(57)【要約】【課題】新規な化学物質を資源として提供すること【解決手段】  下記式（１）で示されるブラジシアニンＡとする。2008150309.tif 000028【選択図】図１
2008150309.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式で示されるブラジシアニンＡ。
【化１】
2008150309.tif 000022
【請求項２】
下記式で示されるブラジシアニンＢ。
【化２】
2008150309.tif 000023
【請求項３】
下記式で示されるブラジシアニンＣ。
【化３】
2008150309.tif 000024
【請求項４】
下記式で示されるブラジシアニンＡ又はその塩を有効成分として含有する薬剤。
【化４】
2008150309.tif 000025
【請求項５】
下記式で示されるブラジシアニンＢ又はその塩を有効成分として含有する薬剤。
【化５】
2008150309.tif 000026
【請求項６】
下記式で示されるブラジシアニンＣ又はその塩を有効成分として含有する薬剤。
【化６】
2008150309.tif 000027
【請求項７】
癌の治療薬である請求項４、５又は６記載の薬剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規化合物であるブランジシアニンＡ、Ｂ及びＣに関し、更には、これらを用いた薬剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在の我々の生活において、天然の動植物、微生物等の体内に含まれる化学物質（以下「天然物」という。）として見出されたもののうち人体に有益な効果をもたらすものは生薬、医薬品の有効成分として使用されている。また、このようなものは更に有用な医薬品を開発するための研究材料としても様々な役割を有しており、非常に重要なものとなっている。
【０００３】
このように、人体に有益な効果をもたらす天然物の探索に関する報告としては、例えば下記非特許文献１に、変形菌からビスインドール化合物、ナフトキノン化合物、グリセリド化合物等を抽出した報告がある。
【０００４】
【非特許文献１】石橋正己、“未利用菌類の資源化：変形菌からの天然物探索”、有機合成化学協会誌、２００３年、第６１巻、第２号、１５２〜１６３頁
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら一方で、天然物の探索が多数の者によって行なわれているにもかかわらず、探索の材料として検討、調査されたものは、地球上の全生物種の中で１０％にも満たないといわれている。
【０００６】
本発明は、新規な化学物質を資源として提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の一手段に係る化学物質は、下記式（１）で示される。なお、下記式（１）で示される化学物質はブランジシアニンＡと呼ばれる。
【化１】
2008150309.tif 000003
【０００８】
また、本発明の他の一手段に係る化学物質は、下記式（２）で示される。なお、下記式（２）で示される化学物質はブランジシアニンＢと呼ばれる。
【化２】
2008150309.tif 000004
【０００９】
また、本発明の他の一手段に係る化学物質は、下記式（３）で示される。なお、下記式（３）で示される化学物質はブランジシアニンＣと呼ばれる。
【化３】
2008150309.tif 000005
【００１０】
また、本発明の他の一手段に係る薬剤は、下記式（１）で示されるブランジシアニンＡを有効成分として含有する。
【化４】
2008150309.tif 000006
【００１１】
また、本発明の他の一手段に係る癌の薬剤は、下記式（２）で示されるブランジシアニンＢを有効成分として含有する。
【化５】
2008150309.tif 000007
【００１２】
