【手続補正書】
【提出日】平成25年10月29日(2013.10.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
2013510093.tif 000001
（上式中、ｐは１から４である）
を有し、遊離システインアミノ酸を介してリンカー（Ｌ）及びジルコニウム錯体（Ｚ）へ結合したシステイン改変抗体（Ａｂ）を含む、ジルコニウム標識されたシステイン改変抗体であって、
システイン改変抗体が、リンカー及び
2013510093.tif 000002
から選択されるデスフェリオキサミン成分へ結合し、
波線は抗体への結合を示し；ジルコニウムはデスフェリオキサミン成分へ錯体形成し；及び
システイン改変抗体が、配列番号１１、１２、１３、及び１５：
2013510093.tif 000003
から選択される重鎖配列を含み、ここで配列番号１１、１２、１３、及び１５のシステインは遊離システインアミノ酸であり、又はシステイン改変抗体が、配列番号１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、４５、及び４６：
2013510093.tif 000004
から選択される軽鎖配列を含み、ここで配列番号１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、４５、及び４６のシステインは遊離システインアミノ酸である、ジルコニウム標識されたシステイン改変抗体。
【請求項２】
ｐが２である、請求項１に記載のジルコニウム標識されたシステイン改変抗体。
【請求項３】
システイン改変抗体が
（ｉ）システイン改変抗体をコードする核酸配列を突然変異誘発し、
（ｉｉ）システイン改変抗体を発現し、及び
（ｉｉｉ）システイン改変抗体を単離し精製する
ことを含む方法により調製される、請求項１に記載のジルコニウム標識されたシステイン改変抗体。
【請求項４】
システイン改変抗体がモノクローナル抗体、二重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、Ｆａｂ断片から選択される、請求項１に記載のジルコニウム標識されたシステイン改変抗体。
【請求項５】
システイン改変抗体がＡ１２１Ｃ チオ-トラスツズマブである、請求項１に記載のジルコニウム標識されたシステイン改変抗体。
【請求項６】
システイン改変抗体が親抗体の一以上のアミノ酸残基を一以上の遊離システインアミノ酸で置換することを含む方法で調製され、親抗体は抗原に選択的に結合し、システイン改変抗体は、親抗体と同じ抗原に選択的に結合する、請求項１に記載のジルコニウム標識されたシステイン改変抗体。
【請求項７】
システイン改変抗体又は親抗体が、レセプター（１）−（５１）：
（１）ＢＭＰＲ１Ｂ（骨形成タンパク質レセプターＩＢ型）；
（２）Ｅ１６（ＬＡＴ１，ＳＬＣ７Ａ５）；
（３）ＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通型上皮抗原）；
（４）０７７２Ｐ（ＣＡ１２５，ＭＵＣ１６）；
（５）ＭＰＦ（ＭＰＦ，ＭＳＬＮ，ＳＭＲ，巨核球増強因子、メソテリン）；
（６）Ｎａｐｉ３ｂ（ＮＡＰＩ−３Ｂ，ＮＰＴＩＩｂ，ＳＬＣ３４Ａ２，溶質輸送体ファミリー３４（リン酸ナトリウム），メンバー２，ＩＩ型ナトリウム依存性リン酸トランスポーター３ｂ）；
