(57)【要約】  上皮過形成および／または線維症に関連する前立腺疾患または障害の予防、治療および／または改善方法であって、それを必要とする対象に有効量のマルチキナーゼ阻害剤を投与することを含み、マルチキナーゼ阻害剤はある範囲のキナーゼ阻害活性を有する。マルチキナーゼ阻害剤は、スニチニブ、レゴラフェニブ、ポナチニブ、パゾパニブ、ニンテダニブおよび／またはレンバチニブである。前立腺疾患または障害は、動物およびヒトにおける、前立腺肥大症およびその関連する下部尿路症状、尿管および腎盂の線維症、前立腺腺腫、ならびに前立腺上皮内腫瘍からなる群から選択される。【選択図】図４
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
上皮過形成および／または線維症に関連する前立腺疾患または障害の予防、治療および／または改善方法であって、前記方法は、それを必要とする対象に有効量のマルチキナーゼ阻害剤を投与することを含み、前記マルチキナーゼ阻害剤はある範囲のキナーゼ阻害活性を有する、方法。
【請求項２】
前記マルチキナーゼ阻害剤が、スニチニブ、レゴラフェニブ、ポナチニブ、パゾパニブ、ニンテダニブおよび／またはレンバチニブである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記マルチキナーゼ阻害剤が、スニチニブ、レゴラフェニブ、ニンテダニブおよびレンバチニブである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記マルチキナーゼ阻害剤が、ニンテダニブおよびレンバチニブである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記マルチキナーゼ阻害剤がニンテダニブである、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記マルチキナーゼ阻害剤がレンバチニブである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記前立腺疾患または障害が、動物およびヒトにおける、前立腺肥大症およびその関連する下部尿路症状、尿管および腎盂の線維症、前立腺腺腫、ならびに前立腺上皮内腫瘍からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記前立腺疾患または障害が、前立腺肥大症（ＢＰＨ）およびその関連する下部尿路症状である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
薬の投与が、非経口、筋肉内、皮内、皮下、局所、腹腔内、病変内、病変周囲、前立腺内、前立腺周囲、経直腸、および経尿道経路で行われる、請求項１〜８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ある範囲のマルチキナーゼに阻害活性を有する化合物に関し、該化合物は尿路疾患において特定の増殖因子および／またはサイトカインシグナル伝達経路および／または応答の段階で作用する。
【背景技術】
【０００２】
前立腺肥大症（ＢＰＨ）とその関連する下部尿路症状（ＬＵＴＳ）は、高齢の男性によく見られる。組織病理学的に、ＢＰＨは、前立腺の尿道周囲部にある上皮細胞と間質細胞の数の増加によって特徴付けられる。これは、腺組織および間質性前立腺組織の両方の質量を増加させるために次第に増殖し、拡大する微細結節の出現によって明らかになる。
【０００３】
テストステロンは、ＢＰＨの発症に関わると言われている。前立腺では、核膜結合型酵素５αリダクターゼは、ホルモンであるテストステロンをジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）に変換する。ＤＨＴが肥大を引き起こすのに重要であることは、５αリダクターゼを阻害することで前立腺のＤＨＴレベルを８５〜９０％も低下させることができ、結果として立腺の容積とＢＰＨの症状を減少させることができるという臨床観察によって裏付けられている。フィナステリドやドュタステリドのような５αリダクターゼ阻害剤は、ＢＰＨの治療に世界中で使われている。
【０００４】
ＢＰＨにおける間質細胞の増殖は、この疾患の発症の主な要因である。平滑筋の激しい緊張は、アドレナリン神経系によって調節されている。α１アドレナリン受容体の刺激は前立腺平滑筋の激しい緊張を仲介し、結果として前立腺尿道抵抗が増加する。タムスロシンやアルフゾシンのようなα１アドレナリン受容体のアンタゴニストは、ＢＰＨに関連する尿道閉塞を緩和することができる。
【０００５】
５αリダクターゼ阻害剤の使用は、遅効性であり、性的副作用と関連している。α１アドレナリン受容体のアンタゴニストは、より効果的であり、即効性があるが、血管拡張の副作用がある。さらに、これらの薬物療法は、主に疾患の軽度から中程度の段階で効果的である。前立腺肥大症および下部尿路症状のための薬物療法の改良が明らかに必要である。
