(57)【要約】【課題】効率よく安定して安価に得られるエタノール及び乳酸並びにこれらの製造方法を提供する。【解決手段】伐採されたオイルパーム幹１０から採取した組成物である樹液を微生物で発酵してエタノールを製造する。また、オイルパーム幹から採取した樹液と樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を加水分解処理して得た単糖及びオリゴ糖の混合糖液とを混合し、微生物で発酵してもよい。一方、伐採されたオイルパーム幹から採取した組成物である樹液を微生物で発酵して乳酸を製造する。このとき、オイルパーム幹から採取した樹液と樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を加水分解処理して得た単糖及びオリゴ糖の混合糖液とを混合し、微生物で発酵してもよい。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
オイルパーム幹由来の樹皮以外の組成物を、微生物で発酵しエタノールを得ることを特徴とする、エタノールの製造方法。
【請求項２】
前記組成物が樹液からなることを特徴とする、請求項１記載のエタノールの製造方法。
【請求項３】
オイルパーム幹から採取した樹液と、樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を加水分解処理して得た単糖又はオリゴ糖と、を混合し、該混合物を微生物で発酵してエタノールを得ることを特徴とする、エタノールの製造方法。
【請求項４】
前記組成物又は樹液から分離して得た遊離糖を発酵させることを特徴とする、請求項１又は３に記載のエタノールの製造方法。
【請求項５】
前記微生物は、細菌及び酵母からなる群から選択される一種以上の微生物であることを特徴とする、請求項１又は３に記載のエタノールの製造方法。
【請求項６】
請求項１〜５に記載の何れかの製造方法により製造されたことを特徴とする、エタノール。
【請求項７】
オイルパーム幹由来の樹皮以外の組成物を、微生物で発酵し乳酸を得ることを特徴とする、乳酸の製造方法。
【請求項８】
前記組成物が樹液からなることを特徴とする、請求項７に記載の乳酸の製造方法。
【請求項９】
オイルパーム幹から採取した樹液と、樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を加水分解処理して得た単糖又はオリゴ糖と、を混合し、該混合物を微生物で発酵し乳酸を得ることを特徴とする、乳酸の製造方法。
【請求項１０】
前記組成物又は樹液から分離して得た遊離糖を発酵させることを特徴とする、請求項７又は９に記載の乳酸の製造方法。
【請求項１１】
前記微生物は細菌及び酵母からなる群から選択される一種以上の微生物であることを特徴とする、請求項７又は９に記載の乳酸の製造方法。
【請求項１２】
請求項７〜１１に記載の何れかの製造方法により製造されたことを特徴とする、乳酸。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エタノール及び乳酸並びにこれらの製造方法に関し、より詳細にはオイルパーム幹から高収率かつ安価に製造することができるエタノール及び乳酸並びにこれらの製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
パーム油は、世界で約３，５５０万トン／年生産され、そのうちの約８７％をマレーシアとインドネシアの２カ国で半々を占める東南アジアの代表的な農産物である（２００５年実績、アメリカ農務省統計資料による）。パーム油は大豆油等と比較し安価であることから、マーガリンや揚げ物用の油など食用に利用されるほか石鹸や化粧品など工業用途にも多用されている。
【０００３】
パーム油生産のために栽培されるオイルパーム（ｏｉｌ  ｐａｌｍ、学名：Ｅｌａｅｉｓ  ｇｕｉｎｅｅｎｓｉｓ、和名：アブラヤシ）は、生産性を維持するために、２０〜２５年の間隔で再植栽培が必要とされる。マレーシアの場合、１９８０年からの本格的なプランテーションにより現在年間約４万ヘクタールの再植栽培が行われるため約３０００万トンのパーム幹が伐採されている。近い将来には、これまでのプランテーション面積拡大の結果として、毎年約２０万〜２５万ヘクタールもの再植栽培が必要になると見込まれている。再植栽培による伐採オイルパームは、幹に薬物を注入して立ち枯れさせるか、伐採後プランテーション内で放置又は焼却処分しており、深刻な環境破壊につながることが懸念され、環境負荷を掛けない活用法の開発が求められている。
【０００４】
オイルパーム幹は他の木質系バイオマスと異なり、幹の大部分が維管束や維管束を取り巻く繊維質で構成されている。そのため、木材としての耐久性が不十分で、利用方法としては比較的強固な外皮を合板等の表面加工資材として利用する程度であり、その他の部分は未利用、廃棄されていることから、特に幹の内側部分の早急な有効利用法の開発が必要である。
【０００５】
一方、近年、石油資源の枯渇や地球温暖化問題の軽減方策として燃料用エタノールなど石油代替エネルギーや乳酸などバイオプラスチック原料の製造技術の開発が活発に行われている。特に燃料用エタノールに関しては、自動車燃料であるガソリンの代替燃料として注目を集めており、その需要は非常に大きい。
しかしながら、現在、燃料用エタノールの多くはトウモロコシ澱粉やサトウキビ汁等の食用農産物から製造されており、将来の人口増に伴う食用農産物需要の増大などにより、食用途とエネルギー用途間での競合が生じることが予想されている。そのため農作物の未利用部分、即ち、農産廃棄物から燃料用エタノールなどへの変換技術の開発が切望されているが、未だ技術開発は困難を極めている状況である。伐採されるオイルパーム幹は、産出される量、持続的なオイルパーム産業の発展及び環境負荷低減の観点からも非常に有望なバイオマス資源である。
【０００６】
このような背景から特許文献１には、伐採オイルパーム幹の繊維質を粉砕して、ヘミセルロース、セルロース、リグニンを含有する植物繊維粉末食品を製造する方法が開示されているが、特許文献１にはオイルパーム幹からエタノールや乳酸を製造する方法は開示されていない。
【０００７】
特許文献２には、オイルパームのセルロース繊維質廃棄物からなる飼料を製造する方法が開示されているが、この廃棄物としては、セルロース繊維質、空果房、果肉繊維等が使用されている。しかしながら、特許文献２にはオイルパーム幹からエタノールや乳酸を製造する方法は開示されていない。
【０００８】
