(57)【要約】      （修正有）【課題】新規ウレア構造を有する新規ピリジンカルボン酸（２−アミノフェニル）アミド誘導体の合成研究及びその誘導体の薬理作用を見出す。【解決手段】式（１）で表される化合物又はその塩。式中、Ｒ1及びＲ2は水素原子、低級アルキル基等、Ｒ3はヒドロキシ基、低級アルコキシ基、低級シクロアルキルオキシ基、アリールオキシ基、カルボキシ基、低級アルコキシカルボニル基、−ＯＣＯＮＲaＲb、−ＮＲcＲd等、Ｒ4及びＲ5はハロゲン原子、低級アルキル基、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基等、Ｒa、Ｒbは水素原子、低級アルキル基、低級シクロアルキル基、アリール基、複素環基等、Ｒc及びＲdは水素原子、低級アルキル基、低級シクロアルキル基、アリール基等、Ｘは低級アルキレン基、Ｙは単結合、低級アルキレン基、Ｗ1−Ｗ2はＮ−Ｃ、Ｃ−Ｎ、ｌ及びｍは０、１、２又は３を示す。2008266320.tif 000160【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式(１)で表される化合物又はその塩。
【化１】
2008266320.tif 000153
[Ｒ1及びＲ2は同一又は異なって、水素原子、置換基を有してもよい低級アルキル基、置換基を有してもよい低級アルケニル基、置換基を有してもよい低級アルキニル基又は下記一般式(２)で表される基を示し;
【化２】
2008266320.tif 000154
Ｒ3はヒドロキシ基、置換基を有してもよい低級アルコキシ基、置換基を有してもよい低級シクロアルキルオキシ基、置換基を有してもよいアリールオキシ基、カルボキシ基、置換基を有してもよい低級アルコキシカルボニル基、−ＯＣＯＮＲaＲb、−ＮＲcＲd又は下記一般式(３)で表される基を示し;
【化３】
2008266320.tif 000155
Ｒ4及びＲ5は同一又は異なって、ハロゲン原子、置換基を有してもよい低級アルキル基、ヒドロキシ基又は置換基を有してもよい低級アルコキシ基を示し；
Ｒ6はハロゲン原子、置換基を有してもよい低級アルキル基、置換基を有してもよい低級シクロアルキル基、置換基を有してもよいアリール基、置換基を有してもよい複素環基、ヒドロキシ基、置換基を有してもよい低級アルコキシ基、置換基を有してもよい低級シクロアルキルオキシ基、置換基を有してもよいアリールオキシ基、メルカプト基、置換基を有してもよい低級アルキルチオ基、置換基を有してもよい低級シクロアルキルチオ基、置換基を有してもよいアリールチオ基、ホルミル基、置換基を有してもよい低級アルキルカルボニル基、カルボキシ基、置換基を有してもよい低級アルコキシカルボニル基、ニトロ基、シアノ基又は-ＮＲeＲfを示し；
Ｒ7は置換基を有してもよい低級アルキル基、置換基を有してもよい低級シクロアルキル基、置換基を有してもよいアリール基、ヒドロキシ基、置換基を有してもよい低級アルコキシ基、置換基を有してもよい低級シクロアルキルオキシ基又は置換基を有してもよいアリールオキシ基を示し；
Ｒa、Ｒbは同一又は異なって、水素原子、置換基を有してもよい低級アルキル基、置換基を有してもよい低級シクロアルキル基、置換基を有してもよいアリール基又は置換基を有してもよい複素環基を示し；
Ｒc、Ｒd、Ｒe及びＲfは同一又は異なって、水素原子、置換基を有してもよい低級アルキル基、置換基を有してもよい低級シクロアルキル基又は置換基を有してもよいアリール基を示し；
環Ａは環式炭化水素又は複素環を示し；
環Ｂは窒素原子及び酸素原子からなる群より選択される１又は複数個のヘテロ原子を環内に有する複素環を示し；
Ｘは置換基を有してもよい低級アルキレン基を示し；
Ｙ及びＺは同一又は異なって、単結合又は置換基を有してもよい低級アルキレン基を示し；
Ｗ1−Ｗ2がＮ−Ｃ又はＣ−Ｎを示し；
ｌ、ｍ、ｎ及びｏは同一又は異なって、０、１、２又は３を示す。]
【請求項２】
一般式(１)において、
Ｒ1及びＲ2が同一又は異なって、水素原子、低級アルキル基、ハロゲン原子を置換基として有する低級アルキル基、メトキシ基を置換基として有する低級アルキル基、メチルチオ基を置換基として有する低級アルキル基、シアノ基を置換基として有する低級アルキル基、メチルアミノカルボニル基を置換基として有する低級アルキル基、ジイソプロピルアミノ基を置換基として有する低級アルキル基、低級アルケニル基、低級アルキニル基又は下記一般式(２)で表される基を示し;
【化４】
2008266320.tif 000156
Ｒ3がヒドロキシ基、低級アルコキシ基、低級シクロアルキルオキシ基、アリールオキシ基、カルボキシ基、低級アルコキシカルボニル基、−ＯＣＯＮＲaＲb、−ＮＲcＲd又は下記一般式(３)で表される基を示し;
【化５】
2008266320.tif 000157
Ｒ4及びＲ5が同一又は異なって、ハロゲン原子、低級アルキル基、ヒドロキシ基又は低級アルコキシ基を示し；
Ｒ6がハロゲン原子、低級アルキル基、ハロゲン原子を置換基として有する低級アルキル基、シアノ基を置換基として有する低級アルキル基、低級シクロアルキル基、アリール基、複素環基、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基、ハロゲン原子を置換基として有する低級アルコキシ基、アリール基を置換基として有する低級アルコキシ基、低級シクロアルキルオキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、低級アルキルチオ基、低級シクロアルキルチオ基、アリールチオ基、ホルミル基、低級アルキルカルボニル基、カルボキシ基、低級アルコキシカルボニル基、ニトロ基、シアノ基又は−ＮＲeＲfを示し；
Ｒ7が低級アルキル基、低級シクロアルキル基、アリール基、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基、低級シクロアルキルオキシ基又はアリールオキシ基を示し；
Ｒa及びＲbが同一又は異なって、水素原子、低級アルキル基、低級シクロアルキル基、アリール基又は複素環基を示し；
Ｒc、Ｒd、Ｒe及びＲfが同一又は異なって、水素原子、低級アルキル基、低級シクロアルキル基又はアリール基を示し；
環Ａが環式炭化水素又は複素環を示し；
環Ｂが窒素原子及び酸素原子からなる群より選択される１又は複数個のヘテロ原子を環内に有する複素環を示し；
Ｘが低級アルキレン基を示し；
Ｙ及びＺが同一又は異なって、単結合、低級アルキレン基又はオキソ基を置換基として有する低級アルキレン基を示し；
Ｗ1−Ｗ2がＮ−Ｃ又はＣ−Ｎを示し；
ｌ、ｍ、ｎ及びｏが同一又は異なって、０、１、２又は３を示す請求項１記載の化合物又はその塩。
【請求項３】
一般式(１)において、
Ｒ1が低級アルキル基、ハロゲン原子を置換基として有する低級アルキル基、メトキシ基を置換基として有する低級アルキル基、メチルチオ基を置換基として有する低級アルキル基、シアノ基を置換基として有する低級アルキル基、メチルアミノカルボニル基を置換基として有する低級アルキル基、ジイソプロピルアミノ基を置換基として有する低級アルキル基、低級アルキニル基又は下記一般式(２)で表される基を示し;
【化６】
2008266320.tif 000158
Ｒ2が水素原子を示し；
Ｒ3がヒドロキシ基、カルボキシ基、低級アルコキシカルボニル基、−ＯＣＯＮＲaＲb、−ＮＲcＲd又は下記一般式(３)で表される基を示し;
【化７】
2008266320.tif 000159
Ｒ6がハロゲン原子、低級アルキル基、ハロゲン原子を置換基として有する低級アルキル基、シアノ基を置換基として有する低級アルキル基、アリール基、モルホリノ基、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基、ハロゲン原子を置換基として有する低級アルコキシ基、アリール基を置換基として有する低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、低級アルキルカルボニル基、ニトロ基、シアノ基又は-ＮＲeＲfを示し；
Ｒ７が低級アルキル基又は低級アルコキシ基を示し；
Ｒa及びＲbが同一又は異なって、水素原子又は複素環基を示し；
Ｒc、Ｒd、Ｒe及びＲfが低級アルキル基を示し；
環Ａが環式炭化水素又は複素環を示し；
環Ｂが窒素原子及び酸素原子からなる群より選択される複数個のヘテロ原子を環内に有する複素環を示し；
Ｘ及びＹが低級アルキレン基を示し；
Ｚが単結合、低級アルキレン基又はオキソ基で置換された低級アルキレン基を示し；
Ｗ1−Ｗ2がＣ−Ｎ又はＮ−Ｃを示し；
ｌ及びｍが０を示し；
ｏが０又は１を示し；
ｎが０、１又は２を示す請求項１又は２記載の化合物又はその塩。
【請求項４】
一般式(１)において、環Ａがベンゼン、インダン、チオフェン、ベンゾ[１，３]ジオキソール、２，３−ジヒドロベンゾフラン、１Ｈ−ベンゾイミダゾール、イソオキサゾール、チアゾール、ベンゾチアゾール、２，３−ジヒドロベンゾ[１，４]ジオキシン又はピリジンを示す請求項１〜３のいずれかに記載の化合物又はその塩。
【請求項５】
一般式(１)において、環Ｂがピロリジン又はモルホリンを示す請求項１〜３のいずれかに記載の化合物又はその塩。
【請求項６】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（２，３−ジヒドロベンゾ［１，４］ジオキシン−６−イル）−１−（３−ジメチルアミノプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（４−ジメチルアミノフェニル）−１−（３−（モルホリン−４−イル）プロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−（モルホリン−４−イル）プロピル）−３−フェネチルウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（３−ジメチルアミノプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（４−メトキシフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（４−ジエチルアミノフェニル）−１−（３−ジメチルアミノプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（３−フルオロフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（３−フルオロ−４−メチルフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（４−フルオロ−３−メチルフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（４−シアノフェニル）−１−（３−ジメチルアミノプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（４−トリフルオロメトキシフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−１−（３−ヒドロキシプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（４−ジメチルアミノフェニル）−１−（２−エトキシカルボニルエチル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−１−（３−ジメチルアミノプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（１H−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１−（３−ジメチルアミノプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（２，３−ジヒドロ−１−ベンゾフラン−５−イル）−１−（３−（モルホリン−４−イル）プロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（２，３−ジヒドロベンゾ［１，４］ジオキシン−６−イル）−１−（２−ヒドロキシエチル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（フェニルカルボニルメチル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（１，３−チアゾール−２−イル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（６−メトキシ−１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（６−フルオロ−１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジエチルアミノプロピル）−３−（３，４−ジフルオロフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−（モルホリン−４−イル）プロピル）−３−（ピリジン−３−イル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（チオフェン−３−イル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−１−（３−ジエチルアミノプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジエチルアミノプロピル）−３−（４−フルオロ−３−ニトロフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（２，３−ジヒドロベンゾ［１，４］ジオキシン−６−イル）−１−（２−ジメチルアミノエチル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（２−ジメチルアミノエチル）−３−（３−メトキシフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（２−ジメチルアミノエチル）−３−（３−フルオロフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（２−ジメチルアミノエチル）−３−（チオフェン−３−イル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（ピリジン−３−イル）−１−［３−（ピロリジン−１−イル）プロピル］ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−（モルホリン−４−イル）プロピル）−３−（フェニルカルボニルメチル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（３−クロロフェニル）−１−（３−（モルホリン−４−イル）プロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（４−フルオロフェネチル）−１−（３−（モルホリン−４−イル）プロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（４−シアノフェニル）−１−（３−ヒドロキシプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（３−フルオロフェニル）−１−[２−(４−メチルピペラジン−１−イル）エチル]ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（２，３−ジヒドロベンゾ［１，４］ジオキシン−６−イル）−１−[３−(４−メチルピペラジン−１−イル）プロピル]ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（２−ジメチルアミノエチル）−３−（３−メチルフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（２，３−ジヒドロベンゾ［１，４］ジオキシン−６−イル）−１−[４−（モルホリン−４−イル）ブチル]ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（２−ジメチルアミノエチル）−３−（チアゾール−２−イル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（２−メトキシフェニル）−１−[４−（モルホリン−４−イル）ブチル]ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、
