(57)【要約】【課題】スチレン系重合体粒子などをはじめとするμmオーダーの大きさの粒子を煩雑な操作を行うことなく、容易に検出することを可能とする粒子の検出方法および粒子の検出装置であって取扱いが容易かつ小型化されたものを提供する【解決手段】下部に光反射体を備えた光透過性基板上に検体を配し、検体を配した基板に対して検体上部から光を照射し、反射した光によってみられる粒子の陰影を検体上部で確認することにより、検体中の粒子の検出が行われることを特徴とする粒子の検出方法および(A)下部に光反射体を備えた光透過性基板および(B)同軸落射照明が筒状体に取り付けられ、下端に10〜20倍の倍率を有する対物レンズを設けた筒状体よりなる粒子検出装置【選択図】    図１
2008076333.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下部に光反射体を備えた光透過性基板上に検体を配し、検体を配した基板に対して検体上部から光を照射し、反射した光によってみられる粒子の陰影を検体上部で確認することにより、検体中の粒子の検出が行われることを特徴とする粒子の検出方法。
【請求項２】
検体が、測定対象である親和性物質とこれに結合親和性を有する結合パートナーを担持した担体粒子との反応液であり、かつ照射される光が発光ダイオードである請求項１記載の粒子の検出方法。
【請求項３】
光透過性基板上で親和性物質とこれに結合親和性を有する結合パートナーを担持した担体粒子との反応が行われる請求項２記載の粒子の検出方法。
【請求項４】
(A)下部に光反射体を備えた光透過性基板および(B)同軸落射照明が筒状体に取り付けられ、下端に10〜20倍の倍率を有する対物レンズを設けた筒状体よりなる粒子検出装置。
【請求項５】
対物レンズの開口数が、0.2〜0.4である請求項４記載の粒子検出装置。
【請求項６】
さらに1.5〜2倍の倍率を有するエックステンダーレンズを備えたカメラが、対物レンズとは逆の筒状体端部に設けられた請求項４記載の粒子検出装置。
【請求項７】
厚み方向に部分的にエッジングしてくぼみ溝を形成した光透過性カバー板を、くぼみ溝を形成した方の面が光透過性基板側となるように配置することにより形成された粒子検出用セル。
【請求項８】
光透過性基板として、裏面に金属膜を形成したものが用いられる請求項７記載のセル。
【請求項９】
セル内部に、作用極および対極が配置され、そこにパルス電圧を印加することにより、測定対象である親和性物質とこれに結合親和性を有する結合パートナーとの結合反応が行われる請求項７または８記載のセル。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、粒子の検出方法および粒子検出装置に関する。さらに詳しくは、免疫ラテックス凝集反応に用いられるラテックス粒子などの検出に好適に用いられる粒子の検出方法および粒子検出装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
医療分野や生化学分野においては、例えば抗原抗体反応などの生物学的特異的反応により生成された反応物を検出して抗原や抗体の存在を検査することにより、病気の診断や解析が行われている。その一例として、測定対象である親和性物質およびこれと結合親和性を有する結合パートナーとの結合反応により生成された反応物を検出することにより、親和性物質の存在が検出、測定されている。
【０００３】
具体的には、抗原や抗体などの反応性物質をスチレン系重合体粒子などの担体に担持させて試薬とし、この試薬と測定試料である血液あるいは尿などを混合した反応液にパルス電圧を印加し、これにより促進される抗原抗体反応に伴って発生する担体粒子の凝集物(パールチェーン)を顕微鏡で観察することで、測定試料中に存在する目的物質の検出、測定を行う方法が提案されている。
【特許文献１】特開昭５９−１７３７６１号公報
【特許文献２】特許第３，３００，４９３号公報
【０００４】
しかるに、従来提案されている方法では、2〜3μm程度の大きさの担体粒子を検出する手段として顕微鏡を用いているため、少なくとも100〜1000倍に拡大観察が可能である生物顕微鏡などを用いる必要があった。かかる顕微鏡を用いた場合、対物レンズに検体を通過させるための光を送るためのミラー角度の調節、焦点の調整(フォーカシング)、視野絞りの調整などが必要であり、全体的に操作が煩雑であった。また、測定装置が大型であり、さらに高価であるため、大病院等ある程度の規模を有する病院であればともかく、開業医といった限られたスペースで診察行為を行う場合には必ずしも適さないものであった。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、スチレン系重合体粒子などをはじめとするμmオーダーの大きさの粒子を煩雑な操作を行うことなく、容易に検出することを可能とする粒子の検出方法および粒子の検出装置であって取扱いが容易かつ小型化されたものを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
