【手続補正書】
【提出日】平成21年7月17日(2009.7.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１分子および第２分子で標識された測定対象サンプルにレーザ光を照射し、このとき測定対象サンプルが発する蛍光を受光することによって、第１分子のエネルギーが第２分子に移動するＦＲＥＴ（Fluorescence Resonance Energy Transfer）を検出するＦＲＥＴ検出方法であって、
レーザ光の強度を所定の周波数で時間変調して前記測定対象サンプルに照射し、このときの前記測定対象サンプルの発する蛍光を受光波長帯域の異なる複数の検出センサで受光することにより、前記測定対象サンプルの蛍光の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集するステップと、
予め記憶手段に記憶されている情報であって、前記測定対象サンプルの前記蛍光のうち前記第１分子が発する第１分子蛍光成分の、前記受光波長帯域における蛍光強度の比を表す第１の強度比率と、前記レーザ光の時間変調に対する前記第１分子蛍光成分の位相情報と、前記蛍光のうち前記第２分子が発する第２分子蛍光成分の、前記受光波長帯域の蛍光強度の比を表す第２の強度比率と、前記レーザ光の時間変調に対する前記第２分子蛍光成分の位相情報と、レーザ光によって励起された第１分子が発する蛍光が１次遅れ系の緩和応答であるとしたとき定義される寿命であって前記ＦＲＥＴが発生しない状態における前記第１分子蛍光成分の非ＦＲＥＴ蛍光寿命と、を少なくとも含むキャリブレーション情報を読み出して取得するステップと、
各検出センサから収集された前記検出値から、前記受光波長帯域毎に、前記測定対象サンプルの蛍光の蛍光強度情報および位相情報を求めて、求めた前記蛍光強度情報および前記位相情報と、前記第１の強度比率と、前記第１分子蛍光成分の前記位相情報と、前記第２の強度比率と、前記第２分子蛍光成分の前記位相情報と、を用いて、レーザ光によって励起された第１分子が発する蛍光が１次遅れ系の緩和応答であるとしたとき定義される前記第１分子蛍光成分のＦＲＥＴ蛍光寿命を求めるステップと、
前記第１分子蛍光成分のＦＲＥＴ蛍光寿命と、前記第１分子蛍光成分の前記非ＦＲＥＴ蛍光寿命との比を用いてＦＲＥＴ発生情報を求めるステップと、を有することを特徴とするＦＲＥＴ検出方法。 
【請求項２】
前記ＦＲＥＴ発生情報を求めるステップでは、前記非ＦＲＥＴ蛍光寿命をτd、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命をτd *とするとき、
前記ＦＲＥＴ発生情報として、１−（τd*／τd）で表されるＦＲＥＴ効率Ｅtを求める請求項１に記載のＦＲＥＴ検出方法。 
【請求項３】
前記検出値を収集するステップでは、複数の前記測定対象サンプルに前記レーザ光を照射し、前記センサにて複数の前記測定対象サンプルそれぞれについて前記検出値を収集し、
前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めるステップでは、各検出値に基づいて、前記測定対象サンプルそれぞれの蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた複数の蛍光強度情報および位相情報から前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求める請求項１または２に記載のＦＲＥＴ検出方法。
【請求項４】
前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めるステップでは、前記受光波長帯域毎に前記検出値から求めた前記蛍光強度および位相情報をベクトルで表し、このベクトルと、前記第１の強度比率および前記第２の強度比率とを、前記受光波長帯域毎に用いて、ＦＲＥＴが生じた状態における前記第１分子蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報と、前記第２分子蛍光成分のうちＦＲＥＴが生じることで発するＦＲＥＴ成分の蛍光強度情報および位相情報とを求め、求めた情報を用いて、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求める請求項１〜３のいずれかに記載のＦＲＥＴ検出方法。 
【請求項５】
前記受光波長帯域は、前記第１分子蛍光成分の蛍光強度が最大となるピーク波長を中心とした第１波長帯域と、前記第２分子蛍光成分の蛍光強度が最大となるピーク波長を中心とした第２波長帯域とを有し、
前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めるステップでは、
前記第１波長帯域の前記検出センサにて収集される検出値によって表される第１波長帯域における前記ベクトルと前記第２の強度比率とを少なくとも用いて、前記ＦＲＥＴが生じた状態における前記第１分子蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報を求め、
前記第２波長帯域の前記検出センサにより収集される検出値によって表される第２波長帯域における前記ベクトルと前記第１の強度比率とを少なくとも用いて、前記ＦＲＥＴ成分の蛍光強度情報および位相情報を求める請求項４に記載のＦＲＥＴ検出方法。 
【請求項６】
前記記憶手段には、前記第２分子蛍光成分のうち前記レーザ光によって第２分子が直接励起されることで発生する直接励起蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報があらかじめ記憶されており、
前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、前記記憶手段に記憶されている前記直接励起蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報を呼び出して、直接励起蛍光成分の情報をベクトルで表し、
前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めるステップでは、前記直接励起蛍光成分の前記ベクトルと、前記第２波長帯域における前記ベクトルとを少なくとも用いて、前記ＦＲＥＴが生じた状態における前記第２分子蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報を求める請求項５に記載のＦＲＥＴ検出方法。 
【請求項７】
前記記憶手段には、前記第２分子蛍光成分のうち前記レーザ光によって第２分子が直接励起されることで発生する直接励起蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報があらかじめ記憶されており、
