(57)【要約】【課題】プロバイオティック微生物の導入によって、消化管の健康に利益をもたらす。【解決手段】本発明は、１種またはそれ以上のプロバイオティック微生物、１種またはそれ以上の炭水化物源、および１種またはそれ以上の抵抗性タンパク質製品を含む組成物を摂取することにより、胃腸の健康を促進する方法に関する。大腸の健康は、便重量、低い便ｐＨ、炭水化物発酵の上昇およびタンパク質発酵の改善のうちの１つまたはそれ以上により利益を受ける。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロバイオティック微生物、炭水化物源、および抵抗性タンパク質製品を含む組成物であって、該炭水化物源は、高アミロース炭水化物、高アミロース抵抗性デンプン製品、およびフルクトオリゴ糖よりなる群から選択されることを特徴とする組成物。
【請求項２】
前記プロバイオティック微生物は、ビフィディバクテリア（Ｂｉｆｉｄｉｂａｃｔｅｒｉａ）であり、前記炭水化物源は高アミロース抵抗性デンプンであり、前記抵抗性タンパク質製品はジャガイモタンパク質であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
胃腸または遠位大腸の健康を促進する、消化管で産生される便重量、骨密度または短鎖脂肪酸を増加させる、インスリン、グルコースまたは／またはミネラルの生物学的利用能を調節もしくはバランスさせる、または消化器癌、肝性脳症、前立腺癌、便秘、下痢、炎症性腸疾患、過敏性腸症、過敏性腸症候群、憩室症、痔疾、骨粗鬆症、骨折、インスリン抵抗性およびインスリン感受性よりなる群から選択される症状を予防もしくは治療する方法であって、請求項１または２の組成物を摂取することを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００６年９月１９日に出願された米国仮特許出願番号第６０／８４５，６５２号の優先権を主張する。
【０００２】
本発明は、１種またはそれ以上のプロバイオティック微生物、１種またはそれ以上の炭水化物源、および１種またはそれ以上の抵抗性タンパク質製品を含む組成物を摂取することにより、胃腸の健康を促進する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
デンプン製品は食事の重要で主要な成分である。複合炭水化物であるデンプンは、２種類の多糖分子と、アルファ‐１，４‐Ｄ‐グルコシド結合により連結されたＤ‐アンヒドログルコース単位のほぼ線状の可撓性ポリマーであるアミロースと、そしてアルファ‐１，６‐Ｄ‐グルコシド結合により連結された直鎖の分岐ポリマーであるアミロペクチンからなる。デンプンは主に小腸で酵素アルファ‐アミラーゼにより消化される。アルファ‐アミラーゼはアルファ‐１，４‐Ｄ‐グルコシド結合を加水分解するが、アルファ‐１，６‐Ｄ‐グルコシド結合は加水分解せず、従ってアミロペクチン画分の加水分解は完全ではない。
【０００４】
デンプンと繊維食のさらなる重要性が研究により証明されている。食物繊維の消費は消化上の健康に重要であり、結腸癌のようないくつかの疾患の予防または治療に有用であるとされている。一般に食物繊維は、ヒトの食物酵素による加水分解（消化）に抵抗性の植物材料の多糖と残物であると規定されており、例えば非デンプン多糖、リグニンのような成分、および糖蜜（ｗａｘ）、クチンおよびスベリンのような小成分がある。食物繊維が豊富な食物の健康上の利益の可能性のために、多くの国で食事のガイドラインにそのような食物の摂取の増加を推奨している。
【０００５】
いくつかの天然に存在するデンプンおよびいくつかのデンプン処理操作は、デンプンを膵臓アミラーゼに対して抵抗性のデンプン（単に抵抗性デンプンとして知られている）に変換できることが知られている。抵抗性デンプンは、消化性アミラーゼ（例えば膵臓アルファ‐アミラーゼ）による消化や小腸での吸収に抵抗するが、大腸まで通過し、そこで腸内微生物叢により発酵され、主に短鎖脂肪酸や気体になる。研究文献は、この腸内微生物叢による抵抗性デンプンの発酵が、腸の健康の改善、憩室症や結腸癌のような疾患の発症確率の低下などの多くの有益性を有することを示している。さらにこれは大腸に達するまで利用されず、大腸で発酵されて短鎖脂肪酸になるため、抵抗性デンプンはカロリー摂取を低下させ、これらの性質の点から食物繊維は有益である。
【０００６】
抵抗性デンプン（ＲＳ）は、文献では抵抗性の原因により４つの範疇に分類されている。ＲＳ１は、顆粒がタンパク質マトリックスまたは植物細胞壁内に捕捉されるため物理的に近づきにくいものである。ＲＳ２は、膵臓アルファ‐アミラーゼによる消化に抵抗する顆粒デンプンである。ＲＳ３は、デンプンまたはデンプン食品の熱／水分処理により生成される劣化した非顆粒デンプンである。ＲＳ４は、アルファ‐アミラーゼによる消化に抵抗する化学的に改質されたデンプンであり、デンプンエステル（例えばアセチル化）、デンプンエーテル（例えば、ヒドロキシプロピル化）、架橋デンプン（例えば、トリメタリン酸ナトリウム塩、トリポリリン酸ナトリウム塩）などがある。
【０００７】
種々のタイプの抵抗性デンプン製品を製造するための種々の方法が報告されており、例えば米国特許第５，５９３，５０３号明細書および第６，６６４，３８９号明細書に開示されている。
