(57)【要約】【課題】試料導入時の圧力変動によるベースライン変動を低減可能な液体クロマトグラフ装置を実現する。【解決手段】分析流路（ポンプ２、カラム３、検出器４）と高圧流路（サンプリング配管２２、ニードル１１）とを切替バルブ６、７により互いに切り離し、高圧流路を大気圧に開放して、プランジャ１２を移動してポンプ室８内に溶媒を吸引することによりニードル１１から試料を高圧流路内に吸引する。高圧流路を大気圧から密閉した後、プランジャ１２を移動してポンプ室８内の溶媒を高圧流路に供給し、高圧流路内圧力を分析流路内圧力とほぼ等しくする。その後、高圧流路と分析流路とを接続し、カラム３を介して試料を検出器４に供給する。これにより、試料導入時の圧力変動によるベースライン変動を低減可能な液体クロマトグラフ装置を実現することができる。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
分析流路を備えるクロマトグラフ装置に、試料導入流路から試料を導入する試料導入装置において、
試料の吸引及び上記試料導入流路の加圧を行う試料吸引加圧手段と、
上記分析流路と試料導入流路との分離、接続を切り替える切替手段と、
上記試料吸引加圧手段及び切替手段の動作を制御する制御手段と、
を備え、上記制御手段は、上記切替手段により上記分析流路と試料導入流路とを互いに分離させ、上記試料導入流路を大気圧に開放し、試料吸引加圧手段により、試料を吸引させ、上記試料導入流路内を密閉して加圧し、上記切替手段により上記試料導入流路と分析流路とを互いに接続させることを特徴とする試料導入装置。
【請求項２】
請求項１記載の試料導入装置において、上記分析流路内の圧力を検出する圧力センサを備え、上記試料吸引加圧手段は、プランジャを有し、このプランジャを移動させることで、上記試料導入流路への試料の吸引及び上記試料導入流路の加圧を行い、上記制御手段は、試料吸引加圧手段により、試料導入流路内に試料を吸引させた後、上記圧力センサにより検出された圧力値に基づいて算出した移動距離だけ、上記プランジャを移動させて、上記試料導入流路内を加圧することを特徴とする試料導入装置。
【請求項３】
請求項１記載の試料導入装置において、上記分析流路内の圧力を検出する第１の圧力センサと、上記試料導入流路内の圧力を検出する第２の圧力センサとを備え、上記制御手段は、試料吸引加圧手段により、試料導入流路内に試料を吸引させた後、上記第２の圧力センサにより検出される圧力値が上記第１の圧力センサにより検出された圧力値となるように、上記試料吸引加圧手段により上記試料導入流路内を加圧させることを特徴とする試料導入装置。
【請求項４】
移動相を導入するポンプと、このポンプにより導入された移動相及び試料が供給される分離カラムと、この分離カラムから試料が供給され試料を検出する検出器とを有する分析流路と、試料を導入する試料導入流路とを備えるクロマトグラフ装置において、
試料の吸引及び上記試料導入流路の加圧を行う試料吸引加圧手段と、
上記分析流路と試料導入流路との分離、接続を切り替える切替手段と、
上記切替手段により上記分析流路と試料導入流路とを互いに分離させ、上記試料導入流路を大気圧に開放し、試料吸引加圧手段により、試料を吸引させ、上記試料導入流路内を密閉して加圧し、上記切替手段により上記試料導入流路と分析流路とを互いに接続させる制御手段と、
を備えることを特徴とするクロマトグラフ装置。
【請求項５】
請求項４記載のクロマトグラフ装置において、上記分析流路内の圧力を検出する圧力センサを備え、上記試料吸引加圧手段は、プランジャを有し、このプランジャを移動させることで、上記試料導入流路への試料の吸引及び上記試料導入流路の加圧を行い、上記制御手段は、試料吸引加圧手段により、試料導入流路内に試料を吸引させた後、上記圧力センサにより検出された圧力値に基づいて算出した移動距離だけ、上記プランジャを移動させて、上記試料導入流路内を加圧することを特徴とするクロマトグラフ装置。
【請求項６】
請求項４記載のクロマトグラフ装置において、上記分析流路内の圧力を検出する第１の圧力センサと、上記試料導入流路内の圧力を検出する第２の圧力センサとを備え、上記制御手段は、試料吸引加圧手段により、試料導入流路内に試料を吸引させた後、上記第２の圧力センサにより検出される圧力値が上記第１の圧力センサにより検出された圧力値となるように、上記試料吸引加圧手段により上記試料導入流路内を加圧させることを特徴とするクロマトグラフ装置。
