【手続補正書】
【提出日】平成23年12月15日(2011.12.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
TGFβ-1、TGFβ-2、TGFβ-3、TGFβ-4またはTGFβ-5の前駆体ドメインである潜在関連ペプチド（latency associated peptide: LAP）および薬学的活性物質を含む、融合タンパク質であって、
該LAPおよび該薬学的活性物質が、アグリカナーゼタンパク質切断部位を含むアミノ酸配列によって連結されている、融合タンパク質。
【請求項２】
前記アグリカナーゼ切断部位が、ADAMTS-4（アグリカナーゼ-1）、ADAMTS-5（アグリカナーゼ-2）またはADAMTS-11によって切断される、請求項1に記載の融合タンパク質。
【請求項３】
前記アグリカナーゼ切断部位が、ADAMTS-4（アグリカナーゼ-1）によって切断され、かつ共通配列E-[AFVLMY]-X(0,1)-[RK]-X(2,3)-[ST]-[VYIFWMLA]によって規定される、請求項2に記載の融合タンパク質。
【請求項４】
前記アグリカナーゼ切断部位が、
HNEFRQRETYMVF、または
DVQEFRGVTAVIR
である、請求項3に記載の融合タンパク質。
【請求項５】
前記アグリカナーゼ切断部位に隣接してペプチドリンカー配列が存在する、請求項1〜4のいずれか一項に記載の融合タンパク質。
【請求項６】
前記ペプチドリンカー配列が、GGGGSまたはその多量体である、請求項5に記載の融合タンパク質。
【請求項７】
前記薬学的活性物質がタンパク質である、請求項1〜6のいずれか一項に記載の融合タンパク質。
【請求項８】
前記薬学的に活性なタンパク質が、成長因子、分化因子、サイトカイン、ケモカイン、栄養因子、サイトカイン阻害物質、サイトカイン受容体、フリーラジカル消去酵素（free-radical scavenging enzyme）、 プロドラッグ変換酵素、ペプチド模倣体、プロテアーゼ阻害物質、組織メタロプロテアーゼ阻害物質、またはセリンプロテアーゼ阻害物質である、請求項7に記載の融合タンパク質。
【請求項９】
潜在型TGFβ結合タンパク質に会合された、前記請求項のいずれか一項に記載の融合タンパク質。
【請求項１０】
TGFβ-1、TGFβ-2、TGFβ-3、TGFβ-4またはTGFβ-5の前駆体ドメインであるLAPおよびアグリカナーゼタンパク質切断部位を含む、融合タンパク質であって、
薬学的活性物質に会合された融合タンパク質。
【請求項１１】
薬学的活性物質をコードする第1の核酸配列、TGFβ-1、TGFβ-2、TGFβ-3、TGFβ-4またはTGFβ-5の前駆体ドメインであるLAPをコードする第2の核酸配列を含む、核酸構築物であって、
該第1の核酸配列と該第2の核酸配列との間に、アグリカナーゼタンパク質切断部位をコードする核酸配列が提供される、核酸構築物。
【請求項１２】
前記アグリカナーゼ切断部位が、ADAMTS-4（アグリカナーゼ-1）、ADAMTS-5（アグリカナーゼ-2）またはADAMTS-11によって切断される、請求項11に記載の核酸構築物。
【請求項１３】
前記薬学的活性物質が、成長因子、分化因子、サイトカイン、ケモカイン、栄養因子、サイトカイン阻害物質、サイトカイン受容体、フリーラジカル消去酵素、 プロドラッグ変換酵素、ペプチド模倣体、プロテアーゼ阻害物質、組織メタロプロテアーゼ阻害物質、またはセリンプロテアーゼ阻害物質である、請求項11または12に記載の核酸構築物。
【請求項１４】
請求項11〜13のいずれか一項に記載の核酸構築物を含む、ベクター。
【請求項１５】
請求項11〜13のいずれか一項に記載の核酸構築物によってコードされた、融合タンパク質。
【請求項１６】
請求項14に記載のベクターまたは請求項11〜13のいずれか一項に記載の核酸構築物を含む、細胞。
【請求項１７】
請求項1〜10のいずれか一項に記載の融合タンパク質、請求項11〜13のいずれか一項に記載の核酸構築物、または請求項16に記載の細胞を含む、薬学的組成物。
