【誤訳訂正書】
【提出日】平成24年11月29日(2012.11.29)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
２つのポリペプチドをそれぞれのＣ末端で結合させる方法であって、
(ａ)結合されるポリペプチドのＣ末端を、反応基を含む化学基を結合されるポリペプチドのＣ末端に導入するように酵素触媒的に修飾し、それにより、反応基Ｗを含む化学基を、結合される第１のポリペプチドのＣ末端に導入し、かつ、反応基Ｚを含む化学基を、結合される第２のポリペプチドのＣ末端に導入し；
(ｂ)(ｉ)反応基Ｚと反応基Ｗとを反応させて、化学基Ｔを形成させ、ここでＴはオキシム、ヒドラゾン、フェニルヒドラゾン、セミカルバゾン、トリアゾール、イソオキサゾリジン、アミド、３-チオピロリジンジオン及びアラルキンのジラジカルからなる群から選択されるか、又は
(ｉｉ)スペーサー分子の第１の反応基と第１の化学基の反応基を反応させ、スペーサー分子の第２の反応基と第２の化学基の反応基を反応させ、ここで２つのポリペプチド間のスペーサーが、少なくとも一のエチレングリコールジラジカルを含む；
ことを含み、
該酵素はカルボキシペプチダーゼＹ又はその変異体又は断片であり、該変異体又は断片は、タンパク質又はペプチドのＣ末端アミノ酸が種々の化学部分で置き換えられる反応を触媒する能力を保持している、
方法。
【請求項２】
酵素がカルボキシペプチダーゼＹである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
工程（ｂ）（ｉｉ）のスペーサー分子の反応基Ｙと反応基Ｚとを反応させて、化学基Ｘを形成させ、
工程（ｂ）（ｉｉ）のスペーサー分子の反応基Ｖと反応基Ｗとを反応させて、化学基Ｕを形成させることを含む、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
ＸとＵが独立して、オキシム、ヒドラゾン、フェニルヒドラゾン、セミカルバゾン、トリアゾール、イソオキサゾリジン、アミド、３-チオピロリジンジオン及びアラルキンのジラジカルからなる群から選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
ＷとＺが独立して、アルコキシルアミノ、アリールオキサミノ、オキソ、アジド、アルキニル、アルケニル、ハロアリール、メルカプト、Ｎ-マレイミド、及び２-(ジフェニルホスフィノ)フェノキシカルボニルからなる群から選択される、請求項１から４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
Ｖ及びＹが個別に、アルコキシルアミノ、アリールオキサミノ、オキソ、アジド、アルキニル、アルケニル、ハロアリール、メルカプト、Ｎ-マレイミド、及び２-(ジフェニルホスフィノ)フェノキシカルボニルからなる群から選択される、請求項３から５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
２つのポリペプチドが同一である、請求項１から６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
２つのポリペプチドが同一であり、反応基Ｗは反応基Ｚとは異なる、請求項１から７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
２つのポリペプチドが互いに異なっている、請求項１から６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
少なくとも一のポリペプチドがヒト成長ホルモンである、請求項１から９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
少なくとも一のポリペプチドがヒト成長ホルモンの誘導体である、請求項１から１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
少なくとも一のポリペプチドがヒト成長ホルモンの変異体又はヒト成長ホルモンの変異体の誘導体である、請求項１から１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
少なくとも一のポリペプチドがｈＧＨ-Ｌｅｕ-Ａｌａである、請求項１から１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
化学基ＺがリンカーＡを介して導入される、請求項１から１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
