(57)【要約】【課題】優れた気道の杯細胞過形成抑制作用を有する新規な医薬組成物を提供すること。【解決手段】アゼラスチンと抗コリン薬を含有する医薬組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アゼラスチンと抗コリン薬を含有する医薬組成物。
【請求項２】
気道の杯細胞過形成を抑制するための請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
鎮咳及び／又は去痰のための請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
気道の杯細胞過形成の抑制と、鎮咳及び／又は去痰とを同時に行うための請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
アゼラスチンが、塩酸アゼラスチンである請求項１乃至請求項４から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
抗コリン薬が、ベラドンナ総アルカロイド、ベラドンナエキス、アトロピン、スコポラミン、ロートエキス、イソプロパミド、ダツラエキス、ベナクチジウム、プロパンテリン及びピペリドレート並びにそれらの薬理上許容される塩及びそれらの薬理上許容される誘導体からなる群より選ばれる１種又は２種以上である請求項１乃至請求項５から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
抗コリン薬が、ベラドンナ総アルカロイド及びベラドンナエキスから選択される１種又は２種である請求項１乃至請求項５から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
感冒剤として用いるための請求項１乃至請求項７から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
急性又は慢性気管支炎の治療に用いるための請求項１乃至請求項７から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
慢性気道疾患における急性呼吸器感染時の症状の治療に用いるための請求項１乃至請求項７から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
アゼラスチンと抗コリン薬が配合剤である請求項１乃至請求項１０から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
アゼラスチンを含有する医薬組成物と抗コリン薬を含有する医薬組成物とからなるキットである請求項１乃至請求項１０から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
アゼラスチンと抗コリン薬を同一の医薬組成物中に含有する請求項１乃至請求項１０のいずれか１項に記載の医薬組成物の製造方法。
【請求項１４】
感冒剤を製造するための請求項１乃至請求項７から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物の使用。
【請求項１５】
アゼラスチンと抗コリン薬を同時に、順次又は別個に投与する方法。
【請求項１６】
哺乳動物に請求項１乃至請求項７のいずれか１項に記載された医薬組成物の有効量を投与する感冒の予防方法又は治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、気道の杯細胞過形成を抑制するための医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
正常な気道の表面の多くは線毛上皮細胞で被われており、その中に気道粘液を産生する杯細胞が散在し、気道分泌液と線毛との協調作用により異物を排除している。しかし、気道分泌が亢進すると、気道内にそれらが貯留して細菌増殖の温床となるため、気道感染を反復したり気道閉塞をきたしたりすることが知られている。また、喫煙、種々の大気汚染物質又はアレルゲンの吸入、気道感染等で、気道分泌亢進のみならず杯細胞の過形成等が惹起され、これが長引くと急性呼吸器疾患から慢性難治性呼吸器疾患へ移行してしまう恐れがある（以上、例えば、非特許文献１参照）。このような悪循環を防ぐためには、急性期における通常の去痰剤による治療のみならず杯細胞過形成を抑制するための対処も必要である。
【０００３】
抗ヒスタミン剤の１種である塩酸アゼラスチンは、医療用薬として気管支喘息、アレルギー性鼻炎、蕁麻疹、湿疹・皮膚炎、アトピー性皮膚炎、皮膚掻痒症等の効能・効果を有することが知られている（例えば、非特許文献２参照）。しかし、感冒時に処方されることは現状では考え難い。一方、抗コリン薬は、副交感神経を遮断することにより過剰な気道分泌を抑制することが知られており（例えば、非特許文献３参照）、総合感冒薬や鼻炎用薬に配合される例がある。
【０００４】
これまでの薬理学的知見からでは、アゼラスチン及び抗コリン薬が杯細胞過形成抑制作用を有することは予想し難く、また、そのような効果を示唆した文献も存在しない。
【０００５】
