(57)【要約】      （修正有）【課題】体内で胆汁酸吸着能を有し、服用しやすく、副作用がなく、製造コストが低い高脂血症（高コレステロール血症）・肥満の予防剤及び治療剤として有用な水溶性高分子架橋体を提供する。【解決手段】胆汁酸を吸着するための陰イオン交換能を有する直径１μｍ以下の高分子架橋体を内核（コア）とし、水溶性高分子を外殻（シェル）とするコア−シェル型粒子を主成分とする高コレステロール血症・肥満の予防又は治療薬。該コア−シェル型粒子の主鎖は、（ｉ）Ｎ，Ｎ−ジ−Ｃ１−６アルキル置換アミノ基を原子数１〜１０の連結基を介して該主鎖に共有結合した側鎖、および（ｉｉ）ポリ（エチレングリコール）セグメントを有する親水性基を該主鎖に共有結合した側鎖、をそれぞれ独立に含んでおり、水性媒体中に可溶化または分散された場合に、該（ｉ）の側鎖と主鎖が主として内核部を形成し、他方、該（ｉｉ）の側鎖が主として外殻部を形成する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
陰イオン交換能を有する直径１μｍ以下の高分子架橋体を内核（コア）とし、水溶性高分子を外殻（シェル）とするコア−シェル型粒子（ナノゲルと略記する）を主成分とする高コレステロール血症・肥満の予防又は治療薬。
【請求項２】
請求項１に含まれる陰イオン交換能を有する高分子架橋体と水溶性高分子との共重合体を有効成分として含有し、該主鎖が、（ｉ）Ｎ，Ｎ−ジ−Ｃ１−６アルキル置換アミノ基を原子数１〜１０の連結基を介して該主鎖に共有結合した側鎖、および（ｉｉ）ポリ（エチレングリコール）セグメントを有する親水性基を該主鎖に共有結合した側鎖、をそれぞれ独立に含んでおり；
こうして、該高分子架橋体は水性媒体中に可溶化または分散された場合に、該（ｉ）の側鎖と主鎖が主として内核部を形成し、他方、該（ｉｉ）の側鎖が主として外殻部を形成する水溶性高分子架橋体からなる高コレステロール血症・肥満の予防又は治療薬。
【請求項３】
該（ｉｉ）の側鎖が共有結合した主鎖が、式Ｉ：
【化１】
2008195701.tif 000006
［式中、Ｘは水素原子、−ＣＯＯＺ基（ここで、Ｚは水素原子または有機基を表す）−ＣＨＲ１Ｒ２（ここで、Ｒ１およびＲ２は、独立して、Ｃ１−６アルキルオキシ基、フェニルオキシ基もしくはフェニル−Ｃ１−３アルキルオキシ基を表すか、またはＲ１およびＲ２は一緒になって−ＯＣＨＲ′ＣＨ２Ｏ−であって、Ｒ′が水素原子もしくはＣ１−６アルキル基である基を表す）または−ＣＨ＝Ｏを表し、Ｒａは水素原子またはＣ１−６アルキル基を表し、Ｌ１はメチレン基またはカルボニル基を表し、Ｌ２はカルボニル基、Ｃ１−３アルキレン基またはＣ１−３アルキルフェニレン基を表しｎは２〜１０，０００の整数であり、ｐは１〜５の整数であり、そして
該（ｉ）の側鎖が、式ＩＩ：
【化２】
2008195701.tif 000007
（式中、Ｒ３およびＲ４は、独立してＣ１−６アルキル基及びアリル基を表し、Ｒｂは水素原子またはＣ１−６アルキル基を表し、Ｙは−Ｏ−または−ＮＨ−を表し、そしてｑは２〜６の整数である）で表されるコモノマーに由来し、さらに、場合により、希釈モノマーに由来する側鎖を含んでいてもよい、請求項１及び２記載の水溶性高分子架橋体として含有する高コレステロール血症・肥満の予防又は治療薬。
【請求項４】
架橋結合が、式ＩＩＩ
【化３】
2008195701.tif 000008
［式中、Ｒｃは水素原子またはＣ１−６アルキル基を表し、Ｙ′は原子価結合、カルボニル基または−ＮＨ−を表し、Ａはフェニレン基、−（ＣＨ２）ｒ−（ここで、ｒは１〜４の整数である）または−（ＯＣＨ２Ｈ２Ｏ）ｓ−（ここで、ｓは１〜４の整数である）を表す］で表される架橋剤に由来する請求項１及び２のいずれかの一つに記載の水溶性高分子架橋体として含有する高コレステロール血症・肥満の予防又は治療薬。
