(57)【要約】      （修正有）【課題】IL-6などの産生抑制作用が強く、抗炎症剤等として有用な薬剤の提供。【解決手段】下記一般式（１）の化合物を含有するインターロイキン産生抑制剤。2008115088.tif 000012（式１中、Rはアルコキシ基等を表し、Xは炭素数１〜６の２価脂肪族炭化水素基等を、Yはアミド基等を、Zは炭素数1〜２０の２価脂肪族炭化水素基を、Qはフェニル基等を表す。）【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）で示される化合物を活性成分として含有することを特徴とする、動物細胞における炎症性インターロイキン産生抑制剤。
【化１】
2008115088.tif 000009
（ただし、式１中、Rは水素原子(H)又はアルコキシ基を表し、Xは単結合又は炭素数１〜６の２価脂肪族炭化水素基を表し、Yはアミド基（-CO-NH-）又はエステル基(−CO-O-)を表し、Zは、炭素数1〜２０の２価脂肪族炭化水素基を表し、Qは水素原子（H）、若しくは水酸基により置換されているかあるいは非置換のフェニル基又はインドリル基を表す。）
【請求項２】
一般式（１）で示される化合物が下記一般式（２）で示されるフェルラ酸の誘導体であることを特徴とする、請求項１に記載の動物細胞における炎症性インターロイキン産生抑制剤。
【化２】
2008115088.tif 000010
（ただし、式２中、Rは水素原子またはアルコキシ基であり、Y1はイミノ基（NH）または酸素原子(O)であり、Zは炭素数１〜１０の２価脂肪族炭化水素基であり、Qは水素原子（H）、若しくは水酸基により置換されていてもよいフェニル基又はインドリル基を表す。）
【請求項３】
一般式（１）で示される化合物が下記一般式（３）で示されるバニリン酸の誘導体であることを特徴とする、請求項１に記載の動物細胞における炎症性インターロイキン産生抑制剤。
【化３】
2008115088.tif 000011
（ただし、式３中、Rは水素原子又はアルコキシ基であり、Y1はイミノ基（NH）または酸素原子(O)であり、Zは炭素数１〜10の２価脂肪族炭化水素基であり、Qは水素原子（H）、若しくは水酸基で置換されていてもよいフェニル基を表す。）
【請求項４】
一般式（２）で表される化合物が、N-(β-フェネチル)フェルラミド、フェルロイルトリプタミン、フェルロイルチラミン、β-フェネチルフェルレート、フェルラ酸3-フェニル-2-プロペニルから選ばれたものであることを特徴とする、請求項２に記載の動物細胞における炎症性インターロイキン産生抑制剤。
【請求項５】
一般式（３）で表される化合物が、4-ヒドロキシ-3-メトキシ安息香酸3-フェニル-2-プロペニル、又はシリンガ酸3-フェニル-2-プロペニルから選ばれたものであることを特徴とする、請求項３に記載の動物細胞における炎症性インターロイキン産生抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は医薬品及び健康食品において有用な、炎症性サイトカインIL-6，ＩＬ-8およびIL-１β等の産生を抑制し、抗炎症作用を有する薬剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
TNF-αやIL-6などの炎症性サイトカインは、病原菌の侵入に対して免疫機能を賦活するなど本来は合目的な機能を有しているが、何らかの原因によって過剰に生産され続けるとリウマチ性関節炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、2型糖尿病などさまざまな疾病を引き起こす。そのため、このような病態においてTNF-α、IL-6など炎症性サイトカインの生産を抑制する薬剤が開発されており、イブプロフェンやインドメタシン等既存の抗炎症剤の他、サリドマイド誘導体（非特許文献１参照）、ピラゾロン誘導体（非特許文献２参照）、合成クロメン誘導体（非特許文献３参照）、スベリヒユ科植物のアルカロイド（特許文献１参照）、クロモン誘導体（特許文献２参照）、肝実質細胞増殖因子（特許文献３参照）などがあるが、これらの疾病は慢性的な経過をたどることが多く治療は長期化することから、経口摂取が可能で副作用がなく安全な化合物が特に求められている。このような観点から、乳蛋白の断片ペプチド（特許文献４参照）、甘草やショウガの抽出物（特許文献５）、ドコサヘキサエン酸等の高度不飽和脂肪酸（特許文献６，７参照）など食品成分が注目されているが、より活性の強い化合物や当該活性のさらなる増強が必要である。
