(57)【要約】【課題】従来法よりも、開発期間が短く、かつ、必要な開発費用が少ない品種識別法を開発することを、本願発明の課題とする。【解決手段】植物の組織から、種々の時期に、フラボノイド含有抽出物を調製し比較検討した結果、植物の組織および成長段階によってフラボノイドの種類および、各種フラボノイドの相対量が一定であり、かつ、品種によって異なること、そのため、フラボノイド含有抽出物中のフラボノイドの相対量を植物の品種同定のために用いることができることを見出し、上記課題を解決した。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
第一の植物と第二の植物が同一品種であるか否かを決定する方法であって、該方法は、以下：
ａ）第一の植物からフラボノイド含有抽出物を調製し、その組成を決定する工程；
ｂ）第二の植物からフラボノイド含有抽出物を調製し、その組成を決定する工程；および
ｃ）該第一の植物のフラボノイドの組成と該第二の植物のフラボノイドの組成とを比較し、該第一の植物と該第二の植物が同一品種であるか否かを決定する工程、
を包含する方法。
【請求項２】
前記フラボノイドが、アントシアニン、フラボノール、フラボン、イソフラボン、フラバノン、フラバノール、フラバン−３，４−ジオール、フラバン−３−オール、アントシアニジン、オーロン、カルコン、および、ジヒドロカルコンからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記フラボノイドが、アントシアニン、および、フラボノールからなる群から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記植物が、チューリップ、キク、バラ、カーネーション、ラン、ペチュニア、トレニア、ほうれん草、レタス、イネ、および小麦からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記植物が、チューリップである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
フラボノイド含有抽出物が前記植物の花弁、葉、果実、種子、茎、および、根からなる群から選択される器官から調製される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
フラボノイド含有抽出物が前記植物の花弁から調製される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
フラボノイド含有抽出物が、開花時、または、つぼみを形成した時期に調製される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
フラボノイド含有抽出物が、開花時に調製される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
試料植物の品種を同定する方法であって、以下：
ａ）試料植物からフラボノイド含有抽出物を調製し、その組成を決定する工程；および、
ｂ）工程（ａ）において決定された組成と、既知の品種のフラボノイド組成とを比較して、試料植物の品種を同定する工程；
を包含する方法。
【請求項１１】
前記フラボノイドが、アントシアニン、フラボノール、フラボン、イソフラボン、フラバノン、フラバノール、フラバン−３，４−ジオール、フラバン−３−オール、アントシアニジン、オーロン、カルコン、および、ジヒドロカルコンからなる群から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記フラボノイドが、アントシアニン、および、フラボノールからなる群から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記植物が、チューリップ、キク、バラ、カーネーション、ラン、ペチュニア、トレニア、ほうれん草、レタス、イネ、および小麦からなる群から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
前記植物が、チューリップである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
フラボノイド含有抽出物が前記植物の花弁、葉、果実、種子、茎、および、根からなる群から選択される器官から調製される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１６】
フラボノイド含有抽出物が前記植物の花弁から調製される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
フラボノイド含有抽出物が、開花時、または、つぼみを形成した時期に調製される、請求項１６に記載の方法
【請求項１８】
フラボノイド含有抽出物が、開花時に調製される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
請求項１０に記載の方法であって、品種同定のために、さらに、
ｃ）試料植物と既知の植物の、以下：
草型、草丈、茎の太さ、茎の色、葉形、葉の大きさ、葉色、葉の光沢、葉数、葉の着生角度、葉の白粉の有無、球根の形、球根の大きさ、球根の色、球根外皮の色及び分球性三つぼみの形、花形、花の大きさ、花色、花弁の形、花弁の色、花弁数、雄ずいの数、花糸色、やくの色、花粉色、花柄の長さ、花柄の太さ、花柄の色、開花期、地上部枯死期、枝咲性、病害抵抗性、および、虫害抵抗性
からなる群から選択される形質を比較する工程；
を包含する方法。
【請求項２０】
以下の構造を有する化合物：
【化１】
2008096317.tif 000016
【請求項２１】
以下の構造を有する化合物：
【化２】
2008096317.tif 000017
【請求項２２】
第一の植物と第二の植物が同一品種であるか否かを決定する方法であって、該方法は、以下：
ａ）第一の植物からフラボノイド含有抽出物を調製し、請求項２０に記載の化合物および請求項２１に記載の化合物の組成を決定する工程；
ａ）第二の植物からフラボノイド含有抽出物を調製し、請求項２０に記載の化合物および請求項２１に記載の化合物の組成を決定する工程；および
ｃ）請求項２０に記載の化合物および請求項２１に記載の化合物の組成について、該第一の植物のフラボノイドの組成と該第二の植物のフラボノイドの組成とを比較し、該第一の植物と該第二の植物が同一品種であるか否かを決定する工程、
を包含する方法。
【請求項２３】
前記植物が、チューリップである、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
フラボノイド含有抽出物が前記植物の花弁から調製される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
試料植物の品種を同定する方法であって、以下：
ａ）試料植物からフラボノイド含有抽出物を調製し、請求項２０に記載の化合物および請求項２１に記載の化合物の組成を決定する工程；および、
ｂ）工程（ａ）において決定された組成と既知の品種における、請求項２０に記載の化合物および請求項２１に記載の化合物の組成とを比較して、試料植物の品種を同定する工程；
を包含する方法。
【請求項２６】
前記植物が、チューリップである、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
