(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
免疫応答を誘導するまたは増強するための組合せ物であって、ＭＮＫ特異的阻害剤および免疫抑制成分の阻害剤を含み、治療有効量の前記組合せ物が、それを必要とする被験体に投与され、それによって、免疫応答が誘導されるまたは増強されることを特徴とし、
前記ＭＮＫ特異的阻害剤が、以下の式（Ｉ）：
【化１３】
0006681919.tif 000048
［式中、
Ｗ１およびＷ２は、独立して、Ｏ、ＳもしくはＮ−ＯＲ’（Ｒ’はＣ１〜Ｃ４アルキルである）であり；
Ｙは、−Ｎ（Ｒ５）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ＝Ｏ、−Ｓ（Ｏ）２−もしくは−ＣＨＲ９−であり；
Ｒ１は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、シクロアルキルもしくはヘテロシクリルであり、ここで、任意のＣ１〜Ｃ４アルキル、シクロアルキルもしくはヘテロシクリルは、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換され；
ｎは、１、２もしくは３であり；
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラアルキレン、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキレン、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、ヘテロシクリルもしくはヘテロシクリルアルキレンであり、ここで、任意のアルキル、アリール、アラアルキレン、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキレン、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、ヘテロシクリルもしくはヘテロシクリルアルキレンは、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換され；
または、Ｒ２およびＲ３は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、シクロアルキルもしくはヘテロシクリルを形成し、ここで、任意のシクロアルキルもしくはヘテロシクリルは、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換され；
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、チオール、ヒドロキシアルキレン、シアノ、アルキル、アルコキシ、アシル、チオアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールもしくはヘテロシクリルであり；
Ｒ５は、水素、シアノもしくはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
または、Ｒ５およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換される、縮合ヘテロシクリルを形成し；
Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、アミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルアミニル、ヘテロシクリルアミニル、ヘテロアリールもしくはヘテロシクリルであり、ここで、任意のアミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、アミノ、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルアミニル、ヘテロシクリルアミニル、ヘテロアリールもしくはヘテロシクリルは、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換され；
または、Ｒ７およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換される、縮合ヘテロシクリルもしくはヘテロアリールを形成し；
Ｊは、−ＳＨ、−ＳＲ９、−Ｓ（Ｏ）Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ９、−ＮＨ２、−ＮＲ９Ｒ９、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ９Ｒ９、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲン、アセチル、アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルキル、チオアルキル、シアノアルキレン、アルキルアミニル、ＮＨ２−Ｃ（Ｏ）−アルキレン、ＮＲ９Ｒ９−Ｃ（Ｏ）−アルキレン、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ４アルキル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、シクロアルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルアミニル、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−シクロアルキル、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−アリール、−ＣＨＲ９−アリール、−Ｃ（Ｏ）−アリール、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−ヘテロシクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクリルアミニルもしくはヘテロシクリルであり；
または、同じ炭素原子もしくはヘテロ原子に結合する任意の２個のＪ基は、一緒になってオキソを形成してよく；
Ｒ９は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキルもしくはＯＨである］
またはこの立体異性体、互変異性体もしくは薬学的に許容される塩を有し；
前記免疫抑制成分の阻害剤が、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＬＡＧ３、ＣＴＬＡ４、ＫＩＲ、ＣＤ２４４、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＧＡＬ９、ＴＩＭ３、Ａ２ａＲまたはこれらの任意の組合せに対して特異的な抗体またはｓｉＲＮＡである、組合せ物。
【請求項２】
誘導されるまたは増強される免疫応答を必要とする前記被験体が、免疫耐性と関連する疾患を有する、請求項１に記載の組合せ物。
【請求項３】
免疫耐性と関連する前記疾患が、がんまたは感染症である、請求項２に記載の組合せ物。
【請求項４】
前記がんが、固形腫瘍、メラノーマ、非小細胞肺がん、腎細胞癌、腎臓がん、血液がん、前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、結腸がん、直腸がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、頭頸部がん、甲状腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、卵巣がん、子宮頸がん、肺がん、尿路上皮がん、膵臓がん、神経膠芽腫、肝細胞がん、骨髄腫、多発性骨髄腫、白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、骨髄異形成症候群、脳がん、ＣＮＳがん、悪性神経膠腫またはこれらの任意の組合せである、請求項３に記載の組合せ物。
【請求項５】
前記感染症が、ウイルス感染症、細菌感染症、真菌感染症または寄生虫感染症である、請求項３に記載の組合せ物。
【請求項６】
前記ウイルス感染症が、フラビウイルス、ヘルペスウイルス、肝炎ウイルス、パピローマウイルス、パラミクソウイルス、レトロウイルス、レンチウイルスまたは水痘帯状疱疹ウイルスによる感染症である、請求項５に記載の組合せ物。
【請求項７】
前記ウイルス感染症が、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ａ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、日本脳炎ウイルスまたはヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）による感染症である、請求項５に記載の組合せ物。
【請求項８】
ａ）誘導されるまたは増強される前記免疫応答が、抗原特異的Ｔ細胞応答である；ならびに／あるいは
ｂ）前記阻害された免疫抑制シグナル伝達経路は、既存の内因性免疫を促進するかまたは新規の内因性免疫を促進する、請求項１から７のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項９】
ａ）ＰＤ−１に対して特異的な前記抗体が、ピジリズマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、ＭＫ−３４７５またはこれらの任意の組合せである；
ｂ）ＰＤ−Ｌ１に対して特異的な前記抗体が、ＭＤＸ−１１０５、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＳＢ００１０７１８Ｃまたはこれらの任意の組合せである；
ｃ）ＣＴＬＡ４に対して特異的な前記抗体が、トレメリムマブ、イピリムマブまたは両方である、請求項１から８のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項１０】
前記組合せ物が、抗がん応答または抗腫瘍応答を誘導するまたは増強する治療と組み合わせて投与されることを特徴とし、前記抗がん応答または抗腫瘍応答を誘導するまたは増強する治療が、ワクチン、免疫抑制成分の阻害剤、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、ＶＥＧＦＲ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、細胞傷害剤、化学療法剤またはこれらの任意の組合せである、請求項１から９のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項１１】
前記化学療法剤が、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、トラメチニブ、コビメチニブ、スニチニブ、エルロチニブ、パクリタキセル、ドセタキセルまたはこれらの任意の組合せである、請求項１０に記載の組合せ物。
【請求項１２】
前記ＭＮＫ特異的阻害剤および前記抗がん応答または抗腫瘍応答を誘導するまたは増強する治療が、同時に、併せて、逐次的にまたはこれらの任意の組合せで投与されることを特徴とする、請求項１０または１１に記載の組合せ物。
【請求項１３】
前記ＭＮＫ特異的阻害剤が、
ａ）ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＬＡＧ３の発現；
ｂ）Ｔ細胞中のＰＤ−１およびＬＡＧ３の発現；または
ｃ）抗原提示細胞または疾患と関連する細胞中のＰＤ−Ｌ１の発現
を低減させる、請求項１から１２のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項１４】
前記ＭＮＫ特異的阻害剤が、ｅＩＦ４Ｅをリン酸化するＭＮＫの能力を低減させるまたは最小化する、請求項１から１３のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項１５】
ＭＮＫ特異的阻害剤、免疫抑制成分の阻害剤、および必要に応じてワクチン、細胞傷害剤、化学療法剤またはこれらの任意の組合せを含む、組合せ物であって、
前記ＭＮＫ特異的阻害剤が、以下の式（Ｉ）：
【化１３】
0006681919.tif 000049
［式中、
Ｗ１およびＷ２は、独立して、Ｏ、ＳもしくはＮ−ＯＲ’（Ｒ’はＣ１〜Ｃ４アルキルである）であり；
Ｙは、−Ｎ（Ｒ５）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ＝Ｏ、−Ｓ（Ｏ）２−もしくは−ＣＨＲ９−であり；
Ｒ１は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、シクロアルキルもしくはヘテロシクリルであり、ここで、任意のＣ１〜Ｃ４アルキル、シクロアルキルもしくはヘテロシクリルは、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換され；
ｎは、１、２もしくは３であり；
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラアルキレン、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキレン、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、ヘテロシクリルもしくはヘテロシクリルアルキレンであり、ここで、任意のアルキル、アリール、アラアルキレン、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキレン、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、ヘテロシクリルもしくはヘテロシクリルアルキレンは、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換され；
または、Ｒ２およびＲ３は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、シクロアルキルもしくはヘテロシクリルを形成し、ここで、任意のシクロアルキルもしくはヘテロシクリルは、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換され；
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、チオール、ヒドロキシアルキレン、シアノ、アルキル、アルコキシ、アシル、チオアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールもしくはヘテロシクリルであり；
Ｒ５は、水素、シアノもしくはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
または、Ｒ５およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換される、縮合ヘテロシクリルを形成し；
Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、アミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルアミニル、ヘテロシクリルアミニル、ヘテロアリールもしくはヘテロシクリルであり、ここで、任意のアミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、アミノ、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルアミニル、ヘテロシクリルアミニル、ヘテロアリールもしくはヘテロシクリルは、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換され；
または、Ｒ７およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換される、縮合ヘテロシクリルもしくはヘテロアリールを形成し；
Ｊは、−ＳＨ、−ＳＲ９、−Ｓ（Ｏ）Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ９、−ＮＨ２、−ＮＲ９Ｒ９、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ９Ｒ９、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲン、アセチル、アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルキル、チオアルキル、シアノアルキレン、アルキルアミニル、ＮＨ２−Ｃ（Ｏ）−アルキレン、ＮＲ９Ｒ９−Ｃ（Ｏ）−アルキレン、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ４アルキル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、シクロアルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルアミニル、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−シクロアルキル、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−アリール、−ＣＨＲ９−アリール、−Ｃ（Ｏ）−アリール、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−ヘテロシクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクリルアミニルもしくはヘテロシクリルであり；
または、同じ炭素原子もしくはヘテロ原子に結合する任意の２個のＪ基は、一緒になってオキソを形成してよく；
Ｒ９は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキルもしくはＯＨである］
またはこの立体異性体、互変異性体もしくは薬学的に許容される塩を有し；
前記免疫抑制成分の阻害剤は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＬＡＧ３、ＣＴＬＡ４、ＫＩＲ、ＣＤ２４４、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＧＡＬ９、ＴＩＭ３、Ａ２ａＲまたはこれらの任意の組合せに対して特異的である抗体またはｓｉＲＮＡである、組合せ物。
【請求項１６】
ａ）ＰＤ−１に対して特異的な前記抗体が、ピジリズマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、ＭＫ−３４７５またはこれらの任意の組合せである；
ｂ）ＰＤ−Ｌ１に対して特異的な前記抗体が、ＭＤＸ−１１０５、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＳＢ００１０７１８Ｃまたはこれらの任意の組合せである；
ｃ）ＣＴＬＡ４に対して特異的な前記抗体が、トレメリムマブ、イピリムマブまたは両方である、請求項１５に記載の組合せ物。
【請求項１７】
前記化学療法剤が、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、トラメチニブ、コビメチニブ、スニチニブ、エルロチニブ、パクリタキセル、ドセタキセルまたはこれらの任意の組合せである、請求項１５または１６に記載の組合せ物。
【請求項１８】
がん抗原または感染性疾患抗原に対して特異的なキメラ抗原受容体を含有するＴ細胞をさらに含む、請求項１５から１７のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項１９】
前記ＭＮＫ特異的阻害剤が、以下の式（Ｉａ）：
【化１４】
0006681919.tif 000050
［式中、
Ｒ１は、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
ｎは、１、２または３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して、出現する毎に、水素、アルキル、炭素環、炭素環アルキル、複素環または複素環アルキルであり、ここで、このようなアルキル、炭素環、炭素環アルキル、複素環または複素環アルキルは、無置換または１、２もしくは３個のＪ基により置換され；
あるいは、Ｒ２およびＲ３は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、炭素環または複素環を形成し、ここで、このようなカルボシクリルまたはヘテロシクリルは、無置換または１、２もしくは３個のＪ基により置換され；
Ｒ４は、水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、チオアルキル、アルケニルまたはシクロアルキルであり；
Ｒ５は、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
あるいは、Ｒ５およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、無置換または１、２もしくは３個のＪ基により置換された縮合複素環を形成し；
Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、独立して、出現する毎に、水素、ハロゲン、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルケニル、アミノ、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、アルキルアミニルまたはシクロアルキルアミニルであり、このそれぞれのアルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルケニル、アミノ、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、アルキルアミニルまたはシクロアルキルアミニルは、無置換または１、２もしくは３個のＪ基により置換され；
あるいは、Ｒ７およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、無置換または１、２もしくは３個のＪ基により置換された縮合複素環を形成し；
Ｊは、ハロゲン、アミノ、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、アミノまたはアミノアルキルであり、あるいは任意の２個のＪ基が同じ炭素原子またはヘテロ原子に結合する場合、一緒になってオキソを形成してよい］
またはこの立体異性体、互変異性体もしくは薬学的に許容される塩を有する、請求項１から１８のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項２０】
前記ＭＮＫ特異的阻害剤が、化合物：
【化１５】
0006681919.tif 000051
またはこの立体異性体、互変異性体もしくは薬学的に許容される塩である、請求項１から１９のいずれか一項に記載の組合せ物。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
背景
Ｔ細胞媒介性免疫応答は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）による抗原認識を通じて引き起こされる。Ｔ細胞応答の最終的な大きさおよび質は、免疫チェックポイントによって調節され、これは、共刺激および共阻害のシグナルのバランスを制御する。免疫チェックポイントは、感染症に対する免疫応答中の自己寛容の維持および損傷からの組織の保護において必要不可欠である。しかしながら、腫瘍による免疫チェックポイントタンパク質の調節不全発現は、重要な免疫耐性機構をもたらす。組織におけるＴ細胞のエフェクター機能を調節する阻害性リガンドおよび受容体は、腫瘍微小環境の腫瘍細胞または非形質転換細胞において、しばしば過剰発現する。腫瘍細胞における免疫チェックポイントリガンドの発現の２つの一般的な機構が明らかになっている。一部の腫瘍において、恒常的な発癌性シグナル伝達は、腫瘍において阻害剤リガンドの発現を誘導して、生得的な免疫耐性をもたらす。あるいは、阻害性リガンドは、活性な抗腫瘍免疫応答（適応免疫耐性）によって生じる炎症シグナルに応答して誘導され得る。前臨床および臨床データは、免疫チェックポイントの阻害が、内在性の抗腫瘍免疫を増強できることを示している（例えば、Pardoll、Nat.  Rev.  Cancer  １２巻、２５２頁、２０１２年を参照）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００２】
【非特許文献１】Pardoll、Nat.  Rev.  Cancer  １２巻、２５２頁、２０１２年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本技術分野において、代替の免疫チェックポイント経路の効果的なモジュレーターについての必要性がある。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本開示は、このような必要性に対するものであり、さらに他の関連する利点を提供する。
特定の実施形態において、例えば、以下が提供される：
（項目１）
免疫応答を誘導するまたは増強する方法であって、治療有効量のＭＮＫ特異的阻害剤を、それを必要とする被験体に投与し、それによって、免疫応答を誘導するまたは増強することを含む、方法。
（項目２）
誘導されるまたは増強される免疫応答を必要とする前記被験体が、免疫耐性と関連する疾患を有する、項目１に記載の方法。
（項目３）
免疫耐性と関連する前記疾患が、がんまたは感染症である、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記がんが、固形腫瘍、メラノーマ、非小細胞肺がん、腎細胞癌、腎臓がん、血液がん、前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、結腸がん、直腸がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、頭頸部がん、甲状腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、卵巣がん、子宮頸がん、肺がん、尿路上皮がん、膵臓がん、神経膠芽腫、肝細胞がん、骨髄腫、多発性骨髄腫、白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、骨髄異形成症候群、脳がん、ＣＮＳがん、悪性神経膠腫またはこれらの任意の組合せである、項目３に記載の方法。
（項目５）
前記感染症が、ウイルス感染症、細菌感染症、真菌感染症または寄生虫感染症である、項目３に記載の方法。
（項目６）
前記ウイルス感染症が、フラビウイルス、ヘルペスウイルス、肝炎ウイルス、パピローマウイルス、パラミクソウイルス、レトロウイルス、レンチウイルスまたは水痘帯状疱疹ウイルスによる感染症である、項目５に記載の方法。
（項目７）
前記ウイルス感染症が、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ａ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、日本脳炎ウイルスまたはヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）による感染症である、項目５に記載の方法。
（項目８）
誘導されるまたは増強される前記免疫応答が、抗原特異的Ｔ細胞応答である、項目１から７のいずれか一項に記載の方法。
（項目９）
免疫抑制成分の阻害剤を投与することをさらに含む、項目１から８のいずれか一項に記載の方法。
（項目１０）
免疫抑制成分の前記阻害剤が、抗体またはｓｉＲＮＡである、項目９に記載の方法。
（項目１１）
前記抗体またはｓｉＲＮＡが、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＬＡＧ３、ＣＴＬＡ４、ＫＩＲ、ＣＤ２４４、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＧＡＬ９、ＴＩＭ３、Ａ２ａＲまたはこれらの任意の組合せに対して特異的である、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
ＰＤ−１に対して特異的な前記抗体が、ピジリズマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブまたはこれらの任意の組合せである、項目１０に記載の方法。
（項目１３）
ＰＤ−Ｌ１に対して特異的な前記抗体が、ＭＤＸ−１１０５、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＳＢ００１０７１８Ｃまたはこれらの任意の組合せである、項目１０に記載の方法。
（項目１４）
ＣＴＬＡ４に対して特異的な前記抗体が、トレメリムマブ、イピリムマブまたは両方である、項目１０に記載の方法。
（項目１５）
抗がん応答を誘導するまたは増強する治療を投与することをさらに含む、項目１から１４のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６）
誘導されたまたは増強された前記抗がん応答が、抗腫瘍応答である、項目１５に記載の方法。
（項目１７）
抗がん応答を誘導するまたは増強する前記治療が、ワクチン、免疫抑制成分の阻害剤、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、ＶＥＧＦＲ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、細胞傷害剤、化学療法剤またはこれらの任意の組合せである、項目１５または１６に記載の方法。
（項目１８）
免疫抑制シグナルの阻害剤が、抗体またはｓｉＲＮＡである、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記抗体またはｓｉＲＮＡが、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＬＡＧ３、ＫＩＲ、ＣＤ２４４、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＧＡＬ９、ＴＩＭ３、Ａ２ａＲまたはこれらの任意の組合せに対して特異的である、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
ＰＤ−１に対して特異的な前記抗体が、ピジリズマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブまたはこれらの任意の組合せである、項目１８に記載の方法。
（項目２１）
ＰＤ−Ｌ１に対して特異的な前記抗体が、ＭＤＸ−１１０５、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＳＢ００１０７１８Ｃまたはこれらの任意の組合せである、項目１８に記載の方法。
（項目２２）
ＣＴＬＡ４に対して特異的な前記抗体が、トレメリムマブ、イピリムマブまたは両方である、項目１８に記載の方法。
（項目２３）
前記化学療法剤が、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、ＶＥＧＦＲ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、抗有糸分裂剤またはこれらの任意の組合せである、項目１７に記載の方法。
（項目２４）
前記化学療法剤が、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、トラメチニブ、コビメチニブ、スニチニブ、エルロチニブ、パクリタキセル、ドセタキセルまたはこれらの任意の組合せである、項目１７に記載の方法。
（項目２５）
前記ＭＮＫ特異的阻害剤および免疫抑制成分の阻害剤が、同時に、併せて、逐次的にまたはこれらの任意の組合せで投与される、項目９から１４のいずれか一項に記載の方法。
（項目２６）
前記ＭＮＫ特異的阻害剤および抗がん応答を誘導するまたは増強する治療が、同時に、併せて、逐次的にまたはこれらの任意の組合せで投与される、項目１５から２４のいずれか一項に記載の方法。
（項目２７）
前記ＭＮＫ特異的阻害剤が、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＬＡＧ３の発現を低減させる、前記項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目２８）
ＰＤ−１およびＬＡＧ３の発現が、Ｔ細胞で低減する、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
ＰＤ−Ｌ１の発現が、抗原提示細胞または疾患と関連する細胞で、低減する、項目２７に記載の方法。
（項目３０）
前記ＭＮＫ特異的阻害剤が、ｅＩＦ４Ｅをリン酸化するＭＮＫの能力を低減させるまたは最小化する、前記項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目３１）
免疫抑制シグナル伝達経路を阻害する方法であって、有効量のＭＮＫ特異的阻害剤を、調節不全の免疫抑制シグナル伝達経路の緩和を必要とする被験体に投与することを含む、方法。
（項目３２）
前記免疫抑制シグナル伝達経路の阻害が、既存の内在性の免疫を促進する、または新規の内在性の免疫を促進する、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記免疫抑制シグナル伝達経路の緩和を必要とする前記被験体が、がんまたは感染症を有する、項目３１に記載の方法。
（項目３４）
前記免疫抑制シグナル伝達経路が、ＰＤ−１および／またはＬＡＧ３の免疫抑制シグナル伝達経路である、項目３１に記載の方法。
（項目３５）
前記がんが、固形腫瘍、メラノーマ、非小細胞肺がん、腎細胞癌、腎臓がん、血液がん、前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、結腸がん、直腸がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、頭頸部がん、甲状腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、卵巣がん、子宮頸がん、肺がん、尿路上皮がん、膵臓がん、神経膠芽腫、肝細胞がん、骨髄腫、多発性骨髄腫、白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、骨髄異形成症候群、脳がん、ＣＮＳがん、悪性神経膠腫またはこれらの任意の組合せである、項目３３に記載の方法。
（項目３６）
前記感染症が、ウイルス感染症、細菌感染症、真菌感染症または寄生虫感染症である、項目３３に記載の方法。
（項目３７）
前記ウイルス感染症が、フラビウイルス、ヘルペスウイルス、肝炎ウイルス、パピローマウイルス、パラミクソウイルス、レトロウイルス、レンチウイルスまたは水痘帯状疱疹ウイルスによる感染症である、項目３６に記載の方法。
（項目３８）
前記ウイルス感染症が、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ａ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、日本脳炎ウイルスまたはヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）による感染症である、項目３６に記載の方法。
（項目３９）
免疫抑制成分の阻害剤を投与することをさらに含む、項目３１から３８のいずれか一項に記載の方法。
（項目４０）
免疫抑制成分の前記阻害剤が、抗体またはｓｉＲＮＡである、項目３９に記載の方法。
（項目４１）
前記抗体またはｓｉＲＮＡが、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＬＡＧ３、ＣＴＬＡ４、ＫＩＲ、ＣＤ２４４、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＧＡＬ９、ＴＩＭ３、Ａ２ａＲまたはこれらの任意の組合せに対して特異的である、項目４０に記載の方法。
（項目４２）
ＰＤ−１に対して特異的な前記抗体が、ピジリズマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブまたはこれらの任意の組合せである、項目４０に記載の方法。
（項目４３）
ＰＤ−Ｌ１に対して特異的な前記抗体が、ＭＤＸ−１１０５、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＳＢ００１０７１８Ｃまたはこれらの任意の組合せである、項目４０に記載の方法。
（項目４４）
ＣＴＬＡ４に対して特異的な前記抗体が、トレメリムマブ、イピリムマブまたは両方である、項目４０に記載の方法。
（項目４５）
抗がん応答を誘導するまたは増強する治療を投与することをさらに含む、項目３３から３５または３９から４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目４６）
誘導されたまたは増強された前記抗がん応答が、抗腫瘍応答である、項目４５に記載の方法。
（項目４７）
抗がん応答を誘導するまたは増強する前記治療が、ワクチン、免疫抑制成分の阻害剤、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、ＶＥＧＦＲ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、細胞傷害剤、化学療法剤またはこれらの任意の組合せである、項目４５または４６に記載の方法。
（項目４８）
免疫抑制成分の前記阻害剤が、抗体またはｓｉＲＮＡである、項目４７に記載の方法。
（項目４９）
前記抗体またはｓｉＲＮＡが、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＬＡＧ３、ＫＩＲ、ＣＤ２４４、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＧＡＬ９、ＴＩＭ３、Ａ２ａＲまたはこれらの任意の組合せに対して特異的である、項目４８に記載の方法。
（項目５０）
ＰＤ−１に対して特異的な前記抗体が、ピジリズマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブまたはこれらの任意の組合せである、項目４８に記載の方法。
（項目５１）
ＰＤ−Ｌ１に対して特異的な前記抗体が、ＭＤＸ−１１０５、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＳＢ００１０７１８Ｃまたはこれらの任意の組合せである、項目４８に記載の方法。
（項目５２）
ＣＴＬＡ４に対して特異的な前記抗体が、トレメリムマブ、イピリムマブまたは両方である、項目４８に記載の方法。
（項目５３）
前記化学療法剤が、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、ＶＥＧＦＲ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、抗有糸分裂剤またはこれらの任意の組合せである、項目４７に記載の方法。
（項目５４）
前記化学療法剤が、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、トラメチニブ、コビメチニブ、スニチニブ、エルロチニブ、パクリタキセル、ドセタキセルまたはこれらの任意の組合せである、項目４７に記載の方法。
（項目５５）
前記ＭＮＫ特異的阻害剤および免疫抑制成分の阻害剤が、同時に、併せて、逐次的にまたはこれらの任意の組合せで投与される、項目３９から４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目５６）
前記ＭＮＫ特異的阻害剤および抗がん応答を誘導するまたは増強する治療が、同時に、併せて、逐次的にまたはこれらの任意の組合せで投与される、項目４５から５４のいずれか一項に記載の方法。
（項目５７）
前記ＭＮＫ特異的阻害剤が、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＬＡＧ３の発現を低減させる、項目３１から５６のいずれか一項に記載の方法。
（項目５８）
ＰＤ−１およびＬＡＧ３の発現が、Ｔ細胞で低減する、項目５７に記載の方法。
（項目５９）
ＰＤ−Ｌ１の発現が、抗原提示細胞または疾患と関連する細胞で、低減する、項目５７に記載の方法。
（項目６０）
前記ＭＮＫ特異的阻害剤が、ｅＩＦ４Ｅをリン酸化するＭＮＫの能力を低減させるまたは最小化する、項目３１から５９のいずれか一項に記載の方法。
（項目６１）
ＰＤ−１活性、ＰＤ−Ｌ１活性、ＬＡＧ３活性またはこれらの任意の組合せを低減させる方法であって、免疫細胞の活性を増加させるため、または免疫細胞のダウンモジュレーションを低減させるために、細胞を有効量のＭＮＫ特異的阻害剤と接触させることを含む、方法。
（項目６２）
前記ＭＮＫ特異的阻害剤が、以下の式（Ｉ）：
【化１３】
0006681919.tif 000002
［式中、
Ｗ１およびＷ２は、独立して、Ｏ、ＳもしくはＮ−ＯＲ’（Ｒ’は低級アルキルである）であり；
Ｙは、−Ｎ（Ｒ５）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ＝Ｏ、−Ｓ（Ｏ）２−もしくは−ＣＨＲ９−であり；
Ｒ１は、水素、低級アルキル、シクロアルキルもしくはヘテロシクリルであり、ここで、任意の低級アルキル、シクロアルキルもしくはヘテロシクリルは、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換され；
ｎは、１、２もしくは３であり；
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラアルキレン、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキレン、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、ヘテロシクリルもしくはヘテロシクリルアルキレンであり、ここで、任意のアルキル、アリール、アラアルキレン、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキレン、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、ヘテロシクリルもしくはヘテロシクリルアルキレンは、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換され；
または、Ｒ２およびＲ３は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、シクロアルキルもしくはヘテロシクリルを形成し、ここで、任意のシクロアルキルもしくはヘテロシクリルは、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換され；
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、チオール、ヒドロキシアルキレン、シアノ、アルキル、アルコキシ、アシル、チオアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールもしくはヘテロシクリルであり；
Ｒ５は、水素、シアノもしくは低級アルキルであり；
または、Ｒ５およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換される、縮合ヘテロシクリルを形成し；
Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、アミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルアミニル、ヘテロシクリルアミニル、ヘテロアリールもしくはヘテロシクリルであり、ここで、任意のアミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、アミノ、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルアミニル、ヘテロシクリルアミニル、ヘテロアリールもしくはヘテロシクリルは、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換され；
または、Ｒ７およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換される、縮合ヘテロシクリルもしくはヘテロアリールを形成し；
Ｊは、−ＳＨ、−ＳＲ９、−Ｓ（Ｏ）Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ９、−ＮＨ２、−ＮＲ９Ｒ９、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ９Ｒ９、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲン、アセチル、アルキル、低級アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルキル、チオアルキル、シアノアルキレン、アルキルアミニル、ＮＨ２−Ｃ（Ｏ）−アルキレン、ＮＲ９Ｒ９−Ｃ（Ｏ）−アルキレン、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−低級アルキル、−Ｃ（Ｏ）−低級アルキル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、シクロアルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルアミニル、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−シクロアルキル、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−アリール、−ＣＨＲ９−アリール、−Ｃ（Ｏ）−アリール、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−ヘテロシクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクリルアミニルもしくはヘテロシクリルであり；
または、同じ炭素原子もしくはヘテロ原子に結合する任意の２個のＪ基は、一緒になってオキソを形成してよく；
Ｒ９は、水素、低級アルキルもしくはＯＨである］
またはこの立体異性体、互変異性体もしくは薬学的に許容される塩を有する、前記項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目６３）
前記ＭＮＫ特異的阻害剤が、以下の式（Ｉａ）：
【化１４】
0006681919.tif 000003
［式中、
Ｒ１は、水素または低級アルキルであり；
ｎは、１、２または３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して、出現する毎に、水素、アルキル、炭素環、炭素環アルキル、複素環または複素環アルキルであり、ここで、このようなアルキル、炭素環、炭素環アルキル、複素環または複素環アルキルは、無置換または１、２もしくは３個のＪ基により置換され；
あるいは、Ｒ２およびＲ３は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、炭素環または複素環を形成し、ここで、このようなカルボシクリルまたはヘテロシクリルは、無置換または１、２もしくは３個のＪ基により置換され；
Ｒ４は、水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、チオアルキル、アルケニルまたはシクロアルキルであり；
Ｒ５は、水素または低級アルキルであり；
あるいは、Ｒ５およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、無置換または１、２もしくは３個のＪ基により置換された縮合複素環を形成し；
Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、独立して、出現する毎に、水素、ハロゲン、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルケニル、アミノ、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、アルキルアミニルまたはシクロアルキルアミニルであり、このそれぞれのアルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルケニル、アミノ、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、アルキルアミニルまたはシクロアルキルアミニルは、無置換または１、２もしくは３個のＪ基により置換され；
あるいは、Ｒ７およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、無置換または１、２もしくは３個のＪ基により置換された縮合複素環を形成し；
Ｊは、ハロゲン、アミノ、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、アミノまたはアミノアルキルであり、あるいは任意の２個のＪ基が同じ炭素原子またはヘテロ原子に結合する場合、一緒になってオキソを形成してよい］
またはこの立体異性体、互変異性体もしくは薬学的に許容される塩を有する、前記項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目６４）
ＭＮＫ特異的阻害剤および免疫抑制成分の阻害剤を含む、組合せ。
（項目６５）
免疫抑制成分の前記阻害剤が、抗体またはｓｉＲＮＡである、項目６４に記載の組合せ。
（項目６６）
前記抗体またはｓｉＲＮＡが、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＬＡＧ３、ＣＴＬＡ４、ＫＩＲ、ＣＤ２４４、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＧＡＬ９、ＴＩＭ３、Ａ２ａＲまたはこれらの任意の組合せに対して特異的である、項目６５に記載の組合せ。
（項目６７）
ＰＤ−１に対して特異的な前記抗体が、ピジリズマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブまたはこれらの任意の組合せである、項目６５に記載の組合せ。
（項目６８）
ＰＤ−Ｌ１に対して特異的な前記抗体が、ＭＤＸ−１１０５、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＳＢ００１０７１８Ｃまたはこれらの任意の組合せである、項目６５に記載の組合せ。
（項目６９）
ＣＴＬＡ４に対して特異的な前記抗体が、トレメリムマブ、イピリムマブまたは両方である、項目６５に記載の組合せ。
（項目７０）
抗がん応答を誘導するまたは増強する治療をさらに含む、項目６４から６９のいずれか一項に記載の組合せ。
（項目７１）
誘導されたまたは増強された前記抗がん応答が、抗腫瘍応答である、項目７０に記載の組合せ。
（項目７２）
抗がん応答を誘導するまたは増強する前記治療が、ワクチン、免疫抑制成分のさらなる阻害剤、細胞傷害剤、化学療法剤またはこれらの任意の組合せである、項目７０または７１に記載の組合せ。
（項目７３）
前記化学療法剤が、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、ＶＥＧＦＲ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、抗有糸分裂剤またはこれらの任意の組合せである、項目７２に記載の組合せ。
（項目７４）
前記化学療法剤が、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、トラメチニブ、コビメチニブ、スニチニブ、エルロチニブ、パクリタキセル、ドセタキセルまたはこれらの任意の組合せである、項目７２に記載の組合せ。
（項目７５）
免疫抑制成分の前記さらなる阻害剤が、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＬＡＧ３、ＫＩＲ、ＣＤ２４４、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＧＡＬ９、ＴＩＭ３、Ａ２ａＲまたはこれらの任意の組合せに対して特異的な抗体またはｓｉＲＮＡである、項目７２に記載の組合せ。
（項目７６）
ＰＤ−１に対して特異的な前記抗体が、ピジリズマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブまたはこれらの任意の組合せである、項目７５に記載の組合せ。
（項目７７）
ＰＤ−Ｌ１に対して特異的な前記抗体が、ＭＤＸ−１１０５、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＳＢ００１０７１８Ｃまたはこれらの任意の組合せである、項目７５に記載の組合せ。
（項目７８）
ＣＴＬＡ４に対して特異的な前記抗体が、トレメリムマブ、イピリムマブまたは両方である、項目７５に記載の組合せ。
（項目７９）
ＭＮＫ特異的阻害剤、免疫抑制成分の阻害剤および化学療法剤を含む、組合せ。
（項目８０）
免疫抑制成分の前記阻害剤が、ピジリズマブ、ニボルマブまたはペムブロリズマブから選択されるＰＤ−１に対して特異的な抗体である、項目７９に記載の組合せ。
（項目８１）
免疫抑制成分の前記阻害剤が、ＭＤＸ−１１０５、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０ＡまたはＭＳＢ００１０７１８Ｃから選択されるＰＤ−Ｌ１に対して特異的な抗体である、項目７９または８０に記載の組合せ。
（項目８２）
免疫抑制成分の前記阻害剤が、トレメリムマブまたはイピリムマブから選択されるＣＴＬＡ４に対して特異的な抗体である、項目７９から８１のいずれか一項に記載の組合せ。
（項目８３）
前記化学療法剤が、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、トラメチニブ、コビメチニブ、スニチニブ、エルロチニブ、パクリタキセル、ドセタキセルまたはこれらの任意の組合せである、項目７９から８１のいずれか一項に記載の組合せ。
（項目８４）
前記化学療法剤が、ダブラフェニブおよびトラメチニブである、項目７９から８１のいずれか一項に記載の組合せ。
（項目８５）
前記ＭＮＫ特異的阻害剤が、項目６２または６３の化合物である、項目６４から８４のいずれか一項に記載の組合せ。
（項目８６）
がん抗原または感染性疾患抗原に対して特異的なキメラ抗原受容体を含有するＴ細胞をさらに含む、項目６４から８５のいずれか一項に記載の組合せ。
（項目８７）
項目６４の組合せ、または項目７９の組合せを含むキット。
【図面の簡単な説明】
【０００５】
【図１Ａ】図１Ａ〜１Ｄは、ＭＮＫ特異的阻害剤が、細胞の生存率または活性化に影響を及ぼすことなく、形質転換されたＴ細胞株（ジャーカット）における種々の免疫チェックポイントタンパク質の発現を阻止することができることを示す。（Ａ）および（Ｂ）フローサイトメトリーによって検出されるように、ＰＤ−１の発現は、ＰＨＡおよびＰＭＡと接触したジャーカット細胞において刺激される一方で、ＰＤ−１の発現は、ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０．０１、０．１、１、３および１０μＭで使用）による用量依存的様式で低減される。（Ｃ）ＥＬＩＳＡアッセイにより、ＰＨＡおよびＰＭＡと接触したジャーカットＴ細胞におけるヒトＩＬ−２産生のレベルの上昇が検出され、これは、ジャーカットＴ細胞が、それらのＴＣＲを介して活性化されたことを示す。ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７の存在は、ＩＬ−２産生を検出可能に変化させず、Ｔ細胞活性化が、ＭＮＫ特異的阻害剤によって影響されないことを示す。（Ｄ）上記（Ａ）のように、ＰＨＡおよびＰＭＡで、またはＰＨＡ、ＰＭＡおよび化合物１０７で処置されたジャーカット細胞の生存率は、固定可能な死細胞株（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使用して検出される死細胞の割合によって決定されるように、影響されなかった。
【図１Ｂ】図１Ａ〜１Ｄは、ＭＮＫ特異的阻害剤が、細胞の生存率または活性化に影響を及ぼすことなく、形質転換されたＴ細胞株（ジャーカット）における種々の免疫チェックポイントタンパク質の発現を阻止することができることを示す。（Ａ）および（Ｂ）フローサイトメトリーによって検出されるように、ＰＤ−１の発現は、ＰＨＡおよびＰＭＡと接触したジャーカット細胞において刺激される一方で、ＰＤ−１の発現は、ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０．０１、０．１、１、３および１０μＭで使用）による用量依存的様式で低減される。（Ｃ）ＥＬＩＳＡアッセイにより、ＰＨＡおよびＰＭＡと接触したジャーカットＴ細胞におけるヒトＩＬ−２産生のレベルの上昇が検出され、これは、ジャーカットＴ細胞が、それらのＴＣＲを介して活性化されたことを示す。ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７の存在は、ＩＬ−２産生を検出可能に変化させず、Ｔ細胞活性化が、ＭＮＫ特異的阻害剤によって影響されないことを示す。（Ｄ）上記（Ａ）のように、ＰＨＡおよびＰＭＡで、またはＰＨＡ、ＰＭＡおよび化合物１０７で処置されたジャーカット細胞の生存率は、固定可能な死細胞株（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使用して検出される死細胞の割合によって決定されるように、影響されなかった。
【図１Ｃ】図１Ａ〜１Ｄは、ＭＮＫ特異的阻害剤が、細胞の生存率または活性化に影響を及ぼすことなく、形質転換されたＴ細胞株（ジャーカット）における種々の免疫チェックポイントタンパク質の発現を阻止することができることを示す。（Ａ）および（Ｂ）フローサイトメトリーによって検出されるように、ＰＤ−１の発現は、ＰＨＡおよびＰＭＡと接触したジャーカット細胞において刺激される一方で、ＰＤ−１の発現は、ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０．０１、０．１、１、３および１０μＭで使用）による用量依存的様式で低減される。（Ｃ）ＥＬＩＳＡアッセイにより、ＰＨＡおよびＰＭＡと接触したジャーカットＴ細胞におけるヒトＩＬ−２産生のレベルの上昇が検出され、これは、ジャーカットＴ細胞が、それらのＴＣＲを介して活性化されたことを示す。ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７の存在は、ＩＬ−２産生を検出可能に変化させず、Ｔ細胞活性化が、ＭＮＫ特異的阻害剤によって影響されないことを示す。（Ｄ）上記（Ａ）のように、ＰＨＡおよびＰＭＡで、またはＰＨＡ、ＰＭＡおよび化合物１０７で処置されたジャーカット細胞の生存率は、固定可能な死細胞株（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使用して検出される死細胞の割合によって決定されるように、影響されなかった。
【図１Ｄ】図１Ａ〜１Ｄは、ＭＮＫ特異的阻害剤が、細胞の生存率または活性化に影響を及ぼすことなく、形質転換されたＴ細胞株（ジャーカット）における種々の免疫チェックポイントタンパク質の発現を阻止することができることを示す。（Ａ）および（Ｂ）フローサイトメトリーによって検出されるように、ＰＤ−１の発現は、ＰＨＡおよびＰＭＡと接触したジャーカット細胞において刺激される一方で、ＰＤ−１の発現は、ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０．０１、０．１、１、３および１０μＭで使用）による用量依存的様式で低減される。（Ｃ）ＥＬＩＳＡアッセイにより、ＰＨＡおよびＰＭＡと接触したジャーカットＴ細胞におけるヒトＩＬ−２産生のレベルの上昇が検出され、これは、ジャーカットＴ細胞が、それらのＴＣＲを介して活性化されたことを示す。ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７の存在は、ＩＬ−２産生を検出可能に変化させず、Ｔ細胞活性化が、ＭＮＫ特異的阻害剤によって影響されないことを示す。（Ｄ）上記（Ａ）のように、ＰＨＡおよびＰＭＡで、またはＰＨＡ、ＰＭＡおよび化合物１０７で処置されたジャーカット細胞の生存率は、固定可能な死細胞株（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使用して検出される死細胞の割合によって決定されるように、影響されなかった。
【図２Ａ】図２Ａ〜２Ｅは、（Ａ）転移性のヒト乳がん細胞株であるＭＤＡ−ＭＢ−２３１、（Ｂ）散在性の大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）細胞株の活性化されたヒトＢ細胞様（ＡＢＣ）サブタイプであるＨＢＬ−１、（Ｃ）ヒト肺腺癌上皮細胞株であるＡ５４９、（Ｄ）ヒト乳腺癌細胞株であるＭＤＡ−ＭＢ−３６１、および（Ｅ）ヒト形質細胞腫細胞株であるＡＭＯ−１において、ウエスタンブロットによって検出されるＰＤ−Ｌ１の発現が、ＤＭＳＯビヒクル対照（カラムに「−」を表示）と比較して、ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０．０１、０．１、１、３および１０μＭで使用）の存在下で用量依存的様式で低減されることを示す。
【図２Ｂ】図２Ａ〜２Ｅは、（Ａ）転移性のヒト乳がん細胞株であるＭＤＡ−ＭＢ−２３１、（Ｂ）散在性の大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）細胞株の活性化されたヒトＢ細胞様（ＡＢＣ）サブタイプであるＨＢＬ−１、（Ｃ）ヒト肺腺癌上皮細胞株であるＡ５４９、（Ｄ）ヒト乳腺癌細胞株であるＭＤＡ−ＭＢ−３６１、および（Ｅ）ヒト形質細胞腫細胞株であるＡＭＯ−１において、ウエスタンブロットによって検出されるＰＤ−Ｌ１の発現が、ＤＭＳＯビヒクル対照（カラムに「−」を表示）と比較して、ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０．０１、０．１、１、３および１０μＭで使用）の存在下で用量依存的様式で低減されることを示す。
【図２Ｃ】図２Ａ〜２Ｅは、（Ａ）転移性のヒト乳がん細胞株であるＭＤＡ−ＭＢ−２３１、（Ｂ）散在性の大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）細胞株の活性化されたヒトＢ細胞様（ＡＢＣ）サブタイプであるＨＢＬ−１、（Ｃ）ヒト肺腺癌上皮細胞株であるＡ５４９、（Ｄ）ヒト乳腺癌細胞株であるＭＤＡ−ＭＢ−３６１、および（Ｅ）ヒト形質細胞腫細胞株であるＡＭＯ−１において、ウエスタンブロットによって検出されるＰＤ−Ｌ１の発現が、ＤＭＳＯビヒクル対照（カラムに「−」を表示）と比較して、ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０．０１、０．１、１、３および１０μＭで使用）の存在下で用量依存的様式で低減されることを示す。
【図２Ｄ】図２Ａ〜２Ｅは、（Ａ）転移性のヒト乳がん細胞株であるＭＤＡ−ＭＢ−２３１、（Ｂ）散在性の大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）細胞株の活性化されたヒトＢ細胞様（ＡＢＣ）サブタイプであるＨＢＬ−１、（Ｃ）ヒト肺腺癌上皮細胞株であるＡ５４９、（Ｄ）ヒト乳腺癌細胞株であるＭＤＡ−ＭＢ−３６１、および（Ｅ）ヒト形質細胞腫細胞株であるＡＭＯ−１において、ウエスタンブロットによって検出されるＰＤ−Ｌ１の発現が、ＤＭＳＯビヒクル対照（カラムに「−」を表示）と比較して、ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０．０１、０．１、１、３および１０μＭで使用）の存在下で用量依存的様式で低減されることを示す。
【図２Ｅ】図２Ａ〜２Ｅは、（Ａ）転移性のヒト乳がん細胞株であるＭＤＡ−ＭＢ−２３１、（Ｂ）散在性の大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）細胞株の活性化されたヒトＢ細胞様（ＡＢＣ）サブタイプであるＨＢＬ−１、（Ｃ）ヒト肺腺癌上皮細胞株であるＡ５４９、（Ｄ）ヒト乳腺癌細胞株であるＭＤＡ−ＭＢ−３６１、および（Ｅ）ヒト形質細胞腫細胞株であるＡＭＯ−１において、ウエスタンブロットによって検出されるＰＤ−Ｌ１の発現が、ＤＭＳＯビヒクル対照（カラムに「−」を表示）と比較して、ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０．０１、０．１、１、３および１０μＭで使用）の存在下で用量依存的様式で低減されることを示す。
【図３Ａ】図３Ａ〜３Ｇは、ＭＮＫ特異的阻害剤が、Ｔ細胞の生存率または活性化に影響を及ぼすことなく、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化された新鮮なＴ細胞における種々の免疫チェックポイントタンパク質の発現を阻止することができることを示す。フローサイトメトリーは、（Ａ）および（Ｂ）ＰＤ−１の発現ならびに（Ｃ）および（Ｄ）ＬＡＧ３が、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化された一次Ｔ細胞においてそれぞれ増加する一方、ＰＤ−１およびＬＡＧ３の発現が、それぞれ、ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０．０１、０．１、１、３および１０μＭで使用）の存在下で用量依存的様式で低減されることを示す。（Ｅ）ＥＬＩＳＡアッセイにより、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞におけるヒトＩＬ−２産生のレベルの上昇を検出した。ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７の存在は、ＩＬ−２産生を検出可能に変化させなかった。（Ｆ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞の生存率、または化合物１０７の存在下で抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞の生存率は、固定可能な死細胞株（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使用して検出される死細胞の割合によって決定されるように、影響されなかった。（Ｇ）免疫抑制サイトカインであるＩＬ−１０の発現は、化合物１０７によって、用量依存的様式で、一次Ｔ細胞中で阻害された。
【図３Ｂ】図３Ａ〜３Ｇは、ＭＮＫ特異的阻害剤が、Ｔ細胞の生存率または活性化に影響を及ぼすことなく、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化された新鮮なＴ細胞における種々の免疫チェックポイントタンパク質の発現を阻止することができることを示す。フローサイトメトリーは、（Ａ）および（Ｂ）ＰＤ−１の発現ならびに（Ｃ）および（Ｄ）ＬＡＧ３が、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化された一次Ｔ細胞においてそれぞれ増加する一方、ＰＤ−１およびＬＡＧ３の発現が、それぞれ、ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０．０１、０．１、１、３および１０μＭで使用）の存在下で用量依存的様式で低減されることを示す。（Ｅ）ＥＬＩＳＡアッセイにより、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞におけるヒトＩＬ−２産生のレベルの上昇を検出した。ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７の存在は、ＩＬ−２産生を検出可能に変化させなかった。（Ｆ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞の生存率、または化合物１０７の存在下で抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞の生存率は、固定可能な死細胞株（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使用して検出される死細胞の割合によって決定されるように、影響されなかった。（Ｇ）免疫抑制サイトカインであるＩＬ−１０の発現は、化合物１０７によって、用量依存的様式で、一次Ｔ細胞中で阻害された。
【図３Ｃ】図３Ａ〜３Ｇは、ＭＮＫ特異的阻害剤が、Ｔ細胞の生存率または活性化に影響を及ぼすことなく、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化された新鮮なＴ細胞における種々の免疫チェックポイントタンパク質の発現を阻止することができることを示す。フローサイトメトリーは、（Ａ）および（Ｂ）ＰＤ−１の発現ならびに（Ｃ）および（Ｄ）ＬＡＧ３が、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化された一次Ｔ細胞においてそれぞれ増加する一方、ＰＤ−１およびＬＡＧ３の発現が、それぞれ、ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０．０１、０．１、１、３および１０μＭで使用）の存在下で用量依存的様式で低減されることを示す。（Ｅ）ＥＬＩＳＡアッセイにより、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞におけるヒトＩＬ−２産生のレベルの上昇を検出した。ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７の存在は、ＩＬ−２産生を検出可能に変化させなかった。（Ｆ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞の生存率、または化合物１０７の存在下で抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞の生存率は、固定可能な死細胞株（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使用して検出される死細胞の割合によって決定されるように、影響されなかった。（Ｇ）免疫抑制サイトカインであるＩＬ−１０の発現は、化合物１０７によって、用量依存的様式で、一次Ｔ細胞中で阻害された。
【図３Ｄ】図３Ａ〜３Ｇは、ＭＮＫ特異的阻害剤が、Ｔ細胞の生存率または活性化に影響を及ぼすことなく、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化された新鮮なＴ細胞における種々の免疫チェックポイントタンパク質の発現を阻止することができることを示す。フローサイトメトリーは、（Ａ）および（Ｂ）ＰＤ−１の発現ならびに（Ｃ）および（Ｄ）ＬＡＧ３が、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化された一次Ｔ細胞においてそれぞれ増加する一方、ＰＤ−１およびＬＡＧ３の発現が、それぞれ、ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０．０１、０．１、１、３および１０μＭで使用）の存在下で用量依存的様式で低減されることを示す。（Ｅ）ＥＬＩＳＡアッセイにより、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞におけるヒトＩＬ−２産生のレベルの上昇を検出した。ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７の存在は、ＩＬ−２産生を検出可能に変化させなかった。（Ｆ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞の生存率、または化合物１０７の存在下で抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞の生存率は、固定可能な死細胞株（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使用して検出される死細胞の割合によって決定されるように、影響されなかった。（Ｇ）免疫抑制サイトカインであるＩＬ−１０の発現は、化合物１０７によって、用量依存的様式で、一次Ｔ細胞中で阻害された。
【図３Ｅ】図３Ａ〜３Ｇは、ＭＮＫ特異的阻害剤が、Ｔ細胞の生存率または活性化に影響を及ぼすことなく、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化された新鮮なＴ細胞における種々の免疫チェックポイントタンパク質の発現を阻止することができることを示す。フローサイトメトリーは、（Ａ）および（Ｂ）ＰＤ−１の発現ならびに（Ｃ）および（Ｄ）ＬＡＧ３が、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化された一次Ｔ細胞においてそれぞれ増加する一方、ＰＤ−１およびＬＡＧ３の発現が、それぞれ、ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０．０１、０．１、１、３および１０μＭで使用）の存在下で用量依存的様式で低減されることを示す。（Ｅ）ＥＬＩＳＡアッセイにより、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞におけるヒトＩＬ−２産生のレベルの上昇を検出した。ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７の存在は、ＩＬ−２産生を検出可能に変化させなかった。（Ｆ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞の生存率、または化合物１０７の存在下で抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞の生存率は、固定可能な死細胞株（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使用して検出される死細胞の割合によって決定されるように、影響されなかった。（Ｇ）免疫抑制サイトカインであるＩＬ−１０の発現は、化合物１０７によって、用量依存的様式で、一次Ｔ細胞中で阻害された。
【図３Ｆ】図３Ａ〜３Ｇは、ＭＮＫ特異的阻害剤が、Ｔ細胞の生存率または活性化に影響を及ぼすことなく、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化された新鮮なＴ細胞における種々の免疫チェックポイントタンパク質の発現を阻止することができることを示す。フローサイトメトリーは、（Ａ）および（Ｂ）ＰＤ−１の発現ならびに（Ｃ）および（Ｄ）ＬＡＧ３が、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化された一次Ｔ細胞においてそれぞれ増加する一方、ＰＤ−１およびＬＡＧ３の発現が、それぞれ、ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０．０１、０．１、１、３および１０μＭで使用）の存在下で用量依存的様式で低減されることを示す。（Ｅ）ＥＬＩＳＡアッセイにより、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞におけるヒトＩＬ−２産生のレベルの上昇を検出した。ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７の存在は、ＩＬ−２産生を検出可能に変化させなかった。（Ｆ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞の生存率、または化合物１０７の存在下で抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞の生存率は、固定可能な死細胞株（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使用して検出される死細胞の割合によって決定されるように、影響されなかった。（Ｇ）免疫抑制サイトカインであるＩＬ−１０の発現は、化合物１０７によって、用量依存的様式で、一次Ｔ細胞中で阻害された。
【図３Ｇ】図３Ａ〜３Ｇは、ＭＮＫ特異的阻害剤が、Ｔ細胞の生存率または活性化に影響を及ぼすことなく、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化された新鮮なＴ細胞における種々の免疫チェックポイントタンパク質の発現を阻止することができることを示す。フローサイトメトリーは、（Ａ）および（Ｂ）ＰＤ−１の発現ならびに（Ｃ）および（Ｄ）ＬＡＧ３が、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化された一次Ｔ細胞においてそれぞれ増加する一方、ＰＤ−１およびＬＡＧ３の発現が、それぞれ、ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０．０１、０．１、１、３および１０μＭで使用）の存在下で用量依存的様式で低減されることを示す。（Ｅ）ＥＬＩＳＡアッセイにより、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞におけるヒトＩＬ−２産生のレベルの上昇を検出した。ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７の存在は、ＩＬ−２産生を検出可能に変化させなかった。（Ｆ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞の生存率、または化合物１０７の存在下で抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞の生存率は、固定可能な死細胞株（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使用して検出される死細胞の割合によって決定されるように、影響されなかった。（Ｇ）免疫抑制サイトカインであるＩＬ−１０の発現は、化合物１０７によって、用量依存的様式で、一次Ｔ細胞中で阻害された。
【図４Ａ】図４Ａおよび４Ｂは、ＭＮＫ特異的阻害剤単独、または抗ＰＤ−１抗体と組み合わせたＭＮＫ特異的阻害剤が、（Ａ）ｉｎ  ｖｉｖｏでのマウスＣＴ２６同種移植腫瘍モデルにおける腫瘍の成長を阻害することができ、（Ｂ）体重に影響を及ぼさない（これは、忍容性を示す）ことを示す。
【図４Ｂ】図４Ａおよび４Ｂは、ＭＮＫ特異的阻害剤単独、または抗ＰＤ−１抗体と組み合わせたＭＮＫ特異的阻害剤が、（Ａ）ｉｎ  ｖｉｖｏでのマウスＣＴ２６同種移植腫瘍モデルにおける腫瘍の成長を阻害することができ、（Ｂ）体重に影響を及ぼさない（これは、忍容性を示す）ことを示す。
【図５】図５は、ＭＮＫ特異的阻害剤単独、抗ＰＤ−１抗体単独、または抗ＰＤ−１抗体と組み合わせたＭＮＫ特異的阻害剤での処置に応答したマウスが、再チャレンジにおいてＣＴ２６腫瘍を拒絶したことを示す。腫瘍の成長は、同じＣＴ２６同種移植腫瘍を移植されたナイーブＢＡＬＢ／ｃマウスと比較して、さらなる薬物処置なしで評価し、これは、ＭＮＫ特異的阻害剤による前処置が、長期間の免疫記憶を確立したことを示す。
【図６】図６は、ＭＮＫ特異的阻害剤単独、または抗ＰＤ−１抗体と組み合わせたＭＮＫ特異的阻害剤が、マウスＣＴ２６同種移植腫瘍から処置後４日で単離された腫瘍の浸潤性リンパ球（ＴＩＬ）の集合におけるＴエフェクター細胞とＴ調節性細胞の、ｉｎ  ｖｉｖｏでの比率を変化させることができることを示す。
【図７】図７は、ＭＮＫ特異的阻害剤で４８時間処置された散在性の大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）細胞株ＴＭＤ８におけるＨＬＡ−ＩＩ（ＨＬＡ−ＤＱＡ１）タンパク質レベルのウエスタンブロット分析を示す。
【発明を実施するための形態】
【０００６】
詳細な説明
本開示は、例えば、免疫抑制分子の誘導によって媒介される、免疫耐性と関連する疾患を軽減すること、および適応免疫応答に関与する分子の低減による、免疫モジュレーションのための組成物および方法に関する。例えば、免疫チェックポイントタンパク質（プログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ−１）またはそのリガンド（ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２）など）、免疫抑制サイトカイン（例えば、ＩＬ−１０）または調節性Ｔ細胞の不適当なレベルまたは活性は、セリン／スレオニンキナーゼ（ＭＫＮＫまたはＭＮＫ）特異的阻害剤と相互作用するＭＡＰキナーゼの使用を通じて、正すことができるか、または正常化することができる。一方、このようなＭＮＫ特異的阻害剤は、Ｔ細胞または免疫記憶に対する抗原提示のために重要な、主要組織適合抗原（ＭＨＣ、またはヒトにおけるＨＬＡ）分子の発現を回復させるためまたは増加させるために使用し得る。
【０００７】
背景として、ヒト適応免疫系の細胞媒介性免疫応答の一部は、リンパ球（Ｔ細胞）の活性化に関与して、病原性細胞または異常細胞および関連分子の破壊を媒介する。Ｔ細胞は、細胞（例えば、がん細胞）の外部（例えば、侵入病原体）または内部が起源の外来抗原を提示する細胞によって活性化され得る。この応答は、異常な応答が、宿主に対して損傷を引き起こし得るので、種々の免疫チェックポイントを通じて高度に調節される。正常な状態下では、免疫チェックポイント系は、Ｔ細胞による過剰な活性化またはエフェクター活性を防止する、複雑な一連の細胞シグナルおよび分子相互作用である。しかしながら、正（共刺激）と負（抑制）のシグナル伝達のこのバランスは、非正常状態によって破壊され、免疫応答または免疫監視を抑制する異常な微小環境をもたらし得る。このような免疫耐性は、がんまたは感染症などのある特定の病原性状態をもたらし得る。
【０００８】
Ｔ細胞活性化の代表的な負の初期調節因子の１つは、細胞傷害性Ｔリンパ球抗原４（ＣＴＬＡ−４）である。細胞傷害性Ｔ細胞の活性化は、細胞表面においてＣＴＬＡ−４の発現をもたらし、次いで、これは、抗原提示細胞（ＡＰＣ）に対するそれらの相互共有リガンドであるＢ７−１（ＣＤ８０）またはＢ７−２（ＣＤ８６）について、共刺激分子であるＣＤ２８と競合する。これらの競合する正および負のシグナルは、同時に、自己限定的な方法でＴ細胞が機能し続けることを可能にしながら、チェックにおける初期段階の細胞傷害性活性を保持する（例えば、Teftら、Ann.  Rev.  Immunol.  ２４巻、６５頁、２００６年を参照）。
【０００９】
Ｔ細胞表面において見いだされる代表的な後期阻害性受容体は、ＰＤ−１であり、これは、ＡＰＣにおいて見いだされる、そのリガンドの１つである、ＰＤ−Ｌ１（Ｂ７−Ｈ１、ＣＤ２７４）またはＰＤ−Ｌ２（Ｂ７−ＤＣ、ＣＤ７３）によって結合した場合に、阻害性シグナルを伝達することができる。ＰＤ−１は、炎症中の末梢組織におけるＴ細胞のエフェクター機能を制限し、寛容を維持することを助ける（すなわち、自己免疫を最小化する）（Franciscoら、Immunol.  Rev.  ２３６巻、２１９頁、２０１０年を参照）。Ｔ細胞表面において見いだされるさらなる代表的な阻害性受容体は、ＣＤ２００Ｒ、ＬＡＧ３、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＳＩＲＰα、ＴＩＭ３およびＡ２ａＲを含む。
【００１０】
本開示は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ３およびＩＬ−１０などの１つまたは複数の種々の免疫抑制成分の低減を、媒介または促進するためのＭＮＫ特異的阻害剤の驚くべき能力、ならびに調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の量をモジュレートするための能力およびエフェクターＴ細胞（ＴＥ）の機能の抑制を効果的に低減させるまたは最小化する能力を述べる。加えて、ＭＮＫ特異的阻害剤は、主要組織適合複合体（ＭＨＣまたはＨＬＡ）クラスＩＩ分子の発現の増加を媒介するまたは促進する能力があり、これは抗原提示を促進することができる。ＭＮＫ特異的阻害剤は、免疫チェックポイント分子の阻害剤またはモジュレーター（例えば、抗ＰＤ−１、抗ＰＤ−Ｌ１または抗ＣＴＬＡ−４抗体；例えば、Pardol、Nature  Rev.  Cancer  １２巻、２５２頁、２０１２年を参照）などの免疫抑制成分の特異的阻害剤または特異的モジュレーターの可能な代替として、またはこれらと組み合わせて使用することができる。
【００１１】
免疫抑制活性（例えば、ＭＨＣ／ＨＬＡ発現の増加）を低減または克服することができる他の分子にも影響を及ぼし得る、ＭＮＫ特異的阻害剤の投与による１つまたは複数の免疫抑制成分（例えば、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ３、ＩＬ−１０）のこのような低減は、例えば、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）の活性を増加させること；免疫細胞のダウンモジュレーションを低減させること；免疫応答を誘導するまたは増強すること；免疫応答を延長すること；抗原特異的Ｔ細胞応答を刺激すること；などによる疾患の進行を、処置するためまたは低減させるために使用することができる。例えば、免疫耐性と関連する疾患（例えば、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１またはＬＡＧ３の調節不全が関与する疾患などの免疫抑制成分が媒介する疾患）を有する被験体（例えば、ヒト）を、ＭＮＫ特異的阻害剤で処置して、被験体における免疫応答を、誘導するまたは増強することができる。代表的な免疫耐性と関連する疾患は、がんおよび感染性疾患を含む。加えて、ＭＮＫ特異的阻害剤は、非抑制的な（正常な、誘導されたまたは増強された）免疫応答が有利である疾患を処置するために、免疫チェックポイント分子に対して特異的な抗体（例えば、抗ＰＤ−１、抗ＰＤ−Ｌ１、抗ＬＡＧ３、抗ＣＴＬＡ−４、キナーゼ阻害剤）などの免疫抑制成分に対する（さらに増強する）他の治療と組み合わせて使用することができる。
【００１２】
本開示をより詳細に説明する前に、本明細書において使用される特定の用語の定義を提供することは、その理解を助けるために有用であり得る。追加の定義を、本開示全体にわたって説明する。
【００１３】