（７）Ｓｅｍａ ５ｂ（ＦＬＪ１０３７２，ＫＩＡＡ１４４５，Ｍｍ.４２０１５，ＳＥＭＡ５Ｂ，ＳＥＭＡＧ，セマフォリン ５ｂ Ｈｌｏｇ，セマドメイン（sema domain)，７回トロンボスポンジン反復（１型及び１型様），膜貫通ドメイン（ＴＭ）および短い細胞質ドメイン（セマフォリン）５Ｂ）；
（８）ＰＳＣＡ ｈｌｇ（２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ，Ｃ５３０００８Ｏ１６Ｒｉｋ，ＲＩＫＥＮ ｃＤＮＡ ２７０００５０Ｃ１２，ＲＩＫＥＮ ｃＤＮＡ ２７０００５０Ｃ１２ 遺伝子）；
（９）ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型レセプター）；
（１０）ＭＳＧ７８３（ＲＮＦ１２４，推定タンパク質ＦＬＪ２０３１５）；
（１１）ＳＴＥＡＰ２（ＨＧＮＣ＿８６３９，ＩＰＣＡ−１，ＰＣＡＮＡＰ１，ＳＴＡＭＰ１，ＳＴＥＡＰ２，ＳＴＭＰ，前立腺癌関連遺伝子１，前立腺癌関連タンパク質１，前立腺の６回膜貫通型上皮抗原２，６回膜貫通型前立腺タンパク質）；
（１２）ＴｒｐＭ４（ＢＲ２２４５０，ＦＬＪ２００４１，ＴＲＰＭ４，ＴＲＰＭ４Ｂ，一過性レセプター電位カチオンチャネル，サブファミリーＭ，メンバー４）；
（１３）ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ，ＣＲ１，ＣＲＧＦ，ＣＲＩＰＴＯ，ＴＤＧＦ１，奇形癌腫由来増殖因子）；
（１４）ＣＤ２１（ＣＲ２（補体レセプター２）又はＣ３ＤＲ（Ｃ３ｄ／エブスタイン・バーウイルスレセプター）又はＨｓ.７３７９２）；
（１５）ＣＤ７９ｂ（ＣＤ７９Ｂ，ＣＤ７９β，ＩＧｂ（免疫グロブリン関連ベータ（immunoglobulin-associated beta）），Ｂ２９）；
（１６）ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４，ＩＲＴＡ４，ＳＰＡＰ１Ａ（ＳＨ２ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質１ａ），ＳＰＡＰ１Ｂ，ＳＰＡＰ１Ｃ）；
（１７）ＨＥＲ２；
（１８）ＮＣＡ；
（１９）ＭＤＰ；
（２０）ＩＬ２０Ｒα；
（２１）ブレビカン；
（２２）ＥｐｈＢ２Ｒ；
（２３）ＡＳＬＧ６５９；
（２４）ＰＳＣＡ；
（２５）ＧＥＤＡ；
（２６）ＢＡＦＦ−Ｒ（Ｂ細胞活性化因子レセプター，ＢＬｙＳレセプター３，ＢＲ３）；
（２７）ＣＤ２２（Ｂ細胞レセプターＣＤ２２−Ｂアイソフォーム）；
（２８）ＣＤ７９ａ（ＣＤ７９Ａ，ＣＤ７９α，免疫グロブリン関連アルファ（immunoglobulin-associated alpha），免疫グロブリンベータ（ＣＤ７９Ｂ）と共有結合性に相互作用し、ＩｇＭ分子と表面上で複合体を形成し、Ｂ細胞分化に関与するシグナルを伝達するＢ細胞特異的タンパク質）；
（２９）ＣＸＣＲ５（バーキットリンパ腫レセプター１は、ＣＸＣＬ１３ケモカインによって活性化され、リンパ球遊走及び体液性防御において機能し、ＨＩＶ−２感染、おそらくエイズ、リンパ腫、骨髄腫、及び白血病の発症において役割を果たす、Ｇタンパク質共役型受容体）；
（３０）ＨＬＡ−ＤＯＢ（ペプチドを結合してそれらをＣＤ４＋Ｔリンパ球に提示するＭＨＣクラスＩＩ分子（Ｉａ抗原）のベータサブユニット）；
（３１）Ｐ２Ｘ５（プリンレセプターＰ２Ｘリガンド開口型イオンチャネル５は、細胞外ＡＴＰにより開閉されるイオンチャネルであり、シナプス伝達及び神経発生に関与する可能性があり、欠乏は、特発性排尿筋不安定性の病態生理の一因となり得る）；
