(57)【要約】【課題】前立腺肥大症患者ごとの遺伝的背景に基づいた至適かつ個別の治療が可能な交感神経遮断薬の選択方法を提供すること。【解決手段】本発明は、前立腺肥大症に伴う下部尿路症状を有する患者の治療を目的とし、その際に患者に対して投与すべきサブタイプ選択的交感神経系α１受容体遮断薬を選択する方法である。本発明の方法では、まず、患者の肥大化前立腺の組織から核酸試料を採取する。次に、採取した核酸試料を用いて、前立腺組織におけるα１ａ受容体サブタイプｍＲＮＡ及びα１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡの発現レベルをそれぞれ測定する。次に、両受容体サブタイプｍＲＮＡの発現レベルを比較する。比較の結果、α１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡが優位に発現している場合にα１ｄ受容体サブタイプ選択性の高い交感神経遮断薬を第一選択薬として選択する。【選択図】  図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
前立腺肥大症に伴う下部尿路症状を有する患者に投与すべきサブタイプ選択的交感神経系α１受容体遮断薬を選択する方法であって、
患者の肥大前立腺組織から核酸試料を採取する工程と、
前記核酸試料を用いて、前記肥大前立腺組織におけるα１ａ受容体サブタイプｍＲＮＡ及びα１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡの発現レベルをそれぞれ測定する工程と、
両受容体サブタイプｍＲＮＡの発現レベルを比較し、α１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡが優位に発現している場合にα１ｄ受容体サブタイプ選択性の高い交感神経遮断薬を第一選択薬として選択する一方、α１ａ受容体サブタイプｍＲＮＡが優位に発現している場合にα１ａ受容体サブタイプ選択性の高い交感神経遮断薬を第一選択薬として選択する工程と
を含むことを特徴とする、前立腺肥大症患者に対する交感神経遮断薬の選択方法。
【請求項２】
前記α１ｄ受容体サブタイプ選択性の高い遮断薬はナフトピジルであることを特徴とする請求項１に記載の選択方法。
【請求項３】
ｍＲＮＡ発現レベルの測定は定量的ＲＴ−ＰＣＲ法によることを特徴とする請求項１または２に記載の選択方法。
【請求項４】
前記肥大前立腺における移行領域の組織から前記核酸試料を採取することを特徴とする請求項１乃至３のいずれか１項に記載の選択方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、前立腺肥大症患者に対する交感神経遮断薬の選択方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
前立腺肥大症（BPH：Benign Prostatic Hyperplasia）は60歳以上の男性の50%以上に存在し、このうち15%〜30%が下部尿路症状を伴っていると言われている（非特許文献１）。前立腺肥大症に伴う下部尿路症状は、QOL（Quality Of Life）と密接に関連した、いわゆるQOL疾患である。このため、その治療を行う場合には、より効率的な方法を選択することが望まれる。よって、治療の効果判定は、主観的な症状の改善及び患者自身の満足度とともに、客観的有効性及び副作用を総合的に評価することによって行うことが重要である。
【０００３】
前立腺肥大症に対する治療は、もともと経尿道的前立腺切除術に代表される外科的治療が主体であった。しかし最近では、外科的治療の適応は、主に尿閉、反復性の尿路感染症や血尿、膀胱結石、上部尿路障害を有するなどの重症の前立腺肥大症症例に狭められている。よって、多くの場合には、まず薬物治療が選択されるようになった。このような薬物治療に用いる薬剤としては、前立腺の平滑筋を弛緩させ、前立腺による閉塞を緩和させる交感神経系α１受容体遮断薬（いわゆるα１ブロッカー）がよく知られている。交感神経系α１受容体遮断薬の効果及び安全性は様々な臨床試験で証明されている。このため、交感神経系α１受容体遮断薬は、今日では前立腺肥大症に対する第一選択薬として位置付けられている（非特許文献２〜６）。
【０００４】
近年、臓器特異性の観点から、α１アドレナリン受容体（以下α１受容体）サブタイプの発現機能解析が進んでいる。その解析によると、前立腺組織においては、α１Ｂ受容体に比較してα１Ａ受容体やα１Ｄ受容体が、多く発現することがわかってきている。一方で、α１Ｂ受容体はアドレナリンに対する心血管系の平滑筋収縮に大きな役割を担っているという報告もある（非特許文献７，８）。それに伴って、α１Ａ受容体サブタイプに選択性の高い「タムスロシン」やα１Ｄ受容体サブタイプに選択性の高い「ナフトピジル」が、前立腺に対する臓器選択性に富むことより、副作用が少なく、前立腺肥大症に対する優れた治療薬として評価されている（非特許文献９〜１２）。
【０００５】
一方、近年では患者の遺伝的特徴に合わせて最も効率的な薬物投与を行うという、ゲノム薬理学及びオーダーメード医療の概念が支持されている（非特許文献１３〜１６）。一般的に、様々な疾患に対して薬物治療を行う上で、ひとつの薬剤が同じ疾患を有する患者全てに効果的であるというわけではない。つまり、薬剤の効果は、その患者自身が有する遺伝的背景に基づいて決まると考えられる。このことから、これまで行われてきた、個人差を無視した、集団に対する統計学的情報を元にした薬物治療ではなくて、今後は患者一人一人を薬剤に対するレスポンダーとノンレスポンダーとに識別し、至適個別化することによる効率的な薬物選択と投与計画とを行うことが期待されている（非特許文献１７）。
【０００６】
