【手続補正書】
【提出日】平成25年1月31日(2013.1.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
イソQC阻害剤を含む、炎症性の疾患又は容態を治療及び／又は予防するための医薬組成物であって、該炎症性の疾患又は容態が、
a．慢性及び急性炎症、例えば、関節リウマチ、粥状硬化、再狭窄、膵炎、骨粗鬆症、
b．他の炎症性疾患、例えば、神経因性疼痛、移植片拒絶反応／移植片不能／移植性脈管障害、HIV感染／エイズ、妊娠中毒症、結節性硬化症、ギラン・バレー症候群、慢性炎症性脱髄性多発性神経根症、及び多発性硬化症、
c．神経炎症、並びに
d．神経炎症から結果として生じ得る神経変性疾患、例えば、軽度認知障害（MCI）、アルツハイマー病、ダウン症候群における神経変性、家族性英国型認知症、及び家族性デンマーク型認知症
からなる群から選択される、前記医薬組成物。
【請求項２】
a．慢性及び急性炎症、例えば、関節リウマチ、粥状硬化、再狭窄、膵炎、骨粗鬆症、
b．他の炎症性疾患、例えば、神経因性疼痛、移植片拒絶反応／移植片不能／移植性脈管障害、HIV感染／エイズ、妊娠中毒症、結節性硬化症、ギラン・バレー症候群、慢性炎症性脱髄性多発性神経根症、及び多発性硬化症、
c．神経炎症、並びに
d．神経炎症から結果として生じ得る神経変性疾患、例えば、軽度認知障害（MCI）、アルツハイマー病、ダウン症候群における神経変性、家族性英国型認知症、及び家族性デンマーク型認知症
からなる群から選択される炎症性の疾患又は容態を治療及び／又は予防する薬剤の製造のためのイソQC阻害剤の使用。
【請求項３】
前記炎症性疾患が、関節リウマチ、粥状硬化、再狭窄、膵炎、及び骨粗鬆症から選択される慢性及び急性炎症である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記炎症性疾患が、神経因性疼痛、移植片拒絶反応／移植片不能／移植性脈管障害、HIV感染／エイズ、妊娠中毒症、結節性硬化症、ギラン・バレー症候群、慢性炎症性脱髄性多発性神経根症、及び多発性硬化症から選択される、請求項１又は３記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記炎症性疾患が神経炎症である、請求項１又は３記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記炎症性疾患が、神経炎症から結果として生じ得る神経変性疾患である、請求項１又は３記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記神経変性疾患が、軽度認知障害（MCI）、アルツハイマー病、ダウン症候群における神経変性、家族性英国型認知症、及び家族性デンマーク型認知症から選択される、請求項６記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記イソQC阻害剤と組み合わせて、抗炎症薬、向知性薬、神経保護薬、抗パーキンソン病薬、アミロイドタンパク質沈着阻害剤、βアミロイド合成阻害剤、抗うつ薬、抗不安薬、抗精神病薬、及び抗多発性硬化症薬、アンギオテンシン変換酵素（ACE）の阻害剤、アンギオテンシンII受容体遮断薬、利尿薬、カルシウムチャネル遮断薬（CCB）、β遮断薬、血小板凝集阻害剤、コレステロール吸収モジュレーター、HMG-Co-A還元酵素阻害剤、高密度リポタンパク質（HDL）を増加させる化合物、レニン阻害剤、IL-6阻害剤、抗炎症性コルチコステロイド、抗増殖薬、一酸化窒素ドナー、細胞外マトリックス合成の阻害剤、増殖因子又はサイトカインシグナル伝達阻害剤、MCP-1アンタゴニスト、及びチロシンキナーゼ阻害剤からなる群から選択されるさらなる薬剤を含む、請求項１又は３〜７のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記疾患及び／又は容態がヒトを苦しめる、請求項１又は３〜８のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項１０】
請求項１〜７のいずれか一項記載のイソQC阻害剤又は請求項８記載の組み合わせを含む医薬組成物。
【請求項１１】
前記イソQC阻害剤が式（I）の化合物、又はそのすべての互変異性体及び立体異性体、又はそれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、若しくは多形体
【化１】
2012502005.tif 000001
であり、式中：
R1は、-C3-8カルボシクリル-ヘテロアリール、-C2-6アルケニルヘテロアリール、-C1-6アルキルヘテロアリール、又は(CH2)aCR5R6(CH2)bヘテロアリールを表し、式中、a及びbは独立して、0〜5の整数を表し、但し、a＋b＝0〜5であり、かつR5及びR6が、それらの結合する炭素と共にC3-C5シクロアルキル基又は二環式ヘテロアリール基を形成するアルキレンであり；
ここで、上記のヘテロアリール基のいずれも、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、C1-6ハロアルキル、-C1-6チオアルキル、-SOC1-4アルキル、-SO2C1-4アルキル、C1-6アルコキシ-、-O-C3-8シクロアルキル、C3-8シクロアルキル、-SO2C3-8シクロアルキル、-SOC3-6シクロアルキル、C3-6アルケニルオキシ-、C3-6アルキニルオキシ-、-C(O)C1-6アルキル、-C(O)OC1-6アルキル、C1-6アルコキシ-C1-6アルキル-、ニトロ、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシル、-C(O)OH、-NH2、-NHC1-4アルキル、-N(C1-4アルキル)(C1-4アルキル)、-C(O)N(C1-4アルキル)(C1-4アルキル)、-C(O)NH2、-C(O)NH(C1-4アルキル)、及び-C(O)NH(C3-10シクロアルキル)から選択される1つ以上の基によって任意に置換してもよく；
かつここで、上記のカルボシクリル基のいずれも、C1-4アルキル、オキソ、ハロゲン、及びC1-4アルコキシから選択される1つ以上の基によって任意に置換してもよく；
R2は、C1-8アルキル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリル、-C1-4アルキルアリール、-C1-4アルキルヘテロアリール、-C1-4アルキルカルボシクリル、又はC1-4アルキルヘテロシクリルを表し；
ここで、上記のアリール基及びヘテロアリール基のいずれも、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、C1-6ハロアルキル、-C1-6チオアルキル、-SOC1-4アルキル、-SO2C1-4アルキル、C1-6アルコキシ-、-O-C3-8シクロアルキル、C3-8シクロアルキル、-SO2C3-8シクロアルキル、-SOC3-6シクロアルキル、C3-6アルケニルオキシ-、C3-6アルキニルオキシ-、-C(O)C1-6アルキル、-C(O)OC1-6アルキル、C1-6アルコキシ-C1-6アルキル-、ニトロ、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシル、-C(O)OH、-NH2、-NHC1-4アルキル、-N(C1-4アルキル)(C1-4アルキル)、-C(O)N(C1-4アルキル)(C1-4アルキル)、-C(O)NH2、-C(O)NH(C1-4アルキル)、及び-C(O)NH(C3-10シクロアルキル)から選択される1つ以上の基によって任意に置換してもよく；
