミノ）エチルなどのＣ１−６アルキルアミノアルキル；または（５−メチル−２−オキソ−１，３−ジオキソｌ−４−イル）メチルなどのＣ１−６環式炭酸基；または（ピバロイルオキシ）メチルなどのＣ１−６アシルオキシアルキルから選択され得る。
【００４８】
例えば、部分Ｒａは、フェニル、５−インダニルまたはＬ−チロシニルなどのアリール基から選択され得る。
【００４９】
例えば、部分Ｒａは、式−（ＣＨ２）ｎＮＲｂＲｃまたは−（ＣＨ２）ｎＣＯ  ＮＲｂＲｃのＣ１−６基などのアミノ基またはアミド基を含有する基から選択され得、式中、ｎは１〜３であり、ＲａおよびＲｂは独立にＨもしくはＣ１−６アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリルであるか、またはＲａおよびＲｂは一緒にモルホリニルなどの環式基を形成している。このような部分の例としては、ジメチルアミノエチル、２−（４−モルホリノ）エチル、アミノ−２−オキソエチル、およびジメチルアミノ−２−オキソエチルが挙げられる。
【００５０】
例えば、部分Ｒａは、Ｌ−セリンおよびＬ−トレオニンなどのα−アミノ酸を含有するヒドロキシルから選択され得る。
【００５１】
例えば、部分Ｒａは、式：
【化９】
0006672276.tif 000010
［式中、Ｒｄは、水素、メチル、エチルまたはイソ−プロピルである。］
の環式カーボネートであり得る。
【００５２】
例えば、部分Ｒａは、−ＣＨＲｅ−Ｏ−ＣＯ−Ｒｆから選択され得、式中、Ｒｅは、水素、またはメチル、エチルもしくはイソ−プロピルなどのＣ１−３アルキルであり、Ｒｆは、メチル、エチル、イソ−プロピル、ｔｅｒｔ−ブチルもしくはＣ５−６シクロアルキルなどのＣ１−４アルキル、またはテトラヒドロピラニルである。
【００５３】
例えば、部分Ｒａは、−ＣＨ（Ｒｇ）−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−Ｒｉから選択され得、式中、Ｒｇは、水素、またはメチル、エチルもしくはイソ−プロピルなどのＣ１−３アルキルであり、Ｒｉは、メチル、エチル、ｔｅｒｔ−ブチルもしくはＣ５−６シクロアルキルなどのＣ１−４アルキル、またはテトラヒドロピラニルである。
【００５４】
いくつかの態様では、Ｘ１は部分−ＮＨＲｊであり得、従って、式（Ｉ）の化合物はアミドであり、式中、Ｒｊは例えばＣ１−６アルキルであり得る。例えば、式（Ｉ）の化合物は、アミノ酸、例えば、グリシン、アラニン、フェニルアラニン、ロイシン、バリン、イソロイシン、プロリン、メチオニン、システイン、セリン、トレオニン、ヒスチジン、チロシン、トリプトファン、リシン、アスパラギン、グルタミン、グルタミン酸、アスパラギン酸、もしくはアルギニンなどの天然に存在するＬ−タンパク質構成アミノ酸のα−アミノ基、または上述のタンパク質構成アミノ酸のジ−ペプチドに連結されたアミノ酸に由来するアミドであり得る。例えば、Ｒｊは、アミノ酸の側鎖ε−アミノ基に連結されたＬ−リシン部分などのタンパク質構成アミノ酸部分、例えば、−（ＣＨ２）４ＣＨ（ＮＨ２）ＣＯ２Ｈであり得る。
【００５５】
例えば、Ｒｊは、−ＳＯ２−Ｒｋなどのスルホンアミド部分であり得、式中、ＲｋはメチルなどのＣ１−６アルキル、または−ＮＲｍＲｎであり、ＲｍおよびＲｎは独立にＨもしくはＣ１−６アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリルであるか、またはＲｍおよびＲｎは一緒にモルホリニルなどの環式基を形成している。
【００５６】
いくつかの態様では、Ｙ１は水素であり得る。
【００５７】
１つの態様（ａ）では、Ｙ１は、Ｃ１−６環式炭酸基により置換されたＣ１−６アルキル、例えば、
【化１０】
0006672276.tif 000011
［式中、Ｒｋは、メチル、エチルまたはイソ−プロピルなどのＣ１−３アルキルである。］
などの（オキソジオキソニル）メチル基である。
【００５８】
別の態様（ｂ）では、Ｙは、カルバミン酸基、例えば、
【化１１】
0006672276.tif 000012
［式中、Ｒｌは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｎ−ペンチル、またはｎ−ヘキシルなどのＣ１−６アルキルである。］
であり得る。
【００５９】
別の態様では、Ｒｌは、ＯＨまたはＮＭｅ２基で置換されたＣ１−６アルキル、例えば、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨまたは−ＣＨ２ＣＨ２ＮＭｅ２である。
【００６０】
別の態様（ｃ）では、Ｙ１は、一般構造
【化１２】
0006672276.tif 000013
［式中、
Ｒｍは、水素、メチルまたはイソ−プロピルであり、ＲｎはＣ１−６アルキル、例えば、メチル、エチル、イソ−プロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロアルキル、例えば、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ヘテロシクリル、例えば、４−テトラヒドロピラニル、アリール、例えば、フェニル、置換フェニル、ヘテロアリール、例えば、２−、３−または４−ピリジルである。］
の基であり得る。
【００６１】
別の態様（ｄ）では、Ｙ１は、一般構造
【化１３】
0006672276.tif 000014
［式中、
ＲｑおよびＲｒは、独立に、水素、フェニル、ナフチル、アルキル、Ｅｔ２ＮＣＯＣＨ２−であるか、またはＲｑおよびＲｒは、サリゲニンなどのＣ１−６環を形成してもよい。］
の基であり得る。
【００６２】
別の態様では、式（Ｉ）の化合物は、Ｘ１およびＹ１が任意の組合せで上記に定義されるような二重プロドラッグである。
【００６３】
本発明は、レシピエントに投与した際に式（Ｉ）の化合物もしくはその薬学的に許容可能な塩、またはその活性代謝物もしくは残渣を（直接的または間接的に）もたらし得る式（Ｉ）の化合物およびその薬学的に許容可能な塩のあらゆるプロドラッグに関する。式（Ｉ）の化合物の他の好適なプロドラッグは当業者に容易に明らかになる（例えば、Burger’s Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 第5版, Vol 1: Principles and Practice, and J. Rautio et al (Nature Reviews Drug Discovery 2008, 7, 255-270）。
【００６４】
化合物の調製
本発明の化合物は、標準的な化学作用を含む様々な方法によって製造することができる。従前に定義された変数はいずれも、そうではないことが示されない限り、従前に定義された意味を有し続ける。一般合成法の実例を以下に示し、次いで、具体的な本発明の化合物を、実施例において調製する。
【００６５】
構造式（Ｉ）の化合物は、構造式（ＩＩ）：
【化１４】
0006672276.tif 000015
［式中、
Ｒ１は、上記に定義された通りであり、かつ、
Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、例えば、ｔｅｒｔ−ブチル、メチル、または(-)-メンチル等のキラルアルコール基、例えば（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキサノールである。］
の化合物の第１の脱保護、すなわち、エステル基の切断、続いて、任意の塩への変換を伴う工程によって製造され得る。
【００６６】
Ｒ２がｔｅｒｔ−Ｂｕである、構造式（ＩＩ）の化合物の脱保護は、例えば、ジクロロメタン、２−メチル−テトラヒドロフラン、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、またはシクロペンチルメチルエーテルまたは水などの不活性な溶媒中の塩酸、臭化水素酸、硫酸、またはトリフルオロ酢酸を用いた酸加水分解により達成され得る。
【００６７】
エステル基の切断後、得られた生成物は、当業者に周知の方法により必要な塩に変換され得る。
【００６８】
構造式（ＩＩ）の化合物は、構造式（ＩＩＩ）：
【化１５】
0006672276.tif 000016
［式中、Ｒ１およびＲ２は、上記で定義された通りである。］
の化合物の触媒（炭素上のパラジウム等）に対する接触水素化によって得られる。水素化は、大気圧下か、または２〜１０大気圧等の水素ガスの多少より高い圧力下で、ＥｔＯＨ、ＭｅＯＨまたは両方の混合物等の好適な溶媒中で実施し得る。
【００６９】
構造式（ＩＩＩ）の化合物は、構造式（ＩＶ）：
【化１６】
0006672276.tif 000017
［式中、
Ｒ１およびＲ２は、上記で定義された通りであり、二重結合の幾何学は、（Ｅ）異性体、または（Ｅ）異性体と（Ｚ）異性体の混合物、好ましくは、純粋な（Ｅ）異性体であり、
構造式（Ｖ）：
【化１７】
0006672276.tif 000018
［式中、
Ｒ１は、上記で定義された通りであり、Ｒ３は、好適な触媒の存在下、場合により上昇した温度にてキラルリガンドの存在下、および塩基の存在下でのピナコール等の水素またはＣ１〜Ｃ６アルキル基のいずれかを表す。］
のボロン酸またはボロン酸エステルである。］
の化合物の反応に関与する方法によって調整され得る。
【００７０】
構造式（Ｖ）の化合物は、純粋なボロン酸（Ｒ３＝Ｈ）として、または水および水酸化カリウムなどの塩基の存在下でｉｎ  ｓｉｔｕにてボロン酸に変換され得るボロン酸エステル（Ｒ３＝アルキル基）として使用され得る。
【００７１】
構造式（ＩＶ）および（Ｖ）の化合物を縮合する工程は、５０〜９０℃等の上昇した温度にて水酸化カリウムなどの塩基の存在下で１，４−ジオキサン等の水混和性溶媒中の、ロジウム触媒、好ましくはおよそ５モル％のクロロ（１，５−シクロオクタジエン）ロジウム（Ｉ）二量体等の好適な触媒の存在下で実行することができる。縮合工程は、厳しい嫌気状態下で実施され、ここで反応混合物が窒素等の不活性ガスでパージされ、低減された圧力下で排出され、排出工程および窒素でのパージング工程は数回（例えば、３回）繰り返される。
【００７２】
この方法によっておよそ１：１の比で、結晶化、クロマトグラフィーまたはＨＰＬＣによって分離することができる２つのジアステレオ異性体が産出される。好ましい分離方法は、キラルパックＯＤ−Ｈ等のキラルサポート上のキラルＨＰＬＣである。生成されたジアステレオ異性体の比は、１０％のキラルリガンド等の添加剤の存在下で、例えば８０：２０超に実質的に増加させることができる。このような添加剤には、主要異性体として生物学的により活性なジアステレオ異性体を提供する、鏡像異性的に純粋なホスフィンリガンド、例えば（Ｒ）−（＋）−２，２′−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１′−ビナフタレン［（Ｒ）−ＢＩＮＡＰ］が含まれる。このベンジルの不斉中心での立体配置は（Ｓ）である。
【００７３】
ジステレオ異性体の比はアルキル基Ｒ２の規模に依存していることが見出された。従って、Ｒ２が三級である場合、所望する主要異性体がより高い比で得られた。より好ましいアルキル基Ｒ２はｔｅｒｔ−Ｂｕであり、最大９１：９のジアステレオ異性体比を産出した。ジアステレオ異性体比は、キラルＨＰＬＣまたは結晶化によって、例えば９９：１超にさらに増加させることができる。
【００７４】
構造式（ＩＶ）の化合物は、ＤＣＭ等の好適な不活性溶媒中のおよそ１０％の好適なパラジウム触媒の存在下で、トリエチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミン等の第三級アミン塩基の存在下で、かつ大気温度にて、（Ｒ）−２−（２−（ピロリジン−３−イル）エチル）−１，８−ナフチリジン［構造式（ＶＩ）の化合物］を構造式（ＶＩＩ）：
【化１８】
0006672276.tif 000019
の化合物と反応させることによって調製することができる。好適なパラジウム触媒は、好ましくは２つのジフェニルホスフィン基（例えば、１，１′−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）［Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２］）等の二座配位子を保有する。構造式（ＶＩ）の化合物は、遊離塩基として用いてもよく、または第三級アミン塩基の存在下で二塩酸塩等の塩からｉｎ  ｓｉｔｕにて発生させてもよい。
【００７５】
構造式（ＶＩ）の化合物［（Ｒ）−２−（２−（ピロリジン−３−イル）エチル）−１，８−ナフチリジン］は本明細書に記載された方法によって調製し得る。例証として（Ｒ）−２−（２−（ピロリジン−３−イル）エチル）−１，８−ナフチリジンは、スキーム１に記載された方法によって調製することができる。
スキーム１
【化１９】
0006672276.tif 000020
【００７６】
試薬および条件：（ａ）ヨウ素、イミダゾール、トリフェニルホスフィン、ＤＣＭ、０℃；（ｂ）２−メチル−［１，８］−ナフチリジン、ＬｉＮ（ＴＭＳ）２、ＴＨＦ、０℃；ジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌ。
【００７７】
３−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルは、FluorochemまたはBePharm Ltdより入手可能であり、２−メチル−［１，８］−ナフチリジンは、例えばManchester Organics Ltd、AldrichまたはAlfa Aesarより入手可能である。
【００７８】
構造式（ＶＩＩ）の化合物は本明細書に記載された方法によって調製することができる。例証としてＲ２がｔｅｒｔ−ブチルであり、二重結合が（Ｅ）幾何学を有する構造式（ＶＩＩ）の化合物は、スキーム２に記載された方法によって調製され得る。
スキーム２
【化２０】
0006672276.tif 000021
【００７９】
試薬および条件：（ａ）イソブチレン、濃縮Ｈ２ＳＯ４、ジエチルエーテル、２４時間；（ｂ）酢酸カリウム、アセトニトリル、６０℃、４時間。
【００８０】
（Ｅ）−４−ブロモブト−２−エン酸を文献[T. Den Hartog, D. J. Van Dijken, A. J. Minnaard, B. L. Feringa Tetrahedron: Asymmetry 2010, 21, 1574-1584]の方法に従い調製した。
【００８１】
Ｒ１がＨである構造式（Ｖ）の化合物、例えば（３−モルホリノフェニル）ボロン酸は、Combi-Blocks Incより入手可能である。
【００８２】
Ｒ１がシクロプロピル基でありかつＲ３がピナコールである構造式（Ｖ）の化合物は、メトキシ（１，５−シクロオクタジエン）イリジウム（Ｉ）二量体等のイリジウム触媒の存在下で、かつ４，４’−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２，２’−ビピリジン等のリガンドの存在下で、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル等の不活性溶媒中で、約８０℃等の上昇した温度にて、好ましくはマイクロ波オーブン内で、構造式（ＶＩＩＩ）：
【化２１】
0006672276.tif 000022
の化合物をビス（ピナコラト）ジホウ素（Aldrichより入手可能）と反応させることによって調製することができる。
【００８３】
Ｒ１がシクロプロピル基である構造式（ＶＩＩＩ）の化合物はスキーム３にて概説されている合成経路および本明細書の実験部分に記載された方法によって１，３−ジブロモベンゼンより調製することができる。
スキーム３
【化２２】
0006672276.tif 000023
【００８４】
試薬および条件：（ａ）モルホリン、Ｐｄ２（ｄｂａ）３、ＮａＯＢｕ−ｔ、ＢＩＮＡＰ、トルエン、マイクロ波オーブン、５０℃；（ｂ）ＴＨＦ中のシクロプロピル臭化マグネシウム、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）−ＣＨ２Ｃｌ２付加物、７０℃。
【００８５】
Ｒ１が１Ｈ−ピラゾールである構造式（Ｖ）の化合物は、スキーム４にて概説されている合成経路および本明細書の実験部分に記載された方法によって１，３−ジブロモ−５−ヨードベンゼンより調製することができる。
スキーム４
【化２３】
0006672276.tif 000024
【００８６】
試薬および条件：（ａ）１Ｈ−ピラゾール、Ｃｓ２ＣＯ３、ＣｕＩ、アセトニトリル、還流；（ｂ）モルホリン、Ｐｄ２（ｄｂａ）３、ＮａＯＢｕ−ｔ、ＢＩＮＡＰ、トルエン、マイクロ波オーブン、９０℃；（ｃ）４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）、ＫＯＡｃ、ＤＭＦ、マイクロ波オーブン、１１５℃、１時間。
【００８７】
Ｒ１が３−メチル−１Ｈ−ピラゾールである構造式（Ｖ）の化合物は、スキーム５にて概説されている合成経路および本明細書の実験部分に記載された方法によって１，３−ジブロモ−５−ヨードベンゼンより調製することができる。
スキーム５
【化２４】
0006672276.tif 000025
【００８８】
試薬および条件：（ａ）３−メチル−１Ｈ−ピラゾール、Ｃｓ２ＣＯ３、ＣｕＩ、アセトニトリル、還流；（ｂ）モルホリン、Ｐｄ２（ｄｂａ）３、ＮａＯＢｕ−ｔ、ＢＩＮＡＰ、トルエン、還流；（ｃ）４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）、ＫＯＡｃ、ＤＭＦ、マイクロ波オーブン、１１５℃、１時間。
【００８９】
Ｒ１が３，５−メチル−１Ｈ−ピラゾールである構造式（Ｖ）の化合物は、スキーム６にて概説されている合成経路および本明細書の実験部分に記載された方法によって１，３−ジブロモアニリンより調製することができる。
スキーム６
【化２５】
0006672276.tif 000026
【００９０】
試薬および条件：（ａ）ｉ）亜硝酸ナトリウム、硫酸、水、０°Ｃ；ｉｉ）（Ｒ）−５−（（Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル）−３，４−ジヒドロキシフラ−２（５Ｈ）−ノン、水；ｉｉｉ）ペンタン−２，４−ジオン、８０°Ｃ；（ｂ）モルホリン、Ｐｄ２（ｄｂａ）３、ＮａＯＢｕ−ｔ、ＢＩＮＡＰ、トルエン、還流；（ｃ）４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）、Ｘ−ＰＨＯＳ、ＫＯＡｃ、１，４−ジオキサン、１１０℃、１時間。合成工程を実施する順序は入れ替えてもよい、例えば、テトラヒドロナフチリジン環を生成するための水素化工程は、最後から２番目の段階よりむしろより早い段階で実施されてもよい。
【００９１】
代替の合成経路において構造式（ＩＩ）の化合物は、エタノール等の溶媒中の水性リン酸三カリウムの存在下での塩化２′−（ジメチルアミノ）−２−ビフェニルイル−パラジウム（ＩＩ）ジノルボルニルホスフィン複合体（Aldrichより入手可能）等の好適な触媒を用いて、かつ例えば約１３０℃の上昇した温度にて、好ましくはマイクロ波反応器にて、構造式（ＩＸ）：
【化２６】
0006672276.tif 000027
［式中、Ｒ２は前記に定義された通りである。］
の化合物をピナコルエステル（例えば、AldrichまたはChemBridgeより入手可能）等の適切なピラゾールボロン酸またはエステルとSuzuki結合させることによって調製し得る。この経路は、１Ｈ−ピラゾール−５−イル環または３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル環等のＲ１がＣ−連結したピラゾールまたは置換されたピラゾールである化合物で研究されてきた。Ｒ２がメチルである場合、（ＩＩ）のエステル基は、反応条件下で加水分解し得、（ＩＩ）を単離する必要なく（Ｉ）を直接提供し得る。
【００９２】
構造式（ＩＸ）の化合物は、構造式（Ｘ）： 
【化２７】
0006672276.tif 000028
の化合物から、
クロロ（１，５−シクロオクタジエン）ロジウム（ｌ）二量体 (Aldrichより入手可能)等の適切な触媒の存在下で、（Ｒ）−ＢＩＮＡＰ (Aldrichより入手可能)等のキラルリガンドの存在下で、かつ水性ＫＯＨ等の塩基の存在下で、１，４−ジオキサン等の不活性溶媒中で、上昇した温度（例えば約７５℃）にて、かつ窒素等の不活性雰囲気下にて、ピナコルエステル等の３−ブロモ−５−モルホリノフェニルボロン酸（CombiBlocksより入手可能）または適切なボロンエステルである構造式（ＸＩ）：
【化２８】
0006672276.tif 000029
の化合物と反応させることによって調製し得る。
【００９３】