本明細書において、任意の濃度範囲、パーセンテージの範囲、比率の範囲または整数の範囲は、別段の指示がない限り、列挙された範囲内の任意の整数の値、および適切な場合、その分数（整数の１０分の１および１００分の１など）を含むものと理解されるべきである。また、本明細書において、ポリマーのサブユニット、サイズまたは厚さなどの任意の物理的特徴に関して列挙された任意の数字の範囲は、別段の指示がない限り、列挙された範囲内の任意の整数を含むものと理解されるべきである。本明細書において使用される場合、「約」という用語は、別段の指示がない限り、指示された範囲、値または構造の±２０％を意味する。「から本質的になる」という用語は、特許請求の範囲を、特定の材料もしくはステップ、または特許請求の範囲に記載された発明の基礎的および新規な特徴に実質的に影響を及ぼさないものに限定する。本明細書において使用される「１つの（ａ）」および「１つの（ａｎ）」という用語は、列挙された成分の「１つまたは複数（ｏｎｅ  ｏｒ  ｍｏｒｅ）」を指すことが理解されるべきである。選択肢（例えば、「または（ｏｒ）」）の使用は、選択肢のいずれか１つ、両方またはこれらの任意の組合せを意味すると理解されるべきである。本明細書において使用される場合、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」「有する（ｈａｖｅ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という用語は、同意語として使用され、この用語およびこれらの変形は、非限定的であると解釈されることを意図している。
【００１４】
「アミノ」は、−ＮＨ２置換基を指す。
【００１５】
「アミノカルボニル」は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２置換基を指す。
【００１６】
「カルボキシル」は、−ＣＯ２Ｈ置換基を指す。
【００１７】
「カルボニル」は、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（＝Ｏ）−基を指す。両方の表示は、本明細書において互換可能に使用される。
【００１８】
「シアノ」は、−Ｃ≡Ｎ置換基を指す。
【００１９】
「シアノアルキレン」は、−（アルキレン）Ｃ≡Ｎ置換基を指す。
【００２０】
「アセチル」は、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３置換基を指す。
【００２１】
「ヒドロキシ」または「ヒドロキシル」は、−ＯＨ置換基を指す。
【００２２】
「ヒドロキシアルキレン」は、−（アルキレン）ＯＨ置換基を指す。
【００２３】
「オキソ」は、＝Ｏ置換基を指す。
【００２４】
「チオ」または「チオール」は、−ＳＨ置換基を指す。
【００２５】
「アルキル」は、１〜１２個の炭素原子（Ｃ１〜Ｃ１２アルキル）、１〜８個の炭素原子（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、または１〜６個の炭素原子（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）を有する、炭素原子および水素原子のみからなる、飽和の、直鎖または分枝状の炭化水素鎖ラジカルを指し、これは、単結合によって、分子の残部と結合する。代表的なアルキル基は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、１−メチルエチル（イソプロピル）、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、１，１−ジメチルエチル（ｔ−ブチル）、３−メチルヘキシル、２−メチルヘキシルなどを含む。
【００２６】
「低級アルキル」は、上記定義のアルキルと同じ意味を有するが、１〜４個の炭素原子（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）を有する。
【００２７】
「アルケニル」は、少なくとも１つの二重結合、および２〜１２個の炭素原子（Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル）、２〜８個の炭素原子（Ｃ２〜Ｃ８アルケニル）、または２〜６個の炭素原子（Ｃ２〜Ｃ６アルケニル）を有する、不飽和のアルキル基を指し、これは、単結合によって、分子の残部と結合し、例えば、エテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニルなどである。
【００２８】
「アルキニル」は、少なくとも１つの三重結合、および２〜１２個の炭素原子（Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル）、２〜１０個の炭素原子（Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル）、２〜８個の炭素原子（Ｃ２〜Ｃ８アルキニル）、または２〜６個の炭素原子（Ｃ２〜Ｃ６アルキニル）を有する、不飽和のアルキル基を指し、これは、単結合によって、分子の残部と結合し、例えば、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニルなどである。
【００２９】
「アルキレン」または「アルキレン鎖」は、それぞれ、炭素および水素のみからなる、分子の残部がラジカル基と連結する、直鎖または分枝状の二価の炭化水素（アルキル）鎖を指す。アルキレンは、１〜１２個の炭素原子を有することができ、例えば、メチレン、エチレン、プロピレン、ｎ−ブチレンなどである。アルキレン鎖は、単結合または二重結合を介して分子の残部と結合する。アルキレン鎖の分子の残部への結合点は、鎖中の１個の炭素または任意の２個の炭素を介してであってよい。「任意選択で置換されるアルキレン」は、アルキレンまたは置換アルキレンを指す。
【００３０】
「アルケニレン」は、二価のアルケンを指す。アルケニレンの例は、限定されず、エテニレン（−ＣＨ＝ＣＨ−）、ならびにその全ての立体異性体および配座異性体を含む。「置換アルケニレン」は、二価の置換アルケンを指す。「任意選択で置換されるアルケニレン」は、アルケニレンまたは置換アルケニレンを指す。
【００３１】
「アルキニレン」は、二価のアルキンを指す。アルキニレンの例は、限定されず、エチニレン、プロピニレンを含む。「置換アルキニレン」は、二価の置換アルキンを指す。
【００３２】
「アルコキシ」は、式−ＯＲａ（Ｒａは、上記定義の指示された数の炭素原子を有するアルキルである）のラジカルを指す。アルコキシ基の例は、限定されず、−Ｏ−メチル（メトキシ）、−Ｏ−エチル（エトキシ）、−Ｏ−プロピル（プロポキシ）、−Ｏ−イソプロピル（イソプロポキシ）などを含む。
【００３３】
「アシル」は、式−Ｃ（Ｏ）Ｒａ（Ｒａは、指示された数の炭素原子を有するアルキルである）のラジカルを指す。
【００３４】
「アルキルアミニル」は、式−ＮＨＲａまたは−ＮＲａＲａ（それぞれのＲａは、独立して、上記定義の指示された数の炭素原子を有するアルキルラジカルである）のラジカルを指す。
【００３５】
「シクロアルキルアミニル」は、式−ＮＨＲａ（Ｒａは、本明細書に定義のシクロアルキルラジカルである）のラジカルを指す。
【００３６】
「アルキルカルボニルアミニル」は、式−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ（Ｒａは、本明細書に定義の指示された数の炭素原子を有するアルキルラジカルである）のラジカルを指す。
【００３７】
「シクロアルキルカルボニルアミニル」は、式−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ（Ｒａは、本明細書に定義のシクロアルキルラジカルである）のラジカルを指す。
【００３８】
「アルキルアミノカルボニル」は、式−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲａまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲａ（それぞれのＲａは、独立して、本明細書に定義の指示された数の炭素原子を有するアルキルラジカルである）のラジカルを指す。
【００３９】
「シクロアルキルアミノカルボニル（Cyclolkylaminocarbonyl）」は、式−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲａ（Ｒａは、本明細書に定義のシクロアルキルラジカルである）のラジカルを指す。
【００４０】
「アリール」は、水素原子、６〜１８個の炭素原子および少なくとも１個の芳香環を含む炭化水素環系ラジカルを指す。代表的なアリールは、水素原子および６〜９個の炭素原子および少なくとも１個の芳香環を含む炭化水素環系ラジカル；水素原子および９〜１２個の炭素原子および少なくとも１個の芳香環を含む炭化水素環系ラジカル；水素原子および１２〜１５個の炭素原子および少なくとも１個の芳香環を含む炭化水素環系ラジカル；または水素原子および１５〜１８個の炭素原子および少なくとも１個の芳香環を含む炭化水素環系ラジカルである。本発明の目的のために、アリールラジカルは、単環式、二環式、三環式または四環式環系であってよく、これは、縮合環系または架橋環系を含んでいてよい。アリールラジカルは、限定されないが、アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、フルオランテン、フルオレン、ａｓ−インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、フェナレン、フェナントレン、プレイアデン、ピレンおよびトリフェニレンから誘導されるアリールラジカルを含む。「任意選択で置換されるアリール」は、アリール基または置換アリール基を指す。
【００４１】
「アリーレン」は、二価のアリールを意味し、「置換アリーレン」は、二価の置換アリールを指す。
【００４２】
「アラルキル」または「アラアルキレン」は、互換可能に使用されてよく、式−Ｒｂ−Ｒｃ（Ｒｂは、本明細書に定義のアルキレン鎖であり、Ｒｃは、本明細書に定義の１つまたは複数のアリールラジカルである）のラジカルを指し、例えば、ベンジル、ジフェニルメチルなどである。
【００４３】
「シクロアルキル」は、炭素原子および水素原子のみからなる、安定な、非芳香族の、単環式または多環式炭化水素ラジカルを指し、これは、３〜１５個の炭素原子、好ましくは３〜１０個の炭素原子、３〜９個の炭素原子、３〜８個の炭素原子、３〜７個の炭素原子、３〜６個の炭素原子、３〜５個の炭素原子を有する縮合環系または架橋環系、４個の炭素原子を有する環または３個の炭素原子を有する環を含んでいてよい。シクロアルキル環は、飽和または不飽和であってよく、単結合によって分子の残部と結合する。単環式ラジカルは、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチルを含む。多環ラジカルは、例えば、アダマンチル、ノルボルニル、デカリニル、７，７−ジメチル−ビシクロ［２．２．１］ヘプタニルなどを含む。
【００４４】
「シクロアルキルアルキレン」または「シクロアルキルアルキル」は、互換可能に使用されてよく、式−ＲｂＲｅ（Ｒｂは、本明細書に定義のアルキレン鎖であり、Ｒｅは、本明細書に定義のシクロアルキルラジカルである）のラジカルを指す。ある特定の実施形態では、Ｒｂは、シクロアルキルアルキレンが２個のシクロアルキル部分を含むように、シクロアルキル基でさらに置換される。シクロプロピルアルキレンおよびシクロブチルアルキレンが、代表的なシクロアルキルアルキレン基であり、少なくとも１個のシクロプロピル基または少なくとも１個のシクロブチル基をそれぞれ含む。
【００４５】
「縮合」は、本発明の化合物において、存在する環構造と縮合した本明細書に記載の任意の環構造を指す。縮合環がヘテロシクリル環またはヘテロアリール環である場合、縮合ヘテロシクリル環または縮合ヘテロアリール環の一部になる、存在する環構造上の任意の炭素原子は、窒素原子と置き換わってよい。
【００４６】
「ハロ」または「ハロゲン」は、ブロモ（臭素）、クロロ（塩素）、フルオロ（フッ素）またはヨード（ヨウ素）を指す。
【００４７】
「ハロアルキル」は、アルキル基の１つまたは複数の水素原子が、上記定義のハロゲン（ハロラジカル）で置換された、本明細書に定義の指示された数の炭素原子を有するアルキルラジカルを指す。ハロゲン原子は、同一または異なっていてよい。代表的なハロアルキルは、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリクロロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、１，２−ジフルオロエチル、３−ブロモ−２−フルオロプロピル、１，２−ジブロモエチルなどである。
【００４８】
「ヘテロシクリル」、「複素環」または「複素環式環」は、２〜１２個の炭素原子、ならびに窒素、酸素および硫黄からなる群から選択される、１〜６個のヘテロ原子、例えば、１〜５個のヘテロ原子、１〜４個のヘテロ原子、１〜３個のヘテロ原子、または１〜２個のヘテロ原子からなる、安定な３〜１８員の飽和または不飽和ラジカルを指す。代表的な複素環は、限定されず、安定な３〜１５員の飽和もしくは不飽和ラジカル、安定な３〜１２員の飽和もしくは不飽和ラジカル、安定な３〜９員の飽和もしくは不飽和ラジカル、安定な８員の飽和もしくは不飽和ラジカル、安定な７員の飽和もしくは不飽和ラジカル、安定な６員の飽和もしくは不飽和ラジカル、または安定な５員の飽和もしくは不飽和ラジカルを含む。
【００４９】
本明細書において特に明記しない限り、ヘテロシクリルラジカルは、単環式、二環式、三環式または四環式環系であってよく、これは、縮合環系または架橋環系を含んでいてよく；ヘテロシクリルラジカルにおける窒素原子、炭素原子または硫黄原子は、任意選択で酸化されてよく；窒素原子は、任意選択で四級化されてよく；ヘテロシクリルラジカルは、部分的または完全に飽和であってよい。非芳香族ヘテロシクリルラジカルの例は、限定されないが、アゼチジニル、ジオキソラニル、チエニル［１，３］ジチアニル、デカヒドロイソキノリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、イソチアゾリジニル、イソオキサゾリジニル、モルホリニル、オクタヒドロインドリル、オクタヒドロイソインドリル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、オキサゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、４−ピペリドニル、ピロリジニル、ピラゾリジニル、キヌクリジニル、チアゾリジニル、テトラヒドロフリル、チエタニル、トリチアニル、テトラヒドロピラニル、チオモルホリニル、チアモルホリニル、１−オキソ−チオモルホリニル、および１，１−ジオキソ−チオモルホリニルを含む。ヘテロシクリルは、本明細書に定義のヘテロアリール、および以下のヘテロアリールの定義において列挙される芳香族ヘテロシクリルの例を含む。
【００５０】
「ヘテロシクリルアルキル」または「ヘテロシクリルアルキレン」は、式−ＲｂＲｆ（Ｒｂは、本明細書に定義のアルキレン鎖であり、Ｒｆは、上記定義のヘテロシクリルラジカルであり、ヘテロシクリルが窒素含有ヘテロシクリルである場合、ヘテロシクリルは、窒素原子でアルキルラジカルと結合してよい）のラジカルを指す。
【００５１】
「ヘテロアリール」または「ヘテロアリーレン」は、水素原子、１〜１３個の炭素原子、窒素、酸素および硫黄からなる群から選択される１〜６個のヘテロ原子、ならびに少なくとも１個の芳香環を含む、５〜１４員の環系ラジカルを指す。本発明の目的のために、ヘテロアリールラジカルは、少なくとも１個のヘテロ原子、少なくとも２個のヘテロ原子、少なくとも３個のヘテロ原子、少なくとも４個のヘテロ原子、少なくとも５個のヘテロ原子または少なくとも６個のヘテロ原子を含む、安定な５〜１２員環、安定な５〜１０員環、安定な５〜９員環、安定な５〜８員環、安定な５〜７員環または安定な６員環であってよい。ヘテロアリールは、単環式、二環式、三環式または四環式環系であってよく、これは、縮合環系または架橋環系を含んでいてよく；ヘテロアリールラジカルにおける窒素原子、２個の炭素原子または硫黄原子は、任意選択で酸化されてよく；窒素原子は、任意選択で四級化されてよい。ヘテロ原子は、芳香環または非芳香環のメンバーであってよく、但しヘテロアリールにおける少なくとも１つの環は芳香族である。例は、限定されないが、アゼピニル、アクリジニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾインドリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキセピニル、１，４−ベンゾジオキサニル、ベンゾナフトフラニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾジオキシニル、ベンゾピラニル、ベンゾピラノニル、ベンゾフラニル、ベンゾフラノニル、ベンゾチエニル（ベンゾチオフェニル）、ベンゾトリアゾリル、ベンゾ［４，６］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジニル、カルバゾリル、シンノリニル、ジベンゾフラニル、ジベンゾチオフェニル、フラニル、フラノニル、イソチアゾリル、イミダゾリル、インダゾリル、インドリル、インダゾリル、イソインドリル、インドリニル、イソインドリニル、イソキノリル、インドリジニル、イソオキサゾリル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、２−オキソアゼピニル、オキサゾリル、オキシラニル、１−オキシドピリジニル、１−オキシドピリミジニル、１−オキシドピラジニル、１−オキシドピリダジニル、１−フェニル−１Ｈ−ピロリル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、フタラジニル、プテリジニル、プリニル、ピロリル、ピラゾリル、ピリジニル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、キノリニル、キヌクリジニル、イソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、チアゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、トリアジニル、およびチオフェニル（すなわち、チエニル）を含む。
【００５２】
「ヘテロアリールアルキル」または「ヘテロアリールアルキレン」は、式−ＲｂＲｇ（Ｒｂは、上記定義のアルキレン鎖であり、Ｒｇは、上記定義のヘテロアリールラジカルである）のラジカルを指す。
【００５３】
「チオアルキル」は、式−ＳＲａ（Ｒａは、１〜１２個の炭素原子、少なくとも１〜１０個の炭素原子、少なくとも１〜８個の炭素原子、少なくとも１〜６個の炭素原子、または少なくとも１〜４個の炭素原子を含有する上記定義のアルキルラジカルである）のラジカルを指す。
【００５４】
「ヘテロシクリルアミニル」は、式−ＮＨＲｆ（Ｒｆは、上記定義のヘテロシクリルラジカルである）のラジカルを指す。
【００５５】
「チオン」は、飽和または不飽和の（Ｃ３〜Ｃ８）環式または（Ｃ１〜Ｃ８）非環式部分の炭素原子と結合した＝Ｓ基を指す。
【００５６】
「スルホキシド」は、硫黄原子が２個の炭素原子に共有結合した、−Ｓ（Ｏ）−基を指す。
【００５７】
「スルホン」は、六価の硫黄が、二重結合を介して２個の酸素原子のそれぞれと結合し、共有単結合を介して２個の炭素原子とさらに結合した−Ｓ（Ｏ）２−基を指す。
【００５８】
「オキシム」という用語は、−Ｃ（Ｒａ）＝Ｎ−ＯＲａラジカル（Ｒａは、上記定義の、水素、低級アルキル、アルキレンまたはアリーレン基である）を指す。
【００５９】
本発明の化合物は、種々の異性体、ならびに、単一の互変異性体および互変異性体の混合物の両方を含む、１つまたは複数の互変異性形態として存在し得る。「異性体」という用語は、化合物の互変異性形態を含む、本発明の化合物の全ての異性体を包含することを意図する。
【００６０】
本明細書に記載の一部の化合物は、不斉中心を有していてよく、したがって、異なるエナンチオマー形態およびジアステレオマー形態で存在していてよい。本発明の化合物は、光学異性体またはジアステレオマーの形態であってよい。したがって、本発明は、ラセミ混合物を含む、これらの光学異性体、ジアステレオマーおよびこれらの混合物の形態の、本明細書に記載の本発明の化合物およびそれらの使用を包含する。本発明の化合物の光学異性体は、不斉合成、キラルクロマトグラフィーまたは光学活性分割剤の使用による立体異性体の化学的分離などの、公知の手法によって得ることができる。
【００６１】
別段の指示がない限り、「立体異性体」は、その化合物の他の立体異性体を実質的に含まない化合物の１つの立体異性体を意味する。したがって、１つのキラル中心を有する立体異性体的に純粋な化合物は、その化合物の逆のエナンチオマーを実質的に含まない。２つのキラル中心を有する立体異性体的に純粋な化合物は、その化合物の他のジアステレオマーを実質的に含まない。典型的な立体異性体的に純粋な化合物は、約８０重量％超のその化合物の１つの立体異性体および約２０重量％未満のその化合物の他の立体異性体を含み、例えば、約９０重量％超のその化合物の１つの立体異性体および約１０重量％未満のその化合物の他の立体異性体、または約９５重量％超のその化合物の１つの立体異性体および約５重量％未満のその化合物の他の立体異性体、または約９７重量％超のその化合物の１つの立体異性体および約３重量％未満のその化合物の他の立体異性体を含む。
【００６２】
表された構造およびその構造に与えられた名称の間に食い違いがある場合、表された構造が優先される。さらに、構造または構造の一部の立体化学が、例えば、太線または破線で示されていない場合、構造または構造の一部は、その全ての立体異性体を包含するものとして解釈されるべきである。しかしながら、場合によっては、１個より多くのキラル中心が存在する場合、構造および名称は、それぞれの立体化学の記載を助けるために、単一のエナンチオマーとして表す場合がある。有機合成の当業者にとっては、化合物が、それを調製するために使用された方法から単一のエナンチオマーとして調製されるかどうかは公知であろう。
【００６３】
本明細書において、「薬学的に許容される塩」は、本発明の化合物の、薬学的に許容される、有機酸もしくは無機酸または塩基の塩である。代表的な薬学的に許容される塩は、例えば、酢酸塩、アムソン酸塩（４，４−ジアミノスチルベン−２，２−ジスルホン酸塩）、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、炭酸水素塩、硫酸水素塩、酒石酸水素塩、ホウ酸塩、臭化物、酪酸塩、カルシウム、エデト酸カルシウム、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クエン酸塩、クラブラン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストル酸塩、エシル酸塩、フィウナル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルニサル酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イソチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、臭化メチル、メチル硝酸塩、メチル硫酸塩、ムチン酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミンアンモニウム塩、３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩（１，１−メタン−ビス−２−ヒドロキシ−３−ナフトエ酸塩、エインボン酸塩）、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ピクリン酸塩、ポリガラクツロ酸、プロピオン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、スルホサリチル酸塩（sulfosaliculate）、スラム酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、トリエチオジドおよび吉草酸塩などのアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩（alkali  earth  salts）、アンモニウム塩、水溶性および水不溶性塩を含む。薬学的に許容される塩は、その構造内に１つより多くの荷電した原子を有し得る。この例において、薬学的に許容される塩は、複数の対イオンを有し得る。したがって、薬学的に許容される塩は、１つまたは複数の荷電した原子および／または１つまたは複数の対イオンを有し得る。
【００６４】
加えて、本明細書に記載の構造および置換基の種々の組合せから誘導される、個々の化合物または化合物群は、各化合物または化合物群を個々に説明する場合と同じ程度で本明細書によって開示されることが理解されるべきである。したがって、特定の構造または特定の置換基の選択は、本開示の範囲内である。
【００６５】
本明細書において使用される場合、「誘導体」という用語は、酵素を用いるまたは用いない、化学的または生物学的手段による化合物の修飾を指し、この修飾された化合物は、親化合物に構造的に類似しており、（実際にまたは理論的に）その親化合物から誘導可能である。一般に、親化合物が、「誘導体」を得るための出発物質であってよく、一方、親化合物が「アナログ」を得るための出発物質として使用される必要がなくてよい点で、「誘導体」は、「アナログ」と相違する。誘導体は、親化合物と比較して、より親水性であるか、または変化した反応性を有するなど、親化合物と、異なる化学的、生物学的または物理的性質を有していてよい。誘導体化（すなわち、修飾）は、分子内の１つまたは複数の部分の置換基が関与してよい（例えば、官能基の変化）。例えば、水素は、フッ素または塩素などのハロゲンで置換されてよく、ヒドロキシル基（−ＯＨ）は、カルボン酸部分（−ＣＯＯＨ）で置き換えられてよい。他の代表的な誘導体化は、グリコシル化、アルキル化、アシル化、アセチル化、ユビキチン化、エステル化およびアミド化を含む。
【００６６】
「誘導体」という用語は、親化合物の、全ての溶媒和物、例えば、水和物または付加物（例えば、アルコールとの付加物）、活性代謝物および塩も指す。塩の種類は、化合物内の部分の性質に依存する。例えば、カルボン酸基などの酸性基は、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩を形成することができる（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、および生理学的に忍容できる四級アンモニウムイオンとの塩、ならびにアンモニア、および、例えばトリエチルアミン、エタノールアミンまたはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミンなどの生理学的に忍容できる有機アミンとの酸付加塩）。塩基性基は、例えば、塩酸、硫酸もしくはリン酸などの無機酸と、あるいは酢酸、クエン酸、乳酸、安息香酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、メタンスルホン酸もしくはｐ−トルエンスルホン酸などの有機カルボン酸または有機スルホン酸と、酸付加塩を形成することができる。塩基性基および酸性基、例えば、塩基性の窒素原子に加えてカルボキシル基を同時に含有する化合物は、双性イオンとして存在し得る。塩は、当業者に公知の通常の方法によって、例えば、溶媒または希釈剤中で、化合物を、無機酸もしくは有機酸または塩基と組み合わせることによって、あるいは他の塩からカチオン交換またはアニオン交換によって得ることができる。
【００６７】
「プロドラッグ」という用語は、患者への投与に際して、活性な薬理作用のある薬剤になる前に代謝プロセスによる化学的変換を受けなければならない化合物である、薬物の前駆体を指す。式Ｉに従う化合物の代表的なプロドラッグは、エステル、アセトアミドおよびアミドである。
【００６８】
本明細書において使用される場合、「免疫細胞」は、造血幹細胞（例えば、骨髄中）が起源である免疫系の任意の細胞を意味し、これは、骨髄系前駆細胞（骨髄系由来サプレッサー細胞、単球、マクロファージ、樹状細胞、巨核球および顆粒球などの骨髄系細胞が挙げられる）およびリンパ球系前駆細胞（Ｔ細胞、Ｂ細胞およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞などのリンパ球系細胞が挙げられる）の２つの主要系列を挙げることができる。代表的な免疫系細胞は、ＣＤ４＋  Ｔ細胞、ＣＤ８＋  Ｔ細胞、ＣＤ４−ＣＤ８−ダブルネガティブＴ細胞、γδ  Ｔ細胞、調節性Ｔ細胞、抗原提示細胞（ＡＰＣ）、ナチュラルキラー細胞および樹状細胞を含む。マクロファージ、樹状細胞および疾患細胞（例えば、がん細胞）は、「抗原提示細胞」または「ＡＰＣ」として言及することができ、これは、ＭＨＣ（ＨＬＡ）受容体が、Ｔ細胞表面上でＴＣＲと相互作用するＡＰＣの表面上で抗原性ペプチドと複合体を形成したときに、Ｔ細胞を活性化することができる細胞である。ある特定の実施形態では、ＡＰＣは、がん細胞または腫瘍細胞である。
【００６９】
本明細書において使用される場合、「免疫応答」という用語は、免疫細胞、例えば、リンパ球、抗原提示細胞、貪食細胞、顆粒球、および上記細胞または肝臓によって産生される可溶性巨大分子（抗体、サイトカインおよび補体を含む）の作用を指し、選択的な損傷をもたらして、侵入病原体、病原体に感染した細胞もしくは組織、がん性細胞、または自己免疫もしくは病理学的炎症の場合において正常なヒト細胞もしくは組織を、破壊またはヒト体内から排除する。ある特定の実施形態では、免疫応答は、抗原特異的Ｔ細胞応答を含む。
【００７０】
「免疫応答を誘導するまたは増強する」という語句は、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）の原因となり、またはこれを刺激して、維持または増幅された生理学的機能を有することを指す。例えば、誘導されたまたは増強されたＴ細胞応答は、ＣＤ８＋Ｔ細胞によるサイトカイン産生の増加、増殖の増加、または介入前の応答に対する抗原応答性の増加を含む。ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤と接触後の増強された免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）の応答のレベルは、ＭＮＫ特異的阻害剤と接触していない免疫細胞と比較して、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％またはそれ超である。免疫応答を誘導するか否かまたは増強するか否かを決定するサイトカインのレベル（例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−１０、ＩＦＮγ）を検出するためのアッセイは、Dossusらによって記載されたマルチプレックスアッセイである（J.  Immunol.  Methods  ３５０巻、１２５頁、２００９年）。免疫応答を誘導するか否かまたは増強するか否かを決定するＴ細胞の増殖を検出するためのアッセイは、Liuらによって記載されたアッセイである（Clin.  Cancer  Res.  ２１巻、１６３９頁、２０１５年）。抗原応答性の増加を決定するためのアッセイは、Tumehらによって記載されたアッセイである（Nature  ５１５巻、５６８頁、２０１４年）。
【００７１】
「免疫応答を延長する」という語句は、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）の原因となり、またはこれを刺激して、維持または増幅された生物学的機能を発揮し続けることを指す。ある特定の実施形態では、延長された免疫応答は、処置を停止した後、一定の抗原特異的な細胞傷害性Ｔ細胞の、経時的な腫瘍の成長もしくはサイズの低減、または検出可能な疾患の低減である。例えば、腫瘍のサイズは、処置の開始時の腫瘍サイズと比較して、同じサイズを維持または収縮し得る。一部の実施形態では、延長された免疫応答は、処置の期間と少なくとも同じ期間、または処置の期間の少なくとも１．５倍、少なくとも２．０倍、少なくとも２．５倍、少なくとも３．０倍、少なくとも３．５倍、少なくとも４．０倍、少なくとも４．５倍、少なくとも５．０倍またはそれ超、持続し得る。
【００７２】
免疫細胞または免疫応答の「ダウンモジュレーションが低減する」という語句は、抑制成分またはシグナルから免疫細胞または免疫系を開放するまたは放出することを指す。例えば、ダウンモジュレーションの低減は、ＣＤ８＋Ｔ細胞によるサイトカイン（例えば、ＩＦＮγ）産生の増加、腫瘍中の免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）の数の増加、腫瘍中のＴ細胞クローンの数の増加、ＴＥ細胞とＴｒｅｇ細胞の比率の増加またはこれらの任意の組合せを含んでいてよい。ある特定の実施形態では、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）または免疫応答のダウンモジュレーションの低減のレベルは、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％またはそれ超の、検出可能な疾患（例えば、腫瘍のボリューム、感染病原体）の低減である。他の実施形態では、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）または免疫応答のダウンモジュレーションの低減のレベルは、無憎悪生存期間の増加であり、この要因は、処置されるがんに応じて変化し、この要因は、当業者には公知である。
【００７３】
「主要組織適合性複合体分子」（ＭＨＣ分子）は、互換可能に使用され、ヒトのカウンターパートである「ヒト白血球抗原」（ＨＬＡ分子）を指すこと、細胞表面にペプチド抗原を送達する糖タンパク質を指すことも理解される。ＭＨＣまたはＨＬＡクラスＩ分子は、膜貫通α鎖（３つのαドメインを有する）および非共有結合的に結合するβ２ミクログロブリンからなるヘテロ二量体である。ＭＨＣまたはＨＬＡクラスＩＩ分子は、２つの膜貫通糖タンパク質αおよびβで構成され、この両方は、膜を貫通する。それぞれの鎖は、２つのドメインを有する。ＭＨＣまたはＨＬＡクラスＩ分子は、サイトゾルに起源をもつペプチドを細胞表面に送達し、そこで、ペプチド：ＭＨＣ（または、ヒトにおいてはペプチド：ＨＬＡ）複合体は、ＣＤ８＋Ｔ細胞によって認識される。ＭＨＣクラスＩ分子と複合体を形成するＴ細胞ペプチド抗原（すなわち、Ｔ細胞によって認識されるエピトープを含有する）は、ＭＨＣクラスＩエピトープとして言及される。ＭＨＣクラスＩエピトープは、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）によって認識され、一般に、約８アミノ酸〜約１１アミノ酸の範囲の長さを有するペプチド抗原において見いだされる。ＭＨＣクラスＩＩ分子は、小胞系に起源をもつペプチドを細胞表面に送達し、そこで、これらはＣＤ４＋Ｔ細胞受容体によって認識される。ＭＨＣクラスＩＩ分子によって提示されたＴ細胞ペプチド抗原は、ＭＨＣクラスＩＩエピトープとして言及される。ＭＨＣクラスＩＩエピトープは、一般に、約１３〜約１７アミノ酸の範囲の長さを有するペプチド抗原において見いだされる。ＭＨＣ分子は、ヒト（ＨＬＡ）、マウス、ラットまたは他の哺乳動物を含む、種々の動物種からのものであってよい。
【００７４】
「Ｔ細胞受容体」（ＴＣＲ）は、Ｔ細胞（または、Ｔリンパ球）の表面において見いだされる分子を指し、これは、ＣＤ３と関連して、一般に、ＭＨＣ（ＨＬＡ）分子に結合する抗原を認識するための原因となる。ＴＣＲは、ほとんどのＴ細胞において、高度に可変性のα鎖およびβ鎖（それぞれ、ＴＣＲαおよびＴＣＲβとしても公知）のジスルフィド連結したヘテロ二量体を有する。Ｔ細胞のサブセットにおいて、ＴＣＲは、可変性のγおよびδ鎖（それぞれ、ＴＣＲγおよびＴＣＲδとしても公知）のヘテロ二量体で作られている。ＴＣＲのそれぞれの鎖は、免疫グロブリンのスーパーファミリーのメンバーであり、１つのＮ末端免疫グロブリンの可変性ドメイン、１つの免疫グロブリン定常ドメイン、膜貫通領域およびＣ末端における短い細胞質側末端を有する（Janewayら、Immunobiology:  The  Immune  System  in  Health  and  Disease、第３版、Current  Biology  Publications、４：３３頁、１９９７年を参照）。
【００７５】
本明細書において使用される場合、「抗原特異的Ｔ細胞応答」という用語は、ＭＨＣ（ＨＬＡ）クラスＩまたはクラスＩＩと複合体を形成するペプチド抗原と特異的に結合するＴＣＲを有するＴ細胞による応答を指す。ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞は、抗原性ペプチドを制限するＨＬＡクラスＩを認識し、同種抗原を発現する標的の細胞を直接死滅させることが可能である。ＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞は、抗原性ペプチドを制限するＨＬＡクラスＩＩを認識し、炎症およびエフェクター免疫応答を媒介する種々のサイトカインを産生する。ＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞は、ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞およびＢ細胞の活性化も促進する。調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）は、免疫応答を阻害するＣＤ４＋Ｔ細胞であり、ＴＧＦβ、ＩＬ−１０、ＩＬ−４、ＩＬ−１ＲＡおよびＩＬ−３５などの阻害性サイトカインを産生する。抗原特異的刺激に対するＴ細胞による応答の非限定的な例は、活性化、増殖およびサイトカイン産生（例えば、ＩＬ−２、ＩＦＮγ産生）を含む。
【００７６】
本明細書において使用される場合、「免疫抑制成分」という用語は、免疫応答の制御または抑制を支援する阻害性シグナルを提供する、１つまたは複数の細胞、タンパク質、分子、化合物または複合体を指す。例えば、免疫抑制成分は、免疫刺激を部分的もしくは完全に阻止する；免疫活性化を低下させる、防止するもしくは遅らせる；または、免疫抑制を増加させる、活性化するもしくは上方調節する、これらの分子を含む。「免疫応答を制御するまたは抑制する」とは、本明細書において使用される場合、抗原提示、Ｔ細胞の活性化、Ｔ細胞の増殖、Ｔ細胞のエフェクター機能、サイトカインの分泌または産生、および標的細胞の溶解の任意の１つまたは複数を低減させることを意味する。このようなモジュレーション、制御または抑制は、過剰増殖疾患または障害（例えば、がん、慢性感染症）の持続を促進または許容することができる。
【００７７】
代表的な免疫抑制成分は、免疫チェックポイントリガンド（ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＨＶＥＭ、アデノシン、ＧＡＬ９など）、免疫チェックポイント受容体（ＰＤ−１、ＣＴＬＡ−４、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、Ａ２ａＲなど）、代謝酵素（アルギナーゼ、インドールアミン、２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）など）、免疫抑制サイトカイン（ＩＬ−１０、ＩＬ−４、ＩＬ−１ＲＡ、ＩＬ−３５など）、Ｔｒｅｇ細胞またはこれらの任意の組合せを含む。ある特定の実施形態では、免疫抑制成分は、免疫チェックポイント分子であり、これは、抗原特異的Ｔ細胞応答をモジュレートする（例えば、阻害する）ことなどによるリガンド−受容体相互作用を通じて免疫抑制シグナルを引き起こし得る。例えば、Ｔ細胞は、その表面において、免疫チェックポイント受容体（例えば、ＰＤ−１、ＬＡＧ３）を発現してよく、抗原提示細胞は、その表面において、免疫チェックポイント受容体リガンド（例えば、ＰＤ−Ｌ１、ＭＨＣ／ＨＬＡ分子）を発現してよい。さらなる実施形態では、免疫抑制成分は、リンパ球、特にＴ細胞の生存および機能に関して必須のアミノ酸の局所的な欠乏を通して免疫応答を阻害する代謝酵素である。よりさらなる実施形態では、免疫抑制成分は、免疫抑制サイトカイン（例えば、ＩＬ−１０、ＩＬ−４、ＩＬ−１ＲＡ、ＩＬ−３５）などのシグナル伝達分子であってよい。よりさらなる実施形態では、免疫抑制成分は、免疫応答を阻害する能力、および免疫抑制サイトカイン（例えば、ＩＬ−１０、ＩＬ−４、ＩＬ−１３、ＩＬ−１ＲＡ）を産生または放出する能力を有するＣＤ４＋Ｔｒｅｇ細胞を含む。
【００７８】
さらにまた、免疫抑制成分（例えば、ＩＬ−１０）は、主要組織適合複合体（ＭＨＣ）またはヒト白血病抗原（ＨＬＡ）分子の発現またはレベルの低減を引き起こしてよく、これは、順番に、抗原提示を低減させ、それによってＴ細胞活性化および対応する免疫応答を低減、妨害または検出可能に阻止することができる。ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、免疫抑制成分の量の低減または活性の阻害を引き起こしてよく、これは、順番に、ＭＨＣ／ＨＬＡ分子（例えば、クラスＩＩ）の発現の増加をもたらすことができる。ＭＮＫ特異的阻害剤によって媒介される免疫抑制成分の低減または阻害によるこのようなＭＨＣ／ＨＬＡのレベルの増加は、免疫抑制成分の低減または阻害なしと比較して、抗原提示を改善することができ、または免疫応答を誘導もしくは増強することができる。
【００７９】
「免疫耐性」という用語は、細胞または生物体（例えば、がん細胞、ウイルス感染細胞、細菌細胞、真菌、寄生虫）のどれかによる、免疫系による認識または排除を、抵抗する、最小化する、逃れるまたは回避するプロセスを指す。免疫耐性は、（ａ）免疫抑制もしくは寛容の増加、（ｂ）免疫抑制もしくは寛容の、活性化を改変する、増加する、増強する、促進する、強めるもしくは上方調節するための細胞もしくは生物体の能力、または（ｃ）細胞もしくは生物体によって発現した抗原の免疫系の無知もしくは遮断を促進するための細胞もしくは生物体の能力、あるいはこれらの任意の組合せが原因であってよい。ある特定の実施形態では、免疫耐性は、がん、腫瘍もしくは慢性感染症などの疾患または障害と関連する。
【００８０】
本明細書において使用される場合、「免疫耐性と関連する疾患」は、ある特定の免疫チェックポイント経路を利用して、免疫系を抑制する疾患または障害を意味し、したがって、疾患または障害は、特に、例えば、腫瘍または感染性疾患抗原に対して特異的なＴ細胞に対する免疫耐性の表現型とともに存在する。
【００８１】
本明細書において使用される場合、「ＭＮＫ」という用語は、「マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）と相互作用するセリン／スレオニンキナーゼ」または「ＭＫＮＫ」としても公知であり、成長因子であるホルボールエステルとＲａｓおよびＭｏｓなどのオンコジーンに応答して、ならびにストレスシグナル伝達分子およびサイトカインによって誘発される、ｐ４２  ＭＡＰキナーゼＥＲＫ１およびＥＲＫ２、ならびにｐ３８−ＭＡＰキナーゼによってリン酸化されるキナーゼを指す。ＭＮＫは、インターロイキン−１受容体が関連するキナーゼ２（ＩＲＡＫ２）およびＩＲＡＫ４によって影響を受ける追加のＭＡＰキナーゼによってリン酸化されるキナーゼも指し、これは、トール様受容体（例えば、ＴＬＲ７）を通じた生得的な免疫応答のシグナル伝達に関与するタンパク質キナーゼである（例えば、Wanら、J.  Biol.  Chem.  ２８４巻、１０３６７頁、２００９年を参照）。ＭＮＫタンパク質のリン酸化は、真核生物翻訳開始因子４Ｅ（ｅＩＦ４Ｅ）に対するそれらのキナーゼ活性を刺激し、これは、順番に、キャップ依存性タンパク質の翻訳開始、およびｈｎＲＮＰＡ１およびＰＳＦ（ＰＴＢ（ポリピリミジントラクト結合タンパク質）が関連するスプライシング因子）を含む、他のエフェクター配列の会合を調節する。例えば、ある特定のｍＲＮＡ（例えば、サイトカイン）の調節性のＡＵリッチ領域（ＡＲＥ）の３’−ＵＴＲと結合するタンパク質は、ＭＮＫによってリン酸化される。したがって、タンパク質のＭＮＫリン酸化は、真核生物のｍＲＮＡの５’−または３’−ＵＴＲと結合するこれらのタンパク質の能力を変化させることができる。特に、ＭＮＫが媒介する低減したｈｎＲＮＰＡ１のリン酸化は、サイトカイン−ＡＲＥへのその結合を低下させる（例えば、Buxade'ら、Immunity  ２３巻、１７７頁、２００５年；JoshiおよびPlatanias、Biomol.  Concepts  ３巻、１２７頁、２０１２年を参照）。ＭＮＫは、２つの異なる遺伝子のＭＮＫ１およびＭＮＫ２によってコードされ、これは、両方とも選択的スプライシングに供される。ＭＮＫ１ａおよびＭＮＫ２ａは、全長転写物を表し、一方、ＭＮＫ１ｂおよびＭＮＫ２ｂは、ＭＡＰＫ結合ドメインを欠いたスプライスバリアントである。したがって、ＭＮＫは、ＭＮＫ１もしくはそのバリアント（ＭＮＫ１ａまたはＭＮＫ１ｂなど）、ＭＮＫ２もしくはそのバリアント（ＭＮＫ２ａまたはＭＮＫ２ｂなど）、またはこれらの組合せを指してよい。特定の実施形態では、ＭＮＫは、ヒトＭＮＫを指す。
