(57)【要約】【課題】加熱殺菌によるヒドロキシヒドロキノンの生成を抑制し、飲用後に体内で過酸化水素を生成せず、風味が良好な容器詰コーヒー飲料を提供する。【解決手段】レトルト殺菌機の加熱処理温度を１２５℃から１４０℃の範囲とし、予備加熱温度から加熱処理温度までの平均昇温速度を６℃／分から１０℃／分とする容器詰コーヒー飲料の製造方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
レトルト殺菌機の加熱処理温度を１２５℃から１４０℃の範囲とし、予備加熱温度から加熱処理温度までの平均昇温速度を６℃／分から１０℃／分とする容器詰コーヒー飲料の製造方法。
【請求項２】
レトルト殺菌機による加熱処理前のコーヒー組成物中のヒドロキシヒドロキノン含量が０〜０．００００２質量％である、請求項１記載の容器詰コーヒー飲料の製造方法。
【請求項３】
レトルト殺菌機による加熱処理前のコーヒー組成物がコーヒー抽出液を多孔質吸着体に接触させてヒドロキシヒドロキノン含量を低減させたものである、請求項1又は２記載の容器詰コーヒー飲料の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、加熱殺菌によるヒドロキシヒドロキノンの生成を抑制した容器詰コーヒー飲料の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
活性酸素の一つである過酸化水素は、変異原性、癌原性等の他、動脈硬化症、虚血性心疾患等の循環器系疾患、消化器疾患、アレルギー疾患、眼疾患など多くの疾患に深く関与しているといわれている（非特許文献１）。一方、コーヒーは、コーヒー中に含まれるヒドロキシヒドロキノンに、生体内で過酸化水素を生成させる作用があること、及びヒドロキシヒドロキノンの含有量を通常含まれる量より十分に少ない量（０〜０．００００５質量％）に制御すれば、生体内で過酸化水素生成を増加させないコーヒー組成物が得られることが報告されている（特許文献１）。
【０００３】
一方、容器詰めコーヒー飲料は、一般的に加熱殺菌が行なわれている。殺菌方法としては、飲料を容器に充填・封入した後に１００℃以上で加熱殺菌をおこなうレトルト殺菌法が一般的に用いられている。しかし、加熱処理することによる風味、成分の劣化や沈殿物等の生成などが問題点となっている。
【０００４】
例えばミルク入りコーヒー飲料のレトルト殺菌は、通常１２４℃、２０分程度、殺菌値（Ｆ０値）として４０程度の殺菌条件で行なわれるが、長時間の殺菌処理による風味やコーヒー成分の劣化が発生する。また、ヒドロキシヒドロキノン含有量においては、殺菌前に低下させておいても、加熱殺菌処理工程でヒドロキシヒドロキノンが再生成してしまう傾向があり、この問題の解決が求められる。
【０００５】
加熱処理による風味劣化や沈殿などを防止する方法としては、高温短時間で加熱処理する方法がある。特許文献２には、すぐれた風味・味覚の乳入り飲料を提供する製造方法として、レトルト殺菌機による加熱処理を中身品温が少なくとも１３０℃に達するまで１〜５℃／分の昇温を行い、１３０℃から１４０℃で最大８分間加熱処理を行なう方法が開示されている。しかし、この殺菌方法を用いた製造方法では、ある程度のヒドロキシヒドロキノン生成抑制効果は得られるものの、その効果は十分とは言えない。
【非特許文献１】栄養―評価と治療 19,3 (2002)
【特許文献１】特開２００６−２０４１９１号公報
