【誤訳訂正書】
【提出日】平成24年11月8日(2012.11.8)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【発明の詳細な説明】
【発明の名称】ＣＴＬ／ＣＴＬＤの細胞炭水化物認識ドメインへターゲティングするための炭水化物誘導体化リポソーム、および治療的に活性な化合物の細胞内送達
【本発明の背景】
【０００１】
１．技術分野
本発明は、医療技術、特に活性剤の標的指向リポソーム送達に関する。
【０００２】
２．関連技術の議論
Ｉ．慢性感染病、ＨＩＶ／ＡＩＤＳおよび他の感染病感染因子は免疫系を活動へ呼び出す。ヒトまたは霊長類動物内のような発展的に進歩した系においては、これは典型的には抗原特異性免疫が活性化され、侵入者上に形成され、それに対して指向されることを意味する。この意味において、職業的抗原提供細胞（ＡＰＣ）は、一次抗原特異性応答を開始させるように感染因子を認識し、そして感染因子を処理する。ここで議論するように、そのようなＡＰＣは侵入者を結合（及び内部化）するＣＲＤレクチンレセプターをも担持している。そのような結合は一方ではＡＰＣが必要とされる保護応答を形成するのを助ける強力な手段であり、他方では病原もその独自の利益のためこのメカニズムを利用し得る。
【０００３】
ここで論ずる特別の意味において、このことは感染因子はＡＰＣへ侵入するために完成したレセプターを利用し、ＡＣＳの免疫調節機能を停止または誤誘導し、そしてさらに損傷されてない形のエンドソームのような細胞質内コンパートメント内にとどまることを意味し得る。そのようなＡＣＳ、典型的にはリンパ器官中に所在するそれは、Ｔ細胞要求指令の無数によって連続的に物理的に結合される。このことは、Ｔ細胞は一旦接触を確立するとＡＰＣから放出された病原によって感染される高いリスクにあることを意味する。本質においてこれは病原体保有（すなわち病原体保有細胞としてＡＰＣの例において）の性格である。
【０００４】
実際に、ＡＰＣはそれらの表面上に因子のいくつかの処理された粒子をディスプレーするから、病原体保有生成因子によって損傷されたＡＰＣは高い確率をもってこの因子に特異性のＴ細胞によって結合されるらしい。その結果、そのようなＴ細胞はもっとたしかに感染され、そしてＨＩＶ病の場合のようにもっと頻繁に殺滅されることを予想できる。事実ＤｏｕｅｋらはＨＩＶ−特異性Ｔ−ヘルパーメモリ細胞はＨＩＶに特異性でないメモリセルよりも多くのＨＩＶ親ウイルス性ＤＮＡを含有することを示した（Ｄｏｕｅｋ，Ｄ．Ｃ．ｅｔ
ａｌ．ＨＩＶ ｐｒｅｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｉｎｆｅｃｔｓ ＨＩＶ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ４＋Ｔｃｅｌｌｓ．Ｎａｔｕｒｅ ２００２：４１７：９５−８）。これらの結果は、病気の慢性状態の確立のほかにも病原体保有の大きい危険は侵入者に対する保護免疫の完全なノックアウトとなり得ることを目立たせる。これは致命的になり得る。
【０００５】
現在の知識に従えば、職業的ＡＰＣは細胞の４つの主要クラス、すなわち（ｉ）骨髄樹状細胞（ｍＤＣ）；（ｉｉ）プラズマサイトイド樹状細胞（ｐＤＣ）；（ｉｉｉ）濾胞樹状細胞（ＦＤＣ）；および（ｉｖ）マクロファージ（ＭＰ）を含んでいる。哺乳類生物においては、これらの細胞は非リンパ器官と組織の両方に所在し（未熟ｍＤＣのいくつかのサブセット、ｐＤＣのいくつかのサブセット、ＭＰのいくつかのサブセット）、同様にリンパ器官および組織に所在する（成熟ｍＤＣのいくつかのサブセット（鉗合ＤＣまたはＩＤＣとも呼ばれる）、ｐＤＣのいくつかのサブセット、ＭＰのいくつかのサブセット）。（Ｉｍａｉ
Ｙ，Ｙａｍａｋａｗａ Ｍ，Ｋａｓａｊｉｍａ Ｔ，Ｔｈｅ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ−ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ｓｙｓｔｅｍ，Ｈｉｓｔｏｌ Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌ
１９９８；１３：４６９−５１０；Ｃｅｌｌａ Ｍ，Ｊａｒｒｏｓｓａｙ Ｄ，Ｆａｃｃｈｅｔｔｉ Ｆ，Ａｌｅｂａｒｄｉ Ｏ，Ｎａｋａｊｉｍａ Ｈ，Ｌａｎｚａｖｅｃｃｈｉａ
Ａ，Ｃｏｌｏｎｎａ Ｍ．Ｐｌａｓｍａｃｙｔｏｉｄ ｍｏｎｏｙｔｅｓ ｍｉｇｒａｔｅ ｔｏ ｉｎｆｌａｍｅｄ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅｓ ａｎｄ ｐｒｏｄｕｃｅ ｌａｒｇｅ
ａｍｏｕｎｔｓ ｔｙｐｅ Ｉ ｉｎｔｅｆｅｒｏｎ，Ｎａｔ Ｍｅｄ．１９９９；５：９１９−２３）
【０００６】
職業的ＡＰＣの中でもｍＤＣは抗原特異性免疫の最も強力な刺激剤であり、そしてそれらは一次的細胞および体液免疫応答を誘発する独特の能力を持っている（例えばＴｅｌｅｍｏ
Ｅ，Ｋｏｒｏｔｋｏｖａ Ｍ，Ｈａｎｓｏｎ ＬＡ，Ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｕｃｏｓａ
ａｎｄ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｈｏｍｉｎｇ，Ａｎｎ Ａｌｌｅｒｇｙ Ａｓｔｈｍａ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００３；９０（Ｓｕｐｐｌ３）：２８−３３において考察されているように腸粘膜において、またはＮｏｖａｋ
Ｎ，Ｓｉｅｐｍａｎｎ Ｋ，Ｚｉｅｒｈｕｔ Ｍ，Ｂｉｅｂｅｒ Ｔ，Ｔｈｅ ｇｏｏｄ，ｔｈｅ ｂａｄ ａｎｄ ｕｇｌｙ−ＡＰＣｓ ｏｆ ｔｈｅ ｅｙｅ，Ｔｒｅｎｄｓ
Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００３；２４：５７０−４の眼の微小環境において）。
【０００７】
ＭＰに関し、抗原プレゼンテーションはこれら細胞のいくつかの機能の一つである。ＭＰは以前にｍＣＤによって開始された二次的抗原特異性応答をトリガし得る（例えばＴｈｏｍａｓ
ＷＥ，Ｂｒａｉｎ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ：ｏｎ ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｐｅｒｉｃｙｔｅｓ ａｎｄ ｐｅｒｉｖａｓｃｕｌａｒ ｃｅｌｌｓ，Ｂｒａｉｎ Ｒｅｖ １９９９；３１：４２−５７に見られるように脳におけるような）。
【０００８】
ｐＤＣの主な知られた機能は強力な抗ウイルスタイプ−Ｉインターフェロンを生産することである（Ｃｅｌｌａ Ｍ，Ｊａｒｒｏｓｓａｙ Ｄ，Ｆａｃｃｈｅｔｔｉ
Ｆ，Ａｌｅｂａｎｄｉ Ｏ，Ｎａｋａｊｉｍａ Ｈ，Ｌａｎｚａｖｅｃｃｈｉａ Ａ，Ｃｏｌｏｎｎａ Ｍ，Ｐｌａｓｍａｃｙｔｏｉｄ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ ｍｉｇｒａｔｏ
ｔｏ ｉｎｆｌａｍｅｄ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅｓ ａｎｄ ｐｒｏｄｕｃｅ ｌａｒｇｅ ａｍｏｕｎｔｓ ｏｆ ｔｙｐｅ Ｉ ｉｎｔｅｒｆｏｒｏｎ，Ｎａｔ Ｍｅｄ １９９９；５：９１９−２３）。
【０００９】
最後に、少なくとも健康状態のもとではＦＤＣの存在はリンパ系器官および組織内の濾胞に密に制限され、そこでそれらは抗原特異性イムノグロブリンの生産のためＢ細胞を指令している。重要なのはＦＤＣは抗原、またはウイルスのような全体のインタクトな病原に対し、それらの豊富な細胞質突出内にこれらの構造を保持することによって強力な長期間メモリを提供する（ｖａｎ
Ｎｉｅｒｏｐ Ｋ，ｄｅ Ｇｒｏｏｔ Ｃ，Ｈｕｍａｎ ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ：ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ，ｏｒｉｇｉｎ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｓｅｍｉｎ
Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００２；１４：２５１−７にレビューされている）。
【００１０】
注目すべきは、ｍＤＣおよびＭＰはＴ−細胞（または細胞）免疫およびメモリを仲介（Ｓｔｅｉｎｍａｎ ＲＭ，Ｔｈｅ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ｓｙｓｔｅｍ
ａｎｄ ｉｔｓ ｒｏｌｅ ｉｎ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｃｉｔｙ，Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９９１；９：２７１−９６；Ｂａｎｃｈｅｒｅａｕ Ｊ，Ｐａｃｚｅｓｎｙ
Ｓ，Ｂｌａｎｃｏ Ｐ ｅｔ ａｌ，Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ：ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｒｓ ｏｆ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ ａ ｎｅｗ ｐｒｏｍｉｓｅ
ｆｏｒ ｉｍｍｕｎｏ ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｎｎ ＮＹ ａｃａｄ Ｓｃｉ ２００３；９８７：１８０−７）、ＦＤＣはＢ−細胞（または体液）免疫およびメモリを実現させる（Ｂｕｒｔｏｎ
Ｇ Ｆ，Ｃｏｎｒａｄ ＤＨ，Ｓｚａｋａｌ ＡＫ，Ｔｅｗ ＪＧ，Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ（ＦＤＣ）ａｎｄ Ｂ ｃｅｌｌ ｃｏ−ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
１９９３；１５０：３１；Ｑｉｎ Ｄ，Ｗｕ Ｊ，Ｃａｒｏｌｌ ＭＣ，Ｂｕｒｔｏｎ ＧＦ，Ｓｚａｋａ ＫＴ，Ｔｅｗ ＪＧ，Ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ
ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ａ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ−ｄｅｒｉｖｅｄ ＣＤ２１ ｌｉｇａｎｄ ｏｎ ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ
ａｎｄ ＣＤ２１ ｏｎ Ｂ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ＩｇＧ ｒｅｓｐｏｎｓｅ，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９８８；１６１：４５４９）。
【００１１】
ここに記載した本発明の文脈において、職業的ＡＰＣはヒト免疫不全ウイルス１（ＨＩＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）のような感染因子、および結核菌のような細胞内生存性細菌の貯蔵庫を提供できることを強調しなければならない（Ｃａｍｂｉ
Ａ，Ｆｉｇｄｏｒ ＣＧ，Ｄｕａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ，Ｃｕｒｒ
Ｏｐｉｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ２００３；１５：５３９−４６；Ｋａｕｆｍａｎｎ ＳＨＥ，Ｓｃｈａｉｂｌｅ ＵＥ，Ａ ｄａｇｅｒｏｕｓ ｌｉａｉｓｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ
ｔｗｏ ｍａｊｏｒ ｋｉｌｌｅｒｓ：Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｔｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ａｎｄ ＨＩＶ ｔａｒｇｅｔ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕｇｈ
ＤＣ−ＳＩＧＮ，Ｊ．Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００３；１９７：１−５）。加えて、感染後同様な潜在性貯蔵庫がメモリ、静止および／または老化Ｔリンパ球のような非ＡＰＣ内に確立できる（Ｖｏｅｈｒｉｎｇｅｒ
Ｄ，Ｂｌａｓｅｒ Ｃ，Ｂｒａｗａｎｔ Ｐ，Ｒａｕｌｅｔ ＤＨ，Ｈａｎｋｅ Ｔ，Ｐｉｒｃｈｅｒ Ｈ，Ｖｉｒａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｉｎｄｕｃｅ ａｂｕｎｄａｎｔ
ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｓｅｎｓｃｅｎｔ ＣＤ８ Ｔ ｃｅｌｌｓ，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００１；１６７：４８３８−４３；Ｄｏｕｅｋ Ｄ Ｃ ｅｔ ａｌ，ＨＩＶ ｐｒｅｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ
ｉｎｆｅｃｔｓ ＨＩＶ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ４＋Ｔ ｃｅｌｌｓ，Ｎａｔｕｒｅ ２００２；４１７：９５−８）。
【００１２】
定義のため種々の用語、すなわち貯蔵庫、サンクチュアリ、潜在性および休眠は、インタクトな感染因子が無限時間別々の解剖学的部位および細胞に貯えられることができる病理学的現象を記載するために文献で現在使用されている（例えば、Ｓｃｈｒａｇｅｒ
ＬＫ，Ｄ’Ｓｏｕｚａ ＭＰ，Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ ｔｏｍｉｃａｌ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒｓ ｏｆ ＨＩＶ−１ ｉｎ
ｐａｔｉｅｎｔｓ ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ ｐｏｔｅｎｔ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ，ＪＡＭＡ １９９８；２８０：６７−７１；Ｓａｖｌａ
Ｕ，Ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ：ａ ｄｉｒｔｙ ｗｏｒｄ ｉｎ ＨＩＶ，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ ２００４；１１３：１４６）。ここに記載した本発明に関し、用語サンクチアリ、潜在性、および老化は異なる文脈において使用されている事実のため、“ウイルス学的貯蔵庫は複製の相対的制限が存在する細胞タイプおよび組織である”とのＮｉｃｋｌｅらの定義がここで使用される（Ｎｉｃｋｌｅ
ＤＣ，Ｊｅｎｓｅｎ ＭＡ，Ｓｈｒｉｎｅｒ Ｄ，Ｂｒｏｄｉｅ ＳＪ，Ｆｒｅｎｋｅｌ ＬＭ，Ｍｉｔｔｌｅｒ ＪＥ，Ｍｕｌｌｉｎｓ ＪＩ，Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ ｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ
ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ １ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒｓ ａｎｄ ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔｓ，Ｊ Ｖｉｒｏｌ ２００３；７７：５５４０−６）。用語貯蔵庫は、構造的にインタクトな感染因子が貯蔵される特異性細胞内コンパートメントに言及する時にも採用される。
【００１３】
ＨＩＶ病および感染サンクチユアリが確立される他の感染病のための原因療法を考案し、創出するためには病原因子をその細胞貯蔵庫からなくすことが最終ゴールでなければならない。ＨＩＶ−１の例で再び議論するように、細胞貯蔵庫の生成および永続が現行の高度に活性な抗ウイルス処置（ＨＡＡＲＴ）での系からのＨＩＶの完全排除を妨げている最重要な要因であることに広く一致している（Ｓｔｅｂｂｉｎｇ
Ｊ，Ｇａｚｚ ａｎｄ Ｂ，Ｄｏｕｅｋ ＤＣ，Ｗｈｅｒｅ ｄｏｅｓ ＨＩＶ ｌｉｖｅ ？，Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２００４；３５０：１８７２−８０）。このことはこれら貯蔵部位においてＨＩＶ−１のような感染因子は活溌に複製されないという事実のためである（Ｎｉｃｋｌｅ
ＤＣ，Ｊｅｎｓｅｎ ＭＡ，Ｓｈｒｉｎｅｒ Ｄ，Ｂｒｏｄｉｅ ＳＪ，Ｆｒｅｎｋｅｌ ＬＭ，Ｍｉｔｔｌｅｒ ＪＥ，Ｍｕｌｌｉｎｓ ＪＩ，Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ Ｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ
ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐ Ｉ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒｓ ａｎｄ ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔｓ，Ｊ Ｖｉｒｏｌ ２００３；７７：５５４０−６）。
【００１４】
反対にＨＡＡＲＴは活溌なＨＩＶ−１複製を妨害するだけである。典型的には、ＨＩＶプロテーゼ阻害剤（ＰＩ）のほかに、ＨＡＡＲＴプロトコールはヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（ＮＲＴＩ）および／または非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（ＮＮＲＴＩ）を含んでいる。ＮＲＴＩおよびＮＮＲＴＩの両方は活性ウイルスゲノム転写のメカニズム特異的にブロックする（例えばＥｎａ
Ｊ，Ａｍａｄｏｒ Ｃ，Ｂｅｎｉｔｏ Ｃ，Ｆｅｎｏｌｌ Ｖ，Ｐａｓｑｕａｕ Ｆ，Ｒｉｓｋ ａｎｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ ｏｆ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｓｅｖｅｒｅ
ｌｉｖｅｒ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｙ ｗｉｔｈ ｎｅｖｉｒａｐｉｎｅ ａｎｄ ｅｆａｖｉｒｅｎｚ−ｃｏｕｔａｉｎｉｎｇ ｒｅｇｉｍｅｎｓ
ｉｎ ＨＩＶ−ｉｆｅｃｔｅｄ ｐａｔｉｅｎｔｓ，Ｉｎｔ Ｊ ＳＴＤ ＡＩＤＳ ２００３；１４：７７６−８１）。このように設計により貯蔵庫に限られた非複製ビリオンはそのような処置によって影響を受けず、それ故系からＨＩＶを決して除去しない。
【００１５】
正確に同じ結論は、細胞内貯蔵庫を確立し、そのための処置が活溌な複製の妨害のみに依存する他の感染因子にも当てはまる。例えばＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）の場合がその通りであり、ここでは現行処置は免疫刺激剤としてインターフェロン−αの適用のほかに、リバビリンを採用する（ＭｃＨｕｔｃｈｉｓｏｎ ＪＧ，Ｇｏｒｄｏｎ ＳＣ，Ｓｃｈｉｆｆ ＥＲ ｅｔ ａｌ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ
ａｌｆａ−２ｂ ａｌｏｎｅ ｏｒ ｉｎ ｃｏｍｂｉｎｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｒｉｂａｖｉｒｉｎ ａｓ ｉｎｉｔｉａｌ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｆｏｒ ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ
Ｃ．Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｇｒｏｕｐ，Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ １９９８；３３９：１４８５−９２；Ｄａｖｉｓ ＧＬ，Ｅｓｔｅｂａｎ−Ｍｕｒ
Ｒ，Ｒｕｓｔｉｇｉ Ｖ ｅｔ ａｌ，Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ａｌｐｈａ−２ｂ ａｌｏｎｅ ｏｒ ｉｎ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｒｉｂａｖｉｒｉｎ ｆｏｒ
ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｒｅｌａｐｓ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ
Ｔｈｅｒａｐｙ Ｇｒｏｕｐ，Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ １９９８；３３９：１４９３−９）。
【００１６】
加えて、ＨＩＶ病におけるＨＡＡＲＴの適用は種々の副作用を伴なう。例えば現行の処置は代謝的に有害に作用し（Ｌｅｅ ＧＡ，Ｓｅｎｅｖｉｒａｔｎｅ Ｔ，Ｎｏｏｒ
ＭＡ，Ｌｏ ＪＣ，Ｓｃｈｗａｒｚ ＪＭ，Ａｗｅｅｋａ ＦＴ，Ｍｕｌｌｉｇａｎ Ｋ，Ｓｃｈａｍｂｅｌａｎ Ｍ，Ｇｒｕｆｅｌｄ Ｃ，Ｔｈｅ ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｅｆｆｅｃｔ
ｏｆ ｌｏｐｉｎａｖｉｒ／ｒｉｔｏｎａｖｉｒ ｉｎ ＨＩＶ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ｍｅｎ，ＡＩＤＳ ２００４；１８：６４１−９）、多分リポジストロフィー、すなわちＨＩＶ−関連脂肪再分布症候群によって最も顕著に例示される（Ｐｏｎｄ
ＣＭ，Ｐａｒａｃｒｉｎｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ａｄｉｐｏｓｅ ａｎｄ ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｔｉｓｓｕｅ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ
ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ＨＩＶ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ａｄｉｐｏｓｅ ｒｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｓｙｎｄｒｏｍｅ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００３；２４：１３−８）。さらに最近ＨＡＡＲＴにあるＨＩＶ感染患者はＣＡＭＰ／ＰＫＡタイプＩ経路の薬物依存性内因性高活性化のためＴ細胞サイトカインネットワームが持続的に前活性化されることが明らかになった（Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ
ＣＣ，Ｂｒｙｎ Ｔ，Ｙｎｄｅｓｔａｄ Ｔ，Ｅｉｋｅｎ ＨＧ，Ｂｊｅｒｋｅｌ Ｖ，Ｆｒｏｌａｎｄ ＳＳ，Ａｕｋｒｕｓｔ Ｐ，Ｔａｓｋｅｎ Ｋ，Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｎｅｔｗｏｒｋｓ
ａｒｅ ｐｒｅ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｉｎ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｆｒｏｍ ＨＩＶ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｏｎ ＨＡＡＲＴ ａｎｄ ａｒｅ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ
ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ＣＡＭＰ，ＡＩＤＳ ２００４；１８：１７１−９）。それ故プロウイルスＤＮＡをかくまっているＴ細胞の活性化はＨＩＶ転写および伝播を同時に活性化するので、現行処置は病気のコースを悪化させ得る。
【００１７】
ＨＩＶの生産的複製はそのＲＮＡゲノムの逆転写、宿主細胞２本鎖ＤＮＡ中への取込み、および組込んだプロウイルス鋳型からの転写を必要とする。重要なのはＨＩＶおよびＨＣＶのようなＲＮＡウイルスはそれらのプルーフリーディングメカニズムの不存在による頻繁な突然変異の結果として抵抗性株への発展により逆転写酵素阻害剤による処置をついに避ける（例えばＭａｊｏｒ
ＭＥ,Ｒｅｈｅｒｍａｎｎ Ｂ，Ｆｅｉｎｓｔｏｎｅ Ｓ，Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓｅｓ，Ｉｎ：Ｋｎｉｐｅ
ＤＭ，Ｈｏｗｌｅｙ ＰＭ，Ｇｒｉｆｆｉｎ ＤＥ，Ｌａｍｂ ＲＡ，Ｍａｒｔｉｎ ＭＡ，Ｒｏｉｚｍａｎ Ｂ，Ｓｔｒａｕｓ ＳＥ（ｅｄｓ．），Ｆｉｅｌｄｓ Ｖｉｏｌｏｇｙ
４ｔｈ Ｅｄ，Ｖｏｌ．１，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ；２００１：ｐｐ．１１２７−６２）。このように逆転写前に構造的にインタクトなレトロビリオンを不活性化する適切な方法は薬物耐性株の発生を有意に減らすかまたは完全に防止することを約束する。これはウイルス保有細胞に貯えられている間にそのようなビリオンを不活性化する方法によって達成することができる（ＭｃＤｏｎａｌｄ
Ｄ，Ｗｕ Ｌ，Ｂｏｈｋｓ ＳＭ，Ｋｅｗａｌ Ｒａｍａｎｉ ＶＮ，Ｕｎｕｔｍａｚ Ｄ，Ｈｏｐｅ ＴＪ，Ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ ｏｆ ＨＩＶ ａｎｄ ｉｔｓ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ
ｔｏ ｄｅｎｔｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ−Ｔ ｃｅｌｌ ｊｕｎｃｔｉｏｎｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２００３；３００：１２９５−７，Ｅｐｕｂ ２００３ Ｍａｙ ０１；Ｔｕｒｖｉｌｌｅ
ＳＧ，Ｓａｎｔｏｓ ＪＪ，Ｆｒａｎｋ Ｉ，Ｃａｍｅｒｏｎ ＰＵ，Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ Ｊ，Ｍｉｒａｎｄａ−Ｓａｋｓｅｎａ Ｍ，Ｄａｂｌｅ Ｊ，Ｓｔｏｓｓｅｌ Ｈ，Ｒｏｍａｎｉ
Ｎ，Ｐｉａｔａｋ Ｍ Ｊｒ，Ｌｉｆｓｏｎ ＪＤ，Ｐｏｐｅ Ｍ，Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ＡＬ，Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｕｐｔａｋｅ，ｔｕｒｎｏｖｅｒ，ａｎｄ
２−ｐｈａｓｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，Ｂｌｏｏｄ ２００４；１０３：２１７０−９；Ｅｐｕｂ ２００３ Ｎｏｖ ２０；Ａｒｒｉｇｈｉ
ＪＦ，Ｐｉｏｎ Ｍ，Ｇａｒｃｉａ Ｅ，Ｅｓｃｏｌａ ＪＭ，ｖａｎ Ｋｏｏｙｋ Ｙ，Ｇｅｉｊｔｅｎｂｅｅｋ ＴＢ，Ｐｉｇｕｅｔ Ｖ ＤＣ−ＳＩＧＮ−ｍｅｄｉａｔｅｄ
ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｓｙｎａｐｓｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｅｎｈａｎｃｅｓ Ｘ４ ＨＩＶ−１ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｆｒｏｍ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ
ｔｏ Ｔ ｃｅｌｌｓ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００４；２００：１２７９−８８）。
【００１８】
Ａ．解剖学的および細胞貯蔵庫
ＨＩＶについて例示的かつ特定的に議論したように、このウイルスは細胞および解剖学的貯蔵庫に感染形で保存されている。細胞貯蔵庫は主に、（ｉ）濾胞樹状細胞；（ｉｉ）骨髄樹状細胞；（ｉｉｉ）マクロファージ；および（ｉｖ）Ｔ−メモリよりなる（Ｓｃｈｒａｇｅｒ
ＬＫ，Ｄ’Ｓｏｕｇａ ＭＰ，Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ ａｎａｔｏｍｉｃａｌ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒｓ ｏｆ ＨＩＶ−１
ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ ｐｏｔｅｎｔ ａｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ，ＪＡＭＡ １９９８；２８０：６７−７１；Ｂｕｒｔｏｎ
ＧＦ，Ｋｅｅｌｅ ＢＦ，Ｅｓｔｅｓ ＪＤ，Ｔｈａｃｋｅｒ ＴＣ，Ｇａｒｔｎｅｒ Ｓ，Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓ
ｔｏ ＨＩＶ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｓｉｓ，Ｓｅｍｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００２；１４：２７５−８４；Ｇｉｅｓｅｌｅｒ ＲＫ，Ｍａｒｑｕｉｔａｎ Ｇ，Ｓｃｏｌａｒｏ
ＭＪ，Ｃｏｈｅｎ ＭＤ，Ｌｅｓｓｏｎｓ ｆｒｏｍ ｈｉｓｔｏｒｙ：ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ＡＰＣｓ，ｉｎｈｅｒｅｎｔ ｄａｎｇｅｒｓ ｏｆ ＳＴＴ ａｎｄ
ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｇｏａｌ，ａｓ ｙｅｔ ｕｎｍｅｔ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００３；２４：１１にレビューされている）。これらの細胞は優先的に別の解剖学的貯蔵庫に居住する。
【００１９】
解剖学的および細胞ＨＩＶ貯蔵庫の実在を指摘した最初の知見は１９８０年代に報告された（Ｍｕｌｌｅｒ Ｈ，Ｆａｌｋ Ｓ，Ｓｔｕｔｔｅ ＨＪ，Ａｃｃｅｓｓｏｒｙ
ｃｅｌｌｓ ａｓ ｐｒｉｍａｒｙ ｔａｒｇｅｔ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ＨＩＶ ｉｍｆｅｃｔｉｏｎ，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｐａｔｈｏｌ
１９８６；９６：１１６１；Ｌｅ Ｔｏｕｒｎｅａｕ Ａ，Ａｕｄｏｕｉｎ Ｊ，Ｄｉｅｂｏｌｄ Ｊ，Ｍａｒｃｈｅ Ｃ，Ｔｒｉｃｏｔｔｅｔ Ｖ，Ｒｅｙｎｅｓ Ｍ，ＬＡＶ−ｌｉｋｅ
ｖｉｒａｌ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｉｎ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅ ｇｅｒｍｉｎａｌ ｃｅｎｔｅｒｓ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ ｌｙｍｐｈａｄｅｎｏｐａｔｈｙ
ｓｙｎｄｒｏｍｅ ａｎｄ ｔｈｅ ａｃｑｕｉｒｅｄ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ−ｒｅｌａｔｅｄ ｃｏｍｐｌｅｘ：ａｎ ｕｌｔｒｒａｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ
ｓｔｕｄｙ ３０ ｃａｓｅｓ，Ｈｕｍ Ｐａｔｈｏｌ １９８７；１７：１０４７−５２；Ｂｉｂｅｒｆｅｌｄ Ｐ，Ｏｎｔ Ａ，Ｐｏｒｗｉｔ Ａ，Ｓａｎｄｓｔｅｄｔ Ｂ，Ｐａｌｌｅｓｅｎ
Ｇ，Ｂｏｔｔｉｇｅｒ Ｂ，Ｍｏｒｆｅｌｔ−Ｍａｎｓｓｏｎ Ｌ，Ｂｉｂｅｒｆｅｌｄ Ｇ，Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｌｏｇｙ ｏｆ
ＨＴＬＶ−ＩＩＩ／ＬＡＶ ｒｅｌａｔｅｄ ｌｙｍｐｈａｄｅｎｏｐａｔｈｙ ａｎｄ ＡＩＤＳ，Ａｃｔａ Ｐａｔｈｏｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｓｃａｎｄ
１９８７；９５：４７−６５；Ｇｒｉｔｔｉ ＦＭ，Ｒａｉｓｅ Ｅ，Ｇｕａｌａｎｄｉ Ｇ，Ｂｏｎａｚｚｉ Ｌ，Ｍａｒｔｕｚｚｉ Ｍ，Ｓｃｈｉａｔｔｏｎｅ ＭＬ，Ｄｉ
Ｐｅｄｅ Ｂ，Ｇａｌｌｏ Ｒ，Ｒｉｖａｎｏ ＭＴ，Ｔａｒｕｓｃｉｏ Ｄ，ｅｔ ａｌ，Ａ ｃｌｉｎｉｃａｌ−ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ
ＡＩＤＳ ｃａｓｅｓ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｓｙｎｄｒｏｍｅ，Ｊ Ｅｘｐ Ｐａｔｈｏｌ １９８７；３：７２３−３６）。その後いくつかの器官および組織、およびその中に所在する別々の細胞タイプが貯蔵部位としてＨＩＶに役立つことが知られるようになった。
【００２０】
１．解剖学的ＨＩＶ貯蔵庫
胃腸管：大部分の患者においてＨＩＶ−１感染は胃腸管を介して起こる（Ｓｍｉｔｈ ＰＤ，Ｍｅｎｇ Ｇ，Ｓａｌａｚａｒ−Ｇｏｎｚａｌｅｚ ＪＦ，Ｓｈａｗ
ＧＭ，Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ＨＩＶ−１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｔｒａｃｔ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ，Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ
Ｂｉｏｌ ２００３；７４：６４２−９）。しかしながら今日既に膣ルートがアフリカおよびアジア大陸においてキー感染経路であるから、全体の数字は予見し得る将来において変り得る（Ｈｕ
Ｑ，Ｆｒａｎｋ Ｉ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ Ｖ，Ｓａｎｔｏｓ ＪＪ，Ｗａｔｔｓ Ｐ，Ｇｒｉｆｆｉｎ ＧＥ，Ｍｏｏｒｅ ＪＰ，Ｐｏｐｅ Ｍ，Ｓｈａｔｔｏｃｋ ＲＪ，Ｂｌｏｃｋａｄｅ
ｏｆ ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ ａｎｄ ｆｕｓｉｏｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎｂｉｔｓ ＨＩＶ−１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｃｅｒｅｖｉｃａｌ ｔｉｓｓｕｅ，Ｊ
Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００４；１９９：１０６５−７５，Ｅｐｕｂ ２００４ Ａｐｒｉｌ １２） （もっと多くの情報は以下を見よ）。胃腸管においては、ＣＣＲ５親和性である伝染したＨＩＶは腸ＣＣＲ５＋上皮細胞によって移送されることができる（Ｓｍｉｔｈ
ＰＤ，Ｍｅｎｇ Ｇ，Ｓａｌａｚａｒ−Ｇｏｎｚａｌｚ ＪＦ， Ｓｈａｗ ＧＭ，Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ＨＩＶ−１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ
ｔｒａｃｔ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ，Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ ２００３；７４：６４２−９，Ｅｐｕｂ ２００３ Ａｕｇ １１）。血液、胃腸管、およびリンパ節を比較すると、胃腸管はＨＩＶのすべての段階において最も多くの実質的ＣＤ４＋細胞、優先的にＣＣＲ５＋ＣＤ４＋細胞欠乏を解明する（Ｂｒｅｎｃｈｌｅｙ
ＪＭ，Ｓｈａｃｋｅｒ ＴＷ，Ｒｕｆｆ ＬＥ，Ｐｒｉｃｅ ＤＡ，Ｔａｙｌｒ ＪＨ，Ｂｅｉｌｍａｎ ＧＪ，Ｎｇｕｙｅｎ ＰＬ，Ｋｈｏｒｕｔｓ Ａ，Ｌａｒｓｏｎ Ｍ，Ｈａａｓｅ
ＡＴ，Ｄｏｕｅｋ ＤＣ，ＣＤ４＋Ｔｃｅｌｌ ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ ｄｕｒｉｎｇ ａｌｌ ｓｔａｇｅｓ ｏｆ ＨＩＶ ｄｉｓｅａｓｅ ｏｃｃｕｒｓ
ｐｒｅｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｉｎ ｔｈｅ ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｔｒａｃｔ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００４；２００：７４９−５９ Ｅｐｕｂ ２００４
Ｓｅｐ １３）。特に腸粘膜において、ＣＣＲ５＋およびＣＸＣＲ４＋リンパ球は初期標的細胞であり、そしてＨＩＶ−１複製を助ける。実際すべての解剖学的部位のうち目立ったＣＤ４＋細胞欠乏は腸粘膜固有層において感染直後最初に明瞭になる。しかしながら病気のその後のコースにおいて骨髄細胞が、血液単球の次々の発生が粘膜固有層マクロファージル分化にする粘膜へ補充されるにつれてＨＩＶ−１保有細胞として増々重要になる。実際これらの区域マクロファージは単核細胞の最大解剖学的プールへ属する。このように腸マクロファージのたった０．０６％だけがビリオンをかまっているが、それらは主要なＨＩＶ貯蔵庫である（Ｓｍｉｔｈ
ＰＤ，Ｍｅｎｇ Ｇ，Ｓａｌａｚａｒ−Ｇｏｎｚａｌｚ ＪＦ，Ｓｈａｗ ＧＭ，Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ＨＩＶ−１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ
ｔｒａｃｔ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ，Ｊ Ｌｅｕｃｏ Ｂｉｏｌ ２００３；７４：６２４−９，Ｅｐｕｂ ２００３ Ａｕｇ １１）。それ故マクロファージは胃腸管中のＨＩＶ貯蔵庫の主要なタイプである。
【００２１】
リンパ系器官および組織：胃腸管に直接関連しそして種々の末梢組織において、リンパ系器官および組織（リンパ節のような）は他の主な解剖学的ＨＩＶ貯蔵庫である（Ｒａｃｚ
Ｐ，Ｔｅｎｎｅｒ−Ｒａｃｚ Ｋ，ｖａｎ Ｖｏｌｔｅｎ Ｆ，Ｓｃｈｉｍｉｄｔ Ｈ，Ｄｉｅｔｒｃｈ Ｍ，Ｇｌｎｃｋｍａｎ ＪＣ，Ｌｅｔｖｉｎ ＮＬ，Ｊａｎｏｓｓｙ
Ｇ，Ｌｙｍｐｈａｔｉｃ ｔｉｓｓｕｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ＡＩＤＳ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ：ｔｏｏｌｓ ａｎｄ ｉｎｓｉｇｈｔｓ，Ｌｙｍｐｈｏｌｏｙ
１９９０；２３：８５−９１；Ｗｏｏｄ ＧＳ，Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｇｙ ｏｆ ｌｙｍｐｈｎｏｄｅｓ ｉｎ ＨＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ：ａ ｒｅｖｉｅｗ，Ｐｒｏｇ
ＡＩＤＳ Ｐａｔｈｏｌ １９９０；２：２５−３２；Ｍａｒｃｏｔｙ Ｃ，Ｈｅｉｎｅｎ Ｅ，Ａｎｏｔｏｉｎｅ Ｎ，Ｔｓｕｎｏｄａ Ｒ，Ｓｉｍａｒ ＬＪ，Ｒａｐｉｄ
ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｌｏｗ ｓｐｅｅｄ ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎ
ｏｎ ｄｉｓｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ ＢＳＡ ｇｒａｄｉｅｎｔｓ，Ａｄｖ Ｅｘｐ Ｍｅｄ Ｂｉｏｌ １９９３；３２９：４２９−９；Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ＹＪ，Ｋｏｓｃｏ
ＭＭ，Ｌｅｗｉｓ ＭＧ，Ｌｅｏｎ ＥＣ，Ｇｒｅｅｎｈｏｕｓｅ ＪＪ，Ｂｉｅｇ ＫＥ，Ｅｄｄｙ ＧＡ，Ｚａｃｋ ＰＭ，Ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ
ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ａｎｄ ＣＤ８＋ ｃｅｌｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎ ｍａｃａｇｕｅ ｌｉｍｐｈｎｏｄｅｓ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ
ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ＳＩＶ２５１， ｄｄｖ Ｅｘｐ Ｍｅｄ Ｂｉｏｌ １９９３；３２９：４１７−２３；Ａ Ｂｕｒｔｏｎ ＧＦ，Ｆｕｃｈｓ
ＢＡ，Ｓｚａｋａｌ ＡＫ，Ｔｅｗ ＪＧ，Ｄｅｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ｉｎ ｍｕｒｉｎｅ ａｑｕｉｒｅｄ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ
ｓｙｎｄｒｏｍｅ，Ａｄｖ Ｅｘｐ Ｍｅｄ Ｂｉｏｌ １９９３；３２９：４１１−６；Ｐａｎｔａｌｅｏ Ｇ，Ｇｒａｚｉｏｓｉ Ｃ，Ｄｅｍａｒｅｓｔ ＪＦ，Ｃｏｈｅｎ
ＯＪ，Ｖａｃｃａｒｅｚｚａ Ｍ，Ｇａｎｔｔ Ｋ，Ｍｕｒｏ−Ｃａｃｈｏ Ｃ，Ｆａｕｃｉ ＡＳ，Ｒｏｌｏ ｏｆ Ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｏｒｇａｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｓｉｓ
ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｎｎｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ（ＨＩＶ）ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ １９９４；１４０：１０５−３０；Ｃａｖｅｒｔ
Ｗ，Ｎｏｔｅｒｍａｎｓ ＤＷ，Ｓｔａｓｋｕｓ Ｋ，Ｗｉｅｔｇｒｅｆｅ ＳＷ，Ｚｕｐａｎｃｉｃ Ｍ，Ｇｅｂｈａｒｄ Ｋ，Ｈａｎｒｙ ＺＱ，Ｍｉｌｌｓ Ｒ，ＭｃＤａｄｅ
Ｈ，Ｓｃｈｕｗｉｒｔｈ ＣＭ，Ｇｏｎｄｓｍｉｔｈ Ｊ，Ｄａｎｎｅｒ ＳＡ，Ｈａａｓｅ ＡＴ，Ｋｅｎｅｔｉｃｓ ｏｆ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｉｎ ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｔｉｓｓｕｅｓ
ｔｏ ａｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ＨＩＶ−１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ，Ｓｃｅｉｎｃｅ １９９７；２７６−９６０−４；Ｓｏｏｎｔｏｒｎｎｉｙｏｍｓｋｉｊ
Ｖ，Ｗａｎｇ Ｇ，Ｋａｐａｄｉｎａ ＳＢ，Ａｃｈｉｍ ＧＬ，Ｗｉｌｅｙ ＣＡ，Ｃｏｎｆｏｃａｌ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ｌｙｍｐｈｏｉｄ
ｔｉｓｓｕｅｓ ｗｉｔｈ ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ ｆｒｏｍ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ
ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ１，Ａｒｃｈ Ｐａｔｏｌ Ｌａｂ Ｍｅｄ １９９８；１２２：５３４−８；Ｈａａｓｅ ＡＴ，Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ＨＩＶ−１
ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ：ｖｉｒａｌ ａｎｄ ＣＲ４＋Ｔ ｃｅｌｌ ｄｅｍｏｇｒａｐｈｉｃｓ ａｎｄ ｄｙｍａｍｉｃｓ ｉｎ ｌｙｍｐｈａｔｉｃ
ｔｉｓｓｕｅｓ，Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９９９；１７：６２５−５６）。定量的には濾胞樹状細胞はリンパ系器官および組織中の主要ＨＩＶ貯蔵集団である。
【００２２】
中枢神経系：中枢神経系の感染により、ＨＩＶは種々の神経挙動および神経病理学的症状を引き起こす。その重篤な形においては、それらはＨＩＶ関連痴呆（ＨＡＤ）と一般に呼ばれる。進んだ処理の利益を受けている人々においては、この症状はさほど重篤ではなく、軽度認知運動障害（ＭＣＭＤ）と名付けられる。今日脳内のＨＩＶ保有細胞はＨＩＶまたはＨＣＤＭへ導く神経発生プロセスを仲介するものと考えられている（Ｇｏｎｚａｌｅｓ−Ｓｃａｒａｎｕ
Ｆ，Ｍａｒｔｉｎ−Ｇａｒｃｉａ，Ｔｈｅ ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ＡＩＤＳ，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖ ２００５；５：６９−８１）。証明し得るＨＩＶビリオンの蓄積により、初期の観察はなお他のＨＩＶ貯蔵部位として脈絡脈叢を示唆した（Ｈａｎｌｙ
Ａ，Ｐｅｔｉｔｏ ＣＫ，ＨＬＡ−ＤＲ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｔｈｅ ｎｏｒｍａｌ ｃｈｏｒｏｉｄ ｐｌｅｘｕｓ：ａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ
ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ ｏｆ ＨＩＶ ｉｎ ｔｈｅ ｃｅｎｔｒａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ，Ｈａｍ Ｐａｔｈｏｌ １９９８；２９：８８−９３，Ｐｅｔｉｔｏ ＣＫ，Ｃｈｅｎ
Ｈ，Ｍａｓｔｒｉ ＡＲ，Ｔｏｒｒｅｓ−Ｍｕｎｏｚ Ｊ，Ｒｏｂｅｒｔｓ Ｂ，Ｗｏｏｄ Ｃ，ＨＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｈｏｒｏｉｄ ｐｌｅｘｕｓ ｉｎ ＡＩＤＳ
ａｎｄ ａｓｙｍｐｔｏｍａｔｉｃ ＨＩＶ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃｈｏｒｏｉｄ ｐｌｅｘｕｓ ｍａｙ ｂｅ ａ
ｒｅｓｅｖｏｉｒ ｏｆ ｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，Ｊ Ｎｅｕｒｏｖｉｏｌ １９９９；５：６７０−７）。しかしながら脳全体に散乱して小グリア細胞および星状細胞もＨＩＶに感染する。可能性ある侵入因子をピンポイントしようと試みた時、Ｌｉｕらは小グリア細胞がすべてＴ細胞感染に参加することが知られているＣＤ４＋，ＣＣＲ５＋およびＣＣＲ３＋を発現することを発表した。他方星状細胞はＣＤ４（Ｔ細胞中のキーＨＩＶレセプター）を発現せず、助因子ＣＣＲ５およびＣＣＲ３のみを発現する。それにも拘らずその後マンノースレセプターを有する両方の細胞タイプは、星形細胞および小グリア細胞においてＣＤ４−非依存性ＨＩＶ−１感染のために必須であることを示すＣ−タイプレクチンを発現することがわかった。重要なことに、ウイルスと結合する時その後の細胞内感染は、エンドソームおよびリゾソーム親和性阻害剤によってそのプロセスをブロックすることができるのでＨＩＶの細胞内移動に依存する（Ｌｉｕ
Ｙ，Ｌｉｕ Ｈ，Ｋｉｍ ＢＯ，Ｇａｔｔｏｎｅ ＶＨ，Ｌｉ Ｊ，Ｎａｔｈ Ａ，Ｂｌｕｍ Ｊ，Ｈｅ ＪＪ，ＣＤ４−ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ
ａｓｔｒｏｃｙｔｅｓ ｂｙ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ−１：ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ ｆｏｒ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｍａｎｎｏｓｅ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ，Ｊ Ｖｉｏｌ ２００４；７８：４１２０−３３，Ｅｒｒａｔｕｍ ｉｎ Ｊ Ｖｉｏｌ ２００４；７８：７２８８−９）。これらの発見は、マンノースレセプターＣ−タイプレクチンが星状細胞および小グリア細胞の両方による飲細胞運動を仲介する事実と符合する（Ｒｅｇｎｉｅｒ−Ｖｉｇｏｕｒｏｕｘ
Ａ，Ｔｈｅ ｍａｎｎｏｓｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｉｎ ｔｈｅ ｂｒａｉｎ Ｉｎｔ Ｒｅｖ Ｃｙｔｏｌ ２００３；２２６：３２１−４１）。最後に脈絡膜叢中のＨＩＶ＋ストローマ細胞の集団を明らかにした以前の研究の拡大において、その後Ｈａｎｌｙらは正常ヒト脈絡膜叢の樹状細胞集団をはじめて証明した。著者はまた、この部位においてこれら細胞は丁度ＨＩＶをかくまい、そして脈絡膜叢の細胞ＨＩＶ貯蔵庫であることを示した（Ｈａｎｌｙ
Ａ，Ｐｅｔｉｔｏ ＣＫ，ＨＬＡ−ＤＲ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｔｈｅ ｎｏｒｍａｌ ｈｕｍａｎ ｃｈｏｒｏｉｄ ｐｌｅｘｕｓ：ａ
ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ ｏｆ ＨＩＶ ｉｎ ｔｈｅ ｃｅｎｔｒａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ，Ｈｕｍ Ｐａｔｈｏｌｓ １９９８；２９：８８−９３）。このようにヒト脳内のＨＩＶ保有細胞は骨髄単球オリジンであり、そしてＣ−タイプレクチンレセプターを発現する。胎盤、臍帯血、授乳乳房および子宮頸：重要なことに女性器官は妊娠中および潜在的に出産後ウイルスの母子伝染を可能とするさらなる解剖学的ＨＩＶ貯蔵庫を特徴とする。胚芽／胎児に関してはＨＩＶ感染は胎盤の細胞フェノタイプ変化に影響することが知られていた（Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ
Ｊ，Ｂｒａｖｅｒｍａｎ Ｍ，Ｓａｌａｆｉａ Ｃ，Ｂｕｃｋｌｅｙ Ｐ，Ｔｈｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｐｌａｃｅｎｔａｌ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ａｎｄ
ｉｔｓ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｇｅｓｔａｔｉｏｎａｌ ａｇｅ，Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ １９８８；１３３：６４８−５９）。これら発見以前にマンノースレセプターはヒト胎盤中に同定され（Ｌｅｎｎａｒｔｚ
ＭＲ，Ｃｏｌｅ ＦＳ，Ｓｈｅｐｈｅｒｄ ＶＬ，Ｗｉｌｅｍａｎ ＴＥ，Ｓｔａｈｌ ＰＤ，Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｍａｎｎｏｓｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ
ｅｎｄｏｃｙｔｏｓｉｓ ｒｅｓｅｐｔｏｒ ｆｒｏｍ ｈｕｍａｎ ｐｌａｃｅｎｔａ，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ １９８７；２６２：９９４２−４），これはキャラクタリゼーション後炭水化物認識ドメインを明らかにした（Ｔａｙｌｅｒ
ＭＥ，Ｃｏｎａｒｙ ＪＴ，Ｌｅｎｎａｒｔｚ ＭＲ，Ｓｔａｈｌ ＰＤ，Ｄｒｉｃｋａｍａｒ Ｋ，Ｐｒｉｍａｒｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｎｎｏｓｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ
ｃｏｎｔａｉｎｓ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｏｔｉｆｓ ｒｅｓｅｍｂｌｉｎｇ ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ−ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｄｏｍａｉｎｓ，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ
１９９０；２６５：１２１５６−６２）。最終的にこのマンノースレセプターは効率的ＨＩＶ結合に相関づけられた（Ｃｕｒｔｉｓ ＢＭ，Ｓｃｈａｒｎｏｗｓｋｅ Ｓ，Ｗａｔｓｏｎ
ＡＪ，Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａ ｍｅｍｂｒａｎｅ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎ ｔｈａｔ ｅｘｈｉｂｉｔｓ
ＣＤ４−ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｅｎｖｅｌｏｐｅ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ｇｐ
１２０，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ｓｃｉ ＵＳＡ １９９２；８９：８３５６−６０）。その実際の細胞発現に関し、Ｓｏｉｌｌｅｕｘらはその後胎盤樹状細胞上にこのレセプターを同定した（Ｓｏｉｌｌｅｕｘ
ＥＪ，Ｂａｒｔｅｎ Ｒ，Ｔｒｏｗｓｄａｌｅ Ｊ，ＤＣ−ＳＩＧＮ；ａ ｒｅｌａｔｅｄ ｇｅｎｅ， ＤＣ−ＳＩＧＮＲ；ａｎｄ ＣＤ２３ ｆｒｏｍ ａ ｃｌｕｓｔｅｒ
ｏｎ １９ｐ１３，Ｊ ｉｍｍｕｎｏｌ ２０００；１６５：２９３７−４２）。さらに胎盤組織はｈＳＲＣＬタイプＩおよびＩＩのような他のＣ−タイプレクチンを発現すること（Ｎａｋａｍｕｒａ
Ｋ，Ｆｕｎａｋｏｓｈｉ Ｈ，ＭＩｙａｍｏｔｏ Ｋ，Ｔｏｋｕｎａｇａ Ｆ，Ｎａｋａｍｕｒａ Ｔ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ
ｃｈａｒａｃｔｅｎｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｈｕｍａｎ ｓｃａｖｅｎｇｅｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｗｉｔｈ Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎ （ＳＲＣＬ），ａ ｎｏｖｅｌ
ｍｅｍｂｅｒ ｏｆ ａ ｓｃａｖｅｎｇｅｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆａｍｉｌｙ，Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ ２００１；２８０：１０２８−３５）および胎盤血管内皮細胞に制限されるＣＬ−Ｐ１を発現することが明らかになった（Ｏｈｔａｎｉ
Ｋ，Ｓｕｚｕｋｉ Ｙ，Ｅｄａ Ｓ，Ｋａｗａｉ Ｔ，Ｋａｓｅ Ｈ，Ｓａｋａｉ Ｙ，Ｆｕｋｕｏｈ Ａ，Ｓａｋａｍｏｔｏ Ｔ，Ｉｔａｂｅ Ｈ，Ｓｕｚｕｔａｎｉ Ｔ，Ｏｇａｓａｗａｒａ
Ｍ，Ｙｏｓｈｉｄａ Ｉ，Ｗａｋａｍｉｙａ Ｎ，Ｔｈｅ ｍｅｍｂｒａｎｅ−ｔｙｐｅ ｃｏｌｌｅｃｔｉｎ ＣＬ−Ｐ１ ｉｓ ａ ｓｃａｎｖｅｎｇｅｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ
ｏｎ ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ， Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２００１；２７６：４４２２２−８，Ｅｐｕｂ ２００１ Ｓｅｐ １９）。最後にＤＣ−ＳＩＧＮは胎盤もに発現されることが発見され、そして特別の胎盤マクロファージ上にはじめて証明された（Ｓｏｉｌｌｅｕｘ
ＥＪ，Ｍｏｒｒｉｓ ＬＳ，Ｌｅｓｌｉｅ Ｇ，Ｃｈｅｈｉｍｉ Ｊ，Ｌｕｏ Ｑ，Ｌｅｖｒｏｎｅｙ Ｅ，Ｔｒｏｗｓｄａｌｏ Ｊ，Ｍｏｎｔａｎｅｒ ＬＪ，Ｄｏｍａｓ ＲＷ，Ｗｅｉｓｓｍａｎ
Ｄ，Ｃｏｌｅｍａｎ Ｎ，Ｌｅｅ Ｂ，Ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ ａｎｄ ｉｎｄｕｃｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＤＣ−ＳＩＧＮＲ ｏｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ
ａｎｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｓｕｂｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｓｉｔｕ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ，Ｊ Ｌｅｎｋｏｃ Ｂｉｏｌ ２００２；７１：４４５−５７）。なお重要なことに、Ｋｒａｍｍｅｒｅｒらはその後妊娠関連脱落膜に制限された子宮未熟ＤＣ−ＳＩＧＮ＋樹脂集団を同定した。この細胞は高い増殖を示し、そして天然キラー細胞に物理的に密に関連しているとのケース（Ｋｒａｍｍｅｒｅｒ
