【手続補正書】
【提出日】平成24年12月25日(2012.12.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
炭素ソース、リン酸ソース、水、化合物の形成を触媒する酵素、エネルギーソース、アデノシン二リン酸（ＡＤＰ）およびアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）再生システムを含む、化合物の合成のためのin vitro無細胞システム。
【請求項２】
in vitroで合成される化合物をさらに含む、請求項１に記載のin vitro無細胞システム。
【請求項３】
化合物の形成を触媒する酵素と、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）再生システムとを含む、単離された無細胞組成物。
【請求項４】
酵素およびＡＴＰ再生システムが、同じソースまたは別々のソースからのものである、請求項３に記載の単離された無細胞組成物。
【請求項５】
in vitroの無細胞反応を形成するために、炭素のソース、リン酸のソース、水、化合物の形成を触媒する酵素、エネルギーソース、アデノシン二リン酸（ＡＤＰ）およびアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）再生システムを含む成分を提供すること、ならびに
化合物を合成するためにin vitroの無細胞反応をインキュベートすること
を含む、化合物を合成するための無細胞の方法。
【請求項６】
ＡＴＰ再生システムが光合成的ＡＴＰ再生システムであり、および／またはＡＴＰ再生システムが、植物、藻類またはシアノバクテリアから単離され、および／または任意に、ＡＴＰ再生システムがチラコイド膜を含み、および／または葉緑体を含み、および／またはＡＴＰシンターゼ、チトクロムｂ６−ｆ複合体、プラストシアニンおよび光化学系１（ＰＳ１）複合体を含む、請求項１または２に記載のin vitro無細胞システム、または請求項３または４に記載の単離された無細胞組成物、または請求項５に記載の無細胞の方法。
【請求項７】
ＰＳ１複合体が、ポリペプチドであるＰｓａＡ−ＰｓａＳならびに分子であるクロロフィル７００、フィロキノン、Ｆｅ４Ｓ４、およびカロテノイドを含み、チトクロムｂ６−ｆ複合体が、チトクロムｂ６、チトクロムｆ、鉄硫黄タンパク質、チトクロムｂ６−ｆサブユニットＩＶ、ならびに分子であるヘムｂＬ、ヘムｂＨ、ヘムｃおよびＦｅ２Ｓ２を含む、請求項６に記載のin vitro無細胞システム、または請求項６に記載の単離された無細胞組成物、または請求項６に記載の無細胞の方法。
【請求項８】
ＡＴＰ再生システムが、ＡＴＰシンターゼ、光化学系２（ＰＳ２）複合体、プラストキノンおよびチトクロムｂ６−ｆ複合体を含む、請求項１、２、６または７のいずれか一項に記載のin vitro無細胞システム、または請求項３、４、６または７のいずれか一項に記載の単離された無細胞組成物、または請求項５〜７のいずれか一項に記載の無細胞の方法。
【請求項９】
ＰＳ２複合体が、ポリペプチドＣｐ４３、Ｃｐ４７、ＰｓｂＯ、ＰｓｂＰ、ＰｓｂＱ、ＰｓｂＥ、ＰｓｂＦ、マンガン安定化タンパク質、ならびに分子であるクロロフィル６８０、フェオフィチン、キノン、ベータカロテンおよびヘムｂ５５９を含み、および／または酵素が、ライセートから得られたかまたはin vitro翻訳により合成されたポリペプチドを含み、および／または化合物が、治療用化合物、治療用化合物のための前駆体または色素であり、および／または化合物がシキミ酸であり、および／または単離された無細胞組成物またはin vitro無細胞システムまたは無細胞の方法が、３−デオキシ−Ｄ−アラビノ−ヘプツロソン酸（ＤＡＨＰ）シンターゼ、デヒドロキナ酸シンターゼ、デヒドロキナ酸デヒドラターゼ、デヒドロシキミ酸デヒドロゲナーゼおよびそれらの組み合わせからなる群より選択される酵素を含む、請求項７または８に記載のin vitro無細胞システム、または請求項７または８に記載の単離された無細胞組成物、または請求項７または８に記載の無細胞の方法。
【請求項１０】
エネルギーソースが、グルコース、グルコース−６−リン酸、ホスホエノールピルビン酸またはそれらの組み合わせを含む、請求項１、２または６〜９のいずれか一項に記載のin vitro無細胞システム、または請求項５〜９のいずれか一項に記載の無細胞の方法。
【請求項１１】
