(57)【要約】【課題】血管平滑筋細胞の増殖を効率よく防止でき、再狭窄を長期に渡って抑制し抗血栓性を付与することができるステントを提供する。【解決手段】体温でゴム状エラストマーの柔軟な生分解吸収性ポリマーがステント表面に均一にコーテイングされ、そこから数ヶ月間にわたってエピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）が徐放されるようにする。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
金属材料または生分解性のポリマー材料からなるステント本体と、これを被覆するコーティング材からなり、このコーティング材は、ガラス転移点が３７℃以下で、結晶化度が４０％以下で、３７℃における弾性率が５ｘ１０６〜５ｘ１０８（ｄｙｎｅ／ｃｍ２）であるゴム状エラストマーの生分解吸収性ポリマー１００重量部に対して、純度９５％以上のエピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）を０．１〜３０重量部添加したものであることを特徴とするステント。
【請求項２】
前記ゴム状エラストマーの生分解吸収性ポリマーが、乳酸／カプロラクトン共重合体、乳酸／グリコール酸共重合体、グリコール酸／カプロラクトン共重合体、グリコール酸／トリメチレンカーボネート共重合体、ポリ−ｐ−ジオキサノン、乳酸／ポリエチレングリコール共重合体、乳酸／ｐ−ジオキサノン共重合体、あるいはセバシン酸をベースとする脂肪族ポリエステルであることを特徴とする請求項１に記載のステント。
【請求項３】
コーティング材中に、抗癌剤、抗炎症剤、抗血栓剤、抗酸化剤、あるいは免疫抑制剤をさらに含むことを特徴とする請求項１に記載のステント。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、経皮的冠動脈形成術等の後の再狭窄を長期間にわたって効率的に抑止するための薬剤溶出ステントに関する。
【背景技術】
【０００２】  近年、心臓の筋肉に栄養を送る冠動脈が狭くなったり詰まったりする狭心症や心筋梗塞などの虚血性心疾患は薬物療法、冠動脈バイパス術および経皮的冠動脈形成術（ＰＴＣＡ）によって治療が行われている。この治療でチタンなどの金属製ステントが多く用いられている。このステントは直径２〜３ｍｍ、長さ１３〜２８ｍｍの網目状の筒のことである。【０００３】  これは、足の付け根から血管内にカテーテルを挿入し、狭くなった血管を内側からバルーンで押し広げ、再び狭くなることを防ぐために使われている。このステントは１９９０年代に世界的に普及し多くの患者に恩恵を与え社会復帰できたものの、術後数年後には３０〜５０％の頻度で再狭窄が生じ、再手術を余儀なくされている。【０００４】  再狭窄を防止する対策の一つとして、必要とされる時期に生物学的生理活性物質を放出し、なおかつ生分解性高分子が生体内で分解して金属薄膜表面を有するステント本体が露出した場合、前記金属薄膜表面が、血管平滑筋細胞の粘着を抑制することを目的とし、種々の生物学的生理活性物質、例えば抗癌剤、免疫抑制剤、抗生物質、抗リウマチ剤、抗血栓薬、抗高脂血症薬、ＡＣＥ阻害剤、カルシウム拮抗剤、インテグリン阻害薬、抗アレルギー剤、抗酸化剤、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ拮抗薬、レチノイド、フラボノイド、カロチノイド、脂質改善薬、ＤＮＡ合成阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、抗血小板薬、血管平滑筋増殖抑制薬、抗炎症薬、生体由来材料、インターフェロンおよびＮＯ産生促進物質の徐放を試みている特許が知られている（特許文献１）。【０００５】  また、茶葉等に含まれるカテキン類には、抗酸化作用（Ｋｈｓａｎ  Ｓ．Ｇ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ，５２，４０５０（１９９２））、抗変異原性（Ｏｋｕｄａ  Ｔ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ，３２，３７５５（１９８４））、抗プロモーション活性（Ｙｏｓｈｉｚａｗａ  Ｓ．，Ｐｈｙｔｈｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｒｅｓ．，１，４４（１９８７））などと共に血管平滑筋細胞の増殖を抑える作用があることが報告されている（Ｌｉａｎｇ−ＨｕｅｉＬｕ，Ｓｈｏｅｉ−Ｓｈｅｎｇ  Ｌｅｅ  ａｎｄ  Ｈｕｅｉ−Ｃｈｅｎ  Ｈｕａｎｇ，Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１２４，１２２７−１２３７（１９９８））。これらの知見を基に、カテキンをステントの再狭窄防止に応用する試みがされた（特許文献２）。【０００６】  しかし、臨床の現場においてカテキン類を用いて再狭窄を抑止する手段は、いまだに成功していない。【０００７】  更に、カテキン類を含有する生分解性材料から構成されている血管内治療用材料、および、前記血管内治療用材料と、前記血管内治療用材料を保持する保持体とを備える血管内治療用器具が提案されている（特許文献３）。【０００８】  しかし、カテキン類は熱に対して極めて不安定で生分解性ポリマー例えばポリ乳酸を繊維状に成形する際、熱溶融成型されるのでその殆どが分解され活性を失ってしまう。【０００９】  薬剤溶出ステント用のポリマーとして非吸収性ポリマーを用いる場合、薬剤放出後も永久に体内に残存し、この残存ポリマーが将来炎症を惹起し、遠隔期における再狭窄やステント血栓症���要因となりうる。このような危惧をなくす目的で、スタチン系薬剤であるｂｉｏｌｉｍｕｓを添加した生分解吸収性ポリマーのポリ乳酸をステントにコーテイングした研究が報告されている（非特許文献１）。この論文では、ブタ冠動脈を用いた検討においてｂｉｏｌｉｍｕｓ溶出ステント留置１ヶ月後にはポリ乳酸が完全に消失し、ステントストラット周囲に炎症は認められず、血管表面は完全に内膜化していたようである。しかし、ポリ乳酸が１ヶ月で分解吸収されるはずはなく、１ヶ月の短期間での検討しかされていない。【００１０】  一方、現在臨床で使用されているステントのほとんどは金属製であるが、冠動脈ステントの歴史は２０年未満と浅く、体内に永久的に残留する金属製ステントの過大評価を危惧する声もある。実際、動脈ステントは手術後６〜９ヶ月間のみステントの機能を保持すれば、その後は生体内に不要の異物となるため、半永久的に残留することは望ましくない。【００１１】  １９９０年、米国のデューク大学は、必要な期間のみステントの機能を保持した後、体内に完全に分解吸収されるステントを開発し、イヌの動脈に応用した報告を行った。その後も生体内分解吸収性ステントの有用性や可能性が報告され、また、少ないながら臨床応用の報告もあるが、金属製ステント同様に再狭窄を惹起することがあるため、未だに広く使用されるには至っていない。
