(57)【要約】      （修正有）【課題】結晶状の固体であり、熱安定性が優れた高血圧症等の治療もしくは予防のための医薬を提供する。【解決手段】従来、アモルファス状の固体として得られている医薬である(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステル（下式）の塩酸塩または臭化水素酸塩の結晶を有効成分として含有する医薬。特に、該化合物の二塩酸塩水和物では、銅のＫα線の照射で得られる粉末Ｘ線回折図において、面間隔が１７、７．１、４．９、４．３、３．９、および、３．５オングストロームに主要なピークを示す結晶を有効成分として含有する医薬が好ましい。2008290988.tif 000003【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの塩酸塩または臭化水素酸塩を有効成分として含有する医薬。
【請求項２】
請求項１において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの塩酸塩を有効成分として含有する医薬。
【請求項３】
請求項２において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二塩酸塩を有効成分として含有する医薬。
【請求項４】
請求項３において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二塩酸塩の水和物を有効成分として含有する医薬。
【請求項５】
請求項４において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二塩酸塩の二水和物を有効成分として含有する医薬。
【請求項６】
請求項３において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二塩酸塩の結晶を有効成分として含有する医薬。
【請求項７】
請求項４において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二塩酸塩の水和物の結晶を有効成分として含有する医薬。
【請求項８】
請求項５において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二塩酸塩の二水和物の結晶を有効成分として含有する医薬。
【請求項９】
請求項６乃至８のいずれかにおいて、銅のＫα線の照射で得られる粉末Ｘ線回折図において、面間隔が１７、７．１、４．９、４．３、３．９、および、３．５オングストロームに主要なピークを示す結晶を有効成分として含有する医薬。
【請求項１０】
請求項１において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの臭化水素酸塩を有効成分として含有する医薬。
【請求項１１】
請求項１０において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二臭化水素酸塩を有効成分として含有する医薬。
【請求項１２】
請求項１１において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二臭化水素酸塩の水和物を有効成分として含有する医薬。
【請求項１３】
請求項１２において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二臭化水素酸塩の二水和物を有効成分として含有する医薬。
【請求項１４】
請求項１１において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二臭化水素酸塩の結晶を有効成分として含有する医薬。
【請求項１５】
請求項１２において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二臭化水素酸塩の水和物の結晶を有効成分として含有する医薬。
【請求項１６】
請求項１３において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二臭化水素酸塩の二水和物の結晶を有効成分として含有する医薬。
【請求項１７】
請求項１４乃至１６のいずれかにおいて、銅のＫα線の照射で得られる粉末Ｘ線回折図において、面間隔が１７、４．０、３．９、３．５、および、３．２オングストロームに主要なピークを示す結晶を有効成分として含有する医薬。
【請求項１８】
請求項１乃至１７のいずれかにおいて、高血圧症、心疾患、動脈硬化症、または、腎障害の治療もしくは予防のための医薬。
【請求項１９】
請求項１８において、高血圧症の治療もしくは予防のための医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、優れたカルシウム拮抗作用、血圧降下作用、血管拡張作用、心保護作用、抗動脈硬化作用、利尿作用、腎障害抑制作用、および、過酸化脂質生成阻害作用を示す、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの特定の酸付加塩；
(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの特定の酸付加塩を有効成分として含有する医薬組成物、好適には、高血圧症、心疾患、動脈硬化症、または、腎障害の治療もしくは予防のための医薬組成物、より好適には、高血圧症、または、心疾患の治療もしくは予防のための医薬組成物、最も好適には、高血圧症の治療もしくは予防のための医薬組成物；
(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの特定の酸付加塩の薬理学的有効量を温血動物（好適には、ヒト）に投与することによる疾患、好適には、高血圧症、心疾患、動脈硬化症、または、腎障害、より好適には、高血圧症、または、心疾患、最も好適には、高血圧症の治療もしくは予防のための方法；および、
(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの特定の酸付加塩の製造方法
に関する。
【背景技術】
【０００２】
ジヒドロピリジン系カルシウム拮抗剤である（±）−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−（３−ニトロフェニル）−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−（１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル）エステル  ５−イソプロピルエステル［以下、化合物（Ia）ともいう］、および、化合物（Ia）の光学異性体であるＲ配置を有する(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステル［以下、化合物（I）ともいう］は、カルシウム拮抗作用および血圧降下作用等の薬理活性を有し、高血圧症等の治療のための医薬として有用であることが知られている（特許文献１乃至４参照）。また、カルシウム拮抗作用を有する化合物が心疾患、動脈硬化症、または、腎障害の治療薬として有用であることも知られている［例えば、(i) Goodman & Gilman’s The pharmacological basis of therapeutics, 第32章，p.767-774；(ii) Annual Report of Sankyo Research Laboratories, 2002年，第54巻, p.1-64；(iii) The American Journal of Medicine, 1989年，第86巻(suppl 4A)，p.27-32；(iv)The American Journal of Hypertention, 1993年，第6巻，p.251S-259S］。