【００８２】
「モジュレートする」、「モジュレーション」などの用語は、免疫チェックポイント分子または関連するサイトカイン（例えば、ＰＤ−１、ＰＤＬ−１、ＬＡＧ３、ＩＬ−１０など）などの免疫抑制成分の機能、活性またはレベルを増加または低下させる化合物の能力を指す。種々の形態における「モジュレーション」は、免疫チェックポイント分子または免疫抑制サイトカインなどの免疫抑制成分と関連する活性の、阻害、アンタゴニズム、部分的アンタゴニズム、活性化、アゴニズムまたは部分的アゴニズムを包含することを意図する。例えば、活性の低下または阻害を含むモジュレーションは、免疫チェックポイント分子または免疫抑制サイトカインなどの免疫抑制成分の発現の低減によって間接的に引き起こされてよい。免疫チェックポイント分子または免疫抑制サイトカインなどの免疫抑制成分を、直接的または間接的にモジュレートする化合物の能力は、本技術分野において公知の生化学的および細胞系アッセイにおいて実証することができる（例えば、実施例１〜３を参照）。
【００８３】
「阻害する」または「阻害剤」という用語は、（１）対照、内在性または基準の標的もしくは経路、または（２）標的もしくは経路の欠如に対する標的またはシグナル伝達経路の発現、量または活性における、直接的または間接的な、変化、干渉、低減、下方調節、阻止、抑制、抑止または分解を指し、ここで、変化、干渉、低減、下方調節、阻止、抑制、抑止または分解は、統計学的、生物学的または臨床的に有意である。
【００８４】
例えば、「ＭＮＫ阻害剤」は、ＭＮＫ活性（例えば、キナーゼ活性または翻訳効果）を、阻止、不活性化、低減もしくは最小化してよく、または、ＭＮＫの分解の促進によって、活性は、無処置のＭＮＫと比較して、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、もしくはそれ超で低減する。ある特定の実施形態では、ＭＮＫ阻害剤は、ｅＩＦ４Ｅ、ｈｎＲＮＰＡ１、ＰＳＦまたはこれらの組合せをリン酸化するＭＮＫの能力を阻止、不活性化、低減もしくは最小化する。さらなる実施形態では、ＭＮＫ阻害剤は、腫瘍細胞またはＡＰＣ（例えば、ＰＤ−Ｌ１）に対するリガンド、Ｔ細胞（例えば、ＰＤ−１、ＬＡＧ３）の受容体、またはこのような細胞（例えば、ＩＬ−１０、ＩＬ−４、ＩＬ−１ＲＡ、ＩＬ−３５）によって産生される免疫抑制サイトカインなどの免疫抑制成分の発現を、低減または最小化する。阻害剤の非限定的な例は、小分子、アンチセンス分子、リボザイム、ＲＮＡｉ分子などを含む。
【００８５】
本明細書において使用される場合、「ＭＮＫ特異的阻害剤」は、（ａ）ＭＮＫ酵素（キナーゼ）活性を阻害する、（ｂ）宿主細胞キノーム（kinome）（すなわち、ＭＮＫ酵素以外）の残部に対して少なくとも約２５倍劣る活性を有する、および（ｃ）Ｔ細胞によるＩＬ−２産生を著しく低減または阻害しない、化合物である。本明細書において使用される場合、「宿主細胞キノーム」は、表Ａに列挙した４１２個のタンパク質および脂質キナーゼを指し（ＭＮＫ酵素を含まない）、これは、目的の特定の生物体または細胞（例えば、ヒト）からのものであってよい。特定のＭＮＫ阻害剤がＭＮＫ特異的阻害剤であるか否かを決定するためのＦＲＥＴ系アッセイは、Rodemsらの方法を使用して、宿主細胞キノームにおいて行われる（Assay.  Drug  Dev.  Technol.  １巻、９頁、２００２年）。
【００８６】
ある特定の実施形態では、表Ａの宿主細胞キノームは、ヒト細胞からのものである。さらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、小分子であり、表Ａに列挙した生物体または細胞のセリン／スレオニンキノームに対して少なくとも５０倍劣る活性を有し、Ｔ細胞によるＩＬ−２産生を著しく低減または阻害しない。特定の実施形態では、表Ａのセリン／スレオニンキノームは、ヒト細胞からのものである。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、表Ａのセリン／スレオニンキノーム酵素以外の、表Ａのキノーム酵素に対して少なくとも約２５倍、少なくとも約３０倍、少なくとも約３５倍、少なくとも約４０倍、少なくとも約４５倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約５５倍、少なくとも約６０倍、少なくとも約６５倍、少なくとも約７０倍、少なくとも約７５倍、少なくとも約８０倍、少なくとも約８５倍、少なくとも約９０倍、少なくとも約９５倍、少なくとも約１００倍劣る、少なくとも約２００倍劣る、少なくとも約２５０倍劣る、少なくとも約３００倍劣る、少なくとも約４００倍劣る、少なくとも約５００倍劣る、少なくとも約７５０倍劣る、少なくとも約１０００倍劣る、またはさらに劣る活性を有し、Ｔ細胞によるＩＬ−２産生を著しく低減または阻害しない。
【００８７】
【表Ａ−１】
0006681919.tif 000004
【表Ａ−２】
0006681919.tif 000005
【表Ａ−３】
0006681919.tif 000006
【表Ａ−４】
0006681919.tif 000007
【表Ａ−５】
0006681919.tif 000008
【表Ａ−６】
0006681919.tif 000009
【００８８】
任意の上述の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ｅＩＦ４Ｅ、ｈｎＲＮＰＡ１、ＰＳＦまたはこれらの任意の組合せをリン酸化するＭＮＫ１ａ、ＭＮＫ１ｂ、ＭＮＫ２ａ、ＭＮＫ２ｂまたはこれらの任意の組合せの能力をさらに阻止、不活性化、低減もしくは最小化することができる。任意の上述の実施形態におけるＭＮＫ特異的阻害剤は、任意選択で、（ｉ）Ｔ細胞の生存率、（ｉｉ）Ｔ細胞の増殖、（ｉｉｉ）ＡＰＣにおけるＭＨＣもしくはＨＬＡ分子の発現、または（ｉｖ）Ｔ細胞によるＩＬ−２、ＣＤ２５、ＩＦＮγもしくはこれらの任意の組合せの産生を、著しく低減または阻害しなくてよい。さらに、任意選択で、任意の上述の実施形態におけるＭＮＫ特異的阻害剤は、Ｔ細胞、ＡＰＣまたは両方における１つまたは複数の免疫抑制成分（例えば、免疫チェックポイント分子、免疫抑制サイトカイン）の発現を、著しく低減または阻害することもできる。Ｔ細胞の生存率を測定するためのアッセイは、Mosmannによって記載されたアッセイである（J.  Immunol.  Meth.  ６５巻、５５頁、１９８３年）。
【００８９】
ＭＮＫ特異的阻害剤に関して、「Ｔ細胞によるＩＬ−２産生を著しく低減または阻害しない」とは、Ｔ細胞によるＩＬ−２産生の低減または阻害が、ＭＮＫ特異的阻害剤に曝露または接触していない同じＴ細胞と比較して、約２５％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、約２％未満、約１％未満、約０．５％未満、約０．２５％未満、約０．１％未満、またはそれ未満であることを意味する。
【００９０】
また、ＭＮＫ特異的阻害剤に関して、「Ｔ細胞の生存率を著しく低減または阻害しない」、「Ｔ細胞の増殖を著しく低減または阻害しない」、「Ｔ細胞、ＡＰＣまたは両方におけるＭＨＣまたはＨＬＡ分子の発現を著しく低減または阻害しない」および「Ｔ細胞によるＩＬ−２、ＣＤ２５、ＩＦＮγまたはこれらの任意の組合せの産生を著しく低減または阻害しない」とは、Ｔ細胞の生存率；Ｔ細胞の増殖；Ｔ細胞、ＡＰＣもしくは両方におけるＭＨＣもしくはＨＬＡ分子の発現；またはＴ細胞によるＩＬ−２、ＣＤ２５、ＩＦＮγもしくはこれらの任意の組合せの産生；の低減または阻害が、ＭＮＫ特異的阻害剤に曝露または接触していない同じ対応する細胞と比較して、それぞれ、約２５％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、約２％未満、約１％未満、約０．５％未満、約０．２５％未満、約０．１％未満、またはそれ未満であることを指す。
【００９１】
また、ＭＮＫ特異的阻害剤に関して、「１つまたは複数の免疫抑制成分の発現を著しく低減または阻害する」とは、Ｔ細胞、ＡＰＣまたは両方における１つまたは複数の免疫抑制成分の発現の低減または阻害が、ＭＮＫ特異的阻害剤に曝露または接触していない同じＴ細胞またはＡＰＣと比較して、少なくとも約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％または約７５％であることを意味する。ある特定の実施形態では、ＡＰＣは、がん細胞または腫瘍細胞である。
【００９２】
阻害剤の存在下または非存在下でキナーゼ活性を検出するための他のアッセイは本技術分野において周知であり、これは、Karamanらによって教示されたアッセイ（Nat.  Biotechnol.  ２６巻、１２７頁、２００７年）などの、特定のＭＮＫ阻害剤が、ＭＮＫ特異的阻害剤であることを示すためのＦＲＥＴ系宿主細胞キノームアッセイのバックアップとして使用することができる。サイトカインのレベル（例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−１０、ＩＦＮγ）を検出するためのアッセイは、Ｒ＆Ｄ  ＳｙｓｔｅｍｓによるＤｕｏＳｅｔ（登録商標）ＥＬＩＳＡアッセイ（製造者の説明書を使用する）など、本技術分野において公知である。Ｔ細胞の生存率、Ｔ細胞の増殖、ＭＨＣまたはＨＬＡ分子の発現、および免疫チェックポイント分子であるＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ３などのような免疫抑制成分の発現を検出するためのアッセイは、実施例１〜３に記載のものである。
【００９３】
免疫調節性活性の変化
生得的な免疫は、侵入病原体に対する防御の第１の選択であり、マクロファージ、単球、好酸球（eiosinophil）、好塩基球およびナチュラルキラー細胞を含む、常在性の免疫エフェクター細胞からなる（MedzhitovおよびJaneway、N.  Engl.  J.  Med.  ３４３巻、３３８頁、２０００年；Vivierら、Science  ３３１巻、４４頁、２０１１年）。しかしながら、適応免疫は、高等真核生物における免疫応答に特異性を与えるものである。抗原は、主要組織適合複合体（ＭＨＣ）クラスＩ（ＭＨＣ−Ｉ）またはクラスＩＩ（ＭＨＣ−ＩＩ）分子を通じてＴ細胞に提示される（Bracialeら、Immunol.  Rev.  ９８巻、９５頁、１９８７年）。ＭＨＣクラスＩＩ遺伝子は、ＣＤ４＋Ｔ細胞への結合およびペプチドの提示に関与する、細胞表面の糖タンパク質をコードする。これらの遺伝子は、多型のＨＬＡ−ＤＲ、−ＤＱおよび−ＤＰ分子をコードし、これらは、α−およびβ−鎖ヘテロ二量体として、細胞表面で発現する。ＭＨＣクラスＩＩ分子は、細胞性および体液性の免疫応答の開始の中心である。しかしながら、抗原が排除されると、残った免疫系のチェックを確実にするために、調節性Ｔ細胞（ＣＤ２５＋ＣＤ４＋Ｆｏｘｐ３＋であるＴｒｅｇ）は、免疫学的な自己寛容および免疫恒常性の維持において積極的に関与するために誘導される。免疫抑制分子（例えば、ＰＤ−１、ＣＴＬＡ４、ＬＡＧ３、ＩＬ−１０、ＴＧＦ−β）の発現の増加において特有であってよい腫瘍微小環境は、その環境において細胞が、免疫監視を回避することを可能にしてよい。さらに、最近の証拠は、複数の腫瘍タイプにおけるＭＨＣクラスＩおよびクラスＩＩの発現の抑制が、腫瘍の免疫回避における役割も果たし得ることを示している（Garridoら、Cancer  Immunol.  Immunother.  ５９巻、１３頁、２０１０年）。
【００９４】
ある特定のＭＮＫ阻害剤である、本開示の化合物は、ＭＮＫ１およびＭＮＫ２の強力な選択的阻害剤である（例えば、化合物１０７を含む、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａまたはＶＩＩｂの化合物）。ＭＮＫ１およびＭＮＫ２は、真核生物翻訳開始因子４Ｅ（ｅＩＦ４Ｅ）および他のｍＲＮＡ結合タンパク質をリン酸化することによる、いくつかの発癌性および免疫シグナル伝達経路からのシグナルをインテグレートし、これは、腫瘍の成長および生存について重要な選択ｍＲＮＡの安定性および翻訳を調節する。
【００９５】
本開示は、ＭＮＫ特異的阻害剤の使用によって、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ３またはＩＬ−１０のレベルまたは活性を低減させる方法、エフェクターＴ細胞（ＴＥ）とＴ調節性（Ｔｒｅｇ）細胞の比率を変化させる方法、ＭＨＣまたはＨＬＡクラスＩＩ分子の発現を誘導する方法またはこれらの任意の組合せを提供し、これらは、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＬＡＧ３を含む免疫チェックポイントタンパク質ならびに関連する免疫抑制サイトカイン（ＩＬ−１０、ＩＬ−４、ＩＬ−１ＲＡ、ＩＬ−３５など）などの種々の免疫抑制成分の発現を予想外に低減または下方調節する。加えて、本開示のＭＮＫ特異的阻害剤は、ＭＨＣまたはＨＬＡクラスＩＩ分子の発現を誘導することができる。さらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、細胞でＰＤ−１、ＬＡＧ３または両方のレベルを低減させ、任意選択で、ｅＩＦ４Ｅ、ｈｎＲＮＰＡ１、ＰＳＦまたはこれらの任意の組合せをリン酸化するＭＮＫキナーゼの能力を阻止または低減させ、さらに任意選択で、免疫抑制サイトカイン（例えば、ＩＬ−１０、ＩＬ−４、ＩＬ−１ＲＡ、ＩＬ−３５）の産生を阻止または低減させる。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、細胞でＰＤ−Ｌ１のレベルを低減させ、ｅＩＦ４Ｅ、ｈｎＲＮＰＡ１、ＰＳＦまたはこれらの任意の組合せをリン酸化するＭＮＫキナーゼの能力を阻止または低減させる。
【００９６】
本開示のＭＮＫ特異的阻害剤は、他のキナーゼ阻害剤（その一部は、ＭＮＫ活性を非特異的に阻害してもよく、本明細書において「別のキナーゼ阻害剤」または「非特異的ＭＮＫ阻害剤」と称する）と組み合わせて使用することができる。ある特定の実施形態では、別のキナーゼ阻害剤または非特異的ＭＮＫ阻害剤は、ＭＮＫキナーゼ活性を、直接的または間接的に、低減または阻害する薬剤であり、そのため、その基質であるｅＩＦ４Ｅは、ＭＮＫによって効率的または実質的にリン酸化されない。特定の実施形態では、別のキナーゼ阻害剤または非特異的ＭＮＫ阻害剤は、ＭＮＫを（例えば、ユビキチン依存性分解を介して）分解する薬剤である。
【００９７】
ＭＮＫ特異的阻害剤は、免疫モジュレーションを必要とする被験体（例えば、がんまたは感染症を有する被験体）に投与することができる。免疫モジュレーションの代表的な方法は、本明細書に記載の、免疫細胞の活性を増加させること；免疫細胞のダウンモジュレーションを低減させること；免疫応答を誘導するもしくは増強すること；免疫応答を延長すること；抗原特異的Ｔ細胞応答を刺激すること；免疫抑制シグナル伝達経路を阻害すること；内在性の免疫（例えば、抗がんなどの、既存もしくは新規のもの）を促進すること；ワクチンが誘導する免疫応答を増強すること；または免疫耐性と関連する疾患（例えば、がん、感染症）を阻害することを含む。
【００９８】
代表的なＭＮＫ特異的阻害剤は、ＭＮＫ１およびＭＮＫ２キナーゼ活性の両方を阻害することができる。ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＭＮＫ２キナーゼ活性よりもＭＮＫ１キナーゼ活性を選択的に阻害するか、またはＭＮＫ１キナーゼ活性よりもＭＮＫ２キナーゼ活性を選択的に阻害する。他の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＭＮＫ１ｂおよびＭＮＫ２ｂのキナーゼ活性よりも、全長アイソフォームであるＭＮＫ１ａおよびＭＮＫ２ａのキナーゼ活性を選択的に阻害する。さらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＭＮＫ１キナーゼ活性またはＭＮＫ２キナーゼ活性のいずれかを選択的に阻害する。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、全長アイソフォームであるＭＮＫ１ａ、ＭＮＫ１ｂ、ＭＮＫ２ａもしくはＭＮＫ２ｂのいずれか１つのキナーゼ活性を選択的に阻害するか、または全てのＭＮＫアイソフォームのキナーゼ活性を阻害する。
【００９９】
さらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、化合物、アンチセンス分子、リボザイム、ＲＮＡｉ分子、または低分子量の有機分子であってよい。
【０１００】
ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、以下の構造（Ｉ）：
【化１】
0006681919.tif 000010
［式中、
Ｗ１およびＷ２は、独立して、Ｏ、ＳもしくはＮ−ＯＲ’（Ｒ’は低級アルキルである）であり；
Ｙは、−Ｎ（Ｒ５）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ＝Ｏ、−Ｓ（Ｏ）２−もしくは−ＣＨＲ９−であり；
Ｒ１は、水素、低級アルキル、シクロアルキルもしくはヘテロシクリルであり、ここで、任意の低級アルキル、シクロアルキルもしくはヘテロシクリルは、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換される；
ｎは、１、２もしくは３であり；
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラアルキレン、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキレン、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、ヘテロシクリルもしくはヘテロシクリルアルキレンであり、ここで、任意のアルキル、アリール、アラアルキレン、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキレン、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、ヘテロシクリルもしくはヘテロシクリルアルキレンは、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換される；
または、Ｒ２およびＲ３は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、シクロアルキルもしくはヘテロシクリルを形成し、ここで、任意のシクロアルキルもしくはヘテロシクリルは、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換される；
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、チオール、ヒドロキシアルキレン、シアノ、アルキル、アルコキシ、アシル、チオアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールもしくはヘテロシクリルであり；
Ｒ５は、水素、シアノもしくは低級アルキルであり；
または、Ｒ５およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換される、縮合ヘテロシクリルを形成し；
Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、アミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルアミニル、ヘテロシクリルアミニル、ヘテロアリールもしくはヘテロシクリルであり、ここで、任意のアミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、アミノ、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルアミニル、ヘテロシクリルアミニル、ヘテロアリールもしくはヘテロシクリルは、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換される；
または、Ｒ７およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換される、縮合ヘテロシクリルもしくはヘテロアリールを形成し；
Ｊは、−ＳＨ、−ＳＲ９、−Ｓ（Ｏ）Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ９、−ＮＨ２、−ＮＲ９Ｒ９、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ９Ｒ９、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲン、アセチル、アルキル、低級アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルキル、チオアルキル、シアノアルキレン、アルキルアミニル、ＮＨ２−Ｃ（Ｏ）−アルキレン、ＮＲ９Ｒ９−Ｃ（Ｏ）−アルキレン、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−低級アルキル、−Ｃ（Ｏ）−低級アルキル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、シクロアルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルアミニル、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−シクロアルキル、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−アリール、−ＣＨＲ９−アリール、−Ｃ（Ｏ）−アリール、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−ヘテロシクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクリルアミニルもしくはヘテロシクリルであり；または、同じ炭素原子もしくはヘテロ原子に結合する任意の２個のＪ基は、一緒になってオキソを形成してよく；
Ｒ９は、水素、低級アルキルもしくは−ＯＨである］
を有する化合物またはこの立体異性体、互変異性体もしくは薬学的に許容される塩である。
【０１０１】
構造（Ｉ）の一実施形態では、本開示は、以下の構造（Ｉａ）を有する化合物、およびこの立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩を提供する。
【化２】
0006681919.tif 000011
【０１０２】
式Ｉａの化合物について、置換基Ｒ１は、水素または低級アルキルであり、添字ｎは、１、２または３である。式Ｉａにおける置換基Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、ヘテロシクリルまたはヘテロシクリルアルキルであり、任意のこのようなアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、ヘテロシクリルまたはヘテロシクリルアルキルは、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換されてよい。
【０１０３】
式Ｉａにおける置換基Ｒ２およびＲ３は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、シクロアルキルまたはヘテロシクリルを形成することができ、任意のこのようなシクロアルキルまたはヘテロシクリルは、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換される。式Ｉａにおいて、Ｒ４ａは、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、チオアルキル、アルケニルまたはシクロアルキルであり、置換基Ｒ５は、水素または低級アルキルである。
【０１０４】
あるいは、置換基群Ｒ５およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換される、縮合ヘテロシクリルを形成する。
【０１０５】
一実施形態では、置換基Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、独立して、出現する毎に、水素、ハロゲン、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルケニル、アミノ、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、アルキルアミニルまたはシクロアルキルアミニルであり、任意のこのようなアルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルケニル、アミノ、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、アルキルアミニルまたはシクロアルキルアミニルは、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換される。式Ｉａに従う一部の化合物について、Ｒ７およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、無置換または１、２もしくは３個のＪ基により置換された縮合ヘテロシクリルを形成する。
【０１０６】
式Ｉａにおける変数Ｊは、−ＳＨ、−ＳＲ９、−Ｓ（Ｏ）Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ９、−ＮＨ２、−ＮＲ９Ｒ９、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ９Ｒ９、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲン、アセチル、アルキル、低級アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルキル、チオアルキル、シアノアルキレン、アルキルアミニル、ＮＨ２−Ｃ（Ｏ）−アルキレン、ＮＲ９Ｒ９−Ｃ（Ｏ）−アルキレン、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−低級アルキル、−Ｃ（Ｏ）−低級アルキル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、シクロアルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルアミニル、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−シクロアルキル、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−アリール、−ＣＨＲ９−アリール、−Ｃ（Ｏ）−アリール、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−ヘテロシクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクリルアミニルまたはヘテロシクリルである。式Ｉａによる本発明化合物の一部について、同じ炭素原子またはヘテロ原子に結合する任意の２個のＪ基は、一緒になってオキソ基を形成してよい。
【０１０７】
一部の実施形態では、式Ｉａにおける変数Ｊは、ハロゲン、アミノ、アルキル、ハロアルキル、アルキルアミニル、シクロアルキルまたはヘテロシクリルである。あるいは、ある特定の式Ｉａの化合物について、同じ炭素原子またはヘテロ原子に結合する場合、任意の２個のＪ基は、一緒になってオキソ基を形成してよい。
【０１０８】
さらなるＭＮＫ特異的阻害剤は、以下に示す式ＩＩａによる化合物であり、ここで、変数Ｙは、−Ｎ（Ｒ５）−であり、添字「ｎ」は、１である。
【化３】
0006681919.tif 000012
【０１０９】
一実施形態によれば、式Ｉにおける変数Ｙは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、スルホキシド、スルホン、−ＣＨＲ９−または−ＣＨ２−であり、添字「ｎ」は、１であり、本発明の化合物は、式ＩＩｂに一致する。式ＩＩｂにおいて、「Ｙ」が−ＣＨＲ９−である場合、置換基Ｒ９は、水素、低級アルキルまたはヒドロキシである。
【化４】
0006681919.tif 000013
【０１１０】
より多くのＭＮＫ特異的阻害剤の実施形態では、式Ｉにおける変数「Ｙ」は、−Ｎ（Ｒ５）−であり、添字「ｎ」は、２または３であり、化合物は、それぞれ、式ＩＩＩａまたは式Ｉｖａに一致する。
【化５】
0006681919.tif 000014
【０１１１】
あるいは、ある特定の実施形態では、式Ｉにおける変数「Ｙ」は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、スルホキシド、スルホン、−ＣＨＲ９−または−ＣＨ２−であり、「ｎ」は、２または３であり、化合物は、それぞれ、式ＩＩＩｂおよび式ＩＶｂに一致する。式ＩＩＩｂまたは式ＩＶｂにおいて、「Ｙ」が−ＣＨＲ９−である場合、置換基Ｒ９は、水素、低級アルキルまたはヒドロキシのいずれかである。
【化６】
0006681919.tif 000015
【０１１２】
ＭＮＫ特異的阻害剤である式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａおよびＩＶｂによる化合物について、変数Ｗ１およびＷ２は両方オキソである。式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａおよびＩＶｂの化合物についてのある特定の実施形態では、Ｗ１はオキソであり、Ｗ２はチオン基である。一実施形態によれば、式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａおよびＩＶｂの化合物は、Ｗ１にオキソ、Ｗ２に＝Ｎ−ＯＲ’基を含む。また、Ｗ１にチオン基、Ｗ２にオキソ基を有する、式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａおよびＩＶｂの化合物は、本ＭＮＫ特異的阻害剤の範囲内に包含される。
【０１１３】
式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａおよびＩＶｂの化合物について、置換基Ｒ２およびＲ３のそれぞれは、Ｒ２およびＲ３が結合する炭素原子がキラル炭素ではない場合、同じであってよい。ある特定の実施形態では、しかしながら、置換基Ｒ２およびＲ３は、異なる。したがって、Ｒ２およびＲ３が結合する炭素原子は、キラルであり、その結果、化合物は立体異性体を有する。
【０１１４】
ある特定のＭＮＫ特異的阻害剤の実施形態では、式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａおよびＩＶｂにおけるそれぞれのＲ２およびＲ３は、水素である。あるいは、式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａおよびＩＶｂにおけるＲ２またはＲ３基の一方は、水素であり、他の基は、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換されるアルキルである。式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａおよびＩＶｂのある特定の化合物について、Ｒ２およびＲ３は、両方とも、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換されるアルキル基である。
【０１１５】
式ＩＩａまたは式ＩＩｂに従う一部の化合物について、Ｒ２は、アルキルであり、Ｒ３は、１、２または３個のＪ基で置換されたアルキルである。代表的なこのカテゴリーの式ＩＩａおよび式ＩＩｂの化合物は、以下の通りである：Ｒ２がアルキル、Ｒ３がハロアルキルである置換基を有する化合物；Ｒ２がアルキル、Ｒ３が１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換されるシクロアルキルである置換基を有する化合物；Ｒ２がアルキル、Ｒ３が、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換されるシクロペンチルである置換基を有する化合物；Ｒ２がアルキル、Ｒ３が、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換されるアリールである置換基を有する化合物；Ｒ２がアルキル、Ｒ３が、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換されるフェニルである置換基を有する化合物；Ｒ２がアルキル、Ｒ３が、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換されるシクロアルキルアルキレンである置換基を有する化合物；Ｒ２がアルキル、Ｒ３が、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換されるアラルキレンである置換基を有する化合物；Ｒ２がアルキル、Ｒ３が１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換されるベンジルである置換基を有する化合物；Ｒ２がアルキル、Ｒ３が、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換されるヘテロシクリルである置換基を有する化合物；Ｒ２がアルキル、Ｒ３が、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換されるヘテロアリールである置換基を有する化合物；Ｒ２がアルキル、Ｒ３が、チオフェニル、チアゾリルもしくはピリジニルである置換基を有する化合物；Ｒ２がアルキル、Ｒ３が、無置換または１、２もしくは３個のＪ基により置換されたヘテロシクリルアルキレンである置換基を有する化合物；またはＲ２がアルキル、Ｒ３が、１、２もしくは３個のＪ基により任意選択で置換されるヘテロアリールアルキレンである置換基を有する化合物。
【０１１６】
一部の実施形態では、式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａおよびＩＶｂの化合物について、それぞれのＲ２およびＲ３は、独立して、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、ヘテロシクリルまたはヘテロシクリルアルキレンであり、任意のこのようなアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、ヘテロシクリルまたはヘテロシクリルアルキレンは、任意選択で、ハロゲン、アミノ、アルキルアミニルおよびアルキルからなる群から独立して選択される、１、２または３個のＪ基で置換されてよい。
【０１１７】
ある特定の式ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａおよびＩＶｂの化合物について、Ｒ２およびＲ３は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、シクロアルキルまたはヘテロシクリル環を形成する。
【０１１８】
Ｙが、−Ｎ（Ｒ５）−であり、添字「ｎ」が、１であり、Ｒ２およびＲ３が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、シクロアルキルまたはヘテロシクリル環「Ａ」を形成する式Ｉの化合物も考慮される。そのような化合物は、式Ｖａに一致し、シクロアルキルまたはヘテロシクリル環「Ａ」は、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換されてよい。
【化７】
0006681919.tif 000016
【０１１９】
あるいは、一部の実施形態では、式ＩにおけるＹは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、スルホキシド、スルホン、−ＣＨＲ９−または−ＣＨ２−であり、「ｎ」は１であり、Ｒ２およびＲ３は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、シクロアルキルまたはヘテロシクリル環Ａを形成する。そのような化合物は、式Ｖｂに一致し、シクロアルキルまたはヘテロシクリル環「Ａ」は、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換されてよい。式Ｖｂにおいて、「Ｙ」が−ＣＨＲ９−である場合、置換基Ｒ９は、水素、低級アルキルまたはヒドロキシのいずれかである。
【化８】
0006681919.tif 000017
【０１２０】
式Ｖａおよび式Ｖｂの化合物について、Ｗ１およびＷ２は、両方オキソであり、環Ａは、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換されるシクロアルキルである。環Ａが、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換される、縮合シクロアルキルである；環Ａが、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換されるシクロアルキルである；環Ａが、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換される、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシルであり、例えば、Ｊ基は、ハロゲン、アミノ、アルキルアミニルおよびアルキルからなる群から選択される、式Ｖａおよび式Ｖｂの化合物も考慮される。
【０１２１】
一部の実施形態について、式Ｖａまたは式Ｖｂの環Ａは、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換されるヘテロシクリルである。代表的なこのようなヘテロシクリル基は、ピロリジニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、チエタニルまたはアゼチジニルである。一実施形態では、上記で例示したヘテロシクリルのそれぞれは、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換されてよい。ある特定の式Ｖａまたは式Ｖｂの化合物について、環Ａは、シクロアルキルの同じ炭素原子に結合した少なくとも２個のＪ基で置換されたシクロアルキルであり、同じ炭素原子に結合した２個のＪ基は、一緒になってオキソ基を形成する。別の実施形態では、式Ｖａまたは式Ｖｂの環Ａは、同じヘテロ原子に結合した少なくとも２個のＪ基で置換されたヘテロシクリルであり、このような２個のＪ基は、一緒になってオキソ基を形成する。一部の式Ｖａまたは式Ｖｂの化合物について、シクロアルキルまたはヘテロシクリル環Ａは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、Ｎ−メチルアミノ、メチル、ジフルオロエチレンおよびメチレンニトリルからなる群から選択されるＪ基により置換される。
【０１２２】
本発明は、式ＶＩに従う化合物、またはその立体異性体、互変異性体もしくは薬学的に許容される塩も提供する。式ＶＩは、Ｙが−Ｎ（Ｒ５）−であり、置換基群Ｒ５およびＲ８が、それらが結合する原子と一緒になって、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換されてよい、複素環式環（heterocycle  ring）Ｂを形成する、式Ｉの下位の属である。
【化９】
0006681919.tif 000018
【０１２３】
変数「Ｙ」が−Ｎ（Ｒ５）−であり、置換基群Ｒ７およびＲ８が、それらが結合する原子と一緒になって縮合環Ｃを形成する式Ｉの化合物も、本ＭＮＫ特異的阻害剤の範囲内に包含される。このような化合物、または立体異性体、互変異性体もしくは薬学的に許容される塩は、式ＶＩＩａに一致する。式ＶＩＩａの化合物について、環Ｃは、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換されてよい。
【化１０】
0006681919.tif 000019
【０１２４】
一実施形態によれば、式Ｉにおける変数「Ｙ」は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、スルホキシド、スルホン、−ＣＨＲ９−または−ＣＨ２−であり、置換基群Ｒ７およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって縮合環Ｃを形成する。このような化合物、およびそれらの立体異性体、互変異性体または薬学的に許容される塩は、式ＶＩＩｂに一致する。「Ｙ」が−ＣＨＲ９−である式ＶＩＩｂの化合物について、置換基Ｒ９は、水素、低級アルキルまたはヒドロキシであってよい。
【化１１】
0006681919.tif 000020
【０１２５】
式ＶＩＩｂの化合物について、縮合環Ｃは、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換されてよい。ＭＮＫ特異的阻害剤の一実施形態では、式ＶＩ、式ＶＩＩａおよび式ＶＩＩｂの化合物について、Ｗ１およびＷ２は、両方オキソである。
【０１２６】
本開示のＭＮＫ特異的阻害剤は、さらに、Ｒ１が水素、またはメチル、エチル、プロピル、ブチル、イソプロピル、ｓｅｃ−ブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルから選択される低級アルキル基である、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａおよびＶＩＩｂの化合物、例えば、Ｒ１がメチルである化合物に対する。
【０１２７】
ある特定の式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａおよびＶＩＩｂの化合物について、Ｒ４ａは、水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、チオアルキル、アルケニルおよびシクロアルキルからなる群から選択される一方、置換基Ｒ４ｂは、水素またはハロゲンである。式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａおよびＶＩＩｂにおけるＲ５は、水素または低級アルキルである一方、置換基Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、水素である。
【０１２８】
