【手続補正書】
【提出日】平成25年5月29日(2013.5.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトＦｃＲポリペプチドに結合することができるグリコシル化されていない抗体Ｆｃドメインを含むポリペプチドであって、
ここで、該Ｆｃドメインは、３８２位と４２８位のアミノ酸でのアミノ酸置換、ならびに以下のアミノ酸：２２４位、２４１位、２５１位、２６６位、２６９位、２７６位、２７９位、２８６位、２９５位、２９７位、３００位、３１５位、３２５位、３２８位、３３０位、３３１位、３３２位、３３８位、３４０位、３４１位、３４８位、３６９位、３７８位、３９２位、４２４位、４２６位、および／または４３４位のうちのいずれかの少なくとも１つのさらなる置換
を含み；
ここで、該３８２位のアミノ酸の置換がバリン（Ｅ３８２Ｖ）であり、そして該４２８位のアミノ酸の置換がイソロイシン（Ｍ４２８Ｉ）であり；
ここで、該少なくとも１つのさらなる置換が：
Ｈ２２４Ｒ／Ｙ、Ｆ２４１Ｌ、Ｋ２５１Ｆ、Ｖ２６６Ｍ、Ｅ２６９Ｋ、Ｎ２７６Ｄ、Ｖ２７９Ｍ、Ｎ２８６Ｄ、Ｑ２９５Ｒ、Ｎ２９７Ｄ、Ｙ３００Ｃ、Ｎ３１５Ｄ、Ｎ３２５Ｓ、Ｌ３２８Ｗ、Ａ３３０Ｖ／Ｅ／Ｉ、Ｐ３３１Ａ／Ｓ／Ｅ、Ｉ３３２Ｙ、Ｋ３３８Ｉ／Ｒ、Ｋ３４０Ｎ／Ｑ、Ｇ３４１Ｖ、Ｖ３４８Ｍ、Ｖ３６９Ａ、Ａ３７８Ｄ、Ｋ３９２Ｅ、Ｓ４２４Ｌ、Ｓ４２６Ｉ、および／またはＮ４３４Ｓ／Ｄであり；
そしてここで、該Ｆｃドメインが、
ａ）Ｋ３３８ＲおよびＧ３４１Ｖ；ｂ）Ｎ２９７Ｄ、Ｎ３１５Ｄ、およびＫ３４０Ｎ、ｃ）Ｋ３４０Ｎ、ｄ）Ｋ３３８ＩおよびＫ３４０Ｎ、ｅ）Ｋ３４０ＱおよびＡ３７８Ｄ；ｆ）Ｎ３２５ＳおよびＫ３４０Ｎ、ｇ）Ｈ２２４Ｙ、Ｅ２６９Ｋ、Ｎ３２５Ｓ、およびＧ３４１Ｖ、ｈ）Ｇ３４１ＶおよびＫ３９２Ｅ、ｉ）Ｋ３３８Ｒ、Ｇ３４１Ｖ、Ｓ４２４Ｌ、およびＮ４３４Ｄ、ｊ）Ｆ２４１ＬおよびＧ３４１Ｖ、ｋ）Ｇ３４１Ｖ、ｌ）Ｎ２７６ＤおよびＧ３４１Ｖ、ｍ）Ｇ３４１ＶおよびＶ３６９Ａ、ｎ）Ｎ２８６Ｄ、Ｇ３４１Ｖ、およびＮ４３４Ｓ、ｏ）Ｎ３２５ＳおよびＧ３４１Ｖ、ｐ）Ｙ３００ＣおよびＧ３４１Ｖ、ｑ）Ｇ３４１ＶおよびＶ３４８Ｍ、ｒ）Ｅ３８２ＶおよびＭ４２８Ｉ、ｓ）Ｖ２６６Ｍ；ｔ）Ｌ３２８Ｗ、Ａ３３０Ｖ、Ｐ３３１Ａ、およびＱ２９５Ｒ、ｕ）Ｌ３２８Ｗ、Ａ３３０Ｅ、Ｐ３３１Ｅ、およびＶ２７９Ｍ、ｖ）Ｌ３２８Ｗ、Ａ３３０ＥおよびＰ３３１Ｅ、ｗ）Ｌ３２８Ｗ、Ａ３３０Ｅ、Ｐ３３１Ｖ、およびＳ４２６Ｔ、ｘ）Ｌ３２８Ｗ、Ａ３３０ＥおよびＰ３３１Ｖ、ｙ）Ｌ３２８Ｗ、Ａ３３０ＩおよびＰ３３１Ｅ、ｚ）Ｌ３２８Ｗ、Ａ３３０Ｅ、ａａ）Ｌ３２８Ｗ、Ｐ３３１Ｓ、ならびに、ｂｂ）Ｌ３２８Ｗ、Ａ３３０Ｖ、Ｐ３３１Ｓ、Ｈ２２４Ｒ、およびＬ２５１Ｆ
からなる群より選択される置換のセットを含む、ポリペプチド。
【請求項２】
前記ＦｃドメインがヒトＦｃγＲＩポリペプチドに結合することができる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
少なくとも１つのさらなる置換が、上方ＣＨ２領域中のアミノ酸の置換であり、特にここで、少なくとも１つのさらなる置換が、上方ＣＨ２領域の以下の部分：２３４Ｌ〜２３９Ｓ；２６４Ｖ〜２６８Ｈ；２９７Ｎ〜２９９Ｔ；または、３２８Ｌ〜３３２Ｉの中のアミノ酸の置換である、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４】
前記ポリペプチドが、３４１位のアミノ酸に別の置換を有しており、特にここで、前記３４１位のアミノ酸の置換がバリン（Ｇ３４１Ｖ）である、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項５】
