【手続補正書】
【提出日】平成24年12月28日(2012.12.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細菌細胞およびセラミド様糖脂質を含む改変細菌であって、該セラミド様糖脂質が該細菌細胞と物理的に結合された改変細菌。
【請求項２】
前記セラミド様糖脂質がグリコシルセラミドまたはその類縁体を含む、請求項1記載の改変細菌。
【請求項３】
前記グリコシルセラミドまたはその類縁体が式Iを含む、請求項2記載の改変細菌：
2012514476.tif 000001
式中、R1は直鎖もしくは分枝C1-C27アルカンもしくはC2-C27アルケンであるか；またはR1は-C(OH)-R3であり、ここでR3は直鎖もしくは分枝C1-C26アルカンもしくはC2-C26アルケンであるか；あるいはR1はC6-C27アルカンもしくはアルケンであり、ここで（i）C6-C27アルカンもしくはアルケンはC5-C15シクロアルカン、C5-C15シクロアルケン、複素環、もしくは芳香環で置換されているか、または（ii）C6-C27アルカンもしくはアルケンは、C6-C27アルキルもしくはアルケニル鎖内に、C5-C15シクロアルカン、C5-C15シクロアルケン、複素環、もしくは芳香環を含み；
R2は以下の（a）〜（e）の1つであり：
（a）-CH2(CH2)XCH3、
（b）-CH(OH)(CH2)XCH3、
（c）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)2、
（d）-CH=CH(CH2)XCH3、
（e）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)CH2CH3、
ここでXは4〜17の範囲の整数であり；
R4はα連結もしくはβ連結単糖であるか、またはR1が直鎖もしくは分枝C1-C27アルカンである場合、R4は下記であり：
2012514476.tif 000002
かつ
AはOまたは-CH2である。
【請求項４】
R1が-(CH2)22CH3もしくは-(CH2)24CH3であるか、R2が-CH(OH)-(CH2)13CH3であるか、またはR4がガラクトシル、マンノシル、フコシルもしくはグルコシルである、請求項3記載の改変細菌。
【請求項５】
前記セラミド様糖脂質がα-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体を含む、請求項1記載の改変細菌。
【請求項６】
前記α-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体が式IIを含む、請求項5記載の改変細菌：
2012514476.tif 000003
式中
R1は直鎖もしくは分枝C1-C27アルカンもしくはC2-C27アルケンであるか；またはR1は-C(OH)-R3であり、ここでR3は直鎖もしくは分枝C1-C26アルカンもしくはC2-C26アルケンであり；かつ
R2は以下の（a）〜（e）の1つであり：
（a）-CH2(CH2)XCH3、
（b）-CH(OH)(CH2)XCH3、
（c）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)2、
（d）-CH=CH(CH2)XCH3、
（e）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)CH2CH3、
ここでXは4〜17の範囲の整数である。
【請求項７】
R2が-CH(OH)(CH2)XCH3であり、ここでXは4〜13の範囲の整数である、請求項6記載の改変細菌。
【請求項８】
R1が(CH2)9CH=CH-CH2-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)8CH=CH-CH2-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)7CH=CH-CH2-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)3CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-(CH2)4CH3、(CH2)3CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2CH3、(CH2)7CH=CH-CH2-CH=CH=(CH2)4CH3、(CH2)7CH=CH-CH=CH(CH2)5CH3、(CH2)8CH=CH-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)9CH=CH-CH=CH(CH2)5CH3、(CH2)6CH=CH-CH=CH-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)6CH=CH-CH=CH-CH=CH(CH2)4CH3および(CH2)7CH=CH-CH=CH-CH=CH(CH2)3CH3からなる群より選択される、請求項6記載の改変細菌。
【請求項９】
二重結合がシスまたはトランスである、請求項8記載の改変細菌。
【請求項１０】
前記α-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体が式IIIを含む、請求項5記載の改変細菌：
2012514476.tif 000004
式中、RはHまたは-C(O)R1であり、ここでR1は直鎖もしくは分枝C1-C27アルカンもしくはC2-C27アルケンであるか；またはR1は-C(OH)-R3であり、ここでR3は直鎖もしくは分枝C1-C26アルカンもしくはC2-C26アルケンであるか；あるいはR1はC6-C27アルカンもしくはアルケンであり、ここで（i）C6-C27アルカンもしくはアルケンはC5-C15シクロアルカン、C5-C15シクロアルケン、複素環、もしくは芳香環で置換されているか、または（ii）C6-C27アルカンもしくはアルケンは、C6-C27アルキルもしくはアルケニル鎖内に、C5-C15シクロアルカン、C5-C15シクロアルケン、複素環、もしくは芳香環を含むか；またはR1は-(CH2)nR5であり、ここでnは0〜5の範囲の整数であり、かつR5は-C(O)OC2H5、置換されていてもよいC5-C15シクロアルカン、置換されていてもよい芳香環、もしくはアラルキルであり、かつ