Ｕ，Ｕｇｇｅｒｔ ＡＯ，Ｋａｐｐ Ｍ，ＭｃＬｅｌｌａｎ ＡＤ，Ｇｅｉｊｔｅｎｂｅｅｋ ＴＢ，Ｄｉｅｔｌ Ｊ，ｖａｎ Ｋｏｏｙｋ Ｙ，Ｋａｍｐｇｅｎ Ｅ，Ｕｎｉｑｕｅ
ａｐｐｅａｒａｎｃｅ ｏｆ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ ａｎｔｉｇｅｎ−ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ＤＣ−ＳＩＧＮ（ＣＤ２０９）ｉｎ
ｔｈｅ ｄｅｃｉｄｕａ ｏｆ ｅａｒｌｙ ｈｕｍａｎ ｐｒｅｇｎａｎｃｙ，Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ ２００３；１６２：８８７−９６）は、それらはＨＩＶの母子伝染において最も重要であることを示す。最後にＨＩＶの妊娠関連のために重要な関心ある他の細胞はＨＩＶ感染樹状細胞へ発展し得る臍帯血単球であり（Ｆｏｌｃｉｋ
ＲＭ，Ｍｅｒｒｉｌｌ ＪＤ，Ｙ，Ｇｕｏ ＣＪ，Ｄｏｕｇｌａｓ ＳＤ，Ｓｔａｒｒ ＳＥ，Ｈｏ Ｗ２，ＨＩＶ−１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐｌａｃｅｎｔａｌ ｃｏｒｄ
ｂｌｏｏｄ ｍｏｎｏｃｙｔｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｌｌｓ，Ｊ Ｈｅｍａｔｏｔｈｅｒ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ ２００１；１０−６０９−２０），それらの前駆体単球が既にＨＩＶ感染に感受性である背景を鑑みる時特にそうである（Ｗｅｉｎｂｅｒｇ
ＪＢ，Ｍａｔｔｈｅｗｓ ＴＪ，Ｃｕｌｌｅｎ ＢＲ，Ｍａｌｉｍ ＭＨ，Ｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ １（ＨＩＶ−１）ｉｎｆｅｅｔｉｏｎ
ｏｆ ｎｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ ｈｕｍａｎ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １９９１；１７４：１４７７−８２；Ｚｈｕ Ｔ，ＨＩＶ−１ ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ
ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ，Ｊ Ｌｅｎｋｏｃ Ｂｉｏｌ ２０００；６８：３３８−４４）。
【００２３】
対照的に産後のＨＩＶ母子伝染については現在あまり知られていない。尚Ｉｃｈｉｋａｗａらはインビトロへ母乳を曝露する時健康な末梢血単球はそれらは通常不可能なＧＭ−ＣＳＦ生産を開始することを発見した。さらに外因性ＩＬ−４のみを添加する時、これら細胞はＣＤ１＋骨髄樹状細胞に分化した。最も興味を抱かせるのは、母乳から新鮮に単離されたマクロファージも自己刺激態様でＧＭ−ＣＳＦを生産し、そして外因性ＩＬ−４単独の存在下Ｔ−細胞応答を効率的に刺激する樹状細胞に分化することが発見された（Ｉｃｈｉｋａｗａ
Ｍ，Ｓｕｇｉｔａ Ｍ，Ｔａｋａｈａｓｈｉ Ｍ，Ｓａｔｏｍｉ Ｍ，Ｔａｋｅｓｈｉｔａ Ｔ，Ａｒａｋｉ Ｔ，Ｔａｋａｈａｓｈｉ Ｈ，Ｂｒｅａｓｔ ｍｉｌｋ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ
ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙ ｐｒｏｄｕｃｅ ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ−ｍａｒｏｆａｇｅ ｃｏｌｏｎｙ−ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅ
ｉｎｔｏ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆ ｅｘｏｇｅｎｎｏｕｓ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−４ａｌｏｎｅ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ
２００３；１０８：１８９−９５）。以下に詳しく記載するように、単球、マクロファージおよび骨髄樹状細胞はすべてＨＩＶ貯蔵庫の成分である。このため現在知られていないが、ＨＩＶ感染授乳母親においてそれらから容易に誘導される母乳単球／マクロファージおよび骨髄樹状細胞はＨＩＶをかくまうことができることを予想できる。もし検証されれば、これは母乳を介してウイルスの垂直母子伝染のリスクを間違いなく増加させるであろう。この場合、そして単球、マクロファージおよび骨髄樹状細胞はＣ−タイプレクチンを発現する事実により、母乳は幼児内のウイルスキメラ貯蔵庫として沈着する可能性ある運動ＨＩＶ貯蔵庫を保持することを予知するであろう。そのようなシナリオはヒト子宮頸管粘膜で得られる結果によって支持される。ＨＩＶ−１侵入阻害剤が女性頸管（アフリカおよびアジアにおいてＨＩＶ伝染の最重要ルート）内の細胞のＨＩＶ感染およびそれからの伝播の防止の能力について評価された時、ＣＤ４単独またはＣＣＲ５とＣＸＣＲ４の両方のブロックは局在化した粘膜感染を阻害したことが示された。しかしながら移動性細胞によるＨＩＶ取込みおよび全身伝播はＣＤ４およびＣ−タイプレクチンレセプター（ＣＤ−ＳＩＧＮを含む）が同じにブロックされた時にのみ阻害された。そのような移動性細胞は二つの主なサブセット（ＣＤ３＋ＨＬＡ−ＤＲ−およびＣＤ３−ＨＬＡ−ＤＲ＋）よりなり、ＨＬＡ−ＤＲ＋がＨＩＶ伝播の９０％を占め、そしてＤＣ−ＳＩＧＮを最も多く発現した（Ｈｕ
Ｑ，Ｆｒａｎｋ Ｉ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ Ｖ，Ｓａｎｔｏｓ ＪＩ，ＷＡｔｔｓ Ｐ，Ｇｒｉｆｆｉｎ ＧＥ，Ｍｏｒｒｅ ＪＰ，Ｐｏｐｅ Ｍ，Ｓｈａｔｔｏｃｋ ＲＪ，Ｂｌｏｃｋａｄｅ
ｏｆ ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ ａｎｄ ｆｕｓｉｏｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ＨＩＶ−１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｃｅｒｅｖｉｃａｌ ｔｉｓｓｕｅ，Ｊ
Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００４；１９９：１０６５−７５，Ｅｐｕｂ ２００４ Ａｐｒ １２）。それ故骨髄単球低下剤は妊娠関連胎盤脱落膜、頸管粘膜組織、および最も多分授乳乳房における主要ＨＩＶ貯蔵庫であるように見える。妊娠および看護においてそのような細胞は子供のＴ細胞へＨＩＶを直接移すことができ、そして新生児内に沈着する可能性を有する運動性細胞ＨＩＶ貯蔵庫として行動することができる。
【００２４】
２．細胞ＨＩＶ貯蔵庫
濾胞樹状細胞（ＦＤＣ）：上で述べた部位に見出される実際の細胞ＨＩＶ貯蔵庫に関し、ＦＤＣは長時間ＨＩＶを保持することが知られた細胞の最も豊富なタイプである。この事実のため、ＨＩＶの潜伏（そのときなおＨＴＬＶ−ＩＩＩ／ＬＡＶと呼ばれる）はＫｌａｒａ
Ｔｅｎｎｅｒ−Ｒａｃｚらにより１９８６年にはじめてＦＤＣ中に同定された。実際この発見はＨＩＶ病における明らかに重要な細胞内ウイルス貯蔵庫の最初の示唆へ導いた（Ｔｅｎｎｅｒ−Ｒａｃｚ
Ｋ，Ｒａｃｚ Ｐ，Ｂｏｆｉｌｌ Ｍ，Ｓｃｈｕｌｚ−Ｍｅｙｅｒ Ａ， Ｄｉｅｔｒｉｃｈ Ｍ，Ｋｅｒｎ Ｐ，Ｗｅｂｅｒ Ｊ，Ｐｉｎｃｈｉｎｇ ＡＪ，Ｖｅｒｏｎｅｓｅ−Ｄｉｍａｒｚｏ
Ｆ，Ｐｏｖｉｃ Ｍ，ｅｔ ａｌ，ＨＩＬＶ−ＩＩＩ／ＬＡＶ ｖｉｒａｌ ａｎｔｉｇｅｎｓ ｉｎ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅｓ ｏｆ ｈｏｍｏｓｅｘｕａｌ ｍｅｎ ｗｉｔｈ
ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ ｇｅｎｅｒａｌｉｚｅｄ ｌｙｍｐｈｅｄｅｎｏｐａｔｈｙ ａｎｄ ＡＩＤＳ，Ａｍ Ｊ Ｐａｔｌｏｌ １９８６；１２３：９−１５）。１９９１および１９９２年に、Ｓｔｅｉｎ
Ｓｐｉｅｇｅｌらはその後、ＦＤＣは主な貯蔵集団であることを証明し、これら細胞は膜捕捉免疫コンプレックス内にＨＩＶを保有することを示し、そしてその局面の大部分において現在の理解となお一致するＨＩＶ病の病理学の理論的解釈を提供した（Ｓｔｅｉｎ
Ｈ，Ｓｐｉｅｇｅｌ Ｈ，Ｎｉｅｄｏｂｉｔｅｋ Ｇ，Ｆｏｓｓ ＨＤ，Ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｔｉｓｓｕｅｓ ａｎｄ ＡＩＤＳ：ｒｏｌｅ ｏｆ Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ａｎｄ
ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ（ＦＤＣ），Ｖｅｒｈ Ｄｔｓｃｈ Ｇｅｓ Ｐａｔｈｏｌ １９９１；７５：４−１９；Ｓｐｉｅｇｅｌ Ｈ，Ｈｅｒｂｓｔ
Ｈ，Ｎｉｅｄｏｂｉｔｅ ＫＧ，Ｆｏｓｓ ＨＤ，Ｓｔｅｉｎ Ｈ，Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ａｒｅ ｍａｊｏｒ ｒｅｓｅｒｖｏｒ ｆｏｒ
ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ １ ｉｎ ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｔｉｓｓｕｅｓ ｆａｃｉｌｉｔａｔｉｎｇ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ
ＣＤ４＋ Ｔ−ｈｅｌｐｅｒ ｃｅｌｌｓ， Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ １９９２；１４０：１５−２２）。続く年においてＨＩＶとネコ免疫不全ウイルス（ＦＩＶ）で感染した動物モデルの両方を含めることによってこのタイプの保有細胞の病原妥当性についてもっと多くの洞察が得られる（Ｅｍｂｒｅｔｓｏｎ
Ｊ，Ｚｕｐａｎｃｉｃ Ｍ，Ｒｉｂａｓ ＪＬ，Ｂｕｒｋｅ Ａ，Ｒａｃｚ Ｐ，Ｔｅｎｎｅｒ−Ｒａｃｚ Ｋ，Ｈａａｓｅ ＡＴ，Ｍａｓｓｉｖｅ ｃｏｖｅｒｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ
ｏｆ ｈｅｌｐｅｒ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ａｎｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｂｙ ＨＩＶ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ ｐｅｒｉｏｄ ｏｆ ＡＩＤＳ，Ｎａｔｕｒｅ
１９９３；３６２：３５９−６２；Ｔｅｎｎｅｒ−Ｒａｃｚ Ｋ，ｖｏｎ ｓｔｅｍｍ ＡＭ，Ｇｕｈｌｋ Ｂ，Ｓｃｈｍｉｔｚ Ｊ，Ｒａｃｚ Ｐ，Ａｒｅ ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ
ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ａｎｄ ｉｎｔｅｒｄｉｇｉｔａｔｉｎｇ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｔｈｅ ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｔｉｓｓｎｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｌｙ
ｉｍｆｅｃｔｅｄ ｂｙ ＨＩＶ？，Ｒｅｓ Ｖｉｒｏｌ １９９４；１４５：１７７−８２；Ｈｕｒｔｒｅｌ Ｂ，Ｃｈａｋｒａｂａｒｔｉ Ｌ，Ｈｕｒｔｒｅｌ Ｍ，Ｂａｃｈ
ＪＭ，Ｇａｎｉｅｒｅ ＪＰ，Ｍｏｎｔａｇｎｉｅｒ Ｌ，Ｅａｒｌｙ ｅｖｅｎｔｓ ｉｎ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅｓ ｄｕｒｉｎｇ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ＳＩＶ
ａｎｄ ＦＩＶ，Ｒｅｓ Ｖｉｒｏｌ １９９４；１４５：２２１−７；Ｓｃｈｕｕｒｍａｎ ＨＪ，Ｊｏｌｉｎｇ Ｐ，ｖａｎ ｄｅｎ Ｔｗｅｅｌ ＪＧ，Ｇｏｕｄｓｍｉｔ
Ｊ，Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｂｙ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ
１−ａ ｃｒｕｃｉａｌ ｔａｒｇｅｔ ｃｅｌｌ ａｎｄ ｖｉｒｕｓ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ，Ｃｕｒｒ Ｔｏｐ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９９５；２０１：１６１−８８；Ｃｏｈｅｎ
ＯＪ，Ｐａｎｔａｌｅｏ Ｇ，Ｓｃｈｗａｒｔｚｅｎｔｒｕｂｅｒ ＤＪ，Ｇｒａｚｉｏｓｉ Ｃ，Ｖａｃｃａｒｅｚｚａ Ｍ，Ｆａｕｃｉ ＡＳ，Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｉｎｓｉｇｈｔｓ
ｆｒｏｍ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｌｙｍｂｈｏｉｄ ｔｉｓｓｕｅ ｆｒｏｍ ＨＩＶ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ，Ｊ Ａｃｑｉｒ Ｉｍｍｕｎｅ Ｄｅｆｉｃ
Ｓｙｎｄｒｏ Ｈｕｍ Ｒｅｔｒｏｖｉｒｏｌ １９９５；１０（Ｓｕｐｐｌ １）：Ｓ６−Ｓ１４；Ｓｐｒｅｎｇｅｒ Ｒ，Ｔｏｅｌｌｎｅｒ ＫＭ，Ｓｃｈｍｅｔｚ Ｃ，Ｌｕｋｅ
Ｗ，Ｓｔａｈｌ−Ｈｅｎｎｉｇ Ｃ，Ｅｒｎｓｔ Ｍ，Ｈｕｎｓｍａｎｎ Ｇ，Ｓｃｈｎｉｔｚ Ｈ，Ｆｌｅｄ ＨＤ，Ｇｅｒｄｅｓ Ｊ ｅｔ ａｌ，Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ
ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｌｙ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓｅｓ ｔｒａｎｓｍｉｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ
ｔｏ Ｔ ｃｅｌｌｓ，Ｍｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９９５；１８４：１２９−３４；Ｂｕｒｔｏｎ ＧＦ，Ｍａｓｕｄａ Ａ，Ｈｅａｔｈ ＳＬ，Ｓｍｉｔｈ
ＢＡ，Ｔｅｗ ＪＧ，Ｓｚａｋａｌ ＡＫ，ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ（ＦＤＣ）ｉｎ ｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ：ｈｏｓｔ／ｐａｔｈｏｇｅｎ
ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ １９９７；１５６：１８５−９７；Ｓｍｉｔｈ ＢＳ，Ｇａｒｔｎｅｒ Ｓ，Ｌｉｕ Ｙ，Ｐｅｒｅｌｓｏｎ ＡＳ，Ｓｔｉｌｉａｎａｋｉｓ
ＮＩ，Ｋｅｅｌｅ ＢＦ，Ｆｅｒｋｅｒｉｎｇ ＴＭ，Ｆｅｒｒｅｉｒａ−Ｇｏｎｚａｌｅｚ Ａ，Ｓｚａｋａｌ ＡＫ，Ｔｅｗ ＪＧ，Ｂｕｒｔｏｎ ＧＦ，Ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ
ｏｆ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ＨＩＶ ｏｎ ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００１；１６６：６９０−６）。重要なことにＴａｃｈｅｔｔｉらはリンパ節の胚中心に特異的に存在するＦＤＣはそれらの外側膜突起中にＨＩＶを保有するばかりでなく、細胞質内コンパートメントに感染性ビリオンをかくまっていることを明らかにした（Ｔａｃｃｈｅｔｔｉ
Ｃ，Ｆａｖｒｅ Ａ，Ｍｏｒｅｓｃｏ Ｌ，Ｍｅｓｚａｒｏｓ Ｐ，Ｌｕｚｚｉ Ｐ，Ｔｒｕｉｎｉ Ｍ，Ｒｉｚｚｏ Ｆ，Ｇｒｏｓｓｉ ＣＥ，Ｃｉｃｃｏｎｅ Ｅ（１９７７），ＨＩＶ
ｉｓ ｔｒａｐｐｅｄ ａｎｄ ｍａｓｋｅｄ ｉｎ ｃｙｔｏｐｌａｓｍ ｏｆ ｌｙｍｐｈｎｏｄｅ ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｃｅｌｌｓ，Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ １５０：５３３−４２）。１９９９年ＨｌａｖａｃｅｋらはＨＩＶのこの貯蔵庫集団からの移動についての最初のインシリコモデルを提示した（Ｈｌａｖａｃｅｋ
ＷＳ，Ｗｏｆｓｒｙ Ｃ，Ｐｅｒｅｌｓｏｎ ＡＳ（１９９９），Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ ＨＩＶ−１ ｆｒｏｍ ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ
ｄｕｒｉｎｇ ＨＡＡＲＴ：ｍａｔｈｅｍａｔｉｃａｌ ａｎｄ ｌｙｓｉｓ，ｐｒｏｃ．Ｎａｔ１ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ９６：１４６８１−６）。
【００２５】
他の抗原および感染因子全体の場合のように、ＦＤＣは多くの月の間ＨＩＶを捕捉しそして捕捉したＨＩＶを機能的に貯蔵する。リンパ節においてＨＩＶ−１
ＲＮＡの約９０％が感染後早くも数日から病気の遅い段階においてＦＤＣネットワークが潰れるまでＦＤＣネットワーク内に局在化される。インビボではどの時点においても１００個ほどの少ないＨＩＶをかくまっているＦＤＣがＨＩＶを他の細胞へ伝染させるのに充分である（Ｓｍｉｔｈ
ＢＡ，Ｇａｒｔｎｅｒ Ｓ，Ｌｉｕ Ｙ，Ｐｅｒｅｌｓｏｎ ＡＳ，Ｓｔｉｌｉａｎａｋｉｓ ＮＩ，Ｋｅｅｌｅ ＢＦ，Ｋｅｒｋｅｒｉｎｇ ＴＭ， Ｆｅｒｒｅｉｒａ−Ｇｏｎｚａｌｅｚ
Ａ，Ｓｚａｋａｌ ＡＫ，Ｔｅｗ ＪＥ，Ｂｕｒｔｏｎ ＧＦ，Ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ ｏｆ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ＨＩＶ ｏｎ ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｃ
ｃｅｌｌｓ，Ｊ ｉｍｍｕｎｏｌ ２００１；１６０：６９０−６）。以前にはＦＤＣ表面結合ＨＩＶ／抗体免疫複合体が感染性であると信じられていたが、その後ＨＩＶはＣＤ５４（ＩＣＡＭ−１）および／またはＣＤＩＩａ（ＬＦＡ−１）へ付着した非複合体形でＦＤＣからＴｈ細胞へ実際に移送されることへと変った（Ｆｕｊｉｗａｒａ
Ｍ，Ｔｓｕｎｏｄａ Ｒ，Ｓｈｉｇｅｔａ Ｓ，Ｙｏｋｏｔａ Ｔ，Ｂａｂａ Ｍ，Ｈｕｍａｎ ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｒｅｍａｉｎ ｕｎｉｎｆｅｃｔｅｄ
ａｎｄ ｃａｐｔｕｒｅ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ １ ｔｈｒｏｕｇｈ ＣＤ５４−ＣＤｌｌａ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ，Ｊ
ｖｉｒｏｌ １９９９；７３：３６０３−７）。重要なことに、高度に活性な抗レトロウイルス処置（ＨＡＡＲＴ）においてさえも、ゆっくり複製されるウイルスがＦＤＣ貯蔵庫を補給し得る（Ｓｍｉｔｈ
ＢＡ，Ｇａｒｔｎｅｒ Ｓ，Ｌｉｕ Ｙ，Ｐｅｒｅｌｓｏｎ ＡＳ，Ｓｔｉｌｉａｎａｋｉｓ ＮＩ，Ｋｅｅｌｅ ＢＦ，Ｋｅｒｋｅｒｉｎｇ ＴＭ， Ｆｅｒｒｅｉｒａ−Ｇｏｎｚａｌｅｚ
Ａ，Ｓｚａｋａｌ ＡＫ，Ｔｅｗ ＪＧ，Ｂｕｒｔｏｎ ＧＦ，Ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ ｏｆ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ＨＩＶ ｏｎ ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ
ｃｅｌｌｓ，Ｊ Ｉｍｍｎｏｌ ２００１；１６６：６９０−６）。しかしながらサルにおけるこの知見はリンパ節胚中心内でＦＤＣはＣ−タイプレクチンＤＣ−ＳＩＧＮを発現するというものである（Ｓｃｈｍｅｔｚ
ＡＪ，Ａｌｖａｒｅｚ Ｘ，Ｌａｃｋｎｅｒ ＡＡ，Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｏｆ ＤＣ−ＳＩＧＮ発現 ｃｅｌｌｓ ｉｎ ＳＩＶ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ
ａｎｄ ｕｎｉｎｆｅｃｔｅｄ ｍａｃａｑｕｅｓ，ＡＩＤＳ Ｒｅｓ Ｈｕｍ Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ ２００２；１８：１０２１−９）ことが最近確認され、そしてヒトＦＤＣがＤＣ−ＳＩＧＮおよびその系統学的親類の一つであるＬ−ＳＩＧＮを発現することにおいてヒトへ拡大された（Ｔａｒｕｉｓｈｉ
Ｍ，Ｔｅｒａｓｈｉｍａ Ｋ，Ｄｅｗａｎ Ｚ，Ｙａｍａｍｏｔｏ Ｎ，Ｉｋｅｄａ Ｓ，Ｋｏｂａｙａｓｈｉ Ｄ，Ｅｉｓｈｉ Ｙ，Ｙａｍａｚａｋｉ Ｍ，Ｆｕｒｕｓａｋａ
Ｔ，Ｓｕｇｉｍｏｔｏ Ｍ，Ｉｓｈｉｉ Ｍ，Ｋｉｔａｍｕｒａ Ｎ，Ｋｉｔａｍｕｒａ Ｎ，Ｒｏｌｅ ｏｆ ｆｏｌｌｉｃｎｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｉｎ
ｔｈｅ ｅａｒｌｙ ＨＩＶ−１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ：ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｍｏｄｅｌ ｗｉｔｈｏｕｔ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｙ，Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ
２００４；４８：６９３−７０２）。それ故、ＨＩＶはＣ−タイプレクチンレセプターを有する表面へ再導入される前にそのような細胞内に長時間保持されるから、ＦＤＣは重要なＨＩＶ貯蔵集団である。本発明はここにＣ−タイプレクチンレセプターを介する標的ＦＤＣの細胞内ウイルス貯蔵庫を記載する。
【００２６】
骨髄樹状細胞（ｍＤＣ）：一次Ｔ細胞仲介抗原特異性免疫の排他的刺激剤としてのそれらの役割（すなわち精巧な免疫性のホールマーク）のため、ｍＤＣは天然のアジュバントの名を与えられていた（Ｓｔｅｉｎｍａｎ
ＲＭ，Ｔｈｅ ｄｅｖｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ ｉｔｓ ｒｏｌｅ ｉｎ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｃｉｔｙ，Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９９１；９：２７１−９６；Ｂａｎｃｈｅｒｅａｕ
Ｊ，Ｐａｃｚｅｓｎｙ Ｓ，Ｂｌａｎｃｏ Ｐ ｅｔ ａｌ，Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ：ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ
ａ ｎｅｗ ｐｒｏｍｉｓｅ ｆｏｒ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ，Ａｎｎ ＮＹ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ２００３；９８７：１８０−７）。その状態でそしてＨＩＶの最も自明な標的としてのＴ細胞と共に、これら細胞はＨＩＶ病の病原形成において重要なプレーヤーであり得ることに強いつつある。しかしながら用語ｍＤＣは重複しそして独自の特徴を発現する多数の全身的、局所的および区域的細胞タイプを含む細胞クラスを意味する。ｍＤＣの主なサブ集団は以下のように分類することができる。
【００２７】
（ｉ）固形末梢非リンパ系器官のＭＤＣ
（ｉｉ）固形リンパ系器官および組織のＭＤＣ
（ｉｉｉ）循環血液ＭＤＣ
（ｉｖ）輸入リンパのベールされている細胞
（ｖ）脳脊髄液のＭＤＣ
（Ｐｅｔｅｒｓ ＪＨ，Ｇｉｅｓｌｅｒ Ｒ，Ｔｈｉｅｌｅ Ｂ，Ｓｔｅｉｎｂａｃｈ Ｆ，Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ；ｆｒｏｍ ｏｎｔｏｇｅｎｅｔｉｃ
ｔｏ ｍｙｅｌｏｍｏｎｏｃｙｔｉｃ ｄｅｓｃｅｎｄａｎｓ，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｔｏｄａｙ １９９６；１７：２７３−８；Ｐａｓｈｅｎｋｏｒ Ｍ，Ｈｕａｎｇ ＹＭ，Ｋｏｓｔｕｌａｓ
Ｖ，Ｈａｇｌｕｎｄ Ｍ，Ｓｏｄｅｒｓｔｒｏｍ Ｍ，Ｌｉｎｋ Ｈ，Ｔｗｏ ｓｕｂｓｅｔｓ ｏｆ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ａｒｅ ｐｒｅｓｅｎｔ ｉｎ ｈｕｍａｎ
ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ ｆｌｕｉｄ，Ｂｒａｉｎ ２００１；１２４：４８０−９２）。しかしながらこの５種類の主なグループの各自は種々のサブセットを含んでいる（Ａｕｓｔｙｎ
ＪＭ，Ａｎｔｉｇｅｎ−ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ ｃｅｌｌｓ．Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，Ａｍ
Ｊ Ｒｅｓｐ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ ２０００；１６２−Ｓ１４６−５０）。ラフな推計は数データのｍＤＣフェノタイプが生理的に実在し得ることである。さらにそれらの寿命の一段階においてｍＣＤは与えられた組織を離れ、体全体に広く移動し、そして新しい解剖学的部位に宿ることが知られている（Ｆ
Ｓｔｅｉｎｂａｃｈ，Ｒ Ｇｉｅｓｌｅｒ，Ａ Ｓｏｒｕｒｉ，Ｂ Ｋｒａｕｓｅ ＆ ＪＨ Ｐｅｔｅｒｓ，Ｍｙｏｌｏｄ ＤＣｓ ｄｅｄｕｃｅｄ ｆｒｏｍ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ：ｉｎ−ｖｉｔｒｏ
ａｎｄ ｉｎ−ｖｉｖｏ ｄａｔａ ｓｕｐｐｏｒｔ ａ ｍｏｎｏｃｙｔｉｃ ｏｒｉｇｉｎ ｏｆ ＤＣｓ，Ａｄｖ Ｅｘｐ Ｍｅｄ Ｂｉｏｌ １９９７；４１７：２７−３２）。なお健康人に観察された移動パターンは病気において目だって変化する（Ａｕｓｔｙｎ
ＪＭ，Ａｎｔｉｇｅｎ−ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ ｃｅｌｌｓ．Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，Ａｍ
Ｊ Ｒｅｓｐ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ １６２：Ｓ１４６−５０）。これらの理由のため、ｍＤＣはＨＩＶ病において特異的な役目をピンポイントするための全くわかりにくい主題である。さらにそれらのサブセットの過多のため、ｍＤＣの一または数タイプについて得た結果が細胞クラス全体についての結論の引出しを許容できるかどうかは高度に疑問である。
【００２８】
それにもかかわらず、ｍＤＣがアクセサリ細胞と呼ばれていた時、ＭｕｌｏｌｅｒらはＨＩＶは実際にｍＤＣを標的とし感染させることを始めて証明した（Ｍｕｌｌｅｒ
Ｈ，Ｆａｌｋ Ｓ，Ｓｔｕｔｌｅ ＨＪ，Ａｃｃｅｓｓｏｒｙ ｃｅｌｌｓ ａｓ ｐｒｉｍａｒｙ ｔａｒｇｅｔ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ
ＨＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｐａｔｈｏｌ １９８６；３９：１１６１）。この発見にそのような細胞の異なるタイプを包含する種々のインビトロおよびインビボ研究が続き、ｍＤＣ関連病原局面の多種類に脚光をあびせた（Ｋｎｉｇｈｔ
ＳＣ，Ｍａｃａｔｏｎｉａ ＳＥ，Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｖｉｒｕｓｅｓ，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｌｅｔｔ １９８９；１９：１７７−８１；Ｒａｐｐｅｒｓｂｅｒｇｅｒ
Ｋ，Ｇａｒｔｎｅｒ Ｓ，Ｓｃｈｅｎｋ Ｐ，Ｓｔｉｎｇｌ Ｇ，Ｇｒｏｈ Ｖ，Ｔｓｃｈａｎｃｈｌｅｒ Ｅ，Ｍａｎｎ ＤＬ，Ｗｏｌｆｆ Ｋ，Ｋｏｎｒａｄ Ｋ，Ｐｏｐｏｖｉｃ
Ｍ，Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ’ｃｅｌｌ ａｒｅ ａｎ ａｃｔｕａｌ ｓｉｔｅ ｏｆ ＨＩＶ−１ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ，Ｉｎｔｅｒｖｉｒｏｌｏｇｙ
１９８８；２９：１８５−９４；Ｌａｎｇｈｏｆｆ Ｅ，Ｔｅｒｗｉｌｌｉｇｅｒ ＥＦ，Ｂｏｓ ＨＪ，Ｋａｌｌａｎｄ ＫＨ，Ｐｏｚｎａｎｓｋｙ ＭＣ，Ｂａｃｏｎ ＯＨ，Ｈａｓｅｌｔｉｍｅ
ＷＡ，Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ １ ｉｎ ｐｒｉｍａｒｙ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ
ｃｕｌｔｕｒｅ，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １９９１；８８：７９９８−８００２；Ｋａｌｔｅｒ ＤＣ，Ｇｅｎｄｅｌｍａｎ ＨＥ，Ｍｅｌｔｚｅｒ
ＭＳ，Ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ，ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，ａｎｄ Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ
ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，Ｄｅｒｍａｔｏｌ Ｃｌｉｎ １９９１；９：４１５−２８；Ｄｕｓｓｅｒｒｅ Ｎ，Ｄｅｚｕｔｔｅｒ−Ｄａｍｂｕｙａｎｔ Ｃ，Ｍａｌｌｅｒ Ｆ，Ｄｅｌｏｒｍｅ
Ｐ，Ｐｈｉｌｉｔ Ｆ，Ｅｂｅｒｓｏｌｄ Ａ，Ｄｅｓｇｒａｎｇｅｓ Ｃ，Ｔｈｉｖｏｌｅｔ Ｊ，Ｓｃｈｍｉｔｔ Ｄ，Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ＨＩＶ−１ ｅｎｔｒｙ ａｎｄ
ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ ｃｅｌｌｓ ｍａｙ ｃｌａｒｉｆｙ ｔｈｅ ＨＩＶ−１ ｇｅｎｏｍｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｂｙ ＰＣＲ ｉｎ
ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ ｏｆ ｓｅｒｏｐｏｓｉｔｉｖｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ，Ｊ Ｉｎｖｅｓｔ Ｄｅｒｍａｔｏｌ １９９２；９９：９９Ｓ−１０２Ｓ；Ｃｈｅｈｉｍｉ Ｊ，Ｐｒａｋａｓｈ
Ｋ，Ｓｈａｎｍｕｇａｎ Ｖ，Ｃｏｌｌｍａｎ Ｒ，Ｊａｃｋｓｏｎ ＳＪ，Ｂａｎｄｙｏｐａｄｈｙａｎ Ｓ，Ｓｔａｒｒ ＳＥ，ＣＤ４−ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ
ｏｆ ｈｕｍａｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｄｅｎｄｓｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ
ｖｉｒｕｓ ｔｙｐ １，Ｊ Ｇｅｎ ｖｉｒｏｌ １９９３；７４：１２７７−８５；Ｈｏｓｍａｌｉｎ Ａ，Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄｂｌｏｏｄ
ａｎｄ ＨＩＶ−１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，Ｐａｔｈｏｌ Ｂｉｏｌ（Ｐａｒｉｓ）１９９５；４３：８８９−９６；Ｄｅｚｕｔｔｅｒ−Ｄａｍｂｕｙａｎｔ Ｃ，Ｃｈａｒｂｏｎｎｉｅｒ
ＡＳ，Ｓｃｈｎｉｔｔ Ｄ，Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ＨＩＶ−１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｖｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ，Ｐａｔｈｏｌ
Ｂｉｏｌ（Ｐａｒｉｓ）１９９５；４３：８８２−８；Ｚａｍｂｒｕｎｏ Ｇ，Ｇｉａｎｅｔｔｉ Ａ，Ｂｅｒｔａｚｚｏｎｉ Ｕ，Ｇｉｒｏｌｏｍｏｎｉ Ｇ，Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ
ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ＨＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｔｏｄａｙ １９９５；１６：５２０−４；Ｇｒｏｕａｒｄ Ｇ，Ｃｌａｒｋ ＥＡ，Ｒｏｌｅ ｏｆ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ
ａｎｄ ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ＨＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｉｎｎｕｍｏｌ
１９９７；９：５６３−７；Ｃｈａｒｔｏｎ−Ｂａｉｎ ＭＣ，Ｔｅｒｒｉｓ Ｂ，Ｄａｕｇｅ ＭＣ，Ｍａｒｃｈｅ Ｃ，Ｗａｌｋｅｒ Ｆ，Ｂｏｕｃｈａｕｄ Ｏ，Ｘｅｒｒｉ
Ｌ，Ｐｏｔｅｔ Ｆ，Ｒｅｄｕｃｅｄ ｍｅｍｂｅｒ ｏｆ Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｏｅｓｏｐｈａｇｅａｌ ｍｕｃｏｓａ ｆｒｏｍ ＡＩＤＳ ｐａｔｉｅｎｔｓ，Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ
１９９９；３４：３９９−４０４）。
【００２９】
これらの早い年のコースにおいて、ＨＩＶ ＲＮＡとプロウイルスＤＮＡの両方がｍＤＣ中に検出できることが明らかになった（Ｇｉａｎｎｅｔｔｉ Ａ，Ｚａｍｂｒｕｎｏ
Ｇ，Ｃｉｍａｒｅｌｌｉ Ｍ，Ｍａｒｃｏｎｉ Ａ，Ｎｅｇｒｏｎｉ Ｍ，Ｇｉｒｏｌｏｍｏｎｉ Ｇ，Ｂｅｒｔａｚｚｏｎｉ Ｕ，Ｄｉｒｅｃｔ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ
ＨＩＶ−１ ＲＮＡ ｉｎ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ＨＩＶ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｐａｔｉｅｎｔｓ，Ｊ．Ａｃｑｉｒ Ｉｍｍｕｎｅ
Ｄｅｆｉｃ Ｓｙｎｄｒ １９９３；６：３２９−３３；Ｐａｔｔｅｒｓｏｎ Ｓ，Ｒｏｂｅｒｔｓ ＭＳ，Ｅｎｇｌｉｓｈ ＮＲ，Ｍａｃａｔｏｎｉａ ＳＥ，Ｇｏｍｐｅｌｓ
ＭＮ，Ｐｉｎｃｈｉｎｇ ＡＪ，Ｋｎｉｇｈｔ ＳＣ，Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ＨＩＶ ＤＮＡ ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ
ｏｆ ＨＩＶ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ，Ｒｅｓ Ｖｉｒｏｌ １９９４；１４５：１７１−６）。しかしながらＨＩＶ保有細胞としてのｍＤＣの役目に関する現在の理解へ導く肝心の発見はＲｏｓｓｉらがそのような細胞はＣ−タイプレクチンを発現することを特定できた研究へ遡る（Ｒｏｓｓｉ
Ｇ，Ｈｅｖｅｋｅｒ Ｎ，Ｆｈｉｅｌｅ Ｂ，Ｇｅｌｄｅｒｂｌｏｍ Ｈ，Ｓｔｅｉｎｂａｃｈ Ｆ，Ｄｅｖｏｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａ Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ ｃｅｌｌ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ
ｆｒｏｍ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｌｅｔｔ １９９２；３１：１８９−９７）。８年後Ｔｅｕｎｉｓ Ｇｅｉｊｔｅｎｂｅｅｋ，Ｙｖｅｔｔｅ
ｖａｎ Ｋｏｏｙｋらはこの分子構造を特徴化し、樹状細胞特異性細胞内接着分子（ＩＣＡＭ）−３−グラビングノンインデクリン（ＤＣ−ＳＩＧＮ；ＣＤ２０９）と名付け（Ｇｅｉｊｔｅｎｂｅｅｋ
ＴＢ，Ｔｒｅｎｓｍａ Ｒ，ｖａｎ Ｖｌｉｅｔ ＳＪ，ｖａｎ Ｄｕｉｊｎｈｏｖｅｎ ＧＣ，Ａｄｅｍａ ＧＪ，ｖａｎ Ｋｏｏｙｋ Ｙ，Ｆｉｇｄｏｒ ＣＧ，Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ
ｏｆ ＤＣ−ＳＩＧＮＲ，ａ ｎｏｖｅｌ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＩＣＡＭ−３ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｔｈａｔ ｓｕｐｐｏｒｔｓ ｐｒｉｍａｒｙ
ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ，Ｃｅｌｌ ２０００；１００：５７５−８５）、そしてＨＩＶのｍＤＣ−Ｔ−細胞移行におけるＤＣ−ＳＩＧＮの役目を証明した（Ｇｅｉｊｔｅｎｂｅｅｋ
ＴＢ，Ｋｗｏｎ ＤＳ，Ｔｏｒｅｎｓｍａ Ｒ，ｖａｎ Ｖ１ｉｅｔ ＳＪ，ｖａｎ Ｄｕｉｊｎｈｏｖｅｎ ＧＣ，Ｍｉｄｄｅｌ Ｊ，Ｃｏｍｅｌｉｓｓｅｎ ＩＬ，Ｎｏｔｔｅｔ
ＨＳ，Ｋｅｗａｌ Ｒａｍａｎｉ ＶＮ，Ｌｉｔｔｍａｎ ＤＲ，Ｆｉｇｄｏｒ ＣＧ，ｖａｎ Ｋｏｏｙｋ Ｙ，ＤＣ−ＳＩＧＮ，ａ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ
ＨＩＶ−１−ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ｔｈａｔ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｔｒａｎｓ−ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ ｃｅｌｌｓ，Ｃｅｌｌ ２０００；１００：５８７−９７）。ｍＤＣの必須の役割を知ってこの発見はＣ−タイプレクチンに多数の感染病研究者をもっと密接に着目させた。その間ＤＣ−ＳＩＧＮは未熟ｍＤＣすなわちＴ−細胞指令のために成熟するリンパ系部位へ移住する前に末梢非リンパ系組織に住む樹状細胞によって最も高度に発現されることへ転じた（Ｓｏｉｌｌｅｕｘ
ＥＪ，Ｍｏｒｒｉｓ ＬＳ，Ｌｅｓｌｉｅ Ｇ，Ｃｈｅｈｉｍｉ Ｊ，Ｌｕｏ Ｑ，Ｌｅｖｒｏｎｅｙ Ｅ，Ｔｒｏｗｓｄａｌｅ Ｊ，Ｍｏｎｔａｎｅｒ ＬＪ，Ｄｏｍｓ ＲＷ，Ｗｅｉｓｓｍａｎ
Ｄ，Ｃｏｌｅｍａｎ Ｎ，Ｌｅｅ Ｂ，Ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ ａｎｄ ｉｎｄｕｃｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＤＣ−ＳＩＧＮ ｏｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ
ａｎｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｓｕｂｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ ｓｉｔｕ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ，Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ ２００２；７１：４４５−５７）。感染の場合、それ故すべての末梢器官は因子を固定化、内部化および消化するためのメカニズムですぐれて供給されるｍＤＣ段階を特徴とする。しかしながら貯蔵庫生成はそのような因子（例えばＨＩＶ）細胞内分解する能力を失わせることができず、そしてそのため高度に感染性の形のままである時に起こる。Ｃ−タイプレクチンは一般にこのプロセスにおいて決定的役目を果たし、それによりそのようなレセプターを発現する細胞中にエンドソーム／細胞内病原（例えばＨＩＶ）の貯蔵庫の確立を許容する（Ｇｉｅｓｌｅｒ
ＲＫ，Ｍａｒｑｕｉｔａｎ Ｇ，Ｈａｈｎ ＭＪ，Ｐｅｒｄｏｎ ＬＡ，Ｄｒｉｅｓｓｅｎ ＷＨ，Ｓｕｌｌｉｖａｎ ＳＭ，Ｓｃｏｌａｒｏ ＭＪ，ＤＣ−ＳＩＧＮ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ
ｌｉｐｏｓｏｍａｌ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｍｙｅｌｏｉｄ
ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ＨＩＶ ｄｉｓｅａｓｅ，Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００４；５９：４１５−２４；およびその中の参考文献）。要するに感染因子はそのホスト細胞をどんな免疫学的アタックからもかくされる“トロイの馬”に似た貯蔵庫中へ転ずる。
【００３０】
ｍＤＣのうち、貯蔵庫生成（病原体保有）は定量的に（しかし専らではないが）皮膚ｍＤＣにおいて起こる（Ｓｉｍｏｎｉｔｃｈ Ｉ，Ｇｅｕｓａｕ Ａ，Ｃｈｏｔｔ
Ａ，Ｊｕｒｅｃｋａ Ｗ，Ｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｎｄｒｉｔｅ ｃｅｌｌｓ ａｒｅ ｍａｉｎ ｔａｒｇｅｔｓ ｉｎ ａｃｕｔｅ ＨＩＶ−１−ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，Ｍｏｄ
Ｐａｔｈｏｌ ２０００；１３：１２３２−７；Ｔｕｒｖｉｌｌ ＳＧ，Ｃａｍｅｒｏｎ ＰＵ，Ｈａｎｄｌｅｙ Ａ，Ｌｉｎ Ｇ，Ｐｏｈｌｍａｎｎ Ｓ，Ｄｏｍｓ ＲＷ，Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ
ＡＬ，Ｄｉｖｅｒｓｔｙ ｏｆ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｂｉｎｄｉｎｇ ＨＩＶ ｏｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ｓｕｂｓｅｔｓ，Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００２；３：９７５−８３）。しかしながら問題はそのような末梢ｍＤＣがリンパ系器官へ移住するときに拡大する。ここでは“トロイ”ＨＩＶ−搭載ｍＤＣが正しくＴ細胞の多数の中へ到達する。一旦成熟すると、ｍＤＣはそのような細胞とタイトな免疫学的シナプスを確立し、そのためｍＤＣのＣＴＬレセプターはシストランスファーおよびイントランス（またはトランス）感染として知られるプロセスによってＨＩＶをＴ細胞へ最も容易に渡すことができる（Ｔｕｒｖｉｌｌｅ
Ｓ，Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ Ｊ，Ｃａｍｅｒｏｎ Ｐ，Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ＡＬ，Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ
ｉｎ ＨＩＶ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｓｉｓ，Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ ２００３；３７：７１０−８，Ｅｐｕｂ ２００３ Ｓｅｐ ０２において評論）Ｇｅｉｊｔｅｎｂｅｅｋ，ｖａｎ
Ｋｏｏｙｋらは最近ＤＣ−ＳＩＧＮがｍＤＣからＴ細胞へ感染的に渡すことの直接の証明を提供した（Ａｒｒｉｇｈｉ ＪＦ，Ｐｉｏｎ Ｍ，Ｗｉｚｎｅｒｏｗｉｃｚ Ｍ，Ｇｅｉｊｔｅｎｂｅｅｋ
ＴＢ，Ｇａｒｃｉａ Ｅ，Ａｂｒａｈａｍｓ Ｓ，Ｌｅｕｂａ Ｆ，Ｄｕｔｏｉｔ Ｖ，Ｄｕｃｒｅｙ−Ｒｕｎｄｑｕｉｓｔ Ｏ，ｖａｎ Ｋｏｏｙｋ Ｙ，Ｔｒｏｎｏ Ｄ，Ｐｉｇｕｅｔ
Ｖ，Ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ｏｆ ＤＣ−ＳＩＧＮ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎｂｉｔｓ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ
ｖｉｒｕｓ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｆｒｏｍ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｔｏ Ｔ ｃｅｌｌｓ，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ ２００４；７８：１０８４８−５５）。しかしながら他のＣＴＬレセプター、すなわちランゲリン（ＣＤ２０７；未熟上皮および粘膜ランゲルハンスタイプｍＤＣによって専ら発現される）では、マンノースレセプター（ＭＲ，ＣＤ２０６：皮膚ｍＤＣによって目立って発現される）、および多分ＤＥＣ−２０５（ＣＤ２０５）は少なくとも等しく重要である（Ｔｕｒｖｉｌｌｅ
ＳＧ，Ｃａｍｅｒｏｎ ＰＵ，Ｈａｎｄｌｅｙ Ａ，Ｌｉｎ Ｇ，Ｐｏｈｌｍａｎｎ Ｓ，Ｄｏｍｓ ＲＷ，Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ＡＬ，Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｒｅｃｅｐｔｏｒ
ｂｉｎｄｉｎｇ ＨＩＶ ｏｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ｓｕｂｓｅｔｓ，Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００２；３：９７５−８３；ｖａｎ Ｋｏｏｙｋ Ｙ，Ｇｅｉｊｔｅｎｂｅｅｋ
ＴＢ，ＤＣ−ＳＩＧＮ：ｅｓｃａｐｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｆｏｒ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ，Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００３；３：６９７−７０９）。２００１年に他のｍＤＣ−発現Ｃ−タイプレクチン、ＤＬＥＣが特徴化された（Ａｒｃｅ
Ｉ，Ｒｏｄａ−Ｎａｖａｒｒｏ Ｐ，Ｍｏｎｔｏｙａ ＭＣ，Ｈｅｒｎａｎｚ−Ｆａｌｃｏｎ Ｐ，Ｐｕｉｇ−Ｋｒｏｇｅｒ Ａ，Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ−Ｒｕｉｚ Ｅ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
ａｎｄ ｇｅｎｏｍｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ＤＬＥＣ，ａ ｎｏｖｅｌ ｍｅｍｂｅｒ ｏｆ ｔｈｅ Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ
ｇｅｎｅ ｆａｍｉｌｙ ｐｒｅｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｏｎ ｍｏｎｏｃｙｔｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，Ｅｕｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ
２００１；３１：２７３３−４０）。その貯蔵庫生成における可能性ある役目は未だ検討されていないが、しかしこれまで調べられたすべての他のＣＴＬレセプターについて検証されたことと似ているらしい。最後にＨＩＶをＴ細胞へ移送する時、ウイルス複製はｍＤＣ自体中での受け渡しの間に早く開始され得る（Ｇｒａｎｅｌｌｉ−Ｐｉｐｅｒｎｏ
Ａ，Ｆｉｎｋｅｌ Ｖ，Ｄｅｌｇａｄｏ Ｅ，Ｓｔｅｉｎｍａｎ ＲＭ，Ｖｉｒｕｓ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｂｅｇｉｎｓ ｉｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｄｕｒｉｎｇ
ｔｈｅ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｏｆ ＨＩＶ−１ ｆｒｏｍ ｍａｔｕｒｅ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｔｏ Ｔ ｃｅｌｌｓ，Ｃｕｒｒ Ｂｉｏｌ １９９９：１４：２１−９）。
【００３１】
最も危険なそして有毒なタイプＨＩＶ貯蔵細胞として根付かせるためのｍＤＣのいくつかの決定的ファクターが存在する。第１にこれらの細胞はサブセットに依存して数日から１日以上の間の範囲にわたる高い回転率を有する（Ｒｕｅｄｌ
Ｃ，Ｋｏｅｂｅｌ Ｐ，Ｂａｃｋｍａｎｎ Ｍ，Ｈｅｓｓ Ｍ，Ｋａｒｊａｌａｉｎｅｎ Ｋ，Ａｎａｔｏｍｉｃａｌ ｏｒｉｇｉｎ ｏｆ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ
ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｓ ｔｈｅｉｒ ｌｉｆｅ ｓｐａｎ ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅｓ，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０００；１６５：４９１０−６；Ｋａｍａｔｈ
ＡＴ，Ｐｏｏｌｅｙ Ｊ，Ｏ’Ｋｅｅｆｆｅ ＭＡ，Ｖｒｅｍｅｃ Ｄ，Ｚｈａｎ Ｙ，Ｌｅｗ ＡＭ，Ｄ’Ａｍｉｃｏ Ａ，Ｗｕ Ｌ，Ｔｏｕｇｈ ＤＦ，Ｓｈｏｒｔｍａｎ Ｋ，Ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ，ａｎｄ
ｔｕｒｎｏｖｅｒ ｒａｔｅ ｏｆ ｍｏｕｓｅ ｓｐｌｅｅｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０００； １６５：６７６２−７０；Ｋａｍａｔｈ
ＡＴ，Ｈｅｎｒｉｓ，Ｂａｔｔｙｅ Ｆ，Ｔｏｕｇｈ ＤＦ，Ｓｈｏｒｔｍａｎ Ｋ，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｋｉｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ ｌｉｆｅｓｐａｎ ｏｆ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ
ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｍｏｕｓｅ ｌｙｐｈｏｉｄ ｏｒｇａｎｓ，Ｂｌｏｏｄ ２００２；１００：１７３４−４１）。このことはｍＤＣの比較的頻繁なそして重複する新発生が逐次ＨＩＶによって感染されることができ、細胞内貯蔵庫を生成し、そして低い率で補充され、何年も持続し、そして比較してウイルスの比較的低い量だけを取り込むタイプの貯蔵細胞よりももっと多量のウイルスを移送することを意味する。第２に、一旦成熟するとｍＤＣはリンパ系器官の副皮質区域に特異的に居住し、そこでＴ細胞応答を刺激するためＴリンパ球と極めて高い周波数において物理的にタイトに相互作用する（Ｓｔｅｉｎｍａｎ
ＲＭ，Ｔｈｅ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ ｉｔｓ ｒｏｌｅ ｉｎ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｃｉｔｙ， Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９９１；９：２７１−９６；Ｂａｎｃｈｅｒｅａｎ
Ｊ，Ｐａｃｚｅｓｎｙ Ｓ，Ｂｌａｎｃｏ Ｐ ｅｔ ａｌ，Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ：ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｒｓ ｏｆ Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ
ａ ｎｅｗ ｐｒｏｍｉｓｅ ｆｏｒ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ，Ａｎｎ ＮＹ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ２００３；９８７：１８０−７）。機能的必要性のうち、全身Ｔ細胞の約９９％がこのように全く同じサブ組織学的部位に居住する。興味あることにＨＩＶ感染Ｔ細胞の約９９％もこれら部位に見出される（Ｓｎｅｄｅｃｏｒ
ＳＪ，Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｔｈｒｅｅ ｋｉｎｅｔｉｃ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ＨＩＶ−１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ
ｏｆ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，Ｊ Ｔｈｅｏｒ Ｂｉｏｌ ２００３；２２１：５１９−４１）。
【００３２】
エンドソーム中へのＨＩＶの内部化は未熟および成熟ｍＤＣの両方において潜在的に異なる結果をもっているけれども委託されたステップである。
（ｉ）ｍＤＣ発達の両方の段階において、エンドソームはそこからウイルスが二次的Ｔ−細胞感染部位としてｍＤＣ−Ｔ−細胞へ指向される出発点である（ＭｃＤｏｎａｌｄ
Ｄ，Ｗｕ Ｌ，Ｂｏｈｋｓ ＳＭ，Ｋｅｗａｌ Ｒａｍａｎｉ ＶＮ，Ｕｎｕｔｍａｚ Ｄ，Ｈｏｐｅ ＴＪ，Ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ ｏｆ ＨＩＶ ａｎｄ ｉｔｓ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ
ｔｏ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ−Ｔ ｃｅｌｌ ｊｕｎｃｔｉｏｎｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２００３；３００：１２９５−７，Ｅｐｕｂ ２００３ Ｍａｙ ０１；Ｔｕｒｖｉｌｌ
ＳＧ，Ｓａｎｔｏｓ ＪＪ，Ｆｒａｎｋ Ｉ，Ｃａｍｅｒｏｎ ＰＵ， Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ Ｊ，Ｍｉｒａｎｄａ−Ｓａｋｓｅｎａ Ｍ，Ｄａｂｌｅ Ｊ，Ｓｔｏｓｓｅｌ Ｈ，Ｒｏｍａｎｉ
Ｎ，Ｐｉａｔａｋ Ｎ Ｊｒ，Ｌｉｆｓｏｎ ＪＤ，Ｐｏｐｅ Ｍ，Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ Ａｌ，Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｕｐｔａｋｅ，ｔｕｒｎｏｖｅｒ，ａｎｄ
２−ｐｈａｓｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，Ｂｌｏｏｄ ２００４；１０３：２１７０−９，Ｅｐｕｂ ２００３ Ｎｏｖ ２０）。
（ｉｉ）しかしながら樹脂細胞をその未熟段階で感染させる時、ＨＩＶはそのような細胞をそのプロウイルスＤＮＡを統合するように強制し得る。成熟した時ｍＤＣは次にビリオンを新たに生産することをスタートし得る（Ｔｕｒｖｉｌｌｅ
ＳＧ，Ｓａｎｔｏｓ ＪＪ，Ｆｒａｎｋ Ｉ，Ｃａｍｅｒｅｏｎ ＰＵ，Ｗｉｌｌｋｉｎｓｏｎ Ｊ，Ｍｉｒａｎｄａ−Ｓａｋｓｅｎａ Ｍ，Ｄａｂｌｅ Ｊ，Ｓｔｏｓｓｅｌ
Ｈ，Ｒｏｍａｎｉ Ｎ，Ｐｉａｔｋ Ｍ Ｊｒ，Ｌｉｆｓｏｎ ＪＤ，Ｐｏｐｅ Ｍ，Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ＡＬ，Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｕｐｔａｋｅ，ｔｕｒｎｏｖｅｒ，ａｎｄ
２−ｐｈａｓｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，Ｂｌｏｏｄ ２００４；１０３：２１７０−９，Ｅｐｕｂ ２００３ Ｎｏｖ ２０）。
【００３３】
ここに記載された本発明は、ＨＩＶの細胞内回転扉としてエンドソームコンパートメントの治療的ターゲティングにより両方のプロセスを防止する。本発明はまた、すべてのフェノタイプ多様性を橋かけする公分母としてｍＤＣが豊富にＣ−タイプレクチンレセプターをディスプレーする時に同調してターゲットする。
【００３４】
マクロファージ：マクロファージは、それらの食作用能力、サイトカインを生産し、そしてＴ細胞による二次抗原特異性免疫応答を刺激するために抗原を処理／提供する故に適応および特異性免応答において重要である（Ｎｏｒｔｈ
