(57)【要約】      （修正有）【課題】糸球体疾患の予防及び／又は治療剤、特に糖尿病性腎症の予防及び／又は治療用の医薬として有用である新規な糖化最終産物（ＡＧＥ）形成阻害剤を提供すること。【解決手段】一般式（１）2008291003.tif 000010（式中、Ｒ１は、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロゲノ低級アルキル基、又はニトロ基を示し、Ｘは、硫黄原子、又は次の一般式（２）2008291003.tif 000011（式中、Ｒ２は、低級アルキル基を示し、Ａ−は、ハロゲノ低級アルキルスルホネート、又はハロゲノボレートを示す。）で示される基を示す。）で表される化合物若しくはその溶媒和物を有効成分とするＡＧＥ形成阻害剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（１）
【化１】
2008291003.tif 000008
（式中、Ｒ１は、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロゲノ低級アルキル基、又はニトロ基を示し、Ｘは、硫黄原子、又は次の一般式（２）
【化２】
2008291003.tif 000009
（式中、Ｒ２は、低級アルキル基を示し、Ａ−は、ハロゲノ低級アルキルスルホネート、又はハロゲノボレートを示す。）で示される基を示す。）で表される化合物若しくはその溶媒和物を有効成分とするＡＧＥ形成阻害剤。
【請求項２】
一般式（１）で表される化合物が、３−［ヒドロキシ（４−ニトロフェニル）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメン−１−イウム  トリフルオロメタンスルホネート、３−［ヒドロキシ（フェニル）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメン−１−イウム  テトラフルオロボレート、３−［４−クロロフェニル（ヒドロキシ）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメン−１−イウム  テトラフルオロボレート、３−［ヒドロキシ（４−トリフルオロメチルフェニル）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメン−１−イウム  テトラフルオロボレート、ｔｒａｎｓ−３−［ヒドロキシ（４−ニトロフェニル）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメン、及びｃｉｓ−３−［ヒドロキシ（４−ニトロフェニル）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメンからなる群から選ばれる化合物、若しくはその溶媒和物である請求項１記載のＡＧＥ形成阻害剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載のＡＧＥ形成阻害剤を有効成分とする糸球体疾患の予防及び／又は治療剤。
【請求項４】
糸球体疾患が、糖尿病性腎症である請求項３記載の予防及び／又は治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は糸球体病変における不可逆的蛋白修飾による糖尿病性腎症の発症又は進展に対する予防及び／又は治療に有用な薬剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、本邦では糖尿病患者、糖尿病が疑われる患者及び糖尿病予備群が約２千万人存在するといわれている。糖尿病を起因とした合併症のうち、糖尿病性腎症の発症率は年々増加の推移をたどり、すでに慢性糸球体腎炎の発症率を上回り第一位となっている。
【０００３】
糖尿病性腎症が発症した場合における最大の問題点は、末期腎不全すなわち透析への移行率が、非常に高いことにある。また、糖尿病性腎症による透析への移行は医療費高騰等の社会的に大きな問題となっている。そこで、糖尿病性腎症に関わる治療剤、又は予防を期待できる薬剤が強く望まれている。
【０００４】
糖尿病性腎症の成因には、（１）遺伝的素因をはじめとして、（２）糸球体血行動態変化、（３）グリケーションの亢進やカルボニル・酸化ストレスにより生じた糖化最終産物（Advanced Glycation End Products（以下、「ＡＧＥ」と称する））の蓄積、（４）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｋｉｎａｓｅ  Ｃの活性化や、（５）ポリオール代謝の亢進など、様々な因子の関与が考えられている（非特許文献１、非特許文献２、非特許文献３、非特許文献４、非特許文献５）。
【０００５】
