【手続補正書】
【提出日】平成25年3月29日(2013.3.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の（ａ）及び（ｂ）を含む単離された抗ＦｃＲＨ５モノクローナル抗体：
（ａ）（ｉ）、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）を含む軽鎖可変領域：
（ｉ）配列番号２６の配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；
（ｉｉ）配列番号２７の配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；
（ｉｉｉ）配列番号２８の配列を含むＨＶＲ−Ｌ３；
（ｂ）（ｖｉ）、（ｖ）及び（ｖｉ）を含む重鎖可変領域：
（ｉｖ）配列番号３５の配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；
（ｖ）配列番号３６の配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；
（ｖｉ）配列番号３７の配列を含むＨＶＲ−Ｈ３。
【請求項２】
Ｆａｂ、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆｖ、ｓｃＦｖまたは（Ｆａｂ’）２断片である請求項１記載の抗体。
【請求項３】
ヒト化されている請求項１記載の抗体。
【請求項４】
キメラ抗体である請求項１記載の抗体。
【請求項５】
抗体がフレームワーク配列を含み、前記フレームワーク配列の少なくとも一部がヒト共通フレームワーク配列である請求項１記載の抗体。
【請求項６】
ヒトκ亜群１共通フレームワーク配列を含む請求項１記載の抗体。
【請求項７】
重鎖ヒト亜群ＩＩＩ共通フレームワーク配列を含む請求項１記載の抗体。
【請求項８】
重鎖可変領域が配列番号４０のアミノ酸配列を含む請求項１記載の抗体。
【請求項９】
軽鎖可変領域が配列番号３０のアミノ酸配列を含む請求項１記載の抗体。
【請求項１０】
軽鎖可変領域が配列番号３０のアミノ酸配列を含む請求項８記載の抗体。
【請求項１１】
Ｆｃ領域に連結される単一Ｆａｂ領域を含む請求項１記載の抗体。
【請求項１２】
抗体が配列番号３８のアミノ酸配列を含むＣＨ１、および／または配列番号３９のアミノ酸配列を含むＦｃ配列を含む請求項１０記載の抗体。
【請求項１３】
抗体が配列番号２９のアミノ酸配列を含むＣＬ１配列を含む請求項１２記載の抗体。
【請求項１４】
（ａ）抗体の重鎖可変ドメインおよび請求項１の抗体の軽鎖可変ドメインを含む抗体を発現する細胞を培養するプロセス；ならびに
（ｂ）前記培養細胞から抗体を単離するプロセス
により製造される、抗ＦｃＲＨ５モノクローナル抗体。
【請求項１５】
１つ以上の遊離システインアミノ酸を含む請求項１記載の抗体。
【請求項１６】
１つ以上の遊離システインアミノ酸が、０．６〜１．０の範囲のチオ反応性値を有する請求項１５記載の抗体。
【請求項１７】
１つ以上の遊離システインアミノ酸残基が軽鎖中に位置する請求項１５記載の抗体。
【請求項１８】
重鎖配列が配列番号４２のアミノ酸配列を含む請求項１５記載の抗体。
【請求項１９】
軽鎖配列が配列番号４１のアミノ酸配列を含む請求項１８記載の抗体。
【請求項２０】
重鎖配列が配列番号４４のアミノ酸配列を含む請求項１５記載の抗体。
【請求項２１】
軽鎖配列が配列番号４３のアミノ酸配列を含む請求項２０記載の抗体。
【請求項２２】
遊離システインアミノ酸が、カバット番号付け規約による軽鎖の位置２０５、１１４、および／または４００にある請求項１５記載の抗体。
【請求項２３】
請求項１記載の抗体と同一のエピトープに結合する単離された抗体。
【請求項２４】
抗体が一価であり、Ｆｃ領域を含む請求項１記載の抗体。
【請求項２５】
二重特異性抗体である請求項１記載の抗体。
【請求項２６】
ＣＤ３に特異的に結合する請求項２５記載の抗体。
【請求項２７】
請求項１−２６のいずれかに記載の抗体をコードするポリヌクレオチド。
【請求項２８】
