(57)【要約】【課題】栽培期間が短く、発生に低温処理が必要なく、子実体の形質が良く、大型で、傘が発達して柄が殆どないか、あるいは柄が発達して傘が余り発達せず、よって流通段階での包装・運搬が容易であり、且つ食感の良いきのこが得られる菌株を提供すること。【解決手段】栽培期間、発生処理、傘の形状、柄の形状ともに所望のものに改良し得た、Pleurotus sp. AFRL 6562（FERM  P-21048）およびPleurotus sp. AFRL 6563（FERM  P-21049）菌株を含むバイリング・エリンギ新交配株を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
バイリングとエリンギの交配株であって、発生に１５℃以下の低温処理が必要なく、総栽培期間５０日以内に発生きのこの柄の太さが６０ｍｍ以上、長さが１００ｍｍ以上に生育するバイリング・エリンギ交配株。
【請求項２】
バイリングとエリンギの交配株であって、総栽培期間５０日以内に、柄の太さが２０ｍｍ以下、長さが２０ｍｍ以下で、傘がバイリング形状に発達したきのこに生育するバイリング・エリンギ交配株。
【請求項３】
菌株が、Pleurotus sp. AFRL 6562（FERM  P-21048）である、請求項１に記載のバイリング・エリンギ交配株。
【請求項４】
菌株が、Pleurotus sp. AFRL 6563（FERM  P-21049）である、請求項２に記載のバイリング・エリンギ交配株。
【請求項５】
請求項１、２、３または４に記載の菌株の培養および栽培により得られるきのこ。
【発明の詳細な説明】
【発明の背景】
【０００１】
発明の分野
本発明は、栽培期間が長くて発生に低温処理が必要な、傘が大きくて柄の小さいバイリングと、栽培期間が短くて発生に低温処理が必要でない、傘の発達より柄が発達するエリンギとの雑種であって、両者の中間型より優れた形質を有するきのこの発生が確実な実用的なきのこ菌株の創製に関する。
【０００２】
背景技術
バイリング（白霊グ；白霊側耳とも言う）は中国原産のヒラタケ属のきのこで、きのこ全体が純白色で、傘は手掌形から馬蹄形で径４〜１３ｃｍ、中央部は平または凸型、柄は長さ３〜４ｃｍ、側生または稀に偏生する。このきのこの栽培期間は長く、２２〜２６℃で９０日間程度培養後、１５日間程度の低温処理を行い、菌掻きをして生育させるが、生育には２０日間程要するので、総栽培期間は１２０日以上必要である（例えば、非特許文献１参照）。エリンギはヨーロッパ原産のヒラタケ属のきのこで、このきのこの傘は成長に伴い丸山型から平ら、更にロート状になり、径３〜１２ｃｍ、柄は長さ３〜１０ｃｍ、中心生で太い。このきのこの栽培期間は比較的短く、２３℃で３０〜４０日間程度培養後、菌掻きをして１５〜１７℃での生育に２０日間程要するだけなので、総栽培期間は５０〜６０日程度である（例えば、非特許文献２参照）。この両者の雑種の創製法は本発明者により既に見出されているが（特許文献１参照）、該方法により得られるきのこの形質並びに栽培特性は両者の中間的なものが大部分であった。
【特許文献１】特開２００６−６７９３０号公報
【非特許文献１】Proceedings of China (Guang Shui) symposium on standarization production for edible mushroom & production fair for rare mushroom (Pleurotus nebrodensis), Edible Fungi Society of China, 2005.
【非特許文献２】澤章三著、エリンギ−安定栽培の実際と販売・利用−、農山漁村文化協会、2001.
