(57)【要約】【課題】ビスフォスフォネート等に要求される服用基準が無いため、寝たきり患者や微小重力下にいる者にとっても、服用が容易な、廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤を提供すること。【解決手段】アンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質を含むことを特徴とする、廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質を含むことを特徴とする、廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤。
【請求項２】
アンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質が、下記の（Ａ）乃至（Ｃ）から選択される少なくとも一種以上であることを特徴とする、請求項１記載の廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤。
（Ａ）低分子化合物
（Ｂ）ペプチド類
（Ｃ）アンジオテンシン（II）1型受容体遺伝子の発現を抑えるポリヌクレオチド
【請求項３】
低分子化合物が、環状構造を有する化合物である、請求項２記載の廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤。
【請求項４】
アンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質が、イルベサルタン，オルメサルタン，カンデサルタン，テルミサルタン，バルサルタン，及びロサルタン，あるいはこれらの薬学的に許容される塩である、請求項３記載の廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
骨粗鬆症は、いきすぎた骨吸収と、相対的に追いつかない骨形成との間のアンバランスによって起こる疾病である。
【０００３】
骨粗鬆症には、閉経後骨粗鬆症，老人性骨粗鬆症，ステロイド性骨粗鬆症，薬物誘発性骨粗鬆症，廃用性骨粗鬆症等、様々な種類があり、その発症メカニズムも様々であるが、中でも、廃用性骨萎縮は、詳しい発症メカニズムは解明されておらず、メカニズムに基づいた根本的な治療法もないため、寝たきり患者や宇宙環境で作業する者等にとって、大きな医学的問題となっている。
【０００４】
廃用性骨萎縮にも、骨吸収の亢進が寄与するため、一般の骨粗鬆症と同様にビスフォスフォネートなどの骨吸収阻害薬が部分的に有効であるとの報告もあるが、ビスフォスフォネート系薬物は、吸収効率が悪く、また消化器障害や逆流性食道炎などの副作用がある。
また、ビスフォスフォネート系薬物を服用する際の、「早朝空腹時に180 mlの水で服用し、服用後３０分は食事をとらず、（逆流を防ぐため）座位または立位を保つ」などの諸注意は、寝たきり患者や微小重力下にいる者にとって、遵守することは困難であり、他の治療剤が望まれていた。
【０００５】
一方、本発明者等は、高血圧症と骨粗鬆症が加齢に伴って発症する二大疾患であり、骨粗鬆症患者の多くが、高血圧をも併発していることに着目し、これらに共通する要因があるのでは無いかと考え、鋭意研究を行った結果、血圧上昇に関連する上記レニン−アンジオテンシン系が、骨粗鬆症の発症にも深く関与していることを見出すに至った。
【０００６】
レニン−アンジオテンシン系は、生命活動にとって重要な系である。
腎臓で生成される酵素であるレニンは、血液中でアンジオテシノ−ゲンに作用してアミノ酸１０個からなるペプチドであるアンジオテンシンＩを生成し、このアンジオテンシンＩのＣ末端から、アンジオテンシン変換酵素が、ジペプチドＨｉｓ−Ｌｅｕを遊離させ、アミノ酸８個からなるアンジオテンシン（II）が生成する。そしてアンジオテンシン（II）が、血管平滑筋を収縮させて血圧を上昇させ、副腎皮質からアルドステロンを分泌させ、腎臓でナトリウムを再吸収させることによって血圧を上昇させる。
【０００７】
本発明者等の研究と並行して、ラットへのアンジオテンシン（II）の投与により、高血圧，破骨細胞の増殖・活性化，及び骨密度の低下が引き起こされ、更に、もともと高血圧のラットに、アンジオテンシン（II）の受容体に対する拮抗薬の一種である「オルメサルタン」を投与した際に、破骨細胞の増殖・活性化が抑えられ、骨密度の低下が防止されるという報告があった（非特許文献１）。
【０００８】
アンジオテンシン（II）の受容体には、「アンジオテンシン（II）1型受容体（ＡＴ１受容体）」と「アンジオテンシン（II）２型受容体（ＡＴ２受容体）」があり、オルメサルタンは、「ＡＴ１受容体」拮抗薬の一種である。
