【手続補正書】
【提出日】平成25年8月26日(2013.8.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ゲル緩衝液システムを含む電気泳動分離ゲルを含む、不連続緩衝液電気泳動システムであって、
前記緩衝液システムは、
ゲルアミン緩衝液と、
ゲル両性電解質と、
緩衝両性電解質を含む水性泳動緩衝液と
を含み、
前記ゲル両性電解質は、前記緩衝両性電解質とは異なり、かつ
前記ゲル両性電解質のｐＫは、前記ゲルアミンのｐＫより約１．５ｐＫ単位大きい、
不連続緩衝液電気泳動システム。
【請求項２】
前記分離ゲルは、アクリルアミド、アガロース、またはアクリルアミドおよびアガロースを含む、請求項１に記載の不連続緩衝液電気泳動システム。
【請求項３】
前記分離ゲルは、アクリルアミドを含み、かつ：
前記分離ゲルが、約６〜約２５重量％のアクリルアミドを含んでいてもよく、または
前記分離ゲルが、約８〜約２０重量％のアクリルアミドを含んでいてもよく、または
前記分離ゲルが、約８〜約１５重量％のアクリルアミドを含んでいてもよい、
請求項１に記載の不連続緩衝液電気泳動システム。
【請求項４】
前記電気泳動分離ゲルは、その一端と連結された濃縮用ゲルをさらに含み、前記濃縮用ゲルは、約４重量％のアクリルアミドを含んでいてもよい、請求項１に記載の不連続緩衝液電気泳動システム。
【請求項５】
前記泳動緩衝液中の前記緩衝両性電解質のｐＫは、前記ゲル両性電解質のｐＫより低い、請求項１に記載の不連続緩衝液電気泳動システム。
【請求項６】
前記ゲルアミン緩衝液のｐＫは、約５．５〜約７．５の範囲であり、かつ前記ゲルアミン緩衝液の濃度は、約１９０ｍＭ〜約２９５ｍＭの範囲であってもよく；
前記ゲルアミン緩衝液は、ビス−トリスであり、かつ前記ゲルアミン緩衝液の濃度は、約１９０ｍＭ〜約２９５ｍＭの範囲であってもよく；
前記ゲルアミン緩衝液の濃度は、約３００ｍＭ未満であるか；または
前記ゲルアミン緩衝液の濃度は、約１７５ｍＭ〜約３００ｍＭである、
のうちの少なくとも１つをさらに含む、請求項１に記載の不連続緩衝液電気泳動システム。
【請求項７】
前記ゲル両性電解質のｐＫは、約７〜約９、約８〜約８．５、または約８．１〜約８．３である、請求項１に記載の不連続緩衝液電気泳動システム。
【請求項８】
前記ゲル両性電解質は、トリシン、ビシン、グリシンアミド、またはアセトアミドグリシンであり、例えばトリシンまたはビシンであり、かつ前記ゲル両性電解質の濃度は、約２５ｍＭ〜約１２５ｍＭの範囲、または約５０ｍＭ〜約１００ｍＭの範囲、または約５０ｍＭであってもよい、請求項１に記載の不連続緩衝液電気泳動システム。
【請求項９】
前記ゲル緩衝液システムのｐＨは、約６〜約８の範囲、または約６．０〜約７．５の範囲、または約６．５であり；
前記ｐＨは、酸の添加により調節されでもよく、
かつさらに前記酸はＨＣｌであってもよい、
請求項１に記載の不連続緩衝液電気泳動システム。
【請求項１０】
前記ゲル緩衝液システムは、Ｃｌ−イオンの供給源をさらに含み、かつ／または
前記ゲル緩衝液システムは、約９５ｍＭ〜約１７０ｍＭのＣｌ−イオンまたは約１３５ｍＭ〜約１４５ｍＭのＣｌ−イオンをさらに含む、
請求項１に記載の不連続緩衝液電気泳動システム。
【請求項１１】
前記緩衝両性電解質は、ＭＥＳ、ＡＤＡ、ＰＩＰＥＳ、ＡＣＥＳ、ＢＥＳ、ＴＥＳ、ＨＥＰＥＳ、ＭＯＰＳ、ＣＡＰＳＯ、ＤＩＰＳＯ、ＰＯＰＳＯ、ＨＥＰＰＳ、ＨＥＰＰＳＯ、それらの塩、またはそれらのいずれかの組み合わせを含み、例えば、前記緩衝両性電解質は、ＭＥＳ、ＭＯＰＳ、またはＤＩＰＳＯを含む、請求項１に記載の不連続緩衝液電気泳動システム。
【請求項１２】
前記電気泳動分離ゲルは、スクロースをさらに含み、
前記スクロースの濃度は、約５重量％未満、約３重量％未満、約２重量％未満、約１．５重量％未満、または約１．５重量％未満であってもよい、
請求項１に記載の不連続緩衝液電気泳動システム。
【請求項１３】
少なくとも前記分離ゲルにＳＤＳをさらに含むか、または前記分離ゲルおよび前記泳動緩衝液にＳＤＳをさらに含む、請求項１に記載の不連続緩衝液電気泳動システム。
【請求項１４】
前記分離ゲルはスラブゲルであり、前記スラブゲルは、２枚のガラスまたはプラスチックプレートの間にあってもよい、請求項１に記載の不連続緩衝液電気泳動システム。
【請求項１５】
少なくとも第１の適切な容器に、
それぞれが、請求項１〜１４のいずれかに記載の不連続緩衝液電気泳動システムを含む、１つ以上のゲルカセットと、
請求項１〜１４のいずれかに記載の水性泳動緩衝液と
を含む、キット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２９】
そのような条件下で本発明の電気泳動分離システムおよび製剤を使用して電気泳動に供される試料は、実質的に、現在使用されているゲル製剤と同程度の分離を達成することができる。
[本発明1001]
ゲル緩衝液システムを含む電気泳動分離ゲルを含む、不連続緩衝液電気泳動システムであって、
前記緩衝液システムは、
ゲルアミン緩衝液と、
ゲル両性電解質と、
緩衝両性電解質を含む水性泳動緩衝液と
を含む、不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1002]
前記分離ゲルは、アクリルアミド、アガロース、またはアクリルアミドおよびアガロースを含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1003]
前記分離ゲルは、アクリルアミドを含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1004]
前記分離ゲルは、約6〜約25重量％のアクリルアミドを含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1005]
前記分離ゲルは、約8〜約20重量％のアクリルアミドを含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1006]
前記分離ゲルは、約8〜約15重量％のアクリルアミドを含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1007]
前記電気泳動分離ゲルは、その一端と連結された濃縮用ゲルをさらに含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1008]
前記濃縮用ゲルは、約4重量％のアクリルアミドを含む、本発明1007の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1009]
前記ゲル両性電解質は、緩衝両性電解質とは異なる、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1010]
前記ゲルアミン緩衝液のｐＫは、約5．5〜約7．5の範囲である、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1011]
前記ゲルアミン緩衝液は、ビス−トリスである、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1012]
前記ゲルアミン緩衝液の濃度は、約190ｍＭ〜約295ｍＭの範囲である、本発明1010または本発明1011のいずれかの不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1013]
