【手続補正書】
【提出日】平成25年6月11日(2013.6.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞を表面上で培養する、展開させる又は成長させる方法であって、前記表面及び前記細胞に結合するリガンドを介して前記細胞を前記表面上に付着させることを含み、当該リガンドが特異的に幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞で発現するＭＵＣ１若しくはＭＵＣ１＊ポリペプチドに結合する、幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞を表面上で培養する、展開させる又は成長させる方法。
【請求項２】
前記リガンドが直接的に又は媒介物を介して間接的に前記表面に結合する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記媒介物が化学リンカー又は別のタンパク質又はそれらの組み合わせである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記タンパク質がプロテインＡ又はプロテインＧである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記リンカーが感光性又は化学物質感応性である、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記リガンド又は前記媒介物が、前記表面に非特異的に吸着しているか、又はアフィニティータグ−結合パートナー相互作用によって前記表面に共有結合的に連結若しくは付着している、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
前記リガンドがポリマーに結び付いている、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記リガンドが抗体又は成長因子である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記抗体がＰＳＭＧＦＲ又はＣ−１０  ＰＳＭＧＦＲに特異的に結合する、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記成長因子が野生型ＮＭ２３若しくはＮＭ２３−Ｓ１２０Ｇ突然変異体、又はｂＦＧＦである、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞を培養する方法であって、前記細胞を、ＰＳＭＧＦＲの配列を有するペプチドに結合する作用物質を含有する培地に曝露する、幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞を培養する方法。
【請求項１２】
前記作用物質が抗体である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記作用物質が野生型ＮＭ２３、又はＮＭ２３−Ｓ１２０Ｇ突然変異体である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞を培養する方法であって、前記細胞を、ＭＵＣ１＊陽性がん細胞から分泌された作用物質を含有する培地に曝露することを含む、幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞を培養する方法。
【請求項１５】
前記ＭＵＣ１＊陽性細胞がＴ４７Ｄ、ＺＲ−７５−３０又はＺＲ−７５−１から選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞を培養する方法であって、前記細胞を、ＭＵＣ１＊陽性がん細胞に由来する馴化培地に曝露することを含む、幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞を培養する方法。
【請求項１７】
前記ＭＵＣ１＊陽性細胞がＴ４７Ｄ、ＺＲ−７５−３０又はＺＲ−７５−１から選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記表面がマトリゲルではない、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記細胞を線維芽細胞フィーダー細胞なしに培養する、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
前記細胞を手作業で解離させることなく前記表面から取り出す、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
請求項１に記載の方法によって成長させた細胞から細胞を採取する方法であって、前記細胞が前記リガンド又は前記表面との結合から放出されるように、前記リガンドに結合する競合分子を添加することを含む、請求項１に記載の方法によって成長させた細胞から細胞を採取する方法。
【請求項２２】
請求項１に記載の方法によって成長させた細胞から細胞を採取する方法であって、前記細胞が前記表面から放出されるように、前記細胞に直接的又は間接的に付着した前記表面に結合したリンカーを切断することを含む、請求項１に記載の方法によって成長させた細胞から細胞を採取する方法。
【請求項２３】
細胞の分化状態を特定する方法であって、前記細胞に結合する抗ＭＵＣ１＊抗体を使用することを含み、抗ＭＵＣ１＊抗体に対する正のシグナルが多能性（puripotent）細胞状態を示し、非短縮型ＭＵＣ１への結合を示す細胞が分化細胞状態を示す、細胞の分化状態を特定する方法。
【請求項２４】