特許文献３には、オイルパームの葉からなる繊維粉末を粉砕して、機能性食品を製造する方法が開示されている。しかしながら、特許文献３にはオイルパーム幹からエタノールや乳酸を製造する方法は開示されていない。
【０００９】
非特許文献１には、オイルパームの繊維質を加水分解することにより得られた糖からエタノールを生産する試みが報告されている。
【００１０】
【特許文献１】特開平８−２２１号公報
【特許文献２】特開平９−１６８３６７号公報
【特許文献３】特開２００５−２１８４２５号公報
【非特許文献１】H.H.Yeohら、“Fermentation of oil palm trunk acid hydrolysate to ethanol”、ASEAN Journal on Science and Technology for Development、２００１年、１８巻（１）、ｐ.１−１０
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
非特許文献１には、繊維質を加水分解することにより得られた糖からエタノールを生産することが報告されているが、加水分解効率が悪く、糖回収率が低いために実用化にはほど遠いという課題がある。
【００１２】
バイオプラスチック原料である乳酸の製造についても低コスト化が強く求められているが、現在はトウモロコシ澱粉等の高価な食用農産物から製造されており低コスト化は困難である。乳酸の低価格化のためには未利用農産物を原料とした製造技術の開発が必要である。しかしながら、これまでにオイルパーム幹を活用した乳酸を製造する技術に関する報告はない。
【００１３】
本発明は上記課題に鑑み、効率よく安定して安価に得られるエタノール及び乳酸並びにこれらの製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明者らは、鋭意研究を重ねたところ、オイルパーム幹の中心領域から外側領域にかけて各部から得られる樹液中の遊離糖組成及び含量が大きく異なり、内部ほど大量の水分と共に大量のグルコース等の遊離糖が存在していることを見出した。その知見を基にオイルパーム幹や伐採後のオイルパーム幹から得られる組成物である樹液などを原料とし、発酵法によりエタノール、乳酸をそれぞれ製造することに成功し、本発明を完成するに至った。また、オイルパーム幹から樹液を採取後、維管束を取り巻く繊維質を酵素処理し、得られる糖と樹液との混合液にすることで、微生物が発酵可能な糖質を大量に調製でき、微生物を用いてエタノール及び乳酸をそれぞれ製造することに成功し本発明に至った。
【００１５】
上記第１の目的を達成するために、本発明のエタノールの製造方法は、オイルパーム幹由来の樹皮以外の組成物を、微生物で発酵してエタノールを得ることを特徴とする。この組成物は、好ましくは樹液からなる。
本発明では、特に、オイルパーム幹から採取した樹液、又はその樹液と、樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を加水分解処理して得た単糖又はオリゴ糖と、を混合し、混合物を微生物で発酵しエタノールを製造することを特徴とする。
上記構成において、組成物又は樹液から分離して得た遊離糖を発酵させてもよい。微生物は、細菌及び酵母からなる群から選択される一種以上の微生物を用いることが好ましい。
本発明のエタノールは、上記製造方法の何れかを用いて製造される。
【００１６】
上記構成によれば、オイルパーム幹由来の組成物を原料として、エタノールが得られ、高収率で安価に安定にエタノールを製造することができる。
【００１７】
上記第２の目的を達成するために、本発明の乳酸の製造方法は、オイルパーム幹由来の樹皮以外の組成物を、微生物で発酵して乳酸を得ることを特徴とする。この組成物は、好ましくは樹液からなる。
本発明では、特に、オイルパーム幹から採取した樹液と、樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を加水分解処理して得た単糖又はオリゴ糖と、を混合し、混合物を微生物で発酵し乳酸を製造することを特徴とする。
上記構成において、組成物又は樹液から分離して得た遊離糖を発酵させてもよい。微生物は、細菌及び酵母からなる群から選択される一種以上の微生物を用いれば好適である。
本発明の乳酸は、上記製造方法の何れかを用いて製造される。
【００１８】
上記構成によれば、オイルパーム幹由来の組成物を原料として、乳酸が得られ、高収率で安価に安定に乳酸を製造することができる。
【発明の効果】
【００１９】
本発明のエタノールの製造方法によれば、オイルパーム幹由来の樹皮以外の組成物を原料として高収率で安価に安定にエタノールを製造することができる。この製造方法で得られるエタノールは、石油代替エネルギーとしてガソリンへ混合してもよく、エチルターシャリーブチルエーテルのようなガソリン添加剤、その他エチレンなどの化学原料としても用いることができるだけでなく、食品や食品添加物として、ビール、蒸留酒その他の酒類、清涼飲料、漬物、醤油等の製造や、医薬品や医薬部外品等の製造にも利用することができる。
【００２０】
本発明の乳酸の製造方法によれば、オイルパーム幹由来の樹皮以外の組成物を原料として高収率で安価に安定に乳酸を製造することができる。この方法で得られる乳酸は、生分解性プラスチックであるポリ乳酸の原料としての利用だけでなく、食品添加物として、ビール、蒸留酒その他の酒類、清涼飲料、漬物、醤油等の製造や、医薬品や医薬部外品等の製造にも利用することができる。
【００２１】
上記何れの製造方法においても、従来廃棄物としてしか扱われなかった伐採オイルパーム幹の樹皮以外の組成物を原材料とし、高収率、安価にエタノール、乳酸をそれぞれ製造できるばかりでなく、伐採オイルパーム幹に対する資源価値を高め、持続的なオイルパーム産業の確立と環境負荷の低減化が可能となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
以下、図面を参照しながら本発明を実施するための最良の形態について説明する。
本発明のエタノールの製造方法及び乳酸の製造方法は、何れもオイルパーム幹又は伐採されたオイルパーム幹から採取した樹皮以外の組成物を原料とし、この原料を微生物で発酵させてエタノール又は乳酸を得ることを特徴としている。組成物は、オイルパーム幹又は伐採されたオイルパーム幹から採取又は抽出した樹液や繊維質の組成物からなる。先ず、本発明のエタノールの製造方法及び乳酸の製造方法で使用するオイルパーム幹と、このオイルパーム幹由来の組成物に関して説明する。以下の説明においては、樹皮以外の組成物を単に組成物と呼ぶことにする。
