(57)【要約】【課題】本発明の課題は、糖尿病性高血糖症、糖尿病性高脂血症、糖尿病性骨粗鬆症等の糖尿病性疾患を改善することができる、副作用の少ない糖尿病性疾患の予防・治療剤や、糖尿病性疾患の予防・改善用機能性食品又は食品素材を提供すること。【解決手段】花粉荷又は水、エタノール抽出物のような花粉荷処理物を有効成分として含有する、血液中の血糖濃度の降下作用、血液中の脂肪酸エステル濃度の降下作用、良質な骨質とすることができる糖尿病性疾患の予防・治療用組成物、及び機能性食品又は食品素材、糖尿病性疾患の予防・治療用の食品又は食品素材として使用する方法、糖尿病性疾患の予防・治療用の食品又は食品素材の配合剤として使用する方法、糖尿病性疾患の予防・治療用の食品又は食品素材を製造する方法とする。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
花粉荷又は花粉荷処理物を有効成分として含有することを特徴とする糖尿病性疾患の予防・治療用組成物。
【請求項２】
花粉荷処理物が、花粉荷の水又はエタノール抽出物であることを特徴とする請求項１記載の糖尿病性疾患の予防・治療用組成物。
【請求項３】
糖尿病性疾患が、高血糖症であることを特徴とする請求項１又は２記載の糖尿病性疾患の予防・治療用組成物。
【請求項４】
糖尿病性疾患が、糖尿病性高脂血症であることを特徴とする請求項１又は２記載の糖尿病性疾患の予防・治療用組成物。
【請求項５】
糖尿病性疾患が、糖尿病性骨粗鬆症であることを特徴とする請求項１又は２記載の糖尿病性疾患の予防・治療用組成物。
【請求項６】
花粉荷又は花粉荷処理物を含有し、糖尿病性疾患の改善作用を有するものであることを特徴とし、糖尿病性疾患改善のために用いられるものである旨の表示を付した機能性食品又は食品素材。
【請求項７】
花粉荷処理物が、花粉荷の水又はエタノール抽出物であることを特徴とする請求項６記載の機能性食品又は食品素材。
【請求項８】
花粉荷又は花粉荷処理物を添加した食品又は食品素材を、糖尿病性疾患の予防・治療用の食品又は食品素材として使用する方法。
【請求項９】
花粉荷又は花粉荷処理物を、糖尿病性疾患の予防・治療用の食品又は食品素材の配合剤として使用する方法。
【請求項１０】
花粉荷又は花粉荷処理物を食品又は食品素材に添加することを特徴とする糖尿病性疾患の予防・治療用の食品又は食品素材を製造する方法。
【請求項１１】
花粉荷処理物が、花粉荷の水又はエタノール抽出物であることを特徴とする請求項８〜１０のいずれか記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、合成された化学物質を用いない、自然食品の一種を有効成分とする糖尿病性疾患の予防・治療用組成物に関し、より詳しくは、該有効成分を高血糖症、糖尿病性高脂血症、糖尿病性骨粗鬆症等の糖尿病性疾患に用いる予防・治療用組成物、糖尿病性疾患の予防・改善用機能性食品又は食品素材等に関する。
【背景技術】
【０００２】
人口の高齢化、生活様式の変化、食品の洋風化等により内因性（ホルモン分泌異常）疾患及びそれに関連した生活習慣病の増大は医療費の増大をもたらしており、社会的に大きな問題として取り上げられている。糖尿病は、膵臓のインシュリン産生細胞（β細胞）のインスリン分泌不全ないしインスリンの標的細胞での作用不全の結果生じる糖、タンパク、脂質の代謝異常をいい、わが国において多くの患者数を有し、糖尿病が強く疑われる人は８００万人以上、糖尿病の可能性を否定できない人を合わせるとその倍以上といわれている。糖尿病は、インスリン依存性糖尿病（Ｉ型糖尿病）とインスリン非依存性糖尿病（ＩＩ型糖尿病）に分類され、いずれもその発症には、遺伝因子と環境因子が関連している。インスリン依存性糖尿病（Ｉ型糖尿病）は若年で発病し、インスリンを注射しなければ治療できない。