(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象における線維症を処置または予防するための医薬組成物であって、治療有効量の式４ｃ：
0006717825.tif 000080
式４ｃ
による構造を有する化合物またはその薬学的に許容され得る塩を含み、
式中：
Ａ１は、ＣＨ２であり；
Ａ２は存在していないか、またはＣＨ２であり；
Ｘ１は、１〜３０個の炭素原子を有するアルキルであり；
Ｘ２は、
0006717825.tif 000081
であり、式中：
Ｅは存在していないか、または１〜２４個の炭素原子を有するアルキル鎖であり；
Ｆは、水素であり；
Ｚは：
0006717825.tif 000082
であり、ここでＲｄは、Ｈまたはアルキルであり；
Ｙは、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、およびホスホリルセリンからなる群より選択され；
該線維症が肝線維症、皮膚線維症、または腎線維症である、医薬組成物。
【請求項２】
Ｘ１が、８〜３０個の炭素原子を有するアルキルである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
Ｘ１が、１０〜３０個の炭素原子を有するアルキルである、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
Ｅが、１〜１０個の炭素原子を有するアルキルである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
Ｅが、１〜４個の炭素原子を有するアルキルである、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
Ｙがホスホリルコリンである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記化合物が、１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシブチル）−グリセロ−３−ホスホコリンである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記化合物が、（Ｒ）−１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシブチル）−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記対象がヒトである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ＴＬＲ２、ＴＬＲ４またはＣＤ１４の活性が、対象の細胞内で阻害される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記化合物が、ＴＬＲ２とＴＬＲ４の活性を対象の細胞内で阻害する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記化合物が、ＴＬＲ４とＣＤ１４の活性を対象の細胞内で阻害する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記化合物が、ＴＬＲ２とＣＤ１４の活性を対象の細胞内で阻害する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記化合物が、ＴＬＲ２、ＴＬＲ４、およびＣＤ１４の活性を対象の細胞内で阻害する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記化合物が、単球の遊走を対象の細胞内で阻害する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記化合物が、単球からのＩＬ−６の分泌を対象の細胞内で阻害する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記化合物が、単球からのＩＬ−１２ｐ４０の分泌を対象の細胞内で阻害する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記線維症が肝線維症である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記線維症が腎線維症である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記腎線維症が巣状分節性糸球体硬化症である、請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記腎線維症が皮膚線維症である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記皮膚線維症がケロイド線維症である、請求項２１に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１４年１１月２６日に出願された米国特許仮出願第６２／０８５，０５１号の優先権の利益を主張する。その内容は、引用によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
発明の分野
本発明は、酸化脂質化合物およびこれを含む医薬組成物により線維症を処置または予防する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
線維症は、器官または組織内における過剰な線維性結合組織の形成である。線維症には、線維性組織の過剰な蓄積の病的状態ならびに治癒における結合組織の蓄積過程が包含される。線維症と瘢痕形成過程は、どちらも、結合組織に存在する刺激された細胞（例えば、線維芽細胞）、例えばコラーゲンおよびグリコサミノグリカンが関与しているという点で類似している。
【０００４】
線維症は、過度な細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の蓄積によって不可逆的な組織の損傷および不全または適正な器官機能の乱れに至る慢性疾患に応答した瘢痕形成過程とみなされ得る。線維症の病理生理学は一般的には、具体的な罹病器官または組織、例えば、肺、腎臓、肝臓、心臓および皮膚との関連において研究されている。代謝恒常性の低下および慢性的な軽度の炎症は線維症の病因の一因となり得る。線維形成は動的過程であり、以下の４つの局面で起こる：（ｉ）器官／組織の傷害による惹起；（ｉｉ）炎症およびエフェクター細胞の活性化；（ｉｉｉ）ＥＣＭの合成強化；ならびに（ｉｖ）終末器官不全への進行を伴うＥＣＭの蓄積。
【０００５】
線維症は、体内の多くの組織で起こり得る。例としては、肺線維症（肺）、特発性肺線維症（肺）、嚢胞性線維症（肺）、進行性塊状線維症（肺）、肝線維症、肝硬変（肝臓）、脂肪性肝炎（脂肪性肝疾患）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、心内膜心筋線維症（心臓）、心筋梗塞（心臓）、心房性線維症（心臓）、縦隔線維症（縦隔の軟部組織）、骨髄線維症（骨髄）、後腹膜線維症（後腹膜の軟部組織）、腎性全身性線維症（皮膚）、ケロイド（皮膚）、クローン病（腸）、強皮症／全身性硬化症（皮膚、肺）、関節線維症（膝、肩、他の関節）、ペイロニー病（陰茎）、デュピュイトラン拘縮（手、指）、癒着性関節包炎（肩）、腎線維症および巣状分節性糸球体硬化症（腎臓）が挙げられる。
【０００６】
インスリン抵抗性およびメタボリックシンドロームの主な合併症の１つは非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）であり、これは、脂肪肝から肝臓の炎症（ＮＡＳＨ）および肝線維症へと進行する。腸内フローラの過剰増殖および組成変化に付随する腸管バリアからの漏出により、細菌成分は、門脈から肝臓内に移動し、ここでＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）に遭遇すると考えられている。
【０００７】
ＴＬＲは、微生物の侵入に対する自然免疫応答のために必須の受容体ファミリーである。ＴＬＲは、その細胞内局在に基づいて２つのサブグループに大別することができる。形質膜発現ＴＬＲとしてはＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５およびＴＬＲ６が挙げられ、一方、細胞内ＴＬＲとしてはＴＬＲ３、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８およびＴＬＲ９が挙げられる。ＴＬＲとその対応するアゴニスト間の相互作用により、アダプター分子ＭｙＤ８８／ＴＲＩＦの動員ならびに下流のＭＡＰＫキナーゼおよびＮＦ−κＢのリン酸化を含む合図のカスケードが誘発される。このような事象は、炎症促進性サイトカイン、例えばＩＬ−１２／２３、ＩＬ−６およびＴＮＦ−αの分泌において最高度に達する。ＴＬＲ２は、細菌のトリアシル化リポペプチドを認識するＴＬＲ１とヘテロ二量体を、および細菌のジアシル化リポペプチドを認識するＴＬＲ６とヘテロ二量体を形成する。ＭＤ２とカップリングしているＴＬＲ４は、リポ多糖結合タンパク質（ＬＢＰ）および共受容体ＣＤ１４との複合体の状態で、グラム陰性菌由来のリポ多糖（ＬＰＳ）に結合する。
【０００８】
肝固有のクッパー細胞および肝星状細胞（ＨＳＣ）はＴＬＲ２（これは、グラム陰性菌およびマイコプラズマ由来のトリアシル化リポペプチドと、グラム陰性菌およびマイコプラズマ由来のジアシル化リポペプチドを認識する）と、ＴＬＲ４およびその共受容体ＣＤ１４（これらは、グラム陰性菌由来のリポ多糖（ＬＰＳ）を認識する）を発現している。また、ＴＬＲ２およびＴＬＲ４はどちらも、傷害された組織から放出される危険因子関連分子パターンにも結合し得る。このようなＴＬＲ２およびＴＬＲ４の複合体は、クッパー細胞および星状細胞による炎症促進性サイトカインの産生および線維形成性の応答を媒介する。前臨床試験により、非アルコール性脂肪性肝炎および肝線維症はＴＬＲ２およびＴＬＲ４欠損マウスにおいて阻害されることが示され、疾患病因におけるその役割が示された。ヒトでは、ＬＰＳ血漿レベルがＮＡＦＬＤ患者において高く、ＴＬＲ４およびＣＤ１４の遺伝子の改変が非アルコール性脂肪性肝炎および線維形成の発生リスクと関連している。
【０００９】
単球は、免疫機構において鍵となる役割因子であり、自然免疫および適応免疫、免疫監視機構ならびに粒子スカベンジャー機能において極めて重要な役割を有する。一方、単球のあるサブセットは「固有」であり、定常状態の監視機構、創傷治癒および炎症の消散を補助するために炎症刺激とは無関係に組織に動員され、ヒトの循環単球の絶対多数（８０〜９０％）は「炎症性」と分類されるものである。このような単球は炎症刺激を感知して血管内皮またはリンパ管内皮から末梢に速やかに遊走し得、そこでマクロファージおよび樹状細胞（ＤＣ）に分化し得、これらがさらなる細胞サブセット（例えば、Ｔｈ１−細胞）と共働して炎症を促進させる。宿主の防御において必要な役割を果たすが、それでもなお単球は、いくつかの炎症性疾患、例えばアテローム性動脈硬化、関節リウマチ（ＲＡ）および多発性硬化症（ＭＳ）の極めて重要な媒介因子であると同定された。慢性的に炎症状態の組織において不要な単球／マクロファージの蓄積を抑制することは治療的潜在性を有し、それに応じて、遊走阻害薬は、動物モデルおよび臨床試験において将来有望な抗炎症成果が示されている。
【００１０】
腎線維症（ｒｅｎａｌ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ、ｋｉｄｎｅｙ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ）は、腎臓傷害後の創傷治癒／瘢痕形成応答であり、これは、多くの慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）の形態で存在する。腎臓傷害後、固有線維芽細胞が種々の炎症促進性および線維症進行性の刺激によって活性化される。活性化された線維芽細胞（筋線維芽細胞とも称される）は過度のＥＣＭタンパク質（これは間質に蓄積される）を生成させ、したがって腎線維症の媒介因子とみなされている。腎線維症に至る一次外傷に関係なく、慢性炎症は、腎線維形成の前兆を示す過程のようである。高レベルの炎症マーカーがＣＫＤ発症の高リスクと関連していた。種々の炎症促進性サイトカインであるインターロイキン（ＩＬ）−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ケモカイン（Ｃ−Ｃモチーフ）リガンド２（ＣＣＬ２）、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）ならびに接着分子（細胞間接着分子−１および血管細胞接着分子−１）の誘導により、マクロファージおよびＴ細胞の循環系から間質への通り抜けが誘引され、それにより炎症状態がさらに増強された。証拠により、ＴＬＲおよびマクロファージは、腎線維症の病因と関連していることが示唆されている。
【００１１】
線維症は、深刻な罹病率ならびに患者の日常の機能、日常生活動作（ＡＤＬ）および生活の質に有害な効果を引き起こし得、予後不良をもたらし得る。例えば、特発性肺線維症（ＩＰＦ）は、悪化性および衰弱性の息切れを伴う慢性の難治性疾患である。ＩＰＦ患者は酸素依存性となり、診断後の平均生存期間中央値は３年生存率および５年生存率が２０％〜４０％である。したがって、線維症のための新しい治療薬の開発が必要とされている。
【発明の概要】
【００１２】
一部の実施形態では、本発明により、線維症（例えば、肝線維症、腎線維症、巣状分節性糸球体硬化症または本明細書に記載の任意の他の線維症）を処置または予防する方法であって、それを必要とする対象に治療有効量の式１：
0006717825.tif 000002
式１
による構造を有する化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、水和物もしくは溶媒和物を投与する段階を含む方法を提供し、
式中：
ｎは１〜６の整数であり、ここで、ｎが１のとき、Ｃｎ、Ｂｎ、ＲｎおよびＹは存在せず、Ｃ１はＲ’ｎに結合しており；
Ｂ１、Ｂ２、…Ｂｎ−１およびＢｎの各々は独立して、酸素、イオウ、窒素、リンおよびケイ素からなる群より選択され、ここで、前記窒素、リンおよびケイ素の各々は、アルキル、ハロ、シクロアルキル、アリール、ヒドロキシ、チオヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオアリールオキシ、チオアルコキシおよびオキソからなる群より選択される１つ以上の置換基により任意選択的に置換されており；
Ａ１、Ａ２、…Ａｎ−１およびＡｎの各々は独立して、ＣＲ”Ｒ’’’、Ｃ＝ＯおよびＣ＝Ｓからなる群より選択され、
Ｙは、以下：
水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビホスホネート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミン、ホスホグリセロール、ならびに、以下の一般式：
0006717825.tif 000003
を有する部分であって、式中：
Ｂ’およびＢ”の各々が独立して、イオウおよび酸素からなる群より選択され；
Ｄ’およびＤ”の各々が独立して、水素、アルキル、アミノ置換アルキル、シクロアルキル、ホスホネートおよびチオホスホネートからなる群より選択される、部分
からなる群より選択され；
Ｘ１、Ｘ２、…Ｘｎ−１の各々は独立して、一般式２：
0006717825.tif 000004
式２
を有する飽和または不飽和の炭化水素であり、式中：
ｍは１〜２６の整数であり；
Ｚは：
0006717825.tif 000005
からなる群より選択され、ここで、Ｗは、酸素およびイオウからなる群より選択され；
Ｘ１、Ｘ２、…Ｘｎ−１のうちの少なくとも１つは水素以外のＺを含み、
Ｒ１、Ｒ’１、Ｒ２、…Ｒｎ−１、Ｒｎ、Ｒ’ｎの各々、Ｒ”およびＲ’’’の各々ならびにＲａ、Ｒ’ａ、Ｒｂ、Ｒ’ｂ、…Ｒｍ−１、Ｒ’ｍ−１、ＲｍおよびＲ’ｍの各々は独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、ホスホネート、ホスフェート、ホスフィニル、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、アミド、カルボニル、チオカルボニル、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、Ｃ−カルバメート、Ｎ−カルバメート、Ｃ−チオカルボキシ、Ｓ−チオカルボキシおよびアミノからなる群より選択されるか、あるいは代わりに、Ｒ１、Ｒ’１、Ｒ２、…Ｒｎ−１、ＲｎおよびＲ’ｎのうちの少なくとも２つおよび／またはＲａ、Ｒ’ａ、Ｒｂ、Ｒ’ｂ、…Ｒｍ−１、Ｒ’ｍ−１、ＲｍおよびＲ’ｍのうちの少なくとも２つが少なくとも１つの４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成している。
【００１３】
一部の実施形態では、該化合物は、１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシブチル）−グリセロ−３−ホスホコリン（ＶＢ−２０１）である。一部の実施形態では、該化合物は、（Ｒ）−１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシブチル）−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンである。他の実施形態では、該化合物は、以下の構造：
0006717825.tif 000006
を有する。
【００１４】
他の実施形態では、該化合物は、以下の構造：
0006717825.tif 000007
を有する。
[本発明1001]
線維症を処置または予防する方法であって、それを必要とする対象に治療有効量の式1：
0006717825.tif 000008
式1
による構造を有する化合物を投与する段階を含み、
式中：
ｎは1〜6の整数であり、ここで、ｎが1のとき、Ｃｎ、Ｂｎ、ＲｎおよびＹは存在せず、Ｃ1はＲ’ｎに結合しており；
Ｂ1、Ｂ2、…Ｂｎ−1およびＢｎの各々は独立して、酸素、イオウ、窒素、リンおよびケイ素からなる群より選択され、ここで、前記窒素、リンおよびケイ素の各々は、水素、孤立電子対、アルキル、ハロ、シクロアルキル、アリール、ヒドロキシ、チオヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオアリールオキシ、チオアルコキシおよびオキソからなる群より選択される少なくとも1つの置換基により置換されており；
Ａ1、Ａ2、…Ａｎ−1およびＡｎの各々は独立して、ＣＲ”Ｒ’’’、Ｃ＝ＯおよびＣ＝Ｓからなる群より選択され、
Ｙは、以下：
水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−4−ホスフェート、ホスホイノシトール−4，5−ビホスホネート、ホスホイノシトール−4，5−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミン、ホスホグリセロール、ならびに、以下の一般式：
0006717825.tif 000009
を有する部分であって、式中：
Ｂ’およびＢ”の各々が独立して、イオウおよび酸素からなる群より選択され；
Ｄ’およびＤ”の各々が独立して、水素、アルキル、アミノ置換アルキル、シクロアルキル、ホスホネートおよびチオホスホネートからなる群より選択される、部分
からなる群より選択され；
Ｘ1、Ｘ2、…Ｘｎ−1の各々は独立して、一般式2：
0006717825.tif 000010
式2
を有する飽和または不飽和の炭化水素であり、式中：
ｍは1〜26の整数であり；
Ｚは：
0006717825.tif 000011
からなる群より選択され、ここで、Ｗは、酸素およびイオウからなる群より選択され；
Ｘ1、Ｘ2、…Ｘｎ−1のうちの少なくとも1つは水素以外のＺを含み、
