【手続補正書】
【提出日】平成25年8月6日(2013.8.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリペプチドを、該ポリペプチドを発現している哺乳動物宿主細胞において産生する方法において、アスパラギン含有のグルタミンフリー産生培養培地における培養の産生期で哺乳動物宿主細胞を培養することを含んでなり、アスパラギンが７．５ｍＭから１５ｍＭの範囲の濃度で添加される方法。
【請求項２】
アスパラギンが７．５ｍＭから１０ｍＭの範囲の濃度で添加される請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記組換え宿主細胞が真核生物宿主細胞である請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記哺乳動物宿主細胞がチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である請求項３に記載の方法。
【請求項５】
哺乳動物宿主細胞がｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞である請求項４に記載の方法。
【請求項６】
産生培地が無血清である請求項１に記載の方法。
【請求項７】
産生培養培地が
１）エネルギー源；
２）必須アミノ酸；
３）ビタミン；
４）遊離脂肪酸；及び
５）微量元素
から成る群から選択される一又は複数の成分を含有する請求項１に記載の方法。
【請求項８】
産生培養培地が
１）ホルモン及び他の増殖因子；
２）塩及びバッファー；及び
３）ヌクレオシド
から成る群から選択される一又は複数の成分を更に含有する請求項７に記載の方法。
【請求項９】
産生期が回分又は流加培養期である請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記ポリペプチドを単離する工程を更に含んでなる請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
細胞生存度、培養寿命、比生産性及び単離後の最終組換えタンパク質力価の一又は複数を決定することを更に含んでなる請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
細胞生存度、培養寿命、比生産性及び最終組換えタンパク質力価の少なくとも一つが、同じ組成のグルタミン含有産生培地で産生される同じポリペプチドと比較して増加される請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
ポリペプチドが哺乳動物糖タンパク質である請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
ポリペプチドが抗体、抗体断片及びイムノアドヘシンからなる群から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記抗体断片が、Ｆａｂ、Ｆａｂ′、Ｆ（ａｂ′）２、ｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、ｄＡｂ、相補性決定領域（ＣＤＲ）断片、線状抗体、単鎖抗体分子、ミニボディ、ダイアボディ、抗体断片から形成された多重特異性抗体から成る群から選択される請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
抗体又は抗体断片が、キメラ、ヒト化又はヒトである請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記抗体又は抗体断片が、治療用抗体又はそれらの生物学的に機能的な断片である請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
前記治療用抗体が、抗ＨＥＲ２抗体 抗ＣＤ２０抗体；抗ＩＬ-８抗体；抗ＶＥＧＦ抗体；抗ＣＤ４０抗体、抗ＣＤ１１ａ抗体；抗ＣＤ１８抗体；抗免疫ＩｇＥ抗体；抗Ａｐｏ-２受容体抗体；抗組織因子（ＴＦ）抗体；抗ヒトα４β７インテグリン抗体；抗ＥＧＦＲ抗体；抗ＣＤ３抗体；抗ＣＤ２５抗体；抗ＣＤ４抗体；抗ＣＤ５２抗体；抗Ｆｃ受容体抗体；抗癌胎児性抗原（ＣＥＡ）抗体；胸部上皮細胞に対する抗体；結腸癌細胞に結合する抗体；抗ＣＤ３８抗体；抗ＣＤ３３抗体；抗ＣＤ２２抗体；抗ＥｐＣＡＭ抗体；抗ＧｐＩＩｂ／ＩＩＩａ抗体；抗ＲＳＶ抗体；抗ＣＭＶ抗体；抗ＨＩＶ抗体；抗肝炎抗体；抗ＣＡ１２５抗体；抗αｖβ３抗体；抗ヒト腎細胞癌抗体；抗ヒト１７-１Ａ抗体；抗ヒト直腸結腸腫瘍抗体；ＧＤ３ガングリオシドに対する抗ヒト黒色腫抗体Ｒ２４；抗ヒト扁平上皮癌；及び抗ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）抗体及び抗ＨＬＡ ＤＲ抗体からなる群から選択される請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記治療用抗体が、ＨＥＲ受容体、ＶＥＧＦ、ＩｇＥ、ＣＤ２０、ＣＤ１１ａ、ＣＤ４０、ＢＲ３又はＤＲ５に結合する抗体である請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