α１受容体はＧ蛋白質共役型の受容体に分類され、内因性カテコルアミンであるノルエピネフリンとエピネフリンとの作用を介し、平滑筋を収縮させる。これまでに、α１受容体について三種類の異なるサブタイプ（α１ａ、α１ｂ、α１ｄ）が分子生物学的手法を用いて同定されている（非特許文献１８）。ヒト正常前立腺組織には主にα１ａ受容体とα１ｄ受容体が多く発現しており、α１ｂ受容体は少ない（非特許文献１９）。さらに、α１ａ受容体及びα１ｄ受容体の発現量を比較すると、α１ａ受容体が前立腺においては優位に発現していることが報告されている（非特許文献２０，２１）。NasuらはRNase protection assayによって正常前立腺組織と前立腺肥大組織とのα１受容体サブタイプmRNAの発現比を検討している（非特許文献２１）。それによると、正常前立腺組織ではα１ａ：α１ｂ：α１ｄは63:31:6、前立腺肥大症組織ではα１ａ：α１ｂ：α１ｄは81:14:1となり、前立腺肥大症患者においてα１ａ受容体の発現が圧倒的に多くなると報告している。こうした背景のもと、α１ａ受容体に選択性の高い遮断薬である「タムスロシン」が前立腺肥大症に伴う下部尿路症状に効果的であることが理論的に証明されてきた（非特許文献９，１０）。従って、交感神経系α１受容体遮断薬の中でも、とりわけ「タムスロシン」を前立腺肥大症に対する第一選択薬として選択し投与することが、本分野では常識とされてきた。
【０００７】
その一方で、α１ｄ受容体に選択性の高い遮断薬であるナフトピジルが、前立腺肥大症に伴う下部尿路症状に効果的であることも報告されている（非特許文献１１，１２，２２）。また、タムスロシンが効果的でない患者の中でナフトピジルが効果的である患者が存在することや、その逆にナフトピジルが効果的でない患者の中でタムスロシンが効果的である患者が存在することも報告されている（非特許文献２３）。
【非特許文献１】Thorpe A, Neal D. Benign prostatic hyperplasia. Lancet 361:1359-67, 2003.
【非特許文献２】Chapple CR. Selective alpha 1-adrenoceptor antagonists in benign prostatic hyperplasia: rationale and clinical experience. Eur Urol. 29:129-44, 1996.
【非特許文献３】Kirby R, Andersson KE, Lepor H, Steers WD. Alpha(1)-Adrenoceptor selectivity and the treatment of benign prostatic hyperplasia and lower urinary tract symptoms. Prostate Cancer Prostatic Dis 3:76-83, 2000.
【非特許文献４】Schwinn DA, Michelotti GA. alpha1-adrenergic receptors in the lower urinary tract and vascular bed: potential role for the alpha1d subtype in filling symptoms and effects of ageing on vascular expression. BJU Int 85 Suppl 2:6-11, 2000.
【非特許文献５】Andersson KE. Alpha-adrenoceptors and benign prostatic hyperplasia: basic principles for treatment with alpha-adrenoceptor antagonists. World J Urol 19:390-6, 2002.
【非特許文献６】Roehrborn CG, Schwinn DA. Alpha1-adrenergic receptors and their inhibitors in lower urinary tract symptoms and benign prostatic hyperplasia. J Urol 171:1029-35, 2004.
【非特許文献７】Cavalli A, Lattion AL, Hummler E, et al. Decreased blood pressure response in mice deficient of the alpha1b-adrenergic receptor.Proc Natl Acad Sci U S A. 1997; 94:11589-94.
【非特許文献８】Vecchione C, Fratta L, Rizzoni D, et al. Cardiovascular influences of alpha1b-adrenergic receptor defect in mice. Circulation. 2002;105:1700-7.
【非特許文献９】Chapple CR, Wyndaele JJ, Nordling J, Boeminghaus F, Ypma AF, Abrams P. Tamsulosin, the first prostate-selective alpha 1A-adrenoceptor antagonist. A meta-analysis of two randomized, placebo-controlled, multicentre studies in patients with benign prostatic obstruction (symptomatic BPH). European Tamsulosin Study Group. Eur Urol 29:155-67,1996.
【非特許文献１０】Lepor H. Phase III multicenter placebo-controlled study of tamsulosin in benign prostatic hyperplasia. Tamsulosin Investigator Group. Urology 51:892-900,1998.
【非特許文献１１】Takei R, Ikegaki I, Shibata K, Tsujimoto G, Asano T. Naftopidil, a novel alpha1-adrenoceptor antagonist, displays selective inhibition of canine prostatic pressure and high affinity binding to cloned human alpha1-adrenoceptors. Jpn J Pharmacol 79:447-54,1999.
