【手続補正書】
【提出日】平成25年4月25日(2013.4.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヘプシジンと結合することができる核酸。
【請求項２】
ヘプシジンのアンタゴニストである、請求項１に記載の核酸。
【請求項３】
５’→３’の方向に、ヌクレオチドの第１の末端ストレッチと、ヌクレオチドの中心ストレッチと、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチとを含み、ヌクレオチドの中心ストレッチが３２〜４０ヌクレオチド、好ましくは３２〜３５ヌクレオチドを含む、請求項１または２に記載の核酸。
【請求項４】
５’→３’の方向に、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチと、ヌクレオチドの中心ストレッチと、ヌクレオチドの第１の末端ストレッチとを含み、ヌクレオチドの中心ストレッチが３２〜４０ヌクレオチド、好ましくは３２〜３５ヌクレオチドを含む、請求項１または２に記載の核酸。
【請求項５】
ヌクレオチドの中心ストレッチが、５’  ＲＫＡＵＧＧＧＡＫＵＡＡＧＵＡＡＡＵＧＡＧＧＲＧＵＷＧＧＡＧＧＡＡＲ  ３’または５’  ＲＫＡＵＧＧＧＡＫＡＡＧＵＡＡＡＵＧＡＧＧＲＧＵＷＧＧＡＧＧＡＡＲ  ３’のヌクレオチド配列を含む、請求項３または４に記載の核酸。
【請求項６】
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチと、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチとが任意選択的に互いにハイブリダイズし、ハイブリダイゼーションの際に二本鎖構造が形成されるとき、
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチが５〜８ヌクレオチドを含み、
ヌクレオチドの第２の末端ストレッチが５〜８ヌクレオチドを含む、請求項５に記載の核酸。
【請求項７】
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチが、５’  Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＳＢＳＢＣ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチが、５’  ＧＶＢＶＹＸ４Ｘ５Ｘ６  ３’のヌクレオチド配列を含み、
式中、Ｘ１はＡまたは不在であり、Ｘ２はＧまたは不在であり、Ｘ３はＢまたは不在であり、Ｘ４はＳまたは不在であり、Ｘ５はＣまたは不在であり、Ｘ６はＵまたは不在である、請求項５または６に記載の核酸分子。
【請求項８】
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチが、５’  Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＳＢＳＢＣ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチが、５’  ＧＶＢＶＢＸ４Ｘ５Ｘ６  ３’のヌクレオチド配列を含み、
式中、
ａ）Ｘ１はＡであり、Ｘ２はＧであり、Ｘ３はＢであり、Ｘ４はＳであり、Ｘ５はＣであり、Ｘ６はＵであり、または
ｂ）Ｘ１は不在であり、Ｘ２はＧであり、Ｘ３はＢであり、Ｘ４はＳであり、Ｘ５はＣであり、Ｘ６はＵであり、または
ｃ）Ｘ１はＡであり、Ｘ２はＧであり、Ｘ３はＢであり、Ｘ４はＳであり、Ｘ５はＣであり、Ｘ６は不在である、請求項５〜７のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項９】
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチが、５’  Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＳＢＳＢＣ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチが、５’  ＧＶＢＶＹＸ４Ｘ５Ｘ６  ３’のヌクレオチド配列を含み、
式中、
ａ）Ｘ１は不在であり、Ｘ２はＧであり、Ｘ３はＢであり、Ｘ４はＳであり、Ｘ５はＣであり、Ｘ６は不在であり、または
ｂ）Ｘ１は不在であり、Ｘ２は不在であり、Ｘ３はＢであり、Ｘ４はＳであり、Ｘ５はＣであり、Ｘ６は不在であり、または
ｃ）Ｘ１は不在であり、Ｘ２はＧであり、Ｘ３はＢであり、Ｘ４はＳであり、Ｘ５は不在であり、Ｘ６は不在である、請求項５または６に記載の核酸分子。
【請求項１０】
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチが、５’  Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＳＢＳＢＣ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチが、５’  ＧＶＢＶＹＸ４Ｘ５Ｘ６  ３’のヌクレオチド配列を含み、
式中、
Ｘ１は不在であり、Ｘ２は不在であり、Ｘ３はＢまたは不在であり、Ｘ４はＳまたは不在であり、Ｘ５は不在であり、Ｘ６は不在である、請求項５〜７のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項１１】
配列番号１１５〜１１９、配列番号１２１、配列番号１４２、配列番号１４４、配列番号１４６、配列番号１４８、配列番号１５１、配列番号１５２、配列番号１７５または配列番号１７６に記載の核酸配列のいずれか１つを含む、請求項５〜１０のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項１２】
ヌクレオチドの中心ストレッチが、５’  ＧＲＣＲＧＣＣＧＧＶＧＧＡＣＡＣＣＡＵＡＵＡＣＡＧＡＣＵＡＣＫＡＵＡ  ３’または５’  ＧＲＣＲＧＣＣＧＧＡＲＧＧＡＣＡＣＣＡＵＡＵＡＣＡＧＡＣＵＡＣＫＡＵＡ  ３’のヌクレオチド配列を含む、請求項３または４に記載の核酸。
【請求項１３】