かつここで、上記のカルボシクリル基及びヘテロシクリル基のいずれも、C1-4アルキル、オキソ、ハロゲン、及びC1-4アルコキシから選択される1つ以上の基によって任意に置換してもよく；
或いはR2は、フェニルによって置換されたフェニル、単環式ヘテロアリール基によって置換されたフェニル、ベンジルオキシによって置換されたフェニル、カルボシクリルに縮合したフェニル、ヘテロシクリルに縮合したフェニル、-C1-4アルキル(フェニルによって置換されたフェニル)、-C1-4アルキル(単環式ヘテロアリール基によって置換されたフェニル)、-C1-4アルキル(ベンジルオキシによって置換されたフェニル)、-C1-4アルキル(任意に置換されたカルボシクリルに縮合した任意に置換されたフェニル)、又はC1-4アルキル(任意に置換されたヘテロシクリルに縮合した任意に置換されたフェニル)を表し；
ここで、上記のフェニル基、ベンジルオキシ基、及びヘテロアリール基のいずれも、C1-4アルキル、ハロゲン、及びC1-4アルコキシから選択される1つ以上の基によって任意に置換してもよく、かつここで、上記のカルボシクリル基及びヘテロシクリル基のいずれも、C1-4アルキル、オキソ、ハロゲン、及びC1-4アルコキシから選択される1つ以上の基によって任意に置換してもよく；
R3は、H、-C1-4アルキル、又はアリールを表し；
ここで、上記のアリールは、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、C1-6ハロアルキル、-C1-6チオアルキル、-SOC1-4アルキル、-SO2C1-4アルキル、C1-6アルコキシ-、-O-C3-8シクロアルキル、C3-8シクロアルキル、-SO2C3-8シクロアルキル、-SOC3-6シクロアルキル、C3-6アルケニルオキシ-、C3-6アルキニルオキシ-、-C(O)C1-6アルキル、-C(O)OC1-6アルキル、C1-6アルコキシ-C1-6アルキル-、ニトロ、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシル、-C(O)OH、-NH2、-NHC1-4アルキル、-N(C1-4アルキル)(C1-4アルキル)、-C(O)N(C1-4アルキル)(C1-4アルキル)、-C(O)NH2、-C(O)NH(C1-4アルキル)、及び-C(O)NH(C3-10シクロアルキル)から選択される1つ以上の基によって任意に置換してもよく；
或いは、R2及びR3は、1つ以上のC1-2アルキル基によって任意に置換されたカルボシクリル環を形成するよう結合し；
或いは、R2及びR3は、フェニルに縮合したカルボシクリル環を形成するよう結合し、ここで、上記のカルボシクリル及び／又はフェニルは、C1-4アルキル、ハロゲン、及びC1-4アルコキシから選択される1つ以上の基によって任意に置換してもよく；
或いは、R2及びR3は、単環式ヘテロアリールに縮合したカルボシクリル環を形成するよう結合し、ここで、上記のカルボシクリル及び／又はヘテロアリールは、C1-4アルキル、ハロゲン、及びC1-4アルコキシから選択される1つ以上の基によって任意に置換してもよく；
R4は、H、-C1-8アルキル、-C(O)C1-6アルキル、又は-NH2を表し；
Xは、O又はSを表し；かつ
Yは、O又はSを表す、請求項１又は３〜１０のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項１２】
R1が、二環式ヘテロアリール基を表す、請求項１１記載の医薬組成物。
【請求項１３】
R1が、1個又は2個の窒素原子を含む5員環に縮合したベンゼン環又はピリジン環を表す、請求項１２記載の医薬組成物。
【請求項１４】
結合点が、ベンゼン環又はピリジン環を介している、請求項１３記載の医薬組成物。
【請求項１５】
R1が、
【化２】
2012502005.tif 000002
イミダゾ[1,2-a]ピリジン、又はベンゾ[c][1,25]チアジアゾリルである、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項１６】
R1が、
【化３】
2012502005.tif 000003
を表す、請求項１５記載の医薬組成物。
【請求項１７】
R1が-C1-6アルキルヘテロアリールを表す、請求項１６記載の医薬組成物。
【請求項１８】
R1のヘテロアリール基が、C1-4アルキル、C1-4アルコキシ-、及びハロゲンから選択される1つ以上の置換基によって任意に置換された1〜3個の窒素原子を含む5員環である、請求項１７記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記ヘテロアリール基が、
【化４】
2012502005.tif 000004
である、請求項１８記載の医薬組成物。
【請求項２０】
R1が、
【化５】
2012502005.tif 000005
を表し、
式中、Aが、非分岐の若しくは分岐したC1-6アルキレン鎖を表し、又はAが、分岐したC1-6アルキレン鎖を表し、又はAが(CH2)aCR5R6(CH2)bを表し、
かつR11、R12、及びR13が独立して、H若しくはC1-2アルキルを表す、請求項１１記載の医薬組成物。
【請求項２１】
R1が、
【化６】
2012502005.tif 000006
を表し、
式中、Bが、結合、-CH2-、-CH2-CH2-、-CH(Me)-、-CH(Me)-CH2-、又は-CH2-CH(Me)-を表し、かつ
R14及びR15が独立して、H又はC1-2アルキルを表す、請求項１２又は１７記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記式（I）の化合物が下記式：
【化７】
2012502005.tif 000007
（式中、R2、R3、R4、X、及びYは請求項１１に定義されるとおりである。）によって表される、請求項１１〜２１のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項２３】
R2が、アリール、ヘテロアリール、フェニルによって置換されたフェニル、ヘテロシクリルに縮合したフェニルを表し、又はR2及びR3が結合して、フェニルに縮合したカルボシクリル環を形成し；上記のアリール、ヘテロアリール、フェニル、ヘテロシクリル、及びカルボシクリルが任意に置換されている、請求項１１〜２２のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項２４】
R2が、フェニルによって置換されたフェニルを表し、上記のフェニル基が、同じでも又は異なってもよくかつハロ、OH、C1-3アルキル、C1-3ハロアルキル、C1-3アルコキシ、C1-3ハロアルコキシから選択される1つ以上の置換基によって任意に置換されている、請求項２３記載の医薬組成物。
【請求項２５】
R2が-ビフェニル-4-イルである、請求項２４記載の医薬組成物。
【請求項２６】
R2が、同じでも又は異なってもよくかつハロ、OH、C1-3アルキル、C1-3ハロアルキル、C1-3アルコキシ、C1-3ハロアルコキシから選択される1、2、又は3個の置換基によって任意に置換されたフェニルを表す、請求項２３記載の医薬組成物。
【請求項２７】
R2が、n-プロピルオキシによって置換されたフェニルである、請求項２６記載の医薬組成物。
【請求項２８】
R3がHを表す、請求項１１〜２７のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項２９】
R2及びR3が結合して、フェニルに縮合したカルボシクリル環を形成する、請求項１１〜２３のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項３０】
