(57)【要約】【課題】安全性が高く、コクシジウム症やクロストリジウム症に対し優れた予防及び／又は治療効果を有する動物用の飼料、抗コクシジウム剤及び抗クロストリジウム剤の提供。【解決手段】ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを含有するコクシジウム症の予防及び／又は治療用飼料；ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを有効成分とする抗コクシジウム剤；ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを含有するクロストリジウム症の予防及び／又は治療用飼料；ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを有効成分とする抗クロストリジウム剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを含有することを特徴とするコクシジウム症の予防及び／又は治療用飼料。
【請求項２】
ナツメグ、タイム、クローブ及びシトラスを含有することを特徴とするコクシジウム症の予防及び／又は治療用飼料。
【請求項３】
さらに、酵母類及び乳酸菌類を含有することを特徴とする請求項１又は２記載の飼料。
【請求項４】
ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを有効成分とすることを特徴とする抗コクシジウム剤。
【請求項５】
ナツメグ、タイム、クローブ及びシトラスを含有することを特徴とする抗コクシジウム剤。
【請求項６】
さらに、酵母類及び乳酸菌類を含有することを特徴とする請求項４又は５記載の抗コクシジウム剤。
【請求項７】
ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを含有することを特徴とするクロストリジウム症の予防及び／又は治療用飼料。
【請求項８】
ナツメグ、タイム、クローブ及びシトラスを含有することを特徴とするクロストリジウム症の予防及び／又は治療用飼料。
【請求項９】
さらに、酵母類及び乳酸菌類を含有することを特徴とする請求項７又は８記載の飼料。
【請求項１０】
ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを有効成分とすることを特徴とする抗クロストリジウム剤。
【請求項１１】
ナツメグ、タイム、クローブ及びシトラスを含有することを特徴とする抗クロストリジウム剤。
【請求項１２】
さらに、酵母類及び乳酸菌類を含有することを特徴とする請求項１０又は１１記載の抗クロストリジウム剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、動物のコクシジウム症の予防及び／又は治療用飼料、並びに抗コクシジウム剤に関するものである。また、本発明は、動物のクロストリジウム症の予防及び／又は治療用飼料、並びに抗クロストリジウム剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
鶏、七面鳥、アヒル、うずら、ガチョウ、キジ等の家禽類やウサギ、牛、羊、豚等の家畜類のコクシジウム症は、ある種の寄生性原虫の感染によって起こる伝染病であり、世界的に多く発生している。コクシジウム症は、例えば鶏では、アイメリア・テネラ(E.tenella)、アイメリア・アセルブリナ(E.acervulina)、アイメリア・ネカトリックス(E.necatrix)、アイメリア・ミチス(E.mitis)、アイメリア・マキシマ(E.maxima)、アイメリア・プレコックス(E.praecox)、アイメリア・ハガニ(E.hagani)、アイメリア・ブルネッティ(E.brunetti)等の寄生性原虫により引き起こされることが知られている。
七面鳥では、アイメリア・メレグリディス(E.meleagridis)、アイメリア・ディスパーサ(E.dispersa)、アイメリア・ガロパボニス(E.gallopavonis)、アイメリア・インノクア(E.innocua)、アイメリア・アデノエイデェス(E.adenoeides)等の寄生性原虫により引き起こされることが知られている。
アヒルでは、ティゼリア・パーニシオサ(Tyzzeria perniciosa)等の寄生性原虫により引き起こされることが知られている。
ガチョウでは、アイメリア・トルンカタ(E.truncata)、アイメリア・アンセリス(E.anseris)、アイメリア・ノセンス(E.nocens)、アイメリア・パルブーラ(E.parvula)等の寄生性原虫により引き起こされることが知られている。
キジでは、アイメリア・ファシアニ(E.phasiani)、アイメリア・ディスパーサ(E.dispersa)等の寄生性原虫により引き起こされることが知られている。
牛では、アイメリア・ズルニ(E.zurni)、アイメリア・ボビス(E.bovis)、アイメリア・エリプソイダリス(E.ellipsoidalis)等の寄生性原虫により引き起こされることが知られている。
