(57)【要約】  本開示は、白樺樹皮抽出物、かかる抽出物を製造する方法、かかる抽出物を含有する安定な医薬組成物、およびかかる抽出物の使用方法に関する。本開示の白樺樹皮抽出物は、創傷治癒を改善することが知られているトリテルペンを含有する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも約７０重量％のベツリンと、ベツリン酸、オレアノール酸、エリスロジオールおよびルペオールからなる群から選択される一つまたは複数のトリテルペンとを含む、固形白樺樹皮抽出物。
【請求項２】
前記固形白樺抽出物が、以下のＨＰＬＣ法にしたがってクロマトグラフ化されたときに、図１に実質的に同一であるＨＰＬＣクロマトグラムを有し、
【表１】
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前記ベツリン酸が、約０．７５〜０．９０の相対保持時間を有し、前記オレアノール酸が約０．８４〜０．９７の相対保持時間を有し、前記ベツリンが１．００の相対保持時間を有し、前記エリスロジオールが約１．２５〜１．４０の相対保持時間を有し、前記ルペオールが約３．５０〜４．１５の相対保持時間を有する、請求項１に記載の固形白樺樹皮抽出物。
【請求項３】
（ａ）  白樺樹皮を薬学的に許容可能な溶媒に接触させ、それによってベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを含む抽出溶液を形成することと、
（ｂ）  前記白樺樹皮を前記抽出溶液から分離することと、
（ｃ）  前記抽出溶液を冷却し、それによって前記ベツリンの一部および一つまたは複数のトリテルペンが前記冷却された抽出溶液から結晶化することと、
（ｄ）  前記冷却された抽出溶液から、前記結晶化したベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを分離することと、
（ｅ）  前記分離された結晶化したベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを乾燥させて、前記固形白樺樹皮抽出物を提供することと、を含むプロセスによって調製され、
乾燥後、精製されたヒマワリ油中に分散されたステップ（ｅ）の約１重量％〜約２０重量％の前記乾燥固形白樺樹皮抽出物が、オレオゲルを形成する、請求項１または請求項２に記載の固形白樺樹皮抽出物。
【請求項４】
一つまたは複数のステップ（ａ）、（ｃ）、および（ｅ）は、以下の条件：
（ｉ）ステップ（ａ）の前記接触は、約６０℃〜約１３０℃の温度で実施される；
（ｉｉ）ステップ（ｃ）の前記冷却は、約−２０℃〜約３５℃の温度で実施される；
（ｉｉｉ）ステップ（ｅ）の前記乾燥は、約７０ｍｂａｒ未満の圧力で約７５℃〜約９５℃の温度で実施される、請求項３に記載の固形白樺樹皮抽出物。
【請求項５】
二つ以上のステップ（ａ）、（ｃ）、および（ｅ）は、以下の条件：
（ｉ）ステップ（ａ）の前記接触は、約６０℃〜約１３０℃の温度で実施される；
（ｉｉ）ステップ（ｃ）の前記冷却は、約−２０℃〜約３５℃の温度で実施される；
（ｉｉｉ）ステップ（ｅ）の前記乾燥は、約７０ｍｂａｒ未満の圧力で約７５℃〜約９５℃の温度で実施される、請求項３に記載の固形白樺樹皮抽出物。
【請求項６】
ステップ（ａ）、（ｃ）、および（ｅ）は、以下の条件：
（ｉ）ステップ（ａ）の前記接触は、約６０℃〜約１３０℃の温度で実施される；
（ｉｉ）ステップ（ｃ）の前記冷却は、約−２０℃〜約３５℃の温度で実施される；
（ｉｉｉ）ステップ（ｅ）の前記乾燥は、約７０ｍｂａｒ未満の圧力で約７５℃〜約９５℃の温度で実施される、請求項３に記載の固形白樺樹皮抽出物。
【請求項７】
前記薬学的に許容可能な溶媒が、炭化水素またはアルコール、またはその組み合わせである、請求項３〜６のいずれか一項に記載の固形白樺樹皮抽出物。
【請求項８】
前記薬学的に許容可能な溶媒が、ｎ−ペンタン、ｎ−ヘキサン、またはｎ−ヘプタンからなる群から選択される炭化水素である、請求項３〜７のいずれか一項に記載の固形白樺樹皮抽出物。
【請求項９】
前記薬学的に許容可能な溶媒が、ｎ−ヘプタンであり、前記接触が、約６０℃〜約１３０℃の温度で、約８〜１２分間実施される、請求項８に記載の固形白樺樹皮抽出物。
【請求項１０】
ステップ（ｃ）で、前記冷却された抽出溶液が少なくとも約２倍過飽和される、請求項３〜９のいずれか一項に記載の固形白樺樹皮抽出物。
【請求項１１】
前記冷却された抽出溶液が約５倍過飽和される、請求項１０に記載の固形白樺樹皮抽出物。
【請求項１２】
残留抽出溶媒の量が約０．５重量％以下である、請求項３〜１１のいずれかに記載の固形白樺樹皮抽出物。
【請求項１３】
約５０μｍ未満の平均粒径を有し、約８０重量％〜約９９重量％の一つまたは複数の非極性液体に分散された、約１重量％〜約２０重量％の請求項１〜１２のいずれか一項に記載の固形白樺樹皮抽出物の粒子を含むオレオゲル。
【請求項１４】
前記分散された固形白樺樹皮抽出物の粒子が、前記オレオゲル中の唯一のオレオゲル形成剤である、請求項１３に記載のオレオゲル。
【請求項１５】
約１０重量％の前記固形白樺樹皮抽出物の粒子を含む、請求項１３に記載のオレオゲル。
【請求項１６】
前記非極性液体が少なくとも一つのトリグリセリドを含む、請求項１３または１５に記載のオレオゲル。
【請求項１７】
前記非極性液体が少なくとも一つのＣ７またはそれ以上の炭化水素を含む、請求項１３または１５に記載のオレオゲル。
【請求項１８】
前記非極性液体が一つまたは複数の植物油を含む、請求項１６に記載のオレオゲル。
【請求項１９】
前記非極性液体がヒマワリ油を含む、請求項１８に記載のオレオゲル。
【請求項２０】
前記非極性液体が約１０未満の過酸化物価を有する、請求項１３〜１９のいずれか一項に記載のオレオゲル。
【請求項２１】
前記過酸化物価が約３以下である、請求項２０に記載のオレオゲル。
【請求項２２】
前記オレオゲルが、約５０μｍを超えるサイズを有する固形白樺樹皮抽出物の粒子を実質的に含まない、請求項１３〜２１のいずれか一項に記載のオレオゲル。
【請求項２３】
前記オレオゲルが滅菌である、請求項１３〜２２のいずれか一項に記載のオレオゲル。
【請求項２４】
前記オレオゲルが、約２０ｋＧｙ未満の用量でイオン化照射によって滅菌される、請求項２３に記載のオレオゲル。
【請求項２５】
前記オレオゲルが、約１１〜約２０ｋＧｙの範囲の用量でイオン化照射によって滅菌される、請求項２４に記載のオレオゲル。
【請求項２６】
前記オレオゲルからの前記非極性液体の前記分離が、２５℃で３０分間、２７５０ｇで遠心分離した後で、約１０％未満である、請求項１３〜２５のいずれか一項に記載のオレオゲル。
【請求項２７】
円錐平板粘度計を使用して、Ｐｈ．Ｅｕｒ．２．２．１０に記載の回転粘度計法にしたがって測定すると、前記オレオゲルの２００／ｓでの粘度が、約０．５〜約４．０Ｐａ．ｓの範囲であり、前記オレオゲルのチキソトロピー値が、約２００〜約１２００Ｐａ．ｓの範囲である、請求項１３〜２６のいずれか一項に記載のオレオゲル。
【請求項２８】
前記オレオゲルの一貫性が、テクスチャーアナライザーの使用にしたがって測定されると、約３００〜３０００ｍＮの範囲である、請求項１３〜２７のいずれか一項に記載のオレオゲル。
【請求項２９】
殺菌剤をさらに含む、請求項１３〜２８のいずれか一項に記載のオレオゲル。
【請求項３０】
前記殺菌剤が、エタノール、ｎ−プロパノール、およびイソプロパノールからなる群から選択される、請求項２９に記載のオレオゲル。
【請求項３１】
親油性抗生物質をさらに含む、請求項１３〜２８のいずれか一項に記載のオレオゲル。
【請求項３２】
滅菌創傷被覆材であって、
（ａ）パッドと、
（ｂ）前記パッドの少なくとも一つの表面上に配置された、請求項１３〜３１のいずれかに記載のオレオゲルを含む、治療有効層と、を含む滅菌創傷被覆材。
【請求項３３】
前記パッドが吸収性パッドである、請求項３２に記載の滅菌創傷被覆材。
【請求項３４】
（ａ）  白樺樹皮を薬学的に許容可能な溶媒に接触させ、それによってベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを含む抽出溶液を形成することと、
（ｂ）  前記白樺樹皮を前記抽出溶液から分離することと、
（ｃ）  前記抽出溶液を冷却し、それによって前記ベツリンの一部および一つまたは複数のトリテルペンが前記冷却された抽出溶液から結晶化することと、
（ｄ）  前記冷却された抽出溶液から、前記結晶化したベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを分離することと、