現在、糖尿病性腎症の治療現場では、糸球体血行動態の改善を主目的としたアンジオテンシン変換酵素阻害剤（以下、「ＡＣＥ阻害剤」と称する）やアンジオテンシンＩＩの１型受容体拮抗剤（以下、「ＡＲＢ」と称する）が汎用されており、基礎のみならず臨床的なｅｖｉｄｅｎｃｅが報告されている（非特許文献６、非特許文献７）。しかしながら、これらの多くは血圧降下剤として認可されており、糖尿病性腎症の治療剤としての認可はほとんどなされていない。単に、糖尿病性腎症の患者の多くは高血圧であることから、これらが汎用されているに過ぎない。なお、ＡＣＥ阻害剤のタナトリル錠（塩酸イミダプリル）は１型糖尿病性腎症の治療剤として初めて認可されたものの、糖尿病性腎症に対する治療又は予防的作用を有する薬剤はほとんどなく、新規な薬剤の登場が切望されている。
【０００６】
そこで次の糖尿病性腎症の治療剤として、ＡＧＥ形成阻害剤が注目を浴びている。ＡＧＥで修飾されたタンパクは腎循環動態、腎糸球体基底膜の濾過機構等、多数の腎機能に悪影響を及ぼし、また、ＡＧＥ自身がメサンギウム細胞等の腎構成細胞に多数存在するＡＧＥ関連受容体（例えば、Receptor for AGE：ＲＡＧＥ）に作用して、サイトカインや増殖因子等の障害因子を産生させることが報告されている（非特許文献８）。従って、ＡＧＥの形成を抑制することは、糖尿病性腎症の進展抑制に繋がると考えられる。
【０００７】
アミノグアニジンは、反応性カルボニル化合物（３−デオキシグルコソン、メチルグリオキサールなど）の捕捉作用、酸素ラジカル（特に、ヒドロキシラジカル）の捕捉作用及び金属キレート形成作用により、ＡＧＥの形成を阻害すると考えられており、ＡＧＥ阻害に基づく糖尿病性腎症の治療剤として、最初に本格的な研究がなされた化合物である。しかし、これはすでに臨床治験も終了したが、いまだ実用化には至っていない。（非特許文献９、非特許文献１０、非特許文献１１）。
【０００８】
また、その他のＡＧＥ形成阻害剤としてはアミノグアニジンの誘導体であるＯＰＢ−９１９５、ＬＲ−９０、ＡＬＴ−９４６、天然化合物及びその類縁体であるチアミン（ビタミンＢ１）、チアミンピロリン酸、ベンフォチアミンなど幾つかの化合物が知られている（非特許文献１２）が、いずれも実用化には至っていない。
その一方で下記一般式（１）で示されるような４−オキソジヒドロチオクロメン骨格を持つＡＧＥ形成阻害剤は知られていなかった。
【０００９】
【化１】
2008291003.tif 000002
【００１０】
（式中、Ｒ１は、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロゲノ低級アルキル基、又はニトロ基を示し、Ｘは、硫黄原子、又は次の一般式（２）
【００１１】
【化２】
2008291003.tif 000003
【００１２】
（式中、Ｒ２は、低級アルキル基を示し、Ａ−は、ハロゲノ低級アルキルスルホネート、又はハロゲノボレートを示す。）で示される基を示す。）
【００１３】
【非特許文献１】Cooper,ME.etal.;Lancet,352,213-219,1998.
【非特許文献２】槙野博史；糖尿病性腎症 発症・進展機序と治療：８０−１２１，１９９９年；診断と治療社
【非特許文献３】Bohlender, J.etal.;Am. J. Physiol. Renal Physiol.,289,F645-F659,2005
【非特許文献４】D, Jay.et al.;Free Radical Biology & Medicine,40,183-192,2006
【非特許文献５】Vinik, A.;ExpertOpin. Investig. Drugs,14(12),1547-1559,2005
【非特許文献６】Masakuni,N.et al.;Jpn. J. Pharmacol.,85:416-422,2001
【非特許文献７】Rossing, K.et al.;DiabetesCare.,28(9):2106-2112,2005
【非特許文献８】Locatelli, F.etal.;Nephrol.Dial.Transplant.,18(9):1716-25,2003
【非特許文献９】Price,DL.et al.;J. Biol. Chem.,276,48967-48972,2001
【非特許文献１０】Abdel-Rahman, E.et al.;ExpertOpin. Investig. Drugs.,11(4):565-574,2002
【非特許文献１１】Mark E.et al.;Current Diabetes Reports.,4:441-446,2004
【非特許文献１２】今泉勉  ほか；ＡＧＥｓ研究の最前線：２０９−２１７，２００４年；メディカルレビュー社
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
本発明は、新規なＡＧＥ形成阻害剤を提供することにある。ＡＧＥ形成阻害剤は糸球体病変における不可逆的蛋白修飾による糖尿病性腎症の発症及び進展に対する予防又は治療に有用である。また、原疾患が糖尿病性腎症と診断されていない患者であっても、慢性糸球体腎炎や高血圧性腎症などの糸球体疾患により透析移行している患者の多くは血漿中のＡＧＥが著しく増加しているという周知の事実から、ＡＧＥ形成阻害剤は糖尿病性腎症のみならず、慢性糸球体腎炎や高血圧性腎症なども含めた糸球体疾患に対する予防又は治療に有用である。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
