【手続補正書】
【提出日】平成25年10月8日(2013.10.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
糖タンパク質の精製のためのプロセスであって、該糖タンパク質を含む液体を下記工程：
ａ）逆相クロマトグラフィー、
ｂ）サイズ排除クロマトグラフィー、および
ｃ）疎水性相互作用クロマトグラフィー
に供することを含み、ここで、該工程が、該示した順序で行われる、プロセス。
【請求項２】
逆相クロマトグラフィー工程ａ）において、溶出用緩衝液が、有機溶媒、好ましくはイソプロパノールを含む、請求項１に記載のプロセス。
【請求項３】
サイズ排除クロマトグラフィー工程ｂ）において、緩衝液交換が行われる、請求項１または２に記載のプロセス。
【請求項４】
クロマトグラフィー工程、ろ過工程およびウイルス不活性化工程からなる群から選ばれる一つ以上の工程を追加的に含む、請求項１〜３のいずれかに記載のプロセス。
【請求項５】
前記追加の工程が、イオン交換クロマトグラフィー、親和性クロマトグラフィー、ダイアフィルトレーション、限外ろ過、ナノろ過およびウイルス不活性化からなる群から選ばれる、請求項１〜４のいずれかに記載のプロセス。
【請求項６】
アニオン交換クロマトグラフィー工程ｄ）を追加的に含む、請求項１〜５のいずれかに記載のプロセス。
【請求項７】
アニオン交換クロマトグラフィー工程ｄ）が、サイズ排除クロマトグラフィー工程ｂ）に引き続いて行われる、請求項６に記載のプロセス。
【請求項８】
アニオン交換クロマトグラフィー工程ｄ）において、少なくとも一種の塩含有溶出用緩衝液が用いられる、請求項６または７に記載のプロセス。
【請求項９】
前記糖タンパク質の荷電の異なるアイソフォームが分離される、請求項６〜８のいずれかに記載のプロセス。
【請求項１０】
前記糖タンパク質が、ＦＳＨ、ＣＧ、ＬＨおよびＴＳＨからなる群より選ばれ、好ましくはＦＳＨである、請求項１〜９のいずれかに記載のプロセス。
【請求項１１】
前記糖タンパク質が、組換えにより生成される、請求項１〜１０のいずれかに記載のプロセス。
【請求項１２】
下記工程：
（０）限外ろ過；
（１）逆相クロマトグラフィー；
（１ａ）必要に応じて限外ろ過；
（２）サイズ排除クロマトグラフィー；
（３）アニオン交換クロマトグラフィー；
（４）疎水性相互作用クロマトグラフィー；
（５）限外ろ過および／またはダイアフィルトレーション；
（６）ナノろ過
を順次行うことを含む、請求項１〜１１のいずれかに記載のプロセス。
【請求項１３】
下記工程を含む、目的の糖タンパク質を製造するためのプロセス：
ｉ）該目的の糖タンパク質を、組換えにより発現させる工程；
ｉｉ）該組換えにより発現させた目的の糖タンパク質を、該糖タンパク質を含む液体を少なくとも下記工程：
ａ）逆相クロマトグラフィー、
ｂ）サイズ排除クロマトグラフィー、および
ｃ）疎水性相互作用クロマトグラフィー
に供することにより精製する工程；
ここで、該工程が、該示した順序で行われる、プロセス。
【請求項１４】
下記工程：
ｉ）請求項１〜１２に定義された工程のうち一つ以上の工程；および／または
ｉｉ）該目的の糖タンパク質を医薬製剤の形態に製剤化する工程
のうち少なくとも一方を含む、請求項１３に記載の製造プロセス。
【請求項１５】
前記糖タンパク質が、ゴナドトロピンから選ばれ、好ましくはＦＳＨ、ＣＧ、ＬＨおよびＴＳＨから選ばれる、請求項１３または１４に記載の製造プロセス。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２８】
