(57)【要約】  【課題】骨格筋運動系の主要代謝物である乳酸の産生を抑制することができる一酸化窒素合成酵素阻害剤を主成分とする乳酸産生抑制剤およびそれを用いた乳酸産生抑制方法を提供すると共に、該一酸化窒素合成酵素阻害剤を成分として含有する鎮痛・消炎剤を提供すること。  【解決手段】この発明の乳酸産生抑制剤は、一酸化窒素合成酵素阻害剤を主成分として含有し、骨格筋運動系の主要代謝物である乳酸の産生を抑制することができる。また、この発明の鎮痛・消炎剤は、該一酸化窒素合成酵素阻害剤を含有するとともに、鎮痛・消炎作用成分を含有していることから、乳酸産生を抑制でき、かつ、鎮痛・消炎作用を有している。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一酸化窒素合成酵素阻害剤を主成分とすることを特徴とする乳酸産生抑制剤。
【請求項２】
請求項１に記載の乳酸産生抑制剤において、前記一酸化窒素合成酵素阻害剤が、N-ニトロ−L−アルギニンメチルエステル（L-NAME）、Ｎ−[（４Ｓ）-４-アミノ-５-[(２-アミノエチル)アミノ]ペンチル]−Ｎ’−ニトログアニジン  トリス（フルオロアセテート）塩、Ｌ−カナバニン硫酸塩（Ｌ−α−アミノ−γ−（グアニジノオキシ）酪酸硫酸塩）、ＮＧ，ＮＧ−ジメチルアルギニンジヒドロクロリド（ＡＤＭＡ）、ジフェニレンヨードニウムクロリド（ジベンジオドリウムクロリドＤＰＩ）、ＮＧ−メチル−Ｌ−アルギニン酢酸塩（Ｌ−ＮＭＭＡ）、Ｌ−Ｎω−ニトロアルギニン−２，４−Ｌ−ジアミノ酪酸アミドジ（トリフルオロアセテート）塩、スペルミジントリヒドロクロリド、スペルミジンテトラヒドロクロリド、ＮＧ−ニトロ−Ｌ−アルギニン（Ｌ−ＮNＡ）、ＮＧ−アミノ−Ｌ−アルギニン酢酸塩（Ｌ−ＮAＡ）、Ｎ５−イミノエチル−Ｌ−オルニチン（Ｌ−NIO）、アミノグアニジン、１，１−ジメチルグアニジン、L−チオシトルリン、１−フェニルイミダゾール、２−フェニルイミダゾール、３−フェニルイミダゾール、５−ニトロインダゾール、６−ニトロインダゾール、７−ニトロインダゾールまたは臭化水素酸Ｎω−ニトロ−Ｌ−アルギニンｐ−ニトロアニリドから選ばれる一酸化窒素合成酵素阻害剤であることを特徴とする乳酸産生抑制剤。
【請求項３】
一酸化窒素合成酵素阻害剤を用いて乳酸の産生を抑制することを特徴とする乳酸産生抑制方法。
【請求項４】
請求項３に記載の乳酸産生抑制方法において、前記一酸化窒素合成酵素阻害剤が、N-ニトロ−L−アルギニンメチルエステル（L-NAME）、Ｎ−[（４Ｓ）-４-アミノ-５-[(２-アミノエチル)アミノ]ペンチル]−Ｎ’−ニトログアニジン  トリス（フルオロアセテート）塩、Ｌ−カナバニン硫酸塩（Ｌ−α−アミノ−γ−（グアニジノオキシ）酪酸硫酸塩）、ＮＧ，ＮＧ−ジメチルアルギニンジヒドロクロリド（ＡＤＭＡ）、ジフェニレンヨードニウムクロリド（ジベンジオドリウムクロリドＤＰＩ）、ＮＧ−メチル−Ｌ−アルギニン酢酸塩（Ｌ−ＮＭＭＡ）、Ｌ−Ｎω−ニトロアルギニン−２，４−Ｌ−ジアミノ酪酸アミドジ（トリフルオロアセテート）塩、スペルミジントリヒドロクロリド、スペルミジンテトラヒドロクロリド、ＮＧ−ニトロ−Ｌ−アルギニン（Ｌ−ＮNＡ）、ＮＧ−アミノ−Ｌ−アルギニン酢酸塩（Ｌ−ＮAＡ）、Ｎ５−イミノエチル−Ｌ−オルニチン（Ｌ−NIO）、アミノグアニジン、１，１−ジメチルグアニジン、L−チオシトルリン、１−フェニルイミダゾール、２−フェニルイミダゾール、３−フェニルイミダゾール、５−ニトロインダゾール、６−ニトロインダゾール、７−ニトロインダゾールまたは臭化水素酸Ｎω−ニトロ−Ｌ−アルギニンｐ−ニトロアニリドから選ばれる一酸化窒素合成酵素阻害剤であることを特徴とする乳酸産生抑制方法。
【請求項５】
一酸化窒素合成酵素阻害剤を主成分とすることを特徴とする消炎剤または鎮痛剤。
【請求項６】