【０００９】
しかしながら、廃用性骨粗鬆症モデルとして知られている、尾部懸垂により後肢を非荷重としたマウスにおいては、アンジオテンシン（II）の上昇が見られず、また高血圧でも無いことから、廃用性骨粗鬆症の場合には、レニン−アンジオテンシン系が関与しているのかどうか自体、疑わしいものがあった。
【００１０】
しかも、本発明者等の実験によると、レニン・アンジオテンシン系が活性化されることによる骨粗鬆症の場合には、「オルメサルタン」と同じ「ＡＴ１受容体」拮抗薬の一種である「ロサルタン」を投与すると、骨量が更に低下し、骨粗鬆症が悪化することが明らかとなった（特許文献１）。これは、ＡＴ２受容体が、ＡＴ１受容体の代替機能を果たしてしまった為と考えられる。
【００１１】
従って、廃用性骨粗鬆症の場合には、レニン−アンジオテンシン系の阻害によって効果があるとは容易には予想されず、特に、レニン・アンジオテンシン系が活性化されることによる骨粗鬆症でも効かなかった「ロサルタン」では、効く筈も無いと考えられた。
【００１２】
しかしながら、驚くべきことに、廃用性骨粗鬆症においては、「ロサルタン」の投与によって効果があることを見出し、本発明を完成したものである。
このことは、「廃用性骨粗鬆症では、全身的にレニン・アンジオテンシン系が活性化されることによる骨粗鬆症とは異なり、骨の局所でＡＴ１受容体そのものがホルモン非依存的に活性化されており、ＡＴ２受容体による代替機能が働いていない」という可能性を示すものである。
【００１３】
しかも、上述の廃用性骨粗鬆症モデルマウスにアンジオテンシン（II）の上昇が見られないことから予想された通り、一般のレニン・アンジオテンシン系が活性化されることによる骨粗鬆症の実験で効果があった、アンジオテンシン（I）から(II)への変換を阻害する「アンジオテンシン変換酵素阻害剤（以下「ＡＣＥＩ」と言うことがある。）」では、廃用性骨粗鬆症には全く効果がなかったことも、同時に確認した。
【００１４】
これは、廃用性骨粗鬆症では、アンジオテンシン（II）非依存的にＡＴ１受容体だけが骨中で活性化されていると言う、予想外のメカニズムによるものと思われ、このメカニズムに基づけば、廃用性骨粗鬆症には、ＡＴ１受容体拮抗薬全般が有効であると思われる。
【００１５】
【非特許文献１】産経新聞 08/09 東京朝刊 総合１面 1頁
【特許文献１】特願２００６−３５３５３３号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
従って、本発明の目的とするところは、ビスフォスフォネート等に要求される服用基準が無いため、寝たきり患者や微小重力下にいる者にとっても、服用が容易な、廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤を提供するにある。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
上述の目的は、下記の発明によって達成される。
【００１８】
（第一の発明）
アンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質を含むことを特徴とする、廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤。
【００１９】
（第二の発明）
アンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質が、下記の（Ａ）乃至（Ｃ）から選択される少なくとも一種以上であることを特徴とする、第一の発明記載の廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤。
（Ａ）低分子化合物
（Ｂ）ペプチド類
（Ｃ）アンジオテンシン（II）1型受容体遺伝子の発現を抑えるポリヌクレオチド
【００２０】
（第三の発明）
低分子化合物が、環状構造を有する化合物である、第二の発明記載の廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤。
【００２１】
（第四の発明）
アンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質が、イルベサルタン，オルメサルタン，カンデサルタン，テルミサルタン，バルサルタン，及びロサルタン，あるいはこれらの薬学的に許容される塩である、第三の発明記載の廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤。
【発明の効果】
【００２２】
