【手続補正書】
【提出日】平成25年10月28日(2013.10.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
(III)  X1-X"-X2
[式中、X1及びX2は、各々、ペプチドフラグメントを示し、X"は、チオール官能基を含むアミノ酸残基を示す。]
のポリペプチドを製造する方法であって、式：
(I)  X1-N(CH2CH2SH)2
のポリペプチドと、式：
(II)  H-X"-X2
のポリペプチドとのライゲーション反応の少なくとも1つのステップを含む、方法。
【請求項２】
前記ライゲーション反応が、ジスルフィド結合を還元する少なくとも1つの化合物の存在下で、式：
【化１】
2013509396.tif 000001
のポリペプチドを、式(II)のポリペプチドに接触させることによって行われ、式(I')のポリペプチドはライゲーション反応のための式(I)のポリペプチドにインサイシュで還元される、請求項１記載の方法。
【請求項３】
X2が、式：
(IV)  X2'-(Xi"-Xi')i=3・・・n
のペプチドフラグメントを示し、
nが３以上の整数であり、
3〜nの整数のiについて、各Xi"はチオール官能基を有するアミノ酸残基を示し、
2〜nの整数のiについて、各Xi'はペプチドフラグメントを示し、
以下：
式(I)のポリペプチドと式(II)のポリペプチドとのライゲーション反応のステップの前に、ライゲーション反応のn-2ステップの連続、1〜n-2の整数jについてライゲーション反応のj番目ステップが、式：
(V)  H-Xn-j"-Xn-j'-N（CH2CH2SH）2
（式中、残基Xn-j"のアミン官能基及び/又はチオール官能基は保護されている）
のポリペプチドと、式：
(VI)  H-（Xj"-Xj'）i=（n-j＋1)・・・n
のポリペプチドとのライゲーション反応によって、当該ライゲーション反応の最後に残基Xn-j"のチオール官能基の脱保護を経る、式：
(VII)  H-（Xj"-Xj'）i=（n-j)・・・n
のポリペプチドを形成するステップを含む、請求項１又は２記載の方法。
【請求項４】
式(V)のポリペプチドと式(VI)のポリペプチドとのライゲーション反応のn-2ステップの1以上が、式：
【化２】
2013509396.tif 000002
のポリペプチドを、式：
(VI)  H-（Xj"-Xj'）i=（n-j＋1)・・・n
（式中、jは、1〜n-2の整数である）
のポリペプチドと、ジスルフィド結合を還元する少なくとも1つの化合物の存在下で接触させることによって行われる、請求項３記載の方法。
【請求項５】
式：
【化３】
2013509396.tif 000003
（式中、X2はペプチドフラグメントを示し、X"はチオール官能基を含むアミノ酸残基を示す。）
の環状ポリペプチドを製造する方法であって、式：
(XI)  H-X"-X2-N（CH2CH2SH）2
のポリペプチドとそれ自体とのライゲーション反応の少なくとも1つのステップを含む、方法。
【請求項６】
前記ライゲーション反応が、式：
【化４】
2013509396.tif 000004
のポリペプチドを、ジスルフィド結合を還元する少なくとも1つの化合物と接触させることによって行われ、式(XI')のポリペプチドはライゲーション反応のための式(XI)のポリペプチドにインサイシュで還元される、請求項５記載の方法。
【請求項７】
前記ライゲーション反応又はライゲーション反応（複数）が、中性の水溶液中で行われる、請求項１〜６のいずれか１項記載の方法。
【請求項８】
前記ライゲーション反応又はライゲーション反応（複数）が、ジスルフィド結合を還元する、トリス（2-カルボキシエチル）ホスフィン、4-メルカプトフェニル酢酸、ジチオスレイトール、ベンジルメルカプタン及びそれらの混合物から選択される、少なくとも1つの化合物の存在下で行われる、請求項１〜７のいずれか１項記載の方法。
【請求項９】
式：
(I)  X1-N（CH2CH2SH）2
のポリペプチド、又は式：
【化５】
2013509396.tif 000005
のポリペプチド（X1は、ペプチドフラグメントを示し、基-N（CH2CH2SH）2又は
【化６】
2013509396.tif 000006
は、C-末端位にあるペプチドフラグメントX1のアミノ酸残基のC=O末端に結合される。）。
【請求項１０】
X1が、2〜300アミノ酸残基を含む、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
式：
(I)  X1-N（CH2CH2SH）2
（X1は、ペプチドフラグメントを示し、基-N（CH2CH2SH）2は、C-末端位にあるペプチドフラグメントX1のアミノ酸残基のC=O末端に結合される。）
のポリペプチドの製造方法であって、ペプチド合成の少なくとも1ステップ及びC-末端官能基化の1ステップを含む、方法。
【請求項１２】
ペプチド合成のステップが官能基化のステップに先行し、ペプチド合成の当該ステップが、式：
