(57)【要約】【課題】支持タンパク質が減少し、酵素分解系が過剰に活性化し、皮膚密度が減少する老化のプロセスを媒介する構成要素に作用しうる、新規な有効成分の提供。【解決手段】有効成分として、琥珀抽出物を含む第１の有効成分、及び、バーソレシア・エクセルサ抽出物、ポテンティラ・エレクタ抽出物、アスパラギン酸マグネシウム、筋肉の収縮に作用するペプチド（特にアセチルヘキサペプチド−３）、脂肪酸（特にＣ１６脂肪酸）がグラフト結合したペプチド若しくはその誘導体、又はかかるペプチドの組み合わせ（コラーゲンの合成を促進、特にパルミトイルオリゴペプチドペンタペプチド−３又はパルミトイルテトラペプチド−７）、大豆粉加水分解物、及び植物の糖脂質（好適には穀物のスフィンゴ糖脂質、より好適には小麦のスフィンゴ糖脂質）からなる群から選択される１つ以上の更なる有効成分を含んでなる化粧用組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分として、
琥珀抽出物を含む第１の有効成分、並びに
バーソレシア・エクセルサの抽出物、ポテンティラ・エレクタの抽出物、アスパラギン酸マグネシウム、筋肉の収縮に作用するペプチド（特にアセチルヘキサペプチド−３）、脂肪酸（特にＣ１６脂肪酸）がグラフト結合したペプチド若しくはその誘導体、又はかかるペプチドの組み合わせ（コラーゲンの合成を促進、特にパルミトイルオリゴペプチドペンタペプチド−３又はパルミトイルテトラペプチド−７）、大豆粉加水分解物、及び植物の糖脂質（好適には穀物のスフィンゴ糖脂質、より好適には小麦のスフィンゴ糖脂質）
からなる群から選択される１つ以上の更なる有効成分を含んでなる化粧用組成物。
【請求項２】
前記琥珀抽出物が琥珀、好適にはバルチックアンバーからの、１つ以上のＣ１〜Ｃ５モノアルコール、及び／又は１つ以上のＣ２〜Ｃ５グリコールを含んでなるアルコール性抽出溶媒若しくはアルコール水溶液を含んでなる抽出溶媒を用いる抽出により得られる、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
前記抽出溶媒が、エタノール、ブチレングリコール、エタノール／水、ブチレングリコール／水、ブチレングリコール／エタノール／水の混合液、望ましくはエタノール含量４０〜８０％のエタノール／水の混合液、ブチレングリコール、５０／５０のブチレングリコール／水の混合液、又は８０／２０〜６０／４０のブチレングリコール／エタノールの混合液からなる群から選択される、請求項２記載の組成物。
【請求項４】
前記琥珀抽出物を０．０１〜５重量％の濃度で含んでなる、請求項１から３のいずれか１項記載の組成物。
【請求項５】
琥珀抽出物と、少なくともスフィンゴ糖脂質、好適には小麦スフィンゴ糖脂質を含有する、請求項１から４のいずれか１項記載の組成物。
【請求項６】
０．０１〜５重量％の濃度、好適には０．０５〜０．８重量％の濃度でスフィンゴ糖脂質、好適には小麦スフィンゴ糖脂質を含有する、請求項１から５のいずれか１項記載の組成物。
【請求項７】
更に、ルメックス・クリスプス抽出物、グリシリザ・グラブラの根茎抽出物、グリコシル化若しくは非グリコシル化トリテルペン誘導体、センテラ・アジアチカ抽出物（特にマデカッソシド、アジアチコシド、アジア酸又はマデカッソ酸の各々単独若しくはそれらの組み合わせ）、ＤＮＡ加水分解物（特に魚の精液抽出物から調製したもの）、及びオキサゾリドン（特に４−デシルオキサゾリジン−２−オン）からなる群から選択される１つ以上の成分を含んでなる、請求項１から６のいずれか１項記載の組成物。
【請求項８】
前記琥珀抽出物が、プログラム化された有効成分の放出を可能にするベクターシステム中、特にリポソーム型のラメラ小胞中に封入されている、請求項１から７のいずれか１項記載の組成物。
【請求項９】
化粧料としての琥珀抽出物、特にバルチックアンバー抽出物の使用であって、
当該抽出物が、真皮の支持タンパク質、及び／又は真皮のタンパク質を分解する酵素システム、及び／又は細胞外マトリックスのグリカンタイプの基本成分（特にプロテオグリカン）に作用して皮膚の基本的な生体の機械的特性（すなわち皮膚のはり及び弾力性）を改善するものであって、