【特許文献２】特開２００１−２７５６３２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、加熱殺菌によるヒドロキシヒドロキノンの生成を抑制し、飲用後に体内で過酸化水素を生成せず、風味が良好な容器詰コーヒー飲料を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記の目的を達成するために検討を行った結果、殺菌条件を限定することで、風味が良好であり、コーヒー飲料中のヒドロキシヒドロキノンの生成を抑制できることを見出した。
【０００８】
すなわち本発明は、レトルト殺菌機の加熱処理温度を１２５℃から１４０℃の範囲とし、予備加熱温度から加熱処理温度までの平均昇温速度を６℃／分から１０℃／分とすることを特徴とする容器詰コーヒー飲料の製造方法である。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、レトルト殺菌によるヒドロキシヒドロキノンの生成抑制が可能となる。これにより飲用後に生体内で過酸化水素が生成しない容器詰コーヒー飲料を安定的に得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明は、焙煎したコーヒー豆を粉砕し、熱水等により抽出したコーヒー抽出液に牛乳や添加剤等を適宜添加してコーヒー飲料を調製する。コーヒー豆は飲料１００ｇあたり生豆換算で１ｇ以上、好ましくはコーヒー豆を２．５ｇ以上、更に好ましくはコーヒー豆を５ｇ以上使用した。また、ショ糖、グルコース、フルクトース、キシロース、果糖ブドウ糖液、糖アルコール等の糖分、抗酸化剤、ｐＨ調整剤、香料等を添加することができる。コーヒー組成物のpHとしては、例えばミルク入りコーヒーであれば５〜７、更に５．４〜６．５、特に５．６〜６．３が飲料の安定性の面で好ましい。次に定量充填機等を使用して１００ｍｌから１０００ｍｌを容器に充填する。容器はレトルト殺菌が可能な缶（アルミニウム、スチール）、紙、レトルトパウチ等の容器に詰めて製造することができる。充填量は飲みやすさの点から好ましくは１５０〜３５０ｍＬ、更に好ましくは１８０〜２５０ｍＬである。
【００１１】
次に本発明のレトルト殺菌であるが、コーヒー飲料を充填した容器をレトルト殺菌機に装填し、予備加熱として１００℃から１１０℃の一定温度で所定の時間保持することでレトルト殺菌機内の脱気操作を行った後、所定の加熱条件まで昇温して、加熱処理を行う。
【００１２】
室温から予備加熱温度、すなわち１００℃から１１０℃までの昇温速度としては、１０〜３０℃／分、好ましくは、１５〜２５℃／分である。１０℃／分以下であると、レトルト運転時間が長くなり生産効率が低下するため好ましくなく、３０℃／分以上であると局所的な加熱が発生するため、好ましくない。
【００１３】
また、予備加熱温度は、脱気操作性の観点から１０５℃〜１１０℃で行うことが、より好ましい。予備加熱温度が１１０℃より高くなると殺菌処理までの昇温幅が小さくなりヒドロキシヒドロキノンの増加抑制効果が小さくなるとともに、飲料品質の熱劣化が大きくなり好ましくない。
【００１４】
予備加熱から加熱処理までの昇温は、６℃／分から１０℃／分、好ましくは７℃／分から９℃／分の昇温条件で行う。
【００１５】
平均昇温速度が６℃／分未満では、ヒドロキシヒドロキノン生成抑制効果が十分でなく、１０℃／分を超えるとレトルト殺菌機内の温度が不均一となり、容器の中身品温の昇温が不安定となることで安定した殺菌値が得られなくなる。
【００１６】
昇温速度を制御する方法としては、昇温速度から単位時間あたりの目標値を設定し、順次目標値を更新しながら加熱処理温度まで連続的に制御を行うことが望ましい。
【００１７】
加熱処理の温度は１２５℃から１４０℃の範囲で実施可能である。
【００１８】
