【手続補正書】
【提出日】平成25年1月8日(2013.1.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
代謝的に活性な、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種スポロゾイトの実質的に精製された調製物。
【請求項２】
２５，０００スポロゾイトあたり８５ナノグラム未満の付随材料、２５，０００スポロゾイトあたり１５ナノグラム未満の付随材料、２５，０００スポロゾイトあたり１ナノグラム未満の付随材料、または２５，０００スポロゾイトあたり０．１２ナノグラム未満の付随材料を含む、請求項１に記載の精製された調製物。
【請求項３】
前記スポロゾイトが、唾液腺材料の精製前調製物から精製されており、ここで、付随材料の少なくとも９８％が、前記精製前調製物から除去されているか、付随材料の少なくとも９９．９％が、前記精製前調製物から除去されているか、または付随材料の少なくとも９９．９７％が、前記精製前調製物から除去されている、請求項１または２に記載の精製された調製物。
【請求項４】
無菌的に調製されている、請求項１〜３のいずれかに記載の精製された調製物。
【請求項５】
前記スポロゾイトが、一つ以上の導入遺伝子を含む、請求項１〜４のいずれかに記載の精製された調製物。
【請求項６】
前記Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種スポロゾイトの種が、Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ、Ｐ．ｖｉｖａｘ、Ｐ．ｍａｌａｒｉａｅ、Ｐ．ｋｎｏｗｌｅｓｉおよびＰ．ｏｖａｌｅからなる群より選択される、請求項１〜５のいずれかに記載の精製された調製物。
【請求項７】
前記スポロゾイトが、宿主の感染後に前記寄生虫がマラリアの疾患病状をもたらすことができないように、十分に弱毒化されており、前記弱毒化が、遺伝性遺伝子改変もしくは遺伝子変異の導入により、または放射線曝露、化学物質暴露、もしくは環境曝露により、確立される、請求項１〜６のいずれかに記載の精製された調製物。
【請求項８】
前記弱毒化が、放射線曝露により確立され、前記放射線曝露が、少なくとも１００Ｇｙであるが、１０００Ｇｙを超えない照射であるか、または前記放射線曝露が、約１５０Ｇｙである、請求項７に記載の精製された調製物。
【請求項９】
ヒト宿主または他の哺乳動物宿主においてＰｌａｓｍｏｄｉｕｍ種寄生虫感染により誘導されるマラリアに対する防御免疫を付与するのに使用するための請求項７または８に記載の精製された調製物を含む組成物であって、前記精製された調製物は、無菌的に調製されており、前記Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種の病原性寄生虫への後の曝露時に、前記マラリアの病理学的発現が前記宿主において防止され、前記組成物の少なくとも一用量が投与されるものであることを特徴とする、組成物。
【請求項１０】
少なくとも二用量または少なくとも三用量の前記組成物が投与されるものであることを特徴とする、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
ヒト宿主または他の哺乳動物宿主において、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種寄生虫により誘導されるマラリアに対する防御免疫を付与するのに使用するための請求項１〜６のいずれかに記載の精製された調製物を含む組成物であって、前記組成物の少なくとも一用量が、抗マラリア剤と組み合わされて投与されるものであることを特徴とし、防御免疫が、前記ヒト宿主または他の哺乳動物宿主において付与される、組成物。
【請求項１２】
前記抗マラリア剤が、クロロキンである、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
代謝的に活性なＰｌａｓｍｏｄｉｕｍスポロゾイトの種の精製のための方法であって、前記方法は、
ａ．Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍスポロゾイトと付随非スポロゾイト材料とを含む、水性精製前調製物を提供するステップと；
ｂ．
ｉ）１０ミクロンより大きい付随材料を保持するが、前記スポロゾイトの通過を許容することができる孔径の、第一排除フィルタと；
ｉｉ）約１．２ミクロンより大きい付随材料を保持するが、前記スポロゾイトの通過を許容することができる孔径の、第二排除フィルタと；
ｉｉｉ）１．２ミクロンまたはそれより小さな材料を通過させ、前記スポロゾイトの通過を許容することができる孔径の、第三メンブレンフィルタと；
を含む、一組のサイズ排除フィルタに、前記水性精製前調製物を順次通すステップと；
ｃ．前記スポロゾイトを保持することができる孔径の収集フィルタに、全量濾過により、前記精製されたスポロゾイト調製物を収集するステップと；
ｄ．前記精製されたスポロゾイト調製物を、前記収集フィルタから取り出すステップであって、前記精製されたスポロゾイト調製物が、実質的に精製されたＰｌａｓｍｏｄｉｕｍ種スポロゾイトを含むステップと
を含む、方法。
【請求項１４】
