【誤訳訂正書】
【提出日】平成25年2月27日(2013.2.27)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【発明の詳細な説明】
【発明の名称】マクロファージ遊走阻止因子阻害剤としてのオキシム誘導体
【技術分野】
【０００１】
関連出願に対する相互参照
本願は、２００６年６月５日出願の米国仮出願第６０／８１１，２５８号の利益を請求する。
【０００２】
（１）本発明の分野
本発明は、一般的に、サイトカイン阻害剤に関する。より具体的には、本発明が、複数のマクロファージ転位阻害因子阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００３】
（２）関連技術の記述
セプシスは、感染に対する潜在的に致死的な全身炎症反応であるが、およそ７００，０００人に影響を及ぼし、年に２１５，０００よりも多い人々を死なせ、国民当たりの費用（コスト）＄１６，７００，０００，０００である（Ｍａｒｔｉｎら、２００３年）。セプシス発症は継続して上昇する一方（Ｏ’ＢｒｉｅｎおよびＡｂｒａｈａｍ、２００３年）、今日に至るまで、小分子治療剤は、現在、その臨床管理に関してＦＤＡにより全く認められていない。これゆえ、重篤なセプシスは、日常的で費用のかかる、しばしば致命的な病状であり、一年での死者は急性心筋梗塞のそれと同じくらいである（Ａｎｇｕｓら、２００１年）。
【０００４】
セプシスは、少なくとも一部、可溶因子により媒介されている。これらの中で、マクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）は炎症経路において重大な役割を果たすことが示されている。ＭＩＦ生物学では、ＭＩＦを炎症促進応答のマクロファージ由来経路に位置させる（Ｂｒｉｄｈｕｉｚｅｎら、２００１年；Ｌｕｅら、２００２年；Ｃａｌａｎｄｒａ、２０００年；２００１年）。ＭＩＦは、１９６０年代早期、培養単球／マクロファージのランダムな動きおよび遊走を阻害した、活性化リンパ球の産物として最初に記載された（ＧｅｏｒｇｅおよびＶａｕｇｈａｎ、１９６２年；ＢｌｏｏｍおよびＢｅｎｎｅｔｔ、１９６６年；Ｄａｖｉｄ、１９６６年）。ＭＩＦが、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで研究するに快適であった最初の非免疫グロブリン可溶因子の１種であったため、この発見は有意な興味を生んだ。
【０００５】
ＭＩＦは、免疫細胞および内分泌細胞などの、多数のタイプの細胞により産生され、現在、グルココルチコイドの抗炎症活性の炎症促進対抗レギュレーター（counter-regulator）として認識されている。Ｉｎ  ｖｉｔｒｏで、ＭＩＦ発現が、炎症促進サイトカイン（ＴＮＦ−α、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、およびＩＬ−８）のグルココルチコイド産生の抗炎症および免疫抑制効果を無効にする（ＣａｌａｎｄｒａおよびＢｕｃａｌａ、１９９７年；Ｄｏｎｎｅｌｌｙら、１９９７年）。マウスにおける、デキサメタゾンを伴う組み替え型ＭＩＦの投与が、ＬＰＳ死へのデキサメタゾンの保護効果を、完全にブロックする（Ｃａｌａｎｄｒａ、１９９５年）。ＭＩＦが、決定的に、種々の炎症疾患の病理に関与している。特に、グラム陽性、グラム陰性、および多くの微生物によるセプシスの動物モデル、ならびにＭＩＦノックアウトモデルが、セプシスのＭＩＦの重大な役割を指し示す（Ｃａｌａｎｄｒａら、２０００年；Ｂｏｚｚａら、１９９９年；Ｂｅｒｎｈａｇｅｎら、１９９３年）。これゆえ、ＭＩＦの多数の炎症促進効果は、免疫細胞活性化およびグルココルチコイドによる炎症促進サイトカインカスケードの通常の生理学的阻害を無効にするか、対抗的に調整する独特の能力と一緒に、敗血症の重大なメディエーターとしてＭＩＦを位置づける。
【０００６】
Ｉｎ  ｖｉｖｏにおける研究が、ＭＩＦは全身炎症の重要な後期作用性メディエーターであることを実証する。ネズミにおけるＭＩＦ遺伝子の欠損が致死内毒素血症スタフィロコッカス毒性ショックに対する保護を授ける（Ｂｏｚｚａら、１９９９年）。加えて、中和ＭＩＦ抗体の投与が：（ａ）ＬＰＳ誘導性致死；（ｂ）Ｅ．ｃｏｌｉ腹腔炎により誘導された致死腹腔炎およびセプシスショック；ならびに（ｃ）ＴＮＦ−α欠損マウスにおける盲腸結紮および穿刺（ＣＬＰ）により誘導された劇症セプシスショックから、マウスを保護した（Ｃａｌａｎｄｒａ、２００１年；Ｂｅｒｎｈａｇｅｎら、１９９３年）。ＴＮＦ−αおよびＩＬ−１βのような早期メディエーターに対し、ＭＩＦ放出は、ピークになって、ＣＬＰ開始５時間後に横ばい状態になり、これにより、治療処置機会の手段を提供する。その結果として、抗ＭＩＦ治療は、抗ＴＮＦ−α治療および抗ＩＬ−１治療よりも潜在的に有益であり、このことが重篤なセプシス患者にとって限定的な利益であることを実証する（Ａｂｒａｈａｍ、１９９９年）。対照的に、セプシス誘導８時間後の抗ＭＩＦ抗体の投与が、コントロールのＩｇＧを受けた動物に対して、マウスＣＬＰ敗血症モデルにおける有意な保護を授ける。ヒトでの研究も、セプシスショックにおけるＭＩＦに関する役割を裏付ける（Ｂｅｉｓｈｕｉｚｅｎら、２００１年；Ｃａｌａｎｄｒａら、２０００年）。外傷患者の損傷もしくは感染の重篤さと彼らの血清中ＭＩＦ濃度との間で相関がある（重篤なセプシス患者（６倍）およびセプシスショック患者（１５倍）で示される上昇した血中ＭＩＦ濃度を伴う）ことが立証されている。（Ｃａｌａｎｄｒａら、２０００年）。まとめると、これらの結果は、ＭＩＦアンタゴニストが強力な抗炎症剤（ＭＩＦの直接的な炎症活性を中和することにより、及び内因性副腎皮質ステロイドもしくは投与副腎皮質ステロイドの抗炎症の利益を回復することにより、双方で作用する）であることを示唆する。
【０００７】
３次元Ｘ線結晶構造解析（ｇｒａｐｈｉｃ）研究は、ＭＩＦがホモ３量体（トリマー）として現れることを示す（Ｓｕｚｕｋｉら、１９９４年；Ｔａｙｌｏｒら、１９９９年；Ｓｕｇｉｍｏｔｏら、１９９５年；Ｋａｔｏら、１９９６年；ＬｏｌｉｓおよびＢｕｃａｌａ、１９９６年；Ｓｕｇｉｍｏｔｏら、１９９６年；Ｓｕｎら、１９９６年；Ｓｕｚｕｋｉら、１９９６年；Ｌｕｂｅｔｓｋｙら、１９９９年；Ｏｒｉｔａら、２００１年；Ｌｕｂｅｔｓｋｙら、２００２年）。ＭＩＦは、Ｄ，Ｌ−ドーパクロームメチルエステルの対応するインドール誘導体への互変異性化を触媒できる独特の能力を保有する（Ｒｏｓｅｎｇｒｅｎら、１９９６年）。ごく最近、フェニルピルビン酸およびｐ−ヒドロキシフェニルピルビン酸が、ＭＩＦの基質であることが見いだされた（Ｍａｔｓｕｎａｇａら、１９９９ａ；Ｒｏｓｅｎｇｒｅｎら、１９９７年；Ｍａｔｓｕｎａｇａら、１９９９ｂ）。ｐ−ヒドロキシフェニルピルビン酸と複合体化されたＭＩＦの結晶構造が、該ホモ３量体（トリマー）の隣接２サブユニット間で形成する疎水空洞中にある活性部位を同定した（Ｌｕｂｅｔｓｋｙら、１９９９年）。Ｐｒｏ−１をセリン（Ｐ１−ｓ）もしくはグリシン（Ｐ１−ｇ）に置換する部位特異性変異誘発が、Ｄ−ドーパクロームとｐ−ヒドロキシフェニルピルビン酸との互変異性化酵素（トートメラーゼ）活性のない突然変異体を生じるため、プロリン（該活性部位のＰｒｏ−１）が、酵素活性に関する重要な残基であるようである。（Ｌｕｂｅｔｓｋｙら、１９９９年；Ｂｅｎｄｒａｔら、１９９７年；Ｓｗｏｐｅら、１９９８年）。
【０００８】
互変異性化酵素（トートメラーゼ）触媒活性とＭＩＦのサイトカイン活性と相関が、幾つかの研究により裏付けられ、ここで、寄生線虫たるＢｒｕｇｉａ  ｍａｌａｙｉ（Ｂｍ）由来のヒトＭＩＦの同族体の構造および互変異性化速度が特徴化された。ＢｍのＭＩＦ突然変異体Ｐ１−ｇが、その親のＢｍのＭＩＦおよびヒトのＭＩＦに比べ、ＴＮＦ−α産生およびヒトマクロファージケモスタチック活性の誘導が１／１０の活性である（Ｚａｎｇら、２００２年）。加えて、Ｐ１−ｇ突然変異体は、活性化好中球におけるスーパーオキシドの発生を刺激できる能力を非常に損傷される（Ｓｗｏｐｅら、１９９８年）。また、ＭＩＦのＰ１−ａ突然変異体（その互変異性化酵素（トートメラーゼ）活性を失っている。）は、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）ｍＲＮＡレベルを高められる能力を失う（Ｏｎｏｄｅｒａら、２０００年）。しかしながら、そのＰｒｏ−１領域単独の突然変異では、そのグルココルチコイド対抗調節活性およびその単球化学走化性阻害を廃するに充分でなく（Ｂｅｎｄｒａｔら、１９９７年；Ｈｅｒｍａｎｏｗｓｋｉ−Ｖｏｓａｔｋａら、１９９９年）、欠失ＭＩＦ突然変異体も、ＭＩＦ結合／活性におけるそのカルボキシ末端に関する役割を示す（Ｋｌｅｅｍａｎｎら、２０００年；Ｍｉｓｃｈｋｅら、１９９７年）。
【０００９】
マクロファージ活性化が、炎症における早期ステップであり、ＴＮＦのような炎症誘導サイトカインの増加に至り、組織損傷を生じる。ＭＩＦが、当初、この名が示すとおり、マクロファージの遊走を規制すると示された。しかしながら、より最近の研究が、ＭＩＦの主要な活性は抗炎症ステロイド応答を抑圧できる能力であることを示している。これゆえ、治療標的としてのＭＩＦに対する合理性は、ＭＩＦをブロックするとセプシスおよび内毒素血症における炎症カスケードを弱め、生存率を向上させることである。
【００１０】
幾つかの研究において、抗ＭＩＦ中和抗体の投与が、：（ａ）ＬＰＳ誘発性致死から；（ｂ）Ｅ．ｃｏｌｉによる腹腔炎により誘導された致死腹腔炎およびセプシスショックに対し；そして（ｃ）ＴＮＦ−α欠損マウスにおける盲腸結紮（ＣＬＰ）および穿刺により誘導された致死敗血症に対し、ネズミを保護する。
【００１１】
化合物たる（Ｓ，Ｒ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾール酢酸メチルエステル（ＩＳＯ−１）が、最近、ＭＩＦ活性阻害剤として設計（デザイン）された（ＰＣＴ公開ＷＯ０２／１００３３２）。ＩＳＯ−１に複合体化されたＭＩＦの結晶構造が、疎水ポケットに結合することを表した。Ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて、ＩＳＯ−１は、ＬＰＳ処理マクロファージによるＴＮＦ放出の６０％を阻害する。Ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、４０ｍｇ／ｋｇでのＩＳＯ−１の腹腔内投与が、内毒素血症およびセプシスにおける生存率を増加させた（Ａｌ−Ａｂｅｄら、２００５年）。これらの結果が、セプシス動物治療用抗ＭＩＦモノクローナル抗体に匹敵する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
ＩＳＯ−１構造は、ＭＩＦ触媒作用によるドーパクローム互変異性化構造を模倣するように元より設計されたＭＩＦ酵素活性シッフ塩基（シッフベース）阻害剤構造を取り込む。ＩＳＯ−１が、穏やかで中庸な抗炎症活性を有する一方、ＩＳＯ−１のみの構造の周辺に着目したライブラリーの合成は、有意にＭＩＦ阻害剤活性を向上させなかった。これゆえ、新しい分子スキャッフォールドが、さらなるＭＩＦ阻害剤を同定するのに必要とされている。本発明は、係る必要性を課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
