(57)【要約】【課題】  本発明は新規で安全な成分の生体内抗酸化剤を提供することを目的とする。【解決手段】  本発明の生体内抗酸化剤は、ブロッコリー種子及び／又は発芽ブロッコリー、並びにブロッコリー種子及び／又は発芽ブロッコリーの抽出物のうちの少なくとも１種を有効成分とすることを特徴とする。また、本発明の生体内抗酸化剤は、哺乳類（ヒトを含む）の医薬品、飲食品、皮膚外用剤に含有することができる。【選択図】  無し【特許請求の範囲】
【請求項１】
ブロッコリー種子及び／又は発芽ブロッコリー、並びにブロッコリー種子及び／又は発芽ブロッコリーの抽出物のうちの少なくとも１種を有効成分とする生体内抗酸化剤。
【請求項２】
請求項１に記載の生体内抗酸化剤を含有する哺乳類（ヒトを含む）の医薬品。
【請求項３】
請求項１に記載の生体内抗酸化剤を含有する哺乳類（ヒトを含む）の飲食品。
【請求項４】
請求項１に記載の生体内抗酸化剤を含有する哺乳類（ヒトを含む）の皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な生体内抗酸化剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
過度の活性酸素の生成は生体内で酸化ストレスを引き起こし、その結果、酸化傷害の蓄積が生活習慣病をはじめとする疾病の誘起・促進に繋がることが報告されている。これに対して、ヒトをはじめとする好気性生物は酸素毒性に対する防御機構を獲得・適応し、進化してきたのである。生体には幾重もの活性酸素に対する防御機構が備わっており、生体の恒常性（ホメオスタシス）を維持している。従って、生体内で何らかの原因により活性酸素に対する防御機構が低下、もしくは活性酸素の生成量が防御機構のキャパシティを超えた場合に酸化的損傷（酸化ストレス）が生じることになる。この抗酸化低損傷によって動脈硬化や糖尿病、癌等を引き起こす。従って、今までに、この酸化ストレスを軽減するために、様々な抗酸化剤が、医薬品や健康食品、機能性食品として開発されている（例えば、特許文献１等）。
【０００３】
【特許文献１】特開平１１−３２３３２８号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
このような背景の下、本発明者はブロッコリー種子や発芽ブロッコリーに含有される成分に生体内抗酸化作用を有することを見出し、本発明を完成させた。
即ち、本発明は新規な成分の生体内抗酸化剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
上記課題を解決するために本発明の生体内抗酸化剤は、ブロッコリー種子及び／又は発芽ブロッコリー、並びにブロッコリー種子及び／又は発芽ブロッコリーの抽出物のうちの少なくとも１種を有効成分とすることを特徴とする。
また、本発明の生体内抗酸化剤は、哺乳類（ヒトを含む）の医薬品、飲食品、皮膚外用剤に含有することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明の生体内抗酸化剤は、ブロッコリー由来の抽出物を有効成分とするものである。
上記ブロッコリー（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ ｖａｒ．
ｉｔａｌｉｃａ）は、アブラナ科アブラナ属（Ｂｒａｓｓｉｃａ）に属するものであり、その産地や栽培方法は特に限定されるものではない。
このとき、生体内抗酸化剤は、ブロッコリーの種子を用いても良いし、発芽ブロッコリーを用いても良い。また、これらのうちの一方のみを用いても良いし、これらの混合物を用いても良い。
これらのうち特に、発芽ブロッコリーを用いることが好ましい。より抗酸化作用を有する有効成分を高濃度含有しているからである。
また、ここで用いられる発芽ブロッコリーは、ブロッコリー（成長体）に比べ、スルフォラファンが約６倍多く含まれており、また、発芽ブロッコリーには、ブロッコリーに含まれない特有の成分として、インドール−３−カルビノールが含まれている。いずれの成分にも発ガン抑制効果が報告されている。このようなことから、発芽ブロッコリーには、ブロッコリーとは異なった薬効効果が期待されている。本発明に用いられる発芽ブロッコリー由来成分の調製法は特に限定されるものではなく、ブロッコリーの発芽体（芽、子葉、種子、根）の一部又は全草をそのまま、あるいは乾燥粉砕したものを溶媒等により抽出して得ることができる。また、乾燥粉砕して粉末化したものをそのまま用いることもできる。
【０００７】
例えば、アブラナ科アブラナ属（Ｂｒａｓｓｉｃａ）に属するブロッコリー（Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｏｌｅｒａｃｅａ
ｖａｒ．  ｉｔａｌｉｃａ）の種子を１５〜２５℃の水に浸漬させ、２〜５日間、間接日光照射にて発芽させた後、芽を１０〜５０ｍｍに成長させた全草（芽、子葉、種子、根）が得られる。このものを乾燥後粉砕処理し、必要に応じ、有機溶媒等を用いて脱脂処理を行うことが好ましい。この脱脂処理を行うことにより、脱脂工程を経ていないものに比べ、スルフォラファン含量を３倍から１０倍に高めることができるからである。その後、微粉砕、殺菌、篩過して、パウダーが得られる。このパウダーをそのまま用いることもできるが、さらに、このパウダーを抽出することにより、抽出液として得ることもできる（以下、特にことわりがない限り、発芽ブロッコリー由来成分を「発芽ブロッコリー抽出物」と称する）。
また、上記パウダーから発芽ブロッコリー抽出物を得る方法は特に限定されないが、溶媒抽出及び超臨界抽出等が挙げられる。
更に、発芽ブロッコリー抽出物は、必要に応じて、更に脱色、脱臭などの工程を加えたり、溶媒を留去して粉末化したものとしても良い。また、抽出物からスルフォラファンを精製して取り出して用いても良い。
【０００８】
抽出方法として溶媒抽出を行う場合、抽出に用いる溶媒としては、例えば水、低級１価アルコール（メチルアルコール、エチルアルコール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、液状多価アルコール（グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール等）、低級エステル（酢酸エチル等）、炭化水素（ベンゼン、ヘキサン、ペンタン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、エーテル類（ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジプロピルエーテル等）、アセトニトリル等が挙げられ、それらの一種又は二種以上を用いることができる。
また、抽出溶媒として、水、エチルアルコールが好ましい。更には、含水エチルアルコールがもっとも好ましい。
【０００９】
好ましい抽出方法の例としては、濃度０〜１００％（ｗ／ｗ）の含水エチルアルコール又は含水１，３−ブチレングリコールを用い、室温で、又は加温して１〜１０日間抽出を行った後濾過し、得られた濾液を更に１週間程放置して熟成させ、再び濾過を行う方法等が挙げられる。
【００１０】
更に、超臨界抽出により抽出を行う場合、このときに用いる超臨界流体は特に限定されないが、たとえば、二酸化炭素及び水等が挙げられる。尚、これらは１種のみを用いても良いし、２種類以上併用しても良い。また、これらのうち特に二酸化炭素が好ましい。より容易に有効成分を抽出することができるからである。また、このときの抽出方法は、公知の方法にて行えばよい。
【００１１】
本発明の生体内抗酸化剤は、以下に説明するように生体内抗酸化作用を有することが判る。
即ち、DNA周辺で発生した過酸化水素（H２O２）は鉄塩や銅塩などと反応すること（Fenton反応）により、非常に有害なヒドロキシラジカル（HO・）を生成する。そして、DNAの構成成分の１つであるデオキシグアノシン（dG）が、HO・により酸化され、８-hydroxy-deoxyguanosine（８-OHdG）を生成する。この８-OHdGは、生体内で代謝されることなく、血液を経て最終的に尿中に排出される。つまり，DNA酸化的ストレスマーカーである尿中８-OHdGは、非侵襲的に酸化ストレスの変化を鋭敏かつ経時的に反映しうる指標である。これにより、尿中に含まれる８-OHdGの含有量を測定することにより、生体内の酸化ストレスの状態を知ることができ、また、８-OHdGの濃度が低くなると生体内の酸化ストレスが小さいといえる。また、活性酸素種による脂質の過酸化過程において脂質ペルオキシドに由来する初期生成物であるヘキサノイルリジン（（Nε-(Hexanoyl) Lysine：ＨＥＬ）の尿中の濃度を測定することにより、生体内酸化ストレスの状態を確認することができ、ＨＥＬの尿中の濃度低い場合は、生体内の酸化ストレスが低いといえる。