前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、前記第２分子蛍光成分のうち、前記レーザ光によって第２分子が直接励起されることで発生する直接励起蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報を呼び出して、前記直接励起蛍光成分のベクトルで表し、
前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めるステップでは、前記第１分子蛍光成分のＦＲＥＴ寿命を前記キャリブレーション情報を用いて求めるのに加えて、前記第２波長帯域における前記ベクトルと、前記第１の強度比率とを少なくとも用いて前記ＦＲＥＴ成分の位相情報を求め、
求めた前記ＦＲＥＴ成分の位相情報と前記直接励起蛍光成分の前記ベクトルとを用いて、前記ＦＲＥＴが生じた状態における前記第２分子蛍光成分のＦＲＥＴ蛍光寿命と、前記ＦＲＥＴが生じない状態における前記第２分子蛍光成分の非ＦＲＥＴ蛍光寿命とを求め、
前記第２分子蛍光成分のＦＲＥＴ蛍光寿命と、前記第２分子蛍光成分の前記非ＦＲＥＴ蛍光寿命とを用いて、前記第１分子蛍光成分のＦＲＥＴ蛍光寿命を求める請求項５に記載のＦＲＥＴ検出方法。 
【請求項８】
前記測定対象サンプルは、前記レーザ光によって励起されて自家蛍光を発する自家蛍光サンプル体に、前記第１分子および前記第２分子で標識されたサンプルであって、
前記記憶手段には、前記自家蛍光サンプル体に前記レーザ光を照射することにより発する前記自家蛍光サンプル体の蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報が予め記憶されており、
前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、前記記憶手段に記憶されている、前記自家蛍光サンプル体の蛍光の前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を呼び出して前記自家蛍光サンプル体の蛍光をベクトルで表し、
前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めるステップでは、前記受光波長帯域毎の前記測定対象サンプルの前記ベクトルのそれぞれから、前記自家蛍光サンプル体の蛍光の前記ベクトルを減算し、この減算で得られたベクトルを用いて、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求める請求項４〜７のいずれかに記載のＦＲＥＴ検出方法。 
【請求項９】
前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、自家蛍光キャリブレーションによって得られた情報を前記記憶手段から呼び出して取得し、
前記自家蛍光キャリブレーションでは、
前記自家蛍光サンプル体を測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集して、前記自家蛍光サンプル体の蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた情報を前記記憶手段に記憶する請求項８に記載のＦＲＥＴ検出方法。 
【請求項１０】
前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、ｎｏｎ−ＦＲＥＴキャリブレーションによって得られた情報を前記記憶手段から呼び出して取得し、
前記ｎｏｎ−ＦＲＥＴキャリブレーションでは、
前記第１分子および前記第２分子がサンプルに付着されて、ＦＲＥＴが生じない処理がなされたｎｏｎ−ＦＲＥＴサンプルを測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集して、前記ｎｏｎ−ＦＲＥＴサンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、
求めた前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報と、前記記憶手段に予め記憶された前記第１の強度比率と、前記第１分子蛍光成分の位相情報と、前記記憶手段に予め記憶された前記第２の強度比率と、前記第２分子蛍光成分の位相情報と、を用いて、レーザ光によって第２分子が直接励起される直接励起蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた情報を前記記憶手段に記憶する請求項１〜９のいずれかに記載のＦＲＥＴ検出方法。
【請求項１１】
前記ｎｏｎ−ＦＲＥＴサンプルは、前記レーザ光によって励起されて自家蛍光を発する自家蛍光サンプル体に、前記第１分子および前記第２分子で標識されたサンプルであって、
前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、自家蛍光キャリブレーションによって得られた情報を前記記憶手段から呼び出して取得し、
前記自家蛍光キャリブレーションは、前記ｎｏｎ−ＦＲＥＴキャリブレーションに先がけて行われるキャリブレーションであって、前記自家蛍光サンプル体を測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集して、前記自家蛍光サンプル体の蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた情報を前記記憶手段に記憶し、
前記ｎｏｎ−ＦＲＥＴキャリブレーションでは、前記ｎｏｎ−ＦＲＥＴサンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報をベクトルで表したｎｏｎ−ＦＲＥＴサンプルベクトルから、前記自家蛍光キャリブレーションで求められた前記自家蛍光の情報をベクトルで表した自家蛍光ベクトルを減算し、この減算で得られたベクトルと、前記記憶手段に予め記憶された前記第１の強度比率と、前記第１分子蛍光成分の位相情報と、前記記憶手段に予め記憶された前記第２の強度比率と、前記第２分子蛍光成分の位相情報と、を用いて前記直接励起蛍光成分ベクトルを導出し、導出した結果を前記記憶手段に記憶する請求項１０に記載のＦＲＥＴ検出方法。 
【請求項１２】
前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、第１分子キャリブレーションによって得られた情報を前記記憶手段から呼び出して取得し、
前記第１分子キャリブレーションでは、
前記第１分子のみで標識された第１分子サンプルを測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記第１分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集して、前記第１分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、
