(57)【要約】【課題】  皮膚中に存在するコラーゲンとヒアルロン酸量を向上させ、シワやタルミを予防、緩和、改善する線維芽細胞増殖促進剤、及び該線維芽細胞増殖促進剤を含有する皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物を提供する。【解決手段】  イトヒメハギエキス、クララエキス、シャクヤクエキス、カキエキス、タンジンエキス、ツボクサエキス、プーアルエキス、アルブチン、アスコルビン酸及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を含有することを特徴とする線維芽細胞増殖促進剤、及び該線維芽細胞増殖促進剤を含有する皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物を提供する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
イトヒメハギエキス、クララエキス、シャクヤクエキス、カキエキス、タンジンエキス、ツボクサエキス、プーアルエキス、アルブチン、アスコルビン酸及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を含有することを特徴とする線維芽細胞増殖促進剤。
【請求項２】
請求項１に記載の線維芽細胞増殖促進剤を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項３】
請求項１に記載の線維芽細胞増殖促進剤を含有することを特徴とする浴用剤。
【請求項４】
請求項１に記載の線維芽細胞増殖促進剤を含有することを特徴とする飲食物。
【請求項５】
イトヒメハギエキス、クララエキス、シャクヤクエキス、カキエキス、タンジンエキス、ツボクサエキス、プーアルエキス、アルブチン、アスコルビン酸及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を０.０１質量％〜１０質量％含有することを特徴とする請求項２〜４に記載の皮膚外用剤、浴用剤、又は飲食物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚の弾力、張り、潤いに重要な役割を担う線維芽細胞の増殖促進剤に関する。更には、該線維芽細胞増殖促進剤を含有する皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、高齢化社会や女性の社会進出に伴い、美容に対する意識が向上している。しかし、皮膚の機能は年齢とともに低下し、加齢により弾力や張りを失い、シワが生じてくる。この原因として、皮膚中に存在する線維芽細胞が産生するコラーゲンとヒアルロン酸の量の低下が挙げられる。
【０００３】
皮膚は皮下組織、真皮、表皮の三層から成っていて、皮膚の弾力など皮膚機能に最も影響を与えるのが真皮であり、この真皮にはコラーゲンとヒアルロン酸が多く含まれている。これらコラーゲンやヒアルロン酸は、真皮中に存在する線維芽細胞が産生することが知られており、皮膚の弾力性の保持に重要な役割を担っている。
【０００４】
また線維芽細胞は、真皮以外にも、全身の結合組織に散在しており、各組織や器官の結合に重要な役割を果たすことが知られていることから、線維芽細胞増殖を調節することによる創傷の治療、線維腫の予防、老化の予防への応用が期待されている。
【０００５】
皮膚の弾力性保持、すなわち皮膚の老化を防止するために、今までに様々な手段が提案されている。例えば特許文献１には、「ゲンクワニンを有効成分として含有する、皮膚外用剤」が記載されている。特許文献１記載の皮膚外用剤に含有されるゲンクワニンは、線維芽細胞におけるコラーゲン、及びヒアルロン酸産生を促進するものであり、線維芽細胞の増殖を促進するものではない。また特許文献１には、イトヒメハギエキス等の特定の植物エキス、又はアスコルビン酸等の特定の化合物が、線維芽細胞の増殖を促す結果、コラーゲン、及びヒアルロン酸産生が向上し、皮膚や爪の老化を防止する点については何も開示していない。
【特許文献１】特開２００４−１３７２１７
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、皮膚中に存在するコラーゲンとヒアルロン酸量を向上させ、シワやタルミを予防、緩和、改善することによって肌の弾力や張りを取り戻すために、コラーゲンやヒアルロン酸を産生する線維芽細胞を増殖する促進剤、及び該線維芽細胞増殖促進剤を含有する皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物を提供することを目的としてなされたものである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、特定の植物エキス、アルブチン、アスコルビン酸、アルギン酸オリゴ糖類が線維芽細胞の増殖を促進する作用を有することを見出し、この知見に基づき本発明を完成させた。
【０００８】
