【手続補正書】
【提出日】平成24年11月13日(2012.11.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
オオムギ植物体またはその一部から調製される飲料であって、前記飲料が２０ｐｐｂ未満のレベルの硫化ジメチル（ＤＭＳ）および２０ｐｐｂ未満のレベルのＳ−メチル−１−メチオニン（ＳＭＭ）を含有し、前記オオムギ植物体またはその一部が、メチオニン−Ｓ−メチルトランスフェラーゼ（ＭＭＴ）をコードする遺伝子において、機能的ＭＭＴの完全な喪失を引き起こす変異を保有する、飲料。
【請求項２】
モルト飲料である、請求項１に記載の飲料。
【請求項３】
ビールである、請求項１または２のいずれか一項に記載の飲料。
【請求項４】
前記飲料が、１０ｐｐｂ未満のＤＭＳを含有する、請求項１から３のいずれか一項に記載の飲料。
【請求項５】
前記飲料が、１０ｐｐｂ未満のＳ−メチル−１−メチオニン（ＳＭＭ）を含有する、請求項１から４のいずれか一項に記載の飲料。
【請求項６】
前記オオムギ植物体が、メチオニン−Ｓ−メチルトランスフェラーゼ（ＭＭＴ）機能の完全な喪失を引き起こす、ＭＭＴをコードする遺伝子における変異を保有する、オオムギ植物体またはその一部。
【請求項７】
前記変異が、前記ＭＭＴをコードする遺伝子のスプライス部位内にある、請求項６に記載のオオムギ植物体またはその一部。
【請求項８】
前記ＭＭＴをコードする遺伝子における前記変異が、配列番号３の塩基番号３０７６のＧ→Ａ変異または配列番号１６の塩基番号１４６２のＧ→Ａ変異である、請求項６から７のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部。
【請求項９】
前記変異の結果として、野生型ＭＭＴのＮ末端断片と、場合によって、野生型ＭＭＴには見出されないさらなるＣ末端配列とを含むＭＭＴの切断形態をコードする遺伝子をもたらし、前記Ｎ末端断片が、配列番号６の最大で５００のＮ末端アミノ酸残基を含む、請求項６から８のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部。
【請求項１０】
前記オオムギ植物体が、「オオムギ（Ｈｏｒｄｅｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ）：８０６３系統」と称し、ＰＴＡ−９５４３の表記で２００８年１０月１３日にＡＴＣＣへと寄託された植物体と、それらの子孫植物体とからなる群から選択される、請求項６から９のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部。
【請求項１１】
請求項６から１０のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部から調製される、請求項１から５のいずれか一項に記載の飲料。
【請求項１２】
加工されたオオムギ植物体またはその一部を含む植物生成物であって、前記オオムギ植物体が請求項６から１０のいずれかに記載のオオムギ植物体である、植物生成物。
【請求項１３】
前記植物生成物が、加工されたオオムギ植物体またはその一部を含むモルト組成物であり、前記オオムギ植物体が請求項６から１０のいずれかに記載のオオムギ植物体である、請求項１２に記載の植物生成物。
【請求項１４】
前記モルト組成物が粉砕モルトである、請求項１３に記載の植物生成物。
【請求項１５】
前記植物生成物が、請求項６から１０のいずれかに記載のオオムギ植物体またはその一部を用いるか、前記オオムギ植物体もしくはその一部、またはこれらの混合物から調製されたモルト組成物を用いて調製されたウォート組成物であり、前記ウォート組成物が２０ｐｐｂ未満のＳＭＭを含有する、請求項１２に記載の植物生成物。
【請求項１６】
請求項１３から１５のいずれか一項に記載の植物生成物から調製される、請求項１から５のいずれかに記載の飲料。
