(57)【要約】  【課題】  免疫抑制を惹き起こすことなく、滑膜細胞の増殖を抑制可能な滑膜細胞増殖抑制剤、並びに感染症に対する抵抗性を低下させずに、滑膜細胞増殖が関与する疾患を治療する薬用組成物及び治療方法を提供する。  【解決手段】  下記構造式（１）で表される化合物であるフラボピリドール（ｆｌａｖｏｐｉｒｉｄｏｌ）、及びその医薬的に許容される塩のいずれかを有効成分とすることを特徴とする滑膜細胞増殖抑制剤である。また、該滑膜細胞増殖抑制剤を少なくとも含むことを特徴とする薬用組成物である。【化４】2008255008.tif 000005  【選択図】        なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記構造式（１）で表される化合物であるフラボピリドール（ｆｌａｖｏｐｉｒｉｄｏｌ）、及びその医薬的に許容される塩のいずれかを有効成分とすることを特徴とする滑膜細胞増殖抑制剤。
【化１】
2008255008.tif 000004
【請求項２】
請求項１に記載の滑膜細胞増殖抑制剤を少なくとも含むことを特徴とする薬用組成物。
【請求項３】
抗関節リウマチ剤、抗変形性関節症剤、抗乾癬性関節炎剤、及び抗痛風剤の少なくともいずれかである請求項２に記載の薬用組成物。
【請求項４】
関節リウマチ、変形性関節症、抗乾癬性関節炎、及び痛風の少なくともいずれかの治療に用いられる請求項２に記載の薬用組成物。
【請求項５】
少なくとも請求項１に記載の滑膜細胞増殖抑制剤を投与し、関節リウマチ、変形性関節症、抗乾癬性関節炎、及び痛風の少なくともいずれかを治療することを特徴とする治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フラボピリドール（ｆｌａｖｏｐｉｒｉｄｏｌ）、及びその医薬的に許容される塩のいずれかを有効成分とする滑膜細胞増殖抑制剤、該滑膜細胞増殖抑制剤を含む薬剤組成物、並びに前記滑膜細胞増殖抑制剤を用いた治療方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
関節滑膜は、元来、一層の滑膜細胞からなるが、何らかの炎症機転によって滑膜細胞が過度に増殖し、滑膜増生を来すことがある。
増生した滑膜では滑膜細胞が活性化し、該滑膜細胞からさまざまな炎症性メディエーターや、組織破壊性蛋白分解酵素が産生される。この一連の炎症反応は、増殖性滑膜炎と称され、該増殖性滑膜炎の結果、軟骨変性や骨組織破壊等の重大な機能障害がもたらされる。このような滑膜細胞の増殖がその病態に関与する疾病としては、例えば、関節リウマチ、変形骨関節症、乾癬性関節炎、及び痛風などが知られている。
【０００３】
前記関節リウマチは、自己免疫疾患のひとつで、リンパ球等からの炎症性メディエーター（例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α等）が関節近傍において過剰に存在することにより、組織の炎症や骨破壊が進行し、病態が現れる疾患である。その病因のひとつとして、前記滑膜細胞の増殖が挙げられているが、その病因は複数存在すると考えられているため、多面的な治療方法が求められており、複数の戦略での治療薬の開発が望まれている。
【０００４】
従来、関節リウマチの治療方法としては、鎮痛剤及び抗炎症剤の投与による対症療法が行われてきたが、対症療法では、発症を遅延させることは可能であっても、症状の進行を停止し、さらには疾患自体を治癒させることは不可能であった。
これに対し、近年、元来抗癌剤として用いられていた薬剤の一部がリンパ球増殖抑制剤としても効果があることに基づき、これらを投与することにより、さらに抗ＴＮＦ−α抗体を併用して治療を行うことにより、炎症が治まり、場合によっては疾病の進行が停止し、疾病の改善率や治癒率が上昇することが報告されている。
しかしながら、これらの薬剤の投与は、治療効果が高い一方で、リンパ球増殖抑制による免疫抑制効果も高いため、投与された患者は常に免疫抑制状態となり、感染等に極めて弱い状況となるという問題がある。
【０００５】
前記抗癌剤、抗ＴＮＦ−α抗体の他、炎症を抑えることにより関節リウマチを治療する薬剤は複数存在するが、例えば、特定の患者には非常に有効であっても、他の患者には効果が低いという薬剤も多く、汎用性が高く、かつ完全な治癒効果を示す薬剤は未だ知られていない。
【０００６】
一方、関節リウマチの治療薬のひとつとして、その病因のひとつである前記滑膜細胞の増殖を抑制する薬剤（滑膜細胞増殖抑制剤）が提案されている。
