【手続補正書】
【提出日】平成25年9月18日(2013.9.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
埋め込み可能な細胞培養物のデバイスであって、該デバイスは：
ａ）ＰＥＤＦを分泌するように遺伝的に操作された１つ以上のＡＲＰＥ−１９細胞を含むコア；および
ｂ）該コアを取り囲む半透膜であって、該膜は、該膜を通るＰＥＤＦの拡散を許容する、半透膜
を備える、デバイス。
【請求項２】
前記細胞が、ＰＥＤＦ改変体を分泌する、請求項１に記載のデバイス。
【請求項３】
前記ＰＥＤＦ改変体が、配列番号１のアミノ酸配列を含む、請求項２に記載のデバイス。
【請求項４】
前記ＰＥＤＦ改変体が、ＰＥＤＦの生物学的に活性なフラグメントである、請求項２に記載のデバイス。
【請求項５】
前記コアが、前記半透膜の内側に配置されたマトリックスをさらに含む、請求項１に記載のデバイス。
【請求項６】
前記マトリックスが、ヒドロゲルまたは細胞外マトリックス成分を含む、請求項５に記載のデバイス。
【請求項７】
前記ヒドロゲルが、多価イオンで架橋されたアルギネートを含む、請求項６に記載のデバイス。
【請求項８】
前記マトリックスが、複数のモノフィラメントを含み、ここで、該モノフィラメントは、ａ）ヤーンに撚り合わされているかもしくはメッシュに織り込まれているか、または
ｂ）不織ストランドにおけるヤーンに撚り合わされており、
ここで、該モノフィラメントの上に前記細胞または組織が分布している、
請求項５に記載のデバイス。
【請求項９】
前記繊維状の細胞支持マトリックスが、アクリル、ポリエステル、ポリエチレン、ポリプロピレンポリアセトニトリル、ポリエチレンテレフタレート、ナイロン、ポリアミド類、ポリウレタン類、ポリブテステル、絹、綿、キチン、炭素および生体適合性金属からなる群より選択される生体適合性材料を含む、請求項８に記載のデバイス。
【請求項１０】
テザーアンカーをさらに備えるものである、請求項１に記載のデバイス。
【請求項１１】
前記テザーアンカーが、アンカーループを備える、請求項１０に記載のデバイス。
【請求項１２】
前記アンカーループが、前記デバイスを眼構造に繋留するために適合されている、請求項１１に記載のデバイス。
【請求項１３】
眼に埋め込まれるものである、請求項１２に記載のデバイス。
【請求項１４】
眼の硝子体、房水、テノン嚢下の空間、眼周囲の空間、後眼房または前眼房に埋め込まれるものである、請求項１３に記載のデバイス。
【請求項１５】
前記半透膜が、選択透過性の免疫隔離膜を含む、請求項１に記載のデバイス。
【請求項１６】
前記半透膜が、限外濾過膜または精密濾過膜を含む、請求項１に記載のデバイス。
【請求項１７】
前記半透膜が、無孔の膜材料を含む、請求項１に記載のデバイス。
【請求項１８】
前記無孔の膜材料が、ヒドロゲルまたはポリウレタンである、請求項１７に記載のデバイス。
【請求項１９】
中空繊維または平らなシートとして形づくられているものである、請求項１に記載のデバイス。
【請求項２０】
請求項１に記載のデバイスであって、少なくとも１つの追加の生物学的に活性な分子が、該デバイスから共に送達される、デバイス。
【請求項２１】
前記少なくとも１つの追加の生物学的に活性な分子が、非細胞性供給源由来である、請求項２０に記載のデバイス。
【請求項２２】
前記少なくとも１つの追加の生物学的に活性な分子が、細胞性供給源由来である、請求項２０に記載のデバイス。
【請求項２３】
前記少なくとも１つの追加の生物学的に活性な分子が、前記コア内の１つ以上の遺伝的に操作されたＡＲＰＥ−１９細胞によって産生される、請求項２２に記載のデバイス。
【請求項２４】
前記半透膜が、１から１５００キロダルトンの分子量カットオフを有する、請求項１に記載のデバイス。
【請求項２５】
２００から３５０μｍの外径および０．４ｍｍから６ｍｍの長さを有する中空繊維である、請求項１に記載のデバイス。
【請求項２６】
前記中空繊維が、ポリエーテルスルホン中空繊維である、請求項２５に記載のデバイス。
【請求項２７】
１から３μｌのコア容量を有するものである、請求項１に記載のデバイス。
【請求項２８】
０．０５から０．１μｌのコア容量を有するものである、請求項１に記載のデバイス。
【請求項２９】
前記デバイスがカプセルの形態をとっており、該カプセルが、１０４から１０７個の細胞を含む、請求項１に記載のデバイス。
