(57)【要約】【課題】キノロン系合成抗菌化合物とｐＨ調節剤のみを含有し、かつ、再溶解性に優れる凍結乾燥製剤の提供。【解決手段】キノロン系合成抗菌化合物およびｐＨ調節剤を含有する水溶液を冷却して凍結体を得、次いで温度を一旦昇温させた後、再度冷却して凍結乾燥することを特徴とする、キノロン系合成抗菌化合物を有効成分とする非晶質凍結乾燥製剤の製造方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式（１）
【化１】
2008231067.tif 000028
［式中、Ｒ1は、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から６のアルケニル基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基、ハロゲン原子が置換していてもよい炭素数３から６の環状アルキル基、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、ニトロ基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基が置換していてもよいアリール基、ハロゲン原子もしくは炭素数１から６のアルキル基が置換していてもよいヘテロアリール基、炭素数１から６のアルコキシ基、または炭素数１から６のアルキルアミノ基を表わし；
Ｒ2は、水素原子または炭素数１から６のアルキルチオ基を表わし；このＲ1とＲ2とは、母核の一部を含んで環状構造を形成するように一体化してもよく、この環は硫黄原子を環の構成原子として含んでもよく、さらにこの環は炭素数１から６のアルキル基を置換基として有していてもよい。
Ｒ3は、水素原子、アミノ基（このアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基もしくは炭素数２から５のアシル基が置換していてもよい。）、チオール基、ハロゲノメチル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から６のアルケニル基、炭素数２から６のアルキニル基、または炭素数１から６のアルコキシ基を表わし；
Ａ1は、窒素原子または式（２）
【化２】
2008231067.tif 000029
（式中、Ｘ2は、水素原子、アミノ基（このアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基もしくは炭素数２から５のアシル基が置換していてもよい。）、ハロゲン原子、シアノ基、ハロゲノメチル基、ハロゲノメトキシ基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から６のアルケニル基、炭素数２から６のアルキニル基、または炭素数１から６のアルコキシ基を表わし；このＸ2と上記のＲ1とは母核の一部を含んで環状構造を形成するように一体化してもよく、このようにして形成された環は、酸素原子、窒素原子、または硫黄原子を環の構成原子として含んでもよく、さらにこの環は炭素数１から６のアルキル基を置換基として有していてもよい。）
で表わされる部分構造を表わし；
Ａ2およびＡ3は、各々異なって窒素原子または炭素原子を表わすが、Ａ1、Ａ2およびＡ3とこれらが結合している炭素原子とは、部分構造
【化３】
2008231067.tif 000030
または、部分構造
【化４】
2008231067.tif 000031
を形成する。
Ｘ1は、ハロゲン原子または水素原子を表わし；
Ｙは、水素原子、フェニル基、アセトキシメチル基、ピバロイルオキシメチル基、エトキシカルボニル基、コリン基、ジメチルアミノエチル基、５−インダニル基、フタリジル基、５−アルキル−２−オキソ−１，３−ジオキソール−４−イルメチル基、３−アセトキシ−２−オキソブチル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から７のアルコキシメチル基、または炭素数１から６のアルキレン基とフェニル基とから構成されるフェニルアルキル基を表わし；
Ｚは、単環式、二環式、または三環式の複素環式置換基を表わすが、この複素環式置換基は飽和または部分飽和であって、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から選ばれる１以上の異原子を含んでいてもよく、さらにビシクロ構造もしくはスピロ環状構造であってもよく、そしてハロゲン原子、水酸基、アミノ基、カルバモイル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルアミノ基、炭素数１から６のアルキルチオ基、および炭素数１から６のアミノアルキル基からなる群より選ばれる１または２以上の原子または基が置換していてもよい。］
で表わされる化合物およびｐＨ調節剤を含有する水溶液を冷却して凍結体を得、次いで温度を一旦昇温させた後、再度冷却して凍結乾燥することを特徴とする、式（１）の化合物を有効成分とする非晶質凍結乾燥製剤の製造方法。
【請求項２】
Ｒ1が、環状アルキル基またはハロゲノシクロアルキル基である請求項１に記載の非晶質凍結乾燥製剤の製造方法。
【請求項３】
Ｒ2およびＲ3が、水素原子である請求項１または２に記載の非晶質凍結乾燥製剤の製造方法。
【請求項４】
Ａ1が、式（２）で表される部分構造であり、Ｘ2が、炭素数１から６のアルコキシ基またはＸ2と上記Ｒ1と母核の一部を含んで酸素原子、窒素原子または硫黄原子を環の構成原子として含む環状構造を形成したものである請求項１〜３のいずれか１項に記載の非晶質凍結乾燥製剤の製造方法。
【請求項５】
Ｘ1が、水素原子またはフッ素原子である請求項１〜４のいずれか１項に記載の非晶質凍結乾燥製剤の製造方法。
【請求項６】
式（１）で表される化合物が、レボフロキサシン、オフロキサシン、シタフロキサシン、（７−［３−（Ｒ）−（１−アミノシクロプロピル）ピロリジン−１−イル］−１−［２−（Ｓ）−フルオロ−１−（Ｒ）−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸、（＋）−７−［（７Ｓ）−７−アミノ−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸１／２水和物、シプロフロキサシン、モキシフロキサシンまたはトロバフロキサシンである請求項１に記載の非晶質凍結乾燥製剤の製造方法。
【請求項７】
昇温時における凍結体の到達温度が、凍結体のガラス転移温度から水溶液の凍結温度の範囲である請求項１〜６のいずれか１項に記載の非晶質凍結乾燥製剤の製造方法。
【請求項８】
昇温時における凍結体の到達温度が、−２０℃から−２℃の範囲である請求項１〜６のいずれか１項に記載の非晶質凍結乾燥製剤の製造方法。
【請求項９】
昇温時における凍結体の到達温度が、−１５℃から−５℃の範囲である請求項１〜６のいずれか１項に記載の非晶質凍結乾燥製剤の製造方法。
【請求項１０】
式（１）
【化５】
2008231067.tif 000032
［式中、Ｒ1は、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から６のアルケニル基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基、ハロゲン原子が置換していてもよい炭素数３から６の環状アルキル基、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、ニトロ基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基が置換していてもよいアリール基、ハロゲン原子もしくは炭素数１から６のアルキル基が置換していてもよいヘテロアリール基、炭素数１から６のアルコキシ基、または炭素数１から６のアルキルアミノ基を表わし；
Ｒ2は、水素原子または炭素数１から６のアルキルチオ基を表わし；このＲ1とＲ2とは、母核の一部を含んで環状構造を形成するように一体化してもよく、この環は硫黄原子を環の構成原子として含んでもよく、さらにこの環は炭素数１から６のアルキル基を置換基として有していてもよい。
Ｒ3は、水素原子、アミノ基（このアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基もしくは炭素数２から５のアシル基が置換していてもよい。）、チオール基、ハロゲノメチル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から６のアルケニル基、炭素数２から６のアルキニル基、または炭素数１から６のアルコキシ基を表わし；
Ａ1は、窒素原子または式（２）
【化６】
2008231067.tif 000033
（式中、Ｘ2は、水素原子、アミノ基（このアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基もしくは炭素数２から５のアシル基が置換していてもよい。）、ハロゲン原子、シアノ基、ハロゲノメチル基、ハロゲノメトキシ基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から６のアルケニル基、炭素数２から６のアルキニル基、または炭素数１から６のアルコキシ基を表わし；このＸ2と上記のＲ1とは母核の一部を含んで環状構造を形成するように一体化してもよく、このようにして形成された環は、酸素原子、窒素原子、または硫黄原子を環の構成原子として含んでもよく、さらにこの環は炭素数１から６のアルキル基を置換基として有していてもよい。）
で表わされる部分構造を表わし；
Ａ2およびＡ3は、各々異なって窒素原子または炭素原子を表わすが、Ａ1、Ａ2およびＡ3とこれらが結合している炭素原子とは、部分構造
【化７】
2008231067.tif 000034
または、部分構造
【化８】
2008231067.tif 000035
を形成する。
Ｘ1は、ハロゲン原子または水素原子を表わし；
Ｙは、水素原子、フェニル基、アセトキシメチル基、ピバロイルオキシメチル基、エトキシカルボニル基、コリン基、ジメチルアミノエチル基、５−インダニル基、フタリジル基、５−アルキル−２−オキソ−１，３−ジオキソール−４−イルメチル基、３−アセトキシ−２−オキソブチル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から７のアルコキシメチル基、または炭素数１から６のアルキレン基とフェニル基とから構成されるフェニルアルキル基を表わし；
Ｚは、単環式、二環式、または三環式の複素環式置換基を表わすが、この複素環式置換基は飽和または部分飽和であって、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から選ばれる１以上の異原子を含んでいてもよく、さらにビシクロ構造もしくはスピロ環状構造であってもよく、そしてハロゲン原子、水酸基、アミノ基、カルバモイル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルアミノ基、炭素数１から６のアルキルチオ基、および炭素数１から６のアミノアルキル基からなる群より選ばれる１または２以上の原子または基が置換していてもよい。］
で表わされる化合物およびｐＨ調節剤を含有する水溶液を、次の一連の工程に附すことを特徴とする、式（１）の化合物を有効成分とする非晶質凍結乾燥製剤の製造方法；
１）該水溶液を冷却して凍結体を得る工程
２）凍結体の温度を昇温させるアニーリング工程
３）再度冷却して凍結乾燥する工程
【請求項１１】
アニーリング工程の温度が、凍結体のガラス転移温度から水溶液の凍結温度の範囲である請求項１０に記載の非晶質凍結乾燥製剤の製造方法。
【請求項１２】
アニーリング工程の温度が、−２０℃から−２℃の範囲である請求項１０に記載の非晶質凍結乾燥製剤の製造方法。
【請求項１３】
アニーリング工程の温度が、−１５℃から−５℃の範囲である請求項１０に記載の非晶質凍結乾燥製剤の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、キノロン系合成抗菌化合物を含有する非晶質凍結乾燥製剤の製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
キノロン系合成抗菌化合物は、広い抗菌スペクトルと強い抗菌活性を有することから、種々の細菌感染症治療薬として広く用いられている（非特許文献１参照）。例えば、レボフロキサシン、オフロキサシン、シプロフロキサシン、モキシフロキサシン、トロバフロキサシン等の化合物は、広い抗菌スペクトルで高い抗菌活性の優れた抗菌活性を有しており特に広く用いられている。また、シタフロキサシンや下記の式（Ｉ）の化合物、そして実施例に記載の式（ＩＩ）の化合物も同様に優れた抗菌活性を有し、かつ薬剤耐性菌に対しても優れた抗菌活性を有することから、優れた抗菌薬として期待される。
式（Ｉ）
【０００３】
【化１】
2008231067.tif 000002
【０００４】
で表される構造を有するキノロン化合物（７−［３−（Ｒ）−（１−アミノシクロプロピル）ピロリジン−１−イル］−１−［２−（Ｓ）−フルオロ−１−（Ｒ）−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸；以下、化合物（Ｉ）と略す。）は、特にメチシリン耐性ブドウ球菌、ペニシリン耐性肺炎球菌、バンコマイシン耐性腸球菌等の薬剤耐性グラム陽性菌に対しても高い抗菌活性を発揮する等優れた抗菌活性を有している。さらに本化合物は安全性も高く優れた治療効果が期待される（特許文献１参照）。また、下記に示す化合物（ＩＩ）も同様に耐性菌を含め優れた抗菌活性を示す他、安全性も高く優れたキノロン化合物である（特許文献２参照）。
【０００５】
キノロン化合物、特に耐性菌に対して優れた抗菌活性を示すものは、その抗菌効果の特性から重症感染症に対しても優れた治療効果が期待できる。重症患者の場合溶液の形態で血管内投与を行なわざるを得ない場合が多い。したがって、キノロン化合物を含有する薬物溶液が必要であり、キノロン化合物の薬物溶液を用時調製するための、原薬とｐＨ調節剤のみを含有する凍結乾燥製剤が提供される。
【０００６】
凍結乾燥製剤の調製法として、アニーリング（Ａｎｎｅａｌｉｎｇ）工程を設ける方法が知られている。アニーリング工程とは、初期工程の冷却工程で得られる原料水溶液の凍結体の温度を一旦上昇させて一定時間保持する工程のことである。賦形剤を含有するまたは賦形剤のみからなる凍結乾燥製剤の調製において、アニーリング工程を設けて調製された凍結乾燥製剤がアニーリング工程なく調製された凍結乾燥製剤とは異なる再溶解性を示す場合のあることが知られている。しかし、これらの場合、再溶解性について一定の傾向はなく改善または悪化のいずれもが認められ、アニーリング工程が凍結乾燥製剤の再溶解性に与える影響は物質によって異なっている（非特許文献２、３参照）。