前記滑膜細胞増殖抑制剤としては、例えば、滑膜細胞のアポトーシスを誘導することにより滑膜細胞の増殖を抑制するものとして、ジテルペン化合物（特許文献１参照）、ＦＡＤＤ遺伝子（特許文献２参照）、Ｆａｓリガンド（特許文献３参照）、抗Ｆａｓ抗体（特許文献４参照）、及び３，６−アンヒドロガラクトース及びその誘導体（特許文献５参照）等、滑膜細胞とコラーゲンとの接着阻害により滑膜細胞の増殖を抑制剤するものとして、イミダゾール誘導体（特許文献６参照）、キノリン誘導体及びキノロン誘導体（特許文献７参照）等が提案されている。これらの他にも、前記滑膜細胞増殖抑制剤として、ヒアルロン酸と亜鉛の会合物（特許文献８参照）、キノロンカルボン酸誘導体（特許文献９参照）、乳ホエータンパク中の物質（特許文献１０参照）、ｂＦＧＦアンタゴニスト（特許文献１１参照）、ＩＬ−６アンタゴニスト（特許文献１２参照）、ｃＡＭＰ誘導体（特許文献１３参照）、ビタミンＤ３及びその誘導体（特許文献１４参照）、ｃ−ｅｒｂＢ−２活性阻害剤（特許文献１５参照）、γ−セクレターゼ様プロテアーゼ阻害剤（特許文献１６）等が提案されている。
【０００７】
これらの滑膜細胞増殖抑制剤は、関節リウマチのみならず、変形性関節症、乾癬性関節炎、及び痛風等の滑膜細胞の増殖が関与する疾患の発症予防、症状の軽減、重篤化の抑制の有用物質として期待される。
しかしながら、リンパ球増殖や活性化を抑制することなく、即ち、免疫抑制を惹き起こすことなく、滑膜細胞の増殖を抑制可能な滑膜細胞増殖抑制剤、感染症に対する抵抗性を低下させずに、滑膜細胞増殖が関与する疾患を治療する薬用組成物及び治療方法は、未だ見出されていないのが現状である。
【０００８】
【特許文献１】特開２００４−１６８７１３号公報
【特許文献２】特開２０００−１９８７３７号公報
【特許文献３】特開平１１−０６０５０１号公報
【特許文献４】特開平０８−２０８５１５号公報
【特許文献５】ＷＯ９９／０６４４２４号公報
【特許文献６】特開２００３−０４０８８８号公報
【特許文献７】特開２００２−３７１０７８号公報
【特許文献８】特開２００３−０８９６４７号公報
【特許文献９】特開２００２−２９３７４５号公報
【特許文献１０】特開２００１−０１１０９４号公報
【特許文献１１】特開２０００−２２９８８３号公報
【特許文献１２】特開平０８−２０８５１４号公報
【特許文献１３】特開平０７−３２４０３５号公報
【特許文献１４】特開平０７−１４５０６２号公報
【特許文献１５】ＷＯ０１／０７６６３０号公報
【特許文献１６】ＷＯ０１／０７２３２１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、前記要望に応え、従来における問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、リンパ球増殖や活性化を抑制することなく、即ち、免疫抑制を惹き起こすことなく、滑膜細胞の増殖を抑制可能な滑膜細胞増殖抑制剤、並びに感染症に対する抵抗性を低下させずに、滑膜細胞増殖が関与する疾患を治療する薬用組成物及び治療方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
前記課題を解決するために本発明者らが鋭意検討した結果、以下の知見を得た。即ち、フラボピリドール（ｆｌａｖｏｐｉｒｉｄｏｌ）が、滑膜細胞増殖に強い抑制活性を示す一方で、リンパ球の活性には影響を与えないという知見である。
フラボピリドールは、癌細胞に対するアポトーシスを誘導するフラボノイドとして、マホガニー科のＤｙｓｏｘｙｌｕｍ ｂｉｎｅｃｔａｒｉｆｅｒｕｍという樹皮から抽出された成分をヒントに合成された新規なフラボノイドであり、その生理活性としては、サイクリン依存性キナーゼ阻害活性、平滑筋増殖阻害活性等が知られている。
しかしながら、フラボピリドールが、リンパ球の活性化や増殖を抑制することなく、滑膜細胞の増殖を抑制することは全く知られておらず、本発明者らの新たな知見である。
【００１１】
本発明は、本発明者らによる前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段は、以下の通りである。即ち、
＜１＞  下記構造式（１）で表される化合物であるフラボピリドール（ｆｌａｖｏｐｉｒｉｄｏｌ）、及びその医薬的に許容される塩のいずれかを有効成分とすることを特徴とする滑膜細胞増殖抑制剤である。
【化２】
