(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉのヒドロキシステロイド化合物またはその塩。
【化１】
0006781148.tif 000041
［式中、
【化２】
0006781148.tif 000042
は独立に、単結合、二重結合またはシクロプロピル環であるが、ただし、隣接する二重結合は許されず、および、Xを含むヘキシル環内に二重結合を含まず；
Ａ1およびＡ2は独立に、水素、ヒドロキシル、ヒドロキシメチル、ハロゲン、およびＣ1−Ｃ6アルキルからなる群から選択され、
Ａ3は水素であり、
ＢおよびＣはそれぞれ独立に、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、−ＯＲ6、−ＣＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＯＣＯＲ6、−ＣＨ2ＯＨ、−ＣＨ2ＯＲ6、−Ｃ（ＯＨ）Ｒ6Ｒ7、−ＮＨＲ6、−ＮＲ6Ｒ7、−Ｃ（Ｏ）ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）ヘテロシクリル、Ｃ1−Ｃ12直鎖または分枝鎖アルキル、５〜６員ヘテロシクロアルキル、および５〜６員ヘテロアリールからなる群から選択され；
前記Ｃ1−Ｃ12直鎖または分枝鎖アルキル、５〜６員ヘテロシクロアルキルまたは５〜６員ヘテロアリールは、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＣＯＮＨＲ6、−ＯＣＯＲ6、＝ＮＯＨ、−ＮＲ6Ｒ7、−ＮＲ6ＣＯＲ7、５〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリール、Ｃ1−Ｃ12アルキル置換５〜６員ヘテロシクロアルキル、およびＣ1−Ｃ12アルキル置換５〜６員ヘテロアリールからなる群から選択される１個または複数の置換基でさらに置換されていてもよく；
またはＢおよびＣは、一緒に組み合わさって、＝Ｏ、または＝ＮＯＲ6を形成するか；
またはＢおよびＣは、それらと結合する炭素原子と一緒に組み合わさって、５〜６員ヘテロシクロアルキルまたは５〜６員ヘテロアリールを形成し；
前記５〜６員ヘテロシクロアルキル、および５〜６員ヘテロアリールは、Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１個または複数のヘテロ原子を含有しており；
Ｒ1は、水素、ジュウテリウム、ヒドロキシル、ハロゲン、＝Ｏ、−ＯＲ6、−ＮＲ6Ｒ7、−ＣＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＯＣＯＲ6、−ＣＯＮＲ6Ｒ7、Ｃ1−Ｃ6アルキル、および−Ｏｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルからなる群から選択され；
Ｒ2は水素であり、
Ｒ4は、水素、ジュウテリウム、ヒドロキシル、ハロゲン、−ＯＲ6、−ＮＲ6Ｒ7、−ＣＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＯＣＯＲ6、−ＣＯＮＲ6Ｒ7、Ｃ1−Ｃ6アルキル、および−Ｏｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルからなる群から選択され；
Ｒ3は、ヒドロキシルであり；
Ｒ3は、ベータ配置であり；
Ｒ5は、水素であり；
Ｒ6およびＲ7はそれぞれ独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ1−Ｃ12アルキル、−ＮＨ2、−（ＣＨ2）nＮＨ2、３〜６員シクロアルキル、４〜６員ヘテロシクロアルキル、および５〜６員ヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｘは、ＮＨおよびＮＲ8からなる群から選択され、Ｒ８はＣ１−Ｃ１２アルキルであり；並びに
ｎは、０〜３である］
【請求項２】
式ＩＩのヒドロキシステロイド化合物またはそれらの塩。
【化３】
0006781148.tif 000043
［式中、
【化４】
0006781148.tif 000044
は独立に、単結合、二重結合またはシクロプロピル環であるが、ただし、隣接する二重結合は許されず；
Ａ1およびＡ2は独立に、水素、ヒドロキシル、ヒドロキシメチル、ハロゲン、およびＣ1−Ｃ6アルキルからなる群から選択され、
ＢおよびＣはそれぞれ独立に、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、−ＯＲ6、−ＣＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＯＣＯＲ6、−ＣＨ2ＯＨ、−ＣＨ2ＯＲ6、−Ｃ（ＯＨ）Ｒ6Ｒ7、−ＮＨＲ6、−ＮＲ6Ｒ7、−Ｃ（Ｏ）ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）ヘテロシクリル、Ｃ1−Ｃ12直鎖または分枝鎖アルキル、５〜６員ヘテロシクロアルキル、および５〜６員ヘテロアリールからなる群から選択され；
前記Ｃ1−Ｃ12直鎖または分枝鎖アルキル、５〜６員ヘテロシクロアルキルまたは５〜６員ヘテロアリールは、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＣＯＮＨＲ6、−ＯＣＯＲ6、＝ＮＯＨ、−ＮＲ6Ｒ7、−ＮＲ6ＣＯＲ7、５〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリール、Ｃ1−Ｃ12アルキル置換５〜６員ヘテロシクロアルキルおよびＣ1−Ｃ12アルキル置換５〜６員ヘテロアリールからなる群から選択される１個または複数の置換基でさらに置換されていてもよく；
またはＢおよびＣは、一緒に組み合わさって、＝Ｏ、または＝ＮＯＲ6を形成するか、
またはＢおよびＣは、それらと結合する炭素原子と一緒に組み合わさって、５〜６員ヘテロシクロアルキル、または５〜６員ヘテロアリールを形成し；
前記５〜６員ヘテロシクロアルキル、および５〜６員ヘテロアリールは、Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１個または複数のヘテロ原子を含有しており；
Ｒ1は、水素、ジュウテリウム、ヒドロキシル、ハロゲン、＝Ｏ、−ＯＲ6、−ＮＲ6Ｒ7、−ＣＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＯＣＯＲ6、−ＣＯＮＲ6Ｒ7、Ｃ1−Ｃ6アルキル、および−Ｏｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルからなる群から選択され；
Ｒ4は、水素、ジュウテリウム、ヒドロキシル、ハロゲン、−ＯＲ6、−ＮＲ6Ｒ7、−ＣＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＯＣＯＲ6、−ＣＯＮＲ6Ｒ7、Ｃ1−Ｃ6アルキル、および−Ｏｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルからなる群から選択され；
Ｒ6およびＲ7はそれぞれ独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ1−Ｃ12アルキル、−ＮＨ2、−（ＣＨ2）nＮＨ2、３〜６員シクロアルキル、４〜６員ヘテロシクロアルキル、および５〜６員ヘテロアリールからなる群から選択され；並びに
ｎは、０〜３である］
【請求項３】
Ｒ1が＝Ｏである、請求項１または２記載のヒドロキシステロイド化合物またはその塩。
【請求項４】
ＢおよびＣが、それらと結合する炭素原子と一緒に組み合わさって、ＯおよびＮからなる群から選択される１個または複数のヘテロ原子を有する５〜６員ヘテロシクロアルキルを形成する、請求項１または２記載のヒドロキシステロイド化合物またはその塩。
【請求項５】
ＢおよびＣはそれぞれ独立に、水素、ハロゲン、−ＯＣＯＲ6、−ＣＨ2ＯＨ、−ＣＨ2ＯＲ6、−Ｃ（ＯＨ）Ｒ6Ｒ7、−ＮＨＲ6、−ＮＲ6Ｒ7、Ｃ1−Ｃ12直鎖または分枝鎖アルキル、および５〜６員ヘテロシクロアルキルからなる群から選択される、請求項１または２記載のヒドロキシステロイド化合物またはその塩。
【請求項６】
Ａ1およびＡ2がそれぞれＣ1−Ｃ6アルキルである、請求項１または２記載のヒドロキシステロイド化合物またはその塩。
【請求項７】
Ｒ2およびＲ4が水素である、請求項１または２記載のヒドロキシステロイド化合物またはその塩。
【請求項８】
ＢおよびＣはそれぞれ独立に、−ＯＲ6、−ＣＯＲ6、および−ＣＯＯＲ6からなる群から選択される、請求項１または２記載のヒドロキシステロイド化合物またはその塩。
【請求項９】
ＢおよびＣはそれぞれ独立に、水素、および５〜６員ヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、前記５〜６員ヘテロシクロアルキルはＣ1−Ｃ6アルキルによりさらに置換されていてもよい、請求項１または２記載のヒドロキシステロイド化合物またはその塩。
【請求項１０】
ＢおよびＣは、一緒に組み合わさって、＝Ｏまたは＝ＮＯＲ6を形成する、請求項１または２記載のヒドロキシステロイド化合物またはその塩。
【請求項１１】
Ｒ4がＣ1−Ｃ3アルキルである、請求項１または２記載のヒドロキシステロイド化合物またはその塩。
【請求項１２】
Ａ1およびＡ2がそれぞれＣ1−Ｃ6アルキルであり、およびＲ1が＝Ｏである、請求項１または２記載のヒドロキシステロイド化合物またはその塩。
【請求項１３】
ｖ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ）−５−ヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，９，９ａ，９ｂ，１０−デカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；
ｖｉ．  （４ａ’Ｒ，５’Ｓ，６ａ’Ｓ）−５’−ヒドロキシ−４ａ’，５’，６ａ’−トリメチル−３’，４’，４ａ’，４ｂ’，５’，６’，６ａ’，８’，９’，９ａ’，９ｂ’，１０’−ドデカヒドロスピロ［［１，３］ジオキソラン−２，７’−インデノ［５，４−ｆ］キノリン］−２’（１’Ｈ）−オン；
ｖｉｉｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ）−７−アセチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−５−ヒドロキシ−４ａ，５，６ａ−トリメチル−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン；
ｘｖｉｉ．  （４ａ’Ｒ，５’Ｓ，６ａ’Ｓ）−５’−ヒドロキシ−４ａ’，６ａ’−ジメチル−３’，４’，４ａ’，４ｂ’，５’，６’，６ａ’，８’，９’，９ａ’，９ｂ’，１０’−ドデカヒドロスピロ［［１，３］ジオキソラン−２，７’−インデノ［５，４−ｆ］キノリン］−２’（１’Ｈ）−オン；
ｘｖｉｉｉ．  （４ａＲ，５Ｒ，６ａＳ）−５−ヒドロキシ−４ａ，５，６ａ−トリメチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，９，９ａ，９ｂ，１０−デカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；
ｘｉｘ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ）−５，７−ジヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン；
ｘｘ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ）−７−フルオロ−５−ヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン；
ｘｘｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ，Ｚ）−５−ヒドロキシ−７−（ヒドロキシイミノ）−４ａ，６ａ−ジメチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン；
ｘｘｉｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ）−５，７−ジヒドロキシ−１，４ａ，６ａ−トリメチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン；
ｘｘｉｉｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ）−５，７−ジヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチルテトラデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン；
ｘｘｉｖ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ）−７−アミノ−５−ヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチルテトラデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン；
ｘｘｖ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ，７Ｓ）−５−ヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチル−７−（２−メチル−１，３−ジオキソラン−２−イル）−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン；
ｘｘｖｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ，７Ｓ）−５−ヒドロキシ−４ａ，５，６ａ−トリメチル−７−（２−メチル−１，３−ジオキソラン−２−イル）−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン；
ｘｘｖｉｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ，７Ｓ）−５−ヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチル−２−オキソ−２，３，４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−テトラデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−７−カルボン酸；
ｘｘｘｖｉｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ，７Ｓ）−７−アセチル−５−ヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン；および
ｘｘｘｖｉｉｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ，７Ｓ）−５−ヒドロキシ−７−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−４ａ，６ａ−ジメチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン；
からなる群から選択される、請求項１に記載のヒドロキシステロイド化合物またはその塩。
【請求項１４】
請求項１３に記載の化合物の立体異性体（ただし、請求項１の式Ｉの化合物のＲ3に相当するヒドロキシル基はベータ配置である）。
【請求項１５】
請求項１３に記載の化合物の薬学的に許容される塩。
【請求項１６】
請求項１４に記載の立体異性体の薬学的に許容される塩。
【請求項１７】
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物。
【請求項１８】
虚血または血流障害もしくは血流不全に関連する骨または心筋疾患、ミトコンドリアの数、構造、または機能に直接的または間接的に影響を及ぼす遺伝的障害に関連する疾患、ミトコンドリアの数または機能の低下に関連する神経機能障害に関連する疾患、骨格筋細胞または心筋細胞の数の減少、機能の低下、または適正で最適に効率的な内部組織の喪失に関連する疾患、代謝疾患、ならびに肝細胞の損傷および脂肪酸代謝の変化に関連する状態からなる群から選択されるミトコンドリア生合成に関する疾患または障害の処置のための、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
急性冠動脈症候群、心筋梗塞、狭心症、腎損傷、腎虚血、大動脈およびその枝の疾患、医学的介入から生じる損傷、アテローム硬化症、外傷、糖尿病、高脂血症、血管狭窄、末梢動脈疾患、脈管障害、脈管炎、フリードライヒ運動失調、筋ジストロフィー、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、ベッカー筋ジストロフィー、肢帯筋ジストロフィー、先天性筋ジストロフィー、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー、緊張性筋ジストロフィー、眼球咽頭型筋ジストロフィー、末梢型筋ジストロフィー、脊髄性筋萎縮症およびエメリー−ドライフス型筋ジストロフィー、ハンチントン病、パーキンソン病、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、サルコペニア、鬱血性心不全、加齢、心筋炎、筋炎、リウマチ性多発性筋痛、多発性筋炎、ＨＩＶ、癌および／または前記癌を標的とする化学療法の副作用、栄養不良、加齢、先天性代謝異常、外傷、ならびに卒中または脂肪肝、肝線維症、硬変、および肝細胞または星状細胞損傷などの他の種類の神経学的障害からなる群から選択されるミトコンドリア生合成媒介疾患の処置のための、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
ミトコンドリア毒性を示す化合物の投与の有害作用を処置または予防するための、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
筋肉構造または機能を改善する；運動に関連するミトコンドリア作用を改善する；年齢、不活動性、食事、または疾患によって制限されているヒトにおいて、運動能力を増強する；運動に応じて筋肉の健康および機能を増強する；運動能力を制限する臨床状況において筋肉の健康および機能を増強する；または活発な活動から、または活発なもしくは持続的な活動に関連する損傷からの筋肉の回復を増強するための、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
スポーツの成績および持久性を増強する、筋肉の形状および強度を作り上げる、またはトレーニングもしくは競技の筋肉関連副作用からの回復を促進するための、請求項１７に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒドロキシステロイド化合物およびそれらの中間体、それらを含む組成物およびそれらの調製方法ならびに本発明の化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ミトコンドリアは、生命を持続させ、成長を支持するために身体が必要とするエネルギーの９０％超の生成を担う細胞の動力室である。ミトコンドリアの機能が衰えると、細胞内で生成されるエネルギーが少なくなり、細胞の損傷および最終的には、細胞死が生じる。ミトコンドリアは、それら自身の代謝プロセスによって生成される酸素ラジカルによって分解されやすい。後に、損傷を受けたミトコンドリアは、細胞によって排出される。新たなミトコンドリアによるその置き換えは、ミトコンドリア生合成と呼ばれる。代謝要求の増大に合わせるためのミトコンドリアの増殖またはそれらの肥大も、ミトコンドリア生合成と呼ばれる。これは、追加のミトコンドリアタンパク質、特に、酸化的リン酸化に関連するものの発現によって表される。ミトコンドリア生合成のための能力は、年齢と共に著しく低下する。したがって、加齢による多くの疾患は、様々な組織におけるミトコンドリアの減少に関連しており、それらの特殊機能は、ミトコンドリア機能および／または数の減少と関連して低下する。神経筋疾患症状を有するもの、サルコペニア、筋ジストロフィー、糖尿病、認知症、パーキンソン病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、肥満、高脂血症、心不全、狼瘡、および加齢黄斑変性（ＡＭＤ）などの眼状態などの多くの病態は、様々な組織における進行性のミトコンドリア減少と関連している。数種の薬物および薬物群も、ミトコンドリア機能および生合成に対して作用を有し、臓器機能に影響を及ぼし得て、臓器の変性または他の副作用につながることさえあり、それらは、ミトコンドリアに対するこれらの薬物の毒性作用に直接関連している。
