(57)【要約】【課題】少数の器具で簡易に実施できる遠心分離容器及び遠心分離方法を提供する。【解決手段】遠心分離容器１０は、ポート１１を有するシリンジ筒１２と、ポート１１に接続可能であって目的とする遠心分離画分を保持可能な容器１３と、シリンジ筒１２を液密に封止してシリンジ筒１２内を往復動されるガスケット１４と、ガスケット１４に設けられたプランジャ１５とを具備する。この遠心分離容器１０によれば、採血や被遠心分離液の吸引に使用されるシリンジを用いて遠心分離を行い、小数の器具で容易に目的とする遠心分離画分を得ることができる。【選択図】図１
2008110272.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポートを有するシリンジ筒と、
上記ポートに接続可能であって目的とする遠心分離画分を保持可能な容器と、
上記シリンジ筒を液密に封止してシリンジ筒内を往復動されるガスケットと、
上記ガスケットに設けられたプランジャと、を具備する遠心分離容器。
【請求項２】
上記容器は、ねじ込み式により上記ポートに対して着脱可能である請求項１に記載の遠心分離容器。
【請求項３】
上記プランジャは、上記ガスケットに対して着脱可能である請求項１又は２に記載の遠心分離容器。
【請求項４】
上記プランジャは、ねじ込み式により上記ガスケットに対して着脱可能である請求項３に記載の遠心分離容器。
【請求項５】
少なくとも上記シリンジ筒、上記容器及び上記ガスケットはγ線滅菌されたものである請求項１から４のいずれかに記載の遠心分離容器。
【請求項６】
上記シリンジ筒、上記容器、上記ガスケット及び上記プランジャが滅菌袋に密封されたものである請求項１から５のいずれかに記載の遠心分離容器。
【請求項７】
ポートを有するシリンジ筒と、該ポートに接続可能であって目的とする遠心分離画分を保持可能な容器と、上記シリンジ筒を液密に封止してシリンジ筒内を往復動されるガスケットと、該ガスケットに設けられたプランジャと、を具備する遠心分離容器を用いた遠心分離方法であって、
被遠心分離液が満たされた上記シリンジ筒のポートに上記容器を取り付ける第１ステップと、
上記容器が接続された上記シリンジ筒のポート側を遠心移動方向として、上記シリンジ筒内の被遠心分離液を遠心分離する第２ステップと、
上記シリンジ筒から上記容器を取り外して、該容器内の遠心分離画分を得る第３ステップと、を含む遠心分離方法。
【請求項８】
上記プランジャは、上記ガスケットに着脱可能に設けられたものであり、
上記第２ステップにおいて、上記プランジャを上記ガスケットから取り外して遠心分離を行う請求項７に記載の遠心分離方法。
【請求項９】
上記被遠心分離液は血小板を含む血漿であり、上記遠心分離画分は多血小板血漿である請求項７又は８に記載の遠心分離方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の遠心分離方法により得られた多血小板血漿。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、遠心分離容器及び遠心分離方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
遠心分離は、比重の異なる物質を分離するために用いられる手法であり、血液から血漿を得る場合などに用いられている。遠心分離では、遠心分離装置が用いられる。遠心分離装置のロータに、被遠心分離液が収容された試験管などの容器が装填され、被遠心分離液に所定のＧが生じるようにロータが回転される。遠心分離により、被遠心分離液中の成分が、比重の重さに応じて遠心力が働く方向へ分離されるので、分離された被遠心分離液から目的とする遠心分離画分を取り出す。このような遠心分離を利用して、血液から多血小板血漿（以下、「ＰＲＰ」と称されることがある。）が得られる。
【０００３】
多血小板血漿とは、血小板を多く含む血漿である。血球成分を含む全血においては、赤血球が約９５％、白血球が３％、血小板が約１％の割合で含まれる。これに対し、多血小板血漿においては、血小板が高い割合で含まれる。ＰＲＰにおける血小板の割合は特に定義がない。一般に、全血における血漿の割合が約５５％であることを考慮すると、血球成分が除去された血漿に含まれる血小板の割合は約２％程度と考えられる。この約２％程度より明らかに高い割合の血小板が、ＰＲＰに含まれる。