R2は以下の（a）〜（e）の1つであり：
（a）-CH2(CH2)XCH3、
（b）-CH(OH)(CH2)XCH3、
（c）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)2、
（d）-CH=CH(CH2)XCH3、
（e）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)CH2CH3、
ここでXは4〜17の範囲の整数である。
【請求項１１】
R1がオキソ；ヒドロキシ；ハロゲン；フェニル；-OC(O)R6；-OR6；-C(O)R6；またはN(R6)2で置換されており、
ここでR6はそれぞれ独立に水素、C1-C6アルキル、またはハロゲン；ヒドロキシ；-OC(O)R7；-OR7；-C(O)R7もしくはN(R7)2で置換されていてもよい芳香環であり、かつ
ここでR7はそれぞれ独立に水素またはC1-C6アルキルであるか、あるいは
R1が下記からなる群より選択され、
2012514476.tif 000005
2012514476.tif 000006
2012514476.tif 000007
式中、( )はR1の式IIIの化合物への結合点を表す、
請求項10記載の改変細菌。
【請求項１２】
前記α-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体が、(2S,3S,4R)-1-O-(α-D-ガラクトピラノシル)-N-ヘキサコサノイル-2-アミノ-1,3,4-オクタデカントリオール（KRN7000）、(2S,3S)-1-O-(α-D-ガラクトピラノシル)-N-ヘキサコサノイル-2-アミノ-1,3-オクタデカンジオール)または(2S,3S,4R)-1-CH2-(α-ガラクトピラノシル)-N-ヘキサコサノイル-2-アミノ-1,3,4-オクタデカントリオール（α-C-GalCer）を含む、請求項5記載の改変細菌。
【請求項１３】
前記セラミド様糖脂質が前記細菌細胞の細胞壁に取り込まれている、請求項1から12のいずれか一項記載の改変細菌。
【請求項１４】
前記細菌細胞がマイコバクテリア細胞、リステリア（Listeria）細胞、サルモネラ（Salmonella）細胞、エルシニア（Yersinia）細胞、フランシセラ（Francisella）細胞、およびレジオネラ（Legionella）細胞からなる群より選択される、請求項1から13のいずれか一項記載の改変細菌。
【請求項１５】
前記マイコバクテリア細胞が結核菌（M. tuberculosis）複合体（MTBC）細胞および非結核性マイコバクテリア（NTM）細胞からなる群より選択される、請求項14記載の改変細菌。
【請求項１６】
前記MTBC細胞が結核菌細胞、ウシ結核菌（M. bovis）細胞、ウシ結核菌カルメット-ゲラン桿菌（BCG）細胞、M.アフリカナム（M. africanum）細胞、M.カネッティ（M. canetti）細胞、M.カプラエ（M. caprae）細胞、およびM.ピンニペディイ（M. pinnipedii'）細胞からなる群より選択されるか、または前記NTM細胞がスメグマ菌（M. smegmatis）細胞である、請求項15記載の改変細菌。
【請求項１７】
前記細菌細胞が生菌、不活化菌、または弱毒菌細胞である、請求項1から16のいずれか一項記載の改変細菌。
【請求項１８】
抗原に対する抗原特異的CD8 T細胞応答を増強する、請求項1から17のいずれか一項記載の改変細菌。
【請求項１９】
前記抗原がマイコバクテリア抗原である、請求項18記載の改変細菌。
【請求項２０】
異種抗原のための担体である、請求項1から19のいずれか一項記載の改変細菌。
【請求項２１】
異種抗原を発現する、請求項1から20のいずれか一項記載の改変細菌。
【請求項２２】
前記異種抗原がウイルス抗原、細菌抗原、真菌抗原、寄生虫抗原、または腫瘍特異性的抗原である、請求項20または21記載の改変細菌。
【請求項２３】
前記異種抗原が免疫原性ペプチドである、請求項20から22のいずれか一項記載の改変細菌。
【請求項２４】
前記セラミド様糖脂質が前記細菌にとって異種である、請求項1から23のいずれか一項記載の改変細菌。
【請求項２５】
前記セラミド様糖脂質がナチュラルキラーT（NKT）細胞を刺激する、請求項1から24のいずれか一項記載の改変細菌。
【請求項２６】
請求項1から25のいずれか一項記載の改変細菌、および薬学的担体を含む組成物。
【請求項２７】
アジュバントをさらに含む、請求項26記載の組成物。
【請求項２８】
請求項1から25のいずれか一項記載の改変細菌または請求項26もしくは27記載の組成物を含むワクチン組成物。
【請求項２９】
治療または予防を必要としている動物における疾患を治療または予防するための薬学的組成物であって、請求項1から25のいずれか一項記載の改変細菌、請求項26もしくは27記載の組成物、または請求項28記載のワクチン組成物を含む、薬学的組成物。
【請求項３０】
免疫応答を前記セラミド様糖脂質と結合していない細菌細胞によって生成される免疫応答に比べて増強または改変する、請求項29記載の薬学的組成物。
【請求項３１】
前記疾患がウイルス疾患、細菌疾患、真菌疾患、寄生虫疾患、および増殖性疾患からなる群より選択される、請求項29または30記載の薬学的組成物。
【請求項３２】
前記細菌疾患がマイコバクテリア疾患である、請求項31記載の薬学的組成物。
【請求項３３】
前記疾患が結核、結核に似た肺疾患、リンパ腺炎、皮膚疾患、播種性疾患、腺ペスト、肺ペスト、野兎病、レジオネラ病、炭疽、腸チフス熱、パラチフス熱、食中毒、リステリア症、マラリア、HIV、SIV、HPV、RSV、インフルエンザ、肝炎（HAV、HBV、およびHCV）、および癌からなる群より選択される、請求項29から31のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項３４】
動物において抗原に対する免疫応答を誘導するための薬学的組成物であって、請求項1から25のいずれか一項記載の改変細菌、請求項26または27記載の組成物、または請求項28記載のワクチン組成物を含む、薬学的組成物。
【請求項３５】
