(57)【要約】【課題】  本発明は、２種以上の液体を混合させるような反応にあたり、反応系を密閉系にすることで最大限にコンタミネーション及び反応物の操作者への飛散を防止可能とし、さらに、単一容器内において容器への試料添加、溶液との混合、反応物の容器からの排出を行うことで、操作の煩雑性を少なくし、ヒューマンエラー（人為的誤操作）を防ぎ、一連の混合操作を効率良く短時間に操作可能な液体混合容器を提供することにある。【解決手段】  注入液注入口を備える液体混合容器において、少なくとも該液体混合容器は第１液封入部、ならびに、網目構造隔壁、レバーが設けられた隔壁および第２液内包物を備える第２液封入部を有することを特徴とする液体混合容器を提供する。また、前記注入液注入口から液体混合容器内に延設された注入液流路が、第１液封入部中の第１液液面に達していることを特徴とする液体混合容器を提供する。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
注入液注入口を備える液体混合容器において、少なくとも該液体混合容器は第１液封入部、ならびに、網目構造隔壁、レバーが設けられた隔壁および第２液内包物を備える第２液封入部を有することを特徴とする液体混合容器。
【請求項２】
前記注入液注入口から液体混合容器内に延設された注入液流路が、第１液封入部中の第１液液面に達していることを特徴とする請求項１に記載の液体混合容器。
【請求項３】
請求項１および２のいずれかに記載の液体混合容器を用いた液体混合方法において、注入液注入部から第３液を注入する工程、該第３液と第１液封入部中の第１液とを混合する工程、レバーを備える隔壁および網目構造隔壁により第２封入部および第２液内包物を圧縮し、該第２内包物を破壊する工程、破壊した該第２液内包物中の第２液を該網目構造隔壁を通じて該第１液封入部に滴下する工程、第１液と滴下した第２液とを混合する工程を有することを特徴とする液体混合方法。
【請求項４】
前記第１液と滴下した第２液とを混合する工程によって得られた反応生成物を、注入液注入部より取り出すことを特徴とする請求項３に記載の液体混合方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、容器内の液体と外部から添加する液体を混合させる容器に関するものであり、容器内の液体がほとんど外気に触れることがないように混合させる機能を有した混合容器に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
生物を取り扱う実験において、例えば核酸抽出操作のように液体を混合させる反応系では、外気やヒトから反応系への汚染、生物脅威物質（例えばウイルス感染した患者の血液や体液等）のヒトへの飛散の恐れがある。こういった外界との接触をできる限り避けるべき試料を他の液体と混合させる際、試料を反応終了まで外界と隔離することは困難であった。
【０００３】
さらに試料を試薬と反応させるにあたり、ピペッティング等、煩雑な操作を有することが多いが、その際、操作者の誤操作による人為的なミスも起こりうる。こういった誤操作を未然に防ぐためには、簡便な混合方法が必要である。反応を終了させるまで、単一容器内において、操作手順を最小限にできれば実験の効率化にもつながりうる。
【０００４】
生体試料を扱う実験では、プラスチック製の反応容器が用いられている（特許文献１参照）。この容器はフタ付きであるが、試料や試薬の注入時や反応終了後に反応物を取り出すときには開放系になってしまい、上記に挙げたような汚染の危険性がある。さらに、試料を２液以上と混合する際には試薬の注入、フタの開け閉め等、操作が煩雑になり、ヒューマンエラーに繋がりかねない。
【特許文献１】特公平４−３１９４５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は以上のような点を鑑み、２種以上の液体を混合させるような反応にあたり、反応系を密閉系にすることで最大限にコンタミネーション及び反応物の操作者への飛散を防止可能とし、さらに、単一容器内において容器への試料添加、溶液との混合、反応物の容器からの排出を行うことで、操作の煩雑性を少なくし、ヒューマンエラー（人為的誤操作）を防ぎ、一連の混合操作を効率良く短時間に操作可能な液体混合容器を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
請求項１に記載の発明は、注入液注入口を備える液体混合容器において、少なくとも該液体混合容器は第１液封入部、ならびに、網目構造隔壁、レバーが設けられた隔壁および第２液内包物を備える第２液封入部を有することを特徴とする液体混合容器である。
【０００７】
請求項２に記載の発明は前記注入液注入口から液体混合容器内に延設された注入液流路が、第１液封入部中の第１液液面に達していることを特徴とする請求項１に記載の液体混合容器である。
【０００８】