【請求項１８】
請求項1〜10のいずれか一項に記載の融合タンパク質、請求項11〜13のいずれか一項に記載の核酸構築物、または請求項16に記載の細胞を含む、関節炎または癌の治療に使用するための薬学的組成物。
【請求項１９】
関節炎または癌の治療のための医薬の製造における、請求項1〜10のいずれか一項に記載の融合タンパク質、請求項11〜13のいずれか一項に記載の核酸配列または請求項16に記載の細胞の使用。
【請求項２０】
請求項1〜10のいずれか一項に記載の融合タンパク質、請求項11〜13のいずれか一項に記載の核酸構築物、もしくは請求項16に記載の細胞、および投与ビヒクルを含む、パーツのキット。
【請求項２１】
宿主細胞での前記融合タンパク質の組換え的発現による産生、発現された該融合タンパク質の精製、ならびにペプチド結合の連結、水素結合もしくは塩結合または化学的架橋の手段による薬学的活性物質と精製された該融合タンパク質との会合を含む、請求項1〜10のいずれか一項に記載の融合タンパク質を調製する方法。
【請求項２２】
潜在関連ペプチド、アグリカナーゼ切断配列、および薬学的活性物質をコードし、任意でアグリカナーゼ切断部位のいずれかの側にリンカー配列を含む核酸配列を共に連結する工程を含む、請求項11〜12のいずれか一項に記載の核酸構築物を調製する方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
本発明の第1の局面により、潜在関連ペプチド（LAP）および薬学的活性物質を含む融合タンパク質であって、該LAPおよび該薬学的活性物質が、アグリカナーゼタンパク質分解部位を含むアミノ酸配列によって連結されている融合タンパク質が提供される。
[本発明1001]
潜在関連ペプチド（latency associated peptide: LAP）および薬学的活性物質を含む、融合タンパク質であって、
該LAPおよび該薬学的活性物質が、アグリカナーゼタンパク質切断部位を含むアミノ酸配列によって連結されている、融合タンパク質。
[本発明1002]
前記潜在関連ペプチド（LAP）が、TGFβの前駆体ドメインである、本発明1001の融合タンパク質。
[本発明1003]
前記潜在関連ペプチド（LAP）が、TGFβ-1、TGFβ-2、TGFβ-3、TGFβ-4またはTGFβ-5の前駆体ドメインである、本発明1002の融合タンパク質。
[本発明1004]
前記アグリカナーゼ切断部位が、ADAMTS-4（アグリカナーゼ-1）、ADAMTS-5（アグリカナーゼ-2）またはADAMTS-11によって切断される、本発明1001〜1003のいずれかの融合タンパク質。
[本発明1005]
前記アグリカナーゼ切断部位が、ADAMTS-4（アグリカナーゼ-1）によって切断される、本発明1004の融合タンパク質。
[本発明1006]
前記アグリカナーゼ切断部位が、共通配列E-[AFVLMY]-X(0,1)-[RK]-X(2,3)-[ST]-[VYIFWMLA]によって規定される、本発明1005の融合タンパク質。
[本発明1007]
前記アグリカナーゼ切断部位が、
HNEFRQRETYMVF、または
DVQEFRGVTAVIR
である、本発明1006の融合タンパク質。
[本発明1008]
前記アグリカナーゼ切断部位に隣接してペプチドリンカー配列が存在する、本発明1001〜1007のいずれかの融合タンパク質。
[本発明1009]
前記ペプチドリンカー配列が、GGGGSまたはその多量体である、本発明1008の融合タンパク質。
[本発明1010]
前記薬学的活性物質がタンパク質である、本発明1001〜1009のいずれかの融合タンパク質。
[本発明1011]
前記薬学的に活性なタンパク質が、成長因子、分化因子、サイトカイン、ケモカイン、栄養因子、サイトカイン阻害物質、サイトカイン受容体、フリーラジカル消去酵素（free-radical scavenging enzyme）、 プロドラッグ変換酵素、ペプチド模倣体、プロテアーゼ阻害物質、組織メタロプロテアーゼ阻害物質、またはセリンプロテアーゼ阻害物質である、本発明1010の融合タンパク質。