凍結乾燥製剤において、賦形剤は元来再溶解性の改善のための成分でもあり、アニーリング工程の影響が知られていた。しかしながら、賦形剤を含有しない凍結乾燥製剤の製造工程にアニーリング工程を設けることで、得られる凍結乾燥製剤の再溶解性にいかなる影響があるかについては明らかではなかった。
【特許文献１】国際公開第０２／４０４７８号パンフレット
【特許文献２】国際出願ＰＣＴ／ＪＰ２００６／３１００６９号明細書
【非特許文献１】Ｈｏｏｐｅｒ  Ｄ．Ｃ．ａｎｄ  Ｒｕｂｉｎｓｔｅｉｎ  Ｅ．（ｅｄｓ）３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  Ｑｕｉｎｏｌｏｎｅ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ．２００３．ＡＳＭ  Ｐｒｅｓｓ  Ｂｏｏｋｓ
【非特許文献２】ジャーナル・オブ・ファーマシューティカル・サイエンシズ，第９０巻，第７号，８７２−８８７頁，２００１年
【非特許文献３】ジャーナル・オブ・ファーマシューティカル・サイエンシズ，第９２巻，第４号，７１５−７２９頁，２００３年
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
化合物（Ｉ）等のキノロン系合成抗菌化合物を含有する凍結乾燥製剤は、原薬とｐＨ調節剤のみを含有する製剤として提供されるのが望ましい。この様な凍結乾燥製剤を調製する際に通常実施される凍結乾燥方法を適用した場合、再溶解に長時間を要する難溶解性の凍結乾燥ケーキが形成されることのあることが判明した。すなわち、薬物溶液を得るために再溶解液を注入した際に凍結乾燥ケーキが直ぐには溶解せず、難溶性の塊状物質に変化するのである。このような難溶性の塊状物質であっても最終的には完全に溶解して薬物溶液が得られるのであるが、再溶解時間が過度に長くなる場合は使用利便性が著しく損なわれる。
したがって本願発明の目的は、キノロン系合成抗菌化合物とｐＨ調節剤のみを含有し、かつ、再溶解性に優れる凍結乾燥製剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者が鋭意研究した結果、キノロン系合成抗菌化合物およびｐＨ調節剤のみからなる凍結乾燥製剤を調製するにあたって、一連の凍結工程にアニーリング工程を設ける方法で調製された非晶質の凍結乾燥製剤であれば再溶解時間が大幅に短縮されることを見出した。
すなわち、キノロン系合成抗菌化合物およびｐＨ調節剤を含有する凍結乾燥製剤調製用の水溶液を冷却して非晶質の凍結体を得た後に、温度を一旦昇温させて一定時間保持する緩和工程を設けた後、再度冷却した後に凍結乾燥して非晶質凍結乾燥製剤を得る製造方法である。このように凍結体を一旦昇温させるアニーリング工程を加えることで再溶解性に優れる非晶質凍結乾燥製剤が得られることを見出し、発明を完成させるに至った。
【０００９】
すなわち本発明は、次の式（１）
【００１０】
【化２】
2008231067.tif 000003
【００１１】
［式中、Ｒ1は、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から６のアルケニル基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基、ハロゲン原子が置換していてもよい炭素数３から６の環状アルキル基、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、ニトロ基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基が置換していてもよいアリール基、ハロゲン原子もしくは炭素数１から６のアルキル基が置換していてもよいヘテロアリール基、炭素数１から６のアルコキシ基、または炭素数１から６のアルキルアミノ基を表わし；
Ｒ2は、水素原子または炭素数１から６のアルキルチオ基を表わし；このＲ1とＲ2とは、母核の一部を含んで環状構造を形成するように一体化してもよく、この環は硫黄原子を環の構成原子として含んでもよく、さらにこの環は炭素数１から６のアルキル基を置換基として有していてもよい。
Ｒ3は、水素原子、アミノ基（このアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基もしくは炭素数２から５のアシル基が置換していてもよい。）、チオール基、ハロゲノメチル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から６のアルケニル基、炭素数２から６のアルキニル基、または炭素数１から６のアルコキシ基を表わし；
Ａ1は、窒素原子または式（２）
【００１２】
【化３】
2008231067.tif 000004
【００１３】
（式中、Ｘ2は、水素原子、アミノ基（このアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基もしくは炭素数２から５のアシル基が置換していてもよい。）、ハロゲン原子、シアノ基、ハロゲノメチル基、ハロゲノメトキシ基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から６のアルケニル基、炭素数２から６のアルキニル基、または炭素数１から６のアルコキシ基を表わし；このＸ2と上記のＲ1とは母核の一部を含んで環状構造を形成するように一体化してもよく、このようにして形成された環は、酸素原子、窒素原子、または硫黄原子を環の構成原子として含んでもよく、さらにこの環は炭素数１から６のアルキル基を置換基として有していてもよい。）
で表わされる部分構造を表わし；
Ａ2およびＡ3は、各々異なって窒素原子または炭素原子を表わすが、Ａ1、Ａ2およびＡ3とこれらが結合している炭素原子とは、部分構造
【００１４】
【化４】
2008231067.tif 000005
【００１５】
または、部分構造
【００１６】
【化５】
2008231067.tif 000006
【００１７】
を形成する。
Ｘ1は、ハロゲン原子または水素原子を表わし；
Ｙは、水素原子、フェニル基、アセトキシメチル基、ピバロイルオキシメチル基、エトキシカルボニル基、コリン基、ジメチルアミノエチル基、５−インダニル基、フタリジル基、５−アルキル−２−オキソ−１，３−ジオキソール−４−イルメチル基、３−アセトキシ−２−オキソブチル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から７のアルコキシメチル基、または炭素数１から６のアルキレン基とフェニル基とから構成されるフェニルアルキル基を表わし；
Ｚは、単環式、二環式、または三環式の複素環式置換基を表わすが、この複素環式置換基は飽和または部分飽和であって、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から選ばれる１以上の異原子を含んでいてもよく、さらにビシクロ構造もしくはスピロ環状構造であってもよく、そしてハロゲン原子、水酸基、アミノ基、カルバモイル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルアミノ基、炭素数１から６のアルキルチオ基、および炭素数１から６のアミノアルキル基からなる群より選ばれる１または２以上の原子または基が置換していてもよい。］
で表わされる化合物およびｐＨ調節剤を含有する水溶液を冷却して凍結体を得、次いで温度を一旦昇温させた後、再度冷却して凍結乾燥することを特徴とする、式（１）の化合物を有効成分とする非晶質凍結乾燥製剤の製造方法に関するものである。
【発明の効果】
【００１８】
アニーリング工程を設けてキノロン系合成抗菌化合物を含有する非晶質凍結乾燥製剤の調製を実施することによって、再溶解性に優れた凍結乾燥ケーキからなる非晶質の凍結乾燥製剤を取得でき、凍結乾燥製剤の使用利便性が向上する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
式（１）中、Ｒ1は、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から６のアルケニル基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基、ハロゲン原子が置換していてもよい炭素数３から６の環状アルキル基、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、ニトロ基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基が置換していてもよいアリール基、ハロゲン原子もしくは炭素数１から６のアルキル基が置換していてもよいヘテロアリール基、炭素数１から６のアルコキシ基、または炭素数１から６のアルキルアミノ基を表わす。
【００２０】
炭素数１から６のアルキル基としては、エチル基が特に好ましい。炭素数２から６のアルケニル基としては、ビニル基、または１−イソプロペニル基が特に好ましい。炭素数１から６のハロゲノアルキル基としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等のハロゲン原子を有する炭素数１から６のアルキル基を挙げることができるが、２−フルオロエチル基が特に好ましい。炭素数３から６の環状アルキル基としては、シクロプロピル基が特に好ましい。環状アルキル基が置換基を有するときには置換基としてハロゲン原子が好ましく、フッ素原子が特に好ましい。このフルオロシクロプロピル基としては２−（Ｓ）−フルオロ−１−（Ｒ）−シクロプロピル基が特に好ましい。
【００２１】
アリール基としては、例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子等のハロゲン原子、水酸基、アミノ基、ニトロ基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基からなる群より選ばれる１から３の原子または基を置換基として有していてもよいフェニル基を挙げることができ、フェニル基、２−フルオロフェニル基、４−フルオロフェニル基、２，４−ジフルオロフェニル基、２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル基、３−アミノ−４，６−ジフルオロフェニル基および４，６−ジフルオロ−３−メチルアミノフェニル基が好ましい。
【００２２】
ヘテロアリール基としては、ハロゲン原子または炭素数１から６のアルキル基を置換基として有していてもよい、５員環または６員環の芳香族複素環化合物から導かれる芳香族複素環置換基を挙げることができる。ヘテロアリール基は、窒素原子、酸素原子、硫黄原子から選ばれる１以上の異原子を含み、例えば、ピリジル基、ピリミジル基等を挙げることができ、６−アミノ−３，５−ジフルオロ−２−ピリジル基が特に好ましい。
【００２３】
炭素数１から６のアルコキシ基としては、メトキシ基が特に好ましい。炭素数１から６のアルキルアミノ基としては、メチルアミノ基が特に好ましい。
【００２４】
置換基Ｒ1としては、環状アルキル基またはハロゲノシクロアルキル基が好ましい。環状アルキル基としてはシクロプロピル基が特に好ましく、ハロゲノシクロプロピル基としては２−ハロゲノシクロプロピル基が好ましく、２−フルオロシクロプロピル基が特に好ましい。
【００２５】
式（１）中、Ｒ2は、水素原子または炭素数１から６のアルキルチオ基を表わす。炭素数１から６のアルキルチオ基としては、メチルチオ基、エチルチオ基が特に好ましい。
置換基Ｒ2としては、水素原子が好ましい。
【００２６】
式（１）において、Ｒ1とＲ2とは母核の一部を含んで環状構造を形成するように一体化してもよい。この環は硫黄原子を環の構成原子として含んでもよく、さらにこの環は炭素数１から６のアルキル基を置換基として有していてもよい。このアルキル基としてはメチル基が好ましい。
【００２７】
式（１）中、Ｒ3は、水素原子、アミノ基（このアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基もしくは炭素数２から５のアシル基が置換していてもよい。）、チオール基、ハロゲノメチル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から６のアルケニル基、炭素数２から６のアルキニル基、または炭素数１から６のアルコキシ基を表わす。
【００２８】
ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基または炭素数２から５のアシル基が置換していてもよいアミノ基としては、例えばホルミルアミノ基、アセチルアミノ基等を挙げることができ、アセチルアミノ基が特に好ましい。炭素数１から６のアルキル基としては、メチル基、エチル基を挙げることができるが、メチル基が特に好ましい。炭素数２から６のアルケニル基としては、ビニル基が特に好ましい。炭素数２から６のアルキニル基としては、エチニル基が特に好ましい。また、炭素数１から６のアルコキシ基としては、メトキシ基が特に好ましい。
置換基Ｒ3としては、水素原子が好ましい。
【００２９】
式（１）中、Ａ1は、窒素原子または式（２）
【００３０】
【化６】
2008231067.tif 000007
【００３１】
で表わされる部分構造を表わす。
式（２）中、Ｘ2は、水素原子、アミノ基（このアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基もしくは炭素数２から５のアシル基が置換していてもよい。）、ハロゲン原子、シアノ基、ハロゲノメチル基、ハロゲノメトキシ基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から６のアルケニル基、炭素数２から６のアルキニル基、または炭素数１から６のアルコキシ基を表わす。
【００３２】
ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基または炭素数２から５のアシル基が置換していてもよいアミノ基としては、アセチルアミノ基が特に好ましい。炭素数１から６のアルキル基としては、メチル基が特に好ましい。炭素数２から６のアルケニル基としては、ビニル基が特に好ましい。炭素数２から６のアルキニル基としては、エチニル基が特に好ましい。また、炭素数１から６のアルコキシ基としては、メトキシ基が特に好ましい。
【００３３】