請求項３に記載の発明は、請求項１および２のいずれかに記載の液体混合容器を用いた液体混合方法において、注入液注入部から第３液を注入する工程、該第３液と第１液封入部中の第１液とを混合する工程、レバーを備える隔壁および網目構造隔壁により第２封入部および第２液内包物を圧縮し、該第２内包物を破壊する工程、破壊した該第２液内包物中の第２液を網目構造隔壁を通じて該第１液封入部に滴下する工程、第１液と滴下した第２液とを混合する工程を有することを特徴とする液体混合方法である。
【０００９】
請求項４に記載の発明は、前記第１液と滴下した第２液とを混合する工程によって得られた反応生成物を、注入液注入部より取り出すことを特徴とする請求項３に記載の液体混合方法である。
【発明の効果】
【００１０】
請求項１に記載の発明は、請求項１に記載の発明は、注入液注入口を備える液体混合容器において、少なくとも該液体混合容器は第１液封入部、ならびに、網目構造隔壁、レバーが設けられた隔壁および第２液内包物を備える第２液封入部を有することを特徴とする液体混合容器である。請求項１に記載の発明により、第１液、第２液および注入液注入口から注入される後述する第３液との混合を密閉系で行うことが可能となる。
【００１１】
請求項２に記載の発明は前記注入液注入口から液体混合容器内に延設された注入液流路が、第１液封入部中の第１液液面に達していることを特徴とする請求項１に記載の液体混合容器である。請求項２に記載の発明により、注入液注入口から注入する第３液がごく微量である場合など、液体混合容器内壁に第３液が付着し、第１液と混合されないロスが生じることを防ぐことが可能となる。
【００１２】
請求項３に記載の発明は、請求項１および２のいずれかに記載の液体混合容器を用いた液体混合方法において、注入液注入部から第３液を注入する工程、該第３液と第１液封入部中の第１液とを混合する工程、レバーを備える隔壁および網目構造隔壁により第２封入部および第２液内包物を圧縮し、該第２内包物を破壊する工程、破壊した該第２液内包物中の第２液を網目構造隔壁を通じて該第１液封入部に滴下する工程、第１液と滴下した第２液とを混合する工程を有することを特徴とする液体混合方法である。請求項３に記載の発明により、第１液、第２液および注入液注入口から注入される後述する第３液との混合を密閉系で行うことが可能となる。
【００１３】
請求項４に記載の発明は、前記第１液と滴下した第２液とを混合する工程によって得られた反応生成物を、注入液注入部より取り出すことを特徴とする請求項３に記載の液体混合方法である。請求項４の発明より、得られた反応生成物の回収まで密閉系で行うことが可能となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
以下に本発明を詳細に説明する。
【００１５】
図１は、本発明の液体混合容器の一例を示す図である。液体混合容器（１）は、注入液注入口（５）、第１液（２）が封じ込められている第１液封入部（１１）、および網目構造隔壁（８）を備える第２液封入部（１２）を有する。前記第２液封入部（１２）は、さらに前記網目構造隔壁（８）と向かい合う位置にレバー（９）が設けられた隔壁（７）を備え、第２液封入部中には、第２液内包物（３）が配置されている。また、第１液封入部にはスターラーバー（４）が設置されている。また、ストッパー（１０）は、レバー（９）が必要時以外に落下するのを防ぐためのものである。また、注入液注入口（５）からは注入液流路（６）が延設されている。
【００１６】
液体混合容器（１）の材質としては、ガラスやプラスチックなど容器内の液体が見える透明なものでできていればよく、適宜選択することが可能である。
【００１７】
注入液注入口（５）から延設された注入液流路（６）は、第１液封入部中の第１液液面に達していることが好ましく、第１液液面下まで注入液流路が延設されていることがより好ましい。注入液流路（６）は、第１液封入部中の第１液液面に達していることにより、注入液注入口から注入する第３液がごく微量である場合など、液体混合容器内壁に第３液が付着し、第１液と混合されないロスが生じることを防ぐことが可能となる。
注入液流路としては、中を第３液が流れることができるものであればよく、樹脂製のチューブやガラス製の筒など、適宜選択することが可能である。注入液流路の径は、後述する反応生成物回収時に用いるシリンジを挿入することができる程度に、シリンジとほぼ同径であることが好ましい。
また、注入液注入口にはセプタムを設置することが好ましい。
【００１８】
網目構造隔壁（８）としては、ポリプロピレンやポリエチレンなどの樹脂が好ましい。網目構造隔壁が例えば金属からなる場合、金属は溶液中でイオン化し、液体混合容器内の反応を阻害する恐れがある。また、網目構造隔壁が金属からなる場合は、第１液封入部に設置されているスターラーバーが網目構造隔壁に付着してしまい、第１液封入部内の混合が不完全になる恐れがある。また、網目構造隔壁は液体混合容器の内壁に固定されており、固定手段としては公知の技術を用いることが可能である。
【００１９】
隔壁（７）にはレバー（９）が設けられており、レバーを上下させることで、液体混合容器内で隔壁を上下させ、第２封入部（１２）の拡張および圧縮が可能となる。隔壁としては、上述した網目構造隔壁と同様に、ポリプロピレンやポリエチレンなどの樹脂が好ましい。隔壁が例えば金属からなる場合、金属は溶液中でイオン化し、液体混合容器内の反応を阻害する恐れがある。