【０００６】
前立腺癌は、ほとんどが非常にゆっくりと進行する病気で、腺細胞から始まる。前立腺がんは、前立腺腺細胞の形や大きさの小さな変化−前立腺上皮内腫瘍（Ｐ１Ｎ）から始まる。５０歳の男性のほぼ５０％がＰ１Ｎを有している。前立腺生検の後に高悪性度のＰ１Ｎであることが判明した患者は、前立腺に癌細胞が存在するリスクが非常に高くなる。
【０００７】
多くの成長因子やサイトカインがＢＰＨおよび／またはＰＩＮの発症に関与している。特にＦＧＦ、ＩＧＦ、ＴＧＦファミリーのメンバーがＢＰＨの進行に寄与していると言われている。染色でＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２およびＣＤ１０５が陽性の微小血管がヒトＢＰＨ組織で報告された。これは、ＢＰＨの病理学的プロセスにおけるＶＥＧＦの積極的な役割を示唆している。
【０００８】
これらのデータは、マルチキナーゼ受容体阻害剤の使用による成長因子およびサイトカインシグナル伝達経路の制御が、前立腺および尿路の、増殖性および線維性疾患ならびにそれらに関連する症状の予防および／または治療のための新たな戦略となることを示唆している。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の実施形態は、ある範囲のマルチキナーゼに阻害活性を有し、上皮過形成および／または線維症に関連する前立腺疾患または障害の治療に有用である薬剤を提供し、該治療は有効量のマルチキナーゼ阻害剤を動物またはヒトに投与することを含む。また、本発明の実施形態は、そのような化合物および組成物の治療的または予防的使用、ならびに上皮過形成および／または線維症に関連する前立腺疾患または障害を治療する方法にも関する。
【００１０】
ひとつの態様では、本発明は、ある範囲のマルチキナーゼに阻害活性を有し、その結果、ヒトの前立腺肥大または下部尿路症状に関連する疾患状態および／または障害の治療の方法に有用である薬剤を提供する。より具体的には、本発明はまた、そのような化合物または組成物の治療的または予防的使用、ならびに、前立腺肥大症およびその関連する下部尿路症状、尿管および腎盂の線維化、前立腺腺腫、および前立腺上皮内腫瘍に関連する疾患状態および／または障害を治療する方法に関する。
【００１１】
ひとつの態様では、本発明は、治療または予防を必要とするヒト対象に治療有効量のマルチキナーゼ阻害剤を投与することによる、前立腺肥大症およびその関連する下部尿路症状の治療または予防の方法を提供し、マルチキナーゼ阻害剤は限定されないが、スニチニブ、レゴラフェニブ、ポナチニブ、パゾパニブ、ニンテダニブ、およびレンバチニブを含む。前立腺疾患または障害は、動物およびヒトにおける、前立腺肥大およびその関連する下部尿路症状、尿管および腎盂の線維化、前立腺腺腫、ならびに前立腺上皮内腫瘍からなる群から選択される。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】１００倍の倍率のラット背側前立腺の腺過形成の顕微鏡写真を示す。パネル（Ａ）は、溶媒処理のサンプルであり、正常（スコア＝０）の腺のプロファイルを示す。パネル（Ｂ）は、テストステロン（ＴＥ）およびフェニレフリン（ＰＥ）で誘導し、溶媒処理したサンプルであり、著しい（スコア＝４）上皮過形成を示す。パネル（Ｃ）は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、ニンテダニブ処理をしたサンプルであり、中程度（スコア＝３）の上皮過形成を示す。パネル（Ｄ）は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、スニチニブ処理をしたサンプルであり、中程度（スコア＝３）の上皮過形成を示す。パネル（Ｅ）は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、レンバチニブ処理をしたサンプルであり、軽度（スコア＝２）の上皮過形成を示す。パネル（Ｆ）は、は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、ドキサゾシン処理をしたサンプルであり、中程度（スコア＝３）の上皮過形成を示す。