【００２３】
本発明ではオイルパーム幹を材料又は原料とする。若木、成木、老木の何れも適用可能ではあるが、とくには、オイルパーム果実生産性が落ちたオイルパーム幹又は２０年以上経過したオイルパーム幹、さらには伐採されたオイルパーム幹が好ましい。また、樹齢が若く、オイルパーム果実生産性があっても再植栽培や計画的な栽培のために伐採されたオイルパーム幹又は病害虫により伐採を余儀なくされるオイルパーム幹でもよく、樹液及び繊維質などからなる組成物を採取可能なオイルパーム幹であれば何れでも構わない。
【００２４】
オイルパーム幹から樹液などの組成物を採取する手法として、物理的な圧搾、粉砕、乾燥、及び遠心分離、水蒸気を伴う加熱、加水、有機溶媒による抽出法を使用することができる。化学的な処理を施し、樹液を採取し易くしてもよい。特に、伐採オイルパーム幹を粉砕後、物理的に圧搾して樹液や繊維を得るのが好ましいが、採取可能であれば何れの方法を採用しても構わない。
【００２５】
樹液の採取は、伐採後すぐに樹液の採取を行うのが好ましい。樹液に含まれる遊離糖の量及び／又は状態により、伐採後数ヶ月、好ましくは数週間、特に好ましくは数日間放置した後でもよい。冷凍、冷蔵、加温、蒸気処理、真空処理、化学的処理等の状態で保存されたオイルパーム幹から上記手法を採用して樹液を採取しても構わない。
【００２６】
図１(Ａ)は、樹液を採取するオイルパーム幹を軸方向に垂直な方向で切断した輪の斜視図であり、（Ｂ）は（Ａ）のＸ−Ｘ方向に沿う断面図である。
樹液を採取するオイルパーム幹１０は、図１に示すように、中心領域１１と中間領域１２と外側領域１３とからなる樹幹部分に領域区分される。最外側表面が樹皮１４である。オイルパーム幹１０の断面直径が３３ｃｍ程度の場合には、中心領域１１は中心軸から外方向に距離５〜８ｃｍ程度に亘る領域であり、中間領域１２は中心領域から外方向に距離５ｃｍ程度に亘る領域であり、樹皮１４の厚さは２〜３ｃｍ程度であり、残りが外側領域１３である。樹液などからなるオイルパーム幹１０由来の組成物を採取するには、オイルパーム幹１０の中心領域１１から採取することが好ましいが、オイルパーム幹１０の状況に応じて中心領域１１及び中間領域１２から採取してもよい。さらに、外側領域１３、中間領域１２及び中心領域１１から採取してもよい。
【００２７】
ここで、本発明においてオイルパーム幹から上記手法を用いて採取した樹皮以外の組成物である樹液や、樹液から分離や分離抽出して得た遊離糖、樹液を採取した後の維管束を含む繊維質残渣の何れか又はこれらの混合物を、水や有機溶媒等により抽出することで、残存している糖質を回収しても良い。その際、糖質が分解されない程度の条件により加熱、冷却、ｐＨの変動により抽出しても構わない。回収された繊維残渣から抽出した糖質は、既に採取した樹液と共に用いてもよい。
【００２８】
さらに、繊維質に残存している糖を回収した後、オイルパーム幹の維管束と維管束を取り巻く繊維質中に残存する糖質を加水分解で得た糖質を用いてもよい。即ち、図１に示すオイルパーム幹１０の中心領域１１、中間領域１２、外側領域１３に存在する維管束と維管束を取り巻く繊維質を用い、セルラーゼやヘミセルラーゼなどの酵素処理を施して加水分解を行い、単糖やオリゴ糖を得ることができる。
【００２９】
ここで、繊維質の状態によっては、上記酵素により直接加水分解処理を施してもよいが、酵素加水分解を施す前に最大限に酵素処理効果を得るために熱や化学薬品を用いた前処理を行うことが好ましい。具体的には、上記繊維質を硫酸、塩酸、硝酸その他の酸性又は水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アンモニア、尿素その他のアルカリ性の薬品と共に、常温で長時間処理するか又は高温度で１０分から２時間程度の反応時間で加熱処理を行うことが好ましい。
【００３０】
硫酸の場合を例にとって具体的に説明すると、硫酸濃度は０．１〜５％、好ましくは、０．５〜３％程度、加熱温度は１４０℃〜２３０℃、好ましくは、１６０℃〜２１０℃程度、反応時間は１〜２０分間、好ましくは、５〜１０分間程度である。これらの前処理は、オートクレーブなどを用いて行うことが好ましい。
【００３１】
前処理が終了次第、中和処理を行う。前処理物が酸性である場合には水酸化ナトリウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、尿素、アンモニアなどのアルカリ性の薬品で中和し、前処理物がアルカリ性である場合には塩酸、硫酸、硝酸などの酸性の薬品で中和すればよい。
【００３２】
中和処理後、中和された前処理物に酵素であるセルラーゼ及びヘミセルラーゼを添加し、放置又は撹拌しながらｐＨ４〜６程度、温度３５〜６０℃程度、１０〜１００時間程度という条件下で酵素加水分解反応させる。この酵素加水分解により得られる二次糖液には、セルロース、ヘミセルロース由来の糖であるグルコース、キシロース、アラビノース、ガラクトース、ラムノース、マンノースやこれらの成分からなるオリゴ糖が含まれる。
【００３３】
オイルパーム幹からの繊維質をより効率よく糖化処理を行う方法としては、酸やアルカリなどの化学薬品による加水分解処理を施しても、糖質を得ることが可能である。具体的には、硫酸、塩酸、硝酸その他の酸性又は水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アンモニア、尿素その他のアルカリ性の薬品を直接用いることができる。場合によっては、上記薬品と共に、常温で処理するか、高温度で１０分から１時間程度加熱処理を行っても糖を得ることができる。また上記処理条件以外でも、酸、アルカリ性薬品または高温、高圧などの条件を用いることで糖質を得ることが可能であれば処理条件になんら制限は無い。
【００３４】
上記処理の一例として、濃硫酸７０％、温度２０〜１００℃程度、反応時間は５分間〜１時間程度を挙げることができる。本処理方法はセルロース、ヘミセルロースから最大限に糖を回収する条件でもある。
【００３５】
上記加水分解処理によって、オイルパーム幹に含まれる繊維質中のセルロース、ヘミセルロースが加水分解され、五炭糖や六炭糖が生成される。次に、加水分解反応物を固液分離する。固液分離の方法は、ろ過や遠心分離などを用いることができる。エネルギー消費の小さいろ過を用いることが好ましい。固液分離したろ液には、セルロースおよびヘミセルロース由来の糖であるグルコース、キシロース、アラビノース、ガラクトース、マンノース等が含まれる。