リンカーＡが、直鎖状、分枝状及び／又は環状のＣ１-１０アルカン、Ｃ２-１０アルケン、Ｃ２-１０アルキン、Ｃ１-１０ヘテロアルカン、Ｃ２-１０ヘテロアルケン、Ｃ２-１０ヘテロアルキンのビ-ラジカルからなる群から選択され、そのいずれもオキソで置換されていてよく、ここで一又は複数の同素環芳香族化合物のビラジカル(類)又は複素環芳香族化合物のビラジカル(類)が挿入されてもよい、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
化学基ＷがリンカーＢを介して導入される、請求項１から１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
リンカーＢが、オキソで置換されていてもよい、直鎖状、分枝状及び／又は環状のＣ１-１０アルカン、Ｃ２-１０アルケン、Ｃ２-１０アルキン、Ｃ１-１０ヘテロアルカン、Ｃ２-１０ヘテロアルケン、Ｃ２-１０ヘテロアルキンのビ-ラジカルからなる群から選択され、ここで一又は複数の同素環芳香族化合物のビラジカル(類)又は複素環芳香族化合物のビラジカル(類)が挿入されてもよい、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
リンカーＡ及びリンカーＢが独立して、次の式：
【化１】
2009526812.tif 000001
2009526812.tif 000002
2009526812.tif 000003
［上式中、＊はリンカーの端の結合部分を表す］
からなる群から選択される、請求項１４から１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
最終生成物において、２つのポリペプチドを結合させる部分が、１,２,３-トリアゾール部分を有する、請求項１から１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
化合物Ｎ,Ｎ'-ビス(２-(２-(２-(２-(４-((３-(Ｎ-((Ｓ)-５-(カルバモイル)-５-(ｈＧＨイルロイシニルアミノ)ペンチル)カルバモイル)ベンジルオキシ)イミノ)ブトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル)オメガ-カルバモイル３．４ｋＤａ ＰＥＧ-カルボン酸アミド。
【化２】
2009526812.tif 000004
【請求項２１】
少なくとも一のエチレングリコールジラジカルを含む結合部分により、Ｃ末端を介して結合した２つのポリペプチドを含有するポリペプチド化合物。
【請求項２２】
結合部分によりそれらのＣ末端を介して結合した２つのポリペプチドを含有するポリペプチド化合物であり、ここで結合部分が１,２,３-トリアゾール部分を有しているポリペプチド化合物。
【請求項２３】
前記結合部分が、次の式：
【化３】
2009526812.tif 000005
2009526812.tif 000006
2009526812.tif 000007
［上式中、＊はリンカーの端の結合部分を表す］
からなる群から選択される、請求項２２に記載のポリペプチド化合物。
【請求項２４】
結合部分によりそれらのＣ末端を介して結合した２つのポリペプチドを含有するポリペプチド化合物であり、ここで結合部分が１,２,３-トリアゾール部分を有しており、該ポリペプチド化合物が、請求項１から１９のいずれか１項に記載の方法を使用することにより得られた又は得られるポリペプチド化合物。
【請求項２５】
それらのＣ末端を介して結合した２つのポリペプチドを含有するポリペプチド化合物で、請求項１から１９のいずれか１項に記載の構造を有するポリペプチド化合物。
【請求項２６】
患者の疾病又は疾患を処置するための、請求項２０から２５のいずれか１項に記載の化合物。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００８】
一実施態様において、本発明は、２つのポリペプチドをそれぞれのＣ末端で結合させる方法であって、
(ａ)結合されるポリペプチドのＣ末端を酵素触媒的に修飾し、それにより反応基を含む化学基を結合されるポリペプチドのＣ末端に導入し；
(ｂ)(ｉ)互いに、２つの化学基の反応基を反応させるか、又は
(ｉｉ)スペーサー分子の第１の反応基と第１の化学基の反応基を反応させ、スペーサー分子の第２の反応基と第２の化学基の反応基を反応させる；
ことを含む方法を提供するものである。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００９】
一実施態様において、本発明は、
(ａ)結合されるポリペプチドのＣ末端を酵素触媒的に修飾し、それにより反応基Ｗを含む化学基を、結合される第１のポリペプチドのＣ末端に導入し、反応基Ｚを含む化学基を、結合される第２のポリペプチドのＣ末端に導入し；
(ｂ)スペーサー分子の反応基Ｙと反応基Ｚとを反応させて、化学基Ｘを形成させ、
スペーサー分子の反応基Ｖと反応基Ｗとを反応させて、化学基Ｕを形成させる；
ことを含む方法を提供する。