【０００３】
【特許文献１】特開2003-26586号公報
【特許文献２】特開2005-247762号公報
【特許文献３】特開2000-239182号公報
【特許文献４】特開2004-196707号公報
【特許文献５】WO2003/007974
【特許文献６】特表2006-511514号公報
【特許文献７】特開2000-159667号公報
【非特許文献１】S. Niwayama et al., J. Med. Chem., 39, 3044-3045, 1996
【非特許文献２】M.P. Clark et al., J. Med. Chem., 47, 2724-2727, 2004
【非特許文献３】J-F. Cheng et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 13, 3647-3650, 2003
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の課題は、上記現状に鑑み、安全性が高く、IL-6、IL-1βおよびIL-8等の炎症性インターロイキンの産生抑制作用が十分に強く、抗炎症剤等として有用な新規な薬剤を開発する点にある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
上記課題を解決するため、本発明者らは鋭意検討の結果、一般式（１）で示される化合物がマクロファージ様に分化した単球系培養細胞（急性単球性白血病細胞、THP-1）を大腸菌のリポ多糖（LPS）で刺激した時のIL-6、IL-1βおよびIL-8等の炎症性インターロイキンの産生を抑制し得ることを見いだし、該化合物が抗炎症剤として有用であると確信し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は以下のとおりである。
【０００６】
１）下記一般式（１）で示される化合物を活性成分として含有することを特徴とする、動物細胞における炎症性インターロイキン産生抑制剤。
【化１】
2008115088.tif 000002
（ただし、式１中、Rは水素原子(H)又はアルコキシ基を表し、Xは単結合又は炭素数１〜６の２価脂肪族炭化水素基を表し、Yはアミド基（-CO-NH-）又はエステル基(−CO-O-)を表し、Zは、炭素数1〜２０の２価脂肪族炭化水素基を表し、Qは水素原子（H）、若しくは水酸基により置換されているかあるいは非置換のフェニル基又はインドリル基を表す。）
２）一般式（１）で示される化合物が下記一般式（２）で示されるフェルラ酸の誘導体であることを特徴とする、上記１）に記載の動物細胞における炎症性インターロイキン産生抑制剤。
【化２】
2008115088.tif 000003
（ただし、式２中、Rは水素原子またはアルコキシ基であり、Y1はイミノ基（NH）または酸素原子(O)であり、Zは炭素数１〜１０の２価脂肪族炭化水素基であり、Qは水素原子（H）、若しくは水酸基により置換されていてもよいフェニル基又はインドリル基を表す。）
３）一般式（１）で示される化合物が下記一般式（３）で示されるバニリン酸の誘導体であることを特徴とする、上記１）に記載の動物細胞における炎症性インターロイキン産生抑制剤。
【化３】
2008115088.tif 000004
（ただし、式３中、Rは水素原子又はアルコキシ基であり、Y1はイミノ基（NH）または酸素原子(O)であり、Zは炭素数１〜10の２価脂肪族炭化水素基であり、Qは水素原子（H）、若しくは水酸基で置換されていてもよいフェニル基を表す。）