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチと、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチとが任意選択的に互いにハイブリダイズし、ハイブリダイゼーションの際に二本鎖構造が形成され、
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチが４〜７ヌクレオチドを含み、
ヌクレオチドの第２の末端ストレッチが４〜７ヌクレオチドを含む、請求項１２に記載の核酸。
【請求項１４】
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチが、５’  Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＳＢＳＮ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチが、５’  ＮＳＶＳＸ４Ｘ５Ｘ６  ３’のヌクレオチド配列を含み、
式中、Ｘ１はＡまたは不在であり、Ｘ２はＧまたは不在であり、Ｘ３はＲまたは不在であり、Ｘ４はＹまたは不在であり、Ｘ５はＣまたは不在であり、Ｘ６はＵまたは不在である、請求項１２または１３に記載の核酸分子。
【請求項１５】
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチが、５’  Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＳＢＳＮ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチが、５’  ＮＳＶＳＸ４Ｘ５Ｘ６  ３’のヌクレオチド配列を含み、
式中、
ａ）Ｘ１はＡであり、Ｘ２はＧであり、Ｘ３はＲであり、Ｘ４はＹであり、Ｘ５はＣであり、Ｘ６はＵであり、または
ｂ）Ｘ１は不在であり、Ｘ２はＧであり、Ｘ３はＲであり、Ｘ４はＹであり、Ｘ５はＣであり、Ｘ６はＵであり、または
ｃ）Ｘ１はＡであり、Ｘ２はＧであり、Ｘ３はＲであり、Ｘ４はＹであり、Ｘ５はＣであり、Ｘ６は不在である、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項１６】
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチが、５’  Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＳＢＳＮ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチが、５’  ＮＳＶＳＸ４Ｘ５Ｘ６  ３’のヌクレオチド配列を含み、
式中、
ａ）Ｘ１は不在であり、Ｘ２はＧであり、Ｘ３はＲであり、Ｘ４はＹであり、Ｘ５はＣであり、Ｘ６は不在であり、または
ｂ）Ｘ１は不在であり、Ｘ２は不在であり、Ｘ３はＲであり、Ｘ４はＹであり、Ｘ５はＣであり、Ｘ６は不在であり、または
ｃ）Ｘ１は不在であり、Ｘ２はＧであり、Ｘ３はＲであり、Ｘ４はＹであり、Ｘ５は不在であり、Ｘ６は不在である、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項１７】
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチが、５’  Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＳＢＳＮ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチが、５’  ＮＳＶＳＸ４Ｘ５Ｘ６  ３’のヌクレオチド配列を含み、
式中、Ｘ１は不在であり、Ｘ２は不在であり、Ｘ３はＲまたは不在であり、Ｘ４はＹまたは不在であり、Ｘ５は不在であり、Ｘ６は不在である、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項１８】
配列番号１２２〜１２６、配列番号１５４、配列番号１５９、配列番号１６３または配列番号１７４に記載の核酸配列のいずれか１つを含む、請求項１〜４および１２〜１７のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項１９】
ヌクレオチドの中心ストレッチが、５’→３’の方向に、ヌクレオチドの以下のストレッチ：
ボックスＡ、ヌクレオチドの連結ストレッチおよびボックスＢ；または
ボックスＢ、ヌクレオチドの連結ストレッチおよびボックスＡ
を含み、ボックスＡが、５’  ＷＡＡＡＧＵＷＧＡＲ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの連結ストレッチが１０〜１８ヌクレオチドを含み、ボックスＢが、５’  ＲＧＭＧＵＧＷＫＡＧＵＫＣ  ３’のヌクレオチド配列を含む、請求項３または４に記載の核酸。
【請求項２０】
ヌクレオチドの連結ストレッチが、５’→３’の方向に、ヌクレオチドの第１の連結サブストレッチと、ヌクレオチドの第２の連結サブストレッチと、ヌクレオチドの第３の連結サブストレッチとを含み、好ましくはヌクレオチドの第１の連結サブストレッチおよびヌクレオチドの第３の連結サブストレッチが任意選択的に互いにハイブリダイズし、ハイブリダイゼーションの際に二本鎖構造が形成される、請求項１９に記載の核酸。
【請求項２１】
ヌクレオチドの第１の連結サブストレッチおよびヌクレオチドの第３の連結サブストレッチがそれぞれ互いに独立して３〜６ヌクレオチドを含む、請求項２０に記載の核酸。
【請求項２２】
ａ）ヌクレオチドの第１の連結サブストレッチが、５’  ＧＧＡＣ  ３’、５’  ＧＧＡＵ  ３’および５’  ＧＧＡ  ３’の群から選択されるヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第３の連結サブストレッチが、５’  ＧＵＣＣ  ３’のヌクレオチド配列を含み、または
ｂ）ヌクレオチドの第１の連結サブストレッチが、５’  ＧＣＡＧ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第３の連結サブストレッチが、５’  ＣＵＧＣ  ３’のヌクレオチド配列を含み、または