本発明の廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤は、廃用性骨粗鬆症を予防又は治療し得る、安全で画期的なものである。
また、アンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質には、降圧作用もあるため、廃用性骨粗鬆症患者が高血圧も発症している場合には、一剤で両方を予防・治療し得るというメリットもある。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００２４】
〈本発明の廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤〉
（１）有効成分の種類
本発明に用いられる、アンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質としては、あらゆるアンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質を用いることができ、例えば（Ａ）低分子化合物，（Ｂ）ペプチド類，（Ｃ）アンジオテンシン（II）1型受容体遺伝子の発現を抑えるポリヌクレオチド等が挙げられる。アンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用とは、アンジオテンシン（II）1型受容体を経由する細胞内へのシグナル伝達を阻害する作用を言う。
【００２５】
（Ａ）低分子化合物
本発明において、低分子化合物であるアンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質としては、アンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有するものであれば良いが、例えば、分子内に1又は２以上の環状構造を有する化合物が好ましいものとして例示される。環状構造としては、単環，縮合多環，環集合構造が挙げられる。尚、環状構造は、炭素のみからなるものほか、複素環であっても良い。
また、かかる上記化合物の薬学的に許容される塩や、人体で上記化合物に変換され得る前駆体等の、各種誘導体であっても良い。
【００２６】
具体的には、以下の、公知のアンジオテンシン（II）1型受容体拮抗薬（前駆体も含む）等を用いることができる。
例示すると、
イルベサルタン（ブリストル・マイヤーズ（株）製「アバプロ」）及びその塩，
オルメサルタン及びオルメサルタン・メドキソミル（第一三共（株）製「オルメテック」等)等の塩，
カンデサルタン及びカンデサルタンシレキセチル（武田薬品工業（株）製「ブロプレス」等）等の塩，
テルミサルタン（アステラス（株）製「ミカルディス」等）及びその塩，
バルサルタン（ノバルティスファーマ（株）製「ディオバン」等）及びその塩，
ロサルタン及びロサルタンカリウム（万有製薬（株）製「ニューロタン」等）等の塩，
等が挙げられる。
【００２７】
（Ｂ）ペプチド類
また、このほか、ペプチド類であるアンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質としては、例えばアンジオテンシン（II）1型受容体に対する抗体等が挙げられるが、これらは、化学的に，あるいは、公知のバイオテクノロジー手法を用いて、人工的に合成したものであっても良い。
【００２８】
（Ｃ）アンジオテンシン（II）1型受容体遺伝子の発現を抑えるポリヌクレオチド
アンジオテンシン（II）1型受容体遺伝子の発現を抑えるポリヌクレオチドとしては、アンジオテンシン（II）1型受容体遺伝子に対するアンチセンスＤＮＡ，又はアンジオテンシン（II）1型受容体のｍＲＮＡに対するＲＮＡ干渉作用を有する二本鎖又は一本鎖のＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ，ｓｈＲＮＡ，マイクロＲＮＡ等）等が挙げられる。
また、ポリヌクレオチドは、ＤＮＡとＲＮＡの、ハイブリッドであっても良い。
更に、アンジオテンシン（II）1型受容体遺伝子の発現を抑えるポリヌクレオチドには、上記のポリヌクレオチドの他、アンジオテンシン（II）1型受容体遺伝子の発現阻害作用に影響を及ぼさない範囲で、これらのポリヌクレオチド配列のうち、１個又は数個のヌクレオチドが、欠失・置換・付加・挿入されたものも含まれる。
これらポリヌクレオチドは、ＤＮＡ，ＲＮＡのまま、あるいは、プラスミド，ウイルスベクター等として使用可能である。
【００２９】
（２）その他の成分
本発明の廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤には、その阻害効果や予防又は治療効果を阻害しない範囲で、他の成分を含有させることができ、例えば薬学的に許容される担体として、賦形剤，滑沢剤，結合剤，崩壊剤，安定剤，矯味矯臭剤，希釈剤，界面活性剤，乳化剤，可溶化剤，吸収促進剤，保湿剤，吸着剤，充填剤，増量剤，付湿剤，防腐剤等の添加剤を用いて周知の方法で製剤化することができる。
