【手続補正書】
【提出日】平成25年8月7日(2013.8.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
検査サンプル中の少なくとも１つのタンパク質の存在または量を測定するためのイムノアッセイにおいて使用するための試薬であって、
少なくとも５連続アミノ酸残基を含む、前記タンパク質から誘導される少なくとも１つのペプチドを含み、
更に、内因性抗体と検査サンプル中のタンパク質との間の相互作用を阻止するために使用される、前記試薬。
【請求項２】
タンパク質は、心臓トロポニンＩ（配列番号１）、心臓トロポニンＴ（配列番号２）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）（配列番号３）、β−ヒト絨毛性ゴナドトロピン（β−ＨＣＧ）（配列番号４）、ミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）（配列番号５）、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）（配列番号６）、ヒトＢ型ナトリウム利尿ペプチド（ｈＢＮＰ）（配列番号７）、ミオシン軽鎖２（配列番号８）、ミオシン−６（配列番号９）、及びミオシン−７（配列番号１０）からなる群から選択される、請求項１に記載の試薬。
【請求項３】
ペプチドは、５連続アミノ酸〜１５連続アミノ酸の長さを有する、請求項１に記載の試薬。
【請求項４】
タンパク質は、心臓トロポニンＩであり、ペプチドは
【化１】
2013513107.tif 000001
からなる群から選択される配列由来の少なくとも５連続アミノ酸残基を含む配列を有する、請求項１に記載の試薬。
【請求項５】
検査サンプル中の心臓トロポニンＩの存在または量を測定するためのイムノアッセイにおいて使用するための試薬であって、前記試薬は
【化２】
2013513107.tif 000002
からなる群から選択される配列由来の少なくとも５連続アミノ酸残基を含む配列を有するペプチドを含む、前記試薬。
【請求項６】
検査サンプル中の少なくとも１つの対象タンパク質の検出方法であって、
（ａ）少なくとも１つの対象タンパク質を含有していると疑われる検査サンプルと、少なくとも１つの試薬とを含む第１混合物を作成するステップ〔ここで、前記試薬は、（１）対象抗体に結合する前記タンパク質から誘導される少なくとも５連続アミノ酸残基を含む少なくとも１つのペプチドであり、（２）検査サンプル中の内因性抗体と抗原との間の相互作用を破壊する〕；
（ｂ）第１混合物と、第１特異的結合パートナーとを含む第２混合物を作成するステップ〔ここで、前記１特異的結合パートナーは、対象タンパク質と結合して第１特異的結合パートナー−タンパク質複合体を形成する抗体を含む〕；
（ｃ）第２混合物を、第２特異的結合パートナーと接触させるステップ〔ここで、第２特異的結合パートナーは、検出可能標識にコンジュゲートされている抗体を含み、更に第１特異的結合パートナー−タンパク質複合体に結合して第１特異的結合パートナー−タンパク質−第２特異的結合パートナー複合体を形成する〕；及び
（ｄ）検出可能標識より発生する又は放出されるシグナルを測定し、検査サンプル中の対象タンパク質を検出するステップ
を含む、前記検出方法。
【請求項７】
タンパク質は、心臓トロポニンＩ、心臓トロポニンＴ、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、β−ヒト絨毛性ゴナドトロピン（β−ＨＣＧ）、ミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、ヒトＢ型ナトリウム利尿ペプチド（ｈＢＮＰ）、ミオシン軽鎖２、ミオシン−６、及びミオシン−７からなる群から選択される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
検査サンプルは、全血、血清または血漿である、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
第１特異的結合パートナー−タンパク質複合体を形成する前またはその後に、第１特異的結合パートナーを固相に固定化する、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
第１特異的結合パートナー−タンパク質−第２特異的結合パートナー複合体を形成する前またはその後に、第２特異的結合パートナーを固相に固定化する、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
検出可能標識は、放射性標識、酵素標識、化学発光標識、蛍光標識、温度測定標識、及びイムノポリメラーゼ連鎖反応標識からなる群から選択される、請求項６に記載の方法。
【請求項１２】
検出可能標識は、アクリジニウム化合物である、請求項６に記載の方法。
【請求項１３】
更に、
（ａ）第２特異的結合パートナーと接触している第２混合物に対して、過酸化水素源を生成または供給し；
（ｂ）ステップ（ａ）の混合物に塩基性溶液を添加し；
（ｃ）ステップ（ｂ）で発生する又は放出される光シグナルを測定し、サンプル中の対象タンパク質を検出する
ことを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
