【誤訳訂正書】
【提出日】平成25年8月12日(2013.8.12)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
コンパクトな細胞凝集物を入手するために、a）真皮乳頭細胞若しくは真皮鞘細胞又はそれらの組合せを浮遊培養で増殖させる工程、及びb）ヒアルロニダーゼ、コラゲナーゼ、コンドロイチナーゼ、又はそれらの組合せからなる群より選ばれる酵素の少なくとも20U/mLを前記培養と混合する工程を含む、真皮乳頭細胞若しくは真皮鞘細胞又はそれらの組合せを凝集させる方法。
【請求項２】
前記酵素が、15日間までの間、前記培養と混合される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
浮遊培養がハンギングドロップ培養である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
ハンギングドロップが、15日間まで培養される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
ハンギングドロップが、5日間培養される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
以下の工程を含む、凝集した真皮乳頭細胞若しくは真皮鞘細胞又はそれらの組合せから毛包の形成を促進する方法：
a）真皮乳頭細胞若しくは真皮鞘細胞又はそれらの組合せを浮遊培養で増殖させる工程；
b）少なくとも20U/mLのヒアルロニダーゼを前記培養と1日から15日間混合してコンパクトな凝集した真皮乳頭細胞又は真皮鞘細胞を生じる工程；及び
c）前記培養を十分な時間インビトロで増殖させて毛包を形成する工程。
【請求項７】
浮遊培養が可溶性因子を含む、請求項１又は６に記載の方法。
【請求項８】
浮遊培養がハンギングドロップ培養である、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
ハンギングドロップ培養が9,000未満の細胞を含む、請求項３又は８に記載の方法。
【請求項１０】
ハンギングドロップ培養が3,000の細胞を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
培養がさらに上皮細胞を含む、請求項１又は６に記載の方法。
【請求項１２】
上皮細胞が毛包細胞又は皮膚細胞に由来する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
上皮細胞がケラチノサイトである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
ヒアルロニダーゼが、Hyal-1、Hyal-2、Hyal-3又はそれらの組合せである、請求項１又は６に記載の方法。
【請求項１５】
ハンギングドロップ培養が24時間培養される、請求項８に記載の方法。
【請求項１６】
ハンギングドロップ培養が48時間培養される、請求項８に記載の方法。
【請求項１７】
工程（c）の増殖が少なくとも24時間である、請求項６に記載の方法。
【請求項１８】
前記浮遊培養が、誘導性マーカー遺伝子の発現が低下するまで培養される、請求項1又は６に記載の方法。
【請求項１９】
誘導性マーカー遺伝子が、Wnt10b、WISE、ヴァーシカン、又はそれらの組み合わせを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
可溶性因子が外因的に添加される、請求項７に記載の方法。
【請求項２１】
浮遊培養が可溶性因子を含み、前記可溶性因子が、請求項６の工程（c）の増殖培養に添加される、請求項６に記載の方法。
【請求項２２】
前記可溶性因子が、5ng/mL培養液から300ng/mL培養液の量で培養と混合される、請求項７に記載の方法。
【請求項２３】
可溶性因子が、ペリオスチン；フォリスタチン；Wise、Wnt10b；
Id3（DNA結合3の阻害物質）、
Osf2（ペリオスチン）、
Apod（アポリポタンパク質D）、
Fn1（フィブロネクチン）、
Gnas（G-タンパク質刺激サブユニット）、
Pcolce（プロコラゲナーゼ-c-プロテイナーゼエンハンサー１）、
Ecm2（SPARC様タンパク質）、
Igfbp2（インスリン成長因子結合タンパク質2）、
Ltbpl（潜在性TGFベータ結合タンパク質1）、
Cnn3（カルポニン3）、
Xlas（Xlas/Alex Gタンパク質）、
Eif4G1（タンパク質合成開始因子4）、
Id2（DNA結合2阻害因子）、
Cabp1（カルシウム結合タンパク質1）、
Mmp15（マトリックスメタロプロテイナーゼ15）、
Id3a（DNA結合3aの阻害因子）、
Fbln5（フィブリン5）、
Lgals1（ガレクチン1）、
Cspg2（ヴァーシカン）、
Pn-1（プロテアーゼネキシン1）、