【非特許文献１２】Yasuda K, Yamanishi T, Tojo M, Nagashima K, Akimoto S, Shimazaki J. Effect of naftopidil on urethral obstruction in benign prostatic hyperplasia: assessment by urodynamic studies. Prostate 25:46-52,1994.
【非特許文献１３】Evans WE, McLeod HL. Pharmacogenomics-drug disposition, drug targets, and side effects. N Engl J Med 348:538-49, 2003.
【非特許文献１４】Meyer UA. Pharmacogenetics and adverse drug reactions. Lancet. 356:1667-1671, 2000.
【非特許文献１５】Severino G, Del Zompo M. Adverse drug reactions: role of pharmacogenomics. Pharmacol Res. 49:363-373, 2004.
【非特許文献１６】Nebert DW, Jorge-Nebert L, Vesell ES. Pharmacogenomics and "individualized drug therapy": high expectations and disappointing achievements. Am J Pharmacogenomics. 3:361-70, 2003.
【非特許文献１７】Tsujimoto G, Katsuma S, Shiojima S, Hirasawa A, Tanoue A.  Functional genomic research of alpha 1-adrenoceptors.  J Cardiovasc Pharmacol. 38 Suppl 1:S1-5, 2001.
【非特許文献１８】Hieble JP, Bylund DB, Clarke DE, et al. International Union of Pharmacology. X. Recommendation for nomenclature of alpha 1-adrenoceptors: consensus update. Pharmacol Rev 47:267-70, 1995.
【非特許文献１９】Price DT, Lefkowitz RJ, Caron MG, Berkowitz D, Schwinn DA. Localization of mRNA for three distinct alpha 1-adrenergic receptor subtypes in human tissues: implications for human alpha-adrenergic physiology. Mol Pharmacol 45:171-5, 1994.
【非特許文献２０】Price DT, Schwinn DA, Lomasney JW, Allen LF, Caron MG, Lefkowitz RJ. Identification, quantification, and localization of mRNA for three distinct alpha 1 adrenergic receptor subtypes in human prostate. J Urol 150:546-51, 1993.
【非特許文献２１】Nasu K, Moriyama N, Kawabe K, et al. Quantification and distribution of alpha 1-adrenoceptor subtype mRNAs in human prostate: comparison of benign hypertrophied tissue and non-hypertrophied tissue. Br J Pharmacol 119:797-803,1996.
【非特許文献２２】Yamanishi T, Yasuda K, Kamai T, et al. Single-blind, randomized controlled study of the clinical and urodynamic effects of an a-blocker (naftopidil) and phytotherapy (eviprostat) in the treatment of benign prostatic hyperplasia. Int J Urol 11, 501-509, 2004.
【非特許文献２３】Ikemoto I, Kiyota H, Ohishi Y, Abe K, Goto H, Kishimoto K, Miki K. Usefulness of tamsulosin hydrochloride and naftopidil in patients with urinary disturbances caused by benign prostatic hyperplasia: a comparative, randomized, two-drug crossover study. Int J Urol 10:587-94, 2003.