【０００４】
ＰＲＰは、全血を遠心分離することにより得られる。詳細に説明すると、まず、全血を弱遠心して赤血球画分を分離して血漿を得る。この血漿には白血球及び血小板が含まれる。さらに、得られた血漿を強遠心する。これにより、血小板は遠心力が加わる方向（以下、本明細書において遠心分離方向とも称する。）に集中し、上清には血小板がほぼ含まれない。強遠心された血漿から上清を取り除き、或いは遠心分離方向（下側）の所定量のみを取り出して、ＰＲＰを得る（特許文献１参照）。
【０００５】
血小板のα顆粒中には、ＰＤＧＦ、ＴＧＦ−β、ＩＬＧＦなどの成長因子が存在することが知られている。これら成長因子が創傷治癒や組織再生に効果的な役割を果たすことが着目されている。例えば、歯周組織再生法などの再生医療において、ＰＲＰの利用が期待されている（特許文献２、特許文献３及び非特許文献１参照）。
【０００６】
【特許文献１】特開２００６−７８４２８号公報
【特許文献２】特開２００６−２３２８３４号公報
【特許文献３】特開２００５−２７８９１０号公報
【非特許文献１】多血小板血漿の口腔への応用、ロバート・Ｅ・マルクス著、クィーン・テッセンス出版社出版
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
前述されたように、全血からＰＲＰを得る方法として遠心分離が知られている。全血を遠心分離すると、遠心分離方向から赤血球画分、バフィーコート及び血小板を含む血漿画分に分離される。血小板を含む血漿画分が上清及びＰＲＰに分離されるには、一般的に強遠心が行われる。したがって、１回目の遠心分離で血小板を含む血漿画分を得て、その血漿画分に対して強遠心、つまり２回目の遠心分離を行う手法が採用される。１回目の遠心分離を強遠心として、１回の遠心分離によりＰＲＰを得ることは可能である。しかし、遠心分離後に、ＰＲＰと赤血球画分とが隣接した状態となるため、ＰＲＰのみを取り出し難くい。
【０００８】
採血された全血から２回の遠心分離によりＰＲＰを得るには、多数の器具が必要とされる。多数の器具とは、採血において使用される採血器具や、１回目の遠心分離において使用される容器、２回目の遠心分離において使用される容器、遠心分離後に所望の血漿やＰＲＰを採取するために使用される注射器などである。また、ＰＲＰが再生医療に用いられる場合には、これら多数の器具はγ線滅菌されることが望ましい。
【０００９】
本発明は、これらの事情に問題に鑑みてなされたものであり、少数の器具で簡易に実施できる遠心分離容器及び遠心分離方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
(1)  本発明に係る遠心分容器は、ポートを有するシリンジ筒と、上記ポートに接続可能であって目的とする遠心分離画分を保持可能な容器と、上記シリンジ筒を液密に封止してシリンジ筒内を往復動されるガスケットと、上記ガスケットに設けられたプランジャと、を具備する。
【００１１】
本発明に係る遠心分離容器が、例えば、血液から多血小板血漿を分離するために用いられる場合には、シリンジ筒は、採血針が取り付けられて採血に使用されてもよい。シリンジ筒が採血に使用された場合には、一度遠心分離を行って赤血球画分と白血球及び血小板を含む血漿画分とを分離して、赤血球画分をシリンジ筒から排出する。また、シリンジ筒は、採血された血液を遠心分離して得られた血小板を含む血漿を吸引するために使用されてもよい。採血や血漿の吸引においては、プランジャが操作されてシリンジ筒内のガスケットが往復動される。このような方法を任意に採択して、シリンジ筒に被遠心分離液が満たされる。
【００１２】
被遠心分離液が満たされたシリンジ筒のポートに容器が接続される。シリンジ筒の内部空間と容器の内部空間とは、ポートを通じて液体や気体が流通可能である。容器が接続されたシリンジ筒は、ポート側（容器側）を遠心移動方向として遠心分離が行われる。遠心分離により、容器内の空気は、ポートを通じてシリンジ筒のガスケット側へ移動する。被遠心分離液において比重の重い遠心分離画分は、ポートを通じてシリンジ筒から容器へ移動する。これにより、容器内に目的とする遠心分離画分が保持される。遠心分離を終えた後、シリンジ筒から容器を取り外して目的とする遠心分離画分を得る。