フラボノイド含有抽出物が前記植物の花弁から調製される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
天然より単離されたフラボノイド含有混合物が由来する植物の品種を同定する方法であって、以下：
ａ）天然より単離されたフラボノイド含有混合物中のフラボノイド組成を決定する工程；および、
ｂ）工程（ａ）において決定された組成と、既知の品種のフラボノイド組成とを比較して、該フラボノイド含有混合物が由来する植物の品種を同定する工程；
を包含する方法。
【請求項２９】
前記フラボノイドが、アントシアニン、フラボノール、フラボン、イソフラボン、フラバノン、フラバノール、フラバン−３，４−ジオール、フラバン−３−オール、アントシアニジン、オーロン、カルコン、および、ジヒドロカルコンからなる群から選択される、請求項２８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物の品種識別方法に属する。
【背景技術】
【０００２】
植物の中には品種数が数百から数千を超えるものも多く、さらに、育種による新たな品種の開発の結果、品種数は年々増大している。
【０００３】
優れた品種の育種には、交配などの技術が利用されているが、効率的かつ適切な育種には、その前提として品種識別法が必要である。
【０００４】
育成者による有用な品種開発が盛んになる一方で、育成者権侵害が近年問題となっている。育成者を権利侵害より十分に保護するためにも、簡便かつ正確な品種識別法が必要とされている。
【０００５】
従来の品種識別においては、品種の遺伝情報であるゲノムＤＮＡの解析が専ら行われていた。なぜなら、ゲノムＤＮＡは、植物の成長時期や育成環境に左右されることがなく、正確な品種識別結果が得られるからである。
【０００６】
ゲノムＤＮＡによる品種識別法としては、例えば、ゲノムフィンガープリント法（例えば、ＡＦＬＰ（Ａｍｐｌｉｆｉｌｅｄ  Ｆｒａｇｍｅｎｔ  Ｌｅｎｇｔｈ  Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ））が挙げられる。しかし、この方法は、反応に必要なＤＮＡが大量に必要であり、ＰＣＲと比較して工程が複雑であり、しかも、制限酵素認識部位以外での１塩基レベルの変化を判別することができないという欠点を有する。
【０００７】
ゲノムＤＮＡを用いる品種識別法としては、ＰＣＲを用いる方法も存在する。ＰＣＲを用いる品種識別法としては、例えば、マイクロサテライト法、ＲＡＰＤ法（ｒａｎｄｏｍ  ａｍｐｌｉｆｉｅｄ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ  ＤＮＡ  ｍｅｔｈｏｄ）、および、ＲＡＰＤ由来ＳＴＳ（ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｔａｇｇｅｄ  ｓｉｔｅ）法が挙げられる。マイクロサテライト法は、ゲノムＤＮＡ中に存在する数塩基の反復配列（マイクロサテライト）を増幅して、その反復配列の繰り返しの数の違いという多型性を判別する方法である。この方法は、数塩基の反復配列の反復数の差異というわずかなＰＣＲ増幅フラグメント長の差異を検出する方法であるため、増幅産物の解析の際に、高濃度のゲルを作成し、かつ慎重に長時間電気泳動をする必要がある。また、１塩基多型を判別できないという欠点を有する。ＲＡＰＤ法は、一般に１２塩基程度のランダムプライマーを使用して、ゲノムＤＮＡを増幅し、増幅されたバンドのパターンを電気泳動によって検出することによる、多型の判別方法である。ＲＡＰＤ法は、プライマーの調製は簡便ではあるものの、ＰＣＲの条件を厳密に設定する必要があり、しかも、わずかな条件（例えば、温度）の差異によって異なる結果が生じる。従って、ＲＡＰＤ法では、ＰＣＲ条件の設定が困難であり、かつ条件を設定しても、再現性に乏しく、安定的な判別が困難である。また、ＲＡＰＤ法は、鋳型ＤＮＡの純度の影響を受け、さらに、複数回のＰＣＲと電気泳動が必要であるという欠点もある。ＲＡＰＤ由来ＳＴＳ法は、ＲＡＰＤ法によって同定された特異的なバンドの配列決定を行い、その配列情報に基づいてプライマーを設計して、ＰＣＲを行う方法である。この方法は、ＲＡＰＤ法によって同定されたバンドに基づく方法であるため、塩基配列がかなり異なる多型を有するゲノム部分でのみ使用可能であり、１塩基置換を判別することが困難である。ＳＮＰｓ法は１塩基多型の遺伝子型を判別することができる方法ではあるが、安定的な判別のためには、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社（Ｂｏｓｔｏｎ、ＭＡ、ＵＳＡ）のマルチラベルカウンターのような高価な装置を使用する必要がある。
【０００８】
以上のように、品種識別の従来法は、ゲノムＤＮＡを用いるものであるが、識別対象となる品種に適切なプライマーの設計などの開発には時間と労力が必要となるという欠点を有する。
【０００９】
一方、チューリップの花色とアントシアニンの含有比率についての報告がなされているものの（非特許文献１〜６）、品種の同定のためにアントシアニンの含有比率を利用することについては、教示も示唆もされていない。また、アントシアニン以外のフラボノイド
については、僅かに報告があるものの（非特許文献７〜８）その多くは本発明で初めてチューリップの組織中で見出されたものである。
【００１０】
この出願の発明に関連する先行技術文献情報としては、次のものがある。
【非特許文献１】Torskangerpollら,Biochemical Sytematics and Ecology, (2005) 33, pp499-510
【非特許文献２】Torskangerpollら,Phytochemistry, (1999) 52, pp1687-1692
【非特許文献３】Niewhofら,Biochemical Systematics and Ecology, (1990) 18, pp399-404
【非特許文献４】Niewhofら,Netherland Journal of Agricultural Science, (1989) 37, pp365-370
【非特許文献５】Van Eijkら,Euphytica, (1987) 36, pp855-862
【非特許文献６】Haleny andAsen, Plant Physiology, 34, (1959), pp494-499
【非特許文献７】Budzianowski,Phytochemistry,  30, (1991), pp1679-1682
【非特許文献８】Budzianowskiand Skrzypczakowa, Phytochemistry, (1978), 17, p2044
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
これら従来法の欠点を克服し、従来法よりも、開発期間が短く、かつ、必要な開発費用が少ない品種識別法を開発することが、本発明の解決すべき課題である。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、植物の組織から、種々の時期に、フラボノイド含有抽出物を調製し比較検討した結果、植物の組織および成長段階によってフラボノイドの種類および、各種フラボノイドの相対量が一定であり、かつ、品種によって異なること、そのため、フラボノイド含有抽出物中のフラボノイドの相対量を植物の品種同定のために用いることができることを見出し、上記課題を解決した。
