(57)【要約】【課題】効果的且つ有害な副作用の無い色素脱失組成物の使用。【解決手段】色素脱失化粧品組成物におけるＡｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物の使用。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
色素脱失化粧品組成物におけるＡｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物の使用。
【請求項２】
色素脱失剤としての、化粧品組成物中のＡｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物の使用。
【請求項３】
Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの該抽出物が全植物体由来である、請求項１又は２に記載の使用。
【請求項４】
Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの該抽出物が水性グリコール抽出物である、前記請求項のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５】
該組成物が、０．５〜１０％の範囲の濃度を有する溶液の形態におけるＡｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物を固体に対して０．０１〜１０重量％、好ましくは０．０１〜５重量％のオーダーで含有する、前記請求項のいずれか１項に記載の使用。
【請求項６】
該組成物が、パセリの抽出物も含有する、前記請求項のいずれか１項に記載の使用。
【請求項７】
該組成物がカモミールの抽出物も含有する、前記請求項のいずれか１項に記載の使用。
【請求項８】
Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物を含有する化粧品組成物の皮膚への適用を含む、皮膚を色素脱失するための化粧処置方法。
【請求項９】
皮膚色素沈着過度の防止又は処置における使用のための皮膚用組成物の調製のためのＡｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、例えば、エイジスポット（age spot）を除去又は軽減するための皮膚の色素脱失を促進するための化粧品組成物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚の色素沈着は、特殊化された細胞、メラノサイトの存在に関連する。後者は、表皮の基底領域の細胞の約５％を示す。それらは、それらが幾つかのケラチノサイトと接触することを可能にする樹状エクステンション（dendritic extensions）を有する。メラノサイトは、メラニン合成又はメラニン形成という１つの主な機能を有する。
【０００３】
メラニン形成は、太陽スペクトルのＵＶＡ照射及びＵＶＢ照射によって主に刺激される。メラニン色素の合成、デンドリシティ（dendricity）及びメラノサイトの数の増加がその結果生じる。表皮の基底領域に透過するＵＶ照射は、直接的に、又はケラチノサイトによるメラニン形成因子（エンドセリン−１、一酸化窒素等）の産生を刺激することによって間接的にメラノサイトに作用し得る。
【０００４】
メラニンは、特殊化された小胞（メラノソームと呼ばれる）において合成され貯蔵される。メラノソームは、細胞の中心から樹状突起の端に運ばれ、そこでそれらはケラチノサイトに移動され得る。メラノサイトによるメラノソーム放出とケラチノサイトによる食作用がＵＶ照射によって誘発され、多くの因子によって調節される。
【０００５】
メラニン形成は、一般的に、皮膚及び毛髪において連続的且つ調和的に起こる。しかし、一定の条件下又は一定の因子の影響下、色素沈着障害が起こり得、そして色素沈着過度を引き起こし得る。幾つかの機構がこの原因であり得、主な二つは、上昇したメラノサイトの活性又はメラノサイトの増殖である。メラノサイトの活性過度（hyperactivity）は、一般的にそばかすと呼ばれる雀卵斑、及びしみ（プレグナンシーマスク（pregnancy mask）とも呼ばれる）の原因である。メラノサイトの増殖は、エイジスポットとも呼ばれる老年性黒子の原因である。手の甲、前腕及び顔に、年齢と共にブラウンスポットが現れ、一般的に露出した領域に影響する。組織学的に、老年性黒子は、メラノソームの数の増加を伴う表皮の基底領域の色素沈着過度を示す。
【０００６】
これらの年齢に関連した斑（spot）は、特に許容に乏しく、多くの人は、それらを消失しようとする。美容術は、多くの色素脱失化粧品を提案し、それらは一般的にチロシナーゼ（メラニン合成における必須の酵素）に働く。従って、フランス国特許２７８７７１０において、本出願人は、活性因子がチロシナーゼを抑制するライトニング（lightening）化粧品組成物を提案した。色素脱失特性を有する特定の分子も存在するが、これらの分子が美容術において使用されるためには、副作用は毒性が強すぎる。
【０００７】
色素脱失プロダクトは、第一に年配の人、そして皮膚の白さが重要である全てのアジア人女性によって非常に高く評価されるため、効果的且つ有害な副作用の無い色素脱失組成物の使用が必要である。
【０００８】
メラノサイトからケラチノサイトへのメラノソームの移動に関与する新たな受容体がまさに実証された：それは、ケラチノサイト増殖因子受容体である（以下、ＫＧＦＲと呼ばれる）。ケラチノサイト増殖因子（以下、ＫＧＦと呼ばれる）によって活性化されるこの受容体は、メラノサイト樹状突起の端におけるメラノソームの食作用に関与する（J Invest Dermatol 125: 1190-1199, 2005）。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本出願人は、Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物を用いてＫＧＦＲの不活性化を実証した。食作用によるメラノサイトからケラチノサイトへのメラノソームの移動は、Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの作用によって低下するため、ケラチノサイトは、メラニンがより豊富ではなく、皮膚は色素脱失され、エイジスポットは除去され、肌色はライトニングされ、より均一になる。Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物は、予防的にも使用され得る。これは、それが肝斑などの病理学的起源の、又はそばかす又は老年性黒子等の自然起源の色素沈着スポットの出現を防ぐことが可能であるためである。
