(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）によって表される化合物、又はその薬学的に許容される塩：
【化１】
0006726192.tif 000037
式中、
Ｒ１は、存在ごとに独立して、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、（アルキル）ＯＣＨ２−、（アルケニル）ＯＣＨ２−、（アラルキル）ＯＣＨ２−、（アルコキシアルキル）ＯＣＨ２−、（アリール）ＯＣＨ２−、又は（（トリアルキルシリル）アルキル）ＯＣＨ２−を表し；
Ｒ２は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し；及び
Ｒ３は、（アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アルケニル）ＯＣ（Ｏ）−、（シクロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−、又は（ハロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す。
【請求項２】
式（ＩＩＩ）に従う化合物、又はその薬学的に許容される塩：
【化２】
0006726192.tif 000038
式中、
Ｒ１は、存在ごとに独立して、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、（アルキル）ＯＣＨ２−、（アルケニル）ＯＣＨ２−、（アラルキル）ＯＣＨ２−、（アルコキシアルキル）ＯＣＨ２−、（アリール）ＯＣＨ２−、又は（（トリアルキルシリル）アルキル）ＯＣＨ２−を表し；
Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し；
Ｒ３は、（アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アルケニル）ＯＣ（Ｏ）−、（シクロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−、又は（ハロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表し；及び
Ｒ４は、アルキル、アラルキル、アルケニル、アリール、又はシクロアルキルを表す。
【請求項３】
Ｒ４がイソプロピル又は９−フルオレニルメチルを表す、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がトリアルキルシリルを表す、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１がトリエチルシリルを表す、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２がメチルを表す、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ３が（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ３が（９−フルオレニルメチル）ＯＣ（Ｏ）−を表す、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
ＡｍＢＣＵ−アリルエステル、又はその薬学的に許容される塩。
【化３】
0006726192.tif 000039
【請求項１０】
式（ＩＶ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を調製する方法であって、
【化４】
0006726192.tif 000040
式（Ｉ）の化合物又はそれらの薬学的に許容される塩と、Ｒ５−ＸＨ又はＲ５−Ｘ−Ｍによって表される化合物とを混合し、それによって前記式（ＩＶ）の化合物を生成する工程を含み、
前記式（Ｉ）の化合物は次式によって表され、
【化５】
0006726192.tif 000041
式中、
Ｒ１は、存在ごとに独立して、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、（アルキル）ＯＣＨ２−、（アルケニル）ＯＣＨ２−、（アラルキル）ＯＣＨ２−、（アルコキシアルキル）ＯＣＨ２−、（アリール）ＯＣＨ２−、又は（（トリアルキルシリル）アルキル）ＯＣＨ２−を表し；
Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し；
Ｒ３は、（アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アルケニル）ＯＣ（Ｏ）−、（シクロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−、又は（ハロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表し；
Ｘは、Ｏ、ＮＨ、又はＮ（Ｒ６）を表し； 
Ｒ５及びＲ６は、各々独立して、アルキル、アラルキル、アルケニル、アリール、又はシクロアルキルを表し；及び
Ｍは、アルカリ金属カチオン、アルカリ土類カチオン、又は遷移金属カチオンである、方法。
【請求項１１】
式（ＩＩ）の化合物とホスホリルアジドとを混合し、それによって前記式（Ｉ）の化合物を生成する工程をさらに含み；式（ＩＩ）の化合物は次式によって表される、請求項１０に記載の方法。
【化６】
0006726192.tif 000042
【請求項１２】
前記ホスホリルアジドがジフェニルホスホリルアジドである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
式（ＩＩ）の化合物とホスホリルアジドとを混合する前記工程が、ブレンステッド塩基をさらに含む、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記ブレンステッド塩基が第三級アミンである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
ＸがＯであり；ＭがＮａ、Ｋ、又はＴｉ（ＯＲ５）３である、請求項１０から１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩とＲ５−ＸＨ又はＲ５−Ｘ−Ｍによって表される化合物とを混合する前記工程が、ルイス酸をさらに含む、請求項１０から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記ルイス酸がチタンアルコキシドである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
Ｒ１がトリアルキルシリルを表す、請求項１０から１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
Ｒ１がトリエチルシリルを表す、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
Ｒ２がメチルを表す、請求項１０から１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
Ｒ３が（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す、請求項１０から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
Ｒ３が（９−フルオレニルメチル）ＯＣ（Ｏ）−を表す、請求項２１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の相互参照】
【０００１】
本出願は、２０１５年１月８日出願の米国仮特許出願第６２／１００，９８８号の優先権の利益を主張する。
【政府の支援】
【０００２】
本発明は、アメリカ国立衛生研究所によって承認された許可番号第ＧＭ０８０４３６号の下、米国政府の支援により成された。米国政府は本発明において一定の権利を有する。
【背景技術】
【０００３】
半世紀以上にわたり、アムホテリシンＢ（ＡｍＢ）は、全身性真菌感染の治療のゴールドスタンダードとしての役割を果たしてきた。ＡｍＢは、広範囲の活性を有しており、抗真菌性であり、かつ、複数の他の薬剤に対して耐性の真菌株に対してさえも有効である。次世代の抗真菌剤では、臨床導入後、僅か２〜３年以内に、それらに対する耐性が見られたのに対し、意外にも、ＡｍＢの臨床的に有意な微生物耐性は、極めて希なままである。残念ながら、ＡｍＢは非常に毒性でもある。よって、ＡｍＢを用いた全身性真菌感染の効果的な治療は、大抵は、有効性の欠如によってではなく、用量制限性の副作用によって不可能となる。リポソーム送達システムを使用して、ある程度の進歩がなされてきたが、これらの治療は、購入が憚られるほど高価であり、顕著な毒性が依然として残っている。よって、低毒性だが同等の効果を有するＡｍＢ誘導体は、人の健康に対し、大きな効果をもたらすであろう。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明のある態様は、式（Ｉ）によって表される化合物、又はそれらの薬学的に許容される塩である：
【化１】
0006726192.tif 000002
［式中、
Ｒ１は、存在ごとに独立して、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、（アルキル）ＯＣＨ２−、（アルケニル）ＯＣＨ２−、（アラルキル）ＯＣＨ２−、（アルコキシアルキル）ＯＣＨ２−、（アリール）ＯＣＨ２−、又は（（トリアルキルシリル）アルキル）ＯＣＨ２−を表し；
Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し；
Ｒ３は、（アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アルケニル）ＯＣ（Ｏ）−、（シクロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−、又は（ハロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す］。
【０００５】
本発明のある態様は、式（ＩＩ）によって表される化合物、又はそれらの薬学的に許容される塩である：
【化２】
0006726192.tif 000003
［式中、
Ｒ１は、存在ごとに独立して、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、（アルキル）ＯＣＨ２−、（アルケニル）ＯＣＨ２−、（アラルキル）ＯＣＨ２−、（アルコキシアルキル）ＯＣＨ２−、（アリール）ＯＣＨ２−、又は（（トリアルキルシリル）アルキル）ＯＣＨ２−を表し；
Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し；
Ｒ３は、（アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アルケニル）ＯＣ（Ｏ）−、（シクロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−、又は（ハロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す］。
【０００６】
本発明のある態様は、式（ＩＩＩ）によって表される化合物、又はそれらの薬学的に許容される塩である：
【化３】
0006726192.tif 000004
［式中、
Ｒ１は、存在ごとに独立して、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、（アルキル）ＯＣＨ２−、（アルケニル）ＯＣＨ２−、（アラルキル）ＯＣＨ２−、（アルコキシアルキル）ＯＣＨ２−、（アリール）ＯＣＨ２−、又は（（トリアルキルシリル）アルキル）ＯＣＨ２−を表し；
Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し；
Ｒ３は、（アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アルケニル）ＯＣ（Ｏ）−、（シクロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−、又は（ハロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表し；
Ｒ４は、アルキル、アラルキル、アルケニル、アリール、又はシクロアルキルを表す］。
【０００７】
本発明のある態様は、ＡｍＢＣＵ−アリルエステル、又はそれらの薬学的に許容される塩である：
【化４】
0006726192.tif 000005
【０００８】
本発明のある態様は、式（ＩＶ）の化合物、又はそれらの薬学的に許容される塩を調製する方法であって、該方法は、式（Ｉ）の化合物又はそれらの薬学的に許容される塩と、Ｒ５−ＸＨ又はＲ５−Ｘ−Ｍによって表される化合物とを混合し、それによって式（ＩＶ）の化合物を生成する工程を含み、該式（ＩＶ）の化合物は以下の式によって表される：
【化５】
0006726192.tif 000006
［式中、
Ｒ１は、存在ごとに独立して、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、（アルキル）ＯＣＨ２−、（アルケニル）ＯＣＨ２−、（アラルキル）ＯＣＨ２−、（アルコキシアルキル）ＯＣＨ２−、（アリール）ＯＣＨ２−、又は（（トリアルキルシリル）アルキル）ＯＣＨ２−を表し；
Ｒ２は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し；
Ｒ３は、（アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アルケニル）ＯＣ（Ｏ）−、（シクロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−、又は（ハロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表し；
Ｘは、Ｏ、ＮＨ、又はＮ（Ｒ６）を表し；
Ｒ５及びＲ６は、各々独立して、アルキル、アラルキル、アルケニル、アリール、又はシクロアルキルを表し；
Ｍは、アルカリ金属カチオン、アルカリ土類カチオン、又は遷移金属カチオンである］。
【０００９】
本発明のある態様は、本明細書及び図面に開示される式（ＩＶ）の化合物の製造方法である。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】ＡｍＢ及びその特定の誘導体の構造式
【図２】２Ａは、最小限に保護された中間体１からのＡｍＢ尿素誘導体の合成の一般的な合成スキームを示す。２Ｂは、ＡｍＢからのＡｍＢＭＵ及びＡｍＢＡＵの三段階合成、並びに、ＡｍＢからのＡｍＢＣＵの四段階合成を示す。
【図３】オキサゾリジノン２を様々なヘテロ原子求核剤と反応させることによる、Ｃ１６アミノＡｍＢ誘導体を調製するための幾つかの合成スキーム
【図４】ＡｍＢ尿素及びカルバメートの代替的合成。ＴＥＳ基を用いたＣ１５アルコールの保護により、イソシアナート５の単離が可能となる。５からルイス酸介在性のカルバメート形成が可能である。
【図５】カンジダ・アルビカンス（C. albicans）を静脈内接種され、次に、２時間後に、ビヒクル対照、ＡｍＢ、ＡｍＢＭＵ、又はＡｍＢＡＵの単回腹腔内投与処置された好中球減少マウスにおける腎臓の真菌負荷（コロニー形成単位、ｃｆｕ）を示す３つのグラフ群。パネルＡ、１ｍｇ／ｋｇのＡｍＢ、ＡｍＢＭＵ、又はＡｍＢＡＵ。パネルＢ、４ｍｇ／ｋｇのＡｍＢ、ＡｍＢＭＵ、又はＡｍＢＡＵ。パネルＣ、１６ｍｇ／ｋｇのＡｍＢ、ＡｍＢＭＵ、又はＡｍＢＡＵ。
【図６】ＡｍＢ、ＡｍＢＭＵ、又はＡｍＢＡＵを提示された用量で単回静脈内投与された健康なマウスにおける致死率を示すグラフ
【発明を実施するための形態】
【００１１】
ＡｍＢが酵母及びヒト細胞に対して毒性となる機構の理解の欠如により、これまで、臨床的に成功した誘導体の合理的開発が妨げられてきた。長年にわたり受け入れられてきたＡｍＢの作用機構は、電気化学勾配の混乱及び最終的には細胞死につながる、細胞膜内におけるイオンチャンネルの形成であった。このモデルは、低毒性の誘導体の開発が、ヒト細胞と対比して、酵母における選択的イオンチャンネルの形成を要件とすることを示唆している。この長年にわたるモデルに反して、我々のグループは、最近、ＡｍＢの主要な作用機構が、イオンチャンネルの形成ではなく、単純なエルゴステロール結合であることを発見した。酵母細胞とヒト細胞は、異なるステロール、すなわち、エルゴステロールとコレステロールをそれぞれ有する。したがって、この新しいモデルは、改善された治療指数へのより単純かつより実用的なロードマップを示唆している；すなわち、低毒性のＡｍＢ誘導体は、強力なエルゴステロール結合能を保持するが、コレステロール結合能を欠いているであろう。誘導体に関して、最近、マイコサミン糖（mycosamine sugar）からＣ２’ヒドロキシル基を除去すると、驚くべきことにエルゴステロール結合能を保持するが、コレステロールに対する結合を示さない誘導体Ｃ２’ｄｅＯＡｍＢ（図１）が生じることが報告された。Wilcock, BC et al., J Am Chem Soc 135:8488(2013)。優先的なステロール結合の仮説と一致して、インビトロでの研究により、Ｃ２’ｄｅＯＡｍＢは、酵母に対しては毒性であるが、ヒト細胞に対しては毒性ではないことが実証された。