このＸ2と上記のＲ1とは母核の一部を含んで環状構造を形成するように一体化してもよく、このようにして形成された環は、酸素原子、窒素原子、または硫黄原子を環の構成原子として含んでもよい。さらにこの環は炭素数１から６のアルキル基を置換基として有していてもよい。
このようにして形成された環構造として好ましくはオフロキサシン等の骨格であるピリドベンゾオキサジン骨格を挙げることができる。さらにこの骨格のアルキル置換基としてはメチル基が好ましく、特に（３Ｓ）−メチル基が好ましい。
【００３４】
置換基Ａ1しては、式（２）で表される部分構造であることが好ましく、また置換基  Ｘ2としては、メチル基、メトキシ基、ジフルオロメトキシ基が好ましい。
【００３５】
式（１）中、Ａ2およびＡ3は、各々異なって窒素原子または炭素原子を表わす。ここで、Ａ1、Ａ2およびＡ3とこれらが結合している炭素原子とは、次の部分構造
【００３６】
【化７】
2008231067.tif 000008
【００３７】
または、部分構造
【００３８】
【化８】
2008231067.tif 000009
【００３９】
を形成する。
すなわち、次の構造
【化９】
2008231067.tif 000010
を有するものである。
これらの部分構造のうちでは
【００４０】
【化１０】
2008231067.tif 000011
【００４１】
で示される部分構造が好ましく、したがって次の構造
【化１１】
2008231067.tif 000012
のものが好ましい。
さらに、Ａ1としては前述の式（２）で示される構造が好ましく、したがって次の構造
【化１２】
2008231067.tif 000013
のものが好ましい。
【００４２】
式（１）中、Ｘ1は、ハロゲン原子または水素原子を表わすが、ハロゲン原子の場合はフッ素原子が好ましい。
置換基Ｘ1としては、フッ素原子または水素原子が好ましい。
【００４３】
式（１）中、Ｙは、水素原子、フェニル基、アセトキシメチル基、ピバロイルオキシメチル基、エトキシカルボニル基、コリン基、ジメチルアミノエチル基、５−インダニル基、フタリジル基、５−アルキル−２−オキソ−１，３−ジオキソール−４−イルメチル基、３−アセトキシ−２−オキソブチル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から７のアルコキシメチル基、または炭素数１から６のアルキレン基とフェニル基とから構成されるフェニルアルキル基を表わす。
置換基Ｙ1としては、水素原子が好ましい。
【００４４】
また、式（１）中、Ｚは、単環式、二環式、または三環式の複素環式置換基を表わす。この複素環式置換基は、飽和または部分飽和であって、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から選ばれる１以上の異原子を含んでいてもよい。さらにビシクロ構造もしくはスピロ環状構造であってもよい。この複素環式置換基は置換基を有していてもよく、例えばハロゲン原子、水酸基、アミノ基、カルバモイル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルアミノ基、炭素数１から６のアルキルチオ基または炭素数１から６のアミノアルキル基が置換していてもよい。複素環式置換基に置換し得る原子または基は１個であっても２個以上であってもよい。
【００４５】
上記複素環式置換基に置換し得る炭素数１から６のアルキル基は、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、カルバモイル基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルアミノ基、炭素数１から６のアルキルチオ基および炭素数１から６のアミノアルキル基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有していてもよく、複素環式置換基に置換し得るアルキル基、該アルキル基に置換し得るハロゲノアルキル基、アルキルアミノ基、アルキルチオ基およびアミノアルキル基のアルキル基部分は、環状構造を有していてもよく、さらに、ハロゲン原子、炭素数１から６のアルキル基および炭素数１から６のアルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有していてもよい。
【００４６】
また、上記のアミノ基、アルキルアミノ基およびアミノアルキル基のアミノ基部分は、炭素数１から６のアルキル基（このアルキル基は、環状構造を有していてもよく、水酸基、ハロゲン原子、炭素数１から６のアルキルチオ基および炭素数１から６のアルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有していてもよい。）の１個または２個を置換基として有していてもよく、２個のときは同一でも異なっていてもよい。さらに、このアミノ基部分は、通常用いられる保護基によって保護されていてもよい。
【００４７】
上記複素環式置換基に置換し得る炭素数１から６のハロゲノアルキル基、炭素数１から６のアルキルアミノ基、炭素数１から６のアルキルチオ基および炭素数１から６のアミノアルキル基のアルキル基部分は、環状構造を有していてもよく、さらにハロゲン原子、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、アリール基およびヘテロアリール基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有していてもよい。
【００４８】
上記複素環式置換基に置換し得るアミノ基、炭素数１から６のアルキルアミノ基および炭素数１から６のアミノアルキル基のアミノ基部分は、さらに炭素数１から６のアルキル基の１個または２個を置換基として有していてもよく、あるいは保護基によって保護されていてもよい。アミノ基上のアルキル基が２個の場合、同一でも異なっていてもよい。
ここで、炭素数１から６のアルキル基としては、環状構造を有していてもよく、またハロゲン原子、水酸基、炭素数１から６のアルキルチオ基および炭素数１から６のアルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有していてもよい。
アミノ基の保護基としてはこの分野で汎用されるものであれば特に限定されないが、例えば、第三級ブトキシカルボニル基、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基等のアルコキシカルボニル基類；ベンジルオキシカルボニル基、パラメトキシベンジルオキシカルボニル基、パラニトロベンジルオキシカルボニル基等のアラルキルオキシカルボニル基類；アセチル基、メトキシアセチル基、トリフルオロアセチル基、クロロアセチル基、ピバロイル基、ホルミル基、ベンゾイル基等のアシル基類；第三級ブチル基、ベンジル基、パラニトロベンジル基、パラメトキシベンジル基、トリフェニルメチル基等のアルキル基類、またはアラルキル基類；メトキシメチル基、第三級ブトキシメチル基、テトヒドロピラニル基、２，２，２−トリクロロエトキシメチル基等のエーテル類；トリメチルシリル基、イソプロピルジメチルシリル基、第三級ブチルジメチルシリル基、トリベンジルシリル基、第三級ブチルジフェニルシリル基等の（アルキルおよび／またはアラルキル）置換シリル基を挙げることができる。
【００４９】
上記複素環式置換基に置換し得るアリール基は、炭素数が６から１０であり、また、ヘテロアリール基は、５員環または６員環であって、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から選ばれるヘテロ原子を１〜４個含んでいてもよい。
【００５０】
上記複素環式置換基に置換し得るアリール基およびヘテロアリール基は、ハロゲン原子、水酸基、チオール基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、カルボキシル基、カルバモイル基、フェニル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルチオ基、炭素数２から６のアルコキシカルボニル基、炭素数２から５のアシル基およびヘテロアリール基（５員環または６員環であって、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から選ばれるヘテロ原子を１〜４個含む。）からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有していてもよい。
ここで、アリール基およびヘテロアリール基に置換し得るフェニル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルチオ基、炭素数２から６のアルコキシカルボニル基、炭素数２から５のアシル基およびヘテロアリール基は、さらにハロゲン原子、水酸基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルチオ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有していてもよい。また、アリール基およびヘテロアリール基に置換し得るアミノ基は、さらにホルミル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から５のアシル基および炭素数２から５のアルコキシカルボニル基からなる群より選ばれる１または２の基を置換基として有していてもよい。
【００５１】
置換基Ｚは、環を構成するいずれの原子を介してキノロン母格と結合してもよいが、窒素原子で結合することがより好ましい。このような窒素原子で結合する複素環式置換基として次の式（３）〜（７）で表わされる構造の置換基を挙げることができる。
式（３）
【００５２】
【化１３】
2008231067.tif 000014
【００５３】
（式中、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ5’、Ｒ6、Ｒ6’、Ｒ7およびＲ8は、前記Ｚで表される複素環式置換基の置換基を表わす。より具体的には、
Ｒ4、Ｒ5およびＲ6は、各々独立して、水素原子または炭素数１から６のアルキル基を表わすが、
このアルキル基は、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、カルバモイル基、炭素数１から６のアルキルチオ基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルアミノ基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基および炭素数１から６のアミノアルキル基からなる群の基から選ばれる１以上の基を置換基として有していてもよく、
上記のアルキル基、該アルキルに置換し得るアルキルチオ基、アルキルアミノ基、ハロゲノアルキル基およびアミノアルキル基のアルキル基部分は、環状構造を有していてもよく、さらにハロゲン原子、炭素数１から６のアルキル基、アルコキシ基からなる群のより選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよい。
また、アルキルに置換し得るアミノ基、アミノアルキル基およびアルキルアミノ基のアミノ基部分は、炭素数１から６のアルキル基（このアルキル基は、環状構造を有していてもよく、また、ハロゲン原子、水酸基、炭素数１から６のアルキルチオ基および炭素数１から６のアルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよい。）の１個または２個を置換基として有していてもよく（２個のときは同一でも異なっていてもよい。）、さらにこのアミノ基部分は通常用いられる保護基によって保護されていてもよい。
Ｒ5’およびＲ6’は、各々独立して、水素原子、アリール基、またはヘテロアリール基を表わすが、
このアリール基は炭素数が６から１０であり、また、ヘテロアリール基は、５員環または６員環であって、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から任意に選ばれるヘテロ原子を１個から４個含んでいてよく、
上記のアリール基およびヘテロアリール基は、ハロゲン原子、水酸基、チオール基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、カルボキシル基、カルバモイル基、フェニル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルチオ基、炭素数２から６のアルコキシカルボニル基、炭素数２から５のアシル基およびヘテロアリール基（５員環または６員環であって、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から任意に選ばれるヘテロ原子を１個から４個含む。）からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよく、
このうちのアルキル基、アルコキシ基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、アシル基、フェニル基およびヘテロアリール基は、ハロゲン原子、水酸基、炭素数１から６のアルコキシ基および炭素数１から６のアルキルチオ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよく、さらにアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から５のアシル基および炭素数２から５のアルコキシカルボニル基からなる群の基から選ばれる１または２の基を置換基として有してもよい。
Ｒ7およびＲ8は、各々独立して、水素原子または炭素数１から６のアルキル基を表わす。
上記のＲ5、Ｒ5’、Ｒ6およびＲ6’から選ばれる任意の２個は、環状構造を形成するように一体化してもよく、酸素原子、窒素原子、および硫黄原子から任意に選ばれる１以上のヘテロ原子をその環の構成原子として含んでもよい。
この様にして形成される環は、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基および炭素数１から６のアルキルチオ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよく、さらにこのアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から５のアシル基および炭素数２から５のアルコキシカルボニル基からなる群の基から選ばれる１または２の基を置換基として有してもよい。）
または、下記の式（４）
【００５４】
【化１４】
2008231067.tif 000015
