(57)【要約】【課題】ニューロン変性、傷害または可塑性障害に特徴付けられる疾患または症状におけるニューロンの増殖および／または修復を促進するための方法の提供。【解決手段】ニューロン変性、傷害または可塑性障害により特徴付けられる疾患または症状におけるニューロンの増殖および／または修復の促進方法であって、有効で、非毒性かつ医薬上許容される量のＰＰＡＲγアゴニストまたはその医薬上許容される誘導体を投与することを含む方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ニューロン変性、傷害または可塑性障害により特徴付けられる疾患または症状におけるニューロンの増殖および／または修復の促進方法であって、有効で、非毒性かつ医薬上許容される量のＰＰＡＲγアゴニストまたはその医薬上許容される誘導体を投与することを含む方法。
【請求項２】
疾患または症状が、ニューロン変性により特徴付けられる請求項１記載の方法。
【請求項３】
疾患または症状が、卒中、アルツハイマー病、前頭側頭型痴呆（タウオパシー）、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、レビー小体型痴呆、外傷性脳傷害または脊髄傷害、多発性硬化症、脊髄小脳変性症、多系統萎縮症、先天性代謝異常およびハンチントン病から選択される請求項２記載の方法。
【請求項４】
疾患または症状が、ニューロン変性および／または可塑性障害により特徴付けられる請求項１記載の方法。
【請求項５】
疾患または症状が、統合失調症および鬱病から選択される請求項４記載の方法。
【請求項６】
疾患または症状が、ニューロン傷害に特徴付けられる請求項１記載の方法。
【請求項７】
疾患または症状が、頭部および／または脊髄傷害に特徴付けられる請求項６記載の方法。
【請求項８】
疾患または症状が、外傷および多発性硬化症から選択される請求項７記載の方法。
【請求項９】
ＰＰＡＲγアゴニストが、式（Ａ）：
【化１】
2008260777.tif 000005
で示される基を含有する化合物である請求項１記載の方法。
【請求項１０】
ＰＰＡＲγアゴニストが、５−（４−［２−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ピリジル）アミノ）エトキシ］ベンジル）−２，４−チアゾリジンジオン、（＋）−５−［［４−［（３，４−ジヒドロ−６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチル−２Ｈ−１−ベンゾピラン−２−イル）メトキシ］フェニル］メチル］−２，４−チアゾリジンジオン（またはトログリタゾン）、５−［４−［（１−メチルシクロヘキシル）メトキシ］ベンジル］チアゾリジン−２，４−ジオン（またはシグリタゾン）、５−［４−［２−（５−エチルピリジン−２−イル）エトキシ］ベンジル］チアゾリジン−２，４−ジオン（またはピオグリタゾン）および５−［（２−ベンジル−２，３−ジヒドロベンゾピラン）−５−イルメチル）チアゾリジン−２，４−ジオン（またはエングリタゾン）から選択される請求項１記載の方法。
【請求項１１】
ＰＰＡＲγアゴニストが、非チアゾリジンジオンＰＰＡＲγアゴニストである請求項１記載の方法。
【請求項１２】
ＰＰＡＲγアゴニストが、２（Ｓ）−（２−ベンゾイル−フェニルアミノ）−３−｛４−［２−５−メチル−２−フェニル−オキサゾール−４−イル）−エトキシ］−フェニル｝−プロピオン酸またはその医薬上許容される誘導体である請求項１記載の方法。
【請求項１３】
ニューロン変性、傷害または可塑性障害により特徴付けられる疾患または症状におけるニューロンの増殖および／または修復を促進するために用いるためのＰＰＡＲγアゴニストまたはその医薬上許容される誘導体。
【請求項１４】
ニューロン変性、傷害または可塑性障害により特徴付けられる疾患または症状におけるニューロンの増殖および／または修復を促進するための医薬の製造において用いるためのＰＰＡＲγアゴニストまたはその医薬上許容される誘導体。
【請求項１５】
ニューロン変性、傷害または可塑性障害により特徴付けられる疾患または症状におけるニューロンの増殖および／または修復の促進において用いるための医薬組成物であって、ＰＰＡＲγアゴニストまたはその医薬上許容される誘導体、および医薬上許容される担体を含んで成る医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規治療方法、特に、ニューロン変性、傷害または可塑性障害に特徴付けられる疾患または症状におけるニューロンの増殖および／または修復を促進するための方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