また、隔壁の形状としては、板状、後述する第２内包物を破壊するための突起物を有する板状、上述した網目構造隔壁と同様に網目状など、様々な形状を選択することが可能であるが、レバーを下げ、第２液封入部を圧縮した時の、液体混合容器内の圧を逃がすために、網目状や圧を逃がすための１又は複数の穴を有する形状であることが、より好ましい。隔壁が網目状や圧を逃がすための１又は複数の穴を有する形状であることにより、第２液封入部圧縮時に液体混合容器内の圧を逃がすことが可能となり、封入部圧縮時の液体混合容器内の圧によって、注入液注入口（５）から液体混合容器内の液体が噴き出ることを防ぐことができる。
【００２０】
第２液内包物（３）としては、カプセルや袋状など、第２液を内包可能であり、かつ薄膜であればよく、公知の技術を用いることが可能である。カプセルに第２液を内包する場合には、例えば、人工魚卵製造に用いられる従来手法を用いる。第２液を薄膜により内包することにより、第２液封入部を圧縮する圧力により、簡単に破壊することが可能となる。また、球状のカプセル形状であれば、液体混合容器内壁等にぶつかることにより誤って破壊される可能性が低くなる。
【００２１】
スターラーバー（４）の材質、形状およびサイズは、液体混合容器の大きさや混合する液体の種類によって適宜選択することが可能である。スターラーバーを用いることにより、超音波による混合方法では破壊してしまう恐れのあるＤＮＡなどの試料を混合することが可能となる。混合する試料によっては、超音波による混合方法を用いることも可能である。
【００２２】
また、本発明の第１液、第２液、第３液とは混合させる液体であり、各々適宜液体を選択することが可能である。例えば、核酸抽出に本発明の液体混合容器を用いる場合、第１液としては強アルカリの抽出液、第２液としては中和液、第３液としては血液試料が挙げられる。
また、第１液、第２液、第３液から選ばれる少なくとも２液の混合に本発明の液体混合容器を用いることも可能である。また、例えば複数の種類の液体を第１液封入部に封入しておいたり、種類の異なる複数の液体をそれぞれ内包した複数種の内包物を第２液封入部に用意するなど、混合させる液体は２液や３液に限定するものではなく、複数の液体の混合が可能である。
【００２３】
次に、本発明の液体混合容器を使用した液体混合方法を、前述の核酸抽出を例として説明する。
本発明の液体混合容器の第１液封入部には抽出液が封入されている。ここで抽出液とは、全血から核酸を抽出するための試薬であり、公知の抽出液を用いることが可能である。抽出液は強アルカリ性を示す。また、第２液として、反応中に極端にアルカリ性に傾く反応液を中和するための中和液を用い、カプセルに内包し第２液内包物とする。注入液注入口にはセプタムが設置されており、使用開始まで閉じられている。
【００２４】
シリンジに第３液として血液試料を採り、注入液注入口のセプタムをシリンジの針で破り、注入液流路内にシリンジの針を挿入し、血液試料を注入する。血液試料は注入液流路を通り、第１液封入部中の抽出液に滴下される。血液試料と抽出液とをスターラーバーを用いて混合し、核酸抽出液とする。このとき、血液試料注入に用いたシリンジは抜かず、挿したままにしておく。
次に、ストッパーを外しレバーを押し下げることにより、隔壁により第２液（中和液）内包物（カプセル）を圧力により破壊する。カプセル破壊により、中和液が網目構造隔壁を通じて、第１液封入部に滴下される。滴下された中和液は核酸抽出液と混合され、アルカリ性に傾いていた核酸抽出液は中和される。
その後、中和された核酸抽出液を挿したままにしておいたシリンジを用いて、必要量採取する。
【００２５】
上述したように、血液試料注入から反応後の核酸抽出液まで、シリンジの針を挿入したまま本発明の液体混合容器を使用することにより、外気と反応容器とを完全に密閉可能とし、コンタミネーションや操作者への血液飛散を防止することが可能となる。また、遠心分離操作など煩雑な操作は必要とせず、非常に簡便に核酸を抽出することが可能となる。
【００２６】
また、例として挙げた核酸抽出に限らず、本発明の液体混合容器を用いることにより、密閉系反応を行うことにより、コンタミネーションや操作者への反応液の飛散を防止することが可能であり、さらには、遠心分離操作、ピペッティング操作、蓋の開閉等の煩雑な操作を必要とせず、非常に簡便に複数の溶液を混合、反応させることが可能である。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】本発明の液体混合容器の一実施例の概略図である。
【符号の説明】
【００２８】
１  液体混合容器
２  第１液
３  第２液内包物
４  スターラーバー
５  注入液注入口
６  注入液流路
７  隔壁
８  網目構造隔壁
９  レバー
１０  ストッパー
１１  第１液封入部
１２  第２液封入部
【図１】
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