前記第１の強度比率として、前記第１分子サンプルの、前記受光波長帯域の蛍光強度の比を求め、
求めた前記第１の強度比率と求めた前記位相情報とを前記記憶手段に記憶する請求項１〜１１のいずれかに記載のFRET検出方法。 
【請求項１３】
前記第１分子サンプルは、前記レーザ光によって励起されて自家蛍光を発する自家蛍光サンプル体に、前記第１分子で標識されたサンプルであって、
前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、自家蛍光キャリブレーションによって得られた情報を前記記憶手段から呼び出して取得し、
前記自家蛍光キャリブレーションは、前記第１分子キャリブレーションに先がけて行われるキャリブレーションであって、前記自家蛍光サンプル体を測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記受光波長帯域毎に蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集して、前記自家蛍光サンプル体の蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた情報を前記記憶手段に記憶し、
前記第１分子キャリブレーションでは、前記第１分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報をベクトルで表した第１分子サンプルベクトルから、前記自家蛍光キャリブレーションで求められた前記自家蛍光サンプル体の蛍光の情報をベクトルで表した自家蛍光ベクトルを減算し、この減算で得られたベクトルを用いて、前記第１分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた情報を前記記憶手段に記憶する請求項１２に記載のＦＲＥＴ検出方法。 
【請求項１４】
前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、第２分子キャリブレーションによって得られた情報を前記記憶手段から呼び出して取得し、
前記第２分子キャリブレーションでは、
前記第２分子のみで標識された第２分子サンプルを測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記第２分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集して、前記第２分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、
前記第２の強度比率として、前記第２分子サンプルの、前記受光波長帯域の蛍光強度の比を求め、
求めた前記第２の強度比率および求めた前記位相情報を前記記憶手段に記憶する請求項１〜１３のいずれかに記載のＦＲＥＴ検出方法。 
【請求項１５】
前記第２分子サンプルは、前記レーザ光によって励起されて自家蛍光を発する自家蛍光サンプル体に、前記第２分子で標識されたサンプルであって、
前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、自家蛍光キャリブレーションによって得られた情報を前記記憶手段から呼び出して取得し、
前記自家蛍光キャリブレーションは、前記第２分子キャリブレーションに先がけて行われるキャリブレーションであって、前記自家蛍光サンプル体を測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記受光波長帯域毎に蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集して、前記自家蛍光サンプル体の蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた情報を前記記憶手段に記憶し、
前記第２分子キャリブレーションでは、前記第２分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報をベクトルで表した第２分子サンプルベクトルから、前記自家蛍光サンプル体キャリブレーションで求められた前記自家蛍光サンプルの蛍光の情報をベクトルで表した自家蛍光ベクトルを減算し、この減算で得られたベクトルを用いて、前記第２分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた情報を前記記憶手段に記憶する請求項１４に記載のＦＲＥＴ検出方法。
【請求項１６】
第１分子および第２分子で標識された測定対象サンプルにレーザ光を照射し、このとき測定対象サンプルが発する蛍光を受光することによって、第１分子のエネルギーが第２分子に移動するＦＲＥＴ(Fluorescence Resonance Energy Transfer)を検出するＦＲＥＴ検出装置であって、
レーザ光の強度を所定の周波数で時間変調して前記測定対象サンプルについて照射し、このときの前記測定対象サンプルの蛍光を受光波長帯域の異なる複数の検出センサで受光することにより、前記測定対象サンプルの蛍光の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を取得する検出情報取得部と、
前記測定対象サンプルの前記蛍光のうち前記第１分子が発する第１分子蛍光成分の、前記受光波長帯域の蛍光強度の比を表す第１の強度比率と、前記第１分子蛍光成分の位相情報と、前記第２分子が発する第２分子蛍光成分の、前記受光波長帯域の蛍光強度の比を表す第２の強度比率と、前記第２分子蛍光成分の位相情報と、レーザ光によって励起された第１分子が発する蛍光が１次遅れ系の緩和応答であるとしたときに定義される寿命であって、前記ＦＲＥＴが発生しない状態における前記第１分子蛍光成分の非ＦＲＥＴ蛍光寿命と、を少なくとも含むキャリブレーション情報を予め記憶しておく記憶手段と、
前記検出情報取得部が取得した前記検出値から、前記受光波長帯域それぞれについて、前記測定対象サンプルの蛍光の蛍光強度情報および位相情報を求めて、求めた前記蛍光強度情報および前記位相情報と、前記記憶手段から読み出した前記第１の強度比率と、前記第１分子蛍光成分の前記位相情報と、前記第２の強度比率と、前記第２分子蛍光成分の前記位相情報と、を用いて、レーザ光によって励起された第１分子が発する蛍光が１次遅れ系の緩和応答であるとしたときに定義される前記第１分子蛍光成分のＦＲＥＴ蛍光寿命を求めるＦＲＥＴ蛍光寿命算出部と、
前記第１分子蛍光成分のＦＲＥＴ蛍光寿命と、前記第１分子蛍光成分の前記非ＦＲＥＴ蛍光寿命との比を用いて表されるＦＲＥＴ発生情報を求めるＦＲＥＴ発生情報算出部と、を有することを特徴とするＦＲＥＴ検出装置。 
