(57)【要約】【課題】医薬として有用なＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの安定した品質の結晶およびその製造方法を提供する。【解決手段】粉末Ｘ線回折パターンおよび／または示差走査熱量分析サーモグラムで特定され、優れた熱安定性などの性質を有する、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶。【選択図】図９
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ピーク角度２θ（エネルギー：１０ＫｅＶ）で表して、ほぼ、3.97°、6.21°、7.00°、7.34°、7.74°、7.95°、8.11°、9.25°、9.41°、9.47°、9.54°、9.76°、9.95°、10.48°、10.62°、10.77°、11.51°、11.88°、11.94°、12.21°、12.44°、12.64°、12.77°、13.20°、13.48°、14.07°、14.15°、14.20°、14.29°および14.32°のピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを示すＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶。
【請求項２】
図９に例示される粉末Ｘ線回折パターンを示すＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶。
【請求項３】
１０℃／ｍｉｎの昇温速度で、ほぼ１５９℃にピークを有する示差走査熱量サーモグラムを示すＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶。
【請求項４】
Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶の製造方法であって、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの含水エタノール溶液から該化合物を結晶化させる工程を含む製造方法。
【請求項５】
含水エタノールが５０〜８０％含水エタノールである請求項４に記載の製造方法。
【請求項６】
結晶化工程がＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの含水エタノール溶液にＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶を加えて該化合物を結晶化させる工程である請求項４または請求項５に記載の製造方法。
【請求項７】
Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶の製造方法であって、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのエタノール溶液にＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶を加えて該化合物を結晶化させる工程を含む製造方法。
【請求項８】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のε型結晶と同定されたＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの原薬。
【請求項９】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶からなる医薬。
【請求項１０】
請求項８の原薬からなる医薬。
【請求項１１】
Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの製造方法であって、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドとＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタールとを反応させる工程を含む製造方法。
【請求項１２】
Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドとＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタールとを反応させる工程がＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドとＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタールとを不活性溶媒中で反応させる工程である請求項１１に記載の製造方法。
【請求項１３】
不活性溶媒がＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドである請求項１２に記載の製造方法。
【請求項１４】
Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶の製造方法であって、請求項１１〜１３のいずれか一項に記載の製造方法で製造したＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドを含水エタノールに溶解する工程、および該含水エタノール溶液からＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドを結晶化させる工程を含む製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの新規結晶多形体、その製造方法およびそれを含有する医薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
下記式（Ｉ）で表されるＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドは、末梢型ベンゾジアゼピン受容体に対して選択的かつ顕著な親和性を示すと共に、優れた抗不安作用を示すので、不安関連疾患、うつ病、てんかんなどの中枢性疾患、多発性硬化症などの免疫性神経疾患、狭心症、高血圧症などの循環器系疾患の治療薬および予防薬として有用な化合物であることが後記特許文献１および特許文献２に記載されている。
【０００３】
【化１】
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【０００４】
特許文献１の実施例１４６および特許文献２の製造例１４６には、式（Ｉ）の化合物がエタノールから再結晶され、その結晶の融点が１６３−１６４℃であったことが記載されている。しかし、他の溶媒での式（Ｉ）の化合物の再結晶や、式（Ｉ）の化合物の結晶多形に関する記載は全くない。
【０００５】