従って、本発明者らはＭＩＦを阻害する化合物を同定した。これらの化合物は哺乳類における炎症を治療するか、もしくは、予防するのに有用である。
【００１４】
従って、本発明は、式Ｉ：
【００１５】
【化１】
2009539838.tif 000001
（式中、Ｒ1が、独立して、単一もしくは多重置換の、Ｈ、ＯＨ、Ｒ5、Ｎ（Ｒ5）、ＳＲ5、もしくはハロゲンであり；
Ｒ2が、環構造を含み、ここで、該環構造中の１原子が、Ｒ3に結合する炭素に結合しており；
Ｒ3が、Ｏ、Ｃ（Ｒ5）2、もしくはＳであり；かつ
Ｒ4が、Ｈ、Ｒ5、もしくはハロゲンであり；式中：
Ｒ5が、独立に、Ｈ、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルカノイル、または直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルコキシである。）
の化合物、または、これらの医薬として許容可能な塩、エステル、もしくは互変異性体（トートマー）に関する。
【００１６】
本発明が、医薬として許容可能な賦形剤において、上の化合物、または、これらの医薬として許容可能な塩を含む医薬組成物にも関する。
【００１７】
本発明は、さらに、式Ｉ： 
【００１８】
【化２】
2009539838.tif 000002
（式中：
Ｒ1が、独立して、単一もしくは多重置換の、Ｈ、ＯＨ、Ｒ5、Ｎ（Ｒ5）、ＳＲ5、もしくはハロゲンであり、ここで、少なくとも１つの置換がハロゲンであり；
Ｒ2が、環構造を含み、ここで、該環構造中の１原子が、Ｒ3に結合する炭素に結合しており；
Ｒ3が、Ｏ、Ｃ（Ｒ5）2、もしくはＳであり；かつ
Ｒ4が、Ｈ、Ｒ5、もしくはハロゲンであり；式中：
Ｒ5が、独立して、Ｈ、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルカノイル、または直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルコキシである。）
の化合物、または、これらの医薬として許容可能な塩、エステル、もしくは互変異性体（トートマー）に関する。本発明は、これらの化合物のいずれかを含む医薬組成物をも包含する。
【００１９】
また、本発明は、式Ｉ： 
【００２０】
【化３】
2009539838.tif 000003
（式中：
Ｒ1が、独立して、単一もしくは多重置換の、Ｈ、ＯＨ、Ｒ5、Ｎ（Ｒ5）、ＳＲ5、もしくはハロゲンであり；
Ｒ2が、パラ（ｐ−）ヒドロキシメチルフェニルであり；
Ｒ3が、Ｏ、Ｃ（Ｒ5）2、もしくはＳであり；かつ
Ｒ4が、Ｈ、Ｒ5、もしくはハロゲンであり；式中：
Ｒ5が、独立して、Ｈ、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルカノイル、または直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルコキシである。）
の化合物、または、これらの医薬として許容可能な塩、エステル、もしくは互変異性体（トートマー）に関する。
【００２１】
本発明が、更に、式ＩＩＩ：
【００２２】
【化４】
2009539838.tif 000004
（式中：
Ｒ1が、環構造を含み、ここで、該環構造中の１原子が、Ｒ2に結合する炭素に結合しており；
Ｒ2およびＲ3が、独立して、Ｏ、Ｃ（Ｒ5）2、もしくはＳであり；
Ｒ4が、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルカノイル、または直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルコキシであり；
Ｒ5が、独立して、Ｈ、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルカノイル、または直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルコキシである。）
の化合物に関する。本発明は、これらの化合物のいずれかを含む医薬組成物をも包含する。
【００２３】
また、本発明は、哺乳類におけるマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）活性を阻害する方法に関する。これら方法が、該哺乳類におけるＭＩＦ活性を阻害するに有効な量で、上で同定された医薬組成物のいずれかを該哺乳類に投与することを含む。
【００２４】
加えて、本発明は、哺乳類におけるマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）活性を阻害する別の方法にも関する。これら方法は、該哺乳類におけるＭＩＦ活性を阻害するに有効な量で医薬組成物を該哺乳類に投与することを含む。これらの方法において、該医薬組成物が、医薬として許容可能な賦形剤中に、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物、または、これらの医薬として許容可能な塩、エステル、もしくは互変異性体（トートマー）を含み、ここで、式Ｉおよび式ＩＩが：
【００２５】
【化５】
2009539838.tif 000005
であり、式中：
Ｒ1が、独立して、単一もしくは多重置換の、Ｈ、ＯＨ、Ｒ5、Ｎ（Ｒ5）、ＳＲ5、もしくはハロゲンであり；
Ｒ2が、環構造を含み、ここで、該環構造中の１原子が、Ｒ3に結合する炭素に結合しており；
Ｒ3が、Ｏ、Ｃ（Ｒ5）2、もしくはＳであり；かつ
Ｒ4が、Ｈ、Ｒ5、もしくはハロゲンであり；式中：
Ｒ5が、独立して、Ｈ、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルカノイル、または直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルコキシである。
【００２６】
更に、本発明は、哺乳類における炎症を治療するか、もしくは、予防する方法に関する。これら方法は、該哺乳類における炎症を治療するかもしくは予防するのに有効な量で、上で同定された医薬組成物のいずれかを該哺乳類に投与することを含む。
【００２７】
本発明は、哺乳類における炎症を治療するか、もしくは、予防する他の方法にも関する。これら方法は、該哺乳類における炎症を治療するかもしくは予防するのに有効な量で、医薬組成物を該哺乳類に投与することを含み、ここで、該医薬組成物は、医薬として許容可能な賦形剤中に、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物、または、これらの医薬として許容可能な塩、エステル、もしくは互変異性体（トートマー）を含む。式Ｉおよび式ＩＩが：
【００２８】
【化６】
2009539838.tif 000006
であり、式中：
Ｒ1が、独立して、単一もしくは多重置換の、Ｈ、ＯＨ、Ｒ5、Ｎ（Ｒ5）、ＳＲ5、もしくはハロゲンであり；
Ｒ2が、環構造を含み、ここで、該環構造中の１原子が、Ｒ3に結合する炭素に結合しており；
Ｒ3が、Ｏ、Ｃ（Ｒ5）2、もしくはＳであり；かつ
Ｒ4が、Ｈ、Ｒ5、もしくはハロゲンであり；式中：
Ｒ5が、独立に、Ｈ、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルカノイル、または直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルコキシである。
【００２９】
加えて、本発明は、セプシス、敗血症（ｓｅｐｔｉｃｅｍｉａ）、および／または内毒素ショックを有する哺乳類を治療する方法に関する。これら方法は、セプシス、敗血症（ｓｅｐｔｉｃｅｍｉａ）、および／または内毒素ショックを治療するのに充分な量で、上で同定された医薬組成物のいずれかを該哺乳類に投与することを含む。
【００３０】
本発明は、更に、セプシス、敗血症（ｓｅｐｔｉｃｅｍｉａ）、および／または内毒素ショックを有する哺乳類を治療する更なる方法に関する。これら方法が、セプシス、敗血症（ｓｅｐｔｉｃｅｍｉａ）、および／または内毒素ショックを治療するのに充分な量で、ある化合物を該哺乳類に投与することを含み、ここで、該化合物が：
【００３１】
【化７】
2009539838.tif 000007
である。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】Ｃｙｃ−Ｏｘｉオキシム化合物の合成に関する原理を示す。
【図２】３種のマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）阻害剤を示す。
【図３】Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１が、ＬＰＳ処理マクロファージにおけるグルココルチコイドを規制できるＭＩＦの能力を抑圧することを樹立している実験結果のグラフである。簡潔に言えば、ヒト末梢血からの単球（モノサイト）誘導巨大食細胞（マクロファージ）が、０．５μｇ／ｍｌリポ多糖（リポポリサッカライド、ＬＰＳ）添加前、デキサメタゾン（１０-9）、もしくは、デキサメタゾン＋ＭＩＦ（３ｎＭ精製天然ＭＩＦ）と種々の濃度のＣｙｃ−Ｏｘｉ−１１（０、０．０１、０．１、および１ｍＭ）でプレインキュベートされた。ＴＮＦ−α産生が、次いで、測定された。示されたデータが、２回繰り返された実験における３重のウェルの平均±ＳＤである。
【図４】Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１が、ＬＰＳ刺激マクロファージからのＴＮＦ放出のＭＩＦ誘導を阻害することを樹立している実験結果のグラフである。簡潔に言えば、ヒト末梢血からの単球（モノサイト）誘導巨大食細胞（マクロファージ）が、０．５μｇ／ｍｌ（ＬＰＳ）添加１０分前に種々の濃度のＣｙｃ−Ｏｘｉ−１１を用いて前処理された。ＴＮＦ−α産生が、次いで、測定された。示されたデータが、２回繰り返された実験における３重のウェルの平均±ＳＤである。
【図５】ＣＬＰ外科手術後、血清中におけるＭＩＦ出現速度論のグラフである。
【図６】セプシス導入２４時間後に与えられた場合でさえ、Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１が、保護的であることを示しているグラフである。
【図７】化合物３ａ〜３ｈの合成および活性を示す。ＩＣ50が、ＭＩＦ互変酵素（トートメラーゼ）活性阻害を表す。
【図８】化合物４〜５の合成および活性を示す。ＩＣ50が、ＭＩＦ互変酵素（トートメラーゼ）活性阻害を表す。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
実施例に記載されたとおり、本発明者らは、ＭＩＦを阻害する化合物を同定した。これらの化合物が、哺乳類における炎症を治療するか、もしくは、予防するのに有用である。
【００３４】
これゆえ、本発明は、式Ｉ：
【００３５】
【化８】
2009539838.tif 000008
（式中：
Ｒ1が、独立して、単一もしくは多重置換の、Ｈ、ＯＨ、Ｒ5、Ｎ（Ｒ5）、ＳＲ5、もしくはハロゲンであり；
Ｒ2が、環構造を含み、ここで、該環構造中の１原子が、Ｒ3に結合する炭素に結合しており；
Ｒ3が、Ｏ、Ｃ（Ｒ5）2、もしくはＳであり；かつ
Ｒ4が、Ｈ、Ｒ5、もしくはハロゲンであり；式中：