化粧用組成物、特にバーソレシア・エクセルサ抽出物、ポテンティラ・エレクタ抽出物、アスパラギン酸マグネシウム、筋肉の収縮に作用するペプチド（好適にはアセチルヘキサペプチド−３）、脂肪酸（好適にはＣ１６脂肪酸）がグラフト結合したペプチド若しくはその誘導体、又はかかるペプチドの組み合わせ（コラーゲンの合成を促進、特にパルミトイルオリゴペプチドペンタペプチド−３又はパルミトイルテトラペプチド−７）、植物の糖脂質（好適には穀物のスフィンゴ糖脂質、より好適には小麦のスフィンゴ糖脂質）からなる群から選択される１つ以上の更なる有効成分を含んでなる化粧用組成物の調製の際に添加される、前記使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は広義には、琥珀抽出物を含む化粧用組成物に関する。本発明は更に、特にスキンファーミング（肌の引き締め）効果を改善するための化粧料としての、かかる抽出物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
化粧用組成物の開発担当者は通常、その化粧用組成物に補助的な効果を付与するために組み合わせる有効成分を探索し、この組成物の効果を最大限にしようとする。
【０００３】
したがって、かかる化粧用組成物中には通常、この組成物に補助的効果（例えば皮膚の保湿性及びアンチリンクル効果）をもたらす有効成分が含有されている。
【０００４】
また、例えばスキンファーミングなどの特定の目的のために、そのような活性を有する有効成分、又はそれと類似の活性を有するが異なるメカニズムで機能することが知られている異なる有効成分を探索し、組み合わせ、最善の結果を得ることも通常行われる。
【特許文献１】特願平０９−２２７３３４号
【特許文献２】中国特許出願第１２４５０５２号
【特許文献３】中国特許出願第１３２５６７８号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
真皮はコラーゲンタンパク質により基本的に構成され、それは線維芽細胞により合成され、水和した細胞外マトリックス内に浸漬し、線維芽細胞により張力が維持されている。しわの形成及び皮膚のはりの喪失は、その真皮におけるトラブルに由来するとして一般に知られている。老化のプロセスでは支持タンパク質が減少し、酵素分解系が過剰に活性化し、皮膚密度が減少する。ゆえに、これらを媒介する構成要素に作用しうる、新規な有効成分を見出すことが必要となる。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の発明者らによる鋭意研究の結果、上記の様々な媒介要素に非常に有効に作用しうる活性成分を見出すに至った。本発明は、皮膚の状態を改善する１つ以上の有効成分を含む化粧用組成物、さらに詳細には、以下からなる群から選択される１つ以上の有効成分を含んでなる化粧用組成物の提供に関する。
−  バーソレシア・エクセルサ（Ｂｅｒｔｈｏｌｌｅｔｉａ  ｅｘｃｅｌｓａ）の抽出物、特にその果皮の抽出物（コラーゲンの合成を促進することが公知）、
−  ポテンティラ・エレクタ（Ｐｏｔｅｎｔｉｌｌａ  ｅｒｅｃｔａ）、別名トルメンティラ（ｔｏｒｍｅｎｔｉｌｌｅ）の抽出物（コラーゲンの合成に作用することが公知）、
−  アスパラギン酸マグネシウム（真皮と表皮の間の接着に作用することが公知）、
−  アセチルヘキサペプチド−３（神経伝達物質の放出を減少させ、筋肉の収縮を促進することが公知のペプチド、特に商標名アルジルリン（登録商標）として公知）、
−  脂肪酸（特にＣ１６脂肪酸）がグラフト結合したペプチド若しくはその誘導体、又はかかるペプチドの組み合わせ（コラーゲンの合成を促進、特にパルミトイルオリゴペプチドペンタペプチド−３又はパルミトイルテトラペプチド−７）、
−  糖タンパク質リッチな大豆加水分解物（Ｉ型コラーゲンの合成に作用することが公知）、及び
−  植物糖ペプチド、特に小麦のスフィンゴ糖脂質（角質層を強化することが公知）。
【０００７】
皮膚のスキンファーミングを改善するという視点から、上記の１つ以上の有効成分を含む化粧用組成物の効果を上げる方法を探索する過程において、本発明の発明者らは琥珀抽出物が特に重要な候補物質であることを見出した。
【０００８】
発明者らはまた、琥珀抽出物のこれらの特に有用な特性と、当該琥珀抽出物が、単層で培養されたヒト真皮線維芽細胞の遺伝子発現プロファイルに対する顕著な調節活性を有し、その活性が同時に幾つかのレベルで作用するという全く予想外の試験結果とが相互に関連することを解明するに至った。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
