【手続補正書】
【提出日】平成21年11月4日(2009.11.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
シリカ粒子の表面に、有機分子が静電的引力によって吸着し、ポリエチレングリコール誘導体が前記有機分子に共有結合し、かつ前記有機分子の外側に位置してなる、シリカ粒子／有機分子／ポリエチレングリコール誘導体の複合粒子。
【請求項２】
シリカ粒子の表面に、有機分子が静電的引力によって吸着し、ポリエチレングリコール誘導体が、前記誘導体の一方の末端で前記有機分子に共有結合し、前記有機分子の外側に位置し、かつ前記ポリエチレングリコール誘導体の他方の末端に生体分子が共有結合してなる、シリカ粒子／有機分子／ポリエチレングリコール誘導体／生体分子の複合粒子。
【請求項３】
前記シリカ粒子の表面に吸着した有機分子が、カチオン性有機分子およびアニオン性有機分子であって、最も内側のカチオン性有機分子が前記シリカ粒子に吸着し、更にアニオン性有機分子が前記カチオン性有機分子に吸着して、前記カチオン性有機分子の外側に位置する構造、又は前記アニオン性有機分子が前記カチオン性有機分子に吸着して、前記カチオン性有機分子の外側に位置する構造を複数回繰り返し、最も外側に前記アニオン性有機分子が位置する構造を有する、請求項１又は２に記載の複合粒子。
【請求項４】
前記カチオン性有機分子及びアニオン性有機分子が、それぞれ、有機分子層を形成していることを特徴とする、請求項３に記載の複合粒子。
【請求項５】
前記最も外側のアニオン性有機分子に、前記ポリエチレングリコール誘導体が共有結合していることを特徴とする、請求項３又は４に記載の複合粒子。
【請求項６】
前記アニオン性有機分子が、ポリアクリル酸、アルギン酸、ポリスチレンスルホン酸、クエン酸、グルタミン酸、アスパラギン酸、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸、又はグルタミン酸もしくはアスパラギン酸の少なくとも１種を含有するポリペプチドのいずれかであって、前記カチオン性有機分子が、ポリアリルアミン塩酸塩、キトサン、ポリリシン、又はリシンのいずれかである、請求項５に記載の複合粒子。
【請求項７】
前記アニオン性有機分子同士が共有結合を介して結合しているか、前記カチオン性有機分子同士が共有結合を介して結合しているか、及び／又は前記アニオン性有機分子と前記カチオン性有機分子とが部分的に共有結合を介して結合していることを特徴とする、請求項５又は６に記載の複合粒子。
【請求項８】
前記ポリエチレングリコール誘導体が有する、前記有機分子と共有結合する末端の官能基が、水酸基、アミノ基、カルボキシル基、チオール基、マレイミド基又はスクシンイミジルエステル基のいずれかであり、前記ポリエチレングリコール誘導体が有する他方の末端の官能基が、カルボキシル基、チオール基、メトキシ基、水酸基、アミノ基、マレイミド基又はスクシンイミジルエステル基のいずれかである、請求項３〜７いずれか１項に記載の複合粒子。
【請求項９】
前記生体分子が、抗原、抗体、ＤＮＡ、ＲＮＡ、糖、糖鎖、リガンド、受容体、ペプチド又は化学物質であることを特徴とする、請求項２〜８のいずれか１項に記載の複合粒子。
【請求項１０】
前記シリカ粒子の平均粒径が１ｎｍ〜１μｍであり、さらに前記有機分子の分子量が５０〜１０００００である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の複合粒子。
【請求項１１】
ｐＨ７の純水中におけるζ電位の絶対値が１〜６０ｍＶである、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の複合粒子。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の複合粒子が、分散媒中に分散した複合粒子コロイド。
【請求項１３】
前記分散媒が緩衝液である、請求項１２に記載の複合粒子コロイド。
【請求項１４】
請求項１２又は１３に記載の複合粒子コロイドを用いてなる分析試薬。
【請求項１５】
シリカ粒子の表面に、カチオン性有機分子の吸着処理を行い、さらにアニオン性有機分子の吸着処理を行うという手順で、前記カチオン性有機分子と前記アニオン性有機分子とを交互に、複数回前記吸着処理を行うことにより前記シリカ粒子表面上に複数の有機分子を重畳的に吸着させることを特徴とする粒子表面修飾方法。