【０００８】
タンパク質は食事の別の主要かつ重要な部分である。タンパク質はアミノ酸からなり、成長、維持、および全身の健康のために体で利用される。タンパク質は動物起源または植物起源であり得て、食物や飼料で多くの機能的役割を与える。これらは重要な栄養物質であり、機能的（例えば風味や色）に寄与する。
【０００９】
すべてのタンパク質の消化は必ずしも同じではないことが研究で証明されている。いくつかのタンパク質は小腸での消化と吸収に抵抗し、大腸まで通過し、そこで腸内微生物叢（ｍｉｃｒｏｆｌｏｒａ）により窒素源として使用される。いくつかの抵抗性タンパク質の存在は、細菌の相対的比率を変化させる。
【００１０】
健常者の消化管の微生物叢は、病原体の侵入から宿主を防御する。しかし若年者、高齢者、および免疫無防備状態の患者では、この防御バリアはあまり有効ではない。ヒトはその健康状態には種々の程度に欠陥があり、小さなストレスや関連する事象、例えば食事の変化、感情および栄養のストレスから、極端な場合として例えば免疫無防備状態患者および放射線療法および／または化学療法を受けている患者まである。
【００１１】
プロバイオティック微生物は、抗微生物作用を示すことが記載されてきており、これは消化管中の他の微生物または微生物群へのそのプロバイオティック調製物の作用である。これらは、腸内の病原性微生物やこれらが産生する病原体に対する抵抗性の上昇のためのプロバイオティクスの使用に直接応用される。相互作用のタイプには、競合的コロニー形成ならびに接着および増殖阻害がある。
【００１２】
競合的コロニー形成は、有用なプロバイオティク株が、利用可能な栄養物質に対して、または結腸上皮のコロニー形成部位に対して、病原体との競合に勝つという事実を意味する。多くの消化管病原体はその感染の第１段階として小腸粘膜に結合するため、この接着が阻害できるなら宿主にとって有用であろう。乳酸菌が、小腸粘膜への毒素原性大腸菌の結合を阻害する化合物を産生するという報告がある。さらにプロバイオティク微生物の増殖中に産生される種々の化合物が病原体の増殖を阻害することが証明されている。これらには、乳酸や酢酸のような有機酸、ロイテリン、およびバクテリオシンがある。有機酸はｐＨを低下させ、こうして病原体の増殖に間接的に影響を与える。さらに乳酸や酢酸は微生物に対して毒性となる。非常に広範囲の細胞の増殖を阻害するロイテリンは、ラクトバシルス・ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｅｕｔｅｒｉ）によりグリセロールの存在下で培養されると産生される。多くのバクテリオシンが乳酸菌により産生されることが報告されており、例えばアシドフィリン（Ａｃｉｄｏｐｈｉｌｉｎ）、アシドリン（Ａｃｉｄｏｌｉｎ）、ラクトシジン（Ｌａｃｔｏｃｉｄｉｎ）、バクテリオシン（Ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎ）、ブルガリカン（Ｂｕｌｇａｒｉｃａｎ）、ラクトリン（Ｌａｃｔｏｌｉｎ）、ラクトバシリン（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｉｎ）およびラクトブレビン（Ｌａｃｔｏｂｒｅｖｉｎ）がある。これらは、非常に広範囲の活性を有するか、または非常に限定された範囲の密接に関連した微生物の増殖を特異的に阻害する。例えばラクトバシルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）の種は、クロストリジウム・ラモスム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｒａｍｏｓｕｍ）に対して特異的拮抗性を示す。
【００１３】
ヒトや動物の消化管の種々の領域で、異なるレベルの特異的細菌集団がある。さらに、種々の属や種の具体的な株が、消化管の場所毎に変化することが証明されている。
【００１４】
ヒトの健康が、消化管、特に大腸に棲息する微生物により正のまたは負の影響を受けると多くの科学者は考えている。これらの微生物は毒素、代謝副産物、短鎖脂肪酸などの産生を介して、宿主の生理学的相乗に影響を与える。
【００１５】
消化管の微生物叢の構成と量は、疾患、生活様式、旅行、および他の要因により誘導される症状やストレスにより影響を受ける。もし個人の健康に正の影響を与える微生物が大腸で増えるようにすると、これは宿主の生理学的健康を改善するはずである。
【００１６】
有用な微生物またはプロバイオティック微生物の導入は、微生物が生存活性のある状態で大腸に達するように、通常飲料、ヨーグルト、カプセル、および他の形態における微生物の摂取により普通は行われる。
【００１７】
驚くべきことに、１種またはそれ以上のプロバイオティック微生物、１種またはそれ以上の炭水化物源、および１種またはそれ以上の抵抗性タンパク質製品を摂取することにより、消化管の健康が利益を受けることがこの度発見された。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明は、１種またはそれ以上のプロバイオティック微生物、１種またはそれ以上の炭水化物源、および１種またはそれ以上の抵抗性タンパク質製品を含む組成物を摂取することにより消化管の健康を促進する方法に関する。大腸の健康は、便重量、低い便ｐＨ、炭水化物発酵の上昇、およびタンパク質発酵の改善の１つまたはそれ以上により利益を受ける。