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかしながら、より理想的なオーダーメード医療を確立するためには、前立腺肥大症患者ごとの遺伝的背景に基づいて至適かつ個別の治療ができるように、その患者に合った交感神経遮断薬を第一選択薬として選択することが望まれる。
【０００９】
本発明は上記の課題に鑑みてなされたものであり、その目的は、前立腺肥大症患者ごとの遺伝的背景に基づいた至適かつ個別の治療が可能な交感神経遮断薬の選択方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記の課題を解決するために、本願発明者らは、前立腺肥大症患者ごとの遺伝的背景に基づいて患者間にα１受容体サブタイプの発現量に差異があるものと仮定し、複数の患者から生検によって採取した肥大前立腺組織のα１受容体各サブタイプｍＲＮＡの発現量を測定した。従来、肥大前立腺組織においてはα１ａ受容体の発現が圧倒的に優位であるとされてきた。しかしながら、このたび本願発明者らは、組織の採取部位の適正化、組織中ｍＲＮＡ発現量の測定方法の適正化等を図った結果、肥大前立腺組織においてα１ｄ受容体が優位に発現している患者が多く存在する、という当業者の常識を覆す意外な知見を新規に得た。このような新規な知見に基づいて、本願発明者らはさらに鋭意研究を行い、α１ａ受容体が優位に発現している患者及びα１ｄ受容体が優位に発現している患者の各々について、α１ａ受容体に選択性の高い遮断薬及びα１ｄ受容体に選択性の高い遮断薬の薬効との相関性を調査、検討し、最終的に下記のような課題解決手段を想到した。
【００１１】
［手段１］前立腺肥大症に伴う下部尿路症状を有する患者に投与すべきサブタイプ選択的交感神経系α１受容体遮断薬を選択する方法であって、患者の肥大前立腺組織から核酸試料を採取する工程と、前記核酸試料を用いて、前記肥大前立腺組織におけるα１ａ受容体サブタイプｍＲＮＡ及びα１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡの発現レベルをそれぞれ測定する工程と、両受容体サブタイプｍＲＮＡの発現レベルを比較し、α１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡが優位に発現している場合にα１ｄ受容体サブタイプ選択性の高い交感神経遮断薬を第一選択薬として選択する一方、α１ａ受容体サブタイプｍＲＮＡが優位に発現している場合にα１ａ受容体サブタイプ選択性の高い交感神経遮断薬を第一選択薬として選択する工程とを含むことを特徴とする、前立腺肥大症患者に対する交感神経遮断薬の選択方法。
【００１２】
［手段２］前記α１ｄ受容体サブタイプ選択性の高い遮断薬はナフトピジルであることを特徴とする手段１に記載の選択方法。
【００１３】
［手段３］ｍＲＮＡ発現レベルの測定は定量的ＲＴ−ＰＣＲ法によることを特徴とする手段１または２に記載の選択方法。
【００１４】
［手段４］前記肥大前立腺における移行領域の組織から前記核酸試料を採取することを特徴とする手段１乃至３のいずれか１項に記載の選択方法。
【発明の効果】
【００１５】
以上詳述したように、請求項１〜４に記載の発明によると、前立腺肥大症患者ごとの遺伝的背景に基づいた至適かつ個別の治療が可能な交感神経遮断薬の選択方法を提供することができる。それゆえ、この方法によって選択した交感神経遮断薬を患者ごとに投与したとすれば、最小の副作用で最大の薬剤効果が得られるような薬物治療が可能となり、現在望まれているオーダーメード医療の確立に向けて大きく前進することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
手段１にかかる方法は、前立腺肥大症に伴う下部尿路症状を有する患者に投与すべきサブタイプ選択的交感神経系α１受容体遮断薬を選択する方法である。
【００１７】
「前立腺肥大症」とは、前立腺の腫大に伴い多彩な下部尿路症状（Lower Urinary Tract Symptoms: LUTS）を呈する良性疾患のことを指す。「前立腺肥大症に伴う下部尿路症状」とは、蓄尿症状、排尿症状、排尿後症状の３つに大別され、日常よくみられるものとしては、頻尿、尿失禁、尿勢低下、排尿後尿滴下などがある。下部尿路症状は、下部尿路機能障害（Lower Urinary Tract Dysfunction: LUTD ）によって出現する自覚症状の総称であるが、ここでは上記のごとく前立腺肥大症に伴うものを対象とする。従って、感染症などにより引き起こされる下部尿路症状は、ここでは対象外とする。
【００１８】
手段１の選択方法における「患者」とは、ヒトに限定されるわけではなく、ヒト以外の哺乳類（例えばラット、マウス、ウサギ、ハムスター、ウシ、ヒツジ、ウマ、イヌ、ネコ等）であってもよい。ただし、女性（メス）は前立腺を有しないので、手段１の選択方法が適用されるのは男性（オス）に限られる。
【００１９】
「サブタイプ選択的交感神経系α１受容体遮断薬」とは、α１受容体を遮断する薬剤（いわゆるα１ブロッカー）のうち、サブタイプに選択的なものを指す。
【００２０】
