(57)【要約】【課題】臭いおよび苦味の低減されたクチナシ抽出物を提供する。【解決手段】クロロホルム／メタノール／水の混合比が６５／２５／４（容量比）の混合溶媒を展開溶媒としてメルク社製シリカゲル６０Ｆ２５４を用いて薄層クロマトグラフィーを行ったとき、Ｒｆ値が０．５〜１．０のスポットが実質的に検出されないことを特徴とする精製クチナシ抽出物。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
クロロホルム／メタノール／水の混合比が６５／２５／４（容量比）の混合溶媒を展開溶媒としてメルク社製シリカゲル６０Ｆ２５４を用いて薄層クロマトグラフィーを行ったとき、Ｒｆ値が０．５〜１．０のスポットが実質的に検出されないことを特徴とする精製クチナシ抽出物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、精製クチナシ抽出物に関する。
【背景技術】
【０００２】
アカネ科クチナシ（Ｇａｒｄｅｎｉａ  ａｕｇｕｓｔａ  ＭＥＲＲＩＬ  、Ｇａｒｄｅｎｉａ  ｊａｓｍｉｎｏｉｄｅｓ  ＥＬＬＩＳ）の果実から得られるクチナシ抽出物は、クロシンを主成分とし、中華麺、栗加工品、菓子、惣菜などの食品の着色に広く利用されている。しかしながら、クチナシ抽出物は、クチナシの果実に由来する特有の臭いおよび苦味を有するため、該クチナシ抽出物を食品に添加すると、その風味に悪影響を与える問題があった。
【０００３】
この問題を解決する手段の一つとして、クチナシ黄色素抽出液の吸着処理液に対して、吸着処理、イオン交換処理、酸処理及び膜分離処理よりなる群から選択される少なくとも一種の処理を行うことを特徴とする無臭若しくは微臭のクチナシ黄色素の製造方法（特許文献１参照）などが提案されているが、必ずしも実用上満足できるものではない。
【０００４】
【特許文献１】特開２００２−１５５２２０号公報（請求項４）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、臭いおよび苦味の低減されたクチナシ抽出物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、上記課題に対して鋭意検討を重ねた結果、中〜低極性の不純物を除去することによりクチナシ抽出物の臭いおよび苦味が低減されることを見出し、この知見に基づいて本発明をなすに至った。
【０００７】
すなわち、本発明は、クロロホルム／メタノール／水の混合比が６５／２５／４（容量比）の混合溶媒を展開溶媒としてメルク社製シリカゲル６０Ｆ２５４を用いて薄層クロマトグラフィーを行ったとき、Ｒｆ値が０．５〜１．０のスポットが実質的に検出されないことを特徴とする精製クチナシ抽出物、からなっている。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の精製クチナシ抽出物は、従来のクチナシ抽出物に比べて臭いおよび苦味が低減されている。
本発明の精製クチナシ抽出物は、飲料その他の食品類、医薬品、化粧品などの着色に好ましく用いることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本発明の精製クチナシ抽出物は、クチナシ抽出液を精製することにより得られる。該クチナシ抽出液は、クチナシの乾燥果実を粉砕し、水またはアルコール及びそれらの混合液を用いて抽出されたものである。抽出溶媒として水が安全性の面からは好ましいが、抽出速度が遅い。そこで工業的にはアルコールと水の混合液が、通常用いられる。アルコールとしては、例えばエタノール、メタノール等が挙げられるが、エタノールが好ましく用いられる。アルコールと水の混合割合は、例えば５０ｖｏｌ％が好ましく用いられる。抽出条件は、例えば水・アルコール混合液を用いた場合、室温（約０〜５０℃）で約１〜１８時間が好ましく、約３０〜４０℃で約２〜４時間がより好ましい。抽出終了後、抽出液は一つに集められ、必要なら珪藻土等のろ過助剤を用いて、ろ紙或いはろ布を通してろ過される。ろ液はアルコールを回収するため濃縮され、クチナシ抽出液濃縮物が得られる。
