(57)【要約】【課題】様々な食品に適用できるヘリコバクター・ピロリの抗菌剤及びそれが含まれた食品を提供することである。【解決手段】植物由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌、及び植物由来のロイコノストック属に属する乳酸菌のうち少なくとも１以上の乳酸菌の生菌を有効成分とするヘリコバクター・ピロリの抗菌剤である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
植物由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌、及び植物由来のロイコノストック属に属する乳酸菌のうち少なくとも１以上の乳酸菌の生菌を有効成分とするヘリコバクター・ピロリの抗菌剤。
【請求項２】
前記植物由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌がラクトバチルス・デルブルッキーに属する乳酸菌、ラクトバチルス・プランタラムに属する乳酸菌、及びラクトバチルス・フェルメンタムに属する乳酸菌のうち少なくとも１以上、並びに前記植物由来のロイコノストック属に属する乳酸菌がロイコノストック・ガーリカムに属する乳酸菌であることを特徴とする請求項１記載のヘリコバクター・ピロリの抗菌剤。
【請求項３】
請求項１又は２記載のヘリコバクター・ピロリの抗菌剤を含むことを特徴とする食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物由来の乳酸菌を有効成分とするヘリコバクター・ピロリの抗菌剤及びそれが含まれた食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヘリコバクター属菌の一種であるヘリコバクター・ピロリは、胃粘膜などに定着し発育する。このヘリコバクター・ピロリの有するウレアーゼは、体液中の尿素を加水分解し、アンモニアを生産し、このアンモニアは、胃粘膜に作用し、胃炎や胃潰瘍の増悪因子として作用している。さらに、１９９４年には世界保健機構（ＷＨＯ）によってヘリコバクター・ピロリが発がん性物質であると確認され、胃癌との関係が示唆されるようになった。日本におけるピロリ菌の感染者は人口の４０％前後であるが、４０歳以上の中高年層になると、その割合は８０％程度と言われている。
【０００３】
従来から、このヘリコバクター・ピロリの生育を阻害する抗菌剤として、様々なものが開発されており、例えば天然生薬由来のものが提案されている（特許文献１及び２）。
【０００４】
【特許文献１】特開平９−５２８３９号公報
【特許文献２】特開平９−５２８４０号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかし、特許文献１などに記載された天然生薬由来の抗菌剤は、生薬特有の苦味などがあり、食品などに添加する場合、その苦味を消すために刺激の強い香辛料などを添加しなければならず、様々な食品に容易に適用できないという問題がある。
【０００６】
そこで、本発明は、様々な食品に容易に適用できるヘリコバクター・ピロリの抗菌剤及びそれが含まれた食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
以上の目的を達成するため、本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、植物由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌、及び植物由来のロイコノストック属に属する乳酸菌のうち少なくとも１以上の乳酸菌の生菌が、ヘリコバクター・ピロリの生育を阻害できることを見出した。すなわち、本発明は、植物由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌、及び植物由来のロイコノストック属に属する乳酸菌のうち少なくとも１以上の乳酸菌の生菌を有効成分とするヘリコバクター・ピロリの抗菌剤である。
【０００８】
本発明に係るヘリコバクター・ピロリの抗菌剤は、植物由来の乳酸菌を有効成分とするので、天然生薬由来のものに比べて特有な苦味などがなく、様々な食品に適用できる。さらに、植物由来の乳酸菌の生菌が胃中で働き、ヘリコバクター・ピロリを効率的に除菌することが可能である。
【発明の効果】
【０００９】
以上のように本発明によれば、様々な食品に適用できるヘリコバクター・ピロリの抗菌剤及びそれが含まれた食品を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
植物由来の植物性乳酸菌は、動物性乳酸菌に比べ貧栄養状態での生育が可能で、生育温度やｐＨ等の環境要因もより過酷な条件で増殖できる。また、胃酸耐性、胆汁酸耐性が高く低ｐＨでの増殖が可能であるため、生体内での生存率が良好である。さらに、動物性乳酸菌が乳や畜肉のみを発酵するのに対し、植物性乳酸菌は、野菜、果実類、穀物、豆類、海藻類等幅広い食物を発酵させることが可能である。
【００１１】
本発明に係るヘリコバクター・ピロリの抗菌剤に含まれる植物性乳酸菌は、すんき漬から分離されていることが好ましい。すんき漬とは、長野県の木曽地方で生産・食されている漬物のことをいい、その製造においては、塩を一切使用せず、乳酸発酵によってのみ味付けを行い、日持ちを向上させるという特徴を有する。すんき漬から植物性乳酸菌は、既知の方法により分離することができる。例えば、漬け汁中に遊離している乳酸菌を乳酸菌分離用培地で分離する方法、または、漬け汁を集積培養後に乳酸菌分離用培地で分離する方法、漬物を集積培養し乳酸菌分離用培地で分離する方法、漬物に付着した乳酸菌を攪拌やホモジナイズ、超音波等で処理後、乳酸菌分離用培地で分離する方法、すんき漬の漬け種から分離する方法等である。