手段１の選択方法においては、まず、患者の肥大前立腺組織から核酸試料を採取する工程を実施する。採取されるべき「組織」は、患者の前立腺組織、つまり肥大化している前立腺組織である必要がある。前立腺１１は、発生学的視点も加えて、中心領域（Central zone: CZ）、移行領域（Transition zone: TZ）、辺縁領域（Peripheral zone: PZ)の三領域に分類される（図１参照）。尿道２１を取り囲んでいる中心領域CZ及び移行領域TZは内腺と呼ばれている一方、尿道２１から離れている辺縁領域PZは外腺と呼ばれている。最近の研究によると、前立腺肥大症は移行領域TZから発生することがわかっている。それゆえ、核酸試料は肥大前立腺１１の移行領域TZの組織から採取することが望ましく、より詳しくいうと、肥大前立腺１１における他の領域（即ち中心領域CZや辺縁領域PZ ）を含まず移行領域TZのみから組織を採取することが特に望ましい。このような採取方法であると、より信頼性の高い測定結果を得ることが可能になるからである。ちなみに、前立腺癌の７０％は辺縁領域PZにて発生するといわれており、明らかに前立腺肥大症とは発生部位が異なっている。それゆえ、測定誤差の発生原因となりうる部位（即ち中心領域CZや辺縁領域PZ）を、採取する組織中に極力混入させないようにすべきである。
【００２１】
患者の肥大化前立腺における移行領域TZから組織を採取する具体的方法としては、例えば一般的な針生検がある。針生検においては移行領域TZにおける複数箇所から組織を採取することが好ましい。針生検は例えば経会陰的に行ってもよいが、経肛門的に行うことも可能である。針生検以外の手法により生検を行うことで組織を採取してもよい。また、肥大前立腺組織から採取されるべき「核酸試料」としては、ｍＲＮＡのようなＲＮＡや、ＤＮＡが挙げられる。なお、肥大前立腺組織から核酸試料を抽出する方法は当業者に周知であり、いずれの方法を使用してもよいが、例えば、市販のＲＮＡ抽出キットを用いることが好適である。
【００２２】
手段１の選択方法では、試料採取工程を実施した後に下記の測定工程を実施する。測定工程では、前記核酸試料を用いて、前記肥大前立腺組織におけるα１ａ受容体サブタイプｍＲＮＡ及びα１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡの発現レベルをそれぞれ測定する。
【００２３】
ｍＲＮＡ発現レベルを測定する手法は特に限定されるべきではなく、従来公知の様々な手法が採用可能であり、例えばＰＣＲ(Polymerase Chain Reaction)法によることが好ましい。この場合、多数あるＰＣＲ法のなかでも、定量的ＲＴ−ＰＣＲ（Quantitative Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction ）法によりｍＲＮＡ発現レベルを測定することが特に好ましい。定量的ＲＴ−ＰＣＲ法は定量性及び再現性に優れた手法であり、この手法によれば信頼性の高い測定結果が得やすくなるからである。なお、ＰＣＲ法以外の手法、例えば、ＤＮＡチップまたはマイクロアレイを用いた方法(Wang DG et al., Science 280,1077(1998)等)、プライマー伸長法、インシチュハイブリダイゼーション法、サザンブロットハイブリダイゼーション法、ドットハイブリダイゼーション法（Southern,E., J. Mol. Biol. 98, 503-517(1975)）等のような従来公知の手法を採用することも可能である。
【００２４】
手段１の選択方法では、測定工程を実施した後に下記の薬剤選択工程を実施する。薬剤選択工程では、先ほどの測定工程により得た結果に基づいて、α１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡの発現レベルと、α１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡの発現レベルとを比較する。そして、α１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡが優位に発現している場合には、α１ｄ受容体サブタイプ選択性の高い交感神経遮断薬を第一選択薬として選択する。一方、α１ａ受容体サブタイプｍＲＮＡが優位に発現している場合には、α１ａ受容体サブタイプ選択性の高い交感神経遮断薬を第一選択薬として選択する。
【００２５】
α１ａ受容体サブタイプ選択性の高い交感神経遮断薬の具体例としては、タムスロシンやシロドシンを挙げることができる。α１ｄ受容体サブタイプ選択性の高い交感神経遮断薬としては、ナフトピジルを挙げることができる。
【実施例１】
【００２６】
１．目的
【００２７】
これまで前立腺組織においてはα１ａ受容体が優位に発現していることが報告され、また前立腺肥大症（BPH）に対するα１ａ遮断薬の治療効果が患者によって差違があることが報告されてきた。
【００２８】
本願発明者らは、患者ごとの遺伝的背景に基づいて、患者間にα１受容体各サブタイプの発現量に違いがある可能性を仮定した。そこで定量的RT-PCRを用いて、複数の患者の肥大前立腺組織のα１受容体各サブタイプの発現量を測定した。さらに、その発現量と年齢・前立腺容量・自覚症状・他覚症状との相関性についてあわせて検討した。
２．対象と方法
【００２９】
対象は下部尿路症状を主訴に来院し、前立腺特異抗原（PSA）の高値もしくは直腸診にて前立腺癌を疑った患者のうち、前立腺生検により前立腺癌が否定された前立腺肥大症未治療例の35名（平均年齢67.9+/-6.9歳）である。
【００３０】
初診時の検討項目として、I-PSS/QOL index、直腸診、PSA、経腹的US（前立腺容量測定）、尿流測定、排尿後残尿測定を行った。
【００３１】