前記精製前調製物が、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍに感染したＡｎｏｐｈｅｌｅｓ蚊の唾液腺に由来する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記第一フィルタ、前記第二フィルタ、および前記第三フィルタがシステムにおいて順次接続され、前記スポロゾイトがある流量で前記フィルタを横断して通過する、請求項１３または１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記システムが、少なくとも３Ｌ／時／ｍ２であるが１５００Ｌ／時／ｍ２を超えないか、または、少なくとも１２５Ｌ／時／ｍ２であるが２５０Ｌ／時／ｍ２を超えない、流量を有する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記第一排除フィルタが、少なくとも２．５ミクロンであるが３０ミクロンを超えない公称孔径、または１０ミクロンの公称孔径を有する、請求項１３〜１６のいずれかに記載の方法。
【請求項１８】
前記第二排除フィルタが、少なくとも０．３ミクロンであるが１．２ミクロンを超えない公称孔径、または０．６ミクロンの公称孔径を有する、請求項１３〜１７のいずれかに記載の方法。
【請求項１９】
前記第三フィルタが、少なくとも１．２ミクロンであるが３ミクロンを超えない孔径、または１．２ミクロンの孔径を有する、請求項１３〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】
前記収集フィルタが、０．４ミクロンの孔径を有する、請求項１３〜１９のいずれかに記載の方法。
【請求項２１】
前記精製されたスポロゾイト調製物が、２５，０００スポロゾイトあたり８５ナノグラム未満の付随材料、２５，０００スポロゾイトあたり１５ナノグラム未満の付随材料、２５，０００スポロゾイトあたり１ナノグラム未満の付随材料、または２５，０００スポロゾイトあたり０．１２ナノグラム未満の付随材料を含む、請求項１３〜２０のいずれかに記載の方法。
【請求項２２】
付随材料の少なくとも９８％が前記精製前調製物から除去されているか、付随材料の少なくとも９９．９％が、前記精製前調製物から除去されているか、または付随材料の少なくとも９９．９７％が、前記精製前調製物から除去されている、請求項１３〜２１のいずれかに記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
別の実施形態では、マラリア関連薬物、ワクチンなどの効能を決定するのに有用な組成物が提供される。本組成物は、生きた実質的に精製された病原性Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫を含む。
本発明の好ましい実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種寄生虫の実質的に精製された調製物。
（項目２）
前記寄生虫が、代謝的に活性である、項目１に記載の調製物。
（項目３）
前記寄生虫が、感染性スポロゾイトである、項目２に記載の調製物。
（項目４）
賦形剤をさらに含む、項目３に記載の調製物。
（項目５）
前記Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種が、Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍである、項目４に記載の調製物。
（項目６）
前記賦形剤が、ヒト血清アルブミンを含む、項目４に記載の調製物。
（項目７）
前記スポロゾイトが、蚊から精製される、項目４に記載の調製物。
（項目８）
前記スポロゾイトが、唾液腺材料の精製前調製物から精製される、項目７に記載の調製物。
（項目９）
前記スポロゾイトが、宿主の感染後に前記寄生虫がマラリアの疾患病状をもたらすことができないように、十分に弱毒化される、項目４に記載の調製物。
（項目１０）
前記スポロゾイトが、一つ以上の導入遺伝子を含む、項目４に記載の調製物。
（項目１１）
前記スポロゾイトの種が、Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍである、項目１０に記載の調製物。
（項目１２）
２５，０００スポロゾイトあたり１５ナノグラム未満の付随材料を含む、項目４に記載の調製物。
（項目１３）
２５，０００スポロゾイトあたり１ナノグラム未満の付随材料を含む、項目１２に記載の調製物。
（項目１４）
２５，０００スポロゾイトあたり０．１２ナノグラム未満の付随材料を含む、項目１２に記載の調製物。
（項目１５）
付随材料の少なくとも９８％が、前記精製前材料から除去されている、項目８に記載の調製物。
（項目１６）
付随材料の少なくとも９９．９％が、前記精製前材料から除去されている、項目８に記載の調製物。
（項目１７）
付随材料の少なくとも９９．９７％が、前記精製前材料から除去されている、項目８に記載の調製物。
（項目１８）
前記弱毒化が、遺伝性遺伝子改変もしくは遺伝子変異の導入により、または放射線曝露、化学物質暴露、もしくは環境曝露により、確立される、項目９に記載の調製物。
（項目１９）
前記弱毒化が、放射線曝露により確立される、項目１８に記載の調製物。
（項目２０）
前記放射線曝露が、少なくとも１００Ｇｙであるが、１０００Ｇｙを超えない照射である、項目１９に記載の調製物。
（項目２１）
前記曝露が、１５０Ｇｙである、項目２０に記載の調製物。
（項目２２）
無菌的に調製され、汚染を伴わない、項目１２に記載の調製物。
（項目２３）