【００１９】
本明細書において用語「炭水化物源」は、高アミロース炭水化物類、高アミロース抵抗性デンプン製品類、およびフルクト（ｆｒｕｃｔｏ）‐オリゴ糖類（特に限定されないがフルクト‐、ガラクト‐、マルト‐、イソマルト‐、ゲンチオ‐、キシロ‐、パラチノース‐、ダイズ‐（ラフィノースとスタキオースを含む）、キト‐、アガロ‐、ネオアガロ‐、α‐グルコ‐、β‐グルコ‐、シクロ‐イヌロ‐、グリコシルスクロース、ラクツロース、ラクトスクロース、およびキシルスクロースを含む）；そして高アミロースデンプンやフラゥア（ｆｌｏｕｒ）のような多糖類を意味する。
【００２０】
本明細書において用語「抵抗性デンプン（ＲＳ）」は、健常者の小腸により吸収されないデンプンおよびデンプン分解産物の合計として定義され、当該分野で公知の種々の試験により測定され得る。本明細書において抵抗性デンプンは、後述の試験で膵臓アルファ‐アミラーゼで処理して測定される。
【００２１】
本明細書において用語「抵抗性デンプン製品」は、５〜１００重量％の抵抗性デンプンを含有する製品として定義される。
【００２２】
本明細書において、通常のアミロースは、２５０〜１２，５００のＤ‐アンヒドログルコース単位と約２００，０００のゲル浸透クロマトグラフィー（「ＧＰＣ」）ピーク分子量を含有するアミロースを意味する。
【００２３】
本明細書において、低分子量アミロースは、約３０〜２５０のアンヒドログルコース単位と、主にアルファ‐１，４‐Ｄ‐グルコシド結合によりリンクされた約１５，０００のＧＰＣピーク分子量とを含有する実質的に線状のポリマーを意味する。
【００２４】
本明細書において、高アミロースは、実施例のセクションに詳述されている電位差測定法により測定した時、小麦または米のフラゥアについてデンプンの少なくとも約２７重量％のアミロース、および他の供給源についてデンプンの少なくとも約５０％アミロースを含有する製品を意味する。
【００２５】
本明細書において、抵抗性タンパク質は、健常者の小腸で吸収されないタンパク質およびタンパク質分解産物の合計を意味し、当該分野で公知の種々の試験により測定される。本明細書において抵抗性タンパク質は後述の試験により測定される。
【００２６】
本明細書において用語「抵抗性タンパク質製品」は、５〜１００重量％の抵抗性タンパク質を含有する製品として定義される。
【００２７】
本明細書においてプロバイオティク細菌もしくは微生物は、その微生物バランスを改善することにより宿主哺乳動物に良い影響を与える生きた微生物食物サプリメントを意味する。これは、Ｒ．Ｆｕｌｌｅｒ（エーエフアールシー食品研究所（ＡＦＲＣ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｆｏｏｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、リーディングラボラトリー（Ｒｅａｄｉｎｇ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）、英国）により、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ、１９８９、６６、３６５〜３７８頁、「ヒトと動物のプロバイオティクス−−総説」で提供されている。
【００２８】
本明細書において、プロバイオティク組成物は、すでに結腸中に存在する微生物の１つまたは限定された数の種の増殖、活性またはその両方を選択的に刺激することにより、宿主に良い影響を与える少なくとも部分的に非消化性食物成分である。
【００２９】
本明細書において、共生（ｓｙｎｂｉｏｔｉｃ）組成物は、宿主である哺乳動物（ヒトを含む）中への導入のためのヨーグルト、カプセル、または他の形態でもよく、ここでプロバイオティク物質は生きた微生物食品補助食品と組み合せて使用される。生きた微生物食品補助食品は、小腸の微生物バランスを改善することにより宿主哺乳動物に良い影響を与える。
【００３０】
本明細書において消化管は、胃、小腸、および大腸を含む。大腸は、結腸、直腸を含み、ヒトでは結腸、直腸、および盲腸を含む。
【００３１】
［発明の詳細な説明］
本発明は、１種またはそれ以上のプロバイオティック微生物、１種またはそれ以上の炭水化物源、および１種またはそれ以上の抵抗性タンパク質製品を含む組成物を摂取することにより消化管の健康を促進する方法に関する。大腸の健康は、便重量、低い便ｐＨ、炭水化物発酵の上昇、およびタンパク質発酵の改善（低下）の１つまたはそれ以上により利益を受ける。
【００３２】