前立腺生検は超音波（ＡＬＯＣＡ社製ProSound SSD-5000SV、7.5Hzプローブ使用）ガイド下経会陰的前立腺針生検を行い、肥大前立腺組織を採取した。なお、前立腺生検は、当施設倫理委員会の承認及び患者の同意のもとに実施した。穿刺には16G針を用い、肥大前立腺の移行領域TZより４カ所生検した。この場合、中心領域CZや辺縁領域PZが混じらないように留意した。得られた検体は直ちにRNAlaterTM (RNA stabilization solution；Ambion Inc. USA)に浸し、24時間後-80℃にて保存した。
３．定量的RT-PCRによるα１受容体サブタイプ発現量の検討
＜Preparation of RNA＞
【００３２】
生検で得られた前立腺組織をサンプルとし、市販のRNA抽出用キット（RNAqueous Kit,  Ambion, Austin, TX, USA)を用いて、全RNAを抽出した。各RNAサンプルは、spectrophotometer（260/280 nm）にて定量（10 mg）後、-80℃で保存した。
＜定量的RT-PCR（Quantitative RT-PCR）＞
10mg (DNase-treated)の全RNAからcDNAを合成（oligo-dT primer and Superscript II, GIBCO/BRL Life Technologies, Gaithersburg, MD, USA) し、最終容量を20 mlに調整した。各α１受容体サブタイプに対するTaqMan PCR は、市販のシステム（Applied Biosystems
PRISM 7700 sequence detection system）を用いて行った。PCR用のプライマーとプローブの設定は、市販のソフトウェア（PRIMER-EXPRESS
software (Applied Biosystems, Branchburg, NJ, USA)）を用いて行った。３つの遺伝子定量を標準化するため、TaqMan
β-actin Control Reagents kit (Applied Biosystems Branchburg, NJ, USA)を用い、β-actinを各標的遺伝子と同じplate上で定量化した。なお、全ての定量は２回行った。
＜定量的RT-PCRの設定条件＞
【００３３】
定量的RT-PCRにて設定したプライマーとプローブの塩基配列を以下に記す。
α1a-AR forward, 5’-TAGCCTGTCACCGACACCTG-3’
α1a-AR reverse, 5’-GGAGGTCGGCCACCG-3’
α1a-AR detection probe, 5’-FAM TCAGTCACGCACTACTACATCGTCAACCTG-3’-TAM
α1b-AR forward, 5’-CTCAACCCCATCATCTACCCA-3’
α1b-AR reverse, 5’-GCACCCGAGGATGCG-3’
α1b-AR detection probe, 5’-FAM TCCAGCAAGGAGTTCAAGCGCG-3’-TAM;
α1d-AR forward, 5’-AGCGCTTCTGCGGTATCA-3’
α1d-AR reverse, 5’-CAGGTAGAAGGAGCACACGG-3’
α1d-AR detection probe, 5’-FAM CGAGGAGGCGGGCTACGCTGT-3’-TAM. 
【００３４】
上記のプライマーとプローブを用いて以下の手順で定量的RT-PCRを行った。PCR反応の条件としては、最初に50℃,2分反応させ、95℃,10秒反応させた後、分離（94℃,15秒）、アニーリング、伸張（60℃,60秒）を50サイクル行い、cDNAを増幅させるようにした。
４．α１受容体サブタイプ発現量の測定結果
【００３５】
α１受容体サブタイプ（α１ａ，α１ｂ，α１ｄ）のmRNA量を測定した結果、前立腺肥大症組織においては、α１受容体各サブタイプのうち、全体の平均値としてはα１ｄ受容体の発現量がα１ａ及びα１ｂの発現量に比較してやや多かった（図２の表１参照）。またα１ａ>α１ｄ受容体の患者は12例で、α１ａ＜α１ｄ受容体の患者は23例であり、α１ｄが優位に発現している患者の方が多く存在した。患者の肥大前立腺組織においては、これまでα１ａ受容体の発現が優位であるとされていたが、α１ａ受容体の発現が優位な患者とα１ｄ受容体の発現が優位な患者とが存在していることがわかった。
【００３６】
今回得られた結果は、肥大前立腺組織においてα１ａ受容体が優位に発現しているというNasuらの結果と異なるものである。このような異なる結果が得られた理由は明らかではないが、原因として考えられることは、両者におけるmRNAの測定方法、患者数、前立腺容量、前立腺組織の採取部位の違いにあると推測される。特に、本願発明者らがmRNAの測定方法として用いた定量的RT-PCR法は、Nasuらが用いたRNase
protection assayに比べて感度がよい方法であり、この方法の選択が信頼性の高い結果の取得につながったと考えている。
５．α１受容体サブタイプの発現量と選択的交感神経系α１受容体遮断薬の薬剤効果との相関
【００３７】
