(57)【要約】【課題】  従来知見による技術では安全性が高く、優れた抗真菌活性の抗真菌性組成物及びその製造方法が工業的優位に出来ていない。【解決手段】  柑橘類の果皮乾留液をエーテル抽出し、更に分画することを特徴とするキシレノール各種異性体を含むフェノール化合物の混合物は安全性が高く、優れた抗真菌活性をもった抗真菌活性組成物として工業的優位に製造できる。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
キシレノール各種異性体を含むフェノール化合物の混合物からなる抗真菌性組成物。
【請求項２】
フェノール化合物がベンジルアルコール、２−イミダゾールカルボキシアルデヒド及びキシレノール各種異性体の混合物である請求項１記載の抗真菌性組成物。
【請求項３】
フェノール化合物が２−イミダゾールカルボキシアルデヒドとキシレノール各種異性体の混合物である請求項１記載の抗真菌性組成物。
【請求項４】
フェノール化合物がキシレノール各種異性体の混合物である請求項１記載の抗真菌性組成物。
【請求項５】
前記キシレノール各種異性体の混合物が３，４―キシレノール、２，３―キシレノールおよび他のキシレノール異性体を1種類以上含有することを特徴とする請求項１、２、３および４記載の抗真菌性組成物。
【請求項６】
柑橘類の果皮乾留液をエーテル抽出し、更に分画することを特徴とするキシレノール各種異性体を含むフェノール化合物の混合物の製造方法。
【請求項７】
柑橘類の果皮乾留液をエーテル抽出し、更に分画して得られたフェノール成分をカラムクロマトグラフィーにより分画することを特徴とするベンジルアルコール、２−イミダゾールカルボキシアルデヒド及びキシレノール各種異性体の混合物の製造方法。
【請求項８】
柑橘類が温州みかんであることを特徴とする請求項６、７記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は水虫など治療予防の抗真菌性組成物及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
国内では果樹類が比較的多く栽培され、果汁の利用も多い。果汁は、例えば、生産量の多い温州みかんでは７０〜８０℃の熱湯に約１分間浸漬して皮をむき、圧搾機に掛けると果汁が得られるが、果皮と果汁かすが副産物として出来る。これらの大半は目下、産業廃棄物として焼却または埋め立てされており有効利用が待たれている。
一方、植物の抽出物による白癬菌に対する抗菌殺菌作用を利用した水虫治療薬に関する提案は、従来より種々なされている。
特開平８−３５９５０４号公報では木酢液を主剤として利用することが提案されている。しかしこの木酢液は異臭が強く患者に不快感を与える難点がある。また木酢液にはいろんな不純物が含まれている。
特開２００１−２８８０９６号公報では木酢液に梅酢液を併用することを提案している。しかし異臭は梅酢液の持つ甘い香りによるマスキング効果で減少するものの、不快感は残っている。また木酢液のいろんな不純物はそのまま残っている。
【０００３】
【特許文献１】特開平８−３５９５０４号公報
【特許文献２】特開２００１−２８８０９６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
従って本発明は植物の抽出物を利用した新たな水虫治療予防物質を開発するものであり、産業廃棄物である柑橘類の果皮を有効に活用出来、水虫など治療予防の抗真菌性組成物及びその製造方法を工業的優位に提供することを目標とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは柑橘類の果皮乾留液中に含まれる化合物の生理活性性を鋭意研究した結果、キシレノール各種異性体を含むフェノール化合物の混合物が白癬菌に対し、抗真菌活性に優れることを見出し、本発明を完結するに至った。
【発明の効果】
【０００６】