Ｒ5が、独立して、Ｈ、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルカノイル、または直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルコキシである。）
の化合物に関する。
【００３６】
好ましくは、Ｒ1が、Ｈ、ＯＨ、もしくはハロゲンである。より好ましくは、Ｒ1がＯＨである。Ｒ1が単一置換である最も好ましい実施形態において、Ｒ1はパラ（ｐ−）位におけるＯＨである。本明細書で他に指定されない場合、式Ｉの化合物のＲ1置換基の、オルト（ｏ−）、メタ（ｍ−）、もしくはパラ（ｐ−）の指定は、オキシム部分（ｍｏｉｅｔｙ、Ｃ＝Ｎ−Ｏ−）に関しての置換基の位置を指定する。
【００３７】
Ｒ1が、多重置換である場合、１つのＲ1が、好ましくはＯＨであり、最も好ましくは、パラ（ｐ−）位にあり、第２の置換が好ましくはハロゲンであり、より好ましくは、フッ素である。最も好ましくは、この第２の置換が、メタ（ｍ−）位におけるフッ素である。
【００３８】
Ｒ2が、３、４、５、もしくは６員の、脂環式環、複素環（ヘテロ環）、もしくは芳香環を含むことも好ましい。Ｒ2が脂環式環である場合、最も好ましい環が、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘキシル−２，３−エン、もしくは１−アダマンチルである。Ｒ2が、複素環（ヘテロ環）状環である場合、最も好ましい環が、ピリミジン、ピリダジン、ピラジン、ピリジン、ピラゾール、イミダゾール、ピロール、ピラン、およびフラン環である。Ｒ2が、芳香環である場合、最も好ましい環が、シクロベンジル、４−ピリミジル、３−ピリミジル、もしくはパラ（ｐ−）ヒドロキシメチルフェニルである（後者は、図８の化合物４および化合物５にあるとおり）。
【００３９】
Ｒ2の環構造が、１よりも多い環を含み得、および／または、置換もしくは非置換であり得る。該環構造が、置換されている場合、好ましくは、少なくとも直鎖もしくは分岐Ｃ1〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ1〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ1〜Ｃ6アルカノイル、直鎖もしくは分岐Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ケト、カルボキシ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、ジアゾ、チオ、もしくはヒドロキシアミノで置換されている。Ｒ2のより好まれた複数の置換基が、少なくとも１つのニトロ、アミノ、ヒドロキシル、もしくはハロゲンである。
【００４０】
好ましくは、Ｒ3がＯである。Ｒ4がＨであることも好ましい。最も好ましい化合物において、Ｒ3がＯであり、Ｒ4がＨである。最も好ましい化合物内で、Ｒ1が、好ましくは、ＯＨであり、最も好ましくは、パラ（ｐ−）位にある。また、Ｒ3がＯであり、Ｒ4がＨである最も好ましい化合物内で、Ｒ2が、最も好ましくは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘキシル−２，３−エン、シクロベンジル、４−ピリミジル、３−ピリミジル、１−アダマンチル、もしくはメトキシフェニルである。
【００４１】
特定の好まれた化合物が：
【００４２】
【化９】
2009539838.tif 000009
を含む。
【００４３】
より好ましくは、本化合物が：
【００４４】
【化１０】
2009539838.tif 000010
を含むか、もしくは、これからなる。本発明の他の好ましい化合物が：
【００４５】
【化１１】
2009539838.tif 000011
を含むか、もしくは、これからなる。本発明のさらなる他の好ましい化合物が：
【００４６】
【化１２】
2009539838.tif 000012
を含むか、もしくは、これからなる。追加の好ましい化合物が：
【００４７】
【化１３】
2009539838.tif 000013
を含むか、もしくは、これからなる。更なる好ましい化合物が：
【００４８】
【化１４】
2009539838.tif 000014
を含むか、もしくは、これからなる。更なる追加の好ましい化合物が：
【００４９】
【化１５】
2009539838.tif 000015
を含むか、もしくは、これからなる。更なる追加の好ましい化合物が：
【００５０】
【化１６】
2009539838.tif 000016
を含むか、もしくは、これからなる。尚更なる追加の好ましい化合物が：
【００５１】
【化１７】
2009539838.tif 000017
を含むか、もしくは、これからなる。追加の好ましい化合物が：
【００５２】
【化１８】
2009539838.tif 000018
【００５３】
上記の化合物はマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）阻害剤として有用である。これゆえ、本発明が、医薬として許容可能な賦形剤中、上の化合物のいずれか、または、これらの医薬として許容可能な塩、エステル、もしくは互変異性体（トートマー）を含む医薬組成物にも関する。
【００５４】
「医薬として許容可能な」により、（ｉ）本組成物の他の成分と混和性があり、その意図された目的に本組成物を不適にすることなく、（ｉｉ）本明細書で規定したような主題を有する使用に適しており、（毒性、刺激、およびアレルギー応答のような）過度な悪影響を及ぼす副作用のない物質が意図される。副作用が、「過度」であるのは、そのリスクが、本組成物により与えられた利益より勝る場合である。医薬として許容可能な担体の非限定例が、限定なく、リン酸緩衝生理食塩水溶液のような標準医薬担体、水、油／水エマルション、微小（ミクロ）エマルションなどのエマルション等を包含する。
【００５５】
上記化合物が、過度の実験なく、特定の応用に適するよう、ヒトを包含する哺乳類に対する投与用に製剤化され得る。加えて、これら組成物の適正用量が、過度の実験なく、標準用量−応答プロトコールを使用して求められ得る。
【００５６】
従って、経口、舌、舌下、口、および口内投与用に設計（デザイン）された組成物が、過度の実験なく、当業界においてよく知られた手段、例えば、不活性稀釈剤を用いてもしくは可食担体を用いて調製され得る。これら組成物が、ゼラチンカプセルに封入され、もしくは錠剤（タブレット）に圧縮されてもよい。経口治療投与目的で、本発明の医薬組成物が賦形剤と共に取り込まれていてよく、タブレット、トローチ、カプセル、エリキシル、サスペンション、シロップ、ウェーハ、チューイングガム等の形態で使用され得る。
【００５７】
タブレット、ピル、カプセル、トローチ等が、バインダー、レシピエント、崩壊剤、潤滑剤、甘味料、および香料も含有してよい。バインダーの幾つかの例として、微結晶セルロース、トラガカントガム、もしくはゼラチンが挙げられる。賦形剤の例として、スターチもしくはラクトースが挙げられる。崩壊剤の幾つかの例として、アルギン酸、コーンスターチ等が挙げられる。潤滑剤の例として、ステアリン酸マグネシウムもしくはステアリン酸カリウムが挙げられる。潤滑剤（ｇｌｉｄａｎｔ）の１例が、コロイド状二酸化珪素である。甘味料の幾つかの例として、スクロース、サッカリンなどが挙げられる。香料の例として、ペパーミント、サリチル酸メチル、オレンジ香料などが挙げられる。これらの種々の組成物を調製することに使用された物質は、医薬として純粋であり、使用される量で非毒性であるべきである。
【００５８】
本化合物は、容易に非経口投与（例えば、静脈内、筋内、クモ膜下腔、もしくは皮下注射など）され得る。非経口投与が、本化合物を溶液もしくは懸濁液に包含させることにより達成され得る。このような溶液もしくは懸濁液は、注射用水、生理食塩水溶液、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、もしくは他の合成溶媒のような無菌稀釈剤も包含してよい。非経口製剤が、例えば、ベンジルアルコールもしくはメチルパラベンのような抗菌剤、例えば、アスコルビン酸もしくは重亜硫酸ナトリウムのような抗酸化剤、ならびに、ＥＤＴＡのようなキレート化剤も包含してよい。酢酸塩、クエン酸塩、もしくはリン酸塩のような緩衝剤（バッファー）、ならびに、塩化ナトリウムもしくはデキストロースのような浸透圧調整剤も加えられてよい。本非経口調製品が、アンプル、使い捨て可能シリンジ、またはガラスもしくはプラスチックから調製された複数回用量バイアルに封入されうる。
【００５９】
直腸投与は、直腸もしくは大腸中に医薬組成物中の本化合物を投与することを包含する。これが、坐薬もしくは浣腸を使用して達成され得る。坐薬製剤が、容易に、当業界において知られた方法により調製され得る。例えば、坐薬製剤は、グリセリンを約１２０℃に加熱し、本組成物をそのグリセリンに溶かし、その加熱熱せられたグリセリンを混合し、その後、精製水が加えられてもよく、そしてその熱い混合物を坐薬型中に注ぐことにより調製され得る。
【００６０】
経皮投与が、皮膚を通しての本組成物の経皮吸収を包含する。経皮製剤が、パッチ（よく知られたニコチンパッチのような）、外用薬、クリーム、ジェル、軟膏などを包含する。
【００６１】
本発明が、治療有効量の本化合物を哺乳類に鼻に投与することを包含する。本明細書では、鼻へ投与すること、もしくは鼻への投与は、その患者の鼻道もしくは鼻腔の粘膜に本化合物を投与することを包含する。本明細書では、本化合物の鼻投与用医薬組成物が、例えば、鼻スプレー、鼻ドロップ、懸濁液、ジェル、外用薬、クリーム、もしくは粉末として投与される、公知の方法により調製された本化合物の治療有効量を包含する。本化合物の投与は、鼻タンポンもしくは鼻スポンジを使用して行われ得る。
【００６２】
本化合物が、血液脳関門を通過しなければならないように末梢投与する場合、本化合物は、好ましくは、これの哺乳類の血液脳関門を通過できる能力を増強する医薬組成物において製剤化される。このような製剤化は、当業界で知られており、吸収を促進する親油性化合物を包含する。非親油性化合物の取り込みが、親油性物質との組み合わせにより増強され得る。鼻粘膜を通過しての本化合物の送達を増強する親油性物質として、脂肪酸（例えば、パルミチン酸）、ガングリオシド（例えば、ＧＭ−１）、リン脂質（例えば、ホスファチジルセリン）、および乳化剤（例えば、ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０）、デオキシコール酸ナトリウムのような胆汁酸塩、ならびに、例えば、ＴｗｅｅｎTMのようなｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０、ＴｒｉｔｏｎTMＸ−１００のようなオクトキシノール、およびタウロ−２４，２５−ジヒドロフシジン酸ナトリウム（ＳＴＤＨＦ）を包含する洗剤様物質が挙げられるが、これらに限定されない。Ｌｅｅら、Ｂｉｏｐｈａｒｍ．、１９８８年４月３０３７号を参照。
【００６３】
本発明の特定の実施形態において、本化合物が、親油性物質から構成されたミセルと組み合わされる。このようなミセルは、鼻膜透過性を修飾し得、本化合物の吸収を増強する。適切な親油性ミセルが、ガングリオシド（例えば、ＧＭ−１ガングリオシド）、および、リン脂質（例えば、ホスファチジルセリン）を包含するが、限定されない。胆汁酸塩およびこれらの誘導体ならびに洗剤様物質も、該ミセルの製剤に包含され得る。本化合物が、１もしくは複数のタイプのミセルと組み合わされ得、更に、これらミセル内で含有され得、もしくは、これらの表面に結合され得る。