【００３６】
このオイルパーム幹の繊維を加水分解することにより得られる糖液は、上記した樹液と一緒に、或いはそれぞれ別個に、窒素、リンを含む栄養源と後述する微生物を添加し、適切な温度、ｐＨ等の条件下で微生物を培養してアルコール発酵を行い、エタノールの製造を行ったり、乳酸発酵を行い乳酸を製造することができる。
【００３７】
オイルパーム幹の繊維懸濁液に直接セルラーゼやヘミセルラーゼ、そして後述する発酵微生物を両方とも加え、酵素加水分解と発酵とを同時並行的に行うこともできる。
【００３８】
オイルパーム幹から得られる樹液及び繊維の加水分解により得られる糖液は、最良の形態を得るために水分含量を調節するなどして糖濃度を調整することができる。具体的には、糖含有量５重量％以上から３０重量％の範囲が好ましいが、それ以下又はそれ以上の糖濃度でも微生物による発酵が行われれば何れの濃度範囲でも構わない。
【００３９】
オイルパーム幹からの組成物である樹液や繊維加水分解から得られる糖液は、最良の形態を得るためにｐＨを調整しても良い。ｐＨとしては、後述する微生物が生育可能な範囲内にある限り制限されないが、例えば４〜７．５、好ましくは５〜７．０に調整する。このｐＨの調整には、ｐＨ調整剤として通常使用されている塩酸、硫酸、酢酸、クエン酸などの酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、炭酸水素ナトリウム、アンモニアなどのアルカリ、又は、トリス塩酸塩、リン酸水素塩などの塩類の何れかを用いることができる。
【００４０】
必要に応じて、硫酸アンモニウムやリン酸水素アンモニウムなどの窒素塩類や、酵母エキス、コーンスティープリカー、ポリペプトン、肉エキス、カゼイン加水分解物、大豆抽出物等の培養補助成分やその他の任意成分を上記オイルパーム幹からの樹液及び糖液と併用して用いることもできる。その他、カリウム塩、ナトリウム塩、リン酸塩、マグネシウム塩、マンガン、亜鉛、鉄等の無機塩類が必要に応じて添加される。また、栄養要求性が付与されている微生物を用いる場合には、生育に要求される栄養物質を添加すればよい。必要であればペニシリン、エリスロマイシン、クロラムフェニコール、ネオマイシンなどの抗生物質類が添加されても良い。
【００４１】
栄養補助成分の一例として、酵母エキスを添加する場合、樹液１００重量％中に酵母エキス０．０１〜２重量％となる範囲に調整するとよい。この添加割合の範囲であれば、微生物の発酵を促進することができる。
【００４２】
次に、発酵の際に用いる微生物について説明する。
エタノール発酵の際に用いる微生物として、サッカロミセス属酵母、ザイモモナス属細菌などが挙げられる。乳酸発酵の際に用いる微生物として、ラクトバチルス属細菌、ストレプトコッカス属細菌などが挙げられる。これらの微生物に限らず、オイルパーム幹から採取、回収した樹液や糖液などの組成物から、エタノール、乳酸をそれぞれ発酵できる微生物であればよい。例えば、遺伝子組み換えを行った酵母や乳酸菌などの微生物でもよく、これらの微生物を用いることでエタノールや乳酸を効率的に生産させることができる。また、セルラーゼなどの加水分解酵素を生産する微生物、例えば、バチルス属細菌又はクロストリジウム属細菌などを使用しても構わない。
【００４３】
発酵する際の温度としては、２５℃〜４５℃付近の培養温度が好ましく、この温度範囲で微生物を効果的に発酵させることができる。微生物の種類に応じて、２５℃以下の低温域又は４０℃以上の高温域で培養、発酵させても構わない。その他の培養条件としては、用いる微生物に応じて、酸素濃度を制限した嫌気条件で培養することや好気的な条件で培養することが好ましい。
【００４４】
本発明のエタノールの製造方法によれば、オイルパーム幹由来の樹皮以外の組成物を原料として、高収率で安価に安定にエタノールを製造することができる。組成物としては、樹液や、樹液から分離や分離抽出して得た遊離糖、樹液を採取した後の維管束を含む繊維質残渣の何れか又はこれらの混合物を用いることができる。この製造方法で得られるエタノールは、石油代替エネルギーとしてガソリンへ混合してもよく、エチルターシャリーブチルエーテルのようなガソリン添加剤、その他エチレンなどの化学原料としても用いることができるだけでなく、食品や食品添加物として、ビール、蒸留酒その他の酒類、清涼飲料、漬物、醤油等の製造や、医薬品や医薬部外品等の製造にも利用することができる。
【００４５】
本発明の乳酸の製造方法によれば、オイルパーム幹由来の組成物を原料として、高収率で安価に安定に乳酸を製造することができる。この方法で得られる乳酸は、生分解性プラスチックであるポリ乳酸の原料としての利用だけでなく、食品添加物として、ビール、蒸留酒その他の酒類、清涼飲料、漬物、醤油等の製造や、医薬品や医薬部外品等の製造にも利用することができる。
【００４６】
上記何れの製造方法においても、従来廃棄物としてしか扱われなかった伐採オイルパーム幹を原材料とし、高収率、安価にエタノール及び乳酸を製造できるばかりでなく、伐採オイルパーム幹に対する資源価値を高め、持続的なオイルパーム産業の確立と環境負荷の低減化が可能となる。
【実施例１】
【００４７】
さらに、実施例を挙げて本発明を詳しく説明する。なお、実施例は本発明の範囲を何ら制限するものではない。
伐採後の直径が３２〜３３ｃｍのオイルパーム幹を、厚さ６．８〜７．０ｃｍでディスク状にスライスし、中心から樹皮１４に向かって中心領域１１、中間領域１２及び外側領域１３と約５ｃｍ間隔で３等分に切断した。最外部の樹皮１４を除いて、外側領域１３、中間領域１２、中心領域１１を、それぞれ大まかに粉砕して、ロータリー粉砕機によりさらに細かく粉砕を行い、オイルパーム幹粉砕物とした。ガラスフィルターを用いて領域毎のオイルパーム幹粉砕物を圧搾ろ過し、樹液を採取した。ろ過で採取した樹液の量は、中心領域１１の部分から約１４０ｃｍ3、中間領域１２の部分から約８０ｃｍ3、外側領域１３の部分から約４０ｃｍ3であった。
【００４８】
オイルパーム幹１０の各領域に含まれる水分を測定した。上記の細かく粉砕したオイルパーム幹粉砕物のおおよそ３〜５ｇを正確に秤量し、１００℃、２４時間加熱し乾固させた。乾固後のオイルパーム幹粉砕物を正確に秤量し、加熱乾燥前のオイルパーム幹粉砕物の重量から差し引くことで、水分重量を算出した。その結果、中心領域１１の重量に対して８３％、中間領域１２の重量に対して７５％、外側領域１３に対して６８％の水分含率を示し、オイルパーム幹１０には大量の水分が含まれることが分かった。
【００４９】
