【手続補正書】
【提出日】平成25年10月9日(2013.10.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト胚性幹細胞またはヒト胚性幹細胞集団の、胚体内胚葉の特徴を示す細胞または胚体内胚葉の特徴を示す細胞集団への分化を誘導するインビトロ方法であって、
前記細胞または細胞集団をGSK-3阻害剤とともにインキュベートするステップを含む方法。
【請求項２】
胚体内胚葉の特徴を示す細胞または胚体内胚葉の特徴を示す細胞集団の、肝細胞様細胞または肝細胞様細胞集団への分化を誘導するインビトロ方法であって、
前記細胞または細胞集団をGSK-3阻害剤とともにインキュベートするステップを含む方法。
【請求項３】
ヒト胚性幹細胞またはヒト胚性幹細胞集団の、肝細胞様細胞または肝細胞様細胞集団への分化を誘導するインビトロ方法であって、
前記細胞または細胞集団をGSK-3阻害剤とともにインキュベートするステップを含む方法。
【請求項４】
GSK-3阻害剤が、以下の構造を有する化合物、またはその機能的誘導体、類似体もしくは同族体である、請求項1から３のいずれか一項に記載の方法であって:
【化１】
2013511974.tif 000001
式中、
R1は、H、C1〜C6アルキル(好ましくはCH3)またはCH2O(CH2)2SiCH3であり、
R2は、H、C1〜C6アルキル(好ましくはCH3)またはCH2O(CH2)2SiCH3であり、あるいは
R1およびR2は一緒になって、非置換である、またはOR6もしくはR7によって置換されている-(CH2)n-、あるいは-(CH2CH2O)m(CH2)2-であり、
R3は、HまたはC1〜C6アルキル(好ましくはCH3)であり、
R4は、HまたはC1〜C6アルキル(好ましくはCH3)であり、
R5は、HまたはCH2アリールであり、ここで、アリールは非置換であるか、またはアルコキシ(好ましくはメトキシ)によって置換されており、
R6は、H、CH2CH=CH2、CH2CH2CH=CH2、CH2OCH2CH=CH2またはSitBuPh2であり、
R7は、H、CH2CH=CH2、CH2CH2CH=CH2、CH2OCH2CH=CH2またはSitBuPh2であり、
nは、6、7、8、9、10または11であり、
mは、3または4であり、
XおよびYは、独立して、CまたはNであり、
場合により、GSK-3阻害剤が、以下の構造の1つを有する化合物、またはその機能的誘導体、類似体もしくは同族体から選択される、方法。
【化２】
2013511974.tif 000002
【化３】
2013511974.tif 000003
【請求項５】
ヒト胚性幹細胞またはヒト胚性幹細胞集団の、胚体内胚葉の特徴を示す細胞または胚体内胚葉の特徴を示す細胞集団への分化を誘導するためのGSK-3阻害剤のインビトロにおける使用。
【請求項６】
胚体内胚葉の特徴を示す細胞または胚体内胚葉の特徴を示す細胞集団の、肝細胞様細胞または肝細胞様細胞集団への分化を誘導するためのGSK-3阻害剤のインビトロにおける使用。
【請求項７】
ヒト胚性幹細胞またはヒト胚性幹細胞集団の、肝細胞様細胞または胚細胞様細胞集団への分化を誘導するためのGSK-3阻害剤のインビトロにおける使用。
【請求項８】
対象における肝疾患の治療のためまたは損傷肝臓の再構築のためのヒト胚性幹細胞およびGSK-3阻害剤。
【請求項９】
対象における肝疾患の治療のためまたは損傷肝臓の再構築のための胚体内胚葉細胞およびGSK-3阻害剤。
【請求項１０】
GSK-3阻害剤が、以下の構造を有する化合物、またはその機能的誘導体、類似体もしくは同族体であり、
【化４】
2013511974.tif 000004
(式中、
R1は、H、C1〜C6アルキル(好ましくはCH3)またはCH2O(CH2)2SiCH3であり、
R2は、H、C1〜C6アルキル(好ましくはCH3)またはCH2O(CH2)2SiCH3であり、あるいは
R1およびR2は一緒になって、非置換である、またはOR6もしくはR7によって置換されている-(CH2)n-、あるいは-(CH2CH2O)m(CH2)2-であり、
R3は、HまたはC1〜C6アルキル(好ましくはCH3)であり、
R4は、HまたはC1〜C6アルキル(好ましくはCH3)であり、
R5は、HまたはCH2アリールであり、ここで、アリールは非置換であるか、またはアルコキ
シ(好ましくはメトキシ)によって置換されており、
R6は、H、CH2CH=CH2、CH2CH2CH=CH2、CH2OCH2CH=CH2またはSitBuPh2であり、
R7は、H、CH2CH=CH2、CH2CH2CH=CH2、CH2OCH2CH=CH2またはSitBuPh2であり、