コーヒー飲料の風味保持および安定した殺菌値を得るという観点から特に１３０℃〜１３５℃が好ましい。
【００１９】
１２５℃未満では、予備加熱温度から加熱処理温度まで昇温する温度幅が小さくなり、本発明によるヒドロキシヒドロキノンの増加抑制効果が小さくなるため好ましくなく、また、１４０℃より高温では、殺菌値の安定性および容器耐久性の点から好ましくない。
【００２０】
加熱処理温度における保持時間としては、例えば、ブラックコーヒーの場合においては、F０値が２０の場合には、８分間以下、好ましくは１〜２分が風味・成分劣化の点から好ましい。また、例えば、ミルクコーヒーの場合においては、F０値が４０の場合には、１６分間以下、好ましくは１〜５分が風味・成分劣化の点からの好ましい。
【００２１】
１２５℃から１４０℃の加熱処理温度における保持時間中の温度は、１２５℃から１４０℃の範囲で変動しても構わないが、所定の殺菌値を安定して得るためには保持時間中の平均温度に対して±０．５℃の範囲で一定温度に保持する方が望ましい。
【００２２】
温度を保持するための方法としては、ある温度範囲を設けて蒸気バルブを開閉することで、一定範囲内に温度を保持する方法があげられる。より好ましい方法としては、コントロールバルブを用いて、蒸気量を連続的にコントロールすることでより安定に一定温度に保持する方法があげられる。
【００２３】
１２５℃から１４０℃の範囲の加熱処理温度で所定の殺菌値となるよう一定時間保持した後、所定の温度まで強制冷却を行う。
【００２４】
冷却速度は、加熱処理温度から１００℃までを０．５分〜２分以内、より好ましくは０．５分〜１分以内にすることがヒドロキシヒドロキノン増加抑制の観点から好ましい。１００℃以下からの冷却速度は、制限はないが生産効率の観点でできるだけ迅速であることが好ましい。
【００２５】
冷却到達温度としては、コーヒー飲料の保存温度に近い２０℃〜３５℃が好ましく、冷却方法としては、水冷式が用いられる。
【００２６】
こうして得られる容器詰コーヒー飲料は、ヒドロキシヒドロキノンの生成を抑制し、かつ風味が良好なものとなっている。
【００２７】
コーヒー飲料の製造において、コーヒー豆の焙煎時にヒドロキシヒドロキノンが生成される。焙煎度の調整によりヒドロキシヒドロキノンの生成を抑制することは可能であるが、良好なコーヒー風味を得られる焙煎条件においては、ヒドロキシヒドロキノン生成量が多くなる。このような場合は、本発明のレトルト殺菌機による加熱処理前にコーヒー組成物中のヒドロキシヒドロキノン含量を０〜０．００００２質量％とすることで、生体内で過酸化水素が生成しない容器詰コーヒー飲料を得ることができる。
【００２８】
レトルト殺菌機による加熱処理前にコーヒー組成物中のヒドロキシヒドロキノン含量を低減する方法としては、コーヒー抽出液中のヒドロキシヒドロキノンを低減する方法として、コーヒー抽出液を多孔質吸着体に接触させてヒドロキシヒドロキノンを吸着除去する方法、酵素により分解する方法、超臨界流体により抽出除去する方法等がある。また、焙煎豆中のヒドロキシヒドロキノンを低減する方法としては、焙煎豆を４０〜１５０℃で熟成処理する方法、焙煎豆を水系溶媒と接触させる方法等がある。これらの方法の中でコーヒー抽出液を多孔質吸着体に接触させてヒドロキシヒドロキノンを吸着除去する方法が好ましい。具体的には、ヒドロキシヒドロキノンを多孔質吸着体に吸着させることにより除去する方法が挙げられる。
【００２９】
ヒドロキシヒドロキノンの吸着除去に用いられる多孔質吸着体としては、活性炭、シリカ、ゼオライト、アルミナ、白土（活性白土、酸性白土）等の無機多孔質吸着体；架橋スチレン系、メタクリル酸エステル系、ポリフェノール類等の有機多孔質吸着体が挙げられる。