すなわち、本発明は、イトヒメハギエキス、クララエキス、シャクヤクエキス、カキエキス、タンジンエキス、ツボクサエキス、プーアルエキス、アルブチン、アスコルビン酸及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を含有することを特徴とする線維芽細胞増殖促進剤を提供する。
また、本発明は、前記線維芽細胞増殖促進剤を含有することを特徴とする皮膚外用剤、浴用剤又は飲食物を提供する。
【発明の効果】
【０００９】
イトヒメハギエキス、クララエキス、シャクヤクエキス、カキエキス、タンジンエキス、ツボクサエキス、プーアルエキス、アルブチン、アスコルビン酸及びアルギン酸オリゴ糖類はそれぞれ単独で、特に組み合わせることで線維芽細胞の増殖を促進する作用があり、線維芽細胞増殖促進剤として様々な用途で有用である。これらを配合した化粧品をはじめ、医薬部外品、浴用剤や飲食物を使用又は摂取することにより、線維芽細胞の増殖の効果が期待できるので、皮膚等の老化現象の防止、改善が図られる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明の線維芽細胞増殖促進剤は、イトヒメハギエキス、クララエキス、シャクヤクエキス、カキエキス、タンジンエキス、ツボクサエキス、プーアルエキス、アルブチン、アスコルビン酸及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を含有することを特徴とするものである。
【００１１】
前記植物エキス、アルブチン、アスコルビン酸及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる２種以上含有する本発明の線維芽細胞増殖促進剤としては、
アルギン酸オリゴ糖類とアルブチン、ツボクサエキス、タンジンエキス、イトヒメハギエキス、カキエキス、クララエキス、又はプーアルエキスとの組み合わせ；
アルブチンとアスコルビン酸、クララエキス、又はプーアルエキスとの組み合わせ；
イトヒメハギエキスとプーアルエキス、タンジンエキス、又はクララエキスとの組み合わせ；
クララエキスとシャクヤクエキス、ツボクサエキス、又はプーアルエキスとの組み合わせ；
シャクヤクエキスとカキエキスとの組み合わせ；
アルギン酸オリゴ糖類、アルブチン、及びカキエキスの組み合わせ；
アルギン酸オリゴ糖類、クララエキス、及びプーアルエキスの組み合わせ；
アルギン酸オリゴ糖類、イトヒメハギエキス、及びクララエキスとの組み合わせ；
アルブチン、クララエキス、及びプーアルエキスの組み合わせ；
カキエキス、クララエキス、及びツボクサエキスの組み合わせ；
イトヒメハギエキス、カキエキス、タンジンエキス、及びツボクサエキスの組み合わせ；
から選ばれる組み合わせを含有するものが、皮膚等の老化現象の防止、改善作用に特に優れることから好ましい。
【００１２】
本発明で使用するイトヒメハギエキスとは、ヒトハギ科植物のイトヒメハギの根を用いて抽出するが、地上部さらに同属植物を用いて抽出することができる。
【００１３】
本発明で使用するクララエキスとは、マメ科植物のクララの根を用いて抽出するが、地上部さらに同属植物を用いて抽出することができる。
【００１４】
本発明で使用するシャクヤクエキスとは、ボタン科植物のシャクヤクの根の外皮を除去したものを用いて抽出するが、地上部さらに同属植物を用いて抽出することができる。
【００１５】
本発明で使用するカキエキスとは、カキノキ科植物のカキの葉を用いて抽出するが、地上部さらに同属植物を用いて抽出することができる。
【００１６】
本発明で使用するタンジンエキスとは、シソ科植物のタンジンの根を用いて抽出するが
、地上部さらに同属植物を用いて抽出することができる。
【００１７】
本発明で使用するツボクサエキスとは、セリ科植物のツボクサの全草を用いて抽出するが、同属植物を用いて抽出することができる。
【００１８】
本発明で使用するプーアルエキスとは、ツバキ科植物のチャの葉を黒麹菌などで後発酵させたもの、いわゆるプーアルの葉を用いて抽出する。
【００１９】
本発明において、イトヒメハギエキス、クララエキス、シャクヤクエキス、カキエキス、タンジンエキス、ツボクサエキス、プーアルエキスなどの植物エキスとしては、上記の各植物の各種部位を未乾燥のまま又は乾燥させた後そのままに、あるいは、破砕又は粉砕後に搾取して使用することができる。さらに、これらを溶媒で抽出して得られるエキスや、該エキスから抽出溶媒を蒸発又は凍結乾燥して得られる不揮発分を使用することができる。
【００２０】
ここで用いられる抽出溶媒としては、水、メタノール、エタノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、１,３−ブチレングリコールなどの低級アルコール類、アセトンなどのケトン類、酢酸エチルなどのエステル類、エチルエーテルなどのエーテル類、トルエンなどの芳香族類等の各種の溶媒が挙げられ、単独又は２種以上の溶媒を任意に組み合わせて使用することができる。
【００２１】
本発明で使用するアルブチンとは、コケモモ、ウワウルシ、ナシなどの植物に含まれる天然型（β−グルコシド型）の配糖体であり、化学名が４−ヒドロキシフェニル−β−Ｄ−グルコシピラノシドのものを用いることができる。