【請求項７】
移動相を導入するポンプと、このポンプにより導入された移動相及び試料が供給される分離カラムと、この分離カラムから試料が供給され試料を検出する検出器とを有する分析流路を備えるクロマトグラフ装置に、試料導入流路から試料を導入する試料導入方法において、
上記分析流路と試料導入流路とを互いに分離し、
上記試料導入流路を大気圧に開放して、この試料導入流路内に試料を吸引し、
上記試料導入流路内を密閉して加圧し、
上記試料導入流路と分析流路とを互いに接続することを特徴とする試料導入方法。
【請求項８】
請求項７記載の試料導入方法において、上記試料導入流路内への試料の導入及び上記試料導入流路内の加圧は、プランジャを有する試料吸引加圧手段により行い、上記分析流路内の圧力値に基づいて算出した移動距離だけ、上記プランジャを移動させて、上記試料導入流路内を加圧することを特徴とする試料導入方法。
【請求項９】
請求項７記載の試料導入方法において、上記分析流路内の圧力を検出し、上記試料導入流路内の圧力を検出し、試料導入流路内に試料を吸引させた後、上記試料導入流路内の圧力値が上記分析流路内の圧力値となるように、上記試料導入流路内を加圧させることを特徴とする試料導入方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、高圧力下での分析に適した液体クロマトグラフ装置及び液体クロマトグラフ装置用試料導入装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
液体クロマトグラフ装置においては、ポンプユニットにより移動相が吸入され、試料導入ユニットにより導入された試料とともにカラムへと送液される。カラムに導入された試料は各々の成分に分離され、各種の検出器により検出される。
【０００３】
一般に、高速液体クロマトグラフ（ＨＰＬＣ）と呼ばれる装置分野においては、最大２０〜４０ＭＰａの高圧流路下で分析を行うことが要求される。このような高速液体クロマトグラフ用ポンプユニットにおいては、高圧力下でも正確に且つ精密に移動相を供給できることが要求される。
【０００４】
特許文献１及び特許文献２には、圧力検出手段によって検出した圧力値に基づいて、プランジャの動きを制御することにより、脈流のない安定送液が可能なポンプ装置が開示されている。
【０００５】
一方、高速液体クロマトグラフ用試料導入ユニットにおいては、試料を吸引するためのニードル、ニードルが吸引した試料を保持するサンプリング配管、およびインジェクションポートを結ぶ流路が、ポンプユニットによって高圧送液される分析流路に組み込まれる方式（ダイレクトインジェクション方式）が主流となっている。
【０００６】
このダイレクトインジェクション方式は、吸引した試料を無駄なくカラムに導入できる点や、ニードル内が常時移動相でフラッシングされるためキャリーオーバが低減できる点で、優れた特長を有している。
【０００７】
また、特許文献３には、ニードルを介して試料を吸引する計量ポンプ内部が、ポンプユニットが送液する移動相によって洗浄される試料導入ユニットが開示されている。
【０００８】
一般に、ダイレクトインジェクション方式を採用した試料導入装置においては、高圧下での分析においてもインジェクションポートから移動相が噴出すること避けるため、ニードルがインジェクションポート内のシールと常時、液密性を保持可能な機構を有している。分析中、高圧流路に組み込まれていたニードル、サンプリング配管は、試料を吸引する段階になると流路切替バルブによって高圧流路から切り離され、ニードル、サンプリング配管内の溶媒が大気圧まで開放される。
【０００９】
そして、大気圧まで開放された後、ニードルが試料保持容器に差し込まれ、ニードルまたはサンプリング配管内に試料を吸引した後、上述したインジェクションポートまでニードルが移動する。この段階で再び流路切替バルブが切り替えられ、ポンプユニットによって送液された移動相と共に、試料がカラムへと供給される。
【００１０】
【特許文献１】特許第２５６４５８８号公報
【特許文献２】特許第２６０４３６２号公報
【特許文献３】特許第２７３０９５１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
