【手続補正書】
【提出日】平成24年2月20日(2012.2.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第２のポリペプチドに連結された第１のポリペプチドを含む融合ポリペプチドであって、前記第１のポリペプチドがα１，４ガラクトシルトランスフェラーゼによってグリコシル化されたムチンポリペプチドであり、前記第２のポリペプチドが免疫グロブリンポリペプチドの少なくとも一領域を含む、融合ポリペプチド。
【請求項２】
前記ムチンポリペプチドが、コア２β１，６−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼによってさらにグリコシル化されたものである、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項３】
前記ムチンポリペプチドが、Ｇａｌα４Ｇａｌβ３ＧａｌＮａｃα構造またはＧａｌα４Ｇａｌβ４ＧｌｃＮａｃ構造を含むグリカンレパートリーを有する、請求項１または２に記載の融合ポリペプチド。
【請求項４】
前記ムチンポリペプチドが、ＰＳＧＬ−１、ＭＵＣ１、ＭＵＣ２、ＭＵＣ３、ＭＵＣ４、ＭＵＣ５ａ、ＭＵＣ５ｂ、ＭＵＣ５ｃ、ＭＵＣ６、ＭＵＣ１１、ＭＵＣ１２、ＣＤ３４、ＣＤ４３、ＣＤ４５、ＣＤ９６、ＧｌｙＣＡＭ−１、およびＭＡｄＣＡＭ−１またはそれらの断片からなる群から選択される、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項５】
前記ムチンポリペプチドが、Ｐ−セレクチン糖タンパク質リガンド１（ＰＳＧＬ−１）の少なくとも一領域を含む、請求項４に記載の融合ポリペプチド。
【請求項６】
前記ムチンポリペプチドが、Ｐ−セレクチン糖タンパク質リガンド１の細胞外部分を含む、請求項５に記載の融合ポリペプチド。
【請求項７】
前記第２のポリペプチドが、免疫グロブリン重鎖ポリペプチドの領域を含む、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項８】
前記第２のポリペプチドが、免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域を含む、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項９】
細菌毒素感染の症状を予防または緩和することを必要とする対象において、細菌毒素感染の症状を予防または緩和するための組成物であって、請求項１に記載の融合ポリペプチドを含む組成物。
【請求項１０】
前記融合ポリペプチドが前記対象に全身投与されることを特徴とする、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記融合ポリペプチドが前記対象に直腸内投与されることを特徴とする、請求項９に記載の組成物。
【請求項１２】
前記細菌毒素が、Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｄｙｓｅｎｔｅｒｉａ、腸管出血性大腸菌、Ａｅｒｏｍｏｎｏｎａｓ  ｃａｖｉａｅ、Ａｅｒｏｍｏｎｏｎａｓ  ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ、Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ  ｆｒｅｕｎｄｉｉおよびＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅからなる群から選択される細菌によって産生される、請求項９に記載の組成物。
【請求項１３】
前記細菌毒素が志賀毒素または志賀様毒素１である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記細菌毒素が志賀様毒素２である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１５】
ムチン−免疫グロブリン融合ポリペプチドを作製する方法であって、
ａ）
ｉ）免疫グロブリンポリペプチドの少なくとも一部分をコードする核酸に連結された、ムチンポリペプチドをコードする核酸と、
ｉｉ）α１，４ガラクトシルトランスフェラーゼポリペプチドをコードする核酸と、
ｉｉｉ）場合によって、コア２β１，６−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼをコードする核酸と
を含む細胞を準備する工程と、
ｂ）前記ムチン−免疫グロブリン融合ポリペプチドの作製を可能にする条件下で前記細胞を培養する工程であって、前記融合ポリペプチドが、Ｇａｌα４Ｇａｌβ３ＧａｌＮＡｃα構造またはＧａｌα４Ｇａｌβ４ＧｌｃＮａｃ構造を含むグリカンレパートリーを有する工程と、
ｃ）前記ムチン−免疫グロブリン融合ポリペプチドを単離する工程と
を含む方法。
【請求項１６】
前記細胞が真核細胞または原核細胞である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記真核細胞が哺乳動物細胞または酵母細胞である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記哺乳動物細胞がＣＨＯ細胞である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記原核細胞が細菌細胞である、請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
ａ）免疫グロブリンポリペプチドの少なくとも一部分をコードする核酸に連結された、ムチンポリペプチドをコードする核酸と、