【００６４】
或いは、本化合物が、吸収を増強するため、リポゾーム（脂質小胞）と組み合わされ得る。本化合物が、該リポゾーム内で含有され得るか、もしくは、溶解され得、および／または、この表面に結合され得る。適切なリポゾームが、リン脂質（例えば、ホスファチジルセリン）および／またはガングリオシド（例えば、ＧＭ−１）を包含する。リン脂質小胞を調製する方法に関し、例えば、Ｒｏｂｅｒｔｓらに対する米国特許第４，９２１，７０６号、および、Ｙｉｏｕｒｎａｓらに対する米国特許第４，８９５，４５２号を参照。胆汁酸塩およびこれらの誘導体ならびに洗剤様物質も、該リポゾームの製剤に包含され得る。
【００６５】
さらに、本発明は、式Ｉ：
【００６６】
【化１９】
2009539838.tif 000019
（式中：
Ｒ1が、独立して、単一もしくは多重置換の、Ｈ、ＯＨ、Ｒ5、Ｎ（Ｒ5）、ＳＲ5、もしくはハロゲンであり、ここで、少なくとも１つの置換が、ハロゲンであり；
Ｒ2が、環構造を含み、ここで、該環構造中の１原子が、Ｒ3に結合する炭素に結合しており；
Ｒ3が、Ｏ、Ｃ（Ｒ5）2、もしくはＳであり；
Ｒ4が、Ｈ、Ｒ5、もしくはハロゲンであり；式中：
Ｒ5が、独立して、Ｈ、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルカノイル、または直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルコキシである。）
の化合物、または、これらの医薬として許容可能な塩、エステル、もしくは互変異性体（トートマー）に関する。本発明は、これらの化合物のいずれかを含む医薬組成物をも含む。
【００６７】
好ましくは、Ｒ1がＯＨおよびハロゲンを含む多重置換である。より好ましくは、Ｒ1が、パラ（ｐ−）位におけるＯＨを含む。このハロゲン置換は、フッ素であることも好ましい。より好ましくは、該フッ素がメタ（ｍ−）位にある。
【００６８】
Ｒ2が、３、４、５、もしくは６員の、脂環式環、複素環、もしくは芳香環を含むことも好ましい。より好ましくは、Ｒ2環が脂環式である。最も好ましい脂環式環が、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘキシル−２，３−エン、および１−アダマンチルである。
【００６９】
Ｒ2の好ましい幾つかの環が、複素環（ヘテロ環）である。好ましい複素環（ヘテロ環）が、パラ（ｐ−）ヒドロキシメチルフェニルである。他の好ましい複素環（ヘテロ環）が、ピリミジン、ピリダジン、ピラジン、ピリジン、ピラゾール、イミダゾール、ピロール、ピラン、およびフランである。
【００７０】
Ｒ2の好まれた他の環が芳香族である。最も好ましくは、この芳香環が、シクロベンジル、４−ピリミジル、もしくは３−ピリミジルである。
【００７１】
Ｒ2の環構造が、１よりも多い環を含む。加えて、Ｒ2の環構造が非置換であり得る。或いは、Ｒ2の環構造が、少なくとも１種の、直鎖もしくは分岐Ｃ1〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ1〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ1〜Ｃ6アルカノイル、直鎖もしくは分岐Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ケト、カルボキシ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、ジアゾ、チオ、もしくはヒドロキシアミノを用いて置換される。Ｒ2の環構造の他の好ましい置換が、少なくとも１種の、ニトロ、アミノ、ヒドロキシル、もしくはハロゲンである。
【００７２】
好ましくは、本発明の化合物で、Ｒ3がＯである。Ｒ4がＨであることも好ましい。最も好ましくは、Ｒ3がＯであり、Ｒ4がＨである。これらの化合物の幾つかの好まれた実施形態で、Ｒ1が、ＯＨ置換およびハロゲン置換を含む。ここで、好ましくは、該ＯＨがパラ（ｐ−）位にある。ここで、より好ましくは、Ｒ2が、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘキシル−２，３−エン、シクロベンジル、４−ピリミジル、３−ピリミジル、１−アダマンチル、もしくはメトキシフェニルである。
【００７３】
好ましくは、本化合物が：
【００７４】
【化２０】
2009539838.tif 000020
を含むか、もしくは、これからなる。
【００７５】
他の好ましい化合物は：
【００７６】
【化２１】
2009539838.tif 000021
を含むか、もしくは、これからなる。
【００７７】
更に、本発明が、式Ｉ：
【００７８】
【化２２】
2009539838.tif 000022
（式中：
Ｒ1が、独立して、単一もしくは多重置換の、Ｈ、ＯＨ、Ｒ5、Ｎ（Ｒ5）、ＳＲ5、もしくはハロゲンであり；
Ｒ2が、パラ（ｐ−）ヒドロキシメチルフェニルであり；
Ｒ3が、Ｏ、Ｃ（Ｒ5）2、もしくはＳであり；
Ｒ4が、Ｈ、Ｒ5、もしくはハロゲンであり；式中：
Ｒ5が、独立して、Ｈ、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルカノイル、または直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルコキシである。）
の化合物、または、これらの医薬として許容可能な塩、エステル、もしくは互変異性体（トートマー）に関する。
【００７９】
好ましくは、Ｒ1がＯＨおよびハロゲンを含む多重置換である。より好ましくは、パラ（ｐ−）位のＯＨおよびメタ（ｍ−）位のフッ素である。最も好ましくは、本化合物が：
【００８０】
【化２３】
2009539838.tif 000023
を含むか、もしくは、これからなる。
【００８１】
別の最も好ましい化合物が：
【００８２】
【化２４】
2009539838.tif 000024
を含むか、もしくは、これからなる。
【００８３】
本発明が、医薬として許容可能な賦形剤において、上の化合物のいずれか、または、これらの医薬として許容可能な塩、エステル、もしくは互変異性体（トートマー）を含む医薬組成物にも関する。
【００８４】
本発明が、更に、式ＩＩＩ：
【００８５】
【化２５】
2009539838.tif 000025
（式中：
Ｒ1が、環構造を含み、ここで該環構造中の原子が、Ｒ2に結合する炭素に結合しており；
Ｒ2およびＲ3が、独立に、Ｏ、Ｃ（Ｒ5）2、もしくはＳであり；
Ｒ4が、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルカノイル、または直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルコキシであり；
Ｒ5が、独立に、Ｈ、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルカノイル、または直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルコキシである。）の化合物に関する。本発明は、これらの化合物のいずれかを含む医薬組成物をも含む。
【００８６】
好ましくは、これらの化合物で、Ｒ2およびＲ3がともにＯである。また、好ましくは、Ｒ4が３級−ブチルである。好ましいＲ1部分が、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロベンジル、および置換シクロベンジルである。Ｒ１が、置換シクロベンジルである場合、好ましくは、パラ（ｐ−）置換シクロベンジルである。該パラ（ｐ−）置換シクロベンジルが、最も好ましくは：
【００８７】
【化２６】
2009539838.tif 000026
である。
【００８８】
さらにより好ましくは、本化合物が：
【００８９】
【化２７】
2009539838.tif 000027
を含む。
【００９０】
尚より好ましくは、本化合物が：
【００９１】
【化２８】
2009539838.tif 000028
からなる。
【００９２】
本化合物が、最も好ましくは：
【００９３】
【化２９】
2009539838.tif 000029
を含むか、もしくは、これからなる。
【００９４】
本化合物が、最も好ましくは：
【００９５】
【化３０】
2009539838.tif 000030
をも含み得るか、もしくは、これからもなり得る。
【００９６】
本化合物が、さらに、最も好ましくは：
【００９７】
【化３１】
2009539838.tif 000031
を含み得るか、もしくは、これからなり得る。
【００９８】
さらに本化合物が、最も好ましくは：
【００９９】
【化３２】
2009539838.tif 000032
を含み得るか、もしくは、これからなり得る。
【０１００】
更に、本化合物が、最も好ましくは：
【０１０１】
【化３３】
2009539838.tif 000033
を含み得るか、もしくは、これからなり得る。
【０１０２】
本化合物が、尚更に、最も好ましくは：
【０１０３】
【化３４】
2009539838.tif 000034
を含み得るか、もしくは、これからなり得る。
【０１０４】
本化合物が、最も好ましくは：
【０１０５】
【化３５】
2009539838.tif 000035
をも含み得るか、もしくは、これからもなり得る。
【０１０６】
さらに本化合物が、好ましくは：
【０１０７】
【化３６】
2009539838.tif 000036
を含み得るか、もしくは、これからなり得る。
【０１０８】
さらに、本化合物が、最も好ましくは：
【０１０９】
【化３７】
2009539838.tif 000037
を含み得るか、もしくは、これからなり得る。
【０１１０】
更に、本化合物が、最も好ましくは：
【０１１１】
【化３８】
2009539838.tif 000038
を含み得るか、もしくは、これからなり得る。
【０１１２】
本発明は、医薬として許容可能な賦形剤における、上の化合物のいずれか、または、これらの医薬として許容可能な塩、エステル、もしくは互変異性体（トートマー）を含む医薬組成物をも含む。
【０１１３】
本発明が、哺乳類におけるマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）活性を阻害する方法にも関する。該方法が、該哺乳類におけるＭＩＦ活性を阻害するに有効な量で、上で同定された医薬組成物のいずれかを該哺乳類に投与することを含む。
【０１１４】
加えて、本発明は、哺乳類におけるマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）活性を阻害する他の方法に関する。該方法は、該哺乳類におけるＭＩＦ活性を阻害するに有効な量での医薬組成物を該哺乳類に投与することを含む。これらの方法において、該医薬組成物が、医薬として許容可能な賦形剤で、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物、または、これらの医薬として許容可能な塩、エステル、もしくは互変異性体（トートマー）を含み、ここで、式Ｉおよび式ＩＩが：
【０１１５】
【化３９】
2009539838.tif 000039
（式中：