・N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（３−メチルフェニル）−１−[３−（４−メチルピペリジン−１−イル）プロピル]ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド、及び
・N−（２−アミノフェニル）−５−［３−シクロペンチル−１−[５−（モルホリン−４−イル）ペンチル]ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミドから選択される化合物又はその塩。
【請求項７】
請求項１〜６記載の化合物又はその塩からなる群より選択される少なくとも１つを含有する医薬組成物。
【請求項８】
請求項１〜６記載の化合物又はその塩からなる群より選択される少なくとも１つを有効成分として含有するヒストン脱アセチル化酵素阻害剤。
【請求項９】
請求項１〜６記載の化合物又はその塩からなる群より選択される少なくとも１つを有効成分として含有する、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤が有効とされる疾患の予防又は治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は医薬として有用なウレア構造を有する新規ピリジンカルボン酸（２−アミノフェニル）アミド誘導体又はその塩に関する。同誘導体又はその塩はヒストン脱アセチル化酵素阻害活性を有し、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤が有効とされる疾患の予防及び/又は治療剤として期待される。
【背景技術】
【０００２】
真核生物の染色体ＤＮＡは、コアヒストン蛋白質であるヒストンＨ２Ａ、Ｈ２Ｂ、Ｈ３、Ｈ４等に巻き付いてヌクレオソームとよばれる基本構造をとる。また、そのヌクレオソーム構造が集合することによりクロマチン構造を形成している。このクロマチン構造の構成にはヒストンの翻訳後修飾が密接に関係しており、その翻訳後修飾として、アセチル化、メチル化、リン酸化、ユビキチン化等が知られている。
【０００３】
例えば、ヒストンのアセチル化は、遺伝子の転写誘導、複製、修復等に関与すると考えられている。
【０００４】
このヒストンのアセチル化は、ヒストンアセチル化酵素（以下、「ＨＡＴ」とする）とヒストン脱アセチル化酵素（以下、「ＨＤＡＣ」とする）により可逆的に制御されている。
【０００５】
このＨＤＡＣを阻害すれば、ＨＡＴによるヒストンのアセチル化が亢進して、それに続く遺伝子の転写誘導、複製、修復等が活性化され、細胞増殖、老化等が関与するとされる種々の疾患、例えば、癌、自己免疫疾患、神経変性疾患、感染症等の予防及び／又は治療が可能になると考えられている(非特許文献１、特許文献１、特許文献２)。
【０００６】
ＨＤＡＣ阻害剤の代表例として、細胞周期停止作用、形質転換細胞の正常化及び分化作用等を有する酪酸（非特許文献２）、細胞周期停止作用、形分化作用等を有する微生物の代謝産物であるトリコスタチンＡ（非特許文献３、４、５）、細胞増殖抑制作用を有する微生物の代謝産物であるトラポキシン（非特許文献６、７）等が知られている。
【０００７】
一方、アリーレンカルボン酸(２−アミノフェニル)アミド構造を有する化合物が、腫瘍細胞増殖阻害剤として特許文献３に開示されている。しかしながら、ウレア構造を有する新規ピリジンカルボン酸（２−アミノフェニル）アミド誘導体に関する具体的な記載は一切なされていない。
【非特許文献１】蛋白質 核酸 酵素 Vol.51.No.14(2006)
【特許文献１】特開２００５−２７２４１９号公報
【特許文献２】特表２００６−５１７５３２号公報
【非特許文献２】J.Biol.Chem.,254,1716-1723(1979)
【非特許文献３】Cancer Res.,47,3688-3691(1987)
【非特許文献４】Exp.Cell Res.,177,122-131(1988)
【非特許文献５】J.Biol.Chem.,265,17174-17179(1990)
【非特許文献６】J.Antibiotics,43,1524-1534(1990)
【非特許文献７】J.Biol.Chem.,268,22429-22435(1993)
【特許文献３】国際公開第２００４／０５２８３８号パンフレット
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
ウレア構造を有する新規ピリジンカルボン酸（２−アミノフェニル）アミド誘導体又はその塩の合成研究及びその誘導体の薬理作用に関する研究は非常に興味深い課題である。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者等は新たな化学構造を有する新規ピリジンカルボン酸（２−アミノフェニル）アミド誘導体又はその塩の合成研究を行い、数多くの新規化合物を創製することに成功した。
【００１０】
さらに、上記誘導体又はその塩の薬理作用について研究した結果、本発明者等は、上記誘導体又はその塩がＨＤＡＣ阻害活性を有し、ＨＤＡＣ阻害剤が有効とされる疾患の予防及び/又は治療剤として有用であること、線維柱帯形態変化作用及び眼圧下降作用を有し、房水循環及び／又は眼圧が関与するとされる疾患の予防及び/又は治療剤として有用であることを見出し、本発明を完成させた。
【００１１】
すなわち、本発明は下記一般式(１)で表される化合物又はその塩(以下、「本発明化合物」とする)及びそれを含む医薬組成物に関する。
【００１２】
また、その医薬用途における好ましい発明は、ＨＤＡＣ阻害剤が有効とされる疾患、例えば、癌、自己免疫疾患、炎症性疾患、神経変性疾患、感染症、造血障害、繊維症、循環器疾患、血管新生が関与するとされる疾患等の予防及び/又は治療剤に関する発明であり、また、線維柱帯形態変化作用及び眼圧下降作用を有することから房水循環及び／又は眼圧が関与するとされる疾患、例えば、緑内障、高眼圧症等の予防及び/又は治療剤に関する発明である。
【化１】
2008266320.tif 000002
【００１３】
[Ｒ1及びＲ2は同一又は異なって、水素原子、置換基を有してもよい低級アルキル基、置換基を有してもよい低級アルケニル基、置換基を有してもよい低級アルキニル基又は下記一般式(２)で表される基を示し;
【化２】
2008266320.tif 000003
【００１４】
Ｒ3はヒドロキシ基、置換基を有してもよい低級アルコキシ基、置換基を有してもよい低級シクロアルキルオキシ基、置換基を有してもよいアリールオキシ基、カルボキシ基、置換基を有してもよい低級アルコキシカルボニル基、−ＯＣＯＮＲaＲb、−ＮＲcＲd又は下記一般式(３)で表される基を示し;
【化３】
2008266320.tif 000004
【００１５】
Ｒ4及びＲ5は同一又は異なって、ハロゲン原子、置換基を有してもよい低級アルキル基、ヒドロキシ基又は置換基を有してもよい低級アルコキシ基を示し；
Ｒ6はハロゲン原子、置換基を有してもよい低級アルキル基、置換基を有してもよい低級シクロアルキル基、置換基を有してもよいアリール基、置換基を有してもよい複素環基、ヒドロキシ基、置換基を有してもよい低級アルコキシ基、置換基を有してもよい低級シクロアルキルオキシ基、置換基を有してもよいアリールオキシ基、メルカプト基、置換基を有してもよい低級アルキルチオ基、ホルミル基、置換基を有してもよい低級シクロアルキルチオ基、置換基を有してもよいアリールチオ基、置換基を有してもよい低級アルキルカルボニル基、カルボキシ基、置換基を有してもよい低級アルコキシカルボニル基、ニトロ基、シアノ基又は-ＮＲeＲfを示し；
Ｒ7は置換基を有してもよい低級アルキル基、置換基を有してもよい低級シクロアルキル基、置換基を有してもよいアリール基、ヒドロキシ基、置換基を有してもよい低級アルコキシ基、置換基を有してもよい低級シクロアルキルオキシ基又は置換基を有してもよいアリールオキシ基を示し；
Ｒa、Ｒbは同一又は異なって、水素原子、置換基を有してもよい低級アルキル基、置換基を有してもよい低級シクロアルキル基、置換基を有してもよいアリール基又は置換基を有してもよい複素環基を示し；
Ｒc、Ｒd、Ｒe及びＲfは同一又は異なって、水素原子、置換基を有してもよい低級アルキル基、置換基を有してもよい低級シクロアルキル基又は置換基を有してもよいアリール基を示し；
環Ａは環式炭化水素又は複素環を示し；
環Ｂは窒素原子及び酸素原子からなる群より選択される１又は複数個のヘテロ原子を環内に有する複素環を示し；
Ｘは置換基を有してもよい低級アルキレン基を示し；
Ｙ及びＺは同一又は異なって、単結合又は置換基を有してもよい低級アルキレン基を示し；
Ｗ1−Ｗ2がＮ−Ｃ又はＣ−Ｎを示し；
ｌ、ｍ、ｎ及びｏは同一又は異なって、０、１、２又は３を示す。以下、同じ。]
【発明の効果】
【００１６】
本発明は医薬として有用なウレア構造を有する新規ピリジンカルボン酸（２−アミノフェニル）アミド誘導体又はその塩を提供する。本発明化合物はＨＤＡＣ阻害活性を有し、ＨＤＡＣ阻害剤が有効とされる疾患の予防及び/又は治療剤として有用であり、特に、癌、自己免疫疾患、炎症性疾患、神経変性疾患、感染症、造血障害、繊維症、循環器疾患、血管新生が関与するとされる疾患の予防及び/又は治療剤として期待されるものであり、また、本発明化合物は線維柱帯形態変化作用及び眼圧下降作用を有することから房水循環及び／又は眼圧が関与するとされる疾患、例えば、緑内障、高眼圧症等の予防及び/又は治療剤に関する発明でもある。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
本明細書中で使用される文言(原子、基、環等)の定義について以下に詳しく説明する。
【００１８】
「ハロゲン原子」とは、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素原子を示す。
【００１９】
「低級アルキル基」とは、炭素原子数が１〜８個、好ましくは１〜６個の直鎖又は分枝のアルキル基を示す。具体例として、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、イソプロピル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソペンチル基等が挙げられる。
【００２０】
「低級アルケニル基」とは、炭素原子数が２〜８個、好ましくは２〜６個の直鎖又は分枝のアルケニル基を示す。具体例として、ビニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、オクテニル、イソプロペニル、２−メチル−１−プロペニル、２−メチル−２−ブテニル基等が挙げられる。
【００２１】
「低級アルキニル基」とは、炭素原子数が２〜８個、好ましくは２〜６個の直鎖又は分枝のアルキニル基を示す。具体例として、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、ヘプチニル、オクチニル、イソブチニル、イソペンチニル基等が挙げられる。
【００２２】
「低級シクロアルキル基」とは、炭素原子数が３〜８個、好ましくは３〜６個のシクロアルキル基を示す。具体例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル又はシクロオクチル基が挙げられる。
【００２３】
「アリール基」とは、炭素原子数が６〜１４個の単環式芳香族炭化水素基又は２環式若しくは３環式の縮合多環式芳香族炭化水素から水素１原子を除いた残基を示す。具体例として、フェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル基等が挙げられる。
【００２４】
「低級アルコキシ基」とは、ヒドロキシ基の水素原子が低級アルキル基で置換された基を示す。具体例として、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、ｎ−ヘキシルオキシ、ｎ−ヘプチルオキシ、ｎ−オクチルオキシ、イソプロポキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、イソペントキシ基等が挙げられる。
【００２５】
「低級シクロアルキルオキシ基」とは、ヒドロキシ基の水素原子が低級シクロアルキル基で置換された基を示す。具体例として、シクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、シクロヘプチルオキシ、シクロオクチルオキシ基が挙げられる。
【００２６】
「アリールオキシ基」とは、ヒドロキシ基の水素原子がアリール基で置換された基を示す。具体例として、フェノキシ、ナフトキシ、アントリルオキシ、フェナントリルオキシ基等が挙げられる。
【００２７】