（３２）ＣＤ７２（Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２，Ｌｙｂ−２）；
（３３）ＬＹ６４（リンパ球抗原６４（ＲＰ１０５），ロイシンリッチリピート（ＬＲＲ）ファミリーのＩ型膜タンパク質であり、Ｂ細胞の活性化及びアポトーシスを制御し、機能喪失は全身性エリテマトーデスの患者における疾患活性の上昇に関連する）；
（３４）ＦｃＲＨ１（Ｆｃレセプター様タンパク質１，Ｃ２タイプＩｇ様ドメイン及びＩＴＡＭドメインを含む免疫グロブリンＦｃドメインについての推定上のレセプターであり、Ｂ−リンパ球分化において役割を有し得る）；
（３５）ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリーレセプタートランスロケーション関連２（Immunoglobulin superfamily receptor translocation associated 2）、Ｂ細胞発生及びリンパ腫形成において役割を有し得る推定上の免疫レセプター；一部のＢ細胞悪性腫瘍においてトランスロケーションによる遺伝子の調節解除が発生する）；
（３６）ＴＥＮＢ２（推定上の膜貫通型プロテオグリカン、増殖因子のＥＧＦ／ヘレグリンファミリー及びフォリスタチンに関連する）；
（３７）ＰＭＥＬ１７（シルバーホモログ；ＳＩＬＶ；Ｄ１２Ｓ５３Ｅ；ＰＭＥＬ１７；（ＳＩ）；（ＳＩＬ）；ＭＥ２０；ｇｐ１００）；
（３８）ＴＭＥＦＦ１（ＥＧＦ様及び２つのフォリスタチン様ドメインを有する膜貫通タンパク質１；Tomoregulin-1；Ｈ７３６５；Ｃ９ｏｒｆ２；Ｃ９ＯＲＦ２；Ｕ１９８７８；Ｘ８３９６１；
（３９）ＧＤＮＦ−Ｒａ１（ＧＤＮＦファミリーレセプターアルファ１；ＧＦＲＡ１；ＧＤＮＦＲ；ＧＤＮＦＲＡ；ＲＥＴＬ１；ＴＲＮＲ１；ＲＥＴ１Ｌ；ＧＤＮＦＲ−アルファ１；ＧＦＲ−ＡＬＰＨＡ−１；Ｕ９５８４７；ＢＣ０１４９６２）；
（４０）Ｌｙ６Ｅ（リンパ球抗原６複合体、遺伝子座Ｅ；Ｌｙ６７，ＲＩＧ−Ｅ，ＳＣＡ−２，ＴＳＡ−１）；
（４１）ＴＭＥＭ４６（シガホモログ(shisa homolog)２（アフリカツメガエル）；ＳＨＩＳＡ２）；
（４２）Ｌｙ６Ｇ６Ｄ（リンパ球抗原６複合体、遺伝子座Ｇ６Ｄ；Ｌｙ６−Ｄ，ＭＥＧＴ１）；
（４３）ＬＧＲ５（ロイシンリッチリピート含有Ｇタンパク質共役型受容体５；ＧＰＲ４９，ＧＰＲ６７）；
（４４）ＲＥＴ（ｒｅｔプロトオンコジーン；ＭＥＮ２Ａ；ＨＳＣＲ１；ＭＥＮ２Ｂ；ＭＴＣ１；（ＰＴＣ）；ＣＤＨＦ１２；Ｈｓ.１６８１１４；ＲＥＴ５１；ＲＥＴ−ＥＬＥ１）；
（４５）ＬＹ６Ｋ（リンパ球抗原６複合体、遺伝子座Ｋ；ＬＹ６Ｋ；ＨＳＪ００１３４８；ＦＬＪ３５２２６）；
（４６）ＧＰＲ１９（Ｇタンパク質共役型受容体１９；Ｍｍ.４７８７）；
（４７）ＧＰＲ５４（ＫＩＳＳ１レセプター；ＫＩＳＳ１Ｒ；ＧＰＲ５４；ＨＯＴ７Ｔ１７５；ＡＸＯＲ１２）；
（４８）ＡＳＰＨＤ１（アスパラギン酸β−ヒドロキシラーゼドメイン含有１；ＬＯＣ２５３９８２）；
（４９）チロシナーゼ（ＴＹＲ；ＯＣＡＩＡ；ＯＣＡ１Ａ；チロシナーゼ；ＳＨＥＰ３）；
（５０）ＴＭＥＭ１１８（リングフィンガータンパク質，膜貫通型２；ＲＮＦＴ２；ＦＬＪ１４６２７）；及び
（５１）ＧＰＲ１７２Ａ（Ｇタンパク質共役型受容体１７２Ａ；ＧＰＣＲ４１；ＦＬＪ１１８５６；Ｄ１５Ｅｒｔｄ７４７ｅ）
の一以上と結合する、請求項１に記載のジルコニウム標識されたシステイン改変抗体。
【請求項８】
式ＩＩ：
2013510093.tif 000005
（上式中、Ｌ-Ｄｆは
2013510093.tif 000006