キラルリガンドの非存在下における反応によって、新規に発生したベンジルのキラル中心にてジアステレオ異性体の１：１の混合物が提供される。異性体は分取キラルＨＰＬＣ等のクロマトグラフィーによって分離され得る。（Ｒ）−ＢＩＮＡＰの存在によって、異性体の比は必要なジアステレオ異性体を優勢に＞８０：２０へ増加する。異性体はキラルセル ＯＪ  Ｈ等のカラム上のキラルＨＰＬＣによって分離することができる。
【００９４】
構造式（Ｘ）の化合物は、構造式（ＸＩＩ）：
【化２９】
0006672276.tif 000030
（ＸＩＩ）
の化合物からか、およそ１０％の好適なパラジウム触媒の存在下で、ＤＣＭ等の好適な不活性溶媒中で、トリエチルアミン、またはジイソプロピルエチルアミン等の第三級アミン塩基の存在下で、かつ大気温度にて、構造式（ＶＩＩ）の化合物と反応させることのいずれかによって調製することができる。好適なパラジウム触媒の例として、１，１′−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）［Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２］が挙げられる。構造式（ＸＩＩ）の化合物は遊離塩基として用いてもよく、または第三級アミン塩基の存在下で二塩酸塩等の塩からｉｎ  ｓｉｔｕにて発生させてもよい。あるいは、構造式（ＸＩＩ）の化合物のアルキル化は、ジクロロメタン等の不活性溶媒中でジイソプロピルエチルアミン、またはトリエチルアミン等の第三級有機塩基の存在下で、０℃等の低下した温度にて、（ＸＩＩＩ）：
【化３０】
0006672276.tif 000031
等の適切な臭化物を用いて実行することができる。構造式（ＸＩＩＩ）の化合物は、市販されているか、例えばＲ２が（Ｅ）−メチル４−ブロモブト−２−エン酸の場合Aldrichより入手可能であり、Ｒ２がｔｅｒｔ−ブチルの場合スキーム２にて概説された方法によって合成することができるかのいずれかである。
【００９５】
構造式（ＸＩＩ）の化合物は、構造式（ＸＩＶ）：
【化３１】
0006672276.tif 000032
の化合物から、ジオキサン中のＨＣｌまたはジクロロメタン中のＴＦＡ等の酸との処理によって調製することができる。
【００９６】
構造式（ＸＩＶ）の化合物は、酢酸エチル等の不活性溶媒中にて、Ｃ上にＰｄまたはＣ上にＲｈ、好ましくは炭素上にＲｈ等の触媒に対する選択的な触媒的水素化によって、構造式（ＸＶ）の化合物から調製することができる。
【００９７】
Ｙ１が水素、Ｘ１がアルコキシである構造式（ＸＶ）の化合物は、ＨＡＴＵの存在下における適切なアルコールとジクロロメタン中のジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基との反応によって、式（Ｉ）の化合物より調製することができる。結果として得られるエステルは、場合により酸の１つの等価と反応させることによって４−スルホン酸トルエン等の塩に転換することができる。
【００９８】
上記の経路のいずれにおいても、１以上の官能基を保護することが有利であり得ることが認識されるであろう。保護基およびそれらの除去のための手段の例は、T. W. Greene ‘Protective Groups in Organic Synthesis’ (3rd edition, J. Wiley and Sons, 1999)に見出すことができる。好適なアミン保護基としては、アシル（例えば、アセチル、カルバメート（例えば、２’，２’，２’−トリクロロエトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニルまたはｔ−ブトキシカルボニル）およびアリールアルキル（例えば、ベンジル）が含まれ、これらは、適当であれば、加水分解（例えば、ジオキサン中の塩酸、もしくはジクロロメタン中のトリフルオロ酢酸などの酸を使用）によって、または還元的に（例えば、ベンジルもしくはベンジルオキシカルボニル基の水素化分解、または酢酸中で亜鉛を使用する２’，２’，２’−トリクロロエトキシカルボニル基の還元的除去）によって除去することができる。他の好適なアミン保護基としては、トリフルオロアセチル（−ＣＯＣＦ３）が含まれ、これは塩基触媒による加水分解によって除去することができる。
【００９９】
上記いずれの経路でも、様々な基および部分が分子に導入される合成段階の正確な順序は可変であることが認識されるであろう。この工程の一段階で導入される基または部分が、その後の変換および反応によって影響を受けないように保証し、それに応じて合成段階の順序を選択することは当業者の技術の範囲内である。
【０１００】
化合物（Ｉ）の絶対立体配置は、既知の絶対立体配置の中間体からの独立したエナンチオ選択的不斉合成によって得ることができる。あるいは、鏡像異性体的に純粋な化合物（Ｉ）は、絶対立体配置が既知の化合物に変換され得る。いずれの場合にも、分光分析データ、旋光度および分析的キラルＨＰＬＣでの保持時間の比較を絶対立体配置の確認に使用することができる。実現可能であれば、第３の選択肢として、Ｘ線結晶構造からの絶対立体配置の決定がある。
【０１０１】
式（ＩＩ）〜（ＸＩＶ）の特定の化合物もまた新規であると考えられ、従って、本発明のさらなる側面をなす。
【０１０２】
使用方法
式（Ｉ）の化合物およびその塩は、αｖインテグリンアンタゴニスト活性、特に、αｖβ６受容体活性を有すると考えられ、従って、αｖβ６アンタゴニストが指示される疾患または病態の治療において潜在的有用性を有する。
【０１０３】
従って、本発明は、療法において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、αｖβ６インテグリンアンタゴニストが指示される疾患または病態の治療において使用することができる。
【０１０４】
従って、本発明は、αｖβ６インテグリンアンタゴニストが指示される疾患または病態の治療において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【０１０５】
また、αｖβ６インテグリンアンタゴニストが指示される疾患または病態の治療のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用も提供される。
【０１０６】
また、必要とする対象においてαｖβ６インテグリンアンタゴニストが指示される疾患または病態を治療する方法であって、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法が提供される。
【０１０７】
好適には、それを必要とする対象は哺乳動物、特に、ヒトである。
【０１０８】
本明細書で使用する場合、用語「有効な量」は、例えば、研究者または臨床家が求めている組織、系、動物またはヒトの生物学的または医学的応答を誘発する薬物または薬剤の量を意味する。さらに、用語「治療有効な量」は、そのような量を受容していない対応する対象と比較して、疾患、障害、もしくは副作用の治療、治癒、予防、もしくは寛解の改善、または疾患もしくは障害の進行速度の低下をもたらす任意の量を意味する。この用語はまた、その範囲内に、正常な生理学的機能を増進するために有効な量に含む。
【０１０９】
線維性疾患は、修復過程または反応過程にある器官または組織において過剰な線維性結合組織の形成を伴う。αｖβ６アンタゴニストは、αｖβ６インテグリン機能およびαｖインテグリンを介してのトランスフォーミング増殖因子βの活性化に依存するものを含む、様々なそのような疾患または病態の治療において有用であると考えられる。疾患には、限定されるものではないが、肺線維症（例えば、特発性肺線維症、非特異的間質性肺炎（ＮＳＩＰ）、通常型間質性肺炎（ＵＩＰ）、Ｈｅｒｍａｎｓｋｙ−Ｐｕｄｌａｋ症候群、進行性塊状線維症（炭坑夫塵肺症の合併症）、結合組織疾患関連肺線維症、喘息およびＣＯＰＤでの気道線維症、ＡＲＤＳ関連線維症、急性肺損傷、放射線誘発線維症、家族性肺線維症、肺高血圧）；腎線維症（糖尿病性腎障害、ＩｇＡ腎障害、狼瘡性腎炎、巣状分節性糸球体硬化症（ＦＳＧＳ）、移植腎障害、自己免疫腎障害、薬物誘発性腎障害、高血圧関連腎障害、腎性全身性線維症）；肝線維症（ウイルス誘発性線維症（例えば、Ｃ型またはＢ型肝炎）、自己免疫肝炎、原発性胆汁性肝硬変、アルコール性肝臓疾患、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を含む非アルコール性脂肪肝疾患、先天性肝線維症、原発性硬化性胆管炎、薬物誘発性肝炎、肝硬変）；皮膚線維症（肥厚性瘢痕、強皮症、ケロイド、皮膚筋炎、好酸球性筋膜炎、Ｄｕｐｙｔｒｅｎｓ拘縮、Ｅｈｌｅｒｓ−Ｄａｎｌｏｓ症候群、Ｐｅｙｒｏｎｉｅ病、栄養障害型表皮水疱症、口腔粘膜下線維症）；眼線維症（加齢黄斑変性（ＡＭＤ）、糖尿病性黄斑浮腫、ドライアイ、緑内障）；角膜瘢痕化、角膜損傷および角膜創傷治癒、線維柱帯切除術後の濾過胞瘢痕化の予防；心臓線維症（鬱血性心不全、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、心内膜心筋線維症、肥大性心筋症（ＨＣＭ））、ならびに他の多種の線維性病態（縦隔線維症、骨髄線維症、腹膜後線維症、クローン病、神経線維腫症、子宮平滑筋腫（線維性）、慢性臓器移植拒絶）が含まれ得る。αｖβ１、αｖβ５またはαｖβ８インテグリンのさらなる阻害に関するさらなる利点も存在し得る。
【０１１０】
加えて、αｖβ６インテグリンに関連する前癌病変または癌も治療することができる（これらには、限定されるものではないが、子宮内膜癌、基底細胞癌、肝臓癌、結腸癌、子宮頸癌、口腔癌、膵臓癌、乳癌および卵巣癌、カポジ肉腫、巨細胞腫瘍、ならびに癌関連間質が含まれ得る)。血管新生に対する作用から利点を得ることができる病態も、利益を受け得る(例えば、固形腫瘍)。
【０１１１】
用語「αｖβ６アンタゴニストが指示される疾患または病態」は、上記病的状態のいずれかまたは総てを含むことが意図される。
【０１１２】
１つの態様では、αｖβ６アンタゴニストが指示される疾患または病態は、特発性肺線維症である。
【０１１３】
別の態様では、αｖβ６アンタゴニストが指示される疾患または病態は、角膜瘢痕化、角膜損傷および角膜創傷治癒から選択される。
【０１１４】
組成物
療法において使用するために、式（Ｉ）の化合物ならびにその薬学的に許容可能な塩を、そのままの化学物質として投与してもよいが、有効成分を医薬組成物として提供することが一般的である。
【０１１５】
従って、本発明は、さらなる側面で、式（Ｉ）の化合物またその薬学的に許容可能な塩と１種以上の薬学的に許容可能な担体、希釈剤および／または賦形剤を含んでなる医薬組成物を提供する。式（Ｉ）の化合物および薬学的に許容可能な塩は上記の通りである。担体、希釈剤または賦形剤は、組成物の他の成分と適合し、そのレシピエントに有害でないという意味で許容されなければならない。
【０１１６】
本発明の別の側面によれば、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を、１種以上の薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤と混合することを含む、医薬組成物の調製方法も提供される。医薬組成物は、本明細書に記載の病態のいずれかの治療において使用することができる。
【０１１７】
さらに、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含んでなる、αｖβ６インテグリンアンタゴニストが指示される疾患または病態を治療するための医薬組成物も提供される。
【０１１８】
さらに、０．０１〜３０００ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的塩と０．１〜２ｇの１種以上の薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤とを含んでなる医薬組成物も提供される。
【０１１９】
式（Ｉ）の化合物は医薬組成物における使用を意図されているので、それらがそれぞれ、好ましくは実質的に純粋な形態で、例えば、少なくとも純度６０％、より好適には少なくとも純度７５％、好ましくは少なくとも純度８５％、特には少なくとも純度９８％（重量に対する重量の％）で提供されることが容易に理解されるであろう。
【０１２０】
医薬組成物は、単位用量当たり所定量の有効成分を含有する単位投与形で提供され得る。好ましい単位投与組成物は、有効成分の１日用量もしくは部分用量、またはその適切な分数を含有するものである。従って、そのような単位用量は、１日２回以上投与することができる。好ましい単位投与組成物は、本明細書の上記で挙げたような１日用量もしくは部分用量（１日２回以上投与するため）、または適切なその分数の有効成分を含有するものである。
【０１２１】
医薬組成物は、任意の適切な経路、例えば、経口（頬側または舌下を含む）、直腸、吸入、鼻腔内、局所（頬側、舌下または経皮を含む）、膣、目または非経口（皮下、筋肉内、静脈内または皮内を含む）経路による投与に適合させることができる。そのような組成物は、薬学分野で知られている任意の方法によって、例えば、有効成分を担体または賦形剤と会合させることによって製造することができる。
【０１２２】
１つの態様では、医薬組成物は経口投与に適合される。
【０１２３】
経口投与に適合させた医薬組成物は、カプセル剤もしくは錠剤などの分離した単位；散剤もしくは顆粒；水性液もしくは非水性液中の溶液もしくは懸濁液；可食フォームまたはホイップ；または水中油型液体エマルションもしくは油中水型液体エマルションとして提供され得る。
【０１２４】
例えば、錠剤またはカプセル剤の形態での経口投与では、有効薬物成分を、エタノール、グリセロール、水などの経口用の非毒性で薬学的に許容可能な不活性担体と合わせることができる。錠剤またはカプセル剤に組み込むために適した散剤は、化合物を好適な微細な粒径（例えば、微粉化によって）に縮小し、例えば、デンプンまたはマンニトールなどの可食炭水化物などの同様に調製された医薬担体と混合することによって調製され得る。香味剤、保存剤、分散剤および着色剤も存在することができる。
【０１２５】
カプセル剤は、上記のように粉末混合物を調製し、成形ゼラチンシースに充填することによって製造することができる。コロイドシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたは固体ポリエチレングリコールなどの、流動促進剤および滑沢剤を、充填操作の前に、粉末混合物に添加することができる。カプセル剤が摂取される際に、薬剤の利用度を改善するために、寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムなどの崩壊剤または可溶化剤を添加することもできる。
【０１２６】
さらに、所望の場合または必要な場合には、好適な結合剤、流動促進剤、滑沢剤、甘味剤、香味剤、崩壊剤および着色剤も、混合物に組み込むことができる。好適な結合剤には、デンプン、ゼラチン、天然の糖（グルコースまたはベータ−ラクトースなど）、トウモロコシ甘味剤、天然および合成ゴム（アラビアガム、トラガカントガムまたはアルギン酸ナトリウムなど）、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどが含まれる。
【０１２７】
これらの投与形で使用される滑沢剤には、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが含まれる。
【０１２８】
崩壊剤には、限定されるものではないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが含まれる。錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、造粒またはスラグとし、滑沢剤および崩壊剤を添加し、打錠することによって製剤化する。粉末混合物は、適切に微粉化された化合物を、上記のように希釈剤または基剤、ならびに任意選択でカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、もしくはポリビニルピロリドンなどの結合剤、パラフィンなどの溶解遅延剤、第四級塩などの吸収促進剤、および／またはベントナイト、カオリンもしくリン酸二カルシウムなどの吸収剤と混合することによって調製される。粉末混合物は、シロップ、デンプンペースト、アラビアゴム漿またはセルロースもしくはポリマー材料の溶液などの結合剤で湿らせ、篩に通すことによって顆粒化することができる。造粒の代わりに、粉末混合物を、打錠機に掛けることができ、結果として不完全に形成されたスラグが破砕されて顆粒となる。顆粒剤は、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱油を添加することによって、錠剤成形金型に粘着することを防止するために滑沢化することができる。次いで、滑沢化された混合物を打錠する。本発明の化合物は、流動性不活性担体と混合して、造粒またはスラグ化工程を行うことなく直接、打錠することもできる。セラックのシールコート、糖またはポリマー材料のコーティング、およびワックスの艶出コーティングからなる透明または不透明の保護コーティングを施すことができる。異なる単位用量を識別するために、これらのコーティングに染料を添加することができる。
【０１２９】
溶液、シロップ、およびエリキシルなどの経口用液体は、所定量が、予め決定された量の化合物を含有するように、単位投与形で調製することができる。シロップは、化合物を適宜矯味した水溶液に溶かすことによって調製することができ、エリキシルは、非毒性アルコールビヒクルの使用によって調製する。懸濁剤は、化合物を非毒性ビヒクルに分散させることによって製剤化することができる。エトキシ化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなどの可溶化剤および乳化剤、保存剤、ペパーミントオイルなどの香味添加剤、または天然甘味剤もしくはサッカリンもしくは他の人口甘味剤なども添加することができる。
【０１３０】
適当であれば、経口投与用の用量単位組成物を、マイクロカプセル化することができる。処方物は、例えば、粒子材料をポリマー、ワックスなどでコーティングまたはそれに包埋することによって、放出を延長また持続させるように調製することもできる。
【０１３１】
本発明の化合物は、小単ラメラ小胞、大単ラメラ小胞および多重ラメラ小胞などのリポソーム送達系の形態で投与することもできる。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンなどの様々なリン脂質から形成することができる。
【０１３２】
経皮投与に適合させた医薬組成物は、長期間にわたってレシピエントの表皮と密着して接触して留まるように意図された別個のパッチ剤として提供することができる。
【０１３３】
局所投与に適合させた医薬組成物は、軟膏、クリーム、懸濁剤、ローション、散剤、液剤、ペースト、ゲル、スプレー、エアロゾルまたはオイルとして製剤化することができる。
【０１３４】
眼または他の外部組織、例えば、口および皮膚の治療では、組成物は、好ましくは、局所用軟膏またはクリームとして塗布される。軟膏に製剤化する場合、有効成分を、パラフィン系または水混和性軟膏剤基剤のいずれかとともに使用することができる。あるいは、有効成分を、水中油型クリーム基剤又は油中水型基剤を用いてクリーム剤に製剤化することができる。本発明の化合物は、局所用点眼剤として投与することができる。本発明の化合物は、１日より長い投与間隔を要する結膜下、房内または硝子体内経路を介して投与することができる。
【０１３５】
眼への局所投与に適合させた医薬組成物（処方物）には、有効成分が好適な担体、特に、水性溶媒に溶解または懸濁している点眼剤が含まれる。眼に投与される処方物は、眼科的に適合するｐＨおよびモル浸透圧濃度を有する。酢酸、ホウ酸、クエン酸、乳酸、リン酸および塩酸などの酸；水酸化ナトリウム、リン酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、および乳酸ナトリウムなどの塩基；ならびにクエン酸塩／デキストロース、重炭酸ナトリウムおよび塩化アンモニウムなどのバッファーを含め、１種以上の眼科的に許容可能なｐＨ調整剤および／または緩衝剤が本発明の組成物に含まれ得る。このような酸、塩基、およびバッファーは、組成物のｐＨを眼科的に許容可能な範囲に維持するのに必要な量で含まれ得る。１以上の眼科的に許容可能な塩は、組成物のモル浸透圧濃度を眼科的に許容可能な範囲とするのに十分な量で組成物を含み得る。このような塩としては、ナトリウム、カリウムまたはアンモニウム陽イオンおよび塩化物、クエン酸、アスコルビン酸、ホウ酸、リン酸、重炭酸、硫酸、チオ硫酸または重亜硫酸陰イオンを有するものが含まれる。
【０１３６】