アクリジニウム化合物は、式Ｉ：
【化３】
2013513107.tif 000003
［式中、
Ｒ１及びＲ２は各々独立して、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールまたはアルアルキル、スルホアルキル、カルボキシアルキル、及びオキソアルキルからなる群から選択され；並びに
Ｒ３〜Ｒ１５は各々独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールまたはアルアルキル、アミノ、アミド、アシル、アルコキシル、ヒドロキシル、カルボキシル、ハロゲン、ハライド、ニトロ、シアノ、スルホ、スルホアルキル、カルボキシアルキル、及びオキソアルキルからなる群から選択され；
場合により、Ｘ−が存在するならばアニオンである］
に記載の構造を有するアクリジニウム−９−カルボキサミドである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
アクリジニウム化合物は、式ＩＩ：
【化４】
2013513107.tif 000004
［式中、
Ｒ１は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールまたはアルアルキル、スルホアルキル、カルボキシアルキル、及びオキソアルキルであり；並びに
Ｒ３〜Ｒ１５は各々独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールまたはアルアルキル、アミノ、アミド、アシル、アルコキシル、ヒドロキシル、カルボキシル、ハロゲン、ハライド、ニトロ、シアノ、スルホ、スルホアルキル、カルボキシアルキル、及びオキソアルキルからなる群から選択され；
場合により、Ｘ−が存在するならばアニオンである］
に記載の構造を有するアクリジニウム−９−カルボキシレートアリールエステルである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
試薬は、５連続アミノ酸〜１５連続アミノ酸の長さを有するペプチドである、請求項６に記載の方法。
【請求項１７】
タンパク質は、心臓トロポニンＩであり、ペプチドは
【化５】
2013513107.tif 000005
からなる群から選択される配列由来の少なくとも５連続アミノ酸残基を含む配列を有する、請求項６に記載の方法。
【請求項１８】
更に、対象タンパク質についての標準曲線を使用するか又は参照標準と比較するのいずれかにより、ステップ（ｄ）におけるシグナルの量を検査サンプル中の１つ以上の対象タンパク質の量に関連づけることによって、検査サンプル中の対象タンパク質の量を定量するステップを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１９】
方法を、自動システムまたは半自動システムで使用するよう適合させる、請求項７に記載の方法。
【請求項２０】
請求項１に記載の試薬、対象タンパク質に結合する抗体を含む捕捉試薬、及び検査サンプル中の少なくとも１つの対象タンパク質を検出および／または定量するための使用説明書を含む、検査サンプル中の少なくとも１つの対象タンパク質を検出および／または定量するためのキット。
【請求項２１】
更に、検出可能標識にコンジュゲートされている抗体を含むコンジュゲートを含む、請求項２０に記載のキット。
【請求項２２】
検出可能標識は、放射性標識、酵素標識、化学発光標識、蛍光標識、温度測定標識、及びイムノポリメラーゼ連鎖反応標識からなる群から選択される、請求項２１に記載のキット。
【請求項２３】
検出可能標識は、アクリジニウム化合物である、請求項２２に記載のキット。
【請求項２４】
アクリジニウム化合物は、式Ｉ：
【化６】
2013513107.tif 000006
［式中、
Ｒ１及びＲ２は各々独立して、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールまたはアルアルキル、スルホアルキル、カルボキシアルキル、及びオキソアルキルからなる群から選択され；並びに
Ｒ３〜Ｒ１５は各々独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールまたはアルアルキル、アミノ、アミド、アシル、アルコキシル、ヒドロキシル、カルボキシル、ハロゲン、ハライド、ニトロ、シアノ、スルホ、スルホアルキル、カルボキシアルキル、及びオキソアルキルからなる群から選択され；
場合により、Ｘ−が存在するならばアニオンである］
に記載の構造を有するアクリジニウム−９−カルボキサミドである、請求項２３に記載のキット。
【請求項２５】
アクリジニウム化合物は、式ＩＩ：
【化７】
2013513107.tif 000007
［式中、
Ｒ１は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールまたはアルアルキル、スルホアルキル、カルボキシアルキル、及びオキソアルキルであり；並びに
Ｒ３〜Ｒ１５は各々独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールまたはアルアルキル、アミノ、アミド、アシル、アルコキシル、ヒドロキシル、カルボキシル、ハロゲン、ハライド、ニトロ、シアノ、スルホ、スルホアルキル、カルボキシアルキル、及びオキソアルキルからなる群から選択され；