ＤＲ５に結合する前記治療用抗体が、Ａｐｏｍａｂｓ１．１、２．１、３．１、４．１、５．１、５．２、５．３、６．１、６．２、６．３、７．１、７．２、７．３，８．１、８．３、９．１、１．２、２．２、３．２、４．２、５．２、６．２、７．２、８．２、９．２、１．３、２．２、３．３、４．３、５．３、６．３、７．３、８．３、９．３、及び２５．３から成る群から選択される請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記治療用抗体が抗ＢＲ３抗体である請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
前記ポリペプチドが治療用ポリペプチドである請求項１に記載の方法。
【請求項２３】
前記治療用ポリペプチドが、ヒト成長ホルモン及びウシ成長ホルモンを含む成長ホルモン；成長ホルモン放出因子；副甲状腺ホルモン；甲状腺刺激ホルモン；リポタンパク質；アルファ-１-アンチトリプシン；インスリンＡ-鎖；インスリンＢ鎖；プロインスリン；卵胞刺激ホルモン；カルシトニン；黄体形成ホルモン；グルカゴン；凝固因子、例えば第ＶＩＩＩＣ因子、第ＩＸ因子、組織因子及びヴォン・ヴィレブランド因子；抗凝固因子、例えばプロテインＣ；心房ナトリウム利尿因子；肺表面活性物質；プラスミノーゲン活性化因子、例えばウロキナーゼ又はヒト尿又は組織型プラスミノーゲンアクチベーター（ｔ-ＰＡ）；ボンベシン；トロンビン；造血成長因子；腫瘍壊死因子-α及び-β；エンケファリナーゼ；ランテス（ＲＡＮＴＥＳ(regulated on activation normally T-cell expressed and secreted)）；ヒトマクロファージ炎症性タンパク質（ＭＩＰ-１-α）；血清アルブミン、例えばヒト血清アルブミン；ミュラー管抑制因子；リラキシンＡ-鎖；リラキシンＢ-鎖；プロ・リラキシン；マウス・ゴナドトロピン関連ペプチド；微生物タンパク、例えばβ‐ラクタマーゼ；デオキシリボヌクレアーゼ；ＩｇＥ；細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原（ＣＴＬＡ）、例えばＣＴＬＡ-４；インヒビン；アクチビン；血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）；ホルモン又は増殖因子の受容体；プロテインＡ又はＤ；リウマトイド因子；神経栄養因子、例えば骨由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、ニューロトロフィン-３、-４、-５又は-６（ＮＴ-３、ＮＴ-４、ＮＴ-５、又はＮＴ-６）、又は神経成長因子、例えばＮＧＦ-β；血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）；線維芽細胞増殖因子、例えばａＦＧＦ及びｂＦＧＦ；上皮成長因子（ＥＧＦ）；トランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）、例えばＴＧＦアルファ及びＴＧＦベータ、ＴＧＦ-β１、ＴＧＦ-β２、ＴＧＦ-β３、ＴＧＦ-β４又はＴＧＦ-β５を含む；インスリン様増殖因子-Ｉ及び-ＩＩ（ＩＧＦ-Ｉ及びＩＧＦＩＩ）；ｄｅｓ（１-３）-ＩＧＦ-Ｉ（脳ＩＧＦ-Ｉ）、インスリン様増殖因子結合タンパク質；ＣＤタンパク質、例えばＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３４及びＣＤ４０；エリスロポエチン；骨誘導因子；イムノトキシン；骨形成タンパク質（ＢＭＰ）；インターフェロン、例えばインターフェロン-α、-β、及び、-γ；コロニー刺激因子（ＣＳＦ）、例えばＭ-ＣＳＦ、ＧＭ-ＣＳＦ及びＧ-ＣＳＦ；インターロイキン（ＩＬ）、例えばＩＬ-１からＩＬ-１０；スーパーオキシドジスムターゼ；Ｔ細胞受容体；表層膜タンパク質；崩壊促進因子；ウィルス抗原、例えばＡＩＤＳエンベロープの一部；輸送タンパク質；ホーミング受容体；アドレシン；調節タンパク質；インテグリン、例えばＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１８、ＩＣＡＭ、ＶＬＡ-４及びＶＣＡＭ；腫瘍関連抗原、例えばＨＥＲ２、ＨＥＲ３又はＨＥＲ４受容体；及び前記ポリペプチドの断片から成る群から選択される請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
産生期におけるポリペプチドの産生のための、アスパラギンを含有する使用準備済のグルタミンフリー細胞培養培地であって、アスパラギンが７．５ｍＭ〜１５ｍＭの範囲の濃度である培養培地。
【請求項２５】
前記イムノアドヘシンがＢＲ３-Ｆｃイムノアドヘシンである請求項１４に記載の方法。