【請求項１７】
前記ＦＲＥＴ蛍光寿命算出部では、前記検出値それぞれから求めた前記蛍光強度および位相情報をベクトルで表し、それぞれのベクトルと、前記第１の強度比率と、前記第１分子蛍光成分の前記位相情報と、前記第２分子蛍光成分の前記第２の強度比率と、前記第２分子蛍光成分の前記位相情報とを用いて、ＦＲＥＴが生じた状態における前記第１分子蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報と、前記第２分子蛍光成分のうちＦＲＥＴが生じることで発するＦＲＥＴ成分の蛍光強度情報および位相情報とを求め、求めたこれらの情報を用いて、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求める請求項１６に記載のＦＲＥＴ検出装置。 
【請求項１８】
前記センサの各受光波長帯域は、前記第１分子蛍光成分の蛍光強度が最大となるピーク波長を中心とした第１波長帯域と、前記第２分子蛍光成分の蛍光強度が最大となるピーク波長を中心とした第２波長帯域であり、
前記ＦＲＥＴ蛍光寿命算出部では、
前記第１波長帯域の検出センサによる前記検出値から求められる第１波長帯域におけるベクトルと、前記第２の強度比率とを少なくとも用いて、前記ＦＲＥＴが生じた状態における前記第１分子蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報を求め、
前記第２波長帯域の前記検出センサによる前記検出値によって表される第２波長帯域におけるベクトルと、前記第１の強度比率とを少なくとも用いて、前記ＦＲＥＴ成分の蛍光強度情報および位相情報を求める請求項１６または１７に記載のＦＲＥＴ検出装置。 
【請求項１９】
前記ＦＲＥＴ検出装置は、さらに、自家蛍光キャリブレーション部を有し、
前記自家蛍光キャリブレーション部は、前記レーザ光によって励起されて自家蛍光を発する自家蛍光を測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、前記検出センサそれぞれから、前記受光波長帯域の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集し、前記自家蛍光サンプル体の蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求めて、前記記憶手段に記憶し、
前記ＦＲＥＴ蛍光寿命算出部では、前記受光波長帯域毎の前記測定対象サンプルの蛍光の情報をベクトルで表し、このベクトルから、前記自家蛍光サンプル体の前記蛍光強度情報および前記位相情報を表したベクトルを減算し、減算して得られたベクトルを用いて、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求める請求項１６〜１８のいずれかに記載のＦＲＥＴ検出装置。
【請求項２０】
前記ＦＲＥＴ検出装置は、さらに、ｎｏｎ−ＦＲＥＴキャリブレーション部を有し、
前記ｎｏｎ−ＦＲＥＴキャリブレーション部は、
前記第１分子および前記第２分子がサンプルに付着されて、ＦＲＥＴが生じない処理がなされたｎｏｎ−ＦＲＥＴサンプルを測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集した際、
前記ｎｏｎ−ＦＲＥＴサンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた蛍光強度情報および位相情報と、前記第１の強度比率と、前記第１分子蛍光成分の前記位相情報と、前記第２の強度比率と、前記第２分子蛍光成分の前記位相情報と、を用いて、前記レーザ光によって第２分子が直接励起されることで発生する直接励起蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報を求め、これらの情報をベクトルで表した直接励起蛍光成分ベクトルを導出し、この導出結果を前記記憶手段に記憶し、
前記ＦＲＥＴ蛍光寿命算出部は、前記直接励起蛍光成分ベクトルを用いて前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求める請求項１６〜１９のいずれかに記載のＦＲＥＴ検出装置。 
【請求項２１】
前記ＦＲＥＴ検出装置は、さらに、第１分子キャリブレーション部を有し、
前記第１分子キャリブレーション部は、
前記第１分子のみで標識された第１分子サンプルを測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記第１分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集した際、
前記第１分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、前記第１の強度比率として、前記第１分子サンプルの、前記受光波長帯域の蛍光強度の比を求め、求めた前記第１の強度比率及び求めた前記第１分子サンプルの蛍光の前記位相情報を前記記憶手段に記憶する請求項１６〜２０のいずれかに記載のＦＲＥＴ検出装置。 
【請求項２２】
前記ＦＲＥＴ検出装置は、さらに、第２分子キャリブレーション部を有し、
前記第２分子キャリブレーション部は、
前記第２分子のみで標識された第２分子サンプルを測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記第２分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集した際、
前記第２分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、前記第２の強度比率として、前記第２分子サンプルの、前記受光波長帯域の蛍光強度の比を求め、求めた前記第２の強度比率及び求めた前記第２分子サンプルの蛍光の前記位相情報を前記記憶手段に記憶する請求項１６〜２１のいずれかに記載のＦＲＥＴ検出装置。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