また、特許文献１および特許文献２には、試薬としてヨウ化メチルと約６０％水素化ナトリウム(油性)を用いる式（Ｉ）の化合物の製造方法が記載されている。ヨウ化メチルは低沸点かつ有害性が強く、また、水素化ナトリウムは反応過程で水素を発生するため、それらの使用は工業的製造面から満足できるものではない。しかし、これらの文献には、他の式（Ｉ）の化合物の製造方法は全く開示されていないし、アルキル化剤と塩基の組み合わせ以外の製造方法の示唆もない。製造方法や再結晶溶媒を変更すると、新規の結晶多形が出現する可能性がある。そして、その可能性の予見は通常不可能である。
【０００６】
一方、ＩＣＨ（The International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use：日米ＥＵ医薬品規制調和国際会議）ガイドラインのトピックＱ６Ａ「新医薬品の規格及び試験方法の設定について（Specifications: Test Procedures and Acceptance Criteria for New Drug Substances and New Drug Products: Chemical Substances）」（非特許文献１）では、原薬の結晶多形について、「新原薬の中には、物理的性質の異なる２つ以上の結晶形で存在するものがある。結晶多形には、溶媒和物あるいは水和物（擬多形とも呼ばれる）や無晶形も含まれる。こうした固体状態の違いが、新製剤の品質や機能に影響を及ぼすことがある。そうした違いが、製剤機能、バイオアベイラビリティあるいは安定性に影響を及ぼすような場合には、新原薬の規格に適切な存在形を規定すべきである。」と述べている。そして、新医薬品の開発では、原薬の結晶多形の存在の有無を確認し、結晶多形が存在する場合は各結晶形の溶解度や安定性、融点に相違がないか調べ、相違がある場合は製剤の安全性や機能性、有効性が結晶形の影響を受けるか否かを調べるべきとしている。
【０００７】
このガイドラインを原薬製造の観点から見ると、原薬に結晶多形が存在する場合は、原薬の結晶形を単一にするか、あるいは複数の結晶形の原薬中の存在比を一定にコントロールすることが求められていると理解される。しかし、原薬の結晶多形が存在することを見つけることは必ずしも容易ではなく、通常は試行錯誤が必要である。また、結晶多形の存在が確認された場合、通常、単一の結晶からなる原薬、あるいは複数の結晶形の存在比が一定にコントロールされた原薬を製造することは容易に達成されることではなく、鋭意検討を必要とする。
【０００８】
【特許文献１】国際公報第９９／２８３２０号パンフレット
【特許文献２】特開２００１−４８８８２号公報
【非特許文献１】ＩＣＨガイドライン、トピックＱ６Ａ「新医薬品の規格及び試験方法の設定について」
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの安定した品質の結晶を工業的に製造可能な方法で提供することを目的とする。
【００１０】
本発明者らは、前記特許文献１および特許文献２の記載に準じて式（Ｉ）の化合物を繰り返し製造したところ、得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンが製造ロットごとにそれぞれ異なること、すなわち、式（Ｉ）の化合物の結晶多形が存在する可能性があることに気づいた。したがって、式（Ｉ）の化合物を医薬品の原薬として製造するためには、上記のガイドラインの観点からも、式（Ｉ）の化合物の結晶形を単一にするなどして、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの安定した品質の結晶を提供することが必要であった。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
そこで、本発明者らは、式（Ｉ）の化合物の結晶多形について鋭意検討を行った結果、特許文献１および特許文献２の記載に準じて製造した式（Ｉ）の化合物が２種類の結晶（以下、これらの２種類の結晶を、「α型結晶」および「γ型結晶」と称す。）の混合物であることを見出した。また、「α型結晶」および「γ型結晶」の示差走査熱量サーモグラムなどから、室温で単離不可能な「β型結晶」と室温で単離可能な「δ型結晶」が存在することをさらに見出した。これらに加えて、本発明者らは、前記特許文献１および特許文献２に記載の製造方法とは全く異なる新規な製造方法で式（Ｉ）の化合物を製造し、これを新規な組み合わせとなる再結晶溶媒（含水エタノール）で再結晶して新規で安定な「ε型結晶」を最初に製造し、本発明を完成するに至った。
【００１２】
すなわち、本発明は、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶、具体的には以下の結晶を提供するものである。
【００１３】
ピーク角度２θ（エネルギー：１０ＫｅＶ）で表して、ほぼ、3.97°、6.21°、7.00°、7.34°、7.74°、7.95°、8.11°、9.25°、9.41°、9.47°、9.54°、9.76°、9.95°、10.48°、10.62°、10.77°、11.51°、11.88°、11.94°、12.21°、12.44°、12.64°、12.77°、13.20°、13.48°、14.07°、14.15°、14.20°、14.29°および14.32°のピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを示すＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶。
【００１４】
図９に例示される粉末Ｘ線回折パターンを示すＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶。
【００１５】
１０℃／ｍｉｎの昇温速度で、ほぼ１５９℃にピークを有する示差走査熱量サーモグラムを示すＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶。
【００１６】
また、本発明は、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶の製造方法を提供する。具体的には以下の製造方法を提供する。
【００１７】
Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶の製造方法であって、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの含水エタノール溶液から該化合物を結晶化させる工程を含む製造方法。
【００１８】
前記のε型結晶の製造方法において、含水エタノールが５０〜８０％含水エタノールであるε型結晶の製造方法は好ましい。
【００１９】
前記のε型結晶の製造方法において、結晶化工程がＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの含水エタノール溶液にＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶を加えて該化合物を結晶化させる工程である製造方法はさらに好ましい。
