【手続補正書】
【提出日】平成24年12月13日(2012.12.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１のインフルエンザウイルスＡ亜型からの内部遺伝子セグメントＰＢ１、ＰＢ２、ＰＡ、Ｍ、ＮＰ、およびＮＳ、ならびに前記内部遺伝子セグメントが由来する前記インフルエンザウイルス亜型からの赤血球凝集素（ＨＡ）およびノイラミニダーゼ（ＮＡ）遺伝子を含み、前記内部遺伝子セグメントはインフルエンザＡ亜型の第１の株に由来し、前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子は前記インフルエンザＡ亜型における第２の株に由来する、再集合体インフルエンザウイルス。
【請求項２】
インフルエンザＡのＨ５Ｎ１株の内部遺伝子セグメントＰＢ１、ＰＢ２、ＰＡ、Ｍ、ＮＰ、およびＮＳ、ならびにＨ５Ｎ１インフルエンザＡウイルスからの赤血球凝集素（ＨＡ）およびノイラミニダーゼ（ＮＡ）遺伝子を含み、前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が同じウイルス株に由来する、精製した請求項１に記載の再集合体インフルエンザウイルス。
【請求項３】
前記内部遺伝子が第１のＨ５Ｎ１クレードからであり、前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が第２のＨ５Ｎ１クレードからである、請求項２に記載の再集合体インフルエンザウイルス。
【請求項４】
前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子、ならびに前記内部遺伝子が同じＨ５Ｎ１クレードからである、請求項２に記載の再集合体インフルエンザウイルス。
【請求項５】
前記ＨＡ遺伝子が弱毒化ウイルスを生成するように改変されている、請求項１または請求項２に記載の再集合体インフルエンザウイルス。
【請求項６】
前記ＨＡ遺伝子が多塩基性切断部位で改変されている、請求項５に記載のウイルス。
【請求項７】
哺乳動物細胞培養物中で増殖する能力を特徴とする、請求項１または請求項２に記載のウイルス。
【請求項８】
前記内部遺伝子が、
【化２０】
2012511914.tif 000001
【化２１】
2012511914.tif 000002
からなる群より選択されるＨ５Ｎ１株に由来する、請求項１に記載のウイルス。
【請求項９】
前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が、
【化２２】
2012511914.tif 000003
からなる群より選択されるＨ５Ｎ１株に由来する、請求項１に記載のウイルス。
【請求項１０】
前記内部遺伝子、ならびに前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が同じウイルス株に由来するか、または前記内部遺伝子、ならびに前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が異なるウイルス株に由来する、請求項１に記載のウイルス。
【請求項１１】
前記内部遺伝子がＨ５Ｎ１株Ａ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４からである、請求項１から１０のいずれか一項に記載のウイルス。
【請求項１２】
前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子がＨ５Ｎ１株Ａ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４からであるかまたはＨ５Ｎ１株Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／０５からである、請求項１から１１のいずれか一項に記載のウイルス。
【請求項１３】
前記ＨＡが、
【化２３】
2012511914.tif 000004
の変異によって多塩基性切断部位で改変されている、請求項１から１２のいずれか一項に記載のウイルス。
【請求項１４】
第１のインフルエンザウイルスＡ亜型からの内部遺伝子セグメントＰＢ１、ＰＢ２、ＰＡ、Ｍ、ＮＰ、およびＮＳ、ならびに前記内部遺伝子セグメントが由来する前記インフルエンザウイルス亜型からの赤血球凝集素（ＨＡ）およびノイラミニダーゼ（ＮＡ）遺伝子を含み、前記内部遺伝子セグメントはインフルエンザＡ亜型の第１の株に由来し、前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子は前記インフルエンザＡ亜型における第２の株に由来する、抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物。
【請求項１５】