プロバイオティック細菌または微生物は、摂取後に宿主哺乳動物に良い影響を与える１つまたはそれ以上の種を含み、当該分野で公知の任意の種、特に限定されないが、ビフィオバクテリウム（Ｂｉｆｉｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、例えばビフ・シュードロングム（Ｂｉｆ．Ｐｓｅｕｄｏｌｏｎｇｕｍ）、ビフ・ラクティス（Ｂｉｆ．Ｌａｃｔｉｓ）、ビフ・ロングム（Ｂｉｆ．Ｌｏｎｇｕｍ）、ビフ・インファンティス（Ｂｉｆ．Ｉｎｆａｎｔｉｓ）、およびビフ・ビフィヅム（Ｂｉｆ．ｂｉｆｉｄｕｍ）；バクテロイズ（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｓ）、例えばバクト・ブルガツス（Ｂａｃｔ．Ｖｕｌｇａｔｕｓ）およびバクト・フラジリス（Ｂａｃｔ．Ｆｒａｇｉｌｉｓ）；クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、例えばシーエル・ブチリクム（Ｃｌ．ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）；ユーバクテリア（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉａ）；フソバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）；プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）；ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）；腸球菌（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）；ラクトコッカス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）；スタフィロコッカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）；ペプトストレプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）；およびラクトバシルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、例えばラクトバシルス・アシドフィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）がある。プロバイオティック微生物はまた、サッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）のような酵母を含む。しかし本発明はこれらの具体的な微生物に限定されるものではない。ある実施態様においてプロバイオティック微生物はビフィドバクテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）である。
【００３３】
使用される炭水化物源は、当該分野で公知の任意の炭水化物源であり、特に限定されないが、デンプン類、フラゥア類、穀粒類、豆果類、多糖類およびオリゴ糖類がある。炭水化物源は、高アミロース炭水化物類、高アミロース抵抗性デンプン製品類、およびフルクトオリゴ糖類から選択される。ある実施態様において炭水化物源は、少なくとも部分的に消化に抵抗し、酪酸塩が産生されるように発酵されるものである。本発明の１つの態様において、使用される炭水化物源は抵抗性デンプン製品であり、ＲＳ１、ＲＳ２、ＲＳ３およびＲＳ４タイプを含む。本発明の別の態様において、炭水化物源は高アミロース抵抗性デンプン製品である。本発明のさらに別の態様において、炭水化物源はフルクトオリゴ糖である。
【００３４】
抵抗性デンプン製品は、天然に存在するものまたは天然に存在するものから作成されるものを使用して作成されるものである。本明細書において未変性のデンプンは、天然に存在するようなものである。また通常の品種改良法（例えば異種交配）、転座、転置、形質転換、または任意の他の遺伝子もしくは染色体工学作成法により植物またはこれらの変種から得られるデンプンも適している。さらに公知の標準的突然変異育種法により産生される上記遺伝的組成物の誘導された変異体や変種から培養された植物からのデンプンも本発明で適している。
【００３５】
典型的なデンプン源は、穀類、塊茎、根、豆果、および果実である。天然の供給源は、トウモロコシ、エンドウ、ジャガイモ、サツマイモ、バナナ、大麦、小麦、米、サゴ、アマランス、タピオカ、クズウコン、カンナ、またはモロコシ、ならびにこれらの高アミロペクチンまたは高アミロース変種がある。本明細書において用語「高アミロペクチン」は、少なくとも約９０重量％、特に少なくとも約９５重量％、さらに詳しくは少なくとも約９８重量％のアミロペクチンを含有するデンプンを含む。本明細書において、用語「高アミロース」は、小麦または米のフラゥアについて少なくとも約２７重量％のアミロース、他の供給源については、少なくとも約５０重量％のアミロース、詳しくは少なくとも約７０、さらに詳しくは少なくとも約８０重量％のアミロペクチンを含有するデンプンを含む。
【００３６】
ある実施態様において使用される炭水化物源は、アミロースエキステンダー遺伝子型を有する植物源から抽出され、かかる物質のデンプンは約１０重量％未満のアミロペクチンを含む。この物質は植物育種集団（特にトウモロコシ）から得られ、これは生殖質選択物の遺伝的複合体であり、ブタノール分画／排除クロマトグラフィー法により測定すると少なくとも７５重量％のアミロースを含み、ある実施態様において少なくとも８５重量％の通常アミロースを含む。デンプンはさらに、約１０重量％未満、ある実施態様において５重量％未満のアミロペクチンを含み、さらに約８〜２５重量％の低分子量アミロースを含む。デンプンは、劣性アミロースエキステンダー遺伝子型を多くのアミロースエキステンダー変更遺伝子とともに有するデンプン産生植物の穀粒から抽出される。このデンプンと調製法は、米国特許第５，３００，１４５号明細書（これは参照することにより本明細書に組み込まれる）に記載されている。