「低級アルキルチオ基」とは、メルカプト基の水素原子が低級アルキル基で置換された基を示す。具体例として、メチルチオ、エチルチオ、ｎ−プロピルチオ、ｎ−ブチルチオ、ｎ−ペンチルチオ、ｎ−ヘキシルチオ、ｎ−ヘプチルチオ、ｎ−オクチルチオ、イソプロピルチオ、イソブチルチオ、ｓｅｃ−ブチルチオ、ｔｅｒｔ−ブチルチオ、イソペンチルチオ基等が挙げられる。
【００２８】
「低級シクロアルキルチオ基」とは、メルカプト基の水素原子が低級シクロアルキル基で置換された基を示す。具体例として、シクロプロピルチオ、シクロブチルチオ、シクロペンチルチオ、シクロヘキシルチオ、シクロヘプチルチオ又はシクロオクチルチオ基が挙げられる。
【００２９】
「アリールチオ基」とは、メルカプト基の水素原子がアリール基で置換された基を示す。具体例として、フェニルチオ、ナフチルチオ、アントリルチオ、フェナントリルチオ基等が挙げられる。
【００３０】
「低級アルキルカルボニル基」とは、ホルミル基の水素原子が低級アルキル基で置換された基を示す。具体例としてメチルカルボニル、エチルカルボニル、ｎ−プロピルカルボニル、ｎ−ブチルカルボニル、ｎ−ペンチルカルボニル、ｎ−ヘキシルカルボニル、ｎ−ヘプチルカルボニル、ｎ−オクチルカルボニル、イソプロピルカルボニル、イソブチルカルボニル、ｓｅｃ−ブチルカルボニル、ｔｅｒｔ−ブチルカルボニル、イソペンチルカルボニル基等が挙げられる。
【００３１】
「低級アルコキシカルボニル基」とは、ホルミル基の水素原子が低級アルコキシ基で置換された基を示す。具体例として、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、ｎ−ブトキシカルボニル、ｎ−ペントキシカルボニル、ｎ−ヘキシルオキシカルボニル、ｎ−ヘプチルオキシカルボニル、ｎ−オクチルオキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、ｓｅｃ−ブトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、イソペントキシカルボニル基等が挙げられる。
【００３２】
「複素環」とは、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選択される１又は複数個のヘテロ原子を環内に有する飽和或いは不飽和単環式複素環又は２環式若しくは３環式の縮合多環式複素環を示す。
【００３３】
飽和の単環式複素環の具体例として、窒素原子を環内に有するアジリジン、アゼチジン、ピロリジン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、トリアゾリジン、ピペリジン、ヘキサヒドロピリダジン、ヘキサヒドロピリミジン、ピペラジン、ホモピペリジン、ホモピペラジン等が、酸素原子を環内に有するテトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、[１，４]ジオキサン、[１，２]ジオキシラン等が、硫黄原子を環内に有するテトラヒドロチオフェン、テトラヒドロチオピラン等が、窒素原子と酸素原子を環内に有するオキサゾリジン、イソオキサゾリジン、モルホリン等が、窒素原子と硫黄原子を環内に有するチアゾリジン、イソチアゾリジン、チオモルホリン等が挙げられる。
【００３４】
また、それらの飽和の単環式複素環はベンゼン環等と縮合してジヒドロインドール、ジヒドロインダゾール、ジヒドロベンゾイミダゾール、テトラヒドロキノリン、テトラヒドロイソキノリン、テトラヒドロシンノリン、テトラヒドロフタラジン、テトラヒドロキナゾリン、テトラヒドロキノキサリン、ジヒドロベンゾフラン、ジヒドロイソベンゾフラン、クロマン、イソクロマン、ベンゾ[１，３]ジオキソール、２，３−ジヒドロベンゾ[１，４]ジオキシン、ジヒドロベンゾチオフェン、ジヒドロイソベンゾチオフェン、チオクロマン、イソチオクロマン、ジヒドロベンゾオキサゾール、ジヒドロベンゾイソオキサゾール、ジヒドロベンゾオキサジン、ジヒドロベンゾチアゾール、ジヒドロベンゾイソチアゾール、ジヒドロベンゾチアジン、キサンテン、４ａ−カルバゾール、ペリミジン等の２環式又は３環式の縮合多環式複素環を形成してもよい。
【００３５】
不飽和の単環式複素環の具体例として、窒素原子を環内に有するジヒドロピロール、ピロール、ジヒドロピラゾール、ピラゾール、ジヒドロイミダゾール、イミダゾール、ジヒドロトリアゾール、トリアゾール、テトラヒドロピリジン、ジヒドロピリジン、ピリジン、テトラヒドロピリダジン、ジヒドロピリダジン、ピリダジン、テトラヒドロピリミジン、ジヒドロピリミジン、ピリミジン、テトラヒドロピラジン、ジヒドロピラジン、ピラジン等が、酸素原子を環内に有するジヒドロフラン、フラン、ジヒドロピラン、ピラン等が、硫黄原子を環内に有するジヒドロチオフェン、チオフェン、ジヒドロチオピラン、チオピラン等が、窒素原子と酸素原子を環内に有するジヒドロオキサゾール、オキサゾール、ジヒドロイソオキサゾール、イソオキサゾール、ジヒドロオキサジン、オキサジン等が、窒素原子と硫黄原子を環内に有するジヒドロチアゾール、チアゾール、ジヒドロイソチアゾール、イソチアゾール、ジヒドロチアジン、チアジン等が挙げられる。
【００３６】
また、それらの不飽和の単環式複素環はベンゼン環等と縮合してインドール、インダゾール、ベンゾイミダゾール、ベンゾトリアゾール、ジヒドロキノリン、キノリン、ジヒドロイソキノリン、イソキノリン、フェナントリジン、ジヒドロシンノリン、シンノリン、ジヒドロフタラジン、フタラジン、ジヒドロキナゾリン、キナゾリン、ジヒドロキノキサリン、キノキサリン、ベンゾフラン、イソベンゾフラン、クロメン、イソクロメン、ベンゾチオフェン、イソベンゾチオフェン、チオクロメン、イソチオクロメン、ベンゾオキサゾール、ベンゾイソオキサゾール、ベンゾオキサジン、ベンゾチアゾール、テトラヒドロベンゾチアゾール、ベンゾイソチアゾール、ベンゾチアジン、フェノキサンチン、カルバゾール、β−カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナントロリン、フェナジン、フェノチアジン、フェノキサジン等の２環式又は３環式の縮合多環式複素環を形成してもよい。
【００３７】
さらにこれらの複素環において、同一の炭素原子上に２つの水素原子を有する複素環の場合、それらの水素原子がオキソ基と置換して、２−ピロリドン、４−ピペリドン、４−チアゾリドン、ピラン−４−(４Ｈ)−オン、ピラジン−２−(３Ｈ)−オン等の複素環式ケトンを形成してもよく、この複素環式ケトンも本発明の複素環の範囲に包含される。
【００３８】
「窒素原子及び酸素原子からなる群より選択される１又は複数個のヘテロ原子を環内に有する複素環」とは、前記複素環の内、窒素原子及び/又は酸素原子を１又は複数個、環内に有する複素環を示す。
【００３９】
「複素環基」とは、複素環から水素１原子を除いた残基を示す。
【００４０】
「環式炭化水素」とは、炭素原子数が３〜１０個の飽和又は不飽和単環式炭化水素、２環式若しくは３環式炭化水素を示す。
【００４１】
飽和単環式炭化水素の具体例として、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロヘプタン、シクロオクタン等が挙げられる。
【００４２】
飽和２環式炭化水素の具体例として、オクタヒドロペンタレン、オクタヒドロインデン、デカヒドロナフタレン等が挙げられる。
【００４３】
飽和３環式炭化水素の具体例として、ビシクロ［２．２．１］ヘプタン等が挙げられる。
【００４４】
不飽和単環式炭化水素の具体例として、シクロペンテン、シクロヘキセン、シクロペンタジエン、シクロヘキサジエン、ベンゼン等が挙げられる。
【００４５】
不飽和２環式炭化水素の具体例として、インダン、１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン、ナフタレン等が挙げられる。
【００４６】
「低級アルキレン基」とは、炭素原子数が１〜８個、好ましくは１〜６個の直鎖又は分枝のアルキレン基を示す。具体例として、メチレン、エチレン、トリメチレン、テトラメチレン、ペンタメチレン、ヘキサメチレン、ヘプタメチレン、オクタメチレン、メチルメチレン、エチルメチレン基等が挙げられる。
【００４７】
「置換基を有してもよい低級アルキル基」、「置換基を有してもよい低級アルケニル基」、「置換基を有してもよい低級アルキニル基」、「置換基を有してもよい低級アルコキシ基」、「置換基を有してもよい低級アルキルチオ基」、「置換基を有してもよい低級アルキルカルボニル基」、「置換基を有してもよい低級アルコキシカルボニル基」及び/又は「置換基を有してもよい低級アルキレン基」とは、ハロゲン原子、低級シクロアルキル基、アリール基、複素環基、ニトロ基、シアノ基、オキソ基、‐ＯＲp、‐ＳＲq、-ＣＯＲr、-ＣＯＯＲs、-ＣＯＮＲtＲu 及び-ＮＲVＲW からなる群より選択される１又は複数個の置換基を有してもよい「低級アルキル基」、「低級アルケニル基」、「低級アルキニル基」、「低級アルコキシ基」、「低級アルキルチオ基」、「低級アルキルカルボニル基」、「低級アルコキシカルボニル基」及び/又は「低級アルキレン基」を示す。
【００４８】
「置換基を有してもよい低級シクロアルキル基」、「置換基を有してもよいアリール基」、「置換基を有してもよい複素環基」、「置換基を有してもよい低級シクロアルキルオキシ基」及び/又は「置換基を有してもよいアリールオキシ基」とは、ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルケニル基、低級アルキニル基、低級シクロアルキル基、アリール基、複素環基、ニトロ基、シアノ基、オキソ基、‐ＯＲp、‐ＳＲq、-ＣＯＲr、-ＣＯＯＲs、-ＣＯＮＲtＲ u 及び-ＮＲvＲwからなる群より選択される１又は複数個の置換基を有してもよい「低級シクロアルキル基」、「アリール基」、「複素環基」、「低級シクロアルキルオキシ基」及び/又は「アリールオキシ基」を示す。
【００４９】
ここで、Ｒp、Ｒq、Ｒr、Ｒs、Ｒt、Ｒu、Ｒv及びＲWは同一又は異なって、水素原子、低級アルキル基、低級アルケニル基、低級アルキニル基、低級シクロアルキル基、アリール基及び複素環基からなる群より選択される基を示す。
【００５０】
本発明でいう「複数個の基」とは、夫々の基が同一であっても異なるものであってもよく、その個数は２又は３個の場合が好ましく、特に２個の場合が好ましい。また、水素原子やハロゲン原子もこの「基」の概念に含まれる。
【００５１】
本発明において、「l」、「ｍ」、「ｎ」及び/又は「ｏ」が２又は３を示す場合、複数存在する各Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6及びＲ7は同一又は異なっていてもよい。尚、「l」、「ｍ」、「ｎ」及び/又は「ｏ」が０を示す場合とは、各Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6及び/又はＲ7が存在しない、すなわち、それらの置換基を有さない場合を示す。
【００５２】
本発明でいう「ＨＤＡＣ阻害剤」とは、ＨＤＡＣを阻害することで、ヒストン等のアセチル化を亢進させて、医薬的作用を発現させる医薬組成物をいう。 
本発明でいう「ＨＤＡＣ阻害剤が有効とされる疾患」とは、ＨＤＡＣ阻害剤で治療効果及び／又は予防効果が期待されることが知られている疾患をいい、その具体例として、癌、自己免疫疾患、炎症性疾患、神経変性疾患、感染症、造血障害、繊維症、循環器疾患等が挙げられる。
【００５３】
より具体的には、急性白血病、慢性白血病、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、大腸癌、脳腫瘍、頭頚部癌、乳癌、肺癌、食道癌、胃癌、肝癌、胆嚢癌、胆管癌、膵癌、膵島細胞癌、腎細胞癌、副腎皮質癌、膀胱癌、前立腺癌、睾丸腫瘍、卵巣癌、子宮癌、絨毛癌、甲状腺癌、悪性カルチノイド腫瘍、皮膚癌、悪性黒色腫、骨肉腫、軟部組織肉腫、神経芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、網膜芽細胞腫等の癌；関節リウマチ、腎炎、糖尿病、全身性エリテマトーデス、ヒト自己免疫性リンパ球増殖性リンパ節症、免疫芽細胞リンパ節症、クローン病、潰瘍性大腸炎、多発性硬化症、炎症性腸疾患、乾癬、変形性関節症、若年性慢性関節炎、移植片対宿主拒絶反応、喘息、アルコール性肝炎、シェーグレン症候群、強直性脊椎炎、膜性糸球体腎炎、椎間板痛、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、角膜炎、結膜炎、ブドウ膜炎、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫等の自己免疫疾患及び／又は炎症性疾患；アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン舞踏病、筋萎縮性側索硬化症、脊髄小脳変性、ポリグルタミン病、線条体黒質変性症、進行性核上麻痺、捻転ジストニア、痙性斜頸、家族性振戦、ジル・ド・ラ・トゥレット症候群、びまん性レヴィー小体病、ピック病、脳内出血、原発性側索硬化症、脊髄性筋萎縮症、筋萎縮性側索硬化症、肥厚性間質性ニューロパシー 、網膜色素変性症、遺伝性視神経萎縮症、遺伝性痙性対麻痺、進行性失調症、シャイ・ドレーガー症候群等の神経変性疾患；真菌感染（カンジダ菌など）、細菌感染、ウィルス感染（単純ヘルペス含む）、原虫感染（マラリアなど）、トキソプラズマ症、コクシジウム症等の感染症；貧血、鎌状赤血球貧血、サラセミア等の造血障害；肝線維症、嚢胞性線維症、血管線維腫等の線維症；心不全、再狭窄、動脈硬化症、心肥大等の循環器疾患；前記癌、関節リウマチ、乾癬、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症等の血管新生が関与するとされる疾患等が挙げられる。
【００５４】
尚、前記した具体的な疾患は、本発明をよりよく理解するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではなく、ＨＤＡＣ阻害剤が有効とされる疾患であれば、特に制限はない。
【００５５】
また、本発明におけるＨＤＡＣに、ファミリー及び／又はサブタイプが存在する場合、そのファミリー及び／又はサブタイプも本発明のＨＤＡＣの範囲に含まれる。
【００５６】
本発明でいう「房水循環及び／又は眼圧が関与するとされる疾患」とは、房水循環及び／又は眼圧が関与するとされる疾患であれば特に制限はないが、好ましくは、緑内障又は高眼圧症が挙げられる