【００２０】
本発明は、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶の製造方法であって、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのエタノール溶液にＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶を加えて該化合物を結晶化させる工程を含む製造方法も提供する。
【００２１】
加えて、本発明は、上述のε型結晶と同定されたＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの原薬を提供する。
【００２２】
さらに、本発明は、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶からなる医薬を提供する。
【００２３】
また、本発明は、前述のε型結晶からなるＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの原薬からなる医薬を提供する。
【００２４】
さらに、本発明は、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの製造方法であって、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドとＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタールとを反応させる工程を含む製造方法を提供する。
【００２５】
前記のＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの製造方法において、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドとＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタールとを反応させる工程がＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドとＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタールとを不活性溶媒中で反応させる工程は好ましい。
【００２６】
前記のＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの製造方法において、不活性溶媒がＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドである製造方法はさらに好ましい。
【００２７】
また、本発明は、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶の製造方法であって、前記（［００２４］〜［００２５］）の製造方法で製造したＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドを含水エタノールに溶解する工程、および該含水エタノール溶液からＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドを結晶化させる工程を含む製造方法を提供する。
【００２８】
本明細書における「α型結晶」、「γ型結晶」、「δ型結晶」および「ε型結晶」とは、通常の粉末Ｘ線回折、示差走査熱量分析等で示される物理化学的性質によって、それぞれ他の結晶および他の結晶との混合物とは区別される結晶を意味する。言い換えれば、本明細書における「α型結晶」、「γ型結晶」、「δ型結晶」および「ε型結晶」は、高純度の結晶を意味しており、具体的にはそれぞれ他の結晶が検出されない結晶であることを意味する（他の結晶の通常の検出限界は５％未満）。
【００２９】
「原薬」とは、ＩＣＨガイドラインのトピックＱ７Ａ「原薬GMPのガイドラインについて」の記載に準じ、医薬品有効成分（ＡＰＩ）とも称される、「医薬品の生産に使用することを目的とする物質で、医薬品の製造に使用された時に医薬品の有効成分となるもの」を意味する。本明細書における「ε型結晶と同定されたＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの原薬」は、実質的に他の結晶を含まないε型結晶であると同定されたＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの原薬を意味し、より具体的には、ε型結晶の含有率が９５％以上のＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの原薬を意味する。原薬の結晶の確認は、通常、粉末Ｘ線回折および／または示差走査熱量分析が用いられる。これらの原薬の定義には、医薬品の製造で通常用いられる方法で適宜粉砕された原薬も含まれる。
【００３０】
「医薬」とは、一般的には医薬品有効成分である原薬を含む製剤であり、具体的に本明細書では、上記のＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの原薬（結晶）を、投与剤型に合わせて製剤用担体と混合して調製された製剤を意味する。具体的な投与剤型および製剤用担体については後述する。したがって、「原薬（結晶）からなる医薬」とは、上記原薬（結晶）を含み、適宜製剤用担体を混合して調製された製剤を意味する。この製剤はまた、治療上有効な他の成分を含有していてもよい。
【発明の効果】
【００３１】
本発明によれば、工業的に生産可能な方法で製造でき、加えて粉砕時においてほとんど固着しない性質を有する、高純度で安定した品質のＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドのε型結晶（以下、「本発明の結晶」と称することもある）を供給することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３２】
「α型結晶」、「β型結晶」、「γ型結晶」、「δ型結晶」および本発明の結晶は、本明細書に記載の物理化学的性質によって特定される。しかし、後記の参考例や実施例において、例えば、同一の結晶形の粉末Ｘ線回折を異なるＸ線の波長で測定すると観測されるピーク角度が異なることからも明らかなように、これらの物理化学的性質を示すデータは、測定方法や測定器具によって多少変わるものであるから、本明細書に記載の結晶形を特定する物理化学的性質は厳密に解されるべきではない。
【００３３】
α型結晶の製法：
式（Ｉ）の化合物のα型結晶は、式（Ｉ）の化合物を含むＣ３−５アルコール（例えば、２−プロパノール、２−メチル−１−プロパノール、３−メチル−１−ブタノール）溶液から該化合物を常法に従って結晶化させることによって製造される。具体例を参考例２に示す。また、式（Ｉ）の化合物のα型結晶は、式（Ｉ）の化合物をエタノールに加熱溶解して調製した溶液を５℃以下、好ましくは−２1〜５℃、さらに好ましくは０〜５℃で冷却することからなる該化合物の結晶化によっても製造される。加熱溶解は、通常、エタノール溶液が還流する温度で行われる。冷却はγ型結晶を析出させないために急速で行われる。具体例を参考例３に示す。