眼送達デバイスは、複数の定義された放出速度ならびに持続的用量動態および透過性を持った１種以上の治療薬の放出制御のために設計することができる。放出制御は、生分解性／声帯浸食性ポリマー（例えば、ポリ（エチレンビニル）アセテート（ＥＶＡ）、超加水分解するｄ  ＰＶＡ）、ヒドロキシアルキルセルロース（ＨＰＣ）、メチルセルロース（ＭＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリカプロラクトン、ポリ（グリコール）酸、ポリ（乳）酸、ポリ無水物の、薬物の拡散、腐食、溶解および浸透を増強するポリマー分子量、ポリマー結晶度、共重合体比、加工条件、表面仕上げ、幾何学、賦形剤添加およびポリマーコーティングの、種々の選択および特性を組み込んだポリマーマトリックスの設計を通して得ることができる。
【０１３７】
眼用デバイスを用いた薬物送達のための処方物は、１種以上の有効薬剤と指示される投与経路に適当なアジュバントを組み合わせることができる。例えば、有効薬剤を、任意の薬学的に許容可能な賦形剤、ラクトース、スクロース、デンプン粉末、アルカン酸のセルロースエステル、ステアリン酸、タルク、ステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リン酸および硫酸のナトリウムおよびカルシウム塩、アラビアガム、ゼラチン、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリジン、および／またはポリビニルアルコールと混合し、従来の投与向けに錠剤化またはカプセル化することができる。あるいは、本化合物をポリエチレングリコール、プロピレングリコール、カルボキシメチルセルロースコロイド溶液、エタノール、トウモロコシ油、落花生油、綿実油、ゴマ油、トラガカントガム、および／または種々のバッファーに溶解させてもよい。本化合物はまた、生分解性および非生分解性ポリマーの両方の組成物および時間遅延特性を有する担体または希釈剤と混合してもよい。生分解性組成物の代表例としては、アルブミン、ゼラチン、デンプン、セルロース、デキストラン、多糖類、ポリ（Ｄ、Ｌ−ラクチド）、ポリ（Ｄ、Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド）、ポリ（グリコリド）、ポリ（ヒドロキシブチレート）、ポリ（アルキルカーボネート）およびポリ（オルトエステル）およびそれらの混合物が挙げられる。非生分解性ポリマーの代表例としては、ＥＶＡコポリマー、シリコーンゴムおよびポリ（メチルアクリレート）、およびそれらの混合物が挙げられる。
【０１３８】
眼送達用の医薬組成物はまた、ｉｎ  ｓｉｔｕゲル化可能水性組成物も含む。このような組成物は、眼または涙液と接触した際にゲル化を促進するのに効果的な濃度でゲル化剤を含んでなる。好適なゲル化剤としては、限定されるものではないが、熱硬化性ポリマーが含まれる。用語「ｉｎ  ｓｉｔｕゲル化可能」とは、本明細書で使用する場合、眼または涙液と接触した際にゲルを形成する低粘度の液体を含むだけでなく、眼に投与した際に実質的に高い粘度またはゲル強度を示す半液体およびチキソトロピックゲルなどのより粘稠な液体も含む。例えば、眼への薬物送達に使用するためのポリマーの例の教示の目的で引用することにより本明細書の一部とされるLudwig (2005) Adv. Drug Deliv. Rev. 3; 57:1595-639を参照。
【０１３９】
口腔中への局所投与に適合させた医薬組成物には、ロゼンジ剤、香錠および洗口液が含まれる。
【０１４０】
直腸投与に適合させた医薬組成物は、坐剤または浣腸として提供することができる。
【０１４１】
鼻腔または吸入投与用の投与形は、好都合には、エアロゾル、溶液、懸濁液、ゲルまたはドライパウダーとして処方され得る。
【０１４２】
吸入投与に好適かつ／または適合させた組成物では、本発明の化合物は粒径縮小形態であることが好ましく、より好ましくは、粒径縮小形態は微粉化により得られるか、または得ることができる。粒径縮小（例えば、微粉化）化合物または塩の好ましい粒径は、約０．５〜約１０ミクロン（例えば、レーザー回折を用いて測定した場合）のＤ５０値により定義される。
【０１４３】
例えば吸入投与用のエアロゾル処方物は、薬学的に許容可能な水性または非水性溶媒中の有効物質の溶液または微細懸濁液を含んでなり得る。エアロゾル処方物は、噴霧装置または吸入器とともに使用するためのカートリッジまたはレフィルの形態と採り得る密閉容器内に無菌形態で単回または複数回用量として提供することができる。あるいは、密閉容器は、単回用量鼻腔用吸入器または容器の内容物が使い尽くされた際に処分することが意図される定量バルブを取り付けたエアロゾルディスペンサー（定量噴霧式吸入器）などの単位分注デバイスであり得る。
【０１４４】
投与形がエアロゾルディスペンサーを含んでなる場合、それは好ましくは、圧縮空気、二酸化炭素、またはヒドロフルオロカーボン（ＨＦＣ）などの有機噴射剤といった加圧下の好適な噴射剤を含有する。好適なＨＦＣ噴射剤としては、１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパンおよび１，１，１，２−テトラフルオロエタンが含まれる。エアロゾル投与形はまた、ポンプ式アトマイザーの形態と採ることもできる。与圧エアロゾルは、有効化合物の溶液または懸濁液を含有し得る。これは、懸濁液処方物の分散特性および均一性を改良するために、付加的賦形剤、例えば、補助溶媒および／または界面活性剤の配合を必要とする場合がある。溶液処方物もまた、エタノールなどの補助溶媒の添加を必要とする場合がある。他の賦形剤としての改質剤も、例えば、処方物の安定性および／または味および／または微粒子塊特性（量および／または特性）を改良するために配合され得る。
【０１４５】
吸入投与に好適なかつ／または適合させた医薬組成物では、医薬組成物はドライパウダー吸入用組成物であり得る。このような組成物は、ラクトース、グルコース、トレハロース、マンニトールまたはデンプンなどの粉末基剤、式（Ｉ）の化合物またはその塩（好ましくは、粒径縮小形態、例えば、微粉化形態）、および場合により、Ｌ−ロイシンもしくは別のアミノ酸および／またはステアリン酸マグネシウムもしくはカルシウムなどのステアリン酸の金属といった性能改質剤を分でなり得る。好ましくは、ドライパウダー吸入用組成物は、ラクトースおよび式（Ｉ）の化合物またはその塩のドライパウダーブレンドを含んでなる。ラクトースは好ましくは、ラクトース水和物、例えば、ラクトース一水和物であり、かつび／または好ましくは吸入級および／もしくは微細級ラクトースである。好ましくは、ラクトースの粒径は、ラクトース粒子の９０％（重量または用量）以上が直径１０００ミクロン（マイクロメートル）（例えば、１０〜１０００ミクロン、例えば、３０〜１０００ミクロン）未満であり、かつ／またはラクトース粒子の５０％以上が直径５００ミクロン（例えば、１０〜５００ミクロン）未満であることにより定義される。より好ましくは、ラクトースの粒径は、ラクトース粒子の９０％以上が直径３００ミクロン未満（例えば、１０〜３００ミクロン、例えば、５０〜３００ミクロン）であり、かつ／またはラクトース粒子の５０％以上が直径１００ミクロン未満であることにより定義される。場合により、ラクトースの粒径は、ラクトース粒子の９０％以上が直径１００〜２００ミクロン未満であり、かつ／またはラクトース粒子の５０％未満が直径４０〜７０ミクロン未満であることにより定義される。最も重要には、粒子の約３〜約３０％（例えば、約１０％）（重量または容量）が直径５０ミクロン未満または２０ミクロン未満であることが望ましい。例えば、限定されるものではないが、好適な吸入級ラクトースはＥ９３３４ラクトース（１０％微粒）（Borculo Domo Ingredients, Hanzeplein 25, 8017 JD Zwolle, オランダ）である。
【０１４６】
場合により、特に、ドライパウダー吸入用組成物では、吸入投与用の医薬組成物は、好適な吸入デバイスの内部のストリップまたはリボンの長手方向に取り付けられた複数の密閉用量容器（例えば、ドライパウダー組成物を含有）中に組み込むことができる。この容器は、要求に応じて裂開可能なまたは剥離開封可能であり、例えばドライパウダー組成物の用量が、グラクソスミスクラインにより市販されているＤＩＳＫＵＳ（商標）デバイスなどのデバイスを介した吸入により投与することができる。ＤＩＳＫＵＳ（商標）吸入デバイスは、例えば、ＧＢ２２４２１３４  Ａに記載され、このようなデバイスでは、粉末形態の医薬組成物用の少なくとも１つの容器（これらの１または複数の容器は好ましくは、ストリップまたはリボンの長手方向に取り付けられた複数の密閉用量容器である）が、互いに剥離可能に取り付けられた２つの部材間に画定され；このデバイスは、前記１または複数の容器の開封ステーションを画定する手段；容器を開封するために開封ステーションから部材を剥離するための手段；および開封された容器と連絡し、それを通して使用者が開封容器から粉末形態の医薬組成物を吸入することができる出口を含んでなる。
【０１４７】
本発明の化合物は、液体ディスペンサーから送達するための液体処方物として吸入または鼻腔投与されるように処方することができ、例えば、液体ディスペンサーは、使用者によりかけられる力が液体ディスペンサーのポンプ機構に適用された際に定量された用量の液体処方物がそれを通して分注される分注ノズルまたは分注オリフィスを備える。このような液体ディスペンサーは一般に、液体処方物の複数の定量された用量のリザーバーが設けられ、それらの用量が連続ポンプ作動時に分注される。分注ノズルまたはオリフィスは、液体処方物を鼻腔に噴霧分注するために使用者の鼻孔に挿入するために構成され得る。上述のタイプの液体ディスペンサーは、その全内容が引用することにより本明細書の一部とされるＷＯ−Ａ−２００５／０４４３５４に記載および示されている。このディスペンサーは、液体処方物を含有するための容器に取り付けられた圧縮ポンプを備えた液体排出デバイスを収容するハウジングを備えている。このハウジングは、少なくとも１個の指で操作可能なサイドレバーを備え、このサイドレバーは、ハウジングに対して内側に動かすと、容器をハウジング内の上方向に移動させてポンプを圧縮させ、定量された用量の処方物をポンプステムから、ハウジングの鼻腔ノズルを介してポンピングすることができる。特に好ましい液体ディスペンサーは、ＷＯ−Ａ−２００５／０４４３５４の図３０〜４０に示されている一般的なタイプのものである。
【０１４８】
吸入または鼻腔投与のための組成物は、噴霧化により肺および気道の他の領域にも投与することができる。そのような組成物は、水性溶液または懸濁液であり得る。噴霧化により吸入するための溶液は、酸もしくはアルカリ、緩衝塩、等張性調整剤、界面活性剤、または塩化ベンジルアルコニウム（ＢＡＣ）などの抗微生物剤などの薬剤を添加して製剤化することができる。組成物は無菌で、抗微生物保存剤不含であってもよい。それらは、例えば、濾過またはオートクレーブ中での加熱によって滅菌してもよい。それらは、非滅菌溶液として提供してもよい。治療上有効な量の本発明の化合物の単回単位用量を、単一の容器内の予め混合され、予め定量された処方物として提供してもよい。
【０１４９】
膣投与に適合させた医薬組成物は、膣坐剤、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォームまたは噴霧処方物として提供され得る。
【０１５０】
非経口投与に適合させた医薬組成物には、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、および組成物を、意図されるレシピエントの血液と等張にする溶質を含有してよい、水性および非水性無菌液、ならびに懸沈殿防止剤および増粘剤を含み得る水性および非水性無菌懸濁剤が含まれる。組成物を、単位用量または多回用量容器、例えば、密封アンプルおよびバイアル中で提供してもよく、使用直前に、無菌液体担体、例えば注射水を添加するだけのフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存してもよい。即時注射溶液および懸濁液は、無菌粉末、顆粒および錠剤から調製することができる。
【０１５１】
本発明の化合物の治療上有効な量は、例えば、対象の齢および体重、治療を必要とする厳密な病態およびその重篤度、処方物の性質、ならびに投与経路を含む複数の因子によって決まり、最終的には担当の医師または獣医の裁量にある。本医薬組成物では、経口または非経口投与の各用量単位は、好ましくは、０．０１〜３０００ｍｇ、０．１〜２０００ｍｇ、またはより一般には０．５〜１０００ｍｇの親化合物として計算される本発明の化合物を含有する。
【０１５２】
鼻腔または吸入投与のための各用量単位は好ましくは、遊離塩基として計算される０．００１〜５０ｍｇ、より好ましくは０．０１〜５ｍｇ、一層より好ましくは１０〜５０ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含有する。
【０１５３】
噴霧化溶液または懸濁液の投与では、用量単位は一般に１〜１５ｍｇ、例えば２ｍｇ〜１０ｍｇ、または４ｍｇ〜６ｍｇを含有し、これらは１日１回、１日２回または１日２回を越える回数で適宜送達され得る。本発明の化合物は、薬局でのもしくは患者による再構成のための乾燥もしくは凍結乾燥粉末で提供してもよいし、または例えば生理食塩水溶液中で提供されてもよい。
【０１５４】
鼻腔または吸入投与のための各用量単位は好ましくは、遊離塩基として計算される０．００１〜５０ｍｇ、より好ましくは０．０１〜５０ｍｇ、一層より好ましくは１０〜５０ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含有する。
【０１５５】
本発明の薬学的に許容可能な化合物は、例えば、遊離塩基として計算される式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩１日当たり０．０１ｍｇ〜３０００ｍｇ、もしくは１日当たり０．５〜１０００ｍｇの経口もしくは非経口用量、または１日当たり０．００１〜５０ｍｇ、もしくは１日当たり０．０１〜５０ｍｇ、もしくは１０〜５０ｍｇの鼻腔もしくは吸入用量の１日用量（成人患者）で投与することができる。この量は、１日当たり単回用量で、またはより通常には、全１日用量は同じであるように１日当たり複数回（２回、３回、４回、５回もしくは６回）の部分用量で与えてよい。その塩有効量のは、有効量の式（Ｉ）の化合物自体の割合として決定することができる。
【０１５６】
本発明の化合物は、単独で、または他の治療薬と組み合わせて使用することができる。従って、本発明による併用療法は、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与、および少なくとも１種の他の薬学上活性な薬剤の使用を含んでなる。好ましくは、本発明による併用療法は、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、および少なくとも１種の他の薬学上活性な薬剤の投与を含んでなる。本発明の１または複数の化合物および１または複数の他の薬学上活性な薬剤は、一緒に単一の医薬組成物で、または別個に投与することができ、別個に投与される場合には、これを同時にまたは任意の順序で逐次に行うことができる。本発明の１または複数の化合物および他の１または複数の薬学上活性な薬剤の量、ならびに投与の相対なタイミングは、所望の併用治療効果が達成されるように選択される。
【０１５７】
よって、さらなる側面では、本発明の化合物と少なくとも１種の他の薬学上活性な薬剤を含んでなる組合せが提供される。
【０１５８】
従って、一側面では、本発明による化合物および医薬組成物は、アレルギー性疾患、炎症性疾患、自己免疫疾患の療法、抗線維性療法および閉塞性気道疾患の療法、糖尿病性眼疾患の療法、ならびに角膜瘢痕化、角膜損傷の療法および角膜創傷治癒を含む、１種以上の他の治療薬と組み合わせて使用し得るか、それを含み得る。
【０１５９】
抗アレルギー療法としては、抗原免疫療法（例えば、ハチ毒、花粉、牛乳、落花生、ＣｐＧモチーフ、コラーゲンの成分および断片、口腔または舌下抗原として投与され得る細胞外マトリックスの他の成分）、抗ヒスタミン薬（例えば、セチリジン、ロラチジン、アクリバスチン、フェキソフェナジン、クロルフェナミン）、およびコルチコステロイド（例えば、プロピオン酸フルチカゾン、フロ酸フルチカゾン、二プロピオン酸ベクロメタゾン、ブデソニド、シクレソニド、フロ酸モメタゾン、トリアムシノロン、フルニソリド、プレドニゾロン、ヒドロコルチゾン）が含まれる。
【０１６０】
抗炎症療法としては、ＮＳＡＩＤ（例えば、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン）、ロイコトリエンモジュレーター（例えば、モンテルカスト、ザフィルルカスト、プランルカスト）、および他の抗炎症療法（例えば、ｉＮＯＳ阻害剤、トリプターゼ阻害剤、ＩＫＫ２阻害剤、ｐ３８阻害剤（ロスマピモド、ジルマピモド）、エラスターゼ阻害剤、β２アゴニスト、ＤＰ１アンタゴニスト、ＤＰ２アンタゴニスト、ｐＩ３Ｋδ阻害剤、ＩＴＫ阻害剤、ＬＰ（リゾホスファチジン酸）阻害剤またはＦＬＡＰ（５−リポキシゲナーゼ活性化タンパク質）阻害剤（例えば、ナトリウム３−（３−（ｔｅｒｔ−ブチルチオ）−１−（４−（６−エトキシピリジン−３−イル）ベンジル）−５−（（５−メチルピリジン−２−イル）メトキシ）−１Ｈ−インドール−２−イル）−２，２−ジメチルプロパノエート）；アデノシンａ２ａアゴニスト（例えば、アデノシンおよびリガデノソン）、ケモカインアンタゴニスト（例えば、ＣＣＲ３アンタゴニストまたはＣＣＲ４アンタゴニスト）、メディエーター放出阻害剤が含まれる。
【０１６１】
自己免疫疾患の療法としては、ＤＭＡＲＤＳ（例えば、メトトレキサート、レフルノミド、アザチオプリン）、生物薬剤療法（例えば、抗ＩｇＥ、抗ＴＮＦ、抗インターロイキン（例えば、抗ＩＬ−１、抗ＩＬ−６、抗ＩＬ−１２、抗ＩＬ−１７、抗ＩＬ−１８）、受容体療法（例えば、エタネルセプトおよび類似の薬剤）；抗原非特異的免疫療法（例えば、インターフェロンまたは他のサイトカイン／ケモカイン、サイトカイン／ケモカイン受容体モジュレーター、サイトカインアゴニストまたはアンタゴニスト、ＴＬＲアゴニストおよび類似の薬剤）が含まれる。
【０１６２】
他の抗線維性療法としては、ＴＧＦβ合成の阻害剤（例えば、ピルフェニドン）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）および線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）受容体キナーゼを標的とするチロシンキナーゼ阻害剤（例えば、ニンテダニブ（ＢＩＢＦ−１１２０）およびメシル酸イマチニブ（グリベック））、エンドセリン受容体アンタゴニスト（例えば、アンブリセンタンまたはマシテンタン）、酸化防止剤（例えば、Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）；広域抗生物質（例えば、コトリモキサゾール、テトラサイクリン（塩酸ミノサイクリン））、ホスホジエステラーゼ５（ＰＤＥ５）阻害剤（例えば、シルデナフィル）、抗αｖβｘ抗体および薬物（例えば、ＷＯ２００３１０００３３Ａ２に記載されているものなどの抗αｖβ６モノクローナル抗体をインテツムマブ、シレンジチドと併用することができる）が併用可能である。
【０１６３】
閉塞性気道疾患の療法としては、短期作用型β２−アゴニスト（例えば、サルブタモール）、長期作用型β２−アゴニスト（例えば、サルメテロール、フォルモテロールおよびビランテロール）、短期作用型ムスカリン性アンタゴニスト（例えば、臭化イプラトロピウム）、長期作用型ムスカリン性アンタゴニスト（例えば、チオトロピウム、ウメクリジニウム）などの気管支拡張薬が含まれる。
【０１６４】
いくつかの態様では、治療はまた、本発明の化合物と他の既存の治療様式、例えば、糖尿病性眼疾患の治療のための既存の薬剤、例えば、抗ＶＥＧＦ療法、例えば、ルセンティス（商標）、アバスチン（商標）、およびアフリバーセプト、ならびにステロイド、例えば、トリアムシノロン、およびフルオシノロンアセトニド含有ステロイドインプラントの組合せも含み得る。
【０１６５】
いくつかの態様では、治療はまた、本発明の化合物と他の既存の治療様式、例えば、角膜瘢痕化、角膜損傷の治療または角膜創傷治癒のための既存の薬剤、例えば、ゲンテル（Ｇｅｎｔｅｌ）（商標）、ウシ血液抽出物、レボフロキサシン（商標）、およびオフロキサシン（商標）の組合せも含み得る。
【０１６６】
本発明の化合物および組成物は、癌を治療するために単独で、または化学療法、放射線療法、標的薬剤、免疫療法および細胞もしくは遺伝子療法を含む癌療法と組み合わせて使用され得る。
【０１６７】
