【手続補正書】
【提出日】平成24年11月19日(2012.11.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞同族レセプターと相互作用するエンベロープウイルス糖タンパク質の可溶性部分に由来し、
−  前記糖タンパク質のレセプター結合性ドメイン(RBD)の１つの一部又は全体を含有し、
−  標的細胞の少なくとも２つの個別の膜レセプターと相互作用しやすい
少なくとも２つの可溶性レセプター結合性リガンドの、標的細胞表面に存在する膜レセプターの発現の同定及び定量についての使用であって、該同定及び定量が所定の時間に又は所定の時間間隔の間に行われかつ標的細胞の生理学的状態の決定を可能にするが、ただし、PTLVに由来する２つの可溶性レセプター結合性リガンドのみを使用する場合には、RBDと相互作用する前記膜レセプターはGLUT1単独ではない、使用。
【請求項２】
前記糖タンパク質が、ガンマレトロウイルス、例えばマウス、ネコ又はテナガザルの白血病ウイルス(MLV、FeLV、GaLV)の、又はデルタレトロウイルス、例えばヒト及びサルのＴ細胞白血病ウイルス(HTLV及びSTLV)若しくはウシ白血病ウイルス(BLV)の、又はラブドウイルス、例えば水疱性口内炎ウイルス(VSV)の糖タンパク質である請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記可溶性レセプター結合性リガンドが以下のウイルス：両栄養性MLV (ampho、配列番号：１)、テナガザル白血病ウイルス(GALV、配列番号：２)、ネコ内在性ウイルス(RD114、配列番号：３)、水疱性口内炎ウイルス(VSV、配列番号：４)、異種栄養性マウス白血病ウイルス(NZB, Xeno、配列番号：10)、ネコ白血病ウイルスＣ(FelV、配列番号：19)、Envコアラレトロウイルス(KoV、配列番号：20)、Envブタ内在性レトロウイルス-B (Perv B、配列番号：22)、ヒトＴ白血病ウイルス-１(HTLV1、配列番号：27)、ヒトＴ白血病ウイルス-２(HTLV2、配列番号：28)、ヒトＴ白血病ウイルス-４(HTLV4、配列番号：31)、又はEnvウシ白血病ウイルス(BLV、配列番号：30)に属する糖タンパク質から単離された請求項１又は２に記載の使用。
【請求項４】
前記膜レセプターがCAT1、PiT2、XPR1、SMIT1、PiT1、ASCT1/ATB0、FLVCR、PAR1、PAR2、GLUT1からなるリストから選択される請求項１〜３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５】
前記標的細胞が動物の幹細胞又は造血幹細胞である請求項１〜４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項６】
前記少なくとも２つの可溶性レセプター結合性リガンドが、請求項３に規定されるリストから選択される２つの可溶性レセプター結合性リガンドの組であり、標的細胞表面に存在する少なくとも２つの膜レセプターの発現の同定及び定量を可能にする請求項１〜５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項７】
前記少なくとも２つの可溶性レセプター結合性リガンドが、請求項３に規定される３〜12の可溶性レセプター結合性リガンドの組である請求項１〜５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項８】
前記レセプター結合性リガンドが10のレセプター結合性リガンドの組であり、糖タンパク質のRBDが以下のウイルス：両栄養性MLV (ampho)、ネコ内在性ウイルス(RD114)、テナガザル白血病ウイルス(GALV)、異種栄養性マウス白血病ウイルス(NZB, Xeno)、Envコアラレトロウイルス(KoV)、Envブタ内在性レトロウイルス-Ｂ(Perv B)、ヒトＴ白血病ウイルス-２(HTLV2)、ヒトＴ白血病ウイルス-４(HTLV4)、Envウシ白血病ウイルス(BLV)、Envネコ白血病ウイルスＣ(FelV)に属する糖タンパク質から選択される請求項１〜５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項９】
前記レセプター結合性リガンドが８つのレセプター結合性リガンドの組であり、糖タンパク質のRBDが請求項３に規定され、以下のウイルス：両栄養性MLV (ampho)、ネコ内在性ウイルス(RD114)、異種栄養性マウス白血病ウイルス(NZB, Xeno)、Envコアラレトロウイルス(KoV)、Envブタ内在性レトロウイルス-Ｂ(Perv B)、ヒトＴ白血病ウイルス-２(HTLV2)、ヒトＴ白血病ウイルス-４(HTLV4)、Envウシ白血病ウイルス(BLV)に属する糖タンパク質から選択される請求項１〜５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１０】
前記少なくとも２つの可溶性レセプター結合性リガンドが請求項３に規定される４つの可溶性レセプター結合性リガンドの組である請求項１〜５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１１】
規定された生理学的状態を有する標的細胞の選択プロセスを実施するための請求項１〜１０のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１２】
以下の工程：
ａ．任意にタグでマーキングされていてもよい請求項１に規定される少なくとも２つの可溶性レセプター結合性リガンドを標的細胞と接触させて、各複合体が１つの前記レセプター結合性リガンドと前記標的細胞の１つの前記膜レセプターとにより構成される少なくとも２つの複合体を形成する工程、
ｂ．形成した各複合体を同定する工程、
ｃ．前記複合体を形成できる前記標的細胞の各膜レセプターの発現を定量する工程、
ｄ．任意に、標的細胞の膜表面に発現したレセプターを、該標的細胞内で発現した全レセプターと区別する工程
を含んでなる、標的細胞の糖タンパク質RBDに対する膜レセプターの発現のインビボ又はエキソビボ同定及び定量方法。
【請求項１３】
前記標的細胞が動物の幹細胞又は造血幹細胞である請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
以下の工程：
ａ．タグでマーキングされた請求項１に規定される少なくとも２つの可溶性レセプター結合性リガンドを標的細胞と接触させて、各複合体が１つの前記レセプター結合性リガンドと前記標的細胞の１つの前記膜レセプターとにより構成される少なくとも２つの複合体を形成する工程、
ｂ．時間T1で、形成した各複合体を検出し、前記形成した各複合体を定量する工程、
ｃ．T1より後の第２の時間T2で、前記形成した各複合体を検出し、定量する工程、
ｄ．T2で、前記複合体を形成している少なくとも１つの特定の膜レセプターの発現に変動を示す前記標的細胞を選択する工程
を含んでなる、所定の発現量で糖タンパク質RBDに対する少なくとも１つの特定の膜レセプターを発現する標的細胞のインビボ又はエキソビボ選択方法。
【請求項１５】
前記標的細胞が動物の幹細胞又は造血幹細胞である請求項１４に記載の選択方法。
【請求項１６】
以下の工程：
ａ．タグでマーキングされた請求項１に規定される少なくとも２つの可溶性レセプター結合性リガンドを標的細胞と接触させて、各複合体が１つの前記レセプター結合性リガンドと前記標的細胞の１つの前記膜レセプターとにより構成される少なくとも２つの複合体を形成する工程、
ｂ．時間T1で、形成した各複合体を検出し、前記形成した各複合体を定量する工程、
ｃ．T1より後の第２の時間T2で、前記形成した各複合体を検出し、定量する工程、
ｄ．T2で、前記複合体を形成している少なくとも１つの特定の膜レセプターの発現に変動を示す前記標的細胞を選択する工程
ｅ．前記選択された標的細胞を選抜し、増幅する工程
を含んでなる、所定の発現量で糖タンパク質RBDに対する少なくとも１つの特定の膜レセプターを発現する標的細胞のインビボ又はエキソビボ増幅方法。
【請求項１７】
前記標的細胞が動物の幹細胞又は造血幹細胞である請求項１６に記載の増幅方法。