プロテアーゼ阻害剤、アミノ酸、リボソーム、化合物の形成を触媒する酵素のアミノ酸配列をコードするＲＮＡ、ＲＮＡポリメラーゼ、化合物の形成を触媒する酵素のヌクレオチド配列をコードするＤＮＡまたはそれらの組み合わせをさらに含む、請求項１、２または６〜１０のいずれか一項に記載のin vitro無細胞システム、または請求項５〜１０のいずれか一項に記載の無細胞の方法。
【請求項１２】
炭素ソースが化合物のための前駆体であり、および／または成分が１より多い工程において添加され、および／または合成された化合物を精製するための工程をさらに含む、請求項５〜１１のいずれか一項に記載の無細胞の方法。
【請求項１３】
化合物がシキミ酸である、請求項５〜１２のいずれか一項に記載の無細胞の方法。
【請求項１４】
光合成的ＡＴＰ再生システムを用いてＡＤＰからＡＴＰを生成するために光エネルギーを提供することをさらに含み、および／またはＰＳ２複合体が、ポリペプチドであるＣｐ４３、Ｃｐ４７、ＰｓｂＯ、ＰｓｂＰ、ＰｓｂＱ、ＰｓｂＥ、ＰｓｂＦ、マンガン安定化タンパク質、ならびに分子であるクロロフィル６８０、フェオフィチン、キノン、ベータカロテンおよびヘムｂ５５９を含み、および／または酵素が、ライセートから得られたかまたはin vitro翻訳により合成されたポリペプチドを含み、および／またはin vitroの無細胞反応が、３−デオキシ−Ｄ−アラビノ−ヘプツロソン酸（ＤＡＨＰ）シンターゼ、デヒドロキナ酸シンターゼ、デヒドロキナ酸デヒドラターゼ、デヒドロシキミ酸デヒドロゲナーゼ、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される酵素を含み、および／またはシキミ酸の前駆体が、ホスホエノールピルビン酸（ＰＥＰ）、エリトロース−４−リン酸（Ｅ４Ｐ）、３−デオキシ−Ｄ−アラビノ−ヘプツロソン酸（ＤＡＨＰ）、デヒドロキナ酸、デヒドロシキミ酸またはそれらの組み合わせであり、および／またはin vitroの無細胞反応が、プロテアーゼ阻害剤、アミノ酸、リボソーム、化合物の形成を触媒する酵素のアミノ酸配列をコードするＲＮＡ、ＲＮＡポリメラーゼ、化合物の形成を触媒する酵素のヌクレオチド配列をコードするＤＮＡおよびそれらの組み合わせからなる群より選択される成分を提供することをさらに含み、成分が１より多い工程において添加され、および／またはシキミ酸を精製するための工程をさらに含む、請求項１３に記載の無細胞の方法。
【請求項１５】
酵素が、３−デオキシ−Ｄ−アラビノ−ヘプツロソン酸（ＤＡＨＰ）シンターゼ、デヒドロキナ酸シンターゼ、デヒドロキナ酸デヒドラターゼ、デヒドロシキミ酸デヒドロゲナーゼ、およびそれらの組み合わせからなる群より選択され、任意に、別々のソースが、無細胞抽出物、細胞ライセート、in vitroの反応、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項１または２に記載のin vitro無細胞システム、請求項３または４に記載の単離された無細胞組成物、または請求項５に記載の無細胞の方法。
【請求項１６】
ＡＴＰ再生システムが、ホスホグルコースイソメラーゼ、ホスホフルクトキナーゼ（ＰＫＫ−Ｉ）、フルクトース二リン酸アルドラーゼ、トリオースリン酸イソメラーゼ（ＴＰＩ）、グリセルアルデヒドリン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＤＰＨ）、ホスホグリセリン酸キナーゼ（ＰＧＫ）、ホスホグリセリン酸ムターゼ（ＰＧＭ）およびエノラーゼをさらに含み、任意に、ＡＴＰ再生システムがヘキソキナーゼ（ＨＫ）をさらに含む、請求項１５に記載のin vitro無細胞システム、請求項１５に記載の単離された無細胞組成物、または請求項１５に記載の無細胞の方法。
【請求項１７】
ＡＴＰ再生システムが、エネルギーソースを用いて、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）をアデノシン二リン酸（ＡＤＰ）と無機リン酸とから生成するシステムであり、任意に、ＡＴＰ再生システムが、細胞抽出物または細胞ライセートであり、エネルギーソースが、光エネルギー、グルコース、グルコース−６−リン酸、ホスホエノールピルビン酸またはそれらの組み合わせを含む、請求項１または２に記載のin vitro無細胞システム、請求項３または４に記載の単離された無細胞組成物、または請求項５に記載の無細胞の方法。
【請求項１８】
組成物、システムまたは方法が、細胞抽出物または細胞ライセートを含む、請求項１〜１７のいずれか一項に記載のin vitro無細胞システム、単離された無細胞組成物、または無細胞の方法。