前記ポリペプチドが、Ｇ３４１Ｖのさらなる置換を有さない、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項６】
前記ポリペプチドが、Ｋ３３８Ｒのさらなる置換を有さず、特にここで、該ポリペプチドが、Ｋ３３８ＲおよびＧ３４１Ｖのさらなる置換を有さない、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項７】
前記ＦｃドメインがＥ３８２ＶおよびＭ４２８Ｉの置換を有し、Ｇ３４１Ｖおよび／またはＫ３４０Ｎ／Ｑのさらなる置換を有する、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項８】
前記ポリペプチドが、グリコシル化されていない野生型抗体Ｆｃドメインを持つポリペプチドと比較して、ｐＨ依存性のＦｃＲｎ結合において少なくとも２倍の減少を有する、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項９】
前記ＦｃドメインがＧ３４１Ｖのさらなる置換を有し、好ましくは
（ｉ）ここで、該Ｆｃドメインが、Ｈ２２４Ｙ、Ｆ２４１Ｌ、Ｅ２６９Ｋ、Ｎ２７６Ｄ、Ｎ２８６Ｄ、Ｙ３００Ｃ、Ｎ３２５Ｓ、Ｋ３３８Ｒ、Ｖ３４８Ｍ、Ｖ３６９Ａ、Ｋ３９２Ｅ、Ｓ４２４Ｌ、およびＮ４３４Ｄ／Ｓからなる群より選択される少なくとも１つの他の置換を有し、より好ましくはここで、該Ｆｃドメインが前記群より選択される複数の他の置換を有するかもしくは該ＦｃドメインがＫ３３８Ｒ置換を含むか；または
（ｉｉ）前記ポリペプチドが、結合可能なリンカーをさらに含むか；または
（ｉｉｉ）前記ポリペプチドが、非ＦｃＲ結合ドメインをさらに含む、請求項７に記載のポリペプチド。
【請求項１０】
（ｉ）前記非ＦｃＲ結合ドメインが抗体の抗原結合部位であるか、または
（ｉｉ）前記非Ｆｃ結合領域が抗体の抗原結合部位ではなく、好ましくはここで、該非Ｆｃ結合領域が細胞表面タンパク質に結合し、より好ましくはここで、該細胞表面タンパク質が受容体であり、さらにより好ましくはここで、該受容体がチロシンキナーゼであり、最も好ましくはここで該非Ｆｃ結合領域が複数のチロシンキナーゼ受容体に結合する、請求項９の（ｉｉｉ）に記載のポリペプチド。
【請求項１１】
前記ポリペプチドが、配列番号５〜３１からなる群より選択される配列を含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１２】
請求項１〜１１に記載のポリペプチドのいずれかをコードする核酸であって、好ましくは
（ｉ）ここで、該核酸がＤＮＡセグメントであるか、または
（ｉｉ）ここで、該核酸が発現ベクターである、核酸。
【請求項１３】
請求項１２に記載の核酸を含む宿主細胞であって、好ましくはここで、該核酸が第１の発現ベクター中に存在し、より好ましくはここで、該宿主細胞が第２の発現ベクターをさらに含み、さらにより好ましくは（ｉ）ここで、該第２の発現ベクターが免疫グロブリン軽鎖を含むポリペプチドをコードする、宿主細胞。
【請求項１４】
請求項１３の（ｉ）に記載の宿主細胞の集団であって、異なるＦｃドメインを発現する複数の宿主細胞を含み、好ましくはここで、いずれか２つの異なるＦｃドメインのアミノ酸配列が、同一性に関して、２０％未満異なる、宿主細胞の集団。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４０】
本発明の他の目的、特徴、および利点は、以下の詳細な記述から明らかとなるであろう。しかし、詳細な説明および具体的な実施例は、本発明の好ましい実施形態を示しているが、本発明の趣旨および範囲内での様々な変更と改変が、この詳細な説明から当業者に明らかとなるであろうとの理由から、説明のために提供されるにすぎないことが理解されるものとする。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