【０００３】
フリー体である化合物（I）は、化合物（Ia）を高速液体クロマトグラフィ−（以下、ＨＰＬＣともいう）法により光学分割することにより、アモルファス状の固体として得られる。また、これまで化合物（I）の酸付加塩であって、結晶状の固体として得ることのできるものは知られていない。
【０００４】
フリー体である化合物（I）に比較して溶解性、経口吸収性、血中濃度、バイオアベイラビリティー（bioavailability; BA）等の点でより優れた性質を有する化合物を見出すことは有用である。また、一定の品質を有する医薬品化合物の工業的規模での供給という観点からは、結晶状の固体として得ることのできる化合物（I）の酸付加塩を見出すことは有用である。
【特許文献１】特公平３−３１７１５号公報
【特許文献２】米国特許第４７７２５９６号明細書
【特許文献３】特開２００４−２１７６３５号公報
【特許文献４】米国特許出願公開第２００５／０２７２７１５号明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明者等は、化合物（I）の酸付加塩について鋭意研究を行い、化合物（I）の特定の酸付加塩は、優れたカルシウム拮抗作用および血圧降下作用等を示し、また、バイオアベイラビリティー、結晶性、熱的安定性等の点で医薬品化合物として優れた性質を有することから、医薬として、特に、高血圧症等の治療もしくは予防のための医薬として有用であることを見出し、本発明を完成した。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、優れたカルシウム拮抗作用、血圧降下作用、血管拡張作用、心保護作用、抗動脈硬化作用、利尿作用、腎障害抑制作用、および、過酸化脂質生成阻害作用を示す、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの特定の酸付加塩；
(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの特定の酸付加塩を有効成分として含有する医薬組成物、好適には、高血圧症、心疾患、動脈硬化症、または、腎障害（以下において、高血圧症に起因する心疾患、動脈硬化症、または、腎障害を含む）の治療もしくは予防のための医薬組成物、より好適には、高血圧症、または、心疾患の治療もしくは予防のための医薬組成物、最も好適には、高血圧症の治療もしくは予防のための医薬組成物；
(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの特定の酸付加塩の薬理学的有効量を温血動物（好適には、ヒト）に投与することによる疾患、好適には、高血圧症、心疾患、動脈硬化症、または、腎障害、より好適には、高血圧症または心疾患、最も好適には、高血圧症の治療もしくは予防のための方法；および、
(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの特定の酸付加塩の製造方法
を提供する。
【０００７】
本発明は、一つの観点からは、以下の知見に基づくものである。
【０００８】
（i）化合物（I）の特定の酸付加塩は、フリー体である化合物（I）または化合物（I）の他の酸付加塩に比較して、優れた薬物動力学的性質（特に、バイオアベイラビリティーおよび血中濃度）を有する。
【０００９】
また本発明は、別の観点からは、以下の知見に基づくものである。
【００１０】
（ii）化合物（I）は、特定の酸と酸付加塩を形成するが、他の酸とは酸付加塩を形成しない。すなわち、化合物（I）は、特定の酸に対して優れた塩形成性を有する。
【００１１】
（iii）取得できる化合物（I）の酸付加塩において、化合物（I）の特定の酸付加塩は、結晶状の固体として得ることができるが、他の酸付加塩は、アモルファス状の固体としてのみ得ることができる。すなわち、化合物（I）の特定の酸付加塩は、他の酸付加塩に比較して優れた結晶性を有する。
【００１２】
（iv）取得できる化合物（I）の酸付加塩において、酸付加塩の種類により熱的安定性に差異がある。すなわち、化合物（I）の特定の酸付加塩は、他の酸付加塩に比較して優れた熱的安定性を有する。
【００１３】
さらに本発明は、別の観点からは、以下の知見に基づくものである。
【００１４】
（v）化合物（I）は、２個のエステル基を有することから、強酸および水の存在下では、加水分解によるエステル残基の脱離が起こることが通常予想される。また、酸付加塩は一般に水に溶解しやすいことから、水の存在下では酸付加塩の取得が困難であることが通常予想される。しかしながらこれらの予想に反して、化合物（I）の特定の酸付加塩は、強酸および水の存在する反応条件下にて、結晶状の固体として収率よく得ることができる。
【００１５】
上記の（i）乃至（v）の知見はいずれも、これまで知れられている先行技術からは予測困難なことである。
【００１６】
本発明は、一つの観点からは、
（１）(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの塩酸塩または臭化水素酸塩を有効成分として含有する医薬、
（２）（１）において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの塩酸塩を有効成分として含有する医薬、
（３）（２）において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二塩酸塩を有効成分として含有する医薬、
（４）（３）において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二塩酸塩の水和物を有効成分として含有する医薬、
（５）（４）において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二塩酸塩の二水和物を有効成分として含有する医薬、
（６）（３）において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二塩酸塩の結晶を有効成分として含有する医薬、
（７）（４）において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二塩酸塩の水和物の結晶を有効成分として含有する医薬、
（８）（５）において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二塩酸塩の二水和物の結晶を有効成分として含有する医薬、
（９）（６）乃至（８）のいずれかにおいて、銅のＫα線の照射で得られる粉末Ｘ線回折図において、面間隔が１７、７．１、４．９、４．３、３．９、および、３．５オングストロームに主要なピークを示す結晶を有効成分として含有する医薬、
（１０）（１）において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの臭化水素酸塩を有効成分として含有する医薬、
（１１）（１０）において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二臭化水素酸塩を有効成分として含有する医薬、
（１２）（１１）において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二臭化水素酸塩の水和物を有効成分として含有する医薬、
（１３）（１２）において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二臭化水素酸塩の二水和物を有効成分として含有する医薬、