そこで、本発明は、体内に摂取することにより尿中の上記８-OHdG及びＨＥＬの濃度を減少させることができる。これにより、生体内のストレスと軽減することができ、これにより生体内抗酸化活性を有する。従って、生体内の活性酸素の増加に起因する疾患（例えば、動脈硬化、糖尿病、癌等）を効果的に予防することができる。
【００１２】
本発明の生体内抗酸化剤は、哺乳類（ヒトを含む）の各種飲食品の素材として使用することができる。ヒト飲食品（以下、単に「飲食品」とする。）としては、例えば、食用油（サラダ油）、菓子類（ガム、キャンディー、キャラメル、チョコレート、クッキー、スナック、ゼリー、グミ、錠菓等）、麺類（そば、うどん、ラーメン等）、乳製品（ミルク、アイスクリーム、ヨーグルト等）、調味料（味噌、醤油等）、スープ類、飲料（ジュース、コーヒー、紅茶、茶、炭酸飲料、スポーツ飲料等）をはじめとする一般食品や、健康食品（錠剤、カプセル等）、栄養補助食品（栄養ドリンク等）が挙げられる。これらの飲食品に本発明の生体内抗酸化剤を適宜配合するとよい。
これら飲食品には、その種類に応じて種々の成分を配合することができ、例えば、ブドウ糖、果糖、ショ糖、マルトース、ソルビトール、ステビオサイド、コーンシロップ、乳糖、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、Ｌ−アスコルビン酸、ｄｌ−α−トコフェロール、エリソルビン酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、アラビアガム、カラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ペクチン、寒天、ビタミンＢ類、ニコチン酸アミド、パントテン酸カルシウム、アミノ酸類、カルシウム塩類、色素、香料、保存剤等の食品素材を使用することができる。さらに、健康維持機能をもった本抗炎症剤には、他の抗酸化物質や健康食品素材などの配剤、例えば、抗酸化物質（還元型アスコルビン酸（ビタミンC）、ビタミンE、還元型グルタチン、トコトリエノール、ビタミンＡ誘導体、リコピン、ルテイン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、フコキサンチン、尿酸、ユビキノン、コエンザイムＱ10、葉酸、ニンニクエキス、アリシン、セサミン、リグナン類、カテキン、イソフラボン、カルコン、タンニン類、フラボノイド類、クマリン、イソクマリン類、ブルーベリーエキス）、健康食品素材（V.（ビタミン）A、V.B1、V.B2、V.B6、V.B1２、V.C、V.D、V.E、V.P、コリン、ナイアシン、パントテン酸、葉酸カルシウム、EPA、オリゴ糖、食物繊維、スクアレン、大豆レシチン、タウリン、ドナリエラ、プロテイン、オクタコサノール、DHA、卵黄レシチン、リノール酸、ラクトフェリン、マグネシウム、亜鉛、クロム、セレン、カリウム、ヘム鉄、カキ肉エキス、キトサン、キチンオリゴ糖、コラーゲン、コンドロイチン、ウコン、カンゾウ、シジミエキス、スッポン、カンゾウ、クコシ、ケイヒ、サンザシ、霊芝、オオバコ、カミツレ、カモミール、セイヨウタンポポ、ハイビスカス、ハチミツ、ボーレン、ローヤルゼリー、ライム、ラベンダー、ローズヒップ、ローズマリー、セージ、ビフィズス菌、フェーカリス菌、ラクリス、小麦胚芽油、ゴマ油、シソ油、大豆油、中鎖脂肪酸、アガリクス、イチョウ葉エキス、ウコン、コンドロイチン、玄米胚芽エキス、レイシ、タマネギ、DHA、EPA、DPA、甜茶、冬虫夏草、ニンニク、蜂の子、パパイヤ、プーアル、プロポリス、メグスリの木、ヤブシタケ、ロイヤルゼリー、ノコギリヤシ、ヒアルロン酸、コラーゲン、ギャバ、ハープシールオイル、サメ軟骨、グルコサミン、レシチン、ホスファチジルセリン、田七ニンジン、桑葉、大豆抽出物、エキナセア、エゾウコギ、大麦抽出物、オリーブ葉、オリーブ実、ギムネマ、バナバ、サラシア、ガルシニア、キトサン、セントジョーンズワート、ナツメ、ニンジン、パッションフラワー、ブロッコリー、プラセンタ、ハトムギ、ブドウ種子、ピーナッツ種皮、ブラックコホシュ、マリアアザミ、月桂樹、セージ、ローズマリー、ラフマ、黒酢、ゴーヤー、マカ、紅花、亜麻、ウーロン茶、花棘、カフェイン、カプサイシン、キシロオリゴ糖、グルコサミン、ソバ、シトラス、食物繊維、プロテイン、プルーン、スピルリナ、大麦若葉、核酸、酵母、椎茸、梅肉、アミノ酸、深海鮫��出物、ノニ、カキ肉、スッポン、シャンピニオン、オオバコ、アセロラ、パイナップル、バナナ、モモ、アンズ、メロン、イチゴ、ラズベリー、オレンジ、フコイダン、メシマコブ、クランベリー、コンドロイチン硫酸、亜鉛、鉄、セラミド、シルクペプチド、グリシン、ナイアシン、チェストツリー、L-システイン、赤ワイン葉、ミレット、ホーステール、ビオチン、センテラアジアティカ、ハスカップ、ピクノジェノール、フキ、ルバーブ、クローブ、ローズマリー、カテキン、プーアル、クエン酸、ビール酵母、メリロート、ブラックジンガー、ショウガ、ガジュツ、ナットウキナーゼ、ベニコウジ、トコトリエノール、ラクトフェリン、シナモン、韃靼ソバ、ココア、ユズ種子エキス、シソの実エキス、α−リポ酸）なども配合することができる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
【００１３】
具体的な製法としては、本発明の生体内抗酸化剤を粉末セルロースとともにスプレードライまたは凍結乾燥し、これを粉末、顆粒、打錠または溶液にすることで容易に飲食品（インスタント食品等）に含有させることができる。また、本発明の生体内抗酸化剤を、例えば、油脂、エタノール、グリセリンあるいはこれらの混合物に溶解して液状にし、飲料に添加するか、固形食品に添加することが可能である。必要に応じてアラビアガム、デキストリン等のバインダーと混合して粉末状あるいは顆粒状にし、飲料に添加するか固形食品に添加することも可能である。
【００１４】
本発明の生体内抗酸化剤を飲食品に適用する場合の添加量としては、健康を維持することが主な目的であるので、飲食品に対して有効成分の含量が合計１〜２０wt％であるのが好ましい。
【００１５】
また、本発明の生体内抗酸化剤は、哺乳類の動物用飼料に含有することができる。上記動物用飼料は、上記飲食品と同様の方法にて含有することができる。また、上記動物用飼料は、使用する動物は特に限定されず、例えば、牛、豚等の家畜用動物、犬、猫、ハムスタ等の伴侶動物（ペットとして飼われている動物）等にも使用することができる。
また、例えば、伴侶動物の飼料として、穀粉、食肉等を用いることができる。このとき、穀粉としては、小麦粉、米粉、ライ麦粉、えんばく粉、ひえ粉、あわ粉、トウモロコシ粉、大豆粉などが例示でき、これらの穀粉は２種以上を併用してもよい。穀粉を使用することにより、伴侶動物に炭水化物などの栄養素を供給することができる。上記の穀粉の中で小麦粉を使用するのが最も好ましく、小麦粉としては、強力粉、中力粉、薄力粉を単独又は適宜組み合わせて使用することができ、また係る小麦粉と他の穀粉を併用してもよい。更に、加熱処理後の動物用飼料の弾力を調整するために、小麦粉と小麦グルテン、大豆蛋白質などを組み合わせてもよい。なお、小麦粉に含まれるグルテンに由来する網目構造は、加熱処理されると、膨化した組織構造を構成することができ、食感の改善に寄与する。
【００１６】
本発明で使用される食肉は特に限定されず、鶏肉、豚肉、牛肉、羊肉、山羊肉、兎肉、七面鳥肉、馬肉などを使用するこができるが、風味の点から鶏肉が好適に使用される。上記の食肉は常法により家畜類を屠殺し解体して得られる。なお、中間水分又は低水分状態の製品の品質劣下は主に脂肪の酸化により生じるので、使用する食肉は脂肪含量が少ないか脂肪を取り除いた赤身肉が好適に使用される。また、食肉の共存は、良質の動物性蛋白質の強化と共に伴侶動物に対する嗜好性の改善を図ることができる。
【００１７】
伴侶動物の飼料は種々の方法により調製することができるが、好ましい方法としては、穀粉（好ましくは小麦粉）及び食肉を含有した練りあがり原料混合物（以下、「ドウ」という。）を調製し、成形後、加熱処理する方法が例示できる。ドウ中の穀粉及び食肉の組成は特に限定されないが、通常、穀粉５〜６０％程度、好ましくは１０〜５０％程度、食肉５〜８０％程度、好ましくは２０〜５０％程度、及び必要量の水からなるように調整される。また、Ａｗ調整剤を使用する場合には、当該Ａｗ調整剤は５〜３０％程度、好ましくは１０〜２０％程度となるように添加される。なお、水の使用量は、ドウが混練・成形できる程度に、穀粉、食肉、Ａｗ調整剤などの使用量に応じて適宜調整すればよい。
