(57)【要約】【課題】運動を起因とするストレス状態を客観的かつ高精度に評価する方法を提出すること。【解決手段】被験者の末梢血由来のメッセンジャーRNAにおいて、運動ストレスの評価マーカーとなる特定遺伝子群の発現プロファイルを解析し、その解析結果に基づいて該被験者の運動ストレスを評価する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
被検者の末梢血由来のメッセンジャーRNAを用いて、表１から選ばれるいずれかのマーカー遺伝子の発現解析結果に基づき、該被検者の運動を起因とするストレス状態を評価することを特徴とするストレス状態の評価方法。
【請求項２】
被検者の末梢血由来のメッセンジャーRNAを用いて、表１に記載されたマーカー遺伝子の発現解析結果に基づき、該被検者の運動を起因とするストレス状態を評価することを特徴とするストレス状態の評価方法。
【請求項３】
前記遺伝子発現解析が、被検者の遺伝子発現プロファイルと、あらかじめ取得された運動負荷状態者の遺伝子発現プロファイルとを比較解析することにより行われることを特徴とする、請求項１又は２に記載のストレス状態の評価方法。
【請求項４】
前記あらかじめ取得された運動負荷状態者の遺伝子発現プロファイルが、運動負荷4時間後、運動負荷24時間後、及び運動負荷48時間後のそれぞれから成り、運動直前サンプル群に対して運動負荷4時間後のサンプル群、運動負荷24時間後のサンプル群、及び運動負荷48時間後のサンプル群をそれぞれ測定して、それぞれの時系列の全てで比較解析をすることを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載のストレス状態の評価方法。
【請求項５】
前記遺伝子発現解析が、チップ、アレイ、メンブレンフィルター、及びビーズを含むDNA固相化試料のいずれかを用いて行われることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載のストレス状態の評価方法。
【請求項６】
前記遺伝子発現解析が、ＲＴ−ＰＣＲ、リアルタイムＰＣＲ、ノーザンブロット法、サブトラクション法、ディファレンシャル・ディスプレイ法、及びディファレンシャル・ハイブリダイゼーション法から選ばれるいずれかの方法を用いて行われることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載のストレス状態の評価方法。
【請求項７】
表１に記載のマーカー遺伝子にそれぞれ特異的にハイブリダイズし、該遺伝子を検出するための各プローブを固相上に固定化したことを特徴とする運動を起因とするストレス状態の評価用固相化試料。
【請求項８】
被検者の遺伝子発現データと、あらかじめ取得された運動ストレス負荷状態者の遺伝子発現データとを比較解析する手段を有することを特徴とする運動を起因とするストレス状態の評価用システム。
【請求項９】
前記遺伝子発現データに、それぞれの年齢及び性別のデータを加えて比較解析する手段を有することを特徴とする請求項８に記載のシステム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、被験者の末梢血メッセンジャーRNAにおける特定遺伝子群の発現プロファイルに基づいて該被験者の運動を起因とするストレス状態を評価する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ストレスの概念は、「外から生体に加わった外力であるストレス刺激に対してそのゆがみを元に戻そうとする反応」であり、免疫反応や炎症反応と同様に、体を守るためには重要な反応である。一般的なストレス反応では、外部からストレス刺激を受けると、中枢神経から発せられた信号に対して、各組織でさまざまな反応が見られる。通常の場合、ある程度の反応が起こると、それを抑制しようとするフィードバック機構が働く。しかしながら、何らかの理由によりこのフィードバック機構が過剰に又は不要に働くと、生体にさまざまな影響を及ぼす。
【０００３】