【００５５】
（式中、Ｒ7、Ｒ7’、Ｒ8、Ｒ8’、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ10’、Ｒ11およびＲ11’は、前記Ｚで表される複素環式置換基上の置換基を表わす。より具体的には、
Ｒ11およびＲ11’は、各々独立して、水素原子または炭素数１から６のアルキル基を表わすが、
このアルキル基は、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、カルバモイル基、炭素数１から６のアルキルチオ基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルアミノ基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基および炭素数１から６のアミノアルキル基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有していてもよい。
Ｒ9、Ｒ10およびＲ10’は、各々独立して、水素原子、ハロゲン原子、アミノ基、水酸基、カルバモイル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルキルアミノ基、アリール基、ヘテロアリール基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルチオ基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基、または炭素数１から６のアミノアルキル基を表わすが、
このアルキル基、アルキルチオ基、ハロゲノアルキル基、アミノアルキル基およびアルキルアミノ基のアルキル基部分は、環状構造を有していてもよく、
さらにハロゲン原子、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有していてもよい。
また、上記のアミノ基、アルキルアミノ基およびアミノアルキル基のアミノ基部分は、炭素数１から６のアルキル基（このアルキル基は、環状構造を有していてもよく、また、ハロゲン原子、水酸基、炭素数１から６のアルキルチオ基および炭素数１から６のアルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよい。）の１個または２個を置換基として有していてもよく（２個のときは同一でも異なっていてもよい。）、さらにこのアミノ基部分は通常用いられる保護基によって保護されていてもよい。
さらに上記のアリール基は炭素数が６から１０であり、また、ヘテロアリール基は、５員環または６員環であって、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から任意に選ばれるヘテロ原子を１個から４個含んでいてよく、
上記のアリール基およびヘテロアリール基は、ハロゲン原子、水酸基、チオール基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、カルボキシル基、カルバモイル基、フェニル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルチオ基、炭素数２から６のアルコキシカルボニル基、炭素数２から５のアシル基およびヘテロアリール基（５員環または６員環であって、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から任意に選ばれるヘテロ原子を１個から４個含む。）からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよく、
このうちのアルキル基、アルコキシ基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、アシル基、フェニル基およびヘテロアリール基は、ハロゲン原子、水酸基、炭素数１から６のアルコキシ基および炭素数１から６のアルキルチオ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよく、さらにアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から５のアシル基および炭素数２から５のアルコキシカルボニル基からなる群の基から選ばれる１または２の基を置換基として有してもよい。
Ｒ7、Ｒ7’、Ｒ8およびＲ8’は、各々独立して、水素原子または炭素数１から６のアルキル基を表わす。
上記の、Ｒ7、Ｒ7’、Ｒ8、Ｒ8’、Ｒ9、Ｒ10およびＲ10’から選ばれる任意の２個は、環状構造を形成するように一体化してもよく、酸素原子、窒素原子、および硫黄原子から任意に選ばれる１以上のヘテロ原子をその環の構成原子として含んでもよい。
この様にして形成される環は、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基および炭素数１から６のアルキルチオ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよく、さらにこのアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から５のアシル基および炭素数２から５のアルコキシカルボニル基からなる群の基から選ばれる１または２の基を置換基として有してもよい。）
または、下記の式（５）
【００５６】
【化１５】
2008231067.tif 000016
【００５７】
（式中、Ｒ7、Ｒ7’、Ｒ8、Ｒ8’、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ10’、Ｒ11、Ｒ11’、Ｒ12およびＲ12’は、前記Ｚで表される複素環式置換基上の置換基を表わす。より具体的には、
Ｒ11およびＲ11’は、各々独立して、水素原子または炭素数１から６のアルキル基を表わすが、
このアルキル基は、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、カルバモイル基、炭素数１から６のアルキルチオ基および炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルアミノ基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基および炭素数１から６のアミノアルキル基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有していてもよい。
Ｒ9、Ｒ10およびＲ10’は、各々独立して、水素原子、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、カルバモイル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルキルアミノ基、アリール基、ヘテロアリール基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルチオ基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基、または炭素数１から６のアミノアルキル基を表わすが、
上記のアルキル基、アルキルチオ基、ハロゲノアルキル基、アミノアルキル基および炭素数アルキルアミノ基のアルキル基部分は、環状構造を有していてもよく、さらにハロゲン原子、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有していてもよい。
また、上記のアミノ基、アルキルアミノ基およびアミノアルキル基のアミノ基部分は、炭素数１から６のアルキル基（このアルキル基は、環状構造を有していてもよく、また、ハロゲン原子、水酸基、炭素数１から６のアルキルチオ基および炭素数１から６のアルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよい。）の１個または２個を置換基として有していてもよく（２個のときは同一でも異なっていてもよい。）、さらにこのアミノ基部分は通常用いられる保護基によって保護されていてもよい。
Ｒ12およびＲ12’は、各々独立して、水素原子、炭素数１から６のアルキル基、アリール基、またはヘテロアリール基を表わすが、
このアリール基は炭素数が６から１０であり、また、ヘテロアリール基は、５員環または６員環であって、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から任意に選ばれるヘテロ原子を１個から４個含んでいてよく、
上記のアリール基およびヘテロアリール基は、ハロゲン原子、水酸基、チオール基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、カルボキシル基、カルバモイル基、フェニル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルチオ基、炭素数２から６のアルコキシカルボニル基、炭素数２から５のアシル基およびヘテロアリール基（５員環または６員環であって、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から任意に選ばれるヘテロ原子を１個から４個含む。）からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよく、
このうちのアルキル基、アルコキシ基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、アシル基、フェニル基およびヘテロアリール基は、ハロゲン原子、水酸基、炭素数１から６のアルコキシ基および炭素数１から６のアルキルチオ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよく、さらにアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から５のアシル基および炭素数２から５のアルコキシカルボニル基からなる群の基から選ばれる１または２の基を置換基として有してもよい。
Ｒ7、Ｒ7’、Ｒ8およびＲ8’は、各々独立して、水素原子または炭素数１から６のアルキル基を表わす。
上記の、Ｒ7、Ｒ7’、Ｒ8、Ｒ8’、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ10’、Ｒ12およびＲ12’から選ばれる任意の２個は、環状構造を形成するように一体化してもよく、酸素原子、窒素原子、および硫黄原子から任意に選ばれる１以上のヘテロ原子をその環の構成原子として含んでもよい。
この様にして形成される環は、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基および炭素数１から６のアルキルチオ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよく、さらにこのアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から５のアシル基および炭素数２から５のアルコキシカルボニル基からなる群の基から選ばれる１または２の基を置換基として有してもよい。）
または、下記の式（６）
【００５８】
【化１６】
2008231067.tif 000017
【００５９】
（式中、Ｒ13、Ｒ13’、Ｒ14、Ｒ14’、Ｒ15、Ｒ16およびＲ16’は、前記Ｚで表される複素環式置換基上の置換基を表わす。より具体的には、
Ｒ13およびＲ13’は、各々独立して、水素原子または炭素数１から６のアルキル基を表わすが、
このアルキル基は、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、カルバモイル基、炭素数１から６のアルキルチオ基および炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルアミノ基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基および炭素数１から６のアミノアルキル基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有していてもよい。
Ｒ14、Ｒ14’、Ｒ15、Ｒ16およびＲ16’は、各々独立して、水素原子、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、カルバモイル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルキルアミノ基、アリール基、ヘテロアリール基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルチオ基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基、または炭素数１から６のアミノアルキル基を表わすが、
上記のアルキル基、アルキルチオ基、ハロゲノアルキル基、アミノアルキル基およびアルキルアミノ基のアルキル基部分は、環状構造を有していてもよく、さらにハロゲン原子、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有していてもよい。
また、上記のアミノ基、アミノアルキル基およびアルキルアミノ基のアミノ基部分は、炭素数１から６のアルキル基（このアルキル基は、環状構造を有していてもよく、また、ハロゲン原子、水酸基、炭素数１から６のアルキルチオ基および炭素数１から６のアルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよい。）の１個または２個を置換基として有していてもよく（２個のときは同一でも異なっていてもよい。）、さらにこのアミノ基部分は通常用いられる保護基によって保護されていてもよい。
上記のアリール基は炭素数が６から１０であり、また、ヘテロアリール基は、５員環または６員環であって、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から任意に選ばれるヘテロ原子を１個から４個含んでいてよく、
上記のアリール基およびヘテロアリール基は、ハロゲン原子、水酸基、チオール基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、カルボキシル基、カルバモイル基、フェニル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルチオ基、炭素数２から６のアルコキシカルボニル基、炭素数２から５のアシル基およびヘテロアリール基（５員環または６員環であって、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から任意に選ばれるヘテロ原子を１個から４個含む。）からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよく、