【発明の概要】
【０００３】
このような状況下にあって、本発明者は、バイリングとエリンギの交配株であって、両者の中間的な形質あるいはより優勢な形質という観点からのみではなく、商品設計の観点から優れた特性を概取り揃えた菌株の取得、即ち、栽培期間が短く、発生に低温処理を必要とすることなく、子実体の形質が良く、大型で、傘が発達して柄が殆どないか、あるいは柄が発達して傘が余り発達せず、よって、流通段階での包装・運搬が容易であり、且つ食感の良いきのこが得られる菌株の取得を主な目的とし、該目的に即して鋭意研究を重ねたところ、遺伝子操作を行わずに良い遺伝形質の菌株を得るには、まず、出来るだけ多くの良形質の親株の収集、数多くの交配、数多くの栽培試験が必要であり、更に、効率的な選抜が必要であろうと思考するに至った。よって、本発明者は、まず、栽培期間の短い株を得る為に、生長の早い株を選抜した。更に、低温処理の必要ない株を選抜する為に、発生処理で低温処理を行わず、また、出来るだけ良形質のものを得る為に、Ｆ１雑種（第一代雑種）の栽培試験である程度目的に近い形質の株を数株選抜し、それらの担子胞子由来の一次菌糸を多数得た。これらを生育の良好な１００分の１程度に絞り、その株間の交配を行い、交配株の栽培試験で実際に栽培期間が短くて、形質が良くて、柄が発達して傘の小さい株かあるいは傘が発達して柄の小さい株を選抜した。これら選抜株につき、上記と同様の方法で一次菌糸を分離・選抜し、前者のもの同士の交配あるいは後者のもの同士の交配を行ってＦ２交配株（第二代交配株）を多数得た。次いで上記と同様の方法で栽培試験を行い、目的の特性に近い株をそれぞれ１０株ずつ得た。更に、Ｆ２交配株の栽培試験を繰り返すことにより所望の形質が安定して得られることを確認して目的とする菌株を取得し、本発明を完成するに至った。
【０００４】
すなわち、本発明は、バイリングとエリンギの交配株であって、発生に１５℃以下の低温処理が必要なく、総栽培期間５０日以内に発生きのこの柄の太さが６０ｍｍ以上、長さが１００ｍｍ以上に生育するバイリング・エリンギ交配株を提供するものである。
このような本発明は、より具体的な態様として、上記特性を有するPleurotus sp. AFRL 6562（FERM  P-21048）バイリング・エリンギ交配株を提供するものである。
また、本発明は、バイリングとエリンギの交配株であって、総栽培期間５０日以内に、柄の太さが２０ｍｍ以下、長さが２０ｍｍ以下で、傘がバイリング形状に発達したきのこに生育するバイリング・エリンギ交配株を提供するものである。
このような本発明は、より具体的な態様として、上記特性を有するPleurotus sp. AFRL 6563（FERM  P-21049）バイリング・エリンギ交配株を提供するものである。
更にまた、本発明は、上記バイリング・エリンギ交配株のいずれかの培養および栽培により得られるきのこ産物を提供するものである。
【発明の具体的な説明】
【０００５】
菌株の収集
まず、バイリングとエリンギの多数の系統を収集する。種菌販売業者から購入したり、野生、栽培、あるいは市販のきのこの子実体組織より、純粋分離するとよい。また、入手したきのこから胞子を得、これより一次菌糸および二次菌糸を得ることも出来る。起源の異なるバイリング15系統およびエリンギ20系統を収集し、保存株とした。
【０００６】
収集系統の栽培試験
収集系統の特性を栽培試験により把握する。また、その際得られたきのこより一次菌糸を次項に示すようにして分離する。この特性試験で、生育が良く、発生期間がより短く、発生が確実で、きのこの形質が良い系統のものを選抜する。ここで、各3系統に絞り込んだ。
【０００７】
一次菌糸の分離・選抜
一次菌糸は、子実体から胞子を得て、単胞子を分離して得る。一次菌糸は顕微鏡で観察するとクランプが無いので、確認できる。１系統につき３，０００株程度分離するとよい。この一次菌糸の生育試験を行い、生育速度が早く、菌叢形態が正常で、菌糸密度の高い株を選抜する。この選抜により１％程度にまで絞り込む。即ち、１系統につき３０株程の一次菌糸を選抜する。
【０００８】
交配
選抜一次菌糸同士の交配を行う。具体的には、固体培地に二つの一次菌糸を１〜３ｃｍ程離して接種し、両菌糸が接触して１０〜５０日後に菌糸を顕微鏡で観察し、クランプが出来ていることを確認して、交配株を得る。交配株の生育試験を行い、生育速度が早く、菌叢形態が正常で、菌糸密度の高い株を選抜する。ここで１，０００株程度のＦ１交配株（第一代交配株）を選抜する。
【０００９】
栽培試験による選抜
選抜Ｆ１交配株約１，０００株の栽培試験を行い、培養２８日間で低温処理なしでも発生し、形質が良く、柄が発達して傘の小さい株かまたは柄が殆ど無くて傘の発達した株を選抜し、中間的な形状の株は廃棄する。その結果、柄が発達して傘の小さい前者の株を１０株、および、柄が殆ど無くて傘の発達した後者の株を５株得た。
【００１０】
これらの二次選抜株から、前述の一次菌系の分離・選抜の項で示すようにして担子胞子由来の一次菌糸を各１０００株得、生育試験で各１０株に絞り、前者由来の一核菌糸同士および後者由来の一核菌糸同士の交配を実施する。こうして得られたＦ２交配株を生育試験で、前者・後者とも各１０００株程度に絞込み、更に栽培試験を実施し、前者・後者ともそれらの形質が一段と明瞭に優れた株を各１０株選抜した。この選抜株の栽培試験を繰り返し、形質が安定して優れた株をそれぞれ1株ずつ選び、これらをAFRL 6562およびAFRL 6563と命名した。