Ｒ1、Ｒ’1、Ｒ2、…Ｒｎ−1、Ｒｎ、Ｒ’ｎの各々、Ｒ”およびＲ’’’の各々ならびにＲａ、Ｒ’ａ、Ｒｂ、Ｒ’ｂ、…Ｒｍ−1、Ｒ’ｍ−1、ＲｍおよびＲ’ｍの各々は独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、ホスホネート、ホスフェート、ホスフィニル、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、アミド、カルボニル、チオカルボニル、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、Ｃ−カルバメート、Ｎ−カルバメート、Ｃ−チオカルボキシ、Ｓ−チオカルボキシおよびアミノからなる群より選択されるか、あるいは代わりに、Ｒ1、Ｒ’1、Ｒ2、…Ｒｎ−1、ＲｎおよびＲ’ｎのうちの少なくとも2つおよび／またはＲａ、Ｒ’ａ、Ｒｂ、Ｒ’ｂ、…Ｒｍ−1、Ｒ’ｍ−1、ＲｍおよびＲ’ｍのうちの少なくとも2つが少なくとも1つの4、5または6員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成しており；
該線維症が肺線維症、皮膚線維症、腎線維症、嚢胞性線維症、進行性塊状線維症、肝硬変、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝疾患、心内膜心筋線維症、心房性線維症、縦隔線維症、骨髄線維症、後腹膜線維症、腎性全身性線維症、ケロイド、関節線維症、ペイロニー病、デュピュイトラン拘縮、癒着性関節包炎または巣状分節性糸球体硬化症である、方法。
[本発明1002]
前記化合物が、1−ヘキサデシル−2−（4’−カルボキシブチル）−グリセロ−3−ホスホコリンである、本発明1001の方法。
[本発明1003]
前記対象がヒトである、本発明1001または1002の方法。
[本発明1004]
ＴＬＲ2、ＴＬＲ4またはＣＤ14の活性が、対象の細胞内で阻害される、本発明1001〜1003のいずれかの方法。
[本発明1005]
ＴＬＲ2とＴＬＲ4の活性；ＴＬＲ4とＣＤ14の活性；ＴＬＲ2とＣＤ14の活性；またはＴＬＲ2、ＴＬＲ4およびＣＤ14の活性が、対象の細胞内で阻害される、本発明1001〜1003のいずれかの方法。
[本発明1006]
肝小葉の形成が対象において低減される、本発明1001〜1005のいずれかの方法。
[本発明1007]
前記化合物が、（Ｒ）−1−ヘキサデシル−2−（4’−カルボキシブチル）−ｓｎ−グリセロ−3−ホスホコリンである、本発明1001〜1006のいずれかの方法。
[本発明1008]
前記化合物が、薬学的に許容され得る塩、水和物、または溶媒和物である、本発明1001〜1007のいずれかの方法。
[本発明1009]
肝線維症を処置または予防する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の1−ヘキサデシル−2−（4’−カルボキシブチル）−グリセロ−3−ホスホコリンを投与する段階を含む、方法。
[本発明1010]
前記1−ヘキサデシル−2−（4’−カルボキシブチル）−グリセロ−3−ホスホコリンが、Ｒ−異性体である、本発明1009の方法。
[本発明1011]
前記対象がヒトである、本発明1009または1010の方法。
[本発明1012]
ＴＬＲ2、ＴＬＲ4またはＣＤ14の活性が、対象の細胞内で阻害される、本発明1009〜1011のいずれかの方法。
[本発明1013]
ＴＬＲ2とＴＬＲ4の活性；ＴＬＲ4とＣＤ14の活性；ＴＬＲ2とＣＤ14の活性；またはＴＬＲ2、ＴＬＲ4およびＣＤ14の活性が、対象の細胞内で阻害される、本発明1009〜1012のいずれかの方法。
[本発明1014]
肝小葉の形成が対象において低減される、本発明1009〜1013のいずれかの方法。
[本発明1015]
1−ヘキサデシル−2−（4’−カルボキシブチル）−グリセロ−3−ホスホコリンが、薬学的に許容され得る塩、水和物、または溶媒和物の形態である、本発明1009〜1014のいずれかの方法。
[本発明1016]
腎線維症を処置または予防する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の1−ヘキサデシル−2−（4’−カルボキシブチル）−グリセロ−3−ホスホコリンを投与する段階を含む、方法。
[本発明1017]
前記1−ヘキサデシル−2−（4’−カルボキシブチル）−グリセロ−3−ホスホコリンが、Ｒ−異性体である、本発明1016の方法。
[本発明1018]
前記対象がヒトである、本発明1016または1017の方法。
[本発明1019]
前記腎線維症が巣状分節性糸球体硬化症である、本発明1016〜1018のいずれかの方法。
[本発明1020]
ＴＬＲ2、ＴＬＲ4またはＣＤ14の活性が、対象の細胞内で阻害される、本発明1016〜1019のいずれかの方法。
[本発明1021]
ＴＬＲ2とＴＬＲ4の活性；ＴＬＲ4とＣＤ14の活性；ＴＬＲ2とＣＤ14の活性；またはＴＬＲ2、ＴＬＲ4およびＣＤ14の活性が、対象の細胞内で阻害される、本発明1016〜1020のいずれかの方法。
[本発明1022]
前記1−ヘキサデシル−2−（4’−カルボキシブチル）−グリセロール−3−ホスホコリンが、薬学的に許容され得る塩、水和物、または溶媒和物の形態である、本発明1016〜1021のいずれかの方法。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
本発明の一部の実施形態を本明細書において、単なる一例として、添付の図面を参照しながら説明する。次に、図面について詳細に具体的に言及するが、図示した具体的事項は一例であり、本発明の実施形態の実例の論考の目的のためのものであることを強調しておく。
【００１６】
【図１Ａ】ＶＢ−２０１が、ヒト単球（一次ＣＤ１４＋）においてリポ多糖（ＬＰＳ）（ＴＬＲ４）誘導性シグナル伝達を阻害することを示す。
【図１Ｂ】ＶＢ−２０１が、ヒト単球（一次ＣＤ１４＋）においてリポ多糖（ＬＰＳ）（ＴＬＲ４）誘導性シグナル伝達を阻害することを示す。
【図１Ｃ】ＶＢ−２０１が、ヒト単球（一次ＣＤ１４＋）においてリポ多糖（ＬＰＳ）（ＴＬＲ４）誘導性シグナル伝達を阻害することを示す。
【図１Ｄ】ＶＢ−２０１が、ヒト単球（一次ＣＤ１４＋）においてリポ多糖（ＬＰＳ）（ＴＬＲ４）誘導性シグナル伝達を阻害することを示す
【図２Ａ】ＶＢ−２０１が、ヒト単球（ＴＨＰ−１細胞株）においてＰＧＮ（ＴＬＲ２）誘導性シグナル伝達を阻害することを示す。
【図２Ｂ】ＶＢ−２０１が、ヒト単球（ＴＨＰ−１細胞株）においてＰＧＮ（ＴＬＲ２）誘導性シグナル伝達を阻害することを示す。
【図３】ＶＢ−２０１が、ヒト単球（ＴＨＰ−１細胞株）においてＭＣＰ−１誘導性シグナル伝達を阻害することを示す。
【図４】ＶＢ−２０１が、ヒト単球（一次ＣＤ１４＋）のケモカイン誘導性遊走を阻害することを示す。
【図５】ＶＢ−２０１が、ヒト単球（ＴＨＰ−１細胞株）のＳＤＦ１誘導性細胞遊走を阻害することを示す。
【図６】ＶＢ−２０１が、ヒト単球（一次ＣＤ１４＋）においてＲＡＮＴＥＳ誘導性シグナル伝達を阻害することを示す。
【図７】図７Ａ〜７Ｂは、ＶＢ−２０１が、ＬＰＳ（ＴＬＲ４）刺激型（図７Ａ）およびＰａｍ３ＣＳＫ４（ＴＬＲ２）刺激型（図７Ｂ）であるヒト単球（一次ＣＤ１４＋）においてＩＬ−１２ｐ４０レベルを阻害することを示す。
【図８】ヒト一次単球によるＬＰＳ結合に対するＶＢ−２０１の効果を示す。試料を、表示した濃度のＶＢ−２０１とともに２０分間インキュベートした後、ビオチン−ＬＰＳ（１００ｎｇ／ｍｌ）をさらに１５分間添加した。結果は三つ組の平均蛍光強度（ＭＦＩ）である。
【図９】ＶＢ−２０１が、ＬＰＳ（ＴＬＲ４）刺激型ヒト単球由来樹状細胞（Ｍｏ由来ＤＣ）においてＩＬ−６分泌を阻害することを示す。
【図１０】ＶＢ−２０１が、ＬＰＳ（ＴＬＲ４）刺激型ヒトＭｏ由来ＤＣにおいてＩＬ−１２ｐ４０分泌を阻害することを示す。
【図１１Ａ】肝臓の炎症に対するＶＢ−２０１の効果を示す。生まれて２日後に、２００μｇのストレプトゾトシン（ＳＴＺ）をマウスに注射し、４週齢から高脂肪食（ＨＦＤ）を給餌することによってＮＡＳＨを誘導した。次いで、６週齢のとき、ビヒクル（陰性対照）、ＶＢ−２０１（４ｍｇ／ｋｇ）もしくはテルミサルタン（１０ｍｇ／ｋｇ；陽性対照）のいずれかでマウスを３週間処置するか、または処置なし（正常）とした。９週齢のときにマウスを屠殺した。図１１Ａは、処置後の平均肝臓炎症スコアを示す（平均±Ｓ．Ｅ；正常−ｎ＝５，ビヒクル−ｎ＝８、ＶＢ−２０１−ｎ＝８，テルミサルタン−ｎ＝６）。
【図１１Ｂ】肝臓の炎症に対するＶＢ−２０１の効果を示す。Ｈ＆Ｅ染色した処置後の肝臓試料を示す（２００倍の倍率）。
【図１２Ａ】肝線維症に対するＶＢ−２０１の効果を示す。図１１Ａ〜１１Ｂに説明したとおりにＮＡＳＨを誘導した。シリウスレッドでの肝臓の組織学的試料の染色を用いて線維症の程度を調べた。図１２Ａは、処置後の平均線維症面積を示す（解析した肝臓切片の％；平均±Ｓ．Ｅ；正常−ｎ＝５，ビヒクル−ｎ＝８，ＶＢ−２０１−ｎ＝８，テルミサルタン−ｎ＝６）。
【図１２Ｂ】肝線維症に対するＶＢ−２０１の効果を示す。処置後の肝臓試料のシリウスレッド染色を示す（２００倍の倍率）。
【図１３】腎線維症モデルでの損傷糸球体の数の低減（％）におけるＶＢ−２０１の効果を示す棒グラフを示す。健常ラット（ｎ＝３）（白いバー）、シャム手術ラット（ｎ＝３）（縞模様の白いバー）、溶媒対照（０．５％エタノール／ＰＢＳ）で処置した腎摘出ラット（黒いバー）（ｎ＝７）、ＶＢ−２０１  ４ｍｇ／ｋｇで処置した腎摘出ラット（ｎ＝７）（薄い灰色のバー）またはテルミサルタン１０ｍｇ／ｋｇで処置した腎摘出ラット（ｎ＝８）（濃い灰色のバー）における損傷糸球体（％）を８週目に評価した。溶媒対照（０．５％エタノール／ＰＢＳ）で処置した腎摘出ラットと対比した統計データを以下のとおりに示す：＊はｐ＝０．０１を表し；＊＊はｐ≦０．００５を表し；＊＊＊はｐ≦０．００１を表す。略号は：Ｎｘ，腎摘出；Ｅｔｈ，エタノールである。
【図１４】糸球体の硬化の低減（％）におけるＶＢ−２０１の効果を示す棒グラフを示す。健常ラット（ｎ＝３）（白いバー）、シャム手術ラット（ｎ＝３）（縞模様の白いバー）、溶媒対照（０．５％エタノール／ＰＢＳ）で処置した腎摘出ラット（黒いバー）（ｎ＝７）、ＶＢ−２０１  ４ｍｇ／ｋｇで処置した腎摘出ラット（ｎ＝８）（薄い灰色のバー）またはテルミサルタン１０ｍｇ／ｋｇで処置した腎摘出ラット（ｎ＝８）（濃い灰色のバー）における糸球体硬化症（％）を８週目に評価した。溶媒対照（０．５％エタノール／ＰＢＳ）で処置した腎摘出ラットと対比した統計データを以下のとおりに示す：＊はｐ＜０．０５を表し；＊＊はｐ≦０．００５を表し；＊＊＊はｐ≦０．００１を表す。略号は：Ｎｘ，腎摘出；Ｅｔｈ，エタノールである。
【図１５】糸球体の硬化の低減におけるＶＢ−２０１の効果を示すＰＡＳ染色（×４００）画像を示す。腎臓の形態構造を光学顕微鏡により、健常ラット（健常  ×４００）、シャム手術ラット（シャム  ×４００）、溶媒対照（０．５％エタノール／ＰＢＳ）で処置した腎摘出ラット（Ｎｘ  ＰＢＳ  ０．５％エタノール  ×４００）、ＶＢ−２０１  ４ｍｇ／ｋｇで処置した腎摘出ラット（Ｎｘ  ＶＢ−２０１  ４ｍｇ／ｋｇ  ×４００）またはテルミサルタン１０ｍｇ／ｋｇで処置した腎摘出ラット（Ｎｘ  テルミサルタン１０ｍｇ／ｋｇ  ×４００）のＰＡＳ染色切片において、最初の手術後、８週目に評価した。略号は：Ｎｘ，腎摘出；Ｅｔｈ，エタノール、ＰＡＳ，過ヨウ素酸シッフである。
【図１６Ａ】糸球体における単球／マクロファージ細胞浸潤に対するＶＢ−２０１の効果を示す（図１６Ａ）。糸球体（細胞／糸球体）および間質（細胞／ｍｍ２）におけるＣＤ６８陽性細胞を、健常ラット（ｎ＝３）（白いバー）、シャム手術ラット（ｎ＝３）（縞模様の白いバー）、溶媒対照（０．５％エタノール／ＰＢＳ）で処置した腎摘出ラット（黒いバー）（ｎ＝７）、ＶＢ−２０１  ４ｍｇ／ｋｇで処置した腎摘出ラット（ｎ＝８）（薄い灰色のバー）またはテルミサルタン１０ｍｇ／ｋｇで処置した腎摘出ラット（ｎ＝８）（濃い灰色のバー）において８週目に評価した。溶媒対照（０．５％エタノール／ＰＢＳ）で処置した腎摘出ラットと対比した統計データを以下のとおりに示す：図１６Ａでは、＊はｐ＝０．００８を表し；＊＊はｐ≦０．００１を表す。略号は：Ｎｘ，腎摘出；Ｅｔｈ，エタノールである。
【図１６Ｂ】間質における単球／マクロファージ細胞浸潤に対するＶＢ−２０１の効果を示す（図１６Ｂ）。糸球体（細胞／糸球体）および間質（細胞／ｍｍ２）におけるＣＤ６８陽性細胞を、健常ラット（ｎ＝３）（白いバー）、シャム手術ラット（ｎ＝３）（縞模様の白いバー）、溶媒対照（０．５％エタノール／ＰＢＳ）で処置した腎摘出ラット（黒いバー）（ｎ＝７）、ＶＢ−２０１  ４ｍｇ／ｋｇで処置した腎摘出ラット（ｎ＝８）（薄い灰色のバー）またはテルミサルタン１０ｍｇ／ｋｇで処置した腎摘出ラット（ｎ＝８）（濃い灰色のバー）において８週目に評価した。溶媒対照（０．５％エタノール／ＰＢＳ）で処置した腎摘出ラットと対比した統計データを以下のとおりに示す：図１６Ｂでは、＊はｐ≦０．００５を表す。略号は：Ｎｘ，腎摘出；Ｅｔｈ，エタノールである。
【図１６Ｃ】ＣＤ６８細胞の数の低減におけるＶＢ−２０１の効果を示す代表的なＣＤ６８の染色（×４００）画像を示す。略号は：Ｎｘ，腎摘出；Ｅｔｈ，エタノールである。
【図１７Ａ】線維症進行性マーカーに対するＶＢ−２０１の効果を示す棒グラフを示す。腎臓におけるコラーゲンＩＶの相対発現を、健常ラット（白いバー）、シャム手術ラット（縞模様の白いバー）、溶媒対照（０．５％エタノール／ＰＢＳ）で処置した腎摘出ラット（黒いバー）、ＶＢ−２０１  ４ｍｇ／ｋｇで処置した腎摘出ラット（薄い灰色のバー）またはテルミサルタン１０ｍｇ／ｋｇで処置した腎摘出ラット（濃い灰色のバー）において８週目に評価した（図１７Ａ）。溶媒対照（０．５％エタノール／ＰＢＳ）で処置した腎摘出ラットと対比した統計データを以下のとおりに示す：図１７Ａでは、＊はｐ＜０．０５を表す。略号は：Ｎｘ，腎摘出；Ｅｔｈ，エタノールである。
【図１７Ｂ】線維症進行性マーカーに対するＶＢ−２０１の効果を示す棒グラフを示す。ＴＧＦ−βの相対発現を、健常ラット（白いバー）、シャム手術ラット（縞模様の白いバー）、溶媒対照（０．５％エタノール／ＰＢＳ）で処置した腎摘出ラット（黒いバー）、ＶＢ−２０１  ４ｍｇ／ｋｇで処置した腎摘出ラット（薄い灰色のバー）またはテルミサルタン１０ｍｇ／ｋｇで処置した腎摘出ラット（濃い灰色のバー）において８週目に評価した（図１７Ｂ）。溶媒対照（０．５％エタノール／ＰＢＳ）で処置した腎摘出ラットと対比した統計データを以下のとおりに示す：図１７Ｂでは、＊はｐ≦０．００１を表す。略号は：Ｎｘ，腎摘出；Ｅｔｈ，エタノールである。
【図１８】ＶＢ−２０１が、ＮＡＳＨ誘導マウスの肝臓においてＩＬ−１２／２３ｐ４０発現を阻害することを示す棒グラフを示す。マウスにＮＡＳＨを誘導し、ＶＢ−２０１を４ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回、６週目〜９週目に経口投与した。テルミサルタンは１０ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回投与した。Ｑ−ＰＣＲを、ビヒクル（溶媒、ｎ＝８）、ＶＢ−２０１（ｎ＝７）、テルミサルタン（ｎ＝５）で上記のとおりに処置したＮＡＳＨ誘導マウスの肝臓または正常マウスの肝臓から抽出したＲＮＡに対して行った。Ｑ−ＰＣＲを用いてＩＬ−１２／２３ｐ４０を検出した。ＧＡＰＤＨをＲＮＡレベルの正規化に使用した。ＮＡＳＨ誘導マウスの肝臓におけるＩＬ−１２／２３ｐ４０の解析は、ＶＢ−２０１がＩＬ−１２／２３ｐ４０の発現をｐ＜０．０５で有意に減衰させたことを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
発明の詳細な説明
本発明の実施形態を詳細に説明する前に、本発明は、その適用が、以下の説明に示した詳細事項または実施例に例示した詳細事項に限定されないことを理解されたい。本発明は、他の実施形態が可能である、または種々の様式で実行もしくは実施することができる。また、本明細書で用いた法律用語および専門用語は説明の目的のためのものであり、限定とみなされるべきでないことを理解されたい。
【００１８】
一般定義
用語「〜を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「〜を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「〜を含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、「〜を含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「〜を有する（ｈａｖｉｎｇ）」、およびその変化形は、「〜を含むが、限定されない（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ  ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｌｉｍｉｔｅｄ  ｔｏ）」を意味する。
【００１９】
文言「任意選択的に（ｏｐｔｉｏｎａｌｌｙ）」は、本明細書で用いる場合、「一部の実施形態では提供され、他の実施形態では提供されない」を意味する。本発明の任意の具体的な実施形態は、複数の「任意選択的な（ｏｐｔｉｏｎａｌ）」特色を含み得る（かかる特色が矛盾しない限り）。
【００２０】
本明細書で用いる場合、単数形「一つの（ａ）」、「一つの（ａｎ）」および「その（ｔｈｅ）」は、本文中にそうでないことを明記していない限り、複数の指示対象物を包含している。例えば、用語「一つの化合物（ａ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ）」または「少なくとも１種類の化合物（ａｔ  ｌｅａｓｔ  ｏｎｅ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ）」には複数の化合物（その混合物を含む）が包含され得る。
【００２１】
本明細書で用いる場合、本発明に関する量を修飾している用語「約」は、例えば常套的な試験および取扱いによって；かかる試験および取扱いにおける偶発的なエラーによって；本発明で使用される成分の製造、供給源もしくは純度の差によって；などによって生じ得る数量における差異をいう。用語「約」で修飾されていようとそうでなかろうと、特許請求の範囲は、記載の量の等価物を包含している。一実施形態において、用語「約」は、報告した数値の１０％以内を意味する。
【００２２】
用語「治療有効量」は、本明細書で用いる場合、障害もしくは状態の１つ以上の症状の改善がもたらされるのに充分な、または障害もしくは状態の出現もしくは進行が妨げられるのに充分なまたは障害もしくは状態の消退もしくは治癒が引き起こされるのに充分な所与の治療用薬剤量をいう。一部の実施形態では、ＶＢ−２０１の治療有効量は、約５ｍｇ〜約１６０ｍｇのＶＢ−２０１／日である。
【００２３】
本明細書で用いる場合、全体をとおして、用語「アルキル」は、直鎖および分枝鎖の基を含む飽和脂肪族炭化水素をいう。一部の実施形態では、アルキル基は１〜２０個の炭素原子を有する。数値範囲；例えば、「１〜２０」が記載されている場合はいつでも、この場合の該基は、アルキル基が１個の炭素原子、２個の炭素原子、３個の炭素原子など、２０個までの炭素原子を含み得ることを含意している。一部の実施形態では、アルキルは、１〜１０個の炭素原子を有する中サイズのアルキルである。一部の実施形態では、アルキルは、１〜４個の炭素原子有する低級アルキルである。アルキル基は置換されていてもよく（例えば、１〜５つの置換基で）、非置換であってもよい。本明細書に記載の任意の実施形態において、アルキルは非置換であり得る。本明細書に記載の任意の実施形態において、アルキルはまた、１〜５つの置換基により置換されていてもよく、ここで、該置換基は、例えば、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロ脂環式、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アジド、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、ホスホニル、ホスフィニル、オキソ、カルボニル、チオカルボニル、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミドおよびアミノ（これらの用語は本明細書において定義している）であり得る。