ＲＪ，Ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ ｏｆ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ ａｎｄ ｆｉｘｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｔｏ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
ｏｆ ｃｅｌｌ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｍｍｕｎｉｔｙ ｔｏ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １９７０；１３２：５２１−３０；Ｂａｎｃｒｏｆｔ ＧＪ，Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ
ＲＤ，Ｕｎａｎｕｅ ＥＲ，Ｎａｔｕｒａｌ ｉｍｍｕｎｉｔｙ：ａ Ｔ−ｃｅｌｌ−ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｐａｔｈｗａｙ ｏｆ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ，ｄｅｆｉｎｅｄ
ｉｎ ｔｈｅ ｓｃｉｄ ｍｏｕｓｅ，Ｉｍｍｕｎｏ１ Ｒｅｖ １９９１；１２４：５−２４）。ヒト免疫系の主な細胞集団として、マクロファージはＨＩＶによって標的とされ、ウイルス貯蔵庫として利用される（Ｗａｈｌ
ＳＭ，Ｏｒｅｎｓｔｅｉｎ ＪＭ，Ｓｍｉｔｈ ＰＤ，Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ＨＩＶ−１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，１９９６：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｐｌｅｎｕｍ）。重要なことにマクロファージは、これら細胞中で最初に特徴化され、そして元々“マクロファージマンノースレセプター”と呼ばれたマンノースレセプターＣ−タイプを豊富に発現する（Ｂａｒｒａｔｔ
Ｇ，Ｔｅｎｕ ＪＰ，Ｙａｐｏ Ａ，Ｐｅｔｉｔ ＪＦ，Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｓｏｍｅｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ
ｍａｎｎｏｓｙｌａｔｅｄ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｓ ｃａｐａｂｌｅ ｏｆ ｔａｒｇｅｔｔｉｎｇ ｄｒｕｇｓ ｔｏ ｍｉｃｒｏｐｈａｇｅ，Ｂｉｏｃｈｉｍ ｂｉｏｐｈｙｓ
Ａｃｔａ １９８６：８６２：１５３−６４）。小膠のような区域的に限られたマクロファージ（Ｔａｋａｈａｓｈｉ Ｋ，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｏｆ ｍａｒｏｐｈａｒｇｅ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｃｅｌｌｓ：ｈｉｓｔｒｏｒｉｃａｌ ｒｅｖｉｅｗ ａｎｄ ｃｕｒｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｐｔｓ，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ
Ｈｅｍａｔｏｐａｔｈｏｌ ２００１；４１：１−３３）もこのレセプターを発現する（Ｌｉｎ Ｙ，Ｌｉｕｌｔ，Ｋｉｍ ＢＯ，Ｇａｔｔｏｎｅ ＶＨ，Ｌｉ Ｊ，Ｎａｔｈ
Ａ，Ｂｌｕｍ Ｊ，ＨｅＪＪ，ＣＤ−４ Ｉｍｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｓｔｒｏｃｙｔｅｓ ｂｙ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ
ｖｉｒｕｓ ｔｙｐ １：ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ ｆｏｒ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｍａｎｎｏｓｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，Ｊ Ｖｉｒｏｌ ２００４；７８：４１２０−３３，Ｅｒｒａｔｕｍ
ｉｎ Ｊ Ｖｉｒｏｌ ２００４；７８：７２８８−９）。マンノースレセプターへの結合はＤＳ−ＳＩＧＮ陰性マクロファージとのＨＩＶの初期会合の６０％を数え、これはＨＩＶのＴ細胞への受け渡しによって検討されている。Ｔ細胞への直接のＨＩＶ受け渡しは急速なＨＩＶのマンノースレセプター仲介内部化のため約２４時間まで生起し、このためウイルスを細胞内感染性貯蔵庫へシフトする（Ｎｇｕｙｅｎ
ＤＧ，Ｈｉｌｄｒｅｔｈ ＪＥ，Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｍａｎｎｏｓｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｉｎ ｔｈｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｎｄ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ
ｏｆ ＨＩＶ ｂｙ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ，Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００３；３３：４８３−９３）。特に二次的Ｔ細胞刺激におけるマクロファージの決定的関与はそれらをビリオンのＴ細胞への受け渡しのための危険な貯蔵集団にする。興味あることに、他のＣ−タイプレクチンであるＤＣ−ＳＩＧＮ（これは骨髄樹状細胞において目立った受け渡し因子である。上を見よ）の発現もサイトカインの存在下マクロファージ中に誘発し得る。骨髄樹状細胞中と同様に、ＤＣ−ＳＩＧＮは追加のビリオンへ結合し、それらをＴ細胞へ渡すことができる（Ｃｈｅｈｉｍｉ
Ｊ，Ｌｕｏ Ｑ，Ａｚｚｏｎｉ Ｌ，Ｓｈａｗｖｅｒ Ｌ，Ｎｇｏｕｂｉｌｌｙ Ｎ，Ｊｕｎｅ Ｒ，Ｊｅｒａｎｄｉ Ｇ，Ｆａｒａｂｏｕｇｈ Ｍ，Ｍｏｎｔａｎｅｒ ＬＪ，ＨＩＶ−１
ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｃｙｔｏｋｉｎｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＤＣ−ＳＩＧＮ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｍｏｎｏｃｙｔｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ
ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ，Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ ２００３；７４：７５７−６３，Ｅｐｕｂ ２００３ Ａｕｇ ２１）。マクロファージにおいては、ＤＣ−ＳＩＧＮのための貯蔵庫生成役割は未だ検討されていないが、しかし典型的にはＣ−タイプレクチンのための分子の細胞内部化サイクルのためのであるらしく、そして他の細胞において証明されている。区域サブセットに応じてマクロファージに数ヶ月から数年の寿命を有する（Ｔａｋａｈａｓｈｉ
Ｋ，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｃｅｌｌｓ：ｈｉｓｔｒｉｃａｌ ａｎｄ
ｃｕｒｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｐｔｓ，Ｊ Ｅｘｐ Ｈｅｍａｔｏｐａｔｈｏｌ ２００４；４１：１−３３）。ＨＩＶ−感染マクロファージはアポトーシスを受けることができることが知られているが、そのような期間はマクロファージに限定されたＨＩＶ貯蔵庫の一部について予見することができ（Ｗａｎｇ
Ｘ，Ｌｅｗｉｓ ＤＥ，ＣＤ８６ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ ｗｉｔｈ ａｍｏｕｎｔｓ ｏｆ ＨＩＶ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ
ｉｎ ｖｉｔｒｏ，Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ ２００１；６９：４０５−１３）、そしてこのためもっと早く時期に死滅するであろう。ここに記載された本発明は、そのような細胞は本質的にそして能力的にＣ−タイプレクチンを発現するからこのセルクラスを同様に標的とする。
【００３５】
プラズマサイトイド樹状細胞（ｐＣＤ）：ヒトにおいてｐＣＤ（ａ．ｋ．ａ．プラズマサイトイド単球；プラズマサイコイドＴ細胞）は天然のタイプ−Ｉインターフェロン（ＩＦＮ−α／β）生産細胞として行動し、そして重要な第１線抗ウイルスレスポンダーである（Ｂｊｏｒｃｋ
Ｐ，Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｌａｓｍａｃｙｔｏｉｄ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｆｒｏｍ Ｆｌｔ３ ｌｉｇａｎｄ
ａｎｄ ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅｓ−ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｃｏｌｏｎｙ−ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ−ｔｒｅａｔｅｄ ｍｉｃｅ，Ｂｌｏｏｄ ２００１；９８：３５２０−６）。それらは脳脊髄液を含んでいるけれどもすべての組織における小集団を代表し、しかしなお個体発生的に争われている（Ｂａｎｃｈｅｒｅａｕ
Ｊ，Ｐｕｌｎｄｒａｎ Ｂ，Ｓｔｅｉｎｍａｎ Ｒ，Ｐａｌｕｃｋａ Ｋ，Ｗｉｌｌ ｔｈｅ ｍａｋｉｎｇ ｏｆ ｐｌａｓｍａｃｙｔｏｉｄ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ
ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｈｅｌｐ ｕｎｒａｖｅｌ ｔｈｅｉｒ ｍｙｓｔｅｒｉｅｓ？，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２０００；１９２：Ｆ３９−４４；Ｐａｃｈｅｎｋｏｖ Ｍ，Ｈｕａｎｇ
ＹＭ，Ｋｏｓｔｕｌａｓ Ｖ，Ｈａｇｌｕｎｄ Ｍ，Ｓｏｄｅｒｓｔｒｏｍ Ｍ，Ｌｉｎｋ Ｈ，Ｔｗｏ ｓｕｂｓｅｔｓ ｏｆ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ａｒｅ ｐｒｅｓｅｎｔ
ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ ｆｌｕｉｄ，Ｂｒａｉｎ ２００１；１２４：４８０−９２）。分化したｐＤＣ中のＣ−タイプレクチンの最初の研究はＤＣ−ＳＩＧＮでなく血液樹状細胞抗原−２（ＢＤＣＡ−２）を発現することを示した（Ｄｚｉｏｎｅｋ
Ａ，Ｓｏｈｍａ Ｙ，Ｎａｇａｆｕｎｅ Ｊ，Ｃｅｌｌａ Ｍ，Ｃｏｌｏｎｎａ Ｍ，Ｆａｃｃｈｅｔｔｉ Ｆ，Ｇｕｎｔｈｅｒ Ｇ，Ｊｏｈｎｓｔｏｎ Ｉ，Ｌａｎｚａｖｅｃｃｈｉａ
Ａ，Ｎａｇａｓａｗａ Ｔ，Ｏｋａｄａ Ｔ，Ｖｅｒｍｉ Ｗ，Ｗｉｎｋｅｌ Ｇ，Ｙａｍａｍｏｔｏ Ｔ，Ｚｙｓｋ Ｍ，Ｙａｍａｇｕｃｈｉ Ｙ，Ｓｃｈｍｉｔｚ Ｊ，ＢＤＣＡ−２，ａ
ｎｏｖｅｌ ｐｌａｓｍａｃｙｔｏｉｄ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｔｙｐｅ II Ｃ−ｔｙｐｅ
ｌｅｃｔｉｎ，ｍｅｄｉａｔｅｓ ａｎｔｉｇｅｎ ｃａｐｔｕｒｅ ａｎｄ ｉｎ ａ ｐｏｔｅｎｔ ｉｎｂｉｔｏｒ ｏｆ ｉｎｔｅｒｆｅｒ ｏｎ α／β ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００１；１９４：１８２３−３４；Ｐａｔｔｅｒｓｏｎ
Ｓ，Ｒａｅ Ａ，Ｈｏｃｋｅｙ Ｎ，Ｇｉｌｍｏｕｒ Ｊ，Ｇｏｔｃｈ Ｆ，Ｐｌａｓｍａｃｙｔｏｉｄ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ａｒｅ ｈｉｇｈｌｙ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ
ｔｏ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｌｅａｓｅ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｖｉｒｕｓ，Ｊ Ｖｉｒｏｌ
２００１；７５：６７１０−３）。しかしながら胎児および成人の両方において、ｐＤＣ２と名付けられた血液起源ｐＤＣ前駆体の小さいサブセットはＢＤＣＡ−ＳＩＧＮ二重陽性である（Ｓｏｉｌｌｅａｕｘ
ＥＪ，Ｍｏｒｒｉｓ ＬＳ，Ｌｅｓｌｉｅ Ｇ，Ｃｈｅｈｉｍｉ Ｊ，Ｌｕｏ Ｑ，Ｌｅｖｒｏｎｅｙ Ｅ，Ｔｒｏｗｓｄａｌｅ Ｊ，Ｍｏｎｔａｎｅｒ ＬＪ，Ｄｏｍｓ ＲＷ，Ｗｅｉｓｓｍａｎ
Ｄ，Ｃｏｌｅｍａｎ Ｎ，Ｌｅｅ Ｂ，Ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ ａｎｄ ｉｎｄｕｃｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＤＣ−ＳＩＧＮ ｏｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ
ａｎｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｓｕｂｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｓｉｔｕ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ，Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ ２００２；７１：４４５−５７）。
【００３６】
ＨＩＶ感染時、ｐＤＣとそれらの前駆体の両方は機能的欠損へ発展する（Ｆｏｕｓｓａｔ Ａ，Ｂｏｕｃｈｅｔ−Ｄｅｌｂｏｓ Ｌ，Ｂｅｒｒｅｂｉ Ｄ，Ｄｕｒａｎｄ−Ｇａｓｓｅｌｉｎ
Ｉ，Ｃｏｕｌｏｍｂ−Ｌ’Ｈｅｒｍｉｎｅ Ａ，Ｋｒｚｙｓｉｅｋ Ｒ，Ｇａｌａｎａｕｄ Ｐ，Ｌｅｖｙ Ｙ，Ｅｍｉｌｉｅｓ
Ｄ，Ｄｅｒｅｇｅｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｐｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｆｒａｃａｌｉｎｅ／ｆｒａｃｔａｌｋｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｃｏｍｐｌｅｘ ｉｎ
ＨＩＶ−１−ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｐａｔｉｅｎｔｓ，Ｂｌｏｏｄ ２００１，９８：１６７８−８６；Ｆｅｌｍａｎ Ｓ，Ｓｔｅｉｎ Ｄ，Ａｍｒｕｔｅ Ｓ，Ｄｅｎｎｙ Ｔ，Ｇａｒｃｉａ
Ｚ，Ｋｌｏｓｅｒ Ｐ，Ｓｕｎ Ｙ，Ｍｅｇｊｕｇｏｒａｃ Ｎ，Ｆｉｔｚｇｅｒａｌｄ−Ｂｏｃａｒｓｌｙ Ｐ，Ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−ａｌｐｈａ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ
ｉｎ ＨＩＶ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ ｗｉｔｈ ｎｕｍｅｒｉｃａｌ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｉｅｓ ｉｎ
ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ｔｙｐｅ ２ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ，Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００１；１０１：２０１−１０）。しかしＨＩＶ感染後まもなく両方のサブセットの数の急速な減少が他の細胞変化に実際に先行する（Ｄｏｎａｇｈｙ
Ｈ，Ｐｏｚｎｉａｋ Ａ，Ｇａｚｚａｒｄ Ｂ，Ｑａｚｉ Ｎ，Ｇｉｌｍｏｕｒ Ｊ，Ｇｏｔｃｈ Ｆ，Ｐａｔｔｅｒｓｏｎ Ｓ，Ｌｏｓｓ ｏｆ ｂｌｏｏｄ ＣＤ １１ｃ＋ｍｙｅｌｏｉｄ
ａｎｄ ＣＤ１１ｃ−ｐｌａｓｍａｃｙｔｏｉｄ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ＨＩＶ−１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ
ｃｏｒｒｅｌｕｔｅｓ ｗｉｔｈ ＨＩＶ−１ ＲＮＡ ｖｉｒｕｓ ｌｏａｄ，Ｂｌｏｏｄ ２００１；９８：２５７４−６；Ｃｈｅｍｉｍｉ Ｊ，Ｃａｍｐｂｅｌｌ ＤＥ，Ａｚｚｏｎｉ
Ｌ，Ｂａｃｈｅｌｌｅｒ Ｄ，Ｐａｐａｓａｖｖａｓ Ｅ，Ｊｅｒａｎｄｉ Ｇ，Ｍｏｕｎｚｅｒ Ｊ，Ｔｒｉｎｃｈｉｅｒｉ Ｇ，Ｍｏｎｔａｎｅｒ ＬＪ，Ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ
ｄｅｃｒｅａｓｅ ｉｎ ｂｌｏｏｄ ｐｌａｍａｃｙｔｏｉｄ ｄｅｎｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ｎｕｍｂｅｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｄｅｓｐｉｔｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｈｉｇｈｌｙ
ａｃｔｉｖｅ ａｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ ｔｈｅｒａｐｙ ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｂｌｏｏｄ ｍｙｅｌｏｉｄ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ＨＩＶ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ
ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ，Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００２；１６８：４７９６−８０）。それ故ＰＤＣはＨＩＶ感染に対し感受性である。それらのＣＴＬレセプターの可能性ある役目について未だデータはないが、ＢＤＣＡ−２およびＤＣ−ＳＩＧＮはウイルス結合および取込みに関与しているらしい。ｐＤＣは明らかに知られた病原体保有細胞の中にあげられていないが、これはｐＤＣをＨＩＶ保有細胞へ変えるかも知れない。ここに開示した本発明はＣＴＬレセプターを介してｐＤＣを首尾よく標的とし得る。加えてそのような発明はこの抗ウイルスタイプ細胞に重大に有害なウイルスを妨害するために有益であることを証明し得る。
【００３７】
Ｔ−メモリおよび天然キラー細胞：最も心配なＨＩＶ貯蔵庫は集積したプロウイルスＨＩＶ ＤＮＡを担持している潜在感染休眠ＣＤ４＋Ｔ−メモリ細胞からなる（Ｐｉｅｒｓｏｎ
Ｔ，ＭｃＡｒｔｈｅｒ Ｊ，Ｓｉｌｉｃｉａｎｏ ＲＦ，Ｒｅｓｅｒｖｏｉｒｓ ｆｏｒ ＨＩＶ−１：ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｆｏｒ ｖｉｒａｌ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ
ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ａｎｄ ａｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｎｎｕ Ｒｅｖ
Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０００；１８：６６５−７０８）。再び活性化される時、そのような細胞は再びウイルスを生産し始めることができ、それにより多数の保管された株変種を放出し、このため治療抵抗性のリスクを増加させる（Ｃｉｌｉｃｉａｎｏ
ＪＤ，Ｓｉｌｉｃｉａｎｏ ＲＦ，Ａ ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ ｌａｔｅｎｔ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ ｆｏｒ ＨＩＶ−１：ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｊ
Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ ２００４；５４：６−９，Ｅｐｕｂ ２００４ Ｍａｙ ２６）。Ｐｉｅｒｓｏｎらは、Ｔ−メモリ貯蔵庫の４４月の極めて長い半減期において、そして現行の処置プロトコールに基づいて、その根絶は処置が６０年以上必要であろうということを推測した。現在の抗レトロウイルス療法でのＨＩＶの撲滅の望みは非現実的であり、そして実質的に長期間の毒性を伴なうことを指摘することにより、彼らはこのＨＩＶ貯蔵庫を根絶する新しいアプローチが緊急に必要であると結論した（Ｐｉｅｒｓｏｎ
Ｔ，ＭｃＡｒｔｈｅｒ Ｊ，Ｓｉｌｉｃｉａｎｏ ＲＦ，Ｒｅｓｅｒｖｏｉｒｓ ｆｏｒ ＨＩＶ−１：ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｆｏｒ ｖｉｒａｌ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ
ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ａｎｄ ａｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｎｎｕ Ｒｅｖ
Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０００；１８：６６５−７０８）。同定されたがなお不完全にしか解明されていないＨＩＶ保有細胞の他のタイプは、ＣＤ４，ＣＣＲ５およびＣＸＣＲ４を発現するＣＤ５６＋ＣＤ３−ヒト天然キラー（ＮＫ）細胞のサブセットである。一旦これら（コ）レセプターを介して感染されると、このＮＫ−細胞サブセットはプロウイルスＤＮＡを曝露し、高度に活性な抗レトロウイルス療法の開始後（少なくとも）１−２年患者を持続して感染させ続ける（Ｖａｌｅｎｔｉｎ
Ａ，Ｒｏｓａｔｉ Ｍ，Ｐａｔｅｎａｕｄｅ ＤＪ，Ｈａｔｚａｋｉｓ Ａ，Ｋｏｓｔｒｉｋｉｓ ＬＧ，Ｌａｚａｎａｓ Ｍ，Ｗｙｖｉｌｌ ＫＭ，Ｙａｒｃｈｏａｎ Ｒ，Ｐａｖｌａｋｉｓ
ＧＮ，Ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ ＨＩＶ−１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｎａｔｕｒａｌ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌｓ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ ｈｉｇｈｌｙ
ａｃｔｉｖｅ ａｎｔｉｒｅｒｏｖｉｒａｌ ｔｈｅｒａｐｙ，ＰＮＡＳ ＵＳＡ ２００２；９９：７０１５−７０２０）。
【００３８】
間接証拠は、Ｔ−メモリ細胞および／または天然キラー細胞もそのようなレセプターを発現するから感染性のインタクトなウイルス／病原体の細胞内貯蔵庫を確立するとの考えを支持する。第１に、成人において末梢血液ＣＤ４＋およびＣＤ８＋の２５％（これらの大部分はＴ−メモリフェノタイプを露出する）とＮＫ−細胞サブセットはＮＫＰ−Ｐ１糖タンパク質ファミリータイプＩＩ
ＣＴＬレセプターｈＮＫＲ−Ｐ１Ａを発現する（Ｌａｎｉｅｒ ＬＬ，Ｃｈａｎｇ Ｃ，Ｐｈｉｌｌｉｐｓ ＪＨ，Ｈｕｍａｎ ＮＫＲ−Ｐ１Ａ，Ａ ｄｉｓｕｌｆｉｄｅ−ｌｉｎｋｅｄ
ｈｏｍｏｄｉｍｅｒ ｏｆ ｔｈｅ Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎ ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｂｙ ａ ｓｕｂｓｅｔ ｏｆ ＮＫ ａｎｄ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ，Ｊ
Ｉｍｍｕｎｏｌ １９９４；１５３：２４１７−２８）。第２に、そして成人と対照的に、新生児の臍帯血はキラー細胞レクチン様レセプターＧ１（ＫＬＲＧ１）、阻害性Ｃ−タイプレクチンを発現するＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞の実質的なサブセットを含んでいる。出産後ＫＬＲＧ１＋は成人に見られるように解剖学的エフェクター／メモリＴ−細胞へ急速にシフトする（Ｍａｒｃｏｌｉｎｏ
Ｉ，Ｐｒｚｙｂｙｌｓｋｉ ＧＫ，Ｋｏｓｃｈｅｌｌａ Ｍ，Ｓｃｈｍｉｄｔ ＣＡ，Ｖｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｄ，Ｓｃｈｌｅｓｉｅｒ Ｍ，Ｄｉｒｃｈｅｒ Ｈ，Ｆｒｅｑｕｅｎｔ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｎａｔｕｒａｌ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＫＬＲＧ１ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃｏｒｄ ｂｌｏｏｄ Ｔ ｃｅｌｌｓ：ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ
ｗｉｔｈ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｖｅ ｈｉｓｔｏｒｙ，Ｅｕｒ Ｊ ｉｍｍｕｎｏｌ ２００４；３４：２６７２−８０）。これは、これらの循環細胞を介してＨＩＶ＋母親によって胎児が感染する著しく増大するリスクを意味する。我々はさらに、これら細胞はそれらの新生児リンパ系内メモリプールへの再配置によって生涯において非常に容易にＨＩＶ貯蔵庫を確立し得ると仮説した。それ故妊婦においては母親の固形胎盤組織に所在するＣＴＬレセプター発現ＨＩＶ保有細胞（上を見よ）のみでなく、胎児の循環細胞によって発現されるＣＴＬおよびＣＴＬＤレセプターも細胞ＨＩＶ貯蔵庫形成を可能にするレセプターとして作用し得る。両方のレセプタータイプはこのようにＨＩＶ−１の母子伝染に含まれる。
【００３９】
しかしながら後の生涯において、Ｔ細胞によるＫＬＲＧ１発現は休眠または機能障害の証明と考えられる。最も興味あるのは、生涯を通じてそのような老廃Ｔ細胞の数はウイルス感染時に増加し、そして加齢に相関する（Ｖｏｅｈｒｉｎｇｅｒ
Ｄ，Ｂｌａｓｔｅｒ Ｃ，Ｂｒａｗａｎｄ Ｐ，Ｒａｕｌｅｔ ＤＨ，Ｈａｎｋｅ Ｔ，Ｐｉｒｃｈｅｒ Ｈ，Ｖｉｒａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｉｎｄｕｃｅ ａｂｕｎｄａｎｔ
ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｓｅｎｓｃｅｎｔ ＣＤ８ Ｔ ｃｅｌｌｓ，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００１；１６７：４８３８−４３；Ｑｕｙａｎｇ Ｑ，Ｗａｇｎｅｒ ＷＭ，Ｖｊｏｅｈｒｉｎｇｅｒ
Ｄ，Ｗｉｋｂｙ Ａ，Ｋｌｅｔｔ Ｔ，Ｗａｌｔｅｒ Ｓ，Ｍｕｌｌｅｒ ＣＡ，Ｐｉｒｃｈｅｒ Ｈ，Ｐａｗｅｌｅｃ Ｇ，Ａｇｅ−ａｓｓｏｃｉａｔｉａｔｅｄ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ
ｏｆ ＣＭＶ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ８＋Ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌ ｌｅｃｔｉｎ−ｌｉｋｅ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｇ１（ＫＬＲＧ１），Ｅｘｐ Ｇｅｒｎｔｏｌ ２００３；３８：９１１−２０）。我々はこれら事実を実際に相関すると信じる。全体の機能的Ｔ−細胞レパートリーはこれら細胞のプールが拡大するにつれて縮小し、このため老人の感染病の増加した例数に貢献することが示された（Ｏｕｙａｎｇ
Ｑ，Ｗａｇｎｅｒ ＷＭ，Ｖｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｄ，Ｗｉｋｂｙ Ａ，Ｋｌａｔｔ Ｔ，Ｗａｌｔｅｒ Ｓ，Ｍｕｌｌｅｒ ＣＡ，Ｐｉｒｃｈｅｒ Ｈ，Ｐａｗｅｌｅｒ Ｇ，Ａｇｅ−ａｓｓｏｃｉａｔｉａｔｅｄ
ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＣＭＶ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ８＋Ｔ ｃｅｌｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｋｉｌｌｅｒ
ｃｅｌｌ ｌｅｃｔｉｎ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｇ１（ＫＬＲＧ１），Ｅｘｐ Ｇｅｒｏｎｔｏｌ ２００３；３８−９１１−２０）。これは特にＨＩＶおよび慢性細胞内病原体貯蔵庫が確立される他の感染病に相関し得る。
活溌にＨＩＶを複製するＴ細胞：感染性ビリオンの連続的ソースとしてのＨＩＶ保有細胞のほかに、持続的感染の確立は標的Ｔ細胞内のＨＩＶ複製を調節する活性化信号にも決定的に依存する。無活動Ｔ細胞はＴ細胞レセプターおよび／またはサイトカイン仲介活性化信号が提供されない限り感染に抵抗性である（Ｕｎｕｔｍａｚ
Ｄ，Ｔ ｃｅｌｌ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｔｈａｔ ｒｅｇｕｌａｔｅ ＨＩＶ−１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ ２００１；２３：１６７−７７）。それ故ＨＩＶ感染はＴ細胞高活性化の慢性状態、ＨＩＶ持続性およびＴ細胞涸渇の結合を含む（Ｇｒｏｓｓｍａｎ
Ｚ，Ｍｅｉｅｒ−Ｓｃｈｅｌｌｅｒｓｈｅｉｍ Ｍ，Ｓｏｕｓａ ＡＥ，Ｖｉｃｔｏｒｉｎｏ ＲＭ，Ｐａｕｌ ＷＥ，ＣＤ４＋Ｔ−ｃｅｌｌ ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ
ｉｎ ＨＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ：ａｒｅ ｗｅ ｃｌｏｓｅｒ ｔｏ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ ｔｈｅ ｃａｕｓｅ？Ｎａｔ Ｍｅｄ ２００２；８：３１９−２３）。
【００４０】
ＨＩＶの標的としてのＣＤ４＋Ｔ−ヘルパー細胞の長く知られた役目の次に（Ｆａｕｃｉ ＡＳ，Ｍｕｌｉｆａｃｔｏｒｉａｌ ｎａｔｕｒｅ
ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｄｉｓｅａｓｅ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｔｈｅｒａｐｙ，Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９３；２６２：１０１１−８）、今やサブセットＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉＴ細胞も感染されることが明らかである。調節Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ細胞）のＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉサブセットはマウスおよびヒトにおいてＴ細胞活性化することが広く認められている（Ｓａｋａｇｕｃｈｉ
Ｓ，Ｓａｋａｇｕｃｈｉ Ｎ，Ａｓａｎｏ Ｍ，Ｉｔｏｈ Ｍ，Ｔａｄａ Ｍ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ ｓｅｌｆｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｍａｉｎｔａｉｎｅｄ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｅｄ
Ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ＩＬ−２ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｌｐｈａｃｈａｉｎｓ（ＣＤ２５）：Ｂｒｅａｋｄｏｗｎ ｏｆ ａ ｓｉｎｇｌｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ
ｏｆ ｓｅｌｆ−ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｃａｕｓｅｓ ｖｉｒｉｏｕｓ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９９５；１５５：１１５１−６４；Ａｓａｎｏ
Ｍ，Ｔａｄａ Ｍ，Ｓａｋａｇｕｃｈｉ Ｎ，Ｓａｋａｇｕｃｈｉ Ｓ，Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ ａｓ ａ ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ
ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｙ ｏｆ ａ Ｔ ｃｅｌｌ ｓｕｂｐｏｐｕａｔｉｏｎ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １９９６；１８４：３８７−９６；Ｓｕｒｉ−Ｐａｙｅｒ Ｅ，Ａｍａｒ
ＡＺ，Ｔｈｏｒｎｔｏｎ ＡＭ，Ｓｈｅｖａｃｈ ＥＭ，ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉＴ ｃｅｌｌｓ ｉｎｈｉｂｉｔ ｂｏｔｈ ｔｈｅ
ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｆｆｅｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｕｔｏｒｅａｃｔｉｖｅ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ ａ ｕｎｉｑｕｅ ｌｉｎｅａｇｅ
ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｃｅｌｌｓ，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９９８；１６０：１２１２−８；Ｔａｋａｈａｓｈｉ Ｔ，Ｋｕｎｉｙａｓｕ Ｙ，Ｔａｄａ
Ｍ，Ｓａｋａｇｙｃｈｉ Ｎ，Ｉｔｏｈ Ｍ，ｅｔ ａｌ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ ｓｅｌｆ−ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｍａｉｎｔａｉｎｅｄ ｂｙ ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉ
ｎａｔｕｒａｌｌｙ ａｎｅｒｇｉｃ ａｎｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ Ｔ ｃｅｌｌｓ；Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ
ｂｙ ｂｒｅａｋｉｎｇ ｔｈｅｉｒ ａｎｅｒｇｉｃ／ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｓｔａｔｅ，Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９９８；１０：１９６９−８０；Ｔｈｏｒｎｔｏｎ
ＡＭ，Ｓｈｅｖａｃｈ ＦＭ，ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉ ｉｍｍｕｎｏｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｓｕｐｐｒｅｓｓ
ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ Ｔ ｃｅｌｌ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｂｙ ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ ２ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，Ｊ Ｅｘｐ
Ｍｅｄ １９９８；１８８：２８７−９６；Ｂａｅｃｈｅｒ−Ａｌｌａｎ Ｃ，Ｂｒｏｗｎ ＪＡ，Ｆｒｅｅｍａｎ ＧＪ，Ｈａｆｌｅｒ ＤＡ，ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉ
ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｃｅｌｌ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００１；１６７：１２４５−５３；Ｄｉｅｃｋｍａｎｎ
Ｄ，Ｐｌｏｔｔｎｅｒ Ｈ，Ｂｅｒｃｈｔｏｌｄ Ｓ，Ｂｅｒｇｅｒ Ｔ，Ｓｃｈｕｌｅｒ Ｇ，Ｅｘ ｖｉｖｏ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ
ｏｆ ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉＴ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｆｒｏｍ ｈｕｍａｎ
ｂｌｏｏｄ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００１；１９３：１３０３−１０；Ｊｏｎｕｌｅｉｔ Ｈ，Ｓｃｈｍｉｔｔ Ｅ，Ｓａｔａｓｓｅｎ Ｍ，Ｔｕｎｅｔｔｅｎｂｅｒｇ Ａ，Ｋｎｏｐ
Ｊ，ｅｔ ａｌ，Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ＣＤ４＋ＣＤ２＋Ｔ
ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００１；１９３：１２８５−９４；Ｔａａｍｓ
ＬＳ，Ｓｍｉｔｈ Ｊ，Ｒｕｓｔｉｎ ＭＨ，Ｓａｌｍｏｎ Ｍ，Ｐｏｕｌｔｅｒ ＬＷ，ｅｔ ａｌ，Ｈｕｍａｎ ａｎｅｒｇｉｃ／ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔ
ｃｅｌｌｓ：Ａ ｈｉｇｈｌｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ａｎｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ−ｐｒｏｎｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ，Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００１；３１：１１２２−３１；Ｌｅｖｉｎｇｓ
ＭＫ，Ｓａｎｇｒｅｇｏｒｉｏ Ｒ，Ｒｏｎｃａｒｏｌｏ ＭＧ，Ｈｕｍａｎ ＣＤ２５＋ＣＤ４＋Ｔ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ
ｃｅｌｌｓ ｓｕｐｐｒｅｓｓ ｎａｉｖｅ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃａｎ ｂｅ ｅｘｐａｎｄｅｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ
ｗｉｔｈｏｕｔ ｌｏｓｓ ｏｆ ｆｕｎｃｉｔｏｎ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００１；１９３：１２９５−３０２；Ｎｇ ＷＦ，Ｄｕｇｇａｎ ＰＪ，Ｐｏｎｃｈｅｌ Ｆ，Ｍａｔａｒｅｓｅ
Ｇ，Ｌｏｍｂａｒｄｉ Ｇ，ｅｔ ａｌ，Ｈｕｍａｎ ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔ ｃｅｌｌｓ：Ａ ｎａｔｕｒａｌｌｙ ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ
ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｕ Ｔ ｃｅｌｌｓ，Ｂｌｏｏｄ ９８：２７３６−２７４４；Ｊｏｎｕｌｅｉｔ Ｈ，Ｓｃｈｎｉｔｔ Ｅ，Ｋａｋｉｒｍａｎ
Ｈ，Ｓｔａｓｓｅｎ Ｍ，Ｋｎｏｐ Ｊ，ｅｔ ａｌ，Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ：Ｈｕｍａｎ ＣＤ２５＋ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ
Ｔ ｃｅｌｌｓ ｃｏｎｖｅｙ ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｔｏ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ＣＤ４＋Ｔ ｈｅｌｐｅｒ ｃｅｌｌｓ，Ｊ
Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００２；１９６：２５５−６０）。Ｏｓｗａｌｄ−Ｒｉｃｈｔｅｒらは健康ドナーから単離したヒトＴｒｅｇ細胞はＨＩＶ−コレセプターＣＣＲ５を発現し、ＨＩＶ感染および複製に高度に感受性であることを示した。彼らは免疫抑制Ｔｒｅｇ細胞は、進行性ＨＩＶ病に特徴的なＴ細胞高活性に貢献し得る低パーセントのＣＤ４＋および高レベルの活性化Ｔ細胞を有するＨＩＶ陽性個人の一部において破壊されて得るという事実の証明を提供した。このためこれら細胞の感染は調節的免疫抑制の損失を意味する（Ｏｓｗａｌｄ−Ｒｉｃｈｔｅｒ
Ｋ，Ｇｒｉｌｌ ＳＭ，Ｓｈａｒｉａｔ Ｎ，Ｌｅｅｌａｗｏｎｇ Ｍ，Ｓｕｎｄｒｕｄ ＭＳ，Ｈａａｓ ＤＷ，Ｕｎｔｍａｚ Ｄ，ＨＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｎａｔｕｒａｌｌｙ
ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙ ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｈｕｍａｎ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ−ｃｅｌｌｓ，ＰＬｏＳ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２００４；２：０９５５−６６）。
【００４１】
その上細胞毒性ＣＤ８＋細胞を感染され、抗ウイルス応答の損失へ導く（Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ ＷＪ，Ｍｏｏｒｅ Ｍ，Ｉｎｎｅｓ
Ｄ，Ｂｅｌｌ ＪＥ，Ｓｉｍｍｏｎｄｓ Ｐ，Ｆｒｅｑｕｅｎｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ＣＤ８−ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｔ−ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ
ｗｉｔｈ ＨＩＶ−１．Ｅｄｉｎｂｕｒｇｈ Ｈｅｔｅｒｏｓｅｘｕａｌ Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｓｔｕｄｙ Ｇｒｏｏｐ，Ｌａｎｃｅｔ １９９６；３４８：６４９−５４）。ＨＩＶによるＣＤ４＋およびＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔ細胞の直接の破壊と組合せた慢性免疫活性化の結果的状態は最終的に進行性免疫低下によって特徴付けられるＡＩＤＳへ導く（Ｆａｕｃｉ
ＡＳ，Ｍｕｌｉｆａｃｔｏｒｉａｌ ｎａｔｕｒｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｄｉｓｅａｓｅ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ
ｔｈｅｒａｐｙ，Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９３；２６２：１０１１−８）。このため我々の治療システムとＨＡＡＲＴの過渡的同時投与の利益を排除するものではないが、もしこのシステムもＴ細胞中の活溌なＨＩＶ複製を妨害するのであれば有益であろう。
【００４２】
Ｂ．骨髄単球可塑性：感染性貯蔵庫の新しい意味
病原体貯蔵庫に関する可能性ある未だ達していない結論は、病原体保有細胞の種々のタイプは互換性ある細胞タイプの高度に可塑性のシステムのメンバーである事実から誘導される。感染因子の細胞貯蔵庫の性格およびダイナミックに対するこの考え方の意味はこのため未だ完全に無視されている。骨髄分化系統に基づいた細胞の可塑性システムの存在のための最初の指示は、組織へ入る時末梢血単胞はそれ自体がマクロファージ段階へ進まないとの発見へ遡る。以前のドグマとは対照的に、今や血液単球は組織マクロファージとｍＤＣの両方を生ずることは広く認められている。その上適切な信号の存在においてｍＤＣはマクロファージへ相互変換することができる。インビボにおける両方の細胞クラスの数多くの区域サブセットのため、この発見は骨髄単球胞子系のための可塑性の考えへ導いた（Ｐｅｔｅｒｓ
ＪＨ，Ｒｕｐｐｅｒｔ Ｊ，Ｇｉｅｓｅｌｅｒ ＲＫＨ，Ｎａｊａｒ ＨＭ，Ｘｎ Ｈ，Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ ｉｎｔｏ
ＣＤ１４−ｎｅｇａｔｉｖｅ ａｃｃｅｓｓｏｒｙ ｃｅｌｌｓ：ｄｏ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｄｅｒｉｖｅ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｍｏｎｏｃｙｔｉｃ ｌｉｎｅａｇｅ？Ｐａｔｈｏｂｉｏｌｏｇｙ
１９９１；５９：１２２−６；Ｐｅｔｅｒｓ ＪＨ，Ｇｉｅｓｌｅｒ Ｒ，Ｔｈｉｅｌｅ Ｂ，Ｓｔｅｉｎｂａｃｈ Ｆ，Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ：ｆｒｏｍ ｏｎｔｏｇｅｎｅｔｉｃ
ｏｒｐｈａｎｓ ｔｏ ｍｙｅｌｏｍｏｎｏｃｙｔｉｃ ｄｅｓｃｅｎｄａｎｔｓ，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｔｏｄａｙ １９９６；１７：２７３−８）。引続いて単球をマクロファージの特定化されたタイプ、すなわち小膠細胞（中枢神経系の区域マクロファージ）および破骨細胞（骨コンパートメントの区域マクロファージ）に分化する信号が同定された（Ｓｅｒｖｅｔ−Ｄｅｌｐｒａ
Ｃ，Ａｒｎａｒｕｄ Ｓ，Ｊｕｒｄｉｃ Ｐ，Ｎａｔａｆ Ｓ，Ｇｒａｓｓｅｔ ＭＦ，Ｓｏｕｌａｓ Ｃ，Ｄｏｍｅｎｇｅｔ Ｃ，Ｄｅｓｔａｎｉｎｇ Ｏ，Ｒｉｖｏｌｌｉｅｒ
Ａ，Ｐｅｒｒｅｔ Ｍ，Ｄｕｍｏｎｔｅｌ Ｃ，Ｈａｎａｎ Ｄ， Ｇｉｌｍｏｒｅ ＧＬ，Ｂｅｌｉｎ ＭＦ，Ｒａｂｏｕｒｄｉｎ−Ｃｏｍｂｅ Ｃ，Ｍｏｕｃｈｉｒｏｕｄ
Ｇ，Ｆｌｔ３＋ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ ｃｏｍｍｉｔ ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌｌｙ ｔｏ ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔｓ，ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ
ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｍｉｃｒｏｇｌｉａ，ＢＭＣ ｉｍｍｕｎｏｌ ２００２；３：１５）。その後これは単球のサブセットは多能幹細胞として作用し、これは適切な因子の存在においてリンパ球、上皮、皮内、神経、および肝細胞を生成することへ発展した（Ｚｈａｏ
Ｙ，Ｇｌｅｓｎｅ Ｄ，Ｈｕｂｅｒｍａｎ Ｅ，Ａ ｈｕｍａｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎｏｃｙｔｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｕｂｓｅｔ ａｃｔｓ ａｓ ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ
ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ２００３；２４２６−３１；Ｋｕｍａｎ Ｍ，Ｏｋａｚａｋｉ Ｙ，ＫＯｄａｍａ Ｈ，ｅｔ ａｌ，Ｈｕｍａｎ
ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ＣＤ４＋ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ ａｓ ａ ｓｏｕｒｃｅ ｏｆ ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｓ ｔｈａｔ ｅｘｈｉｂｉｔ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａ
ｃｅｌｌ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ，Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ ２００３；７４：８３３−４５）。現在末梢血単球も濾胞細胞の持続するよくわからない前駆体が明らかになっている。しかしながら単球の中の幹細胞を同定する上で述べた研究とは対照的に、単球−ＦＤＣ分化はこの場合１：１比で得られた。このため今では単球全体が循環幹細胞と考えられることが示唆された（Ｈｅｉｎｅｍａｎｎ
ＤＥＨ，Ｐｅｔｅｒｓ ＪＨ，Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｄｅｄｕｃｅｄ ｆｒｏｍ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ，ＢＭＣ Ｊｍｍｕｎｏｌ：ｉｎ ｐｒｅｓｓ）。
【００４３】
この新規な固まりつつある凡例の意味は広大であり、そして以下の課題を残す。
（ｉ）骨髄分化可塑性の生物学の我々の理解を広げること；
（ｉｉ）倫理的疑問を無視する幹細胞療法のためのアプローチを産み出すこと；および
（ｉｉｉ）病原体貯蔵庫の性格の現在の考えを再考慮すること。
【００４４】
ＨＩＶに関しては、ごく最近このウイルスは実際末梢血単球を感染させることが明らかにされた（Ｗｅｉｎｂｅｒｇ ＪＢ，Ｍａｔｈｅｗｓ ＴＪ，Ｃｕｌｌｅｎ
ＢＲ，Ｍａｌｉｍ ＭＨ，Ｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ１（ＨＩＶ−１）ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ
ｈｕｍａｎ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １９９１；１７４：１４７７−８２；Ｚｈｕ Ｔ，ＨＩＶ−１ ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ
ｎｏｎｏｃｙｔｅｓ，Ｊ Ｌｅｕｋｃ Ｂｉｏｌ ２０００；６８：３３８−４４）。ＣＤ４ｌｏＣＤ１６ｈｉ単球サブセットは最もしかしそればかりでなく感染を受け易い（Ｃｒｏｗｅ
Ｓ，Ｚｈｕ Ｔ，Ｍｕｌｌｅｒ ＷＡ，Ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｖｉｒａｌ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ ｉｎ ＨＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ
Ｂｉｏｌ ２００３；７４：６３５−４１，Ｅｐｕｂ ２００３ Ａｕｇ ２１）。それ故患者において単球の一部は組織へ移住した時既に感染している。
【００４５】
このことは、骨髄細胞は早くも単球細胞の段階においてＨＩＶ貯蔵庫の一部として（少なくとも）補充され得ることを意味する。単球を多能幹細胞の一つのタイプとして考える時、ＣＤ４ｌｏＣＤ１６ｈｉ（および他の）単球の一次子孫の広いスペクトルがこのためＨＩＶ−感染され得る。既に述べたように、（ｉ）ｍＤＣ；（ｉｉ）マクロファージ；（ｉｉｉ）小膠細胞；（ｉｖ）破骨細胞；（ｖ）濾胞樹状細胞；（ｖｉ）肝細胞；（ｖｉｉ）リンパ球；（ｖｉｉｉ）内皮細胞；（ｉｘ）上皮細胞；および（ｘ）神経細胞への分化はこれまでに証明されている。感染した単球から分化する時、そのような子孫はその個体発生ポテンシャルおよび機能を満たすのが重大に妨げられる。しかしどの場合でもすべての単球は、ＨＩＶの容易な侵入に役立つ表面マーカーのそれらの発現に応じてそれらの発達の遅い段階において感染を受け易くなる。例えば、上に挙げた１０種の証明されたタイプの単球のうち、少なくとも最初の８種のタイプはＣＴＬおよび／またはＣＴＬＤレセプターを発現する（上の参考文献を見よ）。
【００４６】
この分野の研究において、例えばＣＤ４ｌｏＣＤ１６ｈｉ単球だけが子孫の非常に限られたセットを与えるのかどうかは知られていない。単球の誘発し得る分化プログラムは明らかに広いけれども、インビトロで発生させた多岐にわたる単球誘導体がインビボでの大きな分化出来事に対応するか、または比較的マイナーな救助経路を表すのかも知られていない。このためこれらを合せて、現在のところ単球依存広スペルトル分化の生理学的限度および範囲を評価することができない。
【００４７】
他方単球誘導体の１タイプ（ｍＤＣ）のみに限れば、（骨髄）単球前駆体からｍＤＣを操縦する１３種の異なる信号が同定および／または研究されている。これらの信号は古典的成長および分化因子のカラフルなスペクトル（マルチーＣＳＦ〔ＩＬ−３〕，Ｍ−ＣＳＦ，ＧＭ−ＣＳＦ）；サイトカイン（ＩＬ−４，ＴＮＦ−α，ＩＦＮ−γ）；ビタミン（α―トコフェロール、カルチフェロール、１−２５−ジヒドロキシカルチフェロール、すべてのトランス−レチノイン酸）；アミノ酸誘導体（シス−ウロカニン酸）；および必須脂肪酸（リノール酸、リノレン酸）を含む（Ｇｉｅｓｌｅｒ
ＲＫＨ，Ｒｏｂｅｒ ＲＡ，Ｋｕｈｎ Ｒ，Ｗｅｂｅｒ Ｋ，Ｏｓｂｏｒｎ Ｍ，Ｐｅｔｅｒｓ ＪＨ，Ｄｅｎｔｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｂｏｎｅ
ｍａｒｒｏｗ ｐｒｅｃｕｒｓｕｏｒｓ ｕｎｄｅｒ ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ ｄｅｆｉｎｅｄ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｂｅｌｏｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｍｙｅｌｏｉｄ
ｌｉｎｅｇｅ，Ｅｕｒ Ｊ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ １９９１；５４：１７１−８１；Ｇｉｅｓｌｅｒ ＲＫＨ，Ｐｅｔｅｒｓ ＪＨ，ｌｉｎｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ ｓｕｐｐｏｒｔｓ
ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｔｈｅ ａｃｃｅｓｓｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ，８ｔｈ
Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｇｒｅｓｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｂａｄａｐｅｓｔ，Ｈｕｎｇａｒｙ，Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｂｏｏｋ １９９２：５０１；Ｐｅｔｅｒｓ
ＪＨ，Ｘｕ Ｈ，Ｒｕｐｐｅｒｔ Ｊ，Ｏｓｔｅｒｍｅｉｅｒ Ｄ，Ｆｒｉｅｄｒｉｃｈｓ Ｄ，Ｇｉｅｓｌｅｒ ＲＫＨ，Ｓｉｇｎａｌｓ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｎｇ
ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｆｒｏｍ ｈｕｍａｎ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ，Ａｄｖ Ｅｘｐ Ｍｅｄ Ｂｉｏｌ １９９３；３２９：２７５−８０；Ｘｕ
Ｈ，Ｓｏｒｕｒｉ Ａ，Ｇｉｅｓｌｅｒ ＲＫＨ，Ｐｅｔｅｒｓ ＪＨ，１，２５−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ３ ｅｘｅｒｔｓ ｏｐｐｏｓｉｎｇ
ｅｆｆｅｃｔｓ ｔｏ ＩＬ−４ ｏｎ ＭＨＣ ｃｌａｓｓ ＩＩ ａｎｔｉｇｅｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ａｃｃｅｓｓｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｙ，ａｎｄ ｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ
ｏｆ ｈｕｍａｎ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １９９３；１８９：６９；Ｐｅｔｅｒｓ ＪＨ，Ｇｉｅｓｌｅｒ Ｒ，Ｔｈｉｅｌｅ Ｂ，Ｓｔｅｉｎｂａｃｈ
