(57)【要約】【課題】塗布均一性、塗布形状のバラツキの少ない安定した形状で、高精度に生物活性物質を塗布できる生物活性物質の方法を提供することを目的とする。【解決手段】基板４に溶液を塗布する塗布部材１であって、内部に毛細菅流路９を有する突起部と、基板４に対向し突起部１５内の毛細菅流路９中からの溶液がメニスカスを形成する突起部１５先端の第１の基準面８と、突起部１５を包囲し、第１の基準面８より更に基板方向に突出して基板４に接する第２の基準面６を有する支持部１４と、を備え、支持部１４は、基板４に接して当該基板とともに突起部１５周辺に閉空間を形成するとともに、毛細菅流路９に毛細菅力を発生するため当該閉空間に通じる空気穴１６とを有する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
基板に溶液を塗布する塗布部材であって、
内部に毛細菅流路を有する突起部と、
前記基板に対向し前記突起部内の毛細菅流路中からの溶液がメニスカスを形成する突起部先端の第１の基準面と、
前記突起部を包囲し、前記第１の基準面より更に前記基板方向に突出して前記基板に接する第２の基準面を有する支持部と、を備え、
前記支持部は、前記基板に接して当該基板とともに前記突起部周辺に閉空間を形成するとともに、前記毛細菅流路に毛細菅力を発生するため当該閉空間に通じる空気穴とを有することを特徴とする塗布部材。
【請求項２】
前記第１の基準面は、略円形状又は矩形状であることを特徴とする請求項１に記載の塗布部材。
【請求項３】
前記第１の基準面の面積と基板との空隙に形成される液体メニスカスの容積にて、塗布すべき溶液量を決定することを特徴とする請求項１に記載の塗布部材。
【請求項４】
前記第１の基準面を前記基板の下側に配置して溶液を塗布することを特徴とする請求項１に記載の塗布部材。
【請求項５】
基板に溶液を塗布する塗布方法であって、
内部に毛細菅流路を有する突起部を前記基板に対し所定の間隙を保持して設置し、
前記毛細菅流路より塗布すべき溶液を供給し、
前記突起部端面と前記基板との隙間にて液体メニスカスを形成し、
前記形成される液体メニスカスの容積にて所定量の溶液を前記基板に塗布することを特徴とする塗布方法。
【請求項６】
前記第１の基準面を前記基板の下側に配置して溶液を塗布することを特徴とする請求項５に記載の塗布方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生物活性物質を基板上に塗布する塗布部材及び塗布方法に関し、バイオチップの製造技術、基板上への生物活性物質の塗布技術を提供する。
【背景技術】
【０００２】
従来の生物活性物質の塗布技術としては、例えば、特許文献１に示す方法があった。この方法では、先端に溶液のメニスカスを形成できるようにしたピンを用い、ピンを基板に近づけた状態で、ピンに衝撃を与えることで、基板に生物活性物質の溶液を付着させる。
別の方法としては、スポッティング法という方法がある。この方法は、先端が鋭利に尖ったピンを生物活性物質の溶液に浸し、このピンを基板に近づけて、基板に溶液を塗布する方法である。
【０００３】
また別の方法としては、インクジェット技術を応用した方法がある。
この方法では、所定の形状のノズルが取り付けられた容器を用いる。容器及びノズル内には、生物活性物質の溶液を充填しておく。ノズル内に、加熱などにより気泡を発生させて、気泡の発生による体積の増加分だけ、ノズル先端から溶液を押し出すことができる。
【特許文献１】国際公開第９５／３５５０５号パンフレット
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
特許文献１に記載の生物活性物質の塗布方法では、ピン先端の形状のばらつきにより、液体のメニスカスの形状がばらつく。ピン先端の微細な形状を高精度に加工することは困難であるため、結果として、塗布される生物活性物質の溶液の形状がばらつくという問題があった。
【０００５】
また、スポッティング法ではピン先端が、基板との接触により変形することがあり、生物活性物質の塗布形状や塗布量にばらつきが生じるという問題があった。また、ピン先端に生物活性物質の溶液を付着させて、基板上に移動させる間の乾燥状態の制御が困難であり、乾燥状態のばらつきによる塗布形状のばらつきを生じるという問題もあった。
【０００６】
