(57)【要約】本発明は概して、抗体およびその抗原結合フラグメント、例えば、ヒト化、キメラ、およびヒト抗体ならびにその抗原結合フラグメント、ならびに融合タンパク質、そのような抗体およびその抗原結合フラグメントと融合タンパク質とを含む組成物に関し、そのような抗体およびその抗原結合フラグメント、ならびに融合タンパク質は、ＭＣＴ１、例えば、ヒトまたは非ヒトＭＣＴ１に特異的に結合し、インビトロおよび／またはインビボで１つ以上のＭＣＴ１関連機能に拮抗する、それを阻害する、または遮断する。本発明はまた、これらの抗ＭＣＴ１抗体、抗原結合フラグメント、融合タンパク質、および含有する組成物の治療的および診断的使用にも関し、任意に、これらの抗ＭＣＴ１抗体、抗原結合フラグメント、融合タンパク質、および含有する組成物は、他の治療薬、例えば、ミトコンドリア阻害剤および／またはビグアニドまたは小分子ＭＣＴ１阻害剤の投与をさらに含む治療レジメンで使用される。【選択図】図１
2021509822.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトまたは非ヒトＭＣＴ１の細胞外ドメインまたは領域に含まれる１つ以上の残基に結合する、単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項２】
ヒトまたは非ヒトＭＣＴ１に結合し、例えば、インビトロおよび／またはインビボで、１つ以上のＭＣＴ１関連機能に拮抗する、それを阻害する、または遮断する、単離された抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項３】
非ヒトＭＣＴ１、例えば、マウスまたはラットＭＣＴ１などのげっ歯類に結合し、任意に例えば、インビトロおよび／またはインビボで、１つ以上のＭＣＴ１関連機能に拮抗する、それを阻害する、または遮断する、単離された抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項４】
ヒトＭＣＴ１にさらに結合する、請求項３に記載の単離された抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項５】
抗ヒトＭＣＴ１抗体Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれか１つと、ヒトまたは非ヒトＭＣＴ１への結合を競合する、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項６】
抗ヒトＭＣＴ１抗体Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれか１つと、同じまたは重複するヒトＭＣＴ１上のエピトープに結合する、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項７】
以下：
（ｉ）残基Ｔ４１、Ｅ４６、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｋ２８９、Ｈ２９２、Ｙ２９３、Ｋ２９７、Ｇ４１７、Ｉ４７、およびＤ４１８の１つ以上を含むもの、
（ｉｉ）少なくとも３つの残基を含むものであり、前記残基の少なくとも１、２、または３つ全てが、Ｔ４１、Ｅ４６、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｋ２８９、Ｈ２９２、Ｙ２９３、Ｇ４１７、Ｉ４７、およびＤ４１８から選択される残基を含むもの、
（ｉｉｉ）３つの残基を含むものであり、前記残基の少なくとも１、２、または３つ全てが、Ｔ４１、Ｅ４６、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｋ２８９、Ｈ２９２、Ｙ２９３、Ｇ４１７、Ｉ４７、およびＤ４１８を含むもの、
（ｉｖ）３〜６つの残基を含むものであり、前記残基の１、２、３、４、５、または６つが、Ｔ４１、Ｅ４６、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｋ２８９、Ｈ２９２、Ｙ２９３、Ｇ４１７、Ｉ４７、およびＤ４１８を含むもの、
（ｖ）残基Ｔ４１、Ｓ２８５、およびＳ２８６の少なくとも１、２、または３つ全てを含むもの、
（ｖｉ）Ｔ４１を含むもの、
（ｖｉｉ）Ｓ２８６を含むもの、
（ｖｉｉｉ）Ｓ２８５を含むもの、
（ｉｘ）Ｈ２９２を含むもの、
（ｘ）残基Ｔ４１、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｇ４１７、およびＤ４１８を含むもの、
（ｘｉ）残基Ｔ４１、Ｓ２８５、およびＳ２８６を含むもの、
（ｘｉｉ）残基Ｔ４１、Ｉ４７、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｇ４１７、およびＤ４１８を含むもの、
（ｘｉｉｉ）残基Ｅ４６、Ｋ２８９、およびＨ２９２を含むもの、
（ｘｉｖ）残基Ｋ２９７、Ｙ２９３、およびＨ２９２を含むもの、
（ｘｖ）例えば、げっ歯類（例えば、マウス、ラット、モルモット）、ウサギ、ニワトリ、非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル、チンパンジー、オランウータン）、ウシ、ヒツジ、イヌ、およびネコから選択される、非ヒトＭＣＴ１の対応する残基の１つ以上を含むもの、から選択されるヒトＭＣＴ１上のエピトープに結合する、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントであって、
任意に、前記エピトープ中に存在する前記残基が、アラニンスキャニングの使用によって同定される、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項８】
前記抗体または抗原結合フラグメントがさらに、以下の残基：
（ｉ）残基Ｐ３７、Ｉ４０、Ｋ４５、Ｅ４８、およびＴ５５の１つ以上（ループ１）、
（ｉｉ）残基Ｑ１１１（ループ２）、
（ｉｉｉ）残基Ｑ１６６（ループ３）、
（ｉｖ）残基Ｌ２８４、Ｅ２９６、Ｓ２９８の１つ以上（ループ４）、
（ｖ）残基Ｙ３５３（ループ５）、
（ｖｉ）残基Ｙ４１９、Ｔ４２２の一方もしくは両方（ループ６）、ならびに／または
（ｖｉｉ）上記の任意の組み合わせ、の１つ以上と相互作用する、請求項７に記載の選択されたヒトＭＣＴ１上のエピトープに結合する単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項９】
非ヒトＭＣＴ１上のエピトープに結合する、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントであって、非ヒトＭＣＴ１が任意に、げっ歯類（例えば、マウス、ラット、モルモット）、ウサギ、トリ（例えば、ニワトリ、シチメンチョウ、ガチョウ）、非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル、チンパンジー、オランウータン）、ウシ、ヒツジ、イヌ、ネコから選択され、任意に、非ヒトＭＣＴ１上の前記エピトープが、ヒトＭＣＴ１のＴ４１、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｇ４１７、Ｉ４７、およびＤ４１８の１つ以上として非ヒトＭＣＴ１中に対応する残基の１つ以上を含む、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１０】
例えば、インビトロおよび／またはインビボで、前記非ヒトＭＣＴ１の活性（複数可）の１つ以上に拮抗する、それを阻害する、または遮断する、請求項８または９に記載の単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１１】
ヒト、ヒト化、非ヒト霊長類、霊長類化、ニワトリ、げっ歯類、またはキメラである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１２】
例えば、インビトロおよび／またはインビボで、ヒトＭＣＴ１媒介性乳酸輸送を阻害する、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１３】
内因性ＭＣＴ１発現細胞に結合し、かつ／または組換えもしくは操作されたＭＣＴ１発現細胞、例えば、ヒトＭＣＴ１発現２９３細胞に結合する、請求項１〜１２のいずれかに記載の単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１４】
前記抗体またはその抗原結合フラグメントが、ヒトまたはヒト化モノクローナル抗体；単一特異性抗体；多特異性抗体；多重特異性抗体様ポリペプチド、ヒト化抗体；ヒトまたはヒト化四量体抗体；ヒトまたはヒト化四価抗体；ヒトまたはヒト化多重特異性抗体；一本鎖抗体；ドメイン特異性抗体；単一ドメイン抗体；ドメイン欠失抗体；ｓｃＦｃ融合タンパク質；キメラ抗体；合成抗体；組換え抗体；ハイブリッド抗体；多重特異性抗体、二重特異性抗体、ＢｙＴＥ、変異抗体；ＣＤＲグラフト化抗体；抗体フラグメント；Ｆａｂ；Ｆ（ａｂ′）２；Ｆａｂ′フラグメント；Ｆｖフラグメント；一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメント；Ｆｄフラグメント；ｄＡｂフラグメント；ダイアボディ；ナノボディ；二価ナノボディ；ＶＨＨ抗体；およびミニボディからなる群から選択される、請求項１〜１３のいずれかに記載の単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１５】
ヒト化抗体またはその抗原結合フラグメントである、請求項１〜１４のいずれかに記載の単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１６】
抗ＭＣＴ１抗体Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかの少なくとも１、２、３、４、５、または６つ全てのＣＤＲを含み、任意に、前記ＣＤＲが、Ｋａｂａｔに従って、またはＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋに従って定義される、請求項１〜１５のいずれかに記載の単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント、あるいはＭＣＴ１との結合を競合するか、または抗ＭＣＴ１抗体Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかもしくは上記のいずれかの親和性成熟変異体と同じエピトープに結合する、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１７】
抗ＭＣＴ１抗体Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかの同じＣＤＲを含み、任意に、前記ＣＤＲが、Ｋａｂａｔに従って、またはＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋに従って定義される、請求項１〜１６のいずれかに記載のヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項１８】
Ａｂ１〜Ａｂ９５から選択される抗ＭＣＴ１抗体またはそのヒト化変異体に含まれるのと同じＶＨポリペプチドを含む、請求項１〜１７のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項１９】
Ａｂ１〜Ａｂ９５から選択される抗ＭＣＴ１抗体またはそのヒト化変異体に含まれるのと同じＶＬポリペプチドを含む、請求項１〜１８のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項２０】
Ａｂ１〜Ａｂ９５から選択される抗ＭＣＴ１抗体またはそのヒト化変異体に含まれるのと同一であるＶＨポリペプチドおよびＶＬポリペプチドを含む、請求項１〜１９のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項２１】
抗ＭＣＴ１抗体Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかに含まれる可変重鎖ポリペプチドおよび／または可変軽鎖ポリペプチドに対して少なくとも８０、９０、９５、９６、９７、９８、９９、または１００％の配列同一性をそれぞれ有する、可変重鎖ポリペプチドおよび／または可変軽鎖ポリペプチドを含む、請求項１〜２０のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項２２】
配列番号４〜６のアミノ酸配列をそれぞれ有するＶＨ  ＣＤＲ１、２、および３ポリペプチド、ならびに配列番号７〜９のアミノ酸配列をそれぞれ有するＶＬ  ＣＤＲ１、２、および３ポリペプチドを含む、請求項１〜２１のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項２３】
任意に、Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかと同じＣＤＲを含み、任意に、前記ＣＤＲが、Ｋａｂａｔに従って、またはＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋに従って定義される、Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかに由来するヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項２４】
Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかに由来する親和性成熟抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントであって、最大でも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２または１３個のＣＤＲ残基が、Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれか１つの６つのＣＤＲポリペプチドに含まれるＣＤＲ残基に対して変異し、任意に、前記親和性成熟抗ＭＣＴ１抗体が、それが由来する抗ＭＣＴ１抗体と少なくとも同じもしくはそれを超える親和性でヒトＭＣＴ１に結合し、かつ／または前記親和性成熟抗体もしくは抗原結合フラグメントが、例えば、インビボおよび／またはインビボで、ヒトＭＣＴ１に拮抗し、任意に、前記ＣＤＲが、Ｋａｂａｔに従って、またはＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋに従って定義される、Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかに由来する親和性成熟抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項２５】
最大でも１、２、３、４、５、６、または７つのＣＤＲ残基が、Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれか１つのＣＤＲポリペプチドに対して変異している、請求項２４に記載の親和性成熟抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントまたは抗原結合フラグメント。
【請求項２６】
最大でも１、２、３、または４つのＣＤＲ残基が、Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれか１つのＣＤＲポリペプチドに対して変異している、請求項２４に記載の親和性成熟抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントまたは抗原結合フラグメント。
【請求項２７】
最大でも１つまたは２つのＣＤＲ残基が、Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれか１つのＣＤＲポリペプチドに対して変異している、請求項２４に記載の親和性成熟抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントまたは抗原結合フラグメント。
【請求項２８】
非ヒトＭＣＴ１、任意にげっ歯類、ウサギ、ニワトリ、または非ヒト霊長類ＭＣＴ１にさらに結合する、請求項１〜２７のいずれかに記載の抗ヒトＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項２９】
配列番号２および３、配列番号１２および１３、配列番号１４および１５、配列番号１６および１７のＶＨおよびＶＬポリペプチドを含む、抗ＭＣＴ１抗体、あるいは抗体Ａｂ５〜Ａｂ９５の１つのいずれかのＶＬおよび／もしくはＶＨポリペプチドを含むか、または抗体Ａｂ５〜Ａｂ９５の１つのいずれかのＶＬおよび／もしくはＶＨポリペプチドのヒト化もしくは親和性成熟変異体を含む、抗ＭＣＴ１抗体。
【請求項３０】
配列番号２、１２、１４、１６、１９〜３２、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０３、１０５、１０７、１０９、１１１、１１３、１１５、１１７、１１９、１２１、１２３、１２５、１２７、１２９、１３１、１３３、１３５、１３７、１３９、１４１、１４３、１４５、１４７、１４９、１５１、１５３、および１５５から選択されるアミノ酸配列を有する可変重鎖ポリペプチドまたは重鎖ポリペプチド、ならびに配列番号３、１３、１５、１７、３３〜４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、１４８、１５０、１５２、１５４、および１５６から選択されるアミノ酸配列を有する可変軽鎖ポリペプチドまたは軽鎖ポリペプチドを含む、抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項３１】
以下：配列番号２および３、配列番号１２および１３、配列番号１４および１５、配列番号１６および１７、配列番号４５および４６、配列番号４７および４８、配列番号４９および５０、配列番号５１および５２、配列番号５３および５４、配列番号５５および５６、配列番号５７および５８、配列番号５９および６０、配列番号６１および６２、配列番号６３および６４、配列番号６５および６６、配列番号６７および６８、配列番号６９および７０、配列番号７１および７２、配列番号７３および７４、配列番号７５および７６、配列番号７７および７８、配列番号７９および８０、配列番号８１および８２、配列番号８３および８４、配列番号８５および８６、配列番号８７および８８、配列番号８９および９０、配列番号９１および９２、配列番号９３および９４、配列番号９５および９６、配列番号９７および９８、配列番号９９および１００、配列番号１０１および１０２、配列番号１０３および１０４、配列番号１０５および１０６、配列番号１０７および１０８、配列番号１０９および１１０、配列番号１１１および１１２、配列番号１１３および１１４、配列番号１１５および１１６、配列番号１１７および１１８、配列番号１１９および１２０、配列番号１２１および１２２、配列番号１２３および１２４、配列番号１２５および１２６、配列番号１２７および１２８、配列番号１２９および１３０、配列番号１３１および１３２、配列番号１３３および１３４、配列番号１３５および１３６、配列番号１３７および１３８、配列番号１３９および１４０、配列番号１４１および１４２、配列番号１４３および１４４、配列番号１４５および１４６、配列番号１４７および１４８、配列番号１４９および１５０、配列番号１５１および１５２、配列番号１５３および１５４、ならびに配列番号１５５および１５６からそれぞれ選択されるアミノ酸配列を有する可変重鎖ポリペプチドおよび可変軽鎖ポリペプチドを含む、抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項３２】
配列番号３、１３、１５、１７、および３３〜４４のもの、または抗体Ａｂ５〜Ａｂ６０のいずれかのものから選択されるアミノ酸配列を有するＶＬポリペプチドを含む、請求項１〜３１のいずれかに記載のヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項３３】
配列番号２、１２、１４、１６、および１９〜３２のもの、または抗体Ａｂ５〜Ａｂ６０のいずれかのものから選択されるアミノ酸配列を有するＶＨポリペプチドを含む、請求項１〜３２のいずれかに記載のヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項３４】
配列番号１３、１５、１７、および３３〜４４のものから選択されるアミノ酸配列を有するＶＬポリペプチド、ならびに配列番号１２、１４、１６、および１９〜３２のもの、または抗体Ａｂ５〜Ａｂ６０のいずれかのものから選択されるアミノ酸配列を有するＶＨポリペプチドを含む、請求項１〜３３のいずれかに記載のヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項３５】
配列番号３、１３、１５、１７、３３〜４４のいずれかに対して少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を有するＶＬポリペプチド、または抗体Ａｂ５〜Ａｂ９５のいずれかに含まれるＶＬポリペプチドを含む、請求項１〜３４のいずれかに記載のヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項３６】
配列番号２、１２、１４、１６、１９〜３２のいずれかに対して少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９％、もしくは１００％の配列同一性を有する配列を有するＶＨポリペプチド、または抗体Ａｂ５〜Ａｂ９５のいずれかに含まれるＶＨポリペプチドを含む、請求項１〜３５のいずれかに記載のヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項３７】
配列番号３、１３、１５、１７、３３〜４４のいずれかに対して少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を有するＶＬポリペプチド、または抗体Ａｂ５〜Ａｂ９５のいずれかに含まれるＶＬポリペプチド、および／あるいは配列番号２、１２、１４、１６、１９〜３２のＶＨポリペプチドに対して少なくとも９０、９５、９６、９７、９８、９９％、もしくは１００％の配列同一性を有する配列を有するＶＨポリペプチド、または抗体Ａｂ５〜Ａｂ９５のいずれかに含まれるＶＨポリペプチドを含む、請求項１〜３６のいずれかに記載のヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項３８】
前記重鎖ＣＤＲ３配列が、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４個のアミノ酸残基を含む、請求項１〜３７のいずれかに記載のヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項３９】
前記重鎖ＣＤＲ３配列が、２１、２２、２３、または２４個のアミノ酸残基を含む、請求項１〜３８のいずれかに記載のヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項４０】
前記重鎖ＣＤＲ３配列が、配列番号６と同一であるか、またはそれから最大でも５、４、３、２、もしくは１つの残基だけ異なり、任意に、前記差異が、存在する場合、保存的アミノ酸置換を含むか、または同じ長さのＣＤＲ３を含むヒトもしくはげっ歯類抗体の重鎖ＣＤＲ３の同じ位置でよく見られる置換アミノ酸を含む、請求項１〜３９のいずれかに記載の単離された抗ＭＣＴ１ヒトまたは抗原結合フラグメント。
【請求項４１】
ＭＣＴ１への結合を参照抗体と競合し、前記参照抗体が、Ａｂ１〜Ａｂ９５から選択される、請求項１〜４０のいずれかに記載の単離された抗ＭＣＴ１ヒトもしくはヒト化抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項４２】
Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかと同じＣＤＲを含み、かつ／またはＡｂ１〜Ａｂ９５から選択される抗ヒトＭＣＴ１抗体と同じ可変重および／もしくは可変軽ＣＤＲポリペプチドを含む、抗ヒトＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項４３】
Ａｂ１〜Ａｂ９５から選択される抗体の可変重および／または軽ポリペプチドを含む、抗ＭＣＴ１抗体。
【請求項４４】
重鎖および／または軽鎖定常領域、任意にヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４の重鎖および／または軽鎖定常領域を含み、その定常領域（複数可）が任意に、変異されて、少なくとも１つのエフェクター機能を損なうかまたは増強する、請求項１〜４３のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１ヒトもしくはヒト化抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項４５】
前記エフェクター機能が、ＦｃＲ結合、補体結合、ＡＤＣＣ機能、ＦｃＲＮ結合、およびグリコシル化を含む、請求項４４に記載の抗ＭＣＴ１抗体。
【請求項４６】
前記抗体またはその抗原結合フラグメントの前記ＣＤＲが、構造アライメントによって決定したときに２．０Å未満、１．０Å未満、または０．５Å未満の二乗平均偏差（ＲＭＳＤ）だけ異なる対応するＣＤＲのアルファ炭素の位置によって示されるように、Ａｂ１のものと同様のまたは同じ、同様の三次元抗体構造を形成する、請求項１〜４５のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項４７】
Ａｂ１の可変重鎖ＣＤＲ配列（配列番号４、５、６）およびＡｂ１の可変軽鎖ＣＤＲ配列（配列番号７、８、９）を含む、ヒト化抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項４８】
ＭＣＴ１  Ａｂ１のＶＨドメインのアミノ酸配列（配列番号２）に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＨドメインを含み、かつＭＣＴ１  Ａｂ１のＶＬドメインのアミノ酸配列（配列番号３）に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＬドメインを含む、抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項４９】
グリコシル化、ＦｃＲ結合、ＦｃＲＮ結合、補体結合、およびＡＤＣＣ機能から選択される少なくとも１つのＦｃエフェクター機能を増強するためにさらに任意に修飾された、ヒト定常ドメイン、任意にＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４を含む、請求項１〜４８のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項５０】
ＦｃＲ結合および／または補体結合を減少させるように任意に修飾されたヒトＩｇＧ１定常領域を含み、Ｅ２６９Ｒおよび／もしくはＫ３２２Ａ変異をさらに任意に含み、かつ／または前記ヒトＩｇＧ１定常領域が、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、請求項１〜４９のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項５１】
請求項１〜５０のいずれかに記載の少なくとも１つの抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントを含む、融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド。
【請求項５２】
エフェクターＴ細胞活性および／またはエフェクターＴ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、またはＣＤ８＋  エフェクターＴ細胞の数を減少させる、請求項１〜５１のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体、融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド。
【請求項５３】
Ｔｒ１細胞の活性および／または数を増加させる、請求項１〜５２のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体、融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド。
【請求項５４】
エフェクターＴ細胞活性および／またはエフェクターＴ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、またはＣＤ８＋  エフェクターＴ細胞の数を減少させ、さらに、Ｔｒ１細胞の活性および／または数を増加させる、請求項１〜５３のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体、融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド。
【請求項５５】
請求項１〜５４のいずれかに記載の少なくとも１つの抗ＭＣＴ１抗体もしくは抗原結合フラグメント、融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチドを発現する、細胞。
【請求項５６】
ヒト、非ヒト哺乳動物、酵母、細菌、両生類、植物、昆虫、または爬虫類の細胞を含む、請求項５５に記載の細胞。
【請求項５７】
ヒト細胞、任意にヒト免疫細胞、例えば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、単球、制御性Ｔ細胞、またはマクロファージを含む、請求項５５に記載の細胞。
【請求項５８】
任意に、ヒト、ヒト化、および／または親和性成熟である、請求項１〜５７のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントに対して産生された、抗イディオタイプ抗体。
【請求項５９】
ＭＣＴ１に結合する、請求項５８に記載の抗イディオタイプ抗体に対して産生された、抗抗イディオタイプ抗体。
【請求項６０】
１つ以上のＭＣＴ１活性を遮断する、またはそれに拮抗する、請求項５９に記載の抗抗イディオタイプ抗体。
【請求項６１】
請求項１〜６０のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または配列番号６のＶＨ  ＣＤＲ３ポリペプチド、あるいはそれと少なくとも８０％の配列同一性を有する変異体であって、別のポリペプチド、例えば、抗体ポリペプチドもしくは抗体ドメイン、血清アルブミン、ヒトもしくは他の霊長類血清アルブミン、アドネクチン、アフィボディ、ＤＡＲＰｉｎ、アンチカリン、グリコール（ＰＥＧ）、モノメトキシＰＥＧ（ｍＰＥＧ）、ＸＴＥＮ分子、ｒＰＥＧ分子、または上記のいずれかのフラグメントもしくは変異体に直接または間接的に結合した変異体を含む、融合タンパク質。
【請求項６２】
前記抗体ポリペプチドまたはドメインが、Ｆｃポリペプチドまたはそのフラグメント、例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、もしくはＩｇＧ４のＦｃ領域またはそのフラグメントを含む、請求項６１に記載の融合タンパク質。
【請求項６３】
細胞、例えば、活性化Ｔ細胞またはＢ細胞、さらに任意にヒト細胞の表面上のＭＣＴ１に結合すると、以下の特性：
（ｉ）乳酸の輸送を阻害する、
（ｉｉ）ブロモピルビン酸の輸送を阻害する、
（ｉｉｉ）モノカルボン酸、ピルビン酸、ロイシン、バリンおよびイソロイシンに由来する分岐鎖オキソ酸、ケトン体、アセト酢酸、ベータ−ヒドロキシ酪酸、酢酸、乳酸、細胞栄養素、代謝産物、イオン、ホルモン、脂質、およびケトンのうちの１つまたはそれ以上の輸送を阻害する、
（ｉｖ）ＣＤ３／ＣＤ２８刺激Ｔ細胞の増殖を阻害する、
（ｖ）前記活性化Ｔ細胞もしくはＢ細胞の増殖を阻害する、
（ｖｉ）１つ以上の炎症性サイトカインの産生を阻害する、
（ｖｉｉ）エフェクターＴ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、および／もしくはＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の活性および／もしくは数を減少させる、
（ｖｉｉｉ）制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の割合もしくは活性を増加させる、
（ｉｘ）混合リンパ球反応における同種異系活性化を阻害する、
（ｘ）または上記のいずれかの組み合わせ
の１つまたはそれ以上を引き起こす、請求項１〜６２のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは請求項１〜６２のいずれかに記載の上記のいずれかを発現する細胞。
【請求項６４】
ＭＣＴ１に結合すると１つ以上の炎症性サイトカインの産生を阻害する、請求項１〜６３のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは例えば、請求項１〜６３のいずれかに記載の上記のいずれかを発現する細胞。
【請求項６５】
前記１つ以上の炎症性サイトカインの少なくとも１つが、ＦＧＦ２、ＦＬＴ−３Ｌ、フラクタルカイン（Ｆｒａｃｔｉｌｋｉｎｅ）、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＧＲＯ、ＩＦＮα２、ＩＦＮγ、ＩＬ−３、ＩＬ−５、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２ｐ４０、ＩＬ−１２ｐ７０、ＩＬ−１３、ＩＬ−１７ａ、ＩＰ−１０、ＭＣＰ−１、ＭＤＣ、ＭＩＰ−１ａ、ＭＩＰ−１ｂ、ｓＣＤ４０Ｌ、ＴＮＦα、およびＴＮＦβから選択される、請求項１〜６４のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは請求項６４に記載の上記のいずれかを発現する細胞。
【請求項６６】
前記１つ以上の炎症性サイトカインの少なくとも１つが、ＩＦＮγ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、ＩＬ−１０、およびＩＬ−６から選択される、請求項１〜６５のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは請求項６４または６５に記載の上記のいずれかを発現する細胞。
【請求項６７】
乳酸ＦＬＩＰＲアッセイによって測定したときに１００ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、または１０ｎＭ未満のＫｄを有する活性化Ｔ細胞におけるＭＣＴ１媒介性乳酸輸送を阻害する、請求項１〜６６のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞。
【請求項６８】
（ｉ）フローサイトメトリーによって測定したときにＭＣＴ２、ＭＣＴ３、ＭＣＴ４、および／またはＣＤ１４７に結合しない、
（ｉｉ）ＭＣＴ２、ＭＣＴ３、および／またはＭＣＴ４輸送を阻害しない、
（ｉｉｉ）ＩＬ−２の産生を阻害しない、
（ｉｖ）単球における乳酸輸送を阻害しない、
（ｖ）未感作、静止、および／または制御性Ｔ細胞の増殖を阻害しない、
（ｖｉ）ＲＢＣにおける乳酸輸送を阻害しない、
（ｖｉｉ）ＣＤ２５、ＣＤ５４、ＣＤ６９、ＣＤ９５、ＣＤ９８、ＣＤ１４７、ＣＤ１５４、ＣＤ２７８、ＣＤ２７９、およびＨＬＡ−ＤＲ／ＤＰ／ＤＱから任意に選択される、１つ以上のＴ細胞活性化マーカーの発現を改変しない、請求項１〜６７のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞。
【請求項６９】
ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４のＦｃ領域、任意に、エフェクター機能、半減期、タンパク質分解、またはグリコシル化の少なくとも１つを改変するように修飾されたＦｃ領域を含み、任意に、前記Ｆｃ領域が、Ｎ−および／またはＯ−グリコシル化を改変または排除する１つ以上の変異を含む、請求項１〜６８のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞。
【請求項７０】
１００ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、または１０ｎＭ未満の親和性（ＫＤ）を有するヒトＭＣＴ１に結合する、請求項１〜６９のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞。
【請求項７１】
加えて、以下の修飾：
（ｉ）細胞毒性薬に共役される、
（ｉｉ）二重特異性抗体に含まれる、
（ｉｉｉ）多重特異性抗原結合タンパク質に含まれる、
（ｉｖ）標識に共役される、および
（ｖ）別の治療薬、任意に、免疫抑制薬または化学療法薬に共役される、の１つ以上を有する、請求項１〜７０のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞。
【請求項７２】
前記標識が、化学発光標識、常磁性標識、ＭＲＩ造影剤、蛍光標識、生物発光標識、もしくは放射性標識であるか、または細胞毒性薬が、ＤＮＡ、ＲＮＡ、もしくはタンパク質合成を阻害する部分；放射性核種；またはリボソーム阻害タンパク質である、請求項１〜７１のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞。
【請求項７３】
自己免疫、炎症、またはアレルギー状態；代謝障害（例えば、糖尿病）、多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）、癌；移植レシピエントもしくはＥＩＨＩ、または任意の他の状態を有するヒト対象の治療に適しており、エフェクターＴ細胞の数および／もしくは活性、例えば、ＣＤ３＋  Ｔ細胞、ＣＤ４＋  Ｔ細胞、および／もしくはＣＤ８＋  Ｔ細胞の減少、ならびに／またはＴｒ１もしくはサプレッサーＴ細胞の活性および／もしくは数の増加が、治療的に望ましい、請求項１〜７２のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞。
【請求項７４】
任意に、それが結合する抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントの１つ以上の生物学的効果を中和する、請求項１〜７３のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントに対して産生された、抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項７５】
請求項７４に記載の抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合フラグメントに対して産生された、抗抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合フラグメントであって、任意に、それが結合する前記抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合フラグメントを中和する、抗抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項７６】
対象における前記抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメントのインビボレベルを監視するか、または対象における前記抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメントのインビボ効果を中和するための、請求項７４に記載の抗イディオタイプ抗体を使用する方法。
【請求項７７】
請求項１〜７６のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは抗抗ＭＣＴ１抗体もしくは抗原結合フラグメント、または抗抗ＭＣＴ１抗体もしくは抗原結合フラグメントをコードする、ポリヌクレオチド。
【請求項７８】
請求項７７に記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
【請求項７９】
請求項７７に記載のポリヌクレオチドまたは請求項７８に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞、任意にヒト免疫細胞、例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、またはＮＫ細胞。
【請求項８０】
有効量の、請求項１〜７９のいずれか一項に記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは抗抗ＭＣＴ１抗体もしくは抗原結合フラグメント、または抗抗ＭＣＴ１抗体もしくは抗原結合フラグメント、あるいは上記のいずれかを発現する細胞を含む、医薬組成物または診断用組成物。
【請求項８１】
ヒトまたは非ヒトの療法または予防法での使用に適している、請求項８０に記載の医薬組成物。
【請求項８２】
単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを産生する方法であって、前記抗体またはその抗原結合フラグメントの発現を可能にする条件下で、請求項７９に記載の宿主細胞を培養することと、前記培養培地または宿主細胞から前記抗体またはその抗原結合フラグメントを回収することと、を含む、方法。
【請求項８３】
薬学的有効量の、請求項１〜８２のいずれか一項に記載の単離された抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、抗イディオタイプ抗体、融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞を含む、医薬組成物。
【請求項８４】
薬学的希釈剤、担体、または賦形剤をさらに含む、請求項８３に記載の医薬組成物。
【請求項８５】
別の治療薬を含む、請求項８３または８４に記載の医薬組成物。
【請求項８６】
前記他の治療薬が、ミトコンドリア阻害剤、および／またはビグアニド、および／または別のモノカルボン酸輸送体（ＭＣＴ阻害剤）、例えば、ＳＬＣ１６Ａ１、ＳＬＣ１６Ａ２、ＳＬＣ１６Ａ３、ＳＬＣ１６Ａ４、ＳＬＣ１６Ａ５、ＳＬＣ１６Ａ６、ＳＬＣ１６Ａ７、ＳＬＣ１６Ａ８、ＳＬＣ１６Ａ９、ＳＬＣ１６Ａ１０、ＳＬＣ１６Ａ１１、ＳＬＣ１６Ａ１２、ＳＬＣ１６Ａ１３、もしくはＳＬＣ１６Ａ１４阻害剤、またはＭＣＴ１、ＭＣＴ２、ＭＣＴ３、ＭＣＴ４、ＭＣＴ５、ＭＣＴ６、ＭＣＴ７、ＭＣＴ８、ＭＣＴ９、もしくはＭＣＴ１０阻害剤であり、前記阻害剤が、上記のトランスポーターの１つ以上を阻害し、さらに前記阻害剤が任意に、小分子、ＲＮＡｉ、抗体、抗体フラグメント、または融合タンパク質を含む、請求項８５に記載の医薬組成物。
【請求項８７】
前記他の活性剤が、メトホルミン、フェンホルミン、アレクシジン、ビスビグアニド、ブホルミム、クロロヘキシジン、クロルプログアニル、フェニルビグアニド、ポリアミノプロピルビグアニド、ポリヘキサニド、モロキシジン、グリピジド、グリブリド、レパグリニド、サクサグリプチン、シタグリプチン、パモ酸ピルビニウム（Ｐｙｒｖｉｎｕｍ  Ｐａｍｏａｔｅ）、プログアニル、ドキシサイクリン、アトバクオン、カナグリフロジン、グリタゾン（例えば、トログリタゾン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン）、チゲサイクリン、チアゾリド（例えば、ニタゾキサニド）、サリチルアニリド（例えば、クロサンテル、オキシクロザニド、ニクロサミド）、ペルヘキシリン、プロプロノロール、フェノフィブラート、ミコナゾール、ネファゾドン、ペンタミジン、ヒドロコルチゾンヒドロコルチゾン、メタヨードベンジルグアニジン、ロニダミン、アルファトコフェリルスクシネート（一次形態のビタミンＥ）、炭酸脱水酵素、ＭＥ３４４（ＭＥＩ  Ｐｈａｒｍａ）、ＨＩＦ１ａ阻害剤（例えば、クリシン、ケトミン、ジメチル−ビスフェノールＡ、ＢＡＹ８４−２２４３）、ＳＲ１３８００、ジメチルオキサロイルグリシン（ＤＭＯＧ）、カルボニルシアニドｐ−トリフルオロメトキシフェニルヒドラゾン（ＦＣＣＰ）、カルボニルシアニドｍ−クロロフェニルヒドラゾン（ＣＣＣＰ）、アンチマイシンＡ、オリゴマイシン、サリノマイシン、ジニトロフェノール、ロテノン、フェンホルミン、チルホスチン９、アトペニンＡ５、ベルベリン、アジド、シアン化物、亜酸化窒素、三酸化ヒ素、ピルビニウム、カナグリフロジン、ロシグリタゾン、アモバルビタール、ホノキオール、アルクチゲニン、コーヒー酸フェニルエステル、ペルフェナジン（Ｐｅｒｈｅｎａｚｉｎｅ）、トリフルオペラジン（Ｔｒｉｆｌｏｕｒｏｐｅｒａｚｉｎｅ）、メチルグリオキサール、および上記のいずれかを含む組み合わせから選択される、請求項８５または８６に記載の医薬組成物。
【請求項８８】
エフェクターＴ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、および／またはＣＤ８＋  エフェクターＴ細胞の活性および／または数を阻害することを、それを必要としている対象において行うための方法であって、請求項１〜８７のいずれかに記載の、治療または予防有効量の、抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の少なくとも１つを発現する細胞、あるいは治療または予防有効量の上記のいずれかを含有する医薬組成物を、前記対象に投与することを含む、方法。
【請求項８９】
サプレッサーＴまたはＴｒ１細胞の活性および／または数を増加させることを、それを必要としている対象において行うための方法であって、治療または予防有効量の、請求項１〜８８のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の少なくとも１つを発現する細胞、あるいは治療または予防有効量の上記のいずれかを含有する医薬組成物を、前記対象に投与することを含む、方法。
【請求項９０】
エフェクターＴ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、および／またはＣＤ８＋  エフェクターＴ細胞の活性および／または数を阻害し、かつサプレッサーＴまたはＴｒ１細胞の活性および／または数を増加させることを、それを必要としている対象において行うための方法であって、治療または予防有効量の、請求項１〜８９のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の少なくとも１つを発現する細胞、あるいは治療または予防有効量の上記のいずれかを含有する医薬組成物を、前記対象に投与することを含む、方法。
【請求項９１】
前記対象が、エフェクターＴ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、もしくはＣＤ８＋の活性の増加、および／またはサプレッサーＴもしくはＴｒ１活性の減少、および／またはサプレッサーＴもしくはＴｒ１細胞数の減少を特徴とする、自己免疫状態、アレルギー状態、炎症状態、代謝障害、癌、移植レシピエント、細胞療法レシピエント、ＥＩＨＩ状態、多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）を有する、請求項８８〜９０に記載の方法。
【請求項９２】
自己免疫状態、アレルギー状態、炎症状態、代謝障害、癌、移植レシピエント、細胞療法レシピエント、ＥＩＨＩ状態、多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）、または前記状態のいずれかに関連する症状を予防または治療するための方法であって、治療または予防有効量の、請求項１〜９１のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の少なくとも１つを発現する細胞、あるいは治療または予防有効量の上記のいずれかを含有する医薬組成物を、それを必要としている対象に投与することを含む、方法。
【請求項９３】
自己免疫状態、アレルギー状態、炎症状態、代謝障害、癌、移植レシピエント、細胞療法レシピエント、ＥＩＨＩ状態、多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）が、エフェクターＴ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、もしくはＣＤ８＋の活性の増加、および／またはサプレッサーＴもしくはＴｒ１活性の減少、および／またはサプレッサーＴもしくはＴｒ１細胞数の減少を特徴とする、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
前記代謝障害が、ダノン病、真性糖尿病、ガラクトース血症異型、ＭＤＰ症候群、代謝性ミオパシー、メチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素欠損症、ウィンチェスター症候群、サリチル酸感受性、Ｘ連鎖性低リン血症、アルコール性ケトアシドーシス、アルコール紅潮反応、アルファ−アミノアジピン酸およびアルファ−ケトアジピン酸性尿症、高アニオンギャップ代謝性アシドーシス、痛風、リフィーディング症候群、運動関連低ナトリウム血症、膵炎、黄色脂肪症、およびＭｅｔａｂ−Ｌを含む、請求項９２、９３、または９４に記載の方法。
【請求項９５】
前記状態が、活性化Ｔ細胞もしくはＢ細胞および／またはＭＣＴ１発現細胞によって少なくとも部分的に媒介される、請求項８８〜９４に記載の方法。
【請求項９６】
前記抗体もしくはその抗原結合フラグメントまたは融合タンパク質の投与が、以下の効果：
（ｉ）活性化Ｔ細胞またはＢ細胞における乳酸輸送を阻害する、
（ｉｉ）活性化Ｔ細胞またはＢ細胞におけるブロモピルビン酸毒素の輸送を阻害する、
（ｉｉｉ）ＣＤ３／ＣＤ２８刺激Ｔ細胞の増殖を阻害する、
（ｉｖ）活性化Ｔ細胞の増殖を阻害する、
（ｖ）１つ以上の炎症性サイトカインの産生および／または分泌を阻害する、
（ｖｉ）ＩＬ−２の産生および／または分泌を阻害しない、
（ｖｉｉ）尿中ケトンの産生を増加させる、
（ｖｉｉｉ）生存期間を延長する、
（ｉｘ）移植片拒絶を減少させる、
（ｘ）制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の割合または活性を増加させる、
（ｘｉ）ＴｒｅｇであるＣＤ４＋  Ｔ細胞の割合を増加させる、
（ｘｉｉ）ＩｇＧ１＋  Ｂ細胞の割合を減少させる、
（ｘｉｉｉ）胚中心Ｂ細胞の割合を減少させる、
（ｘｉｖ）ヒトＲＢＣ中の乳酸輸送を阻害しない、
（ｘｖ）Ｔ細胞活性化を減少させる、ならびに
（ｘｖｉ）細胞傷害性Ｔ細胞活性を減少させる、の１つ以上を有する、請求項８８〜９５のいずれかに記載の方法。
【請求項９７】
狼瘡、移植片拒絶、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、１型もしくは２型糖尿病、または肥満症の少なくとも１つを治療または予防するために使用される、請求項８８〜９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９８】
治療有効性が、尿中ケトンの測定、ＴＲ１細胞数の増加、炎症性サイトカイン、ＩＦＮγ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、ＩＬ−１０、ＩＬ−６、ＩＬ−２、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ１、グランザイムＢから選択されるバイオマーカーの発現の減少もしくは増加、エフェクターＴ細胞および／もしくはｈＣＤ３＋細胞数の減少、ＰＭＢＣ増殖の抑制、または上記のいずれかの組み合わせによって監視される、請求項８８〜９７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９９】
抗ＭＣＴ１アンタゴニスト抗体の治療有効性を評価する方法であって、上記：尿中ケトン、ＴＲ１細胞数、炎症性サイトカイン、ＩＦＮγ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、ＩＬ−１０、ＩＬ−６、ＩＬ−２、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ１、グランザイムＢから選択されるバイオマーカーの発現、エフェクターＴ細胞および／もしくはｈＣＤ３＋細胞数の減少、ＰＭＢＣ増殖の抑制、または上記のいずれかの組み合わせ、のいずれかに対するインビトロまたはインビボでのその効果を検出することを含む、方法。
【請求項１００】
癌を治療する、またはその再発を予防するための方法であって、治療または予防有効量の、請求項１〜９９のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の少なくとも１つを発現する細胞、あるいは治療または予防有効量の上記のいずれかを含有する医薬組成物を、それを必要としている対象に投与することを含む、方法。
【請求項１０１】
前記腫瘍細胞が、ＭＣＴ１を発現する、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０２】
前記対象が、哺乳動物である、請求項８８〜１０１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０３】
前記哺乳動物が、ヒト、非ヒト霊長類、またはげっ歯類である、請求項１０２に記載の方法。
【請求項１０４】
活性化Ｔ細胞またはＢ細胞を阻害する、またはその活性を低減するための方法であって、前記活性化細胞を、請求項１〜１０３のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の少なくとも１つを発現する細胞と接触させることを含む、方法。
【請求項１０５】
請求項１〜１０４のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の少なくとも１つを発現する細胞が、単剤療法として投与される、請求項８８〜１０４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０６】
請求項１〜１０５のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の少なくとも１つを発現する細胞が、第２の治療薬と組み合わせて投与される、請求項８８〜１０５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０７】
前記治療薬が、免疫抑制薬、化学療法薬、ビグアニド、例えば、メトホルミンもしくは別の抗糖尿病薬、または抗炎症薬から選択される、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１０８】
前記他の治療薬が、ミトコンドリア阻害剤および／またはビグアニドである、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１０９】
前記他の治療薬が、メトホルミン、フェンホルミン、アレクシジン、ビスビグアニド、ブホルミム、クロロヘキシジン、クロルプログアニル、フェニルビグアニド、ポリアミノプロピルビグアニド、ポリヘキサニド、モロキシジン、グリピジド、グリブリド、レパグリニド、サクサグリプチン、シタグリプチン、パモ酸ピルビニウム、プログアニル、ドキシサイクリン、アトバクオン、カナグリフロジン、グリタゾン（例えば、トログリタゾン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン）、チゲサイクリン、チアゾリド（例えば、ニタゾキサニド）、サリチルアニリド（例えば、クロサンテル、オキシクロザニド、ニクロサミド）、ペルヘキシリン、プロプロノロール、フェノフィブラート、ミコナゾール、ネファゾドン、ペンタミジン、ヒドロコルチゾン、メタヨードベンジルグアニジン、ロニダミン、アルファトコフェリルスクシネート（一次形態のビタミンＥ）、炭酸脱水酵素、ＭＥ３４４（ＭＥＩ  Ｐｈａｒｍａ）、ＨＩＦ１ａ阻害剤（例えば、クリシン、ケトミン、ジメチル−ビスフェノールＡ、ＢＡＹ８４−２２４３）、ＳＲ１３８００、ジメチルオキサロイルグリシン（ＤＭＯＧ）、カルボニルシアニドｐ−トリフルオロメトキシフェニルヒドラゾン（ＦＣＣＰ）、カルボニルシアニドｍ−クロロフェニルヒドラゾン（ＣＣＣＰ）、アンチマイシンＡ、オリゴマイシン、サリノマイシン、ジニトロフェノール、ロテノン、フェンホルミン、チルホスチン９、アトペニンＡ５、ベルベリン、アジド、シアン化物、亜酸化窒素、三酸化ヒ素、ピルビニウム、カナグリフロジン、ロシグリタゾン、アモバルビタール、ホノキオール、アルクチゲニン、コーヒー酸フェニルエステル、ペルフェナジン、トリフルオペラジン、メチルグリオキサール、および上記のいずれかを含む組み合わせから選択される、請求項１０６〜１０８のいずれかに記載の方法。
【請求項１１０】
前記抗体、その抗原結合フラグメント、融合タンパク質、または医薬組成物が、経腸的、非経口的、または局所的に投与される、請求項８８〜１０９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１１】
ＭＣＴ１に結合し、ＭＣＴ１媒介性乳酸輸送を低減する抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質による治療の有効性を監視するための方法であって、尿中ケトンのレベルを測定することを含む、方法。
【請求項１１２】
自己免疫、炎症、もしくはアレルギー状態；癌；ＥＩＨＩ；多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）；糖尿病もしくは他の代謝障害、および／またはＭＣＴ１の上方制御に関連する状態から選択される状態を診断するための方法であって、前記方法が、
（ｉ）前記状態の媒介に関与する細胞を単離することと、
（ｉｉ）前記細胞を、抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、またはＭＣＴ１結合融合タンパク質と接触させることと、
（ｉｉｉ）前記細胞に結合した抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、またはＭＣＴ１結合融合タンパク質のレベルを検出することと、を含む、方法。
【請求項１１３】
前記状態が、自己免疫、炎症、移植、ＧＶＨＤ、代謝障害（例えば、糖尿病）、ＥＩＨＩ；多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）；またはアレルギー状態である、請求項１１１または１１２に記載の方法。
【請求項１１４】
前記状態が、自己免疫、炎症、移植、ＧＶＨＤ、代謝障害（例えば、糖尿病）、多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）、またはアレルギー状態であり、前記細胞が、活性化Ｔ細胞またはＢ細胞である、請求項１１２に記載の方法。
【請求項１１５】
前記状態が、癌であり、前記細胞が、腫瘍細胞である、請求項１１２に記載の方法。
【請求項１１６】
前記状態が、ＥＩＨＩであり、前記細胞が、ベータ細胞である、請求項１１２に記載の方法。
【請求項１１７】
前記抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、またはＭＣＴ１結合融合タンパク質が、以下：
（ｉ）Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかから選択される抗ＭＣＴ１抗体、または上記の抗ＭＣＴ１抗体のいずれかと同じＣＤＲを含む別の抗ＭＣＴ１抗体と競合する、
（ｉｉ）Ａｂ１〜Ａｂ９５から選択される抗ヒトＭＣＴ１抗体と同じＣＤＲを含む、
（ｉｉｉ）Ａｂ１〜Ａｂ９５から選択される抗ヒトＭＣＴ１抗体の親和性成熟またはヒト化変異体を含む、
（ｉｖ）ＭＣＴ１  Ａｂ１（配列番号２）、またはＡｂ１〜Ａｂ５９のいずれかのＶＨドメインのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するＶＨドメインを含み、かつＭＣＴ１  Ａｂ１（配列番号３）、またはＡｂ２〜Ａｂ９５のいずれかのＶＬドメインのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するＶＬドメインを含む抗体と競合する、
（ｖ）ＭＣＴ１  Ａｂ１の重鎖ＣＤＲ配列（配列番号４、５、６）およびＭＣＴ１  Ａｂ１の軽鎖ＣＤＲ配列（配列番号７、８、９）、またはＡｂ２〜Ａｂ９５のいずれかのものを含む、
（ｖｉ）ＭＣＴ１  Ａｂ１（配列番号２）、またはＡｂ２〜Ａｂ６０のいずれかのＶＨドメインのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するＶＨドメインを含み、かつＭＣＴ１  Ａｂ１（配列番号３）、またはＡｂ２〜Ａｂ６０のいずれかのＶＬドメインのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するＶＬドメインを含む抗体と競合するか、またはそれ自体がこれらを含む、
（ｖｉｉ）配列番号２、１２、１４、１６、１９〜３２のアミノ酸配列から選択されるか、またはＡｂ５〜Ａｂ６０のいずれかのＶＨドメインのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するＶＨドメインを含む抗体と競合するか、またはそれ自体がこれらを含む、ならびに／あるいは
（ｖｉｉｉ）配列番号１３、１５、１７、もしくは３３〜４４のアミノ酸配列から選択されるか、またはＡｂ５〜Ａｂ６０のいずれかのＶＨドメインのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するＶＬドメインを含む抗体と競合するか、またはそれ自体がこれらを含む、ならびに／あるいは
（ｉｘ）配列番号６と同一の配列を含むか、またはそれから最大でも５、４、３、２、もしくは１つの残基だけ異なる配列を含む、少なくとも１つのペプチドを含み、前記ペプチドが、別のポリペプチド、例えば、抗体ポリペプチドもしくは抗体ドメイン、血清アルブミン、ヒトもしくは他の霊長類血清アルブミン、アドネクチン、アフィボディ、ＤＡＲＰｉｎ、アンチカリン、グリコール（ＰＥＧ）、モノメトキシＰＥＧ（ｍＰＥＧ）、ＸＴＥＮ分子、ｒＰＥＧ分子、または上記のいずれかのフラグメントもしくは変異体に直接または間接的に結合している、の１つ以上を含む、請求項８８〜１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１８】
細胞によるＭＣＴ１、任意に機能性ＭＣＴ１の発現を検出する方法であって、請求項１〜１１７のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体のいずれかが、前記細胞によって発現されたＭＣＴ１に結合するかどうかを判断することを含む、方法。
【請求項１１９】
前記細胞が、非ヒトである、請求項１１８に記載の方法。
【請求項１２０】
前記細胞が、非ヒトである、請求項１１８に記載の方法。
【請求項１２１】
前記細胞が、自己免疫状態、アレルギー状態、炎症状態、代謝障害、癌、移植レシピエント、細胞療法レシピエント、ＥＩＨＩ状態、多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）を有するか、または含むと疑われる患者から得られる、請求項１１８に記載の方法。
【請求項１２２】
前記検出方法が、異常な（増加した）ＭＣＴ１発現または活性を含む細胞を特徴とする、自己免疫状態、アレルギー状態、炎症状態、代謝障害、癌、移植レシピエント、細胞療法レシピエント、ＥＩＨＩ状態、多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）を有するか、または含むと疑われる患者から得られた細胞試料を使用して、疾患または疾患予後を診断または監視するために使用される、請求項１１８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２０１８年１月４日出願の米国仮特許第６２／６１３，４４７号、２０１８年６月１４日出願の米国仮特許第６２／６８４，８７０号、および２０１８年９月２５日出願の米国仮特許第６２／７３６，０２５号、および２０１８年１１月３０日出願の米国仮特許第６２／７７３，６３０号の優先権を主張する。これらの仮出願の各々の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
配列表
２０１９年１月４日に作成された、ｘｘｘｘｘｘバイトのサイズを有する「４３２６０．４２１３．ｔｘｔ」という名前のファイル内の配列表は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００３】
本発明は概して、抗ＭＣＴ１抗体およびその抗原結合フラグメント、例えば、ヒト化、キメラ、およびヒト抗体ならびにその抗原結合フラグメント、例えば、アンタゴニスト抗ＭＣＴ１抗体およびその抗原結合フラグメント、ならびにそのような抗体およびその抗原結合フラグメントを含有する組成物に関する。そのような抗体および抗原結合フラグメントには、ＭＣＴ１、例えば、内因性ＭＣＴ１発現ヒト細胞またはＭＣＴ１を発現するように操作された組換え細胞の表面上に発現するＭＣＴ１に特異的に結合し、ＭＣＴ１に関連する１つ以上の機能、例えば、乳酸輸送を促進するその能力に拮抗するものが含まれる。本発明はまた、１つ以上の抗ＭＣＴ１抗体結合配列を含む融合または多重特異性タンパク質、例えば、多重特異性および二重特異性抗体に関する。本発明はさらに、そのような抗体、抗原結合フラグメント、融合および多重特異性ポリペプチド、ならびにそれらを含有する組成物の治療的および診断的使用に関する。本発明は具体的に、例えば、自己免疫、炎症、アレルギー、移植、ＧＶＨＤ、癌、ならびにＭＣＴ１活性の抑制、および／またはＴＲ１細胞数／活性の増加、および／またはエフェクターＴ細胞の数／活性の減少が治療的に望ましい他の状態の治療のための予防法または治療法としての、これらの抗体およびその抗原結合フラグメントの使用に関する。
【背景技術】
【０００４】
モノカルボン酸栄養素トランスポーターＳＬＣ１６Ａ１（ＭＣＴ１）は、解糖の生成物を含む重要な代謝産物の輸送の促進に寄与するマルチパス膜貫通タンパク質である。ＭＣＴ１は、溶質チャネルタンパク質（ＳＬＣ）として既知の表面膜タンパク質の最大のファミリーの１つのメンバーであり、その機能は、重要な細胞栄養素、代謝産物、イオン、ホルモン、および脂質の膜にわたる輸送を伴う。ＭＣＴ１は、トランスポーターのＳＬＣ１６ファミリーに属し、そのうちの５つは、ピルビン酸、乳酸、およびケトン（参考文献３４〜３６）などのモノカルボン酸を、促進されたｐＨ依存性および両方向性の方式で輸送することが示されている。ＳＬＣ１６Ａ１（ＭＣＴ１）、ＳＬＣ１６Ａ７（ＭＣＴ２）、ＳＬＣ１６Ａ８（ＭＣＴ３）、およびＳＬＣ１６Ａ３（ＭＣＴ４）は全て、Ｋｍが１〜４０ｍＭの範囲のモノカルボン酸塩を輸送することが示されている（参考文献３７）。ＭＣＴ１、ＭＣＴ３、およびＭＣＴ４は、Ｉｇドメイン含有表面タンパク質ＣＤ１４７（Ｂａｓｉｇｉｎ）と共発現し、これは多くの細胞で、適切な細胞表面発現に重要である（参考文献３８、３７）。これらのＭＣＴに加えて、他の乳酸トランスポーターには、最近特徴付けられたＳＬＣ１６Ａ１１（参考文献３９）およびナトリウム依存性ＳＬＣ５Ａ８およびＳＬＣ５Ａ１２（参考文献４０）、ＡＱＰ９（参考文献４１、４２）、ならびに赤血球上に発現したＳＬＣ４Ａ１（Ｂａｎｄ  ３）が含まれる。したがって、９つの独立したタンパク質は、身体全体の細胞内、細胞間、および細胞外への乳酸の輸送を制御および調節することができる。ＭＣＴ１は、ＴおよびＢ細胞における乳酸の輸送に特に関連している（参考文献４３）。
【０００５】
免疫細胞は、成長全体を通してそれらの代謝要求の変化を受け、それらのエフェクター機能を用いるために特定の代謝状態を必要とする。炎症性疾患モデルにおける解糖の遮断は、有効性を示している（参考文献５３）。例えば、リンパ球が活性化の後に解糖経路の使用から遮断された場合、病気にかかりやすいマウスでの狼瘡の発症が予防される（参考文献５３）。実際、これらのモデルにおけるＩＦＮγ産生の欠如は、解糖がＩＦＮγの産生に必要であることを示した以前の報告と一致している（参考文献５４）。乳酸の輸出の遮断は、解糖経路を通る流束を低減し（参考文献５５）、Ｍｙｃを改変することによって、Ｔ細胞をエフェクター機能から離すことができる（参考文献５６）。ＭＣＴ１機能の阻害は、コラーゲン誘発関節炎、同種移植片拒絶、およびＧＶＨＤを含む疾患のいくつかの動物モデルでエフェクターＴ細胞活性を遮断する（参考文献４５、４７、５０、５７〜５９）。
【０００６】
しかしながら、非免疫細胞におけるこれらの経路の遍在性および免疫特異的標的の欠如は、治療的介入を妨げてきた。多くの組織にわたるＭＣＴの幅広い発現を考慮して、複数のＭＣＴに達する小分子アプローチは、組織毒性を含む特定の課題をもたらす。例えば、ＡＺ３９６５は、ＭＣＴ１およびＭＣＴ２に結合する小分子である（参考文献４５、４６）。このＭＣＴ１／２小分子阻害剤は、自己免疫疾患／移植の治療に潜在的な用途を有したが（参考文献４７）、無差別な結合は、前臨床モデルにおいて網膜、心臓、および精巣への毒性をもたらした（参考文献４８、８５）。
【０００７】
ＭＣＴ１が欠損している成人のヒトは、健康である（参考文献４９、６８）。ホモ接合型ＭＣＴ１機能喪失（ＬＯＦ）変異を有する個人は、ケトン利用および代謝の改変によるストレス（感染、飢餓）下でのみ同定された。乳児は、ケトン利用の欠陥、および時には低運動耐容能を示した。これらの様々な症状は、おそらく青年期の骨格筋量の増加により、加齢と共に消えた。ホモ接合型ＭＣＴ１変異を有する個人のヘテロ接合型ファミリーメンバーは、ケトアシドーシスの病歴がなく、ＬＯＦ変異が、追加の遺伝的／環境的要因と関連してのみケトアシドーシスを引き起こすことを示唆している（参考文献６８）。免疫系の外では、ＭＣＴ１は、他のＭＣＴと共に骨格筋、腎臓、肝臓、精巣、心臓、および脳を含む複数の臓器に発現する。ＭＣＴ１変異を有する個人において幅広い毒性がないことは、ＭＣＴの膨大な冗長性が原因である可能性がある。例えば、ＭＣＴ１、ＭＣＴ２、およびＭＣＴ４は全て、網膜に発現し（参考文献６９）、ＭＣＴ１が欠損している個人において網膜の欠陥は観察されず、機能の冗長性を示唆している。現時点では、ＭＣＴ１が欠損している個人において明らかな免疫不全は観察されていない。加えて、ＭＣＴ１が欠損しているヒトは、ＲＢＣ機能不全を示さない。
【０００８】
癌性細胞と正常細胞との間には代謝の違いがあり、具体的には、腫瘍細胞は、細胞機能の維持のためのエネルギーを産生させるために、酸化的リン酸化ではなく高速の好気的解糖に依存する。実際、癌細胞は、十分な酸素が存在していても、正常細胞と比べて最大６０倍の解糖速度の向上がある。この解糖への依存およびその結果は、「ワールブルク効果」と呼ばれる（参考文献９４、９５）。悪性細胞は、同化性が高く、それらの成長および生存に必要な構成成分を合成するために、非常に高レベルの栄養素、ＡＴＰ、およびビルディングブロックを必要とする。解糖経路の使用は、ＡＴＰを提供するが、乳酸の産生も駆動し、これは解糖経路の終わりにピルビン酸から産生される。腫瘍細胞による大量の乳酸産生は、癌細胞の細胞内酸性化を防止するために、その消費または排除のための効率的な手段を必要とする。
【０００９】