2008255008.tif 000002
【００１２】
＜２＞  前記＜１＞に記載の滑膜細胞増殖抑制剤を少なくとも含むことを特徴とする薬用組成物である。
＜３＞  薬学的に許容される担体を含む前記＜２＞に記載の薬用組成物である。
＜４＞  抗関節リウマチ剤、抗変形性関節症剤、抗乾癬性関節炎剤、及び抗痛風剤の少なくともいずれかである前記＜２＞から＜３＞のいずれかに記載の薬用組成物である。
＜５＞  関節リウマチ、変形性関節症、抗乾癬性関節炎、及び痛風の少なくともいずれかの治療に用いられる前記＜２＞から＜３＞のいずれかに記載の薬用組成物である。
【００１３】
＜６＞  少なくとも前記＜１＞に記載の滑膜細胞増殖抑制剤を投与し、関節リウマチ、変形性関節症、抗乾癬性関節炎、及び痛風の少なくともいずれかを治療することを特徴とする治療方法である。
＜７＞  前記＜２＞から＜５＞に記載の滑膜細胞増殖抑制剤を投与し、関節リウマチ、変形性関節症、抗乾癬性関節炎、及び痛風の少なくともいずれかを治療する前記＜６＞に記載の治療方法である。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によると、従来における問題を解決することができ、リンパ球増殖や活性化を抑制することなく、即ち、免疫抑制を惹き起こすことなく、滑膜細胞の増殖を抑制可能な滑膜細胞増殖抑制剤、並びに感染症に対する抵抗性を低下させずに、滑膜細胞増殖が関与する疾患を治療する薬用組成物及び治療方法を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
（エンドトキシン活性阻害剤）
本発明の滑膜細胞増殖抑制剤は、下記構造式（１）で表される化合物であるフラボピリドール、及びその医薬的に許容される塩のいずれかを有効成分とする。
【化３】
2008255008.tif 000003
【００１６】
前記塩としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、無機塩及び有機塩のいずれかが挙げられ、具体的には、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、及びフマル酸塩等が好適である。
【００１７】
フラボピリドールの製造方法としては、特に制限は無く、目的に応じて公知の方法から適宜選択することができる。また、フラボピリドールは、市販品を使用してもよい。
【００１８】
前記滑膜細胞増殖抑制剤は、リンパ球の増殖や活性化を抑制することなく、滑膜細胞の増殖を抑制して増殖性滑膜炎を抑える作用を有し、この結果、免疫抑制を伴うことなく、軟骨変性や骨組織破壊を防止又は予防する。
この免疫抑制を伴わない滑膜細胞増殖抑制能は、例えば、リンパ球欠損マウス（例えば、ＲＡＧ遺伝子欠損マウス等）に、関節炎を自然発症するマウス（例えば、ＫｘＢ／Ｎマウス）の血清を移入して滑膜増生を発生させたモデルマウスを用い、該モデルマウスに本発明の滑膜細胞増殖抑制剤を投与した群と投与しない群との炎症の重篤さを比較することにより、評価することができる。
該評価では、例えば、本発明の滑膜細胞増殖抑制剤を投与した群において、投与量依存的な炎症の抑制が観察されるため、本発明の滑膜細胞増殖抑制剤の作用機序が、リンパ球増殖抑制によるものではないことがわかる。
【００１９】
本発明の滑膜細胞増殖抑制剤は、細胞毒性が低く、安全性が高い。また、分子量が小さいため、例えば、生体に投与した場合、標的となる滑膜増生を生じた部位へ移行しやすく、有利である。
また、本発明の滑膜細胞増殖抑制剤は、以下に説明する本発明の薬用組成物の有効成分として好適であり、さらに、以下に説明する本発明の治療方法に好適に使用される。
【００２０】
（薬用組成物）
本発明の薬用組成物は、少なくとも本発明の前記滑膜細胞増殖抑制剤を含み、必要に応じて、公知のものの中から適宜選択したその他の成分を含有してなる。
前記その他の成分としては、例えば、薬学的に許容される担体が挙げられ、該担体としては、特に制限はなく、前記薬用組成物の剤型に応じて適宜選択することができる。
【００２１】
前記薬用組成物の剤型としては、特に制限はなく、投与方法に応じて適宜選択することができ、例えば、経口固形剤（錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等）、経口液剤（内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等）、注射剤（溶液、懸濁液、用事溶解用固形剤等）、坐剤、軟膏剤、貼付剤、ゲル剤、クリーム剤、外用散剤、スプレー剤、及び吸入散剤などが挙げられる。