ヒトＦｃＲポリペプチドに結合することができるグリコシル化されていない抗体Ｆｃドメインを含むポリペプチドであって、
ここで、該Ｆｃドメインは、３８２位と４２８位のアミノ酸でのアミノ酸置換、ならびに以下のアミノ酸：２２４位、２４１位、２５１位、２６６位、２６９位、２７６位、２７９位、２８６位、２９５位、２９７位、３００位、３１５位、３２５位、３２８位、３３０位、３３１位、３３２位、３３８位、３４０位、３４１位、３４８位、３６９位、３７８位、３８２位、３９２位、４２４位、４２６位、４２８位、および／または４３４位
のうちのいずれかの少なくとも１つのさらなる置換
を含む、ポリペプチド。
（項目２）
前記ＦｃドメインがヒトＦｃγＲＩポリペプチドに結合することができる、項目１に記載のポリペプチド。
（項目３）
少なくとも１つのさらなる置換が、上方ＣＨ２領域中のアミノ酸の置換である、項目１に記載のポリペプチド。
（項目４）
少なくとも１つのさらなる置換が、上方ＣＨ２領域の以下の部分：２３４Ｌ〜２３９Ｓ；２６４Ｖ〜２６８Ｈ；２９７Ｎ〜２９９Ｔ；または、３２８Ｌ〜３３２Ｉ
の中のアミノ酸の置換である、項目３に記載のポリペプチド。
（項目５）
前記３８２位のアミノ酸の置換がバリン（Ｅ３８２Ｖ）である、項目１に記載のポリペプチド。
（項目６）
前記４２８位のアミノ酸の置換がイソロイシン（Ｍ４２８Ｉ）である、項目１に記載のポリペプチド。
（項目７）
前記３８２位のアミノ酸の置換がバリン（Ｅ３８２Ｖ）であり、前記４２８位のアミノ酸の置換がイソロイシン（Ｍ４２８Ｉ）である、項目６に記載のポリペプチド。
（項目８）
前記３２８位のアミノ酸の置換がトリプトファン（Ｌ３２８Ｗ）である、項目１に記載のポリペプチド。
（項目９）
前記３３２位のアミノ酸の置換がチロシンである（Ｉ３３２Ｙ）、項目１に記載のポリペプチド。
（項目１０）
少なくとも３２８位および３３２位のアミノ酸に別の置換を有している、項目１に記載のポリペプチド。
（項目１１）
前記３２８位のアミノ酸の置換がトリプトファン（Ｌ３２８Ｗ）であり、３３２位のアミノ酸の置換がチロシン（Ｉ３３２Ｙ）である、項目１０に記載のポリペプチド。
（項目１２）
３４１位のアミノ酸に別の置換を有している、項目１に記載のポリペプチド。
（項目１３）
前記３４１位のアミノ酸の置換がバリン（Ｇ３４１Ｖ）である、項目１２に記載のポリペプチド。
（項目１４）
前記少なくとも１つのさらなる置換が：
Ｈ２２４Ｒ／Ｙ、Ｆ２４１Ｌ、Ｋ２５１Ｆ、Ｖ２６６Ｍ、Ｅ２６９Ｋ、Ｎ２７６Ｄ、Ｖ２７９Ｍ、Ｎ２８６Ｄ、Ｑ２９５Ｒ、Ｎ２９７Ｄ、Ｙ３００Ｃ、Ｎ３１５Ｄ、Ｎ３２５Ｓ、Ｌ３２８Ｗ、Ａ３３０Ｖ／Ｅ／Ｉ、Ｐ３３１Ａ／Ｓ／Ｅ、Ｉ３３２Ｙ、Ｋ３３８Ｉ／Ｒ、Ｋ３４０Ｎ／Ｑ、Ｇ３４１Ｖ、Ｖ３４８Ｍ、Ｖ３６９Ａ、Ａ３７８Ｄ、Ｋ３９２Ｅ、Ｓ４２４Ｌ、Ｓ４２６Ｉ、またはＮ４３４Ｓ／Ｄ
である、項目１に記載のポリペプチド。
（項目１５）
前記ポリペプチドが、グリコシル化されていない野生型抗体Ｆｃドメインを持つポリペプチドと比較して、ｐＨ依存性のＦｃＲｎ結合において少なくとも２倍の減少を有する、項目１に記載のポリペプチド。
（項目１６）
前記ポリペプチドが、Ｇ３４１Ｖのさらなる置換を有さない、項目１４に記載のポリペプチド。
（項目１７）
前記ポリペプチドが、Ｋ３３８Ｒのさらなる置換を有さない、項目１４に記載のポリペプチド。
（項目１８）
前記ポリペプチドが、Ｋ３３８ＲおよびＧ３４１Ｖのさらなる置換を有さない、項目１７に記載のポリペプチド。
（項目１９）
前記ＦｃドメインがＥ３８２ＶおよびＭ４２８Ｉの置換を有し、Ｇ３４１Ｖおよび／またはＫ３４０Ｎ／Ｑのさらなる置換を有する、項目１４に記載のポリペプチド。