【請求項１７】
オオムギシロップ、モルトシロップ、オオムギ抽出物、およびモルト抽出物からなる群から選択される、請求項１２に記載の植物生成物。
【請求項１８】
２０ｐｐｂ未満のＤＭＳおよび２０ｐｐｂ未満のＳＭＭを含有する飲料を作製する方法であって、
（ｉ）請求項６から１０のいずれかに記載のオオムギ植物体またはその一部を含む組成物を調製する工程と；
（ｉｉ）（ｉ）の組成物を飲料へと加工する工程と
を含み、これらにより、２０ｐｐｂ未満のＤＭＳおよび２０ｐｐｂ未満のＳＭＭを含有する飲料を得る方法。
【請求項１９】
最大で２００ｐｐｂの遊離ＤＭＳを含むモルト組成物を生成させる方法であって、
（ｉ）請求項６から１０のいずれか一項に記載のオオムギ植物体の穀粒を供給する工程と；
（ｉｉ）前記穀粒をスティーピングする工程と；
（ｉｉｉ）前記スティーピングされた穀粒を、所定の条件下で発芽させる工程と；
（ｉｖ）発芽した穀粒を加熱処理する工程と
を含み、これらにより、最大で２００ｐｐｂの遊離ＤＭＳを含むモルト組成物を生成させる方法。
【請求項２０】
ＭＭＴ活性の完全な喪失を引き起こす、ＭＭＴをコードする遺伝子における変異を保有するオオムギ植物体を調製する方法であって、
（ｉ）オオムギ植物体、および／またはオオムギ穀粒、および／またはオオムギ胚芽、および／またはオオムギ細胞、および／またはオオムギ組織を変異誘発し、これにより、Ｍ０世代のオオムギを得る工程と；
（ｉｉ）前記変異誘発されたオオムギ植物体、オオムギ穀粒、オオムギ細胞、オオムギ組織、および／またはオオムギ胚芽を、少なくとも２世代にわたり繁殖させ、これにより、Ｍｘ（ここで、ｘは、≧２の整数である）世代のオオムギ植物体を得る工程と；
（ｉｉｉ）前記Ｍｘ世代のオオムギ植物体から試料を得る工程と；
（ｉｖ）前記試料中におけるＳＭＭレベルを決定する工程と；
（ｖ）検出可能なＳＭＭ活性を欠く植物体を選択する工程と；
（ｖｉ）前記ＭＭＴ遺伝子の少なくとも一部を配列決定する工程と；
（ｖｉｉ）前記ＭＭＴ遺伝子における変異を保有する植物体を選択する工程と
を含み、これらにより、ＭＭＴ活性の完全な喪失を引き起こす、前記ＭＭＴをコードする遺伝子における変異を保有するオオムギ植物体を得る方法。
【請求項２１】
前記オオムギ植物体が、
（ｉ）ＭＭＴ活性の完全な喪失を引き起こす、ＭＭＴをコードする遺伝子における変異；および
（ｉｉ）リポキシゲナーゼ１活性の完全な喪失を引き起こす、リポキシゲナーゼ１をコードする遺伝子における変異
を保有する、請求項６から１０のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部。
【請求項２２】
前記ＭＭＴをコードする遺伝子における前記変異が、請求項７から９のいずれか一項に記載の変異である、請求項２１に記載のオオムギ植物体またはその一部。
【請求項２３】
請求項２１から２２のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部から調製される、請求項１２から１５または１７のいずれか一項に記載の植物生成物。
【請求項２４】
飲料、好ましくはビールである、請求項２３に記載の植物生成物。
【請求項２５】
請求項２１から２２のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部から調製される、請求項１６に記載の飲料。
【請求項２６】
ビールである、請求項２５に記載の飲料。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