インスリン非依存性糖尿病（ＩＩ型糖尿病）は遺伝的要素が強いとされ、生まれつきインスリンをつくる細胞の力が弱い体質の人が、肥満、運動不足、ホルモンの分泌状態の変化等の誘因によりインスリンの供給が減少し必要量を満たさなくなり発病する。糖尿病を放置していると血糖値が高い状態が続き、大小の血管が詰まったり、もろくなったりして、全身の臓器に様々な合併症が起きやすくなる。危険な合併症、即ち三大合併症といわれている糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害がある。
【０００３】
前述のように、糖尿病を始めとする生活習慣病は増加の一途をたどっており、特に糖尿病の治療は、種々のインスリン注射剤及び経口血糖降下剤の開発により多様化されている。しかし、このような多様化された治療があるにもかかわらず、注射や薬剤は定期的、厳密に投与・服用する必要や、副作用があることから、糖尿病患者にとっては、その治療を未だ十分に受けているとはいえない現状である。インシュリン注射にまで至らない糖尿病患者にとって、より服用しやすく、より効果的に日常生活において治療が求められている。前述の危険な合併症を発症する前に、高血糖症、糖尿病性高脂血症、糖尿病性骨粗鬆症等を予防・治療することは医療の面から重要な課題として注目されている。
【０００４】
糖尿病の治療薬剤としては、膵臓からのインシュリンの分泌を促すスルフォニウム尿素系薬剤、小腸において二糖類から単糖へ分解する酵素（α−グルコシダーゼ）の作用を抑制し、食後の高血糖を改善するα−グルコシダーゼ阻害剤、膵臓からのインシュリンの分泌を増加させ、食後の高血糖を効果的に抑える即効性インシュリン分泌促進剤、あるいは最近では、膵臓からのインシュリン分泌は促進せずに、インシュリンの作用を直接強めるインシュリン抵抗性改善薬（チアゾリジン系製剤等）が用いられているが、これら製剤の投与又は服用により種々の副作用を伴うことがある等、治療剤として充分なものがない。
【０００５】
従来、副作用のない、安全な植物等の抽出物を有効成分とする糖尿病予防・治療剤は、多数知られており、植物ニトベギクをベースとする煎汁又はそのエキスよりなる糖尿病治療薬（例えば、特許文献１参照）や、トリゴネラ（Ｔｒｉｇｏｎｅｌｌａ属）から得られる活性物質を含有する抗糖尿病組成物（例えば、特許文献２参照）や、トベラ科植物から特定の分離方法によって得られる物質を含有する糖尿病及び治療剤（例えば、特許文献３参照）等から知られている。さらに、花粉加工物を糖尿病等の治療・予防に用いられる機能性食品として、蜜源花粉の殻壁を破砕精製して得られた精製花粉を発酵させて製造される消化吸収を向上させたロイヤルゼリー様の発酵花粉栄養調製物（例えば、特許文献４参照）が知られている。
【０００６】
【特許文献１】特許第２６０９７８０号
【特許文献２】特許第２６５５０４４号
【特許文献３】特公平６−９９３１８号公報
【特許文献４】特開平５−３０９２６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
高血糖症の他、糖尿病性高脂血症、糖尿病性骨粗鬆症等の合併症を含め、糖尿病性疾患に対しその予防・治療には未だ充分に期待できる状態ではないものであるところ、本発明の課題は、高血糖症、糖尿病性高脂血症、糖尿病性骨粗鬆症等の糖尿病性疾患を改善することができる、副作用の少ない糖尿病性疾患の予防・治療組成物や、糖尿病性疾患の予防・改善用機能性食品又は食品素材等を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、カルシウム・骨代謝調節の仕組みの解明と、その病態としての骨粗鬆症の食品栄養因子による予防と修復に関する研究を行ってきた。