R4がHを表す、請求項１１〜２９のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項３１】
XがOを表す、請求項１１〜３０のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項３２】
YがOを表す、請求項１１〜３１のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項３３】
式（I）の化合物が
【化８】
2012502005.tif 000008
によって表され、式中、R2及びR3は請求項１１に定義されるとおりである、請求項１１〜３２のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項３４】
式（I）の化合物が、
5-(ベンゾ[c][1,2,5]チアジアゾール-6-イル)-1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-フェニルイミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(2-ヒドロキシ-5-メチルフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(2-フルオロ-5-トリフルオロメチル)フェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(2-ブロモ-5-フルオロフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(4-プロポキシフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(4-クロロ-3-トリフルオロメチル)フェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(3-フルオロ-4(トリフルオロメチル)フェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(3-ヒドロキシ-4-メトキシフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(2-ヒドロキシ-3-メトキシフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(1H-ベンズイミダゾール-5-イル)-5-(1,1'-ビフェニル-4-イル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(3-クロロフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(4-クロロフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(2-クロロフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(4-フルオロフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(2,3-ジヒドロベンゾ[b][1,4]ジオキシン-7-イル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(3-(1H-イミダゾール-1-イル)プロピル)-5-フェニルイミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(3-(1H-イミダゾール-1-イル)プロピル)-5-(2-ブロモ-4-フルオロフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(3-(1H-イミダゾール-1-イル)プロピル)-5-(4-プロポキシフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(3-(1H-イミダゾール-1-イル)プロピル)-5-(3-フルオロ-4-(トリフルオロメチル)フェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-[3-(1H-イミダゾール-1-イル)プロピル]-5-(4-ビフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(3-(1H-イミダゾール-1-イル)プロピル)-5-(3-クロロフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(3-(1H-イミダゾール-1-イル)プロピル)-5-(2-クロロフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(3-(5-メチル-1H-イミダゾール-1-イル)プロピル)-5-フェニルイミダゾリジン-2,4-ジオン；
5-(2-ブロモ-5-フルオロフェニル)-1-(3-(5-メチル-1H-イミダゾール-1-イル)プロピル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(3-(5-メチル-1H-イミダゾール-1-イル)プロピル)-5-(4-プロポキシフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-[3-(5-メチル-1H-イミダゾール-1-イル)プロピル]-5-(4-フェニルフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
5-(3-クロロフェニル)-1-(3-(5-メチル-1H-イミダゾール-1-イル)プロピル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(3-(4-メチル-1H-イミダゾール-1-イル)プロピル)-5-フェニルイミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-[3-(4-メチル-1H-イミダゾール-1-イル)プロピル]-5-(4-ビフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
5-(3-クロロフェニル)-1-(3-(4-メチル-1H-イミダゾール-1-イル)プロピル)イミダゾリジン-2,4-ジオン；
3-(1H-ベンズイミダゾール-5-イル)-1',3'-ジヒドロ-2H,5H-スピロ[イミダゾリジン-4,2'-インデン]-2,5-ジオン；
5-(ベンゾ[c][1,2,5]チアジアゾール-6-イル)-1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-2-チオキソイミダゾリジン-4-オン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-フェニル-2-チオキソイミダゾリジン-4-オン；
1-(1H-ベンズイミダゾール-5-イル)-5-(1,1'-ビフェニル-4-イル)-2-チオキソイミダゾリジン-4-オン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(3-ヒドロキシ-4-メトキシフェニル)-2-チオキソイミダゾリジン-4-オン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-フェニル-4-チオキソイミダゾリジン-2-オン；
1-(1H-ベンズイミダゾール-5-イル)-5-(1,1'-ビフェニル-4-イル)-4-チオキソイミダゾリジン-2-オン；