【００３０】
本発明で用いる好ましい多孔質吸着体としては、細孔半径が０．７ナノメートル（ｎｍ）以下の細孔の容量が多孔質吸着体の細孔容量全体に対して１０％以上である多孔質吸着体が挙げられる。更には細孔半径が０．７ナノメートル以下、好ましくは０．２〜０．７ナノメートル（ｎｍ）の細孔の容量が多孔質吸着体の細孔容量全体に対して３０％以上、更に３０〜９９％、更に５０〜９５％、特に７０〜９０％のものが好ましい。細孔半径が０．７ナノメートル（ｎｍ）以下の細孔の容量が多孔質吸着体の細孔容量全体に対して１０％未満の多孔質吸着体は、ヒドロキシヒドロキノン除去の選択性が低くなるため好ましくない。ここで、多孔質吸着体の細孔半径及び容量は、細孔半径１ナノメートル（ｎｍ）以下域においてはＭＰ法により測定された値であり、細孔半径１ナノメートル（ｎｍ）超過域においてはＫＪＨ法により測定された値であり、細孔半径が０．７ナノメートル（ｎｍ）以下の細孔の容量が多孔質吸着体の細孔容量全体に対して１０％であるか否かはＭＰ法及びＫＪＨ法により得られた細孔分布曲線から判定することができる。
【００３１】
ＭＰ法による細孔半径１ナノメートル（ｎｍ）以下の全細孔容量：ＶＭ（ｃｍ3/ｇ）、ＫＪＨ法による細孔半径１ナノメートル（ｎｍ）超過の全細孔容量：ＶＫ（ｃｍ3/ｇ）、ＭＰ法による細孔半径０．７ナノメートル（ｎｍ）以下の細孔容量：Ｖ７（ｃｍ3/ｇ）、細孔半径が０．７ナノメートル（ｎｍ）以下の細孔の容量と多孔質吸着体の細孔容量全体の比：Ｖ％＝Ｖ７／（ＶＭ＋ＶＫ）×１００％
ＭＰ法とは、文献（Colloid and Interface Science, 26, 46(1968)）に記載の細孔測定法であり、ＫＪＨ法とは、文献（J.Amer.Chem.Soc.,73.373(1951)）に記載の細孔測定法である。細孔測定装置としては、ＢＥＬＳＯＲＰ−ｍｉｎｉやＢＥＬＳＯＲＰ−ｍｉｎｉII（日本ベル株式会社製）などがあり、窒素吸着法を用い測定できる。窒素吸着法とは１２０℃で真空脱気後の試料を窒素ガスを用いた定容法により、細孔分布測定を行う。
【００３２】
また、当該多孔質吸着体は、ミクロ孔領域における平均細孔半径が０．５ナノメートル（ｎｍ）以下、更には０．２〜０．５ナノメートル（ｎｍ）、特に０．３〜０．５ナノメートル（ｎｍ）の範囲にあることが好ましい。ここでミクロ孔領域とは、１ナノメートル（ｎｍ）以下を示し、平均細孔半径は、ＭＰ法により得られた細孔分布曲線のピークトップを示す細孔半径の値である。
【００３３】
多孔質吸着体の種類としては吸着技術便覧−プロセス・材料・設計−（平成１１年１月１１日、エヌ・ティー・エス発行、監修者：竹内  雍）に記載されている炭素質吸着材、シリカ・アルミナ系吸着材、高分子吸着材、キトサン樹脂などが使用できる。コーヒー風味を残存させる観点から、炭素質吸着材が好ましい。
【００３４】
炭素質吸着材としてはヒドロキシヒドロキノン選択的吸着の観点から、粉末状活性炭、粒状活性炭、活性炭繊維が好ましい。更に抽出液の風味が良く、クロロゲン酸類の回収量も多いことから活性炭繊維が好ましい。
【００３５】
粉末状及び粒状活性炭の由来原料としては、オガコ、石炭やヤシ殻などがあるが、ヤシ殻由来のヤシ殻活性炭が好ましく、特に、水蒸気などのガスにより賦活した活性炭が好ましい。このような水蒸気賦活活性炭の市販品としては、白鷺WH2Ｃ（日本エンバイロケミカルズ株式会社）、太閣ＣＷ（二村化学工業株式会社）、クラレコールＧＬ（クラレケミカル株式会社）等を用いることができる。
【００３６】
