【手続補正書】
【提出日】平成25年5月7日(2013.5.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
YLEPGPVTA (配列番号１) HLA-A2複合体と結合する特性を有し、TCRアルファ可変ドメイン及び/又はTCRベータ可変ドメインを含むＴ細胞レセプター(TCR)であって、
(i)前記TCRが、配列番号２及び３の細胞外アルファ及びベータ鎖配列を有するTCRと比べて、配列番号２のそのアルファ鎖可変ドメインアミノ酸１〜109及び/又は配列番号３のベータ鎖可変ドメインアミノ酸１〜112において変異されており、
(ii)前記アルファ可変ドメインが、配列番号２のアミノ酸配列１〜109と少なくとも90%の配列同一性を有し、かつ/又は前記ベータ可変ドメインが、配列番号３のアミノ酸配列１〜112と少なくとも90%の配列同一性を有し、かつ
(iii)前記TCRが参照TCRのものの少なくとも２倍のYLEPGPVTA-HLA-A2複合体についての結合親和性及び/又は結合半減期を有し、前記参照TCRが、配列番号45の細胞外アルファ鎖配列と、配列番号46の細胞外ベータ鎖配列とを有する
ことを特徴とするTCR。
【請求項２】
前記変異が、アルファ及び/又はベータ可変ドメインの相補性決定領域の１つ以上にある請求項１に記載のTCR。
【請求項３】
前記変異が、アルファ鎖可変ドメインの相補性決定領域３及び/又はベータ鎖可変ドメインの相補性決定の１つ以上にある請求項１又は２に記載のTCR。
【請求項４】
YLEPGPVTA (配列番号１) HLA-A2複合体と結合する特性を有するＴ細胞レセプター(TCR)であって、94D位、97L位、98V位若しくは102G位の１つ以上のアミノ酸残基が変異されているものを除く、配列番号２のアミノ酸１〜109のアルファ鎖可変ドメイン配列を有し、27L位、28N位、29H位、30D位、31A位、50Q位、51I位、52V位、53N位、54D位、61A位、94S位、95I位、96G位、97G位、98P若しくは100E位の１つ以上のアミノ酸残基が変異されているものを除く、配列番号３のアミノ酸１〜112のベータ鎖可変配列を任意に有するTCR。
【請求項５】
参照TCRのものの少なくとも２倍のYLEPGPVTA-HLA-A2複合体についての結合親和性及び/又は結合半減期を有する請求項４に記載のTCR。
【請求項６】
配列番号２に示す番号付けを用いて、アルファ鎖可変ドメインアミノ酸残基94S、94T、94R、97M、98M、98Q、98G、98S、98A又は102Dの１つ以上の置換を含む請求項１〜５のいずれか１項に記載のTCR。
【請求項７】
配列番号３に示す番号付けを用いて、ベータ鎖可変ドメインアミノ酸残基27I、28F、29Q、30K、31K、50W、51A、51G、52Q、52Y、52T、53G、53F、54N、54H、61T、94L、95Y、95H、95W、95F、95S、95V、96C、97E、97A、98G、100Q又は100Pの１つ以上の置換を含む請求項１〜６のいずれか１項に記載のTCR。
【請求項８】
配列番号７、８及び９のアルファ鎖可変ドメインアミノ酸配列の１つを含む請求項１〜７のいずれか１項に記載のTCR。
【請求項９】
配列番号10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34及び35のベータ鎖可変ドメインアミノ酸配列の１つを含む請求項１〜８のいずれか１項に記載のTCR。
【請求項１０】
αβヘテロダイマーTCRであり、かつ
システイン残基が、TRACのThr 48及びTRBC1又はTRBC2のSer 57を置換し、前記システインが、TCRのアルファ及びベータ定常ドメイン間にジスルフィド結合を形成するアルファ及びベータ鎖定常ドメイン配列を有する請求項１〜９のいずれか１項に記載のTCR。
【請求項１１】
αβヘテロダイマーTCRであり、かつ
定常ドメイン配列が、TRACのエキソン２のCys4とTRBC1又はTRBC2のエキソン２のCys2との間の天然ジスルフィド結合により連結されているアルファ及びベータ鎖定常ドメイン配列を有する請求項１〜10のいずれか１項に記載のTCR。
【請求項１２】
検出可能な標識、治療薬剤、PK改変部分又はこれらのいずれかの組み合わせと会合している、請求項１〜11のいずれか１項に記載のTCR。
【請求項１３】
前記治療薬剤が、TCRのアルファ若しくはベータ鎖のＣ又はＮ末端と共有結合している抗CD3抗体である請求項12に記載のTCR。
【請求項１４】
配列番号２及び３の細胞外アルファ及びベータ鎖配列を有するTCRと比べてグリコシル化が改変されている、請求項１〜13のいずれか１項に記載のTCR。
【請求項１５】
請求項１〜14のいずれか１項に記載の少なくとも２つのTCRを含む多価TCR複合体。
【請求項１６】
請求項１〜14のいずれか１項に記載のTCRをコードするDNA又はRNA。
【請求項１７】
請求項１〜11のいずれか１項に記載のTCRを提示する単離細胞。
【請求項１８】
(i) 配列番号45のTCRアルファ鎖配列、ここで、アミノ酸１〜109は、配列番号８(ここで、１位のアミノ酸はSである)の配列で置き換えられている；
(ii) 配列番号45のTCRアルファ鎖配列、ここで、アミノ酸１〜109は、配列番号８(ここで、１位のアミノ酸はAである)の配列で置き換えられている；
(iii) 配列番号45のTCRアルファ鎖配列、ここで、アミノ酸１〜109は、配列番号８(ここで、１位のアミノ酸はGである)の配列で置き換えられている；
(iv) 配列番号45のTCRアルファ鎖配列、ここで、アミノ酸１〜109は、配列番号８(ここで、１位のアミノ酸はSである)の配列で置き換えられており、アルファ鎖のＣ末端は、配列番号45の番号付けに基づいてF196からS203まで(両端含む)の８アミノ酸が切断されている；
(v) 配列番号45のTCRアルファ鎖配列、ここで、アミノ酸１〜109は、配列番号８(ここで、１位のアミノ酸はAである)の配列で置き換えられており、アルファ鎖のＣ末端は、配列番号45の番号付けに基づいてF196からS203まで(両端含む)の８アミノ酸が切断されている；
(vi) 配列番号45のTCRアルファ鎖配列、ここで、アミノ酸１〜109は、配列番号８(ここで、１位のアミノ酸はGである)の配列で置き換えられており、アルファ鎖のＣ末端は、配列番号45の番号付けに基づいてF196からS203まで(両端含む)の８アミノ酸が切断されている；
からなる群より選択されるTCRアルファ鎖アミノ酸配列と、
(vii) 配列番号36のTCRベータ鎖-抗CD3配列(１位及び２位のアミノ酸がそれぞれD及びIである)；
(viii) 配列番号36のTCRベータ鎖-抗CD3配列(１位及び２位のアミノ酸がそれぞれA及びIである)；
