【手続補正書】
【提出日】平成25年7月2日(2013.7.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
宿主細胞において発現される場合、空のウイルスキャプシドを生成し得る構築物であって、該構築物は、
（ｉ）キャプシド前駆タンパク質をコードするヌクレオチド配列；
（ｉｉ）該キャプシド前駆タンパク質を切断し得るプロテアーゼをコードするヌクレオチド配列；および
（ｉｉｉ）該プロテアーゼの発現を制御する制御エレメント
を含み、ここで、該構築物が該宿主細胞に存在する場合、該制御エレメントは、該プロテアーゼを、該キャプシド前駆タンパク質を切断するのに十分であるが、該宿主細胞において顕著な毒性を誘導するには十分ではないレベルで発現させる、構築物。
【請求項２】
前記制御エレメントは、レトロウイルスに由来し得る、請求項１に記載の構築物。
【請求項３】
前記制御エレメントは、レトロウイルスフレームシフト部位である、請求項２に記載の構築物。
【請求項４】
前記制御エレメントは、ＨＩＶ−１フレームシフト部位である、請求項３に記載の構築物。
【請求項５】
前記フレームシフト部位は、前記キャプシド前駆タンパク質をコードするヌクレオチド配列と前記プロテアーゼをコードするヌクレオチド配列との間に位置し、ここで、
前記構築物が翻訳されるとき：
リボソームがフレームシフトを受けない場合、該構築物は、該キャプシド前駆タンパク質を含むが該プロテアーゼを含まない短縮型生成物を生成する；
しかしリボソームがフレームシフトを受ける場合、該キャプシド前駆タンパク質および該プロテアーゼの両方が翻訳される、
請求項３または４に記載の構築物。
【請求項６】
前記制御エレメントは、翻訳されるｍＲＮＡのうちの約５％においてフレームシフトを引き起こす、請求項３〜５のいずれかに記載の構築物。
【請求項７】
前記プロテアーゼは、該プロテアーゼのキャプシド前駆タンパク質切断活性を低下させる少なくとも１個の変異を含む、請求項１〜６のいずれかに記載の構築物。
【請求項８】
変異体である前記プロテアーゼは、野生型プロテアーゼの約３分の１のキャプシド前駆タンパク質切断活性を有する、請求項７に記載の構築物。
【請求項９】
宿主細胞において発現される場合、空のピコルナウイルスキャプシドを生成し得る、請求項１〜８のいずれかに記載の構築物。
【請求項１０】
宿主細胞において発現される場合、空の口蹄疫ウイルス（ＦＭＤＶ）キャプシドを生成し得る、請求項９に記載の構築物。
【請求項１１】
前記キャプシド前駆タンパク質は、Ｐ１であり、前記プロテアーゼは、３Ｃである、請求項１０に記載の構築物。
【請求項１２】
Ｃｙｓ１４２において変異を有する変異体の３Ｃプロテアーゼを含む、請求項１１に記載の構築物。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれかに記載の構築物を含むベクター。
【請求項１４】
バキュロウイルス移入ベクター；ＤＮＡベクター、プラスミドもしくはウイルスベクターである、請求項１３に記載のベクター。
【請求項１５】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の構築物を含む、宿主細胞。
【請求項１６】
請求項１３または１４に記載のベクターを生成し得る、請求項１５に記載の宿主細胞。
【請求項１７】
空のウイルスキャプシドを生成し得る、請求項１５に記載の宿主細胞。
【請求項１８】
昆虫細胞もしくは哺乳動物細胞である、請求項１６または１７に記載の宿主細胞。
【請求項１９】
空のウイルスキャプシドを生成するための方法であって、該方法は、以下：
（ｉ）宿主細胞において請求項１〜１２のいずれかに記載の構築物を発現させる工程；および
（ｉｉ）該宿主細胞によって生成される空のウイルスキャプシドを採取する工程、
を包含する、方法。
【請求項２０】
ワクチンを生成するための方法であって、該方法は、請求項１９に記載の方法によって空のウイルスキャプシドを生成する工程、および該空のウイルスキャプシドをワクチンに組み込む工程を包含する、方法。
【請求項２１】
被験体における疾患を処置および／もしくは予防するための組成物であって、該組成物は、請求項１〜１２のいずれかに記載の構築物を含み、ここで、該被験体において該構築物が発現された場合、空のキャプシドがインビボで生成される、組成物。
【請求項２２】
前記組成物は、ＤＮＡワクチン接種によって、もしくはウイルスベクターを使用することによって、前記構築物が前記被験体に投与されるように投与されることを特徴とする、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
疾患の予防および／もしくは処置において使用するための組成物であって、請求項１〜１２のいずれかに記載の構築物、あるいは請求項１３または１４に記載のベクターを含む組成物。
【請求項２４】
疾患の予防および／もしくは処置のための医薬の製造における、請求項１〜１２のいずれかに記載の構築物あるいは請求項１３または１４に記載のベクターの使用。
【請求項２５】
ピコルナウイルスタンパク質の発現を制御するための、レトロウイルス制御エレメントの使用。
【請求項２６】
レトロウイルス制御エレメントの制御下でピコルナウイルスタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む構築物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