また、現在のところ、アゼラスチンと抗コリン薬との併用について記載又は示唆した文献は見当たらず、その併用効果については不明であった。
【非特許文献１】医薬ジャーナル、２００２年、第３８巻、第１２号、ｐ１２１−１２６
【非特許文献２】日本医薬品集  医療薬  ２００６年版、じほう、２００５
【非特許文献３】薬理学、理工学社、１９８８年、ｐ１５８−１６５
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
優れた気道の杯細胞過形成抑制作用を有する新規な医薬組成物を見出すことが本発明の課題である。これまでに、当該分野における研究は十分になされてきたとはいえず、本発明の成果により、新規な予防又は治療効果を有する医薬組成物が提供できるものと考えられる。特に本発明は、呼吸器疾患等の予防又は治療、更には感冒等の予防又は治療に役立つと考えられる。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者は、気道の杯細胞過形成抑制作用を有する医薬組成物について長年にわたり鋭意研究を行った結果、意外にも、アゼラスチンと抗コリン薬とを併用すると優れた気道の杯細胞過形成抑制作用が発現するという驚くべき結果を見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
すなわち本発明は、（１）アゼラスチンと抗コリン薬を含有する医薬組成物であり、好適には、
（２）気道の杯細胞過形成を抑制するための（１）に記載の医薬組成物、
（３）鎮咳及び／又は去痰のための（１）に記載の医薬組成物、
（４）気道の杯細胞過形成の抑制と、鎮咳及び／又は去痰とを同時に行うための（１）に記載の医薬組成物、
（５）アゼラスチンが、塩酸アゼラスチンである（１）乃至（４）から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物、
（６）抗コリン薬が、ベラドンナ総アルカロイド、ベラドンナエキス、アトロピン、スコポラミン、ロートエキス、イソプロパミド、ダツラエキス、ベナクチジウム、プロパンテリン及びピペリドレート並びにそれらの薬理上許容される塩及びそれらの薬理上許容される誘導体からなる群より選ばれる１種又は２種以上である（１）乃至（５）から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物、
（７）抗コリン薬が、ベラドンナ総アルカロイド及びベラドンナエキスから選択される１種又は２種である（１）乃至（５）から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物、
（８）感冒剤として用いるための（１）乃至（７）から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物、
（９）急性又は慢性気管支炎の治療に用いるための（１）乃至（７）から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物、
（１０）慢性気道疾患における急性呼吸器感染時の症状の治療に用いるための（１）乃至（７）から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物、
（１１）アゼラスチンと抗コリン薬が配合剤である（１）乃至（１０）から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物及び
（１２）アゼラスチンを含有する医薬組成物と抗コリン薬を含有する医薬組成物とからなるキットである（１）乃至（１０）から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物である。
【０００９】
さらに本発明は、
（１３）アゼラスチンと抗コリン薬を同一の医薬組成物中に含有する（１）乃至（１０）のいずれか１項に記載の医薬組成物の製造方法、
（１４）感冒剤を製造するための（１）乃至（７）から選ばれるいずれか１項に記載の医薬組成物の使用、
（１５）アゼラスチンと抗コリン薬を同時に、順次又は別個に投与する方法及び
（１６）哺乳動物に（１）乃至（７）のいずれか１項に記載された医薬組成物の有効量を投与する感冒の予防方法又は治療方法を提供する。
【００１０】
本発明の「アゼラスチン」とは、アゼラスチン又はその薬理上許容される塩であり、好適には、塩酸アゼラスチンである。
【００１１】
本発明の「抗コリン薬」とは、副交感神経遮断薬とも呼ばれ、一般に医薬の分野でアセチルコリン受容体拮抗薬として作用するものであれば特に限定されないが、例えば、ベラドンナ総アルカロイド、ベラドンナエキス、アトロピン、ホマトロピン、スコポラミン、ロートエキス、イソプロパミド、ダツラエキス、ベナクチジウム、プロパンテリン、トロピカミド及びピペリドレート並びにそれらの薬理上許容される塩及びそれらの薬理上許容される誘導体等であり、好適には、ベラドンナ総アルカロイド、ベラドンナエキス、硫酸アトロピン、臭化水素酸ホマトロピン、臭化水素酸スコポラミン、臭化ブチルスコポラミン、ロートエキス、ヨウ化イソプロパミド、ダツラエキス、臭化メチルベナクチジウム、臭化プロパンテリン、トロピカミド、塩酸ピペリドレートであり、更に好適には、ベラドンナ総アルカロイド、ベラドンナエキス、ロートエキス、ヨウ化イソプロパミド、ダツラエキスであり、特に更に好適には、ベラドンナ総アルカロイドである。