さらに、異常気象が国際問題となっている世界にあって、社会および産業は、温室効果ガス排出の削減、および環境利益に寄与すべきである。したがって、本発明の目的は、エネルギー消費の低い方法を用いるビール生産に有用なオオムギ植物体を提供することである。したがって、本発明のオオムギ植物体は、標準的な醸造法と比較して、加熱する工程の時間経過が短いか、または加熱する工程における温度が低い方法を用いるビールの生産に有用である。根本的に重要なのは、キルンを乾燥させる工程およびウォートを煮沸させる手順における利益であり、これらは、標準的な醸造レジメおよびビール生産レジメと比べて顕著に短縮することもでき、より低温で実施することもでき、これによりエネルギー消費が削減され、ビールを生産するのにより持続可能な方法がもたらされる。
本発明の好ましい実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
オオムギ植物体またはその一部から調製される飲料であって、前記飲料が３０ｐｐｂ未満のレベルの硫化ジメチル（ＤＭＳ）を含有し、前記オオムギ植物体またはその一部が、メチオニン−Ｓ−メチルトランスフェラーゼ（ＭＭＴ）をコードする遺伝子において、機能的ＭＭＴの完全な喪失を引き起こす変異を保有する、飲料。
（項目２）
モルト飲料である、項目１に記載の飲料。
（項目３）
発酵モルト飲料である、項目１および２のいずれか一項に記載の飲料。
（項目４）
ビールである、項目１から３のいずれか一項に記載の飲料。
（項目５）
前記飲料が、２５ｐｐｂ未満、より好ましくは２０ｐｐｂ未満、なおより好ましくは１５ｐｐｂ未満、さらにより好ましくは１０ｐｐｂ未満、なおより好ましくは５ｐｐｂ未満のＤＭＳを含有し、例えば、検出可能なＤＭＳを含有しない、項目１から４のいずれか一項に記載の飲料。
（項目６）
前記飲料が、２０ｐｐｂ未満のＤＭＳを含有する、項目１から５のいずれか一項に記載の飲料。
（項目７）
前記飲料が、５０ｐｐｂ未満、好ましくは４０ｐｐｂ未満、より好ましくは３０ｐｐｂ未満、なおより好ましくは２０ｐｐｂ未満、さらにより好ましくは１０ｐｐｂ未満、なおより好ましくは５ｐｐｂ未満のＳ−メチル−１−メチオニン（ＳＭＭ）を含有し、なおより好ましくは検出可能なＳＭＭを含有しない、項目１から６のいずれか一項に記載の飲料。
（項目８）
前記飲料が、３０ｐｐｂ未満、好ましくは２５ｐｐｂ未満、より好ましくは２０ｐｐｂ未満、なおより好ましくは１５ｐｐｂ未満、さらにより好ましくは１０ｐｐｂ未満、なおより好ましくは５ｐｐｂ未満のＤＭＳを含有し、なおより好ましくは検出可能なＤＭＳを含有せず、および、５０ｐｐｂ未満、好ましくは４０ｐｐｂ未満、より好ましくは３０ｐｐｂ未満、なおより好ましくは２０ｐｐｂ未満、さらにより好ましくは１０ｐｐｂ未満、なおより好ましくは５ｐｐｂ未満のＳＭＭを含有し、なおより好ましくは検出可能なＳＭＭを含有しない、項目１から７のいずれか一項に記載の飲料。
（項目９）
前記飲料が、２０ｐｐｂ未満のＤＭＳおよび２０ｐｐｂ未満のＳＭＭを含有し、好ましくは、５ｐｐｂ未満のＤＭＳおよび５ｐｐｂ未満のＳＭＭを含有する、項目１から８のいずれか一項に記載の飲料。
（項目１０）
野生型のオオムギから、好ましくは栽培品種Ｐｏｗｅｒから同じ方法で調製した飲料との比較において、いずれの飲料のエステルプロファイルも同様となるように調整した場合、熟練の試飲パネルが評価する新鮮さおよび／またはエステル風味についてより高いスコアを示す、項目１から９のいずれか一項に記載の飲料。
（項目１１）
野生型のオオムギから、好ましくは栽培品種Ｐｏｗｅｒから同じ方法で調製した飲料との比較において、熟練の試飲パネルが評価するエステル風味についてより高いスコアを示す、項目１から１０のいずれか一項に記載の飲料。
（項目１２）
メチオニン−Ｓ−メチルトランスフェラーゼ（ＭＭＴ）機能の完全な喪失を引き起こす、ＭＭＴをコードする遺伝子における変異を保有する、オオムギ植物体またはその一部。
（項目１３）
前記変異が、前記ＭＭＴをコードする遺伝子のスプライス部位内にある、項目１２に記載のオオムギ植物体またはその一部。