（ｅ）  前記分離された結晶化したベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを乾燥させて、前記固形白樺樹皮抽出物を提供することと、を含み、
乾燥後、精製されたヒマワリ油中に分散されたステップ（ｅ）の約１重量％〜約２０重量％の前記乾燥固形白樺樹皮抽出物が、オレオゲルを形成する、請求項１または請求項２に記載の固形白樺樹皮抽出物を調製する方法。
【請求項３５】
一つまたは複数のステップ（ａ）、（ｃ）、および（ｅ）は、以下の条件：
（ｉ）  ステップ（ａ）の前記接触は、約６０℃〜約１３０℃の温度で実施される；
（ｉｉ）  ステップ（ｃ）の前記冷却は、約−２０℃〜約３５℃の温度で実施される；
（ｉｉｉ）  ステップ（ｅ）の前記乾燥は、約７０ｍｂａｒ未満の圧力で約７５℃〜約９５℃の温度で実施される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
二つ以上のステップ（ａ）、（ｃ）、および（ｅ）は、以下の条件：
（ｉ）  ステップ（ａ）の前記接触は、約６０℃〜約１３０℃の温度で実施される；
（ｉｉ）  ステップ（ｃ）の前記冷却は、約−２０℃〜約３５℃の温度で実施される；
（ｉｉｉ）  ステップ（ｅ）の前記乾燥は、約７０ｍｂａｒ未満の圧力で約７５℃〜約９５℃の温度で実施される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
ステップ（ａ）、（ｃ）、および（ｅ）は、以下の条件：
（ｉ）  ステップ（ａ）の前記接触は、約６０℃〜約１３０℃の温度で実施される；
（ｉｉ）  ステップ（ｃ）の前記冷却は、約−２０℃〜約３５℃の温度で実施される；
（ｉｉｉ）  ステップ（ｅ）の前記乾燥は、約７０ｍｂａｒ未満の圧力で約７５℃〜約９５℃の温度で実施される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３８】
前記薬学的に許容可能な溶媒が、ｎ−ペンタン、ｎ−ヘキサン、またはｎ−ヘプタンからなる群から選択される炭化水素である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３９】
前記薬学的に許容可能な溶媒が、ｎ−ヘプタンであり、前記接触が、約１１５℃〜約１３０℃の温度で、約８〜１２分間実施される、請求項３４〜３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
ステップ（ｃ）で、前記冷却された抽出溶液が少なくとも約２倍過飽和される、請求項３４〜３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
前記冷却された抽出溶液が約５倍過飽和される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
残留抽出溶媒の量が約０．５重量％以下である、請求項３４〜４１のいずれかに記載の方法。
【請求項４３】
請求項１〜１２のいずれかに記載の固形白樺樹皮抽出物を含む乳濁液。
【請求項４４】
請求項１３〜３１のいずれかに記載のオレオゲルを含む乳濁液。
【請求項４５】
前記乳濁液が油中水型乳濁液である、請求項４３または４４に記載の乳濁液。
【請求項４６】
実質的に乳化剤を含まない、請求項４５に記載の乳濁液。
【請求項４７】
本質的に前記固形白樺樹皮抽出物またはオレオゲル、油、および水からなる、請求項４３〜４６のいずれか一項に記載の乳濁液。
【請求項４８】
前記オレオゲル、油、および水からなる、請求項４４〜４６のいずれか一項に記載の乳濁液。
【請求項４９】
殺菌剤をさらに含む、請求項４３〜４６のいずれか一項に記載の乳濁液。
【請求項５０】
前記殺菌剤が、エタノール、ｎ−プロパノール、およびイソプロパノールからなる群から選択される、請求項４９に記載の乳濁液。
【請求項５１】
親油性抗生物質をさらに含む、請求項４３〜４６のいずれか一項に記載の乳濁液。
【請求項５２】
請求項４３〜５１のいずれか一項に記載の乳濁液を含む発泡体。
【請求項５３】
殺菌剤をさらに含む、請求項５２に記載の発泡体。
【請求項５４】
前記殺菌剤が、エタノール、ｎ−プロパノール、およびイソプロパノールからなる群から選択される、請求項５３に記載の発泡体。
【請求項５５】
親油性抗生物質をさらに含む、請求項５２に記載の発泡体。
【請求項５６】
前記乳濁液の界面張力が約４ｍＮ／ｍよりも大きい、請求項５２〜５５のいずれかに記載の発泡体。
【請求項５７】
発泡指数が、約２より大きい、請求項５２〜５６のいずれかに記載の発泡体。
【請求項５８】
前記オレオゲルが、約５重量％〜約１０重量％の固形白樺樹皮抽出物からなり、前記乳濁液が、前記オレオゲルおよび約２０重量％〜約３０重量％の水からなる油中水型乳濁液である、請求項５２に記載の発泡体。
【請求項５９】
前記オレオゲルが、約７重量％の固形白樺樹皮抽出物からなり、前記乳濁液中の水の量が、約２５重量％である、請求項５８に記載の発泡体。
【請求項６０】
ホスファチジルコリン、ポリグリセリル−３−ジステアリン酸メチルグルコース、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、乳化剤をさらに含む、請求項５２〜５６のいずれか一項に記載の発泡体。
【請求項６１】
請求項４３〜５１のいずれか一項に記載の乳濁液と、薬学的に許容可能な噴射剤とを含む混合物で充填された加圧容器であって、前記容器から前記混合物の少なくとも一部をデカントする際に、前記乳濁液が発泡体を形成する、加圧容器。
【請求項６２】
請求項１３〜３１のいずれか一項に記載のオレオゲルを、創傷の少なくとも一部に局所投与することを含む、患者の創傷を治療する方法。
【請求項６３】
創傷を治療する方法で使用するための、請求項１３〜３１のいずれか一項に記載のオレオゲル。
【請求項６４】
前記創傷が、火傷、外科手術皮膚病変、体表損傷、慢性創傷、褥瘡、糖尿病性足部潰瘍、慢性静脈潰瘍、動脈不全潰瘍、エステティック皮膚治療による創傷、アブレーションレーザー皮膚治療による創傷、ケミカルピーリングによる創傷、皮膚剥離による創傷、薬の副作用により生じる創傷、中毒性表皮壊死症により生じる創傷、ライエル症候群により生じる創傷、スティーブンス・ジョンソン症候群により生じる創傷、および放射線による皮膚炎により生じる創傷からなる群から選択される、請求項６３に記載の使用のための方法またはオレオゲル。
【請求項６５】
請求項４３〜５１のいずれか一項に記載の乳濁液を、創傷の少なくとも一部に局所投与することを含む、患者の創傷を治療する方法。
【請求項６６】
創傷を治療する方法で使用するための、請求項４３〜５１のいずれか一項に記載の乳濁液。
【請求項６７】
前記創傷が、火傷、外科手術皮膚病変、体表損傷、慢性創傷、褥瘡、糖尿病性足部潰瘍、慢性静脈潰瘍、動脈不全潰瘍、エステティック皮膚治療による創傷、アブレーションレーザー皮膚治療による創傷、ケミカルピーリングによる創傷、皮膚剥離による創傷、薬の副作用により生じる創傷、中毒性表皮壊死症により生じる創傷、ライエル症候群により生じる創傷、スティーブンス・ジョンソン症候群により生じる創傷、および放射線による皮膚炎により生じる創傷からなる群から選択される、請求項６６に記載の使用のための方法または乳濁液。
【請求項６８】
請求項５２〜６０のいずれか一項に記載の発泡体を、創傷の少なくとも一部に局所投与することを含む、患者の創傷を治療する方法。
【請求項６９】
創傷を治療する方法で使用するための、請求項５２〜６０のいずれか一項に記載の発泡体。
【請求項７０】
前記創傷が、火傷、外科手術皮膚病変、体表損傷、慢性創傷、褥瘡、糖尿病性足部潰瘍、慢性静脈潰瘍、動脈不全潰瘍、エステティック皮膚治療による創傷、アブレーションレーザー皮膚治療による創傷、ケミカルピーリングによる創傷、皮膚剥離による創傷、薬の副作用により生じる創傷、中毒性表皮壊死症により生じる創傷、ライエル症候群により生じる創傷、スティーブンス・ジョンソン症候群により生じる創傷、および放射線による皮膚炎により生じる創傷からなる群から選択される、請求項６９に記載の使用のための方法または発泡体。
【請求項７１】
患者の表皮水疱症の領域に、請求項１３〜３１のいずれか一項に記載のオレオゲルを局所投与することを含む、それを必要とする前記患者の表皮水疱症を治療する方法。
【請求項７２】
表皮水疱症を治療する方法で使用するための、請求項１３〜３１のいずれか一項に記載のオレオゲル。
【請求項７３】
患者の表皮水疱症の領域に、請求項４３〜５１のいずれか一項に記載の乳濁液を局所投与することを含む、それを必要とする前記患者の表皮水疱症を治療する方法。