請求項５に記載の消炎剤または鎮痛剤において、前記一酸化窒素合成酵素阻害剤が、N-ニトロ−L−アルギニンメチルエステル（L-NAME）、Ｎ−[（４Ｓ）-４-アミノ-５-[(２-アミノエチル)アミノ]ペンチル]−Ｎ’−ニトログアニジン  トリス（フルオロアセテート）塩、Ｌ−カナバニン硫酸塩（Ｌ−α−アミノ−γ−（グアニジノオキシ）酪酸硫酸塩）、ＮＧ，ＮＧ−ジメチルアルギニンジヒドロクロリド（ＡＤＭＡ）、ジフェニレンヨードニウムクロリド（ジベンジオドリウムクロリドＤＰＩ）、ＮＧ−メチル−Ｌ−アルギニン酢酸塩（Ｌ−ＮＭＭＡ）、Ｌ−Ｎω−ニトロアルギニン−２，４−Ｌ−ジアミノ酪酸アミドジ（トリフルオロアセテート）塩、スペルミジントリヒドロクロリド、スペルミジンテトラヒドロクロリド、ＮＧ−ニトロ−Ｌ−アルギニン（Ｌ−ＮNＡ）、ＮＧ−アミノ−Ｌ−アルギニン酢酸塩（Ｌ−ＮAＡ）、Ｎ５−イミノエチル−Ｌ−オルニチン（Ｌ−NIO）、アミノグアニジン、１，１−ジメチルグアニジン、L−チオシトルリン、１−フェニルイミダゾール、２−フェニルイミダゾール、３−フェニルイミダゾール、５−ニトロインダゾール、６−ニトロインダゾール、７−ニトロインダゾールまたは臭化水素酸Ｎω−ニトロ−Ｌ−アルギニンｐ−ニトロアニリドから選ばれる一酸化窒素合成酵素阻害剤であることを特徴とする消炎剤または鎮痛剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、乳酸産生抑制剤に関するものであり、更に詳細には、一酸化窒素合成酵素阻害剤を主成分とする、骨格筋運動系の主要代謝物である乳酸の産生を抑制する乳酸産生抑制剤およびそれを用いた乳酸産生抑制方法に関するものである。また、この発明は、一酸化窒素合成酵素阻害剤を含有する消炎剤または鎮痛剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、加圧筋力トレーニングが、各種スポーツの筋力アップに用いられ、運動機能を促進させることが知られている。このトレーニングはまた、医療の分野でも応用され、高齢者の運動機能回復や各種のリハビリに応用され、骨折や靭帯の損傷、関節の炎症のリハビリはもとより、脳梗塞の後遺症によるマヒした神経や筋肉の回復手段として用いられている。
この加圧トレーニングは、ラバーベルト状の加圧用ベルトを上腕部・大腿部の基部に巻く事によって適正な圧を加えて運動する事により、加圧部位以降において適度に筋血流量を制限して運動を行う事である。筋中血液量を制限すると、運動によって生じる様々な効果が増幅されるという現象が起きる。血流を制限した状態で運動を行うと、軽い運動でも普段使用していない部分の筋繊維までもが広範囲に活動し、一方、筋肉の活動によって、筋肉内に溜まった乳酸などの代謝物は血流制限により、組織から排出されにくくなり、乳酸値が上昇すると考えられている。また、乳酸の蓄積の情報は脳に伝達され成長ホルモンの分泌を促進する。成長ホルモンは全身に作用されるため、運動を行った部位だけでなく全身の筋力アップにつながると推察されている。
【０００３】
一方、一酸化窒素 (Nitricoxide : NO) は、血管内皮細胞由来の内皮依存性弛緩因子
（endothelium-derivedrelaxing
factor, EDRF） として、血管平滑筋を弛緩させていることが1980年発表されて（非特許文献１）以来，急速に研究が進み，平滑筋の可溶性グアニル酸シクラーゼを活性化して細胞内サイクリックGMP を増量させ弛緩させることも明らかとなった（非特許文献２〜６）。またその後、NO合成酵素 (NOsynthase : NOS) の存在や遺伝子レベルまで解明され、循環器系や神経系、免疫系、消化器系、泌尿器系、呼吸器系、内分泌系などで種々の生理的機能や病態的機能に関与すると言われている（非特許文献７）。
しかしながら、加圧筋トレーニングの血流制限時には血管におけるNOの変化とともに運動機能の主体である骨格筋系にどのように影響を及ぼすかの関係は未だに明らかでない。
【非特許文献１】FurchgottR. F., ZawadzkiJ. V.: The obligatory role ofendothelial cells in therelaxation of arterialsmoothmuscle by acetylcholine,Nature.1980. 288:373-6
【非特許文献２】RapoportRM DrazninMB Murad F.: Endothelium-dependent relaxation in rataorta maybe mediated through cyclic GMP-dependent protein phosphorylationNature.1983. 306:174-6
【非特許文献３】ForstermannU MulschA Bohme E Busse R.:Stimulation of soluble guanylatecyclase by anacetylcholine-inducedendothelium-derived factor fromrabbit and canine arteries Circ. Res. 1986. 58:531-8