しかしながら、従来の試料導入ユニットにおいては、大気圧まで開放されたニードルおよびサンプリング配管内の溶媒が、ニードル等への試料吸引後、ポンプユニットによってシステム圧力（分析時の圧力）まで加圧された後、カラムへと供給されることとなる。
【００１２】
即ち、ニードルおよびサンプリング配管内の全容積が加圧されるまで一定の時間を要し、この間システム圧力は不安定になる。この圧力変動はクロマトグラム上でベースライン変動となって現れるため、保持時間の早い成分（カラムへの保持が弱い成分）ピークと重なってしまい、ピークの保持時間や面積値を変動させる要因となる。
【００１３】
ピークの保持時間は、液体クロマトグラフによって分離される成分固有の値で基本的な定性情報であり、面積値は液体クロマトグラフによって分離される成分の濃度を表すため、試料導入時の圧力変動に伴うベースライン変動は、クロマトグラム上の定性情報が不確定となり、定量測定の正確性や再現性を損なう結果となる。
【００１４】
特に、溶媒の屈折率差を検出する示差屈折率検出器や、シングルビーム測光方式を採用した吸光度検出器を使用した場合は、検出器の原理上、圧力変動が検出値に及ぼす影響が極めて大きいため、このようなシステム圧力の変動は当然望ましくない。
【００１５】
また、大容量の試料を流路に導入したい場合は、サンプリング配管内容積を増やす必要があるため、システム圧力まで加圧する溶媒容積が大きくなり、結果として圧力変動も大きくなる。
【００１６】
さらに、超高速液体クロマトグラフと呼ばれる装置分野においては、最大６０〜１００ＭＰａの圧力下で分析を行うことが要求されるため、試料導入時の圧力変動に伴うベースライン変動も、より顕著となる。
【００１７】
本発明の目的は、試料導入時の圧力変動によるベースライン変動を低減可能な液体クロマトグラフ装置及び液体クロマトグラフ装置用試料導入装置を実現することである。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明による試料導入装置は、分析流路を備えるクロマトグラフ装置に試料導入流路から試料を導入する。
【００１９】
そして、本発明による試料導入装置は、試料の吸引及び試料導入流路の加圧を行う試料吸引加圧手段と、分析流路と試料導入流路との分離、接続を切り替える切替手段と、試料吸引加圧手段及び切替手段の動作を制御する制御手段とを備え、制御手段は、切替手段により分析流路と試料導入流路とを互いに分離させ、試料導入流路を大気圧に開放し、試料吸引加圧手段により、試料を吸引させ、試料導入流路内を密閉して加圧し、切替手段により試料導入流路と分析流路とを互いに接続させる。
【００２０】
また、本発明によるクロマトグラフ装置は、移動相を導入するポンプと、このポンプにより導入された移動相及び試料が供給される分離カラムと、この分離カラムから試料が供給され試料を検出する検出器とを有する分析流路と、試料を導入する試料導入流路とを備える。
【００２１】
そして、本発明によるクロマトグラフ装置は、試料の吸引及び試料導入流路の加圧を行う試料吸引加圧手段と、分析流路と試料導入流路との分離、接続を切り替える切替手段と、切替手段により分析流路と試料導入流路とを互いに分離させ、試料導入流路を大気圧に開放し、試料吸引加圧手段により、試料を吸引させ、試料導入流路内を密閉して加圧し、切替手段により試料導入流路と分析流路とを互いに接続させる制御手段と備える。
【００２２】
また、本発明による試料導入方法は、移動相を導入するポンプと、このポンプにより導入された移動相及び試料が供給される分離カラムと、この分離カラムから試料が供給され試料を検出する検出器とを有する分析流路を備えるクロマトグラフ装置に試料導入流路から試料を導入する。
【００２３】
そして、本発明の試料導入方法は、分析流路と試料導入流路とを互いに分離し、試料導入流路を大気圧に開放して、この試料導入流路内に試料を吸引し、試料導入流路内を密閉して加圧し、試料導入流路と分析流路とを互いに接続する。
【発明の効果】
【００２４】
試料導入時の圧力変動によるベースライン変動を低減可能な液体クロマトグラフ装置、液体クロマトグラフ装置用試料導入装置及び試料導入方法を実現することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２５】