（項目２０）
前記ＦｃドメインがＧ３４１Ｖのさらなる置換を有する、項目１９に記載のポリペプチド。
（項目２１）
前記Ｆｃドメインが、Ｈ２２４Ｙ、Ｆ２４１Ｌ、Ｅ２６９Ｋ、Ｎ２７６Ｄ、Ｎ２８６Ｄ、Ｙ３００Ｃ、Ｎ３２５Ｓ、Ｋ３３８Ｒ、Ｖ３４８Ｍ、Ｖ３６９Ａ、Ｋ３９２Ｅ、Ｓ４２４Ｌ、およびＮ４３４Ｄ／Ｓからなる群より選択される少なくとも１つの他の置換を有する、項目２０に記載のポリペプチド。
（項目２２）
前記Ｆｃドメインが前記群より選択される複数の他の置換を有する、項目２１に記載のポリペプチド。
（項目２３）
前記ＦｃドメインがＫ３３８Ｒ置換を含む、項目２１に記載のポリペプチド。
（項目２４）
前記Ｆｃドメインが、
ａ）Ｋ３３８ＲおよびＧ３４１Ｖ；ｂ）Ｎ２９７Ｄ、Ｎ３１５Ｄ、およびＫ３４０Ｎ、ｃ）Ｋ３４０Ｎ、ｄ）Ｋ３３８ＩおよびＫ３４０Ｎ、ｅ）Ｋ３４０ＱおよびＡ３７８Ｄ；ｆ）Ｎ３２５ＳおよびＫ３４０Ｎ、ｇ）Ｈ２２４Ｙ、Ｅ２６９Ｋ、Ｎ３２５Ｓ、およびＧ３４１Ｖ、ｈ）Ｇ３４１ＶおよびＫ３９２Ｅ、ｉ）Ｋ３３８Ｒ、Ｇ３４１Ｖ、Ｓ４２４Ｌ、およびＮ４３４Ｄ、ｊ）Ｆ２４１ＬおよびＧ３４１Ｖ、ｋ）Ｇ３４１Ｖ、ｌ）Ｎ２７６ＤおよびＧ３４１Ｖ、ｍ）Ｇ３４１ＶおよびＶ３６９Ａ、ｎ）Ｎ２８６Ｄ、Ｇ３４１Ｖ、およびＮ４３４Ｓ、ｏ）Ｎ３２５ＳおよびＧ３４１Ｖ、ｐ）Ｙ３００ＣおよびＧ３４１Ｖ、ｑ）Ｇ３４１ＶおよびＶ３４８Ｍ、ｒ）Ｅ３８２ＶおよびＭ４２８Ｉ、ｓ）Ｖ２６６Ｍ；ｔ）Ａ３３０Ｖ、Ｐ３３１Ａ、およびＱ２９５Ｒ、ｕ）Ａ３３０Ｅ、Ｐ３３１Ｅ、およびＶ２７９Ｍ、ｖ）Ａ３３０ＥおよびＰ３３１Ｅ、ｗ）Ａ３３０Ｅ、Ｐ３３１Ｖ、およびＳ４２６Ｔ、ｘ）Ａ３３０ＥおよびＰ３３１Ｖ、ｙ）Ａ３３０ＩおよびＰ３３１Ｅ、ｚ）Ａ３３０Ｅ、ａａ）Ｐ３３１Ｓ、ならびに、ｂｂ）Ａ３３０Ｖ、Ｐ３３１Ｓ、Ｈ２２４Ｒ、およびＬ２５１Ｆ
からなる群より選択される置換のセットを含む、項目１４に記載のポリペプチド。
（項目２５）
結合可能なリンカーをさらに含む、項目２０に記載のポリペプチド。
（項目２６）
非ＦｃＲ結合ドメインをさらに含む、項目２０に記載のポリペプチド。
（項目２７）
前記非ＦｃＲ結合ドメインが抗体の抗原結合部位である、項目２６に記載のポリペプチド。
（項目２８）
前記非Ｆｃ結合領域が抗体の抗原結合部位ではない、項目２６に記載のポリペプチド。
（項目２９）
前記非Ｆｃ結合領域が細胞表面タンパク質に結合する、項目２８に記載のポリペプチド。
（項目３０）
前記細胞表面タンパク質が受容体である、項目２８に記載のポリペプチド。
（項目３１）
前記受容体がチロシンキナーゼである、項目３０に記載のポリペプチド。
（項目３２）
前記非Ｆｃ結合領域が複数のチロシンキナーゼ受容体に結合する、項目３１に記載のポリペプチド。
（項目３３）
項目１〜３２に記載のポリペプチドのいずれかをコードする核酸。
（項目３４）
前記核酸がＤＮＡセグメントである、項目３３に記載の核酸。
（項目３５）
前記核酸が発現ベクターである、項目３３に記載の核酸。
（項目３６）
項目３３に記載の核酸を含む宿主細胞。
（項目３７）
前記核酸が第１の発現ベクター中に存在する、項目３６に記載の宿主細胞。
（項目３８）
第２の発現ベクターをさらに含む、項目３７に記載の宿主細胞。
（項目３９）
前記第２の発現ベクターが免疫グロブリン軽鎖を含むポリペプチドをコードする、項目３８に記載の宿主細胞。
（項目４０）
項目３９に記載の宿主細胞の集団であって、異なるＦｃドメインを発現する複数の宿主細胞を含む集団。
（項目４１）
いずれか２つの異なるＦｃドメインのアミノ酸配列が、同一性に関して、２０％未満異なる、項目４０に記載の宿主細胞の集団。
（項目４２）