（１４）（１１）において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二臭化水素酸塩の結晶を有効成分として含有する医薬、
（１５）（１２）において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二臭化水素酸塩の水和物の結晶を有効成分として含有する医薬、
（１６）（１３）において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの二臭化水素酸塩の二水和物の結晶を有効成分として含有する医薬、
（１７）（１４）乃至（１６）のいずれかにおいて、銅のＫα線の照射で得られる粉末Ｘ線回折図において、面間隔が１７、４．０、３．９、３．５、および、３．２オングストロームに主要なピークを示す結晶を有効成分として含有する医薬、
（１８）（１）乃至（１７）のいずれかにおいて、高血圧症、心疾患、動脈硬化症、または、腎障害の治療もしくは予防のための医薬、または、
（１９）（１８）において、高血圧症の治療もしくは予防のための医薬
を提供する。
【００１７】
本発明において、(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルは、以下の構造式（I-1）を有する化合物である。
【００１８】
【化１】
2008290988.tif 000002
【００１９】
本発明において、化合物（I）の酸付加塩の酸部分は、化合物（I）と酸付加塩を形成し得る酸であれば特に限定はなく、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、フマル酸、酒石酸、または、メタンスルホン酸であり得、好適には、塩酸、臭化水素酸、または、メタンスルホン酸であり、より好適には、塩酸または臭化水素酸であり、最も好適には、臭化水素酸である。
【００２０】
本発明において、化合物（I）は３個の塩基性基（アミノ基、アゼチジン−３−イル基、および、ジヒドロピリジル基）を有する。化合物（I）および一価、二価または三価の酸から形成される酸付加塩において、化合物（I）および酸のモル比［化合物（I）／酸］は、それぞれ、一価の酸の場合には１／１、１／２または１／３、二価の酸の場合には、例えば２／１、１／１または２／３、三価の酸の場合には、例えば３／１、３／２または１／１であり得る。その各々の酸付加塩またはそれらの混合物は本発明に包含される。
【００２１】
本発明において、化合物（I）の塩酸塩は、一塩酸塩、二塩酸塩および三塩酸塩を包含し、好適には、二塩酸塩である。化合物（I）の臭化水素酸塩は、一臭化水素酸塩、二臭化水素酸塩および三臭化水素酸塩を包含し、好適には、二臭化水素酸塩である。化合物（I）のメタンスルホン酸塩は、一メタンスルホン酸塩、二メタンスルホン酸塩および三メタンスルホン酸塩を包含し、好適には、二メタンスルホン酸塩である。
【００２２】
本発明において、三酸塩は、
（i）３個の塩基性基がプロトン化された化合物（I）（１モル）と１個のプロトンが解離した酸（３モル）から形成される塩；
（ii）２個の塩基性基がプロトン化された化合物（I）（１モル）と１個のプロトンが解離した酸（２モル）から形成される塩、および、プロトンが解離していない酸（１モル）から形成される付加体；ならびに、
（iii）１個の塩基性基がプロトン化された化合物（I）（１モル）と１個のプロトンが解離した酸（１モル）から形成される塩、および、プロトンが解離していない酸（２モル）から形成される付加体
を包含し、好適には、上記（i）に示される塩、または、上記（ii）に示される付加体であり、最も好適には、上記（ii）に示される付加体である。
【００２３】
本発明において、化合物（I）の酸付加塩は、水和物または溶媒和物として存在することができ、その各々またはそれらの混合物は本発明に包含される。本発明において、水和物は、任意の量の水を含有する水和物（例えば、一／二水和物、一水和物、二水和物等）を包含し、溶媒和物は、任意の量の溶媒を含有する溶媒和物（例えば、一／二溶媒和物、一溶媒和物、二溶媒和物等）を包含する。
【００２４】
本発明において、化合物（I）の塩酸塩は、その無水物および水和物を包含し、好適には、水和物であり、より好適には、二水和物（特に、二塩酸塩の二水和物）である。化合物（I）の臭化水素酸塩は、その無水物および水和物を包含し、好適には、水和物であり、より好適には、二水和物（特に、二臭化水素酸塩の二水和物）である。
【００２５】
本発明において、化合物（I）の酸付加塩またはそれらの水和物もしくは溶媒和物は、反応条件および結晶化条件により、複数の異なる内部構造および物理化学的性質を有する結晶（結晶多形）を生成することがあり得、その各々の結晶または任意の割合のそれらの混合物は本発明に包含される。また、結晶状の固体およびアモルファス状（無定形）の固体が混在する場合があるが、任意の割合のそれらの混合物は本発明に包含される。すなわち、本発明の特定の結晶形を有する結晶は、他の結晶形を有する結晶またはアモルファス状の固体を含有してもよく、当該特定の結晶形の含有率は、好適には、５０％以上であり、より好適には、８０％以上であり、さらに好適には、９０％以上であり、さらにより好適には、９３％以上であり、特に好適には、９５％以上であり、最も好適には、９７％以上である。
【００２６】
本発明において、結晶とは、その内部構造が三次元的に構成原子（またはその集団）の規則正しい繰返しからなる固体を示し、そのような規則正しい内部構造を有さないアモルファス状の固体とは区別される。ある固体が結晶であるか否かは、結晶学的に周知の方法（例えば、粉末Ｘ線結晶解析、示差走査熱量分析等）で調べることができる。例えば、ある固体について銅のＫα線の照射で得られるＸ線による粉末Ｘ線結晶解析を行い、そのＸ線回折図において明確なピークが観測される場合には、その固体は結晶であると決定され、明確なピークが観測されない場合にはその固体はアモルファス状であると決定される。当該ピークを読み取ることはできるがピークが明確でない（例えば、ブロードである）場合には、その固体は結晶化度の低い結晶であると決定され、そのような結晶化度の低い結晶も本発明の結晶に包含される。
【００２７】
銅のＫα線を使用した粉末Ｘ線結晶解析においては、通常銅のＫα線（Ｋα１線およびＫα２線が分離されていないもの）が試料に照射される。Ｘ線回折図は、Ｋα線に由来する回折を解析して得ることができ、また、Ｋα線に由来する回折から取り出されたＫα１線に由来する回折のみを解析して得ることもできる。本発明において、Ｋα線の照射で得られる粉末Ｘ線回折図は、Ｋα線に由来する回折を解析して得られるＸ線回折図、および、Ｋα１線に由来する回折を解析して得られるＸ線回折図を包含し、好適には、Ｋα１線に由来する回折を解析して得られるＸ線回折図である。
【００２８】
以下の図１乃至６の粉末Ｘ線回折図において、縦軸には回折強度［カウント／秒（ｃｐｓ）］を示し、横軸には回折角度２θ（度）を示す。また、面間隔ｄ（オングストローム）は、式2ｄsinθ=ｎλにおいてｎ＝１として算出することができる。上記式において、Ｋα線の波長λは、１．５４オングストロームであり、Ｋα１線の波長λは、１．５４１オングストロームである。面間隔ｄは、測定条件等によりその位置および相対強度が多少変化し得るものであるため、面間隔ｄがわずかに異なる場合であっても、適宜スペクトル全体のパターンを参照して結晶形の同一性は認定されるべきである。
【００２９】
本発明の化合物（I）の二塩酸塩の結晶は、例えば、図１に示されるような、銅のＫα線の照射で得られる粉末Ｘ線回折図において、面間隔ｄが１７、７．１、４．９、４．３、３．９、および、３．５オングストロームに主要なピークを示す結晶であり得る。ここで主要なピークは、面間隔ｄが７．１オングストロームを示すピークの強度を１００としたときの相対強度が７８以上のピークである。