乳酸ホメオスタシスが維持される方法の１つは、モノカルボン酸トランスポーターを介するものである。発現プロファイリング研究は、ほとんどの侵攻性腫瘍タイプが著しく上昇したレベルのＭＣＴ１、ＭＣＴ４、または両方を発現することを確立した（参考文献９６）。ＭＣＴ１およびＭＣＴ４の発現は、２つの主要な発癌性転写因子であるＭＹＣおよび低酸素誘導因子−ｌ  ａ（ＨＩＦ−１ａ）によってそれぞれ調節され（参考文献９６、９７）、これらは、グルタミンおよびグルコースの異化に関与するアミノ酸トランスポーターおよび酵素を含む、好気的解糖を支持する主要なタンパク質の産生の著しい増加を導く（参考文献９８）。ＭＹＣ関与および低酸素腫瘍を有する悪性腫瘍は概して、現在の最先端の療法に耐性があり、治療の高い失敗率、再発、および高い患者死亡率を伴う（参考文献９９、１００）。重要なことに、ＭＣＴ１の阻害は、エクスビボで腫瘍細胞を死滅させ、インビボで腫瘍退縮を引き起こすことができ、それらの効力は、癌細胞に解糖表現型を強制するメトホルミンなどの薬剤によって増大する（参考文献９６、１００）。
【００１０】
ＭＣＴ１は通常、膵島、特にベータ細胞において非常に低いレベルで発現する（参考文献１０１、１０２）。これはおそらく、これらの細胞による乳酸の取り込みが非常に遅いことを説明する。運動誘発性高インスリン血症（ＥＩＨＩ）の特徴は、激しい身体活動の後の不適切なインスリン分泌であり、これは低血糖症をもたらす（参考文献１０３）。ＥＩＨＩは、ベータ細胞におけるＭＣＴ１の発現の上昇に関連しており、ＭＣＴ１を部分的に過剰発現するように操作されたトランスジェニックマウスは、ＥＩＨＩの特徴の多くを示した（参考文献１０４）。
【００１１】
上記のように、様々な小分子ＭＣＴ阻害剤が開発されているが、これらの小分子阻害剤の多くは、ＭＣＴ１に対する特異性を欠いており、それにより標的外毒性を引き起こす。これらの欠点にもかかわらず、小分子ＭＣＴ１阻害剤は、腫瘍細胞の代謝、増殖、および生存を無効にし、ＭＣＴ１を高度に発現する腫瘍においてインビボでの腫瘍形成能を損なうことが示されている（参考文献９６）。そのような小分子ＭＣＴ１阻害剤の抗腫瘍効果は、ビグアニドメトホルミンの共投与によって増大し、これは、好気的解糖への腫瘍細胞の依存をさらに増強し、したがって乳酸のＭＣＴ１媒介性流出に対する要求を増加させると考えられている。（参考文献９６）しかしながら、これまで、表面発現ＭＣＴ１に結合する抗体、例えば、内因性または操作されたＭＣＴ１発現ヒトまたは非ヒト細胞の表面上に発現するＭＣＴ１に結合する抗体は報告されていない。さらに、出願者の知る限り、機能的抗体、すなわち、ＭＣＴ１に結合し、それによりＭＣＴ１の作用に拮抗する、それを阻害する、または遮断する抗体は、文献において報告されていない。
【発明の概要】
【００１２】
本発明は、内因性または組換えＭＣＴ１発現細胞、例えば、抗体がさらに機能的である、すなわち、そのような抗体がＭＣＴ１関連機能に拮抗するヒト細胞の表面上に発現するヒトＭＣＴ１に特異的に結合する、抗体およびその抗原結合フラグメントを初めて提供する。
【００１３】
より具体的には、本発明は、ＭＣＴ１媒介性乳酸輸送の阻害などのＭＣＴ１関連機能に拮抗するヒトＭＣＴ１に特異的に結合する、新規の抗体およびその抗原結合フラグメントを提供する。
【００１４】
本発明はさらに、１つ以上のＭＣＴ１結合抗体可変ドメインおよび任意に他の部分、例えば、別の抗原結合可変ドメイン、サイトカイン、または受容体などの別のポリペプチドを含む、ＭＣＴ１結合融合タンパク質およびＭＣＴ１結合多重特異性ポリペプチドを提供する。
【００１５】
本発明はさらに、ヒトまたは非ヒトＭＣＴ１の細胞外ドメインまたは領域に含まれる１つ以上の残基に結合する、単離された抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００１６】
本発明はさらに、ヒトまたは非ヒトＭＣＴ１に結合し、例えば、インビトロおよび／またはインビボで、１つ以上のＭＣＴ１関連機能に拮抗する、それを阻害する、または遮断する、単離された抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００１７】
本発明はさらに、非ヒトＭＣＴ１、例えば、マウスまたはラットＭＣＴ１などのげっ歯類に結合し、任意に例えば、インビトロおよび／またはインビボで、１つ以上のＭＣＴ１関連機能に拮抗する、それを阻害する、または遮断する、例えば、任意にヒトＭＣＴ１にさらに結合する、単離された抗体または抗原結合フラグメントを提供する。
【００１８】
本発明はさらに、抗ヒトＭＣＴ１抗体Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれか１つと、ヒトまたは非ヒトＭＣＴ１への結合を競合する、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００１９】
本発明はさらに、抗ヒトＭＣＴ１抗体Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれか１つと、同じまたは重複するヒトＭＣＴ１上のエピトープに結合する、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００２０】
本発明はさらに、以下：
（ｉ）残基Ｔ４１、Ｅ４６、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｋ２８９、Ｈ２９２、Ｙ２９３、Ｋ２９７、Ｇ４１７、Ｉ４７、およびＤ４１８の１つ以上を含むもの、
（ｉｉ）少なくとも３つの残基を含むものであり、前述の残基の少なくとも１、２、または３つ全てが、Ｔ４１、Ｅ４６、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｋ２８９、Ｈ２９２、Ｙ２９３、Ｇ４１７、Ｉ４７、およびＤ４１８から選択される残基を含むもの、
（ｉｉｉ）３つの残基を含むものであり、前述の残基の少なくとも１、２、または３つ全てが、Ｔ４１、Ｅ４６、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｋ２８９、Ｈ２９２、Ｙ２９３、Ｇ４１７、Ｉ４７、およびＤ４１８を含むもの、
（ｉｖ）３〜６つの残基を含むものであり、前述の残基の１、２、３、４、５、または６つが、Ｔ４１、Ｅ４６、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｋ２８９、Ｈ２９２、Ｙ２９３、Ｇ４１７、Ｉ４７、およびＤ４１８を含むもの、
（ｖ）残基Ｔ４１、Ｓ２８５、およびＳ２８６の少なくとも１、２、または３つ全てを含むもの、
（ｖｉ）Ｔ４１を含むもの、
（ｖｉｉ）Ｓ２８６を含むもの、
（ｖｉｉｉ）Ｓ２８５を含むもの、
（ｉｘ）Ｈ２９２を含むもの、
（ｘ）残基Ｔ４１、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｇ４１７、およびＤ４１８を含むもの、
（ｘｉ）残基Ｔ４１、Ｓ２８５、およびＳ２８６を含むもの、
（ｘｉｉ）残基Ｔ４１、Ｉ４７、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｇ４１７、およびＤ４１８を含むもの、
（ｘｉｉｉ）残基Ｅ４６、Ｋ２８９、およびＨ２９２を含むもの、
（ｘｉｖ）残基Ｋ２９７、Ｙ２９３、およびＨ２９２を含むもの、
（ｘｖ）例えば、げっ歯類（例えば、マウス、ラット、モルモット）、ウサギ、ニワトリ、非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル、チンパンジー、オランウータン）、ウシ、ヒツジ、イヌ、およびネコから選択される、非ヒトＭＣＴ１の対応する残基の１つ以上を含むもの、から選択されるヒトＭＣＴ１上のエピトープに結合する、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供し、
任意に、前述のエピトープ中に存在する残基は、アラニンスキャニングの使用によって同定される。
【００２１】
本発明はさらに、前述の抗体または抗原結合フラグメントがさらに、以下の残基：
（ｉ）残基Ｐ３７、Ｉ４０、Ｋ４５、Ｅ４８、およびＴ５５の１つ以上（ループ１）、
（ｉｉ）残基Ｑ１１１（ループ２）、
（ｉｉｉ）残基Ｑ１６６（ループ３）、
（ｉｖ）残基Ｌ２８４、Ｅ２９６、Ｓ２９８の１つ以上（ループ４）、
（ｖ）残基Ｙ３５３（ループ５）、
（ｖｉ）残基Ｙ４１９、Ｔ４２２の一方もしくは両方（ループ６）、ならびに／または
（ｖｉｉ）上記の任意の組み合わせ、の１つ以上と相互作用する、請求項７に記載の選択されたヒトＭＣＴ１上のエピトープに結合する単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００２２】
本発明はさらに、非ヒトＭＣＴ１上のエピトープに結合する、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供し、非ヒトＭＣＴ１は任意に、げっ歯類（例えば、マウス、ラット、モルモット）、ウサギ、トリ（例えば、ニワトリ、シチメンチョウ、ガチョウ）、非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル、チンパンジー、オランウータン）、ウシ、ヒツジ、イヌ、ネコから選択され、任意に、非ヒトＭＣＴ１上の前述のエピトープは、ヒトＭＣＴ１のＴ４１、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｇ４１７、Ｉ４７、およびＤ４１８の１つ以上として非ヒトＭＣＴ１中に対応する残基の１つ以上を含み、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントは、例えば、インビトロおよび／またはインビボで、例えば、前述の非ヒトＭＣＴ１の活性（複数可）の１つ以上に拮抗する、それを阻害する、または遮断する。
【００２３】
本発明はさらに、ヒト、ヒト化、非ヒト霊長類、霊長類化、ニワトリ、げっ歯類、またはキメラである、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００２４】
本発明はさらに、例えば、インビトロおよび／またはインビボで、ヒトＭＣＴ１媒介性乳酸輸送を阻害する、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００２５】
本発明はさらに、内因性ＭＣＴ１発現細胞に結合し、かつ／または組換えもしくは操作されたＭＣＴ１発現細胞、例えば、ヒトＭＣＴ１発現２９３細胞に結合する、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００２６】
本発明はさらに、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供し、抗体またはその抗原結合フラグメントは、ヒトまたはヒト化モノクローナル抗体；単一特異性抗体；多特異性抗体；多重特異性抗体様ポリペプチド、ヒト化抗体；ヒトまたはヒト化四量体抗体；ヒトまたはヒト化四価抗体；ヒトまたはヒト化多重特異性抗体；一本鎖抗体；ドメイン特異性抗体；単一ドメイン抗体；ドメイン欠失抗体；ｓｃＦｃ融合タンパク質；キメラ抗体；合成抗体；組換え抗体；ハイブリッド抗体；多重特異性抗体、二重特異性抗体、ＢｙＴＥ、変異抗体；ＣＤＲグラフト化抗体；抗体フラグメント；Ｆａｂ；Ｆ（ａｂ′）２；Ｆａｂ′フラグメント；Ｆｖフラグメント；一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメント；Ｆｄフラグメント；ｄＡｂフラグメント；ダイアボディ；ナノボディ；二価ナノボディ；ＶＨＨ抗体；およびミニボディからなる群から選択される。
【００２７】
本発明はさらに、ヒト化抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００２８】
本発明はさらに、抗ＭＣＴ１抗体Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかの少なくとも１、２、３、４、５、または６つ全てのＣＤＲを含み、任意に、前述のＣＤＲが、Ｋａｂａｔに従って、またはＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋに従って定義される、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント、あるいはＭＣＴ１との結合を競合するか、または抗ＭＣＴ１抗体Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかもしくは上記のいずれかの親和性成熟変異体と同じエピトープに結合する、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００２９】
本発明はさらに、抗ＭＣＴ１抗体Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかの同じＣＤＲを含む、ヒト化された単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供し、任意に、前述のＣＤＲは、Ｋａｂａｔに従って、またはＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋに従って定義される。
【００３０】
本発明はさらに、Ａｂ１〜Ａｂ９５から選択される抗ＭＣＴ１抗体またはそのヒト化変異体に含まれるのと同じＶＨポリペプチドを含む、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００３１】
本発明はさらに、Ａｂ１〜Ａｂ９５から選択される抗ＭＣＴ１抗体またはそのヒト化変異体に含まれるのと同じＶＬポリペプチドを含む、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００３２】
本発明はさらに、Ａｂ１〜Ａｂ９５から選択される抗ＭＣＴ１抗体またはそのヒト化変異体に含まれるのと同一であるＶＨポリペプチドおよびＶＬポリペプチドを含む、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００３３】
本発明はさらに、抗ＭＣＴ１抗体Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかに含まれる可変重鎖ポリペプチドおよび／または可変軽鎖ポリペプチドに対して少なくとも８０、９０、９５、９６、９７、９８、９９、または１００％の配列同一性をそれぞれ有する、可変重鎖ポリペプチドおよび／または可変軽鎖ポリペプチドを含む、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００３４】
本発明はさらに、配列番号４〜６のアミノ酸配列をそれぞれ有するＶＨ  ＣＤＲ１、２、および３ポリペプチド、ならびに配列番号７〜９のアミノ酸配列をそれぞれ有するＶＬ  ＣＤＲ１、２、および３ポリペプチドを含む、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００３５】
本発明はさらに、任意に、Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかと同じＣＤＲを含み、任意に、前述のＣＤＲが、Ｋａｂａｔに従って、またはＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋに従って定義される、Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかに由来するヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントである、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００３６】
本発明はさらに、Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかに由来する親和性成熟抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントを提供し、最大でも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個のＣＤＲ残基は、Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれか１つの６つのＣＤＲポリペプチドに含まれるＣＤＲ残基に対して変異し、任意に、前述の親和性成熟抗ＭＣＴ１抗体は、それが由来する抗ＭＣＴ１抗体と少なくとも同じもしくはそれを超える親和性でヒトＭＣＴ１に結合し、かつ／または親和性成熟抗体もしくは抗原結合フラグメントは、例えば、インビボおよび／またはインビボで、ヒトＭＣＴ１に拮抗し、任意に、前述のＣＤＲは、Ｋａｂａｔに従って、またはＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋに従って定義され、任意に、最大でも１、２、３、４、５、６、もしくは７つのＣＤＲ残基は、Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれか１つのＣＤＲポリペプチドに対して変異しているか、または最大でも１、２、３、もしくは４つのＣＤＲ残基は、Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれか１つのＣＤＲポリペプチドに対して変異しているか、または最大でも１つもしくは２つのＣＤＲ残基は、Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれか１つのＣＤＲポリペプチドに対して変異している。
【００３７】
本発明はさらに、非ヒトＭＣＴ１、任意にげっ歯類、ウサギ、ニワトリ、または非ヒト霊長類ＭＣＴ１にさらに結合する、上記のいずれかに記載の抗ヒトＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントを提供する。
【００３８】
本発明はさらに、配列番号２および３、配列番号１２および１３、配列番号１４および１５、配列番号１６および１７のＶＨおよびＶＬポリペプチドを含む、抗ＭＣＴ１抗体、あるいは抗体Ａｂ５〜Ａｂ９５の１つのいずれかのＶＬおよび／もしくはＶＨポリペプチドを含むか、または抗体Ａｂ５〜Ａｂ９５の１つのいずれかのＶＬおよび／もしくはＶＨポリペプチドのヒト化もしくは親和性成熟変異体を含む、抗ＭＣＴ１抗体を提供する。
【００３９】
本発明はさらに、配列番号２、１２、１４、１６、１９〜３２、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０３、１０５、１０７、１０９、１１１、１１３、１１５、１１７、１１９、１２１、１２３、１２５、１２７、１２９、１３１、１３３、１３５、１３７、１３９、１４１、１４３、１４５、１４７、１４９、１５１、１５３、および１５５から選択されるアミノ酸配列を有する可変重鎖ポリペプチドまたは重鎖ポリペプチド、ならびに配列番号３、１３、１５、１７、３３〜４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、１４８、１５０、１５２、１５４、および１５６から選択されるアミノ酸配列を有する可変軽鎖ポリペプチドまたは軽鎖ポリペプチドを含む、抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントを提供する。
【００４０】
本発明はさらに、以下：配列番号２および３、配列番号１２および１３、配列番号１４および１５、配列番号１６および１７、配列番号４５および４６、配列番号４７および４８、配列番号４９および５０、配列番号５１および５２、配列番号５３および５４、配列番号５５および５６、配列番号５７および５８、配列番号５９および６０、配列番号６１および６２、配列番号６３および６４、配列番号６５および６６、配列番号６７および６８、配列番号６９および７０、配列番号７１および７２、配列番号７３および７４、配列番号７５および７６、配列番号７７および７８、配列番号７９および８０、配列番号８１および８２、配列番号８３および８４、配列番号８５および８６、配列番号８７および８８、配列番号８９および９０、配列番号９１および９２、配列番号９３および９４、配列番号９５および９６、配列番号９７および９８、配列番号９９および１００、配列番号１０１および１０２、配列番号１０３および１０４、配列番号１０５および１０６、配列番号１０７および１０８、配列番号１０９および１１０、配列番号１１１および１１２、配列番号１１３および１１４、配列番号１１５および１１６、配列番号１１７および１１８、配列番号１１９および１２０、配列番号１２１および１２２、配列番号１２３および１２４、配列番号１２５および１２６、配列番号１２７および１２８、配列番号１２９および１３０、配列番号１３１および１３２、配列番号１３３および１３４、配列番号１３５および１３６、配列番号１３７および１３８、配列番号１３９および１４０、配列番号１４１および１４２、配列番号１４３および１４４、配列番号１４５および１４６、配列番号１４７および１４８、配列番号１４９および１５０、配列番号１５１および１５２、配列番号１５３および１５４、ならびに配列番号１５５および１５６からそれぞれ選択されるアミノ酸配列を有する可変重鎖ポリペプチドおよび可変軽鎖ポリペプチドを含む、抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントを提供する。
【００４１】
本発明はさらに、配列番号３、１３、１５、１７、および３３〜４４のもの、または抗体Ａｂ５〜Ａｂ６０のいずれかのものから選択されるアミノ酸配列を有するＶＬポリペプチドを含む、上記の実施形態のいずれかに記載のヒト化および／もしくは親和性成熟抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントを提供する。
【００４２】
本発明はさらに、配列番号２、１２、１４、１６、および１９〜３２のもの、または抗体Ａｂ５〜Ａｂ６０のいずれかのものから選択されるアミノ酸配列を有するＶＨポリペプチドを含む、上記の実施形態のいずれかに記載のヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントを提供する。
【００４３】
本発明はさらに、配列番号１３、１５、１７、および３３〜４４のものから選択されるアミノ酸配列を有するＶＬポリペプチド、ならびに配列番号１２、１４、１６、および１９〜３２のもの、または抗体Ａｂ５〜Ａｂ６０のいずれかのものから選択されるアミノ酸配列を有するＶＨポリペプチドを含む、上記のいずれかに記載のヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントを提供する。
【００４４】
本発明はさらに、配列番号３、１３、１５、１７、３３〜４４のいずれかに対して少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を有するＶＬポリペプチド、または抗体Ａｂ５〜Ａｂ９５のいずれかに含まれるＶＬポリペプチドを含む、上記のいずれかに記載のヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントを提供する。
【００４５】
本発明はさらに、配列番号２、１２、１４、１６、１９〜３２のいずれかに対して少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９％、もしくは１００％の配列同一性を有する配列を有するＶＨポリペプチド、または抗体Ａｂ５〜Ａｂ９５のいずれかに含まれるＶＨポリペプチドを含む、上記のいずれかに記載のヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントを提供する。
【００４６】
本発明はさらに、配列番号３、１３、１５、１７、３３〜４４のいずれかに対して少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を有するＶＬポリペプチド、または抗体Ａｂ５〜Ａｂ９５のいずれかに含まれるＶＬポリペプチド、および／あるいは配列番号２、１２、１４、１６、１９〜３２のＶＨポリペプチドに対して少なくとも９０、９５、９６、９７、９８、９９％、もしくは１００％の配列同一性を有する配列を有するＶＨポリペプチド、または抗体Ａｂ５〜Ａｂ９５のいずれかに含まれるＶＨポリペプチドを含む、上記のいずれかに記載のヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントを提供する。
【００４７】
本発明はさらに、重鎖ＣＤＲ３配列が、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４個のアミノ酸残基を含む、上記のいずれかに記載のヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントを提供する。
【００４８】
本発明はさらに、重鎖ＣＤＲ３配列が、２１、２２、２３、または２４個のアミノ酸残基を含む、上記のいずれかに記載のヒト化抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントを提供する。
【００４９】
本発明はさらに、重鎖ＣＤＲ３配列が、配列番号６と同一であるか、またはそれから最大でも５、４、３、２、もしくは１つの残基だけ異なり、任意に、前述の差異が、存在する場合、保存的アミノ酸置換を含むか、または同じ長さのＣＤＲ３を含むヒトもしくはげっ歯類抗体の重鎖ＣＤＲ３の同じ位置でよく見られる置換アミノ酸を含む、上記のいずれかに記載の単離された抗ＭＣＴ１ヒトまたは抗原結合フラグメントを提供する。
【００５０】
本発明はさらに、ＭＣＴ１への結合を参照抗体と競合し、参照抗体が、Ａｂ１〜Ａｂ９５から選択される、上記のいずれかに記載の単離された抗ＭＣＴ１ヒトもしくはヒト化抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００５１】
本発明はさらに、Ａｂ１〜Ａｂ９５から選択される抗ヒトＭＣＴ１抗体と同じ可変重および／もしくは可変軽ＣＤＲポリペプチドを含む、抗ヒトＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００５２】
本発明はさらに、Ａｂ１〜Ａｂ９５から選択される抗体の可変重および／または軽ポリペプチドを含む、抗ＭＣＴ１抗体を提供する。
【００５３】
本発明はさらに、重鎖および／または軽鎖定常領域、任意にヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４の重鎖および／または軽鎖定常領域を含み、その定常領域（複数可）が任意に、変異されて、少なくとも１つのエフェクター機能を損なうかまたは増強する、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１ヒトもしくはヒト化抗体またはその抗原結合フラグメントを提供し、例えば、前述のエフェクター機能には、ＦｃＲ結合、補体結合、ＡＤＣＣ機能、ＦｃＲＮ結合、およびグリコシル化が含まれる。
【００５４】
本発明はさらに、抗体またはその抗原結合フラグメントのＣＤＲが、構造アライメントによって決定したときに２．０Å未満、１．０Å未満、または０．５Å未満の二乗平均偏差（ＲＭＳＤ）だけ異なる対応するＣＤＲのアルファ炭素の位置によって示されるように、Ａｂ１のものと同様のまたは同じ、同様の三次元抗体構造を形成する、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００５５】
本発明はさらに、Ａｂ１の可変重鎖ＣＤＲ配列（配列番号４、５、６）およびＡｂ１の可変軽鎖ＣＤＲ配列（配列番号７、８、９）を含む、ヒト化抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００５６】
本発明はさらに、ＭＣＴ１  Ａｂ１のＶＨドメインのアミノ酸配列（配列番号２）に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＨドメインを含み、かつＭＣＴ１  Ａｂ１のＶＬドメインのアミノ酸配列（配列番号３）に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＬドメインを含む、抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００５７】
本発明はさらに、グリコシル化、ＦｃＲ結合、ＦｃＲＮ結合、補体結合、およびＡＤＣＣ機能から選択される少なくとも１つのＦｃエフェクター機能を増強するためにさらに任意に修飾された、ヒト定常ドメイン、任意にＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４を含む、上記の実施形態のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００５８】
本発明はさらに、ＦｃＲ結合および／または補体結合を減少させるように任意に修飾されたヒトＩｇＧ１定常領域を含み、Ｅ２６９Ｒおよび／もしくはＫ３２２Ａ変異をさらに任意に含み、かつ／または前述のヒトＩｇＧ１定常領域が、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、上記の実施形態のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００５９】
本発明はさらに、上記のいずれかに記載の少なくとも１つの抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントを含む、融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチドを提供する。
【００６０】
本発明はさらに、エフェクターＴ細胞活性および／またはエフェクターＴ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、またはＣＤ８＋  エフェクターＴ細胞の数を減少させる、上記の実施形態のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチドを提供する。
【００６１】
本発明はさらに、Ｔｒ１細胞の活性および／または数を増加させる、上記の実施形態のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチドを提供する。
【００６２】
本発明はさらに、エフェクターＴ細胞活性および／またはエフェクターＴ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、またはＣＤ８＋  エフェクターＴ細胞の数を減少させ、さらに、Ｔｒ１細胞の活性および／または数を増加させる、上記の実施形態のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチドを提供する。
【００６３】
本発明はさらに、上記のいずれかに記載の少なくとも１つの抗ＭＣＴ１抗体もしくは抗原結合フラグメント、融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチドを発現する細胞、例えば、ヒト、非ヒト哺乳動物、酵母、細菌、両生類、植物、昆虫、もしくは爬虫類の細胞、またはヒト細胞、任意にヒト免疫細胞、例えばＴ細胞、ＮＫ細胞、単球、制御性Ｔ細胞、またはマクロファージを提供する。
【００６４】
本発明はさらに、任意に、ヒト、ヒト化、および／または親和性成熟である、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントに対して産生された、抗イディオタイプ抗体を提供する。
【００６５】
本発明はさらに、任意にＭＣＴ１に結合し、さらに任意に１つ以上のＭＣＴ１活性を遮断する、またはそれに拮抗する、上記の抗イディオタイプ抗体に対して産生された、抗抗イディオタイプ抗体を提供する。
【００６６】
本発明はさらに、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または配列番号６のＶＨ  ＣＤＲ３ポリペプチド、あるいはそれと少なくとも８０％の配列同一性を有する変異体であって、別のポリペプチド、例えば、抗体ポリペプチドもしくは抗体ドメイン、血清アルブミン、ヒトもしくは他の霊長類血清アルブミン、アドネクチン、アフィボディ、ＤＡＲＰｉｎ、アンチカリン、グリコール（ＰＥＧ）、モノメトキシＰＥＧ（ｍＰＥＧ）、ＸＴＥＮ分子、ｒＰＥＧ分子、または上記のいずれかのフラグメントもしくは変異体に直接または間接的に結合した変異体を含む、融合タンパク質を提供し、例えば、抗体ポリペプチドまたはドメインは、Ｆｃポリペプチドまたはそのフラグメント、例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、もしくはＩｇＧ４のＦｃ領域、またはそのフラグメントを含む。
【００６７】
本発明はさらに、細胞、例えば、活性化Ｔ細胞またはＢ細胞、さらに任意にヒト細胞の表面上のＭＣＴ１に結合すると、以下の特性：
（ｉ）乳酸の輸送を阻害する、
（ｉｉ）ブロモピルビン酸の輸送を阻害する、
（ｉｉｉ）モノカルボン酸、ピルビン酸、ロイシン、バリンおよびイソロイシンに由来する分岐鎖オキソ酸、ケトン体、アセト酢酸、ベータ−ヒドロキシ酪酸、酢酸、乳酸、細胞栄養素、代謝産物、イオン、ホルモン、脂質、およびケトンの１つまたはそれ以上の輸送を阻害する、
（ｉｖ）ＣＤ３／ＣＤ２８刺激Ｔ細胞の増殖を阻害する、
（ｖ）活性化Ｔ細胞もしくはＢ細胞の増殖を阻害する、
（ｖｉ）１つまたはそれ以上の炎症性サイトカインの産生を阻害する、
（ｖｉｉ）エフェクターＴ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、および／もしくはＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の活性および／もしくは数を減少させる、
（ｖｉｉｉ）制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の割合もしくは活性を増加させる、
（ｉｘ）混合リンパ球反応における同種異系活性化を阻害する、
（ｘ）または上記のいずれかの組み合わせ
の１つまたはそれ以上を引き起こす、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞を提供する。
【００６８】
本発明はさらに、ＭＣＴ１に結合すると１つ以上の炎症性サイトカインの産生を阻害する、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは例えば、上記の実施形態のいずれかに記載の上記のいずれかを発現する細胞を提供する。
【００６９】
本発明はさらに、１つ以上の炎症性サイトカインの少なくとも１つが、ＦＧＦ２、ＦＬＴ−３Ｌ、フラクタルカイン（Ｆｒａｃｔｉｌｋｉｎｅ）、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＧＲＯ、ＩＦＮα２、ＩＦＮγ、ＩＬ−３、ＩＬ−５、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２ｐ４０、ＩＬ−１２ｐ７０、ＩＬ−１３、ＩＬ−１７ａ、ＩＰ−１０、ＭＣＰ−１、ＭＤＣ、ＭＩＰ−１ａ、ＭＩＰ−１ｂ、ｓＣＤ４０Ｌ、ＴＮＦα、およびＴＮＦβから選択される、上記の実施形態のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞を提供する。
【００７０】
本発明はさらに、１つ以上の炎症性サイトカインの少なくとも１つが、ＩＦＮγ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、ＩＬ−１０、およびＩＬ−６から選択される、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞を提供する。
【００７１】
本発明はさらに、乳酸ＦＬＩＰＲアッセイによって測定したときに１００ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、または１０ｎＭ未満のＫｄを有する活性化Ｔ細胞におけるＭＣＴ１媒介性乳酸輸送を阻害する、上記の実施形態のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞を提供する。
【００７２】
本発明はさらに、
（ｉ）フローサイトメトリーによって測定したときにＭＣＴ２、ＭＣＴ３、ＭＣＴ４、および／またはＣＤ１４７に結合しない、
（ｉｉ）ＭＣＴ２、ＭＣＴ３、および／またはＭＣＴ４輸送を阻害しない、
（ｉｉｉ）ＩＬ−２の産生を阻害しない、
（ｉｖ）単球における乳酸輸送を阻害しない、
（ｖ）未感作、静止、および／または制御性Ｔ細胞の増殖を阻害しない、
（ｖｉ）ＲＢＣにおける乳酸輸送を阻害しない、
（ｖｉｉ）ＣＤ２５、ＣＤ５４、ＣＤ６９、ＣＤ９５、ＣＤ９８、ＣＤ１４７、ＣＤ１５４、ＣＤ２７８、ＣＤ２７９、およびＨＬＡ−ＤＲ／ＤＰ／ＤＱから任意に選択される、１つ以上のＴ細胞活性化マーカーの発現を改変しない、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞を提供する。
【００７３】
本発明はさらに、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４のＦｃ領域、任意に、エフェクター機能、半減期、タンパク質分解、またはグリコシル化の少なくとも１つを改変するように修飾されたＦｃ領域を含み、任意に、Ｆｃ領域が、Ｎ−および／またはＯ−グリコシル化を改変または排除する１つ以上の変異を含む、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞を提供する。
【００７４】
本発明はさらに、１００ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、または１０ｎＭ未満の親和性（ＫＤ）を有するヒトＭＣＴ１に結合する、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞を提供する。
【００７５】
本発明はさらに、加えて、以下の修飾：
（ｉ）細胞毒性薬に共役される、
（ｉｉ）二重特異性抗体に含まれる、
（ｉｉｉ）多重特異性抗原結合タンパク質に含まれる、
（ｉｖ）標識に共役される、および
（ｖ）別の治療薬、任意に、免疫抑制薬または化学療法薬に共役される、の１つ以上を有する、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の実施形態のいずれかに記載の上記のいずれかを発現する細胞を提供する。
【００７６】
本発明はさらに、標識が、化学発光標識、常磁性標識、ＭＲＩ造影剤、蛍光標識、生物発光標識、もしくは放射性標識であるか、または細胞毒性薬が、ＤＮＡ、ＲＮＡ、もしくはタンパク質合成を阻害する部分；放射性核種；またはリボソーム阻害タンパク質である、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞を提供する。
【００７７】
本発明はさらに、自己免疫、炎症、またはアレルギー状態；代謝障害（例えば、糖尿病）、多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）、癌；移植レシピエントもしくはＥＩＨＩ、または任意の他の状態を有するヒト対象の治療に適しており、エフェクターＴ細胞の数および／もしくは活性、例えば、ＣＤ３＋  Ｔ細胞、ＣＤ４＋  Ｔ細胞、および／もしくはＣＤ８＋  Ｔ細胞の減少、ならびに／またはＴｒ１もしくはサプレッサーＴ細胞の活性および／もしくは数の増加が、治療的に望ましい、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかに記載の上記のいずれかを発現する細胞を提供する。
【００７８】
本発明はさらに、任意に、それが結合する抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントの１つ以上の生物学的効果を中和する、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントに対して産生された、抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【００７９】
本発明はさらに、上記に記載の抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合フラグメントに対して産生された、抗抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合フラグメントを提供し、任意に、抗抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合フラグメントは、それが結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合フラグメントを中和する。
【００８０】
本発明はさらに、対象における前述の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメントのインビボレベルを監視するか、または対象における前述の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメントのインビボ効果を中和するための、上記の抗イディオタイプ抗体を使用する方法を提供する。
【００８１】
本発明はさらに、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは抗抗ＭＣＴ１抗体もしくは抗原結合フラグメント、または抗抗ＭＣＴ１抗体もしくは抗原結合フラグメントをコードする、ポリヌクレオチド、それを含有する発現ベクター、ならびに前述のポリヌクレオチドまたは発現ベクター、任意にヒト免疫細胞、例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、またはＮＫ細胞を含む宿主細胞を提供する。
【００８２】
本発明はさらに、ヒトまたは非ヒト療法または予防法で使用するのに適している、有効量の、上記のいずれか１つに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは抗抗ＭＣＴ１抗体もしくは抗原結合フラグメント、または抗抗ＭＣＴ１抗体もしくは抗原結合フラグメント、あるいは上記のいずれかを発現する細胞を含む、医薬組成物または診断用組成物を提供する。
【００８３】
本発明はさらに、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを産生する方法を提供し、抗体またはその抗原結合フラグメントの発現を可能にする条件下で、上記の宿主細胞を培養することと、培養培地または宿主細胞から抗体またはその抗原結合フラグメントを回収することと、を含む。
【００８４】
本発明はさらに、薬学的有効量の、単離された抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、抗イディオタイプ抗体、融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記のいずれかを発現する細胞を含む、医薬組成物、例えば、薬学的希釈剤、担体、または賦形剤をさらに含み、任意に、ミトコンドリア阻害剤、および／またはビグアニド、および／または別のモノカルボン酸輸送体（ＭＣＴ阻害剤）、例えば、ＳＬＣ１６Ａ１、ＳＬＣ１６Ａ２、ＳＬＣ１６Ａ３、ＳＬＣ１６Ａ４、ＳＬＣ１６Ａ５、ＳＬＣ１６Ａ６、ＳＬＣ１６Ａ７、ＳＬＣ１６Ａ８、ＳＬＣ１６Ａ９、ＳＬＣ１６Ａ１０、ＳＬＣ１６Ａ１１、ＳＬＣ１６Ａ１２、ＳＬＣ１６Ａ１３、もしくはＳＬＣ１６Ａ１４阻害剤、またはＭＣＴ１、ＭＣＴ２、ＭＣＴ３、ＭＣＴ４、ＭＣＴ５、ＭＣＴ６、ＭＣＴ７、ＭＣＴ８、ＭＣＴ９、もしくはＭＣＴ１０阻害剤を含み得るものを提供し、前述の阻害剤は、上記のトランスポーターの１つ以上を阻害し得、さらに前述の阻害剤は任意に、小分子、ＲＮＡｉ、抗体、抗体フラグメント、もしくは融合タンパク質を含むか、または前述の活性剤は、メトホルミン、フェンホルミン、アレクシジン、ビスビグアニド、ブホルミム、クロロヘキシジン、クロルプログアニル、フェニルビグアニド、ポリアミノプロピルビグアニド、ポリヘキサニド、モロキシジン、グリピジド、グリブリド、レパグリニド、サクサグリプチン、シタグリプチン、パモ酸ピルビニウム（Ｐｙｒｖｉｎｕｍ  Ｐａｍｏａｔｅ）、プログアニル、ドキシサイクリン、アトバクオン、カナグリフロジン、グリタゾン（例えば、トログリタゾン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン）、チゲサイクリン、チアゾリド（例えば、ニタゾキサニド）、サリチルアニリド（例えば、クロサンテル、オキシクロザニド、ニクロサミド）、ペルヘキシリン、プロプロノロール、フェノフィブラート、ミコナゾール、ネファゾドン、ペンタミジン、ヒドロコルチゾン、メタヨードベンジルグアニジン、ロニダミン、アルファトコフェリルスクシネート（一次形態のビタミンＥ）、炭酸脱水酵素、ＭＥ３４４（ＭＥＩ  Ｐｈａｒｍａ）、ＨＩＦ１ａ阻害剤（例えば、クリシン、ケトミン、ジメチル−ビスフェノールＡ、ＢＡＹ８４−２２４３）、ＳＲ１３８００、ジメチルオキサロイルグリシン（ＤＭＯＧ）、カルボニルシアニドｐ−トリフルオロメトキシフェニルヒドラゾン（ＦＣＣＰ）、カルボニルシアニドｍ−クロロフェニルヒドラゾン（ＣＣＣＰ）、アンチマイシンＡ、オリゴマイシン、サリノマイシン、ジニトロフェノール、ロテノン、フェンホルミン、チルホスチン９、アトペニンＡ５、ベルベリン、アジド、シアン化物、亜酸化窒素、三酸化ヒ素、ピルビニウム、カナグリフロジン、ロシグリタゾン、アモバルビタール、ホノキオール、アルクチゲニン、コーヒー酸フェニルエステル、ペルフェナジン（Ｐｅｒｈｅｎａｚｉｎｅ）、トリフルオペラジン（Ｔｒｉｆｌｏｕｒｏｐｅｒａｚｉｎｅ）、メチルグリオキサール、および上記のいずれかを含む組み合わせから選択される。
【００８５】
本発明はさらに、エフェクターＴ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、および／またはＣＤ８＋  エフェクターＴ細胞の活性および／または数を阻害することを、それを必要としている対象において行うための方法を提供し、上記のいずれかに記載の、治療または予防有効量の、抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の少なくとも１つを発現する細胞、あるいは治療または予防有効量の上記のいずれかを含有する医薬組成物を、対象に投与することを含む。
【００８６】
本発明はさらに、サプレッサーＴまたはＴｒ１細胞の活性および／または数を増加させることを、それを必要としている対象において行うための方法を提供し、上記のいずれかに記載の、治療または予防有効量の、抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の少なくとも１つを発現する細胞、あるいは治療または予防有効量の上記のいずれかを含有する医薬組成物を、対象に投与することを含む。
【００８７】
本発明はさらに、エフェクターＴ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、および／またはＣＤ８＋  エフェクターＴ細胞の活性および／または数を阻害し、かつサプレッサーＴまたはＴｒ１細胞の活性および／または数を増加させることを、それを必要としている対象において行うための方法を提供し、上記のいずれかに記載の、治療または予防有効量の、抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の少なくとも１つを発現する細胞、あるいは治療または予防有効量の上記のいずれかを含有する医薬組成物を、対象に投与することを含み、例えば、対象は、エフェクターＴ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、もしくはＣＤ８＋の活性の増加、および／またはサプレッサーＴもしくはＴｒ１活性の減少、および／またはサプレッサーＴもしくはＴｒ１細胞数の減少を特徴とする、自己免疫状態、アレルギー状態、炎症状態、代謝障害、癌、移植レシピエント、細胞療法レシピエント、ＥＩＨＩ状態、多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）を有する。
【００８８】
本発明はさらに、自己免疫状態、アレルギー状態、炎症状態、代謝障害、癌、移植レシピエント、細胞療法レシピエント、ＥＩＨＩ状態、多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）、または前述の状態のいずれかに関連する症状を予防または治療するための方法を提供し、上記のいずれかに記載の、治療または予防有効量の、抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の少なくとも１つを発現する細胞、あるいは治療または予防有効量の上記のいずれかを含有する医薬組成物を、それを必要としている対象に投与することを含み、例えば、自己免疫状態、アレルギー状態、炎症状態、代謝障害、癌、移植レシピエント、細胞療法レシピエント、ＥＩＨＩ状態、多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）は、エフェクターＴ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、もしくはＣＤ８＋の活性の増加、および／またはサプレッサーＴもしくはＴｒ１活性の減少、および／またはサプレッサーＴもしくはＴｒ１細胞数の減少を特徴とするか、あるいは代謝障害は、ダノン病、真性糖尿病、ガラクトース血症異型、ＭＤＰ症候群、代謝性ミオパシー、メチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素欠損症、ウィンチェスター症候群、サリチル酸感受性、Ｘ連鎖性低リン血症、アルコール性ケトアシドーシス、アルコール紅潮反応、アルファ−アミノアジピン酸およびアルファ−ケトアジピン酸性尿症、高アニオンギャップ代謝性アシドーシス、痛風、リフィーディング症候群、運動関連低ナトリウム血症、膵炎、黄色脂肪症、およびＭｅｔａｂ−Ｌを含むか、あるいは状態は、活性化Ｔ細胞もしくはＢ細胞および／またはＭＣＴ１発現細胞によって少なくとも部分的に媒介される。
【００８９】
本発明はさらに、抗体もしくはその抗原結合フラグメントまたは融合タンパク質の投与が、以下の効果：
（ｉ）活性化Ｔ細胞またはＢ細胞における乳酸輸送を阻害する、
（ｉｉ）活性化Ｔ細胞またはＢ細胞におけるブロモピルビン酸毒素の輸送を阻害する、
（ｉｉｉ）ＣＤ３／ＣＤ２８刺激Ｔ細胞の増殖を阻害する、
（ｉｖ）活性化Ｔ細胞の増殖を阻害する、
（ｖ）１つ以上の炎症性サイトカインの産生および／または分泌を阻害する、
（ｖｉ）ＩＬ−２の産生および／または分泌を阻害しない、
（ｖｉｉ）尿中ケトンの産生を増加させる、
（ｖｉｉｉ）生存期間を延長する、
（ｉｘ）移植片拒絶を減少させる、
（ｘ）制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の割合または活性を増加させる、
（ｘｉ）ＴｒｅｇであるＣＤ４＋  Ｔ細胞の割合を増加させる、
（ｘｉｉ）ＩｇＧ１＋  Ｂ細胞の割合を減少させる、
（ｘｉｉｉ）胚中心Ｂ細胞の割合を減少させる、
（ｘｉｖ）ヒトＲＢＣ中の乳酸輸送を阻害しない、
（ｘｖ）Ｔ細胞活性化を減少させる、ならびに
（ｘｖｉ）細胞傷害性Ｔ細胞活性を減少させる、の１つ以上を有する、上記のいずれかに記載の方法を提供する。
【００９０】
本発明はさらに、狼瘡、移植片拒絶、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、１型もしくは２型糖尿病、または肥満症の少なくとも１つを治療または予防するために使用される、上記のいずれかに記載の方法を提供する。
【００９１】
本発明はさらに、治療有効性が、尿中ケトンの測定、ＴＲ１細胞数の増加、炎症性サイトカイン、ＩＦＮγ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、ＩＬ−１０、ＩＬ−６、ＩＬ−２、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ１、グランザイムＢから選択されるバイオマーカーの発現の減少もしくは増加、エフェクターＴ細胞および／もしくはｈＣＤ３＋細胞数の減少、ＰＭＢＣ増殖の抑制、または上記のいずれかの組み合わせによって監視される、上記のいずれかに記載の方法を提供する。
【００９２】
本発明はさらに、抗ＭＣＴ１アンタゴニスト抗体の治療有効性を評価する方法を提供し、上記：尿中ケトン、ＴＲ１細胞数、炎症性サイトカイン、ＩＦＮγ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、ＩＬ−１０、ＩＬ−６、ＩＬ−２、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ１、グランザイムＢから選択されるバイオマーカーの発現、エフェクターＴ細胞および／もしくはｈＣＤ３＋細胞数の減少、ＰＭＢＣ増殖の抑制、または上記のいずれかの組み合わせ、のいずれかに対するインビトロまたはインビボでのその効果を検出することを含む。
【００９３】
本発明はさらに、癌を治療する、またはその再発を予防するための方法を提供し、上記のいずれかに記載の、治療または予防有効量の、抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の少なくとも１つを発現する細胞、あるいは治療または予防有効量の上記のいずれかを含有する医薬組成物を、それを必要としている対象に投与することを含み、例えば、腫瘍細胞は、ＭＣＴ１を発現し、または対象は、哺乳動物であり、または対象は、ヒト、非ヒト霊長類、もしくはげっ歯類から選択される哺乳動物である。
【００９４】
本発明はさらに、活性化Ｔ細胞またはＢ細胞を阻害する、またはその活性を低減するための方法を提供し、前述の活性化細胞を、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の少なくとも１つを発現する細胞と接触させることを含む。
【００９５】
本発明はさらに、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の少なくとも１つを発現する細胞が、単剤療法として投与される、上記のいずれかに記載の方法を提供する。
【００９６】
本発明はさらに、上記のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合ポリペプチド、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、多重特異性抗原結合ポリペプチド、または多重特異性もしくは二重特異性抗体ポリペプチド、あるいは上記の少なくとも１つを発現する細胞が、第２の治療薬と組み合わせて投与される、上記のいずれかに記載の方法を提供し、例えば、治療薬は、免疫抑制薬、化学療法薬、ビグアニド、例えば、メトホルミンもしくは別の抗糖尿病薬、または抗炎症薬から選択されるか、あるいは前述の他の治療薬は、ミトコンドリア阻害剤および／またはビグアニドであるか、あるいは前述の他の治療薬は、メトホルミン、フェンホルミン、アレクシジン、ビスビグアニド、ブホルミム、クロロヘキシジン、クロルプログアニル、フェニルビグアニド、ポリアミノプロピルビグアニド、ポリヘキサニド、モロキシジン、グリピジド、グリブリド、レパグリニド、サクサグリプチン、シタグリプチン、パモ酸ピルビニウム、プログアニル、ドキシサイクリン、アトバクオン、カナグリフロジン、グリタゾン（例えば、トログリタゾン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン）、チゲサイクリン、チアゾリド（例えば、ニタゾキサニド）、サリチルアニリド（例えば、クロサンテル、オキシクロザニド、ニクロサミド）、ペルヘキシリン、プロプロノロール、フェノフィブラート、ミコナゾール、ネファゾドン、ペンタミジン、ヒドロコルチゾン、メタヨードベンジルグアニジン、ロニダミン、アルファトコフェリルスクシネート（一次形態のビタミンＥ）、炭酸脱水酵素、ＭＥ３４４（ＭＥＩ  Ｐｈａｒｍａ）、ＨＩＦ１ａ阻害剤（例えば、クリシン、ケトミン、ジメチル−ビスフェノールＡ、ＢＡＹ８４−２２４３）、ＳＲ１３８００、ジメチルオキサロイルグリシン（ＤＭＯＧ）、カルボニルシアニドｐ−トリフルオロメトキシフェニルヒドラゾン（ＦＣＣＰ）、カルボニルシアニドｍ−クロロフェニルヒドラゾン（ＣＣＣＰ）、アンチマイシンＡ、オリゴマイシン、サリノマイシン、ジニトロフェノール、ロテノン、フェンホルミン、チルホスチン９、アトペニンＡ５、ベルベリン、アジド、シアン化物、亜酸化窒素、三酸化ヒ素、ピルビニウム、カナグリフロジン、ロシグリタゾン、アモバルビタール、ホノキオール、アルクチゲニン、コーヒー酸フェニルエステル、ペルフェナジン、トリフルオペラジン、メチルグリオキサール、および上記のいずれかを含む組み合わせから選択される。
【００９７】
本発明はさらに、抗ＭＣＴ１抗体、その抗原結合フラグメント、融合タンパク質、または医薬組成物が、経腸的、非経口的、または局所的に投与される、上記のいずれかに記載の方法を提供する。
【００９８】
本発明はさらに、ＭＣＴ１に結合し、ＭＣＴ１媒介性乳酸輸送を低減する抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質による治療の有効性を監視するための方法を提供し、尿中ケトンのレベルを測定することを含む。
【００９９】
本発明はさらに、自己免疫、炎症、もしくはアレルギー状態；癌；ＥＩＨＩ；多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）；糖尿病もしくは他の代謝障害、および／またはＭＣＴ１の上方制御に関連する状態から選択される状態を診断するための方法を提供し、前述の方法は、
（ｉ）状態の媒介に関与する細胞を単離することと、
（ｉｉ）前述の細胞を、抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、またはＭＣＴ１結合融合タンパク質と接触させることと、
（ｉｉｉ）前述の細胞に結合した抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、またはＭＣＴ１結合融合タンパク質のレベルを検出することと、を含む。
【０１００】
本発明はさらに、状態が、自己免疫、炎症、移植、ＧＶＨＤ、代謝障害（例えば、糖尿病）、ＥＩＨＩ；多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）；またはアレルギー状態である、上記の治療および検出方法を提供し、例えば、状態は、自己免疫、炎症、移植、ＧＶＨＤ、代謝障害（例えば、糖尿病）、多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）、またはアレルギー状態であり、細胞は、活性化Ｔ細胞もしくはＢ細胞であるか、または状態は、癌であり、細胞は、腫瘍細胞であるか、または状態は、ＥＩＨＩであり、細胞は、ベータ細胞である。
【０１０１】
本発明はさらに、抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、またはＭＣＴ１結合融合タンパク質が、以下：
（ｉ）Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかから選択される抗ＭＣＴ１抗体、または上記の抗ＭＣＴ１抗体のいずれかと同じＣＤＲを含む別の抗ＭＣＴ１抗体と競合する、
（ｉｉ）Ａｂ１〜Ａｂ９５から選択される抗ヒトＭＣＴ１抗体と同じＣＤＲを含む、
（ｉｉｉ）Ａｂ１〜Ａｂ９５から選択される抗ヒトＭＣＴ１抗体の親和性成熟またはヒト化変異体を含む、
（ｉｖ）ＭＣＴ１  Ａｂ１（配列番号２）、またはＡｂ１〜Ａｂ５９のいずれかのＶＨドメインのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するＶＨドメインを含み、かつＭＣＴ１  Ａｂ１（配列番号３）、またはＡｂ２〜Ａｂ９５のいずれかのＶＬドメインのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するＶＬドメインを含む抗体と競合する、
（ｖ）ＭＣＴ１  Ａｂ１の重鎖ＣＤＲ配列（配列番号４、５、６）およびＭＣＴ１  Ａｂ１の軽鎖ＣＤＲ配列（配列番号７、８、９）、またはＡｂ２〜Ａｂ９５のいずれかのものを含む、
（ｖｉ）ＭＣＴ１  Ａｂ１（配列番号２）、またはＡｂ２〜Ａｂ６０のいずれかのＶＨドメインのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するＶＨドメインを含み、かつＭＣＴ１  Ａｂ１（配列番号３）、またはＡｂ２〜Ａｂ６０のいずれかのＶＬドメインのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するＶＬドメインを含む抗体と競合するか、またはそれ自体がこれらを含む、
（ｖｉｉ）配列番号２、１２、１４、１６、１９〜３２のアミノ酸配列から選択されるか、またはＡｂ５〜Ａｂ６０のいずれかのＶＨドメインのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するＶＨドメインを含む抗体と競合するか、またはそれ自体がこれらを含む、ならびに／あるいは
（ｖｉｉｉ）配列番号１３、１５、１７、もしくは３３〜４４のアミノ酸配列から選択されるか、またはＡｂ５〜Ａｂ６０のいずれかのＶＨドメインのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するＶＬドメインを含む抗体と競合するか、またはそれ自体がこれらを含む、ならびに／あるいは
（ｉｘ）配列番号６と同一の配列を含むか、またはそれから最大でも５、４、３、２、もしくは１つの残基だけ異なる配列を含む、少なくとも１つのペプチドを含み、前述のペプチドが、別のポリペプチド、例えば、抗体ポリペプチドもしくは抗体ドメイン、血清アルブミン、ヒトもしくは他の霊長類血清アルブミン、アドネクチン、アフィボディ、ＤＡＲＰｉｎ、アンチカリン、グリコール（ＰＥＧ）、モノメトキシＰＥＧ（ｍＰＥＧ）、ＸＴＥＮ分子、ｒＰＥＧ分子、または上記のいずれかのフラグメントもしくは変異体に直接または間接的に結合している、の１つ以上を含む、上記の治療および検出方法を提供する。
【０１０２】
細胞によるＭＣＴ１、任意に機能的ＭＣＴ１の発現を検出する本発明の方法は、上記の実施形態のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体のいずれかが前述の細胞によって発現したＭＣＴ１に結合するかどうかを決定することを含み、例えば、細胞は、ヒトまたは非ヒトであり、例えば、細胞は、自己免疫状態、アレルギー状態、炎症状態、代謝障害、癌、移植レシピエント、細胞療法レシピエント、ＥＩＨＩ状態、多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）を有するか、もしくは含むと疑われる患者から得られるか、または検出方法は、異常な（増加した）ＭＣＴ１発現もしくは活性を含む細胞を特徴とする、自己免疫状態、アレルギー状態、炎症状態、代謝障害、癌、移植レシピエント、細胞療法レシピエント、ＥＩＨＩ状態、多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）を有するか、もしくは含むと疑われる患者から得られた細胞試料を使用して、疾患もしくは疾患予後を診断もしくは監視するために使用される。
【０１０３】
いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、モノクローナル抗体；単一特異性抗体；多特異性抗体；ヒト化抗体；四量体抗体；四価抗体；多重特異性抗体；一本鎖抗体；ドメイン特異性抗体；単一ドメイン抗体；ドメイン欠失抗体；ｓｃＦｃ融合タンパク質；キメラ抗体；合成抗体；組換え抗体；ハイブリッド抗体；変異抗体；ＣＤＲグラフト化抗体；抗体フラグメント；Ｆａｂ；Ｆ（ａｂ′）２；Ｆａｂ′フラグメント；Ｆｖフラグメント；一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメント；Ｆｄフラグメント；ｄＡｂフラグメント；多重特異性抗体、ダイアボディ；ＢｙＴＥ、二価抗体、ナノボディ；二価ナノボディ；サメ可変ＩｇＮＡＲドメイン；ＶＨＨ抗体；ラクダ抗体；およびミニボディからなる群から選択される。
【０１０４】
いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、ヒト、ヒト化、もしくはキメラ抗体、またはその抗原結合フラグメントである。
【０１０５】
いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、本明細書においてＡｂ１〜Ａｂ９５として同定される抗体のいずれかと同じもしくは重複するエピトープと競合するか、またはそれに結合する抗ＭＣＴ１抗体であり、そのような抗体または抗原結合フラグメントは任意に、１つ以上のＭＣＴ１関連機能に拮抗し、例えば、ＭＣＴ１媒介性乳酸輸送を阻害する。
【０１０６】
いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、本明細書においてＡｂ１〜Ａｂ９５として同定される抗ＭＣＴ１抗体のいずれかとして少なくとも１、２、３、４、５、または６つのＣＤＲを含む抗ＭＣＴ１抗体であり、そのような抗体または抗原結合フラグメントは任意に、１つ以上のＭＣＴ１関連機能に拮抗し、例えば、ＭＣＴ１媒介性乳酸輸送を阻害する。
【０１０７】
いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、本明細書においてＡｂ１〜Ａｂ９５として同定される抗ＭＣＴ１抗体のいずれかのヒト化、キメラ、ｓｃＦｖ、または親和性成熟誘導体を含む抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントであり、そのような抗体または抗原結合フラグメントは任意に、１つ以上のＭＣＴ１関連機能に拮抗し、例えば、ＭＣＴ１媒介性乳酸輸送を阻害する。
【０１０８】
いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、本明細書においてＡｂ１〜Ａｂ９５として同定される抗ＭＣＴ１抗体のいずれかと同じＣＤＲ、または重および／または軽可変領域を含む少なくとも１つの抗ＭＣＴ１抗原結合ドメインを含む融合ポリペプチドまたは多重特異性ポリペプチドであり、そのような融合ポリペプチドまたは多重特異性ポリペプチドは任意に、１つ以上のＭＣＴ１関連機能に拮抗し、例えば、ＭＣＴ１媒介性乳酸輸送を阻害する。
【０１０９】
いくつかの実施形態では、抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントは、１９、２０、２１、２２、２３、または２４個のアミノ酸残基を含む重鎖ＣＤＲ３配列を含む。いくつかの実施形態では、重鎖ＣＤＲ３配列は、２１、２２、または２３個のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、重鎖ＣＤＲ３配列は、配列番号６と同一であるか、またはそれから最大で５、４、３、２、もしくは１つの残基だけ異なる。いくつかの実施形態では、前述の置換は、存在する場合、保存的アミノ酸置換を含むか、またはヒトもしくはげっ歯類抗体の重鎖ＣＤＲ３の同じ位置でよく見られる置換アミノ酸を含む。
【０１１０】
いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、参照抗体とＭＣＴ１への結合を競合し、参照抗体は、
ｉ．ＭＣＴ１  Ａｂ１の重鎖ＣＤＲ配列（配列番号４、５、６）およびＭＣＴ１  Ａｂ１の軽鎖ＣＤＲ配列（配列番号７、８、９）、または
ｉｉ．ＭＣＴ１  Ａｂ１のＶＨドメインのアミノ酸配列（配列番号２）に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するＶＨドメイン、およびＭＣＴ１  Ａｂ１のＶＬドメインのアミノ酸配列（配列番号３）に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するＶＬドメインを含むもの、を含む。
【０１１１】
いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、ＭＣＴ１  Ａｂ１の重鎖ＣＤＲ配列（配列番号４、５、６）およびＭＣＴ１  Ａｂ１の軽鎖ＣＤＲ配列（配列番号７、８、９）を含む。
【０１１２】
いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、ＭＣＴ１  Ａｂ１のＶＨドメインのアミノ酸配列（配列番号２）に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＨドメインを含み、かつＭＣＴ１  Ａｂ１のＶＬドメインのアミノ酸配列（配列番号３）に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＬドメインを含む。
【０１１３】
いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、本明細書においてＡｂ１〜Ａｂ９５として同定される抗ＭＣＴ１抗体のいずれかのＶＨドメインに含まれるものと同じＣＤＲを含むＶＨドメインを含み、かつ／または本明細書においてＡｂ１〜Ａｂ８３として同定される抗ＭＣＴ１抗体のいずれかのＶＨドメインと同じＣＤＲを含むＶＬドメインを含む。
【０１１４】
いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、本明細書においてＡｂ１〜Ａｂ９５として同定される抗ＭＣＴ１抗体のいずれかのＶＨドメインのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するＶＨドメインを含み、かつ／または本明細書においてＡｂ１〜Ａｂ８３として同定される抗ＭＣＴ１抗体のいずれかのＶＨドメインのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するＶＬドメインを含む。
【０１１５】
いくつかの実施形態では、抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントは、本発明による抗ＭＣＴ１抗体によって結合されるエピトープの以下の残基の１つ以上、すなわち、Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかに結合し、任意に、エピトープを構成する残基は、アラニンスキャニングによって同定される。
【０１１６】
いくつかの実施形態では、抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントのＣＤＲは、図２１に示されるように、構造アライメントによって決定したときに２．０Å未満、１．０Å未満、または０．５Å未満の二乗平均偏差（ＲＭＳＤ）だけ異なる対応するＣＤＲのアルファ炭素の位置によって示されるように、ＭＣＴ１  Ａｂ１のものと同様の三次元抗体構造を有する。
【０１１７】
本発明はさらに、配列番号２、１２、１４、１６、１９〜３２、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０３、１０５、１０７、１０９、１１１、１１３、１１５、１１７、１１９、１２１、１２３、１２５、１２７、１２９、１３１、１３３、１３５、１３７、１３９、１４１、１４３、１４５、１４７、１４９、１５１、１５３、および１５５から選択されるアミノ酸配列を有する可変重鎖ポリペプチドまたは重鎖ポリペプチド、ならびに配列番号３、１３、１５、１７、３３〜４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１５０、１５２、１４４、１４６、１４８、１５０、１５２、１５４、および１５６から選択されるアミノ酸配列を有する可変軽鎖ポリペプチドまたは軽鎖ポリペプチドを含む、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【０１１８】