【００１３】
従って、本発明に従って、以下が提供される：
（項目１）  第一の植物と第二の植物が同一品種であるか否かを決定する方法であって、該方法は、以下：
ａ）第一の植物からフラボノイド含有抽出物を調製し、その組成を決定する工程；
ｂ）第二の植物からフラボノイド含有抽出物を調製し、その組成を決定する工程；および
ｃ）該第一の植物のフラボノイドの組成と該第二の植物のフラボノイドの組成とを比較し、該第一の植物と該第二の植物が同一品種であるか否かを決定する工程、
を包含する方法。
【００１４】
（項目２）  前記フラボノイドが、アントシアニン、フラボノール、フラボン、イソフラボン、フラバノン、フラバノール、フラバン−３，４−ジオール、フラバン−３−オール、アントシアニジン、オーロン、カルコン、および、ジヒドロカルコンからなる群から選択される、項目１に記載の方法。
【００１５】
（項目３）  前記フラボノイドが、アントシアニン、および、フラボノールからなる群から選択される、項目２に記載の方法。
【００１６】
（項目４）  前記植物が、チューリップ、キク、バラ、カーネーション、ラン、ペチュニア、トレニア、ほうれん草、レタス、イネ、および小麦からなる群から選択される、項目１に記載の方法。
【００１７】
（項目５）  前記植物が、チューリップである、項目４に記載の方法。
【００１８】
（項目６）  フラボノイド含有抽出物が前記植物の花弁、葉、果実、種子、茎、および、根からなる群から選択される器官から調製される、項目１に記載の方法。
【００１９】
（項目７）  フラボノイド含有抽出物が前記植物の花弁から調製される、項目６に記載の方法。
【００２０】
（項目８）  フラボノイド含有抽出物が、開花時、または、つぼみを形成した時期に調製される、項目７に記載の方法。
【００２１】
（項目９）  フラボノイド含有抽出物が、開花時に調製される、項目８に記載の方法。
【００２２】
（項目１０）  試料植物の品種を同定する方法であって、以下：
ａ）試料植物からフラボノイド含有抽出物を調製し、その組成を決定する工程；および、
ｂ）工程（ａ）において決定された組成と、既知の品種のフラボノイド組成とを比較して、試料植物の品種を同定する工程；
を包含する方法。
【００２３】
（項目１１）  前記フラボノイドが、アントシアニン、フラボノール、フラボン、イソフラボン、フラバノン、フラバノール、フラバン−３，４−ジオール、フラバン−３−オール、アントシアニジン、オーロン、カルコン、および、ジヒドロカルコンからなる群から選択される、項目１０に記載の方法。
【００２４】
（項目１２）  前記フラボノイドが、アントシアニン、および、フラボノールからなる群から選択される、項目１１に記載の方法。
【００２５】
（項目１３）  前記植物が、チューリップ、キク、バラ、カーネーション、ラン、ペチュニア、トレニア、ほうれん草、レタス、イネ、および小麦からなる群から選択される、項目１０に記載の方法。
【００２６】
（項目１４）  前記植物が、チューリップである、項目１３に記載の方法。
【００２７】
（項目１５）  フラボノイド含有抽出物が前記植物の花弁、葉、果実、種子、茎、および、根からなる群から選択される器官から調製される、項目１０に記載の方法。
【００２８】
（項目１６）  フラボノイド含有抽出物が前記植物の花弁から調製される、項目１５に記載の方法。
【００２９】
（項目１７）  フラボノイド含有抽出物が、開花時、または、つぼみを形成した時期に調製される、項目１６に記載の方法
（項目１８）  フラボノイド含有抽出物が、開花時に調製される、項目１７に記載の方法。
【００３０】
（項目１９）  項目１０に記載の方法であって、品種同定のために、さらに、
ｃ）試料植物と既知の植物の、以下：
草型、草丈、茎の太さ、茎の色、葉形、葉の大きさ、葉色、葉の光沢、葉数、葉の着生角度、葉の白粉の有無、球根の形、球根の大きさ、球根の色、球根外皮の色及び分球性三つぼみの形、花形、花の大きさ、花色、花弁の形、花弁の色、花弁数、雄ずいの数、花糸色、やくの色、花粉色、花柄の長さ、花柄の太さ、花柄の色、開花期、地上部枯死期、枝咲性、病害抵抗性、および、虫害抵抗性
からなる群から選択される形質を比較する工程；
を包含する方法。
【００３１】
（項目２０）  以下の構造を有する化合物  ケルセチン  ３−ラムノシル−（１→６）−ガラクトシド−７−グルクロニド（Quercetin 3-rhamnosyl-(1→6)-galactoside-7-glucronide）
【００３２】
【化１】
2008096317.tif 000002
（項目２１）  以下の構造を有する化合物  ケンペロール  ３−ラムノシル−（１→６）−ガラクトシド−７−グルクロニド（Kaempferol 3-rhamnosyl-(1→6)-galactoside-7-glucronide）：
【００３３】
【化２】
2008096317.tif 000003
（項目２２）  第一の植物と第二の植物が同一品種であるか否かを決定する方法であって、該方法は、以下：
ａ）第一の植物からフラボノイド含有抽出物を調製し、項目２０に記載の化合物および項目２１に記載の化合物の組成を決定する工程；
ａ）第二の植物からフラボノイド含有抽出物を調製し、項目２０に記載の化合物および項目２１に記載の化合物の組成を決定する工程；および
ｃ）項目２０に記載の化合物および項目２１に記載の化合物の組成について、該第一の植物のフラボノイドの組成と該第二の植物のフラボノイドの組成とを比較し、該第一の植物と該第二の植物が同一品種であるか否かを決定する工程、
を包含する方法。
【００３４】
（項目２３）  前記植物が、チューリップである、項目２２に記載の方法。
【００３５】
（項目２４）  フラボノイド含有抽出物が前記植物の花弁から調製される、項目２２に記載の方法。
【００３６】
（項目２５）  試料植物の品種を同定する方法であって、以下：
ａ）試料植物からフラボノイド含有抽出物を調製し、項目２０に記載の化合物および項目２１に記載の化合物の組成を決定する工程；および、
ｂ）工程（ａ）において決定された組成と既知の品種における、項目２０に記載の化合物および項目２１に記載の化合物の組成とを比較して、試料植物の品種を同定する工程；
を包含する方法。
【００３７】
（項目２６）  前記植物が、チューリップである、項目２５に記載の方法。
【００３８】
（項目２７）  フラボノイド含有抽出物が前記植物の花弁から調製される、項目２５に記載の方法。
【００３９】
（項目２８）  天然より単離されたフラボノイド含有混合物が由来する植物の品種を同定する方法であって、以下：
ａ）天然より単離されたフラボノイド含有混合物中のフラボノイド組成を決定する工程；および、
ｂ）工程（ａ）において決定された組成と、既知の品種のフラボノイド組成とを比較して、該フラボノイド含有混合物が由来する植物の品種を同定する工程；
を包含する方法。
【００４０】
（項目２９）  前記フラボノイドが、アントシアニン、フラボノール、フラボン、イソフラボン、フラバノン、フラバノール、フラバン−３，４−ジオール、フラバン−３−オール、アントシアニジン、オーロン、カルコン、および、ジヒドロカルコンからなる群から選択される、項目２８に記載の方法。