【図２】１００倍の倍率の腹側前立腺の代表的な写真を示す。パネル（Ａ）は、溶媒処理のサンプルであり、正常（スコア＝０）の腺のプロファイルを示す。パネル（Ｂ）は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、溶媒処理したサンプルであり、著しい（スコア＝４）上皮過形成を示す。パネル（Ｃ）は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、ニンテダニブ処理をしたサンプルであり、中程度（スコア＝３）の上皮過形成を示す。パネル（Ｄ）は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、スニチニブ処理をしたサンプルであり、中程度（スコア＝３）の上皮過形成を示す。パネル（Ｅ）は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、レンバチニブ処理をしたサンプルであり、軽度（スコア＝３）の上皮過形成を示す。パネル（Ｆ）は、は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、ドキサゾシン処理をしたサンプルであり、中程度（スコア＝３）の上皮過形成を示す。
【図３】図１に記載の実験についての背側前立腺における腺過形成の平均スコアを示す。
【図４】図２に記載の実験についての腹側前立腺における腺過形成の平均スコアを示す。
【図５】様々な処理群の前立腺重量／体重１００ｇを示す。
【図６】は、１００倍の倍率の背側前立腺の代表的な写真を示す。パネル（１）は、グループ５（溶媒）のラットの写真であり、正常（スコア＝０）の腺のプロファイルを示す。パネル（２）は、グループ１（ＴＥ＋ＰＥ誘導および溶媒処理）のラットの写真であり、軽度（スコア＝２）の上皮過形成を示す。パネル（３）は、グループ３（ＴＥ＋ＰＥ誘導およびソラフェニブ１％処理）のラットの写真であり、軽度（スコア＝２）の上皮過形成を示す。パネル４はグループ４（ＴＥ＋ＰＥ誘導およびピルフェニドン２．５％処理）のラットの写真であり、最小（スコア＝１）の上皮過形成を示す。パネル（５）はグループ６（ＴＥ誘導）のラットの写真であり、軽度（スコア＝２）の上皮過形成を示す。パネル（６）はグループ７（ＴＥ誘導およびリオシグアト１％処理) のラットの写真であり、最小（スコア＝１）の上皮過形成を示す。
【図７】図６に記載したラットＢＰＨモデルにおける上皮過形成の平均スコアを示す。
【図８】実施例４に記載した角膜縫合線維症モデルにおける組織学的所見を示す。
【図９】実施例５に記載のラット脈絡膜新生血管化モデルにおける新生血管病変の減少を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明の実施形態は、動物およびヒトにおける、前立腺肥大またはその関連する下部尿路症状、尿管および腎盂の線維化、前立腺腺腫、ならびに前立腺上皮内腫瘍に関連する、疾患または障害の予防および／または治療に関する。本発明の実施形態によれば、前立腺肥大またはその関連する下部尿路症状の治療方法は、そのような治療を必要とする対象に組成物を与えることを含んでもよく、該組成物は、ＶＥＧＦおよびＴＧＦベータ等に関する選定されたキナーゼを阻害する選定された範囲の活性を有するマルチキナーゼ阻害剤を含む。
【００１４】
本発明の組成物は、マルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩を含んでいてもよい。本明細書で使用される場合、「マルチキナーゼ阻害剤」という用語は、複数のキナーゼを阻害することができる阻害剤を意味する。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される塩」という用語は、開示された化合物の誘導体を意味し、親化合物がその酸塩または塩基塩を作ることにより修飾されている。
【００１５】
薬学的に許容される塩の例は、限定されないが、アミンなどの塩基性残基の鉱酸塩または有機酸塩、カルボン酸などの酸性残基のアルカリ塩または有機塩などが含まれる。薬学的に許容される塩には、たとえば、非毒性の無機酸または有機酸から形成された親化合物／分子の従来の非毒性塩または第四級アンモニウム塩が含まれる。たとえば、そのような従来の非毒性の塩には、塩酸などの無機酸に由来するものが含まれてもよい。
【００１６】
いくつかの実施形態によれば、本発明は、有効成分として１種以上の本発明の化合物／分子を、少なくとも１種の薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤とともに含む医薬組成物も含む。
【００１７】
いくつかの実施形態では、本発明の化合物／分子は、本発明の化合物／分子は、非経口、筋肉内、皮内、皮下、局所、腹腔内、病変内、病変周囲、前立腺内、前立腺周囲、経直腸、および経尿道経路によって投与されてもよい。
【００１８】
投与量は、投与経路、疾患の重症度、患者の年齢および体重、ならびに特定の患者に最も適切な個々のレジメンおよび投与量レベルを決定する際に主治医が通常考慮する他の要因に依存する。すなわち、治療有効量は、患者（年齢、体重など）、病状、投与経路などに基づく。当業者であれば、発明的な努力なしで治療有効量を決定することができる。
