【手続補正書】
【提出日】平成24年11月14日(2012.11.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
センス鎖およびアンチセンス鎖、ならびに１５〜２４個の塩基対を有する２本鎖領域を含む核酸であって、前記センス鎖の５’末端における最後の３つの位置のうちのいずれか１つ以上は、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められる、核酸。
【請求項２】
前記センス鎖の３’末端の最後の２つの位置のうちの１つまたは両方が、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められることをさらに含む、請求項１に記載の核酸。
【請求項３】
前記アンチセンス鎖の３’末端の最後の２つの位置のうちの１つまたは両方が、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められることをさらに含む、請求項１に記載の核酸。
【請求項４】
センス鎖およびアンチセンス鎖、ならびに１５〜２４個の塩基対を有する２本鎖領域を含む核酸であって、前記アンチセンス鎖の５、６、７、および８位のうちの１つ以上は、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められ、前記アンチセンス鎖の前記位置は、前記アンチセンス鎖の５’末端において１位から始まるように数えられる、核酸。
【請求項５】
前記センス鎖の３’末端の最後の２つの位置のうちの１つまたは両方が、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められることをさらに含む、請求項４に記載の核酸。
【請求項６】
前記アンチセンス鎖の３’末端の最後の２つの位置のうちの１つまたは両方が、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められることをさらに含む、請求項４に記載の核酸。
【請求項７】
前記２本鎖領域は、１９または２０個の塩基対を有する、請求項１〜６のうちのいずれか１項に記載の核酸。
【請求項８】
前記センス鎖および前記アンチセンス鎖は、各々２１または２２ヌクレオモノマー長である、請求項１〜６のうちのいずれか１項に記載の核酸。
【請求項９】
前記核酸は、平滑末端または３’末端オーバーハングを有する、請求項１〜６のうちのいずれか１項に記載の核酸。
【請求項１０】
前記アンチセンス鎖は、配列番号１２、３４、５６、７８、１００、１２４、または１４７のうちの任意の１５個の隣接するヌクレオモノマーに相当する、少なくとも１５個の隣接するヌクレオモノマーの領域を有する、請求項１〜６のうちのいずれか１項に記載の核酸。
【請求項１１】
センス鎖およびアンチセンス鎖、ならびに２５〜４０個の塩基対を有する２本鎖領域を含む核酸であって、前記アンチセンス鎖の３’末端の最後の位置および前記センス鎖の３’末端の最後の位置は、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められる、核酸。
【請求項１２】
前記アンチセンス鎖の３’末端の最後の２つの位置は、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められる、請求項１１に記載の核酸。
【請求項１３】
センス鎖およびアンチセンス鎖、ならびに２５〜４０個の塩基対を有する２本鎖領域を含む核酸であって、前記センス鎖の２１、２２、および２３位のうちの１つ以上は、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められ、前記センス鎖の前記位置は、前記センス鎖の５’末端において１位から始まるように数えられる、核酸。
【請求項１４】
センス鎖およびアンチセンス鎖、ならびに２５〜４０個の塩基対を有する２本鎖領域を含む核酸であって、前記アンチセンス鎖の１８、１９、２０、２１、および２２位のうちの１つ以上は、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められ、前記センス鎖の前記位置は、前記アンチセンス鎖の３’末端において１位から始まるように数えられる、核酸。
【請求項１５】
前記アンチセンス鎖の３’末端の最後の２つの位置のうちの１つまたは両方が、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められることをさらに含む、請求項１３または１４に記載の核酸。
【請求項１６】
前記センス鎖の３’末端の最後の２つの位置のうちの１つまたは両方が、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められることをさらに含む、請求項１３または１４に記載の核酸。
【請求項１７】
前記アンチセンス鎖は、配列番号１６９、１８５、２０１、２１７、または２３３のうちの任意の１５個の隣接するヌクレオモノマーに相当する、少なくとも１５個の隣接するヌクレオモノマーの領域を有する、請求項１１、１３、または１４に記載の核酸。