【００１０】
このクチナシ抽出液濃縮物は、通常ゲニポサイド等のイリドイド配糖体を除去するため吸着剤処理される。吸着樹脂処理は、例えば、下記の方法により行われる。
【００１１】
初めに、クチナシ抽出液濃縮物を適当な濃度に希釈し、吸着樹脂を充填したカラムに希釈液を供給する。吸着樹脂としては、アンバーライトＸＡＤ−４、アンバーライトＸＡＤ−７（製品名；オルガノ（株））、ダイヤイオンＨＰ−２０、ＨＰ−２１、ＨＰ−４０（製品名；三菱化学（株））等の多孔性樹脂が挙げられ、アンバーライトＸＡＤ−７が好ましく用いられる。
【００１２】
次に、水または低濃度のアルコールと水の混合液でカラム内の不純物を洗い流した後、約５０〜７０ｖｏｌ％のアルコールによりカラム内の色素を脱着・溶出する。ここで、アルコールとしては、例えばメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、ｉ−ブタノール、ｓｅｃ−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール等の炭素数１〜４の低級アルコールが挙げられ、エタノールが好ましく用いられる。
【００１３】
その後、カラムからの溶出液は、濃縮釜を用いて常法により濃縮され、ゲニポサイドが可及的に低減されたクチナシ溶出液濃縮物が得られる。
【００１４】
上記クチナシ抽出液濃縮物或いはクチナシ溶出液濃縮物から中〜低極性成分を除去し、本発明の精製クチナシ抽出物を得る方法は特に限定されないが、例えば、以下に示す方法１、２及び３が挙げられる。なお、これら方法１、２及び３では、クチナシ抽出液濃縮物とクチナシ溶出液濃縮物のいずれを出発原料に用いた場合でも同様の結果が得られるが、以下、クチナシ溶出液濃縮物を出発原料とする場合について説明する。
【００１５】
[方法１]
方法１は、クチナシ溶出液濃縮物を乾燥して得られるクチナシ抽出物乾燥物に対し、高極性の溶剤を加え、中〜低極性成分を抽出して除去する方法である。
【００１６】
具体的には、初めに、クチナシ溶出液濃縮物を乾燥し、クチナシ抽出物乾燥物を得る。クチナシ溶出液濃縮物の乾燥法は、凍結乾燥、通風乾燥、噴霧乾燥、真空乾燥、ベルト乾燥、棚乾燥、ドラム乾燥等が挙げられるが、凍結乾燥が好ましく行われる。
【００１７】
次に、クチナシ抽出物乾燥物に高極性の溶剤を加えて攪拌する。高極性の溶剤としては、１〜３級の低級アルコール、アセトン等が挙げられ、好ましくはエタノールである。
【００１８】
溶剤にエタノールを用いる場合には、エタノールの含水率（純度）は、９５容量％以上が好ましく、９９容量％以上がより好ましい。また、エタノールの量は、クチナシ抽出物乾燥物１質量部に対して約２〜２００容量部が好ましく、約５〜１０容量部がより好ましい。また、攪拌時の温度は、約１０〜７０℃が好ましく、約４０〜６０℃がより好ましい。また、攪拌時間は、約５分〜５時間、好ましくは約３０分〜２時間である。
【００１９】
攪拌後、クチナシ抽出物乾燥物と溶剤との混合液はろ過され、ろ紙或いはろ布上に残る固形物は自体公知の方法で乾燥される。更に、この固形物に対して上述した方法１の処理を繰返し行うことが好ましい。方法１の処理が行われる回数は、１回〜５０回、好ましくは２回〜５回である。上記方法１の処理が所定の回数行われることにより得られる固形物が本発明の精製クチナシ抽出物である。
【００２０】