【００２２】
本発明で使用するアスコルビン酸とは、ミカン、レモンなどの柑橘類、キウイ、イチゴ、メロンなどの果物や野菜類等に含まれる水溶性のビタミンで、ビタミンＣとも呼ばれる。さらに本発明では、パルミチン酸、ステアリン酸とのモノエステル又はジエステル等の誘導体化したものや、リン酸マグネシウム塩、ナトリウム塩又は配糖体等のアスコルビン酸誘導体も用いることができる。
【００２３】
本発明で使用するアルギン酸オリゴ糖類とは、高分子アルギン酸又は高分子アルギン酸塩（ナトリウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩など）を低分子化し、分子量を２０００〜２００００に調製したものを用いる。そして、その分解方法については、酸又はアルカリ分解、酵素分解、熱分解などの方法で良く、その手法は問わず、また、高分子アルギン酸を低分子アルギン酸とした後、低分子アルギン酸塩にしたものでも良い。
【００２４】
本発明で使用される植物エキスは、医薬又は民間薬、食品、化粧品の成分として一般的に用いられるものであり、その安全性が確認されているものである。
【００２５】
本発明の線維芽細胞増殖促進剤は、前記植物エキス、アルブチン、アスコルビン酸、アルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を含有し、線維芽細胞増殖促進剤への総配合量はその剤型によっても異なるものであり、蒸発残分をそのまま使用しても構わないし、目的用途によって適宜、配合量を調整すればよく、また、本発明の線維芽細胞増殖促進剤の使用量にも特に制限はなく、用途や適用により適宜調整することができる。
【００２６】
本発明の線維芽細胞増殖促進剤は、外用、内用、素材への処理など様々な形態に適用できる。また、通常の外用、内用素材への処理などで使用されている薬剤などとも組み合わせて使用することができ、併用薬剤により本発明の効果がより発現しやすくなる。
本発明の線維芽細胞増殖促進剤は、医薬品、医薬部外品、局所又は全身用の皮膚化粧品
、頭皮・頭髪に適用する薬用又は化粧用の製剤類をはじめとする各種の皮膚外用剤、浴用剤、飲食物などに配合することができる。
【００２７】
本発明の皮膚外用剤、浴用剤、飲食物は、前記線維芽細胞増殖促進剤の１種又は２種以上を含有する。そして前記線維芽細胞増殖促進剤の皮膚外用剤等への総配合量は、剤型により適宜異なるが、前記皮膚外用剤、浴用剤、飲食物全体の質量に対し、一般的には、前記線維芽細胞促進剤に含有される植物エキス、アルブチン、アスコルビン酸、アルギン酸オリゴ糖類の配合量に換算して、０.０１質量％〜１０質量％、好ましくは０.０２５質量％〜５質量％、さらに特定すると０.０５質量％〜２.５質量％となるように含有することが望ましい。
【００２８】
本発明の皮膚外用剤及び浴用剤には、前記線維芽細胞増殖促進剤の他に、通常の皮膚外用剤又は浴用剤において従来から使用されている公知の機能成分、例えば、保湿剤、エモリエント剤、血行促進剤、細胞賦活化剤、抗酸化剤、抗炎症剤、抗菌剤、過酸化物抑制剤などを配合することができる。
【００２９】
公知の機能成分としてより具体的には、グリセリン、ブチレングリコール、尿素、アミノ酸類などの保湿剤；スクワラン、マカデミアナッツ油、オリーブ油、ホホバ油、シリコン油などのエモリエント剤；ビタミンＥ類、トウガラシチンキなどの血行促進剤；核酸などの細胞賦活化剤、ジブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ジブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、酢酸トコフェロールなどの抗酸化剤；グリチルリチン、アラントインなどの抗炎症剤；ヒノキチオール、塩化ベンザルコニウム、クロルヘキシジン塩、パラヒドロキシ安息香酸エステルなどの抗菌剤；スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）などの過酸化物抑制剤など、種々の機能成分を配合することができる。
また、オウゴンエキス、イチョウエキス、胎盤抽出物、乳酸菌培養抽出物などの植物・動物・微生物由来の各種抽出物なども制限なく添加して使用することができる。
【００３０】
本発明の皮膚外用剤とは、外用可能な剤であって、その剤型には特に制限はなく、例えば、ペースト剤、クリーム、ジェル、軟膏、ローション、乳液、パック、パウダー、ハップ剤などが例示できる。
【００３１】
本発明の浴用剤の剤型にも特に制限はなく、例えば、粉末、顆粒状などの固形製剤、乳液、ペースト状などの液体製剤などが例示できる。
【００３２】
本発明の飲食物には、前記線維芽細胞増殖促進剤の他に、通常食品に使用されている様々な材料を特に制限なく併用することができる。
【００３３】
本発明の飲食物の剤型としては適用可能なあらゆる形態があり、例えば、ビスケット、クッキー、錠剤、カプセル剤、キャンディー、ガム、粉末などの固形製剤、飲料などの液体製剤、ゼリーなどの半固形製剤などが例示できる。