上記目的を達成するために、本発明は、第１分子および第２分子で標識された測定対象サンプルにレーザ光を照射し、このとき測定対象サンプルが発する蛍光を受光することによって、第１分子のエネルギーが第２分子に移動するＦＲＥＴ（Fluorescence Resonance Energy Transfer）を検出するＦＲＥＴ検出方法であって、レーザ光の強度を所定の周波数で時間変調して前記測定対象サンプルに照射し、このときの前記測定対象サンプルの発する蛍光を受光波長帯域の異なる複数の検出センサで受光することにより、前記測定対象サンプルの蛍光の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集するステップと、予め記憶手段に記憶されている情報であって、前記測定対象サンプルの前記蛍光のうち前記第１分子が発する第１分子蛍光成分の、前記受光波長帯域における蛍光強度の比を表す第１の強度比率と、前記レーザ光の時間変調に対する前記第１分子蛍光成分の位相情報と、前記蛍光のうち前記第２分子が発する第２分子蛍光成分の、前記受光波長帯域の蛍光強度の比を表す第２の強度比率と、前記レーザ光の時間変調に対する前記第２分子蛍光成分の位相情報と、レーザ光によって励起された第１分子が発する蛍光が１次遅れ系の緩和応答であるとしたとき定義される寿命であって前記ＦＲＥＴが発生しない状態における前記第１分子蛍光成分の非ＦＲＥＴ蛍光寿命と、を少なくとも含むキャリブレーション情報を読み出して取得するステップと、各検出センサから収集された前記検出値から、前記受光波長帯域毎に、前記測定対象サンプルの蛍光の蛍光強度情報および位相情報を求めて、求めた前記蛍光強度情報および前記位相情報と、前記第１の強度比率と、前記第１分子蛍光成分の前記位相情報と、前記第２の強度比率と、前記第２分子蛍光成分の前記位相情報と、を用いて、レーザ光によって励起された第１分子が発する蛍光が１次遅れ系の緩和応答であるとしたとき定義される前記第１分子蛍光成分のＦＲＥＴ蛍光寿命を求めるステップと、前記第１分子蛍光成分のＦＲＥＴ蛍光寿命と、前記第１分子蛍光成分の前記非ＦＲＥＴ蛍光寿命との比を用いてＦＲＥＴ発生情報を求めるステップと、を有することを特徴とするＦＲＥＴ検出方法を提供する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
なお、前記ＦＲＥＴ発生情報を求めるステップでは、前記非ＦＲＥＴ蛍光寿命をτd、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命をτd *とするとき、前記ＦＲＥＴ発生情報として、１−（τd*／τd）で表されるＦＲＥＴ効率Ｅtを求めればよい。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
また、前記検出値を収集するステップでは、複数の前記測定対象サンプルに前記レーザ光を照射し、前記センサにて複数の前記測定対象サンプルそれぞれについて前記検出値を収集し、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めるステップでは、各検出値に基づいて、前記測定対象サンプルそれぞれの蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた複数の蛍光強度情報および位相情報から前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めることが好ましい。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
また、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めるステップでは、前記受光波長帯域毎に前記検出値から求めた前記蛍光強度および位相情報をベクトルで表し、このベクトルと、前記第１の強度比率および前記第２の強度比率とを、前記受光波長帯域毎に用いて、ＦＲＥＴが生じた状態における前記第１分子蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報と、前記第２分子蛍光成分のうちＦＲＥＴが生じることで発するＦＲＥＴ成分の蛍光強度情報および位相情報とを求め、求めた情報を用いて、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めることが好ましい。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
また、前記受光波長帯域は、前記第１分子蛍光成分の蛍光強度が最大となるピーク波長を中心とした第１波長帯域と、前記第２分子蛍光成分の蛍光強度が最大となるピーク波長を中心とした第２波長帯域とを有し、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めるステップでは、前記第１波長帯域の前記検出センサにて収集される検出値によって表される第１波長帯域における前記ベクトルと前記第２の強度比率とを少なくとも用いて、前記ＦＲＥＴが生じた状態における前記第１分子蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報を求め、前記第２波長帯域の前記検出センサにより収集される検出値によって表される第２波長帯域における前記ベクトルと前記第１の強度比率とを少なくとも用いて、前記ＦＲＥＴ成分の蛍光強度情報および位相情報を求めることが好ましい。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
また、前記記憶手段には、前記第２分子蛍光成分のうち前記レーザ光によって第２分子が直接励起されることで発生する直接励起蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報があらかじめ記憶されており、前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、前記記憶手段に記憶されている前記直接励起蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報を呼び出して、直接励起蛍光成分の情報をベクトルで表し、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めるステップでは、前記直接励起蛍光成分の前記ベクトルと、前記第２波長帯域における前記ベクトルとを少なくとも用いて、前記ＦＲＥＴが生じた状態における前記第２分子蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報を求めることが好ましい。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
