【手続補正書】
【提出日】平成23年12月2日(2011.12.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アミノ酸Ｐ４２７、Ｗ５３５、Ｃ５３０、Ａ２４８、およびＤ４８２からなる群より選択される１つまたは複数のアミノ酸位置にアミノ酸変化を含む精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質であって、該アミノ酸位置が配列番号１に従って番号付けられ、該変異体ＳＬＯタンパク質の溶血活性が野生型ＳＬＯと比較して少なくとも５０％低下している、精製された変異体ＳＬＯタンパク質。
【請求項２】
配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、および配列番号２７からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の精製された変異体ＳＬＯタンパク質。
【請求項３】
担体タンパク質にカップリングされている、請求項１に記載の精製された変異体ＳＬＯタンパク質。
【請求項４】
前記担体タンパク質が、細菌毒素、細菌トキソイド、Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ外膜タンパク質、熱ショックタンパク質、百日咳タンパク質、Ｈ．ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅタンパク質Ｄ、サイトカイン、リンホカイン、ホルモン、成長因子、Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ毒素Ａ、Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ毒素Ｂ、および鉄取り込みタンパク質からなる群より選択される、請求項３に記載の精製された変異体ＳＬＯタンパク質。
【請求項５】
請求項１に記載の変異体ＳＬＯタンパク質をコードする核酸分子。
【請求項６】
前記変異体ＳＬＯタンパク質が配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、および配列番号２７からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項５に記載の核酸分子。
【請求項７】
配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４、配列番号５７、配列番号５８、および配列番号５９に示されたコード配列の群から選択されるヌクレオチド配列を含む、請求項５に記載の核酸分子。
【請求項８】
（ａ）以下：
（ｉ）アミノ酸Ｐ４２７、Ｗ５３５、Ｃ５３０、Ａ２４８、およびＤ４８２からなる群より選択される１つまたは複数のアミノ酸位置にアミノ酸変化を含む精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質であって、該アミノ酸位置が配列番号１に従って番号付けられ、該変異体ＳＬＯタンパク質の溶血活性が野生型ＳＬＯと比較して少なくとも５０％低下している、精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質、ならびに
（ｉｉ）該精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質をコードする核酸分子
から選択される活性剤、ならびに
（ｂ）薬学的に許容可能な担体
を含むワクチン組成物。
【請求項９】
（ｉｉｉ）ＧＡＳ抗原、および
（ｉｖ）ＧＡＳ抗原をコードする核酸分子
からなる群より選択される１つまたは複数の活性剤をさらに含む、請求項８に記載のワクチン組成物。
【請求項１０】
小児用ワクチンで有用な活性剤をさらに含む、請求項８に記載のワクチン組成物。
【請求項１１】
前記活性剤が
（ａ）Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ、Ｃｈｏｒｉｎｅｂａｃｔｅｒｉｍ  ｄｉｐｈｔｅｒｉａｅ、ＲＳウイルス、ポリオウイルス、麻疹ウイルス、ムンプスウイルス、風疹ウイルス、およびロタウイルスのポリペプチド抗原からなる群より選択される病原体のポリペプチド抗原、ならびに
（ｂ）該ポリペプチド抗原をコードする核酸分子
からなる群より選択される、請求項１０に記載のワクチン組成物。
【請求項１２】
高齢者または免疫無防備状態の個体のためのワクチンで有用な第２の活性剤をさらに含む、請求項８に記載のワクチン組成物。
【請求項１３】
前記第２の活性剤が
（ａ）Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ
ａｕｒｅａｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ、インフルエンザウイルス、およびパラインフルエンザウイルスのポリペプチド抗原からなる群より選択される病原体のポリペプチド抗原、ならびに
（ｂ）該ポリペプチド抗原をコードする核酸分子
からなる群より選択される、請求項１２に記載のワクチン組成物。
【請求項１４】
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓによる感染を治療または予防するためのワクチン組成物であって、有効量の