【００３０】
本発明の化合物（I）の二臭化水素酸塩の結晶は、例えば、図２に示されるような、銅のＫα線の照射で得られる粉末Ｘ線回折図において、面間隔ｄが１７、４．０、３．９、３．５、および、３．２オングストロームに主要なピークを示す結晶であり得る。ここで主要なピークは、面間隔ｄが１７オングストロームを示すピークの強度を１００としたときの相対強度が２５以上のピークである。
【００３１】
本発明において、心疾患には、狭心症が包含される。また、心疾患、動脈硬化症または腎障害には、高血圧症に起因する心疾患、動脈硬化症または腎障害がそれぞれ包含され、高血圧症には、心疾患、動脈硬化症または腎障害に起因する高血圧症が包含される。  
【発明の効果】
【００３２】
本発明の(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの特定の酸付加塩は、優れたカルシウム拮抗作用、血圧降下作用、血管拡張作用、心保護作用、抗動脈硬化作用、利尿作用、腎障害抑制作用、および、過酸化脂質生成阻害作用を示し、また、物理化学的性質、熱的安定性、保存および取り扱い安定性、残留溶媒比率、吸湿性、潮解性、溶解性、薬理学的性質、薬物動力学的性質、経口吸収性、血中濃度、バイオアベイラビリティー、体内動態、安全性、および、毒性の点で医薬品化合物として優れた性質を有することから、医薬として、好適には、高血圧症、心疾患、動脈硬化症、または、腎障害の治療もしくは予防のための医薬として、より好適には、高血圧症、または、心疾患の治療もしくは予防のための医薬として、最も好適には、高血圧症の治療もしくは予防のための医薬として有用である。また、本発明の化合物（I）の特定の酸付加塩は、胃内ｐＨの変化による血中濃度の変動が小さく、食事の影響を受けにくいとの優れた性質を有する可能性があり、温血動物用の医薬として、好適には、ヒト用の医薬として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３３】
本発明において、化合物（I）の酸付加塩は、以下の方法により製造することができる：
（工程１）化合物（I）を不活性溶媒または含水不活性溶媒に溶解して、当該溶液中に酸または酸の水溶液もしくは不活性溶媒溶液を滴下する；
（工程２）一定温度条件下（好適には、室温条件下）にて一定時間撹拌する；および、
（工程３）生成した固体を濾取して乾燥する。
また必要に応じて、工程２の前または後に、以下の工程からなる群より選択される１以上の工程を行ってもよい：
（工程４−１）種結晶を加える；
（工程４−２）溶媒を一部留去する；
（工程４−３）貧溶媒（酸付加塩を溶解しない不活性溶媒）を加える；および、
（工程４−４）超音波刺激もしくは反応容器の表面の擦過等の機械的刺激を与えることにより結晶の析出を開始もしくは促進させる。
工程１および２においては、水が存在すること、または、酸の水和物を用いることが好適である。また、工程１においては、化合物（I）の不活性溶媒溶液中に酸の水溶液を滴下することが好適である。
【００３４】
上記製造方法において使用される化合物（I）は、特開２００４−２１７６３５号公報（米国特許出願公開第２００５／０２７２７１５号明細書）の実施例１に記載された方法にしたがって製造することができる。化合物（I）としては、単離し精製されたもの、固体状の反応粗生物、または、反応粗生物の溶液のいずれのものでも使用することができる。
【００３５】
使用される不活性溶媒は、反応を阻害せず出発物質をある程度溶解するものであれば特に限定はなく、例えば、ヘキサン、ペンタン、石油エーテル、シクロヘキサンのような脂肪族炭化水素類；ベンゼン、トルエン、キシレンのような芳香族炭化水素類；メチレンクロリド、クロロホルム、四塩化炭素、ジクロロエタン、クロロベンゼン、ジクロロベンゼンのようなハロゲン化炭化水素類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジブチルエーテル、ブチルメチルエーテル、sec−ブチルメチルエーテル、tert−ブチルメチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメトキシエタン、ジエチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；アセトン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、シクロヘキサノンのようなケトン類；酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸ブチルのようなエステル類；アセトニトリル、プロピオニトリル、ブチロニトリル、イソブチロニトリルのようなニトリル類；メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、２−メチル−１−プロパノール、２−メチル−２−プロパノールのようなアルコール類；ホルムアミド、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、ヘキサメチルホスホロトリアミドのようなアミド類；水；または、これらの混合物であり得、好適には、エーテル類、ケトン類、エステル類、アルコール類、水、または、これらの混合物であり、より好適には、tert−ブチルメチルエーテル、アセトン、酢酸エチル、２−プロパノール、または、これらの溶媒と水の混合物であり、さらに好適には、酢酸エチルと水の混合物、アセトンと水の混合物、または、２−プロパノールと水の混合物であり、さらにより好適には、アセトンと水の混合物、または、２−プロパノールと水の混合物であり、最も好適には、アセトンと水の混合物である。また、反応溶液中に適量の水が存在することは、好適である。
【００３６】
使用される酸が一価の酸である場合、酸の使用量は、例えば、化合物（I）１モル（mol）に対して０．４乃至１０モルであり得、好適には、０．６乃至６モルであり、より好適には、０．８乃至５モルである。
【００３７】
使用される酸が二価の酸である場合、酸の使用量は、例えば、化合物（I）１モルに対して０．２乃至１０モルであり得、好適には、０．３乃至６モルであり、より好適には、０．４乃至４モルである。
【００３８】
使用される酸が三価の酸である場合、酸の使用量は、例えば、化合物（I）１モルに対して０．１乃至１０モルであり得、好適には、０．２乃至６モルであり、より好適には、０．３乃至４モルである。
【００３９】
使用される酸の水溶液、または、不活性溶媒溶液の濃度は、例えば、０．１モル／リットル（mol/l）乃至飽和溶液であり得、好適には、１乃至２０モル／リットルであり、より好適には、３乃至１５モル／リットルである。
【００４０】
反応温度は、通常、−２０℃乃至１５０℃であり、好適には、０℃乃至１００℃であり、より好適には、１０℃乃至６０℃である。
【００４１】
反応時間は、使用される酸、溶媒、または、反応温度等によって異なるが、通常、５分間乃至２４時間であり、好適には、１０分間乃至１２時間であり、より好適には、２０分間乃至６時間である。
【００４２】
生成した固体は、例えば、濾過、遠心分離、または、傾斜法によって単離することができる。単離された固体は、必要に応じて、不活性溶媒（好適には、反応で使用された不活性溶媒）で洗浄することができる。
【００４３】
単離された固体は、通常２０乃至８０℃で、好適には、３０乃至６０℃で、減圧下にて、乾燥することができる。乾燥時間は、通常重量がほぼ変化しなくなるまでの時間であるが、好適には、３０分間乃至１２時間であり、より好適には、１乃至６時間である。固体の乾燥は、必要に応じて、シリカゲル、および／または、塩化カルシウム等の乾燥剤の存在下にて行うことができる。
【００４４】