【００２４】
「シクロアルキル」基は、すべての炭素の単環式または縮合環（すなわち、隣接している１対の炭素原子を共有している環）基であって、該環の１つ以上がが完全に共役しているπ電子系を有していないものをいう。シクロアルキル基の例は、限定されないが、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロペンテン、シクロヘキサン、シクロヘキサジエン、シクロヘプタン、シクロヘプタトリエンおよびアダマンタンである。シクロアルキル基は置換されていてもよく（例えば、１〜５つの置換基で）、非置換であってもよい。本明細書に記載の任意の実施形態において、シクロアルキルは非置換であり得る。本明細書に記載の任意の実施形態において、シクロアルキルはまた、１〜５つの置換基により置換されていてもよく、ここで、該置換基は、例えば、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロ脂環式、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アジド、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、ホスホニル、ホスフィニル、オキソ、カルボニル、チオカルボニル、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミドおよびアミノ（これらの用語は本明細書において定義している）であり得る。
【００２５】
「アルケニル」基は、少なくとも２個の炭素原子と少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含む脂肪族炭化水素基をいい、直鎖であっても分枝鎖であってもよい。アルケニル基は置換されていても非置換であってもよい。
【００２６】
「アルキニル」基は、少なくとも２個の炭素原子と少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含む脂肪族炭化水素基をいう。アルキニル基は置換されていても非置換であってもよい。
【００２７】
「アリール」基は、完全に共役しているπ電子系を有するすべて炭素の単環式または縮合環の多環式（すなわち、隣接している１対の炭素原子を共有している環）基をいう。本明細書に記載の任意の実施形態において、アリール基は、６〜１４個の炭素、例えば、６〜１０個の炭素を有し得る。アリール基の例は、限定されないが、フェニル、ナフタレニルおよびアントラセニルである。アリール基は置換されていてもよく（例えば、１〜５つの置換基で）、非置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、例えば、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロ脂環式、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アジド、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、ホスホニル、ホスフィニル、オキソ、カルボニル、チオカルボニル、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミドおよびアミノ（これらの用語は本明細書において定義している）であり得る。本明細書に記載の任意の実施形態において、アリール基は、例えば、１〜５つの置換基、例えば、ハロゲン（例えば、フッ素もしくは塩素）、アルキル基（例えば、Ｃ１〜４アルキル）またはハロゲン置換アルキル（例えば、トリフルオロメチル）により任意選択的に置換されているフェニル基であり得る。
【００２８】
「ヘテロアリール」基は、環（１つまたは複数）内に１個以上の原子、例えば、窒素、酸素およびイオウなどを有し、また完全に共役しているπ電子系を有する単環式または縮合環（すなわち、隣接している１対の原子を共有している環）基をいう。本明細書に記載の任意の実施形態において、ヘテロアリール基は、５〜１４個の環内原子、例えば、５〜１０個の環内原子（例えば、５個または６個の環内原子）を有し得る。ヘテロアリール基の例としては、限定されないが、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピリミジン、キノリン、イソキノリンおよびプリンが挙げられる。ヘテロアリール基は置換されていてもよく（例えば、１〜５つの置換基で）、非置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、例えば、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロ脂環式、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アジド、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、ホスホニル、ホスフィニル、オキソ、カルボニル、チオカルボニル、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミドおよびアミノ（これらの用語は本明細書において定義している）であり得る。
【００２９】
「ヘテロ脂環式」基は、環（１つまたは複数）内に１個以上のヘテロ原子、例えば、窒素、酸素およびイオウを有する単環式または縮合環基をいう。該環は、１つ以上の二重結合を有するものであってもよい。しかしながら、該環は、完全に共役しているπ電子系を有していない。本明細書に記載の任意の実施形態において、ヘテロ脂環式基は３〜１０個の環内原子、例えば、５〜１０個の環内原子（例えば、５個または６個の環内原子）を有し得る。ヘテロ脂環式は置換されていてもよく（例えば、１〜５つの置換基で）、非置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、例えば、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロ脂環式、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アジド、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、ホスホニル、ホスフィニル、オキソ、カルボニル、チオカルボニル、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミドおよびアミノ（これらの用語は本明細書において定義している）であり得る。代表例はピペリジン、ピペラジン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、モルホリンなどである。
【００３０】
「アルコキシ」基は−Ｏ−アルキル基と−Ｏ−シクロアルキル基の両方をいい、ここで、アルキルまたはシクロアルキルは、本明細書において定義したいずれかであり得る。
【００３１】
「アリールオキシ」基は−Ｏ−アリール基と−Ｏ−ヘテロアリール基の両方をいい、ここで、アリールまたはヘテロアリールは、本明細書において定義したいずれかであり得る。
【００３２】
「チオヒドロキシ」基は−ＳＨ基をいう。
【００３３】
「チオアルコキシ」基は−Ｓ−アルキル基と−Ｓ−シクロアルキル基の両方をいい、ここで、アルキルまたはシクロアルキルは、本明細書において定義したいずれかであり得る。
【００３４】
「チオアリールオキシ」基は−Ｓ−アリール基と−Ｓ−ヘテロアリール基の両方をいい、ここで、アリールまたはヘテロアリールは、本明細書において定義したいずれかであり得る。
【００３５】
「カルボニル」基は−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ基をいい、Ｒは水素、本明細書において定義したとおりのアルキル、アルケニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール（環内炭素によって結合）またはヘテロ脂環式（環内炭素によって結合）である。
【００３６】
「アルデヒド」基は、Ｒが水素であるカルボニル基をいう。
【００３７】
「チオカルボニル」基は−Ｃ（＝Ｓ）−Ｒ基をいい、Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００３８】
「Ｃ−カルボキシ」基は−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ基をいい、Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００３９】
「Ｏ−カルボキシ」基はＲＣ（＝Ｏ）−Ｏ−基をいい、Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００４０】
「オキソ」基は＝Ｏ基をいう。
【００４１】
「カルボン酸」基は、Ｒが水素であるＣ−カルボキシル基をいう。
【００４２】
「ハロ」基または「ハロゲン」はフッ素、塩素、臭素またはヨウ素をいう。
【００４３】
「トリハロメチル」基は−ＣＸ３基（ここで、Ｘは、本明細書において定義したとおりのハロ基である）、例えばＣＦ３基をいう。
【００４４】
「スルフィニル」基は−Ｓ（＝Ｏ）−Ｒ基をいい、Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００４５】
「スルホニル」基は−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｒ基をいい、Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００４６】
「Ｓ−スルホンアミド」基は−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲ２基をいい、各Ｒは本明細書に定義したとおりである。
【００４７】
「Ｎ−スルホンアミド」基はＲＳ（＝Ｏ）２−ＮＲ基をいい、ここで、各Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００４８】
「Ｏ−カルバミル」基は−ＯＣ（＝Ｏ）−ＮＲ２基をいい、ここで、各Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００４９】
「Ｎ−カルバミル」基はＲＯＣ（＝Ｏ）−ＮＲ−基をいい、ここで、各Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００５０】
「Ｏ−チオカルバミル」基は−ＯＣ（＝Ｓ）−ＮＲ２基をいい、ここで、各Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００５１】
「Ｎ−チオカルバミル」基はＲＯＣ（＝Ｓ）ＮＲ−基をいい、ここで、各Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００５２】
「アミノ」基は−ＮＲ２基をいい、ここで、各Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００５３】
「Ｃ−アミド」基は−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ２基をいい、ここで、各Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００５４】
「Ｎ−アミド」基はＲＣ（＝Ｏ）−ＮＲ−基をいい、ここで、各Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００５５】
「尿素」基は−ＮＲＣ（＝Ｏ）−ＮＲ２基をいい、ここで、各Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００５６】
「グアニジノ」基は−ＲＮＣ（＝Ｎ）−ＮＲ２基をいい、ここで、各Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００５７】
「グアニル」基はＲ２ＮＣ（＝Ｎ）−基をいい、ここで、各Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００５８】
用語「ホスホニル」または「ホスホネート」は、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ）２基を示し、各Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００５９】
用語「ホスフェート」は−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ）２基を示し、各Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００６０】
「リン酸」は、各Ｒが水素であるホスフェート基である。
【００６１】
用語「ホスフィニル」は−ＰＲ２基を示し、各Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００６２】
用語「チオ尿素」は−ＮＲ−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＲ−基を示し、各Ｒは本明細書において定義したとおりである。
【００６３】
用語「糖」は、開鎖糖単位または環式糖単位（例えば、ピラノースベースもしくはフラノースベースの単位）いずれかの１つ以上の糖単位（ｓｕｇａｒ  ｕｎｉｔ）をいい、特に記載のない限り、任意の単糖、二糖およびオリゴ糖が包含される。
【００６４】
用語「立体異性体」には、幾何異性体、例えばＥまたはＺ異性体、エナンチオマー、ジアステレオマーなどが包含される。
【００６５】
用語「立体異性体混合物」には、本明細書に定義した立体異性体の任意の比率の任意の混合物が包含される。一部の実施形態では、立体異性体混合物にはラセミ混合物が包含される。一部の実施形態では、立体異性体混合物には片方のエナンチオマーを富化した混合物が包含される。一部の実施形態では、立体異性体混合物には任意の比率のジアステレオマーの混合物が包含される。
【００６６】
用語「エナンチオマー過剰」または「ｅｅ」は一方のエナンチオマーが他方と比べてどれだけ多く存在しているかの尺度をいう。ＲとＳのエナンチオマー混合物では、エナンチオマー過剰の割合を
│Ｒ−Ｓ│＊１００
と定義し、ここで、ＲおよびＳは、Ｒ＋Ｓ＝１となるような混合物中のエナンチオマーのそれぞれのモル分率または重量分率である。キラル物質の旋光度の知識により、エナンチオマー過剰の割合は
（［α］ｏｂｓ／［α］ｍａｘ）＊１００
と定義され、ここで、［α］ｏｂｓはエナンチオマー混合物の旋光度であり、［α］ｍａｘは純粋なエナンチオマーの旋光度である。
【００６７】
用語「塩」には、分子内塩または外部塩の両方が包含される。一部の実施形態では、塩が分子内塩、すなわち両性イオン構造である。一部の実施形態では、塩が外部塩である。一部の実施形態では、外部塩は、適当な対イオンを有する薬学的に許容され得る塩である。医薬使用のための好適な対イオンは当該技術分野で知られている。
【００６８】
本出願書類全体を通して、本発明の種々の実施形態を範囲形式で提示している場合があり得る。範囲形式での説明は、便宜上、略して用いたにすぎないと解釈されるべきであり、本発明の範囲に対する柔軟性のない限定と解釈されるべきでないことを理解されたい。したがって、範囲の説明は、可能なすべての下位範囲ならびに該範囲内の個々の数値が具体的に開示されているとみなされるべきである。例えば、１〜６などの範囲の記載は、例えば、１〜３、１〜４、１〜５、２〜４、２〜６、３〜６などの下位範囲ならびに該範囲内の個々の数、例えば、１、２、３、４、５および６が具体的に開示されているとみなされたい。これは、範囲の幅に関係なく適用される。
【００６９】
本発明の特定の特色（これは、明瞭性重視のため、別々の実施形態の状況において記載している）はまた、単一の実施形態において組み合わせて提供してもよいことが認識される。逆に、本発明の種々の特色（これは、簡潔性重視のため、単一の実施形態の状況において記載している）はまた、別々に、または任意の適当な下位の組合せで、もしくは本発明の記載の任意の他の実施形態において適するものとして提供してもよい。種々の実施形態の状況において記載した特定の特色は、このような要素なしでは該実施形態が実施不可である場合を除き、該実施形態の必須の特色であるとみなされるべきでない。
【００７０】
酸化脂質
本発明は、一部において、酸化脂質化合物に関する。一部の実施形態では、本発明における酸化脂質は、式１：
0006717825.tif 000012
式１
による構造を有する化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、水和物もしくは溶媒和物であり、
式中：
ｎは１〜６の整数であり、ここで、ｎが１のとき、Ｃｎ、Ｂｎ、ＲｎおよびＹは存在せず、Ｃ１はＲ’ｎに結合しており；
Ｂ１、Ｂ２、…Ｂｎ−１およびＢｎの各々は独立して、酸素、イオウ、窒素、リンおよびケイ素からなる群より選択され、ここで、前記窒素、リンおよびケイ素の各々は、アルキル、ハロ、シクロアルキル、アリール、ヒドロキシ、チオヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオアリールオキシ、チオアルコキシおよびオキソからなる群より選択される１つ以上の置換基により任意選択的に置換されており；
Ａ１、Ａ２、…Ａｎ−１およびＡｎの各々は独立して、ＣＲ”Ｒ’’’、Ｃ＝ＯおよびＣ＝Ｓからなる群より選択され、
Ｙは、以下：
水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビホスホネート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミン、ホスホグリセロール、ならびに、以下の一般式：
0006717825.tif 000013
を有する部分であって、式中：
Ｂ’およびＢ”の各々が独立して、イオウおよび酸素からなる群より選択され；
Ｄ’およびＤ”の各々が独立して、水素、アルキル、アミノ置換アルキル、シクロアルキル、ホスホネートおよびチオホスホネートからなる群より選択される、部分
からなる群より選択され；
Ｘ１、Ｘ２、…Ｘｎ−１の各々は独立して、一般式２：
0006717825.tif 000014
式２
を有する飽和または不飽和の炭化水素であり、式中：
ｍは１〜２６の整数であり；
Ｚは：
0006717825.tif 000015
からなる群より選択され、ここで、Ｗは、酸素およびイオウからなる群より選択され；
Ｘ１、Ｘ２、…Ｘｎ−１のうちの少なくとも１つは水素以外のＺを含み、
Ｒ１、Ｒ’１、Ｒ２、…Ｒｎ−１、Ｒｎ、Ｒ’ｎの各々、Ｒ”およびＲ’’’の各々ならびにＲａ、Ｒ’ａ、Ｒｂ、Ｒ’ｂ、…Ｒｍ−１、Ｒ’ｍ−１、ＲｍおよびＲ’ｍの各々は独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、ホスホネート、ホスフェート、ホスフィニル、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、アミド、カルボニル、チオカルボニル、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、Ｃ−カルバメート、Ｎ−カルバメート、Ｃ−チオカルボキシ、Ｓ−チオカルボキシおよびアミノからなる群より選択されるか、あるいは代わりに、Ｒ１、Ｒ’１、Ｒ２、…Ｒｎ−１、ＲｎおよびＲ’ｎのうちの少なくとも２つおよび／またはＲａ、Ｒ’ａ、Ｒｂ、Ｒ’ｂ、…Ｒｍ−１、Ｒ’ｍ−１、ＲｍおよびＲ’ｍのうちの少なくとも２つが少なくとも１つの４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成している、
化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、水和物もしくは溶媒和物である。
【００７１】
他の実施形態では、本発明における酸化脂質は、式３：
0006717825.tif 000016
式３
による構造を有する化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、水和物もしくは溶媒和物である。