以下、本発明の実施形態について、添付図面を参照して説明する。
【００２６】
図１は、本発明の第１の実施形態である液体クロマトグラフ装置の概略構成図である。
【００２７】
図１において、ポンプユニット２により送られた移動相１は、流路切替バルブ６、サンプリング配管２２、ニードル１１、インジェクションポート１０、配管１６、流路切替バルブ６を経由してカラム３に送られる。
【００２８】
一方、ニードル１１により導入された試料は、移動相１とともに、カラム３に送られ、検出器４によって検出される。検出器４はドレイン５に接続されている。
【００２９】
ここで、上記ポンプ２、カラム３、検出器４からなる分析流路に加わるシステム圧力は、ポンプユニット２に設置された圧力検出手段（図示せず）によって検出され、高速液体クロマトグラフ装置において最大２０〜４０ＭＰａ、超高速液体クロマトグラフ装置において最大６０〜１００ＭＰａに達する。
【００３０】
流路切替バルブ６は、Ｐ１〜Ｐ６からなる６つのポートを有し、６０度回転することによって２ポジションの切り替えを行う。また、流路切替バルブ７はＰ１〜Ｐ６からなる６つのポートを有している。そして、流路切替バルブ７のポートが、４５度ずつ３ポジションに回転することによって、ポートＰ６に接続された配管２３が、それぞれ、ポート無し（封鎖）、ポートＰ２、ポートＰ３へと接続される。
【００３１】
ポンプ２、流路切替バルブ６、７、ニードル１１、後述するプランジャ１２等の動作制御は、動作制御部（図示せず）により行われる。
【００３２】
試料吸引工程に入る前の準備工程として、まず、サンプリング配管２２、ニードル１１、インジェクションポート１０、配管１６で構成される高圧流路を、上記分析流路から切り離し大気圧に開放する。
【００３３】
図２は、高圧流路を、上記分析流路から切り離す圧力抜き工程の流路図である。図２において、流路切替バルブ７を図１に示した状態から反時計周りに４５度回転させ、流路切替バルブ７を反時計回りに６０度回転させることにより、高圧流路が上記分析流路から切り離され、サンプリング配管２２、ニードル１１、インジェクションポート１０、配管１６内溶媒に負荷されていた圧力は、配管１８、配管２１、洗浄ポート９、ドレイン２０を介して、大気圧に開放される。このとき、配管１６は、切替バルブ６、配管１７、切替バルブ７、配管２３を介して、ポンプ室８に連通している。
【００３４】
次に、試料の吸引工程を説明する。図３は、試料の吸引工程の流路図である。図３において、流路切替バルブ７を、図２に示した状態から反時計周りに４５度回転させ、ニードル１１をインジェクションポート１０から引き抜いて試料１５が保持された試料保持容器２４へと移動させる。このとき、サンプリング配管２２は、切替バルブ６、７を介してポンプ室８に連通されている。
【００３５】
この状態で、試料吸引加圧手段を構成するプランジャ１２を後退させることにより、吸引された試料がニードル１１およびサンプリング配管２２内に保持される。試料の吸引工程の前後には、必要に応じてニードル１１を洗浄ポート９に浸して、ニードル１１の外壁の洗浄を行う（図示無し）。
【００３６】
続いて、試料吸引工程によって一時的に大気圧まで圧力が低下した流路を、再加圧する加圧工程を説明する。図４は、大気圧まで圧力が低下した流路を、再加圧する加圧工程説明図である。
【００３７】
図４において、試料を吸引した後、ニードル１１はインジェクションポート１０まで移動して、液密性が保持される。この状態でプランジャ１２を前進させて流路内溶媒を圧縮することにより、大気圧に開放されたサンプリング配管２２、ニードル１１、インジェクションポート１０、配管１６で構成される流路を、システム圧力まで上昇させる。
【００３８】
加圧工程において、プランジャ１２を前進させる距離ｄｘは、例えば次のように求められる。圧力ｄＰに対する体積変化をｄＶとすると、体積Ｖを持つ溶媒の等温圧縮率ｋＴ（定数）は、次の（１）式で表される。
【００３９】
ｋＴ＝（−ｄＶ/Ｖ）/ｄＰ      ―――  （１）
ポンプユニット２には、分析流路内の圧力を検出する圧力センサが配置されており、この圧力センサが検出するシステム圧力Ｐから、必要とするｄＰが決まり、試料導入流路（高圧流路）を構成する各要素の物理的な寸法およびプランジャ１２の現在位置から、圧縮する溶媒の体積Ｖが求まる。