α１受容体サブタイプ非選択性の交感神経遮断薬であるテラゾシンやドキサゾシンは、もともと高血圧治療薬として開発されたものであるので、血管平滑筋にも作用する。このため、テラゾシンやドキサゾシンは、血圧低下によるめまい、立ちくらみなどの副作用を引き起こすことがある。一方、排尿障害治療薬として開発されたα１受容体サブタイプ選択性の交感神経遮断薬であるタムスロシン及びナフトピジルは、前立腺に特異的に作用するため、血圧や脈拍に影響を与えにくい。それゆえ、タムスロシン及びナフトピジルは、臓器選択性という観点から見て、非常に優れた薬剤であることが証明されている。これら２つの薬剤のうち、前立腺においてはα１ｄ受容体に比較してα１ａ受容体が多く発現しているというこれまでの報告から、α１ａ受容体に選択性の高いタムスロシンの有効性が理論的に証明されてきた。その一方で、α１ｄ受容体に選択性の高いナフトピジルの有効性を理論的に証明した報告は、これまでになかった。しかしながら上述したように、本願発明者らの定量的RT-PCRを用いた研究成果から、前立腺肥大症に伴う下部尿路症状を有する患者のなかには、α１ａ受容体が多く発現している患者とα１ｄ受容体が多く発現している患者とが、ほぼ同数ずついることがわかった。そこで、α１受容体サブタイプmRNAの発現量が、前立腺肥大症に伴う下部尿路症状に対するサブタイプ選択的α１交感神経遮断薬の薬剤効果を規定しうると仮定した。
【００３８】
そこで、本願発明者らは下部尿路症状を伴う未治療の前立腺肥大症患者28例に対し、治療前に前立腺生検を施行した後、一律にナフトピジルを第一選択薬とし、これを１日50mg、12週間投与した。投与後に定量したα１ａ受容体の発現量とα１ｄ受容体の発現量とにより、前立腺肥大症患者をα１ａ受容体発現優位の患者(n=12)とα１ｄ受容体発現優位の患者(n=16)とにわけて、α１ｄ受容体に選択性の高いナフトピジルの薬剤効果に相違があるか否か検討した。
【００３９】
ここでは、ナフトピジル投与前後の自覚所見（I-PSS、QOL index）と、他覚所見（UFM・排尿後残尿量）をそれぞれ評価した。なお、図３の表２はI-PSS（国際前立腺症状スコア）を示し、図４の表３はQOLスコア（QOL index）を示す。
【００４０】
全28例についてナフトピジルの薬剤効果を検討した結果を、図５の表４、図６〜図１０のグラフに示す。これによると、尿線途絶を除くI-PSS各項目、Total I-PSS、QOL index、Qmax（ＵＦＭにおける最大尿流率）のいずれについても、ナフトピジルは統計学的に有意な改善を示した。
【００４１】
一方、α１ａ受容体優位な患者及びα１ｄ受容体優位な患者の２群に分けて、I-PSSの各項目別に検討したところ、α１ａ受容体優位群患者では７項目中１項目のみ有意な改善を認めたのに対し、α１ｄ受容体優位群患者では７項目中５項目で有意な改善を認めた（図５の表４）。また、I-PSSの項目を排出症状、蓄尿症状に分けて検討したところ、α１ａ受容体優位群患者ではいずれも有意な改善を認めなかったのに対し、α１ｄ受容体有意群患者ではいずれも有意な改善を認めた。また、QOL index、残尿量もα１ａ受容体優位群患者では有意な改善を認めなかったのに対し、α１ｄ受容体有意群患者では有意な改善を認めた。さらに、Total I-PSSやQmaxにおいても、α１ｄ受容体優位群患者のほうがα１ａ受容体優位群患者に比べて、ナフトピジルが効果的であった。
【００４２】
注目すべき点は、全28例で検討した場合、I-PSSのうち尿線途絶以外の全ての項目、排出症状、蓄尿症状で統計学的に有意な改善を認めたのに対し、α１ａ受容体優位群とα１ｄ受容体優位群とに分けたところ、ナフトピジルの効果が両群で異なったことである。つまり、患者全体を対象として考えると、統計学的にナフトピジルは前立腺肥大症に対し効果的であるように見える。しかし、患者毎のα１ａ受容体の発現量及びα１ｄ受容体の発現量を詳しく検討してみると、その効果は異なるのである。これらの結果は、前立腺肥大症患者の肥大前立腺におけるα１ａ受容体及びα１ｄ受容体の発現量により、ナフトピジルに対するレスポンダーとノンレスポンダーとをある程度特定できることを示すものである。言い換えれば、前立腺肥大症患者の中にはナフトピジルが効果的な患者と効果的でない患者とが存在し、それらを規定する因子としてα１ａ受容体及びα１ｄ受容体の発現量の２つがあることになる。
【００４３】
以上詳述した本発明によると、α１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡが優位に発現している前立腺肥大症患者については、α１ｄ受容体サブタイプ選択性の高いナフトピジル等の交感神経遮断薬を第一選択薬として選択し、必要に応じてこれを当該患者に投与する。一方、α１ａ受容体サブタイプｍＲＮＡが優位に発現している前立腺肥大症については、α１ａ受容体サブタイプ選択性の高いタムスロシン等の交感神経遮断薬を第一選択薬として選択し、必要に応じてこれを当該患者に投与する。そして、このような方法で選択された交感神経遮断薬は、前立腺肥大症患者ごとの遺伝的背景に基づいて個別に選択された至適の薬剤であると言える。それゆえ、この方法によって選択した交感神経遮断薬を患者ごとに投与したとすれば、最小の副作用で最大の薬剤効果が得られるような理想的な薬物治療が可能となり、現在望まれているオーダーメード医療の確立に向けて大きく前進することができる。
【００４４】
なお、本発明は上記の実施例のみに限定されることはなく、本発明の趣旨を逸脱しない範囲内において自由に変更することが可能である。
【００４５】
以下、本発明の各実施形態により把握できる技術的思想を列挙する。
【００４６】