【００７２】
式３において、ｎは１〜４から選択される整数である。
【００７３】
式３において、Ｂ１、各Ｂ２およびＢ３は独立して、酸素、イオウおよびＮＲ４からなる群より選択され、ここで、Ｒ４は、水素、アルキル、シクロアルキル、アリールおよびアシルから選択される。
【００７４】
式３において、Ａ１および各Ａ２は独立して、ＣＲｅＲｅｅ、ＣＲｅ＝ＣＲｅｅ、Ｃ＝ＯおよびＣ＝Ｓからなる群より選択され、ここで、ＲｅおよびＲｅｅは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択される。
【００７５】
式３において、Ｙは、以下：
水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミン、ホスホグリセロール、ならびに、以下の一般式：
0006717825.tif 000017
を有する部分であって、式中：
Ｂ’およびＢ”の各々が独立して、イオウおよび酸素からなる群より選択され；
Ｄ’およびＤ”が独立して、水素、アルキル、アミノアルキル、シクロアルキル、ホスホネートおよびチオホスホネートからなる群より選択される、部分
からなる群より選択される。
【００７６】
式３において、Ｘ１および各Ｘ２は独立して、飽和または不飽和の線状または分枝状の炭化水素であり、ここで、Ｘ１とＸ２のうちの少なくとも一方は：
0006717825.tif 000018
からなる群より選択される酸化された部分Ｚで置換されており、
式中、Ｗは酸素またはイオウであり；ＲｄおよびＲｄｄは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択される。
【００７７】
式３の一実施形態において、Ｘ１および各Ｘ２は独立して、一般式４：
0006717825.tif 000019
式４
を有する。
【００７８】
式４において、ｍは１〜２６から選択される整数である。
【００７９】
式４において、Ｚは：
0006717825.tif 000020
からなる群より選択され、
式中、Ｗは酸素またはイオウであり；ＲｄおよびＲｄｄは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択され、
Ｘ１とＸ２のうちの少なくとも一方は水素以外のＺを含む。
【００８０】
式３および式４において、Ｒ１、Ｒ１ａ、各Ｒ２、Ｒ３、Ｒ３ａ、Ｒａ、Ｒａａ、各Ｒｂ、各Ｒｂｂ、ＲｃおよびＲｃｃは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、ホスホネート、ホスフェート、ホスフィニル、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、アミド、カルボニル、チオカルボニル、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、Ｃ−カルバメート、Ｎ−カルバメート、Ｃ−チオカルボキシ、Ｓ−チオカルボキシおよびアミノからなる群より選択され、ここで、Ｒ１、Ｒ１ａ、Ｒ２、Ｒ３およびＲ３ａのうちの少なくとも２つが任意選択的に連接されて、４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成しており、Ｒａ、Ｒａａ、Ｒｂ、Ｒｂｂ、Ｒｃ、およびＲｃｃのうちの少なくとも２つが任意選択的に連接されて、４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成している。
【００８１】
式３の一実施形態において、ｎは１または２である。式３の別の実施形態では、ｎは１である。
【００８２】
式３の一実施形態において、Ｙは、水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミンおよびホスホグリセロールからなる群より選択される。
【００８３】
式３の別の実施形態では、Ｙは、水素、ホスホリルコリンおよびホスホリルエタノールアミンからなる群より選択される。
【００８４】
式３の別の実施形態では、Ｙは、ホスホリルコリンおよびホスホリルエタノールアミンからなる群より選択される。
【００８５】
式３の一実施形態において、Ｙはホスホリルコリンである。
【００８６】
式３の一実施形態において、Ｚは、
0006717825.tif 000021
である。式３の別の実施形態では、Ｚはカルボン酸基である。
【００８７】
式３のさらなる一実施形態では、ｎは１であり、Ｙはホスホリルコリンである。
【００８８】
式３のさらなる一実施形態では、Ｂ１、Ｂ２およびＢ３の各々は酸素である。
【００８９】
式３のさらなる一実施形態では、ｎは１であり、Ｙはホスホリルコリンであり、Ｂ１、Ｂ２およびＢ３の各々は酸素である。
【００９０】
一実施形態において、本開示の任意の方法に有用な酸化リン脂質は、式３ａ：
0006717825.tif 000022
式３ａ
による構造を有するもの、またはその薬学的に許容され得る塩、水和物もしくは溶媒和物である。
【００９１】
式３ａにおいて、Ｂ１、Ｂ２およびＢ３は独立して、酸素およびイオウから選択される。
【００９２】
式３ａにおいて、Ａ１およびＡ２は独立して、ＣＨ２、ＣＨ＝ＣＨ、Ｃ＝ＯおよびＣ＝Ｓからなる群より選択される。
【００９３】
式３ａにおいて、Ｙは、以下：
水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミン、ホスホグリセロール、ならびに、以下の一般式：
0006717825.tif 000023
を有する部分であって、式中：
Ｂ’およびＢ”の各々が独立して、イオウおよび酸素からなる群より選択され；
Ｄ’およびＤ”の各々が独立して、水素、アルキル、アミノ置換アルキル、シクロアルキル、ホスホネートおよびチオホスホネートからなる群より選択される、部分
からなる群より選択される。
【００９４】
式３ａにおいて、Ｒ１、Ｒ１ａ、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ３ａは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、ホスホネート、ホスフェート、ホスフィニル、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、アミド、カルボニル、チオカルボニル、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、Ｃ−カルバメート、Ｎ−カルバメート、Ｃ−チオカルボキシ、Ｓ−チオカルボキシおよびアミノからなる群より選択され、ここで、Ｒ１、Ｒ１ａ、Ｒ２、Ｒ３およびＲ３ａのうちの少なくとも２つが任意選択的に連接されて、４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成しており、Ｒａ、Ｒａａ、Ｒｂ、Ｒｂｂ、Ｒｃ、およびＲｃｃのうちの少なくとも２つが任意選択的に連接されて、４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成しており；
式３ａにおいて、Ｘ１およびＸ２は独立して、飽和または不飽和の線状または分枝状の炭化水素であり、ここで、Ｘ１とＸ２のうちの少なくとも一方は：
0006717825.tif 000024
から選択される式を有する酸化された部分Ｚで置換されており、
式中、Ｗは酸素またはイオウであり；ＲｄおよびＲｄｄは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択される。
【００９５】
式３ａの一実施形態において、Ｘ１およびＸ２は独立して、式４ａ：
0006717825.tif 000025
式４ａ
による構造を有する。
【００９６】
式４ａにおいて、ｍは１〜２６から選択される整数である。
【００９７】
式４ａにおいて、Ｒａ、Ｒａａ、各Ｒｂ、各Ｒｂｂ、Ｒｃ、およびＲｃｃは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、ホスホネート、ホスフェート、ホスフィニル、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、アミド、カルボニル、チオカルボニル、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、Ｃ−カルバメート、Ｎ−カルバメート、Ｃ−チオカルボキシ、Ｓ−チオカルボキシおよびアミノからなる群より選択され、ここで、Ｒａ、Ｒａａ、Ｒｂ、Ｒｂｂ、Ｒｃ、およびＲｃｃのうちの少なくとも２つが任意選択的に連接されて、４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成している。
【００９８】
式４ａにおいて、Ｚは：
0006717825.tif 000026
からなる群より選択され、
式中、Ｗは酸素またはイオウであり；ＲｄおよびＲｄｄは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択され、
Ｘ１とＸ２のうちの少なくとも一方は水素以外のＺを含む。
【００９９】
式３ａの一実施形態において、Ｚは、
0006717825.tif 000027
である。式３ａの別の実施形態では、Ｚはカルボン酸基である。
【０１００】
式３ａの一実施形態において、Ｙは、水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミンおよびホスホグリセロールからなる群より選択される。
【０１０１】
式３ａの一実施形態において、Ｙは、水素、ホスホリルコリンおよびホスホリルエタノールアミンからなる群より選択される。
【０１０２】
式３ａの別の実施形態では、Ｙは、ホスホリルコリンおよびホスホリルエタノールアミンからなる群より選択される。
【０１０３】
式３ａの一実施形態において、Ｙはホスホリルコリンである。
【０１０４】
式３ａのさらなる一実施形態では、Ｂ１、Ｂ２およびＢ３の各々は酸素である。
【０１０５】
式３ａのさらなる一実施形態では、Ｙはホスホリルコリンであり、Ｂ１、Ｂ２およびＢ３の各々は酸素である。
【０１０６】
式３ａの一実施形態において、該酸化リン脂質は、式４ｂ：
0006717825.tif 000028
式４ｂ
による構造を有し、
式中、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、Ａ１、Ａ２、Ｘ１、Ｘ２およびＹは、式３ａについて規定のとおりである。
【０１０７】
一実施形態において、式４ｂのＢ１、Ｂ２、Ｂ３の各々は酸素であり、該酸化リン脂質は式４ｃ：
0006717825.tif 000029
式４ｃ
による構造を有する。
【０１０８】
式４ｃにおいて、Ａ１は、ＣＨ２、ＣＨ＝ＣＨおよびＣ＝Ｏからなる群より選択される。一例では、式４ｃのＡ１はＣＨ２である。
【０１０９】
式４ｃにおいて、Ａ２は存在していないか、またはＣＨ２である。
【０１１０】
式４ｃにおいて、Ｘ１は、１〜３０個の炭素原子を有するアルキルである。
【０１１１】
式４ｃにおいて、Ｘ２は、
0006717825.tif 000030
であり、式中：
Ｅは存在していないか、または１〜２４個の炭素原子を有するアルキル鎖であり；
Ｆは、水素、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、ハライド、アセトキシおよびアリールからなる群より選択され；
Ｚは：
0006717825.tif 000031
からなる群より選択され、
Ｒｄは、Ｈ、アルキルおよびアリールから選択される。
【０１１２】
式４ｃにおいて、Ｙは、以下：
水素、アルキル、アリール、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルカルジオリピン、ホスファチジルイノシトール、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミン、ホスホグリセロール、ならびに、以下の一般式：
0006717825.tif 000032
を有する部分であって、式中：
Ｂ’およびＢ”の各々が独立して、イオウおよび酸素からなる群より選択され；
Ｄ’およびＤ”の各々が独立して、水素、アルキル、アミノ置換アルキル、シクロアルキル、ホスホネートおよびチオホスホネートからなる群より選択される、部分
からなる群より選択される。
【０１１３】
式４ｃの一実施形態において、Ｘ１は、１０〜３０個の炭素原子または８〜３０個の炭素原子を有するアルキルである。
【０１１４】
式４ｃの一実施形態において、Ｅは、１〜１０個の炭素原子または１〜４個の炭素原子を有するアルキルである。
【０１１５】
式４ｃの一実施形態において、Ｙはホスホリルコリンである。
【０１１６】
式１、２、３、３ａ、４ｂおよび４ｃの各炭素原子はキラルまたは非キラル炭素原子であり、ここで、各キラル炭素原子はＳ−立体配置またはＲ−立体配置を有し得る。
【０１１７】
一実施形態において、該酸化脂質は、１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシ）ブチル−グリセロ−３−ホスホコリンまたは１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシブチル）−グリセロ−３−ホスホコリンである。本明細書で用いる場合、１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシ）ブチル−グリセロ−３−ホスホコリンと、１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシブチル）−グリセロ−３−ホスホコリンは同じであり、ともに同じ化合物ＶＢ−２０１をいう。本出願の実施形態によるＶＢ−２０１は、１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシブチル）−グリセロ−３−ホスホコリンのキラルエナンチオマー、すなわち、（Ｒ）−エナンチオマー（（Ｒ）−１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシブチル）−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）または（Ｓ）−エナンチオマー（（Ｓ）−１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシブチル）−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）またはその混合物（例えば、ラセミ体）のいずれかであり得る。一実施形態において、該酸化リン脂質は（Ｒ）−１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシ）ブチル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンである。一部の実施形態では、（Ｒ）−１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシ）ブチル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンは、約８０％ｅｅ以上、例えば、約８５％ｅｅ、約９０％ｅｅ、約９１％ｅｅ、約９２％ｅｅ、約９３％ｅｅ、約９４％ｅｅ、約９５％ｅｅ、約９６％ｅｅ、約９７％ｅｅ、約９８％ｅｅ、約９９％ｅｅ、約９９．５％ｅｅ以上のエナンチオマー純度を有する。他の実施形態では、（Ｒ）−１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシ）ブチル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンは約８０％ｅｅ〜約１００％ｅｅ、約８５％ｅｅ〜約１００％ｅｅ、約９０％ｅｅ〜約１００％ｅｅ、約９５％ｅｅ〜約１００％、約８０％ｅｅ〜約９９．５％ｅｅ、約８５％ｅｅ〜約９９．５％ｅｅ、約９０％ｅｅ〜約９９．５％ｅｅ、約９５％ｅｅ〜約９９．５％、またはその任意の範囲内のエナンチオマー純度を有する。
【０１１８】
他の実施形態では、該酸化脂質は以下の構造：
0006717825.tif 000033
を有する。
【０１１９】
他の実施形態では、該酸化脂質は以下の構造：
0006717825.tif 000034
を有する。
【０１２０】
一部の実施形態では、本発明の酸化脂質化合物により線維症（例えば、肝線維症、腎線維症、巣状分節性糸球体硬化症または本明細書に記載の任意の他の線維症）がテルミサルタンと同様に、またはより良好に処置または予防される。他の実施形態では、本発明の酸化脂質化合物により肝臓の炎症がテルミサルタンと同様に、またはより良好に低減される。他の実施形態では、本発明の酸化脂質化合物により肝線維症がテルミサルタンと同様に、またはより良好に低減される。他の実施形態では、本発明の酸化脂質化合物により腎線維症がテルミサルタンと同様に、またはより良好に処置または予防される。他の実施形態では、本発明の酸化脂質化合物により巣状分節性糸球体硬化症がテルミサルタンと同様に、またはより良好に処置または予防される。
【０１２１】
本発明の酸化脂質の合成方法は、例えば、国際特許出願公開番号ＷＯ０４／１０６４８６、ＷＯ０２／４１８２７およびＷＯ２０１１／０８３４６９に記載されている。
【０１２２】
医薬組成物
本発明の他の実施形態は、本発明の酸化脂質を含む医薬組成物に関する。一部の実施形態では、医薬組成物は、本発明の酸化脂質および薬学的に許容され得るビヒクルを含む。他の実施形態では、医薬組成物は、治療有効量の該酸化脂質を含む。一部の実施形態では、医薬組成物は、治療有効量の該酸化脂質および薬学的に許容され得るビヒクルを含む。本明細書で用いる場合、酸化脂質の治療有効量は、本発明の疾患または障害が処置または予防されるのに有効な量である。
【０１２３】
他の実施形態では、本発明の医薬組成物は経口投与され得る。
【０１２４】
他の実施形態では、医薬組成物は、式１：
0006717825.tif 000035
式１
による構造を有する化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、水和物もしくは溶媒和物を含み、
式中：
ｎは１〜６の整数であり、ここで、ｎが１のとき、Ｃｎ、Ｂｎ、ＲｎおよびＹは存在せず、Ｃ１はＲ’ｎに結合しており；
Ｂ１、Ｂ２、…Ｂｎ−１およびＢｎの各々は独立して、酸素、イオウ、窒素、リンおよびケイ素からなる群より選択され、ここで、前記窒素、リンおよびケイ素の各々は、アルキル、ハロ、シクロアルキル、アリール、ヒドロキシ、チオヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオアリールオキシ、チオアルコキシおよびオキソからなる群より選択される１つ以上の置換基により任意選択的に置換されており；
Ａ１、Ａ２、…Ａｎ−１およびＡｎの各々は独立して、ＣＲ”Ｒ’’’、Ｃ＝ＯおよびＣ＝Ｓからなる群より選択され、
Ｙは、以下：
水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビホスホネート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミン、ホスホグリセロール、ならびに、以下の一般式：
0006717825.tif 000036
を有する部分であって、式中：
Ｂ’およびＢ”の各々が独立して、イオウおよび酸素からなる群より選択され；
Ｄ’およびＤ”の各々が独立して、水素、アルキル、アミノ置換アルキル、シクロアルキル、ホスホネートおよびチオホスホネートからなる群より選択される、部分
からなる群より選択され；
Ｘ１、Ｘ２、…Ｘｎ−１の各々は独立して、一般式２：
0006717825.tif 000037
式２
を有する飽和または不飽和の炭化水素であり、式中：
ｍは１〜２６の整数であり；
Ｚは：
0006717825.tif 000038
からなる群より選択され、ここで、Ｗは、酸素およびイオウからなる群より選択され；
Ｘ１、Ｘ２、…Ｘｎ−１のうちの少なくとも１つは水素以外のＺを含み、
