【手続補正書】
【提出日】平成25年11月11日(2013.11.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
単離された抗ウイルス性アンチセンスオリゴヌクレオチドであって、
ａ）ヌクレアーゼ抵抗性骨格；
ｂ）１２〜４０ヌクレオチド塩基、ならびに
ｃ）ｉ）インフルエンザウイルスＡ、インフルエンザウイルスＢおよびインフルエンザウイルスＣのＭ１もしくはＭ２領域のマイナスセンスウイルスＲＮＡセグメントの５’または３’末端の２５塩基
ｉｉ）インフルエンザウイルスのＭ１もしくはＭ２  ｍＲＮＡのＡＵＧ開始コドンの周辺の４５塩基、および
ｉｉｉ）選択的スプライシングに供されるインフルエンザＭ１もしくはＭ２  ｍＲＮＡのスプライス供与部位またはスプライス受容部位の周辺の５０塩基
から選択されるウイルス標的領域にハイブリダイズする少なくとも１０塩基長の標的化配列
を含み、
前記オリゴヌクレオチドは、前記ウイルス標的領域とヘテロ二重鎖構造を形成する能力により特徴付けられ、前記ヘテロ二重鎖構造は、ＲＮａｓｅＨ分解に対して抵抗性である、単離された抗ウイルス性アンチセンスオリゴヌクレオチド。
【請求項２】
前記オリゴヌクレオチドが、前記ウイルス標的領域とヘテロ二重鎖構造を形成する能力により特徴付けられ、ここで、前記ヘテロ二重鎖構造が：
ａ）前記ウイルスのプラスセンス鎖またはマイナスセンス鎖および前記オリゴヌクレオチド化合物から構成され、そして
ｂ）少なくとも４５℃の解離Ｔｍにより特徴付けられる、
請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項３】
前記オリゴヌクレオチドが、
（ｉ）１つのサブユニットのモルホリノ窒素を隣接サブユニットの５’環外炭素に結合させる非荷電のリン含有サブユニット間結合によって連結されたモルホリノサブユニットを含むか；
（ｉｉ）１つ以上のロックト核酸（ＬＮＡ）サブユニットを含むか；
（ｉｉｉ）２’ＯＭｅ残基を含むか；または
（ｉｖ）ペプチド核酸（ＰＮＡ）である、
請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４】
前記モルホリノサブユニットが、以下の構造：
【化１６】
2013510584.tif 000001
に従うホスホロジアミデート結合によって結合されており、
ここで、Ｙ１＝Ｏであり、Ｚ＝Ｏであり、Ｐｊは、塩基特異的な水素結合によってポリヌクレオチド中の塩基に結合するのに有効なプリンまたはピリミジン塩基対形成部分であり、そしてＸは、アルキル、アルコキシ、チオアルコキシまたはアルキルアミノである、
請求項３に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項５】
サブユニット間結合の少なくとも２つかつ総数の半数以下について、Ｘは１−ピペラジンであり、そして、帯電していない結合について、ＸはＮＲ２であり、ここで、各Ｒは、独立して水素またはメチルである、請求項４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項６】
前記ホスホロジアミデートモルホリノオリゴヌクレオチドが、配列番号１３の標的配列を含み、かつ配列番号１３において（＋）で示されるような３つのピペラジン含有サブユニット間結合を有する、請求項５に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項７】
前記ウイルス標的領域が、配列番号１〜１１のうちのいずれか１つ以上を含む、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項８】
前記ウイルス標的領域が、配列番号２または４を含む、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項９】
前記オリゴヌクレオチドが、配列番号１２〜２９、および３４〜４７のうちのいずれか１つ以上の少なくとも１０個連続した塩基を含む、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１０】
前記オリゴヌクレオチドが、配列番号１２、１３、または２６を含む、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１１】
配列番号４８〜６２のうちのいずれか１つ以上の少なくとも１０個連続した塩基を含む、請求項３に記載のＰＮＡオリゴヌクレオチド。
【請求項１２】
配列番号４８〜５３、および５８〜６２のうちの１つ以上から本質的になる、請求項１１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１３】
ＬＮＡサブユニットから本質的になる、請求項３に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１４】
１つ以上のＬＮＡサブユニットを含み、かつ配列番号６３〜１１４のうちのいずれか１つ以上の少なくとも１０個連続した塩基を含む、請求項３に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１５】
配列番号６３〜１１４のうちの１つ以上から本質的になる、請求項１４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１６】
前記オリゴヌクレオチドが、宿主細胞内への前記化合物の取り込みを増大させるアルギニンリッチポリペプチドに結合体化されている、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１７】
前記アルギニンリッチポリペプチドが、配列番号１１５〜１２８からなる群から選択される、請求項１６に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１８】