活性炭繊維としては、ファインガード（東邦レーヨン製）のようなポリアクリロニトリル系、アドール（ユニチカ製）のようなピッチ系、クラクティブ（クラレ製）のようなフェノール系、Ｋフィルター（東洋紡績製）のようなセルロース系、その他フェノール系や綿花系などが挙げられる。
【００３７】
また、多孔質吸着体の形状は特に限定されず、通常の粉体・粒状はもとより吸着体を繊維に練りこんだもの、各多孔質吸着剤同士で成型したもの、セルロース、不織布、バインダーを用い成型したものでも良い。
【００３８】
多孔質吸着体の粒子径は特に限定されないが、大きすぎると被吸着体との接触面積が小さくなり、吸着速度が遅くなる。以上の点から平均粒径として０．０１μｍ以上２mm以下が好ましく、更に５０μｍ以上４００μｍ以下が好ましく、特に好ましいのは５０μｍ以上２００μｍ以下である。
【００３９】
また、多孔質吸着体のＭＰ法による細孔容量は、０．５ｃｍ3／ｇ以上が好ましく、更に０．５〜２ｃｍ3／ｇ、特に０．６〜１ｃｍ3／ｇが好ましい。０．５ｃｍ3／ｇ以上の多孔質吸着体では、ヒドロキシヒドロキノン含量の低減効果が得られ易い。
【００４０】
これらの多孔質吸着体は水性溶媒で洗浄後に使用するのが好ましい。水性溶媒で洗浄することにより、多孔質吸着体処理によるコーヒー抽出液からのヒドロキシヒドロキノン除去率が向上する。洗浄に使用する水性溶媒としては、水、水道水、イオン交換水、純水、エタノール水溶液、食塩水等が挙げられる。また用いる水溶液の温度は５〜９５℃、更に１５〜９０℃、特に４０〜８５℃が好ましい。
【００４１】
洗浄に用いる水性溶媒の量は、多孔質吸着体１００質量部に対し１００質量部以上、更に２００〜２０００質量部、特に４００〜１０００質量部が好ましい。洗浄手段としては、例えば多孔質吸着体を水性溶媒に加えて１分〜２時間撹拌する方法、多孔質吸着体を充填したカラムに水性溶媒を導入する方法等が挙げられる。洗浄時に圧力条件下で行なわれると更に風味も向上するので好ましい。水洗浄時の圧力条件は通常０〜１Ｍｐａである。
【００４２】
本発明における原料コーヒー抽出液と多孔質吸着体との接触は、０．０１ＭＰａ以上１０ＭＰａ以下の圧力条件下で行なわれる。ここでいう圧力とは、バッチ法において密閉容器内の圧力と容器外の圧力の圧力差を意味し、カラム法においてはカラム出口の圧力と大気圧の圧力差を意味する。かかる加圧条件下で接触させることにより、コーヒー抽出液中のヒドロキシヒドロキノン含量が効率良く低下する。更に、得られたコーヒー組成物を容器詰コーヒー等にする際に必要な加熱殺菌処理してもヒドロキシヒドロキノンの再発生も防止できる。加圧条件は０．０１ＭＰａ以上１０ＭＰａ以下であればよいが、０．０２〜１０ＭＰａ、さらに０．０５〜５ＭＰａ、特に０．１〜１ＭＰａが好ましい。このような加圧処理は、例えばバッチ法の場合には、攪拌付密閉容器へ不活性ガスや空気を導入し圧をかける方法、カラム法の場合には、カラム出口に圧力調整弁を設置し圧をかける方法が挙げられる。
【００４３】
多孔質吸着体の使用量は、原料コーヒー抽出液の可溶性固形分に対して１質量％以上２００質量％以下、更に１０〜２００質量％が好ましい。なお、原料コーヒー抽出液の可溶性固形分は、デジタル示差濃度計ＤＤ−７、デジタル屈折計ＲＸ−５０００、デジタル屈折計ＲＸ−５０００α（株式会社アタゴ）等を用いて測定することができる。
【００４４】
接触処理手段としては、バッチ法又はカラム通液方法が挙げられる。
【００４５】
バッチ法としては、コーヒー抽出液を含む液に、多孔質吸着体を加え−１０〜１００℃で０．５分〜５時間撹拌した後、多孔質吸着体を除去すればよい。処理時の雰囲気としては、空気下、不活性ガス下（窒素ガス、アルゴンガス、ヘリウムガス、炭酸ガス）が挙げられるが、風味の観点より不活性ガス下が好ましい。