ストレスの種類としては、外部からのストレス刺激であるストレッサーに応じて、物理・化学的ストレス、生理的・生物学的ストレス、心理的・社会的ストレスなどに大別される。物理・化学的ストレスとは自然などの外部環境的なストレッサーによるもので、具体的なストレッサーとしては、騒音、気温、湿度、けが、有害物質、大気汚染などが挙げられる。生理的・生物学的ストレスとは生体環境的なストレッサーによるもので、具体的なストレッサーとしては、運動、肉体疲労、精神疲労、過労、睡眠不足、栄養不足、ウイルス、細菌感染などが挙げられる。一方、心理的・社会的ストレスとは心理状態や社会生活における周囲環境などに由来するストレッサーによるもので、具体的なストレッサーとしては人間関係の葛藤、欲求不満、不安、心配、緊張、怒り、恐怖、失望などが挙げられる。
【０００４】
古くから、精神的・身体的ストレスがさまざまな疾患に関与していることは、臨床的な観察から経験的に知られている。例えば、ストレスが原因となって引き起こされる、又は助長される疾患として、虚血性心疾患、高血圧、消化管機能異常、摂食障害、アレルギー・アトピー性疾患、糖尿病や甲状腺機能亢進症などの内分泌・代謝疾患、慢性頭痛等がある。また、怠学、失職、引きこもり等の社会的問題やアルコール関連障害等の医学的問題にもストレスが深く関連している。これらの疾患を未然に防ぐためにも、ストレスを客観的に評価するシステムを確立することは、社会的ストレスが増加している今日、注目すべき課題といえる。
【０００５】
ストレスと運動の関わりについては、ヒトが運動不足になると身体的、精神的ストレスを受け、その結果として心臓血管系などの内科的疾患、腰痛症や緊張症候群などの筋・骨格系の疾患、あるいはノイロ−ゼや鬱などの精神医学的疾患などに罹患しやすくなることが古くから指摘されている。事実、現代人の宿命ともいえる高血圧、肥満、糖尿病など生活習慣病は、適度な運動を処方することでかなりの改善が認められることから、臨床でも重要な処方の一つなっている。
【０００６】
ここで、適度な運動は生体のもつ恒常性（ホメオスタシス）に不可欠である一方、やりすぎると今度は逆にストレスを受け、内科、外科的な疾患はもちろんのこと、運動障害や鬱病になることも在り得る。長期的な運動のやりすぎによる抑鬱傾向の増加、鬱病への罹患、慢性疲労の進行、骨密度低下、そして月経異常なども報告されている。
【０００７】
以上のとおり、適度な運動は脳やからだを刺激し、状態不安を軽減し、慢性的ストレスに対する耐性をつくるが、やりすぎると脳を含めたからだの調節系を失調に陥れる可能性がある。
【０００８】
これら運動を起因とするストレスを含むストレス反応自身を測定する方法については、これまで、ライフイベントや日常苛立ち事などのストレッサーの評価、性格判定テストなどの個人の生物学的特徴の評価が行われ、一定の成果を挙げてきた。しかし、これらの評価には膨大な時間と労力が必要であり、定量性や客観性に問題が残されている。また、ストレスホルモンなどの限られた因子を測定する方法、例えば、体液中のクロモグラミンの濃度を定量する方法（特許文献１）、副腎又は下垂体における一酸化窒素合成酵素の活性を測定する方法（特許文献２）、唾液における副腎性性ホルモン又はその代謝物の濃度を指標にする方法（特許文献３）、グルタチオン付加ヘモグロビン量を測定する方法（特許文献４）、唾液中のコルチゾール濃度を測定する方法（特許文献５）、モノアミン類の濃度変化率を測定する方法（特許文献６）、V-1遺伝子発現量又はV-1蛋白質量を測定する方法（特許文献７）、血中のKYN濃度の変化率を測定する方法（特許文献８）、perl遺伝子とper2遺伝子の発現レベルを指標とする方法（特許文献９）など、多くの方法が提案されているが、これらの方法では、内分泌・神経・免疫による複雑系の反応(ストレス反応)を評価することは困難である。
【０００９】
本発明者らは、末梢血白血球に現れる生体反応をマイクロアレイ（DNAチップ）を用いて網羅的に解析し、複雑系の反応（ストレス反応）を客観的に評価する新しい方法論を見出し、ストレス及びストレス関連疾患の診断に応用して来た。すなわち、ストレス及びストレス関連疾患を評価するためのオリゴヌクレオチドアレイ及び検査方法（特許文献１０）、そしてこの技術を用いたうつ病の評価方法（特許文献１１報）や、健常大学院生が学位論文の公開審査時に現れる急性の精神的ストレスを評価する方法（非特許文献１）を提供してきた。今回、発明者らが新たに提供するのはこれまでに色々と提供してきた精神的なストレスに関わるものではなく、運動を起因とするストレス状態に関する評価方法である。
【００１０】
【特許文献１】特開平１１-２３５７２号公報