適当であれば、治療成分の活性および／または安定性および／または溶解度などの物理的特徴を最適化するために、他の治療成分を、塩の形態で、例えば、アルカリ金属塩もしくはアミン塩もしくは酸付加塩として、またはプロドラッグ、またはエステル、例えば低級アルキルエステル、または溶媒和物、例えば水和物として使用することができることは、当業者には明らかである。適当であれば、治療成分を、光学的に純粋な形態で使用することができることもまた明らかである。
【０１６８】
上記で言及した組合せは、好都合には、医薬組成物の形態で使用するために提供することができ、従って、上記で定義されたような組合せを薬学的に許容可能な希釈剤または担体とともに含んでなる医薬組成物は本発明のさらなる側面を表す。そのような組合せの個々の化合物を順次、または個別もしくは組み合わせた医薬組成物として同時に投与することができる。好ましくは、個々の化合物が、組み合わせた医薬組成物として同時に投与される。公知の治療薬の適切な用量は、当業者には容易に分かる。
【０１６９】
本発明の化合物が、通常、吸入、静脈内、経口、鼻腔内、眼内局所、または他の経路よって投与される１種以上の他の治療上有効な薬剤と組み合わせて投与される場合には、結果としての医薬組成物も同じ経路によって投与され得ることが認識されるであろう。あるいは、本組成物の個々の成分は異なる経路によって投与されてもよい。
【０１７０】
以下、本発明を単に例により示す。
【０１７１】
略語
以下のリストは、本明細書で使用される特定の略語の定義を示す。このリストは排他的ではなく、本明細書の下記で定義されていない略語の意味は当業者には容易に分かることが認識されるであろう。
【０１７２】
Ａｃ（アセチル）
ＢＣＥＣＦ−ＡＭ（２’，７’−ビス−（２−カルボキシエチル）−５−（および−６）−カルボキシフルオレセインアセトキシメチルエステル）
ＢＥＨ（エチレン架橋ハイブリッド技術）ビス（ピナコラト）ジボロン＝４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）
Ｂｕ（ブチル）
ＣＨＡＰＳ  （３−［（３−コールアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネート）
キラルＯＤ−Ｈ（５μｍシリカゲル上のセルローストリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）コーティング）
キラルパックＡＤ−Ｈ（５μｍシリカゲル上のアミローストリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）コーティング）
キラルパックＩＤ（５μｍシリカゲル上の固定化されたアミローストリス（３−クロロフェニルカルバメート））
キラルパックＡＳ（５μｍシリカゲル上のアミローストリス（（Ｓ）−α−メチルベンジルカルバメート）コーティング）
ＣＳＨ（表面チャージハイブリッド技術）
ＣＶ（カラム体積）
ＤＣＭ（ジクロロメタン）
ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）
ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）
Ｅｔ（エチル）
ＥｔＯＨ（エタノール）
ＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）
ｈ（時間）
ＨＡＴＵ（（１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシド  ヘキサフルオロリン酸塩）
ＨＣｌ（塩酸）
ＭＤＡＰ（質量分析自動分取ＨＰＬＣ）
Ｍｅ（メチル）
ＭｅＯＨ（メタノール）
ｍｉｎ（分）
Ｐｄ（ｄｐｐｆ）−Ｃｌ２（１，１’−［ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ））
Ｐｈ（フェニル）
ｉＰｒ（イソプロピル）
（Ｒ）−ＢＩＮＡＰ（Ｒ）−（＋）−２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフタレン
Ｓｉ（シリカ）
ＳＰＥ（固相抽出）
ＴＢＭＥ（ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル）
ＴＥＡ（トリエチルアミン）
ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）
ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）
ＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー）
ＵＰＬＣ（超高速液体クロマトグラフィー）
【０１７３】
ブライン(brine)という場合には、塩化ナトリウムの飽和水溶液を指す。
【実施例】
【０１７４】
実験の詳細
分析ＬＣＭＳ
分析的ＬＣＭＳを、次のシステムＡ、ＢまたはＣの１つで行った。
【０１７５】
総てのシステムに対するＵＶ検出は、２２０ｎｍ〜３５０ｎｍの波長の平均シグナルであり、質量スペクトルは、交互スキャンポジティブおよびネガティブモードエレクトロスプレーイオン化を使用する質量分析計で記録した。
【０１７６】
ＬＣＭＳ純度はダイオードアレイ検出から導き出された。
【０１７７】
本明細書において言及するＬＣＭＳシステムＡ〜Ｅの実験の詳細は以下の通りである。
【０１７８】
システムＡ
カラム：  ５０ｍｍ×２．１ｍｍ  ＩＤ、１．７μｍ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８カラム
流速：  １ｍＬ／分
温度：  ４０℃
溶媒：  Ａ：アンモニア溶液でｐＨ１０に調整した水中１０ｍＭ重炭酸アンモニウム
Ｂ：アセトニトリル
勾配：  時間（分） Ａ％ Ｂ％
０            ９９            １
１．５          ３          ９７
１．９          ３          ９７
２．０        ９９            １
【０１７９】
システムＢ
カラム：  ５０ｍｍ×２．１ｍｍ  ＩＤ、１．７μｍ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８カラム
流速：  １ｍＬ／分
温度：  ４０℃
溶媒：  Ａ：水中０．１％ｖ／ｖトリフルオロ酢酸溶液
Ｂ：アセトニトリル中０．１％ｖ／ｖトリフルオロ酢酸溶液
勾配：  時間（分） Ａ％ Ｂ％
０            ９７            ３
１．５          ０        １００
１．９          ０        １００
２．０        ９７            ３
【０１８０】
システムＣ
カラム：  ５０ｍｍ×２．１ｍｍ  ＩＤ、１．７μｍ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８カラム
流速：  １ｍＬ／分
温度：  ４０℃
溶媒：  Ａ：水中０．１％ｖ／ｖギ酸溶液
Ｂ：アセトニトリル中０．１％ｖ／ｖギ酸溶液
勾配：  時間（分） Ａ％ Ｂ％
０            ９７            ３
１．５          ０        １００
１．９          ０        １００
２．０        ９７            ３
【０１８１】
システムＤ
カラム：  ５０ｍｍ×２．１ｍｍ  ＩＤ、１．７μｍ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＣＳＨ  Ｃ１８カラム
流速：  １ｍＬ／分
温度：  ４０℃
溶媒：  Ａ：アンモニア溶液でｐＨ１０に調整した水中１０ｍＭ重炭酸アンモニウム
Ｂ：アセトニトリル
勾配：  時間（分） Ａ％ Ｂ％
０            ９７            ３
１．５          ５          ９５
１．９          ５          ９５
２．０        ９７            ３
【０１８２】
システムＥ
カラム：  ５０ｍｍ×２．１ｍｍ  ＩＤ、１．７μｍ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＣＳＨ  Ｃ１８カラム
流速：  １ｍＬ／分
温度：  ４０℃
溶媒：  Ａ：水中０．１％  ｖ／ｖギ酸溶液
Ｂ：アセトニトリル中０．１％ｖ／ｖギ酸
勾配：  時間（分） Ａ％ Ｂ％
０            ９７            ３
１．５          ５          ９５
１．９          ５          ９５
２．０        ９７            ３
【０１８３】
質量分析自動分取ＨＰＬＣ
粗製生成物を、次の方法Ａ〜Ｃの１つによるＭＤＡＰ  ＨＰＬＣにより精製した。実施時間は、そうではないことが述べられない限り、１５分であった。総ての方法でのＵＶ検出は、２１０ｎｍ〜３５０ｎｍの波長の平均シグナルであり、質量スペクトルは、交互スキャンポジティブおよびネガティブモードエレクトロスプレーイオン化を使用する質量分析計で記録した。
【０１８４】
方法Ａ：
方法Ａは、ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８カラム（一般に１００ｍｍ×３０ｍｍ内径、５μｍパッキング直径）にて周囲温度で行った。使用した溶媒は：
Ａ＝アンモニア溶液でｐＨ１０に調整した１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液
Ｂ＝アセトニトリル
であった。
【０１８５】
使用した勾配:
【表１】
0006672276.tif 000033
【０１８６】
方法Ｂ：
方法Ｂは、ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８カラム（一般に１００ｍｍ×３０ｍｍ内径、５μｍパッキング直径）にて周囲温度で行った。使用した溶媒は：
Ａ＝アンモニア溶液でｐＨ１０に調整した１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液
Ｂ＝アセトニトリル
であった。
【０１８７】
使用した勾配:
【表２】
0006672276.tif 000034
【０１８８】
中間体の製法
中間体１：３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル
５Ｌ真空ジャケット付きガラス反応容器（Ｒａｄｌｅｙ’ｓ  ＬＡＲＡ）に、ＤＣＭ（２Ｌ）、次いで、トリフェニルホスフィン（３３９ｇ、１．２９ｍｏｌ）およびイミダゾール（８８ｇ、１．２９ｍｏｌ）を装填し、温度を０℃に下げた。次に、発熱を制御するために反応温度を０〜５℃に維持しながらヨウ素（３２８ｇ、１．２９ｍｏｌ）を３０分かけて少量ずつ加えた。添加中に粘稠な褐色沈澱が生じた。この沈澱を１０分かけて室温まで温めた後、室温でさらに３０分間撹拌した。ＤＣＭ（２００ｍＬ）中、３−（ヒドロキシメチルピロリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（２００ｇ、９９４ｍｍｏｌ）（ＦｌｕｏｒｏｃｈｅｍまたはＢｅＰｈａｒｍ  Ｌｔｄから入手可能）の溶液を、反応温度を２４〜３０℃の間に維持しながら、１５分かけて少量ずつ加えた。この反応混合物を２時間撹拌した後、ＴＢＭＥ（８Ｌ）で希釈し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、残渣（７００ｇ）を氷水浴にてジエチルエーテル（２Ｌ）中で摩砕し、３３３ｇの粗生成物を得た。２７ｇ部の粗生成物を３０分にわたって０〜５０％酢酸エチル−シクロヘキサンの勾配で溶出するシリカカートリッジ（１００ｇ）でのクロマトグラフィーにより精製した。適当な画分を合わせ、真空蒸発させて標題化合物（１６．３３ｇ、５％）を黄色油状物として得た。残りの粗物質（約３０６ｇ）を、９．５カラム容量にわたって０〜３０％酢酸エチル−シクロヘキサンの勾配で溶出するシリカカートリッジ（１．５ｋｇ）のクロマトグラフィーにより精製した。適当な画分を合わせ、真空蒸発させて標題化合物（２３３．９４ｇ、７６％）を淡黄色油状物として得た：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．１９分、１００％、ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ３１２（Ｍ＋Ｈ）＋；［α］Ｄ２０＝＋２３（ＥｔＯＨ中ｃ１．００）。
【０１８９】
中間体２：３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル
ＴＨＦ（１Ｌ）中、２−メチル−１，８−ナフチリジン（５７．５ｇ、３９９ｍｍｏｌ）  （Ｍａｎｃｈｅｓｔｅｒ  Ｏｒｇａｎｉｃｓから入手可能）および３−（ヨードメチル）ピロリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１２４．２ｇ、３９９ｍｍｏｌ）（中間体１）の撹拌溶液を０℃に冷却し、窒素下、ＴＨＦ中リチウムビス（トリメチルシリル）アミドの溶液（１Ｍ、３９９ｍＬ、３９９ｍｍｏｌ）で２０分かけて処理、この反応混合物を０℃で３時間撹拌した。反応物を飽和塩化アンモニウム溶液（５００ｍＬ）および水（５００ｍＬ）で急冷し、酢酸エチル（１Ｌ）を加えた。層を分離し、水相をさらなる酢酸エチル（１Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空蒸発させた。残った褐色油状物（１６２ｇ）を、８カラム容量にわたって０〜１００％［（５％ＭｅＯＨ−９５％酢酸エチル）中酢酸エチル］の勾配で溶出するシリカカートリッジ（７５０ｇ）でのクロマトグラフィーにより精製した。適当な画分を合わせ、真空蒸発させて標題化合物（４６．６５ｇ、３６％）を橙色固体として得た：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝０．９９分、９７％、ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ３２８（Ｍ＋Ｈ）＋、［α］Ｄ２０＝＋２２（ＥｔＯＨ中ｃ１．００）。
【０１９０】
中間体３：（Ｒ）−２−（２−（ピロリジン−３−イル）エチル）−１，８−ナフチリジン、  二塩酸塩
ＤＣＭ（５００ｍＬ）中３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）３４ロリドン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（(R)-tert-butyl 3-(2-(1, 8-naphthyridin-2-yl)ethyl) 34yrrolidone-1-carboxylate）（１０４．７１  ｇ，  ３２０  ｍｍｏｌ）をＨＣｌ（１，４−ジオキサン（２００ｍＬ、８００ｍｍｏｌ）中４Ｍ）と室温でゆっくり処理した。混合物を一晩中室温で撹拌し、その時までにはフラスコ内に大きな固体の塊が生成されていた。固体を溶解しやすくするためにＭｅＯＨ（〜１００ｍＬ）を添加し、撹拌を継続した。ＬＣＭＳは〜７２％の生成物および〜２５％の出発材料を指示した。１，４−ジオキサン（１００ｍＬ）中の４Ｍ  ＨＣｌの追加量として添加し、１時間撹拌を継続した。溶媒を真空蒸発させ、標題化合物（８９．６６ｇ、９３％）を紫色の固体として得た：ＬＣＭＳ（システムＢ）ＲＴ＝０．３４分、１００％、ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ２２８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９１】
中間体４：４−ブロモブト−２−エン酸（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル
撹拌した４−ブロモブト−２−エン酸（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル（２１０ｇ、１．２７ｍｍｏｌ）[T. Den Hartog, D. J. Van Dijken, A. J. Minnaard, B. L. Feringa Tetrahedron Asymmet. 2010, 21, 1574-1584]とジエチルエーテル（１Ｌ）中の濃縮Ｈ２ＳＯ４（２０．３５ｍＬ、３８２ｍｍｏｌ）溶液にイソブチレンガス（３６３ｍＬ、３．８２ｍｏｌ）を−４０℃にて３０分間スチールオートクレーブ中でバブリングした。混合物をオートクレーブ内に密封し、混合物を室温にて２４時間撹拌した。反応物を０℃に冷まし、次いでトリエチルアミン（２５０ｍＬ）で塩基性化し、ＤＣＭ（３×２００ｍＬ）で抽出した。有機層を真空乾燥させ濃縮した。残渣をｎ−ペンタン（２００ｍＬ）中で粉砕し、褐色シロップとして標題化合物（１４０ｇ、５０％）を得た： 1H NMRδ(CDCl3, 400 MHz) 6.89 (dt, J=15, 7.5 Hz, 1H), 5.95 (dt, J=15, 1 Hz, 1H), 3.99 (dd, J=7.5, 1 Hz, 2H), 1.48 (s, 9H)。水性層を２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ２へ酸性化し、ＥｔＯＡｃ（２×２５０ｍＬ）で抽出し、組み合わさった有機層を水（２×５００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空蒸発させ、未反応の出発材料（５０ｇ）をオフホワイトの固体として得た。
【０１９２】
中間体５：４−アセトキシブト−２−エン酸（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル
アセトニトリル（１．２Ｌ）中４−ブロモブト−２−エン酸（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル（２８０ｇ、１．２７ｍｏｌ）の撹拌溶液を酢酸カリウム（１８６ｇ、１．９ｍｏｌ）で室温にて処理した。混合物を６０℃にて４時間撹拌し、ＴＬＣ（石油エーテル中の１０％ジエチルエーテル、Ｒｆ＝０．４、ＵＶによる検出）によって反応を観察した。反応混合物を室温に冷却し、固体を濾過によって取り除き、ジエチルエーテル（６００ｍＬ）で洗浄した。濾液を低減した圧力下で濃縮し、残渣を石油エーテル中の１０％ジエチルエーテルで溶出するシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。適切な画分を合わせて蒸発させ、標題化合物（１４８ｇ、収率５８％）を淡い黄色液体として得た: 1H NMR δ (CDCl3, 400 MHz) 6.82 (dt, J=15.5, 5 Hz, 1H), 5.94 (dt, J=15.5, 2 Hz, 1H), 4.71 (dd, J=5, 2 Hz, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.49 (s, 9H)。
【０１９３】
中間体６：４−（３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブト−２−エン酸（Ｒ，Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル
ＤＣＭ（１００ｍＬ）中の（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−アセトキシブト−２−エン酸（中間体５）（１４．２０ｇ、７０．９ｍｍｏｌ）と１，１′−ビス（ホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）［Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２］（４．７２ｇ、６．４５ｍｍｏｌ）の混合物を１５分間窒素下にて撹拌し、その後ジイソプロピルエチルアミン（５６．３ｍＬ、３２２ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ（２００ｍＬ）中の（Ｒ）−２−（２−（ピロリジン−３−イル）エチル）−１，８−ナフチリジン二塩酸塩（中間体３）（１７ｇ、５７ｍｍｏｌ）溶液を添加した。鮮明な赤色溶液が得られ、それを窒素下で２４時間撹拌した。混合物をＤＣＭと水（３×１７０ｍＬ）に区分けした。有機相を相分離カートリッジに通し、濾液を低減した圧力下で濃縮した。残留油（２７ｇ）をＤＣＭ中でアミノプロピルカートリッジ（９００ｇ）にロードし、CombiFlash Companion XLで、１０カラム容量にわたって０〜１００％酢酸エチル−シクロヘキサンの勾配を用いてクロマトグラフィーによって精製した。適切な画分を合わせ、真空蒸発させ褐色油としてそのままでは固体化する標題化合物（１７．６２ｇ、８５％）を得た：  ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．０５分、１００％；  ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ３６８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９４】