【発明の効果】
【００４１】
本発明に従って、ゲノム情報に基づく品種同定法・品種比較法と比較して、植物品種の同定・比較を簡便、迅速に行うことができる。また、本発明に従って、従来、形態学的特長からは識別困難であった植物品種の同定・比較を、簡便、迅速に行うことができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４２】
以下、本発明を説明する。本明細書の全体にわたり、単数形の表現は、特に言及しない限り、その複数形の概念も含むことが理解されるべきである。また、本明細書において使用される用語は、特に言及しない限り、当該分野で通常用いられる意味で用いられることが理解されるべきである。したがって、他に定義されない限り、本明細書中で使用される全ての専門用語および科学技術用語は、本発明の属する分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。矛盾する場合、本明細書（定義を含めて）が優先する。
【００４３】
本明細書において使用する場合、用語「フラボノイド」とは、ベンゼン環２個（下図のＡ環とＢ環）を３個の炭素原子でつないだ骨格（フェニルクロマン骨格）を基本構造に有するフェニル化合物群の総称であり、フラバンの誘導体およびその配糖体をいう。フラバンは、Ｃ環には２重結合もカルボニル基も含まれないもので、以下の基本構造を有する：
【００４４】
【化３】
2008096317.tif 000004
フラボノイドとしては、例えば、フラボノール、フラボン、イソフラボン、フラバノン、フラバノノール、フラバン−３，４−ジオール、フラバン−３−オール（フラバノール）、アントシアニジン、オーロン、カルコン、および、ジヒドロカルコンが挙げられるが、これらに限定されない。これらの基本骨格に加え、異なる位置での水酸化、縮合、プレニル化に多様性が見られ多様な構造が存在する。また、アントシアニンはアントシアニジンをアグリコンとする配糖体であるなど、多くは配糖体として存在する。
【００４５】
本発明において使用する場合、用語「フラボノール」とは、フラボンのＣ環３位に水酸基が結合したもので、以下の一般式を有する化合物、および、以下の式を有する化合物の骨格にヒドロキシル基、メトキシル基もしくは他の原子団などの置換した化合物、ならびにこれら化合物の配糖体をいう：
【００４６】
【化４】
2008096317.tif 000005
本発明において使用する場合、用語「フラボン」とは、C環に１個の２重結合を有し、C環４位にカルボニル基を有するもので、以下の一般式を有する化合物、および、以下の式を有する化合物の骨格にヒドロキシル基、メトキシル基もしくは他の原子団などの置換した化合物、ならびにこれら化合物の配糖体をいう：
【００４７】
【化５】
2008096317.tif 000006
本発明において使用する場合、用語「イソフラボン」とは、フラボンで、Ｂ環の結合位置がＣ環２位から３位に置き換わったもので、以下の一般式を有する化合物、および、以下の式を有する化合物の骨格にヒドロキシル基、メトキシル基もしくは他の原子団などの置換した化合物、ならびにこれら化合物の配糖体をいう：
【００４８】
【化６】
2008096317.tif 000007
本発明において使用する場合、用語「フラバノン」とは、Ｃ環４位にカルボニル基を有するもので、以下の一般式を有する化合物、および、以下の式を有する化合物の骨格にヒドロキシル基、メトキシル基もしくは他の原子団などの置換した化合物、ならびにこれら化合物の配糖体をいう：
【００４９】
【化７】
2008096317.tif 000008
本発明において使用する場合、用語「フラバノノール」とは、フラバンのＣ環３位に水酸基が結合したもので、以下の一般式を有する化合物、および、以下の式を有する化合物の骨格にヒドロキシル基、メトキシル基もしくは他の原子団などの置換した化合物、ならびにこれら化合物の配糖体をいう：
【００５０】
【化８】
2008096317.tif 000009
本発明において使用する場合、用語「フラバン−３，４−ジオール」とは、フラバンのＣ環３位と４位に水酸基が結合したもので、以下の一般式を有する化合物、および、以下の式を有する化合物の骨格にヒドロキシル基、メトキシル基もしくは他の原子団などの置換した化合物、ならびにこれら化合物の配糖体をいう：
【００５１】
【化９】
2008096317.tif 000010
本発明において使用する場合、用語「フラバン−３−オール」とは、フラバンのＣ環３位に水酸基が結合したもので、以下の一般式を有する化合物、および、以下の式を有する化合物の骨格にヒドロキシル基、メトキシル基もしくは他の原子団などの置換した化合物、ならびにこれら化合物の配糖体をいう：
【００５２】
【化１０】
2008096317.tif 000011
本発明において使用する場合、用語「アントシアニジン」とは、Ｃ環に２個の２重結合を有し，Ｃ環１位の酸素が十に荷電したもので、以下の一般式を有する化合物、および、以下の式を有する化合物の骨格にヒドロキシル基、メトキシル基もしくは他の原子団などの置換した化合物、ならびにこれら化合物の配糖体をいう：
【００５３】
【化１１】
2008096317.tif 000012
本発明において使用する場合、用語「オーロン」とは、以下の一般式を有する化合物、および、以下の式を有する化合物の骨格にヒドロキシル基、メトキシル基もしくは他の原子団などの置換した化合物、ならびにこれら化合物の配糖体をいう：
【００５４】
【化１２】
2008096317.tif 000013
本発明において使用する場合、用語「カルコン」とは、フラボンのＣ環１位の酸素が還元され２位で開環したもので、以下の一般式を有する化合物、および、以下の式を有する化合物の骨格にヒドロキシル基、メトキシル基もしくは他の原子団などの置換した化合物、ならびにこれら化合物の配糖体をいう：
【００５５】
【化１３】
2008096317.tif 000014
本発明において使用する場合、用語「ジヒドロカルコン」とは、フラバノンのＣ環１位の酸素が還元され２位で開環したもので、以下の一般式を有する化合物、および、以下の式を有する化合物の骨格にヒドロキシル基、メトキシル基もしくは他の原子団などの置換した化合物、ならびにこれら化合物の配糖体をいう：
【００５６】
【化１４】
2008096317.tif 000015
本明細書において使用する場合、用語「植物」とは、具体的に限定する場合を除いて、植物体のみならず、植物細胞、種子、組織、器官、またはこれらの一部をいう。植物の組織または器官としては、例えば、花弁、葉、果実、種子、茎、および、根が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５７】
本明細書において使用する場合、用語「フラボノイド含有抽出物」とは、植物から調製された抽出物であって、フラボノイドを含有する物質をいう。
【００５８】
本明細書において使用する場合、用語フラボノイドの「組成」とは、フラボノイドに包含される種々の化合物種の相対的割合を意味する。従って、本明細書において、用語「組成」とは、「組成比率」と互換可能に使用される。
【００５９】
（フラボノイド含有抽出物の調製）