【００１３】
(2)  上記容器は、ねじ込み式により上記ポートに対して着脱可能なものが好ましい。これにより、遠心分離中にポートから容器が脱落することが防止される。
【００１４】
(3)  上記プランジャは、上記ガスケットに対して着脱可能なものが好ましい。
【００１５】
遠心分離において、ガスケットからプランジャが取り外されることにより、シリンジ筒からプランジャが突出しないので、シリンジ筒の取り扱いが容易である。また、プランジャが不用意に操作されることがない。また、遠心分離においてプランジャの重量がガスケットに作用しないので、シリンジ筒から容器が外れるおそれを軽減できる。一方、シリンジ筒内への被遠心分離液の吸引などにおいて、ガスケットにプランジャが取り付けられることにより、ガスケットが容易に移動できる。
【００１６】
(4)  上記プランジャは、ねじ込み式により上記ガスケットに対して着脱可能なものが好ましい。これにより、ガスケットに着脱可能なプランジャが簡易に実現される。また、プランジャをガスケットへ着脱することを繰り返すことができる。
【００１７】
(5)  少なくとも上記シリンジ筒、上記容器及び上記ガスケットはγ線滅菌されたものが好ましい。これにより、目的とする遠心分離画分を医療行為に用いることができる。
【００１８】
(6)  上記シリンジ筒、上記容器、上記ガスケット及び上記プランジャが滅菌袋に密封されることが好ましい。これらがキットとして１つの滅菌袋に密封されることにより、使い勝手が向上する。
【００１９】
(7)  本発明に係る遠心分離方法は、ポートを有するシリンジ筒と、該ポートに接続可能であって目的とする遠心分離画分を保持可能な容器と、上記シリンジ筒を液密に封止してシリンジ筒内を往復動されるガスケットと、該ガスケットに設けられたプランジャと、を具備する遠心分離容器を用いる。この遠心分離方法は、被遠心分離液が満たされた上記シリンジ筒のポートに上記容器を取り付ける第１ステップと、上記容器が接続された上記シリンジ筒のポート側を遠心移動方向として、上記シリンジ筒内の被遠心分離液を遠心分離する第２ステップと、上記シリンジ筒から上記容器を取り外して、該容器内の遠心分離画分を得る第３ステップと、を含む。
【００２０】
本発明に係る遠心分離方法が、例えば、血液から多血小板血漿を分離するために用いられる場合には、シリンジ筒は、採血針が取り付けられて採血に使用されてもよい。シリンジ筒が採血に使用された場合には、一度遠心分離を行って赤血球画分と白血球及び血小板を含む血漿画分とを分離して、赤血球画分をシリンジ筒から排出する。また、シリンジ筒は、採血された血液を遠心分離して得られた血小板を含む血漿を吸引するために使用されてもよい。採血や血漿の吸引においては、プランジャが操作されてシリンジ筒内のガスケットが往復動される。このような方法を任意に採択して、シリンジ筒に被遠心分離液が満たされる。
【００２１】
第１ステップでは、シリンジのポートに容器を取り付ける。これにより、シリンジ筒の内部空間と容器の内部空間とが、ポートを通じて液体や気体が流通可能となる。第２ステップでは、容器が接続されたシリンジ筒が、ポート側（容器側）を遠心移動方向として遠心分離を行う。遠心分離により、容器内の空気は、ポートを通じてシリンジ筒のガスケット側へ移動する。被遠心分離液において比重の重い遠心分離画分は、ポートを通じてシリンジ筒から容器へ移動する。これにより、容器内に目的とする遠心分離画分が保持される。第３ステップでは、遠心分離を終えた後のシリンジ筒から容器を取り外して目的とする遠心分離画分を得る。
【００２２】
(8)  上記プランジャは、上記ガスケットに着脱可能に設けられたものであり、上記第２ステップにおいて、上記プランジャを上記ガスケットから取り外して遠心分離を行うことが好ましい。
【００２３】