【００１２】
Ｃ２’アルコールの除去により、効率的なエルゴステロール結合を維持しつつ、コレステロール結合能の喪失が何故生じるかについて説明するため、我々は、ＡｍＢ構造が、両方のステロールと結合可能な、基底状態の立体配座で存在するという仮説を立てた。Ｃ２’アルコールを除去すると、エルゴステロール結合能を保持するが、コレステロールとは結合不能なＡｍＢ構造の立体配座の変化を生じる可能性がある。一般的な分子は、共通の結合部位において、２つの異なる配位子と結合することができる。結合ポケットに対して遠位の部位での修飾は、結合部位の立体配座を変化させる。アロステリック修飾のこの原理により、一方の配位子の他方のものよりも優先的な結合が生じる。このような配位子選択的なアロステリック効果は、小分子−小分子相互作用において、以前には観察されていない。勇気づけるように、配位子選択的なアロステリック修飾は、共通の結合部位で複数の配位子と結合するタンパク質において観察されている。Ｃ２’アルコールの除去が、ステロール結合ポケットをアロステリックに修飾し、これがコレステロール結合能の低下の原因であるという仮説を立てた。
【００１３】
Ｎ−ヨードアシルＡｍＢの以前に得られたＸ線結晶構造は、Ｃ２’アルコールをＣ１３ヘミケタールに結合する顕著な水架橋水素結合を示唆した。このような水架橋水素結合がＡｍＢの基底状態の立体配座の剛性化を手伝っているのであれば、Ｃ２’アルコールの除去は、この相互作用を消失させ、それによって、コレステロール及びエルゴステロールに対する親和性が変化した代替的な基底状態配座異性体の選択を潜在的に可能にするであろう。この結晶構造は、エルゴステロールとコレステロールの両方に結合可能なＡｍＢの基底状態の立体配座を表している可能性がある。本発明は、少なくとも一部には、Ｎ−ヨードアシルＡｍＢの結晶構造に見られる剛性化特徴の発見に基づいている。本明細書に記載される発明は、代替的な基底状態の立体配座にアクセスし、それによって、ＡｍＢステロール結合プロファイルを変化させるために、このような剛性化特徴の崩壊又は除去について研究するものである。ＡｍＢの基底状態を安定化させる能力を有する、３つの追加的な分子内の剛性化特徴が特定された：１）Ｃ４１カルボキシレートとＣ３’アンモニウムとの間の塩架橋、２）Ｃ１カルボニルＯ、Ｃ３アルコール及びＣ５アルコール間の１，３，５水素結合ネットワーク、及び３）Ｃ９アルコール、Ｃ１１アルコール、及びＣ１３アルコール間の１，３，５水素結合ネットワーク。
【００１４】
新規アロステリック部位：Ｃ４１−Ｃ３’カルボキシレート
塩架橋相互作用は、提案された剛性化特徴のうち、エネルギー的に最も強い。よって、Ｃ１６炭素に結合する基の系統的な修飾は、このアロステリック修飾モデルをさらに詳しく調べるための第１の一連の誘導体として標的とされた。とりわけ、エステル及びアミドを含む、Ｃ４１カルボキシレートを修飾する複数のＡｍＢ誘導体が報告されている。しかしながら、以前のＡｍＢ誘導体はすべて、Ｃ１６炭素に付加された炭素原子を維持している。
【００１５】
本発明は、少なくとも一部には、Ｃ１６炭素へのヘテロ原子の付加が塩架橋相互作用に大きな影響を有するという発見に基づいている。したがって、このような誘導体にアクセスするために、効率的な化学選択的合成戦略が探求された。このような目標の複雑化により、ＡｍＢは、複雑な感受性官能基の高密アレイを有し、誘導体の直接合成が困難となる。
【００１６】
Ｃ１６にヘテロ原子置換を有するＡｍＢ誘導体への可能性のあるルートの１つは、Ｆｍｏｃ保護、メチルケタール形成、及びクルチウス転位（Curtius rearrangement）（例えば、ジフェニルホスホリルアジドによって促進される）を含む３段階合成である。この合成計画は、中間体イソシアナートを提供し、これが分子内に捕捉されて、オキサゾリジノン２を生成する（スキーム１）。
【化６】
0006726192.tif 000007
【００１７】
最小限に保護されたＡｍＢのジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）での処理は、立体特異的クルチウス転位を手際よく促進し、ここで、Ｃ１６−Ｃ４１結合が開裂し、得られたイソシアナートが、隣接したＣ１５アルコールによって分子内に捕捉され、オキサゾリジノン２を形成する。この特定のオキサゾリジノンは、今度は、驚くべきことに、穏和な条件下での第一級アミンを用いた開環に対して反応性であり、Ｃ１６−窒素結合を有する新種の尿素含有アムホテリシン（ＡｍＢＡＵ、ＡｍＢＭＵ、及びＡｍＢＣＵ）を生成する。興味深いことに、親ヘテロ環である２−オキサゾリジノンは、同一条件下で非反応性である。
【００１８】
最小限に保護されたＡｍＢ誘導体１は、ジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）、アミン、及び水性酸の連続添加を含む、規模変更可能なワンポット操作で、３へと直接変換されうる（図２Ｂ）。１ｇの発酵させたＡｍＢから開始して、求核剤としてメチルアミンを使用して、この３段階手順全体で、２６４ｍｇのＡｍＢメチル尿素（ＡｍＢＭＵ）が得られる。エチレンジアミンを用いると、２３６ｍｇのＡｍＢアミノ尿素（ＡｍＢＡＵ）が生成し、４段階の変型では、β−アラニンアリルエステルとの反応に続いて脱アリル化して、１２４ｍｇのＡｍＢカルボキシラトエチル尿素（ＡｍＢＣＵ）が得られる。よって、この化学は、メートルトンスケールで、すでに発酵させた天然物から出発して、これらの新しい誘導体への、迅速かつ効率的な、規模変更可能なアクセスを提供する。
【００１９】
この新規のＡｍＢ化学種に対する効率的なアクセスを用いて、尿素ＡｍＢＡＵ、ＡｍＢＭＵ、及びＡｍＢＣＵを、インビトロでの抗真菌性及びヒト細胞毒性のスクリーニングにおいて、ＡｍＢ、及び、ある範囲の先に報告されたＡｍＢ誘導体と比較した。酵母毒性を、サッカロミセス・セレビシエ（Saccharomyces cerevisiae）に対する微量液体希釈アッセイ（ＭＩＣ）で測定した。ヒト赤血球の９０％溶血を生じるのに必要とされる化合物の量（ＥＨ９０）を決定することによって、ヒト細胞毒性を調べた。これらの結果を表１にまとめる。アムホテリシンＢは、僅か１０．４μＭで９０％赤血球溶解を引き起こすとともに、０．５μＭでＳ．セレビシエの増殖を阻害した。マイコサミン（ＡｍｄｅＢ）の除去により、酵母とヒトの両方の細胞アッセイにおいて、細胞致死活性は完全になくなる。メチルエステル化（ＡｍＢＭＥ）は、溶血濃度を、ＡｍＢで見られた濃度の３分の１に低下させるとともに、Ｓ．セレビシエに対して０．２５μＭにおける抗真菌活性を保持する。Ｃ４１メチルＡｍＢは、ＡｍＢＭＥと同様に、２２．０μＭで溶血を引き起こすとともに、０．５μＭのＭＩＣを示す。以前に観察されたように、単純なアミド化による、アミノアミドＡｍＢ誘導体ＡｍＢＡＡ又はメチルアミドＡｍＢＭＡの形成により、酵母に対する有効性が、それぞれ、０．０３μＭ及び０．２５μＭまで高められた。溶血活性は、ＡｍＢＭＥ及びＣ４１ＭｅＡｍＢと同様に保持された。ビス−アミノアルキル化アミド誘導体ＡｍＢＮＲ２が治療指数を適度に改善することは、以前に示されている。先例と一致して、ＡｍＢＮＲ２は、４８．５μＭで溶血を引き起こすために高濃度を必要とするとともに、ＡｍＢと比較して高められた抗真菌活性を示した。
【表１−１】
0006726192.tif 000008
【表１−２】
0006726192.tif 000009
【００２０】
尿素誘導体ＡｍＢＡＵ、ＡｍＢＭＵ、及びＡｍＢＣＵは、Ｓ．セレビシエに対し、０．１２５μＭ〜３μＭの範囲で強力な抗真菌活性を維持する。驚くべきことに、ＡｍＢＡＵ、ＡｍＢＭＵ、及びＡｍＢＣＵは、赤血球に対する毒性が劇的に低減していた。ＡｍＢＭＵ及びＡｍＢＡＵは、ＡｍＢで観察された量の４５倍を超える５００μＭにおいてさえも、ＥＨ９０に達しなかった。ＡｍＢＣＵは、赤血球に９０％溶血を引き起こすのに、ＡｍＢが必要とする量の３０倍を超える３２４μＭを必要とした。この初期の治療指数のスクリーニングに後押しされ、尿素類について、臨床的に関連する真菌細胞株カンジダ・アルビカンスに対してさらに試験した。Ｃ．アルビカンスは、最も一般的なヒト真菌感染である。ＡｍＢは、０．２５μＭでＣ．アルビカンスの酵母増殖を阻害する。Ｓ．セレビシエで見られる傾向と同様に、尿素誘導体の有効性は、カチオン特性の量の増加に伴って増加した。ＡｍＢＡＵ、ＡｍＢＭＵ、及びＡｍＢＣＵは、それぞれ、０．２５、０．５、及び１μＭを必要とした（表２）。
【表２】
0006726192.tif 000010
【００２１】
アロステリック修飾モデルに従い、尿素ＡｍＢＡＵ、ＡｍＢＭＵ、及びＡｍＢＣＵは、強力なエルゴステロール結合能を維持するが、コレステロールに結合する能力は喪失している。
【００２２】
ＡｍＢ尿素及び他の誘導体への合成経路
アムホテリシンＢ（ＡｍＢ）尿素誘導体ＡｍＢＡＵ、ＡｍＢＭＵ、及びＡｍＢＣＵは、すべて、コレステロールに対する検出可能な結合を示さず、毒性の劇的な低減を示したことから、さらなるＡｍＢ尿素誘導体もこれらの重要な特徴を共有すると予測することは妥当である。可能な利用できる誘導体のほんの一部について図３に概説する。オキサゾリジノン２を第一級アミンで遮断して第一級尿素を生成し、第二級アミンで第二級尿素を生成し、アルファ分岐を有する第一級アミンで、α位に立体化学が導入された尿素を生成することができた。加えて、オキサゾリジノン２を、アニリンで開環してアリール尿素を生成し、フェノールで開環してアリールカルバメートを生成し、又はアルコールで開環してアルキルカルバメートを生成することができた。よって、この低毒性アムホテリシンの新しいファミリーの薬理学的特性を広範囲に最適化するための実質的な機会がもたらされる。オキサゾリジノンへのある特定の求核付加は、一部には、求核剤又はオキサゾリジノン求電子剤の反応性を原因とする合成課題をもたらしうる。よって、ＡｍＢ類似体のより幅広いファミリーへのアクセスを供与可能な、より反応性の求電子剤を遮断することは有益であろう。例えば、１のクルチウス転位の際に、推定ではイソシアナートが生成される（スキーム１、図２Ａ）。このようなイソシアナートは、多様化のための有望な反応性中間体であろう。
【化７】
0006726192.tif 000011
【００２３】
単離可能なイソシアナートの形成は、Ｃ１５ヒドロキシル基が保護された場合に達成可能である。ＡｍＢから出発して、Ｆｍｏｃカルバメート形成、メチルケタール形成、及び全体的なシリル化を含む、３段階の保護手順によってパーシリルＡｍＢ４が形成される、例示的な反応がスキーム２に示されている。高温での４のＤＰＰＡへの曝露により、クルチウス転位が達成される。隣接するＣ１５アルコールが保護されているために、所望のイソシアナート５を単離することができる。イソシアナート５は、オキサゾリジノン２と同様に、遮断されてさまざまなＡｍＢ誘導体を形成できる多用途の中間体である（図４）。ルイス酸であるチタンイソプロポキシドへの５の曝露により、イソプロポキシ基がイソシアナートに転移し、イソプロピルカルバメート６が形成される。同様に、チタンｔ−ブトキシドとＦｍｏｃアルコールとの間の配位子交換は、Ｆｍｏｃカルバメート７の形成を促進する。さらには、この手順は、ＡｍＢ尿素の代替的な合成経路を提供する。例えば、メチルアミンへの５の曝露と、それに続く脱保護により、ＡｍＢＭＵの代替的合成が完了するであろう。
【００２４】
Ｃ１５ヒドロキシル基を保護するのに使用できる例示的な保護基として、シリル基（例えば、トリアルキルシリル基、ジアルキルアリールシリル基、アルキルジアリールシリル基、及びトリアリールシリル基）、並びに（ヒドロカルビルオキシ）メチルエーテル（例えば、（アルコキシ）メチルエーテル、（アルケニルオキシ）メチルエーテル、（アラルコキシ）メチルエーテル、（アリールオキシ）メチルエーテル、及び（（トリアルキルシリル）アルコキシ）メチルエーテル）が挙げられる。このような保護基のさらに特定の例としては、限定されることなく、メトキシメチルエーテル、（フェニルジメチルシリル）メトキシメチルエーテル、ベンジルオキシメチルエーテル、ｐ−メトキシベンジルオキシメチルエーテル、ｐ−ニトロベンジルオキシメチルエーテル、ｔｅｒｔ−ブトキシメチルエーテル、シロキシメチルエーテル、２−メトキシエトキシメチルエーテル、２，２，２−トリクロロエトキシメチルエーテル、２−（トリメチルシリル）エトキシメチルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、トリメチルシリルエーテル、トリエチルシリルエーテル、トリイソプロピルシリルエーテル、ジエチルイソプロピルシリルエーテル、ジメチルヘキシルシリルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルエーテル、トリフェニルシリルエーテル、及びジフェニルメチルシリルエーテルが挙げられる。
【００２５】
イソシアナート求電子剤に加えることができる求核剤としては、アルコール及びそれらの対応するアルコキシド、チオール及びそれらの対応するチオラート、及びアミンが挙げられる。
【００２６】
アミンの例としては、限定されることなく、１−（１−ナフチル）エチルアミン；１−（２−ナフチル）エチルアミン；１−（４−ブロモフェニル）エチルアミン；１，１−ジフェニル−２−アミノプロパン；１，２，２−トリフェニルエチルアミン；１，２，３，４−テトラヒドロ−１−ナフチルアミン；１，２−ビス（２−ヒドロキシフェニル）エチレンジアミン；１−アミノ−２−ベンジルオキシシクロペンタン；１−アミノインダン；１−ベンジル−２，２−ジフェニルエチルアミン；１−シクロプロピルエチルアミン；１−フェニルブチルアミン；２−（３−クロロ−２，２−ジメチル−プロピオニルアミノ）−３−メチルブタノール；２−（ジベンジルアミノ）プロピオンアルデヒド；２，２−ジメチル−５−メチルアミノ−４−フェニル−１，３−ジオキサン；２−アミノ−１−フルオロ−４−メチル−１，１−ジフェニルペンタン；２−アミノ−３，３−ジメチル−１，１−ジフェニルブタン；２−アミノ−３−メチル−１，１−ジフェニルブタン；２−アミノ−３−メチルブタン；２−アミノ−４−メチル−１，１−ジフェニルペンタン；２−アミノヘプタン；２−アミノヘキサン；２−アミノノナン；２−アミノオクタン；２−クロロ−６−フルオロベンジルアミン；２−メトキシ−α−メチルベンジルアミン；２−メチル−１−ブチルアミン；２−メチルブチルアミン；３，３−ジメチル−２−ブチルアミン；３，４−Ｄｉメトキシ−α−メチルベンジルアミン；３−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）プロピオン酸；３−ブロモ−α−メチルベンジルアミン；３−クロロ−α−メチルベンジルアミン；４−クロロ−α−メチルベンジルアミン；４−シクロヘキセン−１，２−ジアミン；４−フルオロ−α−メチルベンジルアミン；４−メトキシ−α−メチルベンジルアミン；７−アミノ−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフトール；ビス［１−フェニルエチル］アミン；ボルニルアミン；ｃｉｓ−２−アミノシクロペンタノールヒドロクロリド；ｃｉｓ−ミルタニルアミン；ｃｉｓ−Ｎ−Ｂｏｃ−２−アミノシクロペンタノール；イソピノカンフェニルアミン；Ｌ−アリシンエチレンアセタール；メチル３−アミノブチラートｐ−トルエンスルホン酸塩；Ｎ，Ｎ’−ジメチル−１，１’−ビナフチルジアミン；Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−（１−ナフチル）エチルアミン；Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−フェニルエチルアミン；Ｎ，α−ジメチルベンジルアミン；Ｎ−アリル−α−メチルベンジルアミン；Ｎ−ベンジル−α−メチルベンジルアミン；ｓｅｃ−ブチルアミン；ｔｒａｎｓ−２−（アミノメチル）シクロヘキサノール；ｔｒａｎｓ−２−アミノ−１，２−ジヒドロ−１−ナフトールヒドロクロリド；ｔｒａｎｓ−２−ベンジルオキシシクロヘキシルアミン；α，４−ジメチルベンジルアミン；α−エチルベンジルアミン；α−メチルベンジルアミン；及びβ−メチルフェネチルアミンが挙げられる。
【００２７】
アルコールの例としては、限定されることなく、メタノール、エタノール、２−ブトキシエタノール、プロパノール、アリルアルコール、メタリルアルコール、プレノール、イソプロパノール、２，２−ジメチルプロパン−１−オール、２−メチル−２−フェニルプロパン−１−オール、ブタノール、イソブタノール、ｓｅｃ−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、２−ブテン−１−オール、ペンタノール、２−シクロペンテン−１−オール、４−シクロペンテン−１−オール、シクロペンタノール、３−シクロペンテン−１−オール、ヘキサノール、シクロヘキサノール、３−シクロヘキセン−１−オール、フェノール、１−ナフトール、２−ナフトール、ベンジルアルコール、メントール、１，２−エタンジオール、９−フルオレニルメタノール、レゾルシノール、ｍ−クレゾール、シンナミルアルコール、及びゲラニオールが挙げられる。アルコールに対応するアルコキシドも、イソシアナートとの反応における求核剤として使用できることが理解されよう。
【００２８】
本発明の化合物
本発明のある態様は、式（Ｉ）によって表される化合物、又はそれらの薬学的に許容される塩である：
【化８】
0006726192.tif 000012
［式中、