[方法３]
方法２は、クチナシ溶出液濃縮物に対し、低極性の溶剤を加え、中〜低極性成分を抽出して除去する方法である。低極性の溶剤としては、クロロホルム、トルエン、ベンゼン等が挙げられ、好ましくはクロロホルムが用いられる。以下、上記溶剤にクロロホルムを用いる場合について具体的に説明する。
【００２１】
クチナシ抽出液濃縮物１重量部に対して、約１〜２００容量部、好ましくは約２〜４容量部の水を加え希釈液を得る。次に該希釈液１容量部に対して約２〜５０容量部、好ましくは約５〜２０容量部のクロロホルムを加え攪拌する。攪拌時の温度は、約０〜６０℃が好ましく、約２０〜４０℃がより好ましい。また、攪拌時間は、約１分〜２時間、好ましくは約５分〜３０分である。
【００２２】
攪拌後、分液漏斗等を用いて中〜低極性成分を含むクロロホルムの溶媒層を除去する。更に、除去後に残った水層に対して、上述したクロロホルムを加え攪拌する処理を繰り返し行うことが好ましい。この処理が行われる回数は、１回〜５０回、好ましくは２回〜５回である。最後に、得られた水層は、自体公知の方法で乾燥される。乾燥後に得られる固形物が本発明の精製クチナシ抽出物である。
【００２３】
[方法３]
方法３は、上記クチナシ溶出液濃縮物を出発原料とし、吸着剤及び溶媒を用いて中〜低極性成分を分離して除去する方法である。吸着剤としては、シリカゲル、ケイ酸マグネシウム、アルミナ等が挙げられ、好ましくはシリカゲルが用いられる。溶媒の種類及び混合率は、クチナシ溶出液濃縮物に含まれる中〜低極性成分とそれ以外の成分とを分離可能であればよく、特に制限はない。例えば、吸着剤にシリカゲルが用いられる場合には、中〜低極性成分をカラムから溶出するための溶媒として、クロロホルム／メタノールの混合液が好ましく用いられる。
【００２４】
この場合、初めに、クチナシ溶出液濃縮物を自体公知の方法で乾燥して得られる乾燥物に対して、適量のメタノールを加えて溶解した後、更に適量のシリカゲルを加えて攪拌し、混合物を得る。次に該混合物を乾燥する。混合物の乾燥は、ロータリーエバポレーターを用い、約１０〜６０分、好ましくは約２０〜４０分行われることが好ましい。乾燥時の温度は、約３０〜６０℃、好ましくは約３５〜４５℃である。
【００２５】
混合物の乾燥後、得られた乾燥物を、シリカゲルが充填されたカラムの上層に充填し、クロロホルム／メタノールの混合液を該カラムに供給する。該混合液のカラムへの供給は、クロロホルム／メタノールの混合比が９９／１〜９５／５（容量比）のものから開始し、該混合液のメタノール濃度を徐々に増加させながら行うことが好ましい。初めにカラムから溶出する中〜低極性成分を含む溶出液は廃棄し、その後カラムから溶出する色素成分を含む溶出液を回収する。回収された溶出液は、濃縮釜を用いて常法により濃縮され、精製クチナシ抽出物が得られる。
【００２６】
本発明の精製クチナシ抽出物は、クロロホルム／メタノール／水の混合比が６５／２５／４（容量比）の混合溶媒を展開溶媒としてメルク社製シリカゲル６０Ｆ２５４を用いて薄層クロマトグラフィーを行ったとき、Ｒｆ値が０．５〜１．０のスポットが実質的に検出されないことを特徴とする。
【００２７】
ここで、「スポットが実質的に検出されない」とは、薄層クロマトグラフィーを行った後、プレートを乾燥し、濃度５０％の硫酸を噴霧し、１０５℃で２０分加熱して、スポットの発色処理を行ったとき、スポットが目視により観察されないことを意味する。より厳密には、発色処理後のプレートについてデンシトメータでスポットの読み取りを行ったとき、スポットの発色の度合いが当該デンシトメータの検出限界以下であること等によりスポットが検出されないことを意味する。
【００２８】