ここに、賦形剤としては、有機系賦形剤及び無機系賦形剤等が挙げられる。
【００３０】
本発明の廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤は、従来知られている廃用性骨粗鬆症の予防又は治療成分との合剤としても良い。
【００３１】
（３）剤形
本発明の廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤の剤形は、例えば錠剤，カプセル剤，顆粒剤，散剤，丸剤，トローチ，もしくはシロップ剤，注射剤等の形態が挙げられる。
【００３２】
（４）投与方法
本発明の廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤の投与方法としては、有効成分であるアンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質が、低分子化合物やぺプチド類である場合は、経口投与，静注等の静脈投与，筋肉内投与,  経皮投与，経鼻投与，皮内投与，皮下投与，腹腔内投与，直腸内投与，粘膜投与、吸入等が挙げられるが、簡便である等の点からは、経口投与が好ましく、安全かつ血中濃度を一定に保つという点では静注等の静脈投与が好ましく、患部に確実に届く点では、筋肉注射等の筋肉内投与が好ましい。
有効成分であるアンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質が、ポリヌクレオチドの場合、発現プラスミドを直接筋肉内に投与する方法（ＤＮＡワクチン法），リポソーム法，リポフェクチン法，マイクロインジェクション法，リン酸カルシウム法，エレクトロポレーション法等が挙げられ、特にＤＮＡワクチン法、リポソーム法が好ましい。
ウイルスベクターを用いる場合、（日経サイエンス，１９９４年４月号，２０−４５頁、月刊薬事，３６（１），２３−４８（１９９４）、実験医学増刊，１２（１５），（１９９４）、およびこれらの引用文献等）等に記載されているように、ウイルスに、目的とする遺伝子を組み込むことによって行うことができる。
ウイルスベクターに用いるウイルスとしては、例えばレトロウイルス、アデノウイルス、アデノ関連ウイルス、ヘルペスウイルス、ワクシニアウイルス、ポックスウイルス、ポリオウイルス、シンビスウイルス等のＤＮＡウイルス又はＲＮＡウイルスが挙げられる。
ウイルスの中では、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ関連ウイルス、ワクシニアウイルス等が好ましく、特にアデノウイルスが好ましい。
遺伝子を実際に医薬として作用させるには、当該遺伝子を直接体内に導入する「ｉｎ  ｖｉｖｏ法」の他、ヒトかから採集した細胞に当該遺伝子を導入し、その後、遺伝子導入細胞を体内に戻すという、「ｅｘ  ｖｉｖｏ法」等がある［日経サイエンス，１９９４年４月号，２０−４５頁、月刊薬事，３６（１），２３−４８（１９９４）、実験医学増刊，１２（１５），（１９９４）、およびこれらの引用文献等］が、ｉｎ  ｖｉｖｏ法は費用や手間が少なく、簡便である点で好ましく、ｅｘ  ｖｉｖｏ法は、遺伝子の細胞内への導入効率が良いという点で好ましい。
「ｉｎ  ｖｉｖｏ法」により投与する場合は、治療目的の疾患、症状等に応じた適当な投与経路を選択することができる。投与経路としては、例えば、静脈、動脈、皮下、皮内、筋肉内等が挙げられる。
「ｉｎ  ｖｉｖｏ法」によって投与する場合は、例えば、液剤等の製剤形態をとることができる。一般的には遺伝子を含有する注射剤等の形態が好ましく、必要に応じて、注射剤等に常用されている各種の成分等を加えることもできる。
また、遺伝子を含有するリポソームまたは膜融合リポソーム（センダイウイルス（ＨＶＪ）−リポソーム等）においては、懸濁剤、凍結剤、遠心分離濃縮凍結剤等のリポソーム製剤の形態として用いることができる。
【００３３】
（５）有効成分の含有量
本発明の廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤中の、有効成分であるアンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質又はその前駆体の含有量は、剤形によって様々であり、一概に限定できず、各種剤形化が可能な範囲で、投与量との関係で適宜選択すれば良いが、例えば液剤の場合、好ましくは０．０００１〜１０（ｗ／ｖ％），より好ましくは０．００１〜５（ｗ／ｖ％），特に注射剤の場合、好ましくは０．０００２〜０．２（ｗ／ｖ％），より好ましくは０．００１〜０．１（ｗ／ｖ％），固形剤の場合、好ましくは０．０１〜５０（ｗ／ｗ％），より好ましくは０．０２〜２０（ｗ／ｗ％）等として調製できるが、必ずしもこの範囲に限定されるものでは無い。