【請求項７４】
表皮水疱症を治療する方法で使用するための、請求項４３〜５１のいずれか一項に記載の乳濁液。
【請求項７５】
患者の表皮水疱症の領域に、請求項５２〜６０のいずれか一項に記載の発泡体を局所投与することを含む、それを必要とする前記患者の表皮水疱症を治療する方法。
【請求項７６】
表皮水疱症を治療する方法で使用するための、請求項５２〜６０のいずれか一項に記載の発泡体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１８年１月４日出願の米国仮出願第６２／６１３，６４６号の利益を主張し、その全内容はあらゆる目的においてその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本開示は、白樺樹皮の抽出物に由来する医薬製剤に関する。
【背景技術】
【０００３】
白樺樹皮抽出物に見られるトリテルペンは、創傷治癒特性を有することが公知である。白樺樹皮からこれらのトリテルペンを抽出する方法は、米国特許第７，４８２，３８３号に報告されている。これらの方法は、医薬製剤で使用されうる固形白樺樹皮抽出物を提供する。例えば、このような抽出物を含有する乳濁液は、米国特許第７，４８２，３８３号に記載されており、このような抽出物を含有するオレオゲルは、米国特許第９，３５２，０４１号、第８，８２８，４４４号、および第８，５３６，３８０号に記載されている。
【０００４】
創傷治癒における臨床的使用については、治療が必要な皮膚の領域に触れることによって、オレオゲルを塗布する必要がある。接触塗布は、特定の皮膚状態（例えば、表皮水疱症）の治療に不利であり、これはオレオゲルを塗布する単純な作用が皮膚状態の悪化につながる場合があるためである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国仮出願第６２／６１３，６４６号
【特許文献２】米国特許第７，４８２，３８３号
【特許文献３】米国特許第７，４８２，３８３号
【特許文献４】米国特許第９，３５２，０４１号
【特許文献５】米国特許第８，８２８，４４４号
【特許文献６】米国特許第８，５３６，３８０号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
したがって、患者の状態を悪化させることなく、皮膚に塗布されうる固形白樺樹皮抽出物を含有する創傷治癒製剤に対する必要性がある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本開示は、公知の固形白樺樹皮含有乳濁液およびオレオゲルの不利益を克服する、改善されたレオロジー特性を有する、臨床的に有利な創傷治癒製剤（オレオゲル、乳濁液および発泡体を含む）を提供する。
【０００８】
本開示は、少なくとも約７０重量％のベツリンと、ベツリン酸、オレアノール酸、エリスロジオールおよびルペオールからなる群から選択される一つまたは複数のトリテルペンとを含有する、固形白樺樹皮抽出物を提供する。本明細書に記載される固形白樺樹皮抽出物は、臨床的に有利なレオロジー特性を有するオレオゲルで処方されうる。
【０００９】
本開示はまた、非極性溶媒中分散されうる固形白樺樹皮抽出物を作製する方法を提供し、（ａ）白樺樹皮を適切な溶媒に接触させて、ベツリンおよび少なくとも一つのトリテルペンを含有する抽出溶液を形成するステップと、（ｂ）白樺樹皮を抽出溶液から分離するステップと、（ｃ）抽出溶液を冷却して、溶液からベツリンおよびトリテルペンの一部を結晶化させるステップと、（ｄ）結晶化したベツリンとトリテルペンを分離するステップと、（ｅ）分離された結晶化したベツリンとトリテルペンを乾燥させて、固形白樺樹皮抽出物を形成するステップとを含む、臨床的に有利なオレオゲルを提供する。本開示はまた、これらの方法にしたがって調製される固形白樺樹皮抽出物も提供する。
【００１０】
本開示は、約８０％〜約９９％の一つまたは複数の非極性液体に分散された固形白樺樹皮抽出物の粒子を約１重量％〜約２０重量％含む臨床的に有利なオレオゲルを提供し、固形白樺樹皮抽出物は、適切な非極性液体中に分散されてオレオゲルを形成する。パッドおよび治療有効量のオレオゲルを含む滅菌創傷被覆材も提供される。
【００１１】
本開示は、本発明のオレオゲルを含む乳濁液を提供し、本開示の乳濁液を含む発泡体をさらに提供する。
【００１２】
本開示はまた、本開示の有効量のオレオゲル、乳濁液または発泡体を創傷の少なくとも一部に局所投与することによって、患者における創傷を治療する方法も提供する。    
【００１３】
本開示はまた、本開示の有効量のオレオゲル、乳濁液または発泡体を患者の表皮水疱症の領域に局所投与することを含む、それを必要とする患者の表皮水疱症を治療する方法も提供する。
【００１４】
本開示は、以下の番号付けされた実施形態にしたがって、固形白樺樹皮抽出物、オレオゲル、滅菌創傷被覆材、調製プロセス、乳濁液、発泡体、加圧容器、創傷治療方法、および表皮水疱症の治療方法を提供する。
１．  少なくとも約７０重量％のベツリンと、ベツリン酸、オレアノール酸、エリスロジオールおよびルペオールからなる群から選択される一つまたは複数のトリテルペンとを含む、固形白樺樹皮抽出物。
２．  固形白樺抽出物が、以下のＨＰＬＣ法にしたがってクロマトグラフ化されたときに、図１に実質的に同一であるＨＰＬＣクロマトグラムを有し、
【表１】
2021509891.tif 000003
ベツリン酸が、約０．７５〜０．９０の相対保持時間を有し、オレアノール酸が約０．８４〜０．９７の相対保持時間を有し、ベツリンが１．００の相対保持時間を有し、エリスロジオールが約１．２５〜１．４０の相対保持時間を有し、ルペオールが約３．５０〜４．１５の相対保持時間を有する、実施形態１に記載の固形白樺樹皮抽出物。
３．  
（ａ）  白樺樹皮を薬学的に許容可能な溶媒に接触させ、それによってベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを含む抽出溶液を形成することと、
（ｂ）  白樺樹皮を抽出溶液から分離することと、
（ｃ）  抽出溶液を冷却し、それによってベツリンの一部および一つまたは複数のトリテルペンが冷却された抽出溶液から結晶化することと、
（ｄ）  冷却された抽出溶液から、結晶化したベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを分離することと、
（ｅ）  分離された結晶化したベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを乾燥させて、固形白樺樹皮抽出物を提供することと、を含むプロセスによって調製され、
乾燥後、精製されたヒマワリ油中に分散されたステップ（ｅ）の約１重量％〜約２０重量％の乾燥固形白樺樹皮抽出物が、オレオゲルを形成する、実施形態１または２に記載の固形白樺樹皮抽出物。
４．  一つまたは複数のステップ（ａ）、（ｃ）、および（ｅ）は、以下の条件：
（ｉ）ス  テップ（ａ）の該接触は、約６０℃〜約１３０℃の温度で実施される；
（ｉｉ）  ステップ（ｃ）の該冷却は、約−２０℃〜約３５℃の温度で実施される；
（ｉｉｉ）  ステップ（ｅ）の該乾燥は、約７０ｍｂａｒ未満の圧力で約７５℃〜約９５℃の温度で実施される、実施形態３に記載の固形白樺樹皮抽出物。
５．  二つ以上のステップ（ａ）、（ｃ）、および（ｅ）は、以下の条件：
（ｉ）  ステップ（ａ）の該接触は、約６０℃〜約１３０℃の温度で実施される；
（ｉｉ）  ステップ（ｃ）の該冷却は、約−２０℃〜約３５℃の温度で実施される；
（ｉｉｉ）  ステップ（ｅ）の該乾燥は、約７０ｍｂａｒ未満の圧力で約７５℃〜約９５℃の温度で実施される、実施形態３に記載の固形白樺樹皮抽出物。
６．  ステップ（ａ）、（ｃ）、および（ｅ）は、以下の条件：
（ｉ）  ステップ（ａ）の該接触は、約６０℃〜約１３０℃の温度で実施される；
（ｉｉ）  ステップ（ｃ）の該冷却は、約−２０℃〜約３５℃の温度で実施される；
（ｉｉｉ）  ステップ（ｅ）の該乾燥は、約７０ｍｂａｒ未満の圧力で約７５℃〜約９５℃の温度で実施される、実施形態３に記載の固形白樺樹皮抽出物。
７．  薬学的に許容可能な溶媒が、炭化水素またはアルコール、またはその組み合わせである、実施形態３〜６のいずれか一つに記載の固形白樺樹皮抽出物。
８．  薬学的に許容可能な溶媒が、ｎ−ペンタン、ｎ−ヘキサン、またはｎ−ヘプタンからなる群から選択される炭化水素である、実施形態３〜７のいずれか一つに記載の固形白樺樹皮抽出物。