【００１２】
本発明の「薬理上許容される塩」とは、本発明の有効成分である「アゼラスチン」又は「抗コリン薬」が、酸性基または塩基性基を有する場合に、塩基又は酸と反応させることにより、塩基性塩又は酸性塩にすることができるので、その塩を示す。
【００１３】
「塩基性塩」としては、好適には、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩のようなアルカリ金属塩；マグネシウム塩、カルシウム塩のようなアルカリ土類金属塩；Ｎ−メチルモルホリン塩、トリエチルアミン塩、トリブチルアミン塩、ジイソプロピルエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ−メチルピペリジン塩、ピリジン塩、４−ピロリジノピリジン塩、ピコリン塩のような有機塩基塩類又はグリシン塩、リジン塩、アルギニン塩、オルニチン塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩のようなアミノ酸塩であり、好適には、アルカリ金属塩である。
【００１４】
「酸性塩」としては、好適には、フッ化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩のようなハロゲン化水素酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、リン酸塩等の無機酸塩；メタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩のような低級アルカンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩のようなアリ−ルスルホン酸塩、酢酸塩、リンゴ酸塩、フマ−ル酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、酒石酸塩、蓚酸塩、マレイン酸塩等の有機酸塩；及び、グリシン塩、リジン塩、アルギニン塩、オルニチン塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩のようなアミノ酸塩であり、更に好適には、塩酸塩、臭化水素酸塩又は硫酸塩である。
【００１５】
本発明の「薬理上許容される誘導体」としては、例えば、アミノ基が炭素数１乃至６のアルキル基（例、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル又はヘキシル基）で置換された誘導体である。
【００１６】
本発明の有効成分である「アゼラスチン」及び「抗コリン薬」は、大気中に放置したり又は再結晶をすることにより、水分を吸収し、吸着水が付いたり、水和物となったりする場合があるが、そのような水和物も本発明に使用される。
【００１７】
本発明の「慢性気道疾患」とは、例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、気管支拡張症、気管支喘息、肺結核、塵肺症、肺気腫、びまん性汎気管支炎等が挙げられる。
【００１８】
本発明の「配合剤」とは、複数の成分が混合された単一の組成物をいう。
【００１９】
本発明の「キット」とは、複数の別個の組成物を一式にして用いるものをいう。
【００２０】
本発明において、アゼラスチンと抗コリン薬とは、同時に、順次又は別個に投与することができるが、一般に、臨床上は同時に投与するのが便利であり、それゆえ、アゼラスチンと抗コリン薬とは、配合剤として投与することが好ましい。また、製剤技術上、当該両化合物を物理的に混合することが好ましくない場合は、それぞれの単剤を同時に、順次又は別個に投与することもできる。  
【００２１】
本発明における、「同時に」投与するとは、全く同時に投与することの他、薬理学上許される程度に相前後した時間に投与することも含むものである。その投与形態は、ほぼ同じ時間に投与できる投与形態であれば特に限定はないが、単一の組成物であることが好ましい。  
【００２２】
本発明における、「順次又は別個に」投与するとは、異なった時間に別々に投与できる投与形態であれば特に限定はないが、例えば、１の成分を投与し、次いで、決められた時間後に、他の成分を投与する方法がある。  
【００２３】
本発明における、「治療する」とは、病気又は症状を治癒させること又は改善させること或いは症状を抑制させることを意味する。
【発明の効果】
【００２４】
本発明のアゼラスチンと抗コリン薬を含有する医薬組成物は、杯細胞の過形成を顕著に抑制し、ひいては優れた鎮咳及び／又は去痰作用を有することから有用である。
【００２５】
本発明のアゼラスチンと抗コリン薬を含有する医薬組成物は、一般に考えられる感冒等の症状の治療又は予防に有用であるが、好適には、急性又は慢性気管支炎等の症状の治療又は予防に有用であり、更に好適には、急性呼吸器感染症患者における急性気管支炎等の症状又はＣＯＰＤ、気管支拡張症、気管支喘息、肺結核、塵肺症、肺気腫、びまん性汎気管支炎等の慢性気道疾患を有する患者における急性気管支炎等の症状の治療又は予防にも有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２６】
