(57)【要約】【課題】有用リン脂質から成るリポソーム及び粘着性組成物、又は、このリポソームと粘着性組成物及び機能性素材とを有効成分とし、これらの相乗機能を有効に活用して、生理活性を向上させた、有用リン脂質組成物を含む機能性素材を提供する。【解決手段】機能性素材１は、オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質を含む有用リン脂質組成物から成るリポソーム２と粘着性組成物３とを有効成分とする。リポソーム２が粘着性組成物３に被覆されてもよい。機能性物質を有用リン脂質組成物から成るリポソーム２に内包させてもよい。有用リン脂質を水中で乳化してリポソーム２を形成し、このリポソーム２に粘着性組成物３から成る溶液を混合することで製造できる。リポソーム２や機能性物質の体内吸収効率を向上させ、少量で同等以上の生理機能を発揮できる。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質を含む有用リン脂質組成物から成るリポソームと粘着性組成物とを有効成分としたことを特徴とする、有用リン脂質組成物を含む機能性素材。
【請求項２】
オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質を含む有用リン脂質組成物から成るリポソームと該リポソームを被覆する粘着性組成物とを有効成分としたことを特徴とする、有用リン脂質組成物を含む機能性素材。
【請求項３】
オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質を含む有用リン脂質組成物から成るリポソームと粘着性組成物と機能性物質とを有効成分としたことを特徴とする、有用リン脂質組成物を含む機能性素材。
【請求項４】
オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質を含む有用リン脂質組成物から成るリポソームと粘着性組成物と機能性物質とを有効成分とし、
上記機能性物質を、上記リポソーム内に内包したことを特徴とする、有用リン脂質組成物を含む機能性素材。
【請求項５】
オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質を含む有用リン脂質組成物から成るリポソームと該リポソームを被覆する粘着性組成物と機能性物質とから成り、
上記機能性物質を、上記リポソーム内に内包したことを特徴とする、有用リン脂質組成物を含む機能性素材。
【請求項６】
前記オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質が、リン脂質中にエステル結合する脂肪酸の１０重量％以上、好ましくは２０重量％以上がＤＨＡ（ドコサヘキサエン酸）及び／又はＥＰＡ（エイコサペンタエン酸）であることを特徴とする、請求項１〜５の何れかに記載の有用リン脂質組成物を含む機能性素材。
【請求項７】
前記オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質が、エステル交換によってオメガ−３高度不飽和脂肪酸含有量を高めた有用リン脂質組成物であることを特徴とする、請求項６に記載の有用リン脂質組成物を含む機能性素材。
【請求項８】
前記粘着性組成物が、キトサン又は糖鎖形成単糖から成ることを特徴とする、請求項１〜５の何れかに記載の有用リン脂質組成物を含む機能性素材。
【請求項９】
前記糖鎖形成単糖がマンノースであることを特徴とする、請求項８に記載の有用リン脂質組成物を含む機能性素材。
【請求項１０】
前記機能性物質が機能性食品素材であることを特徴とする、請求項１〜５の何れかに記載の有用リン脂質組成物を含む機能性素材。
【請求項１１】
前記機能性物質が医薬品素材であることを特徴とする、請求項１〜５の何れかに記載の有用リン脂質組成物を含む機能性素材。
【請求項１２】
前記機能性物質が、アガリクスであることを特徴とする、請求項１〜５の何れかに記載の有用リン脂質組成物を含む機能性素材。
【請求項１３】
前記機能性物質が、コエンザイムＱ１０であることを特徴とする、請求項１〜５の何れかに記載の有用リン脂質組成物を含む機能性素材。
【請求項１４】
前記オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質が水産生物由来であり、該水産生物が、魚卵、水産動物の生殖巣、イカ、ホタテ貝、ヒトデ、海藻、微生物の何れかであることを特徴とする、請求項１〜５の何れかに記載の有用リン脂質組成物を含む機能性素材。
【請求項１５】
請求項１〜１４の何れかに記載の有用リン脂質組成物を含む機能性素材を、添加したことを特徴とする、機能性食品。
【請求項１６】
前記機能性食品が、飲料であることを特徴とする、請求項１５に記載の機能性食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、有用リン脂質組成物を含む機能性素材とこの機能性素材を添加した機能性食品に関する。さらに詳しくは、有用リン脂質組成物から成るリポソームと粘着性組成物とを有効成分とする機能性素材及びこの機能性素材にさらに機能性物質を含有させた機能性素材と、この機能性材料を含む機能性食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