(ix) 配列番号36のTCRベータ鎖-抗CD3配列(１位及び２位のアミノ酸がそれぞれA及びQである)；
(x) 配列番号36のTCRベータ鎖-抗CD3配列(１位及び２位のアミノ酸がそれぞれD及びIであり、108位〜131位のアミノ酸が配列番号44で置き換えられ、254位〜258位のアミノ酸が配列番号47で置き換えられている)；
(xi) 配列番号36のTCRベータ鎖-抗CD3配列(１位及び２位のアミノ酸がそれぞれD及びIであり、257位のアミノ酸がSであり、258位のアミノ酸がGである)；
(xii) 配列番号36のTCRベータ鎖-抗CD3配列(１位及び２位のアミノ酸がそれぞれD及びIであり、256位のアミノ酸がSであり、258位のアミノ酸がGである)；
(xiii) 配列番号36のTCRベータ鎖-抗CD3配列(１位及び２位のアミノ酸がそれぞれD及びIであり、255位のアミノ酸がSであり、258位のアミノ酸がGである)；
(xiv) 配列番号36の配列を有するTCRベータ鎖-抗CD3(１位及び２位のアミノ酸がA及びQであり、257位のアミノ酸がSであり、258位のアミノ酸がGである)；
(xv) 配列番号36の配列を有するTCRベータ鎖-抗CD3(１位及び２位のアミノ酸がA及びQであり、256位のアミノ酸がSであり、258位のアミノ酸がGである)；
(xvi) 配列番号36の配列を有するTCRベータ鎖-抗CD3(１位及び２位のアミノ酸がA及びQであり、255位のアミノ酸がSであり、258位のアミノ酸がGである)；
(xvii) 配列番号36の配列を有するTCRベータ鎖-抗CD3(１位及び２位のアミノ酸がそれぞれA及びIであり、257位のアミノ酸がSであり、258位のアミノ酸がGである)；
(xviii) 配列番号36の配列を有するTCRベータ鎖-抗CD3(１位及び２位のアミノ酸がそれぞれA及びIであり、256位のアミノ酸がSであり、258位のアミノ酸がGである)；
(xix) 配列番号36の配列を有するTCRベータ鎖-抗CD3(１位及び２位のアミノ酸がそれぞれA及びIであり、255位のアミノ酸がSであり、258位のアミノ酸がGである)
からなる群より選択されるTCRベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列と
を含む、請求項13に記載のTCR。
【請求項１９】
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(i)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(vii)であるか；
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(i)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(x)であるか；
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(vi)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(ix)であるか；
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(v)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(viii)であるか；
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(vi)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(vii)であるか；
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(i)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(xi)であるか；
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(i)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(xii)であるか；
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(i)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(xiii)であるか；
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(vi)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(xiv)であるか；
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(vi)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(xv)であるか；
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(vi)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(xvi)であるか；
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(v)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(xvii)であるか；
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(v)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(xviii)であるか；
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(v)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(xix)であるか；
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(vi)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(xi)であるか；
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(vi)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(xii)であるか；又は
前記アルファ鎖アミノ酸配列が(vi)であり、前記ベータ鎖-抗CD3アミノ酸配列が(xiii)である
請求項18に記載のTCR。