【請求項３０】
前記半透膜が、ポリアクリレート類（アクリル共重合体を含む）、ポリビニリデン類、ポリ塩化ビニル共重合体、ポリウレタン類、ポリスチレン類、ポリアミド類、酢酸セルロース類、硝酸セルロース類、ポリスルホン類（ポリエーテルスルホン類を含む）、ポリホスファゼン類、ポリアクリロニトリル類、ポリ（アクリロニトリル／コ塩化ビニル）、ならびにそれらの誘導体、共重合体および混合物からなる群より選択される材料から形成される、請求項１に記載のデバイス。
【請求項３１】
網膜変性、新生血管形成、眼における流体蓄積、またはそれらの任意の組み合わせを特徴とする眼科疾患または眼科障害の処置を必要とする被験体において、該眼科疾患または該眼科障害を処置するための、請求項１に記載の埋め込み可能な細胞培養物のデバイスであって、該デバイスは、該被験体の眼に埋め込まれて、ＰＥＤＦが該デバイスから該眼に拡散するのを可能にすることによって該疾患または該障害を処置するのを可能にするように形づくられていることを特徴とする、デバイス。
【請求項３２】
前記被験体が、ヒトである、請求項３１に記載のデバイス。
【請求項３３】
前記眼科疾患または前記眼科障害が、加齢性黄斑変性症、網膜色素変性症、糖尿病性黄斑浮腫または糖尿病性網膜症である、請求項３１に記載のデバイス。
【請求項３４】
前記デバイスが、眼内にまたは眼周囲に埋め込まれるように形づくられている、請求項３１に記載のデバイス。
【請求項３５】
０．１ｐｇから１０００μｇ／眼／患者／日のＰＥＤＦが、前記眼に拡散する、請求項３１に記載のデバイス。
【請求項３６】
宿主における神経または網膜の退化または変性を阻害するための、請求項１に記載の埋め込み可能な細胞培養物のデバイスであって、該デバイスは、宿主の眼に埋め込まれるように形づくられており、ここで、該デバイスは、治療有効量のＰＥＤＦを該眼に分泌することによって、ＰＥＤＦが神経栄養物質または神経保護薬として機能するのを可能にすることを特徴とする、デバイス。
【請求項３７】
前記デバイスが、眼内にまたは眼周囲に埋め込まれるように形づくられている、請求項３６に記載のデバイス。
【請求項３８】
レシピエント宿主にＰＥＤＦを送達するための、請求項１に記載の埋め込み可能な細胞培養物のデバイスであって、該デバイスは、該レシピエント宿主の標的領域に埋め込まれるように形づくられており、ここで、被包された１つ以上のＡＲＰＥ−１９細胞は、該標的領域においてＰＥＤＦを分泌することを特徴とする、デバイス。
【請求項３９】
前記標的領域が、脳、脳室、脊髄を含む中枢神経系、ならびに眼の房水および硝子体液からなる群より選択される、請求項３８に記載のデバイス。
【請求項４０】
０．１ｐｇから１０００μｇ／患者／日のＰＥＤＦが、前記標的領域に拡散する、請求項３８に記載のデバイス。
【請求項４１】
宿主における血管新生、網膜の疾患またはそれらの組み合わせに関連する血管透過性を阻害するための、請求項１に記載の埋め込み可能な細胞培養物のデバイスであって、該デバイスは、宿主の眼に埋め込まれるように形づくられており、ここで、該デバイスは、治療有効量のＰＥＤＦを該眼に分泌することによって、ＰＥＤＦが血管透過性を阻害するのを可能にすることを特徴とする、デバイス。
【請求項４２】
請求項１に記載の埋め込み可能な細胞培養物のデバイスを作製するための方法であって、該方法は、
ａ）配列番号２または配列番号４の核酸配列によってコードされるＰＥＤＦポリペプチドを分泌するように少なくとも１つのＡＲＰＥ−１９細胞を遺伝的に操作する工程、およびｂ）該遺伝的に改変されたＡＲＰＥ−１９細胞を半透膜内に被包する工程であって、ここで、該膜は、該膜を通るＰＥＤＦの拡散を許容する、工程
を包含する、方法。
【請求項４３】
請求項１に記載の埋め込み可能な細胞培養物のデバイスを作製するための方法であって、該方法は、
ａ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＰＥＤＦポリペプチドを分泌するように少なくとも１つのＡＲＰＥ−１９細胞を遺伝的に操作する工程、および
ｂ）該遺伝的に改変されたＡＲＰＥ−１９細胞を半透膜内に被包する工程であって、ここで、該膜は、該膜を通るＰＥＤＦの拡散を許容する、工程
を包含する、方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
