【手続補正書】
【提出日】平成24年2月17日(2012.2.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）ＡＮＰ−ＳＰアミノ酸配列１６〜２５（配列番号１２）もしくは１〜１０（配列番号１６）、
（ｂ）配列番号１３もしくは配列番号１７から選択されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列、または
（ｃ）（ａ）もしくは（ｂ）の変異体もしくは断片に結合する抗体またはその抗原結合断片。
【請求項２】
ＡＮＰ（１６〜２５）またはＡＮＰ（１〜１０）に選択的に結合する、請求項１に記載の抗体または抗原結合断片。
【請求項３】
モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、キメラ抗体、もしくはヒト化抗体または断片である、請求項１または２に記載の抗体または抗原結合断片。
【請求項４】
検出可能なマーカーを用いて標識される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合断片。
【請求項５】
対象における急性心障害（ＡＣＤ）を予測する、診断する、またはモニターするための方法であって、前記ＡＣＤの発症の４時間以内にまたは前記ＡＣＤの提示の４時間以内に前記対象から得られる生物学的試料におけるＡＮＰ−ＳＰのレベルを測定する工程および前記ＡＮＰ−ＳＰの前記レベルをコントロールからのＡＮＰ−ＳＰレベルと比較する工程を含み、前記コントロールレベルよりも高いＡＮＰ−ＳＰの測定レベルは、ＡＣＤを示す方法。
【請求項６】
対象における、急性心障害（ＡＣＤ）の治療に対する応答をモニターするための方法であって、前記ＡＣＤの発症の４時間以内にまたは前記ＡＣＤの提示の４時間以内に前記対象から得られる生物学的試料におけるＡＮＰ−ＳＰのレベルを測定する工程および前記ＡＮＰ−ＳＰの前記レベルをコントロールからのＡＮＰ−ＳＰレベルと比較する工程を含み、前記コントロールレベルからのＡＮＰ−ＳＰの前記測定レベルにおける変化は、前記治療に対する応答を示す方法。
【請求項７】
対象における心臓移植拒絶エピソードを予測する、診断する、またはモニターするための方法であって、心臓移植の４時間以内に対象から得られる生物学的試料におけるＡＮＰ−ＳＰのレベルを測定する工程および前記ＡＮＰ−ＳＰの前記レベルを、コントロールからのＡＮＰ−ＳＰレベルと比較する工程を含み、前記コントロールレベルよりも高いＡＮＰ−ＳＰの測定レベルは、移植拒絶を示す方法。
【請求項８】
対象における肺障害と急性心障害（ＡＣＤ）とを区別するための方法であって、前記障害の提示の４時間以内に対象から得られる生物学的試料におけるＡＮＰ−ＳＰのレベルを測定する工程および前記ＡＮＰ−ＳＰの前記レベルを、コントロールからのＡＮＰ−ＳＰレベルと比較する工程を含み、前記コントロールレベルよりも高い、測定ＡＮＰ−ＳＰレベルは、ＡＣＤを示す方法。
【請求項９】
対象における急性心障害（ＡＣＤ）、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害を予測する、診断する、またはモニターするための方法であって、ＡＣＤ、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害の発症の最初の４時間以内に、またはＡＣＤ、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害の臨床提示の最初の４時間以内に、前記対象から得られる生物学的試料におけるＡＮＰ−ＳＰのレベルを測定する工程を含み、ＡＮＰ−ＳＰの前記測定レベルは、コントロールからのＡＮＰ−ＳＰレベルと比較され、前記コントロールレベルよりも高いＡＮＰ−ＳＰの測定レベルは、ＡＣＤまたは移植拒絶を示す方法。
【請求項１０】
ＡＮＰ−ＳＰの前記レベルは、ＡＣＤの発症の最初の２時間、１時間、または３０分以内に測定されるか、またはＡＣＤ、心臓移植拒絶、もしくはＡＣＤ／肺障害の臨床提示の最初の２時間、１時間、または３０分以内に測定される、請求項５〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
繰り返し測定は、発症もしくは臨床提示の４〜６時間以内になされるかまたは最初の測定の２〜３時間以内になされる、請求項５〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