【００４０】
等温圧縮率ｋＴは溶媒固有の定数であり、プランジャ１２の直径は既知であることから、ｄＶ、即ちｄｘが求められる。さらに、ほぼ大気圧下にある溶媒が試料、移動相、洗浄液の複数種から成ることを考慮し、圧縮率ｋＴに温度依存係数を加味することで、ｄｘはより正確に求めることができる。
【００４１】
これにより、システム圧力（分析流路内圧力）と加圧工程後の試料導入流路内圧力との差が小さくなり、クロマトグラム上のベースライン変動を低減することができる。
【００４２】
加圧工程の後、流路切替バルブ６を図４に示す状態から時計回りに６０度回転させることにより、サンプリング配管２２、ニードル１１、インジェクションポート１０、配管１６が分析流路として組み込まれる。この時の流路図を図５に示す。
【００４３】
図５において、ニードル１１およびサンプリング配管２２内に保持された試料は、ポンプユニット２２によって移動相１と共にカラム３へと供給される。流路切替バルブ６を回転した後、流路切替バルブ７を図４に示した状態から時計周りに４５度回転させた状態でプランジャ１２を前進させ、ポンプ室８内の溶媒を配管１７、１８、２１を介して洗浄ポート９へ吐出する。
【００４４】
また、洗浄ポート９内の溶媒置換を十分に行うため、必要に応じて流路切替バルブ７を更に時計周りに４５度回転させ（図１に示した状態となる）、プランジャ１２を後退させて洗浄液１４をポンプ室８内に吸引する。その後、流路切替バルブ７を更に反時計周りに４５度回転させ（図５に示した状態に戻る）、切替バルブ７、配管１９からポンプ室８に供給された洗浄液１４を洗浄ポート９へ吐出する。なお、１３はシールであり、２５はバネである。
【００４５】
以上のように、本発明の第１の実施形態によれば、分析流路と高圧流路とを切り離し、高圧流路を大気圧に開放して、プランジャ１２を移動してポンプ室８内に溶媒を吸引することによりニードル１１から試料を高圧流路内に吸引する。そして、高圧流路を大気圧から密閉した後、プランジャ１２を移動して、ポンプ室８内の溶媒を高圧流路に供給し、高圧流路内圧力を分析流路内圧力とほぼ等しくする。その後、高圧流路と分析流路とを接続し、カラム３を介して試料を検出器４に供給する。
【００４６】
したがって、試料導入時の圧力変動によるベースライン変動を低減可能な液体クロマトグラフ装置を実現することができる。
【００４７】
また、分析流路とは別個の高圧流路を有する試料導入装置、つまり、切替バルブ６、７、サンプリング配管２２、ニードル１１、インジェクションポート１０、ポンプ室８、プランジャ１２、動作制御部（図示せず）、配管１６〜２１を備え、試料導入時の圧力変動によるベースライン変動を低減可能な試料導入装置を実現することができる。
【００４８】
さらに、試料導入時の圧力変動によるベースライン変動を低減可能な試料導入方法を実現することができる。
【００４９】
次に、本発明の第２の実施形態について説明する。図６は、本発明の第２の実施形態である液体クロマトグラフ装置の概略構成図である。
【００５０】
本発明の第２の実施形態と第１の実施形態との異なる点は、配管１９部に圧力センサ２６を設置したことである。その他の構成は、第１の実施形態と第２の実施形態とは同等であるので、説明は省略する。圧力センサ２６は、配管２７を介して切替バルブ７に接続され、配管２８を介して、ポンプ室８に連通している。
【００５１】
圧力センサ２６は、加圧工程において、プランジャ１２の移動に伴う流路内の圧力を検知し、検知した圧力に対応した信号がプランジャ１２を駆動する駆動モータ（図示せず）に供給される。そして、この駆動モータは、圧力センサ２６からの検出信号に従って、プランジャ１２の位置を調整する。
【００５２】
つまり、システム圧力（分析流路内圧力）は、ポンプユニット２に配置された圧力センサにより検出され、制御部（図示せず）は、この検出されたシステム圧力と高圧流路（試料導入流路）内の圧力とが等しくなるように、プランジャ１２の位置を制御する。これにより、サンプリング配管２２、ニードル１１、インジェクションポート１０、配管１６が分析流路に組み込まれる際の圧力変動を極力抑えることができるため、試料導入時におけるベースライン変動を低減することができる。
【００５３】
ここで、圧力センサ２６は図６の位置に配置される必要はなく、流路切替バルブ７のポートＰ５（封鎖）からポートＰ２（封鎖）までの流路のどこに配置されていても良い。