本発明の対象となる植物種としては、あらゆる種類の植物種を用いることができる。本発明の対象となる植物種としては、花き類や、花き類以外の植物、花卉園芸植物が挙げられる。そのような植物種としては、例えば、チューリップ、キク、バラ、カーネーション、ラン、ペチュニア、トレニア、ほうれん草、レタス、イネ、および小麦が挙げられるが、これらに限定されないことは当然である。本発明において、植物からフラボノイド含有抽出物を調製する場合、例えば、植物の花弁、葉、果実、種子、茎、および、根を用いることができる。植物種としては、あらゆる種類の植物種を用いることができる。フラボノイド含有抽出物が植物の花弁から調製される場合、フラボノイド含有抽出物は、開花時、または、つぼみを形成した時期に調製される。
【００６０】
フラボノイドの抽出法としては、当該分野において利用可能な任意の方法を用いることができる。フラボノイドの抽出法としては、例えば、水抽出、有機溶媒抽出、有機溶媒と水との水溶液抽出が挙げられるが、これらに限定されない。有機溶媒抽出に用いる有機溶媒としては、当該分野で一般に有機溶媒抽出に用いられる有機溶媒が使用可能である。そのような有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、ブタノール、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、およびそれらの水溶液が挙げられるが、これらに限定されない。有機溶媒抽出の温度、時間は、当業者が適宜選択できる。なお、本発明においては、植物の重量当たりのフラボノイドの収率を問題にすることなく、フラボノイド含有抽出物中のフラボノイドの種類および組成比率を用いて、植物品種の比較・同定が可能であるため、フラボノイド抽出の方法・条件の差異によってフラボノイドの抽出収率が変化しても、本発明の実施には何ら影響を与えない。
【００６１】
（フラボノイド含有抽出物の分析）
本発明において調製されたフラボノイド含有抽出物中のフラボノイドの種類および組成比率（相対量）は、当該分野で公知の種々の分析法を用いることが可能である。そのような分析法としては、例えば、ＨＰＬＣ，ガスクロマトグラフィー、カラムクロマトグラフィー、質量分析法、薄層クロマトグラフィーが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６２】
代表的分析方法としては、既知の種類の既知量のフラボノイドを上記分析法を用いて分析する。既知のフラボノイドと同様の挙動（例えば、移動度、保持時間など）を示す物質がサンプル中に存在する場合、そのサンプル中には、当該既知のフラボノイドが存在する。さらに、既知量の当該フラボノイドの量の相対値として、サンプル中のフラボノイド量を評価することによって、サンプル中の当該フラボノイドの量が決定できる。
【００６３】
また、ある分析法において同一の挙動を示す複数のフラボノイドが存在する場合は、異なる分析法および／または分析条件を用いて、その複数のフラボノイドが異なる挙動をするように適宜調整する。
【００６４】
（誤差）
本発明の方法において算出されるフラボノイド含有抽出物中のフラボノイドの種類および組成比率は、誤差を含む。そのような誤差は、実験条件によって変化し、例えば、５％、４％、３％、２％、および、１％であり得る。例えば、全フラボノイド中の特定のフラボノイド「Ａ」の組成比率が５０％であり、フラボノイド「Ｂ」の組成比率が２０％であり、測定誤差が１０％である場合、フラボノイド「Ａ」の組成比率を４５％〜５５％として、フラボノイド「Ｂ」の組成比率を１８％〜２２％として評価する。
【００６５】
（品種）
本願発明に従って、第一の植物と第二の植物が同一品種であるか否かを決定する方法が提供される。その方法は、
ａ）第一の植物からフラボノイド含有抽出物を調製し、その組成を決定し、
ｂ）第二の植物からフラボノイド含有抽出物を調製し、その組成を決定し、そして、
ｃ）該第一の植物のフラボノイドの組成と該第二の植物のフラボノイドの組成とを比較し、該第一の植物と該第二の植物が同一品種であるか否かを決定することによって行われる。なお、この品種同定においては、フラボノイド組成のみならず、草型、草丈、茎の太さ、茎の色、葉形、葉の大きさ、葉色、葉の光沢、葉数、葉の着生角度、葉の白粉の有無、球根の形、球根の大きさ、球根の色、球根外皮の色及び分球性三つぼみの形、花形、花の大きさ、花色、花弁の形、花弁の色、花弁数、雄ずいの数、花糸色、やくの色、花粉色、花柄の長さ、花柄の太さ、花柄の色、開花期、地上部枯死期、枝咲性、病害抵抗性、および、虫害抵抗性なども考慮することができる。このフラボノイド組成の比較と同一性の決定においては、測定誤差を考慮する必要がある。誤差範囲内の差異のみを有する二つの種は同一種であるとみなされる。
【００６６】
フラボノイドとしては、種々の物質が利用可能である。例えば、フラボノイドが、アントシアニン、フラボノール、フラボン、イソフラボン、フラバノン、フラバノール、フラバン−３，４−ジオール、フラバン−３−オール、アントシアニジン、オーロン、カルコン、および、ジヒドロカルコンが挙げられるが、これに限定されない。特に、アントシアニン、および、フラボノールが好ましい。
【００６７】
さらに、本願発明においては、試料植物の品種を同定する方法が提供される。この方法は、
ａ）試料植物からフラボノイド含有抽出物を調製し、その組成を決定し、そして、
ｂ）工程（ａ）において決定された組成と、既知の品種のフラボノイド組成とを比較して、試料植物の品種を同定することによって行われる。
【００６８】
上記方法においては、予め複数の品種のフラボノイド組成のデータを蓄積しておく必要がある。その蓄積されたフラボノイド組成のデータが、実験結果と比較対照され、そして、実験対象となった株の品種が決定される。なお、この品種同定においては、フラボノイド組成のみならず、草型、草丈、茎の太さ、茎の色、葉形、葉の大きさ、葉色、葉の光沢、葉数、葉の着生角度、葉の白粉の有無、球根の形、球根の大きさ、球根の色、球根外皮の色及び分球性三つぼみの形、花形、花の大きさ、花色、花弁の形、花弁の色、花弁数、雄ずいの数、花糸色、やくの色、花粉色、花柄の長さ、花柄の太さ、花柄の色、開花期、地上部枯死期、枝咲性、病害抵抗性、および、虫害抵抗性なども考慮することができる。このフラボノイド組成の比較と品種同定においては、測定誤差を考慮する必要がある。誤差範囲内の差異のみを有する二つの種は同一種であるとみなされる。
【００６９】
フラボノイドとしては、種々の物質が利用可能である。例えば、フラボノイドが、アントシアニン、フラボノール、フラボン、イソフラボン、フラバノン、フラバノール、フラバン−３，４−ジオール、フラバン−３−オール、アントシアニジン、オーロン、カルコン、および、ジヒドロカルコンが挙げられるが、これに限定されない。特に、アントシアニン、および、フラボノールが好ましい。
【００７０】
さらに、本願発明においては、新規フラボノールが提供される。この新規物質は、品種同定・識別のマーカーとして有用である。これらの新規物質は、単独で、または、公知のフラボノイドと組み合わせて、その組成を決定することによって、植物品種の同定を可能にする。
【００７１】