前記動物に投与されると、抗原特異的CD8 T細胞応答を増強する、またはナチュラルキラーT（NKT）細胞の活性を増強する、請求項34記載の薬学的組成物。
【請求項３６】
前記免疫応答が抗体応答、CD8 T細胞応答、またはそれらの組み合わせを含む、請求項34記載の薬学的組成物。
【請求項３７】
動物においてBCGに対するCD8 T細胞応答を調節するための薬学的組成物であって、請求項1から25のいずれか一項記載の改変細菌、請求項26または27記載の組成物、または請求項28記載のワクチン組成物を含み、ここで該細菌細胞はBCG細胞である、薬学的組成物。
【請求項３８】
筋肉内、静脈内、気管内、鼻内、経皮、皮内、皮下、眼内、膣、直腸、腹腔内、腸内、吸入、または該経路の複数の組み合わせからなる群より選択される経路による投与用に製剤化された、請求項29から37のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項３９】
請求項1から25のいずれか一項記載の改変細菌、請求項26または27記載の組成物、または請求項28記載のワクチン組成物を含むキット。
【請求項４０】
前記改変細菌が凍結乾燥されている、請求項39記載のキット。
【請求項４１】
前記改変細菌を投与するための手段をさらに含む、請求項39または40記載のキット。
【請求項４２】
セラミド様糖脂質/マイコバクテリア複合体の作成法であって、（a）培地中でマイコバクテリア細胞を培養する段階、および（b）セラミド様糖脂質を培地に、該セラミド様糖脂質が該マイコバクテリア細胞の細胞壁に取り込まれる条件下で加える段階を含む方法。
【請求項４３】
前記セラミド様糖脂質が前記マイコバクテリア細胞にとって異種である、請求項42記載の方法。
【請求項４４】
前記セラミド様糖脂質がナチュラルキラーT（NKT）細胞を刺激する、請求項42または43記載の方法。
【請求項４５】
抗原に対するワクチンを産生する方法であって：（a）請求項42から44のいずれか一項記載のセラミド様糖脂質/マイコバクテリア複合体を単離する段階、および（b）（a）の単離した複合体に薬学的担体を加える段階を含む方法。
【請求項４６】
前記マイコバクテリア細胞が結核菌複合体（MTBC）細胞および非結核性マイコバクテリア（NTM）細胞からなる群より選択される、請求項42から45のいずれか一項記載の方法。
【請求項４７】
前記NTM細胞がスメグマ菌細胞であるか、または前記MTBC細胞が結核菌細胞、ウシ結核菌細胞、BCG細胞、M.アフリカナム細胞、M.カネッティ細胞、M.カプラエ細胞、およびM.ピンニペディイ細胞からなる群より選択される、請求項46記載の方法。
【請求項４８】
前記マイコバクテリア細胞が生菌、不活化菌、または弱毒菌細胞である、請求項42から47のいずれか一項記載の方法。
【請求項４９】
前記セラミド様糖脂質がグリコシルセラミドまたはその類縁体を含む、請求項42〜48のいずれか一項記載の方法。
【請求項５０】
前記グリコシルセラミドまたはその類縁体が式Iを含む、請求項49記載の方法：
2012514476.tif 000008
式中、R1は直鎖もしくは分枝C1-C27アルカンもしくはC2-C27アルケンであるか；またはR1は-C(OH)-R3であり、ここでR3は直鎖もしくは分枝C1-C26アルカンもしくはC2-C26アルケンであるか；あるいはR1はC6-C27アルカンもしくはアルケンであり、ここで（i）C6-C27アルカンもしくはアルケンはC5-C15シクロアルカン、C5-C15シクロアルケン、複素環、もしくは芳香環で置換されているか、または（ii）C6-C27アルカンもしくはアルケンは、C6-C27アルキルもしくはアルケニル鎖内に、C5-C15シクロアルカン、C5-C15シクロアルケン、複素環、もしくは芳香環を含み；
R2は以下の（a）〜（e）の1つであり：
（a）-CH2(CH2)XCH3、
（b）-CH(OH)(CH2)XCH3、
（c）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)2、
（d）-CH=CH(CH2)XCH3、
（e）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)CH2CH3、
ここでXは4〜17の範囲の整数であり；
R4はα連結もしくはβ連結単糖であるか、またはR1が直鎖もしくは分枝C1-C27アルカンである場合、R4は下記であり：
2012514476.tif 000009
かつ
AはOまたは-CH2である。
【請求項５１】
R1が-(CH2)22CH3または-(CH2)24CH3であるか、R2が-CH(OH)-(CH2)13CH3であるか、またはR4がガラクトシル、マンノシル、フコシルもしくはグルコシルである、請求項50記載の方法。
【請求項５２】
前記セラミド様糖脂質がα-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体を含む、請求項42〜48のいずれか一項記載の方法。
【請求項５３】
前記α-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体が式IIを含む、請求項52記載の方法：
2012514476.tif 000010
式中
R1は直鎖もしくは分枝C1-C27アルカンもしくはC2-C27アルケンであるか；またはR1は-C(OH)-R3であり、ここでR3は直鎖もしくは分枝C1-C26アルカンもしくはC2-C26アルケンであり；かつ
R2は以下の（a）〜（e）の1つであり：
（a）-CH2(CH2)XCH3、
（b）-CH(OH)(CH2)XCH3、
（c）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)2、
（d）-CH=CH(CH2)XCH3、
（e）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)CH2CH3、
ここでXは4〜17の範囲の整数である。
【請求項５４】
R2が-CH(OH)(CH2)XCH3であり、ここでXは4〜13の範囲の整数である、請求項53記載の方法。
【請求項５５】