Ｒ１は、存在ごとに独立して、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、（アルキル）ＯＣＨ２−、（アルケニル）ＯＣＨ２−、（アラルキル）ＯＣＨ２−、（アルコキシアルキル）ＯＣＨ２−、（アリール）ＯＣＨ２−、又は（（トリアルキルシリル）アルキル）ＯＣＨ２−を表し；
Ｒ２は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し；及び
Ｒ３は、（アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アルケニル）ＯＣ（Ｏ）−、（シクロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−、又は（ハロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す］。
【００２９】
ある特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１は、例えばトリエチルシリルなどのトリアルキルシリルを表す。
【００３０】
ある特定の実施形態では、Ｒ２はメチルを表す。
【００３１】
ある特定の実施形態では、Ｒ３は、例えば（９−フルオレニルメチル）ＯＣ（Ｏ）−（すなわち、Ｆｍｏｃ）などの（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す。
【００３２】
本発明のある態様は、式（ＩＩ）によって表される化合物、又はそれらの薬学的に許容される塩である：
【化９】
0006726192.tif 000013
［式中、
Ｒ１は、存在ごとに独立して、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、（アルキル）ＯＣＨ２−、（アルケニル）ＯＣＨ２−、（アラルキル）ＯＣＨ２−、（アルコキシアルキル）ＯＣＨ２−、（アリール）ＯＣＨ２−、又は（（トリアルキルシリル）アルキル）ＯＣＨ２−を表し；
Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し；
Ｒ３は、（アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アルケニル）ＯＣ（Ｏ）−、（シクロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−、又は（ハロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す］。
【００３３】
ある特定の実施形態では、式（ＩＩ）の化合物において、Ｒ１は、例えばトリエチルシリルなどのトリアルキルシリルを表す。
【００３４】
ある特定の実施形態では、Ｒ２はメチルを表す。
【００３５】
ある特定の実施形態では、Ｒ３は、例えば（９−フルオレニルメチル）ＯＣ（Ｏ）−（すなわち、Ｆｍｏｃ）などの（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す。
【００３６】
本発明のある態様は、式（ＩＩＩ）によって表される化合物、又はそれらの薬学的に許容される塩である：
【化１０】
0006726192.tif 000014
［式中、
Ｒ１は、存在ごとに独立して、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、（アルキル）ＯＣＨ２−、（アルケニル）ＯＣＨ２−、（アラルキル）ＯＣＨ２−、（アルコキシアルキル）ＯＣＨ２−、（アリール）ＯＣＨ２−、又は（（トリアルキルシリル）アルキル）ＯＣＨ２−を表し；
Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し；
Ｒ３は、（アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アルケニル）ＯＣ（Ｏ）−、（シクロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−、又は（ハロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表し；
Ｒ４は、アルキル、アラルキル、アルケニル、アリール、又はシクロアルキルを表す］。
【００３７】
ある特定の実施形態では、式（ＩＩＩ）の化合物において、Ｒ１は、例えばトリエチルシリルなどのトリアルキルシリルを表す。
【００３８】
ある特定の実施形態では、Ｒ２はメチルを表す。
【００３９】
ある特定の実施形態では、Ｒ３は、例えば（９−フルオレニルメチル）ＯＣ（Ｏ）−（すなわち、Ｆｍｏｃ）などの（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す。
【００４０】
本発明のある態様は、ＡｍＢＣＵ−アリルエステル、又はそれらの薬学的に許容される塩である：
【化１１】
0006726192.tif 000015
【００４１】
ＡｍＢ誘導体の製造方法
本発明のある態様は、式（ＩＶ）の化合物、又はそれらの薬学的に許容される塩の製造方法であり、
【化１２】
0006726192.tif 000016
式（Ｉ）の化合物又はそれらの薬学的に許容される塩とＲ５−ＸＨ又はＲ５−Ｘ−Ｍによって表される化合物とを混合し、それによって式（ＩＶ）の化合物を生成する工程を含み；
［式中、
Ｒ１は、存在ごとに独立して、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、（アルキル）ＯＣＨ２−、（アルケニル）ＯＣＨ２−、（アラルキル）ＯＣＨ２−、（アルコキシアルキル）ＯＣＨ２−、（アリール）ＯＣＨ２−、又は（（トリアルキルシリル）アルキル）ＯＣＨ２−を表し；
Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し；
Ｒ３は、（アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アルケニル）ＯＣ（Ｏ）−、（シクロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−、又は（ハロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表し；
Ｘは、Ｏ、ＮＨ、又はＮ（Ｒ６）を表し；
Ｒ５及びＲ６は、各々独立して、アルキル、アラルキル、アルケニル、アリール、又はシクロアルキルを表す］
式（Ｉ）の化合物は、以下の式によって表される：
【化１３】
0006726192.tif 000017
［式中、Ｍは、アルカリ金属カチオン、アルカリ土類カチオン、又は遷移金属カチオンである］。
【００４２】
ある特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物、又はそれらの薬学的に許容される塩は、Ｒ５−ＸＨによって表される化合物と混合され、該Ｒ５−ＸＨによって表される化合物は、第一級アミン、第二級アミン、又はアルコールである。
【００４３】
ある特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物、又はそれらの薬学的に許容される塩は、Ｒ５−Ｘ−Ｍによって表される化合物と混合され、該Ｒ５−Ｘ−Ｍによって表される化合物は、ナトリウムアミド、カリウムアミド、又はリチウムジイソプロピルアミドなどの金属アミドである。ある特定の実施形態では、Ｒ５−Ｘ−Ｍによって表される化合物は、ナトリウムイソプロポキシド、カリウムメトキシド、又はチタンｔ−ブトキシドなどの金属アルコキシドである。ある特定の実施形態では、Ｍは、Ｎａ、Ｋ、又は、例えばＴｉ（ＯＲ５）３などのＴｉ（Ｏ（ヒドロカルビル））３である。
【００４４】
ある特定の実施形態では、式（ＩＶ）の化合物の製造方法は、式（ＩＩ）の化合物とホスホリルアジドとを混合し、それによって式（Ｉ）の化合物を生成する工程をさらに含む。式（ＩＩ）の化合物は、以下の式によって表される：
【化１４】
0006726192.tif 000018
【００４５】
ある特定の実施形態では、ホスホリルアジドはジフェニルホスホリルアジドである。
【００４６】
ある特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物又はそれらの薬学的に許容される塩とＲ５−ＸＨ又はＲ５−Ｘ−Ｍによって表される化合物とを混合する工程は、例えばチタンアルコキシドなどのルイス酸をさらに含む。
【００４７】
ある特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物又はそれらの薬学的に許容される塩とＲ５−ＸＨ又はＲ５−Ｘ−Ｍによって表される化合物とを混合する工程は、極性非プロトン性溶媒又は非極性溶媒などの溶媒をさらに含む。
【００４８】
ある特定の実施形態では、式（ＩＩ）の化合物とホスホリルアジドとを混合する工程は、ブレンステッド塩基をさらに含む。ある特定の実施形態では、ブレンステッド塩基は第三級アミンである。
【００４９】
ある特定の実施形態では、式（ＩＩ）の化合物とホスホリルアジドとを混合する工程は、極性非プロトン性溶媒又は非極性溶媒などの溶媒をさらに含む。
【００５０】
本方法のある特定の実施形態では、Ｒ１は、例えばトリエチルシリルなどのトリアルキルシリルを表す。
【００５１】
ある特定の実施形態では、Ｒ２はメチルを表す。
【００５２】
ある特定の実施形態では、Ｒ３は、例えば（９−フルオレニルメチル）ＯＣ（Ｏ）−（すなわち、Ｆｍｏｃ）などの（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す。
【００５３】
定義
用語「アルキル」は、当技術分野で認識されており、直鎖アルキル基、分岐鎖アルキル基、シクロアルキル（脂環式）基、アルキル置換されたシクロアルキル基、及びシクロアルキル置換されたアルキル基を含めた、飽和脂肪族基を含む。ある特定の実施形態では、直鎖又は分岐鎖アルキルは、その主鎖に約３０以下の炭素原子（例えば、直鎖についてはＣ１−Ｃ３０、分岐鎖についてはＣ３−Ｃ３０）、あるいは、約２０以下の炭素原子を有する。同様に、シクロアルキルは、それらの環構造内に約３〜約１０個の炭素原子、あるいは環構造内に約５、約６、又は約７個の炭素原子を有する。
【００５４】
用語「アルケニル」及び「アルキニル」は、当技術分野で認識されており、上述したアルキルに対して長さ及び可能な置換については同様であるが、それぞれ、少なくとも１つの二重又は三重結合を含む、不飽和脂肪族基のことを指す。
【００５５】
炭素の数が別に明記されない限り、「低級アルキル」とは、その主鎖構造内に１〜約１０個の炭素を有する、あるいは１〜約６個の炭素原子を有する、上記定義されたアルキル基を指す。同様に、「低級アルケニル」及び「低級アルキニル」は、同様の鎖長を有する。
【００５６】
用語「アラルキル」は、当技術分野で認識されており、アリール基（すなわち、芳香族又はヘテロ芳香族基）で置換されたアルキル基を指す。
【００５７】
用語「アリール」は、当技術分野で認識されており、０〜４個のヘテロ原子を含みうる、５−、６−及び７−員の単環芳香族基を指し、例えば、ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、ピレン、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、トリアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン及びピリミジンなどが挙げられうる。環構造内にヘテロ原子を有するアリール基は、「アリールヘテロ環」又は「ヘテロ芳香族」とも称されうる。芳香族環は、１つ以上の環位置において、例えば、ハロゲン、アジド、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスホナート、ホスフィナート、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、スルホンアミド、ケトン、アルデヒド、エステル、ヘテロシクリル、芳香族又はヘテロ芳香族部分、−ＣＦ３、−ＣＮなどの置換基で置換されうる。用語「アリール」には、２つ以上の炭素を２つの隣接する環で共有する（環は「縮合環」である）、２つ以上の環式環を有する多環式環系も含まれ、ここで、環のうちの少なくとも１つは芳香族であり、例えば、他の環式環は、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール及び／又はヘテロシクリルでありうる。
【００５８】
用語「ヘテロ原子」は、当技術分野で認識されており、炭素又は水素以外の任意の元素の原子を指す。例示的なヘテロ原子としては、ホウ素、窒素、酸素、リン、硫黄及びセレンが挙げられる。
【００５９】
用語「ニトロ」は、当技術分野で認識されており、−ＮＯ２を指す。
【００６０】
用語「ハロゲン」は、当技術分野で認識されており、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ又は−Ｉを指す。
【００６１】
用語「スルフヒドリル」は、当技術分野で認識されており、−ＳＨを指す。
【００６２】
用語「ヒドロキシル」は、当技術分野で認識されており、−ＯＨを指す。
【００６３】
用語「スルホニル」は、当技術分野で認識されており、−ＳＯ２−を指す。
【００６４】
用語「ハロアルキル」とは、本明細書で定義されるアルキル基を通じて親分子部分に付加する、本明細書で定義される少なくとも１つのハロゲンを意味する。ハロアルキルの代表的な例としては、クロロメチル、２−フルオロエチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、及び２−クロロ−３−フルオロペンチルが挙げられるが、それらに限定されない。
【００６５】
用語「アミン」及び「アミノ」は、当技術分野で認識されており、非置換及び置換アミンの両方、例えば、以下の一般式によって表されうる部分などを指す：
【化１５】
0006726192.tif 000019
ここで、Ｒ５０、Ｒ５１及びＲ５２は、各々独立して、水素、アルキル、アルケニル、−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ６１を表し、又は、Ｒ５０及びＲ５１は、それらが結合するＮ原子と一緒に環構造内に４〜８個の原子を有するヘテロ環を完成し；Ｒ６１は、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロ環又は多環を表し；ｍは、ゼロ又は１〜８の範囲の整数である。他の実施形態では、Ｒ５０及びＲ５１（及び、必要に応じてＲ５２）は、各々独立して、水素、アルキル、アルケニル、又は−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ６１を表す。よって、用語「アルキルアミン」には、置換又は非置換アルキルが結合した、上記定義されたアミン基が含まれる、すなわち、Ｒ５０及びＲ５１のうちの少なくとも１つはアルキル基である。
【００６６】
用語「アミド」は、アミノ置換されたカルボニルとして当技術分野で認識されており、以下の一般式によって表されうる部分を含む：
【化１６】
0006726192.tif 000020
ここで、Ｒ５０及びＲ５１は、上述の通りである。本発明におけるアミドのある特定の実施形態は、不安定でありうるイミドを含まない。
【００６７】
用語「アルコキシル」又は「アルコキシ」は、当技術分野で認識されており、そこに結合した酸素ラジカルを有する、上記定義されたアルキル基のことを指す。代表的なアルコキシル基としては、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどが挙げられる。
【００６８】
本明細書で用いられる「極性プロトン性溶媒」は、約１．４〜４．０Ｄの双極子モーメントを有し、かつＯ−Ｈ結合又はＮ−Ｈ結合などの水素結合に関与する化学部分を含む、溶媒である。例となる極性プロトン性溶媒としては、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、イソブタノール、アンモニア、水、及び酢酸が挙げられる。
【００６９】
本明細書で用いられる「極性非プロトン性溶媒」とは、Ｏ−Ｈ又はＮ−Ｈなどの水素結合性基を欠いている、約１．４〜４．０Ｄの双極子モーメントを有する溶媒を意味する。例となる極性非プロトン性溶媒としては、アセトン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、酢酸エチル、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、及びジメチルスルホキシドが挙げられる。
【００７０】
本明細書で用いられる「非極性溶媒」とは、低い比誘電率（dialectric constant）（＜５）及び、約０．０〜約１．２の低い双極子モーメントを有する溶媒を意味する。例となる非極性溶媒としては、ペンタン、ヘキサン、シクロヘキサン、ベンゼン、トルエン、クロロホルム、及びジエチルエーテルが挙げられる。
【００７１】
本発明の目的では、化学元素は、CAS version, Handbook of Chemistry and Physics, 67th Ed., 1986-87の裏表紙の元素周期表に従って特定される。
【００７２】
