【手続補正書】
【提出日】平成21年7月22日(2009.7.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象物に関する情報を取得する方法であって、
前記対象物のイオン化を促進するために、前記対象物に銀又は金を含む水溶液を付与する工程と、
前記水溶液を付与する工程後に、前記対象物を飛翔させるために、前記対象物に一次イオンを照射する工程と、
前記飛翔した対象物の質量に関する情報を、飛行時間型二次イオン質量分析法を用いて取得する工程と
を備えることを特徴とする情報取得方法。
【請求項２】
前記対象物がタンパク質またはペプチドであることを特徴とする請求項１に記載の情報取得方法。
【請求項３】
前記飛翔した対象物が、
（１）前記対象物の親分子に相当するイオン、
（２）前記対象物の親分子に、特定の金属または金属クラスターが付加した質量数に相当するイオン、
（３）前記対象物の親分子に、特定の金属または金属クラスターが付加し、これに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が付加した質量数に相当するイオン、
（４）前記対象物の親分子に、特定の金属または金属クラスターが付加し、これに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が付加し、さらに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が脱離した質量数に相当するイオン、
（５）前記対象物の部分構造に、特定の金属または金属クラスターが付加した質量数に相当するイオン、
（６）前記対象物の部分構造に、特定の金属または金属クラスターが付加し、これに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が付加した質量数に相当するイオン、
（７）前記対象物の部分構造に、特定の金属または金属クラスターが付加し、これに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が付加し、さらに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が脱離した質量数に相当するイオン、
のいずれかであることを特徴とする請求項１又は２に記載の情報取得方法。
【請求項４】
前記飛翔した対象物の検出結果に基づき、一次ビームの走査により得られる前記対象物の二次元分布状態の情報を取得することを特徴とする請求項１乃至３のいずれかに記載の情報取得方法。
【請求項５】
前記水溶液を付与する工程が、銀鏡反応により銀を前記対象物に付与する工程であることを特徴とする請求項１乃至４のいずれかに記載の情報取得方法。
【請求項６】
対象物に関する情報を取得する方法であって、
対象物及び、銀又は金を含む水溶液を基板に付与する工程と、
前記水溶液を付与する工程後に、前記対象物を飛翔させるために、前記対象物に一次イオンを照射する工程と、
前記飛翔した対象物の質量に関する情報を、飛行時間型二次イオン質量分析法を用いて取得する工程と
を備えることを特徴とする情報取得方法。
【請求項７】
前記対象物がタンパク質またはペプチドであることを特徴とする請求項６に記載の情報取得方法。
【請求項８】
前記飛翔した対象物が、
（１）前記対象物の親分子に相当するイオン、
（２）前記対象物の親分子に、特定の金属または金属クラスターが付加した質量数に相当するイオン、
（３）前記対象物の親分子に、特定の金属または金属クラスターが付加し、これに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が付加した質量数に相当するイオン、
（４）前記対象物の親分子に、特定の金属または金属クラスターが付加し、これに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が付加し、さらに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が脱離した質量数に相当するイオン、
（５）前記対象物の部分構造に、特定の金属または金属クラスターが付加した質量数に相当するイオン、
（６）前記対象物の部分構造に、特定の金属または金属クラスターが付加し、これに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が付加した質量数に相当するイオン、
（７）前記対象物の部分構造に、特定の金属または金属クラスターが付加し、これに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が付加し、さらに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が脱離した質量数に相当するイオン、
のいずれかであることを特徴とする請求項６又は７に記載の情報取得方法。
【請求項９】
前記飛翔した対象物の検出結果に基づき、一次ビームの走査により得られる前記対象物の二次元分布状態の情報を取得することを特徴とする請求項６乃至８のいずれかに記載の情報取得方法。
【請求項１０】
対象物に関する情報を取得する方法であって、
金属酸化物またはシリコン酸化物を含む基材表面に対象物を転写する工程と、
前記対象物を転写する工程後に、前記対象物を飛翔させるために、前記対象物に一次イオンを照射する工程と、