本発明化合物における「塩」とは、医薬として許容される塩であれば、特に制限はなく、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸等の無機酸との塩、酢酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、クエン酸、酒石酸、アジピン酸、グルコン酸、グルコヘプト酸、グルクロン酸、テレフタル酸、メタンスルホン酸、乳酸、馬尿酸、１，２−エタンジスルホン酸、イセチオン酸、ラクトビオン酸、オレイン酸、パモ酸、ポリガラクツロン酸、ステアリン酸、タンニン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、硫酸ラウリルエステル、硫酸メチル、ナフタレンスルホン酸、スルホサリチル酸等の有機酸との塩、臭化メチル、ヨウ化メチル等との四級アンモニウム塩、臭素イオン、塩素イオン、ヨウ素イオン等のハロゲンイオンとの塩、リチウム、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属との塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属との塩、鉄、亜鉛等との金属塩、アンモニアとの塩、トリエチレンジアミン、２−アミノエタノール、２，２−イミノビス（エタノール）、１−デオキシ−１−（メチルアミノ）−２−Ｄ−ソルビトール、２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール、プロカイン、Ｎ，Ｎ−ビス（フェニルメチル）−１，２−エタンジアミン等の有機アミンとの塩等が挙げられる。
【００５７】
本発明化合物に幾何異性体又は光学異性体が存在する場合は、それらの異性体も本発明の範囲に含まれる。
【００５８】
また、本発明化合物は水和物又は溶媒和物の形態をとっていてもよい。
【００５９】
本発明化合物にプロトン互変異性が存在する場合には、それらの互変異性体も本発明に含まれる。
【００６０】
本発明化合物に結晶多形及び結晶多形群（結晶多形システム）が存在する場合には、それらの結晶多形体及び結晶多形群（結晶多形システム）も本発明に含まれる。ここで、結晶多形群（結晶多形システム）とは、それら結晶の製造、晶出、保存等の条件及び状態（尚、本状態には製剤化した状態も含む）により、結晶形が変化する場合の各段階における個々の結晶形及びその過程全体を意味する。
【００６１】
(ａ)本発明化合物における好ましい例として、一般式(１)で示される化合物又はその塩において、各基が下記に示す基である化合物又はその塩が挙げられる。
【００６２】
(ａ１)Ｒ1及びＲ2が同一又は異なって、水素原子、低級アルキル基、ハロゲン原子を置換基として有する低級アルキル基、メトキシ基を置換基として有する低級アルキル基、メチルチオ基を置換基として有する低級アルキル基、シアノ基を置換基として有する低級アルキル基、メチルアミノカルボニル基を置換基として有する低級アルキル基、ジイソプロピルアミノ基を置換基として有する低級アルキル基、低級アルケニル基、低級アルキニル基又は下記一般式(２)で表される基を示し; 及び/又は
【化４】
2008266320.tif 000005
【００６３】
(ａ２)Ｒ3がヒドロキシ基、低級アルコキシ基、低級シクロアルキルオキシ基、アリールオキシ基、カルボキシ基、低級アルコキシカルボニル基、−ＯＣＯＮＲaＲb、−ＮＲcＲd又は下記一般式(３)で表される基を示し; 及び/又は
【化５】
2008266320.tif 000006
【００６４】
(ａ３)Ｒ4及びＲ5が同一又は異なって、ハロゲン原子、低級アルキル基、ヒドロキシ基又は低級アルコキシ基を示し；及び/又は
(ａ４)Ｒ6がハロゲン原子、低級アルキル基、ハロゲン原子を置換基として有する低級アルキル基、シアノ基を置換基として有する低級アルキル基、低級シクロアルキル基、アリール基、複素環基、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基、ハロゲン原子を置換基として有する低級アルコキシ基、アリール基を置換基として有する低級アルコキシ基、低級シクロアルキルオキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、低級アルキルチオ基、低級シクロアルキルチオ基、アリールチオ基、ホルミル基、低級アルキルカルボニル基、カルボキシ基、低級アルコキシカルボニル基、ニトロ基、シアノ基又は−ＮＲeＲfを示し；及び/又は
(ａ５)Ｒ7が低級アルキル基、低級シクロアルキル基、アリール基、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基、低級シクロアルキルオキシ基又はアリールオキシ基を示し；及び/又は
(ａ６)Ｒa及びＲbが同一又は異なって、水素原子、低級アルキル基、低級シクロアルキル基、アリール基又は複素環基を示し；及び/又は
(ａ７)Ｒc、Ｒd、Ｒe及びＲfが同一又は異なって、水素原子、低級アルキル基、低級シクロアルキル基又はアリール基を示し；及び/又は
(ａ８)環Ａが環式炭化水素又は複素環を示し；及び/又は
(ａ９)環Ｂが窒素原子及び酸素原子からなる群より選択される１又は複数個のヘテロ原子を環内に有する複素環を示し；及び/又は
(ａ１０)Ｘが低級アルキレン基を示し；及び/又は
(ａ１１)Ｙ及びＺが同一又は異なって、単結合、低級アルキレン基又はオキソ基を置換基として有する低級アルキレン基を示し；
(ａ１２)Ｗ1−Ｗ2がＮ−Ｃ又はＣ−Ｎを示し；及び/又は
(ａ１３)ｌ、ｍ、ｎ及びｏが同一又は異なって、０、１、２又は３を示す。
【００６５】
すなわち、一般式(１)で示される化合物において、上記(ａ１)、(ａ２)、(ａ３)、(ａ４)、(ａ５)、(ａ６)、(ａ７)、(ａ８)、(ａ９)、(ａ１０)、(ａ１１)、 (ａ１２) 及び(ａ１３)からなる群より選択される１又は２以上の各組み合わせからなる化合物又はその塩が挙げられる。
【００６６】
(ｂ)本発明化合物におけるより好ましい例として、一般式(１)で示される化合物又はその塩において、各基が下記に示す基である化合物又はその塩が挙げられる。
【００６７】
(ｂ１)Ｒ1が低級アルキル基、ハロゲン原子を置換基として有する低級アルキル基、メトキシ基を置換基として有する低級アルキル基、メチルチオ基を置換基として有する低級アルキル基、シアノ基を置換基として有する低級アルキル基、メチルアミノカルボニル基を置換基として有する低級アルキル基、ジイソプロピルアミノ基を置換基として有する低級アルキル基、低級アルキニル基又は下記一般式(２)で表される基を示し; 及び/又は
【化６】
2008266320.tif 000007
【００６８】
(ｂ２)Ｒ2が水素原子を示し；及び/又は
(ｂ３)Ｒ3がヒドロキシ基、カルボキシ基、低級アルコキシカルボニル基、−ＯＣＯＮＲaＲb、−ＮＲcＲd又は下記一般式(３)で表される基を示し; 及び/又は
【化７】
2008266320.tif 000008
【００６９】
(ｂ４)Ｒ6がハロゲン原子、低級アルキル基、ハロゲン原子を置換基として有する低級アルキル基、シアノ基を置換基として有する低級アルキル基、アリール基、モルホリノ基、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基、ハロゲン原子を置換基として有する低級アルコキシ基、アリール基を置換基として有する低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、低級アルキルカルボニル基、ニトロ基、シアノ基又は-ＮＲeＲfを示し；及び/又は
(ｂ５)Ｒ７が低級アルキル基又は低級アルコキシ基を示し；及び/又は
(ｂ６)Ｒa及びＲbが同一又は異なって、水素原子又は複素環基を示し；及び/又は
(ｂ７)Ｒc、Ｒd、Ｒe及びＲfが低級アルキル基を示し；及び/又は
(ｂ８)環Ａが環式炭化水素又は複素環を示し；及び/又は
(ｂ９)環Ｂが窒素原子及び酸素原子からなる群より選択される複数個のヘテロ原子を環内に有する複素環を示し；及び/又は
(ｂ１０)Ｘ及びＹが低級アルキレン基を示し；及び/又は
(ｂ１１)Ｚが単結合、低級アルキレン基又はオキソ基で置換された低級アルキレン基を示し；及び/又は
(ｂ１２)Ｗ1−Ｗ2がＣ−Ｎ又はＮ−Ｃを示し；及び/又は
(ｂ１３)ｌ及びｍが０を示し；及び/又は
(ｂ１４)ｏが０又は１を示し；
(ｂ１５)ｎが０、１又は２を示す。
【００７０】
すなわち、一般式(１)で示される化合物において、上記(ｂ１)、(ｂ２)、(ｂ３)、(ｂ４)、(ｂ５)、(ｂ６)、(ｂ７)、(ｂ８)、(ｂ９)、(ｂ１０)、(ｂ１１)、(ｂ１２) 、(ｂ１３)、(ｂ１４)及び(ｂ１５)からなる群より選択される１又は２以上の各組み合わせからなる化合物又はその塩が挙げられる。
【００７１】
(ｃ)環Ａの好ましい例として、下記の環が挙げられる。
【００７２】
環Ａがベンゼン、インダン、チオフェン、ベンゾ[１，３]ジオキソール、２，３−ジヒドロベンゾフラン、１Ｈ−ベンゾイミダゾール、イソオキサゾール、チアゾール、ベンゾチアゾール、２，３−ジヒドロベンゾ[１，４]ジオキシン又はピリジンを示す。
【００７３】
また、その環Ａを有し、上記(ａ)、(ｂ)及び/又は下記(ｄ)の条件を充足する化合物又はその塩が特に好ましい。
【００７４】
（ｄ）環Ｂの好ましい別の例として、下記の環が挙げられる。
【００７５】
環Ｂがピロリジン又はモルホリンを示す。
【００７６】
また、その環Ｂを有し、上記(ａ)、(ｂ)及び/又は(ｃ)の条件を充足する化合物又はその塩が特に好ましい。
【００７７】
（ｅ）本発明化合物における特に好ましい具体例として、下記の化合物又はその塩が挙げられる。
【００７８】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（２，３−ジヒドロベンゾ［１，４］ジオキシン−６−イル）−１−（３−ジメチルアミノプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００７９】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（４−ジメチルアミノフェニル）−１−（３−（モルホリン−４−イル）プロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００８０】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−（モルホリン−４−イル）プロピル）−３−フェネチルウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００８１】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（３−ジメチルアミノプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００８２】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（４−メトキシフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００８３】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（４−ジエチルアミノフェニル）−１−（３−ジメチルアミノプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００８４】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（３−フルオロフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００８５】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（３−フルオロ−４−メチルフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００８６】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（４−フルオロ−３−メチルフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００８７】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（４−シアノフェニル）−１−（３−ジメチルアミノプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００８８】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（４−トリフルオロメトキシフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００８９】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−１−（３−ヒドロキシプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００９０】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（４−ジメチルアミノフェニル）−１−（２−エトキシカルボニルエチル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００９１】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−１−（３−ジメチルアミノプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００９２】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（１H−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１−（３−ジメチルアミノプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００９３】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（２，３−ジヒドロ−１−ベンゾフラン−５−イル）−１−（３−（モルホリン−４−イル）プロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００９４】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（２，３−ジヒドロベンゾ［１，４］ジオキシン−６−イル）−１−（２−ヒドロキシエチル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００９５】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（フェニルカルボニルメチル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００９６】