また、前記記憶手段には、前記第２分子蛍光成分のうち前記レーザ光によって第２分子が直接励起されることで発生する直接励起蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報があらかじめ記憶されており、前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、前記第２分子蛍光成分のうち、前記レーザ光によって第２分子が直接励起されることで発生する直接励起蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報を呼び出して、前記直接励起蛍光成分のベクトルで表し、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めるステップでは、前記第１分子蛍光成分のＦＲＥＴ寿命を前記キャリブレーション情報を用いて求めるのに加えて、前記第２波長帯域における前記ベクトルと、前記第１の強度比率とを少なくとも用いて前記ＦＲＥＴ成分の位相情報を求め、求めた前記ＦＲＥＴ成分の位相情報と前記直接励起蛍光成分の前記ベクトルとを用いて、前記ＦＲＥＴが生じた状態における前記第２分子蛍光成分のＦＲＥＴ蛍光寿命と、前記ＦＲＥＴが生じない状態における前記第２分子蛍光成分の非ＦＲＥＴ蛍光寿命とを求め、前記第２分子蛍光成分のＦＲＥＴ蛍光寿命と、前記第２分子蛍光成分の前記非ＦＲＥＴ蛍光寿命とを用いて、前記第１分子蛍光成分のＦＲＥＴ蛍光寿命を求めることが好ましい。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
また、前記測定対象サンプルは、前記レーザ光によって励起されて自家蛍光を発する自家蛍光サンプル体に、前記第１分子および前記第２分子で標識されたサンプルであって、
前記記憶手段には、前記自家蛍光サンプル体に前記レーザ光を照射することにより発する前記自家蛍光サンプル体の蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報が予め記憶されており、前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、前記記憶手段に記憶されている、前記自家蛍光サンプル体の蛍光の前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を呼び出して前記自家蛍光サンプル体の蛍光をベクトルで表し、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めるステップでは、前記受光波長帯域毎の前記測定対象サンプルの前記ベクトルのそれぞれから、前記自家蛍光サンプル体の蛍光の前記ベクトルを減算し、この減算で得られたベクトルを用いて、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めることが好ましい。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
また、前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、自家蛍光キャリブレーションによって得られた情報を前記記憶手段から呼び出して取得し、前記自家蛍光キャリブレーションでは、前記自家蛍光サンプル体を測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集して、前記自家蛍光サンプル体の蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた情報を前記記憶手段に記憶することが好ましい。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
また、前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、ｎｏｎ−ＦＲＥＴキャリブレーションによって得られた情報を前記記憶手段から呼び出して取得し、前記ｎｏｎ−ＦＲＥＴキャリブレーションでは、前記第１分子および前記第２分子がサンプルに付着されて、ＦＲＥＴが生じない処理がなされたｎｏｎ−ＦＲＥＴサンプルを測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集して、前記ｎｏｎ−ＦＲＥＴサンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報と、前記記憶手段に予め記憶された前記第１の強度比率と、前記第１分子蛍光成分の位相情報と、前記記憶手段に予め記憶された前記第２の強度比率と、前記第２分子蛍光成分の位相情報と、を用いて、レーザ光によって第２分子が直接励起される直接励起蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた情報を前記記憶手段に記憶することが好ましい。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
また、前記ｎｏｎ−ＦＲＥＴサンプルは、前記レーザ光によって励起されて自家蛍光を発する自家蛍光サンプル体に、前記第１分子および前記第２分子で標識されたサンプルであって、前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、自家蛍光キャリブレーションによって得られた情報を前記記憶手段から呼び出して取得し、前記自家蛍光キャリブレーションは、前記ｎｏｎ−ＦＲＥＴキャリブレーションに先がけて行われるキャリブレーションであって、前記自家蛍光サンプル体を測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集して、前記自家蛍光サンプル体の蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた情報を前記記憶手段に記憶し、前記ｎｏｎ−ＦＲＥＴキャリブレーションでは、前記ｎｏｎ−ＦＲＥＴサンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報をベクトルで表したｎｏｎ−ＦＲＥＴサンプルベクトルから、前記自家蛍光キャリブレーションで求められた前記自家蛍光の情報をベクトルで表した自家蛍光ベクトルを減算し、この減算で得られたベクトルと、前記記憶手段に予め記憶された前記第１の強度比率と、前記第１分子蛍光成分の位相情報と、前記記憶手段に予め記憶された前記第２の強度比率と、前記第２分子蛍光成分の位相情報と、を用いて前記直接励起蛍光成分ベクトルを導出し、導出した結果を前記記憶手段に記憶することが好ましい。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
また、前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、第１分子キャリブレーションによって得られた情報を前記記憶手段から呼び出して取得し、前記第１分子キャリブレーションでは、前記第１分子のみで標識された第１分子サンプルを測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記第１分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集して、前記第１分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、前記第１の強度比率として、前記第１分子サンプルの、前記受光波長帯域の蛍光強度の比を求め、求めた前記第１の強度比率と求めた前記位相情報とを前記記憶手段に記憶することが好ましい。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