上記反応条件は、化合物（I）の２個のエステル基の加水分解反応が起こらない条件であることが好ましい。
【００４５】
本発明の化合物（I）の酸付加塩を医薬として使用する場合には、それ自体（原末のまま）で投与することができ、あるいは、適宜の薬理学的に許容される賦形剤、希釈剤等と混合して製造される、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤もしくはシロップ剤等の製剤として、経口的に、または、同様に製造される注射剤もしくは坐剤等の製剤として、非経口的に（好適には、経口的に）投与することができる。
【００４６】
これらの製剤は、賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、乳化剤、安定剤、矯味矯臭剤、および／または、希釈剤等の添加剤を用いて、周知の方法で製造される。
【００４７】
賦形剤は、例えば、有機系賦形剤または無機系賦形剤であり得る。有機系賦形剤は、例えば、乳糖、ショ糖、ブドウ糖、マンニトール、ソルビトールのような糖誘導体；トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、α−デンプン、デキストリンのようなデンプン誘導体；結晶セルロースのようなセルロース誘導体；アラビアゴム；デキストラン；または、プルランであり得る。無機系賦形剤は、例えば、軽質無水珪酸；または、硫酸カルシウムのような硫酸塩であり得る。
【００４８】
滑沢剤は、例えば、ステアリン酸；ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸金属塩；タルク；コロイドシリカ；ビーズワックス、ゲイ蝋のようなワックス類；硼酸；アジピン酸；硫酸ナトリウムのような硫酸塩；グリコール；フマル酸；安息香酸ナトリウム；Ｄ,Ｌ−ロイシン；ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウムのようなラウリル硫酸塩；無水珪酸、珪酸水和物のような珪酸類；または、上記賦形剤におけるデンプン誘導体であり得る。
【００４９】
結合剤は、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、または、上記賦形剤で示された化合物であり得る。
【００５０】
崩壊剤は、例えば、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、内部架橋カルボキシメチルセルロースナトリウムのようなセルロース誘導体；架橋ポリビニルピロリドン；または、カルボキシメチルスターチ、カルボキシメチルスターチナトリウムのような化学修飾されたデンプン・セルロース類であり得る。
【００５１】
乳化剤は、例えば、ベントナイト、ビーガムのようなコロイド性粘土；ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸カルシウムのような陰イオン界面活性剤；塩化ベンザルコニウムのような陽イオン界面活性剤；または、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステルのような非イオン界面活性剤であり得る。
【００５２】
安定剤は、例えば、メチルパラベン、プロピルパラベンのようなパラヒドロキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコールのようなアルコール類；塩化ベンザルコニウム；フェノール、クレゾールのようなフェノール類；チメロサール；デヒドロ酢酸；または、ソルビン酸であり得る。
【００５３】
矯味矯臭剤は、例えば、サッカリンナトリウム、アスパルテームのような甘味料；クエン酸、リンゴ酸、酒石酸のような酸味料；または、メントール、レモンエキス、オレンジエキスのような香料であり得る。
【００５４】
希釈剤は、通常希釈剤として用いられる化合物であり得、例えば、乳糖、マンニトール、ブドウ糖、ショ糖、硫酸カルシウム、ヒドロキシプロピルセルロース、微結晶性セルロース、水、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、グリセロール、デンプン、ポリビニルピロリドン、または、これらの混合物であり得る。
【００５５】
本発明の化合物（I）の酸付加塩の投与量は、患者の症状、年齢、体重等の条件により変化し得るが、経口投与の場合には、各々、１回当たり下限 ０．００２mg／kg（好適には、０．０１mg／kg）、上限１０mg／kg（好適には、５mg／kg）を、非経口的投与の場合には、１回当たり下限０．０００２mg／kg（好適には、０．００１mg／kg）、上限１０mg／kg（好適には、５mg／kg）を、成人に対して１日当たり１乃至６回、症状に応じて投与することができる。
【実施例】
【００５６】
以下に実施例、比較例、試験例、および、製剤例を示して本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の範囲はこれらに限定されるものではない。以下の実施例において、（Ｒ）−２−アミノ−１，４−ジヒドロ−６−メチル−４−（３−ニトロフェニル）−３，５−ピリジンジカルボン酸  ３−（１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル）エステル  ５−イソプロピルエステルは、特開２００４−２１７６３５号公報（米国特許出願公開第２００５／０２７２７１５号明細書）の実施例１に記載された方法にしたがって製造することができる。
【００５７】
（実施例１）(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステル  二塩酸塩  二水和物
（Ｒ）−２−アミノ−１，４−ジヒドロ−６−メチル−４−（３−ニトロフェニル）−３，５−ピリジンジカルボン酸  ３−（１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル）エステル  ５−イソプロピルエステル８．７４ｇ（１５．０ｍｍｏｌ）の酢酸エチル２４０ｍｌ溶液に、２５℃で、３６ｗｔ％塩酸２．５７ｍｌ（３０．０ｍｍｏｌ）を３０分間で滴下した。滴下終了後、反応溶液を更に３０分間撹拌した。生成した粗結晶を濾取した後、酢酸エチル１５ｍｌで洗浄し、５０℃で２時間減圧下にて乾燥して、標記の化合物９．２０ｇ（８９％）を白色粉末として得た。
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（DMSO-d6,δppm）：0.99(d;J=6Hz,3H), 1.19(dd;J=6Hz,3Hz,3H), 2.29(s,3H), 4.03-4.27(m,4H), 4.73-4.90(m,2H), 4.93-5.31(m,1H), 5.68-6.00(m,1H), 6.94(brs,2H), 7.33-7.74(m,12H), 7.92-8.03(m,2H), 9.18-9.30(m,1H), 12.53-12.81(m,1H)。
【００５８】
本化合物の粉末Ｘ線回折図を図１に示す。本化合物は、Ｘ線回折図において明確なピークを有し、結晶状の固体であった。
【００５９】
本化合物は、溶媒としてtert−ブチルメチルエーテルを用いて製造することもできる。
【００６０】
（実施例２）(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステル  二臭化水素酸塩  二水和物
（２Ａ）［反応溶媒：アセトン］