４０〜３００ｐｍｏｌ／Ｌまたは４２〜２００ｐｍｏｌ／Ｌまたは４５〜２００ｐｍｏｌ／Ｌまたは４５〜１５０ｐｍｏｌ／Ｌの範囲の、前記試料におけるＡＮＰ−ＳＰのレベルは、ＡＣＤもしくは心臓移植拒絶を示すまたはＡＣＤを肺障害と区別する、請求項５〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記コントロールレベルよりも３〜８倍高い、前記試料におけるＡＮＰ−ＳＰのレベルは、ＡＣＤもしくは心臓移植拒絶を示すまたはＡＣＤを肺障害と区別する、請求項５〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＡＣＤは、急性冠動脈症候群：提示されるＥＣＧ上でのＳＴ上昇を伴うＡＭＩ、不安定狭心症、および非ＳＴ上昇ＭＩ；心虚血、急性心外傷、急性薬物中毒に起因する急性心損傷、急性心筋症、ならびに心臓移植拒絶から成る群から選択される、請求項５〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記ＡＣＤは、非ＳＴ上昇ＭＩである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＡＣＤは、急性心虚血である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記生物学的試料は、血液、血漿、血清、唾液、間質液、尿、または心臓組織試料である、請求項５〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記測定工程は、
（ａ）ＡＮＰ−ＳＰを結合剤と結合させる工程および
（ｂ）結合したＡＮＰ−ＳＰのレベルを測定する工程を含む、請求項５〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記結合剤は、抗体またはその抗原結合断片である、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記抗体が結合するまたは選択的に結合するＡＮＰ−ＳＰは、ＡＮＰ−ＳＰ（配列番号１４）またはその抗原性断片もしくは変異体である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記抗体は、ＡＮＰ−ＳＰのＮ末端またはＣ末端に結合する、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記抗体または抗原結合断片は、請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗体または断片である、請求項１９〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
ＡＮＰ−ＳＰの結合は、固相上に固定されている抗体または抗原結合断片を使用して測定される、請求項１８〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
ＡＮＰ−ＳＰのレベルは、ＲＩＡ、ＥＬＩＳＡ、質量分析、蛍光免疫測定、免疫蛍光アッセイ、およびイムノラジオメトリックアッセイから選択されるアッセイを使用して測定される、請求項５〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
ＡＮＰ−ＳＰのレベルは、質量分析を使用して測定される、請求項５〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記質量分析は、ＳＥＬＤＩ、ＥＳＩ、ＭＡＬＤＩ、またはＦＴＩＣＲである、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記ＡＣＤまたは心臓移植拒絶またはＡＣＤ／肺障害の１つまたは複数の非ＡＮＰ−ＳＰマーカーのレベルを測定する工程および前記レベルをコントロールからのマーカーレベルと比較する工程をさらに含み、前記コントロールレベルからの前記測定レベルにおける偏差は、ＡＮＰ−ＳＰの前記コントロールレベルよりも高いＡＮＰ−ＳＰの測定レベルと共に、前記ＡＣＤを予測するもしくは診断するものとなる、または前記ＡＣＤ、心臓移植拒絶、もしくはＡＣＤ／肺障害をモニターするために使用することができる、請求項５〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記非ＡＮＰ−ＳＰマーカーは、トロポニンＴ、トロポニンＩ、クレアチンキナーゼ−ＭＢ、ミオグロビン、ＢＮＰ、ＮＴ−ＢＮＰ、ＢＮＰ−ＳＰ、ＬＤＨ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、およびＨ−ＦＡＢＰから成る群から選択される、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記コントロールレベルからの測定レベルにおける前記偏差は、前記非ＡＮＰ−ＳＰマーカーの、より高い測定レベルを含む、請求項２７または２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記モニタリングは、再灌流治療に対する応答のモニタリングである、請求項５〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