神経変性の過程は、卒中、アルツハイマー病、前頭側頭型痴呆（タウオパシー）、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、レビー小体型痴呆、外傷性脳傷害または脊髄傷害、多発性硬化症、脊髄小脳変性症、多系統萎縮症、先天性代謝異常およびハンチントン病を含む多くのＣＮＳ疾患の発生および進行における重要な因子である。現在は、かかるＣＮＳ疾患によるニューロン損傷の後の軸索再生を促進する利用可能な治療が存在しない。
加えて、損傷した軸索の再生の増大およびシナプス形成性の増強は、頭部および／または脊髄傷害の後のＣＮＳの機能的回復を可能にする重要な機構である。また、かかる機構は、シナプス形成性が疾患の病理学において役割を果たすと考えられる多くの精神障害において有益であり得る。
【０００３】
現在、神経変性の治療に関する治療薬は、傷害の後の炎症から生じる二次的な神経損傷を制限することおよび神経細胞死の基礎となる機構を操作することに依存している。卒中のような急性疾患において、血流の停止の後の細胞死は急速に起こるために迅速な医学的介入が必要とされるので、この方法は制限される。
卒中が発症した後、自発的な機能的回復が多くの患者で観察され、このことは、脳が傷害後に修復および／または再構築する能力を有することを示唆している。したがって、この修復を増強する可能性を有する薬剤、例えばニューロンの再増殖および／または修復を促進する薬剤は、脳虚血の発症のかなり後（潜在的には数日）での介入を可能にすることができる。したがって、傷害後の軸索発生を誘発する療法は、慢性および急性神経変性疾患において変性ＣＮＳによる機能的シナプス結合の喪失を再構築することに有用であり得る。
最後に、また、シナプス形成性の増大が有益であり得る疾患は、統合失調症および鬱病を含む精神障害である。効果的な抗鬱剤で慢性的に治療を受けている患者は、シナプス形成性の指標の増大を示すことが報告されている。したがって、ニューロンが神経突起を伸ばす能力を増強し、潜在的に、神経形成性を増大させる化合物は、これらの障害の予防および治療において有効であり得る。
【０００４】
欧州特許出願公開番号０３０６２２８号は、とりわけ、低血糖活性および低脂血症活性ならびにある種の摂食障害の治療における活性を有するとして開示されているある種のチアゾリジンジオン誘導体を開示している。ＥＰ０３０６２２８の実施例３０の化合物は、５−（４−［２−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ピリジル）アミノ）エトキシ］ベンジル）−２，４−チアゾリジンジオン（または「化合物（Ｉ）」）である。
欧州特許出願公開番号：０３０６２２８、０００８２０３、０１３９４２１、００３２１２８、０４２８３１２、０４８９６６３、０１５５８４５、０２５７７８１、０２０８４２０、０１７７３５３、０３１９１８９、０３３２３３１、０３３２３３２、０５２８７３４、０５０８７４０；国際特許出願公開番号９２／１８５０１、９３／０２０７９、９３／２２４４５および米国特許第４６８７７７７号、第５１０４８８８号および第５４７８８５２号は、また、低血糖活性および低脂血症活性を有することが示されているある種のチアゾリジンジオン誘導体を開示している。
ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体のγ−異性体（以後、ＰＰＡＲγと称する）は、ステロイド、甲状腺およびレチノイドホルモンに対する受容体を含む、核内受容体スーパーファミリーの一員であることが知られている（Evans, Science 240, 889-895, (1988)）。
【０００５】
J. Biol. Chem., 270,12963-12966から、化合物（Ｉ）のようなチアゾリジンジオンはＰＰＡＲγアゴニストであることが知られている。
さらに、ＰＰＡＲγアゴニストは、非チアゾリジンジオン、例えば、国際出願公開番号ＷＯ９７／３１９０７（またはＥＰ０８８８３１７）の式（Ｉ）で示される化合物を含む。一の特定の化合物は、２（Ｓ）−（２−ベンゾイル−フェニルアミノ）−３−｛４−［２−５−メチル−２−フェニル−オキサゾール−４−イル）−エトキシ］−フェニル｝−プロピオン酸（化合物（ＩＩ））である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
この度、意外にも、化合物（Ｉ）または化合物（ＩＩ）のようなＰＰＡＲγアゴニストが、ニューロンの増殖および／または修復を促進することが示され、かくして、ニューロン変性、傷害または可塑性障害により特徴付けられる疾患または症状の治療および／または予防において効力を有することが示された。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
したがって、本発明は、ニューロン変性、傷害または可塑性障害により特徴付けられる疾患または症状におけるニューロンの増殖および／または修復の促進方法であって、有効で、非毒性かつ医薬上許容される量の化合物（Ｉ）または化合物（ＩＩ）のようなＰＰＡＲγアゴニストまたはその医薬上許容される誘導体を投与することを含む方法を提供する。