Ｆ，Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ：ｆｒｏｍ ａｎｔｉｇｅｎｉｃ ｏｒｐｈａｎｓ ｔｏ ｍｙｅｌｏｍｏｎｏｃｙｔｉｃ ｄｅｓｃｅｄａｎｔｓ，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｔｏｄａｙ
１９９６；１７：２７３−８；Ｓｔｅｉｎｂａｃｈ Ｆ，Ｇｉｅｓｌｅｒ Ｒ，Ｓｏｒｕｎｉ Ａ，Ｋｒａｕｓｅ Ｂ，Ｐｅｔｅｒｓ ＪＨ，Ｍｙｅｌｏｉｄ ＤＣｓ ｄｅｄｕｃｅｄ
ｆｒｏｍ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ：ｉｎ−ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ−ｖｉｖｏ ｄａｔａ ｓｕｐｐｏｒｔ ａ ｍｏｎｏｃｙｔｉｃ ｏｒｉｇｉｎ ｏｆ ＤＣｓ，Ａｄｖ Ｅｘｐ
Ｍｅｄ Ｂｉｏｌ １９９７；４１７：２７−３２；Ｇｉｅｓｌｅｒ Ｒ，Ｈｅｉｓｅ Ｄ，Ｓｃｈｗａｒｔｚ Ｐ，Ｐｅｔｅｒｓ ＪＨ，Ｉｎ−ｖｉｔｒｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｏｆ ｍａｔｕｒｅ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｆｒｏｍ ｈｕｍａｎ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ，Ｄｅｖｅｌｏｐ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９９８；６：２５−３９；Ｇｉｅｓｌｅｒ
Ｒ，Ｓｃｈｌｅｍｍｉｎｇｅｒ Ｒ，Ｆａｙｙａｚｉ Ａ，Ｐｅｔｅｒｓ ＪＨ，Ｃｉｓ−ＵＣＡ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｓｍａｌｌ Ｂｏｗｅｌ
Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ：Ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｇｒａｆｔ−ｖｅｒｓａｓ−Ｈｏｓｔ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ，Ｉｎ：Ｈｏｎｉｎｇｍａｎｎ
Ｈ，Ｋｎｏｂｌｅｒ Ｒ，Ｔｒａｕｔｉｎｇｅｒ Ｆ，Ｊｏｒｉ Ｇ（ｅｄｓ）：Ｌａｎｄｍａｒｋｓ ｉｎ Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌｏｇｙ，ＯＥＭＦ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ ｓｐａ．Ｍｉｌａｎｏ
１９９８：２８５−８；Ｈｅｉｓｅ Ｄ，Ｐｅｔｅｒｓ ＪＨ，Ｓｃｈｅｄｌｏｗｓｋｉ Ｍ，Ｇｉｅｓｌｅｒ Ｒ，Ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｏｎｏｃｙｔｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ
ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ（ＭｏＤＣ）ｂｙ ａｕｔｏｃｒｉｎｅ ＴＮＦ−α ｓｉｇｎａｌｉｎｇ，Ｉｍｍｕｎｏｌ
１９９９；２００：５６１；Ｇｉｅｓｅｌｅｒ Ｒ，Ｈｏｌｌｍａｎｎ Ｋ，Ｓｃｏｌａｒｏ ＭＪ，Ｐｅｔｅｒｓ ＪＨ，Ａｌｌ−ｔｒａｎｓ−ｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｓ
ＣＤ１ａ ｏｎ ｈｕｍａｎ ｍｏｎｏｃｙｔｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｄｅｎｔｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ（ＭｏＤＣ）：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ
ｍｅｌａｎｏｍａ−ｓｐｅｓｉｆｉｃ ｔｕｍｏｒ ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ，Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０００；２０３：３７８−９）。これらの発見は感受性単球が環境刺激にどのように応答するかに脚光をあびせ、これらの細胞が異なるｍＤＣサブタイプへ分化することによって応答する多様な信号を例証する。このようにそのような非常に限られた１種の分化生産物シナリオさえも単球のポテンシャルを照明する。これまで未同定信号の過多は単球分化生産物の巨大なスペクトルを与えることができ、要するに単球幹細胞の考えに再び到達する結論を与えることができる。
【００４８】
特に感染性細胞内貯蔵庫の生成に関し、そしてこの背景を眺めると、二つの決定的要因は、（ｉ）単球はデザインにより多種類の分化生産物を発生させることができること、（ｉｉ）単球分化は病理学的条件のもとで変化することである（例えば、Ａｕｓｔｙｎ
ＪＭ，Ａｎｔｉｇｅｎ−ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ ｃｅｌｌｓ．Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，Ａｍ
Ｊ Ｒｅｓｐ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ ２０００；１６２：Ｓ１４６−５０；Ｓｔｕｃｋｅ Ｍ，Ｑｕａｄｏｂｅｃｋ Ｂ，Ｅｃｋｓｔｅｉｎ ＡＫ，Ｔｅｗｓ Ｓ，Ｍａｎｎ
Ｋ，Ｅｓｓｅｒ Ｊ，Ｇｉｅｓｅｌｅｒ Ｒ，ＭＨＣ ｃｌａｓｓ ＩＩ ｆｏｃｕｓｉｎｇ，ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｉｎ ＤＣ４０＋
ｃｅｌｌｓ，ａｎｄ ｆａｉｎｔ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｌａｎｇｅｒｉｎ ｂｙ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ ａｒｅ ｄｉｓｔｉｎｃｔｉｖｅ
ｆｅａｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｙｒｏｉｄ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｏｐｈｔｈａｌｍｏｒｐａｔｈｙ，２７ｔｈ Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｕｒｏｐｅａｎ
Ｔｈｙｒｏｉｄ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｗａｒｓａｗ，Ｐｏｌａｎｄ，Ａｕｇ，２５−２９，２００１；Ｑｕａｂｅｃｋ Ｂ，Ｅｃｋｓｔｅｉｎ Ａ，Ｔｅｗｓ Ｓ，Ｗａｌｚ
Ｍ，Ｈｏｅｒｍａｎｎ Ｒ，Ｍａｎｎ Ｋ，Ｇｉｅｓｅｌｅｒ Ｒ，Ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｙｒｏｉｄａｌ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｉｎ Ｇｒａｖｅｓ；ｄｉｓｅａｓｅ，Ｓｃａｎｄ
Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００２；５５：６１２−２０）。重要なことに、これはＨＩＶ病におけるｍＤＣについても証明された（Ｇｉｅｓｅｌｅｒ ＲＫ，Ｍａｒｑｕｉｔａｎｔ
Ｇ，Ｓｃｏｌａｒｏ ＭＪ，Ｃｏｈｅｎ ＭＤ，Ｌｅｓｓｏｎｓ ｆｒｏｍ ｈｉｓｔｏｒｙ：ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ＡＰＣｓ，ｄａｎｇｅｒｓ ｏｆ ＳＴＩ ａｎｄ
ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｇｏａｌ ａｓ ｙｅｔ ｕｎｍｅｔ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００３；２４：１１において簡単に評論）。加えて治療薬物は骨髄単球分化を支配する全身サイトカイン環境に著しく影響する（例えば、Ｇａｌｏｎ
Ｊ，Ｆｒａｎｃｈｉｍｏｎｔ Ｄ，Ｈｒｏｉ Ｎ，Ｆｒｅｙ Ｇ，Ｂｏｅｔｔｎｅｒ Ａ，Ｅｒｈａｒｔ−Ｂｏｍｓｔｅｉｎ Ｍ，Ｏ’Ｓｈｅａ
ＪＪ，Ｃｈｒｏｕｓｏｓ ＧＰ，Ｂｏｒｎｓｆｔｅｉｎ ＳＲ，Ｇｅｎｅ ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ ｒｅｖｅａｌｓ ｕｎｋｎｏｗｎ ｅｎｈａｎｃｉｎｇ ａｎｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ
ａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄｓ ｏｎ ｉｍｍｕｎｅ ｃｅｌｌｓ，ＦＡＳＥＢ Ｊ ２００２；１６：６１−７１）。それ故、病理学的条件下そして薬物の存在において、単球の多能ポテンシャルは現在完全に未知の種々のみちへ引寄される。これらの考慮は、感染病の条件下種々のタイプの単球誘導細胞が種々の病原体保有細胞を生じ得ることを示唆する。もっと重要なことは、そのような誘導体はそれらの共通の起源点、すなわち単球前駆体において早くも感染され得る。ここに提供される本発明は単球を標的とした処置を企図する。そのような処置は相当の利益を持ち得る。
【００４９】
骨髄：骨髄は一次のみならず二次リンパ系器官として役立つとの最近の発見（Ｆｅｕｅｒｅｒ Ｍ，Ｂｅｃｋｈｏｖｅ Ｐ，Ｇａｒｂｉ Ｎ，Ｍａｈｎｋｅ Ｙ，Ｌｉｍｍｅｒ
Ａ，Ｈｏｍｍｅｌ Ｍ，Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇ ＧＪ，Ｋｙｅｗｓｋｉ Ｂ，Ｈａｍａｎｎ Ａ，Ｕｍａｎｓｋｙ Ｖ，Ｓｃｈｉｒｒｍａｃｈｅｒ Ｕ，Ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ
ａｓ ａ ｐｒｉｍｉｎｇ ｓｉｔｅ ｆｏｒ Ｔ−ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｔｏ ｂｌｏｏｄ−ｂｏｒｎｅ ａｎｔｉｇｅｎ，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ ２００３；９：１１５１−７）は、骨髄はある種の感染病において解剖学的貯蔵庫部位であることを強く示唆する。加えて、骨髄は骨髄細胞前駆体と、そして新鮮な分化単球をそれらの循環への放出前に収容する。全身的解剖学的貯蔵部位の動力学に関し、これらの考慮は骨髄はそこから他の貯蔵庫が補充される原始貯蔵庫部位かも知れないとの仮説を有利にする。ここに開示される本発明は発明的ターゲティングシステムの骨髄特異的適用をも含んでいる。事実そのようなルートは、ＨＩＶ病および他の感染病においてそのような細胞が種々の末梢組織居住貯蔵集団の分化へ進む前に病原体保有細胞前駆体の主なプールへ達することを約束する。
【００５０】
ＩＩ．炭水化物認識ドメインを発現するレクチン
１９８８年、Ｋｕｒｔ Ｄｒｉｃｋａｍｅｒは区切られた炭水化物認識ドメイン（ＣＲＤ）を担持する動物レクチン（すなわち糖結合タンパク質）の分野における進歩を要約した（Ｄｒｉｃｋａｍｅｒ
Ｋ，Ｔｗｏ ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｃｌａｓｓｅｓ ｏｆ ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ−ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｄｏｍａｉｎｓ ｉｎ ａｎｉｍａｌ ｌｅｃｔｉｏｎｓ，Ｊ
Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ １９８８；２６３：９５５７−６０）。今日我々はＣＲＤは我々の古代免疫学的遺産の一部であり、そして例えばハエとヒトほど遠い種に発見できることを知っている。重要なのは感染作因のための特異性レセプターとして行動することにより、多数のＣＲＤレクチンは防衛の第１線として役立つ（Ｈａｌｌｍａｎ
Ｍ，Ｒａｍｅｔ Ｍ，Ｅｚｅｋｏｗｉｔｚ ＲＡ，Ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ ｒｅｐｏｒｔｏｒｓ ａｓ ｓｅｎｓｏｒｓ ｏｆ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ，Ｐｅｄｉａｔｒ Ｒｅｓ ２００１；５０：３１５−２１）。このように比較的シンプルな免疫系においてさえも、ＣＲＤレクチンは宿主を感染から保護するためのある程度の特異性を提供する。発展的言葉において、先天性免疫と呼ばれる防衛の古風なもっと粗雑なブランチ（これはＣＲＤレクチンを含んでいる）は長く前に適応化免疫のもっと洗練されたブランチに発展した（これは抗原特異性構造を特徴とする細胞クローンの大量拡大のための我々に高度に特異性の保護メカニズムのぜい沢を提供する）。それにもかかわらず、ヒトおよび霊長類動物においては先天性免疫はクローン拡大の結果として抗原特異性応答の結末のための段階に居続け、個人の全体としての防衛のための基礎を創出する（Ｈｏｌｍｓｋｏｖ
Ｕ，Ｔｈｉｅｌ Ｓ，Ｊｅｎｓｅｎｉｕｓ ＪＣ，Ｃｏｌｌｅｃｔｉｖｅ ａｎｄ ｆｉｃｏｌｉｎｓ：ｈｕｍｏｒａｌ ｌｅｃｔｉｎｓ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｎａｔｅ ｉｍｍｕｎｅ
ｄｅｆｅｎｓｅ，Ａｎｎ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００３；２１：５４７−７８，Ｅｐｕｂ ２００１ Ｄｅｃ １９）。しかしながらここで論ずるように、これらの古代のレクチンの一部は、感染作因による適応化のためいわゆる病原体貯蔵庫の確立において中心的役割を果す。そのような細胞貯蔵庫はヒトおよび高等動物における最も支配的な致命的および／または衰弱化慢性感染の一部の現在の治療不可能性に対して必須である。
【００５１】
免疫学者によって認められる長い以前に、生化学者はＣＲＤレセプターについて深い認識を蓄積していた。しかしながらそれらの生理学的機能は不明のままであった。Ｃｈａｒｌｅｓ
Ａ，Ｊａｎｅｗａｙが彼の感染性非自己モデルを導入した時、理論的構成において病原に対する古風な“広スペクトルレセプター”の潜在的存在の免疫学が実現した。Ｊａｎｅｗａｙは免疫の適応枝のバックボーンである、抗原提示細胞（ＡＰＣ）が病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）によって引金される時、保護免疫を開始させ得ることを提案した。そのような引金は特異性相補細胞外レセプターがダビングされたパターン認識レセプターを必要とするであろう（Ｊａｎｅｗａｙ
Ｊｒ，ＣＡ，Ａｐｐｒｏａｃｈｉｎｇ ｔｈｅ ａｓｙｍｔｏｔｅ？Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｖｏｌｕｔｉｏｎ ｉｎ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ
Ｈａｒｇｏｒ Ｓｙｍｐ Ｑｕａｎｔ Ｂｉｏｌ １９８９；５４：１−１３）。一旦理論的に予見されると、これらの構造は実際発見することができた。知識の増大する量が蓄積し、動作的同義語であるＰＲＲは陣腐になり、これら構造の同定された発展的先祖を意味する表現、トール様レセプター（ＴＬＲ）によって置き換えられた（Ｊｏｈｎｓｏｎ，ＧＢ
ｅｔ ａｌ，Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ ｃｌｕｅｓ ｔｏ ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ ｆａｍｉｌｙ ａｓ ｓｕｖｅｉｌｌａｎｃｅ
ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００３；２４：１９−２４において評論）。機能的にすべてのこれらの分子はＣＲＤレクチンである。
【００５２】
ＣＲＤのサブグループの一つは、カルシウム依存性態様で炭水化物を結合するＣ−タイプレクチン（ＣＴＬ）のファミリーである（Ｈｏｌｍｓｋｏｖ Ｕ，Ｍａｌｈｏｔｒａ
Ｒ，Ｓｉｍ ＲＢ，Ｊｅｎｓｅｎｉｕｓ ＪＣ，Ｃｏｌｌｅｃｔｉｎｓ：ｃｏｌｌａｇｅｎｏｕｓ Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎｓ ｏｆ ｔｈｅ ｉｍｍａｔｅ ｉｍｍｕｎｅ
ｄｅｆｅｎｓｅ ｓｙｓｔｅｍ，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｔｏｄａｙ １９９４；１５：６７−７４）。ＣＴＬレセプター認識ＰＡＭＰの一例は、血漿中および粘膜表面上に存在するいわゆるコレクチンである。これまで同定されたヒトコレクチンはマンナン結合レクチン（ＭＢＬ）および界面活性タンパク質ＡおよびＤ（ＳＰ−ＡおよびＳＰ−Ｄ）である。感染作因を認識する時、（ＭＢＬ）が補体活性化を開始させるか、または（ＳＰ−Ａ，ＳＰ−Ｄ）が感染を制限するようにオプソニン化、中和および凝集反応をトリガし、そして適応免疫応答を編曲する（Ｈｏｌｍｓｋｏｖ
Ｕ，Ｔｈｉｅｌ Ｓ，Ｊｅｎｓｅｎｉｕｓ ＪＣ，Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｆｉｃｏｌｉｎｓ：ｈｕｍａｎ ｌｅｃｔｉｎｓ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｎａｔｅ ｉｍｍｕｎｅ
ｄｅｆｅｎｓｅ，Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００３；２１：５４７−７８，Ｅｐｕｂ ２００３ Ｄｅｃ １９）。ＣＴＬの他の例は、主として肝胃腸器官および組織において保護の役目を果す再生遺伝子（ＲＥＧまたはＲｅｇ）ファミリーである（Ｚｈａｎｇ
ＹＷ，Ｄｉｎｇ ＬＳ，Ｌａｉ ＭＤ，Ｒｅｇ ｇｅｎｅ ｆａｍｉｌｙ ａｎｄ ｈｕｍａｎ ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ ２００３；９：２６３５−４１）に評論され、ＲＥＧファミリーはそこに論じられている。ＣＲＤレクチンのなお他のグループはＣ−タイプレクチン様ドメイン（ＣＴＬＤ）を発現する（Ｃａｍｂｉ
Ａ，Ｆｉｇｄｏｒ ＣＧ，Ｄｕａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｉｎ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ，Ｃｕｒｒ
Ｏｐｉｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ２００３；１５：５３９−４６を見よ）。
【００５３】
ＩＩＩ．ターゲット化リポソーム化合物送達システム
ターゲット化リポソームは、それぞれのターゲティング構造を発現する任意の与えられた細胞へカプセル化化合物を特異的に送達するために適した乗物である。治療的に採用する時、そのような技術は選択した細胞へ送達した化合物を高度に集中させる。しかしながら非ターゲット化リポソームさえも、カプセル化化合物をさもなければアクセスできない細胞中へ摂取させることを許容する事実のため、治療的に有益なツールであり得る。例えば以前我々は、ＨＩＶ５‘ｔａｔスプライスアクセプター部位へ向けたセンスＤＮＡの非ターゲットリポソームによる送達時に感染した末梢血液単核白血球におけるＨＩＶ伝播の阻害を示した（Ｓｕｌｌｉｖａｎ
ＳＭ，Ｇｉｅｓｅｌｅｒ ＲＫ，Ｌｅｎｚｎｅｒ Ｓ，Ｒｕｐｐｅｒｔ Ｊ，Ｇａｂｒｙｓｉａｋ ＴＧ，Ｐｅｔｅｒｓ ＪＨ，Ｃｏｘ Ｇ，Ｒｉｃｈｅｒ Ｌ，Ｍａｒｔｉｎ
ＷＪ，Ｓｃｏｌａｒｏ ＭＪ，Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ−１ ｐｒｏｆｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｌｉｐｏｓｏｍｅ−ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ
ｓｅｎｓｅ ＤＮＡ ｔｏ ｔｈｅ ５’ ｔａｔ ｓｐｌｉｃｅ ａｃｃｅｐｔｏｒ ｓｉｔｅ，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｒｅｓ
Ｄｅｖ １９９２；２：１８７−９７）。第２の例として以前我々は、ターゲット化リポソームにより送達された化合物は選択した細胞タイプへ選択的に到達し、そしてその中味をその細胞タイプの内部へ送達することを示した（Ｇｉｅｓｅｌｅｒ
ＲＫ，Ｍａｒｑｕｉｔａｎ Ｇ，Ｈａｈｎ ＭＪ，Ｐｅｒｄｏｎ ＬＡ，Ｄｒｉｓｓｅｎ ＷＨ，Ｓｕｌｌｉｖａｎ ＳＭ，Ｓｃｏｌａｒｏ ＭＪ，ＤＣ−ＳＩＧＮ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ
ｌｉｐｏｓｏｍａｌ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｍｙｅｌｏｉｄ
ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ ＨＩＶ ｄｉｓｅａｓｅ，Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００４；５９：４１５−２４）。
【００５４】
治療剤の効力を増強しそして毒性を低減する生分解性または生体適合性薬物キャリアとしての脂質（リポソーム）−薬物コンプレックスの使用は、乾燥脂質フィルムの水和がミニチュア細胞オレガネラに似た封入球形ベシクルまたはリポソームを形成した１９６０年代の発見から認められていた（例えば、Ｂａｎｇｈａｍ
ＡＤ，Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ：ｔｈｅ Ｂａｂｒａｈａｍ ｃｏｎｎｅｃｔｉｏｎ，Ｃｈｅｍ Ｐｈｙｓ Ｌｉｐｉｄｓ ６４：２７５−２８５〔１９９３〕）。脂質−薬物コンプレックスは、それらの特定の器官、組織または細胞への局在化の増大によって薬物の治療インデックス（ＴＩ）を強力に改善する方法として長らく見られていた。ＴＩは特定の薬物のメディアン毒性投与量（ＴＤ５０）とメディアン有効投与量（ＥＤ５０）との間の比である。しかしながら脂質―薬物コンプレックスの薬物送達システムへの応用は３０年後まで実現されず、その時においてのみ米国ＦＤＡによりヒト使用のために承認されたリポソームに基づく治療剤の最初のシリーズであった。それによりリポソームは１９９０年代中頃から薬剤適用における薬物キャリアとして使用されて来た（Ｌｉａｎ
Ｔ，Ｈｏ ＲＪＹ，Ｔｒｅｎｄｓ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ ｉｎ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ ２００１；９０：６６７−８０）。
【００５５】
脂質成分は変えることができるけれども、多数の処方は天然リン脂質（主にホスファチジルコリンのような）の合成生成物を使用する。ヒト使用のために承認されたリポソーム処方の大部分は、主要膜構築ブロックとして変化する長さおよび飽和度の脂肪酸アシル鎖を有するホスファチジルコリン（中性静電荷を有する）を含有する。ある割合のコレステロール（〜３０モル％）がリポソーム膜の硬さを変調し、リポソーム膜へ血清タンパクの結合によって生ずる血清誘発不安定性を減らすためにリポソーム処方へしばしば加えられる。
【００５６】
脂質の頭部基とＰＨに基づいて、リポソームはそれらの表面に陰性、中性または陽性電荷を持つことができる。リポソーム表面電荷の性格および密度はそれらの安定性、動力学および生態分布度、それに標的細胞との相互作用、リポソームの細胞による取り込みに影響する。特に、中性表面電荷を持つリポソームは全身投与後細網内皮システム（ＲＥＳ）の細胞によって清浄化される低い傾向を有するが、凝集する最大の傾向を有する。負に帯電したリポソームは凝集を減らし、懸濁液中で増大した安定性を表すが、それらの非特異性細胞取り込みがインビボで増加する。ホスファチジルセリン（ＰＳ）またはホスファチジルグリセロール（ＰＧ）を含める時、そのようなリポソームは中性リポソームよりも速い速度および大きい程度でエンドサイト−シスされる（Ａｌｌｅｎ
ＴＭ ｅｔ ａｌ，Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｌｉｐｉｄ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｏｆ ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ）ｓｈｏｗ
ｐｒｏｌｏｎｇｅｄ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ｈａｌｆ−ｌｉｖｅｓ ｉｎ ｖｉｖｏ，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １９９１；１０６６：２９−３６；Ｌｅｅ
ＲＪ，ｅｔ ａｌ，Ｆｏｌａｔｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｏｆ ｌｉｐｏｓｏｍｅ−ｅｎｔｒａｐｐｅｄ ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ
ｉｎ ｖｉｔｒｏ，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １９９５；１２３：１３４−１４４）。負の表面電荷はマクロファージを含む種々の細胞に見られるレセプターによって認識される（Ａｌｌｅｎ
ＴＭ ｅｔ ａｌ．［１９９１］；Ｌｅｅ ＲＪ ｅｔ ａｌ，Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｉｎｔｏ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ＫＢ ｃｅｌｌｓ ｖｉａ ｆｏｌａｔｅ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｅｎｄｏｃｙｔｏｓｉｓ，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２６９：３１９８−３２０４［１９９４］）。
【００５７】
リポソーム膜中へガングリオシドＧＭ１またはホスファチジルイノシトール（ＰＩ）のようなある種の糖脂質を含めることはマクロファージおよびＲＥＳによる取り込みを阻害し、より長い循環時間をもたらす。少量の負に帯電した脂質は凝集依存性取り込みメカニズムに対して中性リポソームを安定化することが示唆された（Ｄｒｕｍｍｏｎｄ
ＤＣ ｅｔ ａｌ，Ｏｐｔｉｍｉｚｉｎｇ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｆｏｒ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｇｅｎｔｓ ｔｏ ｓｏｌｉｄ ｔｕｍｏｒｓ，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ
Ｒｅｖ ５１：６９１−７４３［１９９９］）。細胞内ＤＮＡのためのＤＮＡ縮合剤としてしばしば使用される正に帯電したカチオン性リポソームは血清タンパク質と相互作用する高い傾向を有し、この相互作用はＲＥＳによる取り込み、最終的には肝、肝臓または脾臓によるクリアランスを増強する結果となる。ＤＮＡ不安定性、免疫仲介クリアランス、炎症応答、および組織アクセシビリティーを含む他のファクターも動物において低いトランスフェクション効率に貢献する。事実、正に帯電したリポソームの高投与量は変動する程度で組織炎症を産むことが示されている（Ｓｃｈｅｕｌ
ＲＫ ｅｔ ａｌ，Ｂａｓｉｓ ｏｆ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃａｔｉｏｎｉｃ ｌｉｐｉｄ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｇｅｎｅ
ｔｒａｎｓｆｅｒ ｔｏ ｔｈｅ ｍａｍｍａｌｉａｎ ｌｕｎｇ，Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ８：６８９−７０７〔１９９７〕）。
【００５８】
リポソーム膜の表面は凝集を減らし、ＲＥＳによる認識を避けるため親水性ポリマーによって修飾することができる。この戦略はしばしば表面水和または立体修飾と呼ばれ、そしてＧＭ１のようなガングリオシド、または潮解性もしくは親水性ポリマーへ化学的に接合した脂質を含めることによってしばしば実施される。通常の方法はホスファチジルエタノールアミンの末端アミノ基へ接合したポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を採用する。リポソーム膜表面へ加えたさらなる親水性ポリマーは追加の水和層を提供する（Ｔｏｒｃｈｉｌｉｎ
ＶＰ，Ｉｍｍｕｎｏｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ａｎｄ ＰＥＧ ｙｌａｔｅｄ ｉｍｍｕｎｏｌｉｐｏｓｏｍｅｓ：ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｕｓｅ ｏｆ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ
ｏｆ ｉｍａｇｉｎｇ ａｇｅｎｔｓ，ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ ４：２４４−２５８〔１９９４〕）。その結果、リポソームは異物としてマクロファージまたはＲＥＳによって異物と認識できなくなり、そしてこのため食細胞クリアランスが始まる。多数の系統的研究がＰＥＧポリマーの最適サイズおよびリポソーム膜中のＰＥＧ脂質の密度を決定した。
【００５９】
初期の研究は、リポソームサイズは全身投与後のベシクル分布およびクリアランスに影響することを証明した。ＲＥＳによるリポソームの取り込み比はベシクルのサイズで増大する（Ｈｗａｎｇ
Ｋ，ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ，Ｉｎ：Ｏｓｔｒｏ ＭＪ，ｅｄ，Ｌｉｐｏｓｏｍｅ：Ｆｒｏｍ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ ｔｏ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｎｅｗ
Ｙｏｒｋ：Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，ｐｐ．１０９−１５６〔１９８７〕）。インビボでのＲＥＳ取り込みはリポソームの高投与量により、または多量のコントロールリポソームの前投与によって飽和させることができるが、この戦略はＲＥＳの生理学的機能の持続する傷害に関連した副作用の故にヒト使用のためには実用的でない。一般に、同様な組成のリポソームのサイズの増大はＲＥＳによる増強された取り込みをもたらす（Ｓｅｎｉｏｒ
Ｊ，ｅｔ ａｌ，Ｔｉｓｓｕｅ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｅｘｈｉｂｉｔｉｎｇ ｌｏｎｇ−ｈａｌｆ ｌｉｖｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ
ａｆｔｅｒ ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｓ，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ ８３９；１−８〔１９８５〕）。最も最近の研究は全身薬物送達用途に対しサイズが５−１００ｎｍの単層ベシクルが使用されている。
【００６０】
例えば、抗カビリポソーム生産物Ａｍ ＢｉｓｏｍｅはＲＥＳ取り込みを減らすためサイズ規格書４５−８０ｎｍへ処方されている。血清タンパク質結合はリポソームサイズに影響しそしてインビボでのクリアランス速度を増大する重要なファクターである。リポソームによる補体活性化、およびオプソニン化はリポソームのサイズに依存する（Ｄｅｖｉｎｅ
ＤＶ ｅｔ ａｌ，Ｌｉｐｏｓｏｍｅ−ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｉｎ ｒａｔ ｓｅｒｕｍ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｌｉｐｏｓｏｍｅ
ｓｕｒｖｉｖａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １１９１：４３−５１〔１９９４〕）；Ｌｉｕ Ｄ ｅｔ ａｌ，Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ
ａｎｄ ｃｌｅａｒａｎｃｅ ｏｆ ｌｉｐｏｓｏｍｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｐｈｏｓｐａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅ ａｒｅ ｍｅｄｉａｔｅｄ
ｂｙ ｓｅｒｕｍ ｏｐｓｏｎｉｎ，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １２３５：１４０−１４６〔１９９５〕）。血清タンパク質結合を減らすためのリポソーム組成物にＰＥＧを含有させても、長期循環ＰＥＧ−ＰＥのサイズ上限は〜２００ｎｍである。生物学的制約のため、立体安定化方法を使用する長期循環大型（＞５００ｎｍ）リポソームの開発は成功していない。それ故薬物開発の早い段階における製造におけるリポソームサイズとそのコントロールの配慮はリポソーム薬物送達システムの効率を最適化する手段を提供する。
【００６１】
リポソームを無価の薬物送達システムとする重要な性質の一つはリポソーム会合および／またはカプセル化薬物の薬物動態を変調する能力である（Ｈｗａｎｇ
ＫＪ，Ｐａｄｋｉ ＭＭ，Ｃｈｏｗ ＤＤ，Ｅｓｓｉｅｎ ＨＥ，Ｌａｉ ＪＹ，Ｂｅａｕｍｉｅｒ ＰＬ，Ｕｐｔａｋｅ ｏｆ ｓｍａｌｌ ｌｉｐｓｏｍｅｓ ｂｙ ｎｏｎ−ｒｅｔｉｃｕｌｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ
ｔｉｓｓｕｅｓ，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ ９０１（１）：８８−９６〔１９８７〕；Ａｌｌｅｎ ＴＭ，Ｈａｎｓｅｎ Ｃ，Ｍａｒｔｉｎ Ｆ，Ｒｅｄｅｍａｎｎ
Ｃ，Ｙａｕ−Ｙｏｕｎｇ Ａ，Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｌｉｐｉｄ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｏｆ ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ
ｇｌｙｃｏｌ）ｓｈｏｗ ｐｒｏｌｏｎｇｅｄ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ｈａｌｆ−ｌｉｖｅｓ ｉｎ ｖｉｖｏ．Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １０６６（１）：２９−３６〔１９９１〕；Ａｌｌｅｎ
ＴＭ，Ａｕｓｔｉｎ ＧＡ，Ｃｈｏｎｎ Ａ，Ｌｉｎ Ｌ，Ｌｅｅ ＫＣ，Ｕｐｔａｋｅ ｏｆ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｂｙ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｍｏｕｓ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ
ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ：ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｌｉｐｏｓｏｍｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｉｚｅ Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １０６１（１）：５６−６４〔１９９１〕；Ｈｗａｎｇ
Ｋ〔１９８７〕；Ａｌｌｅｎ Ｔ ｅｔ ａｌ，Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ ｏｆ ｌｏｎｇ−ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ，Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌ
Ｒｅｖ １６：２６７−２８４〔１９９５〕）。特に水溶液中の同じ薬物に比較して、リポソーム会合薬物の吸収、生体分布およびクリアランスの有意な変化は明らかであり、捕捉された化合物の有効性と毒性の両方に劇的な効果をもたらす（Ｇｆａｂｉｓｏｎ
Ａ，Ｌｉｐｏｓｏｍｅ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ａｎｄ ｔｕｍｏｒ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｃａｎｃｅｒ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，Ａｄｖ
Ｄｒｕｇ Ｄｅｌ Ｒｅｖ １６：２８５−２９４〔１９９５〕；Ｂｅｔｈｕｎｅ Ｃ ｅｔ ａｌ，Ｌｉｐｉｄ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｃｙ
ａｇａｉｎｓｔ ｐｒｉｍａｒｙ ｍｅｄｕｌｌｏｂｌａｓｔｏｍａ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｅｘｐｏｓｕｒｅ ｏｆ １−（２−ｃｈｌｏｒｏｅｔｈｙｌ）−３−ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ−１−ｎｉｔｒｏｓｏｕｒｅａ（ＣＣＮＵ）ｉｎ
ｒａｔｓ，Ｐｈａｒｍａ Ｒｅｓ １６：８９６−９０３〔１９９９〕）。
【００６２】
リポソーム生体分布および処分の正確なメカニズムはそれらの脂質組成、サイズ、電荷および表面水和／立体障害の程度に依存する。リポソームのインビボ処分は投与ルートにも依存する。例えば、静脈内投与直後、リポソームは通常血漿タンパク質によって被覆され、ＲＥＳによって取込まれ、排除される（Ｃｈｏｎｎ
Ａ ｅｔ ａｌ，Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｌｏｏｄ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｗｉｔｈ ｌａｒｇｅ ｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｉｎ ｖｉｖｏ．Ｒｅｌａｔｉｏｎ
ｔｏ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ｌｉｆｅｔｉｍｅｓ，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２６７：１８７５９−１８７６５〔１９９２〕；Ｒａｏ Ｍ，ｅｔ ａｌ，Ｄｅｌｉｖｅｒｙ
ｏｆ ｌｉｐｉｄｓ ａｎｄ ｌｉｐｏｓｏｍａｌ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｔｏ ｔｈｅ ｃｙｔｏｐｌａｓｍ ａｎｄ Ｇｏｌｇｉ ｏｆ ａｎｔｉｇｅｎ−ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ
ｃｅｌｌｓ，Ａｄｖ Ｐｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｒｅｖ ４１：１７１−１８８〔２０００〕）。
【００６３】
リポソームと相互作用するらしい血漿タンパク質はアルブミン、リポタンパク質（例えば高密度リポタンパク質〔ＨＤＬ〕および低密度リポタンパク質〔ＬＤＬ〕）、それに細胞会合タンパク質を含む。ＨＤＬのようなこれらのあるものはリン脂質をそれらの二分子層から除去すくことによってリポソームを不安定化し、このため潜在的に薬物の早期漏洩もしくは解離へ導く。また今日、全身投与リポソームの治療適用は血液からのそれらの速いクリアランスと、ＲＥＳによる取り込みによって制限されている（Ａｌｖｉｎｇ
Ｃ，ｅｔ ａｌ，Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ ｏｆ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ：ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｂｙ “ｓｔｅａｌｔｈ”ｌｉｐｉｄｓ，Ｊ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ Ｒｅｓ ２：３８８−３９５〔１９９２〕），上で述べたように循環時間はリポソームサイズを減らし、ＰＥＧ誘導体で表面／立体効果を修飾することによって増大することができる。また、ＲＥＳによる逃げるクリアランスの十分な安定性のために加工された膜を有するリポソームが利用可能である。それ故それぞれの薬物の毒性学的プロフィルを有意に減らす長期循環リポソームを血漿薬物レベルを維持し、延長するために採用することができる。それにも拘らず、延長した循環は最終標的として意図した組織または細胞中のリポソーム会合薬物の蓄積を間接的に促進するに過ぎない。
【００６４】
このようにインビボでの化合物送達ビヒクルとしての明白な薬物動態学的利益にもかかわらず、そのような結果は現在のリポソーム製剤および投与ルートの欠点を特定する。本発明に関し、そのような欠点は（ｉ）リンパ節のようなあらかじめ区切った位置へ到達のため局所的に、すなわち皮内また皮下ルートを介して投与され、そして（ｉｉ）独自の解剖学的部位内のあらかじめ区切った細胞へ特異的にピンポイント指向することができるターゲティング機構を提供するリポソームによって克服することができる。
【００６５】
ＲＥＳにより実質上清浄化される前に関心ある細胞集団へ指向させるようにリポソームのターゲティングを積極的に強化することは切実な要求である。例えば、イムノリポソームは細胞内マラリア寄生虫の赤血球貯蔵庫を標的とするために成功して採用された（Ｏｗａｉｓ
Ｍ，ｅｔ ａｌ，Ｃｈｌｏｒｏｑｕｉｎｅ ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ ｉｎ ｍａｌａｒｉａ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｂｅａｒｉｎｇ
ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｅｆｆｅｔｉｖｅｌｙ ｃｏｎｔｒｏｌｓ ｃｈｌｏｒｑｕｉｎｅ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｂｅｒｇｈｅｉ ｉｍｆｅｃｔｉｏｎｓ
ｉｎ ｍｉｃｅ，Ａｎｔｉｍｉｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｏｒ ３９（１）：１８０−４〔１９９５〕；Ｓｉｎｇｈ，ＡＭ ｅｔ ａｌ，Ｕｓｅ ｏｆ ｓｐｅｃｉｆｉｃ
ｐｏｌｙｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｆｏｒ ｓｉｔｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｄｒｕｇ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｔｏ ｍａｌａｒｉａ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ
ｉｎ ｖｉｖｏ，Ｉｎｄｉａｎ Ｊ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ ３０：４１１−３〔１９９３〕）。世界的なＨＩＶ／ＡＩＤＳ闘争へ脂質−薬物送達システムを応用することも切実な要求である。現在全世界で約４２００万人がＨＩＶに感染していると推定される（ＵＮＡＩＤＳ，Ｇｌｏｂａｌ
ｓｕｍｍａｒｙ ｏｆ ｔｈｅ ＨＩＶ／ＡＩＤＳ ｅｐｉｄｅｍｉｃ：Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ２００３，ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｕｎａｉｄｓ．ｏｒｇ／ｗａｄ／２００３／ｐｒｅｓｓ／Ｅｐｉｕｐｄａｔｅ
２００３ ｅｎ／Ｅｐｉ０３ ０２ ｅｎ．ｈｔｍ）。実際、ヌクレオシドアナログ（例えば３’−アジド−３’−デオキシチミジン（ＡＺＴ）、ｄｄＣおよびｄｄＩのようなジデオキシヌクレオシド誘導体）、プロテアーゼ阻害剤、またはホスフォン酸（例えばホスフォノギ酸およびホスフォノ酢酸）のような抗ＨＩＶドラッグが脂質誘導化され、またはリポソームに添加された（例えば、Ｂｅｒｇｅｒｏｎ
ＭＧ，ｅｔ ａｌ，Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｏｆ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ａｇｅｎｔｓ ｂｅａｒｉｎｇ ｈｏｓｔ ｃｅｌｌ ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＷＯ００／６６１７３Ａ３；Ｂｅｒｇｅｒｏｎ，ＭＧ，ｅｔ
ａｌ，Ｌｉｐｏｓｏｍｅ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｎｇ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｄｒｕｇｓ，米国特許第５，７７３，０２７号；Ｂｕｒｇｅｒｏｎ
ＭＧ，ｅｔ ａｌ，Ｌｉｐｏｓｏｍｅ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｖｉｒａｌ ｄｉｓｅａｓｅｓ，ＷＯ９６／１０３９９Ａ１；Ｇａｎｇｎｅ
ＪＦ ｅｔ ａｌ，Ｔａｒｇｅｔｅｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｉｎｄｉｎａｖｉｒ ｔｏ ＨＩＶ−１ ｐｒｉｍａｒｙ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒｓ ｗｉｔｈ ｉｍｍｕｎｏｌｉｐｏｓｏｍｅｓ，Ｂｉｏｃｈｉｍ
Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １５５８（２）：１９８−２１０〔２００２〕；Ｄｕｐｒｅｓｎｅ Ｉ，ｅｔ ａｌ，Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅｓ ｗｉｔｈ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ
ｂｅａｒｉｎｇ ａｎｔｉ−ＨＬＡ−ＤＲ Ｆｅｂ’ｆｒａｇｍｅｎｔｓ，Ｂｉｏｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １４２１（２）：２８４−９４〔１９９４〕；Ｂｅｓｔｍａｎ−Ｓｍｉｔｈ
Ｊ，ｅｔ ａｌ，Ｓｔｅｒｉｃａｌｌｙ ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｂｅａｒｉｎｇ ａｎｔｉ−ＨＬＡ−ＤＲ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｆｏｒ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ
ｔｈｅ ｐｒｉｍａｒｙ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒｓ ｏｆ ＨＩＶ−１，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １４６８（１−２）：１６１−７４〔２０００〕；Ｂｅｓｔｍａｎ−Ｓｍｉｔｈ
Ｊ，ｅｔ ａｌ，Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｃｅｌｌ−ｆｒｅｅ ＨＩＶ ａｎｄ ｖｉｒａｌｌｙ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ａｎｔｉ−ＨＬＡ−ＤＲ ｉｍｍｕｎｏｌｉｐｏｓｏｍｅｓ
ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ａｍｐｈｏｔｅｒｉｃｉｎ Ｂ，ＡＩＤＳ１０；１４（１６）：２４５７−６５〔２０００〕）。
【００６６】
動物モデルにおける抗体ターゲット化リポソームの多数の例に加えて、ＨＥＲ２／ｎｅｕに対して上昇させた１本鎖抗体を採用する少なくとも１種のイムノリポソームＤＯＸＩＬ（例えば、Ｐａｒｋ
ＪＷ，Ｈｏｎｇ Ｋ，Ｋｉｒｐｏｔｉｎ ＤＢ，Ｃｏｌｂｅｒｎ Ｇ，Ｓｈａｌａｂｙ Ｒ，Ｂａｓｅｌｇａ Ｊ，Ｓｈａｏ Ｙ，Ｎｉｅｌｓｅｎ ＵＢ，Ｍａｒｋｓ ＪＤ，Ｍｏｏｒｅ
Ｄ，Ｐａｐａｈａｄｊｏｐｏｕｌｏｓ Ｄ，Ｂｅｎｚ ＣＣ，ａｎｔｉ−ＨＥＲ−２ Ｉｍｍｕｎｏｌｉｐｏｓｏｍｅｓ：ｅｎｈａｎｃｅｄ ｅｆｆｉｃａｃｙ ａｔｔｒｉｂｕｔａｂｌｅ
ｔｏ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００２；８：１１７２−８１〔２００２〕）が乳癌のあるタイプの治療的ターゲティングのために同じグループによって現在臨床的に評価されている。
【００６７】
他のターゲティングアプローチは、さもなければ細胞中へ不十分にしか送達されないか、または望ましい細胞内オルガネラへ特異的に効率的に送達されないリポソームカプセル化化合物の膜横断送達および取り込みを強化するように、リポソーム表面へ特異性ベクター分子を取り付けることに基づいている（Ｔｏｒｃｈｉｌｌｉｎ
ＶＰ，Ｌｕｋｙａｎｏｖ ＡＮ，Ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｄｒｕｙ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｔｏ ａｎｄ ｉｎｔｏ ｔｕｍｏｒｓ：ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ ａｎｄ
ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ Ｔｏｄａｙ ２００３；８：２５９−６６；Ｓｃｈａｇａｌ Ａ，Ｄｅｌｉｖｅｒｉｎｇ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎｓ
ｔｏ ｔｕｍｏｒｓ，Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ Ｔｏｄａｙ ２００３；８：６１９；Ｋｏｎｉｎｇ ＧＡ，Ｓｔｏｒｍ Ｇ，Ｔａｒｇｅｔｅｄ ｄｒｕｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ
ｓｙｓｔｅｍｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｄｒｕｇｓ，Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ Ｔｏｄａｙ
２００３；８：４８２−３）。そのようなベクター分子は種々のウイルスまたはＤｒｓｏｐｈｉａ ａｎｔｅｎｎａｐｅｄｉａから誘導されたタンパク質形導入ドメイン（ＰＴＤ）を含んでいる。ＨＩＶ病に適用のため特に関心あるのはＨＩＶ
ＴａｔおよびＰＴＤとして作用するその誘導体である（例えば、Ｓｃｈｗａｒｔｚ ＳＲ，ｅｔ ａｌ，Ｉｎｖｉｖｏ ｐｒｏｔｅｉｎ ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ：ｄｅｌｉｖｅｒｙ
ｏｆ ａ ｂｉｏｌｇｉｃａｌｌｙ ａｃｔｉｖｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｍｏｕｓｅ，Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９９；２８５：１５６９−７２）。
【００６８】
リポソームでリンパ球集団を活性にターゲティングする試みはある程度の成功度をもって満たされた。例えば、マウスへ皮下注射された抗ＨＬＡ−ＤＲＦａｂ’−標識イムノリポソームはリンパ組織に蓄積した（Ｂｅｓｔｍａｎ−Ｓｍｉｔｈ Ｊ ｅｔ ａｌ，Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｃｅｌｌ−ｆｒｅｅ
ＨＩＶ ａｎｄ ｖｉｒａｌｌｙ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ａｎｔｉ−ＨＬＡ−ＤＲ ｉｍｍｕｎｏｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ａｍｐｈｏｔｅｒｉｃｉｎ
Ｂ，ＡＩＤＳ ２０００；１０：２４５７−６５）。同様にＧａｇｎｅ ｅｔ ａｌはイムノリポソームカプセル化抗ＨＩＶドラッグの皮下注射後マウスのリンパ節中の蓄積した薬物濃度を見出した（Ｇａｇｎｅ
ＪＦ，Ｄｅｓｏｒｍｅａｕｘ Ａ，Ｐｅｒｒｏｎ Ｓ，Ｔｒｅｍｂｌａｙ ＭＪ，Ｂｅｒｇｅｒｏｎ ＭＧ，Ｔａｒｇｅｔｅｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｉｎｄｉｎａｖｉｒ
ｔｏ ＨＩＶ−１ ｐｒｉｍａｒｙ ｒｅｓｅｒｖｏｉｎｓ ｗｉｔｈ ｉｍｍｕｎｏｌｉｐｏｓｏｍｅｓ，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ ２００２；１５５８：１９８−２１０）。
【００６９】
ここに記載された発明に関し、特異性細胞集団がＣＲＤレクチンを標的としたリポソームシステムによって治療的に活性な化合物の細胞内送達のための標的となし得る。
【００７０】
本発明は、共通して炭水化物認識ドメイン（ＣＲＤ）を提示する表面タンパク質（ＣＴＬおよびＣＴＬＤと呼ばれる）のあるファミリーを発現する細胞へレクチンまたは薬物のような剤を選択的に送達するための標的化リポソーム送達システムを提供する。これらレクチンは関心ある細胞集団によって発現される。それ故本発明は、中でもそれぞれの感染因子を不活性化するため、植物レクチンまたは薬物のようなリポソームにカプセル化した化合物を送達するため、感染およびＡＩＤＳまたはＣ型肝炎のような関連病に罹っている人々の細胞貯蔵庫を含んでいる異なる集団中のＨＩＶまたはＨＣＶのような潜在的に貯蔵されている感染作因を無能力にする必要性に向けられる。加えて本発明は、それぞれの病原学的プロセスを有益に妨害するため、アポトーシス阻害剤または化学療法剤のようなリポソームカプセル化した治療化合物を送達するため、変性または悪性慢性非感染病に包含されるＣＴＬまたはＣＴＬＤレクチン陽性細胞を標的とする必要性に向けられる。
【本発明の概要】
【００７１】
本発明は、インビボまたはインビトロの哺乳類免疫細胞へレクチンまたは薬物のような剤を優先的に活性的にターゲティングおよび送達するリポソームおよび方法に関する。特に本発明は、表面誘導体化モノもしくはポリフコース（または代って化学的に関連もしくは化学的に修飾した糖）によってターゲットされ、このため、カプセル化された限定ではなくレクチン植物Ｃａｎａｖａｌｉａ
ｅｎｓｉｆｏｒｍｉｓ（すなわちＣｏｎ−Ａ）または植物Ｍｙｒｉａｎｔｈｕｓ ｈｏｌｓｔｉｉ（すなわちＭＨＬ）のようなから得たレクチンのようなＨＩＶ病、ＨＣＶ関連肝炎、結核、および慢性細胞内病原貯蔵庫の生成と一致する種々の他の病気の病原体貯蔵庫の宿主へ標的化化合物を送達するシステムを創出するリポソームを記載する。これらの細胞聖域は、中でも樹状細胞、マクロファージおよび濾胞樹状細胞の異なる免疫学的、発展的および解剖学的サブセットを含んでいる。リポソーム細胞特異性ターゲティングは、炭水化学認識ドメイン（ＣＲＤ）を発現する進化的に保存されたレセプター、そして特にＭＲ（ＣＤ２０６）：ランゲリン（ＣＤ２０７）、ＤＥＣ−２０５（ＣＤ２０５）、およびＤＣ−ＳＩＧＮ（ＣＤ２０９）を含む、いわゆるＣ−タイプレクチンレセプター（ＣＴＬＲ）を介して達成される。これらのすべてはいわゆるマルチレクチンである。本発明の目的は、細胞内病原体を根絶し、そのため多種類のウイルス、細菌およびカビ病全体の治療のための最も価値ある新しいアプローチを提供する手段を提供することである。加えて、適切なレクチンとのＨＩＶの不可逆的相互作用の原理は、活溌に伝播するＨＩＶおよび／または他のウイルスおよび細菌を致命的に妨害することができる。指摘したように、カプセル化された承認された薬物（化学療法剤のような）を含むこの戦略の変形も、慢性非感染性病、特に肝臓および胃腸管に関連するそれらに適用することができる。ある場合には、この目標は表面誘導体化モノ−またはポリガラクトース依存ターゲティングメカニズムのリポソームを採用することによって達成することができる。
【本発明の詳細な説明】
【００７２】
ＨＩＶ−１，ＨＣＶおよび結核菌を含むある種の病原／感染作因は、細胞の進化的に古代Ｃ−タイプレクチン依存性病原体クリアランスを利用することによって感染性エンドソーム／細胞内貯蔵庫を確立できることが増々明らかになった（Ｇｉｅｓｅｌｅｒ
ＲＫ，Ｍａｒｇｕｔａｎ Ｇ，Ｈａｈｎ ＭＪ，Ｐｅｒｄｏｎ ＬＡ，Ｄｒｉｅｓｓｅｎ ＷＨ，Ｓｕｌｌｉｖａｎ ＳＭ，Ｓｃｏｌａｒｏ ＭＪ，ＤＣ−ＳＩＧＮ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ
ｌｉｐｏｓｏｍａｌ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｍｙｅｌｏｉｄ
ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ ＨＩＶ ｄｉｓｅａｓｅ，Ｓｃａｎ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００４；５９：４１５−２４；およびその中の引用文献）。その上抗原提供細胞内に居住する時、これらの感染作因は抗原提供細胞のＴ細胞指令機能をくつがえし、このため免疫サーベランスを逃す。特にｍＤＣによって発現されたＤＣ−ＳＩＧＮの誤用は病原体の抗原のＡＰＣの処理を迂回させ、および／またはトール様レセプター仲介シグナリングを変えることができる。潜在的に保護的なＴ−細胞応答がこのため廃棄されるか誤指導される。ここで議論するように、マンノースレセプター、ランゲリンおよびＤＥＣ−２０５のような他のＣＴＬレセプターも使用され、これは同様にそれらの正規の信号経路をそらせる結果となる（ｖａｎ