請求項２７記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
【請求項２９】
請求項２８記載のベクターを含む宿主細胞。
【請求項３０】
細胞傷害性物質と共有結合される請求項１−２６のいずれかに記載の抗体を含む免疫接合体。
【請求項３１】
細胞傷害性物質が、毒素、化学療法薬、薬剤部分、抗生物質、放射性同位体および核酸分解酵素から選択される請求項３０記載の免疫接合体。
【請求項３２】
捕捉標識、検出標識または固体支持体に共有結合される請求項１−２６のいずれかに記載の抗体を含む免疫接合体。
【請求項３３】
抗体がビオチン捕捉標識に共有結合される請求項３２記載の免疫接合体。
【請求項３４】
抗体が蛍光染料検出標識に共有結合される請求項３２記載の免疫接合体。
【請求項３５】
蛍光染料が、フルオレセイン型、ローダミン型、ダンシル、リサミン、シアニン、フィコエリトリン、テキサスレッドおよびその類似体から選択される請求項３４記載の免疫接合体。
【請求項３６】
抗体が、３Ｈ、１１Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ、３２Ｐ、３５Ｓ、６４Ｃｕ、６８Ｇａ、８６Ｙ、９９Ｔｃ、１１１Ｉｎ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、１３３Ｘｅ、１７７Ｌｕ、２１１Ａｔおよび２１３Ｂｉから選択される放射性核種検出標識に共有結合される請求項３２記載の免疫接合体。
【請求項３７】
式Ａｂ−（Ｌ−Ｄ）ｐを有する免疫接合体であって：
（ａ）Ａｂは請求項１記載の抗体であり；
（ｂ）Ｌはリンカーであり；
（ｃ）Ｄは薬剤部分であり；及び
（ｄ）ｐは１から８である、
免疫接合体。
【請求項３８】
Ｌが、６−マレイミドカプロイル（ＭＣ）、マレイミドプロパノイル（ＭＰ）、バリン−シトルリン（ｖａｌ−ｃｉｔ）、アラニン−フェニルアラニン（ａｌａ−ｐｈｅ）、ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢ）、Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルチオ）ペンタノエート（ＳＰＰ）、Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート（ＳＭＣＣ）、４−（２−ピリジルジチオ）酪酸−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＳＰＤＢ）およびＮ−スクシンイミジル（４−ヨード−アセチル）アミノベンゾエート（ＳＩＡＢ）から選択される請求項３７記載の免疫接合体。
【請求項３９】
Ｄが、アウリスタチンまたはドロスタチンであり、Ｄは以下の式ＤＥまたはＤＦの薬剤部分である請求項３７記載の免疫接合体：
2012522512.tif 000001
（式中、Ｒ２およびＲ６は、各々、メチルであり、Ｒ３およびＲ４は、各々、イソプロピルであり、Ｒ７は、ｓｅｃ−ブチルであり、Ｒ８の各存在は、−ＣＨ３、−Ｏ−ＣＨ３、−ＯＨおよびＨであり、Ｒ９は、Ｈであり、Ｒ１０は、アリールであり、Ｚは、−Ｏ−または−ＮＨ−であり、Ｒ１１は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキルまたは−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ３であり、Ｒ１８は、−Ｃ（Ｒ８）２−Ｃ（Ｒ８）２−アリールである。）
【請求項４０】
ＤがＭＭＡＥおよびＭＭＡＦから選択される請求項３７記載の免疫接合体。
【請求項４１】
免疫接合体が式Ａｂ−（Ｌ−ＭＭＡＥ）ｐを有する請求項３７記載の免疫接合体（式中、ｐは２から５である）。
【請求項４２】
免疫接合体が式Ａｂ−（Ｌ−ＭＭＡＦ）ｐを有する請求項３７記載の免疫接合体（式中、ｐは２から５である）。
【請求項４３】
Ｌがｖａｌ−ｃｉｔ、ＭＣ、ＰＡＢおよび／またはＭＣ−ＰＡＢを含む請求項４１記載の免疫接合体。
【請求項４４】
Ｌがｖａｌ−ｃｉｔ、ＭＣ、ＰＡＢおよび／またはＭＣ−ＰＡＢを含む請求項４２記載の免疫接合体。