前記抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物が、インフルエンザＡのＨ５Ｎ１株に由来する内部遺伝子セグメントＰＢ１、ＰＢ２、ＰＡ、Ｍ、ＮＰ、およびＮＳ、ならびにＨ５Ｎ１インフルエンザＡウイルスに由来する赤血球凝集素（ＨＡ）およびノイラミニダーゼ（ＮＡ）遺伝子を含み、前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が同じウイルス株に由来する、請求項１４に記載の抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物。
【請求項１６】
前記ＨＡ遺伝子が弱毒化ウイルスを生成するように改変されている、請求項１４または請求項１５に記載の抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物。
【請求項１７】
前記ＨＡ遺伝子が多塩基性切断部位で改変されている、請求項１６に記載の抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物。
【請求項１８】
前記インフルエンザウイルスが哺乳動物細胞培養物中で増殖する能力を特徴とする、請求項１４または請求項１５に記載の抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物。
【請求項１９】
前記内部遺伝子セグメント、ならびに前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が同じウイルス株に由来するか、または前記内部遺伝子セグメント、ならびに前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が異なるウイルス株に由来する、請求項１４に記載の抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物。
【請求項２０】
前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子がＨ５Ｎ１株Ａ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４からであるかまたはＨ５Ｎ１株Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／０５からである、請求項１４から１９のいずれか一項に記載の抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物。
【請求項２１】
前記ＨＡが、
【化２７】
2012511914.tif 000005
の変異によって多塩基性切断部位で改変されている、請求項１７から２０のいずれか一項に記載の抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物。
【請求項２２】
薬学的に許容されるキャリアをさらに含む、請求項１４から２０のいずれか一項に記載の抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物。
【請求項２３】
再集合体インフルエンザウイルスを含むワクチンであって、前記ウイルスは、
（ｉ）ＰＢ１をコードするポリヌクレオチド、ＰＡをコードするポリヌクレオチド、ＰＢ２をコードするポリヌクレオチド、Ｍをコードするポリヌクレオチド、ＮＰをコードするポリヌクレオチド、およびＮＳをコードするポリヌクレオチドであって、前記ＰＢ１、ＰＡ、ＰＢ２、Ｍ、ＮＰおよびＮＳは、インフルエンザＡウイルス亜型の第１の株に由来する、ポリヌクレオチド；ならびに
（ｉｉ）表面タンパク質ＨＡをコードするポリヌクレオチドおよび表面タンパク質ＮＡをコードするポリヌクレオチドであって、前記ＨＡおよびＮＡは、インフルエンザウイルスＡ亜型の第２の株に由来する、ポリヌクレオチド；
を含み、前記ポリヌクレオチドは、再集合したポリヌクレオチドのビリオンへのパッケージングを可能にするように作動可能に連結されている、ワクチン。
【請求項２４】
請求項２３に記載のワクチンであって、前記インフルエンザＡウイルス亜型が、Ｈ５Ｎ１である、ワクチン。
【請求項２５】
前記ＨＡ遺伝子が弱毒化ウイルスを生成するように改変されている、請求項２３または請求項２４に記載のワクチン。
【請求項２６】
前記ＨＡ遺伝子が多塩基性切断部位で改変されている、請求項２５に記載のワクチン。
【請求項２７】
前記内部遺伝子セグメント、ならびに前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が同じウイルス株に由来するか、または前記内部遺伝子セグメント、ならびに前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が異なるウイルス株に由来する、請求項２３または２４のいずれか一項に記載のワクチン。
【請求項２８】
