【手続補正書】
【提出日】平成25年6月12日(2013.6.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）ＲＮＡウイルス由来の決定された異種のウイルスエンベロープタンパク質（単数）又はウイルスエンベロープタンパク質（複数）で偽型化され、並びに（ｉｉ）そのゲノム中に、哺乳動物宿主を感染し得るプラスモディウム属（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ）寄生虫の前赤血球ステージ抗原のエピトープ（単数又は複数）を有する少なくとも１つのポリペプチド（単数又は複数）をコードする少なくとも１つの組み換えポリヌクレオチドを含み、ここで前記エピトープ（単数又は複数）は、Ｔ−エピトープ（単数又は複数）及び任意でＢ−エピトープ（単数又は複数）を含む、レンチウイルスベクター粒子。
【請求項２】
複製能力の無いＨＩＶに基づくベクター粒子である、請求項１に記載のレンチウイルスベクター粒子。
【請求項３】
少なくとも１つの組み換えポリヌクレオチドが、ヒトに感染するプラスモディウム属寄生虫のサーカムスポロゾイトタンパク質（ＣＳＰ）からの抗原のポリペプチド（単数又は複数）をコードする、又はスポロゾイト表面タンパク質２（ＴＲＡＰ／ＳＳＰ２）、肝臓ステージ抗原（ＬＳＡ）、ＬＳＡ３、Ｐｆエクスポーティッドタンパク質１（Ｐｆ  Ｅｘｐ１）、Ｐｆ抗原２スポロゾイト及び肝臓ステージ抗原（ＳＡＬＳＡ）、スポロゾイトスレオニン及びアスパラギンリッチ（ＳＴＡＲＰ）からなる群から選択される抗原のポリペプチドをコードする、核酸配列を含む、請求項１に記載のレンチウイルスベクター粒子。
【請求項４】
そのゲノム中に、メロゾイト表面タンパク質１（ＭＳＰ２）、特にメロゾイト表面タンパク質１（ＭＳＰ−１）、メロゾイト表面タンパク質２（ＭＳＰ−２）、メロゾイト表面タンパク質３（ＭＳＰ−３）、メロゾイト表面タンパク質４（ＭＳＰ−４）、メロゾイト表面タンパク質６（ＭＳＰ−６）、ＭＳＰ３−ＧＬＵＲＰ融合タンパク質、リング−感染赤血球表面抗原（ＲＥＳＡ）、桿小体関連タンパク質１（ＲＡＰ−１）、頂端膜抗原１（ＡＭＡ−１）、赤血球結合抗原（ＥＢＡ−１７５）、赤血球膜結合巨大タンパク質又は抗原３３２（Ａｇ３３２）、ｄｎａＫ型分子シャペロン、グルタミン酸リッチタンパク質（ＧＬＵＲＰ）；ＭＳＰ３−ＧＬＵＲＰ融合タンパク質、赤血球膜タンパク質１（ＥＭＰ−１）、セリンリピート抗原（ＳＥＲＡ）、クラスター化したアスパラギンリッチタンパク質（ＣＡＲＰ）、サーカムスポロゾイトタンパク質関連抗原前駆体（ＣＲＡ）、細胞接着結合無性タンパク質（ＣＬＡＧ）、酸塩基リピート抗原（ＡＢＲＡ）又は１０１ｋＤａマラリア抗原、桿小体抗原タンパク質（ＲＡＰ−２）、Ｋｎｏｂ結合ヒスチジンリッチタンパク質（ＫＨＲＰ）、桿小体抗原タンパク質（ＲＡＰ）、システインプロテアーゼ、仮定的なタンパク質ＰＦＥ１３２５ｗ、保護抗原（ＭＡｇ−１）、フルクトース２リン酸アルドラーゼ、リボソームリンタンパク質Ｐ０、Ｐ型ＡＴＰａｓｅ、グルコース制御タンパク質（ＧＲＰ７８）、アスパラギン及びアスパラギン酸リッチタンパク質（ＡＡＲＰ１）、散在リピート抗原又はＰＦＥ００７０ｗの群から選択されるポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、及び／又は有性ステージ及びスポロゾイト表面抗原、抗原Ｐｆｇ２７／２５、抗原ＱＦ１２２、１１−１ポリペプチド、生殖母体特異的表面タンパク質（Ｐｆｓ２３０）、オーキネート表面タンパク質（Ｐ２５）、キチナーゼ、多剤耐性タンパク質（ＭＲＰ）の群から選択されるポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター粒子。
【請求項５】