（Ｒ）−２−アミノ−１，４−ジヒドロ−６−メチル−４−（３−ニトロフェニル）−３，５−ピリジンジカルボン酸  ３−（１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル）エステル  ５−イソプロピルエステル２．９１ｇ（５．００ｍｍｏｌ）のアセトン７ｍｌ溶液に、２５℃で、４７ｗｔ％臭化水素酸１．１６ｍｌ（１０．０ｍｍｏｌ）を３０分間で滴下した。滴下終了後、反応溶液を更に３０分間撹拌した。生成した粗結晶を濾取した後、アセトン７ｍｌで洗浄し、６０℃で２時間減圧下にて乾燥して、標記の化合物２．６８ｇ（６９％）を白色粉末として得た。
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（DMSO-d6,δppm）：0.99(d;J=6Hz,3H), 1.19(d;J=6Hz,3H), 2.29(s,3H), 4.01-4.38(m,4H), 4.75-4.89(m,2H), 4.96-5.23(m,1H), 5.78-6.08(m,1H), 6.85(brs,2H), 7.36-7.70(m,12H), 7.93-8.04(m,2H), 8.99(brs,1H), 11.16-11.61(m,1H)。
【００６１】
本化合物の粉末Ｘ線回折図を図２に示す。本化合物は、Ｘ線回折図において明確なピークを有し、結晶状の固体であった。
（２Ｂ）［反応溶媒：２−プロパノール］
（Ｒ）−２−アミノ−１，４−ジヒドロ−６−メチル−４−（３−ニトロフェニル）−３，５−ピリジンジカルボン酸  ３−（１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル）エステル  ５−イソプロピルエステル２．９１ｇ（５．００ｍｍｏｌ）の２−プロパノール３０ｍｌ溶液に、２５℃で、４７ｗｔ％臭化水素酸１．１６ｍｌ（１０．０ｍｍｏｌ）を３０分間で滴下した。滴下終了後、反応溶液を更に３０分間撹拌した。生成した粗結晶を濾取した後、２−プロパノール１０ｍｌで洗浄し、６０℃で２時間減圧下にて乾燥して、標記の化合物２．６８ｇ（６９％）を白色粉末として得た。
【００６２】
本化合物の1Ｈ−ＮＭＲスペクトルおよび粉末Ｘ線回折図は、実施例（２Ａ）の化合物のものと同様であった。
（２Ｃ）［反応溶媒：酢酸エチル］
（Ｒ）−２−アミノ−１，４−ジヒドロ−６−メチル−４−（３−ニトロフェニル）−３，５−ピリジンジカルボン酸  ３−（１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル）エステル  ５−イソプロピルエステル５．８３ｇ（１０．０ｍｍｏｌ）の酢酸エチル１６０ｍｌ溶液に、３０℃で、４７ｗｔ％臭化水素酸２．３１ｍｌ（２０．０ｍｍｏｌ）を３０分間で滴下した。滴下終了後、反応溶液を更に３０分間撹拌した。生成した粗結晶を濾取した後、酢酸エチル３０ｍｌで洗浄し、５０℃で２時間減圧下にて乾燥して、標記の化合物６．９８ｇ（８９％）を白色粉末として得た。
【００６３】
本化合物の1Ｈ−ＮＭＲスペクトルおよび粉末Ｘ線回折図は、実施例（２Ａ）の化合物のものと同様であった。
【００６４】
本化合物は、溶媒としてtert−ブチルメチルエーテルを用いて製造することもできる。
【００６５】
（比較例１）(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステル  二硫酸塩  二水和物
（Ｒ）−２−アミノ−１，４−ジヒドロ−６−メチル−４−（３−ニトロフェニル）−３，５−ピリジンジカルボン酸  ３−（１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル）エステル  ５−イソプロピルエステル８７４ｍｇ（１．５０ｍｍｏｌ）の酢酸エチル６ｍｌ溶液に、２５℃で、硫酸水溶液［濃硫酸０．１７６ｍｌ（３．３０ｍｍｏｌ）／水０．１７８ｍｌ（９．９０ｍｍｏｌ）］を３０分間で滴下した。滴下終了後、反応溶液を更に３０分間撹拌した。生成した粗結晶を濾取した後、酢酸エチル２ｍｌで洗浄し、５０℃で２時間減圧下にて乾燥して、標記の化合物８６１ｍｇ（７０％）を白色粉末として得た。
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（DMSO-d6,δppm）：1.00(d;J=6Hz,3H), 1.19(d;J=6Hz,3H), 2.28(s,3H), 4.03-4.43(m,4H), 4.73-4.89(m,2H), 4.96-5.18(m,1H), 5.74-6.00(m,1H), 6.83(brs,2H), 7.36-7.66(m,12H), 7.93-8.04(m,2H), 8.93(brs,1H), 10.96-11.40(m,1H)。
【００６６】
本化合物の粉末Ｘ線回折図を図３に示す。水存在条件下で得られた本化合物は、Ｘ線回折図において明確なピークを有し、結晶状の固体であった。
【００６７】
（比較例２）(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステル  一硫酸塩
（Ｒ）−２−アミノ−１，４−ジヒドロ−６−メチル−４−（３−ニトロフェニル）−３，５−ピリジンジカルボン酸  ３−（１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル）エステル  ５−イソプロピルエステル３．９６ｇ（６．８０ｍｍｏｌ）のtert−ブチルメチルエーテル１２ｍｌ溶液に、２５℃で、濃硫酸０．５０ｍｌ（９．３８ｍｍｏｌ）を３０分間で滴下した。滴下終了後、反応溶液を更に２時間撹拌した。生成した粗結晶を濾取した後、tert−ブチルメチルエーテル２ｍｌで洗浄し、４５℃で２時間減圧下にて乾燥して、標記の化合物３．０６ｇ（６６％）を白色粉末として得た。
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（DMSO-d6,δppm）：1.00(d;J=6Hz,3H), 1.18(d;J=6Hz,3H), 2.28(s,3H), 4.01-4.41(m,4H), 4.75-4.90(m,2H), 4.95-5.18(m,1H), 5.66-5.95(m,1H), 6.82(brs,2H), 7.36-7.66(m,12H), 7.92-8.04(m,2H), 8.89(brs,1H), 10.93-11.35(m,1H)。
【００６８】
本化合物の粉末Ｘ線回折図を図４に示す。水不存在条件下で得られた本化合物は、Ｘ線回折図において明確なピークを有さず、アモルファス状の固体であった。
【００６９】
比較例１および２の結果より、結晶状の化合物（I）の酸付加塩を得るために水存在下での反応が有用であることが示された。
【００７０】
（比較例３）(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステル  二メタンスルホン酸塩
（Ｒ）−２−アミノ−１，４−ジヒドロ−６−メチル−４−（３−ニトロフェニル）−３，５−ピリジンジカルボン酸  ３−（１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル）エステル  ５−イソプロピルエステル４．６６ｇ（８．００ｍｍｏｌ）の酢酸エチル６４ｍｌ溶液に、２５℃で、メタンスルホン酸１．０４ｍｌ（１６．０ｍｍｏｌ）を３０分間で滴下した。滴下終了後、反応溶液を更に７５分間撹拌した。生成した粗結晶を濾取した後、酢酸エチル２５ｍｌで洗浄し、６０℃で４時間減圧下にて乾燥して、標記の化合物６．０３ｇ（９７％）を白色粉末として得た。
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（DMSO-d6,δppm）：1.00(d;J=6Hz,3H), 1.18(d;J=6Hz,3H), 2.28(s,3H), 2.37(s,6H), 4.03-4.41(m,4H), 4.75-4.89(m,2H), 4.97-5.16(m,1H), 5.73-5.99(m,1H), 6.83(brs,2H), 7.37-7.66(m,12H), 7.94-8.03(m,2H), 8.94(brs,1H), 10.96-11.42(m,1H)。
