【手続補正書】
【提出日】平成25年9月12日(2013.9.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
集合して、ヘテロ二量体形成を促進するように操作された接合部分を形成する、第一のＣＨ３含有ポリペプチドおよび第二のＣＨ３含有ポリペプチドを含むヘテロ二量体タンパク質であって、前記の第一のＣＨ３含有ポリペプチドおよび前記の第二のＣＨ３含有ポリペプチドが、接合部分内に、ホモ二量体形成にとって静電的に不利であるが、ヘテロ二量体形成にとって静電的に有利である、１以上の荷電アミノ酸を含む、前記ヘテロ二量体タンパク質。
【請求項２】
ヒトＩｇＧ  Ｆｃ領域を含む、請求項１に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項３】
ヒトＩｇＧ  Ｆｃ領域がＩｇＧ１  Ｆｃ領域を含む、請求項２に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項４】
野生型ヒトＩｇＧ１配列中の１以上の正電荷アミノ酸が１以上の負電荷アミノ酸で置き換えられるように、ＩｇＧ１  Ｆｃが、野生型ヒトＩｇＧ１と異なるポリペプチド配列を有する第一のＣＨ３含有ポリペプチドまたは第二のＣＨ３含有ポリペプチドを含む、請求項３に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項５】
第一のＣＨ３含有ポリペプチドまたは第二のＣＨ３含有ポリペプチドが、１またはそれより多くのリジンの負電荷アミノ酸での置換を含む、請求項４に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項６】
リジンが、Ｌｙｓ４０９、Ｌｙｓ３９２、Ｌｙｓ４３９、およびＬｙｓ３７０からなる群より選択される、請求項５に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項７】
Ｌｙｓ４０９が負電荷アミノ酸で置換される、請求項６に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項８】
Ｌｙｓ３９２が負電荷アミノ酸で置換される、請求項６または７に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項９】
負電荷アミノ酸がアスパラギン酸である、請求項４〜８のいずれか１項に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項１０】
第一のＣＨ３含有ポリペプチドまたは第二のＣＨ３含有ポリペプチドが、アスパラギン酸に変更されたＬｙｓ４０９またはＬｙｓ３９２を含む、請求項４〜９のいずれか１項に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項１１】
野生型ヒトＩｇＧ１配列中の１以上の負電荷アミノ酸が１以上の正電荷アミノ酸で置き換えられるように、ＩｇＧ１  Ｆｃが、野生型ヒトＩｇＧ１と異なるポリペプチド配列を有する第一のＣＨ３含有ポリペプチドまたは第二のＣＨ３含有ポリペプチドを含む、請求項３〜１０のいずれか１項に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項１２】
第一のＣＨ３含有ポリペプチドまたは第二のＣＨ３含有ポリペプチドが、アスパラギン酸の正電荷アミノ酸での置換を含む、請求項１１に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項１３】
アスパラギン酸が、Ａｓｐ３９９およびＡｓｐ３５６からなる群より選択される、請求項１２に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項１４】
第一のＣＨ３含有ポリペプチドまたは第二のＣＨ３含有ポリペプチドが、グルタミン酸の正電荷アミノ酸での置換を含む、請求項１１に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項１５】
第一のＣＨ３含有ポリペプチドがアスパラギン酸でのＬｙｓ４０９の置換を含み、そして第二のＣＨ３含有ポリペプチドが、正電荷アミノ酸でのＡｓｐ３９９、Ａｓｐ３５６、またはＧｌｕ３５７の置換を含む、請求項４〜１１のいずれか１項に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項１６】
正電荷アミノ酸がリジンである、請求項１５に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項１７】
Ａｓｐ３９９がリジンで置換される、請求項１５または１６に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項１８】
Ａｓｐ３５６がリジンで置換される、請求項１６または１７に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項１９】