本発明の化合物又はそれらの薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物もまた提供される。このような医薬組成物の製造方法もまた提供される。本方法は、本発明の化合物、又はそれらの薬学的に許容される塩を、薬学的に許容される担体中に配置する工程を含む。
【００７３】
本発明の化合物及び本発明の医薬組成物は、真菌の増殖の阻害にとって有用である。一実施形態では、有効量の本発明の化合物を真菌と接触させ、それによって、真菌の増殖を阻害する。一実施形態では、本発明の化合物、又はそれらの薬学的に許容される塩は、組織培養培地に添加されるか、組織培養培地内に含まれる。
【００７４】
本発明の化合物及び本発明の医薬組成物は、対象における真菌感染の治療にとって有用である。一実施形態では、治療的有効量の本発明の化合物、又はそれらの薬学的に許容される塩が、それらを必要とする対象に投与され、それによって真菌感染を治療する。
【００７５】
真菌は、菌界に分類される真核生物である。菌界には、酵母、カビ、及び、キノコなどを含む、さらに大きな有機体が含まれる。酵母及びカビは、感染因子と臨床的関連性のあるものである。
【００７６】
酵母は、菌界に分類される真核生物である。酵母は、典型的には、真菌の出芽形態として説明される。本発明に関連して特に重要なのは、哺乳動物宿主に感染を引き起こしうる酵母の種類である。このような感染は、感染に対するバリア機能が低下した宿主（例えば、やけど患者）及び免疫系機能が低下した宿主（例えば、化学療法又は免疫抑制療法を受けている宿主、及びＨＩＶに感染した宿主）を含めた、易感染性宿主に最もよく起こる。病原性酵母には、限定されることなく、カンジダ属、並びにクリプトコッカス属のさまざまな種が含まれる。カンジダ属の病原性酵母の中でも特に注目すべきなのは、Ｃ．アルビカンス、Ｃ．トロピカリス（C. tropicalis）、Ｃ．ステラトイデア（C. stellatoidea）、Ｃ．グラブラータ（C. glabrata）、Ｃ．クルセイ（C. krusei）、Ｃ．パラプシローシス（C. parapsilosis）、Ｃ．ギリエルモンジイ（C. guilliermondii）、Ｃ．ビスワナチー（C. viswanathii）、及びＣ．ルシタニエ（C. lusitaniae）である。クリプトコッカス属としては、特に、クリプトコッカス・ネオフォルマンス（Cryptococcus neoformans）が挙げられる。酵母は、例えば、ヒトにおける経口、食道、及び膣感染などの粘膜感染、並びに、骨、血液、尿生殖路、及び中枢神経系の感染を引き起こしうる。このリストは、例示的であり、多少なりとも限定されるものではない。
【００７７】
多くの真菌（酵母は別として）は、哺乳動物宿主に感染を引き起こしうる。このような感染は、感染に対するバリア機能が低下した宿主（例えば、やけど患者）及び免疫系機能が低下した宿主（例えば、化学療法又は免疫抑制療法を受けている宿主、及びＨＩＶに感染した宿主）を含めた、易感染性宿主に最もよく起こる。病原性真菌（酵母は別として）には、限定されることなく、アスペルギルス属、リゾプス属、ケカビ属、ヒストプラズマ属、コクシジオイデス属、ブラストミセス属、トリコフィトン属、ミクロスポルム属、及びエピデルモフィトン属の種が含まれる。前述の中でも特に注目すべきなのは、アスペルギルス・フミガーツス（A. fumigatus）、アスペルギルス・フラブス（A. flavus）、アスペルギルス・ニガー（A. niger）、ヒストプラズマ・カプスラーツム（H. capsulatum）、コクシジオイデス・イミチス（C. immitis）、及びブラストミセス・デルマティティディス（B. dermatitidis）である。菌界は、全身性の感染、及び、２，３の例を挙げれば、肺、骨、血液、尿生殖路、及び中枢神経系などの深部組織感染を引き起こしうる。一部の真菌は、皮膚及び爪の感染の原因となる。
【００７８】
本明細書で用いられる場合、「阻害」又は「阻害する」とは、対照と比較して、客観的に測定可能な量又は程度だけ低下することを意味する。一実施形態では、阻害又は阻害するとは、対照と比較して、少なくとも統計的に有意な量だけ低下することを意味する。一実施形態では、阻害又は阻害するとは、対照と比較して、少なくとも５パーセントの低下を意味する。さまざまな個々の実施形態において、阻害又は阻害するとは、対照と比較して、少なくとも１０、１５、２０、２５、３０、３３、４０、５０、６０、６７、７０、７５、８０、９０、又は９５パーセント（％）の低下を意味する。
【００７９】
本明細書で用いられる場合、用語「治療」及び「治療する」とは、（ａ）状態又は疾患を発症する危険性がありうる、若しくは、状態又は疾患を有する状態になりやすいが、まだ状態又は疾患を有しているとは診断されていない対象において、状態又は疾患が生じることを予防する；（ｂ）例えばその発症の遅延又は阻止など、状態又は疾患を抑止する；若しくは、（ｃ）例えば状態又は疾患の退縮を生じるなど、状態又は疾患を軽減又は改善する、という結果を生じる介入を行うことを指す。一実施形態において、用語「治療する」及び「治療」は、（ａ）例えばその発症の遅延又は阻止など、状態又は疾患を抑止する；又は、（ｂ）例えば状態又は疾患の退縮を生じるなど、状態又は疾患を軽減又は改善する、という結果を生じる介入を行うことを指す。
【００８０】
本明細書で用いられる「真菌感染」とは、本明細書で定義される真菌に対する対象の感染又は感染症を指す。一実施形態では、用語「真菌感染」には、酵母感染が含まれる。本明細書で用いられる「酵母感染」とは、本明細書で定義される酵母に対する対象の感染又は感染症を指す。
【００８１】
本明細書で用いられる場合、「対象」とは、生きている哺乳動物を指す。さまざまな実施形態において、対象は、限定されることなく、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ウサギ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、イヌ、ブタ、ウマ、ウシ、又は非ヒト霊長類を含めた、非ヒト哺乳類である。一実施形態では、対象はヒトである。
【００８２】
本明細書で用いられる場合、「酵母又は真菌感染を有する対象」とは、酵母又は真菌感染の少なくとも１つの客観的兆候を示す対象を指す。一実施形態では、酵母又は真菌感染を有する対象は、酵母又は真菌感染を有すると診断され、かつ、その治療を必要とする対象である。酵母又は真菌感染を診断する方法は、よく知られており、本明細書で詳細を説明する必要はない。
【００８３】
本明細書で用いられる場合、「投与する」は、その通常の意味を有し、限定されることなく、静脈内、筋肉内、腹腔内、髄腔内、眼球内（例えば、硝子体内）、皮下、直接注入（例えば、腫瘍内）、粘膜、吸入、経口、及び局所を含めた、適切な投与経路で投与することを包含する。
【００８４】
一実施形態では、投与は静脈内である。
【００８５】
一実施形態では、投与は経口である。
【００８６】
本明細書で用いられる場合、語句「有効量」とは、所望の生物学的効果を達成するのに十分な量を指す。
【００８７】
本明細書で用いられる場合、語句「治療的有効量」とは、例えば、酵母又は真菌感染を治療するためなどの、所望の治療効果を達成するのに十分な量を指す。
【００８８】
本発明の化合物は、他の治療剤と併用することができる。本発明の化合物と他の治療剤を同時に又は連続的に投与してもよい。他の治療剤が同時に投与される場合、それらは、同一又は別々の調剤で投与することができるが、それらは実質的に同時に投与される。他の治療剤と本発明の化合物との投与が時間的に分離している場合には、他の治療剤は、互いに、及び本発明の化合物と、連続的に投与される。これらの化合物の投与間の時間の分離は、数分程度であってもよいし、あるいは、それより長くてもよい。
【００８９】
他の治療剤の例としては、ＡｍＢを含めた他の抗真菌剤、並びに、他の抗生物質、抗ウィルス剤、抗炎症剤、免疫抑制剤、及び抗癌剤が挙げられる。
【００９０】
上記のように、「有効量」とは、所望の生物学的効果を達成するのに十分な量を指す。本明細書に提供される教示と併せて、さまざまな活性化合物の中から選択し、かつ、有効性、相対的バイオアベイラビリティ、患者の体重、有害な副作用の重症度、及び、好ましい投与方式などの因子に重み付けすることによって、有効な予防的又は治療的処方計画を、実質的に望ましくない毒性を生じさせず、かつ、なお特定の対象の治療に有効となるように、計画することができる。特定の用途のための有効量は、治療される疾患又は状態、投与される本発明の特定の化合物、対象のサイズ、又は、疾患又は状態の重症度などの因子に応じて変動しうる。当業者は、本発明の特定の化合物及び／又は他の治療剤の有効量を、過度の実験を必要とすることなく、経験的に決定することができる。概して、最大用量、すなわち、幾つかの医学的判断に従った最大安全用量が用いられることが好ましい。化合物の適切な全身濃度を実現するために、１日当たり複数回の投与が予定されてもよい。適切な全身濃度は、例えば、患者における薬物のピーク又は持続細胞質濃度の測定によって、決定されうる。「投与量」及び「用量」は、本明細書では同じ意味で用いられる。
【００９１】
概して、活性化合物の１日の経口投与量は、ヒト対象では、１日当たり約０．０１ｍｇ／ｋｇから１日当たり１０００ｍｇ／ｋｇであろう。１日当たり１回又は数回の投与において、０．５〜５０ｍｇ／ｋｇの範囲の経口投与量が、所望の結果を生じると予想される。用量は、投与形態に応じて、局所又は全身の所望の薬物濃度を達成するために適切に調整されうる。例えば、静脈内投与量は、１日当たり１桁から数桁少ない投与量であろうと予想される。このような投与量で対象における応答が不十分な場合には、さらに高い投与量（又は、異なる、より局所的な送達経路による、効果的なより高い投与量）を、患者の耐容性が許容する程度まで用いてもよい。化合物の適切な全身濃度を達成するために、１日当たり複数回の投与が予定されている。
【００９２】
一実施形態において、本発明の化合物の静脈内投与は、典型的には、０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜２０ｍｇ／ｋｇ／日でありうる。よって、静脈内投与は、ＡｍＢの最大耐用量と同様であるか、又は有利には、ＡｍＢの最大耐用量を超えうる。
【００９３】
本明細書に記載される化合物については、治療有効量は、初めに、動物モデルから決定されうる。治療に有効な投与量はまた、ヒトにおいて試験されている本発明の化合物について、及び、他の関連した活性薬剤などの同様の薬理学的活性を示すことが知られている化合物についてのヒトデータから決定されてもよい。非経口の投与には、投与量がより多く必要とされうる。適用される投与量は、相対的バイオアベイラビリティ及び投与される化合物の有効性に基づいて調整されうる。上述の方法及び当技術分野で周知の他の方法に基づき、投与量を調整して、最大効果を達成することは、十分に当業者の能力でできる範囲内である。
【００９４】
本発明の調剤は、通常は、薬学的に許容される濃度の塩、緩衝剤、保存料、相容性の担体、アジュバント、及び必要に応じて他の治療成分を含みうる、薬学的に許容される溶液で投与される。
【００９５】
アムホテリシンＢは、デオキシコラート系調剤及び脂質系（リポソーム製剤を含む）調剤を含む、多くの調剤で市販されている。本発明のアムホテリシンＢ誘導体化合物も同様に、例えば、及び限定されることなく、デオキシコラート系調剤及び脂質系（リポソーム製剤を含む）調剤として、処方されうる。
【００９６】
治療での使用に関して、有効量の本発明の化合物は、所望の表面に本発明の化合物を送達する任意の用法で対象に投与されうる。本発明の医薬組成物の投与は、当業者に知られた任意の手段によって達成されうる。投与経路としては、経口、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下、直接注入（例えば、腫瘍内又は膿瘍内）、粘膜、吸入、及び局所を含むがこれらに限られない。
【００９７】
経口投与では、化合物（すなわち、本発明の化合物、及び他の治療剤）は、活性化合物を当技術分野で周知の薬学的に許容される担体と合わせることによって、容易に調合されうる。このような担体は、本発明の化合物を、治療対象による経口摂取のために、錠剤、丸薬、糖衣錠、カプセル、液体、ゲル、シロップ剤、スラリー、懸濁液等として調合することを可能にする。経口用途の医薬製剤は、固体状の賦形剤として得ることができ、必要に応じて、得られた混合物を粉砕し、顆粒の混合物を加工し、必要に応じて適切な助剤を加えた後、錠剤又は糖衣錠のコアを得る。適切な賦形剤としては、特に、ラクトース、スクロース、マンニトール、又はソルビトールを含む、糖類などの充填剤；例えば、トウモロコシデンプン、小麦デンプン、米デンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントガム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、及び／又はポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）などのセルロース調製物などがある。必要に応じて、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、若しくは、アルギン酸又はその塩（例えばアルギン酸ナトリウム）などの崩壊剤を加えてもよい。必要に応じて、経口調剤はまた、生理食塩水又は、例えば、体内の酸性状態を中和するためのＥＤＴＡなどの緩衝液中で調合されてよく、あるいは、担体を使用せずに投与してもよい。
【００９８】
上記の１種類以上の成分の経口の投与剤形もまた、特に予定されている。１種類以上の成分は、誘導体の経口送達が有効になるように化学的に修飾されうる。概して、予定される化学的修飾は、成分分子自体への少なくとも１つの部分の付加であり、その部分は、（ａ）酸加水分解の抑制；及び、（ｂ）胃又は腸から血流への取り込みを可能にする。１種類以上の成分の全体的な安定性の向上、及び、体内における循環時間の増加もまた所望される。このような部分の例としては、次のものが挙げられる：ポリエチレングリコール、エチレングリコールとプロピレングリコールの共重合体、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン及びポリプロリン。Abuchowski and Davis, “Soluble Polymer-Enzyme Adducts”, In: Enzymes as Drugs、Hocenberg and Roberts, eds., Wiley-Interscience, New York, N.Y., pp. 367-383(1981); Newmark et al., J Appl Biochem 4:185-9(1982)。使用可能な他のポリマーは、ポリ−１，３−ジオキソラン及びポリ−１，３，６−チオキソカン（tioxocane）である。前述の通り、ポリエチレングリコール部分が薬学的利用にとって好ましい。
【００９９】
成分（又は誘導体）について、放出場所は、胃、小腸（十二指腸、空腸、又は回腸）、又は大腸でありうる。当業者は、胃内では溶解せず、十二指腸又は腸の他の場所において物質を放出する、利用可能な調剤を有している。好ましくは、放出は、本発明の化合物（又は誘導体）の保護、又は、例えば腸など、胃内環境を過ぎてからの生物活性物質の放出のいずれかによって、胃内環境の有害な影響を回避する。
【０１００】
十分な胃耐性を確実にするために、少なくともｐＨ５．０に対して非浸透性のコーティングが望ましい。腸溶性コーティングとして用いられる、より一般的な不活性成分の例は、トリメリト酸酢酸セルロース（ＣＡＴ）、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣＰ）、ＨＰＭＣＰ  ５０、ＨＰＭＣＰ  ５５、ポリビニルアセテートフタレート（ＰＶＡＰ）、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ３０Ｄ、Ａｑｕａｔｅｒｉｃ、酢酸フタル酸セルロース（ＣＡＰ）、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ、及びシェラックである。これらのコーティングは、混合膜として使用してもよい。
【０１０１】
コーティング又はコーティング混合物は、胃に対する保護が意図されていない錠剤においても使用することができる。このコーティングには、糖衣、あるいは、錠剤をより飲み込み易くするコーティングが含まれうる。カプセルは、乾燥治療薬（例えば粉末）の送達用の硬質シェル（ゼラチンなど）で構成されうる；液体形態については、軟質ゼラチンシェルが使用されうる。カシェ剤のシェル材料は、濃デンプン又は他の食用紙でありうる。丸薬、トローチ剤、成形錠剤又は粉薬錠剤については、湿式塊化法（moist massing techniques）が使用されうる。
【０１０２】
治療薬は、粒径約１ｍｍの顆粒又はペレットの形態の細かい多微粒子として、調剤中に含まれうる。カプセル投与用の物質の調剤は、粉末、軽度に圧縮されたプラグ（lightly compressed plugs）、又は錠剤でさえありうる。治療薬は、圧縮によって調製されうる。
【０１０３】
着色剤及び香味剤は、すべて、含まれうる。例えば、本発明の化合物（又は誘導体）は、調合されてよく（リポソーム又はマイクロスフィアのカプセル化などによる）、次いで、さらに、着色剤及び香味剤を含む冷蔵された飲料などの可食性の製品内に含まれてもよい。