【請求項４５】
Ｄがメイタンシノイドであり、メイタンシノイドがＤＭ１、ＤＭ３およびＤＭ４から選択される請求項３７記載の免疫接合体。
【請求項４６】
以下の構造式から選択される請求項３７記載の免疫接合体：
2012522512.tif 000002
2012522512.tif 000003
（式中、Ｖａｌはバリンであり；Ｃｉｔはシトルリンである。）
【請求項４７】
請求項１−２６のいずれかに記載の抗体または請求項３７−４６のいずれかに記載の免疫接合体、および製薬上許容可能な担体を含む薬学的組成物。
【請求項４８】
ＦｃＲＨ５を発現する細胞の増殖の抑制するための医薬剤の調整における請求項１−２６のいずれかに記載の抗体または請求項３７−４６のいずれかに記載の免疫接合体の使用。
【請求項４９】
抗体が細胞障害性物質に接合している請求項４８記載の使用。
【請求項５０】
医薬剤がさらに有効量の別の治療薬を含む請求項４８記載の使用。
【請求項５１】
増殖性障害を治療するための医薬剤の調整における請求項１−２６のいずれかに記載の抗体または請求項３７−４６のいずれかに記載の免疫接合体の使用。
【請求項５２】
前記増殖性障害が癌である請求項５１記載の使用。
【請求項５３】
前記癌が、リンパ腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、攻撃性ＮＨＬ、再発性攻撃性ＮＨＬ、再発性無痛性ＮＨＬ、難治性ＮＨＬ、難治性無痛性ＮＨＬ、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫、白血病、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）およびマントル細胞リンパ腫から選択される請求項５２記載の使用。
【請求項５４】
抗体が細胞障害性物質に接合している請求項５１記載の使用。
【請求項５５】
医薬剤がさらに有効量の別の治療薬を含む請求項５１記載の使用。
【請求項５６】
治療薬が、抗体、化学療法薬、細胞傷害性物質、抗血管新生剤、免疫抑制剤、プロドラッグ、サイトカイン、サイトカインアンタゴニスト、細胞傷害性放射線療法、コルチコステロイド、抗嘔吐薬、癌ワクチン、鎮痛薬または増殖阻害剤からなる群から選択される請求項５５記載の使用。
【請求項５７】
治療薬が、ベルケード、レブリミド、タモキシフェン、レトロゾール、エキセメスタン、アナストロゾール、イリノテカン、セツキシマブ、フルベストラント、ビノレルビン、エルロチニブ、ベカシズマブ、ビンクリスチン、イマチニブ、ソラフェニブ、ラパチニブまたはトラスツズマブ、シスプラチン、ゲムシタビン、メトトレキセート、ビンブラスチン、カルボプラチン、パクリタキセル、ペメトレキセド、５−フルオロウラシル、ドキソルビシン、ボルテゾミブ、レナリドミド、メルファラン、プレドニソン、デキサメタゾンまたはドセタキセルからなる群から選択される請求項５５記載の使用。
【請求項５８】
ＦｃＲＨ５を含有することが推測される生物学的試料中のＦｃＲＨ５の存在の確定するためのin vitroでの方法であって、前記試料を請求項１−２６のいずれかに記載の抗体にin vitroで曝露すること、ならびに前記抗体と前記試料中のＦｃＲＨ５との結合を確定することを包含し、ここで、前記抗体の前記試料中のＦｃＲＨ５への結合が前記試料中の前記タンパク質の存在を示す方法。
【請求項５９】
請求項１−２６のいずれかに記載の抗ＦｃＲＨ５抗体（Ａｂ）、およびアウリスタチンまたはマイタンシノイド薬剤部分（Ｄ）を含む抗体−薬剤接合体であって、抗体が１つ以上のシステインアミノ酸を介して、リンカー部分（Ｌ）によりＤに結合され；当該化合物が式Ｉ：
Ａｂ−（Ｌ−Ｄ）ｐ                    Ｉ
（式中、ｐは１、２、３または４である）
を有する抗体−薬剤接合体の製造方法であって、
（ａ）抗体の操作されたシステイン基をリンカー試薬と反応させて抗体−リンカー中間体Ａｂ−Ｌを形成することと；
（ｂ）Ａｂ−Ｌを活性化薬剤部分Ｄと反応させて、それにより抗体−薬剤接合体が形成されるステップ
を包含するか、あるいは