近時、健康志向の高まりに伴って、様々な機能性食品が注目を集めている。それら多くの中のひとつとして、魚介類から採れる有用リン脂質がある（特許文献１，非特許文献１参照）。これはヒトの健康に有用なＥＰＡ（エイコサペンタエン酸）やＤＨＡ（ドコサヘキサエン酸）などの高度不飽和脂肪酸エステルを豊富に含むため、これ自体が機能性食品の素材として注目を集め、商品化もされている。
【０００３】
人体に有用な様々な機能性物質を構成する成分は種々あるが、例えば、親油性成分は、水、血液などから成る人体体液に難溶性であるため、人体への吸収効率は必ずしも高くなく、高価な、また貴重な素材を無駄にする場合がある。これらの親油性成分や親水性成分の吸収効率を向上させるための様々な製剤技術が考案され、食品、医薬品分野での重要な要素技術となっている。
【０００４】
主として機能性食品の範疇に属する素材として、天然由来の各種機能性食品素材を経口摂取することにより、生活習慣の乱れに由来する身体の変調（メタボリックシンドローム等）の改善に最近広く利用されるようになったものがある。これらの中には原料入手が難しく、生産量に限界がある、などの理由から供給量の少ない高価な素材が多い。例えば、アガリクス（非特許文献２）、コエンザイムＱ１０（非特許文献３）、ブルーベリー、ルテイン、アスタキサンチン等を挙げることができる。これら高価な、また貴重な機能性物質の生物学的利用能を向上させる、すなわち、より少量で同等以上の効能を図ることが望まれている。
【０００５】
近年、医薬品などの被覆物としてキトサンを用いることが、特許文献３〜６及び非特許文献４に開示されている。また、健康食品素材と卵黄リン脂質あるいは大豆リン脂質とにがりとから成る機能性食品が特許文献７に開示されている。
【０００６】
【特許文献１】特開平１１−１２３０５２号公報
【特許文献２】特開２００２−２７２４９３号公報
【特許文献３】特表２００２−５１４１８６号公報
【特許文献４】特表２００２−５４００７７号公報
【特許文献５】特表２００４−５０６００３号公報
【特許文献６】特開２００５−２９８４０７号公報
【特許文献７】特開２００６−２７１４００号公報
【非特許文献１】井上良計、食品と開発、３１、１，ｐ．４９
【非特許文献２】アガリクス  インターネット＜ＵＲＬ： HYPERLINK "http://www.aicplus.com/about" http://www.aicplus.com/about agaricus/index.html, ２００５年８月１９日検索
【非特許文献３】日本コエンザイムＱ協会  インターネット＜ＵＲＬ： HYPERLINK "http://www.coenzymeq-jp.com/enterprise.html#q10" http://www.coenzymeq-jp.com/enterprise.html#q10，２００５年８月１９日検索
【非特許文献４】H. Takeuchi 他３名, “Mucoadhesive properties of carbopal or chitosan-coated liposomes and their effectiveness in the oral administration of calcitomin to rats”, Journal of Controlled Release, Vol.86, pp.235-242,2003
【非特許文献５】フレグランスジャー ナル、Ｎｏ．１５、ｐ．６８−７６、１９６５
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、人体に有用で高価な機能性物質を、より効率的に吸収することができる機能性食品や製剤などに使用可能な機能性素材が得られていないという課題がある。
【０００８】
本発明は、上記課題に鑑み、有用リン脂質から成るリポソームとこのリポソームを被覆する物質とを有効成分とするか、さらに、このリポソーム内に機能性物質を内包させ、これらの相乗機能を有効に活用して、生理活性を向上させた、有用リン脂質組成物を含む機能性素材とこれを含む機能性食品を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者等は、鋭意研究行ない、有用リン脂質から成るリポソームと粘着性組成物とを組み合わせて一緒に投与するか、又は、上記材料にさらに機能性物質を含有させた機能性素材により、機能性物質単独投与の場合よりもその生理機能を高めることができることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