このうちのアルキル基、アルコキシ基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、アシル基、フェニル基およびヘテロアリール基は、ハロゲン原子、水酸基、炭素数１から６のアルコキシ基および炭素数１から６のアルキルチオ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよく、さらにアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から５のアシル基および炭素数２から５のアルコキシカルボニル基からなる群の基から選ばれる１または２の基を置換基として有してもよい。
上記のＲ14、Ｒ14’、Ｒ15、Ｒ16およびＲ16’から選ばれる任意の２個は、環状構造を形成するように一体化してもよく、酸素原子、窒素原子、および硫黄原子から任意に選ばれる１以上のヘテロ原子をその環の構成原子として含んでもよい。
この様にして形成される環は、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基および炭素数１から６のアルキルチオ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよく、さらにこのアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から５のアシル基および炭素数２から５のアルコキシカルボニル基からなる群の基から選ばれる１または２の基を置換基として有してもよい。）
または、下記の式（７）
【００６０】
【化１７】
2008231067.tif 000018
【００６１】
（式中、Ｒ13、Ｒ13’、Ｒ14、Ｒ14’、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ16’、Ｒ17およびＲ17’は、前記Ｚで表される複素環式置換基上の置換基を表わす。より具体的には、
Ｒ13およびＲ13’は、各々独立して、水素原子または炭素数１から６のアルキル基を表わすが、
このアルキル基は、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、カルバモイル基、炭素数１から６のアルキルチオ基および炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルアミノ基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基および炭素数１から６のアミノアルキル基からなる群の基から選ばれる１以上の基を置換基として有していてもよい。
式中、Ｒ14、Ｒ14’、Ｒ15、Ｒ16およびＲ16’は、各々独立して、水素原子、ハロゲン原子、アミノ基、水酸基、カルバモイル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルキルアミノ基、アリール基、ヘテロアリール基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルチオ基、炭素数１から６のハロゲノアルキル基、または炭素数１から６のアミノアルキル基を表わすが、
上記のアルキル基、アルキルチオ基、ハロゲノアルキル基、アミノアルキル基およびアルキルアミノ基のアルキル基部分は、環状構造を有していてもよく、さらにハロゲン原子、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有していてもよい。
また、上記のアミノ基、アミノアルキル基およびアルキルアミノ基のアミノ基部分は、炭素数１から６のアルキル基（このアルキル基は、環状構造を有していてもよく、また、ハロゲン原子、水酸基、炭素数１から６のアルキルチオ基および炭素数１から６のアルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよい。）の１個または２個を置換基として有していてもよく（２個のときは同一でも異なっていてもよい。）、さらにこのアミノ基部分は通常用いられる保護基によって保護されていてもよい。
Ｒ17およびＲ17’は、各々独立して、水素原子、炭素数１から６のアルキル基、アリール基、またはヘテロアリール基を表わすが、このアリール基は炭素数が６から１０であり、ヘテロアリール基は、５員環または６員環であって、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から任意に選ばれるヘテロ原子を１個から４個含んでいてよく、
上記のアリール基およびヘテロアリール基は、ハロゲン原子、水酸基、チオール基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、カルボキシル基、カルバモイル基、フェニル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルチオ基、炭素数２から６のアルコキシカルボニル基、炭素数２から５のアシル基およびヘテロアリール基（５員環または６員環であって、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から任意に選ばれるヘテロ原子を１個から４個含む。）からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよく、
このうちのアルキル基、アルコキシ基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、アシル基、フェニル基およびヘテロアリール基は、ハロゲン原子、水酸基、炭素数１から６のアルコキシ基および炭素数１から６のアルキルチオ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよく、さらにアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から５のアシル基および炭素数２から５のアルコキシカルボニル基からなる群の基から選ばれる１または２の基を置換基として有してもよい。
上記の、Ｒ14、Ｒ14’、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ16’、Ｒ17およびＲ17’から選ばれる任意の２個は、環状構造を形成するように一体化してもよく、酸素原子、窒素原子、および硫黄原子から任意に選ばれる１以上のヘテロ原子をその環の構成原子として含んでもよい。
この様にして形成される環は、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基および炭素数１から６のアルキルチオ基からなる群より選ばれる１以上の原子または基を置換基として有してもよく、さらにこのアミノ基は、ホルミル基、炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から５のアシル基および炭素数２から５のアルコキシカルボニル基からなる群の基から選ばれる１または２の基を置換基として有してもよい。）
【００６２】
これらの置換基において好ましいものは、式（３）、（４）、および（５）で示されるものである。特に、式（４）および（５）の構造の置換基が好ましい。また、キノロン母核がピリドベンゾオキサジン骨格であるときには式（３）の置換基が好ましい。
【００６３】
置換基Ｚをより具体的に構造式で示すと、以下の置換基を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。また、これらの置換基において不斉炭素を有していて光学活性となる場合、光学活性置換基が当然にＺに含まれる。
【００６４】
【化１８】
2008231067.tif 000019
【００６５】
式（１）で示されるキノロン系合成抗菌化合物の具体例としては、レボフロキサシン、オフロキサシン、シタフロキサシン、（７−［３−（Ｒ）−（１−アミノシクロプロピル）ピロリジン−１−イル］−１−［２−（Ｓ）−フルオロ−１−（Ｒ）−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（化合物（Ｉ））、（＋）−７−［（７Ｓ）−７−アミノ−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸１／２水和物（化合物（ＩＩ））、シプロフロキサシン、モキシフロキサシン、トロバフロキサシン等を挙げることができる。これらのうち、好ましくはシタフロキサシン、（７−［３−（Ｒ）−（１−アミノシクロプロピル）ピロリジン−１−イル］−１−［２−（Ｓ）−フルオロ−１−（Ｒ）−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（化合物（Ｉ））、（＋）−７−［（７Ｓ）−７−アミノ−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸１／２水和物（化合物（ＩＩ））である。
なお、キノロン化合物から本発明の凍結乾燥製剤を調製する場合、キノロン化合物は遊離体であっても、水和物や塩等の付加物であってもいずれの形態も使用することができる。
【００６６】
本発明に係るキノロン系合成抗菌化合物（１）がジアステレオマーの存在する構造である場合、本発明化合物をヒトや動物に投与する際は単一のジアステレオマーからなるものを投与することが好ましい。この、『単一のジアステレオマーからなる』とは、他のジアステレオマーを全く含有しない場合だけでなく、化学的に純粋程度の場合を含むと解される。つまり、物理定数や、生理活性に対して影響がない程度であれば他のジアステレオマーが含まれてもよいと解釈されるのである。また対掌体の存在する場合も同様に考えればよい。
【００６７】
本発明の凍結乾燥製剤の製造方法について以下に延べる。
本発明において凍結乾燥製剤は、上記式（１）で表される構造を有するキノロン系合成抗菌化合物およびｐＨ調節剤のみを含有する凍結乾燥製剤調製用水溶液（原液）から調製される。なお、本発明において実施されるアニーリング工程以外の凍結乾燥工程自体は、通常この分野で実施される凍結乾燥方法に従って実施すればよい。
【００６８】
本発明で使用されるｐＨ調節剤としては、例えば、塩酸、硫酸、リン酸等の無機酸類；炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸三ナトリウム、リン酸二カリウム、リン酸二水素カリウム、亜硫酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム等の無機酸塩類；酢酸、乳酸、コハク酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、サリチル酸、安息香酸、メタンスルホン酸、チオグリコール酸等の有機酸類；乳酸エチル等の有機酸エステル化合物；クエン酸ナトリウム、クエン酸二ナトリウム、グルコン酸ナトリウム、クエン酸カルシウム、乳酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、ピロリン酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム、カプリル酸ナトリウム、チオグリコール酸ナトリウム等の有機酸塩類；水酸化ナトリウム等の無機塩類；モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン、トロメタモール等の有機アミン化合物類等を挙げることができる。水溶液のｐＨは、化合物（１）の溶解性の点から、７以下であればよく、好ましくは６．５以下であり、特に２．５〜６．０の範囲に設定するのが好ましい。
【００６９】
凍結乾燥製剤を調製するための水溶液中の化合物（１）の濃度は、凍結乾燥ケーキ形成性の点から１０ｍｇ／ｍＬ以上、更に１５ｍｇ／ｍＬ以上、特に２０ｍｇ／ｍＬ以上が好ましい。
凍結乾燥製剤調製用水溶液は、例えば化合物（Ｉ）の場合、表１に示される処方のものを好適に使用することができる。
【００７０】
【表１】
2008231067.tif 000020
【００７１】
凍結乾燥製剤を調製するためには先ず凍結工程によってこの原液を冷却して非晶質の凍結体を得ることが第一段階である。この凍結工程の到達温度は、化合物（１）含有水溶液の凍結体におけるいわゆるガラス転移温度以下に設定すればよく、例えば表１の組成を有する薬物水溶液の場合はその凍結体のガラス転移温度がおよそ−１５℃付近にあるので、通常この分野で実施されるように−４０℃までに設定すればよい。
本発明の場合、−２０℃から−４０℃の範囲で設定すればよく、−３０℃の設定で得た凍結体に対して一連の工程を実施することで目的の非晶質凍結乾燥製剤を取得することができる。
【００７２】
次いでこの凍結工程の冷却温度を緩和・昇温させて、一定時間保持する工程（アニーリング工程）を設けることが本発明における非晶質凍結乾燥製剤の調製方法の特徴である（図１の温度プロファイル参照。なお、この温度プロファイルは、凍結乾燥に使用する機器の設定温度であり、機器内に収められた個々の容器（バイアル等）の温度を必ずしも示すものではない。例えば、凍結工程および二次乾燥工程においては、機器内の容器はこの温度に到達していると考えられる。しかしながら一次乾燥工程では機器内の容器の温度は水分の昇華に伴い温度低下を来たし、設定温度以下となっていると考えられる。）。
アニーリング工程の温度設定は、凍結工程で得られた化合物（１）含有水溶液の非晶質凍結体のガラス転移温度を目安とすればよい。すなわち、凍結体をそのガラス転移温度以上に昇温させて一定時間保持すればよい。凍結体のガラス転移温度は、例えば凍結体のＤＳＣ測定によって求めることができ、このＤＳＣ測定は通常実施される方法にしたがって実施すればよい。凍結体のガラス転移温度はその原液の成分組成等によって変化するので各々の場合においてＤＳＣ測定を実施してガラス転移温度を決定すればよい。
【００７３】
例えば、上記表１に示した組成の化合物（Ｉ）とｐＨ調節剤を含有する凍結体のＤＳＣの測定結果によれば、ガラス転移点のピークはおよそ−１４．０℃から立ち上がることが判明した（図５）。したがって、この温度以上の温度で、かつ、非晶質凍結体が解凍しない範囲の温度に保持することで非晶質凍結乾燥製剤における凍結乾燥ケーキの再溶解性改善効果が付与できるのである。なお、ＤＳＣの測定結果によればそのピーク自体の立ち上がりはおよそ−１７℃であり、この温度以上であればアニーリングの効果が期待できる。
