【手続補正書】
【提出日】平成25年7月22日(2013.7.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
子宮内膜がんを診断するためのインビトロ診断方法であって、（１）患者からの試料における、Ｐ４ＨＢ、ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、ＦＡＳＴＫＤ１、ＤＤＲ１、ＳＩＲＴ６、ＰＨＫＧ２、ＡＣＡＡ１、ＡＰ１Ｍ２、ＥＰＳ８Ｌ２、Ｐ２ＲＸ４、ＰＰＦＩＢＰ２、ＰＰＰ１Ｒ１６Ａ、ＣＧＮ、ＲＡＳＳＦ７、ＲＮＦ１８３、およびＴＪＰ３から選択される１〜１７個のバイオマーカーのレベルを検出すること、ここで、対照値と比較した該１〜１７個のバイオマーカーのレベルの増加は、子宮内膜がんの存在を示す、および／または（２）ＥＦＥＭＰ２、ＳＯＣＳ２、およびＤＣＮから選択される１〜３個のバイオマーカーのレベルを検出すること、ここで、対照値と比較したＥＦＥＭＰ２、ＳＯＣＳ２、および／またはＤＣＮのレベルの減少は、子宮内膜がんの存在を示す、を含む方法。
【請求項２】
Ｐ４ＨＢのレベルを検出することを含む、請求項１に記載のインビトロ診断方法。
【請求項３】
ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、またはＥＦＥＭＰ２のうちの１つ以上のレベルを検出することをさらに含む、請求項２に記載のインビトロ診断方法。
【請求項４】
ＦＡＳＴＫＤ１、ＤＤＲ１、ＳＩＲＴ６またはＰＨＫＧ２のレベルを検出することをさらに含む、請求項２または３に記載のインビトロ診断方法。
【請求項５】
ＡＣＡＡ１、ＡＰ１Ｍ２、ＥＰＳ８Ｌ２、Ｐ２ＲＸ４、ＰＰＦＩＢＰ２、ＰＰＰ１Ｒ１６Ａ、ＣＧＮ、ＲＡＳＳＦ７、ＲＮＦ１８３、ＴＪＰ３、ＳＯＣＳ２、およびＤＣＮから選択される１〜１２個のバイオマーカーのレベルを検出することをさらに含む、請求項２〜４のいずれか一項に記載のインビトロ診断方法。
【請求項６】
該患者からの該試料が、閉経前、閉経期、または閉経後の患者からの試料であるか、該患者が閉経前、閉経期、または閉経後の患者である、請求項１〜５のいずれか一項に記載のインビトロ診断方法。
【請求項７】
該試料が、組織試料、血液および／または血清、ならびに子宮液から選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載のインビトロ診断方法。
【請求項８】
該試料が子宮液試料である、請求項７に記載のインビトロ診断方法。
【請求項９】
該子宮液試料が吸引によって得られる、請求項８に記載のインビトロ診断方法。
【請求項１０】
バイオマーカーに対応するｍＲＮＡのレベルが決定される、請求項１〜９のいずれか一項に記載のインビトロ診断方法。
【請求項１１】
バイオマーカーのレベルが抗体で決定される、請求項１〜９のいずれか一項に記載のインビトロ診断方法。
【請求項１２】
バイオマーカーのレベルがＲＴ−ＰＣＲによって決定される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のインビトロ診断方法。
【請求項１３】
子宮内膜がんの診断に使用するための、
ＩＫＢＫＥ  ｍＲＮＡ、ｃＤＮＡ、またはその相補鎖；
Ｐ４ＨＢ  ｍＲＮＡ、ｃＤＮＡ、またはその相補鎖；
ＳＯＣＳ２  ｍＲＮＡ、ｃＤＮＡ、またはその相補鎖；
ＧＭＩＰ  ｍＲＮＡ、ｃＤＮＡ、またはその相補鎖；
ＤＤＲ１  ｍＲＮＡ、ｃＤＮＡ、またはその相補鎖；
ＥＰＳ８Ｌ２  ｍＲＮＡ、ｃＤＮＡ、またはその相補鎖；および
ＰＰＰ１Ｒ１６Ａ  ｍＲＮＡ、ｃＤＮＡ、またはその相補鎖
から選択される核酸。
【請求項１４】
子宮内膜がんの診断に使用するための、
ＩＫＢＫＥ用のプライマー；
Ｐ４ＨＢ用のプライマー；
ＳＯＣＳ２用のプライマー；
ＧＭＩＰ用のプライマー；
ＤＤＲ１用のプライマー；
ＥＰＳ８Ｌ２用のプライマー；および
ＰＰＰ１Ｒ１６Ａ用のプライマー；
から選択される核酸。
【請求項１５】
子宮内膜がんの診断に使用するための、
ＩＫＢＫＥ用のプローブ；
Ｐ４ＨＢ用のプローブ；
ＳＯＣＳ２用のプローブ；
ＧＭＩＰ用のプローブ；
ＤＤＲ１用のプローブ；
ＥＰＳ８Ｌ２用のプローブ；および
ＰＰＰ１Ｒ１６Ａ用のプローブ；
から選択される核酸。
【請求項１６】
子宮内膜がんの診断に使用するための、請求項１５に記載の２つ以上のプローブを含むキット。
【請求項１７】
子宮内膜がんの診断に使用するための、請求項１４に記載の２つ以上のプライマー対を含むキット。
【請求項１８】
子宮内膜がんの診断に使用するための、
ＩＫＢＫＥに対する抗体；
Ｐ４ＨＢに対する抗体；
ＳＯＣＳ２に対する抗体；
ＧＭＩＰに対する抗体；
ＤＤＲ１に対する抗体；
ＥＰＳ８Ｌ２に対する抗体；および
ＰＰＰ１Ｒ１６Ａに対する抗体
から選択される抗体。
【請求項１９】
子宮内膜がんの診断に使用するための、請求項１８に記載の抗体を含むキット。
【請求項２０】
請求項１に記載の１〜２０個のバイオマーカーのレベルを評価することによる子宮内膜がんの診断に使用するための、子宮液を取得するためのキット。