【００３４】
また、本発明の皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物には、その剤型化のために界面活性剤、油脂類などの基材成分や、必要に応じて増粘剤、防腐剤、等張化剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤、キレート剤、香料、着色料などの種々の添加物を併用できる。
【００３５】
上記の界面活性剤としては、特に限定されるものではないが、一般的な非イオン界面活性剤、陰イオン界面活性剤、陽イオン界面活性剤、両性界面活性剤を用いることができる。例えば、高級アルコールのアルキレンオキサイド付加物、高級アルキルアミンのアルキレンオキサイド付加物、高級脂肪酸のアルキレンオキサイド付加物、高級脂肪酸アミドのアルキレンオキサイド付加物、多価アルコールの脂肪酸エステル、硬化ひまし油のアルキレンオキサイド付加物、ポリエチレングリコールソルビタンアルキルエステル、ステロール等のアルキレンオキサイド付加物などの非イオン界面活性剤；アルキル硫酸ナトリウム、アルキロイルメチルタウリンナトリウム、α−オレフィンスルホン酸ナトリウム、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸ナトリウムなどの陰イオン界面活性剤；塩化アルキルピリジニウム、塩化ジステアリルジメリルアンモニウムなどの陽イオン界面活性剤；アミノプロピオン酸ナトリウム、アルキルポリアミノエチルグリシンなどの両性界面活性剤が挙げられる。そして、これらの界面活性剤は１種又は２種以上を選択して使用することができる。
【００３６】
本発明において使用可能な基材成分として、特に限定されるものではないが、例えば、オリーブ油、ツバキ油、アボカド油、マカデミアナッツ油、杏仁油、ホホバ油、スクワラン、スクワレン、馬油、パラフィン、シリコンなど、一般的に知られている油脂類が挙げられる。
【００３７】
本発明において使用可能な増粘剤として、特に限定されるものではないが、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルアクリルアミド、ポリエチレングリコール、及びこれらの各種誘導体；ヒドロキシアルキルセルロースなどのセルロース類及びその誘導体；デキストラン、ゼラチン、アラビアガム、トラガントガムなどのガム類；カルボキシビニルポリマーなどの水溶性高分子などが挙げられる。
【００３８】
本発明において使用可能な防腐剤として、特に限定されるものではないが、例えば、パラヒドロキシ安息香酸エステル、パラオキシ安息香酸塩とその誘導体、フェノキシエタノール、ヒノキチオール、塩化ベンザルコニウム、クロルヘキシジン塩などが挙げられる。
【００３９】
本発明において使用可能な等張化剤として、特に限定されるものではないが、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウムなどの無機塩類が挙げられる。
【００４０】
本発明において使用可能な紫外線吸収剤として、特に限定されるものではないが、例えば、パラアミノ安息香酸、ベンゾフェノン系紫外線吸収剤、ベンゾトリアゾール系紫外線吸収剤などが挙げられる。
【００４１】
本発明において使用可能なキレート剤として、特に限定されるものではないが、例えば、エチレンジアミン四酢酸、フィチン酸、クエン酸及びこれらの水溶性塩などが挙げられる。
【実施例】
【００４２】
以下、本発明を更に詳しく説明するために実施例によって説明するが、本発明はこれらの実施例により何ら限定されるものではない。
（１）植物エキスの製造方法
植物エキスは、以下の表１に示す各植物の各部位を、５０質量％エタノール水溶液の環流下で１時間かけて抽出後ろ過し、得られた抽出液から水、エタノールを減圧留去して各植物エキスを得た。得られた植物エキスを以下に示す実施例に使用した。
【表１】
2008105983.tif 000002
【００４３】
（２）アルギン酸オリゴ糖類の製造方法
市販のアルギン酸ナトリウムであるＳＫＡＴ−ＵＬＶ（キミカ社製）１.５ｇ、リン酸アンモニウム０.０５ｇ、酵母エキス０.０１ｇ、塩化ナトリウム２ｇをイオン交換水１００ｇ中に溶解させ、オートクレーブで２.１ａｔｍ、１２１℃、２０分間の滅菌操作を行った。滅菌処理後のアルギン酸溶液に対し、アルギン酸分解菌であるＰｓｅｕｄｏ  ａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓ  ｈａｌｏｐｌａｎｃｔｉｃ（ＩＴＭ  ２２２）を一白金耳埴菌し、室温下、８時間前培養を行った。
【００４４】
次に、得られた前培溶液１ｍＬを、アルギン酸ナトリウム分解用培地（リン酸アンモニウム０.１５ｇ、酵母エキス０.０１ｇ、アルギン酸ナトリウム（キミカ社製）９.０ｇ、塩化ナトリウム６.０ｇをイオン交換水３００ｇに溶解させ、オートクレーブで２.１ａｔｍ、１２１℃、２０分間の滅菌操作を行ったものを使用）に添加後、室温条件下で４８時間振とう培養を行った。
【００４５】