Ｒ1が、独立して、単一もしくは多重置換の、Ｈ、ＯＨ、Ｒ5、Ｎ（Ｒ5）、ＳＲ5、もしくはハロゲンであり；
Ｒ2が、環構造を含み、ここで、該環構造中の原子が、Ｒ3に結合する炭素に結合し；
Ｒ3が、Ｏ、Ｃ（Ｒ5）2、もしくはＳであり；
Ｒ4が、Ｈ、Ｒ5、もしくはハロゲンであり；式中：
Ｒ5が、独立して、Ｈ、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルカノイル、または直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルコキシである。）である。
好ましくは、これらの方法において、利用された化合物は、式Ｉのものである。Ｒ1がパラ位におけるＯＨであれば、それも好ましい。上記の化合物に関して、Ｒ2が、好ましくは、３、４、５、もしくは６員脂肪族環、複素環（ヘテロ環）、もしくは芳香環を含む。より好ましくは、Ｒ2が、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘキシル−２，３−エン、シクロベンジル、４−ピリミジル、３−ピリミジル、１−アダマンチル、もしくはメトキシフェニルである。
【０１１６】
本方法に関する好ましい特定の化合物が：
【０１１７】
【化４０】
2009539838.tif 000040
【０１１８】
【化４１】
2009539838.tif 000041
を包含する。
【０１１９】
これらの方法における哺乳類が、好ましくはヒトである。本哺乳類が、好ましくは、ＭＩＦにより少なくとも一部媒介されている炎症サイトカインカスケードを含む病状をも有する。このような病状の好ましい例が、癌、急性呼吸窮迫症候群、サイトカイン媒介毒性、乾癬、インターロイキン−２毒性、虫垂炎、消化性潰瘍、胃潰瘍、および十二指腸潰瘍、腹膜炎、膵炎、潰瘍性結腸炎、偽膜性結腸炎、急性結腸炎、および虚血性結腸炎、憩室炎、喉頭蓋炎、無弛緩症、胆管炎、胆嚢炎、肝炎、炎症性腸疾患、クローン病、腸炎、ホウィップル病、喘息、アレルギー、アナフィラキシーショック、免疫複合体病、臓器虚血、再灌流傷害、臓器壊死、枯草熱、セプシス、敗血症（ｓｅｐｔｉｃｅｍｉａ）、内毒素ショック、悪液質、異常高熱症、好酸球性肉芽腫、肉芽腫症、類肉腫症、敗血症流産、副睾丸炎、膣炎、前立腺炎、尿道炎、気管支炎、気腫、鼻炎、嚢胞性線維症、肺炎、塵肺症、肺胞症、細気管支炎、咽頭炎、胸膜炎、副鼻腔炎、インフルエンザ、呼吸器合胞体ウィルス感染、ヘルペス感染、ＨＩＶ感染、Ｂ型肝炎ウィルス感染、Ｃ型肝炎ウィルス感染、播種性菌血症、デング熱、カンジダ症、マラリア、糸状虫症、アメーバ症、包虫嚢胞、火傷、皮膚炎、皮膚筋炎、日焼け、蕁麻疹、疣、膨疹、血管炎、脈管炎、心内膜炎、動脈炎、アテローム性動脈硬化症、血栓性静脈炎、心膜炎、心筋炎、心筋虚血、結節性動脈周囲炎、リウマチ熱、アルツハイマー病、セリアック病、鬱血性心不全、髄膜炎、脳炎、多発性硬化症、脳梗塞、脳塞栓、ギランバレー症候群、神経炎、神経痛、脊髄損傷、麻痺、ブドウ膜炎、関節炎疹、関節痛、骨髄炎、筋膜炎、パジェット病、痛風、歯周病、リウマチ様関節炎、滑膜炎、重症筋無力症、甲状腺炎、全身性エリテマトーデス、グッドパスチャー症候群、ベーチェット症候群、同種移植の拒絶反応、移植片対宿主病、強直性脊椎炎、バージャー病、１型糖尿病、２型糖尿病、ライター症候群、もしくはホジキン病を包含する。最も好ましい実施形態において、該病状は、セプシス、敗血症（ｓｅｐｔｉｃｅｍｉａ）および／または内毒素ショックである。
【０１２０】
本発明が、哺乳類における炎症を治療するか、もしくは、予防する方法にも関する。本方法が、該哺乳類における炎症を治療するか、もしくは、予防するのに有効な量で、上で同定された医薬組成物のいずれかを該哺乳類に投与することを含む。
【０１２１】
さらに、本発明は、哺乳類における炎症を治療するか、もしくは、予防する他の方法に関する。本方法は、該哺乳類における炎症を治療するか、もしくは、予防するのに有効な量で医薬組成物を該哺乳類に投与することを含み、ここで、該医薬組成物が、医薬として許容可能な賦形剤で、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物、または、これらの医薬として許容可能な塩、エステル、もしくは互変異性体（トートマー）を含む。ここで、式Ｉおよび式ＩＩが：
【０１２２】
【化４２】
2009539838.tif 000042
（式中：
Ｒ1が、独立して、単一もしくは多重置換の、Ｈ、ＯＨ、Ｒ5、Ｎ（Ｒ5）、ＳＲ5、もしくはハロゲンであり；
Ｒ2が、環構造を含み、ここで、該環構造中の原子が、Ｒ3に結合する炭素に結合し；
Ｒ3が、Ｏ、Ｃ（Ｒ5）2、もしくはＳであり；
Ｒ4が、Ｈ、Ｒ5、もしくはハロゲンであり；式中：
Ｒ5が、独立して、Ｈ、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルカノイル、または直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルコキシである。）である。
上記の方法のように、これらの方法における化合物が、好ましくは、式Ｉのものである。また、もし化合物のＲ1が、パラ位におけるＯＨであれば好ましい。さらに、Ｒ2が、好ましくは、３−、４−、５−、もしくは６−員脂環、複素環（ヘテロ環）、もしくは芳香環を含む。最も好ましくは、Ｒ2が、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘキシル−２，３−エン、シクロベンジル、４−ピリミジル、３−ピリミジル、１−アダマンチル、もしくはメトキシフェニルである。これらの方法に関する好ましい特定の化合物が：
【０１２３】
【化４３】
2009539838.tif 000043
である。
【０１２４】
これらの方法における哺乳類は、好ましくはヒトである。本哺乳類が、好ましくは、ＭＩＦにより少なくとも一部媒介されている炎症サイトカインカスケードを含む病状をも有する。このような病状の好ましい例が、癌、急性呼吸窮迫症候群、サイトカイン媒介毒性、乾癬、インターロイキン−２毒性、虫垂炎、消化性潰瘍、胃潰瘍、および十二指腸潰瘍、腹膜炎、膵炎、潰瘍性結腸炎、偽膜性結腸炎、急性結腸炎、および虚血性結腸炎、憩室炎、喉頭蓋炎、無弛緩症、胆管炎、胆嚢炎、肝炎、炎症性腸疾患、クローン病、腸炎、ホウィップル病、喘息、アレルギー、アナフィラキシーショック、免疫複合体病、臓器虚血、再灌流傷害、臓器壊死、枯草熱、セプシス、敗血症（ｓｅｐｔｉｃｅｍｉａ）、内毒素ショック、悪液質、異常高熱症、好酸球性肉芽腫、肉芽腫症、類肉腫症、敗血症流産、副睾丸炎、膣炎、前立腺炎、尿道炎、気管支炎、気腫、鼻炎、嚢胞性線維症、肺炎、塵肺症、肺胞症、細気管支炎、咽頭炎、胸膜炎、副鼻腔炎、インフルエンザ、呼吸器合胞体ウィルス感染、ヘルペス感染、ＨＩＶ感染、Ｂ型肝炎ウィルス感染、Ｃ型肝炎ウィルス感染、播種性菌血症、デング熱、カンジダ症、マラリア、糸状虫症、アメーバ症、包虫嚢胞、火傷、皮膚炎、皮膚筋炎、日焼け、蕁麻疹、疣、膨疹、血管炎、脈管炎、心内膜炎、動脈炎、アテローム性動脈硬化症、血栓性静脈炎、心膜炎、心筋炎、心筋虚血、結節性動脈周囲炎、リウマチ熱、アルツハイマー病、セリアック病、鬱血性心不全、髄膜炎、脳炎、多発性硬化症、脳梗塞、脳塞栓、ギランバレー症候群、神経炎、神経痛、脊髄損傷、麻痺、ブドウ膜炎、関節炎疹、関節痛、骨髄炎、筋膜炎、パジェット病、痛風、歯周病、リウマチ様関節炎、滑膜炎、重症筋無力症、甲状腺炎、全身性エリテマトーデス、グッドパスチャー症候群、ベーチェット症候群、同種移植の拒絶反応、移植片対宿主病、強直性脊椎炎、バージャー病、１型糖尿病、２型糖尿病、ライター症候群、もしくはホジキン病を包含する。最も好ましい実施形態において、該哺乳類は、セプシス、敗血症（ｓｅｐｔｉｃｅｍｉａ）および／または内毒素ショックを有するか、または、そのリスクにある。
【０１２５】
これらの方法が、さらに、該哺乳類に第２抗炎症剤を投与することを含み得る。該第２抗炎症剤の非限定例が、ＮＳＡＩＤ、サリチラート（サリチレート）、ＣＯＸ阻害剤、ＣＯＸ−２阻害剤、もしくはステロイドである。好ましくは、該哺乳類は、セプシス、敗血症（ｓｅｐｔｉｃｅｍｉａ）、および／または内毒素ショックを有するか、または、そのリスクがあり、第２処置が、ムスカリンアゴニスト、アドレノメデュリン（ｍｅｄｕｌｌｉｎ）、アドレノメデュリン（ｍｅｄｕｌｌｉｎ）結合蛋白、乳脂肪球上皮成長因子第８因子、活性化蛋白Ｃ、もしくはα2A−アドレナリンアンタゴニストの投与である。
【０１２６】
本発明が、セプシス、敗血症（ｓｅｐｔｉｃｅｍｉａ）、および／または内毒素ショックを有する哺乳類を治療する方法にも関する。本方法が、セプシス、敗血症（ｓｅｐｔｉｃｅｍｉａ）、および／または内毒素ショックを治療するのに充分な量で、上の医薬組成物のいずれかを該哺乳類に投与することを含む。
【０１２７】
本発明が、更に、セプシス、敗血症（ｓｅｐｔｉｃｅｍｉａ）、および／または内毒素ショックを有する哺乳類を治療する他の方法に関する。本方法は、セプシス、敗血症（ｓｅｐｔｉｃｅｍｉａ）、および／または内毒素ショックを治療するのに充分な量で、化合物を該哺乳類に投与することを含み、ここで、該化合物が：
【０１２８】
【化４４】
2009539838.tif 000044
である。
【０１２９】
本発明の好ましい実施形態は、以下の実施例に記載される。本明細書の特許請求の範囲の範囲内の他の実施形態が、本明細書を検討すること、又は本明細書に記載されているように本発明を実施することにより、当業者に明らかであろう。本実施例とともに、本明細書は、本実施例に続く特許請求の範囲により示される本発明の範囲及び精神で、例示としてのみ見なされることが意図される。
【実施例】
【０１３０】
実施例１．マクロファージ遊走阻止因子たるオキシム阻害剤。