（ａ）以下：
（ｉ）アミノ酸Ｐ４２７、Ｗ５３５、Ｃ５３０、Ａ２４８、およびＤ４８２からなる群より選択される１つまたは複数のアミノ酸位置にアミノ酸変化を含む精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質であって、該アミノ酸位置が配列番号１に従って番号付けられ、該変異体ＳＬＯタンパク質の溶血活性が野生型ＳＬＯと比較して少なくとも５０％低下している、精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質、および
（ｉｉ）該精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質をコードする核酸分子
から選択される活性剤、ならびに
（ｂ）薬学的に許容可能な担体
を含むワクチン組成物。
【請求項１５】
（ｉｉｉ）ＧＡＳ抗原、および
（ｉｖ）ＧＡＳ抗原をコードする核酸分子
からなる群より選択される１つまたは複数の活性剤をさらに含む、請求項１４に記載のワクチン組成物。
【請求項１６】
（ａ）請求項８から１３のいずれか一項に記載のワクチン組成物を含む容器、および
（ｂ）該組成物を用いてＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓによる感染を治療または予防するための使用説明書
を含むキット。
【請求項１７】
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓによる感染の予防または治療のためのワクチンを作製する方法であって、
（ａ）以下：
（ｉ）アミノ酸Ｐ４２７、Ｗ５３５、Ｃ５３０、Ａ２４８、およびＤ４８２からなる群より選択される１つまたは複数のアミノ酸位置にアミノ酸変化を含む精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質であって、該アミノ酸位置が配列番号１に従って番号付けられ、該変異体ＳＬＯタンパク質の溶血活性が野生型ＳＬＯと比較して少なくとも５０％低下している、精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質、ならびに
（ｉｉ）該精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質をコードする核酸分子
から選択される活性剤と、
（ｂ）薬学的に許容可能な担体と、
を組み合わせる工程を含む、方法。
【請求項１８】
前記活性剤が前記精製された変異体ＳＬＯタンパク質であり、該変異体ＳＬＯタンパク質を：
（ａ）該変異体ＳＬＯタンパク質をコードする発現構築物を含む宿主細胞を培養する工程、および
（ｂ）該変異体ＳＬＯタンパク質を回収する工程
を含む方法によって作製する、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
（ｉｉｉ）ＧＡＳ抗原、および
（ｉｖ）ＧＡＳ抗原をコードする核酸分子
からなる群より選択される１つまたは複数の活性剤を薬学的に許容可能な担体と組み合わせる工程をさらに含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓによる感染を治療または予防するための薬物の製造における活性剤の使用であって、該活性剤が、
（ｉ）アミノ酸Ｐ４２７、Ｗ５３５、Ｃ５３０、Ａ２４８、およびＤ４８２からなる群より選択される１つまたは複数のアミノ酸位置にアミノ酸変化を含む精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質であって、該アミノ酸位置が配列番号１に従って番号付けられ、該変異体ＳＬＯタンパク質の溶血活性が野生型ＳＬＯと比較して少なくとも５０％低下している、精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質、ならびに
（ｉｉ）該精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質をコードする核酸分子
からなる群より選択される、使用。
【請求項２１】
ワクチンとして使用する、請求項１から４のいずれか一項に記載の精製された変異体ＳＬＯタンパク質、または請求項５から７のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項２２】
治療で使用する、請求項１から４のいずれか一項に記載の精製された変異体ＳＬＯタンパク質、請求項５から７のいずれか一項に記載の核酸分子、または請求項８から１３のいずれか一項に記載のワクチン組成物。
【請求項２３】
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓによる感染を治療または予防するための、請求項１から４のいずれか一項に記載の精製された変異体ＳＬＯタンパク質、請求項５から７のいずれか一項に記載の核酸分子、または請求項８から１３のいずれか一項に記
載のワクチン組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
