(57)【要約】      （修正有）【課題】大麦や米等を原料とし、麹菌と酵母とを共生発酵させることにより、花粉症などのアレルギー症状の抑制作用を有する成分の含量を高め、副作用の心配がなく安全な機能性食品とその製造方法を提供する。【解決手段】大麦・米のうちから選ばれる少なくとも一種類からなる原料を使用して、麹菌と酵母とを共生発酵させ、酵母のアルコール発酵により生じたエタノールを除去し、残った発酵液の固液分離を行い上清を回収後、乾燥して粉末化する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
花粉症などのアレルギー症状を抑制するための機能性食品であって、大麦・米のうちから選ばれる少なくとも一種類からなる原料を使用して麹菌と酵母とを共生発酵させ、生じたエタノールを除去したことを特徴とする機能性食品。
【請求項２】
大麦・米のうちから選ばれる少なくとも一種類からなる原料を、所定の割合で水を加えて調製した後、麹と酵母とを加えて温度１５〜４０℃で麹菌と前記酵母とを数日間共生発酵させた後に、出来た発酵液を濃縮するとともにエタノールを除去し、残った前記発酵液の固液分離を行い上清を回収することを特徴とする機能性食品の製造方法。
【請求項３】
前記上清を回収後、乾燥して粉末化することを特徴とする請求項２記載の機能性食品の製造方法。
【請求項４】
前記麹菌が、アスペルギルス属であることを特徴とする請求項２または３記載の機能性食品の製造方法。
【請求項５】
前記酵母が、サッカロマイセス属であることを特徴とする請求項２〜４のいずれかに記載の機能性食品の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、花粉症などのアレルギー症状を抑制することができる機能性食品とその製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
今日、わが国の花粉症患者数は急増しており、現在１５００〜２０００万人の患者がいるといわれている。
【０００３】
そして、花粉症に代表されるようなアレルギー症の治療薬として、抗ヒスタミン薬、ステロイド点鼻薬などが一般的に用いられている。
【０００４】
また、アレルギー症状を抑制する働きがあるものとして乳酸菌が知られており、この乳酸菌の抗アレルギー性を利用したアレルギー体質改善効果のあるヨーグルト等の乳酸菌発酵物が既に実用化されている（例えば、特許文献１参照）。
【０００５】
その他には、プロポリス、赤シソ、テンチャ、バラ花びらを含有させ花粉症の症状を改善する飲料（例えば、特許文献２参照）やリンゴ由来のポリフェノールを有効成分とする抗炎症剤が提案されている（例えば、特許文献３参照）。
【特許文献１】特開２００６−５０９７９号公報（第７〜８頁）
【特許文献２】特開２００４−２１７６０４号公報（第３〜５頁）
【特許文献３】特開２００６−４５１９１号公報（第３〜４頁）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、アレルギー症の治療薬は副作用が生じる場合があり、服用に注意を要するため使用しにくい面がある。また、乳酸菌発酵物は抗アレルギー活性を有する乳酸菌を用いているため飲料にすると濁ってしまうし、植物由来の抽出物は抗炎症に効果があるが実際の花粉症症状に対してはどの程度有効であるかがはっきりしないものも多い。
【０００７】
本発明は、これらのような問題点を解決するため、上記先行技術のように乳酸菌による発酵ではなく、大麦や米を原料として麹菌と酵母とを共生発酵させることで、高い抗アレルギー性を有しながら副作用がなく、また、水溶性であって濁りや沈殿を生じさせない機能性食品とその製造方法を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記の目的を達成するために本発明の機能性食品は、花粉症などのアレルギー症状を抑制するための機能性食品であって、大麦・米のうちから選ばれる少なくとも一種類からなる原料を使用して麹菌と酵母とを共生発酵させ、生じたエタノールを除去したことを特徴とするものである。
【０００９】