また、本発明の他の一手段に係る薬剤は、下記式（３）で示されるブランジシアニンＣを有効成分として含有する。
【化６】
2008150309.tif 000008
【００１３】
なお、上記の薬剤は、限定されるわけではないが、癌の治療薬として有用であることが期待される。
【発明の効果】
【００１４】
本発明により、新規な化学物質を資源として提供することができる。特に、本発明に係る化学物質は、癌細胞に対し細胞増殖抑制作用を発揮するため、例えば癌の治療薬として利用が期待される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
以下、本発明の実施形態について説明する。
【００１６】
本発明の一形態に係るブランジシアニンＡ、Ｂ及びＣは、下記式（１）乃至（３）でそれぞれ示される。
【化７】
2008150309.tif 000009
【化８】
2008150309.tif 000010
【化９】
2008150309.tif 000011
【００１７】
本実施形態に係るブランジシアニンＡ、Ｂ及びＣは、後述の実施例から明らかなように、マメ科植物Ｍｉｌｌｅｔｔｉａ  ｂｒａｎｄｉｓｉａｎａから抽出することができるが、これに限定されず、合成も可能であると考えられる。
【００１８】
また、本実施形態に係るブランジシアニンＡ、Ｂ及びＣは、癌細胞に対し細胞増殖抑制作用を発揮するため、薬剤、例えば癌の治療薬として利用が期待される。なお、ブランジシアニンＡ、Ｂ及びＣを癌の治療薬として利用する場合、ブランジシアニンＡ、Ｂ及びＣ並びにこれらの塩の少なくともいずれかを有効成分として含有しておくことが好ましい。
【００１９】
また、本実施形態に係る癌の治療薬は、上記ブランジシアニンＡ、Ｂ及びＣ並びにこれらの塩の少なくともいずれかの他、薬学的に許容しうる通常の担体、結合剤、安定化剤、賦形剤、希釈剤（例えば蒸留水）、ｐＨ緩衝剤（例えばリン酸緩衝生理食塩水）、崩壊剤、可溶化剤、溶解補助剤、等張剤等の各種調剤用配合成分を含有することができる。
【００２０】
またこの癌の治療薬は、患者の性別、体重、症状に見合った適切な投与量を経口的又は非経口的に投与することができる。経口的な投与としては、通常用いられる投与形態、例えば粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤、液剤、懸濁液、油剤、乳化剤等の投与形態を採用することができる。また、非経口的な投与としては、通常用いられる投与形態、例えば上記の液剤、懸濁液等にしたものを直接患部に投与する方法、注射等により投与する形態を採用することができる。
【実施例】
【００２１】
本実施例では、マメ科植物Ｍｉｌｌｅｔｔｉａ  ｂｒａｎｄｉｓｉａｎａからブランジシアニンＡを抽出し、検討した結果を示すものである。図１に、ブラジシアニンＡ、Ｂ及びＣの単離についてのスキームの概略を示しておく。
【００２２】
まず、Ｍｉｌｌｅｔｔｉａ  ｂｒａｎｄｉｓｉａｎａの葉部のメタノール抽出物３０．５ｇを得て、Ｄｉａｉｏｎ  ＨＰ−２０を担体とするカラム（φ４３×４００ｍｍ）に付し、メタノール、５０％メタノール、アセトンを用いて１Ａ（２３．６６ｇ）、１Ｂ（０．３６ｇ）、１Ｃ（３．１８ｇ）の３種の画分に分離した。
【００２３】
次に、１Ａについて、ｎ−ヘキサン、酢酸エチル、ブタノールを用いて溶媒分配を行い、各可溶部を得た。このうち、酢酸エチル可溶部について、Ｓｉｌｉｃａ  ｇｅｌ  ＰＳＱ  １００Ｂを担体とするカラム（φ３０×３５０ｍｍ）に付し、ｎ−ヘキサン、アセトン、メタノールを用いて溶出し、溶出順に２Ａ（２．４ｇ）、２Ｂ（０．３２ｇ）、２Ｃ（１．７ｇ）の各画分を得た。
【００２４】
更に、２Ａについて、下記表１に記載のＨＰＬＣ条件（１）による分取用ＨＰＣＬ（ＯＤＳ）に付し、ブランジシアニンＡ（１３．１ｍｇ）、ブランジシアニンＢ（２３．４ｍｇ）を得た。
【００２５】