ｂ）α１，４ガラクトシルトランスフェラーゼポリペプチドをコードする核酸と、
ｃ）場合によって、コア２β１，６−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼをコードする核酸と
を含む細胞。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
本発明の融合ポリペプチドを含む医薬組成物も本発明に含まれる。
本発明の好ましい実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
第２のポリペプチドに連結された第１のポリペプチドを含む融合ポリペプチドであって、前記第１のポリペプチドがα１，４ガラクトシルトランスフェラーゼによってグリコシル化されたムチンポリペプチドであり、前記第２のポリペプチドが免疫グロブリンポリペプチドの少なくとも一領域を含む、融合ポリペプチド。
（項目２）
前記ムチンポリペプチドが、コア２β１，６−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼによってさらにグリコシル化されたものである、項目１に記載の融合ポリペプチド。
（項目３）
前記ムチンポリペプチドが、Ｇａｌα４Ｇａｌβ３ＧａｌＮａｃα構造またはＧａｌα４Ｇａｌβ４ＧｌｃＮａｃ構造を含むグリカンレパートリーを有する、項目１または２に記載の融合ポリペプチド。
（項目４）
前記ムチンポリペプチドが、ＰＳＧＬ−１、ＭＵＣ１、ＭＵＣ２、ＭＵＣ３、ＭＵＣ４、ＭＵＣ５ａ、ＭＵＣ５ｂ、ＭＵＣ５ｃ、ＭＵＣ６、ＭＵＣ１１、ＭＵＣ１２、ＣＤ３４、ＣＤ４３、ＣＤ４５、ＣＤ９６、ＧｌｙＣＡＭ−１、およびＭＡｄＣＡＭ−１またはそれらの断片からなる群から選択される、項目１に記載の融合ポリペプチド。
（項目５）
前記ムチンポリペプチドが、Ｐ−セレクチン糖タンパク質リガンド１（ＰＳＧＬ−１）の少なくとも一領域を含む、項目４に記載の融合ポリペプチド。
（項目６）
前記ムチンポリペプチドが、Ｐ−セレクチン糖タンパク質リガンド１の細胞外部分を含む、項目５に記載の融合ポリペプチド。
（項目７）
前記第２のポリペプチドが、免疫グロブリン重鎖ポリペプチドの領域を含む、項目１に記載の融合ポリペプチド。
（項目８）
前記第２のポリペプチドが、免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域を含む、項目１に記載の融合ポリペプチド。
（項目９）
細菌毒素感染の症状を予防または緩和することを必要とする対象において、細菌毒素感染の症状を予防または緩和するための方法であって、前記対象に項目１に記載の融合ポリペプチドを投与する工程を含む方法。
（項目１０）
前記融合ポリペプチドが前記対象に全身投与される、項目９に記載の方法。
（項目１１）
前記融合ポリペプチドが前記対象に直腸内投与される、項目９に記載の方法。
（項目１２）
前記細菌毒素が、Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｄｙｓｅｎｔｅｒｉａ、腸管出血性大腸菌、Ａｅｒｏｍｏｎｏｎａｓ  ｃａｖｉａｅ、Ａｅｒｏｍｏｎｏｎａｓ  ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ、Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ  ｆｒｅｕｎｄｉｉおよびＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅからなる群から選択される細菌によって産生される、項目９に記載の方法。
（項目１３）
前記細菌毒素が志賀毒素または志賀様毒素１である、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
前記細菌毒素が志賀様毒素２である、項目１２に記載の方法。
（項目１５）
ムチン−免疫グロブリン融合ポリペプチドを作製する方法であって、
ａ）
ｉ）免疫グロブリンポリペプチドの少なくとも一部分をコードする核酸に連結された、ムチンポリペプチドをコードする核酸と、
ｉｉ）α１，４ガラクトシルトランスフェラーゼポリペプチドをコードする核酸と、
ｉｉｉ）場合によって、コア２β１，６−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼをコードする核酸と
を含む細胞を準備する工程と、
ｂ）前記ムチン−免疫グロブリン融合ポリペプチドの作製を可能にする条件下で前記細胞を培養する工程であって、前記融合ポリペプチドが、Ｇａｌα４Ｇａｌβ３ＧａｌＮＡｃα構造またはＧａｌα４Ｇａｌβ４ＧｌｃＮａｃ構造を含むグリカンレパートリーを有する工程と、
ｃ）前記ムチン−免疫グロブリン融合ポリペプチドを単離する工程と
を含む方法。
（項目１６）
前記細胞が真核細胞または原核細胞である、項目１５に記載の方法。
（項目１７）
前記真核細胞が哺乳動物細胞または酵母細胞である、項目１６に記載の方法。
（項目１８）
前記哺乳動物細胞がＣＨＯ細胞である、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記原核細胞が細菌細胞である、項目１６に記載の方法。
（項目２０）
ａ）免疫グロブリンポリペプチドの少なくとも一部分をコードする核酸に連結された、ムチンポリペプチドをコードする核酸と、
ｂ）α１，４ガラクトシルトランスフェラーゼポリペプチドをコードする核酸と、
ｃ）場合によって、コア２β１，６−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼをコードする核酸と
を含む細胞。