【０１０４】
不活性な物質を用いて、治療薬を希釈し又はその容積を増加させてもよい。これらの希釈剤としては、特に、マンニトール、α−ラクトース、無水乳糖、セルロース、スクロース、改質デキストラン及びデンプンなどの炭水化物を挙げることができる。ある特定の無機塩を、充填剤として使用してもよく、例えば三リン酸カルシウム、炭酸マグネシウム及び塩化ナトリウムが挙げられる。幾つかの市販される希釈剤としては、ファスト−フロ（Fast-Fro）、エムデックス（Emdex）、ＳＴＡ−Ｒｘ  １５００、エンコンプレス（Emcompress）及びアビセル（Avicell）がある。
【０１０５】
崩壊剤は、治療薬を固体投与剤形に処方する際に含まれうる。崩壊剤として使用される物質としては、限定はされないがデンプンが挙げられ、デンプンをベースとした市販の崩壊剤であるエキスプロタブを含む。デンプングリコール酸ナトリウム、アンバーライト、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ウルトラミロペクチン、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、オレンジピール、酸型カルボキシメチルセルロース、天然のスポンジ及びベントナイトは、すべて使用されうる。崩壊剤の別の形態は、不溶性の陽イオン交換樹脂である。粉末状ガムは、崩壊剤及び結合剤として使用してもよく、これらには、寒天、カラヤ又はトラガカントなどの粉末状ガムが含まれうる。アルギン酸及びそのナトリウム塩は、崩壊剤としても有用である。
【０１０６】
結合剤は、治療剤を結合させて堅い錠剤を形成するために使用してもよく、アカシア、トラガカント、デンプン及びゼラチンなどの天然物由来の物質を含む。他のものとしては、メチルセルロース（ＭＣ）、エチルセルロース（ＥＣ）及びカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）が挙げられる。ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）及びヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）はいずれも、治療薬を粒状にするためにアルコール溶液において使用することができる。
【０１０７】
抗摩擦剤（anti-frictional agent）は、調剤プロセスの間の接着を防止するために治療薬の調剤に含まれうる。潤滑剤は、治療薬とダイ壁との間の層として使用してもよく、これらには、ステアリン酸並びにそのマグネシウム及びカルシウム塩、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、液体パラフィン、植物油及びワックスが含まれうるが、これらに限られない。ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム、さまざまな分子量のポリエチレングリコール、Ｃａｒｂｏｗａｘ  ４０００及び６０００などの可溶性の潤滑剤も使用されうる。
【０１０８】
調合の際の薬物の流動特性を改善し、圧縮の際の再配列を補助しうる滑剤を添加してもよい。滑剤としては、デンプン、タルク、焼成シリカ及び水和シリコアルミネート（hydrated silicoaluminate）が挙げられうる。
【０１０９】
水性環境内への治療薬の溶解を補助するために、サーファクタントを湿潤剤として添加してもよい。サーファクタントとしては、ラウリル硫酸ナトリウム、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム及びスルホン酸ジオクチルナトリウムなどのアニオン性洗浄剤が挙げられうる。使用可能なカチオン性洗浄剤としては、塩化ベンザルコニウム及び塩化ベンゼトニウムが挙げられうる。調剤にサーファクタントとして含まれる可能性のある非イオン性洗浄剤としては、ラウロマクロゴール４００、ステアリン酸ポリオキシル４０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油１０、５０及び６０、モノステアリン酸グリセロール、ポリソルベート４０、６０、６５及び８０、スクロース脂肪酸エステル、メチルセルロース、並びにカルボキシメチルセルロースが挙げられる。これらのサーファクタントは、本発明の化合物又は誘導体の調剤中に、単独で、又はさまざまな比率の混合物として、存在しうる。
【０１１０】
経口的に用いることができる医薬製剤は、ゼラチンで作られた押し込み式（push-fit）カプセル、並びに、ゼラチンで作られた軟質の密封カプセル、及び、グリセロール又はソルビトールなどの可塑剤を含む。押し込み式カプセルは、ラクトースなどの充填剤、デンプンなどの結合剤、及び／又は、タルク又はステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤、並びに、必要に応じて安定剤と混合した、活性成分を含みうる。軟質カプセルでは、活性化合物は、脂肪油、液体パラフィン、又は液体ポリエチレングリコールなどの適切な液体に溶解又は懸濁されうる。さらに、安定剤を添加してもよい。経口投与用に調合されたマイクロスフィアもまた、使用されうる。このようなマイクロスフィアは、当技術分野で十分に定義されている。経口投与用のすべての調剤は、このような投与に適した用量であろう。
【０１１１】
口腔内投与については、組成物は、通常の態様で配合された錠剤又はトローチ剤の形態をとりうる。
【０１１２】
吸入による投与については、本発明に従った使用のための化合物は、適切な推進剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素又は他の適切なガスの使用とともに、加圧式容器又はネブライザからエアロゾルスプレーの形態で便利に送達されうる。加圧式エアロゾルの場合には、用量単位は、計量された量を送達するための弁を設けることによって決定されうる。吸入器又は注入器での使用のための、例えばゼラチンの、カプセル及びカートリッジは、化合物と、ラクトース又はデンプンなどの適切な粉末基剤との粉末混合物を含むように調合されうる。
【０１１３】
本発明の化合物（又はそれらの誘導体）の肺送達もまた、本願において予定されている。本発明の化合物（又は誘導体）は、吸入と同時に哺乳動物の肺に送達され、肺上皮内層を横断して血流に入る。吸入分子の他の報告としては、Adjei et al., Pharm Res 7:565-569(1990);Adjei et al., Int J Pharmaceutics 63:135-144(1990)（酢酸リュープロリド）；Braquet et al., J Cardiovasc Pharmacol 13(suppl. 5):143-146(1989)（エンドセリン−１）；Hubbard et al., Annal Int Med 3:206-212(1989)（α１−アンチトリプシン）；Smith et al., 1989, J Clin Invest 84:1145-1146（ａ−１−プロテイナーゼ）；Oswein et al., 1990, “Aerosolization of Proteins”, Proceedings of Symposium on Respiratory Drug Delivery II, Keystone, Colorado, March（組換えヒト成長ホルモン）；Debs et al., 1988, J Immunol 140:3482-3488（インターフェロン−γ及び腫瘍壊死因子α）及びＰｌａｔｚらの米国特許第５，２８４，６５６号明細書（顆粒球コロニー刺激因子）が挙げられる。全身的な効果のための薬物の肺送達のための方法及び組成物は、Ｗｏｎｇらに１９９５年９月１９日に発行された米国特許第５，４５１，５６９号明細書（参照することによって取り込まれる）に記載されている。
【０１１４】
ネブライザ、定量吸入器、及び粉末吸入器を含むが、これらに限られない、治療薬の肺送達のために設計されたさまざまな機械装置が、本発明の実施における使用に予定されており、これらの装置はすべて、当業者によく知られている。
【０１１５】
本発明の実施に適した市販の装置の幾つかの特定の例としては、米国ミズーリ州セントルイス所在のＭａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ、Ｉｎｃ．社製造のＵｌｔｒａｖｅｎｔ  ネブライザ；米国コロラド州エングルウッド所在のＭａｒｑｕｅｓｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ社製造のＡｃｏｒｎ  ＩＩネブライザ；米国ノースカロライナ州リサーチトライアングルパーク所在のＧｌａｘｏ  Ｉｎｃ．社製造のＶｅｎｔｏｌｉｎ定量吸入器；及び、米国マサチューセッツ州ベッドフォード所在のＦｉｓｏｎｓ  Ｃｏｒｐ．社製造のＳｐｉｎｈａｌｅｒ粉末吸入器がある。
【０１１６】
このような装置はすべて、本発明の化合物（又は誘導体）の分配に適した調剤の使用を必要とする。典型的には、各調剤は、採用する装置の種類に特有であり、治療に有用な通常の希釈剤、アジュバント及び／又は担体に加えて、適切な推進剤材料の使用も包含しうる。また、リポソーム、マイクロカプセル又はミクロスフェア、包接体、又は他の種類の担体の使用も予定されている。化学的に修飾された本発明の化合物はまた、化学修飾の種類又は採用する装置の種類に応じて、異なる調剤で調製されてもよい。
【０１１７】
ジェット又は超音波のいずれかでネブライザとともに使用するのに適した調剤は、典型的には、本発明の生物活性化合物を溶液１ｍＬあたり約０．１〜２５ｍｇの濃度で、水に溶解した本発明の化合物（又は誘導体）を含む。調剤はまた、緩衝剤及び単糖を含んでいてもよい（例えば、本発明の化合物の安定化及び浸透圧の調節のため）。ネブライザ調剤は、エアロゾルを形成する溶液の噴霧化によって引き起こされる本発明の化合物の表面誘導凝集を低減又は防止するためのサーファクタントも含みうる。
【０１１８】
定量吸入装置とともに使用するための調剤は、概ね、サーファクタントの助けを借りて推進剤に懸濁された本発明の化合物（又は誘導体）を含有する微粉末を含む。推進剤は、クロロフルオロカーボン、ハイドロクロロフルオロカーボン、ハイドロフルオロカーボン、又は、トリクロロフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタノール、及び１，１，１，２−テトラフルオロエタンを含めた炭化水素、又はそれらの組合せなど、この目的で用いられる通常の材料でありうる。適切なサーファクタントとしては、ソルビタントリオレエート及び大豆レシチンが挙げられる。オレイン酸もまた、サーファクタントとして有用でありうる。
【０１１９】
粉末吸入装置から分配するための調剤は、本発明の化合物（又は誘導体）を含有する乾燥微粉末を含み、かつ、例えばラクトース、ソルビトール、スクロース、又はマンニトールなどの増量剤を、例えば、調剤の質量の５０〜９０％など、装置からの粉末の分散を促進する量で含みうる。本発明の化合物（又は誘導体）は、有利には、肺深部への最も効果的な送達のために、１０マイクロメートル（μｍ）未満、最も好ましくは０．５〜５μｍの平均粒径を有する微粒子形態で調製すべきである。
【０１２０】
本発明の医薬組成物の経鼻送達もまた予定されている。経鼻送達は、肺における治療薬の堆積の必要なしに、鼻への治療薬の投与直後に、血流への本発明の医薬組成物の通過を可能にする。経鼻送達のための調剤としては、デキストラン又はシクロデキストランを用いたものが挙げられる。
【０１２１】
経鼻投与にとって有用な装置は、定量噴霧器が取り付けられた小さい硬質のボトルである。一実施形態では、本発明の液体の医薬組成物を容積が画定されたチャンバ内へと引き込むことによって定量が送達され、このチャンバは、該チャンバ内の液体が圧縮されたときに噴霧を形成することによってエアロゾル調剤をエアロゾル化するように寸法化されたアパーチャを有する。チャンバは圧縮されて本発明の医薬組成物を投与する。特定の実施形態では、チャンバはピストン構成である。このような装置は市販されている。
【０１２２】
あるいは、スクイズされたときに噴霧を形成することによってエアロゾル調剤をエアロゾル化するように寸法化されたアパーチャ又は開口部を備えたプラスチックのスクイズボトルが用いられる。開口部は、通常、ボトルの頂部に設けられ、この頂部は、概して、エアロゾル調剤の効率的な投与のために、鼻道に部分的に適合するようにテーパ状になっている。好ましくは、鼻吸入器は、薬物の定量投与のために、定量のエアロゾル調剤を供給する。
【０１２３】
化合物は、それらを全身的に送達することが望ましい場合には、例えばボーラス注入又は持続注入などの注入による非経口投与用に調合されうる。注入用の調剤は、添加した保存料とともに、例えば、アンプル内又は多回投与用容器内に単位投与剤形で提示されうる。組成物は、油性又は水性のビヒクル中で懸濁液、溶液、又はエマルションなどの形態をとってよく、懸濁、安定化及び／又は分散剤などの製剤化剤（formulatory agents）を含みうる。
【０１２４】
非経口投与のための医薬調剤には、水溶性の形態の活性化合物の水溶液が含まれる。加えて、活性化合物の懸濁液は、適切な油性注入懸濁液として調製されうる。適切な親油性溶媒又はビヒクルとしては、ゴマ油などの脂肪油、又はオレイン酸エチル又はトリグリセリドなどの合成脂肪酸エステル、又はリポソームが挙げられる。水性注入懸濁液は、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、又はデキストランなどの懸濁液の粘性を増加させる物質を含みうる。必要に応じて、懸濁液は、適切な安定剤又は、高濃度溶液の製剤を可能にするために化合物の溶解性を高める薬剤も含みうる。
【０１２５】
あるいは、活性化合物は、使用前に、例えば滅菌した発熱性物質非含有水などの適切なビヒクルで構成するための粉末の形態でありうる。
【０１２６】
化合物はまた、例えば、カカオバター又は他のグリセリドなどの通常の坐剤用基剤を含む坐剤又は停留浣腸など、直腸又は膣用組成物中に調合されうる。
【０１２７】
上述の調剤に加えて、化合物は、デポ製剤としても調合されうる。このような長時間作用型調剤は、適切なポリマー性又は疎水性の材料（例えば、許容される油中のエマルションとして）又はイオン交換樹脂、又は、例えば難溶性塩などの難溶性誘導体とともに調合されうる。
【０１２８】
医薬組成物は、適切な固体又はゲル相の担体又は賦形剤も含みうる。このような担体又は賦形剤の例としては、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、さまざまな糖類、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、及びポリエチレングリコールなどのポリマーが挙げられるが、これらに限られない。
【０１２９】
適切な液体又は固体の医薬製剤の剤形は、例えば、吸入のための水溶液又は食塩水、マイクロカプセル化、渦巻形に内包化（encochleated）、微細な金粒子上のコーティング、リポソームに内包、ネブライザ投与、エアロゾル、皮膚への移植用ペレット、又は、皮膚を引っ掻くための鋭器上の乾燥形態などである。医薬組成物としては、顆粒、粉末、錠剤、コーティング錠、（マイクロ）カプセル、坐剤、シロップ剤、エマルション、懸濁液、クリーム、ドロップ又は活性化合物が徐放される製剤も挙げられ、該製剤において、賦形剤及び添加剤、及び／又は、例えば、崩壊剤、結合剤、コーティング剤、膨潤剤、潤滑剤、香味剤、甘味剤又は可溶化剤などの助剤が、上述のように慣用的に用いられる。医薬組成物は、さまざまな薬物送達システムにおける使用に適している。薬物送達のための方法の簡単な見直しについては、ここに参照することによって本明細書に取り込まれる、Langer R., Science 249:1527-33(1990)を参照されたい。
【０１３０】
本発明の化合物及び必要に応じて他の治療薬は、そのまま（ストレート）で、又は薬学的に許容される塩の形態で投与されうる。医薬に用いられる場合、塩は薬学的に許容されるべきであるが、薬学的に許容されない塩は、それらの薬学的に許容される塩の調製に便利に用いられうる。このような塩としては、次の酸から調製されるものが挙げられるが、それらに限られない：塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、マレイン酸、酢酸、サリチル酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ギ酸、マロン酸、コハク酸、ナフタレン−２−スルホン酸、及びベンゼンスルホン酸。また、このような塩は、カルボン酸基のナトリウム、カリウム又はカルシウム塩など、アルカリ金属塩又はアルカリ土類塩として調製されうる。
【０１３１】
適切な緩衝剤としては、次のものが挙げられる：酢酸及び塩（１〜２％ｗ／ｖ）；クエン酸及び塩（１〜３％ｗ／ｖ）；ホウ酸及び塩（０．５〜２．５％ｗ／ｖ）；並びに、リン酸及び塩（０．８〜２％ｗ／ｖ）。適切な保存料としては、塩化ベンザルコニウム（０．００３〜０．０３％ｗ／ｖ）；クロロブタノール（０．３〜０．９％ｗ／ｖ）；パラベン（０．０１〜０．２５％ｗ／ｖ）及びチメロサール（０．００４〜０．０２％ｗ／ｖ）が挙げられる。
【０１３２】
