【手続補正書】
【提出日】平成24年11月6日(2012.11.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｃ型ナトリウム利尿ペプチド（ＣＮＰ）の変異体であって、該変異体は、約２．６ｋＤａ〜約７．０ｋＤａの範囲の総質量を有し、そして以下の式：
（ｘ）−Ｇｌｙ１−Ｌｅｕ２−Ｓｅｒ３−（Ａｒｇ）４−Ｇｌｙ５−（Ｃｙｓ）６−（Ｐｈｅ）７−（Ｇｌｙ）８−（Ｌｅｕ）９−（Ｌｙｓ）１０−（Ｌｅｕ）１１−Ａｓｐ１２−Ａｒｇ１３−（Ｉｌｅ）１４−（Ｇｌｙ）１５−Ｓｅｒ１６−（Ｍｅｔ）１７−Ｓｅｒ１８−Ｇｌｙ１９−（Ｌｅｕ）２０−Ｇｌｙ２１−Ｃｙｓ２２−（ｚ）（配列番号５０）
［式中、
（ｘ）は、１〜４０個のアミノ酸を含むアミノ酸配列であり、そして該変異体のＮ末端で、ＰＥＧポリマーまたはその誘導体に必要に応じて結合しており；そして
（ｚ）は、非存在であってよく、または骨もしくは軟骨ターゲティング部分；腎クリアランスを減少させる部分；親水性ポリマー；１つもしくは複数のアミノ酸を含むアミノ酸配列；炭水化物；疎水性酸；およびそれらの組合せからなる群から選択されるものでよい］
を有する、ＣＮＰ変異体。
【請求項２】
（ｚ）についての前記骨もしくは軟骨ターゲティング部分が、ビスホスホネート；ヒドロキシアパタイト；グルコサミン；Ｘ型コラーゲン；ポリＡｓｐ；ポリＧｌｕ；ならびにオステオクリン、オステポンチン、オステオカルシンおよびシアロタンパク質の骨ターゲティングドメイン由来のアミノ酸配列からなる群から選択される、請求項１に記載のＣＮＰ変異体。
【請求項３】
（ｚ）についての腎クリアランスを減少させる前記部分が、生理的条件下でカルボキシル基（複数可）、硫酸基（複数可）、リン酸基（複数可）またはその組合せを生成する官能基（複数可）を含むポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）ポリマーである、請求項１から２のいずれか一項に記載のＣＮＰ変異体。
【請求項４】
（ｚ）についての前記親水性ポリマーが、約０．４ｋＤａ〜約２．５ｋＤａの範囲のポリマー数平均分子量を有する、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）ポリマーまたはその誘導体である、請求項１から３のいずれかに記載のＣＮＰ変異体。
【請求項５】
（ｚ）についての１つもしくは複数のアミノ酸を含む前記アミノ酸配列がナトリウム利尿ポリペプチドまたは非ナトリウム利尿ポリペプチド由来であり、該アミノ酸配列が、該ナトリウム利尿ポリペプチドまたは非ナトリウム利尿ポリペプチドの野生型配列と比較してアミノ酸付加（複数可）、欠失（複数可）および／または置換（複数可）を場合によって含んでいてよい、請求項１から４のいずれかに記載のＣＮＰ変異体。
【請求項６】
前記ナトリウム利尿ポリペプチドが、ＣＮＰ−２２、ＣＮＰ−５３、ナトリウム利尿ペプチド前駆体Ｃ（ＮＰＰＣ）、心房ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）、ナトリウム利尿ペプチド前駆体Ａ（ＮＰＰＡ）、脳ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）およびナトリウム利尿ペプチド前駆体Ｂ（ＮＰＰＢ）からなる群から選択される、請求項５に記載のＣＮＰ変異体。
【請求項７】
前記非ナトリウム利尿ポリペプチドが、アルブミン、免疫グロブリン、ヒスチンリッチ糖タンパク質（ＨＲＧＰ）、フィブロネクチン、フィブリノーゲン、亜鉛フィンガー含有ポリペプチド、線維芽細胞成長因子２（ＦＧＦ−２）および骨形成タンパク質（ＢＭＰ）からなる群から選択される、請求項５に記載のＣＮＰ変異体。
【請求項８】
（ｚ）についての１つもしくは複数のアミノ酸を含む前記アミノ酸配列が１〜４０個のアミノ酸を含む、請求項１から７のいずれかに記載のＣＮＰ変異体。
【請求項９】
（ｚ）についての前記疎水性酸が天然脂肪酸および線状または分枝、飽和または不飽和Ｃ５〜Ｃ１２カルボン酸からなる群から選択される、請求項１から８のいずれかに記載のＣＮＰ変異体。
【請求項１０】
（ｘ）が、ＣＮＰ−２２のＧｌｙ１に対応する位置の直前の位置に２つの連続する塩基性アミノ酸を含まない、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＮＰ変異体。
【請求項１１】
ＣＮＰ−２２のＧｌｙ１に対応する位置の直前にＡｒｇ残基を含む、請求項１から１０のいずれかに記載のＣＮＰ変異体。
【請求項１２】
Ｒ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（類似体ＡＺ）（配列番号４１）；
ＥＲ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（類似体ＢＡ）（配列番号３９）；
ＧＡＮＱＱ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（類似体ＣＨ）（配列番号６９）；
ＧＡＮＳＳ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（類似体ＣＧ）（配列番号７０）；
ＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＧＡＮＱＱ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（類似体ＣＫ）（配列番号８４）；
ＧＶＰＱＶＳＴＳＴＧＡＮＱＱ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（類似体ＣＬ）（配列番号８５）；
ＧＱＴＨＳＳＧＴＱＳＧＡＮＱＱ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（類似体ＣＮ）（配列番号８７）；