インフルエンザウイルスの複製を減少させるための組成物であって、前記組成物は、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の抗ウイルス性アンチセンスオリゴヌクレオチドを含み、そして前記組成物は、インフルエンザウイルスに感染した細胞と接触されることを特徴とする、組成物。
【請求項１９】
前記細胞が、被験体内の細胞であり、前記組成物は、前記被験体に投与されることを特徴とする、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記被験体が、二次的細菌感染を有し、前記組成物は、細菌用抗生物質と別個に、またはそれと併用して投与されることを特徴とする、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記二次的細菌感染が、連鎖球菌性肺炎への感染である、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
前記抗生物質が、ベータ−ラクタムである、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２３】
前記抗生物質が、ペニシリン、アモキシシリン、セファロスポリン、クロラムフェニコールおよびクリンダマイシンから選択される、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２４】
ＣＤ２００またはＣＤ２００レセプターをコードするＲＮＡ分子を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドと別個に、またはそれと併用して投与されることをさらに特徴とする、請求項１９または請求項２０に記載の組成物。
【請求項２５】
請求項１〜１７のいずれか１項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチドおよび薬学的に許容され得るキャリアを含む、薬学的組成物。
【請求項２６】
細菌用抗生物質をさらに含む、請求項２５に記載の薬学的組成物。
【請求項２７】
ＣＤ２００またはＣＤ２００レセプターをコードするＲＮＡ分子を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドをさらに含む、請求項２５に記載の薬学的組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３０】
インフルエンザＡウイルスなどのインフルエンザウイルスを処置するために、標的化配列は、配列番号１〜１１と特定される配列の群のうちの１つに関連する領域にハイブリダイズし得る。好ましい標的化配列は、配列番号４のマイナス鎖標的または配列番号２のプラス鎖標的のいずれかと相補的な標的化配列である。これらの２つの領域を標的にする例示的なアンチセンスホスホロジアミデートモルホリノオリゴマー（「ＰＭＯ」）は、それぞれ配列番号２３および１２として列挙されている。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
単離された抗ウイルス性アンチセンスオリゴヌクレオチドであって、
ａ）ヌクレアーゼ抵抗性骨格；
ｂ）１２〜４０ヌクレオチド塩基、ならびに
ｃ）ｉ）インフルエンザウイルスＡ、インフルエンザウイルスＢおよびインフルエンザウイルスＣのマイナスセンスウイルスＲＮＡセグメントの５’または３’末端の２５塩基
ｉｉ）インフルエンザウイルスＡ、インフルエンザウイルスＢおよびインフルエンザウイルスＣのプラスセンスｃＲＮＡの５’または３’末端の末端の３０塩基
ｉｉｉ）インフルエンザウイルスのｍＲＮＡのＡＵＧ開始コドンの周辺の４５塩基、および
ｉｖ）選択的スプライシングに供されるインフルエンザｍＲＮＡのスプライス供与部位またはスプライス受容部位の周辺の５０塩基
から選択される標的領域にハイブリダイズする少なくとも１０塩基長の標的化配列
を含む、単離された抗ウイルス性アンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目２）
前記オリゴヌクレオチドが、ウイルス標的領域とヘテロ二重鎖構造を形成する能力により特徴付けられ、ここで、前記ヘテロ二重鎖構造が：
ａ）前記ウイルスのプラスセンス鎖またはマイナスセンス鎖および前記オリゴヌクレオチド化合物から構成され、そして
ｂ）少なくとも４５℃の解離Ｔｍにより特徴付けられる、
項目１に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目３）
前記オリゴヌクレオチドが、
ｉ）インフルエンザウイルスＡ、インフルエンザウイルスＢおよびインフルエンザウイルスＣのＭ１またはＭ２領域のマイナスセンスウイルスＲＮＡセグメントの５’または３’末端の２５塩基、
ｉｉ）インフルエンザウイルスＡ、インフルエンザウイルスＢおよびインフルエンザウイルスＣのＭ１またはＭ２領域のプラスセンスｃＲＮＡの５’または３’末端の末端の３０塩基
ｉｉｉ）インフルエンザのＭ１またはＭ２  ｍＲＮＡのＡＵＧ開始コドンの周辺の４５塩基、および
ｉｖ）インフルエンザＭ１またはＭ２  ＲＮＡのスプライス供与部位またはスプライス受容部位の周辺の５０塩基
から選択される標的領域と相補的な少なくとも１０塩基を含む、項目１に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目４）
前記オリゴヌクレオチドが、１つのサブユニットのモルホリノ窒素を隣接サブユニットの５’環外炭素に結合する非荷電のリン（ＩＩＩ）含有サブユニット間結合によって連結されたモルホリノサブユニットを含む、項目１に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目５）
前記モルホリノサブユニットが、以下の構造：
【化１６】
2013510584.tif 000002
に従うホスホロジアミデート結合によって結合されており、
