【手続補正書】
【提出日】平成25年2月19日(2013.2.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（Ｉ）：
【化１】
2012518626.tif 000001
（式中、
Ｒ１は水素原子、１個〜４個の炭素原子を有するアルキル基、１個〜４個の炭素原子を有するアミノアルキル基、又はモノアルキルアミノアルキル基若しくはジアルキルアミノアルキル基（該２つのアルキル基が１個〜４個の炭素原子を有する）を表し、
Ｒ２は水素原子又は１個〜４個の炭素原子を有するアルキル基を表し、
Ｒ３は１個〜４個の炭素原子を有するアルキル基を表し、
−ＯＲ４はヒドロキシル基、１個〜４個の炭素原子を有するアルコキシ基若しくは式−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−Ｚのアルコキシ基、若しくは１個〜４個の炭素原子を有するエステル基若しくは式−ＯＣ（Ｏ）Ｚのエステル基を表し、ここで
Ｚは３個〜６個の炭素原子を有するシクロアルキル基、又はフェニル基、ベンジル基、ピリジル基、ピリミジル基、トリアジル基及びオキサゾリル基から選択されるアリール基（該アリール基はハロゲン原子、−ＯＨ基、−ＮＯ２基又は−ＮＨ２基、１個〜４個の炭素原子を有するアルキル基、１個〜４個の炭素原子を有するアルコキシ基及び１個〜４個の炭素原子を有するモノアルキルアミノ基又はジアルキルアミノ基から選択される、同一の又は異なる１つ、２つ又は３つの置換基によりオルト位、メタ位又はパラ位で必要に応じて置換されていてもよい）であり、
ｎは１〜４の範囲の、好ましくは１に等しい整数であり、又は
−ＯＲ４基は式：
【化２】
2012518626.tif 000002
に対応し、ここで
ＶはＣＨ２、Ｏ、ＮＨ又はＮ−アルキルから選択され、該アルキル基は１個〜４個の炭素原子を有し、
ｎ’は２又は３に等しく、
Ｒ５は水素原子又はジアルキルアミノメチル基（ここで該アルキル基は１個〜４個の炭素原子を有する）を表し、
Ｒ６は二重結合によりＤ環と結合した酸素原子、ハロゲン原子、又は１個〜４個の炭素原子を有するアルコキシ基を表し、
Ｒ７は水素原子又は１個〜４個の炭素原子を有するアルキル基を表し、
Ｒ８は水素原子、アルキル基、ヒドロキシアルキル基、式
【化３】
2012518626.tif 000003
のアルキルカルボキシアルキレン基、若しくは式
【化４】
2012518626.tif 000004
のジアルキルホスフェートアルキレン基（ここで該アルキル基及び該アルキレン基が１個〜４個の炭素原子を有する）、又は１個〜４個の炭素原子を有するエステル基を表し、Ｒ６が二重結合によりＤ環と結合した酸素原子である場合にのみＲ８が存在する）に対応することを特徴とする薬物としての四環系化合物及びそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒ１が水素原子であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２がメチル基であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ３がメチル基であることを特徴とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
前記−ＯＲ４基が−ＯＨ基又はメトキシ基であることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
前記−ＯＲ４基が式−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５のベンジルエーテル基、又は式−ＯＣ（Ｏ）Ｃ６Ｈ５のエステル基（該基が−ＮＯ２基、−ＮＨ２基、−Ｎ（ＣＨ３）２基、−ＣＮ基、−ＣＨ２ＮＨ２基又は−ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２基から選択される置換基によりオルト位、メタ位又はパラ位で必要に応じて置換されていてもよい）であることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
前記Ｒ５基が水素原子又はジメチルアミノメチル基であることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
前記Ｒ６基が二重結合によりＤ環と結合した酸素原子であることを特徴とする、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
前記Ｒ８基が水素原子であることを特徴とする、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
以下の式（Ｉ）：
【化５】
2012518626.tif 000005
化合物１
又は式：
【化６】
2012518626.tif 000006
又は式：
【化７】
2012518626.tif 000007
又は式：
【化８】
2012518626.tif 000008