場合により、Ｘ−が存在するならばアニオンである］
に記載の構造を有するアクリジニウム−９−カルボキシレートアリールエステルである、請求項２３に記載のキット。
【請求項２６】
更に、塩基性溶液を含む、請求項２３に記載のキット。
【請求項２７】
塩基性溶液は、少なくとも約１０のｐＨを有する溶液である、請求項２６に記載のキット。
【請求項２８】
更に、過酸化水素源を含む、請求項２３に記載のキット。
【請求項２９】
過酸化水素源は、バッファーまたは過酸化水素を含有する溶液からなる、請求項２８に記載のキット。
【請求項３０】
過酸化水素源は、過酸化水素を生成する酵素からなる、請求項２８に記載のキット。
【請求項３１】
過酸化水素を生成する酵素は、（Ｒ）−６−ヒドロキシニコチンオキシダーゼ、（Ｓ）−２−ヒドロキシ酸オキシダーゼ、（Ｓ）−６−ヒドロキシニコチンオキシダーゼ、３−ａｃｉ−ニトロプロパン酸オキシダーゼ、３−ヒドロキシアントラニル酸オキシダーゼ、４−ヒドロキシマンデル酸オキシダーゼ、６−ヒドロキシニコチン酸デヒドロゲナーゼ、アブシシンアルデヒドオキシダーゼ、アシル−ＣｏＡオキシダーゼ、アルコールオキシダーゼ、アルデヒドオキシダーゼ、アミンオキシダーゼ、アミンオキシダーゼ（銅含有）、アミンオキシダーゼ（フラビン含有）、アリールアルコールオキシダーゼ、アリールアルデヒドオキシダーゼ、カテコールオキシダーゼ、コレステロールオキシダーゼ、コリンオキシダーゼ、コランバミンオキシダーゼ、シクロヘキシルアミンオキシダーゼ、シトクロームｃオキシダーゼ、Ｄ−アミノ酸オキシダーゼ、Ｄ−アラビノノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ、Ｄ−アラビノノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ、Ｄ−アスパラギン酸オキシダーゼ、Ｄ−グルタミン酸オキシダーゼ、Ｄ−グルタミン酸（Ｄ−アスパラギン酸）オキシダーゼ、ジヒドロベンゾフェナントリジンオキシダーゼ、ジヒドロオロット酸オキシダーゼ、ジヒドロウラシルオキシダーゼ、ジメチルグリシンオキシダーゼ、Ｄ−マンニトールオキシダーゼ、エクジソンオキシダーゼ、エタノールアミンオキシダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ、グルタチオンオキシダーゼ、グリセロール−３−リン酸オキシダーゼ、グリシンオキシダーゼ、グリオキシル酸オキシダーゼ、ヘキソースオキシダーゼ、ヒドロキシフィタン酸オキシダーゼ、インドール−３−アセトアルデヒドオキシダーゼ、乳酸オキシダーゼ、Ｌ−アミノ酸オキシダーゼ、Ｌ−アスパラギン酸オキシダーゼ、Ｌ−ガラクトノラクトンオキシダーゼ、Ｌ−グルタミン酸オキシダーゼ、Ｌ−グロノラクトンオキシダーゼ、Ｌ−リシン６−オキシダーゼ、Ｌ−リシンオキシダーゼ、長鎖アルコールオキシダーゼ、Ｌ−ピペコリン酸オキシダーゼ、Ｌ−ソルボースオキシダーゼ、リンゴ酸オキシダーゼ、メタンチオールオキシダーゼ、モノアミノ酸オキシダーゼ、Ｎ６−メチルリシンオキシダーゼ、Ｎ−アシルヘキソサミンオキシダーゼ、ＮＡＤ（Ｐ）Ｈオキシダーゼ、ニトロアルカンオキシダーゼ、Ｎ−メチル−Ｌ−アミノ酸オキシダーゼ、ヌクレオシドオキシダーゼ、シュウ酸オキシダーゼ、ポリアミンオキシダーゼ、ポリフェノールオキシダーゼ、ポリビニルアルコールオキシダーゼ、プレニルシステインオキシダーゼ、タンパク質−リシン６−オキシダーゼ、プトレシンオキシダーゼ、ピラノースオキシダーゼ、ピリドキサール５’−リン酸シンターゼ、ピリドキシン４−オキシダーゼ、ピロロキノリン−キノンシンターゼ、ピルビン酸オキシダーゼ、ピルビン酸オキシダーゼ（ＣｏＡ−アセチル化）、レチクリンオキシダーゼ、レチナールオキシダーゼ、リファマイシンＢオキシダーゼ、サルコシンオキシダーゼ、第２級アルコールオキシダーゼ、亜硫酸オキシダーゼ、スーパーオキシドジスムターゼ、スーパーオキシドレダクターゼ、テトラヒドロベルベリンオキシダーゼ、チアミンオキシダーゼ、トリプトファンα，β−オキシダ��ゼ、尿酸オキシダーゼ（ウリカーゼ、尿酸オキシダーゼ）、バニリルアルコールオキシダーゼ、キサンチンオキシダーゼ、キシリトールオキシダーゼ及びその組合せからなる群から選択される、請求項３０に記載のキット。
【請求項３２】
タンパク質は、心臓トロポニンＩ、心臓トロポニンＴ、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、β−ヒト絨毛性ゴナドトロピン（β−ＨＣＧ）、ミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、ヒトＢ型ナトリウム利尿ペプチド（ｈＢＮＰ）、ミオシン軽鎖２、ミオシン−６またはミオシン−７である、請求項２０に記載のキット。
【請求項３３】
試薬は、５連続アミノ酸〜１５連続アミノ酸の長さを有するペプチドである、請求項２０に記載のキット。
【請求項３４】
タンパク質は、心臓トロポニンＩであり、ペプチドは
【化８】
2013513107.tif 000008
からなる群から選択される配列由来の少なくとも５連続アミノ酸残基を含む配列を有する、請求項３３に記載のキット。