本発明は具体的に、以下：配列番号２および３、配列番号１２および１３、配列番号１４および１５、配列番号１６および１７、配列番号４５および４６、配列番号４７および４８、配列番号４９および５０、配列番号５１および５２、配列番号５３および５４、配列番号５５および５６、配列番号５７および５８、配列番号５９および６０、配列番号６１および６２、配列番号６３および６４、配列番号６５および６６、配列番号６７および６８、配列番号６９および７０、配列番号７１および７２、配列番号７３および７４、配列番号７５および７６、配列番号７７および７８、配列番号７９および８０、配列番号８１および８２、配列番号８３および８４、配列番号８５および８６、配列番号８７および８８、配列番号８９および９０、配列番号９１および９２、配列番号９３および９４、配列番号９５および９６、配列番号９７および９８、配列番号９９および１００、配列番号１０１および１０２、配列番号１０３および１０４、配列番号１０５および１０６、配列番号１０７および１０８、配列番号１０９および１１０、配列番号１１１および１１２、配列番号１１３および１１４、配列番号１１５および１１６、配列番号１１７および１１８、配列番号１１９および１２０、配列番号１２１および１２２、配列番号１２３および１２４、配列番号１２５および１２６、配列番号１２７および１２８、配列番号１２９および１３０、配列番号１３１および１３２、配列番号１３３および１３４、配列番号１３５および１３６、配列番号１３７および１３８、配列番号１３９および１４０、配列番号１４１および１４２、配列番号１４３および１４４、配列番号１４５および１４６、配列番号１４７および１４８、配列番号１４９および１５０、配列番号１５１および１５２、配列番号１５３および１５４、ならびに配列番号１５５および１５６からそれぞれ選択されるアミノ酸配列を有する可変重鎖ポリペプチドおよび可変軽鎖ポリペプチドを含む、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【０１１９】
本発明はさらに、ＭＣＴ１  Ａｂ１のＶＨドメインのアミノ酸配列（配列番号２）に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＨドメインを含み、かつＭＣＴ１  Ａｂ１のＶＬドメインのアミノ酸配列（配列番号３）に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＬドメインを含む、単離された抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。
【０１２０】
本発明はまた、配列番号６と同一の配列を含むか、またはそれから最大でも５、４、３、２、もしくは１つの残基だけ異なる配列を含む少なくとも１つのペプチドを含む、融合タンパク質を提供し、前述のペプチドは、別のポリペプチド、例えば、抗体ポリペプチドもしくは抗体ドメイン、血清アルブミン、ヒトもしくは他の霊長類血清アルブミン、アドネクチン、アフィボディ、ＤＡＲＰｉｎ、アンチカリン、グリコール（ＰＥＧ）、モノメトキシＰＥＧ（ｍＰＥＧ）、ＸＴＥＮ分子、ｒＰＥＧ分子、または上記のいずれかのフラグメントもしくは変異体に直接または間接的に結合している。いくつかの実施形態では、抗体ポリペプチドまたはドメインは、Ｆｃポリペプチドまたはそのフラグメント、例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、もしくはＩｇＧ４のＦｃ領域またはそのフラグメントを含む。いくつかの実施形態では、前述の置換は、存在する場合、保存的アミノ酸置換を含むか、またはヒトもしくはげっ歯類抗体の重鎖ＣＤＲ３の同じ位置でよく見られる置換アミノ酸を含む。
【０１２１】
いくつかの実施形態では、抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質は、活性化Ｔ細胞またはＢ細胞の表面上のＭＣＴ１に結合すると、以下の特性：
ｉ．乳酸の輸送を阻害する、
ｉｉ．ブロモピルビン酸の輸送を阻害する、
ｉｉｉ．モノカルボン酸、ピルビン酸、ロイシン、バリンおよびイソロイシンに由来する分岐鎖オキソ酸、ケトン体、アセト酢酸、ベータ−ヒドロキシ酪酸、酢酸、乳酸、細胞栄養素、代謝産物、イオン、ホルモン脂質、およびケトンのうちの１つまたはそれ以上の輸送を阻害する、
ｉｖ．ＣＤ３／ＣＤ２８刺激Ｔ細胞の増殖を阻害する、
ｖ．活性化Ｔ細胞もしくはＢ細胞の増殖を阻害する、
ｖｉ．１つまたはそれ以上の炎症性サイトカインの産生を阻害する、
ｖｉｉ．制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の割合または活性を増加させる、ならびに
ｖｉｉｉ．混合リンパ球反応における同種異系活性化を阻害する
のうちの１つ以上を有する。
【０１２２】
いくつかの実施形態では、抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質は、ＭＣＴ１に結合すると、１つ以上の炎症性サイトカインの産生を阻害する。いくつかの実施形態では、１つ以上のサイトカイン、例えば、炎症性サイトカインの少なくとも１つ、そのようなサイトカインは、以下：ＦＧＦ２、ＦＬＴ−３Ｌ、フラクタルカイン、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＧＲＯ、ＩＦＮα２、ＩＦＮγ、ＩＬ−３、ＩＬ−５、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２ｐ４０、ＩＬ−１２ｐ７０、ＩＬ−１３、ＩＬ−１７ａ、ＩＰ−１０、ＭＣＰ−１、ＭＤＣ、ＭＩＰ−１ａ、ＭＩＰ−１ｂ、ｓＣＤ４０Ｌ、ＴＮＦα、およびＴＮＦβの１つを含み得る。いくつかの実施形態では、１つ以上の炎症性サイトカインの少なくとも１つは、ＩＦＮγ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、ＩＬ−１０、およびＩＬ−６から選択される。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質は、乳酸ＦＬＩＰＲアッセイを介して測定したときに１００ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、または１０ｎＭ未満のＫｄを有する活性化Ｔ細胞におけるＭＣＴ１媒介性乳酸輸送を阻害する。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質は、
ｉ．フローサイトメトリーによって測定したときにＭＣＴ２、ＭＣＴ３、ＭＣＴ４、および／またはＣＤ１４７に結合しない、
ｉｉ．ＭＣＴ２、ＭＣＴ３、および／またはＭＣＴ４輸送を阻害しない、
ｉｉｉ．ＩＬ−２の産生を阻害しない、
ｉｖ．単球における乳酸輸送を阻害しない、
ｖ．未感作、静止、および／または制御性Ｔ細胞の増殖を阻害しない、
ｖｉ．ＲＢＣにおける乳酸輸送を阻害しない、
ｖｉｉ．ＣＤ２５、ＣＤ５４、ＣＤ６９、ＣＤ９５、ＣＤ９８、ＣＤ１４７、ＣＤ１５４、ＣＤ２７８、ＣＤ２７９、およびＨＬＡ−ＤＲ／ＤＰ／ＤＱから任意に選択される、１つ以上のＴ細胞活性化マーカーの発現を改変しない。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４のＦｃ領域を含む。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質は、エフェクター機能、半減期、タンパク質分解、またはグリコシル化の少なくとも１つを改変するように修飾されたＦｃ領域を含み、任意に、Ｆｃ領域は、Ｎ−および／またはＯ−グリコシル化を改変または排除する１つ以上の変異を含む。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質は、１００ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、または１０ｎＭ未満の親和性（ＫＤ）を有するＭＣＴ１に結合する。
【０１２８】
いくつかの実施形態では、抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質は、さらに、以下の修飾：
ｉ．細胞毒性薬に共役される、
ｉｉ．二重特異性抗体に含まれる、
ｉｉｉ．多重特異性抗原結合タンパク質に含まれる、
ｉｖ．標識に共役される、および
ｖ．別の治療薬、任意に、免疫抑制薬または化学療法薬に共役される、の１つ以上を有する。
【０１２９】
いくつかの実施形態では、標識は、化学発光標識、常磁性標識、ＭＲＩ造影剤、蛍光標識、生物発光標識、または放射性標識である。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、細胞毒性薬は、ＤＮＡ、ＲＮＡ、またはタンパク質合成を阻害する部分；放射性核種；またはリボソーム阻害タンパク質である。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質は、自己免疫、炎症、もしくはアレルギー状態；癌；またはＥＩＨＩを有するヒト対象を治療するのに適している。
【０１３２】
本発明はまた、任意に、それが結合する抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントの１つ以上の生物学的効果を中和する、前述の実施形態のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントに対して産生された、抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。本発明はさらに、抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合フラグメントに対して産生された、抗抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合フラグメントを提供し、任意に、抗抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合フラグメントは、それが結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合フラグメントを中和する。
【０１３３】
さらに、いくつかの実施形態では、本発明は、対象における前述の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメントのインビボレベルを監視するか、または対象における前述の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメントのインビボ効果を中和するための、抗イディオタイプ抗体を使用する方法に関する。
【０１３４】
本発明はまた、上記の実施形態のいずれかによる抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質をコードする単離されたポリヌクレオチドを提供する。加えて、そのようなポリヌクレオチドを含む発現ベクターが提供される。本発明はまた、発現ベクターを含む宿主細胞を提供する。本発明はさらに、単離された抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを産生する方法に関し、抗体またはその抗原結合フラグメントの発現を可能にする条件下で、宿主細胞を培養することと、培養培地または宿主細胞から抗体またはその抗原結合フラグメントを回収することと、を含む。
【０１３５】
本発明はさらに、薬学的有効量の、上記の実施形態のいずれかに記載の、単離された抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質、あるいはそれを発現する細胞を含む医薬組成物を提供し、これはさらに、薬学的希釈剤、担体、または賦形剤を含んでもよい。
【０１３６】
自己免疫、アレルギー、または炎症状態を治療または予防するための方法も本明細書において提供され、治療または予防有効量の、上記の実施形態のいずれかに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質、あるいは上記の医薬組成物を、それを必要としている対象に投与することを含む。
【０１３７】
いくつかの実施形態では、状態は、活性化Ｔ細胞またはＢ細胞によって少なくとも部分的に媒介される。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質の投与は、以下の効果：
ｉ．活性化Ｔ細胞またはＢ細胞における乳酸輸送を阻害する、
ｉｉ．活性化Ｔ細胞またはＢ細胞におけるブロモピルビン酸毒素の輸送を阻害する、
ｉｉｉ．ＣＤ３／ＣＤ２８刺激Ｔ細胞の増殖を阻害する、
ｉｖ．活性化Ｔ細胞の増殖を阻害する、
ｖ．１つ以上の炎症性サイトカインの産生および／または分泌を阻害する、
ｖｉ．ＩＬ−２の産生および／または分泌を阻害しない、
ｖｉｉ．尿中ケトンの産生を増加させる、
ｖｉｉｉ．生存期間を延長する、
ｉｘ．移植片拒絶を減少させる、
ｘ．制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の割合または活性を増加させる、
ｘｉ．ＴｒｅｇであるＣＤ４＋  Ｔ細胞の割合を増加させる、
ｘｉｉ．ＩｇＧ１＋  Ｂ細胞の割合を減少させる、
ｘｉｉｉ．胚中心Ｂ細胞の割合を減少させる、
ｘｉｖ．ヒトＲＢＣ中の乳酸輸送を阻害しない、
ｘｖ．Ｔ細胞活性化を減少させる、ならびに
ｘｖｉ．細胞傷害性Ｔ細胞活性を減少させる、の１つ以上を有する。
【０１３９】
いくつかの実施形態では、方法は、狼瘡を治療または予防するために使用される。
【０１４０】
いくつかの実施形態では、方法は、移植片拒絶を治療または予防するために使用される。
【０１４１】
いくつかの実施形態では、方法は、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）を治療または予防するために使用される。
【０１４２】
いくつかの実施形態では、方法は、糖尿病を治療または予防するために使用される。
【０１４３】
いくつかの実施形態では、方法は、肥満症を治療または予防するために使用される。
【０１４４】
いくつかの実施形態では、治療有効性は、尿中ケトンの測定を介して監視される。
【０１４５】
本発明はさらに、癌を治療する、またはその再発を予防するための方法を提供し、治療または予防有効量の、上記の実施形態のいずれか１つに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質、あるいは上記の実施形態に記載の医薬組成物を、それを必要としている対象に投与することを含む。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は、ＭＣＴ１を発現する。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、対象は、哺乳動物である。いくつかの実施形態では、哺乳動物は、ヒトである。いくつかの実施形態では、哺乳動物は、非ヒト霊長類である。いくつかの実施形態では、哺乳動物は、げっ歯類である。
【０１４８】
本発明はまた、活性化Ｔ細胞またはＢ細胞を阻害する、またはその活性を低減するための方法を提供し、前述の活性化細胞を、上記の実施形態のいずれか１つに記載の抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質と接触させることを含む。
【０１４９】
いくつかの実施形態では、抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質は、単剤療法として投与される。
【０１５０】
いくつかの実施形態では、抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質は、第２の治療薬と組み合わせて投与される。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、治療薬は、免疫抑制薬または化学療法薬から選択される。
【０１５２】
いくつかの実施形態では、抗ＭＣＴ１抗体、その抗原結合フラグメント、融合タンパク質、または医薬組成物は、経腸的、非経口的、または局所的に投与される。
【０１５３】
本発明はさらに、ＭＣＴ１に結合し、ＭＣＴ１媒介性乳酸輸送を低減する抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または融合タンパク質による治療の有効性を監視するための方法を提供し、尿中ケトンのレベルを測定することを含む。
【０１５４】
さらなる態様では、本発明は、自己免疫、炎症、またはアレルギー状態；癌；ＥＩＨＩ；およびＭＣＴ１の上方制御に関連する状態から選択される状態を診断するための方法を提供し、前述の方法は、
ｉ．状態の媒介に関与する細胞を単離することと、
ｉｉ．前述の細胞を、抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、またはＭＣＴ１結合融合タンパク質と接触させることと、
ｉｉｉ．前述の細胞に結合した抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、またはＭＣＴ１結合融合タンパク質のレベルを検出することと、を含む。
【０１５５】
いくつかの実施形態では、状態は、自己免疫、炎症、またはアレルギー状態であり、細胞は、活性化Ｔ細胞またはＢ細胞である。
【０１５６】
いくつかの実施形態では、状態は、癌であり、細胞は、腫瘍細胞である。
【０１５７】
いくつかの実施形態では、状態は、ＥＩＨＩであり、細胞は、ベータ細胞である。
【０１５８】
いくつかの実施形態では、抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、またはＭＣＴ１結合融合タンパク質は、
ｉ．ＭＣＴ１  Ａｂ１の重鎖ＣＤＲ配列（配列番号４、５、６）およびＭＣＴ１  Ａｂ１の軽鎖ＣＤＲ配列（配列番号７、８、９）を含む抗体、またはＡｂ１〜Ａｂ９５のいずれかから選択される抗ＭＣＴ１抗体と競合する、
ｉｉ．ＭＣＴ１  Ａｂ１のＶＨドメインのアミノ酸配列（配列番号２）、またはＡｂ１〜Ａｂ９５のいずれかのＶＨドメインに対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＨドメインを含み、さらにＭＣＴ１  Ａｂ１のＶＬドメインのアミノ酸配列（配列番号３）、またはＡｂ１〜Ａｂ９５のいずれかのＶＬドメインに対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＬドメインを含む、抗体と競合する、
ｉｉｉ．ＭＣＴ１  Ａｂ１の重鎖ＣＤＲ配列（配列番号４、５、６）およびＭＣＴ１  Ａｂ１の軽鎖ＣＤＲ配列（配列番号７、８、９）を含む、
ｉｖ．ＭＣＴ１  Ａｂ１のＶＨドメインのアミノ酸配列（配列番号２）に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＨドメインを含み、かつＭＣＴ１  Ａｂ１のＶＬドメインのアミノ酸配列（配列番号３）に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＬドメインを含む、あるいは
ｖ．配列番号６と同一の配列を含むか、またはそれから最大でも５、４、３、２、もしくは１つの残基だけ異なる配列を含む、少なくとも１つのペプチドを含み、前述のペプチドは、別のポリペプチド、例えば、抗体ポリペプチドもしくは抗体ドメイン、血清アルブミン、ヒトもしくは他の霊長類血清アルブミン、アドネクチン、アフィボディ、ＤＡＲＰｉｎ、アンチカリン、グリコール（ＰＥＧ）、モノメトキシＰＥＧ（ｍＰＥＧ）、ＸＴＥＮ分子、ｒＰＥＧ分子、または上記のいずれかのフラグメントもしくは変異体に直接または間接的に結合している。
【図面の簡単な説明】
【０１５９】
【図１】白血球の代謝状態が異なる免疫学的特性に関連していることを示す（参考文献３３）。静止細胞、記憶細胞、およびＴｒｅｇ細胞が、酸化的リン酸化（Ｏｘｐｈｏｓ）に依存している一方で（左）、エフェクターＴ細胞増殖およびエフェクター機能は、抗原活性化後の解糖に大きく依存している（右）。
【図２】ＣＤ３／ＣＤ２８の活性化が、より高いＭＣＴ１およびＭＣＴ４発現を誘発すること、ならびにＡＺ３９６５による増殖阻害のＩＣ５０値が、ＭＣＴ４の高（ドナー１）または低（ドナー２）発現レベルの存在下で変化しないことを示す（Ｓ＝３日間刺激、ＮＳ＝刺激なし、ＢＳＧ＝ベイシジン／ＣＤ１４７）。ドナー１の左から右に、バーは、ＭＣＴ２、ＭＣＴ４、およびＢＳＧの刺激されていない発現に対応し、ＭＣＴ１、ＭＣＴ２、ＭＣＴ４、およびＢＳＧの刺激された発現がそれに続く。注：ドナー１は、刺激されていない細胞ではＭＣＴ１の発現がなかった。ドナー２の左から右に、バーは、ＭＣＴ１、ＭＣＴ２、ＭＣＴ４、およびＢＳＧの刺激されていない発現に対応し、ＭＣＴ１、ＭＣＴ２、ＭＣＴ４、およびＢＳＧの刺激された発現がそれに続く。
【図３】ＡＺ３９６５を用いた乳酸ＦＬＩＰＲアッセイの結果を含む。ＡＺ３９６５は、ヒトＣＤ４＋  Ｔ細胞（ＣＤ４）、ＣＤ８＋  Ｔ細胞（ＣＤ８）、Ｂ細胞リンパ腫細胞（Ｄａｕｄｉ）、および末梢血単核球（ＰＢＭＣ）における乳酸輸送を阻害するが、単球（Ｍｏｎｏ）では阻害しない。１００ｎＭのＡＺ３９６５の上から下に、曲線は、Ｄａｕｄｉ、ＣＤ４、ＣＤ８、ＰＢＭＣ、およびＭｏｎｏに対応する。
【図４】小分子ＭＣＴ１阻害剤を用いたヒトＴ細胞増殖アッセイの結果を含む。ＭＣＴ１阻害は、０．５４ｎＭのＩＣ５０でＴ細胞増殖の阻害をもたらす。
【図５】小分子ＭＣＴ１阻害剤を用いたヒト混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイの結果を含む。このＭＬＲアッセイにおけるＴ細胞増殖は、１．３４ｎＭのＩＣ５０で阻害された。
【図６】ＡＺ３９６５投与後のインビトロでのＴ細胞サイトカイン分泌の阻害を示す。Ｔ細胞を、薬物投与前の５日間ＣＤ３／ＣＤ２８で活性化した。図の赤い領域（より高い発現）は、黒い点線で縁取られている。他の全ての領域は、青色である（より低い発現）。陰影の強度も発現を示す。ＡＺ３９６５は、ＩＦＮγ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、ＩＬ−１０、およびＩＬ−６の分泌を阻害するが、ＩＬ−２は阻害しない。
【図７Ａ】１００ｎＭの小分子ＭＣＴ１阻害剤による処置または処置なしの４日後の活性化Ｔ細胞における様々なＴ細胞表面マーカーの発現を、非染色対照と比較して示す。各パネルで、抗体非染色対照は、左端のピークである。各パネルで、処置済み状態と未処置状態との間の染色に有意差はない。未処置状態は、処置状態の曲線がわずかにより高い図７Ｈを除いて、全てのパネルについてわずかにより高い曲線である。ここに示される結果は、以下の細胞表面メーカーについてのものである：ＣＤ２５（図７Ａ）、ＣＤ５４（図７Ｂ）、ＣＤ６９（図７Ｃ）、ＣＤ９５（図７Ｄ）、ＣＤ９８（図７Ｅ）、ＣＤ１４７（図７Ｆ）、ＣＤ１５４（図７Ｇ）、ＣＤ２７８（図７Ｈ）、ＣＤ２７９（図７Ｉ）、およびＨＬＡ−ＤＲ、ＤＰ、ＤＱ（図７Ｊ）。
【図７Ｂ】１００ｎＭの小分子ＭＣＴ１阻害剤による処置または処置なしの４日後の活性化Ｔ細胞における様々なＴ細胞表面マーカーの発現を、非染色対照と比較して示す。各パネルで、抗体非染色対照は、左端のピークである。各パネルで、処置済み状態と未処置状態との間の染色に有意差はない。未処置状態は、処置状態の曲線がわずかにより高い図７Ｈを除いて、全てのパネルについてわずかにより高い曲線である。ここに示される結果は、以下の細胞表面メーカーについてのものである：ＣＤ２５（図７Ａ）、ＣＤ５４（図７Ｂ）、ＣＤ６９（図７Ｃ）、ＣＤ９５（図７Ｄ）、ＣＤ９８（図７Ｅ）、ＣＤ１４７（図７Ｆ）、ＣＤ１５４（図７Ｇ）、ＣＤ２７８（図７Ｈ）、ＣＤ２７９（図７Ｉ）、およびＨＬＡ−ＤＲ、ＤＰ、ＤＱ（図７Ｊ）。
【図７Ｃ】１００ｎＭの小分子ＭＣＴ１阻害剤による処置または処置なしの４日後の活性化Ｔ細胞における様々なＴ細胞表面マーカーの発現を、非染色対照と比較して示す。各パネルで、抗体非染色対照は、左端のピークである。各パネルで、処置済み状態と未処置状態との間の染色に有意差はない。未処置状態は、処置状態の曲線がわずかにより高い図７Ｈを除いて、全てのパネルについてわずかにより高い曲線である。ここに示される結果は、以下の細胞表面メーカーについてのものである：ＣＤ２５（図７Ａ）、ＣＤ５４（図７Ｂ）、ＣＤ６９（図７Ｃ）、ＣＤ９５（図７Ｄ）、ＣＤ９８（図７Ｅ）、ＣＤ１４７（図７Ｆ）、ＣＤ１５４（図７Ｇ）、ＣＤ２７８（図７Ｈ）、ＣＤ２７９（図７Ｉ）、およびＨＬＡ−ＤＲ、ＤＰ、ＤＱ（図７Ｊ）。
【図７Ｄ】１００ｎＭの小分子ＭＣＴ１阻害剤による処置または処置なしの４日後の活性化Ｔ細胞における様々なＴ細胞表面マーカーの発現を、非染色対照と比較して示す。各パネルで、抗体非染色対照は、左端のピークである。各パネルで、処置済み状態と未処置状態との間の染色に有意差はない。未処置状態は、処置状態の曲線がわずかにより高い図７Ｈを除いて、全てのパネルについてわずかにより高い曲線である。ここに示される結果は、以下の細胞表面メーカーについてのものである：ＣＤ２５（図７Ａ）、ＣＤ５４（図７Ｂ）、ＣＤ６９（図７Ｃ）、ＣＤ９５（図７Ｄ）、ＣＤ９８（図７Ｅ）、ＣＤ１４７（図７Ｆ）、ＣＤ１５４（図７Ｇ）、ＣＤ２７８（図７Ｈ）、ＣＤ２７９（図７Ｉ）、およびＨＬＡ−ＤＲ、ＤＰ、ＤＱ（図７Ｊ）。
【図７Ｅ】１００ｎＭの小分子ＭＣＴ１阻害剤による処置または処置なしの４日後の活性化Ｔ細胞における様々なＴ細胞表面マーカーの発現を、非染色対照と比較して示す。各パネルで、抗体非染色対照は、左端のピークである。各パネルで、処置済み状態と未処置状態との間の染色に有意差はない。未処置状態は、処置状態の曲線がわずかにより高い図７Ｈを除いて、全てのパネルについてわずかにより高い曲線である。ここに示される結果は、以下の細胞表面メーカーについてのものである：ＣＤ２５（図７Ａ）、ＣＤ５４（図７Ｂ）、ＣＤ６９（図７Ｃ）、ＣＤ９５（図７Ｄ）、ＣＤ９８（図７Ｅ）、ＣＤ１４７（図７Ｆ）、ＣＤ１５４（図７Ｇ）、ＣＤ２７８（図７Ｈ）、ＣＤ２７９（図７Ｉ）、およびＨＬＡ−ＤＲ、ＤＰ、ＤＱ（図７Ｊ）。
【図７Ｆ】１００ｎＭの小分子ＭＣＴ１阻害剤による処置または処置なしの４日後の活性化Ｔ細胞における様々なＴ細胞表面マーカーの発現を、非染色対照と比較して示す。各パネルで、抗体非染色対照は、左端のピークである。各パネルで、処置済み状態と未処置状態との間の染色に有意差はない。未処置状態は、処置状態の曲線がわずかにより高い図７Ｈを除いて、全てのパネルについてわずかにより高い曲線である。ここに示される結果は、以下の細胞表面メーカーについてのものである：ＣＤ２５（図７Ａ）、ＣＤ５４（図７Ｂ）、ＣＤ６９（図７Ｃ）、ＣＤ９５（図７Ｄ）、ＣＤ９８（図７Ｅ）、ＣＤ１４７（図７Ｆ）、ＣＤ１５４（図７Ｇ）、ＣＤ２７８（図７Ｈ）、ＣＤ２７９（図７Ｉ）、およびＨＬＡ−ＤＲ、ＤＰ、ＤＱ（図７Ｊ）。
【図７Ｇ】１００ｎＭの小分子ＭＣＴ１阻害剤による処置または処置なしの４日後の活性化Ｔ細胞における様々なＴ細胞表面マーカーの発現を、非染色対照と比較して示す。各パネルで、抗体非染色対照は、左端のピークである。各パネルで、処置済み状態と未処置状態との間の染色に有意差はない。未処置状態は、処置状態の曲線がわずかにより高い図７Ｈを除いて、全てのパネルについてわずかにより高い曲線である。ここに示される結果は、以下の細胞表面メーカーについてのものである：ＣＤ２５（図７Ａ）、ＣＤ５４（図７Ｂ）、ＣＤ６９（図７Ｃ）、ＣＤ９５（図７Ｄ）、ＣＤ９８（図７Ｅ）、ＣＤ１４７（図７Ｆ）、ＣＤ１５４（図７Ｇ）、ＣＤ２７８（図７Ｈ）、ＣＤ２７９（図７Ｉ）、およびＨＬＡ−ＤＲ、ＤＰ、ＤＱ（図７Ｊ）。
【図７Ｈ】１００ｎＭの小分子ＭＣＴ１阻害剤による処置または処置なしの４日後の活性化Ｔ細胞における様々なＴ細胞表面マーカーの発現を、非染色対照と比較して示す。各パネルで、抗体非染色対照は、左端のピークである。各パネルで、処置済み状態と未処置状態との間の染色に有意差はない。未処置状態は、処置状態の曲線がわずかにより高い図７Ｈを除いて、全てのパネルについてわずかにより高い曲線である。ここに示される結果は、以下の細胞表面メーカーについてのものである：ＣＤ２５（図７Ａ）、ＣＤ５４（図７Ｂ）、ＣＤ６９（図７Ｃ）、ＣＤ９５（図７Ｄ）、ＣＤ９８（図７Ｅ）、ＣＤ１４７（図７Ｆ）、ＣＤ１５４（図７Ｇ）、ＣＤ２７８（図７Ｈ）、ＣＤ２７９（図７Ｉ）、およびＨＬＡ−ＤＲ、ＤＰ、ＤＱ（図７Ｊ）。
【図７Ｉ】１００ｎＭの小分子ＭＣＴ１阻害剤による処置または処置なしの４日後の活性化Ｔ細胞における様々なＴ細胞表面マーカーの発現を、非染色対照と比較して示す。各パネルで、抗体非染色対照は、左端のピークである。各パネルで、処置済み状態と未処置状態との間の染色に有意差はない。未処置状態は、処置状態の曲線がわずかにより高い図７Ｈを除いて、全てのパネルについてわずかにより高い曲線である。ここに示される結果は、以下の細胞表面メーカーについてのものである：ＣＤ２５（図７Ａ）、ＣＤ５４（図７Ｂ）、ＣＤ６９（図７Ｃ）、ＣＤ９５（図７Ｄ）、ＣＤ９８（図７Ｅ）、ＣＤ１４７（図７Ｆ）、ＣＤ１５４（図７Ｇ）、ＣＤ２７８（図７Ｈ）、ＣＤ２７９（図７Ｉ）、およびＨＬＡ−ＤＲ、ＤＰ、ＤＱ（図７Ｊ）。
【図７Ｊ】１００ｎＭの小分子ＭＣＴ１阻害剤による処置または処置なしの４日後の活性化Ｔ細胞における様々なＴ細胞表面マーカーの発現を、非染色対照と比較して示す。各パネルで、抗体非染色対照は、左端のピークである。各パネルで、処置済み状態と未処置状態との間の染色に有意差はない。未処置状態は、処置状態の曲線がわずかにより高い図７Ｈを除いて、全てのパネルについてわずかにより高い曲線である。ここに示される結果は、以下の細胞表面メーカーについてのものである：ＣＤ２５（図７Ａ）、ＣＤ５４（図７Ｂ）、ＣＤ６９（図７Ｃ）、ＣＤ９５（図７Ｄ）、ＣＤ９８（図７Ｅ）、ＣＤ１４７（図７Ｆ）、ＣＤ１５４（図７Ｇ）、ＣＤ２７８（図７Ｈ）、ＣＤ２７９（図７Ｉ）、およびＨＬＡ−ＤＲ、ＤＰ、ＤＱ（図７Ｊ）。
【図８】ＡＺ３９６５を用いた異種ＧＶＨＤアッセイの結果を示す。ＡＺ３９６５は、休薬までＧＶＨＤ罹患率を遮断し、ＪＡＫ阻害剤よりも優れている。
【図９】ＡＺ３９６５投与期間中の異種ＧＶＨＤ実験（図８）についての組織Ｔｒｅｇの頻度の用量依存的増加を示す。
【図１０】移植片拒絶に対するＭＣＴ１小分子阻害剤の効果を示す。１０日目に、視覚的および移植片分析の両方で、２５ｍｇ／ｋｇの化合物の２回／日の投与は、移植片拒絶反応を低減した。
【図１１Ａ】ＡＺ３９６５の投与が、ヒツジＲＢＣに曝露されたマウスのＩｇＧ１  Ｂ細胞および胚中心Ｂ細胞の割合を低減することを示す。図１１Ａは、ＡＺ３９６５の２．５ｍｐｋ投与でのＩｇＧ１  Ｂ細胞の減少を示し、図１１Ｂは、同じ投与量での胚中心Ｂ細胞の減少を示す。
【図１１Ｂ】ＡＺ３９６５の投与が、ヒツジＲＢＣに曝露されたマウスのＩｇＧ１  Ｂ細胞および胚中心Ｂ細胞の割合を低減することを示す。図１１Ａは、ＡＺ３９６５の２．５ｍｐｋ投与でのＩｇＧ１  Ｂ細胞の減少を示し、図１１Ｂは、同じ投与量での胚中心Ｂ細胞の減少を示す。
【図１２Ａ】異なる種のＰＢＭＣの表面上のＭＣＴ１への結合のフローサイトメトリー測定によって評価したときのＭＣＴ１  Ａｂ１の交差反応性を示す。図１２Ａは、ＭＣＴ１  Ａｂ１がヒトＰＢＭＣの表面上のＭＣＴ１に結合すること、およびそれが刺激された細胞にさらに大きい程度まで結合することを示す。
【図１２Ｂ】図１２Ｂは、ＭＣＴ１  Ａｂ１がカニクイザルＭＣＴ１に結合することを示す。
【図１２Ｃ】図１２Ｃは、ＭＣＴ１  Ａｂ１がウサギＭＣＴ１に結合することを示す。
【図１２Ｄ】図１２Ｄは、ＭＣＴ１  Ａｂ１がラットＭＣＴ１に結合しないことを示す。
【図１３Ａ】ＭＣＴ１  Ａｂ１が活性化Ｔ細胞に結合することを示す。ＭＣＴ１  Ａｂ１は、未感作細胞を染色しないが（図１３Ａ）、３日目にＣＤ３／ＣＤ２８活性化細胞の表面を染色する（図１３Ｂ）。図１３Ａの唯一の染色は、核染色に対応し、未感作Ｔ細胞の存在を確認している。
【図１３Ｂ】ＭＣＴ１  Ａｂ１が活性化Ｔ細胞に結合することを示す。ＭＣＴ１  Ａｂ１は、未感作細胞を染色しないが（図１３Ａ）、３日目にＣＤ３／ＣＤ２８活性化細胞の表面を染色する（図１３Ｂ）。図１３Ａの唯一の染色は、核染色に対応し、未感作Ｔ細胞の存在を確認している。
【図１４】ＭＣＴ１  Ａｂ１が、インビトロで活性化Ｔ細胞における乳酸のＭＣＴ１輸送を阻害することを示す。ラットＩｇ対照および緩衝液対照曲線が、対照と比較して変化を示さない一方で、ＭＣＴ１  Ａｂ１は、７．６ｎＭのＫｄで対照と比較して乳酸輸送の減少をもたらした（右側の下の曲線）。
【図１５】ＭＣＴ１  Ａｂ１が、ＡＴＰｌｉｔｅ（Ｋｄ＝１．２ｎＭ）を使用した細胞死からのＭＣＴ１  Ａｂ１防御によって測定したときに、ブロモピルビン酸毒素の輸送を阻害することを示す。
【図１６】ＭＣＴ１  Ａｂ１が、１．３ｎＭのＥＣ５０でＴ細胞増殖を阻害した、Ｔ細胞増殖アッセイの結果を含む。
【図１７】ＭＣＴ１  Ａｂ１が、ヒト混合リンパ球反応において用量依存的に同種異系活性化を阻害したことを示す。
【図１８Ａ】５つの異なる種からのＲＢＣの表面におけるＭＣＴ１発現を示す。図１８Ａでは、精製カニクイザルＲＢＣ（右）のＭＣＴ１  Ａｂ１染色は、発現を欠いている精製ヒトＲＢＣ（２０ドナー、左）とは対照的に、原形質膜上のＭＣＴ１の発現を示す。左のパネルでは、二次ａｂのみの条件、対照条件、およびＭＣＴ１  Ａｂ１染色条件の全てが、ＭＣＴ１の染色を示していない。
【図１８Ｂ】図１８Ｂでは、染色は、ウサギＲＢＣ（左）の表面上でのＭＣＴ１発現を示すが、ラット（中央）またはビーグル（右）ＲＢＣの表面上では何も示さない。
【図１９】ヒトＲＢＣが乳酸輸送のためにＭＣＴ１を必要としないことを示す。ＭＣＴ１のＭＣＴ１  Ａｂ１阻害もＡＺ３９６５阻害も、ＦＬＩＰＲベースの輸送アッセイを使用して、精製ヒトＲＢＣにおける乳酸輸送を遮断しなかった（参考文献１、２）。なし＝阻害剤なし。
【図２０】狼瘡Ｂ細胞のフローサイトメトリー分析の結果を含む。１名の健康な患者および２名の狼瘡患者からのＢ細胞集団の例示的なＭＣＴ１染色は、狼瘡患者に対してＭＣＴ１染色の有意な増加を示す。
【図２１】本出願で４３２６０＿４２００−ＭＣＴ１＿Ａｂ１．ｐｄｂとして寄託されたＭＣＴ１  Ａｂ１  Ｆａｂの結晶構造のグラフィックレンダリングを含む。画像では、ＶＨ  ＣＤＲ３が抗原結合表面の残りの部分を超えて延在することが分かる。
【図２２】ＭＣＴ１が、様々な機能に関与している一方で、リンパ系外の毒性を回避する冗長経路が存在するが、ＭＣＴ１が、リンパ系（例えば、Ｂ、Ｔ細胞）において唯一のトランスポーター経路を有することを概略的に示す。
【図２３】カニクイザル赤血球（ＲＢＣ）が高レベルのＭＣＴ１を発現することを示す。
【図２４】カニクイザルが、５０ｍｐｋでの抗ＭＣＴ１抗体（Ａｂ１）の反復投与に耐性があることを示す実験を含む。
【図２５】投与された抗ＭＣＴ１抗体（Ａｂ１）の良好な結合が存在することを示唆するカニクイザルで観察されたＰＫデータを含み、結果はさらに、５ｍｐｋ存在する以上のＡｂ１用量率で、ＲＢＣシンクが飽和していることを示す。
【図２６】タモキシフェン誘導性ＭＣＴ１ノックアウトマウスの標的組織（筋肉、精巣、および目）を評価する実験を含む。
【図２７】ＭＣＴ１ノックアウトマウス動物が、より小さい精巣を有することを示し、顕微鏡的所見は、精子細胞変性を示している。
【図２８】ＭＣＴ１  ＫＯ表現型が、対照のハウスキーパー遺伝子（ＨＰＲＴ）の発現と比べて、アッセイされた様々な標的組織、すなわち、胸腺、脾臓、リンパ節、精巣、および網膜におけるＭＣＴ１発現の強固なタモキシフェン誘導性ノックダウンを付与することを示す。
【図２９】ノックアウトマウスで観察された精巣における表現型の変化を示す。示されているように、全てのＭＣＴ１ノックアウトマウスの精巣において精子細胞変性が観察された（後期精子細胞および精母細胞の欠如、尿細管細胞性の低下、空胞化、ならびに細胞残屑）。
【図３０】ＷＴマウスおよびＭＣＴ１  ＫＯマウスにおける精巣の組織構造をさらに比較し、野生型と比べて、ノックアウトマウスにおいて精子細胞変性の増加を示す。
【図３１】異なる市販の抗ＭＣＴ１抗体を比較した結合および機能結果を要約する。図は、Ａｂｃａｍから販売されている全ての抗ＭＣＴ１抗体（Ｍａｂおよびポリクローナル）を使用したＭＦＩ（上、フローサイトメトリー、生細胞の細胞結合）およびブロモピルビン酸機能アッセイの結果（下、ＲＬＵ）を含む。（カタログ番号は、図中に列挙されている）。
【図３２】ブロモピルビン酸アッセイでＭＣＴ１トランスポーター活性を遮断する相対的能力に基づいて、本明細書に開示される異なる抗ＭＣＴ１抗体、すなわち、ＩＮＸ４２０、ＩＮＸ４４４、ＩＮＸ３５６、ＩＮＸ３５２、およびＩＮＸ４５３のアンタゴニスト活性を検出した実験結果を含む。
【図３３】本明細書に開示される異なる抗ＭＣＴ１抗体、すなわち、ＩＮＸ４２０、ＩＮＸ４４４、ＩＮＸ３５６、ＩＮＸ３５２、およびＩＮＸ４５３の可変重領域のアライメントを含む。
【図３４】本明細書に開示される異なる抗ＭＣＴ１抗体、すなわち、ＩＮＸ４２０、ＩＮＸ４４４、ＩＮＸ３５６、ＩＮＸ３５２、およびＩＮＸ４５３の可変軽領域のアライメントを含む。
【図３５】図３５Ａおよび図３５Ｂは、本明細書に開示される抗ＭＣＴ１のＭＣＴ１＋  ２９３細胞への結合、およびそれらのブロモピルビン酸毒素輸送アッセイにおける相対的機能性をそれぞれ示す。
【図３６】図３６Ａ〜図３６Ｄは、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋  Ｔ細胞の増殖を阻害する相対的能力に関して、本明細書に開示される２つの抗ＭＣＴ１抗体、すなわち、ＩＮＸ３１０およびＩＮＸ４２０を比較する実験データを含む。
【図３７】図３７Ａ〜図３７Ｄは、本明細書に開示される抗ＭＣＴ１抗体、すなわち、ＩＮＸ４２０が、小分子ＭＣＴ１阻害剤化合物と比較できるほど、インビトロでＰＤ１＋ＴＩＧＩＴ＋細胞の頻度を増加させることを示す実験データを含む。
【図３８】図３８Ａ〜図３８Ｂは、ＰＤ１＋ＴＩＧＩＴ＋Ｔｒ１細胞が、ＰＭＢＣの増殖を抑制することを示す実験データを含む。
【図３９】ＩＬ−１０アンタゴニスト（抗ＩＬ−１０ＲＢ）によるＩＬ−１０シグナル伝達の遮断が、本明細書に開示される抗ＭＣＴ１抗体、すなわち、ＩＮＸ４２０によるＰＭＢＣ増殖の抑制に影響を及ぼさないことを示す実験データを含む。
【図４０】図４０Ａ〜図４０Ｄは、本明細書に開示される抗ＭＣＴ１抗体、すなわち、ＩＮＸ４２０およびＩＮＸ３１０による異種ＧｖＨＤ動物の処置が、対照抗体で処置した異種ＧｖＨＤ動物と比較して、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、およびＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の数の大幅な減少ならびにＴｒ１細胞の増加をもたらしたことを示す実験データを含む。
【図４１】図４１Ａ〜図４１Ｃは、本明細書に開示される抗ＭＣＴ１抗体、すなわち、ＩＮＸ４２０、ＩＮＸ４１３、およびＩＮＸ３１０による異種ＧｖＨＤ動物の処置が、対照抗体で処置した異種ＧｖＨＤ動物と比較して、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、およびＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の数の大幅な減少をもたらしたことを示す実験データを含む。
【図４２】図４２Ａおよび図４２Ｂは、異種ＧｖＨＤ動物モデルにおける抗ＭＣＴ１抗体、すなわち、ＩＮＸ４２０とＩＮＸ３１０の投与が、対照抗体で処置した動物と比較して、生存率、長期防御、および耐性誘導の増加をもたらしたことを示す実験結果を含む。
【図４３】ＴＩＧＩＴおよびＰＤ１が、異種ＧｖＨＤ動物モデルにおけるかなり（７５％）のヒトＴ細胞上で発現し、Ｔｒ１細胞の推定バイオマーカーを含むことを示すバイオマーカー発現データを含む。
【図４４】図４４Ａおよび図４４Ｂは、ＴＩＧＩＴおよびＰＤ１が、Ｔｒ１細胞の推定バイオマーカーを含み、これらのマーカーを発現する推定Ｔｒ１細胞が、エフェクターＴ細胞の増殖を抑制することを示すバイオマーカー発現データを含む。
【図４５】図４５Ａ〜図４５Ｃは、Ｔｒ１細胞が、高レベルのグランザイムＢを発現し、ＦＯＸＰ３またはＢｌｉｍｐ１を発現しないことを示すバイオマーカー発現データを含む。
【図４６】図４６Ａ〜図４６Ｃは、抗ＭＣＴ１抗体（ＩＮＸ４２０）で処置したＮＳＧマウスが、対照抗体で処置した動物と比較して、ｈＣＤ３＋  エフェクターＴ細胞の数が少ないことを示す実験結果を含む。
【図４７】図４７Ａおよび図４７Ｂは、Ｔｒ１細胞が、ＣＤ２３／ＣＤ２８刺激後にｈＣＤ３＋  エフェクターＴ細胞およびＰＭＢＣの増殖を抑制することを示す実験結果を含む。
【図４８】異種ＧｖＨＤ動物モデルにおけるＴｒ１生成の動態を概略的に示し、抗ＭＣＴ１抗体による処置が、エフェクター相における増殖を抑制することを示す。
【図４９】図４９Ａ〜図４９Ｂは、様々な抗体、サイトカイン、およびリガンドを用いたＴｒ１細胞のエクスビボ培養に関する実験データを含む。観察された結果は、抗ＴＩＧＩＴおよびＰＶＲリガンドが、生存率を高めなかったことを示す。対照的に、ＩＬ−２、ＩＬ−１７、およびＩＬ−１５による処置は、用量依存的に、Ｔｒ１細胞のエクスビボ生存を大幅に増加させた（最大約７５％の生存率）。
【図５０】図５０Ａ〜図５０Ｂは、血中ケトンおよびグルコースレベルに基づいて、８〜２４時間の飢餓条件の後のケトーシスに対する小分子ＭＣＴ１阻害剤の効果を示す実験データを含む。
【図５１】図５１Ａ〜図５１Ｂは、小分子ＭＣＴ１阻害剤が、２４時間の飢餓後にケトアシドーシスを引き起こさず、小分子ＭＣＴ１阻害剤の非存在下での飢餓と比較して、ｐＨの最小低減（約０．０５）のみを引き起こすことを示す実験データを含む。
【図５２】図５２Ａ〜図５２Ｄは、アラニンスキャニングによって決定したときの、本発明による４つの例示的な抗ヒトＭＣＴ１抗体によって結合された予測エピトープを構成するヒトＭＣＴ１の残基を示す。結果は、全ての４つの抗体によって結合されたエピトープが、ヒトＭＣＴ１の同じ細胞外領域、およびヒトＭＣＴ１の実質的に同じ残基を含むことを示す。
【図５３】アラニンスキャニングによって決定したときの、本発明による４つの抗ヒトＭＣＴ１抗体によって結合された予測エピトープを構成するヒトＭＣＴ１の特異的残基をさらに示す。この場合もやはり、これらの結果は、全ての４つの抗体によって結合されたエピトープが、ヒトＭＣＴ１の同じ細胞外領域、およびヒトＭＣＴ１の実質的に同じ残基を含むことを示す。
【図５４】アラニンスキャニングによって決定したときの、本発明による４つの抗ヒトＭＣＴ１抗体によって結合された予測エピトープを構成するヒトＭＣＴ１の特異的残基をさらに示す。この場合もやはり、これらの結果は、全ての４つの抗体によって結合されたエピトープが、ヒトＭＣＴ１の同じ細胞外領域、およびヒトＭＣＴ１の実質的に同じ残基を含むことを示す。
【図５５】マウスＭＣＴ１にさらに結合する本発明による抗ヒトＭＣＴ１抗体が、ブロモピルビン酸の毒性作用からマウスＭＣＴ１発現トランスフェクタントを防御することを示す実験結果を含む。
【発明を実施するための形態】
【０１６０】
本発明は、モノカルボン酸トランスポーター１（「ＭＣＴ１」）に結合する抗体およびその抗原結合フラグメント、前述の抗ＭＣＴ１抗体およびその抗原結合フラグメントをコードする核酸、前述の抗ＭＣＴ１抗体およびその抗原結合フラグメントを含む組成物、ならびに診断および療法において前述の抗ＭＣＴ１抗体、抗体フラグメント、および組成物を使用する方法に関する。
【０１６１】
抗体標的：ＭＣＴ１
ＭＣＴ１は、解糖の生成物を含む重要な代謝産物の輸送の促進に寄与するマルチパス膜貫通タンパク質である。本出願は、新規の抗ＭＣＴ１抗体、具体的には、本出願においてＡｂ１−Ａｂ８３として同定された抗体のいずれかと同じＣＤＲを含むものを含む、抗ヒトＭＣＴ１抗体を提供する。本発明以前に、ＭＣＴ１の機能を遮断する抗ＭＣＴ１抗体または抗体フラグメントは報告されていない。
【０１６２】
本発明による抗ＭＣＴ１抗体または抗体フラグメントのＭＣＴ１への結合は、ＭＣＴ１の機能の少なくとも１つを低減、抑制、減少、または別様に阻害する。これが免疫に関連するため、ＭＣＴ１のこの結合および阻害は次いで、自己免疫、例えば、活性化Ｔ細胞、Ｂ細胞、および／または炎症性サイトカイン発現に対して少なくとも１つの抑制効果を有し得る。重要なことに、ＭＣＴ１は、Ｔ細胞およびＢ細胞上で発現する唯一の免疫学的に関連した乳酸トランスポーターである。本発明の抗ＭＣＴ１抗体は、エフェクターＴ細胞活性化の間の解糖へのシフトにより活性化Ｔ細胞を特に標的とし、したがって、自己免疫、炎症、およびアレルギー状態を制御するための革新的かつ強力な機会を提供する。実施例で実証されるように、本発明の抗ＭＣＴ１抗体は、特にヒトにおけるＭＣＴ１欠損に関するデータに照らして、リンパ球代謝の選択的阻害および魅力的な安全性プロファイルを提供する。炎症性疾患モデル、例えば、病気にかかりやすいマウスでの狼瘡のモデルにおけるリンパ球解糖の遮断は、これらのモデルにおけるＩＦＮγ産生を防ぎ、リンパ球解糖を安全かつ効果的な方法で遮断する本発明の抗体が、免疫調節薬として強力な可能性を有することのさらなる証拠を提供する。
【０１６３】
ＭＣＴ１の機能を遮断または阻害する抗ＭＣＴ１抗体は、自己免疫を低下させるために使用され得る。具体的には、これらの抗体は、自己免疫、アレルギー、狼瘡、ＧＶＨＤ、敗血症、または望ましくない炎症性免疫応答などの望ましくないヒト免疫応答を抑制するために使用され得る。
【０１６４】
ＭＣＴ１の発現は、特定のエネルギー要件および腫瘍細胞の解糖への依存により、癌にも関係している。したがって、本発明の抗体およびその抗原結合フラグメントは、癌治療に適している。ベータ細胞におけるＭＣＴ１の過剰発現はまた、運動誘発性高インスリン症（ＥＩＨＩ）の根本的な原因でもあり、そのため本発明の抗体は、ＥＩＨＩの治療にも適用され得る。
【０１６５】
特に、ＭＣＴタンパク質の小分子阻害剤は、前臨床モデルにおける網膜、心臓、および精巣の毒性と関連付けられているが、ＭＣＴ１が欠損しているヒトは、これらの臓器のいずれにおいても毒性がなく（参考文献４９および実施例）、これは、本発明のＭＣＴ１特異性抗体の強力な安全性プロファイルを裏付ける。加えて、ＭＣＴ１が欠損している個人は、健康であることが示されており、これらの結論は、ＭＣＴ１がヒトＲＢＣ乳酸輸送に関与していないことを示す実施例内のデータによって裏付けられている。
【０１６６】
ヒトＭＣＴ１は、ＵｎｉＰｒｏｔデータベースに識別子Ｐ５３９８５−１で寄託された以下のアミノ酸配列（配列番号１）を有する。
【０１６７】
配列番号１
ＭＰＰＡＶＧＧＰＶＧＹＴＰＰＤＧＧＷＧＷＡＶＶＩＧＡＦＩＳＩＧＦＳＹＡＦＰＫＳＩＴＶＦＦＫＥＩＥＧＩＦＨＡＴＴＳＥＶＳＷＩＳＳＩＭＬＡＶＭＹＧＧＧＰＩＳＳＩＬＶＮＫＹＧＳＲＩＶＭＩＶＧＧＣＬＳＧＣＧＬＩＡＡＳＦＣＮＴＶＱＱＬＹＶＣＩＧＶＩＧＧＬＧＬＡＦＮＬＮＰＡＬＴＭＩＧＫＹＦＹＫＲＲＰＬＡＮＧＬＡＭＡＧＳＰＶＦＬＣＴＬＡＰＬＮＱＶＦＦＧＩＦＧＷＲＧＳＦＬＩＬＧＧＬＬＬＮＣＣＶＡＧＡＬＭＲＰＩＧＰＫＰＴＫＡＧＫＤＫＳＫＡＳＬＥＫＡＧＫＳＧＶＫＫＤＬＨＤＡＮＴＤＬＩＧＲＨＰＫＱＥＫＲＳＶＦＱＴＩＮＱＦＬＤＬＴＬＦＴＨＲＧＦＬＬＹＬＳＧＮＶＩＭＦＦＧＬＦＡＰＬＶＦＬＳＳＹＧＫＳＱＨＹＳＳＥＫＳＡＦＬＬＳＩＬＡＦＶＤＭＶＡＲＰＳＭＧＬＶＡＮＴＫＰＩＲＰＲＩＱＹＦＦＡＡＳＶＶＡＮＧＶＣＨＭＬＡＰＬＳＴＴＹＶＧＦＣＶＹＡＧＦＦＧＦＡＦＧＷＬＳＳＶＬＦＥＴＬＭＤＬＶＧＰＱＲＦＳＳＡＶＧＬＶＴＩＶＥＣＣＰＶＬＬＧＰＰＬＬＧＲＬＮＤＭＹＧＤＹＫＹＴＹＷＡＣＧＶＶＬＩＩＳＧＩＹＬＦＩＧＭＧＩＮＹＲＬＬＡＫＥＱＫＡＮＥＱＫＫＥＳＫＥＥＥＴＳＩＤＶＡＧＫＰＮＥＶＴＫＡＡＥＳＰＤＱＫＤＴＤＧＧＰＫＥＥＥＳＰＶ
【０１６８】
ＭＣＴ１への結合およびＭＣＴ１機能の阻害
本発明の抗ＭＣＴ１抗体は、ＭＣＴ１に対して任意の好適な親和性および／または結合力を有することができる。親和性は、抗ＭＣＴ１抗体または他の抗原結合タンパク質のエピトープまたは抗原決定基への結合の強度を指す。典型的には、親和性は、［Ａｂ］×［Ａｇ］／［Ａｂ−Ａｇ］として定義される解離定数Ｋｄの観点から測定され、式中、［Ａｂ−Ａｇ］は、抗体−抗原複合体のモル濃度であり、［Ａｂ］は、未結合抗体のモル濃度であり、［Ａｇ］は、未結合抗原のモル濃度である。親和定数Ｋａは、１／Ｋｄによって定義される。競合阻害、平衡透析などによる結合ペプチドの特異性および親和性を決定するための好適な方法は、例えば、Ｈａｒｌｏｗ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８８）、Ｃｏｌｌｉｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ａｓｓｏｃ．ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎ．Ｙ．，（１９９２，１９９３）、およびＭｕｌｌｅｒ，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．９２：５８９−６０１（１９８３）で見ることができる。
【０１６９】
親和性は、本明細書の他の箇所に記載されている方法または当該技術分野におけるそれらの既知の同等物のいずれかによって決定され得る。親和性を決定するために使用され得る１つの方法の例は、Ｓｃａｔｃｈａｒｄ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｍｕｎｓｏｎ  ＆  Ｐｏｌｌａｒｄ，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１０７：２２０（１９８０）に提供されている。結合親和性は、ＫＩＮＥＸＡ、平衡法（例えば、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、またはラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ））、または動態分析（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ（商標）分析）によっても決定され得る。
【０１７０】
本発明のさらに別の実施形態では、抗ＭＣＴ１抗体および抗原結合フラグメント、例えば、ヒト、ヒト化、またはキメラ化抗ＭＣＴ１抗体または抗体フラグメントは、例えば、２５℃または３７℃で、ＥＬＩＳＡ、バイオレイヤー干渉法（「ＢＬＩ」）、ＫＩＮＥＸＡ、または表面プラズモン共鳴によって測定したときに５×１０−５Ｍ、１０−５Ｍ、５×１０−６Ｍ、１０−６Ｍ、５×１０−７Ｍ、１０−７Ｍ、５×１０−８Ｍ、１０−８Ｍ、５×１０−９Ｍ、１０−９Ｍ、５×１０−１０、１０−１０、５×１０−１１、１０−１１Ｍ、５×１０−１２、１０−１２Ｍ、５×１０−１３Ｍ、または１０−１３Ｍ以下の結合親和性（ＫＤ）でＭＣＴ１に結合し得る。典型的には、本発明によって提供される抗ＭＣＴ１抗体は、約１０−４〜約１０−１２Ｍ（例えば、約１０−７〜約１０−１０Ｍ）の範囲のＭＣＴ１に対する親和性を有する。本明細書における免疫反応という用語は典型的には、約１０−４Ｍ未満の親和性でのＭＣＴ１への抗ＭＣＴ１抗体の結合を指す。例えば、特定の態様において、本発明は、例えば、ＫＩＮＥＸＡによって決定したときにＭＣＴ１に関して約７×１０−９Ｍ以下の結合親和性（ＫＤ）を有する抗ＭＣＴ１抗体を提供する。
【０１７１】
加えて、本発明の抗ＭＣＴ１抗体および抗原結合フラグメント、例えば、ヒト、ヒト化、またはキメラ化抗ＭＣＴ１抗体または抗体フラグメントは、５×１０−４秒−１、１０−４秒−１、５×１０−５秒−１、または１０−５秒−１以下のオフレート（ｋｏｆｆ）でＭＣＴ１に結合する抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントを含み得る。
【０１７２】
結合力は、結合タンパク質と抗原との間の全相互作用の全体的な強度（例えば、抗ＭＣＴ１抗体とＭＣＴ１との間の相互作用の全強度）を指す。親和性は、抗体または他の結合ペプチド上の単一の抗原結合部位と単一のエピトープまたは抗原決定基との間の非共有結合性相互作用全体の強度である。結合力は典型的には、３つの主要な要因：結合タンパク質の、それが結合するエピトープ（複数可）もしくは抗原決定基（複数可）への固有の親和性、抗体もしくは結合タンパク質および抗原の価数（例えば、３、４、もしくはそれ以上の価数の抗ＭＣＴ１は典型的には、二価抗体よりも抗原に対して高いレベルの結合力を示し、二価抗体は、特に抗原において反復エピトープが存在する場合、一価抗体よりも抗原に対して高い結合力を有することができる）、ならびに／または相互作用する構成要素の幾何学的配置、によって決定される。結合力は典型的には、親和性を評価するために使用されるのと同じタイプの技術によって測定される。
【０１７３】
抗ＭＣＴ１抗体は、それらがＭＣＴ１に結合し、それによりＭＣＴ１の１つ以上の機能を阻害する能力に基づいて特徴付けられ得る。そのような抗ＭＣＴ１抗体は、天然の形態で治療薬として直接使用され得る。阻害性抗ＭＣＴ１抗体は、モノカルボン酸塩、イオン、および様々な他の分子、例えば、毒素の輸送など、ＭＣＴ１の様々な機能を部分的または完全に阻害し得る。特定の実施形態では、本発明の抗体は、乳酸のＭＣＴ１媒介性輸送を阻害する。阻害は、任意の好適な方法によって測定され得る。一態様では、阻害は、阻害抗ＭＣＴ１抗体が少なくとも約２０％、例えば、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７５％以上（例えば、約２５〜１００％）のＭＣＴ１媒介性乳酸輸送の減少を引き起こすことに反映されている。この態様における減少率は、対照と比較して、例えば、ＭＣＴ１を発現しない細胞または抗体によって遮断されない細胞からの乳酸輸送アッセイの結果と比較して、乳酸輸送への抗ＭＣＴ１抗体の効果を考慮すると決定され得る。
【０１７４】
抗ＭＣＴ１抗体の産生
本発明による抗ＭＣＴ１モノクローナル抗体（ｍＡｂ）および抗原結合フラグメントは、モノクローナル抗体方法論、例えば、Ｋｏｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５）Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５の標準的な体細胞ハイブリダイゼーション技術などの異なる方法によって潜在的に産生され得る。また、モノクローナル抗体を産生するための他の技術、例えば、Ｂリンパ球のウイルス性または発癌性形質転換が、潜在的に使用され得る。
【０１７５】
ハイブリドーマを調製するための好ましい動物系は、マウス系である。マウスにおけるハイブリドーマ産生は、非常に確立された方法である。融合のための免疫化された脾細胞を単離するための免疫化プロトコルおよび技術は、当該技術分野において既知である。融合パートナー（例えば、マウス骨髄腫細胞）および融合手順も既知である。本発明のキメラまたはヒト化抗体は、上記のように調製されたマウスモノクローナル抗体の配列に基づいて調製され得る。重鎖および軽鎖免疫グロブリンをコードするＤＮＡは、対象となるマウスハイブリドーマから得ることができ、標準的な分子生物学技術を使用して非マウス（例えば、ヒト）免疫グロブリン配列を含むように操作され得る。例えば、キメラ抗体を作製するために、当該技術分野において既知の方法を使用して、マウス可変領域がヒト定常領域に結合され得る（例えば、Ｃａｂｉｌｌｙらの米国特許第４，８１６，５６７号を参照）。ヒト化抗体を作るために、当該技術分野において既知の方法を使用して、マウスＣＤＲ領域がヒトフレームワークに挿入され得る（例えば、Ｗｉｎｔｅｒの米国特許第５，２２５，５３９号および米国特許第５，５３０，１０１号、Ｑｕｅｅｎらの同第５，５８５，０８９号、同第５，６９３，７６２号、および同第６，１８０，３７０号を参照）。
【０１７６】
本発明の少なくともいくつかの実施形態によると、抗体は、ヒトモノクローナル抗体である。ＭＣＴ１に対するそのようなヒトモノクローナル抗体は、マウス系よりもヒト免疫系の一部を担持するトランスジェニックまたはトランス染色体マウス、例えば、ＨｕＭＡｂ  Ｍｏｕｓｅ（商標）、ＫＭ  Ｍｏｕｓｅ（商標）を使用して生成され得る（例えば、Ｌｏｎｂｅｒｇ，ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｎａｔｕｒｅ  ３６８（６４７４）：８５６−８５９を参照）。したがって、マウスは、マウスＩｇＭまたはＫの発現の低下を示し、免疫化に応答して、導入されたヒト重鎖および軽鎖導入遺伝子は、クラススイッチおよび体細胞突然変異を受けて高親和性ヒトＩｇＧ  Ｋモノクローナルを生成する（Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．ｅｔ  ａｌ．（１９９４）、上記を参照。Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．（１９９４）Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  １１３：４９−１０１、Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．ａｎｄ  Ｈｕｓｚａｒ，Ｄ．（１９９５）Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５−９３、およびＨａｒｄｉｎｇ，Ｆ．ａｎｄ  Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．（１９９５）Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．７６４：５３６−５４６で考察されている）。別の実施形態では、本発明の少なくともいくつかの実施形態によるヒト抗体は、ヒト重鎖導入遺伝子およびヒト軽鎖導入トランス染色体を担持するマウスなど、導入遺伝子およびトランス染色体上にヒト免疫グロブリン配列を担持するマウスを使用して作られ得る。本明細書において「ＫＭマウス（商標）」と称されるようなマウスは、ＩｓｈｉｄａらのＰＣＴ公開第ＷＯ０２／４３４７８号に詳細に記載されている。
【０１７７】
さらに、ヒト免疫グロブリン遺伝子を発現する代替のトランスジェニック動物系は、当該技術分野において利用可能であり、本発明の少なくともいくつかの実施形態による抗ＭＣＴ１抗体を作るために使用され得る。例えば、Ｘｅｎｏｍｏｕｓｅ（Ａｂｇｅｎｉｘ，Ｉｎｃ．）と称される代替のトランスジェニック系が使用され得、そのようなマウスは、例えば、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉらの米国特許第５，９３９，５９８号、同第６，０７５，１８１号、同第６，１１４，５９８号、同第６，１５０，５８４号、および同第６，１６２，９６３号に記載されている。
【０１７８】
さらに、ヒト免疫グロブリン遺伝子を発現する代替のトランス染色体動物系は、当該技術分野において利用可能であり、本発明の少なくともいくつかの実施形態による抗ＭＣＴ１抗体を作るために使用され得る。例えば、「ＴＣマウス」と称される、ヒト重鎖トランス染色体およびヒト軽鎖トランス染色体の両方を担持するマウスが使用され得、そのようなマウスは、Ｔｏｍｉｚｕｋａ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ  Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９７：７２２−７２７′に記載されている。さらに、ヒト重鎖および軽鎖トランス染色体を担持するウシは、当該技術分野において記載されており（Ｋｕｒｏｉｗａ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２０：８８９−８９４）、本発明の少なくともいくつかの実施形態による抗ＭＣＴ１抗体を作るために使用され得る。
【０１７９】
本発明の少なくともいくつかの実施形態によるヒトモノクローナル抗体はまた、ヒト免疫グロブリン遺伝子のライブラリをスクリーニングするためのファージディスプレイ法を使用して調製され得る。ヒト抗体を単離するためのそのようなファージディスプレイ法は、当該技術分野において確立されている。例えば、Ｌａｄｎｅｒらの米国特許第５，２２３，４０９号、同第５，４０３，４８４号、および同第５，５７１，６９８号、Ｄｏｗｅｒらの米国特許第５，４２７，９０８号および同第５，５８０，７１７号、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙらの米国特許第５，９６９，１０８号および同第６，１７２，１９７号、ならびにＧｒｉｆｆｉｔｈｓらの米国特許第５，８８５，７９３号、同第６，５２１，４０４号、同第６，５４４，７３１号、同第６，５５５，３１３号、同第６，５８２，９１５号、および同第６，５９３，０８１号を参照されたい。
【０１８０】
本発明の少なくともいくつかの実施形態によるヒトモノクローナル抗体はまた、免疫化によりヒト抗体応答が引き起こされ得るようにヒト免疫細胞が再構成されたＳＣＩＤマウスを使用して調製され得る。そのようなマウスは、例えば、Ｗｉｌｓｏｎらの米国特許第５，４７６，９９６号および同第５，６９８，７６７号に記載されている。
【０１８１】
いくつかの実施形態では、ヒトＩｇマウスが使用されて、例えば、Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｎａｔｕｒｅ  ３６８（６４７４）：８５６−８５９、Ｆｉｓｈｗｉｌｄ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １４：８４５−８５１、ならびにＰＣＴ公開第ＷＯ９８／２４８８４号および同第ＷＯ０１／１４４２４号によって記載されるように、ＭＣＴ１抗原および／もしくは組換えＭＣＴ１、またはＭＣＴ１融合タンパク質の精製または濃縮調製物でそのようなマウスを免疫化することによって、本発明によるヒト抗ＭＣＴ１抗体を作る。好ましくは、マウスは、最初の注入時に６〜１６週齢である。例えば、腹腔内でヒトＩｇマウスを免疫化するために、ＭＣＴ１抗原の精製または組換え調製物（５〜５００μｇの用量範囲）が使用され得る。
【０１８２】
一般に、トランスジェニックマウスは、完全フロイントアジュバント中の抗原で腹腔内（ＩＰ）に最初に免疫化すると反応し、続いて、不完全フロイントアジュバント中の抗原で１週間おきにＩＰ免疫化を行った（最大合計６回）。しかしながら、フロイント以外のアジュバントも有効であることが分かっている。加えて、アジュバントの非存在下での全細胞は、高度に免疫原性であることが分かっている。免疫応答は、眼窩後方からの採血によって得られる血漿試料を用いて、免疫化プロトコルの間に監視され得る。血漿は、ＥＬＩＳＡによってスクリーニングされ得、抗ＭＣＴ１ヒト免疫グロブリンの十分な力価を有するマウスが融合に使用され得る。屠殺および脾臓の摘出の３日前に、マウスが抗原で静脈内に追加免疫され得る。各免疫化に２〜３回の融合が実施される必要があり得ると予想される。典型的には、６〜２４匹のマウスが各抗原に対して免疫化される。
【０１８３】
特定の実施形態では、本発明によるヒトモノクローナル抗ＭＣＴ１抗体を産生するハイブリドーマは、単離され、マウス骨髄腫細胞株などの適切な不死化細胞株に融合された免疫化マウスからの脾細胞および／またはリンパ節細胞を使用して生成され得る。得られたハイブリドーマは、抗原特異性抗体の産生についてスクリーニングされ得る。
【０１８４】
特定の実施形態では、本発明による抗ＭＣＴ１抗体は、例えば、当該技術分野において周知であるような組換えＤＮＡ技術と遺伝子トランスフェクション法の組み合わせを使用して、宿主細胞トランスフェクトーマ中で産生され得る（例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：１２０２）。例えば、抗体またはその抗体フラグメントを発現するために、部分または完全長の軽鎖および重鎖をコードするＤＮＡは、標準的な分子生物学技術（例えば、対象となる抗体を発現するハイブリドーマを使用するＰＣＲ増幅またはｃＤＮＡクローニング）によって得ることができ、ＤＮＡは、遺伝子が転写および翻訳制御配列に作動可能に結合されるように発現ベクターに挿入され得る。この文脈において、「作動可能に結合された」という用語は、ベクター内の転写および翻訳制御配列が抗体遺伝子の転写および翻訳を調節するそれらの意図された機能を果たすように、抗体遺伝子がベクターにライゲーションされることを意味するよう意図されている。発現ベクターおよび発現制御配列は、使用される発現宿主細胞と適合するように選択される。抗体軽鎖遺伝子および抗体重鎖遺伝子は、別々のベクターに挿入され得るか、またはより典型的には、両方の遺伝子が同じ発現ベクターに挿入される。抗体遺伝子は、標準的な方法（例えば、抗体遺伝子フラグメントおよびベクター上の相補的制限部位のライゲーション、または制限部位が存在しない場合の平滑末端ライゲーション）によって発現ベクターに挿入される。本明細書に記載される抗体の軽鎖および重鎖可変領域が使用されて、それらを、ＶＨセグメントがベクター内のＣＨセグメントに作動可能に結合され、ＶＬセグメントがベクター内のＣＬセグメントに作動可能に結合されるように、所望のアイソタイプの重鎖定常領域および軽鎖定常領域をすでにコードしている発現ベクターに挿入することによって、任意の抗体アイソタイプの完全長抗体遺伝子を作製することができる。追加的または代替的に、組換え発現ベクターは、宿主細胞からの抗体鎖の分泌を促進するシグナルペプチドをコードすることができる。抗体鎖遺伝子は、シグナルペプチドがインフレームで抗体鎖遺伝子のアミノ末端に結合されるようにベクターにクローン化され得る。シグナルペプチドは、免疫グロブリンシグナルペプチドまたは異種シグナルペプチド（すなわち、非免疫グロブリンタンパク質からのシグナルペプチド）であってもよい。
【０１８５】
場合によっては、アンタゴニスト抗ＭＣＴ１抗体は、動物、例えば、非ヒト哺乳動物、非ヒト霊長類、トリ、または両生類、例えば、カニクイザル、げっ歯類、ウサギ、モルモット、ウシ、ウマ、イヌ、ネコ、ニワトリ、カエルを、表面上に無傷ＭＣＴ１タンパク質、ＭＣＴ１フラグメント、ＭＣＴ１融合タンパク質、またはＭＣＴ１多量体、および任意に別のアジュバントを発現するウイルス様粒子（ＶＬＰ）で免疫化することによって得ることができる。ＶＬＰの表面上に発現した抗原に対する細胞性または体液性（抗体）免疫応答を引き起こすために、抗原を免疫原として発現するＶＬＰの使用は、当該技術分野において既知である。（例えば、とりわけ、米国特許第１０，１３８，２７７号、同第１０，１３０，６９６号、同第１０，１２５，１７５号、同第１０，０８６，０５６号、同第１０，０８０，７９６号、同第１０，０７２，０５８号、同第１０，０４６，０２６号、同第１０，０４０，８３０号、同第９，９６９，９８６号、同第９，９５７，３００号、同第９，８３３，５０４号、同第９，８０３，１８９号、同第９，６３７，５３２号、同第９，５６６，３２７号、同第９，６１７，３２１号、同第９，５８５，９５４号、同第９，５１８，０９６号、同第９，５１７，２６１号、同第９，３８１，２３９号、同第９，４８１，８７５号、同第９２１３０２７号、同第９，２９６，７９２号、同第９，２１６，２２９号、同第８，９８０，２７５号、同第８，８８９，１４４号、同第８，８５２，６０４号、同第８７２８９８５号、同第８，６９１，２０９号、同第８，６８０，２４４号、同第８，５７４，５９０号、同第８，５２９，９０６号、同第８，３２４，１４９号、同第８，３７７，６９１号、同第８，１５８，１３０号、同第７，９５９，９２８号、同第７，８７５，４５０号、同第７，６４１，８９６号、同第７，４９４，６５６号、同第７，４７９，２８０号、同第７，３２０，７９３号、同第７，２６４，８１０号、同第７２２９６２４号、同第７，１３８，２５２号、同第６，９９１，７９５号、同第６，９６４，７６９号、同第６，５３４，０６４号、および同第５，６６７，７８２号を参照されたく、これらの特許は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる）。
【０１８６】
抗ＭＣＴ１抗体の発現
好適な宿主細胞は一般に、主題の抗ＭＣＴ１抗体およびその抗原結合フラグメントが容易に入手可能な技術および材料を使用して組換えにより産生され得る、任意の細胞を含む。例えば、本発明の抗ＭＣＴ１抗体およびその抗原結合フラグメントは、従来の技術に従って遺伝子操作された宿主細胞において産生され得る。好適な宿主細胞は、外因性ＤＮＡで形質転換またはトランスフェクトされ、培養中で成長することができる細胞型であり、細菌、真菌細胞（例えば、酵母）、および培養された高等真核細胞（多細胞生物の培養細胞を含む）、特に培養された哺乳動物細胞、例えば、ヒトまたは非ヒト哺乳動物細胞を含む。例示的な実施形態では、これらの抗体は、ＣＨＯ細胞またはＨＥＫ−２９３細胞中で発現し得る。クローン化されたＤＮＡ分子を操作し、外因性ＤＮＡを様々な宿主細胞に導入するための技術は、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，２ｎｄ  ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．：Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ（１９８９）、およびＣｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ，ｅｄｉｔｏｒｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｇｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ（１９９３）によって開示されている。
【０１８７】
いくつかの例示的な実施形態では、抗体は、交配コンピテント酵母、例えば、培養中で成長することができる任意の一倍体、二倍体、または四倍体酵母で発現し得る。発酵発現法に有用な酵母は、一倍体、二倍体、または他の倍数体形態で存在し得る。所与の倍数性の細胞は、適切な条件下で、その形態で無限数の世代にわたって増殖し得る。二倍体細胞はまた、胞子形成して一倍体細胞を形成することができる。順次交配は、二倍体株のさらなる交配または融合を通して、四倍体株をもたらすことができる。本発明は、一倍体酵母、ならびに例えば、交配またはスフェロプラスト融合によって産生された二倍体または他の倍数体酵母細胞の使用を企図する。一例として、そのような酵母は、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｔａｃｅａｅ科のメンバーを含んでもよく、これには、Ａｒｘｉｏｚｙｍａ、Ａｓｃｏｂｏｔｒｙｏｚｙｍａ、Ｃｉｔｅｒｏｍｙｃｅｓ、Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ、Ｄｅｋｋｅｒａ、Ｅｒｅｍｏｔｈｅｃｉｕｍ、Ｉｓｓａｔｃｈｅｎｋｉａ、Ｋａｚａｃｈｓｔａｎｉａ、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ、Ｋｏｄａｍａｅａ、Ｌｏｄｄｅｒｏｍｙｃｅｓ、Ｐａｃｈｙｓｏｌｅｎ、Ｐｉｃｈｉａ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｓａｔｕｒｎｉｓｐｏｒａ、Ｔｅｔｒａｐｉｓｉｓｐｏｒａ、Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａ、Ｗｉｌｌｉｏｐｓｉｓ、およびＺｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属が含まれる。本発明において潜在的に有用な他のタイプの酵母には、Ｙａｒｒｏｗｉａ、Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｈａｎｓｅｎｕｌａ、Ｆｉｌｏｂａｓｉｕｍ、Ｓｐｏｒｉｄｉｏｂｏｌｕｓ、Ｂｕｌｌｅｒａ、Ｌｅｕｃｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ、およびＦｉｌｏｂａｓｉｄｅｌｌａが含まれる。
【０１８８】
対象となるポリペプチドコード配列は、所望の宿主細胞、例えば、酵母または哺乳動物細胞におけるポリペプチドの発現を提供する転写および翻訳調節配列に作動可能に結合される。これらのベクター構成成分としては、以下：エンハンサー要素、プロモーター、および転写終結配列の１つ以上が挙げられ得るが、これらに限定されない。ポリペプチドの分泌のための配列、例えば、シグナル配列なども含まれ得る。発現ベクターはしばしば宿主細胞ゲノムに組み込まれるため、複製起点、例えば、酵母複製起点は任意である。本発明の一実施形態では、対象となるポリペプチドは、酵母二倍体細胞からのポリペプチドの最適化された分泌を提供する配列に作動可能に結合または融合される。