上記実情に鑑み、本発明者らは、ＡＧＥ形成阻害作用を持つ化合物を探索した結果、下記一般式（１）で表される化合物が、ＡＧＥの一種であるペントシジンを指標にしたｉｎ  ｖｉｔｒｏ系での阻害試験において、アミノグアニジンと比較して、同等ないしは強いＡＧＥ形成阻害作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１６】
すなわち、本発明は、次の一般式（１）
【００１７】
【化３】
2008291003.tif 000004
【００１８】
（式中、Ｒ１は、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロゲノ低級アルキル基、又はニトロ基を示し、Ｘは、硫黄原子、又は次の一般式（２）
【００１９】
【化４】
2008291003.tif 000005
【００２０】
（式中、Ｒ２は、低級アルキル基を示し、Ａ−は、ハロゲノ低級アルキルスルホネート、又はハロゲノボレートを示す。）で示される基を示す。）
【００２１】
で表される化合物若しくはその溶媒和物を有効成分とするＡＧＥ形成阻害剤を提供するものである。
【００２２】
また、本発明は、一般式（１）で表される化合物が、３−［ヒドロキシ（４−ニトロフェニル）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメン−１−イウム  トリフルオロメタンスルホネート、３−［ヒドロキシ（フェニル）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメン−１−イウム  テトラフルオロボレート、３−［４−クロロフェニル（ヒドロキシ）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメン−１−イウム  テトラフルオロボレート、３−［ヒドロキシ（４−トリフルオロメチルフェニル）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメン−１−イウム  テトラフルオロボレート、ｔｒａｎｓ−３−［ヒドロキシ（４−ニトロフェニル）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメン、及びｃｉｓ−３−［ヒドロキシ（４−ニトロフェニル）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメンからなる群から選ばれる化合物、若しくはその溶媒和物であるＡＧＥ形成阻害剤を提供するものである。
【００２３】
また、本発明は、一般式（１）で表されるＡＧＥ形成阻害剤を有効成分とする糸球体疾患の予防及び／又は治療剤を提供するものである。
【００２４】
さらに、本発明は、一般式（１）で表されるＡＧＥ形成阻害剤を有効成分とする糖尿病性腎症の予防及び／又は治療剤を提供するものである。
【発明の効果】
【００２５】
本発明の一般式（１）で表される化合物若しくはその溶媒和物は、後記試験例に示すように、優れたＡＧＥ形成阻害作用を有し、糸球体疾患の予防及び／又は治療剤、特に糖尿病性腎症の予防及び／又は治療剤として有用である。
【００２６】
実施例に記載するとおり、血液透析患者の血漿を用い、アミノグアニジン又は各被検薬物を添加した評価において、各被検薬物は、アミノグアニジンと比べ、優れたＡＧＥ形成阻害活性を示した。すなわち、血液透析患者の血漿を用い、３７℃、７日間、アミノグアニジン又は各被検薬物を添加した系において認められた主要なＡＧＥの一種であるペントシジンの生成に対して、各被検薬物の添加は、いずれもアミノグアニジン添加に比べ、同等ないしは強いペントシジン生成抑制作用を示した。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２７】
本発明中、ハロゲン原子としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられ、塩素原子が好ましい。本発明中、低級アルキル基としては、直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ６アルキル基、例えばメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基等が挙げられる。本発明中、ハロゲノ低級アルキル基としては、ハロゲン置換された直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ６アルキル基、例えばモノフルオロメチル基、ジフルオロメチル基、トリフルオロメチル基、モノクロロメチル基、ジクロロメチル基、トリクロロメチル基、モノブロモメチル基、ジブロモメチル基、トリブロモメチル基、１−フルオロエチル基、２−フルオロエチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基、３，３，３−トリフルオロ−ｎ−プロピル基、４，４，４−トリフルオロ−ｎ−ブチル基、５，５，５−トリフルオロ−ｎ−ペンチル基、６，６，６−トリフルオロ−ｎ−ヘキシル基等が挙げられ、トリフルオロメチル基が好ましい。