さらに、本明細書においては、フラボノイド含有混合物（例えば、天然より単離されたフラボノイド含有混合物）が由来する植物の品種を同定する方法が提供される。すなわち、対象となるフラボノイド含有混合物がどの植物品種より調製されたか同定する方法が提供される。フラボノイド含有混合物としては、食品、飲料、食品補添物、飲食用補添物、サプリメント、医薬組成物が挙げられるが、これに限定されない。この方法においては、（ａ）フラボノイド含有混合物（例えば、天然より単離されたフラボノイド含有混合物）中のフラボノイド組成を決定する工程；および、（ｂ）工程（ａ）において決定された組成と、既知の品種のフラボノイド組成とを比較して、該フラボノイド含有混合物が由来する植物の品種を同定する工程、が含まれる。
【００７２】
上記方法においては、予め複数の品種のフラボノイド組成のデータを蓄積しておく必要がある。その蓄積されたフラボノイド組成のデータが、実験結果と比較対照され、そして、実験対象となった植物の品種が決定される。
【００７３】
フラボノイドとしては、種々の物質が利用可能である。例えば、フラボノイドが、アントシアニン、フラボノール、フラボン、イソフラボン、フラバノン、フラバノール、フラバン−３，４−ジオール、フラバン−３−オール、アントシアニジン、オーロン、カルコン、および、ジヒドロカルコンが挙げられるが、これに限定されない。特に、アントシアニン、および、フラボノールが好ましい。
【００７４】
また、本願発明においては、第一のフラボノイド含有混合物（例えば、天然より単離されたフラボノイド含有混合物）と第二のフラボノイド含有混合物（例えば、天然より単離されたフラボノイド含有混合物）が同一品種由来であるか否かを決定する方法が提供される。すなわち、第一のフラボノイド含有混合物と第二のフラボノイド含有混合物が同一品種の植物より調製されたか否かを決定する方法が提供される。この方法は、（ａ）第一のフラボノイド含有混合物のフラボノイド組成と第二のフラボノイド含有混合物のフラボノイド組成とを比較し、第一のフラボノイド含有混合物と第二のフラボノイド含有混合物が同一品種由来であるか否かを決定する工程を包含する。
【００７５】
本発明を以下の実施例を用いて例示的に説明するが、以下の実施例はあくまで本発明の例示であり、決して本発明を限定するように解釈されるべきではない。
【実施例】
【００７６】
（実施例１：チューリップよりのフラボノイドの単離および分析）
（フラボノイドの抽出）
開花直後のチューリップの花弁１枚をはさみで１ｃｍ角に刻み１５ｍＬ用試験管に入れた。次に、１０％アセトニトリル、０．５％トリフルオロ酢酸の水溶液３ｍＬで１時間〜３時間抽出した。抽出液１ｍＬを１．５ｍＬのマイクロチューブに入れ１５０００ｒｐｍで遠心し、上清を別のチューブに移しもう一度遠心した。その上清１０μＬをＨＰＬＣ分析する。
【００７７】
（ＨＰＬＣによる分離）
ＨＰＬＣ装置としてウォータズＡｌｌｉａｎｃｅ  ２６９５を、検出器として、ＰＤＡ（フォトダイオードアレイ）検出器を、移動相として、溶液（Ａ）１０％アセトニトリル、０．５％トリフルオロ酢酸、および、溶液（Ｂ）３０％アセトニトリル、０．５％トリフルオロ酢酸を用いた。カラムは、Ｍｉｇｈｔｙｓｉｌ  ＲＰ−１８  ＧＰ  Ａｑｕａ  （１５０−４．６  ｍｍ）（関東化学（株））を用い、カラム温度  ４０℃、流速  １ｍＬ／ｍｉｎの条件を用い、検出を、５３０ｎｍ（アントシアニン検出用）、および、３６０ｎｍ（フラボノール検出用）の波長で行った。
【００７８】
溶出は、０〜３分：０％Ｂ、３〜２０分：０〜１００％Ｂ  リニアグラジエント、２０〜３０分：０％Ｂという条件で行った。
【００７９】
チューリップ品種毎のフラボノールとアントシアニンのＨＰＬＣクロマトグラム例を図１〜３に示す。
【００８０】
（実施例２：チューリップに含まれるフラボノイド）
（アントシアニン）
実施例１の結果、チューリップの花弁に含まれるアントシアニン色素として、以下の７種類が同定された。
（１）デルフィニジン  ３−Ｏ−（６−Ｏ−α−ラムノピラノシル−β−グルコピラノシド）(Delphinidin 3-O-(6-O-α-rhamnopyranosyl-β-glucopyranoside))
（２）ペラルゴニジン  ３−Ｏ−（６−Ｏ−α−ラムノピラノシル−β−グルコピラノシド）(Pelargonidin 3-O-(6-O-α-rhamnopyranosyl-β-glucopyranoside))
（３）シアニジン  ３−Ｏ−（６−Ｏ−α−ラムノピラノシル−β−グルコピラノシド）(Cyanidin 3-O-(6-O-α-rhamnopyranosyl-β-glucopyranoside))
（４）シアニジン  ３−Ｏ−［６−Ｏ−（２−Ｏ−アセチル−α−ラムノピラノシル）−β−グルコピラノシド］(Cyanidin 3-O-[6-O-(2-O-acetyl-α-rhamnopyranosyl)-β-glucopyranoside])
（５）ペラルゴニジン  ３−Ｏ−［６−Ｏ−（２−Ｏ−アセチル−α−ラムノピラノシル）−β−グルコピラノシド］(Pelargonidin 3-O-[6-O-(2-O-acetyl-α-rhamnopyranosyl)-β-glucopyranoside])
（６）シアニジン  ３−Ｏ−［６−Ｏ−（３−Ｏ−アセチル−α−ラムノピラノシル）−β−グルコピラノシド］(Cyanidin 3-O-[6-O-(3-O-acetyl-α-rhamnopyranosyl)-β-glucopyranoside])
（７）デルフィニジン  ３−Ｏ−［６−Ｏ−（３−Ｏ−アセチル−α−ラムノピラノシル）−β−グルコピラノシド］(Delphinidin 3-O-[6-O-(3-O-acetyl-α-rhamnopyranosyl)-β-glucopyranoside])
（８）デルフィニジン  ３−Ｏ−［６−Ｏ−（２−Ｏ−アセチル−α−ラムノピラノシル）−β−グルコピラノシド］(Delphinidin 3-O-[6-O-(2-O-acetyl-α-rhamnopyranosyl)-β-glucopyranoside])
これら（１）〜（８）の構造を、図４に示す。
【００８１】
これらのうち、（１）（２）（３）（４）および（５）は、Torskangerpollら, (1999)  Phytochemistry 52, 1687-1692.、および、Torskangerpollら,(2005)  Biochemical Systematics and Ecology 33, 499-510.によって報告されており、（７）および（８）は、Nakayamaら, (1999) Biosci. Biotechnol. Biochem., 63, 1509-1511.、および、Nakayamaら,(2004) JARQ 38, 185-190.によって報告されているが、（６）は、新規化合物であった。
【００８２】
（フラボノール）
チューリップに含まれるフラボノールは２２種類が論文報告されている（うち１種類は重複する）。
（葉） Harborne (1965) Phytochemistry 4, 107.
（１）ケンペロール  ３−ルチノシド−７−グルコシド(Kaempferol 3-rutinoside-7-glucoside)
（２）ケルセチン  ３−ルチノシド−７−グルコシド(Quercetin 3-rutinoside-7-glucoside)
（３）ケルセチン  ３−ラムノシド  （ルチン）(Quercetin 3-rhamnoside  (rutin))
（花粉 ‘Apeldoorn’）Stack, et. al., (1981) Pflanzenphysiol. 103, 291.