【０１８９】
プロモーターは、それらが作動可能に結合される特定の核酸配列の転写および翻訳を制御する、構造遺伝子の開始コドンの上流（５′）に位置する非翻訳配列である（一般に約１００〜１０００ｂｐ以内）。そのようなプロモーターは、いくつかのクラス：誘導性、構成的、および抑制性プロモーター（リプレッサーの非存在に応じて転写レベルを増加させる）に分類される。誘導性プロモーターは、培養条件のいくつかの変化、例えば、栄養素の存在もしくは非存在、または温度の変化に応じて、それらの制御下でＤＮＡからの転写レベルの増加を開始し得る。プロモーターフラグメントはまた、相同組換えおよび発現ベクターの宿主細胞、例えば、酵母または哺乳動物細胞ゲノムの同じ部位への組込みのための部位として役立ち得る。あるいは、選択可能マーカーが相同組換えの部位として使用され得る。
【０１９０】
対象となる抗ＭＣＴ１抗体ポリペプチドは、直接だけでなく、異種ポリペプチド、例えば、シグナル配列、または成熟タンパク質もしくはポリペプチドのＮ末端に特定の開裂部位を有する他のポリペプチドとの融合ポリペプチドとしても、組換えにより産生され得る。一般に、シグナル配列は、ベクターの構成成分であってもよく、またはベクターに挿入されるポリペプチドコード配列の一部であってもよい。例えば、選択された異種シグナル配列は、宿主細胞、例えば、哺乳動物細胞、昆虫細胞、または酵母細胞内で利用可能な標準経路の１つを通して認識および処理されるものである。加えて、これらのシグナルペプチド配列は、発現系における分泌の増強を提供するように操作され得る。対象となる分泌シグナルはまた、分泌されているタンパク質に対して異種であり得るか、または分泌されているタンパク質の天然の配列であり得る、哺乳動物および酵母シグナル配列を含む。シグナル配列は、プレペプチド配列を含み、場合によっては、プロペプチド配列を含み得る。免疫グロブリン鎖上に見られるシグナル配列、例えば、Ｋ２８プレプロトキシン配列、ＰＨＡ−Ｅ、ＦＡＣＥ、ヒトＭＣＰ−１、ヒト血清アルブミンシグナル配列、ヒトＩｇ重鎖、ヒトＩｇ軽鎖などを含む、多くのそのようなシグナル配列が当該技術分野において既知である。例えば、Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ  ｅｔ．ａｌ，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．，１１（２）：７５（１９９８）、およびＫｏｂａｙａｓｈｉ  ｅｔ．ａｌ．，Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｐｈｅｒｅｓｉｓ，２（４）：２５７（１９９８）を参照されたい。
【０１９１】
ベクターに転写アクチベーター配列を挿入することによって、転写が増加し得る。これらのアクチベーターは、プロモーターに作用してその転写を増加させる、通常約１０〜３００ｂｐのＤＮＡのシス作用エレメントである。転写エンハンサーは、配向および位置に比較的依存せず、イントロン内ならびにコード配列自体内で、転写ユニットに対して５′および３′に見られる。エンハンサーは、コード配列に対して５′または３′位で発現ベクターにスプライシングされ得るが、例えば、プロモーターから５′位に位置している。
【０１９２】
真核宿主細胞で使用される発現ベクターはまた、転写の終結およびｍＲＮＡの安定化に必要な配列を含み得る。そのような配列は、真核細胞またはウイルスＤＮＡまたはｃＤＮＡの非翻訳領域において、３′から翻訳終止コドンまで一般的に利用可能である。これらの領域は、ｍＲＮＡの非翻訳部分にポリアデニル化フラグメントとして転写されたヌクレオチドセグメントを含む。
【０１９３】
上記に列挙された構成成分の１つ以上を含む好適なベクターの構築は、標準的なライゲーション技術またはＰＣＲ／組換え法を用いる。単離されたプラスミドまたはＤＮＡフラグメントは、必要なプラスミドを生成するために望ましい形態で、または組換え法によって、開裂、調整、または再ライゲーションされる。構築されたプラスミドの正しい配列を確認するための分析のために、宿主細胞を形質転換するためにライゲーション混合物が使用され、適切な場合には、抗生物質耐性（例えば、アンピシリンまたはゼオシン）によって成功した形質転換体が選択される。形質転換体からのプラスミドが調製され、制限エンドヌクレアーゼ消化によって分析され、かつ／または配列決定される。
【０１９４】
フラグメントの制限およびライゲーションの代替手段として、特定の付着（「ａｔｔ」）部位および組換え酵素に基づく組換え法が使用されて、ＤＮＡ配列をベクターに挿入することができる。そのような方法は、例えば、Ｌａｎｄｙ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，５８：９１３−９４９（１９８９）に記載され、当業者に既知である。そのような方法は、ラムダおよび大腸菌コードされた組換えタンパク質の混合物によって媒介される分子間ＤＮＡ組換えを利用する。組換えは、相互作用するＤＮＡ分子上のａｔｔ部位間で生じる。ａｔｔ部位の説明については、Ｗｅｉｓｂｅｒｇ  ａｎｄ  Ｌａｎｄｙ，Ｓｉｔｅ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｐｈａｇｅ  Ｌａｍｂｄａ，ｉｎ  Ｌａｍｂｄａ  ＩＩ，ｐ．２１  １−２５０，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ：Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ（１９８３）を参照されたい。組換え部位に隣接するＤＮＡセグメントは、組換え後に、ａｔｔ部位が各親ベクターによって提供された配列からなるハイブリッド配列であるように切り替えられる。組換えは、いかなるトポロジーのＤＮＡ間でも生じ得る。
【０１９５】
対象となる配列を適切なベクターにライゲーションすること、特異的プライマーを使用してａｔｔ  Ｂ部位を含むＰＣＲ産物を生成すること、ａｔｔ部位を含む適切なベクターにクローン化されたｃＤＮＡライブラリを生成することなどによって、Ａｔｔ部位が対象となる配列に導入され得る。
【０１９６】
本明細書で使用される場合、フォールディングは、アミノ酸残基間の相互作用が構造を安定化するように作用する、ポリペプチドおよびタンパク質の三次元構造を指す。非共有結合性相互作用は、構造を決定する上で重要であるが、通常、対象となるタンパク質は、２つのシステイン残基によって形成される分子内および／または分子間の共有ジスルフィド結合を有する。天然に存在するタンパク質およびポリペプチド、またはその誘導体および変異体の場合、適切なフォールディングは典型的には、最適な生物活性をもたらす配置であり、活性、例えば、リガンド結合、酵素活性などについてアッセイによって都合よく監視され得る。
【０１９７】
場合によっては、例えば、所望の生成物が合成起源のものである場合、生物活性に基づくアッセイはあまり意味がない。そのような分子の適切なフォールディングは、物理的特性、エネルギーの考慮、モデリング研究などに基づいて決定され得る。
【０１９８】
発現宿主は、フォールディングおよびジスルフィド結合形成を増強する１つ以上の酵素、すなわち、フォールダーゼ、シャペロニン、タンパク質ジスルフィドイソメラーゼなどをコードする配列の導入によってさらに修飾され得る。そのような配列は、当該技術分野において既知であるように、ベクター、マーカーなどを使用して、酵母宿主細胞において構成的または誘導的に発現し得る。好ましくは、所望の発現パターンに十分な転写調節エレメントを含む配列は、標的化方法論によって宿主細胞ゲノムに安定して組み込まれる。
【０１９９】
例えば、真核細胞タンパク質ジスルフィドイソメラーゼ（「ＰＤＩ」）は、タンパク質システイン酸化およびジスルフィド結合異性化の効率的な触媒であるだけでなく、シャペロン活性も示す。ＰＤＩの共発現は、複数のジスルフィド結合を有する活性タンパク質の産生を促進することができる。免疫グロブリン重鎖結合タンパク質（「ＢＩＰ」）、シクロフィリンなどの発現も興味深い。本発明の一実施形態では、一倍体親株の各々は、別個のフォールディング酵素を発現し、例えば、一方の株は、ＢＩＰを発現し得、もう一方の株は、ＰＤＩを発現し得るか、またはそれらの組み合わせである。
【０２００】
培養された哺乳動物細胞もまた、開示された抗ＭＣＴ１抗体およびその抗原結合フラグメントの産生のための好ましい例示的な宿主である。述べられたように、ＣＨＯ細胞は、抗体の発現に特に適している。哺乳動物細胞においてモノクローナル抗体を製造するための多くの手順が当該技術分野において既知である。（Ｇａｌｆｒｅ，Ｇ．ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｃ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍ．，７３：３−４６，１９８１、Ｂａｓａｌｐ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｕｒｋ．Ｊ．Ｂｉｏｌ，２４：１８９−１９６，２０００、Ｗｕｒｍ，Ｆ．Ｍ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２２：１３９３−１３９８，２００４、およびＬｉ  ｅｔ  ａｌ．，ｍＡｂｓ，２（５）：４６６−４７７，２０１０を参照）。以下でさらに詳細に述べられるように、哺乳動物モノクローナル抗体製造スキームで用いられる一般的な宿主細胞株としては、ヒト胚性網膜芽細胞株ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）（Ｃｒｕｃｅｌｌ  Ｎ．Ｖ．，Ｌｅｉｄｅｎ，Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）、ＮＳＯマウス骨髄腫細胞（Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｕｎｃｉｌ，Ｌｏｎｄｏｎ，ＵＫ）、ＣＶ１サル腎臓細胞株、２９３ヒト胎児由来腎臓株、ＢＨＫベビーハムスター腎臓細胞株、ＶＥＲＯアフリカミドリザル腎臓細胞株、ヒト子宮頸癌細胞株ＨＥＬＡ、ＭＤＣＫイヌ腎細胞、ＢＲＬバッファローラット肝臓細胞、Ｗ１３８ヒト肺細胞、ＨｅｐＧ２ヒト肝臓細胞、ＭＭＴマウス乳腺腫瘍細胞、ＴＲＩ細胞、ＭＲＣ５細胞、Ｆｓ４細胞、骨髄腫もしくはリンパ腫細胞、またはチャイニーズハムスター（Ｃｒｉｃｅｔｕｌｕｓ  ｇｒｉｓｅｕｓ）卵巣（ＣＨＯ）細胞などが挙げられるが、これらに限定されない。ＤＰ１２（ＣＨＯ  Ｋ１  ｄｈｆｒ−）細胞株などの、当該技術分野において既知のＣＨＯ細胞の多くの異なるサブクローンまたはサブ細胞株が、組換えモノクローナル抗体の産生に有用であり、かつ最適化されている。ＮＳＯ細胞は、アザグアニンに耐性があるＮＳ−１細胞の非Ｉｇ分泌、非軽鎖合成サブクローンである。ＣＨＯ−ＤＸＢ１１（ＣＨＯ−ＤＵＫＸ）、ＣＨＯ−ｐｒｏ３、ＣＨＯ−ＤＧ４４、ＣＨＯ  １−１５、ＣＨＯ  ＤＰ−１２、Ｌｅｃ２、Ｍ１ＷＴ３、Ｌｅｃ８、ｐｇｓＡ−７４５などを含む、他のチャイニーズハムスターおよびＣＨＯ細胞が市販されており（ＡＴＣＣなどから）、これらは全て、遺伝的に改変されて、細胞株を様々なパラメーターのために最適化する。モノクローナル抗体は、通常、バッチ供給法を使用して製造され、モノクローナル抗体鎖は、哺乳動物細胞株で発現し、バイオリアクター内の組織培養培地に分泌される。培地（または供給物）は、バイオリアクターに連続的に供給され、組換えタンパク質の発現を最大化する。次いで、回収した培地から組換えモノクローナル抗体が精製される。場合によっては、ジスルフィド結合の還元などを通して抗体を再構築するために追加の手順が必要である。そのような産生方法は、単一バッチで１０，０００Ｌ以上ほどの大きさまで拡大され得る。現在、そのような細胞株および方法論を使用して２０ｐｇ／細胞／日ほども取得し、１０ｇ／Ｌ以上ほど高く、１０ｋＬ〜２５ｋＬバイオリアクターから１５〜１００ｋｇに達する力価を提供することが日常的である（Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ，２０１０）。抗体をコードするポリヌクレオチドの発現ベクターへのクローニング、これらの発現ベクターによる細胞のトランスフェクション、トランスフェクト細胞の選択、ならびにこれらの細胞からの組換えモノクローナル抗体の発現および精製を含む、この産生方法論の様々な詳細が、以下に提供される。
【０２０１】
哺乳動物細胞における抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメントの組換え産生のために、抗体またはそのフラグメントをコードする核酸は一般に、さらなるクローニング（ＤＮＡの増幅）または発現のために複製可能なベクターに挿入される。抗体をコードするＤＮＡは、従来の手順を使用して（例えば、抗体の重鎖および軽鎖をコードするＤＮＡに特異的に結合することが可能であるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）、容易に単離または合成される。ベクター構成成分としては概して、以下：シグナル配列、複製起点、１つ以上のマーカー遺伝子、エンハンサー要素、プロモーター、および転写終結配列、の１つ以上が挙げられるが、これらに限定されない。プロモーター、ターミネーター、選択可能マーカー、ベクター、および他の要素の選択は、当業者のレベルの範囲内の日常的な設計の問題である。そのような要素の多くは、当該技術分野において既知であり、商業的供給元を通して入手可能である。
【０２０２】
本発明の抗体は、直接だけでなく、例えば、シグナル配列、または成熟タンパク質もしくはポリペプチドのＮ末端に特定の開裂部位を有する他のポリペプチドである、異種ポリペプチドとの融合ポリペプチドとしても、組換えにより産生され得る。選択される同種または異種シグナル配列は、例えば、宿主細胞によって認識および処理される（すなわち、シグナルペプチダーゼによって開裂される）ものである。哺乳動物細胞の発現では、哺乳動物シグナル配列ならびにウイルス分泌リーダー、例えば、単純ヘルペスｇＤシグナルが利用可能である。
【０２０３】
そのような発現ベクターおよびクローニングベクターは一般に、ベクターが１つ以上の選択された宿主細胞において複製することを可能にする核酸配列を含む。典型的には、クローニングベクターにおいて、この配列は、ベクターが宿主染色体ＤＮＡとは独立して複製することを可能にするものであり、複製起点または自律複製配列を含む。そのような配列は、様々な細菌、酵母、およびウイルスでよく知られており、例えば、プラスミドｐＢＲ３２２からの複製起点は、ほとんどのグラム陰性菌に適しており、２ｍｕプラスミド起点は、酵母に適しており、様々なウイルス起点（Ｓｉｍｉａｎ  Ｖｉｒｕｓ４０（「ＳＶ４０」）、ポリオーマ、アデノウイルス、水疱性口内炎ウイルス（「ＶＳＶ」）、またはウシパピローマウイルス（「ＢＰＶ」）は、哺乳動物細胞におけるベクターのクローニングに有用である。概して、複製起点の構成成分は、哺乳動物発現ベクターには必要ではない（ＳＶ４０起点は典型的には、単にそれが初期プロモーターを含むという理由で使用され得る）。
【０２０４】
これらのベクターはまた、典型的には、選択可能マーカーとも呼ばれる選択遺伝子を含む。典型的な選択遺伝子は、（ａ）抗生物質または他の毒素、例えば、アンピシリン、ネオマイシン、メトトレキサート、もしくはテトラサイクリンに対する耐性を付与する、（ｂ）栄養素要求性欠陥を補完する、または（ｃ）複合培地から入手不可能な重要な栄養素を供給するタンパク質をコードし、例えば、ＢａｃｉｌｌｉのＤ−アラニンラセマーゼをコードする遺伝子である。
【０２０５】
選択スキームの一例は、薬物を利用して宿主細胞の成長を停止する。薬物選択は概して、外来ＤＮＡが挿入された培養哺乳動物細胞を選択するために使用される。そのような細胞は一般に、「トランスフェクタント」と称される。選択剤の存在下で培養され、対象となる遺伝子をそれらの子孫に継代することが可能である細胞は、「安定したトランスフェクタント」と称される。そのような優性選択の例は、ネオマイシン、ミコフェノール酸、およびヒグロマイシンという薬物を使用する。例示的な選択可能マーカーは、抗生物質のネオマイシンに対する耐性をコードする遺伝子である。選択は、Ｇ−４１８などのネオマイシンタイプの薬物の存在下で行われる。異種遺伝子での形質転換に成功した細胞は、薬剤耐性を付与するタンパク質を産生し、したがって選択レジメンを生き延びる。
【０２０６】
選択システムは、「増幅」と称されるプロセスである、対象となる遺伝子の発現レベルの増加のためにも使用され得る。トランスフェクタントの増幅は典型的には、低レベルの選択剤の存在下で細胞を培養し、次いで選択剤の量を増加させて、導入された遺伝子の産物を高レベルで産生する細胞を選択することによって起こる。哺乳動物細胞の例示的な適切な選択可能マーカーは、ジヒドロ葉酸レダクターゼ（「ＤＨＦＲ」）、チミジンキナーゼ、メタロチオネイン−Ｉおよび−ＩＩ、例えば、霊長類メタロチオネイン遺伝子、アデノシンデアミナーゼ、オルニチンデカルボキシラーゼなどの抗体核酸を取り込む能力がある細胞の同定を可能にするものである。
【０２０７】
例えば、哺乳動物細胞の増幅可能な選択可能マーカーは、メトトレキサートに対する耐性を付与するジヒドロ葉酸レダクターゼである。他の薬物耐性遺伝子（例えば、ハイグロマイシン耐性、多剤耐性、ピューロマイシンアセチルトランスフェラーゼ）も使用され得る。ＤＨＦＲ選択遺伝子で形質転換された細胞は、ＤＨＦＲの競合的アンタゴニストであるメトトレキサート（「ＭＴＸ」）を含む培養培地中で形質転換体の全てを培養することによって最初に同定される。野生型ＤＨＦＲが用いられる場合の適切な宿主細胞は、ＤＨＦＲ活性が欠損しているチャイニーズハムスター卵巣（「ＣＨＯ」）細胞株である。
【０２０８】
あるいは、抗体、野生型ＤＨＦＲタンパク質、およびアミノグリコシド３′−ホスホトランスフェラーゼ（「ＡＰＨ」）などの別の選択可能マーカーをコードするＤＮＡ配列で形質転換または同時形質転換された宿主細胞（特に、内因性ＤＨＦＲを含む野生型宿主）は、アミノグリコシド系抗生物質、例えば、カナマイシン、ネオマイシン、またはＧ−４１８などの選択可能マーカーの選択剤を含む培地での細胞成長によって選択され得る。米国特許第４，９６５，１９９号を参照されたい。
【０２０９】
これらのベクターは、抗体をコードするＤＮＡの転写を促進するエンハンサー配列を含み得る。哺乳動物遺伝子から多くのエンハンサー配列が既知である（例えば、グロビン、エラスターゼ、アルブミン、アルファ−フェトプロテイン、およびインスリン）。頻繁に使用されるエンハンサーは、真核細胞ウイルスに由来するものである。その例としては、複製起点の後期側（ｂｐ１００−２７０）のＳＶ４０エンハンサー、サイトメガロウイルスの初期プロモータエンハンサー、複製起点の後期側のポリオーマエンハンサー、およびアデノウイルスエンハンサーが挙げられる（真核細胞プロモーターの活性化のための増強要素については、Ｙａｎｉｖ，Ｎａｔｕｒｅ，２９７：１７−１８，１９８２も参照）。エンハンサーは、抗体コード配列に対して５′または３′位でベクターにスプライシングされ得るが、例えば、プロモーターから５′位に位置している。
【０２１０】
発現およびクローニングベクターはまた、概して、宿主生物によって認識され、抗体核酸に作動可能に結合されているプロモーターを含む。プロモーター配列は、真核生物で既知である。ほぼ全ての真核細胞遺伝子は、転写が開始される部位の約２５〜３０個の塩基上流に位置するＡＴリッチ領域を有する。多くの遺伝子の転写開始から７０〜８０個の塩基上流に見られる別の配列は、ＣＮＣＡＡＴ領域であり、Ｎは、任意のヌクレオチドであり得る。ほとんどの真核細胞遺伝子の３′末端には、コード配列の３′末端にポリＡテールを付加するためのシグナルであり得るＡＡＴＡＡＡ配列がある。これらの配列は全て、真核細胞発現ベクターに適切に挿入される。
【０２１１】
哺乳動物宿主細胞におけるベクターからの抗体転写は、例えば、ポリオーマウイルス、鶏痘ウイルス、アデノウイルス（アデノウイルス２など）、ＢＰＶ、トリ肉腫ウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、およびほとんどの、例えば、ＳＶ４０などのウイルスのゲノムから、例えば、異種哺乳動物プロモーター、例えば、アクチンプロモーターまたは免疫グロブリンプロモーターから、ヒートショックプロモーターから得られるプロモーターによって制御され、ただしそのようなプロモーターが宿主細胞系と適合性があることを条件とする。
【０２１２】
ＳＶ４０ウイルスの初期および後期プロモーターは、ＳＶ４０ウイルス複製起点も含むＳＶ４０制限フラグメントとして都合よく得られる。ヒトサイトメガロウイルスの最初期プロモーターは、ＨｉｎｄＩＩＩ  Ｅ制限フラグメントとして都合よく得られる。ベクターとしてＢＰＶを使用して哺乳動物宿主においてＤＮＡを発現するための系は、米国特許第４，４１９，４４６号に開示されている。この系の修飾は、米国特許第４，６０１，９７８号に記載されている。単純ヘルペスウイルスからのチミジンキナーゼプロモーターの制御下でのマウス細胞におけるヒトベータ−インターフェロンｃＤＮＡの発現については、Ｒｅｙｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２９７：５９８−６０１（１９８２）も参照されたい。あるいは、ラウス肉腫ウイルスの長い末端反復がプロモーターとして使用され得る。
【０２１３】
ＳＶ４０、サイトメガロウイルス、または骨髄増殖性肉腫ウイルスなどの強力な転写プロモーターが使用され得る。例えば、米国特許第４，９５６，２８８号および米国特許公開第２００３／０１０３９８６号を参照されたい。他の好適なプロモーターには、メタロチオネイン遺伝子（米国特許第４，５７９，８２１号および同第４，６０１，９７８号）由来のプロモーターおよびアデノウイルス主要後期プロモーターが含まれる。哺乳動物細胞で使用するための発現ベクターには、それぞれ受託番号９８６６９、９８６６８、およびＰＴＡ−５２６６で、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，１０８０１  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｂｌｖｄ．，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ．ＵＳＡに寄託されているｐＺＰ−１、ｐＺＰ−９、およびｐＺＭＰ２１、ならびにこれらのベクターの誘導体が含まれる。
【０２１４】
真核宿主細胞（酵母、真菌、昆虫、植物、動物、ヒト、または他の多細胞生物の有核細胞）で使用される発現ベクターは一般に、転写終結およびｍＲＮＡの安定化に必要な配列も含む。そのような配列は、真核細胞またはウイルスＤＮＡまたはｃＤＮＡの５′、時には３′の非翻訳領域から一般に入手可能である。これらの領域は、抗体をコードするｍＲＮＡの非翻訳部分にポリアデニル化フラグメントとして転写されたヌクレオチドセグメントを含む。１つの有用な転写終結構成成分は、ウシ成長ホルモンのポリアデニル化領域である。ＷＯ９４／１１０２６およびそこに開示されている発現ベクターを参照されたい。
【０２１５】
対象の抗体をクローン化または発現するための好適な宿主細胞には、上記の原核生物、酵母、または高等真核生物細胞が含まれる。しかしながら、脊椎動物細胞への関心が最も高く、培養における脊椎動物細胞の増殖は、日常的な手順となっている。有用な哺乳動物宿主細胞株の例は、ＳＶ４０（ＣＯＳ−１（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ  １６５０）によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株；およびＣＯＳ−７、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １６５１）；ヒト胎児由来腎臓株（懸濁培養での成長用にサブクローン化された２９３または２９３細胞）（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ  １５７３；Ｇｒａｈａｍ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ，３６：５９−７２（１９７７））；ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  １０、ＡＴＣＣ  Ｎｏ．ＣＲＬ  １６３２；ＢＨＫ  ５７０、ＡＴＣＣ  Ｎｏ．ＣＲＬ  １０３１４）；ＣＨＯ細胞（ＣＨＯ−Ｋ１、ＡＴＣＣ番号ＣＣＬ  ６１；ＣＨＯ−ＤＧ４４、Ｕｒｌａｕｂ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７７：４２１６−４２２０（１９８０））；マウスセルトリ細胞（ＴＭ４、Ｍａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．，２３：２４３−２５１（１９８０））；サル腎臓細胞（ＣＶ１  ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ７０）；アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ−７６、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１５８７）；ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ２）；イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ３４）；バッファローラット肝臓細胞（ＢＲＬ  ３Ａ、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １４４２）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ７５）；ヒト肝臓細胞（Ｈｅｐ  Ｇ２、ＨＢ  ８０６５）；マウス乳腺腫瘍（ＭＭＴ  ０６０５６２、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ５１）；ＴＲＩ細胞（Ｍａｔｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎａｌｓ  Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，３８３：４４−６８（１９８２））；ＭＲＣ  ５細胞；ＦＳ４細胞；およびヒトヘパトーマ細胞株（Ｈｅｐ  Ｇ２）である。追加の好適な細胞株は、当該技術分野において既知であり、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡなどの公的な寄託機関から入手可能である。
【０２１６】
宿主細胞は、抗体産生のための上記の発現またはクローニングベクターで形質転換され、上記で考察されるように、プロモーターを誘発する、形質転換体を選択する、または所望の配列をコードする遺伝子を増幅させるために適切に修飾された従来の栄養素培地で培養される。
【０２１７】
本発明の抗体を産生するために使用される哺乳動物宿主細胞は、様々な培地で培養され得る。ハムＦ１０（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）、最小必須培地（（「ＭＥＭ」（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ））、ロズウェルパーク記念研究所−１６４０培地（「ＲＰＭＩ−１６４０」、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）、およびダルベッコ改変イーグル培地（「ＤＭＥＭ」Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）は、宿主細胞の培養に適している。加えて、Ｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｒａ．，５８：４４（１９７９）、Ｂａｒｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１０２：２５５（１９８０）、米国特許第４，７６７，７０４号、同第４，６５７，８６６号、同第４，９２７，７６２号、同第４，５６０，６５５号、もしくは同第５，１２２，４６９号、ＷＯ９０／０３４３０、ＷＯ８７／００１９５、または米国特許再審査３０，９８５号は、宿主細胞の培養培地として使用され得る。これらの培地はいずれも、必要に応じてホルモン、ならびに／または他の成長因子（インスリン、トランスフェリン、もしくは上皮成長因子など）、塩（塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、およびリン酸など）、緩衝液（ＨＥＰＥＳなど）、ヌクレオチド（アデノシンおよびチミジンなど）、抗生物質（ゲンタマイシン薬など）、微量元素（通常、マイクロモル範囲の最終濃度で存在する無機化合物として定義される）、およびグルコース、もしくは同等のエネルギー源が補充されてもよい。任意の他の必要な補充剤も、当業者に既知であろう適切な濃度で含まれ得る。温度、ｐＨなどの培養条件は、発現のために選択された宿主細胞で以前に使用されたものであり、当業者には明らかであろう。培地および培養条件の開発および最適化の方法は、当該技術分野において既知である。（Ｇｒｏｎｅｍｅｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，１（４）：１８８−２１２，２０１４を参照）。
【０２１８】
培養条件が最適化され、好ましい細胞株クローンが選択された後、これらの細胞は、この目的のために選び、選択された特定の細胞株に最適化された、培地および供給物を細胞培養に連続的に供給することを伴うバイオリアクター（多くのモデルが市販されている）のバッチ供給プロセスで、最も一般的に培養される（付着細胞または懸濁培養のいずれか）。（Ｂｕｔｌｅｒ，Ｍ．，Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，６８：２８３−２９１，２００５、およびＫｅｌｌｅｙ，Ｂ．，ｍＡｂ，ｌ（５）：４４３−４５２，２００９を参照）。同量の培地がバイオリアクターから回収されている間、培地および供給物が培養に連続的に供給される、灌流システムも利用可能である。（Ｗｕｒｍ，２００４）。合成培地も市販されており、バッチ供給培養で細胞を成長させるために利用可能であり、ウシ血清アルブミンなどの動物構成成分の使用などによる外部供給源からの汚染の可能性を回避する。しかしながら、細胞密度、培養生存率、および生産性の向上に役立つために、動物構成成分を含まない加水分解物が市販されている。（Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０）。ローラーボトルで利用可能なヘッドスペース、成長および発現段階での酸化還元電位、産生中にジスルフィド結合を維持するための還元剤の存在などに対する細心の注意を含む、細胞培養培地を最適化しようとして多くの研究が実施されてきた（例えば、Ｈｕｔｔｅｒｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ｍＡｂｓ，５（４）：６０８−６１３，２０１３、およびＭｕｌｌａｎ  ｅｔ  ａｌ，ＢＭＣ  Ｐｒｏｃｅｅｄ．，５（Ｓｕｐｐｌ  ８）：Ｐ１１０，２０１１を参照）。組換えモノクローナル抗体産生中の有害な酸化の可能性に対処するために、様々な方法論が開発されてきた。（例えば、米国特許第８，５７４，８６９号を参照）。培養細胞は、栄養素を連続的に、または別々に投与された量として供給することによって成長し得る。多くの場合、細胞濃度、ｐＨ、温度、Ｃ０２、ｄ０２、浸透圧、グルコース、乳酸、グルタミン、およびグルタミン酸などの代謝産物の量などの様々なプロセスパラメータは、較正された分析装置への直接接続によるオンライン、またはオペレーターの介入によるオフラインのいずれかで、細胞成長中のプローブの使用によって監視される。培養ステップはまた、典型的には、培養で成長する細胞が、細胞選択について当該技術分野で既知の任意の手段によって、トランスフェクトされた組換え遺伝子を維持することを確実にすることを伴う。
【０２１９】
発酵後、すなわち、最大の細胞成長および組換えタンパク質発現に到達すると、培養ステップの後に典型的には採取ステップが続き、それによって細胞は、培地から分離され、それにより採取された細胞培養培地が得られる。（Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ，ｍＡｂｓ，２（５）：４８０−４９９，２０１０を参照）。典型的には、カラムクロマトグラフィなどを伴う様々な精製ステップが培養に続いて、組換えモノクローナル抗体を細胞構成成分および細胞培養培地構成成分から分離する。組換えモノクローナル抗体の産生のこの段階に必要である正確な精製ステップは、タンパク質の発現部位、すなわち、細胞自体のサイトゾル、または細胞培養培地に排出されるタンパク質のより一般的に好ましい経路に依存する。様々な細胞構成成分は、分画遠心分離技術、重力ベースの細胞沈降、および／またはタンジェント流精密濾過または深層濾過を含み得るサイズ排除クロマトグラフ／濾過技術などの当該技術分野において既知の技術を使用して分離され得る。（Ｐｏｌｌｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，１１０：２０６−２１９，２０１３、およびＬｉｕ  ｅｔ  ａｌ，２０１０を参照）。細胞構成成分の遠心分離は、連続ディスクスタック遠心分離機を使用して大規模に達成され得、続いて、深層フィルタおよび膜フィルタを使用して浄化される。（Ｋｅｌｌｅｙ，２００９を参照）。ほとんどの場合、浄化後、組換えタンパク質は、抗体のＦｃドメインに対するプロテインＡの高い親和性により、プロテインＡクロマトグラフィによってさらに精製され、典型的には、低ｐＨ／酸性化溶出ステップを使用して行われる（典型的には、酸性化ステップは、予防的なウイルス不活化ステップと組み合わされる）。懸濁培養中の動物細胞を可溶性タンパク質から分離するために、酸性またはカチオン性高分子電解質を使用する凝集および／または沈殿ステップも用いられる。（Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ，ｍＡｂｓ，２（５）：４８０−４９９，２０１０）。最後に、アニオンおよびカチオン交換クロマトグラフィ、疎水性相互作用クロマトグラフ（「ＨＩＣ」）、疎水性電荷誘導クロマトグラフ（ＨＣＩＣ）、セラミックヒドロキシアパタイト（Ｃａ５（ＰＯ４）３ＯＨ）２を使用したヒドロキシアパタイトクロマトグラフィ、およびこれらの技術の組み合わせは、典型的には、組換えモノクローナル抗体の溶液を洗練させるために使用される。超遠心分離技術を使用することによって、所望のモノクローナル抗体の最終的な製剤および濃縮が達成され得る。精製収率は典型的には、７０〜８０％である。（Ｋｅｌｌｅｙ，２００９）。
【０２２０】
抗イディオタイプ抗体
本発明の別の態様は、抗イディオタイプ抗体および抗抗イディオタイプ抗体に関する。抗イディオタイプ抗体は、別の抗体（標的抗体）の決定基を認識する抗体である。概して、抗イディオタイプ抗体は、標的抗体の抗原結合部位の決定基を認識する。典型的には、標的抗体は、モノクローナル抗体である。抗イディオタイプ抗体は概して、標的モノクローナル抗体の供給源と同じ種および遺伝子型の動物（特にマウス）を、標的モノクローナル抗体で免疫化することによって調製される。免疫化された動物は、標的モノクローナル抗体のイディオタイプ決定基に対する免疫応答を開始し、標的モノクローナル抗体のイディオタイプ決定基に対する抗体を産生する。抗イディオタイプモノクローナル抗体を生成するために、免疫化された動物の脾臓細胞などの抗体産生細胞が使用され得る。さらに、抗イディオタイプ抗体はまた、動物を免疫化して抗抗イディオタイプ抗体を産生するために使用され得る。これらの免疫化された動物は、標準的な技術を使用して抗抗イディオタイプモノクローナル抗体を生成するために使用され得る。抗抗イディオタイプ抗体は、抗イディオタイプ抗体を調製するために使用された元の標的モノクローナル抗体と同じエピトープに結合し得る。抗抗イディオタイプ抗体は、元の標的モノクローナル抗体と同じ抗原特異性を有する他のモノクローナル抗体を表す。
【０２２１】
標的抗体との抗イディオタイプ抗体の結合が、標的抗体の関連抗原によって阻害される場合、および抗イディオタイプ抗体が、標的抗体と同じ特異性で抗体応答を誘発する場合、それは、標的抗体の抗原を模倣する。そのような抗イディオタイプ抗体は、「内部イメージ抗イディオタイプ」であり、あたかも元の抗原であるかのように抗体応答を誘発することが可能である。（Ｂｏｎａ  ａｎｄ  Ｋｏｈｌｅｒ，Ａｎｔｉ−Ｉｄｉｏｔｙｐｉｃ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ａｎｄ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｉｍａｇｅ，ｉｎ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｄ  Ａｎｔｉ−Ｉｄｉｏｔｙｐｉｃ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｏｂｅｓ  Ｆｏｒ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  Ａｎｄ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ＶｅｎｔｅｒＪ．Ｃ．，Ｆｒａｓｓｅｒ，Ｃ．Ｍ．，Ｌｉｎｄｓｔｒｏｍ，Ｊ．（Ｅｄｓ．），Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｎ．Ｙ．，１９８４．ｐｐ  １４１−１４９）。内部イメージ抗イディオタイプ抗体を組み込んだワクチンは、ウイルス、細菌、および寄生虫に対する防御反応を誘発することが示されている（Ｋｅｎｎｅｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８６）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３２：２２０−２２３、ＭｃＮａｍａｒａ  ｅｔ  ａｌ．（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２６：１３２５−１３２６）。内部イメージ抗イディオタイプ抗体は、腫瘍関連抗原に対する免疫を誘発することも示されている（Ｒａｙｃｈａｕｈｕｒｉ  ｅｌ  ａｌ．（１９８６）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３７：１７４３−１７４９、Ｒａｙｃｈａｕｈｕｒｉ  ｅｔ  ａｌ．（１９８７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３９：３９０２−３９１０、Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｙａ−Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９８７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３９：１３５４−１３６０、Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｙａ−Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４１：１３９８−１４０３、Ｈｅｒｌｙｎ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．（１９８９）Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４：３４７−３５７、Ｃｈｅｎ，Ｚ．−Ｊ  ｅｔ  ａｌ．（１９９０）Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．Ｃａｎｃｅｒ  ３５１−３５９、Ｈｅｒｌｙｎ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｉｎ  Ｖｉｖｏ  ５：６１５−６２４、Ｆｕｒｕｙａ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１２：２７−３２、Ｍｉｔｔｅｌｍａｎ  Ａ．ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ  ８９：４６６−４７０、Ｄｕｒｒａｎｔ，Ｌ．Ｇ．ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５４：４８３７−４８４０、Ｍｉｔｔｅｌｍａｎ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ５４：４１５−４２１、Ｓｃｈｍｉｔｔ，Ｈ．ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  １３：３８９−３９６、Ｃｈａｋｒｏｂａｒｔｙ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．１８：９５−１０３、Ｃｈａｋｒｏｂａｒｔｙ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５５：１５２５−１５３０、Ｆｏｏｎ，Ｋ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１：１２０５−１２９４、Ｈｅｒｌｙｎ，Ｄ，ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  １４：１５９−１６６、Ｓｃｌｅ���ｕｓｃｈ，Ｈ．ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  １４：１６７−１７４、Ｈｅｒｌｙｎ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．４３：６５−７６）。
【０２２２】
ＭＣＴ１の抗イディオタイプ抗体は、例えば、マウスなどの動物を、ＭＣＴ１、またはＭＣＴ１の少なくとも１つの抗原エピトープを含有するその免疫原性部分を含む、免疫原性量の組成物で免疫化することによって調製され得る。組成物はまた、好適なアジュバント、および免疫原性を提供するために必要な任意の担体を含有し得る。ＭＣＴ１を認識するモノクローナル抗体は、上記のように免疫化された動物の細胞から調製され得る。次いでＭＣＴ１のエピトープを認識するモノクローナル抗体が選択され、免疫原性量の抗ＭＣＴ１モノクローナル抗体を含む組成物を調製するために使用される。典型的には、２５〜２００μｇの用量の精製ＭＣＴ１モノクローナルが、好適なアジュバントにおいて十分であろう。
【０２２３】
動物は、投与の間に１４〜３０日の間隔で２〜６回免疫化されてもよい。典型的には、動物は、腹腔内、皮下、静脈内、またはこれらの組み合わせなどの任意の適切な投与経路によって免疫化される。抗イディオタイプ抗体の産生は、標準的なイムノアッセイ法を使用して、免疫化期間中に監視され得る。標的モノクローナル抗体と反応する抗体の適切な力価を有する動物は、抗体産生細胞を採取する３日前に免疫原として使用されるモノクローナル抗体で再免疫化され得る。好ましくは、脾臓細胞が使用されるが、他の抗体産生細胞が選択されてもよい。上記のように、抗体産生細胞が採取され、骨髄腫細胞と融合されてハイブリドーマを産生し、好適な抗イディオタイプ抗体産生細胞が選択される。
【０２２４】
抗抗イディオタイプ抗体は、免疫原として抗イディオタイプモノクローナル抗体を使用することによって、別の回の免疫化およびハイブリドーマ産生によって産生される。
【０２２５】
競合、エピトープマッピング、構造類似性
本明細書に記載されるモノクローナル抗体と実質的または本質的に同じエピトープに結合する１つ以上の抗体の同定は、アラニンスキャニングを使用して容易に決定され得る。加えて、抗体競合が評価され得る様々な免疫学的スクリーニングアッセイのいずれか１つ。多くのそのようなアッセイが日常的に実施されており、当該技術分野において周知である（例えば、参照により本明細書に具体的に組み込まれる、１９９７年８月２６日に発行された米国特許第５，６６０，８２７号を参照）。本明細書に記載される抗体が結合するエピトープを実際に決定することは、本明細書に記載されるモノクローナル抗体と同じ、または実質的に同じ、または重複するエピトープに結合する抗体を同定するために決して必要ではないことが理解される。
【０２２６】
例えば、検査される試験抗体が異なる供給源動物から得られるか、または異なるＩｇアイソタイプでさえある場合、対照抗体が試験抗体と混合され、次いでＭＣＴ１を含有する試料に適用される単純な競合アッセイが使用され得る。ＥＬＩＳＡ、ラジオイムノアッセイ、ウエスタンブロッティング、およびＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｒｌｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡ）分析の使用に基づくプロトコルは、そのような単純な競合研究での使用に適している。
【０２２７】
特定の実施形態では、対照抗ＭＣＴ１抗体は、ＭＣＴ１抗原試料に適用する前のある期間にわたって、異なる量の試験抗体と（例えば、約１：１、１：２、１：１０、または約１：１００の比で）予め混合される。他の実施形態では、対照および様々な量の試験抗体が、ＭＣＴ１抗原試料への曝露中に単純に別々に添加され、混合され得る。結合抗体を遊離抗体から（例えば、分離または洗浄技術を使用して未結合抗体を排除することによって）、かつ対照抗体を試験抗体から（例えば、種特異的またはアイソタイプ特異的二次抗体を使用するか、もしくは対照抗体を検出可能な標識で特異的に標識することによって）区別され得る限り、試験抗体がＭＣＴ１抗原に対する対照抗体の結合を低減するかどうかが決定され得、試験抗体が対照抗ＭＣＴ１抗体と実質的に同じエピトープを認識することを示す。完全に無関係な抗体（ＭＣＴ１に結合しない）の存在下での（標識）対照抗体の結合は、対照の高い値として役立ち得る。対照の低い値は、標識対照抗体を、同じであるが標識されていない対照抗体とインキュベートすることによって得ることができ、そこで競合が起こり、標識抗体の結合を低減する。試験アッセイにおいて、試験抗体の存在下での標識抗体反応性の有意な低減は、実質的に同じエピトープを認識する試験抗体、すなわち、標識対照抗体と競合するものを示す。例えば、ＭＣＴ１への対照抗体の結合を、約１：１または１：１０〜約１：１００の任意の試験抗体比で、少なくとも約５０％、例えば、少なくとも約６０％、またはそれ以上、例えば、少なくとも約７０％（例えば、約６５〜１００％）低減する任意の試験抗体は、対照抗体と実質的に同じまたは重複するエピトープまたは決定基に結合する抗体であると考えられる。
【０２２８】
好ましくは、そのような試験抗体は、試験抗体の非存在下で観察された対照抗体の結合の、例えば、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％（例えば、約９５％）、ＭＣＴ１抗原への対照抗体の結合を低減する。
【０２２９】
ＭＣＴ１（またはその一部分）が固定化される表面に試験抗体が飽和濃度で適用される単純な競合アッセイもまた、有利に用いられ得る。単純な競合アッセイにおける表面は、例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｒｌｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡ）チップ（または表面プラズモン共鳴（「ＳＰＲ」）分析に適したその他の媒体）である。ＭＣＴ１をＭＣＴ１でコーティングされた表面に結合する対照抗体の結合が測定される。対照抗体のＭＣＴ１含有表面のみへのこの結合は、試験抗体の存在下での対照抗体の結合と比較される。試験抗体の存在下での対照抗体によるＭＣＴ１含有表面への結合の有意な低減は、試験抗体が対照抗体と「競合する」ように、試験抗体が対照抗体と実質的に同じエピトープを認識することを示す。対照抗体の結合を少なくとも約２０％以上、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約７０％以上、またはそれ以上低減する任意の試験抗体は、対照抗体と実質的に同じエピトープまたは決定基に結合する抗体であると考えられ得る。好ましくは、そのような試験抗体は、ＭＣＴ１への対照抗体の結合を少なくとも約５０％（例えば、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、またはそれ以上）低減する。対照抗体および試験抗体の順序を逆にすることができ、すなわち、競合アッセイにおいて、対照抗体が最初に表面に結合され、次いで、試験抗体がその後に表面と接触させられることが理解されるであろう。代替的に、（抗体が競合していると仮定して）二次抗体について見られる結合の減少がより大きい規模になることが予想されるため、ＭＣＴ１抗原に対してより高い親和性を有する抗体が最初にＭＣＴ１含有表面に結合される。そのようなアッセイのさらなる例は、例えば、Ｓａｕｎａｌ  ａｎｄ  Ｒｅｇｅｎｍｏｒｔｅｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，１８３：３３−４１（１９９５）に提供され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２３０】
加えて、抗体が、別の抗体と同じもしくは重複するＭＣＴ１上のエピトープ（複数可）、または試験抗体によって結合されたエピトープに結合するかどうかは、特にウエスタンブロットベースのアッセイを使用して決定され得る。このアッセイでは、典型的には１０〜２５、１０〜２０、または１０〜１５アミノ酸長のタンパク質の重複部分を含む、抗体によって結合された抗原であるＭＣＴ１タンパク質に対応するペプチドのライブラリが作られる。ＭＣＴ１配列を含むこれらの異なる重複するアミノ酸ペプチドは合成され、ＰＥＰＳＰＯＴＳ（商標）ニトロセルロース膜（ＪＰＴ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｂｅｒｌｉｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）に共有結合される。次いで、製造元の推奨に従ってブロットが調製およびプローブされる。
【０２３１】
本質的に、イムノブロットアッセイは、ライブラリ内のどのペプチドが試験抗体に結合するかを蛍光測定手段によって検出し、それにより抗原、すなわちＭＣＴ１上のどの残基が試験抗体と相互作用するかを同定することができる。（参照により本明細書に組み込まれる米国特許第７，９３５，３４０号を参照）。
【０２３２】
様々なエピトープマッピング技術が当該技術分野において既知である。一例として、抗原および抗体のＸ線共結晶学；ＮＭＲ；ＳＰＲ（例えば、２５°または３７℃）、アレイベースのオリゴ−ペプチドスキャニング（または「ペプスキャン分析」）、部位特異的突然変異誘発（例えば、アラニンスキャニング）、突然変異誘発マッピング、水素−重水素交換、ファージディスプレイ、および限定タンパク質分解は全て、当該技術分野において周知であるエピトープマッピング技術である（例えば、Ｅｐｉｔｏｐｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｅｄｉｔｏｒｓ  Ｍｉｋｅ  Ｓｃｈｕｔｋｏｗｓｋｉ  ａｎｄ  Ｕｌｒｉｃｈ  Ｒｅｉｎｅｋｅ，２ｎｄ  Ｅｄ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ（２００９）、およびＥｐｉｔｏｐｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｅｄｉｔｏｒ  Ｇｌｅｎｎ  Ｍｏｒｒｉｓ，１ｓｔ  Ｅｄ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ（１９９６）を参照されたく、これらの両方が、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。
【０２３３】
本明細書に記載されるモノクローナル抗体と実質的または本質的に同じエピトープに結合する１つ以上の抗体、例えば、ＭＣＴ１  Ａｂ１またはその変異体の同定は、抗体の競合が評価され得る様々な免疫学的スクリーニングアッセイのいずれか１つを使用して容易に決定され得る。多くのそのようなアッセイが日常的に実施されており、当該技術分野において周知である（例えば、参照により本明細書に組み込まれる、１９９７年８月２６日に発行された米国特許第５，６６０，８２７号を参照）。本明細書に記載される抗体が結合するエピトープを決定することは、本明細書に記載されるモノクローナル抗体と同じまたは実質的に同じエピトープに結合する抗体を同定するために決して必要ではないことが理解される。
【０２３４】
例えば、検査される試験抗体が異なる供給源動物から得られるか、または異なるＩｇアイソタイプでさえある場合、対照抗体（例えば、ＭＣＴ１  Ａｂ１、またはＡｂ１〜Ａｂ９５のいずれか、または例えば、上記の抗体のいずれかのフラグメントもしくは変異体）が試験抗体と混合され、次いでＭＣＴ１  Ａｂ１およびＡｂ１〜Ａｂ９５のいずれかによって結合されることが既知であるＭＣＴ１を含有する試料に適用される、単純な競合アッセイが用いられ得る。ＥＬＩＳＡ、ラジオイムノアッセイ、ウエスタンブロッティング、およびＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｒｌｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡ）分析に基づくプロトコル（本明細書の実施例のセクションに記載される）は、そのような単純な競合研究での使用に適している。
【０２３５】
特定の実施形態では、方法は、対照抗体を、ＭＣＴ１抗原試料に適用する前のある期間にわたって、異なる量の試験抗体と（例えば、約１：１、１：２、１：１０、または約１：１００の比で）予め混合することを含む。他の実施形態では、対照および様々な量の試験抗体が、ＭＣＴ１抗原試料への曝露中に別々に添加され、混合され得る。結合抗体を遊離抗体から（例えば、分離または洗浄技術を使用して未結合抗体を排除することによって）、かつ対照抗体を試験抗体から（例えば、種特異的またはアイソタイプ特異的二次抗体を使用するか、もしくは対照抗体を検出可能な標識で特異的に標識することによって）区別され得る限り、方法は、試験抗体がＭＣＴ１抗原に対する対照抗体の結合を低減することを決定するために使用され得、試験抗体が対照抗体（例えば、ＭＣＴ１  Ａｂ１またはＡｂ１〜Ａｂ９５のいずれか）と実質的に同じエピトープを認識することを示す。完全に無関係な抗体（ＭＣＴ１に結合しない）の存在下での（標識）対照抗体の結合は、対照の高い値として役立ち得る。対照の低い値は、標識対照抗体を、同じであるが標識されていない対照抗体とインキュベートすることによって得ることができ、そこで競合が起こり、標識抗体の結合を低減する。試験アッセイにおいて、試験抗体の存在下での標識抗体反応性の有意な低減は、実質的に同じエピトープを認識する試験抗体、すなわち、標識対照抗体と競合するものを示す。例えば、ＭＣＴ１へのＭＣＴ１  Ａｂ１の結合を、約１：１または１：１０〜約１：１００の任意のＭＣＴ１  Ａｂ１：試験抗体比で、少なくとも約５０％、例えば、少なくとも約６０％、またはそれ以上、例えば、少なくとも約７０％（例えば、約６５〜１００％）低減する任意の試験抗体は、ＭＣＴ１  Ａｂ１、またはＡｂ１〜Ａｂ９５のいずれかと実質的に同じエピトープまたは決定基に結合する抗体であると考えられる。好ましくは、そのような試験抗体は、試験抗体の非存在下で観察されたＭＣＴ１  Ａｂ１の結合の、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％（例えば、約９５％）、ＭＣＴ１へのＭＣＴ１  Ａｂ１の結合を低減する。これらの方法は、他の対照抗体と競合する抗体を同定および／または評価するように適合され得る。
【０２３６】
ＭＣＴ１が固定化される表面に試験抗体が飽和濃度で適用される単純な競合アッセイもまた、有利に用いられ得る。単純な競合アッセイにおける表面は、例えばＯＣＴＥＴ（登録商標）および／またはＰＲＯＴＥＯＮ（登録商標）に適した媒体である。ＭＣＴ１でコーティングされた表面への対照抗体（例えば、ＭＣＴ１  Ａｂ１、またはＡｂ２〜Ａｂ９５のいずれか）の結合が測定される。対照抗体のＭＣＴ１含有表面のみへのこの結合は、試験抗体の存在下での対照抗体の結合と比較される。試験抗体の存在下での対照抗体によるＭＣＴ１含有表面への結合の有意な低減は、試験抗体が対照抗体と「競合する」ように、試験抗体が対照抗体と実質的に同じエピトープを認識することを示す。ＭＣＴ１への対照抗体（ＭＣＴ１  Ａｂ１など）の結合を少なくとも約２０％以上、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約７０％以上、またはそれ以上低減する任意の試験抗体は、対照抗体（例えば、ＭＣＴ１  Ａｂ１）と実質的に同じエピトープまたは決定基に結合する抗体であると考えられ得る。好ましくは、そのような試験抗体は、ＭＣＴ１抗原への対照抗体（例えば、ＭＣＴ１  Ａｂ１）の結合を少なくとも約５０％（例えば、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、またはそれ以上）低減する。対照抗体および試験抗体の順序を逆にすることができ、すなわち、競合アッセイにおいて、対照抗体が最初に表面に結合され、次いで、試験抗体がその後に表面と接触させられることが理解されるであろう。好ましくは、（抗体が競合していると仮定して）二次抗体について見られる結合の減少がより大きい規模になることが予想されるため、ＭＣＴ１に対してより高い親和性を有する抗体が最初にＭＣＴ１含有表面に結合される。そのようなアッセイのさらなる例は、例えば、Ｓａｕｎａｌ  ａｎｄ  Ｒｅｇｅｎｍｏｒｔｅｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，１８３：３３−４１（１９８９）に提供され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２３７】
抗体、その抗原結合フラグメント、または抗体誘導体が、上記で定義されたエピトープ領域の１つに結合するかどうかの決定は、当業者に既知の方法で行われ得る。そのようなマッピング／特徴付け方法の別の例では、抗ＭＣＴ１抗体のエピトープ領域は、ＭＣＴ１タンパク質中の曝露されたアミン／カルボキシルの化学修飾を使用するエピトープ「フットプリント法」によって決定され得る。そのようなフットプリント技術の１つの特定の例は、質量分析法（「ＨＸＭＳ」）によって検出される水素−重水素交換の使用であり、受容体およびリガンドタンパク質アミドプロトンの水素／重水素交換、結合、および逆交換が生じ、タンパク質結合に関与する主鎖アミド基は、逆交換され、したがって、重水素化されたままになる。関連する領域は、消化性タンパク質分解、高速ミクロボア高性能液体クロマトグラフィ分離、および／またはエレクトロスプレーイオン化質量分析によってこの時点で同定され得る（例えば、Ｅｈｒｉｎｇ  Ｈ．，Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２６７（２）：２５２−２５９（１９９９）、およびＥｎｇｅｎ，Ｊ．Ｒ．＆  Ｓｍｉｔｈ，Ｄ．Ｌ．，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，７３：２５６Ａ−２６５Ａ（２００１）を参照）。好適なエピトープ同定技術の別の例は、核磁気共鳴エピトープマッピング（「ＮＭＲ」）であり、典型的には、遊離抗原、および抗体などの抗原結合ペプチドと複合体を形成する抗原の二次元ＮＭＲスペクトルにおけるシグナルの位置が比較される。抗原は典型的には、抗原に対応するシグナルのみが、ＮＭＲスペクトルにおいて見られ、抗原結合ペプチドからのシグナルが見られないように、１５Ｎで選択的に同位体標識されている。抗原結合ペプチドとの相互作用に関与するアミノ酸に由来する抗原シグナルは典型的には、遊離抗原のスペクトルと比較して複合体のスペクトルにおける位置をシフトし、結合に関与するアミノ酸は、そのようにして同定され得る。例えば、Ｅｒｎｓｔ  Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  Ｒｅｓ．Ｆｏｕｎｄ．Ｗｏｒｋｓｈｏｐ，（４４）：１４９−６７（２００４）、Ｈｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ，２８１（ｌ）：６１−６７（１９９８）、およびＳａｉｔｏ  ａｎｄ  Ｐａｔｔｅｒｓｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ，９（３）：５１６−２４（１９９６）を参照されたい。エピトープマッピング／特徴付けは、質量分析（「ＭＳ」）法を使用して実施され得る（例えば、Ｄｏｗｎａｒｄ，Ｊ．Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍ．，３５（４）：４９３−５０３（２０００）、およびＫｉｓｅｌａｒ  ａｎｄ  Ｄｏｗｎａｒｄ，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，７１（９）：１７９２−８０１（１９９９）を参照）。
【０２３８】
プロテアーゼ消化技術はまた、エピトープマッピングおよび同定との関連で有用であり得る。抗原決定基関連の領域／配列は、プロテアーゼ消化によって、例えば、３７℃およびｐＨ７〜８でＭＣＴ１に対して約１：５０の比でトリプシンを一晩（「ｏ／ｎ」）使用し、続いてペプチド同定のために質量分析法（「ＭＳ」）の分析を行うことによって決定され得る。抗ＭＣＴ１抗体によってトリプシン開裂から保護されたペプチドは、続いて、トリプシン消化に供された試料と、抗体とインキュベートされ、次いで、例えばトリプシンによる消化に供された試料を比較することによって（それにより、抗体のフットプリントが明らかになる）、同定され得る。キモトリプシンまたはペプシンなどの他の酵素は、同様のエピトープ特徴付け方法で使用され得る。さらに、酵素消化は、潜在的な抗原決定基配列が、ＭＣＴ１結合ポリペプチドとの関連でＭＣＴ１の領域内にあるかどうかを分析するための迅速な方法を提供することができる。ポリペプチドが表面に露出していない場合は、免疫原性／抗原性の点で関連がない可能性が最も高い（例えば、同様の技術の考察についてＭａｎｃａ，Ａｎｎ．１ｓｔ．Ｓｕｐｅｒ．Ｓａｎｉｔａ．，２７（１）：１５−９（１９９１）を参照）。
【０２３９】
部位特異的突然変異誘発は、結合エピトープの特徴付けに有用な別の技術である。例えば、「アラニンスキャニング」部位特異的突然変異誘発（例えば、アラニンスキャン、アラニンスキャニング突然変異誘発、アラニンスキャニング突然変異、コンビナトリアルアラニンスキャニング、またはアラニン点変異の作成としても既知）では、タンパク質セグメント内の各残基は、例えば、直接ペプチドまたはタンパク質合成、部位特異的突然変異誘発、ＧＥＮＥＡＲＴ（商標）変異誘発サービス（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ  Ｕ．Ｓ．Ａ．）、またはショットガン突然変異誘発などの方法論によって、アラニン残基（またはアラニンが野生型配列中に存在するバリンなどの別の残基）で置き換えられる。それにより、分子の一連の単一点変異体がこの技術を使用して生成され、生成された変異体の数は、分子内の残基の数に等しく、各残基は、一度に１つずつ、単一アラニン残基によって置き換えられる。アラニンは概して、他の多くのアミノ酸が有し得る二次構造の選好を模倣することができる、その嵩高くない、化学的に不活性なメチル官能基のため、天然（野生型）残基を置き換えるために使用される。続いて、天然残基をアラニンで置き換える効果は、アラニンスキャニング変異体の結合親和性にあり、その結合パートナーは、ＳＰＲ結合実験などであるが、これに限定されない方法を使用して測定され得る。突然変異が結合親和性の大幅な低減につながる場合、変異した残基が結合に関与している可能性が最も高い。構造エピトープに特異的なモノクローナル抗体（すなわち、フォールディングされていないタンパク質に結合しない抗体）が、結合親和性実験の陽性対照として使用されて、アラニン置換がタンパク質の全体的な三次構造に影響しないことを検証することができる（タンパク質の全体的なフォールドの変化が間接的に結合に影響を及ぼし、それにより偽陽性の結果を生じさせる可能性があるため）。例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ａｎｄ  Ｗｅｌｌｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２６７：３８３−３８６（１９９５）、Ｗｅｉｓｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９７（１６）：８９５０−８９５４（２０００）、およびＷｅｌｌｓ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９３：１−６（１９９６）を参照されたい。
【０２４０】
電子顕微鏡は、エピトープ「フットプリント」にも使用され得る。例えば、Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５５：２７５−２７８（１９９２）は、低温電子顕微鏡、三次元画像再構成、およびＸ線結晶学の同時適用を使用して、ネイティブササゲモザイクウイルスのカプシド表面上のＦａｂフラグメントの物理学的フットプリントを決定した。
【０２４１】
エピトープ評価用の「ラベルフリー」アッセイの他の形式には、ＳＰＲ（ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）システム、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｒｌｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡとして商業的に販売されている）および反射型干渉分光法（「ＲｉｆＳ」）が含まれる（例えば、Ｆａｇｅｒｓｔａｍ  ｅｔ  ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ，３：２０８−１４（１９９０）、Ｎｉｃｅ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，６４６：１５９−１６８（１９９３）、Ｌｅｉｐｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．，３７：３３０８−３３１１（１９９８）、Ｋｒｏｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ，１７：９３７−９４４（２００２）を参照）。
【０２４２】
いくつかの実施形態では、本発明の抗ＭＣＴ１抗体は、別の抗ＭＣＴ１抗体と同じまたは同様の構造を有し得る。好ましい実施形態では、本発明の抗ＭＣＴ１抗体は、ＭＣＴ１  Ａｂ１、またはＡｂ１〜Ａｂ９５のいずれかの構造と同様の構造を有する。構造類似性は、Ｘ線結晶学、ＮＭＲ、または他の既知の方法によって得られる三次元タンパク質構造の構造アライメントによって評価され得る。同様の構造は、比較される２つのタンパク質のＣＤＲのＣアルファ炭素間の位置の違いを分析することで決定され得る。一般に、１つ以上のＣＤＲにおける５Å未満、４Å未満、３Å未満、２Å未満、１Å未満、または０．５Å未満の平均ＲＭＳＤが、同様のタンパク質構造を示す。したがって、一実施形態では、本発明の抗ＭＣＴ１抗体は、構造アライメントにおいて０．５Å未満の平均ＲＭＳＤを有するＭＣＴ１  Ａｂ１の構造と同じ構造を採用するＣＤＲを有する。
【０２４３】
別の実施形態では、本発明の抗ＭＣＴ１抗体は、タンパク質表面の物理化学的特性においてＭＣＴ１  Ａｂ１と同様であり得る。特定の実施形態では、抗体は、抗体の結合表面において、ＭＣＴ１  Ａｂ１、またはＡｂ１〜Ａｂ９５のいずれかの表面電荷と同じ表面電荷を有する。別の実施形態では、抗体は、同じ静電ポテンシャルおよび／または疎水性を有する。
【０２４４】
例示的な抗ＭＣＴ１抗体、抗体フラグメント、および融合タンパク質
一実施形態では、本発明の抗体は、ＭＣＴ１  Ａｂ１の重鎖および軽鎖ＣＤＲを含む。一実施形態では、本発明の抗体は、配列番号４、５、６の重鎖ＣＤＲおよび配列番号７、８、９の軽鎖ＣＤＲを含む。
【０２４５】
一実施形態では、本発明の抗体または抗体フラグメントは、ＭＣＴ１  Ａｂ１、またはＡｂ２〜Ａｂ９５のいずれかのＶＨドメインおよびＶＬドメインを含む。一実施形態では、本発明の抗体または抗体フラグメントは、配列番号２のアミノ酸配列、またはＡｂ２〜Ａｂ９５のいずれかのＶＨドメインに対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＨドメインを含む。一実施形態では、本発明の抗体または抗体フラグメントは、配列番号３のアミノ酸配列、またはＡｂ１〜Ａｂ９５のいずれかのＶＬドメインに対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＬドメインを含む。一実施形態では、本発明の抗体または抗体フラグメントは、配列番号２のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＨドメイン、および配列番号３のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＬドメインを含む。
【０２４６】
一実施形態では、本発明の抗体または抗体フラグメントは、Ａｂ２〜Ａｂ９５のいずれかのＶＨドメインのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＨドメイン、およびＶＬドメインＡｂ１〜Ａｂ９５のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するＶＬドメインを含み、好ましくは、これらの相同ＶＨおよびＶＬドメインは、同じ抗体、すなわち、Ａｂ２〜Ａｂ９５の１つのドメインに対応する。
【０２４７】
一実施形態では、本発明の融合タンパク質は、ＭＣＴ１  Ａｂ１（配列番号６）の重鎖ＣＤＲ３またはその変異体を含む。一実施形態では、融合タンパク質は、配列番号６のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するペプチドを含む。特に、ＭＣＴ１  Ａｂ１の重鎖ＣＤＲ３は、ほとんどのＣＤＲよりも長く、ＭＣＴ１  Ａｂ１上の抗原結合表面の平面を超えて明確に延在するため、この配列（配列番号６）を有するペプチドまたはその変異体を含む融合タンパク質は、ＭＣＴ１  Ａｂ１の１つ以上の機能または結合能力を保持することができる。
【０２４８】
さらなる修飾
抗体複合体
いくつかの実施形態では、本発明は、ペイロード薬物（多くの場合、細胞毒性）に結合された抗体（または一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）などの抗体フラグメント）からなる、抗体−薬物複合体（ＡＤＣ）を特徴とする。抗体は、ＡＤＣを標的癌細胞に結合させる。多くの場合、ＡＤＣは、細胞によって内在化され、薬物が細胞内に放出される。標的化により、副作用はより低く、より広い治療濃度域をもたらす。親水性リンカー（例えば、ＰＥＧ４Ｍａｌ）は、ＭＤＲ（多剤耐性）トランスポーターを通して耐性癌細胞から薬物が送り出されるのを防ぐのに役立つ。
【０２４９】