Ｋｏｏｙｋ Ｙ，Ｇｅｉｊｔｅｎ ｂｅｅｋ ＴＢ，ＤＣ−ＳＩＧＮ：ｅｓｃａｐｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｆｏｒ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００３；３：６９７−７０９）。それ故ここに記載した本発明はＨＩＶ（または他の病原体／感染作因）が隠れている細胞内コンパートへ治療的に侵入するパン−ＣＴＬターゲティングシステムを採用する。
【００７３】
ＣＴＬレセプターは病原の表面に主に発現される炭水化物を認識する。これらの特徴的糖は種ボーダーを橋かけし、このためＣＴＬレセプターが広スペクトルの感性作因／病原体を妨害するのを許す（Ｔａｙｌｏｒ
ＭＥ，Ｄｒｉｃｋａｍｅｒ Ｋ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ ｆｏｒ ｈｉｇｈ ａｆｆｉｎｉｔｙ ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ｃｏｍｐｌｅｘ ｌｉｇａｎｄｓ
ｂｙ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｍａｎｎｏｓｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ １９９３；２６８：３９９−４０４；Ｂｏｔｏｓ Ｉ，Ｗｌｏｄａｗｅｒ Ａ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ
ｔｈａｔ ｂｉｎｄ ｈｉｇｈ−ｍａｎｎｏｓｅ ｓｕｇａｒｓ ｏｆ ｔｈｅ ＨＩＶ ｅｎｖｅｌｏｐｅ，Ｐｒｏｇ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ：ｉｎ ｐｒｅｓｓ）。ここに記載する本発明は、本発明のターゲティングシステムにおいてＣ−タイプレクチンレセプターの糖選択性の利益を取る。ＣＴＬレセプターは優先的に選択的に広く病原制限された単糖類マンノース、フコースおよびＮ−アセチルグルコサミン、および同様な性格の多価オリゴサッカライドへ結合する（Ｇｅｙｅｒ
Ｈ，Ｈｏｌｓｃｈｂａｃｈ Ｃ，Ｈｕｎｓｍａｎｎ Ｇ，Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ Ｊ，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ
ｏｆ ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｌｉｎｋｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｅｎｖｅｌｏｐｅ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ １２０，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ １９８８；２６３：１１７６０−７；Ｔａｙｌｅｒ
ＭＥ，Ｄｒｉｃｋａｍｅｒ Ｋ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｆｏｒ ｈｉｇｈ ａｆｆｉｎｉｔｙ ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ｃｏｍｐｌｅｘ ｌｉｇａｎｄｓ
ｂｙ ｔｈｅ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ １９９３；２６８：３９９−４０４；Ｂｏｔｏｓ Ｉ，Ｗｌｏｄａｗｅｒ Ａ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ
ｔｈａｔ ｂｉｎｄ ｈｉｇｈ−ｍａｎｎｏｓｅ ｓｕｇａｒｓ ｏｆ ｔｈｅ ＨＩＶ ｅｎｖｅｌｏｐｅ，Ｐｒｏｇ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ：ｉｎ ｐｒｅｓｓ）。本発明に関し、病原様炭水化物−依存ターゲティングメカニズムは、貯蔵および他の細胞をターゲットし、そしてそのような細胞へ活性剤／化合物を細胞内へ送達するように設計されている。病原体保有細胞は、ウイルスおよび細菌および／または潜在病原体のような感染作因のための貯蔵庫を提供する細胞である。
【００７４】
ＣａｍｂｉおよびＦｉｇｄｏｒは、免疫系中のＣＴＬレセプターは二重機能、すなわち主に病原体認識および細胞接着を許容する機能を有することを指摘した。このことは、（１）ＤＣ−ＳＩＧＮ、マンノースレセプターおよびＤＥＣ−２０５のようなレセプターへの病原体結合は後期エンドソーム／リゾソームのエンドサイト−シスおよび融合を招来し、（２）レセプターのあるタイプ、例えばＤＣ−ＳＩＧＮ、マンノースレセプター、ＤＣＡＬ
１およびセレクチンはｍＤＣと、続くＴ−細胞活性化および共刺激のための必要条件としてのＴ−細胞の間、それに白血球と内皮の間（それにより白血球ホーミングを仲介）の接触を仲介することを包含する。このようにＤＣ−ＳＩＧＮおよびマンノースレセプターのようなＣＴＬレセプターはエンドサイト−シスおよび接触／接着を仲介することが明らかになった（Ｃａｍｂｉ
Ａ，Ｆｉｇｄｏｒ ＣＧ，Ｄｕａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ，Ｃｕｒｒ
Ｏｐｉｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ２００３；１５：５３９−４６）。注目すべきはそのようなレセプターは大部分のＨＩＶ保有細胞によって発現されることである。ある種のＣＴＬ分子の二重の生理学的機能は、（ｉ）ＨＩＶ貯蔵庫の生成（病原体結合および取り込みにより）、そしてその後（ｉｉ）ウイルスを局外者細胞へ移す（接触／接着により）ことにおいてそれらの同様な二重の病理的役目のための決定的要因であり得る。大部分のＨＩＶ保有細胞はそれらの表面において糖結合ＣＴＬレセプターをディスプレーする。ここで記載する本発明は天然の原始的それ故基本的ＣＲＤ−レクチンコンセプトに基いて構築され、そしてその利益を享受する、そのような病気のための治療戦略を実現する。その上、細胞はＣＲＤによって結合される時リガンドを内部化することができる事実のため、この戦略は同様に非感染性慢性病にさえも向けることができる。
【００７５】
しかしながら、Ｔ−メモリ細胞および天然キラー細胞貯蔵庫に関し（Ｗｅｉｓ ＷＩ，Ｔａｙｌｏｒ ＭＥ，Ｄｉｃｋａｍｅｒ Ｋ，Ｔｈｅ Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎ
ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ ｉｎ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ １９９８；１６３：１９−３４），構造的に似たＣ−タイプレクチン様ドメイン（ＣＴＬＤ）をディスプレーするレセプターが発現される。それ故ＣＴＬおよびＣＴＬＣレセプターは進化的に関連しないが（Ｋｈａｌｔｕｒｉｎ
Ｋ，Ｂｅｃｋｅｒ Ｍ，Ｒｉｎｋｅｖｉｃｈ Ｂ，Ｂｏｓｃｈ ＴＣ，Ｕｒｏｃｈｏｒｄａｔｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｏｒｉｇｉｎ ｏｆ ｎａｔｕｒａｌ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌｓ：ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ
ｏｆ ａ ＣＤ９４／ＮＫＲ−Ｐ１−ｒｅｌａｔｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｉｎ ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌｓ ｏｆ Ｂｏｔｒｙｌｌｕｓ，Ｐｒｏｃ Ｎａｔ１ Ａｃａｄ Ｓｃｉ
ＵＳＡ ２００３；１００：６２２−７，Ｅｐｕｂ ２００３ Ｊａｎ ０７；Ｚａｌｅｎｓｋｙ ＡＮ，Ｇｒｅａｄｙ ＪＥ，Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎ−ｌｉｋｅ ｄｏｍａｉｎｓ
ｉｎ Ｆｕｇｕｒｕｒｉｐｅｓ，ＢＭＣ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ ２００４；５：５１），それら両者はＨＩＶばかりでなく、それらの構造的類似体をターゲティングするシステムによって結合される。本発明ターゲティングシステムはＨＩＶ保有細胞の全体の組成に向けられるように設計される。
【００７６】
本発明のターゲティングシステムは、病原体保有細胞にばかりでなく、リンパ系器官および組織内の保有細胞を介して感染したＴ細胞にも到達することができる。本発明のリポソームターゲティングシステムは標的細胞によって取り込まれる前に約２時の膜冗長時間を示した。特に、（ｉ）この遅延取り込み、（ｉｉ）ＣＴＬレセプターと、そして病原体保有細胞とＴ細胞の間に形成された免疫学的シナプス中の過渡的に結合したリポソームの会合、（ｉｉｉ）Ｔ細胞へのＨＩＶ受渡しのためのこれらのレセプターの決定的役割（Ａｒｒｉｇｈｉ
ＪＦ，Ｐｉｏｎ Ｍ，Ｇａｒｃｉａ Ｅ，Ｅｓｃｏｌａ ＪＭ，ｖａｎ Ｋｏｏｙｋ Ｙ，Ｇｅｉｊｔｅｎ ｂｅｅｋ ＴＢ，Ｐｉｇｕｅｔ Ｖ，ＤＣ−ＳＩＧＮ−ｍｅｄｉａｔｅｄ
ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｓｙｎａｐｓｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｅｎｈａｎｃｅｓ Ｘ４ ＨＩＶ−１ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｆｒｏｍ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ
ｔｏ Ｔ ｃｅｌｌｓ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００４；２００：１２７９−８８）と、および（ｉｖ）リポソームのＨＩＶ様サイズ（Ｇｉｅｓｅｌｅｒ ＲＫ，Ｍａｒｑｕｉｔａｎ
Ｇ，Ｈａｈｎ ＭＪ，Ｐｅｒｄｏｎ ＬＡ，Ｄｒｉｅｓｓｅｎ ＷＨ，Ｓｕｌｌｉｖａｎ ＳＭ，Ｓｃｏｌａｒｏ ＭＪ，ＤＣ−ＳＩＧＮ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｌｉｐｏｓｏｍａｌ
ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｍｙｅｌｏｉｄ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ
ｆｏｒ ＨＩＶ ｄｉｓｅａｓｅ，Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００４；５９：４１５−２４）は、本発明のターゲット送達システムをしてウイルス自体により採用されるＴ−細胞侵入のための経路を利用させる。それによって本発明のターゲティングシステムはＴ細胞へも同様に移送されることができる。ある程度、レクチンは新しく感染するＨＩＶを凝集し、そしてウイルスが活溌に複製されるのを妨害するためにＴ細胞へ送達し得る（Ｇｉｅｓｅｌｅｒ
ＲＫ，Ｍａｒｑｕｉｔａｎ Ｇ，Ｈａｈｎ ＭＪ，Ｐｅｒｄｏｎ ＬＡ，Ｄｒｉｅｓｓｅｎ ＷＨ，Ｓｕｌｌｉｖａｎ ＳＭ，Ｓｃｏｌａｒｏ ＭＪ，ＤＣ−ＳＩＧＮ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ
ｌｉｐｏｓｏｍａｌ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｍｙｅｌｏｉｄ
ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ＨＩＶ ｄｉｓｅａｓ，Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００４；５９：４１５−２４）。
【００７７】
膜コレステロールはＨＩＶの細胞取り込みにおいてキーファクターである（Ｌｉａｏ Ｚ，Ｃｉｍａｋａｓｋｙ ＬＭ，Ｈａｍｐｔｏｎ Ｒ，Ｎｇｆｕｙｅｎ
ＤＨ，Ｈｉｌｄｒｅｔｈ ＪＥ，Ｌｉｐｉｄ ｒａｆｔｓ ａｎｄ ＨＩＶ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ：ｈｏｓｔ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｉｓ ｒｅｑｕｉｒｅｄ
ｆｏｒ ｉｎｆｅｃｔｉｏ ｂｙ ＨＩＶ ｔｙｐｅ １，ＡＩＤＳ Ｒｅｓ Ｈｕｍ Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ ２００１；１７：１００９−１９）。本発明の一具体例においては、フコシルコレステロールの特徴化により、本発明のリポソームターゲティングシステムはこのため（融合阻害剤と同様に）感染性シナプスの脂質ラフト内でビリオンとリポソームの前融合を許容するＨＩＶトロピック成分を提供する。加えてＨＩＶ複製Ｔ細胞内へ往復動する時ターゲット化レクチン送達システムは、本発明のターゲット化リポソームの顕示されたエンドソームトロピズムのため主要なｇｐ１２０グリコシル化およびウイルスアセンブリがエンドソームコンパートメント内で起こる環境に遭遇し（Ｇｒｅｅｎｅ
ＷＣ，Ｐｅｔｅｒｌｉｎ ＢＭ，Ｃｈａｒｔｉｎｇ ＨＩＶ’Ｓ ｒｅｍａｋａｂｌｅ ｖｏｙａｇｅ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ
ｃｅｌｌ：Ｂａｓｉｃ ｓｃｉｅｎｃｅ ａｓ ａ ｐａｓｓｐｏｒｔ ｔｏ ｆｕｔｕｒｅ ｔｈｅｒａｐｙ，Ｎａｔ Ｍｅｄ ２００２；８：６７３−８０）、このため高度に保護されたｇｐ１２０残基（以下を見よ）のレクチン妨害がＴリンパ球内でも効果を有することが期待される。第３に、ウイルス発芽に必須のＨＩＶ
Ｇｒｇ ポリプロティンがコレステロールリッチ膜ミクロドメインと優先的に会合する（Ｏｎｏ Ａ，Ｆｒｅｅｄ ＢＯ，Ｐｌａｓｍａ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｒａｆｔｓ ｐｌａｙ
ａ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｒｏｌｅ ｉｎ ＨＩＶ−１ ａｓｓｅｍｂｌｙ ａｎｄ ｒｅｌｅａｓｅ，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ２００１；９８：１３９２５−３０）。Ｇａｙの物理化学的優先性はこのため本発明のリポソームターゲティングシステムのコレステロール成分を介してレクチントラップ中へ直接ビリオンの発芽へ導く。
【００７８】
このため本発明の送達システムは、活性ウイルス伝播のすべてのキープロセス、すなわち取り込み、アセンブリおよび発芽と潜在的に相互作用する。本発明のシステムおよび生産物は細胞ＨＩＶ貯蔵庫を妨害するほかに、Ｔ細胞中のＨＩＶの活溌な伝播を妨害する。
【００７９】
本発明の一具体例において、特異性細胞集団の細胞の表面上のＣＲＤレクチンへターゲット化されたリポソームシステムによる治療活性剤／化合物の送達のために特異性細胞集団が標的化される。植物レクチンのような活性剤をカプセル化し、そしてリポソームシステムの外表面上にＦｕｃ−４Ｃ−Ｃｈｏｌのような炭水化物誘導体化されたターゲティングリガンドを有するリポソームシステム（すなわち脂質−活性剤コンプレックス）が細胞へ投与される。本発明の他の具体例は、ターゲット化リポソームシステムである（すなわち活性剤を含有し、コンプレックスの表面に炭水化物誘導体化ターゲティングリガンドを有する脂質−活性剤コンプレックス）。本発明の好ましい具体例では、ターゲティングリガンドはＦｕｃ−４Ｃ−Ｃｈｏｌである。
【００８０】
１９８１年にＲｏｂｂｉｎｓらは哺乳類マクロファージ中に露出したマンノース残基と結合し、糖タンパク質を内部化する輸送システムを始めて同定した。彼等はマクロファージへ薬理学剤のターゲティングにおいて合成物質が有用であり、類似の化合物がそのような剤を他のタイプの細胞へターゲットするし得ることを予見した（Ｒｏｂｂｉｎｓ
ＪＣ，ＬａｍＭＨ，Ｔｒｉｐｐ ＣＳ，Ｂｕｇｉａｎｅｓｉ ＲＬ，Ｐｏｎｐｉｐｏｍ ＭＭ，Ｓｈｅｎ ＴＹ，Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｇｌｙｃｏｐｅｐｔｉｄｅ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ
ｆｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｅｎｄｏｃｙｔｏｓｉｓ ｂｙ ｍａｃｒａｐｈａｇｅｓ，Ｐｒｏｃ Ｎａｔ１ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １９８１；７８：７２９４−８）。
【００８１】
マンノース化表面を有するリポソームを採用する初期の実験は、マクロファージマンノース−フコースレセプター（今やマンノースレセプターＣＤ２０６またはＭＲＣ１と命名された。以下を見よ）との特異的相互作用を明らかにし、そのようなビヒクルは免疫調節剤を細網内皮細胞へ送達するために有用であるとの示唆へ導いた（Ｂａｒｒｅｔｔ
Ｇ，Ｔｅｎｕ ＪＰ，Ｙａｐｏ Ａ，Ｐｅｔｉｔ ＪＦ，Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ
ｍａｎｎｏｓｙｌａｔｅｄ ｐｈｏｐｈｏｌｉｐｉｄｓ ｃａｐａｂｌｅ ｏｆ ｔａｒｇｅｔｔｉｎｇ ｄｒｕｇｓ ｔｏ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ
Ａｃｔａ １９８６；８６２：１５３−６４）。そのようなリポソームに免疫調節剤をカプセル化する時、肺胞マクロファージはインビボおよびインビトロの両方において細胞毒性抗腫瘍レスポンスを誘発した（Ｂａｒｒｅｔｔ
ＧＭ，Ｎｏｌｉｂｅ Ｄ，Ｙａｐｏ Ａ，Ｐｅｔｉｔ ＪＦ，Ｔｅｎｕ ＪＰ，Ｕｓｅ ｏｆ ｍａｎｎｏｓｙｌａｔｅｄ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｆｏｒ ｉｎ ｖｉｖｏ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ
ｏｆ ａ ｍａｎｎｏｓｅ ａｃｔｉｖａｔｏｒ ａｎｄ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ，Ａｎｎ Ｉｎｓｔ Ｐａｓｔｅｕｒ
Ｉｍｍｕｎｏｌ １９８７；１３８：４３７−５０）。これらの結果は炭水化物ターゲット化リポソームシステムの可能性ある有用性を証明した。
【００８２】
もっと最近Ｃｏｐｌａｎｄらは、マンノシル化リポソームで未成熟単球誘導樹状細胞のマンノースレセプターＣ−タイプレクチン（ＣＤ２０６；ＭＲＣ１）をターゲットした。カプセル化したＥＩＴＣ−オバアルブミンによりモニターするとき、そのようなリポソームは、非マンノシル化中性または負に帯電したリポソームに比較した時、３７℃においてこれら細胞により優先的に結合され、取り込まれた。その上、強縮トキソイド（ＴＴ）をカプセル化するマンノシル化リポソームは、中性ＴＴ含有ソポソームまたは非カプセル化ＴＴよりもさらに効果的に樹状細胞依存ＴＴ−特異性Ｔ細胞刺激／伝播を誘発し、マンノシル化リポソームはカプセル化したペプチドまたはタンパクワクチンに対する免疫応答を増強するための多戈の送達ビヒクルであるとの結論へ導いた（Ｃｏｐｌａｎｄ
ＭＪ ｅｔ ａｌ，Ｌｉｐｏｓｏｍａｌ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ａｎｔｉｇｅｎ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，Ｖａｃｃｉｎｅ ２００３；２１：８８３−９０）。
【００８３】
上に要約した骨髄樹状細胞に関する両方の研究は（Ｃｏｐｌａｎ ＭＪらおよびＧｉｅｓｅｌｅｒ ＲＫ，Ｍａｒｑｕｉｔａｎ Ｇ，Ｈａｈｎ ＭＪ，Ｐｅｒｄｏｎ
ＬＡ，Ｄｒｉｅｓｓｅｎ ＷＨ，Ｓｕｌｌｉｖａｎ ＳＭ，Ｓｃｏｌａｒｏ ＭＪ，ＤＣ−ＳｉＧＮ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｌｉｐｏｓｏｍａｌ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ
ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｍｙｅｌｏｉｄ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ
ＨＩＶ ｄｉｓｅａｓｅ，Ｓｃａｎ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００４；５９：４１５−２４）は、このようにＣ−タイプレチクン（これらはここで特に言及される）を発現する細胞は、抗体または炭水化物標識リポソームによって細胞内取り込み、部位特異性送達および機能的変調のために高度に効率的に標的化されることができることを独立に証明した。
【００８４】
Ｃ−タイプレクチンレセプター特異性リポソームの全身投与時のインビボ生体内分布に関して、Ｋａｗａｋａｍｉらはマンノシル化、フコシル化およびガラクトシル化リポソームを研究した。マウスへ静脈内注射後、グリコシル化リポソームの３タイプのすべては循環液から速やかに排除され、そして肝臓内に優先的に回収され、そしてアシアロ糖タンパク質受容体を介して肝臓柔および非柔細胞によって異なる速度で取上げられた（Ｋａｗａｋａｍｉ
Ｓ，Ｗｏｎｇ Ｊ，Ｓａｔｏ Ａ，Ｈａｔｔｏｒｉ Ｙ，Ｙａｍａｓｈｉｔａ Ｆ，Ｈａｓｈｉｄｅ Ｍ，Ｂｉｏｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ
ｏｆ ｍａｎｎｏｓｙｌａｔｅｄ，ｆｕｃｏｓｙｌａｔｅｄ，ａｎｄ ｇａｌａｃｔｏｓｙｌａｔｅｄ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｉｎ ｍｉｃｅ Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ
Ａｃｔａ ２０００；１５２４：２５８−６５）。
【００８５】
しかしながら全身投与モードとは対照的に、本発明の具体例は区域的感染性病原体貯蔵庫のターゲティングのため局部リンパ節へ排出されるように皮下または皮内注射によるようなＣＴＬレセプター特異性リポソームの局部的投与を採用する。慢性非感染病の肝胃腸学的文脈における細胞標的を目的とする時でさえも、本発明の具体例は確立された器官指向方法、例えば肝動脈を介する直接注入の利益を享受することによって処置の選択性を増加させる（Ｋｅｍｅｙ
ＭＭ，Ａｌａｖａ Ｇ，Ｏｌｉｖｅｒ ＪＭ，Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｌｉｖｅｒ ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ ｏｆ ｃｉｒｃａｄｉａｎ ｐａｔｔｅｒｎｅｄ ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ
ｈｅｐａｔｉｃ ａｒｔｅｒｙ ｉｎｆｕｓｉｏｎ ｏｆ ＦＵＤＲ，ＨＰＢ Ｓｕｒｇ １９９４；７：２１９−２４）。それ故グリコシル化リポソームターゲティングシステムを採用する時、期待される結果は、（ｉ）その局部投与はシステムの肝内ロスを防止すること、（ｉｉ）その器官指向投与は吸収の二次的全身部位におけるシステムのロスを最小化することである。望む区域もしくは器官への集中化のほかに、両方のアプローチは明らかな薬物毒性学的利益を有する。
【００８６】
本発明の好ましい具体例において、ある種のＣＲＤレクチンを発現する細胞集団へリポソームカプセル化治療的活性化合物の特異的送達のためにフコース標識リポソームが採用さる。見込まれる特定的応用は以下の治療ターゲティングを含む。
（ｉ）ヒト免疫不全ウイルスタイプ１（ＨＩＶ−１）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、および結核菌での感染のような感染病のＣＲＤ＋（すなわちＣＴＬまたはＣＴＬＤレセプター＋）慢性感染病原体保有細胞；
（ｉｉ）結腸および直腸の癌のようなＣＲＤ＋（すなわちＲＢＧファミリーメンバー＋）新生細胞；および
（ｉｉｉ）例えば非アルコール性脂肪肝炎における高アポトーシス肝細胞へ向けた、肝臓のＣＲＤ＋柔および／または非柔細胞（アシアロ糖タンパク受容体＋肝細胞；マンノース／フコースレセプター＋，非柔肝細胞；およびＬ−ＳＩＧＮ＋肝臓洞血管内皮細胞）
【００８７】
なおＣタイプレクチンのほかに、感染性細胞内貯蔵庫の確立に含まれるレセプターは、ｈＮＨＲ−Ｐ１ＡおよびＫＬＲＧ１のような非ＣＴＬレクチンをも含んでいる。しかしながら、これら分子はＣ−タイプレクチン様ドメイン（ＣＴＬＤ）をディスプレーするので、ＣＴＬおよびＣＴＬＤレクチンの両方は共通して病原体結合炭水化物認識ドメインを特徴としている（Ｃａｍｂｉ
Ａ，Ｆｉｇｄｏｒ ＣＧ，Ｄｕａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ，Ｃｕｒｒ
Ｏｐｉｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ２００３；１５：５３９−４６）。この共通のデノミネーターにより、本発明の炭水化物−依存ターゲティングメカニズムは非ＣＴＬレセプター上のＣＴＬＤ構造へも結合する。その結果本発明の汎ＣＴＬ／ＣＴＬＤターゲティングシステムは、すべてのタイプのＨＩＶ保有細胞へ治療的に指向させる能力を持っている。
【００８８】
要するに、本発明の方法および生産物（すなわちターゲット化リポソームを含んでいるターゲット化脂質−活性剤コンプレックス）は、ＨＩＶによって採用されるＣＴＬおよびＣＴＬＤレセプター仲介経路によって細胞へ結合し、侵入する。その上本発明の生産物はウイルス自体（直径約１２０ｎｍ）に対して優先的に似たサイズ（直径約１５０ｎｍ）である。それにも拘らず、ＤＣ−ＳＩＧＮは広い範囲にわたるサイズの（感染性）粒子を取り込むという事実より（Ｅｎｇｅｒｉｎｇ
Ａ，Ｇｅｉｊｔｅｎｂｅｅｋ ＴＢＨ，ｖａｎ Ｖ１ｉｅｔ ＳＪ ｅｔ ａｌ，Ｔｈｅ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ
ＤＣ−ＳＩＧＮ ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚｅｓ ａｎｔｉｇｅｎ ｆｏｒ ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ ｔｏ Ｔ ｃｅｌｌｓ，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００２；１６８：２１１８−２６；Ｋｗｏｎ
ＤＳ，Ｇｒｅｇｏｒｉｏ Ｇ，Ｂｉｔｔｏｎ Ｎ，Ｈｅｎｄｒｉｃｋｓｏｎ ＷＡ，Ｌｉｔｔｍａｎ ＤＲ，ＤＣ−ＳｉＧＮ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎ
ｏｆ ＨＩＶ ｉｓ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ ｔｒａｎｓ−ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｔ ｃｅｌｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ ２００２；１６：１３５−４４；Ｃａｍｂｉ
Ａ，Ｇｉｊｚｅｎ Ｋ，ｄｅ Ｖｒｉｅｓ ＪＭ ｅｔ ａｌ，Ｔｈｅ Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎ ＤＣ−ＳＩＧＮ（ＣＤ２０９）ｉｓ ａｎ ａｎｔｉｇｅｎ−ｕｐｔａｋｅ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ ｏｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００３；３３：５３２−８；Ｃｏｌｍｅｎａｒｅｓ
Ｍ，Ｐｕｉｇ−Ｋｒｏｇｅｒ Ａ，Ｐｅｌｌｏ ＯＭ，Ｃｏｒｂｉ ＡＬ，Ｒｉｖａｓ Ｌ，Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ（ＤＣ）−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ
ａｄｈｅｓｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ３（ＩＣＡＭ−３）−ｇｒａｂｂｉｎｇ ｎｏｎｉｎｔｅｇｒｉｎ（ＤＣ−ＳＩＧＮ，ＤＣ２０９），ａ Ｃ−ｔｙｐｅ ｓｕｒｆａｃｅ
ｌｅｃｔｉｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ＤＣｓ，ｉｓ ａ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ａｍａｓｔｉｇｏｔｅｓ，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２００２；２７７：３６７６６−９）、本発明のターゲット化送達システムおよび生産物が広く種々の感染作因を確立する慢性細胞内貯蔵庫を妨害することを可能化する。
【００８９】
成功的なターゲティングのための決定的ファクターの一つは標的構造の膜密度である。それらのライフサイクルの少なくとも一段階において、すべての標的化すべき病原体保有細胞は中ないし高膜密度においてＣＴＬおよび／またはＣＴＬＤを発現する。ＣＤ−ＳＩＧＮ／ＣＤ２０９の代表例に関し、Ｂａｒｉｂａｕｄらは少なくとも１×１０５分子／未成熟ｍＤＣの表面発現を測定している（Ｂａｒｉｂａｕｄ Ｆ，Ｐｌｈｌｍａｎｎ Ｓ，Ｌｅｓｌｉｅ
Ｇ，Ｍｏｒｔａｒｉ Ｆ，Ｄｏｍａｓ ＲＷ，Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｖｉｒｕｓ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ
ＤＣ−ＳＩＧＮ ｏｎ ｍｏｎｏｃｙｔｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，Ｊ Ｖｉｒｏｌ ２００２；７６：９１３５−４２）。加えて、これらのターゲティング分子はＴ細胞により確立された脂質ラフツ内および／または（感染性）シナプス内で細胞の膜中で密に配列している（Ａｒｒｉｇｈｉ
ＪＦ，Ｐｉｏｎ Ｍ，Ｇａｒｃｉａ Ｅ，Ｅｓｃｏｌａ ＪＭ，ｖａｎＫｏｏｙｋ Ｙ，Ｇｅｉｊｔｅｎｂｅｅｋ ＴＢ，Ｄｉｇｕｅｔ Ｖ，ＤＣ−ＳＩＧＮ−ｍｅｄｉａｔｅｄ
ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｓｙａｐｓｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｅｎｈａｎｃｅｓ Ｘ４ ＨＩＶ−１ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｆｒｏｍ ｄｅｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｔｏ
Ｔ ｃｅｌｌｓ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００４；２００：１２７９−８８；Ｇｉｅｓｅｌｅｒ ＲＫ，Ｍａｒｑｕｉｔａｎ Ｇ，Ｈａｈｎ ＭＪ，Ｐｅｒｄｏｎ ＬＡ，Ｄｒｉｅｓｓｅｎ
ＷＨ，Ｓｕｌｌｉｖａｎ ＳＭ，Ｓｃｏｌａｒｏ ＭＪ，ＤＣ−ＳＩＧＮ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｌｉｐｏｓｏｍａｌ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ
ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｍｙｅｌｏｉｄ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ：ｉｍｐｌｉｃｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ＨＩＶ ｄｉｓｅａｓｅ，Ｓｃａｎ
Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００４；５９：４１５−２４）。
【００９０】
両方を合せて、そのような条件はここで確立したように、非常に高いターゲティング効率によって快適な分子標的を提供する。このためここに提示される細胞内感染病病原体貯蔵庫のターゲティングのための新規な統合技術は、本発明技術が共通して強力な治療介入のためすべての既知のＨＩＶ保有細胞タイプに到達することを可能にするであろう。ＣＴＬおよびＣＴＬＤレセプターの両方は、ある種のモノまたはポクサッカライド（例えばフコースまたは重合したフコース）で標識され本発明のリポソームの種々のウイルス、細菌および寄生虫の種々の種を含む他の感染作因による細胞内コンパートメントへの往復動のために束ねられることができる（Ｃａｍｂｉ
Ａ，Ｆｉｇｄｏｒ ＣＧ，Ｄｕａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ，Ｃｕｒｒ
Ｏｐｉｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ２００３；１５：５３９−４６）。本発明の方法および生産物は、ＨＩＶ−１、ＨＣＶ、結核菌およびそれ以上の妨害および根絶を許容する。この目的のため、適切な治療化合物が送達されなければならない。本発明の一具体例において、構造的にインタクトな感染作因をそれらの特徴的表面糖を介して凝集する能力を有する化合物が本発明の方法および生産物と共に採用される。
【００９１】
細胞内貯蔵庫の治療的ターゲティングのための病原体制限構造
ＨＩＶおよびＨＣＶのようなレトロウイルスの頻繁な突然変異のため（例えばＭａｊｏｒ ＭＥ，Ｒｅｈｅｒｍａｎｎ Ｂ，Ｆｅｉｎｓｔｏｎｅ Ｓ，Ｈｅｐａｔｉｓｉｓ
Ｃ Ｖｉｒｕｓｅｓ，Ｉｎ：Ｋｎｉｐｅ ＤＭ，Ｈｏｗｌｅｙ ＰＭ，Ｇｒｉｆｆｉｎ ＤＥ，Ｌａｍｂ ＲＡ，Ｍａｒｔｉｎ ＭＡ．Ｒｏｚｍａｎ Ｂ，Ｓｔｒａｕｓ ＳＥ（ｅｄｓ．），Ｆｉｅｌｄｓ
Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，４ｔｈ ｅｄ．Ｖｏｌ Ｉ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ ２００１：ＰＲ１１２７−６２），そのようなウイルスのタンパク質転写はターゲット化リポソームシステムを介する化合物送達のための貧弱にしか信頼できる目標に過ぎない。加えてもしウイルスエンベロープタンパク質（または細菌細胞壁または膜タンパク質）が適切な標的としての資格を有するとしても、これらタンパク質は一般に重いグリコシル化によってマスクされている。しかしながらこれらウイルスエンベロープグリコシルブランチ（または細菌の場合は糖衣）は非常にコンスタントなドメインを特徴とする（例えばＧｅｙｅｒ
Ｈ，Ｈｏｌｓｃｈｂａｃｈ Ｃ，Ｈｕｎｓｍａｎｎ Ｇ，Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ Ｊ，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏ−ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ．Ｓｔｒｕｅｔｕｒｅｓ
ｏｆ ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｌｉｎｋｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｅｎｖｅｌｏｐｅ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓ １２０，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ １９８８；２５：２６３：１１７６０−７）。
【００９２】
ウイルスに関し、そしてＨＩＶの例において、基礎となる理由はＨＩＶ ｇｐ１２０分子のアミノ酸基は宿主細胞のラフな細胞質細網内皮においてグリコシリル化され、そして細胞のゴルジ装置においてさらに処理されていることである（Ｋｏｒｍｆｅｌｄ
Ｒ，Ｋｏｒｎｆｅｌｄ Ｓ，Ａｓｓｅｍｂｌｙ ｏｆ ａｓｐａｒａｇｉｎｅ−ｌｉｎｋｅｄ ｏｌｉｇｏｓｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｂｉｏｃｈｅｍ １９８５；５４：６３１−６４）。このようにこれらのプロセスはＨＩＶ自体の水びたし酵素から独立に働く。後で記載するように、ｇｐ１２０の目立つ成分（他のウイルスおよび細菌表面糖のもののように）はマンノースである。対照的に哺乳類細胞表面または血清糖タンパク質ブランチは末端マンノースをまれに持つだけである（Ｗｅｉｓ
ｅｔ ａｌ，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ １９９８；１６３：１９−３４）。本発明の一具体例においては、本発明のリポソーム送達システムはそのようなエンベロープまたは糖衣炭水化物（最も注目すべきはマンノースおよびフコース残基を特徴とする）を強く相互作用する多価植物レクチンを含むかカプセル化する。感染細胞中へ放出される時、このレクチンは感染作因の細胞内貯蔵庫を凝集する。
【００９３】
詳しくは、ＨＩＶエンペロープ糖タンパクｇｐ１２０およびｇｐ４１は標的細胞へのＨＩＶ侵入を仲介するトリマーコンプレックスを生成する（Ａｌｌａｎ ＪＳ，Ｅｓｓｅｘ
Ｍ，Ｍａｊｏｒ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｔｉｇｅｎｓ ｔｈａｔ ｉｎｄｕｃｅ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｉｎ ＡＩＤＳ ｐａｔｉｅｎｔ ａｒｅ ｅｎｃｏｄｅｄ
ｂｙ ＨＴＬＶ−ＩＩＩ，Ｓｃｉｅｎｃｅ １９５８；２２８：１０９１−４）。トリマー中のｇｐ１２０のアクセス可能の大部分は、レセプター結合区域を囲む可変な重度にグリコシリ化されたコアとループ構造から構成される（Ｗｙａｔｔ
Ｒ，Ｋｗｏｎｇ ＰＤ，Ｄｅｓｊａｒｄｉｎｓ Ｅ，Ｓｗｅｅｔ ＲＷ，Ｒｏｂｉｎｓｏｎ Ｊ，Ｈｅｎｄｒｉｃｋｓｏｎ ＷＡ，Ｓｏｄｒｏｓｋｉ ＪＧ，Ｔｈｅ ａｎｔｉｇｅｎｉｃ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ＨＩＶ ｇｐ１２０ ｅｎｖｅｌｏｐｅ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ １９９８；３９３：７０５−１１）。ｇｐ１２０の分子量の約５０％が糖によって提供され、その全部がｇｐ１２０のペプチドバックボーンのアミノ酸をアンカーするようにＮ−結合している（Ｂｏｔｏｓ
Ｉ，Ｗｌｏｄａｗｅｒ Ａ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｔｈａｔ ｂｉｎｄ ｈｉｇｈ−ｍａｎｎｏｓｅ ｓｕｇａｒｓ ｏｆ ＨＩＶ ｅｎｖｅｌｏｐｅ，Ｐｒｏｇ Ｂｉｏｐｈｙｓ
Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ：ｉｎ ｐｒｅｓｓ）。事実ＨＩＶｇｐ１２０は共通のペンタサッカライドコアとＮ−結合した炭水化物タイプのすべての既知の３カテゴリー、すなわち高マンノース（３３％）、ハイブリッド（４％）およびコンプレックス（６３％）を特徴としている（Ｋｏｒｎｆｅｌｄ
Ｒ，Ｋｏｒｎｆｅｌｄ Ｓ，Ａｓｓｅｍｂｌｙ ｏｆ ａｓｐａｒａｇｉｎｅ−ｌｉｎｋｅｄ ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｂｉｏｃｈｅｍ １９８５；５４：６３１−６４）。
【００９４】
高マンノースオリゴサッカライドにおいて、２ないし６個のマンノース残基がペンタサッカライドコアへ結合している（Ｓａｎｄｅｒｓ ＲＷ，Ｖｅｎｔｕｒｉ
Ｍ，Ｓｃｈｉｆｆｎｅｒ Ｌ，Ｋａｌｙａｎａｒａｍａｎ Ｒ，Ｋａｔｉｎｇｅｒ Ｈ，Ｌｌｏｙｄ ＫＯ，Ｋｗｏｎｇ ＰＤ，Ｍｏｏｒ ＪＰ，Ｔｈｅ ｍａｎｎｏｓｅ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ
ｅｐｉｔｏｐｅ ｆｏｒ ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｙ ２Ｇ１２ ｏｎ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ １ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ
ｇｐ１２０，Ｊ Ｖｉｏｌ ２００２；７６：７２９３−３０５）。ハイブリッドオリゴサッカライドは高マンノースおよびコンプレックス炭水化物構造の両方の要素を含んでいる（Ｋｏｒｎｆｅｌｄ
Ｒ，Ｋｏｒｎｆｅｌｄ Ｓ，Ａｓｓｅｍｂｌｙ ｏｆ ａｓｐａｒａｇｉｎｅ−ｌｉｎｋｅｄ ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｂｉｏｃｈｅｍ １９８５；５４：６３１−６４）。コンプレックスオリゴサッカライドはＬ−フコース（９０％）、マンノース、ガラクトース、Ｎ−アセチルグルコサミン、Ｎ−アセチルガラクトサミン、およびシアル酸を含むことができる（Ｒａｏ
ＶＳＲ，Ｑａｓｂａ ＰＫ，Ｂａｌａｊｉ ＰＶ，Ｃｈａｎｄｒａｓｅｋａｒａｎ Ｒ，Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ，Ｈａｒｗｏｏｄ Ａｃａｄｅｍｉｃ
Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ：１９９８；Ｍｉｚｕｏｃｈｉ Ｔ，Ｓｐｅｌｌｍａｎ ＭＷ，Ｌａｒｋｉｎ Ｍ，Ｓｏｌｏｍｏｎ Ｊ，Ｂａｓａ ＬＪ，Ｆｅｉｚｉ
Ｔ，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ（ＨＩＶ）ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｅｎｖｅｌｏｐｅ
ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ｇｐ１２０ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ−ｈａｍｓｔｅｒ ｏｖａｒｙ ｃｅｌｌｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ １９８８；２５４：５９９−６０３；Ｍｉｚｕｏｃｈｉ
Ｔ，Ｓｐｅｌｌｍａｎ ＭＷ，Ｌａｒｋｉｎ Ｍ，Ｓｏｌｏｍｏｎ Ｊ，Ｂａｓａ ＬＪ，Ｆｅｉｚｉ Ｔ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｂｙ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ（ＨＩＶ）ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ
ｅｎｖｅｌｏｐｅ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ｇｐ１２０ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈａｍｓｔｅｒ ｏｖａｒｙ ｃｅｌｌｓ，Ｂｉｏｍｅｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ
１９８８；２：２６０−７０）。
【００９５】
オリゴサッカライドの利用し得る結晶構造はグリコシド結合のためのごく限られた数のコンフォメーションを曝露するに過ぎない（Ｐｅｔｒｅｓｃｕ ＡＪ，Ｐｅｔｅｒｓｃｕ
ＳＭ，Ｄｗｅｋ ＲＡ，Ｗｏｒｍａｌｄ ＭＲ，Ａ ｓｔａｔｉｓｃａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｎ− ａｎｄ Ｏ−ｇｌｙｃａｎ ｌｉｎｋａｇｅ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ
ｆｒｏｍ ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈｉｃ ｄａｔａ，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ １９９９；９：３４３−５２）。分子ダイナミックシミュレーションおよびＮＭＲ結果は、枝分かれした高マンノース炭水化物は、それらのフレキシブルなグリコシド結合にもかかわらず、良く限定された全体のコンフォメーションを持っていることを示唆する（Ｗｏｏｄｓ
ＲＪ，Ｐａｔｈｉａｓｅｒｉｌ Ａ，Ｗｏｒｍａｌｄ ＭＲ，Ｅｄｇｅ ＣＪ，Ｄｗｅｋ ＲＡ，Ｔｈｅ ｈｉｇｈ ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ｉｎｔｅｒｎａｌ ｆｌｅｘｉｂｉｌｉｔｙ
ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｆｏｒ ｏｎ ｏｌｉｇｏｍａｎｎｏｓｅ ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｄｏｅｓ ｎｏｔ ａｌｔｅｒ ｔｈｅ ｏｖｅｒａｌｌ ｔｏｐｏｌｏｇｙ
ｏｆ ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌｅ，Ｅｕｒ Ｊ Ｂｉｏｃｈｅｍ １９９８；２５８：３７２−８６）。この限られたオリゴサッカライドオリエンテーションは糖結合レクチンとの相互作用において重要であるらしい。例えば、第２のレクチン−炭水化物相互作用は利用できる減らされたコンフォメーションスペースと、そして第１のレクチン−炭水化物相互作用によって創出された減らされたエントロピーペナルティーによって増強されることができる。同様なメカニズムは多価レクチン−炭水化物相互作用に含まれているらしい（Ｎｇ
ＫＫ，Ｋｏｌａｔｋａｒ ＡＲ，Ｐａｒｋ−Ｓｎｙｄｅｒ Ｓ，Ｆｅｉｎｂｅｒｇ Ｈ，Ｃｌａｒｋ ＤＡ，Ｄｒｉｃｋａｍｅｒ Ｋ，Ｗｅｉｓ ＷＩ，Ｏｒｉｅｎｔａｔｉｏｎ
ｏｆ Ｂｏｕｎｄ ｌｉｇａｎｄｓ ｉｎ ｍａｎｎｏｓｅ−ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎｓ．Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｍｕｌｔｉｖａｌｅｎｔ ｌｉｇａｎｄ
ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２００２；２７７：１６０８８−９５）。
【００９６】
それらの高いマンノースおよびフコース含有量と、そしてそれらのマンノース残基のための限定されたコンフォメーション自由度によるレクチン相互作用で、ＨＩＶのような感染作因は細胞外Ｃ−タイプレクチンおよびＣＴＬＤレセプターへの結合に良く適合している。実際細胞はそれら自身の分泌糖タンパクをこれら糖へ結合しないので、我々は細胞は、それらがウイルス感染の場合、そのようなサッカライドへ特異的に結合し、他の細胞が次々に認識し、結合し、そしてそれらの連続的クリアランスのためＣ−タイプレクチンによって遊離された感染作因を取り込むものと仮説する。しかし細胞内貯蔵庫を形成する感染作因については、それらの高度に保存された炭水化物コートが貯蔵庫形成のそれらのＣＴＬ／ＣＴＬＤ仲介経路を確実にする。同時に、これらの特徴はアキレスの踵をもたらし、ＨＩＶ
ｇｐ１２０のような分子が治療的レクチン妨害に完全に適した広い炭水化物特徴をディスプレーする。
【００９７】
治療上活性な化合物／剤
ここに記載される発明に関し、治療上活性な化合物は、ターゲット化されたリポソーム送達によって関心ある細胞集団中へ特異的に導入されることができる。
【００９８】
細胞内病原体の治療的妨害剤としての植物レクチン
レクチンは、例えば癌の治療のための新しいアプローチの開発のような種々の新しい医療用途に使用されている（ｄｅ Ｍｅｊｉａ ＥＧ，Ｂｒａｄｆｏｒｄ
Ｔ，Ｈａｓｌｅｒ Ｃ，Ｔｈｅ ａｎｔｉｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｉｃ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ｓｏｙｂｅａｎ ｌｅｃｔｉｎ ａｎｄ ｌｕｎａｓｉｎ，Ｎｕｔｒ Ｒｅｖ
２００３；６１：２３９−４６，Ｅｒｒｔｕｍ ｉｎ：Ｎｕｔｒ Ｒｅｖ ２００３；６１：２９３）。同様にＨＩＶエンペロープタンパクｇｐ１２０上の高マンノース炭水化物へ結合することが知られた広範囲のレクチンはＨＩＶ感染をコントロールするための可能性ある新しい方法を提供することが認められている（Ｂｏｔｏｓ
Ｉ，Ｗｌｏｄａｗｅｒ Ａ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｔｈａｔ ｂｉｎｄ ｈｉｇｈ−ｍａｎｎｏｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ＨＩＶ ｅｎｖｅｌｏｐｅ，Ｐｒｏｇ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｍｏｌ
Ｂｉｏｌ：ｉｎ ｐｒｅｓｓ）。同じ理論は多数の他の感染作因にも適用される（Ｃａｍｂｉ Ａ，Ｆｉｇｄｏｒ ＣＧ，Ｄｕａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎ−ｌｉｋｅ
ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ２００３；１５：５３９−４６）。レクチンはそれらの炭水化物相互作用の特定のメカニズム、それら起源、または他の基準に従って分類することができる。それらの起源に関し、高マンノース結合レクチンは植物（Ｃｏｎ−Ａ，ＭＨＬ，ＵＤＡ、ジャカリン、ＧＮＡ，ＮＡＰ等）、動物（ＤＣ−ＳＩＧＮ，ＭＢＬ等）、または青緑色海藻（シアノビリン−Ｎ，サイトビリン等）からであることである。（Ｂｏｔｏｓ
Ｉ，Ｗｌｏｄａｗｅｒ Ａ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｔｈａｔ ｂｉｎｄ ｈｉｇｈ−ｍａｎｎｏｓｅ ｓｕｇａｒｓ ｏｆ ＨＩＶ ｅｎｖｅｌｏｐｅ，Ｐｒｏｇ Ｂｉｏｐｈｙｓ
Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ：ｉｎ ｐｒｅｓｓ）。一般にすべてのレクチンは炭水化物へ水素結合、極性接触、およびファンデルワールス相互作用を介して結合する。しかしながら動物／ヒトレクチンと同様に、植物レクチンは異なる特異性および結合優先性をもって炭水化物と結合する（Ｄｒｉｃｋａｍｅｒ
Ｋ，Ｍｕｌｉｐｌｉｃｉｔｙ ｏｆ ｌｅｃｔｉｎ−ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，Ｎａｔｕｒｅ Ｓｔｒｕｃｔ Ｂｉｏｌ １９９５；４３７−９）。
【００９９】
本発明の好ましい具体例においては、植物レクチンは、本発明のターゲット化リポソーム送達システム中へ取り込まれるように選択された。ある種の植物レクチンはヒトまたは動物へ全身／細胞外投与する時マイトジェンとして作用する。これらの場合においてはレクチンは細胞外レセプターへ結合することによって別々の細胞の増殖を誘発し、それらの信号形質導入カスケードを活性化する。全身／細胞外投与する時、種のレクチンはある種の細胞集団（例えば赤血球）を凝集し、これは再びレクチンと細胞外レセプターの係合によって仲介される。この場合、レクチンはいくつかの細胞を架橋（凝集）する。ある種のレクチンは両方の特徴を示す（Ｗｉｍｅｒ
ＢＭ，Ｍａｎｎ ＰＬ，Ｍｉｔｏｇｅｎ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｓｕｍｍａｒｉｅｓ，Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｔｈｅｒ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔ ２００２：１７）。
【０１００】
レクチンの治療的適用を考慮する時これらの効果のどれも許容できない。しかしながらリポソーム送達システム中にカプセル化する時、レクチン（またはその截頭バージョン）は外部環境へ暴露されず、そして細胞にのみ放出される。それ故ある種のレクチンの望ましくない全身副作用が−それらの最も価値ある治療的可能性にもかかわらず−標的化送達シスムテの採用によって防止することができる。加えて、本発明の文脈において見込まれる送達システムは、与えられた位置または器官内の特異的細胞集団の選択的ターゲティングのため局所（例えば皮下）または器官指向（例えば肝動脈注入）適用を意図する。その結果、所望の効果を達成するためのレクチンの濃度は全身投与時の濃度より遥かに低い。その上治療的には、そのようなレクチンは標的細胞中の感染作因を凝集させるために送達されるであろう。この戦略の第１の利益は、作因の親感染結合部位を機能的に不能化するように病原体表面を不可逆的にマスクすることである。第２の利益は、多数のレクチン結合部位のため、作因とレクチンの両方のファゴリソーム酵素分解のため結合した大きなコンプレックスの発生である。標的細胞はこのプロセスの途中で破壊されることができる。例えば、アポトーシスはレセプター結合に応答してしばしば誘発されることが知られている（例えば、Ｃｏｎｔｉｎｈｏ−Ｓｉｌｖａ
Ｒ，Ｐｅｒｓｅｃｈｉｎｉ ＰＭ，Ｄａ Ｃｕｎｈａ Ｂｉｓａｇｇｉｏ Ｒ，Ｐｅｒｆｅｔｔｉｎｉ ＪＬ，Ｔｏｒｒｅｓ Ｄｅ Ｓａ Ｎｅｔｏ ＡＣ，Ｋａｎｅｌｌｏｐｏｕｌｏｓ
ＪＭ，Ｍｏｔｔａ−Ｌｙ Ｉ，Ｄａｕｔｒｙ−Ｖａｒｓａｔ Ａ，Ｏｊｃｉｕｓ ＤＭ，Ｐ２２／Ｐ２ｘ７ ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ
ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ ２７６〔Ｃｅｌｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ ４５〕１９９９；Ｃ１１３９−４７；Ｗｏｌｔｍａｎ
ＡＭ，ｖａｎ ｄｅｒ Ｋｏｏｉｊ ＳＷ，Ｃｏｆｆｅｒ ＰＪ，Ｏｆｆｒｉｎｇａ Ｒ，Ｄａｈａ ＭＲ，ｖａｎ Ｋｏｏｔｅｎ Ｃ，Ｒａｐａｍｙｃｉｎ ｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙ
ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｓ ＧＭ−ＣＳＦｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，ｌｅａｄｉｎｇ ｔｏ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｖｉａ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ
ｐ２７ＫＩＰＩｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，Ｂｌｏｏｄ ２００３；１０１：１４３９−４５）。しかしながらそのような場合においてさえも、漏れ時の残存レクチンの全身濃度は細胞マイトジェシスおよび／または凝集が実現されるための遊離レクチンの最適活性より低い大きさのオーダーであろう。
【０１０１】
選択されたレクチンの特定的説明
コンカナバリンＡ（Ｃｏｎ−Ａ）：たちなたまめＣａｎａｖａｌａ ｅｎｓｉｆｏｒｍｉｓから得られるＣｏｎ−Ａは、植物レクチンの大家族の良く特徴化されたメンバーである（Ｓｈａｒｏｎ
Ｎ，Ｌｅｃｔｉｎ−ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ ｏｆ ｐｌａｎｔｓ ａｎｄ ａｎｉｍａｌｓ：ａｎ ａｔｏｍｉｃ ｒｅｖｉｅｗ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ
Ｓｃｉ １９９３：１８：２２１−６；Ｐａｒｉｎ Ｓ，Ｒｕｐｐ Ｂ，Ｈｏｐｅ ＨＫ，Ａｔｏｍｉｃ Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｓｐｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ Ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ
Ａ ａｔ １２０Ｋ，Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ １９９６；Ｄ５２：１１６１−８；Ｂｌａｋｅｌｙ ＭＰ，Ｋａｌｂ（Ｇｉｌｂｏａ）ＡＪ，Ｈｅｌｌｉｗｅｌｌ ＪＲ，Ｍｙｌｅｓ
ＤＡＡ，Ｔｈｅ １５−Ｋ ｎｅｕｔｒｏｎ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｓａｃｃｈａｒｅｄｅ−ｆｒｅｅ ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ Ａ，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ
Ｓｃｉ ＵＳＡ ２００４；１０１：１６４０５−１０；Ｈａｒｒｏｐ ＳＪ，Ｈｅｌｌｉｗｅｌｌ ＪＲ，Ｗａｎ ＴＣＭ，Ｋａｌｂ（Ｇｉｌｂｏａ）ＡＪ，Ｔｏｎｇ Ｌ，Ｙａｒｉｖ
Ｊ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｃｕｂｉｃ ｃｒｙｓｔａｌ ｏｆ ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ Ａ ｃｏｍｐｌｅｘｅｄ ｗｉｔｈ ｍｅｔｈｙｌ α−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ，Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ １９９６；Ｄ５２：１４３−５５）。
【０１０２】