上記目的を達成するため、本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材は、オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質を含む有用リン脂質組成物から成るリポソームと粘着性組成物とを有効成分としたことを特徴とする。上記リポソームは粘着性組成物により被覆されていてもよい。
上記構成によれば、人体に有用なリン脂質組成物とこのリポソームを被覆する粘着性組成物の生理活性機能の相乗効果により極めて生理活性機能の高い、有用リン脂質組成物を含む機能性素材を提供することができる。
【００１１】
また、本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材は、オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質を含む有用リン脂質組成物から成るリポソームと粘着性組成物と機能性物質とを有効成分としたことを特徴とする。機能性物質がリポソーム内に内包されていてもよい。粘着性組成物が、機能性物質を内包したリポソームを被覆してもよい。
この構成によれば、人体に有用な機能性物質は乳化性に優れた有用リン脂質から形成されるリポソームと粘着性組成物と機能性物質を含有しているので、体内における生物学的利用能を高めることによって、生理活性機能を向上させることができる。
【００１２】
上記構成において、オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質は、好ましくは、リン脂質中にエステル結合する脂肪酸の１０重量％以上、好ましくは２０重量％以上がＤＨＡ（ドコサヘキサエン酸）及び／又はＥＰＡ（エイコサペンタエン酸）である。
オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質は、好ましくは、エステル交換によってオメガ−３高度不飽和脂肪酸含有量を高めた有用リン脂質組成物である。
リポソームを被覆する物質は、好ましくは、キトサン又は糖鎖形成単糖から成る。糖鎖形成単糖は、好ましくはマンノースである。
【００１３】
機能性物質は、好ましくは、機能性食品素材である。機能性物質が医薬品素材であってもよい。この機能性物質は、好ましくは、アガリクス又はコエンザイムＱ１０である。
前記オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質は水産生物由来であると好ましく、水産生物は、魚卵、水産動物の生殖巣、イカ、ホタテ貝、ヒトデ、海藻、微生物の何れかであってよい。
上記構成によれば、有用リン脂質から成るリポソームが天然由来のオメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質であり、リポソームを被覆する物質がキトサン又はマンノースから成るか、又は、さらに、食品素材や医薬品素材から成る機能性物質を含有した有用リン脂質組成物を含む機能性素材を提供することができる。特に、機能性物質がアガリクスやコエンザイムＱ１０である場合、その効果は著しく、オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質又はアガリクスの何れの単体よりも、高い生理活性機能を発現することができる。
【００１４】
また、本発明の機能性食品は、好ましくは、上記有用リン脂質組成物を含む機能性素材を添加している。この場合、機能性食品は飲料であってもよい。
上記構成によれば、機能性物質を内包する有用リン脂質組成物を含む機能性素材を、固形の食品や飲料などから摂取し得る機能性食品を提供することができる。
【発明の効果】
【００１５】
本発明によれば、有用なリン脂質組成物からリポソームが被覆されるか、さらに、リポソーム内に食品素材や医薬品素材から成る機能性物質を内包し、その生物学的利用能を向上させ得る機能性素材及び機能性素材を含有した食品を提供することができる。特に、飲料にして飲用した場合には、機能性物質の体内吸収効率を向上させることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
以下、図面に基づいて本発明の実施の形態を詳細に説明する。
最初に、本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材について説明する。
図１は、本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材の構造を模式的に示す。図において、本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材１は、有用リン脂質組成物から成るリポソーム２と粘着性組成物３とを有効成分としている。リポソーム２は、有用リン脂質組成物が水中で微粒子を形成することにより構成される。このリポソーム２の粒径はリポソーム化の条件によって異なり、通常１０μｍ以下、好ましくは１μｍ以下である。
【００１７】
本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材１は、有用リン脂質組成物から成るリポソーム２と粘着性組成物３とを有効成分とし、リポソーム２が粘着性組成物３により被覆されていてもよい。