【非特許文献４】IgnarroLJ HarbisonRG Wood KS Kadowitz PJ: Activation of purifiedsoluble guanylatecyclase by endothelium-derived relaxingfactor fromintrapulmonary artery and vein:stimulation by acetylcholine bradykinin and arachidonic acid J. Pharmacol. Exp.Ther. 1986. 237:893-900
【非特許文献５】MulschA BohmeE Busse R.:Stimulation ofsoluble guanylate cyclasebyendothelium-derived relaxing factor from cultured endothelial cells Eur. J. Pharmacol.1987. 135:247-50
【非特許文献６】IgnarroLJ.: Biological actions andproperties ofendothelium-derived nitric oxide formedand released from artery and vein Circ. Res. 1989.65:1-21
【非特許文献７】Gold MEWood KS Byrns RE Buga GM Ignarro LJ.: L-arginine-dependentvascular smooth muscle relaxation and cGMP formation Am. J. Physiol.1990. 259:H1813-21
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
したがって、本発明者は、骨格筋系の働きに対するNOの関係を明らかにする目的で鋭意研究した結果、NOS阻害薬が、骨格筋運動系の主要代謝物である乳酸の産生を抑制することを見出して、この発明を完成した。
【０００５】
そこで、この発明は、一酸化窒素合成酵素阻害剤を主成分とすることからなる、骨格筋運動系の主要代謝物である乳酸の産生を抑制することができる乳酸産生抑制剤を提供することを目的としている。
【０００６】
また、この発明は、一酸化窒素合成酵素阻害剤を用いて、骨格筋運動系の主要代謝物である乳酸の産生を抑制することからなる乳酸産生抑制方法を提供することを目的としている。
【０００７】
さらに、この発明は、一酸化窒素合成酵素阻害剤を主成分とすることからなる消炎剤または鎮痛剤を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記目的を達成するために、この発明は、１つの形態として、一酸化窒素合成酵素阻害剤を主成分とすることからなる乳酸産生抑制剤を提供する。この乳酸産生抑制剤は、骨格筋運動系の主要代謝物である乳酸の産生を抑制することから、運動により疲労の起因となる乳酸が骨格筋中に産生することを防止することができる。したがって、この乳酸産生抑制剤は、骨格筋運動による疲労防止または疲労回復に有用である。
【０００９】
この発明は、同様に、一酸化窒素合成酵素阻害剤を主成分とする消炎剤または鎮痛剤を提供する。この発明に係る消炎剤または鎮痛剤は、骨格筋運動系の主要代謝物である乳酸の産生を抑制することから、運動による乳酸の蓄積を減少させることができ、乳酸蓄積による炎症または筋肉痛を防止もしくは緩和することができる、という利点がある。
【発明の効果】
【００１０】
この発明は、運動などによる筋肉の活動による乳酸などの代謝物の産生を抑制することから、筋肉内に溜まって血流を制限することによる疲労の予防ばかりではなく、疲労の回復を促進するという効果を有している。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