（項目１４）
前記ＭＭＴをコードする遺伝子における前記変異が、イントロンのスプライス部位内にある、項目１２から１３のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部。
（項目１５）
前記ＭＭＴをコードする遺伝子における前記変異が、イントロンの５’末端塩基のＧ→Ａ変異など、イントロンの５’側スプライス部位における変異である、項目１２から１４のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部。
（項目１６）
前記ＭＭＴをコードする遺伝子における前記変異が、イントロン２および５からなる群から選択されるイントロンの５’側スプライス部位における変異である、項目１２から１５のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部。
（項目１７）
前記ＭＭＴをコードする遺伝子における前記変異が、配列番号３の塩基番号３０７６のＧ→Ａ変異である、項目１２から１６のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部。
（項目１８）
前記ＭＭＴをコードする遺伝子における前記変異が、配列番号１６の塩基番号１４６２のＧ→Ａ変異である、項目１２から１６のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部。
（項目１９）
前記変異の結果として、野生型ＭＭＴのＮ末端断片と、場合によって、野生型ＭＭＴには見出されないさらなるＣ末端配列とを含むＭＭＴの切断形態をコードする遺伝子をもたらし、前記Ｎ末端断片が、配列番号６の最大で５００、より好ましくは最大で４５０、なおより好ましくは最大で４００、さらにより好ましくは最大で３５０、なおより好ましくは最大で３２０、さらにより好ましくは最大で３１１、または最大で２８８のＮ末端アミノ酸残基を含む、項目１２から１８のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部。
（項目２０）
前記変異が、前記ＭＭＴをコードする遺伝子内に未熟終止コドン、好ましくは、項目１９に記載のＭＭＴの切断形態のうちのいずれかをコードする遺伝子を結果としてもたらす終止コドンを導入する、項目１２から１９のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部。
（項目２１）
「オオムギ（Ｈｏｒｄｅｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ）：８０６３系統」と称し、ＰＴＡ−９５４３の表記で２００８年１０月１３日にＡＴＣＣへと寄託された植物体と、それらの子孫植物体とからなる群から選択される、項目１２から１７のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部。
（項目２２）
前記オオムギ植物体の前記一部が、穀粒（複数可）である、項目１２から２１のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部。
（項目２３）
（ｉ）オオムギ植物体、および／またはオオムギ穀粒、および／またはオオムギ胚芽、および／またはオオムギ細胞、および／またはオオムギ組織を変異誘発し、これにより、Ｍ０世代のオオムギを得る工程と；
（ｉｉ）前記変異誘発されたオオムギ植物体、オオムギ穀粒、オオムギ細胞、オオムギ組織、および／またはオオムギ胚芽を、少なくとも２世代にわたり繁殖させ、これにより、Ｍｘ（ここで、ｘは、≧２の整数である）世代のオオムギ植物体を得る工程と；
（ｉｉｉ）前記Ｍｘ世代のオオムギ穀粒から葉組織を得る工程と；
（ｉｖ）前記穀粒またはそれらの一部におけるＳＭＭレベルを決定する工程と；
（ｖ）検出可能なＳＭＭを欠く植物体を選択する工程と；