また、インクジェット技術を応用した従来の方法では、加熱により気泡を発生させるため、熱により変質する材料が使用できないという問題があった。更に、別の問題として円形状以外の形状で基板上に生物活性物質を塗布することに課題があった。液滴をノズル先端から吹出して基板に塗布する方法のため、吹出された液滴は溶液の表面張力により球形状になって空気中を飛行し、基板に付着する。そのため、基板上に円形状のパターンを形成するのは、容易であるが、円形状以外の形状を形成する場合、多数の液滴が基板上で重なるように塗布する必要がある。液滴が塗布される位置にはばらつきがあるため、液滴の重なり方にばらつきがあり、結果として塗布された生物活性物質のパターン内の塗布均一性が悪くなるという課題があった。
【０００７】
本発明は、従来の課題を解決するもので、安定した形状で、高精度に生物活性物質を塗布できる方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
従来の課題を解決するために、本発明の生物活性物質の塗布方法では、基準面と、前記基準面に凸形状に形成された塗布面と、前記基準面に凸形状に形成され、前記塗布面よりも前記基準面からの高さが高い支持面が設けられた構成の液体状材料の塗布部材を用いることを特徴としたものである。
【０００９】
また、本発明は、前記塗布面に、前記液体状材料を供給可能な供給口を設けた構成の塗布部材を用いることを特徴としたものである。
【００１０】
また、前記塗布面の少なくとも一部分が、前記液体状材料に対して、撥水性の性質を供えている請求項１または２に記載の塗布部材を用いることを特徴としたものである。
【００１１】
また、前記塗布部材の前記支持面と前記塗布面の高さの差により、前記基板上に塗布する前記液体状材料の塗布量を制御するように設計された請求項１から３に記載の塗布部材を用いることを特徴としたものである。
【００１２】
また、請求項１から４に記載の塗布部材の前記支持面を前記基板に接触させ、前記塗布面に形成された前記供給口より、液体状材料を、前記基板と前記塗布面の間に供給することにより、前記基板上に、前記液体状材料を塗布する方法を用いる。
【発明の効果】
【００１３】
本発明の生物活性物質の塗布方法によれば、生物活性物質を基板上に、所定の形状で所定の溶液量の生物活性物質を基板４に、均一性良く塗布する事ができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
以下に、本発明の生物活性物質の塗布方法及び塗布部材について実施の形態を図面とともに詳細に説明する。生物活性物質は、それ自体が液体であったり、希釈液と混合した溶液又は、生物活性物質の検査試薬を含むものであり、以降は、単に生活活性物質という。
【実施例１】
【００１５】
図１は、本発明の実施例１における生物活性物質を塗布するために用いる塗布部材の図を示すものである。図２は、図１に示す塗布部材１の詳細な構造を示す塗布部材１の断面図である。
【００１６】
図１、図２において、塗布部材１は、内部に毛細菅流路９を有する突起部１５の先端部の第１の基準面（Ａ面）８に開口する毛細菅流路９の開口端１０より、生活活性物質の溶液を吐出する。その際に、基板４に接して塗布部材１を支持する第２の基準面（Ｂ面）６は、第１の基準面（Ａ面）８より基板４の方向に突出して、第１の基準面（Ａ面）と基板４との間に液体メニスカスを形成するため、所定の隙間が形成される。
【００１７】
第１の基準面であるＡ面は、第２の基準面であるＢ面６を基板４に接触させた状態で、基板４と接触しないように設計されている。また、支持部１４の壁面に空気抜き穴１６が形成される。生物活性物質の塗布は、塗布部材１をＢ面６を矢印の方向から基板４に押し当てた状態で行う。塗布手順の詳細については後述する。
【００１８】
即ち、基板４に対し、塗布部材１の支持部１４となる第２の基準面６を接すると、第１の基準面を有する突起部の周辺に閉空間を形成する。そして、毛細菅流路９に対し、毛細菅力を発生させるために支持部１４の壁面に空気抜き穴１６が設けられる。
【００１９】
塗布部材１は、ベース面２上に寸法５だけ段差を設けて形成されたＢ面６と、ベース面２上に寸法７だけ段差を設けて形成されたＡ面８を持っている。また、塗布部材１には、貫通穴９が形成されており、貫通穴９の一方の端部１０は、Ａ面８に形成されており、他方の端部１１は、Ａ面８と反対側の面１２に形成されている。貫通穴９の他方の端部１１から、生物活性物質４を注入すると、貫通穴９を通って、Ａ面８に生物活性物質３が供給される構造になっている。ここで、寸法５は寸法７より大きな値になるよう構成されている。このような構造の塗布部材１を用いて、基板４上に生物活性物質３を塗布する方法について、図３を用いて詳細に説明する。
【００２０】
図３（ａ）は、基板４に塗布部材１を用いて生物活性物質注入前、図３（ｂ）は、生物活性物質注入後を示すものである。
【００２１】