本発明に用いられるアゼラスチン及び抗コリン薬は、公知の方法によって容易に合成可能であり、また市販品を購入することによっても入手可能である。
【００２７】
塩酸アゼラスチンは医薬品として市販されており容易に入手できる（例えば、（株）三洋化学研究所から購入できる）。
【００２８】
抗コリン薬のベラドンナエキス、ロートエキス、硫酸アトロピン、臭化ブチルスコポラミン、臭化メチルベナクチジウム、臭化プロパンテリンは日本薬局方ＸＩＶに収載されており、塩酸ピペリドレートは日本薬局方外医薬品規格２００２に収載されている。また、ベラドンナ総アルカロイド、ヨウ化イソプロパミド及びダツラエキスも既に医薬品として販売されているので容易に入手できる。
【００２９】
アゼラスチンの１回投与量は、適応症や年齢により異なるが、通常、０．２ｍｇ乃至１０ｍｇであり、これを１日に、１乃至３回投与する。
【００３０】
固形製剤の場合において、アゼラスチンの含有量は、通常、０．１ｍｇ乃至２０ｍｇであり、好適には、０．５ｍｇ乃至４ｍｇである。
【００３１】
ベラドンナ総アルカロイド及びダツラエキスの含有量は、通常、０．０５ｍｇ乃至８ｍｇであり、好適には、０．１ｍｇ乃至４ｍｇであり、
ヨウ化イソプロパミド及び硫酸アトロピンの含有量は、通常、０．３ｍｇ乃至６０ｍｇであり、好適には、１ｍｇ乃至３０ｍｇであり、
ベラドンナエキス、ロートエキス、臭化ブチルスコポラミン、臭化メチルベナクチジウム、臭化プロパンテリンの含有量は、通常、５ｍｇ乃至８００ｍｇであり、好適には、１０ｍｇ乃至４００ｍｇであり、
塩酸ピペリドレートの含有量は、通常、５０ｍｇ乃至８０００ｍｇであり、好適には、１００ｍｇ乃至４０００ｍｇである。
【００３２】
液剤の場合において、アゼラスチンの含有量は通常、０．０５ｍｇ／ｍＬ乃至４ｍｇ／ｍＬであり、好適には、０．１ｍｇ／ｍＬ乃至２ｍｇ／ｍＬである。
【００３３】
ベラドンナ総アルカロイド及びダツラエキスの含有量は、通常、０．００５ｍｇ／ｍＬ乃至０．８ｍｇ／ｍＬであり、好適には、０．０１ｍｇ／ｍＬ乃至０．４ｍｇ／ｍＬであり、
ヨウ化イソプロパミド及び硫酸アトロピンの含有量は、通常、０．０３ｍｇ／ｍＬ乃至６ｍｇ／ｍＬであり、好適には、０．１ｍｇ／ｍＬ乃至３ｍｇ／ｍＬであり、
ベラドンナエキス、ロートエキス、臭化ブチルスコポラミン、臭化メチルベナクチジウム、臭化プロパンテリンの含有量は、通常、０．５ｍｇ／ｍＬ乃至８０ｍｇ／ｍＬであり、好適には、１ｍｇ／ｍＬ乃至４０ｍｇ／ｍＬであり、
塩酸ピペリドレートの含有量は、通常、５ｍｇ／ｍＬ乃至８００ｍｇ／ｍＬであり、好適には、１０ｍｇ／ｍＬ乃至４００ｍｇ／ｍＬである。
【００３４】
本発明においては、上記有効成分の他、必要に応じて解熱鎮痛消炎薬、鎮咳薬、去痰薬、交感神経興奮薬、中枢神経興奮薬、消炎酵素類、ビタミン類、生薬類等を本発明の効果を損なわない範囲で含有させることができる。
【００３５】
これらの具体的な剤形としては、例えば、錠剤、細粒剤（顆粒剤、散剤を含む）、カプセル、液剤（シロップ剤を含む）等をあげることができ、各剤形に適した添加剤や基材を適宜使用し、日本薬局方等に記載された通常の方法に従い、製造することができる。  
【００３６】
上記各剤形において、その剤形に応じ、通常使用される各種添加剤を使用することもできる。例えば、賦形剤、安定化剤、コーティング剤、滑沢剤、吸着剤、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、着色剤、ｐＨ調節剤及び香料等を添加することができる。
【実施例】
【００３７】
以下に、実施例及び試験例を示し、本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の範囲はこれらに限定されるものではない。
【００３８】
（実施例１）錠剤
（１）成分
（表１）
１錠中（ｍｇ）                    （１ａ）  （１ｂ）  （１ｃ）  （１ｄ）
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−
塩酸アゼラスチン                      ２        ２        ２        ２
ベラドンナ総アルカロイド、又は、  ０．２        −        −        −
ダツラエキス
ヨウ化イソプロパミド、又は、          −        ２        −        −
硫酸アトロピン
ベラドンナエキス、ロートエキス、      −        −      ２０        −
臭化ブチルスコポラミン、
臭化プロパンテリン、又は、
臭化メチルベナクチジウム
塩酸ピペリドレート                    −        −        −    ２００
乳糖                                ７０      ７０      ８０      ８０
ステアリン酸マグネシウム              ８        ８        ８        ９