【請求項１８】
前記ヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーは、２’−３’−セコ−ヌクレオモノマーである、請求項１〜６および１１〜１４のうちのいずれか１項に記載の核酸。
【請求項１９】
前記ヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーは、モノマーＤ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、またはＪ：
【化１２】
2012510297.tif 000001
から選択され、Ｒは、水素、アルキル基、コレステロール誘導体、フルオロフォア、ポ
リアミン、脂肪酸、アミノ酸、糖類、およびポリペプチドからなる群から選択され、
塩基は、任意のプリン、ピリミジン、またはその誘導体もしくは類似体である、請求項１〜６および１０〜１３のうちのいずれか１項に記載の核酸。
【請求項２０】
２’−Ｏ−アルキル−ＲＮＡモノマー、２’−アミノ−ＤＮＡモノマー、２’−フルオロ−ＤＮＡモノマー、ＬＮＡモノマー、ＰＮＡモノマー、ＨＮＡモノマー、ＡＮＡモノマー、ＦＡＮＡモノマー、ＣｅＮＡモノマー、ＥＮＡモノマー、ＤＮＡモノマー、およびＩＮＡモノマーからなる群から選択されるヌクレオチド類似体をさらに含む、請求項１〜６および１０〜１３のうちのいずれか１項に記載の核酸。
【請求項２１】
細胞内の遺伝子の発現を低減するための組成物であって、請求項１〜６および１０〜１３のうちのいずれか１項に記載の核酸を含む、組成物。
【請求項２２】
ヒトにおける疾患を治療するための組成物であって、前記疾患は、リウマチ性関節炎を含む炎症性疾患、高コレステロール血症を含む代謝性疾患、肝疾患、脳炎、骨折、心臓病、肝炎およびインフルエンザを含むウイルス性疾患、ならびに癌から選択され、該組成物は、請求項１〜６および１０〜１３のうちのいずれか１項に記載の核酸を含む、組成物。
【請求項２３】
リウマチ性関節炎を含む炎症性疾患、高コレステロール血症を含む代謝性疾患、肝疾患、脳炎、骨折、心臓病、肝炎およびインフルエンザを含むウイルス性疾患、ならびに癌を含む疾患を治療するための薬剤の調製における、請求項１〜６および１０〜１３のうちのいずれか１項に記載の核酸の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３２】
一態様では、本発明は、リウマチ性関節炎を含む炎症性疾患、高コレステロール血症を含む代謝性疾患、肝疾患、脳炎、骨折、心臓病、肝炎およびインフルエンザを含むウイルス性疾患、ならびに癌を含む疾患を治療するための薬剤の調製における、本明細書の記載に従った核酸の使用を提供する。
本発明の好ましい実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
センス鎖およびアンチセンス鎖、ならびに１５〜２４個の塩基対を有する２本鎖領域を含む核酸であって、前記センス鎖の５’末端における最後の３つの位置のうちのいずれか１つ以上は、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められる、核酸。
（項目２）
前記センス鎖の３’末端の最後の２つの位置のうちの１つまたは両方が、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められることをさらに含む、項目１に記載の核酸。
（項目３）
前記アンチセンス鎖の３’末端の最後の２つの位置のうちの１つまたは両方が、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められることをさらに含む、項目１に記載の核酸。
（項目４）
センス鎖およびアンチセンス鎖、ならびに１５〜２４個の塩基対を有する２本鎖領域を含む核酸であって、前記アンチセンス鎖の５、６、７、および８位のうちの１つ以上は、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められ、前記アンチセンス鎖の前記位置は、前記アンチセンス鎖の５’末端において１位から始まるように数えられる、核酸。
（項目５）
前記センス鎖の３’末端の最後の２つの位置のうちの１つまたは両方が、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められることをさらに含む、項目４に記載の核酸。
（項目６）
前記アンチセンス鎖の３’末端の最後の２つの位置のうちの１つまたは両方が、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められることをさらに含む、項目４に記載の核酸。
（項目７）
前記２本鎖領域は、１９または２０個の塩基対を有する、項目１〜６のうちのいずれか１項に記載の核酸。
（項目８）
前記センス鎖および前記アンチセンス鎖は、各々２１または２２ヌクレオモノマー長である、項目１〜６のうちのいずれか１項に記載の核酸。