化学物質と異なりヒトに安全な天然食品中の生理活性因子が、骨代謝調節機能を発現し、骨粗鬆症の予防と修復に対する有用性を解明することができれば保健医療の面から極めて有意義である故、ヒトの健康と疾病修復の関係で古い歴史があるミツバチ関連花粉荷の成分に着目して、その生理活性について究明してきた。その結果、この成分には強い骨形成促進作用と骨吸収抑制作用を発揮して骨量の増進に役立つ因子が存在することを初めて見出し、先に出願（特願２００５−１６５９２３号）した。そこでさらに花粉荷又は花粉荷処理物の新たな医薬用途の開発研究を進め、ストレプトゾトシン（ＳＴＺ）を投与した実験的糖尿病ラットを用いて花粉荷水抽出物の作用を究明したところ、該花粉荷水抽出物は糖尿病性疾患を修復・改善する効果を発揮することを見い出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち本発明は、（１）花粉荷又は花粉荷処理物を有効成分として含有することを特徴とする糖尿病性疾患の予防・治療用組成物や、（２）花粉荷処理物が、花粉荷の水又はエタノール抽出物であることを特徴とする前記（１）記載の糖尿病性疾患の予防・治療用組成物や、（３）糖尿病性疾患が、高血糖症であることを特徴とする前記（１）又は（２）記載の糖尿病性疾患の予防・治療用組成物や、（４）糖尿病性疾患が、糖尿病性高脂血症であることを特徴とする前記（１）又は（２）記載の糖尿病性疾患の予防・治療用組成物や、（５）糖尿病性疾患が、糖尿病性骨粗鬆症であることを特徴とする前記（１）又は（２）記載の糖尿病性疾患の予防・治療用組成物に関する。    
【００１０】
また本発明は、（６）花粉荷又は花粉荷処理物を含有し、糖尿病性疾患の改善作用を有するものであることを特徴とし、糖尿病性疾患改善のために用いられるものである旨の表示を付した機能性食品又は食品素材や、（７）花粉荷処理物が、花粉荷の水又はエタノール抽出物であることを特徴とする前記（６）記載の機能性食品又は食品素材に関する。        
【００１１】
さらに本発明は、（８）花粉荷又は花粉荷処理物を添加した食品又は食品素材を、糖尿病性疾患の予防・治療用の食品又は食品素材として使用する方法や、（９）花粉荷又は花粉荷処理物を、糖尿病性疾患の予防・治療用の食品又は食品素材の配合剤として使用する方法や、（１０）花粉荷又は花粉荷処理物を食品又は食品素材に添加することを特徴とする糖尿病性疾患の予防・治療用の食品又は食品素材を製造する方法や、（１１）花粉荷処理物が、花粉荷の水又はエタノール抽出物であることを特徴とする前記（８）〜（１０）のいずれか記載の方法に関する。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によると、花粉荷又は花粉荷処理物を有効成分とすることで、副作用を伴うことなく高血糖症、糖尿病性高脂血症、糖尿病性骨粗鬆症等の糖尿病性疾患を予防・治療することができるという顕著な効果を奏し、また、花粉荷又は花粉荷処理物を食品や食品素材に含有することで、前記症状を改善することができる機能性食品又は食品素材を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明の糖尿病性疾患の予防・治療用組成物としては、花粉荷又は花粉荷処理物を有効成分として含有するものであれば特に制限されるものではなく、前記糖尿病性疾患の予防・治療用組成物は、血液中の血糖濃度の降下作用、血液中の脂肪酸エステル濃度の降下作用、血液中のカルシウム濃度の降下作用等を有し、糖尿病性疾患が、高血糖症、糖尿病性高脂血症、糖尿病性骨粗鬆症等である場合において特に優れた効能を有する。
【００１４】