前記飛翔した対象物の質量に関する情報を、飛行時間型二次イオン質量分析法を用いて取得する工程と
を備えることを特徴とする情報取得方法。
【請求項１１】
前記対象物がタンパク質またはペプチドのどちらかであることを特徴とする請求項１０に記載の情報取得方法。
【請求項１２】
前記飛翔した対象物が、
（１）前記対象物の親分子に相当するイオン、
（２）前記対象物の親分子に、特定の金属または金属クラスターが付加した質量数に相当するイオン、
（３）前記対象物の親分子に、特定の金属または金属クラスターが付加し、これに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が付加した質量数に相当するイオン、
（４）前記対象物の親分子に、特定の金属または金属クラスターが付加し、これに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が付加し、さらに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が脱離した質量数に相当するイオン、
（５）前記対象物の部分構造に、特定の金属または金属クラスターが付加した質量数に相当するイオン、
（６）前記対象物の部分構造に、特定の金属または金属クラスターが付加し、これに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が付加した質量数に相当するイオン、
（７）前記対象物の部分構造に、特定の金属または金属クラスターが付加し、これに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が付加し、さらに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が脱離した質量数に相当するイオン、
のいずれかであることを特徴とする請求項１０又は１１に記載の情報取得方法。
【請求項１３】
前記飛翔した対象物の検出結果に基づき、一次ビームの走査により得られる前記対象物の二次元分布状態の情報を取得することを特徴とする請求項１０乃至１２のいずれかに記載の情報取得方法。
【請求項１４】
対象物に関する情報を取得する方法であって、
対象物を含む生体組織に対し、前記対象物を得るために、前記生体組織を限定分解する物質を加える工程と、
前記生体組織を限定分解する物質を加える工程後に、前記対象物を飛翔させるために、前記対象物を含む物質に一次イオンを照射する工程と、
前記飛翔した対象物の質量に関する情報を、飛行時間型二次イオン質量分析法を用いて取得する工程と
を備えることを特徴とする情報取得方法。
【請求項１５】
前記対象物がタンパク質またはペプチドであることを特徴とする請求項１４に記載の情報取得方法。
【請求項１６】
前記飛翔した対象物が、
（１）前記対象物の親分子に相当するイオン、
（２）前記対象物の親分子に、特定の金属または金属クラスターが付加した質量数に相当するイオン、
（３）前記対象物の親分子に、特定の金属または金属クラスターが付加し、これに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が付加した質量数に相当するイオン、
（４）前記対象物の親分子に、特定の金属または金属クラスターが付加し、これに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が付加し、さらに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が脱離した質量数に相当するイオン、
（５）前記対象物の部分構造に、特定の金属または金属クラスターが付加した質量数に相当するイオン、
（６）前記対象物の部分構造に、特定の金属または金属クラスターが付加し、これに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が付加した質量数に相当するイオン、
（７）前記対象物の部分構造に、特定の金属または金属クラスターが付加し、これに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が付加し、さらに、水素、炭素、窒素、酸素の中から選ばれる１から１０のいずれかの数の原子（複数元素の組み合わせを含む）が脱離した質量数に相当するイオン、のいずれかであることを特徴とする請求項１４又は１５に記載の情報取得方法。
【請求項１７】
前記飛翔した対象物の検出結果に基づき、一次ビームの走査により得られる前記対象物の二次元分布状態の情報を取得することを特徴とする請求項１４乃至１６のいずれかに記載の情報取得方法。
【請求項１８】
前記生体組織を限定分解する物質が消化酵素であることを特徴とする請求項１４乃至１７のいずれかに記載の情報取得方法。
【請求項１９】
対象物に関する情報を、飛行時間型二次イオン質量分析法を用いて取得する情報取得装置であって、
液滴を付与する液滴吐出機構、試料の位置を確認するための試料位置確認機構、位置制御プログラムにより制御される試料ステージ機構、液滴付与後に真空排気するための真空排気機構を備えたことを特徴とする情報取得装置。
【請求項２０】
前記液滴吐出機構がインクジェット法を用いた機構であることを特徴とする請求項１９に記載の情報取得装置。
【請求項２１】