【００２２】
前記経口固形剤としては、例えば、前記滑膜細胞増殖抑制剤に賦形剤、必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味・矯臭剤等の添加剤を加え、常法により製造することができる。
前記賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、珪酸等が挙げられる。
前記添加剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記結合剤としては、例えば、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられ、前記崩壊剤としては、例えば、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等が挙げられ、前記滑沢剤としては、例えば、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコール等が挙げられ、前記着色剤としては、酸化チタン、酸化鉄等が挙げられ、前記矯味・矯臭剤としては、例えば、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等が挙げられる。
【００２３】
前記経口液剤としては、例えば、前記滑膜細胞増殖抑制剤に、矯味・矯臭剤、緩衝剤、安定化剤等の添加剤を加え、常法により製造することができる。
前記添加剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記矯味・矯臭剤としては、例えば、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等が挙げられ、前記緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウム等が挙げられ、前記安定剤としては、例えば、トラガント、アラビアゴム、ゼラチン等が挙げられる。
【００２４】
前記注射剤としては、例えば、前記滑膜細胞増殖抑制剤に、ｐＨ調節剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法により皮下、筋肉内および静脈内用注射剤を製造することができる。
前記ｐＨ調節剤及び前記緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム等が挙げられる。前記安定化剤としては、例えば、ピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、チオグリコール酸、チオ乳酸等が挙げられる。前記等張化剤としては、例えば、塩化ナトリウム、ブドウ糖等が挙げられる。前記局所麻酔剤としては、例えば、塩酸プロカイン、塩酸リドカイン等が挙げられる。
【００２５】
前記坐剤としては、前記滑膜細胞増殖抑制剤に、公知の坐剤製剤用担体、例えば、ポリエチレングリコール、ラノリン、カカオ脂、及び脂肪酸トリグリセリド等と、必要に応じてツイーン（ＴＷＥＥＮ：登録商標）のような界面活性剤等とを加えた後、常法により製造することができる。
【００２６】
前記軟膏剤としては、前記滑膜細胞増殖抑制剤に、公知の基剤、安定剤、湿潤剤、保存剤等を配合し、常法により混合し、製造することができる。基剤としては、流動パラフィン、白色ワセリン、サラシミツロウ、オクチルドデシルアルコール、パラフィン等が挙げられる。保存剤としては、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル等が挙げられる。
【００２７】
前記貼付剤としては、例えば、公知の支持体に前記軟膏剤としてのクリーム剤、ゲル剤、ペースト剤等を、常法により塗布し、製造することができる。前記支持体としては、例えば、綿、スフ、化学繊維からなる織布、不織布、軟質塩化ビニル、ポリエチレン、ポリウレタン等のフィルム、及び発泡体シート等が挙げられる。
【００２８】
前記薬剤組成物における前記滑膜細胞増殖抑制剤の含有量としては、剤型や投与対象である患者の症状の程度により、適宜選択することができるが、通常、投与単位あたり、前記経口剤では約１〜１０００ｍｇが好ましく、前記注射剤では約０.１〜５００ｍｇが好ましく、前記坐剤では約５〜１０００ｍｇが好ましい。