Ｃｏｎ−Ａはマンノースを結合し、Ｎ−結合オリゴサッカライドのα−Ｍａｎ−（１，３）−〔α−Ｍａｎ−（１−６）〕−Ｍａｎコアに対して最も特異的である（Ｍａｎｄａｌ ＤＫ，Ｋｉｓｈｏｒｅ Ｎ，Ｂｒｅｗｅｒ ＣＦ，Ｔｈｅｒｍｏｄｙｎａｍｉｃｓ
ｏｆ ｌｅｃｔｉｎ−ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ ａｎｄ ｏｖａｌｂｕｍｉｎ ｔｏ ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ Ａ，Ｂｉｏｃｈｏｍｉｓｔｒｙ １９９４；３３：１１４９−５６）。Ｃｏｎ−ＡはＨＩＶを強力に凝集することが示された（例えば、Ｈａｙａｋａｗａ
Ｔ，Ｋａｗａｍｕｒａ Ｍ，Ｏｋａｍｏｔｏ Ｍ，Ｂａｂａ Ｍ，Ｎｉｉｋａｗａ Ｔ，Ｔａｋａｈａｒａ Ｓ，Ｓｅｒｉｚａｗａ Ｔ，Ａｋａｓｈｉ Ｍ，Ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ
Ａ−ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ ｐｏｌｙｓｔｙｒｅｎｅ ｎａｎｏｓｐｈｅｒｅｓ ｃａｐｔｕｒｅ ＨＩＶ−１ ｖｉｒｉｏｎｓ ａｎｄ ｇｐ１２０：ｐｏｔｅｎｔｉａｌ
ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｏｗａｒｄｓ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏ ｏｆ ｖｉｒａｌ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ，Ｊ Ｍｅｄ Ｖｉｏｌ １９９８；５６：３２７−３１）。その上ｐＨ６．５以上では、Ｃｏｎ−Ａはテトラマーとして存在し（Ｙａｒｖ
Ｊ，Ｋａｌｂ ＡＪ，Ｌｅｖｉｔｚｋｉ Ａ，Ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ Ａ ｗｉｔｈ ｍｅｔｈｙｌ ａｌｐｈａ−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ，
Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １９６８；１６５：３０３−５）、そして各２５−ｋＤａモノマーは糖結合部位で供給される（Ｋａｌｂ ＡＪ，Ｌｅｖｉｔｚｋｉ
Ａ，Ｍｅｔａｌ−ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅｓ ｏｆ ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ Ａ ａｎｄ ｔｈｅｉｒｒｏｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ α−ｍｅｔｈｙｌ Ｄ−ｇｌｎｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ，Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ １９６８；１０９：６６９−７２）。それ故レクチンはＨＩＶを架橋（凝集）することができる。ここに記載される用途に関する追加の利益は、２３７−残基Ｃｏｎ−Ａのトポロジーはすべての天然およびリガンド結合結晶構造において主に不変であり、これは糖結合が有意なコンフォメーション変化を含まないことを意味する（Ｒｅｅｋｅ
Ｊｒ ＧＮ，Ｂｅｃｋｅｒ ＪＷ，Ｅｄｅｌｍａｎ ＧＭ，Ｔｈｅ ｃｏｖａｌｅｎｔ ａｎｄ ｔｈｒｅｅ−ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ
Ａ．ＩＶ．Ａｔｏｍｉｃ ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅｓ，ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｂｏｎｄｉｎｇ，ａｎｄ ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ １９７５；２５０：１５２５−４７）。
【０１０３】
Ｃｏｎ−Ａモノマーあたり二つの追加の金属結合部位は遷移金属イオンおよびＣａ２＋を捕捉する（Ｋａｌｂ ＡＪ，Ｌｅｖｉｔｚｋｉ
Ａ，Ｍｅｔａｌ ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅｓ ｏｆ ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ Ａ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ａｌｐｈａ−ｍｅｔｈｙｌ
ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ，Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ １９６８；１０９：６６９−７２）。重要なのは低ｐＨ値において、Ｃｏｎ−Ａはこれら金属を遊離し、その糖結合能力を失う。しかしながら失った金属の添加は糖結合を回復する（Ｙａｒｉｖ
Ｊ，Ｋａｌｂ ＡＪ，Ｌｅｖｉｔｚｋｉ Ａ，Ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ Ａ ｗｉｔｈ ｍｅｔｈｙｌ ａｌｐｈａ−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ，Ｂｉｏｃｈｉｍ
Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １９６８；１６５：３０３−５）。Ｃａ２＋の存在は、Ｃｏｎ−ＡのＡｌａ２０７−Ａｓｐ２０８シスペプチド結合を安定化すると考えられるＨ２Ｏ分子と相互作用する故に決定的である（Ｎａｉｓｍｉｔｈ
ＪＨ，Ｅｍｍｅｒｉｃｈ Ｃ，Ｈａｂａｓｈ Ｊ，Ｈａｒｒｏｐ ＳＪ，Ｈｅｌｌｉｗｅｌ ＪＲ，Ｈｕｎｔｅｒ ＷＮ，Ｒｅｆｔｅｒｙ Ｊ，Ｋａｌｂ ＡＪ，Ｙａｒｉｖ Ｊ，Ｒｅｆｉｎｅｄ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ Ａ ｃｏｍｐｌｅｘｅｄ ｗｉｔｈ ｍｅｔｈｙｌ α−Ｄ−Ｍａｎｎｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ
ａｔ ２．ＯＡ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｗｉｔｈ ｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｆｒｅｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ
（Ｄ）１９９４；５０：８４７−５８）。対照的にＣａ２＋の不存在下では、このペプチド結合はシス−トランス異性化を受け、糖結合ループＬｅｕ９９−Ｔｙｒ１００の拡大が続き、サッカライド分子を捕捉するこのループの能力の損失を招く（Ｂｏｕｃｋａｅｒｔ
Ｊ，Ｌｏｒｉｓ Ｒ，Ｐｏｏｒｔｍａｎｓ Ｆ，Ｗｙｎｓ Ｌ，Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈｉｃ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｍｅｔａｌ−ｆｒｅｅ ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ
Ａ ａｔ ２．５Ａｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ １９９５；２３：５１０−２４；Ｒｅｅｋｅ Ｊｒ ＧＮ，Ｂｅｃｋｅｒ ＪＷ，Ｅｄｅｌｍａｎ ＧＭ，Ｃｈａｎｇｅｓ
ｉｎ ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ−ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ Ａ ｕｐｏｎ ｄｅｍｅｔａｌｌｉｚｔｉｏｎ，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ
Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １９７８；７５：２２８６−９０）。
【０１０４】
本発明の好ましい具体例においては、Ｃｏｎ−Ａはエンドソーム内貯蔵ＨＩＶの凝集を許容するようにターゲット化リポソーム送達システム中に含まれるかカプセル化される。低いエンドソームｐＨ条件は、ターゲット化リポソーム送達システムがその糖結合能力を保持することを確実にするためレクチンと共にＣａ２＋および遷移金属イオンが同時カプセル化されることを必要とする。Ｍｙｒｉａｎｔｈｕｓ
ｈｏｌｓｔｉｉレクチン（ＭＨＬ）：アフリカ植物Ｍｙｒｉａｎｔｈｕｓ ｈｏｌｓｔｉｉ Ｐａｌ，Ｕｒｉｔｉｃｅａｅの根は９２８４Ｄａレクチンを含有する。Ｍｙｒｉａｎｔｈｕｓ
ｈｏｌｓｔｉｉレクチン（ＭＨＬまたはＭｙｒｉａｎｔｈｉｎ，他の名称Ｏｍｕｆｅ，Ｍａｆｗｉｓａ，Ｍｓｗｉｚａ）は強力な抗ＨＩＶ活性を発揮する。ＭＨＬは１６のジスルフィド結合システィン残基を含んでいる。配列分析は８８のうち７９のアミノ酸残基を成功して割当てし、位置５２、６６および６９におけるそれらの一次構造において多数のアイソフォームの存在を示唆した（Ｃｈａｒａｎ
ＲＤ，Ｍｕｎｒｏ ＭＨ，Ｏ‘Ｋｅｅｆｅ ＢＲ，Ｓｏｗｄｅｒ ＲＣＩＩ，ＭｃＫｅｅ ＴＣ，Ｃｕｒｒｅｎｓ ＭＪ，Ｐａｎｎｅｌｌ
ＬＫ，Ｂｏｙｄ ＭＲ，Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｍｙｒｉａｎｔｈｕｓ ｈｏｌｓｔｉｉ ｌｅｃｔｉｎ，ａ ｐｏｔｅｎｔ
ＨＩＶ−1 ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｐｒｏｔｅｉｎ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｐｌａｎｔ Ｍｙｒｉａｎｔｈｕｓ ｈｏｌｓｔｉｉ，Ｊ
Ｎａｔ Ｐｒｏｄ ２０００；６３：１１７０−４；Ｂｏｔｏｓ Ｉ，Ｗｌｏｄａｗｅｒ Ａ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｔｈａｔ ｂｉｎｄ ｈｉｇｈ−ｍａｎｎｏｓｅ ｓｕｇａｒ
ｏｆ ｔｈｅ ＨＩＶ ｅｎｖｅｌｏｐｅ，Ｐｒｏｇ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ：ｉｎ ｐｒｅｓｓ）。ＣＥＭ−ＳＳ細胞はＭＨＬによって研究室株ＨＩＶ−１ＲＦの細胞変性効果から保護された。５０％細胞保護のための有効濃度（ＥＣ５０値）は１．４μｇ／ｍｌ（１５０ｎＭ）であった。ＭＨＬは２５０ｍｇ／ｍｌの最高テスト濃度においてさえも（すなわちＥＣ５０値の２オーダー上）標的細胞に対し有毒であることが証明されていない。ジスルフィド結合は、それらの還元分裂時に抗ＨＩＶ活性が失われたので明らかに機能一体性のために構造上重要である（Ｂａｌｚａｒｉｍｉ
Ｊ，Ｎｅｙｔｓ Ｊ，Ｓｃｈｏｌｓ Ｄ，Ｈｏｓｏｙａ Ｍ，Ｖａｎ Ｄａｍｍｅ Ｅ，Ｐｅｕｍａｎｓ Ｗ，Ｄｅ Ｃｌｅｒｅｑ Ｅ，Ｔｈｅ ｍａｎｎｏｓｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ
ｐｌａｎｔ ｌｅｃｔｉｎｓ ｆｒｏｍ Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍ ｈｙｂｒｉｄ ａｎｄ Ｅｐｉｐａｃｔｉｓ ｈｅｌｌｅｂｏｒｉｎｅ ａｎｄ ｔｈｅ （Ｎ−ａｃｅｔｙｌｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ）ｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ
ｐｌａｎｔ ｌｅｃｔｉｎ ｆｒｏｍ Ｕｒｔｉｃａ ｄｉｏｉｃａ ａｒｅ ｐｏｔｅｎｔ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｉｎｈｉｔｏｒｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ
ｖｉｒｕｓ ａｎｄ ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ，Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ １９９２；１８：１９１−２０７）。
【０１０５】
ＭＨＬは宿主細胞のＨＩＶ感染を可逆的に阻害し、そして完全活性のため連続的に存在することが必要である（Ｃｈａｒａｎ ＲＤ，Ｍｕｎｒｏ ＭＨ，Ｏ‘Ｋｅｅｆｅ ＢＲ，Ｓｏｗｄｅｒ ＲＣＩＩ，ＭｃＫｅｅ ＴＣ，Ｃｕｒｒｅｎｓ ＭＪ，Ｐａｎｅｌｌ ＬＫ，Ｂｏｙｄ ＭＲ，Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ
ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｍｙｒｉａｎｔｈｕｓ ｈｏｌｓｔｉｉ ｌｅｃｔｉｎ，ａ ｐｏｔｅｎｔ ＨＩＶ−１ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｐｒｏｔｅｉｎ
ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｐｌａｎｔ Ｍｙｒｉａｎｔｈｕｓ ｈｏｌｓｔｉｉ，Ｊ Ｎａｔ Ｐｒｏｄ ２０００；６３：１１７−４）。ＭＨＬは可溶性CD４と同時にｇｐ１２０を結合することができるので、ＭＨＬとＣＤ４はｇｐ１２０へアロステリック的に結合するらしい。テストした糖のシリーズから、ＧｌｃＮａｃだけがＭＨＬ−ｇｐ１２０結合を妨害する。ＧｌｃＮａｃへ結合すると、ＭＨＬはｇｐ１２０を結合することができず、ＭＨＬはｇｐ１２０炭水化物部分と相互作用することを示す。このレクチンはヒト赤血球を凝集しない（Ｃｈａｒａｎ
ＲＤ，Ｍｕｎｒｏ ＭＨ，Ｏ’Ｋｅｅｆｅ ＢＲ，Ｓｏｗｄｅｒ ＲＣＩＩ，ＭｃＫｅｅ ＴＣ、Ｃｕｒｒｅｎｓ ＭＪ，Ｐａｎｎｅｌｌ
ＬＫ，Ｂｏｙｄ ＭＲ，Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｎｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｍｙｒｉａｎｔｈｕｓ ｈｏｌｓｔｉｉ ｌｅｃｔｉｎ，ａ ｐｏｔｅｎｔ ＨＩＶ−１
ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｐｒｏｔｅｉｎ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｐｌａｎｔ Ｍｙｒｉａｎｔｈｕｓ ｈｏｌｓｔｉｉ，Ｊ Ｎａ Ｐｒｏｄ ２０００；６３：１１７０−４）。マイトジェン性はテストされていない。
【０１０６】
本発明の一具体例においては、ＭＨＬがターゲット化リポソーム送達システム内に含められるかカプセル化される。しかしながらＭＨＬはＣｏｎ−Ａほど広く特徴化されておらず、そしてＮ−結合したオリゴサッカライドのα−Ｍａｎ−（１，３）−〔α−Ｍａｎ−（１，６）〕−Ｍａｎコアに対するＣｏｎ−Ａの高い特異性を発揮しない。加えて、ＭＨＬはHIVを可逆的に阻害する。最後にＭＨＬはモノマーとして存在する。不可逆的に凝集することができるＭＨＬのジ−またはマルチマー変種の合成を製造し、採用することができる。ＭＨＬは他の感染作因によって形成された貯蔵庫へ指向されたターゲット化送達システムにも採用することができる。
【０１０７】
さらなる条件
成功的病原体凝集の確率：エンドソーム送達レクチンにとって成功的凝集のためにはそれらの病原体標的へ効果的に拡散できることが必須である。これを達成できるかどうかに関する物理化学的条件に関し、細胞下コンパートメント中の単一標的の位置のためのＫｕｔｈａｎの数学的モデルが基礎を提供する。この簡単な片寄っていない（すなわちドリフトなし）、単一または少数の標的部位（ウイルスのような）をランダムに探しているマクロ分子（レクチンのような）のブラウン運動から進めて、彼は球形コンパートメント（エンドソームのような）中の個々のマクロ分子のランダムウォークのためのウォーク・アンド・キャプチャーモデルを開発した（Ｋｕｔｈａｎ
Ｈ，Ａ ｍａｔｈｅｍａｔｉｃａｌ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｓｉｎｇｌｅ ｔａｒｇｅｔ ｓｉｔｅ ｌｏｃａｔｉｏｎ ｂｙ Ｂｒｏｕｎｉａｎ ｍｏｖｅｍｅｎｔ ｉｎ ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ
ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔｓ，Ｊ Ｔｈｅｏｒ Ｂｉｏｌ ２００３；２２１：７９−８７）。このモデルは、最初にＡｄａｍｓおよびＤｅｌｂｒｕｃｋにより開発され、他のものによって補足された簡単なウォーク・アンド・キャプチャーモデルに基づいていた（Ａｄａｍ
Ｇ，Ｄｅｌｂｒｕｃｋ Ｍ，Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｉｔｙ ｉｎ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ Ｉｎ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ．Ｒｉｃｈ Ａ，Ｄａｖｉｄｓｏｎ Ｎ，ｅｄｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｆｒｅｅｍａｎ ＆ Ｃｏ；１９６８：１９８−２１５；Ｂｅｒｇ
ＨＣ，Ｐｕｒｃｅｌｌ ＥＭ，Ｐｈｙｓｉｃｓ ｏｆ ｃｈｅｍｏｒｅｃｅｐｔｉｏｎ，Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｊ １９７７；２０：１９３−２１９；Ｓｚａｂｏ Ａ，Ｓｃｈｕｌｔｅｎ
Ｋ，Ｓｃｈｕｌｔｅｎ Ｚ，Ｆｉｒｓｔ ｐａｓｓａｇｅ ｔｉｍｅ ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｏ ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｊ Ｃｈａｍ
Ｐｈｙｓ １９８０；７２：４３５０−７）。特にＥＸＡＣＴ ＡＮＤ ＡＰＰＲＯＸＩＭＡＴＥ ＦＩＲＳＴ−ＰＡＳＳＡＧＥ−ＴＩＭＥ（ＦＰＴ）ＰＲＯＢＡＢＩＬＩＴＹ 
ＤＥＮＳＩＴＹ ＦＵＮＣＴＩＯＮの閉鎖解析解答が適用された。小分子Ｃａｊａｒ体（φ０．１−１．０μｍ，これは完全にエンドソームの範囲内である〔Ｄｕｎｄｒ Ｍ，Ｍｉｓｔｅｌｉ Ｔ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ
ｉｎ ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｎｕｃｌｅｕｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ ２００１；３５６：２９７−３１０〕）の例について決定されたように、有効拡散定数Ｄ＝０．５μｍ２ｓ−１（慎重に低くセットした）を持つ単一拡散タンパク分子はｐ＝０．９８の確かに近い確率をもって中程度サイズの標的タンパク（φ５ｎｍ）と１分以内に遭遇するであろう（Ｋｕｔａｎ Ｈ，前出）。これらの考慮はエンドソームへ送達されるレクチンにもあてはまるので、すべての標的病原体の最も速いそして完全な凝集がここに記載した本発明のこの適用に関しても期待される。
【０１０８】
細胞内病原体貯蔵庫の分解のための条件：
貯蔵庫生成へ導く一般的分子および物理化学的条件−そのため治療的植物レクチンによって遭遇される−他のＣＴＬレセプターの代表は、良く研究されたＤＣ−ＳＩＧＮの例に提供されている。一般に哺乳類細胞の高度にダイナミックなエンドソーム／リソソームシステムは、物理的には早期、リサイクリングおよび後期エンドソームおよびリソソームと、そして後期ゴルジ装置からなる。このシステムは、レセプターおよびリガンドを（ｉ）血漿膜および（ｉｉ）後期ゴルジから選別および隔離のため膜輸送を可能にする。細胞表面からエンドソームへ輸送された分子はクラスリンでコートされたピットを通ってレセプター仲介エンドサイト−シスによって内部化される（Ｔｅａｓｄａｌｅ
ＲＤ，Ｌｏｃｉ Ｄ，Ｈｏｎｇｈｔｏｎ Ｆ，Ｋａｒｌｓｓｏｎ Ｌ，Ｇｌｅｅｓｏｎ ＰＡ，Ａ ｌａｒｇｅ ｆａｍｉｌｙ ｏｆ ｅｎｄｏｓｏｍｅ−ｌｏｃａｌｉｚｅｄ
ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｓｏｒｔｉｎｇ ｎｅｘｉｎ １，Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ ２０００；３５８：７−１６）。
【０１０９】
ＤＣ−ＳＩＧＮ−結合リガンドは一般に分解コンパートメントにおいて処理のため内部化されるが、HIVは分解されることなく保護されている（Ｋｗｏｎ
ＤＳ，Ｇｒｅｇｏｒｉｏ Ｇ，Ｂｉｔｔｏｎ Ｎ，Ｈｅｎｄｒｉｃｋｓｏｎ ＷＡ Ｌｉｔｔｍａｎ ＤＲ，ＤＣ−ＳＩＧＮ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎ
ｏｆ ＨＩＶ ｉｓ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ ｔｒａｎｓ−ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｔ ｃｅｌｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ ２００２；１６：１３５−１４４）。どのようにしてHIVビリオンがこの正常メカニズムを逃れるかは今のところわかっていない。しかしながら成熟ｍＤＣにおいては、ＤＣ−ＳＩＧＮはＨＩＶが分解に対してその中で保護されている早期エンドソームコンパーメントへターゲットされることが知られており（Ｅｎｇｅｒｉｎｇ
Ａ，ｅｔ ａｌ，Ｔｈｅ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＤＣ−ＳＩＧＮ ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚｅｓ ａｎｔｉｇｅｎ
ｆｏｒ ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ ｔｏ Ｔ ｃｅｌｌｓ，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００２；１６８：２１１８−２１２６）、ｍＤＣのＨＩＶによって誘発された成熟はその変化した内部化へ導くことができることを示唆する。ウイルスをＴ細胞へ伝達するためには、ＤＣ−ＳＩＧＮによって内部化されたビリオンは細胞表面へリサイクルし戻され、標的細胞上の侵入レセプター（ＣＤ４，ＣＣＲ５，ＣＸＣＲ４）と接触する（Ｇｅｉｊｔｅｎｂｅｅｋ
ＴＢＨ，ｅｔ ａｌ，ＤＣ−ＳＩＧＮ，ａ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＨＩＶ−１−ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ｔｈａｔ ｅｎｈａｎｃｅｓ
ｔｒａｎｓ−ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ ｃｅｌｌｓ，Ｃｅｌｌ ２０００；１００：５８７−５９７）。他のＣ−タイプレクチンＢＤＣＡ−２およびＤＥＣ−２０５も抗原を後期エンドソームまたはリソソームへ送達する。加えてマンノースレセプター（ＣＤ２０６）は抗原（またはＨＩＶ）を早期エンドソームへ送達し、直接表面へリサイクルし戻す（Ｃａｍｂｉ
Ａ，Ｆｉｇｄｏｒ ＣＧ，Ｄｕａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ，Ｃｕｒｒ
Ｏｐｉｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ２００３；１５：５３９−４６）。
【０１１０】
特にリガンドを結合するときおよびルーチンな取り込みおよび膜リサイクリングのコースにおいて、ＤＣ−ＳＩＧＮはその二つの推定ジ−ロイシン−（ＬＬ）およびチロシンに基づく（ＹＳＱＬ）内部化モチーフによって内部化される（Ｒａｐｏｐｏｒｔ
Ｉ，Ｃｈｅｎ ＹＣ，Ｃｕｐｅｒｓ Ｐ，Ｓｈｏｅｌｓｏｎ ＳＥ，Ｋｉｒｃｈｈａｕｓｅｎ Ｔ，Ｄｉｌｅｕｃｉｎｅ−ｂａｓｅｄ ｓｏｒｔｉｎｇ ｓｉｇｎａｌｓ ｂｉｎｄ
ｔｏ ｔｈｅ β−ｃｈａｉｎ ｏｆ ＡＰ−１ ａｔ ａ ｓｉｔｅ ｄｅｓｔｉｎｃｔ ａｎｄ ｒｅｇｕｌａｔｅｄ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｙ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｔｙｒｏｓｉｎｅ−ｂａｓｅｄ ｍｏｔｉｆ−ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ，ＥＭＢＯ Ｊ １９９８；１７：２１４８−５５；Ｔｒｏｗｂｒｉｄｇｅ
ＩＳ，Ｅｎｄｏｃｙｔｏｓｉｓ ａｎｄ ｓｉｇｎａｌｓ ｆｏｒ ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎ，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ １９９１；３：６３４−４１）。ＤＣ−ＳＩＧＮは低ｐＨ（６．０−６．８）で早期エンドソームおよびリソソームコンパートメント中へ内部化される（Ｅｎｇｅｒｉｎｇ
Ａ，Ｇｅｉｊｔｅｎｂｅｅｋ ＴＢ，ｖａｎ Ｖｌｉｅｔ ＳＪ，Ｗｉｊｅｒｓ Ｍ，ｖａｎ Ｌｉｅｍｐｔ Ｅ，Ｄｅｍａｕｒｅ Ｎ，Ｌａｎｚａｖｅｃｃｈｉａ Ａ，Ｆｒａｎｓｅｎ
Ｊ，Ｆｉｇｄｏｒ ＣＧ，Ｐｉｇｎｅｉ Ｖ，ｖａｎ Ｋｏｏｙｋ Ｙ，Ｔｈｅ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＤＣ−ＳＩＧＮ
ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚｅｓ ａｎｔｉｇｅｎ ｆｏｒ ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ ｔｏ Ｔ ｃｅｌｌｓ，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００２；１６８：２１１８−２６）。事実そのような低ｐＨ条件は細胞内貯蔵庫から成功的なＤＣ−ＳＩＧＮ容易化Ｔ細胞感染にとって必須であるらしい（Ｋｗｏｎ
ＤＳ，Ｇｒｅｇｏｒｉｏ Ｇ，Ｂｉｔｔｏｎ Ｎ，Ｈｅｎｄｒｉｃｋｓｏｎ ＷＡ，Ｌｉｔｔｍａｎ ＤＲ，ＤＣ−ＳＩＧＮ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎ
ｏｆ ＨＩＶ ｉｓ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ ｔｒａｎｓ−ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ Ｔ ｃｅｌｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ ２００２；１６：１３５−４４）。ＤＣ−ＳＩＧＮによるＨＩＶのｍＤＣ細胞内低ｐＨコンパートメント中への内部化はこのように貯蔵庫の慢性感染役割にとって決定的であるらしい。最後に、例えば表面へリサイクルされ戻される前にエンドソーム／リソソームシステムを横断する間のトランスフェリンおよびそのレセプターの場合のように、この貯蔵庫に貯えられている間ＤＣ−ＳＩＧＮはＨＩＶへ結合され続けることが考えられる（Ｃｉｅｃｈａｎｏｖｅｒ
Ａ，Ｓｃｈｗａｒｔｚ ＡＬ，Ｌａｓｉｓｈ ＨＦ，Ｓｏｒｔｉｎｇ ａｎｄ ｒｅｃｙｃｌｉｎｇ ｏｆ ｃｅｌｌ ｓｕｒｆａｃｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ａｎｄ ｅｖｄｏｃｙｔｏｓｅｄ
ｌｉｇａｎｄｓ：ｔｈｅ ａｓｉａｌｏｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，Ｊ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ １９８２；２３：１０７−３０）。
【０１１１】
マンノース／フコースレセプターと相互作用する新生糖タンパクおよびモノサッカライドは投与量および時間依存性態様でリポソーム酵素分泌を刺激することが示された。糖（最も効果的にはＬ−フコースまたはマンノース）とタンパク質の組合せが糖単独よりも強力にリソソーム酵素分泌を刺激するけれども、同じ効果は両方の条件下でも得られる。リソソーム酵素分泌はインキュベーション後数時間に限られるという事実は、レセプター自体（ＣＴＬまたはＣＴＬＤレセプターのような）がこのプロセスに参加することを示している。重要なのは、シクロヘキシイミドによるタンパク合成のブロッキングは酵素分泌を阻害しないという事実が、新しい酵素合成を必要としないことを示したことである（Ｏｈｓｕｍｉ
Ｙ，Ｌｅｅ ＹＣ，Ｍａｎｎｏｓｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｌｉｇａｎｄｓ ｓｔｉｍｕｌａｔｅ ｓｅｒｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｙｓｏｓｏｍａｌ ｅｎｚｙｍｅ ｆｒｏｍ ｒａｂｂｉｔ
ａｌｖｅｏｌａｒ ｍａｃｒａｐｈａｇｅｓ，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ １９８７；２６２：７９５５−６２）。これは本発明のターゲティングシステムによって可能化される。最も興味あるのは、リソソーム酵素分泌は分解されないリガンドまたは分解可能リガンドの存在下の両方において似た程度で誘発されることである（Ｏｈｓｕｍｉ
Ｙ，Ｌｅｅ ＹＣ，前出）。ここに提供される本発明に関し、病原体貯蔵庫生成感染作因、強力に結合したＤＣ−ＳＩＧＮのようなレセプター、および凝集レクチンは、このため酵素の病原体消化セットを含んでいるリソソームと標的エンドソーム部位の融合によって生成したファゴリソソームにおいて酵素分解されることができる。
【０１１２】
ＨＩＶ以外の病原体の細胞内貯蔵庫
くり返し述べたように、ＨＩＶ−１以外にも種々の病原性ウイルス、細菌、および寄生虫が慢性細胞内感染性貯蔵庫を生成する。ヒト病原体に限る時、これらはＨＩＶ−２、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、Ｅｐｓｔｅｉｎ−Ｂａｒｒウイルス（ＥＢＶ）、エボラ、結核菌および他のマイコバクテリウム種、およびＬｅｉｓｈｍａｎｉａ
ａｍａｓｔｉｇｏｔｅｓのような有害スペシスを含む（Ｃａｍｂｉ Ａ，Ｆｉｇｄｏｒ ＣＧ，Ｄｕａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ
ｉｎ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ２００３；１５：５３９−４６；Ｋａｕｆｍａｎｎ ＳＨＥ，Ｓｃｈａｂａｉｂｌｅ
ＵＥ，Ａ Ｄａｎｇｅｒｏｕｓ ｌｉａｉｓｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｗｏ ｍａｊｏｒ Ｋｉｌｌｅｒｓ：Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ａｎｄ
ＨＩＶ ｔａｒｇｅｔ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ＤＣ−ＳＩＧＮ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００３；１９７：１−５；Ｂａｒｉｂａｕｄ Ｆ，Ｐｏｈｌｍａｎｎ
Ｓ，Ｄｏｍｓ ＲＷ，Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ＤＣ−ＳＩＧＮ ａｎｄ ＤＣ−ＳＩＧＮ Ｒ ｉｎ ＨＩＶ ａｎｄ ＳＩＶ ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ，ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ
ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ２００１；２８６：１−６；Ｐｏｈｌｍａｎｎ Ｓ，Ｂａｒｉｂａｕｄ Ｆ，Ｌｅｅ Ｂ，Ｌｅｓｌｉｅ ＧＪ，Ｓａｎｃｈｏｚ
ＭＤ，Ｈｉｅｂｅｎｔｈａｌ−Ｍｉｌｌｏｗ Ｋ，Ｍｕｎｃｈ Ｊ，Ｋｉｒｃｈｈｏｆｆ Ｆ，Ｄｏｍｓ ＲＷ，ＤＣ−ＳＩＧＮ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ
ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ １ ａｎｄ ２ ａｎｄ ｓｉｍｉａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ，Ｊ Ｖｉｒｏｌ ２００１；７５：４６６４−７２；Ａｌｖａｌｅｚ
ＣＰ，Ｌａｓａｌａ Ｆ，Ｃａｒｒｉｌｌｏ Ｊ，Ｍｕｎｉｔｚ Ｏ，Ｃｏｒｂｉ ＡＬ，Ｄｅｌｇａｄｏ Ｒ，Ｃ−ｔｙｐｅ ｌｅｃｔｉｎｓ ＤＣ−ＳＩＧＮ ａｎｄ Ｌ−ＳＩＧＮ
ｍｅｄｅａｔｅ ｃｅｌｌｕｌｅｒ ｅｎｔｒｙ ｂｙ Ｅｂｏｌａ ｖｉｒｕｓ ｉｎｃｉｓ ａｎｄ ｉｎ ｔｒａｎｓ，Ｊ Ｖｉｒｏｌ ２００２；７６：６８４１−４；Ｃｏｌｍｅｎａｒｅｓ
Ｍ，Ｐｕｉｇ−Ｋｒｏｇｅｒ Ａ，Ｍｕｎｉｚ Ｐｅｌｌｏ Ｏ，Ｃｏｒｂｉ ＡＬ，Ｒｉｖａｓ Ｌ，Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＩＣＡＭ−３ ｇｒａｂｂｉｎｇ
ｎｏｉｎｔｅｇｒｉｎ（ＤＣ−ＳＩＧＮ，ＣＤ２０９），ａ Ｃ−ｔｙｐｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｌｅｃｔｉｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，ｉｓ ａ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ａｍａｓｔｉｇｏｔｅｓ，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２００２；１６：１６）。疫学的には、これらスペシスの二つは、グローバルベースで二つの主要感染病の原因作因である。その一つ結核菌は単独またはＨＩＶと問題ある同時感染にある患者に存在することができ（Ｓｃｈｌｕｎｇｅｒ
ＮＷ，Ｂｕｚｙｎｓｋｉ Ｊ，Ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ａｎｄ ＨＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ：ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ，ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ＨＩＶ
Ｃｌｉｎ Ｔｒｉａｌｓ ２００１；２：３５６−６３；Ｋａｕｆｍａｎｎ ＳＨＥ，Ｓｃｈａｉｂｅ ＵＥ，前出）、そして最も広く広がって細菌感染である（Ｆｒｉｅｄｅｎ
ＴＲ，Ｓｔｅｒｌｉｎｇ ＴＲ，Ｍｕｎｓｉｆｆ ＳＳ，Ｗａｔｔ ＣＪ，Ｐｙｅ Ｃ，Ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ，Ｌａｎｃｅｔ ２００３；３６２：８８７−９９；Ｃｏｒｂｅｔｔ
ＥＬ，Ｗａｔｔ ＣＪ，Ｗａｌｋｅｒ Ｎ ｅｔ ａｌ，Ｔｈｅ ｇｒｏｗｉｎｇ ｂｕｒｄｅｎ ｏｆ Ｔｕｂｅｃｕｌｏｓｉｓ：ｇｌｏｂａｌ ｔｒｅｎｄｓ ａｎｄ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ
ｗｉｔｈ ＨＩＶ ｅｐｉｄｅｍｉｃ，Ａｒｃｈ Ｉｎｔｅｒｎ Ｍｅｄ ２００３；１６３：１００９−２１；ｖａｎ Ｌｅｔｔｏｗ Ｍ，Ｆａｗｚｉ ＷＷ，Ｓｅｍｂａ ＲＤ，Ｔｒｉｐｌｅ
ｔｒｏｕｂｌｅ：ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｍａｌｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ｉｎ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ａｎｄ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ
ｃｏ−ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，Ｎｕｔｒ Ｒｅｖ ２００３；６１：８１−９０）。他の一つＨＣＶは世界的に最も広くひろがっているウイルス感染であると考えられている。（Ｒａｙ
Ｋｉｍ Ｗ，Ｇｌｏｂａｌ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｂｕｒｄｅｎ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ，Ｍｉｃｒｏｂｅｓ Ｉｎｆｅｃｔ ２００２；４：１２１９−２５；Ｃｈｅｕｎｇ
ＲＣ，Ｈａｎｓｏｎ ＡＫ，Ｍａｇａｎｔｉ Ｋ，Ｋｅｅｆｆｅ ＥＢ，Ｍａｔｓｕｉ ＳＭ，Ｖｉｒａｌ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ
ｄｉｓｅａｓｅｓ ｉｎ ａ ｈｏｍｅｌｅｓｓ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ ２００２；３４：４７６−８０；Ｂｏｒｇｉａ Ｇ，Ｒｅｙｎａｕｄ
Ｌ，Ｇｅｎｔｉｌｅ Ｉ，Ｐｉａｚｚａ Ｍ，ＨＩＶ ａｎｄ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ：ｆａｃｔｓ ａｎｄ ｃｏｔｒｏｖｅｒｓｅｓ，Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ２００３；３１：２３２−４０）。これらの病気はそれ故本発明の治療システムの緊急な一次標的である。
【０１１３】
この目的のため、結核菌および他のｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａによる細菌内貯蔵庫の生成は再びＣ−タイプレクチンレセプターによって仲介されることが知られている（Ｍａｅｄａ
Ｎ，Ｎｉｇｏｕ Ｊ，Ｈｅｒｒｍａｎｎ ＪＬ ｅｔ ａｌ，Ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｓｕｒｆａｃｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＤＣ−ＳＩＧＮ ｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｔｅｓ ｂｅｔｗｅｅｎ
Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐｅｃｉｅｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｎｎｏｓｅ ｃａｐｓ ｏｎ ｌｉｐｏａｒａｂｉｎｏｍａｎｎａｎ，Ｊ
Ｂｉｏｌ Ｃｈａｍ ２００３；２７６：５５１３−６；Ｇｅｉｊｔｅｎｂｅｅｋ ＴＢ，Ｖａｎ Ｖ１ｉｅｔ ＳＪ ｅｔ ａｌ，Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａ ｔａｒｇｅｔ
ＤＣ−ＳＩＧＮ ｔｏ ｓｕｐｐｒｅｓｓ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ，Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００３；１９７：７−１７；Ｔａｉｌｌｅｕｘ Ｌ，Ｓｃｈａｒｔｚ
Ｏ，Ｈｅｒｒｍａｎｎ ＪＬ ｅｔ ａｌ，ＤＣ−ＳＩＧＮ ｉｓ ｔｈｅ ｍａｊｏｒ Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｏｎ
ｈｕｍａｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００３；１９７：１２１−７）。同じことはＨＩＶにも当てはまる（Ｐｏｈｌｍａｎｎ Ｓ，Ｚｈａｎｇ
Ｊ，Ｂａｒｉｂａｕｄ Ｆ ｅｔ ａｌ，Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎｔｅｒａｃｔ ｗｉｔｈ ＤＣ−ＳＩＧＮ ａｎｄ ＤＣ−ＳＩＧＮ，Ｊ
Ｖｉｒｏｌ ２００３；７７：４０７０−８０；Ｌｏｚａｃｈ ＰＹ，Ｌｏｒｔａｔ−Ｊａｃｏｂ Ｈ，ｄｅ Ｌａｃｒｏｉ，ｄｅ Ｌａｖａｌｅｔｔｅ Ａ ｅｔ ａｌ，ＤＣ−ＳＩＧＮ
ａｎｄ Ｌ−ＳＩＧＮ ａｒｅ ｈｉｇｈ ａｆｆｉｎｉｔｙ ｂｉｎｄｉｎｇ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ
Ｅ２，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２００３；２７８：２０３５８−６６；Ｇａｒｄｎｅｒ ＪＰ，Ｄｕｒｓｏ ＲＪ，Ａｒｒｉｇａｌｅ ＲＲ，Ｌ−ＳＩＧＮ（ＤＣ２０９Ｌ）ｉｓ
ａ ｌｉｖｅｒ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃｖｉｒｕｓ，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ２００３；１００：４４９８−５０３）。このため両方の感染作因のための取り込みメカニズムは、ここに記載される本発明のシステムによるそれらの細胞貯蔵庫のターゲティングにとって必須要件を提供する。
【０１１４】
送達すべき治療化合物に関し、Ｃｏｎ−Ａ，ＭＨＬ，およびその他の含むある範囲の植物レクチンがこれら病原体へ結合／凝集し、このためこれら病原体を不活性化／根絶する能力を有する（Ｗｉｍｅｒ
ＢＭ，Ｍａｎ ＰＬ，Ｍｉｔｏｇｅｎ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｓｕｍｍａｒｉｅｓ，Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｔｈｅｒ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔ ２００２；１７−６４；Ｂｏｔｏｓ
Ｉ，ＷｌｏｄａｗｅｒＡ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｔｈａｔ ｂｉｎｄ ｈｉｇｈ−ｍａｎｎｏｓｅ ｓｕｇａｒ ｏｆ ＨＩＶ ｅｎｖｅｌｏｐｅ，Ｐｒｏｇ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｍｅｄ
Ｂｉｏｌ：ｉｎ ｐｒｅｓｓ）。ここに記載される本発明は、ヒトまたは動物宿主のあらかじめ限った細胞集団またはそのサブセット中へ植物レクチンを送達するフコースまたはポリフコース依存性細胞特異性ターゲティングシステムを採用し、ここで細胞集団は病原体／感染作因の貯蔵庫である。
【０１１５】
加えて、細胞の標的コンパートメント（例えばエンドソーム）内で感染作因の完全分解を成功的に可能化するため、このターゲティングシステムは、与えられたレクチンと一緒に、（ｉ）作因をその表面炭水化物を除去することによって非感染性とし、（ｉｉ）例えば病原体の一体の感染性、ゲノミック、および構造成分の完全分解のための標的細胞固有の（ファゴー）リソソーム酵素へ内部アクセシブルとするように、分解酵素（例えばマンノシダーゼおよび／またはＮ−アセチルグルコミンダーゼ）、および／またはレクチンおよび／または酵素機能完全性にとって必須の助因子（例えば金属イオンまたは補酵素）を同時にカプセル化することができる。
【０１１６】
慢性非感染病：結腸および直腸の癌
感染病のほかに、ＣＴＬレセプターターゲティングは、ある種の非感染病を治療的に効率よく宛先とすることを可能にし得る。目立つ一例は結腸および直腸の癌である。肝臓胃腸器官および組織に発現されるＲＥＧファミリーのＣＲＤレクチンに関し、それらの１７種のクローン化され、配列決定されたファミリーメンバーが新規な処置のための新しいオプションを提供し得る。これはＲＥＧファミリーのこれらメンバーは区域ＣＴＬレセプターとして癌化、糖尿病、炎症および傷害に関与する事実のためである（Ｚｈａｎｇ
ＹW，Ｄｉｎｇ ＬＳ，Ｌａｉ ＭＤ，Ｒｅｇ ｇｅｎｅ ｆａｍｉｌｙ ａｎｄ ｈｕｍａｎ ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ｗｏｒｌｄ
Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ ２００３；９（１２）：２６３５−４１）。その結果、癌化におけるこれらレセプターのいくつかの役目はそれらを（ｉ）腫瘍生存の新しい予知インディケーターとして、（ｉｉ）癌化の早期バイオマーカーとして、そして（ｉｉｉ）新規な化学療法剤の設計のための分子マトリックスとして、見込みある候補分子にすることが示唆された（Ｚｗａｎｇ
ＹＷ，Ｄｉｎｇ ＬＳ，Ｌａｉ MD前出）。
【０１１７】
本発明はこれら以前の示唆を補足し、拡張することができる。特に本発明のターゲティングシステムの局所適用によって肝臓胃腸病環境においてＲＥＧファミリーメンバーのアドレッシングは、高度に部位特異的態様において治療薬／化合物の送達を達成することができる。原理において、そのようなアプローチは上述の病気のどれも妨害することを可能にし得る。しかしながら潜在的に最も挑戦的な適用は結腸および直腸の癌に関する。２００３年現在、アメリカ合衆国およびドイツのようなすべての西欧工業化国においては、そのような癌は男性および女性の両方において癌の２番目に最も普通の死因になっている（Ｂｒｕｃｋｎｅｒ
ＨＷ，Ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｏｌｏｎ ａｎｄ Ｒｅｃｔｕｍ，Ｉｎ：Ｆｒｅｉ Ｅ，Ｈｏｌｌａｎｄ ＪＦ（ｅｄｓ．）Ｃａｎｃｅｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
５ｔｈ ｅｄ，Ｃｈａｐｔｅｒ １０３，ＢＣ Ｄｅｃｋｅｒ；Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ｌｏｎｄｏｎ ２０００：ｐｐ１４７２−５２０；Ｊａｃｏｂｉ Ｖ，Ｔｈａｌｈａｍｍｅｒ
Ａ，Ｓｔｒａｕｂ Ｒ，Ｖｏｇｌ ＴＪ，Ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ ｏｆ ｃｏｌｏｎｃｏｎｔｒａｓｔ ｅｎｅｍａ，Ｒａｄｉｏｌｏｇｅ ２００３；４３：１１３−２１）。現在この状況はもっと有望な処置オプションが提供できない限り相当に変化することはあり得ない（Ｗｏｒｌｄ
Ｈｅａｌｔｈ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ，Ｇｌｏｂａｌ ｃａｎｃｅｒ ｒａｔｅｓ ｃｏｕｌｄ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｂｙ ５０％ ｔｏ １５ ｍｉｌｌｉｏｎ ｂｙ ２０２０）。
【０１１８】
本発明のシステムは、結腸および直腸の異なる癌に優先的に発現されるＲＥＧファミリーメンバーをターゲティングすることを介して、現在実現可能なものよりもさらに一層選択的にこれらの癌に向けることができる。その上選択性はこのターゲット化合物送達システムを例えば肝動脈中への直接の注入のような確立された器官指向方法を介して適用することによってさらに増大させることができる（Ｋｅｍｅｎｙ
ＭＭ，Ａｌａｖａ Ｇ，Ｏｌｉｖｅｒ ＪＭ，Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｌｉｖｅｒ ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ ｏｆ ｃｉｒｃａｄｉａｎ ｐａｔｔｅｒｎｅｄ ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ
ｈｅｐａｔｉｃ ａｒｔｅｒｙ ｉｎｆｕｓｉｏｎ ｏｆ ＦＵＤＲ，ＨＰＳ Ｓｕｒｇ １９９４；７：２１９−２４）。加えて本発明のターゲティングシステムは、５−フルオロウラシル、葉酸、オキサリプラチンおよびＦＵＤＲのような既にＦＤＡ承認化学療法薬物を肝臓および／または腸に局在化した癌細胞へ特異的に送達し得る（Ｌｅｖｉ
Ｆ，Ｍｉｓｓｅｔ Ｊ−Ｌ，Ｂｒｉｎｚａ Ｓ，Ｄｅｃｌｅｒｅ Ａ，Ｊａｓｍｉｎ Ｃ，Ｂｉｓｍｕｔｈ Ｈ，Ｒｅｉｎｂｒｇ Ａ，Ａ ｃｈｒｏｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃ
ｐｈａｓｅ ＩＩ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌ ｗｉｔｈ ５−ｆｌｏｒｏｕｒａｃｉｌ，ｆｏｌｉｃ ａｃｉｄ，ａｎｄ ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ ｕｓｉｎｇ ｏｎ ａｍｂｕｌａｔｏｒｙ
ｍｕｌｔｉｃｈａｎｎｅｌ ｐｒｏｇｒａｍｍａｂｌｅ ｐｕｍｐ：ｈｉｇｈ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓ ａｇａｉｎｓｔ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ
ｃａｎｃｅｒ，Ｃａｎｃｅｒ（Ｐｈｉｌａ）１９９２；６９：８９３−９００；Ｋｅｍｅｎｙ ＭＭ，Ａｌｖａ Ｇ，Ｏｌｉｖｅｒ ＪＭ，Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＦＵＤＲ，ＨＰＢ
Ｓｕｒｇ １９９４；７：２１９−２４）。最後に、そのような適用のための時間薬理的療法を採用することができ、非ターゲット化化学療法を採用する時でさえも臨床研究は２４時間隔の処置プロトコールの明瞭な利益を明らかにした（Ｈｒｕｓｈｅｓｋｙ
ＷＪ，Ｃａｎｃｅｒ ｃｈｒｏｎｏｔｈｅｒａｐｙ：ａ ｄｒｕｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｃｈａｌｌｅｎｇｅ，Ｐｒｏｇ Ｃｌｉｎ Ｂｉｏｌ Ｒｅｓ １９９０；３４１Ａ：１−１０；Ｌｅｖｉ，Ｍｉｓｓｅｔ
Ｊ−Ｌ，Ｂｒｉｅｎｚａ Ｓ，Ａｄａｍ Ｒ，Ｍｅｔｚｇｅｒ Ｇ，Ｉｔｚａｋｈｉ Ｍ，Ｃａｕｓｓａｎｅｌ ＪＰ，Ｋｕｎｓｔｉｌｉｎｇｅｒ Ｆ，Ｌｅｃｏｕｔｕｒｉｅｓ
Ｓ，Ｄｅｓｃｏｒｐｓ−Ｄｅｃｌｅｒｅ Ａ，Ｊａｓｍｉｎ Ｃ，Ｂｉｓｍｕｔｈ Ｈ，Ｒｅｉｎｂｅｒｇ Ａ，前出；Ａｌｖａ Ｇ，Ｏｌｉｖｅｒ ＪＭ，前出；Ａｄｌｅｒ
Ｓ，Ｌａｎｇ Ｓ，Ｌａｎｇｅｎｍａｙｅｒ Ｉ，Ｅｉｂｌ−Ｅｉｂｅｓｆｅｌｄｔ Ｂ，Ｒｕｍｐ Ｗ，Ｅｍｍｅｒｉｃｈ Ｂ，Ｈａｌｌｅｋ Ｍ，Ｃｈｒｏｎｏｔｈｅｒａｐｙ
ｗｉｔｈ ５−ｆｌｕｏｒａｃｉｌ ａｎｄ ｆｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ａｄｖａｎｃｅｄ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｃｈｒｏｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃ
ｐｈａｓｅ Ｉ ｔｒｉａｌ，Ｃａｎｃｅｒ １９９４；７３：２９０５−１２；Ｍｏｒｍｏｎｔ ＭＣ，Ｌｅｖｉ Ｆ，Ｃａｎｃｅｒ ｃｈｒｏｎｏｔｈｅｒａｐｙ：ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ，ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ，ａｎｄ
ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ，Ｃａｎｃｅｒ ２００３；９７：１５５−６９）。結果として、既に承認された薬物および薬理学的副作用を軽減するための確立されたアプローチと共にターゲット化送達システムを採用することにより、結腸および直腸の癌処置における進歩を得ることができる。
【０１１９】
慢性非感染病：非アルコール脂肪肝炎
本発明の技術が適用可能な慢性非感染病の他の例は非アルコール性脂肪肝臓病（ＮＡＦＬＤ）である。ＮＡＦＬＤは先進国において最も普通の肝臓病であり、肝硬変、急性慢性肝不全および肝臓癌へ進行し得る。ＮＡＦＬＤの進行したサブエンティティはいわゆる非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）である（Ａｎｇｕｌｏ
Ｐ，ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ，Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２００２；３４６：１２２１−３１）。多数の研究がＮＡＳＨのための種々の処置戦略が実際に納得し得る利益なしに開拓された。実際にＬｕｄｗｉｇらによるＮＡＳＨの最初の記載から（Ｌｕｄｗｉｇ
Ｊ，Ｖｉｇｇｉａｎｏ ＴＲ，ＭｃＧｉｌｌ ＤＢ ｅｔ ａｌ，Ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ：Ｍａｙｏ Ｃｌｉｎｃ ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅｓ
ｗｉｔｈ ａ ｈｉｔｈｅｒｔｏ ｕｎｎａｍｅｄ ｄｉｓｅａｓｅ，Ｍａｙｏ Ｃｌｉｎ Ｐｒｏｃ １９８０；５５：４３４−３８）、効果的な治療法は提供されていない。それ故、実際の病理メカニズムの進歩した洞察は、今やはじめて真に有効な治療オプションを設計するのを助けるであろう。特に増加している証拠は病理学的に増加した肝細胞アポトーシスは肝臓の炎症およびフィブロジェネシスへ貢献し、そのため脂肪肝炎への進行に横たわる最も重要な病原メカニズムであり得ることを示唆する（Ｃａｎｂａｙ
Ａ，Ｈｉｇｕｃｈｉ Ｈ，Ｂｒｏｎｋ Ｆ，ＳＦ ｅｔ ａｌ，Ｆａｓ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｆｉｂｒｏｇｅｎｅｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ｂｉｌｅ ｄｕｃｔ ｌｉｇａｔｅｄ
ｍｏｕｓｅ：ａ ｌｉｎｋ ｂｅｔｗｅｅｎ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ａｎｄ ｆｉｂｒｏｓｉｓ，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ２００２；３５：９６４−６；Ｃａｎｂａｙ
Ａ，Ｇｕｃｃｉａｒｄｉ ＭＥ，Ｈｉｇｕｃｈｉ Ｈ ｅｔ ａｌ，Ｃａｔｈｅｐｓｉｎ Ｂ ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ａｔｔｅｎｕｒａｔｅｓ ｈｅｐａｔｉｃ ｉｎｊｕｒｙ
ａｎｄ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｄｕｒｉｎｇ ｃｈｏｌｅｓｔａｓｉｓ，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ ２００３；１１２：１５２−９）。このため炎症と線維症の両方が実際にＮＡＳＨの目立った特徴であるので、脱線した肝内アポトーシスはＮＡＦＬＤからＮＡＳＨへの進行において決定的役目を果しているものと合理的に仮説することができる（Ｆｅｌｄｓｔｅｉｎ
ＡＥ，Ｃａｎｂａｙ Ａ，Ａｎｇｎｌｏ Ｐ ｅｔ ａｌ，Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ａｎｄ ｆａｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｒｅ ｐｒｏｍｉｎｅｎｔ
ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ２００３；１２５：４３７−４３）。
【０１２０】
特に、これらの患者において肝細胞アポトーシスを阻害する潜在的に高い治療利益のための納得できるケースを確立することができる。そのような戦略は明らかに肝臓炎症、線維症およびそれらの後遺症を防止し得る。この目的のため、カスパーゼ（すなわち二つの主なアポトーシスカスケードの鍵となる酵素）の阻害剤が臨床使用のために開発中である。胆管閉塞の胆管リゲートマウスモデルにおいて、パンカスターゼ阻害剤ＩＤＮ−６５５６は既に抗線維症剤として有益であることが証明されている（Ｃａｎｂａｙ
Ａ，Ｆｅｌｄｓｔｅｉｎ Ａ，Ｂａｓｋｉｎ−Ｂｅｙ Ｅ ｅｔ ａｌ，Ｔｈｅ ｃａｓｐａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ＩＮＤ−６５５６ ａｔｔｅｎｕｒａｔｅｓ ｈｅｐａｔｉｃ
ｉｎｊｕｒｙ ａｎｄ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ｂｉｌｅ ｄｕｃｔ ｌｉｇａｔｅｄ ｍｏｕｓｅ，Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｅｘｐ Ｔｈｅｒ ２００４；３０８：１１９１−６）。同様にこの阻害剤によるＨＣＶ陽性患者の処置は有意に肝臓パラメーターの病理学的値（例えばＡＬＴ）、そのため傷害を減少させる（Ｖａｌｅｎｔｉｎｏ
ＫＬ，Ｇｕｔｉｅｒｒｅｚ Ｍ，Ｓａｎｃｈｅｚ Ｒ ｅｔ ａｌ，Ｆｉｒｓｔ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｃａｓｐａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ：ａｎｔｉ−ａｐｏｐｔｏｓｉｓ
ｃａｓｐａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ＩＤＮ−６５５６，ｉｍｐｒｏｖｅｓ ｌｉｖｅｒ ｅｎｚｙｍｅｓ，Ｉｎｔ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｐｈａｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ ２００３；４１：４４１−９）。しかしながら最近のアプローチがＥｉｃｂｈｏｒｓｔらによって最近提供され、彼等は肝臓ダメージのマウスモデルにおけるアポトーシスを阻害するためＦＤＡによって既に承認されている薬物、スラミンを適用した（Ｇｕｉｃｃｉａｒｄｉ
ＭＥ，Ｇｏｒｅｓ ＧＪ，Ｃｈｅａｔｉｎｇ ｄｅａｔｈ ｉｎ ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ，Ｎａｔ Ｍｅｄ ２００４；１０：５８７−５８８；Ｅｉｃｈｈｏｒｓｔ ＳＴ，Ｋｒｕｅｇｅｒ