【請求項５】
該（ｉ）の側鎖を一部及び全て４級化した請求項１〜４のいずれかの一つに記載の水溶性高分子架橋体を含有する高高コレステロール血症・肥満の予防又は治療薬。
【請求項６】
該（ｉ）の側鎖を誘導するモノマーと該（ｉｉ）の側鎖を誘導するモノマーが、モル比で１／２〜４００／１であり、該（ｉ）のモノマーと該（ｉｉ）のモノマーの総量に対し、架橋剤の割合が、０．１〜２５モル％である請求項１〜５のいずれかの一つに記載の水溶性高分子架橋体として含有する高コレステロール血症・肥満の予防又は治療薬。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の水溶性高分子架橋体を有効成分として含有する、高コレステロール血症、メトトレキサート副作用軽減、高リン血症治療、尿結石の治療、蓄積性塩素含有化合物の排泄促進、重金属の排泄促進、鉄吸収阻害、血糖値低下および血清中尿酸低下からなる群から選ばれる１種類以上に有効な薬剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、体内で胆汁酸吸着能を有し、高脂血症（高コレステロール血症）・肥満の予防剤及び治療剤として有用な水溶性高分子架橋体に関する。
【背景技術】
【０００２】  従来から高脂血症薬・抗肥満薬としてスタチン系製剤（肝臓のＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害薬）が使用され、市場の９割ほどを占めているがその重篤な副作用のため安全性が危ぶまれている。一方、非スタチン系製剤として、陰イオン交換能を有する高分子化合物が腸内で胆汁酸を吸着することで便中への排泄を促進し、腸菅での胆汁酸の再吸収を阻害することによって、血中のコレステロールを低下させる作用があることが知られている。実際に、コレスチラミンやコレスチミドといった陰イオン交換樹脂が高脂血症薬・抗肥満薬として臨床で用いられている。【０００３】  しかしながら、これらの薬剤は水に対して不溶であるため、服用性および副作用の観点で問題があった。例えば、コレスチラミンは１回に４ｇの薬剤を２００ｍＬの水に懸濁させて服用する必要があり、患者にとって服用しづらいことが知られている（非特許文献１参照）。したがって、高齢者の患者に対しては服用性の悪い薬剤であり、改善が求められていた。さらに、これらの薬剤の副作用として便秘を中心とした消化器症状が多いことが知られている。この原因は、薬剤が有する薬理作用ではなく、水に不溶であるという物理的性質にもとづくものと考えられる（非特許文献２参照）。【０００４】  以上の問題を解決する目的で長崎らの先行発明では、陰イオン交換高分子と水溶性高分子を有するブロックおよびグラフト共重合体の報告がなされているが、それらは胆汁酸と弱い相互作用（静電相互作用、親−疎水性相互作用）により会合体を形成しているため、体内の微弱な環境変化に対して非常に不安定であることから胆汁酸吸着能が低いことが問題となっている（非特許文献３参照）。また、それらのブロックおよびグラフト共重合体の製造は、工業的には難しく、製造コストがかかるという問題もある（特許文献４参照）。
【非特許文献１】板倉弘重  他「抗高脂血症薬の選び方と使い方」南江堂
【非特許文献２】五島雄一郎  他「医学のあゆみ」１２５（１２）：１０５８−００９４，１９８３
【非特許文献３】中村ら、「高分子論文集」６０（５）：２３８−２４０，２００３