組み換えポリヌクレオチド（単数又は複数）が、哺乳動物コドン最適化ヌクレオチド配列を有し、任意でＨＩＶに基づくゲノムの配列が、哺乳動物コドン最適化ヌクレオチド配列を有する、請求項１〜４のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター粒子。
【請求項６】
組み換えポリヌクレオチドが、少なくとも一つのＣＳＰ抗原のポリペプチドをコードし、ここで前記ポリペプチドが前記ＣＳＰのＧＰＩ−アンカーリングモチーフを欠損している、請求項１〜５のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター粒子。
【請求項７】
統合能力の欠損しているベクター粒子、又は統合能力を有するベクター粒子のいずれかから選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター粒子。
【請求項８】
Ｉｎｄｉａｎａ株のＶＳＶ−Ｇタンパク質（単数又は複数）、Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ株のＶＳＶ−Ｇタンパク質（単数又は複数）、Ｃｏｃａｌ株のＶＳＶ−Ｇタンパク質（単数又は複数）、Ｉｓｆａｈａｎ株のＶＳＶ−Ｇタンパク質（単数又は複数）、Ｃｈａｎｄｉｐｕｒａ株のＶＳＶ−Ｇタンパク質（単数又は複数）、Ｐｙｒｉ株のＶＳＶ−Ｇタンパク質（単数又は複数）、又はＳＶＣＶ株のＶＳＶ−Ｇタンパク質（単数又は複数）の群から選択される水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）のウイルス膜貫通型糖化（Ｇ）エンベロープタンパク質（単数又は複数）で偽型化される、請求項１〜７のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター粒子。
【請求項９】
・（ｉ）パッケージング、逆転写、及び転写に必要なレンチウイルス、特にＨＩＶ−１のシス作用配列を含み、更に、機能性のレンチウイルス、特にＨＩＶ−１のＤＮＡ  ｆｌａｐエレメントを含み、任意で、統合に必要なシス作用配列を含むベクタープラスミドであって、前記ベクタープラスミドは更に、（ｉｉ）制御発現配列、特にプロモーターの制御下で、プラスモディウム属寄生虫のｃｓ遺伝子の切断された、哺乳動物、特にヒトコドン最適化配列のポリヌクレオチドを含む、ベクタープラスミド；
・ＶＳＶ−Ｇエンベロープタンパク質（単数）又はエンベロープタンパク質（複数）をコードするポリヌクレオチドを含むＶＳＶ−Ｇエンベロープ発現プラスミドであって、前記ポリヌクレオチドは、制御発現配列の制御下にある、ＶＳＶ−Ｇエンベロープ発現プラスミド；及び
・キャプシド形成プラスミドがレンチウイルス、特にＨＩＶ−１の、統合能力のあるベクター粒子の産生に好適なｇａｇ−ｐｏｌコーディング配列、又は統合能力が欠損したベクター粒子の産生に好適な改変されたｇａｇ−ｐｏｌコーディング配列のいずれかを含み、ここで前記ｇａｇ−ｐｏｌ配列がＤＮＡ  ｆｌａｐエレメントとして同一のレンチウイルスサブファミリー由来であり、前記ｇａｇ−ｐｏｌ若しくは改変されたｇａｇ−ｐｏｌ配列が制御発現配列の制御下にある、キャプシド形成プラスミド；
を用いた、哺乳動物細胞の共トランスフェクションから回収された生成物である、請求項１〜８のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター粒子。
【請求項１０】
・（ｉ）パッケージング、逆転写、及び転写に必要なレンチウイルス、特にＨＩＶ−１のシス作用配列を含み、更に、機能性のレンチウイルス、特にＨＩＶ−１のＤＮＡ  ｆｌａｐエレメントを含み、任意で、統合に必要なシス作用配列を含むベクタープラスミドであって、前記ベクタープラスミドは更に、（ｉｉ）制御発現配列、特にプロモーターの制御下で、プラスモディウム属寄生虫のｃｓ遺伝子の切断された、哺乳動物、特にヒトコドン最適化配列のポリヌクレオチドを含む、ベクタープラスミド；