樹液を採取した後に、ガラスフィルター上に残った維管束を含む繊維部分の糖組成を調べるために、繊維は蒸留水にて洗浄後、７２％硫酸３０℃１時間、３％硫酸１２１℃１時間の処理により加水分解処理を行った。
【００５０】
各部分の樹液及び繊維部分の糖組成や糖含有量を、パルスドエレクトロケミカル検出器（ＨＰＡＥ−ＰＥＤ）法を用いた高速液体クロマトグラフィーにより測定した。分析条件としては、ダイオネックスＰＡ−１カラムを使用し、溶離液としては２％水酸化ナトリウム水溶液（０．６ｃｍ3／分、２８℃）を用いた。
【００５１】
表１は、伐採されたオイルパーム幹の各領域から得られた樹液の遊離糖組成と含量を示した図表である。オイルパーム幹の各領域から得られた樹液の遊離糖として、アラビノース、ガラクトース、グルコース、キシリトール、ラムノース、マンノースなどが含まれていた。中心領域１１の部分では、遊離糖が全体として９８ｇ／１０3ｃｍ3得られた。遊離糖の各成分量（組成比（％））は、グルコースが８６．９％で最も多く、以下、アラビノースが６．６％、マンノースが４．２％、ガラクトースが０．９％、キシロースが０．７％、ラムノースが０．４％であった。
【表１】
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【００５２】
中間領域１２の部分では、遊離糖が全体として６０．５ｇ／１０3ｃｍ3得られ、各成分量はグルコースが８６．２％で最も多く、以下、マンノースが５．１％、アラビノースが５％、キシロースが１．４％、ガラクトースが１．３％、ラムノースが０．８％であった。
【００５３】
外側領域１３の部分では、遊離糖が全体として２０．５／１０3ｃｍ3得られ、各成分量はグルコースが６５．７％で最も多く、以下、マンノースが１０．５％、アラビノースが９．３％、キシロースが７．２％、ガラクトースが４．８％、ラムノースが２．５％であった。
【００５４】
上記結果から、オイルパーム幹の各領域から得られた樹液の遊離糖は、中心領域１１、中間領域１２及び外側領域１３で、それぞれ、９８ｇ／１０3ｃｍ3、６０．５ｇ／１０3ｃｍ3、２０ｇ／１０3ｃｍ3となり、中心領域１１が最も多く、外側領域で最も少ないことが分かった。遊離糖は、オイルパーム幹の各領域の何れでも、グルコースが最も多く約６６％以上の組成であり、中心領域１１及び中間領域１２においては、８６％以上含有されていることが分かった。
【００５５】
表２は、遊離糖抽出後のオイルパーム幹繊維の各領域中に含まれる構成糖の組成とその含量を示した表であり、糖として、アラビノース、ガラクトース、グルコース、キシロースが含まれていることが分かる。中心領域１１の部分では、遊離糖が全体として幹繊維乾物重量１ｇ当たり０．８５ｇが得られた。遊離糖の各成分量は、グルコースが０．６１ｇで最も多く、以下、アラビノースが０．０２ｇ、ガラクトースが０．０２ｇ、キシロースが０．１９ｇであった。
中間領域１２の部分では、幹繊維乾物重量１ｇ当たり糖分が１．０４ｇ得られ、糖の各成分量は、グルコースが０．７６ｇで最も多く、以下、キシロースが０．２３ｇ、アラビノースが０．０３ｇ、ガラクトースが０．０２ｇであった。
外側領域１３の部分では、幹繊維乾物重量１ｇ当たり糖分が０．９７ｇ得られ、糖の各成分量は、グルコースが０．７５ｇで最も多く、以下、キシロースが０．２０ｇ、アラビノース及びガラクトースが、それぞれ、０．０１ｇであった。
【表２】
2008178355.tif 000004
【００５６】
これらの結果から、伐採オイルパーム幹の幹から得られる繊維は、中心領域１１、中間領域１２及び外側領域１３の各部分において、幹繊維乾物重量１ｇ当たり０．８５〜１．０４ｇ程度の遊離糖が得られ、何れの場合にもグルコースが主成分であった。
【００５７】
次に、樹液を得た後の繊維部分を蒸留水で洗浄した後、酵素による加水分解処理を行った。
最初に、繊維１．４ｇに５０ｍＭの酢酸緩衝液２０ｃｍ3を加えて懸濁液とした。この懸濁液に糸状菌トリコデルマ・リーシエ由来のセルラーゼ（ノボザイム）２０ユニットを添加し、５０℃に保持し、３日間酵素加水分解を行った。酵素加水分解で得た反応液はガラスフィルターにて不溶性残渣を除き、フィルターろ過を行い透明な糖溶液を得た。この糖溶液にはグルコースが含まれていた。糖溶液のグルコース濃度はテストキット(和光純薬製、グルコースＣＩＩ)を用いて測定し、オイルパーム幹繊維の重量に換算したところ、オイルパーム幹繊維１ｇ当たり０．２ｇのグルコースが得られることが分かった。なお、上記の酵素を添加しない場合には、グルコースの分離は認められなかった。
【００５８】
上記の伐採されたオイルパーム幹１０の中心領域１１から採取した樹液を用いて、実施例１の微生物によるエタノール発酵を行った。
具体的には、樹液中のグルコース濃度が５５ｇ／１０3ｃｍ3となるよう蒸留水を加えて調整し、この糖溶液に酵母エキス０．５重量％と硫酸アンモニウム０．２重量％とを加え、ｐＨを６．０に調整した後に、フィルターろ過滅菌を行い、酵母（酒類総合研究所製、サッカロミセス・セルビシエ協会７号）を植菌して、３０℃、静置条件で２４時間発酵を行った。培養後、培養液中に蓄積したエタノール濃度はガスクロマトグラフィー（島津製作所製、モデルＢＣ−２０１４）を用いて測定した。
【００５９】
（比較例１）
次に、実施例１に対する比較例１について説明する。
樹液に含まれる成分の酵母への発酵阻害の有無を検討するために、グルコース試薬（和光純薬製、０４１−００５９５、試薬特級）を用い、水で濃度を６０ｇ／１０3ｃｍ3とし、実施例１と同様の酵母エキス及び硫酸アンモニウムを添加してフィルターろ過滅菌を行い培地とし、実施例１と同様に酵母を植菌してエタノール発酵を行った。
【実施例２】
【００６０】
実施例１とは異なり、伐採されたオイルパーム幹１０の中心領域１１から調整した樹液と繊維の酵素加水分解物とを混合した原料を用いて、微生物によるエタノール発酵を行った。
ここで、繊維の酵素分解物は５０℃で一晩乾燥濃縮し、先に得られた窒素源を含む樹液で溶解し、フィルターろ過滅菌した後に、エタノール発酵試験に供した。その他の条件は実施例１と同じである。
【００６１】
実施例１及び２並びに比較例１の結果を説明する。
図２は、実施例１及び２並びに比較例１の発酵時間に対するグルコースの残存量とエタノールの生成量を示すグラフである。図において、横軸は発酵時間（時間）、左縦軸はグルコース残存量（ｇ／１０3ｃｍ3）、右縦軸はエタノール生成量（ｇ／１０3ｃｍ3）である。図中、白丸（○）、白三角（△）、白四角（□）プロットは、それぞれ、実施例１、実施例２及び比較例１における培養液中のグルコース残存量を示し、黒丸（●）、黒三角（▲）、黒四角（■）プロットは、それぞれ、実施例１、実施例２及び比較例１における培養液中に蓄積されるエタノール生成量を示している。
