(57)【要約】  本発明は、下部にポートが形成される複数のチャンバを備える第１ボディーと、前記第１ボディーの下部に結合される第２ボディーと、前記第１ボディー及び前記第２ボディーの中心部に回転可能に配置され、下部にポートが形成されるピストンと、前記第２ボディーの上部に形成され、一端が前記ピストンのポートと重なり、他端が前記第１ボディーのポートと重なるように形成される複数の流路とを含む核酸抽出用カートリッジを提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
下部にポートが形成される複数のチャンバを備える第１ボディーと、
前記第１ボディーの下部に結合される第２ボディーと、
前記第１ボディー及び前記第２ボディーの中心部に回転可能に配置され、下部にポートが形成されるピストンと、
前記第２ボディーの上部に形成され、一端が前記ピストンのポートと重なり、他端が前記第１ボディーのポートと重なるように形成される複数の流路とを含むことを特徴とする核酸抽出用カートリッジ。
【請求項２】
前記ピストンのポートは、一定の角度だけ離れて形成される少なくとも２つのポートを含み、前記ポートのうちの少なくとも１つにはフィルター装着部が形成されることを特徴とする請求項１に記載の核酸抽出用カートリッジ。
【請求項３】
前記２つのポートは、
同一円周上で２２．５°の間隔で離れて形成されたことを特徴とする請求項２に記載の核酸抽出用カートリッジ。
【請求項４】
前記第１ボディーと前記第２ボディーとの間に配置され、前記流路を覆うように形成されるパッドをさらに含むことを特徴とする請求項１に記載の核酸抽出用カートリッジ。
【請求項５】
前記パッドは、
前記流路の端部と重なる複数の孔を含むことを特徴とする請求項４に記載の核酸抽出用カートリッジ。
【請求項６】
前記第２ボディーの上面には、前記パッドが結合される載置部が形成され、
前記パッドは、ゴム材質からなり、前記載置部に噛み合って固定されるように形成されることを特徴とする請求項５に記載の核酸抽出用カートリッジ。
【請求項７】
前記第１ボディー又は前記第２ボディーに装着され、一端が前記複数の流路のうち少なくとも１つと重なる内部流路を備える核酸増幅モジュールをさらに含むことを特徴とする請求項２に記載の核酸抽出用カートリッジ。
【請求項８】
前記内部流路は、
両端がそれぞれ第１流路及び第２流路と連結され、
前記第１流路が前記ピストンのポートと重なるとき、前記第２流路はピストンの真空除去溝と重なるように形成されることを特徴とする請求項７に記載の核酸抽出用カートリッジ。
【請求項９】
前記真空除去溝と前記ピストンのポートは、互いに異なる円周上に配置されることを特徴とする請求項８に記載の核酸抽出用カートリッジ。
【請求項１０】
前記第１ボディーのポートは同一円周上に形成されることを特徴とする請求項１に記載の核酸抽出用カートリッジ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般的には核酸抽出のためのカートリッジに関し、より具体的には、核酸を増幅させるためにサンプルから核酸を分離、精製することができるカートリッジの構造に関する。
【背景技術】
【０００２】
現代では、バイオテクノロジー技術の発展に伴い、遺伝子レベルで病気の原因を解析することが可能になった。それによって、ヒトの病気を治癒又は予防するための生体試料の操作及び生化学的分析に対する要求がますます増加している。
【０００３】
併せて、病気の診断以外にも、新薬の開発、ウイルスやバクテリアに感染したか否かの事前検査及び法医学などの様々な分野において、生体試料や細胞が含まれた試料から核酸を抽出、分析する技術が要求される。
【０００４】
従来の核酸抽出装置は、処理過程（濃縮、精製）別にそれぞれの装置が必要であり、一つの処理過程が終わった後、他の装置に移動させなければならないので長い時間を必要とする（特許文献２及び特許文献３参照）。
【０００５】
このような長い処理過程のため検出の効率性が低いという従来の問題を解決するために、特許文献１では、ピストンヘッドに複数の分岐した流路３４，３８，４２，４４を作り、ピストンヘッドが回転しながらチャンバに入っている試薬を直接吸入してピストンの内部空間で混合できるようにした（図１参照）。すなわち、一つのカートリッジを用いて複数の試薬を一度に処理することができる方法が摸索された。
【０００６】