ＦｃＲγＩポリペプチドに結合することができるグリコシル化されていないＦｃドメインと第２の結合ドメインを含むポリペプチドであって、ここで、該第２の結合ドメインは細胞表面分子に結合することができる、ポリペプチド。
（項目４３）
前記第２の結合ドメインが抗体抗原結合ドメインである、項目４２に記載のポリペプチド。
（項目４４）
前記第２の結合ドメインが抗体抗原結合ドメインではない、項目４２に記載のポリペプチド。
（項目４５）
前記細胞表面分子がタンパク質様分子である、項目４２に記載のポリペプチド。
（項目４６）
前記第２の結合ドメインが細胞表面受容体のリガンドである、項目４２に記載のポリペプチド。
（項目４７）
前記第２の結合ドメインが細胞表面リガンドの受容体である、項目４２に記載のポリペプチド。
（項目４８）
項目４２〜４７に記載のポリペプチドのいずれかをコードする核酸。
（項目４９）
前記核酸がＤＮＡセグメントである、項目４８に記載の核酸。
（項目５０）
前記核酸が発現ベクターである、項目４８に記載の核酸。
（項目５１）
項目４８に記載の核酸を含む宿主細胞。
（項目５２）
前記核酸が第１の発現ベクター中に存在する、項目５１に記載の宿主細胞。
（項目５３）
第２の発現ベクターをさらに含む、項目５２に記載の宿主細胞。
（項目５４）
前記第２の発現ベクターが免疫グロブリン軽鎖を含むポリペプチドをコードする、項目５３に記載の宿主細胞。
（項目５５）
グリコシル化されていないポリペプチドを調製するためのインビトロでの方法であって、ａ）ＦｃＲポリペプチドに結合することができるＦｃドメインを含むグリコシル化されていない抗体を発現することができる宿主細胞を得る工程であって、ここで、該Ｆｃドメインは３８２位および４２８位のアミノ酸でのアミノ酸置換と、以下のアミノ酸：２２４位、２４１位、２５１位、２６６位、２６９位、２７６位、２７９位、２８６位、２９５位、２９７位、３００位、３１５位、３２５位、３２８位、３３０位、３３１位、３３２位、３３８位、３４０位、３４１位、３４８位、３６９位、３７８位、３８２位、３９２位、４２４位、４２６位、４２８位、および／または４３４位のうちのいずれかの少なくとも１つのさらなる置換を含む、工程；
ｂ）該グリコシル化されていない抗体の発現を促進する条件下で、培養物中で該宿主細胞をインキュベーションする工程；ならびに
ｃ）該宿主細胞から、発現された抗体を精製する工程
を包含する、方法。
（項目５６）
前記宿主細胞が原核生物細胞である、項目５５に記載の方法。
（項目５７）
前記宿主細胞が真核生物細胞であり、前記ポリペプチドはＮ２９７Ｄの置換を含む、項目５５に記載の方法。
（項目５８）
発現された抗体を上清から回収する工程をさらに含む、項目５５に記載の方法。
（項目５９）
前記抗体を上清から精製する工程が、上清に由来する抗体を、濾過、ＨＰＬＣ、陰イオン交換または陽イオン交換、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、アフィニティークロマトグラフィー、あるいはそれらの組み合わせに供することを包含する、項目５８に記載の方法。
（項目６０）
アフィニティークロマトグラフィーにプロテインＡが含まれる、項目５９に記載の方法。
（項目６１）
被験体において免疫応答を誘導するための、項目１〜３２のいずれか１項に記載のポリペプチド。
（項目６２）
前記グリコシル化されていない抗体が、ＦｃγＲＩポリペプチドに特異的に結合することができる、項目６１に記載の方法。
（項目６３）
前記グリコシル化されていない抗体が、前記抗体のグリコシル化された野生型バージョンよりも少なくとも５０倍低いレベルでＦｃγＲＩＩｂポリペプチドに特異的に結合することができる、項目６１に記載の方法。
（項目６４）
前記抗体が治療用抗体のグリコシル化されていないバージョンである、項目６３に記載の方法。
