(57)【要約】【課題】１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法を提供すること。【解決手段】この方法は、基層、ストレプトアビジンを含む層、および拡散層を有する要素を用意するステップと、拡散層内に含めるかまたはサンプルと組み合わせることができる標識免疫反応物および免疫構成要素を用意するステップと、サンプルを拡散層の３つ以上の領域に分配するステップであって、３つ以上の領域の各中心が、３つ以上の領域によって形成される中心から等距離であり、あらゆる方向に流れる洗浄液がサンプルに接触するように各領域が隣接する領域に接触している、ステップと、洗浄液を、３つ以上の領域によって形成された中心に導き、洗浄液が３つ以上の各領域に均等に流れるようにして、サンプルおよび標識を洗浄するステップと、３つ以上の各領域で測定を行って、１つまたは複数の分析物の存在または濃度を測定するステップとを含む。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
基層、ストレプトアビジンを含む層、および拡散層を有する要素を用意するステップであって、前記ストレプトアビジンは前記拡散層内に存在し得る、ステップと、
前記拡散層内に含めるかまたは前記サンプルと組み合わせることができる標識免疫反応物および免疫構成要素を用意するステップと、
前記サンプル、およびオプションの前記免疫構成要素および前記標識免疫反応物を前記拡散層の３つ以上の領域に分配するステップであって、前記３つ以上の領域の各中心が、前記３つ以上の領域によって形成される中心から等距離であり、あらゆる方向に流れる洗浄液が前記サンプルに接触するように前記各領域が隣接する領域に接触している、ステップと、
前記洗浄液を、前記３つ以上の領域によって形成された前記中心に導き、前記洗浄液が前記３つ以上の各領域に均等に流れるようにして、前記サンプルおよび標識を洗浄するステップと、
前記３つ以上の各領域で測定を行って、前記１つまたは複数の分析物の存在または濃度を測定するステップと、
を含む、方法。
【請求項２】
請求項１に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記免疫構成要素は、結合抗体または抗原のキャプチャを含む、方法。
【請求項３】
請求項１に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記要素は、診断分析装置に用いられるドライスライドを含む、方法。
【請求項４】
請求項１に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記３つ以上の領域は、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、およびヒト免疫不全ウィルスのアッセイの１つを有する４つの領域である、方法。
【請求項５】
請求項１に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記３つ以上の領域は、トロポニン、ＣＫＭＢ、ミオグロビン、およびｐｒｏＢＮＰを含む心臓パネルを含む、方法。
【請求項６】
請求項１に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記３つ以上の領域は、ＨＣＧ、ＦＳＨ、およびＬＨを含む生殖パネルを含む、方法。
【請求項７】
請求項１に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記３つ以上の領域は、４つの領域であり、
前記洗浄ステップの前にインキュベーション期間をさらに含む、方法。
【請求項８】
請求項１に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
異なる各分析物に対する前記免疫構成要素および標識免疫反応物は、前記サンプルが供給される前に、前記拡散層内に導入される、方法。
【請求項９】
請求項８に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記免疫構成要素は、前記キャプチャすなわち結合抗体／抗原を含む、方法。
【請求項１０】
請求項１に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
異なる各分析物に対する前記免疫構成要素は、異なる層内に含められている、方法。
【請求項１１】
請求項１０に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記免疫構成要素は、前記キャプチャすなわち結合抗体／抗原を含む、方法。
【請求項１２】
請求項１に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