一実施態様において、酵素触媒的修飾は、酵素カルボキシペプチダーゼＹにより実施される。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１０】
(本発明の詳細な記載)
上述したように、本発明は、２つのポリペプチドをそれぞれのＣ末端で結合させる方法であって、
(ａ)結合されるポリペプチドのＣ末端を酵素触媒的に修飾し、それにより反応基を含む化学基を結合されるポリペプチドのＣ末端に導入し；
(ｂ)(ｉ)互いに、２つの化学基の反応基を反応させるか、又は
(ｉｉ)スペーサー分子の第１の反応基と第１の化学基の反応基を反応させ、スペーサー分子の第２の反応基と第２の化学基の反応基を反応させる；
ことを含む方法を提供するものである。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１１】
一実施態様において、本発明は、
(ａ)結合されるポリペプチドのＣ末端を酵素触媒的に修飾し、それにより反応基Ｗを含む化学基を、結合される第１のポリペプチドのＣ末端に導入し、反応基Ｚを含む化学基を、結合される第２のポリペプチドのＣ末端に導入し；
(ｂ)スペーサー分子の反応基Ｙと反応基Ｚとを反応させて、化学基Ｘを形成させ、
スペーサー分子の反応基Ｖと反応基Ｗとを反応させて、化学基Ｕを形成させる；
ことを含む方法を提供する。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１２】
ポリペプチドのＣ末端の酵素触媒的修飾は、様々な酵素により実施され得る。一実施態様において、酵素はカルボキシペプチダーゼＹ(ＣＰＹ)である。一実施態様において、酵素はカルボキシペプチダーゼＹの変異体又は断片であり、変異体又は断片は、反応を触媒する能力を保持しており、それによりタンパク質又はペプチドのＣ末端アミノ酸は、種々の化学部分で置き換えられる。カルボキシペプチダーゼＹのいくつかの変異体は、当該技術で公知であり；例えば国際公開第９８／３８２８５号が参照される。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１９】
一実施態様において、本発明は、
(ａ)結合されるポリペプチドのＣ末端を酵素触媒的に修飾し、それにより反応基Ｗを含む化学基を、結合される第１のポリペプチドのＣ末端に導入し、反応基Ｚを含む化学基を、結合される第２のポリペプチドのＣ末端に導入し；
(ｂ)反応基Ｚと反応基Ｗとを反応させて、化学基Ｔを形成させる；
ことを含む方法に関する。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５３】
実施態様２：酵素がカルボキシペプチダーゼＹ又はその変異体又は断片であり、変異体又は断片が、タンパク質又はペプチドのＣ末端アミノ酸が種々の化学部分で置き換えられる反応を触媒する能力を保持している、実施態様１の方法。
実施態様３：酵素がカルボキシペプチダーゼＹである、実施態様２の方法。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５４】
実施態様４：
(ａ)結合されるポリペプチドのＣ末端を酵素触媒的に修飾し、それにより反応基Ｗを含む化学基を、結合される第１のポリペプチドのＣ末端に導入し、反応基Ｚを含む化学基を、結合される第２のポリペプチドのＣ末端に導入し；
(ｂ)スペーサー分子の反応基Ｙと反応基Ｚとを反応させて、化学基Ｘを形成させ、
スペーサー分子の反応基Ｖと反応基Ｗとを反応させて、化学基Ｕを形成させる；
ことを含む、実施態様１から３のいずれかの方法。
実施態様５：ＸとＵが独立して、オキシム、ヒドラゾン、フェニルヒドラゾン、セミカルバゾン、トリアゾール、イソオキサゾリジン、アミド、３-チオピロリジンジオン及びアラルキンのジラジカルからなる群から選択される、実施態様４の方法。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５６】
実施態様８：
(ａ)結合されるポリペプチドのＣ末端を酵素触媒的に修飾し、それにより反応基Ｗを含む化学基を、結合される第１のポリペプチドのＣ末端に導入し、反応基Ｚを含む化学基を、結合される第２のポリペプチドのＣ末端に導入し；
(ｂ)反応基Ｚと反応基Ｗとを反応させて、化学基Ｔを形成させる；
ことを含む、実施態様１から３のいずれかの方法。
実施態様９：Ｔが、オキシム、ヒドラゾン、フェニルヒドラゾン、セミカルバゾン、トリアゾール、イソオキサゾリジン、アミド、３-チオピロリジンジオン及びアラルキンのジラジカルからなる群から選択される、実施態様８の方法。
実施態様１０：Ｗ及びＺが、アルコキシルアミノ、アリールオキサミノ、オキソ、アジド、アルキニル、アルケニル、ハロアリール、メルカプト、Ｎ-マレイミド、及び２-(ジフェニルホスフィノ)フェノキシカルボニルからなる群から選択される、実施態様９の方法。