【０００８】
適当には、該方法はニューロンの増殖を促進するためのものである。
適当には、該方法は、ニューロンの修復方法を提供するものである。
適当には、該疾患または症状は、ニューロン変性に特徴付けられるものである。
適当には、該疾患または症状は、ニューロン傷害に特徴付けられるものである。
適当には、該疾患または症状は、可塑性障害に特徴付けられるものである。
【０００９】
特定の疾患または症状は、ニューロン変性に特徴付けられ、したがって、ニューロンの増殖および／または修復が有益であるものであり、卒中、アルツハイマー病、前頭側頭型痴呆（タウオパシー）、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、レビー小体型痴呆、外傷性脳傷害または脊髄傷害、多発性硬化症、脊髄小脳変性症、多系統萎縮症、先天性代謝異常およびハンチントン病；適当には、卒中；適当には、アルツハイマー病；適当には、前頭側頭型痴呆（タウオパシー）；適当には、パーキンソン病；適当には、筋萎縮性側索硬化症；適当には、レビー小体型痴呆；適当には、外傷性脳傷害または脊髄傷害；適当には、多発性硬化症；適当には、脊髄小脳変性症；適当には、多系統萎縮症；適当には、先天性代謝異常；または適当には、ハンチントン病を含む。
ニューロン変性および／または可塑性障害により特徴付けられる疾患または症状は、精神障害、例えば、統合失調症および鬱病；適当には、統合失調症；適当には、鬱病を含む。
ニューロン傷害に特徴付けられる特定の疾患または症状は、外傷および多発性硬化症；適当には、外傷；適当には、多発性硬化症を含む、頭部および／または脊髄傷害に付随する症状を含む。
【００１０】
適当なＰＰＡＲγアゴニストは、チアゾリジンジオン、特にチアゾリジン−２，４−ジオンを含み、これは、式（Ａ）：
【化１】
2008260777.tif 000002
で示される基を含む化合物である。
【００１１】
式（Ａ）で示される基を含む適当な化合物は、式（Ｉ）：
【化２】
2008260777.tif 000003
［式中、Ｔは、１つまたはそれ以上のアルキル基、アラルキル基またはヘテロサイクリルアルキル基により置換されていてもよい、アリールまたはヘテロサイクリル基を意味し、該アルキル、アラルキルおよびヘテロサイクリルアルキル基は、それ自体置換されていてもよい］
で示される化合物またはその互変異性体および／またはその医薬上許容される塩および／またはその医薬上許容される溶媒和物を含む。
適当には、式（Ｉ）中の星印（＊）で標識された炭素原子は、キラル炭素原子である。
【００１２】
特に、Ｔは（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）、（ｆ）、（ｇ）、（ｈ）および（ｉ）：
【化３】
2008260777.tif 000004
から成る群から選択される基である。
特に、式（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）および（ｅ）で示される基である。
【００１３】
また、欧州特許出願公開番号：０３０６２２８、０００８２０３、０１３９４２１、００３２１２８、０４２８３１２、０４８９６６３、０１５５８４５、０２５７７８１、０２０８４２０、０１７７３５３、０３１９１８９、０３３２３３１、０３３２３３２、０５２８７３４および０５０８７４０、国際特許出願公開番号９２／１８５０１、９３／０２０７９、９３／２２４４５および米国特許第４６８７７７７号、第５１０４８８８号および第５４７８８５２号、特に、その明細書の実施例に開示されているＰＰＡＲγも、本発明の治療に含まれる。これらの刊行物の内容は、出典明示して本明細書に組み入れる。
【００１４】
チアゾリジンジオンＰＰＡＲγアゴニストは、いくつかの互変異性体の１つとして存在することができ、このすべては、個々の互変異性体またはそれらの混合物として本発明に組み入れられる。ＰＰＡＲγアゴニストがキラル炭素原子を含有する場合、したがって、１つもしくはそれ以上の立体異性体または１つもしくはそれ以上の幾何異性体が存在する場合、本発明の方法は、個々の異性体でも、ラセミ体を含むそれらの混合物であろうとも、すべての該形態のＰＰＡＲγアゴニストを包含することは理解できるだろう。
チアゾリジンジオンの特別な例としては、ＥＰ０３０６２２８およびＷＯ９４／０５６５９に開示されているものが挙げられる。さらに特別な例としては、ＥＰ０１３９４２１および米国特許第５４７８８５２号に開示されているチアゾリジンジオンが挙げられる。
【００１５】
好ましいチアゾリジンジオンは化合物（Ｉ）である。
