【手続補正書】
【提出日】平成25年9月3日(2013.9.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
SEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基1位〜273位および285位〜394位が除去され、かつSEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基D406、R432、R467、R490、R513、E548、K590およびQ592が独立にアラニン、グリシンまたはセリンで置換されていることを除き、シュードモナス(Pseudomonas)外毒素A (「PE」）アミノ酸配列を含む、単離されたPEであって、任意で、SEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基D403、R412、R427、E431、R458、D461、R505、E522、R538、R551、R576およびL597の1つまたは複数が独立にアラニン、グリシンまたはセリンで置換されている、単離されたPE。
【請求項２】
SEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基D403、R412、R427、E431、R458、D461、R505、E522、R538、R551、R576およびL597の1つまたは複数が独立にアラニン、グリシンまたはセリンで置換されている、請求項1記載のPE。
【請求項３】
SEQ ID NO:2を含む、請求項1記載のPE。
【請求項４】
SEQ ID NO:3を含む、請求項1または請求項3記載のPE。
【請求項５】
(b)SEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基1位〜273位および285位〜394位が除去され、かつSEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基D406、R432、R467、R490、R513、E548、K590およびQ592がアラニン、グリシンまたはセリンで置換されていることを除き、シュードモナス外毒素A (「PE」）アミノ酸配列を含む、PEであって、任意で、SEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基D403、R412、R427、E431、R458、D461、R505、E522、R538、R551、R576およびL597の1つまたは複数が独立にアラニン、グリシンまたはセリンで置換されている、PE
に結合または融合された(a)標的化部分を含む、キメラ分子。
【請求項６】
SEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基D403、R412、R427、E431、R458、D461、R505、E522、R538、R551、R576およびL597の1つまたは複数が独立にアラニン、グリシンまたはセリンで置換されている、請求項5記載のキメラ分子。
【請求項７】
前記PEがSEQ ID NO:2を含む、請求項5記載のキメラ分子。
【請求項８】
前記PEがSEQ ID NO:3を含む、請求項5記載のキメラ分子。
【請求項９】
前記標的化部分が抗体である、請求項5〜8のいずれか一項記載のキメラ分子。
【請求項１０】
前記抗体が、scFv、dsFv、Fab、単一ドメイン抗体およびF(ab')2からなる群より選択される、請求項9記載のキメラ分子。
【請求項１１】
前記抗体が、CD19、CD21、CD22、CD25、CD30、CD33、CD79b、トランスフェリン受容体、EGF受容体、メソテリン、カドヘリンおよびルイスYからなる群より選択される細胞表面抗原に特異的に結合する、請求項9記載のキメラ分子。
【請求項１２】
前記抗体が、B3、RFB4、SS1、MN、HN1、HN2およびHB21からなる群より選択される、請求項9記載のキメラ分子。
【請求項１３】
前記抗体が、3つの相補性決定領域(CDR)を含む可変軽(VL)鎖、および3つのCDRを含む可変重(VH)鎖を含み、ここで
(i) 該VLのCDR1がQDIXXY(SEQ ID NO:4〜8)を含み、XXが、SN、HG、GR、RGおよびARから選択され;
(ii) 該VLのCDR2がYTSを含み;
(iii) 該VLのCDR3がQQGNTLPWT(SEQ ID NO:9)を含み;
(iv) 該VHのCDR1がGFAFSIYD(SEQ ID NO:10)を含み;