ＧＱＰＳＳＳＳＱＳＴＧＡＮＱＱ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（類似体ＣＭ）（配列番号８６）；
ＧＳＴＧＱＷＨＳＥＳＧＡＮＱＱ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（類似体ＣＯ）（配列番号８８）；
ＧＳＳＳＳＳＳＳＳＳＧＡＮＱＱ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（類似体ＣＰ）（配列番号８９）；
ＰＥＯ１２−Ｒ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（配列番号４１）；
ＰＥＯ２４−Ｒ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（配列番号４１）；
ＰＥＯ１２−ＥＲ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（配列番号３９）；
ＰＥＯ２４−ＥＲ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（配列番号３９）；
ＰＥＧ１Ｋ−ＧＡＮＲＲ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（配列番号３６）；
ＰＥＯ１２−ＧＡＮＲＲ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（配列番号３６）；
ＰＥＯ２４−ＧＡＮＲＲ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（配列番号３６）；
ＰＥＧ２Ｋ−ＧＡＮＲＲ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（配列番号３６）；
ＰＥＯ１２−ＧＡＮＳＳ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（配列番号７０）；
ＰＥＯ２４−ＧＡＮＳＳ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（配列番号７０）；
ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）、Ｎ末端二量体／ジスクシンイミジルグルタレート（配列番号１３４）
ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）、Ｎ末端二量体／Ｂｉｓ−ＰＥＯ５（配列番号１３５）
ＰＥＯ１２−ＧＡＮＱＱ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（配列番号６９）；および
ＰＥＯ２４−ＧＡＮＱＱ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（配列番号６９）
からなる群から選択される、Ｃ型ナトリウム利尿ペプチド（ＣＮＰ）の変異体。
【請求項１３】
約２．６ｋＤａ〜約７．０ｋＤａの範囲の総質量を有するＣ型ナトリウム利尿ペプチド（ＣＮＰ）の変異体であって、該変異体は、
（ａ）親水性ポリマー、および
（ｂ）ＧＡＮＲＲ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（配列番号３６）、ＥＲ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（配列番号３９）、Ｒ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（配列番号４１）、またはＧＡＮＱＱ−ＣＮＰ２２（Ｋ４Ｒ）（配列番号６９）のいずれか一つ
を含み、
該親水性ポリマーがＮ末端、Ｃ末端もしくは内部部位、またはそれらの組合せにおいて該ペプチドに結合している、ＣＮＰ変異体。
【請求項１４】
約２．８ｋＤａ〜約６．０ｋＤａの範囲の総質量を有する、請求項１から１３のいずれかに記載のＣＮＰ変異体。
【請求項１５】
中性エンドペプチダーゼ（ＮＥＰ）切断に対する感受性を評価するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイにおいて野生型ＣＮＰ−２２より少なくとも２倍長い半減期を有する、請求項１から１４のいずれかに記載のＣＮＰ変異体。
【請求項１６】
同じ濃度の野生型ＣＮＰ−２２のもとで産生されるｃＧＭＰレベルの少なくとも約５０％の産生をｉｎ  ｖｉｔｒｏで刺激する、請求項１から１５のいずれかに記載のＣＮＰ変異体。
【請求項１７】
請求項１から１６のいずれかに記載のＣＮＰ変異体および薬学的に許容される賦形剤、担体または希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項１８】
軟骨無形成症、低軟骨形成症、低身長、小人症、致死性形成異常、およびホモ接合性軟骨無形成症からなる群から選択される骨格異形成症を治療するための組成物であって、請求項１、２、５から１２、および１４から１６のいずれかに記載のペグ化されていないＣＮＰ変異体を含む組成物。
【請求項１９】
前記骨格異形成症が軟骨無形成症である、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
高血圧、再狭窄、アテローム動脈硬化症、急性非代償性心不全、鬱血性心不全、心臓浮腫、腎性水腫、肝性浮腫、急性腎不全および慢性腎不全からなる群から選択される血管平滑筋障害を治療するための組成物であって、請求項１から１６のいずれかに記載のペグ化されているＣＮＰ変異体を含む組成物。
【請求項２１】
骨の成長板のサイズを増加させるか、骨を延長させるか、長骨の成長を増大させるか、マトリックス産生を増大させるか、軟骨細胞の増殖を増大させるか、または軟骨細胞の分化を増大させるための組成物であって、請求項１、２、５から１２、または１４から１６のいずれかに記載のペグ化されていないＣＮＰ変異体を含む組成物。
【請求項２２】
（ｚ）が非存在である、請求項１に記載のＣＮＰ変異体。