（IX)  X1-OH
のポリペプチドを供給し；そして、官能基化の当該ステップが以下：
式(IX)のポリペプチドを、液相中で、式：
(VIII)  NH（CH2-CH2-S-G1）2
（G1は保護基である）
のアミン化合物と反応させて、式(I)のポリペプチドを形成し；
場合により式(I)のポリペプチドを脱保護すること、
を含む、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
主骨格及びNH-（CH2CH2-S-Trt-）2官能基又はNH-（CH2CH2-S-Trt-CO-NH-）2官能基を含む、ポリペプチドの固相合成のためのポリマー樹脂支持体であって、Trtは、場合により1以上の置換基によって置換されたトリフェニルメチル基を示し；当該NH-（CH2CH2-S-Trt-）2官能基は、2つのトリフェニルメチル基によって当該主骨格に結合されるか、又は当該NH-（CH2CH2-S-Trt-CO-NH-）2官能基は、2つのアミン基によって当該主骨格に結合されている、支持体。
【請求項１４】
主骨格及びG2-AA-N-（CH2CH2-S-Trt-）2官能基又はG2-AA-N-（CH2CH2-S-Trt-CO-NH-）2官能基を含む、ポリペプチドの固相合成のためのポリマー樹脂支持体であって、Trtは、場合により1以上の置換基によって置換されたトリフェニルメチル基を示し；AAは、場合により1以上の保護基を有するアミノ酸を示し；G2は、水素原子又はアミン官能基を保護する基を示し；当該G2-AA-N-（CH2CH2-S-Trt-）2官能基は、2つのトリフェニルメチル基によって当該主骨格に結合されるか、又は当該G2-AA-N-（CH2CH2-S-Trt-CO-NH-）2官能基は、2つのアミン基によって当該主骨格に結合されている、支持体。
【請求項１５】
前記主骨格が、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、ポリエチレングリコール、セルロース、ポリエチレン、ポリエステル、ラテックス、ポリアミド、ポリジメチルアクリルアミド、ポリエチレングリコールポリスチレンコポリマー、ポリエチレングリコール-ポリアクリルアミドコポリマー骨格、及びその誘導体から選択される、請求項１３又は１４記載の支持体。
【請求項１６】
ポリペプチドの固相合成のためのポリマー樹脂支持体の製造方法であって、
ポリマー樹脂を供給し；
当該ポリマー樹脂を、式：
(VIII')  NH（CH2-CH2-S-H）2
のアミン化合物との反応によって官能基化すること、
を含む、方法。
【請求項１７】
前記ポリマー樹脂の官能基化のステップの前に、
式：
(VIII)  NH（CH2-CH2-S-G1）2
（G1は、保護基を示す）
のアミン化合物を供給し；
当該アミン化合物を脱保護して、式(VIII')のアミン化合物を得ること、
を含む、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
前記官能基化のステップが、ペプチド合成のステップに先行し；
前記官能基化のステップが以下：
プライマー支持体を供給するために、アミノ酸を、請求項１３又は１５記載のポリマー樹脂支持体に結合し；又は
請求項１４記載のポリマー樹脂支持体であるプライマー支持体を供給すること
を含み、
ペプチド合成の当該ステップが、当該プライマー支持体上のアミノ酸の結合の連続を含む、請求項１１記載の方法。
【請求項１９】
アミノ酸の前記ポリマー樹脂支持体への結合が、当該ポリマー樹脂支持体をアミノ酸ハライド又はアミノ酸及び活性化剤に接触させることを含む、請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
式：
【化７】
2013509396.tif 000007
（X1は、ペプチドフラグメントを示し、
【化８】
2013509396.tif 000008
はC-末端位にあるペプチドフラグメントX1のアミノ酸残基のC=O末端に結合される）
のポリペプチドの製造方法であって、
式：
(I)  X1-N（CH2CH2SH）2
のポリペプチドの酸化ステップを含む、方法。
【請求項２１】
請求項１１、１２、１８又は１９に記載の方法に従って式(I)及び/又は(V)又は(XI)のポリペプチドを製造するステップ、又は請求項２０記載の方法に従って式(I')及び/又は(V')又は(XI')のポリペプチドを製造するステップを含む、請求項１〜８のいずれか１項記載の方法。
【請求項２２】
医薬組成物の製造方法であって、以下：
請求項１〜８及び２１のいずれか１項記載の方法に従ってポリペプチドを製造し、及び
1以上の薬学的に許容されるアジュバントと一緒に当該ポリペプチドを製剤化すること、
を含む、方法。
【請求項２３】
診断装置の製造方法であって、以下：
請求項１〜８及び２１のいずれか１項記載の方法に従ってポリペプチドを製造し、及び
診断的使用のために好適な形態で当該ポリペプチドを製剤化すること、
を含む、方法。