【００１０】
従って、本発明は、化粧品又は皮膚科学的色素脱失組成物におけるＡｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物の使用に関する。
【００１１】
本発明は、色素脱失剤としての、化粧品又は皮膚科学的組成物におけるＡｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物の使用にも関する。
【００１２】
Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓはクレンジング剤として、さらにその収斂性及び肥満抑制特性のために美容術において既に使用される。Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの使用は、米国特許４，０５４，６４９において、白っぽい瘢痕障害（whitish cicatiricial lesions）を再色素形成することについても記載されている。驚くべきことに、本出願人は、Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの特定の抽出物が皮膚の色素脱失を促進する及び／又は色素沈着の出現を防ぐ性質を有する事実を実証した。
【００１３】
Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓは、多年生耐寒植物であり、高さ２０〜４０ｃｍで、丸みのある歯型で縁取られた丸い非常に淡いグリーンの葉を有する。夏に開花し、微小でグリーン且つそれ程明るくないその花は、花弁がない。
【００１４】
ハゴロモグサ（Ｌａｄｙ’ｓ  ｍａｎｔｌｅ）は、葉の端におけるピンクがかった色及び後者（latter）の中心に集まる露滴を賢者の石を調製するための“天国の水（heavenly water）”として集めた錬金術師によって、その使用からその名前が付けられた。
【００１５】
有利なことに、本発明のコンテクストにおいて使用され得る抽出物は、全植物体に由来し、それは、例えば、水、アルコール、グリコール、グリセロール、若しくはアセトンなどの溶媒又はこれら溶媒の混合物による抽出によって得られる。好ましくは、それは水性グリコール抽出物である。水とブチレングリコールの混合液中の全植物体の浸漬の後、抽出物は濾過される。特徴的な臭いを有し、以下の分析的特徴を有するオレンジがかったブラウンの液体が得られる：
−ｐＨ：３．５〜５．５
−密度：１．０２５〜１．０５０
屈折率：１．３８５〜１．４１５
固形分：２．０〜６．０％
本発明に従って使用され得るＡｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物は、例えば、Ｓｅｄｅｒｍａ社から得られ得、前記抽出物は、“Ａｌｃｈｅｍｉｌｌｅ  ＢＧ”という商品名で販売される。
【００１６】
本発明に従って、Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物は、１つ以上の他の色素脱失活性剤と共に使用され得る。より具体的に、本発明に従ったＡｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物は、フランス特許２７８７７１０に記載される、パセリの抽出物及び／又はカモミールの抽出物と化粧品又は皮膚科学的組成物において組み合わせられ得る。
【００１７】
本発明に従った組成物は、０．５〜１０％の範囲の濃度を有する溶液の形態において固体に対してＡｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物を０．０１〜１０重量％、好ましくは０．０１〜５重量％のオーダーで含有する。
【００１８】
局所適用のための本願発明の化粧品組成物は、例えば、デイクリーム（day creams）、ナイトクリーム（night creams）又はボディーミルク（body milks）などの、顔、首、手、又は身体のための化粧品又は皮膚科学的な保護、処置、又はケア組成物を特に構成し得る。
【００１９】
本発明に従った化粧品組成物は、化粧品組成物において従来使用されることが知られる配合剤又は添加剤などの、当業者に公知の１つ以上の他の成分を含み得る。例として、非限定的様式において、このような配合剤及び添加剤は、親水性又は親油性のゲル化剤、軟化剤、染料、可溶化剤、テクスチャリング剤（texturing agent）、フレグランス、充填剤、膜形成活性剤、保存剤、界面活性剤、乳化剤、オイル、グリコール、ビタミン、日焼け止め剤などであり得る。化粧品に関するそれらの知識のおかげで、当業者は、所望の性質に従ってどれだけの量において、本発明に従った化粧品組成物にどの配合剤を添加するのかを知る。
【００２０】
有利なことに、本発明に従った組成物は、合成又は自然起源の１つ以上の抗−ＵＶＡ又は抗ＵＶＢの日焼け止め剤を含み得る。有利には、本発明に従った組成物は、１つ以上の抗老化活性剤、特に保湿活性剤、抗しわ活性剤（antiwrinkle active agent）及びテンショニング剤（tensioning agent）も含み得る。
【００２１】
さらに、本発明に従った化粧品組成物は、皮膚への適用のためということ以外の他の特別な薬学的制限なく、化粧品分野における当業者に公知の任意の形態であり得る。従って、本発明の化粧品組成物は、水性又はアルコール溶液又は懸濁液、油性懸濁液、ローション又は漿液タイプの溶液又は分散物、水相における油相の分散（水中油型エマルション：Ｏ／Ｗ）又は逆に（油中水型：Ｗ／Ｏ）によって得られる、乳液タイプの液体又は半液体コンシステンシーを有するエマルション、Ｏ／Ｗ又はＷ／Ｏクリームタイプのエマルション、ゲル、ローション、又はマスクの形態であり得る。本発明に従った化粧用配合物は、ムースの形態又は加圧された噴霧剤を含むエアゾール組成物の形態も想定され得る。
【００２２】
本発明は、Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物を含有する化粧品組成物の皮膚への適用を含む、皮膚を色素脱失する及び／又は色素沈着の出現を防ぐための化粧処置方法にも関する。
【００２３】