本発明の医薬組成物は、薬学的に許容される担体中に含まれる、有効量の本発明の化合物、及び、必要に応じて治療剤を含む。用語「薬学的に許容される担体」とは、ヒト又は他の脊椎動物への投与に適した１種類以上の相容性の固体又は液体の充填剤、希釈剤又は内包用物質を意味する。用語「担体」は、適用を容易にするために活性成分と組み合わせる、天然又は合成の有機又は無機の成分を意味する。医薬組成物の成分はまた、実質的に所望の薬剤効率を損なうような相互作用が存在しない態様で、本発明の化合物と、及び、互いに、混合可能である。
【０１３３】
本発明の化合物を特に含むがそれに限られない治療剤は、粒子内に提供されてもよい。本明細書で用いられる粒子は、ナノ粒子又はマイクロ粒子（又は、場合によっては、より大きい粒子）を意味し、該粒子は、本明細書に記載される本発明の化合物又は他の治療剤の全部又は一部で構成することができる。粒子は、腸溶性コーティングを含むがそれに限られないコーティングによって取り囲まれたコア内に、治療剤を含みうる。治療剤はまた、粒子全体に分散されてもよい。治療剤はまた、粒子内に吸着されていてもよい。粒子は、ゼロ次放出、一次放出、二次放出、遅延放出、徐放、即時放出、及びそれらのいずれかの組合せ等を含む、任意の次数の放出速度論を示しうる。粒子は、治療剤に加えて、崩壊性（erodible）、非崩壊性、生分解性、又は非生分解性の物質又はそれらの組合せを含むがそれらに限られない薬学及び医学の分野で、日常的に使用される物質を含みうる。粒子は、溶液中又は半固体状態内に本発明の化合物を含む、マイクロカプセルでありうる。粒子は、事実上、どのような形状であってもよい。
【０１３４】
非生分解性及び生分解性の両方のポリマー物質を、治療剤の送達のための粒子の製造に使用することができる。このようなポリマーは、天然のポリマーであっても合成のポリマーであってもよい。ポリマーは、放出が望まれる期間に基づいて選択される。特に注目される生体接着性のポリマーとしては、その教示が本明細書に援用される、Sawhney H S et al. (1993) Macromolecules 26:581-7に記載される生体内分解性のハイドロゲルが挙げられる。これらには、ポリヒアルロン酸、カゼイン、ゼラチン、グルチン、ポリ無水物、ポリアクリル酸、アルギン酸塩、キトサン、ポリ（メタクリル酸メチル）、ポリ（メタクリル酸エチル）、ポリ（メタクリル酸ブチル）、ポリ（メタクリル酸イソブチル）、ポリ（メタクリル酸ヘキシル）、ポリ（メタクリル酸イソデシル）、ポリ（メタクリル酸ラウリル）、ポリ（メタクリル酸フェニル）、ポリ（アクリル酸メチル）、ポリ（アクリル酸イソプロピル）、ポリ（アクリル酸イソブチル）、及びポリ（アクリル酸オクタデシル）が含まれる。
【０１３５】
治療剤は、制御放出システム内に含まれうる。用語「制御放出」は、調剤からの薬物放出の態様及びプロファイルが制御された、いずれかの薬物含有調剤を指すことが意図されている。これは、即時放出性の調剤並びに即時放出性ではない調剤のことを指し、即時放出性ではない調剤には、徐放性及び遅延放出性の調剤が含まれるがこれらに限られない。用語「徐放性」（「持続放出」とも称される）は、長期間にわたって薬物の逐次放出をもたらし、かつ、好ましくは、必ずというわけではないが、長期間にわたり薬物の実質的に一定の血中濃度を生じる、製剤のことを指す、通常の意味で用いられる。用語「遅延放出性」は、調剤の投与と、調剤からの薬物の放出との間に時間の遅延が存在する製剤のことを指す、通常の意味で用いられる。「遅延放出性」は、長期間にわたる薬物の逐次の放出を含んでも含まなくてもよく、したがって、「徐放性」であってもなくてもよい。
【０１３６】
長期徐放性インプラントの使用は、慢性的な状態の治療に特に適しうる。「長期」放出は、本明細書で用いられる場合、インプラントが、少なくとも７日間、好ましくは３０〜６０日間、治療濃度の活性成分を送達するように構成かつ配置されることを意味する。長期徐放性インプラントは、当業者に広く知られており、上述の放出システムの幾つかを含む。
【０１３７】
本明細書に記載される組成物及び方法への他の適切な修正及び適合は、当業者に知られた情報の観点から、本明細書に含まれる本発明の説明から容易に明らかとなり、また、本発明又はそれらの実施形態の範囲から逸脱することなくなされうることが、当業者に理解されよう。
【実施例】
【０１３８】
本発明を詳細に説明してきたが、本発明は、単に例証の目的で本明細書に含まれ、本発明を限定することは意図されていない、以下の実施例を参照することによってより明確に理解されよう。
【０１３９】
実施例１．最小限に保護されたＡｍＢからのＡｍＢＭＵの合成
【化１７】
0006726192.tif 000021
丸底フラスコにアムホテリシンＢ（１ｇ、計算値１．０８２ｍｍｏｌ、１当量）及びＦｍｏｃ−スクシンイミド（０．５５ｇ、１．６２ｍｍｏｌ、１．５当量）を入れ、室温でＤＭＦ：ＭｅＯＨの２：１混合液（３３．８ｍＬ）に溶解させた。その後、ピリジン（０．５ｍＬ、６．２１ｍｍｏｌ、５．７４当量）を加え、反応を、室温で１２時間、攪拌した。次に、反応混合物をジエチルエーテル（１．０Ｌ）に注いだ。３０分間の攪拌後、得られた黄色沈殿物を、Ｗｈａｔｍａｎ＃５０フィルタ紙を使用してＢｕｃｈｎｅｒ濾過によって単離し、黄色固体を得た。濾過ケーキをフィルタ上で１０分間、乾燥させ、次に、真空下で１時間、保管した。
【０１４０】
得られた粉末を、ＴＨＦ：ＭｅＯＨ  １：１（３５ｍＬ）に溶解し、０℃まで冷却した。この溶液にカンファースルホン酸（１３８ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ、０．５５当量）を加え、得られた混合物を０℃で１時間、攪拌した。次に、反応を、トリエチルアミン（０．１４ｍＬ、０．５９ｍｍｏｌ、０．５５当量）を用いて０℃でクエンチした。反応を真空下で濃縮し、溶媒のおよそ半分を除去した。得られた飽和溶液を、ヘキサン：ジエチルエーテル１：１（１．０Ｌ）に注ぎ、黄色沈殿物を、Ｗｈａｔｍａｎ＃５０フィルタ紙を使用してＢｕｃｈｎｅｒ濾過によって回収し、ジエチルエーテル（２００ｍＬ）で洗浄して黄色固体を得た。
【０１４１】
得られた固体を、ＴＨＦ（５４ｍＬ、０．０２Ｍ）に溶解させた。この溶液に、トリエチルアミン（０．１５ｍＬ、１．０８ｍｍｏｌ、１当量）を加え、次に、ジフェニルホスホリルアジド（０．７０ｍＬ、３．２５ｍｍｏｌ、３当量）を加えた。反応を５０℃まで加熱し、１２時間、攪拌した。１２時間後、反応を室温まで冷却し、メチルアミン（ＴＨＦ中、２．０Ｍ溶液、４．３３ｍＬ、８．８ｍｍｏｌ、８当量）を加えた。次に、反応を室温で８時間、攪拌し、黄色沈殿物をゆっくりと成長させた（evolving）。次に、反応混合物をジエチルエーテル（１．０Ｌ）に注ぎ、得られた黄色沈殿物を、Ｗｈａｔｍａｎ＃５０フィルタ紙を使用してＢｕｃｈｎｅｒ濾過によって単離し、黄色固体を得た。固体をＤＭＳＯ（およそ１００ｍｇ／ｍＬ）に溶解し、単一の分取用ＨＰＬＣ精製（Ｃ１８、５μｍ、５０×２５０ｍｍ、７５ｍＬ／分、９分間にわたり８０：２０〜５９：４１  ０．３％  ＨＣＯ２Ｈ（ａｑ）：ＭｅＣＮ）によって精製した。同様に、単一のＨＰＬＣ精製のみを必要とする、世界的供給の抗真菌剤カスポファンギンが供給される。ＨＰＬＣ精製の後に、真空下、４０℃で溶媒を除去した。溶媒の除去の完了後、ｍｉｌｌｉＱ水（１０ｍＬ）及びトルエン（５０ｍＬ）と共沸することによって残留ギ酸を除去した。このプロセスを３回繰り返し、ＡｍＢＭＵを黄色固体として得た（２６４．３ｍｇ、０．２７８ｍｍｏｌ、工程あたりの平均収率６４％）。
1H NMR(750 MHz, 1:1 ピリジン d-5: メタノール d-4) δ 6.64(dd, J=14.7, 11.2 Hz, 1H), 6.60(dd, J=14.8, 10.0 Hz, 1H), 6.52(t, J=12.1 Hz, 1H), 6.48 - 6.37(m, 6H), 6.36 - 6.25(m, 4H), 5.69 - 5.63(m, 1H), 5.53 - 5.47(dd, J=14.3, 9.8 Hz, 1H), 4.97(s, 1H), 4.82-4.76(m, 1H), 4.65(app t, J=10.3 Hz, 1H), 4.53(bs, 1H), 4.49(app tt, J=9.8, 2.9 Hz, 1H), 4.42(app t, J=9.1 Hz, 1H), 4.29 - 4.23(m, 1H), 3.98(app t, J=10.0 Hz, 1H), 3.90 - 3.84(m, 2H), 3.80 - 3.72(m, 1H), 3.62 - 3.56(m, 1H), 3.56 - 3.51(m, 1H), 3.47 - 3.44(m, 1H), 3.38(app d, J=9.5 Hz, 1H), 2.79(s, 3H), 2.71 - 2.65(m, 1H), 2.61 - 2.55(m, 1H), 2.51(dd, J=16.7, 9.8 Hz, 1H), 2.39 - 2.34(m, 2H), 2.21 - 2.14(m, 1H), 2.06 - 1.99(m, 2H), 1.96(dd, J=14.8, 7.3 Hz, 1H), 1.85(dd, J=13.9, 10.9 Hz, 1H), 1.84-1.79(m, 1H), 1.73 - 1.65(m, 3H), 1.66 - 1.61(m, 1H), 1.61 - 1.56(m, 1H), 1.53(app dt, J=14.0, 3.0 Hz, 1H), 1.47-1.45(m, 1H), 1.46(d, J=6.2 Hz, 3H), 1.37(d, J=6.5 Hz, 3H), 1.25(d, J=6.4 Hz, 3H), 1.18(d, J=7.1 Hz, 3H)。
13C NMR(125 MHz, 1:1 ピリジン d-5: メタノール d-4) δ 172.31, 161.63, 137.57, 137.33, 134.82, 134.20, 134.17, 133.99, 133.91, 133.67, 133.59, 133.28, 132.98, 131.04, 129.73, 128.99, 98.04, 98.26, 79.10, 77.44, 76.32, 75.24, 74.64, 72.32, 70.92, 70.45, 69.98, 69.26, 68.97, 68.69, 68.46, 58.35, 57.35, 47.22, 45.74, 44.90, 44.06, 42.89, 41.28, 40.80, 36.72, 36.38, 31.53, 27.02, 19.11, 18.10, 17.35, 12.64。
HRMS(ESI)：計算値(C48H77N3O16+H)+ 952.5382；観測値952.5385
分析用HPLC（Zorbax Eclipse C18、1.8μm、2.1×50mm、0.4mL/分、8分間にわたりH2O:MeCN 95:5〜5:95（両方とも0.1% HCO2Hを含む））、保持時間＝5.7分間。
【０１４２】
実施例２．最小限に保護されたＡｍＢからのＡｍＢＡＵの合成
【化１８】
0006726192.tif 000022
丸底フラスコに、ＤＭＦ：ＭｅＯＨの２：１混合物（３３．８ｍＬ）に溶解した、アムホテリシンＢ（１ｇ、計算値１．０８２ｍｍｏｌ、１当量）及びＦｍｏｃ−スクシンイミド（０．５５ｇ、１．６２ｍｍｏｌ、１．５当量）を、室温で充填した。その後、ピリジン（０．５ｍＬ、６．２１ｍｍｏｌ、５．７４当量）を添加し、反応を室温で１２時間、攪拌した。次に、反応混合物をジエチルエーテル（１．０Ｌ）に注いだ。３０分間の攪拌後、得られた黄色沈殿物を、Ｗｈａｔｍａｎ＃５０フィルタ紙を使用してＢｕｃｈｎｅｒ濾過によって単離し、黄色固体を得た。濾過ケーキをフィルタ上で１０分間、乾燥させ、次に、真空下で１時間、保管した。
【０１４３】
得られた粉末を、ＴＨＦ：ＭｅＯＨ  １：１（３５ｍＬ）に溶解し、０℃まで冷却した。この溶液にカンファースルホン酸（１３８ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ、０．５５当量）を加え、得られた混合物を０℃で１時間、攪拌した。次に、反応を、トリエチルアミンを用いて０℃でクエンチした（０．１４ｍＬ、０．５９ｍｍｏｌ、０．５５当量）。反応を真空下で濃縮し、溶媒のおよそ半分を除去した。得られた飽和溶液を、ヘキサン：ジエチルエーテル１：１（１．０Ｌ）に注ぎ、黄色沈殿物を、Ｗｈａｔｍａｎ＃５０フィルタ紙を使用してＢｕｃｈｎｅｒ濾過によって回収し、ジエチルエーテル（２００ｍＬ）で洗浄し、黄色固体を得た。
【０１４４】
得られた固体を、ＴＨＦ（５４ｍＬ、０．０２Ｍ）に溶解させた。この溶液に、トリエチルアミン（０．１５ｍＬ、１．０８ｍｍｏｌ、１当量）を加え、次に、ジフェニルホスホリルアジド（０．７０ｍＬ、３．２５ｍｍｏｌ、３当量）を加えた。反応を５０℃まで加熱し、１２時間、攪拌した。１２時間後、エチレンジアミン（０．２９ｍＬ、４．３３ｍｍｏｌ、４当量）を加え、５０℃で３時間、攪拌下で反応を継続し、黄色沈殿物をゆっくりと成長させた（evolving）。次に、反応混合物をジエチルエーテル（１．０Ｌ）に注ぎ、得られた黄色沈殿物を、Ｗｈａｔｍａｎ＃５０フィルタ紙を使用してＢｕｃｈｎｅｒ濾過によって単離し、黄色固体を得て、これをＤＭＳＯ（およそ６６ｍｇ／ｍＬ）に溶解し、分取用ＨＰＬＣ（Ｃ１８、５μｍ、５０×２５０ｍｍ、７５ｍＬ／分、９分間にわたりＨＣＯ２Ｈ（ａｑ）：ＭｅＣＮ  ８０：２０〜５０：５０、０．３％）で精製した。ＨＰＬＣ精製の後、真空下、４０℃で溶媒を除去した。溶媒の除去の完了後、ｍｉｌｌｉＱ水（１０ｍＬ）及びトルエン（５０ｍＬ）と共沸することによって残留ギ酸を除去した。このプロセスを３回繰り返し、ＡｍＢＡＵを黄色固体として得た（２３６．２ｍｇ、０．２４１ｍｍｏｌ、工程あたりの平均収率６１％）。
1H NMR(750 MHz, 1:1 ピリジン d-5: メタノール d-4) δ 6.64(dd, J=14.7, 11.2 Hz, 1H), 6.60(dd, J=15.2, 8.8 Hz, 1H), 6.55 - 6.47(m, 1H), 6.47 - 6.35(m, 7H), 6.35 - 6.25(m, 3H), 5.68 - 5.61(m, 1H), 5.49(dd, J=15.0, 10.2 Hz, 1H), 4.91(s, 1H), 4.79 - 4.73(m, 1H), 4.64(app t, J=10.7 Hz, 1H), 4.49 - 4.42(m, 3H), 4.28 - 4.23(m, 1H), 3.96(app t, J=10.4 Hz, 1H), 3.88 - 3.82(m, 1H), 3.82 - 3.73(m, 3H), 3.55 - 3.50(m, 1H), 3.51 - 3.46(m, 1H), 3.47 - 3.43(m, 1H), 3.39(app d, J=8.8 Hz, 1H), 3.36(app d, J=9.2 Hz, 1H), 3.32 - 3.26(m, 1H), 3.23 - 3.16(m, 1H), 2.66(dd, J=15.4, 4.9 Hz, 1H), 2.59 - 2.53(m, 1H), 2.49(dd, J=16.8, 9.8 Hz, 1H), 2.38 - 2.33(m, 2H), 2.18 - 2.12(m, 1H), 2.04 - 1.97(m, 2H), 1.90(dd, J=14.9, 7.8 Hz, 1H), 1.84(dd, J=14.0, 11.0 Hz, 1H), 1.82 - 1.75(m, 1H), 1.71-1.65(m, 3H), 1.65 - 1.60(m, 1H), 1.60 - 1.55(m, 1H), 1.52(app dt, J=13.8, 2.9 Hz, 1H), 1.48 - 1.44(m, 1H), 1.44(d, J=6.2 Hz, 3H), 1.36(d, J=6.5 Hz, 3H), 1.24(d, J=6.4 Hz, 3H), 1.17(d, J=7.1 Hz, 3H)。
13C NMR(150 HMz, 1:1 ピリジン d-5: メタノール d-4) δ 172.34, 161.35, 137.58, 137.08, 134.78, 134.16, 134.11, 134.02, 133.93, 133.71, 133.62, 133.26, 133.00, 130.85, 130.62, 98.26, 98.07, 79.12, 77.60, 76.37, 75.24, 74.63, 72.28, 71.43, 70.47, 70.00, 69.23, 69.23, 68.69, 68.62, 58.16, 57.32, 47.18, 45.77, 44.93, 44.05, 42.86, 41.67, 40.80, 40.49, 39.31, 36.73, 36.35, 31.56, 19.08, 18.08, 17.32, 12.63。
HRMS(ESI):計算値(C49H80N4O16+H)+ 981.5648；観測値981.5641
分析用HPLC（Zorbax Eclipse C18、1.8μm、2.1×50mm、0.4mL/分、8分間にわたりH2O:MeCN 95:5〜5:95（両方とも0.1% HCO2Hを含む））、保持時間＝5.2分間。
【０１４５】
実施例３．最小限に保護されたＡｍＢからのＡｍＢＣＵ−アリルエステルの合成
【化１９】
0006726192.tif 000023