【００３７】
ある実施態様において使用される炭水化物源は高アミロース抵抗性デンプン製品である。ある実施態様において、抵抗性デンプン製品は、化学的、物理的および／または酵素的に処理もしくは改質されたデンプンである。
【００３８】
別の実施態様において使用される抵抗性デンプン製品は、ＲＳ２型の抵抗性デンプンを含むものであり、抵抗性デンプンの重量％を増加させるために熱−水分処理により改質したもの、高アミロース炭水化物物質中に典型的に存在するもの、および／または米国特許第５，５９３，５０３号明細書および５，９０２，４１０号明細書に記載のものを含む。さらに別の実施態様において使用される炭水化物源は、ＲＳ３型の抵抗性デンプンを含むものであり、米国特許第５，２８１，２７６号明細書および５，４０９，５４２号明細書に記載のものを含む。さらなる実施態様において使用される炭水化物源は、ＲＳ４型の抵抗性デンプンを含むものであり、酸化、架橋、エーテル化、エステル化、酸性化、デキストリン化、およびこれらの混合よりなる群から選択される化学的改質デンプン、および米国特許第５，８５５，９４６号明細書に記載のものを含む。さらなる実施態様において抵抗性デンプンの酵素感受性の程度は、デンプンのコンフォメーションまたは構造を、例えば酸または酵素低粘稠化および２官能性試薬を使用する架橋により変化させて、改質される。さらに別の実施態様において高アミロース抵抗性デンプンのアミロース分解は修飾されて、表面から顆粒の内部まで延長する孔または侵食を特徴とするデンプン顆粒を与える。これらの孔は、酵素がデンプン顆粒のより酵素感受性の芯まで侵入することを可能にして、デンプンが可溶化される。低アミロースまたは通常アミロース含有デンプンはまた、特にこれらが未変性の型で摂取される時、または同じ方法（例えば、部分的、熱水、酵素的、酸、化学的など）で改質される時に、ＲＳの供給源となる。
【００３９】
さらなる実施態様において使用される炭水化物源はオリゴ糖であり、さらに別の実施態様において炭水化物源はフルクト‐オリゴ糖である。本発明での使用に適したフルクト‐オリゴ糖には、消費に適した任意のフルクト‐オリゴ糖がある。現在利用可能な市販のフルクト‐オリゴ糖類には、特に限定されないが、フルクト‐、ガラクト‐、マルト‐、イソマルト‐、ゲンチオ‐、キシロ‐、パラチノース‐、ダイズ‐（ラフィノースとスタキオースを含む）、キト‐、アガロ‐、ネオアガロ‐、アルファ‐グルコ‐、β‐グルコ‐、シクロ‐イヌロ‐、グリコシルスクロース、ラクツロース、ラクトスクロース、およびキシルスクロースがある。しかし本発明の組成物には他のオリゴ糖も適していることを当業者は理解するであろう。
【００４０】
タンパク質源は任意の抵抗性デンプン製品であり、単一のまたは複数の細胞の動物もしくは植物起源のものを含む。抵抗性タンパク質製品には、特に限定されないが、肉、魚、トウモロコシ、コメ、小麦、オート麦、キビ、エンドウ、ピーナツ、ダイズ、サゴ、カッサバ、クズウコン、サトイモ、および豆からのタンパク質がある。ある実施態様において抵抗性タンパク質製品は植物起源である。別の実施態様においてタンパク質源は合成品であり、オリゴメチオニンを含む。さらに別の実施態様において抵抗性デンプン製品は穀類源由来であり、およびさらに別の実施態様ではジャガイモ由来である。タンパク質源はまた、フラゥア、抽出物、または単離物でもよい。
【００４１】
本発明の１つの態様において、プロバイオティック微生物はビフィディバクテリア（Ｂｉｆｉｄｉｂａｃｔｅｒｉａ）であり、炭水化物源は高アミローストウモロコシ抵抗性デンプンであり、抵抗性タンパク質製品は単離物の形のジャガイモタンパク質である。
【００４２】
組成物の各成分は任意の比率で存在し得る。ある実施態様において、プロバイオティク物質は、１０ｇの組成物につき約１０4〜１０12ＣＦＵのプロバイオティック微生物の量で存在し、ある実施態様においては１０ｇのプロバイオティック微生物／炭水化物源／抵抗性タンパク質組成物につき約１０6〜１０11ＣＦＵのプロバイオティック微生物の量で存在し、さらに別の実施態様においては１０ｇのプロバイオティック微生物／炭水化物源／抵抗性タンパク質組成物につき約１０8〜１０10ＣＦＵのプロバイオティック微生物の量で存在する。ある実施態様において、炭水化物源は、１０ｇのプロバイオティック微生物／炭水化物源／抵抗性タンパク質組成物につき約０．５ｇ〜約９．５ｇの量で存在し、ある実施態様においては、１０ｇのプロバイオティック微生物／炭水化物源／抵抗性タンパク質組成物につき約１ｇ〜約８ｇの量で存在し、さらに別の実施態様においては、１０ｇのプロバイオティック微生物／炭水化物源／抵抗性タンパク質組成物につき約５ｇ〜約７ｇの量で存在する。ある実施態様において、抵抗性タンパク質は、１０ｇのプロバイオティック微生物／炭水化物源／抵抗性タンパク質組成物につき約０．５ｇ〜約９．５ｇの量で存在し、ある実施態様においては、１０ｇのプロバイオティック微生物／炭水化物源／抵抗性タンパク質組成物につき約１ｇ〜約６ｇの量で存在し、さらに別の実施態様においては、１０ｇのプロバイオティック微生物／炭水化物源／抵抗性タンパク質組成物につき約２ｇ〜約４ｇの量で存在する。