【特許文献４】長崎ら、特願２００４−１１０４３８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】  本発明では、服用しやすく、副作用のない、かつ製造コストが低い高脂血症（高コレステロール血症）・肥満の予防剤及び治療剤として有用な水溶性高分子架橋体を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】  本発明者らは、水中に重合性官能基を有する水溶性マクロモノマーと親油性の陰イオン交換能を有するモノマー、２つの重合性官能基を有するモノマー（架橋剤）、およびラジカル開始剤を水に混合した後、レドックスシステムにより乳化重合を行うことで、内核に架橋した陰イオン交換能高分子と外殻に水溶性高分子を有するナノサイズの水溶性高分子架橋体を簡便に得ることができる。【０００７】    したがって、本発明によれば、水溶性高分子架橋体は、ナノサイズでかつ外殻に水溶性高分子を有しているため、水に可溶であることから服用しやすく、副作用も低減でき、一方、内核には、架橋した陰イオン交換能高分子が存在するため、胆汁酸を効率的に吸着でき、かつ体内の環境変化に影響されず安定である。【０００８】  さらには、乳化重合により、一段階で室温において簡便に水中で製造できるため、コストが低い。
【発明の効果】
【０００９】  本発明により、水溶性であるため服用しやすく、副作用のない、かつ製造コストが低い高脂血症（高コレステロール血症）・肥満の予防剤及び治療剤として有用な水溶性高分子架橋体を提供することが可能となった。
【発明の実施するための最良の形態】
【００１０】  また、本発明によれば、一般式（Ｉ）
【００１１】
【化４】
2008195701.tif 000002
【００１２】  ［式中、Ｘは水素原子、−ＣＯＯＺ基（ここで、Ｚは水素原子または有機基を表す）−ＣＨＲ１Ｒ２（ここで、Ｒ１およびＲ２は、独立して、Ｃ１−６アルキルオキシ基、フェニルオキシ基もしくはフェニル−Ｃ１−３アルキルオキシ基を表すか、またはＲ１およびＲ２は一緒になって−ＯＣＨＲ′−ＣＨ２Ｏ−であって、Ｒ′が水素原子もしくはＣ１−６アルキル基である基を表す）または−ＣＨ＝Ｏを表し、Ｒａは水素原子またはＣ１−６アルキル基を表し、Ｌ１はメチレン基またはカルボニル基を表し、Ｌ２はカルボニル基、Ｃ１−３アルキレン基またはＣ１−３アルキルフェニレン基を表すか、あるいは、一体となって水素原子またはＣ１−６アルキル基を表し、ｎは２〜１０，０００の整数であり、そして、ｐは１〜５の整数である］で表されるポリ（エチレングリコール）マクロモノマーと、
（ｂ）式ＩＩ：
【００１３】
【化４】
2008195701.tif 000003
【００１４】（式中、Ｒ３およびＲ４は、独立してＣ１−６アルキル基を表し、Ｒｂは水素原子またはＣ１−６アルキル基を表し、Ｙは−Ｏ−または−ＮＨ−を表し、そしてｑは２〜６の整数である）で表されるコモノマーと、
（ｃ）２個または３個以上の重合性不飽和基を有する架橋剤と、
（ｄ）場合によって存在してもよい（ａ）および（ｂ）以外の重合性不飽和基を有する希釈モノマー、との共重合によって得られる高分子架橋体が提供される。
【００１５】  このような高分子架橋体の特定の態様では、（ｂ）のコモノマーが、１〜１００％の範囲で四級化した前記高分子架橋体が提供される。
【００１６】  このような架橋ポリマーの特定の態様では、（ａ）のポリ（エチレングリコール）マクロモノマーと（ｂ）のコモノマーが、モル比で１／４００、好ましくは１／２００、特に好ましくは１／１００〜２／１の範囲内にあり、そして（ａ）のマクロモノマーと（ｂ）のコモノマーの総量に対し、架橋剤の割合が０．１〜２５モル％である、前記高分子架橋体が提供される。
【００１７】    本発明の高脂血症（高コレステロール血症）・肥満の予防剤及び治療剤は、式（Ｉ）で部分的に表される高分子が水に可溶する性質利用して、液状、ゼリー状等として製剤化することができる。また、前記高分子架橋体を固体にまま用時溶解型の固形製剤や錠剤、散剤等の一般的な固形製剤に配合して製剤化することもできる。製剤化においては特別の方法を要せず、常法によりそれぞれの製剤を調整することができる。