【特許文献２】特開平８-２６２０２５号公報
【特許文献３】特開平１１-３８００４号公報
【特許文献４】特開２０００-７４９２３号公報
【特許文献５】特開２０００-２７５２４８号公報
【特許文献６】特開２００２−１５６３７８号公報
【特許文献７】特開２００３−６１６５４号公報
【特許文献８】特開２００４−１９８３２５号公報
【特許文献９】特開２００５−１４３４２０号公報
【特許文献１０】特開２００２−３４０９１７号公報
【特許文献１１】特開２００４−２０８５４７号公報
【非特許文献１】Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｌｅｔｔｅｒｓ, ３８１（2005）５７-６２
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、運動を起因とするストレス状態を客観的かつ高精度に評価する方法を提供することを目的とする。特に、運動を起因とするストレスの程度を評価する上で不可欠な遺伝子群を特定することで、評価の指標とする遺伝子の数を最小化し、再現性・信頼性の高い評価方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、運動をストレス刺激とするストレス反応を客観的に評価するために、検体として容易に得られ、しかも、ストレスに関連する因子の受容体の多くを発現する末梢血白血球に着目した。そして、ストレス応答に関連する約1500遺伝子のメッセンジャーRNAの発現パターンを網羅的に解析することで、運動を起因とするストレス状態を精度高く評価しうる方法を見出し、本発明の完成に至った。
【００１３】
すなわち、本発明は、被検者の末梢血由来のメッセンジャーRNAを用いて、表１から選ばれるマーカー遺伝子の発現解析結果に基づき、該被検者の運動を起因とするストレス状態を評価することを特徴とする運動ストレスの評価方法を提供する。
【００１４】
本発明はまた、上記評価方法に使用するための固相化試料も提供する。前記固相化試料は、表１から選ばれるマーカー遺伝子に特異的にハイブリダイズし、該遺伝子を検出するためのプローブを適当な固相上に固定して作製される。
【００１５】
本発明はさらに、上記評価方法を実施するためのシステムも提供する。前記システムは、被検者の遺伝子発現データと、あらかじめ取得しておいた運動ストレス負荷状態者の遺伝子発現データとを比較解析する手段を有する。
【発明の効果】
【００１６】
本発明によれば、非侵襲的に、しかも簡便かつ高精度で運動に起因するストレス状態を評価することができる。また、複数のマーカー遺伝子の発現変化を指標とすることで、神経系、内分泌系、免疫系それぞれのバランスの変化に着目して運動ストレスを評価できる。さらに、本発明では運動ストレスの程度を評価する上で不可欠な遺伝子群を特定し、固相化するDNA断片の数を最小化しているため、経済的（アレイの作製コスト等の削減）で効率のよい評価が期待できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
１．ストレスの評価マーカー遺伝子
発明者らは、被験者の全血よりRNAを抽出し、DNAチップを用いて1500の遺伝子の発現量を網羅的に解析し、その結果に基づいてストレス状態の評価マーカーとなる遺伝子群を決定した。DNAチップとは、ガラス等の支持基体上に多数の遺伝子に相当する塩基配列を有するDNA断片を固定化したものであり、ハイブリダイゼーションにより、サンプル中のRNAの変化を検出するものである。解析は遺伝子の網羅的な発現解析が可能であれば、上記DNAチップに代えて、他のDNA固相化試料（DNAアレイ、キャピラリー、メンブレンフィルター等）や定量法を利用してもよい。なお、本発明における運動に起因するストレスとは、緊張、不安、恐怖等の精神的なストレスではなく、走運動、有酸素運動などの運動ストレッサーに由来するストレスを意味する。
【００１８】
評価マーカーとなる遺伝子群の選定は、健常男子大学生5名（20歳）及び男子大学院生1名（26歳）の被験者6名を対象とし、疲労困憊運動前後における末梢血中の遺伝子発現変化を解析して行った。被験者は、それぞれ疲労困憊運動直前に採血してこれを各人のコントロールサンプルとした。疲労困憊運動はエルゴメーターを使用し、まず50Wの運動を5分間行った後、5分ごとに25Wずつ仕事量をふやしエルゴメーターの運動が持続できる限界まで運動を負荷した。疲労困憊運動4時間後、24時間後、及び48時間後採血を行い、上記DNAチップを用いて、運動開始直前をコントロールとして運動終了後の遺伝子発現の変化を経時的に測定した。