【００１８】
有用リン脂質を主成分とする有用リン脂質組成物において、リン脂質は、一例として、化学式（１）で表されるようなグリセリンリン酸エステルであり、魚介類をはじめ、卵黄や大豆などに多く含まれ、抽出利用されている。
【化１】
2008179563.tif 000003
ここで、Ｒ１ ＣＯＯ，Ｒ２ ＣＯＯは脂肪酸残基であり、Ｘはコリン（ＰＣ）、エタノールアミン（ＰＥ）、イノシトール（ＰＩ）、セリン（ＰＳ）、及びグリセロール（ＰＧ）のうちから選ばれるアルコールアミン基などである。この基Ｘとしては、多価アルコールをエステル結合させた基であってもよい。
【００１９】
このようなグリセリンリン酸エステルの例として、化学式（２）で表されるホスファチジルコリンや、化学式（３）で表されるホスファチジルセリンなどが挙げられる。
【化２】
2008179563.tif 000004
【化３】
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ここで、Ｒ１ ＣＯＯ、Ｒ２ ＣＯＯは脂肪酸残基であり、化学式（１）で表されるグリセリンリン酸エステルのＸがコリン（ＰＣ）またはセリン（ＰＳ）である。
【００２０】
Ｒ１ ＣＯＯである脂肪酸残基が、ＤＨＡ（ドコサヘキサエン酸）基、ＥＰＡ（エイコサペンタエン酸）基である場合の化学構造式を下記（４）式及び（５）式に示す。これらＤＨＡ，ＥＰＡは、何れも末端から３番目に位置する炭素が不飽和結合を有していることから、オメガ（ω）−３高度不飽和脂肪酸と呼ばれており、このようなオメガ−３高度不飽和脂肪酸を含むリン脂質が、オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質である。本発明においては、オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質を、有用リン脂質、又は、単にオメガ−３結合リン脂質あるいはｎ−３系リン脂質と呼ぶ。
【化４】
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【化５】
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【００２１】
有用リン脂質は、親水基としてのリン酸部と親油基としてのアルキル基、アルケニル基部をバランスよく有する構造であるので、界面活性剤的な機能を持ち、水中、人体体液中、人体細胞内などで微粒子であるリポソーム２を形成する。外表面にリン脂質の二重膜構造を有するリポソーム２の内部の水相部分に親水成分は内包され易い。一方、親油性成分は、二重膜構造の疎水基構造と緩い結合（親和）を形成して包摂される。したがって、リポソーム２は、粘着性組成物３や後述する機能性物質を親水性及び疎水性を問わずに取り込み、微粒子を形成することができる。
【００２２】
なお、上記有用リン脂質のリン酸部分にエステル結合する化学物質は、コリンであるホスファチジルコリンが主要成分であるが、セリンの結合したリン脂質であるホスファチジルセリンを共存させることによりリポソームの表面に正電荷を持たせることで、液中で相互に電気的に反発させ、分散液中でのリポソームの安定性を著しく高めることができる。共存濃度は、５重量％以上で安定性が顕著であり、６０重量％以下が好ましい。また、有用リン脂質中でエステル結合する脂肪酸には、オメガ−３高度不飽和脂肪酸であるＤＨＡ及び／又はＥＰＡが含まれていることが必須である。オメガ−３高度不飽和脂肪酸は、少量でも含まれていれば本発明の効果を得ることができるが、高濃度であるほど有効である。具体的には、有用リン脂質中にエステル結合する脂肪酸の１０重量％以上で明瞭な効果を示すが、２０重量％以上が一層望ましい。
ここで、ホスファチジルセリンは、水産生物由来のリン脂質から抽出製造しても良いし、ホスファチジルコリンなどのリン脂質をＬ−セリン存在下にホスファチジル基転移反応により、変換することにより製造することができる（特許文献２参照）。また、酵素法等によるエステル交換によって抽出してもよい。さらにコレステロールを１重量％〜５０重量％の範囲で適宜加えることで、リポソーム膜の強度が増し、分散安定性を高めることができる。
なお、本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材１を、適宜に粘着性組成物３を含むリポソーム製剤１又は単にリポソーム製剤１とも呼ぶ。
【００２３】
