(57)【要約】【課題】異なる波長のレーザ光を照射して得られる複数の蛍光画像間における画素ずれをなくして、アンミキシング処理を精度よく行って、複数種類の蛍光を含んだ蛍光画像から個々の蛍光を分離することを可能とする。【解決手段】異なる波長のレーザ光を切り替えて出射可能なレーザ光源８と、出射されたレーザ光の光軸ずれを補正するための補正量を決定する補正量決定部と、レーザ光の光軸を調節する光軸調節部１１と、レーザ光を２次元的に走査する走査部１４と、走査されたレーザ光を標本Ａに集光する一方、標本Ａにおいて発生する蛍光を集光する対物レンズ１５と、集光された蛍光を検出する光検出器２９と、走査部１４によるレーザ光の走査に同期して、レーザ光源８から出射されるレーザ光の波長を切り替えるとともに、補正量決定部により決定された補正量に基づき光軸調節部１１を制御する制御部５とを備える走査型レーザ顕微鏡１を提供する。【選択図】      図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
異なる波長のレーザ光を切り替えて出射可能なレーザ光源と、
前記異なる波長のレーザ光の切り替えによって生じるレーザ光の光軸ずれを補正するための補正量を決定する補正量決定部と、
前記レーザ光源から出射されたレーザ光の光軸を調節する光軸調節部と、
前記レーザ光源から出射されたレーザ光を２次元的に走査する走査部と、
該走査部により走査されたレーザ光を標本に集光する一方、標本において発生する蛍光を集光する対物レンズと、
該対物レンズにより集光された蛍光を検出する光検出器と、
前記走査部によるレーザ光の走査に同期して、前記レーザ光源から出射されるレーザ光の波長を切り替えるとともに、前記補正量決定部により決定された光軸ずれ補正量に基づき前記光軸調節部を制御する制御部とを備える走査型レーザ顕微鏡。
【請求項２】
前記レーザ光源から出射されたレーザ光の光軸ずれ量を検出する光軸ずれ検出部を更に備え、
前記補正量決定部は、前記光軸ずれ検出部で検出された光軸ずれ量に基づいて前記補正量を決定することを特徴とする請求項１に記載の走査型レーザ顕微鏡。
【請求項３】
前記レーザ光源から出射されるレーザ光の波長と光軸ずれ補正量とを対応づけて記憶する記憶部を更に備え、
前記補正量決定部は、前記切り替えによって生じるレーザ光の波長に対応する前記光軸ずれ補正量を前記記憶部から読み出して前記補正量を決定することを特徴とする請求項１に記載の走査型レーザ顕微鏡。
【請求項４】
前記レーザ光の強度を調節する調光部と、
前記レーザ光の波長情報と強度情報とを対応づけて記憶する記憶部と、
前記レーザ光源から出射されるレーザ光の波長が切り替えられたときに、前記記憶部に記憶されているレーザ光の強度情報に基づいて前記調光部を制御する調光制御部を備える請求項２または３に記載の走査型レーザ顕微鏡。
【請求項５】
前記レーザ光の強度を調節する調光部と、
前記レーザ光の強度を検出するパワーモニタと、
前記レーザ光源から出射されるレーザ光の波長が切り替えられたときに、前記パワーモニタにより検出される強度が一定となるように前記調光部を制御する調光制御部を備える請求項２または３に記載の走査型レーザ顕微鏡。
【請求項６】
前記レーザ光源から出射されるレーザ光の波長に応じて、前記光検出器の検出感度を調節する感度制御部を備える請求項２または３に記載の走査型レーザ顕微鏡。
【請求項７】
前記レーザ光源から出射されるレーザ光の波長の切り替えに応じて制御される光軸調節部の調節値を波長に対応づけて記憶する記憶部を備える請求項２に記載の走査型レーザ顕微鏡。
【請求項８】
前記走査部が、前記標本に対するレーザ光の走査平面を光軸方向に相対移動させる駆動機構を備え、
前記制御部が、前記駆動機構により走査平面を光軸方向に移動させつつ、対物レンズの焦点面に沿ってレーザ光を２次元的に走査させる、３次元的な走査に同期して、レーザ光の波長を切り替える請求項２または３に記載の走査型レーザ顕微鏡。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、走査型レーザ顕微鏡に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、パルスレーザ光源等の波長切替可能なレーザ光源を用いて取得した画像に対してアンミキシング処理を行うことにより波長間でオーバーラップした蛍光を分離する技術が知られている（例えば、特許文献１参照。）。