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（１，３−チアゾール−２−イル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００９７】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（６−メトキシ−１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００９８】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（６−フルオロ−１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【００９９】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジエチルアミノプロピル）−３−（３，４−ジフルオロフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１００】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−（モルホリン−４−イル）プロピル）−３−（ピリジン−３−イル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１０１】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（チオフェン−３−イル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１０２】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１０３】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−１−（３−ジエチルアミノプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１０４】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジエチルアミノプロピル）−３−（４−フルオロ−３−ニトロフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１０５】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（２，３−ジヒドロベンゾ［１，４］ジオキシン−６−イル）−１−（２−ジメチルアミノエチル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１０６】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（２−ジメチルアミノエチル）−３−（３−メトキシフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１０７】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（２−ジメチルアミノエチル）−３−（３−フルオロフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１０８】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（２−ジメチルアミノエチル）−３−（チオフェン−３−イル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１０９】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（ピリジン−３−イル）−１−［３−（ピロリジン−１−イル）プロピル］ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１１０】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−（モルホリン−４−イル）プロピル）−３−（フェニルカルボニルメチル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１１１】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（３−クロロフェニル）−１−（３−（モルホリン−４−イル）プロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１１２】
・ N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（４−フルオロフェネチル）−１−（３−（モルホリン−４−イル）プロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１１３】
・N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（４−シアノフェニル）−１−（３−ヒドロキシプロピル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１１４】
・N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（３−フルオロフェニル）−１−[２−(４−メチルピペラジン−１−イル）エチル]ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１１５】
・N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（２，３−ジヒドロベンゾ［１，４］ジオキシン−６−イル）−１−[３−(４−メチルピペラジン−１−イル）プロピル]ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１１６】
・N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（２−ジメチルアミノエチル）−３−（３−メチルフェニル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１１７】
・N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（２，３−ジヒドロベンゾ［１，４］ジオキシン−６−イル）−１−[４−（モルホリン−４−イル）ブチル]ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１１８】
・N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（２−ジメチルアミノエチル）−３−（チアゾール−２−イル）ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１１９】
・N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（２−メトキシフェニル）−１−[４−（モルホリン−４−イル）ブチル]ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１２０】
・N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（３−メチルフェニル）−１−[３−（４−メチルピペリジン−１−イル）プロピル]ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１２１】
・N−（２−アミノフェニル）−５−［３−シクロペンチル−１−[５−（モルホリン−４−イル）ペンチル]ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド。
【０１２２】

本発明化合物は、以下の方法により製造することができる。尚、個々の具体的な製造方法については、後述の実施例［製造例の項］で詳細に説明する。また、下記の合成経路中で使用されているＢｏｃはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を示す。下記の式中Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５に酸素原子、窒素原子、硫黄原子等が含まれる場合にはこれらを汎用される方法で保護、脱保護することが出来る。
【０１２３】
本発明化合物の製造方法は、以下に示す方法に大別することができ、置換基の種類に応じて、適宜その方法を選択することができる。
【０１２４】
１）  本発明化合物（Ｉ）は、合成経路１に従い製造することができる。すなわち、本発明化合物（Ｉ）は、化合物（ＩＩ）をメタノール等の有機溶媒中、塩化水素−酢酸エチル等の酸存在下、０℃から室温で３０分間から２４時間処理することにより得ることができる。
【化８】
2008266320.tif 000009
【０１２５】
化合物（ＩＩａ，Ｒ２＝Ｈ）は、合成経路１−１に従い製造することができる。すなわち、これは、化合物（ＩＩＩ）とイソシアネート（ＩＶ）を塩化メチレン等の有機溶媒中、０℃から室温で３０分間から２４時間反応させることにより得ることができる。
【化９】
2008266320.tif 000010
【０１２６】
化合物（ＩＩＩ）は、合成経路１−２に従い製造することができる。すなわち、これは、スルホネート（Ｖ）とアミン（ＶＩ）を０℃から室温で３０分間から２４時間反応させることにより得ることができる。
【化１０】
2008266320.tif 000011
【０１２７】
化合物（Ｖ）は、合成経路１−３に従い製造することができる。すなわち、これは、化合物（ＶＩＩ）と塩化メタンスルホニル（ＶＩＩＩ）を塩化メチレン等の有機溶媒中、トリエチルアミン等の塩基存在下、０℃から室温で３０分間から３時間反応させることにより得ることができる。
【化１１】
2008266320.tif 000012
【０１２８】
化合物（ＶＩＩａ，Ｙ＝ＣＨ２）は、合成経路１−４に従い製造することができる。すなわち、これは、化合物（ＩＸ）をテトラヒドロフラン（以下、「ＴＨＦ」とする）等の有機溶媒中、テトラヒドロほう素化リチウム等の還元剤の存在下、０℃から室温で３０分間から２４時間反応させることにより得ることができる。
【化１２】
2008266320.tif 000013
【０１２９】
化合物（ＩＸ）は、合成経路１−５に従い製造することができる。すなわち、これは、化合物（Ｘ）と化合物（ＸＩ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（以下、「ＤＭＦ」とする）等の有機溶媒中、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロフォスフェート（以下、「ＨＡＴＵ」とする）等の縮合剤及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン等の塩基存在下、室温で１時間から２４時間反応させることにより得ることができる。
【化１３】
2008266320.tif 000014
【０１３０】
化合物（Ｘ）は、合成経路１−６に従い製造することができる。すなわち、これは、化合物（ＸＩＩ）と二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＸＩＩＩ）をＴＨＦ等の有機溶媒中、トリエチルアミン等の塩基存在下、室温で１時間から２４時間反応させることにより得ることができる。
【化１４】
2008266320.tif 000015
【０１３１】
２）  化合物（ＩＩ）は、合成経路２に従い製造することができる。すなわち、これは、化合物（ＩＩＩ）とアミン（ＸＩＶ）をＴＨＦ等の有機溶媒中、１，１’−カルボニルジイミダゾール等のウレア化剤存在下、０℃から６０℃で３０分間から２４時間反応させることにより得ることができる。
【化１５】
2008266320.tif 000016
【０１３２】
本発明化合物の薬理活性については、後述の実施例「薬理試験」の項で詳細に説明するが、本発明化合物のＨＤＡＣ阻害活性をＨＤＡＣ  Fｌｕｏｒｉｍｅｔｒｉｃ  Ａｓｓａｙ／Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｋｉｔ（ＢＩＯＭＯＬ社製）を用いて、そのプロトコールに準じて検討した結果、本発明化合物が優れたＨＤＡＣ阻害活性を有することを見出した。すなわち、本発明化合物は、ＨＤＡＣ阻害剤が有効とされる疾患の予防及び/又は治療剤として有用であり、特に、癌、自己免疫疾患、炎症性疾患、神経変性疾患、感染症、造血障害、繊維症、循環器疾患、血管新生が関与するとされる疾患等の予防及び/又は治療剤として期待される。
【０１３３】
また、本発明化合物の線維柱帯細胞に対する形態変化作用、すなわち、Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，  １０３，  １１４１−１１５０  （１９９９）に報告されているＣｅｌｌ  Ｓｈａｐｅ  Ｉｎｄｅｘ（以下、「ＣＳＩ」とする）を指標とした評価系において、本発明化合物の線維柱帯細胞の細胞形態変化作用を検討した結果、本発明化合物に優れた線維柱帯細胞の形態変化作用があることを見出した。
【０１３４】
さらに、雄性日本白色ウサギを用いて、本発明化合物の実際の眼圧下降作用を確認する為、前眼房内投与における眼圧下降作用について検討した結果、本発明化合物に眼圧下降作用があることを確認した。すなわち、本発明化合物は線維柱帯形態変化作用及び眼圧下降作用を有することから房水循環及び／又は眼圧が関与するとされる疾患、例えば、緑内障、高眼圧症等の予防及び/又は治療剤としても期待される。
【０１３５】
本発明化合物は経口でも、非経口でも投与することができる。投与剤型として、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、注射剤、点眼剤等が挙げられ、それらは汎用される技術を使用して製剤化することができる。
【０１３６】
例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等の経口剤は、乳糖、マンニトール、デンプン、結晶セルロース、軽質無水ケイ酸、炭酸カルシウム、リン酸水素カルシウム等の賦形剤、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、タルク等の滑沢剤、デンプン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等の結合剤、カルボキシメチルセルロース、低置換度ヒドロキシプロピルメチルセルロース、クエン酸カルシウム等の崩壊剤、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、マクロゴール、シリコーン樹脂等のコーティング剤、パラオキシ安息香酸エチル、ベンジルアルコール