また、前記第１分子サンプルは、前記レーザ光によって励起されて自家蛍光を発する自家蛍光サンプル体に、前記第１分子で標識されたサンプルであって、前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、自家蛍光キャリブレーションによって得られた情報を前記記憶手段から呼び出して取得し、前記自家蛍光キャリブレーションは、前記第１分子キャリブレーションに先がけて行われるキャリブレーションであって、前記自家蛍光サンプル体を測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記受光波長帯域毎に蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集して、前記自家蛍光サンプル体の蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた情報を前記記憶手段に記憶し、前記第１分子キャリブレーションでは、前記第１分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報をベクトルで表した第１分子サンプルベクトルから、前記自家蛍光キャリブレーションで求められた前記自家蛍光サンプル体の蛍光の情報をベクトルで表した自家蛍光ベクトルを減算し、この減算で得られたベクトルを用いて、前記第１分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた情報を前記記憶手段に記憶することが好ましい。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
また、前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、第２分子キャリブレーションによって得られた情報を前記記憶手段から呼び出して取得し、前記第２分子キャリブレーションでは、前記第２分子のみで標識された第２分子サンプルを測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記第２分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集して、前記第２分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、前記第２の強度比率として、前記第２分子サンプルの、前記受光波長帯域の蛍光強度の比を求め、求めた前記第２の強度比率および求めた前記位相情報を前記記憶手段に記憶することが好ましい。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
また、前記第２分子サンプルは、前記レーザ光によって励起されて自家蛍光を発する自家蛍光サンプル体に、前記第２分子で標識されたサンプルであって、前記キャリブレーション情報を取得するステップでは、自家蛍光キャリブレーションによって得られた情報を前記記憶手段から呼び出して取得し、前記自家蛍光キャリブレーションは、前記第２分子キャリブレーションに先がけて行われるキャリブレーションであって、前記自家蛍光サンプル体を測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記受光波長帯域毎に蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集して、前記自家蛍光サンプル体の蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた情報を前記記憶手段に記憶し、前記第２分子キャリブレーションでは、前記第２分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報をベクトルで表した第２分子サンプルベクトルから、前記自家蛍光サンプル体キャリブレーションで求められた前記自家蛍光サンプルの蛍光の情報をベクトルで表した自家蛍光ベクトルを減算し、この減算で得られたベクトルを用いて、前記第２分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた情報を前記記憶手段に記憶することが好ましい。
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
本発明は、また、第１分子および第２分子で標識された測定対象サンプルにレーザ光を照射し、このとき測定対象サンプルが発する蛍光を受光することによって、第１分子のエネルギーが第２分子に移動するＦＲＥＴ(Fluorescence Resonance Energy Transfer)を検出するＦＲＥＴ検出装置であって、レーザ光の強度を所定の周波数で時間変調して前記測定対象サンプルについて照射し、このときの前記測定対象サンプルの蛍光を受光波長帯域の異なる複数の検出センサで受光することにより、前記測定対象サンプルの蛍光の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を取得する検出情報取得部と、前記測定対象サンプルの前記蛍光のうち前記第１分子が発する第１分子蛍光成分の、前記受光波長帯域の蛍光強度の比を表す第１の強度比率と、前記第１分子蛍光成分の位相情報と、前記第２分子が発する第２分子蛍光成分の、前記受光波長帯域の蛍光強度の比を表す第２の強度比率と、前記第２分子蛍光成分の位相情報と、レーザ光によって励起された第１分子が発する蛍光が１次遅れ系の緩和応答であるとしたときに定義される寿命であって、前記ＦＲＥＴが発生しない状態における前記第１分子蛍光成分の非ＦＲＥＴ蛍光寿命と、を少なくとも含むキャリブレーション情報を予め記憶しておく記憶手段と、前記検出情報取得部が取得した前記検出値から、前記受光波長帯域それぞれについて、前記測定対象サンプルの蛍光の蛍光強度情報および位相情報を求めて、求めた前記蛍光強度情報および前記位相情報と、前記記憶手段から読み出した前記第１の強度比率と、前記第１分子蛍光成分の前記位相情報と、前記第２の強度比率と、前記第２分子蛍光成分の前記位相情報と、を用いて、レーザ光によって励起された第１分子が発する蛍光が１次遅れ系の緩和応答であるとしたときに定義される前記第１分子蛍光成分のＦＲＥＴ蛍光寿命を求めるＦＲＥＴ蛍光寿命算出部と、前記第１分子蛍光成分のＦＲＥＴ蛍光寿命と、前記第１分子蛍光成分の前記非ＦＲＥＴ蛍光寿命との比を用いて表されるＦＲＥＴ発生情報を求めるＦＲＥＴ発生情報算出部と、を有することを特徴とするＦＲＥＴ検出装置を、併せて提供する。