本発明の精製方法は、ＦＳＨなどの糖タンパク質を高純度で提供し、そのような糖タンパク質は、医薬組成物として製剤化することができる。純度は、全タンパク質を基準として、通常９０％より高く、好ましくは９５％ｗ／ｗより高く、より好ましくは９９％ｗ／ｗより高く、さらに好ましくは９９．５％ｗ／ｗより高い。さらに、本発明の精製方法は、精製条件を大幅に変更することなく規模の拡大縮小が容易に可能であり、工業的規模にまで拡大することも可能である。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
糖タンパク質の精製のためのプロセスであって、該糖タンパク質を含む液体を下記工程：
ａ）逆相クロマトグラフィー、
ｂ）サイズ排除クロマトグラフィー、および
ｃ）疎水性相互作用クロマトグラフィー
に供することを含む、プロセス。
（項目２）
前記工程が、
（１）逆相クロマトグラフィー、
（２）サイズ排除クロマトグラフィー、および
（３）疎水性相互作用クロマトグラフィー
の順序で行われる、項目１に記載のプロセス。
（項目３）
逆相クロマトグラフィー工程ａ）において、溶出用緩衝液が、有機溶媒、好ましくはイソプロパノールを含む、項目１または２に記載のプロセス。
（項目４）
サイズ排除クロマトグラフィー工程ｂ）において、緩衝液交換が行われる、項目１〜３のいずれかに記載のプロセス。
（項目５）
クロマトグラフィー工程、ろ過工程およびウイルス不活性化工程からなる群から選ばれる一つ以上の工程を追加的に含む、項目１〜４のいずれかに記載のプロセス。
（項目６）
前記追加の工程が、イオン交換クロマトグラフィー、親和性クロマトグラフィー、ダイアフィルトレーション、限外ろ過、ナノろ過およびウイルス不活性化からなる群から選ばれる、項目１〜５のいずれかに記載のプロセス。
（項目７）
アニオン交換クロマトグラフィー工程ｄ）を追加的に含む、項目１〜６のいずれかに記載のプロセス。
（項目８）
アニオン交換クロマトグラフィー工程ｄ）が、サイズ排除クロマトグラフィー工程ｂ）に引き続いて行われる、項目７に記載のプロセス。
（項目９）
アニオン交換クロマトグラフィー工程ｄ）において、少なくとも一種の塩含有溶出用緩衝液が用いられる、項目７または８に記載のプロセス。
（項目１０）
前記糖タンパク質の荷電の異なるアイソフォームが分離される、項目７〜９のいずれかに記載のプロセス。
（項目１１）
前記糖タンパク質が、ＦＳＨ、ＣＧ、ＬＨおよびＴＳＨからなる群より選ばれ、好ましくはＦＳＨである、項目１〜１０のいずれかに記載のプロセス。
（項目１２）
前記糖タンパク質が、組換えにより生成される、項目１〜１１のいずれかに記載のプロセス。
（項目１３）
下記工程：
（０）限外ろ過；
（１）逆相クロマトグラフィー；
（１ａ）必要に応じて限外ろ過；
（２）サイズ排除クロマトグラフィー；
（３）アニオン交換クロマトグラフィー；
（４）疎水性相互作用クロマトグラフィー；
（５）限外ろ過および／またはダイアフィルトレーション；
（６）ナノろ過
を順次行うことを含む、項目１〜１２のいずれかに記載のプロセス。
（項目１４）
下記工程を含む、目的の糖タンパク質を製造するためのプロセス：
ｉ）該目的の糖タンパク質を、組換えにより発現させる工程；
ｉｉ）該組換えにより発現させた目的の糖タンパク質を、該糖タンパク質を含む液体を少なくとも下記工程：
ａ）逆相クロマトグラフィー、
ｂ）サイズ排除クロマトグラフィー、および
ｃ）疎水性相互作用クロマトグラフィー
に供することにより精製する工程。
（項目１５）
下記工程：
ｉ）項目１〜１３に定義された工程のうち一つ以上の工程；および／または
ｉｉ）該目的の糖タンパク質を医薬製剤の形態に製剤化する工程
のうち少なくとも一方を含む、項目１４に記載の製造プロセス。
（項目１６）
前記糖タンパク質が、ゴナドトロピンから選ばれ、好ましくはＦＳＨ、ＣＧ、ＬＨおよびＴＳＨから選ばれる、項目１４または１５に記載の製造プロセス。