異なる各アッセイに対する前記免疫構成要素を前記サンプルと混合し、次に、この混合したサンプルを、３つ以上のアリコットに分割し、検出／測定される各分析物に対する標識免疫反応物を前記アリコットの１つに添加する、方法。
【請求項１３】
請求項１２に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記免疫構成要素は、キャプチャすなわち結合抗体／抗原を含む、方法。
【請求項１４】
請求項１に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記サンプルは、異なるアリコットに分割され、異なる各アッセイに対する前記免疫構成要素および前記標識免疫反応物を異なるアリコット中の前記サンプルと混合する、方法。
【請求項１５】
請求項１４に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記免疫構成要素は、キャプチャすなわち結合抗体／抗原を含む、方法。
【請求項１６】
請求項１に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
異なる各分析物に対する前記免疫構成要素は、前記サンプルおよび標識免疫反応物が添加される前に、前記拡散層内に導入される、方法。
【請求項１７】
請求項１６に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記免疫構成要素は、キャプチャすなわち結合抗体／抗原を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【開示の内容】
【０００１】
〔発明の分野〕
本発明は、１つの要素上での複数の免疫化学アッセイに関する。詳細には、本発明は、診断分析器に用いられる複数のアッセイを含むドライスライドに関する。
【０００２】
〔発明の背景〕
既知の診断分析装置には、オーソ・クリニカル・ダイアグノスティックス社（Ortho-Clinical Diagnostics, Inc.）が販売するＶｉｔｒｏｓ（登録商標）５．１ＦＳなどの臨床化学分析装置が含まれる。このような全ての分析装置は、総称して診断分析装置と呼ばれる。このような診断分析装置は、参照して開示内容の全てを本明細書に組み入れる米国特許第４，２５８，００１号、同第４，６７０，３８１号、および同第４，９９７，７７２号に開示されているようなドライスライドを用いることができる。
【０００３】
スライドは、目的の分析物に反応する抗原または抗体を含む。免疫複合体に固定される抗原または抗体の様々な構造が、参照してその内容を本明細書に組み入れる、ゴスリン（Gosling）著、イムノアッセイズ（Immunoassays）、オックスフォード・ユニバーシティー・プレス（Oxford University Press）、２０００年、ｐ７−１５に記載されている。患者サンプル（例えば、血清または尿）が、表面に標識（label）が設けられたスライド上に載せられる。次に、測定する分析物を捕捉できるようにする短いインキュベーションを行い、サンプルが載せられた要素の一部を洗浄して、非錯化標識免疫反応物（uncomplexed labeled immunoreactants）を除去し、ペルオキシドなどの活性化因子を付加する。さらにインキュベーションを行う。その後、さらにインキュベートされるときに、洗浄した部分の一部を、濃度計または反射率計などの測定装置で数回読み取って着色速度を測定し、この速度を、例えばＤＧＸＮ、ＰＨＹＴ、またはＣＲＰなどの分析物の濃度を示唆する較正された結果と比較する。
【０００４】
上記したように、乾燥試験要素を用いるイムノアッセイの分野では、非錯化標識免疫反応物（すなわち、抗原や抗体）を、検出の前に、結合した標識免疫反応物すなわち錯化標識免疫反応物（complexed labeled immunoreactants）から分離して除去する必要があることが知られている。これは、サンプルを添加し、錯化反応が起こった後に、洗浄液を試験要素に加えて、遊離標識免疫反応物(free labeled immunoreactants)を結合した免疫反応物から分離する形で行われる。このような分離により、理論的には、一定量の結合した標識免疫反応物が試験要素中に残り、洗い流した非錯化免疫反応物の干渉を受けずに結合した標識免疫反応物を測定することができる。この処理は、いずれも参照して開示内容を本明細書に組み入れる米国特許第５，６２０，８６０号および同第５，６４１，８６０号に例示されている。
【０００５】
このようなイムノアッセイ試験要素は、通常は、唯１つの分析物について試験するために作製される。このような作製は、本質的に、所望の各アッセイに異なる試験要素が必要となるため、分析装置のスループットを低下させる。
【０００６】
上記理由から、２つ以上のアッセイに対応できる免疫化学アッセイ要素が要望されている。
【０００７】
〔発明の概要〕
本発明は、２つ以上のアッセイを支持できるイムノアッセイ試験要素、具体的にはドライスライドにおける当該の試験要素の要望に応えることに関する。