（ｃ）薬剤部分の求核性基をリンカー試薬と反応させて、薬剤−リンカー中間体Ｄ−Ｌを形成することと；
（ｄ）Ｄ−Ｌを抗体の操作されたシステイン基と反応させて、それにより抗体−薬剤接合体を形成するステップ
を包含する方法。
【請求項６０】
式Ａｂ−（Ｌ−Ｄ）ｐを有する免疫接合体であって、
（ａ）Ａｂは以下を含む単離された抗ＦｃＲＨ５モノクローナル抗体である抗体であり：
ｉ．ａないしｃを含む軽鎖可変領域：
ａ．配列番号２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；
ｂ．配列番号２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；
ｃ．配列番号２８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３；
ｉｉ．ａないしｃを含む重鎖可変領域：
ａ．配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；
ｂ．配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；
ｃ．配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；
（ｂ）ＬはＭＣ−ＶＣ−ＰＡＢであるリンカーであり；
（ｃ）ＤはＭＭＡＥである薬剤部分であり；および
（ｄ）ｐは１から８である
免疫接合体。
【請求項６１】
重鎖可変領域が配列番号４０のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域が配列番号３０のアミノ酸配列を含む請求項６０記載の免疫接合体。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
一態様では、ＦｃＲＨ５と結合する抗体であって、以下からなる群から選択される少なくとも１、２、３、４、５または６つのＨＶＲを含む抗体を提供する：
（ｉ）配列ＫＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号２６）を含むＨＶＲ−Ｌ１
（ｉｉ）配列ＳＡＳＹＲＹＴ（配列番号２７）を含むＨＶＲ−Ｌ２
（ｉｉｉ）配列ＱＱＨＦＳＳＰＲＴ（配列番号２８）を含むＨＶＲ−Ｌ３
（ｉｖ）配列ＧＦＴＦＳＳＹＡＶＳ（配列番号６９）を含むＨＶＲ−Ｈ１
（ｖ）配列ＡＴＩＳＳＧＧＳＬＴＦＹＬＤＳＶＲ（配列番号７０）を含むＨＶＲ−Ｈ２
（ｖｉ）配列ＰＩＰＤＹＹＡＬＤＹ（配列番号７１）を含むＨＶＲ−Ｈ３。
他の一実施形態では、ＨＶＲ−Ｈ２は、配列番号３６の配列を有する。別の実施形態では、抗体は、ヒトκ亜群１共通フレームワーク配列を含む。他の一実施形態では、抗体は、重鎖ヒト亜群ＩＩＩ共通フレームワーク配列を含む。別の実施形態では、抗体は、配列番号１９から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％のアミノ酸配列同一性を有する軽鎖可変ドメインを含む。一実施形態では、抗体は、配列番号２１から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％のアミノ酸配列同一性を有する重鎖可変ドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、配列番号１９から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％のアミノ酸配列同一性を有する軽鎖可変ドメインを含む。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４７】
一態様では、本発明は、１つ以上の遊離システインアミノ酸を含むシステイン操作された抗ＦｃＲＨ５抗体であって、ＦｃＲＨ５ポリペプチドと結合し、親抗ＦｃＲＨ５抗体の１つ以上のアミノ酸残基をシステインに置き換えることを包含するプロセスにより調製されるシステイン操作された抗ＦｃＲＨ５抗体を包含するが、ここで、親抗体は、以下から選択される少なくとも１つのＨＶＲ配列を含む：