本発明の効果としては、先ず第１に悪臭などのしない水虫など治療予防の抗真菌性組成物を工業的優位に提供できることであり次には産業廃棄物を有効利用できることであり、しかも不純物を分画除去しており安全性が高いことである。すなわち、本発明の目的は産業廃棄物を利用して水虫など治療予防の抗真菌性組成物を工業上有利に提供することにある。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明におけるキシレノール（以下Xｙと略称する）各種異性体、ベンジルアルコール（以下BAと略称する）及び２−イミダゾールカルボキシアルデヒド（以下Iｍと略称する）は合成品でも良いが、柑橘類の果皮乾留液をエーテル抽出し、更に分画して得られたXｙ各種異性体を含むフェノール成分そのままでも良い。そのフェノール成分をカラムクロマトグラフィーにより分画したものが産業廃棄物利用の点から好ましい。このうちBAは抗真菌活性を殆んど示さないが、悪影響も及ぼさない。Iｍも単独では抗真菌活性を余り示さないが、Xｙ各種異性体の抗真菌活性をあげる効果がある。BA、Iｍはいずれも柑橘類の果皮乾留液をエーテル抽出し、更に分画して得られたフェノール成分をカラムクロマトグラフィーにより分画したXｙ各種異性体とともに含まれているのでそのまま利用でき、経済的であるが、合成品を使用する場合はBA、Iｍを使用しないほうが経済的に有利である。Xｙには各種異性体が存在する。いずれの異性体も抗真菌活性を示すが、３、４−Xｙ及び２、３−Xｙの２異性体は抗真菌活性が強く、次いで２、６−Xｙの抗真菌活性が強い。また３、４−Xｙ及び２、３−Xｙの２異性体に他のXｙ異性体を一種以上共存させると抗真菌活性が更に強まり、好ましい。例えば、３、４−Xｙ、２、３−Xｙおよび２、６−Xｙの３種類の異性体とIｍが共存する組み合わせで相乗効果を発揮する。即ち柑橘類の果皮乾留液をエーテル抽出し、更に分画して得られたフェノール成分をそのまま使用しても良いが、更にカラムクロマトグラフィーにより分画して得られるIｍ、２、６−Xｙ、３、４−Xｙ及び２、３−Xｙの４成分混合物が抗真菌活性をあげる効果が優れていることが判明している。その抗真菌性活性発現に必要な各成分の最小重量比はIｍ：２、６−Xｙ：３、４−Xｙ：２、３−Xｙ＝３：３：４：３である。
【０００８】
本発明におけるフェノール成分の製造は１例としてあげれば次の如くして行なわれる。先ず、柑橘類の果皮乾留液に１０％硫酸、飽和食塩水を添加してエチルエーテルで抽出を行ない、そのエーテル層に３％苛性カリウム、２０％食塩水を添加してエーテル抽出を行なう。その水層に再度１０％硫酸、飽和食塩水を添加してエチルエーテルで抽出を行ない、更に得られたエーテル層に４０％亜硫酸水素ナトリウムを添加して、エーテル層を得る。更に１０％炭酸ソーダ、２０％食塩水を添加して得られたエーテル層にシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ワコーゲル  C-２００  :和光純薬製）により分画して得られる。
【０００９】
本発明におけるXｙ各種異性体、BA、及びIｍの製造は前記の如くして得られたフェノール成分を更にカラムクロマトグラフィーで分画を繰返すことにより本発明に使用されるXｙ各種異性体、BA及びIｍが製造される。
【実施例】
【００１０】
以下、本発明を実施例によって具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例により何ら限定されるものではない。
【００１１】
（抗真菌活性測定方法）内径３５ｍｍのシャーレにサブロウ培地１ｍｌを入れ、サンプルのメタノール溶液（２５〜２００ｍｇ／ｍｌ）２０ｍｌを白癬菌の生理食塩水縣濁溶液５０ｍｌを加えた。メタノール２０ｍｌのみを加えた菌ブランク、メタノール２０ｍｌと生理食塩水５０ｍｌを加えたものを培地ブランクとした。３０℃で静置培養した後、肉眼で菌の発育状態を観察した。発育状態の結果は、培地ブランクを０％、菌ブランクを１００％として決定した。
【００１２】