さらに特別なチアゾリジンジオンは、（＋）−５−［［４−［（３，４−ジヒドロ−６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチル−２Ｈ−１−ベンゾピラン−２−イル）メトキシ］フェニル］メチル］−２，４−チアゾリジンジオン（またはトログリタゾン）、５−［４−［（１−メチルシクロヘキシル）メトキシ］ベンジル］チアゾリジン−２，４−ジオン（またはシグリタゾン）、５−［４−［２−（５−エチルピリジン−２−イル）エトキシ］ベンジル］チアゾリジン−２，４−ジオン（またはピオグリタゾン）または５−［（２−ベンジル−２，３−ジヒドロベンゾピラン）−５−イルメチル）チアゾリジン−２，４−ジオン（またはエングリタゾン）である。
特別なチアゾリジンジオンは、５−［４−［２−（５−エチルピリジン−２−イル）エトキシ］ベンジル］チアゾリジン−２，４−ジオン（またはピオグリタゾン）またはその医薬上許容される誘導体、例えば塩酸塩である。
【００１６】
上記したように、さらに、適当なＰＰＡＲγアゴニストは、非チアゾリジンジオンＰＰＡＲγアゴニスト、例えば、国際特許出願公開番号ＷＯ９７／３１９０７（またはＥＰ０８８８３１７）の式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体を含む。ＷＯ９７／３１９０７（またはＥＰ０８８８３１７）の特定の化合物は、化合物（ＩＩ）またはその医薬上許容される誘導体、例えばその医薬上許容される塩または医薬上許容される溶媒和物である。
上記した公開物、例えばＥＰ０３０６２２８、ＷＯ９４／０５６５９、ＷＯ９７／３１９０７およびＥＰ０８８８３１７は、出典明示して本明細書に組み入れる。
【００１７】
本明細書で用いられる場合、「ＰＰＡＲγアゴニスト」なる用語は、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体のガンマサブタイプの小分子量アゴニストのようなアゴニストに関し、この核内受容体は、ステロイド、レチノイドおよび甲状腺受容体を含むリガンド活性化転写因子ファミリーの一員である。
ＰＰＡＲγアゴニスト活性は、Lehmannら: Journal of Biological Chem., 270, 12953-12956 (1995)に開示されている方法を用いて評価することができる。
【００１８】
本明細書で用いられる場合、「アリール」なる用語は、５つまでの、好ましくは３つまでの、ハロゲン、アルキル、フェニル、アルコキシ、ハロアルキル、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルアルキル、アルキルカルボニルオキシまたはアルキルカルボニル基から選択される基により置換されていてもよいフェニルおよびナフチルを含む。
適当なヘテロサイクリル基は、芳香族および非芳香族ヘテロサイクリック基である。
適当な非芳香族ヘテロサイクリック基は、各々の環に、酸素、硫黄または窒素から選択される４つまでのヘテロ原子を含有し、所望により１つまたはそれ以上のアリール基と縮合している、単環または縮合環ヘテロサイクリック基を含有する基である。
適当な芳香族ヘテロサイクリック基は、各々の環に酸素、硫黄または窒素から選択される４つまでのヘテロ原子を含有する、置換または非置換の、単環または縮合環芳香族ヘテロサイクリル基を含む。
【００１９】
好ましい芳香族へテロサイクリル基は、５〜７つの環原子、好ましくは５または６つの環原子を有する、置換または非置換の単環式へテロサイクリル基を含む。
特に、芳香族へテロサイクリル基は、酸素、硫黄または窒素から選択される１、２または３つ、特に、１または２つのヘテロ原子を含有する。
ヘテロサイクリルに対する適当な置換基は、アルキル、アルコキシ、アリールおよびハロゲンから成る群から選択される４つまでの置換基を含み、または、隣接する炭素原子上のいずれの２つの置換基は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、アリール基、好ましくはベンゼン環を形成し、ここに、該２つの置換基により示されるアリール基の炭素原子は、それ自体、置換されていても、または非置換であってもよい。
「アリール」、「ヘテロアリール」およびその置換基の上記した定義は、上記した特許公報に開示されている、特定の化合物に関するのものとは異なっている場合、その公報の定義が優先することは理解できるだろう。
【００２０】
本明細書で用いられる場合、「ハロゲン」なる用語は、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素；好ましくは塩素を意味する。
本明細書で用いられる場合、「アルキル」および「アルコキシ」なる用語は、１２個までの炭素原子を含有する、直鎖または分枝鎖の炭素鎖を有する基である。
本明細書で用いられる場合、「アシル」なる用語は、アルキルカルボニル基を含む。