本発明は、有毒ではないが、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓに対する防御を誘導する能力をなお維持するストレプトリシンＯ（ＳＬＯ；ＧＡＳ２５）の変異体を提供する。変異体形態のＳＬＯは、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓに対する防御を誘導するためのワクチン組成物でとりわけ有用である。
本発明の好ましい実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
アミノ酸Ｐ４２７、Ｗ５３５、Ｃ５３０、Ａ２４８、およびＤ４８２からなる群より選択される１つまたは複数のアミノ酸位置にアミノ酸変化を含む精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質であって、該アミノ酸位置が配列番号１に従って番号付けられ、該変異体ＳＬＯタンパク質の溶血活性が野生型ＳＬＯに対して少なくとも５０％低下している、精製された変異体ＳＬＯタンパク質。
（項目２）
配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、および配列番号２７からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、項目１に記載の精製された変異体ＳＬＯタンパク質。
（項目３）
担体タンパク質にカップリングされている、項目１に記載の精製された変異体ＳＬＯタンパク質。
（項目４）
前記担体タンパク質が、細菌毒素、細菌トキソイド、Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ外膜タンパク質、熱ショックタンパク質、百日咳タンパク質、Ｈ．ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅタンパク質Ｄ、サイトカイン、リンホカイン、ホルモン、成長因子、Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ毒素Ａ、Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ毒素Ｂ、および鉄取り込みタンパク質からなる群より選択される、項目３に記載の精製された変異体ＳＬＯタンパク質。
（項目５）
項目１に記載の変異体ＳＬＯタンパク質をコードする核酸分子。
（項目６）
前記変異体ＳＬＯタンパク質が配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、および配列番号２７からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、項目５に記載の核酸分子。
（項目７）
配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４、配列番号５７、配列番号５８、および配列番号５９に示されたコード配列の群から選択されるヌクレオチド配列を含む、項目５に記載の核酸分子。
（項目８）
（ａ）以下：
（ｉ）アミノ酸Ｐ４２７、Ｗ５３５、Ｃ５３０、Ａ２４８、およびＤ４８２からなる群より選択される１つまたは複数のアミノ酸位置にアミノ酸変化を含む精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質であって、該アミノ酸位置が配列番号１に従って番号付けられ、該変異体ＳＬＯタンパク質の溶血活性が野生型ＳＬＯに対して少なくとも５０％低下している、精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質、ならびに
（ｉｉ）該精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質をコードする核酸分子
から選択される活性剤、ならびに
（ｂ）薬学的に許容可能な担体
を含むワクチン組成物。
（項目９）
（ｉｉｉ）ＧＡＳ抗原、および
（ｉｖ）ＧＡＳ抗原をコードする核酸分子
からなる群より選択される１つまたは複数の活性剤をさらに含む、項目８に記載のワクチン組成物。
（項目１０）
小児用ワクチンで有用な活性剤をさらに含む、項目８に記載のワクチン組成物。
（項目１１）
前記活性剤が
（ａ）Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ、Ｃｈｏｒｉｎｅｂａｃｔｅｒｉｍ  ｄｉｐｈｔｅｒｉａｅ、ＲＳウイルス、ポリオウイルス、麻疹ウイルス、ムンプスウイルス、風疹ウイルス、およびロタウイルスのポリペプチド抗原からなる群より選択される病原体のポリペプチド抗原、ならびに
（ｂ）該ポリペプチド抗原をコードする核酸分子
からなる群より選択される、項目１０に記載のワクチン組成物。
（項目１２）
高齢者または免疫無防備状態の個体のためのワクチンで有用な第２の活性剤をさらに含む、項目８に記載のワクチン組成物。
（項目１３）
前記第２の活性剤が
（ａ）Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ
ａｕｒｅａｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ、インフルエンザウイルス、およびパラインフルエンザウイルスのポリペプチド抗原からなる群より選択される病原体のポリペプチド抗原、ならびに
（ｂ）該ポリペプチド抗原をコードする核酸分子