(v) 該VHのCDR2がISSGGGTT(SEQ ID NO:11)を含み;および
(vi) 該VHのCDR3がARHSGYGXXXGVLFAY(SEQ ID NO:12〜16)を含み、XXXが、SSY、THW、YNW、TTWおよびSTYから選択される、
請求項9記載のキメラ分子。
【請求項１４】
前記抗体が、3つの相補性決定領域(CDR)を含む可変軽(VL)鎖、および3つのCDRを含む可変重(VH)鎖を含み、ここで
(i) 該VLのCDR1がQDIHGY(SEQ ID NO:5)を含み;
(ii) 該VLのCDR2がYTSを含み;
(iii) 該VLのCDR3がQQGNTLPWT(SEQ ID NO:9)を含み;
(iv) 該VHのCDR1がGFAFSIYD(SEQ ID NO:10)を含み;
(v) 該VHのCDR2がISSGGGTT(SEQ ID NO:11)を含み;および
(vi) 該VHのCDR3がARHSGYGTHWGVLFAY(SEQ ID NO:13)を含む、
請求項9記載のキメラ分子。
【請求項１５】
前記標的化部分がサイトカイン、リンホカインまたは増殖因子である、請求項5〜8のいずれか一項記載のキメラ分子。
【請求項１６】
(a) (ii)SEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基1位〜273位および285位〜394位が除去され、かつSEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基D406、R432、R467、R490、R513、E548、K590およびQ592が独立にアラニン、グリシンまたはセリンで置換されていることを除き、シュードモナス外毒素A (「PE」）アミノ酸配列を含む、PEであって、任意で、SEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基D403、R412、R427、E431、R458、D461、R505、E522、R538、R551、R576およびL597の1つまたは複数が独立にアラニン、グリシンまたはセリンで置換されている、PE
に結合または融合された(i)標的化部分を含む、キメラ分子、ならびに
(b) 薬学的に許容される担体
を含む、組成物。
【請求項１７】
SEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基D403、R412、R427、E431、R458、D461、R505、E522、R538、R551、R576およびL597の1つまたは複数が独立にアラニン、グリシンまたはセリンで置換されている、請求項16記載の組成物。
【請求項１８】
前記PEがSEQ ID NO:2を含む、請求項16記載の組成物。
【請求項１９】
前記PEがSEQ ID NO:3を含む、請求項16記載の組成物。
【請求項２０】
前記標的化部分が抗体である、請求項16〜19のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２１】
前記抗体が、scFv、dsFv、Fab、単一ドメイン抗体およびF(ab')2からなる群より選択される、請求項20記載の組成物。
【請求項２２】
前記抗体が、CD19、CD21、CD22、CD25、CD30、CD33、CD79b、トランスフェリン受容体、EGF受容体、メソテリン、カドヘリンおよびルイスYからなる群より選択される細胞表面抗原に特異的に結合する、請求項20記載の組成物。
【請求項２３】
前記抗体が、B3、RFB4、SS1、HN1、HN2、MNおよびHB21からなる群より選択される、請求項20記載の組成物。
【請求項２４】
前記抗体が、3つの相補性決定領域(CDR)を含む可変軽(VL)鎖、および3つのCDRを含む可変重(VH)鎖を含み、ここで
(i) 該VLのCDR1がQDIXXY(SEQ ID NO:4〜8)を有し、XXが、SN、HG、GR、RGおよびARから選択され;
(ii) 該VLのCDR2がYTSを含み;
(iii) 該VLのCDR3がQQGNTLPWT(SEQ ID NO:9)を含み;
(iv) 該VHのCDR1がGFAFSIYD(SEQ ID NO:10)を含み;
(v) 該VHのCDR2がISSGGGTT(SEQ ID NO:11)を含み;および
(vi) 該VHのCDR3がARHSGYGXXXGVLFAY(SEQ ID NO:12〜16)を含み、XXXが、SSY、THW、YNW、TTWおよびSTYから選択される、
請求項20記載の組成物。
【請求項２５】