ドウの調製方法は特に限定されないが、好ましくは、まず食肉をサイレントカッター、チョッパーなどにより細挽する。この際、細挽した食肉に気泡が十分に含まれるように細切しておくのが好ましい。ついで、細挽した食肉に、穀粉、水及び必要に応じてＡｗ調整剤などを添加し、十分に混練して気泡を含有させることにより含泡体ドウを調製することができる。ドウの調製に際して、起泡剤を添加してもよく、特に穀粉として小麦粉以外の穀粉を使用する場合には起泡剤を使用するのが好ましい。起泡剤の添加により、ドウ中に微細な気泡を均一に含有させることができる。起泡剤としては各種起泡剤が使用できるが、気泡の安定性などの点から、大豆蛋白系起泡剤及び／又は酵素分解大豆蛋白系起泡剤を使用するのが好ましい。
【００１８】
かくして調製されたドウを成形し、加熱処理することにより、本発明の伴侶動物の飼料が得られる。ドウの成形は、本発明の伴侶動物用飼料を伴侶動物が食する際の食べ易さ、飼い主の取扱い易さなどに応じて適宜な形状に成形すればよく、例えば、板状、スティック状、円板状、ドーナツ状、ハート形状などが例示される。また、同一の配合から調製したドウから、各々異なる色調の色素で染色し、又は野菜又はフルーツなどを配合して異なる外観の複数のドウを調製し、それらを多層状又は同心円状に組み合わせて成形することもできる。
成形されたドウの加熱手段は特に限定されず、例えば、オーブン加熱、マイクロ波加熱などが例示される。これらの加熱方法は公知であり、常法に準じて加熱処理を行えばよい。加熱処理後の飼料の水分含量は、通常２０〜４０％程度である。上記の加熱処理により、水分の蒸発と気泡の膨張によりドウは膨化し、また短時間に水分が蒸発するのでＡｗが低下し、保存性が向上する。また、穀粉として小麦粉を使用した場合には、加熱処理により、小麦粉に含まれるグルテンに由来する網目構造が固定化し、食感が改善される。なお、オーブン加熱の場合には、飼料に独特の色調（狐色）や香気を生じさせることができる利点があり、一方、マイクロ波加熱による場合には、ドウの内部から加熱することができるので、均質に膨化させることが可能であり、均一な気泡を有する飼料を得ることができる利点がある。上記の加熱処理に際して、得られた飼料のＡｗが０．６〜０．９の範囲になるように調整するのが好ましい。前述のように、Ａｗをこの範囲に調整することより、飼料の保存性を著しく高めることができる。
【００１９】
かくして得られた上記伴侶動物の飼料は、パン状の性状を有する飼料であり、ソフトな食感と適度な柔軟性と弾力性を有するので、幼犬、老齢犬や猫などの歯の弱い伴侶動物の飼料、おやつなどとして好適である。勿論、健常な成犬や成猫の飼料、おやつなどとしても利用することができる。上記動物用飼料は、包装容器に適当量を収納し、密封することにより製品化される。包装容器としては、酸素ガス非透過性の包材を使用するのが好ましい。包装の形態としては、真空包装、不活性ガス充填包装などが例示されるが、脱酸素剤（例えば、エージレスTM等）と共に不活性ガス充填包装するのが好ましい。係る包装形態によれば、保存期間中における酸素による品質劣化と微生物の増殖を防止することができる。
【００２０】
また、上記伴侶動物の飼料は、例えば、使用する食肉又はドウには、当業者が慣用的に用いている添加物（例えば、食塩、重合リン酸塩、エリソルビン酸ナトリウム等の酸化防止剤、植物性蛋白質、脱脂粉乳、カゼインナトリウム、卵白、グルテン、貝殻粉、骨粉、ビタミン類、ミネラル類、微量元素、調味料、香料、色素、保存料、ｐＨ調整剤等）及び／又は野菜やフルーツを添加することもできる。また、ドウを板状に成形し加熱処理し、その後にスティック状、円板状、ドーナツ状、ハート形状などに切断して飼料を調製してもよい。更に、使用する食肉又はドウに、各種のビタミン類やミネラル類などを配合し、犬又は猫のＮＲＣ栄養基準に合致させることもできる。
【００２１】
本発明の生体内抗酸化剤は、哺乳類（ヒトも含む）の薬品（医薬品および医薬部外品、を含む。）の素材として用いてもよい。薬品製剤用の原料に、本発明の生体内抗酸化剤を適宜配合して製造することができる。
本発明をヒトの薬品（以下、単に「薬品」とする。）本発明の生体内抗酸化剤に配合しうる製剤原料としては、例えば、賦形剤（ブドウ糖、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルク等）、結合剤（蒸留水、生理食塩水、エタノール水、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン等）、崩壊剤（アルギン酸ナトリウム、寒天、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖、アラビアゴム末、ゼラチン、エタノール等）、崩壊抑制剤（白糖、ステアリン、カカオ脂、水素添加油等）、吸収促進剤（第四級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等）、吸着剤（グリセリン、デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、硅酸等）、滑沢剤（精製タルク、ステアリン酸塩、ポリエチレングリコール等）などが挙げられる。
【００２２】
上記薬品の投与方法は、一般的には、錠剤、丸剤、軟・硬カプセル剤、細粒剤、散剤、顆粒剤、液剤等の形態で経口投与することができるが、非経口投与であってもよい。非経口剤として投与する場合は、溶液の状態、または分散剤、懸濁剤、安定剤などを添加した状態で、ハップ剤、ローション剤、軟膏剤、チンキ剤、クリーム剤などの剤形で適用することができる。
投与量は、投与方法、病状、患者の年齢等によって変化し得るが、大人では、通常、１日当たり有効成分として０．５〜１０００ｍｇ、子供では通常０．５〜５００ｍｇ程度投与することができる。
生体内抗酸化剤の配合比は、剤型によって適宜変更することが可能であるが、通常、経口または粘膜吸収により投与される場合は約０．３〜１５．０wt％、非経口投与による場合は、０．０１〜１０wt％程度にするとよい。なお、投与量は種々の条件で異なるので、前記投与量より少ない量で十分な場合もあるし、また、範囲を超えて投与する必要のある場合もある。
【００２３】
本発明の本発明の生体内抗酸化剤は、哺乳類（ヒトも含む）の皮膚外用剤（化粧品、医薬品および医薬部外品を含む。）として用いても、生体内抗酸化作用を期待することができる。
本発明の生体内抗酸化剤を配合しうる皮膚外用剤の形態としては、例えば、乳液、石鹸、洗顔料、入浴剤、クリーム、乳液、化粧水、オーデコロン、ひげ剃り用クリーム、ひげ剃り用ローション、化粧油、日焼け・日焼け止めローション、おしろいパウダー、ファンデーション、香水、パック、爪クリーム、エナメル、エナメル除去液、眉墨、ほお紅、アイクリーム、アイシャドー、マスカラ、アイライナー、口紅、リップクリーム、シャンプー、リンス、染毛料、分散液、洗浄料等が挙げられる。
また、本発明の生体内抗酸化剤を配合しうる皮膚外用剤（医薬品または医薬部外品）の形態としては、軟膏剤、クリーム剤、外用液剤等が挙げられる。
【００２４】
上記形態の皮膚外用剤には、本発明による生体内抗酸化剤の他に、その生体内抗酸化作用を損なわない範囲で化粧品、医薬部外品などの皮膚外用剤に配合される成分、油分、高級アルコール、脂肪酸、紫外線吸収剤、粉体、顔料、界面活性剤、多価アルコール・糖、高分子、生理活性成分、溶媒、酸化防止剤、香料、防腐剤等を配合することができる。
例を以下に羅列するが、本発明はこれらの例に限定されるものではない。
【００２５】
（1）油分の例