上記構成からなる本発明の機能性食品は、前記麹菌による前記原料のでんぷん質の糖化と前記酵母によるアルコール発酵とが平行して行われ前記原料のでんぷん質が分解され、ベータグルカンやアラビノキシランなどのアレルギー症状の抑制作用を有する成分を豊富に含んだものとなっている。したがって摂取すれば、くしゃみや鼻掻きなどの鼻炎症状や花粉症状等を効果的に抑えることができる。なお、前記機能性食品は水溶性の液体であるが凍結乾燥やスプレードライ等によって粉末状にすることもできる。
【００１０】
原料として大麦や米を用いるのは、これらに含まれるでんぷん量が、７０〜９０％と高く、麹菌と酵母によってでんぷんを効率よくエタノールや有機酸に転換することができるためであり、特に、穀類の中でもベータグルカン含量の高い大麦が好ましい。
【００１１】
また、前記麹菌としては、でんぷんを低分子化するだけでなく発酵後の香りが良くて有機酸由来の酸味を呈するアスペルギルス属の菌類が好ましく、前記酵母としては、アルコール発酵を効率良く行うことができるサッカロマイセス属の菌類が適している。
【００１２】
そして、本発明にかかる機能性食品の製造方法は、請求項２に記載しているように、大麦・米のうちから選ばれる少なくとも一種類からなる原料を、所定の割合で水を加えて調製した後、麹と酵母とを加えて麹や酵母の活動が活発になる温度１５〜４０℃で麹菌と前記酵母とを数日間共生発酵させた後に、出来た発酵液を濃縮するとともにエタノールを除去し、残った前記発酵液の固液分離を行い上清を回収することを特徴としている。
【００１３】
このような機能性食品の製造方法によれば、前記麹菌による前記原料のでんぷん質の糖化と前記酵母によるアルコール発酵とを平行して行わせ、前記原料のでんぷん質を分解することによって、ベータグルカンやアラビノキシランなどの抗アレルギー性を有する成分の含量を高めることができる。したがって、アレルギー症状の抑制効果の高い機能性食品を得ることができる。しかも、含まれる抗アレルギー性の成分は、生物反応により生成されたものであるため、副作用の心配がない。しかも回収した上清は水溶性であり、水で希釈したり他の飲料に添加して利用することができる。
【００１４】
また、請求項３に記載しているように、回収した上清を乾燥して粉末化することもできる。乾燥は例えば凍結乾燥やスプレードライ等の方法で行うことができる。こうすると、液体の場合に比べて軽くなり、ボリュームも抑えることができるため取り扱い易くなり、日持ちもしやすい。
【００１５】
前記麹菌は、請求項４に記載しているように、でんぷんを低分子化するだけでなく、発酵後の香りが最も好ましく、かつ、有機酸由来のほど良い酸味を呈するアスペルギルス属の菌類を用いるのが好ましい。アスペルギルス属以外では、リゾップス属、ムコール属などの菌がでんぷんを低分子化することができるが、発酵後の風味や有機酸の生産性が落ちる。
【００１６】
前記酵母は、請求項５に記載しているように、アルコール発酵を効率良く行うことができるサッカロマイセス属が好ましい。
【発明の効果】
【００１７】
本発明の機能性食品は、花粉症などのアレルギー症状を効果的に抑制することができ、また、副作用もなく安心して喫食することができる。
【００１８】
そして、本発明の機能性食品の製造方法によれば、高いアレルギー症状抑制効果を備えた機能性食品を得ることができ、しかも、得られた機能性食品は人工的な化学合成などの手段を用いることなく、生物反応を用いて製造することができるため、副作用がなく安心して喫食することができる。
【００１９】
また、粉末化すれば、機能性食品の保管や流通が容易になる他、他の食品に添加して使いやすくなるし、日持ちしやすい。
【００２０】
麹菌にアスペルギルス属の菌類を用いると、良好な香りと風味を有した機能性食品になり、酵母にサッカロマイセス属の菌類を用いれば、アルコール発酵を効率良く行えるため機能性食品の収率を高めることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
以下に、本発明にかかる機能性食品について詳細に説明する。この機能性食品は、大麦・米のうちから選ばれる少なくとも一種類から選ばれる原料を使用する。そして、１５〜４０℃の温度下で原料のでんぷん質を麹菌によって糖化しつつ、出来た糖類を酵母でアルコール発酵することにより、原料のでんぷん質をエタノールと炭酸ガスとに転換する。こうして出来た発酵液を蒸留してエタノールを除去するとともに濃縮し、濃縮された発酵液を固液分離して上清を回収すれば得ることができる。