（項目６５）
標的化された細胞表面ポリペプチドを発現する標的細胞に対して樹状細胞（ＤＣ）媒介性の細胞の殺傷を誘導する方法であって、
ａ）該標的細胞を、少なくともＦｃγＲＩポリペプチドと、該標的化された細胞表面ポリペプチドに結合する第２の結合ドメインとに特異的に結合することができる変異させたグリコシル化されていないＦｃドメインを含むポリペプチドと接触させる工程であって、ここで、該グリコシル化されていないＦｃドメインが、グリコシル化されたＦｃドメインよりも少なくとも５０倍低いレベルでＦｃγＲＩＩＢポリペプチドに特異的に結合する、工程；および
ｂ）該標的細胞を、該標的細胞の殺傷を促進する条件下で樹状細胞に曝す工程
を包含する、方法。
（項目６６）
前記Ｆｃドメインが、以下のアミノ酸の中の少なくとも１つのアミノ酸置換を含む、項目６５に記載の方法：２２４位、２４１位、２５１位、２６６位、２６９位、２７６位、２７９位、２８６位、２９５位、２９７位、３００位、３１５位、３２５位、３２８位、３３０位、３３１位、３３２位、３４０位、３４８位、３６９位、３７８位、３８２位、３９２位、４２４位、４２６位、４２８位、および／または４３４位。
（項目６７）
前記ＦｃドメインにＥ３８２ＶおよびＭ４２８Ｉの置換が含まれる、項目６６に記載の方法。
（項目６８）
特異的なＦｃγＲポリペプチドに結合するＦｃドメインを有しているグリコシル化されていないポリペプチドをスクリーニングするためのインビトロでの方法であって、
ａ）グラム陰性細菌細胞の集団を得る工程であって、この集団の細胞が、それらのペリプラズムの中でＦｃドメインを含むグリコシル化されていないポリペプチドを発現し、前記集団が、複数の異なるＦｃドメインを発現する、工程；
ｂ）該細菌細胞を第１のＦｃＲポリペプチドと、該ＦｃγＲポリペプチドと該グリコシル化されていないＦｃドメインとの間での接触を可能にする条件下で接触させる工程であって、ここで、該ＦｃγＲポリペプチドが、ＦｃγＲＩａ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩｃ、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩＩｂ、またはＦｃαＲＩである、工程；
ｃ）該グリコシル化されていないＦｃドメインの、該第１のＦｃＲポリペプチドに対する結合に基づいて少なくとも１つの細菌細胞を選択する工程
を包含する、方法。
（項目６９）
前記選択された細菌細胞から前記グリコシル化されていないポリペプチドを同定または単離する工程をさらに含む、項目６８に記載の方法。
（項目７０）
選択された細菌細胞中のグリコシル化されていないポリペプチドが他のＦｃＲポリペプチドに結合できるかどうかを決定する工程をさらに含む、項目６８に記載の方法。
（項目７１）
選択された細菌細胞中のグリコシル化されていないポリペプチドが他のＦｃＲポリペプチドに結合できるかどうかを決定する工程が、第２のＦｃＲポリペプチドを用いて工程ａ）〜ｃ）を繰り返し行って該グリコシル化されていないポリペプチドが該第２のＦｃＲポリペプチドにも結合するかどうかを決定することを含む、項目７０に記載の方法。
（項目７２）
前記工程ａ）〜ｃ）が、２つより多くの異なるＦｃＲポリペプチドを用いて繰り返し行われる、項目７１に記載の方法。
（項目７３）
前記グリコシル化されていないポリペプチドが複数のＦｃＲポリペプチドに結合する、項目７２に記載の方法。
（項目７４）
前記細菌細胞がＥ．ｃｏｌｉ細胞である、項目６８に記載の方法。
（項目７５）
前記Ｆｃドメインが、ＩｇＧ、ＩｇＡ、またはＩｇＥのＦｃドメインである、項目６８に記載の方法。
（項目７６）
前記ＩｇＧ  ＦｃドメインがＩｇＧ１  Ｆｃドメインである、項目７５に記載の方法。