丸底フラスコに、ＤＭＦ：ＭｅＯＨの２：１混合物（３３．８ｍＬ）に溶解した、アムホテリシンＢ（１ｇ、計算値１．０８ｍｍｏｌ、１当量）及びＦｍｏｃ−スクシンイミド（０．５５ｇ、１．６２ｍｍｏｌ、１．５当量）を、室温で充填した。その後、ピリジン（０．５ｍＬ、６．２１ｍｍｏｌ、５．７４当量）を添加し、反応を室温で１２時間、攪拌した。次に、反応混合物をジエチルエーテル（１．０Ｌ）に注いだ。３０分間の攪拌後、得られた黄色沈殿物を、Ｗｈａｔｍａｎ＃５０フィルタ紙を使用してＢｕｃｈｎｅｒ濾過によって単離し、黄色固体を得た。濾過ケーキをフィルタ上で１０分間、乾燥させ、次に、真空下で１時間、保管した。
【０１４６】
得られた粉末を、ＴＨＦ：ＭｅＯＨ  １：１（３５ｍＬ）に溶解し、０℃まで冷却した。この溶液にカンファースルホン酸（１３８ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ、０．５５当量）を加え、得られた混合物を０℃で１時間、攪拌した。次に、反応を、トリエチルアミンを用いて０℃でクエンチした（０．１４ｍＬ）。反応を真空下で濃縮し、溶媒のおよそ半分を除去した。得られた飽和溶液を、ヘキサン：ジエチルエーテル１：１（１．０Ｌ）に注ぎ、黄色沈殿物を、Ｗｈａｔｍａｎ＃５０フィルタ紙を使用してＢｕｃｈｎｅｒ濾過によって回収し、ジエチルエーテル（２０ｍＬ）で洗浄し、黄色固体を得た。
【０１４７】
得られた固体（１．０６ｇ、計算値１．０８ｍｍｏｌ、１当量）を、４０ｍＬバイアルに加え、その後、ＴＨＦ（５４ｍＬ、０．０２Ｍ）、トリエチルアミン（０．１６ｍＬ、１．１４ｍｍｏｌ、１．０５当量）、最後に、ジフェニルホスホリルアジド（０．７０ｍＬ、３．２５ｍｍｏｌ、３当量）を加えた。次に、反応を５０℃まで加熱し、１５時間、攪拌した。
【０１４８】
別の４０ｍＬバイアルに、β−アラニンアリルエステル塩酸塩（７．１６ｇ、４３．３ｍｍｏｌ、４０当量）、炭酸ナトリウム（１３．７５ｇ、１２９．８ｍｍｏｌ、１２０当量）、及びＴＨＦ（１４ｍＬ）を加えた。得られた懸濁液を、次に、室温で２０分間、攪拌した。次に、懸濁液をＣｅｌｉｔｅで濾過し、続いて、０．２μｍのシリンジチップフィルタに通して濾過した。次に、得られたβ−アラニンアリルエステル遊離塩基を５０℃の反応混合物に加え、８時間、攪拌した。８時間後、揮発性物質を真空下で除去し、赤色油を得た。これをＤＭＳＯに溶解させ、分取用ＨＰＬＣで直接精製した（Ｃ１８、５μｍ、５０×２５０ｍｍ、８０ｍＬ／分、９分間にわたり８０：２０〜４０：６０  ０．３％  ＨＣＯ２Ｈ（ａｑ）：ＭｅＣＮ）。アセトニトリルとギ酸水溶液を真空下、３５℃で除去する際に、Ｃ−１３メチルケタールがヘミケタールに変換され、ＡｍＢＣＵ−アリルエステルを黄色固体として得る（３７０ｍｇ、０．３５２ｍｍｏｌ、ステップあたりの平均収率６８％）。
1H NMR(500 MHz, 10:1 ピリジン d-5: メタノール d-4) δ 6.71 - 6.25(m, 13H), 6.01 - 5.89(m, 1H), 5.70 - 5.64(m, 1H), 5.54 - 5.48(m, 1H), 5.33(m, 1H), 5.20(m, 1H), 4.97(s, 1H), 4.79(bs, 1H), 4.70 - 4.59(m, 4H), 4.50(app t, J=10.0 Hz ,1H), 4.43(app t, J=8.8 Hz, 1H), 4.26 - 4.20(m, 1H), 3.99(app t, J=10.0 Hz, 1H), 3.88(app d, J=10.8 Hz, 1H), 3.82-3.77(m, 2H), 3.65-3.60(m, 3H), 3.47(m, 1H), 3.42 - 3.35(m, 1H), 3.35 - 3.31(m, 1H), 2.71 - 2.62(m, 3H), 2.58(m, 1H), 2.52(dd, J=16.8, 9.7 Hz, 1H), 2.41 - 2.33(m, 2H), 2.23-2.13(m, 1H), 2.07 - 1.91(m, 3H), 1.91 - 1.77(m, 2H), 1.75 - 1.57(m, 5H),  1.57 - 1.51(m, 1H), 1.48 - 1.44(m, 4H), 1.37(d, J=6.3 Hz, 3H), 1.26(d, J=6.3 Hz, 3H), 1.18(d, J=7.1 Hz, 3H)。
13C NMR(125 MHz, 10:1 ピリジン-d5 : MeOH-d4) δ 172.31, 171.92, 160.41, 136.83, 136.75, 134.46, 133.84, 133.57, 133.47, 133.45, 133.20, 133.03, 132.91, 132.61, 130.57, 129.55, 117.73, 98.06, 97.90, 77.08, 75.96, 74.89, 74.31, 71.92, 71.61, 70.08, 69.59, 68.65, 68.29, 68.19, 65.31, 57.96, 57.09, 46.84, 45.53, 44.62, 42.59, 40.89, 40.48, 36.41, 36.07, 35.42, 31.22, 18.74, 17.89, 17.02, 12.32。
HRMS(ESI)：計算値(C53H83N3O18+H)+ 1050.570；観測値 1050.5756
分析用HPLC（Zorbax Eclipse C18、1.8μm、2.1×50mm、0.4mL/分、8分間にわたりH2O:MeCN 95:5〜5:95（両方とも0.1% HCO2Hを含む））、保持時間＝6.4分間。
【０１４９】
実施例４．ＡｍＢＣＵ−アリルエステルの脱アリル化によるＡｍＢＣＵの合成
【化２０】
0006726192.tif 000024
４０ｍＬバイアルに、ＡｍＢＣＵ−アリルエステル（３７０ｍｇ、３５２．３μｍｏｌ、１当量）、及びチオサリチル酸（２０３．４ｍｇ、１．７６ｍｍｏｌ、５当量）を加えた。次に、バイアルをグローブボックス内に運び入れ、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２０５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ、０．５当量）を加えた。バイアルをセプタムキャップで密封し、グローブボックスから取り出し、シリンジによってＤＭＦ（１７．６ｍＬ、０．２Ｍ）を加えた。次に、反応を室温で１時間、攪拌した。次に、反応を、複数の５０ｍＬ遠心分離管内のＥｔ２Ｏ（３７０ｍＬ）に注いだ。得られた懸濁液を、次に、３７００Ｇで５分間、遠心分離にかけた。淡赤色の上清をデカンテーションし、得られた黄色／橙色固体をＤＭＳＯに溶解させ、分取用ＨＰＬＣで精製し（Ｃ１８、５μｍ、５０×２５０ｍｍ、８０ｍＬ／分、９分間にわたり８０：２０〜４０：６０  ０．３％  ＨＣＯ２Ｈ（ａｑ）：ＭｅＣＮ）、ＡｍＢＣＵを黄色固体として得た（１２４．４ｍｇ、０．１２３ｍｍｏｌ、収率３５％、１ｇのＡｍＢからのステップあたりの平均収率５８％）。
1H NMR(500 MHz, 1:1 ピリジン d-5: メタノール d-4) δ 6.69 - 6.23(m, 13H), 5.70 - 5.64(m, 1H), 5.54-5.50(m, 1H), 5.00(s, 1H), 4.76(bs, 1H), 4.65(app t, J=10.4 Hz, 1H), 4.57(app bs, 1H), 4.49(app t, J=9.0 Hz, 1H), 4.45 - 4.39(m, 1H), 4.30-4.23(m, 1H), 4.01-3.95(m, 1H), 3.92-3.84(m, 2H), 3.82-3.77(m, 1H), 3.73-3.67(m, 2H), 3.67-3.63(m, 2H), 3.57-3.51(m, 2H), 3.49-3.45(m, 1H), 3.38(app d, J=9.8 Hz, 1H), 2.74-2.63(m, 2H), 2.51(dd, J=17.0, 9.5 Hz 1H), 2.43 - 2.34(m, 2H), 2.23 - 2.14(m, 1H), 2.05-1.98(m, 2H), 2.94-1.89(m, 1H), 1.88-1.80(m, 2H), 1.73-1.59(m, 5H), 1.57 - 1.51(m, 1H), 1.46(d, J=6.1 Hz, 4H), 1.44 - 1.40(m, 1H), 1.38(d, J=6.3 Hz, 3H), 1.26(d, J=6.3 Hz, 3H), 1.19(d, J=7.1 Hz, 3H)。
13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 175.38, 170.58, 158.41, 136.81, 136.33, 133.92, 133.76, 133.64, 133.25, 133.16, 132.57, 132.40, 132.25, 132.17, 131.87, 131.23, 130.28, 129.00, 97.04, 96.87, 77.20, 76.06, 73.86, 73.48, 73.05, 69.50, 69.16, 68.80, 67.98, 67.79, 67.44, 66.84, 66.20, 59.75, 56.23, 55.25, 45.84, 44.88, 44.80, 42.52, 42.01, 40.43, 39.52, 35.11, 30.96, 29.05, 18.52, 17.80, 16.96, 12.10。
HRMS(ESI)：計算値(C50H79N3O18+H)+ 1010.5437；実測値 1010.5449
分析用HPLC（Zorbax Eclipse C18、1.8μm、2.1×50mm、0.4mL/分、8分間にわたりH2O:MeCN 95:5〜5:95（両方とも0.1% HCO2Hを含む））、保持時間＝6.07分間。
【０１５０】
実施例５．パーシリルＡｍＢ中間体４
【化２１】
0006726192.tif 000025
図４に示すように、以下に見られるプロトコルに従って、パーシリル中間体４を合成した：Palacios, D. S., Anderson, T. M. & Burke, M. D. A Post-PKS Oxidation of the Amphotericin B Skeleton Predicted to be Critical for Channel Formation Is Not Required for Potent Antifungal Activity. J. Am. Chem. Soc. 129, 13804-13805, (2007)。
【０１５１】
実施例６．イソシアナート５の合成
【化２２】
0006726192.tif 000026
４０ｍＬバイアルに、４（６０２．６ｍｇ、２７５．３μｍｏｌ、１当量）、及びベンゼン（１３．７ｍＬ）を加えた。トリエチルアミン（１１５μＬ、０．８２２ｍｍｏｌ、３当量）を加え、続いてＤＰＰＡ（７１μＬ、３３．０ｍｍｏｌ、１．２当量）を加えた。反応を、８０℃で予熱した加熱ブロック内に設置し、３．５時間、攪拌した。次に、反応を、水（２５ｍＬ）及びジエチルエーテル（５０ｍＬ）とともに、１２５ｍＬの分液漏斗に移した。層を分離し、有機層を、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。得られた赤色／橙色の油を、次に、ＳｉＯ２クロマトグラフィ（ヘキサン：Ｅｔ２Ｏ  １００：０〜０：１００）によって精製し、橙色固体として５を得た（１６８．７ｍｇ、０．０７７ｍｍｏｌ、２８％収率）。
1H NMR(500 MHz, アセトン-d6) δ 7.87(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.70(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.42(t, J=7.4 Hz, 2H), 7.37 - 7.29(m, 2H), 6.59 - 6.11(m, 12H), 6.06(dd, J=15.6, 5.9 Hz, 1H), 5.51(dd, J=14.8, 9.4 Hz, 1H), 5.36(d, J=9.7 Hz, 1H), 4.70(s, 1H), 4.69 - 4.64(m, 2H), 4.48(dd, J=10.5, 6.5 Hz, 1H), 4.35(dd, J=10.5, 6.6 Hz, 1H), 4.24(app t, J=6.6 Hz, 1H), 4.18(s, 1H), 4.16 - 4.05(m, 2H), 4.04 - 3.98(m, 1H), 3.97(app d, J=3.1 Hz, 1H), 3.86(app dd, J=9.0, 2.9 Hz, 1H), 3.80(app t, J=9.4 Hz, 1H), 3.73 - 3.60(m, 2H), 3.48(app t, J=9.0 Hz, 1H), 3.38 - 3.31(m, 1H), 3.29(app t, J=9.7 Hz, 1H), 3.16(s, 3H), 2.48 - 2.41(m, 1H), 2.38(dd, J=14.8, 6.2 Hz, 1H), 2.20 - 2.14(m, 1H), 1.96 - 1.87(m, 2H), 1.87 - 1.81(m, 4H), 1.69 - 1.60(m, 3H), 1.57 - 1.47(m, 1H), 1.29(s, 4H), 1.25(d, J=6.2 Hz, 3H), 1.18(d, J=6.0 Hz, 3H), 1.10 - 0.88(m, 89H), 0.80 - 0.50(m, 54H)。
IR(薄膜, cm-1) 2956.35, 2912.00, 2877.29, 2250.53, 1731.77, 1590.99, 1488.78, 1457.93, 1415.50, 1378.86, 1303.65, 1272.79, 1238.08, 1205.29, 1184.08, 1160.94, 1108.87, 1076.09, 1008.59, 966.16, 738.60。
TLC(ヘキサン:Et2O 7:3、CAM染色):Rf=0.64
HRMS(ESI)：計算値(C117H210N2O18Si9+Na)+ 2206.3400；実測値 2206.3413
【０１５２】
別の合成では、５０ｍＬの丸底フラスコにベンゼン（１８ｍＬ）中、４（７８１ｍｇ、３５７．２μｍｏｌ、１当量）を加えた。トリエチルアミン（１５０μＬ、１．０７ｍｍｏｌ、３当量）をゆっくりと加え、続いて、ＤＰＰＡ（９２μＬ、０．４２９ｍｍｏｌ、１．２当量）を滴下添加した。次に、反応を、油浴中、８５℃で加熱し、反応の進行をＴＬＣでモニタリングした。５時間後、出発材料が完全に消費され、反応を０℃に冷却し、０℃に冷却した水（２５ｍＬ）とジエチルエーテル（５０ｍＬ）の混合液にゆっくりと注いだ。次に、混合物を分液漏斗に移し、水層をジエチルエーテルで抽出した（２５ｍＬ×３）。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。得られた赤色油を、ベンゼン中の溶液として順相シリカカラム上に負荷し、ＳｉＯ２クロマトグラフィ（ヘプタン：Ｅｔ２Ｏ  １９：１〜３：１）で精製し、黄色固体として５を得た（１５８ｍｇ、０．０７２４ｍｍｏｌ、収率２０％）。
1H NMR(500 MHz, アセトン-d6) δ 7.88(d, J=7.6 Hz, 2H), 7.70(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.43(t, J=7.5 Hz, 2H), 7.38 - 7.28(m, 2H), 6.61 - 5.99(m, 11H), 4.69(d, J=15.2 Hz, 2H), 4.24(t, J=6.6 Hz, 2H), 4.09(s, 2H), 4.01(s, 1H), 3.86(d, J=7.4 Hz, 1H), 3.80(t, J=9.4 Hz, 1H), 3.74 - 3.55(m, 3H), 3.35(t, J=7.2 Hz, 1H), 3.32 - 3.21(m, 1H), 3.16(s, 2H), 2.60(d, J=6.5 Hz, 2H), 2.43(dt, J=15.1, 7.7 Hz, 2H), 1.87 - 1.60(m, 7H), 1.27(dq, J=14.2, 7.9 Hz, 5H), 1.18(d, J=6.1 Hz, 3H), 1.12 - 0.82(m, 73H), 0.82 - 0.50(m, 46H)。
IR(薄膜): ν 2955, 2911, 2877, 2248, 1736, 1460, 1110, 1005 cm-1。
【０１５３】
実施例７．カーボネート６の合成
【化２３】
0006726192.tif 000027
１．５ｍＬのバイアルに、５（原液（１．５ｍＬのベンゼン中、１５０ｍｇを１００μＬ）として、１０ｍｇ、４．５７μｍｏｌ、１当量）、及びチタンイソプロポキシド（原液（４．６ｍＬのベンゼン中、２５μＬを５０μＬ）として、０．２７μＬ、０．９１４μｍｏｌ、０．２当量）及びＴＨＦ（８０μＬ）を加えた。次に、反応を室温で１時間、攪拌した。次に、反応を水（１．５ｍＬ）及びジエチルエーテル（１．５ｍＬ）で希釈した。層を分離し、有機層を、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。得られた赤色／橙色の油を、次に、ＳｉＯ２クロマトグラフィ（ヘキサン：Ｅｔ２Ｏ  １００：０〜８０：２０）によって精製し、橙色固体として５を得た。