また、前記薬剤組成物の投与量としては、患者の症状、体重、年齢、性別等に応じて適宜選択することができるが、通常、成人１日あたり約０.１〜５０００ｍｇが好ましく、１〜１０００ｍｇがより好ましい。
前記薬剤組成物の投与頻度としては、上記１日あたりの投与量を、１回、乃至２〜４回程度に分けて投与するのが好ましい。
【００２９】
また、本発明の薬用組成物は、滑膜細胞の増殖がその病態に関与する疾病の治療薬又は予防剤として好適であり、例えば、抗関節リウマチ剤、抗変形性関節症剤、抗乾癬性関節炎剤、及び抗痛風剤として好適である。
【００３０】
（治療方法）
本発明の治療方法は、少なくとも前記滑膜細胞増殖抑制剤を投与し、関節リウマチ、変形性関節症、抗乾癬性関節炎、及び痛風の少なくともいずれかを治療であり、前記薬剤組成物を投与することが好ましい。
【００３１】
前記治療方法において、前記滑膜細胞増殖抑制剤、又は前記薬剤組成物の投与方法としては、特に制限はなく、剤型等に応じて適宜選択することができる。
【００３２】
また、前記治療方法としては、関節リウマチ、変形性関節症、乾癬性関節炎、及び痛風の治療方法において、公知の他の抗関節リウマチ剤、抗変形性関節症剤、抗乾癬性関節炎剤及び抗痛風剤と併用することも可能である。
【実施例】
【００３３】
以下に本発明の実施例を説明するが、本発明は、これらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００３４】
（実施例１）
＜マウスのコラーゲン誘導性関節炎の抑制＞
マウスのコラーゲン誘導性関節炎は、II型コラーゲンに対する自己免疫の結果、滑膜細胞の増殖をともなう滑膜炎がおき、関節リウマチのように関節が破壊される疾患であり、増殖性滑膜炎の良いモデルである。以下の方法により、該関節炎モデルマウスを調製し、本発明の滑膜細胞増殖抑制剤による関節炎の抑制を評価した。
【００３５】
７週齢のＤＢＡ／１Ｊマウス（オス）の尾部の皮下に、下記に示すアジュバントを１００μＬ皮下注射して関節炎を誘導し、さらに２１日後にブースター免疫を行い、関節炎モデルマウスを得た。
前記アジュバントは、０．０５Ｎ酢酸水溶液にウシII型コラーゲン（コラーゲン技術研修会製）を溶解した４ｍｇ／ｍＬのコラーゲン溶液と、完全アジュバントフロイント（Ｄｉｆｃｏ社製）とを等量混合して調製した。
【００３６】
前記関節炎モデルマウスに、ブースター免疫の４日後から連続１０日間、前記滑膜細胞増殖抑制剤として、フラボピリドールをＤＭＳＯに溶解したものを腹腔投与した。投与群を２群に分け、それぞれフラボピリドールの投与量を、１ｍｇ／ｋｇ、又は２．５ｍｇ／ｋｇとした。なお、比較対象群としては、ＤＭＳＯのみを等量腹腔投与した。
【００３７】
前記関節炎モデルマウスの関節炎発症の程度を、関節炎点数（ａｒｔｈｒｉｔｉｃ  ｉｎｄｅｘ）で評価した。一肢につき４点以下、一個体につき１６点以下で、以下の基準に従い評価を行った。結果を図１に示す。
[評価基準]
１．０：関節の一箇所に腫脹が認められる。
２．０：関節の二箇所以上に弱い腫脹が認められる。
３．０：手足の甲に重度の腫脹が認められるが、すべての指には至っていない。
４．０：手足の甲及び指に重度の腫脹が認められる。
【００３８】
（実施例２）
実施例１と同様にして調製した前記関節炎モデルマウスに、ブースター免疫の３日後（第一回免疫から２４日後）から、５週間、週に２回（第一回免疫から２８、３４、３８、４２、４５、４８、５２、５５、５９、及び６２日後）前記滑膜細胞増殖抑制剤として、フラボピリドールをＤＭＳＯに溶解したものを腹腔投与した。投与群を３群に分け、それぞれフラボピリドールの投与量を、１ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇとした。なお、比較対象群としては、ＤＭＳＯのみを等量腹腔投与した。関節炎発症の程度を上記と同様にして評価した結果を図２に示す。
【００３９】
図１及び図２の結果から、前記滑膜細胞増殖抑制剤を含まないＤＭＳＯのみを投与したマウスに比べ、本発明の前記滑膜細胞増殖抑制剤を投与したマウスでは、関節炎の程度が改善され、その改善の程度がフラボピリドールの投与量依存的に改善していることがわかった。
【００４０】
（実施例３）
＜リンパ球欠損マウスにおける関節炎の抑制＞
