【手続補正書】
【提出日】平成25年10月25日(2013.10.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一定期間にわたり室温以上で組成物を維持する段階を含む方法であって、該組成物が、絹フィブロインマトリックス及び抗生物質を含み、該抗生物質が、少なくとも10日間、約25℃において、少なくとも50％の残存活性を維持する、方法。
【請求項２】
前記抗生物質が、少なくとも10日間、37℃において、少なくとも50％の残存活性を維持する、請求項1記載の方法。
【請求項３】
前記抗生物質が、少なくとも60日間、25℃以上において、少なくとも75％の残存活性を維持する、請求項1記載の方法。
【請求項４】
前記絹フィブロインマトリックスが絹フィブロイン溶液である、請求項1記載の方法。
【請求項５】
前記絹フィブロインマトリックスが絹フィブロイン足場である、請求項1記載の方法。
【請求項６】
前記組成物が体温で維持される、請求項1記載の方法。
【請求項７】
抗生物質の活性を安定化する方法であって、抗生物質を絹フィブロイン溶液中に組み入れる段階及び該抗生物質を含む該絹フィブロイン溶液から絹フィブロイン足場を形成する段階を含み、それにより、該絹フィブロイン足場中に組み入れられた該抗生物質が、少なくとも10日間、約25℃において、少なくとも50％の残存活性を維持する、方法。
【請求項８】
前記抗生物質が、少なくとも10日間、37℃において、少なくとも50％の残存活性を維持する、請求項7記載の方法。
【請求項９】
前記抗生物質が、少なくとも60日間、25℃以上において、少なくとも75％の残存活性を維持する、請求項7記載の方法。
【請求項１０】
絹フィブロイン溶液が剤を更に含む、請求項7記載の方法。
【請求項１１】
前記剤が、細胞、タンパク質、ペプチド、核酸アナログ、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、核酸、ペプチド核酸、アプタマー、抗体またはその断片若しくは部分、抗原またはエピトープ、ホルモン、ホルモンアンタゴニスト、成長因子または組換成長因子並びにその断片及びバリアント、細胞付着性メディエーター、サイトカイン、酵素、抗炎症剤、抗真菌剤、抗ウイルス剤、毒素、プロドラッグ、化学療法剤、小分子、薬物、抗菌化合物、並びにこれらの任意の組み合わせからなる群より選択される、請求項10記載の方法。
【請求項１２】
注射可能な絹フィブロイン足場及び、該注射可能な絹フィブロイン足場中に包埋された薬物装薬絹フィブロインミクロスフェアを含む、組成物。
【請求項１３】
前記注射可能な絹フィブロイン足場がハイドロゲルである、請求項12記載の組成物。
【請求項１４】
前記注射可能な絹フィブロイン足場のバルクが薬物を含む、請求項12記載の組成物。
【請求項１５】
前記注射可能な絹フィブロイン足場のバルクが前記薬物の勾配を含む、請求項14記載の組成物。
【請求項１６】
前記薬物装薬絹フィブロインミクロスフェアが前記注射可能な絹フィブロイン足場における勾配を形成する、請求項12記載の組成物。
【請求項１７】
前記薬物が抗生物質である、請求項12記載の組成物。
【請求項１８】
(i) 第1の抗生物質を含む絹フィブロイン足場、及び (ii) 第2の抗生物質を含む絹フィブロインミクロスフェアを含む組成物であって、該絹フィブロインミクロスフェアが該絹フィブロイン足場中に包埋されている、組成物。
【請求項１９】
前記絹フィブロイン足場が第1の抗生物質を第1の用量で送達し、前記絹フィブロインミクロスフェアが第2の抗生物質を第2の用量で送達する、請求項18記載の組成物。
【請求項２０】
第1の用量が初期バースト用量である、請求項19記載の組成物。
【請求項２１】
第2の用量が維持用量である、請求項19記載の組成物。
【請求項２２】
前記絹フィブロイン足場がハイドロゲルである、請求項18記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
本発明の別の態様は、医療用移植片、組織工学、再生医療、若しくは薬物送達システムのための物体または対象の一領域において微生物汚染を予防及び／または処置する方法に関する。該方法は、物体または対象の領域を、絹フィブロインを、ベースとした三次元足場と少なくとも一種の抗生物質剤とを含む組成物に接触させることを含む。該接触は包帯、スポンジ、またはサージカルパック材料により達成してもよい。組成物は、微生物汚染の原因として一般に見出されるような生物のMICを超えるレベルで、該少なくとも一種の抗生物質剤を送達するよう製剤してもよい。例えば、可能性のある微生物汚染は、術部感染と関連している場合がある。一態様では、セファゾリン、ゲンタマイシン、ペニシリン、アンピシリン、またはそれらの組み合わせ等の外科的予防薬が、手術部位感染を予防または処置するために絹フィブロイン中に組み入れられてもよい。
[本発明1001]
三次元絹フィブロイン足場中に包埋された抗生物質装薬（loaded）絹フィブロインミクロスフェアを含む組成物。
[本発明1002]
足場がスポンジ、フィルム、スラブ、粉末、エレクトスピニングされたマット、多孔性マトリックス、ミクロスフェア、ゲル、光学装置、または電子機器である、本発明1001の組成物。
[本発明1003]
包帯を形成するための可撓性物質をさらに含む、本発明1001または1002の組成物。
[本発明1004]