【００４３】
その組成物は、哺乳動物（ヒトを含む）により摂取されて消化管の健康（ある実施態様において大腸の健康、別の実施態様において遠位腸の健康）を促進する。大腸の健康は、便重量、低い便ｐＨ、炭水化物発酵の上昇、およびタンパク質発酵の低下の１つまたはそれ以上により利益を受ける。低い便ｐＨは、短鎖脂肪酸（特に酢酸塩および酪酸塩）含量の増加およびアンモニアの減少による。炭水化物発酵の副産物は有用であるが、タンパク質の発酵の副産物はあまり有用ではないため、タンパク質発酵より炭水化物発酵が好ましい。組成物の摂取はまた、酪酸塩対アンモニアの最大比率と便重量とクレゾールの最大比率を低下させた。この組成物は、消化器癌、肝性脳症、前立腺癌、便秘、下痢、炎症性腸疾患、過敏性腸症、過敏性腸症候群、憩室症、痔疾、骨粗鬆症、骨折、インスリン抵抗性およびインスリン感受性を予防および／または治療するのに使用される。組成物はまた、骨密度を増加させ、インスリン、グルコースおよびミネラル生物学的利用能／バランスを調節するのにも使用される。
【００４４】
本発明の組成物は、任意の食物または飲料（以後では、まとめて食品と呼ぶ）で使用される。ある実施態様において食品は、培養された酪農製品、例えばヨーグルト、チーズ、およびサワークリームである。組成物は官能的および生理学的観点から摂取するヒトに許容される任意の量で添加され、ある実施態様において食品の約０．１〜５０重量％の量で、別の実施態様においては食品の約１〜２５重量％で使用される。
【００４５】
組成物はまた、医薬品または栄養製品で使用され、特に限定されないが、共生組成物、糖尿病食と補助食品、糖尿病食品、血糖応答および血糖指数を制御する食品、および錠剤や他の薬剤剤形がある。
【００４６】
組成物は、家畜またはペットの飼料に使用してもよい。
【００４７】
［実施態様］
以下の実施態様は、本発明を例示し説明するためであり、決してこれを限定するものではない。
【００４８】
１．  プロバイオティック微生物、炭水化物源、および抵抗性タンパク質製品を含む組成物であって、炭水化物源は、高アミロース炭水化物、高アミロース抵抗性デンプン製品、およびフルクト‐オリゴ糖よりなる群から選択されるものである、組成物。
２．  プロバイオティック微生物、炭水化物源、および抵抗性タンパク質製品よりなる群から選択される２つの成分を含有する第１の部分と、残りの成分を含む第２の成分とを含む、２部組成物。
３．  プロバイオティック微生物を含む第１の部分、炭水化物源を含む第２の部分、および抵抗性デンプン製品を含む第３の部分を含むことを特徴とする、３部組成物。
４．  プロバイオティック微生物は、ビフィオバクテリウム（Ｂｉｆｉｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、バクテロイズ（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、ユーバクテリア（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉａ）、フソバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、腸球菌（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ラクトコッカス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）、スタフィロコッカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、ペプトストレプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ラクトバシルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、およびサッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）よりなる群から選択されるものである、上記１の実施態様。
５．  プロバイオティック微生物はビフィオバクテリウム（Ｂｉｆｉｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）である、実施態様項１の組成物。
６．  抵抗性デンプン製品は高アミロース抵抗性デンプン製品である、実施態様１の組成物。
７．  高アミロース抵抗性デンプン製品は、化学的、物理的、および／または酵素的に処理または改質されたデンプンである、実施態様６の組成物。
【００４９】
８．  抵抗性デンプン製品は化学的に修飾されたデンプンであり、ここで化学反応は、酸化、架橋、エーテル化、エステル化、酸性化、デキストリン化、およびこれらの混合よりなる群から選択されるものである、実施態様７の組成物。
９．  抵抗性デンプン製品は、製品の重量％を増加させるために熱‐水分処理により物理的に改質されているデンプンである、実施態様７の組成物。
１０．  抵抗性タンパク質製品はジャガイモタンパク質である、実施態様１の組成物。