・ＶＳＶ−Ｇエンベロープタンパク質（単数）又はエンベロープタンパク質（複数）をコードするポリヌクレオチドを含むＶＳＶ−Ｇエンベロープ発現プラスミドであって、ここで前記ポリヌクレオチドは、制御発現配列、特に誘導可能プロモーターを含む制御発現配列の制御下にある、ＶＳＶ−Ｇエンベロープ発現プラスミド；及び
・キャプシド形成プラスミドが、レンチウイルス、特にＨＩＶ−１の統合能力のあるベクター粒子の産生に好適なｇａｇ−ｐｏｌコーディング配列、又は統合の欠損したベクター粒子の産生に好適な改変されたｇａｇ−ｐｏｌコーディング配列のいずれかを含み、ここで前記ｇａｇ−ｐｏｌ配列がＤＮＡ  ｆｌａｐエレメントとして同一のレンチウイルスサブファミリー由来であり、前記レンチウイルスのｇａｇ−ｐｏｌ若しくは改変されたｇａｇ−ｐｏｌ配列が制御発現配列の制御下にある、キャプシド形成プラスミド；
を用いた、安定的な細胞株から回収された生成物である、請求項１〜９のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター粒子。
【請求項１１】
レンチウイルスベクター粒子のベクターゲノムが、機能性のレンチウイルス遺伝子を欠損しているレンチウイルスに基づく配列、特にＨＩＶ−１に基づく配列を含み、パッケージング、逆転写、及び転写に必要なシス作用配列を含み、更に、機能性のレンチウイルス、特にＨＩＶ−１のＤＮＡ  ｆｌａｐエレメントを含み、ここで前記ベクターゲノムが、前記シス作用配列において、少なくとも一つが以下：
ａ）レンチウイルスゲノムからの３’ＬＴＲ配列が、切断され、Ｕ３領域のエンハンサーを欠損している；
ｂ）レンチウイルスゲノムからの３’ＬＴＲ配列が、切断され、Ｕ３領域を欠損している、又はＵ３領域において部分的に欠失している；
ｃ）ＬＴＲ５’のＵ３領域が、非レンチウイルスＵ３領域により、又はｔａｔ独立第一転写を促すのに好適なプロモーターにより置き換えられている；
のように改変されたポリヌクレオチドであることを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター粒子。
【請求項１２】
（ｉ）第一の決定された異種のウイルスエンベロープタンパク質（単数）又はウイルスエンベロープタンパク質（複数）で偽型化される、請求項１〜１１のいずれか一項に定義のレンチウイルスベクター粒子；
（ｉｉ）（ｉ）においてレンチウイルスベクター粒子と別に提供される場合、前記第一の異種のウイルスエンベロープ（単数又は複数）と異なる、第二の決定された異種のウイルスエンベロープタンパク質（単数）又はウイルスエンベロープタンパク質（複数）で偽型化される、請求項１〜１１のいずれか一項に定義のレンチウイルスベクター粒子；
ここで、前記第一及び第二のウイルスエンベロープタンパク質（単数又は複数）は、互いに血清中和せず、哺乳動物細胞のインビボ形質導入に好適である、
を含む、哺乳動物宿主に分離して投与するための化合物の組み合わせ。
【請求項１３】
・前記第一及び第二のウイルスエンベロープタンパク質がそれぞれＩｎｄｉａｎａ株のＶＳＶ−Ｇ及びＮｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ株のＶＳＶ−Ｇ、若しくはその逆である、又は
・前記第一及び第二のエンベロープタンパク質の１つ又は双方が、天然のＩｎｄｉａｎａ株のＶＳＶ−Ｇ若しくは／及びＮｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ株のＶＳＶ−Ｇの改変型、又は
・前記第一及び第二のエンベロープタンパク質の少なくとも一つが、キメラのＶＳＶ−Ｇタンパク質であって、ここで以下のドメイン：輸送決定因子ＹＴＤＩＥ、細胞質尾部、膜貫通ドメイン、又は細胞質ドメインの少なくとも一つが、Ｉｎｄｉａｎａ株由来である、又は