エステル系の油相成分：トリ2-エチルヘキサン酸グリセリル、2-エチルヘキサン酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ブチル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸エチル、パルミチン酸オクチル、イソステアリン酸イソセチル、ステアリン酸ブチル、ミリスチン酸ブチル、リノール酸エチル、リノール酸イソプロピル、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソセチル、ミリスチン酸イソステアリル、パルミチン酸イソステアリル、ミリスチン酸オクチルドデシル、イソステアリン酸イソセチル、セバシン酸ジエチル、アジピン酸ジイソプロピル、ネオペンタン酸イソアラキル、トリ（カプリル・カプリン酸）グリセリル、トリ2-エチルヘキサン酸トリメチロールプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、テトラ2-エチルヘキサン酸ペンタエリスリトール、カプリル酸セチル、ラウリン酸デシル、ラウリン酸ヘキシル、ミリスチン酸デシル、ミリスチン酸ミリスチル、ミリスチン酸セチル、ステアリン酸ステアリル、オレイン酸デシル、リシノレイン酸セチル、ラウリン酸イソステアリル、ミリスチン酸イソトリデシル、ミリスチン酸イソセチル、ミリスチン酸イソステアリル、パルミチン酸イソセチル、パルミチン酸イソステアリル、ステアリン酸オクチル、ステアリン酸イソセチル、オレイン酸イソデシル、オレイン酸オクチルドデシル、リノール酸オクチルドデシル、イソステアリン酸イソプロピル、2-エチルヘキサン酸セトステアリル、2-エチルヘキサン酸ステアリル、イソステアリン酸ヘキシル、ジオクタン酸エチレングリコール、ジオレイン酸エチレングリコール、ジカプリン酸プロピレングリコール、ジ（カプリル・カプリン酸）プロピレングリコール、ジカプリル酸プロピレングリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、ジオクタン酸ネオペンチルグリコール、トリカプリル酸グリセリル、トリウンデシル酸グリセリル、トリイソパルミチン酸グリセリル、トリイソステアリン酸グリセリル、ネオペンタン酸オクチルドデシル、オクタン酸イソステアリル、イソノナン酸オクチル、ネオデカン酸ヘキシルデシル、ネオデカン酸オクチルドデシル、イソステアリン酸イソセチル、イソステアリン酸イソステアリル、イソステアリン酸オクチルデシル、ポリグリセリンオレイン酸エステル、ポリグリセリンイソステアリン酸エステル、炭酸ジプロピル、炭酸ジアルキル（C12-18）、クエン酸トリイソセチル、クエン酸トリイソアラキル、クエン酸トリイソオクチル、乳酸ラウリル、乳酸ミリスチル、乳酸セチル、乳酸オクチルデシル、クエン酸トリエチル、クエン酸アセチルトリエチル、クエン酸アセチルトリブチル、クエン酸トリオクチル、リンゴ酸ジイソステアリル、ヒドロキシステアリン酸2-エチルヘキシル、コハク酸ジ2-エチルヘキシル、アジピン酸ジイソブチル、セバシン酸ジイソプロピル、セバシン酸ジオクチル、ステアリン酸コレステリル、イソステアリン酸コレステリル、ヒドロキシステアリン酸コレステリル、オレイン酸コレステリル、オレイン酸ジヒドロコレステリル、イソステアリン酸フィトステリル、オレイン酸フィトステリル、12-ステアロイルヒドロキシステアリン酸イソセチル、12-ステアロイルヒドロキシステアリン酸ステアリル、12-ステアロイルヒド��キシステアリン酸イソステアリル等が挙げられる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。炭化水素系の油相成分：スクワラン、流動パラフィン、α-オレフィンオリゴマー、イソパラフィン、セレシン、パラフィン、流動イソパラフィン、ポリブテン、マイクロクリスタリンワックス、ワセリン等が挙げられる。
動植物油とその硬化油、および天然由来のロウ：牛脂、硬化牛脂、豚脂、硬化豚脂、馬油、硬化馬油、ミンク油、オレンジラフィー油、魚油、硬化魚油、卵黄油等の動物油およびその硬化油、アボカド油、アルモンド油、オリーブ油、カカオ脂、杏仁油、ククイナッツ油、ゴマ油、小麦胚芽油、コメ胚芽油、コメヌカ油、サフラワー油、シアバター、大豆油、月見草油、シソ油、茶実油、ツバキ油、トウモロコシ油、ナタネ油、硬化ナタネ油、パーム核油、硬化パーム核油、パーム油、硬化パーム油、ピーナッツ油、硬化ピーナッツ油、ヒマシ油、硬化ヒマシ油、ヒマワリ油、ブドウ種子油、ホホバ油、硬化ホホバ油、マカデミアナッツ油、メドホーム油、綿実油、硬化綿実油、ヤシ油、硬化ヤシ油等の植物油およびその硬化油、ミツロウ、高酸価ミツロウ、ラノリン、還元ラノリン、硬化ラノリン、液状ラノリン、カルナバロウ、モンタンロウ等のロウ等が挙げられる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
シリコーン系の油相成分：ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、メチルシクロポリシロキサン、オクタメチルポリシロキサン、デカメチルポリシロキサン、ドデカメチルシクロシロキサン、メチルハイドロジェンポリシロキサン、ポリエーテル変性オルガノポリシロキサン、ジメチルシロキサン・メチルセチルオキシシロキサン共重合体、ジメチルシロキサン・メチルステアロキシシロキサン共重合体、アルキル変性オルガノポリシロキサン、末端変性オルガノポリシロキサン、アミノ変性シリコーン油、アミノ変性オルガノポリシロキサン、ジメチコノール、シリコーンゲル、アクリルシリコーン、トリメチルシロキシケイ酸、シリコーンRTVゴム等が挙げられる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
フッ素系の油相成分：パーフルオロポリエーテル、フッ素変性オルガノポリシロキサン、フッ化ピッチ、フルオロカーボン、フルオロアルコール、フルオロアルキル・ポリオキシアルキレン共変性オルガノポリシロキサン等が挙げられる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
【００２６】
（2）高級アルコールの例
ラウリルアルコール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、イソステアリルアルコール、オレイルアルコール、ベヘニルアルコール、2-エチルヘキサノール、ヘキサデシルアルコール、オクチルドデカノール等が挙げられる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
【００２７】
（3）脂肪酸の例
カプリル酸、カプリン酸、ウンデシレン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、アラキン酸、アラキドン酸、ベヘン酸、エルカ酸、2-エチルヘキサン酸等が挙げられる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
【００２８】
（4）紫外線吸収剤の例
パラアミノ安息香酸、パラアミノ安息香酸アミル、パラアミノ安息香酸エチルジヒドロキシプロピル、パラアミノ安息香酸グリセリル、パラアミノ安息香酸エチル、パラアミノ安息香酸オクチル、パラアミノ安息香酸オクチルジメチル、サリチル酸エチレングリコール、サリチル酸オクチル、サリチル酸トリエタノールアミン、サリチル酸フェニル、サリチル酸ブチルフェニル、サリチル酸ベンジル、サリチル酸ホモメンチル、ケイ皮酸ベンジル、パラメトキシケイ皮酸オクチル、パラメトキシケイ皮酸2-エチルヘキシル、ジパラメトキシケイ皮酸モノ2-エチルヘキサン酸グリセリル、パラメトキシケイ皮酸イソプロピル、パラメトキシヒドロケイ皮酸ジエタノールアミン塩、ジイソプロピル・ジイソプロピルケイ皮酸エステル混合物、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、ヒドロキシメトキシベン
ゾフェノン、ヒドロキシメトキシベンゾフェノンスルホン酸及びその塩、ジヒドロキシメトキシベンゾフェノン、ジヒドロキシメトキシベンゾフェノンジスルホン酸ナトリウム、ジヒドロキシベンゾフェノン、ジヒドロキシジメトキシベンゾフェノン、ヒドロキシオクトキシベンゾフェノン、テトラヒドロキシベンゾフェノン、ブチルメトキシジベンゾイルメタン、2、4、6-トリアニリノ-p-（カルボ-2-エチルヘキシル-1-オキシ）-1、3、5-トリアジン、2-（2-ヒドロキシ-5-メチルフェニル）ベンゾトリアゾール、メチル-O-アミノベンゾエート、2-エチルヘキシル-2-シアノ-3、3-ジフェニルアクリレート、フェニルベンゾイミダゾール硫酸、3-（4-メチルベンジリデン）カンフル、イソプロピルジベンゾイルメタン、4-（3、4-ジメトキシフェニルメチレン）-2、5-ジオキソ-1-イミダゾリジンプロピオン酸2-エチルヘキシル等、およびこれらの高分子誘導体やシラン誘導体等が挙げられ
る。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
（5）粉体・顔料の例
赤色104号、赤色201号、黄色4号、青色1号、黒色401号等の色素、黄色4号ALレーキ、黄色203号BAレーキ等のレーキ色素、ナイロンパウダー、シルクパウダー、ウレタンパウダー、テフロン（登録商標）パウダー、シリコーンパウダー、ポリメタクリル酸メチルパウダー、セルロースパウダー、デンプン、シリコーンエラストマー球状粉体、ポリエチレン末等の高分子、黄酸化鉄、赤色酸化鉄、黒酸化鉄、酸化クロム、カーボンブラック、群青、紺青等の有色顔料、酸化亜鉛、酸化チタン、酸化セリウム等の白色顔料、タルク、マイカ、セリサイト、カオリン、板状硫酸バリウム等の体質顔料、雲母チタン等のパール顔料、硫酸バリウム、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、珪酸アルミニウム、珪酸マグネシウム等の金属塩、シリカ、アルミナ等の無機粉体、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸マグネシウム、パルミチン酸亜鉛、ミリスチン酸亜鉛、ミリスチン酸マグネシウム、ラウリン酸亜鉛、ウンデシレン酸亜鉛等の金属セッケン、ベントナイト、スメクタイト、窒化ホウ素等が挙げられる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