【０００３】
虚血性および虚血／再灌流障害は、ミトコンドリア機能および数の減少を伴い、心筋梗塞および卒中などの虚血性状態では、アポトーシス細胞死、壊死、および機能性臓器劣化につながる。そのような状態の診断および処置における相当な進歩にも関わらず、これらの状態を処置するための予防的および治療的手法が依然として必要とされている。
ミトコンドリア活性に対して作用を有する化合物は現在、限られており、慢性ミトコンドリア機能不全および毒性に関連するこれらの状態を処置するための新規の化合物、予防的および治療的手法が依然として必要とされている。したがって、１種または複数の組織において、代謝要求の増大に応じてミトコンドリア機能を刺激し、ミトコンドリアの消耗を引き起こす作用物質または状態に応じて、ミトコンドリア複製を誘発する化合物および処置が必要とされている。この理解を反映して、「ミトコンドリア毒性」という語句は、本明細書において使用する場合、対象への化学的組成物の投与から生じるミトコンドリアの不全を指す。
【０００４】
ミトコンドリアは細胞機能に重要であり、ミトコンドリア疾患の作用は多様であり得、独特の特徴を呈し得る。具体的な障害の重症度は、高いことも低いこともあり、多くの場合に、より深刻には、ミトコンドリアおよび多数の組織の動作に影響を及ぼし、多臓器疾患（ｍｕｌｔｉ−ｓｙｓｔｅｍ  ｄｉｓｅａｓｅ）をもたらす。骨格筋ミトコンドリアの障害または機能不全は一般に、重症の状態ではサルコペニアと称される筋肉の衰弱および萎縮をもたらす。全身筋肉衰弱の場合には、骨粗鬆症として知られている骨疾患の原因の１つである骨密度の低下が全身化し得る。心臓におけるミトコンドリアの欠乏は、鬱血性心不全の症状および最終的な死を引き起こし得る。脳におけるミトコンドリア密度の低下は、ハンチントン病、アルツハイマー病、およびパーキンソン病などの神経変性状態に関連している。肝臓ミトコンドリアを含むミトコンドリアの全身低下は、高脂血症、高血圧、および２型糖尿病へのインスリン抵抗性の進行をもたらし得る。肝臓ミトコンドリアは、フルクトース接種によって損傷を受ける。肝臓ミトコンドリアに有害なフルクトース、尿酸、および他の作用物質は、脂肪肝症候群に寄与する細胞内脂質、特にトリグリセリドの蓄積、ならびに全身高脂血症、および最終的には肥満およびインスリン抵抗性に寄与するトリグリセリドの合成および放出の増大を引き起こし得る。
【０００５】
ヒドロキシステロイドは、ステロール構造を有するヒドロキシル化化合物である。ミトコンドリア酵素、１１β−ヒドロキシラーゼを介して、コレステロール、プレグネノロン、プロゲステロンなどを含む様々なステロイドをヒドロキシル化するように作用する高レベルの内在性Ｈ2Ｏ2にミトコンドリアが曝露されると、ヒドロキシステロイドは細胞内で産生されることが知られている。ヒドロキシル化は、７、１６、および１１位を含む多数の位置で起こり得る。次いで、ヒドロキシステロイドと称されるこれらの分子は硫酸化され、細胞外空間に分泌され、脳では、形質膜上のＧＡＢＡ受容体およびカルシウムチャネルをモジュレートする。ヒドロキシルステロイドの細胞内活性が、以前に記載されたことはない。
【０００６】
本発明は、新規のヒドロキシルステロイド、それらの中間体、ヒドロキシステロイドおよびそれらの中間体を合成するための方法、ならびにそれらを含む組成物を、ミトコンドリアに対するそれらの作用と共に開示する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、新規のステロイド化合物、ヒドロキシステロイドおよびそれらの中間体を合成するための方法、ならびにそれらを含む組成物、ならびにミトコンドリアに対する前記化合物の作用を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、式（Ｉ）のヒドロキシステロイドおよびそれらの中間体またはそれらの塩を提供する。
【化１】
0006781148.tif 000002
［式中、
【化２】
0006781148.tif 000003
は独立に、単結合、二重結合またはシクロプロピル環のいずれかであるが、ただし、隣接する二重結合は許されず；
Ａ1、Ａ2、Ａ3は独立に、水素、ヒドロキシル、ヒドロキシメチル、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキルを含む群から選択され；
ＢおよびＣはそれぞれ独立に、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、−ＯＲ6、−ＣＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、ＯＣＯＲ6、ＣＨ2ＯＨ、ＣＨ2ＯＲ6、−ＣＯＮＨＲ6、ＣＯＮＨＲ6Ｒ7、−Ｃ（ＯＨ）Ｒ6Ｒ7、ＮＨＲ6、ＮＨＲ5ＣＯＮＨＲ6、−Ｒ6ＮＨＣＯＯＲ7、−ＮＲ6Ｒ7、Ｃ（Ｏ）ヘテロアリール、Ｃ（Ｏ）ヘテロシクリル、Ｃ1−Ｃ12直鎖または分枝鎖アルキル、５〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリールを含む群から選択され；
前記Ｃ1−Ｃ12直鎖または分枝鎖アルキルまたは５〜６員ヘテロシクロアルキルまたは５〜６員ヘテロアリールは、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＣＯＮＨＲ6、−ＯＣＯＲ6、＝ＮＯＨ、ＮＲ6Ｒ7、−ＮＲ6ＣＯＲ7、５〜６員ヘテロシクロアルキルまたは５〜６員ヘテロアリール；Ｃ1−Ｃ12アルキル置換５〜６員ヘテロシクロアルキルまたはＣ1−Ｃ12アルキル置換５〜６員ヘテロアリールを含む群から選択される１個または複数の置換基でさらに置換されていてもよく；
またはＢおよびＣは、一緒に組み合わさって、＝Ｏ、＝ＮＯＲ6、ＮＨＲ6、５〜６員ヘテロシクロアルキル、または５〜６員ヘテロアリールを形成していてもよく；
前記５〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリールは、１個または複数のヘテロ原子を含有してもよく；
前記ヘテロ原子は、Ｏ、Ｎ、Ｓであってよく；
Ｒ1、Ｒ2、およびＲ4は独立に、水素、ジュウテリウム、ヒドロキシル、ハロゲン、＝Ｏ、−ＯＲ6、−ＮＲ6Ｒ7、−ＣＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＯＣＯＲ6、−ＣＯＮＲ6Ｒ7、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｏｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルを含む群から選択され；
Ｒ3は、ヒドロキシル、カルボニル、ＯＣＯＲ6であり；
Ｒ3は、ベータ配置であり；
Ｒ5は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、ＯＲ6から選択され；
Ｒ6およびＲ7はそれぞれ独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ1−Ｃ12アルキル、−ＮＨ2、−（ＣＨ2）nＮＨ2、３〜６員シクロアルキル、４〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリールを含む群から選択され；
Ｘは、ＣＨ、ＮＨ、ＮＲ6、ＯまたはＳから選択され；
ｎは、０〜３である］
【０００９】
本発明は、式Ｉの化合物を調製する方法、前記式の化合物を含む組成物ならびにミトコンドリア生合成およびＡＭＰキナーゼ活性化における本発明の化合物の使用を開示する。
【００１０】
本発明はまた、ミトコンドリア生合成およびＡＭＰキナーゼ活性化における１１β−ヒドロキシプレグネノロンおよび１１β−ヒドロキシプロゲステロン（ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｇｅｓｔｒｏｎｅ）の使用を開示する。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１ａ】ミトコンドリア生合成を示すグラフである。
【図１ｂ】１１β−ヒドロキシプレグネノロンによる曝露（Ｉ）後３時間におけるミトコンドリア転写因子の発現の刺激を示すグラフである。
【図２ａ】１１β−ヒドロキシプレグネノロンによる曝露後１時間におけるＡＭＰキナーゼの活性化を示す図である。
【図２ｂ】１１β−ヒドロキシプレグネノロンによる３時間でのＡＰＰＬ１の活性化および核への転座を示す図である。
【図３ａ】１１β−ヒドロキシプレグネノロンによる曝露（ＩＩ）後３時間におけるミトコンドリア転写因子の発現の刺激を示すグラフである。
【図３ｂ】１１β−ヒドロキシプレグネノロンによる曝露後２４時間におけるミトコンドリアＤＮＡ含分の上昇を示すグラフである。
【図４】１１β−ヒドロキシプレグネノロンによるミトコンドリア超酸化物生成の低減を示す図である。
【図５】１１β−ヒドロキシプレグネノロンによる肝グルコース新生および脂肪酸化の刺激の低減を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
定義
「アルキル」という用語は、直鎖または分枝飽和一価炭化水素を指し、アルキレンは、本明細書に記載のとおり、置換されていてもよい。「アルキル」という用語はまた、別段の指定がない限り、直鎖および分枝アルキルの両方を包含する。ある種の実施形態では、アルキルは、規定の数の炭素原子を有する直鎖飽和一価炭化水素、または規定の数の炭素原子の分枝飽和一価炭化水素である。本明細書において使用する場合、直鎖Ｃ１−Ｃ６および分枝Ｃ３−Ｃ６アルキル基は、「低級アルキル」とも称される。アルキル基の例には、これらだけに限定されないが、メチル、エチル、プロピル（すべての異性体型を含む）、ｎ−プロピル、イソプロピル、ブチル（すべての異性体型を含む）、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル（すべての異性体型を含む）、およびヘキシル（すべての異性体型を含む）が含まれる。例えば、Ｃ１−Ｃ６アルキルは、１〜６個の炭素原子の直鎖飽和一価炭化水素または３〜６個の炭素原子の分枝飽和一価炭化水素を指す。
【００１３】
「シクロアルキル」という用語は、本明細書において使用する場合、３〜１２個の環原子、または指示されている原子数を含有する飽和または部分不飽和、単環式、縮合二環式または架橋多環式環アセンブリを指す。シクロアルキルは、Ｃ3-6、Ｃ4-6、Ｃ5-6、Ｃ3-8、Ｃ4-8、Ｃ5-8、およびＣ6-8などの任意の数の炭素を含み得る。飽和単環式シクロアルキル環には、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、およびシクロオクチルが含まれる。飽和二環式および多環式シクロアルキル環には、例えば、ノルボルナン、［２．２．２］ビシクロオクタン、デカヒドロナフタレンおよびアダマンタンが含まれる。シクロアルキル基はまた、環中に１つまたは複数の二重結合を有する部分不飽和であり得る。部分不飽和である代表的なシクロアルキル基には、これらだけに限定されないが、シクロブテン、シクロペンテン、シクロヘキセン、シクロヘキサジエン（１，３−および１，４−異性体）、シクロヘプテン、シクロヘプタジエン、シクロオクテン、シクロオクタジエン（１，３−、１，４−および１，５−異性体）、ノルボルネン、およびノルボルナジエンが含まれる。別段に述べない限り、シクロアルキル基は、非置換である。「置換シクロアルキル」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、アルキルアミノ、ニトロ、シアノ、およびアルコキシから選択される１個または複数の部分で置換されていてよい。
【００１４】
「ヘテロアリール」という用語は、少なくとも１個の芳香環を含有し、少なくとも１個の芳香環がＯ、Ｓ、およびＮから独立に選択される１個または複数のヘテロ原子を含有する単環式芳香族基および／または多環式芳香族基を指す。ヘテロアリール基の各環は、１個または２個のＯ原子、１個または２個のＳ原子、および／または１〜４個のＮ原子を含有してよいが、ただし、各環中のヘテロ原子の合計数は４個以下であり、かつ各環は少なくとも１個の炭素原子を含有する。ある種の実施形態では、ヘテロアリールは、５〜２０個、５〜１５個、または５〜１０個の環原子を有する。単環式ヘテロアリール基の例には、これらだけに限定されないが、フラニル、イミダゾリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリル、チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル、テトラゾリル、トリアジニル、およびトリアゾリルが含まれる。二環式ヘテロアリール基の例には、これらだけに限定されないが、ベンゾフラニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾピラニル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾオキサゾリル、フロピリジル、イミダゾピリジニル、イミダゾチアゾリル、インドリジニル、インドリル、インダゾリル、イソベンゾフラニル、イソベンゾチエニル、イソインドリル、イソキノリニル、イソチアゾリル、ナフチリジニル、オキサゾロピリジニル、フタラジニル、プテリジニル、プリニル、ピリドピリジル、ピロロピリジル、キノリニル、キノキサリニル、キナゾリニル、チアジアゾロピリミジル、およびチエノピリジルが含まれる。三環式ヘテロアリール基の例には、これらだけに限定されないが、アクリジニル、ベンゾインドリル、カルバゾリル、ジベンゾフラニル、プルイミジニル、フェナントロリニル、フェナントリジニル、フェナルサジニル（ｐｈｅｎａｒｓａｚｉｎｙｌ）、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、およびキサンテニルが含まれる。ある種の実施形態では、ヘテロアリールはまた、本明細書に記載のとおりに置換されていてもよい。
【００１５】
ヘテロアラルキルという用語は、１個または複数（好ましくは、１、２、３または４個）の炭素原子が酸素、窒素、ケイ素、セレン、リン、ホウ素または硫黄原子（好ましくは、酸素、硫黄または窒素）によって置き換えられている上記で定義したアラルキル基、すなわち、上記の定義に従って、アリールまたはヘテロアリールならびにアルキル、アルケニル、アルキニルおよび／またはヘテロアルキルおよび／またはシクロアルキルおよび／またはヘテロシクロアルキル基の両方を含有する基を指す。ヘテロアラルキル基は好ましくは、５または６〜１０個の炭素原子を有する１個または２個の芳香環系（１または２環）および１または２〜６個の炭素原子を有する１または２個のアルキル、アルケニルおよび／またはアルキニル基および／または５または６個の環炭素原子を有し、それらの炭素原子の１、２、３または４個が酸素、硫黄または窒素原子によって置き換えられているシクロアルキル基を含有する。例は、アリール−ヘテロアルキル、アリール−ヘテロシクロアルキル、アリール−ヘテロシクロアルケニル、アリールアルキル−ヘテロシクロアルキル、アリールアルケニル−ヘテロシクロアルキル、アリールアルキニル−ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル−ヘテロシクロアルケニル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニル、ヘテロアリールアルキニル、ヘテロアリール−ヘテロアルキル、ヘテロアリールシクロ−アルキル、ヘテロアリールシクロアルケニル、ヘテロアリール−ヘテロシクロアルキル、ヘテロアリール−ヘテロシクロアルケニル、ヘテロアリールアルキルシクロアルキル、ヘテロアリールアルキル−ヘテロシクロアルケニル、ヘテロアリール−ヘテロアルキル−シクロアルキル、ヘテロアリール−ヘテロアルキルシクロアルケニルおよびヘテロアリール−ヘテロアルキル−ヘテロシクロアルキル基であり、環式基は、飽和またはモノ−、ジ−もしくはトリ−不飽和である。具体的な例は、テトラヒドロイソキノリニル、ベンゾイル、２−または３−エチルインドリル、４−メチルピリジノ、２−、３−または４−メトキシフェニル、４−エトキシフェニルおよび２−、３−または４−カルボキシルフェニルアルキル基である。
【００１６】
「ヘテロシクロアルキル」という用語は、炭素および水素原子ならびに窒素、酸素、および硫黄から選択される少なくとも１個のヘテロ原子、好ましくは、１〜４個のヘテロ原子を含む非芳香族単環式または多環式環を指し、意味する。ヘテロシクロアルキル基は、それらの存在によって、その環が芳香族にならない限り、環中に１つまたは複数の炭素−炭素二重結合または炭素−ヘテロ原子二重結合を有してよい。ヘテロシクロアルキル基の例には、アジリジニル、ピロリジニル、ピロリジノ、ピペリジニル、ピペリジノ、ピペラジニル、ピペラジノ、モルホリニル、モルホリノ、チオモルホリニル、チオモルホリノ、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフラニル、テトラヒドロピラニル、およびピラニルが含まれる。ヘテロシクロアルキル基は、非置換であるか、または１個または２個の適切な置換基で置換されていてよい。好ましくは、ヘテロシクロアルキル基は、単環式または二環式環、より好ましくは、単環式環であり、その環は、２〜６個の炭素原子および１〜３個のヘテロ原子を含み、本明細書において、（Ｃ1−Ｃ6）ヘテロシクロアルキルと称される。
【００１７】
「非芳香族」という用語は、本明細書において使用する場合、不飽和であってもよいが、芳香族の特徴は有さない環式部分を指す。
「置換（置換されている）」という用語は、分子上の水素ラジカルが別の原子ラジカル、官能基ラジカルまたは部分ラジカルによって置き換えられている場合を指し、これらのラジカルは一般に、「置換基」と称される。
本発明の記載内容における（特に、下記の請求項の内容における）「ａ」および「ａｎ」および「ｔｈｅ」という用語ならびに同様の言及の使用は、本明細書において別段に示されているか、または内容によって明確に禁じられていない限り、単数形および複数形の両方に及ぶと解釈されたい。
「塩（複数可）」という用語は、本明細書において使用する場合、無機および／または有機の酸および塩基と共に形成される酸性および／または塩基性塩を示す。双性イオン（分子内（ｉｎｔｅｒｎａｌ）または分子内（ｉｎｎｅｒ）塩）は、本明細書において使用する場合「塩（複数可）」という用語の範囲内に含まれる（かつ例えば、Ｒ置換基がアミノ基などの塩基性部分を含む場合に形成され得る）。アルキルアンモニウム塩などの第四級アンモニウム塩も、本明細書に含まれる。薬学的に許容される（すなわち、非毒性、生理学的に許容される）塩が好ましい。
【００１８】
「薬学的に許容される塩」という用語は、塩酸、臭化水素酸などの無機酸；またはベンゼンスルホン酸、マレイン酸、シュウ酸、フマル酸、コハク酸、ｐ−トルエンスルホン酸およびリンゴ酸などの有機酸から選択される適切な酸と共に形成される酸付加塩化合物を指す。
「水和物」という用語は、本明細書において使用する場合、水分子が結晶格子中に組み込まれている結晶性分子化合物を示す。したがって、一般的に述べて、水和物は、結晶格子中に組み込まれる唯一のさらなる分子が水分子である分子化合物の結晶形を示す。