【特許文献１】特開２００５−１６８９３７
【特許文献２】米国特許ＵＳ  ６，２１４，８６８  Ｂ１
【特許文献３】特開２００２−８５５４９
【特許文献４】国際公開ＷＯ２００４／０８０５２１
【特許文献５】特開２００６−３３５６９５
【特許文献６】特許２９６１２８７
【非特許文献１】Ｈｏｎｄａ  Ｈ．ｅｔ  ａｌ，Ｅｖｅｒｏｌｉｕｍｓ−ｅｌｕｔｉｎｇ  ｓｔｅｎｔｓ  ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ  ｉｎｈｉｂｉｔ  ｎｅｏｉｎｔｉｍａｌ  ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ  ｉｎ  ａｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｐｉｇ  ｃｏｒｏｎａｒｙ  ｍｏｄｅｌ．Ａｍ．Ｊ  Ｃａｒｄｉｏ．２００２；９０：７２Ｈ．
【非特許文献２】Ｄ．−Ｗ．Ｈａｎ，Ｈ．Ｈ．Ｃｈｏ，Ｋ．Ｍａｔｓｕｍｕｒａ，Ｊ．−Ｃ．Ｐａｒｋ，Ｈ．Ｓ．Ｂａｅｋ，Ｈ．Ｒ．Ｌｉｍ，Ｍ．Ｈ．Ｌｅｅ，Ｙ．Ｉ．Ｗｏｏ，Ｓ．−Ｈ．Ｈｙｏｎ，“Ａｔｔｅｎｕａｔｅｄ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｍｉｇｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒａｔ  Ａｏｒｔｉｃ  Ｓｍｏｏｔｈ  Ｍｕｓｃｌｅ  Ｃｅｌｌｓ  ｉｎｔｏ  Ｅｐｉｇａｌｌｏｃａｔｅｃｈｉｎ−３−Ｏ−ｇａｌｌａｔｅ−Ｌｏａｄｅｄ  Ｃｏｌｌａｇｅｎ  Ｍａｔｒｉｃｅｓ”，Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１０（１），３６−４２（２００６）．
【非特許文献３】Ｄ．−Ｗ．Ｈａｎ，Ｈ．Ｒ．Ｌｉｍ，Ｈ．Ｓ．Ｂａｅｋ，Ｍ．Ｈ．Ｌｅｅ，Ｓ．Ｊ．Ｌｅｅ，Ｓ．−Ｈ．Ｈｙｏｎ，  Ｊ．−Ｃ．  Ｐａｒｋ，  “Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｅｐｉｇａｌｌｏｃａｔｅｃｈｉｎ−３−Ｏ−ｇａｌｌａｔｅ  ｏｎ  ｓｅｒｕｍ−ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ  ｒａｔ  ａｏｒｔｉｃ  ｓｍｏｏｔｈ  ｍｕｓｃｌｅ  ｃｅｌｌｓ  ｖｉａ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｆａｃｔｏｒ−  κ  Ｂ  ｄｏｗｎ−ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ”，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，３４５（１），１４８−１５５（２００６）．
【非特許文献４】Ｄ．−Ｗ．Ｈａｎ，Ｈ．Ｈ．Ｃｈｏ，Ｄ．−Ｙ．Ｊｕｎｇ，Ｊ．Ｊ．Ｌｅｅ，Ｋ．Ｍａｔｓｕｍｕｒａ，Ｊ．−Ｃ．Ｐａｒｋ，Ｓ．−Ｈ．Ｈｙｏｎ，“Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｓｍｏｏｔｈ  Ｍｕｓｃｌｅ  Ｃｅｌｌ  Ｂｅｈａｖｉｏｒｓ  Ｏｎｔｏ  Ｅｐｉｇａｌｌｏｃａｔｅｃｈｉｎ  Ｇａｌｌａｔｅ−Ｂｌｅｎｄｅｄ  Ｌ−Ｌａｃｔｉｄｅ／  ε  −Ｃａｐｒｏｌａｃｔｏｎｅ  Ｃｏｐｏｌｙｍｅｒｓ”，  Ｋｅｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，３４２−３４３（２００７），１８９−１９２．
【００１２】  一方、（特許文献４）の実施例１１には、「ステンレススチール製のステント本体にタクロリムスを重量比として２０％混合させたＰＬ／ＧＡ比７５／２５のポリ乳酸−グリコール酸共重合体をスプレー塗布した。」との記載がある。この特許では、金属製のステント薬剤を含有した生分解性のポリ乳酸をコーテイング材として用いているが、ポリ乳酸のガラス転移点は６０℃で体温より高いため、ステントがバルーンで拡張した際、亀裂が入ること、また、薬剤が初期に大量に放出されるバースト現象が起こること、などの欠点がある。【００１３】  また、（特許文献５）には、静脈グラフトをＥＧＣＧ溶液に浸漬することで内膜肥厚を抑制できることが示されているがステントへの応用は開示されていない。更に、（特許文献６）には、ポリグリコール酸モノフィラメントを編成して得られるステントが示されているが、この特許はステント本体が生分解性のポリマーから構成されており、ポリマーとしてポリ乳酸あるいはポリグリコール酸のように、ステントとして要求される形状維持のためのいわゆる硬いポリマーが使用されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】  本発明は、効率的かつ確実に血管平滑筋細胞の増殖を顕著に抑えることによって、ＰＴＣＡ後の再狭窄を防止することができる血管内治療用器具を臨床の場に提供することに主たる目的がある。【００１５】  本発明者らは、マウス線維芽細胞由来Ｌ９２９細胞およびブタ肝細胞を緑茶カテキンで処理することで、細胞分裂を一旦停止させ、またその洗浄により増殖を再開させることが可能であることを数年前に発見した。フローサイトメトリーを用いた詳細な検討より、カテキンを投与することによりＳ期、Ｍ期の細胞の減少とともにＧ０／Ｇ１期の細胞が増加し、洗浄後は徐々にＳおよびＭ期の細胞が増加してくることが確認された。