（項目７７）
前記ＩｇＧ１  Ｆｃドメインが抗ＨＥＲ２抗体のＦｃドメインである、項目７６に記載の方法。
（項目７８）
前記ＩｇＧ１  ＦｃドメインがトラスツズマブのＦｃドメインのＦｃドメインである、項目７７に記載の方法。
（項目７９）
前記グラム陰性細菌細胞の集団が、前記複数のグリコシル化されていないＦｃドメインをコードする複数の核酸を含む、項目６８に記載の方法。
（項目８０）
前記複数の核酸が、前記複数のグリコシル化されていないＦｃドメインに融合させられた膜分泌シグナルをさらにコードする、項目７９に記載の方法。
（項目８１）
前記膜分泌シグナルがＰｅｌＢである、項目８０に記載の方法。
（項目８２）
前記膜分泌シグナルがＤｓｂＡである、項目８０に記載の方法。
（項目８３）
前記グリコシル化されていないＦｃドメインが、ヒンジ領域、ＣＨ２領域、およびＣＨ３領域を含む、項目６８に記載の方法。
（項目８４）
前記グリコシル化されていないポリペプチドが真核生物のＦｃドメインを含む、項目６８に記載の方法。
（項目８５）
前記グリコシル化されていないポリペプチドが合成Ｆｃドメインを含む、項目６８に記載の方法。
（項目８６）
前記ＦｃＲポリペプチドが、表１のうちのポリペプチドの１つに由来する抗体結合ドメインを含む、項目８４に記載の方法。
（項目８７）
前記ＦｃＲポリペプチドが、ヒトＦｃγＲＩａ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩｃ、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩＩｂ、ＦｃαＲＩ、またはＣ１ｑに由来する抗体結合ドメインを含む、項目８６に記載の方法。
（項目８８）
前記ＦｃＲポリペプチドが、ヒトＦｃγＲＩａに由来する抗体結合ドメインを含む、項目８７に記載の方法。
（項目８９）
前記ＦｃＲポリペプチドが標識されている、項目６８に記載の方法。
（項目９０）
前記ＦｃＲポリペプチドが、発蛍光団、放射性同位体、または酵素で標識されている、項目８９に記載の方法。
（項目９１）
前記ＦｃＲポリペプチドが発蛍光団で標識されている、項目９０に記載の方法。
（項目９２）
前記ＦｃＲポリペプチドが蛍光タンパク質または酵素に融合している、項目８９に記載の方法。
（項目９３）
前記ＦｃＲポリペプチドが緑色蛍光タンパク質ＧＦＰに融合している、項目９２に記載の方法。
（項目９４）
前記ＦｃＲポリペプチドが固定化されている、項目６８に記載の方法。
（項目９５）
前記工程（ｃ）の選択が、少なくとも２回の選択を含むとさらに定義され、ここでは、第１回目の選択において得られた細菌細胞のサブ集団が、ＦｃＲポリペプチドに対するＦｃポリペプチドの結合に基づく少なくとも第２回目の選択に供される、項目６８に記載の方法。
（項目９６）
２回〜１０回の選択を含む、項目９５に記載の方法。
（項目９７）
前記選択が、ＦＡＣＳまたは磁気分離により行われる、項目９６に記載の方法。
（項目９８）
前記細菌細胞を少なくとも２つのＦｃＲポリペプチドと接触させる工程をさらに含む、項目６８に記載の方法。
（項目９９）
前記少なくとも２つのＦｃＲポリペプチドが異なる標識を含む、項目９８に記載の方法。
（項目１００）
前記少なくとも２つのＦｃＲポリペプチドに対するグリコシル化されていないＦｃドメインの結合に基づいて細菌細胞を選択する工程をさらに含む、項目９９に記載の方法。
（項目１０１）
少なくとも１つのＦｃＲポリペプチドに対するグリコシル化されていないＦｃドメインの結合に基づいて、そして、少なくとも１つの他のＦｃＲポリペプチドに対しては該グリコシル化されていないＦｃドメインが結合しないことに基づいて細菌細胞を選択する工程をさらに含む、項目９９に記載の方法。