【００１２】
本発明に係るヘリコバクター・ピロリの抗菌剤において、植物性乳酸菌の生菌とは、単独或いは数種類の植物性乳酸菌を培養した培養液、その集菌物、凍結乾燥やスプレードライ等により乾燥させた植物性乳酸菌の粉末、顆粒、タブレット状の物で、乳酸菌分離用または増殖用の培地に接種した時、増殖する能力を有する物をいう。
【００１３】
本発明に係るヘリコバクター・ピロリの抗菌剤において、前記植物由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌がラクトバチルス・デルブルッキーに属する乳酸菌、ラクトバチルス・プランタラムに属する乳酸菌、及びラクトバチルス・フェルメンタムに属する乳酸菌のうち少なくとも１以上、並びに前記植物由来のロイコノストック属に属する乳酸菌がロイコノストック・ガーリカムに属する乳酸菌であることが好ましい。さらに、胃酸耐性が高く、低ｐＨ条件化での生育が良いことが好ましい。
【００１４】
本発明に係るヘリコバクター・ピロリの抗菌剤の形態としては、すんき漬などの植物からの分離物を液体状、粉末状、顆粒状及びタブレット状などに加工されたものの他、すんき漬などの植物から分離せずに、その植物そのものを加工したものであっても良い。特に、すんき漬の発酵条件により多くのヘリコバクター・ピロリの生育阻害作用を得ることができる。植物そのものを加工したものとして、例えば乾燥させて切断されたものや、粉末化されたものがある。
【００１５】
本発明に係る食品として、菌株又はそれを含む発酵物を種菌として食物を発酵させたものがある。これら発酵食品として、例えばヨーグルトやチーズ、漬物、発酵飲料などがある。また、本発明に係る食品としては、これらの他に錠剤状又はカプセル状の健康食品、錠菓などの菓子類、飲料、ゼリーなど多くの用途に用いることができる。
【実施例】
【００１６】
次に、本発明に係るヘリコバクター・ピロリの抗菌剤の実施例について、説明する。すんき漬の一部を乳酸菌用集積培地で集積培養後、滅菌生理食塩水で任意に希釈し、薬剤を添加した乳酸菌分離用寒天培地（ＧＹＰ白亜寒天培地）で培養して乳酸菌の分離を行った。乳酸菌分離用寒天培地上に検出されたコロニーを個々に純培養し、常法によりグラム染色や顕微鏡による形態観察を行った後、細菌同定検査キット（アピ５０ＣＨＬ（日本ビオメリュー（株））で乳酸菌の確認を行った。さらに、１６ＳｒＲＮＡをコードするＳＳＵ ｒＤＮＡのＰＣＲ産物のシークエンスを行い、その塩基配列より乳酸菌の同定を行った。以上の方法ですんき漬より分離、同定した乳酸菌５菌株を表１に示す。また、分離した乳酸菌をＭＲＳ培地（ＯＸＩＯＩＤ）でそれぞれ純培養し、集菌、洗浄後凍結乾燥により実施例１乃至５に係る乳酸菌粉末を作製した。
【００１７】
【表１】
2008266148.tif 000002
【００１８】
次に、すんき漬け由来の乳酸菌の増殖性とｐＨ低下性を調べた。実施例１乃至５に係る乳酸菌をそれぞれ、ヘリコバクター・ピロリの増殖培地であるブルセラ培地に添加、３７℃で２４時間培養し、その増殖を660nmの吸光度で測定した。さらに、培養液のｐＨを測定し、ｐＨ低下性を調べた。これらの結果を表２に示す。比較例として、増殖性、ｐＨ低下性の低い菌株であるラクトバチルス・プランタラム  １４株を使用し、同様に操作した。
【００１９】
【表２】
2008266148.tif 000003
【００２０】
表２から明らかなように実施例１乃至５に係る乳酸菌は、ヒト体温の３７℃での増殖性とｐＨ低下性が良好であった。
【００２１】
次に、ヘリコバクター・ピロリの生育環境である胃中での乳酸菌の胃酸耐性を調べた。ｐＨ３.０に調整し、０.３％ペプシンを添加したＭＲＳ培地に、実施例1乃至５に係る乳酸菌の前培養液を１０％添加して３７℃で３時間培養した。その培養液をリン酸緩衝液を用いて希釈し、ＭＲＳ寒天培地に０．１mｌ塗布後、３７℃で２日間培養し、コロニー数をカウントした。培養前のコロニー数を１００とした時の、３時間培養後の乳酸菌の生存率を求めた。その結果を表３に示す。
【００２２】
【表３】
2008266148.tif 000004
【００２３】
表３から明らかなように、実施例１乃至５に係る乳酸菌はｐＨ２.５での生存性が良好であった。
【００２４】
次に、ブルセラ培地にヘリコバクター・ピロリの培養液を１０％濃度になるように添加後、実施例２を代表として抗菌剤の培養液を１％添加し、３７℃で２４時間、微好気状態で培養した。培養０時間及び２４時間目にサンプリングを行い、培養中のヘリコバクター・ピロリの菌数を測定した。比較例として本発明に係る抗菌剤を添加せずに、同様に培養した。これらの結果を表４に示す。
【００２５】
【表４】
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【００２６】
表４から明らかなように実施例２を代表として抗菌剤を添加したものは、ヘリコバクター・ピロリが死滅したことが分かる。
【００２７】
次に、本発明に係る抗菌剤が含まれた食品として豆乳ヨーグルトを作製した。先ず、原材料となる豆乳１００部、脱脂大豆粉末２０部及び水５０部を均一に混合・溶解し、１００℃、３０秒の加熱殺菌を行い、４５℃まで冷却後、実施例２に係るラクトバチスル・デルブルッキーのスタータを２０部添加し、容器に充填した後、３７℃で発酵させた。約１２時間後に発酵を終了させ、１０℃に冷却した。発酵終了時のｐＨは４．１であり、大豆タンパクのゲル化によりカード（ヨーグルト）を形成していた。