【００３４】
γ型結晶の製法：
式（Ｉ）の化合物のγ型結晶は、式（Ｉ）の化合物を含むメタノール、Ｃ１−５アルキルアセタート（例えば、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸イソプロピル、酢酸ｎ−ブチル、酢酸イソアミル）、Ｃ３−６ケトン（例えば、アセトン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン）またはジメチルスルホキシド溶液から該化合物を結晶化させることによって製造される。この結晶化は常法に従って行うことができ、具体的な製造例を参考例６に示す。γ型結晶の製造に用いる溶媒は、前記溶媒の中ではＣ３−６ケトンが好ましく、具体例としてはアセトン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトンが挙げられ、これらの中では、メチルイソブチルケトンが特に好ましい。式（Ｉ）の化合物１ｇの結晶化に用いる溶媒量は、７〜１４ｍｌが好ましく、８〜９ｍｌがさらに好ましい。この場合において、式（Ｉ）の化合物は加熱して溶媒に溶解する。このときの加熱温度は特に限定されないが、通常は、溶媒の還流温度である。
【００３５】
δ型結晶の製法：
式（Ｉ）の化合物のδ型結晶は、溶媒の非存在下または存在下、式（Ｉ）の化合物の結晶（α型結晶とγ型結晶の混合物またはいずれか一方の結晶；これらの結晶は非晶質との混合物であってもよい。）を通常は１３０℃以上１６２℃未満の温度、好ましくは１４０℃以上１６１℃以下、さらに好ましくは１５０℃以上１６０℃以下の温度で加熱することによって製造される。具体的な製造例を参考例７に示す。
【００３６】
ε型結晶の製法：
式（Ｉ）の化合物のε型結晶は、式（Ｉ）の化合物を含む含水エタノール溶液から該化合物を結晶化させることによって製造される。この結晶化は常法に従って行うことができる。通常、式（Ｉ）の化合物１ｇの結晶化に用いる溶媒量は、７〜１６ｍｌが好ましく、１２〜１４ｍｌがさらに好ましい。この場合において、式（Ｉ）の化合物は加熱して溶媒に溶解する。このときの加熱温度は特に限定されないが、通常は、溶媒が還流するまで加熱する。具体的な製造例を実施例３に示す。
【００３７】
含水エタノールは水とエタノールの混合物を意味し、好ましい含水エタノールは、通常、５０〜８０％含水エタノールであり、更に好ましいものは５５〜７５％含水エタノールであり、更に一層好ましいものは６０〜７０％含水エタノールである。この明細書において、例えば、６５％含水エタノールとは３５容量部の水と６５容量部のエタノールの混合物を意味する。また、エタノールは原薬製造に通常使用される純度であって市販されているエタノールを意味する。
【００３８】
上記式（Ｉ）の化合物の含水エタノール溶液を冷却するとε型結晶が析出する。結晶化のときに、式（Ｉ）の化合物の結晶を種晶として加えてもよく、ここにおいて結晶の種はε型結晶が好ましい。この溶液の冷却速度は、特に限定されないが、好ましくは０.２５〜２．５℃／ｍｉｎである。溶液中に析出した結晶を濾取し、常法に従って乾燥（好ましくは１２０℃以下で乾燥）すれば、目的の結晶が製造される。
【００３９】
後記の参考例２〜７、参考例３、平衡吸湿性試験等から明らかなとおり、ε型結晶はそれ自体安定な結晶であり、さらに、δ型結晶が高温で直接加熱する方法で製造されるのに対し、通常行われる再結晶法で容易に製造できる。したがって、ε型結晶はＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの原薬として好ましい。また、ε型結晶は、γ型結晶とは異なってジェットミルによる粉砕においてほとんど固着せず、粉砕工程を経た原薬の製造が容易な結晶である。
【００４０】
α型結晶、γ型結晶およびδ型結晶は、特許文献１に記載の方法に準じて製造した式（Ｉ）の化合物を用いて単一溶媒からの再結晶を検討して得られた結晶である。一方、ε型結晶は、式（Ｉ）の化合物の工業的製法検討を行った結果得られた結晶であり、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドとＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（以下、「ＤＭＦＤＭＡ」と称することもある。）とを反応させることからなる新規な製造方法で製造した式（Ｉ）の化合物を含水エタノールから再結晶して初めて製造された結晶である。但し、新規な結晶（α型結晶、γ型結晶、δ型結晶およびε型結晶）が一度得られると、それらの結晶の製造方法が原料として用いる化合物（式（Ｉ）の化合物）の製造方法に依存しなくなることは当業者によく知られていることである。以下に式（Ｉ）の化合物の新規製法について説明する。
【００４１】
Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドとＤＭＦＤＭＡとの反応は、無溶媒下または適当な不活性溶媒中で常圧または加圧下に行うことができる。不活性溶媒とはＤＭＦＤＭＡなどの溶質と反応しない溶媒を意味し、使用する溶媒としては、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、テトラヒドロフラン、メチルテトラヒドロフラン、１，２−ジメトキシエタン、２，２−ジメトキシプロパン、１，１−ジエトキシプロパン、ジグライム、１，４−ジオキサン、アニソール、メタノール、トルエン、キシレン、酢酸メチルが挙げられる。これらの溶媒はそれぞれ単独で、或いは２種以上混合して用いられるが、通常は単独の溶媒を用い、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを単独の溶媒として用いる。通常、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミド１ｇに対して１〜６ｍｌ、好ましくは１〜２ｍｌの溶媒を用いる。
【００４２】
Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドとＤＭＦＤＭＡとの反応は、適当な不活性溶媒中で行うのが好ましく、さらには、常圧下で行うことが好ましい。ＤＭＦＤＭＡの使用量は、通常、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミド１モルに対してＤＭＦＤＭＡを１モル〜３モル用い、好ましくは１．１〜２．５モル用いる。
【００４３】
Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドと過剰量のＤＭＦＤＭＡを無溶媒下で反応させることも可能である。この場合、過剰量のＤＭＦＤＭＡを回収して用いることが好ましい。通常、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミド１ｇに対してＤＭＦＤＭＡを５〜１０ｍｌ用いる。