【００５４】
本発明の代表的な圧力センサとして、耐食性に優れたステンレス部材等で作られたダイアフラムを通して圧力を変位に変換し、ブリッジ回路により電気量として取り出す半導体ひずみゲージ式圧力変換器を使用する。
【００５５】
このセンサは長時間、高圧下で使用しても高い堅牢性・信頼性・安定性を有すること、有機溶媒・酸・アルカリ等の多様な溶媒に対する耐食性が優れていること、装置に内蔵可能な小型であること、検出部の溶媒接触容量（デッドボリューム）が小さいこと、応答性に優れていること、広い圧力範囲で使用できること等の特長を有するため、液体クロマトグラフとして好適である。
【００５６】
本発明の第２の実施形態においても、第１の実施形態と同様に、試料導入時の圧力変動によるベースライン変動を低減可能な液体クロマトグラフ装置、液体クロマトグラフ装置用試料導入装置、試料導入方法を実現することができる。
【００５７】
次に、本発明を適用した場合と、適用しない場合の液体クロマトグラフ装置を用いてクロマトグラムを取得した結果を比較する。
【００５８】
図７は、本発明を適用しない場合に得られたクロマトグラムであり、図７の（Ａ）はブランクを導入した場合、（Ｂ）は試料を導入した場合の結果を示している。
【００５９】
本発明を適用していない場合は、ブランクを導入した際に大きなベースライン変動が発生してしまうため、試料を導入した際に目的とする成分ピークとベースライン変動とが重なってしまう。このような試料導入時の圧力変動に伴うベースライン変動波形は、一般的に再現性に乏しいため、測定後に成分ピーク波形とベースライン変動波形を、波形処理計算にて分離することも極めて困難である。
【００６０】
従って、本発明を適用していない場合は、ピーク面積を計算する際に、大きな誤差を生じる可能性があり、このようなカラムからの溶出の早い（保持時間の早い）ピークに対して正しい定量結果を得ることが難しい。また、目的とする成分ピークの保持時間がさらに早く、圧力変動に伴うベースライン変動と完全に重なってしまった場合には、定性情報であるピーク保持時間をも誤認識するおそれが生じ、データの信頼性を欠く結果となる。
【００６１】
図８は、本発明を適用した場合に得られたクロマトグラムである。試料を吸引した大気圧流路をシステム圧力まで加圧して、分析流路に組み込む方式を実現することにより、ブランクを導入した際に圧力変動、ベースライン変動を極端に小さくすることができる（図８の（Ａ））。これにより、図８の（Ｂ）に示すように、カラムからの溶出の早い（保持時間の早い）ピークに対しても、正確な保持時間および面積値を、再現性良く取得することが可能となるため、分析結果の信頼性を向上させることができる。
【００６２】
なお、上述した例は、本発明を液体クロマトグラフ装置に適用した場合の例であるが、本発明は、ガスクロマトグラフ装置、超臨界クロマトグラフ装置にも適用可能である。
【図面の簡単な説明】
【００６３】
【図１】本発明の第１の実施形態の概略構成図である。
【図２】本発明の第１の実施形態における圧力抜き工程を示す流路図である。
【図３】本発明の第１の実施形態における試料吸引工程を示す流路図である。
【図４】本発明の第１の実施形態における加圧工程を示す流路図である。
【図５】本発明の第１の実施形態における洗浄工程を示す流路図である。
【図６】本発明の第２の実施形態の概略構成図である。
【図７】本発明が適用されない場合のクロマトグラムを示す図である。
【図８】本発明が適用された場合のクロマトグラムを示す図である。
【符号の説明】
【００６４】
１・・・移動相、２・・・ポンプユニット、３・・・カラム、４・・・検出器、５・・・ドレイン、６、７・・・流路切替バルブ、８・・・ポンプ室、９・・・洗浄ポート、１０・・・インジェクションポート、１１・・・ニードル、１２・・・プランジャ、１３・・・シール、１４・・・洗浄液、１５・・・試料、１６〜１８・・・配管、１９、２０・・・ドレイン、２１、２２、２３、２７、２８・・・配管、２４・・・試料保持容器、２５・・・バネ
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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