第２ステップにおいて、ガスケットからプランジャが取り外されることにより、シリンジ筒からプランジャが突出しないので、遠心分離においてシリンジ筒の取り扱いが容易である。また、プランジャが不用意に操作されることがない。また、遠心分離においてプランジャの重量がガスケットに作用しないので、シリンジ筒から容器が外れるおそれを軽減できる。一方、シリンジ筒に被遠心分離液を満たす場合などにおいて、ガスケットにプランジャが取り付けられることにより、ガスケットが容易に移動できる。
【００２４】
(9)  上記被遠心分離液として、血小板を含む血漿が想定される。上記遠心分離画分として、多血小板血漿が想定される。
【００２５】
(10)  本発明は、前述された遠心分離方法により得られた多血小板血漿として捉えうる。
【発明の効果】
【００２６】
本発明に係る遠心分離容器及び遠心分離方法によれば、採血や被遠心分離液の吸引に使用されるシリンジを用いて遠心分離を行い、小数の器具で容易に目的とする遠心分離画分を得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２７】
以下、本発明の好ましい実施形態を説明する。なお、本実施形態は本発明の一実施態様にすぎず、本発明の要旨を変更しない範囲で実施態様を変更できることは言うまでもない。
【００２８】
図１は、本発明の実施形態に係る遠心分離容器１０の外観構成を示す分解斜視図である。図２は、遠心分離容器１０の内部構成を示す縦断面図である。
【００２９】
図１及び図２に示されるように、遠心分離容器１０は、ポート１１を有するシリンジ筒１２と、ポート１１に着脱可能な容器１３と、シリンジ筒１２内を往復動されるガスケット１４と、ガスケット１４に着脱可能に設けられたプランジャ１５とを具備する。
【００３０】
シリンジ筒１２は、ガスケット１４及びプランジャ１５とともにシリンジを構成する。シリンジ筒１２は、ほぼ円筒形状であり、一方の端部が縮径されて針取付部２０が形成されている。針取付部２０の内部空間は、シリンジ筒１２の内部空間と連続している。針取付部２０により本発明に係るポート１１が形成されている。針取付部２０には、採血針が取り付け可能である。
【００３１】
シリンジ筒１２には、針取付部２０の周囲に雌ネジ部２１が形成されている。雌ネジ部２１は円筒形状であり、一端側がシリンジ筒１２に接続されており、他端側がポート１１と同方向に開口している。雌ネジ部２１の内面と針取付部２０の外面との間に間隙が形成されている。この間隙は、容器１３や採血針の取り付けのために設けられている。雌ネジ部２１の軸方向の長さは、針取付部２０の軸方向の長さより若干短く、針取付部２０の先端は雌ネジ部２１の先端から軸方向に突出している。
【００３２】
シリンジ筒１２の他方の端部は、縮径されることなく開口されている。この他方の端部からシリンジ筒１２の内部空間へプランジャ１５が進退される。シリンジ筒１２の他方の端部には、シリンジ筒１２の外周側へ突出する鍔２２が形成されている。鍔２２はハンドリングを向上させるためのものであり、シリンジ筒１２及びプランジャ１５の操作の際に鍔２２に指が掛けられる。
【００３３】
シリンジ筒１２の素材は特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。遠心分離容器１０がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、シリンジ筒１２をポリプロピレンの成形品とすることが一般的である。シリンジ筒１２の内部空間に満たされた血液や血漿などを目視確認するために、シリンジ筒１２は、透明ないし半透明であることが好ましい。シリンジ筒１２の容量は特に限定されない。シリンジ筒１２に容量を示す目盛りが付されていると、内部空間に満たされた液体の量などが容易に把握できるので好ましい。
【００３４】
容器１３は、目的とする遠心分離画分を保持可能である。容器１３は、先端側が封止された円筒形状であり、その内部空間に所定容量の液体を保持する。容器１３の基端側（ポート１１と接続される側）は開口しており、この基端側がシリンジ筒１２のポート１１に接続可能である。容器１３の外径はシリンジ筒１２の雌ネジ部２１の外径とほぼ同じである。容器１３の基端側は縮径されて、接続部３０が形成されている。接続部３０は、雌ネジ部２１に挿入可能な外径である。接続部３０の外周面には雄ネジ３１が形成されており、この雄ネジ３１が雌ネジ部２１と噛合する。これにより、容器１３が、ねじ込み式によりポート１１に対して着脱可能となる。