かかる本発明の目的は、下部に光反射体を備えた光透過性基板上に検体を配し、検体を配した基板に対して検体上部から光を照射し、反射した光によってみられる粒子の陰影を検体上部で確認することにより、検体中の粒子の検出が行われることを特徴とする粒子の検出方法および(A)下部に光反射体を備えた光透過性基板および(B)同軸落射照明が筒状体に取り付けられ、下端に10〜20倍の倍率を有する対物レンズを設けた筒状体よりなる粒子検出装置よって達成される。
【発明の効果】
【０００７】
本発明に係る粒子の検出方法によれば、粒子の検出を粒子の陰影により行うものであるため、従来顕微鏡で粒子を確認する場合に必要とされた輝度よりも低い照明によって、明確な粒子像を検出することができるといったすぐれた効果を奏する。かかる粒子像は、従来の顕微鏡およびカメラを介してPCによる画像解析を行った場合と同等に検出される。また、測定対象である親和性物質とこれに結合親和性を有する結合パートナーを担持した担体粒子との反応は、熱の発生が小さいLEDを用いることで、反応液の蒸発や熱による粒子のブラウン運度が必要以上に活性化されることがなく、1〜2μｍ程度の大きさの比較的小さい粒子であってもパールチェインの形成妨害が回避され、結合反応および測定を同時進行で行うことが可能となる。さらに、本発明の粒子検出装置は、従来の顕微鏡を用いた検出装置に比べて小型化されており、さらには安価であるといった特徴を有する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
光透過性基板としては、光を透過する性質を有するものであればその材質は特に限定されず、例えばガラスやポリメチルメタクリレートによって代表される透明プラスチックなどが挙げられ、さらに基板上に電極が形成される場合には、絶縁性のものが用いられる。
【０００９】
光透過性基板は、その表面側方向、好ましくは垂直方向から照射された光を反射させるために、その下部に光反射体を備えたものが用いられる。具体的には、基板裏面の少なくとも一部に金属膜を形成した光透過性基板や光透過性基板下部に光反射部材平面部を平行して配置したものなどが挙げられる。光透過性基板下部に光反射部材平面部を平行して配置される態様としては、光反射部材としての金属板上に光透過性基板を静置する態様も含まれる。光反射部材としては、その少なくとも一部に平面部を有するものであれば、光反射部材そのものが金属製など光を反射する材質のもの、または光を反射しない材料の平面部に光を反射させる性質を有する金属膜などを形成させたもののいずれも用いられる。ここで、金属膜材料としては、金、白金、アルミニウム、クロムなど、好ましくは金、クロムが挙げられ、金属膜は基板または光反射部材平面上にメッキ法、蒸着法、箔貼り付け法など公知の方法により形成することができる。
【００１０】
検体としては、粒子を有するものであれば粉末状、懸濁液状のいずれであっても構わないが、取扱いの容易性から粒子を懸濁させた液体状のものが用いられ、例えば測定対象である親和性物質とこれに結合親和性を有する結合パートナーを担持した担体粒子との反応液などが挙げられる。親和性物質とこれに結合親和性を有する結合パートナーを担持した担体粒子との反応液としては、反応がすでに終了しているもののほか、光透過性基板上で反応を行っている状態のものも含まれる。また、粒子の大きさについても、特に限定されないが0.8μmの程度の大きさのものまで検出することができる。
【００１１】
ここで、親和性物質およびこれと結合親和性を有する結合パートナーとは、結合反応を構成することができるあらゆる物質の組み合わせをいう。すなわちある物質とある物質とを結合するとき、一方が親和性物質であり、他方は結合パートナーとなる。いずれも天然物質、人工的に合成された化合物のいずれであってもよく、例えば抗原と抗体、相補的な核酸双方、リガンドとレセプターなどの組み合わせが挙げられる。
【００１２】