「立体異性体」という用語は、同じ分子式および原子の連結性を有するが、三次元空間において異なる原子配置を有する少なくとも２種の化合物を指す。本開示を考慮すると、立体異性体は、例えば、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、またはメソ化合物であり得る。
【００１９】
「予防的」という用語は、本明細書において使用する場合、感染を予防し、かつ／または感染の予防において役立つ医薬品、量（ａｍｏｕｎｔ）または量（ｑｕａｎｔｉｔｙ）、方法、使用および効果などを様々に指す。
「治療的」という用語は、本明細書において使用する場合、疾患または状態の予防、寛解、処置、改善、または治癒を指す。
「約」という用語は、本明細書において使用する場合、それが修飾する数値を限定することが意図されており、そのような値が、誤差限界の範囲内で変動可能であると示す。データのチャートまたは表において示されている平均値に対する標準偏差などの特定の誤差限界が挙げられていない場合、「約」という用語は、挙げられている値を包含するであろう範囲、および加えて、有効数字を考慮して、その数値を切り上げまたは切り捨てによって含まれるであろう範囲を意味すると理解されるべきである。
【００２０】
「疾患」という用語は、本明細書において使用する場合、一般に、正常な機能を損なうヒトまたは動物の身体またはその部分の一つの異常な状態をすべて反映し、典型的には、徴候および症状の識別によって現れ、ヒトまたは動物の寿命および生活の質を低下させる「障害」、「症候群」、および「状態」（医学的状態においての場合）という用語と同意語であり、それと互換的に使用されることが意図されている。
「筋疾患」という用語は、骨格筋または心筋細胞の数または機能の欠陥を伴う疾患を指す。
「併用療法」という用語は、本開示に記載の治療上の状態または障害を処置するための２種以上の治療薬の投与を意味する。そのような投与は、固定比の活性成分を有する単一カプセル剤において、または各活性成分のための複数の別々のカプセル剤においてなどの実質的に同時の手法でのこれらの治療薬の同時投与を包含する。加えて、そのような投与はまた、連続手法での各種の治療薬の使用を含む。いずれの場合においても、その処置レジメンは、本明細書に記載の状態または障害の処置において薬物の併用の有益効果をもたらす。ある種の実施形態では、化合物の組合せを、身体からの各化合物のクリアランス半減期が少なくとも部分的に相互に重なるように投与する。例えば、第１の医薬品は１時間のクリアランス半減期を有し、時間＝０に投与され、第２の医薬品は１時間のクリアランス半減期を有し、時間＝４５分に投与される。
【００２１】
「治療上有効」という語句は、疾患もしくは障害の処置において、または臨床エンドポイントの達成で使用される活性成分の量を定量することが意図されている。
「治療的に許容される」という用語は、過度の毒性、刺激、およびアレルギー応答を伴うことなく、患者の組織と接触させて使用するために適しており、合理的なベネフィット／リスク比に見合い、それらの意図された使用に有効である化合物（または塩、プロドラッグ、互変異性体、双性イオン形態など）を指す。
本明細書において使用する場合、患者の「処置」に対する言及は、予防を含むことが意図されている。処置はまた、実際に先取的であってもよく、すなわち、疾患の予防を含んでよい。疾患の予防は、例えば、病原体への感染の予防の場合においてなど、疾患からの完全な保護に関してよいか、または疾患の進行の予防に関してよい。例えば、疾患の予防は、いずれかのレベルでの疾患に関連するあらゆる作用の完全な除外を意味しなくてもよく、代わりに、臨床的に有意か、または検出可能なレベルでの疾患の症状の予防を意味してよい。疾患の予防はまた、疾患の後期段階への疾患の進行の予防を意味してよい。
【００２２】
「患者」という用語は一般に、「対象」という用語と同意語であり、ヒトを含むすべての哺乳動物を包含する。患者の例には、ヒト、ウシ、ヤギ、ヒツジ、ブタ、およびウサギなどの家畜、ならびにイヌ、ネコ、ウサギ、およびウマなどのコンパニオン動物が含まれる。好ましくは、患者は、ヒトである。
本明細書において開示する化合物および組成物は「有効量」で投与される。この用語は、本明細書において下記で定義される。明確に、または別段に、他に規定しない限り、「有効量」は、状態を寛解するために十分な最小量、または状態の最適もしくは最大の寛解をもたらす量に限定されない。２種以上の化合物を一緒に投与する場合、１種のそのような化合物の有効量は、それ自体で単独で有効量でなくてもよいが、追加の化合物と一緒に使用すると、有効量であってよい。
【００２３】
「一緒に投与する（される）」という語句は、本明細書において使用する場合、同じ医薬組成物での化学組成物の提供を指し得るが、その語句は、本明細書において使用する場合、そのようでなければならないことを意味することは意図されていない。むしろ、身体からの各組成物のクリアランスでのＴ1/2が少なくとも部分的に相互に重なるならば、２種以上の化学組成物は「一緒に投与される」。例えば、第１の医薬品がクリアランスで１時間のＴ1/2を有し、時間＝０に投与され、第２の医薬品がクリアランスで１時間のＴ1/2を有し、時間＝４５分に投与される場合、そのような医薬品は、一緒に投与されると判断される。逆に、第２の薬物が時間＝２時間に投与される場合、そのような医薬品は、一緒に投与されるとは判断されない。
【００２４】
発明の詳細な説明
Ａ．本発明の化合物
本発明は、式（Ｉ）のヒドロキシステロイドおよびそれらの中間体またはそれらの塩を提供する。
【化３】
0006781148.tif 000004
［式中、
【００２５】
【化４】
0006781148.tif 000005
は独立に、単結合、二重結合またはシクロプロピル環のいずれかであるが、ただし、隣接する二重結合は許されず；
Ａ1、Ａ2、Ａ3は独立に、水素、ヒドロキシル、ヒドロキシメチル、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキルを含む群から選択され；
ＢおよびＣはそれぞれ独立に、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、−ＯＲ6、−ＣＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、ＯＣＯＲ6、ＣＨ2ＯＨ、ＣＨ2ＯＲ6、−ＣＯＮＨＲ6、ＣＯＮＨＲ6Ｒ7、−Ｃ（ＯＨ）Ｒ6Ｒ7、ＮＨＲ6、ＮＨＲ5ＣＯＮＨＲ6、−Ｒ6ＮＨＣＯＯＲ7、−ＮＲ6Ｒ7、Ｃ（Ｏ）ヘテロアリール、Ｃ（Ｏ）ヘテロシクリル、Ｃ1−Ｃ12直鎖または分枝鎖アルキル、５〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリールを含む群から選択され；
【００２６】
前記Ｃ1−Ｃ12直鎖または分枝鎖アルキルまたは５〜６員ヘテロシクロアルキルまたは５〜６員ヘテロアリールは、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＣＯＮＨＲ6、−ＯＣＯＲ6、＝ＮＯＨ、ＮＲ6Ｒ7、−ＮＲ6ＣＯＲ7、５〜６員ヘテロシクロアルキルまたは５〜６員ヘテロアリール；Ｃ1−Ｃ12アルキル置換５〜６員ヘテロシクロアルキルまたはＣ1−Ｃ12アルキル置換５〜６員ヘテロアリールを含む群から選択される１個または複数の置換基でさらに置換されていてもよく；
またはＢおよびＣは、一緒に組み合わさって、＝Ｏ、＝ＮＯＲ6、ＮＨＲ6、５〜６員ヘテロシクロアルキル、または５〜６員ヘテロアリールを形成していてもよく；
前記５〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリールは、１個または複数のヘテロ原子を含有してもよく；
前記ヘテロ原子は、Ｏ、Ｎ、Ｓであってよく；
【００２７】
Ｒ1、Ｒ2、およびＲ4は独立に、水素、ジュウテリウム、ヒドロキシル、ハロゲン、＝Ｏ、−ＯＲ6、−ＮＲ6Ｒ7、−ＣＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＯＣＯＲ6、−ＣＯＮＲ6Ｒ7、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｏｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルを含む群から選択され；
Ｒ3は、ヒドロキシル、カルボニル、ＯＣＯＲ６であり；
Ｒ3は、ベータ配置であり；
Ｒ5は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、ＯＲ6から選択され；
Ｒ6およびＲ7はそれぞれ独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ1−Ｃ12アルキル、−ＮＨ2、−（ＣＨ2）nＮＨ2、３〜６員シクロアルキル、４〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリールを含む群から選択され；
Ｘは、ＣＨ、ＮＨ、ＮＲ6、ＯまたはＳから選択され；
ｎは、０〜３である］
【００２８】
本発明は、式（ＩＩ）のヒドロキシステロイドおよびそれらの中間体またはそれらの塩を提供する。
【化５】
0006781148.tif 000006
［式中、
【００２９】
【化６】
0006781148.tif 000007
は独立に、単結合、二重結合またはシクロプロピル環のいずれかであるが、ただし、隣接する二重結合は許されず；
Ａ1、Ａ2は独立に、水素、ヒドロキシル、ヒドロキシメチル、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキルを含む群から選択され；
【００３０】
ＢおよびＣはそれぞれ独立に、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、−ＯＲ6、−ＣＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、ＯＣＯＲ6、ＣＨ2ＯＨ、ＣＨ2ＯＲ6、−ＣＯＮＨＲ6、ＣＯＮＨＲ6Ｒ7、−Ｃ（ＯＨ）Ｒ6Ｒ7、ＮＨＲ6、ＮＨＲ5ＣＯＮＨＲ6、−Ｒ6ＮＨＣＯＯＲ7、−ＮＲ6Ｒ7、Ｃ（Ｏ）ヘテロアリール、Ｃ（Ｏ）ヘテロシクリル、Ｃ1−Ｃ12直鎖または分枝鎖アルキル、５〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリールを含む群から選択され；
前記Ｃ1−Ｃ12直鎖または分枝鎖アルキルまたは５〜６員ヘテロシクロアルキルまたは５〜６員ヘテロアリールは、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＣＯＮＨＲ6、−ＯＣＯＲ6、＝ＮＯＨ、ＮＲ6Ｒ7、−ＮＲ6ＣＯＲ7、５〜６員ヘテロシクロアルキルまたは５〜６員ヘテロアリール；Ｃ1−Ｃ12アルキル置換５〜６員ヘテロシクロアルキルまたはＣ1−Ｃ12アルキル置換５〜６員ヘテロアリールを含む群から選択される１個または複数の置換基でさらに置換されていてもよく；
【００３１】
またはＢおよびＣは、一緒に組み合わさって、＝Ｏ、＝ＮＯＲ6、ＮＨＲ6、５〜６員ヘテロシクロアルキル、または５〜６員ヘテロアリールを形成していてもよく；
前記５〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリールは、１個または複数のヘテロ原子を含有してもよく；
前記ヘテロ原子は、Ｏ、Ｎ、Ｓであってよく；
Ｒ1およびＲ4は独立に、水素、ジュウテリウム、ヒドロキシル、ハロゲン、＝Ｏ、−ＯＲ6、−ＮＲ6Ｒ7、−ＣＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＯＣＯＲ6、−ＣＯＮＲ6Ｒ7、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｏｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルを含む群から選択され；
Ｒ6およびＲ7はそれぞれ独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ1−Ｃ12アルキル、−ＮＨ2、−（ＣＨ2）nＮＨ2、３〜６員シクロアルキル、４〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリールを含む群から選択され；
ｎは、０〜３である］
【００３２】
本発明は、式（ＩＩＩ）のヒドロキシステロイドおよびそれらの中間体またはそれらの塩を提供する。
【化７】
0006781148.tif 000008
［式中、
Ａ1およびＡ2は独立に、水素、ヒドロキシル、ヒドロキシメチル、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキルを含む群から選択され；
【００３３】
ＢおよびＣはそれぞれ独立に、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、−ＯＲ6、−ＣＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、ＯＣＯＲ6、ＣＨ2ＯＨ、ＣＨ2ＯＲ6、−ＣＯＮＨＲ6、ＣＯＮＨＲ6Ｒ7、−Ｃ（ＯＨ）Ｒ6Ｒ7、ＮＨＲ6、ＮＨＲ5ＣＯＮＨＲ6、−Ｒ6ＮＨＣＯＯＲ7、−ＮＲ6Ｒ7、Ｃ（Ｏ）ヘテロアリール、Ｃ（Ｏ）ヘテロシクリル、Ｃ1−Ｃ12直鎖または分枝鎖アルキル、５〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリールを含む群から選択され；
【００３４】
前記Ｃ1−Ｃ12直鎖または分枝鎖アルキルまたは５〜６員ヘテロシクロアルキルまたは５〜６員ヘテロアリールは、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＣＯＮＨＲ6、−ＯＣＯＲ6、＝ＮＯＨ、ＮＲ6Ｒ7、−ＮＲ6ＣＯＲ7、５〜６員ヘテロシクロアルキルまたは５〜６員ヘテロアリール；Ｃ1−Ｃ12アルキル置換５〜６員ヘテロシクロアルキルまたはＣ1−Ｃ12アルキル置換５〜６員ヘテロアリールを含む群から選択される１個または複数の置換基でさらに置換されていてもよく；
またはＢおよびＣは、一緒に組み合わさって、＝Ｏ、＝ＮＯＲ6、ＮＨＲ6、５〜６員ヘテロシクロアルキル、または５〜６員ヘテロアリールを形成していてもよく；
前記５〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリールは、１個または複数のヘテロ原子を含有してもよく；
【００３５】
前記ヘテロ原子は、Ｏ、Ｎ、Ｓであってよく；
Ｒ4は独立に、水素、ジュウテリウム、ヒドロキシル、ハロゲン、＝Ｏ、−ＯＲ6、−ＮＲ6Ｒ7、−ＣＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＯＣＯＲ6、−ＣＯＮＲ6Ｒ7、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｏｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルを含む群から選択され；
Ｒ6およびＲ7はそれぞれ独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ1−Ｃ12アルキル、−ＮＨ2、−（ＣＨ2）nＮＨ2、３〜６員シクロアルキル、４〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリールを含む群から選択され；
ｎは、０〜３である］
【００３６】
本発明は、式（ＩＶ）のヒドロキシステロイドおよびそれらの中間体またはそれらの塩を提供する。
【化８】
0006781148.tif 000009
［式中、
Ａ１およびＡ2は独立に、水素、ヒドロキシル、ヒドロキシメチル、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキルを含む群から選択され；
【００３７】
ＢおよびＣはそれぞれ独立に、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、−ＯＲ6、−ＣＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、ＯＣＯＲ6、ＣＨ2ＯＨ、ＣＨ2ＯＲ6、−ＣＯＮＨＲ6、ＣＯＮＨＲ6Ｒ7、−Ｃ（ＯＨ）Ｒ6Ｒ7、ＮＨＲ6、ＮＨＲ5ＣＯＮＨＲ6、−Ｒ6ＮＨＣＯＯＲ7、−ＮＲ6Ｒ7、Ｃ（Ｏ）ヘテロアリール、Ｃ（Ｏ）ヘテロシクリル、Ｃ1−Ｃ12直鎖または分枝鎖アルキル、５〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリールを含む群から選択され；
前記Ｃ1−Ｃ12直鎖または分枝鎖アルキルまたは５〜６員ヘテロシクロアルキルまたは５〜６員ヘテロアリールは、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＣＯＮＨＲ6、−ＯＣＯＲ6、＝ＮＯＨ、ＮＲ6Ｒ7、−ＮＲ6ＣＯＲ7、５〜６員ヘテロシクロアルキルまたは５〜６員ヘテロアリール；Ｃ1−Ｃ12アルキル置換５〜６員ヘテロシクロアルキルまたはＣ1−Ｃ12アルキル置換５〜６員ヘテロアリールを含む群から選択される１個または複数の置換基でさらに置換されていてもよく；
【００３８】
またはＢおよびＣは、一緒に組み合わさって、＝Ｏ、＝ＮＯＲ6、ＮＨＲ6、５〜６員ヘテロシクロアルキル、または５〜６員ヘテロアリールを形成していてもよく；
前記５〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリールは、１個または複数のヘテロ原子を含有してもよく；
前記ヘテロ原子は、Ｏ、Ｎ、Ｓであってよく；
Ｒ4は独立に、水素、ジュウテリウム、ヒドロキシル、ハロゲン、＝Ｏ、−ＯＲ6、−ＮＲ6Ｒ7、−ＣＯＲ6、−ＣＯＯＲ6、−ＯＣＯＲ6、−ＣＯＮＲ6Ｒ7、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｏｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルを含む群から選択され；
Ｒ6およびＲ7はそれぞれ独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ1−Ｃ12アルキル、−ＮＨ2、−（ＣＨ2）nＮＨ2、３〜６員シクロアルキル、４〜６員ヘテロシクロアルキル、５〜６員ヘテロアリールを含む群から選択され；
ｎは、０〜３である］
【００３９】
本発明の化合物を例示し得るが、本発明の化合物は、表１に示される例に限定されるものではない。
【００４０】
【表１−１】
0006781148.tif 000010
【００４１】
【表１−２】
0006781148.tif 000011
【００４２】
【表１−３】
0006781148.tif 000012
【００４３】
【表１−４】
0006781148.tif 000013
【００４４】
【表１−５】
0006781148.tif 000014
【００４５】
【表１−６】
0006781148.tif 000015
【００４６】
【表１−７】
0006781148.tif 000016
【００４７】
【表１−８】
0006781148.tif 000017
【００４８】
【表１−９】
0006781148.tif 000018
【００４９】
本発明の化合物には、以下が含まれる：
ｉ．  （１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−２，３，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−テトラデカヒドロ−１１−ヒドロキシ−１０，１３−ジメチル−３−オキソ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−カルボン酸
ｉｉ．  （３Ｓ，８Ｓ，９Ｓ，１０Ｓ，１１Ｓ，１３Ｓ，１４Ｓ，１７Ｓ）−ヘキサデカヒドロ−３，１１−ジヒドロキシ−Ｎ，１０，１３−トリメチル−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−カルボキサミド