【００３５】
図２に示されるように、容器１３が雌ネジ部２１に噛合された状態で、容器１３の内部空間は、ポート１１を通じてシリンジ筒１２の内部空間と通じている。したがって、シリンジ筒１２と容器１３との間において、液体又は気体が流通可能である。また、容器１３が雌ネジ部２１に噛合されると、シリンジ筒１２の内部空間は容器１３により密封された状態となる。したがって、この状態で遠心分離が行われても、シリンジ筒１２内の液体がポート１１からシリンジ筒１２又は容器１３の外側へ漏出することがない。
【００３６】
容器１３の素材は特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。遠心分離容器１０がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、容器１３としてポリプロピレンの成形品が採用されうる。
【００３７】
ガスケット１４は、シリンジ筒１２の内部に挿入されてシリンジ筒１２を液密に封止する。ガスケット１４は、液密状態を維持したまま、シリンジ筒１２内を往復動可能である。ガスケット１４の往復動により、シリンジ筒１２の内部に密封可能な液体の容量が変化する。図１に示されるように、ガスケット１４は、シリンジ筒１２の内径に対応した径の円柱形状である。図２に示されるように、ガスケット１４の一方の端面は円錐形状に突出されている。この端面の形状は、シリンジ筒１２の奥部の形状に対応している。プランジャ１５と接続されるガスケット１４の他方の端面には、取付孔４０が形成されている。取付孔４０はガスケット１４の円形の端面の中心に形成されている。取付孔４０は円孔であり、その内周面に雌ネジ４１が形成されている。
【００３８】
ガスケット１４の素材は特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。遠心分離容器１０がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、ガスケット１４としてエラストマーの成形品が採用されうる。
【００３９】
プランジャ１５は、ねじ込み式によりガスケット１４に対して着脱可能なものである。プランジャ１５の全体形状は、シリンジ筒１２の内部空間に挿入可能な外形であって、シリンジ筒１２の軸方向（図１の１点鎖線方向、図２における上下方向）の長さより十分に長い。したがって、ガスケット１４をシリンジ筒１２の奥部（ポート１１側）に押し込んだ状態で、プランジャ１５の一部がシリンジ筒１２の反対側の端部から突出する。
【００４０】
プランジャ１５は、雄ネジ部５０と軸部５１と端板５２とを有する。雄ネジ部５０は、ガスケット１４の取付孔４０にねじ込まれる。取付孔４０の雌ネジ４１と雄ネジ部５０とは噛合する。これにより、プランジャ１５がガスケット１４に対してねじ込み式により着脱される。この着脱は繰り返し行うことができる。
【００４１】
軸部５１は、横断面（軸方向と直交する方向）が十字形状である。軸部５１の断面形状は成形加工の容易性や強度などを考慮して適宜選択されうる。軸部５１の一方端に雄ネジ部５０が配置され、他方端に端板５２が配置されている。端板５２は、円板形状の平板であり、軸部５１の軸方向に垂直に接続されている。端板５２はプランジャ１５のハンドリングを向上させるためのものであり、プランジャ１５がシリンジ筒１２に対して押し込まれる際に指が押し当てられ、プランジャ１５がシリンジ筒１２から引き出される際に持ち手となる。
【００４２】
プランジャ１５の素材は特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。遠心分離容器１０がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、プランジャ１５をポリプロピレンの成形品とすることが一般的である。
【００４３】