検体は、光透過性基板上に配され、この検体上部から光透過性基板に対して好ましくは垂直に光が照射される。照射される光としては、発光ダイオード(LED)、ハロゲンランプなどの可視光が用いられ、好ましくはLED、さらに好ましくは白色のLEDが用いられる。ハロゲンランプを用いた場合には、装置が大型化してしまう上、熱の発生が大きいため、検体として親和性物質とこれに結合親和性を有する結合パートナーを担持した担体粒子との反応液が用いられる場合には、反応液の蒸発や熱による粒子のブラウン運度が活性化され、1〜2μｍ程度の大きさの比較的小さい粒子ではパールチェインの形成が妨害されるため好ましくない。この基板表面上部より照射された光は、光透過性基板の裏面に形成された金属膜あるいは検体下部に位置する光反射部材平面部によって全反射するが、検体中の粒子存在部分は、光が透過しないか、透過したとしても照射した光を全透過することがないため、少なくとも光の全反射はみられず、粒子の陰影を検体上部にて確認することができる。すなわち、粒子の陰影とは、粒子に照射された光が反射しない場合にみられる粒子の陰のことをいう。
【００１３】
ここで、粒子は通常1〜5μm程度の大きさを有するものであり、通常は確認が困難なため、10〜20倍の拡大レンズを用いて粒子の検出が行われる。これ以上の倍率のものを用いると、焦点深度が小さくなるため流路の高さを低くする必要があるが、流路の高さが低くなると、粒子が入りにくくなる上、セルを洗浄して使用する場合に流路内の洗浄がやりにくくなるので好ましくない。
【００１４】
ここで、焦点深度は対物レンズの開口数によっても決定される。開口数はこのほか分解能や像の明るさも決定し、開口数の数値が大きいほど対物レンズの分解能が高く、高解像で焦点深度の浅い像が得られる。従って、焦点深度を深くしようとすると解像度が悪くなる関係にある。かかる観点より、10〜20倍の対物レンズを用いた場合の開口数としては、0.2〜0.4が選択される。これ以下の開口数では、粒子の認識がしにくくなり、一方これ以上の開口数では、焦点深度が浅いために焦点の合わない粒子の陰影しか観察されず、正しい解析ができないため好ましくない。
【００１５】
かかる粒子の検出装置としては、図１に例示されるように(A)基板裏面に光反射体である金属膜３を形成した光透過性基板２または光反射体である光反射部材平面部と平行して配置された光透過性基板および(B)同軸落射照明５が筒状体４に取り付けられ、下端に10〜20倍の倍率を有する対物レンズ６を設けた直径20〜40mmの筒状体４よりなる粒子検出装置１が用いられる。同軸落射照明とは、筒状体の同軸上から光が照射される照明のことをいい、例えば筒状体の長軸方向に対して垂直照射された光５が、筒状体内部に設けられたハーフミラー７によって反射して、筒状体下部へ照射されるような照明などをいう。ここで、ハーフミラー７は、筒状体の長軸方向に対して照射された光を筒状体下部へ反射させるとともに筒状体下部から上部への光を透過する性質も有しているため、筒状体上部にて光反射体から再反射された光を確認することにより、検体中の粒子の存否を確認することができる。ここで、筒状体としては、光を透過しない材質のものが用いられ、その形状は円筒状に限らず、角筒状など中空筒状体であれば任意の形状のものを用いることができる。
【００１６】
この粒子検出装置には、さらに1.5〜2倍の倍率を有するエックステンダーレンズ９を備えたカメラ８を対物レンズ６とは逆の筒状体端部に設けることにより、さらに大きな粒子の画像を捉えることができる。カメラとしては、CCDカメラ、CMOSカメラなどを用いることができ、カメラで捉えられた画像は、目視での粒子の確認のほか、コンピューター(PC)に取り込み、粒子の寸法やその数を画像解析により測定することもできる。
【００１７】
この検出装置を用いての粒子の検出は、検体中の粒子の陰影を確認することにより行われる。このように粒子の陰影を確認することによって、検体中の粒子そのものは確認できない場合であっても、その凝集状態を含めて明確に把握することができる。粒子の陰影によって粒子の存在(状態)が容易に確認されるのは、光を反射するための金属膜等が、光透過性基板を介して検体に対して一定の間隔、例えば少なくとも0.2〜2mmを確保して設けられているためであると考えられる。かかる観点により、基板の厚さは、一般に約200〜2000μm、好ましくは約500〜1500μmの範囲に設定される。
【００１８】