琥珀の語源は、アラビア語のａｒｉｂａｒである。琥珀は古代の樹木が化石となった樹脂であり、学名はＰｉｎｕｓ  ｓｕｃｃｉｎｉｆｅｒａで、「琥珀の森」として知られていた場所で産生されたものである。約４，５００万年前、中央ヨーロッパ地域全体は森に覆われていたと言われている。琥珀の形成が、いずれの木に由来するかは不明であるが、一般の常識に反するが、琥珀は恐らく、特に急激な気候変動が生じた時代に浸出した松の樹液ではなく、木の維管束組織から形成されたものと考えられる。琥珀の組成に関して記載されている刊行物が幾つか存在する（特にＣ．Ｗ．Ｂｅｃｋ，Ｔｈｅ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ａｍｂｅｒ，Ｅｓｔ．Ｍｕｓ．Ｃｉｅｎｃ．ｎａｔ．ｄｅ  Ａｌａｖａ，１９９９，ｎｕｍ．ｅｓｐｅｃ．２，３３−４８、及びＪ．Ｓ．Ｍｉｌｌｓ，Ｔｈｅ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｂａｌｔｉｃ  ａｍｂｅｒ，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｇｅｏｌｏｇｙ，１９８４，４７，１５−３９を参照）。
【００１０】
世界の琥珀資源の９０％は、バルト海の北部に位置する、ポーランドとリトアニアに囲まれた、ロシアの飛び領地に集中している。特に本発明で使用するものはこの地域原産の琥珀の抽出物であり、以下「バルチックアンバー抽出物」と称する。
【００１１】
化粧用組成物としての琥珀又は琥珀抽出物の使用については、本特許出願以前に既に幾つか開示がなされている。
【００１２】
例えば特許文献１には、有機溶媒で抽出した琥珀抽出物の、抗菌性、抗酸化作用及び脱臭効果を目的とした使用に関する記載が存在する。
【００１３】
特許文献２には、アンチリンクル効果を目的とする琥珀粉の使用に関する記載が存在する。
【００１４】
特許文献３には、皮膚において形成される防御シールドを強化するための、また皮膚内の微小循環を改善するための、アルコールによる琥珀抽出物の使用に関する記載が存在する。
【００１５】
すなわち、これらの様々な特許文献の存在により、本発明以前にも、化粧用組成物への琥珀粉又は琥珀抽出物の使用が公知であったことが明らかである。しかし、これらの特許文献のいずれにも、本発明の発明者らにより明示された真皮の構成要素に作用する特別な活性に関して、又はその、本発明の主要部を形成する特定の組み合わせによる有効性との因果関係に関しては何ら記載されてはいない。前記有効性は、本特許出願の発明者らにより立証された、自明ではない、多くの特性に起因するものである。
【００１６】
すなわち、その基本的な一態様では、本発明は有効成分として以下のうちのいずれかを含んでなる化粧用組成物に関する：
−  琥珀抽出物を含む第１の有効成分、及び
−  バーソレシア・エクセルサ（Ｂｅｒｔｈｏｌｌｅｔｉａ  ｅｘｃｅｌｓａ）の抽出物、
−  ポテンティラ・エレクタ（Ｐｏｔｅｎｔｉｌｌａ  ｅｒｅｃｔａ）の抽出物、
−  アスパラギン酸マグネシウム、筋肉の収縮に作用するペプチド（特にアセチルヘキサペプチド−３）、
−  脂肪酸（特にＣ１６脂肪酸）がグラフト結合したペプチド若しくはその誘導体、又はかかるペプチドの組み合わせ（コラーゲンの合成を促進、特にパルミトイルオリゴペプチドペンタペプチド−３又はパルミトイルテトラペプチド−７）、
−  大豆粉加水分解物、及び
−  植物の糖脂質（好適には穀物のスフィンゴ糖脂質、より好適には小麦のスフィンゴ糖脂質）
からなる群から選択される１つ以上の更なる有効成分。
【００１７】
別の基本的な一態様では、本発明は更に化粧料としての琥珀抽出物、特にバルチックアンバー抽出物の使用に関する。当該琥珀抽出物は真皮の支持タンパク質、及び／又は真皮のタンパク質を分解する酵素システム、及び／又は細胞外マトリックスのグリカンタイプの基本成分（特にプロテオグリカン）に作用して皮膚の基本的な生体の機械的特性（すなわち皮膚のはり（ｆｉｒｍｎｅｓｓ）及び弾力性）を改善するものであり、化粧用組成物、特にバーソレシア・エクセルサ（Ｂｅｒｔｈｏｌｌｅｔｉａ  ｅｘｃｅｌｓａ）の抽出物、ポテンティラ・エレクタ（Ｐｏｔｅｎｔｉｌｌａ  ｅｒｅｃｔａ）の抽出物、アスパラギン酸マグネシウム、筋肉の収縮に作用するペプチド（特にアセチルヘキサペプチド−３）、脂肪酸（特にＣ１６脂肪酸）がグラフト結合したペプチド若しくはその誘導体、又はかかるペプチドの組み合わせ（コラーゲンの合成を促進、特にパルミトイルオリゴペプチドペンタペプチド−３又はパルミトイルテトラペプチド−７）、植物の糖脂質（好適には穀物のスフィンゴ糖脂質、より好適には小麦のスフィンゴ糖脂質）からなる群から選択される１つ以上の更なる有効成分を含んでなる化粧用組成物の調製の際に添加される。
【００１８】
これらの２つの態様において使用する琥珀抽出物は、好適にはバルチックアンバー抽出物である。
【００１９】