デンシトメータは、例えば、ＤＵＡＬ−ＷＡＶＥＬＥＮＧＴＨ  ＦＬＹＩＮＧ−ＳＰＯＴ  ＳＣＡＮＮＥＲ  ＣＳ−９０００（島津製作所製）を用いることができる。
【実施例】
【００２９】
以下、実施例をもって本発明を具体的に説明する。
【００３０】
［クチナシ抽出物乾燥物の調製］
粉砕したクチナシの乾燥果実１２００ｇに５０ｖｏｌ％エタノール・水混合液２．４Ｌを加え、室温で３時間攪拌した後吸引ろ過した。さらに、抽出残に５０ｖｏｌ％エタノール・水混合液２．４Ｌを加え室温で３０分間攪拌した後吸引ろ過する操作を２回繰り返し、ろ液として計約７．０Ｌの抽出液を得た。この抽出液を、ロータリーエバポレーターを用いて、約６０℃及び約４ｋＰａの条件で濃縮し、クチナシ抽出液濃縮物約４２０ｇを得た。
【００３１】
次に、クチナシ抽出液濃縮物に精製水を加えて４．０Ｌとし、得られた溶液を吸引ろ過し、ろ液をアンバーライトＸＡＤ−７（オルガノ社製）２．０Ｌを充填したカラムに流速ＳＶ＝０．５で通液した。続いて、精製水１６．０Ｌをカラムに流速ＳＶ＝０．５で通液し、排出液を廃棄した。最後に、７０ｖｏｌ％エタノール・水混合液２．０Ｌを流速ＳＶ＝０．５で通液し、色素を脱着・溶出した。
【００３２】
得られた溶出液を、エバポレータを用いて、約６０℃及び約４ｋＰａの条件で濃縮し、クチナシ溶出液濃縮物約１４０ｇを得た。更に、クチナシ溶出液濃縮物約１００ｇを凍結乾燥し、クチナシ抽出物乾燥物４５ｇを得た。
【００３３】
［エタノールによる中〜低極性成分の除去］
上記調整により得られたクチナシ抽出物乾燥物約４０ｇにエタノール（１級エタノール；和光純薬工業社製；純度９９．５容量％）８００ｍＬを加え、約５０℃で約１時間攪拌した。攪拌は、スターラーで５分、超音波洗浄器で１分ずつ交互に行った。次に、保留粒子径１μｍの定量ろ紙Ｎｏ．５Ｃ（アドバンテック東洋社製）で吸引ろ過し、ろ紙上に残った固形物を５０℃で真空乾燥した。
【００３４】
更に、乾燥された固形物約１５ｇにエタノール（１級エタノール；和光純薬工業社製；純度９９．５容量％）３００ｍＬを加え、約５０℃で約１時間同様に攪拌した。そして、保留粒子径１μｍの定量ろ紙Ｎｏ．５Ｃ（アドバンテック東洋社製）で吸引ろ過し、ろ紙上に残った固形物を５０℃で真空乾燥し、精製クチナシ抽出物（実施品）約１０．７ｇを得た。
【００３５】
以下、薄層クロマトグラフィーによる精製クチナシ抽出物の分析について説明する。
【００３６】
[薄層クロマトグラフィーによる精製クチナシ抽出物の分析]
精製クチナシ抽出物（実施品）１０ｍｇを２００μＬのメタノールに溶解してサンプル液を調整した。次に、サンプル液５μＬをシリカゲル６０Ｆ２５４（メルク社製）のプレートにスポットし、クロロホルム／メタノール／水の容量比が６５／２５／４の混合溶媒を展開溶媒として展開した。対照として、クチナシ抽出物乾燥物についても同様にサンプル液を調整して展開を行った。展開溶媒の先端が原線から１５ｃｍの高さに上昇したとき展開を止めた。展開後、プレートを風乾し、１１０℃で１０分間加熱して溶媒を除いた。冷後、プレートに５０％硫酸を噴霧し、１０５℃で２０分間加熱し、スポットの発色処理を行った。このようにして得られた薄層クロマトグラムを図１の写真に示す。
【００３７】
この結果、クチナシ抽出物乾燥物に対応する図１のレーン１では、Ｒｆ値が０．５〜１．０のスポットが観察された。これに対し、精製クチナシ抽出物（実施品）に対応する図１のレーン２では、Ｒｆ値が０．５〜１．０のスポットは観察されなかった。なお、この薄層クロマトグラム上で、Ｒｆ値が０〜０．２５のスポットはクロシンを含む色素成分を示す。
【００３８】