【０００３】
これら寄生性原虫に感染した動物は下痢、血便等の症状を呈し、治療が遅れた場合又は症状が重い場合は斃死することも多く、斃死に至らない場合であっても、生産上の被害は大きい。そのため、コクシジウム症は被害の極めて大きい動物疾患の一つであり、特に多数の家禽類等を扱う飼育業者にとって大きな問題となっている。
【０００４】
従来、コクシジウム症の予防や治療に当たっては、抗生物質、合成抗菌剤からなる化学治療剤、ワクチン等の生物学的製剤が主に使用されてきた。
しかしながら、抗生物質や化学治療剤では副作用の発現、薬剤への耐性獲得による効果の減退等の問題があり、また生物学的製剤の場合は予防のみで治療に使用できなかった。しかも、薬剤を投与した動物の肉や卵等を人間が食する場合には、動物の体内に残留した薬剤の人体への移行の問題があり、その使用量や投与期間に厳しい制限が必要であった。
【０００５】
そこで、上記したような問題がなく、安全性が高いコクシジウム症に対する予防及び／又は治療剤として、例えばカシューナッツ穀油及び／又はアナカルド酸類を有効成分として含有するコクシジウム症軽減剤が提案されている（特許文献１）。また、緑茶及び／又は緑茶抽出液を含有する飼料添加物により抗コクシジウム症の効果が得られること等が知られている（特許文献２）。
しかしながら、斯かる従来の飼料によっても、未だ十分満足のいく効果が得られていないのが実状であった。
【０００６】
一方、家畜及び家禽のクロストリジウム  バーフリンゲンス感染症は、Clostridium perfringensの感染によって起こる疾病で、代表的な症状として壊疸性腸炎があり、またエンテロトキセミア、悪性水腫の原因にもなる。罹病率、致死率がともに高く、養鶏、ブロイラー、養豚、酪農業界に与える経済的被害は大きい。従って、家畜及び家禽の数ある疾病の中でもその防除対策の確立が急がれる最も重要な疾病の一つである。
壊疸性腸炎は、子豚、雛等の疾病臨床的には、下痢がみられ、腸粘膜への細菌の侵入、小腸の壊死を伴うことを特徴とする。
エンテロトキセミアは、クロストリジウム  バーフリンゲンスが動物の小腸内で増殖し、その産生する毒素により、壊死性、出血性の病変を起こし、かつ毒血症のために急性死を招く疾病である。
悪性水腫は、偶発的または外科手術により生じた創面に、菌が侵入して発生し、その菌が発芽、増殖して毒素を出し毒血症、菌血症を起こし死に至らせる疾病である。
【０００７】
上記クロストリジウム症の予防及び／又は治療剤としては、カンゾウ、ヨモギ、オウレン、オウゴン、オウバク、ゲンノショウコ、コウボク、タンジン、チモ、ダイオウ、チョウジ、ジョテイ、ケイガイ、ケイヒ、ゲンジン、ケツメイシ、ビワヨウ、ボウフウ、ホップ、ソヨウ、ヨウバイヒ、レンギョウ、アロエ、ギュウタン、イレイセン、ウバイ、エンメイソウ、シャゼンソウ、シンイ、インチンコウ、ジンコウ、センキュウ、コウホン、ゴバイシ、サンシュユ、シコン、コオウレン、シャクヤク、キンオウシ、タイム、シロナンテン、チユ及びマオウからなる群から選択された１種または２種以上の生薬を含有する家畜及び家禽のクロストリジウム  バーフリンゲンス感染症の予防及び治療剤が知られている（特許文献３）。
しかしながら、クロストリジウム  バーフリンゲンス感染症は、重大な伝染病にあるにもかかわらず、予防・治療方法が未だ確立されていなく、予防方法として、飼育管理を適当に行うことなどが行なわれているが、実際には予防は極めて困難なのが実状であった。
【特許文献１】特開平０８−２３１４１０号公報
【特許文献２】特開平０７−２５５３８６号公報
【特許文献３】特許第２５９９１６１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、上記の如き従来の問題と実状に鑑みてなされたものであり、安全性が高く、コクシジウム症やクロストリジウム症に対し優れた予防及び／又は治療効果を有する動物用の飼料、抗コクシジウム剤及び抗クロストリジウム剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者は、当該課題を解決すべく、種々研究を重ねた結果、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンの４成分又はこれら成分を含有する天然物を併用して動物に給与すれば、コクシジウム症及びクロストリジウム症に対し優れた予防及び／又は治療効果を発揮し得ることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
すなわち、本発明は、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを含有することを特徴とするコクシジウム症の予防及び／又は治療用飼料により上記課題を解決したものである。
【００１１】
また、本発明は、ナツメグ、タイム、クローブ及びシトラスを含有することを特徴とするコクシジウム症の予防及び／又は治療用飼料により上記課題を解決したものである。