3-(1H-ベンズイミダゾール-5-イル)-5-チオキソ-1',3'-ジヒドロ-2H-スピロ[イミダゾリジン-4,2'-インデン]-2-オン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(4-クロロフェニル)-4-チオキソイミダゾリジン-2-オン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(2,3,4-トリフルオロフェニル)-4-チオキソイミダゾリジン-2-オン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-イル)-5-(4-ブロモ-2-フルオロフェニル)-4-チオキソイミダゾリジン-2-オン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(2,3-ジフルオロ-4-メチルフェニル)-4-チオキソイミダゾリジン-2-オン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(4-クロロ-3-メチルフェニル)-4-チオキソイミダゾリジン-2-オン；
1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-3-メチル-5-フェニルイミダゾリジン-2,4-ジオン；
1-(H-イミダゾ[1,2-a]ピリジン-7-イル)-5-フェニルイミダゾリジン-2,4-ジオン；
又はそのすべての互変異性体及び立体異性体、又はそれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、若しくは多形体から選択される、請求項１１〜３３のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記イソQC阻害剤が、1-(1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-イル)-5-(4-プロポキシフェニル)イミダゾリジン-2,4-ジオンであり、下記構造：
【化９】
2012502005.tif 000009
、又はそのすべての互変異性体及び立体異性体、又はそれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、若しくは多形体を有する、請求項１又は３〜３４のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項３６】
イソQC阻害剤を含む診断アッセイであって、該イソQC阻害剤が、請求項１〜９及び１１〜３５のいずれか一項において定義した、その医薬として許容し得る塩、溶媒和物、及び立体異性体を含む化合物である、前記診断アッセイ。
【請求項３７】
請求項１〜７のいずれか一項において定義した疾患及び／又は容態のいずれか1つを診断するための、請求項１〜９及び１１〜３５のいずれか一項において定義したイソQC阻害剤の使用を実施するための診断キットであって、該使用が、
-該疾患及び／又は容態で苦しめられていることが疑われる対象から収集された試料をイソQC阻害剤と接触させる工程、及び
-該対象が該疾患及び／又は容態によって苦しめられているか否かを決定する工程、
を含む、前記診断キット。
【請求項３８】
前記試料が、血液試料、血清試料、脳脊髄液の試料、又は尿試料である、請求項３７記載の診断キット。
【請求項３９】
検出手段として請求項３６記載の診断アッセイと決定手段とを含む、請求項３７又は３８記載の診断キット。
【請求項４０】
前記イソQC阻害剤が、配列番号11、12、13、14、15、16、17、18、57、58、59、若しくは60のいずれかの配列を含むポリペプチド又は配列番号2、3、4、5、6、7、8、9、53、54、55、若しくは56のいずれかの配列を含む核酸によってコードされるポリペプチドの群から選択されるポリペプチドのいずれか1つを阻害する、請求項２記載の使用。
【請求項４１】
前記イソQC阻害剤が、配列番号11、12、13、14、15、16、17、18、57、58、59、若しくは60のいずれかの配列を含むポリペプチド又は配列番号2、3、4、5、6、7、8、9、53、54、55、若しくは56のいずれかの配列を含む核酸によってコードされるポリペプチドの群から選択されるポリペプチドのいずれか1つを阻害する、請求項３７〜３９のいずれか一項記載のキット。
【請求項４２】
前記イソQC阻害剤が、配列番号11、12、13、14、15、16、17、18、57、58、59、若しくは60のいずれかの配列を含むポリペプチド又は配列番号2、3、4、5、6、7、8、9、53、54、55、若しくは56のいずれかの配列を含む核酸によってコードされるポリペプチドの群から選択されるポリペプチドのいずれか1つを阻害する、請求項１又は３〜３５のいずれか一項記載の医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６４】
同様に、本発明の説明を通じての本実施態様記載の用語「イソ-グルタミニルシクラーゼ（イソQC、QPCTL）」は、種々の種、例えば、哺乳類、昆虫、又は植物のイソQC由来のイソ-グルタミニルシクラーゼを含む。好ましくは、本実施態様記載の及び本発明の説明を通じてのイソ-グルタミニルシクラーゼ（イソQC）は、哺乳類イソQCであり、より好ましくは例えばマウス又はラット由来の齧歯類イソQCであるが、最も好ましくはヒトイソQCである。イソグルタミニルシクラーゼ酵素は、その核酸配列及びアミノ酸配列においてグルタミニルシクラーゼ酵素とは異なる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７６】
【図１】図１は、H-Gln-AMCのpGlu-AMCへの、阻害剤塩酸1-(3-(1H-イミダゾール-1-イル)プロピル)-3-(3,4-ジメトキシフェニル)チオ尿素による、ヒトイソQCにより触媒された変換の阻害を示す。データは、線形競合的阻害を考慮するミカエリス-メンテンの動力学的モデルに従って評価した。阻害剤濃度は下記のとおりであった：
【表１】
2012502005.tif 000010
決定したKi値は、240±8nMであった。
【図２】図２は、RT-PCRによるイソQC発現の分析を示す。SH-SY5Y、LN405、HaCaT、及びHep-G2における検出。  レーン：bp、DNA標準物質ｌ1、SH-SY5Y由来のヒトイソQCの増幅したPCR産物；2、LN405由来のヒトイソQCの増幅したPCR産物；3、HaCaT由来のヒトイソQCの増幅したPCR産物；4、Hep-G2由来のヒトイソQCの増幅したPCR産物。
【図３】図３は、酵母ピキア・パストリスにおいて異種性に発現したヒトイソQCタンパク質コンストラクトの模式図を提供する。2つの変異をいくつかのタンパク質において導入し、位置55におけるグリコシル化部位（I55N）及び位置351における変異したシステイン残基（C351A）をもたらした。発現のために、膜貫通ドメインを含むN末端を酵母の分泌シグナル（YSS）によって置換した。N末端分泌シグナルを含むコンストラクトは、培地へと効率よく分泌されることになっていた。
【図４】図４は、発現している酵母細胞の培地において決定したイソQC活性を示す。膜貫通ドメインにより、未処置のコンストラクトは培地へと分泌されなかった（未実施）。グリコシル化（I55N）によって起因して、タンパク質は最も効率よく分泌される。また、変異C351Aは、培地において検出されたより高いイソQC活性を結果的に生じた。