（項目９）
前記核酸は、平滑末端または３’末端オーバーハングを有する、項目１〜６のうちのいずれか１項に記載の核酸。
（項目１０）
前記アンチセンス鎖は、配列番号１２、３４、５６、７８、１００、１２４、または１４７のうちの任意の１５個の隣接するヌクレオモノマーに相当する、少なくとも１５個の隣接するヌクレオモノマーの領域を有する、項目１〜６のうちのいずれか１項に記載の核酸。
（項目１１）
センス鎖およびアンチセンス鎖、ならびに２５〜４０個の塩基対を有する２本鎖領域を含む核酸であって、前記アンチセンス鎖の３’末端の最後の位置および前記センス鎖の３’末端の最後の位置は、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められる、核酸。
（項目１２）
前記アンチセンス鎖の３’末端の最後の２つの位置は、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められる、項目１１に記載の核酸。
（項目１３）
センス鎖およびアンチセンス鎖、ならびに２５〜４０個の塩基対を有する２本鎖領域を含む核酸であって、前記センス鎖の２１、２２、および２３位のうちの１つ以上は、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められ、前記センス鎖の前記位置は、前記センス鎖の５’末端において１位から始まるように数えられる、核酸。
（項目１４）
センス鎖およびアンチセンス鎖、ならびに２５〜４０個の塩基対を有する２本鎖領域を含む核酸であって、前記アンチセンス鎖の１８、１９、２０、２１、および２２位のうちの１つ以上は、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められ、前記センス鎖の前記位置は、前記アンチセンス鎖の３’末端において１位から始まるように数えられる、核酸。
（項目１５）
前記アンチセンス鎖の３’末端の最後の２つの位置のうちの１つまたは両方が、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められることをさらに含む、項目１３または１４に記載の核酸。
（項目１６）
前記センス鎖の３’末端の最後の２つの位置のうちの１つまたは両方が、同一のまたは異なるヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーによって占められることをさらに含む、項目１３または１４に記載の核酸。
（項目１７）
前記アンチセンス鎖は、配列番号１６９、１８５、２０１、２１７、または２３３のうちの任意の１５個の隣接するヌクレオモノマーに相当する、少なくとも１５個の隣接するヌクレオモノマーの領域を有する、項目１１、１３、または１４に記載の核酸。
（項目１８）
前記ヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーは、２’−３’−セコ−ヌクレオモノマーである、項目１〜６および１１〜１４のうちのいずれか１項に記載の核酸。
（項目１９）
前記ヒドロキシメチル置換ヌクレオモノマーは、モノマーＤ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、またはＪ：
【化１２】
2012510297.tif 000002
から選択され、Ｒは、水素、アルキル基、コレステロール誘導体、フルオロフォア、ポ
リアミン、脂肪酸、アミノ酸、糖類、およびポリペプチドからなる群から選択され、
塩基は、任意のプリン、ピリミジン、またはその誘導体もしくは類似体である、項目１〜６および１０〜１３のうちのいずれか１項に記載の核酸。
（項目２０）
２’−Ｏ−アルキル−ＲＮＡモノマー、２’−アミノ−ＤＮＡモノマー、２’−フルオロ−ＤＮＡモノマー、ＬＮＡモノマー、ＰＮＡモノマー、ＨＮＡモノマー、ＡＮＡモノマー、ＦＡＮＡモノマー、ＣｅＮＡモノマー、ＥＮＡモノマー、ＤＮＡモノマー、およびＩＮＡモノマーからなる群から選択されるヌクレオチド類似体をさらに含む、項目１〜６および１０〜１３のうちのいずれか１項に記載の核酸。
（項目２１）
細胞内の遺伝子の発現を低減するための方法であって、項目１〜６および１０〜１３のうちのいずれか１項に記載の核酸を調製することと、前記細胞を前記核酸で処理することと、を含む、方法。
（項目２２）
ヒトにおける疾患を治療するための方法であって、前記疾患は、リウマチ性関節炎を含む炎症性疾患、高コレステロール血症を含む代謝性疾患、肝疾患、脳炎、骨折、心臓病、肝炎およびインフルエンザを含むウイルス性疾患、ならびに癌から選択され、項目１〜６および１０〜１３のうちのいずれか１項に記載の核酸を調製することと、前記核酸を前記ヒトに投与することと、を含む、方法。
（項目２３）
リウマチ性関節炎を含む炎症性疾患、高コレステロール血症を含む代謝性疾患、肝疾患、脳炎、骨折、心臓病、肝炎およびインフルエンザを含むウイルス性疾患、ならびに癌を含む疾患を治療するための薬剤の調製における、項目１〜６および１０〜１３のうちのいずれか１項に記載の核酸の使用。