【００１２】
また、本発明は、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを有効成分とすることを特徴とする抗コクシジウム剤により上記課題を解決したものである。
【００１３】
さらに、本発明は、ナツメグ、タイム、クローブ及びシトラスを含有することを特徴とする抗コクシジウム剤により上記課題を解決したものである。
【００１４】
また、本発明は、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを含有することを特徴とするクロストリジウム症の予防及び／又は治療用飼料により上記課題を解決したものである。
【００１５】
また、本発明は、ナツメグ、タイム、クローブ及びシトラスを含有することを特徴とするクロストリジウム症の予防及び／又は治療用飼料により上記課題を解決したものである。
【００１６】
また、本発明は、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを有効成分とすることを特徴とする抗クロストリジウム剤により上記課題を解決したものである。
【００１７】
さらに、本発明は、ナツメグ、タイム、クローブ及びシトラスを含有することを特徴とする抗クロストリジウム剤により上記課題を解決したものである。
【発明の効果】
【００１８】
本発明の飼料を動物に給与、あるいは本発明の薬剤を動物に投与すれば、副作用を引き起こすことなく、動物のコクシジウム症及びクロストリジウム症を予防及び／又は治療することができる。また、コクシジウム症やクロストリジウム症による飼育成績の低下、生産性の低下を防止することもできる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
本発明で用いられるピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンは、化学合成物あるいは天然物から分離したものの如何を問わない。また、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを含有する天然物を原末そのまま、あるいは蒸留、抽出等の手段により有効成分を濃縮した形態で用いることができる。天然物は、抗コクシジウム効果・抗クロストリジウム効果の点から、有効成分を濃縮した形態で用いるのが好ましく、特に精油の形態で用いるのが好ましい。
【００２０】
ピネンを含有する天然物としては、例えばナツメグ、コリアンダー、レモン等が挙げられ、特にナツメグ（Myristica fragrans）が好ましい。チモールを含有する天然物としては、例えばタイム等が挙げられ、特にタイム（Thymus vulgaris）が好ましい。オイゲノールを含有する天然物としては、例えばシナモン、クローブ等が挙げられ、特にクローブ（Syzygium aromaticum, Eugenia caryophyllata）が好ましい。リモネンを含有する天然物としては、例えばシトラス、ハッカ、スペアミント、フェンネル等が挙げられ、特にシトラス（Citrus spp.）が好ましい。シトラスとしては、例えばレモン、ライム、オレンジ、ダイダイ等が挙げられる。
なお、前記ピネンとして、天然界にはα−ピネン、β−ピネンが存在する。本発明においては、それらの化合物を単独又は混合して用いることができる。
【００２１】
抽出物は、上記ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを含有する天然物をそのまま、あるいは必要に応じて乾燥、切断、粉砕、粉末化等の前処理を行った後、有機溶媒で抽出したものである。抽出に際し、上記天然物は何れの部位も使用することができるが、例えばナツメグは果実の種子核中の仁を、タイムは葉又は花穂を、クローブは蕾を、シトラスは果皮をそれぞれ用いるのが好ましい。
【００２２】
抽出方法としては、一般的な方法を使用することができ、例えば溶剤抽出法を挙げることができる。
溶剤抽出に用いられる有機溶剤としては、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等のアルコール類；アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類；酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類；テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等の鎖状及び環状エーテル類；ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素類；ヘキサン、シクロヘキサン、石油エーテル等の炭化水素類；ベンゼン、トルエン等の芳香族炭化水素類；ピリジン類；超臨界二酸化炭素；油脂、ワックス、その他オイル等が挙げられ、これらは単独で又は２種以上を組み合わせて使用でき、溶剤を変えて繰り返し行うことも可能である。
