【手続補正書】
【提出日】平成23年11月22日(2011.11.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
また、本発明は、結合体化工程が、＞１０ｍＭのリン酸塩を含むリン酸緩衝液中で行なわれる、担体タンパク質に結合体化させたグルカンの作製方法；およびこのような方法によって得られる結合体に関する。
したがって、本発明は、以下の項目を提供する：
（項目１）
（ａ）β−１，３−結合および／またはβ−１，６−結合を含むグルカン；ならびに（ｂ）アジュバントを含む免疫原性組成物であって、ただし、成分（ｂ）は完全フロイントアジュバントではなく、コレラ毒素でもない、免疫原性組成物。
（項目２）
上記グルカンが単一の分子種である、項目１に記載の組成物。
（項目３）
β−１，３−結合および／またはβ−１，６−結合を含むグルカンを含む免疫原性組成物であって、該グルカンが単一の分子種であり、かつ担体タンパク質に結合体化されている、免疫原性組成物。
（項目４）
さらにアジュバントを含む、項目３に記載の組成物。
（項目５）
上記グルカンが担体タンパク質に結合体化されている、項目１または２に記載の組成物。
（項目６）
上記グルカンが上記担体タンパク質に直接結合体化されている、項目３〜５のいずれか１項に記載の組成物。
（項目７）
上記グルカンが上記担体タンパク質にリンカーによって結合体化されている、項目３〜５のいずれか１項に記載の組成物。
（項目８）
上記担体タンパク質が、細菌毒素もしくはトキソイド、またはその変異体である、項目３〜７のいずれか１項に記載の組成物。
（項目９）
上記担体タンパク質がＣＲＭ１９７である、項目８に記載の組成物。
（項目１０）
上記グルカンが、１００ｋＤａ未満（例えば、８０、７０、６０、５０、４０、３０、２５、２０または１５ｋＤａ未満）の分子量を有する、項目１〜９のいずれか１項に記載の組成物。
（項目１１）
上記グルカンが、６０個以下のグルコース単糖単位を有する、項目１〜１０のいずれか１項に記載の組成物。
（項目１２）
上記グルカンが、一部β−１，６分枝を有するβ−１，３グルカンである、項目１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
（項目１３）
上記グルカンがラミナリンである、項目１２に記載の組成物。
（項目１４）
上記グルカンのβ−１，３−結合グルコース残基およびβ−１，６−結合グルコース残基において、β−１，６−結合残基に対するβ−１，３結合グルコース残基の比が少なくとも８：１である、ならびに／またはβ−１，３結合のみによって他の残基に連結された少なくとも５つの隣接する非末端残基の配列が１つ以上存在する、項目１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
（項目１５）
上記グルカンがβ−１，３−結合グルコース残基とβ−１，６−結合グルコース残基との両方を含み、β−１，６−結合残基に対するβ−１，３結合グルコース残基の比が少なくとも８：１である、項目１３に記載の組成物。
（項目１６）
上記グルカンが排他的にβ−１，３結合を有する、項目１〜１５のいずれか１項に記載の組成物。
（項目１７）
上記グルカンがカードランである、項目１４〜１６いずれか１項に記載の組成物。
（項目１８）
薬学的に許容され得る担体を含む、項目１〜１７のいずれか１項に記載の組成物。
（項目１９）
上記アジュバントが、水酸化アルミニウムなどのアルミニウム塩；水中油型乳剤；免疫刺激性オリゴヌクレオチド；および／またはα−グリコシルセラミドの１種類以上を含む、項目１〜１８のいずれか１項に記載の組成物。
（項目２０）
上記アジュバントが、免疫刺激性オリゴヌクレオチドおよびポリカチオンオリゴペプチドを含む、項目１９に記載の組成物。
（項目２１）
哺乳動物に項目１〜２０のいずれか１項に記載の組成物を投与することを含む、哺乳動物の免疫応答を惹起するための方法。
（項目２２）
フロロタンニンをグルカンから分離し、水中１ｍｇ／ｍｌで、２７０ｎｍにおいて０．１７未満のＵＶ吸光度を有するグルカンを得る工程を含む、グルカンの精製プロセス。
（項目２３）
上記フロロタンニンが上記グルカンからデプスフィルタを用いた濾過によって分離される、項目２２に記載のプロセス。
（項目２４）
上記グルカンの上記フロロタンニン夾雑物を測定する後続の工程をさらに含む、項目２２または２３に記載のプロセス。
（項目２５）
水中１ｍｇ／ｍｌで、２７０ｎｍにおいて０．１７未満のＵＶ吸光度を有するグルカン。
（項目２６）
項目２２〜２４いずれか１項に記載のプロセスによって取得された、または取得可能なグルカン。
（項目２７）
結合体化工程が、＞１０ｍＭのリン酸塩を含むリン酸緩衝液中で行なわれる、担体タンパク質に結合体化されたグルカンの作製方法。
（項目２８）
上記結合体化工程が、９０〜１１０ｍＭのリン酸塩を含むリン酸緩衝液中で行なわれる、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
上記結合体化工程前に上記グルカンをリンカーに結合させる、項目２８に記載の方法。
（項目３０）
上記リンカーの遊離端がエステル基を含む、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
項目２７〜３０いずれか１項に記載の方法によって得られる結合体。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）β−１，３−結合および／またはβ−１，６−結合を含むグルカン；ならびに（ｂ）アジュバントを含む免疫原性組成物であって、ただし、成分（ｂ）は完全フロイントアジュバントではなく、コレラ毒素でもない、免疫原性組成物。