また、検体の検出に当たっては、平面状の透過性基板そのものが用いられるほか、厚み方向に部分的にエッジングしてくぼみ溝を形成した光透過性カバー板を、くぼみ溝を形成した面が光透過性基板側となるように配置することにより形成した1〜5μm径程度の粒子検出用セルを用いることができる。かかる3〜30μmの高さを有する粒子検出用セル、例えば1.5μm径の粒子を検出する場合には、5〜9μm、好ましくは6〜7μmの高さ有する検出用セルが、3.0μm径の粒子を検出する場合には、6〜15μm、好ましくは8〜12μmの高さ有する検出用セルを用いることにより、検体液量を少量とするばかりでなく、1〜5μm径程度の大きさの粒子が、検体液内で重畳状態となることを回避することが可能となるため、特許文献３に開示されるような三次元情報を取得することなく、正確に粒子の検出を行うことができるといったすぐれた効果を奏する。セルには、光を反射するための金属膜を光透過性基板裏面に形成することが好ましい。
【特許文献３】ＷＯ  ２００４／１１１６４９号公報
【００１９】
ここで、測定対象である親和性物質とこれに結合親和性を有する結合パートナーを担持した担体粒子を検出するセルとしては、図２(a)に示される如く、光透過性基板２上に厚み10〜50μm程度の電極板１１，１１′を電極間距離が0.1〜1.0mmとなるように形成したものを用い、電極上をカバーガラス１２で覆うことにより検体を導入する流路１３を形成したもの(前記特許文献１〜２)かプラスチックフィルムで予めラミネートされているもの(下記特許文献４)あるいは(b)に示されるような厚さ0.1〜1.0μm程度の電極用金属薄膜１４，１４′を形成した光透過性基板２上に、3〜30μmの深さでエッジングしてくぼみ溝を形成した光透過性カバー板を、くぼみ溝を形成した面が光透過性基板側となるようにUV硬化樹脂などの公知の方法で貼りあわせることにより流路１３を形成した粒子検出用セル１０が用いられる。光透過性カバー板としては、光透過性基板と同様に光を透過する性質を有するものであればその材質は特に限定されず、例えばガラスやポリメチルメタクリレートによって代表される透明プラスチックなどが用いられる。
【特許文献４】特開２００３−７５４４１号公報
【００２０】
図２(a)の金属膜３以外の部分に示されるセルは、セル内で均一な親和性物質の特異的反応を効率よく行うためには、パールチェインが均一に形成される電場条件が必要不可欠であると考えられていたため、セル側面の対向性の精度を保持した条件で考案されたものである。その結果、セルの側面は電極であり、例えば特許文献４では電極の厚みが10〜50μmと記載されている。これに対して、1.5μmのラテックスビーズを用いる場合には、上述した如く流路の高さは5〜9μmが好ましく、新規なセルの開発が望まれていた。かかる観点から、本発明者が鋭意研究した結果、セルの側面の厚みと電極との関係についての新規な発明を完成したものが、図２(b)に示されるセルである。
【００２１】
ここで、電極用金属薄膜としては、ステンレス鋼、アルミニウム合金、銅合金、金など、好ましくは酸化しにくい材料、例えばSUS304などのステンレス鋼箔などが用いられ、スクリーン印刷法、メッキ法など公知の方法で薄膜が形成される。酸化しやすい材料は、酸化膜が形成されて絶縁されてしまうため、電圧降下によりパールチェイン化が起きにくくなり、親和性物質の結合反応に負の誤差が生じる。この場合、反応時の印加電圧を高く設定する必要があるが、高い印加電圧は反応液の電気分解を起こしやすくなり、所望の抗原抗体反応などが起こりにくくなるため好ましくない。このように電極を形成した透過性基板を用いることにより、基板上で親和性物質とこれに結合親和性を有する結合パートナーとの反応を直接行うことが可能となる。この場合にも、セルには光を反射するための金属膜３を光透過性基板裏面に形成することが好ましい。
【００２２】
また、図３に例示されるように、電極を複数対形成することで、光透過性基板上に複数のセル１０を形成させることもできる。図３に示されたセル１０は、図2(b)の断面図に示されるように、例えば幅0.5mm、長さ5mm、高さ7μmの空間を形成している。このように複数のセルを光透過性基板上に形成することにより、同一測定試料についての異なる反応あるいは同一反応について異なる測定試料を同時に検出することができる。各セル１０への反応液の導入は毛細管現象により行われ、各電極接続端子１５に、周波数10KHz以上、好ましくは200KHzの交流電圧を印加することにより、電極間に電界が形成される。
【００２３】