【図５】図５は、トランスジェニックピキア・パストリス株の培地由来のコンストラクトYSShイソQCI55NC351A C-Hisに基づいたヒトイソQCの精製を示す。IMAC（固定化金属アフィニティクロマトグラフィー、レーン3）、HIC（疎水性相互作用クロマトグラフィー、レーン4）、及び脱塩（レーン5）の組み合わせによって、イソQCを精製した。酵素のグリコシル化は、タンパク質の泳動におけるシフトを結果として生じる酵素の脱グリコシル化による証拠（レーン6）であった。レーン1、タンパク質標準物質：レーン2、精製前の培地。
【図６】図６は、形質転換した大腸菌の細胞均質化液由来のコンストラクトGST-hイソQC C-Hisに基づいたヒトイソQCの精製を示す。IMAC（固定化金属アフィニティクロマトグラフィー、レーン3）、GST-アフィニティ（レーン4）、脱塩（レーン5）、及びイオン交換クロマトグラフィー（レーン6）によって、イソQCを精製した。レーン1、タンパク質標準物質：レーン2、精製前の細胞均質化液。酵母及び大腸菌において発現したhイソQC間の分子量の差は、N末端のGST-タグ融合に起因する。発現したコンストラクトは、図の上側部分において模式的に提供される。
【図７】図７は、ヒトイソQC（YSShイソQCI55NC351A C-His）、GST-hイソQC、及びヒトQCによるの変換についての特異性定数を示す。GST-hイソQCの特異性は最も低く、次いで、YSShイソQCI55NC351A C-Hisであった。最も高い特異性は、ヒトQCを示し、より高い全体的な酵素活性を示した。
【図８】図８は、酵母において発現したヒトイソQC（hイソQC）を及びヒトQC（hQC）を使用して研究した触媒作用のpH依存性を示す。両タンパク質は、pH7〜8の間に至適pHを示す。適合した曲線は、触媒作用に影響を及ぼす3つの解離群に基づいており、1つは酸性pHにおいてであり、2つは塩基性pHにおいてである。
【図９】図９は、LN405細胞におけるマウスイソQC（m-イソQC）の細胞内局在を示す：（a）代替的な開始メチオニンンMetI又はMetIIのうちの1つで開始するm-イソQC-EGFP融合タンパク質の局在、並びに（b）MetI又はMetIIで開始し、Ser55（付番は、N末端アミノ酸位置1を表すMetIに基づいており、図１５と比較されたい。）で終止するm-イソQCのN末端配列、及びC末端EGFP融合からなる融合タンパク質。ゴルジ複合体は、抗マンノシダーゼII抗体を使用して染色した。共局在は、EGFP蛍光及びCy3蛍光の重ね合わせ（混合）によって示す。
【図１０】図１０は、LN405細胞におけるラットイソQC（r-イソQC）の細胞内局在を示す：（a）代替的な開始メチオニンMetIのうちの1つ又はMetIIを使用して開始するr-イソQC-EGFP融合タンパク質の局在、並びに（b）MetI又はMetIIで開始してSer55（付番はN末端アミノ酸位置1を表すMetIに基づいており、図１５と比較されたい。）で終止するr-イソQCのN末端配列、及びC末端EGFP融合からなる融合タンパク質の局在の局在を示す。ゴルジ複合体は、抗マンノシダーゼII抗体を使用して染色した。共局在は、EGFP蛍光及びCy3蛍光の重ね合わせ（混合）によって示す。
【図１１】図１１は、SH-SY5Y細胞におけるマウス-イソQC（m-イソQC）の細胞内局在を示す：（a）代替的な開始メチオニンMetI又はMetIIで開始するm-イソQC-EGFP融合タンパク質の局在、並びに、（b）MetI又はMetIIで開始し、Ser55（付番はN末端アミノ酸位置1を表すMetIに基づいており、図１５と比較されたい。）で終止するm-イソQCのN末端配列、及びC末端EGFP融合からなる融合タンパク質の局在。ゴルジ複合体は、抗マンノシダーゼII抗体を使用して染色した。共局在は、EGFP蛍光及びCy3蛍光の重ね合わせ（混合）によって示す。
【図１２】図１２は、SH-SYS5細胞におけるラット-イソQC（r-イソQC）の細胞内局在を示す：（a）代替的な開始メチオニンMetI又はMetIIで開始するr-イソQC-EGFP融合タンパク質の局在、並びに、（b）MetI又はMetIIで開始し、Ser55（付番はN末端アミノ酸位置1を表すMetIに基づいており、図１５と比較されたい。）で終止するN末端配列、及びC末端EGFP融合からなる融合タンパク質の局在。ゴルジ複合体は、抗マンノシダーゼII抗体を使用して染色した。共局在は、EGFP蛍光及びCy3蛍光の重ね合わせ（混合）によって示す。
【図１３】図１３は、RAW細胞におけるマウスQC（mQPCT）及びマウスイソQC（mQPCTL）の発現の特徴づけのための定量的PCRの結果を示す。（a）アガロースゲル電気泳動を使用したPCR増幅産物の分析。M- 100bpラダー（Peglab, Erlangen, Germany）、脳：脳組織から単離したRNAの産物、B16：B16メラノーマ細胞から単離したRNAの産物、RAW：RAW264.7細胞から単離したRNAの産物。（b）プライマー対QPCT F5/R6、F3/R2、及びF3/R20を使用した増幅曲線。
【図１４】図１４は、LPS（1μg/mL）による24時間の処理後のTHP1細胞におけるヒトQC（hQPCT）及びヒトイソQC（hQPCTL）の遺伝子発現についての定量的PCR結果を示す。
【図１５】図１５は、ヒト、マウス、及びラットのイソQCの配列比較を示す。該タンパク質は、83％の配列同一性を共有する。2つの異なる有望な開始メチオニンが太線で強調されている。
【図１６】図１６は、発酵後のマウスイソQCの精製を説明するSDS-PAGE分析を示す。タンパク質をクーマシー染色によって可視化した。レーン1、分子量標準物質（キロダルトン）（Dual Color, Bio-Rad）；レーン2、発現後の上清；レーン3、拡張したベッド様式における初期の疎水性相互作用クロマトグラフィー後のマウス-イソQCを含む画分；レーン4、疎水性相互作用クロマトグラフィー後のマウス-イソQC；レーン5、UnoQカラム後のマウス-イソQC。レーン6  ゲル濾過及び脱グリコシル化酵素EndoHFによる処理後のマウス-イソQC。イソQCタンパク質は、50kDa〜70kDaのタンパク質に相当する。脱グリコシル化タンパク質は、37kDaにおけるタンパク質バンドに相当する。マウスイソQCを均一になるまで精製した。
【図１７】図１７は、SDS-PAGEによって分析したラット-イソQCの精製を説明する。レーンは下記を表す：レーン1ｌラット-イソQC発酵後の上清；レーン2  金属アフィニティクロマトグラフィー後のラット-イソQC含有画分；レーン3  疎水性相互作用クロマトグラフィー後のラット-イソQCタンパク質、レーン4  脱塩カラム後の精製したラット-イソQC；イソQCタンパク質は、50kDa〜70kDaのタンパク質に相当する。均質な脱グリコシル化したラット-イソQCは、37kDaにおけるタンパク質バンド（レーン5）に相当し、脱グリコシル化酵素EndoHFは、75kDaに泳動する。クーマシー染色によってタンパク質を可視化した。ラット-イソQCを均質になるまで精製した。
【図１８】図１８は、マウス-イソQC及びヒトイソQCによるジペプチド-代替物、ジペプチド、及びオリゴペプチドの変換についての特異性定数を示す。最高の特異性は、マウス-イソQCによって呈され、より高い全体的な酵素活性を示している。