【００４６】
カラム通液法としては、吸着カラム内に多孔質吸着体を充填し、コーヒー抽出液を含む液をカラム下部又は上部から通液させ、他方から排出させる。吸着体の充填高さＬ及びＤ（径）の比Ｌ／Ｄは通常０．１〜１０が好ましい。多孔質吸着体のカラム内への充填量は、通液前に吸着カラムに充填できる量であれば良い。吸着カラムの上段又は下段の少なくとも１つにメッシュ（網）又はパンチングメタルなど有し実質的に多孔質吸着体が漏れ出さない分離構造体を有していれば良い。分離構造体の開口径は、多孔質吸着体の平均粒径より小さければ良い、好ましくは多孔質吸着体の平均粒径の１／２以下、特に好ましくは１／３以下の目開きが良い。具体的な開口径は、０．１〜１０００μｍである。コーヒー抽出液を含む液の吸着処理温度は−１０℃〜１００℃が好ましいが、更に風味の観点より０〜４０℃が好ましい。吸着カラム内の吸着剤量（Ｋ[ｇ]）対するコーヒー抽出液を含む液流量（ＱＣ[ｇ／分]）の滞留時間（Ｋ/ＱＣ）は０．５〜３００分である。
【００４７】
コーヒー組成物は、固液分離工程により吸着剤の微粉を除去することが可能である。吸着剤の微粉を除去する方法としては、遠心分離機、ろ紙、ゼータ電位フィルター、フィルタープレス、珪藻土ろ過の１種以上から選ばれる方法が選択できる。固液分離工程により、通常１μｍ以上の微粉、好ましくは０．５μｍ以上の微粉、特に好ましくは０．１μｍ以上の微粉を除去することが風味や食感の観点より好ましい。
【実施例】
【００４８】
実施例１
中焙煎度のコーヒー豆に対して８倍量のイオン交換水（９５℃）で抽出し、コーヒー抽出液を得た。次に本コーヒー抽出液中のＢｒｉｘを測定し、Ｂｒｉｘに対して５０重量％の量の活性炭（白鷺ＷＨ２Ｃ）を充填したカラム（内径４５ｍｍ、長さ１５０ｍｍ）を準備した。その後、活性炭を充填したカラムに温度２５℃、ＳＶ８［１／容量［ｍ３］／流量［ｍ３/ｈｒ］］の条件下でコーヒー抽出液を通液し、活性炭処理してヒドロキシヒドロキノンを除去したコーヒー組成物を得た。このコーヒー組成物をイオン交換水で希釈し、重曹にてｐＨ調整を行った。こうして得られた加熱殺菌前のコーヒー飲料のヒドロキシヒドロキノンは、０．０００００５質量％（検出限界）以下であった（ＨＰＬＣ−電気化学検出器によるヒドロキシヒドロキノンの分析方法）。次にこのコーヒー飲料を１９０ｇ缶に充填・密封し、表１に示す殺菌条件（昇温速度、殺菌温度および殺菌時間）でレトルト殺菌機にて加熱殺菌処理を施し、容器詰めコーヒー飲料を得た。また加熱殺菌後のヒドロキシヒドロキノンは、ＨＰＬＣ−電気化学検出器によるヒドロキシヒドロキノンの分析方法を用いた。官能評価については、開栓時の香り立ちや飲んだときのコーヒー感など、総合的なコーヒー風味の良さを４段階で評価し、結果を表１に示した。
比較例１
表１に示す殺菌条件（昇温速度、殺菌温度および殺菌時間）に制御した以外は実施例１と同様に容器詰コーヒー飲料を製造した。
実施例２
実施例１と同様の方法で、ヒドロキシヒドロキノンが０．００００１質量％のコーヒー飲料を製造し、表１に示す殺菌条件（昇温速度、殺菌温度および殺菌時間）で容器詰コーヒー飲料を製造した。
比較例２、実施例３
表１に示す殺菌条件（昇温速度、殺菌温度および殺菌時間）に制御した以外は実施例２と同様に容器詰コーヒー飲料を製造した。
【００４９】
【表１】
2008193964.tif 000002
【００５０】
表１に示したように、レトルト殺菌機による加熱処理温度を１２５℃から１４０℃の範囲とし、加熱処理温度までの平均昇温速度を６℃／分から１０℃／分とすることにより、ヒドロキシヒドロキノンの生成が抑制されることが判った。