ここで、Ｙ１＝Ｏであり、Ｚ＝Ｏであり、Ｐｊは、塩基特異的な水素結合によってポリヌクレオチド中の塩基に結合するのに有効なプリンまたはピリミジン塩基対形成部分であり、そしてＸは、アルキル、アルコキシ、チオアルコキシまたはアルキルアミノである、
項目４に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目６）
Ｘ＝ＮＲ２であり、各Ｒは、独立して水素またはメチルであり、正に帯電した結合の場合、Ｘは、１−ピペラジンである、項目５に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目７）
少なくとも２つかつサブユニット間結合の総数の半数以下が、正に帯電している、項目６に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目８）
前記モルホリノオリゴマーが、配列番号１３に示されるような正に帯電したサブユニット間結合を含む、項目６に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目９）
前記ウイルス標的領域が、配列番号１〜１１のうちのいずれか１つ以上を含む、項目１に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１０）
前記ウイルス標的領域が、配列番号２または４を含む、項目１に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１１）
前記オリゴヌクレオチドが、配列番号１２〜４７のうちのいずれか１つ以上の少なくとも１０個連続した塩基を含む、項目１に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１２）
前記オリゴヌクレオチドが、配列番号１２または１３を含む、項目１に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１３）
前記オリゴヌクレオチドが、ペプチド核酸（ＰＮＡ）である、項目１に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１４）
配列番号４８〜６２のうちのいずれか１つ以上の少なくとも１０個連続した塩基を含む、項目１３に記載のＰＮＡオリゴヌクレオチド。
（項目１５）
配列番号４８〜６２のうちの１つ以上から本質的になる、項目１４に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１６）
１つ以上のロックト核酸（ＬＮＡ）サブユニットを含む、項目１に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１７）
ＬＮＡサブユニットから本質的になる、項目１６に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１８）
配列番号６３〜１１４のうちのいずれか１つ以上の少なくとも１０個連続した塩基を含む、項目１６に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１９）
配列番号６３〜１１４のうちの１つ以上から本質的になる、項目１８に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目２０）
前記オリゴヌクレオチドが、宿主細胞内への前記化合物の取り込みを増大させるアルギニンリッチポリペプチドに結合体化されている、項目１に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目２１）
前記アルギニンリッチポリペプチドが、配列番号１１５〜１２８からなる群から選択される、項目２０に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目２２）
インフルエンザウイルスの複製を減少させる方法であって、前記方法は、インフルエンザウイルスに感染した細胞を、項目１〜２１のいずれか１項に記載の抗ウイルス性アンチセンスオリゴヌクレオチドと接触させる工程を包含する、方法。
（項目２３）
前記細胞が、被験体内の細胞であり、前記方法が、前記被験体に前記アンチセンスオリゴヌクレオチドを投与する工程を包含する、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
前記被験体が、二次的細菌感染を有し、細菌用抗生物質を、前記抗ウイルス性アンチセンスオリゴヌクレオチドと別個に、またはそれと同時に併用して投与する工程をさらに包含する、項目２３に記載の方法。
（項目２５）
前記二次的細菌感染が、連鎖球菌性肺炎への感染である、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
前記抗生物質が、ベータ−ラクタムである、項目２４に記載の方法。
（項目２７）
前記抗生物質が、ペニシリン、アモキシシリン、セファロスポリン、クロラムフェニコールおよびクリンダマイシンから選択される、項目２４に記載の方法。
（項目２８）
前記抗ウイルス性アンチセンスオリゴヌクレオチドと別個に、またはそれと同時に併用して、ＣＤ２００またはＣＤ２００レセプターをコードするＲＮＡ分子を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドを投与する工程をさらに包含する、項目２３または項目２４に記載の方法。
（項目２９）
項目１〜２１のいずれか１項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチドおよび薬学的に許容され得るキャリアを含む、薬学的組成物。
（項目３０）
細菌用抗生物質をさらに含む、項目２９に記載の薬学的組成物。
（項目３１）
ＣＤ２００またはＣＤ２００レセプターをコードするＲＮＡ分子を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドをさらに含む、項目２９に記載の薬学的組成物。