中間体７：４−（（Ｒ）−３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）−３−（３−モルホリノフェニル）ブタン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル
ＫＯＨ（３．８Ｍ，８．１６ｍＬ，３１．０ｍｍｏｌ）中の（３−モルホリノフェニル）ボロン酸（Combi-Blocks Inc.より入手可能）（６．４２ｇ、３１．０ｍｍｏｌ）溶液を１，４−ジオキサン（７０ｍＬ）中の４−（３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブト−２−エン酸（Ｒ，Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル（中間体６）（６．７ｇ、１５．５ｍｍｏｌ）で処理し、低減した圧力下にて５分間パージした窒素下で真空排気によって脱気した。これにクロロ（１，５−シクロオクタジエン）ロジウム（Ｉ）二量体（０．３８２ｇ、０．７７５ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−ＢＩＮＡＰ（０．９６５ｇ、１．５５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物をさらに５分間脱気した。溶液を９０°Ｃにて６０分間加熱した。冷却後、反応混合物をＤＣＭと水に区分けした。水相をＤＣＭで抽出し、組み合わせたＤＣＭ抽出物を真空蒸発させた。残留濃褐色油（１１．６ｇ）を０−５０％酢酸エチル−シクロヘキサンの勾配で４０分間溶出するアミノプロピルカートリッジ（５０ｇ）でのクロマトグラフィーによって精製した。適切な画分を合わせ真空蒸発させ５．６１ｇの褐色油を得た。５０％のＥｔＯＨ（０．２％イソプロピルアミン含有）−ヘプタンで等張的に溶出する、流速＝１．０ｍＬ／分、検出２１５ｎｍの、キラルパックＡＤ−Ｈカラム（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）での分析的キラルは、油が２つのジアステレオ異性体：ピーク１ＲＴ＝６．９９分、９１％；ピーク２ＲＴ＝１２．２分９％であることを指示した。混合物を、４０％エタノール（０．２％イソプロピルアミン含有）−ヘプタン溶出、流速＝３０ｍＬ／分、検出２３０ｎｍの、主要成分の画分を回収（ＲＴ＝６．５-１０分）する、キラルパックＡＤ−Ｈカラム（３０ｍｍ×２５０ｍｍ）での分取キラルＨＰＬＣによって分離した。合わせた画分を低減した圧力下で蒸発させ標題化合物の主要異性体（異性体１）（４．１８ｇ、５１％）を得た。ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．２０分，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ５３１（Ｍ＋Ｈ）＋，［ａ］Ｄ２０＋１０（ＥｔＯＨ中ｃ１．０），キラルパックＡＤ−Ｈでの分析的キラルＨＰＬＣ  ＲＴ＝７．２分。ＲＴ＝１４−２１分で溶出した画分の蒸発によって、非主要のジアステレオ異性体（異性体２）（４６２ｍｇ、６％）を褐色油として得た。
【０１９５】
中間体８：３−（３−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（異性体１）
４−（（Ｒ）−３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）−３−（３−モルホリノフェニル）ブタン酸tert-ブチル（中間体７、異性体１）（４．１８ｇ、７．８８ｍｍｏｌ）をＰｄ／Ｃ（８３８ｍｇ）上でＥｔＯＨ（２０ｍＬ）中で水素ガスの雰因気下で室温にて６０時間水素化した。触媒を１０ｇのセライトカートリッジを通して濾過によって取り除き、エタノールで洗浄した。組み合わさった濾液と洗浄物を真空蒸発させ標題化合物（３．４８ｇ、８３％）を褐色油として得た。ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．３６分、ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ５３５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９６】
中間体９：４−（３−ブロモフェニル）モルホリン
１，３−ジブロモベンゼン（３．８９ｍＬ、３２．１ｍｍｏｌ）、モルホリン（１．４０ｍＬ、１６．１ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（７３６ｍｇ、０．８０３ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブトキシドナトリウム（１．６ｇ、１６．６ｍｍｏｌ）、ＢＩＮＡＰ（７５０ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）およびトルエン（８ｍＬ）の混合物をマイクロ波バイアル内に入れた。バイアルを密封し、マイクロ波オーブンで反応物を加熱した（通常電力、５０℃、６０分）。反応物を周囲温度に冷まし、反応混合物（２０ｍＬ）に水を添加し、かつ有機層を分離させ、低減した圧力下で濃縮した。残渣をＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中に溶解し、（メタノールで）前処理したアミノプロピルカートリッジに適用した。カラムをＭｅＯＨ（２ＣＶ）で、次いでメタノール（２ＣＶ）中の２Ｍアンモニアで洗浄した。適切な画分を低減した圧力下で濃縮し、橙色油として標題化合物（２．３ｇ、５９％）を得た：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．０８分、ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ２４２／２４４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９７】
中間体１０：４−（３−シクロプロピルフェニル）モルホリン
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の４−（３−ブロモフェニル）モルホリン（中間体９）（３．３ｇ、１３．６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ中の０．５Ｍのシクロプロピルマグネシウム臭化物（３２．７ｍＬ、１６．４ｍｍｏｌ）に添加し、その後ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）−ＣＨ２Ｃｌ２付加物（３７８ｍｇ、０．４６３ｍｍｏｌ）に添加した。混合物を窒素（７０℃）下で２時間還流させた。反応混合物を真空下で濃縮し、残渣をＭｅＯＨ中で溶解し、（ＭｅＯＨで）前処理したＳＣＸ−２カートリッジに適用した。カートリッジをＭｅＯＨ（２ＣＶ）で、次いでＭｅＯＨ（２ＣＶ）中の２Ｍアンモニアで溶出した。適切な画分を回収し、低減した圧力下で濃縮した。残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、かつ３０分間０−５０％ＥｔＯＡｃ−シクロヘキサンで溶出するシリカカートリッジでのクロマトグラフィーによって精製した。適切な画分を低減した圧力下で濃縮し、標題化合物（２．１ｇ、７６％）を得た：  ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．０８分、ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ２０４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９８】
中間体１１：４−（３−シクロプロピル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）モルホリン
ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（８ｍＬ）中の４−（３−シクロプロピルフェニル）モルホリン（中間体１０）（１．０ｇ、４．９ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（Aldrichより入手可能）（７５０ｍｇ、２．９５ｍｍｏｌ）、４，４’−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２，２’−ビピリジン（７９ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）およびメトキシ（１，５−シクロオクタジエン）イリジウム（Ｉ）二量体（９８ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を含有するマイクロ波バイアルをマイクロ波オーブン（高出力）内で８０℃にて６０分間加熱した。反応混合物はフロリジル上で吸収され、０−５０％ＥｔＯＡｃ−シクロヘキサンで溶出する３つのシリカカートリッジ（各１００ｇ）上でのクロマトグラフィーによって６０分間精製された。適切な画分を真空下で濃縮し、標題化合物（８４５ｍｇ、５２％）を得た：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．３１分、ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ３３０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９９】
中間体１２：４−（（Ｒ）−３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）−３−（３−シクロプロピル−５−モルホリノフェニル）ブタン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル
４−（３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブト−２−エン酸（Ｒ，Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル（中間体６）（３００ｍｇ、０．８１６ｍｍｏｌ）、クロロ（１，５−シクロオクタジエン）ロジウム（Ｉ）二量体（２０．１３ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）、４−（３−シクロプロピル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）モルホリン（中間体１１）（６０５ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−ＢＩＮＡＰ（６１ｍｇ、０．０９８ｍｍｏｌ）および３．８Ｍ  ＫＯＨ（０．４３０ｍＬ、１．６３ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（２ｍＬ）中に溶解し、溶液をマイクロ波オーブン（高出力）内で１００分間９５℃にて加熱した。反応混合物を、セライトを通して濾過しＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で洗浄した。組み合わせた濾液および洗浄物を蒸発させ、残渣をＭｅＯＨ（１ｍＬ）中に溶解し、５−９５％  ［１０ｍＭ水性アンモニウム重炭酸塩中のＭｅＣＮ（０．１％アンモニア含有）］（２０ＣＶ）の勾配で溶出するＣ１８、３０ｇカートリッジでの逆相クロマトグラフィーによって精製した。適切な画分を合わせて蒸発させ、標題化合物をジアステレオ異性体の混合物として得た（８１ｍｇ、１７％）。生成物をＥｔＯＨ（１ｍＬ）およびヘプタン（１ｍＬ）中に溶解し、２つのジアステレオ異性体を、４５分間にわたって４０％［ＥｔＯＨ（０．２％ｖ／ｖイソプロピルアミン含有）含有ヘプタン］で等張的に溶出する、流速３０ｍＬ／分、検出２１５ｎｍの、キラルパックＡＤ−Ｈカラム（２５０ｍｍ×３０ｍｍ）でのキラルＨＰＬＣを用いて分離し、標題化合物の主要ジアステレオ異性体（中間体１２、異性体１）４−（（Ｒ）−３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）−３−（３−シクロプロピル−５−モルホリノフェニル）ブタン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（３０ｍｇ、６％）を得た。４０％［（０．２％ｖ／ｖイソプロピルアミン含有ＥｔＯＨ）含有ヘプタン］溶出、流速＝１ｍＬ／分、検出２１５ｎｍの、キラルパックＡＤ−Ｈカラム（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）での分析的キラルＨＰＬＣ：ＲＴ＝５．９分、９８．３％；および非主要異性体（中間体１２、異性体２）４−（（Ｒ）−３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）−３−（３−シクロプロピル−５−モルホリノフェニル）ブタン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（５ｍｇ、１％）：分析的キラルＨＰＬＣ  ＲＴ＝１１．６分、＞９９．５％。
【０２００】
中間体１３：３−（３−シクロプロピル−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチルは中間体１２異性体１の水素化によって中間体８と同様の様式で調製された：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．４５分，  ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ５７５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０１】
中間体１４：１−（３，５−ジブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール
アセトニトリル（４８ｍＬ）中の１，３−ジブロモ−５−ヨードベンゼン（Fluorochemより入手可能）（５．００ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）、１Ｈ−ピラゾール（１．３８ｍＬ、２０．７ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（５２６ｍｇ、２．７６ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（９．０１ｇ、２７．６ｍｍｏｌ）の撹拌した懸濁液を加熱し一晩中還流させた。冷却後、反応混合物を真空内で濾過し濃縮した。残渣をＤＣＭ中に溶解し、０−１００％ＥｔＯＡｃ−シクロヘキサンの勾配で溶出するシリカカートリッジ（１００ｇ）でのクロマトグラフィーによって６０分間精製した。適切な画分を合わせ、真空濃縮し、標題化合物（３．２ｇ、７７％）を得た：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．２６分、ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ３０１，３０３，３０５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０２】
中間体１５：４−（３−ブロモ−５−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル）モルホリン
トルエン（７０ｍＬ）中の１−（３，５−ジブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール（中間体１４）（１．１０ｇ、３．６４ｍｍｏｌ）、モルホリン（０．３４６ｍＬ、４．０１ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（６９１ｍｇ、０．７５４ｍｍｏｌ）ｔｅｒｔ−ブトキシドナトリウム（３５０ｍｇ、３．６４ｍｍｏｌ）およびＢＩＮＡＰ（７３９ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）の混合物をマイクロ波バイアル内に密封し、Biotage Initatorマイクロ波オーブン内で、９０℃で２時間加熱した。反応混合物を、セライトのパッドに移し、水（１００ｍＬ）で洗浄した。有機相をさらにブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。組み合わせた有機溶液を相分離器に移し、真空濃縮した。残渣をＤＣＭ中に溶解し０−１００％ＥｔＯＡｃ−シクロヘキサンの勾配で溶出するシリカゲルカートリッジ（３９５ｇ）でのクロマトグラフィーによって精製し、標題化合物（５６１．５ｍｇ、５０％）を得た：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．０７分，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ３０８，３１０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０３】
中間体１６：４−（３−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）モルホリン
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の４−（３−ブロモ−５−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル）モルホリン（中間体１５）（１．５６ｇ、５．０７ｍｍｏｌ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．９３ｇ、７．６１ｍｍｏｌ）、［１，１′−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（０．３７１ｇ、０．５０７ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（１．９９ｇ、２０．３ｍｍｏｌ）の混合物をマイクロ波バイアルに密封し、Biotage Initator  マイクロ波オーブン内で１１５℃にて１時間加熱した。反応混合物を、平行して実施していた別の反応の反応混合物と組合せ、セライトのパッドに移しＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を水（１００ｍＬ）と食塩（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで有機溶液を相分離器に移し真空濃縮した。残渣を０−１００％酢酸エチル−シクロヘキサン（１４ＣＶ）の勾配で溶出するシリカでのクロマトグラフィーによって精製し、標題化合物（４．３８ｇ）を得た：ＬＣＭＳ（システムＣ）ＲＴ＝１．１６分、ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ３５６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０４】
中間体１７：４−（（Ｒ）−３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）−３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル）ブタン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル
１，４−ジオキサン（１７ｍＬ）中、４−（３−（２−（１，８−ナフチリジン−２-イル)エチル）ピロリジン−１−イル）ブト−２−エン酸（Ｒ，Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル（中間体６）（５００ｍｇ、１．３６１ｍｍｏｌ）と４−（３−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）モルホリン（中間体１６）（１．４５ｇ、４．０８ｍｍｏｌ）、２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフタレン（８５ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、クロロ（１，５−シクロオクタジエン）ロジウム（ｌ）二量体（３３．５ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）および３．８Ｍ  ＫＯＨ（０．３５８ｍＬ、１．３６ｍｍｏｌ）の混合物を、マイクロ波バイアルに密封し、Biotage Initatorマイクロ波オーブン内で９５℃にて４０分間加熱した。ＬＣＭＳは不完全な反応を示した。バイアルを密封しBiotage Initator内で９５℃にて２時間加熱した。ＬＣＭＳは初めのＬＣＭＳと類似していた。３．８Ｍ  ＫＯＨ（０．３５８ｍＬ、１．３６ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、バイアルを９５℃にて４０分間加熱した。ＬＣＭＳは変化を示さなかった。追加的な触媒（３３．５ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）を添加し、バイアルを９５℃にて４０分間加熱した。反応混合物を真空濃縮した。残渣をＤＣＭ（２５ｍＬ）と水（５０ｍＬ）に区分けした。水性層をＤＣＭ（５０ｍＬ）でさらに抽出し、組み合わさった有機溶液をブラインで洗浄した。有機層を相分離器に移し、真空濃縮した。残渣を、０−１００％ＥｔＯＡｃ−シクロヘキサンの勾配で溶出するアミノプロピルカートリッジでのクロマトグラフィーによって精製した。適切な画分を合わせ、真空濃縮し、さらなる精製が必要な褐色油を得た。粗製生成物を２０−７５％アセトニトリル（０．１％ギ酸含有）−水（０．１％ギ酸含有）（１１ＣＶ）の勾配で溶出するＳＮＡＰカートリッジでの逆相ＨＰＬＣによって精製した。結果として得られた生成物は、ジアステレオ異性体の混合物であり、それらは５０％ＥｔＯＨ（０．２％イソプロピルアミン含有）−ヘプタン溶出、流速４０ｍＬ／分、検出２１５ｎｍの、画分をＲＴ＝９−１１．５分およびＲＴ＝１５−１８分で回収する、キラルパックＡＤ−Ｈカラム（３０ｍｍ×２５ｃｍ）での分取キラルＨＰＬＣによって分離され、標題化合物異性体１として４−（（Ｒ）−３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）−３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル）ブタン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（５７ｍｇ）：５０％ＥｔＯＨ（０．２％イソプロピルアミン含有）−ヘプタン溶出、流速１ｍＬ／分、検出２１５ｎｍのキラルパックＡＤ−Ｈカラム（４．６ｍｍ  ｉｄ×２５ｃｍ）での分析的キラルＨＰＬＣ  ＲＴ＝１０．３分、ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．１７分、ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ５９７（Ｍ＋Ｈ）＋、および異性体２として４−（（Ｒ）−３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）−３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル）ブタン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（９ｍｇ）：分析的キラルＨＰＬＣ  ＲＴ＝１��．５分を得た。
【０２０５】
中間体１８：３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル
酢酸エチル（９ｍＬ）中、４−（（Ｒ）−３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）−３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル）ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチル（中間体１７、異性体１）（９８ｍｇ、０．１６４ｍｍｏｌ）の溶液を室温にて炭素（１．７ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）上で４時間水素化した。追加のＲｈ／Ｃ（１００ｍｇ）を反応混合物に添加し、一晩中撹拌した。触媒を濾過によって取り除き、酢酸エチルで洗浄した。組み合わさった濾液および洗浄物を低減した圧力下で濃縮し、標題化合物（８６ｍｇ、８８％）を淡い黄色油として得た：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．３７分、ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ６０１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０６】
中間体１９：１−（３，５−ジブロモフェニル）−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール
ＭｅＣＮ（７０ｍＬ）中、１，３−ジブロモ−５−ヨードベンゼン（６．３４ｇ、１７．５ｍｍｏｌ）、３−メチル−１Ｈ−ピラゾール（２．５４ｍＬ、３１．５ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（１１．４ｇ、３５．０ｍｍｏｌ）およびヨウ化銅（Ｉ）（６６７ｍｇ、３．５０ｍｍｏｌ）の混合物を加熱し、一晩中還流させた。冷却後、反応混合物を濾過し、濾液を真空濃縮した。残渣を４０分で０−１００％ＥｔＯＡｃ−シクロヘキサンの勾配で溶出するシリカカラム（１００ｇ）でのクロマトグラフィーによって精製した。適切な画分を合わせ、真空濃縮し、位置異性体のさらなる分離が必要な褐色固体を得た。粗製生成物をアンモニア溶液（１３ＣＶ）でｐＨ１０に調節した水中、５０−７５％アセトニトリル−１０ｍＭアンモニア重炭酸塩の勾配で溶出するＫＰ−Ｃ１８−ＨＳ（１２０ｇ）での逆相クロマトグラフィーによって精製した。適切な画分を合わせ、低減した圧力下で蒸発させ標題化合物（２．８ｇ、５１％）を得た: 1H NMRδ(400 MHz, DMSO-d6) 8.52 (d, J=2.5 Hz, 1H), 8.05 (d, J=1.47 Hz, 2H), 7.69 (t, J=1.5 Hz, 1H), 6.38 (d, J=2.5 Hz, 1H), 2.27 (s, 3H)。
【０２０７】
中間体２０：４−（３−ブロモ−５−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル）モルホリン
トルエン（８０ｍＬ）中、１−（３，５−ジブロモフェニル）−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール（中間体１９）（２．８０ｇ、８．８６ｍｍｏｌ）の溶液をモルホリン（０．８４１ｍＬ、９．７５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１．６８ｇ、１．８３ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブトキシドナトリウム（０．８５２ｇ、８．８６ｍｍｏｌ）および２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフタレン（１．７９９ｇ、２．８９ｍｍｏｌ）で処理した。混合物を２時間加熱し還流させ、次いでセライトのパッドに移された。濾液を水（２００ｍＬ）で洗浄した。有機相を相分離器に移し、真空濃縮した。残渣を０−１００％酢酸エチル−シクロヘキサン（１４ＣＶ）の勾配で溶出するシリカカートリッジ（３２５ｇ）でのクロマトグラフィーによって精製し、標題化合物（１．８２ｇ、６４％）を得た： 1H NMRδ(400 MHz, DMSO-d6) 8.43 (d, J 2.5 Hz, 1H), 7.40 (t, J 2 Hz, 1H), 7.30 (t, J 2 Hz, 1H), 6.96 (t, J 2 Hz, 1H), 6.32 (d, J = 2 Hz, 1H), 3.83-3.65 (m, 4H), 3.17-3.26 (m, 4H), 2.25 (s, 3H)。
【０２０８】
中間体２１：４−（３−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）モルホリンを中間体２０から、中間体１６で記載された方法と類似の様式で調製し、標題化合物（１．４８ｇ、７６％）を得た：ＬＣＭＳ（システムＡ）ボロン酸についてはＲＴ＝０．６５  分  ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ２８８（Ｍ＋Ｈ）＋、ボロン酸エステルについてはＲＴ＝１．２０  ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ３７０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０９】
中間体２２：４−（（Ｒ）−３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）−３−（３−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−モルホリノフェニル）ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルを中間体６および中間体２１から、中間体１７の調製で記載された方法と類似の様式で調製した。粗製生成物をＭＤＡＰ（方法Ａ）によって精製し、標題化合物（３０ｍｇ、３６％）をジアステレオ異性体の混合物として得た（分取キラルＨＰＬＣは実行しなかった）：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．２１分、２４％，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ６１１（Ｍ＋Ｈ）＋、およびＲＴ＝１．２３分、７６％，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ６１１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２１０】
中間体２３：３−（３−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸ｔｅｒｔ-ブチルを中間体２２（ジアステレオ異性体の混合物）の水素化によって中間体１８の調製で記載された方法と類似の様式で調製し、標題化合物（６８ｍｇ、８９％）を得た：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．３８分、ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ６１５（Ｍ＋Ｈ）＋．
【０２１１】
中間体２４：１−（３，５−ジブロモフェニル）−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール
氷浴中で０℃に冷却した、アセトニトリル（５０ｍＬ）中、撹拌した３，５−ジブロモアニリン（２．１１ｇ、８．４１ｍｍｏｌ）の溶液、水中、（３ｍＬ）硫酸（６．８２ｍＬ、６１．４ｍｍｏｌ）および亜硝酸ナトリウム（０．６３８ｇ、９．２５ｍｍｏｌ）をゆっくり添加し、反応混合物とし、これを０℃にて７２時間撹拌し、その後水中（５ｍＬ）の（Ｒ）−５−（（Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル）−３，４−ジヒドロキシフラン−２（５Ｈ）−オン（１．６２９ｇ、９．２５ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、これを一晩中撹拌し、反応混合物を室温に温めた。次いで、反応混合物を１度の充填で添加したペンタン−２，４−ジオン（１．７１８ｍＬ、１６．８２ｍｍｏｌ）で処理した。これを室温にて７２時間撹拌、８０℃にて５時間撹拌した。反応物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、次いで水（１００ｍＬ）、ＨＣｌ（２Ｍ、５０ｍＬ）および再び水（５０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空濃縮した。残渣を０−１０％ヘキサン中酢酸エチルの勾配を用いてシリカゲルクロマトグラフィー（１００−２００メッシュ）によって精製した。適切な画分を合わせ、真空蒸発させ、標題化合物（１．７５ｇ、収率６２％）を黄色固体として得た。ＬＣＭＳ  ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ３２９，３３１，３３３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２１２】
中間体２５：４−（３−ブロモ−５−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル）モルホリンを中間体２４から、中間体２０に記載されていると類似の様式で調製し、標題化合物（３．５ｇ、７８％）を得た。ＬＣＭＳ  ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ３３６，３３８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２１３】
中間体２６：４−（３−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）モルホリンを中間体２５から、中間体１６に記載されていると類似の様式で調製し、標題化合物（４．２ｇ、３６％）を得た。ＬＣＭＳ  ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ３８４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２１４】
中間体２７：４−（３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）−３−（３−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−モルホリノフェニル）ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチル
マイクロ波バイアル中で、１，４−ジオキサン（４ｍＬ）中に溶解した、４−（３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブト−２−エン酸（Ｒ，Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル（中間体６）（３００ｍｇ、０．８１６ｍｍｏｌ）と４−（３−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）モルホリン（中間体２６）（９３９ｍｇ、２．４４９ｍｍｏｌ）の混合物を、クロロ（１，５−シクロオクタジエン）ロジウム（ｌ）二量体（２０．１３ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）、ＫＯＨ（０．４２２ｍＬ、１．６３３ｍｍｏｌ）およびＲ−ＢＩＮＡＰ（５０．８ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を密封し、Biotage Initiator内で９５℃にて２時間加熱した。冷却後、溶媒を真空除去した。残渣をＤＣＭ（４５ｍＬ）と水（４５ｍＬ）に区分けした。ブライン（３０ｍＬ）を水性層に添加し、これをＤＣＭ（３０ｍＬ）で抽出した。組み合わさった有機溶液をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮させた。残渣を、ジクロロメタンを用いてアミノプロピル（１１０ｇ）にロードし、クロマトグラフィーによって精製した（０−１００％のＥｔＯＡｃ−シクロヘキサン）。適切な画分を合わせ、真空濃縮し、１０％ＥｔＯＨ（０．２％イソプロピルアミン含有）−ヘプタン溶出、流速＝４０ｍＬ／分のキラルパックＡＤ−Ｈカラム（２５０ｍｍ×３０ｍｍ）でのキラルＨＰＬＣによって分離し、標題化合物の２つの異性体を得た。
【０２１５】
異性体１：４−（３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）−３−（３−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−モルホリノフェニル）ブタン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１３４ｍｇ）: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) 1.31 (s, 9H), 1.44 (s, 1H), 1.91 - 1.99 (m, 2H), 1.98- 2.03 (m, 1H),  2.15-2.25 (m, 1H), 2.20-2.27 (m, 1H), 2.25-2.29 (m, 4H), 2.35-2.43 (m, 1H), 2.38 - 2.46 (m, 1H), 2.47-2.56 (m, 1H), 2.70-2.76 (m, 1H), 2.73-2.77 (m, 1H), 2.77-2.85 (m, 1H), 2.82 (dd, J=15.4, 5.9 Hz, 1H), 2.95-3.10 (m, 2H), 3.16-3.21 (m, 4H), 3.24-3.35 (m, 1H), 3.79-3.88 (m, 4 H), 5.96 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.78 (br. s, 1H), 6.80 (s, 1H), 7.37 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.44 (dd, J=8.1, 4.4 Hz, 1H), 8.09 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.15 (dd, J=8.1, 1.8 Hz, 1H), 9.07 (dd, J=4.2, 2.0 Hz, 1H);ＬＣＭＳ（システムＣ）ＲＴ＝０．８４分，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ６２５（Ｍ＋Ｈ）＋；１５％ＥｔＯＨ（０．２％イソプロピルアミン含有）−ヘプタン溶出、流速＝１ｍＬ／分、検出２３５ｎｍの、キラルパックＡＤカラム（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）での分析的キラルＨＰＬＣ  ＲＴ＝１３．７分；および、
異性体２：４−（３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）−３−（３−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−モルホリノフェニル）ブタン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（３１ｍｇ）：１５％ＥｔＯＨ（０．２％イソプロピルアミン含有）−ヘプタン溶出、流速＝１ｍＬ／分、検出２３５ｎｍの、キラルパックＡＤカラム（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）での分析的キラルＨＰＬＣ  ＲＴ＝１６．３分。
【０２１６】
中間体２８：３−（３−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル  異性体１を、中間体２７異性体１の水素化によって中間体１８の調製で記載された方法と類似の様式で調製し、標題化合物（８９ｍｇ、８８％）を得た：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．４２分、ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ６２９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２１７】
中間体２９：３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリドン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル
ＥｔＯＡｃ（１．５Ｌ）中、３−（２−（１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリドン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（中間体２）（５２ｇ，１５９ｍｍｏｌ）の溶液を、水素雰因気下で室温にて２０時間、５％Ｒｈ／Ｃ（３２．７ｇ，５０％湿潤）で撹拌した。反応混合物を、セライトのパッドに移し、濾液を濃縮し標題化合物（５２．６ｇ，９６％）を得た：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．２５分、ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ３３２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２１８】
中間体３０：（Ｒ）−７−（２−（ピロリジン−３−イル）エチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン
３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリドン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（中間体２９）（５０．７２ｇ，１５３ｍｍｏｌ）の溶液を１，４−ジオキサン（４Ｍ，２００ｍＬ）中のＨＣｌで処理した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、溶媒を真空除去した。残渣を水とＴＢＭＥに区分けした。水性相を２Ｍ  ＮａＯＨ溶液でｐＨ１１へ塩基性化し、ＤＣＭで抽出した（３回）。ＤＣＭ溶液を疎水性フリットへ移し、濾液を真空蒸発させ、標題化合物（３４．６９ｇ，９８％）を油として得た：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝０．８０分、ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ２３２（Ｍ＋Ｈ）＋；［α］Ｄ２０＝＋６（ＥｔＯＨ中ｃ＝０．９６１）。
【０２１９】
中間体３１．４−（３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブト−２−エン酸（Ｒ，Ｅ）−メチル
（Ｒ）−７−（２−（ピロリジン−３−イル）エチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン（中間体３０）（７．０ｇ，３０．３ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１００ｍＬ）中に溶解させた。ＤＩＰＥＡ（１０．５４ｍＬ，６０．５ｍｍｏｌ）を溶液に添加し、続いて４−アセトキシブト−２−エン酸（Ｅ）−メチル（４．７９ｇ，３０．３ｍｍｏｌ）および１，１′−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）−ＤＣＭ［Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２］（２．４７１ｇ，３．０３ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩中撹拌した。反応混合物を２つのアミノプロピルＳＰＥカートリッジ（各１００ｇ）に適用し、０−１００％ＥｔＯＡｃ−シクロヘキサンの勾配で溶出し、適切な画分を合わせ、真空濃縮し、標題化合物（７．３５ｇ，６４％）を得た：ＬＣＭＳ（システムＤ）ＲＴ＝１．０７分  ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ３３０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２２０】
中間体３２．３−（３−ブロモ−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸メチル、異性体１および異性体２ 
水酸化カリウム（３．８Ｍ，２．５８ｍＬ，９．７９ｍｍｏｌ）を、４−（３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブト−２−エン酸（Ｒ，Ｅ）−メチル（中間体３１）（２．１５ｇ，６．５３ｍｍｏｌ）および４−（３−ブロモ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキソボロラン−２−イル）フェニル）モルホリン（３．６０ｇ，９．７９ｍｍｏｌ） (CombiPhosより入手可能)、１，４−ジオキサン（２１．５ｍＬ）中、（Ｒ）−ＢＩＮＡＰ(Aldrichより入手可能)（０．８１３ｇ，１．３ｍｍｏｌ）およびクロロ（１，５−シクロオクタジエン）ロジウム（ｌ）二量体(Aldrichより入手可能) （０．３２２ｇ，０．６５３ｍｍｏｌ）の混合物に添加した。反応混合物を５０℃にて２時間加熱した。冷却後、反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）および水（５０ｍＬ）で希釈した。２つの相を分離し、有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空濃縮した。残渣をＫＰ−ＮＨカートリッジ（１００ｇ）にロードし、０−５０％ＥｔＯＡｃ−シクロヘキサンで溶出するクロマトグラフィーによって精製した。適切な画分を合わせ、真空濃縮し、生成物をジアステレオ異性体混合物として得た（２．９ｇ）。混合物を、４０％ＥｔＯＨ（０．２％イソプロピルアミン含有）含有ヘプタン溶出、流速３０ｍＬ／分、検出２１５ｎｍの、画分をＲＴ＝２１−２３分およびＲＴ＝２３−３１分（後者が主成分である）で回収する、キラルセルＯＪ−Ｈカラム（３０ｍｍ×２５ｃｍ）上で、分取ＨＰＬＣで分離させた。画分を合わせ、真空蒸発させ、次いで同じ条件を用いて再精製し、標題化合物の２つのジアステレオ異性体を得た：
異性体１  ３−（３−ブロモ−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（Ｒ）−メチル（１０６ｍｇ，３％）：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．４２分，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ５７１，５７３（Ｍ＋Ｈ）＋；４０％ＥｔＯＨ（０．２％イソプロピルアミン含有）含有ヘプタン溶出、流速１ｍＬ／分、検出２１５ｎｍの、キラルセルＯＪ−Ｈカラム（４．６ｍｍ  ｉｄ×２５ｃｍ）での、分析的分取ＨＰＬＣ：ＲＴ＝１７．２分，９７％。  
異性体２  ３−（３−ブロモ−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（Ｓ）−メチル（１．３４ｇ，３４％）：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝１．４２分，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ５７１，５７３（Ｍ＋Ｈ）＋；４０％ＥｔＯＨ（０．２％イソプロピルアミン含有）含有ヘプタン溶出、流速１ｍＬ／分、検出２１５ｎｍの、キラルセルＯＪ−Ｈカラム（４．６ｍｍ  ｉｄ×２５ｃｍ）上でＲＴ＝２０．３分，９６．６％。
【０２２１】
例の製造
例１：（Ｓ）−３−（３−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸
【化３２】
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ＤＣＭ（３０ｍＬ）中、３−（３−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（中間体８、異性体１）（３．４８ｇ，６．５１ｍｍｏｌ）の溶液をトリフルオロ酢酸（２０ｍＬ）で処理し、室温にて１．５時間撹拌した。溶媒を真空蒸発させ、紫色油を得て、それを次いでＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中に溶解させ、エタノール（３ＣＶ）および次に２Ｍアンモニア／メタノール（３ＣＶ）で溶出するＳＣＸ−２カートリッジ（７０ｇ）で精製した。塩基性画分を合わせ、真空蒸発させ、９６％純正の粗製生成物（３．１７５ｇ）を淡い茶色固体として得た。生成物を１０カラム容量上で１５−４０％アセトニトリル（０．１％アンモニア含有）−（重炭酸アンモニア水溶液１０ｍＭ）の勾配で溶出する、Ｃ１８カートリッジ（１２０ｇ）での逆相クロマトグラフィーによってさらに精製した。適切な画分を合わせ、真空蒸発させ標題化合物（２．１ｇ，６７％）を白色固体として得た：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝０．７７分，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ４７９（Ｍ＋Ｈ）＋；1H NMR δ (CD3OD, 400MHz) は、1.63-1.70 (m, 1H), 1.73-1.83 (m, 2H), 1.82-1.90 (m, 2H), 2.15-2.24 (m, 1H), 2.27-2.38 (m, 1H), 2.54 (t, J=7.8 Hz, 2H), 2.57-2.64 (m, 1H), 2.69 (t, J=6 Hz, 2H), 2.81 (dd, J=16.5, 10.5 Hz, 1H), 2.95-3.06 (m, 1H), 3.10-3.17 (m, 4H), 3.17-3.24 (m, 1H), 3.34-3.40 (m, 3H, 溶媒により目立たず), 3.55 (dd, J=12.5, 9 Hz, 1H), 3.78-3.85 (m, 4H), 6.31-6.42 (m, 1H), 6.74 (d, J=7.5 Hz, 1H), 6.83-6.88 (m, 2H), 7.13 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.17-7.25 (m, 1H); [α]D 20 + 23 (ＥｔＯＨ中c=1.0)を含む。
【０２２２】
例２：（Ｓ）−３−（３−シクロプロピル−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸を例１に記載の方法と同様の方法で中間体１２、異性体１から製造した：
【化３３】
0006672276.tif 000036
ＬＣＭＳ  （システムＡ）ＲＴ＝０．８８分，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ５１９（Ｍ＋Ｈ）＋； 1H NMRδ (CD3OD, 600MHz) 7.13 (d, J=7.3 Hz, 1H), 6.63 (s, 1H), 6.57 (s, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.38 (d, J=7.3 Hz, 1H), 3.82 - 3.77 (m, 4H), 3.53 (dd, J=12.7, 9.4 Hz, 1H), 3.38-3.35 (m, 3H), 3.30-3.24 (m, 3H), 3.18 (dd, J=12.7, 3.7 Hz, 1H), 3.14-3.08 (m, 4H), 3.02-2.92 (m, 1H), 2.78 (dd, J=16.3, 10.6 Hz, 1H), 2.69(t, J=6.2 Hz, 2H), 2.60-2.56 (m, 1H), 2.56-2.51 (m, 2H), 2.32 (m, 1H), 2.23-2.14 (m, 1H), 1.89-1.83 (m, 3H), 1.83-1.72 (m, 2H), 1.67 (dq, J=13.0, 8.6 Hz), 0.96-0.85 (m, 2H), 0.71-0.62 (m, 2H)。
【０２２３】
例３：（Ｓ）−３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸
【化３４】
0006672276.tif 000037
ＤＣＭ（６．１５ｍＬ）中、３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（中間体１８、異性体１）（８６．５ｍｇ，０．１４４ｍｍｏｌ）の溶液をＴＦＡ（３ｍＬ）で処理し、反応混合物を室温にて２時間撹拌した。溶媒およびＴＦＡを真空除去し、残渣を前処理したアミノプロピルカートリッジ（１０ｇ）に適用した。カートリッジをＭｅＯＨで洗浄し、次いでメタノール（２．５ＣＶ）中の２Ｍアンモニアで洗浄した。アンモニア性の画分を真空濃縮し、標題化合物（６７ｍｇ，８５％）を得た：ＬＣＭＳ（システムＤ）ＲＴ＝０．８０分，９８．２％，  ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ５４５（Ｍ＋Ｈ）＋; NMRδ(500 MHz, DMSO-d6) 8.48 (1H, br s), 7.70 (1H, br s), 7.19 (1H, br s), 7.15 (1H, br s), 7.02 (1H, d, J 7 Hz), 6.78 (1H, br s), 6.51 (1H, br s), 6.30-6.24 (2H, m), 3.77-3.74 (4H, m), 3.27-3.22 (3H, m), 3.21-3.17 (4H, m), 2.88-2.68 (3H, m), 2.65-2.54 (4H, m), 2.48-2.33 (4H, m), 2.11-1.98 (1H, m), 1.97-1.87 (1H, m), 1.79-1.70 (2H, m), 1.69-1.56 (2H, m), 1.43-1.31 (1H, m)。
【０２２４】
例４：３−（３−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸
【化３５】
0006672276.tif 000038
例３に記載の方法と同様の方法によって中間体２３（ジアステレオ異性体の混合物）から標題化合物(４８ｍｇ，８８％)を得た:ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝０．８３分，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ５５９（Ｍ＋Ｈ）＋； 1H NMRδ(400 MHz, CDCl3) 7.80 (1H, d, J 2 Hz), 7.14 (1H, d, J 7.3 Hz), 7.10 (1H, m), 6.94 (1H, br s), 6.65 (1H, br s), 6.28 (1H, d, J 7.3 Hz), 6.23 (1H, d, J 2 Hz), 3.91-3.83 (4H, m), 3.52-3.35 (4H, m), 3.27-3.20 (4H, m), 3.12-2.94 (2H, m), 2.79-2.66 (5H, m), 2.62-2.41 (3H, m), 2.37 (3H, s), 2.36-2.29 (1H, br), 2.20-1.99 (4H, m), 1.95-1.81 (3H, m), 1.65-1.53 (1H, m), 1.50-1.40 (1H, m)。 
【０２２５】
例５：（Ｓ）−３−（３−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸
【化３６】
0006672276.tif 000039
例３に記載の方法と同様の方法によって中間体２８、異性体１から標題化合物(３４ｍｇ，６２％）を得た：ＬＣＭＳ（システムＡ）ＲＴ＝０．８５分，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ５７３（Ｍ＋Ｈ）＋; 1H NMRδ(400 MHz, DMSO-d6) 7.03 (1H, d, J 7.3 Hz), 6.86 (1H, br s), 6.79 (1H, m), 6.75 (1H, br s), 6.37-6.32 (1H, br), 6.26 (1H, d, J 7.3 Hz), 6.03 (1H, s), 3.76-3.71 (4H, m), 3.27-3.20 (3H, m), 3.18-3.13 (4H, m), 3.00-2.57 (9H, m), 2.49-2.38 (4H, m), 2.27 (3H, s), 2.17 (3H, s), 2.11-1.88 (2H, m), 1.78-1.71 (2H, m), 1.66-1.57 (2H, m), 1.43-1.33 (1H, m)。
【０２２６】
例６：（Ｓ）−３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−５−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸
【化３７】
0006672276.tif 000040
３−（３−ブロモ−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（中間体３２、異性体２）（４５４ｍｇ，０．７９ｍｍｏｌ）１Ｈ−ピラゾール−５−ボロン酸（Ｓ）−メチル（Chemimpexより入手可能）（２６７ｍｇ，２．３９ｍｍｏｌ）、クロロ（ジ−２−ノルボルニルホスフィノ）（２′−ジメチルアミノ−１，１’−ビスフェニル−２−イル）パラジウム（ＩＩ）（Flukaより入手可能）（４４．５ｍｇ，０．０８ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（１２．５ｍＬ）および水（３．２ｍＬ）中のリン酸三カリウム（５０６ｍｇ，２．３９ｍｍｏｌ）の混合物を、マイクロ波反応器内で１４０℃まで６０分加熱した。反応混合物を室温に冷ました後、混合物を同じ規模の同一の反応混合物と合わせ、合わさった混合物を真空濃縮した。残渣をＤＭＳＯ−ＭｅＯＨ（１：１）中で溶解し、０−３０％アセトニトリル−０．１％水性重炭酸アンモニアの勾配を用いたＣ１８（１００ｇカラム）上での逆相クロマトグラフィーによって精製した。適切な画分を真空蒸発させ標題化合物（６８３ｍｇ，７９％）を得た：ＬＣＭＳ（システムＤ）ＲＴ＝０．７９分，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ５４５（Ｍ＋Ｈ）＋； 1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz) 14.5-12.5 (2H, br s), 7.64 (1H, br s), 7.17 (1H, s), 7.12 (1H, s), 7.01 (1H, d), 6.76 (1H, s), 6.68 (1H, d), 6.26-6.24 (2H, d + br s), 3.75 (4H, m), 3.23 (2H, m), 3.20-3.13 (5H, 2 x m), 2.92 (1H, t), 2.83-2.77 (2H, m), 2.74 (1H, q), 2.59 (3H, t), 2.54 (1H, dd), 2.45-2.38 (3H, m), 2.36 (1H, t), 2.04 (1H, m), 1.92 (1H, m), 1.74 (2H, m), 1.62 (2H, m), 1.36 (1H, m)。
【０２２７】
例７：（Ｓ）−３−（３−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸 
【化３８】
0006672276.tif 000041