上記リポソーム２は、有用リン脂質より成る二分子膜を形成し、その内部に水相を有する閉鎖小胞のことである。水と油など混じり合わない二液の一方が細粒となって他方の相に分散する系、乳化（エマルジョン）とは異なる。通常の乳化は界面活性剤などを用いてエマルジョンの安定化がなされている。有用リン脂質自体も界面活性剤の作用はあるが、本発明ではリポソームの二分子膜等として使用している。リポソームの形態としては、多膜リポソーム（０．１〜数μｍ) と一枚膜リポソーム（０．０１〜数μｍ）が知られている。前者には、多重層リポソーム（ＭＬＶ）、数枚膜リポソーム（ＯＬＶ）、多相リポソームがあり、後者には小さな一枚膜リポソーム（ＳＵＶ）、大きな一枚膜リポソーム（ＬＵＶ）、それに巨大一枚膜リポソーム（ＧＵＶ）がある。内部水相乃至二重膜相に機能性物質を必要量保持できさえすれば、そのいずれでも良いが、好ましくは一枚膜リポソームである。ここで、リポソーム２の調製・製造方法としては、vortexing 法、sonication法、reverse-phase evaporation 法、などを用いることができる（非特許文献５参照）。大量生産法としては、多価アルコール法、加温法、噴霧乾燥法、メカノケミカル法などでもよい。
【００２４】
リポソーム２を被覆する粘着性組成物３としては、生体内の粘膜などの組織に付着し易く、生体内で分解する物質が好ましく、高分子から成る材料、特に生物由来の材料を好適に用いることができる。このような物質としては、キトサンやマンノースが挙げられる。リポソーム２が粘着性組成物３により被覆される場合、粘着性組成物３の最小限の厚さは、その分子寸法から０．３ｎｍから１０ｎｍ程度と推定される。
【００２５】
本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材１によれば、人体に有用なリン脂質組成物から成るリポソーム２と粘着性組成物３の生理活性機能の相乗効果により、生理活性機能の極めて高い機能性食品を提供することができる。特に、粘着性組成物３がキトサンやマンノースである場合には、小腸や大腸などの腸の内壁に付着し易くなり、有用リン脂質組成物を含む機能性素材の腸内の滞留時間を長くする効果が著しく、リン脂質組成物単体よりも高い生理活性機能を発現することができる。
【００２６】
次に、本発明のさらに別の機能性素材として、オメガ−３結合リン脂質などの有用リン脂質組成物から成るリポソーム２と粘着性組成物３と機能性物質とを有効成分とした有用リン脂質組成物を含む機能性素材について説明する。
リポソーム２と粘着性組成物３と機能性物質とは混合されたものでもよく、リポソーム２の内部に機能性物質が内包されたものに粘着性組成物３が混合された混合体でもよい。  なお、本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材を、適宜、粘着性組成物３と機能性物質５とを含むリポソーム製剤又は単にリポソーム製剤とも呼ぶ。
【００２７】
図２は、本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材の別の構造を模式的に示すものである。図において、有用リン脂質組成物を含む機能性素材１０は、リポソーム２の内部に機能性物質５が内包され、リポソーム２がさらに粘着性組成物３で被覆されている。
【００２８】
機能性物質５を内包するリポソーム２は、有用リン脂質が水中で乳化凝集して微粒子を形成している。このリポソーム２の粒径はリポソーム化条件によって異なり、通常１０μｍ以下であり、より好ましくは１μｍ以下である。
ここで、有用リン脂質から成るリポソーム２及びこのリポソームを被覆する粘着性組成物３としては、上記と同様の材料を好適に用いることができる。さらに、有用リン脂質としては、オメガが結合し、リポソーム効果を有するリン脂質の修飾又は誘導体であってもよい。このような、脂質としては、ジガラクトシルジアシルグリセロール（ＤＧＤＧ）のような糖脂質であってもよい。
【００２９】
リポソームに内包される機能性物質５は、機能性食品素材や医薬品素材であれば何でもよい。このような機能性食品素材としては、アガリクス、メシマコブ、ハナビラタケなどのキノコ抽出エキス類や、コエンザイムＱ１０、水溶性ペプチド、カロチンなどカロチノイド類、ポリフェノール、茶カテキン、イチョウ葉エキス、各種ハーブ類、イソフラボン等のフラボノイド類、葉酸、ビタミン類、ミネラル類、アミノ酸類、トコフェロール、グルコサミン、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、コラーゲン、フコイダン、キチン、キトサン、ブルーベリー、ルテイン、アスタキサンチン等、それにＤＨＡ，ＥＰＡなどのオメガ−３系脂肪酸、共役脂肪酸（ＣＬＡ）などが挙げられる。これらの中で、アガリクスは顕著な抗がん作用を示すことが知られている。また、コエンザイムＱ１０は、人体細胞中でも生成して人体の“元気の素”と呼ばれる物質であり、健康、美容、体力増進の補助剤として多くの商品が販売されている。
【００３０】
一般に医薬品は、食品と異なり不都合な副作用を伴っている。例えば、アドレアマイシン、シスプラチン、タキソール等の抗がん剤は、優れた殺がん細胞効果を示すので広くがんの治療に用いられている。しかしながら、効果を高めるために使用量を増すと、脱毛、吐き気などの副作用が強くなり、治療の障害となっている。本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材により、これら医薬品の効能を高めると、医薬品の使用量を低下させ、副作用のレベルも大幅に低減化することができる。その結果、患者の生活の質（Ｑuality of Life)を著しく高めることができる点も、本発明の優れた効果である。