【００１６】  この細胞増殖抑制作用に着目し、心臓血管外科分野における冠動脈バイパスグラフト手術時の内膜肥厚防止作用について検討した。虚血性心疾患に対する外科治療は、１９６０年代初頭に初めて冠動脈バイパス手術が行われて以来発達し、これまでに確立されてきた。【００１７】  冠動脈バイパス術に使用される大伏在静脈グラフトは、術後１０年以内にその４０〜５０％が閉塞もしくは高度の狭窄を来すとされ、その原因は新生内膜肥厚により静脈グラフト内腔に瀰漫性の変化が起こるためである。新生内膜肥厚は、移植静脈グラフトの採取時における手術手技による機械的ストレスおよび移植後の動脈圧負荷にさらされることによるストレスから平滑筋細胞が増殖することにより起こる。このようなグラフト移植後の狭窄を予防するためには、内膜肥厚を抑制する薬物療法が理想であるが、現時点では有効な薬物療法は確立されていない。【００１８】  研究としては、静脈グラフト採取時および移植後の平滑筋細胞のＭｉｔｏｇｅｎ−Ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｋｉｎａｓｅ（ＭＡＰＫ）シグナル伝達が活性化することで増殖のスイッチが入ることから、ＭＡＰＫ抑制剤を局所的あるいは全身的に投与するものがある。しかし、この合成阻害剤では非可逆的にＭＡＰＫシグナルを完全に遮断するため、予期不可能な合併症の可能性などの問題点がある。【００１９】  そこで、緑茶カテキンの主成分の一つであるエピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）の細胞増殖抑制作用が内膜肥厚を防止するのではないかと期待し、次の実験を行った（特許文献５）。【００２０】  ウサギ総頚動脈を、同側の外頚静脈にて置換し、静脈グラフトモデルとし、外頚静脈採取後のＥＧＣＧ処理による内膜肥厚抑制作用について検討した。採取した外頚静脈を、生理食塩水に１時間浸漬した後に移植したコントロール群、ＥＧＣＧ１ｍｇ／ｍＬ溶液に１時間浸漬した後に移植したＥＧＣＧ１ｍｇ群、ＥＧＣＧ０．１ｍｇ／ｍＬ溶液に１時間浸漬した後に移植したＥＧＣＧ０．１ｍｇ群の３群に分け検討した（各群それぞれｎ＝８）。移植後３週目に犠牲死とし、組織学的に内膜肥厚抑制効果を評価した。【００２１】  移植３週目に各群の静脈グラフトはすべて開存しており、ＨＥ染色にてＥＧＣＧ処理群は、コントロール群に比較し、内膜肥厚を抑制していた。また、各内膜の厚みを測定し比較した結果、内膜厚はＥＧＣＧ未処理系で１０４．７μｍ、ＥＧＣＧ０．１ｍｇ／ｍＬの系で４８．５μｍ、ＥＧＣＧ１ｍｇ／ｍＬの系で４３．５μｍであり、統計的有意差を���って濃度依存的に半分以下の厚みに抑えられることがわかった。また、ＭＡＰＫの一種であるＥＲＫ、ｐ３８の活性化を有意に抑えるという結果も得られた。これらの結果から、ＥＧＣＧ処理が内膜肥厚を抑制していることが確認され、静脈グラフトの成功率を高めるための有効な治療法となる可能性が示唆された。【００２２】  ポリフェノールが種々の生理活性作用、例えば、抗ガン作用、抗酸化作用、抗菌・抗ウィルス作用に優れていることは１９８０年代から多くの研究者によって報告されてきている。このポリフェノールが細胞増殖に及ぼす影響に関する研究も既に報告されているものの、そのほとんどはガン細胞の増殖を抑制するというもので、ポリフェノール、特に緑茶カテキンの主要成分の一つであるエピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ））が臓器（特に、心臓、腎臓、膵島、神経など）や細胞の機能保護、また、前述したように血管の内膜肥厚防止に有効であるということは、本発明者らによって発見されたものである。
【課題を解決するための手段】
【００２３】  そこで、本発明では、再狭窄を防止する薬剤として、高い生理活性を有する緑茶ポリフェノールの一種であるエピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）を用い、このＥＧＣＧを生分解性ポリマーに含有させステント素材にコーティングした薬物徐放性を有するステントの開発を行い、ステント表面の生分解ポリマー中のＥＧＣＧが拡散で放出されることにより、再狭窄を抑制したステントを提供する。また、本発明の血管内治療用器具は、内膜肥厚抑制剤を含有するゴム状の生分解吸収性材料から構成されていることを特徴とする。
【発明の効果】
【００２４】  経皮的冠動脈インターベンション（ＰＣＩ；Ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ  Ｃｏｒｏｎａｒｙ  Ｉｎｔｅｒｖａｎｔｉｏｎ）治療でのステント治療後に血管平滑筋細胞の増殖を効率よく防止でき、再狭窄を長期に渡って抑制することができる薬剤溶出ステント（ＤＥＳ；Ｄｒｕｇ  Ｅｌｕｔｉｎｇ  Ｓｔｅｎｔ）を提供できる。これにより長期間の抗血栓薬の服用や抗血栓薬による副作用の心配がなくなるばかりでなく、社会の高齢化に対応した低侵襲・低ストレスの医療技術を提供可能にする。【００２５】  また、心臓病の患者数は確実に増加しており、欧米と比較して少ないと言われていた日本でも今後さらに患者数の増加が予想されている。厚生労働省の人口動態統計（平成１６年）によれば、心臓病の年間死亡者数は１５９，６２５人、虚血性心疾患による死亡者数７１，２８５人で、ガンによる死亡者数３２０，３５８人、脳血管疾患による死亡者数１２９，０５５人に迫る勢いで増加している。従って、再狭窄を防止したステントを実用化することで、虚血性心疾患患者数の減少に貢献できるものと考えている。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２６】  本発明の血管内治療用器具は、金属性ステントあるいポリ乳酸などの生分解性ステントの表面に高純度のＥＧＣＧを含有した生分解性ポリマーがコーテイングされている。【００２７】  本発明のＥＧＣＧは、緑茶から抽出されたカテキンの一種で、最も抗酸化活性が高く血管平滑筋細胞の増殖を抑える作用がある。このＥＧＣＧの純度は高ければ高いほどその効果が高いので、９５％以上でも使用されるが９８％以上が最も効果が高い。