【０００３】
【特許文献１】特開２００４−２３３３５１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、この特許文献１の技術では、波長変更可能なパルスレーザ光源を使用しているため、レーザ光の波長を変更することによりレーザ光源から標本までの光路において光軸ずれが発生する。
レーザ光の波長を順次変更していく間にレーザ光の光軸ずれが発生すると、異なる波長のレーザ光を照射して取得された蛍光画像間において画素ずれが発生するという不都合がある。その結果、画素ずれの発生した複数の蛍光画像に基づくアンミキシング処理は、画素間の共通性がないために全く無意味な処理となり、複数種類の蛍光を含んだ蛍光画像から個々の蛍光を分離することができないという問題がある。
【０００５】
本発明は上述した事情に鑑みてなされたものであって、異なる波長のレーザ光を照射して得られる複数の蛍光画像間における画素ずれをなくして、アンミキシング処理を精度よく行って、複数種類の蛍光を含んだ蛍光画像から個々の蛍光を分離することを可能とする蛍光画像を取得可能なレーザ顕微鏡を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記目的を達成するために、本発明は以下の手段を提供する。
本発明は、異なる波長のレーザ光を切り替えて出射可能なレーザ光源と、前記異なる波長のレーザ光の切り替えによって生じるレーザ光の光軸ずれを補正するための補正量を決定する補正量決定部と、前記レーザ光源から出射されたレーザ光を２次元的に走査する走査部と、該走査部により走査されたレーザ光を標本に集光する一方、標本において発生する蛍光を集光する対物レンズと、該対物レンズにより集光された蛍光を検出する光検出器と、前記走査部によるレーザ光の走査に同期して、前記レーザ光源から出射されるレーザ光の波長を切り替えるとともに、前記補正量決定部により決定された光軸ずれ補正量に基づき前記光軸調節部を制御する制御部とを備える走査型レーザ顕微鏡を提供する。
【０００７】
本発明によれば、レーザ光源から発せられたレーザ光が、走査部により２次元的に走査され、対物レンズにより標本に集光されると、標本に含まれる蛍光物質が励起されて蛍光が発生する。発生した蛍光は対物レンズにより集光され光検出器により蛍光強度情報として取得される。したがって、走査部による走査位置と蛍光強度情報とを対応付けて記憶しておくことにより、２次元的な蛍光画像を取得することができる。
【０００８】
レーザ光の波長が変更されると、レーザ光の光軸が変動するので補正量決定部が光軸ずれを補正するための補正量を決定し、前記補正量に基づいて光軸調節部の作動により光軸ずれ量が解消するように、光軸調節が行われることにより、レーザ光の波長が変化しても、一定の光軸に沿ってレーザ光を標本に照射することができる。そして、制御部の作動により、走査部によるレーザ光の走査に同期してレーザ光源から出射されるレーザ光の波長が切り替えられ、光軸ずれを解消するように光軸調節部が制御されるので、レーザ光の波長が変化しても光軸が一致した状態で各蛍光画像を取得することができる。その結果、異なる波長のレーザ光を照射して得られる複数の蛍光画像間における画素ずれをなくして、アンミキシング処理を精度よく行うことが可能となる。
上記発明においては、前記レーザ光の波長変更によって生じる光軸ずれ量を検出するための光軸ずれ検出部を備えて、検出された光軸ずれ量に基づいて前記補正量決定部が前記補正量を決定するようにしてもよい。
【０００９】
上記発明においては、前記レーザ光の強度を調節する調光部と、前記レーザ光の波長情報と強度情報とを対応づけて記憶する記憶部と、前記レーザ光源から出射されるレーザ光の波長が切り替えられたときに、前記記憶部に記憶されているレーザ光の強度情報に基づいて前記調光部を制御する調光制御部を備えることとしてもよい。
【００１０】
レーザ光源から出射されるレーザ光の波長を変更すると、レーザ光源から出射されるレーザ光の強度は変動する。
上記のようにすることで、レーザ光源から出射されるレーザ光の波長が切り替えられたときに、調光制御部の作動により、記憶部に対応づけて記憶されている強度情報に基づいて調光部が制御されるので、波長の変更に関わらず一定の強度のレーザ光を照射することができる。その結果、波長毎に得られる蛍光画像の強度の変動を抑制することができる。
【００１１】