ＡＣＤ、心臓移植拒絶、もしくはＡＣＤ／肺障害の発症から４時間以内、またはＡＣＤ、心臓移植拒絶、もしくはＡＣＤ／肺障害の臨床提示の４時間以内に対象から得られる生物学的試料におけるＡＮＰ−ＳＰについてのアッセイであって、任意の公知の方法を使用して、前記試料におけるＡＮＰ−ＳＰのレベルを検出し、測定する工程を含むアッセイ。
【請求項３２】
ＡＮＰ−ＳＰのレベルは、ＡＮＰ−ＳＰに結合するまたは選択的に結合する結合剤へのＡＮＰ−ＳＰの結合を通して前記試料において検出される、請求項３１に記載のアッセイ。
【請求項３３】
（ａ）生物学的試料からの１つまたは複数のＡＮＰ−ＳＰポリペプチドを結合させる工程であって、前記ＡＮＰ−ＳＰポリペプチドは、群ＡＮＰ−ＳＰ（１〜１０）（配列番号１６）およびＡＮＰ−ＳＰ
１６〜２５（配列番号１２）またはその変異体もしくは断片から選択される工程ならびに
（ｂ）結合したＡＮＰ−ＳＰポリペプチドのレベルを測定する工程を含む、ＡＮＰ−ＳＰについてのアッセイ。
【請求項３４】
前記ＡＮＰ−ＳＰポリペプチドは、ＡＮＰ−ＳＰ結合剤、または請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗体もしくはその抗原結合断片を使用して結合される、請求項３３に記載のアッセイ。
【請求項３５】
前記ＡＮＰ−ＳＰのレベルは、マススペクトロメトリーを使用して測定される、請求項３１〜３４のいずれか一項に記載のアッセイ。
【請求項３６】
前記マススペクトロメトリーは、ＳＥＬＤＩ、ＥＳＩ、ＭＡＬＤＩ、またはＦＴＩＣＲである、請求項３５に記載のアッセイ。
【請求項３７】
前記測定は、基質に結合したＡＮＰ−ＳＰ抗体または抗原結合断片を含むＳＥＬＤＩプローブを提供する工程、前記抗体または断片が、生物学的試料からの１つまたは複数のＡＮＰ−ＳＰポリペプチドを捕捉するように、前記抗体または断片を前記生物学的試料と接触させる工程、およびＳＥＬＤＩを使用して、結合したＡＮＰ−ＳＰのレベルを測定する工程を含む、請求項３６に記載のアッセイ。
【請求項３８】
前記ＳＥＬＤＩは、クロマトグラフィー表面でＳＥＬＤＩバイオチップを使用して実行される、請求項３７に記載のアッセイ。
【請求項３９】
前記ＡＮＰ−ＳＰのレベルは、ＲＩＡ、ＥＬＩＳＡ、免疫蛍光アッセイ、およびイムノラジオメトリックアッセイから選択されるアッセイを使用して測定される、請求項３１〜３４のいずれか一項に記載のアッセイ。
【請求項４０】
対象における急性心障害（ＡＣＤ）、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害を予測する、診断する、またはモニターするのに使用される、ＡＮＰ−ＳＰ（配列番号１４）またはその断片もしくは変異体に結合するＡＮＰ−ＳＰ結合剤であって、前記ＡＣＤ、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害は、ＡＣＤ、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害の発症の４時間以内にまたはＡＣＤ、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害の臨床提示の４時間以内に前記対象から得られる生物学的試料におけるＡＮＰ−ＳＰの出現によって特徴づけられるＡＮＰ−ＳＰ結合剤。
【請求項４１】
ＡＮＰ−ＳＰは、４０〜３００ｐｍｏｌ／Ｌまたは４２〜２００ｐｍｏｌ／Ｌまたは４５〜２００ｐｍｏｌ／Ｌまたは４５〜１５０ｐｍｏｌ／Ｌの範囲で前記試料において存在する、請求項４０に記載のＡＮＰ−ＳＰ結合剤。
【請求項４２】
ＡＮＰ−ＳＰは、ＡＮＰ−ＳＰの平均コントロールよりも３〜７倍高いレベルで前記試料において存在する、請求項４０に記載のＡＮＰ−ＳＰ結合剤。
【請求項４３】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合断片である、請求項４０〜４２のいずれか一項に記載のＡＮＰ−ＳＰ結合剤。
【請求項４４】
対象における急性心障害（ＡＣＤ）、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害を評価するための予後ツール、診断ツール、またはモニターツールの製造における、ＡＮＰ−ＳＰ結合剤の使用であって、評価は、ＡＣＤ、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害の発症の４時間以内にまたはＡＣＤ、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害の臨床提示の４時間以内に実行される使用。
【請求項４５】
前記予後ツール、診断ツール、またはモニターツールは、０．１〜５００ｐｍｏｌ／Ｌまたは１〜３００ｐｍｏｌ／Ｌまたは２〜１００ｐｍｏｌ／Ｌまたは５〜１５０ｐｍｏｌ／Ｌの範囲におけるＡＮＰ−ＳＰレベルを測定するために較正される、請求項４４に記載の使用。