【００２８】  本発明の生分解性材料は、生体内で分解され、なおかつ分解されたものが毒性を示さない材料であれば特に限定されないが、ガラス転移点が体温以下の３７℃のポリマーであり、また結晶化度が４０％以下のポリマー、例えば、乳酸／カプロラクトン共重合体、乳酸／グリコール酸共重合体、グリコール酸／カプロラクトン共重合体、グリコール酸／トリメチレンカーボネート共重合体、ポリ−ｐ−ジオキサノン、乳酸／ポリエチレングリコール共重合体、あるいは乳酸／ｐ−ジオキサノン共重合体などで、体温付近でゴム状エラストマーのポリマーが適している。【００２９】  ガラス転移点が体温以上であると薬物が拡散で放出されにくく、生分解性ポリマーの分解に伴って薬物が放出されるため徐放性の制御が困難である。また、体温で硬いとステントをバルーンで拡張する際にスムーズに拡張できなく、剥離や亀裂が生じやすい欠点がある。例えばポリ乳酸であるとガラス転移点が６０℃であるため体温では硬く、またポリグリコール酸ではガラス転移点が４０℃であるが結晶化度が約０％と高いため有機溶媒による溶解性が悪く、硬すぎるため本発明には適さない。【００３０】  本発明の血管内治療用具においては、上記生分解性材料がＥＧＣＧを含有している。含有の様態は、特に限定されず、ＥＧＣＧが生分解性材料からなるコーティング材中に均一または不均一に存在していてもよく、また生分解性材料中に局所的に存在していても良く、あるいはＥＧＣＧ徐放性を制御するためにナノもしくはマイクロ微小球を混入させても良い。【００３１】  コーティング材は、生分解性材料１００重量部に対し、ＥＧＣＧを０．１〜３０重量部、好ましくは、１〜２０重量部添加したものである。コーティング層の厚みは、例えば０．０１〜２００μｍである。【００３２】  本発明の血管内治療用具の製造方法は、特に限定されない。例えば、生分解性ポリマーとして乳酸／カプロラクトン共重合体を用いる場合、その良溶媒であるジオキサンやアセトンにポリマーを溶解させた後、一定量の割合でＥＧＣＧを攪拌下で溶解し、金属性もしくは生分解性ステントの表面に浸漬することで均一にコーテイングし、乾燥することで作成できる。【００３３】  また、市販のメデイコートステントコーテイングシステム（ＳＯＮＯ  ＴＥＫ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を用い、上記ジオキサンにポリマーとＥＧＣＧを溶解させた溶液をスプレーにてマイクロオーダーで塗布することもできる。本発明の血管内治療用具は、ステント本体が非分解性の金属材料もしくは生分解性のポリマー材料でも応用できる。本発明の血管内治療用器具は、ステント、カテーテル、バルーン、血管補綴材、人工血管等を保持体々することができ、中でも、保持体がステントであるのが��ましい形態である。【００３４】  以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明する。なお、本発明は下記の実施例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００３５】  ２ｍｌのジオキサンに乳酸／カプロラクトン共重合体（共重合組成比＝７５／２５、重量平均分子量２８５、０００）０．５ｇを溶解し、この溶液に、さらにＥＧＣＧ（純度９８％以上）を１００ｍｇ加えて溶解した。そして、この溶液に直径５０μｍ、内径２ｍｍ、長さ１ｃｍの円筒径のステンレス製のメッシュステントを浸漬させた後に乾燥させ、血管内治療用器具を作成した。このステントからのＥＧＣＧのｉｎ  ｖｉｔｒｏ溶出実験を３７℃の生理食塩中で行った。溶出されるＥＧＣＧの定量を、ＨＰＬＣを用い行った。その定量の条件はＯＤＳカラムに１０ｍＭリン酸：アセトニトリル＝８５：１５（ｖｏｌ／ｖｏｌ）を移動相としてＵＶ（２８０ｎｍ波長検出器で検出した。その結果、初期バーストがなく約１ヶ月にわたってＥＧＣＧの溶出が認められた。（図１）
【比較例１】
【００３６】    ２ｍｌのクロロホルムにポリＬ−乳酸、ＰＬＣＬ（重量平均分子量２１２，０００）０．５ｇを溶解し、さらにＥＧＣＧ（純度９８％）を１００ｍｇ加えて溶解した。この溶液に、さらにＥＧＣＧ（純度９８％）を１００ｍｇ加えて溶解した。そして、この溶液に直径５０μｍ、内径２ｍｍ、長さ１ｃｍの円筒径のステンレス製のメッシュステントを浸漬させた後に乾燥させ、血管内治療用器具を作成した。ＥＧＣＧのｉｎ  ｖｉｔｒｏ溶出実験を実施例１と同じように行ったところ、溶出１日目で３８％のＥＧＣＧが溶出し、その後十分なＥＧＣＧがリリース量が得られず、約６週間後に残存するＥＧＣＧが大量に放出された。このように、ポリ乳酸を用いた場合、約一ヶ月間にわたる長期の均一な徐放性が得られなかった。
【実施例２】
【００３７】  ＥＧＣＧ０，５，１０％含有乳酸／カプロラクトン共重合体、ＰＬＣＬ（共重合組成比＝５０／５０、重量平均分子量２６３、０００）フィルム上にラット血管平滑筋細胞を２００００ｃｅｌｌｓ播種し、３日間培養した時の細胞数を計数し、０％ＥＧＣＧ−ＰＬＣＬフィルム（比較例１）に対する比を調べた（図２）。ＥＧＣＧ含有量に比例して平滑筋細胞の増殖が抑制されていることがわかった。０％および５％ＥＧＣＧ含有ＰＬＣＬフィルム上で３日間培養したときのラット平滑筋細胞の光学顕微鏡像を図ｙに示した。０％ＥＧＣＧフィルム上では細胞が伸展して増殖傾向にあるのに対し、５％フィルム上で細胞が球状になり、増殖が停止している状態であることがわかる。
【実施例３】
【００３８】  ウサギ総頚動脈バルーン擦過による血管傷害モデルを用いた血管内治療効果について、実施例１で用いたステントによる内膜肥厚抑制作用について検討した。コントロール群として、ＥＧＣＧ含有ポリマーのコーテイングなしのステントを用いた。各群をｎ＝８とした。移植後８週目に犠牲死とし、組織学的に内膜肥厚抑制効果を評価した。移植８週目に各群のグラフトはすべて開存しており、ＨＥ染色にてＥＧＣＧ処理群は、コントロール群に比較し、内膜肥厚を抑制していた。また、各内膜の厚みを測定し比較した結果、内膜厚はコントロール群で１２４μｍ、ＥＧＣＧ処理群で４３μｍであり、統計的有意差を持ってコントロール群に比べて半分以下の厚みに抑えられることがわかった。（図３Ａ，３Ｂ）