【００７４】
アニーリング工程の温度の上限値は、アニーリング工程においては非晶質凍結体が解凍しないことが必須であるので、凍結体が凍結を維持できる上限温度である。通常の場合、薬物水溶液はほぼ０℃まで凍結状態を維持すると考えてよい。アニーリングの効果はアニーリングの工程での温度がより高く設定されるほど効率的に達成されるが、設定温度が高すぎる場合には凍結体が解凍するので注意が必要である。
本発明方法においてアニーリング工程の温度としては−２０℃から−２℃の範囲であればよく、より好ましくは、−１５℃から−５℃の範囲である。
【００７５】
アニーリング工程の保持時間、つまり非晶質凍結体を昇温状態に保持しておく時間は、凍結体全体が設定温度となるに足る時間またはそれ以上であればよい。本工程に要する時間は、アニーリングを実施する温度によって異なる（この他に製造しようとする凍結乾燥体の数量によっても変化することは言うまでもない。）。アニーリング温度がガラス転位温度に近いほど（より低温であるほど）長時間を要し、ガラス転位温度よりもより高温であるほどアニーリング工程に要する時間は短縮される。
本発明の方法においては凍結体をアニーリング工程の昇温温度に保持させる時間は約１５分〜４８時間程度であれば通常は十分であり、より好ましくは３０分〜１２時間程度である。
【００７６】
本発明の非晶質凍結乾燥製剤の製造方法において、冷却や昇温に際しての温度を下降させるまたは上昇させる速度は特に制限はなく、使用する機器の能力や製造工程の管理時間等の要因に基づいて設定しても凍結乾燥製剤に特段の影響はないことが明らかとなっている。
【００７７】
アニーリング工程の後、非晶質凍結体を再度冷却して減圧処理を行なって非晶質凍結乾燥製剤の調製工程（一次乾燥工程）に進むが、これは通常実施される凍結乾燥の方法に従って実施すればよい。すなわち、再冷却の設定温度に到達した時点で減圧処理を開始して凍結乾燥を実施する。この再冷却での到達温度がガラス転移温度以下であればよいのはアニーリング工程前の冷却工程と同様であるが、通常の凍結乾燥製剤の調製時に設定される−４０℃を目安とすればよい。また、この工程での減圧処理の到達減圧度は、６〜２７Ｐａの範囲であればよく、好ましくは１３〜２０Ｐａの範囲である。
【００７８】
一次乾燥工程は、減圧下にガラス転移点以下の温度条件で実施する。この温度は、凍結乾燥用の機器内に収められた小分け容器（バイアル等）の到達温度であるが、凍結体からの水分の昇華に伴って温度低下が起きるため、機器の実際の設定温度はガラス転位温度以上でよい。本発明の場合、機器の設定温度としてはおよそ２５℃〜−１５℃の範囲であればよい。
【００７９】
一次乾燥工程に要する時間は、昇華させる水分の量によっても異なるが、およそ１６時間〜８０時間の範囲であればよく、より好ましくは１６時間〜５０時間である。なお、昇華する水分が減少するに伴って温度低下が緩和になり、この結果として品温が上昇し始めるがそのときが一次乾燥工程の終末点といってよい。
【００８０】
一次乾燥工程の後二次乾燥工程を実施する。すなわち、一次乾燥工程で設定した機器の温度から昇温して二次乾燥工程としての設定温度に到達させた後一定時間保持する工程である。二次乾燥工程の温度は室温以上であればよく、およそ２５℃〜４５℃の範囲に設定すればよいが、好ましくは２５℃〜３０℃の範囲である。二次乾燥工程に要する時間は、およそ２時間〜２０時間の範囲であればよく、より好ましくは３時間〜１５時間の範囲である。二次乾燥工程でも継続して減圧状態を保持するが、二次乾燥工程では水分の脱離を促進させるために減圧度を高めるのがよい。減圧度は、０．５Ｐａ〜１０Ｐａの範囲であればよいが、より好ましくは１Ｐａ〜５Ｐａの範囲である。
なお、本発明の非晶質凍結乾燥製剤の製造にあたって滅菌処理等は通常行なわれる手順に従って実施すればよい。
【実施例】
【００８１】
以下に実施例を示して本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではなく、これらは如何なる場合においても限定的に解釈してはならない。
【００８２】
実施例１
［原薬およびｐＨ調節剤処方凍結乾燥製剤］
注射用水（２５Ｌ）に１ｍｏｌ／Ｌ塩酸（１４００ｍＬ）を加えた。この水溶液に化合物（Ｉ）（６００ｇ）を溶解し、更に１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加えてｐＨを３．４に調整した。この溶液に注射用水を加え、化合物（Ｉ）の含量を２０ｍｇ／ｍＬに調整して凍結乾燥製剤調製用原液とした。この溶液を小分け容器に１０ｍＬずつ充填し、下記の工程にしたがって凍結乾燥した後、密栓した。
【００８３】
［凍結乾燥工程］
１）化合物（Ｉ）溶液を充填した容器を、５℃に設定した凍結乾燥機の棚に積載し、
２）棚温度を、０．１５℃／分の冷却速度で−３０℃に冷却し、６時間保持した。
３）棚温度を、０．５℃／分の昇温速度で−１０℃に昇温し、６時間保持した。
４）棚温度を、１．０℃／分の冷却速度で−４０℃に冷却した。
５）棚温度−４０℃で３時間以上保持した後、
６）減圧処理を開始し、棚温度を−５℃に設定して３０時間以上保持した。この間，減圧度は２０Ｐａに保持した。
７）品温が−５℃以上になった後、棚温度を２５℃に設定して６時間以上保持した。この間、減圧度は１Ｐａに保持した。
【００８４】
化合物（Ｉ）（結晶）とその凍結乾燥製剤（アニーリング工程あり）、及びアニーリング工程を設けずに得た凍結乾燥製剤の粉末Ｘ線回析測定の結果を図９に示す。図９から明らかなように、凍結乾燥製剤は明白な回析ピ−クを示さず、非晶質であることが確認された。
【００８５】
また、上記と同様の条件にて薬液を調製後、容器に充填して表２に示す条件で凍結し、同様の手順で凍結乾燥した後、再溶解時間を測定した。その結果は図４に示した。また、再溶解液を注入しておよそ３０秒後の状態を図２（アニーリング工程なし）および図３（アニーリング工程あり）に示す。
【００８６】
【表２】
2008231067.tif 000021
【００８７】
アニーリング工程の温度、保持時間等を表３の内容で変化させて凍結乾燥を実施した。得られた凍結乾燥製剤の再溶解に要する時間を図７に示す。なお、再溶解時間測定手順としては、凍結乾燥後の１バイアルに充填液量と同量の注射用水を加えて穏やかに振り混ぜ、内容物が完全に溶解するまでの時間を測定した。
【００８８】
【表３】
2008231067.tif 000022
【００８９】
実施例２
レボフロキサシン、オフロキサシン、シタフロキサシンおよび化合物（ＩＩ）の４種類のキノロン系合成抗菌化合物について凍結乾燥製剤を調製し、アニーリング工程による再溶解性改善の効果を確認した。
その結果、いずれのキノロン系合成抗菌化合物の凍結乾燥製剤についてもアニーリング工程を加えて調製した凍結乾燥製剤において再溶解時間が短縮することを確認した（図８）。
【００９０】
また、化合物（ＩＩ）とその凍結乾燥製剤、シタフロキサシンとその凍結乾燥製剤の粉末Ｘ線回析測定の結果を図１０及び図１１に示す。図１０及び１１から明らかなように、何れの凍結乾燥製剤も明白な回析ピ−クを示さず、本発明の凍結乾燥製剤は非晶質であることが確認された。
【００９１】
各キノロン系合成抗菌化合物の構造は以下の通りである。
１）レボフロキサシン［（−）−（Ｓ）−９−ｆｌｕｏｒｏ−２，３−ｄｉｈｙｄｒｏ−３−ｍｅｔｈｙｌ−１０−（４−ｍｅｔｈｙｌ−１−ｐｉｐｅｒａｚｉｎｙｌ）−７−ｏｘｏ−７Ｈ−ｐｙｒｉｄｏ［１，２，３−ｄｅ］［１，４］ｂｅｎｚｏｘａｚｉｎｅ−６−ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ  ａｃｉｄ  ｈｅｍｉｈｙｄｒａｔｅ］
【００９２】
【化１９】
2008231067.tif 000023
【００９３】
２）オフロキサシン［（±）−９−ｆｌｕｏｒｏ−２，３−ｄｉｈｙｄｒｏ−３−ｍｅｔｈｙｌ−１０−（４−ｍｅｔｈｙｌ−１−ｐｉｐｅｒａｚｉｎｙｌ）−７−ｏｘｏ−７Ｈ−ｐｙｒｉｄｏ［１，２，３−ｄｅ］［１，４］ｂｅｎｚｏｘａｚｉｎｅ−６−ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ  ａｃｉｄ］
【００９４】
【化２０】
2008231067.tif 000024
【００９５】
３）シタフロキサシン［（−）−７−［（７Ｓ）−７−Ａｍｉｎｏ−５−ａｚａｓｐｉｒｏ［２．４］ｈｅｐｔａｎ−５−ｙｌ］−８−ｃｈｌｏｒｏ−６−ｆｌｕｏｒｏ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−ｆｌｕｏｒｏ−１−ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ］−１，  ４−ｄｉｈｙｄｒｏ−４−ｏｘｏ−３−ｑｕｉｎｏｌｉｎｅｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ  ａｃｉｄ  ｓｅｓｑｕｉｈｙｄｒａｔｅ］
【００９６】
【化２１】
2008231067.tif 000025
【００９７】
４）化合物（ＩＩ）［（＋）−７−［（７Ｓ）−７−Ａｍｉｎｏ−７−ｍｅｔｈｙｌ−５−ａｚａｓｐｉｒｏ［２．４］ｈｅｐｔａｎ−５−ｙｌ］−６−ｆｌｕｏｒｏ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−ｆｌｕｏｒｏ−１−ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ］−１，４−ｄｉｈｙｄｒｏ−８−ｍｅｔｈｏｘｙ−４−ｏｘｏ−３−ｑｕｉｎｏｌｉｎｅｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ  ａｃｉｄ  ｈｅｍｉｈｙｄｒａｔｅ］
【００９８】
【化２２】
2008231067.tif 000026
【００９９】
なお、上記化合物（ＩＩ）は、以下の方法により製造することができる。
(１)アセト酢酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４９７ｍＬ，３．００ｍｏｌ）、１，２−ジブロモエタン（３１０ｍＬ，３．６０ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１．１０６ｋｇ，８．００ｍｍｏｌ）、およびジメチルホルムアミド（２．０Ｌ）の混合物を３０℃の水浴で１．５時間、６０℃の水浴で３．５時間、続いて３０℃の水浴で４日間加熱攪拌した。反応液をセライト濾過し、濾取物をジエチルエーテル（３．５Ｌ）で洗浄した。濾液とジエチルエーテル洗浄液をあわせて水（２Ｌ）に加え、有機層を分離した。水層からジエチルエーテル（２Ｌ）で抽出し、得られた水層に水（１Ｌ）を加えた後に、さらにジエチルエーテル（２Ｌ）で抽出した。有機層をすべて合わせた後に、１０％クエン酸水溶液（２Ｌ）、水（２Ｌ×３）、および飽和食塩水（２Ｌ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥した。乾燥剤を濾去後、溶媒を減圧溜去し、得られた残留物を減圧蒸留して１−アセチル−１−シクロプロパンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル３７１．８ｇ（１０ｍｍＨｇ，７２−７８℃の溜分，２．０２ｍｏｌ，６７％）を無色透明オイルとして得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δｐｐｍ：１．３７−１．４０（４Ｈ，ｍ），１．４９（９Ｈ，ｓ），２．４４（３Ｈ，ｓ）．
【０１００】
（２）１−アセチル−１−シクロプロパンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（９．２１ｇ，５０．０ｍｍｏｌ）を７規定アンモニア／メタノール溶液（３００ｍＬ）へ溶解し、氷冷下、濃アンモニア水（９０ｍＬ）、塩化アンモニウム（５３．５ｇ，１．００ｍｏｌ）、およびシアン化ナトリウム（４．９０ｇ，１００．０ｍｍｏｌ）を加え、その後室温で１８時間攪拌した。溶媒を減圧濃縮し、残留液へ水（１００ｍＬ）を加えた後、ジクロロメタン（３００ｍＬ＋２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層へ無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥し、乾燥剤を濾去後、溶媒を減圧溜去することによって１−（１−アミノ−１−シアノエチル）−１−シクロプロパンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル粗生成物１０．１５ｇ（４８．３ｍｍｏｌ，９７％）を薄褐色オイルとして得た。得られた粗生成物はこれ以上精製することなく次の反応に用いた。
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δｐｐｍ：１．０２−１．１２（２Ｈ，ｍ），１．１９−１．１７（２Ｈ，ｍ），１．４８（９Ｈ，ｓ），１．５０（３Ｈ，ｓ），２．１３（２Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１５５（Ｍ−ｔＢｕ）+．
【０１０１】
（３）１−（１−アミノ−１−シアノエチル）−１−シクロプロパンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．１２ｇ，５．３０ｍｍｏｌ）のエタノール溶液（５０ｍＬ）にラネーニッケル触媒（日興理化，Ｒ−１００，１０ｍＬ）のエタノール懸濁液（３０ｍＬ）を加え、水素ガス雰囲気下において室温で６時間激しく攪拌した。触媒をセライト濾過によって濾去し、溶媒を減圧溜去することによって、１−（１，２−ジアミノ−１−メチルエチル）−１−シクロプロパンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル粗生成物０．８４ｇ（３．９２ｍｍｏｌ，７４％）を無色透明オイルとして得た。得られた粗生成物はこれ以上精製することなく次の反応に用いた。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２１５（Ｍ＋Ｈ）+．
【０１０２】
（４）１−（１，２−ジアミノ−１−メチルエチル）−１−シクロプロパンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル粗生成物０．８２ｇ（３．８３ｍｍｏｌ）を室温で濃塩酸（５ｍＬ）に溶解し、同温度で３０分間攪拌した。反応液へ水を加えた後に溶媒を減圧溜去し、続いてエタノールで共沸した（２回）。１−（１，２−ジアミノ−１−メチルエチル）−１−シクロプロパンカルボン酸二塩酸塩粗生成物０．８２ｇ（３．５５ｍｍｏｌ，９３％）を薄黄色泡状固体として得た。得られた粗生成物はこれ以上精製することなく次の反応に用いた。