細胞を幹細胞及び幹様細胞又は誘導多能性幹細胞、並びに新たに分化する細胞の混合集団から分離することを含み、前記細胞に結合する抗ＭＵＣ１＊抗体を使用することを含み、抗ＭＵＣ１＊抗体に対する正のシグナルが多能性細胞状態を示し、非短縮型ＭＵＣ１への結合を示す細胞が分化細胞状態を示す、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記細胞を、幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞のマーカーに対する抗体と接触させることを更に含み、幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞のマーカーに対する正のシグナルが、多能性幹細胞状態の存在を示す、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記細胞を抗ＭＵＣ１＊抗体及び抗Ｔｒａ  １−８１抗体、抗Ｔｒａ  １−６０抗体、ＳＳＥＡ３抗体又はＳＳＥＡ４抗体と接触させる、請求項２７に記載の方法。
【請求項２７】
がん幹細胞を前記細胞に結合する抗ＭＵＣ１＊抗体を用いて検出する方法であって、抗ＭＵＣ１＊抗体に対する正のシグナルが、がん幹細胞を示す、がん幹細胞を前記細胞に結合する抗ＭＵＣ１＊抗体を用いて検出する方法。
【請求項２８】
前記細胞を幹細胞マーカーに対する抗体と反応させることを含み、幹細胞マーカーに対する正のシグナルが、がん幹細胞の存在を示す、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
表面上での幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞の培養、展開又は成長を調節し、その分化を阻害する方法であって、前記細胞を前記表面に、直接的に又は前記細胞に結合するリガンドを介して間接的に付着させること、及び前記細胞をＰＳＭＧＦＲの配列を有するペプチドに結合する作用物質を含有する培地に曝露することを含む、表面上での幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞の培養、展開又は成長を調節し、その分化を阻害する方法。
【請求項３０】
前記作用物質がＭＵＣ１＊を二量化して、成長を促進し、分化を阻害する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記作用物質がＭＵＣ１＊の二量化を阻害して、分化を促進する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
細胞型を分離する方法であって、
異なる細胞型、又は細胞段階若しくは細胞型を特定する特異的マーカーに対して親和性を有する様々なリガンドについて表面上の空間アドレスを作成すること、及び
前記細胞を前記表面に添加すること
を含み、前記細胞が、前記細胞の結合するリガンドに応じて空間的に分離されている、細胞型を分離する方法。
【請求項３３】
前記表面が粒子である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記粒子がナノ粒子である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
宿主の体内に、幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞のリガンドが付着した表面を移植する方法。
【請求項３６】
前記宿主が患者である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記リガンドが、前記宿主の幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞の成長因子である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３８】
宿主の体内に、表面及び細胞に結合するリガンドを介して前記細胞が付着した前記表面を移植する方法。
【請求項３９】
幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞をｉｎ  ｖｉｖｏで増殖させる方法であって、宿主の体に、幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞のリガンドが付着した表面を投与することを含む、幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞をｉｎ  ｖｉｖｏで増殖させる方法。
【請求項４０】
組成物であって、
プロテインＡ又はプロテインＧが親和性相互作用によって結合した表面であって、前記プロテインＡ又は前記プロテインＧが、幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞上で特異的に発現されるポリペプチドに特異的な抗体に結合する、プロテインＡ又はプロテインＧが親和性相互作用によって結合した表面、及び
ＭＵＣ１＊二量化剤
を含む、組成物。
【請求項４１】
前記親和性相互作用が前記表面とのＮＴＡ−Ｎｉの相互作用によるものである、請求項４０に記載の組成物。
【請求項４２】
前記ポリペプチドが、ＭＵＣ１若しくはＭＵＣ１＊、ＳＳＥＡ３、ＳＳＥＡ４、Ｔｒａ  １−８１又はＴｒａ  １−６０である、請求項４０に記載の組成物。
【請求項４３】
前記ＭＵＣ１＊二量化剤が、野生型ＮＭ２３又はＮＭ２３−Ｓ１２０Ｇ突然変異体である、請求項４０に記載の組成物。
【請求項４４】
幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞を増殖させる方法であって、プロテインＡ又はプロテインＧが親和性相互作用によって結合した表面であって、前記プロテインＡ又は前記プロテインＧが、幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞上で特異的に発現されるポリペプチドに特異的な抗体に結合する、プロテインＡ又はプロテインＧが親和性相互作用によって結合した表面を、ＭＵＣ１＊二量化剤とともに前記細胞を含有するサンプルと相互作用させることを含む、幹細胞若しくは幹様細胞又は誘導多能性幹細胞を増殖させる方法。
【請求項４５】
前記培地が最小培地である、請求項１１に記載の方法。