【手続補正書】
【提出日】平成25年3月22日(2013.3.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１、７、８又は９に記載のアデニレートシクラーゼ（CyaA）の断片を含むポリペプチドであって、当該断片が、
（１）配列番号１、７又は８に記載のCyaAの少なくとも３５０アミノ酸残基を有する断片であって、（ａ）配列番号１、７又は８にそれぞれ記載のボルデテラ・ペルツッシス（Bordetella pertussis）、ボルデテラ・パラペルツッシス（Bordetella parapertussis）又はボルデテラ・ヒンジイ（Bordetella hinzii）の天然CyaA配列の位置５７０に対応するグルタミン酸残基が、グルタミン残基又はAsn、Met、Thr、Ser、Gly、Arg、Lys、Val、Leu、Cys、Ile及びAspからなる群より選択される保存残基で置換され、（ｂ）配列番号１、７又は８にそれぞれ記載のボルデテラ・ペルツッシス（Bordetella pertussis）、ボルデテラ・パラペルツッシス（Bordetella parapertussis）又はボルデテラ・ヒンジイ（Bordetella hinzii）の天然CyaA配列の位置８６０に相当するリシン残基が、アルギニン残基又はAsn、Gln、Met、Thr、Ser、Gly、Val、Leu、Cys及びIleからなる群より選択される保存残基で置換され、更に（ｃ）０〜５０の置換、欠失及び／又は挿入を有する断片、並びに、
（２）配列番号９に記載のCyaAの少なくとも３５０アミノ酸残基を有する断片であって、（ａ）配列番号９に記載のボルデテラ・ブロンキセプティカ（Bordetella bronchiseptica）の天然CyaA配列の位置５６９に対応するグルタミン酸残基が、グルタミン残基又はAsn、Met、Thr、Ser、Gly、Arg、Lys、Val、Leu、Cys、Ile及びAspからなる群より選択される保存残基で置換され、（ｂ）配列番号９に記載のボルデテラ・ブロンキセプティカ（Bordetella bronchiseptica）の天然CyaA配列の位置８５９に対応するリシン残基が、アルギニン残基又はAsn、Gln、Met、Thr、Ser、Gly、Val、Leu、Cys及びIleからなる群より選択される保存残基で置換され、更に（ｃ）０〜５０の置換、欠失及び／又は挿入を有する断片
からなる群より選択され、
前記ポリペプチドが、ボルデテラ・ペルツッシス（Bordetella pertussis）、ボルデテラ・パラペルツッシス（Bordetella parapertussis）、ボルデテラ・ヒンジイ（Bordetella hinzii）又はボルデテラ・ブロンキセプティカ（Bordetella bronchiseptica）のCyaAタンパク質による、CD11b/CD18受容体発現細胞のCD11b/CD18受容体への結合能を有する、ポリペプチド。
【請求項２】
Ｎ末端アデニレートシクラーゼ酵素ドメイン又はその一部をCD11b/CD18発現細胞内に転位させる能力を有する、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
（ｉ）配列番号１、７若しくは８に記載の配列の位置５７０、又は、配列番号９に記載の配列の位置５６９に対応するグルタミン酸残基が、グルタミン残基で置換されるとともに、（ii）配列番号１、７若しくは８に記載の配列の位置８６０、又は、配列番号９に記載の配列の位置８５９に対応するリシン残基が、アルギニン残基で置換されてなる、請求項１又は２に記載のポリペプチド。
【請求項４】
前記断片が、配列番号１、７、８又は９の少なくとも４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００又は１６００のアミノ酸残基を有する、請求項１〜３の何れか一項に記載のポリペプチド。
【請求項５】
前記ポリペプチドのアミノ酸配列が、