【００３４】
（６）廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤の投与量（有効成分換算）
本発明の廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤の投与量は、投与経路，症状，標的とする組織や器官，年齢，体重，予防又は治療剤の形態等によって異なるが、例えば、有効成分であるアンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質が、低分子化合物，ペプチド類等である場合、予防又は治療剤中の有効成分の量が、処置を必要としている対象体重１ｋｇ当たり好ましくは０．００５〜５００ｍｇ，より好ましくは、０．１〜１００ｍｇ，但し、成人に対して１日あたり、下限として好ましくは０．０１ｍｇ（より好ましくは０．１ｍｇ），上限として、好ましくは２０ｇ（より好ましくは２０００ｍｇ，更に好ましくは５００ｍｇ，特に好ましくは１００ｍｇ）となるように、１回又は数回に分けて、症状に応じて投与することが望ましい。
有効成分であるアンジオテンシン（II）1型受容体阻害作用を有する物質がポリヌクレオチドの場合の投与量も、症状，標的とする組織や器官，年齢，体重等によって適宜調節すべきであるが、一般に、ポリヌクレオチドとして、好ましくは０．０００１〜１００ｍｇ，更に好ましくは０．００１〜１０ｍｇを、数日又は数ヶ月に一回の割合で投与することが好ましい。
【実施例】
【００３５】
以下、実施例において、本発明を詳細に説明するが、それに先だって、実施例の廃用性骨粗鬆症予防治療薬の効果を確認するために用いた、尾部懸垂により後肢を非荷重とした廃用性骨粗鬆症モデル動物について説明する。
この「尾部懸垂モデル」に用いるマウスは、特に種類は問わず、あらゆる実験に適したマウスが用いられ、例えば、C57BL/6Nマウス，C57BL/6Jマウス（B6マウス），Balb/cマウス等が挙げられる。
【００３６】
また、予防又は治療剤の効果の確認には、BV/TV (bone volume/tissue volume)×１００，すなわち骨量を組織総量で割った、骨量フラクション（３次元の骨量（％））という値で評価した。
骨量の測定は、マイクロCT（スキャンコメディカル（株）（SCANCO Medical AG）製，micro CT-40）によって行った。
【００３７】
尚、下記の実施例及び比較例において用いられたマウスは、尾部懸垂により後肢を非荷重とした後も、アンジオテンシン（II）の上昇が見られず、また高血圧でも無いことが確認された。
【００３８】
実施例１
（ＡＴ１受容体拮抗薬：ロサルタン）
１２週齢の雄のC57BL/6Jマウス群に、公知のＡＴ１受容体拮抗薬であるロサルタンカリウムを含む飲料水（170 mg/L）で、２日間前処置した後、７日間、尾部懸垂し、マイクロCTスキャンによって、脛骨の海綿骨部の骨量を測定した。
対照例として、尾部懸垂しないマウス群，及び、尾部懸垂をするが、ロサルタンカリウムを投与しないで飼育したマウス群を用いた（１群４−５匹）。
【００３９】
結果を、図１に示す。尚、図１のデータは、それぞれの群の３次元骨量の平均を表す。
【００４０】
図１から分かる通り、ロサルタンカリウムを投与した群は、明らかに、廃用性骨粗鬆症が是正されていた。
【００４１】
比較例１
（ＡＣＥＩ：マレイン酸エナラプリル）
ＡＣＥ阻害薬であるマレイン酸エナラプリルを含む飲料水（33 mg/L）を用い、実施例１と同様の方法で、試験を行った結果を、図２に示す。
【００４２】
図２から分かる通り、マレイン酸エナラプリルを投与した群は、全く効果がなかった。
【産業上の利用可能性】
【００４３】
本発明の廃用性骨粗鬆症の予防又は治療剤は、一剤で、高血圧と廃用性骨粗鬆症の両方を予防又は治療し得る、画期的なものである。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】ロサルタンカリウム（ＡＴ１受容体拮抗薬）投与による、骨量の変化を表す図である。骨量はマイクロCTスキャンによって定量化した。
【図２】マレイン酸エナラプリル（ＡＣＥ阻害薬）投与による、骨量の変化を表す図である。骨量はマイクロCTスキャンによって定量化した。
【図１】
2008222685.tif 000002
【図２】
2008222685.tif 000003