対象物に関する情報を、飛行時間型二次イオン質量分析法を用いて取得する情報取得装置であって、
基材表面に対象物を転写する機構、転写後に真空排気するための真空排気機構を備えたことを特徴とする情報取得装置。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の名称】情報取得方法及び情報取得装置
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００１】
本発明は、情報取得方法及び情報取得装置に関する。特に飛行時間型二次イオン質量分析法（ＴＯＦ−ＳＩＭＳ）を用いるものに関する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
ＴＯＦ−ＳＩＭＳでプロテインを分析した例としては、特定のプロテインの一部分を15Ｎなどでアイソトープラベル化し、当該プロテインをＣ15Ｎ-のような二次イオンを用いてイメージング検出するもの(1A. M. Belu et al., Anal. Chem., 73, 143 (2001) ）がある。また、アミノ酸残基に対応するフラグメントイオン（二次イオン）の種類やその相対強度からプロテインの種類を推定するもの（D. S. Mantus et al., Anal. Chem., 65, 1431 (1993) ）がある。さらに、各種基板上に吸着させたプロテインについてのＴＯＦ−ＳＩＭＳ検出限界を調べたもの（M. S. Wagner el. Al., J. Biomater. Sci. Polymer Edn., 13, 40 7 (2002).）が知られている。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
本発明の第１の情報取得方法は、
対象物に関する情報を取得する方法であって、
前記対象物のイオン化を促進するために、前記対象物に銀又は金を含む水溶液を付与する工程と、
前記水溶液を付与する工程後に、前記対象物を飛翔させるために、前記対象物に一次イオンを照射する工程と、
前記飛翔した対象物の質量に関する情報を、飛行時間型二次イオン質量分析法を用いて取得する工程と
を備えることを特徴とする情報取得方法である。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
本発明の第２の情報取得方法は、
対象物に関する情報を取得する方法であって、
対象物及び、銀又は金を含む水溶液を基板に付与する工程と、
前記水溶液を付与する工程後に、前記対象物を飛翔させるために、前記対象物に一次イオンを照射する工程と、
前記飛翔した対象物の質量に関する情報を、飛行時間型二次イオン質量分析法を用いて取得する工程と
を備えることを特徴とする情報取得方法である。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
本発明の第３の情報取得方法は、
対象物に関する情報を取得する方法であって、
金属酸化物またはシリコン酸化物を含む基材表面に対象物を転写する工程と、
前記対象物を転写する工程後に、前記対象物を飛翔させるために、前記対象物に一次イオンを照射する工程と、
前記飛翔した対象物の質量に関する情報を、飛行時間型二次イオン質量分析法を用いて取得する工程と
を備えることを特徴とする情報取得方法である。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
本発明の第４の情報取得方法は、
対象物に関する情報を取得する方法であって、
対象物を含む生体組織に対し、前記対象物を得るために、前記生体組織を限定分解する物質を加える工程と、
前記生体組織を限定分解する物質を加える工程後に、前記対象物を飛翔させるために、前記対象物を含む物質に一次イオンを照射する工程と、
前記飛翔した対象物の質量に関する情報を、飛行時間型二次イオン質量分析法を用いて取得する工程と
を備えることを特徴とする情報取得方法である。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
本発明にかかる第１の情報取得装置は、
対象物に関する情報を、飛行時間型二次イオン質量分析法を用いて取得する情報取得装置であって、
液滴を付与する液滴吐出機構、試料の位置を確認するための試料位置確認機構、位置制御プログラムにより制御される試料ステージ機構、液滴付与後に真空排気するための真空排気機構を備えたことを特徴とする情報取得装置である。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
本発明にかかる第２の情報取得装置は、
対象物に関する情報を、飛行時間型二次イオン質量分析法を用いて取得する情報取得装置であって、
基材表面に対象物を転写する機構、転写後に真空排気するための真空排気機構を備えたことを特徴とする情報取得装置である。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】削除
【補正の内容】
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５４】
また、本発明の対象物のイオン化を促進する物質は、上述のＩＩ．で述べたものと同様である。また、付与の方法も同様とすることができる。また、その他の条件等も特に断らない限り、上述のＩＩ．と同様とすることができる。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８１】