９．  薬学的に許容可能な溶媒が、ｎ−ヘプタンであり、該接触が、約６０℃〜約１３０℃の温度で、約８〜１２分間実施される、実施形態８に記載の固形白樺樹皮抽出物。
１０．  ステップ（ｃ）で、冷却された抽出溶液が少なくとも約２倍過飽和される、実施形態３〜９のいずれか一つに記載の固形白樺樹皮抽出物。
１１．  冷却された抽出溶液が約５倍過飽和される、実施形態１０に記載の固形白樺樹皮抽出物。
１２．  残留抽出溶媒の量が約０．５重量％以下である、実施形態３〜１１のいずれかに記載の固形白樺樹皮抽出物。
１３．  約５０μｍ未満の平均粒径を有し、約８０重量％〜約９９重量％の一つまたは複数の非極性液体に分散された、実施形態１〜１２のいずれか一つに記載の約１重量％〜約２０重量％の固形白樺樹皮抽出物の粒子を含むオレオゲル。
１４．  分散された固形白樺樹皮抽出物の粒子が、オレオゲル中の唯一のオレオゲル形成剤である、実施形態１３に記載のオレオゲル。
１５．  約１０重量％の固形白樺樹皮抽出物の粒子を含む、実施形態１３または１４に記載のオレオゲル。
１６．  非極性液体が少なくとも一つのトリグリセリドを含む、実施形態１３〜１５のいずれか一つに記載のオレオゲル。
１７．  非極性液体が少なくとも一つのＣ７またはそれ以上の炭化水素を含む、実施形態１３〜１６のいずれか一つに記載のオレオゲル。
１８．  非極性液体が一つまたは複数の植物油を含む、実施形態１６に記載のオレオゲル。
１９．  非極性液体がヒマワリ油を含む、実施形態１８に記載のオレオゲル。
２０．  非極性液体が約１０未満の過酸化物価を有する、実施形態１３〜１９のいずれか一つに記載のオレオゲル。
２１．  過酸化物価が約３以下である、実施形態２０に記載のオレオゲル。
２２．  オレオゲルが、約５０μｍを超えるサイズを有する固形白樺樹皮抽出物の粒子を実質的に含まない、実施形態１３〜２１のいずれか一つに記載のオレオゲル。
２３．  オレオゲルが滅菌である、実施形態１３〜２２のいずれか一つに記載のオレオゲル。
２４．  オレオゲルが、約２０ｋＧｙ未満の用量でイオン化照射によって滅菌される、実施形態２３に記載のオレオゲル。
２５．  オレオゲルが、約１１〜約２０ｋＧｙの範囲の用量でイオン化照射によって滅菌される、実施形態２４に記載のオレオゲル。
２６．  オレオゲルからの非極性液体の分離が、２５℃で３０分間、２７５０ｇで遠心分離した後で、約１０％未満である、実施形態１３〜２５のいずれか一つに記載のオレオゲル。
２７．  円錐平板粘度計を使用して、Ｐｈ．Ｅｕｒ．２．２．１０に記載の回転粘度計法にしたがって測定すると、オレオゲルの２００／ｓでの粘度が、約０．５〜約４．０Ｐａ．ｓの範囲であり、オレオゲルのチキソトロピー値が、約２００〜約１２００Ｐａ．ｓの範囲である、実施形態１３〜２６のいずれか一つに記載のオレオゲル。
２８．  オレオゲルのコンシステンシーが、テクスチャーアナライザーの使用により測定すると、約３００〜３０００ｍＮの範囲である、実施形態１３〜２７のいずれか一つに記載のオレオゲル。
２９．  殺菌剤をさらに含む、実施形態１３〜２８のいずれか一つに記載のオレオゲル。
３０．  殺菌剤が、エタノール、ｎ−プロパノール、およびイソプロパノールからなる群から選択される、実施形態２９に記載のオレオゲル。
３１．  親油性抗生物質をさらに含む、実施形態１３〜２８のいずれか一つに記載のオレオゲル。
３２．  滅菌創傷被覆材であって、
（ａ）パッドと、
（ｂ）パッドの少なくとも一つの表面上に配置された、実施形態１３〜３１のいずれかに記載のオレオゲルを含む、治療有効層と、を含む滅菌創傷被覆材。
３３．  パッドが吸収性パッドである、実施形態３２に記載の滅菌創傷被覆材。
３４．  
（ａ）  白樺樹皮を薬学的に許容可能な溶媒に接触させ、それによってベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを含む抽出溶液を形成することと、
（ｂ）  白樺樹皮を抽出溶液から分離することと、
（ｃ）  抽出溶液を冷却し、それによってベツリンの一部および一つまたは複数のトリテルペンが冷却された抽出溶液から結晶化することと、
（ｄ）  冷却された抽出溶液から、結晶化したベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを分離することと、
（ｅ）  分離された結晶化したベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを乾燥させて、固形白樺樹皮抽出物を提供することと、を含むプロセスによって調製され、
乾燥後、精製されたヒマワリ油中に分散されたステップ（ｅ）の約１重量％〜約２０重量％の乾燥固形白樺樹皮抽出物が、オレオゲルを形成する、実施形態１または２に記載の固形白樺樹皮抽出物を調製する方法。
３５．  一つまたは複数のステップ（ａ）、（ｃ）、および（ｅ）は、以下の条件：
（ｉ）  ステップ（ａ）の該接触は、約６０℃〜約１３０℃の温度で実施される；
（ｉｉ）  ステップ（ｃ）の該冷却は、約−２０℃〜約３５℃の温度で実施される；
（ｉｉｉ）  ステップ（ｅ）の該乾燥は、約７０ｍｂａｒ未満の圧力で約７５℃〜約９５℃の温度で実施される、実施形態３４に記載の方法。
３６．  二つ以上のステップ（ａ）、（ｃ）、および（ｅ）は、以下の条件：
（ｉ）  ステップ（ａ）の該接触は、約６０℃〜約１３０℃の温度で実施される；
（ｉｉ）  ステップ（ｃ）の該冷却は、約−２０℃〜約３５℃の温度で実施される；
（ｉｉｉ）  ステップ（ｅ）の該乾燥は、約７０ｍｂａｒ未満の圧力で約７５℃〜約９５℃の温度で実施される、実施形態３４に記載の固形白樺樹皮抽出物。
３７．  ステップ（ａ）、（ｃ）、および（ｅ）は、以下の条件：
（ｉ）  ステップ（ａ）の該接触は、約６０℃〜約１３０℃の温度で実施される；
（ｉｉ）  ステップ（ｃ）の該冷却は、約−２０℃〜約３５℃の温度で実施される；
（ｉｉｉ）  ステップ（ｅ）の該乾燥は、約７０ｍｂａｒ未満の圧力で約７５℃〜約９５℃の温度で実施される、実施形態３４に記載の固形白樺樹皮抽出物。
３８．  薬学的に許容可能な溶媒が、ｎ−ペンタン、ｎ−ヘキサン、またはｎ−ヘプタンからなる群から選択される炭化水素である、実施形態３４〜３７のいずれか一つに記載の方法。
３９．  薬学的に許容可能な溶媒が、ｎ−ヘプタンであり、該接触が、約１１５℃〜約１３０℃の温度で、約８〜１２分間実施される、実施形態３４〜３８のいずれか一つに記載の方法。
４０．  ステップ（ｃ）で、冷却された抽出溶液が少なくとも約２倍過飽和される、実施形態３４〜３９のいずれか一つに記載の方法。
４１．  冷却された抽出溶液が約５倍過飽和される、実施形態４０に記載の方法。
４２．  残留抽出溶媒の量が約０．５重量％以下である、実施形態３４〜４１のいずれかに記載の方法。
４３．  実施形態１〜１２のいずれかに記載の固形白樺樹皮抽出物を含む乳濁液。
４４．  実施形態１３〜３１のいずれかに記載のオレオゲルを含む乳濁液。
４５．  該乳濁液が油中水型乳濁液である、実施形態４３または４４に記載の乳濁液。
４６．  実質的に乳化剤を含まない、実施形態４５に記載の乳濁液。
４７．  本質的に固形白樺樹皮抽出物またはオレオゲル、油、および水からなる、実施形態４３〜４６のいずれか一つに記載の乳濁液。
４８．  オレオゲル、油、および水からなる、実施形態４４〜４６のいずれか一つに記載の乳濁液。
４９．  殺菌剤をさらに含む、実施形態４３〜４６のいずれか一つに記載の乳濁液。
５０．  殺菌剤が、エタノール、ｎ−プロパノール、およびイソプロパノールからなる群から選択される、実施形態４９に記載の乳濁液。
５１．  親油性抗生物質をさらに含む、実施形態４３〜４６のいずれか一つに記載の乳濁液。
５２．  実施形態４３〜５１のいずれか一つに記載の乳濁液を含む発泡体。
５３．  殺菌剤をさらに含む、実施形態５２に記載の発泡体。
５４．  殺菌剤が、エタノール、ｎ−プロパノール、およびイソプロパノールからなる群から選択される、実施形態５３に記載の発泡体。
５５．  親油性抗生物質をさらに含む、実施形態５２に記載の発泡体。
５６．  乳濁液の界面張力が約４ｍＮ／ｍよりも大きい、実施形態５２〜５５のいずれかに記載の発泡体。
５７．  発泡指数が、約２より大きい、実施形態５２〜５６のいずれかに記載の発泡体。
５８．  オレオゲルが、約５重量％〜約１０重量％の固形白樺樹皮抽出物からなり、乳濁液が、オレオゲルおよび約２０重量％〜約３０重量％の水からなる油中水型乳濁液である、実施形態５２に記載の発泡体。
５９．  オレオゲルが、約７重量％の固形白樺樹皮抽出物からなり、乳濁液中の水の量が、約２５重量％である、実施形態５８に記載の発泡体。