４）一般式（２）で表される化合物が、N-(β-フェネチル)フェルラミド、フェルロイルトリプタミン、フェルロイルチラミン、β-フェネチルフェルレート、フェルラ酸3-フェニル-2-プロペニルから選ばれたものであることを特徴とする、上記２）に記載の動物細胞における炎症性インターロイキン産生抑制剤。
５）一般式（３）で表される化合物が、4-ヒドロキシ-3-メトキシ安息香酸3-フェニル-2-プロペニル、又はシリンガ酸3-フェニル-2-プロペニルから選ばれたものであることを特徴とする、上記３）に記載の動物細胞における炎症性インターロイキン産生抑制剤。
【発明の効果】
【０００７】
本発明において一般式（１）で表される化合物は、動物の免疫細胞におけるIL-6、IL-1βおよびIL-8等の炎症性インターロイキンの産生を抑制する。その結果、個体レベルでは関節リウマチや潰瘍性大腸炎等の慢性炎症疾患の症状を緩和させる効果を有する。
一方、炎症性サイトカインの産生抑制物質として知られている前記したピラゾール誘導体等の物質は、安全性、副作用の問題を抱えているのに対し、本発明の一般式（１）で表される化合物は、従来から、園芸作物や漢方薬、プロポリス等健康増進剤の成分として、喫食あるいは服用されていたものが多く、本発明の薬剤は安全性が高いものといえる。
炎症性インターロイキンはリウマチや大腸炎ばかりでなく、肥満や誤嚥など色々な局面で過剰生産され、潜在的な疾病原因となっている。従って、このような炎症性インターロイキンの恒常的なコントロールは健康維持にとり極めて重要な意義がある。本発明の薬剤は上述のように食品やそれに近縁する素材の成分で構成され安全性が高いため、日常的かつ長期の摂取が可能と考えられ、治療剤としてばかりでなく、健康維持機能性食品添加物としても有用な薬剤である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明の炎症性インターロイキン産生抑制剤は、以下の一般式（１）で表される化合物を有効成分として含有するものである。
【化１】
2008115088.tif 000005
（ただし、式１中、Rは水素原子(H)又はアルコキシ基を表し、Xは単結合又は炭素数１〜６の２価脂肪族炭化水素基を表し、Yはアミド基（-CO-NH-）又はエステル基(−CO-O-)を表し、Zは、炭素数1〜２０の２価脂肪族炭化水素基を表し、Qは水素原子（H）、若しくは水酸基により置換されているかあるいは非置換のフェニル基又はインドリル基を表す。）
【０００９】
本発明の一般式（１）の化合物をさらに具体的に示すと以下のとおりである。
a）下記一般式（２）で示されるフェルラ酸の誘導体。
【化２】
2008115088.tif 000006
（ただし、式２中、Rは水素原子またはアルコキシ基であり、Y1はイミノ基（NH）または酸素原子(O)であり、Zは炭素数１〜１０の２価脂肪族炭化水素基であり、Qは水素原子（H）、若しくは水酸基により置換されていてもよいフェニル基又はインドリル基を表す。）
【００１０】
b）下記一般式（３）で示されるバニリン酸の誘導体。
【化３】
2008115088.tif 000007
（ただし、式３中、Rは水素原子又はアルコキシ基であり、Y1はイミノ基（NH）または酸素原子(O)であり、Zは炭素数１〜10の２価脂肪族炭化水素基であり、Qは水素原子（H）、若しくは水酸基で置換されていてもよいフェニル基を表す。）
【００１１】
本発明に使用する一般式（１）で示される化合物のうち、好ましいものの化学構造を具体的に例示すると、以下の４〜１０の化合物が挙げられるが、これらに限定されるわけではない。
【化４】
2008115088.tif 000008
【００１２】
これらの化合物の置換基を、一般式（１）中の置換基に対応させて以下に説明する。なお括弧内は、より具体的な一般式（２）〜（３）の中の該当する式の置換基と対応させたものである。
４の化合物（N-(β-フェネチル)フェルラミド）；一般式（１）中、R= H、X =- CH＝CH-,  Y=-CO-NH-基、Z=-CH2CH2-,  Q =-C6H5である化合物（一般式（２）中、R= H, Y1 =-NH,  Z=-CH2CH2-,  Q=-C6H5である化合物）。