特に好適な一変形態様では、１つ以上のＣ１〜Ｃ５モノアルコール、及び／又は１つ以上のＣ２〜Ｃ５グリコールを含んでなるアルコール性抽出溶媒若しくはアルコール水溶液を含んでなる抽出溶媒を用いて当該琥珀抽出物を調製する。
【００２０】
そのような抽出溶媒は、好適にはエタノール、ブチレングリコール、エタノール／水、ブチレングリコール／水、ブチレングリコール／エタノール／水の混合液、望ましくはエタノール含量４０〜８０％のエタノール／水の混合液、ブチレングリコール、５０／５０のブチレングリコール／水の混合液、又は８０／２０〜６０／４０のブチレングリコール／エタノールの混合液からなる群から選択される。
【００２１】
本発明の枠内で使用する琥珀抽出物は、アルコール性抽出溶媒の使用により良好に得られ、その抽出物を乾燥させ、更に化粧用組成物として使用可能なグリコール溶媒、特にブチレングリコールと混合する。
【００２２】
前記アルコール抽出物の調製方法は以下のとおりである：
琥珀、特に黄色のバルチックアンバーを粉末状にし、Ｃ１〜Ｃ５アルコール、又は水とＣ１〜Ｃ５アルコール（特にエタノール）との混合液、更に詳細にはエタノール含量が４０〜８０体積％のエタノールと水の混合液で抽出する。この操作は、アルコール／水混合液に琥珀粉を添加し、冷所で数時間（例えば約５時間）静置することにより行われる。次いで、数時間（例えば約８時間）その混合液を加熱する。次いで、例えば遠心分離、より好適には濾過して固形残渣を除去し、抽出液を回収する。次いで、好適には真空下で溶媒を蒸発させて除去し、粉末状のアルコール抽出物と呼ばれるものを得る。次いで、化粧品用途に使用できる溶媒（特にグリコール、好適にはブチレングリコール、又は界面活性剤の混合物）中にこの微細粉を溶解若しくは分散させる。
【００２３】
別の変形態様では、いわゆるグリコール抽出物を調製する。かかる抽出物の調製法は以下のとおりである：
琥珀、望ましくは黄色のバルチックアンバーを粉末状にし、次いで、冷所で約４８時間、望ましくは撹拌しながらグリコール性溶媒に浸漬する。次いで、好適には約６時間にわたり熱抽出を行う。次いで、好適には遠心分離により固液分離を行い、その後上澄みを回収し、濾過し、液中に懸濁している可能性のある微粒子を除去する。以上より本発明に係る好適な抽出物が調製される。
【００２４】
使用する当該グリコール溶媒は、ブチレングリコール、体積比率５０／５０のブチレングリコール／水の混合液、又は体積比率８０／２０〜６０／４０のブチレングリコール／アルコールの混合液が望ましい。
【００２５】
上記のように、本発明の組成物の調製において琥珀抽出物が選択されたのは、それらが皮膚のスキンファーミング効果という特徴的な利用価値を有するためである。前記価値は、これらの抽出物がヒト真皮線維芽細胞の遺伝子発現に影響を及ぼすことを示す生物学的試験により確認されている。すなわちこのことは実施例に開示されており、そこではこの抽出物が、
−  コラゲナーゼ又はＭＭＰ１と呼ばれるメタロプロテイナーゼ−１、
−  真皮内の主要なコラーゲン（特に１型、３型及び５型コラーゲン、より具体的には５型コラーゲン）の比率（真皮の線維の配向に作用）、
−  デルマトポンチン（真皮内のタンパク質／細胞外マトリックスの相互作用を制御することが公知）、及び
−  小型ロイシンリッチプロテオグリカン（ＳＬＲＰ）（特にビグリカン及びバーシカン。皮膚の生体機械的特性の維持において主要な役割を果たす線維の形成に関与するプロテオグリカン。）
に対して影響を及ぼすことが開示されている。
【００２６】
上記の琥珀抽出物とは別に、本発明の組成物は、以下からなる群から選択される少なくとも他の１つの有効成分を含んでなる：
バーソレシア・エクセルサ（Ｂｅｒｔｈｏｌｌｅｔｉａ  ｅｘｃｅｌｓａ）の抽出物、
ポテンティラ・エレクタ（Ｐｏｔｅｎｔｉｌｌａ  ｅｒｅｃｔａ）の抽出物、
アスパラギン酸マグネシウム、
筋肉の収縮に作用するペプチド（特にアセチルヘキサペプチド−３）、
脂肪酸（特にＣ１６脂肪酸）がグラフト結合したペプチド若しくはその誘導体、又はかかるペプチドの組み合わせ（コラーゲンの合成を促進、特にパルミトイルオリゴペプチドペンタペプチド−３又はパルミトイルテトラペプチド−７）、
植物の糖脂質（好適には穀物のスフィンゴ糖脂質、より好適には小麦のスフィンゴ糖脂質）。
【００２７】
本発明の組成物に含まれる他の「有効成分」が各々有する特有の効果及び好適な含有比率を以下に示す。
１）バーソレシア・エクセルサ（Ｂｅｒｔｈｏｌｌｅｔｉａ  ｅｘｃｅｌｓａ）の抽出物：