振とう培養後のアルギン酸ナトリウム分解液から、菌体除去のための遠心分離操作（１００００ｒｐｍ×１０分間）を行い、上澄み液を得た。得られた上澄み液に液量と同量のメタノールを加え、分解後のアルギン酸ナトリウム溶液から高分子量（数万）のアルギン酸ナトリウムを沈降させて濾別し、低分子量のアルギン酸オリゴ糖ナトリウムを含有している濾液を得た。
【００４６】
アルギン酸オリゴ糖ナトリウムを含有している濾液の中から塩化ナトリウムなどの不純物を除去し、精製を行うために、ゲル濾過操作（Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０、Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｆｉｎｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を行った。ゲル濾過操作後、得られた液を濃縮して、凍結乾燥機で乾燥を行い、目的とするアルギン酸オリゴ糖ナトリウム（重量平均分子量約２０００）を５.４ｇ（収率６０％）得た。
【００４７】
また、振とう培養時間を４８時間から８時間に換えた以外は上記と同様に操作して、重量平均分子量約２００００のアルギン酸オリゴ糖ナトリウムを得た。
更には、得られた重量平均分子量約２０００のアルギン酸オリゴ糖ナトリウムをイオン交換樹脂（アンバーライト１００６Ｆ  Ｈ、ローム・アンド・ハース・ジャパン社製）と共に操作して、重量平均分子量約２０００のアルギン酸オリゴ糖を得た。
【００４８】
なお、重量平均分子量の測定は、水系ゲルパーミッションクロマトグラフィー装置ＧＰＣ−８０２０（東ソー(株)製）を用いて測定した。測定条件は、カラムにＧ３０００（東ソー(株)製）とＧ５０００（東ソー(株)製）を直結して用い 、カラム温度４０℃、カラム流量１.０ｍｌ／ｍｉｎ、溶出液０.１Ｍ ＮａＣｌ水溶液、ＲＩ検出であり、重量平均分子量はＰＥＧ（ポリエチレングリコール）を標品として換算した値である。
【００４９】
得られたアルギン酸オリゴ糖ナトリウム、アルギン酸オリゴ糖を以下に示す実施例に使用した。
【００５０】
（３）アルブチン
和光純薬工業(株)製のアルブチンを以下に示す実施例に使用した。
（４）アスコルビン酸
和光純薬工業(株)製のＬ(＋)−アスコルビン酸を以下に示す実施例に使用した。
【００５１】
（Ｉ）線維芽細胞増殖促進剤
［実施例１］
アルブチンを１０ｍｇ／ｍＬとなるよう調整し、その後、クリーンベンチ内で０.２μｍのシリンジフィルターを用いて滅菌した。そして、滅菌精製水を加えて２ｍｇ／ｍＬとなるよう調整して、培地に添加するアルブチンの希釈液を作製した。
次に、倉敷紡績(株)製の正常ヒト皮膚線維芽細胞を規定の調製法に基づき、分化、培養を行った。培地には、低血清増殖添加剤（ＬＳＧＳ）を添加した正常ヒト皮膚線維芽細胞増殖用低血清培地（Ｍｅｄｉｕｍ１０６Ｓ）を用いた。
培地に正常ヒト成人線維芽細胞（５０００００ｃｅｌｌ／ｍＬ）の溶液を播種し、３７℃、５％−ＣＯ2、加湿のインキュベーターに入れ、１日おきに培地を交換し、６日間培養した。
６日後、シャーレから細胞をはがし、細胞浮遊液を作成した（１５０００ｃｅｌｌ／ｍＬ）。細胞浮遊液を２４ｗｅｌｌ  ｐｌａｔｅに１ｍＬずつ播種し、２日間培養した。培地交換の際、前記アルブチンの希釈液を１０μＬ（最終濃度が２０μｇ／ｍＬとなる）添加し、さらに２日間培養した。２日おきに培地交換等を行い、細胞播種８日目に培地を回収した後、細胞は１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウムではがし、Ｌｏｗｒｙ法にてタンパク質の量を測定した。
【００５２】
この時のタンパク質の量は、線維芽細胞増殖促進成分（アルブチン）の希釈液の代わりに滅菌精製水を添加して、その他は同様の操作をした比較例１のタンパク質の量と比較したところ１２５％であり、２５％増加していた。このタンパク質は線維芽細胞由来のものであり、細胞増殖の指標となり、タンパク質量の増加は線維芽細胞が増殖していることを反映している。
【００５３】
［実施例２〜４０］
線維芽細胞増殖促進成分及び添加した最終濃度を表２のように換えた以外は実施例１と同様の操作をして得られたタンパク質の量と、比較例１のタンパク質の量とを比較した結果を表２に示す。
【００５４】
【表２】
2008105983.tif 000003
【００５５】
【表３】
2008105983.tif 000004
【００５６】
表２に示すように、線維芽細胞増殖促進成分として実施例１〜４０の各種植物エキス、アルブチン、アスコルビン酸、アルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上の組成物を用いたものは、線維芽細胞に対し有意に増殖促進効果を示していることがわかる。
【００５７】
（II）皮膚外用剤の処方例
表３〜１４に示す組成で線維芽細胞増殖促進剤を配合した皮膚外用剤（化粧水、乳液、クリーム、ボディクリーム）の処方を調製した。調製方法は下記の通りである。なお、配合量の単位はｇで、表中の精製水の「残量」とは全量を１００ｇとする量である。