この発明に係る薬剤は、一酸化窒素合成酵素（NOS：Nitric Oxide Synthase）阻害剤を主成分としている。この発明で使用できる NOS 阻害剤としては、例えば、N-ニトロ−L−アルギニンメチルエステル（L-NAME）、Ｎ−[（４Ｓ）-４-アミノ-５-[(２-アミノエチル)アミノ]ペンチル]−Ｎ’−ニトログアニジン  トリス（フルオロアセテート）塩、Ｌ−カナバニン硫酸塩（Ｌ−α−アミノ−γ−（グアニジノオキシ）酪酸硫酸塩）、ＮＧ，ＮＧ−ジメチルアルギニンジヒドロクロリド（ＡＤＭＡ）、ジフェニレンヨードニウムクロリド（ジベンジオドリウムクロリドＤＰＩ）、ＮＧ−メチル−Ｌ−アルギニン酢酸塩（Ｌ−ＮＭＭＡ）、Ｌ−Ｎω−ニトロアルギニン−２，４−Ｌ−ジアミノ酪酸アミドジ（トリフルオロアセテート）塩、スペルミジントリヒドロクロリド、スペルミジンテトラヒドロクロリド、ＮＧ−ニトロ−Ｌ−アルギニン（Ｌ−ＮNＡ）、ＮＧ−アミノ−Ｌ−アルギニン酢酸塩（Ｌ−ＮAＡ）、Ｎ５−イミノエチル−Ｌ−オルニチン（Ｌ−NIO）、アミノグアニジン、１，１−ジメチルグアニジン、L−チオシトルリン、１−フェニルイミダゾール、２−フェニルイミダゾール、３−フェニルイミダゾール、５−ニトロインダゾール、６−ニトロインダゾール、７−ニトロインダゾールまたは臭化水素酸Ｎω−ニトロ−Ｌ−アルギニンｐ−ニトロアニリドから選ばれる一酸化窒素合成酵素阻害剤などが挙げられる。
【００１２】
この発明で用いられるNOS 阻害剤を医薬活性成分として含む鎮痛消炎剤は、通常使用されるものなら特に限定されないが、例えば、アスピリンならびにアスピリンアルミニウム等のその塩、サリチル酸ならびにサリチル酸ナトリウム等のその塩もしくはエテンザミド等のその誘導体、サザピリン、ジフルニサル、サルサレート、オルサラジン、スルファサラジン等のサリチル酸系鎮痛消炎剤；アルクロフェナク、フェンブフェン、アンフェナクナトリウム、ジクロフェナクナトリウム、メチアジン酸、トルメチンナトリウム、ケトロラクトロメタミン、フェンチアザク、モフェゾラク等のアリル酢酸系鎮痛消炎剤；インドメタシン、インドメタシンファルネシル、アセメタシン、マレイン酸プログルメタシン、スリンダク等のインドール酢酸系鎮痛消炎剤；エトドラク、アルミノプロフェン、イブプロフェン、ザルトプロフェン、ケトプロフェン、ナプロキセン、フェノプロフェンカルシウム、フルルビプロフェン、フルルビプロフェンアキセチル、プラノプロフェン、ロキソプロフェンナトリウム、カルプロフェン、ピルプロフェン、インドブフェン、チアプロフェン酸、オキサプロジン等のプロピオン酸系鎮痛消炎剤；メフェナム酸、エトフェナム酸、フルフェナム酸、トルフェナム酸、フルフェナム酸アルミリウム、フロクタフェニン、メクロフェナム酸ナトリウム、ロベンザリット二ナトリウム等のフェナム酸系鎮痛消炎剤；ピロキシカム、アンピロキシカム、テノキシカム、メロキシカム、ドロキシカム、ピボキシカム、イソキシカム、ローノキシカム、シンノキシカム、スドキシカム等のオキシカム系鎮痛消炎剤；アンチピリン、イソプロピルアンチピリン、アミノピリン、ジピロン、クロフェゾン、ケトフェニルブタゾン、スルピリン、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン等のピラゾロン系鎮痛消炎剤；アセトアミノフェン、フェナセチン等のパラアミノフェノール系鎮痛消炎剤；ナブメトン、グラフェニン、ブコローム、メシル酸ジメトチアジンなどの酸性非ステロイド性鎮痛消炎剤；または塩酸チアラミド、塩酸チノリジン、塩酸ベンジダミン、塩酸トラマドール、ペンタゾシン、エピリゾール(メピリゾール)、フェニルアセチルグリシンジメチルアミド、クエン酸ペリソキサール、エモルファゾン、塩酸レフェタミン、塩酸ブプレノルフィン、酒石酸ブトルファノール、臭化水素酸エプタゾシンなどの非酸性非ステロイド性抗炎症剤などが挙げられる。
【００１３】
この発明に係る薬剤は、例えば錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤、シロップ剤などの剤型での経口投与、静注、筋注などの注射剤や、坐剤、クリーム剤、軟膏剤、液剤、ローション剤、ゲル剤、エアゾール剤、チック剤などの剤型での非経口投与を行うことができる。この発明の薬剤は、投与形態は特に限定されないが、その製剤により適切な投与形態により投与するのがよい。例えば、乳酸産生抑制剤の場合は、上記のような経口投与製剤での経口投与または非経口投与製剤での非経口投与を行うのがよく、一方鎮痛・消炎剤の場合は、上記のような非経口投与製剤での非経口投与を行うのがよい。
【００１４】
この発明によれば、かかる経口投与製剤は、例えば、有効成分に賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定化剤、着色剤、矯味矯臭剤などを加え、常法により錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤などに調製することができる。
【００１５】
賦形剤としては、例えばアクリル酸デンプン、アラビアゴム、乳糖、コーンスターチ、白糖、ブドウ糖、ソルビット、結晶セルロース、二酸化ケイ素ケイ酸カルシウム、ケイ酸マグネシウムなどが挙げられ、結合剤としては、例えばポリビニルアルコール、クエン酸カルシウム、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルエチルセルロース、ポリビニルエーテル、メチルセルロース、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、シェラック、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、デキストリン、ポリリン酸ナトリウム、ペクチンなどが挙げられ、崩壊剤としては、例えばクロスポビドン、クロスカルメロースナトリウム、カルメロースカルシウム等のスーパー崩壊剤と称される崩壊剤；ヒドロキシプロピルセルロース；カルボキシメチルスターチナトリウム；コーンスターチなどが挙げられ、滑沢剤としては、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、ステアリン酸アルミニウム、乳糖、炭酸マグネシウム、カルメロースカルシウム、カルメロースナトリウム、硬化植物油などが挙げられ、安定化剤としては、例えばエデト酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、ブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエンなどが挙げられ、着色剤としては、例えばカラメル、食用黄色５号、食用赤色２号、食用青色２号等の食用色素や食用レーキ色素、ベンガラなどが挙げられ、矯味矯臭剤としては、例えば塩酸、オレンジ油、ウイキョウ、ココア末、ハッカ脳、芳香酸、ハッカ油、ケイヒ油などが挙げられる。錠剤や顆粒剤には糖衣、ゼラチン衣、その他必要に応じてコーティングすることもできる。
【００１６】
注射剤を調製する場合には、主薬に必要により等張化剤、pH調整剤、緩衝剤、懸濁化剤、溶解補助剤、安定化剤、保存剤などを添加し、常法により静脈、皮下、筋肉内注射剤に調製することができる。製剤は、必要に応じ、常法により凍結乾燥物とすることもできる。
【００１７】
等張化剤としては、例えばマンニトール、ソルビトール、塩化ナトリウム、ブドウ糖、グリセリンなどが使用できる。ｐＨ調整剤としては、例えば塩酸、リン酸等の無機酸もしくはそのアルカリ金属塩、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム等の無機塩基、酢酸、酒石酸、クエン酸、乳酸等の有機酸、あるいはそれらのアルカリ金属塩、アルギニン、エタノールアミン等の有機塩基などを使用できる。懸濁化剤としては、例えばエタノール、カラギーナン、カンテン、メチルセルロース、ポリソルベート８０、ヒドロキシエチルセルロース、アラビアゴム、トラガント末、結晶セルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート等を使用することができる。緩衝剤としては、例えば緩衝液、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、酢酸緩衝液などが使用できる。溶解補助剤としては、例えば無水エタノール、尿素、乳酸、酒石酸、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリソルベート８０、ニコチン酸アミド、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、マグロゴール、ヒマシ油脂肪酸エチルエステルなどを使用できる。安定化剤や保存剤としては、例えばメチルパラベン、プロピルパラベン等のアルキルパラベンなどが使用できる。
【００１８】
その他の製剤についても、通常使用される周知または公知の製剤成分を適宜選択することにより常法により調製することができる。
【００１９】
この発明に係る薬剤の投与量は、年齢、体重、症状、投与形態、投与回数などによって異なるが、通常成人に対して有効成分として１日用量として、一般的には１００ｍｇ〜１５００ｍｇ、好ましくは２００ｍｇ〜５００ｍｇの範囲がよく、これを１回または数回に分けて投与するのがよい。
【００２０】