【図１９】図１９は、異なるQCコンストラクト及びイソQCコンストラクトを使用するHEK293細胞のトランスフェクション後のヒトイソQC抗体pAb3284の決定についてのウェスタンブロット分析を示す（トランスフェクトしたコンストラクトにつき、32μLの破砕した細胞及び32μLの1：10に濃縮した培地をSDSゲルに負荷した。）。  （a）レーン1、精製したヒトイソQC（500ng）；レーン2、ヒトイソQCをトランスフェクトした細胞；レーン3、ヒトイソQC発現後の培地；レーン4、ヒトQCを使用したトランスフェクション後の細胞；レーン5、ヒトQC発現後の培地；レーン6、ラット-イソQC発現後の細胞；レーン7、ラット-イソQC発現後の培地；レーン8、ラットQC発現後の細胞；レーン9、ラットQC発現後の培地。特異的ヒトイソQC抗体pAb 3284を使用するタンパク質検出。  （b）特異的ヒトQC抗体（pAb 8695）を使用した、Restore（商標）Western Blot Stropping Buffer（Thermo Scientific）による洗浄後のウェスタンブロットの顕色
【図２０】図２０は、ウェスタンブロット分析による異なる哺乳類種由来の細胞におけるイソQCの基本的な発現レベルの決定を示す。破砕した細胞由来の120μgのタンパク質をSDSゲルに負荷し、レーン1、精製したヒトイソQC（10ng）；レーン2、HEK293細胞（ヒト）；レーン3、SH-SY5Y（ヒト）；レーン4、U343（ヒト）；レーン5、RAW（マウス）；レーン6、N2a（マウス）；レーン7、PC12（ラット）であった。  （a）ヒトイソQC抗体pAb 3284によるタンパク質の検出。  （b）ラット-イソQC抗体pAb 3286によるタンパク質の検出。
【図２１】図２１は、ヒトCCL2（MCP-1）と組換えヒトDP4とのインキュベーションを示す。  （a）組換えヒトDP4によるCCL2（Q1-76）の切断（1：200）。  （b）ヒトCCL2と組換えヒトイソQCとのインキュベーション（1：1000）（CCL(pGlu1-76)）後のDP4とのインキュベーション（1：200）。示された時点について切断を最長4時間モニターし、Maldi-TOF MSを使用して産物を分析した。
【図２２】図２２は、ヒトCCL8（MCP-2）と組換えヒトDP4とのインキュベーションを示す。  （a）組換えヒトDP4によるCCL8（Q1-76）（10μg/mL）の切断（1：100）。  （b）ヒトCCL8と組換えヒトイソQCとのインキュベーション（1：1000）（CCL8(pGlu1-76)）後の、DP4とのインキュベーション（1：200）。示された時点について切断を最長4時間までモニターし、Maldi-TOF MSを使用して産物を分析した。
【図２３】図２３は、ヒトCCL7（MCP-3）と組換えヒトDP4とのインキュベーションを示す。  （a）組換えヒトDP4によるCCL7（Q1-76）（10μg/mL）の切断（1：2000）。  （b）ヒトCCL7とヒト組換えイソQCとのインキュベーション（CCL7(pGlu1-76)）後のDP4とのインキュベーション（1：200）。示された時点について切断を最長4時間までモニターし、Maldi-TOF MSを使用して産物を分析した。
【図２４】図２４は、ヒトCCL13（MCP-4）と組換えヒトDP4とのインキュベーションを示す。  （a）組換えヒトDP4によるCCL13（Q1-76）（10μg/mL）の切断（1：2000）。  （b）ヒトCCL13と組換えヒトイソQCとのインキュベーション（1：1000）（CCL13(pGlu1-76)）後のDP4とのインキュベーション（1：200）。示された時点について切断を最長4時間までモニターし、Maldi-TOF MSを使用して産物を分析した。
【図２５】図２５の（ａ）は、チオグリコラート（thioglycollate）誘発性腹膜炎における単球浸潤に及ぼすQC／イソQC阻害剤イソQC-Iの効果を示す（平均±平均値の標準誤差、1群につきn＞5）。チオグリコラート（TG）及び阻害剤を腹腔内注射により適用した。表面マーカー7/4について陽性であり（7/4(高)）かつマーカーLy6Gについて弱い免疫反応を有する（Ly6G(低)）細胞は、浸潤した単球集団を表す。真の計数ビーズ（BD）を使用するサイトフルオロメトリーによって、陽性細胞集団を計数した。  （b）は、対照動物及びチオグリコラートのみを注射した動物と比較した、チオグリコラートを注射しかつ異なる用量のイソQC-Iで処理したマウスの洗浄液におけるMCP-1 N1pE濃度の決定を示す。
【図２６】図２６は、混合型雄／雌野生型同腹仔（WT）と比較した、混合型雄／雌ホモ接合型（HOM）QPCTLノックアウト動物における単球（a）及び顆粒球（b）の浸潤を示す。動物にチオグリコラート（Thio）又は塩類溶液（PBS）を注射した（***、P＜0.001；分散分析、次いでTuckeyの事後分析）。
【図２７】図２７は、混合型雄／雌野生型同腹仔（WT）と比較した、チオグリコラートを注射した混合型雄／雌ホモ接合型（HOM）QPCTLノックアウト動物において特異的ELISAを使用した総MCP-1（黒い棒）及びpGlu-MCP-1（白い棒）の分析を示す（**、p＜0.01、Studentのt検定）。
【図２８】図２８の（a）は、QPCTLノックアウト動物（HOM）及び野生型同腹仔（WT）から単離した刺激していないPBMC（-LPS）と比較した、LPS刺激したPBMC（+LPS）において特異的ELISAを使用した総MCP-1（黒い棒）及びpGlu-MCP-1（白い棒）の分析を示す。  （b）は、LPS刺激の不在下（-LPS）又は存在下（+LPS）でのQPCTLノックアウト動物（白い棒）及び野生型同腹仔（黒い棒）由来のpGlu-MCP-1と総MCP-1の％比を示す（***、p＜0.001；二元配置分散分析、次いでBonferroniの事後検定）。
【図２９】図２９の（a）は、異なる比の亜鉛対酵素を使用するマウス-イソQC、マウスQC、及びキイロショウジョウバエ由来のQC（DromeQC）の再活性化を示す。再活性化の前に、500mM NaClを含む1,10-フェナントロリン含有50mMビストリス，pH6.8で、1％を下回る残効性まで酵素を失活させた。その後、500ｍM NaCl及び50g/L Chelexを含む50mMビストリス，pH6.8に対する透析に酵素を供した。失活したタンパク質への異なる濃度のZnSO4の添加によって、再活性化を実施した。  （b）酵素を完全に再活性化するのに必要な亜鉛を決定するために、マウス-イソQCを亜鉛イオンで再活性化する際のタンパク質対亜鉛の含有量を増大させていった。500mM NaClを含む1,10-フェナントロリン含有50mMビストリス，pH6.8を使用して失活を実施した。
【図３０】図３０は、失活下及び再活性化したマウスイソQCの二次構造のCD分光分析を示す。タンパク質を10mMリン酸カリウム緩衝液，pH6.8に溶解した。二次構造の概算によって、両酵素について50％のαヘリックス及び26％のβターンが明らかとなった。亜鉛イオンは、二次構造に及ぼす影響を発揮していない。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８３】
個々のタンパク質は配列を配列番号11〜18に与える。これらのタンパク質についてコードする核酸配列をさらに開示する（配列番号2〜9）。
【表２】
2012502005.tif 000011
2012502005.tif 000012
2012502005.tif 000013
2012502005.tif 000014
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９６】
R1が-C3-8カルボシクリル-ヘテロアリールを表す場合、カルボシクリルの例には、シクロアルキル（例えば、シクロヘキシル）及びシクロアルケニル（例えば、シクロヘキセニル）を含む。典型的な-C3-8カルボシクリル-ヘテロアリール基は、3-イミダゾール-1-イル-シクロヘキシル-である。