Ｒ１、Ｒ’１、Ｒ２、…Ｒｎ−１、Ｒｎ、Ｒ’ｎの各々、Ｒ”およびＲ’’’の各々ならびにＲａ、Ｒ’ａ、Ｒｂ、Ｒ’ｂ、…Ｒｍ−１、Ｒ’ｍ−１、ＲｍおよびＲ’ｍの各々は独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、ホスホネート、ホスフェート、ホスフィニル、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、アミド、カルボニル、チオカルボニル、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、Ｃ−カルバメート、Ｎ−カルバメート、Ｃ−チオカルボキシ、Ｓ−チオカルボキシおよびアミノからなる群より選択されるか、あるいはまた、Ｒ１、Ｒ’１、Ｒ２、…Ｒｎ−１、ＲｎおよびＲ’ｎのうちの少なくとも２つおよび／またはＲａ、Ｒ’ａ、Ｒｂ、Ｒ’ｂ、…Ｒｍ−１、Ｒ’ｍ−１、ＲｍおよびＲ’ｍのうちの少なくとも２つが少なくとも１つの４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成している、
化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、水和物もしくは溶媒和物である。
【０１２５】
他の実施形態では、医薬組成物は、式３：
0006717825.tif 000039
式３
による構造を有する化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、水和物もしくは溶媒和物を含む。
【０１２６】
式３において、ｎは１〜４から選択される整数である。
【０１２７】
式３において、Ｂ１、各Ｂ２およびＢ３は独立して、酸素、イオウおよびＮＲ４からなる群より選択され、ここで、Ｒ４は、水素、アルキル、シクロアルキル、アリールおよびアシルから選択される。
【０１２８】
式３において、Ａ１および各Ａ２は独立して、ＣＲｅＲｅｅ、ＣＲｅ＝ＣＲｅｅ、Ｃ＝ＯおよびＣ＝Ｓからなる群より選択され、ここで、ＲｅおよびＲｅｅは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択される。
【０１２９】
式３において、Ｙは、以下：
水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミン、ホスホグリセロール、ならびに、以下の一般式：
0006717825.tif 000040
を有する部分であって、式中：
ＢおよびＢａの各々が独立して、イオウおよび酸素からなる群より選択され；
ＤおよびＤａが独立して、水素、アルキル、アミノアルキル、シクロアルキル、ホスホネートおよびチオホスホネートからなる群より選択される、部分
からなる群より選択される。
【０１３０】
式３において、Ｘ１および各Ｘ２は独立して、飽和または不飽和の線状または分枝状の炭化水素であり、ここで、Ｘ１とＸ２のうちの少なくとも一方は：
0006717825.tif 000041
からなる群より選択される酸化された部分Ｚで置換されており、
式中、Ｗは酸素またはイオウであり；ＲｄおよびＲｄｄは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択される。
【０１３１】
式３の一実施形態において、Ｘ１および各Ｘ２は独立して、一般式４：
0006717825.tif 000042
式４
を有する。
【０１３２】
式４において、ｍは１〜２６から選択される整数である。
【０１３３】
式４において、Ｚは：
0006717825.tif 000043
からなる群より選択され、
式中、Ｗは酸素またはイオウであり；ＲｄおよびＲｄｄは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択され、
Ｘ１とＸ２のうちの少なくとも一方は水素以外のＺを含む。
【０１３４】
式３および式４において、Ｒ１、Ｒ１ａ、各Ｒ２、Ｒ３、Ｒ３ａ、Ｒａ、Ｒａａ、各Ｒｂ、各Ｒｂｂ、ＲｃおよびＲｃｃは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、ホスホネート、ホスフェート、ホスフィニル、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、アミド、カルボニル、チオカルボニル、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、Ｃ−カルバメート、Ｎ−カルバメート、Ｃ−チオカルボキシ、Ｓ−チオカルボキシおよびアミノからなる群より選択され、ここで、Ｒ１、Ｒ１ａ、Ｒ２、Ｒ３およびＲ３ａのうちの少なくとも２つが任意選択的に連接されて、４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成しており、Ｒａ、Ｒａａ、Ｒｂ、Ｒｂｂ、Ｒｃ、およびＲｃｃのうちの少なくとも２つが任意選択的に連接されて、４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成している。
【０１３５】
式３の一実施形態において、ｎは１または２である。式３の別の実施形態では、ｎは１である。
【０１３６】
式３の一実施形態において、Ｙは、水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミンおよびホスホグリセロールからなる群より選択される。
【０１３７】
式３の別の実施形態では、Ｙは、水素、ホスホリルコリンおよびホスホリルエタノールアミンからなる群より選択される。
【０１３８】
式３の別の実施形態では、Ｙは、ホスホリルコリンおよびホスホリルエタノールアミンからなる群より選択される。
【０１３９】
式３の一実施形態において、Ｙはホスホリルコリンである。
【０１４０】
式３の一実施形態において、Ｚは、
0006717825.tif 000044
である。式３の別の実施形態では、Ｚはカルボン酸基である。
【０１４１】
式３のさらなる一実施形態では、ｎは１であり、Ｙはホスホリルコリンである。
【０１４２】
式３のさらなる一実施形態では、Ｂ１、Ｂ２およびＢ３の各々は酸素である。
【０１４３】
式３のさらなる一実施形態では、ｎは１であり、Ｙはホスホリルコリンであり、Ｂ１、Ｂ２およびＢ３の各々は酸素である。
【０１４４】
一実施形態において、医薬組成物は、式３ａ：
0006717825.tif 000045
式３ａ
による構造を有する化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、水和物もしくは溶媒和物を含む。
【０１４５】
式３ａにおいて、Ｂ１、Ｂ２およびＢ３は独立して、酸素およびイオウから選択される。
【０１４６】
式３ａにおいて、Ａ１およびＡ２は独立して、ＣＨ２、ＣＨ＝ＣＨ、Ｃ＝ＯおよびＣ＝Ｓからなる群より選択される。
【０１４７】
式３ａにおいて、Ｙは、水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミンおよびホスホグリセロールからなる群より選択される。
【０１４８】
式３ａにおいて、Ｒ１、Ｒ１ａ、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ３ａは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、ホスホネート、ホスフェート、ホスフィニル、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、アミド、カルボニル、チオカルボニル、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、Ｃ−カルバメート、Ｎ−カルバメート、Ｃ−チオカルボキシ、Ｓ−チオカルボキシおよびアミノからなる群より選択され、ここで、Ｒ１、Ｒ１ａ、Ｒ２、Ｒ３およびＲ３ａのうちの少なくとも２つが任意選択的に連接されて、４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成しており、Ｒａ、Ｒａａ、Ｒｂ、Ｒｂｂ、Ｒｃ、およびＲｃｃのうちの少なくとも２つが任意選択的に連接されて、４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成しており；
式３ａにおいて、Ｘ１およびＸ２は独立して、飽和または不飽和の線状または分枝状の炭化水素であり、ここで、Ｘ１とＸ２のうちの少なくとも一方は：
0006717825.tif 000046
から選択される式を有する酸化された部分Ｚで置換されており、
式中、Ｗは酸素またはイオウであり；ＲｄおよびＲｄｄは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択される。
【０１４９】
式３ａの一実施形態において、Ｘ１およびＸ２は独立して、式４ａ：
0006717825.tif 000047
式４ａ
による構造を有する。
【０１５０】
式４ａにおいて、ｍは１〜２６から選択される整数である。
【０１５１】
式４ａにおいて、Ｒａ、Ｒａａ、各Ｒｂ、各Ｒｂｂ、Ｒｃ、およびＲｃｃは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、ホスホネート、ホスフェート、ホスフィニル、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、アミド、カルボニル、チオカルボニル、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、Ｃ−カルバメート、Ｎ−カルバメート、Ｃ−チオカルボキシ、Ｓ−チオカルボキシおよびアミノからなる群より選択され、ここで、Ｒａ、Ｒａａ、Ｒｂ、Ｒｂｂ、Ｒｃ、およびＲｃｃのうちの少なくとも２つが任意選択的に連接されて、４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成している。
【０１５２】
式４ａにおいて、Ｚは：
0006717825.tif 000048
からなる群より選択され、
式中、Ｗは酸素またはイオウであり；ＲｄおよびＲｄｄは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択され、
Ｘ１とＸ２のうちの少なくとも一方は水素以外のＺを含む。
【０１５３】
式３ａの一実施形態において、Ｚは、
0006717825.tif 000049
である。式３ａの別の実施形態では、Ｚはカルボン酸基である。
【０１５４】
式３ａの一実施形態において、Ｙは、水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミンおよびホスホグリセロールからなる群より選択される。
【０１５５】
式３ａの一実施形態において、Ｙは、水素、ホスホリルコリンおよびホスホリルエタノールアミンからなる群より選択される。
【０１５６】
式３ａの別の実施形態では、Ｙは、ホスホリルコリンおよびホスホリルエタノールアミンからなる群より選択される。
【０１５７】
式３ａの一実施形態において、Ｙはホスホリルコリンである。
【０１５８】
式３ａのさらなる一実施形態では、Ｂ１、Ｂ２およびＢ３の各々は酸素である。
【０１５９】
式３ａのさらなる一実施形態では、Ｙはホスホリルコリンであり、Ｂ１、Ｂ２およびＢ３の各々は酸素である。
【０１６０】
式３ａの一実施形態において、該酸化リン脂質は、式４ｂ：
0006717825.tif 000050
式４ｂ
による構造を有し、
式中、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、Ａ１、Ａ２、Ｘ１、Ｘ２およびＹは、式３ａについて規定のとおりである。
【０１６１】
一実施形態において、式４ｂのＢ１、Ｂ２、Ｂ３の各々は酸素であり、該酸化リン脂質は式４ｃ：
0006717825.tif 000051
式４ｃ
による構造を有する。
【０１６２】
式４ｃにおいて、Ａ１は、ＣＨ２、ＣＨ＝ＣＨおよびＣ＝Ｏからなる群より選択される。一例では、式４ｃのＡ１はＣＨ２である。
【０１６３】
式４ｃにおいて、Ａ２は存在していないか、またはＣＨ２である。
【０１６４】
式４ｃにおいて、Ｘ１は、１〜３０個の炭素原子を有するアルキルである。
【０１６５】
式４ｃにおいて、Ｘ２は
0006717825.tif 000052
であり、式中：
Ｅは存在していないか、または１〜２４個の炭素原子を有するアルキル鎖であり；
Ｆは、水素、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、ハライド、アセトキシおよびアリールからなる群より選択され；
Ｚは：
0006717825.tif 000053
からなる群より選択され、
Ｒｄは、Ｈ、アルキルおよびアリールから選択される。
【０１６６】
式４ｃにおいて、Ｙは、水素、アルキル、アリール、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルカルジオリピン、ホスファチジルイノシトール、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミン、ホスホグリセロールからなる群より選択される。
【０１６７】
式４ｃの一実施形態において、Ｘ１は、１０〜３０個の炭素原子または８〜３０個の炭素原子を有するアルキルである。
【０１６８】
式４ｃの一実施形態において、Ｅは、１〜１０個の炭素原子または１〜４個の炭素原子を有するアルキルである。
【０１６９】
式４ｃの一実施形態において、Ｙはホスホリルコリンである。
【０１７０】
式１、２、３、３ａ、４ｂおよび４ｃの各炭素原子は、キラルまたは非キラル炭素原子であり、ここで、各キラル炭素原子は、Ｓ−立体配置またはＲ−立体配置を有し得る。
【０１７１】
別の実施形態では、本発明の医薬組成物は、１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシ）ブチル−グリセロ−３−ホスホコリンまたは１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシブチル）−グリセロ−３−ホスホコリン（ＶＢ−２０１）を含む。別の実施形態では、本発明の医薬組成物は、（Ｒ）−１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシ）ブチル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンを含む。一部の実施形態では、（Ｒ）−１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシ）ブチル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンは、約８０％ｅｅ以上、例えば、約８５％ｅｅ、約９０％ｅｅ、約９１％ｅｅ、約９２％ｅｅ、約９３％ｅｅ、約９４％ｅｅ、約９５％ｅｅ、約９６％ｅｅ、約９７％ｅｅ、約９８％ｅｅ、約９９％ｅｅ、約９９．５％ｅｅ以上のエナンチオマー純度を有する。他の実施形態では、（Ｒ）−１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシ）ブチル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンは、約８０％ｅｅ〜約１００％ｅｅ、約８５％ｅｅ〜約１００％ｅｅ、約９０％ｅｅ〜約１００％ｅｅ、約９５％ｅｅ〜約１００％、約８０％ｅｅ〜約９９．５％ｅｅ、約８５％ｅｅ〜約９９．５％ｅｅ、約９０％ｅｅ〜約９９．５％ｅｅ、約９５％ｅｅ〜約９９．５％、またはその任意の範囲内のエナンチオマー純度を有する。
【０１７２】
他の実施形態では、本発明の医薬組成物は、以下の構造：
0006717825.tif 000054
の化合物を含む。
【０１７３】
他の実施形態では、本発明の医薬組成物は、以下の構造：
0006717825.tif 000055
の化合物を含む。
【０１７４】
他の実施形態では、該医薬組成物により線維症（例えば、肝線維症、腎線維症、巣状分節性糸球体硬化症または本明細書に記載の任意の他の線維症）がテルミサルタンと同様に、またはより良好に処置または予防される。他の実施形態では、該医薬組成物により肝臓の炎症がテルミサルタンと同様に、またはより良好に低減される。他の実施形態では、該医薬組成物により肝線維症がテルミサルタンと同様に、またはより良好に低減される。他の実施形態では、該医薬組成物により腎線維症がテルミサルタンと同様に、またはより良好に処置または予防される。他の実施形態では、該医薬組成物により巣状分節性糸球体硬化症がテルミサルタンと同様に、またはより良好に処置または予防される。
【０１７５】
線維症の処置方法または予防方法
本発明の実施形態は、本発明の酸化脂質を投与する段階を含む、線維症または肝臓の炎症を処置または予防するための方法に関する。他の実施形態では、該方法は、治療有効量の本発明の酸化脂質を、それを必要とする対象に投与する段階を含む。他の実施形態では、該方法は、本発明の医薬組成物を投与する段階を含む。
【０１７６】
本発明の方法の一部の実施形態では、線維症が肺線維症、肝線維症、皮膚線維症または腎線維症である。本発明の方法の一部の実施形態では、線維症が心臓線維症、骨髄線維症、腸線維症、関節線維症（膝、肩または他の関節）、手の線維症、指の線維症、骨格筋線維症、神経線維症および陰茎線維症である。他の実施形態では、線維症が特発性肺線維症（ＩＰＦ）、嚢胞性線維症、進行性塊状線維症、肝硬変、脂肪性肝炎（脂肪性肝疾患）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、心内膜心筋線維症、心筋梗塞、心房性線維症、縦隔線維症、骨髄線維症、後腹膜線維症、腎性全身性線維症、ケロイド、クローン病、強皮症／全身性硬化症、関節線維症、ペイロニー病、デュピュイトラン拘縮、癒着性関節包炎または巣状分節性糸球体硬化症である。一部の実施形態では、線維症が肝臓の炎症と関連している。一部の実施形態では、線維症が肝線維症である。一部の実施形態では、線維症が腎線維症である。一部の実施形態では、腎線維症の処置または予防を必要とする対象が慢性腎臓疾患を有する対象である。一部の実施形態では、線維症が巣状分節性糸球体硬化症である。一部の実施形態では、巣状分節性糸球体硬化症の処置または予防を必要とする対象が慢性腎臓疾患を有する対象である。
【０１７７】
一部の実施形態では、線維症は、特発性肺線維症を含まない線維症である。他の実施形態では、線維症は、嚢胞性線維症を含まない線維症である。他の実施形態では、線維症は、進行性塊状線維症を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、肝硬変を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、脂肪性肝炎（脂肪性肝疾患）を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、心内膜心筋線維症を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、心筋梗塞を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、心房性線維症を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、縦隔線維症を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、骨髄線維症を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、後腹膜線維症を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、腎性全身性線維症を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、ケロイドを含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、クローン病を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、強皮症／全身性硬化症を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、関節線維症を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、ペイロニー病を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、デュピュイトラン拘縮を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、癒着性関節包炎を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、巣状分節性糸球体硬化症を含まない線維症である。一部の実施形態では、線維症は、動脈内の線維性の病変またはプラークを含まない線維症である。