適当なアルキル基は、Ｃ１−１２アルキル基、特にＣ１−６アルキル基、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、イソブチルまたはｔｅｒｔ−ブチル基である。
いずれのアルキル基に対する適当な置換基は、「アリール」なる用語に関して上記したものを含む。
【００２１】
ＰＰＡＲγアゴニストの適当な誘導体は、医薬上許容される誘導体、例えば塩および溶媒和物である。
いずれのＰＰＡＲγアゴニストの適当な誘導体は、上記した公報に開示されているものを含む。
適当な医薬上許容される塩は、適当な酸由来の塩、例えば酸付加塩、または塩基由来の塩を含む。
【００２２】
適当な医薬上許容される塩は、例えば、アルミニウムのような金属塩、リチウム、ナトリウムまたはカリウムのようなアルカリ金属塩、カルシウムまたはマグネシウムのようなアルカリ土類金属塩、およびアンモニアまたは置換アンモニア塩、例えばトリエチルアミン、２−ヒドロキシエチルアミン、ビス−（２−ヒドロキシエチル）−アミンまたはトリ−（２−ヒドロキシエチル）−アミンのようなヒドロキシアルキルアミン、ビシクロヘキシルアミンのようなシクロアルキルアミンのような低級アルキルアミンとの塩、またはプロカイン、ジベンジルピペリジン、Ｎ−ベンジル−ｂ−フェネチルアミン、デヒドロアビエチルアミン、Ｎ，Ｎ’−ビスデヒドロアビエチルアミン、グルカミン、Ｎ−メチルグルカミンまたはピリジン型の塩基、例えばピリジン、コリジンまたはキノリンとの塩を含む。
【００２３】
適当な酸付加塩は、医薬上許容される無機塩、例えば、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、ホウ酸塩、塩酸塩および臭化水素酸塩ならびに医薬上許容される有機塩付加塩、例えば、酢酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、メタン−スルホン酸塩、α−ケトグルタル酸塩、グリセロリン酸塩、特にマレイン酸塩を含む。
化合物（Ｉ）の適当な医薬上許容される塩は、ＥＰ０３０６２２８およびＷＯ９４／０５６５９に開示されているものであり、マレイン酸塩を含む。
適当な医薬上許容される溶媒和物は水和物を含む。
化合物（Ｉ）の適当な医薬上許容される溶媒和物は、ＥＰ０３０６２２８およびＷＯ９４／０５６５９に開示されているものであり、水和物を含む。
化合物（ＩＩ）の適当な医薬上許容される誘導体、例えば塩または溶媒和物は、ＷＯ９７／３１９０７（またはＥＰ０８８８３１７）に開示されているものを含む。
【００２４】
本明細書において言及する、ＰＰＡＲγアゴニスト、例えば、チアゾリジンジオンまたは非チアゾリジンジオン、例えば、ＷＯ９７／３１９０７（または、ＥＰ０８８８３１７）に開示されている化合物は、有利には、上記した開示されている特許公報に開示されている方法に従って調製される：かくして、化合物（Ｉ）、またはその互変異性体、および／またはその医薬上許容される塩、および／またはその医薬上許容される溶媒和物は、ＥＰ０３０６２２８およびＷＯ９４／０５６５９に開示されている方法を用いて調製できる。また、化合物（ＩＩ）、またはその医薬上許容される誘導体、その塩または溶媒和物は、ＷＯ９７／３１９０７（またはＥＰ０８８８３１７）に記載されている方法を用いて調製できる。
チアゾリジンジオンの塩および／または溶媒和物は、慣用的な方法、例えば、上記した特許公報に開示されている方法に従って、調製することができ、単離することができる。
【００２５】
また、本発明は、ニューロン変性、傷害または可塑性障害により特徴付けられる疾患または症状におけるニューロンの増殖および／または修復を促進するために用いるためのＰＰＡＲγアゴニストまたはその医薬上許容される誘導体を提供する。
また、本発明は、ニューロン変性、傷害または可塑性障害により特徴付けられる疾患または症状におけるニューロンの増殖および／または修復を促進するための医薬の製造において用いるためのＰＰＡＲγアゴニストまたはその医薬上許容される誘導体を提供する。
【００２６】
上記した方法において、ＰＰＡＲγアゴニストは、それ自体、または好ましくは、医薬上許容される担体も含む医薬組成物として投与することができる。
本発明の治療において、本明細書に記載したＰＰＡＲγアゴニストは、上記した特許出願および特許に開示された方法に従って、処方され、投与される。
したがって、また、本発明は、ニューロン変性、傷害または可塑性障害により特徴付けられる疾患または症状におけるニューロンの増殖および／または修復を促進するための医薬組成物であって、ＰＰＡＲγアゴニストまたはその医薬上許容される誘導体、および医薬上許容される担体を含んで成る医薬組成物を提供する。
【００２７】
本明細書で用いられる場合、「医薬上許容される」なる用語は、ヒトおよび獣医での使用のための、化合物、組成物および成分を包含し、例えば、「医薬上許容される塩」なる用語は、獣医学的に許容される塩を包含する。
【００２８】