・第一のウイルスエンベロープタンパク質が、Ｉｎｄｉａｎａ株のＶＳＶ−Ｇ若しくはＮｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ株のＶＳＶ−Ｇのいずれかであり、第二のウイルスエンベロープタンパク質が、Ｃｏｃａｌ株のＶＳＶ−Ｇタンパク質（単数又は複数）、Ｉｓｆａｈａｎ株のＶＳＶ−Ｇタンパク質（単数又は複数）、Ｃｈａｎｄｉｐｕｒａ株のＶＳＶ−Ｇタンパク質（単数又は複数）、Ｐｙｒｉ株のＶＳＶ−Ｇタンパク質（単数又は複数）、及びＳＶＣＶ株のＶＳＶ−Ｇタンパク質（単数又は複数）の群から選択される、
請求項１２に記載の化合物の組み合わせ。
【請求項１４】
レンチウイルス粒子が、（ｉ）ＣＳＰ抗原のポリペプチド、又はＧＰＩアンカーリングモチーフを欠損したＣＳＰ抗原のポリペプチド、及び（ｉｉ）スポロゾイト表面タンパク質２（ＴＲＡＰ／ＳＳＰ２）、肝臓ステージ抗原（ＬＳＡ）、Ｐｆエクスポーティッドタンパク質１（Ｐｆ  Ｅｘｐ１）、Ｐｆ抗原２の群において選択されるマラリア寄生虫の抗原の少なくとも一つの更なるポリペプチドを含む、異なるポリペプチドをコードし、ここで、前記抗原の異なるポリペプチドが、同一のレンチウイルス粒子又は異なるレンチウイルス粒子から発現される、請求項９又は１０に記載の、分離して提供される化合物の組み合わせ。
【請求項１５】
レンチウイルス粒子が、メロゾイト表面タンパク質１（ＭＳＰ−１）、メロゾイト表面タンパク質２（ＭＳＰ−２）、頂端膜抗原１（ＡＭＡ−１）、セリンリピート抗原（ＳＥＲＡ）、ＧＬＵＲＰ抗原、Ｐｆ１５５／ＲＥＳＡ（リング−感染赤血球表面抗原）、又は桿小体関連タンパク質１（ＲＡＰ−１）若しくは桿小体関連タンパク質２（ＲＡＰ−２）の群において選択されるポリペプチドをコードする、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の、分離して提供される、化合物の組み合わせ。
【請求項１６】
哺乳動物宿主、特にヒト宿主において、マラリア寄生虫感染又は寄生虫に誘導される病理に対する予防的免疫付与のための、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター粒子又は化合物の組み合わせ。
【請求項１７】
哺乳動物宿主、特にヒト宿主において、マラリア寄生虫感染又は寄生虫に誘導される病理に対する予防的免疫付与に使用のための好適な投与ビヒクルで製剤化され、ここで前記使用は、宿主の細胞性免疫応答をプライムするために有効量のレンチウイルス粒子を投与すること、及び宿主の細胞性免疫応答をブーストするために有効量のレンチウイルス粒子を後で投与すること、及び任意でブーストについての前記投与ステップを繰り返すことを含む免疫付与パターンを含み、ここでプライム又はブートするステップのそれぞれにおいて投与されるレンチウイルス粒子は、互いに血清中和をしない異なるエンベロープタンパク質（単数又は複数）で偽型化され、ここで前記プライム又はブーストするステップは、少なくとも６週間、特に少なくとも８週間の時間空けられる、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター粒子又は化合物の組み合わせ。
【請求項１８】
分離して提供される用量の前記レンチウイルス粒子を含む投与計画において、哺乳動物宿主、特にヒト宿主における、マラリア寄生虫感染又は寄生虫に誘導される病理に対する予防的免疫付与のために用いられ、ここで、細胞性免疫応答をプライムすることを目的とする用量は、中程度の用量であり、細胞性免疫応答をブーストすることを目的とする用量は、プライムするための用量より多い、請求項１〜１７のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター粒子又は化合物の組み合わせ。
【請求項１９】