ｉｉｉ．  （３Ｓ，８Ｓ，９Ｓ，１０Ｓ，１１Ｓ，１３Ｓ，１４Ｓ，１７Ｓ）−Ｎ−（２−アミノエチル）−ヘキサデカヒドロ−３，１１−ジヒドロキシ−１０，１３−ジメチル−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−カルボキサミド
ｉｖ．  （３Ｓ，５Ｒ，６Ｒ，１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−ヘキサデカヒドロ−６−メトキシ−１０，１３−ジメチル−１７−（２−メチル−１，３−ジオキソラン−２−イル）−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，５，１１−トリオール
【００５０】
ｖ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ）−５−ヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，９，９ａ，９ｂ，１０−デカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン（４ａ’Ｒ，５’Ｓ，６ａ’Ｓ）−５’−ヒドロキシ−４ａ’，５’，６ａ’−トリメチル−３’，４’，４ａ’，４ｂ’，５’，６’，６ａ’，８’，９’，９ａ’，９ｂ’，１０’−ドデカヒドロスピロ［［１，３］ジオキソラン−２，７’−インデノ［５，４−ｆ］キノリン］−２’（１’Ｈ）−オン
ｖｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ）−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，９，９ａ，９ｂ，１０−デカヒドロ−５−ヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチル−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン
ｖｉｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ）−７−アセチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−５−ヒドロキシ−４ａ，５，６ａ−トリメチル−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン
ｖｉｉｉ．  （１１Ｓ）−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−３，１１−ジヒドロキシ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−カルボン酸
【００５１】
ｉｘ．  （４ａＲ，６ａＳ）−２，３，４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−テトラデカヒドロ−４ａ，６ａ−ジメチル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−７−カルボン酸
ｘ．  （１７Ｓ）−１７−アセチル−７，８，１３，１５，１６，１７−ヘキサヒドロ−３−ヒドロキシ−１−メチル−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１１（９Ｈ，１２Ｈ，１４Ｈ）−オン
ｘｉ．  （１３Ｓ，１７Ｓ）−１７−アセチル−７，８，１３，１５，１６，１７−ヘキサヒドロ−３−ヒドロキシ−１３−メチル−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１１（９Ｈ，１２Ｈ，１４Ｈ）−オン
ｘｉｉ．  （１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−１１−ヒドロキシ−１０，１３−ジメチル−３−オキソ−６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−カルボン酸
ｘｉｉｉ．  （１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−１１−ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ，１０，１３−テトラメチル−３−オキソ−６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−カルボキサミド
【００５２】
ｘｉｖ．  （１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−１７−アセチル−１１−ヒドロキシ−１０，１３−ジメチル−６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オン
ｘｖ．  （１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−１１−ヒドロキシ−１７−（（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル）−１０，１３−ジメチル−６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オン
ｘｖｉ．  （４ａ’Ｒ，５’Ｓ，６ａ’Ｓ）−５’−ヒドロキシ−４ａ’，６ａ’−ジメチル−３’，４’，４ａ’，４ｂ’，５’，６’，６ａ’，８’，９’，９ａ’，９ｂ’，１０’−ドデカヒドロスピロ［［１，３］ジオキソラン−２，７’−インデノ［５，４−ｆ］キノリン］−２’（１’Ｈ）−オン
ｘｖｉｉ．  （４ａＲ，５Ｒ，６ａＳ）−５−ヒドロキシ−４ａ，５，６ａ−トリメチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，９，９ａ，９ｂ，１０−デカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン
ｘｖｉｉｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ）−５，７−ジヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン
ｘｉｘ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ）−７−フルオロ−５−ヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン
【００５３】
ｘｘ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ，Ｚ）−５−ヒドロキシ−７−（ヒドロキシイミノ）−４ａ，６ａ−ジメチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン
ｘｘｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ）−５，７−ジヒドロキシ−１，４ａ，６ａ−トリメチルテトラデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン
ｘｘｉｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ）−５，７−ジヒドロキシ−１，４ａ，６ａ−トリメチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン
ｘｘｉｉｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ）−７−アミノ−５−ヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチルテトラデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン
ｘｘｉｖ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ，７Ｓ）−５−ヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチル−７−（２−メチル−１，３−ジオキソラン−２−イル）−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン
【００５４】
ｘｘｖ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ，７Ｓ）−５−ヒドロキシ−４ａ，５，６ａ−トリメチル−７−（２−メチル−１，３−ジオキソラン−２−イル）−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン
ｘｘｖｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ，７Ｓ）−５−ヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチル−２−オキソ−２，３，４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−テトラデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−７−カルボン酸
ｘｘｖｉｉ．  （１１Ｓ，１３Ｓ）−１７−（１−ヒドロキシエチル）−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１１−ジオール
【００５５】
ｘｘｖｉｉｉ．  １−（（１１Ｓ，１３Ｓ）−３，１１−ジヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−イル）エタノン
ｘｘｉｘ．  （１１Ｓ，１３Ｓ）−１７−（１−ヒドロキシエチル）−３−メトキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１１−オール
ｘｘｘ．  （１１Ｓ，１３Ｓ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１３−メチル−１７−（２−メチル−１，３−ジオキソラン−２−イル）−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１１−オール
ｘｘｘｉ．  （１１Ｓ，１３Ｓ）−１３−メチル−１７−（２−メチル−１，３−ジオキソラン−２−イル）−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１１−ジオール
ｘｘｘｉｉ．  （１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−１１，１７−ジヒドロキシ−１０，１３−ジメチル−６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オン
ｘｘｘｉｉｉ．  （１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ）−１１−ヒドロキシ−１０，１３−ジメチル−７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６−デカヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１７（６Ｈ）−ジオン
【００５６】
ｘｘｘｉｖ．  （１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−４，１１−ジヒドロキシ−１，１３−ジメチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−カルボン酸
ｘｘｘｖ．  （１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１１，１７−トリオール
ｘｘｘｖｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ，７Ｓ）−７−アセチル−５−ヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン
ｘｘｘｖｉｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ，７Ｓ）−５−ヒドロキシ−７−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−４ａ，６ａ−ジメチル−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン
【００５７】
ｘｘｘｖｉｉｉ．  １−（（８Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ，１４Ｓ）−３，１１−ジヒドロキシ−１０，１３−ジメチル−２，３，４，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−テトラデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−イル）エタノン
ｘｘｘｉｘ．  （８Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ，１４Ｓ）−１７−アセチル−１１−ヒドロキシ−１０，１３−ジメチル−６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３（２Ｈ）−オン
ｘｌ．  （１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−１１−ヒドロキシ−１０，１３−ジメチル−３−オキソ−６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−カルボキサミド
ｘｌｉ．  （１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−１１−ヒドロキシ−１７−（ヒドロキシメチル）−１０，１３−ジメチル−６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オン
【００５８】
ｘｌｉｉ．  （１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−１７−（（ジメチルアミノ）メチル）−１１−ヒドロキシ−１０，１３−ジメチル−６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オン
ｘｌｉｉｉ．  （１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−メチル４，１１−ジヒドロキシ−１，１３−ジメチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−カルボキシレート
ｘｌｉｖ．  （１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−４，１１−ジヒドロキシ−１，１３−ジメチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−カルボキサミド
ｘｌｖ．  （１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−４，１１−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ，１，１３−テトラメチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−カルボキサミド
ｘｌｖｉ．  （（１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−４，１１−ジヒドロキシ−１，１３−ジメチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−イル）（ピペラジン−１−イル）メタノン
ｘｌｖｉｉ．  （１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−１７−（ヒドロキシメチル）−１，１３−ジメチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−４，１１−ジオール
ｘｌｖｉｉｉ．  （１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−１１−ヒドロキシ−４−メトキシ−１，１３−ジメチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−カルボン酸
【００５９】
ｘｌｉｘ．  （１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−１７−（（ジメチルアミノ）メチル）−１，１３−ジメチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−４，１１−ジオール
ｌ．  １−（（１１Ｓ，１３Ｓ）−１１−ヒドロキシ−３−メトキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−イル）エタノン
ｌｉ．  （Ｅ）−１−（（１１Ｓ，１３Ｓ）−３，１１−ジヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−イル）エタノンオキシム
ｌｉｉ．  （Ｅ）−１−（（１１Ｓ，１３Ｓ）−３，１１−ジヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−イル）エタノンオキシム
【００６０】
ｌｉｉｉ．  （１１Ｓ，１３Ｓ）−１７−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１１−ジオール
ｌｉｖ．  （１１Ｓ，１３Ｒ）−１７−エチル−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１１−ジオール
ｌｖ．  （８Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ，１４Ｓ，Ｚ）−１１−ヒドロキシ−１７−（ヒドロキシイミノ）−１０，１３−ジメチル−６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オン
ｌｖｉ．  （８Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ，１４Ｓ）−１７−アミノ−１１−ヒドロキシ−１０，１３−ジメチル−６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オン
【００６１】
ｌｖｉｉ．  （８Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ，１４Ｓ）−１１−ヒドロキシ−１０，１３−ジメチル−６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オン
ｌｖｉｉｉ．  （８Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ，１１Ｓ，１３Ｓ，１４Ｓ，１７Ｓ）−１１，１７−ジヒドロキシ−１０，１３，１７−トリメチル−６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オン
ｌｉｘ．  （１１Ｒ，１３Ｓ，１７Ｓ）−１１，１３，１７−トリメチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１１，１７−トリオール
ｌｘ．  （１１Ｓ，１３Ｓ）−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１１−ジオール
ｌｘｉ．  （１１Ｓ，１３Ｓ，１７Ｓ）−１７−アミノ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１１−ジオール