【００２２】
原料に大麦や米を用いるのは、これらに含まれるでんぷん量が、７０〜９０％と高く、麹菌と酵母によってでんぷんを効率よくエタノールや有機酸に転換することができるためである。また、原料に、粟、稗、黍、大豆、小豆などのでんぷん価の高い穀類を混合させることもできる。
【００２３】
また、麹菌にはでんぷんを低分子化するだけでなく、発酵後の香りが最も好ましく、かつ、有機酸由来のほど良い酸味を呈するアスペルギルス属の菌類を用いることが好まし  い。なお、麹菌は、黄麹、白麹、黒麹など種類は問わないが、黄麹よりも白麹あるいは黒麹が望ましい。黄麹はクエン酸の生産性が低いため酸味が若干弱くなる。また、発酵後の風味や有機酸の生産性が落ちるが、リゾップス属、ムコール属などの菌も利用できる。
【００２４】
酵母はアルコール発酵を効率良く行うことができるサッカロマイセス属の菌類であることが好ましい。また、効率的にはサッカロマイセス属に比べ落ちるが、ザイモモナス菌の利用も可能である。
【００２５】
回収した上清は、水溶性であり濁りや沈殿がなく、クエン酸のさわやかな酸味と、でんぷんの糖化により生じた自然な甘味とをバランス良く備え、かつ、ベータグルカンやアラビノキシランなどのアレルギー症状の抑制作用を有する成分が豊富に含まれている機能性飲料として利用することが出来る。さらに、風味を良くするために、回収した上清に果汁やハーブエキスなどを加えても良い。特に、紫蘇エキスを加えると、ほのかな紫蘇の香付けができるだけでなく、紫蘇が有するアレルギー症状の抑制機能を付加して機能性を向上させることができる。
【００２６】
回収した上清は、飲料の他、粉末剤、カプセル剤、打錠剤などの健康食品をはじめ、あらゆる飲食物に添加して使用、適用が可能である。また、回収した上清を乾燥して粉末化し、粉状の機能性食品として使用することも可能である。
【００２７】
さらに、原料の大麦や米の代わりに、大麦や米のでんぷんを含んでいる大麦・米焼酎蒸留残渣を用いることもできる。この場合、大麦や米の焼酎残渣をアスペルギルス属によりでんぷんを低分子化し、それをサッカロマイセス属によりエタノールに転換させ、蒸留によりエタノールを除去すれば得ることができる。こうして得られる機能性食品は、さわやかな酸味を有するとともに原料由来のベータグルカンやアラビノキシランなどを多く含んでおり、アレルギー性症状を抑制する効能を備えている。
【実施例】
【００２８】
以下に本発明の実施例について説明する。なお、本発明は下記の実施例に限定されるものではない。
＜実施例１：花粉症モデルマウスでの評価＞
１．試料の調製
蒸煮した大麦に加水し、大麦麹（大麦を原料にアスペルギルス属のアスペルギルス  カワチ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｋａｗａｃｈｉｉ）で製麹したもの）とサッカロマイセス属のサッカロマイセス  セレヴィシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）を培養した培養液とを加えて、３０℃で麹菌と酵母とを数日間共生発酵させた。そして、出来た発酵液を蒸留してエタノールを除去し、残りの濃縮された発酵液を遠心分離して上清画分を回収し、回収した上清を凍結乾燥して粉末化した。これを以下、本発明品と称する。
【００２９】
２．花粉症モデルマウスの作製
Ｂａｌｂ／ｃマウス（５週齢・メス）を日本クレア株式会社より購入し、１週間予備飼育した後、実験に供した。卵白アルブミン（以下ＯＶＡと略す。シグマ社製）１００μｇ、水酸化アルミニウムゲル（以下Ａｌｕｍ と略す。シグマ社製）１ｍｇ、百日咳毒素（シグマ社製）３００ｎｇを、２００μｌのリン酸緩衝生理食塩水（以下ＰＢＳと略す）に懸濁し、Ｂａｌｂ／ｃマウスの腹腔内に投与した。
【００３０】
初回感作５日後に、ＯＶＡ ５０μｇを１００μｌのＰＢＳに溶解し、背部皮下に投与した。さらに、局所感作として、初回感作１９日目よりＯＶＡ溶液（５０μｇ／μｌ）１μｌを両側鼻腔内に５週間連続投与し、くしゃみ及び鼻掻き行動などの鼻炎症状を呈する花粉症モデルを作製した。鼻炎症状の評価は、局所感作直後より３０分間のくしゃみ及び鼻掻き行動を測定する事によって行なった。