【００１９】
得られたそれぞれの結果を用いて、運動直前サンプル群と運動4時間後のサンプル群、運動直前サンプル群と運動24時間後のサンプル群、又は運動直前サンプル群と運動48時間後のサンプル群のそれぞれについて有意差検定を行い、各実験でのP値が0.25以下である遺伝子を運動ストレスのマーカー遺伝子とした（表１）。
【００２０】
【表１】
2008054590.tif 000002
2008054590.tif 000003
【００２１】
２．評価マーカー遺伝子の特徴
表1に記載のカゼインキナーゼII（CSNK2A1、CSNK2A2）は全ての細胞の核と細胞質に存在する普遍的な分子をコードしており、この分子はタンパク質のリン酸化酵素としての機能を有することが広く知られている。この分子は後述するストレス関連の熱ショックタンパク質をリン酸化することが知られているが（Biochem. J. 2003 May 1;371(Pt 3):917-25.）、運動ストレス状態との具体的関係は報告されていない。
【００２２】
また、HLA-G遺伝子はクラス1型のMHA（Majour Histocompatibility Complex；主要組織適合遺伝子複合体）遺伝子であり、これがコードする分子は免疫反応に深く関わっていることが知られている。免疫反応は生体が外部からの刺激であるストレッサーから身を守るための機構であるが、これらの遺伝子と運動ストレス状態との具体的関係は報告されていない。
【００２３】
HSPA6遺伝子は熱ショック蛋白質(HSP)ファミリーに属する。HSPファミリーはいわゆるストレス反応を支える一群のタンパク質として最も広く知られており、環境変化に反応して抵抗性を誘導し、さらに普段から分子シャペロンとしてタンパク質の介添え役を果たしていることがわかってきている。
【００２４】
CREB1はcAMPに応答する認識配列に結合する転写因子として同定され、CREB活性化に至る細胞内シグナルとして、MAPKカスケード、CaM-Kカスケード、cAMP-PKAカスケードなど様々な信号伝達系カスケードが関与していることが広く知られている。また、ストレス反応との関わりについても数多く報告されている（Free Radic. Biol. Med. 2005 Jun 15;38(12):1653-61、BMC Neurosci. 2004 Sep 20;5(1):36、J. Neurosci. 2004 Jul 28;24(30):6686-92）。しかしながら、これらの遺伝子についても運動ストレス状態との具体的関係は報告されていない。
【００２５】
上記以外の他の遺伝子の多くも免疫反応や神経伝達に関わっているが、運動ストレス状態との具体的関係は報告されていない。
【００２６】
３．ストレスの評価方法、及びストレス評価システム
本発明は、上記実験結果に基づき完成されたものであり、被験者の末梢血由来のメッセンジャーRNAを用いて、運動ストレスの評価マーカーとなる特定遺伝子群の発現プロファイルを解析し、その解析結果に基づいて該被験者の運動ストレスを評価する方法に関する。本発明のストレスの評価方法の概念図を図1に示す。
【００２７】
遺伝子の発現解析方法は、DNAチップに限定されず、DNAアレイやメンブレンフィルター等の他のDNA固相化試料を用いた核酸ハイブリダイゼーション法、RT-PCRやリアルタイムPCR等の定量的PCR法、ノーザンブロット法、サブトラクション法、ディファレンシャル・ディスプレイ法、ディファレンシャル・ハイブリダイゼーション法、及びクロスハイブリダイゼーション法等、当該技術分野で知られた任意の解析方法を用いることができる。特に、多数の遺伝子を一度に網羅的に解析できるという点で、DNAチップ、DNAアレイ、メンブレンフィルター、及びキャピラリー等のDNA固相化試料が好ましい。
【００２８】