又は式：
【化９】
2012518626.tif 000009
に対応することを特徴とする、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
以下の式（Ｉ）：
【化１０】
2012518626.tif 000010
に対応することを特徴とする化合物。
【請求項１２】
有効成分としての少なくとも１つの請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物と少なくとも１つの薬学的に許容されるビヒクルとを含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項１３】
別の抗がん有効成分も含むことを特徴とする、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物の抗がん活性を評価する方法であって、
１．真核細胞を試験対象の前記化合物とインキュベートした後の、微小管ネットワークを保護するが脱重合したチューブリンの排出を可能にするバッファーによる該細胞の透過処理、
２．前記細胞の固定後、Ｔｙｒ−チューブリンを抗チロシン化チューブリン一次抗体及び波長λ１で発光する二次抗体で標識化し、Ｇｌｕ−チューブリンを抗脱チロシン化チューブリン一次抗体及び波長λ２で発光する二次抗体で標識化した後の脱重合剤に最も感受性がある動的微小管及び安定化した微小管を同定するための様々な波長での蛍光の定量化、
３．細胞層の状態を評価するための核の補助的な標識化、
４．工程１と同じ条件下での試験対象の前記化合物とＨｅＬａ細胞とのインキュベーション、及び蛍光が波長λ２で観察される場合の該化合物の選抜、
５．インキュベートした細胞試料のミトコンドリアマーカーによる染色及びインキュベートした細胞試料のアジ化ナトリウムによる染色、並びにミトコンドリアに対するアジ化ナトリウムの効果と試験対象の前記化合物の効果との比較、並びに該化合物がアジ化ナトリウムと同様のミトコンドリア染色の変更を示す場合の該化合物の除外、
６．ＨｅＬａ細胞と試験対象の分子とのインキュベーション、ノコダゾールによる任意の処理、その後の微小管ネットワークの免疫蛍光標識化の分析及びリーダーを用いた定量化、並びに
７．前記ＨｅＬａ細胞と試験対象の前記化合物とのインキュベーション、任意のその後のラトランクリンＢとの同時インキュベーション、及びアクチンネットワークに対する試験対象の前記化合物の効果を分析し、該化合物が該アクチンネットワークの形態を変更しない場合該化合物を選抜するためのフルオロフォア（λ２で発光）と連結したファロトキシンによるＦ−アクチンの標識化、
を含むことを特徴とする、方法。
【請求項１５】
神経変性型の病変を予防及び／又は治療する薬物として用いられる、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
アルツハイマー病及び統合失調症を予防及び／又は治療する薬物として用いられる、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
寄生虫病を予防及び／又は治療する薬物として用いられる、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
マラリアを予防及び／又は治療する薬物として用いられる、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
緑内障を予防及び／又は治療する薬物として用いられる、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
がんを予防及び／又は治療する薬物として用いられる、請求項１２又は１３に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏでＬＩＭＫ１の活性を阻害又は安定化させやすい分子をスクリーニングする方法であって、
（ｉ）ＬＩＭＫ１を、必要に応じて標識化した請求項１〜１１のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物に接触させること、
（ｉｉ）試験対象の前記化合物を添加すること、及び
（ｉｉｉ）試験対象の前記化合物による式（Ｉ）の化合物の置き換えを評価すること（avaluating）、
を含む、方法。
【請求項２２】
ｉｎ  ｖｉｖｏで直接的若しくは間接的なＬＩＭＫ１活性化因子、又はホスファターゼ阻害因子をスクリーニングする方法であって、
（ｉ）請求項１〜１１のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物を真核細胞、好ましくはヒト細胞に接触させること、
（ｉｉ）ＬＩＭＫ１基質、例えばコフィリンのリン酸化の低減を測定することにより、式（Ｉ）の前記化合物の阻害効果を評価すること、
（ｉｉｉ）試験対象の前記化合物を添加すること、及び
（ｉｖ）ＬＩＭＫ１基質のリン酸化の阻害に対する試験対象の前記化合物の効果を測定すること、
を含む、方法。