【００４４】
常圧下での反応温度は室温から反応溶液の還流温度の間から選択できる。加圧下での反応温度は、室温から３００℃までの範囲の温度から選択できる。通常の反応温度は４０℃〜２００℃であり、好ましくは６０℃〜１５５℃、さらに好ましくは１００℃〜１２０℃である。
【００４５】
反応時間は、反応温度や溶媒の種類などの反応条件に影響されるため特に限定はされないが、通常、５分〜２４時間、好ましくは１時間〜３時間程度である。
【００４６】
単離精製方法としては、例えば、濃縮、濾取、晶析、洗浄、再結晶、溶媒抽出、カラムクロマトグラフィーやこれらを組み合わせた方法などが挙げられる。
【００４７】
上記Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドはＷＯ９９／２８３２０および特開２００１−４８８８２号公報に記載の方法またはこれらに準じた方法により製造することができる。ＤＭＦＤＭＡは市販されているものをそのまま使用できる。
【００４８】
本発明の結晶は、末梢型ベンゾジアゼピン受容体に対して選択的でかつ顕著な親和性を示すと共に優れた抗不安作用を示すので、不安関連疾患(神経症、心身症、不安障害など)、うつ病、てんかんなどの中枢性疾患、多発性硬化症などの免疫性神経疾患、狭心症、高血圧症などの循環器系疾患の治療薬および予防薬として有用である。このことは前記特許文献１に記載の式(Ｉ)の化合物の薬理試験結果（末梢型ベンゾジアゼピン受容体に対するＩＣ５０＝０.８５ｎＭ、中枢型ベンゾジアゼピン受容体に対するＩＣ５０＞１０００ｎＭ、抗不安作用の最小有効量＝０.００３ｍｇ／ｋｇ）から説明される。
【００４９】
本発明の結晶の投与経路としては、経口投与あるいは非経口投与のいずれでもよい。投与量は、投与方法、患者の症状・年齢等により異なるが、通常０.０１〜５０mg／kg／日、好ましくは０.０３〜５mg／kg／日である。
【００５０】
本発明の結晶は通常、製剤用担体と混合して調製した製剤の形で投与される。製剤用担体としては、製剤分野において常用され、かつ本発明の結晶と反応しない物質が用いられる。
【００５１】
剤型としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤、シロップ剤、懸濁剤、坐剤、貼付剤、注射剤等が挙げられる。これらの製剤は常法に従って調製され、例えば、ＷＯ９９／２８３２０に記載の製剤例をそのまま具体例として挙げることができる。これらの製剤は、本発明の結晶を０．０１％以上、好ましくは０．１〜７０％の割合で含有することができる。これらの製剤はまた、治療上有効な他の成分を含有していてもよい。
【実施例】
【００５２】
以下、参考例および実施例を挙げて本発明の新規な結晶およびその製造方法について説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。また、実施例に記載のデータは、通常、同じ実験を繰り返しても数値が多少変わるものであるから、厳密に解されるべきではない。参考例および実施例で得られた結晶は以下の方法で同定した。
【００５３】
（１）高輝度放射光施設SPring-8 BL24XU Hutch Bを用いたα型結晶、β型結晶、γ型結晶およびδ型結晶の粉末Ｘ線回折：BL24XU Hutch Bに設置された小型回折計を用い、エネルギー１０ＫｅＶ、ステップ０.００６°（２θ）、０.５ｍｍφ石英キャピラリー、測定時間１.０ｓｅｃ／ｓｔｅｐ、入射スリット０.４×１.０ｍｍ、受光スリット（１）０.１ｍｍ（垂直）、受光スリット（２）０.３ｍｍ（垂直）、受光スリット間距離６３０ｍｍで透過法により測定した。
【００５４】
（２）高輝度放射光施設SPring-8 BL24XU Hutch Bを用いたε型結晶の粉末Ｘ線回折：BL24XU Hutch Bに設置された小型回折計を用い、エネルギー１０ＫｅＶ、ステップ０.００６°（２θ）、１. ０ｍｍφ石英キャピラリー、測定時間２.０ｓｅｃ／ｓｔｅｐ、入射スリット０.４×１.０ｍｍ、受光スリット（１）０.２ｍｍ（垂直）、受光スリット（２）０.３ｍｍ（垂直）、受光スリット間距離８５０ｍｍで透過法により測定した。
【００５５】
（３）理学社製RINT2000 Ultima+を用いた粉末Ｘ線回折：Ｃｕ Ｋα１，２線、スキャン速度２°／ｍｉｎで集中法により測定した。
【００５６】
（４）島津製作所製XRD-6100を用いた粉末Ｘ線回折：Ｃｕ Ｋα１，２線、ステップ０.０２００°（２θ）、計測時間１．２ｓｅｃ／ｓｔｅｐ、スリットＤＳ０．５０度、スリットＳＳ０．５０度、スリットＳＳ０．１５ｍｍで測定した。
【００５７】
（５）昇温粉末Ｘ線回折：理学社製RINT2000 Ultima+を用い、水平試料板にヤナコ社製融点測定器MP型のヒートシンクを密着させ、昇温しながら、Ｃｕ Ｋα１，２線、スキャン速度１０°／ｍｉｎで集中法により測定した。
【００５８】
（６）α型、γ型およびδ型結晶の示差走査熱量分析：パーキンエルマー社製Pyrislを用い、昇温速度１０℃／ｍｉｎ、窒素雰囲気下２０ｍＬ／ｍｉｎで測定した。温度校正は、水（０℃）、インジウム（１５６.６℃）、亜鉛（４１９.５℃）を用い、熱量校正にはインジウム（２８.４５Ｊ／ｇ）を用いた。２〜５ｍｇの式（Ｉ）の化合物の結晶をアルミニウムパンにいれ、アルミニウムカバーでクリンプした後、測定に供した。
（７）ε型結晶の示差走査熱量分析：温度校正した理学社製Thermo Plus2を用い、昇温速度１０℃／ｍｉｎで測定した。
【００５９】
（８）熱重量分析：パーキンエルマー社製TGA7を用い、昇温速度５℃／ｍｉｎ、窒素雰囲気下、サンプル流量５０ｍＬ／ｍｉｎ、バランス流量２０ｍＬ／ｍｉｎで測定した。温度校正は、アルメル（alumel）（１５４.２℃）、ニッケル（３５５.３℃）を用いた。２〜５ｍｇの式（Ｉ）の化合物の結晶をプラチナパンにいれ、測定に供した。
【００６０】
（９）ホットステージ顕微鏡：オリンパス光学社製実体顕微鏡SZH型の光軸と、ヤナコ社製融点測定器MP型のヒートシンク中央の光軸を合わせ、ヒートシンク下方向からオリンパス光学社製LGPS光源を用いて偏光を照射し、昇温速度約５℃／ｍｉｎで昇温しながら結晶の変化、偏光の消失等を観察した。
【００６１】
参考例１  Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミド［式（Ｉ）の化合物］の製造：
本参考例はＷＯ９９／２８３２０の実施例１４６に記載の化合物［式（Ｉ）の化合物］の製法（ＷＯ９９／２８３２０の実施例１０６の製法に準じる製法）に準じて行った。但し、本参考例では６０％水素化ナトリウムに替えて炭酸カリウムを用いた。