本発明は、皮膚の色素沈着過度を防ぐ又は処置することにおける使用のための皮膚科学的組成物の調製のためのＡｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物の使用にも関する。
【００２４】
例えば、アジア人などの有色の皮膚を有する個人において、本発明に従ったＡｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物の使用は、処理された全領域に亘って均一なより淡い肌色を獲得し、維持することを可能にする。病理学的又は自然起源のスポットの形態の皮膚の色素沈着過度を有する個人において、Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物の使用は、色素沈着過度の領域のライトニングによって肌色の均質性を元に戻すことを可能にする。
【００２５】
以下の実施例は、第一に、Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物を用いたメラノサイトとからケラチノサイトへのメラノソームの移動の抑制の評価及び、第二に、本発明の主題である組成物に関する。
【実施例】
【００２６】
実施例は、以下の図を参照する。
Ｉ：メラノソーム移動に対するＡｌｃｈａｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物による抑制の評価
Ａ．原理
ＫＧＦＲは、表皮の増殖及び分化に関与する増殖因子であるＫＧＦのためのケラチノサイト受容体を構成する。この受容体は、ＫＧＦが結合する場合に吸収される。ＫＧＦＲは、メラノサイトからケラチノサイトへのメラノソーム移動において役割を担うことが示された。実際、ＫＧＦの影響の下で、前記メラノソームは、より容易に細胞に入る。メラノソームは、インターナライゼーション小胞中でＫＧＦＲと共存する。この技術は、ＫＧＦを用いた活性化を介した移動の特別な経路における特定分子の影響を実証することを可能にする。それは、単層におけるヒトのケラチノサイトの細胞ベースの研究モデルにおいて、メラノソームを模倣するフルオスフィア（fluospheres）の使用を必要とする（J. Invest. Dermatol 125: 1190-1199, 2005）。
Ｂ．材料及び方法
１．播種
ヒトケラチノサイトは、５％ＣＯ２を有する水分飽和雰囲気において、２ｍＭのＬ−グルタミン及び１０％のウシ胎児血清（ＦＣＳ）を含有するＤＭＥＭ培地（ダルベッコの改良基礎培地）中に、４０×１０３細胞／３ｍｌ／ウェルの割合で、６−ウェルプレートのウェル中のガラスカバースリップ上に培養される。培養物は、７２時間インキュベートされる。
【００２７】
２．処理
細胞は、洗浄され、以下のように４８時間インキュベートされた：
−培地のみ（コントロール）
−Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物０．０５％*
−Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物０．１％*
−Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物０．２％*
*培地において、最終容量３ｍｌ、濃度はホルマザンブルー還元試験（Formazan blue reduction test）において細胞にとって細胞障害性でないことが見出された。
【００２８】
３．処理及び細胞によるフルオスフィアの取り込み
ビーズ及びこの工程のための処理のための培地は、上記で使用したものと異なる：ＤＭＥＭ、１０％不活性化ＦＣＳ、０．５％ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）。
【００２９】
ａ）蛍光ビーズの調製
ビーズは、上記の培養培地中で調製される。ウシ血清アルブミンの使用は、溶液中のビーズの均一な分散を容易にすることを可能にする。不活性化ウシ胎児血清は、実験によって提供されるＫＧＦと相互作用し得るより少ない栄養分及び増殖因子を供給する。
【００３０】
４×１０９粒子／ｍｌの濃度が実験のために使用される。ビーズを含有するフラスコは、冷蔵庫から離されるとボルテックスにかけられ、次いで２０分の間、超音波浴に配置される。ビーズは、再度激しくボルテックスにかけられ、作業溶液を調製するために必要な量が除かれ（フード下で）、培地中に懸濁される。作業溶液は、後にボルテックスにかけられ、次いで１０分間超音波浴中に浸される。
【００３１】
これらの工程は、可能な限り均一であるビーズの溶液を得るために必要である。
【００３２】
ｂ）処理剤の調製
ビーズの作業溶液は、適用される処理剤の種々の濃度に対応する幾つかの１５ｍｌチューブ中に分配される。ＫＧＦ（１０ｍｇ／ｍｌ）は、２０ｎｇ／ｍｌの最終濃度を得るために、各チューブに添加される。各溶液は、ピペット内外の吸引によって混合される。
【００３３】
ｃ）食作用
ＫＧＦ、蛍光ビーズ及びＡｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物を種々の濃度（０．０５；０．１；０．２％）で含有する各溶液の３ｍｌ容量が各ウェル中に置かれる。ＫＧＦのみを含有するポジティブコントロールウェルが供給される。
【００３４】
プレートは、溶液を均一に分配するために、手動のローテーションによって撹拌される。細胞は、３７℃−５％ＣＯ２のインキュベーター中で２時間（ＫＧＦの影響下でＫＧＦＲが取り込まれるために必要な時間である）インキュベートされる。
【００３５】
ｄ）食作用の阻止
インキュベーション期間が経過したとき、細胞によるビーズの取り込みは、細胞外状態（extracellular state）に残されたビーズを除去することによって停止されなければならない。このために：
−各ウェルの全含有量が吸引システムを用いて除去される；
−１ｍｌの不活性化されたＦＣＳが各ウェルに配置され、それは撹拌され、３７℃−５％ＣＯ２のインキュベーター中で２０分間配置される；
−ＦＣＳは、除去され、約１分の４回の激しい洗浄が２〜３ｍｌの冷完全ＤＭＥＭ（cold complete DMEM）で実施され、プレートは各洗浄において、撹拌される。
−次いで、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を用いた２回の洗浄が、最終洗浄時に全体的にプレートを撹拌すること及び／又は全体的にＰＢＳを吸引することによって実施される。