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δｐｐｍ：１．２０−１．２６（１Ｈ，ｍ），１．２８（３Ｈ，ｓ），１．３２−１．４３（２Ｈ，ｍ），１．５８−１．６２（１Ｈ，ｍ），３．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ），３．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１５９（Ｍ＋Ｈ）+．
【０１０３】
（５）１−（１，２−ジアミノ−１−メチルエチル）−１−シクロプロパンカルボン酸二塩酸塩粗生成物（８００ｍｇ，３．４６ｍｍｏｌ）のアセトニトリル溶液（７０ｍＬ）に、１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザン（７．３８ｍＬ，３４．６ｍｍｏｌ）を加え、窒素置換下、１００℃のオイルバスで４時間加熱還流した。室温まで冷却し、メタノール（７０ｍＬ）を加えた後に溶媒を減圧溜去することによって、７−アミノ−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−４−オン粗生成物を薄褐色ガム状固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１４１（Ｍ＋Ｈ）+．
【０１０４】
上記で得られた７−アミノ−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−４−オン粗生成物へ室温で１，４−ジオキサン（２０ｍＬ）、およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１．５２８ｇ，７．００ｍｍｏｌ）を加え、混合物を同温度で５時間攪拌した。反応液へ水（５０ｍＬ）を加え、クロロホルム（１００ｍＬ＋５０ｍＬ）で抽出した後、合わせた有機層へ無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥し、乾燥剤をショートシリカゲルカラムを用いて濾去後、溶媒を減圧溜去した。得られた残留物にジエチルエーテルを加えて懸濁させ濾取することによって、７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−４−オン５０２ｍｇ（２．０９ｍｍｏｌ，２ステップ，６０％）を白色粉末として得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δｐｐｍ：０．７７−０．８２（１Ｈ，ｍ），０．９４−１．０４（２Ｈ，ｍ），１．１６−１．２３（１Ｈ，ｍ），１．２８（３Ｈ，ｓ），１．４３（９Ｈ，ｓ），３．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ），４．１２（１Ｈ，ｍ），４．６０（１Ｈ，ｂｒｓ），５．８２（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１８５（Ｍ−ｔＢｕ）+．
【０１０５】
（６）７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−４−オン（３．１２ｇ，１２．９７ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド溶液（６５ｍＬ）に、氷冷下、水素化ナトリウム（５５％、ミネラルオイルディスパージョン、５３８ｍｇ，１２．３３ｍｍｏｌ）を５分かけて加えた。同温度で４０分間攪拌した後、臭化ベンジル（１．８５１ｍＬ，１５．５６ｍｍｏｌ）を加え、室温で１．５時間攪拌した。反応液へ酢酸エチル（３００ｍＬ）を加えて希釈し、水（１００ｍＬ×２）、および飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄した。無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥し、乾燥剤を濾去後、溶媒を減圧溜去し、得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（へキサン−酢酸エチル＝９：１→４：１→２：１）で精製することによって、５−ベンジル−７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−４−オン４．２０ｇ（１２．７１ｍｍｏｌ，９８％）を無色透明ガム状固体として得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δｐｐｍ：０．７６−０．８１（１Ｈ，ｍ），０．９３−１．０６（２Ｈ，ｍ），１．２１−１．２９（４Ｈ，ｍ），１．３７（９Ｈ，ｍ），３．１４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ），３．９２−３．９８（１Ｈ，ｍ），４．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．１Ｈｚ），４．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ），４．５６（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２２−７．３３（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３３１（Ｍ＋Ｈ）+．
【０１０６】
（７）上記（６）で得られたラセミ体の５−ベンジル−７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−４−オン（２．２５４ｇ，６．８２ｍｍｏｌ）を光学活性カラム（ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ，２０ｍｍφ×２５０ｍｍ，へキサン−イソプロピルアルコール＝９０：１０，流速＝２０ｍＬ／分，１回あたり５０ｍｇを分割）で光学分割し、（−）−５−ベンジル−７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−４−オン（９９７ｍｇ，３．０２ｍｍｏｌ，保持時間＝７．０分，［α］D25.1＝−１１３．９゜（ｃ＝０．１８０，クロロホルム））、および（＋）−５−ベンジル−７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−４−オン（９５７ｍｇ，２．９０ｍｍｏｌ，保持時間＝１１．３分，［α］D25.1＝＋１０８．８゜（ｃ＝０．２４９，クロロホルム））を得た。
【０１０７】
（８）（−）−５−ベンジル−７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−４−オン（９５０ｍｇ，２．８８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１５ｍＬ）に、室温で、トリフルオロ酢酸（７．５ｍＬ）を加え、同温度で４０分間攪拌した。溶媒を減圧溜去し、トルエンで共沸した（２回）後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３０ｍＬ）を加え、クロロホルム（１００ｍＬ＋２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層へ無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥し、乾燥剤を濾去後、溶媒を減圧溜去した。得られた残留物をテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）に溶解し、氷冷攪拌下、水素化リチウムアルミニウム（２１８ｍｇ，５．７４ｍｍｏｌ）を加え、同温度で１時間攪拌した。さらに水素化リチウムアルミニウム（１０９ｍｇ，２．８７ｍｍｏｌ）を加え、室温で２．５時間攪拌した後、再び氷冷し、水（０．３１ｍＬ）、１５％水酸化ナトリウム水溶液（０．３１ｍＬ）、および水（０．９３ｍＬ）を順に注意深く加えた。得られた混合物を室温で１晩攪拌した後、硫酸マグネシウムを加えて乾燥し、セライト濾過した。濾液を減圧濃縮することによって、７−アミノ−５−ベンジル−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン粗生成物を無色透明オイルとして得た。得られた粗生成物はこれ以上精製することなく次の反応に用いた。
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δｐｐｍ：０．３７−０．４５（２Ｈ，ｍ），０．５６−０．６６（２Ｈ，ｍ），０．９６（３Ｈ，ｓ），２．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），２．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），２．７４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），３．５９（２Ｈ，ｓ），７．２１−７．３７（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２１７（Ｍ＋Ｈ）+．
【０１０８】
上記で得られた７−アミノ−５−ベンジル−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン粗生成物をジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１．２５５ｇ，５．７５ｍｍｏｌ）を加え、室温で２２時間攪拌した。溶媒を減圧溜去した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム−メタノール−トリエチルアミン＝９８：２：１  →  ９５：５：１）で精製することによって、（−）−５−ベンジル−７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン５８６ｍｇ（１．８５２ｍｍｏｌ，３ステップ，６４％）を無色透明ガム状固体として得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δｐｐｍ：０．４０−０．４５（１Ｈ，ｍ），０．５０−０．５５（１Ｈ，ｍ），０．６３−０．６９（１Ｈ，ｍ），０．８０−０．８５（１Ｈ，ｍ），１．２０（３Ｈ，ｓ），１．４３（９Ｈ，ｓ），２．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），２．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ），２．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），３．３３（１Ｈ，ｍ），３．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ），３．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ），４．７５（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２０−７．３７（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３１７（Ｍ＋Ｈ）+．
［α］D25.1＝−６３．６゜（ｃ＝０．１２９，クロロホルム）
【０１０９】
（９）（＋）−５−ベンジル−７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−４−オン（９５０ｍｇ，２．８８ｍｍｏｌ）を用い、上記（８）と同様の方法によって、７−アミノ−５−ベンジル−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン粗生成物を無色透明オイルとして得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δｐｐｍ：０．３７−０．４５（２Ｈ，ｍ），０．５６−０．６６（２Ｈ，ｍ），０．９６（３Ｈ，ｓ），２．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），２．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），２．７４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），３．５９（２Ｈ，ｓ），７．２１−７．３７（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２１７（Ｍ＋Ｈ）+．
【０１１０】
さらに、上記で得られた７−アミノ−５−ベンジル−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン粗生成物から、上記（８）と同様の方法によって、（＋）−５−ベンジル−７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン６２９ｍｇ（１．９８５ｍｍｏｌ，３ステップ，６９％）を無色透明ガム状固体として得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δｐｐｍ：０．４０−０．４５（１Ｈ，ｍ），０．５０−０．５５（１Ｈ，ｍ），０．６３−０．６９（１Ｈ，ｍ），０．８０−０．８５（１Ｈ，ｍ），１．２０（３Ｈ，ｓ），１．４３（９Ｈ，ｓ），２．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），２．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ），２．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），３．３３（１Ｈ，ｍ），３．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ），３．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ），４．７５（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２０−７．３７（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３１７（Ｍ＋Ｈ）+．