R1が-C2-6アルケニルヘテロアリールを表す場合、C2-6アルケニルの例には、C2-4アルケニル、特にプロペニルを含む。典型的な-アルケニルヘテロアリール基は、3-イミダゾール-1-イル-プロパ-2-エニル-である。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１２】
R2が、任意に置換されたアリールを表す場合、アリールは典型的にはフェニルを表してもよい。典型的な置換フェニル基には、2,4-ジクロロフェニル-、2,4-ジフルオロフェニル-、2,4-ジメトキシフェニル-、2,4-ジメチルフェニル-、2,4-ビス(トリフルオロメチル)フェニル-、2,4,6-トリフルオロフェニル-、2,4,6-トリメチルフェニル-、2,6-ジクロロフェニル-、2,6-ジフルオロフェニル-、2,6-ジメトキシフェニル-、2-イソプロピル-6-メチルフェニル-、3-(シクロペンチルオキシ)-4-メトキシフェニル-、3,4,5-トリメトキシフェニル-、3,4-ジメトキシフェニル-、3,4-ジクロロフェニル-、3,4-ジメチルフェニル-、3,4,5-トリフルオロフェニル-、3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル-、3,5-ジメトキシフェニル-、3-メトキシフェニル-、4-(トリフルオロメチル)フェニル-、4-ブロモ-2-(トリフルオロメチル)フェニル-、4-ブロモフェニル-、4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル-、4-クロロフェニル-、4-シアノフェニル-、4-エトキシフェニル-、4-エチルフェニル-、4-フルオロフェニル-、4-イソプロピルフェニル-、4-メトキシフェニル-を含む。或いは、R2は、非置換フェニル-を表してもよい。さらなる典型的な置換フェニル基には、2,3,4-トリフルオロフェニル、2,3-ジフルオロ-4-メチルフェニル、2-ブロモ-4-フルオロフェニル-、2-ブロモ-5-フルオロフェニル-、2-クロロフェニル-、2-フルオロ-5-(トリフルオロメチル)フェニル-、2-ヒドロキシ-3-メトキシフェニル-、2-ヒドロキシ-5-メチルフェニル-、3-クロロフェニル-、3-フルオロ-4-(トリフルオロメチル)フェニル-、3-ヒドロキシ-4-メトキシフェニル-、4-ブロモ-2-フルオロフェニル、4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル-、4-クロロ-3-メチルフェニル、4-クロロフェニル-、4-フルオロフェニル-、及び4-プロポキシフェニル-を含む。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１３】
R2が、任意に置換されたアリールを表し、かつアリールがナフチルを表す場合、例には、非置換ナフチル（例えば、ナフタレン-1-イル、ナフタレン-2-イル、ナフタレン-3-イル）、及び置換ナフチル（例えば、4-メチル-ナフタレン-2-イル、5-メチル-ナフタレン-3-イル-、7-メチル-ナフタレン-3-イル-、及び4-フルオロ-ナフタレン-2-イル-）を含む。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１６】
R2が、（任意に置換してもよい）ヘテロシクリルを表す場合、例には、テトラヒドロフラニル、モルフォリニル、ピペリジニル、3,4-ジヒドロ-2H-ピラニル、ピロリジニル、メチルテトラヒドロフラニル-（例えば、5-メチルテトラヒドロフラン-2-イル-）を含む。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１９】
R2が（任意に置換してもよい）-C1-4アルキル-カルボシクリルを表す場合、例には、-メチル-シクロペンチル、-メチル-シクロヘキシル、-エチル-シクロヘキシル、-プロピル-シクロヘキシル、-メチル-シクロヘキセニル、-エチル-シクロヘキセニル、-メチル(4-メチルシクロヘキシル)、及び-プロピル(3-メチルシクロヘキシル)を含む。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３５】
R3が、-C1-4アルキルを表す場合、例には、メチル、エチル、プロピル（例えば、n-プロピル、イソプロピル）、及びブチル（例えば、n-ブチル- sec-ブチル、イソブチル、及びtert-ブチル）を含む。
R3が、任意に置換されたアリールを表す場合、アリールは典型的には、フェニルを表し得る。典型的な置換フェニル基には、2,4-ジクロロフェニル-、2,4-ジフルオロフェニル-、2,4-ジメトキシフェニル-、2,4-ジメチルフェニル-、2,4-ビス(トリフルオロメチル)フェニル-、2,4,6-トリフルオロフェニル-、2,4,6-トリメチルフェニル-、2,6-ジクロロフェニル-、2,6-ジフルオロフェニル-、2,6-ジメトキシフェニル-、2-イソプロピル-6-メチルフェニル-、3-(シクロペンチルオキシ)-4-メトキシフェニル-、3,4,5-トリメトキシフェニル-、3,4-ジメトキシフェニル-、3,4-ジクロロフェニル-、3,4-ジメチルフェニル-、3,4,5-トリフルオロフェニル-、3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル-、3,5-ジメトキシフェニル-、3-メトキシフェニル-、4-(トリフルオロメチル)フェニル-、4-ブロモ-2-(トリフルオロメチル)フェニル-、4-ブロモフェニル-、4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル-、4-クロロフェニル-、4-シアノフェニル-、4-エトキシフェニル-、4-エチルフェニル-、4-フルオロフェニル-、4-イソプロピルフェニル-、4-メトキシフェニル-を含む。或いは、R3は、非置換フェニル-を表してもよい。さらなる典型的な置換フェニル基には、2-ブロモ-4-フルオロフェニル-、2-ブロモ-5-フルオロフェニル-、2-クロロフェニル-、2-フルオロ-5-(トリフルオロメチル)フェニル-、2-ヒドロキシ-3-メトキシフェニル-、2-ヒドロキシ-5-メチルフェニル-、3-クロロフェニル-、3-フルオロ-4-(トリフルオロメチル)フェニル-、3-ヒドロキシ-4-メトキシフェニル-、4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル-、4-クロロフェニル-、4-フルオロフェニル-、及び4-プロポキシフェニル-を含む。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６１】
エチレングリコール（0.01モルの出発材料の場合25mL）を添加し、溶液を0〜5℃に冷却した後、対応するイソニトリル（1当量）、KSCN（1当量）、及び塩化ピリジニウム（1当量）を添加した。混合物を0〜5℃で2.5時間、次に室温で一晩撹拌した。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２２５】
特に、下記の併用は、本発明の目的に有用であると考えられる：
−粥状硬化の治療及び／又は予防のための、イソQC阻害剤、特にイソQC-Iと、アトルバスタチンとの併用
−再狭窄の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、特にイソQC-Iと、免疫抑制薬、好ましくはラパマイシンとの併用
−再狭窄の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、特にイソQC-Iと、免疫抑制薬、好ましくはパクリタキセルとの併用