特にその果皮の抽出物が望ましい。当該抽出物の作用機構及び効果に関しては、国際公開第９６／２５１４３号及びフランス特許出願第２７５２５２７号に記載されている。これらの２つの特許出願において、当該抽出物がコラーゲン合成の促進活性及び抗フリーラジカル活性を有し、その結果、真皮の老化が抑制され、しわの発生が予防され若しくはしわの深度が減少し、又はスキンファーミング効果が得られることが開示されている。当該抽出物は、本発明の組成物中に０．１〜２重量％の濃度で使用するのが好適である。
２）ポテンティラ・エレクタ（Ｐｏｔｅｎｔｉｌｌａ  ｅｒｅｃｔａ）の抽出物：
当該抽出物は、特に欧州特許第０９４６１３８号に記載されている。この特許文献において、当該抽出物の使用により、真皮−表皮接合部の強化により真皮−表皮間の接着が促進され、ＶＩＩ型コラーゲンの形成が刺激され、これらの２つの作用の組合せにより、スキンファーミング効果が得られ、皮膚の老化の兆候の表面化が予防若しくは遅延され、しわの発生が遅延されるか若しくはしわの震度が減少することが開示されている。ポテンティラ・エレクタ（Ｐｏｔｅｎｔｉｌｌａｅｒ  ｅｃｔａ）のグリコール抽出物は、本発明の組成物中に０．１〜２重量％の濃度で使用するのが好適である。
３）アスパラギン酸マグネシウム：
本発明の組成物中に、好適には０．０１〜０．５重量％の濃度、特に好適には０．０２〜０．１重量％の濃度で使用する。
４）神経伝達物質の放出を減少させ、筋肉の収縮を促進するペプチド：
特にリポテック社（Ｌｉｐｏｔｅｃｈ  ＳＡ）製のアルジルリン（登録商標）として公知のアセチルヘキサペプチド−３。組成物に対して０．１〜１重量％の濃度で使用するのが好適である。
５）脂肪酸（特にＣ１６脂肪酸）がグラフト結合したペプチド若しくはその誘導体、又はかかるペプチドの組み合わせ：
コラーゲン合成を促進。特に、パルミトイルオリゴペプチドペンタペプチド−３又はパルミトイルテトラペプチド−７。組成物の総重量に対して好適には０．１〜５重量％の濃度、より好適には１〜３重量％の濃度で使用する。
６）糖タンパク質リッチな大豆加水分解物：
かかる加水分解物は市販されており、特にシラブ社（Ｓｉｌａｂ）により市販され、Ｉ型コラーゲン、フィブリリン１、及びフィブロネクチンの合成を増加させるとされているラフェルミン（登録商標）が挙げられる。かかる加水分解物は、化粧用組成物の重量に対して、好適には０．１〜５重量％の濃度、特に好適には１〜３．５重量％の濃度で使用する。
７）植物の糖脂質（特に穀物のスフンゴ糖脂質、好適には小麦のスフィンゴ糖脂質）：
かかる糖脂質（特に小麦のスフンゴ糖脂質）は、組成物中の第２の有効成分として使用される望ましい成分を構成する。組成物に最適な効果（表皮細胞への作用）が付与される。好適には０．０１〜５重量％の濃度、特に好適には０．０５〜０．８重量％の濃度で使用する。
【００２８】
本発明の化粧用組成物は、好適には約２重量％の琥珀のグリコール抽出物、及び約０．１重量％のスフィンゴ糖脂質（特に小麦から抽出したスフィンゴ糖脂質）を含んでなる。
【００２９】
使用するスフィンゴ糖脂質を含む抽出物は、グルコシルセラミド、ジラクトシルジグリセリド、トリグリセリド、及びホスホリン脂質を含有する抽出物であるのが好適である。これらの抽出物は、好適には約５０重量％のグルコシルセラミド、４０％のジガラクトシルジグリセリド、０〜５％のトリグリセリド、及び５〜１０％のホスホリン脂質を含有する。
【００３０】
好適には、約５０〜６５％のリノール酸、１５〜２０％のパルミチン酸及び１０〜１５％のオレイン酸の構成比率で脂肪酸を含有するスフィンゴ糖脂質の混合物を使用する。
【００３１】
本発明の組成物はまた、他の有効成分、特に以下に列挙する成分を含有してもよい：
−  ミトコンドリア、特にミトコンドリアＤＮＡの保護剤：例えばヘキサペチド−１１（通常０．１〜５重量％の濃度、好適には０．５〜２重量％の濃度で使用）、又はゲンチジン酸トコフェロール（通常０．０１〜２重量％の濃度で使用）。
−  トコトリエノール及びその誘導体（通常０．０１〜５重量％、好適には０．０２〜０．５重量％の濃度で使用）。
−  ルメックス・クリスプス（Ｒｕｍｅｘ  ｃｒｉｓｐｕｓ）の抽出物（通常０．１〜５重量％、好適には０．５〜２重量％の濃度で使用）。
−  グリシリザ・グラブラ（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ）の根茎の抽出物（通常０．０１〜１重量％の濃度で使用）。
−  センテラ・アジアチカ（Ｃｅｎｔｅｌｌａ  ａｓｉａｔｉｃａ）から抽出した、グリコシル化若しくは非グリコシル化トリテルペンの誘導体（特にマデカッソシド、アジアチコシド、アジア酸又はマデカッソ酸（各々単独若しくはそれらの組み合わせ）、通常０．１〜５重量％の濃度で使用）。