ＭＩＦ炎症促進活性阻害剤設計（デザイン）への１つの手段として、ＭＩＦ互変酵素（トートメラーゼ）活性部位に干渉することに焦点を当て、互変酵素（トートメラーゼ）活性を阻害する。この点で、Ｐｒｏ−１とＭｅｔ−２との間のアラニンの挿入（ｐａｍ）による該活性部位の分断が、該互変酵素（トートメラーゼ）触媒活性を無効にし、この結果得られる変異体が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおけるＭＩＦグルココルチコイド対抗調節（counter-regulatory）活性において欠陥がある（Ｌｕｂｅｔｓｋｙら、２００２年）。また、アセトアミノフェンＰ４５０依存代謝体たるＮ−アセチル−ｐ−ベンゾキノンイミン（ＮＡＰＱＩ）が、その酵素部位においてＭＩＦに共有結合し、デキサメタゾンの抗炎症効果との干渉などの数多くのｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物アッセイにおいてＭＩＦサイトカイン活性を不活化させ、これが、ＭＩＦ生物活性を媒介する該活性部位の役割を示唆している（Ｓｅｎｔｅｒら、２００２年）。不運にも、ＮＡＰＱＩの毒性が、全身ＭＩＦアンタゴニストとしてのその使用を妨げる。これゆえ、ＭＩＦの互変酵素（トートメラーゼ）触媒のインドール生成物を模倣している化合物が、該活性部位で結合し得、有効な阻害剤たり得ると仮定した。この目的を達成するに当たり、シッフ塩基（シッフベース）付加体が、ｐ−ヒドロキシベンズアルデヒドとアミノ酸メチルエステルをカップリングさせることにより合成されたが、アミノ酸シッフ塩基型（シッフベースタイプ）化合物（ＩＩ型）を提供する。最も効力のある阻害剤は、１．６５μＭのＩＣ50を有するトリプトファンシッフ塩基（シッフベース）であることが分かった（Ｄｉｏｓら、２００２年）。水性溶媒でのトリプトファンシッフ塩基（シッフベース）の緩やかな速度の加水分解により、更なるフェニルイミンスキャッフォールドが、潜在的ＭＩＦアンタゴニストとして研究された。幾つかの代表的なフェニルイミン化合物が、ドーパクローム互変酵素（トートメラーゼ）阻害活性に関しテストされたが、これらイソキサゾリン類が、更に注目する魅力的なスキャッフォールドを表すと結論された（Ｌｕｂｅｔｓｋｙら、２００２年）。このシリーズにおけるＭＩＦ互変酵素（トートメラーゼ）および炎症促進活性の先導的（リード）阻害剤が、（Ｓ，Ｒ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾール酢酸メチルエステル（ＩＳＯ−１）である。ＩＳＯ−１に複合体化されたＭＩＦの結晶構造が、ｐ−ヒドロキシフェニルピルビン酸に似た該活性部位中での結合を明らかとした。阻害剤と結合したＭＩＦの更なる研究が、活性部位の占拠が、ｉｎ  ｖｉｖｏおよびｉｎ  ｖｉｔｒｏにおけるＭＩＦ炎症促進特性の阻害と関連されることを示し、炎症活性におけるＭＩＦ触媒活性部位に関する役割を更に規定する。これらの先行の研究が、Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１の調製をもたらす新しい分類（クラス）の化合物の合理的設計（デザイン）のための分子の基準を提供し、これが、確認試験で、ＭＩＦ互変酵素（トートメラーゼ）阻害において、ＩＳＯ−１よりも３０倍効力がある。さらに、Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏ双方で、高用量での明らかな毒性を欠く。Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１および関��化合物が、セプシス治療に可能な治療剤として評価された。
【０１３１】
Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１設計（デザイン）。
ＭＩＦ薬理学的阻害剤たるＩＳＯ−１が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏモデルおよびｉｎ  ｖｉｖｏモデルにおける外因性ＭＩＦおよび内因性ＭＩＦを中和する。これが、ＭＩＦ生物学的活性に拮抗するための、化学的アプローチの上首尾な応用を示す。ＩＳＯ−１が有意な抗炎症活性を有するが、より良好な阻害剤の開発が望まれていた。ＩＳＯ−１構造を中心として焦点を当てたライブラリーの合成が、該活性を有意に向上させなかった（データを示さなかった）。しかしながら、ＩＳＯ−１は他の２種のスキャッフォールドと共に統合され（図１）、新しいスキャッフォールドを設計（デザイン）し、このある１例が、Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１（＝ＯＸＩＭ−１１）であり（図２）、これが、このフッ化誘導体と共に（実施例２）以前に記載された化合物よりも効力のあるＭＩＦ活性阻害剤である。Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１が、該スキャッフォールドの周辺で合成された２９種のオキシム誘導体の１種であり、ＩＳＯ−１よりもｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて３０倍効力のあるＭＩＦ炎症促進活性阻害剤である。ＭＩＦドーパクローム互変酵素（トートメラーゼ）活性を阻害するそれらのＩＣ50と共に、新規オキシムスキャッフォールドの代表的構造が表１で提示されている。毒性が、いずれの新規化合物の治療目的での使用の提案にも関した問題であるので、Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１予備的急性毒性（急毒）スクリーニングが遂行された。腹腔内注射における毒性の証拠が、１００ｍｇ／Ｋｇにまでの用量で全く見いだされなかった（データを示さなかった）。予備的な研究で、Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１抗菌効果もテストされたが、陰性（ネガティブ）であることが見いだされた。
【０１３２】
【表１】
2009539838.tif 000045
表１．Ｃｙｃ−Ｏｘｉ（ＯＸＩＭ）スキャッフォールド構造の選択。ＩＣ50が、そのＭＩＦ互変酵素（トートメラーゼ）活性阻害を表す。
【０１３３】
ＭＩＦ活性部位に結合しているＣｙｃ−Ｏｘｉ−１１が、ＬＰＳ活性化単球へのＭＩＦグルココルチコイド調節活性をダウンレギュレーションする。
上のＩＳＯ−１研究で示されたとおり、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおけるＭＩＦ炎症促進活性のより効力のある中和が、ＭＩＦ互変酵素（トートメラーゼ）活性への増強された阻害効果と関連付けられる。この関連が、この新しい分類（クラス）のＣｙｃ−Ｏｘｉ剤において更に生み出されている。図３で示されたとおり、Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１が、ＬＰＳ刺激マクロファージからのグルココルチコイドとのＭＩＦ依存干渉を有意に阻害したが、Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１が、両アッセイにおいて〜１．３μＭのＩＣ50を有するＭＩＦ互変酵素（トートメラーゼ）および炎症促進活性の最も効力のある阻害剤の１種である（ＩＳＯ−１よりも３０倍効力がある）。Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいてＴＮＦ放出を阻害する。
【０１３４】
Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおけるＭＩＦ炎症促進活性を阻害する。
マクロファージが、ＭＩＦの潤沢な源であることが示されており（Ｃａｌａｎｄｒａら、１９９４年）、ＬＰＳ刺激後、放出される。これが、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける分泌ＭＩＦのオートクリン活性およびパラクリン活性の検査に至った。以前の研究が、抗体を使用したＭＩＦの中和がＬＰＳ刺激マクロファージによるＴＮＦ分泌をブロックしたことを示した。ここで、ＬＰＳ刺激ヒトマクロファージからのＭＩＦの分泌のＣｙｃ−Ｏｘｉ−１１による中和は、ＴＮＦ放出を仲介するＭＩＦ活性を阻害できるかどうかが決定された。図４で示されたとおり、Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１が、用量依存的な様式で、抗ＭＩＦ抗体処理同様、ＬＰＳ刺激ヒトマクロファージによるＴＮＦ放出を阻害する。
【０１３５】
ＭＩＦ触媒部位において結合する小分子が、該分子の炎症調節機能およびグルココルチコイド調節機能を廃する（妨げる）。阻害剤の合理的設計（デザイン）が、Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１の同定をもたらし、ある特定の関連ＯＸＩＭスキャッフォールド化合物が、最も効力のあるＭＩＦ活性阻害剤として設計（デザイン）された。その予備的な急性毒性（急毒）スクリーニングが、１００ｍｇ／ｋｇにまでの用量において毒性の証拠を全く見いださなかったので、この分子が、セプシス、ならびに、他のＭＩＦ媒介性疾患および病状と関連したひどい罹患率および致死率を抑えるための治療剤としての効力（ポテンシャル）を示す。
【０１３６】
セプシスによる死を防ぐＣｙｃ−Ｏｘｉ−１１活性が、次に評価された。ＣＬＰ術後の血清中のＭＩＦ出現動態が、ＣＬＰ６、１２、２４、３６、および４８時間後、採血することにより、次いで、ウェスタンブロットにより該血清を分析し、循環ＭＩＦ濃度を求めることにより求められた。１時点当たり、５匹のネズミが試験された。図５で示されたとおり、血清ＭＩＦが、１２時間後増加し始め、約３６時間でピークを迎える（＊Ｐ＜０．０５）。
【０１３７】
他のマウス（ｍｉｃｅ）が、次いで、ＣＬＰ２４時間後、Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１（０．１ｍｇ／マウス／日）もしくはビヒクルで腹腔内注射された（ｎ＝１３）。追加の２回の注射が、２日目および３日目、与えられた。１３匹のネズミがテストされた。結果が図６に示される。セプシス発症２４時間後のＣｙｃ−Ｏｘｉ−１１処理が、ＣＬＰにより引き起こされた死亡をかなり抑えた（Ｐ＜０．００１）。
【０１３８】
実施例２．ＯＸＩＭ−１１（Ｃｙｃ−Ｏｘｉ−１１）のフッ素化が、マクロファージ遊走阻止因子活性の効力のある阻害を向上させる
実施例の要約
効力のある特異的なＭＩＦ互変酵素（トートメラーゼ）活性阻害剤としての一連のハロゲン化（Ｅ）−４−ヒドロキシベンズアルデヒドＯ−シクロヘキサンカルボニルオキシム（ＯＸＩＭ−１１、図２）の合成が記載されている。このＯＸＩＭのスキャッフォールドの４−ヒドロキシ保有フェニル環のモノフッ素化だけが、これらの親化合物に比べ６３％にまで、これら阻害剤の効力を向上させる。
【０１３９】
マクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）は、炎症性疾患の発病における重要な役割を果たす炎症促進サイトカインである。ＭＩＦたるホモ３量体（Ｓｕｎら、１９９６年；Ｓｕｇｉｍｏｔｏら、１９９６年）が、Ｄ−もしくはＬ−ドーパクロームメチルエステルのような非生理学的基質を、その対応するインドール誘導体への互変異性化を触媒できる独特の能力を所有する（Ｒｏｓｅｎｇｒｅｎら、１９９６年）。突然変異、もしくは、小分子を使用し、この活性部位をブロックすると、セプシス（Ｂｅｉｓｈｕｉｚｅｎら、２００１年；Ｌｕｅら、２００２年；Ｃａｌａｎｄｒａら、２００２年；Ｃａｌｅｎｄｒａら、２０００年）、ＥＡＮ、および１型糖尿（Ｃｖｅｔｋｏｖｉｃら、２００５年）におけるＭＩＦ生物活性を阻害する。
【０１４０】
最近、発明者らは標的分子を更に修飾し、最も効力のあるＭＩＦ阻害剤たる、（Ｅ）−４−ヒドロキシベンズアルデヒドＯ−シクロヘキサンカルボニルオキシムを与えた（ＯＸＩＭ−１１、ｃｙｃ−ｏｘｉ−１１、図２；図７の化合物３ａ）。ここに確立されたとおり、シクロヘキシル基（３ａ、図７）および４−メトキシフェニル基（４、図８、スキーム２）を有する分子が最も阻害活性を有する。３ａが、１．３μＭのＩＣ50でドーパクローム互変酵素（トートメラーゼ）活性を阻害し、４が、１．１ＭのＩＣ50でドーパクローム互変酵素（トートメラーゼ）活性を阻害する。
【０１４１】
この実施例が、ＭＩＦ互変酵素（トートメラーゼ）活性を阻害できる有効性へのヒドロキシル基に関してのオルトハロゲン化の影響を記載する。これゆえ、一連のハロゲン化（Ｅ）−４−ヒドロキシベンズアルデヒドＯ−シクロヘキサンカルボニルオキシム（ＯＸＩＭ−１１、３ａ）の合成、効力のある、特異的なＭＩＦ互変酵素（トートメラーゼ）活性阻害剤が記載されている。該ヒドロキシルに対してオルトでのモノフッ素化が、６３％にまで、ＭＩＦ生物活性阻害を向上させる。