（ｖｉ）前記ＭＭＴ遺伝子の少なくとも一部を配列決定する工程と；
（ｖｉｉ）前記ＭＭＴをコードする遺伝子における変異を保有する植物体を選択する工程と
を含む方法により作製されるか、またはこれらの工程を含む方法により作製される植物体の子孫である、項目１２から２２のうちのいずれかに記載のオオムギ植物体またはその一部。
（項目２４）
項目１２から２３のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部から調製される、項目１から１１のいずれか一項に記載の飲料。
（項目２５）
項目１２から２３のいずれかに記載のオオムギ植物体またはその一部を含む組成物。
（項目２６）
項目１２から２３のいずれかに記載のオオムギ植物体である加工オオムギ植物体またはその一部を含む植物生成物。
（項目２７）
項目１２から２３のいずれかに記載のオオムギ植物体である加工オオムギ植物体またはその一部を含むモルト組成物である、項目２６に記載の植物生成物。
（項目２８）
前記オオムギ植物体の前記一部が、穀粒（複数可）である、項目２７に記載のモルト組成物。
（項目２９）
グリーンモルトおよびキルン乾燥モルトからなる群から選択される、項目２７から２８のいずれか一項に記載のモルト組成物。
（項目３０）
粉砕モルトである、項目２７から２８のいずれか一項に記載のモルト組成物。
（項目３１）
最大で２００ｐｐｂ、好ましくは最大で１５０ｐｐｂ、より好ましくは最大で１００ｐｐｂ、なおより好ましくは最大で５０ｐｐｂ、例えば最大で２５ｐｐｂの遊離ＤＭＳを含む、項目２７から３０のいずれかに記載のモルト組成物。
（項目３２）
最大で１０００ｐｐｂ、好ましくは最大で５００ｐｐｂ、より好ましくは最大で１５０ｐｐｂのＳＭＭを含む、項目２７から３１のいずれかに記載のモルト組成物。
（項目３３）
最大で２００ｐｐｂの遊離ＤＭＳおよび最大で１０００ｐｐｂのＳＭＭを含む、例えば最大で２５ｐｐｂの遊離ＤＭＳおよび最大で１５０ｐｐｂのＳＭＭを含む、項目２７から３２のいずれかに記載のモルト組成物。
（項目３４）
項目１２から２３のいずれかに記載のオオムギ植物体またはその一部を用いるか、前記オオムギ植物体もしくはその一部、またはこれらの混合物から調製されたモルト組成物を用いて調製されたウォート組成物である、項目２６に記載の植物生成物。
（項目３５）
７０℃を超えない温度、好ましくは６９℃を超えない温度におけるマッシングを用いて生成させる、項目３４に記載のウォート組成物。
（項目３６）
最長で４５分間、なおより好ましくは最長で３０分間煮沸される、項目３４から３５のいずれか一項に記載のウォート組成物。
（項目３７）
前記植物体の前記一部が、穀粒（複数可）である、項目３４から３６のいずれか一項に記載のウォート組成物。
（項目３８）
前記モルト組成物が、項目２７から３３のいずれかに記載のモルト組成物である、項目３４から３７のいずれか一項に記載のウォート組成物。
（項目３９）
項目３４から３８のいずれか一項に記載のウォート組成物であるか、または前記組成物から調製した飲料である、項目２６に記載の植物生成物。
（項目４０）
（ｉ）項目１２から２３のいずれかに記載のオオムギ植物体またはその一部を含む組成物と；
（ｉｉ）項目２７から３３のいずれかに記載のモルト組成物と
の混合物から調製される組成物。
（項目４１）
項目２７から３３のいずれか一項に記載のモルト組成物、または項目３４から３８のいずれか一項に記載のウォート組成物から調製される、項目１から１１のいずれかに記載の飲料。
（項目４２）
オオムギシロップ、モルトシロップ、オオムギ抽出物、およびモルト抽出物からなる群から選択される、項目２６に記載の植物生成物。
（項目４３）
３０ｐｐｂ未満のＤＭＳを含有する飲料を作製する方法であって、
（ｉ）項目１２から２３のいずれかに記載のオオムギ植物体またはその一部を含む組成物を調製する工程と；