（項目１０２）
前記細菌細胞をＦｃＲポリペプチドと接触させる前に、前記細菌細胞の外膜を破壊する工程をさらに含む、項目６８に記載の方法。
（項目１０３）
前記細菌細胞の外膜を破壊する工程に、高浸透圧条件での処理、物理的ストレスでの処理、細菌のファージ感染、リゾチームでの処理、ＥＤＴＡでの処理、消化酵素での処理、または外膜を破壊する化学物質での処理が含まれる、項目１０２に記載の方法。
（項目１０４）
前記細菌細胞の外膜を破壊する工程に、前記方法の組み合わせが含まれる、項目１０３に記載の方法。
（項目１０５）
前記細菌細胞の外膜を破壊する工程に、外膜の物理的、化学的、および酵素的破壊の組み合わせとともに細菌細胞を加熱することが含まれる、項目１０２に記載の方法。
（項目１０６）
前記細菌細胞の外膜を破壊する工程に、前記細菌の外膜を除去することがさらに含まれる、項目１０２に記載の方法。
（項目１０７）
グリコシル化されていないＦｃドメインに結合していないＦｃＲポリペプチドを除去する工程がさらに含まれる、項目６８に記載の方法。
（項目１０８）
前記細菌が、スクロース、ソルビトール、マンニトール、またはトレハロースを含む培地中で増殖させられる、項目６８に記載の方法。
（項目１０９）
前記細菌が、トレハロースを含む培地中で増殖させられる、項目６８に記載の方法。
（項目１１０）
ＦｃＲポリペプチドに対して特異的親和性を有している抗体Ｆｃポリペプチドをコードする核酸配列を産生する方法としてさらに定義される、前記細菌細胞からＦｃポリペプチドをコードする核酸配列をクローニングして、ＦｃＲポリペプチドに対して特異的親和性を有している抗体Ｆｃポリペプチドをコードする核酸配列を産生する工程をさらに含む、項目６８に記載の方法。
（項目１１１）
前記クローニング工程が前記核酸配列の増幅を含む、項目１１０に記載の方法。
（項目１１２）
ＦｃＲポリペプチドに対して特異的親和性を有している抗体Ｆｃポリペプチドを産生する方法としてさらに定義される、前記抗体Ｆｃポリペプチドをコードする核酸配列を発現させて、ＦｃＲポリペプチドに対して特異的親和性を有している抗体Ｆｃポリペプチドを産生する工程をさらに含む、項目１１０に記載の方法。
（項目１１３）
前記ＦｃＲポリペプチドがＦｃγＲＩポリペプチドである、項目１１２に記載の方法。
（項目１１４）
前記複数の異なるＦｃドメインが１つのＦｃドメインの変異体バリエーションである、項目６８に記載の方法。
（項目１１５）
前記変異体バリエーションが無作為に作製されたものである、項目１１４に記載の方法。
（項目１１６）
Ｆｃドメインを有しているグリコシル化されていないポリペプチドの１つ以上の特異的ＦｃＲポリペプチドに対するＦｃの結合を最適化するためのインビトロでの方法であって：ａ）グラム陰性細菌細胞の集団を得る工程であって、該集団の細胞が、それらのペリプラズムの中でＦｃドメインを含むグリコシル化されていないポリペプチドを発現し、ここでは、該集団が様々な変異したＦｃドメインを発現する複数の様々なポリペプチドを発現する、工程；
ｂ）該細菌細胞を第１のＦｃＲポリペプチドと、該ＦｃＲポリペプチドと該グリコシル化されていないＦｃドメインとの間での接触を可能にする条件下で接触させる工程であって、ここで、該ＦｃＲポリペプチドは、ＦｃγＲＩａ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩｃ、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩＩｂ、またはＦｃαＲＩである、工程；
ｃ）該グリコシル化されていないＦｃドメインの、該第１のＦｃＲポリペプチドに対する結合に基づいて少なくとも１つの細菌細胞を選択する工程
を包含する、方法。