前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子がＨ５Ｎ１株Ａ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４からであるかまたはＨ５Ｎ１株Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／０５からである、請求項２３から２７のいずれか一項に記載のワクチン。
【請求項２９】
前記ＨＡが前記多塩基性切断部位で
【化３０】
2012511914.tif 000006
の変異によって改変されている、請求項２３から２８のいずれか一項に記載のワクチン。
【請求項３０】
アジュバントをさらに含む、請求項２３から２９のいずれか一項に記載のワクチン。
【請求項３１】
前記ワクチンが不活化ワクチンである、請求項２３から３０のいずれか一項に記載のワクチン。
【請求項３２】
ＨＡ１μｇから１００μｇのＨＡ含量を含む、請求項２３から３１のいずれか一項に記載のワクチン。
【請求項３３】
被験体における、少なくとも１つの汎流行のインフルエンザウイルス株に対する免疫反応を誘発するための組成物であって、請求項１４から２２のいずれか一項に記載の抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物、または請求項２３から３２のいずれか一項に記載のワクチンを、少なくとも１つのＨ５Ｎ１インフルエンザウイルス株の感染から前記被験体を保護するのに有効な量において含む、組成物。
【請求項３４】
インフルエンザウイルスによる被験体の感染を防ぐための組成物であって、有効量の、請求項１から１３のいずれか一項に記載のウイルス、請求項１４から２２のいずれか一項に記載の抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物、または請求項２３から３２のいずれか一項に記載のワクチンを含む、組成物。
【請求項３５】
Ｈ５Ｎ１インフルエンザウイルスによる被験体の感染を防ぐための組成物であって、有効量の、請求項１から１３のいずれか一項に記載のウイルス、請求項１４から２２のいずれか一項に記載の抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物、または請求項２３から３２のいずれか一項に記載のワクチンを含む、組成物。
【請求項３６】
前記ワクチンがＨＡ１μｇから１００μｇ、ＨＡ１μｇから３０μｇ、ＨＡ１μｇから１５μｇ、ＨＡ単位１０ｎｇから１μｇのＨＡ含量を含む、請求項３５に記載の組成物。
【請求項３７】
インフルエンザＡのＨ５Ｎ１株の内部遺伝子セグメントＰＢ１、ＰＢ２、ＰＡ、Ｍ、ＮＰ、およびＮＳ、ならびにＨ５Ｎ１インフルエンザＡウイルスからの赤血球凝集素（ＨＡ）およびノイラミニダーゼ（ＮＡ）遺伝子を含む再集合体インフルエンザウイルスを含むワクチンを作製する方法であって、前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子は同じウイルス株に由来し、前記ＨＡ遺伝子は弱毒化ＨＡ遺伝子を生成するように多塩基性切断部位で改変されており、前記方法は、前記再集合体ウイルスの増殖に適する条件下で哺乳動物細胞中に、前記ウイルスをトランスフェクトすることを含む、方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７７】
なお別の一実施形態において、本発明は、バックボーン／ドナー株として、例えば、Ａ／Ａｎｎ  Ａｒｂｏｒ／６／６０（Ｈ２Ｎ２）、Ａ／Ｌｅｎｉｎｇｒａｄ／１３４／１７／５７（Ｈ２Ｎ２）、Ｂ／Ａｎｎ  Ａｒｂｏｒ／１／６６、および当技術分野において公知の他のものなど、低温適応ウイルスを用いて産生された再集合体ウイルス（ここで、内部のバックボーン遺伝子は第１の亜型からであり、ＨＡおよびＮＡ遺伝子は同じ亜型の異なる株からである）を除外するものである。
本発明の好ましい実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
第１のインフルエンザウイルスＡ亜型からの内部遺伝子セグメントＰＢ１、ＰＢ２、ＰＡ、Ｍ、ＮＰ、およびＮＳ、ならびに前記内部遺伝子セグメントが由来する前記インフルエンザウイルス亜型からの赤血球凝集素（ＨＡ）およびノイラミニダーゼ（ＮＡ）遺伝子を含み、前記内部遺伝子セグメントはインフルエンザＡ亜型の第１の株に由来し、前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子は前記インフルエンザＡ亜型における第２の株に由来する、再集合体インフルエンザウイルス。
（項目２）
インフルエンザＡのＨ５Ｎ１株の内部遺伝子セグメントＰＢ１、ＰＢ２、ＰＡ、Ｍ、ＮＰ、およびＮＳ、ならびにＨ５Ｎ１インフルエンザＡウイルスからの赤血球凝集素（ＨＡ）およびノイラミニダーゼ（ＮＡ）遺伝子を含み、前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が同じウイルス株に由来する、項目１に記載の精製した再集合体インフルエンザウイルス。