【実施例４】
【００３９】  実施例１で用いたＥＧＣＧに変えて、ｂｉｏｌｉｍｕｓを添加した生分解吸収性ポリマーである乳酸／カプロラクトン共重合体、ＰＬＣＬ（共重合組成比＝５０／５０、重量平均分子量２６３、０００）を生分解吸収性ポリマーであるポリ乳酸のステントにコーテイングした。Ｂｉｏｌｉｍｕｓのｉｎ  ｖｉｔｒｏ溶出実験を実施例１と同じように行ったところ、初期バーストがなく約１ヶ月にわたってｂｉｏｌｉｍｕｓの溶出が認められた。
【図１】
2008253707.tif 000002
【図２】
2008253707.tif 000003
【図３Ａ】
2008253707.tif 000004
【図３Ｂ】
2008253707.tif 000005
【手続補正書】
【提出日】平成19年5月31日(2007.5.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、経皮的冠動脈形成術等の後の再狭窄を長期間にわたって効率的に抑止するための薬剤溶出ステントに関する。
【背景技術】
【０００２】  近年、心臓の筋肉に栄養を送る冠動脈が狭くなったり詰まったりする狭心症や心筋梗塞などの虚血性心疾患は薬物療法、冠動脈バイパス術および経皮的冠動脈形成術（ＰＴＣＡ）によって治療が行われている。この治療でチタンなどの金属製ステントが多く用いられている。このステントは直径２〜３ｍｍ、長さ１３〜２８ｍｍの網目状の筒のことである。【０００３】  これは、足の付け根から血管内にカテーテルを挿入し、狭くなった血管を内側からバルーンで押し広げ、再び狭くなることを防ぐために使われている。このステントは１９９０年代に世界的に普及し多くの患者に恩恵を与え社会復帰できたものの、術後数年後には３０〜５０％の頻度で再狭窄が生じ、再手術を余儀なくされている。【０００４】  再狭窄を防止する対策の一つとして、必要とされる時期に生物学的生理活性物質を放出し、なおかつ生分解性高分子が生体内で分解して金属薄膜表面を有するステント本体が露出した場合、前記金属薄膜表面が、血管平滑筋細胞の粘着を抑制することを目的とし、種々の生物学的生理活性物質、例えば抗癌剤、免疫抑制剤、抗生物質、抗リウマチ剤、抗血栓薬、抗高脂血症薬、ＡＣＥ阻害剤、カルシウム拮抗剤、インテグリン阻害薬、抗アレルギー剤、抗酸化剤、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ拮抗薬、レチノイド、フラボノイド、カロチノイド、脂質改善薬、ＤＮＡ合成阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、抗血小板薬、血管平滑筋増殖抑制薬、抗炎症薬、生体由来材料、インターフェロンおよびＮＯ産生促進物質の徐放を試みている特許が知られている（特許文献１）。【０００５】  また、茶葉等に含まれるカテキン類には、抗酸化作用（Ｋｈｓａｎ  Ｓ．Ｇ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ，５２，４０５０（１９９２））、抗変異原性（Ｏｋｕｄａ  Ｔ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ，３２，３７５５（１９８４））、抗プロモーション活性（Ｙｏｓｈｉｚａｗａ  Ｓ．，Ｐｈｙｔｈｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｒｅｓ，，１，４４（１９８７））などと共に血管平滑筋細胞の増殖を抑える作用があることが報告されている（Ｌｉａｎｇ−Ｈｕｅｉ  Ｌｕ，Ｓｈｏｅｉ−Ｓｈｅｎｇ  Ｌｅｅ  ａｎｄ  Ｈｕｅｉ−Ｃｈｅｎ  Ｈｕａｎｇ，Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１２４，１２２７−１２３７（１９９８））。これらの知見を基に、カテキンをステントの再狭窄防止に応用する試みがされた（特許文献２）。【０００６】  しかし、臨床の現場においてカテキン類を用いて再狭窄を抑止する手段は、いまだに成功していない。【０００７】  更に、カテキン類を含有する生分解性材料から構成されている血管内治療用材料、および、前記血管内治療用材料と、前記血管内治療用材料を保持する保持体とを備える血管内治療用器具が提案されている（特許文献３）。【０００８】  しかし、カテキン類は熱に対して極めて不安定で生分解性ポリマー例えばポリ乳酸を繊維状に成形する際、熱溶融成型されるのでその殆どが分解され活性を失ってしまう。【０００９】  薬剤溶出ステント用のポリマーとして非吸収性ポリマーを用いる場合、薬剤放出後も永久に体内に残存し、この残存ポリマーが将来炎症を惹起し、遠隔期における再狭窄やステント血栓��の要因となりうる。このような危惧をなくす目的で、スタチン系薬剤であるｂｉｏｌｉｍｕｓを添加した生分解吸収性ポリマーのポリ乳酸をステントにコーテイングした研究が報告されている（非特許文献１）。この論文では、ブタ冠動脈を用いた検討においてｂｉｏｌｉｍｕｓ溶出ステント留置１ヶ後にはポリ乳酸が完全に消失し、ステントストラット周囲に炎症は認められず、血管表面は完全に内膜化していたようである。しかし、ポリ乳酸が１ヶ月で分解吸収されるはずはなく、１ヶの短期間での検討しかされていない。【００１０】  一方、現在臨床で使用されているステントのほとんどは金属製であるが、冠動脈ステントの歴史は２０年未満と浅く、体内に永久的に残留する金属製ステントの過大評価を危惧する声もある。実際、動脈ステントは手術後６〜９ヶ間のみステントの機能を保持すれば、その後は生体内に不要の異物となるため、半永久的に残留することは望ましくない。【００１１】  １９９０年、米国のデューク大学は、必要な期間のみステントの機能を保持した後、体内に完全に分解吸収されるステントを開発し、イヌの動脈に応用した報告を行った。その後も生体内分解吸収性ステントの有用性や可能性が報告され、また、少ないながら臨床応用の報告もあるが、金属製ステント同様に再狭窄を惹起することがあるため、未だに広く使用されるには至っていない。
【特許文献１】特開２００５−１６８９３７
【特許文献２】米国特許ＵＳ  ６，２１４，８６８  Ｂ１