ｌｘｉｉ．  （１１Ｓ，１３Ｓ，Ｚ）−３，１１−ジヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１５，１６−オクタヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７（１４Ｈ）−オンオキシム
ｌｘｉｉｉ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ，７Ｓ）−５−ヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチル−７−（２−メチル−１，３−ジオキソラン−２−イル）−４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−ドデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−２（３Ｈ）−オン
ｌｘｉｖ．  （４ａＲ，５Ｓ，６ａＳ，７Ｓ）−５−ヒドロキシ−４ａ，６ａ−ジメチル−２−オキソ−２，３，４，４ａ，４ｂ，５，６，６ａ，７，８，９，９ａ，９ｂ，１０−テトラデカヒドロ−１Ｈ−インデノ［５，４−ｆ］キノリン−７−カルボン酸
【００６２】
本発明は、その範囲内に、塩および異性体を含む。新規であることに次いで、本発明の化合物は、一部の場合には、塩を形成してもよく、それらも、本発明の範囲内である。「塩（複数可）」という用語は、本明細書において使用する場合、無機および／または有機の酸および塩基と共に形成される酸性および／または塩基性塩を示す。双性イオン（分子内（ｉｎｔｅｒｎａｌ）または分子内（ｉｎｎｅｒ）塩）は、本明細書において使用する場合「塩（複数可）」という用語の範囲内に含まれる（かつ例えば、Ｒ置換基がアミノ基などの塩基性部分を含む場合に形成され得る）。アルキルアンモニウム塩などの第四級アンモニウム塩も、本明細書に含まれる。薬学的に許容される（すなわち、非毒性、生理学的に許容される）塩が好ましい。
【００６３】
化合物のＲ置換基上の不斉炭素によって存在し得るものなどの本発明の化合物のすべての立体異性体が、鏡像異性およびジアステレオ異性形態を含めて、本発明の範囲内と考えられる。本発明の化合物は、それらの鏡像異性的に純粋な形態またはそれらの混合物で存在してよい。
【００６４】
Ｂ．塩および異性体および対イオン
本発明は、その範囲内に、塩および異性体を含む。新規であることに次いで、本発明の化合物は、一部の場合には、塩を形成してもよく、それらも、本発明の範囲内である。「塩（複数可）」という用語は、本明細書において使用する場合、無機および／または有機の酸および塩基と共に形成される酸性および／または塩基性塩を示す。双性イオン（分子内（ｉｎｔｅｒｎａｌ）または分子内（ｉｎｎｅｒ）塩）は、本明細書において使用する場合「塩（複数可）」という用語の範囲内に含まれる（かつ例えば、Ｒ置換基がアミノ基などの塩基性部分を含む場合に形成され得る）。薬学的に許容される（すなわち、非毒性、生理学的に許容される）塩が好ましい。化合物のＲ置換基上の不斉炭素によって存在し得るものなどの本化合物のすべての立体異性体が、鏡像異性およびジアステレオ異性形態を含めて、本発明の範囲内と考えられる。本発明の化合物は、それらの鏡像異性的に純粋な形態またはそれらの混合物で存在してよい。
【００６５】
Ｃ．本発明の組成物
したがって、本発明は、ヒト医学または獣医学において使用するための、本明細書において定義する新規の化合物の使用を提供する。医薬品として使用するための化合物は、医薬組成物として提供され得る。したがって、本発明は、さらなる一態様では、新規の本発明の化合物をその薬学的に許容される賦形剤／担体と共に含み、他の治療用および／または予防用成分を共に含んでいてもよい医薬組成物を提供する。賦形剤／担体は、組成物の他の成分と適合性であり、かつその受容者に対して有害でないという意味において、「許容され」なければならない。適切には、医薬組成物は、適切な製剤の形であろう。
医薬製剤は、任意の製剤であってよく、経口、鼻腔内、または非経口（筋肉内および静脈内を含む）投与に適したものを包含する。製剤を、適切な場合には、好都合に、別個の投薬単位で提供してよく、かつ薬学の分野で周知の方法のいずれかによって調製してよい。すべての方法が、活性化合物を液体担体もしくは微粉固体担体、またはその両方と混合するステップと、次いで、必要な場合には、生成物を所望の製剤に成形するステップとを含む。これらの目的では、本発明の化合物を、経口、局所、鼻腔内、非経口で、吸入噴霧剤によって、または直腸で、従来の非毒性の薬学的に許容される担体、アジュバントおよびビヒクルを含有する投薬単位製剤で投与してよい。非経口という用語は、本明細書において使用する場合、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内（ｉｎｔｒａｓｔｅｒａｌ）注射または注入技術を含む。マウス、ラット、ウマ、イヌ、ネコなどの温血動物の処置に加えて、本発明の化合物は、ヒトの処置において有効である。
【００６６】
Ｄ．本発明の化合物の使用
本発明の化合物を、ミトコンドリア生合成に関する疾患および障害において使用する。ミトコンドリア生合成媒介疾患は、虚血、または血流障害もしくは血流不全に関連する骨または心筋疾患、ミトコンドリアの数、構造、または機能に直接的または間接的に影響を及ぼす遺伝的障害に関連する疾患、ミトコンドリアの数または機能の低下に関連する神経機能障害に関連する疾患、骨格筋細胞または心筋細胞の数の減少、機能の低下、または適正で最適に効率的な内部組織の喪失に関連する疾患、代謝疾患、ならびに肝細胞の損傷および脂肪酸代謝の変化に関連する状態を含む群から選択される。
【００６７】
ミトコンドリア生合成媒介疾患は、急性冠動脈症候群、心筋梗塞、狭心症、腎損傷、腎虚血、大動脈およびその枝の疾患、医学的介入から生じる損傷、アテローム硬化症、外傷、糖尿病、高脂血症、血管狭窄、末梢動脈疾患、脈管障害、および脈管炎を含む群から選択される。ミトコンドリア生合成媒介疾患は、フリードライヒ運動失調、筋ジストロフィー、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、ベッカー筋ジストロフィー、肢帯筋ジストロフィー、先天性筋ジストロフィー、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー、緊張性筋ジストロフィー、眼球咽頭型筋ジストロフィー、末梢型筋ジストロフィー、脊髄性筋萎縮症およびエメリー−ドライフス型筋ジストロフィー、ハンチントン病、パーキンソン病、アルツハイマー病、および筋萎縮性側索硬化症からなる群から選択される。ミトコンドリア生合成媒介疾患は、サルコペニア、鬱血性心不全、加齢、心筋炎、筋炎、リウマチ性多発性筋痛、多発性筋炎、ＨＩＶ、癌および／または前記癌を標的とする化学療法の副作用、栄養不良、加齢、先天性代謝異常、外傷、ならびに卒中または脂肪肝、肝線維症、硬変、および肝細胞または星状細胞損傷などの他の種類の神経学的障害を含む群から選択される。
【００６８】
本発明の化合物は、ミトコンドリア毒性を示す化合物の投与の有害作用を処置または予防する際に使用してよい。
本発明の化合物は、筋肉構造または機能を改善する；運動に関連するミトコンドリア作用を改善する；年齢、不活動性、食事、または疾患によって制限されているヒトにおいて、運動能力を増強する；運動に応じて筋肉の健康および機能を増強する；運動能力を制限する臨床状況において筋肉の健康および機能を増強する；活発な活動から、または活発か、もしくは持続的な活動に関連する損傷からの筋肉の回復を増強することが可能である。
本発明の化合物は、スポーツの成績および持久性を増強する、筋肉の形状および強度を作り上げる、またはトレーニングもしくは競技の筋肉関連副作用からの回復を促進することが可能である。
【００６９】
Ｅ．本発明の化合物の用量
さらなる実施形態では、本明細書において開示する方法は、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／用量〜約１０ｍｇ／ｋｇ／用量、代わりに、約０．３ｍｇ／ｋｇ／用量〜約３ｍｇ／ｋｇ／用量の合計１日用量での開示の化合物の投与を含む。別の実施形態では、用量範囲は、約０．１〜約１ｍｇ／ｋｇ／日である。一般に、１日当たり約０．０１ｍｇ〜約０．１グラムを投与することができ；代わりに、約２．５ｍｇ〜約２００ｍｇを投与することができる。用量を、簡便であるように、多くの分割用量として投与してよい。
【００７０】
さらなる実施形態では、所望の濃度を、少なくとも３０分間、１時間、３時間、６時間、１２時間、２４時間、４８時間、７２時間以上にわたって維持する。まださらなる実施形態では、所望の濃度を、少なくとも２４時間、４８時間、７２時間、１週間、１か月以上にわたってそれぞれ１２時間の間に少なくとも１回；または少なくとも４８時間、７２時間、１週間、１か月以上にわたってそれぞれ２４時間の間に少なくとも１回達成する。所望の時間にわたって所望の濃度を維持するために、１種または複数の化合物の複数の用量を使用してよい。投与間隔は、身体からの各対象化合物のクリアランス半減期に基づき決定してよい。
【００７１】
化合物を他の治療薬と組み合わせて投与してよいことは、本発明の範囲内と考えられる。それらの化合物を一緒に、または順に投与してよい。
【００７２】
理論に制限されることはないが、新規の本発明の化合物は、かなり異なる薬物動態および薬力学的プロファイルを示すことが提示されている。次の例に関連して、本発明を本明細書において下記で詳細に記載するが、それらの例は、単に説明のために提示するものである。しかしながら、これらの例が、本発明の範囲を限定すると解釈されることはない。当業者に自明であり得るいずれの実施形態も、本発明の範囲内に含まれると考えられる。
【実施例】
【００７３】
（例１）
本発明の化合物の調製
【化９】
0006781148.tif 000019
ステップ１：化合物［１］（５００ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）をＡＣＮ（２００ｍｌ）に入れ、トリメチルシリルヨージド（１．１７ｍｌ、８．２８ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物を室温で２０分間撹拌した。完了後に、反応物を１０％チオ硫酸ナトリウム（５０ｍｌ）によってクエンチし、飽和ＮａＨＣＯ3で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し；Ｎａ2ＳＯ4で脱水し、減圧下で蒸発させて、［２］を薄黄色の固体（４５０ｍｇ、９４％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３４７。
【００７４】
ステップ２：アセトン中の［２］（１．０ｇ、２．８９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＮａＩＯ4（２．４７ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）の水（５０ｍｌ）溶液を添加し、反応混合物を２時間室温で撹拌した。反応物を水（２５ｍｌ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、減圧下で蒸発させて、［１００１］を白色の固体（８５０ｍｇ、８８％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３３３。
ステップ３：ジオキサン（５０ｍｌ）中の化合物［１００１］（１．０ｇ、３．０１ｍｍｏｌ）の溶液を、ＴＢＤＭＳＣｌ（０．０２２ｇ、０．１５２ｍｍｏｌ）で、続いて、ＤＤＱ（０．９０ｇ、３．９５ｍｍｏｌ）で０℃で処理した。混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮し、３％ＭｅＯＨ：ＤＣＭで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物［１０１３］を薄黄色の固体（０．６１ｇ、収率６１％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋＋１）３３１。
【００７５】
ステップ４：化合物［１０１３］（０．５ｇ、１．５１ｍｍｏｌ）をピリジン（１５ｍＬ）に入れ、それに亜鉛粉末（１９．６ｇ、３０．２ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、水（０．５ｍｌ）を添加した。反応混合物を９０分間１１５℃で加熱し、冷却し、濾過し、０．１Ｎ  ＨＣｌで洗浄し、ＤＣＭ（２×１００ｍＬ）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮し、４０％酢酸エチル：ヘキサンで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物［２４］を白色の固体として、生成物［１０３５］をオフホワイト色の固体として得た。収率（０．３８ｇ、収率７６％）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３３１。
【００７６】
ステップ−５：ＤＭＦ（３ｍｌ）中の［１０１３］（０．２ｍｇ、０．６０６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＥＤＣ．ＨＣｌ（０．１７ｍｇ、０．９０９ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で３０分間撹拌した。ＴＨＦ中のジメチルアミン２Ｍ溶液（１．５ｍｌ、３．０３ｍｍｏｌ）を、続いて、Ｎ−メチルモルホリン（０．１５ｇ、１．５１ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌を１８時間室温で継続した。反応混合物をブライン（５０ｍｌ）でクエンチし、酢酸エチル（３×１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、濃縮して、粗製物を得、これを、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル１００〜２００メッシュ）によって精製して、化合物［１０１４］をオフホワイト色の固体（０．１２５ｇ、収率５８％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３５８。
例１に基づき合成されるこのシリーズのいくつかの例示される例には、１０１４、１０４１〜１０５０が含まれる。
【００７７】
（例２（ａ））
本発明の化合物の調製
【化１０】
0006781148.tif 000020
ステップ１：ジオキサン（５０ｍｌ）中の化合物［３０］（１．０ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）の溶液をＴＢＤＭＳＣｌ（０．０２２ｇ、０．１５２ｍｍｏｌ）で、続いて、ＤＤＱ（０．９０ｇ、３．９５ｍｍｏｌ）で０℃で処理した。混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、４０％酢酸エチル：ヘキサンで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物［３０ａ］を白色の固体（０．４５ｇ、収率４５％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３２５。
【００７８】
ステップ２：無水ＴＨＦ（５ｍｌ）中の化合物［３０ａ］（１ｇ、３．０８ｍｍｏｌ）の溶液を入れた。これに、ＰＣｌ5（１．１５ｇ、５．５５ｍｍｏｌ）を−８０℃で添加し、３０分で撹拌した。完了後に、１０％ＮａＯＨ溶液を添加して、ｐＨを７に調整し、有機層を酢酸エチルで抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで脱水し、減圧下で蒸発させて、組成物を得た。粗製の残渣を、１５〜２０％酢酸エチル：ヘキサンで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、茶色の固体［３１］（０．８０ｇ、収率７７％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３１３。
【００７９】
ステップ３：化合物［３１］（０．５ｇ、１．６０ｍｍｏｌ）をピリジン（１５ｍＬ）に入れ、それにＺｎ粉末（２０．８ｇ、３２ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、水０．５ｍｌを添加した。完了のために、反応混合物を９０分間、１１５℃で加熱した。反応混合物を冷却し、濾過し、０．１Ｎ  ＨＣｌで洗浄し、ＤＣＭ（２×１００ｍＬ）で抽出した。有機層をＮａ2ＳＯ4で脱水し、濃縮して、生成物［３２］をオフホワイト色の固体として得た。（０．３５ｇ、収率７３％）、ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）２９７。
【００８０】
（例２ｂ）
本発明の化合物の調製
【化１１】
0006781148.tif 000021
ステップ１：ＤＣＭ（２０ｍｌ）中の化合物［３２］（１．０ｇ、３．３ｍｍｏｌ）の溶液をイミダゾール（０．６ｇ、９．９ｍｍｏｌ）で処理し、続いて、ＴＢＤＭＳＣｌ（０．９９ｇ、６．６ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応マスを４時間４０℃で加熱した。反応混合物を水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機相を飽和炭酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、減圧下で蒸発させて、粗製の生成物を得た。粗製の生成物を、溶離液として２〜３％酢酸エチル：ヘキサンを使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィー上での精製に掛けて、化合物［３３］を白色の固体（１．２ｇ、収率８７％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）４１１。
【００８１】
ステップ２：ベンゼン（１００ｍｌ）中の［３３］（０．５ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（２０ｍｇ）、およびエチレングリコール（３ｍｌ）の混合物を、水を共沸除去しながら４時間還流させた。混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、回転蒸発器によって濃縮して、化合物［３４］を薄黄色の固体（１３０ｍｇ）として収率８７％で得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ+）４５５。
【００８２】
ステップ３：無水ＴＨＦ（５ｍｌ）中の化合物［３４］（１ｇ、２．４４ｍｍｏｌ）の溶液を入れた。これに、ＢＨ3．ＤＭＳ（２．３ｍｌ、２４．４ｍｍｏｌ）を室温で添加し、反応マスを３時間４０℃で加熱した。完了後に、水２ｍｌを−３０℃で添加してクエンチし、続いて、１０％ＮａＯＨ溶液およびＨ2Ｏ2を混合物（１：１；２０ｍｌ）として滴下添加した。反応マスを酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮した。粗製の残渣を、溶離液として６０％酢酸エチル：ヘキサンを使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、黄色の固体［３５］を得た。（０．６ｇ、収率５２％）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+−１）．４７３
【００８３】