【００２３】
また、例えばナツメグの果実の種子核中の仁、タイムの葉又は花穂、クローブの蕾、またはシトラスの果皮を水蒸気蒸留して得られる粗精製物としても取得することができる。
【００２４】
上記合成や天然物からの分離により得られるピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンは、医薬品上、食品上又は飼料上許容し得る規格に適合するものであれば、合成物、抽出物、粗精製物、精製物の何れも使用することができる。精製手段としては、蒸留、有機溶剤沈殿、遠心分離、限界濾過膜、高速液体クロマトグラフやカラムクロマトグラフなどが挙げられる。
【００２５】
後記実施例に示すように、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンの４成分又はこれら成分を含有する天然物を併用することにより、動物のコクシジウム症及びクロストリジウム症に対して優れた予防及び／又は治療効果を有する。従って、これら４成分又はこれら成分を含有する天然物を飼料中に添加することにより種々の動物のコクシジウム症の予防及び／又は治療用飼料、並びにクロストリジウム症の予防及び／又は治療用飼料が得られる。また、これら４成分又はこれら成分を含有する天然物を添加混合することによって抗コクシジウム剤及び抗クロストリジウム剤が得られる。これらの薬剤はそのまま直接動物に投与してもいいし、あるいは飼料等に添加して動物に給与してもよい。
【００２６】
本発明において、飼料中のピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンの含有量としては、動物の種類、年齢（月齢）、症状などによって異なるが、通常これら４成分を添加する前の飼料に（外割）０．０００１〜０．１質量％、好ましくは０．０００５〜０．０１質量％の範囲で添加することが最適である。添加量が０．０００１質量％より少ないと、コクシジウム症やクロストリジウム症に対する効果が得られにくく、他方０．１質量％より多いとコストアップを招き好ましくない。また、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンの配合比率は特に限定されず適宜選択可能であるが、例えば１〜１００：１〜１００：１〜１００：１〜１００の範囲で含有することが抗コクシジウム効果、抗クロストリジウム効果、動物による嗜好性の点から好ましい。
【００２７】
また、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを含有する天然物、例えばナツメグ、タイム、クローブ及びシトラスを添加する場合は、乾物換算で、飼料に（外割）０．０１〜１０質量％、好ましくは０．０５〜５質量％の範囲で添加することが最適である。
【００２８】
本発明の飼料に用いる飼料原料としては、特に制限されず、例えば、とうもろこし、マイロ、大麦、小麦等の穀類；ふすま等の糟糠類；大豆油粕、菜種油粕等の植物性油粕類；魚粉、骨肉粉等の動物性飼料；食塩、オリゴ糖類、ケイ酸、各種ビタミン類、炭酸カルシウム、第２リン酸カルシウム等のミネラル類；アミノ酸類及び有機酸類等が挙げられる。
【００２９】
本発明において、抗コクシジウム剤又は抗クロストリジウム剤中のピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンの含有量としては、動物の種類、年齢（月齢）、症状などによって異なるが、製剤中に０．０１〜６０質量％、好ましくは０．１〜１０質量％の範囲であることが最適である。添加量が０．０１質量％より少ないと、抗コクシジウム剤、抗クロストリジウム剤として投与する量が多くなり短期間に投与することが困難となる。他方６０質量％より多いと製剤化が難しく取扱いも困難となる。また、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンの配合比率は特に限定されず適宜選択可能であるが、例えば１〜１００：１〜１００：１〜１００：１〜１００の範囲で含有することが抗コクシジウム効果、抗クロストリジウム効果、動物による嗜好性の点から好ましい。
【００３０】
また、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを含有する天然物、例えばナツメグ、タイム、クローブ及びシトラスを添加する場合は、乾物換算で、製剤中１〜１００質量％、好ましくは１０〜５０質量％の範囲が最適である。
【００３１】
本発明においては、適宜、薬学的に許容される担体、例えば賦形剤、滑沢剤、希釈剤、結合剤、崩壊剤、乳化剤、安定剤、嬌味嬌臭剤等を使用して錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等の経口投与製剤とするのが好ましく、上述のように飼料等に添加して動物に給与するのが好ましい。
【００３２】