＜ＨＰＬＣ−電気化学検出器によるヒドロキシヒドロキノンの分析方法＞
容器詰コーヒー飲料又はコーヒー組成物のヒドロキシヒドロキノンの分析法は次の通りである。分析機器はＨＰＬＣ−電気化学検出器（クーロメトリック型）であるクーロアレイシステム（モデル５６００Ａ、開発・製造：米国ＥＳＡ社、輸入・販売：エム・シー・メディカル（株））を使用した。装置の構成ユニットの名称・型番は次の通りである。
【００５１】
アナリティカルセル：モデル５０１０、クーロアレイオーガナイザー、クーロアレイエレクトロニクスモジュール・ソフトウエア：モデル５６００Ａ、溶媒送液モジュール：モデル５８２、グラジエントミキサー、オートサンプラー：モデル５４２、パルスダンパー、デガッサー：Ｄｅｇａｓｙｓ  Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＤＵ３００３、カラムオーブン：５０５。カラム：ＣＡＰＣＥＬＬ  ＰＡＫ  Ｃ１８  ＡＱ  内径４．６ｍｍ×長さ２５０ｍｍ粒子径５μｍ（（株）資生堂）。
【００５２】
分析条件は次の通りである。
【００５３】
サンプル注入量：１０μＬ、流量：１．０ｍＬ／ｍｉｎ、電気化学検出器の印加電圧：０ｍＶ、カラムオーブン設定温度：４０℃、溶離液Ａ：０．１（Ｗ／Ｖ）％リン酸、０．１ｍＭ  １−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸、５（Ｖ／Ｖ）％メタノール溶液、溶離液Ｂ：０．１（Ｗ／Ｖ）％リン酸、０．１ｍＭ  １−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸、５０（Ｖ／Ｖ）％メタノール溶液。
【００５４】
溶離液Ａ及びＢの調製には、高速液体クロマトグラフィー用蒸留水（関東化学（株））、高速液体クロマトグラフィー用メタノール（関東化学（株））、リン酸（特級、和光純薬工業（株））、１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸（６０％水溶液、東京化成工業（株））を用いた。
【００５５】
濃度勾配条件
時間      溶離液Ａ        溶離液Ｂ
０．０分      １００％          ０％
１０．０分      １００％          ０％
１０．１分          ０％      １００％
２０．０分          ０％      １００％
２０．１分      １００％          ０％
５０．０分      １００％          ０％
分析試料の調製は、試料５ｇを精秤後、０．５（Ｗ／Ｖ）％リン酸、０．５ｍＭ  １−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸、５（Ｖ／Ｖ）％メタノール溶液にて１０ｍＬにメスアップし、この溶液について遠心分離を行い上清を得た。この上清について、ボンドエルートＳＣＸ（固相充填量：５００ｍｇ、リザーバ容量：３ｍＬ、ジーエルサイエンス（株））に通液し、初通過液約０．５ｍＬを除いて通過液を得た。この通過液について、メンブレンフィルター（ＧＬクロマトディスク２５Ａ，孔径０．４５μｍ，ジーエルサイエンス（株））にて濾過し、速やかに分析に供した。
【００５６】
ＨＰＬＣ−電気化学検出器の上記の条件における分析において、ヒドロキシヒドロキノンの保持時間は、６．３８分であった。得られたピークの面積値から、ヒドロキシヒドロキノン（和光純薬工業（株））を標準物質とし、質量％を求めた。