ステップ４：ＤＣＭ（２０ｍｌ）中の化合物［３５］（０．５ｇ、１．１６ｍｍｏｌ）の溶液をデスマーチンペルヨージナン（１．９７ｇ、４．６５ｍｍｏｌ）で室温で２０時間処理した。反応混合物をＤＣＭで希釈し、飽和炭酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、溶離液としてヘキサン中の３０％酢酸エチルを使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物［３６］を白色の固体（０．３１ｇ、収率６２％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）．４７１
【００８４】
ステップ５：エタノール（５０ｍｌ）中の化合物［３６］（０．２ｇ、０．４７ｍｍｏｌ）の溶液にホウ水素化ナトリウム（０．０３４ｇ、０．９３ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応物を氷浴内で８時間撹拌した。反応物を水（５ｍｌ）でクエンチし、固体が現れるまで、真空下で濃縮した。固体残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液として２％ＭｅＯＨ：ＤＣＭ）によって精製して、化合物［１０３１］を白色の固体（０．１５ｇ、収率７５％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）．４７３
【００８５】
ステップ６：ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の化合物［１０３１］（０．２ｇ、０．４２３ｍｍｏｌ）の溶液をＴＨＦ中のＴＢＡＦ  １Ｍ溶液（０．８５ｍｌ、０．８４７ｍｍｏｌ）で０℃で処理した。混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、ヘキサン中の４０％酢酸エチルで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物［１０３２］を薄黄色の固体（０．１２５ｇ、収率８２％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３５９
【００８６】
ステップ７  アセトン（７ｍｌ）および水（３ｍｌ）中の化合物［１０３２］（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の溶液を濃硫酸（０．５ｍｌ）で０℃で処理した。混合物を２時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、４０％酢酸エチル：ヘキサン（Ｈａｘｅｎｅ）で溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物［１０２９］を白色の固体（０．０５ｍｇ、収率７５％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３１５。
【００８７】
ステップ８：エタノール（５０ｍｌ）中の化合物［１０２９］（０．１ｇ、０．３１７ｍｍｏｌ）の溶液に、ホウ水素化ナトリウム（０．０２４ｇ、０．６３４ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応物を氷浴内で４時間撹拌した。反応物を水（５ｍｌ）でクエンチし、固体が現れるまで、真空下で濃縮した。固体残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液として２％ＭｅＯＨ：ＤＣＭ）によって精製して、化合物［１０２８］を白色の固体（０．０８０ｇ、収率８０％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３１９。
例２ｂに基づき合成されるこのシリーズのいくつかの例示される例には、１０２８、１０５１〜１０５５が含まれる。
【００８８】
（例３）
本発明の化合物の調製
【化１２】
0006781148.tif 000022
ステップ１：ＤＭＦ：アセトン（２０ｍｌ）中の化合物［３２］（１．０ｇ、３．３ｍｍｏｌ）の溶液をＭｅＩ（１．４ｇ、９．９ｍｍｏｌ）およびＫ2ＣＯ3（１．３６ｇ、９．９ｍｍｏｌ）および触媒量の１８−クラウン−６で室温で処理した。反応マスを１４時間４０℃で加熱し、反応の進行をＴＬＣによってモニターした。反応混合物を室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、過剰の溶媒を蒸発させた。残留マスを水に溶かし、酢酸エチルで抽出した。有機層を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、溶離液としてヘキサン中の２〜３％酢酸エチルを使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物［３７］を白色の固体（１．２ｇ、収率８７％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３１１。
【００８９】
ステップ２：化合物［３８］を、例２ｂにおいて上述した手順と同じ手順を使用して合成した。収率５４％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３３１。
ステップ３：化合物［３９］を、例２ｂにおいて上述した手順と同じ手順を使用して合成した。収率６５％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３２７。
ステップ４：化合物［１０３０］を、例２ｂにおいて上述した手順と同じ手順を使用して合成した。収率７０％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３３１。
【００９０】
（例４）
本発明の化合物の調製
【化１３】
0006781148.tif 000023
ステップ１：水（４ｍＬ）中の三酸化クロム（３．３ｇ、３３．３ｍｍｏｌ）の溶液を酢酸（３００ｍｌ）中の［１０４０］（１０ｇ、３０．３ｍｍｏｌ）の溶液に滴下添加した。反応物を１．５時間撹拌し、メタノール（３０ｍＬ）を添加することによってクエンチし、０．５時間撹拌した。混合物を回転蒸発器によって７０℃で濃縮し、酢酸エチル／メタノールに溶かし、飽和炭酸水素ナトリウムおよびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮して、オフホワイト色の固体［４１］（９．０ｇ）を得た。収率９０％）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３２９。
【００９１】
ステップ２：ジオキサン（５０ｍｌ）中の化合物［４１］（１．０ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）の溶液をＴＢＤＭＳＣｌ（０．０２２ｇ、０．１５２ｍｍｏｌ）で、続いて、ＤＤＱ（０．９０ｇ、３．９５ｍｍｏｌ）で０℃で処理した。混合物を４０℃で２０時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、２〜３％ＭｅＯＨ：ＤＣＭで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物［４２］を薄黄色の固体（０．４５ｇ、収率４５％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３２７。
【００９２】
ステップ３：化合物［４３］を、例２ｂにおいて上述した手順と同じ手順を使用して合成した。収率７８％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３７１。
ステップ４：化合物［４４］を、例２ｂにおいて上述した手順と同じ手順を使用して合成した。収率７８％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３７３。
ステップ５：化合物［４５］を、例２ｂにおいて上述した手順と同じ手順を使用して合成した。収率７８％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３２９。
ステップ６：化合物［１０１６］を、例２ｂにおいて上述した手順と同じ手順を使用して合成した。収率７８％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３３１。
【００９３】
（例５）
本発明の化合物の調製
【化１４】
0006781148.tif 000024
ステップ１：ＴＨＦ（４ｍｌ）およびメタノール（２ｍｌ）中の化合物［５０］（０．２１ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）の溶液を、水中のメタ過ヨウ素酸ナトリウム（３８３ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）の温溶液で処理し、１時間室温で撹拌した。混合物を水（１０ｍｌ）で希釈し、沈澱物が形成するまで、回転蒸発器によって濃縮し、その沈澱物を濾過し、水で洗浄し、高真空下で乾燥して、化合物［１０］を白色の固体（０．１５ｍｇ）として得た。収率８６％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ−１）３０３。
【００９４】
ステップ２：合成手順は、例２においてと同じであり、［１０３４］を得る。収率８０％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３０１。
ステップ３：合成手順は、例２の手順と同じであり、［１０３３］を得る。収率７５％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３０３。
例５に基づき合成されるこのシリーズのいくつかの例示される例には、１０３３、１０５６〜１０５９が含まれる。
【００９５】
（例６ａ）
本発明の化合物の調製
【化１５】
0006781148.tif 000025
ステップ１：化合物を、例２ａにおいて上述した手順と同じ手順を使用して合成して、［１０３４］を得た。収率７５％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３０１。
【００９６】
ステップ２：化合物を、例２ａにおいて上述した手順と同じ手順を使用して合成して、［６１］を得た。収率８０％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）２８３。
ステップ３：化合物を、例２ａにおいて上述した手順と同じ手順を使用して合成して、［６２］を生じさせた。収率７８％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）２６９。
【００９７】
（例６ｂ）
【化１６】
0006781148.tif 000026
ステップ１：化合物を、例２ｂにおいて上述した手順と同じ手順を使用して合成して、［６４］を得た。収率７０％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋＋１）３８３。
【００９８】
ステップ２：化合物を、例２ｂにおいて上述した手順と同じ手順を使用して合成して、［６５］を得た。収率５６％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）４０３。
ステップ３：化合物を、例２ｂにおいて上述した手順と同じ手順を使用して合成して、［６６］を得た。収率７１％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３９９。
【００９９】
ステップ４：化合物を、例２ｂにおいて上述した手順と同じ手順を使用して合成して、［６７］を生じさせた。収率７８％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）４０３。
ステップ５：ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の化合物［６７］（０．１ｇ、０．２４８ｍｍｏｌ）の溶液をＴＨＦ中のＴＢＡＦ  １Ｍ溶液（０．５ｍｌ、０．４９７ｍｍｏｌ）で０℃で処理した。混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、ヘキサン中の４０％酢酸エチルで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物［１０３６］を薄黄色の固体（０．０５ｇ、収率７０％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）２８９。
例６ａおよび６ｂに基づき合成されるこのシリーズのいくつかの例示される例には、１０６０〜１０６３が含まれる。
【０１００】
（例７ａ）
本発明の化合物の調製
【化１７】
0006781148.tif 000027
ステップ１：ＥｔＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍｌ、１：１）中のヒドロコルチゾン［１］（２．０ｇ、５．５２ｍｍｏｌ）の溶液をＮａＢＨ４（８４ｍｇ、２．２０ｍｍｏｌ）で処理した。２時間後に、アセトン（１０ｍｌ）を、続いて、水９１０ｍｌ）およびＮａＩＯ４（２．９５ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）を添加した。その溶液を室温で終夜撹拌し、続いて、水（２００ｍｌ）を添加し、ＣＨＣｌ３で抽出し、シリカゲルプラグを通してフラッシュした。溶媒を蒸発させた後に、ケトン［１０］１．５ｇを白色の固体として収率９０％で得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ+）３０３。
【０１０１】
ステップ２：水（１ｍＬ）中の三酸化クロム（０．３６４ｇ、３．６４ｍｍｏｌ）の溶液を酢酸（３０ｍｌ）中の化合物［１０］（１ｇ、３．３１ｍｍｏｌ）の溶液に滴下添加した。反応物を１．５時間撹拌し、０．５時間撹拌しながらメタノール（３０ｍＬ）を添加することによってクエンチした。混合物を回転蒸発器によって７０℃で濃縮し、酢酸エチル／メタノールに溶かし、飽和炭酸水素ナトリウムおよびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮して、化合物［１１］をオフホワイト色の固体（０．９ｇ）として収率９０％で得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ＋）３０１。
【０１０２】
ステップ３：ｔｅｒｔ−ブタノール（１０ｍｌ）中の［１１］（０．９ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の溶液に、無水炭酸ナトリウム（０．５０９ｇ、４．８ｍｍｏｌ）および水（１ｍｌ）を添加し、反応混合物を還流させた。水（１４ｍｌ）中の過ヨウ素酸ナトリウム（５．３ｇ、２４．９ｍｍｏｌ）および過マンガン酸カリウム（６６ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）の溶液を還流反応混合物に滴下添加し、還流をさらに３時間維持した。こうして形成した沈澱物を濾過し、水で洗浄した。濾液を５Ｍ  ＨＣｌで酸性化し、ジクロロメタンで抽出した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濾液を蒸発させた。粗製の生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ：ＤＣＭ  ３：１）によって精製して、化合物［１２］を黄色の固体（３２０ｍｇ）として収率３３％で得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ+）３２１。
【０１０３】
ステップ４：酢酸（４ｍｌ）中の化合物［１２］（３２０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の混合物に、酢酸アンモニウム（２３１ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を添加し、４時間還流させた。反応混合物を蒸発させて、酢酸を除去し、水で洗浄し、飽和炭酸水素塩溶液で中和し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を分離し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濾液を真空下で蒸発させて、粗製の生成物を得た。粗製の生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液として２％ＭｅＯＨ：ＤＣＭ）によって精製して、［１３］を薄黄色の固体（１３０ｍｇ）として収率４３％で得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ+）３０２。
【０１０４】
ステップ５：ベンゼン（１００ｍｌ）中の［１３］（１３０ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１３ｍｇ）、およびエチレングリコール（１．３ｍｌ）の混合物を、水を共沸除去しながら８時間還流させた。混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、回転蒸発器によって濃縮して、化合物［１４］を薄黄色の固体（１３０ｍｇ）として収率８７％で得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ+）３４６。
ステップ６：７：３のエタノール／ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の化合物［１４］（５０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）の溶液に、ホウ水素化ナトリウム（１１ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応物を氷浴内で８時間撹拌した。反応物を水（５ｍｌ）でクエンチし、固体が現れるまで、真空下で濃縮した。固体残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液として２％ＭｅＯＨ：ＤＣＭ）によって精製して、化合物［１００６］を白色の固体（４０ｍｇ、収率８０％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ+）３４８。
【０１０５】
ステップ７：アセトン（７ｍｌ）および水（３ｍｌ）中の化合物［１５］（４０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液を濃硫酸（０．１ｍｌ）で０℃で処理した。混合物を２時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、２〜３％ＭｅＯＨ：ＤＣＭで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物［１００５］を白色の固体（１７ｍｇ、収率５０％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ＋）３０４。
ステップ８：エタノール（１０ｍｌ）中の化合物［１４］（４０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）の溶液に、ホウ水素化ナトリウム（１０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応物を氷浴内で８時間撹拌した。反応物を水（５ｍｌ）でクエンチし、固体が現れるまで、真空下で濃縮した。固体残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液として２％ＭｅＯＨ：ＤＣＭ）によって精製して、化合物［１００８］を白色の固体（３０ｍｇ、収率７５％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ+＋１）３０６。
【０１０６】