等の安定化剤、甘味料、酸味料、香料等の矯味矯臭剤等を必要に応じて、必要量を使用し、調製することができる。
【０１３７】
また、注射剤、点眼剤等の非経口剤は、塩化ナトリウム、濃グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、塩化カリウム、ソルビトール、マンニトール等の等張化剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸，氷酢酸、トロメタモール等の緩衝化剤、ポリソルベート８０、ステアリン酸ポリオキシ４０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０等の界面活性剤、クエン酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム等の安定化剤、塩化ベンザルコニウム、パラベン、塩化ベンゾトニウム、パラオキシ安息香酸エステル、安息香酸ナトリウム、クロロブタノール、ソルビン酸等の防腐剤、塩酸、クエン酸、リン酸、氷酢酸、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等のｐＨ調整剤、ベンジルアルコール等の無痛化剤等を必要に応じて、必要量を使用し、調製することができる。
【０１３８】
本発明化合物の投与量は、症状、年齢、剤型等により適宜選択して使用することができる。例えば、経口剤では通常１日当たり０．０１〜１０００ｍｇ、好ましくは１〜１００ｍｇを１回又は数回に分けて投与することができる。また、点眼剤は通常０．０００１％〜１０％(ｗ／ｖ)、好ましくは０．０１％〜５％(ｗ／ｖ)の濃度のものを１回又は数回に分けて投与することができる。
【０１３９】
以下に本発明化合物の製造例、製剤例及び薬理試験の結果を示す。尚、これらの例示は本発明をよりよく理解するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。
【０１４０】
[製造例]
参考例１
２−アミノフェニルカルバミン酸  ｔ−ブチルエステル（参考化合物１−１）
Ｏ−フェニレンジアミン（２２ｇ、２００ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（３０ｍＬ、２１０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５０ｍＬ）溶液に二炭酸ジ−ｔ−ブチル（４４ｇ、２００ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液を滴下し、室温で１５時間撹拌した。反応液を濃縮して得られた固体を酢酸エチルでろ取し、固体を減圧下で乾燥して標記参考化合物２１ｇを白色固体として得た。またろ液を濃縮して得られた固        体を酢酸エチルでろ取し、減圧下で乾燥することにより、標記参考化合物１１ｇを白色固体として得た（収率７６％）。
【表１】
2008266320.tif 000017
【０１４１】
参考例２
N−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノフェニル）−５−メトキシカルボニルピリジン−２−カルボン酸アミド（参考化合物２−１）
２−アミノフェニルカルバミン酸  ｔ−ブチルエステル（参考化合物１−１、１０ｇ、５０ｍｍｏｌ）、５−メトキシカルボニルピリジン−２−カルボン酸（１０ｇ、５５ｍｍｏｌ）及びＮ−メチルモルホリン（１１ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）溶液にＨＡＴＵ（２１ｇ、５５ｍｍｏｌ）を加え、室温で２０時間撹拌した。水（３００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３００ｍＬ）で３回抽出した。有機層を飽和食塩水（２００ｍＬ）で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去し、析出した固体をろ取することにより、標記参考化合物１５ｇを淡褐色固体として得た（収率７９％）。
【表２】
2008266320.tif 000018
【０１４２】
参考例３
N−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノフェニル）−５−ヒドロキシメチルピリジン−２−カルボン酸アミド（参考化合物３−１）
氷冷下でN−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノフェニル）−５−メトキシカルボニルピリジン−２−カルボン酸アミド（参考化合物２−１、３８ｇ、１００ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４００ｍＬ）溶液にテトラヒドロほう素化リチウム（２．１ｇ、１００ｍｍｏｌ）を加え、３時間撹拌した。氷冷下で水（２００ｍＬ）、１．０Ｍ塩酸（３００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３００ｍＬ）で抽出し、有機層を水（５００ｍＬ）、飽和食塩水（４００ｍＬ）で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残渣に酢酸エチル（２０ｍＬ）、ヘキサン（３０ｍＬ）を加え、析出した固体をろ取することにより、標記参考化合物１８ｇを白色固体として得た（収率５３％）。
【表３】
2008266320.tif 000019
【０１４３】
参考例４
N−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノフェニル）−５−メタンスルホニルオキシメチルピリジン−２−カルボン酸アミド（参考化合物４−１）
氷冷下でN−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノフェニル）−５−ヒドロキシメチルピリジン−２−カルボン酸アミド（参考化合物３−１、１６ｇ、４５ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（１６ｍＬ、１１０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１５０ｍＬ）溶液に塩化メタンスルホニル（４．２ｍＬ、５４ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。水（４００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５００ｍＬ）で５回抽出した。有機層を水（５００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下で溶媒を留去した。残渣にヘキサン（８０ｍＬ）、酢酸エチル（２０ｍＬ）を加え、析出した固体をろ取することにより、標記参考化合物１８ｇを白色固体として得た（収率９４％）。
【表４】
2008266320.tif 000020
【０１４４】
参考例５
Ｎ−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノフェニル）−５−（３−ジメチルアミノプロピルアミノメチル）ピリジン−２−カルボン酸アミド（参考化合物５−１）
Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，３−プロパンジアミン（３．０ｍＬ、２４ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（３．３ｇ、２４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４０ｍＬ）懸濁液にN−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノフェニル）−５−メタンスルホニルオキシメチルピリジン−２−カルボン酸アミド（参考化合物４−１、４．９ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で６時間撹拌した。飽和重曹水（１００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ）で２回抽出した。有機層を水（１００ｍＬ）で３回洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下で溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム−メタノール）で精製することにより、標記参考化合物１．９ｇを黄色アモルファスとして得た（収率３８％）。
【表５】
2008266320.tif 000021
【０１４５】
以下、参考化合物４−１及び市販化合物から選択される化合物を使用し、参考化合物５−１の製造方法に準じて、参考化合物５−２〜５−１９を得た。また、参考化合物１１−１及び市販化合物から選択される化合物を使用し、参考化合物４−１及び５−１の製造方法に準じて、参考化合物５−２０を得た。
【表６−１】
2008266320.tif 000022
【表６−２】
2008266320.tif 000023
【表６−３】
2008266320.tif 000024
【表６−４】
2008266320.tif 000025
【表６−５】
2008266320.tif 000026
【表６−６】
2008266320.tif 000027
参考例６
N−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−フェネチルウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド（参考化合物６−１）
N−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノフェニル）−５−（３−ジメチルアミノプロピルアミノメチル）ピリジン−２−カルボン酸アミド（参考化合物５−１、２７ｍｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１．０ｍＬ）溶液にフェネチルイソシアネート（１５μＬ、０．１１ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。反応液を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム−メタノール）で精製することにより、標記参考化合物３２ｍｇを無色アモルファスとして得た（収率８８％）。
【表７】
2008266320.tif 000028
【０１４６】
以下、参考化合物５−１〜５−２０、市販化合物及び既知化合物から選択される化合物を使用し、参考化合物６−１の製造方法に準じて、参考化合物６−２〜６−１４１を得た。
【表８−１】
2008266320.tif 000029
【表８−２】
2008266320.tif 000030
【表８−３】
2008266320.tif 000031
【表８−４】
2008266320.tif 000032
【表８−５】
2008266320.tif 000033
【表８−６】
2008266320.tif 000034
【表８−７】
2008266320.tif 000035
【表８−８】
2008266320.tif 000036
【表８−９】
2008266320.tif 000037
【表８−１０】
2008266320.tif 000038
【表８−１１】
2008266320.tif 000039
【表８−１２】
2008266320.tif 000040
【表８−１３】
2008266320.tif 000041
【表８−１４】
2008266320.tif 000042
【表８−１５】
2008266320.tif 000043
【表８−１６】
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【表８−１７】
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【表８−１８】
2008266320.tif 000046
【表８−１９】
2008266320.tif 000047
【表８−２０】
2008266320.tif 000048
【表８−２１】
2008266320.tif 000049
【表８−２２】
2008266320.tif 000050
【表８−２３】
2008266320.tif 000051
【表８−２４】
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【表８−２５】
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【表８−２６】
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【表８−２７】
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【表８−２８】
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【表８−２９】
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【表８−３０】
2008266320.tif 000058
【表８−３１】
2008266320.tif 000059
【表８−３２】
2008266320.tif 000060
【表８−３３】
2008266320.tif 000061
【表８−３４】
2008266320.tif 000062
【表８−３５】
2008266320.tif 000063
【表８−３６】
2008266320.tif 000064
【表８−３７】
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【表８−３８】
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【表８−３９】
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【表８−４０】
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参考例７