Btg1（B細胞転座遺伝子1）、
TNF細胞内ドメイン-相互反応タンパク質、
インスリン様成長因子結合タンパク質3、
ディスインテグリン及びメタロプロテイナーゼドメイン17、
インターフェロン調節因子1、
CIKS（核因子NF-カッパ-Bアクチベーター1）、
Jun-B、
アファジン、
接合部プラコグロビン、
アグリン、
クルッペル様因子4（腸管）、
アルカリホスファターゼ、組織非特異的、
クルッペル様因子9、
アネキシン1、
ラミンA、
アポリポタンパク質B、
ラミニン、ベータ2、
アポリポタンパク質E、
レクチン、ガラクトース結合、可溶性5、
ベクリン1（コイルド-コイル、ミオシン様BCL2-相互作用タンパク質）、
レクチン、ガラクトース結合、可溶性7、
骨形態発生タンパク質4、
マトリックスGlaタンパク質、
カルモデュリン1、
マトリックスメタロプロテイナーゼ14、膜挿入、
カルモデュリン3、
マトリックスメタロプロテイナーゼ3、
カルネキシン、
マイトジェン活性化タンパク質キナーゼキナーゼ2、
カルレティクリン、
マイトジェン活性化タンパク質キナーゼキナーゼキナーゼ12、
カテプシンK、
N-myc下流-調節遺伝子2、
カテプシンS、
Notch遺伝子ホモローグ1（キイロショウジョウバエ）、
CCAAT/エンハンサー結合タンパク質(C/EBP)、ベータ、
p21 (CDKNIA)-活性化キナーゼ2、
CD81抗原、
PKC-デルタ結合タンパク質、
CD63抗原、
プロコラーゲン、１型、アルファ2、
細胞性レチン酸結合タンパク質2、
プロサイモシンアルファ、
細胞性レチン酸結合タンパク質1、
ラバプチン5、
コラーゲン、I型、アルファ1、
Ras-関連GPT-結合タンパク質raga、
コラーゲン、III型、アルファ1、
ベータ-チュブリンTベータ15、
コラーゲン、V型、アルファ1、
ラツス・ノルヴェジクス  プレクチン1、
サイクリンD1、
レセプター様チロシンキナーゼ、
シスタチンB、
RhoB、
シスタチンC、
発育不全関連転写因子1、
先天性角化不全症1、ディスケリン、
S100カルシウム-結合タンパク質A4、
EphレセプターB2、
S-100 関連タンパク質、クローン42C、
脂肪酸結合タンパク質4、
分泌された酸性システイン富裕糖タンパク質、
FGFレセプター活性化タンパク質1、
セリン（又はシステイン）プロテイナーゼ阻害物質、クレードG、
線維芽細胞増殖因子レセプター1、
プロテイナーゼ阻害物質、クレードH、メンバー1、
FK506-結合タンパク質1a、
血清/グルココルチコイド調節キナーゼ、
フォリスタチン様、
平滑筋アルファ-アクチン、
Fynプロト-オンコジーン、
シンデカン1、
GABA(A)レセプター関連タンパク質様2、
シンデカン4、
ゴナドトロピン-放出ホルモンレセプター、
サイモシンベータ-4、
増殖停止特異的6、
メタロプロテイナーゼ2の組織阻害因子、
増殖因子レセプター結合タンパク質2、
トランスフェリン、
インヒビンアルファ、
チュブリン、ベータ5、
DNA結合１の阻害因子、
v-aktネズミ胸腺腫ウイルスオンコジーンホモローグ1、
インスリン様成長因子1、
ヴィメンチン及び
インスリン様成長因子2からなる群より選ばれる任意の1つ以上の可溶性因子若しくはそれらの任意の組み合わせ；又はそれらの任意の組み合わせを含む、請求項７に記載の方法。
【請求項２４】
さらに、Wnt10b；ペリオスチン；フォリスタチン；Wise；
Id3（DNA結合3の阻害物質）、
Osf2（ペリオスチン）、
Apod（アポリポタンパク質D）、
Fn1（フィブロネクチン）、
Gnas（G-タンパク質刺激サブユニット）、
Pcolce（プロコラゲナーゼ-c-プロテイナーゼエンハンサー１）、
Ecm2（SPARC様タンパク質）、
Igfbp2（インスリン成長因子結合タンパク質2）、
Ltbpl（潜在性TGFベータ結合タンパク質1）、
Cnn3（カルポニン3）、
Xlas（Xlas/Alex Gタンパク質）、
Eif4G1（タンパク質合成開始因子4）、
Id2（DNA結合2阻害因子）、
Cabp1（カルシウム結合タンパク質1）、
Mmp15（マトリックスメタロプロテイナーゼ15）、
Id3a（DNA結合3aの阻害因子）、
Fbln5（フィブリン5）、
Lgals1（ガレクチン1）、
Cspg2（ヴァーシカン）、
Pn-1（プロテアーゼネキシン1）、
Btg1（B細胞転座遺伝子1）、
TNF細胞内ドメイン-相互反応タンパク質、
インスリン様成長因子結合タンパク質3、
ディスインテグリン及びメタロプロテイナーゼドメイン17、
インターフェロン調節因子1、
CIKS（核因子NF-カッパ-Bアクチベーター1）、
Jun-B、
アファジン、
接合部プラコグロビン、
アグリン、
クルッペル様因子4（腸管）、
アルカリホスファターゼ、組織非特異的、
クルッペル様因子9、
アネキシン1、
ラミンA、
アポリポタンパク質B、