1H NMR(500 MHz, アセトン-d6) δ 7.88(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.70(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.43(t, J=7.3 Hz, 2H), 7.36 - 7.32(m, 2H), 6.59 - 6.08(m, 12H), 6.03(dd, J=15.5, 6.1 Hz, 1H), 5.51(dd, J=14.9, 9.5 Hz, 1H), 5.35(d, J=9.9 Hz, 1H), 4.87(p, J=6.3 Hz, 1H), 4.77 - 4.73(m, 1H), 4.71 - 4.67(m, 1H), 4.65(s, 1H), 4.48(dd, J=10.5, 6.5 Hz, 1H), 4.37(dd, J=10.4, 6.5 Hz, 1H), 4.25(app t, J=6.3 Hz, 2H), 4.18 - 4.09(m, 1H 4.07 - 3.97(m, 2H), 3.87 - 3.84(m, 1H), 3.76(app dd, J=11.8, 6.9 Hz, 1H), 3.70(d, J=8.9 Hz, 1H), 3.74 - 3.66(m, 2H), 3.47 - 3.34(m, 2H), 3.35 - 3.28(m, 1H), 3.15(s, 3H), 2.58(d, J=6.6 Hz, 1H), 2.47 - 2.40(m, 2H), 2.26(app dd, J=15.6, 7.4 Hz, 2H), 2.20 - 2.15(m, 1H), 1.94 - 1.85(m, 4H), 1.84 - 1.80(d, J=13.1 Hz, 3H), 1.79 - 1.68(m, 4H), 1.68 - 1.61(d, J=9.3 Hz, 2H), 1.54 - 1.56(s, 1H), 1.26(app dd, J=6.2, 3.2 Hz, 6H), 1.22(d, J=6.2 Hz, 3H), 1.18(d, J=6.0 Hz, 3H), 1.14 - 0.83(m, 87H), 0.81 - 0.53(m, 54H)。
LRMS(ESI)：計算値(C120H218N2O19Si9+Na)+ 2266.4；実測値 2266.6
TLC(ヘキサン:Et2O 7:3、CAM染色):Rf=0.51
【０１５４】
実施例８．カーボネート７の合成
【化２４】
0006726192.tif 000028
１．５ｍＬのバイアルに、５（原液（１．５ｍＬベンゼン中１５０ｍｇを１００μＬ）として、１０ｍｇ、４．５７μｍｏｌ、１当量）、チタンｔ−ブトキシド（原液（３．５ｍＬベンゼン中２５μＬを５０μＬ）として、０．３５μＬ、０．９１４μｍｏｌ、０．２当量）、及びＦｍｏｃ−アルコール（原液（１．５８ｍＬ中、２１．１ｍｇ）として、１．３３ｍｇ、９．１５μｍｏｌ、２当量）を加えた。次に、反応を室温で１時間、攪拌した。次に、反応を水（１．５ｍＬ）及びジエチルエーテル（１．５ｍＬ）で希釈した。層を分離し、有機層を、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。得られた赤色／橙色の油を、次に、ＳｉＯ２クロマトグラフィ（ヘキサン：Ｅｔ２Ｏ  １００：０〜８０：２０）によって精製し、橙色固体として７を得た。
LRMS(ESI)：計算値(C120H218N2O19Si9+Na)+ 2402.4；実測値2402.5
TLC(7:3 ヘキサン:Et2O、CAM染色)：Rf=0.53
【０１５５】
実施例９．アミド８の合成
【化２５】
0006726192.tif 000029
乾燥した２０ｍＬバイアルに、ＴＨＦ（２．３ｍＬ）中の５（１００ｍｇ、４５．８ｍｍｏｌ、１当量）を加えた。反応容器を０℃まで冷却し、Ｍｅ２Ｚｎ（４８μＬのＴＨＦ中、０．８５Ｍ溶液、０．０４１ｍｍｏｌ、０．９当量）を反応に滴下して加えた。反応を、０℃で１時間、攪拌し、次に、追加のＭｅ２Ｚｎ（４８μＬのＴＨＦ中、０．８５Ｍ溶液、０．０４１ｍｍｏｌ、０．９当量）を加えた。反応を、０℃で１時間、攪拌し、次に、Ｈ２Ｏ（５ｍＬ）の滴下添加によって０℃でクエンチした。混合液を室温まで温め、分液漏斗に移し、ジエチルエーテルで抽出した（１０ｍＬ×３）。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。得られた油を、ベンゼン中の溶液として順相シリカカラム上に負荷し、ＳｉＯ２クロマトグラフィ（ヘキサン：Ｅｔ２Ｏ  １００：０〜３：２）で精製し、黄色固体として８を得た（４０ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ、４０％）。
1H NMR(500 MHz, アセトン-d6) δ 7.90(d, J=7.6 Hz, 2H), 7.72(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.45(t, J=7.5 Hz, 2H), 7.38(s, 6H), 6.55(td, J=17.4, 16.3, 9.9 Hz, 3H), 6.49 - 5.96(m, 11H), 5.64(s, 5H), 4.71(d, J=16.1 Hz, 3H), 4.26(q, J=7.5, 7.0 Hz, 2H), 4.20 - 4.07(m, 2H), 3.88(dd, J=9.0, 2.8 Hz, 1H), 3.82(t, J=9.4 Hz, 1H), 3.77 - 3.60(m, 3H), 3.50(t, J=8.9 Hz, 1H), 3.43(q, J=7.0 Hz, 4H), 3.40 - 3.35(m, 1H), 3.33(d, J=5.4 Hz, 2H), 3.31(s, 1H), 3.19(s, 3H), 2.62(d, J=6.5 Hz, 2H), 1.98 - 1.92(m, 2H), 1.85(s, 2H), 1.84 - 1.72(m, 5H), 1.72 - 1.61(m, 2H), 1.38 - 1.23(m, 13H), 1.20(d, J=6.0 Hz, 4H), 1.13(t, J=7.0 Hz, 7H), 1.11 - 0.85(m, 110H), 0.85 - 0.54(m, 66H)。
【０１５６】
実施例１０．生物活性のインビトロ評価
本明細書で提案される各誘導体を、その治療指数を決定するために、酵母及びヒト細胞の両方に対する生物活性について試験する。微量液体希釈実験は、Ｓ．セレビシエ及び臨床的に関連するＣ．アルビカンスに対する各誘導体のＭＩＣ（最小発育阻止濃度）を決定し、それによって、各新規誘導体の抗真菌活性を確立する。ヒト細胞に対する毒性を試験するため、各化合物を、ヒト赤血球の９０％溶解を生じるのに必要とされる濃度（ＥＨ９０）を決定する、赤血球に対する溶血アッセイにかける。加えて、腎細胞に対する各化合物の毒性を決定するために、各化合物を、ヒト初代腎細管細胞に接触させる。これらのアッセイは、同一細胞株に対するＡｍＢの既知の値と比較した場合に、各化合物の治療指数の改善を決定する。
【０１５７】
実施例１１．生物活性のインビボ評価
ＡｍＢＭＵ及びＡｍＢＡＵの抗真菌剤の有効性を、播種性カンジダ症のマウスモデルにおいて試験した。この実験では、好中球減少マウスに、尾静脈を介してＣ．アルビカンスを感染させ、次に、感染２時間後、マウスに、ＡｍＢ、ＡｍＢＭＵ、又はＡｍＢＡＵの単回の腹腔内注入の処置をした。感染の２、６、１２、及び２４時間後に、マウスを殺処置し、該マウスの腎臓に存在する真菌量を定量した。結果を図５に示す。ＡｍＢＭＵ及びＡｍＢＡＵはいずれも、３つの試験量（すなわち、１、４、及び１６ｍｇ／ｋｇ）のすべてにおいて、腎臓に存在する真菌量の低減においてＡｍＢよりも実質的により効果的であった。接種２４時間後、差異は、１６ｍｇ／ｋｇ用量において最も顕著であった。ＡｍＢと比較して、ＡｍＢＭＵは、真菌量を１．２ｌｏｇ単位（ｐ≦０．００１）低減し、ＡｍＢＡＵは、真菌量を、ほぼ３ｌｏｇ単位（ｐ≦０．０００１）低減した。我々は、水溶性の大幅な増加に起因して薬理学的プロファイルが改善されることにより、新しい化合物のインビボでの抗真菌活性における予期しない劇的な改善に寄与しうる可能性があると推測している。
【０１５８】
実験の別のセットでは、急性毒性を、１、２、４、８、１６、３２、又は６４ｍｇ／ｋｇのＡｍＢ又はその誘導体の健康なマウスへの単回静脈内投与によって評価し、続いて、致死率についてモニタリングした。結果を図６に示す。４ｍｇ／ｋｇのＡｍＢ用量群のマウスはすべて、数秒内に死亡した。ＡｍＢＡＵは、劇的に低毒性であり、６４ｍｇ／ｋｇ用量群に至るまで、＞５０％の致死率に達しなかった。際立って、６４ｍｇ／ｋｇのＡｍＢＭＵを投与されたすべてのマウスが観測可能な毒性なく、生存した。
他の実施形態
１．式（Ｉ）によって表される化合物、又はその薬学的に許容される塩：
【化２６】
0006726192.tif 000030
［式中、
Ｒ１は、存在ごとに独立して、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、（アルキル）ＯＣＨ２−、（アルケニル）ＯＣＨ２−、（アラルキル）ＯＣＨ２−、（アルコキシアルキル）ＯＣＨ２−、（アリール）ＯＣＨ２−、又は（（トリアルキルシリル）アルキル）ＯＣＨ２−を表し；
Ｒ２は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し；
Ｒ３は、（アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アルケニル）ＯＣ（Ｏ）−、（シクロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−、又は（ハロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す］。
２．Ｒ１がトリアルキルシリルを表す、実施形態１に記載の化合物。
３．Ｒ１がトリエチルシリルを表す、実施形態１に記載の化合物。
４．Ｒ２がメチルを表す、実施形態１から３のいずれかに記載の化合物。
５．Ｒ３が（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す、実施形態１から４のいずれかに記載の化合物。
６．Ｒ３が（９−フルオレニルメチル）ＯＣ（Ｏ）−を表す、実施形態５に記載の化合物。
７．式（ＩＩ）によって表される化合物、又はその薬学的に許容される塩：
【化２７】
0006726192.tif 000031
［式中、
Ｒ１は、存在ごとに独立して、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、（アルキル）ＯＣＨ２−、（アルケニル）ＯＣＨ２−、（アラルキル）ＯＣＨ２−、（アルコキシアルキル）ＯＣＨ２−、（アリール）ＯＣＨ２−、又は（（トリアルキルシリル）アルキル）ＯＣＨ２−を表し；
Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し；
Ｒ３は（アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アルケニル）ＯＣ（Ｏ）−、（シクロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−、又は（ハロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す］。
８．Ｒ１がトリアルキルシリルを表す、実施形態７に記載の化合物。
９．Ｒ１がトリエチルシリルを表す、実施形態７に記載の化合物。
１０．Ｒ２がメチルを表す、実施形態７から９のいずれかに記載の化合物。
１１．Ｒ３が（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す、実施形態７から１０のいずれかに記載の化合物。
１２．Ｒ３が（９−フルオレニルメチル）ＯＣ（Ｏ）−を表す、実施形態１１に記載の化合物。
１３．式（ＩＩＩ）に従った化合物、又はその薬学的に許容される塩：
【化２８】
0006726192.tif 000032
［式中、
Ｒ１は、存在ごとに独立して、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、（アルキル）ＯＣＨ２−、（アルケニル）ＯＣＨ２−、（アラルキル）ＯＣＨ２−、（アルコキシアルキル）ＯＣＨ２−、（アリール）ＯＣＨ２−、又は（（トリアルキルシリル）アルキル）ＯＣＨ２−を表し；
Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し；
Ｒ３は、（アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アルケニル）ＯＣ（Ｏ）−、（シクロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−、又は（ハロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表し；
Ｒ４は、アルキル、アラルキル、アルケニル、アリール、又はシクロアルキルを表す］。
１４．Ｒ１がトリアルキルシリルを表す、実施形態１３に記載の化合物。
１５．Ｒ１がトリエチルシリルを表す、実施形態１３に記載の化合物。
１６．Ｒ２がメチルを表す、実施形態１３から１５のいずれかに記載の化合物。
１７．Ｒ３が（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す、実施形態１３から１６のいずれかに記載の化合物。
１８．Ｒ３が（９−フルオレニルメチル）ＯＣ（Ｏ）−を表す、実施形態１７に記載の化合物。
１９．Ｒ４がイソプロピル又は９−フルオレニルメチルを表す、実施形態１３から１８のいずれかに記載の化合物。
２０．ＡｍＢＣＵ−アリルエステル、又はその薬学的に許容される塩：
【化２９】
0006726192.tif 000033
２１．式（ＩＶ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩を調製する方法であって：
【化３０】
0006726192.tif 000034
［式中、
Ｒ１は、存在ごとに独立して、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、（アルキル）ＯＣＨ２−、（アルケニル）ＯＣＨ２−、（アラルキル）ＯＣＨ２−、（アルコキシアルキル）ＯＣＨ２−、（アリール）ＯＣＨ２−、又は（（トリアルキルシリル）アルキル）ＯＣＨ２−を表し；
Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し；
Ｒ３は、（アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−、（アルケニル）ＯＣ（Ｏ）−、（シクロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−、又は（ハロアルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表し；
Ｘは、Ｏ、ＮＨ、又はＮ（Ｒ６）を表し；及び
Ｒ５及びＲ６は、各々独立して、アルキル、アラルキル、アルケニル、アリール、又はシクロアルキルを表す］；
式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩と、Ｒ５−ＸＨ又はＲ５−Ｘ−Ｍによって表される化合物とを混合し、それによって前記式（ＩＶ）の化合物を生成する工程を含み；
前記式（Ｉ）の化合物は、下記式によって表され：
【化３１】
0006726192.tif 000035
ここで、
Ｍは、アルカリ金属カチオン、アルカリ土類カチオン、又は遷移金属カチオンである、
方法。
２２．式（ＩＩ）の化合物とホスホリルアジドとを混合し、それによって前記式（Ｉ）の化合物を生成する工程をさらに含み；該式（ＩＩ）の化合物は、下記式によって表される、実施形態２１に記載の方法：
【化３２】
0006726192.tif 000036
２３．前記ホスホリルアジドがジフェニルホスホリルアジドである、実施形態２２に記載の方法。
２４．ＸがＯであり；ＭがＮａ、Ｋ、又はＴｉ（ＯＲ５）３である、実施形態２１から２３のいずれかに記載の方法。
２５．式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩とＲ５−ＸＨ又はＲ５−Ｘ−Ｍによって表される化合物とを混合する前記工程が、ルイス酸をさらに含む、実施形態２１から２４のいずれかに記載の方法。
２６．前記ルイス酸がチタンアルコキシドである、実施形態２５に記載の方法。
２７．式（ＩＩ）の化合物とホスホリルアジドとを混合する前記工程が、ブレンステッド塩基をさらに含む、実施形態２２から２６のいずれかに記載の方法。
２８．前記ブレンステッド塩基が第三級アミンである、実施形態２７に記載の方法。
２９．Ｒ１がトリアルキルシリルを表す、実施形態２１から２８のいずれかに記載の方法。
３０．Ｒ１がトリエチルシリルを表す、実施形態２９に記載の方法。
３１．Ｒ２がメチルを表す、実施形態２１から３０のいずれかに記載の方法。
３２．Ｒ３が（アラルキル）ＯＣ（Ｏ）−を表す、実施形態２１から３１のいずれかに記載の方法。
３３．Ｒ３が（９−フルオレニルメチル）ＯＣ（Ｏ）−を表す、実施形態３２に記載の方法。
【図１】
0006726192.tif 000043
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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