【００５８】
化粧水（実施例４１〜６２、比較例２）
表３〜５のＡ成分、Ｂ成分のそれぞれを８０℃で加温して溶解し、Ｂ成分をＡ成分に撹拌しながら徐々に加えて乳化した。その後撹拌しながら冷却し、４０℃でＣ成分を加えて、３５℃で調製を終了した。
【００５９】
【表４】
2008105983.tif 000005
【００６０】
【表５】
2008105983.tif 000006
【００６１】
【表６】
2008105983.tif 000007
【００６２】
乳液（実施例６３〜８４、比較例３）
表６〜８のＤ成分、Ｅ成分のそれぞれを８０℃に加温して溶解し、Ｄ成分をＥ成分に攪拌しながら加え、均一とした後、ホモミキサーで乳化した。ハンドルミキサーで攪拌しながら冷却し、４０℃以下でＦ成分を加えて、調製を終了した。
【００６３】
【表７】
2008105983.tif 000008
【００６４】
【表８】
2008105983.tif 000009
【００６５】
【表９】
2008105983.tif 000010
【００６６】
クリーム（実施例８５〜１０６、比較例４）
表９〜１１のＧ成分、Ｈ成分をそれぞれ７５℃に加温して溶解し、Ｇ成分をパドルミキサーで撹拌しながらＨ成分を少量ずつ加えた。その後、撹拌しながら冷却し、４０℃でＩ成分を加えた後、約３５℃で調製を終了した。
【００６７】
【表１０】
2008105983.tif 000011
【００６８】
【表１１】
2008105983.tif 000012
【００６９】
【表１２】
2008105983.tif 000013
【表１３】
2008105983.tif 000014
【表１４】
2008105983.tif 000015
【表１５】
2008105983.tif 000016
【００７０】
ボディクリーム（実施例１０７〜１２８、比較例５）
表１２〜１４のＪ成分、Ｋ成分をそれぞれ７５℃に加温して、Ｊ成分をパドルミキサーで撹拌しながらＫ成分を少量ずつ加えた。その後、撹拌しながら冷却し、４５℃以下でＬ成分を加えて調製を終了した。
【００７１】
【表１６】
2008105983.tif 000017
【００７２】
【表１７】
2008105983.tif 000018
【００７３】
【表１８】
2008105983.tif 000019
【００７４】
評  価
前記実施例４１〜１２８、比較例２〜５の皮膚外用剤について、それぞれ女性２名ずつの（２３群×４処方）計１８４名に対して毎日、朝と夜の２回、適量を肌に塗布することを１ヶ月間続けるモニター試験を行い、その使用感を調べた。下記の基準にて評価を行った結果を表１５に示す。なお、使用期間中に皮膚の異常を訴えたものはいなかった。
有  効  ：肌のハリ・ツヤ・弾力が増した
やや有効：肌のハリ・ツヤ・弾力がやや増した
効果無し：使用前と変化無し
【００７５】
【表１９】
2008105983.tif 000020
【表２０】
2008105983.tif 000021
【００７６】
本発明の線維芽細胞増殖促進剤を配合した実施例４１〜１２８の皮膚外用剤では、線維芽細胞増殖促進効果により肌のハリ・ツヤ・弾力が増した。一方、本発明の線維芽細胞増殖促進剤を添加していない比較例２〜５の皮膚外用剤では、肌のハリ・ツヤ・弾力性が使用前とは変化がなかったことから、本発明の皮膚外用剤ではいずれも皮膚の老化現象の改善が図られる。
【００７７】
(III)皮膚（頭髪）用外用剤の処方
次に、表１６〜１８に示す組成で線維芽細胞増殖促進剤を配合した皮膚（頭髪）用外用剤（シャンプー、コンディショナー、ヘアトニック）の処方を調製した。調製方法は下記の通りである。なお、配合量の単位はｇで、表中の精製水の「残量」とは全量を１００ｇとする量である。
【００７８】
シャンプー（実施例１２９〜１５０、比較例６）
表１６〜１８のＭ成分を７５℃に加温し、撹拌しながら３５℃まで冷却した。その後、撹拌を続けながらＮ成分を加えて、ｐＨ調整、粘度調整を行った。さらにＯ成分を加えて、調製を終了した。
【００７９】
【表２１】
2008105983.tif 000022
【００８０】
【表２２】
2008105983.tif 000023
【００８１】
【表２３】
2008105983.tif 000024
【００８２】
コンディショナー（実施例１５１〜１７２、比較例７）
表１９〜２１のＰ成分、Ｑ成分をそれぞれ７５℃に加温し、Ｐ成分をパドルミキサーで撹拌しながら、Ｑ成分を少量ずつ加えた。その後、パドルミキサーで撹拌しながら冷却して、４５℃以下でＲ成分を加えて調製を終了した。
【００８３】
【表２４】
2008105983.tif 000025
【００８４】
【表２５】
2008105983.tif 000026
【００８５】
【表２６】
2008105983.tif 000027
【００８６】
ヘアトニック（実施例１７３〜１９４、比較例８）
表２２〜２４のＳ成分、Ｔ成分、Ｕ成分の全てを４０℃に暖めて混合した。
【００８７】
【表２７】
2008105983.tif 000028
【００８８】
【表２８】
2008105983.tif 000029