nは、6、7、8、9、10または11であり、
mは、3または4であり、
XおよびYは、独立して、CまたはNである)
場合により、GSK-3阻害剤が、以下の構造の1つを有する化合物、またはその機能的誘導体、類似体もしくは同族体から選択される、請求項5から7のいずれか一項に記載の使用、請求項8に記載のヒト胚性幹細胞およびGSK-3阻害剤、または、請求項９に記載の胚体内胚葉細胞およびGSK-3阻害剤。
【化５】
2013511974.tif 000005
【請求項１１】
GSK-3阻害剤を含む、ヒト胚性幹細胞の胚体内胚葉細胞への分化組成物。
【請求項１２】
GSK-3阻害剤を含む、胚体内胚葉の肝細胞様細胞への分化組成物。
【請求項１３】
GSK-3阻害剤を含む、ヒト胚性幹細胞の肝細胞様細胞への分化組成物。
【請求項１４】
GSK-3阻害剤が、以下の構造を有する化合物、またはその機能的誘導体、類似体もしくは同族体である、請求項11から13のいずれか一項に記載の組成物であり:
【化６】
2013511974.tif 000006
(式中、
R1は、H、C1〜C6アルキル(好ましくはCH3)またはCH2O(CH2)2SiCH3であり、
R2は、H、C1〜C6アルキル(好ましくはCH3)またはCH2O(CH2)2SiCH3であり、あるいは
R1およびR2は一緒になって、非置換である、またはOR6もしくはR7によって置換されている-(CH2)n-、あるいは-(CH2CH2O)m(CH2)2-であり、
R3は、HまたはC1〜C6アルキル(好ましくはCH3)であり、
R4は、HまたはC1〜C6アルキル(好ましくはCH3)であり、
R5は、HまたはCH2アリールであり、ここで、アリールは非置換であるか、またはアルコキ
シ(好ましくはメトキシ)によって置換されており、
R6は、H、CH2CH=CH2、CH2CH2CH=CH2、CH2OCH2CH=CH2またはSitBuPh2であり、
R7は、H、CH2CH=CH2、CH2CH2CH=CH2、CH2OCH2CH=CH2またはSitBuPh2であり、
nは、6、7、8、9、10または11であり、
mは、3または4であり、
XおよびYは、独立して、CまたはNである)
場合により、GSK-3阻害剤が、以下の構造を有する化合物、またはその機能的誘導体、類似体もしくは同族体から選択される、組成物。
【化７】
2013511974.tif 000007
【請求項１５】
請求項11から14のいずれか一項に記載の組成物を含む培養培地。
【請求項１６】
肝疾患の治療のためまたは損傷肝臓の再構築のための、ヒト胚性幹細胞およびGSK-3阻
害剤を含む組成物。
【請求項１７】
肝疾患の治療のためまたは損傷肝臓の再構築のための、胚体内胚葉細胞およびGSK-3阻
害剤を含む組成物。
【請求項１８】
GSK-3阻害剤が、以下の構造を有する化合物、またはその機能的誘導体、類似体もしく
は同族体である、請求項16または17に記載の組成物:
【化８】
2013511974.tif 000008
(式中、
R1は、H、C1〜C6アルキル(好ましくはCH3)またはCH2O(CH2)2SiCH3;であり、
R2は、H、C1〜C6アルキル(好ましくはCH3)またはCH2O(CH2)2SiCH3であり、または
R1およびR2は一緒になって、非置換である、またはOR6もしくはR7によって置換されている-
(CH2)n-、あるいは-(CH2CH2O)m(CH2)2-であり、
R3は、HまたはC1〜C6アルキル(好ましくはCH3)であり、
R4は、HまたはC1〜C6アルキル(好ましくはCH3)であり、
R5は、HまたはCH2アリールであり、ここで、アリールは非置換であるか、またはアルコキ
シ(好ましくはメトキシ)によって置換されており、
R6は、H、CH2CH=CH2、CH2CH2CH=CH2、CH2OCH2CH=CH2またはSitBuPh2であり、
R7は、H、CH2CH=CH2、CH2CH2CH=CH2、CH2OCH2CH=CH2またはSitBuPh2であり、
nは、6、7、8、9、10または11であり、
mは、3または4であり、
XおよびYは、独立して、CまたはNである)。
【請求項１９】
GSK-3阻害剤が、以下の構造の1つを有する化合物、またはその機能的誘導体、類似体も
しくは同族体から選択される、請求項18に記載の組成物。
【化９】
2013511974.tif 000009
【化１０】
2013511974.tif 000010
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４４】
【化１】
2013511974.tif 000011