６０．  ホスファチジルコリン、ポリグリセリル−３−ジステアリン酸メチルグルコース、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、乳化剤をさらに含む、実施形態５２〜５６のいずれかに記載の発泡体。
６１．  実施形態４３〜５１のいずれか一つに記載の乳濁液と、薬学的に許容可能な噴射剤とを含む混合物で充填された加圧容器であって、容器から混合物の少なくとも一部をデカントする際に、乳濁液が発泡体を形成する、加圧容器。
６２．  実施形態１３〜３１のいずれか一つに記載のオレオゲルを、創傷の少なくとも一部に局所投与することを含む、患者の創傷を治療する方法。
６３．  創傷を治療する方法で使用するための、実施形態１３〜３１のいずれか一つに記載のオレオゲル。
６４．  創傷が、火傷、外科手術皮膚病変、体表損傷、慢性創傷、褥瘡、糖尿病性足部潰瘍、慢性静脈潰瘍、動脈不全潰瘍、エステティック皮膚治療による創傷、アブレーションレーザー皮膚治療による創傷、ケミカルピーリングによる創傷、皮膚剥離による創傷、薬の副作用により生じる創傷、中毒性表皮壊死症により生じる創傷、ライエル症候群により生じる創傷、スティーブンス・ジョンソン症候群により生じる創傷、および放射線による皮膚炎により生じる創傷からなる群から選択される、実施形態６３の使用のための方法またはオレオゲル。
６５．  実施形態４３〜５１のいずれか一つに記載の乳濁液を、創傷の少なくとも一部に局所投与することを含む、患者の創傷を治療する方法。
６６．  創傷を治療する方法で使用するための、実施形態４３〜５１のいずれか一つに記載の乳濁液。
６７．  創傷が、火傷、外科手術皮膚病変、体表損傷、慢性創傷、褥瘡、糖尿病性足部潰瘍、慢性静脈潰瘍、動脈不全潰瘍、エステティック皮膚治療による創傷、アブレーションレーザー皮膚治療による創傷、ケミカルピーリングによる創傷、皮膚剥離による創傷、薬の副作用により生じる創傷、中毒性表皮壊死症により生じる創傷、ライエル症候群により生じる創傷、スティーブンス・ジョンソン症候群により生じる創傷、および放射線皮膚炎により生じる創傷からなる群から選択される、実施形態６６の使用のための方法または乳濁液。
６８．  実施形態５２〜６０のいずれか一つに記載の発泡体を、創傷の少なくとも一部に局所投与することを含む、患者の創傷を治療する方法。
６９．  創傷を治療する方法で使用するための、実施形態５２〜６０のいずれか一つに記載の発泡体。
７０．  創傷が、火傷、外科手術皮膚病変、体表損傷、慢性創傷、褥瘡、糖尿病性足部潰瘍、慢性静脈潰瘍、動脈不全潰瘍、エステティック皮膚治療による創傷、アブレーションレーザー皮膚治療による創傷、ケミカルピーリングによる創傷、皮膚剥離による創傷、薬の副作用により生じる創傷、中毒性表皮壊死症により生じる創傷、ライエル症候群により生じる創傷、スティーブンス・ジョンソン症候群により生じる創傷、および放射線皮膚炎により生じる創傷からなる群から選択される、実施形態６９の使用のための方法または発泡体。
７１．  患者の表皮水疱症の領域に、実施形態１３〜３１のいずれか一つに記載のオレオゲルを局所投与することを含む、それを必要とする患者の表皮水疱症を治療する方法。
７２．  表皮水疱症を治療する方法で使用するための、実施形態１３〜３１のいずれか一つに記載のオレオゲル。
７３．  患者の表皮水疱症の領域に、実施形態４３〜５１のいずれか一つに記載の乳濁液を局所投与することを含む、それを必要とする患者の表皮水疱症を治療する方法。
７４．  表皮水疱症を治療する方法で使用するための、実施形態４３〜５１のいずれか一つに記載の乳濁液。
７５．  患者の表皮水疱症の領域に、実施形態５２〜６０のいずれか一つに記載の発泡体を局所投与することを含む、それを必要とする患者の表皮水疱症を治療する方法。
７６．  表皮水疱症を治療する方法で使用するための、実施形態５２〜６０のいずれか一つに記載の発泡体。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】図１は、２１０ｎｍ（上図）および３２０ｎｍ（下図）をモニタリングする、固形白樺樹皮抽出物から得られたＨＰＬＣクロマトグラフを示す。図１のｘ軸は保持時間（分）であり、ｙ軸はピーク強度（ｍＡＵ）である。
【図２】図２は、ベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを含む抽出溶液を提供するための白樺樹皮の連続的な抽出を図示する。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
定義
以下の用語は、当業者によって十分理解されていると思われるが、以下の定義は、本開示の主題の説明を容易にするために記載される。
【００１７】
本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を説明することのみを目的とし、限定することを意図していないことが理解されるべきである。
【００１８】
他に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本開示が属する分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。好ましい方法、装置、および材料が記載されているが、本明細書に記載のものと類似または同等のいかなる方法および材料も、本開示の実施または試験に使用することができる。本明細書に引用されるすべての参照文献（米国特許第９，３５２，０４１号、第８，８２８，４４４号、第８，５３６，３８０号、および第７，４８２，３８３号を含む）は、あらゆる目的において、その全体が参照により組み込まれる。
【００１９】
長年にわたる特許法の慣習にしたがい、「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」という用語は、特許請求の範囲を含む本出願で使用される場合、「一つまたは複数」を指す。したがって、例えば、「担体」への言及は、一つまたは複数の担体、二つ以上の担体などの混合物を含む。
【００２０】
別途示されていない限り、本明細書および特許請求の範囲で使用される成分の量、反応条件などを表す全ての数は、「約」という用語によって全ての場合に変更されるものとして理解されるべきである。したがって、反対に示される場合を除き、本明細書および添付の特許請求の範囲に記載される数値パラメータは、本出願によって取得されることが求められる所望の特性に応じて変化する可能性がある近似値である。一般的に、「約」という用語は、重量、時間、用量などの測定可能な値に言及するときに本明細書で使用される場合、ある例では特定の量から±１５％または±１０％、別の例では±５％、別の例では±１％、さらに別の例では±０．１％の変動を包含することを意味し、このような変動は、開示された方法を実施するために適切である。
【００２１】
「投与する」とは、経口、皮下、舌下、経粘膜、非経口、静脈内、動脈内、口腔、舌下、局所、膣、直腸、眼、耳、鼻、吸入、および経皮などの任意の投与様式を含む。「投与する」とは、特定の化合物を含む剤形の処方箋を、処方または記入することも含むことができる。「投与する」には、特定の化合物またはその化合物を含む剤形に関する方法を実施するための指示を提供することも含まれうる。
【００２２】
本明細書で使用される場合、本明細書および特許請求の範囲において使用される「含む」という動詞およびその活用形は、その非限定的な意味で使用され、単語に続く項目が含まれるが、具体的に言及されていない項目も除外されないことを意味する。
【００２３】
「白樺樹皮」という用語は、白い樹皮のカバノキの皮層を意味する。好ましい実施形態には、Ｂｅｔｕｌａ  ｐｅｎｄｕｌａ  ＲｏｔｈおよびＢｅｔｕｌａ  ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ  Ｅｈｒｈならびに両種の雑種由来の白樺樹皮が含まれる。
【００２４】
「相対保持時間」（または「ＲＲＴ」）という用語は、未知のピークの保持時間のベツリンピークに対する保持時間の比率を意味し、以下の方程式にしたがって計算される。
ＲＲＴ＝ＲＴｕｎｋｎｏｗｎ／ＲＴｂｅｔｕｌｉｎ
式中、ＲＴｕｎｋｏｗｎは未知のピークの保存時間であり、ＲＴｂｅｔｕｌｉｎはベツリンピーク（２１０ｎｍ）の保持時間であり、以下のＨＰＬＣ法によって測定される。
【表２】
2021509891.tif 000004
【００２５】