【０１７８】
一部の実施形態では、該酸化脂質により肝臓の炎症が処置または予防されるが肝線維症は改められない。他の実施形態では、該酸化脂質により肝線維症が処置または予防されるが肝臓の炎症は改められない。
【０１７９】
本発明の方法の一部の実施形態では、ＴＬＲ２、ＴＬＲ４および／またはＣＤ１４の活性が処理細胞において阻害される。一部の実施形態では、ＴＬＲ２およびＴＬＲ４の活性が阻害されるか；ＴＬＲ４とＣＤ１４の活性が阻害されるか；ＴＬＲ２とＣＤ１４の活性が阻害されるか；またはＴＬＲ２、ＴＬＲ４およびＣＤ１４の活性が阻害される。
【０１８０】
本発明の方法の一部の実施形態では、本発明の酸化脂質で処置された対象の脂肪症が、未処置対象またはプラセボ処置対象と比べて低減されない。他の実施形態では、本発明の酸化脂質で処置された対象の肝小葉の形成が、未処置対象またはプラセボ処置対象と比べて減少しない。他の実施形態では、本発明の酸化脂質で処置された対象の肝小葉の構築が、未処置対象またはプラセボ処置対象と比べて減少しない。他の実施形態では、未処置対象またはプラセボ処置対象と比べて、それぞれ、本発明の酸化脂質で処置された対象の脂肪症は低減されず、本発明の酸化脂質で処置された対象の肝小葉の形成は減少する。他の実施形態では、未処置対象またはプラセボ処置対象と比べて、それぞれ、本発明の酸化脂質で処置された対象の脂肪症は低減されず、本発明の酸化脂質で処置された対象の肝小葉の形成は減少しない。他の実施形態では、泡沫細胞様マクロファージが本発明の酸化脂質で処置された対象において、未処置対象またはプラセボ処置対象と比べて減少する。一部の実施形態では、本発明の酸化脂質で処置された対象の肝小葉の形成および泡沫細胞様マクロファージが、それぞれ、未処置対象またはプラセボ処置対象と比べて減少する。一部の実施形態では、本発明の酸化脂質で処置された対象の肝小葉の炎症が、未処置対象またはプラセボ処置対象と比べて減少する。一部の実施形態では、本発明の酸化脂質で処置された対象の肝小葉の炎症および泡沫細胞様マクロファージが、それぞれ、未処置対象またはプラセボ処置対象と比べて減少する。一部の実施形態では、肝小葉の形成、本発明の酸化脂質で処置された対象の肝小葉の炎症および泡沫細胞様マクロファージが、それぞれ、未処置対象またはプラセボ処置対象と比べて減少する。一部の実施形態では、本発明の酸化脂質で処置された対象の肝小葉の形成が、未処置対象またはプラセボ処置対象と比べて約５％〜約５０％（例えば、約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、または明示した値間の任意の範囲）減少する。一部の実施形態では、本発明の酸化脂質で処置された対象の泡沫細胞様マクロファージの形成が、未処置対象またはプラセボ処置対象と比べて約５％〜約５０％（例えば、約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、または明示した値間の任意の範囲）減少する。一部の実施形態では、本発明の酸化脂質で処置された対象の肝小葉の炎症が、未処置対象またはプラセボ処置対象と比べて約５％〜約５０％（例えば、約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、または明示した値間の任意の範囲）減少する。
【０１８１】
一部の実施形態では、該酸化脂質が、式１：
0006717825.tif 000056
式１
による構造を有する化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、水和物もしくは溶媒和物であり、
式中：
ｎは１〜６の整数であり、ここで、ｎが１のとき、Ｃｎ、Ｂｎ、ＲｎおよびＹは存在せず、Ｃ１はＲ’ｎに結合しており；
Ｂ１、Ｂ２、…Ｂｎ−１およびＢｎの各々は独立して、酸素、イオウ、窒素、リンおよびケイ素からなる群より選択され、ここで、前記窒素、リンおよびケイ素の各々は、アルキル、ハロ、シクロアルキル、アリール、ヒドロキシ、チオヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオアリールオキシ、チオアルコキシおよびオキソからなる群より選択される１つ以上の置換基により任意選択的に置換されており；
Ａ１、Ａ２、…Ａｎ−１およびＡｎの各々は独立して、ＣＲ”Ｒ’’’、Ｃ＝ＯおよびＣ＝Ｓからなる群より選択され、
Ｙは、以下：
水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビホスホネート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミン、ホスホグリセロール、ならびに、以下の一般式：
0006717825.tif 000057
を有する部分であって、式中：
Ｂ’およびＢ”の各々が独立して、イオウおよび酸素からなる群より選択され；
Ｄ’およびＤ”の各々が独立して、水素、アルキル、アミノ置換アルキル、シクロアルキル、ホスホネートおよびチオホスホネートからなる群より選択される、部分
からなる群より選択され；
Ｘ１、Ｘ２、…Ｘｎ−１の各々は独立して、一般式２：
0006717825.tif 000058
式２
を有する飽和または不飽和の炭化水素であり、式中：
ｍは１〜２６の整数であり；
Ｚは：
0006717825.tif 000059
からなる群より選択され、ここで、Ｗは、酸素およびイオウからなる群より選択され；
Ｘ１、Ｘ２、…Ｘｎ−１のうちの少なくとも１つは水素以外のＺを含み、
Ｒ１、Ｒ’１、Ｒ２、…Ｒｎ−１、Ｒｎ、Ｒ’ｎの各々、Ｒ”およびＲ’’’の各々ならびにＲａ、Ｒ’ａ、Ｒｂ、Ｒ’ｂ、…Ｒｍ−１、Ｒ’ｍ−１、ＲｍおよびＲ’ｍの各々は独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、ホスホネート、ホスフェート、ホスフィニル、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、アミド、カルボニル、チオカルボニル、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、Ｃ−カルバメート、Ｎ−カルバメート、Ｃ−チオカルボキシ、Ｓ−チオカルボキシおよびアミノからなる群より選択されるか、あるいはまた、Ｒ１、Ｒ’１、Ｒ２、…Ｒｎ−１、ＲｎおよびＲ’ｎのうちの少なくとも２つおよび／またはＲａ、Ｒ’ａ、Ｒｂ、Ｒ’ｂ、…Ｒｍ−１、Ｒ’ｍ−１、ＲｍおよびＲ’ｍのうちの少なくとも２つが少なくとも１つの４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成している、
化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、水和物もしくは溶媒和物である。
【０１８２】
他の実施形態では、該酸化脂質が、式３：
0006717825.tif 000060
式３
による構造を有する化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、水和物もしくは溶媒和物である。
【０１８３】
式３において、ｎは１〜４から選択される整数である。
【０１８４】
式３において、Ｂ１、各Ｂ２およびＢ３は独立して、酸素、イオウおよびＮＲ４からなる群より選択され、ここで、Ｒ４は、水素、アルキル、シクロアルキル、アリールおよびアシルから選択される。
【０１８５】
式３において、Ａ１および各Ａ２は独立して、ＣＲｅＲｅｅ、ＣＲｅ＝ＣＲｅｅ、Ｃ＝ＯおよびＣ＝Ｓからなる群より選択され、ここで、ＲｅおよびＲｅｅは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択される。
【０１８６】
式３において、Ｙは、以下：
水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミン、ホスホグリセロール、ならびに、以下の一般式：
0006717825.tif 000061
を有する部分であって、式中：
ＢおよびＢａの各々が独立して、イオウおよび酸素からなる群より選択され；
ＤおよびＤａが独立して、水素、アルキル、アミノアルキル、シクロアルキル、ホスホネートおよびチオホスホネートからなる群より選択される、部分
からなる群より選択される。
【０１８７】
式３において、Ｘ１および各Ｘ２は独立して、飽和または不飽和の線状または分枝状の炭化水素であり、ここで、Ｘ１とＸ２のうちの少なくとも一方は：
0006717825.tif 000062
からなる群より選択される酸化された部分Ｚで置換されており、
式中、Ｗは酸素またはイオウであり；ＲｄおよびＲｄｄは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択される。
【０１８８】
式３の一実施形態において、Ｘ１および各Ｘ２は独立して、一般式４：
0006717825.tif 000063
式４
を有する。
【０１８９】
式４において、ｍは１〜２６から選択される整数である。
【０１９０】
式４において、Ｚは：
0006717825.tif 000064
からなる群より選択され、
式中、Ｗは酸素またはイオウであり；ＲｄおよびＲｄｄは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択され、
Ｘ１とＸ２のうちの少なくとも一方は水素以外のＺを含む。
【０１９１】
式３および式４において、Ｒ１、Ｒ１ａ、各Ｒ２、Ｒ３、Ｒ３ａ、Ｒａ、Ｒａａ、各Ｒｂ、各Ｒｂｂ、ＲｃおよびＲｃｃは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、ホスホネート、ホスフェート、ホスフィニル、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、アミド、カルボニル、チオカルボニル、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、Ｃ−カルバメート、Ｎ−カルバメート、Ｃ−チオカルボキシ、Ｓ−チオカルボキシおよびアミノからなる群より選択され、ここで、Ｒ１、Ｒ１ａ、Ｒ２、Ｒ３およびＲ３ａのうちの少なくとも２つが任意選択的に連接されて、４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成しており、Ｒａ、Ｒａａ、Ｒｂ、Ｒｂｂ、Ｒｃ、およびＲｃｃのうちの少なくとも２つが任意選択的に連接されて、４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成している。
【０１９２】
式３の一実施形態において、ｎは１または２である。式３の別の実施形態では、ｎは１である。
【０１９３】
式３の一実施形態において、Ｙは、水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミンおよびホスホグリセロールからなる群より選択される。
【０１９４】
式３の別の実施形態では、Ｙは、水素、ホスホリルコリンおよびホスホリルエタノールアミンからなる群より選択される。
【０１９５】
式３の別の実施形態では、Ｙは、ホスホリルコリンおよびホスホリルエタノールアミンからなる群より選択される。
【０１９６】
式３の一実施形態において、Ｙはホスホリルコリンである。
【０１９７】
式３の一実施形態において、Ｚは、
0006717825.tif 000065
である。式３の別の実施形態では、Ｚはカルボン酸基である。
【０１９８】
式３のさらなる一実施形態では、ｎは１であり、Ｙはホスホリルコリンである。
【０１９９】
式３のさらなる一実施形態では、Ｂ１、Ｂ２およびＢ３の各々は酸素である。
【０２００】
式３のさらなる一実施形態では、ｎは１であり、Ｙはホスホリルコリンであり、Ｂ１、Ｂ２およびＢ３の各々は酸素である。
【０２０１】
一実施形態において、該酸化脂質は、式３ａ：
0006717825.tif 000066
式３ａ
による構造を有するもの、またはその薬学的に許容され得る塩、水和物もしくは溶媒和物である。
【０２０２】
式３ａにおいて、Ｂ１、Ｂ２およびＢ３は独立して、酸素およびイオウから選択される。
【０２０３】
式３ａにおいて、Ａ１およびＡ２は独立して、ＣＨ２、ＣＨ＝ＣＨ、Ｃ＝ＯおよびＣ＝Ｓからなる群より選択される。
【０２０４】
式３ａにおいて、Ｙは、水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミンおよびホスホグリセロールからなる群より選択される。
【０２０５】
式３ａにおいて、Ｒ１、Ｒ１ａ、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ３ａは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、ホスホネート、ホスフェート、ホスフィニル、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、アミド、カルボニル、チオカルボニル、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、Ｃ−カルバメート、Ｎ−カルバメート、Ｃ−チオカルボキシ、Ｓ−チオカルボキシおよびアミノからなる群より選択され、ここで、Ｒ１、Ｒ１ａ、Ｒ２、Ｒ３およびＲ３ａのうちの少なくとも２つが任意選択的に連接されて、４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成しており、Ｒａ、Ｒａａ、Ｒｂ、Ｒｂｂ、Ｒｃ、およびＲｃｃのうちの少なくとも２つが任意選択的に連接されて、４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成しており；
式３ａにおいて、Ｘ１およびＸ２は独立して、飽和または不飽和の線状または分枝状の炭化水素であり、ここで、Ｘ１とＸ２のうちの少なくとも一方は：
0006717825.tif 000067
から選択される式を有する酸化された部分Ｚで置換されており、
式中、Ｗは酸素またはイオウであり；ＲｄおよびＲｄｄは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択される。
【０２０６】
式３ａの一実施形態において、Ｘ１およびＸ２は独立して、式４ａ：
0006717825.tif 000068
式４ａ
による構造を有する。
【０２０７】
式４ａにおいて、ｍは１〜２６から選択される整数である。
【０２０８】
式４ａにおいて、Ｒａ、Ｒａａ、各Ｒｂ、各Ｒｂｂ、Ｒｃ、およびＲｃｃは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、ホスホネート、ホスフェート、ホスフィニル、スルホニル、スルフィニル、スルホンアミド、アミド、カルボニル、チオカルボニル、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、Ｃ−カルバメート、Ｎ−カルバメート、Ｃ−チオカルボキシ、Ｓ−チオカルボキシおよびアミノからなる群より選択され、ここで、Ｒａ、Ｒａａ、Ｒｂ、Ｒｂｂ、Ｒｃ、およびＲｃｃのうちの少なくとも２つが任意選択的に連接されて、４、５または６員の芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の環を形成している。
【０２０９】
式４ａにおいて、Ｚは：
0006717825.tif 000069
からなる群より選択され、
式中、Ｗは酸素またはイオウであり；ＲｄおよびＲｄｄは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択され、
Ｘ１とＸ２のうちの少なくとも一方は水素以外のＺを含む。
【０２１０】
式３ａの一実施形態において、Ｚは、
0006717825.tif 000070
である。式３ａの別の実施形態では、Ｚはカルボン酸基である。
【０２１１】
式３ａの一実施形態において、Ｙは、水素、アシル、アルキル、アリール、シクロアルキル、カルボキシ、糖、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−グルタル酸、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミンおよびホスホグリセロールからなる群より選択される。
【０２１２】
式３ａの一実施形態において、Ｙは、水素、ホスホリルコリンおよびホスホリルエタノールアミンからなる群より選択される。
【０２１３】
式３ａの別の実施形態では、Ｙは、ホスホリルコリンおよびホスホリルエタノールアミンからなる群より選択される。
【０２１４】
式３ａの一実施形態において、Ｙはホスホリルコリンである。
【０２１５】
式３ａのさらなる一実施形態では、Ｂ１、Ｂ２およびＢ３の各々は酸素である。
【０２１６】
式３ａのさらなる一実施形態では、Ｙはホスホリルコリンであり、Ｂ１、Ｂ２およびＢ３の各々は酸素である。
【０２１７】
式３ａの一実施形態において、該酸化リン脂質は、式４ｂ：
0006717825.tif 000071
式４ｂ
による構造を有し、
式中、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、Ａ１、Ａ２、Ｘ１、Ｘ２およびＹは、式３ａについて規定のとおりである。
【０２１８】
一実施形態において、式４ｂのＢ１、Ｂ２、Ｂ３の各々は酸素であり、該酸化リン脂質は式４ｃ：
0006717825.tif 000072
式４ｃ
による構造を有する。
【０２１９】
式４ｃにおいて、Ａ１は、ＣＨ２、ＣＨ＝ＣＨおよびＣ＝Ｏからなる群より選択される。一例では、式４ｃのＡ１がＣＨ２である。
【０２２０】
式４ｃにおいて、Ａ２は存在していないか、またはＣＨ２である。
【０２２１】
式４ｃにおいて、Ｘ１は、１〜３０個の炭素原子を有するアルキルである。
【０２２２】
式４ｃにおいて、Ｘ２は
0006717825.tif 000073
であり、式中：
Ｅは存在していないか、または１〜２４個の炭素原子を有するアルキル鎖であり；
Ｆは、水素、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、ハライド、アセトキシおよびアリールからなる群より選択され；
Ｚは：
0006717825.tif 000074
からなる群より選択され、
Ｒｄは、Ｈ、アルキルおよびアリールから選択される。
【０２２３】
式４ｃにおいて、Ｙは、水素、アルキル、アリール、リン酸、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルカルジオリピン、ホスファチジルイノシトール、ホスホリルカルジオリピン、ホスホリルイノシトール、エチルホスホコリン、ホスホリルメタノール、ホスホリルエタノール、ホスホリルプロパノール、ホスホリルブタノール、ホスホリルエタノールアミン−Ｎ−ラクトース、ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（プロピレングリコール）］、ホスホイノシトール−４−ホスフェート、ホスホイノシトール−４，５−ビスホスフェート、ピロホスフェート、ホスホエタノールアミン−ジエチレントリアミン−ペンタアセテート、ジニトロフェニル−ホスホエタノールアミンおよびホスホグリセロールからなる群より選択される。
【０２２４】
式４ｃの一実施形態において、Ｘ１は、１０〜３０個の炭素原子または８〜３０個の炭素原子を有するアルキルである。
【０２２５】
式４ｃの一実施形態において、Ｅは、１〜１０個の炭素原子または１〜４個の炭素原子を有するアルキルである。
【０２２６】
式４ｃの一実施形態において、Ｙはホスホリルコリンである。
【０２２７】
式１、２、３、３ａ、４ｂおよび４ｃの各炭素原子はキラルまたは非キラル炭素原子であり、ここで、各キラル炭素原子はＳ−立体配置またはＲ−立体配置を有し得る。