【００１９】
本発明の実施形態によれば、投与レジメンは、（誘導）手術前、手術後（外傷時／急性炎症時、増殖時、リモデリング時、成熟時、またはそれらの前）であり得る。
【００２０】
本発明の実施形態によれば、本発明の化合物／分子から医薬製剤を調製するための、不活性の薬学的に許容される担体は固体または液体のいずれでもよい。
【００２１】
組成物という用語は、活性成分または薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体との製剤を含むことを意図する。たとえば、本発明は、当技術分野で知られている手段によって、たとえば、水性または油性の溶液、懸濁液、乳剤、クリーム、軟膏、ゲル、および非経口使用のための滅菌水性または油性の溶液または懸濁液または滅菌乳剤の形態に、製剤化してもよい。
【００２２】
液状組成物には、溶液、懸濁液、およびエマルジョンが含まれる。非経口投与に適した液状組成物の例として、活性化合物／分子の滅菌水または水-プロピレングリコール溶液を挙げることができる。また、液状組成物は、ポリエチレングリコール水溶液中の溶液に製剤化することもできる。経口投与用の水溶液は、有効成分を水に溶解し、必要に応じて適当な着色剤、香料、安定剤、増粘剤等を添加して調製することができる。経口使用のための水性懸濁液は、天然の合成ゴム、樹脂、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および製剤処方の分野で知られている他の懸濁剤などの粘性材料とともに、微細な活性成分を水に分散させることによって製造することができる。
【００２３】
医薬組成物は、単位投与形態であってもよい。そのような形態では、組成物は、活性成分の適切な量を含む単位用量に分割される。単位投与形態は、包装された製剤であってもよく、その包装は個別の製剤を含む。
【００２４】
組成物は、任意の適切な投与経路および投与手段のために製剤化することができる。薬学的に許容される担体または希釈剤には、直腸投与、局所投与または非経口投与に適した製剤に使用されるものが含まれる。製剤は、利便性のために単位投与形態で提供されてもよく、製薬の分野で周知の任意の方法で調製されてもよい。
【００２５】
固体組成物の場合、従来の非毒性の固体担体には、たとえば、医薬品グレードのマンニトール、乳糖、セルロース、セルロース誘導体、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルカム、グルコース、ショ糖、炭酸マグネシウムなどが用いられ得る。液状の薬学的に投与可能な組成物は、たとえば、上記で定義した活性化合物／分子および任意の薬学的アジュバントを、たとえば、水、生理食塩水デキストロース、グリセロール、エタノールのような担体に溶解、分散などして、溶液または懸濁液を形成することによって調製することができる。必要に応じて、投与される医薬組成物は、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝剤等の少量の非毒性補助物質、例えば、酢酸ナトリウム、ソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミン酢酸ナトリウム、ソルビタンモノラウレート、オレイン酸トリエタノールアミン等を含んでいてもよい。そのような剤形を調製する実際の方法は、当業者に知られているか、または明らかである。
【００２６】
本発明の実施形態は、以下の実施例で説明される。当業者であれば、これらの例は例示のためだけのものであり、本発明の範囲から逸脱することなく他の修正および変形が可能であることを理解する。
【００２７】
（実施例１）
ヒトとげっ歯類の前立腺は形態的、解剖学的には異なるが、薬理学的、組織化学的には多くの類似性があり、ラットのＢＰＨの研究は有用な研究アプローチである。ヒトでもラットでも前立腺は、腺要素を取り囲む細かいネットワークによって神経支配されている。これらの神経構造のほとんどはカテコールアミン作動性であり、異なるサブタイプのアドレナリン受容体を含んでいる。
【００２８】
前立腺細胞の増殖におけるアドレナリン作動性神経支配の潜在的な影響をみるため、ラットの前立腺へのフェニレフリンの投与の影響が検討された。１日あたり１ｍｇ／ｋｇの用量で、フェニルフリンは管腔内に突出した不規則な管を誘導する。上皮は厚くなり、細胞の局所的な「堆積」さえ起こる。一方、間質は、線維芽細胞と平滑筋細胞の過形成と肥大を示す。これらの変化は、ヒトにおける前立腺肥大の実体に対応している。さらに、フェニルフリンは、ラットの前立腺において上皮成分および間質成分の両方に影響を与えるＰＩＮ病変の発生に二重の役割がある。
【００２９】