これらの粉体の形状（球状、棒状、針状、板状、不定形状、燐片状、紡錘状等）および粒子径に特に制限はない。なおこれらの粉体は、従来公知の表面処理、例えばフッ素化合物処理、シリコーン処理、シリコーン樹脂処理、ペンダント処理、シランカップリング剤処理、チタンカップリング剤処理、油剤処理、N-アシル化リジン処理、ポリアクリル酸処理、金属セッケン処理、アミノ酸処理、レシチン処理、無機化合物処理、プラズマ処理、メカノケミカル処理等によって事前に表面処理されていてもいなくても構わない。
【００２９】
（6）界面活性剤の例
アニオン性界面活性剤：脂肪酸セッケン、α-アシルスルホン酸塩、アルキルスルホン酸塩、アルキルアリルスルホン酸塩、アルキルナフタレンスルホン酸塩、アルキル硫酸塩、POEアルキルエーテル硫酸塩、アルキルアミド硫酸塩、アルキルリン酸塩、POEアルキルリン酸塩、アルキルアミドリン酸塩、アルキロイルアルキルタウリン塩、N-アシルアミノ酸塩、POEアルキルエーテルカルボン酸塩、アルキルスルホコハク酸塩、アルキルスルホ酢酸ナトリウム、アシル化加水分解コラーゲンペプチド塩、パーフルオロアルキルリン酸エステル等が挙げられる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
カチオン性界面活性剤：塩化アルキルトリメチルアンモニウム、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、臭化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化セトステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ジステアリルジメチルアンモニウム、塩化ステアリルジメチルベンジルアンモニウム、臭化ベヘニルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベヘニン酸アミドプロピルジメチルヒドロキシプロピルアンモニウム、ステアリン酸ジエチルアミノエチルアミド、ステアリン酸ジメチルアミノプロピルアミド、ラノリン誘導体第四級アンモニウム塩等が挙げられる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
両性界面活性剤：カルボキシベタイン型、アミドベタイン型、スルホベタイン型、ヒドロキシスルホベタイン型、アミドスルホベタイン型、ホスホベタイン型、アミノカルボン酸塩型、イミダゾリン誘導体型、アミドアミン型等が挙げられる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
ノニオン性界面活性剤：プロピレングリコール脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、POEソルビタン脂肪酸エステル、POEソルビット脂肪酸エステル、POEグリセリン脂肪酸エステル、POEアルキルエーテル、POE脂肪酸エステル、POE硬化ヒマシ油、POEヒマシ油、POE・POP共重合体、POE・POPアルキルエーテル、ポリエーテル変性シリコーンラウリン酸アルカノールアミド、アルキルアミンオキシド、水素添加大豆リン脂質等が挙げられる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
天然系界面活性剤：レシチン、サポニン、糖系界面活性剤等が挙げられる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
【００３０】
（7）多価アルコール、糖の例
エチレングリコール、ジエチレングリコール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、グリセリン、ジグリセリン、ポリグリセリン、3-メチル-1、3-ブタンジオール、1、3-ブチレングリコール、ソルビトール、マンニトール、ラフィノース、エリスリトール、グルコース、ショ糖、果糖、キシリトール、ラクトース、マルトース、マルチトール、トレハロース、アルキル化トレハロース、混合異性化糖、硫酸化トレハロース、プルラン等が挙げられる。またこれらの化学修飾体等も使用可能である。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
【００３１】
（8）高分子の例
アクリル酸エステル／メタクリル酸エステル共重合体（プラスサイズ、互応化学社製）、酢酸ビニル／クロトン酸共重合体（レジン28-1310、NSC社製）、酢酸ビニル／クロトン酸／ビニルネオデカネート共重合体（28-2930、NSC社製）、メチルビニルエーテルマレイン酸ハーフエステル（ガントレッツES、ISP社製）、T-ブチルアクリレート／アクリル酸エチル／メタクリル酸共重合体（ルビマー、BASF社製）、ビニルピロリドン／ビニルアセテート／ビニルプロピオネート共重合体（ルビスコールVAP、BASF社製）、ビニルアセテート／クロトン酸共重合体（ルビセットCA、BASF社製）、ビニルアセテート／クロトン酸／ビニルピロリドン共重合体（ルビセットCAP、BASF社製）、ビニルピロリドン／アクリレート共重合体（ルビフレックス、BASF社製）、アクリレート／アクリルアミド共重合体（ウルトラホールド、BASF社製）、ビニルアセテート／ブチルマレエート／イソボルニルアクリラート共重合体（アドバンテージ、ISP社製）、カルボキシビニルポリマー（カーボポール、BFGoodrich社製）、アクリル酸・メタクリル酸アルキル共重合体（ペミュレン、BF Goodrich社製）等のアニオン性高分子化合物や、ジアルキルアミノエチルメタクリレート重合体の酢酸両性化物（ユカフォーマー、三菱化学社製）、アクリル酸オクチルアクリルアミド／アクリル酸ヒドロキシプロピル／メタクリル酸ブチルアミノエチル共重合体（AMPHOMER、NSC社製）等の両性高分子化合物、ビニルピロリドン／ジメチルアミノエチルメタクリレートの4級化物（GAFQUAT、ISP社製）、メチルビニルイミダゾリウムクロリド／ビニルピロリドン共重合体（ルビコート、BASF社製）等のカチオン性高分子化合物、ポリビニルピロリドン（ルビスコールK、BASF社製）、ビニルピロリドン／酢酸ビニル共重合体（ルビスコールVA、BASF社製）、ビニルピロリドン／ジメチルアミノエチルメタクリレート共重合体（コポリマー937、ISP社製）、ビニルカプロラクタム／ビニルピロリドン／ジメチルアミノエチルメタクリレート共重合体（コポリマーVC713、ISP社製）等ノニオン性高分子化合物等がある。また、セルロースまたはその誘導体、ケラチン及びコラーゲンまたはその誘導体、アルギン酸カルシウム、プルラン、寒天、ゼラチン、タマリンド種子多糖類、キサンタンガム、カラギーナン、ハイメトキシルペクチン、ローメトキシルペクチン、グアーガム、アラビアゴム、結晶セルロース、アラビノガラクタン、カラヤガム、トラガカントガム、アルギン酸、アルブミン、カゼイン、カードラン、ジェランガム、デキストラン等の天然由来高分子化合物も好適に用いることができる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
【００３２】
（9）生理活性成分の例