【００３１】
本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材１０によれば、人体に有用なリン脂質組成物から成るリポソーム２と粘着性組成物３と機能性物質５との生理活性機能の相乗効果により、極めて生理活性機能の高い機能性食品を提供することができる。
特に、粘着性組成物３がキトサンや糖鎖形成単糖のような腸粘膜に対して付着性のある物質である場合には、小腸や大腸などの腸の内壁に付着し易くなり、有用リン脂質組成物から成るリポソーム２及び機能性物質５の腸内の滞留時間を長くする効果が著しく、リン脂質組成物単体よりも高い生理活性機能を発現することができる。糖鎖形成単糖としては、マンノース、グルコース、キシロース、ラクトース、フコース、Ｎ−アセチルガラクトサミン、Ｎ−アセチルノイラミン酸などが挙げられる。一般食品用途として、キトサンの場合にはアレルゲンフリーとなるように精製したものを用いることが好ましい。マンノースの場合には、アレルゲンの副作用がないという利点がある。
【００３２】
本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材１０においては、有用リン脂質から成るリポソーム２の形成の際に、リポソーム２内に機能性物質５を内包させることで製造することができる。この場合、機能性物質５は、リポソーム２の内部に１〜９０重量％、好ましくは、２０〜７０重量％添加されることが好ましい。
【００３３】
本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材によれば、図２に示すように、有用リン脂質でリポソーム２を形成し、その内部に機能性物質５を内包させているので、種々の生物学的利用能を向上させる機能性物質５を内包する有用リン脂質のリポソームから成る機能性素材１０を提供することができる。したがって、本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材１０を用いる場合には、機能性物質５を単独で投与する以上の生理機能を発揮させることができる。
この場合、有用リン脂質は、単独でも多くの生理活性があることが知られており、良好な界面活性剤でもある。したがって、有用リン脂質自体をリポソーム化し、その内部に機能性素材５を内包させた機能性素材は、その他の特別な界面活性剤などの添加物を使用せずに分散化できる。このため、有用リン脂質を水に添加して、リン脂質の脂質二重膜を形成する処理を施すことにより、リポソーム２を効率良く形成することができる。
【００３４】
さらに、有用リン脂質は、例えば、肝機能改善、血圧降下、抗アレルギー、記憶力などの学習機能向上、制がんなどの生理活性があるので、機能性物質５の有効成分と有用リン脂質中の生理活性成分との相乗効果によっても、全体としての生理機能を向上させることができる。
【００３５】
ここで、生理活性機能を向上させる機構としては、小腸における吸収性を高めたり、腸内や体内での機能性物質５の分解を抑えたり、徐放性による血中濃度の維持、生体膜と類似構造であることから細胞との相互作用を促進したりすることに起因すると考えられる。また、生体の特定部位（疾患のターゲット部位）に機能性物質５を、濃度高く集積したりできるものと推定される。さらに、腸管のパイエル板における免疫細胞の活性化や、オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質で作成したリポソーム２が、がん細胞の増殖抑制効果がある場合や、オメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質そのものの他の生理機能との相乗効果などのいずれか、又はその複合効果などの種々の要因が考えられるが、詳細は不明である。
【００３６】
次に、本発明の有用リン脂質組成物から成るリポソーム２を含む機能性素材の製造方法を説明する。
有用リン脂質組成物から成るリポソーム２と粘着性組成物３とから成る機能性素材１は、有用リン脂質組成物を水中で乳化し、このリポソーム懸濁液に粘着性組成物３を含有する溶液を混合することにより製造することができる。別の製造方法として、リポソーム懸濁液を噴霧乾燥流動槽に導入し、この槽内のリポソーム微粒子に粘着性組成物３から成る溶液を噴霧することでリポソーム微粒子に粘着性組成物３を被覆してもよい。
【００３７】
有用リン脂質組成物から成るリポソーム２と粘着性組成物３と機能性物質５とから成る機能性素材１０は、最初に有用リン脂質組成物に機能性物質５を混合し、乳化して、有用リン脂質組成物のリポソーム２を形成し、機能性物質５と混合したリポソーム懸濁液に粘着性組成物溶液を混合することにより製造することができる。この場合、水中で乳化することによって、機能性物質５を内包したリポソーム２とし、さらに、粘着性組成物３を混合してもよい。別の製造方法として、リポソーム２及び機能性物質５から成る懸濁液を噴霧乾燥流動槽に導入し、この槽内のリポソーム２及び機能性物質５から成る微粒子に粘着性組成物３から成る溶液を噴霧することでリポソーム微粒子に粘着性組成物３を被覆してもよい。