１１．  プロバイオティック微生物はビフィディバクテリア（Ｂｉｆｉｄｉｂａｃｔｅｒｉａ）であり、炭水化物源は高アミロース抵抗性デンプンであり、抵抗性タンパク質製品はジャガイモタンパク質である、実施態様１の組成物。
１２．  １０ｇのプロバイオティック微生物／炭水化物源／抵抗性タンパク質組成物につき、プロバイオティク微生物は約１０4〜１０12ＣＦＵの量で存在し、炭水化物源は約０．５ｇ〜約９．５ｇの量で存在し、抵抗性タンパク質製品は約０．５ｇ〜約９．５ｇの量で存在する、実施態様１または１１の組成物。
１３．  １０ｇのプロバイオティック微生物／炭水化物源／抵抗性タンパク質組成物につき、プロバイオティク微生物は約１０8〜１０10ＣＦＵの量で存在し、炭水化物源は約５ｇ〜約７ｇの量で存在し、抵抗性タンパク質は約２ｇ〜約４ｇの量で存在する、実施態様１または１１の組成物。
【００５０】
１４．  組成物は、食物、飲料、医薬品、および栄養物質よりなる群から選択されるものである、実施態様１または１１の組成物。
１５．  実施態様１または１１の組成物を摂取することを含む、消化管の健康を促進する方法。
１６．  実施態様１または１１の組成物を摂取することを含む、遠位大腸の健康を促進する方法。
１７．  便重量を増加させ、便ｐＨを低下させ、炭水化物発酵を上昇させ、および／またはタンパク質発酵を低下させる、実施態様１６の方法。
１８．  実施態様１または１１の組成物を摂取することを含む、消化管で産生される短鎖脂肪酸の量を増加させる方法。
１９．  実施態様１または１１の組成物を摂取することを含む、消化管で産生される酢酸塩、プロピオン酸塩、および酪酸塩よりなる群から選択される短鎖脂肪酸の量を増加させる方法。
２０．  実施態様１または１１の組成物を摂取することを含む、消化管で産生される酪酸塩の量を増加させる方法。
２１．  実施態様１または１１の組成物を摂取することを含む、便重量を増加させる方法。
２２．  実施態様１または１１の組成物を摂取することを含む、消化器癌、肝性脳症、前立腺癌、便秘、下痢、炎症性腸疾患、過敏性腸症、過敏性腸症候群、憩室症、痔疾、骨粗鬆症、骨折、インスリン抵抗性およびインスリン感受性を予防または治療する方法。
２３．  実施態様１または１１の組成物を摂取することを含む、骨ミネラル密度を増加させる方法。
２４．  実施態様１または１１の組成物を摂取することを含む、インスリン、グルコースおよび／またはミネラル生物学的利用能を調節またはバランスさせる方法。
【実施例】
【００５１】
以下の例は本発明を例示し説明するためであり、決してこれを限定するものではない。特に明記しない場合は、すべての部およびパーセントは重量で与えられ、すべての温度は摂氏度（℃）で与えられる。
【００５２】
以下の成分が実施例で使用された。
１）抵抗性デンプン含量が６５％である、高アミローストウモロコシからの抵抗性デンプン製品（ナショナルスターチ・アンド・ケミカルカンパニー（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｔａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、アメリカ合衆国、から販売されている）。
２）抵抗性タンパク質含量が１６．０％である、ジャガイモから単離された抵抗性タンパク質製品（ホクレン社（Ｈｏｋｕｒｅｎ  Ｃｏ．）、日本、から販売されている）；ｐＨを５．０〜５．５に調整後、蒸気凝固させてジャガイモジュースから調製した。
３）ビフィドバクテリウム・ラクティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  Ｌａｃｔｉｓ）（ＬＡＦＴＩ  Ｂ９４）、１０10ＣＦＵ／ｇ（ディーエスエムスペシャリティーズ（ＤＳＭ  Ｓｐｅｃｉａｌｉｔｉｅｓ）、オーストラリア、から販売されている）。
【００５３】
実施例全体を通して以下の試験法を使用した。
【００５４】
Ａ．  消化のシミュレーション  −  （Ｅｎｇｌｙｓｔら、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，１９９２，４６：Ｓ３３‐Ｓ５０から改変）
食物を咀嚼したかのように食物試料を粉砕／分割する。粉末デンプン試料を粒子サイズ２５０ミクロンまたはそれ以下にスクリーニングする。５００〜６００ｍｇ±０．１ｍｇの試料を計量し、試料試験管に加える。各試験管に１０ｍｌのペプシン（０．５％）、グアールガム（０．５％）、およびＨＣｌ（０．０５Ｍ）を加える。
【００５５】
ブランク試験管とグルコース標準物質試験管とを調製する。ブランクは、０．２５Ｍ酢酸ナトリウムと０．０２％塩化カルシウムとを含有する２０ｍｌの緩衝液である。グルコース標準物質は、１０ｍｌの酢酸ナトリウム緩衝液（上記）と１０ｍｌの５０ｍｇ／ｍｌグルコース溶液とを混合して調製される。標準物質は二重で調製する。
【００５６】
酵素混合物は、１８ｇのプタパンクレアチン（シグマ（Ｓｉｇｍａ）、Ｐ−７５４５）を１２０ｍｌの脱イオン水に加え、充分混合し、次に３０００ｇで１０分間遠心分離して調製される。上清を採取し、４８ｍｇの乾燥インベルターゼ（シグマ（Ｓｉｇｍａ）、Ｉ−４５０４）と０．５ｍｌのＡＭＧＥ（ノボノルディスク（Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ））を加える。