【００１８】  本発明の高脂血症（高コレステロール血症）・肥満の予防剤及び治療剤は、成人に対し０．１〜２０ｇを１日１回乃至数回に分けて経口投与することができる。投与量は年齢、体重、症状等により適切に増減することができる。
【００１９】  内服液剤の調製に使用する担体としては、ショ糖脂肪酸エステル類、ステアリン酸ポリオキシ類、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール類、ポリオキシエチレンモノ脂肪酸エステル類等の界面活性剤、合成ケイ酸アルミニウム、ケイ酸マグネシウム、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等の増粘剤、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液等の有機酸系・無機酸系のｐＨ調整剤が挙げられる。必要に応じて溶解補助剤、緩衝剤、保存剤、香料、色素、甘味剤を配合することができる。
【００２０】  固形剤の調製に使用する担体としては、乳糖、デンプン、砂糖、マンにトール、結晶セルロース等の賦形剤、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ゼラチン、ＰＶＰ等の結合剤、カルボキシルメチルセルロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、硬化ヒマシ油、タルク等の潤滑剤が挙げられる。必要に応じて溶解補助剤、緩衝剤、保存剤、香料、色素、甘味剤を配合することができる。
【００２１】  本発明の高脂血症（高コレステロール血症）・肥満の予防剤及び治療剤には、以上の成分以外に他の有効成分を本発明の作用を損なわない範囲で適切に配合しても良い。
【実施例】
【００２２】  実施例１：メトキシ−ＰＥＧ−４−ベンジルスチレンの製造【００２３】
【化５】
2008195701.tif 000004
【００２３】  窒素下、ナスフラスコ中、室温において、開始剤２−メトキシエタノール２．０ｍｍｏｌ（０．１６ｍｌ）を溶媒テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）３０ｍｌにマイクロシリンジで加え、Ｋ−ナフタレン２．０ｍｍｏｌ（０．３３３ｍｏｌ／ｌ−ＴＨＦ溶液、６．０ｍｌ）を加えて２０分間メタル化を施した。次いで、エチレンオキシド２２７ｍｍｏｌ（１１．４ｍｌ）を加えて室温で２日間撹拌し、アニオン開環重合を行った。その後、ナトリウムハイドライドを２．５倍モル量５．０ｍｍｏｌ（３５０ｍｇ）と停止剤として４−ビニルベンジルクロライドを５倍モル量１０ｍｍｏｌ（１．４ｍｌ）を順次加え、室温において１日停止反応を行った。その後、２−プロパノール沈澱（２１）、遠心分離（５０００×ｇ、４５分間）、減圧乾燥、ベンゼン凍結乾燥により精製を行った。この生成物の収量は１０．８ｇ（９５％）であった。【００２４】  ゲルパーミエーションクロマトグラフィーの測定により、得られたポリマーは単峰性であり、その数平均分子量は５０００であり、仕込み分子量４９９０とほぼ一致していた。【００２５】  さらに、得られたポリマーの重クロロホルム中での１Ｈ−ＮＭＲ（プロトン核磁気共鳴）スペクトルより、このポリマーはエチレンオキシド骨格を主鎖に有し、α−末端にメトキシ基、ω−末端にベンジルスチレン基を有するヘテロテレケリックポリエチレンオキシドであることが確認された。【００２６】  実施例２：水溶性高分子架橋体の製造【００２７】  ５００ｍＬナスフラスコにメトキシ−ＰＥＧ−４−ベンジルスチレン（分子量５０００：４．６ｇ，０．