目的とする遠心分離画分、例えば多血小板血漿を再生医療などの医療行為に適したものとして得るには、遠心分離容器１０を構成する各部材のうち、採血された血液と接触する少なくともシリンジ筒１２、容器１３、及びガスケット１４は、γ線滅菌されることが好適である。また、シリンジ筒１２、容器１３、ガスケット１４及びプランジャ１５を滅菌袋に密封してキットとすることにより、遠心分離容器１０の使い勝手が向上する。キットの構成品は、少なくともシリンジ筒１２、容器１３、ガスケット１４及びプランジャ１５を各１個含んでいればよいが、例えば、後述される多血小板血漿分離方法の前処理としての遠心分離においてキャップ１６を用いる場合には、キットにキャップ１６が付属されていてもよい。また、本実施形態に係るシリンジ筒１２、容器１３、ガスケット１４、及びプランジャ１５の構成は一例であり、本発明の要旨を変更しない範囲において、各部材の構成の一部を他の公知の部材の構成に変更しうる。
【００４４】
以下に、本発明に係る遠心分離方法が説明される。本実施形態に係る遠心分離方法は、上記遠心分離容器１０を用いて行われ、３つの主要なステップからなる。第１ステップでは、被遠心分離液が満たされたシリンジ筒１２のポート１１に対して容器１３を取り付ける。第２ステップでは、容器１３が接続されたシリンジ筒１２のポート１１側を遠心移動方向として、シリンジ筒１２内の被遠心分離液を遠心分離する。第３ステップでは、シリンジ筒１２から容器１３を取り外して、容器１３内の遠心分離画分を得る。これら各ステップが、図３から図５を用いて以下に詳細に説明される。図３から図５は、多血小板血漿分離方法の各ステップにおける遠心分離容器１０の状態を示す断面図である。
【００４５】
本実施形態では、本発明に係る遠心分離方法が、血液から多血小板血漿を分離するために用いられる場合について説明される。つまり、本発明に係る被遠心分離液が血小板を含む血漿６２であり、目的とする遠心分離画分がＰＲＰ６３である。この場合、シリンジ筒１２は、採血針が取り付けられて採血に使用されうる。シリンジ筒１２が採血に使用された場合には、一度遠心分離を行って赤血球画分と白血球及び血小板を含む血漿画分とを分離して、赤血球画分をシリンジ筒１２から排出する。このような前処理が、本発明に係る遠心分離方法に先立って説明される。
【００４６】
図３（ａ）に示されるように、シリンジ筒１２のポート１１に対してキャップ１６を取り付けて、シリンジ筒１２を密封状態にする。キャップ１６はポート１１を封止できるものであればよい。シリンジ筒１２、ガスケット１４、及びプランジャ１５からなるシリンジは、採血に使用される。採血する際には、シリンジ筒１２のポート１１には採血針が取り付けられる。また、プランジャ１５はガスケット１４に取り付けられる。採血は通常の方法であり、詳細な説明は省略される。この採血により、シリンジ筒１２は血液６０で満たされる。血液６０は全血であり、赤血球、白血球、血小板、血漿などを含む。採血後に、シリンジ筒１２のポート１１から採血針を取り外して、キャップ１６を用いてポート１１を封止する。これにより、図３（ａ）に示されるように、シリンジ筒１２が密封状態となる。
【００４７】
つづいて、密封したシリンジ筒１２を用いて１回目の遠心分離を行う。この遠心分離に先だって、図３（ｂ）に示されるように、プランジャ１５をガスケット１４から取り外す。これにより、シリンジ筒１２からプランジャ１５が突出しないので、遠心分離においてシリンジ筒１２の取り扱いが容易である。また、遠心分離において、プランジャ１５が不用意に操作されることがない。さらに、遠心分離においてプランジャ１５の重量がガスケット１４に作用しないので、シリンジ筒１２から容器１３が外れるおそれを軽減できる。
【００４８】
この遠心分離において、シリンジ筒１２のポート１１側を遠心移動方向とする。ここで、「遠心移動方向」とは、遠心分離において遠心力が作用する方向であり、通常は下側である。また、１回目の遠心分離は、弱遠心である。弱遠心とは、血液の遠心分離において慣用されており、一般に、「全血を赤血球とその他（白血球、血小板、血漿）に分離する遠心分離」（非特許文献１参照）と定義される。具体的には、遠心分離条件が約５００〜２５００ｒｐｍの範囲における遠心分離が弱遠心とされる。遠心分離に用いられる遠心分離容器は一般的なものなので、詳細な説明は省略される。
【００４９】