また、本発明は、花粉荷又は花粉荷処理物を含有し、糖尿病性疾患の改善作用を有する機能性食品又は食品素材（すなわち糖尿病性疾患改善のために用いられるものである旨の表示を付した機能性食品又は食品素材）や、花粉荷又は花粉荷処理物を添加した食品又は食品素材を、糖尿病性疾患の予防・治療用の食品又は食品素材として使用する方法や、花粉荷又は花粉荷処理物を、糖尿病性疾患の予防・治療用の食品又は食品素材の配合剤として使用する方法や、花粉荷又は花粉荷処理物を食品又は食品素材に添加する糖尿病性疾患の予防・治療用の食品又は食品素材を製造する方法に関し、上記糖尿病性疾患としては、高血糖症、糖尿病性高脂血症、糖尿病性骨粗鬆症等を挙げることができる。
【００１５】
上記花粉荷とは、ミツバチが採集した花粉を意味し、花粉荷に含まれる成分は花粉種によって異なるが、本発明においては植物の種類は何ら限定されるものではなく、蜜源植物の花粉、例えば、果樹類の花粉、クローバー、ダイコン、シスタス、ナタネ、茶、ソバ等の花粉を挙げることができる。本発明では、シスタスの花粉を用いることが好ましい。
【００１６】
本発明においては、花粉荷をそのまま利用することもできるが、花粉の粒子は細胞壁が硬く消化率が低いといわれていることから、粉砕処理、破砕処理、乾燥処理、抽出処理、酵素処理、発酵処理又はこれらの複合処理等が施された花粉荷処理物を有利に用いることもできる。例えば、花粉混和水に超音波振動を施す等の物理的処理、酵素処理、発酵処理技術を用いて細胞壁を壊し消化を良くするようにすることもできるが、抽出処理が好ましい。かかる抽出処理により得られる花粉荷抽出物としては、花粉荷の水又はエタノール（エタノール水も含む）抽出物が好ましく、必要に応じて抽出後に粉末化処理を行うこともできる。例えば花粉荷のエタノール抽出物であるエタノールエキスは、花粉荷の重量に対して０．５〜１０倍量、特に１〜３倍量のエタノールを用いて抽出したものが好ましい。また、花粉荷の水抽出物である水エキスは、花粉荷の重量に対して０．５倍量〜１０倍量、特に２〜６倍量の水を用いて抽出したものがより好ましい。さらに、エタノール水溶液を花粉荷の重量に対して０．５〜１０倍量用いて抽出し、エタノール水エキスとすることもできる。抽出温度は、通常２０〜５０℃程度で行われるが、特に限定されず、低温抽出、高温抽出等を行ってもよい。
【００１７】
本発明において糖尿病性疾患とは、Ｉ型及び／又はII型糖尿病及びこれら糖尿病に起因する種々の合併症等の疾病の症状を呈した状態をいい、糖尿病性疾患としては、高血糖症、糖尿病性高脂血症、糖尿病性骨粗鬆症、糖尿病により体重が減少する症状や、糖尿病により血中ミネラル濃度が変動する症状、神経障害や網膜症や腎臓障害等の合併症などの症状を呈した状態を具体的に例示することができる。そして、本発明の糖尿病性疾患の予防・治療用組成物は、高血糖症、糖尿病性高脂血症、糖尿病性骨粗鬆症等の糖尿病性疾患の予防・改善作用を有することから、糖尿病患者又は糖尿病予備軍の人に経口投与することによる糖尿病性疾患の予防・治療に、あるいは、食品に添加配合することにより該食品を糖尿病性疾患の予防・改善作用を有する機能性食品や、薬理組成物食品素材として、有利に用いることができる。
【００１８】
本発明の糖尿病性疾患の予防・治療用組成物は、薬学的に許容される通常の担体、結合剤、安定化剤、賦形剤、希釈剤、ｐＨ緩衝剤、崩壊剤、可溶化剤、溶解補助剤、等張剤等の各種調剤用配合成分を添加することができる他、他の高血糖症、糖尿病性高脂血症、糖尿病性骨粗鬆症等の糖尿病性疾患の治療薬と併用することもできる。
【００１９】
本発明の糖尿病性疾患の予防・治療用組成物、糖尿病性疾患の予防・治療機能を有する食品や食品素材（サプリメント形態を含む）は、前述のように、花粉荷又は花粉荷処理物を有効成分として含有するものであれば特に制限されるものではなく、すなわち、上記本発明の糖尿病性疾患の予防・治療用組成物を有効成分として含有するものであればその含有量は特に制限されるものではないが、目安として、投与量、又は摂取量は成人１人１日あたり０．００１〜５０ｇが好ましく、０．００１〜１５ｇがより好ましく、０．０５〜１５ｇがさらに好ましい。