また、上記発明においては、前記レーザ光の強度を調節する調光部と、前記レーザ光の強度を検出するパワーモニタと、前記レーザ光源から出射されるレーザ光の波長が切り替えられたときに、前記パワーモニタにより検出される強度が一定となるように前記調光部を制御する調光制御部を備えることとしてもよい。
このようにすることで、調光制御部の作動により、パワーモニタにより検出される強度が一定となるように調光部が制御されるので、レーザ光源から出射されるレーザ光の波長が変動しても、一定の強度のレーザ光を照射することができる。その結果、波長毎に得られる蛍光画像の強度の変動を抑制することができる。
【００１２】
また、上記発明においては、前記レーザ光源から出射されるレーザ光の波長に応じて、前記光検出器の検出感度を調節する感度制御部を備えることとしてもよい。
このようにすることで、レーザ光源から出射されるレーザ光の波長に応じてレーザの強度が変動するが、感度制御部の作動により、光検出器の検出感度を調節することで、波長が変更されても一定の強度の蛍光画像を取得することができる。
【００１３】
また、上記発明においては、前記レーザ光源から出射されるレーザ光の波長の切り替えに応じて制御される光軸調節部の調節値を波長に対応づけて記憶する記憶部を備えることとしてもよい。
このようにすることで、波長の切り替えに応じて、波長に対応づけて光軸調節部の調節値を記憶部に記憶しておくことにより、次回同一の波長に切り替えられたときに、光軸ずれ検出部による検出処理および光軸調節部の調節値の同定を行うことなく、記憶部に記憶された調節値を使用して迅速に光軸調節部による光軸の調節を行うことができる。
【００１４】
また、上記発明においては、前記走査部が、前記標本に対するレーザ光の走査平面を光軸方向に相対移動させる駆動機構を備え、前記制御部が、前記駆動機構により走査平面を光軸方向に移動させつつ、対物レンズの焦点面に沿ってレーザ光を２次元的に走査させる、３次元的な走査に同期して、レーザ光の波長を切り替えることとしてもよい。
このようにすることで、レーザ光の波長切り替え回数を最小限に抑え、短時間で、複数の波長のレーザ光による、画素ずれのない３次元的な蛍光画像を取得することができる。
【００１５】
また、本発明は、異なる波長のレーザ光を切り替えて出射可能なレーザ光源と、該レーザ光源から出射されるレーザ光の波長と光軸ずれ補正量とを対応づけて記憶する記憶部と、前記レーザ光源から出射されたレーザ光の光軸を調節する光軸調節部と、前記レーザ光源から出射されたレーザ光を２次元的に走査する走査部と、該走査部により走査されたレーザ光を標本に集光する一方、標本において発生する蛍光を集光する対物レンズと、該対物レンズにより集光された蛍光を検出する光検出器と、前記走査部によるレーザ光の走査に同期して、前記レーザ光源から出射されるレーザ光の波長を切り替えるとともに、前記記憶部から読み出した光軸ずれ補正量に基づき前記光軸調節部を制御する制御部とを備える走査型レーザ顕微鏡を提供する。
【発明の効果】
【００１６】
本発明によれば、異なる波長のレーザ光を照射して得られる複数の蛍光画像間における画素ずれをなくして、アンミキシング処理を精度よく行って、複数種類の蛍光を含んだ蛍光画像から個々の蛍光を分離することができるという効果を奏する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
本発明の一実施形態に係る走査型レーザ顕微鏡１について、図１〜図３を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る走査型レーザ顕微鏡１は、図１に示されるように、ステージ２に載置された標本Ａに対して超短パルスレーザ光（以下、レーザ光と言う。）を照射する照明光学系３と、標本Ａおいて発生した蛍光を検出する観察光学系４と、これらを制御する制御装置５と、各種設定値を入力するための入力装置６と、取得された蛍光画像を表示する表示装置７とを備えている。
【００１８】
前記照明光学系３は、多波長のレーザ光を出射可能なレーザ光源８と、該レーザ光源８から出射されたレーザ光のオンオフ、調光および波長選択を行うＡＯＴＦのような音響光学素子（調光部）９と、短波長光を優先的に透過させるネガティブチャープ（ＮＣ）１０と、レーザ光の光軸のオフセットおよび傾きを調節可能な光軸調節部１１と、レーザ光の光軸ずれを検出する光軸ずれ検出部１２と、レーザ光の強度を検出するパワーモニタ１３と、レーザ光を２次元的に走査するスキャナ１４と、該スキャナ１４により走査されたレーザ光を標本Ａに照射する一方、標本Ａにおいて発生する蛍光を集光する対物レンズ１５とを備えている。