【００６２】
図２から明らかなように、実施例１の樹液を用いたエタノール発酵においては、培養約１２時間後にはグルコースの大部分が消費されており、２４時間後には培養液中にエタノールが３０ｇ／１０3ｃｍ3の濃度で蓄積した。この値は、グルコース濃度から計算されるエタノールの理論収率の１０７％に相当し、樹液に含有されるマンノースやガラクトース等のグルコース以外の糖もエタノールへ変換されているものと考えられる。２４時間後に蓄積されるエタノールの１時間当たりのエタノール生成効率も、１．２５ｇ／１０3ｃｍ3であった。これらの諸数値は、比較例１の発酵試験と同等であることから、実施例１においては、全く阻害を受けずにエタノール発酵することが分かった。
【００６３】
図２から明らかなように、実施例２の樹液と繊維の酵素加水分解物とを混合した原料による発酵においては、発酵開始時のグルコース濃度は６５ｇ／１０3ｃｍ3であり、２４時間以内にグルコースが消費されて、エタノールの生成が完了し、培養液中には３３ｇ／１０3ｃｍ3のエタノールが生成された。これは、グルコース濃度から算出されるエタノール生成の理論収率のほぼ１００％に相当し、エタノール生成速度も１時間当たり約１．３ｇ／１０3ｃｍ3と高く、効率良くエタノールを製造できることが分かった。
【実施例３】
【００６４】
実施例１のエタノール発酵に用いた同じ樹液を用いて微生物による乳酸発酵を行った。中心領域１１から採取した樹液を、樹液中のグルコース濃度が５５ｇ／１０3ｃｍ3となるよう蒸留水を加え調整した。この樹液を含む糖溶液に、酵母エキス０．５重量％と肉エキス０．２重量％と加え、ｐＨを７．０に調整した後、フィルター滅菌とろ過とを行い、乳酸菌（アメリカン・タイプカルチャー・コレクション製、ラクトバチルス・ラクティスＡＴＣＣ１９４３５株）を植菌し、３０℃に保持して所謂静置培養を４８時間行った。乳酸発酵後、培養液中に蓄積した乳酸濃度は、ポストカラムｐＨ緩衝化電気伝導度検出法を用いた高速液体クロマトグラフィー有機酸分析システム（島津製作所製、Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ）を用いた測定した。
【００６５】
（比較例２）
次に、実施例３に対する比較例２について説明する。
樹液に含まれる成分の酵母への発酵阻害の有無を検討するために、グルコース試薬（和光純薬製、０４１−００５９５、試薬特級）を用い、水で濃度を６０ｇ／１０3ｃｍ3とし、実施例３と同様の酵母エキス及び肉エキスを添加してフィルターろ過滅菌を行い培地とし、実施例３と同様に乳酸菌を植菌して、乳酸発酵を行った。
【実施例４】
【００６６】
伐採されたオイルパーム幹１０の中心領域１１から調整した樹液と繊維の酵素加水分解物とを混合した原料を用いた以外は、実施例３と同様にして乳酸発酵を行った。
ここで、繊維の酵素分解物は５０℃で一晩乾燥濃縮し、先に得られた窒素源を含む樹液で溶解し、フィルターでろ過した後に用いた。
【００６７】
実施例３及び４並びに比較例２の結果を説明する。
図３は、実施例３及び４並びに比較例２の発酵時間に対するグルコースの残存量と乳酸の生成量とを示すグラフである。縦軸は発酵時間（時間）、左縦軸はグルコースの残存量（ｇ／１０3ｃｍ3）、右縦軸は乳酸生成量（ｇ／１０3ｃｍ3）である。図中、白丸（○）、白三角（△）、白四角（□）プロットは、それぞれ、実施例３、実施例４及び比較例２における培養液中のグルコース残存量を示し、黒丸（●）、黒三角（▲）、黒四角（■）プロットは、それぞれ、実施例３、実施例４及び比較例２における培養液中に蓄積される乳酸生成量を示している。
【００６８】
実施例３の樹液を用いた乳酸発酵においては、培養４８時間後にはグルコースの大部分が消費されており、培養液中に乳酸が５０ｇ／１０3ｃｍ3の濃度で蓄積した。乳酸生成速度も１時間当たり約１．０４ｇ／１０3ｃｍ3であった。これらの結果は、対照試験である比較例２のグルコース培地での発酵試験とほぼ同等であった。
【００６９】
実施例４は、実施例３の樹液にさらに繊維の酵素分解物を混合した場合の乳酸発酵であるが、発酵開始のグルコース濃度は６５ｇ／１０3ｃｍ3であった。培養４８時間後にはグルコースが消費されて乳酸の生成が完了し、培養液中には５８ｇ／１０3ｃｍ3の濃度で乳酸が蓄積した。乳酸生成速度は１時間当たり約１．２ｇ／１０3ｃｍ3であり、比較例２の乳酸発酵の場合と同等であった。
【実施例５】
【００７０】
樹液から遊離糖を分離抽出するために、実施例１に記載の高速液体クロマトグラフィーを用いた糖分析で検出される糖の分取を行った。
図４は、実施例５の樹液に含まれる遊離糖の分離クロマトグラムを示す図である。図において、横軸は溶出時間（分）であり、縦軸は信号強度（ｍＡ）である。図４から明らかように、遊離糖中、溶出時間が約３２〜４４分前後のピークを示すフラクションであるグルコース１５が抽出できた。グルコース１５と同様に、その他のピークとして認められたフラクションもそれぞれ回収した。回収したグルコース溶液又は同様に回収したその他の遊離糖からなる溶液は、凍結乾燥を行った。このように適当なクロマトグラフィーを用いることで、容易に樹液中の遊離糖を分離回収することが可能であることが分かった。
【実施例６】
【００７１】
実施例１で得た樹液のみを用い、実施例１と同じ酵母を用いてエタノール発酵を行った。中心領域１１の部分から採取した樹液（グルコース濃度は５５ｇ／１０3ｃｍ3）に、実施例２で添加した窒素源を添加せず、ｐＨも調整を行わず、直接フィルターろ過滅菌を行い、実施例１と同様の酵母を接種し、同じ培養条件（３０℃、２４時間）でエタノール発酵を行った。
【００７２】
実施例６においては、上記培養液から実施例１で得られた結果とほぼ同様に、収率１００％でエタノールの蓄積を確認した。
【実施例７】
【００７３】
実施例１で得た樹液のみを用いて、乳酸菌による乳酸発酵を行った。中心領域１１の部分から採取した樹液（グルコース濃度は５５ｇ／１０3ｃｍ3）に実施例３で添加した窒素源を添加せず、ｐＨも調整を行わず、直接フィルター滅菌とろ過とを行い、実施例４と同様の微生物を接種し、同じ培養条件（３０℃、４８時間）で乳酸発酵を行った。
【００７４】
実施例７においては、上記培養液から実施例３で得られた結果とほぼ同様に、収率１００％で乳酸の蓄積を確認した。
【００７５】