（項目３）
前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が第１のＨ５Ｎ１クレードからであり、前記内部遺伝子が第２のＨ５Ｎ１クレードからである、項目２に記載の再集合体ウイルス。
（項目４）
前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子、ならびに前記内部遺伝子が同じＨ５Ｎ１クレードからである、項目２に記載の再集合体ウイルス。
（項目５）
前記ＨＡ遺伝子が弱毒化ウイルスを生成するように改変されている、項目１または項目２に記載の再集合体ウイルス。
（項目６）
前記ＨＡ遺伝子が多塩基性切断部位で改変されている、項目５に記載のウイルス。
（項目７）
哺乳動物細胞培養物中で増殖する能力を特徴とする、項目１または項目２に記載のウイルス。
（項目８）
前記哺乳動物細胞が、ＭＲＣ−５、ＭＲＣ−９、Ｌｅｄｅｒｌｅ  １３０、Ｃｈａｎｇ
ｌｉｖｅｒおよびＷＩ−３８；Ｕ９３７、ベロ、ＣＶ−１、ＩＭＲ−９０およびＩＭＲ−９１、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、ＨＥＫ、Ｈ９、ＣＥＭおよびＣＤ４発現ＨＵＴ７８、ＰｅｒＣ６、ＢＨＫ−２１細胞、ＢＳＣ、およびＬＬＣ−ＭＫ２からなる群より選択される、項目７に記載のウイルス。
（項目９）
前記哺乳動物細胞培養物がベロ細胞培養物である、項目７に記載のウイルス。
（項目１０）
前記内部遺伝子が、
【化２０】
2012511914.tif 000007
【化２１】
2012511914.tif 000008
からなる群より選択されるＨ５Ｎ１株に由来する、項目１に記載のウイルス。
（項目１１）
前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が、
【化２２】
2012511914.tif 000009
からなる群より選択されるＨ５Ｎ１株に由来する、項目１に記載のウイルス。
（項目１２）
前記内部遺伝子、ならびに前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が同じウイルス株に由来する、項目１に記載のウイルス。
（項目１３）
前記内部遺伝子、ならびに前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が異なるウイルス株に由来する、項目１に記載のウイルス。
（項目１４）
前記内部遺伝子がＨ５Ｎ１株Ａ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４からである、項目１から１３のいずれか一項に記載のウイルス。
（項目１５）
前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子がＨ５Ｎ１株Ａ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４からである、項目１から１４のいずれか一項に記載のウイルス。
（項目１６）
前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子がＨ５Ｎ１株Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／０５からである、項目１から１４のいずれか一項に記載のウイルス。
（項目１７）
前記多塩基性切断部位の改変が、
【化２３】
2012511914.tif 000010
の変異である、項目１から１６のいずれか一項に記載のウイルス。
（項目１８）
第１のインフルエンザウイルスＡ亜型からの内部遺伝子セグメントＰＢ１、ＰＢ２、ＰＡ、Ｍ、ＮＰ、およびＮＳ、ならびに前記内部遺伝子セグメントが由来する前記インフルエンザウイルス亜型からの赤血球凝集素（ＨＡ）およびノイラミニダーゼ（ＮＡ）遺伝子を含み、前記内部遺伝子セグメントはインフルエンザＡ亜型の第１の株に由来し、前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子は前記インフルエンザＡ亜型における第２の株に由来する、抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物。
（項目１９）
前記抗原組成物が、インフルエンザＡのＨ５Ｎ１株に由来する内部遺伝子セグメントＰＢ１、ＰＢ２、ＰＡ、Ｍ、ＮＰ、およびＮＳ、ならびにＨ５Ｎ１インフルエンザＡウイルスに由来する赤血球凝集素（ＨＡ）およびノイラミニダーゼ（ＮＡ）遺伝子を含み、前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が同じウイルス株に由来する、項目１８に記載の抗原性再集合体ウイルス組成物。
（項目２０）
前記ＨＡ遺伝子が弱毒化ウイルスを生成するように改変されている、項目１８または項目１９に記載の抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物。