ヒドロキシプロピルセルロース        ２５      ２５      ３０      ４０
トウモロコシデンプン                適量      適量      適量      適量
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−。
【００３９】
（２）製法
上記成分及び分量をとり、日局製剤総則「錠剤」の項に準じて錠剤を製造する。
【００４０】
（実施例２）顆粒剤
（１）成分
（表２）
１包中（ｍｇ）                    （２ａ）  （２ｂ）  （２ｃ）  （２ｄ）
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−
塩酸アゼラスチン                      ２        ２        ２        ２
ベラドンナ総アルカロイド、又は、  ０．２        −        −        −
ダツラエキス
ヨウ化イソプロパミド、又は、          −        ２        −        −
硫酸アトロピン
ベラドンナエキス、ロートエキス、      −        −      ２０        −
臭化ブチルスコポラミン、
臭化プロパンテリン、又は、
臭化メチルベナクチジウム
塩酸ピペリドレート                    −        −        −    ２００
乳糖                              ９００    ９００    ８００    ６００
ポリビニルピロリドン                ２５      ２５      ３０      ３５
トウモロコシデンプン                適量      適量      適量      適量
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−。
【００４１】
（２）製法
上記成分及び分量をとり、日局製剤総則「顆粒剤」の項に準じて細粒剤を製造する。
【００４２】
（実施例３）カプセル剤
（１）成分
（表３）
１乃至２カプセル中（ｍｇ）        （３ａ）  （３ｂ）  （３ｃ）  （３ｄ）
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−
塩酸アゼラスチン                      ２        ２        ２        ２
ベラドンナ総アルカロイド、又は、  ０．２        −        −        −
ダツラエキス
ヨウ化イソプロパミド、又は、          −        ２        −        −
硫酸アトロピン
ベラドンナエキス、ロートエキス、      −        −      ２０        −
臭化ブチルスコポラミン、
臭化プロパンテリン、又は、
臭化メチルベナクチジウム
塩酸ピペリドレート                    −        −        −    ２００
乳糖                              ２００    ２００    １６０    １００
ポリビニルピロリドン                ２５      ２５      ３０      ３５
トウモロコシデンプン                適量      適量      適量      適量
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−。
【００４３】
（２）製法
上記成分及び分量をとり、日局製剤総則「顆粒剤」の項に準じて細粒剤を製造した後、カプセルに充てんして硬カプセル剤を製造する。
【００４４】
（実施例４）シロップ剤
（１）成分
（表４）
１０ｍＬ中（ｍｇ）                （４ａ）  （４ｂ）  （４ｃ）  （４ｄ）
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−
塩酸アゼラスチン                      ２        ２        ２        ２
ベラドンナ総アルカロイド、又は、  ０．２        −        −        −
ダツラエキス
ヨウ化イソプロパミド、又は、          −        ２        −        −
硫酸アトロピン
ベラドンナエキス、ロートエキス、      −        −      ２０        −
臭化ブチルスコポラミン、
臭化プロパンテリン、又は、
臭化メチルベナクチジウム
塩酸ピペリドレート                    −        −        −    ２００
安息香酸ナトリウム                  ７０      ７０      ７０      ７０
グリセリン                        １００    １００    １５０    ２００
ポリビニルアルコール                ８０      ８０      ８０      ８０