前記ゲルアミン緩衝液の濃度は、約300ｍＭ未満である、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1014]
前記ゲルアミン緩衝液の濃度は、約175ｍＭ〜約300ｍＭである、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1015]
前記ゲル両性電解質のｐＫは、前記ゲルアミンのｐＫより約1．5ｐＫ単位大きい、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1016]
前記ゲル両性電解質のｐＫは、約7〜約9である、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1017]
前記ゲル両性電解質のｐＫは、約8〜約8．5である、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1018]
前記ゲル両性電解質のｐＫは、約8．1〜約8．3である、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1019]
前記ゲル両性電解質は、トリシン、ビシン、グリシンアミド、またはアセトアミドグリシンである、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1020]
前記ゲル両性電解質は、トリシンまたはビシンである、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1021]
前記ゲル両性電解質の濃度は、約25ｍＭ〜約125ｍＭの範囲である、本発明1019または1020のいずれかの不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1022]
前記ゲル両性電解質の濃度は、約50ｍＭ〜約100ｍＭの範囲である、本発明1019または1020のいずれかの不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1023]
前記ゲル両性電解質の濃度は、約50ｍＭである、本発明1019または1020のいずれかの不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1024]
前記ゲル緩衝液システムのｐＨは、約6〜約8の範囲である、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1025]
前記ゲル緩衝液システムのｐＨは、約6．0〜約7．5の範囲である、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1026]
前記ゲル緩衝液システムのｐＨは、約6．5である、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1027]
前記ｐＨは、酸の添加により調節される、本発明1024〜1026のいずれかの不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1028]
前記酸はＨＣｌである、本発明1027の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1029]
前記ゲル緩衝液システムは、Ｃｌ−イオンの供給源をさらに含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1030]
前記ゲル緩衝液システムは、約95ｍＭ〜約170ｍＭのＣｌ−イオンをさらに含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1031]
前記ゲル緩衝液システムは、約135ｍＭ〜約145ｍＭのＣｌ−イオンをさらに含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1032]
前記泳動緩衝液中の前記緩衝両性電解質のｐＫは、前記ゲル両性電解質のｐＫより低い、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1033]
前記緩衝両性電解質は、ＭＥＳ、ＡＤＡ、ＰＩＰＥＳ、ＡＣＥＳ、ＢＥＳ、ＴＥＳ、ＨＥＰＥＳ、ＭＯＰＳ、ＣＡＰＳＯ、ＤＩＰＳＯ、ＰＯＰＳＯ、ＨＥＰＰＳ、ＨＥＰＰＳＯ、それらの塩、またはそれらのいずれかの組み合わせを含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1034]
前記緩衝両性電解質は、ＭＥＳ、ＭＯＰＳ、またはＤＩＰＳＯを含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1035]
前記緩衝両性電解質はＭＥＳを含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1036]
前記緩衝両性電解質はＭＯＰＳを含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1037]
前記緩衝両性電解質はＤＩＰＳＯを含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1038]
前記電気泳動分離ゲルは、スクロースをさらに含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1039]
前記スクロースの濃度は、約5重量％未満である、本発明1038の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1040]
前記スクロースの濃度は、約3重量％未満である、本発明1038の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1041]
前記スクロースの濃度は、約2重量％未満である、本発明1038の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1042]
前記スクロースの濃度は、約1．5重量％未満である、本発明1038の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1043]
少なくとも前記分離ゲルにＳＤＳをさらに含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1044]
前記分離ゲルおよび前記泳動緩衝液にＳＤＳをさらに含む、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1045]
前記分離ゲルはスラブゲルである、本発明1001の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1046]
前記スラブゲルは、2枚のガラスまたはプラスチックプレートの間にある、本発明1045の不連続緩衝液電気泳動システム。
[本発明1047]
少なくとも第1の適切な容器に、
それぞれが、本発明1001〜1047のいずれかの不連続緩衝液電気泳動システムを含む、1つ以上のゲルカセットと、
本発明1001〜1047のいずれかの水性泳動緩衝液と
を含む、キット。