５の化合物(フェルロイルトリプタミン)； 一般式（１）中、R =H, X=-CH＝CH-,  Y=-CO-NH-基、Z=-CH2CH2-,  Q = 3-インドリル基である化合物（一般式（２）中、R =H, Y1 =-NH-,  Z =-CH2CH2-,  Q = 3-インドリル基である化合物）。
６の化合物(フェルロイルチラミン)； 一般式（１）中、R =H, X =-CH＝CH-,  Y=-CO-NH-基,  Z =-CH2CH2-, Q = p-ヒドロキシフェニル基である化合物（一般式（２）中、R= H,  Y1 =-NH-,  Z =-CH2CH2-,  Q = p-ヒドロキシフェニル基である化合物）。
７の化合物(β-フェネチルフェルレート)； 一般式（１）中、R = H,   X=-CH＝CH-,  Y =-CO-O-基,  Z =-CH2CH2-,  Q =フェニル基である化合物（一般式（２）中、Ｒ = H,  Y1=-O-,   Z =-CH2CH2-,  Q =フェニル基である化合物）。
８の化合物(フェルラ酸3-フェニル-2-プロペニル)； 一般式（１）中、R =H, X =-CH＝CH-,  Y=-CO-O-基,  Z=-CH2CH＝CH-,  Q=フェニル基である化合物（一般式（２）中、R =H,Y1 =-O-,  Z =-CH2CH＝CH-,  Q =フェニル基である化合物）。
９の化合物(4-ヒドロキシ-3-メトキシ安息香酸3-フェニル-2-プロペニル)； 一般式（１）中、R = H,   X =単結合,  Y =-CO-O-,  Z =-CH2CH＝CH-,  Q =-C6H5である化合物（一般式（３）中、R= H,  Y1 =-O-,  Z =-CH2CH＝CH-,  Q =-C6H5である化合物）。
１０の化合物（シリンガ酸3-フェニル-2-プロペニル）；一般式（１）中、R =-OMe,   X=単結合,   Y =-CO-O-,  Z =-CH2CH＝CH-,  Q =-C6H5である化合物（一般式（３）中、R =-OMe,   Y1 =-O-,  Z =-CH2CH＝CH-,  Q =-C6H5である化合物）。
【００１３】
本発明の上記フェルラ酸誘導体の代表例はフェルロイルトリプタミン（FATA）であり、該化合物が、動物細胞における炎症性インターロイキン産生を抑制することは本発明者により初めて見出されたものである。
この活性自体は既存の医薬品である、炎症性サイトカイン抑制活性の知られているクロルプロマジン（M. Zinetti et al., Immunology, 86, 416-421, 1995）よりも弱いがイブプロフェンよりは強い。さらにFATAは、トウモロコシやベニバナの油糧種子に含まれており、FATAを有効成分とする炎症性インターロイキン産生抑制剤の安全性は高い。FATAの他、N-(β−フェネチル)フェルラミド（FAPA）、フェルラ酸フェネチルエステル（FAPE）、フェルラ酸３-フェニル-２-プロペニル等のフェルラ酸誘導体も炎症性インターロイキン産生抑制作用を示す。
【００１４】
上記バニリン酸誘導体の代表例はバニリン酸３-フェニル-２-プロペニル等であり、このようなバニリン酸エステルが、動物細胞における炎症性インターロイキンの産生を抑制することは本発明者により初めて見いだされたものである。
さらに、本発明で使用する、一般式（１）で示される化合物、すなわち、上記した、フェルラ酸誘導体、バニリン酸誘導体は、ＩＬ−６，ＩＬ−１β等の炎症性インターロイキンの産生を抑制するほか炎症性サイトカインTNF-αの産生も抑制し、さらに動物細胞における一酸化窒素（ＮＯ）の産生も抑制する。また、上記フェルラ酸誘導体、バニリン酸誘導体は、IL-8の産生も抑制する。したがって、本願発明の一般式（１）で表される化合物は、抗炎症剤として有用なものである。
【００１５】
一方、炭素数16〜２２の不飽和脂肪酸あるいはそのグリセリドまたは低級アルキルエステルの併用は、炎症性インターロイキンおよび一酸化窒素（ＮＯ）の産生抑制効果も顕著に向上させる。