ＲＡＧ遺伝子を欠くマウスは、リンパ球を欠くためリンパ球による免疫応答が無いが、慢性関節リウマチに極めて類似した関節炎を自然発症するモデルマウス（ＫｘＢ／Ｎ）の血清（ＫｘＢ／Ｎ血清）を投与すると、滑膜細胞の増殖が促され、関節炎が引き起こされることが知られている。このモデルマウスを用い、本発明の滑膜細胞増殖抑制剤による関節炎の抑制を評価した。
【００４１】
ＲＡＧ遺伝子欠損マウス（９〜１０週齢、ＲＡＧ２／Ｂ６  ＫＯ、Ｃ５７ＢＬ／６遺伝背景）に、ＫｘＢ／Ｎマウスの血清３００μＬを腹腔投与して、関節炎モデルを調製した。
前記血清移入１日後から連続１０日間、前記滑膜細胞増殖抑制剤として、フラボピリドールをＤＭＳＯに溶解したものを腹腔投与した。投与群を２群に分け、それぞれフラボピリドールの投与量を、１ｍｇ／ｋｇ、又は２．５ｍｇ／ｋｇとした。なお、比較対象群としては、ＤＭＳＯのみを等量腹腔投与した。
前記関節炎モデルマウスの関節炎発症の程度を、実施例１と同様にして評価した。結果を図３に示す。
【００４２】
図３の結果から、前記滑膜細胞増殖抑制剤を含まないＤＭＳＯのみを投与したマウスに比べ、本発明の前記滑膜細胞増殖抑制剤を投与したマウスでは、関節炎の程度が改善され、その改善の程度がフラボピリドールの投与量依存的に改善していることがわかった。
また、このことから、増殖性関節炎の抑制が、本発明の滑膜細胞増殖抑制剤の作用がリンパ球の活性化抑制や増殖抑制等の免疫反応の抑制によるものではないことが明らかになった。
【００４３】
（実施例４）
＜マウスのコラーゲン誘導性関節炎における抗体応答＞
実施例１と同様にして関節炎を誘導したモデルマウスに、実施例１と同様にして前記滑膜細胞増殖抑制剤を投与し、投与開始日（０日目、投与直前）、投与後１１日目、及び投与後３９日目に、マウスのサブクラス（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ）の抗体応答を下記の方法により測定した。結果を図４〜６にそれぞれ示す。
【００４４】
前記抗体応答の測定は、ウシII型コラーゲンをコートした９６穴プレートに、マウスより採取した血清の希釈液を入れて反応させた後、該９６穴プレートを洗浄し、次いでペルオキシダーゼ結合抗マウスＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、又はＩｇＧ２ｂ抗体（Ｚｙｍｅｄ社製）を加えて反応させ、これらをＴＭＢＺ（３，３’，５，５’−Ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｉｄｉｎｅ）基質により発色させ、４５０ｎｍ波長の吸光度を測定することにより行った。
【００４５】
図４〜６の結果から、サブクラスの抗体応答において有意な差が認められなかった。この結果から、本発明の滑膜細胞増殖抑制剤は、リンパ球による抗体応答を抑制することなく、増殖性滑膜炎を強く抑制することができることがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００４６】
本発明の、フラボピリドールを有効成分とする滑膜細胞増殖抑制剤、該滑膜細胞増殖抑制剤を有効成分とする薬用組成物は、投与することにより、滑膜細胞増殖が病態に関与する疾患に対し、免疫を抑制することなく予防又は治療することができるため、抗関節リウマチ剤、抗変形性関節症剤、抗乾癬性関節炎剤及び抗痛風剤として好適である。また、前記滑膜細胞増殖抑制剤、及び前記薬用組成物を投与することにより、滑膜細胞増殖が病態に関与する疾患に対し、免疫を抑制することなく予防又は治療することができる。
【図面の簡単な説明】
【００４７】
【図１】図１は、実施例１の結果を示すグラフである。
【図２】図２は、実施例２の結果を示すグラフである。
【図３】図３は、実施例３の結果を示すグラフである。
【図４】図４は、実施例４のＩｇＧ１サブクラスの抗体応答の結果を示すグラフである。
【図５】図５は、実施例４のＩｇＧ２ａサブクラスの抗体応答の結果を示すグラフである。
【図６】図６は、実施例４のＩｇＧ２ｂサブクラスの抗体応答の結果を示すグラフである。
【図１】
2008255008.tif 000006
【図２】
2008255008.tif 000007
【図３】
2008255008.tif 000008
【図４】
2008255008.tif 000009
【図５】
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【図６】
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