【特許文献３】特開２００２−８５５４９
【特許文献４】国際公開ＷＯ２００４／０８０５２１
【特許文献５】特開２００６−３３５６９５
【特許文献６】特許２９６１２８７
【非特許文献１】Ｈｏｎｄａ  Ｈ．ｅｔ  ａｌ，Ｅｖｅｒｏｌｉｕｍｓ−ｅｌｕｔｉｎｇ  ｓｔｅｎｔｓ  ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ  ｉｎｈｉｂｉｔ  ｎｅｏｉｎｔｉｍａｌ  ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ  ｉｎ  ａｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｐｉｇ  ｃｏｒｏｎａｒｙ  ｍｏｄｅｌ．Ａｍ．Ｊ  Ｃａｒｄｉｏ．２００２；９０：７２Ｈ．
【非特許文献２】Ｄ．−Ｗ．Ｈａｎ，Ｈ．Ｈ．Ｃｈｏ，Ｋ，Ｍａｔｓｕｍｕｒａ，Ｊ．−Ｃ．Ｐａｒｋ，Ｈ．Ｓ．Ｂａｅｋ，Ｈ．Ｒ．Ｌｉｍ，Ｍ．Ｈ．Ｌｅｅ，Ｙ．Ｉ．Ｗｏｏ，Ｓ．−Ｈ．Ｈｙｏｎ，”Ａｔｔｅｎｕａｔｅｄ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｍｉｇｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒａｔ  Ａｏｒｔｉｃ  Ｓｍｏｏｔｈ  Ｍｕｓｃｌｅ  Ｃｅｌｌｓ  ｉｎｔｏ  Ｅｐｉｇａｌｌｏｃａｔｅｃｈｉｎ−３−Ｏ−ｇａｌｌａｔｅ−Ｌｏａｄｅｄ  Ｃｏｌｌａｇｅｎ  Ｍａｔｒｉｃｅｓ”，Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１０（１），３６−４２（２００６）．
【非特許文献３】Ｄ．−Ｗ．Ｈａｎ，Ｈ．Ｒ．Ｌｉｍ，Ｈ．Ｓ．Ｂａｅｋ，Ｍ．Ｈ．Ｌｅｅ，Ｓ．Ｊ．Ｌｅｅ，Ｓ．−Ｈ．Ｈｙｏｎ，Ｊ．−Ｃ．Ｐａｒｋ，“Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｅｐｉｇａｌｌｏｃａｔｅｃｈｉｎ−３−Ｏ−ｇａｌｌａｔｅ  ｏｎ  ｓｅｒｕｍ−ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ  ｒａｔ  ａｏｒｔｉｃ  ｓｍｏｏｔｈ  ｍｕｓｃｌｅ  ｃｅｌｌｓ  ｖｉａ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｆａｃｔｏｒ−κ  Ｂ  ｄｏｗｎ−ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ”，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，３４５（１），１４８−１５５（２００６）．
【非特許文献４】Ｄ．−Ｗ．Ｈａｎ，Ｈ．Ｈ．Ｃｈｏ，Ｄ．−Ｙ．Ｊｕｎｇ，Ｊ．Ｊ．Ｌｅｅ，Ｋ．Ｍａｔｓｕｍｕｒａ，Ｊ．−Ｃ．Ｐａｒｋ，Ｓ．−Ｈ．Ｈｙｏｎ，“Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｓｍｏｏｔｈ  Ｍｕｓｃｌｅ  Ｃｅｌｌ  Ｂｅｈａｖｉｏｒｓ  Ｏｎｔｏ  Ｅｐｉｇａｌｌｏｃａｔｅｃｈｉｎ  Ｇａｌｌａｔｅ−Ｂｌｅｎｄｅｄ  Ｌ−Ｌａｃｔｉｄｅ／  ε  −Ｃａｐｒｏｌａｃｔｏｎｅ  Ｃｏｐｏｌｙｍｅｒｓ”，Ｋｅｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，３４２−３４３（２００７），１８９−１９２．
【００１２】  一方、（特許文献４）の実施例１１には、「ステンレススチール製のステント本体にタクロリムスを重量比として２０％混合させたＰＬ／ＧＡ比７５／２５のポリ乳酸−グリコール酸共重合体をスプレー塗布した。」との記載がある。この特許では、金属製のステント薬剤を含有した生分解性のポリ乳酸をコーテイング材として用いているが、ポリ乳酸のガラス転移点は６０℃で体温より高いため、ステントがバルーンで拡張した際、亀裂が入ること、また、薬剤が初期に大量に放出されるバースト現象が起こること、などの欠点がある。【００１３】  また、（特許文献５）には、静脈グラフトをＥＧＣＧ溶液に浸漬することで内膜肥厚を抑制できることが示されているがステントへの応用は開示されていない。更に、（特許文献６）には、ポリグリコール酸モノフィラメントを編成して得られるステントが示されているが、この特許はステント本体が生分解性のポリマーから構成されており、ポリマーとしてポリ乳酸あるいはポリグリコール酸のように、ステントとして要求される形状維持のためのいわゆる硬いポリマーが使用されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】  本発明は、効率的かつ確実に血管平滑筋細胞の増殖を顕著に抑えることによって、ＰＴＣＡ後の再狭窄を防止することができる血管内治療用器具を臨床の場に提供することに主たる目的がある。【００１５】  本発明者らは、マウス線維芽細胞由来Ｌ９２９細胞およびブタ肝細胞を緑茶カテキンで処理することで、細胞分裂を一旦停止させ、またその洗浄により増殖を再開させることが可能であることを数年前に発見した。フローサイトメトリーを用いた詳細な検討より、カテキンを投与することによりＳ期、Ｍ期の細胞の減少とともにＧ０／Ｇ１期の細胞が増加し、洗浄後は徐々にＳおよびＭ期の細胞が増加してくることが確認された。【００１６】  この細胞増殖抑制作用に着目し、心臓血管外科分野における冠動脈バイパスグラフト手術時の内膜肥厚防止作用について検討した。虚血性心疾患に対する外科治療は、１９６０年代初頭に初めて冠動脈バイパス手術が行われて以来発達し、これまでに確立されてきた。【００１７】  冠動脈バイパス術に使用される大伏在静脈グラフトは、術後１０年以内にその４０〜５０％が閉塞もしくは高度の狭窄を来すとされ、その原因は新生内膜肥厚により静脈グラフト内腔に瀰漫性の変化が起こるためである。新生内膜肥厚は、移植静脈グラフトの採取時における手術手技による機械的ストレスおよび移植後の動脈圧負荷にさらされることによるストレスから平滑筋細胞が増殖することにより起こる。このようなグラフト移植後の狭窄を予防するためには、内膜肥厚を抑制する薬物療法が理想であるが、現時点では有効な薬物療法は確立されていない。