本開示のある特定の実施形態では、式ＶＩにおけるＲ６およびＲ７は、両方とも水素である一方、ある特定の式ＶＩＩａおよび式ＶＩＩｂの化合物については、Ｒ６は、水素である。
【０１２９】
本開示のＭＮＫ特異的阻害剤は、さらに、置換基群Ｒ６およびＲ８が、両方とも水素であり、Ｒ７が、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、アミノ、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルアミニル、ヘテロシクリルアミニル、ヘテロアリール、およびヘテロシクリルからなる群から選択される、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、ＶａおよびＶｂの化合物に対する。これらの化合物に関して、任意のアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、アミノ、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルアミニル、ヘテロシクリルアミニル、ヘテロアリールまたはヘテロシクリルは、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換される。ある特定の実施形態では、Ｒ７は、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、アミノ、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、ヘテロシクリルアミニル、ヘテロアリール、ヘテロシクリルおよびシクロアルキルアミニルからなる群から選択される。このような化合物について、任意のアルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、アミノ、アルキルアミニル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルカルボニルアミニル、ヘテロシクリルアミニル、ヘテロアリール、ヘテロシクリルまたはシクロアルキルアミニルは、１、２または３個のＪ基により任意選択で置換されてよい。したがって、ある特定の実施形態は、置換基群Ｒ６およびＲ８が両方とも水素であり、Ｒ７がアミノである；置換基群Ｒ６およびＲ８が両方とも水素であり、Ｒ７がアルキルアミニルである；置換基群Ｒ６およびＲ８が両方とも水素であり、Ｒ７が−ＮＨＣＨ３である；置換基群Ｒ６およびＲ８が両方とも水素であり、Ｒ７がシクロアルキル、例えばシクロプロピルである；置換基群Ｒ６およびＲ８が両方とも水素であり、Ｒ７が、１〜３個のＪ基、例えばハロゲンで置換されたシクロアルキルアミニルである、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、ＶａおよびＶｂの化合物を提供する。
【０１３０】
一実施形態では、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、ＶａおよびＶｂに従う化合物について、置換基群Ｒ６およびＲ８は、両方とも水素であり、Ｒ７は、−ＮＨＣＨ（ＣＦ３）シクロプロピル、シクロアルキルカルボニルアミニル、−ＮＨＣ（Ｏ）シクロプロピル、シクロアルキルアルケニレンおよび−ＣＨ＝ＣＨシクロプロピルからなる群から選択される。
【０１３１】
式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａおよびＶＩＩｂに従う任意の化合物について、Ｊは、−ＳＨ、−ＳＲ９、−Ｓ（Ｏ）Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ９、−ＮＨ２、−ＮＲ９Ｒ９、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ９Ｒ９、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲン、アセチル、アルキル、低級アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルキル、チオアルキル、シアノアルキレン、アルキルアミニル、ＮＨ２−Ｃ（Ｏ）−アルキレン、ＮＲ９Ｒ９−Ｃ（Ｏ）−アルキレン、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−低級アルキル、−Ｃ（Ｏ）−低級アルキル、アルキルカルボニルアミニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、シクロアルキルアルケニレン、シクロアルキルカルボニルアミニル、シクロアルキルアミニル、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−シクロアルキル、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−アリール、−ＣＨＲ９−アリール、−Ｃ（Ｏ）−アリール、−ＣＨＲ９−Ｃ（Ｏ）−ヘテロシクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクリルアミニルまたはヘテロシクリルであり、Ｒ９は、水素、低級アルキルまたは−ＯＨである。さらに、２個のＪ基が同じ炭素原子またはヘテロ原子に結合する場合、一緒になってオキソを形成してよい。
【０１３２】
式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａおよびＶＩＩｂによるある特定の化合物について、Ｊは、ハロゲン、ヒドロキシ、アルキル、アルケニル、アルキニルまたはシアノアルキレンである。説明として、アルキルまたはアルキレン鎖は、Ｃ１〜Ｃ１０炭素原子、Ｃ１〜Ｃ８炭素原子、Ｃ１〜Ｃ６炭素原子、Ｃ１〜Ｃ４炭素原子、Ｃ１〜Ｃ３炭素原子、ならびにエチルおよびメチル基を有するものである。あるいは、Ｊがアルケニルまたはアルキニルである場合、その炭素鎖は、少なくとも１個の二重結合または三重結合をそれぞれ有し、およびＣ２〜Ｃ１０炭素原子、Ｃ２〜Ｃ８炭素原子、Ｃ２〜Ｃ６炭素原子、Ｃ２〜Ｃ４炭素原子またはＣ２〜Ｃ３炭素原子を有する。
【０１３３】
式（Ｉ）ならびに式Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａおよびＶＩＩｂのＭＮＫ特異的阻害剤は、異なる原子質量または質量数を有する原子によって置き換えられた１つまたは複数の原子を有することにより、同位体標識されていてよい。構造（Ｉ）の化合物に組み込まれ得る同位体の例は、それぞれ、２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１３Ｎ、１５Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、３６Ｃｌ、１２３Ｉ、および１２５Ｉなどの、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素、塩素およびヨウ素の同位体を含む。これらの放射標識された化合物は、例えば、作用の部位もしくはモードまたは薬理学的に重要な作用部位に対する結合親和性を特徴付けることによって、化合物の有効性を決定または測定するのに有用であり得る。ある特定の同位体標識された式（Ｉ）の化合物、例えば、放射性同位元素を組み込んだものは、薬物または基質の組織分布の研究に有用である。放射性同位元素であるトリチウム、すなわち、３Ｈ、および炭素−１４、すなわち、１４Ｃは、それらの組み込みの容易さおよび迅速な検出手段の観点から、この目的のために特に有用である。
【０１３４】
重水素、すなわち２Ｈなどの重い同位元素での置換は、より大きな代謝安定性からもたらされるある特定の治療上の利点、例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏでの半減期の増加、または必要投与量の低減を提供してよく、したがって、一部の環境において好ましくあり得る。
【０１３５】
１１Ｃ、１８Ｆ、１５Ｏおよび１３Ｎなどの陽電子放出同位体での置換は、基質の受容体占有を調べるための陽電子放出組織分布（ＰＥＴ）研究において有用であり得る。同位体標識された式（Ｉ）ならびに式Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａおよびＶＩＩｂの化合物は、通常、当業者に公知の従来技術によって、または２０１５年６月２４日に出願された「MNK  Inhibitors  and  Methods  Related  Thereto」という名称の米国特許出願第１４／７４８，９９０号に示されたような調製および実施例に記載のものに類似するプロセスによって調製することができ、この化合物および合成方法は、それらの全体が本明細書に組み込まれ、以前に使用された非標識試薬の代わりに適切に同位体標識された試薬が使用される。
【０１３６】
本開示の実施形態は、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａおよびＶＩＩｂのＭＮＫ特異的阻害剤のｉｎ  ｖｉｖｏでの代謝産物を包含することも意味する。このような産物は、主に酵素的プロセスに起因する、例えば、投与された化合物の酸化、還元、加水分解、アミド化、エステル化などから生じ得る。したがって、本開示は、本開示のＭＮＫ特異的阻害剤を、その代謝産物が生じるのに十分な期間、哺乳動物に投与することを含むプロセスによって産生する化合物を含む。このような産物は、典型的には、ラット、マウス、モルモット、サル、またはヒトなどの動物に、検出可能な用量で、放射標識された本明細書に記載のＭＮＫ特異的阻害剤を投与し、代謝が起こるのに十分な時間を与え、尿、血液または他の生体試料から変換産物を単離することよって同定される。
【０１３７】
一部の実施形態では、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａおよびＶＩＩｂによる化合物のいずれか１つのＭＮＫ特異的阻害剤は、薬学的に許容される塩の形態であり、これは、酸付加塩および塩基付加塩の両方を含む。
【０１３８】
この目的で、「薬学的に許容される酸付加塩」は、遊離塩基の生物学的な有効性および性質を保持するそれらの塩を指し、これは、生物学的にまたはその他の点で望ましくないものではなく、限定されないが、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、および、酢酸、２，２−ジクロロ酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、４−アセトアミド安息香酸、ショウノウ酸、カンファー−１０−スルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、炭酸、桂皮酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデシル硫酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチシン酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、２−オキソ−グルタル酸、グリセロリン酸、グリコール酸、馬尿酸、イソ酪酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、ニコチン酸、オレイン酸、オロチン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモン酸、プロピオン酸、ピログルタミン酸、ピルビン酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、酒石酸、チオシアン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、ウンデシレン酸などの有機酸を用いて形成される。
【０１３９】
同様に「薬学的に許容される塩基付加塩」は、遊離酸の生物学的な有効性および性質を保持するそれらの塩を指し、これは、生物学的にまたはその他の点で望ましくないものではない。これらの塩は、遊離酸への無機塩基または有機塩基の添加によって調製される。無機塩基から誘導される塩は、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウムの塩などを含む。好ましい無機塩は、アンモニウム、ナトリウム、カリウム、カルシウムおよびマグネシウムの塩である。有機塩基から誘導される塩は、アンモニア、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、ジエタノールアミン、エタノールアミン、デアノール、２−ジメチルアミノエタノール、２−ジエチルアミノエタノール、ジシクロヘキシルアミン、リシン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、ベネタミン、ベンザチン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、ポリアミン樹脂などの、第一級、第二級および第三級アミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環状アミンおよび塩基性イオン交換樹脂の塩を含む。特に好ましい有機塩基は、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、コリンおよびカフェインである。
【０１４０】
結晶化により、しばしば、ＭＮＫ特異的阻害剤である本開示の化合物の溶媒和物が生成する。本明細書において使用される場合、「溶媒和物」という用語は、本発明の化合物の１つまたは複数の分子と１つまたは複数の溶媒の分子とを含む集合体を指す。溶媒は水であってよく、この場合において、溶媒和物は水和物であってよい。あるいは、溶媒は有機溶媒であってよい。したがって、ＭＮＫ特異的阻害剤である本開示の化合物は、一水和物、二水和物、半水和物、セスキ水和物、三水和物、四水和物などを含む水和物、および対応する溶媒和形態として存在していてよい。ＭＮＫ特異的阻害剤である本開示の化合物は、完全溶媒和物であってよいが、他の場合において、化合物は、単に外来性の水を保持していてよく、または水と一部の外来性の溶媒の混合物であってよい。
【０１４１】
「立体異性体」は、同じ結合によって結合した同じ原子からなるが、異なる三次元構造を有する化合物を指し、これは、相互変転換可能ではない。本開示は、種々の立体異性体およびその混合物を考慮し、「エナンチオマー」を含み、これは、分子が互いに重ねることができない（non-superimposeable）鏡像体である分子の２つの立体異性体を指す。
【０１４２】
本開示のＭＮＫ特異的阻害剤またはこれらの薬学的に許容される塩は、１つまたは複数の不斉中心を含有してよく、したがって、（Ｒ）−もしくは（Ｓ）−として、またはアミノ酸について（Ｄ）−もしくは（Ｌ）−として、絶対立体化学で定義され得る、エナンチオマー、ジアステレオマー、および他の立体異性体を挙げることができる。本開示は、このような可能な全ての異性体、ならびにこれらのラセミ体および光学的に純粋な形態を含むことを意味する。光学的に活性な（＋）および（−）、（Ｒ）−および（Ｓ）−、または（Ｄ）−および（Ｌ）−異性体は、キラルシントンまたはキラル試薬を使用して調製してよく、または従来技術、例えば、クロマトグラフィーおよび分別再結晶を使用して分割してよい。個々のエナンチオマーの調製／単離のための従来技術は、適切な光学的に純粋な前駆体からのキラル合成、または、例えば、キラル高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を使用するラセミ体（またはラセミ体の塩もしくは誘導体）の分割を含む。本明細書に記載の化合物が、オレフィン性の二重結合または他の幾何学的非対称中心を含有する場合、特に定めがない限り、化合物が、ＥおよびＺ幾何異性体の両方を含むことを意図する。同様に、全ての互変異性体を含むことも意図する。
【０１４３】
「互変異性体」という用語は、分子の１つの原子から、同じ分子の別の原子にプロトンがシフトすることを指す。例えば、Ｗ１がオキソであり、Ｒ１がＨである場合、本開示は、以下に示す式Ｉの化合物の互変異性体を提供する。
【化１２】
0006681919.tif 000021
【０１４４】
同様の互変異性体が、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａおよびＶＩＩｂの化合物について存在する。化合物は、従来の合成方法を使用して、より具体的には、一般的方法および２０１５年６月２４日に出願された「MNK  Inhibitors  and  Methods  Related  Thereto」という名称の米国特許出願第１４／７４８，９９０号に見られる実施例の具体的な合成プロトコールを使用して、合成され、この化合物および合成方法は、それらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０１４５】
代表的なＭＮＫ特異的阻害剤である本開示の化合物は、表１および米国特許出願公開第２０１５／０３７６１８１号に示され、これらの化合物は、それらの全体が参照によって本明細書に組み込まれる。同様に、米国仮特許出願第６２／２４７，９５３号（名称「Isoindoline,  Azaisoindoline,  Dihydroindenone  and  Dihydroazaindenone  Inhibitors  of  MNKl  and  MNK2」）および米国仮特許出願第６２／２４７，９６６号（名称「Pyrrolo-,  Pyrazolo-,  Imidazo-Pyrimidine  and  Pyridine  Compounds  that  Inhibit  MNK1  and  MNK2」）の化合物およびその製造方法は、それらの全体が参照によって本明細書に組み込まれる。このような化合物は、説明の目的のために提供されるが、限定されない。
【表１−１】
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【表１−２】
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【表１−３】
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【表１−４】
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【表１−５】
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【表１−６】
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【表１−７】
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【表１−８】
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【表１−９】
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【表１−１０】
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【表１−１１】
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【表１−１２】
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【表１−１３】
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【表１−１４】
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【表１−１５】
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【表１−１６】
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【表１−１７】
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【０１４６】
本開示のＭＮＫ特異的阻害剤と組み合わせて使用してよい他のＭＮＫ阻害剤の例、および本明細書に記載の方法のいずれかによる例は、セルコスポラミド；ＳＥＬ２０１；ＣＧＰ５７３８０（Knaufら、Mol.  Cell.  Biol.  ２１巻、５５００〜５５１１頁、２００１年を参照）；ＣＧＰ５２０８８（Tschoppら、Mol.  Cell.  Biol.  Res.  Commun.  ３巻、２０５〜２１１頁、２０００年を参照）；ＹＹＣ−３７（Schmid、「Targeting  cap-dependent  translation  for  cancer  therapy:  Identification  of  novel  Mnk  kinase  inhibitors  with  enzymatic  assays」www.fhnw.ch/lifesciences/master/master-thesis/MS_MT_Schmid_Raffaela_2014.pdf、２０１４年）；レチンアミド、レチノイン酸代謝遮断剤（レチンアミドＲＡＭＢＡとしても公知）（例えば、ＶＮＬＧ−１５２）（ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１０／０３６４０４号；Ramalingamら、Oncotarget  ５巻、５３０〜５４３頁、２０１４年；Mbatiaら、J.  Med.  Chem.  ５８巻、１９００〜１９１４頁、２０１５年参照）；米国特許第８，９０１，１３８号に開示されるようなスルホキシイミン置換キナゾリン誘導体；米国特許第８，６９７，７１３、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１３／１７４７４３号またはＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１４／０４４６９１号に開示されるようなピロールピリミジン化合物；米国特許第８，４８６，９５３号、米国出願公開第２０１０／０１４３３４１号、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１３／１７４７４４号またはＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１４／１１８２２９号に開示されるようなチエノピリミジン化合物；ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１４／０８８５１９号に開示されるようなピペラジン系化合物（例えば、ＥＴＣ０３６またはＥＴＣ０３７）；ＰＣＴ出願公開第２０１３／１４７７１１号に開示されるような二環式複素環誘導体（例えば、化合物２０、３５９または４１６）；米国特許第８，０７１，６０７号に開示されるようなピラゾロピリミジン化合物；ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１４／１３５４８０号に開示されるような置換チアゾロピリミジン化合物；米国特許出願公開第２０１４／０２９６２３１号、米国特許出願公開第２０１４／０２８８０６９号、米国特許出願公開第２０１４／０２２８３７０号、米国特許出願公開第２０１４／０１９４４３０号、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１３／１４９９０９号、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１３／１４４１８９号、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１３／０８７５８１号、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１４／１２８０９３号、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１４／０７６１６２号またはＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１４／１１８１３５に開示されるような置換イミダゾピリダジン化合物；ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１４／１１８２２６号に開示されるような置換ピラゾロピリミジニルアミノ−インダゾール化合物；ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１４／０４８８９４号またはＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１４／０４８８６９号に開示されるような置換インダゾール−ピロロピリミジン化合物；ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１３／１７４７３５号に開示されるような置換ベンゾチエノピリミジン化合物；ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１４２０６９２２号に開示されるようなスルホキシイミン置換キナゾリン化合物；あるいは、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１２／１７５５９１号に開示されるようなヘテロシクリルアミノイ��ダゾピリダジン化合物を含む（これらの文献のそれぞれの化合物は、それらの全体が参照によって本明細書に組み込まれる）。
【０１４７】
ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａおよびＶＩＩｂ、または表１または表２Ａのいずれか１つの化合物であり、これは、哺乳動物（例えば、ヒト）への医薬組成物の投与において、目的の特定の疾患または状態（例えば、がん、慢性感染症）を処置するために有効な量の医薬組成物として製剤化される。特定の実施形態では、医薬組成物は、本明細書に記載のＭＮＫ特異的阻害剤および薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含む。
【０１４８】
これに関して、「薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤」は、ヒトまたは飼育動物において使用するために許容されるような、米国食品医薬品局によって承認されている任意の補助剤、担体、賦形剤、流動促進剤、甘味剤、希釈剤、保存剤、色素／着色剤、香味増強剤、界面活性剤、湿潤剤、分散剤、懸濁化剤、安定化剤、等張剤、溶媒または乳化剤を含む。
【０１４９】
さらに、「哺乳動物」は、ヒト、サルおよび類人猿などの霊長類、ならびに実験動物およびペットを含む飼育動物（例えば、例えば、ネコ、イヌ、ブタ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、ウサギ）および野生生物などの非飼育動物などの非霊長類を含む。
【０１５０】
本開示の医薬組成物は、本明細書に記載のＭＮＫ特異的阻害剤を適切な薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と組合せるかまたは製剤化することにより調製することができ、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、軟膏剤、溶液剤、坐剤、注射剤、吸入剤、ゲル剤、微粒子剤またはエアゾール剤などの固体状、半固体状、液体状またはガス状形態の調製物に製剤化してよい。このような医薬組成物を投与する代表的な経路は、経口、局所、経皮、吸入、非経口、舌下、頬側、直腸、膣および鼻腔内を含む。本明細書において使用される非経口という用語は、皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射、胸骨内注射または点滴の手法を含む。本開示の医薬組成物は、患者への投与の際に、その内部に含有される有効成分を生物が利用可能にすることを可能にするように製剤化される。被験体または患者に投与される組成物は、１つまたは複数の投与量単位の形態をとり、ここで、例えば、錠剤は単一投与量単位であってよく、エアゾール形態における本明細書に記載のＭＮＫ特異的阻害剤の容器は、複数回の投与量単位を保持してよい。このような剤形を調製する実際の方法は、公知であるか、または当業者には明らかである；例えば、Remington:  The  Science  and  Practice  of  Pharmacy、第２０版（Philadelphia  College  of  Pharmacy  and  Science、２０００年）を参照。投与される組成物は、いかなる場合でも、本明細書の教示に従って目的の疾患または状態の処置において免疫応答のモジュレーションを助けるために、治療有効量の本開示のＭＮＫ特異的阻害剤またはこれらの薬学的に許容される塩を含有する。
【０１５１】
本明細書に記載のＭＮＫ特異的阻害剤の医薬組成物は、固体または液体の形態であってよい。一態様では、担体は、粒子状であるので、組成物は、例えば錠剤または粉末の形態である。担体は、組成物とともに液体であってよく、例えば、経口シロップ、注射液またはエアゾールであってよく、これは、例えば、吸入投与に有用である。経口投与を目的とする場合、本開示のＭＮＫ特異的阻害剤の医薬組成物は、好ましくは、固体状また液体状の形態のいずれかであり、半固体状、半液体状、懸濁状およびゲル状の形態は、固体または液体のいずれかのような、本明細書で考慮される形態に含まれる。
【０１５２】
経口投与用の固体組成物としては、本明細書に記載のＭＮＫ特異的阻害剤の医薬組成物は、散剤、顆粒剤、圧縮錠剤、丸剤、カプセル剤、チューインガム、オブラート剤などの形態に製剤化されてよい。このような固体組成物は、典型的には、１つまたは複数の不活性希釈剤または食用担体を含有する。加えて、１つまたは複数の以下のものが存在していてよい：カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、結晶セルロース、トラガカントガムまたはゼラチンなどの結合剤；デンプン、ラクトースまたはデキストリンなどの賦形剤；アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、プリモゲル、トウモロコシデンプンなどの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムまたはステロテックスなどの滑沢剤；コロイド状二酸化ケイ素などの流動促進剤；スクロースまたはサッカリンなどの甘味剤；ペパーミント、サリチル酸メチルまたはオレンジ香料などの香味剤；および着色剤。
【０１５３】
医薬組成物がカプセル形態、例えば、ゼラチンカプセルである場合、上記の種類の物質に加えて、ポリエチレングリコールまたは油などの液体担体を含有していてよい。
【０１５４】
医薬組成物は、液体剤の形態、例えば、エリキシル剤、シロップ剤、溶液剤、乳剤または懸濁剤であってよい。液体剤は、２つの例として、経口投与用または注射による送達用であってよい。経口投与を目的とする場合、好ましい組成物は、ＭＮＫ特異的阻害剤に加えて、１つまたは複数の甘味剤、保存剤、色素／着色剤および香味増強剤を含有する。注射による投与を目的とする組成物において、１つまたは複数の界面活性剤、保存剤、湿潤剤、分散剤、懸濁化剤、緩衝剤、安定化剤および等張剤を含んでいてよい。
【０１５５】
ＭＮＫ特異的阻害剤の液体医薬組成物は、それらが溶液、懸濁液または他の同様の形態であろうとなかろうと、１つまたは複数の以下の補助剤を含有していてよい：注射用水、食塩水、好ましくは生理的食塩水、リンゲル液、等張食塩水、溶媒または懸濁媒体としての役目を果たす合成モノまたはジグリセリドなどの固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の溶媒などの無菌希釈剤；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなどの抗菌剤；アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化剤；エチレンジアミン四酢酸などのキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩などの緩衝剤；および塩化ナトリウムまたはブドウ糖などの浸透圧の調整剤。非経口調製物は、アンプル、使い捨てシリンジまたはガラスもしくはプラスチック製の複数回投与バイアルに封入することができる。生理的食塩水が好ましい補助剤である。注射可能な医薬組成物は、好ましくは無菌である。
【０１５６】
非経口または経口投与のいずれかを目的とするＭＮＫ特異的阻害剤の液体医薬組成物は、適切な投与量を得るような本開示のＭＮＫ特異的阻害剤の量を含有しなければならない。
【０１５７】
ＭＮＫ特異的阻害剤の医薬組成物は、局所投与を目的としていてよく、この場合において、担体は、溶液、エマルジョン、軟膏またはゲル基剤を適切に含んでいてよい。基剤は、例えば、１つまたは複数の以下のものを含んでいてよい：ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール、ミツロウ、鉱油、水およびアルコールなどの希釈剤、ならびに乳化剤および安定化剤。局所投与用の医薬組成物中に、増粘剤が存在していてよい。経皮投与を目的とする場合、本開示のＭＮＫ特異的阻害剤の組成物を、経皮パッチまたはイオン導入装置に含めてよい。
【０１５８】
ＭＮＫ特異的阻害剤の医薬組成物は、例えば、坐剤の形態で、直腸投与を目的としていてよく、これは、直腸で融けて、薬物を放出する。直腸投与用の組成物は、適切な非刺激性の賦形剤として、油性基剤を含有していてよい。このような基剤は、例えば、ラノリン、カカオバターまたはポリエチレングリコールを含む。
【０１５９】
ＭＮＫ特異的阻害剤の医薬組成物は、固体または液体の投与量単位の物理的形態を改変する種々の物質を含んでいてよい。例えば、組成物は、有効成分の周囲にコーティングシェルを形成する物質を含んでいてよい。コーティングシェルを形成する物質は、典型的には不活性で、例えば、糖、シェラックおよび他の腸溶性コーティング剤から選択されてよい。あるいは、有効成分は、ゼラチンカプセルに封入されてよい。
【０１６０】
固体または液体形態の本開示の医薬組成物は、本明細書に記載のＭＮＫ特異的阻害剤と結合して、それによって化合物の送達を支援する薬剤を含んでいてよい。この能力で作用し得る適切な薬剤は、モノクローナル抗体もしくはポリクローナル抗体、タンパク質またはリポソームを含む。
【０１６１】
ＭＮＫ特異的阻害剤の医薬組成物は、エアゾールとして投与され得る投与量単位から構成されてよい。エアゾールという用語は、コロイド的性質のものから加圧包装からなるシステムまでの様々な範囲のシステムを表すために使用される。送達は、液化ガスもしくは圧縮ガスによって、または有効成分を分注する適切なポンプシステムによってであってよい。ＭＮＫ特異的阻害剤のエアゾールは、有効成分を送達するために、単相、二相または三相系で送達されてよい。エアゾールの送達は、必要な容器、活性剤、バルブ、サブコンテナなどを含み、これらは一緒にキットを形成してよい。当業者であれば、過度の実験をすることなく、好ましいエアゾール製剤および送達モードを決定し得る。
【０１６２】
本開示の医薬組成物は、製薬分野において周知の方法論によって調製してよい。例えば、注射による投与を目的とする医薬組成物は、溶液を形成するために本明細書に記載のＭＮＫ特異的阻害剤を無菌溶媒と混合することによって調製することができる。界面活性剤は、均一溶液または懸濁液の形成を促進するために添加されてよい。界面活性剤は、水性の送達システム中での化合物の溶解または均質懸濁を促進するために、本開示の化合物と非共有結合的に相互作用する化合物である。
【０１６３】
本明細書において使用される場合「組合せ」は、ＭＮＫ特異的阻害剤および免疫抑制成分の阻害剤を含む組合せを指し、これらのそれぞれは、連続で（逐次的に）、併せてまたは同時に、本明細書に記載のように、投与されてよい。例えば、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａまたはＶＩＩｂのいずれか１つのＭＮＫ特異的阻害剤は、（ａ）ピジリズマブ、ニボルマブもしくはペムブロリズマブなどのＰＤ−１に対して特異的な抗体；（ｂ）ＭＤＸ−１１０５、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０ＡもしくはＭＳＢ００１０７１８ＣなどのＰＤ−Ｌ１に対して特異的な抗体；（ｃ）トレメリムマブもしくはイピリムマブなどのＣＴＬＡ４に対して特異的な抗体；（ｄ）ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、トラメチニブ、コビメチニブ、スニチニブ、エルロチニブ、パクリタキセルもしくはドセタキセルなどの化学療法剤；（ｅ）ウレルマブなどの抗ＣＤ１３７（４−１ＢＢ）抗体；（ｆ）ＭＤＩ６４６９（ＯＸ−４０アゴニスト）などの抗ＣＤ１３４（ＯＸ−４０）抗体；（ｇ）レナリドミドもしくはポマリドミド；または（ｈ）これらの任意の組合せと組み合わせることができる。
【０１６４】
ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤と免疫抑制成分の阻害剤の組合せは、さらに化学療法剤を含み、これらのそれぞれは、連続で（逐次的に）、併せてまたは同時に、本明細書に記載のように、投与されてよい。例えば、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａまたはＶＩＩｂのいずれか１つのＭＮＫ特異的阻害剤は、（ａ）ピジリズマブ、ニボルマブもしくはペムブロリズマブなどのＰＤ−１に対して特異的な抗体；（ｂ）ＭＤＸ−１１０５、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０ＡもしくはＭＳＢ００１０７１８ＣなどのＰＤ−Ｌ１に対して特異的な抗体；（ｃ）トレメリムマブもしくはイピリムマブなどのＣＴＬＡ４に対して特異的な抗体；（ｄ）ＭＤＩ６４６９（ＯＸ−４０アゴニスト）などの抗ＣＤ１３４（ＯＸ−４０）抗体；（ｅ）レナリドミドもしくはポマリドミド；または（ｆ）ウレルマブなどの抗ＣＤ１３７（４−１ＢＢ）抗体；およびベムラフェニブ、ダブラフェニブ、トラメチニブ、コビメチニブ、スニチニブ、エルロチニブ、パクリタキセルまたはドセタキセルなどの化学療法剤と組み合わせることができる。
【０１６５】
免疫モジュレーションの活性を変化させる方法
本明細書に記載のＭＮＫ特異的阻害剤は、免疫抑制経路としても公知の、免疫阻害経路に関与する免疫抑制成分（例えば、免疫チェックポイント分子、免疫抑制サイトカイン）のレベルを予想外に低減させることができる。ある特定の態様では、本開示は、有効量のＭＮＫ特異的阻害剤を、それを必要とする被験体に投与することによる免疫モジュレーションのための方法を提供する。代表的な免疫モジュレーションの形態は、免疫細胞の活性を増加させること；免疫細胞のダウンモジュレーションを低減させること；免疫応答を誘導するまたは増強すること；免疫応答を延長すること；抗原特異的Ｔ細胞応答を刺激すること；免疫抑制シグナル伝達経路を阻害すること；内在性の免疫（既存または新規のもの）を促進すること；免疫耐性と関連する疾患（例えば、がん）を阻害すること；ワクチンが誘導する免疫応答を増強すること；またはこれらの任意の組合せを含む。さらなる実施形態では、免疫モジュレーションを必要とする被験体は、過剰増殖障害（例えば、がん）、感染症または感染性疾患（例えば、ウイルス感染症、細菌感染症、原虫感染症）を有する。特定の実施形態では、免疫モジュレーションを必要とする被験体は、免疫耐性と関連する過剰増殖障害（例えば、がん）または免疫耐性に関与する感染性疾患（例えば、慢性感染症）を有している。任意の上述の実施形態では、処置される被験体はヒトである。
【０１６６】
（本開示のＭＮＫ特異的阻害剤によってモジュレートされる）代表的な免疫阻害または抑制経路は、ＰＤ−１またはＣＤ２７９としても公知のプログラム細胞死タンパク質１によって媒介され、これは、免疫グロブリンスーパーファミリーに属する細胞表面受容体であり、Ｔ細胞（ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞、ＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞、Ｔｒｅｇまたはこれらの任意の組合せ）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、マクロファージ、樹状細胞およびＢ細胞において発現する。ＰＤ−１は、ＰＤ−Ｌ１（Ｂ７−Ｈ１またはＣＤ２７４としても公知）およびＰＤ−Ｌ２（ＢＣ−ＤＣまたはＣＤ２７３としても公知）の２つのリガンドと結合する。本開示のＭＮＫ特異的阻害剤は、ＰＤ−Ｌ１のレベルも低減させる。
【０１６７】
背景として、ＰＤ−１およびそのリガンドは、末梢組織において抗原を認識するＴ細胞による組織の炎症反応を調節するために主に作用する。ＰＤ−１の発現は、例えば、抗原提示細胞においてＰＤ−１リガンドの発現を誘導する組織における活性化したＴ細胞および炎症シグナルに誘導される。リガンドの結合において、ＰＤ−１は、ＳＨＰ２フォスファターゼを介するＴ細胞活性化が関与するキナーゼを阻害し、ＴＣＲが媒介する活性化、増大、サイトカイン産生の阻害、およびＣＤ８＋エフェクターＴ細胞のエフェクター機能の獲得をもたらす。ＰＤ−１が媒介する免疫応答の減弱は、損傷から末梢組織を保護し、自己寛容の維持を助ける。ＩＦＮγの分泌は、ＰＤ−Ｌ１の誘導のためのシグナルであり、これは、主にヘルパーＴ（ＴＨ１）細胞１によって行われる。ＰＤ−１受容体シグナル伝達の活性は、本技術分野において公知の方法を使用して、Ｔ細胞の増殖およびサイトカイン産生（例えば、ＩＦＮγ、ＩＬ−２）を調べることによって検出されてよい。
【０１６８】
ＰＤ−１は、Ｔｒｅｇ細胞においても高度に発現し、Ｔｒｅｇ細胞においてＰＤ−１が媒介するシグナル伝達は、Ｔｒｅｇの発生および機能を促進することによってエフェクター免疫応答のさらなる抑制をもたらし得る（Franciscoら、Immunol.  Rev.  ２３６巻、２１９頁、２０１０年）。ＰＤ−１シグナル伝達はまた、ＮＫ細胞およびＢ細胞におけるその効果を介して、ＮＫ細胞の活性化、ならびに細胞傷害性および抗体産生を弱め得る（Bensonら、Blood  １１６巻、２２８６頁、２０１０年；Thibultら、Int.  Immunol.  ２５巻、１２９頁、２０１３年）。
【０１６９】
慢性的な抗原の曝露（例えば、がん、慢性感染症）の結果として生じ得る高レベルの持続的なＰＤ−１の発現は、同種抗原特異的なＴ細胞の中で、消耗およびアネルギーを誘導し得る（Barberら、Nature  ４３８巻、６８２頁、２００６年）。
【０１７０】
ＰＤ−１シグナル伝達による、免疫応答、例えば、Ｔ細胞応答の下方調節は、がんまたは感染症の持続を促進し得る。ＰＤ−１リガンドは、通常、多数の腫瘍および腫瘍浸潤性リンパ球（ＴＩＬ）のがん細胞の表面において上方調節され、これは、局所的な抗腫瘍Ｔ細胞応答を制限する。ＰＤ−Ｌ１発現の上方調節は、メラノーマ、卵巣がん、肺がん、腎臓がん、乳がんおよび多くの他のがんにおいて認められており、予後不良（上記のPardollにおいて概説）と関連している。ＰＤ−Ｌ２の上方調節も、ある特定のＢ細胞リンパ腫に対して報告されている（同上）。
【０１７１】