別の態様では、本発明は、細胞毒素、薬物（例えば、免疫抑制薬）、または放射性毒素などの治療薬にコンジュゲートされた抗ＭＣＴ１抗体またはそのフラグメントを含む免疫複合体を特徴とする。そのような複合体は、本明細書において「免疫複合体」と称される。１つ以上の細胞毒素を含む免疫複合体は、「免疫毒素」と称される。細胞毒素または細胞毒性薬は、細胞に有害である（例えば、死滅させる）任意の薬剤を含む。例としては、タキソール、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、臭化エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テニポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシンジオン（ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ  ａｎｔｈｒａｃｉｎ  ｄｉｏｎｅ）、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンＤ、１−ジヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、およびピューロマイシン、ならびにそれらの類似体または相同体が挙げられる。治療薬としてはまた、例えば、代謝拮抗薬（例えば、メトトレキサート、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、シタラビン、５−フルオロウラシルデカルバジン）、アルキル化剤（例えば、メクロレタミン、チオテパクロラムブシル、メルファラン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）およびロムスチン（ＣＣＮＵ）、シクロホスファミド、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンＣ、およびシス−ジクロロジアミンプラチナ（ＩＩ）（ＤＤＰ）シスプラチン）、アントラサイクリン（例えば、ダウノルビシン（以前はダウノマイシン）およびドキソルビシン）、抗生物質（例えば、ダクチノマイシン（以前はアクチノマイシン）、ブレオマイシン、ミトラマイシン、およびアントラマイシン（ＡＭＣ））、ならびに抗有糸分裂剤（例えば、ビンクリスチンおよびビンブラスチン）が挙げられる。
【０２５０】
本発明の少なくともいくつかの実施形態による、抗体にコンジュゲートされ得る治療用細胞毒素の他の例としては、デュオカルマイシン、カリケアマイシン、メイタンシン、およびオーリスタチン、ならびにそれらの誘導体が挙げられる。カリケアマイシン抗体複合体の例は、市販されている（Ｍｙｌｏｔａｒｇ（商標）Ｗｙｅｔｈ）。
【０２５１】
細胞毒素は、当該技術分野において利用可能なリンカー技術を使用して、本発明の少なくともいくつかの実施形態に従って抗体にコンジュゲートされ得る。細胞毒素を抗体にコンジュゲートするために使用されてきたリンカータイプの例としては、ヒドラゾン、チオエーテル、エステル、ジスルフィド、およびペプチド含有リンカーが挙げられるが、これらに限定されない。例えば、リソソーム区画内の低ｐＨによる開裂を受けやすい、またはカテプシン（例えば、カテプシンＢ、Ｃ、Ｄ）などの腫瘍組織で優先的に発現するプロテアーゼなどのプロテアーゼによる開裂を受けやすいリンカーが選択され得る。細胞毒素のタイプ、リンカー、および治療薬を抗体にコンジュゲートするための方法の更なる考察については、Ｓａｉｔｏ，Ｇ．ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．５５：１９９−２１５、Ｔｒａｉｌ，Ｐ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．５２：３２８−３３７、Ｐａｙｎｅ，Ｇ．（２００３）Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  ３：２０７−２１２、Ａｌｌｅｎ，Ｔ．Ｍ．（２００２）Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ  ２：７５０−７６３、Ｐａｓｔａｎ，Ｉ．ａｎｄ  Ｋｒｅｉｔｍａｎ，Ｒ．Ｊ．（２００２）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ  ３：１０８９−１０９１、Ｓｅｎｔｅｒ，Ｐ．Ｄ．ａｎｄ  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，Ｃ．Ｊ．（２００１）Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．５３：２４７−２６４も参照されたい。
【０２５２】
本発明の抗体はまた、放射性同位元素にコンジュゲートされて、放射性免疫複合体とも称される細胞毒性放射性医薬品を生成することもできる。診断的または治療的に使用するために抗体にコンジュゲートされ得る放射性同位元素の例としては、ヨウ素１３１、インジウム１１１、イットリウム９０、およびルテチウム１７７が挙げられるが、これらに限定されない。放射性免疫複合体を調製するための方法は、当該技術分野において確立されている。Ｚｅｖａｌｉｎ（登録商標）（ＢｉｏｇｅｎｌＤＥＣ）およびＢｅｘｘａｒ（登録商標）（Ｃｏｒｉｘａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）を含む、放射免疫複合体が市販されており、同様の方法が、本発明の少なくともいくつかの実施形態による抗体を使用して放射性免疫複合体を調製するために使用され得る。
【０２５３】
本発明の少なくともいくつかの実施形態に従って含有する抗ヒトＭＣＴ１抗体および複合体は、所与の生物学的応答を修飾するために使用され得、薬物部分は、古典的な化学治療薬に限定されると解釈されるべきではない。例えば、薬物部分は、所望の生物活性を有するタンパク質またはポリペプチドであり得る。そのようなタンパク質としては、例えば、酵素的に活性な毒素、またはその活性フラグメント、例えば、アブリン、リシンＡ、シュードモナス外毒素、もしくはジフテリア毒素；腫瘍壊死因子もしくはインターフェロンγなどのタンパク質；または生体応答修飾物質、例えば、リンホカイン、インターロイキン−１（「ＩＬ−１」）、インターロイキン−２（「ＩＬ−２」）、インターロイキン−６（「ＩＬ−６」）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（「ＧＭ−ＣＳＦ」）、顆粒球コロニー刺激因子（「Ｇ−ＣＳＦ」）、もしくは他の成長因子が挙げられ得る。
【０２５４】
そのような治療部分を抗体にコンジュゲートするための技術は周知であり、例えば、Ａｒｎｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，”Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｆｏｒ  Ｉｍｍｕｎｏｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｏｆ  Ｄｒｕｇｓ  Ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ”，ｉｎ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｒｅｉｓｆｅｌｄ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），ｐｐ．２４３−５６（Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．１９８５）、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，”Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ”，ｉｎ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ（２ｎｄ  Ｅｄ．），Ｒｏｂｉｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），ｐｐ．６２３−５３（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．１９８７）、Ｔｈｏｒｐｅ，”Ｃａｒｒｉｅｒｓ  Ｏｆ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ：Ａ  Ｒｅｖｉｅｗ”，ｉｎ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ′８４：Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｐｉｎｃｈｅｒａ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），ｐｐ．４７５−５０６（１９８５）、”Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｒｅｓｕｌｔｓ，Ａｎｄ  Ｆｕｔｕｒｅ  Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  Ｏｆ  Ｔｈｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｕｓｅ  Ｏｆ  Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ”，ｉｎ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｂａｌｄｗｉｎ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），ｐｐ．３０３−１６（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ  １９８５）、およびＴｈｏｒｐｅ  ｅｔ  ａｌ．，”Ｔｈｅ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  Ａｎｄ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  Ｏｆ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｔｏｘｉｎ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ”，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．，６２：１１９−５８（１９８２）を参照されたい。
【０２５５】
定常領域、Ｆｃドメイン、および翻訳後修飾の修飾
フレームワークまたはＣＤＲ領域内で行われた修飾に加えて、またはその代わりとして、本発明の少なくともいくつかの実施形態による抗体は、典型的には、血清半減期、補体固定、Ｆｃ受容体結合、および／または抗原依存性細胞傷害性などの抗体の１つ以上の機能特性を改変するための、Ｆｃ領域内の修飾を含むように操作され得る。さらに、本発明の少なくともいくつかの実施形態による抗体は、化学的に修飾され得る（例えば、１つ以上の化学的部分が抗体に付着され得る）か、またはそのグリコシル化を改変し、この場合もやはり、抗体の１つ以上の機能特性を改変するように修飾され得る。そのような実施形態は、以下でさらに説明される。Ｆｃ領域の残基の番号付けは、ＫａｂａｔのＥＵインデックスの番号付けである。
【０２５６】
一実施形態では、ＣＨ１のヒンジ領域は、ヒンジ領域中のシステイン残基の数が変えられる、例えば、増加または減少するように修飾される。このアプローチは、Ｂｏｄｍｅｒらによる米国特許第５，６７７，４２５号にさらに記載されている。ＣＨ１のヒンジ領域のシステイン残基の数は、例えば、軽鎖および重鎖のアセンブリを容易にするように、または抗体の安定性を増加もしくは減少させるように変えられる。
【０２５７】
別の実施形態では、抗体のＦｃヒンジ領域は、抗体の生物学的半減期を減少させるように変異される。より具体的には、抗体が天然のＦｃヒンジドメインＳｐＡ結合と比較してブドウ球菌プロテインＡ（ＳｐＡ）結合を損なっているように、１つ以上のアミノ酸変異が、ＦｃヒンジフラグメントのＣＨ２−ＣＨ３ドメイン界面領域に導入される。このアプローチは、Ｗａｒｄらによる米国特許第６，１６５，７４５号にさらに詳細に記載されている。
【０２５８】
別の実施形態では、抗体は、その生物学的半減期を増加させるように修飾される。様々なアプローチが可能である。例えば、Ｗａｒｄの米国特許第６，２７７，３７５号に記載されるように、以下の突然変異の１つ以上が導入され得る：Ｔ２５２Ｌ、Ｔ２５４Ｓ、およびＴ２５６Ｆ。または、Ｐｒｅｓｔａらによる米国特許第５，８６９，０４６号および同第６，１２１，０２２号に記載されるように、生物学的半減期を延長するために、抗体は、ＩｇＧのＦｃ領域のＣＨ２ドメインの２つのループから得られたサルベージ受容体結合エピトープを含有するようにＣＨ１またはＣＬ領域内で改変され得る。
【０２５９】
さらに他の実施形態では、Ｆｃ領域は、抗体のエフェクター機能を改変するように、少なくとも１つのアミノ酸残基を異なるアミノ酸残基で置き換えることにより改変される。例えば、アミノ酸残基２３４、２３５、２３６、２３７、２９７、３１８、３２０、および３２２から選択される１つ以上のアミノ酸は、抗体がエフェクターリガンドに対する改変された親和性を有するが、親抗体の抗原結合能力を保持するように、異なるアミノ酸残基で置き換えられ得る。親和性が改変されているエフェクターリガンドは、例えば、Ｆｃ受容体または補体のＣ１構成成分であり得る。このアプローチは、米国特許第５，６２４，８２１号および同第５，６４８，２６０号（両方ともＷｉｎｔｅｒらによる）にさらに詳細に記載されている。
【０２６０】
いくつかの実施形態では、アミノ酸残基３２９、３３１、および３２２から選択される１つ以上のアミノ酸は、抗体がＣ１ｑ結合を改変しており、かつ／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を低減または無効にしているように、異なるアミノ酸残基で置き換えられ得る。このアプローチは、Ｉｄｕｓｏｇｉｅらによる米国特許第６，１９４，５５１号にさらに詳細に記載されている。
【０２６１】
別の実施形態では、アミノ酸位置２３１および２３９内の１つ以上のアミノ酸残基は、改変されて、それにより、補体を固定する抗体の能力を改変する。このアプローチは、ＢｏｄｍｅｒらによるＰＣＴ公開第ＷＯ  ９４／２９３５１号にさらに記載されている。
【０２６２】
さらに別の実施形態では、Ｆｃ領域は、以下の位置で１つ以上のアミノ酸を修飾することによって、Ｆγ受容体に対する抗体の親和性を高めるように修飾される：２３８、２３９、２４８、２４９、２５２、２５４、２５５、２５６、２５８、２６５、２６７、２６８、２６９、２７０、２７２、２７６、２７８、２８０、２８３、２８５、２８６、２８９、２９０、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９８、３０１、３０３、３０５、３０７、３０９、３１２、３１５、３２０、３２２、３２４、３２６、３２７、３２９、３３０、３３１、３３３、３３４、３３５、３３７、３３８、３４０、３６０、３７３、３７６、３７８、３８２、３８８、３８９、３９８、４１４、４１６、４１９、４３０、４３４、４３５、４３７、４３８、または４３９。このアプローチは、ＰｒｅｓｔａによるＰＣＴ公開第ＷＯ００／４２０７２号にさらに記載されている。さらに、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、ＦｃγＲＩＩＩ、およびＦｃＲｎに対するヒトＩｇＧ１の結合部位は、マッピングされており、結合が改善された変異体が記載されている（Ｓｈｉｅｌｄｓ，Ｒ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．２００１）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１−６６０４を参照）。位置２５６、２９０、２９８、３３３、３３４、および３３９での特異的突然変異は、ＦｃγＲＩＩＩへの結合を改善することが示されている。加えて、以下の組み合わせ変異体がＦｃγＲＩＩＩ結合を改善することが示されている：Ｔ２５６Ａ／Ｓ２９８Ａ、Ｓ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ、Ｓ２９８Ａ／Ｋ２２４Ａ、およびＳ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ／Ｋ３３４Ａ。さらに、Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６ＥまたはＭ４２８Ｌ／Ｎ４３４Ｓなどの突然変異は、ＦｃＲｎへの結合を改善し、抗体循環半減期を延長する（Ｃｈａｎ  ＣＡ  ａｎｄ  Ｃａｒｔｅｒ  ＰＪ（２０１０）Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １０：３０１−３１６を参照）。
【０２６３】
さらに別の実施形態では、抗体は、インビボでのＦａｂアーム交換を無効にするように修飾され得る。具体的には、このプロセスは、他のＩｇＧ４抗体間でのＩｇＧ４半分子（１つの重鎖および１つの軽鎖）の交換を伴い、機能的に一価である二重特異性抗体を効果的にもたらす。重鎖のヒンジ領域および定常ドメインへの突然変異は、この交換を無効にすることができる（Ａａｌｂｅｒｓｅ，ＲＣ，Ｓｃｈｕｕｒｍａｎ  Ｊ．，２００２，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １０５：９−１９を参照）。
【０２６４】
さらに別の実施形態では、抗体のグリコシル化が修飾される。例えば、非グリコシル化抗体が作られ得る（すなわち、抗体はグリコシル化を欠いている）。グリコシル化は、例えば、抗原に対する抗体の親和性を高めるように改変され得る。そのような炭水化物修飾は、例えば、抗体配列内のグリコシル化の１つ以上の部位を改変することによって達成され得る。例えば、１つ以上の可変領域フレームワークのグリコシル化部位の排除をもたらし、それによりその部位でのグリコシル化を排除する、１つ以上のアミノ酸置換が行われ得る。そのような非グリコシル化は、抗原に対する抗体の親和性を高め得る。そのようなアプローチは、Ｃｏらによる米国特許第５，７１４，３５０号および同第６，３５０，８６１号にさらに詳細に記載されている。
【０２６５】
追加的または代替的に、フコシル残基の量が低減した低フコシル化抗体または二分ＧｌｃＮａｃ構造が増加した抗体など、改変されたタイプのグリコシル化を有する抗体が作られ得る。そのような改変されたグリコシル化パターンは、抗体のＡＤＣＣ能力を高めることが実証されている。そのような炭水化物修飾は、例えば、グリコシル化機構が改変された宿主細胞内に抗体を発現することによって達成され得る。グリコシル化機構が改変された細胞は、当該技術分野において記載されており、本発明の少なくともいくつかの実施形態による組換え抗体を発現して、それによりグリコシル化が改変された抗体を産生する宿主細胞として使用され得る。例えば、細胞株Ｍｓ７０４、Ｍｓ７０５、およびＭｓ７０９は、フコシルトランスフェラーゼ遺伝子ＦＵＴ８（ａ（１，６）フコシルトランスフェラーゼ）を欠いており、これによりＭｓ７０４、Ｍｓ７０５、およびＭｓ７０９細胞株において発現した抗体は、それらの炭水化物上でフコースを欠いている。Ｍｓ７０４、Ｍｓ７０５、およびＭｓ７０９  ＦＵＴ８細胞株は、２つの置換ベクターを使用してＣＨＯ／ＤＧ４４細胞のＦＵＴ８遺伝子を標的破壊することによって作製される（Ｙａｍａｎｅらによる米国特許公開第２００４／０１１０７０４号およびＹａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  Ｂｉｏｅｎｇ  ８７：６１４−２２を参照）。別の例として、ＨａｎａｉらによるＥＰ１，１７６，１９５は、フコシルトランスフェラーゼをコードする機能的に破壊されたＦＵＴ８遺伝子を有する細胞株について記載し、そのような細胞株において発現する抗体は、１，６結合関連酵素を低減または排除することによって低フコシル化を示する。Ｈａｎａｉらはまた、抗体のＦｃ領域に結合するＮ−アセチルグルコサミンにフコースを付加する酵素活性が低いか、または酵素活性を有しない細胞株、例えば、ラット骨髄腫細胞株ＹＢ２／０（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １６６２）について記載する。ＰｒｅｓｔａによるＰＣＴ公開第ＷＯ０３／０３５８３５号は、Ａｓｎ（２９７）結合炭水化物にフコースを付着させる能力が低下し、その宿主細胞内で発現した抗体の低フコシル化をもたらす、変異体ＣＨＯ細胞株、Ｌｅｃｌ３細胞について記載する（Ｓｈｉｅｌｄｓ，Ｒ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７：２６７３３−２６７４０も参照）。ＵｍａｎａらによるＰＣＴ公開第ＷＯ９９／５４３４２号は、操作された細胞株において発現した抗体が、二分ＧｌｃＮａｃ構造の増加を示し、これが抗体のＡＤＣＣ活性の増加をもたらすように、糖タンパク質修飾グリコシルトランスフェラーゼ（例えば、Ｐ（１，４）−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩＩＩ（ＧｎＴＩＩＩ））を発現するよう操作された細胞株について記載する（Ｕｍａｎａ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１７：１７６−１８０も参照）。あるいは、抗体のフコース残基は、フコシダーゼ酵素を使用して開裂され得る。例えば、フコシダーゼ−Ｌ−フコシダーゼは、フコシル残基を抗体から除去する（Ｔａｒｅｎｔｉｎｏ，Ａ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．（１９７５）Ｂｉｏｃｈｅｍ．１４：５５１６−２３）。
【０２６６】
本発明によって企図される本明細書における抗体の別の修飾は、例えば、半減期を増強するための、他の水溶性部分、典型的にはポリマーのペグ化または付加である。抗体は、例えば、抗体の生物学的（例えば、血清）半減期を延長させるようにペグ化され得る。抗体をペグ化するために、抗体またはそのフラグメントは、１つ以上のＰＥＧ基が抗体または抗体フラグメントに付着するようになる条件下で、典型的には、ＰＥＧの反応性エステルまたはアルデヒド誘導体などのポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と反応させられる。好ましくは、ペグ化は、反応性ＰＥＧ分子（または類似の反応性水溶性ポリマー）とのアシル化反応またはアルキル化反応を介して行われる。本明細書で使用される場合、「ポリエチレングリコール」という用語は、モノ（Ｃｉ−Ｃｉｏ）アルコキシ−もしくはアリールオキシ−ポリエチレングリコールまたはポリエチレングリコール−マレイミドなどの他のタンパク質を誘導体化するために使用されている任意の形態のＰＥＧを包含するよう意図される。特定の実施形態では、ペグ化される抗体は、非グリコシル化抗体である。タンパク質をペグ化するための方法は、当該技術分野において既知であり、本発明の少なくともいくつかの実施形態による抗体に適用され得る。例えば、ＮｉｓｈｉｍｕｒａらによるＥＰ０１５４３１６およびＩｓｈｉｋａｗａらによるＥＰ０４０１３８４を参照されたい。
【０２６７】
核酸分子
本発明はさらに、本発明による抗ＭＣＴ１抗体、またはそのフラグメントもしくは複合体をコードする核酸を提供する。核酸は、細胞全体、細胞溶解物、または部分的に精製された形態もしくは実質的に純粋な形態で存在し得る。核酸は、アルカリ／ＳＤＳ処理、ＣｓＣｌバンド形成、カラムクロマトグラフィ、アガロースゲル電気泳動、および当該技術分野において周知のその他を含む標準技術によって、他の細胞構成成分または他の汚染物質、例えば、他の細胞核酸またはタンパク質から精製されると、「単離されている」または「実質的に純粋な状態にされている」。Ａｕｓｕｂｅｌ，ｅｔ  ａｌ．（２０１１）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．を参照されたい。本発明の少なくともいくつかの実施形態による核酸は、例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡであり得、イントロン配列を含んで含まなくてもよい。好ましい態様では、核酸はｃＤＮＡ分子である。
【０２６８】
本発明の少なくともいくつかの実施形態による核酸は、標準的な分子生物学技術を使用して得ることができる。ハイブリドーマ（例えば、以下でさらに説明される、ヒト免疫グロブリン遺伝子を担持するトランスジェニックマウスから調製されたハイブリドーマ）によって発現した抗体の場合、ハイブリドーマによって作製された抗体の軽鎖および重鎖をコードするｃＤＮＡは、標準的なＰＣＲ増幅またはｃＤＮＡクローン化技術によって得ることができる。免疫グロブリン遺伝子ライブラリから（例えば、ファージディスプレイ技術を使用して）得られた抗体の場合、抗体をコードする核酸は、ライブラリから回収され得る。
【０２６９】
いったんＶＨおよびＶＬセグメントをコードするＤＮＡフラグメントが得られると、これらのＤＮＡフラグメントは、標準的な組換えＤＮＡ技術によってさらに操作されて、例えば、可変領域遺伝子を完全長抗体鎖遺伝子、Ｆａｂフラグメント遺伝子、またはｓｃＦｖ遺伝子に変換することができる。これらの操作では、ＶＬまたはＶＨをコードするＤＮＡフラグメントは、抗体定常領域または可動性リンカーなど、別のタンパク質をコードする別のＤＮＡフラグメントに作動可能に結合される。先に定義したように、「作動可能に結合された」とは、２つのＤＮＡフラグメントが結合され、これにより２つのＤＮＡフラグメントによってコードされたアミノ酸配列が、インフレームのままであることを意味する。
【０２７０】
ＶＨ領域をコードする単離されたＤＮＡは、ＶＨをコードするＤＮＡを、重鎖定常領域（ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３）をコードする別のＤＮＡ分子に作動可能に結合することによって、完全長重鎖遺伝子に変換され得る。ヒト重鎖定常領域遺伝子の配列は、当該技術分野において既知であり（例えば、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｌ  ａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．９１−３２４２を参照）、これらの領域を包含するＤＮＡフラグメントは、標準的なＰＣＲ増幅によって得ることができる。重鎖定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、またはＩｇＤ定常領域であり得るが、ほとんどは、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、またはＩｇＧ４定常領域である。Ｆａｂフラグメント重鎖遺伝子の場合、ＶＨをコードするＤＮＡは、重鎖ＣＨ１定常領域のみをコードする別のＤＮＡ分子に作動可能に結合され得る。
【０２７１】
ＶＬ領域をコードする単離されたＤＮＡは、ＶＬをコードするＤＮＡを、軽鎖定常領域、ＣＬをコードする別のＤＮＡ分子に作動可能に結合することによって、完全長軽鎖遺伝子（ならびにＦａｂ軽鎖遺伝子）に変換され得る。ヒト軽鎖定常領域遺伝子の配列は、当該技術分野において既知であり（例えば、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．９１−３２４２を参照）、これらの領域を包含するＤＮＡフラグメントは、標準的なＰＣＲ増幅によって得ることができる。軽鎖定常領域は、カッパ（κ）またはラムダ（λ）定常領域であり得るが、ほとんどは、例えば、κ定常領域である。
【０２７２】
ｓｃＦｖ遺伝子を作製するために、ＶＨおよびＶＬをコードするＤＮＡフラグメントは、可動性リンカーをコードする、例えば、アミノ酸配列（Ｇｌｙ４−Ｓｅｒ）３をコードする別のフラグメントに作動可能に結合され、これによりＶＨおよびＶＬ配列は、ＶＬ領域およびＶＨ領域が可動性リンカーで結合された隣接一本鎖タンパク質として発現することができる（例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６、Ｈｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４を参照）。
【０２７３】
ベクター
本発明はまた、本発明のＤＮＡが挿入されたベクターを提供する。レトロウイルス由来のベクターは、柔軟なゲノムを有することに加えて、遺伝的安定性および高発現を可能にするため、長期的な遺伝子移入を実現するのに適したツールである。さらに、レトロウイルスベクターを用いた臨床経験は、それらの使用における有効性および安全性を最適化するためのガイダンスを提供する。
【０２７４】
要約すると、抗体またはその抗原結合フラグメントをコードする天然または合成核酸の発現は、典型的には、抗体もしくはその抗原結合フラグメントまたはその一部分をコードする核酸を、プロモーターに作動可能に結合結し、発現ベクターに構築することによって達成される。ベクターは、真核生物における複製および組み込みに好適であり得る。典型的なクローニングベクターは、転写および翻訳ターミネーター、開始配列、および所望の核酸配列の発現の調節に有用なプロモーターを含む。
【０２７５】
核酸は、多くのタイプのベクターにクローン化され得る。例えば、核酸は、プラスミド、ファージミド、ファージ誘導体、動物ウイルス、およびコスミドが挙げられるが、これらに限定されないベクターにクローン化され得る。特に興味深いベクターとしては、発現ベクター、複製ベクター、プローブ生成ベクター、および配列決定ベクターが挙げられる。
【０２７６】
さらに、発現ベクターは、ウイルスベクターの形態で細胞に提供されてもよい。ウイルスベクター技術は、当該技術分野において周知であり、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．２００１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）、および他のウイルス学および分子生物学のマニュアルに記載されている。ベクターとして有用であるウイルスとしては、レトロウイルス、ガンマレトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス、およびレンチウイルスが挙げられるが、これらに限定されない。概して、好適なベクターは、少なくとも１つの生物において機能する複製起点、プロモーター配列、便利な制限エンドヌクレアーゼ部位、および１つ以上の選択可能マーカーを含む（例えば、ＷＯ０１／９６５８４、ＷＯ０１／２９０５８、および米国特許第６，３２６，１９３号）。
【０２７７】
哺乳動物細胞への遺伝子移入のために、多くのウイルスベースの系が開発されてきた。例えば、レトロウイルスは、遺伝子送達系に便利なプラットフォームを提供する。選択された遺伝子が、当該技術分野において既知の技術を使用してベクターに挿入され、レトロウイルス粒子にパッケージングされ得る。次いで、組換えウイルスが単離され、インビボまたはエクスビボのいずれかで対象の細胞に送達され得る。多くのレトロウイルス系が、当該技術分野において既知である。いくつかの実施形態では、アデノウイルスベクターが使用される。多くのアデノウイルスベクターが、当該技術分野において既知である。一実施形態では、レトロウイルスベクターが使用される。
【０２７８】
追加のプロモーター要素、例えばエンハンサーは、転写開始の頻度を調整する。典型的には、これらは、開始部位の３０〜１１０ｂｐ上流の領域に位置するが、多くのプロモーターは最近、開始部位の下流でも同様に機能的要素を含有することが示されている。多くの場合、プロモーター要素間の間隔は柔軟であり、そのため要素が互いに対して反転または移動した場合に、プロモーター機能は維持される。チミジンキナーゼ（ｔｋ）プロモーターでは、活性が低下し始める前に、プロモーター要素間の間隔が５０ｂｐまで離れて増加し得る。プロモーターに応じて、個々の要素が協調的にまたは独立してのいずれかで機能して、転写を活性化することができるように思われる。
【０２７９】
前初期サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター、伸長成長因子−１α（ＥＦ−１α）、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）初期プロモーター、マウス乳腺腫瘍ウイルス（ＭＭＴＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）長い末端反復（ＬＴＲ）プロモーター、ＭｏＭｕＬＶプロモーター、トリ白血病ウイルスプロモーター、エプスタイン−バーウイルス前初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモーター、ならびにアクチンプロモーター、ミオシンプロモーター、ヘモグロビンプロモーター、およびクレアチンキナーゼプロモーターなどであるが、これらに限定されないヒト遺伝子プロモーターが挙げられるが、これらに限定されない様々なプロモーター配列が使用され得る。さらに、本発明は、構成的プロモーターの使用に限定されるべきではない。誘導性プロモーターもまた、本発明の一部として企図される。誘導性プロモーターの使用は、そのような発現が望まれる場合に作動可能に結合されるポリヌクレオチド配列の発現をオンにするか、または発現が望まれない場合に発現をオフにすることが可能な分子スイッチを提供する。誘導性プロモーターの例としては、メタロチオネインプロモーター、グルココルチコイドプロモーター、プロゲステロンプロモーター、およびテトラサイクリンプロモーターが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２８０】
抗体、抗体の抗原結合フラグメント、またはその一部分の発現を評価するために、細胞に導入される発現ベクターは、選択可能マーカー遺伝子もしくはレポーター遺伝子のいずれか、またはその両方を含んで、ウイルスベクターを通してトランスフェクトまたは感染されることが求められている細胞の集団からの発現細胞の同定および選択を容易にすることができる。他の態様では、選択可能マーカーは、別個のＤＮＡ片上で運ばれ、同時トランスフェクション手順において使用され得る。選択可能マーカーおよびレポーター遺伝子の両方には、宿主細胞での発現を可能にするために、適切な調節配列が隣接していてもよい。有用な選択可能マーカーには、例えば、ｎｅｏなどの抗生物質耐性遺伝子が含まれる。
【０２８１】
レポーター遺伝子は、トランスフェクトされた可能性のある細胞を同定し、調節配列の機能性を評価するために使用される。概して、レポーター遺伝子は、レシピエントの生物または組織中に存在しないか、またはそれによって発現せず、かつその発現がいくつかの容易に検出可能な特性、例えば、酵素活性によって明らかにされるポリペプチドをコードする遺伝子である。レポーター遺伝子の発現は、ＤＮＡがレシピエント細胞に導入された後の好適な時点でアッセイされる。好適なレポーター遺伝子は、ルシフェラーゼ、ベータ−ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、分泌型アルカリホスファターゼをコードする遺伝子、または緑色蛍光タンパク質遺伝子を含み得る（例えば、Ｕｉ−Ｔｅｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０００  ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ４７９：７９−８２）。好適な発現系は周知であり、既知の技術を使用して調製され得るか、または商業的に入手され得る。概して、レポーター遺伝子の最高レベルの発現を示す最小５′隣接領域を有する構築物が、プロモーターとして同定される。そのようなプロモーター領域は、レポーター遺伝子に結合され、プロモーター駆動転写を調節する能力について薬剤を評価するために使用され得る。
【０２８２】
形質導入
細胞に遺伝子を導入および発現する方法は、当該技術分野において既知である。発現ベクターとの関連で、ベクターは、当該技術分野における任意の方法によって、宿主細胞、例えば、哺乳動物、細菌、酵母、または昆虫細胞に容易に導入され得る。例えば、発現ベクターは、物理的、化学的、または生物学的手段によって宿主細胞に移入され得る。
【０２８３】
ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための物理的方法としては、リン酸カルシウム沈殿、リポフェクション、粒子衝撃、マイクロインジェクション、エレクトロポレーションなどが挙げられる。ベクターおよび／または外因性核酸を含む細胞を産生するための方法は、当該技術分野において周知である。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．（２００１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）を参照されたい。ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための好ましい方法は、リン酸カルシウムトランスフェクションである。
【０２８４】
対象となるポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための生物学的方法としては、ＤＮＡおよびＲＮＡベクターの使用が挙げられる。ウイルスベクター、特にレトロウイルスベクターは、哺乳動物、例えば、ヒト細胞に遺伝子を挿入するために最も広く使用されている方法になっている。他のウイルスベクターは、レンチウイルス、ポックスウイルス、単純ヘルペスウイルスＩ、アデノウイルス、およびアデノ随伴ウイルスなどに由来し得る。例えば、米国特許第５，３５０，６７４号および同第５，５８５，３６２号を参照されたい。
【０２８５】
ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための化学的手段としては、巨大分子複合体、ナノカプセル、ミクロスフェア、ビーズなどのコロイド分散系、ならびに水中油型エマルジョン、ミセル、混合ミセル、およびリポソームなどの脂質ベースの系が挙げられる。インビトロおよびインビボでの送達ビヒクルとして使用するための例示的なコロイド系は、リポソーム（例えば、人工膜小胞）である。
【０２８６】
非ウイルス送達系が利用される場合、例示的な送達ビヒクルは、リポソームである。脂質製剤の使用は、（インビトロ、エクスビボ、またはインビボでの）宿主細胞への核酸の導入のために企図される。別の態様では、核酸は、脂質と関連し得る。脂質に関連する核酸は、リポソームの水性内部にカプセル化され得る、リポソームの脂質二重層内に散在し得る、リポソームおよびオリゴヌクレオチドの両方に関連する結合分子を介してリポソームに付着し得る、リポソームに封入され得る、リポソームと複合体化し得る、脂質を含有する溶液中に分散され得る、脂質と混合され得る、脂質と組み合わされ得る、脂質中に懸濁液として含有され得る、ミセルに含有され得るかもしくはミセルと複合体化され得る、または別様に脂質と関連し得る。脂質、脂質／ＤＮＡ、または脂質／発現ベクター関連組成物は、溶液中の特定の構造に限定されない。例えば、それらは、ミセルとして二重層構造で、または「崩壊した」構造を伴って存在し得る。それらはまた、単に溶液中に散在し、おそらくサイズまたは形状が均一ではない凝集体を形成する可能性がある。脂質は、天然または合成脂質であり得る脂肪物質である。例えば、脂質としては、細胞質で自然に発生する脂肪滴、ならびに長鎖脂肪族炭化水素およびその誘導体、例えば、脂肪酸、アルコール、アミン、アミノアルコール、およびアルデヒドを含有する化合物のクラスが挙げられる。
【０２８７】
使用に適した脂質は、商業的供給源から入手され得る。例えば、ジミリスチルホスファチジルコリン（「ＤＭＰＣ」）は、Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．から入手され得、リン酸ジセチル（「ＤＣＰ」）は、Ｋ＆Ｋ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｐｌａｉｎｖｉｅｗ，Ｎ．Ｙ．）から入手され得、コレステロール（「Ｃｈｏｉ」）は、Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ−Ｂｅｈｒｉｎｇから入手され得、ジミリスチルホスファチジルグリセロール（「ＤＭＰＧ」）および他の脂質は、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ，Ｉｎｃ．（Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，Ａｌａ．）から入手され得る。クロロホルムまたはクロロホルム／メタノール中の脂質の原液は、摂氏約−２０度で保存され得る。クロロホルムは、メタノールよりも容易に蒸発するため、唯一の溶媒として使用される。「リポソーム」は、封入された脂質二重層または凝集体の生成によって形成される、様々な単一および多層の脂質ビヒクルを包含する総称である。リポソームは、リン脂質二重層膜および内部水性媒体を伴う小胞構造を有するものとして特徴付けられ得る。多重膜リポソームは、水性媒体によって分離された複数の脂質層を有する。それらは、リン脂質が過剰の水溶液中に懸濁されると自然に形成される。脂質構成成分は、閉鎖構造の形成前に自己再構成を受け、脂質二重層の間に水および溶解溶質を閉じ込める（Ｇｈｏｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１  Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ  ５：５０５−１０）。しかしながら、溶液中に通常の小胞構造とは異なる構造を有する組成物も包含される。例えば、脂質はミセル構造をとり得るか、または単に脂質分子の不均一な凝集体として存在してもよい。リポフェクタミン−核酸複合体も企図される。
【０２８８】
外因性核酸を宿主細胞に導入するか、または別様に細胞を本発明の阻害剤に曝露するために使用される方法に関係なく、宿主細胞における組換えＤＮＡ配列の存在を確認するために、様々なアッセイが実施され得る。そのようなアッセイとしては、例えば、サザンブロッティングおよびノーザンブロッティング、ＲＴ−ＰＣＲおよびＰＣＲ；例えば、免疫学的手段（ＥＬＩＳＡおよびウエスタンブロット）による、または本発明の範囲内にある薬剤を同定するための本明細書に記載されるアッセイによる、特定のペプチドの存在または非存在の検出などの、当業者に周知の「分子生物学的」アッセイが挙げられる。
【０２８９】
治療用途
上記の方法によって得られた単離された抗ＭＣＴ１抗体もしくはその抗原結合フラグメント、またはそれを含む組成物は、対象における疾患、障害、または状態の治療での薬剤として使用され得る。いくつかの実施形態では、そのような薬剤は、自己免疫、炎症、またはアレルギー状態を治療するために使用され得る。いくつかの実施形態では、薬剤は、癌の治療に使用され得る。いくつかの実施形態では、薬剤は、ＥＩＨＩの治療に使用され得る。
【０２９０】
対象
本明細書で言及される対象は、任意の生存対象であってもよい。好ましい実施形態では、対象は、哺乳動物である。本明細書で言及される哺乳動物は、任意の哺乳動物であり得る。本明細書で使用される場合、「哺乳動物」という用語は、マウスおよびハムスターなどのげっ歯目の哺乳動物、ならびにウサギなどのウサギ目の哺乳動物が挙げられるが、これらに限定されない任意の哺乳動物を指す。哺乳動物は、ネコ（猫）およびイヌ（犬）を含む食肉目からのものであり得る。哺乳動物は、ウシ（牛）およびブタ（豚）を含む偶蹄目からのもの、またはウマ（馬）を含む奇蹄目のものであり得る。哺乳動物は、霊長目、セボイド目、もしくはシモイド（サル）目、または真猿亜目（ヒトおよび類人猿）のものであり得る。
【０２９１】
いくつかの実施形態では、抗体、抗体フラグメント、または組成物が投与される対象は、ヒトなどの霊長類である。いくつかの実施形態では、霊長類は、サルまたは類人猿である。対象は、男性または女性であり得、乳児、若年、青年、成人、および高齢対象を含む、任意の好適な年齢であり得る。いくつかの実施例では、患者または対象は、疾患、抗体療法のための、および／または毒性転帰を評価するための検証された動物モデルである。
【０２９２】
いくつかの実施形態では、対象は、例えば、別の免疫療法、ならびに／または化学療法、放射線、および／もしくは造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）、例えば、同種異系ＨＳＣＴを含む他の療法による治療後に、持続性または再発性疾患を有する。いくつかの実施形態では、投与は、対象が別の療法に対して耐性になったにもかかわらず、対象を効果的に治療する。いくつかの実施形態では、対象は、再発していないが、再発のリスクが高いなど、再発のリスクがあると判断され、したがって化合物または組成物は、例えば、再発の可能性を低減するか、または再発を予防するために予防的に投与される。
【０２９３】
いくつかの実施形態では、方法は、対象、組織、または細胞への抗ＭＣＴ１抗体、抗体フラグメント、または含有する組成物の投与を含む。治療される対象、または組織もしくは細胞が由来する対象は、ＭＣＴ１の発現に関連する疾患、状態、または障害を有するか、そのリスクがあるか、または有すると疑われる対象であり得る。いくつかの実施形態では、抗体、抗体フラグメント、または組成物は、治療される特定の疾患または状態を有する対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体、抗体フラグメント、または組成物は、疾患または状態を有するか、またはそのリスクがある対象などの対象に投与される。いくつかの態様では、方法はそれにより、自己免疫障害を媒介する活性化Ｔ細胞またはＢ細胞の割合を減少させることなどによって、疾患または状態の１つ以上の症状を治療、例えば、改善する。
【０２９４】
機能活性および／または評価
ＭＣＴ１の阻害は、自己免疫応答を下方制御するために使用され得る。下方制御は、すでに進行中の自己免疫応答を阻害もしくは遮断する形態であり得るか、または自己免疫応答の誘発を妨げることを伴い得る。ＭＣＴ１媒介性乳酸輸送を阻害することによって、活性化免疫細胞の機能が阻害され得る。例えば、ＭＣＴ１  Ａｂ１は、活性化Ｔ細胞およびＢ細胞上で発現し、免疫学的に関連するＭＣＴ１に結合し得、それにより、これらの細胞によって媒介される自己免疫応答を下方調節する。本明細書に開示されるように、他の抗ＭＣＴ１抗体は、例えば、活性化Ｔ細胞活性または増殖を阻害するそれらの能力によって、かつ／あるいはインビトロでの、または炎症、アレルギー、もしくは自己免疫疾患モデルにおけるそれらの免疫抑制効果に基づいて同定され得る。
【０２９５】
抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントの存在下で、例えば、細胞増殖またはエフェクター機能（例えば、抗体産生、サイトカイン産生、食作用）を測定するために、当該技術分野において認識されている多くの細胞活性化の読み出しが用いられ得る。試験抗体がＭＣＴ１を阻害する能力は、測定されている増殖またはエフェクター機能の減少をもたらす抗体の能力を測定することによって容易に決定され得る。したがって、免疫抑制性であり、自己免疫活性化を遮断する試験抗体の能力は、異なる濃度の抗原でのサイトカイン産生および／または増殖を測定することによって決定され得る。いくつかの実施形態では、本発明の治療方法の有効性を監視するために炎症性サイトカインの産生または分泌が使用され得る。
【０２９６】
いくつかの実施形態では、本発明の抗体を用いた治療の有効性は、尿中ケトンの検出によって測定され得る。特に、ＭＣＴ１  Ａｂ１は、げっ歯類ＭＣＴ１と交差反応しないため、マウス研究におけるインビボ結果は、ケトン尿がヒト白血球から直接誘発され得、それは、これらがＮＳＧマウスにおける唯一の標的細胞であるためであることを示唆し得る。加えて、ＭＣＴ１阻害の観察された免疫調節効果のいくつかは、研究が、ケトンの血中濃度の増加がインフラマソームを抑制することができることを示しているため、ケトンの生成から間接的に生じ得る（参考文献６７）。
【０２９７】
いくつかの態様では、本発明の抗体を用いた治療の有効性は、臨床転帰を評価することによって測定される。自己免疫、炎症、またはアレルギー状態の治療の場合、治療有効性は、状態の改善によって測定され得る。例えば、狼瘡の症状の減少、ＧＶＨＤの生存率の改善、移植片拒絶の低減、自己抗体濃度の減少など。癌の治療の場合、これは、腫瘍負荷または腫瘍細胞量の低減、腫瘍の安定化、無増悪生存率、または全生存率を含み得る。ＥＩＨＩの治療の場合、そのような臨床転帰には、身体活動後の低血糖症の低減が含まれ得る。
【０２９８】
免疫応答の下方制御
ＭＣＴ１阻害は、免疫応答を下方制御するために使用され得る。下方制御は、すでに進行中の免疫応答を阻害もしくは遮断する形態であり得るか、または免疫応答の誘発を妨げることを伴い得る。活性化免疫細胞の機能は、免疫細胞応答を下方制御することによって、または免疫細胞に特異的アネルギーを誘発することによって、またはその両方によって阻害され得る。例えば、抗ＭＣＴ１抗体は、活性化Ｔ細胞上のＭＣＴ１に結合し、それにより免疫応答を下方調節し得る。この抗体は、単一特異性または多重特異性であり得、例えばそれは、ＢｉＴＥなどの二重特異性抗体を含み得る。例えば、そのような抗体は、例えば、免疫細胞、例えば、活性化Ｔ細胞またはＢ細胞上の細胞表面受容体を標的とする、ＭＣＴ１抗原結合部分および別の抗原結合部分を含むことができる。そのような抗体は、ＭＣＴ１抗原結合部位を含むことに加えて、分子を特定の細胞集団に標的化するために、Ｂ細胞抗原受容体、Ｔ細胞抗原受容体、またはＦｃもしくは他の受容体に結合する結合部位を含み得る。二重特異性抗体に対するこの第２の抗原の選択は、標的とされる細胞集団の選択に柔軟性を提供する。本明細書に開示されるように、他のヒトＭＣＴ１結合抗体は、Ｔ細胞活性または増殖を阻害するそれらの能力によって、かつ／あるいはインビトロでの、または炎症、アレルギー、もしくは自己免疫疾患モデルにおけるそれらの免疫抑制効果に基づいて同定され得る。
【０２９９】
本発明による抗ＭＣＴ１抗体と抗原を同時投与することによって、特定の抗原に対する耐性が誘発され得る。例えば、特定のポリペプチドに対する耐性が誘発され得る。免疫応答が望ましくないアレルゲンまたは外来ポリペプチドに対する免疫応答が阻害され得る。例えば、第ＶＩＩＩ因子を受けた患者は、この凝固因子に対する抗体を頻繁に生成する。本発明による抗ＭＣＴ１抗体と組換え第ＶＩＩＩ因子の共投与は、この望ましくない免疫応答を抑制し得る。
【０３００】
本発明による抗ＭＣＴ１抗体は、免疫応答を下方調節するために、免疫細胞上の共刺激受容体の活性を遮断するか、または免疫細胞上で発現した免疫抑制受容体もしくはリガンドの活性を刺激する別の薬剤と組み合わせて使用され得る。例示的な分子としては、ＰＤ−１、ＰＤＬ−１アゴニスト、可溶性形態のＣＴＬＡ−４、抗Ｂ７−１抗体、抗Ｂ７−２抗体、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＢＴＬＡ、Ｂ７−Ｈ４、Ｂ７Ｈ３などの１つ以上を標的とするアンタゴニスト抗体、および／またはＣＤ４０、ＣＤ１３７、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＩＣＯＳ、もしくはＶＩＳＴＡの１つ以上を標的とするアゴニスト抗体、あるいはそれらの組み合わせが挙げられる。これらの部分は、単一の組成物または化合物、例えば、本発明による抗ＭＣＴ１抗体を含有し、免疫アゴニスト抗体をさらに含む二重特異性抗体に組み合わされ得るか、またはそれは、別の免疫抑制ポリペプチドもしくは他の活性剤に融合している、本発明による抗ＭＣＴ１抗体を含有する融合ポリペプチドを含み得る。代替的に、これらの部分は、同じまたは異なる組成物中で別々または個別の実体として（同時にまたは順次に）投与されて、対象における免疫細胞媒介性免疫応答を下方制御し得る。
【０３０１】
本発明による抗ＭＣＴ１抗体と組み合わされ得る特定の免疫抑制分子の例としては、共刺激シグナルを遮断する抗体（例えば、ＣＤ２８もしくはＩＣＯＳに対する）、ＣＴＬＡ４を介して阻害シグナルを活性化する抗体、および／または他の免疫細胞マーカーに対する（例えば、ＣＤ４０、ＣＤ４０リガンド、もしくはサイトカインに対する）抗体、融合タンパク質（例えば、ＣＴＬＡ４−ＦｃもしくはＰＤ−１−Ｆｃ）、および免疫抑制薬（例えば、ラパマイシン、シクロスポリンＡ、もしくはＦＫ５０６）が挙げられる。
【０３０２】
さらなる実施形態では、本発明による抗ＭＣＴ１抗体を含有する二重特異性抗体は、例えば、特定のタイプの細胞、例えば活性化Ｔ細胞またはＢリンパ球上にのみ見られるマーカーを使用して、特定の細胞集団を標的とするのに有用である。ＭＣＴ１を遮断することによる免疫応答の下方制御は、例えば、組織、皮膚、および臓器移植、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、もしくはアレルギーの状況において、または全身性エリテマトーデス、ＩＢＤ、ＲＡ、乾癬、および多発性硬化症などの自己免疫および炎症性疾患において、免疫応答を下方調節するのに有用である。例えば、ＭＣＴ１機能の遮断により、組織移植における組織破壊が低減される。典型的には、組織移植では、移植片の拒絶は、免疫細胞による異物としてのその認識を通して開始され、移植を破壊する免疫反応がその後に続く。移植前または移植時に、免疫細胞上のＭＣＴ１を阻害する分子を単独で、または別の下方調節剤と併せて投与すると、共刺激シグナルの生成を阻害することができる。さらに、ＭＣＴ１を遮断することはまた、免疫細胞をアネルギー化するために十分であり得、それにより対象における耐性を誘発する。
【０３０３】
一部の疾患または一部の対象において十分な免疫抑制または耐性を達成するために、他の分子の共刺激機能を遮断することが必要な場合がある。例えば、移植前または移植時に、これらの抗原の各々の活性を有するか、またはこれらの抗原に対する抗体を遮断するペプチドの組み合わせの可溶性形態を投与することによって（別々に、もしくは一緒に単一組成物中で）、Ｂ７−１およびＢ７−２の機能を遮断することが望ましい場合がある。あるいは、ＭＣＴ１を遮断し、Ｂ７−１および／またはＢ７−２の共刺激活性をさらに阻害することが望ましい場合がある。
【０３０４】
主題の抗ＭＣＴ１抗体は、自己免疫疾患の治療に特に有用である。多くの自己免疫障害は、自己組織に対して反応性であり、かつ疾患の病理に関与するサイトカインおよび自己抗体の産生を促進する、免疫細胞の不適切な活性化の結果である。自己反応性免疫細胞の活性化を防ぐことで、疾患の症状が低減または解消され得る。主題の抗ＭＣＴ１抗体の投与は、自己反応性免疫細胞の抗原特異的耐性を誘発し得、これは、疾患からの長期的な緩和をもたらし得る。加えて、Ｂ７分子と共刺激受容体の受容体−リガンド相互作用を妨害することによって免疫細胞の共刺激を遮断する薬剤の同時投与は、免疫細胞活性化を阻害して、疾患過程に関与し得る自己抗体またはサイトカインの産生を防ぐのに有用であり得る。
【０３０５】
主題の抗ＭＣＴ１抗体を介した免疫応答の下方制御はまた、自家組織の自己免疫攻撃を治療するのに有用であり得る。したがって、自己免疫攻撃によって引き起こされるか、または悪化する状態（例えば、心臓病、心筋梗塞、またはアテローム性動脈硬化症）は、ＭＣＴ１を阻害することによって和らげられ得るか、または改善され得る。したがって、主題の抗ヒトＭＣＴ１抗体を使用してＭＣＴ１を阻害することによって、自己免疫疾患などの自己免疫攻撃によって悪化した状態（ならびに心臓病、心筋梗塞、およびアテローム性動脈硬化などの状態）を調節することは、本発明の範囲内である。
【０３０６】
前述のように、自己免疫および炎症性障害を予防または緩和するための本発明による抗ＭＣＴ１抗体の有効性は、ヒト自己免疫および炎症性疾患の十分に特徴付けられた多くの動物モデルを使用して決定され得る。例としては、マウス実験的自己免疫性脳炎、ＭＲＬ／ｌｐｒ／ｌｐｒマウスまたはＮＺＢハイブリッドマウスにおける全身性エリテマトーデス、マウス自己免疫性コラーゲン関節炎、ＮＯＤマウスおよびＢＢラットにおける真性糖尿病、ならびにマウス実験的重症筋無力症が挙げられる。Ｐａｕｌ  ｅｄ．，Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８９，ｐａｇｅｓ  ８４０−８５６を参照されたい。
【０３０７】
免疫細胞活性化の阻害は、例えば、ＩｇＥ産生を阻害することによって、アレルギーおよびアレルギー反応の治療において治療的にさらに有用である。主題の抗ＭＣＴ１抗体は、アレルギー性の対象に投与されて、対象における免疫細胞媒介性アレルギー反応を阻害することができる。ＭＣＴ１の阻害は、適切なＭＨＣ分子と併せたアレルゲンへの曝露を伴い得る。アレルギー反応は、アレルゲンの侵入経路およびマスト細胞または好塩基球へのＩｇＥの沈着のパターンに応じて、本質的に全身性または局所性であり得る。したがって、免疫細胞媒介性アレルギー反応は、主題の抗ヒトＭＣＴ１抗体の投与によって局所的または全身的に阻害され得る。
【０３０８】
自己免疫、炎症、またはアレルギー状態の治療
本発明による抗体、抗体フラグメント、および医薬組成物は、活性化Ｔ細胞またはＢ細胞を阻害し、かつ自己免疫、アレルギー、または炎症状態など、これが治療的に望ましい状態を治療するために使用され得る。これらの組成物は、Ｂ細胞活性もしくはＴ細胞活性化もしくは増殖またはサイトカイン発現の抑制を必要としている対象において、それを行うのに有効な量の本発明による抗体または抗体フラグメントを含む。そのような自己免疫、炎症、およびアレルギー状態としては、例えば、関節炎状態、例えば、関節リウマチ（ＲＡ）、乾癬性関節炎、乾癬、強皮症、多発性硬化症、狼瘡、ＩＢＤ、ＩＴＰ、糖尿病、ＧｖＨＤ、サルコイドーシス、アレルギー性喘息、および肝炎関連肝毒性が挙げられる。これらの抗体はまた、移植された細胞、組織、または臓器、例えば、組織移植片、ＣＡＲ−Ｔ細胞もしくは遺伝子療法構築物、または含有する細胞などに対する望ましくないＴ細胞免疫応答を阻害するために使用され得る。
【０３０９】
本発明の抗体が単独で、または他の治療薬、特に他の免疫抑制分子と組み合わせて使用され得る特定の状態としては、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、後天性脾萎縮症、急性前部ブドウ膜炎、急性散在性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、急性痛風性関節炎、急性壊死性出血性白質脳炎、急性または慢性副鼻腔炎、急性化膿性髄膜炎（もしくは他の中枢神経系炎症性障害）、急性重度炎症、アジソン病、副腎炎、成人発症型糖尿病（ＩＩ型糖尿病）、成人発症型特発性副甲状腺機能低下症（ＡＯＩＨ）、無ガンマグロブリン血症、無顆粒球症、血管炎（脈管炎、任意に、大型血管炎、任意に、リウマチ性多発性筋痛症、および巨細胞性（高安）関節炎（ｇｉａｎｔ  ｃｅｌｌ（Ｔａｋａｙａｓｕ′ｓ）ａｒｔｈｒｉｔｉｓ）を含む）、アレルギー状態、アレルギー性接触皮膚炎、アレルギー性皮膚炎、アレルギー性肉芽腫性血管炎、アレルギー性過敏症障害、アレルギー性神経炎、アレルギー反応、円形脱毛症、完全脱毛症、アルポート症候群、肺胞炎、任意にアレルギー性肺胞炎または線維化性肺胞炎、アルツハイマー病、アミロイドーシス、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ；ルーゲーリック病）、好酸球関連障害、任意に好酸球増加症、アナフィラキシー、強直性脊椎炎、血管拡張症、抗体媒介性腎炎、抗ＧＢＭ／抗ＴＢＭ腎炎、抗原−抗体複合体媒介性疾患、抗糸球体基底膜疾患、抗リン脂質抗体症候群、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、アフタ、アフタ性口内炎、再生不良性貧血、不整脈、動脈硬化症、動脈硬化性疾患、関節炎、任意に関節リウマチ、例えば、急性関節炎、もしくは慢性関節リウマチ、慢性進行性関節炎、変形性関節炎、回虫症、アスペルギルス腫、好酸球を含む肉芽腫、アスペルギルス症、アスペルミオジェネース（ａｓｐｅｒｍｉｏｇｅｎｅｓｅ）、喘息、任意に気管支喘息（ａｓｔｈｍａ  ｂｒｏｎｃｈｉａｌｅ）、気管支喘息（ｂｒｏｎｃｈｉａｌ  ａｓｔｈｍａ）、もしくは自己免疫性喘息、毛細血管拡張性運動失調症、失調性硬化症、アテローム性動脈硬化症、自閉症、自己免疫性血管性浮腫、自己免疫性再生不良性貧血、自己免疫性萎縮性胃炎、自己免疫性血糖尿病、自己免疫性精巣炎および卵巣炎を含む精巣および卵巣の自己免疫障害、膠原病に関連する自己免疫障害、自己免疫性自律神経障害、自己免疫性耳疾患（ＡＧＥＤ）、自己免疫性甲状腺炎などの甲状腺炎を含む自己免疫性内分泌疾患、自己免疫性腸症症候群、自己免疫性性腺機能不全、自己免疫性聴力損失、自己免疫性溶血、自己免疫性肝炎、自己免疫性肝臓障害、自己免疫性高脂血症、自己免疫性免疫不全、自己免疫性内耳疾患（ＡＩＥＤ）、自己免疫性心筋炎、自己免疫性好中球減少症、自己免疫性膵炎、自己免疫性多腺性内分泌障害、多腺性自己免疫症候群Ｉ型、自己免疫性網膜症、自己免疫性血小板減少性紫斑病（ＡＴＰ）、自己免疫性甲状腺疾患、自己免疫性蕁麻疹、自己免疫媒介性胃腸疾患、軸索およびニューロン神経障害、バロー病、ベーチェット病、良性家族性および虚血再灌流傷害、良性リンパ球性血管炎、ベルガー病（ＩｇＡ腎症）、愛鳥家肺、失明、ベック病、閉塞性細気管支炎（非移植）対ＮＳＩＰ、気管支炎、気管支肺炎性アスペルギルス症、ブルトン症候群、水疱性類天疱瘡、カプラン症候群、心筋症、心血管虚血、キャッスルマン症候群、セリアック病（Ｃｅｌｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）、セリアックスプルー（グルテン性腸症）、脳変性、脳虚血、および血管新生に伴う疾患、シャーガス病、チャネル病、任意にてんかん、ＣＮＳのチャネル病、脈絡網膜炎、脈絡膜炎、自己免疫性血液障害、慢性活動性肝炎もしくは自己免疫性慢性活動性肝炎、慢性接触皮膚炎、慢性好酸球性肺炎、慢性疲労症候群、慢性肝炎、慢性過敏性肺炎、慢性炎症性関節炎、慢性炎症性脱髄性多発神経障害（ＣＩＤＰ）、慢性難治性炎症、慢性粘膜皮膚カンジダ症、慢性神経障害、任意にＩｇＭ多発性神経障害もしくはＩｇＭ媒介性神経障害、慢性閉塞性気道疾患、慢性肺炎症性疾患、慢性再発性多巣性骨髄炎（ＣＲＭＯ）、慢性甲状腺炎（橋本甲状腺炎）もしくは亜急性甲状腺炎、チャーグ−ストラウス症候群、瘢痕性類天疱瘡／良性粘膜類天疱瘡、ＣＮＳ炎症性障害、ＣＮＳ血管炎、セリアック病、コーガン症候群、寒冷凝集素病、ポリープ性大腸炎、大腸炎、例えば、潰瘍性大腸炎（ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ  ｃｏｌｉｔｉｓ）、潰瘍性大腸炎（ｃｏｌｉｔｉｓ  ｕｌｃｅｒｏｓａ）、膠原線維性大腸炎、Ｔ細胞の浸潤および慢性炎症反応を伴う状態、先天性心ブロック、先天性風疹感染症、クームス陽性貧血、冠動脈疾患、コクサッキー心筋炎、ＣＲＥＳＴ症候群（石灰症、レイノー現象）、クローン病、クリオグロブリン血症、クッシング症候群、毛様体炎、任意に慢性毛様体炎、異時性毛様体炎（ｈｅｔｅｒｏｃｈｒｏｎｉｃ  ｃｙｃｌｉｔｉｓ）、虹彩毛様体炎、もしくはフックス毛様体炎、嚢胞性線維症、サイトカイン誘発性毒性、難聴、変性性関節炎、脱髄疾患、任意に自己免疫性脱髄疾患、脱髄性神経障害、デング熱、疱疹状皮膚炎およびアトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎を含む皮膚炎、皮膚筋炎、急性炎症成分を伴う皮膚病、デビック病（視神経脊髄炎）、糖尿病性大動脈障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、ダイアモンド・ブラックファン貧血、びまん性間質性肺線維症、拡張型心筋症、円板状狼瘡、白血球漏出を伴う疾患、ドレスラー症候群、デュピュイトラン拘縮、エコーウイルス感染症、アレルギー性またはアトピー性湿疹を含む湿疹、ラスムッセン脳炎ならびに辺縁系脳炎および／もしくは脳幹脳炎などの脳炎、脳脊髄炎、任意にアレルギー性脳脊髄炎（ａｌｌｅｒｇｉｃ  ｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ）もしくはアレルギー性脳脊髄炎（ｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ  ａｌｌｅｒｇｉｃａ）および実験的アレルギー性脳脊髄炎（ＥＡＥ）、動脈内過形成、心内膜炎、内分泌性眼症、子宮内膜症、心内膜心筋線維症、眼球陥入水晶体過敏性眼内炎、眼内炎、アレルギー性腸炎、好酸球増加−筋痛症候群、好酸球性筋膜炎、流行性角結膜炎、後天性表皮水疱症（ＥＢＡ）、上強膜、上強膜炎、エプスタイン−バーウイルス感染症、持久性隆起性紅斑、多形紅斑、らい性結節性紅斑、結節性紅斑、胎児赤芽球症、食道運動障、本態性混合型クリオグロブリン血症、篩骨、エヴァン症候群、実験的アレルギー性脳脊髄炎（ＥＡＥ）、第ＶＩＩＩ因子欠乏症、農夫肺、リウマチ熱（ｆｅｂｒｉｓ  ｒｈｅｕｍａｔｉｃａ）、フェルティ症候群、線維筋痛症、線維化性肺胞炎、フィラリア症、巣状分節性糸球体硬化症（ＦＳＧ���）、食中毒、前面胃萎縮、巨細胞性関節炎（ｇｉａｎｔ  ｃｅｌｌ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ）（側頭動脈炎（ｔｅｍｐｏｒａｌ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ））、巨細胞性肝炎、巨細胞性多発筋痛、糸球体腎炎、慢性もしくは急性糸球体腎炎（例えば、原発性ＧＮ）などのネフローゼ症候群を伴う、および伴わない糸球体腎炎（ＧＮ）、グッドパスチャー症候群、痛風性関節炎、顆粒球輸血関連症候群、リンパ腫様肉芽腫症を含む肉芽腫症、多発血管炎性肉芽腫症（ＧＰＡ）、肉芽腫性ブドウ膜炎、グレーヴス病、ギラン−バレー症候群、滴状乾癬、血色素尿症発作、ハンマン−リッチ病、橋本病、橋本脳炎、ヘモクロマトーシス、溶血性貧血もしくは自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）を含む免疫性溶血性貧血、溶血性貧血、血友病Ａ、ヘノッホ−シェーンライン紫斑病、妊娠性疱疹、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症、痛覚過敏、低ガンマグロブリン血症、性腺機能低下症、副甲状腺機能低下症、特発性尿崩症、特発性顔面麻痺、特発性甲状腺機能低下症、特発性ＩｇＡ腎症、突発性膜性ＧＮもしくは突発性膜性腎症、特発性腎炎症候群、特発性肺線維症、特発性スプルー、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、ＩｇＡ腎症、ＩｇＥ媒介性疾患、任意にアナフィラキシーおよびアレルギー性もしくはアトピー性鼻炎、ｌｇＧ４関連硬化性疾患、限局性回腸炎、免疫複合体腎炎、サイトカインおよびＴリンパ球によって媒介される急性および遅延型過敏症に関連する免疫応答、免疫媒介性ＧＮ、成人もしくは急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）を含む免疫調節リポタンパク質、封入体筋炎、感染性関節炎、抗精子抗体に起因する不妊症、ブドウ膜の全てもしくは一部の炎症、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）炎症性過剰増殖性皮膚疾患、炎症性ミオパシー、インスリン依存性糖尿病（１型）、膵島炎、間質性膀胱炎、間質性肺疾患、間質性肺線維症、虹彩炎、虚血再灌流障害、関節炎、若年性関節炎、若年性皮膚筋炎、若年性糖尿病、若年発症型（Ｉ型）真性糖尿病、小児インスリン依存性真性糖尿病（ＩＤＤＭ）、若年発症関節リウマチ、川崎症候群、乾性角結膜炎、キパノソミアシス（ｋｙｐａｎｏｓｏｍｉａｓｉｓ）、ランバート−イートン症候群、リーシュマニア症、ハンセン病、白血球減少症（ｌｅｕｃｏｐｅｎｉａ）、白血球接着不全症、白血球破砕性血管炎、白血球減少症（ｌｅｕｋｏｐｅｎｉａ）、扁平苔癬、硬化性苔癬、木質性結膜炎、線形ＩｇＡ皮膚症、線状ＩｇＡ疾患（ＬＡＤ）、レフラー症候群、ルポイド肝炎、狼瘡（腎炎、脳炎、小児、非腎性、腎外、円板状、脱毛症を含む）、狼瘡（ＳＬＥ）、播種性紅斑性狼瘡、ライム関節炎、ライム病、リンパ性間質性肺炎、マラリア、男性および女性の自己免疫性不妊症、上顎、中型血管炎（川崎病および結節性多発動脈炎を含む）、Ｉ型およびＩＩ型を含む膜性（ｍｅｍｂｒａｎｏ−）または膜性（ｍｅｍｂｒａｎｏｕｓ）増殖性ＧＮ（ＭＰＧＮ）、および急速進行性ＧＮ、膜性ＧＮ（膜性腎症）、メニエール病、髄膜炎、顕微鏡的大腸炎、顕微鏡的多発性血管炎、片頭痛、微小変化腎症、混合性結合組織病（ＭＣＴＤ）、感染性単核球症、モーレン潰瘍、ムッハ−ハーベルマン病、多巣性運動神経障害、多発性内分泌腺不全、多臓器障害症候群（敗血症、外傷、もしく���血に続発するものなど）、多臓器障害症候群、脊髄視覚ＭＳなどの多発性硬化症（ＭＳ）、多発性硬化症、おたふく風邪、筋障害、胸腺腫関連重症筋無力症などの重症筋無力症、重症筋無力症、心筋炎、筋炎、ナルコレプシー、壊死性腸炎、および全層性大腸炎、および自己免疫性炎症性腸疾患、壊死性、皮膚、もしくは過敏性血管炎、新生児狼瘡症候群（ＮＬＥ）、ネフローゼ、ネフローゼ症候群、神経疾患、視神経脊髄炎（デビック病）、視神経脊髄炎、神経ミオトニー、好中球減少症、非癌性リンパ球増加症、非肉芽腫性ブドウ膜炎、非悪性胸腺腫、眼球および眼窩炎症性障害、眼球瘢痕性類天疱瘡、卵巣炎、交感神経眼炎、オプソクローヌスミオクローヌス症候群（ＯＭＳ）、オプソクローヌスミオクローヌス症候群（ＯＭＳ）、および感覚神経障害、視神経炎、肉芽腫性精巣炎、変形性関節症、回帰性リウマチ、膵炎、汎血球減少症、ＰＡＮＤＡＳ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓに関連する小児自己免疫神経精神障害）、傍腫瘍性小脳変性症、腫瘍随伴症候群、傍腫瘍性神経症候群を含む腫瘍随伴症候群、任意にランバート−イートン筋無力症候群もしくはイートン−ランバート症候群、リーシュマニアなどの寄生虫病、発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）、パリー−ロンバーグ症候群、扁平部炎（周辺性ブドウ膜炎）、パーソネージ−ターナー症候群、パルボウイルス感染症、水疱性類天疱瘡および皮膚類天疱瘡などの類天疱瘡、天疱瘡（尋常性天疱瘡を含む）、紅斑性天疱瘡、落葉状天疱瘡、天疱瘡粘膜類天疱瘡、天疱瘡、消化性潰瘍、周期性四肢麻痺、末梢神経障害、静脈周囲性脳脊髄炎、悪性貧血（ｐｅｒｎｉｃｉｏｕｓ  ａｎｅｍｉａ）（悪性貧血（ａｎｅｍｉａ  ｐｅｒｎｉｃｉｏｓａ））、悪性貧血、水晶体抗原性ブドウ膜炎、肺硬変、ＰＯＥＭＳ症候群、結節性多発動脈炎、Ｉ、ＩＩ、およびＩＩＩ型、原発性慢性多発性関節炎、多発性軟骨炎（例えば、難治性または再発性多発性軟骨炎）、多内分泌性自己免疫疾患、多内分泌不全、多腺性症候群、任意に自己免疫性多腺性症候群（もしくは多腺性内分泌障害症候群）、リウマチ性多筋痛、多発筋炎、多発筋炎／皮膚筋炎、多発性神経障害、急性多発性神経根炎、心臓切開後症候群、後部ブドウ膜炎、もしくは自己免疫性ブドウ膜炎、心筋梗塞後症候群、心膜切開後症候群、連鎖球菌感染後腎炎、ワクチン接種後症候群、初老期認知症、原発性胆汁性肝硬変、原発性甲状腺機能低下症、原発
