(57)【要約】【課題】本発明の課題は、有効性の高いツバキ科チャ属チャノキ植物（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．＝Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）の花の抽出物に関して有効に活用する方法を見つけることにある。また一方で、頭髪の薄毛や抜け毛、頭皮のフケやかゆみ、アクネ炎症といった上の悩みを予防・改善する有効な皮膚外用剤の開発が望まれている。【解決手段】ツバキ科チャ属チャノキ植物（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．＝Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）の花の抽出物がこれまで確認されていなかった機能、すなわち５α−レダクターゼ活性阻害作用、リパーゼ阻害作用、タンパク質凝集作用を有することが分かり、頭髪の薄毛や抜け毛、頭皮のフケやかゆみ、アクネ炎症といった上の悩みに対して有効であることが分かった。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ツバキ科チャ属チャノキ植物（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．＝Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）の花の抽出物を配合することを特徴とする５α−レダクターゼ活性阻害剤。
【請求項２】
ツバキ科チャ属チャノキ植物（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．＝Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）の花の抽出物を配合することを特徴とするリパーゼ活性阻害剤。
【請求項３】
ツバキ科チャ属チャノキ植物（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．＝Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）の花の抽出物を配合することを特徴とするタンパク質凝集作用剤。
【請求項４】
ツバキ科チャ属チャノキ植物（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．＝Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）の花より抽出される５α−レダクターゼ活性阻害剤並びにリパーゼ活性阻害剤並びにタンパク質凝集作用剤を含有する皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】本発明品は、ツバキ科チャ属チャノキ植物（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．＝Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）の花の抽出物が、５α−レダクターゼ活性並びにリーパゼ活性を優位に阻害し、並びにタンパク質凝集作用を有することで、頭髪の抜け毛や薄毛、頭皮のふけやかゆみと言った悩み、アクネ炎症を予防・改善する皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】チャノキは中国原産で、ツバキ科チャ属植物で、学名をＴｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．＝Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅといい、九州で野生化している常緑小低木である。製茶用として各地で栽培されている。飲用の用途に葉を釜炒りして発酵させた中国緑茶は、古くは薬として考えられてきたが、蒸して発酵を止める製法によってできる日本の緑茶にも様々な効果があると人々に親しまれてきた。近年茶に含まれるカテキンが注目されたことで、再び茶への関心が広がってきており、例えば特定保健用食品の認可を受けた茶関連商品も多く見られるようになってきた。また、飲食用に留まらず、その用途は医薬品や化粧品にも広がっている（特許文献１−３）。【０００３】しかし、これらはチャノキの葉を利用したものであり、チャノキの花の抽出物を応用した例はこれまで確認されていない。学術面での研究についても公表数は数少なく、チャノキの花の抽出物の成分分析、生理作用については近年始まったばかりである（非特許文献１−４）。
【特許文献１】特開２００１−１２２７６５号
【特許文献２】特開平６−２４９３７号
【特許文献３】特開平１１−２４６３８８号
【非特許文献１】Ｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｕｌｌ（Ｔｏｋｙｏ）．２００７  Ａｐｒ；５５（４）：５９８−６０５
【非特許文献２】Ａｓｉａ  Ｐａｃ  Ｊ．Ｃｌｉｎ  Ｎｕｔｒ．２００７；１６Ｓｕｐｐｌ：１４８−５２．
【非特許文献３】Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．２００５；６８（９）：１３６０−１３６５
【非特許文献４】Ｊ．Ａｇｒｉｃ  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．２００３  Ｆｅｂ  １２；５１（４）：９７５−８０