（１）配列番号１、７又は８に記載の配列において、（ａ）配列番号１、７又は８にそれぞれ記載のボルデテラ・ペルツッシス（Bordetella pertussis）、ボルデテラ・パラペルツッシス（Bordetella parapertussis）又はボルデテラ・ヒンジイ（Bordetella hinzii）の天然CyaA配列の位置５７０に対応するグルタミン酸残基の、グルタミン残基又はAsn、Met、Thr、Ser、Gly、Arg、Lys、Val、Leu、Cys、Ile及びAspからなる群より選択される保存残基による置換、及び、（ｂ）配列番号１、７又は８にそれぞれ記載のボルデテラ・ペルツッシス（Bordetella pertussis）、ボルデテラ・パラペルツッシス（Bordetella parapertussis）又はボルデテラ・ヒンジイ（Bordetella hinzii）の天然CyaA配列の位置８６０に対応するリシン残基の、アルギニン残基又はAsn、Gln、Met、Thr、Ser、Gly、Val、Leu、Cys及びIleからなる群より選択される保存残基による置換、が導入された配列、並びに、
（２）配列番号９に記載の配列において、（ａ）in 配列番号９に記載のボルデテラ・ブロンキセプティカ（Bordetella bronchiseptica）の天然CyaA配列の位置５６９に対応するグルタミン酸残基の、グルタミン残基又はAsn、Met、Thr、Ser、Gly、Arg、Lys、Val、Leu、Cys、Ile及びAspからなる群より選択される保存残基による置換、及び、（ｂ）配列番号９に記載のボルデテラ・ブロンキセプティカ（Bordetella bronchiseptica）の天然CyaA配列の位置８５９に対応するリシン残基の、アルギニン残基又はAsn、Gln、Met、Thr、Ser、Gly、Val、Leu、Cys及びIleからなる群より選択される保存残基による置換、が導入された配列
からなる群より選択される、請求項１〜３の何れか一項に記載のポリペプチド。
【請求項６】
前記ポリペプチドのアミノ酸配列が、
（１）配列番号１、７又は８に記載の配列において、（ａ）配列番号１、７又は８にそれぞれ記載のボルデテラ・ペルツッシス（Bordetella pertussis）、ボルデテラ・パラペルツッシス（Bordetella parapertussis）又はボルデテラ・ヒンジイ（Bordetella hinzii）の天然CyaA配列の位置５７０に対応するグルタミン酸残基のグルタミン残基による置換、及び、（ｂ）配列番号１、７又は８にそれぞれ記載のボルデテラ・ペルツッシス（Bordetella pertussis）、ボルデテラ・パラペルツッシス（Bordetella parapertussis）又はボルデテラ・ヒンジイ（Bordetella hinzii）の天然CyaA配列の位置８６０に対応するリシン残基のアルギニン残基による置換、が導入された配列、並びに、
（２）配列番号９に記載の配列において、（ａ）配列番号９に記載のボルデテラ・ブロンキセプティカ（Bordetella bronchiseptica）の天然CyaA配列の位置５６９に対応するグルタミン酸残基の、グルタミン残基による置換、及び、（ｂ）配列番号９に記載のボルデテラ・ブロンキセプティカ（Bordetella bronchiseptica）の天然CyaA配列の位置８５９に対応するリシン残基の、アルギニン残基による置換、が導入された配列
からなる群より選択される、請求項５に記載のポリペプチド。
【請求項７】
アデニレートシクラーゼトキソイドの突然変異体であって、細胞内におけるアデニレートシクラーゼ活性が、partly又はtotally suppressed as compared to that of the ボルデテラ・ペルツッシス（Bordetella pertussis）、ボルデテラ・パラペルツッシス（Bordetella parapertussis）、ボルデテラ・ヒンジイ（Bordetella hinzii）又はボルデテラ・ブロンキセプティカ（Bordetella bronchiseptica）CyaA毒素と比べて、部分的に又は完全に抑制されてなる、請求項１〜６の何れか一項に記載のポリペプチド。