【００１８】  研究としては、静脈グラフト採取時および移植後の平滑筋細胞のＭｉｔｏｇｅｎ−Ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｋｉｎａｓｅ（ＭＡＰＫ）シグナル伝達が活性化することで増殖のスイッチが入ることから、ＭＡＰＫ抑制剤を局所的あるいは全身的に投与するものがある。しかし、この合成阻害剤では非可逆的にＭＡＰＫシグナルを完全に遮断するため、予期不可能な合併症の可能性などの問題点がある。【００１９】  そこで、緑茶カテキンの主成分の一つであるエピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）の細胞増殖抑制作用が内膜肥厚を防止するのではないかと期待し、次の実験を行った（特許文献５）。【００２０】  ウサギ総頚動脈を、同側の外頚静脈にて置換し、静脈グラフトモデルとし、外頚静脈採取後のＥＧＣＧ処理による内膜肥厚抑制作用について検討した。採取した外頚静脈を、生理食塩水に１時間浸漬した後に移植したコントロール群、ＥＧＣＧ  １ｍｇ／ｍＬ溶液に１時間浸漬した後に移植したＥＧＣＧ  １ｍｇ群、ＥＧＣＧ  ０．１ｍｇ／ｍＬ溶液に１時間浸漬した後に移植したＥＧＣＧ  ０．１ｍｇ群の３群に分け検討した（各群それぞれｎ＝８）。移植後３週目に犠牲死とし、組織学的に内膜肥厚抑制効果を評価した。【００２１】  移植３週目に各群の静脈グラフトはすべて開存しており、ＨＥ染色にてＥＧＣＧ処理群は、コントロール群に比較し、内膜肥厚を抑制していた。また、各内膜の厚みを測定し比較した結果、内膜厚はＥＧＣＧ未処理系で１０４．７μｍ．ＥＧＣＧ  ０．１ｍｇ／ｍＬの系で４８．５μｍ、ＥＧＣＧ  １ｍｇ／ｍＬの系で４３．５μｍであり、統計的���意差を持って濃度依存的に半分以下の厚みに抑えられることがわかった。また、ＭＡＰＫの一種であるＥＲＫ、ｐ３８の活性化を有意に抑えるという結果も得られた。これらの結果から、ＥＧＣＧ処理が内膜肥厚を抑制していることが確認され、静脈グラフトの成功率を高めるための有効な治療法となる可能性が示唆された。【００２２】  ポリフェノールが種々の生理活性作用、例えば、抗ガン作用、抗酸化作用、抗菌・抗ウィルス作用に優れていることは１９８０年代から多くの研究者によって報告されてきている。このポリフェノールが細胞増殖に及ぼす影響に関する研究も既に報告されているものの、そのほとんどはガン細胞の増殖を抑制するというもので、ポリフェノール、特に緑茶カテキンの主要成分の一つであるエピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ））が臓器（特に、心臓、腎臓、膵島、神経など）や細胞の機能保護、また、前述したように血管の内膜肥厚防止に有効であるということは、本発明者らによって発見されたものである。
【課題を解決するための手段】
【００２３】  そこで、本発明では、再狭窄を防止する薬剤として、高い生理活性を有する緑茶ポリフェノールの一種であるエピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）を用い、このＥＧＣＧを生分解性ポリマーに含有させステント素材にコーテイングした薬物徐放性を有するステントの開発を行い、ステント表面の生分解ポリマー中のＥＧＣＧが拡散で放出されることにより、再狭窄を抑制したステントを提供する。また、本発明の血管内治療用器具は、内膜肥厚抑制剤を含有するゴム状の生分解吸収性材料から構成されていることを特徴とする。
【発明の効果】
【００２４】  経皮的冠動脈インターベンション（ＰＣＩ；Ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ  Ｃｏｒｏｎａｒｙ  Ｉｎｔｅｒｖａｎｔｉｏｎ）治療でのステント治療後に血管平滑筋細胞の増殖を効率よく防止でき、再狭窄を長期に渡って抑制することができる薬剤溶出ステント（ＤＥＳ；Ｄｒｕｇ  Ｅｌｕｔｉｎｇ  Ｓｔｅｎｔ）を提供できる。これにより長期間の抗血栓薬の服用や抗血栓薬による副作用の心配がなくなるばかりでなく、社会の高齢化に対応した低侵襲・低ストレスの医療技術を提供可能にする。【００２５】  また、心臓病の患者数は確実に増加しており、欧米と比較して少ないと言われていた日本でも今後さらに患者数の増加が予想されている。厚生労働省の人口動態統計（平成１６年）によれば、心臓病の年間死亡者数は１５９，６２５人、虚血性心疾患による死亡者数７１，２８５人で、ガンによる死亡者数３２０，３５８人、脳血管疾患による死亡者数１２９，０５５人に迫る勢いで増加している。従って、再狭窄を防止したステントを実用化することで、虚血性心疾患患者数の減少に貢献できるものと考えている。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２６】  本発明の血管内治療用器具は、金属性ステントあるいポリ乳酸などの生分解性ステントの表面に高純度のＥＧＣＧを含有した生分解性ポリマーがコーテイングされている。【００２７】  本発明のＥＧＣＧは、緑茶から抽出されたカテキンの一種で、最も抗酸化活性が高く血管平滑筋細胞の増殖を抑える作用がある。このＥＧＣＧの純度は高ければ高いほどその効果が高いので、９５％以上でも使用されるが９８％以上が最も効果が高い。【００２８】  本発明の生分解性材料は、生体内で分解され、なおかつ分解されたものが毒性を示さない材料であれば特に限定されないが、ガラス転移点が体温以下の３７℃のポリマーであり、また結晶化度が４０％以下のポリマー、例えば、乳酸／カプロラクトン共重合体、乳酸／グリコール酸共重合体、グリコール酸／カプロラクトン共重合体、グリコール酸／トリメチレンカーボネート共重合体、ポリ−ｐ−ジオキサノン、乳酸／ポリエチレングリコール共重合体、あるいは乳酸／ｐ−ジオキサノン共重合体などで、体温付近でゴム状エラストマーのポリマーが適している。【００２９】  ガラス転移点が体温以上であると薬物が拡散で放出されにくく、生分解性ポリマーの分解に伴って薬物が放出されるため徐放性の制御が困難である。また、体温で硬いとステントをバルーンで拡張する際にスムーズに拡張できなく、剥離や亀裂が生じやすい欠点がある。