（白癬菌の保存）サブロウ寒天培地（ブドウ糖４ｇ、ペプトン１ｇ、寒天２ｇを純水１０００ｍｌに加温溶解し、試験管１０本に分注して１２１℃で１５分間高圧蒸気滅菌したもの）を用いて、３０℃で３〜４日間斜面培養した。新しいコロニーが増殖した後、４℃で保存した。但し、１ケ月ごとに白金耳で古いコロニーを新しい斜面培地に移植して継代した。
【００１３】
（機器分析）ガスクロマトグラフィーは日立ガスクロマトグラフィーＧ−５０００（キャピラリーカラム  ＤＢ−１）型を用いた。液体クロマトグラフィーは島津高速液体クロマトグラフＬＣ−６ＡＤ、及び日本分析工業ＬＣ−０９型を用いた。ＧＣ−ＭＳスペクトルは日本電子ＪＥＯＬ−ＪＭＮ−ＨＸ質量分析計を用いて測定した。
【００１４】
・  実施例１
温州みかん果皮からの乾留液７リッターを分液ロートでエーテル抽出し、エーテル濃縮後、２８０ｇの抽出物を得た。常法（栗山旭、日本木材学会講要、１６、１９０、１９６６）により、温州みかん乾留液抽出物を中性成分（Ａ）、塩基性成分（Ｂ）、フェノール成分（Ｃ）、酸性成分（Ｄ）およびカルボニル成分（Ｅ）に分画した。それらの抗真菌活性を測定した。
【表１】
2008308431.tif 000002
上表よりフェノール成分（C）が良いことが判る。次に活性の認められたフェノール成分（C）についてシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ワコーゲル  C−２００  ：和光純薬製）による分画を下図の如く行なった。
【表２】
2008308431.tif 000003
上図の各フラクションの抗真菌活性測定結果は下表の如くであった。なおC2-1とC2-4は同一成分と認められた。
【表３】
2008308431.tif 000004
フェノール成分より分画したC1-1〜C1-4の抗真菌活性測定の結果はC1-1及びC1-２に活性が認められた。C1-1より分画した C２-1〜C２-３およびC1-２より分画したC２-４〜 C２-７の抗真菌活性を測定した結果、C２-1 とC２-４に活性が認められた。但し前述のようにC２-1 とC２-４は同一成分と確認された。次にC２-1より分画した C３-1〜C３-３の抗真菌活性を測定した結果、C３-1に活性が認められた。C３-1より分画した C４-1〜C４-４の抗真菌活性を測定した結果、C４-３に活性が認められた。C４-３より分画した C５-1〜C５-４の抗真菌活性を測定した結果、C５-２に活性が認められた。GC-MSの開裂パターンによる同定を行なったところ、Xｙ各種異性体（２，５−Xｙ、３，５―Xｙ、２，６―Xｙ、３，４−Xｙおよび２，３―Xｙ）、BA及びIｍであった。
【００１５】
・  比較例１
実施例１で得られたC５-２即ち、Xｙ各種異性体（２，５−Xｙ、３，５―Xｙ、２，６―Xｙ、３，４−Xｙおよび２，３―Xｙ）、BA及びIｍ各化合物単独の抗真菌活性を各化合物の標品を用いて測定した。
【表４】
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上表の如くXｙ各種異性体（２，５−Xｙ、３，５―Xｙ、２，６―Xｙ、３，４−Xｙおよび２，３―Xｙ）、BA及びIｍ各化合物は単独では強い抗真菌活性を示さなかった。
【００１６】
・  実施例２
実施例１で得られたC５-２即ち、Xｙ各種異性体（２，５−Xｙ、３，５―Xｙ、２，６―Xｙ、３，４−Xｙおよび２，３―Xｙ）、BA及びIｍ各化合物を混合した種々のサンプルを調整（原液はDMSO１mlに溶解）して、その抗真菌活性を各化合物の標品を用いて測定した。
【表５】
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上表で見ると、Xｙ異性体は抗真菌活性に必須であり、特に３，４−Xｙと２，３−Xｙの共存する系が活性が強く、更に３，４−Xｙと２，３−Xｙの共存する系に他のXｙ異性体が１種類以上存在すると活性が強まることがわかる。
【産業上の利用可能性】
【００１７】
本発明は植物の抽出物を利用した新たな水虫治療予防物質を開発するものであり、産業廃棄物である柑橘類の果皮を有効に活用出来、水虫など治療予防の抗真菌性組成物及びその製造方法を工業的優位に提供することである。