ＰＤ−１またはＬＡＧ３様の免疫チェックポイントタンパク質などのある特定の免疫抑制成分は、慢性感染症の持続における役割も果たし得る。ＰＤ−１は、ＨＩＶに感染した患者のＴ細胞において上方調節されていることが示されており、これは、ウイルス負荷およびＴ細胞消耗と関連し、細胞の増殖、細胞傷害性機能およびサイトカイン分泌の低下をもたらす（Eichbaum、Curr.  Med.  Chem.  １８巻、３９７１頁、２０１１年およびHofmeyerら、J.  Biomed.  Biotech.  ２０１１巻、４５１６９４頁、２０１１年において概説）。ＰＤ−１が媒介するＴ細胞消耗もＢ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルスおよびＬＣＭＶなどの他の慢性感染症の持続において重要であり、細菌感染症（例えば、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、トリパノソーマ感染症（例えば、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ  ｄｏｎｏｖａｎｉ）、寄生性原虫感染症（例えば、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｇｏｎｄｉｉ）、蠕虫感染症（例えば、Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ  ｍａｎｓｏｎｉ）および単純ヘルペスウイルス１感染症（例えば、ＨＳＶ１）の持続または再活性化において関係する（上記Hofmeyerら）。
【０１７２】
別の代表的な免疫抑制成分は、リンパ球活性化遺伝子３（ＬＡＧ３、ＣＤ２２３としても公知）であり、これは、Ｔｒｅｇ細胞において高度に発現し、Ｔｒｅｇ細胞の免疫抑制の活性を増強する役割を有する（GoldbergおよびDrake、Curr.  Top.  Microbiol.  Immunol.  ３４４巻、２６９頁、２０１１年）。ＬＡＧ３は、Ｔｒｅｇ細胞を介した効果とは独立してＣＤ８＋エフェクターＴ細胞も直接阻害する（Grossoら、J.  Clin.  Invest.  １１７巻、３３８３頁、２００７年）。ＬＡＧ３はまた、細胞表面でＣＤ３−ＴＣＲ複合体と結合する活性化ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔリンパ球において発現し、シグナル伝達を負に調節する（Hannierら、J.  Immunol.  １６１巻、４０５８頁、１９９８年；Darlingtonら、J.  Exp.  Med.  １９５巻、１３３７頁、２００２年）。Ｔ細胞応答の下方調節におけるＬＡＧ３の役割は十分に確立されており（Matsuzakiら、Proc.  Nat'l.  Acad.  Sci.  USA  １０７巻、７８７５頁、２０１０年）、ホジキンリンパ腫（Gandhiら、Blood  １０８巻、２２８０頁、２００６年）および前立腺がん（Sfanosら、Clin.  Cancer  Res.  １４巻、３２５４頁、２００８年）などのがんにおける腫瘍浸潤性Ｔ細胞の調節機能のその関与の証拠が増加している。ＬＡＧ３、ＭＨＣ／ＨＬＡクラスＩＩ分子のリガンドは、一部の上皮性がん（例えば、メラノーマ）および腫瘍浸潤性のマクロファージおよび樹状細胞において上方調節される。開発されたいくつかのＬＡＧ３阻害剤があり、ＬＡＧ３−ＭＨＣクラスＩＩ結合を阻止しないＬＡＧ３抗体でさえ、Ｔ細胞増殖およびエフェクター機能を増強することがさらに可能である（上記Pardollにおいて概説）。
【０１７３】
本開示は、免疫細胞のダウンモジュレーションを低減させることによって疾患を処置する方法であって、有効量のＭＮＫ特異的阻害剤を、それを必要とする被験体（例えば、ヒト）に投与することを含む、方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示は、過剰増殖障害（例えば、がん）または感染症もしくは感染性疾患に対して、免疫応答を増強することまたは免疫細胞のダウンモジュレーションを低減させることにおける使用のための、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１またはＬＡＧ３シグナル伝達を低減させるまたは阻止する方法を提供する。ある特定の態様では、本開示は、治療有効量のＭＮＫ特異的阻害剤を、誘導されたもしくは増強された免疫応答を必要とする被験体または免疫細胞のダウンモジュレーションもしくは抑制の低減を必要とする被験体に、投与することによって、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ３またはこれらの組合せのレベルまたは活性を低減させ、任意選択で、免疫抑制サイトカイン（例えば、ＩＬ−１０）の産生を阻止するまたは低減させる方法を提供する。ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、がんまたは慢性感染症を有する被験体において、免疫応答を誘導するもしくは増強するため、または免疫細胞のダウンモジュレーションもしくは抑制を低減させるために使用される。さらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、表１もしくは表２Ａの化合物のいずれか１つ、または式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａもしくはＶＩＩｂの構造を有するいずれかの化合物である。よりさらなる実施形態では、誘導されるまたは増強される免疫応答は、抗原特異的Ｔ細胞応答を含み、低減されるダウンモジュレーションまたは抑制は、抗原特異的なＴ細胞のものである。
【０１７４】
特定の実施形態では、本方法は、抗体もしくはその結合断片、融合タンパク質（例えば、Ｆｃ融合）、ｓｉＲＮＡなどの免疫抑制成分の阻害剤を投与することをさらに含み、これは、他の免疫抑制成分（ＩＬ−１０、ＩＬ−４、ＩＬ−１ＲＡ、ＩＬ−３５のような免疫抑制サイトカインなど）に対する、またはＴｒｅｇ細胞などの他の免疫抑制成分をモジュレートする（例えば、ＴＥ細胞に対してＴｒｅｇ細胞を低減させる）、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ３またはこれらの組合せの阻害剤であってよい。さらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、本明細書に記載のようにして、任意選択で、ＭＨＣまたはＨＬＡ分子のレベルの上昇を媒介して、抗原提示を促進または増強する。
【０１７５】
よりさらなる実施形態では、本開示は、ＰＤ−１媒介性、ＰＤ−Ｌ１媒介性またはＬＡＧ３媒介性の免疫耐性と関連する疾患を処置する方法であって、有効量のＭＮＫ特異的阻害剤を、それを必要とする被験体に投与することを含む、方法を提供する。
【０１７６】
任意の上述の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、表１もしくは表２Ａの化合物のいずれか１つ、または式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａもしくはＶＩＩｂの構造を有するいずれかの化合物である。よりさらなる実施形態では、誘導されるまたは増強される免疫応答は、抗原特異的Ｔ細胞応答である。特定の実施形態では、本方法は、抗体もしくはその結合断片、融合タンパク質、ｓｉＲＮＡなどの免疫抑制成分の阻害剤を投与することをさらに含む。
【０１７７】
よりさらなる実施形態では、本開示は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ３またはこれらの組合せなどの調節不全免疫チェックポイントタンパク質と関連する免疫抑制シグナル伝達経路を阻害する方法であって、有効量のＭＮＫ特異的阻害剤を、それを必要とする被験体に投与すること、任意選択で、免疫抑制サイトカイン（例えば、ＩＬ−１０）の産生を阻害することを含む、方法を提供する。ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、表１もしくは表２Ａの化合物のいずれか１つ、または式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａもしくはＶＩＩｂの構造を有するいずれかの化合物である。よりさらなる実施形態では、誘導されるまたは増強される免疫応答は、抗原特異的Ｔ細胞応答である。特定の実施形態では、本方法は、抗体もしくはその結合断片、融合タンパク質、ｓｉＲＮＡなどの免疫抑制シグナルの阻害剤を投与することをさらに含む。
【０１７８】
より多くの実施形態では、本開示は、調節不全のＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１および／またはＬＡＧ３免疫抑制シグナル伝達経路を阻害する方法であって、有効量のＭＮＫ特異的阻害剤を、それを必要とする被験体に投与すること、任意選択で、免疫抑制サイトカイン（例えば、ＩＬ−１０）の産生を阻害することを含む、方法を提供する。ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、表１もしくは表２Ａの化合物のいずれか１つ、または式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａもしくはＶＩＩｂの構造を有するいずれかの化合物である。より多くの実施形態では、本方法は、免疫抑制シグナル伝達経路のＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１および／またはＬＡＧ３などの免疫抑制成分を阻害して、調節不全または不適当な免疫抑制を修正し、内在性の免疫（例えば、既存または新規）を促進する。ある特定の実施形態では、本開示は、免疫抑制成分を阻害して、内在性の免疫を促進する方法であって、有効量のＭＮＫ特異的阻害剤および免疫抑制阻害剤を、それを必要とする被験体に投与することを含む、方法を提供し、ここで、（ａ）ＭＮＫ特異的阻害剤は、免疫抑制阻害剤の存在下で、抗原に対する応答のために、抗原特異的Ｔ細胞を予備刺激する、または（ｂ）ＭＮＫ特異的阻害剤は、内在性の免疫の促進において、免疫抑制阻害剤の効果を増強するまたは延長する。よりさらなる実施形態では、誘導されるまたは増強される免疫応答は、抗原特異的Ｔ細胞応答である。特定の実施形態では、本方法は、抗体もしくはその結合断片、融合タンパク質、ｓｉＲＮＡなどの免疫抑制成分の阻害剤を投与することをさらに含む。
【０１７９】
本明細書に記載のＭＮＫ特異的阻害剤の使用の方法は、任意選択で、免疫抑制成分または免疫抑制成分の産生を標的とする阻害剤と組み合わせて使用してよい。代表的な免疫抑制成分の標的は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＨＶＥＭ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＧＡＬ９、ＴＩＭ３、２Ｂ４、アデノシン、Ａ２ａＲ、ＴＧＦβ、ＩＬ−１０、ＩＬ−３５、アルギナーゼ、ＩＤＯまたは免疫抑制サイトカイン（例えば、ＩＬ−１０）を含む。免疫抑制成分の阻害剤は、化合物、抗体、抗体断片もしくは融合ポリペプチド（例えば、ＣＴＬＡ４−ＦｃまたはＬＡＧ３−ＦｃなどのＦｃ融合）、アンチセンス分子、リボザイムまたはＲＮＡｉ分子または低分子量有機分子であってよい。
【０１８０】
ある特定の実施形態では、免疫抑制成分の阻害剤は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＨＶＥＭ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＧＡＬ９、ＴＩＭ３、２Ｂ４、アデノシン、Ａ２ａＲ、ＴＧＦβ、ＩＬ−１０、ＩＬ−３５、アルギナーゼ、ＩＤＯまたはこれらの任意の組合せに対して特異的な、抗体もしくはその結合断片、融合タンパク質またはｓｉＲＮＡである。
【０１８１】
ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ピジリズマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、ＭＥＤＩ０６８０（以前はＡＭＰ−５１４）、ＭＫ−３４７５、ＡＭＰ−２２４、ＢＭＳ−９３６５５８もしくはこれらの任意の組合せなどのＰＤ−１特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。さらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＢＭＳ−９３６５５９、デュルバルマブ（ＭＥＤＩ４７３６）、アテゾリズマブ（ＭＰＤＬ３２８０Ａ）、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ、ＲＧ７４４６もしくはこれらの任意の組合せなどのＰＤ−Ｌ１特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＬＡＧ５２５、ＩＭＰ３２１、ＩＭＰ７０１、９Ｈ１２、ＢＭＳ−９８６０１６もしくはこれらの任意の組合せなどのＬＡＧ３特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。さらに多くの実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＰＤ−１阻害剤およびＣＴＬＡ４阻害剤と組み合わせて使用される。他の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤およびＣＴＬＡ４阻害剤と組み合わせて使用される。さらに他の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＰＤ−１阻害剤およびＬＡＧ３阻害剤、またはＰＤ−Ｌ１阻害剤およびＬＡＧ３阻害剤と組み合わせて使用される。
【０１８２】
ＣＤ１５２としても公知の細胞傷害性Ｔ−リンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ４）は、Ｔ細胞によってもっぱら発現する受容体であり、Ｔ細胞活性化の負の調節因子として働く。ＣＴＬＡ４は、主に、Ｔ細胞共刺激受容体ＣＤ２８の活性に対抗する。ＣＴＬＡ４およびＣＤ２８は、同じリガンドＣＤ８０（Ｂ７．１としても公知）およびＣＤ８６（Ｂ７．２としても公知）を共有し、これらは、抗原提示細胞の表面上で発現する。ＣＤ８０またはＣＤ８６によるＣＤ２８の結合は、Ｔ細胞受容体がその同種抗原と結合する場合、Ｔ細胞増殖およびＩＬ−２産生のみを活性化する。ＴＣＲおよびＣＤ２８を通じたＴ細胞活性化は、ＣＴＬＡ４の発現を誘導する。ＣＴＬＡ４は、その両方のリガンドについて、ＣＤ２８よりも高い親和性を有する。理論に縛られることは望まないが、ＣＴＬＡ４が、Ｔ細胞に対するリガンド結合および阻害性シグナルの伝達のためにＣＤ２８を打ち負かすことによって、Ｔ細胞活性化を弱めることを示唆する（上記Pardollにおいて概説）。ＣＴＬＡ４は、複数のＴ細胞サブセットにおいて発現し、シグナル伝達は、ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞、ＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞の活性のダウンモジュレーションおよびＴｒｅｇ活性を増強してよい。
【０１８３】
ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＣＴＬＡ４の阻害剤と組み合わせて使用される。特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、イピリムマブ、トレメリムマブ、ＣＴＬＡ４−Ｉｇ融合タンパク質（例えば、アバタセプト、ベラタセプト）もしくはこれらの任意の組合せなどのＣＴＬＡ４特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。
【０１８４】
Ｂ７−Ｈ３（ＣＤ２７６としても公知）およびＢ７−Ｈ４（Ｂ７−Ｓ１、Ｂ７ｘおよびＶＣＴＮ１としても公知）などの他のＢ７ファミリー阻害性リガンドは、免疫阻害性の役割を有していてよい（Yiら、Immunol.  Rev.  ２２９巻、１４５頁、２００９年）。Ｂ７−Ｈ３およびＢ７−Ｈ４に対する受容体は、まだ特定されていない。しかし、Ｂ７−Ｈ３およびＢ７−Ｈ４は、腫瘍細胞および腫瘍浸潤性細胞において上方調節される（Heら、Clin.  Dev.  Immunol.  ２０１１巻、６９５８３４頁、２０１１年）。
【０１８５】
より多くの実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＭＧＡ２７１、３７６．９６もしくは両方などのＢ７−Ｈ３特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。Ｂ７−Ｈ４抗体結合断片は、例えば、Dangajら、Cancer  Res.  ７３巻、４８２０頁、２０１３年に記載されているようなｓｃＦｖまたはその融合タンパク質であってよい。
【０１８６】
ナチュラルキラー細胞受容体２Ｂ４としても公知のＣＤ２４４は、ナチュラルキラー細胞、γδ  Ｔ細胞およびメモリーＣＤ８＋（αβ）Ｔ細胞において発現する細胞表面受容体である。ＣＤ２４４に対するリガンドは、ＣＤ４８であり、これは、造血細胞において発現する。ＣＤ２４４シグナル伝達は、ＣＤ２４４の発現レベルおよびクロスリンク度に応じて、活性化および阻害の様式の両方で、ＮＫ−細胞の細胞溶解活性をモジュレートすると考えられる（Chlewickiら、J.  Immunol.  １８０巻、８１５９頁、２００８年）。
【０１８７】
ＢおよびＴリンパ球アテニュエータ（ＢＬＴＡ、ＣＤ２７２としても公知）は、Ｔ細胞活性化中に発現が誘導される阻害性受容体である。このリガンドは、ヘルペスウイルス侵入受容体（ＨＶＥＭ、ＴＮＦＲＳＦ１４としても公知）である。ＨＶＥＭは、複数の組織／細胞タイプにおいて広く発現する。ＨＶＥＭはまた、例えば、メラノーマ、リンパ腫、前立腺がん、結腸直腸がん、尿路上皮がんおよび腫瘍浸潤性リンパ球を含む、ある特定の腫瘍タイプにおいて上方調節される。ＢＴＬＡ−ＨＶＥＭトランス相互作用は、Ｔ細胞における阻害効果をもたらす（Shuiら、J.  Leukoc.  Biol.  ８９巻、５１７頁、２０１１年によって概説）。Ｔ細胞におけるＨＶＥＭ−ＢＴＬＡのシス結合は、阻害性機能を有していてもよく、これは、可溶性ＬＩＧＨＴ（ＴＮＦＳＦ１４またはＣＤ２５８としても公知）によって安定化される（上記Shuiら）。
【０１８８】
Ｔ細胞膜タンパク質３（ＴＩＭ３、ＨＡＶＣＲ２としても公知）は、Ｔ細胞ならびにＴＨ１およびＴＨ１７サイトカイン分泌の負の調節因子である、ＣＤ４＋Ｔヘルパー１（ＴＨ１）特異的細胞表面タンパク質である（Hastingsら、Eur.  J.  Immunol.  ３９巻、２４９２頁、２００９年）。このリガンドは、ガレクチン９（ＧＡＬ９）である。ＩＦＮγ産生によって特徴付けられるＴＨ１細胞は、抗がんおよび抗ウイルス免疫応答のために重要である。ＩＬ−１７およびＩＬ−２２産生によって特徴付けられるＴＨ１７細胞は、粘膜の病原性細菌および病原性真菌に対する免疫応答のために重要である。
【０１８９】
アデノシンＡ２ａ受容体（Ａ２ａＲ）は、Ｔ細胞アネルギーを誘導することによるおよびＣＤ４＋Ｔ細胞におけるＦＯＸＰ３の発現を促進することによるＴ細胞応答、ならびにＴｒｅｇ細胞への発達を阻害する（Zarekら、Blood  １１１巻、２５１頁、２００８年）。Ａ２ａＲのリガンドはアデノシンである。アデノシンは、細胞死中に放出される（例えば、腫瘍、ウイルス感染症）。
【０１９０】
キラー細胞免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ、ＣＤ１５８としても公知）は、ナチュラルキラー細胞およびＴ細胞サブセットにおいて見いだされる細胞表面タンパク質である。ＫＩＲは、ＭＨＣクラスＩ分子と相互作用し、ＮＫ細胞の細胞傷害活性を抑制する。個々のＫＩＲは、別々のＭＨＣクラスＩアロタイプのサブセットを認識する。ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、リリルマブ（ＢＭＳ−９８６０１５）などのＫＩＲの阻害剤と組み合わせて使用される。
【０１９１】
ＴＧＦβ、ＩＬ−１０およびＩＬ−３５を含む、阻害性サイトカインは、ＴＨ１タイプ応答を抑制し、Ｔｒｅｇ細胞の発生を促進することによって免疫応答を阻害し得る（BettiniおよびVignali、Curr.  Opin.  Immunol.  ２１巻、６１２頁、２００９年）。
【０１９２】
インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）は、トリプトファンのＮ−ホルミル−キヌレニンへの分解を触媒する酵素である。ＩＤＯは、ＩＦＮγによって誘導され、細胞の微小環境からのトリプトファンの局所的な分解によってＴ細胞応答を抑制する（Mellor、Biochem.  Biophys.  Res.  Comm.  ３３８巻、２０〜４頁、２００５）。理論に縛られることは望まないが、Ｔ細胞のトリプトファン欠乏およびトリプトファン分解経路からの毒性分解産物の生成は、Ｔ細胞の抑止およびアポトーシスを誘導し、Ｔ細胞を不活性にすると考えられる（Solimanら、Cancer  J.  １６巻、３５４〜９頁、２０１０年）。ＩＤＯは、浸潤性骨髄細胞（例えば、樹状細胞）によって発現する（MellorおよびMunn、Nat.  Rev.  Immunol.  ４巻、７６２〜７４頁、２００４年）。ＩＤＯは、様々な範囲の腫瘍タイプのがん細胞によっても発現し、腫瘍に対する免疫応答を阻害し得る（Munn、Update  Cancer  Ther.  １巻、１７５〜１８５頁、２００６年）。
【０１９３】
ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、左旋性−１−メチルトリプトファン、エパカドスタット（ＩＮＣＢ０２４３６０；Liuら、２０１０年、Blood  １１５巻、３５２０〜３０頁）、エブセレン（Terentisら、２０１０年、Biochem.  ４９巻、５９１〜６００頁）、インドキシモド、ＮＬＧ９１９（Mautinoら、American  Association  for  Cancer  Research、第１０４回年会、２０１３年；２０１３年４月６日〜１０日）、１−メチル−トリプトファン（１−ＭＴ）−チラパラザミンまたはこれらの任意の組合せなどのＩＤＯ阻害剤と組み合わせて使用される。
【０１９４】
オルニチンおよび尿素へのアルギニンの代謝は、細胞質およびミトコンドリアに位置する２つの別個の遺伝子によってコードされる、アルギナーゼＩおよびアルギナーゼＩＩによって触媒される。オルニチンは、細胞周期進行に必要なポリアミンの産生のための主要物質である。アルギニンは、誘導性の一酸化窒素シンターゼによって代謝されて、シトルリンおよび一酸化窒素を産生することもでき、これは、細胞傷害機構において重要な役割を果たす。アルギナーゼは、ＣＤ３ζ鎖の発現の減少によってＴ細胞アネルギーを引き起こすこともできる（Rodriguezら、Cancer  Res.  ６４巻、５８３９頁、２００４年）。アルギナーゼは、骨髄に由来するサプレッサー細胞によって産生され、この発現はいくつかの腫瘍細胞株において観察されている（RodriguezおよびOchoa、Immunol.  Rev.  ２２２巻、１８０〜１９１頁、２００８年）。
【０１９５】
ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、Ｎ（オメガ）−ニトロ−Ｌ−アルギニンメチルエステル（Ｌ−ＮＡＭＥ）、Ｎ−オメガ−ヒドロキシ−ノル−ｌ−アルギニン（ノル−ＮＯＨＡ）、Ｌ−ＮＯＨＡ、２（Ｓ）−アミノ−６−ボロノヘキサン酸（ＡＢＨ）、Ｓ−（２−ボロノエチル）−Ｌ−システイン（ＢＥＣ）またはこれらの任意の組合せなどのアルギナーゼ阻害剤と組み合わせて使用される。
【０１９６】
ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、他の免疫モジュレーション分子を標的とする薬剤と組み合わせて使用される。例えば、ＭＮＫ特異的阻害剤は、抗ＣＤ１３７（４−１ＢＢ）抗体（ウレルマブなど）、抗ＣＤ１３４（ＯＸ−４０）抗体（ＭＤＩ６４６９（ＯＸ−４０アゴニスト）など）、レナリドミド、ポマリドミドまたはこれらの組合せと組み合わせて使用され得る。
【０１９７】
本明細書において使用される場合、「過剰増殖障害」または「過剰増殖疾患」は、正常細胞または非疾患細胞と比較して、過剰成長または増殖を指す。代表的な過剰増殖障害は、異形成症、腫瘍症、非接触阻害された細胞または腫瘍形成的に形質転換された細胞、腫瘍、がん、癌腫、肉腫、悪性細胞、前悪性細胞、および非腫瘍性または非悪性の過剰増殖障害（例えば、腺腫、線維腫、脂肪腫、筋腫、血管腫、線維症、再狭窄など）を含む。ある特定の実施形態では、本開示の組成物および方法による免疫モジュレーションによって処置されるがんは、癌腫（上皮性）、肉腫（結合組織）、リンパ腫もしくは白血病（造血細胞）、生殖細胞腫瘍（多能性細胞）、芽腫（未成熟な「前駆」細胞または胚組織）またはこれらの任意の組合せを含む。これらの種々の形態の過剰増殖疾患は、本技術分野において公知であり、診断および分類のための基準は確立されている（例えば、HanahanおよびWeinberg、Cell  １４４巻、６４６頁、２０１１年；HanahanおよびWeinberg、Cell  １００巻、５７頁、２０００年；Cavalloら、Canc.  Immunol.  Immunother.  ６０巻、３１９頁、２０１１年；Kyrigideisら、J.  Carcinog.  ９巻、３頁、２０１０年）。
【０１９８】
固形腫瘍および白血病を含む、広範な過剰増殖障害は、本明細書に開示の組成物および方法がモジュレートする免疫に対して受け入れられる。本開示の免疫モジュレーションによって処置され得る代表的ながんは、乳房、前立腺および直腸の腺癌；全ての形態の肺の気管支原性肺癌；骨髄腫（myeloid）；メラノーマ；肝細胞腫；神経芽細胞腫；乳頭腫；アプドーマ；分離腫；鰓腫；悪性カルチノイド症候群；カルチノイド心疾患；および癌腫（例えば、ウォーカー癌腫、基底細胞癌、基底扁平細胞癌、ブラウン・ピアース癌、腺管癌、エールリッヒ腫瘍、クレブス２癌、メルケル細胞癌、粘液性癌、非小細胞肺癌、燕麦細胞癌、乳頭癌、スキルス癌、細気管支癌、気管支原性癌、扁平上皮細胞癌、および移行上皮癌）を含む。処置され得る追加の代表的ながんは、組織球性障害；悪性組織球増殖症；免疫増殖性小腸疾患；形質細胞腫；細網内皮症；メラノーマ；軟骨芽細胞腫；軟骨腫；軟骨肉腫；線維腫；線維肉腫；巨細胞腫；組織球腫；脂肪腫；脂肪肉腫；中皮腫；粘液腫；粘液肉腫；骨腫；骨肉腫；脊索腫；頭蓋咽頭腫；未分化胚細胞腫；過誤腫；間葉腫；中腎腫；筋肉腫；エナメル上皮腫；セメント質腫；歯牙腫；奇形腫；胸腺腫；および絨毛性腫瘍を含む。
【０１９９】
代表的な血液系悪性腫瘍は、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性好酸球性白血病（ＣＥＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）（例えば、濾胞性リンパ腫、散在性の大細胞型Ｂ細胞リンパ腫または慢性リンパ性白血病）または多発性骨髄腫（ＭＭ）を含む。
【０２００】
よりさらなる代表的な過剰増殖障害は、腺腫；胆管腫；真珠腫；円柱腫（cyclindroma）；嚢胞腺癌；嚢胞腺腫；顆粒膜細胞腫；半陰陽性卵巣腫瘍；肝細胞腫；汗腺腫；膵島細胞腫瘍；ライディッヒ細胞腫瘍；セルトリ細胞腫瘍；莢膜細胞腫；平滑筋腫（leimyoma）；平滑筋肉腫；筋芽細胞腫；筋腫（myomma）；筋肉腫；横紋筋腫；横紋筋肉腫；上衣腫；神経節腫；神経膠腫；髄芽腫；髄膜腫；神経鞘腫；神経芽腫；神経上皮腫；神経線維腫；神経腫；傍神経節腫；非クロム親和性傍神経節腫；角化血管腫；好酸球性血管リンパ球増殖症；硬化性血管腫；血管腫症；グロムス血管腫；血管内皮腫；血管腫；血管外皮腫；血管肉腫；リンパ管腫；リンパ管筋腫；リンパ管肉腫；松果体腫；癌肉腫；軟骨肉腫；葉状嚢肉腫；線維肉腫；血管肉腫；平滑筋肉腫；白血肉腫；脂肪肉腫；リンパ管肉腫；筋肉腫；粘液肉腫；卵巣癌；横紋筋肉腫；肉腫；新生物；神経線維腫症；および子宮頚部異形成を含む。
【０２０１】
特定の態様では、本開示は、有効量のＭＮＫ特異的阻害剤を、固形腫瘍、メラノーマ、非小細胞肺がん、腎細胞癌、腎臓がん、血液がん、前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、結腸がん、直腸がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、頭頸部がん、甲状腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、卵巣がん、子宮頸がん、肺がん、尿路上皮がん、膵臓がん、神経膠芽腫、肝細胞がん、骨髄腫、多発性骨髄腫、白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、骨髄異形成症候群、脳がん、ＣＮＳがん、悪性神経膠腫またはこれらの任意の組合せを有する被験体に投与することによる、免疫細胞の活性を増加させるための方法を提供する。
【０２０２】
他の態様では、本開示は、有効量のＭＮＫ特異的阻害剤を、固形腫瘍、メラノーマ、非小細胞肺がん、腎細胞癌、腎臓がん、血液がん、前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、結腸がん、直腸がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、頭頸部がん、甲状腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、卵巣がん、子宮頸がん、肺がん、尿路上皮がん、膵臓がん、神経膠芽腫、肝細胞がん、骨髄腫、多発性骨髄腫、白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、骨髄異形成症候群、脳がん、ＣＮＳがん、悪性神経膠腫またはこれらの任意の組合せを有する被験体に投与することによる、免疫細胞のダウンモジュレーションを低減させるための方法を提供する。
【０２０３】
さらに他の態様では、本開示は、有効量のＭＮＫ特異的阻害剤を、固形腫瘍、メラノーマ、非小細胞肺がん、腎細胞癌、腎臓がん、血液がん、前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、結腸がん、直腸がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、頭頸部がん、甲状腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、卵巣がん、子宮頸がん、肺がん、尿路上皮がん、膵臓がん、神経膠芽腫、肝細胞がん、骨髄腫、多発性骨髄腫、白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、骨髄異形成症候群、脳がん、ＣＮＳがん、悪性神経膠腫またはこれらの任意の組合せを有する被験体に投与することによる、免疫応答を向上する、増強するまたは延長するための方法を提供する。
【０２０４】
さらに他の態様では、本開示は、有効量のＭＮＫ特異的阻害剤を、固形腫瘍、メラノーマ、非小細胞肺がん、腎細胞癌、腎臓がん、血液がん、前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、結腸がん、直腸がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、頭頸部がん、甲状腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、卵巣がん、子宮頸がん、肺がん、尿路上皮がん、膵臓がん、神経膠芽腫、肝細胞がん、骨髄腫、多発性骨髄腫、白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、骨髄異形成症候群、脳がん、ＣＮＳがん、悪性神経膠腫またはこれらの任意の組合せを有する被験体に投与することによる、抗原特異的Ｔ細胞応答を刺激するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、刺激される抗原特異的Ｔ細胞応答は、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）に対して特異的である。
【０２０５】
より多くの態様では、本開示は、有効量のＭＮＫ特異的阻害剤を、固形腫瘍、メラノーマ、非小細胞肺がん、腎細胞癌、腎臓がん、血液がん、前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、結腸がん、直腸がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、頭頸部がん、甲状腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、卵巣がん、子宮頸がん、肺がん、尿路上皮がん、膵臓がん、神経膠芽腫、肝細胞がん、骨髄腫、多発性骨髄腫、白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、骨髄異形成症候群、脳がん、ＣＮＳがん、悪性神経膠腫またはこれらの任意の組合せを有する被験体に投与することによる、免疫抑制シグナル伝達経路を阻害するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、免疫抑制シグナルは、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＨＶＥＭ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＧＡＬ９、ＴＩＭ３、２Ｂ４、アデノシン、Ａ２ａＲ、ＴＧＦβ、ＩＬ−１０、ＩＬ−３５またはこれらの任意の組合せと関与する。ある特定の実施形態では、免疫抑制シグナルは、免疫耐性と関連する疾患を有する被験体において生じる、１つまたは複数の調節不全の免疫チェックポイントタンパク質と関与し、被験体は、疾患（例えば、がん）に対する免疫応答を誘導または増強するために、不適切な免疫抑制シグナル伝達経路をモジュレートするＭＮＫ特異的阻害剤を用いる処置を必要とする。特定の実施形態では、免疫耐性と関連する免疫抑制成分は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ３、ＩＬ−１０、Ｔｒｅｇ細胞またはこれらの組合せである。ある特定の実施形態では、阻害される免疫抑制シグナル伝達経路は、ＰＤ−１経路またはＬＡＧ３経路である。例えば、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ３または３つ全ての発現を下方調節することができ、またはＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ３または３つ全てを間接的に阻害することができ、それによって、これらの免疫抑制経路を阻害される。
【０２０６】
さらなる実施形態では、免疫抑制シグナルは、過剰な調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）を誘導し、ここで、ＭＮＫ特異的阻害剤は、エフェクターＴ細胞（ＴＥ）とＴｒｅｇ細胞の比率を変化させる。ある特定の実施形態では、ＴＥ細胞とＴｒｅｇ細胞の比率は、ＭＮＫ特異的阻害剤の存在下で、阻害剤の非存在の場合と比較して、増加する。さらに他の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＭＨＣ／ＨＬＡ分子（例えば、ＭＨＣ／ＨＬＡクラスＩＩ）の発現を下方調節または低減させて抗原提示を最小化する免疫抑制シグナルと対抗し、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＭＨＣ／ＨＬＡクラスＩＩ分子などのＭＨＣ／ＨＬＡ分子のレベルを調節する（すなわち、増加させる）ことによって抗原提示を促進または増強する。
【０２０７】
さらなる態様では、本開示は、有効量のＭＮＫ特異的阻害剤を、固形腫瘍、メラノーマ、非小細胞肺がん、腎細胞癌、腎臓がん、血液がん、前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、結腸がん、直腸がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、頭頸部がん、甲状腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、卵巣がん、子宮頸がん、肺がん、尿路上皮がん、膵臓がん、神経膠芽腫、肝細胞がん、骨髄腫、多発性骨髄腫、白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、骨髄異形成症候群、脳がん、ＣＮＳがん、悪性神経膠腫またはこれらの任意の組合せを有する被験体に投与することによる、内在性の抗がん免疫を促進するための方法を提供する。「内在性」という用語は、外因的に獲得されるものとは対照的に、例えば、免疫グロブリン治療、養子Ｔ細胞治療、遺伝子組換えＴ細胞治療（例えば、キメラ抗原受容体、組換えＴ細胞受容体）によって、被験体に存在する抗がん免疫応答を指す。ある特定の実施形態では、促進される内在性の抗がん免疫は、抗原特異的Ｔ細胞応答を含む。
【０２０８】
よりさらなる態様では、本開示は、有効量のＭＮＫ特異的阻害剤を、固形腫瘍、メラノーマ、非小細胞肺がん、腎細胞癌、腎臓がん、血液がん、前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、結腸がん、直腸がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、頭頸部がん、甲状腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、卵巣がん、子宮頸がん、肺がん、尿路上皮がん、膵臓がん、神経膠芽腫、肝細胞がん、骨髄腫、多発性骨髄腫、白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、骨髄異形成症候群、脳がん、ＣＮＳがん、悪性神経膠腫またはこれらの任意の組合せを有する被験体に投与することによる、免疫耐性と関連する疾患を阻害するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、免疫耐性と関連する疾患は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１またはＬＡＧ３の免疫抑制シグナル伝達経路によって媒介される。特定の実施形態では、免疫耐性の阻害は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ３またはこれらの組合せを下方調節すること、発現を低減させることまたは間接的に阻害することを含む。ある特定の他の実施形態では、免疫耐性の阻害は、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＨＶＥＭ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＧＡＬ９、ＴＩＭ３、２Ｂ４、アデノシン、Ａ２ａＲ、ＴＧＦβ、ＩＬ−１０、ＩＬ−３５、アルギナーゼ、ＩＤＯまたはこれらの任意の組合せを下方調節することまたは間接的に阻害することを含む。
【０２０９】
本明細書に記載の免疫モジュレーションのための組成物および方法は、感染症または感染性疾患（例えば、ウイルス、細菌、真菌、寄生虫、原生動物、蠕虫）の状況において使用されてもよい。ある特定の態様では、本開示は、有効量のＭＮＫ特異的阻害剤を、慢性感染症などの感染症を有する被験体（例えば、ヒト）に投与することによる、（１）免疫細胞の活性を増加させる；（２）免疫細胞のダウンモジュレーションを低減させる；（３）免疫応答を誘導する、増強するもしくは延長する；（４）抗原特異的Ｔ細胞応答を刺激する；（５）免疫抑制シグナル伝達経路を阻害する；（６）内在性の抗感染性因子の免疫を促進する；（７）ワクチンが誘導する免疫応答を増強する；または（８）免疫耐性と関連する疾患を阻害する；ための方法を提供する。
【０２１０】
感染性疾患は、感染病原体と関連するものを含み、任意の様々な細菌（例えば、病原性のＥ．ｃｏｌｉ、Ｓ．ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｃ．ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ、Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｃ．ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ、Ｖ．ｃｈｏｌｅｒａｅ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｓｐｐ．、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ  ｓｐｐ．、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｓｐｐ．、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ、Ｐｎｅｕｍｏｎｏｃｏｃｃｉ、Ｍｅｎｉｎｇｏｃｏｃｃｉなど）、マイコバクテリアおよび寄生虫（原虫、トリパノソーマ、マラリア、ジアルジア属、トキソプラズマの任意の公知の寄生虫のメンバーを含む）を含む。感染性ウイルスは、アデノウイルス、ブニヤウイルス、サイトメガロウイルス、エンテロウイルス、エプスタイン・バーウイルス、フラビウイルス（例えば、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ａ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、日本脳炎ウイルス）、ヘルペスウイルス、パボーバウイルス、パピローマウイルス（例えば、ＨＰＶ）、パラミクソウイルス（例えば、麻疹ウイルス、流行性耳下腺炎ウイルス）、ピコルナウイルス（例えば、ライノウイルス）、ポリオウイルス、風疹ウイルス、ラブドウイルス（例えば、狂犬病）、オルソミクソウイルス（例えば、インフルエンザ）、ポックスウイルス（例えば、ワクシニア）、レオウイルス、レトロウイルス、レンチウイルス（例えば、ヒト免疫不全ウイルス、ＨＩＶ）、ヒトＴ白血病ウイルス（ＨＴＬＶ１、ＨＴＬＶ２）、水痘帯状疱疹ウイルス、人畜共通感染症ウイルス（例えば、重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）、エボラウイルスおよびウエストナイルウイルス）などの真核生物ウイルスを含む。感染性真菌は、例えば、Ｃａｎｄｉｄａ、ＣｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓおよびＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓを含む。ある特定の実施形態では、免疫細胞の活性を増加させるまたはダウンモジュレーションを低減させるための方法は、有効量の本開示のＭＮＫ特異的阻害剤を、その抗原がＭＨＣまたはＨＬＡクラスＩ分子によってプロセシングおよび提示される、サイトゾル病原体に感染した被験体に投与することを含む。
【０２１１】
任意の上述の実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞（例えば、ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞、ＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞または調節性Ｔ細胞）、ナチュラルキラー細胞、樹状細胞、骨髄細胞（単球、マクロファージ、好酸球、マスト細胞、好塩基球または顆粒球など）またはこれらの任意の組合せなどのリンパ球である。特定の実施形態では、免疫細胞は、ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞（細胞傷害性Ｔリンパ球またはＣＴＬとしても公知）などのＴ細胞である。
