【誤訳訂正書】
【提出日】平成25年3月7日(2013.3.7)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
サケ科魚類のアルファウイルスのゲノムに由来し、
−転写プロモーター、
そして該プロモーターの下流に、かつ該プロモーターの転写制御下に、
−少なくとも５個のヌクレオチドからなるスペーサー配列と、
−サケ科魚類のアルファウイルスのゲノムＲＮＡのｃＤＮＡ、
を含んでいる組換えＤＮＡであり、
スペーサー配列が、
５’  Ｘ1ＣＴＧＡＮＧＡＲＸ2Ｂ2Ｘ’2ＹＧＡＡＡＸ3Ｂ3Ｘ’3ＴＨ  ３’  （Ｉ）、
という一般式（Ｉ）によって定義され、
該式において、Ａ、Ｔ、ＧおよびＣは通常の意味を有し、Ｈは、Ｃ、ＴまたはＡを表し、ＹはＡまたはＧを表し、ＲはＣまたはＴを表し、ＮはＡ、Ｔ、ＧまたはＣを表し、Ｘ1は、前記アルファウイルスのゲノムの５’末端の配列に相補的な配列の、少なくとも３個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチドを表し、Ｘ2は、任意の配列の、少なくとも３個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチドを表し、Ｂ2は、任意の配列の、４個または５個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチドを表し、Ｘ’2はＸ2に相補的なオリゴヌクレオチドを表し、Ｘ3は、任意の配列の、少なくとも２個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチドを表し、Ｂ3は、任意の配列の、４個または５個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチドを表し、そしてＸ’3は、Ｘ3に相補的なオリゴヌクレオチドを表していることを特徴とする、組換えＤＮＡ。
【請求項２】
サケ科魚類のアルファウイルスのｃＤＮＡインサートが一つまたは複数の発現カセットを含んでおり、該発現カセットのそれぞれが、前記サブゲノムプロモーターのコピーと、前記サブゲノムプロモーターの下流かつ該プロモーターの転写制御下に、発現させようとする異種配列またはこの配列の導入を可能にするクローニング部位を含んでいることを特徴とする、請求項１に記載の組換えＤＮＡ。
【請求項３】
サケ科魚類のアルファウイルスのＲＮＡレプリコンの調製方法であり、宿主細胞に、請求項１または請求項２に記載の組換えＤＮＡをインビトロで導入することと、前記宿主細胞を培養することを含むことを特徴とする方法。
【請求項４】
請求項３に記載の方法によって得ることのできる、弱毒化したサケ科魚類のアルファウイルスのＲＮＡレプリコン。
【請求項５】
サケ科魚類の組換えアルファウイルスの調製方法であり、請求項１または請求項２に記載の組換えＤＮＡまたは請求項４に記載のＲＮＡレプリコンを、自身のパッケージングに不可欠な前記アルファウイルスの構造タンパク質の全てが発現する宿主細胞にインビトロで導入することと、前記宿主細胞を培養することを含む方法。
【請求項６】
前記構造タンパク質の発現を可能にする全遺伝情報が前記組換えＤＮＡまたは前記ＲＮＡレプリコンに保持されていることを特徴とする、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記構造タンパク質の発現を可能にする遺伝情報の全部または一部が宿主細胞によってトランスで提供されることを特徴とする、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
請求項５〜請求項７のいずれか一つに記載の方法によって得ることのできる、弱毒化したサケ科魚類の組換えアルファウイルス。
【請求項９】
請求項１もしくは請求項２に記載の組換えＤＮＡ、請求項４に記載の弱毒化したサケ科魚類のアルファウイルスのＲＮＡレプリコン、または、請求項８に記載の弱毒化したサケ科魚類の組換えアルファウイルスの、ワクチンを得るための利用方法。
【請求項１０】
請求項８に記載の弱毒化したサケ科魚類の組換えアルファウイルスを含むワクチン。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１３】
さらに、本発明者らは、ＳＭＶのサブゲノムプロモーターの制御下で異種配列を導入するためにこの構築物を用いた。本発明者らは、この配列がこの構築物によって感染した細胞内で発現することと、この配列を含んだウイルスゲノムが通常、ウイルス粒子にパッケージングできることを見出した。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１６】