ＢＰＨは真に過形成の過程である。組織学的研究では、細胞数の増加が報告されている。したがって、試験化合物および溶媒が、テストステロン（ＴＥ）およびフェニレフリン（ＰＥ）で誘導されたラットの前立腺肥大症に与える影響を決定するための研究が行われた。オスのウィスターラットに、５日目〜３２日目まで毎日テストステロン（２ｍｇ／ｋｇ）およびフェニレフリン（５ｍｇ／ｋｇ）を皮下注射で投与して誘導した。溶媒および試験化合物（全て１％ｗ／ｗ）、ニンテダニブ、スニチニブ、レンバチニブ、および０．５％メシル酸ドキサゾシンを、背外側葉および腹側葉に、１日目〜１８日目まで前立腺内注射（０．４ｍｌ）で投与した。動物を３２日目に安楽死させた。体重を測定し、前立腺を採取した。実験計画を表１で概説する。
【００３０】
【表１】
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【００３１】
剖検時に、前立腺の腹側および背外側葉を分離し、半分に切った。左半分は１０％中性緩衝ホルマリンで固定し、切片にし、ヘマトキシリンおよびエオシン（Ｈ＆Ｅ）で染色した。これらの切片の組織学的な変化をスコア化した。上皮過形成は、正常に見える腺プロファイルでの上皮細胞の増加として認識され、これは主に上皮細胞の層化、ならびに房状化した上皮および乳頭突起の存在の増加によって反映された。各サンプルには、０（存在しない）から５（重度）までの重症度グレードを割り当てた。代表的な写真を図１および図２に示す。平均スコア（＋／−ＳＤ）を図３および図４に示す。
【００３２】
図１は、１００倍の倍率の背側前立腺の代表的な写真を示す。パネル（Ａ）は、溶媒処理したサンプルであり、正常（スコア＝０）の腺プロファイルを示す。パネル（Ｂ）は、テストステロン（ＴＥ）およびフェニレフリン（ＰＥ）で誘導し、溶媒処理したサンプルであり、著しい（スコア＝４）上皮過形成を示す。パネル（Ｃ）は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、ニンテダニブ処理をしたサンプルであり、中程度（スコア＝３）の上皮過形成を示す。パネル（Ｄ）は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、スニチニブ処理をしたサンプルであり、中程度（スコア＝３）の上皮過形成を示す。パネル（Ｅ）は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、レンバチニブ処理をしたサンプルであり、軽度（スコア＝２）の上皮過形成を示す。パネル（Ｆ）は、は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、ドキサゾシン処理したサンプルであり、中程度（スコア＝３）の上皮過形成を示す。
【００３３】
図２は、１００倍の倍率の腹側前立腺の代表的な写真を示す。パネル（Ａ）は、溶媒処理したサンプルであり、正常（スコア＝０）の腺プロファイルを示す。パネル（Ｂ）は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、溶媒処理したサンプルであり、著しい（スコア＝４）上皮過形成を示す。パネル（Ｃ）は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、ニンテダニブ処理をしたサンプルであり、中程度（スコア＝３）の上皮過形成を示す。パネル（Ｄ）は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、スニチニブ処理をしたサンプルであり、中程度（スコア＝３）の上皮過形成を示す。パネル（Ｅ）は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、レンバチニブ処理をしたサンプルであり、わずかな（スコア＝３）上皮過形成を示す。パネル（Ｆ）は、ＴＥおよびＰＥで誘導し、ドキサゾシン処理をしたサンプルであり、中程度（スコア＝３）の上皮過形成を示す。
【００３４】
研究結果は、ラットにおけるＴＥおよびＰＥ誘導後の腺過形成の組織学的変化を示しており、これは、ヒト前立腺過形成および腺腫、すなわち内腔に向かって乳頭構造を形成する腺過形成で観察された。試験化合物のニンテダニブ、スニチニブ、レンバチニブ、およびドキサゾシンは、未処理のＴＥ／ＰＥ誘導前立腺と比較して、腺過形成の減少を示した（図１Ｂおよび２Ｂ）。このモデルにおけるニンテダニブ、スニチニブ、レンバチニブ、およびドキサゾシンによる立腺肥大の阻害は、これらの化合物は前立腺肥大症（ＢＰＨ）、ならびに尿生殖路の増殖性および線維性障害の治療に効果的であることを示す。
【００３５】
（実施例２）