【００２０】
上記本発明の糖尿病性疾患の予防・治療に用いられる、糖尿病性疾患の予防・治療機能を有する食品や食品素材の種類としては特に制限されず、例えば、ヨーグルト、ドリンクヨーグルト、ジュース、牛乳、豆乳、酒類、コーヒー、紅茶、煎茶、ウーロン茶、スポーツ飲料等の各種飲料や、プリン、クッキー、パン、ケーキ、ゼリー、煎餅などの焼き菓子、羊羹などの和菓子、冷菓、チューインガム等のパン・菓子類や、うどん、そば等の麺類や、かまぼこ、ハム、魚肉ソーセージ等の魚肉練り製品や、みそ、しょう油、ドレッシング、マヨネーズ、甘味料等の調味類や、チーズ、バター等の乳製品や、豆腐、こんにゃく、その他佃煮、餃子、コロッケ、サラダ等の各種総菜を挙げることができる。これら食品や食品素材には、カルシウム、マグネシウム、リン等のミネラルを併用してもよく、食品や食品素材とした場合の花粉荷処理物の摂取量は成人１人１日あたり０．００１〜５０ｇが好ましく、０．００１〜１５ｇがより好ましく、０．０５〜１５ｇがさらに好ましい。
【００２１】
以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの例示に限定されるものではない。
【実施例１】
【００２２】
（花粉荷水抽出物の調製）
花粉荷（スペイン産シスタス）１０ｇにイオン交換水を４０ｍｌ加え、乳ばちにて練り込み、次に５０ｍｌのコーニングチューブに移し、室温で３０分間振とうした。その後、該チューブを１，５００ｒｐｍ、１０分間遠心分離機で遠心分離し、上澄み液をさらに同条件で合計２回遠心分離した。上澄み液を１．５ｍｌのエッペンドルフチューブに移し、１３，０００ｒｐｍ（１０，０００ｘｇ）、２０分間遠心分離機で遠心分離した。さらに、上清液を吸引ろ過（ろ紙：アドバンテック１３１）した。そのろ液を直径０．４５μｍのフィルターでろ過し、凍結乾燥を行った。得られた粉末を秤量し、５８０ｍｇ／ｍｌのサンプルを作製した。
【実施例２】
【００２３】
（ストレプトゾトシン及び花粉荷水抽出物の投与方法）
ストレプトゾトシン（以下、「ＳＴＺ」と略する場合がある。）は、ラットに投与することによりインスリン分泌障害によるＩ型糖尿病を誘発する。この糖尿病ラットを用いて、花粉荷水抽出物の抗糖尿病性疾患の作用効果について調べた。ストレプトゾトシン（和光純薬工業社製）は１５０ｍＭ塩化ナトリウム溶液に５０ｍＭクエン酸（ｐＨ４．５）を溶解した溶液に溶かし、６ｍｇ／ｍｌのものを調製し、この調製したＳＴＺをラット（ウイスター系雄性５週齢；体重１１０−１２０ｇ）に１回皮下投与した。一方、花粉荷水抽出物の凍結乾燥物は精製蒸留水に溶解して１０及び２０ｍｇ／ｍｌの濃度の溶液を調製した。この溶液を前記ラットに、ＳＴＺ投与１時間後に胃ゾンデを用いて１日１回１４日間連続的に経口投与した。ラットは最終投与の２４時間目に軽いエーテル麻酔下で心臓せん刺により採血し、大腿骨を摘出した。
【実施例３】
【００２４】
［測定項目と測定方法］
前記ラットより採血した血液は、室温で３０分間放置し、３０００回転で５分間遠心分離して、血清を得た。血清中の糖尿病と関連した血清グルコースと血清トリグリセライドのそれぞれの濃度については、測定キット（和光純薬工業社製「グルコース−テストワコー」、「トリグリセライド−テストワコー」）を用いて測定し、さらに骨代謝に関係したカルシウムと無機リンの濃度それぞれについても測定キット（和光純薬工業社製「カルシウムＣ−テストワコー」、「ピーテストワコー」）を用いて測定した。また、大腿骨組織は、筋肉組織を除去し、骨組織を骨幹部（ｄｉａｐｈｙｓｉｓ；皮質骨で硬い骨質をもつ）組織と骨幹端部（ｍｅｔａｐｈｙｓｉｓ；海綿骨で軟い骨質をもつ）組織とに分け、冷０．２５Ｍショ糖溶液中で骨髄細胞を洗浄除去した。それぞれの骨組織を用いて、以下に記載の方法でカルシウム量、骨の石灰化の促進に関する最も重要な酵素であるアルカリ性ホスファターゼの発現量、及び骨組織中の細胞数の指標としてＤＮＡ量をそれぞれ測定した。