ところが、特許文献１によれば、ピストンヘッドの内部に複数の分岐した流路を生成させなければならないので、ピストンの製造単価が高くなることがあり、製造工程で小さな誤差が発生する場合でも、装置の性能に致命的な影響を及ぼすことがあるという問題がある。
【０００７】
したがって、このような問題点を解決するために、より簡潔で直観的な構造の核酸抽出用カートリッジの構造に関する研究が進められている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】米国登録特許ＵＳ６，３７４，６８４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、より簡潔で効率的な構造の核酸抽出用カートリッジを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記のような課題を解決するために、本発明の一実施例に係る核酸抽出用カートリッジは、下部にポートが形成される複数のチャンバを備える第１ボディーと、前記第１ボディーの下部に結合される第２ボディーと、前記第１ボディー及び前記第２ボディーの中心部に回転可能に配置され、下部にポートが形成されるピストンと、前記第２ボディーの上部に形成され、一端が前記ピストンのポートと重なり、他端が前記第１ボディーのポートと重なるように形成される複数の流路とを含む。
【００１１】
本発明の一実施例によれば、前記ピストンのポートは、一定の角度だけ離れて形成される少なくとも２つのポートを含み、前記ポートのうちの少なくとも１つにはフィルター装着部が形成される。
【００１２】
本発明の一実施例によれば、前記２つのポートは、同一円周上で２２．５°の間隔で離れて形成される。
【００１３】
本発明の一実施例によれば、前記第１ボディーと前記第２ボディーとの間に配置され、前記流路を覆うように形成されるパッドをさらに含む。
【００１４】
本発明の一実施例によれば、前記パッドは、前記流路の端部と重なる複数の孔を含む。
【００１５】
本発明の一実施例によれば、前記第２ボディーの上面には、前記パッドが結合される載置部が形成され、前記パッドは、ゴム材質からなり、前記載置部に噛み合って固定されるように形成される。
【００１６】
本発明の一実施例によれば、前記第１ボディー又は前記第２ボディーに装着され、一端が前記複数の流路のうち少なくとも１つと重なる内部流路を備える核酸増幅モジュールをさらに含む。
【００１７】
本発明の一実施例によれば、前記内部流路は、両端がそれぞれ第１流路及び第２流路と連結され、前記第１流路が前記ピストンのポートと重なるとき、前記第２流路はピストンの真空除去溝と重なるように形成される。
【００１８】
本発明の一実施例によれば、前記真空除去溝と前記ピストンのポートは、互いに異なる円周上に配置される。
【００１９】
本発明の一実施例によれば、前記第１ボディーのポートは同一円周上に形成される。
【発明の効果】
【００２０】
本発明の一実施例に係る核酸抽出用カートリッジによれば、ピストンの内部流路を単純化することで、カートリッジの設計及び生産効率性を向上させることができる。
【００２１】
また、本発明の一実施例に係る核酸抽出用カートリッジによれば、サンプルと試薬が混合されるピストンの内部空間を拡張することで、サンプルと試薬の混合効率を向上させることができる。
【００２２】
また、本発明の一実施例に係る核酸抽出用カートリッジによれば、サンプルと試薬が移動する流路がカートリッジの下部ボディーの上面に形成されることで、流路の作製及び流路の状態の点検を容易にする。
【００２３】
併せて、本発明の一実施例によれば、カートリッジの上部ボディーと下部ボディーとの間にゴムパッドが配置されることで、カートリッジの利用中に液体が漏れるのを防止することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】従来技術に適用されるカートリッジのピストンを示す概念図である。
【図２】本発明の一実施例に係る核酸抽出装置用カートリッジの斜視図である。
【図３】本発明の一実施例に係る核酸抽出装置用カートリッジの分解図である。
【図４】図２に示された第１ボディーの平面図である。
【図５】図４の平面図を傾けて見た概念図である。
【図６】図２に示された第１ボディーの底面図である。
【図７】図２に示された第２ボディーの斜視図である。
【図８】本発明の一実施例に係るピストンの底面斜視図である。