R1が(CH2)9CH=CH-CH2-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)8CH=CH-CH2-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)7CH=CH-CH2-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)3CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-(CH2)4CH3、(CH2)3CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2CH3、(CH2)7CH=CH-CH2-CH=CH=(CH2)4CH3、(CH2)7CH=CH-CH=CH(CH2)5CH3、(CH2)8CH=CH-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)9CH=CH-CH=CH(CH2)5CH3、(CH2)6CH=CH-CH=CH-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)6CH=CH-CH=CH-CH=CH(CH2)4CH3および(CH2)7CH=CH-CH=CH-CH=CH(CH2)3CH3からなる群より選択される、請求項53記載の方法。
【請求項５６】
二重結合がシスまたはトランスである、請求項55記載の方法。
【請求項５７】
前記α-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体が式IIIを含む、請求項52記載の方法：
2012514476.tif 000011
式中、RはHまたは-C(O)R1であり、ここでR1は直鎖もしくは分枝C1-C27アルカンもしくはC2-C27アルケンであるか；またはR1は-C(OH)-R3であり、ここでR3は直鎖もしくは分枝C1-C26アルカンもしくはC2-C26アルケンであるか；あるいはR1はC6-C27アルカンもしくはアルケンであり、ここで（i）C6-C27アルカンもしくはアルケンはC5-C15シクロアルカン、C5-C15シクロアルケン、複素環、もしくは芳香環で置換されているか、または（ii）C6-C27アルカンもしくはアルケンは、C6-C27アルキルもしくはアルケニル鎖内に、C5-C15シクロアルカン、C5-C15シクロアルケン、複素環、もしくは芳香環を含むか；またはR1は-(CH2)nR5であり、ここでnは0〜5の範囲の整数であり、かつR5は-C(O)OC2H5、置換されていてもよいC5-C15シクロアルカン、置換されていてもよい芳香環、もしくはアラルキルであり、かつ
R2は以下の（a）〜（e）の1つであり：
（a）-CH2(CH2)XCH3、
（b）-CH(OH)(CH2)XCH3、
（c）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)2、
（d）-CH=CH(CH2)XCH3、
（e）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)CH2CH3、
ここでXは4〜17の範囲の整数である。
【請求項５８】
R1がオキソ；ヒドロキシ；ハロゲン；フェニル；-OC(O)R6；-OR6；-C(O)R6；またはN(R6)2で置換されており、
ここでR6はそれぞれ独立に水素、C1-C6アルキル、またはハロゲン；ヒドロキシ；-OC(O)R7；-OR7；-C(O)R7もしくはN(R7)2で置換されていてもよい芳香環であり、かつ
ここでR7はそれぞれ独立に水素またはC1-C6アルキルであるか、あるいは
R1が下記からなる群より選択され、
2012514476.tif 000012
2012514476.tif 000013
2012514476.tif 000014
式中、( )はR1の式IIIの化合物への結合点を表す、
請求項57記載の方法。
【請求項５９】
前記α-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体が、(2S,3S,4R)-1-O-(α-D-ガラクトピラノシル)-N-ヘキサコサノイル-2-アミノ-1,3,4-オクタデカントリオール（KRN7000）、(2S,3S)-1-O-(α-D-ガラクトピラノシル)-N-ヘキサコサノイル-2-アミノ-1,3-オクタデカンジオール)または(2S,3S,4R)-1-CH2-(α-ガラクトピラノシル)-N-ヘキサコサノイル-2-アミノ-1,3,4-オクタデカントリオール（α-C-GalCer）を含む、請求項52記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
本発明のこれらおよび他の局面を以下にさらに詳細に記載する。
[本発明1001]
細菌細胞およびセラミド様糖脂質を含む改変細菌であって、該セラミド様糖脂質が該細菌細胞と物理的に結合された改変細菌。
[本発明1002]
前記セラミド様糖脂質がグリコシルセラミドまたはその類縁体を含む、本発明1001の改変細菌。
[本発明1003]
前記グリコシルセラミドまたはその類縁体が式Iを含む、本発明1002の改変細菌：
2012514476.tif 000015
式中、R1は直鎖もしくは分枝C1-C27アルカンもしくはC2-C27アルケンであるか；またはR1は-C(OH)-R3であり、ここでR3は直鎖もしくは分枝C1-C26アルカンもしくはC2-C26アルケンであるか；あるいはR1はC6-C27アルカンもしくはアルケンであり、ここで（i）C6-C27アルカンもしくはアルケンはC5-C15シクロアルカン、C5-C15シクロアルケン、複素環、もしくは芳香環で置換されているか、または（ii）C6-C27アルカンもしくはアルケンは、C6-C27アルキルもしくはアルケニル鎖内に、C5-C15シクロアルカン、C5-C15シクロアルケン、複素環、もしくは芳香環を含み；
R2は以下の（a）〜（e）の1つであり：
（a）-CH2(CH2)XCH3、
（b）-CH(OH)(CH2)XCH3、
（c）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)2、
（d）-CH=CH(CH2)XCH3、
（e）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)CH2CH3、