性特発性粘液水腫、原発性リンパ球増加症（モノクローナルＢ細胞リンパ球増加症を含む、任意に、良性の単クローン性ガンマグロブリン血症および意義不明の単クローン性ガンマグロブリン血症、ＭＧＵＳを含む）、原発性粘液水腫、原発性進行性ＭＳ（ＰＰＭＳ）、および再発寛解型ＭＳ（ＲＲＭＳ）、原発性硬化性胆管炎、プロゲステロン皮膚炎、進行性全身性硬化症、増殖性関節炎、乾癬、例えば、尋常性乾癬、乾癬、乾癬性関節炎、肺胞蛋白症、肺浸潤性好酸球増加症、真正赤血球性貧血もしくは無形成症（ＰＲＣＡ）、純赤血球無形成症、化膿性もしくは非化膿性副鼻腔炎、膿疱性乾癬および爪の乾癬、腎盂炎、壊疽性膿皮症、ケルヴァン甲状腺炎、レイノー現象、反応性関節炎、反復性流産、血圧応答の低減、反射性交感神経性ジストロフィー、難治性スプルー、ライター病もしくは症候群、再発性多発軟骨炎、心筋組織もしくは他の組織の再灌流傷害、再灌流傷害、呼吸窮迫症候群、むずむず脚症候群、網膜自己免疫、後腹膜線維症、レイノー症候群、リウマチ性疾患、リウマチ熱、リウマチ、関節リウマチ、リウマチ性脊椎炎、風疹ウイルス感染症、サムプター症候群（Ｓａｍｐｔｅｒ′ｓ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、サルコイドーシス、住血吸虫症、シュミット症候群、ＳＣＩＤ、およびエプスタイン−バーウイルス関連疾患、強膜、強膜炎、強指症（ｓｃｌｅｒｏｄａｃｔｙｌ）、強皮症、任意に全身性強皮症、硬化性胆管炎、播種性硬化症、全身性硬化症などの硬化症、感音性難聴、血清反応陰性脊椎関節炎、シーハン症候群、シュルマン症候群、珪肺、シェーグレン症候群、精子および精巣自己免疫、蝶形骨洞炎、スティーブンス−ジョンソン症候群、スティッフマン（もしくはスティッフパーソン）症候群、亜急性細菌性心内膜炎（ＳＢＥ）、亜急性皮膚エリテマトーデス、突発性難聴、スザック症候群、シデナム舞踏病、交感性眼炎、全身性エリテマトーデス（ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｌｕｐｕｓ  ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ）（ＳＬＥ）もしくは全身性エリテマトーデス（ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｌｕｐｕｓ  ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｄｅｓ）、皮膚ＳＬＥ、全身性壊死性血管炎、ＡＮＣＡ関連血管炎、任意にチャーグ−ストラウス血管炎もしくは症候群（ＣＳＳ）、脊髄ろう、高安動脈炎、毛細血管拡張症、側頭動脈炎／巨細胞動脈炎、閉塞性血栓性血管炎（ｔｈｒｏｍｂｏａｎｇｉｉｔｉｓ  ｕｂｉｔｅｒａｎｓ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）および自己免疫もしくは免疫媒介性血小板減少症を含む血小板減少症、例えば、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）（慢性もしくは急性ＩＴＰを含む）、血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、甲状腺中毒症、組織傷害、トロサ−ハント症候群、中毒性表皮壊死症、毒素性ショック症候群、輸血反応、一過性乳児低ガンマグロブリン血症、横断性脊髄炎（ｔｒａｎｓｖｅｒｓｅ  ｍｙｅｌｉｔｉｓ）、横断性脊髄炎（ｔｒａｖｅｒｓｅ  ｍｙｅｌｉｔｉｓ）、熱帯性肺好酸球増加症、結核、潰瘍性大腸炎、未分化結合組織病（ＵＣＴＤ）、蕁麻疹、任意に慢性アレルギー性蕁麻疹、および慢性自己免疫性蕁麻疹を含む慢性特発性蕁麻疹、ブドウ膜炎、前部ブドウ膜炎、網膜ブドウ膜、弁膜炎、血管機能不全、血管炎、脊椎関節炎、水疱性皮膚病、白斑、ウェゲナー��芽腫症（多発血管炎性肉芽腫（ＧＰＡ））、ウィスコット−アルドリッチ症候群、またはＸ連鎖性高ＩｇＭ症候群が挙げられる。
【０３１０】
本明細書で特定される疾患状態は、例示的であり、網羅的ではないことが意図されることを理解されたい。
【０３１１】
少なくともいくつかの実施形態によると、ラクトースのＭＣＴ１媒介性輸送を減少させるように機能する、本明細書に記載の抗ＭＣＴ１抗体、そのフラグメント、複合体、またはそれを含む医薬組成物は、免疫系関連疾患の治療に使用され得る。
【０３１２】
任意に、免疫系関連状態は、免疫関連状態、本明細書に列挙される自己免疫疾患、狼瘡、移植拒絶および移植片対宿主病、ならびに／または活性化Ｔ細胞およびＢ細胞の遮断の場合、本明細書に列挙される免疫関連疾患、ならびに／または免疫療法（免疫刺激の阻害）の場合のものを含む。
【０３１３】
任意に、免疫状態は、自己免疫疾患、移植拒絶、炎症性疾患、アレルギー状態、または移植片対宿主病から選択される。特定の実施形態では、本発明の抗ＭＣＴ１抗体は、狼瘡を治療するために使用され得る。一実施形態では、本発明の抗ＭＣＴ１抗体は、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）を治療するために使用され得る。別の実施形態では、本発明の抗ＭＣＴ１抗体は、移植片拒絶を治療するために使用され得る。さらに別の実施形態では、本発明の抗ＭＣＴ１抗体は、Ｉ型糖尿病を治療するために使用され得る。一実施形態では、本発明の抗ＭＣＴ１抗体は、ＩＩ型糖尿病を治療するために使用され得る。別の実施形態では、本発明の抗ＭＣＴ１抗体は、肥満症を治療するために使用され得る。
【０３１４】
特定の実施形態では、ＭＣＴ１  Ａｂ１が、狼瘡を治療するために使用され得る。一実施形態では、ＭＣＴ１  Ａｂ１が、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）を治療するために使用され得る。別の実施形態では、ＭＣＴ１  Ａｂ１が、移植片拒絶を治療するために使用され得る。さらに別の実施形態では、ＭＣＴ１  Ａｂ１が、Ｉ型糖尿病を治療するために使用され得る。一実施形態では、ＭＣＴ１  Ａｂ１が、ＩＩ型糖尿病を治療するために使用され得る。別の実施形態では、ＭＣＴ１  Ａｂ１が、肥満症を治療するために使用され得る。同様に、これらの実施形態の各々では、ＭＣＴ１  Ａｂ１の１つ以上のＣＤＲを含む変異体または融合タンパク質が使用され得る。
【０３１５】
任意に、治療は、免疫関連状態の治療に有用な別の部分、例えば、メトホルミンと組み合わされる。
【０３１６】
したがって、主題の抗体を使用した全身性エリテマトーデスの治療は、例えば、任意に本明細書に記載されるような、全身性エリテマトーデスを治療するための任意の既知の治療薬または方法と組み合わされ得る。同様に、主題の抗体を使用したＧＶＨＤの治療は、例えば、任意に本明細書に記載されるような、ＧＶＨＤを治療するための任意の既知の治療薬または方法と組み合わされ得る。本発明の少なくともいくつかの実施形態による薬剤を使用した多発性硬化症の治療は、例えば、任意に本明細書に記載されるような、多発性硬化症を治療するための任意の既知の治療薬または方法と組み合わされ得る。同様に、主題の抗体を使用した関節リウマチまたは他の関節炎状態の治療は、例えば、任意に本明細書に記載されるような、関節リウマチを治療するための任意の既知の治療薬または方法と組み合わされ得る。加えて、主題の抗体を使用した１型糖尿病の治療は、例えば、任意に本明細書に記載されるような、１型糖尿病を治療するための任意の既知の治療薬または方法と組み合わされ得る。主題の抗体を使用した乾癬の治療は、例えば、任意に本明細書に記載されるような、乾癬を治療するための任意の既知の治療薬または方法と組み合わされ得る。
【０３１７】
上記の療法において、例えば、上記または他の自己免疫もしくは炎症状態の１つを有する対象は、本明細書に開示される抗ＭＣＴ１抗体または本発明による抗原結合フラグメントが投与され、この抗体は、活性化Ｔ細胞および／もしくはＢ細胞、ならびに／または疾患の病理に関与する炎症誘発性サイトカインの産生を抑制し、それにより疾患の症状を予防または改善し、例えば、Ｔ細胞耐性または長期の免疫抑制を誘発するＴｒｅｇの誘発により、長期の疾患寛解をもたらす可能性がある。
【０３１８】
本発明の少なくともいくつかの実施形態よる、本明細書に列挙される治療薬および／またはそれを含む医薬組成物は、例えば、同種移植もしくは異種移植の急性もしくは慢性拒絶または炎症性もしくは自己免疫傷害の治療または予防、あるいは耐性の誘発のために、唯一の活性成分として、または免疫調節レジメンにおける他の薬物もしくは他の抗炎症薬と一緒に投与され得る。
【０３１９】
癌の治療
治療され得る癌には、血管が新生されていない、またはまだ実質的に血管が新生されていない腫瘍、ならびに血管が新生された腫瘍が含まれる。癌は、非固形腫瘍（血液腫瘍、例えば、白血病およびリンパ腫など）を含み得るか、または固形腫瘍を含み得る。本発明の抗体で治療される癌のタイプとしては、癌腫、芽細胞腫、および肉腫、ならびに特定の白血病またはリンパ系悪性腫瘍、良性および悪性腫瘍、および悪性腫瘍、例えば、肉腫、癌腫、および黒色腫が挙げられるが、これらに限定されない。成人腫瘍／癌および小児腫瘍／癌も含まれる。
【０３２０】
血液癌は、血液または骨髄の癌である。血液（または血行性）癌の例としては、急性白血病（急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病（ａｃｕｔｅ  ｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、急性骨髄性白血病（ａｃｕｔｅ  ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、ならびに骨髄芽球性、前骨髄球性、骨髄単球性、単球性、および赤白血病など）、慢性白血病（慢性骨髄性（顆粒球性）白血病（ｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃ（ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｉｃ）ｌｅｕｋｅｍｉａ）、慢性骨髄性白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、および慢性リンパ性白血病）を含む白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（無痛性および高悪性度の形態）、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、有毛細胞白血病、および脊髄形成異常が挙げられる。
【０３２１】
固形腫瘍は、通常は嚢胞または液体領域を含まない組織の異常な塊である。固形腫瘍は、良性または悪性の場合がある。様々なタイプの固形腫瘍は、それらを形成する細胞のタイプ（肉腫、癌腫、およびリンパ腫）にちなんで名付けられる。肉腫および癌腫などの固形腫瘍の例としては、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、および他の肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、リンパ系悪性腫瘍、膵臓癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、前立腺癌、肝細胞癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、甲状腺髄様癌、甲状腺乳頭癌、褐色細胞腫脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、髄様癌、気管支原性癌、腎細胞癌、肝細胞癌、胆管癌、絨毛癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、精巣腫瘍、精上皮腫、膀胱癌、黒色腫、ならびにＣＮＳ腫瘍（神経膠腫（脳幹神経膠腫および混合神経膠腫など）、膠芽腫（多形膠芽腫としても既知））星細細胞腫、ＣＮＳリンパ腫、胚腫、髄芽腫、シュワン細胞腫頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、および脳転移）が挙げられる。
【０３２２】
好ましくは、本発明の抗体は、腫瘍細胞がＭＣＴ１の発現に対して陽性である癌を治療するために使用される。一般に、ＭＣＴ１陽性腫瘍細胞は、既知の方法によって同定され得る。例えば、腫瘍細胞上のＭＣＴ１発現は、本発明の抗体を使用した免疫蛍光法またはフローサイトメトリーによって同定され得る。代替的に、ＭＣＴ１発現は、標的細胞に対する本発明の抗体による阻害の観察を通して機能的に測定され得る。
【０３２３】
生検とは、個体からの組織および／または細胞の切除である。そのような切除は、切除された組織および／または細胞に対して実験を実施するために、個体から組織および／または細胞を採取することであり得る。この実験は、個体が特定の状態または疾患状態を有しているか、および／または罹患しているかを判断するための実験を含み得る。状態または疾患は、例えば、癌であり得る。宿主におけるＭＣＴ１発現腫瘍細胞の存在を検出することに関して、宿主の細胞を含む試料は、全細胞、その溶解物、または全細胞溶解物の画分、例えば、核もしくは細胞質画分、全タンパク質画分、または核酸画分を含む試料であり得る。試料が全細胞を含む場合、細胞は、宿主の任意の細胞、例えば、血液細胞または内皮細胞を含む任意の臓器または組織の細胞であり得る。
【０３２４】
他のＭＣＴ１関連状態、例えば、ＥＩＨＩの治療
本発明の抗体および抗体フラグメントはまた、正常細胞または罹患細胞におけるＭＣＴ１の発現を伴う任意の他の状態、障害、または疾患を治療、予防、または診断するために使用され得る。例えば、本発明はまた、対象におけるＥＩＨＩを治療または予防する方法を企図し、その方法は、本発明による抗体または抗体フラグメントを投与することを含む。
【０３２５】
投与方法
本発明の組成物は、局所治療または全身治療のどちらが望まれるかに応じて、多くの方法で投与され得る。
【０３２６】
概して、投与は、局所的、非経口的、または経腸的であり得る。
【０３２７】
本発明の組成物は典型的には、非経口投与に適している。本明細書で使用される場合、医薬組成物の「非経口投与」は、対象の組織の物理的な裂け目を特徴とする任意の投与経路、および組織の裂け目を通した医薬組成物の投与を含み、したがって概して、血流、筋肉、または内臓への血液への直接投与をもたらす。したがって、非経口投与としては、組成物の注射、外科的切開を通した組成物の適用、組織貫通非外科的創傷を通した組成物の適用などによる医薬組成物の投与が挙げられるが、これらに限定されない。特に、非経口投与は、皮下、腹腔内、筋肉内、胸骨内、静脈内、動脈内、髄腔内、脳室内、尿道内、頭蓋内、腫瘍内、滑液嚢内注射または注入、ならびに腎臓透析注入技術が挙げられるが、これらに限定されないと企図される。好ましい実施形態では、本発明の組成物の非経口投与は、皮下または腹腔内投与を含む。
【０３２８】
非経口投与に適した医薬組成物の製剤は典型的には、活性成分を、滅菌水または滅菌等張食塩水などの薬学的に許容される担体と組み合わせて含む。そのような製剤は、ボーラス投与または連続投与に適した形態で調製、包装、または販売され得る。注射可能な製剤は、アンプル、または防腐剤を含む複数回用量の容器などの単位剤形で調製、包装、または販売され得る。非経口投与用の製剤としては、油性または水性ビヒクル中の懸濁液、溶液、エマルジョン、ペーストなどが挙げられるが、これらに限定されない。そのような製剤は、懸濁剤、安定剤、または分散剤が挙げられるが、これらに限定されない１つ以上の追加の成分をさらに含んでもよい。非経口投与用の製剤の一実施形態では、活性成分は、再構成された組成物の非経口投与前に、好適なビヒクル（例えば、滅菌発熱性物質除去蒸留水）で再構成するための乾燥（すなわち、粉末または顆粒）形態で提供される。非経口製剤はまた、塩、炭水化物、および緩衝剤（例えば、３〜９のｐＨまで）などの賦形剤を含有し得る水溶液を含むが、いくつかの用途では、それらは、滅菌非水性溶液として、または滅菌発熱性物質除去蒸留水などの好適なビヒクルと併せて使用される乾燥形態として、より好適に製剤化され得る。例示的な非経口投与形態としては、滅菌水溶液、例えば、水性プロピレングリコールまたはデキストロース溶液中の溶液または懸濁液が挙げられる。そのような剤形は、必要に応じて好適に緩衝化され得る。有用である他の非経口投与可能な製剤としては、微結晶形態でまたはリポソーム調製物中に活性成分を含むものが挙げられる。非経口投与用の製剤は、即時放出および／または調節放出であるように製剤化され得る。調節放出製剤としては、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的放出、およびプログラム放出が挙げられる。
【０３２９】
「経口の」、「経腸の」、「経腸的に」、「経口的に」、「非−非経口の」、「非−非経口的に」などの用語は、消化管に沿った経路または方法による個体への化合物または組成物の投与を指す。組成物の「経口」投与経路の例としては、液体または固体形態の組成物の口からの嚥下、経鼻空腸または胃瘻チューブを介した組成物の投与、組成物の十二指腸内投与、および例えば、消化管の下部腸管に坐剤を使用した直腸投与が挙げられるが、これらに限定されない。
【０３３０】
好ましくは、単離された抗ＭＣＴ１抗体または抗体フラグメントを含む製剤化組成物は、注射による投与に適している。
【０３３１】
局所投与用の医薬組成物および製剤としては、経皮パッチ、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、ドロップ、坐剤、スプレー、液体、半固体、単相組成物、多相組成物（例えば、水中油型、油中水型）、フォーム、マイクロスポンジ、リポソーム、ナノエマルジョン、エアロゾルフォーム、ポリマー、フラーレン、および粉末が挙げられ得る。従来の薬学的担体、水性、粉末または油性基剤、増粘剤などが必要であるか、または望ましい場合がある。
【０３３２】
経口投与用の組成物および製剤としては、粉末もしくは顆粒、水もしくは非水性媒体中の懸濁液または溶液、カプセル、サシェット、または錠剤が挙げられる。増粘剤、香味剤、希釈剤、乳化剤、分散助剤、または結合剤が望ましい場合がある。
【０３３３】
非経口、髄腔内、または脳室内投与用の組成物および製剤としては、緩衝液、希釈剤、ならびに浸透促進剤、カーダー化合物（ｃａｒｄｅｒ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ）、および他の薬学的に許容される担体または賦形剤などであるが、これらに限定されない他の好適な添加剤も含み得る、滅菌水溶液が挙げられ得る。
【０３３４】
本発明の医薬組成物としては、溶液、エマルジョン、およびリポソーム含有製剤が挙げられるが、これらに限定されない。これらの組成物は、予め形成された液体、自己乳化固体、および自己乳化半固体が挙げられるが、これらに限定されない様々な構成成分から生成され得る。
【０３３５】
本発明の医薬組成物は、便利に単位剤形で提供され得、製薬業において周知の従来の技術に従って調製され得る。そのような技術は、活性成分を医薬担体（複数可）または賦形剤（複数可）と組み合わせるステップを含む。概して、製剤は、活性成分を液体担体もしくは微粉化固体担体またはその両方と均一かつ密接に組み合わせ、次いで必要に応じて、生成物を成形することによって調製される。
【０３３６】
本発明の組成物は、錠剤、カプセル、液体シロップ、軟質ゲル、坐剤、エアロゾル、および浣腸剤などの多くの可能な剤形のいずれかに製剤化され得る。本発明の組成物はまた、水性、非水性、または混合媒体中の懸濁液として製剤化され得る。水性懸濁液は、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、および／またはデキストランを含む、懸濁液の粘度を増加させる物質をさらに含有し得る。懸濁液はまた、安定剤も含有し得る。
【０３３７】
本発明の一実施形態では、医薬組成物は、フォームとして製剤化および使用され得る。医薬フォームとしては、エマルジョン、マイクロエマルジョン、クリーム、ゼリー、およびリポソームなどの製剤が挙げられるが、これらに限定されない。基本に性質は似ているが、これらの製剤は、最終生成物の構成成分および一貫性が異なる。細胞レベルでのオリゴヌクレオチドの取り込みを増強する薬剤もまた、本発明の医薬組成物および他の組成物に添加され得る。例えば、リポフェクチン（米国特許第５，７０５，１８８号）などのカチオン性脂質、カチオン性グリセロール誘導体、およびポリリジン（ＷＯ９７／３０７３１）などのポリカチオン性分子も、オリゴヌクレオチドの細胞取り込みを増強する。
【０３３８】
本発明の組成物は、加えて、医薬組成物に従来見られる他の補助構成成分を含有してもよい。したがって、例えば、組成物は、例えば鎮痒薬、収斂薬、局所麻酔薬、もしくは抗炎症薬などの追加の適合性のある薬学的に活性な物質を含有し得るか、または染料、香味剤、防腐剤、抗酸化剤、乳白剤、増粘剤、および安定剤など、本発明の組成物の様々な剤形を物理的に製剤化するのに有用な追加の物質を含有し得る。しかしながら、そのような物質は、添加される場合、本発明の組成物の構成成分の生物活性を過度に妨げてはならない。製剤は、滅菌され、必要に応じて補助剤、例えば、製剤の核酸（複数可）と有害に相互作用しない潤滑剤、防腐剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を与えるための塩、緩衝液、着色剤、香料、および／または芳香族物質などと混合され得る。
【０３３９】
抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを含む製剤は、薬学的に許容される賦形剤（複数可）を含み得る。製剤に含まれる賦形剤は、例えば、抗体および投与方法に応じて異なる目的を有する。一般に使用される賦形剤の例としては、生理食塩水、緩衝生理食塩水、デキストロース、感染に対する水（ｗａｔｅｒ−ｆｏｒ−ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）、グリセロール、エタノール、およびそれらの組み合わせ、安定剤、可溶化剤および界面活性剤、緩衝液および防腐剤、等張化剤、充填剤、ならびに潤滑剤が挙げられるが、これらに限定されない。抗ＭＣＴ１抗体を含む製剤は典型的には、動物血清（例えば、ウシ血清アルブミン）などの任意の非ヒト構成成分の非存在下で調製および培養されているであろう。
【０３４０】
製剤または組成物はまた、結合分子または細胞で治療されている特定の兆候、疾患、または状態に有用な２つ以上の活性成分、例えば、それぞれの活性が互いに悪影響を及ぼさない、結合分子または細胞に相補的な活性を有する活性成分を含有し得る。そのような活性成分は、意図された目的に有効である量で組み合わせて好適に存在する。したがって、いくつかの実施形態では、医薬組成物は、化学療法剤などの薬学的に活性な薬剤または薬物、例えば、アスパラギナーゼ、ブスルファン、カルボプラチン、シスプラチン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシ尿素、メトトレキサート、パクリタキセル、リツキシマブ、ビンブラスチン、ビンクリスチンなどをさらに含む。いくつかの実施形態では、薬学的に活性な薬剤または薬物は、免疫チェックポイント阻害剤、例えば、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＬＡＧ３、ＣＴＬＡ４、ＫＩＲ、ＣＤ２４４、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＧＡＬ９、ＴＩＭ３、および／またはＡ２ａＲを標的とする薬物を含み得る。これらの阻害剤の例としては、ピジリズマブ、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、アテゾリズマブ、ＭＤＸ−１１０５、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ、トレメリムマブ、およびイピリムマブが挙げられるが、これらに限定されず、これらは単独で、または他の薬剤、例えば、ＧＭ−ＣＳＦと組み合わせて投与され得る。
【０３４１】
抗体は、同じまたは異なる組成物で、同時にまたは異なる時間に、およびいずれかの順序で投与され得る、他の治療薬と組み合わされ得る。例えば、本発明の抗体は、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アゴニスト、ＣＴＬＡ４−Ｉｇ、サイトカイン、サイトカインアゴニストもしくはアンタゴニスト、または別の受容体アゴニストもしくはアンタゴニストの投与を含む治療レジメンで投与され得る。
【０３４２】
いくつかの態様における医薬組成物は、組成物の送達が、治療される部位の感作の前に、かつそれを引き起こすのに十分な時間で起こるように、徐放、遅延放出、および持続放出送達系を用いることができる。多くのタイプの放出送達系が利用可能であり、既知である。そのような系は、組成物の反復投与を回避することができ、それにより、対象および医師の利便性を向上させる。
【０３４３】
投与
いくつかの実施形態における医薬組成物は、治療有効量または予防有効量などの、疾患または状態を治療または予防するのに有効な量の抗ＭＣＴ１抗体または抗体フラグメントを含有する。いくつかの実施形態における治療的または予防的有効性は、治療された対象の周期的な評価によって監視される。数日またはそれ以上の反復投与の場合、状態に応じて、疾患症状の望ましい抑制が起こるまで治療が繰り返される。しかしながら、他の投与レジメンが有用であり得、決定され得る。所望の投与量は、組成物の単回ボーラス投与、組成物の複数回ボーラス投与、または組成物の連続注入投与によって送達され得る。
【０３４４】
抗体または抗体フラグメントは、１回以上の用量で投与され得る。いくつかの実施形態では、前述の有効量の抗体は、単回用量として投与され得る。いくつかの実施形態では、前述の有効量の抗体は、ある期間にわたって２回以上の用量として投与され得る。投与のタイミングは、管理医の判断の範囲内であり、患者の臨床状態に依存する。個々のニーズは異なるが、特定の疾患または状態に対する所与の抗体の有効量の最適範囲の決定は、当該技術分野の範囲内である。有効量は、治療的または予防的利益を提供する量を意味する。投与される投与量は、レシピエントの年齢、健康状態、および体重、もしあれば同時治療の種類、治療の頻度、および所望の効果の性質に依存する。いくつかの実施形態では、有効量の抗体またはそれらの抗体を含む組成物は、非経口的に投与される。いくつかの実施形態では、投与は、静脈内投与であり得る。いくつかの実施形態では、投与は、疾患部位内への注射によって直接行われ得る。
【０３４５】
本発明の目的のために、投与される本発明の抗体の量または用量は、妥当な時間枠にわたって対象または動物において治療的または予防的応答をもたらすのに十分であるべきである。例えば、本発明の抗体の用量は、投与の時間から約２時間以上、例えば約１２〜約２４時間以上の期間で、抗原に結合するか、または疾患を検出、治療、もしくは予防するのに十分でなければならない。特定の実施形態では、期間は、さらに長くなり得る。用量は、特定の抗体の有効性および動物（例えば、ヒト）の状態、ならびに治療される動物（例えば、ヒト）の体重によって決定される。
【０３４６】
担体材料と組み合わせて単一剤形を作り出すことができる活性成分の量は、治療されている対象、および特定の投与方法に応じて異なる。担体材料と組み合わせて単一剤形を産生することができる活性成分の量は概して、治療効果をもたらす組成物の量である。概して、１００パーセントのうち、この量は、薬学的に許容される担体と組み合わせて、約０．０１パーセント〜約９９パーセントの活性成分、例えば、約０．１パーセント〜約７０パーセント、ほとんどは、例えば、約１パーセント〜約３０パーセントの活性成分の範囲である。
【０３４７】
投与レジメンは、最適な所望の応答（例えば、治療応答）を提供するように調整される。例えば、単回ボーラスが投与されてもよく、いくつかの分割用量が時間をかけて投与されもよく、または用量は、治療状況の緊急性によって示されるように、比例的に減少または増加してもよい。投与の容易さおよび投与量の均一性のために、非経口組成物を投与単位形態に製剤化することが特に有利である。投与単位形態は、本明細書で使用される場合、治療される対象のための単位投与量として適した物理的に個別の単位を指し、各単位は、必要とされる医薬担体と共に所望の治療効果をもたらすように計算された所定量の活性化合物を含有する。本発明の少なくともいくつかの実施形態による投与単位形態の仕様は、（ａ）活性化合物の特有の特徴および達成される特定の治療効果、ならびに（ｂ）固体における感受性の治療のためにそのような活性化合物を配合する、当該技術分野に固有の制限によって決定され、かつこれらに直接依存する。
【０３４８】
本明細書に開示される抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントの投与について、投与量は、宿主の体重の約０．０００１〜１００ｍｇ／ｋｇ、より一般には０．０１〜５ｍｇ／ｋｇの範囲である。例えば、投与量は、０．３ｍｇ／ｋｇ体重、１ｍｇ／ｋｇ体重、３ｍｇ／ｋｇ体重、５ｍｇ／ｋｇ体重、もしくは１０ｍｇ／ｋｇ体重、または１〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲内であり得る。例示的な治療計画は、１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、１ヶ月に１回、３ヶ月に１回、または３〜６ヶ月に１回の投与を伴う。本発明の少なくともいくつかの実施形態による、本明細書に開示される抗体の好ましい投与レジメンは、静脈内投与による１ｍｇ／ｋｇ体重または３ｍｇ／ｋｇ体重を含み、本明細書に開示される抗体は、以下の投与スケジュールの１つを使用して与えられる：（ｉ）６回の用量を４週間毎、次いで３か月毎、（ｉｉ）３週間毎、（ｉｉｉ）３ｍｇ／ｋｇ体重を１回、続いて、１ｍｇ／ｋｇ体重を３週間毎。
【０３４９】
いくつかの方法では、異なる結合特異性を有する２つ以上のモノクローナル抗体が同時に投与され、その場合、本明細書に開示される各抗体の投与量は、示される範囲内に入る。本明細書に開示される抗体は通常、複数の機会に投与される。単回投与間の間隔は、例えば、毎日、毎週、毎月、３ヶ月毎、または毎年であり得る。患者における標的抗原に対する抗体の血中濃度を測定することによって示されるように、間隔は不規則でもあり得る。いくつかの方法では、投与量は、約１〜１０００μｇ／ｍｌ、いくつかの方法では、約２５〜３００μｇ／ｍｌの血漿抗体濃度を達成するように調整される。
【０３５０】
代替的に、治療薬は、持続放出製剤として投与され得、その場合、より少ない頻度の投与が必要とされる。投与量および頻度は、患者における治療薬の半減期によって異なる。概して、ヒト抗体は、最も長い半減期を示し、ヒト化抗体、キメラ抗体、および非ヒト抗体が続く。融合タンパク質の半減期は、大きく異なり得る。投与量および投与頻度は、治療が予防的であるか治療的であるかによって異なり得る。予防用途では、比較的低い投与量が長期間にわたって比較的低頻度の間隔で投与される。一部の患者は、今後一生治療を受け続ける。治療用途では、疾患の進行が軽減または終了するまで、例えば、患者が疾患の症状の部分的または完全な改善を示すまで、比較的短い間隔で比較的高い投与量が必要になる場合がある。その後、患者は、予防計画を施され得る。
【０３５１】
本発明の医薬組成物中の活性成分の実際の投与量レベルは、患者に有毒であることなく、特定の患者、組成物、および投与方法のための所望の治療応答を達成するのに有効である活性成分の量を得るように変化し得る。選択された投与量レベルは、用いられる本発明の特定の組成物、またはそのエステル、塩、もしくはアミドの活性、投与経路、投与時間、用いられている特定の化合物の排泄速度、治療期間、用いられる特定の組成物と組み合わせて使用される他の薬物、化合物、および／または材料、治療されている患者の年齢、性別、体重、状態、健康全般、および以前の病歴、ならびに医療分野で周知の同様の要因を含む、様々な薬物動態学的因子に依存する。
【０３５２】
いくつかの実施形態では、抗体は、別の抗体または操作された細胞または受容体または薬剤などの別の治療介入、例えば、細胞毒性薬または治療薬と同時に、または任意の順序で順次になど、併用療法の一部として投与される。いくつかの実施形態における抗体は、１つ以上の追加の治療薬と、または別の治療的介入と関連して、同時にまたは任意の順序で順次にのいずれかで共投与される。いくつかの状況では、抗体は、抗体が１つ以上の追加の治療薬の効果を増強するように、またはその逆になるように、時間的に十分に近い別の療法と同時投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１つ以上の追加の治療薬の前に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１つ以上の追加の治療薬の後に投与される。
【０３５３】
変化形態
本明細書に記載される本発明の抗体の機能的部分は、本発明の範囲に含まれる。抗体に関して使用される場合、「機能的部分」という用語は、本発明の抗体の任意の部分またはフラグメントを指し、この部分またはフラグメントは、それが一部である抗体（親抗体）の生物活性を保持する。機能的部分は、例えば、親抗体と同様の程度、同じ程度、またはより高い程度まで、標的細胞を認識するか、または疾患を検出、治療、もしくは予防する能力を保持する抗体の部分を包含する。親抗体に関して、機能的部分は、例えば、親抗体の約１０％、２５％、３０％、５０％、６８％、８０％、９０％、９５％、またはそれ以上を構成することができる。
【０３５４】
機能的部分は、その部分のアミノ末端もしくはカルボキシ末端、または両方の末端に追加のアミノ酸を含むことができ、これらの追加のアミノ酸は、親抗体のアミノ酸配列には見られない。望ましくは、追加のアミノ酸は、例えば、標的細胞を認識し、癌を検出、治療、または予防するなどの機能的部分の生物学的機能を妨げない。より望ましくは、追加のアミノ酸は、親抗体の生物活性と比較して、生物活性を増強する。
【０３５５】
本明細書に記載される本発明の抗体の機能的変異体は、本発明の範囲に含まれる。本明細書で使用される場合、「機能的変異体」という用語は、親抗体と実質的または有意な配列同一性または類似性を有する抗体、ポリペプチド、またはタンパク質を指し、この機能的変異体は、それが変異体である抗体の生物活性を保持する。機能的変異体は、例えば、親抗体と同様の程度、同じ程度、またはより高い程度まで、標的細胞を認識する能力を保持する、本明細書に記載される抗体（親抗体）の変異体を包含する。親抗体に関して、機能的変異体は、例えば、親抗体とアミノ酸配列が少なくとも約３０％、５０％、７５％、８０％、９０％、９８％、またはそれ以上同一であり得る。
【０３５６】
機能的変異体は、例えば、少なくとも１つの保存的アミノ酸置換を伴う親抗体のアミノ酸配列を含むことができる。代替的または追加的に、機能的変異体は、少なくとも１つの非保存的アミノ酸置換を伴う親抗体のアミノ酸配列を含むことができる。この場合、非保存的アミノ酸置換は、機能的変異体の生物活性を妨害または阻害しないことが好ましい。非保存的アミノ酸置換は、機能的変異体の生物活性を増強し得、これにより機能的変異体の生物活性は、親抗体と比較して増加する。
【０３５７】
本発明の抗体のアミノ酸置換は、例えば、保存的アミノ酸置換である。保存的アミノ酸置換は、当該技術分野において既知であり、特定の物理的および／または化学的特性を有する１つのアミノ酸が、同じまたは同様の化学的または物理的特性を有する別のアミノ酸に交換されるアミノ酸置換を含む。例えば、保存的アミノ酸置換は、別の酸性／負に帯電した極性アミノ酸に置換された酸性／負に帯電した極性アミノ酸（例えば、ＡｓｐまたはＧｌｕ）、非極性側鎖が非極性側鎖を有する別のアミノ酸に置換されたアミノ酸（例えば、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｔｒｐ、Ｃｙｓ、Ｖａｌなど）、別の塩基性／正に帯電した極性アミノ酸に置換された塩基性／正に帯電した極性アミノ酸酸（例えば、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｒｇなど）、極性側鎖を有する別の非荷電アミノ酸に置換された極性側鎖を有する非荷電アミノ酸（例えば、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒなど）、ベータ分岐側鎖を有する別のアミノ酸に置換されたベータ分岐側鎖を有するアミノ酸（例えば、Ｉｌｅ、Ｔｈｒ、およびＶａｌ）、芳香族側鎖を有する別のアミノ酸に置換された芳香族側鎖を有するアミノ酸、（例えば、Ｈｉｓ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、およびＴｙｒ）などであり得る。
【０３５８】
また、アミノ酸は、ベクター設計に基づいて配列に付加され得るか、または配列から除去され得る。
【０３５９】
抗体は、他の構成要素、例えば、他のアミノ酸が機能的変異体の生物活性を実質的に変化させないように、本明細書に記載の特定のアミノ酸配列（複数可）から本質的になることができる。
【０３６０】
本発明の実施形態の抗体（機能的部分および機能的変異体を含む）は、抗体（またはその機能的部分もしくは機能的変異体）がそれらの生物活性、例えば、抗原に特異的に結合する能力、哺乳動物における疾患細胞を検出する能力、または哺乳動物における疾患を治療または予防する能力などを保持するという条件で、任意の長さであり得、すなわち、任意の数のアミノ酸を含むことができる。例えば、抗体は、約５０〜約５０００アミノ酸長、例えば、５０、７０、７５、１００、１２５、１５０、１７５、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００アミノ酸長、またはそれ以上であり得る。
【０３６１】
本発明の実施形態の抗体（本発明の機能的部分および機能的変異体を含む）は、１つ以上の天然に存在するアミノ酸の代わりに合成アミノ酸を含むことができる。そのような合成アミノ酸は、当該技術分野において既知であり、例えば、アミノシクロヘキサンカルボン酸、ノルロイシン、α−アミノｎ−デカン酸、ホモセリン、Ｓ−アセチルアミノメチル−システイン、トランス−３−およびトランス−４−ヒドロキシプロリン、４−アミノフェニルアラニン、４−ニトロフェニルアラニン、４−クロロフェニルアラニン、４−カルボキシフェニルアラニン、β−フェニルセリンβ−ヒドロキシフェニルアラニン、フェニルグリシン、α−ナフチルアラニン、シクロヘキシルアラニン、シクロヘキシルグリシン、インドリン−２−カルボン酸、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸、アミノマロン酸、アミノマロン酸モノアミド、Ｎ′−ベンジル−Ｎ′−メチル−リジン、Ｎ′，Ｎ′−ジベンジル−リジン、６−ヒドロキシリジン、オルニチン、α−アミノシクロペンタンカルボン酸、α−アミノシクロヘキサンカルボン酸、α−アミノシクロヘプタンカルボン酸、α−（２−アミノ−２−ノルボルナン）−カルボン酸、α，γ−ジアミノ酪酸、α，β−ジアミノプロピオン酸、ホモフェニルアラニン、およびα−ｔｅｒｔ−ブチルグリシンが挙げられる。
【０３６２】
本発明の実施形態の抗体（機能的部分および機能的変異体を含む）は、グリコシル化、アミド化、カルボキシル化、リン酸化、エステル化、Ｎ−アシル化、例えば、ジスルフィド架橋を介して環化、もしくは酸付加塩に変化、および／あるいは任意に、二量体化もしくは重合、またはコンジュゲートされ得る。
【０３６３】
本発明の実施形態の抗体（その機能的部分および機能的変異体を含む）は、当該技術分野において既知の方法によって得ることができる。抗体は、ポリペプチドまたはタンパク質を作る任意の好適な方法によって作製され得る。ポリペプチドおよびタンパク質をデノボ合成する好適な方法は、Ｃｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｍｏｃ  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ，Ｕｎｉｔｅｄ  Ｋｉｎｇｄｏｍ，２０００、Ｐｅｐｔｉｄｅ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ａｎａｌｙｓｉｓ，ｅｄ．Ｒｅｉｄ，Ｒ．，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，２０００、Ｅｐｉｔｏｐｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ，ｅｄ．Ｗｅｓｔｗｏｏｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ，Ｕｎｉｔｅｄ  Ｋｉｎｇｄｏｍ，２００１、および米国特許第５，４４９，７５２号などの参考文献に記載されている。また、ポリペプチドおよびタンパク質は、標準的な組換え方法を使用して、本明細書に記載の核酸を使用して組換えにより産生され得る。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，３ｒｄ  ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．２００１、およびＡｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ  ａｎｄ  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎ  Ｙ，１９９４を参照されたい。さらに、本発明の抗体のいくつか（その機能的部分および機能的変異体を含む）は、植物、細菌、昆虫、哺乳動物、例えば、ラット、ヒトなどの供給源から単離および／または精製され得る。単離および精製の方法は、当該技術分野において周知である。代替的に、本明細書に記載の抗体（その機能的部分およびその機能的変異体を含む）は、企業によって商業的に合成され得る。この点で、本発明の抗体は、合成、組換え、単離、および／または精製であり得る。
【０３６４】
ＶＨおよび／またはＶＬ配列、またはそれに付着している定常領域（複数可）を修飾することによって、新しい変異体抗体を作製するために、本明細書に開示されるＶＨおよびＶＬ配列を有する抗体が使用され得る。したがって、ＭＣＴ１への結合など、本発明の抗体の少なくとも１つの機能特性を保持する構造的に関連する変異体抗体を作製するために、本発明の変異体抗体の構造的特徴が使用される。例えば、１つの抗ＭＣＴ１変異体抗体、例えば、Ａｂ１〜Ａｂ９５またはその変異の１つの１つ以上のＣＤＲ領域が、本明細書で考察されるように、既知のフレームワーク領域および／または他のＣＤＲと組み換えにより組み合わされて、本発明の追加の組み換え操作された抗ＭＣＴ１抗体（例えば、ＭＣＴ１に結合する抗体）を作製し得る。操作方法の出発物質は、本明細書に提供されるＶＨおよび／もしくはＶＬ配列の１つ以上、またはその１つ以上のＣＤＲ領域であってもよい。操作された抗体を作製するために、本明細書に提供されるＶＨおよび／もしくはＶＬ配列の１つ以上、またはその１つ以上のＣＤＲ領域を有する抗体を実際に調製する（すなわち、タンパク質として発現する）必要はない。むしろ、配列（複数可）に含まれる情報は、元の配列（複数可）から生じる「第２世代」配列（複数可）を作製するための出発物質として使用され、次いで、「第２世代」配列（複数可）が調製され、タンパク質として発現する。改変した抗体配列を調製および発現するために、標準的な分子生物学技術が使用され得る。
【０３６５】
改変した抗体配列（複数可）によってコードされた抗体は、本明細書に提供される方法によって、かつ配列を用いて産生された抗ＭＣＴ１抗体の機能特性の１つ、いくつか、または全てを保持し得、その機能特性は、特定のＫＤレベル以下での変異体ＭＣＴ１もしくは変異体ＭＣＴ１複合体への結合、および／または免疫細胞活性の調節、および／または例えば、活性Ｔ細胞もしくはＢ細胞などの所望の標的細胞への選択的結合を含む。改変した抗体の機能特性は、当該技術分野において利用可能な、かつ／または本明細書に記載の標準的なアッセイを使用して評価され得る。
【０３６６】
突然変異は、抗ＭＣＴ１抗体コード配列の全てまたは一部に沿ってランダムにまたは選択的に導入され得、得られた修飾抗ＭＣＴ１抗体は、結合活性および／または他の所望の機能特性についてスクリーニングされ得る。
【０３６７】
定義
別段定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載のものと同様または同等の方法および材料が、本発明または本発明の試験で使用され得るが、好適な方法および材料は、以下に記載される。材料、方法、および例は、単に例示的なものであり、限定することを意図するものではない。本明細書に記載の分析化学、合成有機化学、ならびに医薬品化学および製薬化学に関連して利用される命名法、ならびにそれらの実験手順および技術は、当該技術分野において周知であり、一般に使用されているものである。標準的な技術は、化学合成、化学分析、医薬品の調製、製剤、および送達、ならびに患者の治療に使用され得る。
【０３６８】
本明細書で使用される場合、「５′キャップ」（ＲＮＡキャップ、ＲＮＡ  ７−メチルグアノシンキャップ、またはＲＮＡ  ｍ７Ｇキャップとも呼ばれる）は、転写開始直後の真核生物メッセンジャーＲＮＡの「前」または５′末端に付加されている修飾グアニンヌクレオチドである。５′キャップは、最初に転写されたヌクレオチドに結合されている末端基からなる。その存在は、リボソームによる認識およびＲＮａｓｅからの防御にとって重要である。キャップ付加は転写と連結され、各々が互いに影響し合うように共転写的に起こる。転写開始直後に、合成されているｍＲＮＡの５′末端は、ＲＮＡポリメラーゼに関連するキャップ合成複合体によって結合される。この酵素複合体は、ｍＲＮＡキャッピングに必要である化学反応を触媒する。合成は、多段階の生化学反応として進行する。キャッピング部分は、その安定性または翻訳の効率などのｍＲＮＡの機能性を調節するように修飾され得る。
【０３６９】
本明細書の説明および以下の特許請求の範囲全体にわたって使用される場合、「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」の意味は、文脈から明らかにそうでないと示されない限り、複数の参照を含む。
【０３７０】
本明細書で使用される場合、「アレルギー性疾患」は、アレルギー反応を伴う疾患を広く指す。より具体的には、「アレルギー性疾患」は、アレルゲンが特定され、そのアレルゲンへの曝露と病理学的変化の発症との間に強い相関があり、その病理学的変化が免疫学的機構を有することが証明されている疾患として定義される。ここで、免疫学的機構とは、白血球がアレルゲン刺激に対して免疫応答を示すことを意味する。
【０３７１】
「同種異系」または「ドナー由来」という用語は、材料が導入される個体と同じ種の異なる動物に由来する任意の材料を指す。１つ以上の遺伝子座の遺伝子が同一でない場合、２人以上の個体は、互いに同種異系であると言われる。いくつかの態様では、同じ種の個体からの同種異系材料は、抗原的に相互作用するために遺伝的に十分に異なり得る。
【０３７２】
本明細書で使用される場合、「アミノ酸」は、しぜんはアミノ酸および合成アミノ酸、ならびに天然に存在するアミノ酸と同様に機能するアミノ酸類似体およびアミノ酸模倣体を広く指す。天然に存在するアミノ酸は、遺伝暗号によってコードされているアミノ酸、ならびに後に修飾されるアミノ酸（例えば、ヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタミン酸、およびＯ−ホスホセリン）である。アミノ酸類似体は、天然に存在するアミノ酸（すなわち、水素、カルボキシル基、アミノ基に結合している炭素）、およびＲ基（例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウム）と同じ基本的な化学構造を有する化合物を指す。類似体は、修飾されたＲ基（例えば、ノルロイシン）または修飾されたペプチド骨格を有し得るが、天然に存在するアミノ酸と同じ基本的な化学構造を保持する。アミノ酸模倣体は、アミノ酸の一般的な化学構造とは異なる構造を有するが、天然に存在するアミノ酸と同様に機能する化合物を指す。
【０３７３】
本明細書で使用される場合、「抗体」という用語は、抗原と特異的に結合する免疫グロブリン分子を指す。一態様では、抗原は、ＭＣＴ１である。抗体は、天然源または組換え源に由来する無傷の免疫グロブリンであり得、無傷の免疫グロブリンの免疫反応性部分であり得る。この用語は、最も広い意味で使用され、無傷の抗体を含むポリクローナルおよびモノクローナル抗体、ならびにフラグメント抗原結合（Ｆａｂ）フラグメント、Ｆ（ａｂ′）２フラグメント、Ｆａｂ′フラグメント、Ｆｖフラグメント、組換えＩｇＧ（ｒＩｇＧ）フラグメント、一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）を含む一本鎖抗体フラグメント、ＢｙＴＥ、多重特異性抗体ポリペプチド、ダイアボディ、および単一ドメイン抗体（例えば、ｓｄＡｂ、ｓｄＦｖ、ナノボディ）フラグメントを含む機能的（抗原結合）抗体フラグメントが含まれる。この用語は、イントラボディ、ペプチボディ、キメラ抗体、完全ヒト抗体、ヒト化抗体、およびヘテロコンジュゲート抗体、多重特異性、例えば、二重特異性抗体、ダイアボディ、トリアボディ、およびテトラボディ、タンデムジ−ｓｃＦｖ、およびタンデムトリ−ｓｃＦｖなどの遺伝子操作および／または別様に修飾された形態の免疫グロブリンを包含する。特に明記しない限り、「抗体」という用語は、その機能的抗体フラグメントを包含することがさらに理解されるべきである。この用語はまた、ＩｇＧおよびそのサブクラス、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、およびＩｇＤを含む任意のクラスまたはサブクラスの抗体を含む、無傷または完全長の抗体を包含する。
【０３７４】
「抗原結合フラグメント」または「抗体フラグメント」という用語は、無傷の抗体の一部分を指し、かつ無傷の抗体の抗原決定可変領域を指す。抗体フラグメントの例としては、フラグメント抗原結合（Ｆａｂ）フラグメント、Ｆ（ａｂ′）２フラグメント、Ｆａｂ′フラグメント、Ｆｖフラグメント、組換えＩｇＧ（ｒＩｇＧ）フラグメント、一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）を含む一本鎖抗体フラグメント、単一ドメイン抗体（例えば、ｓｄＡｂ、ｓｄＦｖ、ナノボディ）フラグメント、ダイアボディ、および抗体フラグメントから形成された多重特異性抗体が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、Ｆｖフラグメントの２つのドメイン、ＶＬおよびＶＨは、別々の遺伝子によってコードされるが、それらは、それらが、ＶＬおよびＶＨ領域が対合して一本鎖ＦＶ（ｓｃＦＶ）として既知の一価の分子を形成する単一タンパク質鎖として作製されることを可能にする剛性リンカーによって、組換え方法を使用して結合され得る。例えば、Ｂｉｒｄ，ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６、Ｈｕｓｔｏｎ，ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３、およびＯｓｂｏｕｒｎ，ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１６：７７８を参照されたい。一本鎖抗体もまた、抗体の「抗原結合部分」という用語に包含されることが意図される。完全なＩｇＧ分子または他のアイソタイプをコードする発現ベクターを生成するために、特定のｓｃＦｖの任意のＶＨおよびＶＬ配列が、ヒト免疫グロブリン定常領域ｃＤＮＡまたはゲノム配列に結合され得る。ＶＨおよびＶＬは、タンパク質化学または組換えＤＮＡ技術のいずれかを使用して、免疫グロブリンのＦａｂ、Ｆｖ、または他のフラグメントの生成にも使用され得る。ダイアボディなどの一本鎖抗体の他の形態も包含される。ダイアボディは、ＶＨおよびＶＬドメインが単一ポリペプチド鎖上に発現するが、同じ鎖上の２つのドメイン間の対合を可能にするには短すぎるリンカーを使用し、それにより、ドメインを別の鎖の相補的ドメインと対合させて、２つの抗原結合部位を作る、二価の二重特異性抗体である。例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ，ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８、Ｐｏｌｊａｋ，ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ２：１１２１−１１２３を参照されたい。さらに、抗体またはその抗原結合部分（抗原結合フラグメント、抗体フラグメント、抗体部分）は、抗体または抗体部分と１つ以上の他のタンパク質またはペプチドとの共有結合的または非共有結合的会合によって形成される、より大きい免疫接着分子の一部であり得る。免疫接着分子の例には、四量体ｓｃＦｖ分子を作るためのストレプトアビジンコア領域の使用（Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ，ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｈｕｍ．Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ  ６：９３−１０１）、ならびに二価のビオチン化ｓｃＦｖ分子を作るためのシステイン残基、マーカーペプチド、およびＣ−末端ポリヒスチジンタグの使用（Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ，ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３１：１０４７−１０５８）が含まれる。ＦａｂおよびＦ（ａｂ′）２フラグメントなどの抗体部分は、全抗体のパパインまたはペプシン消化のそれぞれなどの従来の技術を使用して、全抗体から調製され得る。さらに、抗体、抗体部分、および免疫接着分子は、本明細書に記載されるように、標準的な組換えＤＮＡ技術を使用して得ることができる。抗体は、ポリクローナル、モノクローナル、異種、同種異系、同系、またはそれらの修飾形態、例えば、ヒト化、キメラ、二重特異性、または多重特異性抗体であり得る。
【０３７５】
本明細書で使用される場合、「抗体重鎖」は、それらの天然に存在する配座で全ての抗体分子中に存在する２つのタイプのポリペプチド鎖のより大きい方を指す。
【０３７６】
本明細書で使用される場合、「抗体軽鎖」は、それらの天然に存在する配座で全ての抗体分子中に存在する２つのタイプのポリペプチド鎖のより小さい方を指す。カッパおよびラムダ軽鎖は、２つの主要な抗体軽鎖アイソタイプを指す。本明細書で使用される場合、「合成抗体」という用語は、例えば、本明細書に記載されるバクテリオファージによって発現する抗体などの、組換えＤＮＡ技術を使用して生成される抗体を意味する。この用語はまた、抗体をコードするＤＮＡ分子の合成によって生成され、そのＤＮＡ分子が抗体タンパク質を発現する抗体、または抗体を特定するアミノ酸配列を意味すると解釈されるべきであり、ここで、ＤＮＡまたはアミノ酸配列は、入手可能であり、かつ当該技術分野において周知の合成ＤＮＡまたはアミノ酸配列技術を使用して得られている。
【０３７７】
「抗原」または「Ａｇ」という用語は、免疫応答を誘発する分子、例えば、（体液性）自己免疫の場合は自己抗原、または移植の場合は同種抗原、またはアレルギー状態の場合はアレルゲンを指す。この免疫応答は、抗体産生、もしくは特定の免疫学的に適格な細胞の活性化、またはその両方を伴い得る。当業者は、実質的に全てのタンパク質またはペプチドを含む任意の巨大分子が抗原として役立ち得ることを理解するであろう。さらに、抗原は、組換えまたはゲノムＤＮＡに由来し得る。当業者は、免疫応答を誘発するタンパク質をコードするヌクレオチド配列または部分ヌクレオチド配列を含む任意のＤＮＡが、したがって、その用語が本明細書で使用される場合の「抗原」をコードすることを理解するであろう。さらに、当業者は、抗原が遺伝子の完全長ヌクレオチド配列によってのみコードされる必要がないことを理解するであろう。本発明が、２つ以上の遺伝子の部分ヌクレオチド配列の使用を含むが、これに限定されないこと、およびこれらのヌクレオチド配列が、所望の免疫応答を誘発するポリペプチドをコードするために様々な組み合わせで配置されることは容易に明らかである。さらに、当業者は、抗原が「遺伝子」によってコードされる必要が全くないことを理解するであろう。抗原が、生成され得る、合成され得る、もしくは生体試料に由来し得るか、またはポリペプチド以外の巨大分子であり得ることは容易に明らかである。そのような生体試料としては、組織試料、腫瘍試料、細胞、または他の生体構成成分を含む流体が挙げられ得るが、これらに限定されない。一態様では、抗原は、ＭＣＴ１である。
【０３７８】
本明細書で使用される場合、「自己免疫」または「自己免疫疾患もしくは状態」は、個体自体の組織またはその共分離体もしくは発現から生じ、かつそれらに向けられた疾患または障害、あるいはそれから生じる状態を広く指し、かつそれらを含む。ここで、自己免疫状態には、炎症またはアレルギー状態、例えば、関節リウマチなどの組織破壊に関連する可能性のある自己抗原に対する宿主免疫反応を特徴とする慢性疾患が含まれる。
【０３７９】
「自家」という用語は、後に再導入される同じ個体に由来する任意の材料を指す。
【０３８０】
「ＡＺ３９６５」は、本明細書において、同じ結合親和性、ＰＫ、およびＭＣＴ１／２選択性を有するＡＺ３９６５およびその類似体を集合的に指すために使用される。（参考文献５０）
【０３８１】
「結合する」という用語は、分子が互いにごく近接している安定した会合をもたらす２つの分子間の魅力的な相互作用を指す。分子結合の結果は時に、分子複合体が形成であり、ここで、構成成分を一緒に保持する引力は概して、非共有結合であり、したがって通常は、共有結合よりもエネルギー的に弱い。
【０３８２】
本明細書で使用される場合、「癌」は、悪性増殖または腫瘍（例えば、調節されていない細胞成長）を引き起こす異常で制御されていない細胞分裂を特徴とする、任意の腫瘍性疾患（侵襲性か転移性かにかかわらず）を広く指す。本明細書で使用される場合、「癌」または「癌性」という用語は、悪性増殖または腫瘍を引き起こす異常で制御されていない細胞分裂を特徴とする、任意の腫瘍性疾患（侵襲性か、非侵襲性か、転移性かにかかわらず）を包含すると理解されるべきであり、これらの非限定的には例は、本明細書に記載されている。これには、典型的には調整されていない細胞成長を特徴とする、哺乳動物における任意の生理学的状態が含まれる。癌の例としては、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、および白血病が挙げられるが、これらに限定されない。そのような癌のより具体的な例としては、扁平上皮癌、肺癌（小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、および肺扁平上皮癌を含む）、腹膜癌、肝細胞癌、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）または胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）（胃腸癌を含む）、膵臓癌、膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝癌（ｈｅｐａｔｏｍａ）、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌または腎癌、肝臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌（ｈｅｐａｔｉｃ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、および様々なタイプの頭頸部癌、ならびにＢ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）；小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ；中悪性度／濾胞性ＮＨＬ；中悪性度びまん性ＮＨＬ；高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ；高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ；高悪性度小型非分割細胞ＮＨＬ；巨大病変ＮＨＬ；マントル細胞リンパ腫；エイズ関連リンパ腫；およびワルデンシュトレームマクログロブリン血症）；慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）；急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）；有毛細胞白血病；慢性骨髄芽球性白血病；多発性骨髄腫、および移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）が挙げられる。本発明による治療に適した他の癌としては、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、および白血病またはリンパ系悪性腫瘍が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の治療に適した癌性状態には、ＭＣＴ１を発現する癌が含まれる。
【０３８３】
本明細書で使用される場合、「相補性決定領域」、「超可変領域」、または「ＣＤＲ」は、抗体の軽鎖または重鎖の可変領域に見られる超可変領域または相補性決定領域（ＣＤＲ）の１つ以上を広く指す。Ｋａｂａｔ，ｅｔ  ａｌ．（１９８７）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．を参照されたい。これらの表現には、Ｋａｂａｔ，ｅｔ  ａｌ．（１９８３）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓによって定義される超可変領域、または抗体の３次元構造の超可変ループが含まれる。Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ（１９８７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７。各鎖のＣＤＲは、フレームワーク領域によってごく近接して保持され、他の鎖からのＣＤＲと共に、抗原結合部位の形成に寄与する。ＣＤＲ内には、選択性決定領域（ＳＤＲ）として説明されている選択されたアミノ酸があり、これは、抗体−抗原相互作用においてＣＤＲによって使用される重要な接触残基を表す。（Ｋａｓｈｍｉｒｉ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：２５−３４（２００５））。
【０３８４】
抗体に関して本明細書で使用される場合、「競合する」という用語は、第１の抗体またはその抗原結合フラグメント（または部分）が、第２の抗体またはその抗原結合フラグメントの結合に十分類似した方法でエピトープに結合し、これにより第１の抗体のその同族エピトープとの結合の結果が、第２の抗体の非存在下での第１の抗体の結合と比較して、第２の抗体の存在下で検出可能に減少することを意味する。第２の抗体のそのエピトープへの結合も第１の抗体の存在下で検出可能に減少する代替手段が当てはまる可能性があるが、そうである必要はない。つまり、第２の抗体が、第１の抗体のそのそれぞれのエピトープへの結合を阻害することなく、第１の抗体が、第２の抗体のそのエピトープへの結合を阻害することができる。しかしながら、同じ程度か、より大きい程度か、より小さい程度かにかかわらず、各抗体が他の抗体とその同族のエピトープまたはリガンドとの結合を検出可能に阻害する場合、抗体は、それらのそれぞれのエピトープ（複数可）の結合について互いに「交差競合」すると言われている。競合抗体および交差競合抗体の両方が本発明に包含される。そのような競合または交差競合が起こる機構（例えば、立体障害、配座変化、または共通のエピトープもしくはその一部分への結合）にかかわらず、当業者は、本明細書に提供される教示に基づいて、そのような競合および／または交差競合抗体が包含され、本明細書に開示される方法に有用であり得ることを理解するであろう。いくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＭＣＴ１への結合に関してＭＣＴ１  Ａｂ１と競合または交差競合し得る。
【０３８５】
「超可変領域」または「ＨＶＲ」と同義の「相補性決定領域」および「ＣＤＲ」という用語は、抗原特異性および／または結合親和性を付与する、抗体可変領域内のアミノ酸の非隣接配列を指すことが当該技術分野において既知である。一般に、各重鎖可変領域内に３つのＣＤＲ（ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、ＣＤＲ−Ｈ３）、および各軽鎖可変領域内に３つのＣＤＲ（ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３）が存在する。「フレームワーク領域」および「ＦＲ」は、重鎖および軽鎖の可変領域の非ＣＤＲ部分を指すことが当該技術分野において既知である。一般に、各完全長重鎖可変領域内に４つのＦＲ（ＦＲ−Ｈ１、ＦＲ−Ｈ２、ＦＲ−Ｈ３、およびＦＲ−Ｈ４）、ならびに各完全長軽鎖可変領域内に４つのＦＲ（ＦＲ−Ｌ１、ＦＲ−Ｌ２、ＦＲ−Ｌ３、およびＦＲ−Ｌ４）が存在する。
【０３８６】
「サイトカイン」という用語は、細胞シグナル伝達に関与する幅広いカテゴリーの小タンパク質を指す。概して、それらの放出は、それらの周囲の細胞の挙動に何らかの影響を及ぼす。サイトカインは、免疫調節薬として自己分泌シグナル伝達、傍分泌シグナル伝達、および／または内分泌シグナル伝達に関与し得る。サイトカインとしては、ケモカイン、インターフェロン、インターロイキン、リンホカイン、および腫瘍壊死因子が挙げられる。サイトカインは、マクロファージ、Ｂリンパ球、Ｔリンパ球、およびマスト細胞を含む免疫細胞、ならびに内皮細胞、線維芽細胞、および様々な間質細胞を含む、幅広い細胞によって産生される。「ケモカイン」は、走化性の媒介に一般に関与するサイトカインのファミリーである。
【０３８７】
「ＭＣＴ１の発現に関連する疾患」という語句には、ＭＣＴ１の発現に関連する疾患、または例えば、狼瘡などの自己免疫疾患を含むＭＣＴ１を発現する細胞に関連する状態、またはＭＣＴ１を発現する細胞に関連する癌性もしくは非癌性の兆候が含まれるが、これらに限定されない。
【０３８８】
本明細書で使用される場合、「ＥＣ５０」という用語は、アッセイにおいてその最大応答または効果の５０％をもたらす、試験化合物、例えば、抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントの用量を指す。
【０３８９】
「有効量」または「治療に有効な量」は、個体の疾患、状態、または障害を予防または治療するのに十分である用量を指す。治療的または予防的使用に有効な量は、例えば、治療されている疾患または障害の段階および重症度、患者の年齢、体重、および一般的な健康状態、ならびに処方する医師の判断に依存する。用量のサイズはまた、選択された活性物質、投与方法、投与のタイミングおよび頻度、特定の活性物質の投与に付随して起こり得る任意の有害な副作用の存在、性質、および程度、ならびに所望の生理学的効果によって決定される。様々な疾患または障害が、おそらく各投与回または様々な投与回で本発明の抗体を使用して、複数回の投与を伴う長期治療を必要とする可能性があることが、当業者によって理解されるであろう。
【０３９０】
「エピトープ」または「結合部位」は、抗原結合ペプチド（抗体など）が特異的に結合する抗原上の範囲または領域である。タンパク質エピトープは、結合に直接関与するアミノ酸残基（エピトープの免疫優性構成成分とも呼ばれる）、および結合に直接関与しない他のアミノ酸残基、例えば、特異的抗原結合ペプチドによって効果的に遮断されるアミノ酸残基（換言すれば、アミノ酸残基は特異的抗原結合ペプチドの「フットプリント」内にある）を含み得る。本明細書におけるエピトープという用語は、抗ＭＣＴ１抗体に特異的に結合するＭＣＴ１の任意の特定の領域における両方のタイプのアミノ酸結合部位を含む。ＭＣＴ１は、多くの異なるエピトープを含むことができ、これには、（１）線状ペプチド抗原決定基、（２）成熟ＭＣＴ１配座において互いに近接して位置する１つ以上の非隣接アミノ酸からなる配座抗原決定基、および（３）炭水化物基などの、ＭＣＴ１タンパク質に共有結合的に付着した分子構造から、全体もしくは一部のいずれかとしてなる翻訳後抗原決定基が含まれ得るが、これらに限定されない。特に、「エピトープ」という用語は、タンパク質またはペプチド、例えば、ＭＣＴ１中の特定の残基を含み、これらは、アラニンスキャニング技術などの既知の認められた方法によって決定されるように、そのようなタンパク質またはペプチド中の結合に関与する。そのような方法は、本明細書で例示されている。
【０３９１】
本明細書における「発現ベクター」は、標的宿主細胞、例えば、細菌、昆虫、酵母、植物、両生類、爬虫類、トリ、または哺乳動物細胞、最も典型的には、酵母または哺乳動物細胞、例えば、ＣＨＯ細胞内での外来タンパク質の発現のための操作を容易にする要素を含むＤＮＡベクターを指す。好都合なことに、形質転換のための配列の操作およびＤＮＡの産生は、最初に細菌宿主、例えば、大腸菌で実施され、通常、ベクターは、細菌の複製起点および適切な細菌選択マーカーを含む、そのような操作を容易にする配列を含む。選択マーカーは、選択培養培地で成長した形質転換宿主細胞の生存または成長に必要なタンパク質をコードする。選択遺伝子を含むベクターで形質転換されていない宿主細胞は、培養培地中で生存しない。典型的な選択遺伝子は、（ａ）抗生物質または他の毒素に対する耐性を付与する、（ｂ）栄養素要求性欠陥を補完する、または（ｃ）複合培地から入手不可能な重要な栄養素を供給するタンパク質をコードする。酵母の形質転換のための例示的なベクターおよび方法は、例えば、Ｂｕｒｋｅ，Ｄ．，Ｄａｗｓｏｎ，Ｄ．，＆Ｓｔｅａｒｎｓ，Ｔ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  ｙｅａｓｔ  ｇｅｎｅｔｉｃｓ：ａ  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｃｏｕｒｓｅ  ｍａｎｕａｌ，Ｐｌａｉｎｖｉｅｗ，ＮＹ：Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ（２０００）に記載されている。本発明の方法で使用するための発現ベクターは、形質転換された宿主株を同定するための選択可能な栄養要求性マーカーまたは薬物マーカーを含む、酵母または哺乳動物特異的配列を含み得る。酵母宿主細胞におけるベクターのコピー数を増幅するために、薬物マーカーがさらに使用され得る。
【０３９２】
「発現する」および「産生する」という用語は、本明細書では同義語として使用され、遺伝子産物の生合成を指す。これらの用語は、遺伝子のＲＮＡへの転写を包含する。これらの用語はまた、ＲＮＡの１つ以上のポリペプチドへの翻訳を包含し、さらに全ての天然に生じる転写後および翻訳後修飾を包含する。抗体または抗原結合フラグメントの発現／産生は、細胞の細胞質内、および／または細胞培養の増殖培地などの細胞外環境内であり得る。
【０３９３】
「Ｆｃ受容体」および「ＦｃＲ」という用語は、抗体のＦｃ領域に結合する受容体を表す。好ましいＦｃＲは、天然配列のヒトＦｃＲである。さらに、好ましいＦｃＲは、ＩｇＧ抗体に結合するもの（ガンマ受容体）であり、これらの受容体の対立遺伝子変異体および選択的スプライス形態を含む、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、およびＦｃγＲＩＩＩサブクラスの受容体を含む。ＦｃγＲＩＩ受容体には、主にその細胞質ドメインが異なる類似のアミノ酸配列を有するＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）およびＦｃγＲＩＩＢ（「阻害受容体」）が含まれる。ＦｃＲは、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，９：４５７−９２（１９９１）、Ｃａｐｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ，４：２５−３４（１９９４）、およびｄｅ  Ｈａａｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．，１２６：３３０−４１（１９９５）で考察されている。「ＦｃＲ」にはまた、母体ＩｇＧの胎児への移行に寄与し（Ｇｕｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１１７：５８７（１９７６）、およびＫｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２４：２４９（１９９４））、かつ循環中の抗体の半減期を調節および／または延長するように主に機能する、新生児受容体ＦｃＲｎも含まれる。開示された抗ＭＣＴ１抗体が非グリコシル化される限り、発現系および／または配列の結果として、主題の抗体は、ＦｃＲｎ受容体に結合するが、Ｆｃγ受容体には結合しない（または最小限に結合する）ことが予想される。