【図９】ピストンの下部ボディーの平面図である。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
以下、本発明について図面を参照してより詳細に説明する。本明細書では、互いに異なる実施例でも同一・類似の構成に対しては同一・類似の参照符号を付与し、その説明は最初の説明で代替する。本明細書で使用される単数の表現は、文脈上明らかに別の意味を示すものでない限り、複数の表現を含む。また、以下の説明で使用される構成要素に対する接尾辞である「モジュール」及び「部」は、明細書の作成の容易さのみを考慮して付与又は混用されるものであって、それ自体で互いに区別される意味又は役割を有するものではない。
【００２６】
図２は、カートリッジの斜視図であり、図３は、図２に示されたカートリッジの分解図である。
【００２７】
図２及び図３を参照すると、核酸抽出用カートリッジは、大きく第１ボディー１００と、第２ボディー２００と、ピストン３００と、核酸増幅モジュール４００などを含むことができる。
【００２８】
第１ボディー１００は、複数個の試薬を貯蔵する用途に使用することができる。
【００２９】
図示によると、第１ボディー１００には、互いに分離された隔室を形成する複数個のチャンバ１１０が形成され得る。それぞれのチャンバ１１０には、互いに異なる試薬またはサンプルが配置され、試薬が互いに混ざらないように、各チャンバ１１０は独立した空間を形成する。
【００３０】
第２ボディー２００は、第１ボディー１００に貯蔵された試薬またはサンプルが移動する経路を含む。
【００３１】
本発明の一実施例によれば、第２ボディー２００には、液体が移動可能な液体流路と、空気が移動可能な空気流路とが存在することができ、第２ボディー２００は、第１ボディー１００との結合時に液体の漏れを防止するために、上面に配置されるパッド２２０を含むことができる。パッド２２０とカートリッジの第２ボディー２００とが結合されると、カートリッジの第２ボディー２００の液体流路及び空気流路が、パッド２２０によって上面が塞がって空間を形成し、完壁な流路２１０が完成される。
【００３２】
液体流路は、第１ボディー１００と連結されてサンプル及び試薬が移動、混合可能な空間を提供する。
【００３３】
空気流路は、増幅モジュールとピストン３００の真空制御部位を連結して、抽出された核酸が増幅モジュールに移動するときに発生し得る真空を制御し、核酸増幅産物が汚染することを防止する役割を果たす。
【００３４】
パッド２２０には、パッド２２０を上下に貫通する複数個の孔が形成され得る。孔を介して、カートリッジの下部の液体流路及び空気流路が、カートリッジの第１ボディー１００に位置した多数の試薬チャンバ１１０と連結される。
【００３５】
パッド２２０の中央部は、ピストンの下部ボディー３２０の底面と密着するように結合される。
【００３６】
パッド２２０の中央部に形成された孔は、ピストンが回転するとき、ピストンの下部ボディー３２０のフィルターポートまたは液体ポートと重畳する。
【００３７】
より具体的には、第２ボディー２００の上部には複数個の流路２１０が形成され得る。それぞれの流路２１０は、互いに交差せず、第２ボディー２００の中心部から外郭部に延びるように形成される。図示によると、一部の流路は、一端が同一円周上に配置され、他端も互いに同一円周上に配置され得る。
【００３８】
第２ボディー２００の上部にはパッド２２０が結合され得る。
【００３９】
第２ボディー２００の上部には、下端に向かって窪んだ載置部２０１が形成され得、パッド２２０は、第２ボディー２００の上部の載置部２０１に噛み合って結合され得る。
【００４０】
言い換えると、第２ボディー２００の上部表面には、パッドを取り囲む外郭壁が形成され得、外郭壁は、パッドの厚さと同じ高さを有するように形成され得る。
【００４１】
パッド２２０は、第２ボディー２００の上面に密着しながら流路２１０を密閉させることができる。パッド２２０が第２ボディー２００にさらに強く密着できるように、前記パッド２２０は、弾性を有するゴムまたは合成樹脂で形成されてもよい。
【００４２】
本発明の一実施例によれば、孔は、流路２１０の端部と上下に重なるように配置される。言い換えると、パッド２２０に形成される孔は、一対ずつ組をなして流路２１０を介して連結され得る。
【００４３】
パッド２２０には、中心部の同一円周Ｃ１上に配置される複数の孔、及び外郭部の同一円周Ｃ２上に配置される複数の孔を備えることができる。
【００４４】