ｃ）ヌクレオチドの第１の連結サブストレッチが、５’  ＧＧＧＣ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第３の連結サブストレッチが、５’  ＧＣＣＣ  ３’のヌクレオチド配列を含み、または
ｄ）ヌクレオチドの第１の連結サブストレッチが、５’  ＧＡＣ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第３の連結サブストレッチが、５’  ＧＵＣ  ３’のヌクレオチド配列を含み、または
ｅ）ヌクレオチドの第１の連結サブストレッチが、５’  ＡＣＵＵＧＵ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第３の連結サブストレッチが、５’  ＧＣＡＡＧＵ  ３’および５’  ＧＣＡＡＧＣ  ３’の群から選択されるヌクレオチド配列を含み、または
ｆ）ヌクレオチドの第１の連結サブストレッチが、５’  ＵＣＣＡＧ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第３の連結サブストレッチが、５’  ＣＵＧＧＡ  ３’のヌクレオチド配列を含み、
好ましくは、ヌクレオチドの第１の連結サブストレッチが、５’  ＧＡＣ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第３の連結サブストレッチが、５’  ＧＵＣ  ３’のヌクレオチド配列を含む、請求項２０または２１に記載の核酸。
【請求項２３】
ヌクレオチドの第２の連結サブストレッチが３〜５ヌクレオチドを含む、請求項２０〜２２のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項２４】
ヌクレオチドの第２の連結サブストレッチが、５’  ＶＢＡＡＷ  ３’、５’  ＡＡＵＷ  ３’および５’  ＮＢＷ  ３’の群から選択されるヌクレオチド配列を含む、請求項２０〜２３のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項２５】
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチと、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチとが任意選択的に互いにハイブリダイズし、ハイブリダイゼーションの際に二本鎖構造が形成され、
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチが４〜７ヌクレオチドを含み、
ヌクレオチドの第２の末端ストレッチが４〜７ヌクレオチドを含む、請求項１９〜２４のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項２６】
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチが、５’  Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＢＫＢＫ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチが、５’  ＭＶＶＶＸ４Ｘ５Ｘ６  ３’のヌクレオチド配列を含み、
式中、Ｘ１はＧまたは不在であり、Ｘ２はＳまたは不在であり、Ｘ３はＶまたは不在であり、Ｘ４はＢまたは不在であり、Ｘ５はＳまたは不在であり、Ｘ６はＣまたは不在である、請求項１９〜２５のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項２７】
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチが、５’  Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＢＫＢＫ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチが、５’  ＭＶＶＶＸ４Ｘ５Ｘ６  ３’のヌクレオチド配列を含み、
式中、
ａ）Ｘ１はＧであり、Ｘ２はＳであり、Ｘ３はＶであり、Ｘ４はＢであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ６はＣであり、または
ｂ）Ｘ１は不在であり、Ｘ２はＳであり、Ｘ３はＶであり、Ｘ４はＢであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ６はＣであり、または
ｃ）Ｘ１はＧであり、Ｘ２はＳであり、Ｘ３はＶであり、Ｘ４はＢであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ６は不在である、請求項１９〜２６のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項２８】
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチが、５’  Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＢＫＢＫ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチが、５’  ＭＶＶＶＸ４Ｘ５Ｘ６  ３’のヌクレオチド配列を含み、
式中、
ａ）Ｘ１は不在であり、Ｘ２はＳであり、Ｘ３はＶであり、Ｘ４はＢであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ６は不在であり、または
ｂ）Ｘ１は不在であり、Ｘ２は不在であり、Ｘ３はＶであり、Ｘ４はＢであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ６は不在であり、または
ｃ）Ｘ１は不在であり、Ｘ２はＳであり、Ｘ３はＶであり、Ｘ４はＢであり、Ｘ５は不在であり、Ｘ６は不在である、請求項１９〜２６のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項２９】
ヌクレオチドの第１の末端ストレッチが、５’  Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＢＫＢＫ  ３’のヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチドの第２の末端ストレッチが、５’  ＭＶＶＶＸ４Ｘ５Ｘ６  ３’のヌクレオチド配列を含み、