【０００４】男性ホルモンの代表的なものとしてテストステロンが知られ、男性では精巣で女性では副腎で合成され血中に分泌される。テストステロンが作用する標的臓器として例えば頭皮や前立腺、皮脂腺があり、それら標的臓器の細胞内で５α−レダクターゼの還元作用を受け５α−ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）に変換後アンドロゲンの受容体と結合して、遺伝子の活性化を示す。加齢や生活ストレスによってＤＨＴのバランスが崩れると、頭皮においては抜け毛や薄毛を引き起こし、また他の皮膚表面においては皮脂分泌過剰によるアクネ炎症を引き起こす。よって５α−レダクターゼ活性を阻害することは抜け毛や薄毛、アクネ炎症の予防、改善には有効である。【０００５】皮膚常在菌には、好脂質性真菌（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ  ｆｕｒｆｕｒ）、表皮ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）、アクネ（ニキビ）菌（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ）などが知られており、これらはリパーゼ産生能を有している。こうした菌が産生するリパーゼによって皮脂中のトリグリセライドが分解され遊離脂肪酸が産生される。この遊離脂肪酸はアクネ炎症因子や毛嚢を刺激しフケの増悪因子となることが知られている。よってリパーゼの活性を阻害することは、フケの予防改善や５α−レダクターゼ活性阻害効果と相乗してアクネ炎症の予防、改善に有効である。【０００６】頭皮や皮膚における過剰な皮脂の分泌が、抜け毛や薄毛、アクネ菌の増殖を引き起こすことが知られており、皮脂の分泌をコントロールすることでこうした悩みが予防、改善される。皮脂腺や汗腺の開口部のタンパク質に結合し、凝固、収縮させる効果のある剤は収斂剤と知られ、化粧品への配合も数多く見られる。収斂剤の塗布によって抜け毛や薄毛、アクネ炎症の予防、改善が期待できる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】本発明の目的は、リパーゼ阻害剤並びにタンパク質凝集剤としての効果については知れらていないツバキ科チャ属チャノキ植物（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．＝Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）の花の抽出物がこれら作用を有することを見出し、またチャノキの葉と同様にチャノキの花の抽出物が５α−レダクターゼ阻害作用を有することを見出し、頭皮の抜け毛や薄毛、ふけかゆみ、皮膚のアクネ炎症といった悩みの予防・改善を成すため、さらにはこれを有効に活用するために種々検討した。
【課題を解決するための手段】
【０００８】前記目的を達成するため、本発明者らは鋭意検討した結果、ツバキ科チャ属チャノキ植物（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．＝Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）の花の抽出物に５α−レダクターゼ活性阻害剤並びにリパーゼ阻害剤並びにタンパク質凝集剤としての効果があることを見出し、これにより頭皮の抜け毛や薄毛、フケやかゆみ、皮膚でのアクネ炎症を予防・改善することが分かった。【０００９】なお本明細書における「抽出物」とは、抽出処理によって得られる抽出液、抽出液の希釈液もしくは濃縮液、抽出液を乾燥して得られる乾燥物、またはこれらの粗精製物もしくは濃縮液のいずれをも含むものとする。【００１０】本発明のツバキ科チャ属チャノキ植物（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．＝Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）の花の抽出物の各作用剤の調製法としては、特に限定されるものではなく、前記した天然植物から所望の方法により抽出物（または濃縮抽出エキス）を製造すれば良い。例えば抽出エキスは、生薬の粉末１Ｋｇに対して３〜５Ｌの溶媒（水あるいはメタノールやエタノールなどのアルコールやこれらの混合など）を加え、加温または冷温下で抽出して製造すればよい。なお加温の場合は加温の場合は８０〜９０℃で数時間、冷温の場合は室温で３日間浸漬後いずれもろ過すれば良く、さらにろ液を例えば４５℃以下で減圧濃縮し、溶媒を留去して乾燥エキスとすれば良い。【００１１】上記したツバキ科チャ属チャノキ植物（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．＝Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）の花の抽出物は、皮膚に適応した場合の使用感と安全性に優れているため、皮膚外用剤に配合するのに好適である。本発明の皮膚外用剤は、上記ツバキ科チャ属チャノキ植物（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．＝Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）の花の抽出物を含有し、各作用を有する。もちろん、製剤化した本発明の各作用剤を含有するものも本発明の皮膚外用剤の範囲に含まれる。【００１２】皮膚外用剤の種類としては、例えば軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック等が挙げられ、その皮膚外用剤におけるツバキ科チャ属チャノキ植物（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．＝Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）の花の抽出物の好適な配合率は、約０．０００１％〜２０重量％である。【００１３】本発明の皮膚外用剤は、常法に従い、通常の皮膚外用剤として知られる種々の形態の基剤に配合して調製することができ、外用剤の形態としては特に限定されず、例えば、乳液、クリーム、水溶液、パック等の任意の剤形を選択することができる。【００１４】本発明の皮膚外用剤において、ツバキ科チャ属チャノキ植物（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．＝Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）の花の抽出物とともに構成成分として利用可能なものは例えば、保湿剤・紫外線吸収剤・複合脂質・活性酸素消去作用を有する物質・抗炎症剤・ビタミンおよびその誘導体・油性成分・界面活性剤・防腐剤・酸化防止剤・コレステロール類・植物ステロール類・リポプロテイン類・微生物���来成分・藻類抽出物・血行促進剤・抗脂漏剤・増粘剤・着色料などが挙げられ、本発明の効果を損なわない範囲で適宜選択して用いることが出来る。