[本発明1012]
前記サイトカインが、インターロイキンまたはインターフェロンである、本発明1011の融合タンパク質。
[本発明1013]
潜在型TGFβ結合タンパク質に会合された、前記本発明のいずれかの融合タンパク質。
[本発明1014]
LAPおよびアグリカナーゼタンパク質切断部位を含む融合タンパク質であって、
薬学的活性物質に会合された融合タンパク質。
[本発明1015]
関節炎または癌の治療に使用するための、本発明1001〜1014のいずれかの融合タンパク質。
[本発明1016]
本発明1001〜1014のいずれかの融合タンパク質を含む、薬学的組成物。
[本発明1017]
薬学的活性物質をコードする第1の核酸配列、LAPをコードする第2の核酸配列を含む、核酸構築物であって、
該第1の核酸配列と該第2の核酸配列との間に、アグリカナーゼタンパク質切断部位をコードする核酸配列が提供される、核酸構築物。
[本発明1018]
前記アグリカナーゼ切断部位が、ADAMTS-4（アグリカナーゼ-1）、ADAMTS-5（アグリカナーゼ-2）またはADAMTS-11によって切断される、本発明1017の核酸構築物。
[本発明1019]
前記薬学的活性物質が、成長因子、分化因子、サイトカイン、ケモカイン、栄養因子、サイトカイン阻害物質、サイトカイン受容体、フリーラジカル消去酵素、 プロドラッグ変換酵素、ペプチド模倣体、プロテアーゼ阻害物質、組織メタロプロテアーゼ阻害物質、またはセリンプロテアーゼ阻害物質である、本発明1017または1018の核酸構築物。
[本発明1020]
本発明1017〜1019のいずれかの核酸構築物を含む、ベクター。
[本発明1021]
本発明1017〜1019のいずれかの核酸構築物によってコードされた、融合タンパク質。
[本発明1022]
本発明1021のベクターまたは本発明1017〜1019のいずれかの核酸構築物を含む、細胞。
[本発明1023]
関節炎または癌の治療に使用するための、本発明1017〜1019のいずれかの核酸配列、または本発明1023の細胞。
[本発明1024]
本発明1017〜1019のいずれかの核酸構築物または本発明1022の細胞を含む、薬学的組成物。
[本発明1025]
関節炎または癌の治療のための医薬の製造における、本発明1001〜1014のいずれかの融合タンパク質の使用。
[本発明1026]
関節炎または癌の治療のための医薬の製造における、本発明1017〜1019のいずれかの核酸配列または本発明1022の細胞の使用。
[本発明1027]
潜在関連ペプチド（LAP）および薬学的活性物質を含む融合タンパク質を含む組成物の被験体への投与を含む、関節炎または癌を治療する方法であって、
該LAPおよび該薬学的活性物質が、アグリカナーゼタンパク質切断部位を含むアミノ酸配列によって連結されている、方法。
[本発明1028]
本発明1017〜1019のいずれかの核酸構築物または本発明1022の細胞の被験体への投与を含む、関節炎または癌を治療する方法。
[本発明1029]
本発明1001〜1014のいずれかの融合タンパク質、本発明1017〜1019のいずれかの核酸構築物、もしくは本発明1022の細胞、および投与ビヒクルを含む、パーツのキット。
[本発明1030]
宿主細胞での前記融合タンパク質の組換え的発現による産生、発現された該融合タンパク質の精製、ならびにペプチド結合の連結、水素結合もしくは塩結合または化学的架橋の手段による薬学的活性物質と精製された該融合タンパク質との会合を含む、本発明1001〜1014のいずれかの融合タンパク質を調製する方法。
[本発明1031]
潜在関連ペプチド、アグリカナーゼ切断配列、および薬学的活性物質をコードし、任意でアグリカナーゼ切断部位のいずれかの側にリンカー配列を含む核酸配列を共に連結する工程を含む、本発明1017〜1019のいずれかの核酸構築物を調製する方法。