【請求項２１】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載のインビトロ診断方法であって、子宮内膜がんの症状または危険因子を有する患者からの子宮液吸引物試料中のバイオマーカーのレベルを決定することを含み、ここに、該バイオマーカーは、子宮内膜がんに罹患していない個体を代表する対照値と比較して子宮内膜がんにおいて差異的に発現され、（１）Ｐ４ＨＢ、ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、ＦＡＳＴＫＤ１、ＤＤＲ１、ＳＩＲＴ６、ＰＫＨＧ２、ＡＣＡＡ１、ＡＰ１Ｍ２、ＥＰＳ８Ｌ２、Ｐ２ＲＸ４、ＰＰＦＩＢＰ２、ＰＰＰ１Ｒ１６Ａ、ＣＧＮ、ＲＡＳＳＦ７、ＲＮＦ１８３、またはＴＪＰ３のレベルが、患者の子宮内膜吸引物試料においてアップレギュレートされている場合、その患者は子宮内膜がんを有する可能性が増大しており、（２）ＥＦＥＭＰ２、ＳＯＣＳ２、またはＤＣＮのレベルが吸引物試料においてダウンレギュレートされている場合、その患者は子宮内膜がんを有する可能性が増大している方法。
【請求項２２】
子宮内膜がんを診断するためのインビトロ診断方法であって、子宮内膜がんの症状または危険因子を有するヒト患者からの子宮液試料中の２〜９個のバイオマーカーのＲＮＡ発現のレベルを定量ＰＣＲによって決定することを含み、ここに、該マーカーは、Ｐ４ＨＢ、ＥＦＥＭＰ２、ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、ＤＤＲ１、ＦＡＳＴＫＤ１、ＳＩＲＴ６、ＰＫＨＧ２、およびＳＯＣＳ２から選択され、対照と比較したＰ４ＨＢ、ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、ＤＤＲ１、ＦＡＳＴＫＤ１、ＳＩＲＴ６、およびＰＫＨＧ２から選択される１〜７個のバイオマーカーのレベルの増加および／またはＥＦＥＭＰ２もしくはＳＯＣＳ２のレベルの減少が子宮内膜がんの存在を示す方法。
【請求項２３】
該レベルの検出が、該１つ以上のバイオマーカーを、該１つ以上のバイオマーカーを特異的に増幅する能力を有するプライマーおよび試薬類と接触させること、ならびに該増幅されたバイオマーカーにハイブリダイズする１つまたは複数のプローブを使って該増幅された１つ以上のバイオマーカーのレベルを検出することを含む、請求項１〜１０、１２、２１または２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
該プローブが、該増幅されたバイオマーカーに特異的にハイブリダイズする、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、Ｐ４ＨＢ、ＥＦＥＭＰ２およびＦＡＳＴＫＤ１；ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、Ｐ４ＨＢ、ＥＦＥＭＰ２およびＤＤＲ１；ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、Ｐ４ＨＢ、ＥＦＥＭＰ２およびＰＨＫＧ２；ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、Ｐ４ＨＢ、ＥＦＥＭＰ２およびＳＩＲＴ６；ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、Ｐ４ＨＢ、ＥＦＥＭＰ２およびＡＣＡＡ１；ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、Ｐ４ＨＢ、ＳＯＣＳ２およびＥＦＥＭＰ２；ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、Ｐ４ＨＢ、ＥＦＥＭＰ２およびＥＰＳ８Ｌ２；ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、Ｐ４ＨＢ、ＥＦＥＭＰ２およびＰ２ＲＸ４；ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、Ｐ４ＨＢ、ＥＦＥＭＰ２およびＰＰＦＩＢＰ２；ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、Ｐ４ＨＢ、ＥＦＥＭＰ２およびＰＰＰ１Ｒ１６Ａ；ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、Ｐ４ＨＢ、ＥＦＥＭＰ２、ＡＣＡＡ１およびＦＡＳＴＫＤ１；ＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、Ｐ４ＨＢ、ＥＦＥＭＰ２、ＰＨＫＧ２およびＦＡＳＴＫＤ１；またはＧＭＩＰ、ＩＫＢＫＥ、Ｐ４ＨＢ、ＥＦＥＭＰ２、ＳＩＲＴ６およびＦＡＳＴＫＤ１を含むマーカーの組合せが検出される、請求項１〜１２および２２〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
子宮内膜がんの危険因子または症状を有する患者からパイペル装置またはシリンジで得られる子宮液試料を用意すること；該試料を、該子宮液試料中のＲＮＡを保存し、その分解を防止または低減する能力を有する薬剤と接触させること；該試料における、該１〜２０個のマーカーと１つ以上の内在性遺伝子とに対応するｍＲＮＡの発現レベルを、定量ＰＣＲを使って決定すること；該１〜２０個のバイオマーカーの発現レベルを、１つ以上の内在性遺伝子で標準化すること；１〜２０個のバイオマーカーの標準化されたレベルを対照値と比較することをさらに含み、前記バイオマーカーのうちの１〜２０個の差異的発現が、子宮内膜がんまたは子宮内膜がんの可能性の増大を示す、請求項１〜１２および２２〜２５のいずれか一項に記載のインビトロ診断方法。