生物活性物質を注入するには、まず、図３に示すように、基板４に塗布部材１のＢ面６を接触させる。寸法５と寸法７の差の寸法１３に対応する隙間が、Ａ面８と基板４の間に形成される。次に、図３に示すように隙間１３に、液体状の生物活性物質３を流し込む。
【００２２】
生物活性物質３は、基板４を上部に配置し、毛細管現象により、Ａ面８と基板４の間に充填されるが、Ａ面８の端部で、図９のような液面形状、即ち、液体メニスカスを形成して停止する。この液体メニスカスは、第１の基準面であるＡ面８の両端に形成されるが、Ａ面８と基板４の親水性により、図９に示す凹面状の他に凸面状に形成される場合もある。
【００２３】
以下この現象について説明する。図１０は、生物活性物質３の貯留層３４を含め、塗布部材１を用いて基板４に所定量の生物活性物質の塗布を説明するための図である。
【００２４】
貯留層３４に貯留された生物活性物質の液面は、基板表面とＡ面８の間を表面張力に起因する力により毛細菅流路開口端部まで進行する。端部ではＡ面８が毛細菅流路９の方向から折れ曲がって広がった形状になっており、液面をＡ面８と平行な方向に進行させる力がほとんど働かない。基板４側では、液面を進行させる力が働いているが、液面を後退させる力として、図１０の液高さ３３に対応する液体自体の重さによる力が働き、２つの力が釣り合って液面は端部で停止することになる。本実施例では、液高さ３３は、３ｃｍとした。
【００２５】
つまり、液高さ３３を一定に保っておけば、常に同じ形状の液面形状が形成されることになる。液高さ３３は、溶液の貯留槽３４の液面３５を一定し、基板の位置を固定しておくことで、一定に保てるため、塗布量がばらつくことはなく、常に均一な塗布を行うことができる。またＡ面８の形状、及び寸法５と寸法７は後述する加工方法により、高精度に加工すること可能なため、基板４上に塗布される生物活性物質３の形状を高精度に制御可能である。そのため、塗布量及び塗布形状を高精度に制御して塗布を行うことができる。
【００２６】
従って、第１の基準面であるＡ面の形状と、当該基準面Ａと基板４との間の隙間を所定の値に設定し液体メニスカスを形成することにより、所定の形状で所定の溶液量の生活活性物質を基板４に塗布することができる。
【００２７】
本実施例では、寸法５は、１ｍｍ、寸法１３は、０．０１ｍｍとなるように、図４に示す手順で塗布部材１を作製した。まず図４（ａ）でシリコン基板１５に、第１のレジスト１６を貼り付ける。シリコン基板１５の厚みは５ｍｍであり、第１のレジスト１６にはフィルム状レジストを用いた。次に、図４（ｂ）で第１のマスク１７を通して第１のレジスト１６を露光する。第１のマスク１７には図７に示すパターンが形成されている。図７の黒塗りした領域が光１９を遮光する遮光部１８である。次に、図４（ｃ）に示すように、現像を行い、マスク１７のパターンに対応した形状のレジストを形成する。次に、図４（ｄ）で基板１５をエッチングにより１．０ｍｍ加工した。そのため、寸法２４は、１．０ｍｍになる。エッチングは、リアクティブイオンエッチングにより行った。
【００２８】
次に、図４（ｅ）で第１のレジスト１６を除去し、図４（ｆ）で第２のレジスト２０を塗布する。塗布した第２のレジスト２０は、図４（ｇ）で第２のマスク２１を通して露光する。第２のマスク２１には、図８に示すパターンが形成されている。第２のレジスト２０を露光、図４（ｈ）で現像した後、図４（ｉ）でシリコン層２５を１０μｍ成膜する。この成膜工程で、シリコン層２５の膜厚が１０μｍ±０．１μｍとなるように、成膜と測定を繰り返す。最後に、図４（ｊ）で第２のレジスト２０を剥離することで、図４に示す形状のマスター基板２２を作製する。シリコン層は、スパッタリング成膜により形成した。
【００２９】
次に、図５（ａ）に示すように、マスター基板２２をステンレス製の型枠２３に入れて、型枠２３に対して、固定ジグ３１を用いて固定する。固定ジグ３１と型枠２３とマスター基板２２はそれぞれ接着剤にて固定した。固定後に、図５（ｂ）に示すように型枠２３内にシリコン樹脂２６を流し込み、真空装置内で脱泡した後、大気中でシリコン樹脂２６が硬化するまで放置する。シリコン樹脂２６が硬化した後、図５（ｃ）のように型枠２３を取り外し、シリコン樹脂２６を図５（ｄ）に示す切断線２９で切断して、マスター基板２２と固定ジグ３１を取り外す。
【００３０】