この遠心分離により、シリンジ筒１２に密封された血液６０は、赤血球画分６１と白血球及び血小板を含む血漿６２とに分離される。図３（ｃ）に示されるように、赤血球画分６１は、遠心分離により遠心移動方向、つまりシリンジ筒１２の下側に分離される。
【００５０】
つづいて、シリンジ筒１２から赤血球画分６１を排出する。遠心分離を終了した後、図４（ａ）に示されるように、プランジャ１５をガスケット１４に取り付ける。これにより、ガスケット１４が容易に移動できる。また、図４（ａ）に示されるように、シリンジ筒１２からキャップ１６を外してポート１１を開封する。その状態で、プランジャ１５を操作してガスケット１４をポート１１側へ移動させる。これにより、シリンジ筒１２のポート１１から赤血球画分６１が排出される。シリンジ筒１２から赤血球画分６１を完全に排出した後、ガスケット１４の移動を中止する。これにより、シリンジ筒１２には血小板を含む血漿６２のみが残る。排出された赤血球画分６１は廃棄するか、別目的に使用する。ここまでの作業が前処理である。
【００５１】
１回目の遠心分離を弱遠心とすることにより、血液６０を赤血球画分６１と白血球及び血小板を含む血漿６２とに分離するとともに、血漿６２においては血小板をほぼ均等に分散させることができる。つまり、赤血球画分６１との境界付近に血小板が集中することがなく、赤血球画分６１の完全な排出のために、血漿６２をも若干排出することに伴う血小板のロスを少なくすることができる。
【００５２】
以下に本発明に係る遠心分離方法の各ステップが説明される。第１ステップでは、図４（ｂ）に示されるように、シリンジ筒１２のポート１１に容器１３を取り付ける。これにより、シリンジ筒１２の内部空間と容器１３の内部空間とが、ポート１１を通じて液体や気体が流通可能となる。前述されたように、シリンジ筒１２の内部空間は血漿６２で満たされている。容器１３の内部空間には液体は保持されていない。また、シリンジ筒１２は、容器１３が取り付けられることにより密封状態になる。容器１３は、シリンジ筒１２の雌ネジ部２１にねじ込まれているので、この状態で遠心分離が行われても、容器１３がシリンジ筒１２から脱落することはない。
【００５３】
第２ステップでは、容器１３が接続されたシリンジ筒１２を、ポート１１側（容器１３側）を遠心移動方向として遠心分離を行う。この遠心分離に先だって、図４（ｂ）に示されるように、プランジャ１５をガスケット１４から取り外す。これにより、シリンジ筒１２からプランジャ１５が突出しないので、遠心分離においてシリンジ筒１２の取り扱いが容易である。また、遠心分離において、プランジャ１５が不用意に操作されることがない。さらに、遠心分離においてプランジャ１５の重量がガスケット１４に作用しないので、シリンジ筒１２から容器１３が外れるおそれを軽減できる。
【００５４】
この遠心分離において、シリンジ筒１２のポート１１側を遠心移動方向とする。また、第２ステップにおける遠心分離は、強遠心である。強遠心とは、血液の遠心分離において慣用されており、一般に、「血小板、白血球と残留赤血球を血漿から分離する遠心分離」（非特許文献１参照）と定義される。本発明では、血漿６２の下方に血小板を濃縮する遠心分離を強遠心という。具体的には、遠心分離条件が約３０００〜４０００ｒｐｍの範囲における遠心分離が強遠心とされる。
【００５５】
容器１３内の空気は、血漿６２より比重が軽いので、この遠心分離によりポート１１を通じてシリンジ筒１２内のガスケット１４側へ移動する。血漿６２において比重の重い血小板は、ポート１１を通じてシリンジ筒１２から容器１３内へ移動する。つまり、図５（ａ）に示されるように、血小板を含む血漿６２が遠心分離され、血小板が遠心移動方向、つまり容器１３内へ移動する。また、この遠心分離を強遠心とすることにより、血小板を含む血漿６２から高濃度のＰＲＰ６３を分離することができる。なお、図５（ａ）において、血小板を含む血漿６２中に示された横線の密度が高いほど、血小板濃度が高いことが示されている。実際には、遠心分離された血小板を含む血漿６２において、上側から下側へ向けて形成されるほぼ透明から濃い黄色へのグラデーションにより、血小板が下側に移動したことが目視により確認できる。これにより、容器１３内に目的とするＰＲＰ６３が保持される。
【００５６】