本発明中、ハロゲノ低級アルキルスルホネートとしては、ハロゲン置換された直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ６アルキルスルホネート、例えばモノフルオロメタンスルホネート、トリフルオロメタンスルホネート、２，２，２−トリフルオロエタンスルホネート、３，３，３−トリフルオロ−ｎ−プロパンスルホネート、４，４，４−トリフルオロ−ｎ−ブチルスルホネート、５，５，５−トリフルオロ−ｎ−ペンチルスルホネート、６，６，６−トリフルオロ−ｎ−ヘキシルスルホネート等が挙げられ、トリフルオロメタンスルホネートが好ましい。本発明中、ハロゲノボレートとしては、テトラフルオロボレート、テトラクロロボレートが挙げられ、テトラフルオロボレートが好ましい。本発明の一般式（１）で示されるＲ１の置換位置はｏ位、ｍ位又はｐ位が挙げられるが、ｐ位が好ましい。
【００２８】
本発明の化合物の好ましい例としては、３−［ヒドロキシ（４−ニトロフェニル）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメン−１−イウム  トリフルオロメタンスルホネート、３−［ヒドロキシ（フェニル）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメン−１−イウム  テトラフルオロボレート、３−［４−クロロフェニル（ヒドロキシ）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメン−１−イウム  テトラフルオロボレート、３−［ヒドロキシ（４−トリフルオロメチルフェニル）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメン−１−イウム  テトラフルオロボレート、ｔｒａｎｓ−３−［ヒドロキシ（４−ニトロフェニル）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメン、又はｃｉｓ−３−［ヒドロキシ（４−ニトロフェニル）メチル］−１−メチル−４−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−チオクロメンが挙げられる。  
【００２９】
一般式（１）で表される化合物は、水和物に代表される任意の溶媒和物を形成することができ、これらの溶媒和物も本発明に包含される。
【００３０】
また、一般式（１）は個々の鏡像異性体、ジアステレオマー及びそれらの混合物を示す。すなわち、本発明の一般式（１）で表わされる化合物において、ジヒドロチオクロメン骨格の３位の炭素原子及び３位に隣接する水酸基で置換された炭素原子は、不斉炭素であるが、本発明は該不斉炭素に基づくいずれの立体配置からなる異性体をも包含し、例えば、ラセミ体やいずれか一方の鏡像異性体を包含する。さらに、本発明は、生じることのある他の立体異性体を全て包含する。
【００３１】
本発明の一般式（１）で表される化合物は、公知の方法（Chem.Commun.,2001,1958又はJ.Org.Chem.,2003,7532に記載の方法等）に従い製造することができる。すなわち、市販のアリールアルデヒド（VI）と２−アルキルチオフェニルプロペノン（V）をトリフルオロボラン  ジエチルエーテレート等のルイス酸（VII）存在下反応後、重曹水又はトリエチルアミン等のアルキル処理により、４−オキソジヒドロチオクロメン誘導体（１ａ）、さらにヨウ化カリウム（VIII）の存在下、脱アルキル反応を行い（１ｂ）を製造することができる。２−アルキルチオフェニルプロペノン（V）は公知の方法（Tetrahedron, 1998, 54, 55599記載の方法等）に従い製造することができる。すなわち、２−アルキルチオベンゼン（IV）をβ−アルキルチオプロピオニルフルオライド（III）と反応させ２−アルキルチオフェニルプロペノン（V）を製造することができる。また、β−アルキルチオプロピオニルフルオライド（III）は公知の方法（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，１９９５，６３１７に記載の方法等）に従い、それぞれ市販のジフルオロ亜鉛（I）とβ−アルキルチオプロピオニルクロライド（II）から製造することができる。
【化５】
2008291003.tif 000006
【００３２】
〔式中、Ｒ１、Ｒ２及びＡ‐は前記と同じ置換基を示し、Ｒ３はＣ１〜Ｃ６アルキル基を示す〕
【００３３】
本発明の一般式（１）で表される化合物は、上記方法によって得られるが、さらに必要に応じて再結晶法、カラムクロマトグラフィー等の通常の精製手段を用いて精製することができる。また必要に応じて、常法によって前記した所望の溶媒和物にすることもできる。また、生じる異性体は、薄層シリカゲルカラムクロマトグラフィー等の通常の精製手段を用いて分離精製することができる。