ピストン３００は、ピストンの上部ボディー３１０及びピストンの下部ボディー３２０からなることができる。
【００４５】
ピストン３００の上部ボディー３１０には、試薬とサンプルを混合できる内部空間が形成され、前記内部空間には、上下に移動するピストン３００の制御棒モジュールが配置され得る。
【００４６】
ピストンの制御棒モジュールは、核酸抽出装置の駆動部と結合される結合部３０１と、ピストンの内部空間に密着して上下に移動する密着部３０２とを含むことができる。
【００４７】
ピストンの下部ボディー３２０は、ピストンの上部ボディー３１０と結合して一つのボディーをなす。
【００４８】
ピストンの下部ボディー３２０は回転調節モジュール３３０と結合され得る。
【００４９】
図示によると、ピストンの上部ボディー３１０は、第１ボディー１００の中央部に形成された孔に挿入され、ピストンの下部ボディー３２０のシャフト３２４は、第２ボディー２００の中央部に形成されたシャフト孔２０２に挿入される。
【００５０】
前記ピストンの下部ボディー３２０のシャフト３２４は、第２ボディー２００の下端に結合される回転調節モジュール３３０と噛み合って固定される。
【００５１】
核酸増幅モジュール４００は、第１ボディー１００または第２ボディー２００と結合されてもよい。
【００５２】
核酸増幅モジュール４００の内部には内部流路が形成され得、内部流路の一端は、第２ボディー２００に形成される流路２１０のうち少なくともいずれか１つと重なるように形成され得る。
【００５３】
本発明の一実施例によれば、核酸増幅モジュール４００が任意に分離されないように核酸増幅モジュール４００を覆い、第１ボディー１００と第２ボディー２００を結合させる固定部材４１０が存在することができる。
【００５４】
固定部材４１０の両端には、第１ボディー１００及び第２ボディー２００に形成された結合溝１０２，２０３に締結される固定突起４１１が形成され得る。
【００５５】
図４は、図２に示された第１ボディーの平面図であり、図５は、図４の平面図を傾けて見た概念図であり、図６は、第１ボディーの底面図である。
【００５６】
図４乃至図６を参照して、第１ボディー１００の構造をより具体的に説明する。
【００５７】
第１ボディー１００は、多数個の試薬チャンバ１１０を含むことができ、それぞれのチャンバ１１０は、互いに隔離されるように形成される。
【００５８】
それぞれのチャンバ１１０の下端には、流路２１０の一端またはパッド２２０に形成された孔と重なるポート１２１が形成される。ポートは、チャンバ１１０の用途に応じて、中心からの距離が互いに異なるように形成することができる。
【００５９】
各試薬チャンバ１１０は試薬チャンバポートを含んでいる。各試薬チャンバポートは、ゴムパッド２２０の孔２２１を介してカートリッジの第２ボディー２００の流路と連結される。
【００６０】
図示によると、サンプルチャンバポート同士は同一円周上に配置され、マスターミックスビーズチャンバポートは、サンプルチャンバポートと異なる円周上に配置され得る。
【００６１】
サンプルチャンバには、サンプルの抽出に必要な複数個の乾燥ビーズが含まれ得、マスターミックスビーズチャンバには、核酸の増幅に必要な複数個の乾燥ビーズが含まれ得る。
【００６２】
サンプルチャンバ及びマスターミックスビーズチャンバは、それぞれサンプルチャンバポート及びマスターミックスビーズチャンバポートと連結され、各ポートは、パッドに形成された孔及びカートリッジの第２ボディー２００の流路と連結されることで、液体が移動することができる構造を形成する。
【００６３】
図８は、本発明の一実施例に係るピストンの斜視図であり、図９は、ピストンの下部ボディーの平面図である。
【００６４】
図８に示されたピストンは、上述したカートリッジに装着され、カートリッジのチャンバに配置されたサンプルと試薬を順次吸入し、混合して核酸を抽出する。
【００６５】
図示によると、ピストン３００は、上部ボディー３１０と、下部ボディー３２０と、回転調節モジュール３３０と、制御棒モジュールなどを含むことができる。
【００６６】
上部ボディー３１０は、円筒状をなし、中空を含むことができる。
【００６７】
上部ボディー３１０の中空には、中空に沿って上下に移動する制御棒モジュールが配置され得る。
【００６８】
制御棒モジュールは、核酸抽出装置の制御棒と結合される結合部３０１と、結合部３０１の外周を取り囲み、上部ボディー３１０の内壁に密着して移動する密着部３０２とを含むことができる。