形態学的には、ＢＰＨは、既存の管腔内に上皮が増殖することにより、新規の構造が形成されることで特徴付けられる。間質細胞が上皮細胞のホメオスタシスにおいて重要なパラクリン制御機能を果たしていることを考えると、間質−上皮相互作用の後期段階での変化は、ＢＰＨの進行についての見識を与え得る。第二の研究は、ラットにおけるテストステロンおよび／またはフェニレフリン誘導ＢＰＨを用いたプロトコールでの、誘導後の試験化合物および溶媒の治療効果を決定するために行われた。
【００３６】
オスのウィスターラットに、１日目〜２８日目まで毎日テストステロン（２ｍｇ／ｋｇ）およびフェニレフリン（５ｍｇ／ｋｇ）を皮下注射で投与して誘導した。１５日目〜２９日目まで毎日、溶媒または試験化合物ソラフェニブ（１％ｗ／ｗ）、ピルフェニドン（２．５％ｗ／ｗ）、およびリオシグアト（１％ｗ／ｗ）を背側葉に、前立腺内注射（０．２ｍｌ）で投与した。動物は４２日目に安楽死させた。体重を測定した。前立腺を摘出し、計量した。実験計画を表２で概説する。
【００３７】
【表２】
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【００３８】
各処理群で、前立腺重量／１００ｇ体重を測定した。図５に示すように、ソラフェニブおよびピルフェニドンは、溶媒に比べ、平均前立腺重量の減少を示さなかった。同様の試験（ＴＥ誘導を伴う）では、リオシグアト処理は、溶媒対照群に比べ、平均前立腺重量を減少させた。
【００３９】
剖検時に、前立腺の背外側葉および腹葉を分離し、半分に切った。左半分を１０％中性緩衝ホルマリンで固定し、切片にし、ヘマトキシリンおよびエオシン（Ｈ＆Ｅ）で染色した。上皮過形成は正常に見える腺プロファイルでの上皮細胞の増加として認識され、これは、上皮細胞の層化、ならびに房状化した上皮および乳頭突起の存在の増加によって反映された。間質の変化を顕微鏡で調べた。これらの変化には、炎症および組織線維形成が含まれていた。各切片には、０（存在しない）から５（重度）までの重症度スコアが与えられた。
【００４０】
図６は、１００倍の倍率の背側前立腺の代表的な写真を示す。パネル（１）は、グループ５（溶媒）のラットの写真であり、正常（スコア＝０）の腺のプロファイルを示す。パネル（２）は、グループ１（ＴＥ＋ＰＥ誘導および溶媒処理）のラットの写真であり、軽度（スコア＝２）の上皮過形成を示す。パネル（３）は、グループ２（ＴＥ＋ＰＥ誘導およびソラフェニブ１％処理）のラットの写真であり、軽度（スコア＝２）の上皮過形成を示す。パネル４はグループ３（ＴＥ＋ＰＥ誘導およびピルフェニドン２．５％処理）のラットの写真であり、最小（スコア＝１）の上皮過形成を示す。パネル（５）はグループ５（ＴＥ誘導）のラットの写真であり、軽度（スコア＝２）の上皮過形成を示す。パネル（６）はグループ６（ＴＥ誘導およびリオシグアト１％処理) のラットの写真であり、最小（スコア＝１）の上皮過形成を示す。これらのスコアを棒グラフにまとめ、図７に示す。
【００４１】
この研究はラットモデルにおける誘導ＢＰＨの経時的な消散が、試験化合物のピルフェニドンおよびリオシグアトに対する反応を低下させたことを示している。リオシグアトは、上皮過形成における前立腺体積および組織学的変化に対する影響を示した。抗ＶＥＧＦＲおよび抗ＰＤＧＦＲ活性を有するマルチキナーゼ阻害剤であるソラフェニブは、前立腺肥大過形成の有効な阻害剤ではないことも観察された。したがって、すべてのマルチキナーゼ阻害剤が前立腺肥大症および／または線維性疾患において、予防的または治療的利益をもたらすわけではない。
【００４２】
（実施例３）
（ラットにおける前立腺内注射後の前立腺でのソラフェニブ濃度）
この研究では、１５日目と２９日目に、前立腺内注射でソラフェニブが単回投与された。動物を４２日目に安楽死させ、前立腺組織サンプルを解析のために得た。組織サンプルはＢｅａｄ  Ｒｕｐｔｏｒホモジナイザーを用いて調製し、その後、アセトニトリルで抽出し、高速遠心分離をした。ソラフェニブを測定するためにＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法を用いた。
【００４３】
４２日目に、前立腺内のソラフェニブの平均濃度は８９２ｍｇ／ｇｍであった。これらの組織濃度はＶＥＧＦＲおよびＰＤＧＦＲ活性の阻害のために必要な濃度より高い。この研究は、前立腺内でのソラフェニブの暴露が良好であったにもかかわらず、ソラフェニブは前立腺での治療効果を示さなかったという考えを支持する。
【００４４】
（実施例４）
線維形成は、一般的に、疾患、外傷、遺伝性疾患または感染症に関連する組織における後期の反応性および／または修復的な反応である。病態生理学的には、関与する臓器や組織にかかわらず、強固な重なりがある。前立腺以外の組織での所見は、前立腺肥大症やその関連する下部尿路症状など、前立腺の疾患または障害に関連する線維性疾患の進行および退行の我々の理解に貢献する可能性がある。