（ｉ）配列ＫＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号２６）を含むＨＶＲ−Ｌ１
（ｉｉ）配列ＳＡＳＹＲＹＴ（配列番号２７）を含むＨＶＲ−Ｌ２
（ｉｉｉ）配列ＱＱＨＦＳＳＰＲＴ（配列番号２８）を含むＨＶＲ−Ｌ３
（ｉｖ）配列ＧＦＴＦＳＳＹＡＶＳ（配列番号６９）を含むＨＶＲ−Ｈ１
（ｖ）配列ＡＴＩＳＳＧＧＳＬＴＦＹＬＤＳＶＲ（配列番号７０）を含むＨＶＲ−Ｈ２
（ｖｉ）配列ＰＩＰＤＹＹＡＬＤＹ（配列番号７１）を含むＨＶＲ−Ｈ３。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７１】
一態様では、ＦｃＲＨ５と結合する抗体であって、以下のものを含む抗体が提供される：
（ａ）以下の：
（ｉ）配列ＫＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号２６）を含むＨＶＲ−Ｌ１
（ｉｉ）配列ＳＡＳＹＲＹＴ（配列番号２７）を含むＨＶＲ−Ｌ２
（ｉｉｉ）配列ＱＱＨＦＳＳＰＲＴ（配列番号２８）を含むＨＶＲ−Ｌ３
（ｉｖ）配列ＧＦＴＦＳＳＹＡＶＳ（配列番号６９）を含むＨＶＲ−Ｈ１
（ｖ）配列ＡＴＩＳＳＧＧＳＬＴＦＹＬＤＳＶＲ（配列番号７０）を含むＨＶＲ−Ｈ２
（ｖｉ）配列ＰＩＰＤＹＹＡＬＤＹ（配列番号７１）を含むＨＶＲ−Ｈ３
からなる群から選択される少なくとも１、２、３、４、５または６つのＨＶＲ。
一実施形態では、本発明の抗体のＨＶＲ−Ｌ１は、配列番号２６の配列を含む。一実施形態では、本発明の抗体のＨＶＲ−Ｌ２は、配列番号２７の配列を含む。一実施形態では、本発明の抗体のＨＶＲ−Ｌ３は、配列番号２８の配列を含む。一実施形態では、本発明の抗体のＨＶＲ−Ｈ１は、配列番号３５の配列を含む。一実施形態では、本発明の抗体のＨＶＲ−Ｈ２は、配列番号３６の配列を含む。一実施形態では、本発明の抗体のＨＶＲ−Ｈ３は、配列番号３７の配列を含む。一実施形態では、（本明細書中に記載されるような組合せで）これらの配列を含む本発明の抗体は、ヒト化またはヒト抗体である。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７２】
一態様では、ＦｃＲＨ５と結合する抗体であって、以下のものを含む抗体が提供される：
（ａ）以下の：
（ｉ）配列ＫＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号２６）を含むＨＶＲ−Ｌ１
（ｉｉ）配列ＳＡＳＹＲＹＴ（配列番号２７）を含むＨＶＲ−Ｌ２
（ｉｉｉ）配列ＱＱＨＦＳＳＰＲＴ（配列番号２８）を含むＨＶＲ−Ｌ３
（ｉｖ）配列ＧＦＴＦＳＳＹＡＶＳ（配列番号６９）を含むＨＶＲ−Ｈ１
（ｖ）配列ＡＴＩＳＳＧＧＳＬＴＦＹＬＤＳＶＲ（配列番号７０）を含むＨＶＲ−Ｈ２
（ｖｉ）配列ＰＩＰＤＹＹＡＬＤＹ（配列番号７１）を含むＨＶＲ−Ｈ３
からなる群から選択される少なくとも１、２、３、４、５または６つのＨＶＲ；ならびに
（ｂ）変異体ＨＶＲ配列は、配列番号２６、２７、２８、６９、７０または７１で示される配列の少なくとも１つの残基の修飾を含む、少なくとも１つの変異体ＨＶＲ。一実施形態では、本発明の抗体のＨＶＲ−Ｌ１は、配列番号２６の配列を含む。一実施形態では、本発明の抗体のＨＶＲ−Ｌ２は、配列番号２７の配列を含む。一実施形態では、本発明の抗体のＨＶＲ−Ｌ３は、配列番号２８の配列を含む。一実施形態では、本発明の抗体のＨＶＲ−Ｈ１は、配列番号３５の配列を含む。一実施形態では、本発明の抗体のＨＶＲ−Ｈ２は、配列番号３６の配列を含む。一実施形態では、本発明の抗体のＨＶＲ−Ｈ３は、配列番号３７の配列を含む。一実施形態では、（本明細書中に記載されるような組合せで）これらの配列を含む本発明の抗体は、ヒト化またはヒト抗体である。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】変更
【補正の内容】
【配列表】
2012522512000001.app
【手続補正７】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１１】
2012522512.tif 000004