【請求項２】
前記グルカンが単一の分子種である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
β−１，３−結合および／またはβ−１，６−結合を含むグルカンを含む免疫原性組成物であって、該グルカンが単一の分子種であり、かつ担体タンパク質に結合体化されている、免疫原性組成物。
【請求項４】
さらにアジュバントを含む、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記グルカンが担体タンパク質に結合体化されている、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項６】
前記グルカンが前記担体タンパク質に直接結合体化されている、請求項３〜５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
前記グルカンが前記担体タンパク質にリンカーによって結合体化されている、請求項３〜５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
前記担体タンパク質が、細菌毒素もしくはトキソイド、またはその変異体である、請求項３〜７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
前記担体タンパク質がＣＲＭ１９７である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記グルカンが、１００ｋＤａ未満（例えば、８０、７０、６０、５０、４０、３０、２５、２０または１５ｋＤａ未満）の分子量を有する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記グルカンが、６０個以下のグルコース単糖単位を有する、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記グルカンが、一部β−１，６分枝を有するβ−１，３グルカンである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記グルカンがラミナリンである、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記グルカンのβ−１，３−結合グルコース残基およびβ−１，６−結合グルコース残基において、β−１，６−結合残基に対するβ−１，３結合グルコース残基の比が少なくとも８：１である、ならびに／またはβ−１，３結合のみによって他の残基に連結された少なくとも５つの隣接する非末端残基の配列が１つ以上存在する、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記グルカンがβ−１，３−結合グルコース残基とβ−１，６−結合グルコース残基との両方を含み、β−１，６−結合残基に対するβ−１，３結合グルコース残基の比が少なくとも８：１である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１６】
前記グルカンが排他的にβ−１，３結合を有する、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１７】
前記グルカンがカードランである、請求項１４〜１６いずれか１項に記載の組成物。
【請求項１８】
薬学的に許容され得る担体を含む、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１９】
前記アジュバントが、水酸化アルミニウムなどのアルミニウム塩；水中油型乳剤；免疫刺激性オリゴヌクレオチド；および／またはα−グリコシルセラミドの１種類以上を含む、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２０】
前記アジュバントが、免疫刺激性オリゴヌクレオチドおよびポリカチオンオリゴペプチドを含む、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
請求項１〜２０のいずれか１項に記載の組成物を含む、哺乳動物の免疫応答を惹起するための組成物。
【請求項２２】
フロロタンニンをグルカンから分離し、水中１ｍｇ／ｍｌで、２７０ｎｍにおいて０．１７未満のＵＶ吸光度を有するグルカンを得る工程を含む、グルカンの精製プロセス。
【請求項２３】
前記フロロタンニンが前記グルカンからデプスフィルタを用いた濾過によって分離される、請求項２２に記載のプロセス。
【請求項２４】
前記グルカンの前記フロロタンニン夾雑物を測定する後続の工程をさらに含む、請求項２２または２３に記載のプロセス。
【請求項２５】
水中１ｍｇ／ｍｌで、２７０ｎｍにおいて０．１７未満のＵＶ吸光度を有するグルカン。
【請求項２６】
請求項２２〜２４いずれか１項に記載のプロセスによって取得された、または取得可能なグルカン。
【請求項２７】
結合体化工程が、＞１０ｍＭのリン酸塩を含むリン酸緩衝液中で行なわれる、担体タンパク質に結合体化されたグルカンの作製方法。
【請求項２８】
前記結合体化工程が、９０〜１１０ｍＭのリン酸塩を含むリン酸緩衝液中で行なわれる、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記結合体化工程前に前記グルカンをリンカーに結合させる、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記リンカーの遊離端がエステル基を含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
請求項２７〜３０いずれか１項に記載の方法によって得られる結合体。