具体的には、ＷＯ９９／２８３２０に記載の製法に準じて製造したＮ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７,８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミド（ＷＯ９９／２８３２０の実施例９１の化合物）７.７５gと炭酸カリウム４.１５gをジメチルホルムアミド１００mlに懸濁させ、これにヨウ化メチル４.２６gを加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物を減圧で濃縮し、残留物に水およびクロロホルムを加えてクロロホルム層を分取し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルムで溶出・精製し、エタノールから再結晶して目的物４.４６gを得た。融点は１６５〜１６６℃（未補正）だった。
同様の製法で式（Ｉ）の化合物の製造を数回繰り返したが、得られた結晶についてRINT2000 Ultima+で粉末Ｘ線回折を測定し、それぞれのパターンを比較するとピークの現れ方に差異が見られた。
【００６２】
参考例２  α型結晶の製造：
参考例１の式（Ｉ）の化合物１ｇを１００ｍＬナスフラスコに入れ、これに２−プロパノール（イソプロパノール）４０ｍＬを加えて栓をした後、水浴（１００℃）上で振騰して参考例１の化合物を溶解した。この溶液を室温で一昼夜放置した後、析出した結晶を濾取し、室温で減圧下１時間乾燥してα型結晶を得た。α型結晶のSPring-8 BL24XU Hutch Bを用いて得られたパターン（１０ＫｅＶ）および示差走査熱量サーモグラムを図１および図２に示す。
【００６３】
SPring-8 BL24XU Hutch Bを用いて得られたα型結晶の粉末Ｘ線回折のピーク角度（１０ＫｅＶ）とその相対強度（図１のピーク角度とその相対強度）を表１に示す。
【００６４】
【表１】
2008031093.tif 000004
【００６５】
昇温粉末Ｘ線回折を用いたα型結晶の測定では、１２５℃からβ型特有の回折ピークが現われ始め、１４０℃でα型からβ型への完全な転移が観測され、１６５℃でδ型への転移に伴うピークが観測された。
【００６６】
α型結晶の示差走査熱量サーモグラム（図２）は、１２０℃でβ型への転移に伴う吸熱ピーク、１６１℃で転移体（β型結晶）の融解およびδ型への転移に伴う吸発熱ピーク、１６７℃に転移体（δ型結晶）の融解に伴う吸熱ピークを示した。
【００６７】
α型結晶について熱重量分析を行った結果、重量変化は観測されなかった。
【００６８】
ホットステージ顕微鏡でα型結晶を観察すると、昇温過程と降温過程のいずれにおいてもα型−β型間の転移は融解を伴わず固体状態で転移した。β型からδ型への転移では結晶の融解を伴っていた。
【００６９】
参考例３  α型結晶の製造：
参考例１の化合物２５ｍｇを１５ｍＬガラススピッツに入れ、これにエタノール１ｍＬを加えて栓をした後、水浴（１００℃）上で振騰して参考例１の化合物を溶解した。この溶液を５℃に設定した恒温槽に入れ、析出した結晶を濾取し、室温で減圧下１時間乾燥してα型結晶を得た。この結晶の結晶形は粉末Ｘ線回折（RINT2000 Ultima+）で確認した。
【００７０】
参考例４  エタノール再結晶から得られた結晶：
参考例３の恒温槽の温度を２０℃または５０〜３０℃（５０℃から３０℃まで−５℃／ｈで冷却）に設定して式（Ｉ）の化合物の結晶を得た。これらの結晶について理学社製RINT2000 Ultima+を用いて粉末Ｘ線回折を測定すると、いずれの結晶もα型結晶とγ型結晶の混合物だった。
【００７１】
参考例５  β型結晶：
α型結晶の昇温粉末Ｘ線回折を測定した結果、α型結晶は１４０℃でβ型に転移し、続いて冷却すると１２０℃でα型に転移した。
【００７２】
SPring-8 BL24XU Hutch Bを用いて得られたβ型結晶の粉末Ｘ線回折のピーク角度（１０ＫｅＶ）とその相対強度（図７のピーク角度とその相対強度）を表２に示す。
【００７３】
【表２】
2008031093.tif 000005
【００７４】
昇温粉末Ｘ線回折の測定において、α型結晶は１４０℃に加熱されるとβ型固有の回折ピークを示してβ型結晶に転移し、β型結晶は冷却すると１２０℃でα型結晶と同じ回折パターンを示して、α型結晶に再転移した。
【００７５】
α型を１４０℃まで加熱、冷却、再加熱した時の示差走査熱量サーモグラムは１２０℃でそれぞれ吸熱（昇温）、発熱（降温）、吸熱（再昇温）パターンを示した。それらの熱量は同じであったことから、α型とβ型の転移は可逆的であった。
【００７６】
参考例６  γ型結晶の製造：
参考例１の化合物１ｇを５０ｍＬナスフラスコに入れ、これにメチルイソブチルケトン８ｍＬを加えて栓をした後、水浴（１００℃）上で振騰して参考例１の化合物を溶解した。この溶液を室温で一昼夜放置した後、析出した結晶を濾取し、室温で減圧下１時間乾燥してγ型結晶を得た。γ型結晶のSPring-8 BL24XU Hutch Bを用いて得られた粉末Ｘ線回折パターン（１０ＫｅＶ）および示差走査熱量サーモグラムをそれぞれ図３および図４に示す。
【００７７】
SPring-8 BL24XU Hutch Bを用いて得られたγ型結晶の粉末Ｘ線回折のピーク角度（１０ＫｅＶ）とその相対強度（図３のピーク角度とその相対強度）を表３に示す。
【００７８】
【表３】
2008031093.tif 000006
【００７９】
γ型結晶は、昇温粉末Ｘ線回折の測定において、１７０℃からδ型に由来する回折ピークが認められるようになり、１７４℃で完全にδ型結晶に転移した。γ型結晶がδ型結晶に転移するまでの間、α型結晶やβ型結晶への転移は観測されなかった。
【００８０】
γ型結晶の示差走査熱量サーモグラム（図４）は、１６２℃に融解による吸熱ピークを示した。示差走査熱量分析の昇温速度を５℃／ｍｉｎにすると、１６７℃に転移体（δ型結晶）の融解に伴う吸熱ピークが観測された。
【００８１】
γ型結晶について熱重量分析を行った結果、重量変化は観測されなかった。
【００８２】
参考例７  δ型結晶の製造：
参考例１の化合物を密栓ガラス容器に入れ、１５０℃のオーブンで２４時間加熱し、δ型結晶を得た。δ型結晶のSPring-8 BL24XU Hutch Bを用いて得られたパターン（１０ＫｅＶ）および示差走査熱量サーモグラムをそれぞれ図５および図６に示す。
【００８３】
SPring-8 BL24XU Hutch Bを用いて得られたδ型結晶の粉末Ｘ線回折のピーク角度（１０ＫｅＶ）とその相対強度（図５のピーク角度とその相対強度）を表４に示す。
【００８４】
【表４】
2008031093.tif 000007
【００８５】
δ型結晶は、昇温粉末Ｘ線回折の測定において、１７８℃で融解するまで結晶の変化はなかった。
【００８６】
δ型結晶の示差走査熱量サーモグラム（図６）では、１６７℃に融解による吸熱ピークが認められた。
【００８７】
δ型結晶について熱重量分析を行った結果、重量変化は観測されなかった。
【００８８】
実施例１  Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７，８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの製造：
Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７，８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミド３００ｇ、ＤＭＦＤＭＡ１１１ｇおよびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド３００ｍｌの混合物を１１０℃で３時間加熱攪拌した。反応混合物にイソプロパノール３ｌを加え、室温で２時間ついで氷冷下で１時間攪拌した。析出した結晶を濾取し、イソプロパノール６００ｍｌで２回洗浄する。結晶を８０℃で１６時間送風乾燥して目的物２９４．７ｇを得た。この結晶の化学純度をＨＰＬＣで測定した結果は９９.８６２％だった。
【００８９】
実施例２  Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（７−メチル−８−オキソ−２−フェニル−７，８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミドの製造：
Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチル−２−（８−オキソ−２−フェニル−７，８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトアミド２．５ｇおよびＤＭＦＤＭＡ１３ｍｌの混合物を１００℃で３０分間攪拌した。反応混合物に水３８ｍｌ加えた後、析出物を濾取、水洗し、目的物２．０ｇを得た。
実施例１および実施例２で得られた化合物は、元素分析値、マススペクトル、ＮＭＲスペクトルにより、ＷＯ９９／２８３２０の実施例１４６の化合物と同一の化学構造であることを確認した。
【００９０】
実施例３  ε型結晶の製造：
実施例１に記載の製法で製造された式（Ｉ）の化合物１３．０ｇ、エタノール７２．８ｍｌおよび水１８．２ｍｌの混合物を７８−８０℃で２６分間加熱攪拌した後、濾過した。容器をエタノール２８．６ｍｌおよび水３６．４ｍｌの混合溶媒で洗浄し、洗浄液を続いて濾過した。あわせた濾液に液温が７０℃のときにγ型結晶２ｍｇを添加し、加温しながら６３−７０℃で３時間攪拌した。攪拌しながら５０分かけて６６℃から１０℃まで冷却した後、１０−４℃で１時間攪拌した。析出した結晶を濾取し、６５％含水エタノール１５ｍｌで２回洗浄した。結晶を６０℃で１６時間送風乾燥して目的物１２．７ｇを得た。この結晶の化学純度をＨＰＬＣで測定した結果は９９.９８９％だった。
融点１６２−１６５℃（未補正）。
元素分析：  Ｃ２３Ｈ２３Ｎ５Ｏ２として
理論値  Ｃ  ６８．８１  Ｈ  ５．７７  Ｎ  １７．４４
測定値  Ｃ  ６８．７９  Ｈ  ５．７９  Ｎ  １７．４７。
ε型結晶のXRD-6100を用いて得られたパターン（Ｃｕ Ｋα１，２線）を図８に示す。
【００９１】
XRD-6100を用いて得られたε型結晶の粉末Ｘ線回折のピーク角度（Ｃｕ Ｋα１，２線）（図８のピーク角度）は、ピーク角度２θで表して、8.98°、9.26°、9.45°、11.34°、11.63°、12.02°、12.22°、13.00°、14.65°、14.99°、17.30°、17.90°、18.06°、18.80°、19.04°、19.39°、19.84°、20.04°、23.66°、24.70°、24.86°、25.11°、25.73°、26.40°および26.58°だった。
【００９２】
実施例４  ε型結晶の製造：
実施例１に記載の製法で製造された式（Ｉ）の化合物３００ｇにエタノール３．９ｌを加え加熱攪拌溶解後、溶液を濾過した。容器をエタノール３００ｍｌで洗浄後、洗浄液を濾過し溶液に合わせた。溶解液を還流温度まで加熱し、結晶が溶解するまで攪拌した。溶解液を冷却し、７０℃で未粉砕のε型結晶１．５ｇを添加し６５−７０℃で１時間攪拌した。内温３０℃以下になるまで冷却し（冷却速度：０．２５〜１℃／ｍｉｎ）、さらに３０℃以下で１時間攪拌した。析出結晶を濾取し、エタノール３００ｍｌで２回掛け洗いした。結晶を６０℃で１６時間乾燥し、目的物２８３．４ｇを得た。この結晶の化学純度をＨＰＬＣで測定した結果は１００．０％、電位差滴定で測定した結果は９９．８％だった。
元素分析：  Ｃ２３Ｈ２３Ｎ５Ｏ２として
理論値  Ｃ  ６８．８１  Ｈ  ５．７７  Ｎ  １７．４４
測定値  Ｃ  ６８．７０  Ｈ  ５．７６  Ｎ  １７．３１。
【００９３】
ε型結晶のSPring-8 BL24XU Hutch Bを用いて得られた粉末Ｘ線回折パターン（１０ＫｅＶ）を図９に示す。
【００９４】
SPring-8 BL24XU Hutch Bを用いて得られたε型結晶の粉末Ｘ線回折のピーク角度（１０ＫｅＶ）とその相対強度（図９のピーク角度とその相対強度）を表５に示す。
【００９５】
【表５】
2008031093.tif 000008
【００９６】
ε型結晶の示差走査熱量サーモグラム（図１０）では、１５９℃に融解による吸熱ピークが認められた。
【００９７】
ε型結晶について熱重量分析を行った結果、重量変化は観測されなかった。
【００９８】
実施例５：
実施例１に記載の製法で製造された式（Ｉ）の化合物５ｇに６５％含水エタノール１４９ｍｌを加え加熱攪拌溶解後、溶液を濾過した。濾液を還流温度まで加熱し、結晶が溶解するまで攪拌した。溶解液を冷却し、６０℃で未粉砕のε型結晶２５ｍｇを添加し６０℃で２時間攪拌した。内温１０℃になるまで冷却し（冷却速度：０．２５℃／ｍｉｎ）、さらに１０℃以下で１時間攪拌した。析出結晶を濾取し、乾燥した。この結晶が含有率９５％以上のε型結晶であることを粉末Ｘ線回折（XRD-6100、他の結晶の検出限界：＜５％）で確認した。
参考例８：
実施例１に記載の製法で製造された式（Ｉ）の化合物５ｇにエタノール１２７ｍｌを加え加熱攪拌溶解後、溶液を濾過した。濾液を還流温度まで加熱し、結晶が溶解するまで攪拌した。溶解液を冷却し、６０℃で未粉砕のγ型結晶２５ｍｇを添加し６０℃で２時間攪拌した。内温１０℃になるまで冷却し（冷却速度：０．２５℃／ｍｉｎ）、さらに１０℃以下で１時間攪拌した。析出結晶を濾取し、乾燥した。この結晶がγ型結晶であることを粉末Ｘ線回折（XRD-6100）で確認した。
【００９９】
参考例９：
ε型結晶２５ｍｇ、α型結晶２５ｍｇおよびエタノール１．０ｍｌの混合物を５０℃で２４時間攪拌した後、濾過した。濾取した結晶を乾燥した。この結晶の粉末Ｘ線回折（XRD-6100）を測定すると、α型結晶のピークはほとんど観測されず、ε型結晶のピークが観測された。すなわち、α型結晶がほとんどε型結晶に変化していたことが確認された。
【０１００】
参考例１０：
ε型結晶２５ｍｇ、γ型結晶２５ｍｇおよびエタノール１．０ｍｌの混合物を５０℃で２４時間攪拌した後、濾過した。濾取した結晶を乾燥した。この結晶の粉末Ｘ線回折パターン（XRD-6100）は、ε型結晶とγ型結晶の等量混合物の粉末Ｘ線回折パターン（XRD-6100）と比較すると、γ型結晶に特有のピークが相対的に減弱していた。すなわち、γ型結晶の一部がε型結晶に変化していたことが確認された。