「空のキャプシド」ベースのワクチンは、伝統的な不活性化完全病原体ワクチン（例えば、ＦＭＤに関する）より有利である。なぜなら、それは、製造のために高い安全性の封じ込め施設を必要とせず、従って、ウイルスが「漏れ出る」いかなるリスクをも軽減するからである。上記ワクチンはまた、非感染性であり、取り扱いやすく、（本発明に鑑みれば）調製するのに容易かつ安価である。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
宿主細胞において発現される場合、空のウイルスキャプシドを生成し得る構築物であって、該構築物は、
（ｉ）キャプシド前駆タンパク質をコードするヌクレオチド配列；
（ｉｉ）該キャプシド前駆タンパク質を切断し得るプロテアーゼをコードするヌクレオチド配列；および
（ｉｉｉ）該プロテアーゼの発現を制御する制御エレメント
を含み、ここで、該構築物が該宿主細胞において発現される場合、該制御エレメントは、該プロテアーゼを、該キャプシド前駆タンパク質を切断するのに十分であるが、該宿主細胞において顕著な毒性を誘導するには十分ではないレベルで発現させる、構築物。
（項目２）
前記制御エレメントは、レトロウイルスに由来し得る、項目１に記載の構築物。
（項目３）
前記制御エレメントは、レトロウイルスフレームシフト部位である、項目２に記載の構築物。
（項目４）
前記制御エレメントは、前記ＨＩＶ−１フレームシフト部位である、項目３に記載の構築物。
（項目５）
前記フレームシフト部位は、前記キャプシド前駆タンパク質をコードするヌクレオチド配列と前記プロテアーゼをコードするヌクレオチド配列との間に位置し、ここで、
前記構築物が翻訳されるとき：
リボソームがフレームシフトを受けない場合、該構築物は、該キャプシド前駆タンパク質を含むが該プロテアーゼを含まない短縮型生成物を生成する；
しかしリボソームがフレームシフトを受ける場合、該キャプシド前駆タンパク質および該プロテアーゼの両方が翻訳される、
項目３または４に記載の構築物。
（項目６）
前記制御エレメントは、翻訳されるｍＲＮＡのうちの約５％においてフレームシフトを引き起こす、項目３〜５のいずれかに記載の構築物。
（項目７）
前記プロテアーゼは、該プロテアーゼのキャプシド前駆タンパク質切断活性を低下させる少なくとも１個の変異を含む、前述の項目のいずれかに記載の構築物。
（項目８）
変異体である前記プロテアーゼは、野生型プロテアーゼの約３分の１のキャプシド前駆タンパク質切断活性を有する、項目７に記載の構築物。
（項目９）
宿主細胞において発現される場合、空のピコルナウイルスキャプシドを生成し得る、前述の項目のいずれかに記載の構築物。
（項目１０）
宿主細胞において発現される場合、空の口蹄疫ウイルス（ＦＭＤＶ）キャプシドを生成し得る、項目９に記載の構築物。
（項目１１）
前記キャプシド前駆タンパク質は、Ｐ１であり、前記プロテアーゼは、３Ｃである、項目１０に記載の構築物。
（項目１２）
Ｃｙｓ１４２において変異を有する変異体の３Ｃプロテアーゼを含む、項目１１に記載の構築物。
（項目１３）
前述の項目のいずれかに記載の構築物を含むベクター。
（項目１４）
バキュロウイルス移入ベクター；ＤＮＡベクター、プラスミドもしくはウイルスベクターである、項目１３に記載のベクター。
（項目１５）
項目１〜１２のいずれか１項に記載の構築物を含む、宿主細胞。
（項目１６）
項目１３または１４に記載のベクターを生成し得る、項目１５に記載の宿主細胞。
（項目１７）
空のウイルスキャプシドを生成し得る、項目１５に記載の宿主細胞。
（項目１８）
昆虫細胞もしくは哺乳動物細胞である、項目１６または１７に記載の宿主細胞。
（項目１９）
空のウイルスキャプシドを生成するための方法であって、該方法は、以下：
（ｉ）宿主細胞において項目１〜１２のいずれかに記載の構築物を発現させる工程；および
（ｉｉ）該宿主細胞によって生成される空のウイルスキャプシドを採取する工程、
を包含する、方法。
（項目２０）
ワクチンを生成するための方法であって、該方法は、項目１９に記載の方法によって空のウイルスキャプシドを生成する工程、および該空のウイルスキャプシドをワクチンに組み込む工程を包含する、方法。
（項目２１）
被験体における疾患を処置および／もしくは予防するための方法であって、該方法は、空のキャプシドがインビボで生成されるように、項目１〜１２のいずれかに記載の構築物を該被験体において発現させる工程を包含する、方法。
（項目２２）
前記構築物は、ＤＮＡワクチン接種によって、もしくはウイルスベクターを使用することによって、前記被験体に投与される、項目２１に記載の方法。
（項目２３）
疾患の予防および／もしくは処置において使用するための、項目１〜１２のいずれかに記載の構築物、項目１３または１４に記載のベクター。
（項目２４）
疾患の予防および／もしくは処置のための医薬の製造における、項目１〜１２のいずれかに記載の構築物あるいは項目１３または１４に記載のベクターの使用。
（項目２５）
ピコルナウイルスタンパク質の発現を制御するための、レトロウイルス制御エレメントの使用。
（項目２６）
レトロウイルス制御エレメントの制御下でピコルナウイルスタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む構築物。