上記実施例６及び７の結果から、樹液と実施例１及び３で使用した微生物種だけを用いることで、簡便に効率的にエタノール発酵を行ったり、乳酸発酵を行うことができることが分かった。
【００７６】
上記実施例によれば、大量に廃棄されている伐採オイルパーム幹又はその樹液等の組成物を用いて、安価で簡便にエタノール又は乳酸を製造できることを確認した。
【００７７】
本発明は、上記実施の形態に限定されるものではなく、特許請求の範囲に記載した発明の範囲内で種々の変形が可能である。オイルパーム幹から採取する原料は各種の処理を行うことができ、エタノール発酵や乳酸発酵に用いる培地やこれらの発酵に用いる酵母は、オイルパーム幹から得た原料やその形状に応じて適宜に選択することができ、それらも本発明の範囲内に含まれることはいうまでもない。
【産業上の利用可能性】
【００７８】
本発明は、主として大部分が廃棄されているパーム幹の中心部分を用い、安価かつ簡便に燃料用エタノール又はバイオプラスチック用乳酸を生産する技術の開発であり、化石資源消費量の低減化ならびに地球温暖化問題等の環境問題の解決を目指した、新規バイオマス産業の育成・発展に寄与するものである。また、東南アジアを中心とするパームオイル産業の一層の効率化、高収益化及び持続的発展にも大きく貢献すると考えられる。
【図面の簡単な説明】
【００７９】
【図１】（Ａ）は樹液を採取するオイルパーム幹を軸方向に垂直な方向で切断した輪の斜視図であり、（Ｂ）は（Ａ）のＸ−Ｘ方向に沿う断面図である。
【図２】実施例１及び２並びに比較例１の発酵時間に対するグルコースの残存量とエタノールの生成量を示すグラフである。
【図３】実施例３及び４並びに比較例２の発酵時間に対するグルコースの残存量と乳酸の生成量とを示すグラフである。
【図４】実施例５の樹液に含まれる遊離糖の分離クロマトグラムを示す図である。
【符号の説明】
【００８０】
１０：オイルパーム幹
１１：中心領域
１２：中間領域
１３：外側領域
１４：樹皮
１５：グルコースのピーク
【図１】
2008178355.tif 000005
【図２】
2008178355.tif 000006
【図３】
2008178355.tif 000007
【図４】
2008178355.tif 000008
【手続補正書】
【提出日】平成19年7月17日(2007.7.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
オイルパーム幹からエタノールを製造する方法であって、
（１）オイルパーム幹から樹皮を除去する工程と、
（２）樹皮が除去されたオイルパーム幹から樹液を採取する工程と、
（３）樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を酵素で加水分解する工程と、
（４）上記工程（２）で採取した樹液と上記工程（３）で得られた加水分解物を微生物で発酵する工程と、
を含むことを特徴とする、エタノールの製造方法。
【請求項２】
前記工程（３）と（４）を同時に行うことを特徴とする、請求項１に記載のエタノールの製造方法。
【請求項３】
前記オイルパーム幹から採取した樹液と、前記樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を加水分解処理して得た単糖又はオリゴ糖と、を混合し、該混合物を微生物で発酵してエタノールを得ることを特徴とする、請求項１に記載のエタノールの製造方法。
【請求項４】
前記組成物又は樹液から分離抽出して得た遊離糖を発酵させることを特徴とする、請求項１〜３の何れかに記載のエタノールの製造方法。
【請求項５】
前記微生物は、細菌及び酵母からなる群から選択される一種以上の微生物であることを特徴とする、請求項１〜３の何れかに記載のエタノールの製造方法。
【請求項６】
請求項１〜５に記載の何れかの製造方法により製造されたことを特徴とする、エタノール。
【請求項７】
オイルパーム幹から乳酸を製造する方法であって、
（１）オイルパーム幹から樹皮を除去する工程と、
（２）樹皮が除去されたオイルパーム幹から樹液を採取する工程と、
（３）樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を酵素で加水分解する工程と、
（４）上記工程（２）で採取した樹液と上記工程（３）で得られた加水分解物を微生物で発酵する工程と、
を含むことを特徴とする、乳酸の製造方法。
【請求項８】
前記工程（３）と（４）を同時に行うことを特徴とする、請求項７に記載の乳酸の製造方法。
【請求項９】
前記オイルパーム幹から採取した樹液と、前記樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を加水分解処理して得た単糖又はオリゴ糖と、を混合し、該混合物を微生物で発酵し乳酸を得ることを特徴とする、請求項７に記載の乳酸の製造方法。
【請求項１０】
前記組成物又は樹液から分離して得た遊離糖を発酵させることを特徴とする、請求項７〜９の何れかに記載の乳酸の製造方法。
【請求項１１】
前記微生物は細菌及び酵母からなる群から選択される一種以上の微生物であることを特徴とする、請求項７〜９の何れかに記載の乳酸の製造方法。
【請求項１２】
請求項７〜１１の何れかに記載の何れかの製造方法により製造されたことを特徴とする、乳酸。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
上記第１の目的を達成するために、本発明は、オイルパーム幹からエタノールを製造する方法であって、（１）オイルパーム幹から樹皮を除去する工程と、
（２）樹皮が除去されたオイルパーム幹から樹液を採取する工程と、（３）樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を酵素で加水分解する工程と、（４）上記工程（２）で採取した樹液と上記工程（３）で得られた加水分解物を微生物で発酵する工程と、を含むことを特徴とする。
特に、オイルパーム幹から採取した樹液、又はその樹液と、樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を加水分解処理して得た単糖又はオリゴ糖と、を混合し、混合物を微生物で発酵しエタノールを製造することを特徴とする。
上記構成において、好ましくは、組成物又は樹液から分離抽出して得た遊離糖を発酵させてもよい。微生物は、好ましくは、細菌及び酵母からなる群から選択される一種以上の微生物である。