［α］D25.1＝＋７６．２゜（ｃ＝０．２９０，クロロホルム）
【０１１１】
（１０）（−）−５−ベンジル−７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン（５８１ｍｇ，１．８３６ｍｍｏｌ）のメタノール（４０ｍＬ）溶液へ１０％パラジウム炭素触媒（Ｍ，約５０％含水，３４９ｍｇ）を加え、水素ガス雰囲気下、室温で２．５時間攪拌した。触媒をろ去後、溶媒を減圧溜去し、（−）−７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン粗生成物４３４ｍｇ（定量的）を無色透明ガム状固体として得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δｐｐｍ：０．３８−０．４３（１Ｈ，ｍ），０．５５−０．６０（２Ｈ，ｍ），０．７４−０．８０（１Ｈ，ｍ），１．０８（３Ｈ，ｓ），１．４４（９Ｈ，ｓ），２．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），２．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ），３．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ），３．７５（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），４．４４（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２２７（Ｍ＋Ｈ）+．
［α］D25.1＝−６３．５゜（ｃ＝０．２７７，クロロホルム）
【０１１２】
（１１）（＋）−５−ベンジル−７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン（６２７ｍｇ，１．９８１ｍｍｏｌ）のメタノール（４０ｍＬ）溶液へ１０％パラジウム炭素触媒（Ｍ，約５０％含水，３７６ｍｇ）を加え、水素ガス雰囲気下、室温で５時間攪拌した。触媒をろ去後、溶媒を減圧溜去し、（＋）−７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン粗生成物４５２ｍｇ（定量的）を無色透明ガム状固体として得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δｐｐｍ：０．３８−０．４３（１Ｈ，ｍ），０．５５−０．６０（２Ｈ，ｍ），０．７４−０．８０（１Ｈ，ｍ），１．０８（３Ｈ，ｓ），１．４４（９Ｈ，ｓ），２．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），２．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ），３．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ），３．７５（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），４．４４（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２２７（Ｍ＋Ｈ）+．
［α］D25.1＝＋５９．５゜（ｃ＝０．１８５，クロロホルム）
【０１１３】
（１２）上記（１０）で得られた（−）−７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン粗生成物（４３４ｍｇ，１．８３６ｍｍｏｌ）と、６，７−ジフルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロシクロプロピル］−８−メトキシ−１，４−ジヒドロ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸・ジフルオロボロン錯体（６６３ｍｇ，１．８３６ｍｍｏｌ）、並びにトリエチルアミン（０．７６８ｍＬ，５．５１０ｍｍｏｌ）をジメチルスルホキシド（５ｍＬ）に溶解し、４０℃のオイルバスで１４時間加熱攪拌した。反応液にエタノール：水＝４：１混合溶液（５０ｍＬ）およびトリエチルアミン（５ｍＬ）を加えて１００℃のオイルバスで２時間加熱還流した。反応液を減圧濃縮し、残留物を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解し、１０％クエン酸水溶液（５０ｍＬ）および水（５０ｍＬ×２）および飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧留去することによって、７−［７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロシクロプロピル］−８−メトキシ−１，４−ジヒドロ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸粗生成物８７０ｍｇ（１．６７６ｍｍｏｌ，９１％）を黄色泡状固体として得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δｐｐｍ：０．５５−０．６０（１Ｈ，ｍ），０．６８−０．７３（１Ｈ，ｍ），０．７４−０．８０（１Ｈ，ｍ），０．９２−０．９７（１Ｈ，ｍ），１．２２（３Ｈ，ｓ），１．４０（９Ｈ，ｓ），１．４３−１．５９（２Ｈ，ｍ），３．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），３．６０（３Ｈ，ｓ），３．７５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．０，３．７Ｈｚ），３．８５（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１０．２，４．５Ｈｚ），４．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ），４．４７（１Ｈ，ｍ），４．６２（１Ｈ，ｓ），４．７９−４．９９（１Ｈ，ｄｍ），７．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ），８．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ），１４．８８（０．７Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５２０（Ｍ＋Ｈ）+．
［α］D25.1＝−１２８．５゜（ｃ＝１．２４０，クロロホルム）
【０１１４】
（１３）上記（１１）で得られた（＋）−７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン粗生成物（４５２ｍｇ，１．９８１ｍｍｏｌ）、および６，７−ジフルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロシクロプロピル］−８−メトキシ−１，４−ジヒドロ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸・ジフルオロボロン錯体（７１５ｍｇ，１．９８１ｍｍｏｌ）を用いて、上記（１２）と同様の方法によって７−［７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロシクロプロピル］−８−メトキシ−１，４−ジヒドロ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸粗生成物１．００ｇ（１．９２５ｍｍｏｌ，９７％）を黄色泡状固体として得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δｐｐｍ：０．５５−０．６０（１Ｈ，ｍ），０．６８−０．８０（２Ｈ，ｍ），０．９１−０．９７（１Ｈ，ｍ），１．２１（３Ｈ，ｓ），１．４０（９Ｈ，ｓ），１．５３−１．６８（２Ｈ，ｍ），３．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ），３．６１（３Ｈ，ｓ），３．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．７，４．４Ｈｚ），３．８７−３．９３（１Ｈ，ｍ），４．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），４．４６（１Ｈ，ｍ），４．６５−４．８５（２Ｈ，ｍ），７．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ），８．７６（１Ｈ，ｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５２０（Ｍ＋Ｈ）+．
［α］D25.1＝＋１３３．２゜（ｃ＝２．２３０，クロロホルム）
【０１１５】
（１４）上記（１２）で得られた７−［７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロシクロプロピル］−８−メトキシ−１，４−ジヒドロ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（８７０ｍｇ，１．６７６ｍｍｏｌ）を氷冷下濃塩酸（１０ｍＬ）に溶解後、室温で２０分間撹拌し、反応液をクロロホルム（２０ｍＬ×５）で洗浄した。水層に氷冷下飽和水酸化ナトリウム水溶液を加えｐＨ１２．０とし、次いで塩酸でｐＨ７．４に調整後、クロロホルム：メタノール＝１０：１混合溶液（２００ｍＬ×２）、およびクロロホルム：メタノール：水＝７：３：１下層溶液（２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧留去した。得られた残留物をエタノールから再結晶精製し、減圧乾燥して化合物（ＩＩ）６４４ｍｇ（１．５３５ｍｍｏｌ，９２％）を淡桃色粉末として得た。
ｍｐ：１９５−２００℃．
［α］D25.1＝＋４０．８゜（ｃ＝０．１４７，０．１Ｎ−ＮａＯＨ）．
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，０．１Ｎ−ＮａＯＤ）δｐｐｍ：０．４９−０．５６（２Ｈ，ｍ），０．６７−０．７６（２Ｈ，ｍ），１．１２（３Ｈ，ｓ），１．４３−１．６４（２Ｈ，ｍ），３．５６（３Ｈ，ｓ），３．５９−３．７１（４Ｈ，ｍ），３．９９−４．０４（１Ｈ，ｍ），４．８０−５．０３（１Ｈ，ｍ），７．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ），８．４５（１Ｈ，ｓ）．
元素分析：Ｃ21Ｈ23Ｆ2Ｎ3Ｏ4・０．７５ＥｔＯＨ・０．５Ｈ2Ｏとして；
計算値：Ｃ，５８．３７；Ｈ，６．２０；Ｆ，８．２１；Ｎ，９．０８．
実測値：Ｃ，５８．２３；Ｈ，５．９９；Ｆ，８．０９；Ｎ，９．０２．
ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ：４１９（Ｍ+）．
ＩＲ（ＡＴＲ）：２９６４，２８４３，１７２６，１６１２，１５７２，１５３７，１４５２，１４３９，１３８７，１３６０，１３４６，１３１１，１２９４，１２６５，１２０７ｃｍ-1．
【０１１６】
［凍結乾燥製剤の調製］
注射用水（３５０ｍＬ）にレボフロキサシン（無水物として８０００ｍｇ）を溶解し、ｐＨ調節剤を加えてｐＨを７に調整した。この溶液に注射用水を加え、レボフロキサシン溶液の含量を２０ｍｇ／ｍＬに調整した。この溶液を容器に１０ｍＬずつ充填し、凍結乾燥した後、密栓した。
【０１１７】
［凍結乾燥方法（アニーリング工程あり）］
１）レボフロキサシンを含む溶液を充填した容器を、５℃に設定した凍結乾燥機の棚に積載し、
２）棚温度を、０．１５℃／分の冷却速度で−３０℃に冷却し、３時間保持した。
３）棚温度を、０．５℃／分の昇温速度で−５℃に昇温し、２時間保持した。
４）棚温度を、１．０℃／分の冷却速度で−４０℃に冷却した。
５）棚温度−４０℃で２時間以上保持した後、
６）減圧処理を開始し、棚温度を１５℃に設定して３０時間以上保持した。この間、減圧度は２０Ｐａに保持した。
７）品温が１５℃以上になった後、棚温度を２５℃に設定して６時間以上保持した。この間、減圧度は１Ｐａに保持した。
【０１１８】
［アニーリング工程なしの凍結乾燥方法］
１）レボフロキサシンを含む溶液を充填した容器を、５℃に設定した凍結乾燥機の棚に積載し、
２）棚温度を、１．０℃／分の冷却速度で−４０℃に冷却した。
３）棚温度−４０℃で２時間以上保持した後、
４）減圧処理を開始し、棚温度を１５℃に設定して３０時間以上保持した。この間、減圧度は２０Ｐａに保持した。
５）品温が１５℃以上になった後、棚温度を２５℃に設定して６時間以上保持した。この間、減圧度は１Ｐａに保持した。
【０１１９】
その他の３化合物については表４に示す条件に従い溶液を調製した後、レボフロキサシンと同様の手順で凍結乾燥した後、密栓した。
【０１２０】
［再溶解時間］
１バイアルに１０ｍＬの注射用水を加えて穏やかに振り混ぜ、内容物が完全に溶解するまでの時間を測定した。
【０１２１】
【表４】
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【図面の簡単な説明】
【０１２２】
【図１】アニーリング工程を設けた凍結乾燥方法とアニーリング工程のない凍結乾燥方法についての温度プロファイルを示す。
【図２】アニーリング工程のない凍結乾燥方法によって調製した化合物（Ｉ）の凍結乾燥製剤に再溶解液を加えたおよそ３０秒後の状態を示す。
【図３】アニーリング工程を設けた凍結乾燥方法によって調製した化合物（Ｉ）の凍結乾燥製剤に再溶解液を加えたおよそ３０秒後状態を示す。
【図４】凍結乾燥製剤に対するアニーリング工程の有無による再溶解時間の変化を示す。
【図５】化合物（Ｉ）含有水溶液（２０ｍｇ／ｍＬ）を約−４０℃に冷却して凍結させ測定したＤＳＣ測定結果を示す。
【図６】塩化ナトリウムの添加量によるＤＳＣ測定結果の違いを示す。
【図７】アニーリング工程の条件の変化による再溶解時間の変化を示す。
【図８】凍結乾燥製剤に対するアニーリング工程の有無による再溶解時間の変化を示す。
【図９】化合物（Ｉ）及びその凍結乾燥製剤の粉末Ｘ線回析測定結果を示す。
【図１０】化合物（ＩＩ）及びその凍結乾燥製剤の粉末Ｘ線回析測定結果を示す。
【図１１】シタフロキサシン及びその凍結乾燥製剤の粉末Ｘ線回析測定結果を示す。
【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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