【００２５】
（骨カルシウムの測定）
摘出した大腿骨の組織片を０．２５Ｍショ糖溶液で洗浄、乾燥後、骨重量を測定した。その後、組織片に濃硝酸を加えて１２０℃で１２時間灰化し、原子吸光分光光度計（パーキンエルマー社製「パーキンエルマー３０３」）を用いて骨カルシウム量を定量した。
【００２６】
（アルカリ性ホスファターゼ活性の測定）
摘出した大腿骨の組織片を０．２５Ｍのショ糖液で洗浄し、６．５ｍＭのバルビタール緩衝液（ｐＨ７．４）３ｍｌ中で破砕し、超音波処理した。この液を遠心分離して上清を酵素液としてＷａｌｔｅｒ及びＳｃｈｕｔｔの方法（in Method of Enzymatic Analysis, Vol1-2,p856, Academic Press, New York, 1965）に従って測定した。すなわち、ｐ−ニトロフェニール燐酸を基質として、ジエタノールアミン緩衝液（ｐＨ９．８）２ｍｌに酵素液０．０５ｍｌを添加し、３７℃で３０分間インキュベーションし、０．０５ＮのＮａＯＨを１０ｍｌ添加した後、分光光度計を用いて吸光度（４０５ｎｍ）を測定し、骨石灰化促進酵素であるアルカリ性ホスファターゼ活性を調べた。
【００２７】
（ＤＮＡ量の定量）
骨組織中の細胞数の指標として、ＤＮＡ量を定量した。摘出した大腿骨の組織片を０．２５Ｍのショ糖溶液で洗浄し、湿重量を測定した。その後、０．１ＮのＮａＯＨ４ｍｌ中で粉砕して、４℃で２４時間浸透させた。この液を遠心分離し、上清を試料としてＣｅｒｉｏｔｔｉらの方法（J.Biol.Chem., 241: 34-77, 1951）に従って定量した。すなわち、試料２ｍｌに濃塩酸１ｍｌ及び０．０４％のインドール溶液１ｍｌを添加し沸騰水中で１００℃に加熱後、急冷して、クロロホルム４ｍｌで抽出し、クロロホルム層を採取して、分光光度計（４９０ｎｍ）を用いて骨中のＤＮＡ量を測定した。
【００２８】
（統計処理）
得られた結果は、平均値±標準誤差として表示し、Ｓｔｕｄｅｎｔ  ｔ−ｔｅｓｔ（ｔ−検定）により統計処理し、対照群（６匹のラットを使用）と花粉荷抽出物（各投与群６匹のラットを使用）投与群から得られた値を比較して有意差検定を行い、危険率１％以下の場合に有意差ありとした。
【実施例４】
【００２９】
花粉荷水抽出物溶液の１０，２０ｍｇ／ｍｌを成長期のラットの体重１００ｇ当り、１．０ｍｌを１日１回１４日間連続経口投与した。この間、固型飼料（オリエンタル酵母、ＭＦ）と精製蒸留水を自由に摂取させた。最終投与の２４時間目にラットを屠殺した。また、ＳＴＺと花粉荷水抽出物を共に投与しないものを対照とした。
【実施例５】
【００３０】
［結果］
（体重、血清中のグルコース濃度、トリグリセライド濃度）
最終投与の２４時間目におけるラットの体重（ｇ）と血清グルコース（ｍｇ／ｄｌ）、血清トリグリセライド（ｍｇ／ｄｌ）の濃度の変動を調べ、測定結果を表１に示す。表１に示すように、ＳＴＺ投与による糖尿病ラットは、対照群と比較して、体重においては、有意な減少を引き起こし、さらに、血清グルコース濃度及び血清トリグリセライド濃度においては、有意な増加を引き起こした。これに対して、本発明の花粉荷水抽出物投与群では、体重は、ＳＴＺ投与群と比較して、有意に増加し、また、血清グルコース濃度及び血清トリグリセライド濃度は、共に有意に減少していることがわかった。また、花粉荷水抽出物の濃度が高い方（２０ｍｇ／１００ｇ）が低い濃度（１０ｍｇ／１００ｇ）に比して、糖尿病ラットの体重増加率が高く、また、血清トリグリセライド濃度の減少率が大きいことも分った。以上のとおり、花粉荷水抽出物には、血清グルコース濃度低下作用及び血清脂質濃度低下作用があり、糖尿病状態の高血糖、高脂血症及び体重減少が花粉荷水抽出物によって有意に改善されることが明かにされた。