５−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−１−（３−ジメチルアミノプロピル）ウレイドメチル］−N−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノフェニル）ピリジン−２−カルボン酸アミド（参考化合物７−１）
氷冷下でＮ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール（９８ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３．０ｍＬ）溶液に２−アミノ−１，３−ベンゾチアゾール（１００ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を加え、２時間撹拌した。さらにN−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノフェニル）−５−（３−ジメチルアミノプロピルアミノメチル）ピリジン−２−カルボン酸アミド（参考化合物５−１、９０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で３時間撹拌した。水（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ）で２回抽出し、有機層を水（３０ｍＬ）、飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下で溶媒を留去することにより、標記参考化合物を含有する２２０ｍｇの混合物を白色アモルファスとして得た。
【表９】
2008266320.tif 000069
【０１４７】
以下、参考化合物５−１〜５−２０及び市販化合物から選択される化合物を使用し、参考化合物７−１の製造方法に準じて、参考化合物７−２〜７−４９を得た。
【表１０−１】
2008266320.tif 000070
【表１０−２】
2008266320.tif 000071
【表１０−３】
2008266320.tif 000072
【表１０−４】
2008266320.tif 000073
【表１０−５】
2008266320.tif 000074
【表１０−６】
2008266320.tif 000075
【表１０−７】
2008266320.tif 000076
【表１０−８】
2008266320.tif 000077
【表１０−９】
2008266320.tif 000078
【表１０−１０】
2008266320.tif 000079
【表１０−１１】
2008266320.tif 000080
【表１０−１２】
2008266320.tif 000081
【表１０−１３】
2008266320.tif 000082
【表１０−１４】
2008266320.tif 000083
参考例８
６−メチルピリジン−３−カルボン酸メチルエステル  N−オキシド（参考化合物８−１）
６−メチルピリジン−３−カルボン酸メチルエステル（３．０ｇ、２０ｍｍｏｌ）に３０％過酸化水素水（５．７ｍL、５０ｍｍｏｌ）とタングステン酸ナトリウム2水和物（２７０ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で７０分間、８０℃で４時間半撹拌した。氷冷し、メタノール（１０ｍｌ）と酸化マンガン（０．５１ｇ、６．０ｍｍｏｌ）を加え、室温に戻し１６時間撹拌した。セライトで不溶物をろ去し、ろ液を濃縮することにより、標記参考化合物３．２ｇを薄茶色固体として得た（収率９８％）。
【表１１】
2008266320.tif 000084
【０１４８】
参考例９
６−アセトキシメチルピリジン−３−カルボン酸メチルエステル（参考化合物９−１）
６−メチルピリジン−３−カルボン酸メチルエステル  N−オキシド（参考化合物８−１、２．１ｇ、１３ｍｍｏｌ）の酢酸（１４ｍL）溶液にＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２．２ｍL、１３ｍｍｏｌ）と無水酢酸（３．５ｍL、３８ｍｍｏｌ）を加え、１２０℃で１３５分撹拌した。放冷後、飽和重曹水（１００ｍL）を加え、さらに泡が出なくなるまで重曹を加えた。酢酸エチル（１００ｍL、５０ｍL）で抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、得られた固体をヘキサンと酢酸エチルを用いて濾取することにより、標記参考化合物１．２ｇを薄黄色固体として得た（収率４８％）。
【表１２】
2008266320.tif 000085
【０１４９】
参考例１０
６−ヒドロキシメチルピリジン−３−カルボン酸（参考化合物１０−１）
氷冷下、６−アセトキシメチルピリジン−３−カルボン酸メチルエステル（参考化合物９−１、０．６０ｇ、２．９ｍｍｏｌ）のメタノール（６．０ｍL）溶液に２規定水酸化ナトリウム水溶液（３．０ｍL）を加え、氷冷で４０分間、室温で４時間撹拌した。氷冷下、２規定塩酸（３．１ｍL）を加え、減圧下で溶媒を留去することにより、標記参考化合物を橙色固体として得た。
【表１３】
2008266320.tif 000086
【０１５０】
参考例１１
N−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノフェニル）−６−ヒドロキシメチルピリジン−３−カルボン酸アミド（参考化合物１１−１）
参考例１０で得られた６−ヒドロキシメチルピリジン−３−カルボン酸（参考化合物１０−１）をＤＭＦ（１０ｍL）に懸濁させ、２−アミノフェニルカルバミン酸  ｔ−ブチルエステル（参考化合物１−１、０．６０ｇ、２．９ｍｍｏｌ），Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．５ｍL、８．６ｍｍｏｌ），ＨＡＴＵ（１．１ｇ、２．９ｍｍｏｌ）を加えて2時間撹拌した。水（２００ｍL）を加え、酢酸エチル（１００ｍL、５０ｍｌ）で抽出し、有機層を飽和食塩水（１００ｍL）で２回洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下で溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル）で精製することにより、標記参考化合物０．６６ｇを褐色油状物として得た（収率６７％（２工程））。
【表１４】
2008266320.tif 000087
【０１５１】
実施例１
N−（２−アミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−フェネチルウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド（化合物１−１）
N−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノフェニル）−５−［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−フェネチルウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド（参考化合物６−１、３１ｍｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）のメタノール（２．０ｍＬ）溶液に４．０Ｍ塩化水素−酢酸エチル（１．０ｍＬ）を加え、室温で４時間撹拌した。飽和重曹水（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ）で３回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下で溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム−メタノール）で精製することにより、標記化合物２４ｍｇを黄色アモルファスとして得た（収率８４％）。
【表１５】
2008266320.tif 000088
【０１５２】
以下、参考化合物６−２〜６−１４１、参考化合物７−１〜７−４９から選択される化合物を使用し、化合物１−１の製造方法に準じて、化合物１−２〜１−１９０を得た。
【表１６−１】
2008266320.tif 000089
【表１６−２】
2008266320.tif 000090
【表１６−３】
2008266320.tif 000091
【表１６−４】
2008266320.tif 000092
【表１６−５】
2008266320.tif 000093
【表１６−６】
2008266320.tif 000094
【表１６−７】
2008266320.tif 000095
【表１６−８】
2008266320.tif 000096
【表１６−９】
2008266320.tif 000097
【表１６−１０】
2008266320.tif 000098
【表１６−１１】
2008266320.tif 000099
【表１６−１２】
2008266320.tif 000100
【表１６−１３】
2008266320.tif 000101
【表１６−１４】
2008266320.tif 000102
【表１６−１５】
2008266320.tif 000103
【表１６−１６】
2008266320.tif 000104
【表１６−１７】
2008266320.tif 000105
【表１６−１８】
2008266320.tif 000106
【表１６−１９】
2008266320.tif 000107
【表１６−２０】
2008266320.tif 000108
【表１６−２１】
2008266320.tif 000109
【表１６−２２】
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【表１６−２３】
2008266320.tif 000111
【表１６−２４】
2008266320.tif 000112
【表１６−２５】
2008266320.tif 000113
【表１６−２６】
2008266320.tif 000114
【表１６−２７】
2008266320.tif 000115
【表１６−２８】
2008266320.tif 000116
【表１６−２９】
2008266320.tif 000117
【表１６−３０】
2008266320.tif 000118
【表１６−３１】
2008266320.tif 000119
【表１６−３２】
2008266320.tif 000120
【表１６−３３】
2008266320.tif 000121
【表１６−３４】
2008266320.tif 000122
【表１６−３５】
2008266320.tif 000123
【表１６−３６】
2008266320.tif 000124
【表１６−３７】
2008266320.tif 000125
【表１６−３８】
2008266320.tif 000126
【表１６−３９】
2008266320.tif 000127
【表１６−４０】
2008266320.tif 000128
【表１６−４１】
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【表１６−４２】
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【表１６−４３】
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【表１６−４４】
2008266320.tif 000132
【表１６−４５】
2008266320.tif 000133
【表１６−４６】
2008266320.tif 000134
【表１６−４７】
2008266320.tif 000135
【表１６−４８】
2008266320.tif 000136
【表１６−４９】
2008266320.tif 000137
【表１６−５０】
2008266320.tif 000138
【表１６−５１】
2008266320.tif 000139
【表１６−５２】
2008266320.tif 000140
【表１６−５３】
2008266320.tif 000141
【表１６−５４】
2008266320.tif 000142
実施例２
N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（４−ジメチルアミノフェニル）−１−[３−（モルホリン−４−イル）プロピル]ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド（化合物２−１）
N−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノフェニル）−５−[３−（モルホリン−４−イル）プロピルアミノメチル）]ピリジン−２−カルボン酸アミド（参考化合物５−１０、２５ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１．０ｍＬ）溶液に４−ジメチルアミノフェニルイソシアネート（２３ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。反応液をNH基修飾シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル）で精製することにより、無色の化合物を得た。得られた化合物をメタノール（０．５ｍＬ）に溶解し、４．０Ｍ塩化水素−酢酸エチル（１．０ｍＬ）溶液を加え、室温で４時間撹拌した。飽和重曹水（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ）で抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で溶媒を留去することにより、標記化合物２７ｍｇを無色アモルファスとして得た（７７％）
【表１７】
2008266320.tif 000143
【０１５３】
以下、参考化合物５−１、５−２、５−６、５−７、５−９及び５−１０から選択される化合物を使用し、化合物２−１の製造方法に準じて、化合物２−２〜２−１５を得た。
【表１８−１】
2008266320.tif 000144
【表１８−２】
2008266320.tif 000145
【表１８−３】
2008266320.tif 000146
【表１８−４】
2008266320.tif 000147
【表１８−５】
2008266320.tif 000148
実施例３
N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−[５−（モルホリン−４−イル）ペンチル]ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド（化合物３−１）