【０００８】
本発明の一態様は、１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法に関する。この方法は、基層、ストレプトアビジンを含む層、および拡散層を有する要素を用意するステップであって、ストレプトアビジンは拡散層内に存在し得る、ステップと、拡散層内に含めるかまたはサンプルと組み合わせることができる標識免疫反応物および免疫構成要素を用意するステップと、サンプル、およびオプションの免疫構成要素および標識免疫反応物を拡散層の３つ以上の領域に分配するステップであって、３つ以上の領域の各中心が、３つ以上の領域によって形成される中心から等距離であり、あらゆる方向に流れる洗浄液がサンプルに接触するように各領域が隣接する領域に接触している、ステップと、洗浄液を、３つ以上の領域によって形成された中心に導き、洗浄液が３つ以上の各領域に均等に流れるようにして、サンプルおよび標識を洗浄するステップと、３つ以上の各領域で測定を行って、１つまたは複数の分析物の存在または濃度を測定するステップを含む。好適な実施形態では、この要素は、診断分析装置に用いられるドライスライドである。
【０００９】
本発明のさらなる目的、特徴、および利点は、当業者であれば、以下に記載する好適な実施形態を熟慮すれば明らかになるであろう。
【００１０】
〔詳細な説明〕
本発明は、１つの要素上で複数のアッセイの実施を可能にするイムノアッセイ要素に関する。このような形態の１つの利点は、異なる分析物の「メニュー」が同じ要素上で測定されるのを可能にする点である。例えば、供血者スクリーニングに一般的に用いられる感染スクリーニングメニューは、通常は、ＨＩＶ、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、およびＣ型肝炎について試験する。本発明の前は、供血者スクリーニングには、全ての穴で同じ分析物を測定する、例えば９６穴の大きい微量定量プレートが必要であった。したがって、これら４種の疾患の簡易なスクリーニングには、４つの微量定量プレートが必要であった。プレートの一部の穴しか使用されない場合は、相当の無駄になり、費用がかかる。本発明では、多数の微量定量プレートを用いるのではなく、１人の供血者を１つの要素上で試験することができる。
【００１１】
本発明の別の利点は、同じ要素上にキャリブレータ（基準物質など）を設けることができる点である。例えば、本発明の一実施形態では、要素は、１つの要素上に複数の同じアッセイを有することができる。要素上の１つのアッセイ位置は、キャリブレータすなわち基準を含むことができる。これにより、キャリブレータが要素上の実際のアッセイと同じ保管および使用条件に従うため、要素の安定性が増大する。
【００１２】
本発明は、例えば、スライド構造などの同じ要素上にアッセイのパネルを提供する。これにより、新しいハードウエアに実質的に投資することなく、システムのスループットが改善される。また、複数の結果に唯１つの試験要素を用いるため、試験当たりのコストが低下する。
【００１３】
本明細書で用いる「標識免疫反応物」とは、標的抗原が、標識された抗原と競合するなどの競合アッセイ、または標的抗原がキャプチャ抗体と標識抗体（標識免疫反応物）との間にサンドイッチを形成するなどのサンドイッチアッセイによるものかにかかわらず、抗原または抗体などの標的分析物を検出するために用いられるあらゆる標識抗原または標識抗体を指す。標識は、例えば、フルオロフォアまたはＨＲＰなどの酵素などのあらゆる有用かつ検出可能な直接または間接インジケータとすることができる。本明細書で用いる「免疫構成要素」とは、標識免疫反応物を除く、例えば、キャプチャ（capture）すなわち結合抗体または抗原、ビオチンなどの使用される全ての他の反応種を指す。
【００１４】
このようなマルチアッセイ要素を用意する一例は次の通りである。
（１）ポリエステルまたはマイラー（Mylar）などの透明な材料からなる基層を用意する。
（２）次に、バッファー層を基層の上に設ける。
（３）白色染料を含む、ゼラチンまたはポリマーからなる支持／吸収層を設ける。この染料に抗酸化剤を混合して、染料の白色から有色への自然な経時変化を遅らせる。
（４）水溶性ラテックス接着剤と共に保持されたポリスチレンビーズを含む拡散層を設ける。
（５）ストレプトアビジン被覆ビーズを、拡散層に含めるかまたは拡散層の下の別の層として設ける。
【００１５】
これらの層の付加は、要素全体に行うのが好ましい。しかしながら、これらの層は、要素のアッセイを含む部分に付加することもできる。これで、異なる各アッセイが、以下に記す実施形態の１つによって形成される。
【００１６】
試験要素を完成させ、このような試験要素で分析物をアッセイするための処理は次の通りである。実施するアッセイによって、標識免疫反応物および免疫構成要素（Ｎ個の異なるアッセイに対する構成要素）を、後述するいくつかの異なる実施形態で設けることができる（要素上に少なくともＮ個の異なる位置がスポットされる。較正またはコントロールの確認などのために同じアッセイが複数のスポットで行われる場合は、Ｎ個よりも多い異なる位置がスポットされる）。