（項目２１）
前記ＨＡ遺伝子が多塩基性切断部位で改変されている、項目２０に記載の抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物。
（項目２２）
前記インフルエンザウイルスが哺乳動物細胞培養物中で増殖する能力を特徴とする、項目１８または項目１９に記載の抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物ウイルス。
（項目２３）
前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が、
【化２４】
2012511914.tif 000011
からなる群より選択されるＨ５Ｎ１株に由来する、項目１９に記載の抗原組成物。
（項目２４）
前記内部遺伝子が、
【化２５】
2012511914.tif 000012
【化２６】
2012511914.tif 000013
からなる群より選択されるＨ５Ｎ１株に由来する、項目１９に記載の抗原組成物。
（項目２５）
前記内部遺伝子セグメント、ならびに前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が同じウイルス株に由来する、項目１８に記載の抗原組成物。
（項目２６）
前記内部遺伝子セグメント、ならびに前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が異なるウイルス株に由来する、項目１８に記載の抗原組成物。
（項目２７）
前記内部遺伝子セグメントがＡ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４からである、項目１８から２６のいずれか一項に記載の抗原組成物。
（項目２８）
前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子がＨ５Ｎ１株Ａ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４からである、項目１８から２７のいずれか一項に記載の抗原組成物。
（項目２９）
前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子がＨ５Ｎ１株Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／０５からである、項目１８から２７のいずれか一項に記載の抗原組成物。
（項目３０）
前記多塩基性切断部位の改変が、
【化２７】
2012511914.tif 000014
の変異である、項目２１から２９のいずれか一項に記載の抗原組成物。
（項目３１）
薬学的に許容されるキャリアをさらに含む、項目１８から２９のいずれか一項に記載の抗原組成物。
（項目３２）
再集合体インフルエンザウイルスを含むワクチンであって、前記ウイルスは、
表面タンパク質ＨＡをコードするポリヌクレオチドおよび表面タンパク質ＮＡをコードするポリヌクレオチドであって、ＨＡおよびＮＡは各々、インフルエンザウイルスＡ亜型の第１の株に由来する、ポリヌクレオチド；ＰＢ１をコードするポリヌクレオチド、ＰＡをコードするポリヌクレオチド、ＰＢ２をコードするポリヌクレオチド、Ｍをコードするポリヌクレオチド、ＮＰをコードするポリヌクレオチド、ＮＳをコードするポリヌクレオチドであって、ＰＢ１、ＰＡ、ＰＢ２、Ｍ、ＮＰおよびＮＳについての前記ポリヌクレオチドは、インフルエンザＡウイルス亜型の第２の株に由来する、ポリヌクレオチド
を含み、前記ポリヌクレオチドは、再集合したポリヌクレオチドのビリオンへのパッケージングを可能にするように作動可能に連結されている、ワクチン。
（項目３３）
項目３２に記載の再集合体インフルエンザＡウイルスを含むワクチンであって、前記ウイルスが、
表面タンパク質ＨＡをコードするポリヌクレオチドおよび表面タンパク質ＮＡをコードす
るポリヌクレオチドであって、ＨＡおよびＮＡの各々はＨ５Ｎ１インフルエンザウイルスに由来する、ポリヌクレオチド；ＰＢ１をコードするポリヌクレオチド、ＰＡをコードするポリヌクレオチド、ＰＢ２をコードするポリヌクレオチド、Ｍをコードするポリヌクレオチド、ＮＰをコードするポリヌクレオチド、ＮＳをコードするポリヌクレオチドであって、ＰＢ１、ＰＡ、ＰＢ２、Ｍ、ＮＰおよびＮＳについての前記ポリヌクレオチドは、Ｈ５Ｎ１インフルエンザウイルスに由来する、ポリヌクレオチド
を含み、前記ポリヌクレオチドが、再集合したポリヌクレオチドのビリオンへのパッケージングを可能にするように作動可能に連結されている、ワクチン。
（項目３４）
前記ＨＡ遺伝子が弱毒化ウイルスを生成するように改変されている、項目３２または項目３３に記載の抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物。
（項目３５）
前記ＨＡ遺伝子が多塩基性切断部位で改変されている、項目３４に記載の抗原性再集合体インフルエンザウイルス組成物。