生理活性成分としては、皮膚に塗布した場合に皮膚に何らかの生理活性を与える物質が挙げられる。例えば、美白成分、抗炎症剤、老化防止剤、紫外線防御剤、スリミング剤ひきしめ剤、抗酸化剤、発毛剤、育毛剤、保湿剤、血行促進剤、抗菌剤、殺菌剤、乾燥剤、冷感剤、温感剤、ビタミン類、アミノ酸、創傷治癒促進剤、刺激緩和剤、鎮痛剤、細胞賦活剤、酵素成分等が挙げられる。これらの好適な配合成分の例としては、例えばアシタバエキス、アボカドエキス、アマチャエキス、アルテアエキス、アルニカエキス、アロエエキス、アンズエキス、アンズ核エキス、イチョウエキス、ウイキョウエキス、ウコンエキス、ウーロン茶エキス、エイジツエキス、エチナシ葉エキス、オウゴンエキス、オウバクエキス、オウレンエキス、オオムギエキス、オトギリソウエキス、オドリコソウエキス、オランダカラシエキス、オレンジエキス、海水乾燥物、海藻エキス、加水分解エラスチン、加水分解コムギ末、加水分解シルク、カモミラエキス、カロットエキス、カワラヨモギエキス、甘草エキス、カルカデエキス、カキョクエキス、キナエキス、キューカンバ-エキス、グアノシン、クチナシエキス、クマザサエキス、クララエキス、クルミエキス、グレープフルーツエキス、クレマティスエキス、クロレラエキス、クワエキス、ゲンチアナエキス、紅茶エキス、酵母エキス、ゴボウエキス、コメヌカ発酵エキス、コメ胚芽油、コンフリーエキス、コラーゲン、コケモモエキス、サイシンエキス、サイコエキス、サイタイ抽出液、サルビアエキス、サボンソウエキス、ササエキス、サンザシエキス、サンショウエキス、シイタケエキス、ジオウエキス、シコンエキス、シソエキス、シナノキエキス、シモツケソウエキス、シャクヤクエキス、ショウブ根エキス、シラカバエキス、ナエキス、セイヨウキズタエキス、セイヨウサンザシエキス、セイヨウニワトコエキス、セイヨウノコギリソウエキス、セイヨウハッカエキス、セ-ジエキス、ゼニアオイエキス、センキュウエキス、センブリエキス、ダイズエキス、タイソウエキス、タイムエキス、茶エキス、チョウジエキス、チガヤエキス、チンピエキス、トウキエキス、トウキンセンカエキス、トウニンエキス、トウヒエキス、ドクダミエキス、トマトエキス、納豆エキス、ニンジンエキス、ニンニクエキス、ノバラエキス、ハイビスカスエキス、バクモンドウエキス、パセリエキス、蜂蜜、ハマメリスエキス、パリエタリアエキス、ヒキオコシエキス、ビサボロール、ビワエキス、フキタンポポエキス、フキノトウエキス、ブクリョウエキス、ブッチャーブルームエキス、ブドウエキス、プロポリス、ヘチマエキス、ベニバナエキス、ペパーミントエキス、ボダイジュエキス、ボタンエキス、ホップエキス、マツエキス、マロニエエキス、ミズバショウエキス、ムクロジエキス、メリッサエキス、モモエキス、ヤグルマギクエキス、ユーカリエキス、ユキノシタエキス、ヨクイニンエキス、ヨモギエキス、ラベンダーエキス、リンゴエキス、レタスエキス、レモンエキス、レンゲソウエキス、ローズエキス、ローズマリーエキス、ローマカミツレエキス、ローヤルゼリーエキス等を挙げることができる。
また、デオキシリボ核酸、ムコ多糖類、ヒアルロン酸ナトリウム、コンドロイチン硫酸ナトリウム、コラーゲン、エラスチン、キチン、キトサン、加水分解卵殻膜などの生体高分子、アミノ酸、加水分解ペプチド、乳酸ナトリウム、尿素、ピロリドンカルボン酸ナトリウム、ベタイン、ホエイ、トリメチルグリシンなどの保湿成分、スフィンゴ脂質、セラミド、フィトスフィンゴシン、コレステロール、コレステロール誘導体、リン脂質などの油性成分、ε-アミノカプロン酸、グリチルリチン酸、β-グリチルレチン酸、塩化リゾチーム、グアイアズレン、ヒドロコールチゾン等の抗炎症剤、ビタミンA、ビタミンB2、ビタミンB6、ビタミンC、ビタミンD、ビタミンE、パントテン酸カルシウム、ビオチン、ニコチン酸アミド、ビタミンCエステル等のビタミン類、アラントイン、ジイソプロピルアミンジクロロアセテート、4-アミノメチルシクロヘキサンカルボン酸等の活性成分、トコフェロール、カロチノイド、フラボノイド、タンニン、リグナン、サポニン等の抗酸化剤、α-ヒドロキシ酸、β-ヒドロキシ酸などの細胞賦活剤、γ-オリザノール、ビタミンE誘導体などの血行促進剤、レチノール、レチノール誘導体等の創傷治癒剤、アルブチン、コウジ酸、プラセンタエキス、イオウ、エラグ酸、リノール酸、トラネキサム酸、グルタチオン等の美白剤、セファランチン、カンゾウ抽出物、トウガラシチンキ、ヒノキチオール、ヨウ化ニンニクエキス、塩酸ピリドキシン、DL-α-トコフェロール、酢酸DL-α-トコフェロール、ニコチン酸、ニコチン酸誘導体、パントテン酸カルシウム、D-パントテニルアルコール、アセチルパントテニルエチルエーテル、ビオチン、アラントイン、イソプロピ
ルメチルフェノール、エストラジオール、エチニルエストラジオール、塩化カプロニウム、塩化ベンザルコニウム、塩酸ジフェンヒドラミン、タカナール、カンフル、サリチル酸、ノニル酸バニリルアミド、ノナン酸バニリルアミド、ピロクトンオラミン、ペンタデカン酸グリセリル、L-メントール、モノニトログアヤコール、レゾルシン、γ-アミノ酪酸、塩化ベンゼトニウム、塩酸メキシレチン、オーキシン、女性ホルモン、カンタリスチンキ、シクロスポリン、ジンクピリチオン、ヒドロコールチゾン、ミノキシジル、モノステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタン、ハッカ油、ササニシキエキス等の育毛剤などが挙げられる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
【００３３】
（10）酸化防止剤の例
亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、エリソルビン酸、エリソルビン酸ナトリウム、チオジプロピオン酸ジラウリル、トコフェロール、トリルビグアナイド、ノルジヒドログアヤレチン酸、パラヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシアニソール、ジブチヒドロキシトルエン、ステアリン酸アスコルビル、パルミチン酸アスコルビル、没食子酸オクチル、没食子酸プロピル、カロチノイド、フラボノイド、タンニン、リグナン、サポニン、リンゴエキスやチョウジエキスなどの酸化防止効果の認められる植物エキス等が挙
げられる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
【００３４】
（11）溶媒の例
精製水、エタノール、低級アルコール、エーテル類、LPG、フルオロカーボン、N-メチルピロリドン、フルオロアルコール、揮発性直鎖状シリコーン、次世代フロン等が挙げられる。尚、これらは１種のみを配合しても良いし、２種類以上併用しても良い。
【実施例】
【００３５】
実施例
含水エチルアルコールを用いる発芽ブロッコリー抽出物の調製
アブラナ科アブラナ属（Ｂｒａｓｓｉｃａ）に属するブロッコリー（Ｂｒａｓｓｉｃａ
ｏｌｅｒａｃｅａ ｖａｒ． ｉｔａｌｉｃａ）の種子を１５℃〜２５℃の水に浸漬させ、２〜５日間、間接日光照射にて発芽させた後、芽を１０〜３０ｍｍ（このとき、根は１０ｍｍ程度）に成長させた全草（芽、種子、根）を乾燥し、粉砕処理工程を経て、さらに有機溶媒（ｎ−ヘキサン）を用いて脱脂処理を行った。その後、脱脂処理物を微粉砕、殺菌、篩過して、パウダー状としたものを得た。こうして得られたパウダー状物に、５０％（ｗ／ｗ）上記パウダーの
３倍量の含水エチルアルコールを加え、室温にて１時間抽出を行った後ろ過をして抽出物を得た。
【００３６】
試験例
生体内抗酸化作用の測定
[プロトコル]
試験方法
一重盲検試験法
被験物質
実施例１の発芽ブロッコリー抽出物（以下、単に「発芽ブロッコリー抽出物」ともいう。）
被験対象
男性健常人30名を対象に予備試験として8-ＯＨdＧ値 又は、ＨＥＬ値の測定を行い、8-ＯＨdＧ値又は、ＨＥＬ値の比較的高い２０名を選択した。（医薬品を常用していない者）
【００３７】
投与群、被験者人数、処方量
上記で選択した20名を下記の表１のように3群に分けて、1日1回就寝前に処方量に従がって服用した。
【００３８】
【表１】
2008074816.tif 000002
【００３９】
摂取期間
3週間、1日1回就寝前。
検査方法
摂取前と、摂取１週間後および3週間後に尿中の8-OHdＧを検査キット（日研ザイル株式会社  New 8-OHdG Check Kit）を用いて測定し、更に尿中のＨＥＬを検査キット（日研ザイル株式会社  ヘキサノイルリジン測定キット）を用いて測定した。その後、その結果をMicrosoft Office Excel  2003(11.5612.5606)を用いて有意差検定を行った。尚、上記8-OHdＧ及びＨＥＬの測定方法はそれぞれの検査キット（（日研ザイル株式会社  New 8-OHdG Check Kit）及び（日研ザイル株式会社  ヘキサノイルリジン測定キット））の説明書に従って行った。
【００４０】
[結果]
発芽ブロッコリー抽出物摂取前、摂取1週間後および3週間後の尿中8-OHｄGおよびヘキサノイルリジン（HEL）の測定結果を表２に示した。
また、各群の各被験者の尿中8-OHｄG量の推移の平均をグラフに示したものを図１に、各群の初期値を0とした時の尿中８-OHdG量の推移を図２に示した。
同様に、各被験者の尿中HEL量の推移の平均をグラフに示したものを図３に、各群の初期値を0とした時の尿中HEL量の推移を図４に示した。尚、8-OHｄGおよびHELの測定結果を有意差検定した結果を表３及び表４に示した。
【００４１】
【表２】
2008074816.tif 000003
【００４２】
【表３】
2008074816.tif 000004
【００４３】