第３ステップでは、図５（ｂ）に示されるように、遠心分離を終えた後のシリンジ筒１２から容器１３を取り外して目的とするＰＲＰ６３を得る。容器１３を取り外しても、シリンジ筒１２内のガスケット１４は移動しないので、ポート１１から血漿６２が漏れ出すことがない。これにより、採血された血液６０からＰＲＰ６３が分離される。ＰＲＰ６３における血小板の濃度は必ずしも明確に定義されていないが、例えば、１ｍＬにおける血小板数を血小板の濃度とした場合、採取された全血における血小板の濃度に対して３〜７倍に濃縮されたものがＰＲＰ６３とされる。また、本発明に係る多血小板血漿分離方法においては、容器１３に保持される所定量をＰＲＰ６３とすることが考えられる。本実施形態に係る遠心分離方法によれば、例えば、約１０ｍＬの血液６０から約１ｍＬのＰＲＰ６３を得ることができる。
【００５７】
このように、本発明に係る遠心分離容器１０及び遠心分離方法によれば、採血に使用されるシリンジ筒１２を用いて遠心分離を行い、小数の器具で容易に目的とするＰＲＰ６３を得ることができる。
【００５８】
なお、上記実施形態では、シリンジ筒１２を採血及び１回目の遠心分離（前処理）に使用することとしたが、前処理においてシリンジ筒１２を使用するか否かは任意である。したがって、別のシリンジなどを用いて血液６０を赤血球画分６１と、白血球及び血小板を含む血漿６２に遠心分離して、その血漿６２をシリンジ筒１２へ吸引することとしてもよい。
【００５９】
図６には、別のシリンジ１７を用いて血液６０を遠心分離した状態が示されている。シリンジ１７の構成は任意であり、例えば、シリンジ筒１２、ガスケット１４、キャップ１６と同様の構成が採用されうる。もちろん、シリンジ１７ではなく、遠心分離管や試験管が用いられてもよい。シリンジ１７内の血液は遠心分離により赤血球画分６１と、白血球及び血小板を含む血漿６２とに分離されている。
【００６０】
図６に示されるように、このシリンジ１７から血漿６２をシリンジ筒１２内へ吸引する。シリンジ筒１２の針取付部２０には採血針１８を取り付ける。また、ガスケット１４にはプランジャ１５を取り付ける。そして、シリンジ１７の基端側から遠心分離装置１０を進入させて、採血針１８のカヌラ１９をシリンジ１７のガスケット２３に貫通させる。これにより、カヌラ１９の先端がシリンジ１７内の血漿６２に到達する。この状態で、プランジャ１５をシリンジ筒１２から引き出してガスケット１４を移動させると、シリンジ１７内の血漿６２がシリンジ筒１２内へ吸引される。このような前処理によっても、シリンジ筒１２に被遠心分離液である血漿６２を満たすことができる。その後、前述された第１ステップから第３ステップを行うことにより、血漿６２からＰＲＰ６３を得ることができる。
【００６１】
また、本実施形態では、本発明に係る遠心分離装置及び遠心分離方法を、血液６０からＰＲＰ６３を得るために用いることとしたが、本発明の使用目的はＰＲＰを得ることのみに限定されない。例えば、被遠心分離液として精子及びパーコールを含む液を用い、目的とする遠心分離画分として濃縮された精子を得る場合に、本発明を使用することができる。このような精子の濃縮方法は、例えば特開２０００−２８８０８２号公報に開示されている。
【図面の簡単な説明】
【００６２】
【図１】図１は、本発明の実施形態に係る遠心分離容器１０の外観構成を示す分解斜視図である。
【図２】図２は、遠心分離容器１０の内部構成を示す縦断面図である。
【図３】図３は、多血小板血漿分離方法の各ステップにおける遠心分離容器１０の状態を示す断面図である。
【図４】図４は、多血小板血漿分離方法の各ステップにおける遠心分離容器１０の状態を示す断面図である。
【図５】図５は、多血小板血漿分離方法の各ステップにおける遠心分離容器１０の状態を示す断面図である。である。
【図６】図６は、本発明に係る遠心分離方法に用いられる他の前処理を説明するための断面図である。
【符号の説明】
【００６３】
１０・・・遠心分離容器
１１・・・ポート
１２・・・シリンジ筒
１３・・・容器
１４・・・ガスケット
１５・・・プランジャ
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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