ステップ９：無水ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の化合物［１４］（５０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＭｅＬｉ（０．０６ｍｌ、０．１８ｍｍｏｌ）を０℃で滴下添加し、６時間室温にした。反応混合物を塩化アンモニウムの飽和溶液でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濾液を蒸発させた。粗製の残渣を、２％〜３％ＭｅＯＨ：ＤＣＭで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物［１００６］を薄黄色の固体（４０ｍｇ、収率７６％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ＋）３６２
ステップ１０：アセトン（７ｍｌ）および水（３ｍｌ）中の化合物［１００６］（４０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液を濃硫酸（０．１ｍｌ）で０℃で処理した。混合物を２時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、２％〜３％ＭｅＯＨ：ＤＣＭで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物［１００７］を薄黄色の固体（１８ｍｇ、収率５１％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ＋）３１８。
【０１０７】
（例７ｂ）
本発明の化合物の調製
【化１８】
0006781148.tif 000028
【０１０８】
ステップ１：ｔｅｒｔ−ブタノール（３０ｍｌ）中の［１６］（３ｇ、９．０ｍｍｏｌ）の溶液に、無水炭酸ナトリウム（１．６５ｇ、２８．０９ｍｍｏｌ）および水（３ｍｌ）を添加し、反応混合物を還流させた。水（３０ｍｌ）中の過ヨウ素酸ナトリウム（１７．１、５０．０ｍｍｏｌ）および過マンガン酸カリウム（ｐｏｔａｓｓｉｕｍ  ｐｅｒｍａｇｎａｔｅ）（０．２１ｇ、４．２ｍｍｏｌ）の溶液を、還流反応混合物に滴下添加した。反応マスをさらに３時間還流させた。沈澱物を濾過し、水で洗浄し、濾液を５Ｍ  ＨＣｌで酸性化し、ジクロロメタンで抽出した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濾液を蒸発させた。粗製の生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ：ＤＣＭ  ３：１）によって精製して、化合物［１７］を黄色の固体（１．８ｇ）として収率５６％で得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３４９。
【０１０９】
ステップ２：酢酸（５ｍｌ）中の化合物［１７］（１．８ｍｇ、５．１７ｍｍｏｌ）の混合物に、酢酸アンモニウム（１．１９ｇ、１５．５ｍｍｏｌ）を添加し、１３０℃で４時間還流させた。反応混合物を蒸発させて、酢酸を除去し、水で洗浄し、飽和で中和し、ジクロロメタンで抽出した。有機ポーションをＮａ2ＳＯ4で脱水し、濾過し、濾液を真空下で蒸発させた。粗製の生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液として２％ＭｅＯＨ：ＤＣＭ）によって精製して、化合物［１８］を薄黄色の固体（１．３ｇ）として収率７６％で得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３３０。
【０１１０】
ステップ３：ベンゼン（２５０ｍｌ）中の化合物［１８］（０．３００ｇ、０．９１ｍｍｏｌ）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１３ｍｇ）、およびエチレングリコール（２．５ｍｌ）の混合物を、水を共沸除去させながら８時間還流させた。混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、真空下で濃縮して、化合物［１９］を薄黄色の固体（０．３３６ｇ）として収率９９％で得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３７４。
【０１１１】
ステップ４：無水ＴＨＦ（１００ｍｌ）中の化合物［１９］（０．１ｇ、０．２６８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＭｅＭｇＢｒ（０．１３４ｍｌ、０．４０ｍｍｏｌ）を０℃で滴下添加し、６時間室温にした。反応混合物を塩化アンモニウムの飽和溶液でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濾液を蒸発させた。粗製の残渣を、２〜３％ＭｅＯＨ：ＤＣＭで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物［１０２６］を薄黄色の固体（０．５０ｇ、収率４８％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ+）３９０
【０１１２】
ステップ５：アセトン（１０ｍｌ）中の化合物［１０２６］（０．０５ｇ、０．１２８ｍｍｏｌ）の溶液を濃硫酸（０．０５ｍｌ）で０℃で処理した。混合物を２時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、２〜３％ＭｅＯＨ：ＤＣＭで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物［１００８］を薄黄色の固体（２０ｍｇ、収率４５％）として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ+）３４６。
ステップ６：化合物［１０２５］を、例７ａのステップ６において上述した手順と同じ手順を使用して合成した。収率８０％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３７６。
ステップ７：化合物［１０３７］を、例７ｂのステップ５において上述した手順と同じ手順を使用して合成した。収率７０％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３３２。
ステップ８：化合物［１０３８］を、例７ｂのステップ４において上述した手順と同じ手順を使用して合成した。収率７５％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３４８。
【０１１３】
（例７ｃ）
本発明の化合物の調製
【化１９】
0006781148.tif 000029
ステップ−１：ＥｔＯＨ（１０ｍｌ）中の化合物［１３］（０．４ｇｍ、１．３２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＮａＢＨ4（０．０５ｇｍ、１．３２ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。反応物をさらに１時間撹拌し、反応の進行をＴＬＣによってモニターした。反応の完了後に、アセトン１０ｍｌを添加し、続いて、水（２０ｍｌ）を添加した。有機層を酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、蒸発させて、粗製の化合物［７０］（収率９０％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３０４。
【０１１４】
ステップ−２：化合物［７０］（０．０６５ｍｇ、０．１６５）をＤＣＭに溶かし、続いて、ＤＡＳＴ（０．０４ｍｇ、０．２４７）を添加し、１時間撹拌した。反応をＴＬＣによってモニターし、完了後に水で希釈した。有機層を酢酸エチルで抽出し、硫酸ナトリウムで脱水し、続いて、減圧下で蒸発させて、粗製の化合物［７１］（収率７５％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３０６。
【０１１５】
ステップ−３：ＥｔＯＨ（１０ｍｌ）中の化合物［７１］（０．５ｇｍ、１．６５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＢＨ４（０．３１ｇｍ、８．２７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を４０℃で１８時間加熱した。反応をＴＬＣによってモニターし、アセトン１０ｍｌでクエンチし、続いて、水で希釈した。有機層を酢酸エチルで抽出し、硫酸ナトリウムで脱水し、続いて、蒸発させて、粗製の化合物［１０２０］を白色の固体（収率８０％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３０８
【０１１６】
ステップ：４  化合物［１０１９］を、例７ｃのステップ３において上述した手順と同じ手順を使用して高温で合成した。収率８０％ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３０６
ステップ：−５  化合物［１０２３］（５０ｍｇ）をＥｔＯＨに溶かし、Ｐｄ／Ｃ（５ｍｇ）を添加した。反応物を水素圧下で３時間、完了するまで撹拌した。反応の進行をＴＬＣでモニターした。完了後に、反応マスをセライト層上で濾過し、過剰の溶媒を減圧下で蒸発させて、化合物１０２３（収率８０％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３０８
ステップ６：ＴＨＦ中の化合物［１０２３］（０．２ｇｍ、０．６５１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬＡＨ（８５ｍｇ、２．２８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１２時間撹拌した。反応の進行をＴＬＣによってモニターした。反応物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機層をＮａＳＯ４で脱水し、蒸発させて、化合物［１０２３−１’］を得た。収率８５％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）２９４
【０１１７】
（例７ｄ）
本発明の化合物の調製
【化２０】
0006781148.tif 000030
ステップ：−１  ＤＭＦ（２ｍｌ）中の化合物［１３］（０．１ｇｍ、０．３３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨ（０．０１ｇｍ、０．３３ｍｍ）を０℃で添加した。反応混合物を２０分間、同じ温度で撹拌し、続いて、ＭｅＩ（０．０５ｍｌ、０．３３ｍｍｏｌ）を添加した。反応マスをさらに２〜３時間室温で撹拌し、反応の進行をＴＬＣによってモニターした。完了後に、反応物を水でクエンチし、酢酸エチル（１００×２）で抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水し、真空下で蒸発させて、化合物［７４］（収率９０％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３１６。
【０１１８】
ステップ２：化合物［１０２２］を、例２ｂにおいて上述した手順と同じ手順を使用して合成した。収率８０％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３２０。
ステップ３：化合物［１３］（０．５ｇ、１．６５ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ：水（２０ｍＬ）に入れた。この溶液に、塩酸ヒドロキシルアミン（０．２４ｇ、３．４６ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、酢酸ナトリウム（０．２９ｇ、３．６３）を添加した。その混合物を６０℃で２時間加熱した。溶媒を蒸発させ、粗製マスを水（５０ｍｌ）に入れ、酢酸エチル（３×１００ｍｌ）で抽出した。有機層を分離し、無水Ｎａ2ＳＯ4で脱水し、濾過し、濃縮して、化合物をオフホワイト色の固体（０．２ｇ、９５％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３１７。
【０１１９】
ステップ４：化合物１０２１を、例７ｃのステップ４において上述した手順と同じ手順を使用して合成した。収率８０％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３１９。
ステップ−５：化合物１０２１（０．２ｇ、０．６２７ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（５０ｍｌ）に入れた。Ｐｄ／Ｃ（０．０３０ｇ）を添加し、反応物を室温で、Ｈ２ａｔｍ（６０ｐｓｉ、Ｐａｒｒシェーカー）下で撹拌した。完了後に、過剰の溶媒を濾過し、濃縮して、化合物［１０２４］を薄茶色の固体（０．１７ｇ、８８％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３０７。
【０１２０】
（例７ｅ）
本発明の化合物の調製
【化２１】
0006781148.tif 000031
ステップ１：化合物［２２］を、上記例６においてと同じ手順で合成した；収率６９％、ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ−１）３４９。
ステップ２：化合物［１０１０］を、例６においてと同じ手順で合成した；収率３１％、ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３３４。
ステップ４：化合物［１０２７］を、例７ｃのステップ４において上述した手順と同じ手順を使用して合成した。収率７６％；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３３４。
例７ａ、７ｂおよび７ｃに基づき合成されるこのシリーズのいくつかの例示される例には、１００５、１００８、１０１７、１０１８、１０２０〜１０２３、１０２６、１０６４、１０６５が含まれる。
【０１２１】
（例８）
本発明の化合物の調製
【化２２】
0006781148.tif 000032
ステップ１：化合物［２２］を上記例６においてと同じ手順で合成した；収率６９％、ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ−１）３５１。
【０１２２】
ステップ２：化合物［１０１０］を例６においてと同じ手順で合成した；収率３１％、ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３３２。
【０１２３】
（例９）
本発明の化合物の調製
【化２３】
0006781148.tif 000033
ステップ１：水（４ｍＬ）中の三酸化クロム（３．３ｇ、３３．３ｍｍｏｌ）の溶液を、酢酸（３００ｍｌ）中の［１０４０］（１０ｇ、３０．３ｍｍｏｌ）の溶液に滴下添加した。反応物を１．５時間撹拌し、メタノール（３０ｍＬ）の添加によってクエンチし、０．５時間撹拌した。混合物を回転蒸発器によって７０℃で濃縮し、酢酸エチル／メタノール中に溶かし、飽和炭酸水素ナトリウムおよびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮して、１７−アセチル−１０，１３−ジメチル−１，６，７，８，９，１０，１２，１３，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−２Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１１−ジオンをオフホワイト色の固体（９．０ｇ）として得た。
【０１２４】
ステップ２
【化２４】
0006781148.tif 000034
酢酸エチル（１０ｍｌ）中の７０％ギ酸（１０ｕｌ）の溶液を、酢酸エチル（３０ｍｌ）中の無水酢酸（４．８ｍＬ）の溶液に添加し、最終体積を５０ｍｌにする。［４１］（５００ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を７分間撹拌し、次いで、飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、回転蒸発器によって７０℃で濃縮した。得られた油状物をメタノール（１０ｍｌ）に溶かし、ピリジン（１ｍｌ）で処理し、回転蒸発器によって濃縮して油状物にし、これを酢酸エチルに溶かし、１０％クエン酸、飽和炭酸水素ナトリウム、およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮して、アセタートジエンを油状物として得、これは、放置すると固化した。ベンゼン（２５ｍｌ）中のトルエンスルホン酸水和物（１１０ｍｇ）およびエチレングリコール（２ｍｌ）の混合物を、水を除去しながら０．５時間還流させた。ベンゼン（１２ｍｌ）中のアセタートジエンの溶液を添加し、反応物を１．５時間還流させた。混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウムおよびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。粗製の生成物を、２０％〜３０％酢酸エチル／ヘキサンで溶離するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、酢酸［８５］を白色の結晶質固体（４２０ｍｇ）として得た。収率６６％、およびＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）４１５。
【０１２５】
ステップ３
【化２５】
0006781148.tif 000035
７：３のエタノール／ＴＨＦ（１２５ｍｌ）中の酢酸［８５］（１．５９ｇ）の冷やした溶液を、８０％エタノール（５０ｍｌ）中のホウ水素化ナトリウム（２．５ｇ）の氷冷懸濁液に滴下添加した。反応物を氷浴内で８時間撹拌し、次いで、終夜、氷浴をゆっくり溶かした。反応物を１０％酢酸でクエンチし、固体が形成するまで、回転蒸発器によって濃縮した。固体を濾過し、水で洗浄し、一定重量まで乾燥して、［８６］を白色の固体（７９７ｍｇ）として得る。第２の収量を、母液をさらに濃縮することによって得る（２２８ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ−ＡＰＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ+）３７７．８。
【０１２６】
ステップ４：
【化２６】
0006781148.tif 000036
［８６］（５７０ｍｇ）およびｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（６０ｍｇ）を９５％アセトン（４０ｍｌ）に溶かし、終夜室温で撹拌した。固体が現れるまで、反応混合物を回転蒸発器によって濃縮し、濾過し、水で洗浄し、一定重量まで乾燥して、白色の固体として［１０３９］（３１９ｍｇ）を得た。母液を酢酸エチルで希釈し、クエン酸およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮して、第２の収量を白色の固体（１４０ｍｇ）として得た。収率９１％、ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）３５３。
【０１２７】
（例１０）
本発明の化合物の調製
【化２７】
0006781148.tif 000037
【０１２８】
ステップ１：水（４ｍＬ）中の三酸化クロム（３．３ｇ、３３．３ｍｍｏｌ）の溶液を、酢酸（３００ｍｌ）中の［９０］（１０ｇ、３０．３ｍｍｏｌ）の溶液に滴下添加した。反応物を１．５時間撹拌し、メタノール（３０ｍＬ）を添加することによってクエンチし、０．５時間撹拌した。混合物を回転蒸発器によって７０℃で濃縮し、酢酸エチル／メタノールに溶かし、飽和炭酸水素ナトリウムおよびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮して、［４１］をオフホワイト色の固体（９．０ｇ）として得た。