【０１４２】
ハロゲン化４−ヒドロキシベンズアルデヒド１ｂ〜１ｈ（図７）が、市販されていたか、もしくは、文献記載の手順（Ｌａｗｒｅｎｃｅら、２００３年）に従いながら調製された。オキシム２ａ〜２ｈ（図７）が、塩基性アルコール溶媒中で、アルデヒド１ａ〜１ｈとのヒドロキシルアミンの縮合により優れた収率で合成された。最終化合物３ａ〜３ｈ（図７）が、終夜、０℃〜室温で、ピリジン存在下、乾燥ジクロロメタン中で、シクロヘキサンカルボン酸クロリドとのオキシム２ａ〜２ｈの縮合により、良好な収率で合成された（スキーム１、下の補足資料参照）。化合物４および化合物５が、化合物３と同様の方法として調製された（図８）。ここに報告された最終化合物３ａ〜３ｈ、４、および５が、1Ｈ  ＮＭＲ、13Ｃ  ＮＭＲ、およびＥＳＩ−ＭＳにより充分特徴化された（下の補足資料参照）。
【０１４３】
ＩＳＯ−１もしくはＯＸＩＭ−１１に複合体化されたＭＩＦの結晶構造が、そのフェノール基が、基質および阻害剤両方のＭＩＦ活性部位内での結合における重大な役割を有することを明らかにした。これゆえ、そのフェノール基のオルト位においてハロゲンを保有している化合物が評価され、該ハロゲンが、ＭＩＦ活性部位内での更なる結合に対する該フェノールの水素結合を増強するかどうか求めた。候補化合物３ａ〜３ｈが合成され、ＭＩＦドーパクローム互変酵素（トートメラーゼ）活性阻害が図７で提示されている。
【０１４４】
（Ｅ）−４−ヒドロキシベンズアルデヒドＯ−シクロヘキサンカルボニルオキシム（ＯＸＩＭ−１１、３ａ）が、１．３μＭのＩＣ50でＭＩＦドーパクローム互変酵素（トートメラーゼ）活性を阻害する。そのフェノール基のオルト位でのモノフッ素化（化合物３ｂ）が、０．９μＭのＩＣ50にまで３５％、ドーパクローム互変酵素（トートメラーゼ）活性阻害を向上させる。この立体効果に加えて、このフッ素置換基の強い電気陰性度がこのフェノール環を分極させ、化合物３ｂの観測された最上の効力に対応するＯＨ水素結合受容能力を増強する。ジフルオロ類似体３ｃおよびテトラフルオロ類似体３ｄが、該フッ素基の静電的反発（Ｍａｌａｍａｓら、２００４年）のために３ｂよりも顕著に有効でなかった。例えば、２，６−ジフルオロ類似体３ｃが、最もＡｓｎ−９７のアミド基との反発を有する可能性がある。しかしながら、塩素もしくは臭素もしくはヨウ素を有する他のハロゲン化化合物（化合物３ｅ〜３ｈ）は活性が低下している（図７）。Ａｓｎ−９７の側鎖とヒドロキシル基との間の水素結合が、ＭＩＦ活性部位内の重要な相互作用である（Ｌｕｂｅｔｓｋｙら、１９９９年）ので、この知見は驚くほどではない。該ヒドロキシル基に対してオルトの、塩素、臭素、およびヨウ素のような嵩高いハロゲンを導入すると、その分子としてのサイズを有意に変えて、著しく低下したリガンド結合を生じる。また、プロトン（1Ｈ）ＮＭＲ解析でＯＨの酸性度を増加させることから明らかなように、ＯＨとハロゲンとの間の分子内水素結合が、そのＯＨ水素結合供与能力を低下させる（図７、Ｈｉｍｏら、２０００年）。これゆえ、化合物３ｂのフェノール基のオルト位のフッ素が、ＭＩＦ活性部位内での更なる結合に対して重大かつ特異的な役割を有する。モノフッ素化でドーパクローム互変酵素（トートメラーゼ）活性の増強が、（Ｅ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒドＯ−４’−メトキシフェニルカルボニルオキシム（５）でも観測された。この類似体が、その親化合物（４）よりもドーパクローム互変酵素（トートメラーゼ）活性で６３％の向上する（図８）。
【０１４５】
結論として、ヒドロキシル基に対するオルト位へのモノフッ素化は、ＭＩＦ活性部位内のリガンド結合へ重大な影響を与える。
【０１４６】
補足材料
ＭＩＦ互変酵素（トートメラーゼ）活性が、ＵＶ−可視分光光度計（ＳＨＩＭＡＤＺＵ、ＵＶ１６００Ｕ）により計測された。Ｌ−ドーパクロームメチルエステルの未使用保管溶液が、過ヨウ素酸ナトリウムでＬ−３，４−ジヒドロキシフェニルアラニンメチルエステルを酸化することにより、２．４ｍＭ調製された。種々の濃度の本酵素阻害剤を伴う、１μＬのＭＩＦ溶液（８００〜９００ｎｇ／ｍＬ）および１μＬのＤＭＳＯ溶液が、０．７ｍＬアッセイ緩衝液（１Ｘリン酸カリウム、ｐＨ７．２）を含有するプラスチックセル（１０ｍｍ、１．５ｍＬ）に加えられた。該Ｌ−ドーパクロームメチルエステル溶液（０．３ｍＬ）が、該アッセイ緩衝液混合物に加えられた。活性が室温で決定され、分光計測が、２０秒間λ＝４７５ｎｍで、標準溶液と比較してＬ−ドーパクロームメチルエステルの脱色の速度をモニターすることで行われた。
【０１４７】
ハロゲン化（Ｅ）−４−ヒドロキシベンズアルデヒドＯ−シクロヘキサンカルボニルオキシム（３ａ〜３ｈ）合成のための一般的な手順。
７０ｍＬ乾燥ジクロロメタン中のハロゲン化４−ヒドロキシベンゾアルデヒドオキシム（２ａ〜２ｈ、１２．８ミリモル）およびシクロヘキサンカルボン酸クロリド（１３．４ミリモル）の混合物が、０℃にまで冷却された。この懸濁液にピリジン（１２．８ミリモル）が滴下され、薄黄色溶液が生じた。該溶液が、１０分間０℃で攪拌され、次いで、１８時間、室温にまで温められた。この混合物が、ＣＨ2Ｃｌ2および水を用いて稀釈され、これらの層が分離した。この水の部分が、ＣＨ2Ｃｌ2洗浄され、この組み合わされた有機分画が、飽和ＮａＣｌ洗浄され、ＭｇＳＯ4乾燥された。濾過および真空中でのエバポレーションにより白色固体を得て、これがフラッシュクロマトグラフィ（４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製された。ＥｔＯＡｃ／ヘキサンからの結晶化により所望の白色固体生成物（３ａ〜３ｈ）を得た。
【０１４８】
化合物３ａ〜３ｈに関する分析データ。
全ての溶媒が、Ｆｉｓｈｅｒ  ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃからのＨＰＬＣ等級（グレード）であった。シリカゲル（Ｓｅｌｅｃｔｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、３２〜６３μｍ平均粒子サイズ）が、フラッシュカラムクロマトグラフィ（ＦＣＣ）に使用された。２５４ｎｍ蛍光指示薬ＴＬＣ板（プレート）を有するアルミニウム裏打ちシリカゲル６０が、使用された。ＴＬＣ板（プレート）上のスポットは、短波長ＵＶランプ下で可視化されたか、もしくは、Ｉ2蒸気を用いて染色された。ＮＭＲスペクトルが、1Ｈ  ＮＭＲスペクトルに関して２７０ＭＨｚ、かつ13Ｃ  ＮＭＲスペクトルに関して６７．５ＭＨｚでＪｅｏｌ  Ｅｃｌｉｐｓｅ２７０により実行された。結合定数（カップリングコンスタント）が、ヘルツ単位で（Ｈｚ）、報告されており、化学シフトが、重水素化溶媒のピークに相対してｐｐｍ単位で、報告されている。これら結合定数（カップリングコンスタント、Ｊ）が測定され（Ｈｚ）、シングレット（ｓ）、ダブレット（ｄ）、トリプレット（ｔ）、マルチプレット（ｍ）、およびブロード（ｂｒ）として割り当てられた。低分解能質量スペクトルが、陰イオンモードを有するＴｈｅｒｍｏｆｉｎｎｉｇａｎ ＬＣＱ  ＤｅｃａＸＰｐｌｕｓ４極イオントラップＭＳを使用して達成された。
【０１４９】
選択されたいくつかの化合物の分析データ
化合物３ａ：白色固体生成物として単離された（３８％）。1Ｈ ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、アセトン−ｄ6）δ９．０４（ｂｒ、１Ｈ）、８．４２（ｓ、１Ｈ）、７．６５（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、２Ｈ）、６．９４（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、２Ｈ）、２．４６（ｍ、１Ｈ）、１．２〜２．０（ｍ、１０Ｈ）；13Ｃ ＮＭＲ（６７．５ＭＨｚ、アセトン−ｄ6）δ１７２．２３、１６０．５６、１５５．９２、１３０．０６、１２２．２３、１１５．８８、４１．６７、２５．１９；ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ ２４６（Ｍ-）。
化合物３ｂ：白色固体生成物として単離された（４０％）。1Ｈ ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、アセトン−ｄ6）δ９．３７（ｂｒ、１Ｈ）、８．４４（ｓ、１Ｈ）、７．５５（ｍ、１Ｈ）、７．４５（ｍ、１Ｈ）、７．１０（ｍ、１Ｈ）、２．４６（ｍ、１Ｈ）、１．２〜２．０（ｍ、１０Ｈ）；13Ｃ ＮＭＲ（６７．５ＭＨｚ、アセトン−ｄ6）δ１７２．１０、１５５．１６、１５３．２９、１４９．７２、１４８．２２、１２５．７５、１２３．０７、１１８．１８、１１５．２０、４１．６１、２５．１７；ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ ２６４（Ｍ-）。
化合物３ｃ：白色固体生成物として単離された（３５％）。1Ｈ ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、アセトン−ｄ6）δ１０．７９（ｂｒ、１Ｈ）、８．１６（ｓ、１Ｈ）、７．４０（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、２．７６（ｍ、１Ｈ）、１．２〜２．０（ｍ、１０Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ ２８２（Ｍ-）。
化合物３ｄ：白色固体生成物として単離された（４５％）。1Ｈ ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、アセトン−ｄ6）δ１１．３４（ｂｒ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、２．８５（ｍ、１Ｈ）、１．２〜２．０（ｍ、１０Ｈ）；13Ｃ ＮＭＲ（６７．５ＭＨｚ、アセトン−ｄ6）δ１７１．５０、１４６．５４、１４２．８９、１３９．２５、１３８．０２、１２９．３２、１１０．４４、４２．１６、２４．８４；ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ ３２１（Ｍ-）。
化合物３ｅ：白色固体生成物として単離された（４０％）。1Ｈ ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、アセトン−ｄ6）δ９．５５（ｂｒ、１Ｈ）、８．５０（ｓ、１Ｈ）、７．８５（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．６７（ｄｄ、Ｊ1＝８．５Ｈｚ、Ｊ2＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．１８（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ）、２．５５（ｍ、１Ｈ）、１．２〜２．０（ｍ、１０Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ ２８０（Ｍ-）。