（項目３６）
前記内部遺伝子が、
【化２８】
2012511914.tif 000015
からなる群より選択されるＨ５Ｎ１株に由来する、項目３３に記載のワクチン。
（項目３７）
前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が、
【化２９】
2012511914.tif 000016
からなる群より選択されるＨ５Ｎ１株に由来する、項目３３に記載のワクチン。
（項目３８）
前記内部遺伝子セグメント、ならびに前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が同じウイルス株に由来する、項目３２または３３のいずれか一項に記載のワクチン。
（項目３９）
前記内部遺伝子セグメント、ならびに前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子が異なるウイルス株に由来する、項目３２または３３のいずれか一項に記載のワクチン。
（項目４０）
前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子がＨ５Ｎ１株Ａ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４からである、項目３２から３９のいずれか一項に記載のワクチン。
（項目４１）
前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子がＨ５Ｎ１株Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／０５からである、項目３２から３９のいずれか一項に記載のワクチン。
（項目４２）
前記ＨＡが前記多塩基性切断部位で
【化３０】
2012511914.tif 000017
の変異によって改変されている、項目３２から４１のいずれか一項に記載のワクチン。
（項目４３）
アジュバントをさらに含む、項目３２から４２のいずれか一項に記載のワクチン。
（項目４４）
前記ワクチンが不活化ワクチンである、項目３２から４３のいずれか一項に記載のワクチン。
（項目４５）
ＨＡ１μｇから１００μｇのＨＡ含量を含む、項目３２から４４のいずれか一項に記載のワクチン。
（項目４６）
被験体における、少なくとも１つの汎流行のインフルエンザウイルス株に対する免疫反応を誘発するための方法であって、項目１８から３１のいずれか一項に記載の抗原組成物、または項目３２から４５のいずれか一項に記載のワクチンを、少なくとも１つのＨ５Ｎ１インフルエンザウイルス株の感染から前記被験体を保護するのに有効な量において投与することを含む、方法。
（項目４７）
インフルエンザウイルスによる被験体の感染を防ぐための方法であって、有効量の、項目１から１７のいずれか一項に記載のウイルス、項目１８から３１のいずれか一項に記載の抗原組成物、または項目３２から４５のいずれか一項に記載のワクチンを前記被験体に投与することを含む、方法。
（項目４８）
Ｈ５Ｎ１インフルエンザウイルスによる被験体の感染を防ぐための方法であって、有効量の、項目１から１７のいずれか一項に記載のウイルス、項目１８から３１のいずれか一項に記載の抗原組成物、または項目３２から４５のいずれか一項に記載のワクチンを前記被験体に投与することを含む、方法。
（項目４９）
前記ワクチンがＨＡ１μｇから１００μｇのＨＡ含量を含む、項目４８に記載の方法。
（項目５０）
前記ワクチンがＨＡ１μｇから３０μｇのＨＡ含量を含む、項目４９に記載の方法。
（項目５１）
前記ワクチンがＨＡ１μｇから１５μｇを含む、項目４９に記載の方法。
（項目５２）
前記ワクチンがＨＡ単位１０ｎｇから１μｇのＨＡ含量を含む、項目４８に記載の方法。
（項目５３）
インフルエンザＡのＨ５Ｎ１株の内部遺伝子セグメントＰＢ１、ＰＢ２、ＰＡ、Ｍ、ＮＰ、およびＮＳ、ならびにＨ５Ｎ１インフルエンザＡウイルスからの赤血球凝集素（ＨＡ）およびノイラミニダーゼ（ＮＡ）遺伝子を含む再集合体インフルエンザウイルスを含むワクチンを作製する方法であって、前記ＨＡおよびＮＡ遺伝子は同じウイルス株に由来し、前記ＨＡ遺伝子は弱毒化ＨＡ遺伝子を生成するように多塩基性切断部位で改変されており、前記方法は、前記再集合体ウイルスの増殖に適する条件下で哺乳動物細胞中に、前記ウイルスをトランスフェクトすることを含む、方法。
（項目５４）
前記哺乳動物細胞が、ＭＲＣ−５、ＭＲＣ−９、Ｌｅｄｅｒｌｅ  １３０、Ｃｈａｎｇ
ｌｉｖｅｒおよびＷＩ−３８；Ｕ９３７、ベロ、ＣＶ−１、ＩＭＲ−９０およびＩＭＲ−９１、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、ＨＥＫ、Ｈ９、ＣＥＭおよびＣＤ４発現ＨＵＴ７８、ＰｅｒＣ６、ＢＨＫ−２１細胞、ＢＳＣ、およびＬＬＣ−ＭＫ２からなる群より選択される、項目５３に記載の方法。
（項目５５）
前記哺乳動物細胞がベロ細胞である、項目５３に記載の方法。