前記抗体が、3つの相補性決定領域(CDR)を含む可変軽(VL)鎖、および3つのCDRを含む可変重(VH)鎖を含み、ここで
(i) 該VLのCDR1がQDIHGY(SEQ ID NO:5)を含み;
(ii) 該VLのCDR2がYTSを含み;
(iii) 該VLのCDR3がQQGNTLPWT(SEQ ID NO:9)を含み;
(iv) 該VHのCDR1がGFAFSIYD(SEQ ID NO:10)を含み;
(v) 該VHのCDR2がISSGGGTT(SEQ ID NO:11)を含み;および
(vi) 該VHのCDR3がARHSGYGTHWGVLFAY(SEQ ID NO:13)を含む、
請求項20記載の組成物。
【請求項２６】
前記標的化部分がサイトカイン、リンホカインまたは増殖因子である、請求項16〜19のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２７】
SEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基1位〜273位および285位〜394位が除去され、かつSEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基D406、R432、R467、R490、R513、E548、K590およびQ592が独立にアラニン、グリシンまたはセリンで置換されていることを除き、シュードモナス外毒素A (「PE」）アミノ酸配列を含む、改変型PEであって、任意で、SEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基D403、R412、R427、E431、R458、D461、R505、E522、R538、R551、R576およびL597の1つまたは複数が独立にアラニン、グリシンまたはセリンで置換されている、改変型PE
をコードする単離された核酸。
【請求項２８】
SEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基D403、R412、R427、E431、R458、D461、R505、E522、R538、R551、R576およびL597の1つまたは複数が独立にアラニン、グリシンまたはセリンで置換されている、請求項27記載の単離された核酸。
【請求項２９】
前記PEがSEQ ID NO:2を含む、請求項27記載の単離された核酸。
【請求項３０】
前記PEがSEQ ID NO:3を含む、請求項27記載の単離された核酸。
【請求項３１】
標的化部分をさらにコードする、請求項27〜30のいずれか一項記載の単離された核酸。
【請求項３２】
前記標的化部分が抗体である、請求項31記載の単離された核酸。
【請求項３３】
前記抗体が、scFv、dsFv、Fab、単一ドメイン抗体およびF(ab')2からなる群より選択される、請求項32記載の単離された核酸。
【請求項３４】
前記抗体が、CD19、CD21、CD22、CD25、CD30、CD33、CD79b、トランスフェリン受容体、EGF受容体、メソテリン、カドヘリンおよびルイスYからなる群より選択される細胞表面抗原に特異的に結合する、請求項32記載の単離された核酸。
【請求項３５】
前記抗体が、B3、RFB4、SS1、HN1、HN2、MNおよびHB21からなる群より選択される、請求項32記載の単離された核酸。
【請求項３６】
前記抗体が、3つの相補性決定領域(CDR)を含む可変軽(VL)鎖、および3つのCDRを含む可変重(VH)鎖を含み、ここで
(i) 該VLのCDR1がQDIXXY(SEQ ID NO:4〜8)を含み、XXが、SN、HG、GR、RGおよびARから選択され;
(ii) 該VLのCDR2がYTSを含み;
(iii) 該VLのCDR3がQQGNTLPWT(SEQ ID NO:9)を含み;
(iv) 該VHのCDR1がGFAFSIYD(SEQ ID NO:10)を含み;
(v) 該VHのCDR2がISSGGGTT(SEQ ID NO:11)を含み;および
(vi) 該VHのCDR3がARHSGYGXXXGVLFAY(SEQ ID NO:12〜16)を含み、XXXが、SSY、THW、YNW、TTWおよびSTYから選択される、
請求項32記載の単離された核酸。
【請求項３７】
前記抗体が、3つの相補性決定領域(CDR)を含む可変軽(VL)鎖、および3つのCDRを含む可変重(VH)鎖を含み、ここで
(i) 該VLのCDR1がQDIHGY(SEQ ID NO:5)を含み;
(ii) 該VLのCDR2がYTSを含み;
(iii) 該VLのCDR3がQQGNTLPWT(SEQ ID NO:9)を含み;