更に、デンシトメータ（ＤＵＡＬ−ＷＡＶＥＬＥＮＧＴＨ  ＦＬＹＩＮＧ−ＳＰＯＴ  ＳＣＡＮＮＥＲ  ＣＳ−９０００、島津製作所製）で上記発色処理後のプレートの読み取りを行った。この結果、クチナシ抽出物乾燥物に対応する図１のレーン１では、Ｒｆ値が０．５以上のスポットが検出された。これに対し、精製クチナシ抽出物（実施品）に対応する図１のレーン２については、スポットの発色強度がデンシトメータの検出限界以下であったため、Ｒｆ値が０．５以上のスポットは検出されなかった。
【００３９】
[試験例１]
実施例で得た精製クチナシ抽出物（実施品）とクチナシ抽出物乾燥物（対照品）の臭いを官能試験で評価した。試験は２点比較法で行い、その結果について２点比較法（両側検定）検定表で検定した。結果を表１に示した。
【００４０】
〈官能試験の方法〉
精製クチナシ抽出物（実施品）とクチナシ抽出物乾燥物（対照品）を、液層の長さ１ｃｍで波長４４０ｎｍ付近の極大吸収部における吸光度が１．０となるように各々精製水に溶解し、試験液とした。得られた試験液を５０ｍｌの共栓付フラスコに１０ｇずつ秤量した。官能試験は１５名のパネラーで行い、実施品に対応する試験液および対照品に対応する試験液から、臭いがより少ない方を選択させた。
【００４１】
【表１】
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【００４２】
[試験例２]
実施例で得た精製クチナシ抽出物（実施品）とクチナシ抽出物乾燥物（対照品）の苦味を官能試験で評価した。試験は２点比較法で行い、その結果について２点比較法（両側検定）検定表で検定した。結果を表２に示した。
【００４３】
〈官能試験の方法〉
精製クチナシ抽出物（実施品）とクチナシ抽出物乾燥物（対照品）を、液層の長さ１ｃｍで波長４４０ｎｍ付近の極大吸収部における吸光度が１．０となるように各々精製水に溶解し、試験液とした。得られた試験液を２０ｇずつ紙コップに入れた。官能試験は１５名のパネラーで行い、実施品に対応する試験液および対照品に対応する試験液から、苦味がより少ない方を選択させた。
【００４４】
【表２】
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【産業上の利用可能性】
【００４５】
本発明の精製クチナシ抽出物は、化粧料、医薬品、食品、及び健康食品の分野で好適に利用することができる。具体的には、本発明の精製クチナシ抽出物が添加された化粧料、医薬品は、その使用目的及び使用形態に応じて、添加剤、医薬担体、及び剤型等を適宜当業者が選択し、自体公知の方法で製造及び使用できる。より具体的には、精製クチナシ抽出物の他、賦型剤、崩壊剤、結合剤、界面活性剤、乳化剤、湿潤剤、滑沢剤、糖類、ｐH調整剤、防腐剤、香料もしくは着色料等を添加して製造できる。化粧品の剤型としては、クリーム、ローション、軟膏、液剤、ペースト等が挙げられる。医薬品の場合には、シロップ剤、散剤、顆粒剤、丸剤、錠剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤の剤型で経口的に、或いは座剤、注射剤、輸液剤等の剤型で非経口的に投与することができる。また、本発明の精製クチナシ抽出物が添加された食品及び健康食品は、各種の栄養素、ビタミン類、香料、着色料、酸化防止剤、チーズやチョコレート等の風味物質もしくは合成甘味料等を当業者が適宜添加して製造できる。食品の形態は、黄色着色料として精製クチナシ抽出物を配合した、菓子類、麺類、乳製品、練り製品或いはその他の漬物、酢の物、練り羊羹、水羊羹、ういろう、煮豆、練りウニ、ふりかけ等が挙げられる。また、健康食品の形態は、顆粒、錠菓、ガム、キャンディ、ゼリー、飲料等が挙げられる。
【図面の簡単な説明】
【００４６】
【図１】精製クチナシ抽出物の薄層クロマトグラムの写真
【図１】
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