生体組織の薄片試料表面に付与される増感物質を含む溶液量について述べる。増感物質として銀イオンを例にあげると、薄片試料表面第一層に存在すると見込まれるペプチド鎖に対し、モル比で１倍から１００倍の銀イオンが付与されることが好ましく、モル比で２倍から１０倍の銀イオンが付与されることが特に好ましい（即ち、ペプチド鎖長やその存在量に依存する）。一般的には、薄片試料表面に付与される増感物質の総量は、銀イオンを例にあげると、１０11〜１０13イオン／ｃｍ2程度となる（即ち単分子膜レベル以下）。増感物質を含む溶液における、増感物質の含有濃度は、１μｍｏｌ／ｍＬ〜１０μｍｏｌ／ｍＬの範囲に選択することが望ましい。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９８】
例えば、前記転写工程で利用される、化学的な処理を施された平坦な基材表面は、前記特定のタンパク質に対する反応性を示す官能基として、マレイミド基を表面上に導入されているものとすることができる。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６６】
（実施例２０）
前処理室付情報取得装置
図９は本実施例の情報取得装置を示す簡略図である。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７２】
（実施例２１）
本例では、生体組織の試料薄片をスライドガラスの平坦な表面上に貼り付け、その試料薄片の表面に対して、下記する手順により増感物質による処理を施す例を示す。
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７４】
その後、該薄片試料の表面に、バブルジェット（Ｒ）法などにより、硝酸銀水溶液を付与する。この増感物質を含む溶液として利用する硝酸銀水溶液は、例えば、濃度０．５ｍｍｏｌ／ＬのＡｇＮＯ3水溶液が利用できる。該水溶液を、例えば、塗布量０．５μＬ／ｃｍ2で薄片試料表面に付与する。このＡｇＮＯ3水溶液で表面を覆った状態で、１０分間、室温で放置し、薄片試料表面に存在しているタンパク質成分に、水溶液中に溶解している溶質イオン種を作用させる。その後、表面を覆っているＡｇＮＯ3水溶液を純水洗浄により除去する。
【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８２】
（実施例２２）
本例では、金表面に固定された牛胸腺アルブミン（ＢＳＡ）を対象として、ＴＯＦ−ＳＩＭＳ法による二次元分析能力の確認を行った。
【手続補正１９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８８】
（実施例２３）
本例では、下記する手順により、生体組織の試料薄片を平坦な金属表面上に接触させ、試料薄片の表面から金属表面上に転写されるタンパク質分子に関して、ＴＯＦ−ＳＩＭＳ法を利用して、タンパク質分子の種類ごとの二次元分布解析を行う例を示す。
【手続補正２０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１９６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１９６】
【図１】実施例４における正の二次イオン質量スペクトルの部分拡大図である。（ａ）は実測スペクトル、（ｂ）は同位体存在比を基に算出した理論スペクトルを示す。
【図２】実施例９における正の二次イオン質量スペクトルの部分拡大図を示す。（ａ）は実測スペクトル、（ｂ）は同位体存在比を基に算出した理論スペクトル、（ｃ）は得られた二次イオン質量スペクトルを用いたイメージング像を示す。
【図３】実施例１１における実測の正の二次イオン質量スペクトルの部分拡大図を示す。
【図４】実施例１３における正の二次イオン質量スペクトルの部分拡大図を示す。（ａ）は実測スペクトル、（ｂ）は同位体存在比を基に算出した理論スペクトル、（ｃ）は得られた二次イオン質量スペクトルを用いたイメージング像を示す。
【図５】比較例１における実測の正の二次イオン質量スペクトルの部分拡大図を示す。
【図６】実施例１４における、ペプチドの配置図である。
【図７】実施例１５における正の二次イオン質量スペクトルの部分拡大図である。（ａ）はペプチド１）のスペクトル、（ｂ）はペプチド２）のスペクトル、（ｃ）はペプチド３）のスペクトルである。
【図８】図７で示したスペクトルを用いた二次イオン像である。
【図９】実施例２０における情報取得装置略図である。
【図１０】実施例２０における二次イオン像である。
【図１１】本発明の第三の形態にかかる情報取得方法を模式的に示す図であり、例として生体組織試料の切断薄片に対し、該切断面上への増感物質を含む溶液付与により、切断面上に存在するタンパク質成分への増感物質の作用、結合、ならびに、増感物質の作用、結合処理が施された、切断面上に存在するタンパク質成分のＴＯＦ−ＳＩＭＳイメージング像を概念的に示す図である。
【図１２】本発明の第四の形態にかかる情報取得方法を模式的に示す図であり、例として生体組織試料の切断面上に存在するタンパク質成分の転写板への転写、ならびに、転写板への転写されたタンパク質成分のＴＯＦ−ＳＩＭＳイメージング像を概念的に示す図である。