Ａ，Ｍｕｅｒｋｏｓｔｅｒ Ｓ ｅｔ ａｌ，Ｓｕｒａｍｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｄｅａｔｈ ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｉｎｄｕｃｅｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ
ａｎｄ ｆｕｌｍｉｎａｎｔ ａｐｏｐｔｏｃｉｃ ｌｉｖｅｒ ｄａｍａｇｅ ｉｎ ｍｉｃｅ，Ｎａｔ Ｍｅｄ ２００４；１０：６０２−９）。この知見は慢性肝臓病ＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨ患者のための最初の合理的療法の道を歩むことができる。新しい肝細胞アポトーシス指向処置オプションの設計が最近示唆された（Ｃａｎｂａｙ
Ｃ，Ｇｉｅｓｅｌｅｒ ＲＫ，Ｇｏｒｅｓ ＧＪ，Ｇｅｒｋｅｎ Ｇ，Ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ａｎｄ ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ
ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ：ａｎ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ ｃｏｎｅｒｓｔｏｎｅ ｔｕｒｎｅｄ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ，Ｚ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ
２００５；４３：２１１−７）。警告として、抗アポトーシス薬の治療的長期および全身採用は高増殖障害を潜在的に促進し、そしてある種のタイプの癌および／またはリンパ腫を促進し得る。しかしながら選択方法は細胞特異的ターゲット化送達システムによってスラミンのような有益な薬物を送達し得る。
【０１２１】
ここに記載される本発明に関し、ＲＥＧタンパク質の肝胃腸学的に限られたファミリーのメンバー（Ｚｈａｎｇ ＹＷ，Ｄｉｎｇ ＬＳ，Ｌａｉ ＭＤ，Ｒｅｇ
ｇｅｎｅ ｆａｍｉｌｙ ａｎｄ ｈｕｍａｎ ｄｅｓｅａｓｅｓ，Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ ２００３；９：２６３５−４１）は、再び潜在的な肝内ターゲティング構造を含んでいる。しかしながらある種の肝細胞サブセットへ指向し得るＣ−タイプレクチンは、もっと特に（ｉ）肝細胞によって発現される唾液糖タンパクレセプター（これはＧａｌ−４−Ｃｈｏｌ−標識リポソームでターゲット化することができる）、および（ｉｉ）非実質肝細胞によって発現されるマンノースおよびフコースレセプター（これはＦｕｃ−４−Ｃｈｏｌ−標識リポソームで両方ともターゲット化可能）である（Ｋａｗａｋａｍｉ
Ｓ，Ｗｏｎｇ Ｊ，Ｓａｔｏ Ａ，Ｈａｔｔｏｒｉ Ｙ，Ｙａｍａｓｈｉｔａ Ｆ，Ｈａｓｈｉｄａ Ｍ，Ｂｉｏｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ
ｏｆ ｍａｎｎｏｓｙｌａｔｅｄ，ｆｕｃｏｓｙｌａｔｅｄ，ａｎｄ ｇａｌｏｃｔｏｓｙｌａｔｅｄ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｉｎ ｍｉｃｅ，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ
Ａｃｔａ ２０００；１５２４：２５８−６５）。加えて、Ｆｕｃ−４−Ｃｈｏｌ−標識リポソームは肝臓／リンパ節−特異性ＩＣＡＭ−３−探索ノンインテグリン（Ｌ−ＳＩＧＮ）、ＤＣ−ＳＩＧＮ関連ＣＴＬレセプターをターゲティングすることによって肝臓洞内皮細胞を宛先とすることができる（Ｂａｓｈｉｒｏｖａ
ＡＡ，Ｇｅｉｊｔｅｎｂｅｅｋ ＴＢＨ，ｖａｎ Ｄｕｉｊｎｈｏｖｅｎ ＧＣＶ，ｖａｎ Ｖｌｉｅｔ ＳＪ，Ｅｉｌｅｒｉｎｇ ＪＢＧ，Ｍａｒｔｉｎ ＭＰ，Ｗｕ Ｌ，Ｍａｒｔｉｎ
ＴＤ，Ｖｉｅｂｉｇ Ｎ，Ｋｎｏｌｌｅ ＰＡ，ＫｅｗａＲａｍａｉｎ ＵＮ，ｖａｎ Ｋｏｏｙｋ Ｙ，Ｃｕｒｒｉｎｇｔｏｎ Ｍ，Ａ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ−ｓｐｅｃｉｆｅｃ
ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ３−ｇａｂｂｉｎｇ ｎｏｎｉｎｔｅｇｒｉｎ（ＤＣ−ＳＩＧＮ）−ｒｅｌａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｓ
ｈｉｇｈｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｏｎ ｈｕｍａｎ ｌｉｖｅｒ ｓｉｎｕｓｏｉｄａｌ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ＨＩＶ−１
ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００１；１９３：６７１−８）。
【０１２２】
事実、先進国における最も多い肝臓病としてＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨに対する効果的な処置の不存在下においては、そのようなオプションは最初の真に有効な介入戦略を可能とし得る。その上、同じ論理に基づくアプローチは、同様に増加したそして病原学的に適切なアポトーシス速度を表わす他の病気に効果があることが期待される（Ｃａｎｂａｙ
Ｃ，Ｇｉｅｓｅｌｅｒ ＲＫ，Ｇｏｒｅｓ ＧＪ，Ｇｅｒｋｅｎ Ｇ，前出）。特に示唆された治療的アプローチは二つの強力な生学的同盟を束ねる。第１は、細胞外肝細胞特異性ＣＲＤレクチンドメインをターゲティングする細胞特異性送達のため、第２はアポトーシスカスケードの細胞内カスパーゼを治療的にターゲティングする（例えば薬物スラミンを介して）脱線アポトーシスを妨害するためである。ＣＲＤレクチンシステムおよびアポトーシスのシステムの両方は我々の生物学的遺産のスレートの中に深く刻み込まれている。換言すれば、地球上の細胞進化の礎石上の建物はそのようなアプローチを成功に結びつけるようにせしめる。スラミンのようなアポトーシス／カスケード阻害薬物の採用（Ｅｉｃｈｈｏｒｓｔ
ＳＴ，Ｋｒｕｅｇｅｒ Ａ，Ｍｕｅｋｏｓｔｅｒ Ｓ ｅｔ ａｌ，前出）は、本発明のターゲティングシステムの肝局所的および時間薬理学的採用（Ｋｅｍｅｎｙ ＭＭ，Ａｌａｖａ
Ｇ，Ｏｌｉｖｅｒ ＪＭ，前出）を通じて、該薬物の潜在的な有害効果を最小化しつつはじめてのＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨの効果的処置を許容することができる。
【０１２３】
本発明のいくつかの具体例は、ヒトを含む哺乳類対象の免疫細胞の病原体保有細胞へ活性剤を優先的に送達するための方法に関する。標的病原体保有細胞は骨髄中の骨髄幹細胞、単球、骨髄樹状細胞、マクロファージ、濾胞樹状細胞、形質細胞系樹状細胞、Ｔリンパ球、およびナチュラルキラー細胞を含む。以下において、術語「樹状細胞」は、骨髄系、形質細胞系、および濾胞細胞系樹状細胞を含む。術語「Ｔリンパ球」は、限定でなくＴ−ヘルパー、Ｔ−調節、またはＴ−メモリ細胞を含む。
【０１２４】
術語「優先的」は、ターゲティングシステム、すなわち脂質−活性剤／化合物コンプレックス、もしくはターゲット化リガンドを含有する外表面を有するターゲット化リポソームが、本発明と比較して、匹敵する脂質−活性剤コンプレックス、もしくはモノ−またはポリフコース部分のようなターゲティングリガンドを含まない外表面を有するリポソームよりも一層効果的に細胞へ送達され、そして活性剤／化合物（例えば植物レクチンまたは薬物）が細胞によって取り込まれることを意味する。
【０１２５】
この方法は哺乳類対象へ、活性剤または活性剤の組合せを含む本発明に従ったターゲット化リポソームのような脂質―活性剤コンプレックスを注入、または局所的または他のように適用することを含み、免疫細胞は限定でなくヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）のような感染作因（または病原体）に感染しているか、または感染に服し得る細胞である。いくつかの具体例において、免疫細胞はウイルス、細菌、菌類、またはプロトゾエアのような感染作因に感染しているか、または感染へ服し得る。感染作因の例は、ＨＩＶ−１，ＨＩＶ−２，ＨＣＶ，ＨＳＶ，ＥＢＶ，ＨＰＶ，インフルエンザウイルス、または結核菌である。いくつかの具体例は特にエンドソーム内ＨＩＶ不活性化のための細胞内ターゲティングに関する。
【０１２６】
本発明は特に、ターゲット化リポソームを含む脂質−活性剤／化合物コンプレックスのようなターゲティングシステムにも関し、それらの表面はモノ−またはポリフコースのようなターゲティングリガンドで標識されており、それらはコンプレックスおよびリポソームへここに提供されている既知の技術により結合され、すなわちコレステロール結合およびコレステン−５−イルオキシ−Ｎ−（４−（（１−イミノ−２−β−Ｄ−チオフコシルエチル）アミノ）アルキル）ホルムアミド（または略してＦｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ）の膜投錨、続いてジアステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、コレステロール（Ｃｈｏｌ）、およびＦｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌのモル比６０：３５：５の組成物として処方することによって製造される（例えば，Ｋａｗａｋａｍｉ
Ｓ，Ｗｏｎｇ Ｊ，Ｓａｔｏ Ａ，Ｈａｔｔｏｒｉ Ｙ，Ｙａｍａｓｈｉｔａ Ｆ，Ｈａｓｈｉｄａ Ｍ，Ｂｉｏｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ
ｏｆ ｍａｎｎｏｓｙｌａｔｅｄ，ｆｕｃｏｓｙｌａｔｅｄ ａｎｄ ｇａｌａｔｏｓｙｌａｔｅｄ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｉｎ ｍｉｃｅ，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ
Ａｃｔａ ２０００ Ｄｅｃ １５；１５２４（２−３）；２５８−６５）。フコース、ポリフコースおよびポリフコース誘導体はターゲティングリガンドまたはＣＲＤレセプター特異性アンカーの例である。本発明の他の具体例においては、ターゲティングリガンドまたはＣＲＤレセプター特異性アンカーはＣＴＬまたはＣＴＬＤレセプターへ特異的に結合する。そのようなターゲッティングダガンドはカラクトース、ポリガラクトースおよびポリガラクトース誘導体を含み得る。
【０１２７】
ここに記載した本発明に関し、リポソーム膜修飾のための本発明のターゲティングリガンド、またはＣＴＬレセプター特異性アンカーを含むＣＲＤレセプター特異性アンカーの合成は、Ｋａｗａｋａｍｉらのプロトコールに基づく。彼等の研究において、彼等はガラクトース（Ｇａｌ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ）、マンノース（Ｍａｎ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ）、およびフコース（Ｆｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ）で誘導体としたコレステロールのリポソーム膜アンカー、すなわちそれぞれコレステロール−５−イルオキシ−Ｎ−（４−（（１−イミノ−２−１−ｄ−チオガラクトシルエチル）アミノ）アルキル）ホルムアミド、コレステン−５−イルオキシ−Ｎ−（４−（（１−イミノ――１−ｄ−チオマンノシルエチル）アミノ）アルキル）ホルムアミド、およびコレステン−５−イルオキシ−Ｎ−（４−（（１−イミノ−２−１−ｄ−チオフコシルエチル）アミノ）−アルキル）ホルムアミドを、このグループの以前の仕事においてはじめて開発された方法（Ｋａｗａｋａｍｉ
Ｓ，Ｙａｍａｓｈｉｔａ Ｆ．Ｎｉｓｈｉｋａｗａ Ｍ，Ｔａｋａｋｕｒａ Ｙ，Ｈａｓｈｉｄａ Ｍ，Ａｓｉａｌｏｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ
ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｕｓｉｎｇ ｎｏｖｅｌ ｇａｌａｃｔｏｓｙｌａｔｅｄ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎｕ １９９８；２５２：７８−８３）で合成した（Ｋａｗａｋａｍａｉ
Ｓ，Ｗｏｎｇ Ｊ，Ｓａｔｏ Ａ，Ｈａｔｔｏｒｉ Ｙ，Ｙａｍａｓｈｉｔａ Ｆ，Ｈａｓｈｉｄａ Ｍ，前出）。
【０１２８】
彼等のプロトコールは他の知られた方法的ステップに従って修飾された（Ｎｉｓｈｉｋａｗａ Ｍ，Ｋａｗａｋａｍｉ Ｓ，Ｙａｍａｓｈｉｔａ Ｆ，Ｈａｓｈｉｄａ
Ｍ，Ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ ｃａｔｉｏｎｉｃ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｆｏｒ ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｍｅｃｉａｔｅｄ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ，Ｍｅｔｈ
Ｅｎｚｙｍｏｌ ２００３；３７３：３８４−３９９；Ｗｏｌｆｒｏｍ ＭＬ，Ｔｈｏｍｐｓｏｎ Ａ，Ａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．ＩＩ；ｐｐ．２１１−５（１９６３）；Ｃｈｉｐｏｗｓｋｙ Ｙ，Ｌｅｅ ＹＣ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ １−ｔｈｉｏａｌｄｏｓｉｄｅｓ
ｈａｖｉｎｇ ａｎ ａｍｉｎｏ ｇｒｏｕｐ ａｔ ｔｈｅ ａｇｌｙｃｏｎ ｔｅｒｍｉｎａｌ，Ｃａｒｂｏｈｙｄ Ｒｅｓ １９７３；３１：３３９−３４６；Ｌｅｅ ＹＣ，Ｓｔｏｗｅｌｌ
ＣＰ，Ｋｒａｎｚ ＭＬ，２−Ｉｍｉｎｏ−２−ｍｅｔｈｏｘｙｔｈｙｌｅｎ−１−ｔｈｉｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ：ｎｅｗ ｒｅａｇｅｎｔｓ ｆｏｒ ａｔｔａｃｈｉｎｇ
ｓｕｇａｒｓ ｔｏ ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ １９７６；１５：３９５６−３９６３）。最後にさらなる新しい化学的修飾と品質管理対策が含められた。得られたマンノース（Ｍａｎ−Ｃ４−Ｃｈｌｏ）、フコース（Ｆｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ）、およびガラクトース（Ｇａｌ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ）ターゲティングアンカーに関し、これらの変種は異なる目的に役立った。その証明された有効性のため、Ｍａｎ−Ｃ４−Ｃｈｏｌは陽性コントロールとして採用された。Ｍａｎ−Ｃ４−Ｃｈｏｌと同様な結合有効度のため、Ｆｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌは送達システムのためのターゲティングアンカーとして特化された。最後にＧａｌ−Ｃ４−Ｃｈｏｌはマンノース／フコース特異性ターゲティング構造をターゲティングする時の陰性コントロールとして使用された。しかしながらＧａｌ−４−Ｃｈｏｌはさらに非実質肝細胞へ向って指向されたリポソームの特異性ターゲティングアンカーとして有望である（Ｋａｗａｋａｍｉ
Ｓ，Ｗｏｎｇ Ｊ，Ｓａｔｏ Ａ，Ｈａｔｔｏｒｉ Ｙ，Ｙａｍａｓｈｉｔａ Ｆ，Ｈａｓｈｉｄａ Ｍ，前出）。
【０１２９】
「コンプレックス」は、脂質、活性剤、ターゲティングリガンドおよび／または本発明の脂質−活性剤コンプレックスもしくはターゲティングシステムの他の任意成分を含む、その成分間の化学的結合もしくは結合から生じた混合物または付加体である。化学結合は共有結合、イオン結合、水素結合、ファンデルワールス結合、疎水結合、またはコンプレックスの成分をそれらの部分のどこかで結合するこれらの結合タイプのどれかの組合せを持つことができ、成分は一または多数の種々の種類の基を持つことができる。コンプレックスのすべての成分がすべての他の成分へ結合する必要はなく、各成分はコンプレックスの少なくとも１種の他の成分との化学結合を持っている。本発明によれば、脂質−活性剤コンプレックスの例はリポソーム（脂質ベシクル）、または脂質−活性剤シート−ディスクコンプレックスを含む。脂質接合活性剤も本発明に従った脂質−活性剤コンプレックスの部分であることができる。本発明の具体例においては、活性剤は脂質−活性剤コンプレックス内にカプセル化され、そして脂質活性剤コンプレックスはその外表面にターゲティングリガンドを持つ。活性剤はリポソーム内のカプセル化を含む脂質処方とカプセル化することができる。
【０１３０】
リポソームのような脂質−活性コンプレックスの製造するための有用な技術はこの分野では良く知られている（例えば、Ｓｕｌｌｉｖａｎ ＳＭ，Ｇｉｅｓｅｌｅｒ
ＲＫＭ，Ｌｅｎｚｎｅｒ Ｓ，Ｒｕｐｐｅｒｔ Ｊ，Ｇａｂｒｙｓｉａｋ ＴＧ，Ｃｏｘ Ｇ，Ｒｉｃｈｅｒ Ｌ，Ｍａｒｔｉｎ ＷＪ，ａｎｄ Ｓｃｏｌａｒｏ ＭＪ，Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ
ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ−１ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｂｙ ｌｉｐｏｓｏｍｅ−ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ ｓｅｎｓｅ ＤＮＡ
ｔｏ ｔｈｅ ５‘ＴＡＴ ｓｐｌｉｃｅｄ ａｃｃｅｐｔｏｒ ｓｉｔｅ，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｒｅｓ Ｄｒｖ １９９２；２：１８７−９７；Ｌａｖｅｒｍａｎ
Ｐ，Ｂｏｅｍａｎ ＯＣ，Ｏｙｅｎ ＷＪＧ，Ｃｏｒｓｔｅｎｓ ＦＨＭ，Ｓｔｏｒｍ Ｇ，Ｉｎ ｖｉｔｏｒｏ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ＰＥＧ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ：ｕｎｅｘｐｅｃｔｅｄ
ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｓ，Ｃｒｉｔ Ｒｅｖ Ｔｈｅｒ Ｄｒｕｇ Ｃｏｒｒｉｅｒ Ｓｙｓｔ ２００１；１８：５５１−６６；Ｏｕｓｓｏｒｅｎ Ｃ，Ｓｔｏｒｍ Ｇ，Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ
ｔｏ ｔａｒｇｅｔ ｔｈｅ ｌｙｍｐｈａｔｉｃｓ ｂｙ ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉ Ｒｅｖ ２００１；５０（１−２）：１４３−５６；Ｂｅｓｔｍａｎ−Ｓｍｉｔｈ
Ｊ，Ｇｏｕｒｄｅ Ｐ，Ｄｅｓｏｒｍｅａｕｘ Ａ，Ｔｒｅｍｂｌａｙ ＭＪ，Ｂｅｒｇｅｒｏｎ ＭＧ，Ｓｔｅｒｉｃａｌｌｙ ｓｒａｂｉｚｅｄ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｂｅａｒｉｎｇ
ａｎｔｉ−ＨＬＡ−ＤＲ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｆｏｒ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｔｈｅ ｐｒｉｍａｒｙ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒｓ ｏｆ ＨＩＶ−１，Ｂｉｏｃｈｉｍ
Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ ２０００；１５２４：２５８−６５）１４６８（１−２）：１６１−７４；Ｂｅｓｔｍａｎ−Ｓｍｉｔｈ Ｊ，Ｄｅｓｏｒｍｅａｕｘ Ａ，Ｔｒｅｍｂｌａｙ
ＭＪ，Ｂｅｒｇｅｒｏｎ ＭＧ，Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｃｅｌｌ−ｆｒｅｅ ＨＩＶ ａｎｄ ｖｉａｌｌｙ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ａｎｔｉ−ＨＬＡ−ＤＲ
ｉｍｍｕｎｏｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｃｏｎｔａｔｉｎｉｎｇ ａｍｐｈｏｔｅｒｉｃｉｉｎ Ｂ，ＡＩＤＳ ２０００；１４（１６）：２４５７−６５；Ｍａｙｅｒ ＬＤ，Ｈｏｐｅ
ＭＪ，Ｃｕｌｌｉｓ ＰＲ，Ｖｅｃｉｃｌｅｓ ｏｆ ｖａｒｉａｂｌｅ ｓｉｚｅｓ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ ａ ｒａｐｉｄ ｅｘｔｒｕｓｉｏｎ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ，Ｂｉｏｃｈｉｍ
Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １９８６；８５８：１６１−１６８；Ｋｉｎａｎ Ｌ ｅｔ ａｌ，Ｌｉｐｉｄ−ｄｒｕｇ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓ ｅｎｈａｎｃｅｄ ＨＩＶ
ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｉｎｄｉｎｏｖｉｒ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ｉｎ ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｔｉｓｓｕｅｓ ａｎｄ ｖｉｒａｌ ｌｏａｄ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ：ａ
ｐｒｏｏｆ ｏｆ ｃｏｎｃｅｐｔ ｓｔｕｄｙ ｉｎ ＨＩＶ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｍａｃａｑｕｅｓ，Ｊ ＡＩＤＳ ２００３；ｉｎ ｐｒｅｓｓ；Ｈａｒｖｉｅ Ｐ，Ｄｅｓｏｒｍｅａｕｘ
Ａ，Ｇａｎｇｅ Ｎ，Ｔｒｅｍｂｌａｙ Ｍ，Ｐｏｕｌｉ Ｌ，Ｂｅａｕｃｈａｍｐ Ｄ，Ｂｅｒｇｅｒｏｎ ＭＧ，Ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｔｉｓｓｕｅｓ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ
ｏｆ ｌｉｐｓｏｍｅ−ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ ２’，３‘−ｄｉｄｅｘｙｉｎｏｓｉｎｅ，ＡＩＤＳ
１９９５；９（７）：７０１−７；Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ Ｎｏ．５，７７３，０２７；Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ Ｎｏ．５，２２３，２６３；ＷＯ９６／１０３９９Ａ１）。
【０１３１】
リポソーム調製のためのいくつかの有用な方法は、押出し、ホモジナイズ化、リモートローディングおよび逆相蒸発を含む。押出しにおいては、それ自体まはたコレステロールとの組合せによってリン脂質から構成されるフィルムが脂質溶液から有機溶媒（クロロホルムのような）を蒸発することによって生成される。疎水性活性剤が溶媒蒸発の前に脂質溶液へ加えられる。水溶性活性剤の捕捉のためには、乾燥脂質フィルムが活性剤を含んでいる等張水溶液でかきまぜ（超音波、ボルティックス、モーター付き攪拌機等）によって水和される。脂質サスペンジョンは３ないし４回冷凍および解凍される。次にサスペンジョンは規定した直径０．８μｍ，０．４μｍ，０．２μｍまたは０．１μｍのような直径のポアを含んでいるポリカーボネートフィルターのシリーズを通過させられる。水溶性活性剤のためには、カプセル化されない活性剤はゲル透過カラムクロマトグラフィー、透析またはダイアフィルトレーションによって除去される。リポソームは無菌濾過（例えば０．２２μｍフィルターを通して）することができる。
【０１３２】
ラクトース、グルコース、ショ糖のような凍結保護剤を等張性が維持される限り無菌リポソームへ加えることができる。リポソームはその後凍結乾燥され、凍結乾燥ケーキとして無期限に貯蔵される（例えば、Ｍａｙｅｒ
ＬＤ，Ｈｏｐｅ ＭＪ，Ｃｕｌｌｉｓ ＰＲ，前出；Ｔｓｖｅｔｋｏｖａ ＮＭ ｅｔ ａｌ，Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｓｕｇａｒｓ ｏｎ ｈｅａｄｇｒｏｕｐ ｍｏｂｉｌｉｔｙ
ｉｎ ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｉｅｄ ｄｉｐａｌｍｉｔｏｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌ ｃｈｏｌｉｎｅ ｂｉｌａｙｅｒｓ：ｓｏｌｉｄ ｓｔａｔｅ ３１Ｐ ＮＭＲ ａｎｄ
ＦＴＩＲ ｓｔｕｄｉｅｓ，Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｊ １９９８；７５：２９４７−２９５５；Ｃｒｏｗｅ ＪＨ，Ｏｌｉｖｅｒ ＡＥ，Ｈｏｅｋｓｔｒａ ＦＡ，Ｃｒａｗｅ ＬＭ，Ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ
ｏｆ ｄｒｙ ｍｅｍｂｒａｎｅｓ ｂｙ ｍｉｘｔｕｒｅｓ ｏｆ ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌ ｓｔａｒｃｈ ａｎｄ ｇｌｕｃｏｓｅ：ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｖｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ
１９９７；３５：２０−３０；Ｓｕｎ ＷＱ，Ｌｅｏｐｏｌｄ ＡＣ，Ｃｒｏｗｅ ＬＭ，Ｃｒｏｗｅ ＪＨ，Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｄｒｙ ｌｉｐｏｓｏｍｅ ｉｎ ｓｕｇａｒ
ｇｌａｓｓｅｓ，Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｊ １９９６；７０：１７６９−１７７６）。
【０１３３】
ホモジナイゼーションは大規模製造に適している。脂質サスペンジョンは上に記載したように調製される。大規模での冷凍解凍ステップが問題になり得る。リポソームの直径は、脂質サスペンジョンを同じ脂質サスペンジョンの接近する流れに衝突させるか（マイクロフリダイゼーション）か、まはた鋼板に衝突させる（グアリニゼーション）ことによって減少させられる。後者の技術はミルクのホモジナイゼーションのための乳産業において使用されている。捕捉されなかった水溶性活性剤はダイアフィルトレーションによって除去される。疎水性活性剤は完全に捕捉され、そして通常除去すべき遊離活性剤は存在しない（例えば、Ｐａａｖｏｌａ
Ａ，Ｋｉｌｐｅｌａｉｎｅｒ Ｉ，Ｙｌｉｒｕｕｓｉ Ｊ，Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ Ｐ，Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｒｅｌｅａｓｅ ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ ｌｉｐｓｏｍａｌ ｇｅｌ
ｏｆ ｉｂｕｐｒｏｆｅｎ ｆｏｒ ｅｐｉｄｕｒａｌ ａｎａｌｇｅｓｉａ，Ｉｎｔ Ｊ Ｐｈａｒｍ ２０００；１９９：８５−９３；Ｚｈｅｎｇ Ｓ，Ｚｈｅｎｇ Ｙ，Ｂｅｉｓｓｉｎｇｅｒ
ＲＬ，Ｆｒｅｓｃｏ Ｒ，Ｌｉｐｏｓｏｍｅ−ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄｓ，Ｂｉｏｍａｓｔｅｒ Ａｉｔｉｆ
Ｃｅｌｌｓ Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ １９９２；２０：３５５−３６４）。
【０１３４】
活性剤捕捉のための他の方法はリモートローディングである。捕捉すべき活性剤は電荷を持たなければならない。プロトン化または脱プロトン化の程度はイオン化基のｐＨによって制御される。接合酸または塩基はリポソームの内側にトラップされる。イオン化し得る活性剤はリポソームの外へ加えられる。活性剤がリポソーム内側にトラップされたイオン化し得る物質の中和剤として作用するようにｐＨが下げられる。捕捉されたイオン化し得る分子に対するカウンターインはｐＨ変化のリポソームの外へ拡散することができる。これは活性剤がリポソーム内へ拡散するために充分なエネルギーを有する勾配を形成する。実例はドキソルビシンの予製リポソーム中へのローディングである。
【０１３５】
逆相蒸発においては、脂質フィルムが典型的には約３０ｍＭの最終濃度へジエチルエーテル中に可溶化される。典型的には捕捉された活性剤を有する水１部が脂質エーテル溶液３部へ加えられる。超音波の形のエネルギーが印加され、サスペンジョンを均一なエマルジョンに強制する。安定なエマルジョンが生成した後（１ないし３時間静置した後分離しない）、エーテルが蒸発によって除去され、典型的には２００ｎｍ直径および高い捕捉効率を有するリポソームを与える。
【０１３６】
典型的には直径５０ｎｍのリポソームを得るＤＮＡ捕捉のためのエタノール／カルシウムリポソームが上の方法のどれかにより（押出し、ホモジナイゼーションまたは超音波）調製される。このリポソームはプラスミドＤＮＡプラス８ｍＭ塩化カルシウムと混合される。エタノールは典型的には約４０％の濃度を得るようにサスペンジョンへ添加される。エタノールはダイアフィルトレーションによって除去され、生成したリポソームは一般に約７５％のリポソーム内に捕捉されたＤＮＡを有する直径２００ｎｍ未満である。
【０１３７】
細胞ターゲティングのため、本発明に従ってリポソームは上の方法のどれかによって調製することができる。このリポソームはタンパク質を架橋するこができる脂質を含有することができる。これら脂質の例は、Ｎ−グルタリル−ホスファチジルエタノールアミン、Ｎ−スクシニル−ホスファジルエタノールアミン、マレイミド−フェニルブチリル−ホスファチジルエタノールアミン、スクシンイミジル−アセチルチオアセテート−ホスファチジルエタノールアミン、ＳＰＤＰ−ホスファチジルエタノールアミンである。グルタリルおよびスクシンイミジルホスファチジルエタノールアミンは、アミンのようなヌクレオフィルヘシクロカルボジミドを使用して結合とすることができる。マレイミド、アセチルチオアセテートおよびＳＰＤＰホスファチジルエタノールアミンは、タンパク、ペプチドまたは小分子量リガンド（＜１０００ｇｍ／モル）上のチオールと反応させることができる。タンパクは生成後リポソームへ誘導体化することができる。誘導体化されないタンパクはゲルパーミエーションクロマトグラフィーによって除去することができる。ペプチドおよび低分子量リガンドは脂質へ誘導化し、そして脂質フィルムの生成前に有機脂質溶液へ加えることができる。
【０１３８】
本発明によれば、有用な脂質の例は限定でなく、天然および合成的に製造したホスファチジルコリン（以後ＰＣと呼ぶ）、ホスファチジル酸（以後ＰＡと呼ぶ）、リソホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン（以後ＰＳと呼ぶ）、ホスファチジルエタノールアミン（以後ＰＥと呼ぶ）、スフィンゴ脂質、ホスファチジルグリセロール（以後ＰＧと呼ぶ）、スピンゴミエリン、カルディオリピン、糖脂質、ガングリオシド、セレブロシド、および大豆リン脂質（例えばアソレクチン、組合せた濃縮物のような単独にまたは混合して使用される同様な脂質のような、ベシクル生成使用される同様な脂質のような、ベシクル生成脂質を含む。ＰＣ，ＰＧおよびＰＥは精製した卵黄およびその水素化誘導体から得ることができる。
【０１３９】
任意に、ステロイド、コレステロール、長鎖脂肪族アミンおよびカルボン酸のような脂肪族アミン、長鎖硫酸エステルおよびリン酸エステル、ジアセチルホスフェート、ブチル化ヒドロキシトルエン、トコフェロール、レチノールおよびイソプレノイド化合物のような他の脂質は、生成したベシクルへある種の望むおよび既知の性質を付与するためにリン脂質成分と相互混合することができる。加えて、ヒドロキシル基、分岐炭素鎖、環状誘導体、芳香族誘導体、エーテル、アミド、ポリ不飽和誘導体、ハロゲン化誘導体のような変化した脂肪族部分か、または炭水化物、グリコール、ホスフェート、ホスフォネート、４級化アミン、サルフェート、スルホネート、カルボキシ、アミン、スルフヒドリル、もしくはイミダゾームを含む変化した親水性部分を含んでいる合成リン脂質、およびそのような基の組合せが上で述べたリン脂質に代替まはた混合され、本発明に従って使用されることができる。これら成分のあるものはリポソーム膜流動を増し、このためもっと効果的な取り込みを伴なうことが知られ、他のものは例えば腫瘍細胞に対してそれら分化能力に影響することによって直接の効果を持つことが知られている。上記から、本発明の方法によって調製された脂質成分の化学的組成は、ベシクルのサイズは脂質組成によって影響されることができるけれども、活性剤捕捉のパーセンテージの認識し得る減少なしに大きく変えることができることが認められるであろう。
【０１４０】
ジパルミトイルのような飽和合成ＰＣおよびＰＧも使用することができる。有利にはＰＣの使用するこができる他の両親媒性脂質はガングリオシド、グロボシド、脂肪酸、ステアリルアミン、長鎖アルコール等である。ＰＥＧ化脂質、モノグリセライド、ジグリセライド、トリグリセライドも含まれる。アシル化およびジアシル化リン脂質も有用である。
【０１４１】
さらなる例として、ある具体例において有用なリン脂質は、卵ホスファチジコリン（ＥＰＣ）、ジラウリロイルホスファジルコリン（ＤＬＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、１−ミリストイル−２−パルミトイルホスファチジルコリン（ＭＤＰＣ）、１−パルミトイル−２−ミリストイルホスファチジルコリン（ＰＭＰＣ）、１−パルミトイル−２−ステアロイルホスファチジルコリン（ＰＳＰＣ）、１−ステアロイル−２−パルミトイルホスファチジルコリン（ＳＰＰＣ）、ジオレイロイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジラウリロイルホスファチジルグリセロール（ＤＬＰＧ）、ジミリストイルホスファチジルグリセロール（ＤＭＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）、ジステアロイルホスファチジルグリセロール（ＤＳＰＧ）、ジステアロイルスフィンゴミエリン（ＤＳＳＰ）、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、ジオレイロイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジミリストイルホスファチジル酸（ＤＭＰＡ）、ジパルミトイルホスファチジル酸（ＤＰＰＡ）、ジミリストイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジミリストイルホスファチジルセリン（ＤＭＰＳ）、ジパルミトイルホスファチジルセリン（ＤＰＰＳ）、脳ホスファチジルセリン（ＢＰＳ）、脳スフィンゴミエリン（ＢＳＰ）、およびジパルミトルスフィンゴミエリン（ＤＰＳＰ）を含む。
【０１４２】
一具体例において、ホスファチジルコリンとコレステロールが採用される。しかしながら非ステロイド：ステロイド脂質（例えばコレステロール）混合物のどのような適当なモル比が貯蔵中および／または哺乳類対象へ送達の間特定の脂質−活性剤コンプレックス安定性を促進するために採用されることができる。
【０１４３】
活性剤と脂質の混合は、界面活性剤（後に例えば透析により除去）を使用する公知の技術、例えば超音波、うず、押出し、マイクロフリダイゼーション、ホモジナイゼーションであることができる。活性剤と脂質とは、脂質：活性剤のモル比、約３：１ないし約１００：１またはそれ以上（比較的毒性の大きい活性剤のために特に有用）、そしてもっと好ましくは約３：１ないし約１０：１、最も好ましくは約５：１ないし約７：１で混合される。
【０１４４】
ある種の活性剤について有機溶媒の使用がリポソームのような脂質−活性剤コンプレックスの製造を容易化し得る。有機溶媒は、真空蒸発、または脂質および活性剤成分が使用する温度において安定である限り加熱により、例えばヘヤードライヤーまたはオーブンの使用により、または熱エタノールの注射により（例えば、Ｄｅａｍｅｒの米国特許Ｎｏ．４，５１，７３６）、活性剤と脂質の混合後に除去される。透析および／またはアフィニティグロマトグラフィーを含むクロマトグラフィーを有機溶媒を除去するために使用できる。活性剤の水和は水または任意の生体適合性バッファー、例えば生理的にバランスした浸透圧を維持するリン酸塩緩衝食塩水、ＨＥＰＥＳまたはＴＲＩＳによって実施される。リポソームの水和は有機溶媒の除去と同時に達成することができ、または代ってリポソームの使用のためのもっと好都合な時まで遅らせることができる（例えば、Ｐａｐａｈａｄｊｏｐｏｕｌｏｓらの米国特許Ｎｏ．４，２３５，８７１を見よ）。リポソームの水和し得る（すなわち乾燥した）ものの寿命は約８ケ月ないし約１年が典型的であるが、これは凍結乾燥によって延長することができる。
【０１４５】
一具体例において、脂質−活性剤コンプレックスはユニラメラリポソームである。ユニラメラリポソームは、標的細胞内の表面および／または標的細胞内部の感染作因と相互作用し得るリポソームの外へ活性剤の最高の曝露を提供する。しかしマルチラメラリポソームも本発明に従って使用することができる。ＰＥＧ化リポソームの使用も本発明に含まれる。
【０１４６】
リポソームのような脂質−活性剤コンプレックスは、必ずしも必要ではないが、好ましくは直径約３０ないし約２５０ｎｍである。
【０１４７】
本発明に従い、脂質−活性剤コンプレックスは、後の使用のため凍結乾燥のような任意の保存方法によって保存することができる（例えば、米国特許Ｎｏ．４，８５７，３１９）。典型的には、凍結乾燥または有用な他の凍結保存技術はジサッカライド（例えばトレハロース、マルトース、ラクトースまたはスクロース）のような凍結保存剤の添加を含む。
【０１４８】
活性剤を含んでいるリポソームのような脂質−活性剤コンプレックスは任意の適当な手段、例えば注射によって対象へ投与される。注射は動脈内、静脈内、硬膜内、眼内、皮下、筋肉内、腹腔内であることができ、または特定のリンパ系組織中、または腫瘍もしくは他の病変部中への直接（例えば定位）注射であることができる。リンパ器官中へ脂質−活性剤コンプレックスを導入するために皮下または筋肉内注射が好ましい。
【０１４９】
本発明に従い、リンパ組織は、（ｉ）鼡径、腸間膜、回腸盲腸または脇下リンパ節、（ｉｉ）脾臓、（ｉｉｉ）胸腺、（ｉｖ）肺、腸壁の粘膜固有層、小腸に関連したＰｅｙｅｒパッチと呼ばれる構造に見られるような粘膜関連リンパ組織、または（ｖ）解剖学的に別個の構造のような鼡径、口蓋および咽頭扁桃を含むＷａｌｄｅｙｅｒネックリングである。
【０１５０】
注射は、血流ではなくリンパ系または骨髄中へ直接または優先的に排出する任意の方法による。それ故最も好ましいのは皮下、皮内、および骨髄指向注射ルートであり、典型的には脂質−活性剤コンプレックスよりも大きい注射針ゲージを使用する。慢性感染貯蔵庫を提供する細胞の局在化に関し、適当な垂下体内または尿道内適用、それに膓腔内注射ルートも有用である。最後に限定ではなく肝動脈経由適用のような器官特異的適用が有用である。典型的には注射可能な体積（一般に１〜５ｃｍ３）の注射は対象の腕、脚または腹部へであるが、しかし皮下注射のために任意の便利な部位を選ぶことができる。本発明に従って例えば皮下的に投与された活性剤が全身血液流へ入る前にリンパ系へ入る時、利益は（ｉ）リンパ系全体に分布およびリンパ節中に局在化、（ｉｉ）脂質−活性剤コンプレックスの（血清）タンパク仲介不安定化の回避もしくは最小化、（ｉｉｉ）他の投与ルート（例えば静脈内）によって投与された活性剤の可溶形では得ることができない濃度において活性剤の送達を含む。
【０１５１】
典型的には、ＨＩＶ／ＡＩＤＳの処置における注射の頻度は最も好ましくは週１回であるが、もっと高または低頻度（例えば毎月）も適切であり得る。
【０１５２】
本発明の目的に対し、活性剤は剤、レクチン、薬物、または（ｉ）関心ある感染作因に対して活性な、（ｉｉ）関心ある新生物生成に対して指向された、または（ｉｉｉ）関心ある非感染性退化病を妨害する、免疫調節化合物である。
【０１５３】
好ましい具体例においては活性剤は植物レクチンである。植物レクチンは、慢性細胞内／エンドソーム内貯蔵庫を確立するＨＩＶまたは他の感染作因のエンドソーム内阻害のために高度に関心ある物質のクラスである。本発明はその治療的有効性のためのどのような特定メカニズムにも依存しないが、マンノースまたはフコースへ強く結合する植物レクチンの能力（例えばＨＩＶエンペレープ糖タンパクｇｐ１２０によって目立って示されるような）がウイルス−細胞融合を治療的に妨害するものと考えられる。有用な植物レクチンの例は、Ｃａｎａｖａｌｉａ
ｅｎｓｉｆｏｒｍｉｓ，Ｍｙｒｉａｎｔｈｕｓ ｈｏｌｓｔｉｉ，Ｇａｌａｎｔｈｕｓ ｎｉｖａｌｉｓ，Ｈｉｐｐｅａｓｔｒｕｍ ｈｙｂｒｉｄ，Ｎａｒｃｉｓｓｕｓ ｐｓｅｕｄｏｎａｒｃｉｓｓｕｓ，Ｅｐｉｐａｃｔｉｓ
ｈｅｌｌｂｆｏｎｉｎｅ，およびＬｉｓｅｒａ ｏｖａｔａからのマンノース特異性植物レクチン、およびＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２感染を約０．０４ないし約０．０８μｇ／ｍｌのＩＣ５０において阻害するＵｒｔｉｃａ ｄｉｏｉｃａからのＮ−アセチルグルコサミン特異性レクチンを含む。重要なことに、この低濃度が非ターゲット化送達に必要とするので、もっと低い濃度が細胞ターゲット化送達によって得ることができる。不可逆的な凝集ネットワークがエンドソーム内貯蔵ＨＩＶビリオンまたは貯蔵細胞の他の病原体粒子間に形成され、そのため感染作因の感染能力を不活性化する。植物レクチンはヘルペスシンプレックスウイルス（ＨＳＶ−１，ＨＳＶ−２）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、インフルエンザウイルス、および他のウイルスを強力に妨害する。特にＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）および小疱胃炎ウイルス（ＶＳＶ）はＣａｎａｖａｌｉａ
ｅｎｓｉｆｏｒｍｉｓおよびＡｒｃｅｕｔｏｂｉｕｍ ＳＰＰ．（ｍｉｓｔｌｅｔｏｅ）から得られた植物レクチンによって不活性化される。これは主要な修飾なしで他のウイルス病へのその適用に対して直接同じ考えを運搬し得る。
【０１５４】
立体的に植物レクチンのテトラマーは典型的には直径約０．５オングストローム（５ｎｍ）である（これはｐＨに依存してダイマーまたはテトラマーとして存在する）。このためエンドソームに貯蔵されたウイルス貯蔵庫を成功して凝集するため直径約１５０−２００ｎｍのリポソーム中に多数のそのような分子が捕捉されなければならない。
【０１５５】
本発明の他の具体例において、モノ−またはポリフコースターゲット化リポソームによって含められる活性剤は、抗ウイルス薬または静ウイルス剤（インターフェロンのような）、ヌクレオシドアナログ、また非ヌクレオシド抗ウイルス薬であることができる薬物である。例は、インディナビール（Ｃｒｉｘｉｖａｎ，Ｍｅｒｃｋ
＆ Ｃｏ．，Ｉｎｃ．，Ｒａｈｗａｙ，ＮＪ；ｓａｑｕｉｎａｖｉｒ（Ｎ−ｔ−ブチル−デカヒドロ−２−〔２（Ｒ）−ヒドロキシ−４−フェニル−３−（Ｓ）−〔〔Ｎ−（２−キノリルカルボニル）−Ｌ−アスパラギニル〕ブチル〕−（４ａＳ，８ａＳ）−イソキノリン−３（ｓ）−カルボキサマイド；ＭＷ６７０．８６
Ｄａ（Ｆｏｒｔｏｖａｓｅ、Ｒｏｃｈｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪ）；ネルフィナビール（すなわちネルフィナビールメシレート、Ｖｉｒａｃｅｐｔ；〔３Ｓ−〔２Ｓ，３Ｓ〕−３ａ，４ａｂ，８ａｂ〕〕−Ｎ（１，１−ジメチルエチル）ブチル〕−３−イソキノリンカルボキサマイドモノメタンスルホン酸塩、ＭＷ＝６６３．９０Ｄａ〔遊離塩基として５６７.７６〕；Ａｇｏｕｒｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｌｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，ＣＡ）のような抗ＨＩＶ薬物（例えばＨＩＶ逆プロテアーゼ阻害剤）を含む。ネルフィナビールメシレートはｐＨ＜４において水に僅かに溶け、メタノール、エタノール、イソプロパノールおよびプロピレングリコールに自由に溶ける白色ないし灰白色アモルファス粉末である。抗ウイルス剤の他の例は、テノフォビールジソルプロキシフマレート、（９−〔（Ｒ）−２−〔〔ビス〔〔イソプロポキシカルボニル〕オキシ〕メトキシ〕ホスフィニル〕メトキシ〕プロピル〕アデニンフマレート（１：１）；ＭＷ＝６３５．５２Ｄａ；Ｖｉｒｅａｄ，Ｇｉｌｅａｄ
Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ，ＣＡ）のような逆転写酵素阻害剤を含む。
【０１５６】
他の具体例において、活性剤は抗癌薬、抗細菌薬、抗菌類薬、または寄生プロトエアを妨害する化合物である。
【０１５７】
なおさらなる具体例において、活性剤はシクロスポリン、ステロイドおよびステロイド誘導体のような免疫調節剤（例えば免疫活性化剤、免疫原、免疫抑制剤、または抗炎症剤）である。本発明に従った他の有用な薬物の例は、治療的細胞毒剤（例えばシスプラチン、カルボプラチン、メトトレキセート、５−フルオロウラシル、およびアンフオテリシン）、裸のＤＮＡ発現ベクター、治療的タンパク質、治療的オリゴヌクレオチドもしくはヌクレオチドアナログ、インターフェロン、サイトカイン、またはサイトカインアゴニストもしくはアンタゴニストである。薬物としてやはり有用なものは、限定でなくブスルフアン（１，４−ブタンジオールジメタンスルホネート；Ｍｙｌｅｒａｎ，Ｇｌａｘｏ
Ｗｅｌｌｃｏｍｅ），クロラムブシル；シクロホスファミド、メルファラン、またはエタンスルホン酸エチルのような細胞毒性アルキル化剤である。そのような薬物または剤は、免疫細胞の病理学的増殖を含む状態、例えばリンパ癌または自家免疫病の処置に特に有用である。
【０１５８】
植物レクチンおよび／または薬物であれ活性剤の組合せも本発明に含まれる。本発明の具体例においては、活性剤は脂質−活性剤コンプレックス中にカプセル化することができる。
【実施例】
【０１５９】
実施例１．材料および方法
リポソームの調製とキャラクタリゼーション
ジオレイロイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）はＬｉｐｏｉｄ（Ｌｕｄｕｒｉｇｓｈａｆｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）から、コレステロール（Ｃｈｏｌ）はＣａｅｌｏ（Ｃａｅｓａｒ
ａｎｄ Ｌｏｒｅｎｔｚ，Ｈｉｌｄｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）からそれぞれ購入した。糖−コレステロール誘導体は以下のように合成した。脂質−サッカライド誘導体混合物（すなわち、各自６０：３５：５モル比のＤＯＰＣ：Ｃｈｏｌ：Ｇａｌ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ，ＤＯＰＣ：Ｃｈｏｌ：Ｍａｎ−Ｃ４−ＣｈｏｌまたはＣＯＰＣ：Ｃｈｏｌ：Ｇａｌ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ；または陰性対照として６０：４０モル比のＤＯＰＣ：Ｃｈｏｌ）をジクロロメタン／メタノール（１：２ｖ／ｖ）中に溶解した溶媒を減圧下３５℃において、続いて高真空蒸発によって完全に除去した。
【０１６０】
蛍光分析のため、５０ｍＭカルセイン（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＵＳＡ）および１ｍＭ ＥＤＴＡ （Ｍｅｒｃｋ，Ｄａｒｍｓｔａｄｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ）の溶液を調製し、ＮａＯＨでｐＨ７．５へ調節した。乾燥脂質フィルムをカルセイン溶液１ｍｌで緩和な混合によって水和し、トータル脂質約３０ｍＭの分散液を得た。分散液は６回凍結−解凍し、次に２００ｎｍポアを有するポリカーボネート膜を１１回通って、その後８０ｎｍポアを有するポリカーボネート膜を通って２１回（両方の膜はＷｈａｔｍａｎ，Ｍａｉｄｓｔｏｎｅ，Ｋｅｎｔ，ＵＫから購入）Ｌｉｐｏｓｏ
Ｆａｓｔ装置（Ａｖｅｓｔｉｎ，Ｏｔｔａｗａ，Ｃａｎａｄａ）を使用して押出した。非カプセル化カルセインは、等張ＨＥＰＥＳバッファー（１３０ｍＭ ＮａＣｌ，１０mＭ ＨＥＰＥＳ，１ｍＭ ＥＤＴＡ，ｐＨ７．４）で平衡化したセファロースＣＬ−４Ｂ カラム（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）を使用してゲルクロマトグラフィーによって完全に除去した。
【０１６１】
最終リン脂質濃度は長く確立された高度に信頼できるリンアッセイ（Ｂａｒｔｔｌｅｔ ＧＲ，Ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ ａｓｓａｙ ｉｎ ｃｏｌｕｍｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，Ｊ
Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ １９５９；２３４：４６６−８）によって決定した。リポソームサイズはフォトン相関スペクトロスコピー（Ｚｅｔａ−Ｍａｓｔｅｒ Ｓ，Ｍａｌｖｅｒｎ
Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｍａｌｖｅｒｎ，ＵＫ）によって測定した。サンプルは、１００〜１５０キロカウント／秒のカウンティング速度を得るように新たに濾過した粒子フリー（０．２２μｍ Ｍｉｎｉｓａｒｔ，Ｇｏｔｔｉｎｇｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）ＨＥＰＥＳバッファーで希釈した。すべてのサンプルは、サンプルを２５℃へ平衡化させるため測定開始５分間サンプルホルダーに静置した。
【０１６２】
コレステロール−グリコシル誘導体の合成
３種の異なるグリコシル化コレステロール誘導体の合成は、Ｈａｓｈｉｄａおよび共同研究者によって発表された合成経路（Ｋａｗａｓａｋｉ Ｓ，Ｙａｍａｓｈｉｔａ
Ｆ，ＮＩｓｈｉｋａｗａ Ｍ，Ｔａｋａｋｕｒａ Ｔ，Ｈａｓｈｉｄａ Ｍ，Ａｓｉａｌｏｇｌｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ
ｕｓｉｎｇ ｎｏｖｅｌ ｇａｌａｃｔｏｓｙｌａｔｅｄ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ １９９８；２５２；７８−８３；Ｎｉｓｈｉｋａｗａ
Ｍ，Ｋａｗａｋａｍｉ Ｓ，Ｙａｍａｓｈｉｔａ Ｆ，Ｈａｓｈｉｄａ Ｍ，Ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ ｃａｔｉｏｎｉｃ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｆｏｒ ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ，Ｍｅｔｈ Ｅｎｙｍｏｌ ２００３；３７３：３８４−３９９）に一部修飾して主に従った。（ｉ）フコースで誘導化したコレステロール、すなわちコレステン−５−イルオキシ−Ｎ−（４−（（１−イミノ−ｃ−β−Ｄ−チオフコシルエチル）アミノ）ブチル）ホルムアミド、（ｉｉ）フコースで誘導体化したコレステロール、すなわちコレステン−５−イルオキシ−Ｎ−（４−（（１−イミノ−ｃ−β−Ｄ−チオマンノシルエチル）アミノ）ブチル）ホルムアミド、または（ｉｉｉ）ガラクトースで誘導体化したコレステロール、すわなちコレステン−５−イルオキシ−Ｎ−（４−（（１−イミノ−ｃ−β−Ｄ−チオガラクトシルエチル）アミノ）ブチル）ホルムアミド−フコチル誘導体を得るためのプロトコールは、フコシル誘導体について以下に詳細に示したように、相互に密接に似させた。合成を通じすべての単離した中間体の構造は核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルによって確認された。
【０１６３】
ステップ１：フコースのアセチル化／１，２，３，４−テトラ−Ｏ−アセチルフコピラノシドの合成
（Ｎｉｓｈｉｋａｗａ M，Ｋａｗａｋａｍｉ Ｓ，Ｙａｍａｓｈｉｔａ Ｆ，Ｈａｓｈｉｄａ Ｍ，前出；Ｗｏｌｆｒｏｍ
ＭＬ，Ｔｈｏｍｐｓｏｎ Ａ，Ａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ ＩＩ；ｐｐ．２１１−５，１９６３）に従って、フコース１５２ｍｍｏｌが段階的に連続的攪拌下に氷上であらかじめ冷やした酢酸無水物１７５ｍｌと過塩素酸１．２５ｍｌの混合物へ加えられた。溶液は次に空気中の湿気の排除下室温でさらに３時間攪拌された。この反応混合物を氷中２００ｍｌへ注ぎ、酢酸エチル３００ｍｌを加えた。漏斗中において相分離の後、集めた有機層を冷水１００ｍｌで３回洗い、無水硫酸マグネシウム上で乾燥した。濾過および溶媒の蒸発はオイルとして１，２，３，４−テトラ−Ｏ−アセチルフコピラノシドを与えた。
【０１６４】
ステップ２：１−ブロモ−２，３，４−トリ−Ｏ−アセチルフコピラノシドの合成
１，２，３，４−テトラ−Ｏ−アセチルフコピラノシド４７．６ｍｍｏｌを氷浴中かきまぜながらゆっくり（段階的に）臭化水素／酢酸溶液（３３％）７５ｍｌへ加え、この混合物を４℃において一夜さらにかきまぜた（対照的に１−ブロモ−２，３，４−トリ−Ｏ−アセチルガラクトピラノシドは氷水および酢酸エチル各自４００ｍｌを加えることにより精製された）。相分離後、有機層を集め、水層を酢酸エチル１００ｍｌで３回洗った。合併した酢酸エチル分画をその後飽和重炭酸ナトリウム溶液を加えることによって中和した。中和した有機相を１％塩化ナトリウム溶液２００ｍｌで洗い、生成した層を分離し、有機層を硫酸マグネシムウで乾燥し、濾過し、蒸発して２，３，４−Ｏ−アセチルフコピラノシルブロマイドを得た。
【０１６５】
ステップ３：２−Ｓ−（２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−チオフコピラノシル）−２−チオプソイド尿素臭化水素酸塩の合成
（ＣｈｉｐｏｗｓｋｙおよびＬｅｅによって開発されたプロトコール（Ｃｈｉｐｏｗｓｋｙ Ｙ，Ｌｅｅ ＹＣ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ １−ｔｈｉｏａｌｄｏｓｉｄｅｓ
ｈａｖｉｎｇ ａｍｉｎｏ ｇｒｏｕｐ ａｔ ｔｈｅ ａｇｌｙｃｏｎ ｔｅｒｍｉｎａｌ，Ｃａｒｂｏｈｙｄ Ｒｅｓ １９７３；３３９−３４６）に従って、乾燥した１−ブロモ−２，３，４−トリ−Ｏ−アセチルフコピラノシド４５．１７ｍｍｏｌを乾燥アセトン２０ｍｌに溶かした。この溶液を２５０ｍｌ丸底フラスコへ移し、チオ尿素５０ｍｍｏｌをアルゴン雰囲気下に加えた。反応混合物を１５分還流し、次に氷浴中で冷却した。このようにして沈澱した２−Ｓ−（２，３，４−トリ−Ｏ−アセチルチオフロピラノシル）−２−チオプソイド尿素臭化水素酸塩を濾過によって集めた。
【０１６６】
ステップ４：シアノメチル−２，３，４−トリ−Ｏ−アセチルチオフコピラノシドの合成
シアノメチル−２，３，４−トリ−Ｏ−アセチルチオフコピラノシドは、（Ｎｉｓｈｉｋａｗａ Ｍ，Ｋａｗａｋａｍｉ Ｓ，Ｙａｍａｓｈｉｔａ Ｆ，Ｈａｓｈｉｄａ
Ｍ，前出；Ｌｅｅ ＹＣ，Ｓｔｏｗｅｌｌ ＣＰ，Ｋｒａｎｔｚ ＭＬ，２−Ｉｍｉｎｏ−２−ｍｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌｅｎ−１−ｔｈｉｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ：ｎｅｗ ｒｅａｇｅｎｔｓ
ｆｏｒ ａｔｔａｃｈｉｎｇ ｓｕｇａｒｓ ｔｏ ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ １９７６；１５：３９５６−３９６３）に従い、連続攪拌下２−Ｓ−（２，３，４−トリ−Ｏ−アセチルチオフコピラノシル）−２−チオプソイド尿素臭化水素酸塩１２．３ｍｍｏｌをクロロアセトニトリル３．１ｍｌプラス１：１（ｖ／ｖ）水／アセトン２４ｍｌ中に溶かした。殆ど透明な溶液を得た時、炭酸カリウム１４．３ｍｍｏｌと重硫酸ナトリウム２４．９ｍｍｏｌを加え、反応混合物を室温で３０分間かきまぜた。精製のためこの混合物を蒸発し、残渣を酢酸エチルに溶かした。生成物シアノメチル−２，３，４−トリ−Ｏ−アセチルフコピラノシドはその後ＳｃｈｗａｒｚおよびＳｔｒｅｉｃｈｅｒによって新しく開発された操作によって精製された。要約すると、フラッシュクロマトグラフィー（１：１溶出剤：酢酸エチル／トルエンにおいて）を採用した後、生成物を含む分画を合併し、蒸発し、そして結晶化許容するため４℃に一夜保った。
【０１６７】
ステップ５：脱アセチル化／２−イミノ−２−メトキシエチル−１−チオフコピラノシド（ＩＭＥ−チオピノシド）の合成
脱アセチル化は、（Ｋａｗａｋａｍｉ Ｓ，Ｙａｍａｓｈｉｔａ Ｆ，ＮＩｓｈｉｋａｗａ Ｍ，Ｔａｋａｋｕｒａ Ｙ，Ｈａｓｈｉｄａ Ｍ，前出；Ｌｅｅ
ＹＣ，Ｓｔｏｗｅｌｌ ＣＰ，Ｋｒａｎｔｚ ＭＬ，前出）に従って実施された。すなわちシアノメチル−２，３，４−トリ−Ｏ−アセチルチオフコピラノシド５ｍｍｏｌをメタノール１８ｍｌとナトリウムメトキサイド０．１Ｍに溶かし、室温に一夜保った。メタノール蒸発後、生成したＩＭＥ−チオフコピラノシド含有シロップをＮ−（４−アミノブチル）−（コレステン−５−イルオキシ）ホルムアミドへこの中間体を連結するために使用した（ステップ６、パート２を見よ）。