【００３１】
３．群分け
局所投与前日に血中ＯＶＡ特異的ＩｇＥ抗体価を測定し、ＩｇＥの平均値が等しくなるように７匹ずつ３群に振り分けた。実験群は、飼育用粉末飼料ＣＥ−２（日本クレア株式会社製）のみを与えた対照群、本発明品をＣＥ−２に２％混ぜた群（本発明品投与群）、紫蘇エキス粉末をＣＥ−２に１％に混ぜた群（紫蘇エキス投与群）を設定し、各飼料は、局所投与開始とともに自由摂取させた。
【００３２】
４．ＯＶＡ特異的ＩｇＥ抗体価の測定
ＯＶＡ特異的ＩｇＥ抗体価の測定は、局所投与開始０、２、４、５週目に行なった。測定は以下に示す方法にて行なった。９６穴マイクロプレートを抗マウスＩｇＥ抗体（２μｇ／ｍｌ  ベッチル社製）で１晩固相化した後、ブロッキング溶液（１％ＢＳＡ、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ、０．１４Ｍ ＮａＣｌ）で１時間ブロッキングした。ＰＢＳ−Ｔ０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０を含むＰＢＳ）で３回洗浄後、希釈した血清サンプル及びスタンダードを加え、室温で２時間静置した。ＰＢＳ−Ｔで３回洗浄後、ビオチンラベルしたＯＶＡ（５μｇ／ｍｌ）を加え、1時間静置後、ＰＢＳ−Ｔで３回洗浄し、Ａｖｉｄｉｎ  Ｈｏｒｓｅ  Ｒａｄｉｓｈ  Ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社製)を加え、０分間室温で静置した。ＰＢＳ−Ｔで４回洗浄後、基質溶液（ＴＭＢ ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社製）を加え、約１０分反応後、１Ｍリン酸溶液で反応を停止し、４５０ｎｍの吸光度を測定した。スタンダードにはＯＶＡ２０μｇとＡｌｕｍ２ｍｇの混合液をマウス腹腔内に４回投与して得られた血清を用いた。
【００３３】
５．脾細胞からのサイトカイン産生測定
試験最終日にマウスから脾臓を摘出し、脾細胞のサイトカイン産生に供した。方法は以下に示す。摘出した脾臓を滅菌ＰＢＳ で洗浄後、１％牛胎児血清(以下ＦＣＳと略す。第一化学薬品株式会社製)入りＰＢＳ中でスライドグラスにより磨り潰し、細胞懸濁液にした。この細胞懸濁液をＡＣＴＢ溶液（０．０１７Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌに０．７５％となるようにＮＨ4Ｃｌを加えた溶液）により赤血球を除去した後、ＦＣＳ及び抗生物質（ストレプトマイシン１００μｇ／ｍｌ、ペニシリンＧ １００Ｕ／ｍｌ  ＧＩＢＣＯ社製）を含む ＲＰＭＩ１６４０培地（シグマ社製）で５×１０6ｃｅｌｌｓ／ｍｌに調製した。調製した脾細胞懸濁液２００μｌを９６穴プレートに撒き、そこに最終濃度１００μｇ／ｍｌとなるようにＯＶＡを添加し、３７℃−５％ＣＯ2下で３日間培養した。培養後、細胞懸濁液を回収し、遠心分離後の上清中のＩＦＮ−γとＩＬ−４をＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社のキットを使用して測定した。
【００３４】
６．実験結果１（鼻炎症状）
図１に鼻かき行動、図２にくしゃみの測定結果を示す。図１および２において、「＊」は有意差があることを（ｐ＜０．０５）、「＊＊」は有意差があること（ｐ＜０．０１）を表している。対照群の鼻掻き行動およびくしゃみ回数は、試験期間とともに増加し、鼻炎症状の悪化が確認された。一方で、本発明品投与群では、鼻掻き行動が２週目より抑制されており、３週目及び５週目で有意な抑制効果が認められた。またくしゃみ回数についても４週目に有意な抑制効果が確認され、紫蘇エキス投与群と同等の抑制効果を示した。
【００３５】
７．実験結果２（血中OVA特異的ＩｇＥ）
試験期間における血中ＯＶＡ特２１３異的ＩｇＥの変動を図３に示す。対照群では、試験期間ともにＯＶＡ特異的ＩｇＥ抗体価の上昇が認められた。一方で、本発明品投与群では、２週目以降上昇を抑制していることが認められた。
【００３６】
８．実験結果３（サイトカイン）
脾細胞のサイトカイン産生の測定結果を図４及び図５に示す。ＩＦＮ−γは、対照群と同レベルであったが、ＩＬ−４では対照群より低値を示した。