また、宿主細胞の内因性のＲＮＡポリメラーゼ、特にＲＮＡポリメラーゼＩＩによって認識されるプロモーターを使うこともできる。それは、ウイルスプロモーター、たとえば、ＣＭＶプロモーター（サイトメガロウイルス）、ＲＳＶプロモーター（ラウス肉腫ウイルス）、ＳＶ４０初期プロモーター、ＭｏＭＬＶプロモーター（モロニーマウス白血病ウイルス）などのような、哺乳動物の細胞内で異種遺伝子を発現させるために一般的に用いられているものの一つとすることができる。また、真核生物のプロモーター、たとえば、ＡＬＯＮＳＯ  ｅｔ  ａｌ．（Ｖａｃｃｉｎｅ，２１，１５９１−１６００，２００３）に記載されているような魚のプロモーターとすることもできる。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２２】
本発明にしたがった組換えＤＮＡは、選択されたサケ科魚類のアルファウイルスのゲノムＲＮＡを逆転写することで得られたｃＤＮＡから容易に構築することができる。必要なら、本発明にしたがった組換えＤＮＡについて計画されている利用法に応じて、このｃＤＮＡにさまざまな修飾を行うことができる。たとえば、一つまたは複数の制限部位の導入、ウイルスゲノムの一部の削除、とりわけ、該ウイルスの複製に必要ではない部分の削除（たとえば、構造タンパク質をコードする領域の全部または一部）、ウイルス配列の重複、異種配列の導入などである。また、これらのアルファウイルスの特性、たとえば該アルファウイルスの感染力、病原性または抗原性に対する効果をテストするための変異であってもよい。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２５】
とりわけ、本発明は、サケ科魚類のアルファウイルスから、他のアルファウイルスからすでに構築されている発現ベクター（たとえばＦＲＯＬＯＶ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９３，１１３７１−１１３７７，１９９６参照）に類似した構造の発現ベクターを構築することを可能にする。これらの発現ベクターは二つの主要なタイプとすることができ、該二つの主要なタイプとは、
−複製する能力と、自身に導入される異種配列を発現させる能力、そして、新しいウイルス粒子を産生するためにパッケージングされる能力をもったベクターであり、一般的には、サブゲノムプロモーターのコピーの制御下に置かれた有益な異種配列をアルファウイルスの完全なゲノムに導入することで該アルファウイルスの完全なゲノムから得られるベクターと、
−複製する能力と、自身に導入される異種配列を発現する能力は持っているが、新しいウイルス粒子を産生する能力は持たないベクターであり、一般的には、構造タンパク質をコードするアルファウイルスのゲノム領域を、有益な異種配列で置換することによって得られるものであり、たとえば、これらのタンパク質を発現する補助のベクターを宿主細胞に導入することにより、または、宿主細胞として、これらのタンパク質を発現する発現カセットによって安定的に形質転換された細胞株を利用することにより、構造タンパク質が宿主細胞内にトランスで存在するときにだけ、ウイルスのパッケージングが行われるベクターである。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２６】
本発明にしたがった組換えＤＮＡは、サケ科魚類のアルファウイルスのサブゲノムプロモーターの制御下で、有益な異種配列を発現させるために用いることができる。この場合、サケ科魚類のアルファウイルスのｃＤＮＡインサートは、一つまたは複数の発現カセットを含んでおり、該発現カセットのそれぞれは、前記サブゲノムプロモーターのコピーと、前記サブゲノムプロモーターの下流かつ該プロモータの転写制御下に、発現させようとする異種配列またはこの配列の導入を可能にするクローニング部位を含んでいる。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２８】
異種配列は、有益なタンパク質をコードする配列、あるいは、たとえばアンチセンスＲＮＡまたは干渉ＲＮＡのような、ＲＮＡに転写された有益な配列とすることができる。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８５】
異種遺伝子を発現する感染性組換えＳＭＶ構築物
ＧＦＰを発現する感染性の組換えウイルスを産生するため、感染性のｃＤＮＡであるｐＨＨ−ＳＤＶ−Ｔ７ｔを二つの異なる様式で修飾することで、ＧＦＰを発現する追加の発現カセットを導入した。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９９】
これらの結果は、ＳＭＶが、野生型ウイルスのゲノムよりも２０％以上長い異種核酸を含みうることを示している。