本発明のエタノールは、上記製造方法の何れかを用いて製造される。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
上記第２の目的を達成するために、本発明は、オイルパーム幹から乳酸を製造する方法であって、（１）オイルパーム幹から樹皮を除去する工程と、（２）樹皮が除去されたオイルパーム幹から樹液を採取する工程と、（３）樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を酵素で加水分解する工程と、（４）上記工程（２）で採取した樹液と上記工程（３）で得られた加水分解物を微生物で発酵する工程と、を含むことを特徴とする。
特に、オイルパーム幹から採取した樹液と、樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を加水分解処理して得た単糖又はオリゴ糖と、を混合し、混合物を微生物で発酵し乳酸を製造することを特徴とする。
上記構成において、好ましくは、組成物又は樹液から分離抽出して得た遊離糖を発酵させてもよい。微生物は、好ましくは、細菌及び酵母からなる群から選択される一種以上の微生物である。
本発明の乳酸は、上記製造方法の何れかを用いて製造される。
【手続補正書】
【提出日】平成19年10月15日(2007.10.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
オイルパーム幹からエタノールを製造する方法であって、
（１）オイルパーム幹から樹皮を除去する工程と、
（２）樹皮が除去されたオイルパーム幹から樹液を採取する工程と、
（３）樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を酵素で加水分解する工程と、
（４）上記工程（２）で採取した樹液と上記工程（３）で得られた加水分解物を微生物で発酵する工程と、
を含むことを特徴とする、エタノールの製造方法。
【請求項２】
前記工程（３）と（４）を同時に行うことを特徴とする、請求項１に記載のエタノールの製造方法。
【請求項３】
前記オイルパーム幹から採取した樹液と、前記樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を加水分解処理して得た単糖又はオリゴ糖と、を混合し、該混合物を微生物で発酵してエタノールを得ることを特徴とする、請求項１に記載のエタノールの製造方法。
【請求項４】
前記組成物又は樹液から分離抽出して得た遊離糖を発酵させることを特徴とする、請求項１〜３の何れかに記載のエタノールの製造方法。
【請求項５】
前記微生物は、細菌及び酵母からなる群から選択される一種以上の微生物であることを特徴とする、請求項１〜３の何れかに記載のエタノールの製造方法。
【請求項６】
オイルパーム幹から乳酸を製造する方法であって、
（１）オイルパーム幹から樹皮を除去する工程と、
（２）樹皮が除去されたオイルパーム幹から樹液を採取する工程と、
（３）樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を酵素で加水分解する工程と、
（４）上記工程（２）で採取した樹液と上記工程（３）で得られた加水分解物を微生物で発酵する工程と、
を含むことを特徴とする、乳酸の製造方法。
【請求項７】
前記工程（３）と（４）を同時に行うことを特徴とする、請求項６に記載の乳酸の製造方法。
【請求項８】
前記オイルパーム幹から採取した樹液と、前記樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を加水分解処理して得た単糖又はオリゴ糖と、を混合し、該混合物を微生物で発酵し乳酸を得ることを特徴とする、請求項６に記載の乳酸の製造方法。
【請求項９】
前記組成物又は樹液から分離して得た遊離糖を発酵させることを特徴とする、請求項６〜８の何れかに記載の乳酸の製造方法。
【請求項１０】
前記微生物は細菌及び酵母からなる群から選択される一種以上の微生物であることを特徴とする、請求項６〜８の何れかに記載の乳酸の製造方法。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００１】
本発明は、エタノール及び乳酸の製造方法に関し、より詳細にはオイルパーム幹から高収率かつ安価に製造することができるエタノール及び乳酸の製造方法に関する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
上記第１の目的を達成するために、本発明は、オイルパーム幹からエタノールを製造する方法であって、（１）オイルパーム幹から樹皮を除去する工程と、
（２）樹皮が除去されたオイルパーム幹から樹液を採取する工程と、（３）樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を酵素で加水分解する工程と、（４）上記工程（２）で採取した樹液と上記工程（３）で得られた加水分解物を微生物で発酵する工程と、を含むことを特徴とする。
特に、オイルパーム幹から採取した樹液、又はその樹液と、樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を加水分解処理して得た単糖又はオリゴ糖と、を混合し、混合物を微生物で発酵しエタノールを製造することを特徴とする。
上記構成において、組成物又は樹液から分離抽出して得た遊離糖を発酵させてもよい。微生物は、好ましくは、細菌及び酵母からなる群から選択される一種以上の微生物である。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
上記第２の目的を達成するために、本発明は、オイルパーム幹から乳酸を製造する方法であって、（１）オイルパーム幹から樹皮を除去する工程と、（２）樹皮が除去されたオイルパーム幹から樹液を採取する工程と、（３）樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を酵素で加水分解する工程と、（４）上記工程（２）で採取した樹液と上記工程（３）で得られた加水分解物を微生物で発酵する工程と、を含むことを特徴とする。
特に、オイルパーム幹から採取した樹液と、樹液を採取した後のオイルパーム幹の繊維を加水分解処理して得た単糖又はオリゴ糖と、を混合し、混合物を微生物で発酵し乳酸を製造することを特徴とする。
上記構成において、組成物又は樹液から分離抽出して得た遊離糖を発酵させてもよい。微生物は、好ましくは、細菌及び酵母からなる群から選択される一種以上の微生物である。