１．各Ｎ個のアッセイに対する全ての免疫構成要素および標識免疫反応物を、製造の際に拡散層に均一にコーティングする。次に、サンプルを、要素上（例えば、ドライスライドの拡散層）にスポットする。
２．上記したＮ個の免疫構成要素および標識免疫反応物を、Ｚ方向はともかくＸ／Ｙ方向に均一となるように各Ｎ個のアッセイに対してＮ個の異なる層にコーティングする。次に、Ｎ個のサンプルを、要素上（例えば、ドライスライドの拡散層）にスポットする。
３．全ての構成要素を別個にコーティングしてＮ個の異なるアッセイを形成する。次に、Ｎ個の異なるアッセイを、製造工程の際に試験要素に接合する。この接合工程は、別個の構成要素を互いにスプライシング（splicing）して行ってもよい。次に、サンプルを、要素上（例えば、ドライスライドの拡散層）にスポットする。
４．Ｎ個のアッセイに対する全ての免疫構成要素をサンプルと混合して、このサンプルをＮ個のアリコット（aliquot）に分割する。各分析物に対するＨＲＰ標識などの標識免疫反応物を、Ｎ個の各アリコットに添加する。次に、これらのサンプルと標識免疫反応物の混合物のそれぞれを、スライドのＮ個の位置にスポットする。
５．サンプルをＮ個の容器内に等分し、Ｎ個の各アッセイのための免疫構成要素およびＨＲＰなどの標識免疫反応物と別個に混合する。この混合物を、要素（例えば、ドライスライドの拡散層）のＮ個の異なる位置にスポットする。これが、最も好ましい実施形態である。
６．実施形態１と５の組合せ。Ｎ個の異なるアッセイのためのＮ個全ての免疫構成要素を、拡散層内に均一にコーティングする。サンプルをＮ個の容器に等分してから、サンプルをＮ個の各アッセイのための標識免疫反応物と混合し、要素の少なくともＮ個の別個の位置にスポットする。この実施形態の問題点は、サンドイッチの両端部が、測定すべき分析物の一部に結合するわけではないことにより、アッセイの特異性が失われる可能性がある点である。
【００１７】
例えば、抗フェノバルビタール抗体または抗‐ＴＳＨ抗体などの、固定された抗‐抗原抗体、または固定された抗原が、各アッセイの要素全体または一部でストレプトアビジン被覆ビーズに共有結合する。好ましくは、これら固定された抗‐抗原抗体、または固定された抗原は、上記した実施形態５などの形態でサンプルと共に付加される。抗原‐ペルオキダーゼ結合物などの標識免疫反応物は、固定された抗体または抗原上の結合部位に対して、サンプル中の標的分析物と競合する。この標識免疫反応物は、理想的には、サンプルに既知の量が含まれ、サンプルと同時に要素に付加されるべきである。スライドでのこの初めのアッセイを、図１にＡとして示す。
【００１８】
別の種類の固定された抗‐抗原抗体または抗原を、第１のアッセイに近接して載せ、ストレプトアビジンに固定する。これを、それぞれ異なる固定された抗‐抗原抗体または抗原を含む第３および第４のアッセイのために同様に行う。これらを、図１にＢ、Ｃ、およびＤとして示す。これらは、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、およびＨＩＶなどのアッセイのパネル、トロポニン、ＣＫＭＢ、ミオグロビン、およびｐｒｏＢＮＰなどの心臓パネル、またはＨＣＧ、ＬＨ、ＦＳＨの生殖パネル（fertility panel）とすることができる。各要素に含めることができるアッセイの数には制限がない。僅かな制限因子は、各アッセイスポットの中心が、詳細を後述するように洗浄の中心から等距離でなければならないこと、および洗浄液が優先的に流れ得るサンプル間の乾燥拡散層が存在しないようにサンプルスポットが全て接触しなければならないことである。このサンプル間の接触は、図１および図２の参照符号Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉで示されている。したがって、要素は、図１に示されているように、中心洗浄スポットＥの周りに配置される３、４、５、６個などのアッセイを含むことができる。したがって、１つの要素上で、１つのサンプルに対して複数の異なるアッセイ、または複数のサンプルに対して異なるアッセイを行うことが可能である。上記説明は、各アッセイが異なるとして説明したが、各アッセイスポットを同じ分析物についてのアッセイとすることもできる。すなわち、固定されたそれぞれの抗‐抗原抗体または固定された抗原は同じである。これにより、複数のサンプルを同じ分析物についてアッセイすることができる。しかしながら、１つのサンプルを同じアッセイで行い、４つ全ての位置に配置して、システムが、結果を平均してより信頼できる推定を可能にする、または較正液またはコントロール液を患者スポットと共にスポットして各結果を較正することができる。同様に、２つだけのアッセイが要求された場合も当てはまる。この場合は、両方のアッセイをスライド上で２回行い、同じ定量供給サイクル（metering cycle）において同じチップから供給する。１つの要素に複数のアッセイを含めることにより、１つまたは複数の付加的なスポットが、コントロール液または較正液を含むことができる。