また、この発明において消炎鎮痛剤の配合量は、一般的には製剤全体の０．１〜４０質量％、好ましくは１〜１０質量％であるのがよい。ただし、この配合量は、その剤型や消炎鎮痛剤の種類や配合量によって適宜変えることができる。
【実施例１】
【００２１】
（加圧条件）
本実験においてラットに加圧を行うに際し、ヒトの場合にはすでに用いられている加圧専用ベルトが存在するが、ラットにおいては存在しないためその制作から行った。ヒトにおいての加圧条件が血流の停止する圧の60~65%に設定するため、ラットの足の甲にレーザー血流計(Laser blood Flow meter：アドバンス)を用いて正常時の血流を測定し、その後ゴムバンドを用いて大腿部における血流の制限を行い、ヒトと類似した正常血流の60~65%の制限下加圧条件を作った。
【００２２】
（実験動物）
本実験にはSD系雄性ラット8-12週齢(n=3-8)を用いた。
（採血）
採血は麻酔下において舌下静脈から行った。
【００２３】
（運動）
運動はトレッドミル（MK-680S：室町機械株式会社）を用いて行った。運動時間は１５分とし、速度は２０m/minで行った。
【００２４】
（NOxの測定）
採取した血液中の亜硝酸イオン（以下NO2?）および硝酸イオン（以下NO3?）は、Griees法（吸収極大：540 nm）に基づいた高速液体クロマトグラフィー（ENO-10型：エイコム）により測定を行い、測定結果はNOx（NOx= NO2?+
NO3?）で表した。
【００２５】
（乳酸値の測定）
採取した血液中に含まれる乳酸の測定には、酵素反応を利用した電気化学的測定による簡易血中乳酸濃度測定器（ラクテート・プロ：アークレイ）を用いた。
【００２６】
（運動および採血スケジュール）
ラットにペントバルビタール・ナトリウムを50mg/kg腹腔内投与し、10分後に安静時採血を行った。その後直ちに加圧を施行し、血流が制限できた後、加圧による血管内物質の影響を見るために加圧完了の10分後に採血を行った。その後完全に覚醒するまで時間をおき運動を行った。運動後直ちに麻酔を施行し運動後の採血を行った。なお採血は加圧を施してないものに関しては安静時、安静時採血より40〜50分後、運動後の3回行った。加圧群に関しては安静時、加圧後、運動後の3回行った。それぞれ採血を採血１、２，３とした。
なお、NOxならびに乳酸値は図１に述べる採血１を100％ とし、その変化量で示した。
【００２７】
（NOx合成酵素阻害剤）
NOx合成酵素であるNOS(nitricoxide
synthase) には数種のアイソフォームが存在するが、本実施例では非選択阻害薬であるN-ニトロ−L−アルギニンメチルエステル（L-NAME）を用いた。
【００２８】
（運動および採血スケジュール）
上記と同様に麻酔を施した。十分運動が行える程度に覚醒したラットにL-NAMEを１mg/kg腹腔内投与し10分後に同様の運動を行い、麻酔後採血を行った。
【００２９】
（加圧の影響）
加圧のみでは、NOxならびに乳酸値の変化は見られなかったが、運動を負荷した群では、いずれも有意に増加した（図３，４）。
この事から、本実験は加圧の動物モデルとして有用である事が示された。
【００３０】
（NOx合成酵素阻害薬を投与した後の運動）
加圧を行った運動によるNOxならびに乳酸値の上昇はL-NAMEによって完全に抑制された（図５，６）。
【産業上の利用可能性】
【００３１】
ラット大腿部基部に加圧を施行し、トレッドミルを用いて強制運動を行ったところ、加圧を施行することによりNOxならびに乳酸値は有意に上昇した。この事より本実験は加圧の動物モデルとして有用であると考えられた。さらにL-NAMEなどのNOS阻害薬は、運動前に投与してもNOxならびに乳酸値の上昇を著明に抑制することから、筋肉痛などの予防にも有用である。
これらの事実から、NOS阻害剤は、過度の運動による乳酸蓄積による筋肉痛や炎症の予防または改善に係わる可能性が高く、医薬品としての有用性が明らかとなった。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】運動および採血スケジュールを示す説明図。
【図２】運動および採血スケジュールを示す別の説明図。
【図３】NOxの変化を示すグラフ。
【図４】乳酸値の変化を示すグラフ。
【図５】NOxの変化を示すグラフ。
【図６】乳酸値の変化を示すグラフ
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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