また、本発明の飼料又は薬剤に、さらに酵母類及び乳酸菌類を配合すれば、よりコクシジウム症やクロストリジウム症に対する予防及び／又は治療効果を高めることができる。
本発明に使用する酵母類としては、Saccharomyces cerevisiae、Saccharomyces uvarum、Saccharomyces diastaticus、Saccharomyces rouxii等のSaccharomyces属；Schizosaccharomyces pombe等のSchizosaccharomyces属；Saccharomycodes ludwigii等のSaccharomycodes属；Hanseniaspora valbyensis等のHanseniaspora属；Kluyveromyces fragilis、Kluyveromyces lactis等のKluyveromyces属；Pichia membranaefaciens等のPichia属；Hansenula anomala等のHansenula属；Debaryomyces hansenii等のDebaryomyces属；Lipomyces starkeyi等のLipomyces属；Brettanomyces bruxellensis等のBrettanomyces属；Candida utilis、Candida tropicalis、Candida lipolytica等のCandida属等の酵母が挙げられる。
また、本発明の酵母類は、前記酵母菌の他に、酵母細胞から常法により分取した酵母細胞壁も使用することができる。この酵母細胞壁は通常酵母菌及び／又は酵母醗酵産生物をも含有している。そして前記の酵母類は１種又は２種以上を適宜選択して使用することができる。
【００３３】
本発明に使用する乳酸菌としては、Lactobacillus acidophilus菌、Enterococcus faecium菌等が挙げられ、これらの乳酸菌の１種又は２種以上を適宜選択して使用することができる。また製剤中の乳酸菌は通常１０5／ｇ〜１０12／ｇ含有されている。
【００３４】
本発明の飼料中の酵母類及び乳酸菌類の含有量としては、抗コクシジウム効果、抗クロストリジウム効果、動物の嗜好性の点から、酵母類の場合、０．０１〜５質量％とするのが好ましく、特に０．０５〜０．５質量％とするのが好ましい。また乳酸菌類の場合、０．０００１〜１０質量％とするのが好ましく、特に０．００１〜１質量％とするのが好ましい。
本発明の抗コクシジウム剤又は抗クロストリジウム剤中の酵母類及び乳酸菌類の含有量としては、抗コクシジウム効果、抗クロストリジウム効果、動物の嗜好性の点から、酵母の場合、１〜９９．９質量％とするのが好ましく、特に５〜５０質量％とするのが好ましい。また乳酸菌類の場合、０．０１〜５０質量％とするのが好ましく、特に０．１〜２０質量％とするのが好ましい。
【００３５】
本発明において、飼料の給与量、あるいは薬剤の投与量は、動物の種類、年齢（月齢）、症状などによって異なるが、通常ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンとして０．０５〜２００ｍｇ／体重ｋｇ／日とするのが好ましく、特に０．２〜２０ｍｇ／体重ｋｇ／日とするのが好ましい。本発明の飼料の給与又は薬剤の投与は、全飼育期間にわたって行っても、飼育期間の一定期間のみ行ってもよいが、特に鶏の場合は産まれた直後から４週齢まで給与するのが、高い抗コクシジウム効果や抗クロストリジウム効果が得られる点で好ましい。
【００３６】
本発明の飼料及び薬剤を給与する動物の種類は特に限定されず、例えば鶏、アヒル等の家禽類、牛、豚、羊等の家畜類を挙げることができ、特に鶏に好適である。
【実施例】
【００３７】
以下、本発明について実施例をあげて具体的に説明するが、本発明はこれらによって何等限定されるものではない。
【００３８】
下記の表１に示す組成よりなる鶏用飼料（基礎飼料）をそれぞれ準備した。
【００３９】
【表１】
2008110951.tif 000002
【００４０】
実施例１
供試鶏（鶏種：チャンキー１週令、雄）を１区３０羽として７区設けた。
第１区〜第７区の供試鶏に対し、表１に示した基礎飼料（１００質量％）にそれぞれの成分を添加した各飼料（表４）を自由に摂取させて１２日間飼育した。第１区を除く第２区〜第７区の供試鶏に対しては、飼育開始７日後にコクシジウム原虫アイメリア・アセルブリナのオーシストを５．０×１０4個／羽の割合で経口感染させた。次いで、飼育終了後、各試験区の供試鶏を解剖し、十二指腸の病変状態の程度を下記の評価基準に従って評価した。また、解剖当日に各区ごとに糞を採取し、糞１ｇ当たりのオーシスト数（OPG）を測定し、その数値範囲により下記の評価基準に従って評価した。その結果を表５に示す。
【００４１】
【表２】
2008110951.tif 000003
【００４２】
【表３】
2008110951.tif 000004
【００４３】
【表４】
2008110951.tif 000005
【００４４】