【００１９】
また、照明光学系３には、対物レンズ１５によるレーザ光の焦点面を光軸方向に移動させるビームエキスパンダ１６が備えられている。また、照明光学系３には、スキャナ１４へのレーザ光の入射をオンオフするシャッタ１７が備えられている。図中、符号１８はミラーである。
【００２０】
前記光軸調節部１１は、図示しない２枚の平面ミラーとモータとを組み合わせたものであり、２枚の平面ミラーを同時に並進移動させることによりレーザ光の光軸に直交する方向へのオフセットが可能であり、平面ミラーを光軸に直交する軸線回りに回転させることにより、レーザ光の傾き角度を調節することができるようになっている。
【００２１】
前記光軸ずれ検出部１２は、例えば、ビームエキスパンダ１６の後段の光路からレーザ光の一部を分岐するビームスプリッタ１９と、該ビームスプリッタ１９により光路から分岐されたレーザ光を異なる光路長を介して検出する２つのセンサ２０，２１とを備えている。符号２２はビームスプリッタ、符号２３はミラーである。
【００２２】
各センサ２０，２１は、例えば、４分割フォトダイオードであり、受光するレーザ光のスポット位置に応じた４つのセンサ部分（図示略）の出力バランスにより、レーザ光の本来の光軸に対する該光軸に直交する方向に沿うオフセット量を検出することができるようになっている。また、異なる光路長を介した２つのセンサ２０，２１におけるオフセット量の差に応じて、レーザ光の本来の光軸に対する傾き量を検出することができるようになっている。
【００２３】
前記スキャナ１４は、例えば、相互に直交する軸線回りに揺動可能に支持された２枚のガルバノミラー１４ａ，１４ｂを対向配置させたものである。このスキャナ１４によれば、２つのガルバノミラー１４ａ，１４ｂを同期させて揺動させることにより、レーザ光を、例えば、ラスタスキャン方式に２次元的に走査させることができるようになっている。
【００２４】
また、パワーモニタ１３は、例えば、光軸ずれ検出部１２の後段の光路からレーザ光の一部を分岐するビームスプリッタ２４と、該ビームスプリッタ２４により光路から分岐されたレーザ光を通過させる対物瞳相当の絞り２５と、該絞り２５を通過したレーザ光を検出するセンサ２６とを備えている。
【００２５】
前記観察光学系４は、対物レンズ１５により集光された蛍光を、対物レンズ１５とスキャナ１４との間においてレーザ光の光路から分岐するダイクロイックミラー２７と、該ダイクロイックミラー２７により分岐された蛍光からレーザ光を除去するバリアフィルタ２８と、該バリアフィルタ２８を透過した蛍光を検出する、例えば、光電子増倍管からなる光検出器２９とを備えている。
【００２６】
前記制御装置５は補正量決定部として動作し、異なる波長のレーザ光の切り替えによって生じるレーザ光の光軸ずれを補正するための補正量を決定するようになっている。また、前記制御装置５は、音響光学素子９に対し指令信号を出力し、レーザ光の波長を選択するようになっている。また、制御装置５は、光軸ずれ検出部１２からの検出信号を受信して、光軸調節部１１の調節値を算出し、光軸調節部１１に対して出力するようになっている。また、制御装置５は、パワーモニタ１３により検出されたレーザ光の強度に基づいて、レーザ光を調光するように音響光学素子９に指令信号を出力するようになっている。
【００２７】
また、制御装置５は、レーザ光の波長に応じたチャープ量をネガティブチャープ１０に指示するようになっている。また、制御装置５は、レーザ光の波長に応じてレーザ光の光束径を調節するようにビームエキスパンダ１６に指示するようになっている。
【００２８】
また、制御装置５は、レーザ光の波長を変更するときは、シャッタ１７をオフ状態にしてレーザ光のスキャナ１４への入射を禁止し、上記各種機器の調節動作が終了した段階でシャッタ１７をオン状態として、レーザ光の標本Ａへの照射を許容するようになっている。
また、制御装置５は、光検出器２９により検出される蛍光の輝度情報とスキャナ１４による走査位置情報とに基づいて、蛍光画像を構築し、表示装置７に出力するようになっている。
【００２９】
このように構成された本実施形態に係る走査型レーザ顕微鏡１の作用について、以下に説明する。