更に、上記２ＢをＳｉｌｉｃａ  ｇｅｌ  ６０Ｎを担体とするカラム（φ１．６×５００ｍｍ）に付し、ｎ−ヘキサン、アセトン、メタノールを用いて溶出し、溶出順に３Ａ〜３Ｇの７つの画分に分離した。そして３Ａについて、下記表１に示すＨＰＬＣ条件（２）による分取用ＨＰＬＣ（ＯＤＳ）に付し、ブランジシアニンＣ（１０．０ｍｇ）を得た。
【表１】
2008150309.tif 000012
【００２６】
（ブランジシアニンＡ）
次に、ブランジシアニンＡに対して高分解ＦＡＢＭＳを行い、［Ｍ＋Ｋ］＋と推測されるｍ／ｚ４３７．１００４のピークを観測した。この結果分子式をＣ２２Ｈ２２Ｏ７と推定した。
【００２７】
次に、赤外吸収測定を行い、赤外吸収スペクトル（以下「ＩＲスペクトル」という。）を得た。この結果、３２６３ｃｍ−１、１６５８ｃｍ−１にそれぞれＯＨ基、カルボニル基に由来すると考えられる吸収を観測した。
【００２８】
また、ブランジシアニンＡに対して紫外吸収測定を行い、紫外吸収スペクトル（以下「ＵＶスペクトル」という。）も得た。この紫外吸収測定は、メタノールを溶媒として濃度を２．０×１０−５ｍｏｌ／ｌ、セル長を１ｃｍとして行なった。この結果、２９５．５ｎｍ、２６０．０ｎｍ、２０３．５ｎｍにそれぞれ吸収ピークを有しており、芳香族化合物又は共役二重結合化合物であることが推定できた。なお、そのそれぞれにおけるモル吸光係数（ε）はそれぞれ１１５５０、２１２５０、３７９５０であった。図２に、ブランジシアニンＡにおけるＵＶスペクトルを示す。
【００２９】
また、ブランジシアニンＡに対し、電子衝撃型質量分析（ＥＩＭＳ）の測定を行なった。この結果、本化合物の分子量が３９８であることが分かった。
【００３０】
また、ブランジシアニンＡに対し、旋光角［α］Ｄの測定を行った。この結果、旋光角は０度であり、光学不活性であることが確認できた。なお、下記表２に、ブランジシアニンＡに対する高分解能ＦＡＢＭＳ、ＥＩＭＳ、ＩＲスペクトル、ＵＶスペクトル及び旋光角のデータを示しておく。
【表２】
2008150309.tif 000013
【００３１】
また更に、ブランジシアニンＡに対し、１Ｈ  ＮＭＲ及び１３Ｃ  ＮＭＲの測定も行った。この結果を表３、図３及び図４に示す。この結果、この物質においてはイソフラボン骨格に由来するシグナル、一連のプレニル基に由来するシグナルが観測された。更に、δｃ１８０．８にカルボニル炭素のシグナルが、δＨ１２．９１にこのカルボニル炭素と水素結合していると推定されるヒドロキシル基由来のシグナルが観察された。
【表３】
2008150309.tif 000014
【００３２】
更に、ブランジシアニンＡに対し、ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣスペクトル解析も行なった。図５にＨＭＱＣスペクトルを、図６にＨＭＢＣスペクトルをそれぞれ示す。この結果、プレニル基の１”位のメチレンプロトンから４’位にＨＭＢＣ相関が認められ、また、１”位のケミカルシフト値からプレニル基がＢ環の４’位に酸素原子を介して結合していることが認められた。
【００３３】
以上より、ブランジシアニンＡの構造を下記式として決定した。
【化１０】
2008150309.tif 000015
【００３４】
また、このブランジシアニンＡについてＨｅＬａ細胞に対するＩＣ５０値の測定を行ったところ、２５μｇ／ｍｌよりも大きな値であることが確認でき、この濃度では癌細胞に対する増殖抑制作用を確認することができなかった。
【００３５】
（ブランジシアニンＢ）
次に、ブランジシアニンＢに対して高分解ＦＡＢＭＳを行い、［Ｍ＋］と推測されるｍ／ｚ３９６．１２１２のピークを観測した。この結果分子式をＣ２２Ｈ２０Ｏ７と推定した。
【００３６】
次に、赤外吸収測定を行い、ＩＲスペクトルを得た。この結果、３５４５ｃｍ−１、１６５８ｃｍ−１にそれぞれＯＨ基、カルボニル基に由来すると考えられる吸収を観測した。
【００３７】