【表５】
2008110951.tif 000006
【００４５】
表５の結果から、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを添加した飼料（第５区）を給与すれば、基礎飼料（感染）（第２区）で観察された、アイメリア・アセルブリナの感染による発育の低下が改善されていた。また、盲腸の病変指数も低く抑えられていた。体重増体率比、生存率、病変点数及び糞中OPG点数より算出したACI（抗コクシジウム指数）でも、サリノマイシンに次いで、高い値を示していた。これらの結果から、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンの組み合わせによりアイメリア・アセルブリナの感染による生産性への影響を低く抑えることができると判断された。
【００４６】
実施例２
供試鶏（鶏種：チャンキー初生雛、雄）を１区２０羽として３区設けた。
第８区〜第１０区の供試鶏に対し、上記表１に示した基礎飼料（１００質量％）にそれぞれの成分を添加した各飼料（表６）を自由に摂取させて２８日間飼育した。全ての試験区の供試鶏に対して、飼育開始２１日後にコクシジウム原虫アイメリア・マキシマのオーシストを１．５×１０4個／羽の割合で経口感染させた。感染６〜８日後の各日に各区ごとに糞を採取し、糞１ｇ当たりのオーシスト数（OPG）を測定した（３日間の値を平均）。その結果を表７に示す。
【００４７】
【表６】
2008110951.tif 000007
【００４８】
【表７】
2008110951.tif 000008
【００４９】
表７の結果から、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを添加した飼料（第１０区）を給与すれば、アイメリア・マキシマのOPG排泄を低下させ、アイメリア感染時の発育を改善することができた。これらの結果から、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンの組み合わせにより、アイメリア・マキシマの感染による生産性への影響を低く抑えることができた。
【００５０】
実施例３
供試鶏（鶏種：チャンキー初生雛、雄）を１区８０羽として５区設けた。
第１１区〜第１５区の供試鶏に対し、上記表１に示すように２週毎に配合組成を変えた基礎飼料（１００質量％）にそれぞれの成分を添加した各飼料（表８）を自由に摂取させて３５日間飼育した。全ての試験区の供試鶏に対しては、飼育開始２１日後にコクシジウム原虫アイメリア・アセルブリナのオーシストを７．０×１０3個／羽、アイメリア・テネラのオーシストを６．０×１０3個／羽、及びアイメリア・マキシマのオーシストを１．５×１０4個／羽の割合でそれぞれ経口感染させた。飼育開始４週後及び５週後に各区ごとに糞を採取し、糞１ｇ当たりのオーシスト数（OPG）を測定した。その結果を表９に示す。
【００５１】
【表８】
2008110951.tif 000009
【００５２】
【表９】
2008110951.tif 000010
【００５３】
表９の結果から、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを添加した飼料（第１２区）を給与すれば、アイメリア・アセルブリナ、アイメリア・テネラ及びアイメリア・マキシマ感染時の発育が改善され、OPGの排泄も低く抑えられており、これらのアイメリア類の感染を低く抑えられるものと判断された。また酵母類及び乳酸菌類を添加することで、発育は更に改善され、OPGの排泄もやや低くなる傾向であり、より優れた抗コクシジウム効果が得られることが確認できた（第１３区）。
【００５４】
実施例４
供試鶏（鶏種：チャンキー初生雛、雄）を１区２０羽として５区設けた。
第１５区〜第１８区の供試鶏に対し、上記表１に示した基礎飼料（１００質量％）にそれぞれの成分を添加した各飼料（表１０）を自由に摂取させて２１日間飼育した。本試験で用いた基礎飼料は、ライ麦を３０％配合しており、これにより、腸管内でのクロストリジウム・パーフリンゲンスの増殖が促進され、雛の発育が抑制される。飼育開始１週、２週、及び３週後に、クロアカ部分のスワブによりクロストリジウム・パーフリンゲンスの菌数を測定した。その結果を表１１示す。
【００５５】
【表１０】
2008110951.tif 000011
【００５６】
【表１１】
2008110951.tif 000012
【００５７】
表１１の結果から、ピネン、チモール、オイゲノール及びリモネンを添加した飼料（第１７区）では、ライ麦を多給して、クロストリジウムの増殖を促進し、人為的にクロストリジウムの影響を受けるように設定した実験系において、初期のクロストリジウムの増殖を遅らせ、増体重が改善されており、クロストリジウムの感染による発育の影響を軽減できる。また、酵母類及び乳酸菌類を添加することにより、クロストリジウムの増殖は更に抑制され、増体重も大きくなっており、より優れたクロストリジウム効果を得られることが確認された（第１８区）。