【００８９】
【表２９】
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【００９０】
評  価
前記実施例１２９〜１９４、比較例６〜８の皮膚（頭髪）用外用剤について、それぞれ男女１名ずつの（２３群×３処方）計１３８名に対して、シャンプー及びコンディショナーについては毎日の入浴時に洗髪又はコンディショニング剤として頭髪に適量使用し、ヘアトニックについては毎日の入浴後又は朝に頭皮又は頭髪に適量使用して、これを１ヶ月間続けるモニター試験を行い、その使用感を調べた。下記の基準にて評価を行った結果を表２５に示す。なお、使用期間中に皮膚の異常を訴えたものはいなかった。
有効：頭皮のハリ・ツヤ・弾力が増した又は頭髪が健やかになった
やや有効：頭皮のハリ・ツヤ・弾力がやや増した又は頭髪がやや健やかになった
効果無し：使用前と変化無し
【００９１】
【表３０】
2008105983.tif 000031
【表３１】
2008105983.tif 000032
【００９２】
本発明の線維芽細胞増殖促進剤を配合した実施例１２９〜１９４の皮膚（頭髪）用外用剤では、頭皮のハリ・ツヤ・弾力が増すか又はやや増し、また、頭髪が健やかになったか又はやや健やかになって、線維芽細胞増殖促進効果による老化現象の改善が認められた。一方、比較例６〜８の皮膚（頭髪）用外用剤では、頭皮又は頭髪が使用前と変化無しとの評価であったことから、本発明の皮膚（頭髪）用外用剤の効果はいずれも有意であった。
【００９３】
(IV)皮膚（爪）用外用剤の処方
次に、表２６〜２８に示す組成で線維芽細胞増殖促進剤を配合した皮膚（爪）用外用剤（ネイル用トリートメントクリーム）の処方を調製した。調製方法は下記の通りである。なお、配合量の単位はｇで、表中の精製水の「残量」とは全量を１００ｇとする量である。
【００９４】
ネイル用トリートメントクリーム（実施例１９５〜２１６、比較例９）
表２６〜２８のＶ成分、Ｗ成分ともに８０℃に加温溶解して、Ｖ成分をホモミキサーで撹拌しながらＷ成分を加えて乳化した。乳化後、Ｘ成分を加えて均一になるまで撹拌した後、更にＹ成分を加えて撹拌混合した。その後、冷却しながら４０℃になるまで撹拌し、Ｚ成分を加えて３５℃で調製を終了した。
【００９５】
【表３２】
2008105983.tif 000033
【００９６】
【表３３】
2008105983.tif 000034
【００９７】
【表３４】
2008105983.tif 000035
【００９８】
評  価
前記実施例１９５〜２１６、比較例９の皮膚（爪）用外用剤について、それぞれ女性３名ずつの（２３群）計６９名に対して、爪の周囲に上記ネイル用トリートメントクリームを適量塗布することを１ヶ月間続けるモニター試験を行い、その使用感を調べた。下記の基準にて評価を行った結果を表２９に示す。なお、使用期間中に皮膚の異常を訴えたものはいなかった。
有  効  ：爪のツヤ・弾力が増した
やや有効：爪のツヤ・弾力がやや増した
効果無し：使用前と変化無し
【００９９】
【表３５】
2008105983.tif 000036
【０１００】
本発明の線維芽細胞増殖促進剤を配合した実施例１９５〜２１６の皮膚（爪）用外用剤では、爪のツヤ・弾力が増すか又はやや増すとの評価結果であり、線維芽細胞増殖促進効果による老化現象の改善が認められた。一方、比較例９の皮膚（爪）用外用剤では、爪のツヤ・弾力は使用前と変化無しとの評価であったことから、本発明の皮膚（爪）用外用剤の効果はいずれも有意であった。
【０１０１】
（Ｖ）浴用剤の処方例
表３０〜３２、表３４〜３６に示す組成で線維芽細胞増殖促進剤を配合した浴用剤（入浴剤、ボディソープ）の処方を調製した。調製方法は下記の通りである。なお、配合量の単位はｇで、表中の精製水の「残量」とは全量を１００ｇとする量である。
【０１０２】
入浴剤（実施例２１７〜２３８、比較例１０）
表３０〜３２のＡＡ成分とＡＢ成分をそれぞれ均一になるまで混合した後、ＡＡ成分とＡＢ成分とを混合し、さらに均一になるまで充分混合した。
【０１０３】
【表３６】
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【０１０４】
【表３７】
2008105983.tif 000038
【０１０５】
【表３８】
2008105983.tif 000039
【０１０６】
評  価
前記実施例２１７〜２３８、比較例１０の入浴剤について、それぞれ男女１名ずつの（２３群）計４６名に対して、毎日の入浴時にお湯１８０Ｌに対して入浴剤３０ｍＬを溶かして入浴することを１ヶ月間続けるモニター試験を行い、その使用感を調べた。下記の基準にて評価を行った結果を表３３に示す。なお、使用期間中に皮膚の異常を訴えたものはいなかった。
有  効  ：肌のハリ・ツヤ・弾力が増した
やや有効：肌のハリ・ツヤ・弾力がやや増した
効果無し：使用前と変化無し
【０１０７】
【表３９】
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【０１０８】