このような炭素数１６〜２２の不飽和脂肪酸は、2重結合の数が１〜６の天然に広く分布している脂肪酸であり、具体的には、
ドコサヘキサエン酸(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-docosahexaenoic acid)、
(n-6)ドコサペンタエン酸(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z-docosapentaenoic acid)、
(n-3)ドコサペンタエン酸(7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-docosapentaenoic acid)、
エイコサペンタエン酸(5Z,8Z,11Z,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid)、
アラキドン酸(5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid)、
ステアリドン酸(6Z,9Z,12Z,15Z-octadecatetraenoic acid)、
ホモ-γ-リノレン酸(8Z,11Z,14Z-eicosatrienoic acid)、
α-リノレン酸(9Z, 12Z, 15Z-octadecatrienoic acid)、
γ-リノレン酸(6Z, 9Z, 12Z-octadecatrienoic acid)、
リノール酸(9Z,12Z-octadecadienoic acid)、
オレイン酸(9Z-octadecenoic acid)、
共役リノレン酸（10E,12Z-octadecadienoic acid
又は9Z,11E-octadecadienoic acid）などが挙げられる。
【００１６】
これらのうちでは、とりわけ魚油に含まれるドコサヘキサエン酸やエイコサペンタエン酸が高い炎症性インターロイキン産生抑制効果を示す。また、これらの不飽和脂肪酸は、グリセリドであってもよく、モノグリセリド、ジグリセリド、トリグリセリドのいずれでも良く、ジグリセリド、トリグリセリドの場合には当該不飽和脂肪酸以外の脂肪酸、例えばパルミチン酸やステアリン酸が結合していても良い。また、低級アルキルエステルとしてはエチルエステルの他に、メチル、プロピル、もしくはブチルエステルも用いられる。
【００１７】
本発明に関わる一般式（１）で示される化合物のうち、フェルラ酸の誘導体は、天然から容易に抽出されるフェルラ酸やバニリン酸の適当な誘導体と、対応するアミンやアルコールを酸クロライド法やカルボジイミド法など公知の方法で縮合させることにより容易に製造できる。以下の実施例で用いたフェルロイルトリプタミン（FATA）等のフェノール性化合物の合成法は特開2005-225872、特願2005-61659、特願2005-218519に記載したところと同様である。
【００１８】
また、ＦＡＴＡやフェルロイルチラミンは植物にも含まれており、それらを植物から公知の方法で抽出製造することも可能である。
この場合、不都合な夾雑物がない限り、粗抽出物や部分精製品として用いることもできる。抽出は水やエタノールで容易に行なえる。本発明に用いる場合、一般式（１）の化合物の添加量は化合物の種類、精製の方法や程度、求められる効果の程度により、生理的に安全な範囲で加減する。例えば式２の化合物の添加量は飲用水の１mlもしくは食物の１ｇあたり数ｍg以下とするが、総摂取量や摂取形態に応じて、生理的に安全な範囲内で適宜増減する。
次に、本発明を実施例に基づいてさらに詳細に説明する。
【実施例１】
【００１９】