【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
なお、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命算出部では、前記検出値それぞれから求めた前記蛍光強度および位相情報をベクトルで表し、それぞれのベクトルと、前記第１の強度比率と、前記第１分子蛍光成分の前記位相情報と、前記第２分子蛍光成分の前記第２の強度比率と、前記第２分子蛍光成分の前記位相情報とを用いて、ＦＲＥＴが生じた状態における前記第１分子蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報と、前記第２分子蛍光成分のうちＦＲＥＴが生じることで発するＦＲＥＴ成分の蛍光強度情報および位相情報とを求め、求めたこれらの情報を用いて、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めることが好ましい。
【手続補正１９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
また、前記センサの各受光波長帯域は、前記第１分子蛍光成分の蛍光強度が最大となるピーク波長を中心とした第１波長帯域と、前記第２分子蛍光成分の蛍光強度が最大となるピーク波長を中心とした第２波長帯域であり、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命算出部では、前記第１波長帯域の検出センサによる前記検出値から求められる第１波長帯域におけるベクトルと、前記第２の強度比率とを少なくとも用いて、前記ＦＲＥＴが生じた状態における前記第１分子蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報を求め、前記第２波長帯域の前記検出センサによる前記検出値によって表される第２波長帯域におけるベクトルと、前記第１の強度比率とを少なくとも用いて、前記ＦＲＥＴ成分の蛍光強度情報および位相情報を求めることが好ましい。
【手続補正２０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
また、前記ＦＲＥＴ検出装置は、さらに、自家蛍光キャリブレーション部を有し、前記自家蛍光キャリブレーション部は、前記レーザ光によって励起されて自家蛍光を発する自家蛍光を測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、前記検出センサそれぞれから、前記受光波長帯域の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集し、前記自家蛍光サンプル体の蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求めて、前記記憶手段に記憶し、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命算出部では、前記受光波長帯域毎の前記測定対象サンプルの蛍光の情報をベクトルで表し、このベクトルから、前記自家蛍光サンプル体の前記蛍光強度情報および前記位相情報を表したベクトルを減算し、減算して得られたベクトルを用いて、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めることが好ましい。
【手続補正２１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
また、前記ＦＲＥＴ検出装置は、さらに、ｎｏｎ−ＦＲＥＴキャリブレーション部を有し、前記ｎｏｎ−ＦＲＥＴキャリブレーション部は、前記第１分子および前記第２分子がサンプルに付着されて、ＦＲＥＴが生じない処理がなされたｎｏｎ−ＦＲＥＴサンプルを測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集した際、前記ｎｏｎ−ＦＲＥＴサンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、求めた蛍光強度情報および位相情報と、前記第１の強度比率と、前記第１分子蛍光成分の前記位相情報と、前記第２の強度比率と、前記第２分子蛍光成分の前記位相情報と、を用いて、前記レーザ光によって第２分子が直接励起されることで発生する直接励起蛍光成分の蛍光強度情報および位相情報を求め、これらの情報をベクトルで表した直接励起蛍光成分ベクトルを導出し、この導出結果を前記記憶手段に記憶し、前記ＦＲＥＴ蛍光寿命算出部は、前記直接励起蛍光成分ベクトルを用いて前記ＦＲＥＴ蛍光寿命を求めることが好ましい。
【手続補正２２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
また、前記ＦＲＥＴ検出装置は、さらに、第１分子キャリブレーション部を有し、前記第１分子キャリブレーション部は、前記第１分子のみで標識された第１分子サンプルを測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記第１分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集した際、前記第１分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、前記第１の強度比率として、前記第１分子サンプルの、前記受光波長帯域の蛍光強度の比を求め、求めた前記第１の強度比率及び求めた前記第１分子サンプルの蛍光の前記位相情報を前記記憶手段に記憶することが好ましい。
【手続補正２３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２８】
また、前記ＦＲＥＴ検出装置は、さらに、第２分子キャリブレーション部を有し、前記第２分子キャリブレーション部は、前記第２分子のみで標識された第２分子サンプルを測定対象物として所定の周波数で時間変調したレーザ光を照射することにより、各検出センサから、前記第２分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集した際、前記第２分子サンプルの蛍光の、前記受光波長帯域毎の蛍光強度情報および位相情報を求め、前記第２の強度比率として、前記第２分子サンプルの、前記受光波長帯域の蛍光強度の比を求め、求めた前記第２の強度比率及び求めた前記第２分子サンプルの蛍光の前記位相情報を前記記憶手段に記憶することが好ましい。