また、ブランジシアニンＢに対して紫外吸収測定を行い、ＵＶスペクトルも得た。この紫外吸収測定は、メタノールを溶媒として濃度を２．０×１０−５ｍｏｌ／ｌ、セル長を１ｃｍとして行なった。この結果、２９４．５ｎｍ、２６３．５ｎｍ、２０２．５ｎｍにそれぞれ吸収ピークを有しており、芳香族化合物又は共役二重結合化合物であることが推定できた。なお、そのそれぞれにおけるモル吸光係数（ε）はそれぞれ１０２００、２４５００、４０９５０であった。図７に、ブランジシアニンＢにおけるＵＶスペクトルを示す。
【００３８】
また、ブランジシアニンＢに対し、電子衝撃型質量分析（ＥＩＭＳ）の測定を行なった。この結果、本化合物の分子量が３９６であることが分かった。
【００３９】
また、ブランジシアニンＢに対し、旋光角［α］Ｄの測定を行った。この結果、旋光角は−４．７７度であり、光学活性であることが確認できた。なお、下記表４に、ブランジシアニンＢに対する高分解能ＦＡＢＭＳ、ＥＩＭＳ、ＩＲスペクトル、ＵＶスペクトル及び旋光角のデータを示しておく。
【表４】
2008150309.tif 000016
【００４０】
また更に、ブランジシアニンＢに対し、１Ｈ  ＮＭＲ及び１３Ｃ  ＮＭＲの測定も行った。この結果を表５、図８及び図９に示す。この結果、イソプロペニルデヒドロフラン環の存在が示唆された。
【００４１】
【表５】
2008150309.tif 000017
【００４２】
更に、ブランジシアニンＢに対し、ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣスペクトル解析も行なった。図１０にＨＭＱＣスペクトルを、図１１にＨＭＢＣスペクトルをそれぞれ示す。この結果、プレニル基の１”位のメチレンプロトンから４’位にＨＭＢＣ相関が認められ、また、１”位のケミカルシフト値からプレニル基がＢ環の４’位に酸素原子を介して結合していることが認められた。
【００４３】
以上より、ブランジシアニンＢの構造を下記式として決定した。
【化１１】
2008150309.tif 000018
【００４４】
また、このブランジシアニンＢについてＨｅＬａ細胞に対するＩＣ５０値の測定を行ったところ、９．７μｇ／ｍｌであることが確認でき、癌細胞に対する増殖抑制作用を確認することができた。
【００４５】
（ブランジシアニンＣ）
ブランジシアニンＣに対して高分解ＦＡＢＭＳを行い、［Ｍ＋］と推測されるｍ／ｚ３９８．１３７０のピークを観測した。この結果分子式をＣ２２Ｈ２２Ｏ７と推定した。
【００４６】
次に、赤外吸収測定を行い、ＩＲスペクトルを得た。この結果、３４６９ｃｍ−１、１６５５ｃｍ−１にそれぞれＯＨ基、カルボニル基に由来すると考えられる吸収を観測した。
【００４７】
また、ブランジシアニンＣに対して紫外吸収測定を行い、ＵＶスペクトルも得た。この紫外吸収測定は、メタノールを溶媒として濃度を２．０×１０−５ｍｏｌ／ｌ、セル長を１ｃｍとして行なった。この結果、２９３．０ｎｍ、２６４．０ｎｍ、２０２．５ｎｍにそれぞれ吸収ピークを有しており、芳香族化合物又は共役二重結合化合物であることが推定できた。なお、そのそれぞれにおけるモル吸光係数（ε）はそれぞれ８２５０、１８０００、３１４５０であった。図１２に、ブランジシアニンＡにおけるＵＶスペクトルを示す。
【００４８】
また、ブランジシアニンＣに対し、電子衝撃型質量分析（ＥＩＭＳ）の測定を行なった。この結果、本化合物の分子量が３９８であることが分かった。
【００４９】
また、ブランジシアニンＣに対し、旋光角［α］Ｄの測定を行った。この結果、旋光角は０度であり、光学不活性であることが確認できた。なお、下記表６に、ブランジシアニンＡに対する高分解能ＦＡＢＭＳ、ＥＩＭＳ、ＩＲスペクトル、ＵＶスペクトル及び旋光角のデータを示しておく。
【表６】
2008150309.tif 000019
【００５０】