【表４】
2008074816.tif 000005
【００４４】
摂取３週間後の試験結果は以下の通りであった。
即ち、Placebo群において、6名中5名に8-OHｄGの減少が見られ（表２太字）、平均でも減少傾向を示した（表２、図１、２）。またHELでは6名中1名に減少が見られたのみで、後の５名は増加し、平均の値が増加した（表２、図３、４）。
また、BSE-150群においては、７名中3名に8-OHｄGの減少が、1名にHELの減少が見られたが（表２太字）、平均では8-OHｄGで減少傾向が、HELで増加傾向が見られ、変動の幅は、Placebo群とあまり差が認められなかった（表２、図１、２、３、４）。
更に、BSE-450群においては、7名中7名全員に8-OHdGの減少がみられた（表２太字）。平均においても、Placebo群およびBSE-150群と比較して減少する傾向にあった（表２、図１、２）。HELについては、7名中5名に減少が見られ、平均も減少傾向にあった（表２、図３、４）。
また、8-OHdGのBSE-450群において初期と摂取3週間後間で1対標本による両側平均検定（T検定）を行ったところ有意差が認められた（p＜0.01）。また摂取3週間後間のPlaceboとBSE-150，及びPlaceboとBSE-450の間でT検定を実施したところ，双方に有意差が認められた（p＜0.05）（表３、図１）。
また、HELの摂取3週間後間のPlaceboとBSE-450の間でT検定を実施したところ、双方に有意差が認められた（p＜0.05）（表４、図３）。
【００４５】
［考察・実施例の効果］
男性健常人30名のうち、尿中の8-OHdG及びHELの値が高い20名を選択し、この20名をBSE-150群(7名)、BSE-450群(7名)、Placebo群(6名)の3群に分けた。それぞれ１日に発芽ブロッコリー抽出物を150mg、450mg、デキストリン 450mgを3週間服用してもらい、尿中の8-OHdG,HELを測定し、発芽ブロッコリー抽出物の生体内の抗酸化作用について評価した。その結果、BSE-450群で摂取3週間後の8-OHdG,HELの値は初期値より減少し（表２、図１、図３参照）、Placebo群、BSE-150群と比較しても、減少傾向が大きかった（図１、図３参照）。また特に8-OHdGについては3週間服用後のBSE-450群で、7名全員の値が減少し、初期と摂取3週間後の1対標本による両側平均検定（T検定）を行ったところ有意差が認められ（p＜0.01）、発芽ブロッコリー抽出物がDNAの酸化傷害を抑制する効果があることが確認できた。また、摂取3週間後のPlacebo群とBSE-150群，Placebo群、BSE-450群の間で2群間検定（T検定）を行ったところ有意差が認められた（p＜0.05）。HELについては摂取3週間後のPlacebo群、BSE-450群の間で有意差が認められた（p＜0.05）。
また、BSE-150、Placeboの2群の値が増加したのに対し、BSE-450群のHEL値は減少した。
また、今回の試験中に発芽ブロッコリー抽出物摂取による体調不良、及び腹痛などを訴える人もいなかった。
以上の結果より、発芽ブロッコリー抽出物を１日に150mgまたは450mg、3週間服用すると、尿中の8-OHdGはコントロール群と比較して有意に減少し（p<0.05）、さらに、450mg摂取においては初期と3週間後で両側平均検定（T検定）を行ったところ、p＜0.01で有意に8-OHdGが減少していた。また、発芽ブロッコリー抽出物
450mgの摂取は，尿中のHELも減少させる傾向にあった。
尿中の8-OHdG値の減少はDNAの酸化傷害が抑制されたことを、また、HEL値の減少は生体内の脂質酸化が抑制されたことを意味する。この両方を測定することにより生体内抗酸化作用を推察できる。今回の結果より、発芽ブロッコリー抽出物はDNAの酸化傷害を抑制する効果があり、また生体内の脂質過酸化抑制作用があることが確認でき、発芽ブロッコリー抽出物は生体内抗酸化作用があることが判った。またその作用は継続服用3週間後に効果が現れることが判った。
【００４６】
以下に本発明の生体内抗酸化剤（発芽ブロッコリー抽出物）の配合例を挙げるが、下記配合例は本発明を限定するものではない。
配合例１：チューインガム
砂糖                                  ５３．０ｗｔ％
ガムベース                            ２０．０
グルコース                            １０．０
水飴                                  １６．０
香料                                    ０．５
発芽ブロッコリー抽出物                    ０．５    
１００．０ｗｔ％
【００４７】
配合例２：グミ
還元水飴                              ４０．０ｗｔ％
グラニュー糖                          ２０．０
ブドウ糖                              ２０．０
ゼラチン                                ４．７
水                                      ９．６８
キウイ果汁                              ４．０
キウイフレーバー                        ０．６
色素                                    ０．０２
発芽ブロッコリー抽出物                    １．０    
１００．０ｗｔ％
【００４８】
配合例３：キャンディー
砂糖                                  ５０．０ｗｔ％
水飴                                  ３３．０
水                                    １４．４
有機酸                                  ２．０
香料                                    ０．２
発芽ブロッコリー抽出物                    ０．４    
１００．０ｗｔ％
【００４９】
配合例４：ヨーグルト（ハード・ソフト）
牛乳                                  ４１．５ｗｔ％
脱脂粉乳                                ５．８
砂糖                                    ８．０
寒天                                    ０．１５
ゼラチン                                ０．１
乳酸菌                                  ０．００５
発芽ブロッコリー抽出物                    ０．４    
香料                                    微量
水                                      残余      
１００．０ｗｔ％
【００５０】
配合例５：ソフトカプセル
米胚芽油                              ８７．０ｗｔ％
乳化剤                                １２．０
発芽ブロッコリー抽出物                    １．０    
１００．０ｗｔ％
【００５１】
配合例６：清涼飲料
果糖ブドウ糖液糖                      ３０．０ｗｔ％
乳化剤                                  ０．５
発芽ブロッコリー抽出物                    ０．０５
香料                                    適量
精製水                                  残余      
１００．０ｗｔ％
【００５２】
配合例７：錠剤
乳糖                                  ５４．０ｗｔ％
結晶セルロース                        ３０．０
澱粉分解物                            １０．０
グリセリン脂肪酸エステル                ５．０
発芽ブロッコリー抽出物                    １．０    
１００．０ｗｔ％
【００５３】
配合例８：錠菓
砂糖                                  ７６．４ｗｔ％