【請求項１６】
シリカ粒子の表面に、カチオン性有機分子の吸着処理を行い、さらにアニオン性有機分子の吸着処理を行うという手順で、前記カチオン性有機分子と前記アニオン性有機分子とを交互に、複数回前記吸着処理を行うことを特徴とする、シリカ粒子と有機分子よりなる複合粒子の製造方法。
【請求項１７】
前記シリカ粒子のコロイドと、前記シリカ粒子の表面電荷に対し反対の電荷を有する有機分子の溶液とを混合することを特徴とする、請求項１６に記載の複合粒子の製造方法。
【請求項１８】
さらに、前記シリカ粒子と前記有機分子よりなる前記複合粒子のコロイドと、前記複合粒子の表面電荷に対し反対の電荷を有する有機分子の溶液を混合することを特徴とする、請求項１６又は１７に記載の複合粒子の製造方法。
【請求項１９】
請求項１６〜１８のいずれか１項に記載の製造方法により前記シリカ粒子と前記有機分子よりなる前記複合粒子を製造した後、
前記複合粒子の最も外側に位置する有機分子に、ポリエチレングリコール誘導体を縮合剤または架橋剤により共有結合させることを特徴とする、粒子／有機分子／ポリエチレングリコール誘導体の複合粒子の製造方法。
【請求項２０】
前記シリカ粒子と前記有機分子よりなる前記複合粒子のコロイドと、前記ポリエチレングリコール誘導体の溶液と、前記縮合剤または架橋剤とを混合することを特徴とする、請求項１９に記載の複合粒子の製造方法。
【請求項２１】
請求項１９に記載の製造方法により前記シリカ粒子／有機分子／ポリエチレングリコール誘導体の前記複合粒子を製造した後、
さらに、前記ポリエチレングリコール誘導体の１つの末端に生体分子を共有結合させることを特徴とする、シリカ粒子／有機分子／ポリエチレングリコール誘導体／生体分子の複合粒子の製造方法。
【請求項２２】
前記ポリエチレングリコール誘導体の１つの末端への前記生体分子の共有結合が、前記シリカ粒子／有機分子／ポリエチレングリコール誘導体の前記複合粒子のコロイドと、前記生体分子の溶液と、前記縮合剤または架橋剤とを混合することにより行われることを特徴とする、請求項２１に記載の複合粒子の製造方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
上記課題は下記の手段により達成された。
（１）シリカ粒子の表面に、有機分子が静電的引力によって吸着し、ポリエチレングリコール誘導体が共有結合し、かつ前記有機分子の外側に位置してなる、シリカ粒子／有機分子／ポリエチレングリコール誘導体の複合粒子。
（２）シリカ粒子の表面に、有機分子が静電的引力によって吸着し、ポリエチレングリコール誘導体が、前記誘導体の一方の末端で前記有機分子に共有結合し、前記有機分子の外側に位置し、かつ前記ポリエチレングリコール誘導体の他方の末端に生体分子が共有結合してなる、シリカ粒子／有機分子／ポリエチレングリコール誘導体／生体分子の複合粒子。
（３）前記シリカ粒子の表面に吸着した有機分子が、カチオン性有機分子およびアニオン性有機分子であって、最も内側のカチオン性有機分子が前記シリカ粒子に吸着し、更にアニオン性有機分子が前記カチオン性有機分子に吸着して、前記カチオン性有機分子の外側に位置する構造、又は前記アニオン性有機分子が前記カチオン性有機分子に吸着して、前記カチオン性有機分子の外側に位置する構造を複数回繰り返し、最も外側に前記アニオン性有機分子が位置する構造を有する、（１）又は（２）に記載の複合粒子。
（４）前記カチオン性有機分子及びアニオン性有機分子が、それぞれ、有機分子層を形成していることを特徴とする、（３）に記載の複合粒子。
（５）前記最も外側のアニオン性有機分子に、前記ポリエチレングリコール誘導体が共有結合していることを特徴とする、（３）又は（４）に記載の複合粒子。
（６）前記アニオン性有機分子が、ポリアクリル酸、アルギン酸、ポリスチレンスルホン酸、クエン酸、グルタミン酸、アスパラギン酸、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸、又はグルタミン酸もしくはアスパラギン酸の少なくとも１種を含有するポリペプチドのいずれかであって、前記カチオン性有機分子が、ポリアリルアミン塩酸塩、キトサン、ポリリシン、又はリシンのいずれかである、（５）に記載の複合粒子。