足場がサージカルパック材料である、本発明1001または1002の組成物。
[本発明1005]
足場が、絹フィブロイン足場に包埋された抗生物質装薬絹フィブロインミクロスフェアを含む、本発明1001〜1004のいずれかの組成物。
[本発明1006]
抗生物質が、アクチノマイシン、アミノグリコシド、β-ラクタマーゼ阻害剤、グリコペプチド、アンサマイシン、バシトラシン、カルバセフェム、カルバペネム、セファロスポリン、イソニアジド、リネゾリド、マクロライド、ムピロシン、ペニシリン、オキソリン酸、ポリペプチド、キノロン、スルホンアミド、テトラサイクリン、モノバクタム、クロラムフェニコール、リンコマイシン、クリンダマイシン、エタンブトール、ムピロシン、メトロニダゾール、ペフロキサシン、ピラジンアミド、チアンフェニコール、リファンピシン、チアムフェニクル（thiamphenicl）、ダプソン、クロファジミン、キヌプリスチン、メトロニダゾール、リネゾリド、イソニアジド、ピラシル（piracil）、ノボビオシン、トリメトプリム、ホスホマイシン、及びフシジン酸からなる群より少なくとも選択される抗生物質である、本発明1001〜1005のいずれかの組成物。
[本発明1007]
抗生物質がセファゾリン、ゲンタマイシン、ペニシリン、アンピシリン、またはそれらの組み合わせである、本発明1006の組成物。
[本発明1008]
デフェンシン、マガイニン、ナイシン、溶菌バクテリオファージ、細胞、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、核酸アナログ、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、ペプチド核酸、アプタマー、抗体またはその断片若しくは部分、抗原またはエピトープ、ホルモン、ホルモンアンタゴニスト、成長因子または組換成長因子並びにその断片及びバリアント、細胞付着性メディエーター、サイトカイン、抗炎症剤、抗真菌剤、抗ウイルス剤、毒素、プロドラッグ、化学療法剤、小分子、薬物、染料、ビタミン、酵素、抗酸化剤、並びに、他の抗菌化合物からなる群より選択される少なくとも一つの剤をさらに含む、本発明1001〜1007のいずれかの組成物。
[本発明1009]
以下を含む工程により調製された、抗生物質装薬三次元絹フィブロイン足場：
少なくとも一種の抗生物質剤を含む絹フィブロインミクロスフェアを調製する工程、
該抗生物質装薬絹フィブロインミクロスフェアを絹フィブロイン水性塩溶液と、三次元の形を限定する容器中で混合する工程、並びに
抗生物質装薬絹ミクロスフェアが包埋された三次元絹フィブロイン足場を形成するために、該溶液から塩及び水を除去する工程。
[本発明1010]
以下を含む工程により調製された、抗生物質装薬三次元絹フィブロイン足場：
少なくとも一種の抗生物質剤を含む絹フィブロインミクロスフェアを調製する工程、
該抗生物質装薬絹フィブロインミクロスフェアを絹フィブロイン溶液と混合する工程、並びに
抗生物質装薬絹ミクロスフェアを包埋したゲル足場を形成するよう、該溶液を超音波処理する工程。
[本発明1011]
少なくとも一つの活性剤をさらに含む、本発明1009または1010の抗生物質装薬三次元絹フィブロイン足場。
[本発明1012]
必要とする対象の一領域における微生物汚染を予防及び／または処置する方法であって、対象の該領域を本発明1001の組成物と接触させる段階を含む方法。
[本発明1013]
抗生物質を選択する段階、
該抗生物質を絹フィブロイン溶液中に組み入れる段階、及び
該溶液より足場を形成する段階
を含む、抗生物質長期貯蔵組成物を調製する方法。
[本発明1014]
前記溶液が水性溶液または水和型脂質溶液である、本発明1013の方法。
[本発明1015]
前記足場が、前記溶液を表面上に流し込んでフィルムまたはスラブ得ることにより形成される、本発明1013の方法。
[本発明1016]
前記足場が、前記溶液を鋳型または容器中に流し入れることにより形成され、次いで乾燥させて三次元足場が形成される、本発明1013の方法。
[本発明1017]
ゲル足場を形成するように前記溶液が超音波処理される、本発明1013の方法。
[本発明1018]
マット足場を形成するように前記溶液がエレクトロスピニングされる、本発明1013の方法。
[本発明1018]
抗生物質含有ミクロスフェアを作出するように前記溶液を処理する段階をさらに含む、本発明1013の方法。
[本発明1019]
抗生物質装薬ミクロスフェアを絹フィブロイン溶液に添加する段階、及び
該抗生物質装薬ミクロスフェアを含む足場を形成する段階
をさらに含む、本発明1018の方法。
[本発明1020]
前記足場を抗生物質含有絹フィブロイン溶液と少なくとも1回接触させて、前記足場上に抗生物質含有層を形成させる段階をさらに含む、本発明1013の方法。
[本発明1021]
前記溶液に追加の剤を添加する段階をさらに含む、本発明1013の方法。
[本発明1022]
前記抗生物質長期貯蔵組成物中の抗生物質が、少なくとも10日間、約4℃において、少なくとも50％の残存活性を維持する、本発明1013の方法。
[本発明1023]
前記抗生物質長期貯蔵組成物中の抗生物質が、少なくとも10日間、約25℃において、少なくとも50％の残存活性を維持する、本発明1013の方法。
[本発明1024]
前記抗生物質長期貯蔵組成物中の抗生物質が、少なくとも10日間、約37℃において、少なくとも50％の残存活性を維持する、本発明1013の方法。