「実質的に同一」という用語は、本明細書で使用される場合、ＨＰＬＣクロマトグラム、ＮＭＲスペクトルなどの分析スペクトルを意味し、ピーク位置およびその強度の両方で基準スペクトルに大いに似ている。例えば、ＨＰＬＣクロマトグラム内のピーク位置（相対保持時間）が、参照クロマトグラムのピーク位置（相対保持時間）から±５％以下で変動する場合、ＨＰＬＣクロマトグラムは、参照クロマトグラムと「実質的に同一」である。いくつかの実施形態では、ＨＰＬＣクロマトグラムの相対ピーク強度は、参照クロマトグラムのピーク強度から±１０％以下で変動しうる。
【００２６】
「治療有効量」とは、疾患、障害、または他の望ましくない医学的状態を治療するために対象に投与された場合、その疾患、障害、または状態に対して有益な効果を有するのに十分な活性物質の量を意味する。治療有効量は、活性物質の化学的同一性および製剤形態、疾患または状態およびその重症度、ならびに治療される患者の年齢、体重、およびその他の関連特性に応じて変化する。所与の活性物質の治療有効量を決定することは、当技術分野の範囲内であり、典型的には通常の実験のみを必要とする。
【００２７】
「実質的に含まない」という用語は、示された成分が存在しないか、またはわずかな量だけ存在することを意味する。一実施形態では、「実質的に含まない」とは、約１０％未満（例えば、約１０重量％未満）を意味する。他の実施形態では、「実質的に含まない」とは、約５％未満（例えば、約５重量％未満）、約２％未満（例えば、約２重量％未満）、または約１％未満（例えば、約１重量％未満）、または約０％（例えば、約０重量％）を意味する。  例えば、乳化剤を実質的に含まない乳濁液は、実質的な量の乳化剤を含有しない（例えば、約１０重量％未満、約５重量％未満、約２重量％未満、または約１重量％未満の乳化剤、または約０重量％の乳化剤を含有する）。同様に、約５０μｍを超えるサイズを有する固形白樺樹皮抽出物粒子を実質的に含まないオレオゲルは、約５０μｍを超えるサイズを有する固形白樺樹皮抽出物粒子を実質的な量で含有しない（例えば、約５０μｍを超えるサイズを有する固形白樺樹皮抽出物粒子を約１０重量％未満、約５重量％未満、約２重量％未満、または約１重量％未満含有するか、または約５０μｍを超えるサイズを有する固形白樺樹皮抽出物粒子を０重量％含有する）。
【００２８】
固形白樺樹皮抽出物
本開示は、臨床的に有益なオレオゲルで処方されうる固形白樺樹皮抽出物を提供する。いかなる理論にも束縛されるものではないが、本開示の方法にしたがって生成された固形白樺樹皮抽出物の化学組成および粒子形態が、これらの利点の原因であると考えられている。
【００２９】
本開示の固形白樺樹皮抽出物は、それらの化学組成に基づいて特徴付けられうる。いくつかの実施形態では、本開示の固形白樺樹皮抽出物は、ルパンおよびオレアナントリテルペンを含む。特に、白樺樹皮抽出物は、ルパントリテルペン：ベツリン、ルペオール、およびベツリン酸、ならびにオレアナントリテルペン：エリスロジオールおよびオレアノール酸を含有しうる。
【００３０】
白樺抽出物中の特定のトリテルペンの存在は、ＨＰＬＣクロマトグラフィーから得られる相対保持時間を使用して判断することができる。以下のＨＰＬＣ法は、本開示の固形白樺樹皮抽出物の化学組成を判断するために使用される。
【表３】
2021509891.tif 000005
【００３１】
Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｋｉｎｅｔｉｘ  Ｃ１８カラムは、上記のカラム寸法を有するコアシェルシリカ固体担体（２．６μｍ  ＨＩＬＩＣ  １００Å）にＣ−１８修飾シリカ固定相を用いたＨＰＬＣカラムの例である。
【００３２】
固形白樺樹皮抽出物が上述のＨＰＬＣクロマトグラフィー法を受けるとき、ベツリン酸は約０．７５〜０．９０の相対保持時間を有し、オレアノール酸は約０．８４〜０．９７の相対保持時間を有し、ベツリンは１．００の相対保持時間を有し、エリスロジオールは約１．２５〜１．４０の相対保持時間を有し、およびルペオールは約３．５０〜４．１５の相対保持時間を有する。
【００３３】
特定の実施形態では、固形白樺樹皮抽出物は、図１と実質的に同一のＨＰＬＣクロマトグラムを有する。
【００３４】
いくつかの実施形態では、固形白樺樹皮抽出物は、少なくとも約５０重量％、少なくとも約５５重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約６５重量％、少なくとも約７０重量％、少なくとも約７５重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、または少なくとも約９０重量％のベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを含む。いくつかの実施形態では、一つまたは複数のトリテルペンが、ベツリン酸、オレアノール酸、エリスロジオールおよびルペオールからなる群から選択される。
【００３５】
いくつかの実施形態では、固形白樺樹皮抽出物は、以下の物質：３−β−カフェオイルベツリン、ベツリン酸のメチルエステルの酢酸塩、アセチルオレアノール酸、アロベツリン、ベツリン酸アルデヒド、ベツロン酸、ベツロン酸アルデヒド、ルパン−３β，２０，２８−トリオール、ルパン−３β，２０−ジオール（モノジノール）、オレアノール酸アルデヒド、シトステロール、ウルソール酸、またはβ−アミリンの少なくとも一つを含む。
【００３６】
本開示の固形白樺樹皮抽出物は、固形白樺樹皮抽出物の粒径によって特徴付けられうる。いくつかの実施形態では、固形白樺樹皮抽出物の粒子の平均粒径は、約１００μｍ未満、約９０μｍ未満、約８０μｍ未満、約７０μｍ未満、約６０μｍ未満、約５０μｍ未満、約４０μｍ未満、約３０μｍ未満または約２５μｍ未満である。
【００３７】
その他の実施形態では、本開示の固形白樺樹皮抽出物は、約３０μｍを超える、約４０μｍを超える、約５０μｍを超える、約６０μｍを超える、約７０μｍを超える、約８０μｍを超える、約９０μｍを超える、または約１００μｍを超える粒径を有する固形白樺樹皮抽出物粒子を実質的に含まない。
【００３８】
好ましい実施形態では、固形白樺樹皮抽出物は、Ｂｅｔｕｌａ  ｐｅｎｄｕｌａ  ＲｏｔｈおよびＢｅｔｕｌａ  ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ  Ｅｈｒｈならびに両種の雑種由来である。
【００３９】
固形白樺樹皮抽出物の製造方法
本開示は、臨床的に有益なオレオゲルで処方されうる固形白樺樹皮抽出物を調製するための方法を提供する。一般に、方法は、カバノキを獲得するステップと、該カバノキからの樹皮をはがし、処理するステップと、処理した白樺樹皮を適切な溶媒に接触させて、ベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを含む抽出溶液を提供するステップと、抽出溶液からベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを含む白樺樹皮抽出物を単離し、乾燥させるステップとを含む。いくつかの実施形態では、単離された白樺樹皮抽出物は固形形態である。
【００４０】
いくつかの実施形態では、方法は、（ａ）白樺樹皮を薬学的に許容可能な溶媒に接触させて、ベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを含む抽出溶液を形成すること、（ｂ）抽出溶液から白樺樹皮を分離することと、（ｃ）抽出溶液を冷却し、それによってベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンの一部が、冷却された抽出溶液から結晶化することと、（ｄ）冷却された抽出溶液から結晶化したベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを分離することと、（ｅ）分離された結晶化したベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを乾燥させて、固形白樺樹皮抽出物を提供することと、を含む。
【００４１】
いくつかの実施形態では、ステップ（ａ）で使用される白樺樹皮は、最初に処理され、白樺樹皮からのベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンの抽出効率を改善する。例えば、実験は、抽出された白樺樹皮粒子が小さい時、白樺樹皮からの乾燥抽出物の収率が最も高いことを示している。特定の実施形態では、ステップ（ａ）の前に、白樺樹皮の粒径を、ミルまたは他の適切な装置を使用して、得られた白樺樹皮が約１．２５ｍｍのメッシュサイズのふるいを通過するまで、減少させる。
【００４２】