＜実施例２：アレルギーモデルマウスによる評価＞
１．アレルギーモデルマウスの作製
ＯＶＡ２０μｇ及びＡｌｕｍ ２ｍｇをＰＢＳ２００μｌに懸濁し、Ｂａｌｂ／ｃマウスの腹腔内に投与した。追感作として初回感作５日目に同量ＯＶＡ及びＡｌｕｍを腹腔内投与した。さらに、局所感作として初回感作２６日目より両側鼻腔内にＯＶＡ溶液（５０μｇ／μｌ）２μｌを２週間連続投与した。
【００３７】
２．群分け
２次感作１週間後に血中ＯＶＡ特異的ＩｇＥ抗体価を測定し、ＩｇＥの平均値が等しくなるように５匹ずつ４群に分けた。実験群はＣＥ−２（日本クレア株式会社製）のみを与えた対照群、本発明品をＣＥ−２に２％混ぜた群（本発明品２％投与群）、１％混ぜた群（本発明品１％投与群）、０．５％混ぜた群（本発明品０．５％投与群）を設定し、各飼料は群分け直後より試験終了時まで自由摂取させた。
【００３８】
３．ＯＶＡ特異的ＩｇＥ抗体価の測定
ＯＶＡ特異的ＩｇＥ抗体価の測定は、２次感作１週間後より、４週目まで毎週行なった。測定は実施例１で示した方法で行なった。
【００３９】
４．実験結果
血中ＯＶＡ特異的ＩｇＥ抗体価を測定した結果を図６に示す。図６の「＊」は有意差があること（ｐ＜０．０５）を表している。試験３週目に投与量依存的に血中ＯＶＡ特異的ＩｇＥ抗体価の上昇抑制効果が見られ、４週目においては本発明品2%投与群で有意な抑制効果が認められた。
＜実施例３：本発明品と紫蘇液の組み合わせたものによる鼻炎症状の緩和効果＞
１．試料の調製
本発明品と紫蘇液の組み合わせたものを凍結乾燥して使用した。
【００４０】
２．群分け
実験群はＣＥ−２（日本クレア株式会社製）のみを与えた対照群、本発明品と紫蘇液を組み合わせたものを凍結乾燥し、ＣＥ−２に５％混ぜた群（本発明品＋紫蘇液投与群）、本発明品をＣＥ−２に１％に混ぜた群（本発明品投与群）を設定し、各飼料は、局所投与開始とともに自由摂取させた。
【００４１】
３．実験方法
実験は、実施例１と同様の方法で行なった。
【００４２】
４．実験結果１（鼻炎症状）
図７に鼻かき行動、図８にくしゃみの測定結果を示す。図８の「＊」は有意差があること（ｐ＜０．０５）を表している。対照群では、試験期間とともに鼻掻き回数、くしゃみ回数が増加し、鼻炎症状の悪化が観察された。一方で、本発明品+紫蘇液投与群では、鼻掻き行動が２週目より抑制傾向を示し、くしゃみ回数では３週目及び５週目に対照群と比較して有意な抑制効果が認められた。
【００４３】
５．実験結果２（血中ＯＶＡ特異的ＩｇＥ）
試験期間における血中ＯＶＡ特異的ＩｇＥの変動を図９に示す。対照群では、試験期間ともにＯＶＡ特異的ＩｇＥ抗体価の上昇が認められた。一方で、本発明品+紫蘇液投与群では、３週目以降上昇を抑制していることが認められた。
【００４４】
以上により、本発明に係る機能性食品は、花粉症モデルマウスおよびアレルギーモデルマウスに対してアレルギー抑制効果のあることが実証された。
【図面の簡単な説明】
【００４５】
【図１】実施例１における花粉症モデルマウスに対する本発明品の鼻掻き行動の抑制結果を示すグラフである。
【図２】実施例１における花粉症モデルマウスに対する本発明品のくしゃみの抑制結果を示すグラフである。
【図３】実施例１における花粉症モデルマウスに対する本発明品のＯＶＡ特異的ＩｇＥの上昇抑制を示すグラフである。
【図４】実施例１における本発明品のＩＦＮ−γ産生に及ぼす影響を示すグラフである。
【図５】実施例１における本発明品のＩＬ−４産生を抑制する結果を示すグラフである。
【図６】実施例２におけるアレルギーモデルマウスに対する本発明品のＯＶＡ特異的ＩｇＥの上昇抑制効果を示すグラフである。
【図７】実施例３における花粉症モデルマウスに対する本発明品＋紫蘇液を組み合わせたものによる鼻掻き行動の抑制効果を示すグラフである。
【図８】実施例３における花粉症モデルマウスに対する本発明品＋紫蘇液を組み合わせたものによるくしゃみの抑制効果を示すグラフである。
【図９】実施例３における花粉症モデルマウスに対する本発明品＋紫蘇液を組み合わせたものによるＯＶＡ特異的ＩｇＥの上昇抑制効果を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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