電極を形成したセル内での親和性物質とこれに結合親和性を有する結合パートナーを担持した担体粒子との反応を、抗原抗体反応を例として図４を用いて説明する。担体１００に、化学結合あるいは疎水結合などの手法により抗体１０１を担持した上で、これと検出対象である抗原を含む血清などの測定試料、好ましくはさらに10mM以上の塩を混合して反応液を調製する。本発明の担体粒子としては、ラテックスビーズ、炭素粉末、リポソーム、ゼラチン粒子、血球などが挙げられる。この反応液を、電極１０３，１０３間に形成されたセル内に滴下して、電極間に交流電圧を印加すると、ラテックスビーズ１００は静電誘導によって分極し、この分極によりラテックスビーズ１００はセル内の反応液１０５中で電界の方向に直鎖状に連結する。所定時間後電圧印加を停止すると、反応液(検体)中に抗原１０７が存在する場合には、抗原１０７を介してラテックスビーズ１００に担持された抗体１０１が結合して、電界の方向に直鎖状に整列(パールチェイン化)した状態を維持し、抗原が存在しない場合は、ラテックスビーズ１００が再分散する。このラテックスビーズ１００の整列状態を、本発明方法で確認することで抗原の存在の有無や量を測定することができる。かかる測定方法の原理自体は、前記特許文献１〜３に詳細に開示されている。
【００２４】
ラテックスビーズとしては、凝集反応に一般的に用いられているもの、例えばポリスチレン系ラテックス、ポリビニルトルエン系ラテックス、ポリメタクリレート系ラテックスなどが、好ましくはポリスチレン系ラテックスビーズが用いられる。また、官能基を有するモノマーの共重合によって、ラテックス粒子表面に-COOH、-OH、-NH2、-SO3等官能基を導入したラテックス粒子を用いることもできる。かかる官能基を有するラテックス粒子には、結合パートナーを化学的に結合させることができる。
【００２５】
担体粒子の平均粒径は、例えばラテックスビーズの場合、0.8〜5.0μm、好ましくは1.0〜3.0μm、さらに好ましくは1.0〜1.6μmのものが用いられる。平均粒径がこれより小さいと粒子の検出が難しくなり、一方これより大きいとパールチェイン化の後に電界を遮断した際、直鎖に並んでいた担体粒子が瞬時に再分散しにくく非凝集粒子を凝集粒子と誤認識する場合が多くなる。ここで、ラテックス粒子として好ましい平均粒径のものを用いると、パールチェインによる反応の促進効果とブラウン運動による反応促進効果の相乗効果が得られるようになる。
【実施例】
【００２６】
次に、実施例について本発明を説明する。
【００２７】
実施例１
図2(b)に示したセル(幅0.5mm、長さ5mm、高さ7μm)を用い、光透過性基板裏面にクロムメッキを施した流路に、径1.5μmのポリスチレンよりなるラテックスビーズ懸濁溶液(積水化学工業製品、固形分1％)を毛細管現象によって導入し、LED(光源量6000ルックス)を照射し、図１に示した検出装置(筒状体の外径30mm、長さ120mm、アルミ製、対物レンズの倍率20倍、開口数0.3)によって粒子の検出および輝度計(コニカミノルタ社製LS-110)を用いての反射輝度の測定が行なわれた。得られた画像は、図５に示される。ラテックスビーズが鮮明に確認され、また最大輝度は192 mcd、最小輝度は40 mcd、平均輝度は128.1 mcdであった。
【００２８】
実施例２
実施例１において、クロムメッキの代わりにアルミ箔が光透過性基板裏面に設けられたセルが用いられたところ、ラテックスビーズが鮮明に確認され、また最大輝度は254 mcd、最小輝度は44 mcd、平均輝度は173.7 mcdであった。
【００２９】
比較例１
実施例１において、クロムメッキが施されない光透過性基板が用いられたところ、最大輝度は59 mcd、最小輝度は20 mcd、平均輝度は36.2 mcdであった。また、ラテックスビーズは、LED照明の光源量を最大(光源量8700ルックス)にした場合であっても、図６に示されるように暗視野のため確認することができなかった。
【００３０】
比較例２
実施例１において、クロムメッキの代わりに白紙が光透過性基板裏面に設けられたセルが用いられたところ、最大輝度は69 mcd、最小輝度は25 mcd、平均輝度は41.9 mcdであった。またラテックスビーズは、LED照明の光源量を最大(光源量8700ルックス)にした場合に、図７に示されるように僅かに確認することはできたものの、鮮明な画像にはほど遠いものであった。
【００３１】
実施例３
0.1mgの抗HBsAgポリクローナル抗体(ABI社製ABHBS-0500)を1mLのグリシン緩衝液(GBS、pH8.2)に溶解し、径1.5μmのラテックスビーズ(積水化学工業製品、固形分1％)1mLを加えて37℃で2時間攪拌した後、遠心分離して上清を除去し、沈殿を0.5％牛血清アルブミンを含むグリシン緩衝液(0.5％BSA-GBS)2mLに懸濁させ、抗HBsAg抗体担持ラテックスビーズ懸濁液を調製した。