次に、図６（ａ）、（ｂ）に示すように、切断したシリコン樹脂２６を切断前の状態と同じように重ねて配置する。マスター基板２２が取り除かれているため、マスター基板２２と同じ形状の空洞３２が、シリコン樹脂２６の内部に形成されている。また固定ジグ３１の部分も取り除かれているため、空洞３２とつながった空洞２７が形成されている。図６（ｂ）及び（ｃ）に示すように空洞２７及び空洞３２内に溶解したプラスチック樹脂２８を流し込む。プラスチック樹脂２８の硬化後に、図６（ｄ）に示すようにシリコン樹脂２６を取り外し、図６（ｅ）のように空洞２７に対応するプラスチック樹脂部分を切断することで、マスター基板２２と同じ形状のプラスチック基板３０を作製した。プラスチック基板３０はマスター基板２２と同じ形状、寸法であるため、寸法１３は０．０１ｍｍである。最後にプラスチック基板３０に、貫通穴９と空気抜き穴１４を機械加工により作製し、塗布部材１として使用した。
【００３１】
塗布量は、Ａ面の面積に寸法１３を乗じた値になる。本実施例では、Ａ面は半径が１ｍｍの円形とし、寸法１３が、０．０１ｍｍとした。Ａ面の面積や寸法１３の誤差が塗布量の誤差になるため、塗布前に、複数作製した塗布部材１の中から、Ａ面の面積及び寸法１３を検査することで、誤差の小さいものを選択して使用した。
【００３２】
更に、塗布部材１を用いて、生物活性物質を塗布する場合、基板４の塗布面が下を向いた状態で塗布することが望ましい。図２に示すように、液体を上から下に落とす構造で塗布すると、溶液の液量に応じた圧力が塗布面Ａの端部１０にも加わってしまい、塗布面Ａの形状より広い範囲に溶液が塗布される場合がある。これに対して、図１０に示すように基板４の塗布面が下を向いた状態で塗布すれば、溶液は、毛細菅流路を形成する貫通穴９を毛細管現象の作用で昇っていき、寸法１３の隙間を満たす。Ａ面８の端部で、塗布部材の毛細菅流路である貫通穴９の方向は折れ曲がって広がった形状になっており、液面をＡ面８と平行な方向に進行させる力がほとんど働かない。基板４側では、液面を進行させる力が働いているが、液面を後退させる力として、図１０の液高さ３３に対応する液体自体の重さによる力が働き、２つの力が釣り合って液面は端部で停止することになる。そのため、液体がＡ面より広い範囲に塗布されることはなかった。
【００３３】
即ち、内部に毛細菅流路９を有する突起部の先端部の第１の基準面（Ａ面）８を基板４の下側に配置する。このように配置しても、毛細菅流路の開口端に作用する表面張力により基準面８と基板４との間で液体メニスカスを形成するが、毛細菅力と液面自体の重量とが釣り合った状態となるので、液体メニスカスが広がらず基準面Ａと基板４との隙間で決まる溶液量が塗布されることになる。
【００３４】
以上のような方法で、生物活性物質を塗布することで、パターン精度と塗布量のばらつきの小さい高精度な塗布が可能である。
【産業上の利用可能性】
【００３５】
本発明にかかる生物活性物質の塗布方法は、生物活性物質の塗布パターンの精度が高くまた、塗布量のばらつきが小さいという特徴を有し、バイオチップ、バイオセンサー用途で必要となる生物活性物質の塗布技術などとして有用である。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
【図１】本発明の実施例１における塗布部材の斜視図
【図２】本発明の実施例１における塗布部材の断面構造を示す図
【図３】本発明の実施例１における塗布部材を用いた塗布状態を示す図
【図４】本発明の実施例１における塗布部材のマスター基板の作製手順を示す説明図
【図５】本発明の実施例１における塗布部材のシリコン樹脂の鋳型の作製方法の説明図
【図６】本発明の実施例１における塗布部材の作製方法を説明するための図
【図７】本発明の実施例１における塗布部材の第１の露光用マスクのパターンを示す図
【図８】本発明の実施例１における塗布部材の第２の露光用マスクのパターンを示す図
【図９】本発明の実施例１における塗布方法の液体メニスカスを示す図
【図１０】本発明の実施例１における塗布部材の生物活性物質の貯留層を含め生物活性物質の塗布を説明するための図
【符号の説明】
【００３７】
１  塗布部材
２  ベース面
３  生物活性物質
４  基板
５  寸法
６  Ｂ面
７  寸法
８  Ａ面
９  貫通穴
１０  端部
１１  端部
１２  Ａ面８と反対側の面
１３  寸法
１４  空気抜き穴
１５  シリコン基板
１６  第１のレジスト
１７  第１のマスク
１８  遮光部
１９  光
２０  第２のレジスト
２１  第２のマスク
２２  マスター基板
２３  型枠
２４  寸法
２５  シリコン層
２６  シリコン樹脂
２７  空洞
２８  プラスチック樹脂
２９  切断線
３０  プラスチック基板
３１  固定ジグ
３２  空洞
３３  液高さ
３４  貯留槽
３５  液面
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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