【誤訳訂正書】
【提出日】平成25年2月6日(2013.2.6)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００６】
本発明は、尿サンプル中のリセドロネートを定量的に測定するための方法であって、該方法は:
ａ）内部標準を尿サンプルに添加すること；
ｂ）尿サンプルを、メタノールでプレコンディショニングされているオアシスHLB（Oasis HLB）カートリッジにかけること；
ｃ）カートリッジを水中約１％ (v／v)TEA及びメタノール中約１％ (v／v)ギ酸で洗浄すること；
ｄ）リセドロネートを、少なくとも１回、約３mM EDTAを含有する約60％(v／v)メタノールと約40％(v／v)水との混合物で真空下溶離すること；
ｅ）溶離した溶液をエバポレートし、そして10％(v／v)メタノールと90％(v／v)0.05M NH4Ac−NH4OH緩衝液との混合物で再構成して、リセドロネートと内部標準とのサンプル混合物を得ること；及び
ｆ）サンプル混合物をLC−MS／MSシステムで分析すること；
を含む、方法に関する。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
尿サンプル中のリセドロネートを定量的に測定するための方法であって:
ａ）内部標準溶液を尿サンプルに添加すること；
ｂ）尿サンプルを、メタノールでプレコンディショニングされているオアシス HLBカートリッジにかけること；
ｃ）カートリッジを水中約１％ (v／v)TEA及びメタノール中約１％ (v／v)ギ酸で洗浄すること；
ｄ）リセドロネートを、少なくとも１回、約３mM EDTAを含有する約60％(v／v)メタノールと約40％(v／v)水との混合物で真空下溶離すること；
ｅ）溶離した溶液をエバポレートし、そして約10％(v／v)メタノールと約90％(v／v)約0.05M NH4Ac−NH4OH緩衝液との混合物で再構成して、リセドロネートと内部標準とのサンプル混合物を得ること；及び
ｆ）サンプル混合物をLC−MS／MSシステムで分析すること；
を含む、方法。
【請求項２】
尿サンプルがマウス又はラットの尿サンプルである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
内部標準がデオキシ−リセドロネートである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
内部標準が、水溶液として添加されるデオキシ−リセドロネートである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
内部標準が、約10μg／mLの水溶液として添加されるデオキシ−リセドロネートである、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
オアシス HLBカートリッジが30mg オアシス HLBカートリッジである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
尿サンプルの量が約0.4mLである、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
カートリッジが約１mLのメタノールでプレコンディショニングされている、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
カートリッジが、約１mLのメタノール、続いて水中１％(v／v)TEA約0.5mLでプレコンディショニングされている、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
カートリッジが、水中約１％ (v／v)TEA約0.5mL及びメタノール中約１％(v／v)ギ酸約0.5mLで洗浄される、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
約３mM EDTAを含有する約60％(v／v)メタノールと約40％(v／v)水との混合物の量が約1.5mLである、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
リセドロネートを、約３mM EDTAを含有する約60％(v／v)メタノールと約40％(v／v)水との混合物約0.75mLで２回溶離する、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
約10％(v／v)メタノールと約90％(v／v) 約0.05M NH4Ac−NH4OH緩衝液との混合物の量が約100μLである、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
内部標準がデオキシ−リセドロネートであり、そしてサンプル混合物をLC−MS／MSシステムで分析することが、リセドロネートとデオキシ−リセドロネートとをイナートシルフェニル−3 HPLCカラム上で溶液Ａ及び溶液Ｂの混合物を用いるグラジエント溶離によるHPLCにより分離することを含み、ここで溶液Ａの量を約10％(v／v)から約95％(v／v)に増加させ、そして溶液Ａは水中約90％(v／v)メタノールであり、そして溶液Ｂは２％(v／v)トリエチルアミンを含有する約10mM 酢酸アンモニウム−酢酸緩衝液である、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
マウス又はラットの尿サンプル中のリセドロネートを定量的に測定するための方法であって:
ａ）約10μg／mLデオキシ−リセドロネート水溶液約100μLをマウス又はラットの尿サンプル約0.4mLに添加すること；
ｂ）マウス又はラットの尿サンプルを、メタノール約１mL、続いて水中１％(v／v)TEA約0.5mLでプレコンディショニングされている30mg オアシス HLBカートリッジにかけること；
ｃ）カートリッジを水中約１％(v／v)TEA約0.5mL及びメタノール中約１％(v／v)ギ酸約0.5mLで洗浄すること；
ｄ）リセドロネートを、約３mM EDTAを含有する約60％(v／v)メタノールと約40％(v／v)水との混合物約1.5mLで溶離すること；
ｅ）溶離した溶液をエバポレートし、そして約10％ (v／v)のメタノールと約90％(v／v)の約0.05M NH4Ac−NH4OH緩衝液との混合物約100μLで再構成してリセドロネート及びデオキシ−リセドロネートのサンプル混合物を得ること；及び
ｆ）サンプル混合物をLC−MS／MSシステムで分析すること；
を含み、ここでリセドロネートとデオキシ−リセドロネートとをイナートシルフェニル−3 HPLCカラム上で溶液Ａ及び溶液Ｂの混合物を用いるグラジエント溶離によるHPLCにより分離し、ここで溶液Ａの量を約10％(v／v)から約95％(v／v)に増加させ、そして溶液Ａは水中約90％(v／v)メタノールであり、そして溶液Ｂは２％(v／v)トリエチルアミンを含有する約10mM 酢酸アンモニウム−酢酸緩衝液である、方法。
【請求項１６】
マウス又はラットの尿サンプル中のリセドロネートを定量的に測定するための方法であって:
ａ）約10μg／mL デオキシ−リセドロネート水溶液約100μLを、マウス又はラットの尿サンプル約0.4mLに添加すること；
ｂ）マウス又はラットの尿サンプルを、メタノール約１mL、続いて水中１％(v／v)TEA約0.5mLでプレコンディショニングされている30mg オアシス HLBカートリッジにかけること；
ｃ）カートリッジを水中約１％(v／v)TEA約0.5mL及びメタノール中約１％(v／v)ギ酸約0.5mLで洗浄すること；
ｄ）リセドロネートを、約３mM EDTAを含有する約60％(v／v)メタノールと約40％(v／v)水との混合物約0.75mLで２回溶離すること；
ｅ）溶離した溶液をエバポレートし、そして約10％ (v／v)のメタノールと約90％(v／v)の約0.05M NH4Ac−NH4OH緩衝液との混合物約100μLで再構成してリセドロネート及びデオキシ−リセドロネートのサンプル混合物を得ること；及び
ｆ）サンプル混合物をLC−MS／MSシステムで分析すること；
を含み、ここでリセドロネートとデオキシ−リセドロネートとをイナートシルフェニル−3 HPLCカラム上で溶液Ａ及び溶液Ｂの混合物を用いるグラジエント溶離によるHPLCにより分離し、ここで溶液Ａの量を約10％(v／v)から約95％(v／v)に増加させ、そして溶液Ａは水中約90％(v／v)メタノールであり、そして溶液Ｂは２％(v／v)トリエチルアミンを含有する約10mM 酢酸アンモニウム−酢酸緩衝液である、方法。