【００３８】
乳化は、水と有用リン脂質組成物と機能性物質５を強力に撹拌し、又は、微細孔を通して噴射することによって行なうことができる。特に、機能性物質５が親水性である場合には、機能性物質５がリポソーム２のリン脂質二重膜内部に取り込まれて、均一な乳液となり易い（図２参照）。さらに、機能性物質５が親油性である場合には、その一部又は全部がリポソーム２内部のリン脂質二重膜の層間に挟まれて、リン脂質の内部に保持、即ち包摂される。乳化により形成されるリポソーム２の粒径は、１０μｍ以下である。粒径が小さいほど水性媒体中でリポソーム２は安定であり、また有用リン脂質中のリン酸部分にエステル結合する化学物質として、５重量％以上のセリンが含まれる場合、安定性は向上する。またリポソーム化の方法によって粒径分布は、適宜調製することができる。粒径および粒径分布は用途に応じて適宜設計すればよい。
【００３９】
有用リン脂質としては、イクラなどの魚卵、カツオ、マグロなどの解体加工屑や生殖巣、イカ、ヒトデ、ホタテ貝、海藻、微生物等の水産生物由来の油分から抽出し、精製したオメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質を用いることができる。
【００４０】
粘着性組成物３としては、酸性やアルカリ性の緩衝液に粘着性組成物３を溶解させ所定のｐＨとし、上記リポソーム２と混合する前に、蒸留水で適正な濃度に希釈して用いることができる。粘着性組成物３が溶解するときのｐＨ依存性にもよるが、リポソーム２と粘着性組成物３の混合後におけるリポソーム２の安定性を考慮すれば、ｐＨは少なくとも３以上１０以下が好ましく、ｐＨが６〜７の範囲で特に中性が好ましい。上記範囲外では、リポソーム２と粘着性組成物３の混合後におけるリポソーム２の安定性がなくなるので好ましくない。
【００４１】
上記製造方法によれば、有用リン脂質自体をリポソーム化し、粘着性組成物３を混合することで有用リン脂質組成物を含む機能性素材１を効率良く製造することができる。
【００４２】
上記製造方法によれば、有用リン脂質と機能性物質５とを混合し、有用リン脂質をリポソーム化すると同時に機能性物質５と混合するか又はリポソーム２内に機能性物質５を内包し、さらに、粘着性組成物３を混合することで有用リン脂質組成物を含む機能性素材１０を効率良く製造することができる。
【実施例１】
【００４３】
以下、実施例によって本発明をさらに詳細に説明する。
実施例１として、有用リン脂質組成物と粘着性組成物３とを有効成分とする、有用リン脂質組成物を含むリポソーム製剤１を製造した。
薄膜剥離法によりイカミール由来のオメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質を調製した。具体的には、イカミール由来のホスファチジルコリン（ＰＣ）と同ホスファチジルセリン（ＰＳ）とコレステロールを９：１：１０のモル比とし、有機溶媒に溶解後、溶媒をナス型フラスコで留去し、その内壁に薄膜を形成した。次に、このようにして得たオメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質の１００倍量の水を加えてボルテックスミキサーで上記脂質の薄膜が完全に剥離するまで攪拌して、リポソーム分散液を調製した。一方、キトサン（片倉チッカリン株式会社製、品名ダイキトサンＶＬ）を酢酸緩衝液に溶かした。キトサン濃度は１重量％でｐＨは６とした。キトサンの溶液は−２０℃に保持した。使用の前にこの溶液を蒸留水で１．５倍に希釈し０．６７重量％の濃度とした。０．５ｃｍ３のリポソーム懸濁液を２ｃｍ３のキトサン溶液に６００ｒｐｍ、室温で１時間撹拌しつつ滴下した。得られた懸濁液を４℃で一昼夜放置して安定させ、リン脂質組成物から成るリポソーム２と粘着性組成物３とから成る実施例１の機能性素材を調製した。
【実施例２】
【００４４】
実施例１と同様にして、有用リン脂質組成物から成るリポソーム２がキトサンから成る粘着性組成物３で被覆された実施例２の機能性素材を調製した。
【実施例３】
【００４５】
実施例１と同様にしてリポソーム分散液を調製した。具体的には、リポソーム２を、水とアガリクスの水抽出液で水和させ、ボルテックスミキサーで２０分間攪拌して、リポソーム化を行なった。このリポソーム２を、ポリカーボネート樹脂製で孔径が０．４μｍの２段式フィルタ（Ｗｈａｔｕｅｎ  Ｉｎｃ．，Ｎｅｗｔｏｎ、ＭＡ，ＵＳＡ）メンブランフィルターを５回通し、サイジング及び除菌を行なった。このリポソーム懸濁液に実施例１と同様にして、キトサン溶液を混合し、一昼夜放置して安定させ、有用リン脂質組成物から成るリポソーム２とキトサン３とアガリクス５とから成る実施例３のリポソーム製剤１０を調製した。
【００４６】
次に、比較例について説明する。
（比較例１）