−多発性硬化症の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、特にイソQC-Iと、インターフェロン、好ましくはアロネックス（Aronex）との併用
−多発性硬化症の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、特にイソQC-Iと、インターフェロン、好ましくはベタフェロンとの併用
−多発性硬化症の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、特にイソQC-Iと、インターフェロン、好ましくはレビフとの併用
−多発性硬化症の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、特にイソQC-Iと、コパクソンとの併用
−再狭窄の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、特にイソQC-Iと、デキサメタゾンとの併用
−粥状硬化の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、特にイソQC-Iと、デキサメタゾンとの併用
−関節リウマチの予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、特にイソQC-Iと、デキサメタゾンとの併用
−再狭窄の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、特にイソQC-Iと、HMG-CoA-レダクターゼ阻害剤との併用、ここでHMG-CoA-レダクターゼ阻害薬は、アトルバスタチン、セリバスタチン、フラバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン及びシンバスタチンから選択される
−粥状硬化の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、特にイソQC-Iと、HMG-CoA-レダクターゼ阻害剤との併用、ここでHMG-CoA-レダクターゼ阻害薬は、アトルバスタチン、セリバスタチン、フラバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン及びシンバスタチンから選択される
−関節リウマチの予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、特にイソQC-Iと、HMG-CoA-レダクターゼ阻害剤との併用、ここでHMG-CoA-レダクターゼ阻害薬は、アトルバスタチン、セリバスタチン、フラバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン及びシンバスタチンから選択される
−軽度認知障害の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、好ましくはイソQC-Iと、アミロイド-β抗体との併用、ここでアミロイド-β抗体はAcl-24である、
−アルツハイマー病の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、好ましくはイソQC-Iと、アミロイド-β抗体との併用、ここでアミロイド-β抗体はAcl-24である、
−ダウン症候群における神経変性の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、好ましくはイソQC-Iと、アミロイド-β抗体との併用、ここでアミロイド-β抗体はAcl-24である、
−軽度認知障害の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、好ましくはイソQC-Iと、βセクレターゼ阻害剤との併用、ここでβセクレターゼ阻害剤は、WY-25105、GW-840736X及びCTS-21166から選択される、
−アルツハイマー病の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、好ましくはイソQC-Iと、βセクレターゼ阻害剤との併用、ここでβセクレターゼ阻害剤は、WY-25105、GW-840736X及びCTS-21166から選択される、
−ダウン症候群における神経変性の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、好ましくはイソQC-Iと、βセクレターゼ阻害剤との併用、ここでβセクレターゼ阻害剤は、WY-25105、GW-840736X及びCTS-21166から選択される、
−軽度認知障害の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、好ましくはイソQC-Iと、γ-セクレターゼ阻害剤との併用、ここでγ-セクレターゼ阻害剤は、LY-450139、LY-411575及びAN-37124から選択される、
−アルツハイマー病の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、好ましくはイソQC-Iと、γ-セクレターゼ阻害剤との併用、ここでγ-セクレターゼ阻害剤は、LY-450139、LY-411575及びAN-37124から選択される、
−ダウン症候群における神経変性の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、好ましくはイソQC-Iと、γ-セクレターゼ阻害剤との併用、ここでγ-セクレターゼ阻害剤は、LY-450139、LY-411575及びAN-37124から選択される、
−軽度認知障害の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、好ましくはイソQC-Iと、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤との併用、ここでアセチルコリンエステラーゼ阻害剤は、ドネペジル及びジメボンから選択される、
−アルツハイマー病の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、好ましくはイソQC-Iと、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤との併用、ここでアセチルコリンエステラーゼ阻害剤は、ドネペジル及びジメボンから選択される、
−ダウン症候群における神経変性の予防及び／又は治療のための、イソQC阻害剤、好ましくはイソQC-Iと、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤との併用、ここでアセチルコリンエステラーゼ阻害剤は、ドネペジル及びジメボンから選択される。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２４２】
（実施例1：ヒトイソQCの製造）
（細胞株及び培地）
アフリカミドリザル腎臓細胞株COS-7、ヒト神経芽細胞腫細胞株SH-SY5Y、ヒトアストロサイトーマ細胞株LN405、ヒト角質細胞腫（keratinocytoma）細胞株HaCaT、及びヒト肝細胞癌細胞株Hep-G2を、37℃で、5％CO2（HaCaT、Hep-G2、COS-7）又は10％CO2（SH-SY5Y、LN405）の高湿大気下で、適切な細胞培地（Cos-7、SH-SY5Y、LN405、HaCaTについてはDMEM、10％FBS）（Hep-G2についてはRPMI1640、10％FBS）において培養した。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図５】
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