本発明で用いられる固相化試料は、表１から選ばれたマーカー遺伝子に特異的にハイブリダイズし、該遺伝子を検出するためのプローブをガラス、ナイロンメンブレン等の固相上に固定することにより作製される。遺伝子を検出するためのプローブは、周知の方法に従って、マーカー遺伝子の特異性の高い領域（例えば、3’UTR部分）に相補的な配列として設計することができ、20〜1500塩基長が好ましく、60〜1000塩基長であることがより好ましい。固相上へのプローブの固定方法は、特に限定されず、周知の方法に従い、合成したプローブを固相上にスポットするか、プローブを固相上で合成すればよい。
【００２９】
ストレスの評価は、一定のRNAサンプル、例えば、ユニバーサルRNAサンプルをコントロールサンプルとして、被験者サンプルの遺伝子発現プロファイルとコントロールサンプルの遺伝子発現プロファイルとを比較解析することにより行ってもよい。「ユニバーサルRNAサンプル」とは、一群の異なるヒト組織から抽出したトータルRNA（あるいはmRNA）を混合して作製されたRNAサンプルであって、ヒト全発現遺伝子の大部分（好ましくは、90％以上）をカバーする標準RNAサンプルである。そのようなユニバーサルRNAサンプルは、常法にしたがって調製することもできるが、市販のユニバーサルRNAサンプル（例えば、BD ClontechのPremium RNATMヒト汎用リファレンス用トータルRNA（Clontech）等）を好適に利用することができる。
【００３０】
あるいは、ストレスの評価は、同一被験者の平常時における遺伝子発現プロファイルとストレス負荷状態時における遺伝子発現プロファイルとを比較解析することにより、該被験者のストレスを評価するものであってもよい。
【００３１】
好ましくは、上記したコントロールや平常時の遺伝子発現プロファイルとの比較データは、あらかじめ取得しておいた運動ストレス負荷状態者の同様のデータと比較解析して評価する。このようにあらかじめ蓄積されたデータとの比較解析を行うことで、より精度の高い評価を行うことができる。
【００３２】
たとえば、運動直前サンプル群に対して運動負荷4時間後のサンプル群、運動負荷24時間後のサンプル群、及び運動負荷48時間後のサンプル群をそれぞれ測定して、それぞれの時系列の全てで比較解析をする。
【００３３】
データの解析方法は、クラスタ解析に限定されず、サポートベクターマシン等の機械学習のアルゴリズム等、当該技術分野で知られた任意の解析方法を用いることができる。
【００３４】
ユニバーサルRNAサンプルの遺伝子発現データや運動ストレス負荷状態者の遺伝子発現データをあらかじめデータベースに蓄えておけば、当該データベースからこれらのデータを取り出して測定された被験者のデータと比較するだけで、被験者の運動ストレス状態をいつでも簡便に評価することができる。本発明は、そのような運動ストレス評価システムも提供する。
【００３５】
本発明のストレスの評価方法は、対象者の特別な協力を必要とせず、通常の採血による5ccの血液をもとに解析可能であり、非侵襲的、簡便かつ日常的に行うことのできる評価方法である。数多くのRNA発現量から生体機能を多面的に把握する本法は、従来の限られた因子を測定する方法に比べ、心と身体にまたがる複雑なストレスの評価方法として原理的にも適切である。
【実施例】
【００３６】
以下、実施例を用いて、本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
〔実施例１〕
被験者6名を対象に、疲労困憊運動直前のサンプルをコントロ−ルサンプルとして、各人ごとにコントロ−ルサンプルに対する運動4時間後、24時間後、及び48時間後より採取したサンプルの遺伝子発現比較解析を上記DNAチップを用いて実施した。なお、詳細は下記の通りである。
【００３７】
１．試験方法
検査の内容を説明し、文書にて同意を得た健康な男子大学生5名（20歳）及び男子大学院生1名（26歳）の計6名を被験者とした。被験者それぞれに対して、疲労困憊運動直前、運動4時間後、24時間後、及び48時間後に医師又は看護師が安静下に肘静脈より採血した。なお、採血量については、疲労困憊運動直前は10cc、運動終了後は5ccとした。採血された血液より、PAXgene Blood RNA System（キアゲン社製）を用いて、トータルRNAを抽出した。トータルRNAの収量は、5ccの血液から5-15μgであった。なお、疲労困憊運動はエルゴメーターを使用し、まず50Wの運動を５分間行った後、5分ごとに25Wずつ仕事量を増やし、エルゴメーターの運動が持続できる限界まで運動を負荷した。250Wの運動負荷中に1名、275Wの運動負荷中に3名、300Wの運動負荷中に１名、325Wの運動負荷中に1名が限界に達して運動を中止した。