【００４５】
ウサギの縫合糸誘導線維症モデルにおける試験化合物および溶媒の局所投与の潜在的な有益な効果を決定するための研究を行った。顕微鏡下で、縫合糸をウサギの角膜の間質内に配置した。各眼では、１つの９−０シルク縫合糸は、角膜の中心に対し側方の垂直方向の位置に配置され、２番目の縫合糸は、角膜の中心に対して鼻側に配置された。各縫合糸は、辺縁部から約２ｍｍの位置に２つの間質性の侵襲があった。ある範囲のマルチキナーゼ阻害活性を有する試験化合物または溶媒を、手術後１０日間、１日３回、眼に局所的に注入した（３５ｐＬ／眼）。治療群には、溶媒、ニンテダニブ（０．３％、ｗ／ｗ）、ソラフェニブ（０．３％、ｗ／ｗ）、レンバチニブ（０．３％、ｗ／ｗ）が含まれる。治療群ごとに左目を６個使用した。
【００４６】
生存期の段階で、肉眼で観察される非常に軽度から中等度の結膜のうっ血と腫れは、溶媒対照群を含むグループ間で類似していた。動物を１１日目に犠牲にし、組織病理学的評価のために眼球を摘出し、解剖した。結果を図８に示す
【００４７】
結果は、組織学的染色によって証明されるように、ニンテダニブおよびレンバチニブが、線維形成および／またはコラーゲン密度を有意に減少させたことを示している（図８参照）。対照的に、ソラフェニブは、周囲の結合組織から細胞を分化させるためのＭａｓｓｏｎのトリクローム試験によって明らかにされたように、線維形成またはコラーゲン形成、特に線維化反応におけるコラーゲン形成にはほとんど、または全く影響がなかった。さらに、ニンテダニブとレンバチニブは、免疫組織化学的分析でαＳＭＡ染色を大幅に減少させたが、ソラフェニブは溶媒処理と比較してαＳＭＡに影響がなかった。αＳＭＡは筋線維芽細胞の重要なマーカーであり、創傷治癒や細胞外マトリックス形成における機能は線維性疾患と関連している。
【００４８】
（実施例５）
前立腺肥大症、高悪性度前立腺上皮内腫瘍、および前立腺癌において、ＶＥＧＦおよびｂＦＧＦのような血管新生因子の発現の増加が、微小血管密度の増加とともに報告されている。このことは、ＢＰＨの調節におけるこれらの因子の阻害の役割を示唆している。本実施例では、ラットの血管新生モデルにおけるマルチキナーゼ阻害剤の局所投与の効果を調べた。新生血管の成長は成長因子受容体シグナル伝達経路によって制御されており、その機能は臓器および組織の間で幅広く重複している。本研究では、マルチキナーゼ阻害剤であるニンテダニブおよびレンバチニブの局所投与の効果を、レーザー誘導脈絡膜血管新生後のラットの眼に、硝子体内注射または局所投与して検討した。
【００４９】
試験薬、ポジティブ対照、または溶媒の、新しい血管の発達に対する効果を決定するために２２日間の試験を実施した。１日目に、５２０ｎｍの熱レーザーを使用して全動物にレーザー治療を行い、１眼あたり合計３つの病変を発生させた。２日目〜２１日目に、溶媒、１％ニンテダニブ、または１％レンバチニブの両側局所投与を１日３回行った。３日目に、第２の動物群に、溶媒、５ｐｇ／眼のラット抗ＶＥＧＦ抗体、５０ｐｇ／眼のニンテダニブ、または５０μｇ／眼のレンバチニブの両側硝子体内注射を行った。
【００５０】
２２日目に全動物にフルオレセイン血管造影を行い、画像解析ソフト（ＩｍａｇｅＪ）を用いて病変の大きさ／面積を測定した。図９に示すように、硝子体内注射で送達された場合、ニンテダニブおよびレンバチニブの治療は、溶媒処理した眼と比較して、病変の大きさを有意に減少させた。さらに、レンバチニブの硝子体内注射は、ポジティブ対照であるラット抗ＶＥＧＦと比較して、病変の大きさを有意に減少させた。
【００５１】
硝子体内注射に加えて、本発明の化合物は局所投与でも使用できる。図９に示すように、ニンテダニブまたはレンバチニブのいずれかの局所的な点眼投与は、溶媒のものと比較して、病変の大きさを減少させた。
【００５２】
これらのデータは、ニンテダニブおよびレンバチニブが、局部的な投与、たとえば注射または局所投与の後、レーザー誘導性病変からの血管新生を減少させるのに効果的であることを示している。
【００５３】
（付記）
（付記１）
上皮過形成および／または線維症に関連する前立腺疾患または障害の予防、治療および／または改善方法であって、前記方法は、それを必要とする対象に有効量のマルチキナーゼ阻害剤を投与することを含み、前記マルチキナーゼ阻害剤はある範囲のキナーゼ阻害活性を有する、方法。
【００５４】
（付記２）
前記マルチキナーゼ阻害剤が、スニチニブ、レゴラフェニブ、ポナチニブ、パゾパニブ、ニンテダニブおよび／またはレンバチニブである、付記１に記載の方法。
【００５５】
（付記３）
前記マルチキナーゼ阻害剤が、スニチニブ、レゴラフェニブ、ニンテダニブおよびレンバチニブである、付記１に記載の方法。
【００５６】
（付記４）
前記マルチキナーゼ阻害剤が、ニンテダニブおよびレンバチニブである、付記１に記載の方法。