【００６９】
上部ボディー３１０の一端には、下部ボディー３２０と噛み合う結合構造が形成され得、下部ボディー３２０の液体ポートと連結される第１孔、及び下部ボディー３２０のフィルターポートと連結される第２孔が形成され得る。第２孔は、支持構造体及びフィルターの離脱を防止できるように、フィルターポートのフィルター載置空間３２３よりも小さい直径を有するように形成され得る。
【００７０】
下部ボディー３２０は、上部ボディー３１０の一端に結合され得る。より具体的には、下部ボディー３２０は、上部ボディー３１０の一端に形成される結合構造に噛み合って固定される。
【００７１】
下部ボディー３２０は、円板状の胴体と、胴体の中心から外部に突出するように形成されるシャフト３２４と、胴体の中心から同じ距離だけ離れて配置される液体ポート３２１及びフィルターポート３２２とを含むことができる。胴体は、中心部３２０ａが外郭部３２０ｂに比べて突出するように形成され得る。中心部３２０ａは、上部ボディーの結合構造上に形成される溝に挿入されて固定され得る。
【００７２】
液体ポート３２１は、サンプル及び試薬をピストンの内部に吸入、混合し、排出するときに用いられ、フィルターポート３２２は、核酸捕捉フィルターを洗浄するか、または核酸捕捉フィルターから核酸を分離するときに用いることができる。
【００７３】
また、下部ボディー３２０の胴体の外周には、前記中心方向に凹んだ溝が形成され得る。この溝は、カートリッジの内部で液体の移動時に発生し得る真空を除去する役割を果たすことができる。
【００７４】
液体ポート３２１とフィルターポート３２２は、同一円周上で互いに一定の角度だけ離れて配置される。例えば、フィルターポート３２２と液体ポート３２１は、２つのポートが１８°〜３６°だけ互いに離れて配置されてもよい。より具体的には、２つのポートは、２２．５°の間隔をなすように配置され得る。１６回に分割して一回りの回転を行うステップモータを用いる場合、１回の駆動によって液体ポート３２１とフィルターポート３２２の位置を変更することができる。
【００７５】
下部ボディー３２０のフィルターポート３２２はフィルター載置空間３２３を含むことができ、フィルター載置空間には、フィルター及び支持構造体が配置され得る。核酸の捕捉のためのフィルターは、様々な粒度を有するガラス繊維フィルターが使用されてもよく、支持構造体は、核酸の捕捉のためのフィルターを固定させる役割を果たす。
【００７６】
支持構造体は、液体の排出時に前記フィルターの離脱を防止し、一定の圧力を維持できるように、一定の粒度を有する多孔性プラスチック材質で形成されてもよい。
【００７７】
回転調節モジュール３３０は、装備の駆動部と連結されてピストン３００を一定の角度で回転させる媒介体の役割を果たす。
【００７８】
前記回転調節モジュール３３０は、一面の中央部に前記シャフトと噛み合うように形成される結合溝と、他面に核酸抽出装置の駆動軸と噛み合うように形成される駆動溝とを含むことができる。
【００７９】
回転調節モジュール３３０は、ピストン３００と結合して、核酸抽出ステップで必要な様々な化学的反応を一つのカートリッジの内部で行うことができるように、適切な試薬チャンバポートの位置にフィルターポート及び液体ポートを位置させる。
【００８０】
液体ポートとフィルターポートとは一定の角度だけ離れており、回転調節モジュール３３０は、核酸の抽出時に前記ポートを各ステップに適する位置に回転させる。
【００８１】
フィルターポートに核酸の捕捉に必要なフィルターを挿入した後、下部ボディー３２０を上部ボディー３１０と結合させ、その後、第１ボディー１００及び第２ボディー２００に結合させてカートリッジのセッティングを完了する。
【００８２】
以上で説明した核酸抽出用カートリッジは、上述した実施例の構成及び方法に限定されるものではなく、上記実施例は、様々な変形が可能なように、各実施例の全部又は一部が選択的に組み合わされて構成されてもよい。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【国際調査報告】
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2021509268.tif 000013
2021509268.tif 000014
2021509268.tif 000015
2021509268.tif 000016
2021509268.tif 000017