【００３４】
本発明の医薬組成物は、一般式（１）で表される化合物若しくはそれらの溶媒和物を含有するものであって、単独で用いてよいが、通常は薬学的に許容される担体、添加物等を配合して使用される。医薬組成物の投与形態は、特に限定されず、治療目的に応じて適宜選択できる。斯かる剤形としては、例えば、散剤、顆粒剤、細粒剤、ドライシロップ剤、錠剤、カプセル剤、注射剤等を挙げることができる。
【００３５】
これらの製剤は、その剤形に応じて製剤学上使用される賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、希釈剤、緩衝剤、等張化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、溶解補助剤等の医薬品添加物と適宜混合、希釈又は溶解し、常法に従い製造することができる。
【００３６】
例えば、散剤の場合は、必須成分のほかに、必要に応じて適当な賦形剤、滑沢剤等を加えよく混和して調製すればよい。錠剤の場合は、必要に応じて適当な賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤等を加え、常法に従い打錠して調製すればよい。また錠剤は必要に応じてコーティングを施し、フィルムコート錠、糖衣錠等にすることができる。
【００３７】
また、注射剤の場合は、液剤（無菌水又は非水溶液）、乳剤及び懸濁剤の形態とすることができる。これらに用いられる非水担体、希釈剤、溶媒又はビヒクルとしては、例えばプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油等の植物油、オレイン酸エチル等の注射可能な有機酸エステルが挙げられる。また、該組成物には防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤等の補助剤を適宜配合することができる。
【００３８】
本発明の一般式（１）で表される化合物の投与量は年齢、体重、症状、投与形態及び投与回数等によって異なるが、通常は成人に対して１日１〜１０００ｍｇを、１回又は数回に分けて経口投与又は非経口投与するのが好ましい。
【実施例】
【００３９】
以下、実施例により本発明をさらに詳細に説明する。本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００４０】
実施例１
血液透析患者の血漿を用いてのＡＧＥ形成阻害作用
血液透析患者の血漿中ＡＧＥ（指標：ペントシジン）の測定はＭｉｙａｔａらの報告に従って実施した（Miyata,T.et al:J. Am. Soc. Nephrol.,13,2478-2487,2002）。血液透析患者の血漿０．９ｍＬをアミノグアニジン又は各被検薬物の存在下（添加量は０．１ｍＬ）で、３７℃で７日間反応した。アミノグアニジン及び各被検薬物の最終濃度は５．０ｍＭとした。なお、アミノグアニジン又は各被検薬物はジメチルスルフォキシド（ＤＭＳＯ）に溶解して使用した。ＤＭＳＯの最終濃度は反応溶液１ｍＬ中、反応時における酸化反応に影響しない１０％とした。７日間の反応後に、アミノグアニジン又は各被検薬物を添加した血漿中のペントシジンの濃度を以下に示す方法で測定した。
【００４１】
反応溶液０．０５ｍＬに等量の１０％トリクロロ酢酸（以下、「ＴＣＡ」と称する）を加え、５０００×ｇ、５分間遠心した。上清を除去し、沈殿物を５％ＴＣＡ０．３ｍＬで洗い、その後凍結乾燥し乾燥させた。次いで、窒素条件下で１１０℃、１６時間６Ｎ塩酸０．１ｍＬを添加し、乾燥物を加水分解した。引き続き、５Ｎ水酸化ナトリウム０．１ｍＬと０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）０．２ｍＬを添加し中和した。中和溶液は、口径０．５μｍのフイルターを通し、リン酸緩衝液で希釈し、ペントシジン測定用サンプルを調整した。ペントシジン濃度の測定はＭｉｙａｔａらの方法に従って実施した。
【００４２】
表１に、各被検薬物によるペントシジン形成阻害強度を、アミノグアニジンによる形成阻害強度を１．０とした場合における相対値として表した（形成阻害強度はコントロール群を対照においた。コントロール群にはＤＭＳＯのみ添加した）。
相対値＝（被検薬物の形成阻害率）÷（アミノグアニジンの形成阻害率）
【００４３】
アミノグアニジン及び各被検薬物の反応中における最終濃度は５．０ｍＭに固定した。
【００４４】
各被検薬物の相対値は、それぞれ７．７１、４．１８、３．８７、３．８５、２．２０及び１．００と算出され、いずれもアミノグアニジンによるペントシジン形成阻害強度と同等以上であった。以上から、一般式（１）で表される本発明の化合物は、アミノグアニジンと同等ないしは強力なＡＧＥ形成阻害作用を有し、さらに強力な治療剤としての可能性が本実験結果より明らかとなった。
【００４５】
【表１】
2008291003.tif 000007