【００１９】
実際には、患者サンプルの液滴を要素の各アッセイ上で定量供給(meter)し、拡散層によって均一に分散させる。サンプル中の分析物が、競合アッセイの場合は、第１のインキュベーションキャプチャの際に、限定された数の結合部位に対して、標識免疫反応物と競合し、サンドイッチアッセイの場合は、抗‐抗原によってＳＡＣ結合と抗‐抗原と標識結合との間に結合する。
【００２０】
次に、測定する分析物を捕捉できるようにする短いインキュベーションを行い、サンプルが供給された要素の一部を洗浄して、非錯化標識免疫反応物を除去する。ペルオキシドなどの活性化因子を含む別の洗浄液で洗浄し、さらにインキュベーションを行う。
【００２１】
次に、さらにインキュベートしながら、洗浄した部分の一部を濃度計または反射率計などの測定装置で数回読み取り、着色速度を測定し、この速度を、例えばＣＫＭＢまたはミオグロビンなどの分析物の濃度を示唆する較正結果と比較する。
【００２２】
標識免疫反応物を、競合アッセイの場合は、目的の分析物に、サンドイッチアッセイの場合は、抗体に結びつかせることができる。いずれの工程も本発明に用いられる。
【００２３】
本発明は、サンプルおよび標識を、要素の３つ以上の領域、例えば４つ以上の領域に供給して１つの要素で複数のアッセイを行う方法を提供する。重要な特徴は、３つ以上の領域の中心が、これら３つ以上の領域を組み合わせて形成された中心とほぼ等距離であること、およびスポット間に拡散層のドライウェッジすなわち間隙が存在しないことである。
【００２４】
４つの位置すなわち領域が存在する好適な実施形態では、４つの各位置にサンプルを供給する４回の定量供給と１回の「二重」洗浄が行われる。この「二重」洗浄とは、すなわち、第１の洗浄が、ペルオキシダーゼなどの活性化因子の添加を行わない、つまり活性化のステップが存在しないＢ／Ｆ（bound free）分離であり、第２の洗浄では、活性化学種が用いられる洗浄を示す。本発明の以前には、製造、分析装置への一体化、および同じスライド上の複数のアッセイまたは異なるサンプルの効果的な洗浄処理の維持に関連した全ての問題に対処したデザインは存在しなかった。
【００２５】
本発明の重要な特徴は、同じ定量供給サイクル中、またはその次の定量供給サイクルの際に、４つのサンプルと標識のスポットのそれぞれをスライドに供給できるように要素上での定量供給工程を構築することである。これは、ストレプトアビジン被覆（ＳＡＣ）型システムで生じる迅速な結合のため、スライド上でのインキュベーション時間によってこの方法が影響を受けないことで可能になる。
【００２６】
洗浄が、この方法の重要な部分である。なぜなら、要素上の各アッセイが、結合した標識免疫反応物から非結合標識免疫反応物を完全に等しく分離するために同量の洗浄液を受け取る必要があるからである。参照して開示内容の全てを本明細書に組み入れる米国特許第５，６２０，８６０号に開示されているランプ洗浄（ramped wash）では、図１に示されているアッセイの群の中心点Ｅの洗浄が可能である。このアッセイの群の中心点Ｅの洗浄は、要素の全てのアッセイ領域に洗浄液を維持し（たとえ、唯１つの結果が必要な場合でも）、要素上の複数のアッセイスポットの洗浄を可能にする。アッセイの中心スポットが、全ての方向でアッセイによって取り囲まれていない場合は、洗浄工程がショートカットされ、洗浄液が、アッセイが存在しない乾燥拡散層に優先的に流れてしまう。図１および図２の両方に明確に示されているように、アッセイの中心に供給される洗浄液は、洗浄液が要素の中心から周辺に向かって流れる際にアッセイに接触する必要がある。このためには、洗浄液が、要素上の各アッセイに等しく接触して反応し、全てのアッセイに対して一貫した洗浄が行われるようにする必要がある。
【００２７】
図２は、使用できる１つの好適な定量供給の順序を示している。図２に示されているように、対角的な定量供給方法は、定量供給工程の際の洗浄液の相互作用を低減するため、サンプル（およびオプションの免疫構成要素および標識免疫反応物）流体が吸収されてから、近接するアッセイにサンプル（およびオプションの免疫構成要素および標識免疫反応物）を加えることができる。上記したように、定量供給の後に、第１のインキュベーションを行って、例えば、固定された抗体に抗原および標識免疫反応物を競合的に結合させることができる。次に、要素に、別の洗浄液を定量供給し、白色染料が着色するように再びインキュベートする。この着色は、速度測定またはエンドポイントで測定することができる。これらの技術はいずれも、当分野で良く知られている。要素、例えばスライドは、理想的には、反射率計のキャプチャ要素としてＣＣＤなどを利用するイメージキャプチャを用いて読み取られ、読取り工程と定量供給の工程との間の位置感度を排除することができる。