本発明はさらに、配列番号２または配列番号４の核酸配列によってコードされるＰＥＤＦポリペプチドを分泌するように少なくとも１つのＡＲＰＥ−１９細胞を遺伝的に操作し、そしてその遺伝的に改変されたＡＲＰＥ−１９細胞を半透膜内に被包することによって、本発明の埋め込み可能な細胞培養物のデバイスを作製するため方法を提供し、ここで、前記膜は、それを通るＰＥＤＦの拡散を可能にする。あるいは、本発明の埋め込み可能な細胞培養物のデバイスは、配列番号１のアミノ酸配列を含むＰＥＤＦポリペプチドを分泌するように少なくとも１つのＡＲＰＥ−１９細胞を遺伝的に操作し、そしてその遺伝的に改変されたＡＲＰＥ−１９細胞を半透膜内に被包することによって作製され得、ここで、前記膜は、それを通るＰＥＤＦの拡散を可能する。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
埋め込み可能な細胞培養物のデバイスであって、該デバイスは：
ａ）ＰＥＤＦを分泌するように遺伝的に操作された１つ以上のＡＲＰＥ−１９細胞を含むコア；および
ｂ）該コアを取り囲む半透膜であって、該膜は、該膜を通るＰＥＤＦの拡散を許容する、半透膜
を備える、デバイス。
（項目２）
前記細胞が、ＰＥＤＦ改変体を分泌する、項目１に記載のデバイス。
（項目３）
前記ＰＥＤＦ改変体が、配列番号１のアミノ酸配列を含む、項目２に記載のデバイス。
（項目４）
前記ＰＥＤＦ改変体が、ＰＥＤＦの生物学的に活性なフラグメントである、項目２に記載のデバイス。
（項目５）
前記コアが、前記半透膜の内側に配置されたマトリックスをさらに含む、項目１に記載のデバイス。
（項目６）
前記マトリックスが、ヒドロゲルまたは細胞外マトリックス成分を含む、項目５に記載のデバイス。
（項目７）
前記ヒドロゲルが、多価イオンで架橋されたアルギネートを含む、項目６に記載のデバイス。
（項目８）
前記マトリックスが、複数のモノフィラメントを含み、ここで、該モノフィラメントは、ａ）ヤーンに撚り合わされているかもしくはメッシュに織り込まれているか、または
ｂ）不織ストランドにおけるヤーンに撚り合わされており、
ここで、該モノフィラメントの上に前記細胞または組織が分布している、
項目５に記載のデバイス。
（項目９）
前記繊維状の細胞支持マトリックスが、アクリル、ポリエステル、ポリエチレン、ポリプロピレンポリアセトニトリル、ポリエチレンテレフタレート、ナイロン、ポリアミド類、ポリウレタン類、ポリブテステル、絹、綿、キチン、炭素および生体適合性金属からなる群より選択される生体適合性材料を含む、項目８に記載のデバイス。
（項目１０）
テザーアンカーをさらに備えるものである、項目１に記載のデバイス。
（項目１１）
前記テザーアンカーが、アンカーループを備える、項目１０に記載のデバイス。
（項目１２）
前記アンカーループが、前記デバイスを眼構造に繋留するために適合されている、項目１１に記載のデバイス。
（項目１３）
眼に埋め込まれるものである、項目１２に記載のデバイス。
（項目１４）
眼の硝子体、房水、テノン嚢下の空間、眼周囲の空間、後眼房または前眼房に埋め込まれるものである、項目１３に記載のデバイス。
（項目１５）
包被が、選択透過性の免疫隔離膜を含む、項目１に記載のデバイス。
（項目１６）
前記包被が、限外濾過膜または精密濾過膜を含む、項目１に記載のデバイス。
（項目１７）
前記包被が、無孔の膜材料を含む、項目１に記載のデバイス。
（項目１８）
前記無孔の膜材料が、ヒドロゲルまたはポリウレタンである、項目１７に記載のデバイス。
（項目１９）
中空繊維または平らなシートとして形づくられているものである、項目１に記載のデバイス。
（項目２０）
項目１に記載のデバイスであって、少なくとも１つの追加の生物学的に活性な分子が、該デバイスから共に送達される、デバイス。
（項目２１）
前記少なくとも１つの追加の生物学的に活性な分子が、非細胞性供給源由来である、項目２０に記載のデバイス。
（項目２２）
前記少なくとも１つの追加の生物学的に活性な分子が、細胞性供給源由来である、項目２０に記載のデバイス。
（項目２３）
前記少なくとも１つの追加の生物学的に活性な分子が、前記コア内の１つ以上の遺伝的に操作されたＡＲＰＥ−１９細胞によって産生される、項目２２に記載のデバイス。
（項目２４）
前記半透膜が、１から１５００キロダルトンの分子量カットオフを有する、項目１に記載のデバイス。
（項目２５）
２００から３５０μｍの外径および０．４ｍｍから６ｍｍの長さを有する中空繊維である、項目１に記載のデバイス。
