【手続補正書】
【提出日】平成24年12月17日(2012.12.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ．ＳＮＡＲＥタンパク質を切断可能な非細胞毒性プロテアーゼと、
ｂ．哺乳動物細胞のエンドソームの中から、エンドソーム膜を横切って、前記哺乳動物細胞のサイトゾル中に前記非細胞毒性プロテアーゼを転移可能な転移ドメインと、
ｃ．第２プロテアーゼにより切断可能であるが前記非細胞毒性プロテアーゼにより切断可能でない第１破壊性切断部位であって、前記第２プロテアーゼによるその切断後にポリペプチドの効力が低下する第１破壊性切断部位と、
ｄ．エンドサイトーシスを受けて、神経筋接合部の神経細胞内のエンドソーム中に組み込まれることが可能である、前記神経細胞上の結合部位と結合するターゲティング部分（ＴＭ）と
を含むポリペプチドであって、
ｅ．前記第１破壊性切断部位が前記ＴＭ内にないことを条件とする
ポリペプチド。
【請求項２】
破壊性切断部位が、循環性プロテアーゼ、組織関連プロテアーゼ、及び細胞内プロテアーゼから選択されるプロテアーゼにより切断される、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
循環性プロテアーゼが細胞外プロテアーゼである、請求項２に記載のポリペプチド。
【請求項４】
細胞外プロテアーゼが血清プロテアーゼ又は血液凝固カスケードのプロテアーゼである、請求項３に記載のポリペプチド。
【請求項５】
組織関連プロテアーゼが、マトリクスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）である、請求項２〜４のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項６】
ＭＭＰが筋肉のＭＭＰである、請求項５に記載のポリペプチド。
【請求項７】
細胞内プロテアーゼが標的細胞に存在しないプロテアーゼである、請求項２〜６のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項８】
プロテアーゼが、トロンビン、第Ｘａ因子、ＡＤＡＭ１７、ヒト気道トリプシン様プロテアーゼ（ＨＡＴ）、ＡＣＥ（ペプチジルジペプチダーゼＡ）、エラスターゼ、フューリン、グランザイム、カスパーゼ、マトリクスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）、ＴＡＣＥ、アダマライシン、セラライシン、アスタシン、凝固第VIIａ因子、凝固第IXａ因子、凝固第XIａ因子、凝固第XIIａ因子、カリクレイン、プロテインＣ又はＭＢＰ関連セリンプロテアーゼである、請求項２〜７のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項９】
カスパーゼがカスパーゼ１〜１０のうちの１つである、請求項８に記載のポリペプチド。
【請求項１０】
非細胞毒性プロテアーゼが、クロストリジウム神経毒Ｌ鎖、若しくはＳＮＡＲＥタンパク質を切断可能なそのフラグメントを含むか、又は前記非細胞毒性プロテアーゼがＩｇＡプロテアーゼ、若しくはＳＮＡＲＥタンパク質を切断可能なそのフラグメントを含む、請求項１〜９のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１１】
非細胞毒性プロテアーゼ構成要素に存在する少なくとも１つの第１破壊性切断部位、及び／又は転移ドメインに存在する少なくとも１つの第１破壊性切断部位を含む、請求項１〜１０のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１２】
転移ドメインが、クロストリジウム神経毒転移ドメインを含む、請求項１〜１１のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１３】
ＴＭが、クロストリジウム神経毒のＨＣドメイン若しくはＨＣＣドメイン、又はニューロンと結合可能なそのフラグメントを含むか、或いは
前記ＴＭが、グルカゴン様ホルモン、ニューロホルモン、神経調節性サイトカイン、ニューロトロフィン、成長因子、軸索ガイダンスシグナル伝達分子、糖結合性タンパク質、ニューレキシンと選択的に結合するリガンド、ニューレキシン２αのリガンド、ニューレキシン２βのリガンド、ニューレキシン３αのリガンド、ニューレキシン３βのリガンド、ＷＮＴ、Ｎｇ−ＣＡＭ（ＬＩ）、ＮＣＡＭ、Ｎ−カドヘリン、ＶＩＰペプチド、ＰＡＣＡＰペプチド、アグリン−ＭＵＳＫ、基底膜ポリペプチド、及び前記ポリペプチドのいずれかのバリアント；神経調節性サイトカイン、及び前記神経調節性サイトカインのバリアントから選択されるペプチドを含む、請求項１〜１２のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１４】
神経調節性サイトカインが、毛様体神経栄養因子（ＣＮＴＦ）、グリコホリンＡ（ＧＰＡ）、白血病抑制因子（ＬＩＦ）、インターロイキン（ＩＬ）、オノスタチンＭ、カルジオトロフィン１（ＣＴ−１）、カルジオトロフィン様サイトカイン（ＣＬＣ）、ニューロロイキン、ＶＥＧＦ、インスリン様成長因子（ＩＧＦ）、及び上皮成長因子（ＥＧＦ）から選択される、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項１５】
破壊性切断部位での切断の後に、ＳＮＡＲＥタンパク質を切断する能力が低減している、請求項１〜１４のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１６】
配列番号４、６、１０、１２、１４、１６、２０、２２、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８及び３９から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１〜１５のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１７】
配列番号４、６、１０、１２、１４、１６、２０、２２、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８及び３９から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１〜１５のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１８】
配列番号４、６、１０、１２、１４、１６、２０、２２、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８及び３９から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１〜１５のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１９】
請求項１〜１８のいずれかに記載のポリペプチドをコードする核酸。
【請求項２０】
配列番号３、５、９、１１、１３、１５、１９、２１及び２３から選択される核酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有する核酸配列を含む、請求項１９に記載の核酸。
【請求項２１】
配列番号３、５、９、１１、１３、１５、１９、２１及び２３から選択される核酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する核酸配列を含む、請求項１９に記載の核酸。
【請求項２２】
配列番号３、５、９、１１、１３、１５、１９、２１及び２３から選択される核酸配列と少なくとも９５％の配列同一性を有する核酸配列を含む、請求項１９に記載の核酸。
【請求項２３】
請求項１〜１８のいずれかに記載のポリペプチドを含む、斜視、眼瞼痙攣、藪睨、ジストニア、斜頚、（ＳＮＡＲＥの下方制御又は不活性化による）細胞／筋肉の無能力化により利益を受ける美化療法（美容）の用途、眼球運動の神経筋異常又は疾患、書痙、眼瞼痙攣、歯ぎしり、ウィルソン病、振戦、チック、分節性ミオクローヌス；攣縮、慢性多発性硬化症による痙攣、異常膀胱制御をもたらす痙攣、アニムス、背部攣縮、筋肉のこり、筋収縮性頭痛、挙筋骨盤症候群、二分脊椎症、遅発性ジスキネジア、パーキンソン病及び吃音症から選択される異常又は疾患の抑制剤。
【請求項２４】
ジストニアが、痙攣性ジストニア、顎口腔ジストニア、限局性ジストニア、遅発性ジストニア、喉頭ジストニア、及び四肢ジストニアから選択される、請求項２３に記載の抑制剤。
【請求項２５】
斜頚が、痙攣性斜頚である、請求項２３又は２４に記載の抑制剤。
【請求項２６】
眼球運動の神経筋異常又は疾患が、共動斜視、上下斜視、外側直筋麻痺、眼振、及び甲状腺不全性筋疾患から選択される、請求項２３〜２５のいずれかに記載の抑制剤。