活性化合物は、通常、単独の薬剤として投与されるが、他の薬剤と組み合わせて投与することもできる。
また、該組合せは、ＰＰＡＲγアゴニスト、例えば、化合物（Ｉ）または化合物（ＩＩ）もしくはその医薬上許容される誘導体、あるいは式（Ｉ）で示される化合物もしくはその医薬上許容される誘導体および付加的な薬剤の同時投与、あるいは、ＰＰＡＲγアゴニスト、例えば、化合物（Ｉ）または化合物（ＩＩ）もしくはその医薬上許容される誘導体、あるいは式（Ｉ）で示される化合物もしくはその医薬上許容される誘導体および付加的な薬剤の逐次投与を含む。
【００２９】
同時投与は、ＰＰＡＲγアゴニスト、例えば、化合物（Ｉ）または化合物（ＩＩ）もしくはその医薬上許容される誘導体、あるいは式（Ｉ）で示される化合物もしくはその医薬上許容される誘導体および付加的な薬剤の両方を含む医薬組成物の投与、または、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体および付加的な薬剤の別個医薬組成物との、実質的に同時の投与を含む。
望ましい場合、組成物は、使用に関する手書きの、または印刷されている説明書が添え付けられたパックの形態であってもよい。
【００３０】
通常、本発明の医薬組成物は、他の経路、例えば注射および経皮吸収による投与のための組成物も考えられるが、経口投与に適しているだろう。
経口投与に特に適した組成物は、錠剤およびカプセルのような単位投与量形態である。他の適した単位投与量形態、例えばサッシェに入れた粉末も、また用いることができる。
慣用的な医薬手法に従って、担体は、希釈剤、充填剤、崩壊剤、湿潤剤、滑沢剤、着色剤、フレーバーまたは他の慣用的なアジュバントを含み得る。
典型的な担体は、例えば、微結晶セルロース、スターチ、スターチグリコール酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、ポリビニルポリピロリドン、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウムまたはシュークロースを含む。
【００３１】
ＰＰＡＲγアゴニストの適当な投与量は、例えば英国および米国薬局方、Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co.)、Martindale The Complete Drug Reference (London, The Pharmaceutical Press, 32nd Edition)のような参考テキストまたは上記した公報に記載されているか、または言及されているようなこれらの化合物の公知の投与量、または標準的な方法により決定することができる投与量を含む。
化合物（Ｉ）の適当な投与量は、ＥＰ０３０６２２８およびＷＯ９４／０５６５９に記載の投与量、ならびに１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２ｍｇの化合物（Ｉ）を含む。
化合物（Ｉ）の特別な投与量は、２ｍｇ、４ｍｇおよび８ｍｇである。
化合物（ＩＩ）もしくはその医薬上許容される誘導体、例えばその塩または溶媒和物の適当な投与量は、ＷＯ９７／３１９０７（またはＥＰ０８８８３１７）に開示されているものを含む。
【００３２】
本発明の組成物は、１日に１〜６回、最も好ましくは１日１または２回で、または上記した公報に開示されている別の周期で投与することができる。
固体経口組成物は、混合、充填または錠剤化の慣用的な方法により調製することができる。反復混合操作は、多量の充填剤を用いるこれらの組成物の全体に活性薬剤を分配させるために用いることができる。かかる操作は、当該分野において、もちろん慣用的なものである。錠剤は、通常の医薬手法においてよく知られた方法に従って、コーティング、特に腸溶コーティングすることができる。
【００３３】
経口液体製剤は、例えば、エマルジョン、シロップまたはエリキシルの形態であってもよく、または使用前に水または他の適当なビヒクルで復元する乾燥粉末の形態で与えられてもよい。かかる液体製剤は、慣用的な添加剤、例えば、懸濁化剤、例えばソルビトール、シロップ、メチルセルロースゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲル、硬化食用油；乳化剤、例えばレシチン、ソルビタンモノオレアート、ヤシ油、油性エステル、例えばグリセリン、プロピレングリコールまたはエチルアルコールのエステル；保存剤、例えばメチルまたはプロピルｐ−ヒドロキシベンゾエートまたはソルビン酸；および望ましい場合、慣用的なフレーバーまたは着色剤を含んでいてもよい。
【００３４】