【０１０１】
参考例１１：
ε型結晶２５ｍｇ、δ型結晶２５ｍｇおよびエタノール１．０ｍｌの混合物を５０℃で２４時間攪拌した後、濾過した。濾取した結晶を乾燥した。この結晶の粉末Ｘ線回折パターン（XRD-6100）は、ε型結晶とδ型結晶の等量混合物の粉末Ｘ線回折パターン（XRD-6100）と比較すると、δ型結晶に特有のピークが相対的に減弱していた。すなわち、δ型結晶の一部がε型結晶に変化していたことが確認された。
【０１０２】
平衡吸湿性試験：
無機飽和塩で調湿したデシケーター（２５℃，１５〜９３％ＲＨ；ＲＨは相対湿度を意味する）にα型、γ型、δ型の各結晶約１００ｍｇを入れ、１ヶ月間経時的に重量変化を測定した結果、いずれの結晶も０.１％以上の重量変化は観測されなかった。
無機飽和塩で調湿したデシケーター（２５℃，２３〜９８%ＲＨ；ＲＨは相対湿度を意味する）にε型結晶約１ g を入れ、２週間経時的に重量変化を測定した結果，吸湿性を示さなかった。
【０１０３】
固体安定性試験：
α型、γ型、δ型の各結晶約１ｍｇを精密に１０ｍＬアンプルまたはバイアルに量り込み、それぞれを４０℃、７０℃、８０℃、１００℃、４０℃（７５％ＲＨ）、２５℃（５２％ＲＨ）、２５℃（７５％ＲＨ）および２５℃（９３％ＲＨ）の各条件下に保存した。４５日後の残存量をＨＰＬＣを用いて定量した。各測定時点における標準品は、同様に秤量して別途４℃で保存したα型、γ型、δ型の各結晶を用いた。いずれの結晶も、いずれの条件下において、HPLCクロマトグラム上に類縁物質ピークの増加は認められず、残存量はほぼ100%(99.8-100.1%)と安定であった。
ε型結晶を４０℃／７５％RH及び２５℃／６０%RHで６ヶ月間保存した。性状、確認試験、類縁物質、乾燥減量、含量及び結晶形を測定した結果、いずれも安定であった。
【０１０４】
溶解度：
α型、γ型、δ型の各結晶の適量と蒸留水をミクロテストチューブにいれ、タイテック社製ミクロインキュベータM-36を用いて、３７℃、２０００ｒ／ｍｉｎで約５時間振騰し飽和させた。振騰後、フィルター（アドバンテックDISMIC-13HP:0.2μm）で濾過し、水溶液中濃度をＨＰＬＣで定量した。α型、γ型、δ型の各結晶の溶解度はそれぞれ１.７μｇ／ｍＬ、１.８μｇ／ｍＬ、１.７μｇ／ｍＬだった。
【０１０５】
溶解試験：
α型、γ型、δ型の各結晶１ｍｇにトウモロコシデンプン４ｍｇを加え、メノウ乳鉢でよく混合して試料を調製した。日本薬局方溶出試験器を用い、第二液(ｐＨ６.８)、９００ｍＬ、３７℃、パドル１００回転／ｍｉｎで溶解させた。経時的にフィルター（アドバンテックDISMIC-13HP：0.2μm）で濾過し、溶解液をとり、ＨＰＬＣを用いて溶解液中濃度を定量した。α型、γ型、δ型の各結晶のそれぞれの溶解曲線にはほとんど差が認められず、α型、γ型、δ型の各結晶の溶解性はほぼ同等だった。
α型、γ型、δ型の各結晶約１２０ｍｇをＩＲ用ＫＢｒ錠剤成形器を用いて圧縮成形（２０００ｋｇ／ｃｍ２、１０秒）し、直径１３ｍｍの円盤試料を調製した。円盤試料を円盤固定ホルダー（有効面積：０.７０８５ｃｍ２）に固定し、水９００ｍＬ、３７℃、１００ｒｐｍで溶解させた。経時的に溶解液をとり、ＨＰＬＣを用いて溶解液中濃度を定量した。α型、γ型、δ型の各結晶の溶解速度はそれぞれ０.０１８ｍｇ／ｈｒ／ｃｍ２、０.０１６ｍｇ／ｈｒ／ｃｍ２、０.０１５ｍｇ／ｈｒ／ｃｍ２であった。
ε型、γ型の各結晶の適量とメタノールを共栓付三角フラスコに入れ、２５℃，４０℃，５５℃で３時間振とうさせ、飽和させた。懸濁液をメンブランフィルター（Millex-LH, 0.45μm）で濾過し、メタノール溶液中濃度をHPLCで定量した。ε型、γ型の各結晶のメタノールに対する溶解度はそれぞれ25℃で6.05mg/mL、7.10mg/mL、40℃で12.80mg/mL、14.71mg/mL、55℃で30.22mg/mL、33.70mg/mLだった。
ε型、γ型の各結晶の適量と精製水を共栓付三角フラスコに入れ、２５℃、４０℃、５５℃で３時間振とうさせ、飽和させた。懸濁液をメンブランフィルター（Millex-LH, 0.45μm）で濾過し、水溶液中濃度をHPLCで定量した。ε型、γ型の各結晶の溶解度はそれぞれ25℃で1.54μg/mL、1.75μg/mL、40℃で2.86μg/mL、3.39μg/mL、55℃で6.23μg/mL、7.25μg/mLだった。
ε型、γ型の各結晶の適量と精製水を二重ビーカーに入れ、25℃で撹拌させ、飽和させた。懸濁液をメンブランフィルター（Millex-HV, 0.45μm）で濾過し、水溶液中濃度をHPLCで定量した。ε型、γ型の各結晶の溶解度はそれぞれ1.5μg/mL、1.9μg/mLだった。
【産業上の利用可能性】
【０１０６】
本発明の結晶は、不安関連疾患(神経症、心身症、不安障害など)、うつ病、てんかんなどの中枢性疾患、多発性硬化症などの免疫性神経疾患、狭心症、高血圧症などの循環器系疾患の治療薬および予防薬の製造に用いる安定した品質の原薬となり得る。殊に、ε型結晶は、α型結晶よりも安定であり、δ型結晶とは異なって工業的に生産可能な方法で製造でき、加えて粉砕時においてほとんど固着しないので、医薬製造のための原薬として有用な結晶である。
【図面の簡単な説明】
【０１０７】
【図１】SPring-8 BL24XU Hutch Bを用いて得られたα型結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。
【図２】α型結晶の示差走査熱量サーモグラムである。
【図３】SPring-8 BL24XU Hutch Bを用いて得られたγ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。
【図４】γ型結晶の示差走査熱量サーモグラムである。
【図５】SPring-8 BL24XU Hutch Bを用いて得られたδ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。
【図６】δ型結晶の示差走査熱量サーモグラムである。
【図７】SPring-8 BL24XU Hutch Bを用いて得られたβ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。
【図８】XRD-6100を用いて得られた本発明のε型結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。
【図９】SPring-8 BL24XU Hutch Bを用いて得られた本発明のε型結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。
【図１０】本発明のε型結晶の示差走査熱量サーモグラムである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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