【０２２８】
別の実施形態では、該酸化脂質が１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシ）ブチル−グリセロ−３−ホスホコリンまたは１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシブチル）−グリセロ−３−ホスホコリン（ＶＢ−２０１）である。別の実施形態では、該酸化脂質が（Ｒ）−１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシ）ブチル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンである。一部の実施形態では、（Ｒ）−１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシ）ブチル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンは、約８０％ｅｅ以上、例えば、約８５％ｅｅ、約９０％ｅｅ、約９１％ｅｅ、約９２％ｅｅ、約９３％ｅｅ、約９４％ｅｅ、約９５％ｅｅ、約９６％ｅｅ、約９７％ｅｅ、約９８％ｅｅ、約９９％ｅｅ、約９９．５％ｅｅ以上のエナンチオマー純度を有する。他の実施形態では、（Ｒ）−１−ヘキサデシル−２−（４’−カルボキシ）ブチル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンは、約８０％ｅｅ〜約１００％ｅｅ、約８５％ｅｅ〜約１００％ｅｅ、約９０％ｅｅ〜約１００％ｅｅ、約９５％ｅｅ〜約１００％、約８０％ｅｅ〜約９９．５％ｅｅ、約８５％ｅｅ〜約９９．５％ｅｅ、約９０％ｅｅ〜約９９．５％ｅｅ、約９５％ｅｅ〜約９９．５％、またはその任意の範囲内のエナンチオマー純度を有する。
【０２２９】
他の実施形態では、該酸化脂質は、以下の構造：
0006717825.tif 000075
を有する。
【０２３０】
他の実施形態では、該酸化脂質は、以下の構造：
0006717825.tif 000076
を有する。
【０２３１】
他の実施形態では、該酸化脂質化合物により、線維症（例えば、肝線維症、腎線維症、巣状分節性糸球体硬化症または本明細書に記載の任意の他の線維症）がテルミサルタンと同様に、またはより良好に処置または予防される。他の実施形態では、該酸化脂質化合物により肝臓の炎症がテルミサルタンと同様に、またはより良好に低減される。他の実施形態では、該酸化脂質化合物により肝線維症がテルミサルタンと同様に、またはより良好に低減される。他の実施形態では、該酸化脂質化合物により腎線維症がテルミサルタンと同様に、またはより良好に処置または予防される。他の実施形態では、該酸化脂質化合物により巣状分節性糸球体硬化症がテルミサルタンと同様に、またはより良好に処置または予防される。
【０２３２】
一部の実施形態では、対象は哺乳動物またはヒトである。他の実施形態では、ヒトは女性である。他の実施形態では、ヒトは男性である。
【実施例】
【０２３３】
次に、以下の実施例に言及するが、これは上記の説明と一緒に、非限定的な様式で本発明の一部の実施形態の実例を示すものである。
【０２３４】
実施例１
ＶＢ−２０１はヒト単球（一次ＣＤ１４＋）においてＬＰＳ（ＴＬＲ４）誘導性シグナル伝達を阻害する
方法および材料
単球の単離
静脈血試料は、健常男性ドナーから、Ｓｈｅｂａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ（Ｒａｍａｔ  Ｇａｎ，Ｉｓｒａｅｌ）の施設内治験審査委員会に従うように採取されたものであった。ＰＢＭＣをＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ  ＰＬＵＳ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）で、５０ｍｌ容Ｌｅｕｃｏｓｅｐチューブ（Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−Ｏｎｅ，Ｆｒｉｃｋｅｎｈａｕｓｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて単離した。細胞をＰＢＳ（Ｋｉｂｂｕｔｚ  Ｂｅｉｔ  Ｈａｅｍｅｋ，Ｉｓｒａｅｌ）中で洗浄し、４℃で１５分間、ＰＢＳおよび０．５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含有するバッファー中で、ヒトＣＤ１４マイクロビーズ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ，Ｂｅｒｇｉｓｃｈ  Ｇｌａｄｂａｃｈ，Ｇｅｒｍａｎｙ）とともにインキュベートした。
【０２３５】
細胞の活性化およびウエスタンブロッティング
細胞（１０６／ｍｌ）を、２０分間、ＶＢ−２０１（図１に示した用量）または溶媒（Ｓｏｌ）で前処理した後、１００ｎｇ／ｍｌのリポ多糖（ＬＰＳ）で１５分間活性化させるか、あるいは未処理（Ｕｎｔ）とした。細胞を洗浄し、１：１００のジチオトレイトール（ＤＴＴ）、ホスファターゼおよびプロテアーゼ阻害薬（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を含有する溶解バッファー中に再懸濁させた。試料をプレキャストＣｒｉｔｅｒｉｏｎ  ＴＧＸゲル（Ｂｉｏ−Ｒａｄ，Ｈｅｍｅｌ  Ｈｅｍｐｓｔｅａｄ，ＵＫ）上にロードし、ニトロセルロース膜に転写した。ブロットを、５％ミルクまたはＢＳＡ（Ｔｒｉｓ緩衝生理食塩水およびＴｗｅｅｎ  ２０（ＴＢＳＴ）中）で１時間ブロックした後、一次抗体および二次抗体とともにインキュベーションした。膜を、ＥＣＬキット（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて発色させた。以下の抗体をイムノブロッティングに使用した。
【０２３６】
一次抗体：ｐ−ｐ３８（カタログ番号４５１１；１：１０００）およびｐ−ＩＫＫ（カタログ番号２６９７；１：１０００）はＣｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｄａｎｖｅｒｓ，ＭＡ，ＵＳＡ）製のものであった。ｐ−ＥＲＫ１／２（カタログ番号Ｍ８１５９；１：１００００）はＳｉｇｍａ（Ｉｓｒａｅｌ）から購入した。αチューブリン（Ｔｕｂ）または熱ショックタンパク質９０（ＨＳＰ９０）をローディング対照として使用した。
【０２３７】
二次抗体：ＨＲＰロバ抗ウサギ（１：５０００）およびＨＲＰヤギ抗マウス（１：３０００）はＪａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ（Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ，ＵＳＡ）製のものであった。ＨＲＰロバ抗ヤギ（１：５０００）はＳａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ製のものであった。
【０２３８】
結果
ＴＬＲ４媒介性シグナル伝達経路に対するＶＢ−２０１の効果を調べるため、単離されたヒト一次単球（ＣＤ１４＋）をＶＢ−２０１とともにプレインキュベートし、次いで、ＬＰＳで活性化した。図１Ａ〜１Ｄは、ＶＢ−２０１が、ヒト単球においてＬＰＳによって誘導されるｐ−ＩＫＫ、ｐ−ＥＲＫおよびｐ−ｐ３８およびｐ−ＡＫＴの形成を用量依存的様式で阻害することを示す。したがって、ＶＢ−２０１はＬＰＳ（ＴＬＲ４）誘導性シグナル伝達を阻害する。
【０２３９】
実施例２
ＶＢ−２０１はヒト単球（ＴＨＰ−１細胞株）においてＰＧＮ（ＴＬＲ２）誘導性シグナル伝達を阻害する
方法および材料
細胞の活性化およびウエスタンブロッティング
単球ＴＨＰ−１細胞株はＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから購入した（ＡＴＣＣカタログ番号ＴＩＢ−２０２）。細胞（１０６／ｍｌ）を、２０分間、ＶＢ−２０１（図２に示した用量）または溶媒で前処理した後、２０μｇ／ｍｌのペプチドグリカン（ＰＧＮ）（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）で１５分間活性化させるか、あるいは未処理（「Ｕｎｔ」）とした。細胞を洗浄し、１：１００のジチオトレイトール（ＤＴＴ）、ホスファターゼおよびプロテアーゼ阻害薬（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を含有する溶解バッファー中に再懸濁させた。試料をプレキャストＣｒｉｔｅｒｉｏｎ  ＴＧＸゲル（Ｂｉｏ−Ｒａｄ，Ｈｅｍｅｌ  Ｈｅｍｐｓｔｅａｄ，ＵＫ）上にロードし、ニトロセルロース膜に転写した。ブロットを、５％ミルクまたはＢＳＡ（Ｔｒｉｓ緩衝生理食塩水およびＴｗｅｅｎ  ２０（ＴＢＳＴ）中）で１時間ブロックした後、一次抗体および二次抗体とともにインキュベーションした。膜を、ＥＣＬキット（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて発色させた。以下の抗体をイムノブロッティングに使用した。
【０２４０】
一次抗体：ｐ−ｐ３８（カタログ番号４５１１；１：１０００）およびｐ−ＩＫＫ（カタログ番号２６９７；１：１０００）はＣｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｄａｎｖｅｒｓ，ＭＡ，ＵＳＡ）製のものであった。ｐ−ＥＲＫ１／２（カタログ番号Ｍ８１５９；１：１００００）はＳｉｇｍａ（Ｉｓｒａｅｌ）から購入した。αチューブリンをローディング対照として使用した。
【０２４１】
二次抗体：ＨＲＰロバ抗ウサギ（１：５０００）およびＨＲＰヤギ抗マウス（１：３０００）はＪａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ（Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ，ＵＳＡ）製のものであった。ＨＲＰロバ抗ヤギ（１：５０００）はＳａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ製のものであった。
【０２４２】
結果
ＴＨＰ−１細胞を処理し、ウエスタンブロットによって解析した。図２Ａ〜２Ｂは、ＶＢ−２０１が、ＴＨＰ−１細胞においてＰＧＮによって誘導されるｐ−ＩＫＫ、ｐ−ＥＲＫおよびｐ−ｐ３８の形成を阻害することを示す。したがって、ＶＢ−２０１はＰＧＮ（ＴＬＲ２）誘導性シグナル伝達を阻害する。
【０２４３】
実施例３
ＶＢ−２０１はヒト単球（ＴＨＰ−１細胞株）においてＭＣＰ−１誘導性シグナル伝達を阻害する
方法および材料
細胞の活性化およびウエスタンブロッティング
ＴＨＰ−１細胞（１０６／ｍｌ）を、２０分間、ＶＢ−２０１（図４に示した用量）または溶媒で前処理した後、５０ｎｇ／ｍｌのＭＣＰ１で活性化させるか、あるいは未処理（「Ｕｎｔ」）とした。細胞を洗浄し、１：１００のジチオトレイトール（ＤＴＴ）、ホスファターゼおよびプロテアーゼ阻害薬（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を含有する溶解バッファー中に再懸濁させた。試料をプレキャストＣｒｉｔｅｒｉｏｎ  ＴＧＸゲル（Ｂｉｏ−Ｒａｄ，Ｈｅｍｅｌ  Ｈｅｍｐｓｔｅａｄ，ＵＫ）上にロードし、ニトロセルロース膜に転写した。ブロットを、５％ミルクまたはＢＳＡ（Ｔｒｉｓ緩衝生理食塩水およびＴｗｅｅｎ  ２０（ＴＢＳＴ）中）で１時間ブロックした後、一次抗体および二次抗体とともにインキュベーションした。膜を、ＥＣＬキット（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて発色させた。以下の抗体をイムノブロッティングに使用した。
【０２４４】
一次抗体：ｐ−ＥＲＫ１／２（カタログ番号Ｍ８１５９；１：１００００）はＳｉｇｍａ（Ｉｓｒａｅｌ）から購入した。ｐ−ＡＫＴ（カタログ番号４０６０；１：１０００）はＣｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｄａｎｖｅｒｓ，ＭＡ）から購入した。αチューブリンをローディング対照として使用し、Ｓｉｇｍａ（Ｉｓｒａｅｌ）から購入した。
【０２４５】
二次抗体：ＨＲＰロバ抗ウサギ（１：５０００）およびＨＲＰヤギ抗マウス（１：３０００）はＪａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ（Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ，ＵＳＡ）製のものであった。ＨＲＰロバ抗ヤギ（１：５０００）はＳａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ製のものであった。
【０２４６】
結果
図３は、ＶＢ−２０１が、ＴＨＰ−１細胞においてＭＣＰ−１によって誘導されるｐ−ＡＫＴおよびｐ−ＥＲＫの形成を阻害することを示す。したがって、ＶＢ−２０１はＭＣＰ−１誘導性シグナル伝達を阻害する。
【０２４７】
実施例４
ＶＢ−２０１はヒト単球（一次ＣＤ１４＋）のケモカイン誘導性遊走を阻害する
方法および材料
単球の単離
静脈血試料は、健常男性ドナーから、Ｓｈｅｂａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ（Ｒａｍａｔ  Ｇａｎ，Ｉｓｒａｅｌ）の施設内治験審査委員会に従うように採取されたものであった。ＰＢＭＣをＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ  ＰＬＵＳ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）で、５０ｍｌ容Ｌｅｕｃｏｓｅｐチューブ（Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−Ｏｎｅ，Ｆｒｉｃｋｅｎｈａｕｓｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて単離した。細胞をＰＢＳ（Ｋｉｂｂｕｔｚ  Ｂｅｉｔ  Ｈａｅｍｅｋ，Ｉｓｒａｅｌ）中で洗浄し、４℃で１５分間、ＰＢＳおよび０．５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含有するバッファー中で、ヒトＣＤ１４マイクロビーズ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ，Ｂｅｒｇｉｓｃｈ  Ｇｌａｄｂａｃｈ，Ｇｅｒｍａｎｙ）とともにインキュベートした。
【０２４８】
細胞の活性化および細胞遊走トランスウェルアッセイ
細胞（１０６／ｍｌ）を、２０分間、ＶＢ−２０１（図５に示した用量）または溶媒（Ｓｏｌ）で前処理した。
【０２４９】
ケモカイン誘導性細胞遊走について試験するため、ＲＡＮＴＥＳ（１００ｎｇ／ｍｌ；カタログ番号３００−０６，ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ，Ｉｓｒａｅｌ）およびＭＣＰ−１（５０ｎｇ／ｍｌ；カタログ番号３００−０４，ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ，Ｉｓｒａｅｌ）を、０．５％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を補給したＲＰＭＩ−１６４０培地に溶解させ、ＱＣＭ  ２４ウェル，５ｍｍ穴の遊走アッセイプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ−Ｃｏｓｔａｒ，Ｃｏｒｎｉｎｇ，ＮＹ）の下部チャンバに配した。細胞（３×１０５）を上部チャンバに播種し、２〜４時間インキュベートした。続いて、下部コンパートメントに遊走した細胞の数を蛍光標示式細胞分取（ＦＡＣＳ）によって測定した。
【０２５０】
結果
ヒト単球を処理し、細胞遊走についてトランスウェルアッセイによって解析した。図４は、ＶＢ−２０１がヒト単球（一次ＣＤ１４＋）のケモカイン誘導性遊走を阻害することを示す。
【０２５１】
実施例５
ＶＢ−２０１はヒト単球（ＴＨＰ−１細胞株）においてＳＤＦ１誘導性遊走を阻害する
方法および材料
ＴＨＰ−１細胞（１０６／ｍｌ）を、２０分間、ＶＢ−２０１または溶媒（Ｓｏｌ）で前処理した。ケモカイン誘導性細胞遊走について試験するため、ＲＡＮＴＥＳ（１００ｎｇ／ｍｌ，カタログ番号３００−０６）（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ，Ｉｓｒａｅｌ）およびＭＣＰ−１（５０ｎｇ／ｍｌ，カタログ番号３００−０４）（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ，Ｉｓｒａｅｌ）を、０．５％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を補給したＲＰＭＩ−１６４０培地に溶解させ、ＱＣＭ  ２４ウェル，５ｍｍ穴の遊走アッセイプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ−Ｃｏｓｔａｒ，Ｃｏｒｎｉｎｇ，ＮＹ）の下部チャンバに配した。細胞（３×１０５）を上部チャンバに播種し、２〜４時間インキュベートした。続いて、下部コンパートメントに遊走した細胞の数を蛍光標示式細胞分取（ＦＡＣＳ）によって測定した。
【０２５２】
結果
図５は、ＶＢ−２０１がヒト単球（ＴＨＰ−１細胞株）のＳＤＦ１誘導性遊走を阻害することを示す。
【０２５３】
実施例６
ＶＢ−２０１はヒト単球（一次ＣＤ１４＋）においてＲＡＮＴＥＳ誘導性シグナル伝達を阻害する
ヒト単球を、細胞をＲＡＮＴＥＳ（１００ｎｇ／ｍｌ；カタログ番号３００−０６，ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ，Ｉｓｒａｅｌ）で１５分間誘導したこと以外は実施例１および図６に記載のとおりに入手し、処理し、ウエスタンブロットによって解析した。図６は、ＶＢ−２０１が、ヒト単球においてＲＡＮＴＥＳによって誘導されるｐ−ＥＲＫの形成を阻害することを示す。したがって、ＶＢ−２０１はＲＡＮＴＥＳ誘導性シグナル伝達を阻害する。
【０２５４】
実施例７
ＶＢ−２０１は、ＬＰＳ（ＴＬＲ４により）またはＰａｍ３ＣＳＫ４（ＴＬＲ２により）によって刺激されたヒト単球（一次ＣＤ１４＋）においてＩＬ−１２ｐ４０レベルを阻害する
方法および材料
ヒト単球を播種し（１０６／ｍｌ）、ＶＢ−２０１で１時間、前処理した後、１００ｎｇ／ｍｌの大腸菌株０５５：Ｂ５由来ＬＰＳ（Ｓｉｇｍａ，Ｉｓｒａｅｌ）（図７Ａ）または３００ｎｇ／ｍｌのＰａｍ３ＣＳＫ４（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）（図７Ｂ）で２４時間活性化させ、サイトカイン産生を誘導した。次いで、上清み中のＩＬ−１２／２３ｐ４０濃度をＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ，カタログ番号ＤＹ１２４０）によって測定した。溶媒（０．５％エタノール含有ＰＢＳ）で活性化させた細胞を対照として使用した。
【０２５５】
結果
図７Ａ〜７Ｂは、ＶＢ−２０１が、ＬＰＳ（ＴＬＲ４）刺激型およびＰａｍ３ＣＳＫ４（ＴＬＲ２）刺激型ヒト単球（一次ＣＤ１４＋）によるＩＬ−１２ｐ４０の分泌を阻害することを示す。
【０２５６】
実施例８
ＶＢ−２０１はヒト単球（一次ＣＤ１４＋）によるＬＰＳ結合を阻害する
方法および材料
単球の単離
静脈血試料は、健常男性ドナーから、Ｓｈｅｂａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ（Ｒａｍａｔ  Ｇａｎ，Ｉｓｒａｅｌ）の施設内治験審査委員会に従うように採取されたものであった。ＰＢＭＣをＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ  ＰＬＵＳ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）で、５０ｍｌ容Ｌｅｕｃｏｓｅｐチューブ（Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−Ｏｎｅ，Ｆｒｉｃｋｅｎｈａｕｓｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて単離した。細胞をＰＢＳ（Ｋｉｂｂｕｔｚ  Ｂｅｉｔ  Ｈａｅｍｅｋ，Ｉｓｒａｅｌ）中で洗浄し、４℃で１５分間、ＰＢＳおよび０．５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含有するバッファー中で、ヒトＣＤ１４マイクロビーズ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ，Ｂｅｒｇｉｓｃｈ  Ｇｌａｄｂａｃｈ，Ｇｅｒｍａｎｙ）とともにインキュベートした。