ヒト宿主または他の哺乳動物宿主においてＰｌａｓｍｏｄｉｕｍ種寄生虫により誘導されるマラリアに対する防御免疫を付与する方法であり、前記方法は、前記Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種の代謝的に活性の弱毒化スポロゾイトの実質的に精製された調製物の少なくとも一用量の投与を含み、前記Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種の病原性寄生虫への後の曝露時に、前記マラリアの病理学的発現が前記宿主において防止される、方法。
（項目２４）
前記調製物が、賦形剤をさらに含む、項目２３に記載の方法。
（項目２５）
前記賦形剤が、ヒト血清アルブミンを含む、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
少なくとも二用量の前記調製物の投与を含む、項目２３に記載の方法。
（項目２７）
三以上の用量の前記調製物の投与を含む、項目２６に記載の方法。
（項目２８）
前記弱毒化が、遺伝性遺伝子改変もしくは遺伝子変異の導入により、または放射線曝露、化学物質暴露、もしくは環境曝露により、確立される、項目２３に記載の方法。
（項目２９）
前記弱毒化が、放射線曝露により確立される、項目２８に記載の方法。
（項目３０）
前記Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種が、Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ、Ｐ．ｖｉｖａｘ、Ｐ．ｏｖａｌｅ、Ｐ．ｋｎｏｗｌｅｓｉまたはＰ．ｍａｌａｒｉａｅである、項目２３に記載の方法。
（項目３１）
前記種が、Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍである、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
代謝的に活性のＰｌａｓｍｏｄｉｕｍスポロゾイトの精製のための方法であり、前記方法は、
（ａ）スポロゾイトと付随非スポロゾイト材料とを含む、水性精製前調製物を提供するステップと；
（ｂ）
（ｉ）１０ミクロンより大きい付随材料を保持するが、前記スポロゾイトの通過を許容することができる孔径の、第一排除フィルタと；
（ｉｉ）約１．２ミクロンより大きい付随材料を保持するが、前記スポロゾイトの通過を許容することができる孔径の、第二排除フィルタと；
（ｉｉｉ）１．２ミクロンまたはそれより小さな材料を通過させ、前記スポロゾイトの通過を許容することができる孔径の、第三メンブレンフィルタと；
を含む、一組のサイズ排除フィルタに、前記スポロゾイト調製物を順次通すステップと；
（ｃ）前記スポロゾイトを保持することができる孔径の収集フィルタに、実質的に精製されたスポロゾイトを収集するステップと；
（ｄ）前記回収された実質的に精製されたスポロゾイトを、前記収集フィルタから除去し、これにより、付随非スポロゾイト材料を実質的に伴わない精製スポロゾイト調製物を
生成するステップと
を含む、方法。
（項目３３）
前記第一フィルタ、前記第二フィルタ、および前記第三フィルタがシステムにおいて順次接続され、前記スポロゾイトがある流量で前記フィルタを横断して通過する、項目３２に記載の方法。
（項目３４）
前記システムが、少なくとも３Ｌ／時／ｍ２であるが１５００Ｌ／時／ｍ２を超えない流量を有する、項目３３に記載の方法。
（項目３５）
前記流量が、少なくとも１２５Ｌ／時／ｍ２であるが２５０Ｌ／時／ｍ２を超えない、項目３４に記載の方法。
（項目３６）
前記第一排除フィルタが、１０ミクロンの公称孔径を有する、項目３３に記載の方法。
（項目３７）
前記第二排除フィルタが、０．６ミクロンの公称孔径を有する、項目３３に記載の方法。
（項目３８）
前記第三フィルタが、１．２ミクロンの孔径を有する、項目３３に記載の方法。
（項目３９）
前記収集フィルタが、０．４ミクロンの孔径を有する、項目３３に記載の方法。
（項目４０）
前記精製スポロゾイト調製物中の前記付随非スポロゾイト材料の量が、２５，０００スポロゾイトあたり１５ナノグラム未満である、項目３３に記載の方法。
（項目４１）
前記精製スポロゾイト調製物中の前記付随非スポロゾイト材料の量が、２５，０００スポロゾイトあたり１ナノグラム未満である、項目３３に記載の方法。
（項目４２）
前記精製スポロゾイト調製物中の前記付随非スポロゾイト材料が、２５，０００スポロゾイトあたり０．１２ナノグラム未満である、項目３３に記載の方法。
（項目４３）
前記精製前調製物中の付随材料の少なくとも９８％が除去されている、項目３３に記載の方法。
（項目４４）
前記精製前調製物中の付随材料の少なくとも９９．９％が除去された、項目３３に記載の方法。
（項目４５）
前記精製前調製物中の付随材料の少なくとも９９．９７％が除去される、項目３３に記載の方法。
（項目４６）
ヒト宿主または他の哺乳動物宿主において、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種寄生虫により誘導されるマラリアに対する防御免疫を付与する方法であり、前記方法が、前記Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種の病原性スポロゾイトの実質的に精製された調製物の少なくとも一用量の投与と同時の抗マラリア剤のレジメンの投与を含み、前記Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種の病原性寄生虫に対する後の曝露時に前記宿主において前記マラリアの病理学的発現が防止される、方法。
（項目４７）
前記抗マラリア剤が、クロロキンである、項目４６に記載の方法。