白糖                            １２００  １２００  １５００  １５００
精製水                              残部      残部      残部      残部
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−。
【００４５】
（２）製法
上記成分及び分量をとり、日局製剤総則「シロップ剤」の項に準じてシロップ剤を製造した後、褐色ガラス瓶に充てんしてシロップ剤を製造する。
【００４６】
（試験例）杯細胞形成抑制効果試験
（１）被験物質
ベラドンナ総アルカロイドはアルプス薬品工業（株）のものを使用した。また、塩酸アゼラスチンは（株）三洋化学研究所製のものを使用した。
【００４７】
各被験物質は投与液量が５ｍＬ／Ｋｇになるように、試験当日に０．５％カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）液を加えて調製した。
【００４８】
（２）動物
Ｆ３４４／ＤｕＣｒｊ雄性ラットの１０週齢を日本チャールズリバー（株）から購入し、温度２０〜２６℃、湿度３０〜７０％、照明時間７時〜１９時に制御されたラット飼育室内でラット用ブラケットテーパーケージに５匹ずつ入れ、飼料（マウス・ラット飼育用Ｆ−２、船橋農場製）および水フィルターを通した水道水を自由に摂取させて約１週間予備飼育した。試験開始日に肉眼で動物の健康状態を観察し良好なことを確認して体重を測定し無作為に１群７匹に群分けして用いた。
【００４９】
（３）気道粘膜障害モデルの作製方法
ラットにペントバルビタール５０ｍｇ／Ｋｇを腹腔内投与して麻酔させ、仰臥位に固定し、頚部喉頭側皮膚を正中に切開して、筋肉を鈍性に分離し気管を露出させた。口腔からラット用の液体気管内投与器具を用いて、気管露出部から確認しながら気管内に挿入し、１％リポポリサッカライド（ＬＰＳ）溶液を１００μＬ投与した。直ちに、気管周囲筋肉を縫合して切開部皮膚を瞬間接着剤（アロンアルファ(登録商標）、東亞合成社製）で接着させて気道粘膜障害動物を作成した。
【００５０】
（４）試験
試験開始日の午前中に被験物質（対象群にはＣＭＣ液）を経口投与した後に、上述の方法でＬＰＳ溶液を気管内投与し、その日の夕刻に再度被験物質（対象群にはＣＭＣ液）を経口投与した。２日目と３日目は１日２回（午前と夕刻）被験薬（対象群にはＣＭＣ液）を経口投与した。  
【００５１】
４日目に体重を測定した後、ペントバルビタール麻酔下で頚動脈を切断して放血安楽死させてから、喉頭蓋部より肺までの気管を採取し、生理食塩水で洗浄後、１０％中性緩衝ホルマリン液に親せき浸漬し充分に固定した。  
【００５２】
充分に固定後、気管を左右主気管支分岐部より上部約１０ｍｍで横断し、さらに上方に６ｍｍ以上の長さで横断し、管状の気管を切り出し観察材料とした。  
【００５３】
常法により、管状の気管を縦断して短冊状の薄切気管標本を作製し、これをアルシアン青・ＰＡＳ染色で染色後、６ｍｍ長の範囲内の杯細胞数を顕微鏡下で計測した。なお、１例について２本の短冊状気管組織標本の杯細胞合計数を計測数とした。
【００５４】
杯細胞形成抑制率（％）を次式より求めた。
【００５５】
（式１）
杯細胞形成抑制率（％）＝［１−Ｂ／Ａ］×１００
Ａ：ＣＭＣ投与群の杯細胞数の平均値
Ｂ：被験物質投与群の杯細胞数の平均値
（５）試験結果
得られた杯細胞形成抑制率の結果を表５に示す。なお、各値とも１群７匹の平均値である。
【００５６】
（表５）
被験物質（投与量：ｍｇ／Ｋｇ／回）                      杯細胞形成抑制率（％）
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−
塩酸アゼラスチン（０．２）                                          ８．７
ベラドンナ総アルカロイド（０．０５）                                ５．１
塩酸アゼラスチン（０．２）＋ベラドンナ総アルカロイド（０．０５）  ３４．５
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−。
【００５７】
表５より、塩酸アゼラスチンとベラドンナ総アルカロイドを併用すると、それぞれ単剤では予想不可能な顕著な気道杯細胞形成抑制効果が発現することがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００５８】
本発明のアゼラスチンと抗コリン薬を含有する医薬組成物は、杯細胞の過形成を顕著に抑制し、ひいては優れた鎮咳及び／又は去痰作用を有することから有用である。
【００５９】
本発明のアゼラスチンと抗コリン薬を含有する医薬組成物は、一般に考えられる感冒等の症状の治療又は予防に有用であるが、好適には、急性又は慢性気管支炎等の症状の治療又は予防に有用であり、更に好適には、急性呼吸器感染症患者における急性気管支炎等の症状又はＣＯＰＤ、気管支拡張症、気管支喘息、肺結核、塵肺症、肺気腫、びまん性汎気管支炎等の慢性気道疾患を有する患者における急性気管支炎等の症状の治療又は予防にも有用である。