例えばポリ乳酸であるとガラス転移点が６０℃であるため体温では硬く、またポリグリコール酸ではガラス転移点が４０℃であるが結晶化度が約０％と高いため有機溶媒による溶解性が悪く、硬すぎるため本発明には適さない。【００３０】  本発明の血管内治療用具においては、上記生分解性材料がＥＧＣＧを含有している。含有の様態は、特に限定されず、ＥＧＣＧが生分解性材料からなるコーティング材中に均一または不均一に存在していてもよく、また生分解性材料中に局所的に存在していても良く、あるいはＥＧＣＧ徐放性を制御するためにナノもしくはマイクロ微小球を混入させても良い。【００３１】  コーティング材は、生分解性材料１００重量部に対し、ＥＧＣＧを０．１〜３０重量部、好ましくは、１〜２０重量部添加したものである。コーティング層の厚みは、例えば０．０１〜２００μｍである。【００３２】  本発明の血管内治療用具の製造方法は、特に限定されない。例えば、生分解性ポリマーとして乳酸／カプロラクトン共重合体を用いる場合、その良溶媒であるジオキサンやアセトンにポリマーを溶解させた後、一定量の割合でＥＧＣＧを攪拌下で溶解し、金属性もしくは生分解性ステントの表面に浸漬することで均一にコーテイングし、乾燥することで作成できる。【００３３】  また、市販のメデイコートステントコーテイングシステム（ＳＯＮＯ  ＴＥＫ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を用い、上記ジオキサンにポリマーとＥＧＣＧを溶解させた溶液をスプレーにてマイクロオーダーで塗布することもできる。本発明の血管内治療用具は、ステント本体が非分解性の金属材料もしくは生分解性のポリマー材料でも応用できる。本発明の血管内治療用器具は、ステント、カテーテル、バルーン、血管補綴材、人工血管等を保持体とすることができ、中でも、保持体がステントであるのが��ましい形態である。【００３４】  以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明する。なお、本発明は下記の実施例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００３５】  ２ｍｌのジオキサンに乳酸／カプロラクトン共重合体（共重合組成比＝７５／２５、重量平均分子量２８５、０００）０．５ｇを溶解し、この溶液に、さらにＥＧＣＧ（純度９８％以上）を１００ｍｇ加えて溶解した。そして、この溶液に直径５０μｍ、内径２ｍｍ、長さ１ｃｍの円筒径のステンレス製のメッシュステントを浸漬させた後に乾燥させ、血管内治療用器具を作成した。このステントからのＥＧＣＧのｉｎ  ｖｉｔｒｏ溶出実験を３７℃の生理食塩中で行った。溶出されるＥＧＣＧの定量を、ＨＰＬＣを用い行った。その定量の条件はＯＤＳカラムに１０ｍＭリン酸：アセトニトリル＝８５：１５（ｖｏｌ／ｖｏｌ）を移動相としてＵＶ（２８０ｎｍ波長検出器で検出した。その結果、初期バーストがなく約１ヶ月にわたってＥＧＣＧの溶出が認められた。（図１）
【比較例１】
【００３６】    ２ｍｌのクロロホルムにポリＬ−乳酸、ＰＬＣＬ（重量平均分子量２１２，０００）０．５ｇを溶解し、さらにＥＧＣＧ（純度９８％）を１００ｍｇ加えて溶解した。この溶液に、さらにＥＧＣＧ（純度９８％）を１００ｍｇ加えて溶解した。そして、この溶液に直径５０μｍ、内径２ｍｍ、長さ１ｃｍの円筒径のステンレス製のメッシュステントを浸漬させた後に乾燥させ、血管内治療用器具を作成した。ＥＧＣＧのｉｎ  ｖｉｔｒｏ溶出実験を実施例１と同じように行ったところ、溶出１日目で３８％のＥＧＣＧが溶出し、その後十分なＥＧＣＧがリリース量が得られず、約６週間後に残存するＥＧＣＧが大量に放出された。このように、ポリ乳酸を用いた場合、約一ヶ月間にわたる長期の均一な徐放性が得られなかった。
【実施例２】
【００３７】  ＥＧＣＧＯ，５，１０％含有乳酸／カプロラクトン共重合体、ＰＬＣＬ（共重合組成比＝５０／５０、重量平均分子量２６３、０００）フィルム上にラット血管平滑筋細胞を２００００ｃｅｌｌｓ播種し、３日間培養した時の細胞数を計数し、０％ＥＧＣＧ−ＰＬＣＬフィルム（比較例１）に対する比を調べた（図２）。ＥＧＣＧ含有量に比例して平滑筋細胞の増殖が抑制されていることがわかった。０％および５％ＥＧＣＧ含有ＰＬＣＬフィルム上で３日間培養したときのラット平滑筋細胞の光学顕微鏡像を図ｙに示した。０％ＥＧＣＧフィルム上では細胞が伸展して増殖傾向にあるのに対し、５％フィルム上で細胞が球状になり、増殖が停止している状態であることがわかる。
【実施例３】
【００３８】  ウサギ総頚動脈バルーン擦過による血管傷害モデルを用いた血管内治療効果について、実施例１で用いたステントによる内膜肥厚抑制作用について検討した。コントロール群として、ＥＧＣＧ含有ポリマーのコーテイングなしのステントを用いた。各群をｎ＝８とした。移植後８週目に犠牲死とし、組織学的に内膜肥厚抑制効果を評価した。移植８週目に各群のグラフトはすべて開存しており、ＨＥ染色にてＥＧＣＧ処理群は、コントロール群に比較し、内膜肥厚を抑制していた。また、各内膜の厚みを測定し比較した結果、内膜厚はコントロール群で１２４μｍ、ＥＧＣＧ処理群で４３μｍであり、統計的有意差を持ってコントロール群に比べて半分以下の厚みに抑えられることがわかった。（図３Ａ，３Ｂ）
【実施例４】
【００３９】  実施例１で用いたＥＧＣＧに変えて、ｂｉｏｌｉｍｕｓを添加した生分解吸収性ポリマーである乳酸／カプロラクトン共重合体、ＰＬＣＬ（共重合組成比＝５０／５０、重量平均分子量２６３、０００）を生分解吸収性ポリマーであるポリ乳酸のステントにコーテイングした。Ｂｉｏｌｉｍｕｓのｉｎｖｉｔｒｏ溶出実験を実施例１と同じように行ったところ、初期バーストがなく約１ヶ月にわたってｂｉｏｌｉｍｕｓの溶出が認められた。
【図面の簡単な説明】
【図１】ステントからのＥＧＣＧのｉｎ  ｖｉｔｒｏ溶出実験の結果を示す図である。
【図２】ＰＬＣＬフィルム上でのラット平滑筋細胞の細胞数を計数した結果、及び光学顕微鏡像を示す一組の図である。
【図３Ａ】ステントによる内膜肥厚抑制作用について示す図（１）である。
【図３Ｂ】ステントによる内膜肥厚抑制作用について示す図（２）である。