また更に、ブランジシアニンＣに対し、１Ｈ  ＮＭＲ及び１３Ｃ  ＮＭＲの測定も行った。この結果を表７、図１３及び図１４に示す。この結果、この物質においてはイソフラボン骨格に由来するシグナル、プレニル基に由来するシグナルが観測された。
【００５１】
【表７】
2008150309.tif 000020
【００５２】
更に、ブランジシアニンＣに対し、ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣスペクトル解析も行なった。図１５にＨＭＱＣスペクトルを、図１６にＨＭＢＣスペクトルをそれぞれ示す。この結果、プレニル基の１”位のメチレンプロトンから７、８、８ａ位の炭素への相関が認められ、プレニル基がＡ環の８位に結合していることが認められた。
【００５３】
以上より、ブランジシアニンＣの構造を下記式として決定した。
【化１２】
2008150309.tif 000021
【００５４】
また、このブランジシアニンＣについてＨｅＬａ細胞に対するＩＣ５０値の測定を行ったところ、１９．１μｇ／ｍｌであることが確認でき、癌細胞に対する増殖抑制作用を確認することができた。
【産業上の利用可能性】
【００５５】
本発明は、新規化合物を含有する薬剤として産業上の利用可能性がある。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】ブラジシアニンＡ、Ｂ及びＣの単離についてのスキームの概略を示す図である。
【図２】ブランジシアニンＡのＵＶスペクトルを示す図である。
【図３】ブランジシアニンＡの１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図４】ブランジシアニンＡの１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図５】ブランジシアニンＡのＨＭＱＣスペクトルを示す図である。
【図６】ブランジシアニンＡのＨＭＢＣスペクトルを示す図である。
【図７】ブランジシアニンＢのＵＶスペクトルを示す図である。
【図８】ブランジシアニンＢの１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図９】ブランジシアニンＢの１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図１０】ブランジシアニンＢのＨＭＱＣスペクトルを示す図である。
【図１１】ブランジシアニンＢのＨＭＢＣスペクトルを示す図である。
【図１２】ブランジシアニンＣのＵＶスペクトルを示す図である。
【図１３】ブランジシアニンＣの１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図１４】ブランジシアニンＣの１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図１５】ブランジシアニンＣのＨＭＱＣスペクトルを示す図である。
【図１６】ブランジシアニンＣのＨＭＢＣスペクトルを示す図である。
【図１】
2008150309.tif 000029
【図２】
2008150309.tif 000030
【図３】
2008150309.tif 000031
【図４】
2008150309.tif 000032
【図５】
2008150309.tif 000033
【図６】
2008150309.tif 000034
【図７】
2008150309.tif 000035
【図８】
2008150309.tif 000036
【図９】
2008150309.tif 000037
【図１０】
2008150309.tif 000038
【図１１】
2008150309.tif 000039
【図１２】
2008150309.tif 000040
【図１３】
2008150309.tif 000041
【図１４】
2008150309.tif 000042
【図１５】
2008150309.tif 000043
【図１６】
2008150309.tif 000044