第一のＣＨ３含有ポリペプチドが、さらに負電荷アミノ酸でのＬｙｓ３９２の置換を含む、請求項１５〜１８のいずれか１項に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項２０】
第一のＣＨ３含有ポリペプチドが、アスパラギン酸に変更されたＬｙｓ４０９およびＬｙｓ３９２を含み、そして第二のＣＨ３含有ポリペプチドが、リジンに変更されたＡｓｐ３９９およびＡｓｐ３５６を含む、請求項４〜１９のいずれか１項に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項２１】
第一のＣＨ３含有ポリペプチドが、３９２及び４０９の位置のアミノ酸の負電荷アミノ酸での置換を含み、そして第二のＣＨ３含有ポリペプチドが、３５６及び３９９の位置のアミノ酸の正電荷アミノ酸での置換を含む、請求項１に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項２２】
第一のＣＨ３含有ポリペプチドが、３７０、３９２及び４０９の位置のアミノ酸の負電荷アミノ酸での置換を含み、そして第二のＣＨ３含有ポリペプチドが、３５６、３５７及び３９９の位置のアミノ酸の正電荷アミノ酸での置換を含む、請求項２１に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項２３】
負電荷アミノ酸がアスパラギン酸である、請求項２１または２２に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項２４】
正電荷アミノ酸がリジンである、請求項２１、２２または２３に記載のヘテロ二量体タンパク質。
【請求項２５】
請求項１〜２４のいずれか１項に記載のヘテロ二量体タンパク質を調製する方法であって、当該方法は以下の工程：（ａ）第一のＣＨ３含有ポリペプチドをコードする核酸および第二のＣＨ３含有ポリペプチドを含む核酸を含む宿主細胞を培養し、ここで培養された宿主細胞が第一および第二のＣＨ３含有ポリペプチドを発現し；そして（ｂ）宿主細胞培養からヘテロ二量体タンパク質を回収する；を含む、前記方法。
【請求項２６】
請求項１〜２４のいずれか１項に記載のヘテロ二量体タンパク質を製造するための宿主細胞であって、第一のＣＨ３含有ポリペプチドをコードする核酸および第二のＣＨ３含有ポリペプチドをコードする核酸を含む、前記宿主細胞。
【請求項２７】
抗体のＣＨ３領域を含むポリペプチドであって、野生型ＣＨ３中の１以上の正電荷アミノ酸が１以上の負電荷アミノ酸で置き換えられるように、ＣＨ３領域が、野生型ＣＨ３領域と異なるポリペプチド配列を含み、野生型ＣＨ３領域を含むポリペプチドに比較して、ホモ二量体を形成する能力が減少している、前記ポリペプチド。
【請求項２８】
抗体がヒトＩｇＧである、請求項２７に記載のポリペプチド。
【請求項２９】
１またはそれより多くのリジンが、負電荷アミノ酸で置換される、請求項２７または２８に記載のポリペプチド。
【請求項３０】
Ｌｙｓ４０９が負電荷アミノ酸で置換される、請求項２９に記載のポリペプチド。
【請求項３１】
Ｌｙｓ３９２が負電荷アミノ酸で置換される、請求項２９または３０に記載のポリペプチド。
【請求項３２】
負電荷アミノ酸がアスパラギン酸である、請求項２７〜３１のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項３３】
抗体のＣＨ３領域を含むポリペプチドであって、野生型ＣＨ３中の１以上の負電荷アミノ酸が１以上の正電荷アミノ酸で置き換えられるように、ＣＨ３領域が、野生型ＣＨ３領域と異なるポリペプチド配列を含み、野生型ＣＨ３領域を含むポリペプチドに比較して、ホモ二量体を形成する能力が減少している、前記ポリペプチド。
【請求項３４】
抗体がヒトＩｇＧである、請求項３３に記載のポリペプチド。
【請求項３５】
１またはそれより多くのアスパラギン酸が正電荷アミノ酸で置換されている、請求項３３または３４に記載のポリペプチド。
【請求項３６】
Ａｓｐ３９９が正電荷アミノ酸で置換されている、請求項３５に記載のポリペプチド。
【請求項３７】
Ａｓｐ３５６が正電荷アミノ酸で置換されている、請求項３５または３６に記載のポリペプチド。
【請求項３８】
正電荷アミノ酸がリジンである、請求項３３〜３７のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項３９】
請求項２７〜３８のいずれか１項に記載のポリペプチドをコードする単離された核酸。
【請求項４０】
プロモーターへ機能可能に連結された請求項３９に記載の単離された核酸を含む、発現ベクター。
【請求項４１】
請求項４０に記載の発現ベクターを含有する宿主細胞。
【請求項４２】
請求項２７〜３８のいずれか１項に記載のポリペプチドを含む医薬組成物。
【請求項４３】
請求項１〜２４のいずれか１項に記載のヘテロ二量体タンパク質を含む医薬組成物。