【００２８】
１つのスライド上に複数のアッセイを用いる利点は、次の通りである。
・スループットの改善
・試験当たりのコスト削減
・安定に関連した問題を軽減して、本質的に低価の分析装置および質の低めの製造工程により、許容範囲の処理が行えるようにする、内部基準を用いたリラクタント分析（reluctant analysis）の能力
【００２９】
基本的な試験構造は、せいぜい僅かな変更で既存の診断プラットフォームで実施することができる。
【００３０】
試験要素は、試験管壁、プラスチックカップ、ビーズ、プラスチックボールとシリンダ、および紙とプラスチックボールを含む様々な固体支持体を含め、あらゆる適当な構造とすることができる。特に好適な実施形態では、試験要素は、Ｖｉｔｒｏｓ（登録商標）分析装置に用いられるようなスライドである。このようなスライドは、参照して開示内容の全てを本明細書に組み入れる米国特許第４，２５８，００１号に開示されている。
【００３１】
本発明は、その作業のバッチ特性、すなわち微量定量プレートがスライド要素の代わりに用いられるため、供血者スクリーニングアッセイに用いることもできる。各スライド上で参照またはコントロールを行う可能性を組み合わせたマルチ試験法は、スループット、信頼性、およびコストに関連した、血液バンキングの有用な要求を満たす助けとなる。血液バンキングの現行の処理は、同じプレート上にキャリブレータまたはコントロールを常に有する微量定量プレートである。本発明のマルチアッセイ要素（例えば、３つのアッセイおよび３つのコントロール）は、各スライド上での血液バンキングに必要なパネル半分のアッセイを実施することができ、試験が正確であることを保証する、またはこの種の試験環境に必要な大きな保証を与える結果と共に、同じスライド上の各アッセイの基準値を有する。特定の患者の全ての結果、この場合は血液の単位の全ての結果が同時に出るのが好ましいが、現行の微量定量プレートデザインでは不可能である。また、プレートで１０の結果のみを得る必要がある場合は、プレートの残りが無駄になってしまう。これは、プレート上の各セルのコストが約３ドルであるため、相当の費用がかかる。
【００３２】
マルチアッセイ要素に内部基準を含めることは、この技術を簡易化した較正または「工場」較正（"factory" calibration）に変更できる可能性がある。工場較正は、獣医学およびポイント・オブ・ケア（ＰＯＣ）の分野にも用途を広げるが、これは、較正が分析装置を単に使用するよりも高度な技術レベルを必要とすることによる。これは、較正が、洗浄液を正確な順序で供給する必要があり、時には再構築が必要であり、操作者がいくつかのステップを行わなければならないためである。次に、較正をチェック／検証する必要がある。獣医学およびＰＯＣの分野では、多くの場合、較正に必要な時間がない、またはトレーニングを行えないため、自動較正または工場較正により、通常なら中央検査室に送らなければならないこのような分野での試験が可能となる。
【００３３】
マルチアッセイスライド要素を洗浄するための方法は、コンピュータ可読プログラムコードを有し、かつ当分野で周知の分析装置のコンピュータコントローラと相互作用するコンピュータプログラムによって実施することができる。
【００３４】
当業者であれば、本発明の複合物、組成、およびプロセスに様々な改良および変更を加えることができることを理解されたい。したがって、本発明は、添付の特許請求の範囲およびその等価物の範囲内であれば、このような改良形態および変更形態を包含するものとする。
【００３５】
上記した全ての刊行物は、個々に参照して組み入れるのと同程度に、参照して開示内容の全てを本明細書に組み入れるものとする。
【００３６】
〔実施の態様〕
（１）１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
基層、ストレプトアビジンを含む層、および拡散層を有する要素を用意するステップであって、前記ストレプトアビジンは前記拡散層内に存在し得る（may or may not be）、ステップと、
前記拡散層内に含めるかまたは前記サンプルと組み合わせることができる標識免疫反応物および免疫構成要素を用意するステップと、
前記サンプル、およびオプションの前記免疫構成要素および前記標識免疫反応物を前記拡散層の３つ以上の領域に分配するステップであって、前記３つ以上の領域の各中心が、前記３つ以上の領域によって形成される中心から等距離であり、あらゆる方向に流れる洗浄液が前記サンプルに接触するように前記各領域が隣接する領域に接触している、ステップと、
前記洗浄液を、前記３つ以上の領域によって形成された前記中心に導き、前記洗浄液が前記３つ以上の各領域に均等に流れるようにして、前記サンプルおよび標識を洗浄するステップと、