−  トコフェロール及びその誘導体（特にリン酸トコフェロール又は酢酸トコフェロール、０．１〜０．５重量％の濃度で使用）。
−  アスコルビン酸又はビタミンＣ。特にエラスチン合成を促進することが公知。エラスチン合成に関してはフランス特許第２７３７９７１号に記載されている。好適には０．１〜５重量％の濃度で、特に好適には１〜２重量％の濃度でアスコロビン酸を本発明にかかる組成物に添加する。
−  ヒアルロン酸又はそのナトリウム塩（好適には０．１〜５重量％の濃度で使用）。
−  Ｄ−キシロース（その使用に関して欧州特許第１０２８７０５号に記載されている。本発明の組成物に対し、好適には０．１〜１重量％の濃度で使用。）。
−  グリコール（特にブチレングリコール）及びグリセロール（１〜５重量％の濃度で使用）。
−  レチノイン酸（０．０１〜１重量％の濃度）、又はレチノール若しくはそのエステル（例えばプロピオン酸レチノール。通常１５００〜２５００ＩＵの濃度）。
−  ＤＮＡ加水分解物（特に魚の精液抽出物の処理により調製）０．０１〜１重量％、
−  植物由来のエクジステロイド（０．１％〜２重量％の濃度）。
−  オキサゾリドン（特に４−デシルオキサゾリジン−２−オン、好適には０．１％〜５重量％の濃度で使用）。
−  植物性タンパク質又は植物タンパク質加水分解物（特に小麦タンパク質及び／又はオーツ麦タンパク質、皮膚表面の引き締め効果を有する。当該タンパク質を０．１％〜５重量％の濃度で、本発明の組成物中に用いるのが好適である）。
【００３２】
これらの全ての組成物中に、琥珀抽出物を０．０１％〜５重量％の濃度で添加するのが好ましい。アルコール抽出物の場合には、当該琥珀抽出物の濃度は好適には０．０１〜０．１重量％であり、上記のグリコール抽出物の場合には０．５〜５重量％、好適には１〜２．５重量％の濃度である。
【００３３】
上記の補助的な有効成分のうち、以下を選択するのが好適である：
ルメックス・クリスプス（Ｒｕｍｅｘ  ｃｒｉｓｐｕｓ）の抽出物、
グリシリザ・グラブラ（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ）の根茎の抽出物、
グリコシル化された又は非グリコシル化トリテルペンの誘導体、
センテラ・アジアチカ（Ｃｅｎｔｅｌｌａａｓｉａｔｉｃａ）の抽出物（特にマデカッソシド、アジアチコシド、アジア酸又はマデカッソ酸の各々単独若しくはそれらの組み合わせ）、
ＤＮＡ加水分解物（特に魚の精液抽出物から調製したもの）、及び
オキサゾリドン（特に４−デシルオキサゾリジン−２−オン）。
これらの様々な物質を、好適には上記の割合で、より好適には当該化粧料の第２の有効成分としての小麦スフィンゴ脂質含有抽出物を含む組成物中で使用する。
【００３４】
好適な一変形態様では、当該琥珀抽出物を、プログラム化された有効成分の放出を可能にするベクターシステム中、特にリポソーム型のラメラ小胞中に封入する。
【００３５】
本発明の組成物の効果は、以下の実施例により更に明確に理解される。
【００３６】
＜実施例１＞：琥珀のエタノール抽出物の調製
黄色のバルチックアンバーを粉末状にし、冷所で５時間、６０体積％エタノール／水の混合液（比率：１：１０ｖ／ｖ、琥珀ベース）に浸漬し、その後８時間加熱して抽出した。混合液を遠心分離し、抽出液を回収し、濾過して微小な粒子を除去した。得られた抽出物を次の実施例に用いた。
【００３７】
＜実施例２＞：
実施例１の操作の後、当該アルコール抽出物を真空乾燥し、微粉末化し、グリコール又は界面活性剤などの、化粧品用途に使用可能な溶媒に溶解若しくは分散させる。本実施例では、当該乾燥抽出物を０．５重量％でブチレングリコールと混合し、全体としては最終組成物の２重量％の調製物を得た。
【００３８】
＜実施例３＞：バルチックアンバーのグリコール抽出物の調製
黄色のバルチックアンバーを粉末状にし、冷所で４８時間、撹拌しながらブチレングリコール中に浸漬させ、次に６時間加熱して抽出した。遠心分離により固液分離し、ポンプで液体抽出物を回収し、濾過し、微小粒子を除去し、本発明に係るグリコール抽出物を回収した。
【００３９】
＜実施例４＞：単層培養したヒト真皮線維芽細胞の遺伝子発現プロフィールに対する、琥珀抽出物の作用
１）材料と方法
ａ）細胞培養
正常ヒト線維芽細胞（ＮＨＦ）を融解し、次いで７５ｃｍ２のプレートに、１０％（ｖ／ｖ）のウシ胎仔血清（ＦＣＳ）を含有するＤＭＥＭ（ダルベッコ変法イーグル培地）中、プレート当り１０６細胞の細胞密度で撒種した。コンフルエンスに達した時、細胞をトリプシン溶液で処理し、８個のプレートに再度撒種した。コンフルエンスに達した時に、ＮＨＦをリン酸緩衝液（リン酸緩衝生食塩水、ＰＢＳ）で３回洗浄し、次いでＦＣＳを含まないＤＭＥＭで１８時間培養した。