【００３８】
得られたトータルRNA 5μgを用いて、T7プロモータ配列を付加したオリゴ(dT)24プライマーをアニールさせFirst strand DNA合成を行った。次に、このFirst strand DNAを鋳型にして、T7プロモータ配列を有するSecond strand DNAを合成した。最後にSecond strand DNAを鋳型にして、T7 RNA polymeraseによるRNA合成を行った。合成したRNA 6μgに対し、蛍光標識物質存在下でランダムヘキサマーをアニールさせ逆転写酵素反応を行い蛍光標識産物を調製した。なお、疲労困憊運動直前由来の産物をCy3に、運動後のサンプルをCy5にそれぞれ蛍光標識した。
【００３９】
比較解析を行う2種類のcDNAを等量混合した後、DNAチップ（日立製作所社製薬物応答解析用DNAチップ）にかけてハイブリダイゼーションを62℃で、12時間行った。洗浄後スキャナー（GSI-Lumonics社製ScanArray 5000）により各スポットの蛍光強度を測定した。なお、各人ごとに運動直前由来のサンプルをコントロ−ルサンプルとして運動4時間後、24時間後、及び48時間後由来のサンプルを同一のDNAチップ上で直接比較し、それぞれのタイムポイントにおける遺伝子の発現量比（変動値）を求めた。
【００４０】
２．結果
すべての解析で300以上の蛍光強度が得られた遺伝子群を対象とし、得られた被験者6名の発現量比を用いて、各タイムポイント毎に有意差検定を行いマーカー遺伝子となり得る変動遺伝子を抽出した。P値が0.25以下であった遺伝子について、表2から表4にP値と発現強度比（Cy5/Cy3）を示す。なお、有意差検定は発現量比に対してBayes推定を用いる場合と用いない場合の2通りの方法で実施した。
【００４１】
【表２】
2008054590.tif 000004
【００４２】
【表３】
2008054590.tif 000005
【００４３】
【表４】
2008054590.tif 000006
【００４４】
最後に、それぞれの有意差検定において、P値が0.25以下である遺伝子を運動ストレスのマーカー遺伝子として選定した（前掲：表１）。
【００４５】
〔実施例２〕被検者のマーカー遺伝子による運動ストレスの評価
実施例１と同様に文書にて同意を得た男子大学生5名（20歳）及び男子大学院生1名（26歳）の計6名を被験者とした。ブラインドされた被検者A, B, Cは実施例１と同様に疲労困憊運動を実施後、運動直前、運動4時間後、運動24時間後、及び運動48時間後のそれぞれで得られた血液を用いて同様に発現量比を測定した。一方、被験者D, E, Fはエルゴメーターを用いて最大酸素摂取量に対する60％酸素摂取運動を実施した後、同様に血液を用いて発現量比を測定した。次に、各個人ごとに得られた表１に示したマ−カー遺伝子の発現量比を用いて、上記6人の被検者を先に解析した6名と合わせ、クラスタ間の重み無しコサイン係数距離による階層型クラスタリング法によりクラスタ解析を行った。解析結果より、疲労困憊運動を実施した被験者A, B, Cと先に実施した6人は運動4時間後、運動24時間後、及び運動48時間後のそれぞれの時系列で同一のクラスタに属し、一方、60％酸素摂取量の運動を実施した被験者D, E, Fはそれぞれの時系列で異なるクラスタに分類された。
【００４６】
以上のように、本発明の特定遺伝子群の発現解析にもとづく運動ストレス評価方法の有効性が非常に高く効用大なるものであることが示された。
【産業上の利用可能性】
【００４７】
本発明の方法は、個人の健康管理はもとより、職場、学校、及び地域の検診や人間ドック等において、ストレスの客観的かつ簡便な評価方法として利用できる。本発明は予防医学的見地から、国民のこころの健康の向上に大きく寄与するものである。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】図１は、本発明のストレスの評価方法の概念図である。
【符号の説明】
【００４９】
1・・・DNAチップ
2・・・本発明で選択された遺伝子に相当するプローブDNA
3・・・励起光源及び蛍光検出器
4・・・蛍光検出器制御コンピュータ
【図１】
2008054590.tif 000007