キトサン３を混合しない以外は実施例１と同様の操作で、比較例１のイカ由来のオメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質から成るリポソームを調製した。比較例１のリポソーム製剤において、乳化液１ｃｍ３ 当たりのＤＨＡを主成分とするオメガ−３高度不飽和脂肪酸結合リン脂質の含有量は、０．２ｍｇ／ｃｍ３ である。
（比較例２）
実施例１のキトサン溶液を比較例２とした。
【００４７】
次に、実施例１，２及び比較例１，２で調製した各組成物の効果について説明する。
各組成物を水に混ぜてマウス（ＢＡＬＢ／ｃ）に飲料として自由摂取させ、マウスに接種したがん細胞（ＳＰ２ｔｕｍｏｒｓ）に及ぼす影響を調べた。上記飲料は、がん細胞接種後７日目以降毎日与えた。
ここで、試験に使用したマウスは、ＢＡＬＢ／ｃの雄（ｎｕ／ｎｕ）、５週齢で入室馴化飼育後、６週齢から試験を開始した。がん細胞ＳＰ２は、７頭のマウス（試料数ｎ＝７）に、各頭３０万細胞を右脇下に皮下投与した。マウスは、日本クレア製の飼料ＣＥ２で飼育した。また、実施例１，２及び比較例１，２で調製した各組成物の水への添加濃度は０．４ｍｇ／ｃｍ３ とした。
なお、実施例１，２及び比較例１，２の組成物を添加しない水だけを、自由摂取させたマウスをコントロール群とした。
【００４８】
図３は、実施例１，２及び比較例１，２の組成物を含む水を自由摂取させたときのマウスの体重増加を示す図である。図において、横軸はがん細胞接種直後から７日毎の日数（７，１４，２１，２８，３５）であり、縦軸は各群毎の体重増加の平均値（ｇ）である。図３及び後述する図４，５に示しているエラーバーは、何れも±１標準偏差の値である。図３及び後述する図４，５には、実施例１及び比較例１，２に対して、比較対照のために上記組成物を何も入れない水を自由摂取させたマウスのデータを無投与として合わせて示している。
図３から明らかなように、２８日目までは、実施例１及び実施例２の場合の体重増加は、比較例１、比較例２及び無投与の場合に比較して大きいことが分かる。
【００４９】
図４は、実施例１，２及び比較例１，２の組成物を含む水を自由摂取させたときに、マウスに接種したがん細胞の体積変化を示す図である。図４において、横軸はがん細胞接種以後の日数を、縦軸は各群毎のがん細胞体積の平均値（ｍｍ３）を示す。
図４から明らかなように、２８日目のがん細胞量は、実施例１、比較例１、比較例２、無投与の場合、それぞれ、２．３ｍｍ３、２．８ｍｍ３、５．７ｍｍ３、４ｍｍ３、５ｍｍ３となり、実施例１及び２の場合には、無投与の場合と比較して、約５０％以下しか増殖しなかった。これから、実施例１及び２の組成物の場合には、がん細胞の増殖を抑圧している効果が顕著に認められた。
【００５０】
図５は、実施例１，２及び比較例１，２の組成物を含む水を自由摂取させたときに、マウスに接種したがん細胞の体重に対する重量％を示す図である。図４において、横軸はがん細胞接種以後の日数を、縦軸は各群毎のがん細胞の重量％を示す。
図５から明らかなように、３５日目のがん細胞の重量％は、実施例１、実施例２、比較例１、比較例２、無投与の場合、それぞれ、１１％（無投与の約３７％）、８％（無投与の約２７％）、２５％、２１％、３０％となった。実施例１の組成物の場合にはがん細胞の重量％は無投与の約３７％であり、実施例２の組成物の場合にはがん細胞の重量％は無投与の約２７％であり、何れの場合にもがん細胞の増殖を抑圧している効果が顕著に認められた。
【００５１】
本発明は、上記実施例に限定されることなく、特許請求の範囲に記載した発明の範囲内で種々の変形が可能であり、それらも本発明の範囲内に含まれることはいうまでもない。例えば、上記リポソーム製剤１，１０の製造工程における粘着性組成物溶液のｐＨや、有用リン脂質のクロマト法による精製工程のクロマトカラムなどは適宜に設計でき、また、魚介類の部位は、上記実施例のホタテやイカ由来に限らないことはいうまでもない。
【図面の簡単な説明】
【００５２】
【図１】本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材の構造を模式的に示すものである。
【図２】本発明の有用リン脂質組成物を含む機能性素材の別の構造を模式的に示すものである。
【図３】実施例１，２及び比較例１，２の組成物を含む水を自由摂取させたときのマウスの体重増加を示す図である。
【図４】実施例１，２及び比較例１，２の組成物を含む水を自由摂取させたときに、マウスに接種したがん細胞の体積変化を示す図である。
【図５】実施例１，２及び比較例１，２の組成物を含む水を自由摂取させたときに、マウスに接種したがん細胞の体重に対する重量％を示す図である。
【符号の説明】
【００５３】
１，１０：機能性素材
２：有用リン脂質から成るリポソーム
３：粘着性組成物
５：機能性物質
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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