【０２５７】
ＬＰＳ結合阻害アッセイ
リポ多糖（ＬＰＳ）結合による干渉を評価するため、ＶＢ−２０１またはＶＢ−７０３を２０分間、細胞（１０６／ｍｌ）とともにインキュベートし、その後、１００ｎｇ／ｍｌのビオチン−ＬＰＳ（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ）をさらに１５分間、すべて４℃で添加した。細胞を洗浄し、ＦＡＣＳバッファー中に再懸濁させ、ＦＡＣＳ−Ｃａｌｉｂｕｒ装置で解析した。
【０２５８】
図８は、ＶＢ−２０１が、ＬＰＳのヒト単球（一次ＣＤ１４＋）に対する結合を約７μｇ／ｍｌのＩＣ５０で阻害したことを示す。
【０２５９】
実施例９
ＶＢ−２０１はＬＰＳ（ＴＬＲ４）刺激型単球駆動性樹状細胞（Ｍｏ駆動性ＤＣ）においてＩＬ−６分泌を阻害する
方法および材料
単球由来ＤＣ（Ｍｏ由来ＤＣ）を作製するため、ＣＤ１４＋単球を計数し、洗浄し、ＲＰＭＩ−１６４０、Ｌ−グルタミン、β−メルカプトエタノール、１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）、ピルビン酸ナトリウム、非必須アミノ酸、０．０１Ｍ  ＨＥＰＥＳ、抗生物質（ペニシリン，ストレプトマイシン）、５０ｎｇ／ｍｌのヒト顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭＣＳＦ）および２０ｎｇ／ｍｌのヒトＩＬ−４（ともに、ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ  Ａｓｉａ（Ｉｓｒａｅｌ）製）を含む培地中に播種した（１０６／ｍｌ）。培地を２〜３日ごとに交換した。Ｍｏ−ＤＣを培養後５〜６日目に収集し、計数し、播種した（１０６／ｍｌ）。細胞をＶＢ−２０１で１時間前処理した後、１００ｎｇ／ｍｌの大腸菌株０５５：Ｂ５由来ＬＰＳ（Ｓｉｇｍａ，Ｉｓｒａｅｌ）で２４時間活性化させ、サイトカイン産生を誘導した。上清み中のＩＬ−６濃度（図９）をＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ，カタログ番号ＤＹ２０６）によって測定した。溶媒（０．５％エタノール含有ＰＢＳ）で活性化させた細胞を対照として使用した。
【０２６０】
結果
図９は、ＶＢ−２０１が、ＬＰＳ（ＴＬＲ４）刺激型Ｍｏ由来ＤＣにおいてＩＬ−６分泌を阻害することを示す。
【０２６１】
実施例１０
ＶＢ−２０１はＬＰＳ（ＴＬＲ４）刺激型Ｍｏ由来ＤＣにおいてＩＬ−１２ｐ４０分泌を阻害する
Ｍｏ由来ＤＣを、上清み中のＩＬ−１２ｐ４０濃度をＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ，カタログ番号ＤＹ１２４０）によって測定したこと以外は実施例（Ｅａｍｐｌｅ）９および図１０に記載のとおりに入手し、処理し、ＥＬＩＳＡによって解析した。図１０は、ＶＢ−２０１がＬＰＳ（ＴＬＲ４）刺激型Ｍｏ由来ＤＣにおいてＩＬ−１２ｐ４０分泌を阻害することを示す。
【０２６２】
実施例１１
肝臓の炎症および線維症に対するＶＢ−２０１の効果
方法および材料
ＮＡＳＨおよび肝線維症の誘導
低用量のストレプトゾトシン（ＳＴＺ）に曝露した新生仔雄マウスは、糖尿病とともに肝臓脂肪症を発症する。継続的な高脂肪食（ＨＦＤ）により、泡沫細胞様マクロファージを伴う小葉の炎症が増大し、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の病態が示される。４０匹の雄マウスにおいて、生まれて２日後の２００μｇ／マウスのＳＴＺの単回皮下注射および４週齢からＨＦＤ［５７ｋｃａｌ％脂肪］）の給餌によってＮＡＳＨを誘導した。ビヒクル、ＶＢ−２０１（４ｍｇ／ｋｇ）または陽性対照としてテルミサルタン（１０ｍｇ／ｋｇ）を、６週齢から開始し、１日１回、３週間投与した。マウスを９週齢のときに屠殺した。
【０２６３】
脂肪性肝炎および線維症の評価
肝臓の病態を用いて、肝臓の炎症および線維症に対するＶＢ−２０１の効果を調べた。組織学検査スライドをヘマトキシリン／エオシン（Ｈ＆Ｅ）で染色し、炎症を評価した。炎症スコアを以下のとおりに判定した。
０  −  炎症性の病巣なし
１  −  炎症性の病巣＜２個
２  −  炎症性の病巣２〜４個
３  −  炎症性の病巣＞４個
【０２６４】
組織学検査スライドをシリウスレッドで染色し、線維症の程度のマーカーとしてのコラーゲン含有量を測定した。
【０２６５】
結果
ＮＡＳＨマウスモデルにおける肝臓の炎症および線維症に対するＶＢ−２０１の効果を試験した。図１１Ａ〜１１Ｂは、疾患の誘導によりビヒクル処置マウスの肝臓において顕著な炎症がもたらされたことを示す。ＶＢ−２０１での処置により炎症が６５％有意に抑えられた。陽性対照テルミサルタンでの投与では、肝臓の炎症が７７％有意に低減された。図１２Ａ〜１２Ｂは、実施例１１における疾患の誘導でもまた、ビヒクル処置マウスの肝臓において線維症面積の顕著な増大がもたらされたことを示す。図１２Ａ〜１２Ｂの結果は、ＶＢ−２０１により、ビヒクル処置マウスと比べて線維症の程度が有意に（約３４％）低減されたことを示す。
【０２６６】
実施例１２
巣状分節性糸球体硬化症に対するＶＢ−２０１の効果
方法および材料
動物および実験プロトコル
初期体重２００ｇの雄Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラット（Ｈａｒｌａｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｓｒａｅｌ）を、専用のＨＶＡＣ（熱、換気、空調動物施設）のＩＶＣケージに２〜３匹／ケージで収容した。施設は外部光に対する曝露はなく、１２時間の明／１２時間の暗の自動交互サイクルに維持した。動物に、市販の齧歯類用飼料（Ｈａｒｌａｎ  Ｔｅｋｌａｄ  ＴＲＭ  Ｒａｔ／Ｍｏｕｓｅ  Ｄｉｅｔ）を随意に与え、ステンレス鋼シッパー管を有するポリスルホンボトルによって各ケージに供給されるオートクレーブ処理水を自由に摂取させた。動物試験はすべて、イスラエルの動物実験委員会によって承認されたものであった（ＩＬ−１３−０３−０２７）。
【０２６７】
５／６腎摘出術による慢性腎疾患の誘導
ラットを以下の３つの群に分けた：（１）Ａ群の健常ラット（ｎ＝３）、（２）Ｂ群のシャム群−外科的（ｃｈｉｒｕｒｇｉｃａｌ）プロセスに供したが腎臓質量減少なし（ｎ＝３）、および（３）残りに慢性腎不全を誘導したもの（ｎ＝２４）。慢性腎不全は、２段階の（５／６）腎摘出術（Ｎｘ）（まず、左の腎臓の約２／３を左側腹切開によって摘出し、１週間後、右の腎臓を全摘）によって誘導した。全身麻酔は、ケタミン１００ｍｇ／ｋｇおよびキシラジン２０ｍｇ／ｋｇの腹腔内注射からなるものにした（各調製物１ｍｌに関して、０．８５ｍｌのケタミン＋０．１５ｍｌのキシラジン；１μｌ／ｇＢＷをＩ．Ｐ．注射した）。
【０２６８】
実験群
２回目の手術の１週間後、ラットを、以下の実験群に無作為に割り付けた：
健常，ビヒクル−ＰＢＳ  ０．５％エタノールを経口投与（ｎ＝３）；
シャム手術，ビヒクル−ＰＢＳ  ０．５％エタノールを経口投与（ｎ＝３）；
腎摘出，ビヒクル−ＰＢＳ  ０．５％エタノールを経口投与（ｎ＝８）；
腎摘出，ＶＢ−２０１  ４ｍｇ／ｋｇを経口投与（ｎ＝８）；および
腎摘出，陽性対照としてのテルミサルタン１０ｍｇ／ｋｇを経口投与（ｎ＝８）。
【０２６９】
体重（ＢＷ）を、試験全体をとおしてモニタリングし、ラットを体重に応じて７週間、経口強制投与によって処置した。右の腎臓の摘出（２回目の手術）から８週目にラットをＣＯ２吸入によって屠殺した。
【０２７０】
腎臓採取
８週目の屠殺時に、腎臓を採取し、重量計測し、４％ホルムアルデヒド中に固定した。
【０２７１】
腎臓の形態構造および形態計測解析
光学顕微鏡検査のため、４μｍのパラフィン包埋組織スライドを過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）試薬で染色した。
【０２７２】
糸球体硬化症指数．  糸球体硬化症をＰＡＳ染色切片により、半定量的スコアリングシステムを用いて評価した。糸球体硬化症の程度を、主に１００個の無作為に選択した糸球体を４００倍の倍率で検査し、硬化した糸球体の面積のパーセンテージによるスコアシステムを適用することによって評価した。スコアは０〜４に等級分類した：（０＝０％面積；１＝１〜２５％；２＝２６〜５０％，３＝５１＝７５％，４＝７６％以上）。スコアリングしたすべての糸球体の平均を示した。さらに、全節性および分節性の糸球体硬化症の程度を同じ糸球体において評価し、ここで、＜８０％の硬化を分節性と称し、＞８０％を全節性と称した。
【０２７３】
糸球体面積．  １００倍の倍率で、主に１００個の無作為に選択した糸球体の糸球体面積を、グリッドを用いて糸球体領域でカバーされた正方形を計数することによって定量し、平均糸球体面積を計算した。
【０２７４】
免疫組織化学検査．  腎組織を４％ホルムアルデヒド中に固定し、パラフィン中に包埋した。次いで、このパラフィン包埋組織をカットして４μｍの組織スライドを形成した。パラフィン包埋組織スライドの免疫組織化学を、以下の濃度の抗体：モノクローナルマウス抗ラットＣＤ−６８（ＥＤ−１，Ｓｅｒｏｔｅｃ  ＭＣＡ３４１）１：２５を用いて解析した。間質ＣＤ６８＋染色の定量のため、陽性細胞の数を動物ごとに２０個の無作為に選択した重複しない視野において計数し、平均値を示した。
【０２７５】
リアルタイムＰＣＲ．  腎臓ＲＮＡをＲＮｅａｓｙ  Ｆｉｂｒｏｕｓ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｍｉｎｉキット（Ｑｉａｇｅｎ）で抽出し、ＤＮＡｓｅ  Ｉ処理後、一本鎖ｃＤＮＡを２μｇの全ＲＮＡからｑＳｃｒｉｐｔ  ｃＤＮＡ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  Ｋｉｔ（Ｑｕａｎｔａ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて合成し、リアルタイムＰＣＲのために希釈した。コラーゲン４α、フィブロネクチンおよびＴＧＦβの発現を、７３００  Ｒｅａｌ  Ｔｉｍｅ  ＰＣＲ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて定量した。アッセイは、製造業者の使用説明書に従い、以下の表に示すＡｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓによって供給されるプライマー（アッセイＩＤ）を用いて行った。データを参照遺伝子ＴＡＴＡボックス結合タンパク質（ＴＢＰ）に対して正規化し、シャムＰＢＳ  ０．５％エタノール処置と比較した相対ｍＲＮＡレベルとして示した（表１）。
【０２７６】
（表１）遺伝子発現参照
0006717825.tif 000077
【０２７７】
統計
データを平均±ＳＥＭで示す。統計学的有意性は、一元配置ＡＮＯＶＡまたはスチューデントのｔ検定（適切な場合）によって判定した。統計解析はＳｉｇｍａ  Ｓｔａｔソフトウェアを用いて行った。
【０２７８】
結果
糸球体の損傷に対するＶＢ−２０１処置の効果
糸球体を線維症の程度について、スコアリングによって、ならびに分節性硬化、全節性硬化を有する糸球体の割合および全節性硬化糸球体と分節性硬化糸球体の合計の計算によって評価した。さらに、糸球体の面積を計算し、肥大した糸球体の割合を計算した。損傷糸球体には、肥大した（正常面積の少なくとも１．５倍の）糸球体およびまたは硬化糸球体を含めた。
【０２７９】
ＶＢ−２０１およびテルミサルタン処置では、損傷糸球体が、それぞれ２９％（ｐ＝０．０１）および３１％（ｐ≦０．００５）有意に低減された（図１３）。この効果は一部において、糸球体肥大の低減の寄与によるものであった。糸球体損傷の低減に対する主な寄与は、硬化糸球体の低減によるものであった。ＶＢ−２０１およびテルミサルタン処置により、それぞれ３４％（ｐ＜０．０５）および５７％（ｐ≦０．００５）の硬化糸球体の低減がもたらされた（図１４，表２）。
【０２８０】
（表２）糸球体硬化症に対するＶＢ−２０１の効果（平均±Ｓ．Ｅ）＊
0006717825.tif 000078
＊１群あたりの試験動物の数およびＮｘ  ＰＢＳ  ０．５％エタノール群に対するｐ値を示す。
【０２８１】
図１５は、健常動物もしくはシャム手術動物またはＶＢ−２０１処置動物もしくはテルミサルタン処置動物と対比させた、ビヒクル処置した腎摘出動物の糸球体（ＰＡＳ染色）における典型的な硬化性変化を示す。
【０２８２】
糸球体および間質の単球／マクロファージ浸潤に対するＶＢ−２０１処置の効果
糸球体内に浸潤した単球／マクロファージの数を手術後８週目に評価した。（ＥＤ−１／ＣＤ６８＋）はビヒクル処置した腎摘出ラット（３．６６９±０．３２４）において、健常動物（０．３２０±０．０４０）またはシャム手術動物（０．８８０±０．１３９）と対比させると、それぞれ１１倍または４倍、有意に（ｐ≦０．００１）高かった。ＶＢ−２０１処置により糸球体の単球／マクロファージの数が、Ｎｘ  ＰＢＳ  ０．５％エタノール処置で観察されたものと比較すると、４２％（２．１１３±０．３７４）有意に（ｐ＝０．００８）低減された。テルミサルタン処置動物では、Ｎｘ  ＰＢＳ  ０．５％エタノール処置で観察されたものと比較すると有意でない１３％の低減がみられた（３．１８５±０．４２７）（図１６Ａ，１６Ｃおよび表３）。
【０２８３】
（表３）糸球体および間質の単球／マクロファージ浸潤に対するＶＢ−２０１の効果（平均±Ｓ．Ｅ）＊
0006717825.tif 000079
＊１群あたりの試験動物の数およびＮｘ  ＰＢＳ  ０．５％エタノール群に対するｐ値を示す。
【０２８４】
手術後８週目に調べた間質単球／マクロファージ（ＥＤ−１／ＣＤ６８＋）の数は、ビヒクル処置した腎摘出ラット（５２７．９±７２．９３）において、健常動物（７９．０±７．７７）またはシャム手術動物（８６．６７±１６．１８）と対比させると、それぞれ７倍または６倍、有意に（ｐ＝０．００５）高かった。ＶＢ−２０１処置により、間質単球／マクロファージの数が、Ｎｘ  ＰＢＳ  ０．５％エタノール処置で観察されたものと比較すると４９％（２６９．２５±２５．４１）有意に（ｐ＜０．００５）低減された。テルミサルタン処置では、間質単球／マクロファージの数がＮｘ  ＰＢＳ  ０．５％エタノール処置で観察されたものと比較すると２０％（４２１．０±６１．７７）低減された（図１６Ｂおよび表３）。
【０２８５】
線維症進行性マーカーに対するＶＢ−２０１処置の効果
コラーゲンＩＶのｍＲＮＡ発現は、ビヒクル処置した腎摘出ラット（７．５±１．５１）において、健常動物（１．１±０．１２）またはシャム手術動物（１．０±０．３２）と対比させると、それぞれ７倍または８倍、有意に増大した。ＶＢ−２０１処置により、コラーゲンＩＶ発現が、Ｎｘ  ＰＢＳ  ０．５％エタノール処置で観察されたものと比較すると４２％（４．３±０．３３）有意に（ｐ＜０．０５）低減された。Ｎｘ  ＰＢＳ  ０．５％エタノール処置で観察されたものと比較すると、コラーゲンＩＶ発現の４１％の低減がテルミサルタン処置した腎摘出ラット（４．４±０．２３）において観察された（有意傾向の有意性（ｐ＝０．０６４））（図１７Ａ）。
【０２８６】
ＴＧＦ−βのｍＲＮＡ発現は、ビヒクル処置した腎摘出ラット（８．４±０．４９）において、健常動物（０．９±０．２４）またはシャム手術動物（１．０±０．２３）と対比させると、それぞれ１０倍または８倍、有意に増大した（ｐ≦０．００１）。ＶＢ−２０１およびテルミサルタン処置では、ＴＧＦ−β発現が、Ｎｘ  ＰＢＳ  ０．５％エタノール処置で観察されたものと比較すると、それぞれ３７％（５．３±０．３３）および４４％（４．７±０．５２）有意に（ｐ≦０．００１）低減された（図１７Ｂ）。
【０２８７】
実施例１３
ＶＢ−２０１はＮＡＳＨ誘導マウスの肝臓においてＩＬ−１２／２３ｐ４０の発現を阻害する
ＮＡＳＨ誘導マウスに、４ｍｇ／ｋｇの用量のＶＢ−２０１または１０ｍｇ／ｋｇの用量のテルミサルタンを１日１回、６週目〜９週目に経口投与した。ＲＮＡを、正常マウスおよびビヒクル、ＶＢ−２０１またはテルミサルタンで処置したＮＡＳＨ誘導マウスの肝臓から、ＲＮｅａｓｙミニキット（Ｑｉａｇｅｎ）を用いて調製した。ｃＤＮＡの調製のため、２μｇのＲＮＡをｑＳｃｒｉｐｔ反応ミックスおよびｑＳｃｒｉｐｔ逆転写酵素（Ｑｕａｎｔａ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅｓ）と２２℃で５分間、次いで、４２℃で３０分間、合わせた。反応を、８５℃でさらに５分間のインキュベーションによって終了させた。リアルタイムＰＣＲ反応はすべて、７３００  Ｒｅａｌ  Ｔｉｍｅ  ＰＣＲ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて行った。Ｑ−ＰＣＲを、マウスＩＬ−１２／２３ｐ４０（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）に対するプローブとプライマーの組を用いて行った。ＧＡＰＤＨをＲＮＡレベルの正規化に使用した。
【０２８８】
図１８は、ＶＢ−２０１が、ＮＡＳＨ誘導マウスの肝臓においてＩＬ−１２／２３ｐ４０発現を阻害することを示す。ＮＡＳＨ誘導マウスの肝臓におけるＩＬ−１２／２３ｐ４０の解析は、ＶＢ−２０１がＩＬ−１２／２３ｐ４０の発現を有意に減衰させたことを示す。
【０２８９】
本出願書類において挙げた刊行物、特許および特許出願はすべて、引用により、個々の各刊行物、特許および特許出願があたかも具体的に個々に示されて引用により本明細書に組み込まれているのと同程度に本明細書にその全体が組み込まれる。また、本出願書類における任意の参考文献の引用または特定は、かかる参考文献が本発明の先行技術として利用可能であるという是認と解釈されるべきでない。セクションの見出しを使用している点において、これは、必ずしも限定していると解釈されるべきでない。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
0006717825.tif 000084
【図１Ｃ】
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【図１Ｄ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３】
0006717825.tif 000089
【図４】
0006717825.tif 000090
【図５】
0006717825.tif 000091
【図６】
0006717825.tif 000092
【図７】
0006717825.tif 000093
【図８】
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【図９】
0006717825.tif 000095
【図１０】
0006717825.tif 000096
【図１１Ａ】
0006717825.tif 000097
【図１１Ｂ】
0006717825.tif 000098
【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
0006717825.tif 000103
【図１６Ａ】
0006717825.tif 000104
【図１６Ｂ】
0006717825.tif 000105
【図１６Ｃ】
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【図１７Ａ】
0006717825.tif 000107
【図１７Ｂ】
0006717825.tif 000108
【図１８】
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