ヒトTHP-1急性単球性白血病細胞（大日本製薬株式会社より購入）を10％の牛胎仔血清（FBS）を含むRPMI-1640培地で前培養後、1 x 105 cells/mlの懸濁液とし、0.1μMのphorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) を添加してから0.1mlづつ96-wellプレートに分注した。2日間培養後、細胞がマクロファージ様に分化し底面に張り付いたことを検鏡・確認してから、各ウェルの培地を10μM のドコサヘキサエン酸を加えたかもしくは加えていない10％FBS入り新鮮培地の0.2mlづつに交換した。次いで各ウェルの培地に所定濃度（1〜10ｍM）のサンプルのエタノール溶液またはエタノールのみを2μl添加し、さらに3時間培養した。次いで、大腸菌細胞膜のリポ多糖（0127:B8、Sigma社製）を32μg/mlの濃度で含むリン酸緩衝液の6μlづつを各ウェルに添加し、20時間培養した。培地を回収し、ELISAキット（Endogen社製）でＩＬ−６を測定した。培地を回収後ウェルに残った細胞は0.2％クリスタルバイオレット−20％メタノール液で染色し、十分水洗後、１％SDS水溶液の0.1mlづつを各ウェルに加えて色素を溶出させプレートリーダー（595nm）で吸光度を測定して細胞数の指標とした。
【００２０】
用いたサンプルのうち、Ibp（イブプロフェン、東京化成製）、Cpz,（クロルプロマジン、和光純薬製）はそれぞれ記載したメーカーから購入した。N-(β-フェネチル)フェルラミド（FAPA）とフェルロイルトリプタミン（FATA）は特開2005-225872と特願2005-218519において記載した方法で合成した。結果を図１に示す。培養液中のサンプルの濃度（μM）は図中に示してある。図１Aの結果から、FATAが図中に表示された範囲で濃度依存的にＩＬ−６の産生を抑制し、さらに、培地にドコサヘキサエン酸が同時に添加されていると一層強く抑制することがわかる。また、FAPAもIL-6の産生を抑制する。なお、図１Bに示すように、細胞数の指標となる色素濃度は実験終了後にコントロールとサンプル間でおおむね通常１０％以下しか違いがなかったことから、ＩＬ−６産生の低下は細胞の逸失によるものではないことが確認された。
【実施例２】
【００２１】
FATAとフェルラ酸フェネチルエステル（FAPE）を用いて実施例１と同様の実験を行ない、回収した培地中のインターロイキン１β(IL-1β)の濃度をELISAキット（Endogen社製）で測定した。 結果を図２Aに示す。IL-1βの産生はFATA等の上記化合物で抑制されることが明らかである。また、図２Bの抽出色素の定量結果からこの抑制が細胞の逸失のためでないことが確認された。
【実施例３】
【００２２】
実施例１と同様にして、THP-1細胞を培養し、FATA、FAPA、フェルラ酸３-フェニル-２-プロペニル（Fer-oCinn）、4-ヒドロキシ-3-メトキシ安息香酸3-フェニル-2-プロペニル(Va- oCinn)、シリンガ酸3-フェニル-2-プロペニル (Syr- oCinn）を添加後、リポ多糖で刺激し２２時間培養し、回収した培地中のインターロイキン８(IL-８)の濃度をELISAキット（Endogen社製）で測定した。 結果を図３に示す。ＩＬ−８の産生はFATA等の上記化合物で抑制されることが明らかである。
【００２３】
参考例１
上記の化合物及びフェルロイルチラミン（Fer-Tyr）、N-(β-フェネチル)カフェイン酸アミド（CAPA）を用いて、実施例１と同様な実験を行ない、回収した培地中のTNF-αの濃度をELISAキット（Endogen社製）で測定した。結果を図４と図５に示す。
これによればFATA、FAPE等上記の化合物が図中に表示された範囲で濃度依存的にTNF-αの産生を抑制し、さらに、培地にドコサヘキサエン酸が同時に添加されていると一層強く抑制することがわかる。
【００２４】
参考例２
炎症反応のシグナル分子として一酸化窒素(NO)も重要な役割を果たしており、NOの産生抑制は炎症の抑制につながる。マウスRAW264マクロファージ細胞株（理化学研究所から購入）を10％FBS入りのDMEM培地で前培養し、トリプシン処理で回収して2 x 105 cells/mlの懸濁液とし、0.2mlづつ96-ウェルプレートに植え込んだ。2日間培養後、各ウェルの培地を10μM のドコサヘキサエン酸を加えたかもしくは加えていない10％FBS入り新鮮培地の0.2mlづつに交換した。次いで各ウェルの培地に所定濃度（1〜10ｍM）のサンプルのエタノール溶液またはエタノールのみを2μl添加し、さらに3時間培養した。