非経口投与に関しては、流体単位投与量形態は、化合物および滅菌ビヒクルを利用して調製され、使用濃度に応じて、ビヒクルに懸濁するか、または溶解することができる。溶液の調製において、化合物を注射用の水に溶解することができ、適当なバイアルまたはアンプルに充填する前に濾過滅菌し、シールすることができる。有利には、局所麻酔剤、保存剤および緩衝化剤のようなアジュバントはビヒクルに溶解することができる。安定性を増強するために、組成物は、バイアルに充填する前に凍結させ、減圧下で水を除去することができる。非経口懸濁液は、化合物を溶解する代わりにビヒクルに懸濁し、滅菌を濾過により行えないこと以外は、実質的に同様の方法で調製される。化合物は、滅菌ビヒクルに懸濁する前に、エチレンオキシドに曝すことにより滅菌することができる。有利には、界面活性剤または湿潤剤が、化合物の均一な分配を促進するために組成物に含まれる。
【００３５】
組成物は、投与方法に応じて、０．１重量％〜９９重量％、好ましくは１０〜６０重量％の活性物質を含み得る。
望ましい場合、組成物は、使用に関する手書きの、または印刷されている説明書が添え付けられたパックの形態であってもよい。
組成物は、例えば英国および米国薬局方、Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co.), Martindale The Complete Drug Reference (London, The Pharmaceutical Press, 32nd Edition)および Harry's Cosmeticology (Leonard Hill Books)のような参考テキストに開示記載されているような慣用的な方法に従って処方できる。
【００３６】
シナプス可塑性の一の指標は、シナプス伝達の増加である。これは、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  Ｖｏｌ  ９５  ｐｐ１０２３５−１０２３９（１９９８）のＬｅｖｉｎｅ  Ｅ  Ｓ，  Ｃｒｏｚｉｅｒ  Ｒ  Ａ，  Ｂｌａｃｋ  Ｉ  Ｂ，  Ｐｌｕｍｍｅｒ  Ｍ  Ｒ．  「Ｂｒａｉｎ  ｄｅｒｉｖｅｄ  ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ  ｆａｃｔｏｒ  ｍｏｄｕｌａｔｅｓ  ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ  ｓｙｎａｐｔｉｃ  ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ  ｂｙ  ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ  Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ  ａｓｐａｒｔｉｃ  ａｃｉｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｃｔｉｖｉｔｙ」に記載されているような電気生理学的記録を用いて、培養海馬ニューロンにおいて測定できる。かくして、ニューロンは、試験化合物、例えば化合物（Ｉ）で処理することができ、ついで、グルタミン酸塩曝露の後、これらのシナプス伝達を対照に対して測定した。
【００３７】
上記の投与量の範囲において、本発明の組成物または方法に、不都合な毒性効果はないと考えられる。
以下の記載および実施例により本発明を説明するが、これらはいかなる点においても本発明を制限するものではない。
【００３８】
記載および実施例
一次神経細胞培養
妊娠１８日のラットの胚の海馬を切り取り、トリプシン（０．０８％、３７℃で３０分）中でインキュベートし、機械的に分離した（Skaperら、1990）。海馬細胞を、Ｂ２７、酸化防止剤、１ｍＭのグルタミン、２５μＭのグルタミン酸塩、１ｍＭのピルビン酸塩、＋／−化合物１（１０ｎＭ〜５μＭ）を捕捉した神経基礎培地またはビヒクル（ＤＭＳＯ）対照に再び懸濁した。
増殖アッセイに関して、細胞を、前もってポリ−Ｄ−リシン、ついで、１０％のＦＣＳでコートした９６ウェル皿に３０００細胞／ウェルの密度で置いた。ＲＮＡ単離に関して、細胞を、前もってポリ−Ｄ−リシン、ついで１０％のＦＣＳでコートした、３５ｍｍ組織培養皿に１×１０６細胞／ウェルで置いた。
【００３９】
ＲＮＡ単離および逆転写