【００７１】
本化合物の粉末Ｘ線回折図を図５に示す。本化合物は、Ｘ線回折図において明確なピークを有し、結晶状の固体であった。
【００７２】
（比較例４）(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステル［化合物（I）］
特開２００４−２１７６３５号公報（米国特許出願公開第２００５／０２７２７１５号明細書）の実施例１に記載された方法にしたがい標記化合物を得た。
【００７３】
得られた化合物の粉末Ｘ線回折図を図６に示す。本化合物は、Ｘ線回折図において明確なピークを有さず、アモルファス状の固体であった。
【００７４】
（試験例１）熱的安定性試験
試験化合物をガラス瓶に入れ、下記（１）および（２）の条件下にて静置して、一定時間経過後に試験化合物中の有効成分［化合物（I）］の残存率を高速液体クロマトグラフィーにより測定した。
【００７５】
（１）：密閉状態、６０℃；
（２）：非密閉状態、４０℃、湿度７５％。
【００７６】
高速液体クロマトグラフィーの測定条件は、以下の通りである。
【００７７】
カラム：L-column ODS [4.6mm×250 mm，化学物質評価研究機構製]
移動層：アセトニトリル／22mMリン酸二水素カリウム緩衝液／メタノール＝455 / 350 / 195 (V/V/V)（リン酸でpH5.5に調整）
流量：1ml/min
カラム温度：40℃
検出波長：220 nm
残存率（％）は下記の式で算出した。
【００７８】
残存率（％）＝［１−（不純物および分解物のピーク面積百分率の総和）］×１００
上記の（１）および（２）の条件下における結果をそれぞれ表１および２に示す。
【００７９】
［表１］［条件（１）］
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
試験化合物      化合物（I）の残存率（％）
番号            時間：  ０          １週          １月          ３月
￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣
実施例１            ９９．４      ９６．６      ９５．３      ９２．０
実施例２Ａ          ９９．８      ９９．８      ９９．７      ９９．７
実施例２Ｃ          ９９．１      ９５．０      ９４．２      ９４．５
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
比較例１            ９９．３      ６８．０        ０．４
比較例２            ９３．１      ２５．０      ２４．３
比較例３            ９９．３      ９３．２      ９０．０      ８４．１
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
表１の結果より、アモルファス状の固体である比較例２の化合物は安定性が非常に低く、比較例１の化合物は、結晶状の固体であるにもかかわらず安定性が非常に低かった。また、比較例３の化合物は、結晶状の固体であるにもかかわらず安定性は高くなかった。それに比較して、本発明の実施例１および２（２Ａおよび２Ｃ）の化合物は、結晶状の固体であり、且つ優れた安定性を示した。
【００８０】
［表２］［条件（２）］
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
試験化合物      化合物（I）の残存率（％）
番号            時間：  ０          １週          １月          ３月
￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣
実施例１            ９９．４      ９７．８      ９６．０      ９４．１
実施例２Ａ          ９９．８      ９９．７      ９９．６      ９９．４
実施例２Ｃ          ９９．１      ９５．５      ９２．１      ９０．６
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
比較例１            ９９．３      ９６．８      ８４．４
比較例２            ９３．１        ８．９
比較例３            ９９．３        ０．１        ０．０
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
表２の結果より、アモルファス状の固体である比較例２の化合物は安定性が非常に低く、比較例３の化合物は、結晶状の固体であるにもかかわらず安定性が非常に低かった。また、比較例１の化合物は、結晶状の固体であるにもかかわらず安定性は高くなかった。それに比較して、本発明の実施例１および２（２Ａおよび２Ｃ）の化合物は、結晶状の固体であり、且つ優れた安定性を示した。
【００８１】
表１および２の結果より、比較例１乃至３の化合物の中で（１）および（２）の条件下でともに優れた安定性を示すものはなかったが、本発明の実施例１および２（２Ａおよび２Ｃ）の化合物は（１）および（２）の条件下でともに優れた安定性を示した。
【００８２】
表１および２の結果は、結晶状の固体として取得できる化合物（I）の酸付加塩の全てが優れた熱的安定性を有するものではなく、本発明の化合物（I）の特定の酸付加塩が他の酸付加塩に比較して優れた熱的安定性を有することを示す。
【００８３】
（試験例２）イヌにおける吸収性試験
（１）方法
試験化合物の投与30分前、投与直前、および、投与30分後にラニチジン（2.5mg/kg）を絶食した雄性ビーグル犬（体重：約10kg，ｎ＝6）の後足大腿部に筋肉注射して、胃内pHを中性に調整した。試験化合物は0.5%メチルセルロース溶液に懸濁させて10mg/kgの用量で経口投与した。投与0.5、1、2、3、4、6、8および24時間後に、ヘパリン処理した注射筒を用いて前腕正中皮静脈より約3ml採血した。採取した血液を遠心分離して血漿を得て、試験化合物の濃度測定の時まで−20℃で冷凍保存した。融解した血漿100μlに内部標準液［化合物（Ia）のd3体のメタノール溶液，5ng/ml］300μlを加えて混和し、遠心分離した。上清をフィルターにて濾過した後に流出液をLC/MS/MSにて分析した。
【００８４】
検量線の作成は、イヌ血漿100μlに代えて各濃度に調製した検量線用試料［化合物（Ia）のメタノール溶液，0.5-400ng/ml］100μlを用いて、上記と同様に操作することにより行った。
【００８５】
以下にLC/MS/MSの分析条件を示す。
［MS/MS］
システム：API3000 LC/MS/MS System（Applied Biosystems）
イオン源：TurboIonSpray
ターボヒーターガス：Air，425 ℃，7 l/min
ネブライザーガス：Air，40 psi，0.92 l/min
カーテンガス：N2，0.95 l/min
オリフィス電圧：化合物（Ia）  101 V
化合物（Ia）のd3体  96 V
イオンスプレー電圧： 5000 V
コリジョンガス：N2
コリジョンエネルギー：化合物（Ia）  33 V
化合物（Ia）のd3体  37 V
測定モード：positive/MRM