【実施例】
【００１５】次に実施例および比較例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれになんら制約されるものではない。また使用した薬剤のエキスについての抽出方法においても何ら限定されるものではない。【００１６】（試験例１）５α−レダクターゼ活性阻害試験
テストステロン溶液にＮＡＤＰＨ含有５ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．２）を加えて混合し、さらに各濃度に希釈したサンプル及びＳ−９（オリエンタル酵母社製）を混合し、３７℃でインキュベートした。その後、塩化メチレンを加えて反応を停止させ、塩化メチレン層を分取して、テストステロンの残存量をＨＰＬＣにより定量した。別に対照として、上記のサンプルの代わりにその溶媒だけを同量添加した場合について同様に処理し分析した。また、陽性サンプルとして、エチニルエストランジオールを用いた。サンプル無添加時の反応率を１００％としたときの各サンプル添加時の反応阻害率を算出し、そこから５０％反応阻害濃度を求めた。【００１７】
【表１】
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（注１）チャノキの花の抽出物はチャノキの花１０ｇに精製水１５０ｍＬとエタノール１５０ｍＬの混合液を加えて５０℃５時間熱した後、ろ過し、溶媒留去したエキスを用いた。
（注２）チャノキの葉の抽出物はチャノキの葉１０ｇに精製水１５０ｍＬとエタノール１５０ｍＬの混合液を加えて５０℃５時間熱した後、ろ過し、溶媒留去したエキスを用いた。【００１８】（試験例２）リパーゼ活性阻害試験
４−メチルウンベリフェリルオレート溶液にサンプルと０．１Ｍ  Ｍｕｌｌｖａｉｎｅ  Ｂｕｆｆｅｒ、ヒト皮膚常在微生物由来リパーゼを混和させ、３７℃で反応した後、０．１ＮＨＣＬで停止させ、０．２Ｍ  クエン酸ナトリウム溶液を加え、生成した４−メチルウンベリフェロンの蛍光を励起波長３２０ｎｍ、蛍光波長４５０ｎｍで定量した。サンプル無添加時の反応率を１００％としたときの各サンプル添加時の反応阻害率を算出し、そこから５０％反応阻害濃度を求めた。【００１９】
【表２】
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（注３）チャノキの花の抽出物はチャノキの花１０ｇに精製水１５０ｍＬとエタノール１５０ｍＬの混合液を加えて５０℃５時間熱した後、ろ過し、溶媒留去したエキスを用いた。
（注４）チャノキの葉の抽出物はチャノキの葉１０ｇに精製水１５０ｍＬとエタノール１５０ｍＬの混合液を加えて５０℃５時間熱した後、ろ過し、溶媒留去したエキスを用いた。【００２０】（試験例３）タンパク質凝集作用試験
０．３％アルブミン溶液（ｐＨ４．５：クエン酸緩衝液）２．０ｍＬにエキスサンプル１．０ｍＬを加えて混和し、正確に５分後の濁度（６５０ｎｍ）を測定した。各サンプルの濁度（アルブミンを抜かした濁度）を分光光度計にて測定し、ブランクとした。タンニン酸を用いて検量線を作成し、相当タンニン酸濃度で以下の表に示した。相当タンニン酸濃度が高いほど、収斂効果が期待できる。【００２１】
【表３】
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（注５）チャノキの花の抽出物はチャノキの花１０ｇに精製水１５０ｍＬとエタノール１５０ｍＬの混合液を加えて５０℃５時間熱した後、ろ過し、溶媒留去したエキスを用いた。【００２２】（試験例４）養毛料の効果
実施例および比較例の処方を表４に示す。作成方法は常法により行った。なお表４の配合量は重量部で示す。
【表４】
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（注６）チャノキの花の抽出物はチャノキの花１０ｇに精製水１５０ｍＬとエタノール１５０ｍＬの混合液を加えて５０℃５時間熱した後、ろ過し、溶媒留去したエキスを用いた。
（注７）チャノキの葉の抽出物はチャノキの葉１０ｇに精製水１５０ｍＬとエタノール１５０ｍＬの混合液を加えて５０℃５時間熱した後、ろ過し、溶媒留去したエキスを用いた。【００２３】表４記載の実施例１〜２、比較例１の養毛効果試験を実施した。試験方法は３５〜６５歳の男性３０名をパネルとし、毎日朝と夜の２回、２４週間に渡って被験外用剤の適量を頭皮に塗布した。頭皮による養毛効果の結果を表５に示す。【００２４】
【表５】
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【００２５】（試験例５）皮膚外用剤の効果
実施例および比較例の処方を表６に示す。作成方法は常法により行った。なお表６は美容液の処方で、配合量は重量部で示す。
【表６】
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（注８）チャノキの花の抽出物はチャノキの花１０ｇに精製水１５０ｍＬとエタノール１５０ｍＬの混合液を加えて５０℃５時間熱した後、ろ過し、溶媒留去したエキスを用いた。
（注９）チャノキの葉の抽出物はチャノキの葉１０ｇに精製水１５０ｍＬとエタノール１５０ｍＬの混合液を加えて５０℃５時間熱した後、ろ過し、溶媒留去したエキスを用いた。【００２６】表６記載の実施例３〜４、比較例２のアクネ炎症・過剰皮脂分泌改善効果試験を実施した。試験方法は２５〜６０歳の女性３０名をパネルとし、毎日朝と夜の２回、１２週間に渡って洗顔後に被験外用剤の適量を顔面に塗布した。塗布によるアクネ炎症・過剰皮脂分泌改善効果の結果を表７に示す。【００２７】
【表７】
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【００２８】ツバキ科チャ属チャノキ植物（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．＝Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）の花の抽出物に５α−レダクターゼ活性阻害剤並びにリパーゼ阻害剤並びにタンパク質凝集剤としての効果があることを見出し、これにより頭皮の抜け毛や薄毛、フケやかゆみ、皮膚でのアクネ炎症を予防・改善することが分かった。