【００３６】
３．移動の視覚化
視覚化は、同日に実施される。細胞外ビーズの除去の後、細胞は、フルオロスフィアを視覚化するためにカバースリップ上に固定され（メタノール、−２０℃）、そして免疫細胞化学技術によってサイトケラチンを標識化することによって、ケラチノサイトも同様に可視化する。
【００３７】
標識化のために、使用された一次抗体は、ウサギの抗ヒトサイトケラチンＩｇＧであり；二次抗体は、ＦＩＴＣ−結合ヤギ抗ウサギＩｇＧである。画像分析ソフトウエアに連結された蛍光顕微鏡は、我々にラベリングを可視化すること及び写真をとることを可能にする。
【００３８】
ＩＩ．実施例
ライトニングクリーム
％
キサンタンガム・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０．１０
グリセロール・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・５．００
セテアリルグリコシド・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・３．００
ＡＥ  グリセロールモノステアレート・・・・・・・・・・・・・・・・・２．００
Ｃ８Ｃ１０  トリグリセリド・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１０．００
シリコーンオイル・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・３．００
パセリ抽出物・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１．００
カモミール抽出物・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１．００
Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓ抽出物・・・・・・・・・・・・２．００
保存剤・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１．００
フレグランス・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０．３０
脱イオン水・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・Ｑ．Ｓ．１００
【００３９】
ライトニングゲル
グリセロール・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・３．００
キサンタンガム・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０．２０
エタノール・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・５．００
パセリ抽出物・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１．００
カモミール抽出物・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１．００
Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓ抽出物・・・・・・・・・・・・２．００
保存剤・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０．５０
可溶化剤・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０．５０
フレグランス・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０．２０
脱イオン水・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・Ｑ．Ｓ．１００
【００４０】
ライトニングローション
グリコール・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・２．００
塩化ナトリウム・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１．００
エタノール・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・５．００
パセリ抽出物・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１．００
カモミール抽出物・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１．００
Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓ抽出物・・・・・・・・・・・・２．００
保存剤・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０．５０
可溶化剤・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０．３０
フレグランス・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０．１０
脱イオン水・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・Ｑ．Ｓ．１００
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１】図１は、未処理のコントロールを示す。
【図２】図２は、ＫＧＦで処理されたコントロール中への蛍光ビーズの取り込みを示す。
【図３】図３は、ＫＧＦ及びＡｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓの抽出物で処理された細胞中への蛍光ビーズの取り込みを示す。
【図１】
2008024691.tif 000003
【図２】
2008024691.tif 000004
【図３】
2008024691.tif 000005
【外国語明細書】
2008024691000001.pdf
2008024691000002.pdf
2008024691000003.pdf
2008024691000004.pdf