【０３９４】
「Ｆｃ領域」という用語は、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために使用される。「Ｆｃ領域」は、天然配列Ｆｃ領域または変異体Ｆｃ領域であり得る。免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は変化し得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は通常、Ｃｙｓ２２６の位置のアミノ酸残基から、またはＰｒｏ２３０からそのカルボキシル末端まで伸びると定義されている。Ｆｃ領域の残基の番号付けは、Ｋａｂａｔと同様にＥＵインデックスの番号付けである。Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ：Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ（１９９１）。免疫グロブリンのＦｃ領域は概して、２つの定常ドメイン、ＣＨ２およびＣＨ３を含む。
【０３９５】
「フレームワーク領域」または「ＦＲ」という表現は、抗体の軽鎖および重鎖の可変領域内のフレームワーク領域の１つ以上を指す（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，４ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ：Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ（１９８７）を参照）。これらの表現は、抗体の軽鎖および重鎖の可変領域内のＣＤＲ間に挿入されたアミノ酸配列領域を含む。
【０３９６】
「機能的Ｆｃ領域」は、天然配列Ｆｃ領域の少なくとも１つのエフェクター機能を有する。例示的な「エフェクター機能」には、Ｃ１ｑ結合；補体依存性細胞傷害（「ＣＤＣ」）；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞介在性細胞傷害（「ＡＤＣＣ」）；食作用；細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体（「ＢＣＲ」））の下方制御などが含まれる。そのようなエフェクター機能は概して、Ｆｃ領域を結合ドメイン（例えば、抗体可変ドメイン）と組み合わせる必要があり、そのような抗体エフェクター機能を評価するための当該技術分野において既知の様々なアッセイを使用して評価され得る。「天然配列Ｆｃ領域」は、自然に見られるＦｃ領域のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。「変異体Ｆｃ領域」は、少なくとも１つのアミノ酸修飾によって天然配列Ｆｃ領域のものとは異なるが、それでもなお天然配列Ｆｃ領域の少なくとも１つのエフェクター機能を保持するアミノ酸配列を含む。好ましくは、変異体Ｆｃ領域は、天然配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域と比較して、天然配列のＦｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域において、少なくとも１つのアミノ酸置換、例えば、約１〜約１０のアミノ酸置換、および例えば、約１〜約５のアミノ酸置換を有する。本明細書の変異体Ｆｃ領域は、例えば、天然配列Ｆｃ領域および／または親ポリペプチドのＦｃ領域と少なくとも約８０％の配列同一性、ほとんどは、例えば、それと少なくとも約９０％の配列同一性、さらには、例えば、それと少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有する。
【０３９７】
本明細書で使用される場合、「移植片対宿主病」（ＧＶＨＤ）は、同種異系骨髄移植または造血幹細胞移植の一般的な合併症を指し、移植された骨髄における機能的免疫細胞は、レシピエントを「外来」として認識し、宿主組織に対する免疫応答をもたらす。１９５９Ｂｉｌｌｉｎｇｈａｍ  Ｃｒｉｔｅｒｉａによると、ＧＶＨＤが生じるためには、３つの基準を満たす必要がある：１）生存可能で機能的な免疫細胞での免疫適格移植片の投与、２）レシピエントは免疫学的に組織不適合性である、３）レシピエントは免疫不全であり、したがって移植された細胞を破壊または不活性化することができない。臨床的に、移植片対宿主病は、急性型および慢性型に分けられる。急性型または劇症型の疾患（ａＧＶＨＤ）は通常、移植後最初の１００日以内に観察され、関連する罹患率および死亡率のため、移植の有効性に対する主要な課題である。慢性型の移植片対宿主病（ｃＧＶＨＤ）は通常、１００日後に生じる。中等度から重度のｃＧＶＨＤの出現は、長期生存に悪影響を及ぼす。骨髄移植後、汚染物質として、または意図的に宿主に導入され、移植片中に存在するＴ細胞は、宿主組織を抗原的に外来として認識した後、移植レシピエントの組織を攻撃する。Ｔ細胞は、ＴＮＦαおよびインターフェロン−ガンマ（ＩＦＮγ）を含む、過剰なサイトカインを産生する。幅広い宿主抗原、特にヒト白血球抗原（ＨＬＡ）が、移植片対宿主病を引き起こす可能性がある。しかしながら、移植片対宿主病は、ＨＬＡと同一の兄弟がドナーである場合でさえ生じる可能性がある。古典的には、急性移植片対宿主病は、肝臓、皮膚、および粘膜、ならびに胃腸管への選択的損傷を特徴とする。追加の研究は、その移植片対宿主病が免疫系（骨髄および胸腺など）自体を含む臓器、ならびに特発性肺炎の形態の肺を標的とすることを示している。慢性移植片対宿主病も上記の臓器を攻撃するが、その長期にわたる経過により、結合組織および外分泌腺への損傷も引き起こす可能性がある。
【０３９８】
本明細書で使用される場合、「宿主細胞」は、本発明の組換え発現ベクターなどの本発明の核酸分子が導入された細胞を広く指す。宿主細胞は、原核細胞（例えば、大腸菌）、または酵母、昆虫（例えば、ＳＦ９）、両生類などの真核細胞、またはＣＨＯ、ＨｅＬａ、ＨＥＫ−２９３などの哺乳動物細胞、例えば、培養細胞、外植片、およびインビボの細胞であり得る。「宿主細胞」および「組換え宿主細胞」という用語は、本明細書では互換的に使用される。そのような用語は、特定の対象細胞だけでなく、そのような細胞の子孫または潜在的な子孫も指すことを理解されたい。突然変異または環境の影響により後継世代で特定の改変が生じる可能性があるため、子孫は、実際には親細胞と同一ではない可能性があるが、それでもなお本明細書で使用される用語の範囲内に含まれる。
【０３９９】
本明細書で使用される場合、「ヒト抗体」は、ヒトによって産生された抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体、および／または当業者に既知の、もしくは本明細書に開示される、ヒト抗体を作るための技術のいずれかを使用して作られた抗体を意味する。ヒト抗体のこの定義には、少なくとも１つのヒト重鎖ポリペプチドまたは少なくとも１つのヒト軽鎖ポリペプチドを含む抗体が含まれる。そのような一例は、マウス軽鎖およびヒト重鎖ポリペプチドを含む抗体である。ヒト抗体は、当該技術分野において既知の様々な技術を使用して産生され得る。一実施形態では、ヒト抗体は、ファージライブラリから選択され、そのファージライブラリは、ヒト抗体を発現する（Ｖａｕｇｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１４：３０９−３１４，１９９６、Ｓｈｅｅｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（ＵＳＡ）９５：６１５７−６１６２，１９９８、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１，１９９１、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１，１９９１）。ヒト抗体はまた、内因性遺伝子座の代わりにヒト免疫グロブリン遺伝子座が遺伝子導入された動物、例えば、内因性免疫グロブリン遺伝子が部分的または完全に不活性化されたマウスの免疫化によって作製され得る。このアプローチは、米国特許第５，５４５，８０７号、同第５，５４５，８０６号、同第５，５６９，８２５号、同第５，６２５，１２６号、同第５，６３３，４２５号、および同第５，６６１，０１６号に記載されている。代替的に、ヒト抗体は、標的抗原に対する抗体を産生するヒトＢリンパ球を不死化することによって調製されてもよい（そのようなＢリンパ球は、個体から、もしくはｃＤＮＡの単一細胞クローニングから回収され得るか、またはインビトロで免疫されていてもよい）。例えば、Ｃｏｌｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，ｐ．７７，１９８５、Ｂｏｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７（１）：８６−９５，１９９１、および米国特許第５，７５０，３７３号を参照されたい。
【０４００】
「ヒトモノクローナル抗体」は、フレームワークおよびＣＤＲ領域の両方がヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する、単一結合特異性を示す抗体を指す。一実施形態では、ヒトモノクローナル抗体は、不死化細胞に融合したヒト重鎖導入遺伝子および軽鎖導入遺伝子を含むゲノムを有するトランスジェニック非ヒト動物、例えば、トランスジェニックマウスから得られたＢ細胞を含むハイブリドーマによって産生される。これには、例えば、治療薬または診断薬などのエフェクター剤に結合された、完全ヒトモノクローナル抗体およびその複合体および変異体が含まれる。
【０４０１】
本明細書で使用される場合、「ヒト化抗体」は、ヒト細胞によって作られる抗体により厳密に類似するように改変された可変領域および定常領域を有する非ヒト細胞によって作られる抗体を広く含む。例えば、非ヒト抗体のアミノ酸配列を改変して、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に見られるアミノ酸を組み込むことによる。本発明のヒト化抗体は、例えばＣＤＲにおいて、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基を含み得る（例えば、インビトロでのランダムもしくは部位特異的突然変異誘発によって、またはインビボでの体細胞突然変異によって導入された変異）。本明細書で使用される場合、「ヒト化抗体」という用語は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖系列に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列にグラフト化された抗体も含む。本明細書で使用される場合、「ヒト化抗体」という用語はまた、例えば、ＭＣＴ１または別の標的抗原への抗体の結合を増強するために、ヒト化および親和性成熟の両方である親和性成熟抗体も含む。
【０４０２】
本明細書で使用される場合、「ＩＣ５０」という用語は、生化学的アッセイにおいて５０％の阻害をもたらす、試験化合物、例えば、抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントの用量を指す。
【０４０３】
本明細書で互換的に使用される「炎症性障害」、「炎症状態」、および／または「炎症」は、慢性または急性の炎症性疾患を広く指し、炎症性自己免疫疾患および炎症性アレルギー状態を明示的に含む。これらの状態には、一例として、病原体、損傷した細胞、または刺激物などの有害な刺激に対する免疫応答の調節不全を特徴とする炎症性異常が含まれる。炎症性疾患は、様々なヒト疾患の根底にある。炎症過程に病因がある非免疫疾患には、癌、アテローム性動脈硬化症、および虚血性心疾患が含まれる。炎症に関連する障害の例としては、慢性前立腺炎、糸球体腎炎、過敏症、骨盤内炎症性疾患、再灌流傷害、サルコイドーシス、血管炎、間質性膀胱炎、正補体血症性蕁麻疹様血管炎、心膜炎、筋炎、抗合成酵素症候群、マクロファージ活性化症候群、ベーチェット症候群（Ｂｅｈｇｅｔ′ｓ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、ＰＡＰＡ症候群、ブラウ症候群、痛風、成人および若年スティル病、クリオピリン関連周期熱症候群、マックル−ウェルズ症候群、家族性風邪誘発性自己炎症症候群、新生児期発症多臓器性炎症性疾患、家族性地中海熱、慢性乳児神経、皮膚、および関節症候群、全身型若年性特発性関節炎、高ＩｇＤ症候群、シュニッツラー症候群、ＴＮＦ受容体関連周期性症候群（ＴＲＡＰＳＰ）、歯肉炎、歯周炎、肝炎、肝硬変、膵炎、心筋炎、血管炎、胃炎、痛風、痛風性関節炎、ならびに乾癬、アトピー性皮膚炎、湿疹、酒さ、蕁麻疹、および座瘡から選択される炎症性皮膚障害が挙げられる。
【０４０４】
本明細書で使用される場合、「阻害剤」という用語は、標的に結合し、それを生物学的に不活性にするか、または活性をより低くする化合物を指す。特定の実施形態では、化合物は、抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントである。いくつかの実施形態では、化合物の阻害効果は、ＭＣＴ１媒介性乳酸輸送の阻害を介して測定される。
【０４０５】
「単離された」生物学的構成成分（単離された抗体、または細胞、またはベクター、またはタンパク質、または核酸など）は、その環境から実質的に分離もしくは精製された構成成分、または構成成分が天然に存在する生物の細胞中の他の生物学的構成成分、例えば、他の染色体および染色体外のＤＮＡおよびＲＮＡ、タンパク質、ならびにオルガネラなどを指す。「単離された」核酸およびタンパク質には、標準的な精製方法によって精製された核酸およびタンパク質が含まれる。この用語はまた、組換え技術ならびに化学合成によって調製された核酸およびタンパク質も包含する。単離された核酸またはタンパク質は、実質的に精製された形態で存在することができるか、または例えば、宿主細胞などの非天然環境中に存在することができる。
【０４０６】
本明細書で使用される場合、「単離された抗体」は、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を指すよう意図される（例えば、ＭＣＴ１に特異的に結合する単離された抗体は、ＭＣＴ１以外の抗原を特異的に結合する抗体を実質的に含まない）。さらに、単離された抗体は、他の細胞物質および／または化学物質を実質的に含まない可能性がある。
【０４０７】
本明細書で使用される場合、「標識」または「検出可能な部分」は、分光学的、光化学的、生化学的、免疫化学的、化学的、または他の物理的手段によって検出可能な組成物を広く指す。
【０４０８】
本明細書で使用される場合、「狼瘡」は、あらゆるタイプの狼瘡を含むよう意図される。以下で考察されるループスには４つのタイプがある。本明細書で使用される場合、「狼瘡様状態」は、腎臓炎、タンパク尿の増加、および脾腫などの狼瘡に類似した症状を伴う炎症状態を含むよう意図される。「全身性エリテマトーデス」または（「ＳＬＥ」）は、狼瘡の最も一般的な形態であり、軽度または重度であり得、主要な臓器系に影響を及ぼす可能性がある。これは、ほとんどの人が「狼瘡」に関連する状態である。これは、原因不明の自己免疫疾患であり、ループス腎炎と呼ばれる腎臓の炎症を引き起こす可能性があり、これは、血液から老廃物を濾過する身体の能力に影響を及ぼす可能性があるか、または重度の場合、透析もしくは腎臓移植を必要とする腎臓損傷を引き起こす可能性がある。また、ＳＬＥは、肺高血圧症と呼ばれる肺の血圧の上昇を引き起こす可能性があり、呼吸困難を引き起こす可能性がある。さらに、ＳＬＥは、神経系および脳の炎症を引き起こす可能性があり、これは、記憶障害、混乱、頭痛、および脳卒中を引き起こす可能性がある。さらに、ＳＬＥは、脳の血管に炎症を引き起こす可能性があり、これは、高熱、発作、および行動変化を引き起こす可能性がある。また、ＳＬＥは、動脈硬化または冠動脈疾患を引き起こす可能性があり、冠動脈壁上の沈着物の蓄積は、心臓発作を引き起こす可能性がある。本明細書における「皮膚狼瘡」は、皮膚にのみ影響を及ぼす狼瘡状態を指す。皮膚の慢性皮膚エリテマトーデス（ＣＣＬＥ）（円板状エリテマトーデス［ＤＬＥ］とも呼ばれる）、亜急性皮膚エリテマトーデス（ＳＣＬＥ）、および腫脹性狼瘡に影響を及ぼす３つのタイプの狼瘡がある。皮膚エリテマトーデスまたは円板状エリテマトーデスは、多くのタイプの発疹および病変（痛み）を引き起こす可能性があり、最も一般的には円板状発疹と呼ばれ、隆起し、鱗状で赤くなるが、痒くはない。発疹の領域は、円板または円のように見える。皮膚狼瘡の別の一般的な例は、蝶型紅斑として既知の、頬上かつ鼻梁を横切る発疹である。他の発疹または痛みは、顔、首、もしくは頭皮上（日光もしくは蛍光灯に曝露されている皮膚の領域）、または口、鼻、もしくは膣内に現れ得る。脱毛および皮膚の色素もしくは色の変化も、皮膚狼瘡の症状である。皮膚狼瘡を有する人の約１０％が全身性狼瘡を発症する。しかしながら、これらの人々はすでに全身性狼瘡を患っており、皮膚の発疹が主な症状である可能性が高い。「薬物誘発性エリテマトーデス」は、ＳＬＥを有しない人において狼瘡様症状を引き起こす可能性がある特定の薬物によって引き起こされる状態である。概して、この狼瘡は、一時的なものであり、通常、投薬を中止してから数ヶ月以内に治まる。狼瘡様症状を誘発することが既知の医薬品には、血圧の薬であるヒドララジンおよびメチルドパ、プロカインアミドと呼ばれる心臓の薬、および金属中毒の場合に使用されるＤ−ペニシラミンと呼ばれる薬物が含まれる。薬物誘発性狼瘡の他の原因には、ミノサイクリン（座瘡の治療に使用）、イソニアジド（結核の治療）、および抗ＴＮ  Ｆ（関節リウマチの治療に使用）が含まれる。薬物誘発性狼瘡の症状は全身性狼瘡の症状に類似���ており、しかしながら、ＳＬＥとは異なるが、主要な臓器に影響を及ぼすことはほとんどない。新生児狼瘡は、真の形態の狼瘡ではない。これは、狼瘡を有する女性の乳児に影響を及ぼす稀な状態であり、子宮内の胎児に作用する母親からの抗体によって引き起こされる。出生時、乳児は、皮膚の発疹、肝臓の問題、または血球数の低下を有する可能性があるが、これらの症状は概して、数ヶ月後に完全に消え、持続的な影響はない。新生児狼瘡を患っている一部の乳児はまた、深刻な心臓の欠陥を有する可能性がある。
【０４０９】
「ＭＣＴ１」は、プロトン結合モノカルボン酸トランスポーターである。ＭＣＴ１は、解糖の生成物を含む重要な代謝産物の輸送の促進に寄与するマルチパス膜貫通タンパク質である。これは、乳酸、ピルビン酸、ロイシン、バリン、およびイソロイシン由来の分岐鎖オキソ酸、ならびにケトン体アセトアセテート、ベータ−ヒドロキシブチレート、および酢酸など、多くのモノカルボン酸の細胞膜を横切る急速な輸送を触媒する。組織および状況に応じて、ＭＣＴ１は、乳酸およびケトン体の内外への輸送を媒介する。ＭＣＴ１は、溶質チャネルタンパク質（ＳＬＣ）として既知の表面膜タンパク質の最大のファミリーの１つのメンバーであり、その機能は、重要な細胞栄養素、代謝産物、イオン、ホルモン、および脂質の膜にわたる輸送を伴う。ＭＣＴ１は、トランスポーターのＳＬＣ１６ファミリーに属し、そのうちの５つは、ピルビン酸、乳酸、およびケトンなどのモノカルボン酸を、促進されたｐＨ依存性および両方向性の方式で輸送することが示されている。ＭＣＴ１はまた、次の名前のいずれかで呼ばれ得る：モノカルボン酸トランスポーター１、ＳＬＣ１６Ａ１、ＨＨＦ７、ＭＣＴ、ＭＣＴ１、ＭＣＴ１Ｄ、溶質キャリアファミリー１６メンバー１。ヒトにおいて、これは、ＳＬＣ１６Ａ１遺伝子によってコードされる。
【０４１０】
「ＭＣＴ２」は、プロトン結合モノカルボン酸トランスポーターである。これは、乳酸、ピルビン酸、ロイシン、バリン、およびイソロイシン由来の分岐鎖オキソ酸、ならびにケトン体アセトアセテート、ベータ−ヒドロキシブチレート、および酢酸など、多くのモノカルボン酸の原形質膜を横切る急速な輸送を触媒する。これはまた、高親和性ピルビン酸トランスポーターとしても機能する。ＭＣＴ２はまた、次の名前のいずれかで呼ばれ得る：モノカルボン酸トランスポーター２、ＳＬＣ１６Ａ７、ＭＣＴ２、溶質キャリアファミリー１６メンバー７。ヒトにおいて、これは、ＳＬＣ１６Ａ７遺伝子によってコードされる。
【０４１１】
「ＭＣＴ３」は、プロトン結合モノカルボン酸トランスポーターである。これは、乳酸、ピルビン酸、ロイシン、バリン、およびイソロイシン由来の分岐鎖オキソ酸、ならびにケトン体アセトアセテート、ベータ−ヒドロキシブチレート、および酢酸など、多くのモノカルボン酸の原形質膜を横切る急速な輸送を触媒する。これはまた、高親和性ピルビン酸トランスポーターとしても機能する。ＭＣＴ３の発現は、網膜色素上皮および脈絡叢上皮に限定されており、頂端膜上に見られるＭＣＴ１とは対照的に、基底膜に位置している。ＭＣＴ３はまた、次の名前のいずれかで呼ばれ得る：モノカルボン酸トランスポーター３、ＳＬＣ１６Ａ８、ＭＣＴ３、ＲＥＭＰ、溶質キャリアファミリー１６メンバー８。ヒトにおいて、これは、ＳＬＣ１６Ａ８遺伝子によってコードされる。
【０４１２】
「ＭＣＴ４」は、プロトン結合モノカルボン酸トランスポーターである。ＭＣＴ４はまた、次の名前のいずれかで呼ばれ得る：モノカルボン酸トランスポーター４、ＳＬＣ１６Ａ３、ＭＣＴ  ３、ＭＣＴ  ４、ＭＣＴ−３、ＭＣＴ−４、ＭＣＴ３、ＭＣＴ４、溶質キャリアファミリー１６メンバー３。ヒトにおいて、これは、ＳＬＣ１６Ａ３遺伝子によってコードされる。
【０４１３】
「多重特異性抗体」または「多重特異性抗原結合タンパク質」は、２つ以上の抗原結合領域を有するポリペプチドまたは抗体を指す。これには、二重特異性抗体が含まれる。これらの抗原結合領域は、異なる抗原または同じ抗原の異なるエピトープに結合し得る。
【０４１４】
「核酸」および「ポリヌクレオチド」という用語は、直鎖もしくは分岐鎖、一本鎖もしくは二本鎖、またはそれらのハイブリッドであるＲＮＡまたはＤＮＡを指す。この用語はまた、ＲＮＡ／ＤＮＡハイブリッドも包含する。以下は、ポリヌクレオチドの非限定的な例である：遺伝子または遺伝子フラグメント、エクソン、イントロン、ｍＲＮＡ、ｔＲＮＡ、ｒＲＮＡ、リボザイム、ｃＤＮＡ、組換えポリヌクレオチド、分岐ポリヌクレオチド、プラスミド、ベクター、任意の配列の単離されたＤＮＡ、任意の配列の単離されたＲＮＡ、核酸プローブ、およびプライマー。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチドおよびヌクレオチド類似体などの修飾ヌクレオチド、ウラシル、他の糖、およびフルオロリボースおよびチオレートなどの連結基、ならびにヌクレオチド分岐を含み得る。ヌクレオチドの配列は、標識化構成成分とのコンジュゲーションなどによって重合後にさらに修飾され得る。この定義に含まれる他のタイプの修飾は、キャップ、天然に存在するヌクレオチドのうちの１つ以上の類似体での置換、およびポリヌクレオチドをタンパク質、金属イオン、標識化構成成分、他のポリヌクレオチド、または固体支持体に付着させるための手段の導入である。ポリヌクレオチドは、化学合成によって得ることができるか、または微生物に由来し得る。「遺伝子」という用語は、生物学的機能に関連するポリヌクレオチドの任意のセグメントを指すために広く使用される。したがって、遺伝子には、ゲノム配列におけるようなイントロンおよびエクソン、またはｃＤＮＡにおけるようなコード配列のみ、および／またはそれらの発現に必要な調節配列が含まれる。例えば、遺伝子はまた、ｍＲＮＡもしくは機能的ＲＮＡを発現するか、または特定のタンパク質をコードし、かつ調節配列を含む、核酸フラグメントも指す。
【０４１５】
核酸は、別の核酸配列と機能的な関係に置かれると「作動可能に結合」される。例えば、シグナル配列のＤＮＡは、それがポリペプチドの分泌に関与するプレタンパク質として発現する場合、ポリペプチドのＤＮＡに作動可能に結合されており、プロモーターまたはエンハンサーは、それが配列の転写に影響を及ぼす場合、コード配列に作動可能に結合されている。概して、「作動可能に結合された」とは、結合されているＤＮＡ配列が隣接しており、分泌リーダーの場合は隣接しており、かつリーディングフレーム内にあることを意味する。しかしながら、エンハンサーは、隣接している必要はない。結合は、好都合な制限部位でのライゲーションによって、あるいは当業者によく知られているＰＣＲ／組換え法（ＧＡＴＥＷＡＹ１１  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）を介して達成される。そのような部位が存在しない場合、合成オリゴヌクレオチドアダプターまたはリンカーが従来の慣行に従って使用される。
【０４１６】
「薬学的に許容される担体」または「賦形剤」とは、製剤化中の医薬組成物において、かつ／または貯蔵を可能にするために従来から使用されている化合物または材料を指す。
【０４１７】
「ポリペプチド」、「ペプチド」、および「タンパク質」は、互換的に使用され、修飾（例えば、リン酸化またはグリコシル化）にかかわらず、任意の長さのアミノ酸残基のポリマーを広く指す。この用語は、１つ以上のアミノ酸残基が対応する天然に存在するアミノ酸の類似体または模倣体であるアミノ酸ポリマー、ならびに天然に存在するアミノ酸ポリマーに適用される。この用語は、１つ以上のアミノ酸残基が対応する天然に存在するアミノ酸の人工化学模倣体であるアミノ酸ポリマー、ならびに天然に存在するアミノ酸ポリマーおよび天然に存在しないアミノ酸ポリマーに適用される。ポリペプチドは、例えば、糖タンパク質を形成するための炭水化物残基の付加によって修飾され得る。「ポリペプチド」、「ペプチド」、および「タンパク質」という用語は、糖タンパク質、ならびに非糖タンパク質を明示的に含む。
【０４１８】
本明細書で使用される場合、「プロモーター」という用語は、ポリヌクレオチド配列の特異的転写を開始するのに必要な、細胞の合成機構、または導入された合成機構によって認識されるＤＮＡ配列として定義される。
【０４１９】
本明細書で使用される場合、「予防有効量」は、疾患の予防または疾患の再発の防止のために患者に投与された場合、疾患または再発のそのような予防をもたらすのに十分である化合物の量を広く指す。予防有効量は、兆候および／または症状の発生を予防するのに有効な量であり得る。「予防有効量」は、疾患およびその重症度、ならびに治療される患者の年齢、体重、病歴、状態に対する素因、既存の状態に応じて異なり得る。
【０４２０】
本明細書で使用される場合、「組換え」は、産物、例えば、細胞、または核酸、タンパク質、もしくはベクターを広く指し、細胞、核酸、タンパク質、またはベクターが、異種核酸の導入、または天然核酸もしくはタンパク質の改変によって修飾されていること、あるいは細胞が、そのように修飾された細胞に由来することを示す。したがって、例えば、組換え細胞は、細胞の天然（非組換え）形態内に見られない遺伝子を発現するか、またはそうでなければ異常発現するか、低発現するか、もしくは全く発現しない天然遺伝子を発現する。
【０４２１】
本明細書で使用される場合、「組換えヒト抗体」という用語は、（ａ）ヒト免疫グロブリン遺伝子またはそれから調製されたハイブリドーマ（以下にさらに記載）に対してトランスジェニックまたはトランス染色体である動物（例えば、マウス）から単離された抗体、（ｂ）ヒト抗体を発現するように形質転換された宿主細胞から、例えば、トランスフェクトーマから単離された抗体、（ｃ）組換えのコンビナトリアルヒト抗体ライブラリから単離された抗体、および（ｄ）他のＤＮＡ配列へのヒト免疫グロブリン遺伝子配列のスプライシングを含む任意の他の手段によって調製、発現、作成、または単離された抗体など、組換え手段によって調製、発現、作成、または単離される全てのヒト抗体を含む。そのような組換えヒト抗体は、フレームワークおよびＣＤＲ領域がヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する。しかしながら、特定の実施形態では、そのような組換えヒト抗体は、インビトロ突然変異誘発（または、ヒトＩｇ配列にトランスジェニックな動物が使用される場合、インビボ体細胞突然変異誘発）に供され得、したがって、組換え抗体のＶＨおよびＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖系列ＶＨおよびＶＬ配列に由来し、かつそれらに関連しているが、インビボでヒト抗体生殖系列レパートリー内に天然に存在しなくてもよい配列である。
【０４２２】
本明細書における「選択可能マーカー」は、例えば、形質転換事象を通して、その遺伝子を受容する細胞に成長表現型（物理的成長特性）を付与する遺伝子または遺伝子フラグメントを指す。選択可能マーカーは、その選択可能マーカー遺伝子を受容しない細胞が成長することができない条件下で、選択成長培地においてその細胞が生存および成長することを可能にする。選択可能マーカー遺伝子は概して、いくつかのタイプに分類され、例えば、細胞に抗生物質または他の薬物への耐性、２つの温度感受性（「ｔｓ」）変異体が交雑されるとき、またはｔｓ変異体が形質転換されるときに温度への耐性を付与する遺伝子などのポジティブ選択可能マーカー遺伝子；生合成遺伝子であって、その生合成遺伝子を有しない全ての細胞に必要とされる特定の栄養素を欠く培地で成長する能力を細胞に付与する生合成遺伝子、または野生型遺伝子を有しない細胞によって、細胞を成長不可能にする突然変異生合成遺伝子などのネガティブ選択マーカー遺伝子などを含む。好適なマーカーとしては、ＺＥＯ、Ｇ４１８、ＬＹＳ３、ＭＥＴ１、ＭＥＴ３ａ、ＡＤＥ１、ＡＤＥ３、ＵＲＡ３などが挙げられるが、これらに限定されない。
【０４２３】
本明細書における療法または診断の文脈における「対象」または「患者」または「個体」は、任意のヒトまたは非ヒト動物を含む。「非ヒト動物」という用語は、全ての脊椎動物、例えば、非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ニワトリ、両生類、爬虫類などの哺乳動物および非哺乳動物を含み、すなわち、本発明に従って治療されるのに適したいかなるものとしては、トリおよび哺乳動物対象が挙げられるが、これらに限定されず、例えば、哺乳動物である。本発明に従って治療されることを必要としている任意の哺乳動物対象が、好適である。両方の性別および任意の発達段階（すなわち、新生児、乳児、若年者、青年期、および成人）のヒト対象は、本発明に従って治療され得る。本発明はまた、動物対象、特にマウス、ラット、イヌ、ネコ、ウシ、ヤギ、ヒツジ、およびウマなどの哺乳動物対象に対して、獣医学的目的、ならびに薬物スクリーニングおよび薬物開発目的で実施され得る。「対象」は、「固体」および「患者」と互換的に使用される。
【０４２４】
抗体（例えば、第１の抗体）が別の抗体（例えば、第２の抗体）と同じエピトープに「実質的に」または「少なくとも部分的に」結合するという語句は、第１の抗体のエピトープ結合部位が、第２の次抗体のエピトープ結合部位を構成する抗原上のアミノ酸残基の少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上を含むことを意味する。また、第１の抗体が第２の抗体と実質的にまたは部分的に同じまたは重複するエピトープに結合することは、上記のように、第１および第２の抗体が抗原への結合において競合することを意味する。したがって、モノクローナル抗体「と実質的に同じエピトープまたは決定基に結合する」という用語は、抗体がその抗体と「競合する」ことを意味する。対象となる抗体「と同じまたは重複するエピトープまたは決定基に結合する」という語句は、抗体が対象となる前述の抗体と、対象となる前述の抗体が特異的に結合するＭＣＴ１上の少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、）または全ての残基に関して「競合する」ことを意味する。本明細書に記載されるモノクローナル抗体と実質的または本質的に同じエピトープに結合する１つ以上の抗体の同定は、アラニンスキャニングを使用して容易に決定され得る。加えて、抗体競合が評価され得る様々な免疫学的スクリーニングアッセイのいずれか１つ。多くのそのようなアッセイが日常的に実施されており、当該技術分野において周知である（例えば、参照により本明細書に具体的に組み込まれる、１９９７年８月２６日に発行された米国特許第５，６６０，８２７号を参照）。本明細書に記載される抗体が結合するエピトープを実際に決定することは、本明細書に記載されるモノクローナル抗体と同じ、または実質的に同じ、または重複するエピトープに結合する抗体を同定するために決して必要ではないことが理解される。
【０４２５】
「トランスフェクトされた」または「形質転換された」または「形質導入された」という用語は、外因性核酸が宿主細胞に移入または導入されるプロセスを指す。「トランスフェクトされた」または「形質転換された」または「形質導入された」細胞は、外因性核酸でトランスフェクト、形質転換、または形質導入された細胞である。細胞は、一次対象細胞およびその子孫を含む。
【０４２６】
本明細書で使用される場合、「療法」、「治療の」、「治療する」、または「治療」は、疾患を治療すること、疾患もしくはその臨床症状の進行を阻止もしくは低減すること、および／または疾患を緩和して、疾患もしくはその臨床症状の後退を引き起こすことを広く指す。療法は、疾患、兆候、および／または疾患の症状の予防、治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）、治療（ｒｅｍｅｄｙ）、低減、緩和、および／またはそれらからの軽減の提供を包含する。療法は、疾患の兆候および／または症状（例えば、炎症、疼痛）が進行している患者における兆候および／または症状の緩和を包含する。療法はまた、「予防」も包含する。療法を目的とした「低減した」という用語は、兆候および／または症状の臨床的に有意な低減を広く指す。療法には、再発、または再発性の兆候および／もしくは症状（例えば、炎症、疼痛）の治療が含まれる。療法は、いつでも兆候および／または症状の発現を妨げること、ならびに既存の兆候および／または症状を低減し、既存の兆候および／または症状を排除することを包含するが、これらに限定されない。療法には、慢性疾患（「維持」）および急性疾患の治療が含まれる。例えば、治療は、兆候および／または症状（例えば、炎症、疼痛）の再発（ｒｅｌａｐｓｅ）または再発（ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ）の治療または予防を含む。
【０４２７】
本明細書で使用される場合、「Ｔｒｅｇ細胞」（サプレッサーＴ細胞または誘導性Ｔｒｅｇ細胞またはｉＴｒｅｇとも呼ばれる場合がある）は、免疫系を調節し、自己抗原に対する耐性を維持し、自己免疫疾患を阻止することができるＴ細胞の亜集団を指す。Ｆｏｘｐ３＋  ＣＤ４＋ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）は、正常な条件下で末梢性耐性を維持する上で重要である。
【０４２８】
本明細書における「Ｔｒ１細胞」という用語は、制御性Ｔ細胞の特定のタイプまたは集団、すなわち、一般に、それらのＣＤ４９ｂおよびＬＡＧ−３の発現に基づいて科学文献で特徴付けられる、高レベルのＩＬ−１０を発現するＣＤ４＋  Ｆｏｘｐ３−細胞を含む１型制御性Ｔ細胞（Ｔｒ１）を指す。これらの細胞は、ＩＬ−４およびＩＬ−１７の非存在下で、ＩＬ−１０、ＴＧＦ−β、およびグランザイム（Ｇｚ）Ｂを分泌するそれらの能力によってさらに特徴付けられる。報告によると、Ｔｒ１細胞が免疫応答を制御する主な機構は、ＩＬ−１０およびＴＧＦ−βの分泌、ならびにＧｚＢを介した骨髄細胞の死滅を含む。Ｔｒ１細胞は、ＨＬＡ不一致胎児肝臓造血幹細胞移植後に耐性が生じた患者の末梢血で最初に観察され、いくつかの免疫媒介性疾患において炎症性およびエフェクターＴ細胞応答を調節すると報告されている。これらの細胞は、１型糖尿病および多発性硬化症などの自己免疫状態の患者の治療における細胞療法での潜在的な臨床使用の評価につながったＡｇ特異的な方法において、インビトロで生成および増殖され得る。
【０４２９】
本明細書で使用される場合、「可変領域」または「ＶＲ」は、抗体の抗原への結合に直接関与する抗体の軽鎖および重鎖の各対内のドメインを広く指す。各重鎖は、一端に可変ドメイン（ＶＨ）を有し、その後に多くの定常ドメインが続く。各軽鎖は、一端に可変ドメイン（ＶＬ）、およびそのもう一端に定常ドメインを有する。軽鎖の定常ドメインは、重鎖の第１の定常ドメインと整列し、軽鎖可変ドメインは、重鎖の可変ドメインと整列する。
【０４３０】
「ベクター」は、プラスミド、ファージ、コスミド、またはウイルスなどのレプリコンであり、核酸セグメントは、セグメントの複製または発現をもたらすように作動可能に挿入され得る。ベクターは、調節配列（例えば、プロモーター、エンハンサー）、選択マーカー、およびポリアデニル化シグナルなどであるが、これらに限定されない１つ以上の追加の配列を含み得る。多種多様な宿主細胞を形質転換するためのベクターは、当業者に周知である。それらには、プラスミド、ファージミド、コスミド、バキュロウイルス、バクミド、細菌人工染色体（ＢＡＣ）、酵母人工染色体（ＹＡＣ）、ならびに他の細菌、酵母、およびウイルスベクターが含まれるが、これらに限定されない。本明細書に記載のベクターは、宿主ゲノムに組み込まれ得るか、または細胞もしくは核において独立して維持され得る。
【０４３１】
「異種」という用語は、異なる種の動物に由来する移植片を指す。
【０４３２】
本発明を説明してきたが、以下の実施例は、本発明およびその固有の利点をさらに実証するために提供される。以下の実施例は、特許請求された本発明を説明するために提供され、これを限定するものではない。
【実施例】
【０４３３】
実施例１：Ｔ細胞上のＭＣＴの差次的発現
材料および方法
市販されているＳＭ化合物ＡＺ３９６５（ＭｅｄＣｈｅｍ  Ｅｘｐｒｅｓｓ，ＮＪ）およびその関連類似体を使用して、免疫細胞におけるＭＣＴ１経路の固有の生物学を明らかにすることを促した。明確にするために、同じ結合親和性、ＰＫ、およびＭＣＴ１／２選択性を有するＡＺ３９６およびその類似体を集合的に「ＡＺ３９６５」と称する。
【０４３４】
ＭＣＴ１、ＭＣＴ２、ＭＣＴ４、およびＢＳＧ（ＣＤ１４７）発現を、２つの異なるドナーからの非刺激および刺激白血球で測定した。「刺激」状態では、細胞をＣＤ３／ＣＤ２８で３日間活性化した。刺激細胞を、ＡＺ３９６５による増殖の阻害について試験した。
【０４３５】
結果
ＭＣＴ１は、解糖の産物を含む代謝産物の移動を促進し、これは、活性化Ｔ／Ｂ細胞においてより重要である（図１）。２つのドナーのＭＣＴ１、ＭＣＴ２、ＭＣＴ４、およびＢＳＧ（ＣＤ１４７）の発現レベルが図２に示され、活性化Ｔ細胞がＭＣＴ１（図１３Ｂも）を上方制御するが、ＭＣＴ２は上方制御せず、静止Ｔ細胞も活性化Ｔ細胞もＭＣＴ２を高レベルで発現せず、固体間で、活性化Ｔ細胞におけるＭＣＴ４の発現が異なることを実証する。ＡＺ３９６５阻害アッセイ（結果は図２に示される）は、ＭＣＴ４発現が高い（０．５９ｎＭ）対ＭＣＴ４発現が低い（０．４３ｎＭ）個体におけるＴ細胞増殖の抑制のＩＣ５０が区別できないことを示す。これらの結果は、ＭＣＴ４が、活性化Ｔ細胞における乳酸輸送に大きく寄与しないこと、およびＭＣＴ１特異的標的化が、ＭＣＴ４の存在下でさえＴ細胞機能を阻害することを実証する。
【０４３６】
追加のデータは、マウスＭＣＴ４欠損Ｔ細胞が、ＣＤ３／ＣＤ２８による活性化後にＷＴ  Ｔ細胞と同一であることを示す。
【０４３７】
実施例２：ＡＺ３９６５阻害剤を使用して検証された炎症／自己免疫障害のインビトロおよびインビボでのＭＣＴ１標的化の実行可能性
インビトロ
乳酸輸送に対する効果．乳酸ＦＬＩＰＲアッセイを使用して、ＡＺ３９６５がヒトＴ細胞（ＣＤ４＋およびＣＤ８＋の両方）、Ｂ細胞リンパ腫（Ｄａｕｄｉ）、およびＰＢＭＣにおいて乳酸輸送を阻害するが、単球では阻害しないことを示した（図３）。ＡＺ３９６５は、影響を受けた細胞において乳酸輸送を最大８０％阻害したが、単球では輸送に影響を及ぼさず、これは、処置された固体における自然免疫応答を防御するのに重要である。
【０４３８】
ヒトＴ細胞増殖．ヒトＴ細胞増殖アッセイにおいて、ＭＣＴ１阻害剤の投与は、０．５４ｎＭのＩＣ５０でＴ細胞増殖を低減した（図４）。
【０４３９】
ヒト混合リンパ球反応（ＭＬＲ）．ヒトＭＬＲアッセイにおいて、ＭＣＴ１阻害剤の投与は、１．３４ｎＭのＩＣ５０でＴ細胞増殖を低減した（図５）。
【０４４０】
Ｔ細胞サイトカイン分泌．Ｔ細胞を、インビトロで５日間、ＣＤ３／ＣＤ２８で活性化した。後続のＡＺ３９６５投与は、次のサイトカイン：ＩＦＮγ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、ＩＬ−１０、およびＩＬ−６の分泌を阻害した（図６）。
【０４４１】
活性化マーカー．ＣＤ３／ＣＤ２８活性化Ｔ細胞を１００ｎＭの小分子ＭＣＴ１阻害剤で４日間処置するか、または４日間未処置にした（未処置対照）。これらの条件を陰性（抗体非染色）対照と比較した。２００を超えるＣＤマーカーを、フローサイトメトリー染色によって評価した。ＴＣＲ刺激後のフローサイトメトリー染色によって観察されるように、ＭＣＴ１阻害は、表面ＰＤ１およびＣＴＬＡ４の発現のわずかな増加を除いて、細胞表面マーカー（例えば、ＣＤ２５、ＣＤ４４、ＣＤ６９、ＣＤ４、ＣＤ８、ＬＦＡ、クラスＩ／ＩＩなど、図７Ａ〜図７Ｊを参照）のＴ細胞発現を妨げない。リンパ球のＡＺ３９６５処置も、細胞生存率に影響を与えない。
【０４４２】
インビボ
ＧＶＨＤ抑制およびＴｒｅｇ頻度の増加．ヒトＰＢＭＣを、ＧＶＨＤのマウスモデルの免疫不全ＮＳＧマウスに移入した。ＡＺ３９６５投与は、ＪＡＫ阻害剤ＣＰ−６９０５５０よりも優れた方法で異種ＧＶＨＤ中のマウス生存を延長し、休薬までＧＶＨＤ罹患率を低減した（図８）。この異種ＧＶＨＤ実験の２０日目に、制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞であるＣＤ４＋  Ｔ細胞の割合のＡＺ３９６５用量依存的な増加が、２ｍｇ／ｋｇ（２．５％  Ｔｒｅｇ）〜５０ｍｇ／ｋｇ（１０％）で観察された（図９）。このモデルでは、Ｔｒｅｇは典型的には、一部には炎症性微小環境が原因で、リンパ球減少環境への移行後に長く生存しない（参考文献６０〜６２）。別のＧＶＨＤ実験では、ＡＺ３９６５は、ＣＦＳＥ標識化Ｔ細胞の増殖によって測定したときにマウスＧＶＨＤを軽減した（ＢＡＬＢ／ｃ−＞Ｃ５７ＢＬ／６）。
【０４４３】
移植片拒絶．マウス同種移植片アッセイでは、２５ｍｇ／ｋｇの化合物投与により、移植片拒絶反応が低減した（図１０）。
【０４４４】
Ｂ細胞ＩｇＧ１応答の阻害．ＡＺ３９６５投与（２．５ｍｐｋ／日）も、ヒツジＲＢＣに対するＩｇＧ１応答を介して測定したときにＢ細胞免疫グロブリン産生を阻害した（図１１Ａ）。この投与はまた、胚中心Ｂ細胞の割合を約３０％低減した（図１１Ｂ）。
【０４４５】
尿中ケトンの増加．ヒトにおけるＭＣＴ１の喪失と一致して（参考文献４９）、ＡＺ３９６５が投与されたマウスは、関連するケトアシドーシスを伴わない尿中ケトンの測定可能であるが有害ではない増加を示した。
【０４４６】
結論
これらの研究は、狼瘡などの自己免疫疾患の治療標的化の重要な特徴である、Ｔ細胞およびＢ細胞の両方の応答を低減するＭＣＴ１阻害の有効性を示す。したがって、ＭＣＴ１は、炎症を制御するための実行可能な薬物標的であり、阻害は、先天性免疫に対する影響は示さないが、適応免疫／体液性免疫には大きい影響を示す。
【０４４７】
実施例３：抗ヒトＭＣＴ１抗体の開発および結合特性化
ＭＣＴ１  Ａｂ１  ｍＡｂの選択．ＭＣＴ１  Ａｂ１は、ＭＣＴ１発現およびＭＣＴ１ノックアウト（ＫＯ）細胞株を使用した、細胞ベースのげっ歯類免疫化および結合スクリーンに従って選択された、ラット抗ヒトＭＣＴ１モノクローナル抗体である。
【０４４８】
結合親和性およびＭＣＴ１交差反応性．結合平衡除外アッセイ（ＫｉｎＥｘＡ）分析は、ＭＣＴ１  Ａｂ１が６．３ｎＭのＫｄでヒトＭＣＴ１に結合することを明らかにした。ＭＣＴ１  Ａｂ１はまた、カニクイザル（ｃｙｎｏ）およびウサギＭＣＴ１と高度に交差反応性であるが、げっ歯類ＭＣＴ１とは交差反応性ではない（図１２Ａ〜図１２Ｄ）。
【０４４９】
結合特異性．ＨＥＫ−２９３  ＷＴ細胞は、ＲＴ−ＰＣＲによって測定したときに、ＭＣＴ１／ＣＤ１４７のみを発現し、他のＭＣＴは発現しない。本発明の抗体の結合特異性を測定するために、ＨＥＫ−２９３  ＭＣＴ１／ＣＤ１４７ダブルＫＯ細胞株が、陰性対照として使用され得る。さらに、このダブルＫＯ細胞株を、個々のトランスポーター（ＭＣＴ１、ＭＣＴ２、ＭＣＴ３、ＭＣＴ４、ＣＤ１４７）を発現するように操作した。フローサイトメトリーを使用して、これらの操作された細胞株は、Ｆｌａｇタグ付きタンパク質の検出によって各タンパク質の発現を、かつ表面染色によって抗ＭＣＴ１抗体の結合について測定され得る。
【０４５０】
活性化Ｔ細胞へのＭＣＴ１  Ａｂ１の結合．ＭＣＴ１  Ａｂ１は、ＭＣＴ１に特異的に結合し、３日目にヒトＣＤ３／ＣＤ２８活性化Ｔ細胞上の細胞表面発現の増加を確認したが（図１３Ｂ）、静止未感作Ｔ細胞上では低い染色を示したか、または全く示さなかった（図１３Ａ）。この結合は、図２に示される発現データを確認し、ｍＲＮＡ分析に基づく予測を確認する。
【０４５１】
結論
ＭＣＴ１  Ａｂ１は、非常に特異的なラット抗ヒトＭＣＴ１抗体である。
【０４５２】
実施例４：抗ＭＣＴ１抗体によるＭＣＴ１阻害のインビトロ特性化
乳酸輸送の阻害．ＦＬＩＰＲ  Ｔｅｔｒａ（登録商標）およびｐＨ感受性色素ＢＣＥＣＦを使用した細胞ベースの乳酸輸送アッセイ（参考文献６３〜６５）は、ＭＣＴ１  Ａｂ１が活性化Ｔ細胞において用量依存的に乳酸輸送を遮断することができることを証明した（Ｋｄ＝７．６ｎＭ）（図１４）。
【０４５３】
ブロモピルビン酸毒性の阻害．ＭＣＴ１は、抗癌毒素ブロモピルビン酸のインビトロ有効性に必要な唯一のトランスポーターであるため（参考文献６６）、１５０μＭの濃度でこの毒素を使用して、細胞のインビトロ死滅を測定するために第２の細胞ベースの機能アッセイが開発された。このアッセイでは、ＡＴＰｌｉｔｅを使用した細胞死からの防御によって測定したように、ブロモピルビン酸毒性の用量依存的阻害が観察された（Ｋｄ＝１．２ｎＭ）（図１５）。
【０４５４】
Ｔ細胞増殖、炎症性サイトカイン産生、および同種異系活性化の阻害．ＭＣＴ１  Ａｂ１は、ＣＤ３／ＣＤ２８刺激培養物において１．３ｎＭのＥＣ５０でＴ細胞増殖を阻害した（図１６）。本発明の抗ＭＣＴ１抗体または抗体フラグメントはまた、刺激後３日目の刺激されたＴ細胞において、対照と比較して、炎症性サイトカインの産生を阻害するその能力について試験され得る。ＣＤ３／ＣＤ２８活性化を伴うＭＣＴ１  Ａｂ１Ａ、ＭＣＴ１  Ａｂ１Ａは、ヒト混合リンパ球反応において同種異系活性化を５０〜６０％阻害した（例えば、図１７を参照）。
【０４５５】
実施例５：抗ＭＣＴ１抗体投与のインビボ免疫調節効果
致命的ＧＶＨＤからの防御．３週間の異種ＧＶＨＤ研究（ヒトＰＢＭＣ−＞ＮＳＧマウスを使用）は、１週間に１回の薬物または対照投与および群当たりｎ＝８マウスで実施され得る。様々な用量の抗ＭＣＴ１抗体について、致命的ＧＶＨＤからの防御が、試験期間ＭＣＴ１  Ａｂ１全体にわたって毎日観察され得る。絶対リンパ球数（ＡＬＣ）および炎症性サイトカインによって示されるＴ細胞集団は、２回の用量のＭＣＴ１  Ａｂ１抗ＭＣＴ１抗体または対照を投与した後、１４日目に測定され得る。血中ＣＤ４＋  Ｔ細胞増殖の低減および炎症性サイトカインの低減が観察される。これらのデータが低用量で高い効力を示す場合、いくつかの実施形態では、ＭＣＴ１  Ａｂ１、抗ＭＣＴ１抗体、または抗体フラグメントは、自己免疫疾患の治療薬として皮下投与され得る。
【０４５６】
尿中ケトンの増加．ケトン尿症は、３つの実験の異種ＧＶＨＤ研究の４日目に測定され得、用量依存性について分析され得る。ＭＣＴ１  Ａｂ１そのような薬物誘発性のケトンの増加は、臨床研究で使用するためのオンターゲットＭＣＴ１阻害の近位にある薬力学（ＰＤ）バイオマーカーを提供し得る。
【０４５７】
さらに、予備的なメタボロミクス研究結果は、ＭＣＴ１  Ａｂ１で処置されたヒトＴ細胞における酸化代謝および生存率の増加と共に、ＡＴＰおよびＮＡＤＨの生成の改善を示している。
【０４５８】
実施例６：抗ＭＣＴ１特異性抗体を用いたヒトＭＣＴ１の標的化の安全性
ＭＣＴ１は、ヒトＲＢＣ上では発現しない。ＭＣＴ１  Ａｂ１を使用して、対照条件および二次抗体のみの条件で、カニクイザルＲＢＣおよびヒトＲＢＣ（２０ドナー）を染色した。結果は、高レベルでＭＣＴ１を発現しないカニクイザルＲＢＣとは全く対照的に、ＭＣＴ１がヒトＲＢＣ上では発現しないことを明確に示している（図１８Ａ）。ＭＣＴ１はまた、ウサギＲＢＣ上で発現するが、ラットまたはビーグルＲＢＣ上では発現しない（図１８Ｂ）。
【０４５９】
ＭＣＴ１  Ａｂ１およびＡＺ３９６５は、ヒトＲＢＣ乳酸輸送に影響を及ぼさない。ＭＣＴ１  Ａｂ１およびＡＺ３９６５を使用して、１０ｍＭ乳酸の存在下でＦＬＩＰＲベースの輸送アッセイ（参考文献１、２）を使用して、精製されたヒトＲＢＣにおけるＭＣＴ１乳酸輸送を阻害した。乳酸輸送のレベルを、乳酸塩なしの対照条件および乳酸の存在下での阻害剤なしの条件と比較した。結果は、ヒトＲＢＣにおける乳酸輸送がＡＺ３９６５またはＭＣＴ１  Ａｂ１処置によって影響を受けないことを示し（図１９）、ＭＣＴ１もＭＣＴ２もＲＢＣにおける乳酸輸送に必要ではないことを確認している。
【０４６０】
条件付きＭＣＴ１  ＫＯマウス系統は、ＭＣＴ１阻害の限られた毒性を確認している。毒性学的懸念を評価するために、条件付きＭＣＴ１  ＫＯマウス系統が開発された。これらのマウスを、全ての組織においてタモキシフェンを使用して両方のＭＣＴ１対立遺伝子を欠失させるように生後に誘発し、欠失から４ヶ月後に深刻な有害所見は見られなかった。精子形成前に精子細胞変性が観察されたが、精子形成のこの段階は解糖系であり（参考文献８２）、実際には新しい種類の可逆性避妊薬の標的である（参考文献８３、８４）ため、この損失は可逆的であると見なされた。免疫学的に、マウスは、正常な造血を支持する免疫区画細胞性の変化を示さなかった。しかしながら、リンパ球増殖および活性化に対して観察されたＳＭおよびｍＡｂ阻害剤による影響と一致して、全ての組織においてＭＣＴ１が条件付きで欠失させたマウスは、ＯＴＩＩ（ＯＶＡ特異的トランスジェニックＴＣＲ）Ｔ細胞移入研究によって測定したときに抗原特異的免疫応答の有意な低減を示し、Ｔ細胞記憶への影響はほとんどなかった。したがって、これらの研究およびＭＣＴ１が欠損している個人（参考文献４９）で発生した限られた毒性の懸念は、特定の抗ＭＣＴ１  ｍＡｂが毒性を伴わないか、または限られた毒性を伴い、強力な免疫調節活性を有するという証拠を提供する。
【０４６１】
結論
抗ＭＣＴ１  ｍＡｂを用いたヒトにおけるＭＣＴ１の標的化は、安全である。既存のデータは、優れた安全性プロファイルを強く示している。ＭＣＴ１が欠損している成人ヒトは、健康であり（参考文献４９、６８）、ＭＣＴ１が欠損している個人において明らかな免疫不全は観察されておらず、かつ成人のＭＣＴ１が欠損しているヒトはさらに、神経学的に障害がなく（参考文献４９）、ＭＣＴ１の喪失後にヒトの脳に影響がないことを示唆している。ＭＣＴ１変異を有する個人において幅広い毒性がないことは、ＭＣＴの膨大な冗長性が原因である可能性が高い。
【０４６２】
加えて、我々のデータは、ＭＣＴ１がヒト赤血球（ＲＢＣ）上の主要な乳酸トランスポーターではなく、ＭＣＴ１が欠損しているヒトがＲＢＣ機能不全を示さないことを確認している。
【０４６３】
実施例７：抗ＭＣＴ１抗体を用いたＢ細胞阻害を介した狼瘡の治療
狼瘡患者における形質細胞上のＭＣＴ１の発現の大幅な増加．狼瘡患者および健康な患者からの形質細胞をＭＣＴ１  Ａｂ１で染色し、フローサイトメトリーで測定した。図２０は、健康なＢ細胞対狼瘡Ｂ細胞のＭＣＴ１発現の例示的なフローサイトメトリーデータを示し、罹患した細胞のＭＣＴ１発現の大幅な増加を明らかにしている。
【０４６４】
結論
狼瘡の病因に関与する主要な適応免疫細胞であるＢ細胞に関して、結果は、ＭＣＴ１が狼瘡患者における形質細胞上ではるかに高度に発現することを示している（図２０）。したがって、抗ＭＣＴ１抗体は、エフェクター細胞代謝を標的とするだけでなく、狼瘡患者の全ての病原性リンパ球でそうする可能性がある。
【０４６５】
実施例８：抗ＭＣＴ１抗体のヒト化および選択
ヒト化
抗ＭＣＴ１抗体ＭＣＴ１  Ａｂ１は、ラット／ヒトキメラである。ＭＣＴ１  Ａｂ１のヒト化は、免疫原性試験（別名「脱免疫化」）と連携して実施される（参考文献８７）。ヒト化および脱免疫化が組み合わされ、それにより機能、親和性、および特異性を維持しながら、低い免疫原性プロファイルをもたらす。Ｔ細胞エピトープの除去は、免疫原性のリスクを最小限に抑え、したがって患者が治療の全過程を受けることを可能にする。このアプローチは、結合ドメインの注意深い分析、適切なヒト配列セグメントの選択、およびインシリコツールの適用を組み合わせて、提案されたヒト化抗体配列を生成し、ヒト化抗体のパネルを産生する。３つの抗体を親和性に基づいて選択する。
【０４６６】
３つのｍＡｂの評価には、ＥｐｉＳｃｒｅｅｎ（商標）テクノロジーを使用した免疫原性評価が含まれ、これは、２０名を超える健康なボランティアドナーからの血液試料を使用した経時的な樹状細胞：Ｔ細胞共培養アッセイを使用する。陽性レスポンダーの割合として表される免疫原性を、既知の臨床免疫原性を有する様々な臨床グレードの生物製剤のデータベースに対してベンチマークする。目標は、１０％未満の陽性レスポンダーである。
【０４６７】
対照としてのＭＣＴ１  Ａｂ１と共に３つのｍＡｂを全ＩｇＧフォーマットに変換する。「サイレント」ＦｃドメインをＩｇＧ１上で選択する。ａｌａ／ａｌａなどの既知の抗体依存性細胞介在性細胞傷害（ＡＤＣＣ）サイレンシング変異をＦｃドメインに付加することは、ＭＣＴ１抗炎症効果を維持しながら潜在的な毒性を低減する。これらのｍＡｂを、各々２００ｍｇのスケールで発現および精製し、この材料を、単一のリード候補を選択するために使用する。
【０４６８】
親和性測定
細胞ベースのアッセイを、ＭＣＴ１（他のＭＣＴはなし）を発現するように操作されたＣＤ１４７−／−ＨＥＫ−２９３細胞と使用し、親和性を、Ｓａｐｉｄｙｎｅの免疫センサーベースの結合平衡除外分析（ＫｉｎＥｘａ）を使用して測定する。ＣＤ１４７は、ＭＣＴ１表面発現に影響を及ぼすことが知られているため（参考文献８８）、ＭＣＴ１  ｃＤＮＡも、ＣＤ１４７の有無にかかわらず、ＣＤ１４７−／−ＭＣＴ１−／−細胞に導入して、ＭＣＴ１  Ａｂ１結合親和性に対するこのパートナータンパク質の影響を推定する。
【０４６９】
インビトロでの機能試験
ＭＡｂを、標準的なＴ細胞活性化アッセイを使用してランク付けする。ＣＤ４＋  Ｔ細胞を、ヒトＰＢＭＣからの陰性選択によって単離し、次いで、３つのヒト化ＭＣＴ１  ｍＡｂまたはアイソタイプ対照の各々と氷上で３０分間インキュベートする。Ｔ細胞および抗体を、抗ＣＤ３／ＣＤ２８コーティング９６ウェル平底プレート上に置き、７２時間培養し、その後、Ｌｕｍｉｎｅｘによるサイトカイン産生の分析のために上清を回収する。別に、三重水素チミジン（３Ｈ）を培養物に８時間添加して、３Ｈの取り込みによる増殖を測定する。
【０４７０】
ｍＡｂを、固有のドナーを使用した３つの独立した実験で試験して、活性を確認する。各抗体を、半対数希釈（０．０１→３０μｇ／ｍＬ）で試験し、ＩＣ５０値を計算して、どれが最も強力であるか（最低濃度で最高の有効性）を決定する。
【０４７１】
非ヒト霊長類（ＮＨＰ）交差反応
カニクイザルにおける強力なＴ細胞増殖を促進する抗ＣＤ３クローンＳＰ３４およびＣＤ２８を使用して、関連する毒性種、カニクイザル（ｃｙｎｏ）における機能的活性の保持をスクリーニングするために、ヒトＴ細胞活性化アッセイと同一のアッセイを使用する。カニクイザルからの全血をＷｏｒｌｄ  Ｗｉｄｅ  Ｐｒｉｍａｔｅｓ（Ｆｌｏｒｉｄａ）から得て、Ｔ細胞を陰性選択によって単離する。Ｔ細胞を抗体とインキュベートし、ＣＤ３コーティングプレート上で７２時間培養する。サイトカイン産生を、非ヒト霊長類（ＮＨＰ）特異的Ｌｕｍｉｎｅｘアッセイで分析し、増殖を３Ｈの取り込みによって測定する。ＩＣ５０スコアをヒトと比較する。
【０４７２】
インビボでの機能テスト
異種ＧＶＨＤは、照射されたマウス宿主への異種ヒトＴ細胞の養子移入によって媒介される全身性疾患である。ＭＣＴ１  Ａｂ１を様々な用量で試験して、Ｔ細胞増殖の減少を決定し、異種ＧＶＨＤのＮＳＧモデルにおけるサイトカインレベルを低減する。３つのｍＡｂの各々を、ＭＣＴ１  Ａｂ１および対照ＩｇＧ１と共にさらに試験して、インビボ機能性を確認する。群当たり８匹のマウスを２回の反復実験で使用し、１０、３、１、または０．３ｍｐｋの各抗体を、ヒトＰＢＭＣ移入時ならびに移入後２日目および４日目に投与する。１４日目にマウスから採血し、絶対リンパ球数（ＡＬＣ）およびサイトカインレベルを、それぞれフローサイトメトリーおよびＬｕｍｉｎｅｘ分析によって決定する。各マウスの体重を追跡し、その初期体重の２０％超を失ったいかなるマウスも屠殺する。カプラン−マイヤー曲線を、各抗ＭＣＴ１抗体を対照と比較する統計ログランク検定を使用して、各実験に対して生成する。
【０４７３】
さらなる修飾
記載されるヒト化は、免疫原性を増加させることなく、結合、特異性、および効力を維持する場合が多い。これらの機能をさらに改善するために、ＣＤＲの周囲の復帰突然変異が導入されて、結合および効力を高めることができる。代替的に、ＣＤＲの近くの配列を維持し、突然変異により可変ドメイン内の任意の予測される免疫原性Ｔ細胞エピトープを排除することによって、抗体はヒト化され得る。抗体半減期を改善するために、ＦｃＲｎ結合突然変異が導入され得る。
【０４７４】
ヒト化抗体の特徴
本発明のいくつかのヒト化抗体は以下を有する：
ａ．ＭＣＴ１のみを発現するＨＥＫ−２９３細胞への結合によって示されるＭＣＴ１特異的結合。
ｂ．インビトロＣＤ３／ＣＤ２８アッセイにおける、ヒトＴ細胞と同様に９０％超の効力でのカニクイザルとの交差反応性。
ｃ．２０名を超える健康なボランティアドナーのうち、１０％未満の陽性リスポンダーの免疫原性。
ｄ．異種ＧＶＨＤモデルにおけるインビボ効力の確認。
【０４７５】
結論
ヒト化ｍＡｂ抗ＭＣＴ１  Ａｂ４を、上記の基準を満たすことによって、かつインビトロＣＤ３／ＣＤ２８アッセイを使用してＩＣ５０値をランク付けすることによって選択し、抗ＭＣＴ１  Ａｂ４は、高い効力および低い変動性を有する（実験内および実験間で）。ヒト化抗ＭＣＴ１抗体Ａｂ４ならびにＡｂ３およびＡｂ２（全てａｂ１に由来）のヒト化可変重および可変軽配列は、請求項に先行する配列表に含まれている。
【０４７６】
実施例９：親和性成熟
ヒト化抗体ＭＣＴ１  Ａｂ４を、ファージディスプレイ技術を使用して親和性成熟させる。
【０４７７】
抗体を一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フォーマット（可溶性またはＭ１３ファージに結合のいずれか）に変換し、ヒト化中に使用されるＭＣＴ１＋  ＨＥＫ−２９３細胞株への結合について試験して、可変ドメインが選択したフォーマットと互換性があることを確認し、ベースラインを確立する。このｓｃＦｖフォーマットを達成するために、可変重（ＶＨ）および軽（ＶＬ）ドメインをコードする遺伝子を、１５アミノ酸リンカーを介して結合する（参考文献８９）。次いで、出発抗体のＣＤＲ内の特定のアミノ酸を同定し、ランダム突然変異誘発の標的とする。加えて、特定のフレームワーク残基は、故意にまたはランダムに突然変異され得る。得られた変異体を使用して、Ｍ１３ファージの表面上に提示されるｓｃＦｖファージディスプレイライブラリ（約１×１０８メンバーを有する）を生成する。ＭＣＴ１＋細胞株を使用した３回の選択を、親和性成熟ｓｃＦｖを同定するために各回の抗原濃度を低減することによって実施する。
【０４７８】
親和性成熟ｓｃＦｖを配列決定し、１０個未満の固有のｓｃＦｖを選択し、可溶性発現およびＩＭＡＣ精製のためにスケールアップする。３つを親和性に基づいて選択し、サイレントＩｇＧフォーマットに変換する。
【０４７９】
３つを（ａ）インビトロＴ細胞アッセイにおけるＩＣ５０効力、および（ｂ）異種ＧＶＨＤモデルにおけるインビボ機能によってランク付けする。ランク付けは、効力および変動性の両方を組み込み、理想的な候補は、高い効力および低い変動性を有する。最高ランクのｍＡｂをＭＣＴ１  Ａｂ５．０１、他をＭＣＴ１  Ａｂ５．０２およびＭＣＴ１  Ａｂ５．０３として指定する。
【０４８０】
親和性成熟の追加の回が実施され得る。Ａｂ１の例示的なヒト化親和性成熟変異体の配列、すなわち、Ａｂ５〜Ａｂ６０は、本明細書の請求項に先行する配列表で見ることができる。
【０４８１】
結論
本発明の親和性成熟ヒト化抗体は、最適化された皮下投与のために、２ｍｇ／ｋｇ未満の効力を有し得る。低用量での有効性を決定ために、対象となる抗体ＭＣＴ１  Ａｂ１の異種ＧＶＨＤデータが使用され得る。
【０４８２】
実施例１０：抗ＭＣＴ１抗体の物理化学的評価
ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１を、好適な堅牢性、溶解度、および安定性について評価する。特に、（ａ）高温での物理化学的安定性、（ｂ）溶解度、ならびに（ｃ）典型的な製造プロセス設定で見られる物理的ストレスおよび低ｐＨストレスについて試験する。
【０４８３】
物理化学的安定性評価を、異なる緩衝液、ｐＨ、および賦形剤の４つの製剤で実施する。製剤の各々に高温（４０℃）で最大４週間ストレスを与え、次いで、（ａ）ダイマーまたは高分子量種に凝集する傾向（ＳＥＣ−ＨＰＬＣ、ｃＧＥ、および吸光度による）、ならびに（ｂ）異性化、脱アミド化、および／または酸化による任意の潜在的な分解（ｉＣＥによる電荷変異体の変化によって観察されるような）について評価する。
【０４８４】
皮下投与への適合性を評価するために、ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１を２つの別々の製剤において１５０ｍｇ／ｍＬで調製する。これらの試料を、４週間の安定性評価に使用したのと同じ試験パネルで分析し、後に上記の分析評価が続く。
【０４８５】
強制分解の物理的および化学的手段を使用したストレス研究は、複数回の凍結融解、撹拌、および低ｐＨ条件後のＭＣＴ１  Ａｂ５．０１の分解に対する感受性を評価する。低ｐＨ研究は、潜在的なウイルスの不活性化のために抗体製造中に典型的に使用される条件を模倣する。
【０４８６】
さらに、ＣＨＯ−ＤＧ４４  ＤＨＦＲミニプールを使用して２．５グラムの精製抗体を製造する。材料を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、ＳＥＣ−ＨＰＬＣ、ＬＡＬによる内毒素、およびフローサイトメトリーによる結合によって純度について分析する。
【０４８７】
いくつかの実施形態では、本発明の抗体は、以下を有し得る：
ａ．４週間の安定性試験中の最小（１０％未満）の凝集、純度の低下、および電荷変異体の変化
ｂ．強制分解ストレス研究における同じ特徴の最小（５％未満）の変化
ｃ．１００ｍｇ／ｍＬを超える溶解度
【０４８８】
実施例１１：細胞株の開発
チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株を使用したＭＣＴ１  Ａｂ５．０１のｃＧＭＰ商業的生産を可能にするために、高発現細胞株を開発する。
【０４８９】
コドン最適化、遺伝子合成、および発現ベクターへの挿入のための配列を生成する。合計６つの異なるコドン最適化変異体を調製し、パイロットタンパク質産生（１ｍｇ未満）によって確認する。宿主細胞株（ＣＨＯ−Ｍ）を、６つの抗体変異体配列を使用してトランスフェクトし、安定したプールを生成する。安定したプールのうちの１つを選択し、細胞株の生産性を高めるために再トランスフェクトする。２つのクローニングステップの後、１０〜１２の最高力価のクローンを拡大し、リサーチセルバンク（ＲＣＢ）として凍結保存する。流加培養でクローンのさらなる評価を実施し、力価および生産性に基づいて上位３つのクローンを選択する。クローンの安定性を確認するために、表現型の安定性研究を、最大６０世代の細胞株の連続継代によって実施し、抗体産生および生産性を監視する。上記のように、インビトロ効力およびインビボ機能を確認した後、最高力価のクローンを選択する。生成物の品質を確認するために、精製した抗体を、凝集および断片化（ＳＥＣ−ＨＰＬＣによる）ならびに電荷の不均一性（ｉｃＩＥＦによる）について評価する。ＲＰ−ＵＰＬＣ  ＭＳ／ＭＳを使用したペプチドマッピングを、予想されるアミノ酸配列を確認するために最高の発現体上で実施する。
【０４９０】
いくつかの実施形態では、本発明のクローンは、少なくとも１ｇ／Ｌを産生し得る。ｍＡｂ遺伝子のコピー数を増やすために、上位のクローンが再トランスフェクトされ得る。
【０４９１】
実施例１２：バイオマーカー発見および疾病関連性
薬力学（ＰＤ）バイオマーカー発見
ケトンは、ＰＤバイオマーカーとして使用され得る。これらの代謝産物は、（ａ）尿中または血中で容易に測定され、（ｂ）抗ＭＣＴ１抗体の投与によって誘発される可能性があり、かつ（ｃ）作用機構（ＭＯＡ）において妥当な役割を果たし、重要な免疫調節機能を単独で示す（参考文献６７）。ＰＤバイオマーカーをさらに詳しく説明するために、ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１をインビトロＴ／Ｂ細胞アッセイ（狼瘡に関与する両方の細胞型）およびインビボアッセイでさらに使用する。
【０４９２】
代謝産物．メタボロミクス研究を使用して、内因性化合物、生体異物およびその代謝産物を含む、約１２，０００の小分子実体の相対濃度プロファイル、ならびに１，１００を超える脂質種の完全な定量測定を評価する。血漿およびヒト細胞を、インビトロＴおよびＢ細胞アッセイからの細胞と共に、異種ＧＶＨＤモデル（ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１および対照で処置）から単離する。異種ＧＶＨＤの場合、１０名の健康なドナー、１つの投与量、および採血のための様々な時点で実験を行う。インビトロ試験の場合、１０名の健康なボランティア（抗ＣＤ３／ＣＤ２８もしくはＣＤ４０Ｌ／ＩＬ４でそれぞれ刺激）または１０名の狼瘡患者（さらなる刺激なし）からのヒトＴおよびＢ細胞を、ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１または対照で処置する。包括的メタボロミクスおよびリピドミクス技術を使用した質量分析ベースのメタボロミクスで分析を行って、各試料中に存在する分析物を同定および測定する。生化学的変化分析には、各アッセイで追加のＭＯＡを示す代謝経路分析が含まれ、新規の代謝産物は、後続のＭＳ分析を使用してデコンボリューションする。
【０４９３】
サイトカイン．キメラＭＣＴ１  Ａｂ１および対照で処置された白血球を比較して、例えば、ＩＦＮγおよびＩＬ１０を含む推定バイオマーカーとしていくつかのサイトカインを得るために、Ｌｕｍｉｎｅｘ研究からのデータが使用され得る。サイトカインバイオマーカーを決定するためにも、ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１が使用される。異種ＧＶＨＤモデルからの、ならびにインビトロＴおよびＢ細胞アッセイにおける、処置済み細胞集団と未処置細胞集団との間の違いを比較する。異種ＧＶＨＤ実験を５名の異なるドナーで行い、動物を少なくとも２つのＭＣＴ１  Ａｂ５．０１投与量で処置し、４つの異なる時点で血漿を収集する。臨床エンドポイント（移植片受容または拒絶反応の遅延）との相関をスコアリングし、追加のサイトカインバイオマーカーを同定する。
【０４９４】
転写産物．ＲＮＡ−ｓｅｑによるトランスクリプトミクスを使用して、異種ＧＶＨＤモデル（１０名の健康なドナー）における細胞のＭＣＴ１  Ａｂ５．０１処置、ならびに健康なボランティア（抗ＣＤ３／ＣＤ２８もしくはＣＤ４０Ｌ／ＩＬ−４のそれぞれで刺激）または狼瘡患者（さらなる刺激なし）を使用したインビトロＴおよびＢ細胞アッセイに関連付けられた、差次的に発現した遺伝子および経路を同定する。細胞ペレットを、ＲＮＡ単離、ポリ（Ａ）に富むライブラリ調製、およびＩｌｌｕｍｉｎａ計器上での両末端配列決定に供する。生データをｆａｓｔｑ形式で提供し、バイオインフォマティクスを、公的に利用可能な差次的発現のパイプライン（Ｒ／ＢｉｏｃｏｎｄｕｃｔｏｒからのＳＴＡＲアライナーおよびＤＥＳｅｑ２）を使用して実施する。差次的に発現した転写産物を、以下に記載されるように、インビボおよびインビトロ系の両方にわたって検証する。
【０４９５】
ヒトＴおよびＴ／Ｂ細胞アッセイ．上記のＴ細胞およびＰＢＭＣアッセイに加えて、ＴおよびＢ細胞への影響を、共培養系で測定する。Ｔ細胞を、ヒトＰＢＭＣからの陰性選択によって単離し、抗ＣＤ３／ＣＤ２８コーティング９６ウェル平底プレート上でＣＤ１９精製Ｂ細胞と５日間共培養する。上清を回収して、Ｉｇ産生（ＩｇＭおよび総ＩｇＧ）ならびにＢ細胞活性化マーカー（ＣＤ８０、ＣＤ８３、ＣＤ８６、クラスＩＩ  ＭＨＣ、および細胞内Ｉｇ）を測定する。ＭＣＴ１  ｍＡｂまたはアイソタイプ対照を、培養開始時に濃度範囲（０．１〜１０μｇ／ｍＬ）で添加する。Ｂ細胞活性化に対する直接的な影響を測定するために、ＣＤ１９精製Ｂ細胞を、アゴニストＣＤ４０Ｌ（１００ｎｇ／ｍＬのｍｅｇａＣＤ４０Ｌ、Ｅｎｚｏ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＩＬ−２（５０Ｕ／ｍＬ）、およびＩＬ−４（４００Ｕ／ｍＬ）と培養する。Ｂ細胞の増殖、活性化、およびＩｇ産生を５日間の期間にわたって評価する。ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１または対照を、培養開始時に添加する。
【０４９６】
ＰＤバイオマーカーの選択および確認
尿中ケトンは、強力な候補バイオマーカーであり得る。他の検体も検査し（血清／血漿／細胞）、分析して、変化する分子構成成分（例えば、アセトン、アセトアシディック酸（ａｃｅｔｏａｃｉｄｉｃ  ａｃｉｄ）、β−ヒドロキシ酪酸、および／または環状、飽和、もしくは不飽和ケトンなどのより広いクラス）を同定する。これは、ＲＮＡ−ｓｅｑおよび／またはフローもしくはＰｈｏｓＦｌｏｗサイトメトリーによって発見された、潜在的に対応する（または新しい）遺伝子／タンパク質の変化を伴うメタボロミクスセクションで達成される。ＰＤバイオマーカーを、病理学的エンドポイントとの相関に基づいて選択する。異種ＧＶＨＤからのデータはまた、ＮＳＧ−ＳＧＭ３マウス（再構成されたヒト幹細胞）および／またはヒトＭＣＴ１ノックインマウスなどの追加モデルを使用して確認され得る。
【０４９７】
ＳＧＭ３マウス（再構成幹細胞）．ＮＯＤ／ｓｃｉｄ／ＩＬ２受容体ガンマノックアウトマウス（ＮＳＧ）は、ヒト血液細胞の生着、特にＣＤ３４＋造血幹細胞を使用した長期生着のための標準的なマウス系統である。この生着は、はるかに少数の骨髄細胞を伴い、血液中に多数のヒトリンパ球を生成する。最近、ヒトサイトカイン遺伝子の群は、このモデルに組み込まれている（スチール因子、ＧＭ−ＣＳＦ、およびＩＬ−３、別名「ＳＧＭ３」）。ＳＧＭ３モデルは、高レベルのリンパ球および高レベルのヒト骨髄細胞の両方を支持し、ヒト血液細胞のより完全な生着を提供する。
【０４９８】
ヒトＭＣＴ１ノックイン（ＫＩ）マウス．ヒトＳＬＣ１６Ａ１（ＭＣＴ１）ｃＤＮＡがエクソン１でノックインされたＫＩ／ＫＯマウスモデルを生成し、終了停止は、マウス遺伝子の発現を妨げ、したがってマウスＳＬＣ１６Ａ１遺伝子のＫＯを作製する。このモデルは、ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１が内因性ＭＣＴ１標的に結合することを可能にするげっ歯類系統を提供する。このマウス系統を使用して、ＭＣＴ１  ＫＩマウスから、ヒト狼瘡で観察される表現型（Ｂ細胞活性化、抗ｄｓ  ＤＮＡ抗体、糸球体腎炎、インターフェロン−α遺伝子サイン）の多くに近似する（Ｂ６ｘＤＢＡ）Ｆ１マウスへのＣＤ８枯渇脾細胞の移入などの追加の狼瘡関連研究を実施する（参考文献９０、９１）。いくつかの実施形態では、本発明の抗ＭＣＴ１  ｍＡｂは、これらの狼瘡様表現型の多くを抑制し得る。
【０４９９】
ＭＣＴ１健康対照および患者試料のヒト狼瘡疾患関連