いくつかの実施形態では、白樺樹皮を、約５０℃〜約２００℃の温度で薬学的に許容可能な溶媒と接触させる。その他の実施形態では、温度は約６０℃〜約１００℃、約６０℃〜約１１０℃、約６０℃〜約１２０℃、約６０℃〜約１３０℃、約７０℃〜約１３０℃、約８０℃〜約１３０℃、約９０℃〜約１３０℃、または約１００℃〜約１５０℃である。特定のさらなる実施形態では、温度は約１１５℃〜１３０℃である。
【００４３】
いくつかの実施形態では、白樺樹皮を、約２〜１０バールの圧力で、薬学的に許容可能な溶媒と接触させる。一実施形態では、圧力は約４．５バールである。
【００４４】
薬学的に許容可能な溶媒は、当業者に公知であり、炭化水素、アルコール、ケトン、エーテルエステル、スルホキシドなどを含む。薬学的に許容可能な溶媒の例には、これらに限定されないが、１−ブタノール、１−ペンタノール、１−プロパノール、２−ブタノール、２−メチル−１−プロパノール、２−プロパノール、３−メチル−１−ブタノール、酢酸、アセトン、アニソール、酢酸ブチル、ジメチルスルホキシド、エタノール、酢酸エチル、エチルエーテル、ギ酸エチル、ギ酸、ヘプタン、ヘキサン、酢酸イソブチル、酢酸イソプロピル、酢酸メチル、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、ペンタン、酢酸プロピル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、メチルイソプロピルケトン、およびメチルテトラヒドロフランが含まれる。
【００４５】
いくつかの実施形態では、二つ以上の薬学的に許容可能な溶媒を混合して、薬学的に許容可能な溶媒を提供する。
【００４６】
いくつかの実施形態では、白樺樹皮を、約６０℃〜１３０℃の温度で、８〜１２分間、ｎ−ヘプタンと接触させる。
【００４７】
いくつかの実施形態では、（ａ）白樺樹皮を、薬学的に許容可能な溶媒に接触させて、ベツリンおよび一つまたは複数のトリテルペンを含む抽出溶液を形成することと、（ｂ）抽出溶液から白樺樹皮を分離することが、連続抽出方法を使用して実行される（図２に示す）。
【００４８】
連続抽出方法の一実施形態では、白樺樹皮は、約１：１４〜１：１６（ｗ／ｖ）の比率でｎ−ヘプタンと混合される。混合物は、約１１５〜１３０℃の温度および約４．５バール（窒素）の圧力で、ｎ−ヘプタンを抽出溶媒として使用して連続的に抽出される。沈殿容器の下端で、抽出したコルクは冷たいｎ−ヘプタンで洗い流され、沈殿容器の上端で抽出物（ｎ−ヘプタン中のトリテルペンの高温溶液）が濾過され（１０μｍフィルター）、第二のフィルター（１μｍフィルター）を通して、結晶化ステップに送られる。
【００４９】
いくつかの実施形態では、ステップ（ｃ）の冷却は、約−２０℃〜約３５℃、約−１５℃〜約３５℃、−１０℃〜約３５℃、約−５℃〜約３５℃、または約０℃〜約３５℃の温度で実施される。その他の実施形態では、ステップ（ｃ）では、冷却された抽出溶液は少なくとも約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍または約６倍に過飽和される。好ましい実施形態では、ステップ（ｃ）では、冷却された抽出溶液は、約２倍または約５倍に過飽和される。
【００５０】
いくつかの実施形態では、乾燥ステップ（ｅ）は、少なくとも５０℃、少なくとも６０℃、少なくとも７０℃、少なくとも８０℃、または少なくとも８５℃の温度で真空下で実施される。特定の実施形態では、乾燥ステップ（ｅ）は、約６５℃〜約７５℃、約７０℃〜約８０℃、約７５℃〜約８５℃、または約８５℃〜約９５℃の温度で実施される。
【００５１】
いくつかの実施形態では、乾燥ステップ（ｅ）は、約９０ｍｂａｒ未満、約８０ｍｂａｒ未満、約７０ｍｂａｒ未満、約６０ｍｂａｒ未満、または約５０ｍｂａｒ未満の圧力で真空下で実施される。特定の実施形態では、乾燥ステップ（ｅ）は、乾燥白樺樹皮抽出物中の薬学的に許容可能な溶媒の量を、約０．５％（重量／重量）未満に減少させる。
【００５２】
本発明はまた、上述の方法にしたがって調製された、固形白樺樹皮抽出物を提供する。
【００５３】
固形白樺樹皮抽出物を含む組成物
本開示は、固形白樺樹皮抽出物を含む臨床的に有利な創傷治癒製剤を提供する。組成物は、オレオゲル、乳濁液、発泡体、およびオレオゲル含浸滅菌創傷被覆材を含む。組成物は、局所創傷治癒剤として有用である。
【００５４】
ゲルは、液相および固相を含む、細かく分散されたシステムである。固相はコヒーレントな三次元フレームワークを形成し、二つの相は互いに透過する。オレオゲルは、非極性液体（例えば、油、ろう、またはパラフィン）をベースにした疎水性ゲルであり、これにゲル形成剤を添加して、所望の物理的特性を達成する。
【００５５】
本開示は、非極性液体およびオレオゲル形成剤を含むオレオゲルを提供する。本開示のオレオゲルで使用するための適切な非極性液体には、例えば、植物、動物、または合成油、ろう、およびパラフィンが含まれる。いくつかの実施形態では、非極性液体は、ひまし油、ピーナッツ油、ホホバ油、ヒマワリ油、オリーブ油、アボカド油、およびアーモンド油からなる群から選択される植物油である。好ましい実施形態では、非極性液体はヒマワリ油である。
【００５６】
いくつかの実施形態では、非極性液体は、少なくとも一つのトリグリセリドを含む。特定の実施形態では、少なくとも一つのトリグリセリドはミグリオールである。他の実施形態では、非極性液体が少なくとも一つのＣ７またはそれ以上の炭化水素を含む。特定の実施形態では、少なくとも一つのＣ７またはそれ以上の炭化水素はパラフィンである。
【００５７】
いくつかの実施形態では、オレオゲルで使用される非極性液体は、約１５未満、約１０未満、約５未満、約４未満、約３未満、または約２未満の過酸化物価を有する。特定の実施形態では、非極性液体は約３以下の過酸化物価を有する。「過酸化物価」という用語は、本明細書で使用される場合、Ｐｈ．Ｅｕｒ．２．５．５．にしたがって、過酸化物価が決定されることを意味する。
【００５８】
本開示は、オレオゲルを作製する方法を提供する。いくつかの実施形態では、固形白樺樹皮抽出物が乾燥した後、約１重量％〜約２０重量％の乾燥固形白樺樹皮抽出物が、非極性液体中に分散され、オレオゲルを形成する。特定の実施形態では、非極性液体はヒマワリ油である。
【００５９】
特定の実施形態では、オレオゲルは滅菌される。オレオゲルは、例えば、電子ビーム（ＥＢ）、Ｘ線、またはガンマなどの電離放射線を使用して、当業者に公知の適切な方法によって滅菌されてもよい。いくつかの実施形態では、オレオゲルは、約４０ｋＧｙ未満、約３５ｋＧｙ未満、約３０ｋＧｙ未満、約２５ｋＧｙ未満、約２０ｋＧｙ未満、または約１５ｋＧｙ未満の用量で、イオン化（例えば、ガンマ）照射によって滅菌される。特定の実施形態では、オレオゲルは、約５〜約２５ｋＧｙ、約９〜約２５ｋＧｙ、約１０〜約２５ｋＧｙ、約１１〜約２５ｋＧｙ、約１２〜約２５ｋＧｙ、または約１１〜約２０ｋＧｙの範囲の用量で、イオン化（例えば、ガンマ）照射によって滅菌される。
【００６０】
いくつかの実施形態では、オレオゲルは、約７０重量％〜約９９重量％の一つまたは複数の非極性液体の中に分散された、約１重量％〜約３０重量％の固形白樺樹皮抽出物を含み、オレオゲルは、固形白樺樹皮抽出物粒子に加えて、少なくとも一つのオレオゲル形成剤を含有する。いくつかの実施形態では、オレオゲルは、約８０重量％〜約９９重量％の一つまたは複数の非極性液体の中に分散された、約１重量％〜約２０重量％の固形白樺樹皮抽出物を含み、オレオゲルは、固形白樺樹皮抽出物粒子に加えて、少なくとも一つのオレオゲル形成剤を含有する。
【００６１】
他の実施形態では、オレオゲルは、約７０重量％〜約９９重量％の一つまたは複数の非極性液体の中に分散された、約１重量％〜約３０重量％の固形白樺樹皮抽出物粒子を含み、分散された固形白樺樹皮抽出物粒子は、オレオゲル中唯一のオレオゲル形成剤である。いくつかの実施形態では、オレオゲルは、約８０重量％〜約９９重量％の一つまたは複数の非極性液体の中に分散された、約１重量％〜約２０重量％の固形白樺樹皮抽出物を含み、オレオゲルは、固形白樺樹皮抽出物粒子に加えて、少なくとも一つのオレオゲル形成剤を含有する。
【００６２】
特定の実施形態では、オレオゲルは、約９５重量％の一つまたは複数の非極性液体中に分散された約５重量％の固形白樺樹皮抽出物粒子、約９０重量％の一つまたは複数の非極性液体中に分散された約１０重量％の固形白樺樹皮抽出物粒子、約８５重量％の一つまたは複数の非極性液体中に分散された約１５重量％の固形白樺樹皮抽出物粒子、または約８０重量％の一つまたは複数の非極性液体中に分散された約２０重量％の固形白樺樹皮抽出物粒子を含む。
【００６３】