ＥｔＯＨ（０．５ｍＬ）中、３−（３−ブロモ−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（Ｓ）−メチル（中間体３２、異性体２）（５７ｍｇ，０．１００ｍｍｏｌ）の溶液を、３−メチル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール(ChemBridgeより入手可能)（２１ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）に添加し、Anton Paarマイクロ波バイアルに入れた。水中（０．８ｍｌ）に溶解させたリン酸三カリウム（６５．５ｍｇ，０．３０８ｍｍｏｌ）の原液を調製し、アリコート（０．２ｍＬ）をバイアル内に投入した。最後に塩化２′−（ジメチルアミノ）−２−ビフェニルイル−パラジウム（ＩＩ）ジノルボルニルホスフィン複合体（Aldrichより入手可能)（５．７６ｍｇ，１０．２８μｍｏｌ）を添加し、反応容器を密封し、初期出力６００Ｗで１３０℃まで３０分間、Anton Parrマイクロ波反応器内で加熱した。反応物を冷ました後、追加の３−メチル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール（２１ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ）を添加し、続いてリン酸三カリウム（６３．５ｍｇ，０．２９９ｍｍｏｌ）および塩化２′−（ジメチルアミノ）−２−ビフェニルイル−パラジウム（ＩＩ）ジノルボルニルホスフィン複合体（５．５９ｍｇ，９．９７μｍｏｌ）を添加した。バイアルを密封し、１３０℃まで３０分間、Anton Parrマイクロ波反応器（microwave）（６００Ｗ）内で加熱した。ＤＭＳＯ（０．４ｍＬ）を反応混合物に添加し、濾過し、アセトニトリル水性重炭酸アンモニアを用いてWaters CSH C18（１９ｍｍ×１００ｍｍ  ５μｍ）カラム上でＭＤＡＰによって精製した。適切な画分を、窒素ガス流下でブローダウン(blown down)した装置内にて蒸発させ、標題化合物（２．８ｍｇ，５％）を得た:ＬＣＭＳ（システムＥ）ＲＴ＝０．４９分，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ５５９（Ｍ＋Ｈ）＋; 1H NMRδ(400 MHz, DMSO-d6) 7.12-7.10 (m, 1H), 7.06-7.05 (m, 1H), 7.01 (d, J=7.3 Hz, 1H), 6.75-6.73 (m, 1H), 6.41 (s, 1H), 6.26-6.23 (m, 2H), 3.77-3.72 m, 4H), 3.25-3.20 (m, 2H), 3.15-3.11 (m, 4H), 2.93-2.68 (m, 4H), 2.62-2.52 (m, 5H), 2.43-2.30 (m, 5H), 2.23 (s, 3H), 2.08-1.98 (m, 1H), 1.96-1.84 (m, 1H), 1.78-1.70 (m, 2H), 1.67-1.55  (m, 2H), 1.41-1.30 (m, 1H)。
【０２２８】
例８．（Ｓ）−３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸
【化３９】
0006672276.tif 000042
ＥｔＯＨ（４ｍＬ）中、３−（３−ブロモ−５−モルホリノフェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（Ｓ）−メチル（中間体３２、異性体２）（８０ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）の溶液を、塩化２′−（ジメチルアミノ）−２−ビフェニルイル−パラジウム（ＩＩ）ジノルボルニルホスフィン複合体（７．８４ｍｇ，０．０１４ｍｍｏｌ）、リン酸三カリウム（８９ｍｇ，０．４２ｍｍｏｌ）および水（１ｍＬ）で処理した。バイアルを密封し、Biotage Initiator内で１３０℃にて３０分加熱した。反応混合物を真空濃縮した。残渣をＭｅＣＮ中のBiotage SNAPカートリッジ（３０ｇ）にロードし、１０ｍＭ重炭酸アンモニア中で２５−６０％ＭｅＣＮ（０．１％アンモニア含有）の勾配で溶出する、逆相クロマトグラフィーによって精製した。適切な画分を真空濃縮し、淡い茶色固体（３７．３ｍｇ）を得て、それをさらにＭＤＡＰ（方法Ａ）によって濃縮した。適切な画分を合わせ、真空濃縮し、標題化合物（１２ｍｇ，１６％）を得た:ＬＣＭＳ（システムＤ）ＲＴ＝０．７７分，９８％，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ５４５（Ｍ＋Ｈ）＋; 1H NMR (DMSO-d6 ,600 MHz) 8.01 (br s, 2H), 7.01-7.02 (m, 1H), 7.01 (d, J=7.3 Hz, 1H), 6.97-6.99 (m, 1H), 6.98 (d, J=1.5 Hz, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.64 (s, 1H), 6.25 (d, J=7.2 Hz, 2H), 3.70-3.77 (m, 4H), 3.20-3.27 (m, 3H), 3.09-3.18 (m, 5H), 2.95 (br t, J=11.2 Hz, 1H), 2.78-2.84 (m, 1H), 2.70-2.86 (m, 2H), 2.57-2.65 (m, 3H), 2.52-2.57 (m, 1H), 2.39-2.45 (m, 1H), 2.35-2.45 (m, 3H), 1.99-2.09 (m, 1H), 1.87-1.96 (m, 1H), 1.70-1.77 (m, 2H), 1.62 (br dd, J=13.2, 7.5 Hz, 2H), 1.37 (br d, J=4.4 Hz, 1H)。
【０２２９】
例９．３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−５−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（Ｓ）−２−アミノ−２−オキソエチル ４−メチルベンゼンスルホン酸塩
ＤＣＭ（２ｍＬ）中、（Ｓ）−３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−５−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（例６）（１００ｍｇ，０．１８４ｍｍｏｌ）および２−ヒドロキシアセトアミド（１３．７８ｍｇ，０．１８４ｍｍｏｌ）の溶液を、ＨＡＴＵ（１４０ｍｇ，０．３６７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．０７１ｍＬ，０．４０４ｍｍｏｌ）で処理し、その後２時間室温にて撹拌した。反応混合物をアミノプロピルカラム（１０ｇ）上にロードし、０−１００％酢酸エチル−シクロヘキサン溶媒システムで３０分溶出した。適切な画分を合わせ、低減した圧力下で蒸発させ、無色のガムを得た（８４ｍｇ）。反応混合物を別のアミノプロピルカラム（１０ｇ）上にロードし、０−１００％（３：１酢酸エチル−エタノール＋１％ＮＨ３）−シクロヘキサン溶媒システムで２０分間溶出した。画分を週末にかけて放置したところ、ＬＣＭＳはエチルエステルの存在を示した。そのため低減した圧力下で同じシステムおよび適切な画分から蒸発直後の溶媒を用いて試料を再精製し、標題化合物の遊離塩基（３６ｍｇ，３３％）をオフホワイトのガムとして得た。ＬＣＭＳ（システムＤ）ＲＴ＝０．９９分，９８％，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ６０２（Ｍ＋Ｈ）＋。 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) ・7.66-7.61 (m, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.01 (d, J=7.0 Hz, 1H), 6.82-6.66 (m, 2H), 6.24 (d, J=7.3 Hz, 1H), 4.31 (d, J=4.5 Hz, 2H), 3.78-3.71 (m, 5H), 3.26-3.17 (m, 3H), 3.16-3.09 (m, 3H), 2.89 (d, J=6.5 Hz, 1H), 2.75-2.64 (m, 2H), 2.43-2.34 (m, 4H), 2.17-2.10 (m, 1H), 1.77-1.70 (m, 2H), 1.54 (br. s., 1H), 1.30-1.26 (m, 1H)。３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−５−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナ
フチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（Ｓ）−２−アミノ−２−オキソエチル（３２ｍｇ，０．０５３ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１ｍＬ）中に溶解し、アセトニトリル（１ｍＬ）中、ベンゼンスルホン酸４−メチル（１０．１２ｍｇ，０．０５３ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を室温にて一晩中撹拌した。溶媒を窒素下でブローダウンし標題化合物（４１ｍｇ，１００％）を白色固体として得た：ＬＣＭＳ（システムＤ）ＲＴ＝０．９９分，７８％，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ６０２（Ｍ＋Ｈ）＋。（ＲＴ＝０．４２分，２０％（トシル酸）。
【０２３０】
例１０．３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−５−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（Ｓ）−２−モルホリノエチル、４−メチルベンゼンスルホン酸塩
ＤＣＭ（２ｍＬ）中、（Ｓ）−３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−５−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（例６）（１００ｍｇ，０．１８４ｍｍｏｌ）および２−モルホリノエタノール（２４．０８ｍｇ，０．１８４ｍｍｏｌ）の溶液を、ＨＡＴＵ（１４０ｍｇ，０．３６７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．０７１ｍＬ，０．４０４ｍｍｏｌ）で処理し、その後２時間室温にて撹拌した。反応混合物をアミノプロピルカラム（１０ｇ）上にロードし、０−１００％酢酸エチル−シクロヘキサン溶媒システムで３０分溶出した。適切な画分を合わせ、低減した圧力下で蒸発させ、標題化合物の遊離塩基（１０２ｍｇ，８４％）を無色ガムとして得た。ＬＣＭＳ（システムＤ）ＲＴ＝１．０７分，９８％，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ６５８（Ｍ＋Ｈ）＋。1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) 7.64 (d, J=2 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.01 (d, J=7.3 Hz, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.24 (d, J=7.1 Hz, 1H), 4.00 (t, J=5.8 Hz, 2H), 3.79-3.72 (m, 4H), 3.57-3.51 (m, 2H), 3.25-3.20 (m, 3H), 3.16-3.08 (m, 3H), 2.81 (s, 1H), 2.75-2.64 (m, 2H), 2.59 (t, J=5.9 Hz, 3H), 2.13 (d, J=8.6 Hz, 1H), 1.77-1.69 (m, 2H), 1.59 (d, J=7.8 Hz, 2H)。３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−５−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（Ｓ）−２−モルホリノエチル（１００ｍｇ，０．１５２ｍｍｏｌ）をアセトニトリル中に（１ｍＬ）溶解し、アセトニトリル中（１ｍＬ）に溶解した４−メチルベンゼンスルホン酸（２８．９ｍｇ，０．１５２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温にて一晩中撹拌した。溶媒を窒素下でブローダウンし、標題化合物（９４ｍｇ，９５％）を無色
ガムとして得た。ＬＣＭＳ（システムＤ）ＲＴ＝１．０７分，８２％，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ６５８（Ｍ＋Ｈ）＋。（ＲＴ＝０．４２分，１５％（トシル酸）。
【０２３１】
例１１．３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−５−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）エチル、４−メチルベンゼンスルホン酸塩
ＤＣＭ（１ｍＬ）中、撹拌した（Ｓ）−３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−５−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（１００ｍｇ，０．１８４ｍｍｏｌ）（例６）、ＨＡＴＵ（１１５ｍｇ，０．３０２ｍｍｏｌ）および２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）エタノール（０．０７２ｍＬ，０．５５１ｍｍｏｌ）の溶液にＤＩＰＥＡ（０．０７１ｍＬ，０．４０４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を一晩中大気温度にて撹拌した。水（１ｍＬ）を添加し、１０分撹拌し、次いで混合物を疎水性フリットに移し、溶媒を真空蒸発させた。残渣をＤＭＳＯ中で溶解し、３０−８５％に緩衝化した（方法Ａ）アセトニトリル−水の勾配を用いてＭＤＡＰによって精製した。適切な画分を取り、室温にて窒素流下で溶媒を取り除いた。残渣（６５．７ｍｇ）をＤＣＭ中のアミノプロピルカラム（５ｇ）上にロードし、０−１００％酢酸エチル／シクロヘキサンの勾配を用いて１５分精製した。適切な画分を合わせ、溶媒を真空蒸発させ標題化合物の遊離塩基（６１．５ｍｇ）を無色ガラスとして得た。ＬＣＭＳ（システムＤ）ＲＴ＝１．２７分，９９％，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ６４５（Ｍ＋Ｈ）＋。遊離塩基（５０ｍｇ）をアセトニトリル（１ｍＬ）中に溶解させ、ベンゼンスルホン酸４−メチル（１８．０７ｍｇ，０．０９５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を一晩中室温にて撹拌した。溶媒を真空除去し、標題化合物（６０．８ｍｇ）をオフホワイトのガムとして得て、これはフラスコをスクラッチングすることで固体化した。ＬＣＭＳ（システムＤ）ＲＴ＝１．２７分，８２％，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ６４５（Ｍ＋Ｈ）＋  ０．４１分，１６％（トシル酸）。
【０２３２】
例１２．３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−５−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（Ｓ）−２−メトキシエチル 
ＤＣＭ（１ｍＬ）中、撹拌した（Ｓ）−３−（３−モルホリノ−５−（１Ｈ−ピラゾール−５−イル）フェニル）−４−（（Ｒ）−３−（２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−２−イル）エチル）ピロリジン−１−イル）ブタン酸（例６）（１０６ｍｇ，０．１９５ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１１５ｍｇ，０．３０２ｍｍｏｌ）および２−メトキシエタノール（０．０４６ｍＬ，０．５８４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．０７５ｍＬ，０．４２８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２時間大気温度にて撹拌した。水（１ｍＬ）を添加し１０  分撹拌し、次いで混合物を疎水性フリットに移し、アミノプロピル（１０ｇ）カラム上にロードした。化合物を０−１００％酢酸エチル−シクロヘキサンの勾配を用いて、順相クロマトグラフィーによって１５分精製した。適切な画分を合わせ、溶媒を真空除去し、標題化合物の遊離塩基（６１．５ｍｇ）を無色ガムとして得た：ＬＣＭＳ（システムＤ）ＲＴ＝１．１２分，１００％，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ６０３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２３３】
試料をアセトニトリル（１ｍＬ）中に溶解し、４−メチルベンゼンスルホン酸塩（１９．４０  ｍｇ，０．１０２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温にて７時間撹拌した。溶媒を真空蒸発させ、標題化合物（８０．５ｍｇ）を無色ガムとして得た。ＬＣＭＳ（システムＤ）ＲＴ＝１．１２分，７５％，ＥＳ＋ｖｅ  ｍ／ｚ  ６０３（Ｍ＋Ｈ）＋  ０．４０分，１９％，（トシル酸）。
【０２３４】
溶解性
動的溶解性を社内のアッセイを用いて決定した。５μｌの名目上１０ｍＭのＤＭＳＯ原液をｐＨ７．４のリン酸緩衝生理食塩水(PBS)で１００μｌに希釈し、１時間室温にて平衡化させMillipore MultiscreenHTS-PCF濾過プレート(MSSL BPC)を通して濾過した。DMSO 原液および濾液を、N. Bhattachar et.al. J. Pharm. Biomed. Anal. 2006, 41, 152-157に概説されたものと類似の、社内のフローインジェクションChemi-Luminescent Nitrogen Detection 方法論によって定量化した。全ての化合物は１５０μＭを超えた溶解性を有することが見いだされた。
【０２３５】
生物学的アッセイ
細胞間接着アッセイ
使用した試薬および方法は記載の通りであり[Ludbrook et al, Biochem. J. 2003, 369, 311)、以下に明瞭化の点を示す。以下の細胞株を使用し、括弧内にリガンドを示す：Ｋ５６２−α５β１（フィブロネクチン）、Ｋ５６２−αｖβ３（ＬＡＰ−ｂ１）、Ｋ５６２−αｖβ５（ビトロネクチン）、Ｋ５６２−αｖβ６（ＬＡＰ−ｂ１）、Ｋ５６２−αｖβ８（ＬＡＰ−ｂ１）。接着を促進するために使用した二価陽イオンは２ｍＭ  ＭｇＣｌ２であった。接着を、蛍光色素ＢＣＥＣＦ−ＡＭ（Ｌｉｆｅ  ＴｅｃＨｎｏｌｏｇｉｅｓ）での細胞標識によって定量化し、その際、３×１０６細胞／ｍＬの細胞懸濁液を、０．３３ｍＬ／ｍＬの３０ｍＭ  ＢＣＥＣＦ−ＡＭとともに３７℃で１０分間インキュベートし、その後、アッセイプレートに分注した。アッセイの終了時に、接着した細胞を、Ｈ２Ｏ中０．５％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００を５０μＬ／ウェルで使用して溶解し、蛍光を放出させた。蛍光強度を、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ（商標）プレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して検出した。このアッセイにおいて活性な阻害剤について、ＩＣ５０決定のために、データを４パラメーターロジスティック方程式にフィットさせた。
【０２３６】
細胞間接着アッセイにおける例１の平均親和性（ｐＩＣ５０）は、αｖβ６でｐＩＣ５０＝８．４；αｖβ３でｐＩＣ５０＝６．２；αｖβ５でｐＩＣ５０＝７．３；αvβ1でｐＩＣ５０＝６．６であった。
【０２３７】
細胞間接着アッセイにおける例２の平均親和性（ｐＩＣ５０）は、αｖβ６でｐＩＣ５０＝８．４；αｖβ３でｐＩＣ５０＝５．７；αｖβ５でｐＩＣ５０＝６．６；αｖβ８でｐＩＣ５０＝７．７であった。
【０２３８】
細胞間接着アッセイにおける例３の平均親和性（ｐＩＣ５０）は、αｖβ６でｐＩＣ５０＝８．５；αｖβ３でｐＩＣ５０＝５．４；αｖβ５でｐＩＣ５０＝６．７；αｖβ８でｐＩＣ５０＝７．８；αｖβ１でｐＩＣ５０＝７．３であった。
【０２３９】
細胞間接着アッセイにおける例４の平均親和性（ｐＩＣ５０）は、αｖβ６でｐＩＣ５０＝８．１；αｖβ３でｐＩＣ５０＝５．２；αｖβ５でｐＩＣ５０＝６．８；αｖβ８でｐＩＣ５０＝７．５であった。
【０２４０】
細胞間接着アッセイにおける例５の平均親和性（ｐＩＣ５０）は、αｖβ６でｐＩＣ５０＝８．１；αｖβ３でｐＩＣ５０＝５．０；αｖβ５でｐＩＣ５０＝５．８；αｖβ８でｐＩＣ５０＝８．０であった。
【０２４１】
細胞間接着アッセイにおける例６の平均親和性（ｐＩＣ５０）は、αｖβ６でｐＩＣ５０＝８．５；αｖβ３でｐＩＣ５０＝５．９；αｖβ５でｐＩＣ５０＝７．３；αｖβ８でｐＩＣ５０＝８．１；αｖβ１でｐＩＣ５０＝８．０であった。
【０２４２】
細胞間接着アッセイにおける例７の平均親和性（ｐＩＣ５０）は、αｖβ６でｐＩＣ５０＝８．０；αｖβ３でｐＩＣ５０＝５．７；αｖβ５でｐＩＣ５０＝６．７；αｖβ８でｐＩＣ５０＝７．６であった。
【０２４３】
細胞間接着アッセイにおける例８の平均親和性（ｐＩＣ５０）は、αｖβ６でｐＩＣ５０＝８．３；αｖβ３でｐＩＣ５０＝５．４；αｖβ５でｐＩＣ５０＝７．２；αｖβ８でｐＩＣ５０＝８．３であった。