【誤訳訂正書】
【提出日】平成25年2月21日(2013.2.21)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】特許請求の範囲
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
同位体希釈質量分析試料を平衡化する方法であって、
a)固相担持体に、所定量又は所定濃度の同位体標識された被分析物類似体を添加して、前記固相担持体上の同位体標識された被分析物類似体を、吸着又は化学的付着によって固定化するステップであって、前記固相担持体は、表面改質及び／又は官能化されたイオン交換媒体、表面改質された固相支持体、吸着媒体、固相抽出媒体、樹脂結合固相、吸着剤、中実及び／又は多孔質ビーズ、表面活性化ビーズ、混合ベッド媒体、フィルター、固定化液体抽出に用いられる二状態液体、充填カラムにパッケージされたファイバー、表面改質されたＳＥＬＤＩプレート、固相表面改質プレート、表面改質フィルター、固相抽出カートリッジ、並びに、免疫測定固相媒体担持体からなる群から選択され、前記固相担持体は、マイクロタイタープレート及び表面改質された固相支持体の何れかを更に備えているステップと、
b)前記固相担持体に、前記同位体標識された被分析物類似体に対応する被分析物を含むか又は含むと推測される試料を添加して、前記固相担持体の保持機構によって前記固相担持体に前記試料を保持するステップと、
c)平衡化ステップを実行するステップであって、固相担持体及び試料を１秒〜２４時間インキュベートして、同位体標識された被分析物類似体が含まれる平衡化された試料を作製するステップと、
d)同位体標識された被分析物類似体が含まれる平衡化された試料を、直接イオン化し、分析を行なうために質量分析計へ移送するステップと、
を含んでいる方法。
【請求項２】
同位体希釈質量分析試料は、種別同位体希釈質量分析試料である請求項１の方法。
【請求項３】
同位体希釈質量分析試料は、種特異性同位体希釈質量分析試料である請求項１の方法。
【請求項４】
固相担持体及び試料をインキュベートするステップは、１〜600秒の時間範囲で平衡を達成する請求項１の方法。
【請求項５】
被分析物は、同位体変化が自然界に起こるあらゆる要素を含む化合物又は組成物からなる群から選択される請求項１の方法。
【請求項６】
被分析物は、水銀を含む化合物又は組成物、tert-ブタノール、メチル-t-ブチルエーテル、エチル-t-ブチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、t-アミルメチルエーテル、モルヒネ、ジオキサン、ジクロロエタン、テトラクロロエタン、ナフタレン及びフェナントレンからなる群から選択される請求項５の方法。
【請求項７】
試料中の被分析物の濃度は、同位体標識された被分析物類似体に対する質量分析によって決定された被分析物全体の比に基づいて算出される請求項５の方法。
【請求項８】
被分析物の濃度は、校正曲線を適用せず、種の同位体比に基づく濃度及び／又は分解調節の数学的計算を用いて直接算出される請求項５の方法。
【請求項９】
固相平衡は、IDMS及び／又はSIDMS質量分析を自動化するのに用いられる請求項５の方法。
【請求項１０】
同位体希釈質量分析試料を平衡化する方法であって、
a)固相担持体に、同位体標識された被分析物類似体に対応する分析対象物を含む所定量又は所定濃度の試料を添加するステップであって、前記固相担持体は、表面改質及び／又は官能化されたイオン交換媒体、表面改質された固相支持体、吸着媒体、固相抽出媒体、樹脂結合固相、吸着剤、中実及び／又は多孔質ビーズ、表面活性化ビーズ、混合ベッド媒体、フィルター、固定化液体抽出に用いられる二状態液体、充填カラムにパッケージされたファイバー、表面改質されたＳＥＬＤＩプレート、固相表面改質プレート、表面改質フィルター、固相抽出カートリッジ、並びに免疫測定固相媒体担持体からなる群から選択され、前記固相担持体は、マイクロタイタープレート及び表面改質された固相支持体の何れかを更に備えており、マイクロタイタープレート又は表面改質された固相支持体の機能によって、マイクロタイタープレート又は表面改質された固相支持体に、前記試料を吸着又は化学的付着によって保持するステップと、
b)前記同位体標識された被分析物類似体を前記固相担持体に添加して、前記同位体標識された被分析物類似体を、前記固相担持体に固定化するステップと、
c)平衡化ステップを実行するステップであって、前記固相担持体、前記同位体標識された被分析物類似体及び前記試料を１秒〜２４時間インキュベートして、同位体標識された被分析物類似体が含まれる平衡化された試料を作製するステップと、
d)同位体標識された被分析物類似体が含まれる平衡化された試料を、直接イオン化し、分析を行なうために質量分析計へ移送するステップと、
を含んでいる方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００２】
IDMS及びSIDMSは、濃縮同位体平衡に基づいて、種の被分析物(analyte)を正確に測定することができる。同位体希釈質量分析(IDMS)及び種別同位体希釈質量分析(speciated  isotope  dilution  mass  spectrometry)(SIDMS)を記載した特許として、例えば、米国特許第5414259号、米国特許第6790673B1号、米国特許第6974951B1号、米国特許第5883349号、米国特許第5830417号、米国特許第7005635B2号、米国特許第7220383号があり、また、米国特許公開第2002/0198230A1号は測定用試料を調製し、試料中に存在する化学種を測定する方法を開示しており、化学種のバルク化学濃度をオンラインで測定し、感度、精度及び効率の向上が達成される。これら特許の開示は、明示的な引用を以て本願に組み込まれるものとする。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１３】