【００３１】
【表１】
2008105982.tif 000002
【実施例６】
【００３２】
（血清中のカルシウム濃度及び無機リン濃度）
同様に、最終投与の２４時間目における各ラット群の血清カルシウム濃度（ｍｇ／ｄｌ）と血清リン濃度（ｍｇ／ｄｌ）の変動を調べ、その測定結果を表２に示す。表２に示すように、ＳＴＺ投与による糖尿病ラット群は、対照群と比較して、血清カルシウム濃度の有意な上昇と無機リン濃度の有意な低下をもたらした。
本発明の花粉荷水抽出物投与によるラット群では、ＳＴＺ群に対し、血清カルシウム濃度は、有意に減少し、無機リンは、有意に増加することが分った。
以上のとおり、糖尿病状態において、血清中のカルシウム濃度、無機リン濃度が変動するが、この変動は花粉荷水抽出物の投与によって有意に修復されることが明らかとなり、花粉荷水抽出物は優れた抗糖尿病効果を発揮することが明かとなった。
【００３３】
【表２】
2008105982.tif 000003
【実施例７】
【００３４】
（骨組織中のカルシウム濃度）
花粉荷水抽出物を糖尿病ラットに経口投与（１４日間）したときの大腿骨組織の骨幹部と骨幹端部組織における骨部のカルシウム濃度（ｍｇ／ｇ骨乾燥量）の変動を調べ、その測定結果を表３に示す。表３に示すように、大腿骨組織の骨幹部組織及び骨幹端部組織におけるカルシウム濃度は、ＳＴＺ投与群においては、対照群と比べて有意に低下することが明かにされた。この低下に対し、本発明の糖尿病ラットへの花粉荷水抽出物投与（１０ｍｇ／１００ｇ、２０ｍｇ／１００ｇ）により、有意に抑制された。なお、骨幹部組織のカルシウム濃度においては、花粉荷水抽出物１０ｍｇ／１００ｇ投与の方が、２０ｍｇ／１００ｇに比べてやや増加率は大きく、花粉荷水抽出物の投与量がカルシウム濃度に比例するとは限らないが、骨幹端部組織中のカルシウム濃度は、濃度に比例することが示された。
【００３５】
（骨組織中のアリカリ性ホスファターゼ濃度）
花粉荷水抽出物を糖尿病ラットに経口投与（１４日間）したときの大腿骨組織の骨幹部組織及び骨幹端部組織におけるアルカリ性ホスファターゼ活性（μｍｏｌ／分／ｍｇ蛋白質）の変動を調べ、その測定結果を表３に示す。表３に示すように、大腿骨組織の骨幹部組織及び骨幹端部組織におけるアルカリ性ホスファターゼ活性においては、ＳＴＺ投与群は対照群と比べて有意に減少した。この減少は、本発明の糖尿病ラットへの花粉荷水抽出物投与（１０ｍｇ／１００ｇ、２０ｍｇ／１００ｇ）により、有意に増加させた。
【００３６】
（骨組織中のＤＮＡ濃度）
花粉荷水抽出物を糖尿病ラットに経口投与（１４日間）したときの大腿骨組織の骨幹部組織及び骨幹端部組織におけるＤＮＡ濃度は、対照群に比してＳＴＺ投与群において有意に減少した。この減少は、本発明の花粉荷水抽出物投与（１０ｍｇ／１００ｇ、２０ｍｇ／１００ｇ）により、大腿骨組織の骨幹部組織中のＤＮＡ量を有意に増加させた。しかし、骨幹端部組織中のＤＮＡ量は、有意差が認められなかった。
【００３７】
【表３】
2008105982.tif 000004
【００３８】
（まとめ）
以上の結果から明らかなように、花粉荷抽出物投与により、糖尿病状態における体重増加の抑制、高血糖及び高脂血症、並びに糖尿病性骨粗鬆症が改善された。糖尿病性骨粗鬆症の改善に関しては、糖尿病状態の血液中カルシウム濃度の上昇、無機リン濃度の低下、骨組織中のカルシウム濃度、ＤＮＡ濃度、アルカリ性ホスファターゼ活性の低下等、骨減少に対して、花粉荷抽出物は骨形成促進作用を有し、有意な改善効果を発現することが明かにされた。このように、花粉荷抽出物投与により高血糖及び高脂血症を有意に改善できたことから、花粉荷抽出物は、Ｉ型糖尿病（インスリン分泌障害による糖尿病）のみならず、II型糖尿病に対しても改善効果を発揮し得るものと推察される。