【００３２】
図2(b)に示したセル(幅0.5mm、長さ5mm、高さ7μm、電極厚さ0.1μm)を用い、光透過性基板裏面にクロムメッキを施した流路に、0.5％BSA-GBSで希釈調整した2.06IU/mLのHBs抗原液(NIBSC、00/588)2μLと調製されたHBsAg抗体感作ラテックスビーズ懸濁液2μLを混合したものを毛細管現象によって導入し、交流電圧(±10V、400KHz、矩形波)を30秒間印加した。印加終了後、図１に示した検出装置(筒状体の外径30mm、長さ120mm、アルミ製、対物レンズの倍率20倍、開口数0.3)によって粒子の検出が、CMOSカメラを介した画像のPC処理(画像解析ソフト)による計測および目視による計測とによって行われた。
【００３３】
実施例４
実施例３において、クロムメッキの代わりにアルミ箔が光透過性基板裏面に設けられたセルが用いられた。
【００３４】
比較例３
実施例３において、クロムメッキが施されない光透過性基板が用いられたところ、暗視野のため目視およびPC(画像解析ソフト)のいずれにあっても全くカウントができなかった。
【００３５】
比較例４
実施例３において、クロムメッキの代わりに白紙が光透過性基板裏面に設けられたセルが用いられた。暗視野のため、目視によるカウントはできなかった
【００３６】
以上の実施例３〜４および比較例４で得られた結果は、次の表に示される。
表
粒子の凝集数(個)            
1     2     3     4     5     6   粒子総数 凝集率(％)
実施例３
コンピューター   556     69     11      3      2      0      641      13.26
目視             569     72     11      3      1      0      656      13.26
実施例４
コンピューター   592     85     21      5      0      0      703      15.79
目視             587     87     18      5      0      0      697      15.78
比較例４
コンピューター     2      0      3      2      0      1        8      75.00
【産業上の利用可能性】
【００３７】
本発明に係る粒子の検出方法および粒子の検出装置は、非凝集粒子、凝集粒子またはこれらの粒子の検出を容易に行うことを可能とする。また、測定対象である親和性物質の測定にあたっては、大病院のみならず開業医など限られたスペースで診察行為を行う場合にも、免疫反応(抗原抗体反応)や遺伝子反応などの担体粒子の凝集反応を利用した反応を短時間かつリアルタイムに観察することができるため、病気の診断などに有効に用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】本発明にかかる粒子の検出装置の一例を示す図である
【図２】本発明で用いられるを粒子検出用セルの一例(a)および他の例(b)を示す電極長手方向中心線断面図である
【図３】電極を複数形成した光透過性基板の一例を示す図である
【図４】電極を形成したセル内における抗原とこれに対する抗体を担持した担体粒子との反応を示す図である
【図５】実施例１で得られた粒子確認画像を示す図である
【図６】比較例１で得られた粒子確認画像を示す図である
【図７】比較例２で得られた粒子確認画像を示す図である
【符号の説明】
【００３９】
１      粒子検出装置
２      光透過性基板
３      金属膜
４      筒状体
５      光
６      対物レンズ
７      ハーフミラー
８      カメラ
９      エックステンダーレンズ
１０    セル
１１    電極板
１２    カバーガラス
１３    流路
１４    電極用金属薄膜
１５    電極接続端子
１００  担体
１０１  抗体
１０３  電極
１０５  反応液(検体)
１０７  抗原
【図１】
2008076333.tif 000003
【図２】
2008076333.tif 000004
【図３】
2008076333.tif 000005
【図４】
2008076333.tif 000006
【図５】
2008076333.tif 000007
【図６】
2008076333.tif 000008
【図７】
2008076333.tif 000009