（ｉｉ）（ｉ）の組成物を飲料へと加工する工程と
を含み、これらにより、３０ｐｐｂ未満のＤＭＳを含有する飲料を得る方法。
（項目４４）
２０ｐｐｂ未満のＤＭＳ、なおより好ましくは５ｐｐｂ未満のＤＭＳを含有する飲料を作製する方法である、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
工程（ｉ）が、前記オオムギ植物体の穀粒またはその一部からモルト組成物を調製する工程を含む、項目４３から４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目４６）
前記組成物を飲料へと加工する工程が、マッシング工程を含み、これによりウォート組成物を生成させる、項目４３から４５のいずれかに記載の方法。
（項目４７）
前記マッシング工程が、７０℃を超えない温度、好ましくは６９℃を超えない温度におけるマッシングを用いて実施される、項目４６に記載の方法。
（項目４８）
前記組成物を飲料へと加工する工程が、マッシング工程、ウォート濾過工程、およびスパージング工程を含み、これらによりウォート組成物を生成させる、項目４３から４７のいずれかに記載の方法。
（項目４９）
前記組成物を飲料へと加工する工程が、前記ウォートを煮沸する工程を含み、前記ウォートが最長で４５分間、なおより好ましくは最長で３０分間煮沸される、項目４６から４８のいずれか一項に記載の方法。
（項目５０）
前記組成物を飲料へと加工する工程が、前記ウォートの発酵を含む、項目４６から４９のいずれかに記載の方法。
（項目５１）
最大で２００ｐｐｂの遊離ＤＭＳを含むモルト組成物を生成させる方法であって、
（ｉ）項目２２に記載の穀粒を供給する工程と；
（ｉｉ）前記穀粒をスティーピングする工程と；
（ｉｉｉ）前記スティーピングされた穀粒を、所定の条件下で発芽させる工程と；
（ｉｖ）発芽した穀粒を加熱処理する工程と
を含み、これらにより、最大で２００ｐｐｂの遊離ＤＭＳを含むモルト組成物を生成させる方法。
（項目５２）
ＭＭＴ活性の完全な喪失を引き起こす、ＭＭＴをコードする遺伝子における変異を保有するオオムギ植物体を調製する方法であって、
（ｉ）オオムギ植物体、および／またはオオムギ穀粒、および／またはオオムギ胚芽、および／またはオオムギ細胞、および／またはオオムギ組織を変異誘発し、これにより、Ｍ０世代のオオムギを得る工程と；
（ｉｉ）前記変異誘発されたオオムギ植物体、オオムギ穀粒、オオムギ細胞、オオムギ組織、および／またはオオムギ胚芽を、少なくとも２世代にわたり繁殖させ、これにより、Ｍｘ（ここで、ｘは、≧２の整数である）世代のオオムギ植物体を得る工程と；
（ｉｉｉ）前記Ｍｘ世代のオオムギ植物体から試料を得る工程と；
（ｉｖ）前記試料中におけるＳＭＭレベルを決定する工程と；
（ｖ）検出可能なＳＭＭ活性を欠く植物体を選択する工程と；
（ｖｉ）前記ＭＭＴ遺伝子の少なくとも一部を配列決定する工程と；
（ｖｉｉ）前記ＭＭＴ遺伝子における変異を保有する植物体を選択する工程と
を含み、これらにより、ＭＭＴ活性の完全な喪失を引き起こす、前記ＭＭＴをコードする遺伝子における変異を保有するオオムギ植物体を得る方法。
（項目５３）
（ｉ）ＭＭＴ活性の完全な喪失を引き起こす、ＭＭＴをコードする遺伝子における変異；および
（ｉｉ）リポキシゲナーゼ１活性の完全な喪失を引き起こす、リポキシゲナーゼ１をコードする遺伝子における変異
を保有するオオムギ植物体またはその一部。
（項目５４）
前記ＭＭＴをコードする遺伝子における前記変異が、項目１３から２０のいずれか一項に記載の変異である、項目５３に記載のオオムギ植物体またはその一部。
（項目５５）
項目５３から５４のいずれか一項に記載のオオムギ植物体またはその一部から調製される植物生成物。
（項目５６）
飲料、好ましくはビールである、項目５５に記載の植物生成物。