ラミニン、ベータ2、
アポリポタンパク質E、
レクチン、ガラクトース結合、可溶性5、
ベクリン1（コイルド-コイル、ミオシン様BCL2-相互作用タンパク質）、
レクチン、ガラクトース結合、可溶性7、
骨形態発生タンパク質4、
マトリックスGlaタンパク質、
カルモデュリン1、
マトリックスメタロプロテイナーゼ14、膜挿入、
カルモデュリン3、
マトリックスメタロプロテイナーゼ3、
カルネキシン、
マイトジェン活性化タンパク質キナーゼキナーゼ2、
カルレティクリン、
マイトジェン活性化タンパク質キナーゼキナーゼキナーゼ12、
カテプシンK、
N-myc下流-調節遺伝子2、
カテプシンS、
Notch遺伝子ホモローグ1（キイロショウジョウバエ）、
CCAAT/エンハンサー結合タンパク質(C/EBP)、ベータ、
p21 (CDKNIA)-活性化キナーゼ2、
CD81抗原、
PKC-デルタ結合タンパク質、
CD63抗原、
プロコラーゲン、１型、アルファ2、
細胞性レチン酸結合タンパク質2、
プロサイモシンアルファ、
細胞性レチン酸結合タンパク質1、
ラバプチン5、
コラーゲン、I型、アルファ1、
Ras-関連GPT-結合タンパク質raga、
コラーゲン、III型、アルファ1、
ベータ-チュブリンTベータ15、
コラーゲン、V型、アルファ1、
ラツス・ノルヴェジクス  プレクチン1、
サイクリンD1、
レセプター様チロシンキナーゼ、
シスタチンB、
RhoB、
シスタチンC、
発育不全関連転写因子1、
先天性角化不全症1、ディスケリン、
S100カルシウム-結合タンパク質A4、
EphレセプターB2、
S-100 関連タンパク質、クローン42C、
脂肪酸結合タンパク質4、
分泌された酸性システイン富裕糖タンパク質、
FGFレセプター活性化タンパク質1、
セリン（又はシステイン）プロテイナーゼ阻害物質、クレードG、
線維芽細胞増殖因子レセプター1、
プロテイナーゼ阻害物質、クレードH、メンバー1、
FK506-結合タンパク質1a、
血清/グルココルチコイド調節キナーゼ、
フォリスタチン様、
平滑筋アルファ-アクチン、
Fynプロト-オンコジーン、
シンデカン1、
GABA(A)レセプター関連タンパク質様2、
シンデカン4、
ゴナドトロピン-放出ホルモンレセプター、
サイモシンベータ-4、
増殖停止特異的6、
メタロプロテイナーゼ2の組織阻害因子、
増殖因子レセプター結合タンパク質2、
トランスフェリン、
インヒビンアルファ、
チュブリン、ベータ5、
DNA結合１の阻害因子、
v-aktネズミ胸腺腫ウイルスオンコジーンホモローグ1、
インスリン様成長因子1、
ヴィメンチン及び
インスリン様成長因子2からなる群より選ばれる1つ以上の可溶性因子若しくはそれらの任意の組み合わせ；又はそれらの任意の組み合わせをコードする核酸を細胞にトランスフェクトする工程を含む、請求項１又は６に記載の方法。
【請求項２５】
さらに、毛包を非ヒト対象者の皮膚に移植する工程を含む、請求項１又は６に記載の方法。
【請求項２６】
前記対象者が非ヒト哺乳動物である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記哺乳動物がマウス、イヌ、ネコ又はトリである、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
細胞が前記対象者にとって自己由来である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
さらに、コンパクトな細胞凝集物を浮遊後培養に置く工程を含む、請求項１又は６に記載の方法。
【請求項３０】
さらに前記毛包を浮遊後培養に置く工程を含むか、又は工程（c）の増殖が浮遊後培養で生じる、請求項６に記載の方法。
【請求項３１】
前記浮遊後培養が生物分解性骨組みを含む、請求項２９又は３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記生物分解性骨組みがアルギネートを含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記細胞が一次細胞、二次細胞、継代された二次細胞又は細胞株を含む、請求項１又は６に記載の方法。
【請求項３４】
前記細胞が哺乳動物由来である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記哺乳動物がヒト、マウス、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ又はトリである、請求項３４に記載の方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２３】
表2：真皮乳頭及び皮膚鞘膜の両方で発現される選択遺伝子
2009528062.tif 000001
2009528062.tif 000002