（１）前立腺肥大症に伴う下部尿路症状を有する患者に投与すべきサブタイプ選択的交感神経系α１受容体遮断薬を選択する方法であって、患者の肥大前立腺における移行領域の組織から核酸試料を採取する工程と、前記核酸試料を用いて、前記肥大前立腺組織におけるα１ａ受容体サブタイプｍＲＮＡ及びα１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡの発現レベルをそれぞれ定量的ＲＴ−ＰＣＲ法により測定する工程と、両受容体サブタイプｍＲＮＡの発現レベルを比較し、α１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡが優位に発現している場合にα１ｄ受容体サブタイプ選択性の高い交感神経遮断薬を第一選択薬として選択する一方、α１ａ受容体サブタイプｍＲＮＡが優位に発現している場合にα１ａ受容体サブタイプ選択性の高い交感神経遮断薬を第一選択薬として選択する工程と、を含むことを特徴とする、前立腺肥大症患者に対する交感神経遮断薬の選択方法。
【００４７】
（２）上記（１）において、前記移行領域の組織のみから前記核酸試料を採取することを特徴とする選択方法。
【００４８】
（３）上記（２）において、前記移行領域の組織の複数箇所から前記核酸試料を採取することを特徴とする選択方法。
【００４９】
（４）上記（１）乃至（３）のいずれか１項において、前記患者は、前立腺癌が否定された前立腺肥大症未治療患者であることを特徴とする選択方法。
【００５０】
（５）上記（１）乃至（４）のいずれか１項において、前記患者は、炎症性の下部尿路疾患に罹患しておらず、かつ、前立腺癌が否定された前立腺肥大症未治療患者であることを特徴とする選択方法。
【００５１】
（６）前立腺肥大症に伴う下部尿路症状を有する患者に投与すべきサブタイプ選択的交感神経系α１受容体遮断薬を選択する方法であって、患者の前立腺が肥大しているか否かを判定する工程と、正常状態より肥大している場合に前立腺針生検をする工程と、前記前立腺針生検により得た肥大前立腺組織から前立腺癌の有無を判断する工程と、前記前立腺癌が無と判断した場合に前記患者の肥大前立腺における移行領域の組織から核酸試料を採取する工程と、前記核酸試料を用いて、前記肥大前立腺組織におけるα１ａ受容体サブタイプｍＲＮＡ及びα１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡの発現レベルをそれぞれ定量的ＲＴ−ＰＣＲ法により測定する工程と、両受容体サブタイプｍＲＮＡの発現レベルを比較し、α１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡが優位に発現している場合にα１ｄ受容体サブタイプ選択性の高い交感神経遮断薬を第一選択薬として選択する一方、α１ａ受容体サブタイプｍＲＮＡが優位に発現している場合にα１ａ受容体サブタイプ選択性の高い交感神経遮断薬を第一選択薬として選択する工程と、を含むことを特徴とする、前立腺肥大症患者に対する交感神経遮断薬の選択方法。
【００５２】
（７）上記（１）乃至（６）のいずれか１項の選択方法により選択した第一選択薬を投与して前記患者を治療する工程を含む、前立腺肥大症患者に対する交感神経遮断薬の使用方法。
【００５３】
（８）上記（７）において、α１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡが優位に発現している患者に対するα１ｄ受容体サブタイプ選択性の高い交感神経遮断薬の投与は、I-PSS（国際前立腺症状スコア）のうち尿線途絶以外の全ての項目、排出症状、蓄尿症状を改善しうることを特徴とする使用方法。
【００５４】
（９）上記（７）において、α１ｄ受容体サブタイプｍＲＮＡが優位に発現している患者に対するα１ｄ受容体サブタイプ選択性の高い交感神経遮断薬の投与は、ＱＯＬスコアを改善しうることを特徴とする使用方法。
【図面の簡単な説明】
【００５５】
【図１】前立腺の解剖図である。
【図２】前立腺肥大組織におけるα１受容体サブタイプの発現量を示す表である（表１）。
【図３】I-PSS（国際前立腺症状スコア）を示す表である（表２）。
【図４】QOLスコア（QOL index）を示す表である（表３）。
【図５】α１受容体サブタイプの発現量とナフトピジル投薬前後のI-PSS、QOLスコアとの有意差を示す表である（表４）。
【図６】α１受容体サブタイプの発現量とナフトピジル投薬前後のI-PSS排尿症状との有意差を示すグラフであって、(ａ)は全患者、(ｂ)はα１ａ優位群、(ｃ)はα１ｄ優位群のものである。
【図７】α１受容体サブタイプの発現量とナフトピジル投薬前後のI-PSS蓄尿症状との有意差を示すグラフであって、(ａ)は全患者、(ｂ)はα１ａ優位群、(ｃ)はα１ｄ優位群のものである。
【図８】α１受容体サブタイプの発現量とナフトピジル投薬前後のTotal I-PSSとの有意差を示すグラフであって、(ａ)は全患者、(ｂ)はα１ａ優位群、(ｃ)はα１ｄ優位群のものである。
【図９】α１受容体サブタイプの発現量とナフトピジル投薬前後のQOL index との有意差を示すグラフであって、(ａ)は全患者、(ｂ)はα１ａ優位群、(ｃ)はα１ｄ優位群のものである。
【図１０】α１受容体サブタイプの発現量とナフトピジル投薬前後のQmaxとの有意差を示すグラフであって、(ａ)は全患者、(ｂ)はα１ａ優位群、(ｃ)はα１ｄ優位群のものである。
【符号の説明】
【００５６】
１１…前立腺、ＴＺ…移行領域
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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