【実施例】
【００１１】
選抜して得られた上記の２株に関して、これら菌株が目的とする商業生産向きの実用バイリング・エリンギ交配株であることを以下の試験により実証する。
菌株
本発明のバイリングとエリンギの交配株AFRL 6562および6563と、対照のバイリングおよびエリンギ菌株とを比較した。対照のバイリング菌株としては、中国新疆哈密地区天山菌業研究所の天山２号の母菌を購入して用いた。また、対照のエリンギ菌株としては、オランダのCentraalbureau voor Schimmelculturesの保存株CBS 100.82を用いた。
【００１２】
栽培試験
コットンハル：コーンブラン：麸皮：ホミニフィード：炭酸カルシウムを、乾物重量比で３９：３５：２０：５：１の割合で混合し、水分を６５重量％に調整した。これを８５０ｍｌのきのこ栽培瓶に５６０ｇずつ充填し、接種孔を空け、蓋をして、滅菌した（培地温度１２０℃達温後１時間）。
【００１３】
滅菌後、２０℃に冷却し、上記菌株より調整した種菌を接種した。温度２２〜２４℃、湿度６０〜７０％ＲＨ、暗黒の培養室で２８日間培養後（対照のバイリング菌株は６０日間培養後、３〜５℃の低温室で１４日間低温処理を行った後）、菌掻きを行い、温度１６〜１８℃、湿度８０〜９５％ＲＨ、白色灯下（照度２０〜４０  ｌｘ）の発生室で、芽出し、芽掻きを行い、生育時は（AFRL 6562と対照のエリンギ菌株は柄の長さが５ｃｍ程になってから）照度を５００〜１０００  ｌｘとした。なお、発生きのこは１本になるように芽掻きを行い、傘の縁の捲き込みが残っている時点で収獲を行った。この栽培試験の結果は表１に、また、収穫きのこの平均的な形質は表２にまとめて示してある。
【００１４】
対照の天山２号は、培養期間が２８日であると、低温発生処理後２ヶ月程経過しても全く発生が見られない。また、培養期間を６０日としても低温処理をしてないと発生が殆ど見られない。よって、培養期間を６０日間、低温処理を１４日間として試験を行った。このように試験した１６瓶の内１４瓶できのこが収穫された。平均収量は１２５ｇで、他の試験区のものに比べて少なかった。収穫期のこのきのこの形質はバイリング本来の形状で、肉質は硬すぎず軟らかすぎず、緻密で、食感のとても良いものであった。
【００１５】
対照のＣＢＳ  １００．８２は、培養期間が２８日でも発生室に移して１７日間で収獲でき、収量は１６１ｇと多かった。きのこの形状は傘が余り発達せず、柄の大きないわゆるエリンギ型で、柄の径が６０ｍｍ以上、長さが１００ｍｍ以上のきのこも２本得られたが、平均の柄の径は５１ｍｍであった。柄の肉質は硬めであった。
【００１６】
本発明のエリンギ型株のAFRL 6562は、２８日間の培養後、発生処理に移して１８日後には収獲可能であった。対照のエリンギ菌株であるＣＢＳ  １００．８２より１日長めであるが、総栽培期間は４６日間であり、目標の５０日以内に収まった。収量は１６３ｇ得られ、試験区の中では最高であった。また、きのこの形状はいわゆるエリンギ型で、柄の発達したきのこであるが、柄の径が対照のものより一段と太く、平均で６２ｍｍあった。柄の肉質はバイリングの傘肉より少し硬めであるが、対照のエリンギよりは軟らかく程よい硬さであった。
【００１７】
本発明のバイリング型株のAFRL 6563は、２８日間の培養後、発生処理に移して２２日後には収獲可能であった。対照のエリンギ菌株より５日長めであるが、総栽培期間は５０日間であり、目標内に収まった。収量は１３８ｇ得られ、エリンギ型のものより少いが、対照のバイリング菌株より多かった。また、きのこの形状はバイリング似であり、傘が発達して大きいが、より丸みが強く、傘色は少し茶味を帯びた灰色であった。柄は極小さく、付き方は中心生であった。傘の肉質は対照のバイリングと同様に硬すぎず軟らかすぎず、緻密で、食感のとても良いものであった。
【００１８】
以上の表１および表２の結果に基づく説明から明らかな様に、本発明のAFRL 6562およびAFRL 6563は、いずれも栽培期間が短く、発生に低温処理を必要とすることなく、また、発生きのこは形質が良く、大型で、傘が発達して柄が殆どないか（後者）、あるいは柄が発達して傘が余り発達していないものであり（前者）、よって、流通段階での包装・運搬が容易であり、且つきのこの食感の良い菌株であることから、商品設計の観点から両者とも商業生産向きの実用バイリング・エリンギ新交配株といえる。
【００１９】
菌学的性質
本発明菌株の菌学的性質を表3に示す。AFRL 6562およびAFRL 6563は、麦芽汁寒天培地およびサブロー寒天培地での生育および生育最適温度では対照のエリンギＣＢＳ  １００．８２に類似しており、ＰＤＡ培地およびツァペック寒天培地では対照のバイリング菌株（天山２号）とエリンギ菌株（ＣＢＳ  １００．８２）との中間的な生育度を示した。また、試験をした全ての菌株ともラッカーゼおよびチロシナーゼ活性を有し、胞子紋は白色であった。
【表１】
2008131890.tif 000002
【表２】
2008131890.tif 000003
【表３】
2008131890.tif 000004
【００２０】
本発明菌株の寄託
本発明の実用バイリング・エリンギ交配株Pleurotus sp. AFRL 6562および6563を、平成１８年１０月３日に独立行政法人  産業技術総合研究所  特許生物寄託センターに寄託した。これらの菌株は、それぞれFERM  P-21048およびFERM  P-21049として寄託されている。