【０２１２】
任意の上述の実施形態では、免疫応答は、Ｔ細胞、ナチュラルキラー細胞、樹状細胞、骨髄細胞またはこれらの任意の組合せによって媒介される。ある特定の実施形態では、免疫応答は、ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞などのＴ細胞によって媒介される。
【０２１３】
任意の上述の実施形態では、免疫耐性は、Ｔ細胞、ナチュラルキラー細胞、樹状細胞、骨髄細胞またはこれらの任意の組合せに対して耐性である。ある特定の実施形態では、免疫耐性は、ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞などのＴ細胞に対して媒介される。
【０２１４】
本明細書に記載の組成物および方法の任意の態様における、免疫細胞もしくは免疫応答の、活性の増加、または誘導、増強、延長もしくは刺激、あるいは免疫抑制シグナル伝達経路または免疫耐性の阻害は、本技術分野において公知の方法を使用して、例えば、免疫細胞の増殖、免疫細胞の活性／エフェクター機能、免疫細胞の持続、抗体産生またはサイトカイン産生を測定することにより、測定してよい。例として、Ｔ細胞活性の増加は、ＭＮＫ特異的阻害剤の存在および非存在下、Ｔ細胞増殖の増加（３Ｈ−チミジン取り込みアッセイ、ＣＦＳＥ希釈アッセイ）、Ｔ細胞共刺激の増強、Ｔ細胞活性化細胞表面マーカーの発現（フローサイトメトリー）、細胞溶解活性（５１クロム放出アッセイ）、ＩＦＮγまたはＩＬ−２分泌の増加（ＥＬＩＳＡ、フローサイトメトリー）によって実証され得る。
【０２１５】
さらなる態様では、本開示は、抗原特異的な免疫応答の増強を促進するための方法であって、有効量のＭＮＫ特異的阻害剤および抗原（例えば、ワクチン）を、それを必要とする被験体に投与することを含み、抗原特異的免疫応答が、ＭＮＫ特異的阻害剤を用いる処置のない場合よりも、ＭＮＫ特異的阻害剤との組合せにおいてより有効である方法を提供する。抗原特異的免疫応答の有効性は、本技術において公知の方法を使用して、例えば、免疫細胞の活性化、免疫細胞のエフェクター機能、免疫細胞の増殖、免疫細胞の生存、免疫細胞、免疫細胞サイトカイン産生によって確認され得る。ある特定の実施形態では、抗原特異的免疫応答は、Ｔ細胞応答である。本明細書において使用される場合、「ワクチン」という用語は、抗原特異的な免疫応答を誘導する生物学的な調製物を指す。ワクチンは、抗原を含み、これは、ペプチド、ポリペプチドもしくはタンパク質またはこれらの免疫原性断片；糖タンパク質またはこれらの免疫原性断片；ペプチド、ポリペプチド、タンパク質もしくは糖タンパク質またはこれらの免疫原性断片をコードする核酸；糖脂質；炭水化物または分子含有炭水化物；脂質分子；あるいは細胞または細胞調製物であってよい。ある特定の実施形態では、ワクチンは、抗原をコードするポリヌクレオチド；ポリヌクレオチドを含むリコンビナント発現ベクター；抗原もしくは抗原をコードするポリヌクレオチドが誘導する免疫細胞または他の細胞、（生、減弱、死）細胞、細胞膜調製物、細胞小器官調製物、あるいは細胞のエキソソームを含む。ワクチンは、予防的または治療的であってよい。ワクチンは、感染病原体または内在性の細胞（例えば、がん細胞）に対するものであってよい。ある特定の実施形態では、ワクチンは、がん細胞抗原または腫瘍関連抗原に対して特異的である。ある特定の実施形態では、ワクチン抗原は、ＭＨＣ（ＨＬＡ）クラスＩエピトープ、ＭＨＣ（ＨＬＡ）クラスＩＩエピトープまたはこれらの組合せを含む。
【０２１６】
「処置」、「処置する」または「回復させる」とは、被験体（すなわち、患者）の疾患、障害または状態の医学的管理を指し、これは治療的、予防的／予防性（preventative）またはこれらの処置の組合せであってよい。処置は、少なくとも１つの疾患の症状の重症度を改善または減少させ、疾患の悪化もしくは進行を遅らせ、またはさらなる関連疾患の発症を遅らせるもしくは防ぐものであってよい。「疾患を発症する危険性を低減させる」とは、疾患の発症、または、１つもしくは複数の疾患（例えば、がん）の症状の再発を予防するまたは遅らせることを指す。ある特定の実施形態では、本開示のＭＮＫ特異的阻害剤によって提供される免疫モジュレーションは、処置のレジメンを助けるもしくは増強し、または宿主生物の免疫系を助けるもしくは増強する。
【０２１７】
「患者」または「被験体」は、ヒト、ウシ、ウマ、ヒツジ、子ヒツジ、ブタ、ニワトリ、七面鳥、ウズラ、ネコ、イヌ、マウス、ラット、ウサギまたはモルモットなどの動物を含む。動物は、非霊長類および霊長類（例えば、サルおよびヒト）などの哺乳動物であってよい。一実施形態では、患者は、ヒトの乳幼児、子供、青年または成人などのヒトである。
【０２１８】
本開示のＭＮＫ特異的阻害剤またはこれらの薬学的に許容される塩は、１つもしくは複数の他の治療剤またはレジメンの投与と同時に、前にまたは後に投与されてもよい。このような組合せ治療は、本開示のＭＮＫ特異的阻害剤および１つまたは複数のさらなる活性薬剤（例えば、免疫抑制成分の阻害剤）を含有する、単一の医薬投与製剤の投与、ならびに本開示のＭＮＫ特異的阻害剤およびそれぞれの活性薬剤のそれ自体別々の医薬投与製剤での投与を含む。例えば、本開示のＭＮＫ特異的阻害剤および別の活性薬剤は、錠剤もしくはカプセル剤または液体剤などの単一の経口投与組成物中で一緒に患者に投与することができ、またはそれぞれの薬剤は、別々の経口投与製剤で投与されてよく、あるいは、それぞれの薬剤は、異なる投与経路（例えば、経口および非経口）によって投与されてよい。さらなる活性薬剤は、がんもしくは感染症（例えば、ワクチン、化学療法剤）または新たに登場した治療（例えば、１つまたは複数の免疫抑制成分に対する抗体）などの特定の疾患状態または障害のための標準的な処置として、本技術分野において許容されるものであってよい。別々の投与製剤を使用する場合、本開示のＭＮＫ特異的阻害剤および１つまたは複数のさらなる活性薬剤は、実質的に同じ時に、すなわち、併せて、または別々に時間をずらして、すなわち、逐次的に投与することができ；組合せ治療は、これらレジメンの全てを含むものと理解される。本開示のＭＮＫ特異的阻害剤の投与は、単一用量として投与されてよく、または投与は、数回行ってよく、複数の用量が、それを必要とする被験体に与えられる。
【０２１９】
ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤および免疫抑制成分の阻害剤を含む組合せは、そのそれぞれが連続して（逐次的に）、併せてまたは同時に投与されてよく、被験体（例えば、ヒト）における疾患（がんまたは感染症など）を処置するために使用される。例えば、がんまたは感染性疾患を処置するために有用な組合せは、（ａ）ピジリズマブ、ニボルマブもしくはペムブロリズマブなどのＰＤ−１に対して特異的な抗体；（ｂ）ＭＤＸ−１１０５、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０ＡもしくはＭＳＢ００１０７１８ＣなどのＰＤ−Ｌ１に対して特異的な抗体；（ｃ）トレメリムマブもしくはイピリムマブなどのＣＴＬＡ４に対して特異的な抗体；（ｄ）ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、トラメチニブ、コビメチニブ、スニチニブ、エルロチニブ、パクリタキセルもしくはドセタキセルなどの化学療法剤；（ｅ）ウレルマブなどの抗ＣＤ１３７（４−１ＢＢ）抗体；（ｆ）ＭＤＩ６４６９（ＯＸ−４０アゴニスト）などの抗ＣＤ１３４（ＯＸ−４０）抗体；（ｇ）レナリドミドもしくはポマリドミド；または（ｈ）これらの任意の組合せと組み合わせた、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａまたはＶＩＩｂのＭＮＫ特異的阻害剤のいずれか１つを含む。
【０２２０】
任意の上述の実施形態では、処置または免疫モジュレーションの方法は、化学療法剤をさらに含む組合せの使用を含み、組合せのそれぞれの成分は、本明細書に記載のように、連続して（逐次的に）、併せてまたは同時に投与されてよい。例えば、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａまたはＶＩＩｂのＭＮＫ特異的阻害剤のいずれか１つは、（ａ）ピジリズマブ、ニボルマブもしくはペムブロリズマブなどのＰＤ−１に対して特異的な抗体；（ｂ）ＭＤＸ−１１０５、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０ＡもしくはＭＳＢ００１０７１８ＣなどのＰＤ−Ｌ１に対して特異的な抗体；（ｃ）トレメリムマブもしくはイピリムマブなどのＣＴＬＡ４に対して特異的な抗体；（ｄ）ＭＤＩ６４６９（ＯＸ−４０アゴニスト）などの抗ＣＤ１３４（ＯＸ−４０）抗体；（ｅ）レナリドミドもしくはポマリドミド；または（ｆ）ウレルマブなどの抗ＣＤ１３７（４−１ＢＢ）抗体；などの免疫抑制成分の阻害剤、およびベムラフェニブ、ダブラフェニブ、トラメチニブ、コビメチニブ、スニチニブ、エルロチニブ、パクリタキセル、ドセタキセルなどの化学療法剤と組み合わせることができる。
【０２２１】
任意の上述の実施形態では、処置または免疫モジュレーションの方法は、がん抗原（例えば、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ））に対して特異的なＣＡＲを含有するＴ細胞、もしくは感染した細胞で発現される抗原、または両方をさらに含む組合せの使用を含み、組合せのそれぞれの成分は、本明細書に記載のように、連続して（逐次的に）、併せてまたは同時に投与されてよい。例えば、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩＩａまたはＶＩＩｂのＭＮＫ特異的阻害剤のいずれか１つは、（ａ）ピジリズマブ、ニボルマブもしくはペムブロリズマブなどのＰＤ−１に対して特異的な抗体；（ｂ）ＭＤＸ−１１０５、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０ＡもしくはＭＳＢ００１０７１８ＣなどのＰＤ−Ｌ１に対して特異的な抗体；（ｃ）トレメリムマブもしくはイピリムマブなどのＣＴＬＡ４に対して特異的な抗体；（ｄ）ＭＤＩ６４６９（ＯＸ−４０アゴニスト）などの抗ＣＤ１３４（ＯＸ−４０）抗体；（ｅ）レナリドミドもしくはポマリドミド；または（ｆ）ウレルマブなどの抗ＣＤ１３７（４−１ＢＢ）抗体；などの免疫抑制成分の阻害剤、およびＣＤ３、ＣＥＡＣＡＭ６、ｃ−Ｍｅｔ、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３、ＥｒｂＢ４、ＥｐｈＡ２、ＩＧＦ１Ｒ、ＧＤ２、Ｏ−アセチルＧＤ２、Ｏ−アセチルＧＤ３、ＧＨＲＨＲ、ＧＨＲ、ＦＬＴ１、ＫＤＲ、ＦＬＴ４、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ１５１、ＣＡ１２５、ＣＥＡ、ＣＴＬＡ−４、ＧＩＴＲ、ＢＴＬＡ、ＴＧＦＢＲ２、ＴＧＦＢＲ１、ＩＬ６Ｒ、ｇｐ１３０、ルイスＡ、ルイスＹ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＰＤ１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＨＶＥＭ、ＭＡＧＥ−Ａ、メソセリン、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＰＳＭＡ、ＲＡＮＫ、ＲＯＲ１、ＴＮＦＲＳＦ４、ＣＤ４０、ＣＤ１３７、ＴＷＥＡＫ−Ｒ、ＬＴβＲ、ＬＩＦＲβ、ＬＲＰ５、ＭＵＣ１、ＯＳＭＲβ，ＴＣＲα，ＴＣＲβ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ５２、ＣＤ５６、ＣＤ８０、ＣＤ８１、ＣＤ８６、ＣＤ１２３、ＣＤ１７１、ＣＤ２７６、Ｂ７Ｈ４、ＴＬＲ７、ＴＬＲ９、ＰＴＣＨ１、ＰＴＣＨ１、Ｒｏｂｏ１、α−胎児タンパク質（ＡＦＰ）、Ｆｒｉｚｚｌｅｄ、ＯＸ４０（ＣＤ１３４ともいう）またはＣＤ７９ｂなどのがん抗原（例えば、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ））に対して特異的なＣＡＲを含有するＴ細胞；またはアデノウイルス、ブニヤウイルス、ヘルペスウイルス（例えば、エプスタイン・バーウイルス、サイトメガロウイルス）、パボーバウイルス、パピローマウイルス（例えば、ヒトパピローマウイルス、ＨＰＶ）、パラミクソウイルス、ピコルナウイルス、ラブドウイルス（例えば、狂犬病）、オルソミクソウイルス（例えば、インフルエンザ）、ポックスウイルス（例えば、ワクシニア）、レオウイルス、レトロウイルス、レンチウイルス（例えば、ヒト免疫不全ウイルス、ＨＩＶ）、フラビウイルス（例えば、Ｃ型肝炎ウイルス、ＨＣＶ；Ｂ型肝炎ウイルス、ＨＢＶ）からの分子などの感染した細胞で発現される抗原に対して特異的なＣＡＲを含有するＴ細胞と組み合わせることができる。
【０２２２】
さらなる実施形態では、１つまたは複数の用量のＭＮＫ特異的阻害剤は、１つまたは複数の用量の免疫抑制成分の阻害剤、および任意選択で、１つまたは複数の用量の化学療法剤または感染した細胞において発現するＴＡＡもしくは抗体に対して特異的なＣＡＲを含有するＴ細胞とともに、連続して（逐次的に）、併せてまたは同時に投与される。よりさらなる実施形態では、複数回用量のＭＮＫ特異的阻害剤は、複数回用量の免疫抑制成分の阻害剤および複数回用量の化学療法剤とともに連続して（逐次的に）、併せてまたは同時に投与される。よりさらなる実施形態では、複数回用量のＭＮＫ特異的阻害剤は、１〜約４回用量の免疫抑制成分の阻害剤および１〜約４回用量の化学療法剤とともに連続して（逐次的に）、併せてまたは同時に投与される。全ての上記実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、最初に投与されてよく、または、免疫抑制成分の阻害剤は最初に投与されてよく、または化学療法剤は最初に投与されてよい。
【０２２３】
本組合せは、組合せキットとして存在していてよい。本明細書において使用される「組合せキット」または「キットの部分」という語句は、本開示にしたがって、ＭＮＫ特異的阻害剤、免疫抑制成分の阻害剤、および任意選択で化学療法剤を投与するために使用される１つまたは複数の医薬組成物を意味する。ＭＮＫ特異的阻害剤および免疫抑制成分の阻害剤が同時に投与される場合、組合せキットは、錠剤、バイアルまたは両方などの、単一の医薬組成物中または別々の医薬組成物中にＭＮＫ特異的阻害剤および免疫抑制成分の阻害剤を含有してよく、ならびにバイアル中に化学療法剤を含有してよい。ＭＮＫ特異的阻害剤および免疫抑制成分の阻害剤が同時に投与される場合、組合せキットは、錠剤、バイアルまたは両方などの、単一の医薬組成物中または別々の医薬組成物中にＭＮＫ特異的阻害剤および化学療法剤を含有してよく、ならびにバイアル中に免疫抑制成分の阻害剤を含有してよい。ＭＮＫ特異的阻害剤ならびに免疫抑制成分の阻害剤および／または任意選択で化学療法剤が同時に投与されない場合、組合せキットは、別々の医薬組成物中に、ＭＮＫ特異的阻害剤、免疫抑制成分の阻害剤および任意選択で化学療法剤を含有し、ＭＮＫ特異的阻害剤、免疫抑制成分の阻害剤および任意選択で化学療法剤は、いずれも単一包装中、または別々の包装の別々の医薬組成物中にある。
【０２２４】
一態様では、以下の構成要素を含むキットの部分が提供される：（ａ）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤中のＭＮＫ特異的阻害剤；（ｂ）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤中の免疫抑制成分の阻害剤；および任意選択で（ｃ）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤中の化学療法剤。
【０２２５】
ある特定の実施形態では、キットの部分は、以下の構成要素：（ａ）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤中のＭＮＫ特異的阻害剤；（ｂ）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤中の免疫抑制成分の阻害剤；および任意選択で（ｃ）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤中の化学療法剤を含み、構成要素は、連続、別々および／または同時の投与のために適切な形態で提供される。
【０２２６】
ある特定の実施形態では、キットの部分は、（１）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤中にＭＮＫ特異的阻害剤を含む第１の容器；および（２）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤中に免疫抑制成分の阻害剤を含む第２の容器、および任意選択で（３）薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤中に化学療法剤を含む第３の容器を含む。組合せキットは、投薬および投与の指示などの説明書とともに提供されてもよい。このような投薬および投与の指示は、例えば、薬物の製品ラベルによって、医師に提供される種類のものであってよく、またはこれらは、患者への説明書などの、医師によって提供される種類のものであってよい。
【０２２７】
本明細書において使用される「負荷量」という用語は、例えば、薬物の血中濃度レベルを素早く上昇させるために、被験体に投与される維持量よりも高投与量の、ＭＮＫ特異的阻害剤または免疫抑制成分の阻害剤もしくは化学療法剤の単一用量または短期間レジメンを意味すると理解されるべきである。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の使用のための短期間レジメンは、１〜約１４日；１〜約７日：１〜約３日；約３日間；約２日間；または１日間である。一部の実施形態では、「負荷量」は、治療的に有効なレベルに、化合物（例えば、本開示のＭＮＫ特異的阻害剤）の血中濃度を上昇させることができる。一部の実施形態では、「負荷量」は、化合物の維持量と併せて、治療的に有効なレベルに化合物（例えば、本開示のＭＮＫ特異的阻害剤）の血中濃度を上昇させることができる。「負荷量」は、１日当たり１回、または１日当たり２回以上（例えば、１日当たり４回まで）投与することができる。ある特定の実施形態では、「負荷量」は、１日当たり１回投与される。一部の実施形態では、負荷量は、維持量の２〜約１００倍；約２〜約１０倍；約２〜約５倍；または約２倍から約３倍；約４倍；もしくは約５倍の量である。他の実施形態では、負荷量は、１〜約７日；１〜約５日：１〜約３日；１日間；約２日間；約３日間投与され、その後投与プロトコールが維持される。
【０２２８】
本明細書において使用される「維持量」という用語は、連続的に投与される用量（すなわち、少なくとも２回）を意味すると理解され、これは、化合物（例えば、本開示のＭＮＫ特異的阻害剤）の血中濃度のレベルを治療的に有効なレベルにゆっくりと上昇させるか、または所望の期間にわたって（例えば、時間、日、週、月、年）、このように治療的に有効なレベルを維持することのいずれかを意図する。ある特定の実施形態では、維持量は、１日当たり１回または２回投与され、１日維持量は、総１日負荷量よりも低い。
【０２２９】
本明細書において使用される場合、「ＲＮＡ干渉剤」（ＲＮＡｉ剤）という用語は、典型的には標的のｍＲＮＡ分子の切断によって、標的遺伝子の発現を減少させるまたは阻害する能力を有する、短い一重鎖または二重鎖ＲＮＡポリヌクレオチドを指す。ＲＮＡｉ剤の非限定的な例は、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）およびＰＩＷＩ干渉ＲＮＡ（ｐｉＲＮＡ）を含む。
【０２３０】
前述の実施形態のいずれかでは、本方法は、ＭＮＫ特異的阻害剤および任意選択で抗がん応答を誘導するまたは増強する化合物を投与することを含む。ある特定の実施形態では、誘導されたまたは増強された抗がん応答は、抗腫瘍応答である。さらなる実施形態では、抗がん応答を誘導するまたは増強する治療は、ワクチン、免疫抑制シグナルの阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、細胞傷害剤、化学療法剤またはこれらの任意の組合せである。ある特定の実施形態では、抗がん応答を誘導するまたは増強する治療は、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤またはＶＥＧＦＲ阻害剤などの化学療法剤である。
【０２３１】
本明細書において使用される場合、「Ｂ−Ｒａｆ阻害剤」という用語は、Ｂ−Ｒａｆ癌原遺伝子としても公知のＢ−Ｒａｆの活性を低減させるまたは阻害する任意の薬剤を指す。Ｂ−Ｒａｆは、ＭＡＰキナーゼ／ＥＲＫシグナル伝達経路の調節において役割を果たすセリン／スレオニンキナーゼであり、これは、細胞分裂、分化および分泌に影響する。Ｂ−Ｒａｆ阻害剤の非限定的な例は、ソラフェニブ、ベムラフェニブおよびダブラフェニブを含む。ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ソラフェニブ、ベムラフェニブ、ダブラフェニブまたはこれらの任意の組合せなどのＢ−Ｒａｆ阻害剤と組み合わせて使用される。さらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤およびＰＤ−１特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤およびＰＤ−Ｌ１特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤およびＣＴＬＡ４特異的抗体もしくはその結合断片または融合タンパク質と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤およびＬＡＧ３特異的抗体もしくはその結合断片または融合タンパク質と組み合わせて使用される。
【０２３２】
本明細書において使用される場合、「ＭＥＫ阻害剤」という用語は、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼであるキナーゼ酵素ＭＥＫ１および／またはＭＥＫ２の活性を低減させるまたは阻害する任意の薬剤を指す。ＭＥＫ阻害剤の非限定的な例は、トラメチニブ、セルメチニブ、ビニメチニブ、ＰＤ−３２５９０１、コビメチニブ、ＣＩ−１０４０およびＰＤ０３５９０１を含む。ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、トラメチニブ、セルメチニブ、ビニメチニブ、ＰＤ−３２５９０１、コビメチニブ、ＣＩ−１０４０、ＰＤ０３５９０１またはこれらの任意の組合せなどのＭＥＫ阻害剤と組み合わせて使用される。さらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＭＥＫ阻害剤およびＰＤ−１特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＭＥＫ阻害剤およびＰＤ−Ｌ１特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＭＥＫ阻害剤およびＣＴＬＡ４特異的抗体もしくはその結合断片または融合タンパク質と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＭＥＫ阻害剤およびＬＡＧ３特異的抗体もしくはその結合断片または融合タンパク質と組み合わせて使用される。
【０２３３】
本明細書において使用される場合、「血管内皮成長因子阻害剤」または「ＶＥＧＦ阻害剤」という用語は、ＶＥＧＦの活性を低減させるまたは阻害する任意の薬剤を指す。ＶＥＧＦは、脈管形成、血管新生を促進し、血管透過性を増加させる血管新生促進因子である。ＶＥＧＦは、ＶＥＧＦ−Ａ、ＶＥＧＦ−Ｂ、ＶＥＧＦ−Ｃ、ＶＥＧＦ−Ｄ、ＶＥＧＦ−Ｅまたはこれらの任意の組合せを指してよい。ＶＥＧＦ阻害剤の非限定的な例は、ベバシズマブ、ラニビズマブ、ＡＺＤ２１７１、カンナビジオール（cannbidiol）、ＴＨＣまたはこれらの任意の組合せを含む。さらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＶＥＧＦ阻害剤およびＰＤ−１特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＶＥＧＦ阻害剤およびＰＤ−Ｌ１特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＶＥＧＦ阻害剤およびＣＴＬＡ４特異的抗体もしくはその結合断片または融合タンパク質と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＶＥＧＦ阻害剤およびＬＡＧ３特異的抗体もしくはその結合断片または融合タンパク質と組み合わせて使用される。
【０２３４】
本明細書において使用される場合、「血管内皮成長因子受容体阻害剤」または「ＶＥＧＦＲ阻害剤」という用語は、ＶＥＧＦ特異的なチロシンキナーゼ受容体であるＶＥＧＦＲ１、ＶＥＧＦＲ２、ＶＥＧＦＲ３またはこれらの任意の組合せの活性を阻害する任意の薬剤を指す。ＶＥＧＦＲ阻害剤の非限定的な例は、アキシチニブ、スニチニブ、バタラニブ、ソラフェニブ、ＧＷ−７８６０３４、ＣＰ−５４７６３２、ＡＧ−０１３７３６、レンバチニブ、モテサニブ、パゾパニブ、レゴラフェニブ、ラムシルマブ、ＣＤＰ−７９１またはこれらの任意の組合せを含む。さらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＶＥＧＦＲ阻害剤およびＰＤ−１特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＶＥＧＦＲ阻害剤およびＰＤ−Ｌ１特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＶＥＧＦＲ阻害剤およびＣＴＬＡ４特異的抗体もしくはその結合断片または融合タンパク質と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、ＶＥＧＦＲ阻害剤およびＬＡＧ３特異的抗体もしくはその結合断片または融合タンパク質と組み合わせて使用される。
【０２３５】
本明細書において使用される場合、「チロシンキナーゼ阻害剤」という用語は、チロシンキナーゼを阻害する任意の薬剤を指す。チロシンキナーゼ阻害剤は、チロシンキナーゼおよびアロステリック阻害剤の触媒結合部位で競合的なＡＴＰ阻害をもたらす阻害剤を含む。チロシンキナーゼ阻害剤の非限定的な例は、アキシチニブ、イマチニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ラパチニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、パゾパニブ、バンデタニブおよびダサチニブを含む。ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、イマチニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ラパチニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、パゾパニブ、バンデタニブ、ダサチニブまたはこれらの任意の組合せなどのチロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせて使用される。さらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、チロシンキナーゼ阻害剤およびＰＤ−１特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、チロシンキナーゼ阻害剤およびＰＤ−Ｌ１特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、チロシンキナーゼ阻害剤およびＣＴＬＡ４特異的抗体もしくはその結合断片または融合タンパク質と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、チロシンキナーゼ阻害剤およびＬＡＧ３特異的抗体もしくはその結合断片または融合タンパク質と組み合わせて使用される。
【０２３６】
本明細書において使用される場合、「細胞傷害剤」という用語は、細胞成長を阻害し、細胞増殖を阻害して、細胞死などをもたらす任意の薬剤を指す。ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、アクチノマイシン、ブレオマイシン（belomycin）、プリカマイシン、マイトマイシン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシン、ピラルビシン（pirarubucin）、アクラルビシン、ミトキサントロンまたはこれらの組合せなどの細胞傷害剤と組み合わせて使用される。抗有糸分裂剤または抗微小管剤は、パクリタキセル、ドセタキセル、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビンまたはこれらの組合せであってよい。さらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、細胞傷害剤およびＰＤ−１特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、細胞傷害剤およびＰＤ−Ｌ１特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、細胞傷害剤およびＣＴＬＡ４特異的抗体もしくはその結合断片または融合タンパク質と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、細胞傷害剤およびＬＡＧ３特異的抗体もしくはその結合断片または融合タンパク質と組み合わせて使用される。
【０２３７】
ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤による免疫モジュレーションは、少なくとも１つの抗がん剤とともに使用される。抗がん剤は、化学療法薬を含む。化学療法剤は、例えば、クロマチン機能の阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、微小管阻害薬物、ＤＮＡ損傷剤、代謝拮抗剤（葉酸アンタゴニスト、ピリミジンアナログ、プリンアナログおよび糖修飾アナログなど）、ＤＮＡ合成阻害剤、ＤＮＡ相互作用剤（挿入剤など）またはＤＮＡ修復阻害剤を含む。さらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、化学療法剤およびＰＤ−１特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、化学療法剤およびＰＤ−Ｌ１特異的抗体またはその結合断片と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、化学療法剤およびＣＴＬＡ４特異的抗体もしくはその結合断片または融合タンパク質と組み合わせて使用される。よりさらなる実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤は、化学療法剤およびＬＡＧ３特異的抗体もしくはその結合断片または融合タンパク質と組み合わせて使用される。
【０２３８】
化学療法剤は、例えば、以下の群を含む：ピリミジンアナログ（５−フルオロウラシル、フロクスウリジン、カペシタビン、ゲムシタビンおよびシタラビン）およびプリンアナログ、葉酸アンタゴニストおよび関連する阻害剤（メトトレキセート、ペメトレキセド、メルカプトプリン、チオグアニン、ペントスタチンおよび２−クロロデオキシアデノシン（クラドリビン））などの代謝拮抗剤／抗がん剤；ビンカアルカロイド（ビンブラスチン、ビンクリスチンおよびビノレルビン）などの天然物質、タキサン（パクリタキセル、ドセタキセル）、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ノコダゾール、エポチロン、エリブリンおよびナベルビンなどの微小管かく乱物質を含む抗増殖剤／抗有糸分裂剤；エピジポドフィロトキシン（エトポシド、テニポシド）；ＤＮＡ損傷剤（アクチノマイシン、アムサクリン、アントラサイクリン、ブレオマイシン、ブスルファン、カンプトテシン、カルボプラチン、クロラムブシル、シスプラチン、シクロホスファミド、シトキサン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、ヘキサメチルメラミンオキサリプラチン、イホスファミド、メルファラン、メクロレタミン（merchlorehtamine）、マイトマイシン、ミトキサントロン、ニトロソウレア、プリカマイシン、プロカルバジン、タキソール、タキソテール、テモゾラミド、テニポシド、トリエチレンチオホスホラミドおよびエトポシド（ＶＰ１６））；ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤（アザシチジン）；ダクチノマイシン（アクチノマイシンＤ）、ダウノルビシン、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、イダルビシン、アントラサイクリン、ミトキサントロン、ブレオマイシン、プリカマイシン（ミスラマイシン）およびマイトマイシンなどの抗生物質；酵素（Ｌ−アスパラギンを全身的に代謝し、それら自身がアスパラギン合成能を持たない細胞を欠乏させるＬ−アスパラギナーゼ）；抗血小板剤；ナイトロジェンマスタード（メクロレタミン、シクロホスファミドおよびアナログ、メルファラン、クロラムブシル）、エチレンイミンおよびメチルメラミン（ヘキサメチルメラミンおよびチオテパ）、アルキルスルホネート（ブスルファン）、ニトロソウレア（カルムスチン（ＢＣＮＵ）およびアナログ、ストレプトゾシン）、トリアゼン（ダカルバジン（ＤＴＩＣ））などの抗増殖／抗有糸分裂アルキル化剤；葉酸アナログ（メトトレキセート）などの抗増殖／抗有糸分裂代謝拮抗剤；白金配位錯体（シスプラチン、カルボプラチン）、プロカルバジン、ヒドロキシウレア、ミトタン、アミノグルテチミド；ホルモン、ホルモンアナログ（エストロゲン、タモキシフェン、ゴセレリン、ビカルタミド、ニルタミド）およびアロマターゼ阻害剤（レトロゾール、アナストロゾール）；抗凝固剤（ヘパリン、合成ヘパリン塩および他のトロンビン阻害剤）；血栓溶解剤（組織プラスミノーゲン活性化因子、ストレプトキナーゼおよびウロキナーゼなど）、アスピリン、ジピリダモール、チクロピジン、クロピドグレル、アブシキシマブ；抗遊走剤；抗分泌剤（ブレベルジン）；免疫抑制剤（シクロスポリン、タクロリムス（ＦＫ−５０６）、シロリムス（ラパマイシン）、アザチオプリン、ミコフェノール酸モ��ェチル）；抗血管新生化合物（ＴＮＰ４７０、ゲニステイン、ポマリドミド）およびｚｉｖ−アフリベルセプトなどの成長因子阻害剤（血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）阻害剤；線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）阻害剤）；アポトーシスタンパク質（ＩＡＰ）アンタゴニストの阻害剤（ビリナパント）；ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤（ボリノスタット、ロミデプシン、チダミド、パノビノスタット、モセチノスタット、アベキシノスタット、ベリノスタット、エンチノスタット、レスミノスタット、ギビノスタット、キシノスタット、ＳＢ９３９）；プロテアソーム阻害剤（イキサゾミブ）；アンジオテンシン受容体遮断剤；一酸化窒素ドナー；アンチセンスオリゴヌクレオチド；抗体（トラスツズマブ、パニツムマブ、ペルツズマブ、セツキシマブ、アダリムマブ、ゴリムマブ、インフリキシマブ、リツキシマブ、オクレリズマブ、オファツムマブ、オビヌツズマブ、アレムツズマブ、アブシキシマブ、アトリズマブ、ダクリズマブ、デノスマブ、エファリズマブ、エロツズマブ、ロベリズマブ、ルプリズマブ、ウステキヌマブ、ビジリズマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、ブレンツキシマブベドチン（brentuximb  vedotin））；キメラ抗原受容体；細胞周期阻害剤（フラボピリドール、ロスコビチン、ブリオスタチン−１）および分化誘導剤（トレチノイン）；ｍＴＯＲ阻害剤；トポイソメラーゼ阻害剤（ドキソルビシン（アドリアマイシン）、アムサクリン、カンプトテシン、ダウノルビシン、ダクチノマイシン、エニポシド、エピルビシン、エトポシド、イダルビシン、イリノテカン（ＣＰＴ−１１）およびミトキサントロン、トポテカン、イリノテカン）、コルチコステロイド（コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン（methylpednisolone）、プレドニゾンおよびプレニゾロン）；ＰＡＲＰ阻害剤（ニラパリブ、オラパリブ）；接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤（デファクチニブ（ＶＳ−６０６３）、ＶＳ−４７１８、ＶＳ−６０６２、ＧＳＫ２２５６０９８）；成長因子シグナル伝達キナーゼ阻害剤（セジラニブ、ガルニセルチブ、ロシレチニブ、バンデタニブ、アファチニブ、ＥＧＦ８１６、ＡＺＤ４５４７）；ｃ−Ｍｅｔ阻害剤（カプマチニブ、ＩＮＣ２８０）；ＡＬＫ阻害剤（セリチニブ、クリゾチニブ）；ミトコンドリア機能障害誘導剤；コレラ毒素、リシン、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓアデニレートシクラーゼ毒素またはジフテリア毒素およびカスパーゼ活性剤などの毒素；ならびにクロマチンかく乱物質。
【０２３９】
ある特定の実施形態では、化学療法剤は、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、ＶＥＧＦＲ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、抗有糸分裂剤またはこれらの任意の組合せである。具体的な実施形態では、化学療法剤は、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、トラメチニブ、コビメチニブ、スニチニブ、エルロチニブ、パクリタキセル、ドセタキセルまたはこれらの任意の組合せである。
【０２４０】
ある特定の実施形態では、抗がん応答を誘導するまたは増強する治療、例えば、ワクチン、免疫抑制シグナルの阻害剤、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、ＶＥＧＦＲ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、細胞傷害剤、化学療法剤またはこれらの任意の組合せは、本明細書に記載の免疫モジュレーション方法において、ＭＮＫ特異的阻害剤と組み合わせて使用され、抗がん応答を誘導するまたは増強する治療は、１つまたは複数の阻害性免疫チェックポイント分子に対するＭＮＫ特異的阻害剤の阻害活性を、アンタゴナイズする、低減させる、弱めるまたは低下させることはない。ＭＮＫ特異的阻害剤とのアンタゴニスト性の組合せは、１つまたは複数の阻害性免疫チェックポイント分子において、抗がん応答を誘導するまたは増強する治療とともに、および伴わずに、ＭＮＫ特異的阻害剤の阻害活性を読み取るように、Ｔ細胞活性化のレベルを測定することによって（例えば、本明細書の実施例２に記載）確認され得る。ある特定の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤および抗がん応答を誘導するまたは増強する治療の組合せは、１つもしくは複数の阻害性免疫チェックポイント分子に対するＭＮＫ特異的阻害剤の阻害活性をアンタゴナイズせず、または１つまたは複数の阻害性免疫チェックポイント分子に対するＭＮＫ特異的阻害剤の阻害活性のみを、約２５％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、約２％未満、約１％未満、約０．５％未満、約０．２５％未満、または約０．１％未満減少させる。
【０２４１】
感染症または感染性疾患の状況において、ＭＮＫ特異的阻害剤による免疫モジュレーションは、抗ウイルス剤（例えば、抗ＨＩＶ剤）、抗生剤、抗菌剤、抗寄生虫剤または抗真菌剤と組み合わせて使用される。抗ＨＩＶ薬の例は、例えば、逆転写酵素阻害剤（例えば、ＡＺＴ、ｄｄｌ、３ＴＣおよびｄ４Ｔ）、プロテアーゼ阻害剤（例えば、メシル酸サキナビル、リトナビル、メシル酸ネルフィナビル、アンプレナビル、メシル酸デラビルジン、サキナビルおよびロピナビル／リトナビル）またはＣＣＲ５受容体アンタゴニストを含む。抗ウイルス剤は、例えば、抗ヘルペスウイルス剤、抗インフルエンザウイルス剤、インターフェロン−αおよびβまたは種々の免疫グロブリンを含む。
【０２４２】
ＭＮＫ特異的阻害剤による免疫モジュレーションは、抗ウイルスワクチン、抗細菌ワクチン、抗真菌ワクチン、抗寄生虫ワクチンと一緒に使用されてよく、またはこのようなワクチンを有する製剤として製造されてよい。感染性疾患のためのワクチンは、例えば、ポリオワクチン、麻疹ワクチン、日本脳炎ワクチン、ＢＣＧワクチン、三種ワクチン、流行性耳下腺炎ウイルスワクチン、水痘ウイルスワクチン、インフルエンザワクチン、Ａ型肝炎ワクチン、Ｂ型肝炎ワクチン、ＨＩＶワクチン、マラリアワクチンおよびコレラワクチンを含む。
【０２４３】
「それを必要とする被験体」とは、本明細書において提供される化合物またはその組成物を用いて処置または回復のために受け入れられる、疾患、障害または状態（例えば、がんのような過剰増殖障害、慢性感染症）の危険性があるかまたは患っている被験体を指す。本明細書に記載の治療剤の投与を必要とする被験体は、がんであると疑われる被験体、がんがあると示された被験体、がんワクチンを受けている被験体、感染病原体に感染していると疑われる被験体、感染症もしくは感染性疾患であると示された被験体、または感染病原体に対するワクチンを受けている被験体を含む。被験体は、ヒト、ペット、家畜、ショー動物、動物園の動物、または他の動物などのがんの発症または感染が可能な任意の生物体であってよい。例えば、被験体は、ヒト、非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、ウサギ、ウマなどであってよい。ある特定の実施形態では、必要とする被験体はヒトである。特定の実施形態では、必要とする被験体は、免疫耐性が関係する、がんまたは慢性感染症などの疾患を有する。
【０２４４】
任意の上述の実施形態では、ＭＮＫ特異的阻害剤（例えば、構造（Ｉ）の化合物）を含む医薬組成物は、ＭＮＫ特異的活性を阻害するおよび免疫抑制を低減させるために十分な量で、好ましくは、それに対して許容される毒性で、被験体に投与される。適切な濃度および投与量は、当業者によって容易に決定することができる。
【０２４５】
ＭＮＫ特異的阻害剤またはその薬学的に許容される塩は、治療有効量で投与され、これは、使用される特異的化合物の活性；化合物の代謝安定性および作用の長さ；患者の年齢、体重、全身の健康、性別および食事；投与の方法および時間；排泄の速度；薬物の組合せ；特定の障害または状態の重症度；ならびに治療を受けている被験体を含む、様々な要因に応じて異なる。
【０２４６】