本発明の線維芽細胞増殖促進剤を配合した実施例２１７〜２３８の入浴剤では、肌のハリ・ツヤ・弾力が増すか又はやや増すとの評価結果であり、線維芽細胞増殖促進効果による老化現象の改善が認められた。一方、比較例１０の入浴剤では、肌のハリ・ツヤ・弾力は使用前と変化無しとの評価であったことから、本発明の入浴剤の効果はいずれも有意であった。
【０１０９】
ボディソープ（実施例２３９〜２６０、比較例１１）
表３４〜３６のＡＣ成分を８０℃に加温し石鹸を作った後、ＡＤ成分を順次加えて溶解した。その後、冷却しながら４０℃でＡＥ成分を加えて、３５℃で調製を終了した。
【０１１０】
【表４０】
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【０１１１】
【表４１】
2008105983.tif 000042
【０１１２】
【表４２】
2008105983.tif 000043
【０１１３】
評  価
前記実施例２３９〜２６０、比較例１１のボディソープについて、それぞれ女性３名ずつの（２３群）、計６９名に対して、毎日の入浴時にボディソープとして適量使用することを１ヶ月間続けるモニター試験を行い、その使用感を調べた。
下記の基準にて評価を行った結果を表３７に示す。なお、使用期間中に皮膚の異常を訴えたものはいなかった。
有  効  ：肌のハリ・ツヤ・弾力が増した
やや有効：肌のハリ・ツヤ・弾力がやや増した
効果無し：使用前と変化無し
【０１１４】
【表４３】
2008105983.tif 000044
【０１１５】
本発明の線維芽細胞増殖促進剤を配合した実施例２３９〜２６０のボディソープでは、肌のハリ・ツヤ・弾力が増すか又はやや増すとの評価結果であり、線維芽細胞増殖促進効果による老化現象の改善が認められた。一方、比較例１１の入浴剤では、肌のハリ・ツヤ・弾力は使用前と変化無しとの評価であったことから、本発明の入浴剤の効果はいずれも有意であった。
【０１１６】
（VI）飲食物の処方例
次に、表３８〜４１に示す組成で線維芽細胞増殖促進剤を配合した飲食物（パン、サプリメント（錠剤））の処方を調製した。調製方法は下記の通りである。なお、配合量の単位はｇで、表中の水の「残量」とは全量を１００ｇとする量である。
【０１１７】
パン（実施例２６１〜２７０、比較例１２）
表３８〜３９のＡＦ成分全部を混ぜ合わせものに、４０℃に加温したＡＧ成分とＡＨ成分を混ぜ合わせたもの加えて、均一になった時点でよくこねた。３５℃で４０分一次発酵させ、空気を抜くように再度こねた。４０℃で４０分二次発酵後、１８０℃で２５分間焼いた。
【０１１８】
【表４４】
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【０１１９】
【表４５】
2008105983.tif 000046
【０１２０】
サプリメント（錠剤）（実施例２７１〜２８０、比較例１３）
表４０〜４１のＡＩ成分とＡＪ成分を良く混ぜ合わせたものを、打錠機を用いてタブレット状に押し固め、錠剤（０.３ｇ）を形成した。
【０１２１】
【表４６】
2008105983.tif 000047
【０１２２】
【表４７】
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【０１２３】
評  価
前記実施例２６１〜２８０、比較例１２及び１３の飲食物について、それぞれ女性２名ずつの（１１群×２処方）計４４名に対して、パンについては、毎日の朝食時に、前記実施例又は比較例のパンを主食として約９０ｇ摂取する、サプリメント（錠剤）については、毎日３回の食事後にサプリメント（錠剤）を５錠（１.５ｇ）摂取する以外は通常の生活をして１ヶ月間続けるモニター試験を行い、その使用感を調べた。
下記の基準にて評価を行った結果を表４２に示す。なお、使用期間中に皮膚の異常を訴えたものはいなかった。
有  効  ：肌のハリ・ツヤ・弾力が増した
やや有効：肌のハリ・ツヤ・弾力がやや増した
効果無し：使用前と変化無し
【０１２４】
【表４８】
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【０１２５】
本発明の線維芽細胞増殖促進剤を配合した実施例２６１〜２８０の飲食物を摂取したモニターでは、肌のハリ・ツヤ・弾力が増すか又はやや増すとの評価結果であり、線維芽細胞増殖促進効果による老化現象の改善が認められた。一方、比較例１２又は１３の飲食物を摂取したモニターでは、肌のハリ・ツヤ・弾力は使用前と変化無しとの評価であったことから、本発明の飲食物の効果はいずれも有意であった。
【産業上の利用可能性】
【０１２６】
イトヒメハギエキス、クララエキス、シャクヤクエキス、カキエキス、タンジンエキス、ツボクサエキス、プーアルエキス、アルブチン、アスコルビン酸又はアルギン酸オリゴ糖類は線維芽細胞の増殖を促進するために、線維芽細胞において産生されるコラーゲン及びヒアルロン酸の量が相対的に増大し、その結果として、シワ、タルミの予防、緩和、改善がなされるので、老化現象の防止、改善を目的とした化粧品をはじめとする各種の皮膚外用剤、浴用剤、飲食物などへの利用が可能となる。