（７）前記アニオン性有機分子同士が共有結合を介して結合しているか、前記カチオン性有機分子同士が共有結合を介して結合しているか、及び／又は前記アニオン性有機分子と前記カチオン性有機分子とが部分的に共有結合を介して結合していることを特徴とする、（５）又は（６）に記載の複合粒子。
（８）前記ポリエチレングリコール誘導体が有する、前記有機分子と共有結合する末端の官能基が、水酸基、アミノ基、カルボキシル基、チオール基、マレイミド基又はスクシンイミジルエステル基のいずれかであり、前記ポリエチレングリコール誘導体が有する他方の末端の官能基が、カルボキシル基、チオール基、メトキシ基、水酸基、アミノ基、マレイミド基又はスクシンイミジルエステル基のいずれかである、（３）〜（７）のいずれか１項に記載の複合粒子。
（９）前記生体分子が、抗原、抗体、ＤＮＡ、ＲＮＡ、糖、糖鎖、リガンド、受容体、ペプチド又は化学物質であることを特徴とする、（２）〜（８）のいずれか１項に記載の複合粒子。
（１０）前記シリカ粒子の平均粒径が１ｎｍ〜１μｍであり、さらに前記有機分子の分子量が５０〜１０００００である、（１）〜（９）のいずれか１項に記載の複合粒子。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
（１１）ｐＨ７の純水中におけるζ電位の絶対値が１〜６０ｍＶである、（１）〜（１０）のいずれか１項に記載の複合粒子。
（１８）前記（１）〜（１１）のいずれか１項に記載の複合粒子が、分散媒中に分散した複合粒子コロイド。
（１３）前記分散媒が緩衝液である、前記（１２）に記載の複合粒子コロイド。
（１４）前記（１２）又は（１３）に記載の複合粒子コロイドを用いてなる分析試薬。
（１５）シリカ粒子の表面に、カチオン性有機分子の吸着処理を行い、さらにアニオン性有機分子の吸着処理を行うという手順で、前記カチオン性有機分子と前記アニオン性有機分子とを交互に、複数回前記吸着処理を行うことにより前記シリカ粒子表面上に複数の有機分子を重畳的に吸着させることを特徴とする粒子表面修飾方法。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
（１６）シリカ粒子の表面に、カチオン性有機分子の吸着処理を行い、さらにアニオン性有機分子の吸着処理を行うという手順で、前記カチオン性有機分子と前記アニオン性有機分子とを交互に、複数回前記吸着処理を行うことを特徴とする、シリカ粒子と有機分子よりなる複合粒子の製造方法。
（１７）前記シリカ粒子のコロイドと、前記シリカ粒子の表面電荷に対し反対の電荷を有する有機分子の溶液とを混合することを特徴とする、（１６）に記載の複合粒子の製造方法。
（１８）さらに、前記シリカ粒子と前記有機分子よりなる前記複合粒子のコロイドと、前記複合粒子の表面電荷に対し反対の電荷を有する有機分子の溶液を混合することを特徴とする、（１６）又は（１７）に記載の複合粒子の製造方法。
（１９）前記（１６）〜（１８）のいずれか１項に記載の製造方法により前記シリカ粒子と前記有機分子よりなる前記複合粒子を製造した後、
前記複合粒子の最も外側に位置する有機分子に、ポリエチレングリコール誘導体を縮合剤または架橋剤により共有結合させることを特徴とする、粒子／有機分子／ポリエチレングリコール誘導体の複合粒子の製造方法。
（２０）前記シリカ粒子と有機分子よりなる前記複合粒子のコロイドと、前記ポリエチレングリコール誘導体の溶液と、前記縮合剤または架橋剤とを混合することを特徴とする、（１９）に記載の複合粒子の製造方法。
（２１）前記（１９）に記載の製造方法により前記シリカ粒子／有機分子／ポリエチレングリコール誘導体の前記複合粒子を製造した後、
さらに、前記ポリエチレングリコール誘導体の１つの末端に生体分子を共有結合させることを特徴とする、シリカ粒子／有機分子／ポリエチレングリコール誘導体／生体分子の複合粒子の製造方法。
（２２）前記ポリエチレングリコール誘導体の１つの末端への前記生体分子の共有結合が、前記シリカ粒子／有機分子／ポリエチレングリコール誘導体の前記複合粒子のコロイドと、前記生体分子の溶液と、前記縮合剤または架橋剤とを混合することにより行われることを特徴とする、（２１）に記載の複合粒子の製造方法。
を提供するものである。