「有効量」または「治療有効量」は、哺乳動物（例えば、ヒト）に投与される場合に、ヒトなどの哺乳動物の疾患の処置を助けるための、本明細書に定義の免疫抑制の緩和効果に十分である、本明細書に記載のＭＮＫ特異的阻害剤の量を指す。「治療有効量」をなすＭＮＫ特異的阻害剤の量は、化合物、状態およびその重症度、投与の様式および処置される哺乳動物の年齢に応じて異なるが、当業者であれば、その自身の知識および本開示を考慮して、日常的に決定することができる。個々の有効成分を指す場合、単独で投与される治療有効用量は、その単独の有効成分を指す。組合せについて言及する場合、治療有効用量は、連続して、併せてまたは同時にのいずれかで投与されて、治療効果をもたらす有効成分の組合せ量を指す。
【０２４７】
本明細書において提供される、免疫細胞の活性を増加させる；免疫応答を誘導する、増強するもしくは延長する；抗原特異的Ｔ細胞応答を刺激する；免疫抑制シグナル伝達経路を阻害する；内在性の抗がんのもしくは抗感染性因子の免疫を促進する；またはがん細胞もしくは感染病原体／感染細胞の免疫耐性を阻害する、治療的なＭＮＫ特異的阻害剤およびその医薬組成物は、がん、感染症もしくは感染性疾患を発症する危険性を有するまたは危険性がある被験体に、治療有効量または用量で投与される。このような用量は、特異的治療剤または医薬組成物、投与経路、被験体の状態、すなわち、疾患の段階、ウイルス／細菌／真菌／寄生虫の負荷、疾患によって引き起こされる症状の重症度、全身の健康状態、ならびに年齢、性別および体重を含む、種々の要因、ならびに医薬分野の当業者に明らかな他の要因に応じて、決定または調整することができる。同様に、疾患または障害を処置するための治療的用量は、医薬分野の当業者によって理解されるパラメータに従って決定することができる。
【０２４８】
単独治療が抗がん治療として十分であり得る例は、強い、内在性の（既存の）抗がん免疫応答を有する患者の状況においてである。例えば、腫瘍は、抗原特異的な腫瘍浸潤性リンパ球（ＴＩＬ）の大きな集団を有していてよい。しかし、腫瘍微小環境における活性な抗がん免疫応答は、腫瘍細胞および腫瘍関連マクロファージを誘導して、抗がん免疫応答をダウンモジュレートする免疫阻害性シグナル（例えば、ＰＤ−Ｌ１）を発現してよい。ＭＮＫ特異的阻害剤などの免疫抑制シグナルの阻害剤の追加は、腫瘍の適応免疫耐性機構を阻害し、内在性の抗がん免疫応答（例えば、ＴＩＬ）によって腫瘍の退縮を可能にする。ある特定の実施形態では、抗がん応答を促進する単独治療は、ＭＮＫ特異的阻害剤、ワクチン、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、ＶＥＧＦＲ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、細胞傷害剤、化学療法剤またはこれらの任意の組合せであってよい。ある特定の実施形態では、免疫抑制シグナル成分の阻害剤は、ＭＮＫ、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＨＶＥＭ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＧＡＬ９、ＴＩＭ３、２Ｂ４、アデノシン、Ａ２ａＲ、ＴＧＦβ、ＩＬ−１０、ＩＬ−３５、アルギナーゼ、ＩＤＯまたはこれらの任意の組合せの阻害剤である。
【０２４９】
他の例において、組合せ治療は、弱い、内在性の抗がん免疫応答を有する患者の状況において有用であり得る。例えば、腫瘍の環境は、腫瘍が低い免疫原性であるので、より少数のＴＩＬを有していてよい。新規の抗がん応答を誘導するまたは増強する治療は、内在性の抗がん免疫応答を促進または増加させることができる。しかし、単一治療と同様に、この抗がん免疫応答の有効性は、免疫抑制シグナル成分（例えば、ＰＤ−Ｌ１）の上方調節によって制限され得る。例えば、抗がん応答を誘導するまたは増強する治療（「プライム」）と免疫抑制シグナルの阻害剤（「ブースト」）の組合せは、腫瘍の退縮の可能性を、誘導、促進または改善し得る。あるいは、組合せ治療は、免疫抑制シグナル成分の阻害剤（「プライム」）と、腫瘍の退縮の可能性を、誘導もしくは促進、または改善し得る抗がん応答を誘導または増強する薬剤（「ブースト」）を含んでいてよい。抗がん応答を誘導するまたは増強する治療（「プライム」）と免疫抑制シグナル成分の阻害剤または下方調節因子（「ブースト」）の組合せは、内在性の抗腫瘍免疫応答を可能にして、このように機能することによって、腫瘍の退縮を誘導し得る。ある特定の実施形態では、抗がん応答を誘導もしくは増強または促進する組合せ治療は、１つまたは複数の以下のものとともに使用されるＭＮＫ特異的阻害剤であってよい：ワクチン、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、ＶＥＧＦＲ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、細胞傷害剤、化学療法剤、またはこれらの任意の組合せ。ある特定の実施形態では、免疫抑制シグナル成分の阻害剤は、ＭＮＫ、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＨＶＥＭ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＧＡＬ９、ＴＩＭ３、２Ｂ４、アデノシン、Ａ２ａＲ、ＴＧＦβ、ＩＬ−１０、ＩＬ−３５、アルギナーゼまたはＩＤＯの阻害剤である。ある特定の実施形態では、組合せ治療は、「プライム」および「ブースト」の処置を含み、それぞれの処置は、被験体に、同時にまたは併せて投与される。他の実施形態では、「ブースト」処置は、「プライム」処置の後に連続して投与される。
【０２５０】
一般に、治療剤は、治療有効量または用量で投与される。治療有効量または用量は、選択された投与経路、組成物の製剤、患者の応答、状態の重症度、被験体の体重および処方する医師の判断を含む、いくつかの要因に従って変更される。投与量は、個々の患者の必要性に応じて、経時的に増加または減少することができる。ある特定の例において、患者は、最初、低用量を与えられ、その後、患者の許容できる有効投与量に増加される。加えて、患者は、所定の期間および特定の時間増分（例えば、毎日、毎週、隔週、毎月、四半期、年２回、毎年など）にわたって、複数の用量を投与されてよい。有効量または投薬レジメンの決定は、十分に、当業者の能力内である。
【０２５１】
組合せを指す場合、治療的な有効用量は、連続してまたは同時にのいずれかで投与されて、治療効果をもたらす有効成分の組合せ量を指す（同じ製剤、または同時的では別々の製剤中）。最も効果的な用量は、一般に、実験モデルおよび／または臨床試験を使用して決定され得る。本明細書に記載の治療剤（予防的利益のために投与される場合を含む）のための前臨床および臨床試験の設計および実行は、十分に、関連する分野における当業者の技能内である。
【０２５２】
治療剤の投与経路は、経口、腹腔内、経皮、皮下、静脈内または筋肉内注射、吸入、局所、病巣内、点滴；リポソームが媒介する送達；局所、髄腔内、歯肉ポケット、直腸、気管支内、経鼻、経粘膜、腸管、眼もしくは耳への送達、または本技術分野において公知の任意の他の方法であってよい。
【実施例】
【０２５３】
（実施例１）
ＭＮＫ特異的な阻害は、免疫チェックポイント受容体およびリガンドの発現を減少させる
Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）シグナル伝達の活性化において、Ｔ細胞の増殖は、サイトカイン（例えば、ＩＬ−２）を産生し、免疫チェックポイント受容体の発現を誘導する。プログラム死１（ＰＤ−１）は、活性化されたＴ細胞および骨髄細胞の表面上で発現する阻害性チェックポイント受容体である。ＰＤ−１のリガンドである、プログラム死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１、Ｂ７−Ｈ１／ＣＤ２７４）は、Ｔ細胞または正常な上皮細胞によって発現しないが、抗原提示細胞によって発現し、いくつかのがんにおいて過剰発現する。ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１の相互作用は、Ｔ細胞における抗増殖効果、最終的にＴ細胞消耗およびアポトーシスをもたらす。活性化したＴ細胞および腫瘍細胞におけるＭＮＫの役割を研究するために、免疫チェックポイント制御分子に対するＭＮＫ特異的阻害剤の効果を調べた。
【０２５４】
ＰＤ−１（ＣＤ２７９）の発現
ＰＤ−１の発現に対するＭＮＫ特異的阻害剤の効果を調べるために、ジャーカット細胞（クローンＥ６．１、ＡＴＣＣ、形質転換されたＴ細胞）を使用し、これは、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）のシグナル伝達を通じて活性化された場合に、ＰＤ−１を発現する。簡単には、ジャーカット細胞を、１×Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐおよび１０％ＦＢＳを有する１×ＲＰＭＩ中で成長させ、次いで、約３×１０６のジャーカット細胞を１μｇ／ｍＬのＰＨＡ（Ｓｉｇｍａ）および５０ｎｇ／ｍＬのＰＭＡ（Ｓｉｇｍａ）の存在下で活性化した。試験細胞を、種々の濃度のＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７（０、０．０１、０．１、１、３および１０μＭ）で同時に処理した。４８時間後、培養物の上清を収集し、ヒトＩＬ−２  ＥＬＩＳＡ  ＤｕｏＳｅｔ（登録商標）（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮ）を使用して、ＩＬ−２の存在について、サンドイッチＥＬＩＳＡにより調べた。ジャーカット細胞におけるＰＤ−１のレベルを、固定できる死細胞株（１：２０，０００；ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）とともに細胞を、４℃で１５分間インキュベートし、フロー染色緩衝液（１×ＰＢＳ、４％ＦＢＳおよび１ｍＭのＥＤＴＡ）で２回洗浄し、ヒトＦｃＲブロックとともにインキュベートし、次いで、アロフィコシアニン（ＡＰＣ）コンジュゲート化抗ＰＤ−１抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）を４℃で３０分間接触させ、フロー緩衝液で２回洗浄し、最終的に細胞を、固定化緩衝液を用いて４℃で２０分間固定することにより調べた。固定後、細胞を、フロー緩衝液で２回洗浄し、フロー緩衝液に再懸濁し、ＢＤ  Ａｃｃｕｒｉ  Ｃ６フローサイトメーターを使用して蛍光を評価した。データをＣ６サイトメーターソフトウェア（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使用して分析した。
【０２５５】
図１Ａおよび１Ｃに示すように、ＰＨＡおよびＰＭＡによるジャーカットＴ細胞の活性化は、それぞれ、非誘導細胞（無刺激）と比較して、刺激されたジャーカット細胞の約２５〜３０％の細胞表面上でのＰＤ−１の発現を誘導し、１，０００倍上昇したＩＬ−２サイトカイン産生を誘導した。ＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７を用いるＰＨＡ／ＰＭＡ活性化ジャーカットＴ細胞の処理は、対照と比較して、最高濃度の５０％低減まで、免疫阻害性受容体ＰＤ−１の発現の濃度依存的な低下をもたらした（図１Ｂを参照）。加えて、図１Ｃは、化合物１０７によるＭＮＫ特異的な阻害が、ＩＬ−２のレベルによって測定されるサイトカイン産生を変化させないので、ＰＤ−１のこの低減が、ジャーカットＴ細胞活性化自体における阻止のためではなかったことを示す（図１Ｃを参照）。最後に、化合物１０７によるＭＮＫ特異的な阻害は、細胞生存率に対する効果を有さなかった（図１Ｄ）。
【０２５６】
実際に、ジャーカットＴ細胞アッセイにおける種々の異なるＭＮＫ特異的阻害剤は、細胞生存率に影響を及ぼすことなく、免疫チェックポイント阻害剤を下方調節する能力を示した。このような化合物を表２Ａにまとめる。
【０２５７】
【表２Ａ−１】
0006681919.tif 000039
【表２Ａ−２】
0006681919.tif 000040
【表２Ａ−３】
0006681919.tif 000041
【表２Ａ−４】
0006681919.tif 000042
【表２Ａ−５】
0006681919.tif 000043
【０２５８】
【表２Ｂ】
0006681919.tif 000044
【０２５９】
一部の特異的なＭＮＫ阻害剤化合物は、わずかな抗ＰＤ−１活性を有し、一部は、細胞生存率に対する効果を有するが、試験された大部分の化合物は、検出可能な毒性がなく、免疫チェックポイント阻害剤を翻訳的に下方調節する能力があり、一方で、非特異的ＭＮＫ阻害剤は、いずれも毒性があり、または免疫チェックポイント発現（ＰＤ−１）に対する効果を有さなかった。
【０２６０】
ＰＤ−Ｌ１（Ｂ７−Ｈ１、ＣＤ２７４）の発現
ＰＤ−１のリガンドであるＰＤ−Ｌ１は、様々な腫瘍タイプにおいて上方調節することが示されている（Mahoneyら、Nat.  Rev.  Drug  Discov.  １４巻、５６１頁、２０１５年）。ＭＮＫの特異的な阻害がＰＤ−Ｌ１の発現に対して効果を有するか否かを調べるために、恒常的にＰＤ−Ｌ１を発現する、細胞を含むいくつかの腫瘍細胞株を、指示された濃度のｅＦＴ５０８またはビヒクル（ＤＭＳＯ）で４８時間処理した。細胞を、プロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤（Ｂｉｏｔｏｏｌ、Ｈｏｕｓｔｏｎ  ＴＸ）を補充した１×ＲＩＰＡ溶解緩衝液（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ  ＭＡ）中で溶解した。細胞可溶化液中のタンパク質濃度をＢＣＡタンパク質アッセイ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、Ｗａｌｔｈａｍ  ＭＡ）によって定量し、等量の全タンパク質をＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分離し、抗ＰＤ−Ｌ１およびＧＡＰＤＨ抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｄａｌｌａｓ  ＴＸ）を用いて免疫ブロットし、ＬＩ−ＣＯＲ  Ｏｄｙｓｓｅｙ  ｉｍａｇｅｒ（ＬＩ−ＣＯＲ、Ｌｉｎｃｏｌｎ  ＮＥ）によって可視化した。Ａ５４９（ヒト肺腺癌上皮細胞株）、ＨＢＬ−１（散在性の大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）細胞株の活性化されたヒトＢ細胞様（ＡＢＣ）サブタイプ）、ＡＭＯ−１（ヒト形質細胞腫細胞株）、ＭＤＡ−ＭＢ−３６１（ヒト乳腺癌細胞株）およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１（転移性ヒト乳がん細胞株）を試験した。ＨＢＬ−１細胞およびＡＭＯ−１細胞を、１×Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐおよび１０％ウシ胎仔血清ＦＢＳを有する１×ＲＰＭＩ中で別々に成長させ、次いで、新鮮な培地中の２〜４×１０６のＨＢＬ−１細胞またはＡＭＯ−１細胞を、ビヒクルのみ（ＤＭＳＯ）または種々の濃度（０．０１、０．１、１、３または１０μＭ）のＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７と、別々に、４８時間接触させた。Ａ５４９細胞、ＭＤＡ−ＭＢ−３６１細胞およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を、１×Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐおよび１０％ＦＢＳを有する１×ＤＭＥＭ中で別々に成長させ、次いで、新鮮な培地中の２〜４×１０６のＡ５４９細胞、ＭＤＡ−ＭＢ−３６１細胞またはＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を、ビヒクルのみ（ＤＭＳＯ）または種々の濃度（０．０１、０．１、１、３または１０μＭ）のＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７と、別々に、４８時間接触させた。全ての細胞可溶化液を、１×プロテアーゼおよびフォスファターゼ阻害剤（ＢｉｏＴｏｏｌ、Ｈｏｕｓｔｏｎ、ＴＸ）を補充した１×放射性免疫沈降分析アッセイ（ＲＩＰＡ）の緩衝液（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ、ＭＡ）を使用して調製した。タンパク質濃度を、ＢＣＡタンパク質アッセイ試薬（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）を用いて推定し、約２５μｇの全タンパク質を用いて４〜１２％Ｂｉｓ−ＴｒｉｓＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で分離し、以下の抗体：（ａ）ＰＤ−Ｌ１を検出するための抗ＰＤ−Ｌ１（ＥＭＤ  Ｍｉｌｉｐｏｒｅ、Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ、ＭＡ）、（ｂ）リン酸化されたｅＩＦ４Ｅを検出するための抗リンｅＩＦ４ｅ（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｄａｌｌａｓ、ＴＸ）、および（ｃ）内部標準としてＧＡＰＤＨを検出するための抗ＧＡＰＤＨ抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｄａｌｌａｓ、ＴＸ）を用いるウエスタンブロットにより探索した。ウエスタンブロットによって検出されるタンパク質レベルを、Ｉｍａｇｅ  Ｓｔｕｄｉｏ（商標）Ｌｉｔｅ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ（ＬＩ−ＣＯＲ、Ｌｉｎｃｏｌｎ、ＮＥ）を使用して定量した。
【０２６１】
図２Ａ〜２Ｅは、試験した全ての細胞株が、高度にグリコシル化された形態のＰＤ−Ｌ１（上側のバンド、５５ｋＤａ）および低度にグリコシル化された形態のＰＤ−Ｌ１（３３ｋＤａ）の発現を示したことを示す。ＭＮＫ特異的な阻害は、試験された全てのがん細胞タイプ：（Ａ）乳がんＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞；（Ｂ）Ｂ細胞リンパ腫ＨＢＬ−１細胞；（Ｃ）肺腺癌Ａ５４９細胞；（Ｄ）乳腺癌ＭＤＡ−ＭＢ−３６１細胞；および（Ｅ）多発性骨髄腫ＡＭＯ−１細胞において、高度にグリコシル化されたＰＤ−Ｌ１タンパク質（上側のバンド）の約３０〜４０％の低減をもたらした。陽性対照として、ｅＩＦ４Ｅは、ＭＮＫ酵素活性の直接的な標的であるので（データを、図２Ａおよび２Ｂのみに示す）、ＭＮＫの阻害を、ｅＩＦ４Ｅリン酸化の抑止を検出することによって確認し、これは、キャップ依存翻訳による遺伝子発現の調節に影響を与え得る。
【０２６２】
結論
これらのデータは、ＭＮＫが、エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞におけるＰＤ−１）および標的細胞（例えば、抗原提示細胞におけるＰＤ−Ｌ１）の両方における免疫チェックポイント系分子の発現に影響を及ぼすことを実証する。ＭＮＫ特異的阻害剤の存在は、サイトカイン（例えば、ＩＬ−２）産生および細胞生存率に対する効果が最小であるか効果を有さないので、データは、ＭＮＫ機能の特異的な阻害が、Ｔ細胞機能を減少することなく、阻害性免疫チェックポイントシグナル伝達を除去するであろうことも示す。
【０２６３】
（実施例２）
一次Ｔ細胞における免疫チェックポイント受容体の発現に対するＭＮＫ特異的な阻害効果
ＭＮＫの特異的な阻害が、患者のＴ細胞におけるＰＤ−１およびＬＡＧ３の発現に対して効果を有するか否かを調べるために、健康な提供者からの新鮮なヒトＰａｎ−Ｔ細胞（純度９９％のＣＤ３＋マーカー）をＡｌｌ  Ｃｅｌｌｓ（Ａｌａｍｅｄａ、ＣＡ）から購入し、これを、間接的な免疫磁気Ｐａｎ−Ｔ標識システムを使用して、単核細胞からネガティブに単離し、試験した。約３×１０５のＴ細胞を、製造者のプロトコール（Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）の通り、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８磁気ビーズを使用して活性化した。簡単には、Ｔ細胞を活性化するために使用される新鮮な一次Ｔ細胞とビーズの比率は１：１であった（８０，０００個のＴ細胞毎に、２μｌのビーズを添加）。試験細胞を、種々の濃度（０．０１、０．１、１、３および１０μＭ）のＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７で同時に処理した。４８時間後、培養物の上清を収集し、ヒトＩＬ−２  ＥＬＩＳＡ  ＤｕｏＳｅｔ（登録商標）（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮ）を使用して、ＩＬ−２の存在について、サンドイッチＥＬＩＳＡにより調べた。ＰＤ−１の発現、ＬＡＧ３の発現および他のＴ細胞マーカーのレベルを、固定できる死細胞株（１：２０，０００；ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）とともに細胞を、４℃で１５分間インキュベートし、フロー染色緩衝液（１×ＰＢＳ、４％ＦＢＳおよび１ｍＭのＥＤＴＡ）で２回洗浄し、ヒトＦｃＲブロックとともにインキュベートし、次いで、アロフィコシアニン（ＡＰＣ）コンジュゲート化抗ＰＤ−１抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）またはアロフィコシアニン（ＡＰＣ）コンジュゲート化抗ＬＡＧ３抗体（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）ならびにフィコエリトリン（ＰＥ）標識化抗ＣＤ３（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）およびＰＥ標識化抗ＣＤ４５（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を４℃で３０分間接触させ、フロー緩衝液で２回洗浄し、最終的に細胞を、固定化緩衝液（Ｃｙｔｏｆｉｘ（商標）、ＢＤ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を用いて４℃で１０分間固定することにより調べた。固定後、細胞を、フロー緩衝液で２回洗浄し、フロー緩衝液に再懸濁し、ＢＤ  Ａｃｃｕｒｉ  Ｃ６フローサイトメーターを使用して蛍光を評価した。データをＣ６サイトメーターソフトウェア（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使用して分析した。
【０２６４】
ＰＤ−１（ＣＤ２７９）の発現
ジャーカットＴ細胞における観察と一致して、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで活性化されたＴ細胞は、約５０％の活性化されたＴ細胞においてＰＤ−１の細胞表面の発現が増加し（図３Ａ）、これは、Ｔ細胞が、これらのＴ細胞受容体（ＴＣＲ）によって活性化されたことを示した。新鮮な一次Ｔ細胞の活性化は、サイトカイン応答の誘導を調べることにより、さらに確認された。特に、図３Ｅは、ＩＬ−２が、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズへの曝露において１，０００倍を超えて誘導されたことを示し、これは、ＴＣＲによる活性化をさらに示した。活性化されたＴ細胞のＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７による処理は、１０μＭで観察された７６％の最大阻害とともに、免疫阻害性受容体ＰＤ−１の発現の用量依存的な低下をもたらした（図３Ｂを参照）。加えて、化合物１０７によるＭＮＫ特異的な阻害は、ＩＬ−２のレベルによって測定されるサイトカイン産生の活性化を検出可能に変化させず（図３Ｅを参照）、Ｔ細胞活性化が、ＭＮＫ特異的阻害剤によって影響されないことを示した。最後に、化合物１０７によるＭＮＫ特異的な阻害は、Ｔ細胞生存率に対する効果を有さなかった（図３Ｆ）。
【０２６５】
ＬＡＧ３（ＣＤ２２３）の発現
ジャーカットＴ細胞における観察とも一致して、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８クロスリンキングによるＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を介した一次Ｔ細胞の刺激は、ＬＡＧ３の発現を誘導し、これは、これらの細胞表面におけるＬＡＧ３についておよそ２０％のポジティブなＴ細胞染色をもたらし（図３Ｃ）、同様にＩＬ−２産生の増加をもたらした（図３Ｅ）。ＬＡＧ３は、ＣＤ８＋Ｔ細胞およびＴｒｅｇ細胞において見いだされ、これは、生得的な免疫応答を阻害するために機能する。ＣＤ３／ＣＤ２８抗体ビーズで活性化されたＴ細胞のＭＮＫ特異的阻害剤である化合物１０７による処理は、免疫阻害性受容体ＬＡＧ３の発現の濃度依存的な低下をもたらし、１０μＭで６２％の低減が観察された（図３Ｄ）。
【０２６６】
ＩＬ−１０の産生
ＩＬ−１０は、複数の細胞タイプ（例えば、Ｔｒｅｇ、Ｔｈ１、Ｔｈ２、細胞傷害性Ｔ細胞、樹状細胞、マクロファージ、骨髄由来サプレッサー細胞）によって分泌される免疫抑制サイトカインであり、これは、腫瘍の微小環境の状況において、免疫応答を阻害することができる（例えば、Rabinovichら、Annu.  Rev.  Immunol.  ２５巻、２６７頁、２００７年；Rowlettら、Am.  J.  Physiol.  Gastrointest.  Liver  Physiol.  ２９４巻、Ｇ４５２頁、２００８年；およびRuffellおよびCoussens、Cancer  Cell  ２７巻、４６２頁、２０１５年を参照）。興味深いことに、化合物１０７は、いくつかの他のＭＮＫ特異的阻害剤化合物のように（表３）、１０μＭで９６％の最大阻害とともに、用量依存的にＩＬ−１０の産生を阻害した（図３Ｇ）。
【０２６７】
【表３−１】
0006681919.tif 000045
【０２６８】
結論
実施例１の結果と併せて、これらのデータは、ＭＮＫが、直接的にまたはタンパク質の翻訳レベルのいずれかで、複数の免疫チェックポイント受容体（例えば、Ｔ細胞におけるＰＤ−１およびＬＡＧ３）およびリガンド（例えば、抗原提示細胞におけるＰＤ−Ｌ１）の発現を制御することを実証する。加えて、ＭＮＫの特異的な阻害は、免疫抑制サイトカインであるＩＬ−１０の産生の低減をもたらした。最終的に、正常なＴ細胞機能は、ＴＣＲ刺激から生じるＩＬ−２発現またはＴ細胞生存率によって評価されるように、化合物１０７によって減少しないことが明らかになり、細胞のシグナル伝達経路に対する化合物１０７の選択的な効果を再度実証している。
【０２６９】
（実施例３）
抗原提示および免疫認識に対するＭＮＫ特異的阻害剤の効果
ＨＬＡクラスＩＩタンパク質のレベルを調節するＭＮＫ特異的阻害剤化合物の能力を、散在性の大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）細胞株であるＴＭＤ８において評価した。簡単には、ヒトＤＬＢＣＬ細胞株ＴＭＤ８（ＡＴＣＣ）を、ペニシリンＧ（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）および１０％ＦＢＳを補充したＲＰＭＩ培地で、５％ＣＯ２の加湿雰囲気中、３７℃を維持して培養した。約２〜４×１０６のＴＭＤ８細胞を、薬物で処理する前２４時間に１０ｃｍプレートに播種した。次の日、細胞を、ビヒクル対照（ＤＭＳＯ）または指示された濃度の化合物１０７のいずれかで処理した（図７）。細胞を処理の４８時間後に収集した。
【０２７０】
処理した細胞を収集し、ＰＢＳで洗浄し、１×ＲＩＰＡ緩衝液（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ）に４℃で１５分間溶解した。可溶化液を、１４，０００×ｒｐｍで１５分間遠心分離することによって清澄化し、上清を回収した。可溶性分画中のタンパク質濃度を、ＢＣＡタンパク質アッセイ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して決定した。タンパク質を、４〜２０％のＢｉｓ−Ｔｒｉｓ勾配ポリアクリルアミドゲル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に溶解し、ニトロセルロース膜に移した。得られたブロットを、Ｏｄｙｓｓｅｙブロッキング溶液（ＬＩ−ＣＯＲ）を用いて室温で１時間ブロックし、次いで、抗ＨＬＡ−ＤＱＡ１（Ａｂｃａｍ、ａｂ１２８９５９；１：５０００希釈）、抗リンｅＩＦ４Ｅ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）および抗ｅＩＦ４Ｅ（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ）とともに、４℃で終夜インキュベートした。次の日、ブロットを、ＴＢＳＴで１０分間、３回洗浄し、ヤギ抗ウサギ蛍光コンジュゲート化二次抗体（ＩＲＤｙｅ  ８００ＣＷ、１：２０，０００；ＬＩ−ＣＯＲ）とともに、室温で１時間インキュベートした。ブロットを洗浄し、スキャンし、特異的なタンパク質を、ＬＩ−ＣＯＲ  Ｏｄｙｓｓｅｙ  ｉｎｆｒａｒｅｄ  ｉｍａｇｅｒを使用して検出した。使用した負荷対照は、β−アクチン（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１：３０００）であった。
【０２７１】
結果
ＨＬＡクラスＩＩタンパク質ＨＬＡ−ＤＱＡ１の発現およびｅＩＦ４Ｅのリン酸化を、ウエスタンブロット分析により分析した。化合物１０７は、ｅＩＦ４Ｅタンパク質の総レベルに影響を及ぼすことなく、ｅＩＦ４Ｅのリン酸化を強力に阻害した。ＨＬＡ−ＤＱＡ１タンパク質の基礎レベルは、リンパ腫ＴＭＤ８細胞株において低かった。しかしながら、３００ｎＭまたは１０μＭのいずれかの化合物１０７による処理の４８時間後、ＨＬＡ−ＤＱＡ１タンパク質レベルの用量依存的な増加が観察されたが（ＥＣ５０が約３００ｎＭと推定）、β−アクチン（対照）のレベルは変化しなかった（図７）。
【０２７２】
結論
ＤＬＢＣＬにおけるＨＬＡクラスＩＩ遺伝子およびタンパク質発現の検出可能な減少は、腫瘍免疫監視の低下および不十分な患者の生存率に関連している。化合物１０７によるＤＬＢＣＬ細胞株ＴＭＤ８の処理は、ＨＬＡ−ＩＩ  ＨＬＡ−ＤＱＡ１のタンパク質発現の用量依存的な増加をもたらした。これらの結果は、特異的なＭＮＫ特異的阻害剤が、ＨＬＡ／ＭＨＣクラスＩＩタンパク質のレベルを調節することによって、抗原提示における重要な役割を果たすことができ、これは、免疫応答の誘発のために重要であり得る。
【０２７３】
（実施例４）
ＭＮＫ特異的阻害剤または免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせたＭＮＫ特異的阻害剤のｉｎ  ｖｉｖｏの効果
がんにおけるＭＮＫ特異的阻害剤の有効性を評価するために、ｉｎ  ｖｉｖｏ同種移植腫瘍モデルを使用した。簡単には、１０％ＦＢＳを補充したＤＭＥＭ中で成長させたＣＴ２６（マウス直腸癌）細胞を、指数関数的な成長中に収集し、免疫適格性のＢＡＬＢ／ｃマウスへの腫瘍の接種のためにカウントした。それぞれのマウスについて、成長培地（０．１ｍｌ）およびＭａｔｒｉｇｅｌ（登録商標）ｍａｔｒｉｘ（０．１ｍｌ）（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ  ＣＡ）中に１：１の比率（体積対体積）の細胞を含む、０．２ｍｌ体積で、右側腹部領域に、０．３×１０６のＣＴ２６腫瘍細胞を接種した。腫瘍を、研究を開始する前に１００〜２００ｍｍ３に成長させた。処置を開始する前に、全ての動物の体重を量り、腫瘍体積を、ノギスを使用して測定した。腫瘍体積は、任意に与えられた処置の有効性に影響を及ぼし得るので、腫瘍が同様のサイズに達した後、マウスを、ビヒクルおよび試験物処置群に無作為に割り当てた。各調査群は８匹のマウスを含有し、各群は以下の処置の１つを受けた：（１）１０％  １−メチル−２−ピロリジノンおよび９０％プロピレングリコール中の化合物１０７、１ｍｇ／ｋｇの用量を経口で１日１回与えた；（２）ＰＢＳ中の抗ＰＤ１（ＢｉｏＸｃｅｌｌ、Ｌｅｂａｎｏｎ、ＮＨ）、０．５ｍｇ／マウスの用量を腹腔内に４日毎に１回与えた（Weiら、PLoS  One  ８巻、ｅ８４９２７頁、２０１３年によって記載）；（３）１ｍｇ／ｋｇの化合物１０７を経口で１日１回および０．５ｍｇ／マウスの抗ＰＤ１を腹腔内に４日毎に１回の組合せ；（４）ビヒクルのみの対照。
【０２７４】
研究の間、腫瘍のサイズ（皮下の移植片）を、週に２回、ノギスを用いて長さおよび幅を測定した。腫瘍体積は、ＮＣＩ標準に従って、式Ｌ×Ｗ×Ｗ／２によって計算した。腫瘍の成長阻害（ＴＧＩ％）は、抗腫瘍有効性の指標であり、これは、以下のようにして表される：ＴＧＩ（％）＝１００×（１−（ΔＴ／ΔＣ））。ΔＴおよびΔＣは、処置開始時の腫瘍体積の平均に対する、処置群および対照群の腫瘍体積の平均の変化であった。群の平均腫瘍体積が約２０００〜２，５００ｍｍ３のサイズに達するまで、全ての実験を継続した。平均腫瘍サイズが、約２０００ｍｍ３〜２，５００より大きくなった群は、薬物の有効性について腫瘍の質を確認するために安楽死させた。また、それぞれのマウスの体重を、研究の開始前に少なくとも１回、および研究中は週に２回回収した。体重の変化は忍容性の指標であり、体重変化の割合は以下のようにして計算される：体重の変化（％）＝１００×（体重終了時−体重開始時）／体重開始時。マウスは、投薬中の死亡率、移動度、猫背の姿勢、立毛または他の苦痛の兆候についても毎日観察した。マウスが、毒性または毒性および腫瘍の負荷の組合せによって体重の２０％超減少した場合、安楽死させた。明らかに毒性がある場合、マウスは処置から外し、臨床的観察および体重の測定を毎日行った。
【０２７５】
結果
化合物１０７を、ＢＡＬＢ／ｃマウスの同種移植ＣＴ２６直腸癌腫瘍モデルにおいて、単一薬剤、および抗ＰＤ−１モノクローナル抗体との組合せについて、ｉｎ  ｖｉｖｏで評価した。測定した腫瘍の成長阻害（ＴＧＩ）および体重変化を表３にまとめる。
【０２７６】
【表３−２】
0006681919.tif 000046
【０２７７】
１日１回（ＱＤ）の１ｍｇ／ｋｇの化合物１０７の経口処置は、１５日の処置期間中に、約３４％の中程度の腫瘍の成長阻害を生じたが（図４Ａ）、数匹の化合物１０７処置動物が、投薬の休止後、退行が継続する腫瘍を有していた（２２日で約５５％）ことに注意することが重要である。４日毎に１回の０．５ｍｇ／マウスの用量での抗ＰＤ−１抗体によるＣＴ２６同種移植腫瘍を有するマウスの腹腔内処置も、いくらか低い約２３％の腫瘍の成長阻害をもたらした。化合物１０７群と同様に、複数の抗ＰＤ−１処置動物は、処置の中止後、退行が継続する腫瘍を有していた（２２日で約３３％）。体重には、有意な影響がなく（図４Ｂ）、処置が良好に忍容されたことを意味する。驚くべきことに、化合物１０７と抗ＰＤ−１抗体の組合せは、１５日で、顕著に相乗的な約９９％の腫瘍の成長阻害を生じ（図４Ａ）、大部分の動物は、試験の最後には腫瘍がなくなった（２２日）。
【０２７８】
腫瘍の再チャレンジ
各処置群の治療に応答したかまたは腫瘍がなくなった（処置の８日後）、先に処置された同種移植マウスに、新たなＣＴ２６腫瘍を再移植し、ナイーブＢＡＬＢ／ｃマウスと比較して腫瘍の成長を評価することにより、長期間の免疫記憶の発生について、試験した。簡単には、処置されたマウスは、再移植され、ナイーブは、前と同様に、０．１ｍｌの成長培地および等しい０．１ｍｌ体積比のＭａｔｒｉｇｅｌ（登録商標）ｍａｔｒｉｘ（１：１の体積対体積比）で、左側腹部領域に、腫瘍細胞を初回移植した。これらの未処置マウスの腫瘍を、本明細書に記載の移植に続き、測定した。再チャレンジの実験の結果を表４にまとめる。
【０２７９】
【表４】
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【０２８０】
全ての再チャレンジしたマウスは、前に化合物１０７に曝露された動物の０／４、前に抗ＰＤ−１に曝露された動物の０／４、および前に化合物１０７と抗ＰＤ−１の組合せに曝露された動物の０／７で、ＣＴ２６腫瘍の形成に対して抵抗性で、任意に測定可能な腫瘍を示した（図５）。対照的に、全てのナイーブＢＡＬＢ／ｃ対照マウス（１０／１０）は、測定可能なＣＴ２６腫瘍を形成した。予想外に、この結果は、化合物１０７単独治療または化合物１０７と抗ＰＤ−１の組合せに対して前に応答を示したマウスが、ＣＴ２６腫瘍において発現する腫瘍抗原に対する長期間の免疫記憶を有していたことを示す。
【０２８１】
（実施例５）
Ｔｒｅｇ細胞に対するＭＮＫ特異的阻害剤のｉｎ  ｖｉｖｏの効果
腫瘍が誘導する免疫抑制は、Ｔ調節性（Ｔｒｅｇ）細胞などの腫瘍の微小環境における免疫抑制性浸潤の蓄積を含む、複数の機構が関与する。Ｔｒｅｇ細胞が、がんにおける免疫回避機構において役割を果たし得ること、および腫瘍が、ＴＲｅｇ細胞を通じて抗腫瘍免疫を強力に抑止し得ることの証拠が増え続けている（Schabowskyら、Curr.  Opin.  Investig.  Drugs  ８巻、１００２頁、２００７年；Liuら、J.  Immunol.  １８２巻、６１６０頁、２００９年）。変化した免疫チェックポイント機構がＣＴ２６同種移植モデルにおけるＴｒｅｇ細胞に対する効果を有するか否かを調べるために、処置されたマウスから単離された腫瘍中の腫瘍浸潤性リンパ球（ＴＩＬ）について、Ｔエフェクター（ＣＤ８＋）およびＴ調節性の（ＦＯＸＰ３＋）細胞の集合における変化について調べた。
【０２８２】
確立されたＣＴ２６腫瘍（１００〜２００ｍｍ３）を有するマウスを、実施例４に記載のようにして、化合物１０７、抗ＰＤ１抗体または化合物１０７および抗ＰＤ−１抗体の組合せで処置した。処置の４日後、マウスを安楽死させ、腫瘍を切除した。切除した腫瘍をカミソリの刃を用いて細かく解体し、ＲＰＭＩ中でコラゲナーゼ、ヒアルロニダーゼおよびＤＮＡｓｅ  Ｉ（Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ、Ｌａｋｅｗｏｏｄ  ＮＪ）とともにインキュベートし、１×トリプシン−ＥＤＴＡ中でインキュベートし、最終的に、７０ミクロンの細胞濾過フィルター（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ  ＣＡ）を通過させることによって、単一細胞の懸濁液が生じた。腫瘍中に存在するＴエフェクター（ＴＥ、ＣＤ３＋／ＣＤ８＋）細胞およびＴ調節性（Ｔｒｅｇ、ＣＤ４＋／ＦＯＸＰ３＋）細胞の量を分析するために、細胞を固定できる死細胞株（１：２０，０００；ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）とともに４℃で１５分間インキュベートし、フロー染色緩衝液（１×ＰＢＳ、４％ＦＢＳおよび１ｍＭのＥＤＴＡ）で２回洗浄し、ヒトＦｃＲブロック（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ  ＣＡ）とともにインキュベートし、製造者のプロトコールに従って、ＣＤ４５（ＣＤ４５  ＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ  ＣＡ）、ＣＤ３（ＣＤ３−ＡＰＣ、ＥＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ  ＣＡ）およびＣＤ８（ＣＤ８−ＰＥ、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ  ＣＡ）に対して特異的な抗体混合物、またはＣＤ４５（ＣＤ４５  ＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）およびＣＤ４（ＣＤ４−ＡＰＣ、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）に対して特異的な抗体カクテルを用いて染色した。試料をＣＤ４５／ＣＤ３／ＣＤ８について評価するために、細胞をフロー緩衝液で２回洗浄し、固定化緩衝液とともに４℃で１０分間インキュベートした。固定後、細胞を、フロー緩衝液で２回洗浄し、フローサイトメトリー分析のために、フロー緩衝液に再懸濁した。ＣＤ４５／ＣＤ４について評価された試料を、製造者のプロトコールに従って、抗ＦＯＸＰ３抗体（ＦＯＸＰ３−ＰＥ、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）およびＦＯＸＰ３／転写因子染色緩衝液セット（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ  ＣＡ）を使用して、ＦＯＸＰ３の細胞内染色のために、さらに処理した。細胞を１×透過処理緩衝液で２回洗浄し、フローサイトメトリー分析のために透過処理緩衝液に再懸濁した。データを回収し、ＢＤ  Ａｃｃｕｒｉ  Ｃ６  ｆｌｏｗ  ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ  ＣＡ）を使用して分析した。ＴＥ細胞とＴｒｅｇ細胞の比率を、ＣＤ４５＋リンパ球の集合中に存在するＣＤ３＋／ＣＤ８＋細胞の割合を決定し、同じ集合中に存在するＣＤ４＋／ＦＯＸＰ３＋の割合で割ることによって、計算した。
【０２８３】
結果
ビヒクル対照において、平均ＴＥ：Ｔｒｅｇ比率は３．４であった（図６）。化合物１０７で処置されたマウスは、平均ＴＥ：Ｔｒｅｇ比率が９．７に増加したことを示した。同様の結果が抗ＰＤ−１抗体で観察され、処置は平均ＴＥ：Ｔｒｅｇ比率を８．８に増加させ、これは、この化合物についての以前の報告と一致した（Duraiswamyら、Cancer  Res.  ７３巻、３５９１頁、２０１３年）。最終的に、化合物１０７と抗ＰＤ−１抗体の組合せは、平均ＴＥ：Ｔｒｅｇ比率を８．４に増加させた。
【０２８４】
結論
これらの結果は、ＭＮＫ特異的阻害剤が、ｉｎ  ｖｉｖｏで腫瘍内のＴＩＬの集合をモジュレートすることができ、Ｔｒｅｇ細胞の数を低減させ、ＴＥ細胞をより効率的な明らかな病原細胞にすることを実証する。
【０２８５】
本明細書に記載の種々の実施形態は、提供されたさらなる実施形態と組み合わせることができる。本明細書において言及されたおよび／または出願データシートに列挙された、全ての特許、特許出願公開、特許出願および非特許刊行物は、それらの全体が、参照によって本明細書に組み込まれる。実施形態の態様は、必要に応じて、よりさらなる実施形態を提供するために、種々の特許、出願および刊行物の概念を使用して、改変することができる。
【０２８６】
一般に、以下の特許請求の範囲において、使用される用語は、特許請求の範囲を、明細書および特許請求の範囲に開示されている特定の実施形態に限定するものと解釈されるべきではなく、このような特許請求の範囲に付与されるものと十分に均等な範囲にそって、全ての可能な実施形態を含むものと解釈されるべきである。したがって、特許請求の範囲は本開示によって限定されない。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図１Ｄ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図２Ｅ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図３Ｅ】
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【図３Ｆ】
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【図３Ｇ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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