前記３つ以上の各領域で測定を行って、前記１つまたは複数の分析物の存在または濃度を測定するステップと、
を含む、方法。
（２）実施態様（１）に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記免疫構成要素は、結合抗体または抗原のキャプチャを含む、方法。
（３）実施態様（１）に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記要素は、診断分析装置に用いられるドライスライドを含む、方法。
（４）実施態様（１）に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記３つ以上の領域は、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、およびヒト免疫不全ウィルスのアッセイの１つを有する４つの領域である、方法。
（５）実施態様（１）に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記３つ以上の領域は、トロポニン、ＣＫＭＢ、ミオグロビン、およびｐｒｏＢＮＰを含む心臓パネルを含む、方法。
【００３７】
（６）実施態様（１）に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記３つ以上の領域は、ＨＣＧ、ＦＳＨ、およびＬＨを含む生殖パネルを含む、方法。
（７）実施態様（１）に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記３つ以上の領域は、４つの領域であり、
前記洗浄ステップの前にインキュベーション期間をさらに含む、方法。
（８）実施態様（１）に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
異なる各分析物に対する前記免疫構成要素および標識免疫反応物は、前記サンプルが供給される前に、前記拡散層内に導入される、方法。
（９）実施態様（８）に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記免疫構成要素は、前記キャプチャすなわち結合抗体／抗原を含む、方法。
（１０）実施態様（１）に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
異なる各分析物に対する前記免疫構成要素は、異なる層内に含められている、方法。
【００３８】
（１１）実施態様（１０）に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記免疫構成要素は、前記キャプチャすなわち結合抗体／抗原を含む、方法。
（１２）実施態様（１）に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
異なる各アッセイに対する前記免疫構成要素を前記サンプルと混合し、次に、この混合したサンプルを、３つ以上のアリコットに分割し、検出／測定される各分析物に対する標識免疫反応物を前記アリコットの１つに添加する、方法。
（１３）実施態様（１２）に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記免疫構成要素は、キャプチャすなわち結合抗体／抗原を含む、方法。
（１４）実施態様（１）に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記サンプルは、異なるアリコットに分割され、異なる各アッセイに対する前記免疫構成要素および前記標識免疫反応物を異なるアリコット中の前記サンプルと混合する、方法。
（１５）実施態様（１４）に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記免疫構成要素は、キャプチャすなわち結合抗体／抗原を含む、方法。
【００３９】
（１６）実施態様（１）に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
異なる各分析物に対する前記免疫構成要素は、前記サンプルおよび標識免疫反応物が添加される前に、前記拡散層内に導入される、方法。
（１７）実施態様（１６）に記載の１つまたは複数の目的の分析物についてサンプルを分析する方法において、
前記免疫構成要素は、キャプチャすなわち結合抗体／抗原を含む、方法。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】洗浄液が導入される中心点の周りに４つのアッセイが配置されたスライドの模式的な線図である。
【図２】４つのアッセイを有するスライド、ならびにサンプルおよびオプションの標識免疫反応物および他の免疫構成要素を供給する順序を示す模式図である。
【図１】
2008209403.tif 000003
【図２】
2008209403.tif 000004
【外国語明細書】
2008209403000001.pdf