【０１６８】
ステップ６：コレステン−５−イルオキシ−Ｎ−（４−（（１−イミノ−Ｃ−β−Ｄ−チオフコシリルエチル）アミノ）ブチルホルムアミドの合成
このステップは（Ｎｉｓｈｉｋａｗａ Ｍ，Ｋａｗａｋａｍｉ Ｓ，Ｙａｍａｓｈｉｔａ Ｆ，Ｈａｓｈｉｄａ Ｍ，前出）に従って実施された。
パート１：Ｎ−（４−アミノブチル）−（コレステン−５−イルオキシ）ホルムアミドは、Ｎ−Ｂｏｃ−１，４−ブタンジアミン５．２２ｍｍｏｌとコレステリルクロロホルメート４．７５ｍｍｏｌとをクロロホルム９５ｍｌ中で合併し、室温で２４時間攪拌することより調製された。クロロホルム２４ｍｌ中のトリフロロ酢酸９．５ｍｌの溶液を滴下し、そして反応混合物を攪拌下４℃に４時間保った。クロロホルムの蒸発およびトルエン１００ｍｌとの共蒸発によるトリフロロ酢酸の除去はＮ−（４−アミノブチル）−（コレステン−５−イルオキシ）ホルムアミドを与え、ｎ−ペンタン１５ｍｌの添加によりこれを結晶化した。
パート２：次にフコース誘導体ＩＭＥ−チオフコシド２．５ｍｍｏｌを乾燥ピリジン２０ｍｌに溶かし、トリエチルアミン１５３ｍｌを加えた。最終反応混合物はその後コレステロール誘導体Ｎ−（４−アミノブチル）−（コレステン−５−イルオキシ）ホルムアミド１ｍｍｏｌを加え、室温に２４時保ったことによって得られた。溶媒の蒸発およびトルエンとの共蒸発に続いて、材料を蒸留水３０ｍｌに懸濁し、１２−ｋＤａカットオフを有する透析チューブで水に対して透析し（２日、４℃）、凍結乾燥し、最後にジエチルエーテルで洗った。得られた物質、コレステン−５−イルオキシ−Ｎ−（４−（（１−イミノ−Ｃ−β−Ｄ−チオフコシルエチル）アミノ）ブチル）ホルムアミドはＦｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌとも呼ばれる。従って合成した他の糖誘導体はＭａｎ−Ｃ４−ＣｈｏｌおよびＧａｌ−Ｃ４−Ｃｈｏｌと呼ばれる。
【０１６９】
ターゲット化リポソーム中へのレクチンカプセル化
西洋わさびペルオキシターゼ（ＨＲＰＯ）−接合コカナバリン−ＡＣ（ｏｎ−Ａ）、すなわちＣｏｎ−ＡｘＨＲＰＯ（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ Ｕ．Ｓ．Ａ．）をカプセル化するため、我々はＧｅｒｂｅｒ
ｅｔ ａｌの修飾後（Ｇｅｒｇｅｒ ＣＥ，Ｂｒｕｃｈｅｌｔ Ｇ，Ｆａｌｋ ＵＢ，Ｋｉｍｐｆｌｅｒ Ａ，Ｈａｕｓｃｈｉｌｄ Ｏ，Ｋｕｃｉ Ｓ，Ｂａｃｈｉ Ｔ，Ｎｉｅｔｈａｍｍｅｒ
Ｄ，Ｓｈｕｂｅｒｔ Ｒ，Ｒｅｃｏｎｓｉｔｕｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｄａｌ ａｃｔｉｖｅｉｔｙ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｕｓ ｄｉｓｅａｓｅ
ｃｅｌｌ ｂｙ ｇｌｕｃｏｓｅ−ｏｘｉｄａｓｅ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ，Ｂｌｏｏｄ ２００１；９８：３０９７−３１０５）を採用した。要約すると、モル比７０：２５：５の（ＤＯＰＣ：Ｃｈｏｌ：Ｆｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ）の脂質混合物をクロロホルム／メタノール（１：２ｖ／ｖ）に溶かした。有機溶媒を除去し、脂質を真空乾燥した。Ｃｏｎ−ＡｘＨＲＰＯをリポソームへカプセル化するため、脂質をフィルムとしてＣｏｎ−ＡｘＨＲＰＯ０．５ｍｇを含むＰＢＳ（ｐＨ６．３）１ｍｌに分散した。この分散液を５回凍結−解凍し、次にＬｉｐｏＦａｓｔ装置（Ａｖｅｓｔｉｎ，Ｏｔｔａｗａ，Ｃａｎａｄａ）を使用して０．４μｍポリカーボネート膜を通して１１回、次に０．２μｍポリカーボネート膜を通して１２回押出した。この操作の後、Ｃｏｎ−ＡｘＨＲＰＯ分子がリポソーム膜に埋没またはその表面に接着し、押出すことができない。そのような場合、レクチンは標的細胞の表面の糖と相互作用するであろう。これは不利である。その上Ｃｏｎ−ＡｘＨＲＰＯ接合体のサイズ（Ｃｏｎ−Ａについて１０２ｋＤＡの分子量、およびＨＲＰＯについて４４ｋＤ）は殆どＸ１５００の係数によって実際のターゲティングメディエーターとして作用すると思われるフコシル残基（ＭＷ１０２Ｄａ）のサイズを上廻っている。それ故、少数のリポソーム外ＣｏｎＡｘＨＲＰＯ分子がターゲティングメカニズムを完全に無効にし得るのであろう。これらの理由のため、レクチン負荷システムをカプセル化完了の後５分間トリプリシン消化した。最終的にすべてのリポソーム調製物（表１）はＳｅｐｈａｒｏｓｅ
４Ｂ−ＣＬカラム（ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）上のゲルクロマトグラフィーによって精製された。
【０１７０】
細胞結合／取込み研究
上清から非接着性のベールで覆われた細胞をペレット化し、ＰＢＳ中１％ＥＤＴＡで３０分間４℃で弱く接着した細胞を引離すことにより、成熟細胞を培養７日において収穫した。強い接着性の細胞は細胞スクレーパー（ＴＰＰ）を適用することによって得られた。すべての分画をプールし、ＰＢＳで洗い、そして使用するまで氷上の培地８０／２０プラス１％ＰＢＳ中に保った。試験のため、細胞を１％ＰＢＳを加えた新鮮培地中に２×１０５細胞／ウエルの密度でプレートした。樹状細胞へのターゲティングの時間依存性を得るため、同培地中の２×１０５ＭｏDC／マイクロウエル（２００μｍ／ウエルにおいて９６ウエルマイクロタイタープレート）がリポソームと、後で記載するように、脂質５０μＭにおいて１，３，または２４時間３７℃で、または他の時間および温度においてインキュベートされた。インキュベーション後、細胞はリン酸緩衝化食塩水（ＰＢＳ，ｐＨ７．２，２価カチオンなし）で３回洗浄され、フローメトリーにより分析された。
【０１７１】
フローサイトメトリー
フローサイトメトリーは、（ｉ）骨髄樹状細胞（ｍＤＣまたはDCと呼ばれ）のフェノタイプを、ＨＩＶ−１のＭ−またはＴ−トロピック株での感染ありなし、またはフコースターゲット化送達システムもしくは対照リポソームで処置したDC分化を通じて異なる時間において決定するために、そして（ｉｉ）非感染または感染ｍＤＣへのカルセイン／薬物の同時送達を決定するために採用することができる。
【０１７２】
標識したｍＤＣは、（ｉ）一次ｍＡｂと、フルオレセイン−５−イソシアネート（ＦＩＴＣ）（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を接合した二次ポリクローナルＩｇＧで間接染色した後（Ｇｉｅｓｅｌｅｒ
Ｒ ｅｔ ａｌ，Ｉｎ−ｖｉｔｒｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｔｕｒｅ ｄｅｎｔｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｆｒｏｍ ｈｕｍａｎ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ，Ｄｅｖ
Ｉｍｍｕｎｏｌ １９９８；６：２５−３９）；または（ｉｉ）それぞれのカルセイン含有リポソーム調製物とインキュベーションの後；あるいは（ｉｉｉ）特異性抗体染色またはリポソームターゲティング研究のため陰性対照とインキュベーションの後にすぐ、製造者の指示書に従ってＣｏｕｌｔｅｒ
Ｅｐｉｃｓ ＸＬ−ＭＣＬ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｆｕｌｅｒｔｏｎ，ＣＡ）上で分析された。フローサイトメトリーが実施された時、止められた細胞のみが抗原発現と、リポソームターゲティングおよび取込み研究について評価された。要約すると、細胞は断片を排除するために前部および側部スキャッタードットプロッティングを介してゲートされた。ＦＴＴＣおよびカレセインのため一般に適しているため、すなわち励起およびエミッション波長λＥＸ＝４８８ｎｍまたはλＥＸ＝５２５ｎｍにおいて止められた細胞についてヒストグラムが確立された。データがダウンロードされ、そしてテストサンプルおよび対照のための対応するヒストグラムが重ねられ、ＷｉｎＭＤＩ２．８ソフトウエア（Ｊ．Ｔｒｏｔｔｅｒ：ｆａｃｓ．ｓｃｒｉｐｐｓ．ｅｄｕ）で解析された。ターゲティング有効性は、ｍＤＣ（または採用した時、同様な結果をもって１０％自家ドナー血清または１０％ＦＢＳを補給した８０／２０培地上で７日発生させたマクロファージ）をそれぞれのターゲット化リポソームを、またはリポソーム陰性対照とインキュベーション直後、または不適切アイソタイプＩｇＧ抗体ＭＯＰＣ−２１／Ｐ３を採用した後に決定された。表面が炭水化物を欠いたリポソームを採用する陰性対照の結果は不適切対照で得られた結果と同じであった。ｍＤＣによるリポソームの非特異的取り込みを介する影響はこのように排除できた。フローサイトメトリーのため、未熟ｍＤＣは日５または日７に収穫された。成熟非接着性および接着性細胞は日５または日８に収穫された。マクロファージも日７または日８に収穫された。
【０１７３】
末梢血液白血球（ＰＢＬ）
単核白血球（ＭＮＬ）は以前に記載したように調製された（Ｇｉｅｓｅｌｅｒ ｅｔ ａｌ，前出）、要約するとＭＮＬは、Ｃａ２＋／Ｍｇ２＋なしのＰＢＳで１：１希釈された全血からＬｙｍｐｈｏｐｒｅｐ（ρ＝１．０７７ｇ／ｃｍ３，Ｎｙｅｇａａｄ，Ｏｓｌｏ，Ｎｏｒｗａｙ）上の密度勾配遠心によってエンリッチされた。バッフィーコートが収穫され、プールされ、残りの血小板はＰＢＳでの３〜４回洗浄によって除去された。これらの操作は２６０Ｇおよび４℃における１０分間遠心ステップの数回を含んでいた。
【０１７４】
単球の磁気活性化分離（ＭＡＣＳ）
単球は、ＣＤ３＋，ＣＤ７＋，ＣＤ１９＋，ＣＤ４５ＲＡ＋，ＣＤ５６＋およびＩｇＥ＋細胞をｍＡｂコート磁気マイクロビーズで除去することにより負の磁気活性化細胞分離（ＭＡＣＳ；Ｍｉｌｔｅｎｙｉ；Ｂｅｒｇｉｓｃｈ−Ｇｌａｄｂａｃｈｋ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を通じて単離された。負の単球分離は新たに単離された単球の望まない活性化を避けるために選ばれ、製造者の指令書に従って実施された。要約すると、操作は０．５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ；細胞培養グレード、＜０．１ｎｇ／ｍｇエンドトキシン；ＩＣＮ，Ｉｒｖｉｎｅ，ＣＡ）と、２ｍＭ
ＥＤＴＡ（Ｓｉｇｍａ Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）を補給したＰＢＳ２回の洗浄を含みそして洗った細胞は規定された磁場（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）に置かれたＬＳ磁気マイクロカラムを通過させ、ＣＤ１４のためのフローサイトメトリールによって測定して、９８．６〜９９．９％純度（ｎ＝３の範囲）へ単球をエンリッチした。
【０１７５】
骨髄樹状細胞の分化
成熟および未成熟ｍＤＣは末梢血液単球から発生させた。要約すると、単球はＰＢＳ希釈全血のＬｙｍｐｈｏｐｒｅｐ（ρ＝１．０７７ｇ／ｃｍ３）（Ｎｙｅｇａａｄ，Ｏｓｌｏ，Ｎｏｒｗａｙ）上の引き続く密度勾配遠心により、そして製造者（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）の指示書に従って引き続いてのネガティブ磁気細胞分離（ＭＡＣＳ）によって単離された。次に単球は９６ウエルマイクロタイタープレート（ＴＰＰ，Ｔｒａｓａｄｉｎｇｅｎ，Ｓｗｉｚｅｒｌａｎｄ）中に１×１０５／２００μｌにおいてシードされた。我々によって以前開発された一般に認められたプロトコ−ルに従って、我々は基本ＤＣ分化因子として０日に顆粒／マイクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）を採用し、このため未熟成抗原捕捉ｍＤＣステージへ導いた（Ｐｅｔｅｒｓ
ＪＨ，Ｘｕ Ｈ，Ｒｕｐｐｅｒｔ Ｊ，Ｏｓｔｅｒｍｅｉｅｒ Ｄ，Ｆｒｉｅｄｒｉｃｈｓ Ｄ，Ｇｉｅｓｅｌｅｒ ＲＫ，Ｓｉｇｎａｌｓ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｎｇ
ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｆｒｏｍ ｈｕｍａｎ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ，Ａｄｖ Ｅｘｐ Ｍｅｄ Ｂｉｏｌ １９９３；３２９：２７５−８０；Ｒｕｐｐｅｒｔ
Ｊ，Ｓｃｈｕｔｔ Ｃ，Ｏｓｔｅｒｍｅｉｅｒ Ｄ，Ｐｅｔｅｒｓ ＪＨ，Ｄｏｗｎ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ａｎｄ ｒｅｌｅａｓｅ ｏｆ ＣＤ４ ｏｎ ｈｕｍａｎ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ
ｂｙ ＩＬ−４ ｄｅｐｅｎｄｓ ｏｎ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｏｒ ＧＭ−ＣＳＦ，Ａｄｖ Ｅｘｐ Ｍｅｄ Ｂｉｏｌ １９９３；３２９：２８１−６）。引き続き、もし望むならば成熟ｍＤＳは、さらに腫瘍ネクローシス因子（ＴＮＦ）−αを日５または日６に加えることにより得られ、このためＴ−ヘルパー（Ｔｈ）１およびＴｈ２−依存免疫へ導いた（Ｃａｕｘ Ｃ，Ｄｅｚｕｔｔｅｒ−Ｄａｍｂｕｙａｎｔ
Ｃ，Ｓｃｈｍｉｔｔ Ｄ，Ｂａｎｃｈｅｒｅａｕ Ｊ，ＧＭ−ＣＳＦ ａｎｄ ＴＮＦ−α ｃｏｏｐｅｒａｔｅ ｉｎ ｔｈｅ
ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ ｃｅｌｌｓ，Ｎａｔｕｒｅ １９９２；３６０：２５８−６１；Ｓａｌｌｕｓｔｏｎ Ｆ，Ｌａｎｚａｖｅｃｃｈｉａ
Ａ，Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｌｕｂｌｅ ａｎｔｉｇｅｎ ｂｙ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｈｕｍａｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｉｓ
ｍａｉｎｔａｉｎｅｄ ｂｙ ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ／ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｃｏｌｏｎｙ−ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ ｐｌｕｓ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ
４ ａｎｄ ｄｏｗｎ ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｂｙ ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｅｒ ａｌｐｈａ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ，１９９４；１７９：１１０９−１８；Ｂａｎｃｈｅｒｅａｕ
Ｊ，Ｓｔｅｉｎｍａｎ ＲＭ，Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｉｍｍｕｎｉｔｙ，Ｎａｔｕｒｅ １９９８；３９２：２４５−５２）。
【０１７６】
ＤＣ収穫およびリポソームインキュベーション
収穫したｍＤＣおよびリポソーム調製物は異なる相対濃度において（実験環境に依存して）３時間室温でインキュベートされた。未熟非接着性および接着性ｍＤＣは日７または日８に収穫された。成熟非接着性および接着性ｍＤＣは日７および日８に収穫された。この目的のため分化培地が集められ、遠心され、そしてベールされた非接着性細胞のペレット化ＤＣ分画が収穫された。第２に、接着性ＤＣはＰＢＳ／ＥＤＴＡと３０分間４℃のインキュベーションと、細胞スクレーパー（ラバーポリスマンとも呼ばれる）の引き続く使用によってウエルから引き離された。引き離した接着性細胞は非接着性分画とプールされ、両者の組合せは必要とする細胞数へ調節され、その後リポソームまたは不適切対照抗体とインキュベートされた。
【０１７７】
上記のように、ｍＤＣはＣＤ４，ＣＤ１４，ＣＤ４０，ＣＤ４５ＲＡ，ＣＤ４５ＲＯ，ＣＤ６８，ＣＤ６９，ＣＤ８３，ＣＤ１８４，ＣＤ１９５，ＣＤ２０６（マンノースレセプター）、ＣＤ２０７，ＣＤ２０８，および／またはＣＤ２０９（ＣＤ−ＳＩＧＮ）について陰性対照としてマウス抗ヒトＩｇＧｌｋ（クローンＭＯＰＣ−２１／Ｐ３）（Ｓｅｒｏｔｅｃ，Ｏｘｆｏｒｄ，ＵＫから入手可能）でフローメトリー分析された。１種または２種のｍＡｂが使用されるかにより（直接染色ｖｓ間接染色）、抗原はＦＩＴＣ−接合マーカー特異性モノクローナル抗体（ｍＡｂ）によって染色されるか、または未標識第１ｍＡｂプラス二次ポリクローナルＩｇＧＸ
ＦＩＴＣ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅから入手可能）によって間接に染色された。
【０１７８】
ＭＯＰＣ−２１／Ｐ３はＩｇＧｋアイソタイプ対照として採用された。この抗体で得られた結果は、（ｉ）インビトロで分化した細胞は真のＤＣフェノタイプを発揮したことを検討するため、（ｉｉ）それらのフェノタイプ個々間分化を決定すること、および（ｉｉｉ）同じ抗体でターゲットされたリポソームとインキュベート後、与えられたマーカーの発現を示されたヒストグラムパターンと比較するための３つの目的を果たした。
【０１７９】
細胞ターゲティングのため、少なくとも５×１０４ＤＣのｍＤＣサスペンジョン（または採用した時マクロファージ）のアリコットがリポソームと０．１，１．０または１０．０μｌ／オンセットにおいて２または３時間３７℃において連続アジテーションのもとでインキュベーター中でインキュベートされ、次にフローサイトメトリーによって検査された。信頼性あるそして再現し得る結果が２時間同時インキュベーションによって得られ、すぐれたターゲティングおよび化合物送達結果は３時間同時インキュベーションによって得られた。
【０１８０】
ＨＩＶｐ２４コア抗原のためのＥＬＩＳＡ
商業的に入手し得るＥＬＩＳＡ（Ａｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｃｈｉｃａｇｏ，ＩＬ）により製造者の指示書に従って、ｐ２８の存在について上清をテストすることができる。
【０１８１】
ＨＩＶのための定量的ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＰＣＲ）
樹状細胞宿主ＤＮＡ中へのＨＩＶプロウイルスＤＮＡの取り込みの程度は、以下のようなＨＩＶプロウイルス配列のための重なりプライマーペア（重なりセミ−ｑＰＣＲ）によって決定することができる。
外側プライマー：
５‘−ａｇｔ−ｇｇｇ−ｇｇｇ−ａｃａ−ｔｃａ−ａｇｃ−ａｇｃ−ｃａｔ−ｇｃａ−ａａｔ−３’／／（配列番号１）
５‘−ｔｃａ−ｔｃｔ−ｇｇｃ−ｃｔｇ−ｇｔｇ−ｃａａ−３’／／（配列番号２）
内部プライマー：
５‘−ｃａｇ−ｃｔｔ−ａｇａ−ｇａｃ−ｃａｔ−ｃａａ−ｔｇａ−ａｇｃ−５ｇ−３‘（５−ＦＡＭ）／／（配列番号３）（これは５−カルボキシフルオレセインで標識されたＬＵＸ−プライマー、すなわち５−ＦＡＭである）
５‘−ｇｇｔ−ｇｃａ−ａｔａ−ｇｇｃ−ｃｃｔ−ｇｃａ−ｔ−３‘／／（配列番号４）
【０１８２】
ＤＮＡの単離は製造者の指令書（Ｅａｓｙ−ＤＮＡ−Ｋｉｔ，ｐｒｏｔｏｃｏｌ＃３，“Ｓｍａｌｌ Ａｍｏｕｎｔ
ｏｆ Ｃｅｌｌｓ，Ｔｉｓｓｎｅｓ，ｏｒ Ｐｌａｎｔ Ｌｅａｖｅｓ”，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に従って達成することができる。ＰＣＲ反応混合物は、典型的には以下のものを含む：バッファー（１０×ＰＣＲ Ｒｘｎバッファー５μｌ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）；ＭｇＣｌ２（３μｌ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）；ｄＮＴＰ（各自１０μＭのｄＡＴＰ，ｄＣＴＰ，ｄＧＴＲ，ｄＴＴＰの混合物１μ１）、外側プライマー（配列番号１；１０ｐｍｏｌ／μｌ，１μｌ）、外側プライマー（配列番号２；１０ｐｍｏｌ／μｌ，１μｌ）；Ｔａｑ ５単位／μｌ，０．２μｌ；白金Ｔａｑ
ＤＮＡポリメラーゼ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）；２回蒸留水（３７ｍｌ）；ＤＮＡサンプル（２μｌ）。一つの標準的サーモサイクリングプロフィルは以下のとおり：９５℃５分（９５℃で２秒；５５℃で３０秒；７２℃で３０秒）×２５；７２℃で２分；４℃に保持。ＰＣＲは、外側プライマーの代りに内側プライマー（配列番号３および配列番号４）を使用すること、および異なるサーモサイクリング：９５℃で５分（９５℃で２０秒；５５℃で３０秒；７２℃で３０秒×３５；７２℃で２分（溶融カーブは０．５℃のステップにおいて５５℃へ下降）を使用することを除き、新しいＰＣＲ混合物中の第１の反応から移された増幅されたＤＮＡの２μｌを使用して一般に繰り返された。
【０１８３】
与えられたサンプルにおいて、ＤＮＡの定量はＨＩＶプロウイルスＤＮＡの既知量のＤＮＡサンプルの段階希釈液との比較によって達成することができる。トータル細胞ＤＮＡ（例えば樹状細胞からの）の異なる含有量を有するサンプルからのＨＩＶプロウイルスＤＮＡの定量を許容するため、マルチプレックスＰＣＲを実施することができる。概して、第２の重なりＰＣＲは、ヒトクロモソーム配列（ゲノム均等物）のため６−カルボキシー４‘，５’−ジクロロ−２‘，７’−ジメトキシフルオロセインスクシンイミジルエステルで標識したＬＵＸプライマーを用いて同じ反応において実施することができる。これはサンプルに当りのトータルＤＮＡの定量を可能にする。ヒトゲノム均等物あたりのプロウイルスコピーの数はそのようなデータから計算することができる。
【０１８４】
実施例２．骨髄樹状細胞のフェノタイプ
末梢血液単核細胞（ＰＢＭＮＣ）がそれらのサイズ（前方散乱）および顆粒化度（側方散乱）に従った評価され、このため少割合の血液樹状細胞（データ示さず）を含む、その対のＴおよびＢ細胞；活性化Ｔ細胞およびＢ細胞、および単球としてゲートされた。培養した単球誘導骨髄細胞（ｍＤＣまたはＤＣ）は、それらの発達段階（成熟度）を決定するマーカーの発現それにｍＤＣサブタイプマーカーについてテストされた。ＤＣは典型的には、ＨＩＶ感染の決定的役目を果すと考えられる皮膚および粘膜ＤＣの典型であるマーカーを発現した。粘膜ルートを介して感染する時、粘膜ｍＤＣはＨＩＶによって直接感染される第１の免疫細胞タイプであり、そして（ｉ）プロウイルスＤＮＡとしてその遺伝子情報中にしばしば集積し、および／または（ｉｉ）ＤＣ−ＳＩＧＮによってそれらの表面にＨＩＶを固定し、および／または（ｉｉｉ）ウイルスを細胞質内コンパートメント（例えばエンドソーム）に保持する種々のメカニズムのどれかによってＨＩＶを取り込む。そのような細胞は次にＨＩＶを他の細胞タイプへ、目立ってＴ−ヘルパー細胞（ＣＤ４細胞）へ、そして連続的ｍＤＣ回転のコースにおいてリンパ節沈着ｍＤＳの次世代を含む他の病原体保有細胞が渡される区域的および局所的リンパ節へ移動する。これらの事実に鑑み、我々のインビトロシステムにおいて発生したｍＤＣは、そのような細胞への推定的インビトロターゲティング効果を評価するための理想的モデルを提供する。
【０１８５】
ＧＭ−ＣＳＦ，ＩＬ−４および後でＴＮＦ−αで７日までの培養で成熟させたＭＤＣは、ｍＤＣまたはそのサブ集団によって発現されることが知られているマーカーの発現についてフローサイトメトリーによってテストされた。ＤＣ−ＳＩＧＮ（ＣＤ−２０９）のほかに、我々はインビトロおよびインビボにおいて熟成ＤＣを決定するマーカー（ＣＤ４０，ＣＤ４５ＲＯ，ＣＤ８３）と、表皮の樹状ランゲルハンス細胞（ＣＤｌａ）および腸（ＣＤ４）と鼻粘膜（ＣＤ１４）の成熟細胞を決定するマーカーを選んだ。このためフェノタイピングは、（ｉ）未成熟または成熟としてインビトロで発生させたＤＣを証明するため；（ｉｉ）ｍＤＣへの免疫リポソーム化合物送達のためのあらかじめ考えた標的としてＤＣ−ＳＩＧＮ（ＣＤ２０９）およびマンノースレセプター（ＣＤ２０６）の強い発現を証明するため；および（ｉｉｉ）発生させたＭｏＤＣがインビトロにおいて表皮および粘膜ランゲルハンス細胞のホールマークとしてＣＤ１ａを発現したかどうかを決定するのに役立った。
【０１８６】
テスト条件対陰性対照（ｎ＝３）の相対的平値蛍光強度（△ＭＦＩ）は、成熟ＭｏＤＣのフェノタイプのフィルをＣＤ１ａ＋＋＋，ＣＤ４±，ＣＤ１４±〜＋＋＋，ＣＤ４０＋＋〜＋＋＋，ＣＤ４５ＲＯ＋〜＋＋＋，ＣＤ８３＋，ＣＤ２０９＋＋＋として特徴化した。ここで（−）は陰性対照と一致；（＋）は△ＭＦＩピーク≦Ｘ陰性対照；（＋＋＋）は△ＭＦＩピーク×≧２５０を示す。テストしたすべてのマーカーのうち、ＣＤ１４はドナーの中で最も変動した。対象的にＤＣ−ＳＩＧＮ（ＣＤ２０９）およびランゲルハンス細胞マーカー（ＣＤｌａ）はすべてのドナーにおいて一致して高い発現を示した。
【０１８７】
実施例３．炭水化物表面標識リポソームでのｍＤＣの活性ターゲティング：蛍光顕微鏡取込み研究、フローメトリー取込みおよび結合研究、およびＨＩＶ阻害研究
初期対照研究において、Ｆｕｃ−４Ｃ−ＣｈｌおよびＭａｎ−４Ｃ−Ｃｈｏｌターゲット化リポソームは、細胞へそれらのリポソームとのインキュベーション前に可溶性フリーＬ−フコースまたはＤ−マンノース（陽性対照）を加えることによって完全に阻害された。予期したように、Ｄ−ガラクトース（陰性対照）の添加は非効果的であった（すべての単糖類はＳｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＩから購入）。これらの対照（結果は示さず）は、フコースおよびマンノース標識リポソームが見込まれる細胞外ターゲティング構造、すなわちＣ−タイプレクチンレセプターへ特異的に結合したことを証明した。
【０１８８】
樹状細胞特異性細胞内接着分子（ＩＣＡＭ）−３−グラビングノンインテグリン（ＤＣ−ＳＩＧＮ；ＣＤ２０９）と呼ばれるＣＴＬファミリーのメンバーは、３７℃において未成熟および成熟単球誘導樹状細胞上へターゲットされた。高度に効率的な樹状細胞特異的結合、取り込み、およびカプセル化したカルセインの細胞内送達は、ＤＣ−ＳＩＧＮ特異性抗体を担持する免疫リポソームでＤＣ−ＳＩＧＮをターゲティングする時に得られた。細胞内送達はエンドソームへ大きく限られるが、カルセインは核でなく細胞質において示すことができた。やはり検討した細胞表面上の他の同様な標的分子（ＣＤ１ａ，ＣＤ４，ＣＤ１４，ＣＤ４５ＲＯ，ＣＤ８３およびそれらの二重コンビネーション）に向けた免疫リポソームの変形は、ＤＣ−ＳＩＧＮ特異性免疫リポソームのすぐれた正味ターゲティング効率を証明した。取り込み前約２時間の結合ＤＣ−ＳＩＧＮ特異性リポソームの膜冗長性も証明された（Ｇｉｅｓｅｌｉｒ
ＲＫ，Ｍａｒｑｕｉｔａｎ Ｇ，Ｈａｈｎ ＭＪ，Ｐｅｒｄｏｎ ＬＡ，Ｄｒｉｅｓｓｅｎ ＷＩ，Ｓｕｌｌｉｖａｎ ＳＭ，Ｓｃｏｌａｒｏ ＭＩ，ＤＣ−ＳｉＧＮ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ
ｌｉｐｏｓｏｍａｌ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｍｙｅｌｏｉｄ
ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ＨＩＶ ｄｉｓｅａｓｅ，Ｓｃａｎ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００４；５９：４１５−２４）。
【０１８９】
図１はインビトロにおける分化の間のヒト骨髄樹状細胞の形態学的外観を示す。３日目（ａ）、５日目（ｂ）、７日目（ｃ，ｄ）に位相差顕微鏡写真を撮った。（ａ）３日目にＧＭ−ＣＳＦとＩＬ−４により分化を誘発した時、卵形ｍＤＣは膜ベールおよび薄い膜突起（矢印）（オリジナル倍率×４００）へ成長し始める。（ｂ）５日目、大部分の未成熟ｍＤＣは引伸ばした形態を取り、膜突起（すなわち樹状）を発現したが、しかし卵形細胞がなお存在する。この未成熟状態においてさえも、いくらかのｍＤＣは小さいホモタイプクラスター（矢印）（オリジナル倍率×１８０）を生成するように会合する。（ｃ）しかしながら５日目にＴＮＦ−αによって未成熟ｍＤＣを誘発する時、完全成熟ｍＤＣは７日目に大きなホモタイプクラスターへ会合する。新しく発現された接着分子による強いクラスター生成は、ｍＤＣがそれらの完全な機能的成熟度へ到達したことを示す。クラスター（矢印）を指している豊富な線形突起に注目せよ。リンパ系器官内に所在する時、そのような樹状物はヘテロタイプｍＤＣ−Ｔ細胞クラスター（オリジナル倍率×１８０）において抗原特異性刺激のためＴ細胞との密接な接触を確立する。
【０１９０】
この出来事のシリーズは最も健康なドナーにおけるｍＤＣの分化コースを表すけれども、ドナーの少数割合から得た単球は同じミクロ環境条件に対して異なって応答する。特に多分遺伝子プレ素因のため、少数のドナーからの細胞はより少ない樹状細胞および／または小さいけれどももっと多数のクラスターの形を発現する。その一例が完全マイクロタイターウエルが倍率×５０で（ｅ）に示されている。また、非常に稀なケースにおいて、ｍＤＣ分化は全く行われず、その代りマクロファージが発達する。これはそれぞれのドナーにおいて、例えば進行する感染の場合に単球に作用するプライミング信号の重なりによるものであろう。重要なのは、ヒト骨髄樹状細胞についての我々のターゲティング研究はＧＭ−ＣＳＦ／ＩＬ−４およびその後のＴＮＦ−αの存在下における約８０〜のケースにおいて観察された正常な分化の後に実施されたことである。
【０１９１】
図２は、トレーサー染料カルセインを送達するフコース標識リポソームでターゲット化された未成熟骨髄樹状細胞（ｍＤＣ）の光学的断面シリーズを示す。ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−４で５日目発生させた未成熟ｍＤＣはＥＤＴＡによって基層から引離され、そして緑色蛍光トレーサー染料カルセインを送達するＦｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌターゲット化リポソームと連続的アジテーションのもとで３７℃で３時間インキュベートされた。細胞はブルー核ＤＡＰＩスティンで逆染色され、固定された（ａ−１）。逐次断面の蛍光顕微鏡オーパレイは観察された最低および最高取り込みを表す二つのｍＤＳによるシステムの取り込みを示している。左側のｍＤＣにおいては、カルセインは主にエンドソーム（例えばＣ；矢印）に限定され、かすかな時折の細胞質染色（例えばフレームｇ中の核へ重なった：矢印）が見られる。対照的に、右側のｍＤＣはエンドソーム（蛍光を中断する、例えばｃ，ｆ）と細胞質（例えばｂ）の両方の明るい染色を示した。細胞のもっと多数を比較する時、テストしたすべてのドナー（ｎ＝３）からのすべてのｍＤＣはフコースターゲット化システムを内部化した。青色染色から明らかなように、リポソームペイロードは決して核へ送達されなかった。Ｍａｎ−Ｃ４−Ｃｈｏｌターゲット化陽性対照はより小さい効率で取り込まれ、そしてＧａｌ−Ｃ４−Ｃｈｏｌタ−ゲット化陰性対照は結合および／または内部化されなかった（示さず）。オリジナル倍率は×４００である。
【０１９２】
図３は、培養５日後のマンノース標識リポソームの結合およひ取り込みを示す。結合または取り込みの程度は、位相差（左カラム）および蛍光（右カラム）フォトマイクログラフの比較により２人のドナー（Ａ、上列；Ｂ、下列）において示されている。両方の場合、そしてフコース標識リポソームと比較して、細胞の５％以下のみが３時間インキュベーション後にそれらの表面へ結合した、または内部化されたリポソーム内のトレーサー染料カルセインを示した。トレーサー陽性ｍＤＣの一部は細胞内取り込みを示したが（Ｂ１，Ｂ２：上部および中間円）、他のものは延長したインキュベーション後なお取り込みなしの表面結合を示した（Ａ１，Ａ２およびＢ１，Ｂ２：下部円）。未成熟ｍＤＣにおいては、Ｍａｎ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ標識リポソームによるターゲティングは、このようにＦｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌターゲット化送達システムを採用した時に観察されるよりもより少ないｍＤＣへ達するばかりでなく、マンノースターゲット化システムはレセプター仲介エンドサイト−シスによってもっと小さい取り込み効率であった。しかしながらマンノースターゲティングは、おそらくマンノースレセプター（ＣＤ２０６）Ｃ−タイプレクチンの一層高い発現のためマクロファージにおいて同等に効果的であった（示さず）。Ｇａｌ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ標識陰性対照リポソームとのインキュベーションは、表面結合または細胞取り込みへ決して導かなかった（示さず）。位相差顕微鏡写真Ａ１およびＢ１の矢印は、それらの水ぶくれした表面膜によって明らかなように、培養中死滅した細胞を指している。時折の死滅細胞は非特異的カルセイン染色を示したが（Ａ１，Ａ２；上部円）、死滅細胞へのフコース、マンノースまたはガラクトース標識リポソームの非特異的結合はこの時点においては一般に観察されなかった（Ｂ１およびＢ２中の等距離棒で正確に位置決定されたボックスで囲まれた細胞を比較せよ）。
【０１９３】
図４は、クラスター化した成熟ｍＤＣのＣ−タイプレクチン特異性ターゲティングを示す。ＧＭ−ＣＳＦ，ＩＬ−４およびＴＮＦ−αの存在下の７日培養後の成熟ｍＤＣのホモタイプクラスターは、通常形状が全体として丸く、そして数面の細胞を含む（図１参照）。クラスターはインキュベーション前ターゲティングシステムによるクラスター化細胞を処理することによって崩壊する。しかしながら接着分子（例えばＩＣＡＭ−１，ＩＣＡＭ−３，ＬＦＡ−１）を介してのち密な結合のため、そのようなクラスターのフラグメントは物理的にそのままである。大きな蛍光フォトマイクログラフは、Ｆｕｃ−４Ｃ−Ｃｈｏｌ標識リポソームとの３時間インキュベーション後いくつかの密に会合したｍＤＳを含むそのようなフラグメントを示す。このフラグメントの輪郭をマーキングする薄青色アウトラインにより、個々の細胞各自は内側へ渦巻く時計廻りでその下方右手に数えられる。カウントされた１７個のｍＤＣすべてのリポソーム送達されたカルセインによって少なくとも薄い細胞質染色を示す。大部分のケースにおいて、染色されたエンドソームはそれらの明るい、しばしば良く光る中断蛍光によって目立っている。トレーサー染料は矢印で示すように決して細胞の核（見える時）を染色しない。成熟ｍＤＣは一般に未成熟ｍＤＣに見られるよりもターゲティング後低い取り込みを示す（図２およびフローサイトメトリーを見よ）。このようにフコースターゲット化システムはすべてのｍＤＣへそれらの密な物理的会合にも拘らず到達した。このため同じことは、インビボにおいてリンパ系器官および組織においてホモタイプｍＤＣクラスターおよびヘテロタイプｍＤＣ−Ｔ−細胞クラスター中のｍＤＣについて期待することができる。オリジナル倍率は×４００である。小さい挿入部分に示すように、７日培養からの単一ｍＤＣはもっと頻繁にフコ−スターゲット化リポソームおよびカルセイン送達を示した。赤でアントラインしたｍＤＣの典型的不規則形核はカルセイン送達から完全に容赦される。表面（青線）Ｃ−タイプレクチンレセプターへ結合したらしいターゲット化リポソームは矢印で指示されている。オリジナル倍率×１０００。
【０１９４】
重要なことに、図２に示した未成熟ｍＤＣおよび図４に示した成熟ｍＤＣの一致部分は、ランゲルハンス細胞マーカーＣＤ１ａを発現した（フローサイトメトリーを見よ）。そのような細胞はＨＩＶの感染で最初に感染した粘膜および表皮ｍＤＣサブセットに相当する。反対にｍＤＳの他の部分はＤＣ１ａを発現せず（フローサイトメトリーを見よ）、このため全身およびリンパ系ｍＤＣサブセットに相当する。最後に成熟ｍＤＣ（図４）は、リンパ系器官に所在する成熟ｍＤＣによって一貫して発現される免疫グロブリンスーパーファミリーマーカーＣＤ８３を発現した。ｍＤＣのこれらタイプのすべてはカプセル化した化合物の細胞内エンドソームおよび細胞質送達のために成功的にターゲットされた。このように、これらの結果はすべての末梢およびリンパ系ｍＤＣは治療的化合物の細胞内送達のためのＦｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ標識システムで効率良くターゲットされることができることを強く指示する。
【０１９５】
図５は、培養７日後のヒトマクロファージによるフコース標識リポソームの結合および取り込みを示す。インキュベーション前に、マクロファージはＥＤＴＡ／トリプシン処理によって基層から引き離され、そしてそれらのスライドへの後での移行を可能にするように、それらの堅固な再付着を防止する連続的かきまぜ下に保たれた。代表的マクロファージの逐次的光学断面（ａ〜ｈ）は、Ｆｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌターゲット化リポソームとのインキュベーション２時間後既にターゲティングシステムによって送達されたトレーサー染料カルセインによる豊富なエンドソーム限定細胞内染色を示した。骨髄樹状細胞とは対照的に、細胞質染色（すなわちリポソーム送達）はマクロファージではより明瞭でなかった。Ｍａｎ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ標識リポソームは匹敵するターゲティング有効性を持っていた（示さず）。Ｇａｌ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ標識陰性対照とのインキュベーションは稀なマクロファージによる僅かな取り込みへ導いた（示さず）。ここに示したケースにおいて、細胞は１０％自家ドナー血清の存在下で発生させた。オリジナル倍率×１０００
【０１９６】
図６は、フコース標識リポソームでのターゲティング２時間後の異なる２人のドナーからの代表的マクロファージのカラー蛍光フォトマイクログラフである。この場合、マクロファージは１０％異種ウシ胎児血清（ＦＢＳ）の存在下７日間分化された。そのような条件下、結合および取り込み結果は、陽性（Ｍａｎ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ）および陰性（Ｇａｌ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ）対照システムでのターゲティングの結果を含む、自家血清で発生させたマクロファージで得られた結果と同じであった。このようにＦＢＳ依存分化はマクロファージターゲティング研究のためにインビトロで採用することができる。中間断面倍率×１０００
【０１９７】
重要なことに、これらの結果はフコースターゲット化リポソーム送達システムは、ＨＩＶ病におけるように胃腸管および多分脳の主な感染細胞貯蔵庫を形成する細胞のシステムを代表するマクロファージによって効率的に内部化される。
【０１９８】
図７は、トレーサー染料カルセインを送達するＦｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ標識リポソームでターゲット化された単胞の逐次断面を示す。新たに単離された末梢血単球が、連続攪拌下３７℃において緑色蛍光トレーサー染料カルセインを送達するＦｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌターゲット化リポソームと３時間インキュベートされた。細胞は青い核ＤＡＰＩステインで逆染色され、固定された（ａ〜ｆ）。逐次断面（〜１．５ｍｍステップ）の蛍光顕微鏡緑／青オーパレイは、代表的単球（典型的核形状に注目せよ）によるシステムの取り込みを示している。単球においては、ターゲット化システムのペイロードとしてのカルセインの細胞内分布は、ｍＤＣに見られるのと同じであった。蛍光化合物は細胞のエンドソームに、（フレームｃ，ｄおよびｅにおいて最も明瞭：中断蛍光）、同様にもっと拡散的に単球の細胞質（すなわちすべての逐次マイクログラフ）に濃縮されるが、しかしそれらの核内には決して濃縮されなかった。その上ｍＤＣにも見られたように、テストしたすべてのドナー（ｎ＝３）からのすべての単球はフコースターゲット化システムを内部化した。再びＭａｎ−Ｃ４−Ｃｈｏｌターゲット化陽性対照はより低い効率で取り込まれ、そしてＧａｌ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ陰性対照は少しも内部化されなかった（示さず）。オリジナル倍率×４００
【０１９９】
重要なことに、これらの結果は骨髄樹状細胞およびマクロファージへ到達するほかに、治療化合物のフコース仲介ターゲット化送達は単球のためにも達成することができることを示す。この結論は、単球は前に説明したように潜在的にＨＩＶおよび他の感染貯蔵庫として動員されるべき最も初期の骨髄リネージ誘導細胞タイプであることを考慮する時目立ったインパクトを持つことができる。事実単球はそのように効率的にＣ−タイプレクチン特異性システムによってターゲット化されるケースは感染作因の取り込みおよび生理学的および病理学的単球子孫の多数において慢性感染性細胞内貯蔵庫の後からの形成のためのこの経路の重要性に脚光をあびせる。
【０２００】
図８は、フコースターゲット化化合物送達システムは高度に特異的でそして極めて高いいターゲティング有効性を持っていることを示す。ＨＩＶおよび他の感染剤のための重要な病原体保有集団として未成熟および成熟骨髄樹状細胞を採用する時、フコースターゲティングは未成熟ｍＤＳにおいて最も効果的であった。カルセイン送達炭水化物標識リポソームの結合または取り込みは、細胞へ非特異的に結合する糖非標識リポソームでのバックグラウンド染色の空のヒストグラムと重ねた充満したヒトスダラムとして示される。Ｇａｌ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ標識陰性対照リポソームは非特異性対照リポソームと決して異ならず、このため陰性対照としてガラクトース標識の正しい選択を証明する。対照的に、マンノースおよびフコース標識リポソームは特異的細胞表面ターゲティングおよび／または取り込みの異なる程度を示した。Ｍａｎ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ陽性対照と比較する時、Ｆｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌターゲット化システムは未成熟ｍＤＣにおいてはるかにすぐれた結合効率を示した。両方のドナーにおいて、対数スケール（横座標）上でフコース標識リポソームのターゲティング効率は１オーダだけ陽性対照を上廻っていた。成熟ｍＤＣの特異的ターゲティングは、ドナーＡのような１部の個人において低レベルのＣ−タイプレクチンを発現する成熟ｍＤＣを生産する点においてドナー依存性であった。しかし大部分のドナー、例えばドナーＢはそのような分子（図１０も見よ）の少なくとも中間膜密度を示し、そのためそれらの正味合計はＦｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ標識リポソーム送達システムでの効果的ターゲティングを許容する。にもかかわらずそのような個人における成熟ｍＤＣへの低い結合でさえもこのシステムの高い濃度によって有意に増大されることができる（図９を見よ）。
【０２０１】
図９は、フコース標識リポソームの増大濃度は未成熟および成熟ｍＤＣの両方を高度に効率的にターゲットすることを示す。同じ陽性および陰性対照（図８を見よ）を使用し、未成熟および成熟ｍＤＣはＦｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌターゲット化システムの異なる濃度でインキュベートされた。この実験は２人のドナー（ＣおよびＤ）で実施され、ターゲティングシステムの低濃度（下列）は未成熟ｍＤＣには達したがしかし成熟ｍＤＣには到達しなかった。しかしながらシステムの濃度を係数×１０または×１００にそれぞれ増加する時（中間および上列）、未成熟ｍＤＣは高度に効率よくターゲットされた。中間濃度は図２および図４の示された実験において適用された。中間列の矢印（ドナーＣ）は、この条件下でのＦｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌターゲティングシステムの結合および取り込み効率の細胞スペクトルを表す図２に示した二つの細胞のおおよその位置を指示する。両方を合せると、Ｃ−タイプレクチンレセプターの高および低膜密度を発現する両方の細胞は我々のターゲット化化合物送達システムによって成功的にアドレスできる。
【０２０２】
図１０は、未成熟および成熟ｍＤＣのフェノタイピングを示す。マーカー陽性細胞は充満したヒストグラムとして描写され、そして陰性不適切対照抗体での背景染色を指示する空のヒストグラムと重なっている。陰性対照カットオフの左のグレー区域は与えられたマーカーを発現しない細胞の部分を表し、カットオフの右のグレー区域は（ドナーＡからの未成熟ｍＤＣにおけるＣＤ１ａ発現を示すグラフに例示的に示されるような）マーカーを発現する。横座標は、それぞれのマーカーを認識する一次モノクローナル抗体の添加後ＦＩＴＣ接合二次抗体での細胞標識の対数蛍光強度を指示する。ｍＤＣによって発現された典型的なＣ−タイプレクチンの代表としてＤＣ−ＳＩＧＮおよびマンノースレセプターは成熟ｍＤＣよりも未成熟ｍＤＣにおいてもっと目立って発現される。個々の変動は明らかである。インビボにおいて、未成熟ＤＣは末梢非リンパ系器官および組織に滞在する。ここではそのような表面分子の強い発現が多く病原体を結合しそして摂取する細胞の能力を確実にする。リンパ系器官および組織へ移動すれば、成熟ｍＤＣはＣ−タイプレクチン発現を下方調節するが、しかし通常これらターゲティングマーカーの中程度膜密度を保持する。特に現在知られている限り、ｍＤＣは一般に少なくとも４種のことなる表面レクチン（ＤＣ−ＳＨＧＮ，ＤＥＣ−２０５，ＭＲおよびＤＬＥＣ）を発現し、そのためそのような分子の正味合計発現はフコース標識リポソーム送達システムでの効果的ターゲティングを常に許容する。同様にマクロファージはそれらが一貫してマンノースレセプターの高い発現を示すので（示さず）、そのすべての発達段階においてターゲットされることができる。これらの細胞もＤＣ−ＳＩＧＮのような他のＣ−タイプレクチンを発現するように誘発することができる。ＣＤ８３の発現ｍＤＣの成熟状態は指示する。インビボにおいてＣＤ１ａの発現は粘膜および表皮に所在するランゲルハンス細胞ｍＤＣサブセット（このため５番目のＣ−タイプレクチンとしてランゲリンも発現）の指標である。未成熟および成熟ｍＤＣの両方はすべの時点においてＣＤ１ａ陰性から強いＣＤ１ａ陽性細胞のスペクトルを含み、このため非ランゲルハンス様ｍＤＣの対応するスペクトルをカバーしていることに注目せよ。Ｆｕｃ−４Ｃ−Ｃｈｏｌターゲット化リポソームはすべてのこれらサブタイプへ細胞内にカルセインを成功的に送達し（図２，４を見よ）、このため治療化合物をエンドソームおよび細胞内部位へ送達するためのシステムとしてそれらの高い能力を指示した。
【０２０３】
図１１は、ターゲット化処理ありなしでＨＩＶ感染ｍＤＣの８日培養後の形態学的変化を示す。Ｉ．培養物外観およびホモタイプｍＤＣクラスタリング。細胞はＧＭ−ＣＳＦ／ＪＬ−４（０日）および逐次ＴＭＦ−α（５日）の存在下に分化された。日２，４または６において、ｍＤＣはそれぞれＭ−トロピックＨＩＶ−１株Ａｄａ−ＭまたはＴ−トロピックＨＩＶ株Ｌａｉで感染された。５０％の細胞のための組織培養投与量は、Ｉ．ＨＩＶ−１ａｄａ−Ｍ：６７×ＴＣＩＤ５０（すなわちウイルスストック溶液０．１ｍｌ＋培地１９９ｍｌ）；およびＩＩ，ＨＩＶ−１ＬＡＩ：６．７×ＴＣＩＤ５０（すなわちウイルスストック溶液１Ｍｌ＋培地１９９ｍｌ）であった。結果は各状況について４個の別々の培養ウエルの全面積のスキャニングによって得られた。これらの細胞の機能的完全性を指示する基準としてホモタイプｍＤＣクラスタリングが８日目に評価された。結果は半定量的および（丸められた）値で与えられる。それぞれの株で感染１日後、ｍＤＣはＦｕｃ−４Ｃ−Ｃｈｏｌターゲット化リポソームを送達するコンカナバリン−Ａ（Ｃｏｎ−Ａ）で処理された。この時間遅延は細胞が細胞内ＨＩＶ貯蔵庫を形成することを許容した。明らかなように、ＨＩＶ−１の両方のタイプの感染においておよびテストしたすべての条件下で、クラスタリング挙動は正常化された。ホモタイプおよびヘテロタイプｍＤＣクラスタリングは感染時ＨＩＶによって上方調節されるので（Ｓｏｌ−Ｆｏｕｌｏｎ
Ｎ，Ｍｏｒｉｓ Ａ，Ｎｏｂｉｌｅ Ｃ，Ｂｏｃｃａｃｃｉｏ Ｃ，Ｅｎｇｅｒｉｎｇ Ａ，Ａｂａｓｔａｄｏ ＪＰ，Ｈｅａｒｄ ＩＭ，ｖｏｎ Ｋｏｏｙｋ Ｙ，Ｓｃｈｗａｒｔｚ
Ｏ，ＨＩＶ−１ Ｎｅｆ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＤＣ−ＳＩＧＮ ｉｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｈｙｐｈｏｃｙｔｅ
ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ａｎｄ ｖｉｒａｌ ｓｐｒｅａｄ，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ ２００２；１６：１４５−５５）、これらの結果はＨＩＶの成功的排除を証明する（図１２も見よ）。
【０２０４】
図１２は、ターゲット化ありなしのＨＩＶ感染ｍＤＣの培養８日後におけるmＤＳの形態学的変化を示す。ＩＩ．ｍＤＣのタイプおよび生存性。ｍＤＣの発生、ＨＩＶ−１による感染、ターゲット化処理のための条件はすべて図１１に与えられている。結果は各状況について４個の別々の培養ウエルの全面積をスキャニングによって得られた。ＨＩＶ−１感染時のｍＤＣの増加した死亡率はＣｏｎ−Ａ送達フコースターゲット化リポソームでの処理によって正常化された。リポソーム処理後３時間の洗浄操作はｍＤＣの感染後蓄積した死滅細胞を除去したことに注目せよ。培養物はこのようにしばしば同じ与えられた時点において未成熟培養物と比較する時有意に減少した細胞数を含み、このことが自己刺激自動コンディショニング信号の低濃度を介してｍＤＣ形態の相対的比率に影響し得る。それにもかかわらずＨＩＶ感染時のベールされた細胞と樹状形ｍＤＣタイプの相対的シフトは処理後大きく正常化された。これらの結果は再びＨＩＶの成功的排除を間接的に証明する。
【０２０５】
【表１】
2007529558.tif 000001
【０２０６】
ＨＩＶ−１ Ｌａｉ；およびＨＩＶ−１ Ａｄａ−ＭはＮＩＨ貯蔵庫から得た。これらの株の高度に感染性のストックの増殖のための条件が表２に示されている。そのようなストックは、未分離末梢血単核細胞（ＰＢＭＮＬ）またはＭＡＣＳ−富化単球（ＭＯ）において７５ｃｍ２（Ｔ７５）フラスコ中１４日間培養して発生させた。ある場合には４人のドナーのプールした細胞が採用され、それにより発生を刺激するための混合白血球培養条件をつくり、そして細胞を活性化するためのサイトカインおよび多分集積したプロウイルスの上清濃度を増加させた。Ｔ−トロピックＨＩＶ−１
Ｌａｉの増殖はフィトヘマアグルチニンタイプＭ（ＰＨＡ）を添加を含んでいた。Ｍ−トロピックＨＩＶ−１ ａｄａ−Ｍの増殖はポリブレン（ＰＢ）の存在下で達成された。その後ＰＢＭＮＬ培養物は上清を含んでいる収穫したウイルスで感染させ、そして培養１週間後両方の株の組織培養５０％感染投与量（ＴＣＩＤ５０）がこの分野で公知の方法に従って決定された。ＨＩＶ−１
ＡｄａおよびＨＩＶ−１ Ｌａｉは使用まで−７０℃に冷凍保存された。
【０２０７】
【表２】
2007529558.tif 000002
【０２０８】
上で論じた図および表を含むここで提示したデータは、フコース（Ｆｕｃ−４Ｃ−Ｃｈｏｌ）ターゲット化送達システムは、ＨＩＶまたは他の感染作因の妨害を許容する現在知られているすべての化合物または将来知られるべき化合物の送達のため単球、骨髄樹状細胞およびマクロファージを含む異なるＨＩＶ保有集団に対し特異的にそして高度に効率的にアドレスさせることができる。本発明に従い、これら病原体保有集団およびここに記載した他の病原体保有および非保有集団は本発明のターゲティングシステム、または例えばもっと有効と推定される細胞ターゲティングのメディエーターとにポリフコース膜標識を特徴とするような機能的に関連するシステムによってターゲット化されることができる。
【０２０９】
重要なことに、高いターゲティング効率は、培養およびインキュベーションの間採用されるウシ胎児血清の少量の成分を構成する、肝臓から得られる物質（Ｄｏｗｎｉｎｇ
Ｉ ｅｔ ａｌ，Ｉｍｍａｔｕｒｅ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｐｏｓｓｅｓｓ ａ ｓｕｇａｒ−ｓｅｎｉｔｉｖｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ ｍａｎｎａｎ−ｂｉｎｄｉｎｇ
ｌｅｃｔｉｏｎ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｙ ２００３；１０９：３６０−４）である血清由来マンナン−またはマンノース結合レクチン（ＭＢＬ）の存在下得られる。ＭＢＬは未成熟ヒトＭｏＤＣによって自家分泌されることも知られている（Ｄｏｗｎｉｎｇ
Ｉ ｅｔ ａｌ，上出）。その上、ＭＢＬはその独自のＣ−タイプレクチンドメインを介してＨＩＶ−１がＤＣ−ＳＩＧＮへ結合するのを防止することができる（Ｓｐｅａｒ ＧＴ
ｅｔ ａｌ，Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＤＣ−ＳｉＧＮ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｔｒａｎｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｍａｎｎｏｓｅ−ｂｉｎｄｉｎｇ
ｌｅｃｔｉｎ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇ ２００３；１１０：８０−５）。それ故可溶性ＭＢＬ（およびそのような特徴を示すことができる他の同定されていない分子）は、本発明のＣＴＬ／ＣＴＬＤ特異性リポソームが膜へ結合したＣ−タイプレクチンと相互作用するのを防止しなかった。
【０２１０】
リポソームへ捕捉されたトレーサー、カルセインを採用することにより、Ｃ−タイプレクチンのすぐれたターゲティング有効性が蛍光顕微鏡およびフローサイトメトリーによって証明された。蛍光顕微鏡はさらに未成熟および成熟ｍＤＣによる時間依存性Ｃ−タイプレクチン特異性リポソームの表面結合および細胞内取り込みを明らかにした。これらの結果は効果的な結合、内部化および細胞内化合物送達を明らかにする。データは、フコース標識免疫リポソームがそれらの中味を未成熟および成熟ｍＤＣ、単球およびマクロファージへ送達すること、そしてそれらのもっと微弱な細胞質分布に加え、それらの中味は細胞内エンドソーム／リソソームに強く蓄積されることを示す。これら観察は、ＨＩＶおよび投与されるリポソームはサイズにおいて匹敵する事実とあわせて、本発明の送達システムが高度に感染性ＨＩＶが貯められ、そして他の細胞を感染させるように放出されるまで全身的攻撃から保護されている正確に同じコンパートメントへ達することを可能にする。好適な送達される剤は、本発明に従ってこれまでどんな治療戦略によっても到達できなかった重要な保護区へ到達するであろう。他の重要な利益は、これらリポソームは長期間ｍＤＣの表面に保持されているという事実のため、抗原特異性刺激のコースにあるリンパ系器官および組織内のｍＤＣと相互作用するＴ細胞サブセットがこれら非病原体保有細胞中に治療効果を誘発するために到達できることである。
【０２１１】
このように、もし骨髄を指向する皮内、皮下、腹腔内、胎盤内、子宮内、または他の見込まれる適用ルートによって投与されるならば、本発明の生産物および方法は、Ｃ−タイプレクチンレセプターまたはＣ−タイプレクチン様ドメインを示すレセプターを介して、個人内、個人間（例えば母子間ＨＩＶおよび他の慢性感染作因の伝染）において明らかに重要な役目を果す病原体保有細胞、およびＨＩＶまたは他の感染作因を活溌に複製する非病原体保有細胞のターゲティングの利益を提供する（図１３）。同様に同じ結果は、治療活性剤を送達するように慢性非感染病に含まれる区域的に限られたＣ−タイプレクチン（例えば胃腸または肝臓に限られた）のターゲティングを許容し得るか、またはワクチネーションのための新しいアプローチを可能／改良することができる。この技術の全体の固有の可能性が図１４に示されている。
【０２１２】
2007529558.tif 000003
2007529558.tif 000004
【図面の簡単な説明】
【０２１３】
【図１】インビトロにおいて分化の間ヒト骨髄樹状細胞（ｍＤＣ）の基本的形態学的外観を示す。
【図２】トレーサー染料カルセインを送達するフコース標識リポソームでターゲット化された未成熟骨髄樹状細胞の光学的逐次断面を示す。
【図３】培養５日後の未成熟ｍＤＣによるマンノース標識リポソームの結合および取り込みを示す。
【図４】クラスターとなった成熟ｍＤＣのＣ−タイプレクチン特異性ターゲティングを示す。
【図５】培養７日後のヒトマクロファージによるフコース標識リポソームの結合および取り込みを示す。
【図６】フコース標識リポソームでターゲティング２時間後の異なるドナーからの代表的マクロファージのカラー蛍光フォトマイクログラフである。
【図７】トレーサー染料カルセインを送達するＦｕｃ−Ｃ４−Ｃｈｏｌ標識リポソームでターゲット化された単球の光学的逐次断面を示す。
【図８】フコースターゲット化化合物送達システムが高度に特異性であり、そして極めて高いターゲティング有効性を有することを示す。
【図９】フコース標識リポソームの増加した濃度が未成熟および成熟ｍＤＣの両方を高度に効率的にターゲットすることを示す。
【図１０】未成熟および成熟骨髄樹状細胞の表現型を描写する。
【図１１】ターゲット化処理ありなしのＨＩＶ感染ＨＩＶｍＤＣの８日培養後の形態学的変化を示す。
【図１２】ターゲット化処理ありなしのＨＩＶ感染ｍＤＣの８日培養後の形態学的変化を示す。
【図１３】（Ｉ）正常病原体排除、（ＩＩ）ＨＩＶによる侵略、および（ＩＩＩ）本発明の炭水化物−レクチンターゲティングおよび処置システムを示す。
【図１４】本発明の炭水化物−レクチンターゲティングおよび処置システムを示す。