ここでXは4〜17の範囲の整数であり；
R4はα連結もしくはβ連結単糖であるか、またはR1が直鎖もしくは分枝C1-C27アルカンである場合、R4は下記であり：
2012514476.tif 000016
かつ
AはOまたは-CH2である。
[本発明1004]
R1が-(CH2)22CH3または-(CH2)24CH3である、本発明1003の改変細菌。
[本発明1005]
R2が-CH(OH)-(CH2)13CH3である、本発明1003の改変細菌。
[本発明1006]
R4がガラクトシル、マンノシル、フコシルまたはグルコシルである、本発明1003の改変細菌。
[本発明1007]
前記セラミド様糖脂質がα-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体を含む、本発明1001の改変細菌。
[本発明1008]
前記α-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体が式IIを含む、本発明1007の改変細菌：
2012514476.tif 000017
式中
R1は直鎖もしくは分枝C1-C27アルカンもしくはC2-C27アルケンであるか；またはR1は-C(OH)-R3であり、ここでR3は直鎖もしくは分枝C1-C26アルカンもしくはC2-C26アルケンであり；かつ
R2は以下の（a）〜（e）の1つであり：
（a）-CH2(CH2)XCH3、
（b）-CH(OH)(CH2)XCH3、
（c）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)2、
（d）-CH=CH(CH2)XCH3、
（e）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)CH2CH3、
ここでXは4〜17の範囲の整数である。
[本発明1009]
R2が-CH(OH)(CH2)XCH3であり、ここでXは4〜13の範囲の整数である、本発明1008の改変細菌。
[本発明1010]
R1が(CH2)9CH=CH-CH2-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)8CH=CH-CH2-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)7CH=CH-CH2-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)3CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-(CH2)4CH3、(CH2)3CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2CH3、(CH2)7CH=CH-CH2-CH=CH=(CH2)4CH3、(CH2)7CH=CH-CH=CH(CH2)5CH3、(CH2)8CH=CH-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)9CH=CH-CH=CH(CH2)5CH3、(CH2)6CH=CH-CH=CH-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)6CH=CH-CH=CH-CH=CH(CH2)4CH3および(CH2)7CH=CH-CH=CH-CH=CH(CH2)3CH3からなる群より選択される、本発明1008の改変細菌。
[本発明1011]
二重結合がシスまたはトランスである、本発明1010の改変細菌。
[本発明1012]
前記α-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体が式IIIを含む、本発明1007の改変細菌：
2012514476.tif 000018
式中、RはHまたは-C(O)R1であり、ここでR1は直鎖もしくは分枝C1-C27アルカンもしくはC2-C27アルケンであるか；またはR1は-C(OH)-R3であり、ここでR3は直鎖もしくは分枝C1-C26アルカンもしくはC2-C26アルケンであるか；あるいはR1はC6-C27アルカンもしくはアルケンであり、ここで（i）C6-C27アルカンもしくはアルケンはC5-C15シクロアルカン、C5-C15シクロアルケン、複素環、もしくは芳香環で置換されているか、または（ii）C6-C27アルカンもしくはアルケンは、C6-C27アルキルもしくはアルケニル鎖内に、C5-C15シクロアルカン、C5-C15シクロアルケン、複素環、もしくは芳香環を含むか；またはR1は-(CH2)nR5であり、ここでnは0〜5の範囲の整数であり、かつR5は-C(O)OC2H5、置換されていてもよいC5-C15シクロアルカン、置換されていてもよい芳香環、もしくはアラルキルであり、かつ
R2は以下の（a）〜（e）の1つであり：
（a）-CH2(CH2)XCH3、
（b）-CH(OH)(CH2)XCH3、
（c）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)2、
（d）-CH=CH(CH2)XCH3、
（e）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)CH2CH3、
ここでXは4〜17の範囲の整数である。
[本発明1013]
R1がオキソ；ヒドロキシ；ハロゲン；フェニル；-OC(O)R6；-OR6；-C(O)R6；またはN(R6)2で置換されており、
ここでR6はそれぞれ独立に水素、C1-C6アルキル、またはハロゲン；ヒドロキシ；-OC(O)R7；-OR7；-C(O)R7もしくはN(R7)2で置換されていてもよい芳香環であり、かつ
ここでR7はそれぞれ独立に水素またはC1-C6アルキルである、本発明1012の改変細菌。
[本発明1014]
R1が下記からなる群より選択される、本発明1012の改変細菌
2012514476.tif 000019
2012514476.tif 000020
2012514476.tif 000021
式中、( )はR1の式IIIの化合物への結合点を表す。
[本発明1015]