モニターイオン：化合物（Ia）  m/z  583 → 167
化合物（Ia）のd3体  m/z  586 → 167
［HPLC］
システム：LC-10Avp（島津製作所製）
カラム：L-column ODS  1.5mm I.D.×150 mm（化学物質評価研究機構製）
移動相：アセトニトリル/水/1M酢酸アンモニウム水溶液/ぎ酸  (60/40/0.1/0.05)
流速：0.2 ml/min
カラム温度： 40 ℃
注入量：2 μl
（２）結果
試験化合物として実施例１、実施例２（２Ｃ）および比較例４の化合物を用いて上記方法にしたがって得られた結果より、薬物吸収性の指標となる薬物速度論的パラメーターである血漿中濃度−時間曲線下面積（AUC0-24h）および最高血漿中濃度（Cmax）を算出した。結果を表３に示す。
【００８６】
［表３］
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
試験化合物番号      AUC0-24h[ng・h/ml]      Cmax[ng/ml]
￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣
実施例１               １６６０            １６８
実施例２Ｃ             １９２９            ２３０
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
比較例４               １４９７            １６１
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
本発明の化合物［特に、実施例２の化合物］は、フリー体である比較例４の化合物［化合物（I）］に比較して優れたバイオアベイラビリティーおよび血中濃度（AUC0-24hおよびCmax）を示した。
【００８７】
（試験例３）ラット大脳皮質膜画分を用いたカルシウムチャンネル受容体結合試験
Ｌ型カルシウムチャネルのソースとしてラット大脳皮質膜画分を、またＬ型カルシウムチャネルのリガンドとして3H-(+)-イスラジピンを用いた。トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩酸塩（Tris-HCl；50 mM、pH 7.4）緩衝液中で膜画分（5.0 mg蛋白／ml）、3H-(+)-イスラジピン（0.5 nM）および試験化合物を室温で60分間反応させ、膜画分に結合した3H-(+)-イスラジピンを液体シンチレーションカウンターで測定した。測定されたカウントから非標識のニトレンジピン存在下でのカウント（非特異的結合量）を引き、特異的結合量を算出した。各試験化合物について、特異的結合の濃度と結合阻害率の関係をlogit-logモデルにあてはめ、IC50値（特異的結合の50％阻害濃度；nM）およびKi値（解離定数；nM）を算出した。
【００８８】
実施例１または２の化合物は、1.4から2.0nMのKi値を示した。本発明の化合物（I）の特定の酸付加塩は、優れたカルシウムチャンネル受容体拮抗作用を示し、高血圧症、心疾患、動脈硬化症、または、腎障害の治療もしくは予防のための医薬として有用である。
【００８９】
試験例３は、Ｌ型カルシウムチャネルのソースとしてブタ心筋ミクロソームを用いて行うこともできる。
【００９０】
（試験例４）高血圧ラットにおける血圧降下作用試験
雄性高血圧自然発症ラットを用い、無麻酔下で試験化合物を経口投与し、5分ごとに24時間にわたり、テレメトリー法で血圧を測定した。試験化合物は0.5%メチルセルロース溶液に懸濁してラットに投与した。各測定時点における血圧の降下率より、投与時から投与24時間後までの面積を台形法で算出して、血圧降下率面積値（％・hr）を求めた。
【００９１】
実施例１および２の化合物は、127から132（％・hr）の血圧降下率面積値を示した。本発明の化合物（I）の特定の酸付加塩は、優れた血圧降下作用を示し、高血圧症等の治療もしくは予防のための医薬として有用である。
【００９２】
（製剤例１）カプセル剤
実施例化合物（10.0mg）、乳糖（168.7mg）、トウモロコシデンプン（70.0mg）、および、ステアリン酸マグネシウム（1.3mg）（計250mg）の粉末を混合して、60メッシュのふるいに通した後、この粉末を２号ゼラチンカプセルに入れてカプセル剤とする。
【００９３】
（製剤例２）錠剤
実施例化合物（10.0mg）、乳糖（149.0mg）、トウモロコシデンプン（40.0mg）、および、ステアリン酸マグネシウム（1.0mg）（計200mg）の粉末を混合し、打錠機により打錠して１錠200mgの錠剤とする。
【００９４】
【産業上の利用可能性】
【００９５】
本発明の(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの特定の酸付加塩は、優れたカルシウム拮抗作用、血圧降下作用、血管拡張作用、心保護作用、抗動脈硬化作用、利尿作用、腎障害抑制作用、および、過酸化脂質生成阻害作用を示し、また、物理化学的性質、熱的安定性、保存および取り扱い安定性、残留溶媒比率、吸湿性、潮解性、溶解性、薬理学的性質、薬物動力学的性質、経口吸収性、血中濃度、バイオアベイラビリティー、体内動態、安全性、および、毒性の点で医薬品化合物として優れた性質を有することから、医薬として、好適には、高血圧症、心疾患、動脈硬化症、または、腎障害の治療もしくは予防のための医薬として、より好適には、高血圧症、または、心疾患の治療もしくは予防のための医薬として、最も好適には、高血圧症の治療もしくは予防のための医薬として有用である。また、本発明の化合物（I）の特定の酸付加塩は、胃内ｐＨの変化による血中濃度の変動が小さく、食事の影響を受けにくいとの優れた性質を有する可能性があり、温血動物用の医薬として、好適には、ヒト用の医薬として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００９６】
【図１】実施例１で得られる(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステル  二塩酸塩  二水和物の粉末Ｘ線回折図。
【図２】実施例２Ａで得られる(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステル  二臭化水素酸塩  二水和物の粉末Ｘ線回折図。
【図３】比較例１で得られる(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステル  二硫酸塩  二水和物の粉末Ｘ線回折図。
【図４】比較例２で得られる(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステル  一硫酸塩の粉末Ｘ線回折図。
【図５】比較例３で得られる(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステル  二メタンスルホン酸塩の粉末Ｘ線回折図。
【図６】比較例４で得られる(Ｒ)−２−アミノ−１,４−ジヒドロ−６−メチル−４−(３−ニトロフェニル)−３,５−ピリジンジカルボン酸  ３−(１−ジフェニルメチルアゼチジン−３−イル)エステル  ５−イソプロピルエステルの粉末Ｘ線回折図。
【図１】
2008290988.tif 000004
【図２】
2008290988.tif 000005
【図３】
2008290988.tif 000006
【図４】
2008290988.tif 000007
【図５】
2008290988.tif 000008
【図６】
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