からなる群より選択される、項目１２に記載のワクチン組成物。
（項目１４）
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓによる感染を治療または予防する方法であって、
（ａ）以下：
（ｉ）アミノ酸Ｐ４２７、Ｗ５３５、Ｃ５３０、Ａ２４８、およびＤ４８２からなる群より選択される１つまたは複数のアミノ酸位置にアミノ酸変化を含む精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質であって、該アミノ酸位置が配列番号１に従って番号付けられ、該変異体ＳＬＯタンパク質の溶血活性が野生型ＳＬＯに対して少なくとも５０％低下している、精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質、および
（ｉｉ）該精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質をコードする核酸分子
から選択される活性剤、ならびに
（ｂ）薬学的に許容可能な担体
を含むワクチン組成物を、それを必要としている個体に有効量投与する工程を含む、方法。
（項目１５）
前記ワクチン組成物が、
（ｉｉｉ）ＧＡＳ抗原、および
（ｉｖ）ＧＡＳ抗原をコードする核酸分子
からなる群より選択される１つまたは複数の活性剤をさらに含む、項目１４に記載の方法。
（項目１６）
（ａ）項目８から１３のいずれか一項に記載のワクチン組成物を含む容器、および
（ｂ）該組成物を用いてＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓによる感染を治療または予防するための使用説明書
を含むキット。
（項目１７）
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓによる感染の予防または治療のためのワクチンを作製する方法であって、
（ａ）以下：
（ｉ）アミノ酸Ｐ４２７、Ｗ５３５、Ｃ５３０、Ａ２４８、およびＤ４８２からなる群より選択される１つまたは複数のアミノ酸位置にアミノ酸変化を含む精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質であって、該アミノ酸位置が配列番号１に従って番号付けられ、該変異体ＳＬＯタンパク質の溶血活性が野生型ＳＬＯに対して少なくとも５０％低下している、精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質、ならびに
（ｉｉ）該精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質をコードする核酸分子
から選択される活性剤と、
（ｂ）薬学的に許容可能な担体と、
を組み合わせる工程を含む、方法。
（項目１８）
前記活性剤が前記精製された変異体ＳＬＯタンパク質であり、該変異体ＳＬＯタンパク質を：
（ａ）該変異体ＳＬＯタンパク質をコードする発現構築物を含む宿主細胞を培養する工程、および
（ｂ）該変異体ＳＬＯタンパク質を回収する工程
を含む方法によって作製する、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
（ｉｉｉ）ＧＡＳ抗原、および
（ｉｖ）ＧＡＳ抗原をコードする核酸分子
からなる群より選択される１つまたは複数の活性剤を薬学的に許容可能な担体と組み合わせる工程をさらに含む、項目１７に記載の方法。
（項目２０）
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓによる感染を治療または予防するための薬物の製造における活性剤の使用であって、該活性剤が、
（ｉ）アミノ酸Ｐ４２７、Ｗ５３５、Ｃ５３０、Ａ２４８、およびＤ４８２からなる群より選択される１つまたは複数のアミノ酸位置にアミノ酸変化を含む精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質であって、該アミノ酸位置が配列番号１に従って番号付けられ、該変異体ＳＬＯタンパク質の溶血活性が野生型ＳＬＯに対して少なくとも５０％低下している、精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質、ならびに
（ｉｉ）該精製された変異体ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）タンパク質をコードする核酸分子
からなる群より選択される、使用。
（項目２１）
ワクチンとして使用する、項目１から４のいずれか一項に記載の精製された変異体ＳＬＯタンパク質、または項目５から７のいずれか一項に記載の核酸分子。
（項目２２）
治療で使用する、項目１から４のいずれか一項に記載の精製された変異体ＳＬＯタンパク質、項目５から７のいずれか一項に記載の核酸分子、または項目８から１３のいずれか一項に記載のワクチン組成物。
（項目２３）
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓによる感染を治療または予防するための、項目１から４のいずれか一項に記載の精製された変異体ＳＬＯタンパク質、項目５から７のいずれか一項に記載の核酸分子、または項目８から１３のいずれか一項に記
載のワクチン組成物。