【０１２９】
ステップ２：ベンゼン（２５ｍｌ）中の［４１］（４００ｍｇ）、トルエンスルホン酸水和物（１１０ｍｇ）およびエチレングリコール（２ｍｌ）の混合物を、水を除去しながら０．５時間還流させた。ベンゼン（１２ｍｌ）中のアセタートジエンの溶液を添加し、反応物を１．５時間還流させた。混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウムおよびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。粗製の生成物を、２０％〜３０％酢酸エチル／ヘキサンで溶離するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、純粋な生成物［９１］を白色の結晶質固体（４２０ｍｇ）として得た。Ｍ／Ｚ  ４１７
【０１３０】
ステップ３：７：３のエタノール（ｅｔｈａｎｌ）／ＴＨＦ（１２５ｍｌ）中の［９１］（０．５９ｇ）の冷やした溶液を、８０％エタノール（５０ｍｌ）中のホウ水素化ナトリウム（２．５ｇ）の氷冷懸濁液に滴下添加した。反応物を氷浴内で８時間撹拌し、次いで、終夜、氷浴をゆっくり溶かした。反応物を１０％酢酸でクエンチし、固体が形成するまで、回転蒸発器によって濃縮した。固体を濾過し、水で洗浄し、一定重量まで乾燥して、純粋な［９２］を白色の固体（４９７ｍｇ）として得る。ＭＳ（ＥＳ−ＡＰＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ+）４１９。
【０１３１】
ステップ４：アセトン（１０ｍｌ）中の化合物［９２］（０．２５ｇ）の溶液を濃硫酸（０．０５ｍｌ）で０℃で処理した。混合物を２時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、２〜３％ＭｅＯＨ：ＤＣＭで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、［１０４０］を薄黄色の固体（０．１８０ｍｇ）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ+）３３１
【０１３２】
（例１１）
本発明の化合物の生物学的試験。
本発明の化合物を、ＡＭＰキナーゼに対するそれらの活性について試験した。培養細胞におけるＡＭＰキナーゼリン酸化状態の定量的蛍光免疫酵素アッセイによって、ＡＭＰキナーゼに対する活性を評価した。５−ＡＭＰ活性化プロテインキナーゼ（ＡＭＰキナーゼ）は、細胞内エネルギーバランスの重要なセンサーである。ＡＭＰキナーゼは、筋肉収縮、飢餓、または低酸素などのいくつかの因子に起因し得るＡＭＰ／ＡＴＰ比の上昇に応じて活性化する。ＡＭＰキナーゼは、α−（６３ｋＤａ）、β−（３８ｋＤａ）およびγ−（３８ｋＤａ）サブユニットからなるヘテロ三量体タンパク質複合体である。各サブユニットについて、アイソフォームが同定されており（α１、α２、β１、β２、γ１、γ２、γ３）、それらは、理論的には、１２種の異なるタンパク質の形成を可能にする。α−サブユニットは、セリン／トレオニンキナーゼドメインを含有し、調節サブユニットは、ＡＭＰおよびＡＴＰ（γ−サブユニット）のための、かつグリコーゲン（β−サブユニット）のための結合部位を含有する。ＡＭＰキナーゼは、触媒ドメイン内のＴｈｒ−１７２でのリン酸化によって活性化する。ＡＭＰの結合は、基礎レベルと比較して、ＡＭＰキナーゼ活性の２〜５倍の上昇をもたらす。γ−サブユニットへのＡＭＰの結合は、キナーゼのアロステリック活性化を引き起こし、かつＴｈｒ−１７２の脱リン酸化からＡＭＰキナーゼを保護するキナーゼドメインにおける配座異性変化を誘発する。
ＢｉｏＡｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓの細胞ベースのＥＬＩＳＡは、全細胞においてリン酸化ＡＭＰキナーゼを測定し、そのシグナルを全タンパク質含分に対して正規化する。抗体は、両方のα−サブユニットを認識し、したがって、すべての組織（ヒト、マウス、ラット）からの細胞について使用することができる。この単純で効率的なアッセイは、細胞溶解産物を調製する必要を除去し、短期および長期アッセイにおいてＡＭＰキナーゼ調節を試験するために使用することができる。このアッセイでは、９６ウェルプレート内で成長させた細胞を固定し、そのウェル内で透過する。蛍光ＥＬＩＳＡを、続いて、各ウェルでの全タンパク質測定を使用して、ＡＭＰキナーゼリン酸化（ｐＡＭＰＫ）を測定する。
【０１３３】
いくつかの本発明の化合物の例を１０ｎＭで試験し、それらの化合物のＡＭＰキナーゼ活性化を表２に列挙する：
【表２】
0006781148.tif 000038
【０１３４】
表２から、本発明の化合物はＡＭＰキナーゼを活性化させることが可能であることが分かり得る。
【０１３５】
（例１２）
３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）アッセイにおける［１０３９］および［１０４０］の生物学的活性。
６，０００ＢＣＡＥＣを、透明９６ウェル平底プレートに１ウェル当たり１００μｌで播種した。飢餓の後に、細胞を対応する化合物で４８時間処理した。化合物を１２および２４時間ごとに変えた（１ウェル当たり新鮮な培地１００μｌと共に）。処理の後に、培地をプレートから吸引し、ＨＢＳＳ１００μｌで１回洗浄し、引き続いて、１ウェル当たりフェノールレッド非含有ＤＭＥＭ中の０．５ｍｇ／ｍｌのＭＴＴ１００μｌを添加した。プレートを１時間３７℃でインキュベートし、これに、ＭＴＴ溶液の吸引、ホルマザン結晶を溶解させるための、１ウェル当たりＤＭＳＯ１００μｌの添加、および３７℃で１５分間のインキュベーションを続けた。６７０ｎｍでの背景差分を使用して、５４０ｎｍで測定される吸光度によって、ミトコンドリア機能を定量化した。ＭＴＴ吸光度測定の後に、培地を除去し、多少の変更を伴うが他で記載されたとおりに（Oliver et al, 1989）、各ウェルにおいて細胞を定量化した。簡単には、１０％ホルモル生理食塩水１００μｌを各ウェルに添加し、４℃で２４時間インキュベートした。次に、ホルモル溶液をウェルから除去し、０．０１Ｍホウ酸緩衝液中の濾過した０．１％（ｗ／ｖ）メチレンブルー１００μｌ（ｐＨ８．５）を各ウェルに添加した。３０分後に、過剰の染料を除去し、０．０１Ｍホウ酸緩衝液（ｐＨ８．５）で３回洗浄した。細胞上の染色色素を１：１（ｖ／ｖ）のエタノールおよび０．１Ｍ−ＨＣｌ１００μｌを各ウェルに添加することによって溶離した。次いで、プレートを穏やかに振盪し、ベンチロッカー下で１５分間インキュベートした。吸光度を６５０ｎｍで測定した。ＭＴＴ／メチレンブルー比を使用して、ミトコンドリア機能を定量化した。Oliver MH, Harrison NK, Bishop JE, Cole PJ, Lauren GJ. A rapid and convenient assay for counting cells cultured in microwell plates: application for assessment of growth factors. J Cell Sci. 1989,3:513-8。
【０１３６】
スロットブロット法。処理の後に、１２ウェルプレート内で成長させたウシ大動脈内皮細胞を、０．１５ｍｍ  ＰＭＳＦ、５ｍｍ  Ｎａ3ＶＯ4および３ｍｍ  ＮａＦを補充したプロテアーゼおよびホスファターゼ阻害薬カクテル（Ｐ２７１４およびＰ２８５０、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を含む溶解緩衝液５０μｌ（１％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、２０ｍｍトリス、１４０ｍｍ  ＮａＣｌ、２ｍｍ  ＥＤＴＡ、および０．１％ＳＤＳ）中に掻き落とす。ホモジネートをインスリンシリンジに５回通し、３０分間４℃で音波処理し、１０分間遠心（１２，０００ｇ）した。Ｂｒａｄｆｏｒｄ法を使用して、全タンパク質含分を上清中で測定する。合計１０〜２０μｇのタンパク質を組み立て済みのスロットブロット装置に装填して、真空下でポリビニル膜上に移し、ブロッキング溶液（ＴＢＳ中の５％脱脂粉乳および０．１％Ｔｗｅｅｎ２０（ＴＢＳ−Ｔ））中で１時間インキュベートし、続いて、一次抗体（酸化的リン酸化複合体（ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ  ｃｏｍｐｌｅｘ）ＩまたはＧＡＰＤＨ）と共に４℃で終夜インキュベーションする。一次抗体をＴＢＳ−Ｔおよび５％脱脂粉乳中で希釈する。膜をＴＢＳ−Ｔ中で洗浄し（３×５分間）、ブロッキング溶液中で希釈した、ＨＲＰ−コンジュゲートした二次抗体の存在下、室温で１時間インキュベートする。膜を再びＴＢＳ−Ｔ中で３回洗浄し、ＥＣＬ  Ｐｌｕｓ検出キット（Ａｍｅｒｓｈａｍ−ＧＥ）を使用して、イムノブロットを展開する。ＩｍａｇｅＪソフトウェア（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｉｈ．ｇｏｖ）を使用して、バンド強度をデジタルで定量化する。膜のストリッピングおよびリプロービングの後にＧＡＰＤＨを使用して、複合体Ｉ値を装填差について正規化する。得られるすべてのウェスタンブロットイメージが、Ｘ線フィルムの線形範囲内にあり、計算機援用デンシトメトリー確度を保証するであろう。結果を表３に示す。
【０１３７】
【表３】
0006781148.tif 000039
【０１３８】
（例１３）
化合物［１０３９］および［１０４０］のＡＭＰキナーゼ活性化
細胞ベースのＥＬＩＳＡを使用して、これらの化合物のＡＭＰキナーゼ活性化能力を評価した。肝細胞癌（Ｈｅｐ  Ｇ２）肝臓細胞を、２５ｍＭ  ＤＭＥＭ＋１０％ウシ胎児血清を含有するＴ７５培養フラスコ中で維持した。細胞を、培地（ＤＭＥＭ＋１０％ウシ胎児血清）を含有するＴ７５培養フラスコ中で維持した。７０〜８０％の集密度に達したら、細胞を、９６ウェルプレートに１ウェル当たり４０，０００細胞の密度で、２５ｍＭ  ＤＭＥＭ＋１０％ＦＣＳ媒体中で播種した。次いで、プレートを３７℃で５％ＣＯ2と共に２４時間インキュベートした。様々な濃度の薬物をＤＭＳＯ中で調製し、培地を用いて必要な濃度に希釈し、３７℃で５％ＣＯ2と共に、エピカテキン類似体および１１−ＢＨＰ類似体でそれぞれ３０分間、および１時間インキュベートした。メトホルミンを陽性対照として使用した。細胞を４％ホルムアルデヒドで３０分間室温で固定し、０．１％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００を含有するＰＢＳで３回洗浄した。内在性ペルオキシダーゼをＰＢＳ−Ｔ中の１％Ｈ2Ｏ2（０．１％  Ｔｗｅｅｎ  ２０）で３０分間クエンチし、ＰＢＳ−Ｔ中で３回洗浄した。細胞をＰＢＳ−Ｔ中の１％ＢＳＡで１時間ブロックした。細胞を１：１０００希釈一次抗体（Ｐｈｏｓｐｈｏ−ＡＭＰＫα（Ｔｈｒ１７２）ウサギｍＡｂ、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇと共に、５％ＢＳＡを含有するＰＢＳ−Ｔ中、４℃で終夜インキュベートした。次いで、細胞をＰＢＳ−Ｔで３回、５分間洗浄し、１：１０００希釈二次抗体（抗ウサギＩｇＧ、ＨＲＰ結合抗体、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）と共に、１％ＢＳＡを含むＰＢＳ−Ｔ中、１時間室温でインキュベートした。細胞をＰＢＳ−Ｔで３回、５分間洗浄した。細胞をＴＭＢ基質溶液１００μｌと共に３０分間インキュベートし、反応物を２Ｎ  Ｈ2ＳＯ4１００μｌで停止させた。次いで、ＥＬＩＳＡプレートリーダーを使用して４５０ｎＭでプレートを読取り、吸光度を記録した。ＤＭＳＯ対照を１００％として使用して、活性％を計算した。結果を表４に示す。
【０１３９】
【表４】
0006781148.tif 000040
【０１４０】
（例１４）
ヒト冠動脈内皮細胞ミトコンドリアの酸化的リン酸化複合体Ｉタンパク質レベルに対する［１０３９］の効果。
細胞を、ウシ胎児血清（１０％）を補充されたダルベッコ変法イーグル培地中で集密度約９０％まで成長させた。細胞をビヒクル（水）または増加用量の作用物質（水中に溶解）のいずれかで、合計４８時間処理した（処理を、２４時間時点で繰り返した）。実験の終了時に、細胞をウェスタンブロットサンプル緩衝液中に溶解させた。固定量のタンパク質（２５マイクログラム）をポリアクリルアミドゲル上に装填し、１時間流して、タンパク質の電気泳動分離を可能にした。次いで、ゲルをポリビニル膜に移して、１ｒｙ抗体（抗ヒト複合体Ｉ）に曝露する前に、ブロッキング緩衝液と共にインキュベートした。室温での１時間のインキュベーションの後に、膜を洗浄し、次いで、２ｒｙ抗体に１時間曝露した。第２セットの洗浄の後に、膜を増強化学発光キット溶液と共にインキュベートし、続いて、Ｘ線フィルムに曝露した。得られたイメージを、化合物用量の関数としての複合体Ｉタンパク質レベルの定量的変化に使用した。装填差について正規化するために、膜をサブユニット６リボソームプロテイン（Ｓ６ＲＰ）と共に再インキュベートし（上記のとおり）、Ｘ線フィルムに曝露した。複合体Ｉレベルでの値の変化を、Ｓ６ＲＰレベルの差に対して正規化する。すべてのデータを、ビヒクルのみ（＝１００％）で処理した細胞について記述された値に対して正規化する。結果を図１ａに示す。その図から、化合物［１０３９］がミトコンドリア生合成を引き起こすことが明らかに分かり得る。
【０１４１】
遺伝子のｍＲＮＡレベルに対するＯＨＰ（［１０３９］の別の記述法）の効果は、ミトコンドリア生合成において、ＰＰＡＲＧＣ１ａ−ＰＧＣ１ａ−、ＴＦＡＭ、ならびにシトクロムオキシダーゼのサブユニット１および２を必要とした。ＨｅｐＧ２細胞を漸増量のＯＨＰ（ｕＭで）に３時間曝露し、次いで、ｍＲＮＡ単離のために収集した（ＲＮｅａｓｙキット、ＱＩＡＧＥＮ）。ｍＲＮＡをｃＤＮＡに変換し（ｉＳｃｒｉｐｔ、Ｂｉｏ−Ｒａｄ）、特異的プライマーを利用し、かつハウスキーピング遺伝子としてのアクチンレベルを使用して、リアルタイムＰＣＲによって、遺伝子発現量を分析した。データをｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ４でプロットし、すべてのコラム間のａｄ  ｈｏｃ  Ｔｕｋｅｙ比較を伴うＡＮＯＶＡによって分析した（＊Ｐ＜０．０５および＊＊Ｐ＜０．０１）。結果を図１ｂで示す。その図から、化合物［１０３９］は、３時間の曝露で早くも、ミトコンドリア転写因子を発現することが明らかに分かり得る。
【０１４２】
（例１５）
［１０３９］によるＡＭＰキナーゼの活性化
ＨｅｐＧ２細胞におけるＡＭＰキナーゼ活性化に対するＯＨＰの効果。ＨｅｐＧ２細胞を、漸増量のＯＨＰ（ｕＭで）に１時間曝露し、次いで、ホスファターゼ阻害薬（Ｐｈｏｓｓｔｏｐ、Ｒｏｃｈｅ）を含有する、ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００をベースとする溶解緩衝液を使用するタンパク質単離のために収集した。タンパク質レベルを定量化（ＢＣＡアッセイ）し、全ＡＭＰＫ、リン酸化（活性）ＡＭＰＫ、全およびリン酸化アセチルＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ、ＡＭＰＫ標的遺伝子）ならびにアクチン装填対照を検出するために、タンパク質４０ｕｇを装填した。（ＲＮｅａｓｙ  ｋｉｔ、ＱＩＡＧＥＮ）。ＡＰＰＬ１核転座に対するＯＨＰ効果。ＨｅｐＧ２細胞を、漸増量のＯＨＰ（ｕＭで）に１時間曝露し、核およびサイトゾル画分を単離し（Ｂｉｏｖｉｓｉｏｎ核／サイトゾル画分キット）、全タンパク質を定量化した（ＢＣＡアッセイ）。全ＡＰＰＬ１、リン酸化（活性）ＡＭＰＫ、チューブリン（サイトゾル画分のマーカー）およびラミン（核フラクションのマーカー）を検出するために、タンパク質４０ｕｇを装填した。結果を図２ａおよび２ｂに示す。その図から、［１０３９］は、曝露の１時間後でもＡＭＰキナーゼを活性化し、ＡＰＰＬ１を活性化し、核へのその転座を引き起こすことが分かり得る。
【０１４３】
（例１６）
ミトコンドリアにおける［１０３９］の活性
遺伝子のｍＲＮＡレベルに対するＯＨＰの効果は、ミトコンドリア生合成において、Ｎｒｆ１およびＴＦＢ２Ｍを必要とした。ＨｅｐＧ２細胞を漸増量のＯＨＰ（ｕＭで）に３時間曝露し、次いで、ｍＲＮＡ単離のために収集した（ＲＮｅａｓｙキット、ＱＩＡＧＥＮ）。ｍＲＮＡをｃＤＮＡに変換し（ｉＳｃｒｉｐｔ、Ｂｉｏ−Ｒａｄ）、特異的プライマーを利用し、かつハウスキーピング遺伝子としてのアクチンレベルを使用して、リアルタイムＰＣＲによって、遺伝子発現量を分析した。ＨｅｐＧ２細胞を漸増量のＯＨＰ（ｕＭで）に２４時間曝露し、次いで、ＤＮＡ単離（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｗｉｚａｒｄ  ＤＮＡ単離）のために収集した。得られたＤＮＡの量を定量化し、ミトコンドリアＤＮＡによって分類されるミトコンドリア遺伝子（シトクロムＣ）のコピー数を、核ＤＮＡによって分類されるミトコンドリア遺伝子（ピルビン酸デヒドロゲナーゼ）のコピー数に対して測定することによって、ミトコンドリアＤＮＡ（ミトコンドリア量のマーカー）の分析を決定した。データをｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ４でプロットし、すべてのコラム間のａｄ  ｈｏｃ  Ｔｕｋｅｙ比較を伴うＡＮＯＶＡによって分析した（＊Ｐ＜０．０５および＊＊Ｐ＜０．０１）。結果を図３ａおよび３ｂで示す。その結果から、化合物［１０３９］は、ミトコンドリア転写因子の発現を刺激し、かつミトコンドリアのＤＮＡ含分を増大させることが分かり得る。
【０１４４】
（例１７）
ミトコンドリア酸化ストレスに対する［１０３９］の効果
ＨｅｐＧ２細胞をビヒクルまたはＯＨＰ（１０ｎＭに曝露し、ミトソックス測定キット（ｍｉｔｏｓｏｘ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｋｉｔ）（分子プローブ）を使用して、ミトコンドリア超酸化物産生を共焦点顕微鏡によって測定し、強度データを、ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ４でプロットし、すべてのコラム間のａｄ  ｈｏｃ  Ｔｕｋｅｙ比較を伴うＡＮＯＶＡによって分析した。図４を参照されたい。図４から、［１０３９］は、ミトコンドリアにおける超酸化物の生成を低減することが明らかである。
【０１４５】
（例１８）
肝グルコース新生および脂肪酸化に対する［１０３９］の効果。
ＨｅｐＧ２細胞を血清非含有培地に３時間曝露し、次いで、漸増濃度のＯＨＰ（ｎＭで）の存在下でグルコース新生因子（ラクタートおよびピルバート、１０：１比）および刺激物質（ｃＡＭＰ）に曝露した。細胞内グルコース産生（新規グルコース新生のマーカー）、さらには、細胞内ベータ−ヒドロキシブチラートレベル（脂肪酸化のマーカー）およびトリグリセリド（脂肪酸化のための基質）を酵素によって測定した（バイオビジョングルコース測定キット（ｂｉｏｖｉｓｉｏｎ  ｇｌｕｃｏｓｅ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｋｉｔ））。データを、ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ４でプロットし、すべてのコラム間のａｄ  ｈｏｃ  Ｔｕｋｅｙ比較を伴うＡＮＯＶＡによって分析した（＊Ｐ＜０．０５および＊＊Ｐ＜０．０１）。結果を図５に示す。図５から、［１０３９］は肝グルコース新生を低減し、脂肪の酸化を刺激することが明らかに分かり得る。
【図１ａ】
0006781148.tif 000045
【図１ｂ】
0006781148.tif 000046
【図２ａ】
0006781148.tif 000047
【図２ｂ】
0006781148.tif 000048
【図３ａ】
0006781148.tif 000049
【図３ｂ】
0006781148.tif 000050
【図４】
0006781148.tif 000051
【図５】
0006781148.tif 000052