前記α-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体が、(2S,3S,4R)-1-O-(α-D-ガラクトピラノシル)-N-ヘキサコサノイル-2-アミノ-1,3,4-オクタデカントリオール（KRN7000）または(2S,3S)-1-O-(α-D-ガラクトピラノシル)-N-ヘキサコサノイル-2-アミノ-1,3-オクタデカンジオール)を含む、本発明1007の改変細菌。
[本発明1016]
前記α-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体が、(2S,3S,4R)-1-CH2-(α-ガラクトピラノシル)-N-ヘキサコサノイル-2-アミノ-1,3,4-オクタデカントリオール（α-C-GalCer）を含む、本発明1007の改変細菌。
[本発明1017]
前記セラミド様糖脂質が前記細菌細胞の細胞壁に取り込まれている、本発明1001から1016のいずれかの改変細菌。
[本発明1018]
前記細菌細胞がマイコバクテリア細胞、リステリア（Listeria）細胞、サルモネラ（Salmonella）細胞、エルシニア（Yersinia）細胞、フランシセラ（Francisella）細胞、およびレジオネラ（Legionella）細胞からなる群より選択される、本発明1001から1017のいずれかの改変細菌。
[本発明1019]
前記細菌細胞がマイコバクテリア細胞である、本発明1018の改変細菌。
[本発明1020]
前記マイコバクテリア細胞が結核菌（M. tuberculosis）複合体（MTBC）細胞および非結核性マイコバクテリア（NTM）細胞からなる群より選択される、本発明1019の改変細菌。
[本発明1021]
前記マイコバクテリア細胞がMTBC細胞である、本発明1020の改変細菌。
[本発明1022]
前記MTBC細胞が結核菌細胞、ウシ結核菌（M. bovis）細胞、ウシ結核菌カルメット-ゲラン桿菌（BCG）細胞、M.アフリカナム（M. africanum）細胞、M.カネッティ（M. canetti）細胞、M.カプラエ（M. caprae）細胞、およびM.ピンニペディイ（M. pinnipedii'）細胞からなる群より選択される、本発明1021の改変細菌。
[本発明1023]
前記MTBC細胞が結核菌細胞である、本発明1022の改変細菌。
[本発明1024]
前記MTBC細胞がBCG細胞である、本発明1022の改変細菌。
[本発明1025]
前記マイコバクテリア細胞がNTM細胞である、本発明1020の改変細菌。
[本発明1026]
前記NTM細胞がスメグマ菌（M. smegmatis）細胞である、本発明1025の改変細菌。
[本発明1027]
前記細菌細胞が生菌、不活化菌、または弱毒菌細胞である、本発明1001から1026のいずれかの改変細菌。
[本発明1028]
前記細菌細胞が生菌細胞である、本発明1027の改変細菌。
[本発明1029]
前記細菌細胞が不活化菌細胞である、本発明1027の改変細菌。
[本発明1030]
前記細菌細胞が弱毒菌細胞である、本発明1027または1028の改変細菌。
[本発明1031]
抗原に対する抗原特異的CD8 T細胞応答を増強する、本発明1001から1030のいずれかの改変細菌。
[本発明1032]
前記抗原がマイコバクテリア抗原である、本発明1031の改変細菌。
[本発明1033]
異種抗原を発現する、本発明1001から1031のいずれかの改変細菌。
[本発明1034]
前記異種抗原がウイルス抗原、細菌抗原、真菌抗原、寄生虫抗原、または腫瘍特異性的抗原である、本発明1033の改変細菌。
[本発明1035]
前記異種抗原が免疫原性ペプチドである、本発明1033の改変細菌。
[本発明1036]
前記細菌細胞が組換え細菌細胞である、本発明1001から1035のいずれかの改変細菌。
[本発明1037]
本発明1001から1036のいずれかの改変細菌、および薬学的担体を含む組成物。
[本発明1038]
前記薬学的担体が食塩水、緩衝食塩水、デキストロース、水、グリセロール、およびその組み合わせからなる群より選択される、本発明1037の組成物。
[本発明1039]
アジュバントをさらに含む、本発明1037の組成物。
[本発明1040]
前記アジュバントが糖脂質、サイトカイン、ケモカイン、サイトカインおよびケモカインの産生を誘導する化合物、成長因子、インターフェロン、細菌成分、アルミニウム塩、カルシウム塩、シリカ、ポリヌクレオチド、類毒素、血清タンパク質、ウイルス、ウイルス由来材料、毒物、毒液、イミダゾキニリン化合物、TLR9アゴニスト（例えば、CPG ODNS）、TLR7/8アゴニスト（例えば、イミキモド）、ポロキサマー、カチオン脂質、不活性担体、プルロニックブロックコポリマー、デポー形成剤、界面活性材料、マクロファージ刺激物質、交代経路補体活性化物質、非イオン性界面活性剤、mLT、MF59(商標)、SAF、Ribi(商標)アジュバント系、LPS誘導体（例えば、モノホスホリルリピドA（MPL））、トレハロースジミコレート（TDM）、細胞壁骨格（CWS）、Detox(商標)、QS21、Stimulon(商標)、完全フロイントアジュバント、不完全フロイントアジュバント、マクロファージコロニー刺激因子（M-CSF）、腫瘍壊死因子（TNF）、3-O-脱アシル化MPL、CpGオリゴヌクレオチド、サポニン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリオキシエチレンエステル、ならびに複数の第二のアジュバントの任意の組み合わせからなる群より選択される、本発明1039の組成物。
[本発明1041]
本発明1001から1035のいずれかの改変細菌または本発明1035から1040のいずれかの組成物を含むワクチン組成物。
[本発明1042]
動物の疾患の治療法であって、該治療を必要としている動物に本発明1001から1035のいずれかの改変細菌、本発明1035から1040のいずれかの組成物、または本発明1041のワクチン組成物を投与する段階を含み、ここで該改変細菌は該疾患の進行を変化させるのに十分な量で投与する方法。
[本発明1043]
動物の疾患の予防法であって、該予防を必要としている動物に本発明1001から1035のいずれかの改変細菌、本発明1035から1040のいずれかの組成物、または本発明1041のワクチン組成物を投与する段階を含み、ここで該改変細菌は該動物において該疾患に対する免疫応答を誘導するのに十分な量で投与する方法。