【００５７】
試料試験管を３７℃で３０分前インキュベートし、次に浴から取り出し、ガラスボール／ビー玉（振盪中の試料の物理的分解を助けるため）とともに１０ｍｌの酢酸ナトリウム緩衝液を加える。
【００５８】
５ｍｌの酵素混合物を試料、ブランク、標準物質に加える。試験管を３７℃の水浴中で約１８０ストローク／分で水平に振盪する。「ゼロ」時間は、酵素混合物を最初の試験管に加えた時間である。
【００５９】
１２０分後、インキュベート試料から０．５ｍｌのアリコートを取り、２０ｍｌの６６％エタノール（反応を停止させるため）の別の試験管に入れる。１時間後、アリコートを３０００ｇで１０分遠心分離する。
【００６０】
試験管中のグルコース濃度をグルコースオキシダーゼ／ペルオキシダーゼ法を使用して測定する（メガザイムグルコース測定法（Ｍｅｇａｚｙｍｅ  Ｇｌｕｃｏｓｅ  Ａｓｓａｙ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ）ＧＬＣ９／９６）。これは比色法である。
【００６１】
デンプン消化の程度は、変換係数０．９を使用して、グルコース標準物質に対してグルコース濃度を計算して決定する。抵抗性デンプンの量は、１００％から１２０分目の消化されたデンプン％（乾燥重量ベース）を引いて求められる。
【００６２】
すべての試料分析バッチは未調理のコーンスターチの参照試料を含む。コーンスターチの％消化値の許容範囲は以下の通りである：
【００６３】
【表１】
2008081501.tif 000002
すなわち、コーンスターチは約２０％の抵抗性デンプンを含有する。
【００６４】
Ｂ．  電位差滴定法によるアミロース含量
０．５ｇのデンプン（１．０ｇの粉砕穀粒）試料を１０ｍｌの濃縮塩化カルシウム（約３０重量％）中で、９５℃で３０分加熱した。試料を室温まで冷却し、５ｍｌの２．５％酢酸ウラニル溶液で希釈し、充分混合し、２０００ｒｐｍで５分間遠心分離した。次に試料をろ過して清澄な溶液を得た。デンプン濃度を１ｃｍの旋光分析セルを使用して旋光分析により測定した。次に試料のアリコート（通常５ｍｌ）を直接標準化０．０１Ｎヨード溶液を用いて滴定し、ＫＣｌ参照電極を有する白金電極を使用して電位を測定した。変曲点に達するのに必要なヨードの量を直接結合ヨードとして測定した。アミロースの量は、１．０ｇのアミロースが２００ミリグラムのヨードに結合すると仮定して計算した。
【００６５】
Ｃ．  タンパク質消化性の測定
タンパク質消化性は、ウィスターラットを用いてカゼインを参照タンパク質として使用してインビボで測定した。ラットを個々に金属スクリーンのあるケージに入れ、タンパク質不含食、１０％タンパク質単離食、および１０％カゼイン食の３つの食事のうちの１つを１０日間与えた。食物摂取と体重を毎日記録し、実験期間の最後の３日間便を採取した。食事の窒素摂取と便窒素を測定した。
【００６６】
抵抗性タンパク質（％）＝１００−真のタンパク質消化性（％）
ここで、タンパク質消化性（％）＝［窒素摂取−（排泄された便窒素−タンパク質不含食事で排泄された便窒素）］／窒素摂取×１００
【００６７】
【表２】
2008081501.tif 000003
【００６８】
Ｄ．  ラット試験；プロバイオティク／非プロバイオティク組合せの作用
オスのスプラーグ−ドーレイラットを、底がワイアスクリーンになったプラスチックケージに入れた。１群１２匹のラットに８種類の食事の１つを４週間与えた。食事は改質ＡＩＮ−７６食（下表を参照）であり、繊維不含食からなるか、または３成分を、個々に、２部組合せとして、または３部組合せとして加えた同じ食餌であった。タンパク質単離物をカゼインの代わりに加え（食事の１９％）、高アミロース抵抗性デンプン製品を正規のコーンスターチの代わりに加え（食事の１０％）、プロバイオティク物質を食事の１％で加えた。
【００６９】
【表３】
2008081501.tif 000004
【００７０】
実験期間の最後に、各ラットについて３日間新鮮な便試料を採取した。最終日に各ラットを屠殺し、大腸を取り出し、切片にし、以後の分析のためにきれいにした。大腸の内容物も以後の分析のために除去した。
【００７１】
測定したパラメータは、（１）便重量、ｐＨ、短鎖脂肪酸（ＳＣＦＡ）（総、酢酸塩、プロピオン酸塩、および酪酸塩、およびアンモニアを含む；（２）尿−クレゾール（以下の表参照）を含んだ。
【００７２】
３部組合せを有する食事（食事８）を食べたラットは、繊維不含食または１部または２部組合せを食べたラットより、便重量が多く便ｐＨは低かった。さらに便酪酸塩：アンモニア、便重量：アンモニア、および便重量：尿クレゾールの比は、３部組合せが最大であった。総短鎖脂肪酸ならびに酢酸塩および酪酸塩の濃度は、３部組合せで高かった。全体に食餌８（３部組合せ）は、どの組合せより測定したパラメータに対する影響が大きかった。
【００７３】
【表４】
2008081501.tif 000005
【００７４】
以下の特許請求の範囲において、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、その後の要素を含むが、その他を排除はせず、制限は無いことを意味する。
【外国語明細書】
2008081501000001.pdf