【００２５】
次いで、330μg/mlの大腸菌細胞膜リポ多糖（0127:B8、Sigma社製）、3.2μg/mlのアルギニン、及び0.32μg/mlのIFN-γを含む水溶液を6μlづつ各ウェルに添加し、20時間培養した。培地を回収し、培地中でNOから転換生成した亜硝酸イオンをグリース試薬（Sigma社製）で定量した。また、細胞は実施例１と同様にクリスタルバイオレットで染色し吸光度を測定して細胞数の指標とした。図６のAに示した結果から、フェルラ酸やバニリン酸の誘導体がLPSで刺激されたマクロファージ細胞におけるNO産生を抑制すること、さらに、ドコサヘキサエン酸が同時に添加されると一層強く抑制することがわかる。なお、図６のBに示すように、細胞数の指標となる色素濃度は実験終了後にコントロールとサンプル間で通常１０％以下しか違いがなかったことから、NO産生の大きな低下は細胞の逸失によるものではないことが確認された。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】Aは本発明の使用化合物、及び該化合物とドコサヘキサエン酸の組合せによりTHP-1細胞におけるIL-6産生が抑制されることを示すグラフである。縦軸の値は培地中のIL-6濃度（2つのウェルの平均と標準偏差）であり、横軸に付した数字はサンプルの濃度（μM）である。Bは各ウェルの細胞をクリスタルバイオレットで染色し、洗浄後、色素を抽出して測定した吸光度（2つのウェルの平均と標準偏差）である。
【図２】Aは本発明の使用化合物、および該化合物とドコサヘキサエン酸の組合せによりTHP-1細胞におけるIL-1β産生が抑制されることを示すグラフである。縦軸の値はコントロールウェルにおけるIL-1β濃度を100としたときの各ウェルにおけるIL-1β濃度の相対値（2つのウェルの平均と標準偏差）であり、横軸に付した数字はサンプルの濃度（μM）である。Bは各ウェルの細胞をクリスタルバイオレットで染色し、洗浄後、色素を抽出して測定した吸光度の相対値（2つのウェルの平均と標準偏差、コントロールの値を１００％とする）である。
【図３】本発明の使用化合物により、THP-1細胞におけるIL-8産生が抑制されることを示すグラフである。縦軸の値はコントロールウェルにおけるIL-8濃度を100としたときのサンプルウェルにおけるIL-8濃度の相対値（2つのウェルの平均と標準偏差）であり、横軸に付した数字はサンプルの濃度（μM）である。
【図４】フェルラ酸誘導体及びそれらとドコサヘキサエン酸の組合せによりTHP-1細胞におけるTNF-α産生が抑制されることを示すグラフである。縦軸の値は培地中のTNF-α濃度（2つのウェルの平均と標準偏差）であり、横軸に付した数字はサンプルの濃度（μM）である。
【図５】フェルラ酸やカフェイン酸アミドの誘導体とドコサヘキサエン酸の組合せによりTHP-1細胞におけるTNF-α産生が抑制されることを示すグラフである。縦軸の値はコントロールウェルにおけるTNF-α濃度を100としたときのサンプルウェルにおけるTNF-α濃度の相対値（2つのウェルの平均と標準偏差）であり、横軸に付した数字はサンプルの濃度（μM）である。
【図６】Aはフェルラ酸誘導体及びそれらとドコサヘキサエン酸の組合せによりマウスマクロファージRAW264細胞におけるNO産生が抑制されることを示すグラフである。縦軸の値はグリース試薬による発色の吸光度から求めたNOの相対生産量（LPSを加えたコントロールウェルの値を100％とする。各サンプルの各濃度について4ウェルの平均と標準偏差）であり、横軸に付した数字はサンプルの濃度（μM）である。Bは各ウェルの細胞をクリスタルバイオレットで染色し、洗浄後、色素を抽出して測定した吸光度（４ウェルの平均と標準偏差）である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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