式中、
Ｘ１は不在であり、Ｘ２は不在であり、Ｘ３はＶまたは不在であり、Ｘ４はＢまたは不在であり、Ｘ５は不在であり、Ｘ６は不在である、請求項１９〜２６のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項３０】
配列番号２９、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３９から４１、配列番号４３、配列番号４６、配列番号１３７から１４１または配列番号１７３に記載の核酸配列のいずれか１つを含む、請求項１〜４および１９〜２９のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項３１】
配列番号１２７〜１３１に記載の核酸配列のいずれか１つを含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項３２】
核酸が修飾基を含み、修飾基を含む核酸分子の生物からの排出速度が、修飾基を含まない核酸と比較して低下する、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項３３】
核酸が修飾基を含み、修飾基を含む核酸分子の生物における保持時間が、修飾基を含まない核酸と比較して増大する、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項３４】
修飾基がリンカーを介して核酸と結合し、好ましくはリンカーが生分解性リンカーである、請求項３２または３３に記載の核酸。
【請求項３５】
核酸のヌクレオチドまたは核酸を形成するヌクレオチドがＬ−ヌクレオチドである、請求項１〜３４のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項３６】
Ｌ−核酸である、請求項１〜３４のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項３７】
疾患の治療および／または予防方法で使用するための、請求項１〜３６のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項３８】
請求項１〜３７のいずれか一項に記載の核酸、および任意選択的にさらなる構成要素を含む医薬組成物であって、さらなる構成要素が、薬学的に許容される賦形剤、薬学的に許容される担体および薬学的活性作用物質を含む群から選択される医薬組成物。
【請求項３９】
薬剤を製造するための、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の核酸の使用。
【請求項４０】
診断手段を製造するための、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の核酸の使用。
【請求項４１】
薬剤が、貧血、低鉄血症、異食症、ヘプシジンレベルの上昇を伴う状態、鉄レベルの上昇を伴う状態もしくは鉄過剰を伴う状態の治療および／または予防用の薬剤である、請求項３９に記載の使用。
【請求項４２】
薬剤が、さらなる薬剤もしくは治療方法に使用される、または、さらなる薬剤もしくは治療方法と組み合わせて使用するための薬剤であり、前記薬剤または治療方法が、さらなる薬学的活性化合物または当該さらなる薬学的活性化合物の投与を含み、前記さらなる薬学的活性化合物が、鉄補給剤、ビタミン補給剤、赤血球産生刺激物質、抗生物質、抗炎症性生物製剤、免疫系の抑制物質、抗血栓溶解剤、スタチン、昇圧剤および変力性化合物の群から選択される、請求項３９に記載の使用。
【請求項４３】
好ましくは結晶複合体である、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の核酸およびヘプシジンを含む複合体。
【請求項４４】
ヘプシジンを検出するための、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の核酸の使用。
【請求項４５】
ヘプシジンのアンタゴニストまたはアゴニストをスクリーニングする方法であって、
ヘプシジンの候補アンタゴニストおよび／または候補アゴニストを提供するステップと、
請求項１〜３７のいずれか一項に記載の核酸を提供するステップと、
ヘプシジンのアンタゴニストおよび／またはアゴニストの存在下でシグナルをもたらす試験系を提供するステップと、
前記候補アンタゴニストがヘプシジンのアンタゴニストであるかどうか、および／または前記候補アゴニストがヘプシジンのアゴニストであるかどうかを決定するステップと
を含む方法。
【請求項４６】
ヘプシジンを検出するためのキットであって、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の核酸を含み、好ましくはヘプシジンがヒトヘプシジンであるキット。
【請求項４７】
試料中の請求項１〜３７のいずれか一項に記載の核酸を検出する方法であって、
ａ）本発明による核酸を含有する試料を提供するステップと、
ｂ）捕捉プローブおよび検出プローブを提供するステップと、ここで、捕捉プローブが請求項１〜３７のいずれか一項に記載の核酸の第１の部分と少なくとも部分的に相補的であるか、検出プローブが請求項１〜３７のいずれか一項に記載の核酸の第２の部分と少なくとも部分的に相補的であるか、捕捉プローブが請求項１〜３７のいずれか一項に記載の核酸の第２の部分と少なくとも部分的に相補的であり、検出プローブが請求項１〜３７のいずれか一項に記載の核酸の第１の部分と少なくとも部分的に相補的であり、
ｃ）捕捉プローブおよび検出プローブを、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の核酸またはその部分と同時にまたは任意の順番で順次に反応させるステップと、
ｄ）任意選択的に、捕捉プローブがステップａ）で提供された請求項１〜３７のいずれか一項に記載の核酸による核酸とハイブリダイズするか否かを検出するステップと、
ｅ）請求項１〜３７のいずれか一項に記載の核酸および捕捉プローブおよび検出プローブからなる、ステップｃ）で形成された複合体を検出するステップと
を含む方法。