化合物３ｆ：白色固体生成物として単離された（３９％）。1Ｈ ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、アセトン−ｄ6）δ９．６６（ｂｒ、１Ｈ）、８．４４（ｓ、１Ｈ）、７．９４（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．６６（ｄｄ、Ｊ1＝８．４Ｈｚ、Ｊ2＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．１０（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、２．４７（ｍ、１Ｈ）、１．２〜２．０（ｍ、１０Ｈ）；13Ｃ ＮＭＲ（６７．５ＭＨｚ、アセトン−ｄ6）δ１７２．１２、１５６．９３、１５４．７５、１３３．０９、１２８．８７、１２４．０１、１１６．８２、１１０．０４、４１．６２、２５．１８。
化合物３ｇ：白色固体生成物として単離された（３７％）。1Ｈ ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、アセトン−ｄ6）δ１０．８２（ｂｒ、１Ｈ）、８．１５（ｓ、１Ｈ）、７．９３（ｓ、２Ｈ）、２．７３（ｍ、１Ｈ）、１．２〜２．０（ｍ、１０Ｈ）。
化合物３ｈ：白色固体生成物として単離された（４０％）。1Ｈ ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、アセトン−ｄ6）δ１０．７４（ｂｒ、１Ｈ）、８．１３（ｓ、２Ｈ）、８．１０（ｓ、１Ｈ）、２．７１（ｍ、１Ｈ）、１．２〜２．０（ｍ、１０Ｈ）。
化合物４：白色固体生成物として単離された（４０％）。1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、アセトン−ｄ6）δ９．０５（ｂｒ、１Ｈ）、８．６０（ｓ、１Ｈ）、８．０２（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、２Ｈ）、７．６８（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、２Ｈ）、７．０５（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、２Ｈ）、６．９３（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、２Ｈ）、３．８７（ｓ、３Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ ２７０（Ｍ-）。
化合物５：白色固体生成物として単離された（４０％）。1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、アセトン−ｄ6）δ９．３７（ｂｒ、１Ｈ）、８．６２（ｓ、１Ｈ）、８．０２（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．６０（ｄｄ、Ｊ1＝８．４Ｈｚ、Ｊ2＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．４７（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．０６（ｍ、３Ｈ）、３．８７（ｓ、３Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ ２８８（Ｍ-）。
【０１５０】
実施例３．ＭＩＦを阻害する更なる化合物。
更なる化合物が生産され、上の実施例で記載された方法により、ｉｎ  ｖｉｔｒｏのＭＩＦ阻害活性を試験された。表２がそれらの実験の結果を示す。
【０１５１】
【表２】
2009539838.tif 000046
【０１５２】
表２の続き
【表３】
2009539838.tif 000047
【０１５３】
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【０１５４】
上記の点を考慮して、本発明の幾つかの利点が達成され、他の利点が達成されたことが分かるであろう。
【０１５５】
本発明の範囲から逸脱することなく上記の方法及び組成物には多様な変更が成され得るので、上記の記載に含まれ、添付図面に示される全ての事柄は実例として解釈され、限定的な意味ではないものであるべきと意図される。
【０１５６】
本明細書に引用された全ての参考文献は、参照されて本明細書中の一部とする。本明細書中での参考文献の論考は単に著者らによる主張を概説するために意図され、どの文献も先行技術を構成するという承認は成されていない。本出願者らは、引用文献が正確および適切であるかを検討する権利を留保する。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2009539838.tif 000048
（式中：
Ｒ1が、独立して、多重置換の、ＯＨもしくはハロゲンであり、ここで第１のＲ１がＯＨであり、第２のＲ１がハロゲンであり；
Ｒ2が、３、４、５、もしくは６員の、脂環式環、複素環、もしくは芳香環の環構造を含み、ここで、該環構造中の１原子はＲ3に結合する炭素に結合しており；
Ｒ3が、Ｏ、Ｃ（Ｒ5）2、もしくはＳであり；かつ
Ｒ4が、Ｈ、Ｒ5、もしくはハロゲンであり；式中：
Ｒ5が、独立に、Ｈ、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルカノイル、または直鎖もしくは分岐Ｃ2〜Ｃ6アルコキシである。）
の化合物、または、その医薬として許容可能な塩、もしくは互変異性体。
【請求項２】
Ｒ１がパラ位のＯＨを含む、請求項１の化合物。
【請求項３】
前記ハロゲン置換がフッ素である、請求項１または２の化合物。
【請求項４】
前記フッ素がメタ位にある、請求項３の化合物。
【請求項５】
Ｒ２の環が脂環式環である、請求項１の化合物。
【請求項６】
前記脂環式環が、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルもしくはシクロヘキシル−２，３−エンである、請求項５の化合物。
【請求項７】
Ｒ２の環が複素環である、請求項１の化合物
【請求項８】
Ｒ２の環がパラヒドロキシメチルフェニルもしくはパラメトキシフェニルである、請求項７の化合物。
【請求項９】
前記複素環が、ピリミジン、ピリダジン、ピラジン、ピリジン、ピラゾール、イミダゾール、ピロール、ピラン、もしくはフランである、請求項７の化合物。
【請求項１０】
Ｒ２の環が芳香族である、請求項１の化合物。
【請求項１１】
前記芳香環が、シクロベンジル、４−ピリミジル、もしくは３−ピリミジルである、請求項１０の化合物。
【請求項１２】
Ｒ２の環構造が置換されていない、請求項１〜１１のいずれか１項の化合物。
【請求項１３】
Ｒ２の環構造が、少なくとも１つの、直鎖もしくは分岐Ｃ１〜Ｃ６アルキル、直鎖もしくは分岐Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、直鎖もしくは分岐Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル、直鎖もしくは分岐Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ケト、カルボキシ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、ジアゾ、チオ、もしくはヒドロキシアミノで置換される、請求項１〜１２のいずれか１項の化合物。
【請求項１４】
Ｒ２の環構造が、少なくとも１つのニトロ、アミノ、ヒドロキシル、もしくはハロゲンで置換される、請求項１３の化合物。
【請求項１５】
Ｒ３がＯである、請求項１〜１４のいずれか１項の化合物。
【請求項１６】
Ｒ４がＨである、請求項１〜１５のいずれか１項の化合物。
【請求項１７】
【化２】
2009539838.tif 000049
を含むか、もしくは、これから成る、請求項１の化合物。
【請求項１８】
【化３】
2009539838.tif 000050
を含むか、もしくは、これから成る、請求項１の化合物。
【請求項１９】
医薬として許容可能な賦形剤に、請求項１〜１８のいずれか１項の化合物、または、その医薬として許容可能な塩、もしくは互変異性体を含む、医薬組成物。
【請求項２０】
（ｉ）哺乳類におけるマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）活性を阻害するための、（ｉｉ）哺乳類におけるマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）活性を阻害するための医薬を製造するための、（ｉｉｉ）哺乳類における炎症を治療するかもしくは予防するための、（ｉｖ）哺乳類における炎症を治療するかもしくは予防するための医薬を製造するための、（ｖ）セプシス、敗血症および／または内毒素ショックを有するか、または、セプシス、敗血症および／または内毒素ショックのリスクのある哺乳類のセプシス、敗血症、および／または内毒素ショックを、治療するか予防するための、または、（ｖｉ）セプシス、敗血症および／または内毒素ショックを有するか、または、セプシス、敗血症および／または内毒素ショックのリスクのある哺乳類のセプシス、敗血症および／または内毒素ショックを、治療するか予防するための医薬を製造するための、請求項１〜１８のいずれか１項の化合物の使用、または、請求項１９に記載の医薬組成物の使用。
【請求項２１】
前記哺乳類が、癌、急性呼吸窮迫症候群、サイトカイン媒介毒性、乾癬、インターロイキン−２毒性、虫垂炎、消化性潰瘍、胃潰瘍、および十二指腸潰瘍、腹膜炎、膵炎、潰瘍性結腸炎、偽膜性結腸炎、急性結腸炎、および虚血性結腸炎、憩室炎、喉頭蓋炎、無弛緩症、胆管炎、胆嚢炎、肝炎、炎症性腸疾患、クローン病、腸炎、ホウィップル病、喘息、アレルギー、アナフィラキシーショック、免疫複合体病、臓器虚血、再灌流傷害、臓器壊死、枯草熱、セプシス、敗血症、内毒素ショック、悪液質、異常高熱症、好酸球性肉芽腫、肉芽腫症、類肉腫症、敗血症流産、副睾丸炎、膣炎、前立腺炎、尿道炎、気管支炎、気腫、鼻炎、嚢胞性線維症、肺炎、塵肺症、肺胞症、細気管支炎、咽頭炎、胸膜炎、副鼻腔炎、インフルエンザ、呼吸器合胞体ウィルス感染、ヘルペス感染、ＨＩＶ感染、Ｂ型肝炎ウィルス感染、Ｃ型肝炎ウィルス感染、播種性菌血症、デング熱、カンジダ症、マラリア、糸状虫症、アメーバ症、包虫嚢胞、火傷、皮膚炎、皮膚筋炎、日焼け、蕁麻疹、疣、膨疹、血管炎、脈管炎、心内膜炎、動脈炎、アテローム性動脈硬化症、血栓性静脈炎、心膜炎、心筋炎、心筋虚血、結節性動脈周囲炎、リウマチ熱、アルツハイマー病、セリアック病、鬱血性心不全、髄膜炎、脳炎、多発性硬化症、脳梗塞、脳塞栓、ギランバレー症候群、神経炎、神経痛、脊髄損傷、麻痺、ブドウ膜炎、関節炎疹、関節痛、骨髄炎、筋膜炎、パジェット病、痛風、歯周病、リウマチ様関節炎、滑膜炎、重症筋無力症、甲状腺炎、全身性エリテマトーデス、グッドパスチャー症候群、ベーチェット症候群、同種移植の拒絶反応、移植片対宿主病、強直性脊椎炎、バージャー病、１型糖尿病、２型糖尿病、ライター症候群、もしくはホジキン病を有する、請求項２０の使用。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】図面
【訂正対象項目名】図６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図６】
2009539838.tif 000051