【００４０】
ｂ）琥珀による処理
無血清の条件で１８時間培養した後、細胞を以下の異なる条件下で処理した：
−  実施例１の琥珀抽出物  ２％（ｖ／ｖ）
−  溶媒（ブチレングリコール）  ２％（ｖ／ｖ）
−  ＤＭＥＭ単独（陽性コントロール）４時間培養後、全ＲＮＡを抽出した。
【００４１】
ｃ）全ＲＮＡの抽出
培養後、培地を廃棄し、細胞を洗浄せずに直接氷上に置いた。ケミカルフード下で細胞を掻き取り、１ｍｌのＲＮＡｐｌｕｓ（Ｑｂｉｏｇｅｎｅ社製）に溶解させ、１．５ｍｌのエッペンドルフチューブに全て回収した。次いで全ＲＮＡをＡｇｉｒｅｎｔ  ２１００バイオアナライザーで分析した。
【００４２】
ｄ）ＲＮＡの増幅及び標識
ハイブリダイゼーションの前に、ＲＮＡの増幅を、Ｅｂｅｒｗｉｎｅによるプロトコールに従って実施した（Ｅｂｅｒｗｉｎｅ，（１９９６）．Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍＲＮＡ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ  ｕｓｉｎｇ  ａ  ＲＮＡ  ｇｅｎｅｒａｔｅｄ  ｆｒｏｍ  ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ  ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）−Ｔ７  ｐｒｉｍｅｄ  ｃＤＮＡ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，２０，５８４−５９１）。次いで、ＲＮＡ増幅した各サンプル（以下ａＲＮＡｓと称する）を分光光度測定した（Ａｇｉｌｅｎｔ  ２００１バイオアナライザーを使用）。未処理サンプル及び琥珀抽出物で処理したサンプルから得た１μｇのａＲＮＡｓを、それぞれ蛍光色素Ｃｙ５及びＣｙ３を用いて逆転写反応により標識した。次いで、これらの標識された相補的ＤＮＡ（以下ａｃＤＮＡという）サンプルを、皮膚特異的に発現する遺伝子解析用のバイオチップにハイブリダイズさせ、琥珀抽出物の添加によりレベル変化した遺伝子を解析した。本実施例では、ＰＩＱＯＲ（登録商標）  Ｍｉｃｒｏａｒｒａｙｓバイオチップ（番号：１６０−０００−６８１）を用いた。
【００４３】
ｅ）ハイブリダイゼーション及びデータ分析
ハイブリダイゼーションステーションで１６時間ハイブリダイゼーション反応を行なわせ、その後Ｂｏｓｉｏらの方法に従いデータを分析した（Ｂｏｓｉｏ，Ａ．，Ｋｎｏｒｒ，Ｃ．，Ｊａｎｓｓｅｎ，Ｕ．，Ｇｅｂｅｌ，Ｓ．，Ｈａｕｓｓｍａｎｎ，Ｈ．Ｊ．ａｎｄ  Ｍｕｌｌｅｒ，Ｔ．（２００２）．Ｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  ｇｅｎｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ  ｉｎ  Ｓｗｉｓｓ  ３Ｔ３  ｃｅｌｌｓ  ｅｘｐｏｓｅｄ  ｔｏ  ａｑｕｅｏｕｓ  ｅｘｔｒａｃｔｓ  ｏｆ  ｃｉｇａｒｅｔｔｅ  ｓｍｏｋｅ．Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ  ２３，７４１−７４８）。簡単には、蛍光シグナルの画像キャプチャと数値化を、ＳｃａｎＡｒｒａｙＬｉｔｅ装置（Ｐａｃｋａｒｄ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社製，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ，ＵＳＡ）及びＩｍａＧｅｎｅ  ４．１ソフトウエア（ＢｉｏＤｉｓｃｏｖｅｒｙ社製，Ｌｏｓ  Ａｎｇｅｌｅｓ，ＣＡ，ＵＳＡ）を用いて実施した。部位的バックグラウンドノイズをシグナルから除去し、正味の強度を得、Ｃｙ５／Ｃｙ３の比率を測定した。ａｃＤＮＡに対して同時に４つのスポットの蛍光の平均値を算出し、次いで線形回帰法（ＬＯＷＥＳＳ標準化法）により標準化した。更に、バックグラウンドノイズに対して２倍の正味強度を示す遺伝子のみを後の分析用に残した。
【００４４】
２）結果
各バイオチップにおける分析結果から、琥珀抽出物が、皮膚のＮＨＦで発現する遺伝子のうちの一部において、有意な発現量変化をもたらすことが明らかになった。実際、バイオチップを用いた分析により、琥珀抽出物処理による以下のような有意差が確認された：