（上記構造において、破線は抗体（Ａｂ）への結合を示す）
から選択され、及び
ｐは１から４である）
を有し、遊離システインアミノ酸を介してリンカー（Ｌ）及びデスフェリオキサミン成分（Ｄｆ）へ結合するシステイン改変抗体（Ａｂ）を含む、デスフェリオキサミン標識されたシステイン改変抗体。
【請求項９】
構造：
2013510093.tif 000007
（上記構造において、Ｒは
2013510093.tif 000008
から選択される）
から選択されるデスフェリオキサミン標識試薬。
【請求項１０】
式ＩＩ：
2013510093.tif 000009
（上式中、Ｌ-Ｄｆは
2013510093.tif 000010
（波線は抗体（Ａｂ）への結合を示す）
から選択され、及び
ｐは１から４である）
を有し、遊離システインアミノ酸を介してリンカー（Ｌ）及びデスフェリオキサミン成分（Ｄｆ）へ結合したシステイン改変抗体（Ａｂ）を含む、デスフェリオキサミン標識されたシステイン改変抗体を作製する方法であって、
構造：
2013510093.tif 000011
（上記構造において、Ｒは
2013510093.tif 000012
から選択される）
から選択される組成物を、一以上の遊離システインアミノ酸を有するシステイン改変抗体と反応させることを含み、
それによって、デスフェリオキサミン標識されたシステイン改変抗体が形成される方法。
【請求項１１】
式Ｉ：
2013510093.tif 000013
（上式中、ｐは１から４である）
を有し、遊離システインアミノ酸を介してリンカー（Ｌ）及びジルコニウム錯体（Ｚ）へ結合したシステイン改変抗体（Ａｂ）を含む、ジルコニウム標識されたシステイン改変抗体を作る方法であって、
式ＩＩ：
2013510093.tif 000014
（上式中、Ｌ-Ｄｆは、
2013510093.tif 000015
（上記構造において波線は抗体（Ａｂ）への結合を示す）
から選択され、及び
ｐは１から４であり、
それによって、デスフェリオキサミン標識されたシステイン改変抗体が形成される）
を有し、遊離システインアミノ酸を介してリンカー（Ｌ）及びデスフェリオキサミン成分（Ｄｆ）へ結合したシステイン改変抗体（Ａｂ）を含む、デスフェリオキサミン標識されたシステイン改変抗体でジルコニウム試薬を錯体化させることを含む方法。
【請求項１２】
ジルコニウム試薬が89ジルコニウムシュウ酸塩である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
動物へジルコニウム標識されたシステイン改変抗体を投与すること、及び
イメージングによりジルコニウム標識されたシステイン改変抗体の存在をインビボで検出することを含む、イメージングの方法であって、
該ジルコニウム標識されたシステイン改変抗体が、式Ｉ：
2013510093.tif 000016
（ここでｐは１から４である）
を有し、リンカー（Ｌ）を介して一以上のジルコニウム錯体（Ｚ）と結合した一以上の遊離システインアミノ酸を持つシステイン改変抗体（Ａｂ）を含む、イメージングの方法。
【請求項１４】
ＺがデスフェリオキサミンＢへ錯体形成したジルコニウムを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
ジルコニウム標識されたシステイン改変抗体が抗原に結合する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
動物が腫瘍異種移植マウスモデルである、請求項１３に記載の方法。