[本発明1044]
免疫応答を前記セラミド様糖脂質と結合していない細菌細胞によって生成される免疫応答に比べて増強または改変する、本発明1043の方法。
[本発明1045]
前記疾患がウイルス疾患、細菌疾患、真菌疾患、寄生虫疾患、および増殖性疾患からなる群より選択される、本発明1042から1044のいずれかの方法。
[本発明1046]
前記疾患が細菌疾患である、本発明1045の方法。
[本発明1047]
前記疾患がマイコバクテリア疾患である、本発明1046の方法。
[本発明1048]
前記疾患が結核、結核に似た肺疾患、リンパ腺炎、皮膚疾患、播種性疾患、腺ペスト、肺ペスト、野兎病、レジオネラ病、炭疽、腸チフス熱、パラチフス熱、食物伝染病、リステリア症、マラリア、HIV、SIV、HPV、RSV、インフルエンザ、肝炎（HAV、HBV、およびHCV）、および癌からなる群より選択される、本発明1042から1046のいずれかの方法。
[本発明1049]
前記マイコバクテリア疾患が結核である、本発明1047の方法。
[本発明1050]
動物において抗原に対する免疫応答を誘導する方法であって、該動物に本発明1001から1035のいずれかの改変細菌、本発明1035から1040のいずれかの組成物、または本発明1041のワクチン組成物を投与する段階を含む方法。
[本発明1051]
前記改変細菌を前記動物の抗原特異的CD8 T細胞応答を増強する、またはナチュラルキラーT（NKT）細胞の活性を増強するのに十分な量で投与する、本発明1050の方法。
[本発明1052]
前記免疫応答が抗体応答を含む、本発明1050の方法。
[本発明1053]
前記免疫応答がCD8 T細胞応答を含む、本発明1050の方法。
[本発明1054]
前記免疫応答がCD8 T細胞応答および抗体応答を含む、本発明1050の方法。
[本発明1055]
動物においてBCGに対するCD8 T細胞応答を調節する方法であって、該動物に本発明1001から1035のいずれかの改変細菌、本発明1035から1040のいずれかの組成物、または本発明1041のワクチン組成物の有効量を投与する段階を含み、ここで該細菌細胞はBCG細胞である方法。
[本発明1056]
前記投与が筋肉内、静脈内、気管内、鼻内、経皮、皮内、皮下、眼内、膣、直腸、腹腔内、腸内、吸入、または該経路の複数の組み合わせからなる群より選択される経路による、本発明1042から1055のいずれかの方法。
[本発明1057]
前記投与が皮内投与である、本発明1056の方法。
[本発明1058]
本発明1001から1035のいずれかの改変細菌、本発明1035から1040のいずれかの組成物、または本発明1041のワクチン組成物を含むキット。
[本発明1059]
前記改変細菌が凍結乾燥されている、本発明1060のキット。
[本発明1060]
前記改変細菌を投与するための手段をさらに含む、本発明1058または1059のキット。
[本発明1061]
セラミド様糖脂質/マイコバクテリア複合体の作成法であって、（a）培地中でマイコバクテリア細胞を培養する段階、および（b）セラミド様糖脂質を培地に、該セラミド様糖脂質が該マイコバクテリア細胞の細胞壁に結合する条件下で加える段階を含む方法。
[本発明1062]
抗原に対するワクチンを産生する方法であって：（a）本発明1061のセラミド様糖脂質/マイコバクテリア複合体を単離する段階、および（b）（a）の単離した複合体に薬学的担体を加える段階を含む方法。
[本発明1063]
前記マイコバクテリア細胞が結核菌複合体（MTBC）細胞および非結核性マイコバクテリア（NTM）細胞からなる群より選択される、本発明1061または1062の方法。
[本発明1064]
前記NTM細胞がスメグマ菌細胞である、本発明1063の方法。
[本発明1065]
前記MTBC細胞が結核菌細胞、ウシ結核菌細胞、BCG細胞、M.アフリカナム細胞、M.カネッティ細胞、M.カプラエ細胞、およびM.ピンニペディイ細胞からなる群より選択される、本発明1063の方法。
[本発明1066]
前記MTBC細胞が結核菌細胞である、本発明1065の方法。
[本発明1067]
前記MTBC細胞がウシ結核菌細胞である、本発明1065の方法。
[本発明1068]
前記MTBC細胞がBCG細胞である、本発明1065の方法。
[本発明1069]
前記細菌細胞が生菌、不活化菌、または弱毒菌細胞である、本発明1061から1068のいずれかの方法。
[本発明1070]
前記セラミド様糖脂質がグリコシルセラミドまたはその類縁体を含む、本発明1061〜1069のいずれかの方法。
[本発明1071]
前記グリコシルセラミドまたはその類縁体が式Iを含む、本発明1070の方法：
2012514476.tif 000022
式中、R1は直鎖もしくは分枝C1-C27アルカンもしくはC2-C27アルケンであるか；またはR1は-C(OH)-R3であり、ここでR3は直鎖もしくは分枝C1-C26アルカンもしくはC2-C26アルケンであるか；あるいはR1はC6-C27アルカンもしくはアルケンであり、ここで（i）C6-C27アルカンもしくはアルケンはC5-C15シクロアルカン、C5-C15シクロアルケン、複素環、もしくは芳香環で置換されているか、または（ii）C6-C27アルカンもしくはアルケンは、C6-C27アルキルもしくはアルケニル鎖内に、C5-C15シクロアルカン、C5-C15シクロアルケン、複素環、もしくは芳香環を含み；
R2は以下の（a）〜（e）の1つであり：
（a）-CH2(CH2)XCH3、
（b）-CH(OH)(CH2)XCH3、
（c）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)2、
（d）-CH=CH(CH2)XCH3、
（e）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)CH2CH3、
ここでXは4〜17の範囲の整数であり；
R4はα連結もしくはβ連結単糖であるか、またはR1が直鎖もしくは分枝C1-C27アルカンである場合、R4は下記であり：
2012514476.tif 000023
かつ
AはOまたは-CH2である。
[本発明1072]
R1が-(CH2)22CH3または-(CH2)24CH3である、本発明1071の方法。
[本発明1073]