（４）ケンペロール  ３−ラムノシルグルコシド(Kaempferol 3-rhamosylglucoside)
（５）ケンペロール  ３−キシロシルラムノシルグルコシド(Kaempferol 3-xylosylrhamnosylglucoside)
（６）＝（３）ケルセチン  ３−ラムノシルグルコシド  （ルチン）(Quercetin 3-rhamnosylglucoside  (rutin))
（７）ケルセチン  ３−グルコシルラムノシルグルコシド(Quercetin 3-glucosylrhamnosylglucoside)
（８）イソラムネチン  ３−ラムノシルグルコシド(Isorhamnetin 3-rhamnosylglucoside)
（９）イソラムネチン  ３−キシロシルラムノシルグルコシド(Isorhamnetin 3-xylosylrhamnosylglucoside)
（花‘Parade’） Budzianowski and Skrzypczak (1979) Pol. J. Chem. 53. 1489.
（１０）ケンペロール  ３−ラムノシド(Kaempferol 3-rhamnoside)
（１１）ケンペロール  ７−グルコシド(Kaempferol 7-glucoside)
（１２）ケンペロール  ３−ルチノシド−７−ジグリコシド(Kaempferol 3-rutinoside-7-diglycoside)
（１３）ケルセチン  ３−ルチノシド−７−ジグリコシド(Quercetin 3-rutinoside-7-diglycoside)
（１４）ケンペロール  ３，７−ジグリコシド(Kaempferol 3,7-diglycoside)
（１５）ケルセチン  ３，７−ジグリコシド(Quercetin 3,7-diglycoside)
（１６）Ｃ−グルコシルフラバノン  （ヘミフロイン）(C-glucosylflavanone (hemiphloin))
（花 ‘Parade’）Budzianowski (1991) Phytochemistry 30, 1679.
（１７）ケルセチン  ３−Ｏ−ゲンチオビオシド−７−Ｏ−グルクロニド(Quercetin 3-O-gentiobioside-7-O-glucuronide)
（１８）ケンペロール  ３−Ｏ−ゲンチオビオシド−７−Ｏ−グルクロニド(Kaempferol 3-O-gentiobioside-7-O-glucuronide)
（１９）ケルセチン  ３−Ｏ−ルチノシド−７−Ｏ−グルクロニド(Quercetin 3-O-rutinoside-7-O-glucuronide)
（２０）ケンペロール  ３−Ｏ-ルチノシド−７−Ｏ−グルクロニド(Kaempferol 3-O-rutinoside-7-O-glucuronide)
（２１）ケンペロール  ３−Ｏ−グルコシド−７−Ｏ−グルクロニド(Kaempferol 3-O-glucoside-7-O-glucuronide)
（２２）ケルセチン  ３−Ｏ−グルコシド−７−Ｏ−グルクロニド(Quercetin 3-O-glucoside-7-O-glucuronide)
本発明では以下の、１１種類のフラボノールを同定した。
Ｆ１：ケルセチン  ３−ラムノシル−（１→２）［ラムノシル−（１→６）−グルコシド］  （マンガスリン）(Quercetin 3-rhamnosyl-(1→2)[rhamnosyl-(1→6)-glucoside]  (manghaslin))
Ｆ２：ケンペロール  ３−ラムノシル−（１→２）［ラムノシル−（１→６）−グルコシド］(Kaempferol 3-rhamnosyl-(1→2)[rhamnosyl-(1→6)-glucoside])
Ｆ３＝（６）：ケルセチン  ３−ラムノシル−（１→６）−グルコシド  （ルチン）(Quercetin 3-rhamnosyl-(1→6)-glucoside   (rutin))
Ｆ５＝（１９）：ケルセチン  ３−ラムノシル−（１→６）−グルコシド−７−グルクロニド(Quercetin 3-rhamnosyl-(1→6)-glucoside-7-glucuronide)
ＢＦ０：ケルセチン  ３−ラムノシル−（１→６）−ガラクトシド−７−グルクロニド  (Quercetin 3-rhamnosyl-(1→6)-galactoside-7-glucuronide)(新規化合物)
ＢＦ１：ケンペロール  ３−ラムノシル−（１→６）−ガラクトシド−７−グルクロニド  (Kaempferol 3-rhamnosyl-(1→6)-galactoside-7-glucuronide)（新規化合物）
ＢＦ２＝（２０）：ケンペロール  ３−ラムノシル−（１→６）−グルコシド−７−グルクロニド(Kaempferol 3-rhamnosyl-(1→6)-glucoside-7-glucuronide)
ＢＦ３＝（２１）：ケンペロール  ３−グルコシド−７−グルクロニド(Kaempferol 3-glucoside-7-glucuronide)
ＢＦ６＝（４）：ケンペロール  ３−ラムノシル−（１→６）−グルコシド(Kaempferol 3-rhamnosyl-(1→6)-glucoside)
ＢＦ７：ケンペロール  ３−ラムノシル−（１→６）−ガラクトシド(Kaempferol 3-rhamnosyl-(1→6)-galactoside)
ＭＦ１：ケンペロール  ３−ラムノシル−（１→２）［ラムノシル−（１−６）−ガラクトシド]  （マウリチアニン）(Kaempferol 3-rhamnosyl-(1→2)[rhamnosyl-(1-6)-galactoside]  (mauritianin))
これらの構造を、図５〜６に示す。なお、上記のように、BF0およびBF1が新規化合物である。
【００８３】
（実施例３：花弁から調製したフラボノイドの組成比率は、花弁の模様の差異に関わらず一定である）
フラボノイド組成を品種識別に使用するためには、たとえ花弁の模様が異なっていても、その模様の差異を反映せずに、一定のフラボノイド組成を示さなければならない。フラボノイドは、花弁の色に影響を与え得る物質であるために、例えば、ワシントン種などのように、個体間で花弁の模様が異なる品種においては、フラボノイド組成が個体差に影響を受けるか否かが問題となる。
【００８４】
そこで、斑入り模様の品種においてもアントシアニンとフラボノールの花弁毎の違いはないことを、ワシントンを例として用いて実証した。結果を図７に示す。サンプルとして使用した各花弁の写真と、その右に、各パネルの上部に、３６０ｎｍで検出したフラボノールの結果、各パネルの下部に、５２０ｎｍで検出したアントシアニンの結果を示した。
【００８５】
右のパネルに示されるように、花弁に模様に関わらず、一定のフラボノイド組成が示された。
【００８６】
（実施例４：栽培温度はフラボノイド組成に影響を与えない）
フラボノイド組成を品種識別に使用するためには、栽培条件に関わらず一定のフラボノイド組成を示す必要がある。そこで、異なる栽培温度で栽培したチューリップよりフラボノイドを単離し、分析し、栽培温度によるフラボノイド組成への影響を確認した。結果を図８に示す。
【００８７】
チューリップとしては、紫水晶を用い、Ａ：２０℃（適温）、Ｂ：１２℃（色が濃くなる）、Ｃ：２８℃（色が薄くなる）の培養温度でチューリップを培養した。各パネルの写真に示すように、２０℃での適温と比較して、１２℃では色が濃くなり、２８℃では色が薄くなった。ＨＰＬＣによるフラボノイド分析の結果を右に示す。各パネルの上部は、３６０ｎｍで検出したフラボノールの結果、各パネルの下部は、５２０ｎｍで検出したアントシアニンの結果である。
【００８８】