分離して提供される用量の前記レンチウイルス粒子を含む投与計画において、哺乳動物宿主、特にヒト宿主においてマラリア寄生虫感染又は寄生虫に誘導される病理に対する予防的免疫に用いられ、ここで、統合能力のあるベクター粒子が用いられる場合、細胞性免疫応答をプライム及びブートすることを目的とする用量は、１０7〜１０9のレンチウイルス粒子を含み、並びに統合能力のないベクター粒子が用いられる場合、細胞性免疫応答をプライム及びブーストすることを目的とする用量は、１０8〜１０10のレンチウイルス粒子を含む、請求項１〜１８のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター粒子又は化合物の組み合わせ。
【請求項２０】
宿主において、少なくとも１つの以下の効果：
（Ｉ）ヒト宿主において、マラリア寄生虫感染、特にプラスモディウム・ファルシパルム（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）、プラスモディウム・マラリアエ（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｍａｌａｒｉａｅ）、プラスモディウム・ビバックス（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｖｉｖａｘ）、プラスモディウム・ノウレシ（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｋｎｏｗｌｅｓｉ））、又はプラスモディウム・オバール（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｏｖａｌｅに対する無菌保護を誘発すること；
（ＩＩ）マラリア寄生虫の細胞外形態を阻害すること；
（ＩＩＩ）マラリア寄生虫による肝細胞感染を予防すること、又は感染の肝臓ステージ増幅を阻害すること；
（ＩＶ）マラリア寄生虫抗原（単数又は複数）に対する特異的Ｔ細胞免疫応答、
特にＣＤ８＋Ｔ細胞応答及び／又は特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞応答を誘発すること；
（Ｖ）寄生虫抗原（単数又は複数）に対するＢ細胞応答を誘発すること；
（ＶＩ）マラリア寄生虫による感染の影響を減少又は緩和するために寄生虫血症を制御すること；
（ＶＩＩ）寄生虫による感染又は寄生虫により誘導される病理に対する保護細胞性免疫を誘発すること；
（ＶＩＩＩ）メモリーＴ細胞免疫応答を誘発すること；
（ＩＸ）マラリア寄生虫による感染の間、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞応答の早期の及び高い回復を誘発すること；
（Ｘ）プラスモディウム属感染に関して肝臓内のメモリーリンパ球を刺激することによる早期の強力なＣＴ（ＣＤ８＋Ｔ）応答を誘発すること；
（ＸＩ）マラリア寄生虫が免疫応答を回避することを防ぐこと、従って、マラリア寄生虫による感染の長期の制御を可能にすること；
を得るために好適である、投与用量及び投与計画において、哺乳動物宿主、特にヒト宿主における、マラリア寄生虫感染又は寄生虫に誘導される病理に対する予防的免疫付与に用いられる、請求項１〜１９のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター粒子又は化合物の組み合わせ。
【請求項２１】
哺乳動物宿主、特にヒト宿主において、マラリア寄生虫感染又は寄生虫に誘導される病理に対する予防的免疫付与のための免疫原性組成物の製造のための、請求項１〜２０のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター粒子又は化合物の組み合わせの使用。
【請求項２２】
アジュバント化合物、及び／又は免疫付与化合物、及び適切な送達ビヒクルと関連して、哺乳動物宿主、特にヒト宿主において、マラリア寄生虫感染又は寄生虫に誘導される病理に対する予防的免疫付与に用いられる、請求項１〜２１のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター粒子又は化合物の組み合わせ。