窒素雰囲気下、N−（２−アミノフェニル）−５−［３−（４−ベンジルオキシフェニル）−１−[５−（モルホリン−４−イル）ペンチル]ウレイドメチル］ピリジン−２−カルボン酸アミド（化合物１−１８２，４５ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（２．０ｍｌ）とメタノール（３．０ｍｌ）の混合溶液に１０％パラジウム−炭素（３０ｍｇ）を加えた後、水素雰囲気下、室温で2時間撹拌した。セライトで不溶物をろ去し、ろ液を濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム−メタノール）で精製することにより、標記化合物３２ｍｇを黄色油状物質として得た(収率８４％)。
【表１９】
2008266320.tif 000149
【０１５４】
［製剤例］
本発明化合物の代表的な製剤例を以下に示す。
【０１５５】
1)錠剤(150mg中)
本発明化合物                                 1mg
乳糖                                       100mg
トウモロコシデンプン                       40mg
カルボキシメチルセルロースカルシウム        4.5mg
ヒドロキシプロピルセルロース                4mg
ステアリン酸マグネシウム                    0.5mg
上記処方の錠剤にコーティング剤(例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、マクロゴール、シリコーン樹脂等の通常のコーティング剤)3mgを用いてコーティングを施し、目的とする錠剤を得ることができる。また、本発明化合物並びに添加物の種類及び／又は量を適宜変更することで、所望の錠剤を得ることもできる。
【０１５６】
2)カプセル剤(150mg中)
本発明化合物                                5mg
乳糖                                      135mg
カルボキシメチルセルロースカルシウム        4.5mg
ヒドロキシプロピルセルロース                4mg
ステアリン酸マグネシウム                    1.5mg
本発明化合物並びに添加剤の種類及び又は量を適宜変更することで、所望のカプセル剤を得ることができる。
【０１５７】
3)点眼剤(100ml中)
本発明化合物                              100mg
塩化ナトリウム                            900mg
ポリソルベート80                          500mg
水酸化ナトリウム                           適量
塩酸                                       適量
滅菌精製水                                 適量
本発明化合物及び添加物の種類及び／又は量を適宜変更することで、所望の点眼剤を得ることができる。
【０１５８】
［薬理試験］
１．ＨＤＡＣ阻害活性評価試験
本発明化合物のＨＤＡＣ阻害活性の評価は、ＨＤＡＣ  Fｌｕｏｒｉｍｅｔｒｉｃ  Ａｓｓａｙ／Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｋｉｔ（ＢＩＯＭＯＬ社製）を用い、キットのプロトコールに準じて実施した。キットには、Ｂｕｆｆｅｒ、ＨｅＬａ細胞核抽出液（ＨＤＡＣが含まれている）、Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ、Ｄｅｖｅｌｏｐｅｒ及びＴｒｉｃｈｏｓｔａｔｉｎ  Ａ（ＨＤＡＣ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）が含まれている。
【０１５９】
（被験化合物溶液の調製）
被験化合物をジメチルスルホキシド（以下、「ＤＭＳＯ」とする）に溶解して２ｍｇ／ｍＬ溶液を調製し、これを５％ＤＭＳＯ含有Ｂｕｆｆｅｒで希釈して１５０μＭの被験化合物溶液を調製した。
【０１６０】
（試験方法及び測定方法）
１）３８４穴プレートに被験化合物溶液を１穴あたり２μＬずつ添加した。
【０１６１】
２）Ｂｕｆｆｅｒにて３０倍希釈したＨｅＬａ細胞核抽出液を１穴あたり３μＬずつ添加し、３７℃で２時間インキュベーションした。
【０１６２】
３）Ｂｕｆｆｅｒにて５００倍希釈したＳｕｂｓｔｒａｔｅを１穴あたり５μＬずつ添加し、３７℃で１０分間インキュベーションした（被験化合物濃度：３０μＭ）。
【０１６３】
４）Ｂｕｆｆｅｒにて２０倍希釈したＤｅｖｅｌｏｐｅｒ（２μＭ  Ｔｒｉｃｈｏｓｔａｔｉｎ  Ａ含有）を１穴あたり１０μＬずつ添加し、室温で１５分間インキュベーションした。
【０１６４】
５）マルチラベルカウンター  ＡＲＶＯ（Ｗａｌｌａｃ社製）を用いて、各穴の蛍光強度（励起波長：３６０ｎｍ、蛍光波長：４６０ｎｍ）を測定した。
【０１６５】
６）被験化合物溶液に代えて５％ＤＭＳＯ含有Ｂｕｆｆｅｒを用いて、他は前記１〜５）と同じ操作を行い、その結果をコントロールとした。
【０１６６】
７）被験化合物溶液に代えて５％ＤＭＳＯ含有Ｂｕｆｆｅｒを、また、ＨｅＬａ細胞核抽出液に代えてＢｕｆｆｅｒを用いて、他は前記１〜５）と同じ操作を行い、その結果をブランクとした。
【０１６７】
（酵素阻害率の計算式）
酵素阻害率（％）は以下の式により算出した。
【０１６８】
酵素阻害率（％）＝１００×｛１−（被験化合物溶液の蛍光強度−ブランクの蛍光強度）／（コントロールの蛍光強度−ブランクの蛍光強度）｝
（試験結果）
被験化合物として、化合物１−２、化合物１−３、化合物１−４、化合物１−６、化合物１−８、化合物１−１０、化合物１−１３、化合物１−１４、化合物１−２０、化合物１−２１、化合物１−２４、化合物１−２５、化合物１−２７、化合物１−３０、化合物１−３１、化合物１−３８、化合物１−４０、化合物１−４１、化合物１−４２、化合物１−４４、化合物１−４６、化合物１−５１、化合物１−５３、化合物１−５５、化合物１−５６、化合物１−５８、化合物１−６３、化合物１−６８、化合物１−７９、化合物１−９０、化合物１−９６、化合物１−１１５、化合物１−１１６、化合物１−１４１、化合物２−１、化合物２−３及び化合物２−１０を使用した場合の酵素阻害率を表Ｉに示す。
【表Ｉ】
2008266320.tif 000150
２．線維柱帯細胞に対する形態変化作用の評価試験
細胞の形態変化を評価する方法の一つとして、Ｃｅｌｌ  Ｓｈａｐｅ  Ｉｎｄｅｘ（以下、「ＣＳＩ」とする）を指標とした評価系が、Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，  １０３，  １１４１−１１５０  （１９９９）に報告されている。そこで、前記文献記載の方法に準じ、本発明化合物の線維柱帯細胞に対する形態変化作用を評価した。
【０１６９】
（使用細胞）
Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ  ＆  Ｖｉｓｕａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  ４３，  １５１−１６１  （２００２）に報告されている、ヒト線維柱帯細胞株（以下、「ＴＭ−１細胞」とする）を使用した。
【０１７０】
（試薬の調製）
培養液１：Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ  Ｍｅｄｉｕｍ（以下、「Ｄ−ＭＥＭ」とする）にウシ胎児血清（１０％）、Ｌ−グルタミン（２ｍＭ）、アンフォテリシンＢ（２．５μｇ／ｍＬ）及びゲンタマイシン（２５μｇ／ｍＬ）を添加し、培養液１とした。
【０１７１】
培養液２：Ｄ−ＭＥＭにウシ胎児血清（３％）、Ｌ−グルタミン（２ｍＭ）、アンフォテリシンＢ（２．５μｇ／ｍＬ）及びゲンタマイシン（２５μｇ／ｍＬ）を添加し、培養液２とした。
【０１７２】
細胞染色液：Ｃａｌｃｅｉｎ−ＡＭ溶液（細胞質染色試薬、ＤＯＪＩＮＤＯ社製）及びＨｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２溶液（核染色試薬、ＤＯＪＩＮＤＯ社製）を、Ｌ−グルタミン（２ｍＭ）、アンフォテリシンＢ（２．５μｇ／ｍＬ）及びゲンタマイシン（２５μｇ／ｍＬ）を添加したＤ−ＭＥＭで希釈し、Ｃａｌｃｅｉｎ−ＡＭ（１６μＭ）、Ｈｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２（４０μＭ）の混合液を調製した。
【０１７３】
（細胞の調製）
３７℃、８％炭酸ガス雰囲気下で継代培養したＴＭ−１細胞を、後述の薬物処理２４時間前にトリプシン−ＥＤＴＡ溶液（０．０５％トリプシン、０．５３ｍＭエチレンジアミン四酢酸四ナトリウム）で処理して９６穴培養プレートに播種した。細胞の継代培養には培養液１を用いた。プレート播種後の細胞培養には培養液２を用いた。
【０１７４】
（被験化合物溶液の調製）
被験化合物をＤＭＳＯに溶解して５ｍＭ溶液を調製し、これを培養液２で希釈して２００μＭの被験化合物溶液を調製した。
【０１７５】
（陽性対照化合物溶液の調製）
Ｒｈｏキナーゼ阻害剤であるＹ−２７６３２が線維柱帯細胞の形態変化を誘導することがＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ  ＆  Ｖｉｓｕａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，４２，１３７−１４４（２００１）に報告されている。そこでＹ−２７６３２（国際公開第９０／０５７２３号パンフレットに記載の方法に従い製造）を陽性対照として設定し、被験化合物と同様にＹ−２７６３２をジメチルスルホキシドに溶解して５ｍＭ溶液を調製し、これを培養液２で希釈して２００μＭの溶液の陽性対照化合物溶液を調製した。
【０１７６】
（試験方法及び測定方法）
１）９６穴培養プレートに１．６×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍＬに調製したＴＭ−１細胞を１穴あたり９５μＬ（１．５×１０４ｃｅｌｌｓ）ずつ添加した。
【０１７７】
２）８％炭酸ガス雰囲気下、３７℃で２４時間培養を行った。
【０１７８】
３）被験化合物溶液または陽性対照化合物溶液を１穴あたり５μＬずつ添加した（被験化合物または陽性対照化合物の最終濃度：１０μＭ）。またコントロールとしては、ＤＭＳＯ（４％）を含有する培養液２を１穴あたり５μＬずつ添加した。
【０１７９】
４）８％炭酸ガス雰囲気下、３７℃で２４時間培養を行った。
【０１８０】
５）細胞染色液を１穴あたり１０μＬずつ添加した。
【０１８１】
６）８％炭酸ガス雰囲気下、３７℃で１時間インキュベーションし細胞を染色した。
【０１８２】
７）３７％ホルムアルデヒド溶液を１穴あたり１０μＬずつ添加した。
【０１８３】
８）室温で１時間インキュベーションし細胞を固定した。
【０１８４】
９）リン酸緩衝生理食塩液による洗浄を行った。
【０１８５】
１０）Ａｒｒａｙ  Ｓｃａｎ  Ｖｔｉ  ＨＣＳ  ｒｅａｄｅｒ（Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ社製）を用いて、２０倍の対物レンズで、１被験化合物添加群あたり８０視野（１０視野×８穴）につき染色細胞の画像を取り込んだ。
【０１８６】
１１）各細胞につきＣＳＩを算出し、各被験化合物添加群ごとの平均値を求めた。
【０１８７】
（ＣＳＩの計算式）
ＣＳＩは以下の式により算出した。
【０１８８】
ＣＳＩ＝４π×細胞の面積／（細胞周囲の長さ）２
（試験結果）
被験化合物として、化合物１−２、化合物１−３、化合物１−４、化合物１−６、化合物１−８、化合物１−１０、化合物１−１３、化合物１−１４、化合物１−２０、化合物１−２１、化合物１−２４、化合物１−２５、化合物１−２７、化合物１−３０、化合物１−３１、化合物１−３８、化合物１−４０、化合物１−４１、化合物１−４２、化合物１−４４、化合物１−４６、化合物１−５１、化合物１−５３、化合物１−５５、化合物１−５６、化合物１−５８、化合物１−６３、化合物１−６８、化合物１−７９、化合物１−９０、化合物１−９６、化合物１−１１５、化合物１−１１６、化合物１−１４１、化合物２−１、化合物２−３、化合物２−１０及びＹ−２７６３２を使用した場合のＣＳＩを表ＩＩに示す。
【表ＩＩ】
2008266320.tif 000151
３．眼圧下降作用の評価試験
本発明化合物の眼圧下降作用を評価するため、雄性日本白色ウサギを用いた本発明化合物の前房内投与による眼圧下降作用の評価試験を実施した。
【０１８９】
（被験化合物投与液の調製）
被験化合物を０．５％のＤＭＳＯ含有生理食塩液に溶解させ、１ｍＭの被験化合物投与液を調製した。
【０１９０】
（試験方法及び測定方法）
雄性日本白色ウサギの両眼に０．４％塩酸オキシブプロカイン点眼液を一滴ずつ点眼し局所麻酔した後、圧平式眼圧計を用いて眼圧を測定した。次いで、３０Ｇ針の注射器を用い、片眼に被験化合物投与液（２０μＬ）を前房内投与した。コントロールとしては、被験化合物の溶媒（０．５％ＤＭＳＯ含有生理食塩液）を２０μＬ前房内投与した。被験化合物又は溶媒を投与してから一定時間の後に、投与眼に０．４％塩酸オキシブプロカイン点眼液を一滴ずつ点眼し局所麻酔した後、圧平式眼圧計を用いて眼圧を測定した。
【０１９１】
（眼圧下降率の計算式）
被験化合物の眼圧下降作用は眼圧下降率を算出することにより評価した。眼圧下降率（％）は以下の式により算出した。
【０１９２】
眼圧下降率（％）＝１００×（コントロール群の眼圧の平均値−各被験化合物投与群の眼圧の平均値）／コントロール群の眼圧の平均値
（試験結果及び考察）
被験化合物として、化合物１−９６を使用した場合の眼圧下降率を表ＩＩＩに示す。尚、以下の眼圧下降率は、各被験化合物を投与してから９時間後のものである（一群あたり６例）。
【表ＩＩＩ】
2008266320.tif 000152
表Ｉで示したとおり、本発明化合物は優れたＨＤＡＣ阻害活性を有しており、ＨＤＡＣ阻害剤が有効とされる疾患、例えば、癌、自己免疫疾患、炎症性疾患、神経変性疾患、感染症、造血障害、繊維症、循環器疾患、血管新生が関与するとされる疾患の予防及び/又は治療剤として期待される。又、表ＩＩで示したとおり、かかる化合物は線維柱帯細胞に対して、陽性対照としたＹ−２７６３２と同程度またはそれ以上の優れた細胞形態変化作用を有した（尚、表ＩＩにおいては、ＣＳＩが小さい程、細胞形態変化が大きいことを示す）。さらに表ＩＩＩで示したとおり、かかる化合物は実際の動物モデル試験においても優れた眼圧下降作用を有していることから、かかる化合物は、房水循環及び／又は眼圧が関与するとされる疾患の予防及び/又は治療剤、特に緑内障、高眼圧症等の予防及び/又は治療剤としても有用であることが期待される。