【図１０】図１０は、マイクロタイタープレート又は表面改質された固相支持体(側面図)であり、濃縮同位体が結合された異なる２種類の抗原が交互に列をなしている。同位体濃縮抗原のうちの一方は、天然同位体試料を用いたELISAの実施に先立って、固体表面の一部として準備される。なお、同位体が予め装填された(preloaded)抗原が固相に存在していない場合は、濃縮抗原と非濃縮抗原は両方とも、ELISAの実施中、抗体に結合されたとき迅速に平衡化される。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１４】
【図１１】図１１は、マイクロタイタープレート又は表面改質された固相支持体(側面図)であり、抗体の一部には、同位体濃縮抗原が既に結合されている。ELISAの測定は、これら２組の抗原の比に応じて、試料中に存在する同位体濃縮抗原の結合度を測定することによって行われる。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１５】
【図１２】図１２は、サンドイッチシステムを用いたマイクロタイタープレート又は表面改質された固相支持体(側面図)であり、２種類の抗体と抗原の分析は、同位体濃縮抗原を使用し、２つの濃縮同位体スパイクの比を計測している。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１６】
【図１３】図１３は、マイクロタイタープレート又は表面改質されたSELDIプレート(側面図)を示しており、天然バイオマーカーと同位体濃縮されたバイオマーカーとが２つの分離した列をなしている。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１８】
【図１５】図１５は、固相表面改質されたプレートを示しており、該プレートには、結合蛋白質分析物バイオマーカー又はヌクレオチドプローブ(両方とも、濃縮された天然のもの)が高密度マイクロアレイフォーマットに交互に１６列に配列されている。定量化は、多変量(multi-variant)バイオマーカー又はヌクレオチド(両方とも、濃縮された天然のもの)を使用し、IDMS及び／又はSIDMSの直接比アルゴリズムを適用することで行なわれる。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３２】
｛課題及び解決に関する説明｝
現在、試料の調製は、測定に先行して行われなければならない。IDMS及び/又はSIDMS(種特特異性同位体希釈質量分析計(species  specific  isotope  dilution  mass  spectrometry)-SSIDMSを含む)のどれを使用する場合も、最初に、濃縮同位体種と被分析種の天然種との平衡化を達成することが必要である。もしこのステップに数日あるいは数時間かかり、機器分析及び自動化の時間がほんの数秒で済むのであれば、IDMS及び/又はSIDMSの自動化で使用することを妨げる時間差があるということである。もし試料を抽出、分離、あるいは操作をしなければならない場合、自動化可能な方法は、平衡化の速度を速めると共に抽出及び/又は分離を実行することが必要である。IDMS/SIDMSの平衡化及び自動化の促進により、効率の最適化、再現性及び時間節約がもたらされるが、前記の方法では、これまで具体的に達成されていない。本発明はこの課題に取り組んだ結果、毒性物質取扱いの安定性及び安全性を得ることができた。このことは、国土防衛、国土安全、環境及び環境科学捜査、生命科学並びに産業規則の遵守等の分野で適用する上で特に重要なことである。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９３】
レーザーイオン化を使用し、同位体を固相表面改質材料に組み入れることにより、直接及び定量的固相IDMS及びSIDMS質量分析測定が行われる。その結果、マトリックス支援レーザー脱離イオン化(MALDI)又はレーザー切断(LA)が、表面及び／又はマトリックスを除去し、被分析物の直接濃縮同位体比分析が行われる。このとき、他の次元の定量化が加えられるが、１つの追加の自由度は以前に存在しなかった。この最終の自由度は、表面固相平衡化システムの定量除去の代わりに、比を可能にして、IDMS及びSIDMSの数学的利点がもたらされる。重要な利点の１つは、最終的な定量化及び再現性を達成するために、修正された固相全体表面／マトリックス(同位体濃縮されたタグを含む)及び被分析物の除去を必要としないことである。IDMS及び／又はSIDMS条件の下では、修正された固相表面／マトリックス(同位体濃縮されたタグを含む)のいかなる部分も、校正曲線ではなく、同位体比に基づいて定量化が可能である。MALDI又はLAの他の形態では、定量化及び再現性を可能とするために表面を除去して校正曲線を作る必要があるのに対し、校正曲線なしで定量化を達成することは、IDMS及びSIDMSに固有である。それゆえ、平衡化した表面のどの部分も正確な定量化が得られ、通常は質量分析定量及びELISA定量の両定量化に伴う誤差をなくすことができる。一旦平衡化されると、マトリックス吸着及び除去効率の変化はもはや定量化の要因とはならない。イオンが質量分析計を通過する際の質量分析計の効率及び信号ドリフトは、IDMS及びSIDMS法では定量化の誤差原因として排除される。固相スパイキング(タグ付け)は、IDMS及びSIDMSに記載された直接の数学的定量化が可能であり、これはELISA及び／又は質量分析の分野ではこれまで適用されなかったものである。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０３】
＜直接ELISA＞
抗原が受動的吸着によって固相に付着される。洗浄後、酵素標識された抗体が加えられる。インキュベーション期間を経て洗浄した後、基質システムが加えられ、色を発現させることができる。