−  コラゲナーゼ−１又はＭＭＰ−１の発現：実際、ＮＨＦにおけるコラゲナーゼの発現の阻害効果が確認され、コントロール群と比較して発現量は６０％であった（コントロール群を１００％として比較した場合）。
−  Ｉ型、ＩＩＩ型及びＶ型コラーゲンの合成：詳細には、コントロール群（１００％）を比較して以下のような活性化が観察された：
−  Ｉ型コラーゲン−α１鎖：１７５％、
−  Ｉ型コラーゲン−α２鎖：２５０％、
−  ＩＩＩ型コラーゲン：コントロール群と比較して２２１％、
−  Ｖ型コラーゲン−α１鎖：コントロール群と比較して２００％の活性化、
−  Ｖ型コラーゲン−α２鎖：コントロール群と比較して２２０％の活性化。
−  デルモポンチンの発現：コントロール群と比較して２１０％のオーダーで活性化する効果が観察された。
−  ビグリカン及びバーシカンの発現：コントロール群と比較して、それぞれ２００％及び３００％で活性化が観察された。
【００４５】
＜実施例５＞本発明の組成物
以下に組成物を例証する。琥珀抽出物の含量を重量％で示す。
【００４６】
ａ）引き締め用ゲル：
琥珀抽出物（実施例３のブチレングリコール中液）：４
小麦のスフィンゴ糖脂質（Ｅ．Ｐ．Ｉ．Ｆｒａｎｃｅ社製、小麦セラゾーム）：０．２
グリセロール：２
防腐剤及び香料：０．３
賦形剤：（全量１００となるまで）
【００４７】
ｂ）引き締め用ローション
琥珀抽出物（実施例１のエタノール中）：０．１
小麦のスフィンゴ糖脂質：０．１５（Ｅ．Ｐ．Ｉ．Ｆｒａｎｃｅ社製、小麦セラソーム）
防腐剤及び香料：０．３
賦形剤：（全量１００となるまで）
【００４８】
ｃ）引き締め用クリーム
琥珀抽出物（実施例３のブチレングリコール中液）：２
バーソレシア抽出物：１
ポテンティラ・エレクタのグリコール抽出物：０．５
パルミトイルオリゴペプチドペンタペプチド−３：３
小麦のスフィンゴ糖脂質：０．２（Ｅ．Ｐ．Ｉ．Ｆｒａｎｃｅ社製、小麦セラソーム）
酢酸トコフェロール：０．２
グリセロール：２
４−デシルオキサゾリジン−２−オン：１
防腐剤及び香料：０．３
賦形剤：（全量１００となるまで）
この乳液を１日に１、２回顔に塗布した結果、次第に肌のしわが引き締まった。
【００４９】
ｄ）顔の下半分及び首の引き締め用セラム（美容液）：
琥珀抽出物（実施例３のブチレングリコール中液）：３
バーソレシア（Ｂｅｒｔｈｏｌｌｅｔｉａ）の抽出物：１
ポテンティラ・エレクタ（Ｐｏｔｅｎｔｉｌｌａ  ｅｒｅｃｔａ）のグリコール抽出物：０．５
オーツ麦タンパク質：２
パルミトイルオリゴペプチドペンタペプチド−３：３
スフィンゴ糖脂質：０．２
グリシリザ・グラブラ（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ）の抽出物：０．１
酢酸トコフェロール：０．２
微粒子状酸化チタン：０．５
４−デシルオキサゾリジン−２−オン：１
防腐剤及び香料：０．３
賦形剤：（全量１００となるまで）
この肌を引き締めるセラムを、毎朝肌に塗布した結果、基礎化粧品の効果とあいまって直ちに効果を発揮した。
【００５０】
ｅ）フィルムパッチ
琥珀抽出物（実施例３のブチレングリコール中液）：１．５
バーソレシア（Ｂｅｒｔｈｏｌｌｅｔｉａ）の抽出物：１
アスパラギン酸マグネシウム：０．１
ポテンティラ・エレクタ（Ｐｏｔｅｎｔｉｌｌａ  ｅｒｅｃｔａ）のグリコール抽出物：０．５
パルミトイルオリゴペプチドペンタペプチド−３：３
スフィンゴ糖脂質：０．２
グリシリザ・グラブラ（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ）の抽出物：０．１
ポリマー：２
酢酸トコフェロール：０．２
グリセロール：１
４−デシルオキサゾリジン−２−オン：０．８
防腐剤：０．２
芳香添加剤：（全量１００となるまで）
このフィルムパッチは、夜、就寝時に顔の下半分及び首に貼る。
【００５１】
ｆ）ケア用アンプル
琥珀抽出物（実施例３のブチレングリコール中液）：５
バーソレシア（Ｂｅｒｔｈｏｌｌｅｔｉａ）の抽出物：１
ポテンティラ・エレクタ（Ｐｏｔｅｎｔｉｌｌａ  ｅｒｅｃｔａ）のグリコール抽出物：０．５
スフィンゴ糖脂質：０．２
安定化アスコルビン酸ヒアルロン酸溶液：２
タンパク質加水分解物：１
可溶化システム：１．５
アンプル形態のケア用品を用いて２１日にわたりトリートメントし、その結果、肌の深部にまで浸透し、組織の引き締め効果が得られた。
【外国語明細書】
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