R2が-CH(OH)-(CH2)13CH3である、本発明1071の方法。
[本発明1074]
R4がガラクトシル、マンノシル、フコシルまたはグルコシルである、本発明1071の方法。
[本発明1075]
前記セラミド様糖脂質がα-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体を含む、本発明1061〜1069のいずれかの方法。
[本発明1076]
前記α-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体が式IIを含む、本発明1075の方法：
2012514476.tif 000024
式中
R1は直鎖もしくは分枝C1-C27アルカンもしくはC2-C27アルケンであるか；またはR1は-C(OH)-R3であり、ここでR3は直鎖もしくは分枝C1-C26アルカンもしくはC2-C26アルケンであり；かつ
R2は以下の（a）〜（e）の1つであり：
（a）-CH2(CH2)XCH3、
（b）-CH(OH)(CH2)XCH3、
（c）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)2、
（d）-CH=CH(CH2)XCH3、
（e）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)CH2CH3、
ここでXは4〜17の範囲の整数である。
[本発明1077]
R2が-CH(OH)(CH2)XCH3であり、ここでXは4〜13の範囲の整数である、本発明1076の方法。
[本発明1078]
R1が(CH2)9CH=CH-CH2-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)8CH=CH-CH2-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)7CH=CH-CH2-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)3CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-(CH2)4CH3、(CH2)3CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2CH3、(CH2)7CH=CH-CH2-CH=CH=(CH2)4CH3、(CH2)7CH=CH-CH=CH(CH2)5CH3、(CH2)8CH=CH-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)9CH=CH-CH=CH(CH2)5CH3、(CH2)6CH=CH-CH=CH-CH=CH(CH2)4CH3、(CH2)6CH=CH-CH=CH-CH=CH(CH2)4CH3および(CH2)7CH=CH-CH=CH-CH=CH(CH2)3CH3からなる群より選択される、本発明1076の方法。
[本発明1079]
二重結合がシスまたはトランスである、本発明1078の方法。
[本発明1080]
前記α-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体が式IIIを含む、本発明1079の方法：
2012514476.tif 000025
式中、RはHまたは-C(O)R1であり、ここでR1は直鎖もしくは分枝C1-C27アルカンもしくはC2-C27アルケンであるか；またはR1は-C(OH)-R3であり、ここでR3は直鎖もしくは分枝C1-C26アルカンもしくはC2-C26アルケンであるか；あるいはR1はC6-C27アルカンもしくはアルケンであり、ここで（i）C6-C27アルカンもしくはアルケンはC5-C15シクロアルカン、C5-C15シクロアルケン、複素環、もしくは芳香環で置換されているか、または（ii）C6-C27アルカンもしくはアルケンは、C6-C27アルキルもしくはアルケニル鎖内に、C5-C15シクロアルカン、C5-C15シクロアルケン、複素環、もしくは芳香環を含むか；またはR1は-(CH2)nR5であり、ここでnは0〜5の範囲の整数であり、かつR5は-C(O)OC2H5、置換されていてもよいC5-C15シクロアルカン、置換されていてもよい芳香環、もしくはアラルキルであり、かつ
R2は以下の（a）〜（e）の1つであり：
（a）-CH2(CH2)XCH3、
（b）-CH(OH)(CH2)XCH3、
（c）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)2、
（d）-CH=CH(CH2)XCH3、
（e）-CH(OH)(CH2)XCH(CH3)CH2CH3、
ここでXは4〜17の範囲の整数である。
[本発明1081]
R1がオキソ；ヒドロキシ；ハロゲン；フェニル；-OC(O)R6；-OR6；-C(O)R6；またはN(RO)2で置換されており、
ここでR6はそれぞれ独立に水素、C1-C6アルキル、またはハロゲン；ヒドロキシ；-OC(O)R7；-OR7；-C(O)R7もしくはN(R7)2で置換されていてもよい芳香環であり、かつ
ここでR7はそれぞれ独立に水素またはC1-C6アルキルである、本発明1075の方法。
[本発明1082]
R1が下記からなる群より選択される、本発明1081の方法
2012514476.tif 000026
2012514476.tif 000027
2012514476.tif 000028
式中、( )はR1の式IIIの化合物への結合点を表す。
[本発明1083]
前記α-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体が、(2S,3S,4R)-1-O-(α-D-ガラクトピラノシル)-N-ヘキサコサノイル-2-アミノ-1,3,4-オクタデカントリオール（KRN7000）または(2S,3S)-1-O-(α-D-ガラクトピラノシル)-N-ヘキサコサノイル-2-アミノ-1,3-オクタデカンジオール)を含む、本発明1075の方法。
[本発明1084]
前記α-ガラクトシルセラミドまたはその類縁体が、(2S,3S,4R)-1-CH2-(α-ガラクトピラノシル)-N-ヘキサコサノイル-2-アミノ-1,3,4-オクタデカントリオール（α-C-GalCer）を含む、本発明1075の方法。