ＲＮＡは、プレート１０ｃｍ２当たり１ｍｌのトリ−リージェント（Tri-reagent）（Sigma，Dorset，UK）を用いて、トリ−リージェント中に溶解した細胞から調製した。製造業者の提案したプロトコールに従って、さらに、追加のクロロホルム抽出工程および相分離ならびに７０％エタノール中での単離ＲＮＡの追加の洗浄を行って、全てのＲＮＡを組織から抽出した。ＲＮＡを、オートクレーブ二重蒸留水中に再び懸濁し、濃度はＡ２６０測定により計算した。ＲＮＡ特性を、１％のアガロースゲルでの電気泳動により評価した。ファーストストランドｃＤＮＡを、オリゴ（ｄＴ）１５および５００ｎｇの各々のＲＮＡ試料；０．０１Ｍのジチオトレイトール、０．５ｍＭの各々のｄＮＴＰ、０．５μｇのオリゴ（ｄＴ）１５プライマー、４０ＵのＲＮＡｓｅＯＵＴリボヌクレアーゼ阻害剤（Life Technologies, Paisley, UK）、２００ＵのスーパースクリプトＩＩ逆転写酵素(Life Technologies, Paisley, UK）を用いて合成した。ＲＮＡのゲノムＤＮＡ汚染の評価を可能にするために逆転写酵素を除いた反応と一緒に、逆転写反応を二重に行った。タックマン（Taqman）ＰＣＲを、以下の条件、５０℃で２分間、９５℃で１０分間、ついで、９５℃で１５秒、６０℃で１分間を４０周期で、ＡＢＩプリズム７７００連続検出器（Perkin Elmer, Cheshire, UK）を用いて行った。反応混合物は、ｃＤＮＡ試料（２０μｌの室温反応の５μｌ）；２．５ｍＭのＭｇＣｌ２、０．２ｍＭのｄＡＴＰ、ｄＣＴＰ、ｄＧＴＰおよびｄＵＴＰ、０．１μＭの各々のプライマー、０．０５μＭのタックマンプローブ、０．０１ＵのＡｍｐＥｒａｓｅウラシル-N-グリコシラーゼ（Perkin Elmer, Cheshire, UK）、０．０１２５ＵのＡｍｐｌｉｔａｑ Ｇｏｌｄ ＤＮＡポリメラーゼ（Perkin Elmer, Cheshire, UK）を含む。ラットＰＰＡＲ−ガンマタックマンプライマーおよびプローブの組を、プライマー発現ソフトウェア（Perkin Elmer, Cheshire, UK）を用いて設計した。プライマーおよびプローブ配列（５’−３’）（順方向プライマー、逆方向プライマー、タックマンプローブ）は以下の通りである；
順方向プライマー：ＣＴＧＡＣＣＣＡＡＴＧＧＴＴＧＣＴＧＡＴＴＡＣ
逆方向プライマー：ＧＧＡＣＧＣＡＧＧＣＴＣＴＡＣＴＴＴＧＡＴＣ
プローブ：ＦＡＭ−ＡＡＡＴＡＴＧＡＣＣＴＧＡＡＧＣＴＣＣＡＡＧＡＡＴＡＣＣＡＡＡＧＴＧＣ−ＴＡＭＲＡ
（アンプリコン（Ａｍｐｌｉｃｏｎ）は８０ｂｐであり、アンプリコンはラットＰＰＡＲガンマｍＲＮＡ（受け入れ番号ＡＢ０１１３６５）に整合し、１７６〜２５５である）
三重に増幅を行い、増幅の後、各々の試料（２μｌ）からの代表的なアンプリコンを、４％アガロースゲルで電気泳動に付して分子量を測定した。
【００４０】
神経突起成長アッセイ
化合物（Ｉ）をＤＭＳＯ中に溶解し、１：１０００の希釈度で細胞プレーティングする時に培養培地に加えた。ビヒクルのみ（１：１０００）を、未処理の対照の培養培地に加えた。４８時間後、細胞を氷上で４％のパラホルムアルデヒドで固定し、ＰＢＳで洗浄し、Coomassieを用いて染色した。アッセイをＫＳ３００画像解析システム（Imaging Associates, UK）を用いて定量した。各々の細胞の測定に関しては、細胞の端から最も長い細胞突起のまでの長さを、各々三重に処理した１００細胞／ウェルに関して測定した。すべてのデータは平均値であり、ＳＥＭは３回の独立した実験から得た。結果をビヒクルのみで処理した細胞の神経突起の長さのパーセントとして表す。
＃０．０１および０．０５μＭでの化合物（Ｉ）は、１回の実験のみで分析した（ｎ＝３）。
結果：結果を以下のような添付の図１（ａ）、１（ｂ）および２に示す。
図１（ａ）：ＰＰＡＲ−ガンマはラット一次海馬ニューロンにより発現される。（ａ）ラット一次海馬ニューロン由来のｃＤＮＡにおけるＰＰＡＲ−ガンマの即時ＰＣＲ（タックマン）増幅プロット。
図１（ｂ）：タックマン分析からのアンプリコンは、４％のアガロースゲルで分離された。脂肪由来のｃＤＮＡを正の対照として用いた。分子量は予測値である。
図２：化合物（Ｉ）は、投与依存法において、ラットの一次海馬ニューロンの神経突起の成長を増大させる。１００ｎＭの化合物（Ｉ）は、未処理の対照よりも約５０％成長を増大させる。
【００４１】
引用文献
Skaper SD, Facci L, Milani D, Leon A, and Toffano G (1990). In Methods in 
Neurosciences, Vol 2, Academic Press, San Diego. 
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１ａ】図１ａは、ラット一次海馬ニューロン由来のｃＤＮＡにおけるＰＰＡＲ−ガンマの即時ＰＣＲ（タックマン）増幅プロットを示す。
【図１ｂ】図１ｂは、タックマン分析からのアンプリコンのアガロースゲル上での分離を示す。
【図２】図２は、未処理のラットの一次海馬ニューロンの神経突起の成長に対する化合物（Ｉ）の各濃度での成長のパーセントを示す。
【図１ａ】
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【図１ｂ】
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【図２】
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