（項目２６）
前記中空繊維が、ポリエーテルスルホン中空繊維である、項目２５に記載のデバイス。
（項目２７）
１から３μｌのコア容量を有するものである、項目１に記載のデバイス。
（項目２８）
０．０５から０．１μｌのコア容量を有するものである、項目１に記載のデバイス。
（項目２９）
カプセルが、１０４から１０７個の細胞を含む、項目１に記載のデバイス。
（項目３０）
前記半透膜が、ポリアクリレート類（アクリル共重合体を含む）、ポリビニリデン類、ポリ塩化ビニル共重合体、ポリウレタン類、ポリスチレン類、ポリアミド類、酢酸セルロース類、硝酸セルロース類、ポリスルホン類（ポリエーテルスルホン類を含む）、ポリホスファゼン類、ポリアクリロニトリル類、ポリ（アクリロニトリル／コ塩化ビニル）、ならびにそれらの誘導体、共重合体および混合物からなる群より選択される材料から形成される、項目１に記載のデバイス。
（項目３１）
網膜変性、新生血管形成、眼における流体蓄積、またはそれらの任意の組み合わせを特徴とする眼科疾患または眼科障害の処置を必要とする被験体において、該眼科疾患または該眼科障害を処置するための方法であって、該方法は、項目１に記載の埋め込み可能な細胞培養物のデバイスを該被験体の眼に埋め込む工程、およびＰＥＤＦが該デバイスから該眼に拡散するのを可能にすることによって該疾患または該障害を処置する工程を包含する、方法。
（項目３２）
前記被験体が、ヒトである、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記眼科疾患または前記眼科障害が、加齢性黄斑変性症、網膜色素変性症、糖尿病性黄斑浮腫または糖尿病性網膜症である、項目３１に記載の方法。
（項目３４）
前記デバイスが、眼内にまたは眼周囲に埋め込まれる、項目３１に記載の方法。
（項目３５）
０．１ｐｇから１０００μｇ／眼／患者／日のＰＥＤＦが、前記眼に拡散する、項目３１に記載の方法。
（項目３６）
宿主における神経または網膜の退化または変性を阻害するための方法であって、該方法は、項目１に記載の細胞培養物のデバイスを宿主の眼に埋め込む工程を包含し、ここで、該デバイスは、治療有効量のＰＥＤＦを該眼に分泌することによって、ＰＥＤＦが神経栄養物質または神経保護薬として機能するのを可能にする、方法。
（項目３７）
前記デバイスが、眼内にまたは眼周囲に埋め込まれる、項目３６に記載の方法。
（項目３８）
レシピエント宿主にＰＥＤＦを送達する方法であって、該方法は、項目１に記載の埋め込み可能な細胞培養物のデバイスを該レシピエント宿主の標的領域に埋め込む工程を包含し、ここで、被包された１つ以上のＡＲＰＥ−１９細胞は、該標的領域においてＰＥＤＦを分泌する、方法。
（項目３９）
前記標的領域が、脳、脳室、脊髄を含む中枢神経系、ならびに眼の房水および硝子体液からなる群より選択される、項目３８に記載の方法。
（項目４０）
０．１ｐｇから１０００μｇ／患者／日のＰＥＤＦが、前記標的領域に拡散する、項目３８に記載の方法。
（項目４１）
宿主における血管新生、網膜の疾患またはそれらの組み合わせに関連する血管透過性を阻害するための方法であって、該方法は、項目１に記載の細胞培養物のデバイスを宿主の眼に埋め込む工程を包含し、ここで、該デバイスは、治療有効量のＰＥＤＦを該眼に分泌することによって、ＰＥＤＦが血管透過性を阻害するのを可能にする、方法。
（項目４２）
項目１に記載の埋め込み可能な細胞培養物のデバイスを作製するための方法であって、該方法は、
ａ）配列番号２または配列番号４の核酸配列によってコードされるＰＥＤＦポリペプチドを分泌するように少なくとも１つのＡＲＰＥ−１９細胞を遺伝的に操作する工程、およびｂ）該遺伝的に改変されたＡＲＰＥ−１９細胞を半透膜内に被包する工程であって、ここで、該膜は、該膜を通るＰＥＤＦの拡散を許容する、工程
を包含する、方法。
（項目４３）
項目１に記載の埋め込み可能な細胞培養物のデバイスを作製するための方法であって、該方法は、
ａ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＰＥＤＦポリペプチドを分泌するように少なくとも１つのＡＲＰＥ−１９細胞を遺伝的に操作する工程、および
ｂ）該遺伝的に改変されたＡＲＰＥ−１９細胞を半透膜内に被包する工程であって、ここで、該膜は、該膜を通るＰＥＤＦの拡散を許容する、工程
を包含する、方法。