本実施形態に係る走査型レーザ顕微鏡１を用いて標本Ａの蛍光観察を行うには、図２に示されるように、入力装置６を介して制御装置５に観察条件を入力する（ステップＳ１）。本実施形態の場合には、レーザ光源８から出射されるレーザ光の波長を切り替えて、波長毎に、対物レンズ１５の焦点面に沿う２次元的な蛍光画像を取得する場合について説明する。
【００３０】
制御装置５は、入力された観察条件に従って、各種機器を制御する。観察条件としては、例えば、レーザ光の目標強度および走査回数が挙げられる。
制御装置５は、まず、シャッタ１７にオフ指令信号を出力し、レーザ光源８からスキャナ１４に向かう光路を遮断する（ステップＳ２）。そして、この状態で、レーザ光源８からレーザ光を出射させる（ステップＳ３）。レーザ光には多波長の光が含まれているので、制御装置５から波長選択指令信号が音響光学素子９に入力され、選択された波長のレーザ光が音響光学素子９から出射される（ステップＳ４）。
【００３１】
レーザ光の波長が選択されることにより、音響光学素子９から出射されるレーザ光の光軸および強度が変動する。この場合に、光軸ずれ検出部１２において光軸のオフセット量および傾き量が検出され（ステップＳ５）、制御装置５がこれらの検出信号に基づいて、光軸調節部１１の調節値を算出し、光軸調節部１１を制御する（ステップＳ６）。これにより、光軸ずれ検出部１２の位置において光軸ずれが解消される。また、パワーモニタ１３においてレーザ光の強度が検出され（ステップＳ７）、制御装置５が、強度信号に基づいて、目標強度となるように音響光学素子９に指令するので、レーザ光が所定の強度に調光される（ステップＳ８）。
【００３２】
そして、これら光軸調節および調光が行われた後に、制御装置５がシャッタ１７にオン指令信号を出力することにより、レーザ光源８からのレーザ光がスキャナ１４に向けて出射される（ステップＳ９）。
レーザ光はスキャナ１４によって２次元的に走査され（ステップＳ１０）、対物レンズ１５によって集光されてステージ２上の標本Ａに照射される。
【００３３】
レーザ光が照射されることにより標本Ａ内の蛍光物質が励起され、蛍光が発生する。レーザ光として超短パルスレーザ光が用いられているので、対物レンズ１５の焦点面に沿う極めて薄い領域において多光子励起効果により多光子蛍光が発生する。
発生した蛍光は対物レンズ１５によって集光されて同一光路を戻る途中において、ダイクロイックミラー２７により分岐され、バリアフィルタ２８を介して光検出器２９により検出される。
【００３４】
光検出器２９により検出された蛍光の強度情報と、該蛍光が検出された各時点におけるスキャナ１４の走査位置情報とが制御装置５に送られ、対応づけて記憶される。スキャナ１４により、所定の撮像領域にレーザ光がラスタスキャン方式に走査されることにより、２次元的な多光子蛍光画像が構築され、表示装置７に表示される。
【００３５】
本実施形態においては、所定の撮像領域にわたるレーザ光の走査が終了した場合、走査回数が設定された回数か否かが判断され（ステップＳ１１）、設定された走査回数が終了していない場合には、ステップＳ２に戻って処理が繰り返される。設定された走査回数が終了している場合には、処理が終了される。
【００３６】
このように、本実施形態に係る走査型レーザ顕微鏡１によれば、標本Ａの所定の撮像領域の１回の走査により多光子蛍光画像が取得される間、レーザ光の波長が同一波長に維持されるとともに、当該１回の走査の終了に同期して、その都度、レーザ光の波長が切り替えられ、かつ、その切り替えの都度に光軸ずれの補正と、強度の補正とが行われるので、異なる波長のレーザ光を照射して取得された複数の蛍光画像間において、画素ずれの問題および蛍光強度の不均一さの問題の発生を防止することができる。
【００３７】
したがって、このようにして得られた複数の蛍光画像を用いて線形回帰分析を行うことにより、異なる波長のレーザ光によってオーバーラップして発生した蛍光を、精度よくアンミキシングして分離することができるという利点がある。
【００３８】
なお、本実施形態に係る走査型レーザ顕微鏡１においては、超短パルスレーザ光を使用した多光子励起型のものを例示して説明したが、これに限定されるものではなく、連続レーザ光を用いた共焦点型の顕微鏡にこれを採用してもよい。