【請求項８】
アデニレートシクラーゼ活性の部分的又は完全な抑制が、特に配列番号１、７、８又は９にそれぞれ記載の、アデニレートシクラーゼ of ボルデテラ・ペルツッシス（Bordetella pertussis）、ボルデテラ・パラペルツッシス（Bordetella parapertussis）、ボルデテラ・ヒンジイ（Bordetella hinzii）又はボルデテラ・ブロンキセプティカ（Bordetella bronchiseptica）の位置１８８及び１８９に対応するアミノ酸残基間へのジペプチド挿入により達成される、請求項７に記載のポリペプチド。
【請求項９】
請求項１〜８の何れか一項に記載のポリペプチドと、１又は２以上の別の分子とを含むポリペプチド誘導体。
【請求項１０】
前記１又は２以上の分子の各々が、免疫応答を誘発し得るアミノ酸配列を有する、請求項９に記載のポリペプチド誘導体。
【請求項１１】
前記免疫応答を誘発し得るアミノ酸配列が、５〜８００、特に３００〜６００、又は４００〜５００のアミノ酸残基からなる、請求項１０に記載のポリペプチド誘導体。
【請求項１２】
前記免疫応答を誘発し得るアミノ酸配列が、ポリオウイルス抗原、ＨＩＶウイルス抗原、インフルエンザウイルス抗原、脈絡髄膜炎ウイルス配列、及び腫瘍抗原からなる群より選択される抗原のアミノ酸配列、又は当該抗原のアミノ酸配列の少なくとも１つエピトープを含む部分配列を含む、請求項１０又は１１に記載のポリペプチド誘導体。
【請求項１３】
前記ポリペプチドが、前記免疫応答を誘発し得るアミノ酸配列が前記ポリペプチドの許容し得る部位内に挿入された組換ポリペプチドであるとともに、前記ポリペプチドのＮ末端アデニレートシクラーゼ酵素ドメインをCD11b/CD18発現細胞に転位する能力が保存されてなる、請求項１０〜１２の何れか一項に記載のポリペプチド誘導体。
【請求項１４】
前記免疫応答を誘発し得るアミノ酸配列が、前記ポリペプチドのアミノ酸残基にグラフト、特に化学的にグラフトされてなる、請求項１０又は１１に記載のポリペプチド誘導体。
【請求項１５】
請求項１〜８の何れか一項に記載のポリペプチド、又は、請求項９〜１４の何れか一項に記載のポリペプチド誘導体の、医薬の製造における使用。
【請求項１６】
当該医薬が、宿主においてＴ細胞及び／又はＢ細胞の免疫応答を誘発するための医薬である、請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
当該医薬が、新生物、癌、及び、ウイルス性、レトロウイルス性、細菌性、寄生生物性又は真菌性疾患から選択される感染性疾患の予防又は治療のための医薬である、請求項１５に記載の使用。
【請求項１８】
前記医薬が、アジュバントと共に、及び／又は、治療活性を有する他の分子との組み合わせで投与される、請求項１５〜１７の何れか一項に記載の使用。
【請求項１９】
前記医薬が、アジュバントとの組み合わせでは投与されない、請求項１５〜１７の何れか一項に記載の使用。
【請求項２０】
請求項１〜８の何れか一項に記載のポリペプチド、又は、請求項９〜１４の何れか一項に記載のポリペプチド誘導体を含む医薬組成物。
【請求項２１】
医薬的に許容可能な担体と、任意によりアジュバント及び／又は治療活性を有する分子とを更に含む、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
新生物、癌、及び、ウイルス性、レトロウイルス性、細菌性、寄生生物性又は真菌性疾患から選択される感染性疾患の予防又は治療のための、請求項２０又は２１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
CD11b/CD18発現細胞に分子を送達するためのタンパク質ベクターを調製する方法であって、前記分子を請求項１〜７の何れか一項に記載のポリペプチドに結合させることを含む方法。
【請求項２４】
請求項１〜８の何れか一項に記載のCyaAポリペプチド、又は、請求項９〜１４の何れか一項に記載のポリペプチド誘導体をコードするＤＮＡ分子。