結果から明らかなように、栽培温度は、フラボノイド組成に影響を与えなかった。従って、栽培温度などの栽培条件に関わらず、フラボノイド組成を品種識別に用いることができる。
【００８９】
（実施例５：種々の品種の同定）
本願発明の方法を用いて、種々の品種同定が可能であることを確認した。
【００９０】
図９および図１０に示される種々のチューリップ品種からフラボノイドを単離分析し、その組成比を、グラフとして示した。結果から明らかなように、フラボノールとアントシアニンの組成比率を組み合わせることによって、種々の品種を識別・同定することが可能であった。本願発明の方法は、品種の識別・同定が困難であるとされる紫色品種についても適応可能であることが実証された。
【００９１】
（実施例６：バラの品種の同定）
本願発明の適用範囲がチューリップの品種同定に限定されないことを実証するために、バラ品種の識別・同定を行った。結果を、図１１に示す。
【００９２】
相互に色素組成が類似することが予測される赤系品種相互であっても、品種の識別・同定をすることが可能であった。
【００９３】
以上のように、本発明の好ましい実施形態を用いて本発明を例示してきたが、本発明は、この実施形態に限定して解釈されるべきものではない。本発明は、特許請求の範囲によってのみその範囲が解釈されるべきであることが理解される。当業者は、本発明の具体的な好ましい実施形態の記載から、本発明の記載および技術常識に基づいて等価な範囲を実施することができることが理解される。本明細書において引用した特許、特許出願および文献は、その内容自体が具体的に本明細書に記載されているのと同様にその内容が本明細書に対する参考として援用されるべきであることが理解される。
【産業上の利用可能性】
【００９４】
本願発明によって、植物品種の識別・同定を簡便かつ容易に行うことが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００９５】
【図１】図１は、チューリップ花弁のフラボノール分析を示す結果である。
【図２】図２は、チューリップ花弁のアントシアニン分析を示す結果である。
【図３Ａ】図３Ａ〜Ｈは、チューリップ品種毎のフラボノールとアントシアニンのＨＰＬＣクロマトグラム例を示す結果である。
【図３Ｂ】図３Ａ〜Ｈは、チューリップ品種毎のフラボノールとアントシアニンのＨＰＬＣクロマトグラム例を示す結果である。
【図３Ｃ】図３Ａ〜Ｈは、チューリップ品種毎のフラボノールとアントシアニンのＨＰＬＣクロマトグラム例を示す結果である。
【図３Ｄ】図３Ａ〜Ｈは、チューリップ品種毎のフラボノールとアントシアニンのＨＰＬＣクロマトグラム例を示す結果である。
【図３Ｅ】図３Ａ〜Ｈは、チューリップ品種毎のフラボノールとアントシアニンのＨＰＬＣクロマトグラム例を示す結果である。
【図３Ｆ】図３Ａ〜Ｈは、チューリップ品種毎のフラボノールとアントシアニンのＨＰＬＣクロマトグラム例を示す結果である。
【図３Ｇ】図３Ａ〜Ｈは、チューリップ品種毎のフラボノールとアントシアニンのＨＰＬＣクロマトグラム例を示す結果である。
【図３Ｈ】図３Ａ〜Ｈは、チューリップ品種毎のフラボノールとアントシアニンのＨＰＬＣクロマトグラム例を示す結果である。
【図４】図４は、チューリップの花弁中のアントシアニン８種類の化学式を示す図である。
【図５】図５は、チューリップのフラボノールの化学式を示す図である。
【図６】図６は、チューリップのフラボノールの化学式を示す図である。
【図７Ａ】図７Ａ〜Ｅは、斑入り模様の品種においてもアントシアニンとフラボノールの花弁毎の違いはないことを、ワシントンを例として示す結果である。
【図７Ｂ】図７Ａ〜Ｅは、斑入り模様の品種においてもアントシアニンとフラボノールの花弁毎の違いはないことを、ワシントンを例として示す結果である。
【図７Ｃ】図７Ａ〜Ｅは、斑入り模様の品種においてもアントシアニンとフラボノールの花弁毎の違いはないことを、ワシントンを例として示す結果である。
【図７Ｄ】図７Ａ〜Ｅは、斑入り模様の品種においてもアントシアニンとフラボノールの花弁毎の違いはないことを、ワシントンを例として示す結果である。
【図７Ｅ】図７Ａ〜Ｅは、斑入り模様の品種においてもアントシアニンとフラボノールの花弁毎の違いはないことを、ワシントンを例として示す結果である。
【図８Ａ】図８Ａ〜Ｃは、栽培温度の違いがフラボノイド組成に影響を与えないことを、紫水晶を例として示す結果である。
【図８Ｂ】図８Ａ〜Ｃは、栽培温度の違いがフラボノイド組成に影響を与えないことを、紫水晶を例として示す結果である。
【図８Ｃ】図８Ａ〜Ｃは、栽培温度の違いがフラボノイド組成に影響を与えないことを、紫水晶を例として示す結果である。
【図９−１】図９は、チューリップ品種毎のアントシアニンとフラボノールの組成比率を示す結果である。
【図９−２】図９は、チューリップ品種毎のアントシアニンとフラボノールの組成比率を示す結果である。
【図１０−１】図１０−１は、紫色品種におけるアントシアニンとフラボノールの組成比率を示す結果である。
【図１０−２】図１０−２は、紫色品種におけるアントシアニンとフラボノールの組成比率を示す結果である。
【図１１Ａ】図１１Ａ〜Ｅは、バラの赤系品種におけるアントシアニンとフラボノール組成を示す結果である。
【図１１Ｂ】図１１Ａ〜Ｅは、バラの赤系品種におけるアントシアニンとフラボノール組成を示す結果である。
【図１１Ｃ】図１１Ａ〜Ｅは、バラの赤系品種におけるアントシアニンとフラボノール組成を示す結果である。
【図１１Ｄ】図１１Ａ〜Ｅは、バラの赤系品種におけるアントシアニンとフラボノール組成を示す結果である。
【図１１Ｅ】図１１Ａ〜Ｅは、バラの赤系品種におけるアントシアニンとフラボノール組成を示す結果である。
【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図９−１】
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【図９−２】
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【図１０−１】
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【図１０−２】
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【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図３Ｅ】
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【図３Ｆ】
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【図３Ｇ】
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【図３Ｈ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図７Ｄ】
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【図７Ｅ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１１Ｃ】
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【図１１Ｄ】
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【図１１Ｅ】
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