また、レーザ光の波長に関わらず、その強度が目標強度となるようにパワーモニタ１３により検出して音響光学素子９により調光することとしたが、これに代えて、レーザ光の波長と強度とを対応づけて記憶するルックアップテーブルを備えておき、パワーモニタ１３を用いることなくレーザ光の強度を一定に維持することにしてもよい。すなわち、レーザ光の強度は、図３に示されるように、波長に応じて変動する。したがって、この関係に基づき作成したルックアップテーブルにより、波長に関わらず、レーザ光の強度が一定になるように音響光学素子９への指令信号を設定することにすればよい。
【００３９】
また、音響光学素子９によりレーザ光のオンオフ、調光および波長選択を行うこととしたが、これに代えて、電気光学素子等の他の変調器を採用してもよい。
また、音響光学素子９によりレーザ光を調光して、標本Ａに照射するレーザ光の強度を波長にかかわらず一定に維持することとしたが、これに代えて、レーザ光の強度を調光することなく、取得される蛍光の強度を調節することにしてもよい。すなわち、図３に示される波長特性を有するレーザ光が標本Ａに照射されることにより、該レーザ光の強度に比例する蛍光が発生する。したがって、光検出器２９の受光感度を図３の波長特性に反比例する波長特性に従って調節することにより、レーザ光の波長に依存せず、複数の蛍光画像間での相対的な蛍光強度関係を補正した蛍光画像を取得することができる。
【００４０】
さらに、レーザ光の波長を変更する都度に、設定された光軸調節部１１の調節値や、音響光学素子９による調光の調節値を記憶する記憶部を備えておくこととしてもよい。このようにすることで、同一の波長のレーザ光を照射する際に、記憶部に記憶された調節値を使用することができ、アライメント調節やパワーモニタリングを再度行うことを不要として、観察に要する時間を短縮することができる。
【００４１】
また、本実施形態においては、対物レンズ１５の単一の焦点面に沿う多光子蛍光画像を、レーザ光の波長を切り替えて取得する場合について説明したが、これに加えて、対物レンズ１５の焦点面を光軸方向に走査させる駆動機構３０（図１）を設けることとしてもよい。この場合、対物レンズ１５の焦点面に沿う２次元的な多光子蛍光画像を光軸方向に平行間隔をあけて複数取得することができ、当該間隔を十分に小さくすることにより、標本Ａの３次元的な多光子蛍光画像を取得することができる。
【００４２】
この場合に、レーザ光の波長の切り替えタイミングを、光軸方向に沿う走査が１回行われる都度に設定することにより、波長の切替回数を最小限に抑えることができ、波長の異なるレーザ光を照射した複数の３次元の多光子蛍光画像を迅速に取得することができるという利点がある。
【００４３】
また、本実施形態においては、制御装置５が、光軸ずれ検出部１２からの検出信号を受信して、光軸調節部１１の調節値を算出することとしたが、これに代えて、音響光学素子９により選択される全ての波長と、該波長に対応する光軸調節部１１の調節値（光軸ずれ補正量）とを対応づけて制御装置５に接続された記憶部３１（図１）に記憶しておくこととしてもよい。この場合には、図４のステップＳ５′に示されるように、制御装置５は、音響光学素子９によりレーザ光の波長を選択すると、選択された波長に対応して記憶部内に記憶されている調節値を読み出して光軸調節部１１を制御することにすればよい。
【００４４】
また、本実施形態においては、波長の切替やアライメント調節を行った際にレーザ光が安定するまでの間、標本Ａにレーザ光が照射されることを防止するために、シャッタ１７によりレーザ光を遮断することとしたが、これに限定されるものではなく、シャッタ１７は必ずしも設けられていなくてもよい。
【図面の簡単な説明】
【００４５】
【図１】本発明の一実施形態に係る走査型レーザ顕微鏡の全体構成を示すブロック図である。
【図２】図１の走査型レーザ顕微鏡を用いた標本の観察動作を説明するフローチャートである。
【図３】図１の走査型レーザ顕微鏡に用いられるレーザ光源から出射されるレーザ光の強度の波長特性を示すグラフである。
【図４】図１の走査型レーザ顕微鏡の変形例による標本の観察動作を説明するフローチャートである。
【符号の説明】
【００４６】
Ａ  標本
１  走査型レーザ顕微鏡
５  制御装置（制御部：調光制御部：感度制御部）
８  レーザ光源
９  音響光学素子（調光部）
１１  光軸調節部
１２  光軸ずれ検出部
１３  パワーモニタ
１４  スキャナ（走査部）
１５  対物レンズ
２９  光検出器
【図１】
2008233883.tif 000003
【図２】
2008233883.tif 000004
【図３】
2008233883.tif 000005
【図４】
2008233883.tif 000006