(iv) 該VHのCDR1がGFAFSIYD(SEQ ID NO:10)を含み;
(v) 該VHのCDR2がISSGGGTT(SEQ ID NO:11)を含み;および
(vi) 該VHのCDR3がARHSGYGTHWGVLFAY(SEQ ID NO:13)を含む、
請求項32記載の単離された核酸。
【請求項３８】
前記標的化部分がサイトカイン、リンホカインまたは増殖因子である、請求項31記載の単離された核酸。
【請求項３９】
標的分子を持つ細胞の増殖を阻害するためのキメラ分子であって、
(a) 該標的分子に特異的に結合する、標的化部分、ならびに
(b) SEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基1位〜273位および285位〜394位が除去され、かつSEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基D406、R432、R467、R490、R513、E548、K590およびQ592が独立にアラニン、グリシンまたはセリンで置換されていることを除き、シュードモナス外毒素A (「PE」）アミノ酸配列を含む、PEであって、任意で、SEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基D403、R412、R427、E431、R458、D461、R505、E522、R538、R551、R576およびL597の1つまたは複数が独立にアラニン、グリシンまたはセリンで置換されている、PE 
を含む、キメラ分子。
【請求項４０】
SEQ ID NO:1に規定されるアミノ酸残基D403、R412、R427、E431、R458、D461、R505、E522、R538、R551、R576およびL597が独立にアラニン、グリシンまたはセリンで置換されている、請求項39記載のキメラ分子。
【請求項４１】
前記PEがSEQ ID NO:2を含む、請求項39記載のキメラ分子。
【請求項４２】
前記PEがSEQ ID NO:3を含む、請求項39記載のキメラ分子。
【請求項４３】
前記標的化部分が抗体である、請求項39〜42のいずれか一項記載のキメラ分子。
【請求項４４】
前記抗体が、scFv、dsFv、Fab、単一ドメイン抗体およびF(ab')2からなる群より選択される、請求項43記載のキメラ分子。
【請求項４５】
前記抗体が、CD19、CD21、CD22、CD25、CD30、CD33、CD79b、トランスフェリン受容体、EGF受容体、メソテリン、カドヘリンおよびルイスYからなる群より選択される細胞表面抗原に特異的に結合する、請求項43記載のキメラ分子。
【請求項４６】
前記抗体が、B3、RFB4、SS1、HN1、HN2、MNおよびHB21からなる群より選択される、請求項43記載のキメラ分子。
【請求項４７】
前記抗体が、3つの相補性決定領域(CDR)を含む可変軽(VL)鎖、および3つのCDRを含む可変重(VH)鎖を含み、ここで
(i) 該VLのCDR1がQDIXXY(SEQ ID NO:4〜8)を含み、XXが、SN、HG、GR、RGおよびARから選択され;
(ii) 該VLのCDR2がYTSを含み;
(iii) 該VLのCDR3がQQGNTLPWT(SEQ ID NO:9)を含み;
(iv) 該VHのCDR1がGFAFSIYD(SEQ ID NO:10)を含み;
(v) 該VHのCDR2がISSGGGTT(SEQ ID NO:11)を含み;および
(vi) 該VHのCDR3がARHSGYGXXXGVLFAY(SEQ ID NO:12〜16)を含み、XXXが、SSY、THW、YNW、TTWおよびSTYから選択される、
請求項43記載のキメラ分子。
【請求項４８】
前記抗体が、3つの相補性決定領域(CDR)を含む可変軽(VL)鎖、および3つのCDRを含む可変重(VH)鎖を含み、ここで
(i) 該VLのCDR1がQDIHGY(SEQ ID NO:5)を含み;
(ii) 該VLのCDR2がYTSを有し;
(iii) 該VLのCDR3がQQGNTLPWT(SEQ ID NO:9)を含み;
(iv) 該VHのCDR1がGFAFSIYD(SEQ ID NO:10)を含み;
(v) 該VHのCDR2がISSGGGTT(SEQ ID NO:11)を含み;および
(vi) 該VHのCDR3がARHSGYGTHWGVLFAY(SEQ ID NO:13)を含む、
請求項43記載のキメラ分子。
【請求項４９】
前記標的化部分がサイトカイン、リンホカインまたは増殖因子である、請求項39〜42のいずれか一項記載のキメラ分子。