グルコース                            １９．０
ショ糖脂肪酸エステル                    ０．２
発芽ブロッコリー抽出物                    ０．５
精製水                                  ３．９      
１００．０ｗｔ％
【００５４】
配合例９：顆粒内服剤（医薬品）
発芽ブロッコリー抽出物                        １．０ｗｔ％
乳糖                                        ３０．０
コーンスターチ                              ６０．０
結晶セルロース                                ８．０
ポリビニールピロリドン                        １．０
１００．０ｗｔ％
【００５５】
配合例１０：化粧クリーム
スクワラン                            ２０．０wt％
ミツロウ                                ５．０
精製ホホバ油                            ５．０
グリセリン                              ５．０
グリセリンモノステアレート              ２．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン-
モノステアレート                        ２．０
発芽ブロッコリー抽出物                    ２．０
防腐剤                                  適量
香料                                    適量
精製水                                  残余        
１００．０wt％
【００５６】
配合例１１：化粧水
エタノール                              ５．０wt％
グリセリン                              ２．０
1,3−ブチレングリコール                 ２．０
ポリエチレンオレイルエーテル            ０．５
クエン酸ナトリウム                      ０．１
クエン酸                                ０．１
発芽ブロッコリー抽出物                    ０．１
精製水                                  残余        
１００．０wt％
【００５７】
配合例１２：ボディージェル
マカデミアナッツ油                      ２．０wt％
ミリスチン酸オクチルドデシル          １０．０
メチルフェニルポリシロキサン            ５．０
ベヘニルアルコール                      ３．０
ステアリン酸                            ３．０
バチルアルコール                        １．０
モノステアリン酸グリセリル              １．０
テトラオレイン酸ポリオキシエチレンソルビット  ２．０
水素添加大豆リン脂質                    １．０
セラミド                                ０．１
パルミチン酸レチノール                  ０．１
防腐剤                                  適量
ツボクサ抽出物                          １．０
発芽ブロッコリー抽出物                  １．０
１、３−ブチレングリコール              ５．０
精製水                                  残余        
１００．０wt％
【００５８】
配合例１３：乳液
スクワラン                              ４．０wt％
ワセリン                                ２．５
セタノール                              ２．０
グリセリン                              ２．０
親油型モノステアリン酸グリセリン        １．０
ステアリン酸                            １．０
Ｌ−アルギニン                          １．０
発芽ブロッコリー抽出物                  ０．５
水酸化カリウム                          ０．１
香料                                    微量
精製水                                  残余        
１００．０wt％
【００５９】
配合例１４：浴用剤（液状）
プロピレングリコール                  ５０．０wt％
エタノール                            ２０．０
硫酸ナトリウム                          ５．０
発芽ブロッコリー抽出物                    ０．５
ラノリン                                ０．５
アボガド油                              ０．５
色素                                    １．５
香料                                  ２２．０        
１００．０wt％
【００６０】
配合例１５：キャットフード
とうもろこし                        ３４．０ｗｔ％
小麦粉                              ３５．０
ミートミール                        １５．０
牛脂                                  ８．９
食塩                                  １．０
かつおエキス                          ４．０
発芽ブロッコリー抽出物                  １．０
タウリン                              ０．１
ビタミン類                            ０．５
ミネラル類                            ０．５
１００．０ｗｔ％
【００６１】
配合例１６：ドッグフード
とうもろこし                              ３０．０ｗｔ％
肉類（チキン）                            １５．０
脱脂大豆                                  １０．０
小麦粉                                    ２５．０
糟糠類                                      ５．０
発芽ブロッコリー抽出物                        ５．０
動物性油脂                                  ８．９
オリゴ糖                                    ０．１
ビタミン                                    ０．５
ミネラル                                    ０．５
１００．０ｗｔ％
【産業上の利用可能性】
【００６２】
以上説明したように、本発明は、ブロッコリー種子や、発芽ブロッコリーを使用しているので、新規な安全性の高い生体内抗酸化剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００６３】
【図１】尿中の８−ＯＨｄＧの推移を示すグラフである。
【図２】図１において、初期値を０とした時の尿中の８−ＯＨｄＧの推移を示すグラフである。
【図３】尿中のＨＥＬの推移を示すグラフである。
【図４】図３において初期値を０とした場合のＨＥＬの推移を示すグラフである。
【図１】
2008074816.tif 000006
【図２】
2008074816.tif 000007
【図３】
2008074816.tif 000008
【図４】
2008074816.tif 000009