前述の実施形態では、固形白樺樹皮抽出物粒子（例えば、約１重量％〜約２０重量％）の量は、非極性液体に溶解している最大約０．５重量％の固形白樺樹皮抽出物粒子を含む。
【００６４】
遠心分離によってオレオゲルにストレスをかけることは、オレオゲルの非極性液体を分離（ｓｅｐａｒａｔｅ）（または分離（ｓｅｇｒｅｇａｔｅ））する傾向に関する情報を提供する。いくつかの実施形態では、本開示のオレオゲルは、２５℃で約３０分間、２７５０ｇ（例えば４，４００ｒｐｍ）で遠心分離した後、オレオゲルからの非極性液体の分離は、約１０％、約９％、約８％、約７％、約６％、約５％、約４％、約３％、約２％、約１％、約０．５％、または約０．１％未満である。
【００６５】
本開示のオレオゲルは、それらの粘性によって特徴付けられうる。特定の実施形態では、円錐平板粘度計を使用して、Ｐｈ．Ｅｕｒ．２．２．１０に記載の回転粘度計法にしたがって測定すると、オレオゲルの２００／ｓでの粘度が、約０．５〜約４．０Ｐａ．ｓの範囲であり、オレオゲルのチキソトロピー値が、約２００〜約１２００Ｐａ．ｓの範囲である。
【００６６】
また、本開示のオレオゲルは、テクスチャーアナライザーを使用して決定されるような、その一貫性値によって特徴付けられてもよい。テクスチャー分析は主に、二つのサイクルテクスチャープロファイル分析試験の結果から算出された製品の機械的特性の測定に関連している。テクスチャーアナライザーは、制御された力を製品に印加し、力、変形および時間の形態でその応答を記録することによって、この試験を実施する。
【００６７】
本開示では、一貫性とは、円筒形貫通物体（０．５インチ＝１．２７ｃｍ）を備えた材料試験装置（テクスチャーアナライザー）を使用して測定した、試料（例えば、オレオゲル）に１ｃｍ貫通するために必要な力［ｍＮ］である。貫通速度は０．４ｍｍ／秒である。
【００６８】
本開示のオレオゲルは、一貫性値に基づいて、固形白樺樹皮抽出物の単純な増粘混合物と区別されうる。具体的には、本開示のオレオゲルは、テクスチャーアナライザーによって測定されるように、約３０００ｍＮ未満、および少なくとも約２５０ｍＮの一貫性値を有することで特徴付けられてもよい。いくつかの実施形態では、オレオゲルの一貫性値は、テクスチャーアナライザーによって測定されるように、約３００〜２０００ｍＮである。
【００６９】
本開示はまた、オレオゲルを調製するための方法を提供する。いくつかの実施形態では、方法は、適切な非極性液体中に固形白樺樹皮抽出物を分散させることを含む。
【００７０】
いくつかの実施形態では、本開示のオレオゲルを含むパッドおよび治療有効層を含む滅菌創傷被覆材が提供されている。特定の実施形態では、パッドは吸着性パッドである。他の実施形態では、パッドは、綿ガーゼを含む創傷を覆うために適切な任意の固形材料である。いくつかの実施形態では、オレオゲルの治療有効層を、パッドの一つまたは複数の表面（例えば、患者の皮膚または創傷に直接接触することが意図されたパッドの表面）に適用する。他の実施形態では、パッドは、オレオゲルがパッドの外部表面の少なくとも一部に、および随意にパッドの内部の少なくとも一部に配置されるように、オレオゲルに浸漬される。
【００７１】
いくつかの実施形態では、パッドは、使用時に溶解してオレオゲルを放出する創傷を被覆するのに適した材料を含むことができる。こうした材料には、コラーゲン、アルギン酸塩などを含む吸収性材料が含まれうる。
【００７２】
乳濁液という用語は、一般的には相と呼ばれる、相互に混和しない、または限られた範囲で混和する二つの液体からなる不均一系に関する。乳濁液では、二つの液体のうちの一つが、微小液滴の形態で他方の液体内に分散される。
【００７３】
いくつかの実施形態では、本開示の固形白樺樹皮抽出物を含む乳濁液が提供される。他の実施形態は、本開示のオレオゲルを含む乳濁液を提供する。
【００７４】
いくつかの実施形態では、本開示の乳濁液は乳化剤を含む。特定の実施形態では、乳化剤は（ヒドロプロピル）メチルセルロースである。特定の他の実施形態では、乳濁液は、乳化剤を実質的に含まない。
【００７５】
皮膚創傷を治療するために、オレオゲルの塗布は接触する必要があるが、発泡体はほぼ接触せずに創傷に塗布できるため、発泡体はオレオゲルより優れている場合がある。発泡体は一般的に、噴射剤が乳濁液の分散された脂質相と混合される乳濁液に基づく。
【００７６】
本開示は、上述の通り、固形白樺樹皮抽出物含有乳濁液を含む発泡体を提供する。
【００７７】
特定の実施形態では、発泡体が、約５重量％〜約１０重量％の固形白樺樹皮抽出物からなるオレオゲルを含み、乳濁液が、オレオゲルおよび約２０重量％〜約３０重量％の水からなる油中水型乳濁液である。
【００７８】
特定の他の実施形態では、発泡体が、約７重量％の固形白樺樹皮抽出物からなるオレオゲルを含み、乳濁液が、オレオゲルおよび約２５重量％の水からなる油中水型乳濁液である。
【００７９】
特定の実施形態では、本開示の発泡体は乳化剤をさらに含む。乳化剤は、乳濁液を安定化させ、界面活性剤を含む物質として当技術分野で周知である。本発明で有用な乳化剤は、医薬用途、特に皮膚または創傷との接触に許容されるものである。いくつかの実施形態では、適切な乳化剤には、乳化ろう、セテアリルアルコール、ポリソルベート２０、セテアレス２０などが含まれる。特定のさらなる実施形態では、乳化剤は、ホスファチジルコリン、ポリグリセリル−３−ジステアリン酸メチルグルコース、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００８０】
特定の実施形態では、本開示のオレオゲル、乳濁液、および発泡体は、殺菌剤をさらに含む。特定のさらなる実施形態では、殺菌剤が、エタノール、プロパン−１−オール（ｎ−プロパノール）、およびプロパン−２−オール（イソプロパノール）からなる群から選択される。他の実施形態では、本開示のオレオゲル、乳濁液、および発泡体は、抗生物質、特にフルオロキノロン、マクロライド、チゲサイクリン、リンコサミド、リファンピン、リネゾリド、テトラサイクリン、およびクロラムフェニコールなどの親油性抗生物質をさらに含む。
【００８１】
特定の実施形態では、本開示の発泡体は特定の物理的特性を有する。いくつかの実施形態では、発泡指数は約２より大きい。他の実施形態では、発泡体に使用される乳濁液は、当技術分野で公知の方法を使用して約４ｎＭ／ｍより大きい界面張力を示す。「発泡指数」という用語は、本明細書で使用される場合、特定の材料の発泡密度および非発泡密度の比である。例えば、特定の発泡体の発泡指数は、発泡前の材料の密度に対する発泡した材料の密度の比である。
【００８２】
本開示はまた、本発明の乳濁液で充填された加圧容器および薬学的に許容可能な噴射剤を提供し、それによって乳濁液は、容器からの混合物の少なくとも一部をデカントする際に発泡体を形成する。
【００８３】
固形白樺樹皮抽出物の使用方法
本開示はまた、本開示の有効量のオレオゲル、乳濁液または発泡体を創傷の少なくとも一部に局所投与することによって、患者における創傷を治療する方法も提供する。
【００８４】
特定の実施形態では、治療される創傷は、火傷（軽度から重度の火傷など）、外科手術皮膚病変、体表損傷、慢性創傷（褥瘡、糖尿病性足部潰瘍、慢性静脈潰瘍、動脈不全潰瘍など）、エステティック皮膚治療（アブレーションレーザー皮膚治療、ケミカルピーリング、皮膚剥離など）、薬の副作用により生じる創傷（中毒性表皮壊死症、ライエル症候群、スティーブンス・ジョンソン症候群、放射線による皮膚炎、化学療法による皮膚炎など）、稀な皮膚病（表皮水疱症、尋常性天疱瘡、類天疱瘡、水疱性類天疱瘡、落葉状天疱瘡、壊疽性膿皮症など）およびその組み合わせからなる群から選択される。
【００８５】
本開示はまた、本開示の有効量のオレオゲル、乳濁液または発泡体を患者の表皮水疱症の領域に局所投与することを含む、それを必要とする患者の表皮水疱症を治療する方法も提供する。
【００８６】
参照による組み込み
本明細書に引用されるすべての参考文献、論文、刊行物、特許、特許公開、および特許出願は、全ての目的のためにその全体が参照により組み込まれる。しかし、本明細書に引用される参考文献、論文、刊行物、特許、特許公開、および特許出願の言及は、それらが有効な従来技術を構成している、または世界中のどの国においても共通の一般知識の一部を形成していること承認、または何らかの形の示唆として解釈するものではなく、するべきではない。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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