９２ｍｍｏｌ）を、開始剤としての過硫酸カリウム（２７０ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を入れて、窒素置換後に脱気した蒸留水を３１３ｍＬ加え、架橋剤としてエチレンジメタクリレート（１９０μＬ，１ｍｏｌ％）を加えて溶解させた。その後、水溶性高分子架橋体の内核部位となる２−（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）エチルメタクリル酸エステル（１８．４ｇ，２０ｍＬ）を加え室温にて一晩以上攪拌し、乳化重合を行った。精製は限外濾過（分画分子量；２０，０００）により行い、超純水で置換し、０．２２μｍのフィルターに通して滅菌処理を行った。【００２８】    動的光散乱の測定により、得られた水溶性高分子架橋体は単峰性であり、その粒径は８７ｎｍであることが確認された（図１）。【００２９】  実施例３：水溶性高分子架橋体のｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける胆汁酸吸着能の確認【００３０】  タウロコール酸水溶液（８０ｍＭ）と所定量の実施例２で得られた水溶性高分子架橋体の水溶液（５０ｍｇ／ｍＬ）及びリン酸バッファー（１５０ｍＭ，ｐＨ６）を混合し、正確に２ｍＬとしｐＨを６．４に調整した。その後、３７度で３０分間攪拌した。溶液の混合割合は以下の表１通りに行った。試験の繰り返しはｎ＝３である。【００３１】
【表１】
2008195701.tif 000005
【００３２】  攪拌後、混合液を５００μＬ分取し、遠心限外ろ過（７０００ｒｐｍ，２ｈ，分画分子量：１０００）を行った後、胆汁酸吸着量を逆相ＨＰＬＣにより決定した。【００３３】  水溶性高分子架橋体の濃度と胆汁酸吸着率を図２に示す。
これより、水溶性高分子架橋体の濃度が増加するにつれ胆汁酸吸着率も増加し、水溶性高分子架橋体の濃度が１４ｍｇ／ｍＬで９０％近い胆汁酸が吸着していることから、十分な胆汁酸吸着能を有することが明らかになった。【００３４】  実施例４：水溶性高分子架橋体のｉｎ  ｖｉｖｏにおける胆汁酸吸着能の確認【００３５】  ５週齢のハムスター（♂）に高脂肪食飼料を自由に摂取させながら、最初１週間（月から木まで）検体を水溶性高分子架橋体：０．８２５ｍｇ／ｇで１日１回投与し、次の１週間（月から木まで）はナノゲル：１．１ｍｇ／ｇで１日１回投与した。Ｏ／Ｎで絶食後ネンブタール腹腔内投与による麻酔下で尾静脈より採血し、これを遠心分離し血漿を得、その後スカイライトバイオテクにてＨＰＬＣ（ゲルろ過）を用いてリポ蛋白分画を行い、おのおのの分画のコレステロール値を酵素法にて測定した。【００３６】  投与後の時間に対する、ＬＤＬコレステロール量を図３に示す。
これより、毒性は示さずに２週間後では水溶性高分子架橋体を投与しなかったハムスターに比べ、投与したハムスターはＬＤＬ−コレステロール量が半分以下になっていることが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【００３７】  本発明により、服用しやすく、副作用がなく、優れた薬理作用を有する高脂血症・肥満の予防薬および治療薬の提供により、高脂血症・肥満の治療に対するコンプライアンスの改善が期待できる。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】水溶性高分子架橋体の動的光散乱測定の結果を示す。
【図２】胆汁酸の濃度と水溶性高分子架橋体１つあたりの電荷に対する胆汁酸吸着量の関係を示すグラフである。
【図３】水溶性高分子架橋体投与後の時間にたいする、ＬＤＬコレステロール量の関係を示すグラフである。
【図１】
2008195701.tif 000009
【図２】
2008195701.tif 000010
【図３】
2008195701.tif 000011