【請求項４６】
前記予後ツール、診断ツール、またはモニターツールは、ＡＮＰ−ＳＰコントロールレベルよりも３〜７倍高い範囲のＡＮＰ−ＳＰレベルを測定するために較正される、請求項４４に記載の使用。
【請求項４７】
対象における急性心障害（ＡＣＤ）、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害の予測、診断、またはモニタリングのためのＡＮＰ−ＳＰ結合剤の使用であって、予後、診断、またはモニタリングは、ＡＣＤ、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害の発症の４時間以内にまたはＡＣＤ、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害の臨床提示の４時間以内に実行される使用。
【請求項４８】
前記予測、診断、またはモニタリングは、請求項５〜３０のいずれか一項に記載の方法または請求項３１〜３９のいずれか一項に記載のアッセイを使用して達成される、請求項４７に記載の使用。
【請求項４９】
前記結合剤は、ＡＮＰ−ＳＰ（配列番号１４）またはその断片もしくは変異体に結合するまたは選択的に結合する結合剤である、請求項４４〜４８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項５０】
前記結合剤は、抗体またはその抗原結合断片である、請求項４９に記載の使用。
【請求項５１】
前記抗体または抗原結合断片は、請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合断片である、請求項５０に記載の使用。
【請求項５２】
対象における急性心障害（ＡＣＤ）、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害を評価するための予後ツール、診断ツール、またはモニターツールの製造における、請求項１〜４のいずれか一項に記載のＡＮＰ−ＳＰ抗体またはその抗原結合断片の使用。
【請求項５３】
対象における急性心障害（ＡＣＤ）、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害の予測、診断、またはモニタリングのための、請求項１〜４のいずれか一項に記載のＡＮＰ−ＳＰ抗体またはその抗原結合断片の使用。
【請求項５４】
請求項４０〜４３のいずれか一項に記載のＡＮＰ−ＳＰ結合剤を含む、急性心障害（ＡＣＤ）、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害を予測する、診断する、またはモニターするためのキットであって、前記キットは、ＡＣＤ、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害の発症の４時間以内に、またはＡＣＤ、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害の臨床提示の４時間以内に対象から得られる生物学的試料を用いる使用のためのものであるキット。
【請求項５５】
請求項４０〜４３のいずれか一項に記載の結合剤を含む、急性心障害（ＡＣＤ）、心臓（cardia）移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害を予測する、診断する、またはモニターするためのキットであって、前記キットは、０．１〜５００ｐｍｏｌ／Ｌ、好ましくは１〜３００ｐｍｏｌ／Ｌ、好ましくは２〜１００ｐｍｏｌ／Ｌの範囲におけるＡＮＰ−ＳＰレベルを測定するために較正されるキット。
【請求項５６】
請求項１〜４のいずれか一項に記載のＡＮＰ−ＳＰ抗体またはその抗原結合断片を含む、急性心障害（ＡＣＤ）、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害を予測する、診断する、またはモニターするためのキット。
【請求項５７】
前記結合剤または抗体が固定されている固相をさらに含む、請求項５４〜５６のいずれか一項に記載のキット。
【請求項５８】
発症または臨床提示の４時間以内に得られた前記生物学的試料において測定されるＡＮＰ−ＳＰレベルから、発症または臨床提示の４時間以内に、対象におけるＡＣＤ、心臓移植拒絶、またはＡＣＤ／肺障害を予測する、診断する、またはモニタリングするための説明書をさらに含む、請求項５４〜５７のいずれか一項に記載のキット。
【請求項５９】
（ａ）ＡＮＰ−ＳＰ（１６〜２５）（配列番号１２）またはその変異体もしくは断片、
（ｂ）ＡＮＰ−ＳＰ（１〜１０）（配列番号１６）またはその変異体もしくは断片、または
（ｃ）配列番号１２または配列番号１６のポリペプチドに対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％のアミノ酸同一性を有するアミノ酸配列から選択されるＡＮＰ−ＳＰポリペプチドまたはその変異体もしくは断片。