【００５７】
（付記５）
前記マルチキナーゼ阻害剤がニンテダニブである、付記１に記載の方法。
【００５８】
（付記６）
前記マルチキナーゼ阻害剤がレンバチニブである、付記１に記載の方法。
【００５９】
（付記７）
前記前立腺疾患または障害が、動物およびヒトにおける、前立腺肥大症およびその関連する下部尿路症状、尿管および腎盂の線維症、前立腺腺腫、ならびに前立腺上皮内腫瘍からなる群から選択される、付記１に記載の方法。
【００６０】
（付記８）
前記前立腺疾患または障害が、前立腺肥大症（ＢＰＨ）およびその関連する下部尿路症状である、付記１に記載の方法。
【００６１】
（付記９）
薬の投与が、非経口、筋肉内、皮内、皮下、局所、腹腔内、病変内、病変周囲、前立腺内、前立腺周囲、経直腸、および経尿道経路で行われる、付記１〜８に記載の方法。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【手続補正書】
【提出日】令和2年8月26日(2020.8.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
マルチキナーゼ阻害剤を含む、上皮過形成および／または線維症に関連する前立腺疾患または障害の予防、治療および／または改善のための薬剤であって、有効量の前記薬剤はそれを必要とする対象に投与され、前記マルチキナーゼ阻害剤はある範囲のキナーゼ阻害活性を有する、薬剤。
【請求項２】
前記マルチキナーゼ阻害剤が、スニチニブ、レゴラフェニブ、ポナチニブ、パゾパニブ、ニンテダニブ、レンバチニブ、またはその組み合わせである、請求項１に記載の薬剤。
【請求項３】
前記マルチキナーゼ阻害剤が、スニチニブ、レゴラフェニブ、ニンテダニブおよびレンバチニブである、請求項１に記載の薬剤。
【請求項４】
前記マルチキナーゼ阻害剤が、ニンテダニブおよびレンバチニブである、請求項１に記載の薬剤。
【請求項５】
前記マルチキナーゼ阻害剤がニンテダニブである、請求項１に記載の薬剤。
【請求項６】
前記マルチキナーゼ阻害剤がレンバチニブである、請求項１に記載の薬剤。
【請求項７】
前記マルチキナーゼ阻害剤がスニチニブである、請求項１に記載の薬剤。
【請求項８】
前記マルチキナーゼ阻害剤がレゴラフェニブである、請求項１に記載の薬剤。
【請求項９】
前記マルチキナーゼ阻害剤がポナチニブである、請求項１に記載の薬剤。
【請求項１０】
前記マルチキナーゼ阻害剤がパゾパニブである、請求項１に記載の薬剤。
【請求項１１】
前記前立腺疾患または障害が、動物およびヒトにおける前立腺肥大症（ＢＰＨ）またはその関連する下部尿路症状である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項１２】
前記前立腺疾患または障害が、動物およびヒトにおける尿管および腎盂の線維症である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項１３】
前記前立腺疾患または障害が、動物およびヒトにおける前立腺腺腫である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項１４】
前記前立腺疾患または障害が、動物およびヒトにおける前立腺上皮内腫瘍である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項１５】
前記マルチキナーゼ阻害剤が前立腺内注射により投与される、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項１６】
前記マルチキナーゼ阻害剤が前立腺周囲注射により投与される、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項１７】
前記マルチキナーゼ阻害剤が経直腸送達により投与される、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項１８】
前記マルチキナーゼ阻害剤が経尿道送達により投与される、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項１９】
前記マルチキナーゼ阻害剤が非経口送達により投与される、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項２０】
前記マルチキナーゼ阻害剤が、腹腔内、皮下、筋肉内、皮内、局所、病変内、または病変周囲への送達により投与される、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の薬剤。
【国際調査報告】
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