マウスおよびヒトのデータは、ＭＣＴ１の発現が慢性炎症の部位で増加していることを示唆する。例えば、狼瘡患者の末梢血におけるヒト形質細胞によるＭＣＴ１の細胞表面発現は、健康なドナーと比較して劇的に増加している（図２０）。ＭＣＴ１発現を、ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１および系統分析を使用して、狼瘡患者からの細胞で研究する。少なくとも３名の健康なボランティアおよび３名の狼瘡患者に対して研究を実施する。
【０５００】
健康な細胞および狼瘡細胞におけるＭＣＴ１発現の決定．健康なドナーおよび狼瘡患者からの血液白血球におけるＭＣＴ１の構成的発現を決定するために、Ｔ細胞、Ｂ細胞、およびＮＫ細胞を含む様々な免疫集団を、ＭＣＴ１（ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１）、ＣＤ４５、ＣＤ１６、ＣＤ５６、ＣＤ１４、ＣＤ１３８、ＣＤ８、ＣＤ１９、ＣＤ４、およびＣＤ３のフロー染色によって特徴付ける。抗Ｋｉ６７およびＣｅｌｌ  Ｔｒａｃｅ  Ｖｉｏｌｅｔを、細胞増殖のためにここで、かつ以下で使用する。
【０５０１】
Ｔ／Ｂ細胞増殖のＭＣＴ１  Ａｂ５．０１阻害の測定．ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１がＴおよびＢ細胞増殖を阻害するかどうかを決定するために、精製ＴまたはＢ細胞を、抗ＣＤ３／ＣＤ２８ビーズ＋ＩＬ−２、またはｍｅｇａＣＤ４０Ｌ＋ＩＬ−４＋ＩＬ−２でそれぞれ刺激する。Ｔ細胞にはＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＣＲ７、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ１２７、およびＣＤ２５を、Ｂ細胞にはＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３８、ＣＤ２７、ＩｇＤ、およびＩｇＧを使用して、様々な細胞亜集団を同定する。ＭＣＴ１上の細胞内エピトープに結合する市販の抗体を使用してＭＣＴ１を検出する（これらの抗体は、ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１と競合しない）。
【０５０２】
狼瘡におけるリンパ球増殖のＭＣＴ１  Ａｂ５．０１阻害．リンパ球増殖のＭＣＴ１  Ａｂ５．０１阻害を、狼瘡患者からのＰＢＭＣを使用して実施する。ＭＣＴ１（市販）、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＣＲ７、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ１２７、ＣＤ２５、およびＣＤ５６、または個別にＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３８、ＣＤ２７、およびＩｇＧの染色によって、様々なＴおよびＢ細胞集団を同定する。
【０５０３】
図２０に示されるデータを考慮すると、ＭＣＴ１発現は、疾患の重症度、タイプ、および／または進行段階に相関している可能性がある。追加の患者を評価し、追加の細胞型を研究する。
【０５０４】
実施例１３：カニクイザルにおける非ＧＬＰ毒性／ＰＫ／ＰＤ．
試験材料の製造．６グラムのＭＣＴ１  Ａｂ５．０１を産生し、材料を純度（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、ＳＥＣ−ＨＰＬＣ）および内毒素レベル（ＬＡＬ）について分析する。
【０５０５】
非ＧＬＰ毒性／ＰＫ／ＰＤ．表１に要約されるように、用量漸増標的媒介性薬物動態（ＴＭＤＤ）研究、続いて反復投与毒性、単回投与ＰＫ、およびＰＤ／ＴＤＡＲ研究を含む、カニクイザルにおける４段階の研究を実施する。精巣および網膜の生体分布および組織分析が実施され得る。
【表１】
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【０５０６】
研究１−標的媒介性薬物動態（ＴＭＤＤ）の用量漸増評価．ＭＣＴ１は、ヒト赤血球（ＲＢＣ）上には存在しないが、カニクイザルのＲＢＣ上には存在する（図１８Ａ）。したがって、２匹の動物に対して最初のカニクイザル研究を実施して、ＲＢＣシンクを克服するために必要な用量を決定し、ヒト血液ではなくカニクイザルにおける大きいＴＭＤＤ標的である、ＲＢＣの非存在下での正確なＰＫおよび毒性を推定する。抗体がＲＢＣに結合するＮＨＰ研究では、一過性貧血を引き起こすことは珍しくない（参考文献９２）。この貧血状態の間に、動物に再投与し、ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１の血清レベルを典型的な抗体の予測ＰＫと比較する。カニクイザルには漸増用量のＭＣＴ１  Ａｂ５．０１を投与し、免疫表現型決定／受容体占有分析は、後続のカニクイザル研究で全てのＭＣＴ１結合ＲＢＣを除去するための最適な用量を示唆している。この分析の時点を、以前の調査に基づいて選択する（参考文献９２）。これにより、ヒトにおける白血球へのＭＣＴ１  Ａｂ５．０１の結合に近似する用量の評価が可能になる。
【０５０７】
ＴＭＤＤ評価は、追加の研究のためにカニクイザルにおける合理的で達成可能な投薬を可能にする用量を特定する。ヒトＲＢＣではなくカニクイザル上のＭＣＴ１の異常な発現により、カニクイザルのＲＢＣ区画内の任意のＴＭＤＤの評価を、毒性およびＰＫ研究を実施する前に最初に実施する。これを、ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１の血清レベルを測定し、貧血を監視しながら、これらの値を典型的な抗体の予測ＰＫと比較することによって達成する。
【０５０８】
研究２−毒性．毒性試験のために、この薬物の推定最小薬理作用量（ＭＡＢＥＬ）よりも高い１ｍｐｋであると推定される低用量で、３匹の動物に対してパイロット２週間研究を実施する。これに続いて、毒性を測定するために４匹の動物に対して１０倍超高い用量を検査する。製剤化が可能にする場合、５０ｍｐｋなどのより高い用量を選択し得る。出血スケジュール：１日目投与前、投与後１０分、１時間、および２４時間、次の投与の直前、放出時、または剖検時。臨床測定および健康観察を毎日行い、毎週要約する。血液学、凝固、血清化学、インスリン、バイオマーカー、および受容体占有率を、標準的な時点で評価する。より高い用量で処置した動物を剖検し、組織病理学を使用して組織を分析する。
【０５０９】
カニクイザルにおけるＭＣＴ１  Ａｂ５．０１についてＮＯＡＥＬ（無毒性量）を決定する。ＮＯＡＥＬは、標準的な毒性学的基準に基づいているか、または毒性試験で観察されない場合、最高の処方用量レベルがＮＯＡＥＬとして機能する。いくつかの実施形態では、本発明による抗ＭＣＴ１抗体は、有意な毒性を引き起こさず、有意な炎症性サイトカイン放出を刺激しない。
【０５１０】
研究３−ＰＫ．ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１のクリアランスを決定するために、１日目投与前、投与後１０分、１時間、２４時間、および１６８時間、ならびに投与後３週間および４週間のＰＫ分析のために、１回の投与後の３匹のカニクイザルから血液試料を採取する。血清ＰＫをＥＬＩＳＡによって決定し、データを直線性、Ｃｍａｘ、ＡＵＣ、ＣＬ、Ｖｄ、および最終ｔ１／２決定について検査する。抗薬物抗体（ＡＤＡ）応答も評価する。サンドイッチＥＬＩＳＡ  ＡＤＡアッセイに必要な抗ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１抗体ツールは、記載されるようにＭＣＴ１  Ａｂ５．０１を使用して、カニクイザル（ＣＲＬ）の超免疫化後に生成される（参考文献９３）。投与前および投与後４週間からの血清を、適格なＡＤＡアッセイを使用して比較する。
【０５１１】
本発明の抗体は、約２０日のヒトＩｇＧに対する正常なＰＫを有し得る。ＰＫがより短い場合、既知のＦｃＲｎ結合突然変異を調査して、ｍＡｂ半減期を改善する。
【０５１２】
研究４−ＰＤ／ＴＤＡＲ．ＭＣＴ１  Ａｂ５．０１の免疫調節効果を評価するために、Ｔ細胞依存性抗体応答（ＴＤＡＲ）を２つの用量レベルで実施する。合計８匹の動物（各用量で雄２匹、雌２匹）に、単回用量のＭＣＴ１  Ａｂ５．０１を静脈内投与する。追加の４匹の動物（雄２匹、雌２匹）に陰性対照を投与する。０日目に動物をＫＬＨおよびＭＣＴ１  Ａｂ５．０１で免疫化する。研究開始前、ならびに７、１０、１４、２１、および２８日目に血液試料を採取し、ＥＬＩＳＡによって抗ＫＬＨ力価について分析する。いくつかの実施形態では、これらの力価は、本発明の抗ＭＣＴ１抗体によって２５〜９０％阻害される。
【０５１３】
本発明の抗体は、皮下（ＳＣ）投与を支持する効力を有し得る。ヒト白血球を有するＮＳＧモデルは、１ｍｐｋで効果を示し、ＳＣの目標は、２ｍｐｋ以下である。ＭＣＴ１  Ａｂ１は、異種ＧＶＨＤにおいて約１ｍｐｋのＭＡＢＥＬを有した。ＴＤＡＲを使用して、ヒトにおけるＭＣＴ１  Ａｂ５．０１に対してより正確なＭＡＢＥＬを提供する。
【０５１４】
実施例１４：前臨床および臨床プログラム計画
上記の実験は、ＭＯＡ、有効性、および安全性に関する広範なデータセットを提供する。
【０５１５】
狼瘡に対するものを含む抗ＭＣＴ１抗体を使用する治療薬の開発は、非ヒト霊長類およびヒト組織におけるＭＣＴ１  Ａｂ５．０１の効果に関するコンパイルされたデータに基づいている。健康なボランティアにおける第１相単回漸増投与試験および狼瘡患者における複数回漸増投与試験を実施する。第２の研究計画には、活動性（非腎臓）の全身性疾患を有する狼瘡患者における治療の臨床効果を評価するための複数回投与のプラセボ対照無作為化構成要素が含まれる。
【０５１６】
実施例１５：インビトロＭＣＴ１機能アッセイ：ブロモピルビン酸感受性
ＨＥＫ２９３Ｔ細胞を、抗ＭＣＴ１抗体または小分子ＭＣＴ１阻害剤で３７℃において１時間前処置する。次いで、細胞を細胞毒性試薬３−ブロモピルビン酸（３−ＢｒＰｙ）と共に、２５〜５００μＭの濃度で２〜６時間インキュベートする。死にかけている細胞からのＡＴＰを、９６ウェルプレートで市販の生存率キット（ＡＴＰｌｉｔｅ，ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を使用して定量化し、発光を使用して生存率を測定する。ＡＴＰ産生の低減は、抗体の機能性を示す。陽性対照抗体は、ヒト化前のマウスまたはキメラ抗体である。陰性対照細胞株は、ＭＣＴ１／ＣＤ１４７ダブルノックアウト２９３Ｔ細胞である。
【０５１７】
このアッセイを使用して、機能的、すなわち、アンタゴニスト抗ＭＣＴ１抗体を同定することができる。
【０５１８】
実施例１６：非ヒト霊長類におけるインビボ研究は、抗ＭＣＴ１抗体の治療有効性および安全性を裏付ける
ＭＣＴ１（ヌル変異体）を発現しないヒトは、報告によると主要な毒性を示さない。ＭＣＴ１の発現がないことに関連する唯一の既知の異常には、思春期前の患者でのみ観察され、高齢の対象では観察されない誘発ケトアシドーシスが含まれる。明白な免疫表現型は報告されていない。さらに、免疫に対するＭＣＴ１の効果に基づいて、これらの対象が自己免疫疾患または自己免疫の発症からのある程度の防御さえ有し得ることが発明者らによって理論化されている。
【０５１９】
ヒト療法のための抗ＭＣＴ１抗体の安全性および有効性をさらに裏付けるために、５０ｍｐｋの投与量の抗ヒトＭＣＴ１抗体をカニクイザルに投与した。この実施例で開示され、かつ本明細書で参照される図面によって裏付けられるように、３０日後に毒性は観察されなかった。
【０５２０】
図２２に示されるように、ＭＣＴ１が様々な機能に関与する一方で、リンパ系外の毒性を回避する冗長経路がある。対照的に、ＭＣＴ１は、リンパ系（Ｂ、Ｔ細胞）に唯一のトランスポーター経路を有し、これは、リンパ系におけるこのトランスポーター経路およびその関連する活性を遮断するためのアンタゴニスト抗ＭＣＴ１抗体の有効性を可能にする。
【０５２１】
図２３に示されるように、カニクイザル赤血球（ＲＢＣ）は、高レベルのＭＣＴ１を発現する。これに基づいて、カニクイザルにおけるアンタゴニスト抗ＭＣＴ１抗体の効果を試験し、特に抗ＭＣＴ１抗体投与後のＲＢＣに対するいかなる効果も調べた。また、カニクイザルが抗体の治療有効投与量に耐性を有することができるかどうかを判断した。
【０５２２】
図２４の結果から明らかなように、カニクイザルは、５０ｍｐｋでのＡｂ１の反復投与に耐性があり、投与後にＲＢＣ質量の初期低減があるが、これは短時間で解消する。これらの結果は、アンタゴニスト抗ＭＣＴ１抗体が霊長類において安全かつ有効であるはずであることを示す。
【０５２３】
図２５にさらに示されるように、カニクイザルにおいて観察されたＰＫデータは、予備的ではあるが、抗ＭＣＴ１抗体の十分な曝露があったことをさらに示し、結果は、５ｍｐｋ以上のＡｂ１用量率で、ＲＢＣシンクが飽和していることを示す。
【０５２４】
さらに、抗ＭＣＴ１抗体の投与の３０日後に、特に週４回の用量のアンタゴニスト抗ＭＣＴ１抗体（Ａｂ１）を５０ｍｐｋで投与した後に、良好な暴露で有意な生存中毒性は観察されなかったことがさらに観察された。特に、Ｈ＆Ｅを使用して評価した臓器の全て（心臓、筋肉、精巣、および眼）に有害な組織学的所見は見られなかった。
【０５２５】
実施例１７：マウスの条件付きＫＯ毒性学的評価
治療薬としてのアンタゴニスト抗ＭＣＴ１抗体の潜在的な安全性および有効性をさらに評価するために、マウスにおけるＭＣＴ１の条件付きノックアウトの効果を研究した。
【０５２６】
図２６に示されるように、タモキシフェン誘導性ＭＣＴ１ノックアウトマウスにおける標的組織（筋肉、精巣、および眼）を評価した。研究した臓器の全て（精巣を除く）は、遺伝子型に関連した変化はなく、正常であることが分かった。図２７に示されるように、ＭＣＴ１ノックアウトマウス動物は、より小さい精巣を有することを示し、顕微鏡的所見は、精子細胞変性を示している。
【０５２７】
図２８にさらに示されるように、ＭＣＴ１  ＫＯ表現型は、対照のハウスキーパー遺伝子（ＨＰＲＴ）の発現と比べて、アッセイされた様々な標的組織、すなわち、胸腺、脾臓、リンパ節、精巣、および網膜におけるＭＣＴ１発現の強固なタモキシフェン誘導性ノックダウンを付与することを示す。図２９はさらに、ノックアウトマウスで観察された精巣における表現型の変化を示す。示されているように、全てのＭＣＴ１ノックアウトマウスの精巣において精子細胞変性が観察された（後期精子細胞および精母細胞の欠如、尿細管細胞性の低下、空胞化、ならびに細胞残屑）。図３０はさらに、ＷＴマウスおよびＭＣＴ１  ＫＯマウスにおける精巣の組織構造を比較し、野生型と比べて、ノックアウトマウスにおいて精子細胞変性の増加を示す。
【０５２８】
実施例１８：以前に報告された抗ＭＣＴ１抗体は、拮抗活性を示さない
ＭＣＴ１に結合するとされる市販の抗体が多くある。出願者のこれらの抗体のスクリーニングに基づいて、細胞表面に発現したＭＣＴ１に結合するものはなく、さらに発明者らの知る限りでは、これらの市販の抗ＭＣＴ１抗体のいずれも、ＭＣＴ１の効果を調節または遮断しない。
【０５２９】
図３１は、異なる市販の抗ＭＣＴ１抗体を用いたこれらの結果を要約する。図は、全ての市販のＡｂｃａｍ抗ＭＣＴ１抗体（Ｍａｂおよびポリクローナル）を使用したＭＦＩ（上、フローサイトメトリー、生細胞の細胞結合）およびブロモピルビン酸機能アッセイの結果（下、ＲＬＵ）を含む。（カタログ番号は、図中に列挙されている）。
【０５３０】
これらの結果から分かるように、これらの市販の抗ＭＣＴ１抗体は、ＭＣＴ１発現細胞に結合せず、結果として、ＭＣＴ１関連活性に対する効果を誘発しない。対照的に、これらの同じアッセイにおける本発明の抗ＭＣＴ１抗体は、ＭＣＴ１細胞表面発現ＭＣＴ１（異なる細胞上）に結合し、ＭＣＴ１のトランスポーター機能（すなわち、ブロモピルビン酸を輸送するその能力）を強力に遮断する。同様の結果（図示せず）は、本発明者らによって現在まで試験されてきた他の全ての市販の抗ＭＣＴ１抗体について観察されている。
【０５３１】
実施例１９：例示的な抗ＭＣＴ１抗体（Ａｂ１）のヒト化
上記の実施例で使用したラット抗ＭＣＴ１抗体の可変重鎖および軽鎖ポリペプチド（Ａｂ１またはＩＮＸ３１０）を、ヒト療法用のヒト化抗ＭＣＴ１抗体を提供するために、既知の方法を使用してヒト化した。例示的なヒト化重鎖および軽鎖は、以下に示される。示された配列では、可変重鎖または軽鎖ポリペプチドには下線が引かれ、それに関連する定常領域（ＩｇＧ１定常領域）は太字である。例示的な配列は、Ｃ１ｑおよびＦｃＲ結合を排除する突然変異（Ｅ２６９Ｒ／Ｋ３２２Ａ突然変異）を含むように修飾された、ＦｃサイレントヒトＩｇＧ１／カッパ主鎖（ヒトＩｇＧ１）（Ｕｎｉｐｒｏｔ  Ｐ０１８５７）を含む。可変領域には下線が引かれ、定常領域は太字である。シグナル配列は、示された例示的なヒト化軽鎖および重鎖配列には示されていない。
ヒト化重鎖
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【０５３２】
本発明による例示的なヒト化抗ＭＣＴ１抗体が、以下にさらに記載される。例示的なヒト化抗体は、共通の軽鎖を含む。配列の太字の残基は、予測されたＣＤＲである（ＩＭＧＴ  ＤｏｍａｉｎＧａｐＡｌｉｇｎを使用して同定）。
ラット抗ＭＣＴ１抗体（Ａｂ１またはＩＮＸ３１０）
＞  Ｒａｔ  Ａｎｔｉ−ＭＣＴ１  Ａｂ  ＿ＶＨ
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ヒト化抗ＭＣＴ１抗体１（Ａｂ２またはＩＮＸ３５２）
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ヒト化抗ＭＣＴ１抗体２（Ａｂ３またはＩＮＸ３５６）
＞  Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ  Ａｎｔｉ−ＭＣＴ１  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ２＿ＶＨ
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＞  Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ  Ａｎｔｉ−ＭＣＴ１  ａｎｔｉｂｏｄｙ  １，  ２  ａｎｄ  ３  ＿ＶＬ
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ヒト化抗ＭＣＴ１抗体３（Ａｂ４またはＩＮＸ３６４）
＞  Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ  Ａｎｔｉ−ＭＣＴ１  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ３  ＿ＶＨ
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ＬＶＴＶＳＳ
＞  Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ  Ａｎｔｉ−ＭＣＴ１  ａｎｔｉｂｏｄｙ  １，  ２  ａｎｄ  ３  ＿ＶＬ
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サイレントＩｇＧ１（定常）
●Ｅ２６９Ｒ／Ｋ３２２Ａ
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【０５３３】
実施例２０：親和性成熟、ヒト化抗ＭＣＴ１抗体
上記の実施例で開示されたラット抗ＭＣＴ１抗体の可変重鎖および軽鎖ポリペプチド（Ａｂ１またはＩＮＸ３１０）を、ヒト療法用のヒト化抗ＭＣＴ１抗体を提供するために、ヒト化し、親和性成熟させた。これらの抗体は、高い親和性でヒトＭＣＴ１に結合し、ヒト対象において実質的に非免疫原性であるはずである。これらのヒト化され親和性成熟した抗ＭＣＴ１抗体（Ａｂ５〜Ａｂ６０）のＶＨおよびＶＬ配列は、本出願の請求項の直前にある配列表に含まれている。Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）と同様に、これらの抗体は、インビトロまたはインビボでＭＣＴ１の効果に拮抗するために使用され得、それらの親和性の増加に基づいて、それらは、Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）よりも強力であるはずである。図３２は、ブロモピルビン酸機能アッセイ、すなわち、ＩＮＸ４２０、ＩＮＸ３５６、ＩＮＸ３６４、ＩＮＸ４４４、およびＩＮＸ４５３における、本発明による異なる抗ＭＣＴ１抗体の拮抗活性を比較する実験結果を含む。
【０５３４】
図３３および図３４は、本明細書に開示される異なる抗ＭＣＴ１抗体の可変重および可変軽領域の配列を比較するアライメントを含む。特に、これらの図は、Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）、それに由来する３つのヒト化抗体、すなわち、Ａｂ２（ＩＮＸ３５２）、Ａｂ３（ＩＮＸ３５６）、およびＡｂ４（ＩＮＸ３６４）のＶＨおよびＶＬ配列を、Ａｂ１（Ａｂ２３（ＩＮＸ４２０）、Ａｂ４７（ＩＮＸ４４４）、およびＡｂ５６（ＩＮＸ４５３））由来のヒト化親和性成熟抗ＭＣＴ１抗体にそれぞれ整列させた。これらのアライメントのボックスで囲まれた領域は、フレームワーク残基の配列の違いを示す。ＣＤＲは太字であり、親抗体Ａｂ１およびそのヒト化変異体、すなわち、Ａｂ２（ＩＮＸ３５２）、Ａｂ３（ＩＮＸ３５６）、およびＡｂ４（ＩＮＸ３６４）のＣＤＲと比較した、これらの親和性成熟抗体のＣＤＲ変化を示す。
【０５３５】
実施例２１：他の高親和性、機能的抗ＭＣＴ１抗体の単離
追加の抗ヒトＭＣＴ１抗体をニワトリにおいて産生した。機能的抗ヒトＭＣＴ１結合抗体の産生を潜在的に誘発するために、ニワトリを、それらの表面上にヒトＭＣＴ１タンパク質を発現する組換え細胞で免疫化した。これらの動物から血清を得て、抗ＭＣＴ１結合抗体をスクリーニングした。次いで、前述の抗体をコードする核酸をクローン化し、宿主細胞で発現した。そのような方法は、請求項に先行する配列表に含まれる配列を有する抗ヒトＭＣＴ１抗体Ａｂ６１〜Ａｂ９５を含む、１００を超える推定ヒトＭＣＴ１結合抗体の単離をもたらした。
【０５３６】
これらの抗体をさらにスクリーニングして、ＭＣＴ１を発現する２９３細胞に特異的に結合する抗体を同定した。図３５Ａは、ＭＣＴ＋  ２９３細胞への抗ＭＣＴ１抗体の結合を示し、その配列の一部は、請求項に先行する配列表に含まれている。これらの抗体は、配列表において抗ＭＣＴ１抗体Ａｂ６１〜Ａｂ９５として同定され、かつ代替命名法によって同定され（「ＬＭ−ＸＸＸ」または「ＭＣＴ」指定）、その一部は、図３５Ａおよび図３５Ｂで同定される。図３５Ａの結合結果から、これらの抗体の多くがＭＣＴ１を発現する２９３細胞に、Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）に匹敵する親和性で結合することが分かる。
【０５３７】
２９３細胞の表面上に発現したヒトＭＣＴ１に特異的に結合することが実証された同じ抗ＭＣＴ１抗体を、以前に記載されたブロモピルビン酸毒素輸送アッセイにおけるＭＣＴ１の効果を遮断するか、またはそれに拮抗するＭＣＴ１結合抗体をスクリーニングする機能アッセイでさらにスクリーニングした。図３５Ｂにさらに示されるように、これらの機能スクリーニング方法は、これらの抗ヒトＭＣＴ１抗体の多くが、このアッセイで機能的であること、すなわち、それらがＡＴＰ−ｌｉｔｅによって測定されるように細胞死からの防御を提供したことを実証した。これらの追加の抗ヒトＭＣＴ１抗体は、Ａｂ１の配列、ならびに本明細書においてＡｂ２〜Ａｂ６０として同定される、それに由来するヒト化および親和性成熟変異体と比較して配列多様性を有し、すなわち、これらの追加の抗ＭＣＴ１抗体のいずれも、Ａｂ１〜Ａｂ６０と同じＣＤＲを含まない。
【０５３８】
Ａｂ６１〜Ａｂ９５と称されるこれらの３５個の他の抗ヒトＭＣＴ１抗体の配列は、本出願の請求項に先行する配列表で見ることができる。配列表には、重および軽ＣＤＲ、可変重鎖および軽鎖ポリペプチド、重および軽ポリペプチドのアミノ酸配列が含まれ、さらに、これらの３５個の抗ヒトＭＣＴ１抗体の各々をコードする核酸の配列が含まれる。ヒトＭＣＴ１への、Ａｂ１に匹敵するそれらの結合親和性およびブロモピルビン酸毒素アッセイにおけるそれらの機能的活性に基づいて、これらの抗体の多くが、例えば、ヒト化および／または親和性成熟によって、他の治療的抗ＭＣＴ１抗体を開発するために使用され得ると予想される。
【０５３９】
得られた抗体は、高い親和性でヒトＭＣＴ１に結合し、さらに、ヒト対象において実質的に非免疫原性であるべきである。Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）およびそれに由来するヒト化または親和性成熟変異体（Ａｂ２〜Ａｂ６０）と同様に、Ａｂ６１〜Ａｂ９５に由来するヒト化および／または親和性成熟抗ＭＣＴ１抗体は、潜在的に、インビトロまたはインビボでＭＣＴ１の効果に拮抗するために使用され得、潜在的に、炎症、自己免疫、およびアレルギー状態、癌、移植およびＧＶＨＤ、ならびにＴＲ１細胞の増加および／もしくはエフェクターＴ細胞の減少、またはＭＣＴ１活性の減少が治療上望ましい他の状態などの疾患の治療で使用され得る。
【０５４０】
さらに、本明細書に開示されるヒト化またはヒト化親和性成熟重および軽ポリペプチドの異なる組み合わせが組み合わされて、他の機能的（アンタゴニスト）抗ＭＣＴ１抗体を産生し得ることが企図される。また、本明細書に開示される例示的なヒト化またはヒト化親和性成熟重および軽ポリペプチドのいずれも、さらにヒト化され得るか、または他のヒト化可変重鎖および軽鎖ポリペプチドを含む他のヒト化抗ＭＣＴ１抗体が、ヒト療法に適した他のヒト化抗ＭＣＴ１抗体を得るための既知のヒト化方法によって、Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）、またはＡｂ２〜Ａｂ９５のいずれかに由来し得る。また、これらのヒト化配列は、結合親和性が増加した抗ＭＣＴ１抗体を得るために、さらに親和性成熟し得る。さらに、これらのヒト化または親和性成熟抗体ポリペプチドは、他の周知の多重特異性抗体フォーマットの中で、二重特異性抗体、ＢｓＡｂｓ、二重可変ドメイン−ＩｇＧ（ＤＶＤ−Ｉｇ）ダイアボディなどの異なるフォーマットであり得る、多重特異性結合ポリペプチドに組み込まれ得る。
【０５４１】
これらのヒト化重および軽ポリペプチドはさらに、異なるヒトＩｇＧ定常ドメイン、例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４定常ドメインまたはそのドメインもしくはフラグメントと関連している可能性がある。これらの定常領域は、必要に応じて、ＦｃＲ結合、例えばＦｃγＲ（ＩｇＧ）、ＦｃεＲＩ（ＩｇＥ）、ＦｃαＲＩ（ＩｇＡ）、ＦｃμＲ（ＩｇＭ）、およびＦｃδＲ（ＩｇＤ）結合、補体結合、ＡＤＣＣ活性、ＣＤＣ活性、ＦｃＲＮ結合などの少なくとも１つのエフェクター機能を損なうかまたは増強するように修飾され得る。例示的な「エフェクター機能」としては、Ｃｌｑ結合、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞介在性細胞傷害（ＡＤＣＣ）；食作用；細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体；ＢＣＲ）の下方制御などが挙げられるが、これらに限定されない。そのようなエフェクター機能は概して、Ｆｃ領域が結合ドメイン（例えば、抗体可変ドメイン）と組み合わされることを必要とし、そのような抗体エフェクター機能を評価するための当該技術分野において既知の様々なアッセイを使用して評価され得る。
【０５４２】
ヒトまたは動物療法で使用するためのヒト化抗ＭＣＴ１抗体を産生するために使用され得る、Ａｂ１または本明細書に開示される他の抗ＭＣＴ１抗体に由来する代替のヒト化重および軽ポリペプチドを得るために、他のヒト化または親和性成熟法が使用され得るため、実証されるヒト化およびヒト化親和性成熟配列は、例示的であることが意図される。本発明は特に、Ａｂ１〜Ａｂ９５のいずれかと同じＣＤＲを含む任意の抗ＭＣＴ１抗体を包含する。
【０５４３】
実施例２２：本発明による異なる抗ＭＣＴ１抗体の効力
本発明による２つの抗ＭＣＴ１抗体、すなわち、ＩＮＸ４２０およびＩＮＸ３１０の効力を、異なる抗体濃度でのＣＤ４＋およびＣＤ８＋  Ｔ細胞の増殖に対するそのような抗体の効果を決定するアッセイで比較した。図３６Ａ〜図３６Ｄに示されるように、両方の抗体は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋  Ｔ細胞の増殖を阻害した。これらの２つの抗体のうち、親和性成熟抗体ＩＮＸ４２０は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋  Ｔ細胞の増殖をより強力に阻害し、これらの機能アッセイで１桁のｎＭ効力を有する。
【０５４４】
これらの結果は、親抗体Ａｂ１と同様に、Ａｂ１の親和性成熟によって得られたこの抗ＭＣＴ１抗体が、本発明による別の抗ＭＣＴ１抗体（Ａｂ１）と比較して、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋  Ｔ細胞の増殖を強力に抑制することを実証する。
【０５４５】
実施例２３：Ｔｒ１細胞に対する抗ＭＣＴ１抗体のインビトロ効果
本発明による抗ＭＣＴ１抗体を、Ｔｒ１細胞に対するそれらの効果を評価するためにインビトロアッセイでさらに評価した。Ｔｒ１細胞を生成するために使用される方法およびＴｒ１細胞を使用するアッセイが、以下に記載される。
【０５４６】
Ｔｒ１細胞およびＴｒ１機能アッセイのインビトロ生成
Ｔｒ１細胞を、新鮮な総ｈＰＢＭＣのＣＤ３／ＣＤ２８刺激（＋ＩＮＸ４２０）を使用してインビトロで生成し、これらの細胞を、以下に記載の方法および材料を使用して、抗ＭＣＴ１抗体を用いた機能アッセイにおいてインビトロで試験する。
試薬
１．９６ウェル組織培養平底プレート（Ｆａｌｃｏｎ、カタログ番号３５３０７２）
２．５０ｍＬ試薬リザーバ（Ｃｏｓｔａｒ、カタログ番号４８７０）
３．ＰＢＳ（Ｃｏｒｎｉｎｇ、カタログ番号２１−０４０−ＣＶ）
４．培地−ＲＰＭＩ１６４０（ＨｙＣｌｏｎｅ、カタログ番号ＳＨ３００９６．０１）。１０％ヒト血清、１×ペニシリン／ストレプトマイシン／グルタミン、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ
５．Ｊｕｒｋａｔの培地−ＲＰＭＩ１６４０（ＨｙＣｌｏｎｅ、カタログ番号ＳＨ３００９６．０１）。１０％ＦＢＳ、１×ペニシリン／ストレプトマイシン／グルタイン、１０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ
６．抗ＣＤ３−クローンＯＫＴ３（Ｂｉｏ  Ｘ  Ｃｅｌｌ、カタログ番号ＢＥ０００１−２）
７．抗ＣＤ２８−クローン１５Ｅ８（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ、カタログ番号１３０−０９３−３７５）
８．アフェレーシスコーン血液
９．Ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ  １０７７
１０．ＩＮＸ４２０ロット１７０６９−８１２９２６９
１１．Ｖｅｒｓｅｎｅ  １×（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１５０４０−０６６）
【表２】
2021509822.tif 000004
−１／０日目：抗ＣＤ３を備えたコートプレート
１．ストックＯＫＴ３をＰＢＳ中で１ｕｇ／ｍＬに希釈する
２．１００ｕＬの１ｕｇ／ｍＬ  ＯＫＴ３を９６ウェル平底プレートの各ウェルに添加する
３．４℃で一晩または３７Ｃで１時間インキュベートする
０日目：新鮮なヒトＰＢＭＣの刺激
１．コア血液から新鮮なＰＢＭＣを調製する
●滅菌状態で５０ｍＬファルコンに血液を移し、ＰＢＳで３０ｍＬに希釈する
●希釈した血液の下に１３ｍＬのＨｉｓｔｏｐａｑｕｅ  １０７７をゆっくりと重ねる
●穏やかな加速（１／５または３／９）で室温において２０分間８５０×ｇで遠心分離し、ブレーキをオフにする。
●血漿／フィコール界面から単核細胞を回収し、５０ｍＬのＰＢＳ中に再懸濁し、４００×ｇで５分間遠心分離する。
●細胞を数え（１：１０希釈）、２００Ｋ／１００ｕＬ（２＊１０６／ｍＬ）でｈＰＢＭＣを調製する
２．ＲＰＭＩ中でＯＫＴ３コーティングプレートを２回洗浄する
●プレートからＰＢＳを除去する
●すぐに２００ｕＬのＲＰＭＩをウェルに添加する
●培地を除去し、２００ｕＬのＲＰＭＩをウェルに添加する
３．ＯＫＴ３コーティングプレートを取り、残りのＲＰＭＩを除去する。滅菌ガーゼで覆われたペーパータオルでプレートを拭き取ることによって、いかなる残っている培地も除去されることを確実にする
４．ＲＰＭＩにおいて２倍で全ての試薬およびｍＡｂを調製し、１ウェル当たり１００ｕＬを添加する
５．１００ｕＬ中２００ｋで細胞を添加し、３７℃／５％ＣＯ２で最大７日間インキュベートする。
細胞を７日より長く培養する場合は、１０×のｍＡｂ（ＣＤ２８、ＩＮＸ４２０）を含む２０ｕＬの培地で培養物を補充する
【０５４７】
Ｔｒ１表現型決定
本発明による抗ＭＣＴ１抗体で処置した動物の血清に由来するＴｒ１細胞を、以下のように表現型決定する：
材料および方法：
−全血の１００を分析のために使用した
−染色−１洗浄プロトコルを使用して血液を染色して、以下のＡｂパネルを用いた絶対細胞数を可能にし、続いて溶解緩衝液（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、＃３４９２０２）を用いた。全血を１０×抗体（以下に示す）と共にインキュベートし、３０分後、製造元の指示に従って大量の１×溶解緩衝液（少なくとも６回）で血液を溶解した。または、血液を最初にＡＣＫで溶解し（１０分）、ＰＢＳで洗浄し、以下の表に記載されるとおりに抗体ミックスで染色した。
以下のフローパネル（血液ＡＬＣについて）
【表３】
2021509822.tif 000005
【表４】
2021509822.tif 000006
【０５４８】
以下に記載のフロー抗体を、推定上のＴｒ１細胞の表面上に発現するマーカーの表面特性化にさらに使用した。
【表５】
2021509822.tif 000007
【０５４９】
以下に記載のフロー抗体を、推定上のＴｒ１細胞によって細胞内に発現するマーカーの細胞内特性化にさらに使用した。
【表６】
2021509822.tif 000008
７日目：ＦＡＣＳおよび抑制アッセイのために細胞を回収する
１．２００ｕＬの培養培地（プールウェル）から細胞を回収する
２．１ウェル毎に１５０ｕＬの滅菌Ｖｅｒｓｅｎｅを添加することによって、プレートから残った細胞を分離し、３７℃で１０分間インキュベートし、以前に回収した培地と組み合わせる
３．細胞を、振とうしながら（４００ｒｐｍ）、５０ｕＬの抗体ミックス（Ｔｒ１純度チェックのパネル）で室温において３０分間染色するか、または抑制アッセイに進む
【０５５０】
生成されたＴｒ１細胞を使用するインビトロアッセイ
本発明による抗ＭＣＴ１抗体の効果は、アッセイ、例えば、以下に記載のアッセイで上記のように生成されたＴ１ｒ１細胞を使用するインビトロアッセイで評価され得る。
１．生存率
２．ＴＩＧＩＴ＋ＰＤ１＋セルの数および％
３．ヒトＣＤ３＋（またはＴＩＧＩＴ＋ＰＤ１＋）細胞を用いた抑制アッセイ
４．６／７日目：新鮮なヒトＰＢＭＣまたはＴ細胞（Ｊｕｒｋａｔを含む）の増殖の抑制
【０５５１】
前述のアッセイで使用され得る例示的な試薬および材料が以下に記載される。
試薬および材料
●ＣＤ３／ＣＤ２８  Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号１１１３１Ｄ）
●Ｃｅｌｌ  Ｔｒａｃｅ  Ｖｉｏｌｅｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ＃Ｃ３４５５７）
●レスポンダー細胞：ＰＢＭＣ、Ｔ細胞、Ｊｕｒｋａｔ細胞
【表７】
2021509822.tif 000009
【０５５２】
結果
図３７Ａ〜図３７Ｄの結果によって示されるように、ＣＤ３／ＣＤ２８刺激後の例示的な抗ＭＣＴ１抗体、ＩＮＸ４２０によるＰＭＢＣのインビトロ処置は、ＰＤ１＋ＴＩＧＩＴ＋細胞の数の実質的な増加をもたらした。また、観察された結果は、同じインビトロアッセイで小分子ＭＣＴ１阻害剤によって誘発された結果に匹敵した。
【０５５３】
図３８の結果によってさらに示されるように、これらのインビトロ実験は、同じ例示的な抗ＭＣＴ１抗体、ＩＮＸ４２０を用いた処置の結果として産生されたＰＤ１＋ＴＩＧＩＩＴ＋Ｔｒ１細胞が、ＰＭＢＣの増殖を強力に抑制することをさらに明らかにした。
【０５５４】
実験が抗ＭＣＴ１抗体およびＩＬ−１０アンタゴニストの存在下でのＰＭＢＣの増殖を評価した図３９のインビトロ実験結果によってさらに示されるように、ＩＬ−１０アンタゴニスト（例えば、抗ＩＬ１０ＲＢ）によるＩＬ−１０シグナル伝達の遮断が、抗ＭＣＴ１抗体を用いた処置から生じたＰＭＢＣ増殖のＴｒ１媒介性抑制を妨害しなかったことが実証された。
【０５５５】
上記の実験結果は、臨床的に重要であり、これは、Ｔｒ１細胞の頻度／機能の欠陥およびその数が、多くの自己免疫および炎症性疾患（前臨床および臨床モデルにおける）で実証されており、ＩＬ−１０を産生するＴｒ１細胞が疾患の防御に関連すること、ならびにインビボでＴｒ１細胞ブーストをもたらす薬物が、Ｔ細胞媒介性疾患、例えば、自己免疫および炎症状態ならびに同種異系移植の治療／予防において潜在的な用途を有することを示すためである。
【０５５６】
実施例２４：異種ＧｖＨＤアッセイにおける抗ＭＣＴ１抗体の効果
本発明による例示的な抗ＭＣＴ１抗体、すなわち、ＩＮＸ４２０、ＩＮＸ４１３、およびＩＮＸ３１０を、ＧＶＨＤのインビボモデル、すなわち、異種ＧｖＨＤモデルでさらに評価した。
【０５５７】
異種ＧｖＨＤモデル：
このＧｖＨＤ動物モデルでは、雄のＮＳＧマウスを亜致死照射（２５０ｒａｄ）で処置し、その後、これらのマウスに２．５×１０６の新鮮なヒトＰＢＭＣを投与した（０日目）。抗ヒトＭＣＴ１の最初の用量を細胞と組み合わせ、静脈内注射する。フォローアップ処置スケジュールは、毎週である（７、１４、および２１日目、腹腔内）。抗ＭＣＴ１（ＩＮＸ４２０またはその他）およびヒトＩｇＧ１対照の両方に１０ｍｇ／Ｋｇで（または指定のとおり）投与する。
【０５５８】
以前に（０、７、１４、２１日目）抗ＭＣＴ１で処理された再攻撃接種実験の場合、ＮＳＧマウスに、同じドナーの以前に凍結させたヒトＰＢＭＣの２．５×１０６の２回目の投与を投与する（４２日目）。これらのマウスの生存率および体重減少を、追加の抗体処置なしで監視し、同じドナーＰＢＭＣを投与したＮＳＧマウスの新しいコホートと比較する。
【０５５９】
絶対リンパ球数（ＡＬＣ）．
１００ｕＬの全血を分析に使用する：染色−１洗浄プロトコルを使用して血液を染色して、以下のＡｂパネルを用いた絶対細胞数を可能にし、続いて溶解緩衝液（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、＃３４９２０２）を用いた。全血を１０×抗体（以下に示す）と共にインキュベートし、３０分後、製造元の指示に従って大量の１×溶解緩衝液（少なくとも６回）で血液を溶解した。または、血液を最初にＡＣＫで溶解し（１０分）、ＰＢＳで洗浄し、以下の表に記載されるとおりに抗体ミックスで染色した。
【０５６０】
エクスビボ抑制実験
ヒト化ＮＳＧマウス（抗ＭＣＴ１で処置）を６７日目または指定された他の日に屠殺し、脾臓から単一細胞懸濁液を調製し、続いて、ｈＣＤ３＋細胞のビーズベースの濃縮を行った。単離した細胞を、古典的な抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８刺激（ｄｙｎａｂｅａｄｓ，Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，＃１１１３１Ｄ）条件下で、異なるドナーの新鮮なヒトＰＢＭＣの有無にかかわらず７２〜９６時間播種し、続いて、三重水素チミジンで１６時間パルシングして、増殖を評価した。
【表８】
2021509822.tif 000010
【０５６１】
代替的に、新鮮なＰＢＭＣ増殖の抑制を、Ｃｅｌｌ  Ｔｒａｃｅ（商標）Ｖｉｏｌｅｔ色素の希釈の減少として測定した。この目的のために、レスポンダーＰＢＭＣの細胞標識化を、フローサイトメトリー用のＣｅｌｌ  Ｔｒａｃｅ（商標）Ｖｉｏｌｅｔ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（Ｃ３４５５７，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ）で行った。次いで、レスポンダーＰＢＭＣを様々な量のＴｒ１細胞と９６時間共培養した。Ｔｒ１細胞をＴＩＧＩＴ＋ＰＤ１＋細胞として定義し、磁気ビーズ技術（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃｈ）を使用して単離した。
【０５６２】
エクスビボＴｒ１生存率
ヒト化ＮＳＧマウス（抗ＭＣＴ１で処置）を３２日目または指定された他の日に屠殺し、脾臓から単一細胞懸濁液を調製し、続いて、ｈＣＤ３＋細胞のビーズベースの濃縮を行った。単離した細胞を、Ｔｒ１生存率を得るために検体（上記の表を参照）で播種した。
【０５６３】
結果
図４０Ａ〜図４０Ｄおよび図４１Ａ〜図４１Ｃの結果によって示されるように、これらの実験は、本発明による例示的な抗ＭＣＴ１抗体、すなわち、異種ＧｖＨＤモデルにおけるＩＮＸ４２０、ＩＮＸ４１３、およびＩＮＸ３１０を用いた処置が、対照抗体で処置されたＮＳＧマウスと比較して、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、およびＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の数の有意な減少をもたらしたことを明らかにした。さらに、これらの抗ＭＣＴ１抗体は両方とも、Ｔｒ１細胞の数の大幅な増加を誘発した。
【０５６４】
さらに、図４２Ａ〜図４２Ｂの実験結果によって示されるように、これらの同じ例示的な試験済み抗ＭＣＴ１抗体は、これらの動物が同じドナー由来のドナーＰＭＢＣを４２日目に再攻撃接種された場合、異種ＧｖＨＤモデルにおいて長期の防御および耐性をさらに誘発した。
【０５６５】
図４３および図４４に含まれるバイオマーカーの結合結果によってさらに示されるように、ＴＩＧＩＴおよびＰＤ１は、Ｔｒ１細胞の推定バイオマーカーであり、これは、これらのバイオマーカーは、異種ＧｖＨＤモデルにおけるヒトＴ細胞の７５％超で発現するためである。図４５の実験結果によってさらに示されるように、Ｔｒ１細胞は、高レベルのグランザイムＢを発現するが、ＦＯＸＰ３またはＢｌｉｍｐ１を発現しない。
【０５６６】
図４６Ａ〜図４６Ｃの実験は、１４日目に、これらのＮＳＧマウスが多くのエフェクター細胞を含むことをさらに実証し、ｈＣＤ３＋細胞の増殖が、例示的な抗ＭＣＴ１抗体（ＩＮＸ４２０）によって抑制されることをさらに示している。図４７Ａ〜図４７Ｂの実験結果はまた、Ｔｒ１細胞が、ｈＣＤ３＋細胞および総ＰＭＢＣの増殖を強力に抑制することを示している。
【０５６７】
図４８は、異種ＧｖＨＤモデルでのＴｒ１細胞生成の動態を概略的に示す。具体的には、図は、抗ＭＣＴ１抗体がＴエフェクター相を低減することを示す。図４９Ａ〜図４９Ｂは、エクスビボＴｒ１生存因子を示す。図４９Ｂはさらに、標的細胞の死滅が、Ｔｒ１細胞がそのような抑制を誘発する機構ではないこと、およびＴｒ１細胞が、標的細胞との共培養で生存するが、個別に培養すると死滅することを示す。図４９Ａに示される実験結果は、抗ＴＩＧＩＴおよびＰＶＲリガンドが、エクスビボＴｒ１生存率を改善しないことを明らかにする。対照的に、図４９Ａにさらに示されるように、ＩＬ−２、ＩＬ−７、およびＩＬ−１５は、用量依存的な方法でエクスビボＴｒ１生存率を高め、Ｔｒ１細胞生存率は、最大約７５％増加した。
【０５６８】
実施例２５：ケトーシスに対する小分子ＭＣＴ１アンタゴニストの効果
安全性に対するＭＣＴ１阻害剤の効果を、それらのケトーシスに対する効果に基づいて評価するために、さらに実験を実施した。図５０Ａ〜図５０Ｂの実験結果によって示されるように、小分子ＭＣＴ１阻害剤（ＳＭＩ）は、８〜２４時間の飢餓によって誘発されたケトーシスを増強し、ＳＭｉによって引き起こされたケトーシスは、飢餓時に低血糖症を進行させ、かつＳＭｉ処置は、飢餓によって引き起こされたケトーシスおよび低血糖症を増強する。
【０５６９】
対照的に、図５１Ａ〜図５１Ｂの実験結果は、ＳＭｉの存在下および非存在下での２４時間の飢餓が、ケトアシドーシスを誘発しなかったことを示した。むしろ、本発明者らは、高用量のＳＭｉにおいてのみ、わずかな飢餓依存性のｐＨ低減（７．３から７．１）およびわずかな追加の低減（約０．０５）を観察しただけであった。
【０５７０】
実施例２６：アラニンスキャニング実験による機能的抗ＭＣＴ１抗体のエピトープ特性化
本発明の機能的抗ＭＣＴ１抗体によって結合されるエピトープ（複数可）を構成するＭＣＴ１残基を同定するために、アラニンスキャニング実験をさらに実施した。具体的には、４つの例示的な機能的抗ヒトＭＣＴ１抗体（ＩＮＸ４４４、ＩＮＸ４２０、ＬＭ１８３、およびＬＭ１８６）によって結合されるエピトープを、標的タンパク質ＭＣＴ１のモデル構造で視覚化した。これらの４つの抗体を、本明細書で同定されたものを代表するように選択した。特に、これらの抗体のうちの２つは、マウス抗ヒトＭＣＴ１抗体ＩＮＸ３１０（Ａｂ１）の親和性成熟変異体であり、他の２つは、ニワトリ抗ヒトＭＣＴ１抗体である。これらの４つの抗体は全て、機能的であり、すなわち、全てヒトＭＣＴ１機能を遮断する。
【０５７１】
構築されたアラニンスキャニングライブラリ内の各変異クローンへの各試験Ｆａｂの結合を、ハイスループットフローサイトメトリーによって２連で決定した。各時点について、バックグラウンド蛍光を生データから差し引き、次いで、これをＷＴ標的タンパク質とのＦａｂ反応性に正規化した。各変異クローンについて、平均結合値を発現の関数としてプロットした（対照反応性によって表される）。予備的な一次重要クローンを同定するために、対照ＭＡｂまたはＦａｂへの７０％を超えるＷＴ結合および試験Ｆａｂへの１５％未満のＷＴ結合の閾値を適用した。二次クローンは、設定した閾値を満たしていないが、その結合活性の減少および重要残基への近接は、変異した残基が抗体の一部である可能性をさらに示唆する。
【０５７２】
以下の表は、試験した４つ全ての抗ヒトＭＣＴ１抗体に由来するＦａｂ（複数可）の標的（ヒトＭＣＴ１タンパク質）への結合のために同定された重要残基を含む。重要残基は、その突然変異が特定の抗体との最低の反応性をもたらした残基である。検証済みの重要残基は、側鎖が抗体−エピトープ相互作用に最もエネルギー的に寄与するアミノ酸を表す（Ｂｏｇａｎ，Ａ．Ａ．ａｎｄ  Ｔｈｏｒｎ，Ｋ．Ｓ．（１９９８）．「Ａｎａｔｏｍｙ  ｏｆ  ｈｏｔ  ｓｐｏｔｓ  ｉｎ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎｔｅｒｆａｃｅｓ」．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２８０，１−９、Ｌｏ  Ｃｏｎｔｅ，Ｌ．，Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｃ．，ａｎｄ  Ｊａｎｉｎ，Ｊ．（１９９９）．Ｔｈｅ  ａｔｏｍｉｃ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎ−ｐｒｏｔｅｉｎ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｓｉｔｅｓ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２８５，２１７７−２１９８．，１９９９）。したがって、これらの残基は、結合エピトープへの主要なエネルギー的寄与因子である可能性が高い。
【表９】
2021509822.tif 000011
【０５７３】
以下の表には、これらの同じ４つの抗体のＭＣＴ１エピトープを構成する同定された重要残基の平均結合反応性（および範囲）が含まれる。Ｆａｂ結合の重要残基（赤枠で囲まれている）は、突然変異が試験Ｆａｂへの結合については陰性であったが、対照Ｆａｂへの結合については陽性であった残基であった。閾値ガイドラインを満たさなかった追加の二次残基（青枠で囲まれている）を同定したが、その結合活性の減少および重要残基への近接は、それらが抗体エピトープの一部である可能性があることを示唆した。
【表１０】
2021509822.tif 000012
【０５７４】
具体的には、これら４つの例示的な機能的抗ヒトＭＣＴ１抗体（ＩＮＸ４４４、ＩＮＸ４２０、ＬＭ１８３、およびＬＭ１８６）の結合に関与する重要残基および二次残基を、標的ＭＣＴ１タンパク質のモデル構造でさらに視覚化した。図５２は、アラニンスキャニングによって同定されたこれら４つの異なる抗体の予測された抗ＭＣＴ１エピトープを含む残基を示す。これらの抗体の４つ全てのエピトープを構成する残基が、ヒトＭＣＴ１の同じ細胞外領域に含まれていることが分かり、これは、本明細書に開示される機能的抗ヒトＭＣＴ１抗体の多くまたは全てが、ヒトＭＣＴ１上の同じまたは重複するエピトープに結合する可能性が高いことを示唆する。図５３および図５４はさらに、試験した４つの例示的な抗ＭＣＴ１抗体によって結合された特定のヒトＭＣＴ１残基をマッピングする。
【０５７５】
エピトープ分析に基づいて、本発明は、以下：
（ｘ）残基Ｔ４１、Ｅ４６、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｋ２８９、Ｈ２９２、Ｙ２９３、Ｋ２９７、Ｇ４１７、Ｉ４７、およびＤ４１８の１つ以上を含むもの、
（ｘｉ）少なくとも３つの残基を含むものであり、前述の残基の少なくとも１、２、または３つ全てが、Ｔ４１、Ｅ４６、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｋ２８９、Ｈ２９２、Ｙ２９３、Ｇ４１７、Ｉ４７、およびＤ４１８から選択される残基を含むもの、
（ｘｉｉ）３つの残基を含むものであり、前述の残基の少なくとも１、２、または３つ全てが、Ｔ４１、Ｅ４６、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｋ２８９、Ｈ２９２、Ｙ２９３、Ｇ４１７、Ｉ４７、およびＤ４１８を含むもの、
（ｘｉｉｉ）３〜６個の残基を含むものであり、前述の残基の１、２、３、４、５、または６つが、Ｔ４１、Ｅ４６、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｋ２８９、Ｈ２９２、Ｙ２９３、Ｇ４１７、Ｉ４７、およびＤ４１８を含むもの、
（ｘｉｖ）残基Ｔ４１、Ｓ２８５、およびＳ２８６の少なくとも１、２、または３つ全てを含むもの、
（ｘｖ）Ｔ４１を含むもの、
（ｘｖｉ）Ｓ２８６を含むもの、
（ｘｖｉｉ）Ｓ２８５を含むもの、
（ｘｖｉｉｉ）Ｈ２９２を含むもの、
（ｘｉｘ）残基Ｔ４１、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｇ４１７、およびＤ４１８を含むもの、
（ｘｘ）残基Ｔ４１、Ｓ２８５、およびＳ２８６を含むもの、
（ｘｘｉ）残基Ｔ４１、Ｉ４７、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｇ４１７、およびＤ４１８を含むもの、
（ｘｘｉｉ）残基Ｅ４６、Ｋ２８９、およびＨ２９２を含むもの、
（ｘｘｉｉｉ）残基Ｋ２９７、Ｙ２９３、およびＨ２９２を含むもの、
（ｘｘｉｖ）げっ歯類（例えば、マウス、ラット、モルモット）、ウサギ、ニワトリ、非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル、チンパンジー、オランウータン）、ウシ、ヒツジ、イヌ、ネコから選択される、非ヒトＭＣＴ１の対応する残基の１つ以上を含むもの、から選択されるヒトＭＣＴ１上のエピトープに結合する、任意の単離された抗体またはその抗原結合フラグメントを少なくとも包含し、
任意に、エピトープ中に存在する残基を、アラニンスキャニングの使用によって同定する。
【０５７６】
同じエピトープ分析に基づいて、本発明は、ヒトＭＣＴ１のループ１〜６に含まれる以下のヒトＭＣＴ１残基、または非ヒトＭＣＴ１、例えば、げっ歯類もしくは非ヒト霊長類ＭＣＴ１のループ１〜６領域に含まれる対応する残基のいずれかをさらに含み得る上記のヒトＭＣＴ１上のエピトープに結合する、任意の単離された抗体またはその抗原結合フラグメントを少なくともさらに包含する。
（ｉ）残基Ｐ３７、Ｉ４０、Ｋ４５、Ｅ４８、およびＴ５５の１つ以上（ループ１）、
（ｉｉ）残基Ｑ１１１（ループ２）、
（ｉｉｉ）残基Ｑ１６６（ループ３）、
（ｉｖ）残基Ｌ２８４、Ｅ２９６、Ｓ２９８の１つ以上（ループ４）、
（ｖ）残基Ｙ３５３（ループ５）、
（ｖｉ）残基Ｙ４１９、Ｔ４２２の一方もしくは両方（ループ６）、ならびに／または
（ｖｉｉ）上記の任意の組み合わせ。
【０５７７】
実施例２７：マウスＭＣＴ１への抗ヒトＭＣＴ１抗体（ＩＮＸ４４４）の結合
本明細書に開示される少なくとも機能的な１つの抗ヒトＭＣＴ１抗体（ＩＮＸ４４４）はまた、マウスＭＣＴ１に結合する。これは、主題の抗ヒトＭＣＴ１抗体がヒトＭＣＴ１タンパク質上で相互作用するヒトＭＣＴ１の領域またはエピトープまたは残基が、異なる種、例えば、ヒトおよびマウス、ならびに非ヒト霊長類などの考え得る他の種のＭＣＴ１タンパク質で保存される可能性が高いことをさらに示す。
【０５７８】
さらに、マウスＭＣＴ１に結合するこの抗ヒトＭＣＴ１抗体は、マウスＭＣＴ１を発現するトランスフェクタントをブロモピルビン酸の毒性作用から防御することがさらに実証された。具体的には、図５５に示されるように、この同じ抗体は、２つの異なるＡｂ濃度（低１０ｕｇ／ｍＬ、高１００ｕｇ／ｍＬ）で試験した場合、陽性対照、ＡＺ３９６５（小分子ＭＣＴ１阻害剤、緑）と同様に、ブロモピルビン酸の毒性作用から、マウスＭＣＴ１を発現するトランスフェクタントを防御する。
【０５７９】
対照的に、他の２つの試験済みの機能的抗ヒトＭＣＴ１抗体、すなわち、同じ実験のＩＮＸ４２０およびＩＮＸ４３８は、マウスＭＣＴ１機能を遮断しなかった（ベースライン）。（１５０ｕＭのブロモピルビン酸では、トランスフェクタント細胞がこのブロモピルビン酸濃度で完全に死滅しないため、培地のみの対照はゼロに到達しないことに留意されたい）。
【０５８０】
この結果は、主題の抗ヒトＭＣＴ１抗体がヒトＭＣＴ１タンパク質上で相互作用する機能的エピトープまたは残基が、異なる種のＭＣＴ１タンパク質で保存される可能性が高いことをさらに裏付け、これは、主題の抗ヒトＭＣＴ１抗体が競合結合アッセイで使用されて、他の機能的抗ＭＣＴ１抗体、すなわち、ヒトＭＣＴ１の１つ以上の活性に拮抗する、阻害する、もしくは遮断するもの、またはそのオルソログ、例えば、げっ歯類もしくは非ヒト霊長類ＭＣＴ１タンパク質の１つ以上の活性に拮抗する、阻害する、もしくは遮断するものをスクリーニングし得ることを示唆する。
参考文献
このリストの参考文献は、参照により組み込まれ、上記の明細書中の参照番号によって言及される。
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８．Ｐｕｃｉｎｏ  Ｖ，Ｂｏｍｂａｒｄｉｅｒｉ  Ｍ，Ｐｉｔｚａｌｉｓ  Ｃ，Ｍａｕｒｏ  Ｃ．Ｌａｃｔａｔｅ  ａｔ  ｔｈｅ  ｃｒｏｓｓｒｏａｄｓ  ｏｆ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，ａｎｄ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ．Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２０１７；４７（１）：１４−２１．Ｅｐｕｂ  ２０１６／１１／２５．ｄｏｉ：１０．１００２／ｅｊｉ．２０１６４６４７７．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２７８８３１８６．
９．Ｍａｋ  ＴＷ，Ｇｒｕｓｄａｔ  Ｍ，Ｄｕｎｃａｎ  ＧＳ，Ｄｏｓｔｅｒｔ  Ｃ，Ｎｏｎｎｅｎｍａｃｈｅｒ  Ｙ，Ｃｏｘ  Ｍ，Ｂｉｎｓｆｅｌｄ  Ｃ，Ｈａｏ  Ｚ，Ｂｒｕｓｔｌｅ  Ａ，Ｉｔｓｕｍｉ  Ｍ，Ｊａｇｅｒ  Ｃ，Ｃｈｅｎ  Ｙ，Ｐｉｎｋｅｎｂｕｒｇ  Ｏ，Ｃａｍａｒａ  Ｂ，Ｏｌｌｅｒｔ  Ｍ，Ｂｉｎｄｓｌｅｖ−Ｊｅｎｓｅｎ  Ｃ，Ｖａｓｉｌｉｏｕ  Ｖ，Ｇｏｒｒｉｎｉ  Ｃ，Ｌａｎｇ  ＰＡ，Ｌｏｈｏｆｆ  Ｍ，Ｈａｒｒｉｓ  ＩＳ，Ｈｉｌｌｅｒ  Ｋ，Ｂｒｅｎｎｅｒ  Ｄ．Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ  Ｐｒｉｍｅｓ  Ｔ  Ｃｅｌｌ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｆｏｒ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．２０１７；４６（４）：６７５−８９．Ｅｐｕｂ  ２０１７／０４／２０．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｉｍｍｕｎｉ．２０１７．０３．０１９．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２８４２３３４１．
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１１．Ｊｅｌｌｕｓｏｖａ  Ｊ，Ｃａｔｏ  ＭＨ，Ａｐｇａｒ  ＪＲ，Ｒａｍｅｚａｎｉ−Ｒａｄ  Ｐ，Ｌｅｕｎｇ  ＣＲ，Ｃｈｅｎ  Ｃ，Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ  ＡＤ，Ｃｏｎｎｅｒ  ＥＭ，Ｂｅｎｓｃｈｏｐ  ＲＪ，Ｗｏｏｄｇｅｔｔ  ＪＲ，Ｒｉｃｋｅｒｔ  ＲＣ．Ｇｓｋ３  ｉｓ  ａ  ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒ  ｉｎ  Ｂ  ｃｅｌｌｓ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２０１７；１８（３）：３０３−１２．Ｅｐｕｂ  ２０１７／０１／２４．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｉ．３６６４．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２８１１４２９２；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ５３１０９６３．
１２．Ｇｎａｎａｐｒａｋａｓａｍ  ＪＮＲ，Ｓｈｅｒｍａｎ  ＪＷ，Ｗａｎｇ  Ｒ．ＭＹＣ  ａｎｄ  ＨＩＦ  ｉｎ  ｓｈａｐｉｎｇ  ｉｍｍｕｎｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ａｎｄ  ｉｍｍｕｎｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ．Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｖ．２０１７；３５：６３−７０．Ｅｐｕｂ  ２０１７／０４／０２．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｃｙｔｏｇｆｒ．２０１７．０３．００４．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２８３６３６９１．
１３．Ｍａｈ  ＡＹ，Ｃｏｏｐｅｒ  ＭＡ．Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｋｉｌｌｅｒ  Ｃｅｌｌ  ＩＦＮ−ｇａｍｍａ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．Ｃｒｉｔｉｃａｌ  ｒｅｖｉｅｗｓ  ｉｎ  ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２０１６；３６（２）：１３１−４７．Ｅｐｕｂ  ２０１６／１２／０３．ｄｏｉ：１０．１６１５／ＣｒｉｔＲｅｖＩｍｍｕｎｏｌ．２０１６０１７３８７．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２７９１０７６４；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ５３３５９０７．
１４．Ｌｏｆｔｕｓ  ＲＭ，Ｆｉｎｌａｙ  ＤＫ．Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ：Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  Ｔｕｒｎｓ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｒｅｇｕｌａｔｏｒ．Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２０１６；２９１（１）：１−１０．Ｅｐｕｂ  ２０１５／１１／０５．ｄｏｉ：１０．１０７４／ｊｂｃ．Ｒ１１５．６９３９０３．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２６５３４９５７；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ４６９７１４６．
１５．Ｋｅａｔｉｎｇ  ＳＥ，Ｚａｉａｔｚ−Ｂｉｔｔｅｎｃｏｕｒｔ  Ｖ，Ｌｏｆｔｕｓ  ＲＭ，Ｋｅａｎｅ  Ｃ，Ｂｒｅｎｎａｎ  Ｋ，Ｆｉｎｌａｙ  ＤＫ，Ｇａｒｄｉｎｅｒ  ＣＭ．Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ  Ｓｕｐｐｏｒｔｓ  ＩＦＮ−ｇａｍｍａ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ＣＤ５６ｂｒｉｇｈｔ  ＮＫ  Ｃｅｌｌｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２０１６；１９６（６）：２５５２−６０．Ｅｐｕｂ  ２０１６／０２／１４．ｄｏｉ：１０．４０４９／ｊｉｍｍｕｎｏｌ．１５０１７８３．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２６８７３９９４．
１６．Ｃｒｅｔｅｎｅｔ  Ｇ，Ｃｌｅｒｃ  Ｉ，Ｍａｔｉａｓ  Ｍ，Ｌｏｉｓｅｌ  Ｓ，Ｃｒａｖｅｉｒｏ  Ｍ，Ｏｂｕｒｏｇｌｕ  Ｌ，Ｋｉｎｅｔ  Ｓ，Ｍｏｎｇｅｌｌａｚ  Ｃ，Ｄａｒｄａｌｈｏｎ  Ｖ，Ｔａｙｌｏｒ  Ｎ．Ｃｅｌｌ  ｓｕｒｆａｃｅ  Ｇｌｕｔ１  ｌｅｖｅｌｓ  ｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈ  ｈｕｍａｎ  ＣＤ４  ａｎｄ  ＣＤ８  Ｔ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  ｓｕｂｓｅｔｓ  ｗｉｔｈ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｅｆｆｅｃｔｏｒ  ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ．Ｓｃｉ  Ｒｅｐ．２０１６；６：２４１２９．Ｅｐｕｂ  ２０１６／０４／１４．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓｒｅｐ２４１２９．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２７０６７２５４；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ４８２８７０２．
１７．Ａｄａｍｉａ  Ｎ，Ｊｏｒｊｏｌｉａｎｉ  Ｌ，Ｋｈａｃｈａｐｕｒｉｄｚｅ  Ｄ，Ｋａｔａｍａｄｚｅ  Ｎ，Ｃｈｋｕａｓｅｌｉ  Ｎ．Ａｌｌｅｒｇｉｃ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ  ａｎｄ  Ａｓｔｈｍａ  ｉｎ  Ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｓ．Ｇｅｏｒｇｉａｎ  Ｍｅｄ  Ｎｅｗｓ．２０１５（２４３）：５８−６２．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２６０８７７３２．
１８．Ｙａｎｇ  Ｚ，Ｍａｔｔｅｓｏｎ  ＥＬ，Ｇｏｒｏｎｚｙ  ＪＪ，Ｗｅｙａｎｄ  ＣＭ．Ｔ−ｃｅｌｌ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｉｎ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＆  Ｔｈｅｒａｐｙ．２０１５；１７：２９．Ｅｐｕｂ  ２０１５／０４／１９．ｄｏｉ：１０．１１８６／ｓ１３０７５−０１５−０５４２−４．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２５８９０３５１；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ４３２４０４６．
１９．Ｐｏｌｌｉｚｚｉ  ＫＮ，Ｐａｔｅｌ  ＣＨ，Ｓｕｎ  ＩＨ，Ｏｈ  ＭＨ，Ｗａｉｃｋｍａｎ  ＡＴ，Ｗｅｎ  Ｊ，Ｄｅｌｇｏｆｆｅ  ＧＭ，Ｐｏｗｅｌｌ  ＪＤ．ｍＴＯＲＣ１  ａｎｄ  ｍＴＯＲＣ２  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙ  ｒｅｇｕｌａｔｅ  ＣＤ８（＋）Ｔ  ｃｅｌｌ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ．２０１５；１２５（５）：２０９０−１０８．Ｅｐｕｂ  ２０１５／０４／２２．ｄｏｉ：１０．１１７２／ＪＣＩ７７７４６．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２５８９３６０４；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ４４６３１９４．
２０．Ｍｅｄｚｈｉｔｏｖ  Ｒ．Ｂｒｉｎｇｉｎｇ  Ｗａｒｂｕｒｇ  ｔｏ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２０１５；１５（１０）：５９８．Ｅｐｕｂ  ２０１５／０９／２６．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｒｉ３９１８．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２６４０３１９３．
２１．Ｃｈｅｎ  Ｈ，Ｙａｎｇ  Ｔ，Ｚｈｕ  Ｌ，Ｚｈａｏ  Ｙ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｏｎ  Ｔ−ｃｅｌｌ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２０１５；３４（１）：１９−３３．Ｅｐｕｂ  ２０１４／０４／０９．ｄｏｉ：１０．３１０９／０８８３０１８５．２０１４．９０２４５２．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２４７０８０６０．
２２．Ｍａｔａｒｅｓｅ  Ｇ，Ｃｏｌａｍａｔｔｅｏ  Ａ，Ｄｅ  Ｒｏｓａ  Ｖ．Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｆｕｅｌｌｉｎｇ  ｏｆ  ｐｒｏｐｅｒ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ．２０１４；１６１（２）：１７４−８．Ｅｐｕｂ  ２０１３／１２／２５．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｉｍｌｅｔ．２０１３．１２．０１２．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２４３６５０６４．
２３．Ｋｕｇｅｌｂｅｒｇ  Ｅ．Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ：ＴＬＲ  ａｇｏｎｉｓｔｓ  ｔｒｉｇｇｅｒ  ｒａｐｉｄ  ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｃｈａｎｇｅｓ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２０１４；１４（４）：２０９．Ｅｐｕｂ  ２０１４／０３／２６．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｒｉ３６５２．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２４６６２３７８．
２４．Ｇｒｅｅｎ  ＤＲ，ＲａｔｈｍｅｌｌＪ．Ｓｗｅｅｔ  ｎｏｔｈｉｎｇｓ：ｓｅｎｓｉｎｇ  ｏｆ  ｓｕｇａｒ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｃｏｎｔｒｏｌｓ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｃｅｌｌ  Ｍｅｔａｂ．２０１３；１８（１）：７−８．Ｅｐｕｂ  ２０１３／０７／０５．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｃｍｅｔ．２０１３．０６．００９．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２３８２３４７３；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ３７４９２３２．
２５．Ｗａｎｇ  Ｒ，Ｇｒｅｅｎ  ＤＲ．Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｓ  ｉｎ  ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２０１２；１３（１０）：９０７−１５．Ｅｐｕｂ  ２０１２／０９／２０．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｉ．２３８６．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２２９９０８８８．
２６．Ｍａｒｋｏ  ＡＪ，Ｍｉｌｌｅｒ  ＲＡ，Ｋｅｌｍａｎ  Ａ，Ｆｒａｕｗｉｒｔｈ  ＫＡ．Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｇｌｕｃｏｓｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｉｎ  ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｔ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ｉｓ  ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｂｙ  ｍｉｔｏｇｅｎ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ．ＰｌｏＳ  Ｏｎｅ．２０１０；５（１１）：ｅ１５４２５．Ｅｐｕｂ  ２０１０／１１／１９．ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００１５４２５．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２１０８５６７２；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ２９７８１０５．
２７．Ｊａｃｏｂｓ  ＳＲ，Ｍｉｃｈａｌｅｋ  ＲＤ，Ｒａｔｈｍｅｌｌ  ＪＣ．ＩＬ−７  ｉｓ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  ｆｏｒ  ｈｏｍｅｏｓｔａｔｉｃ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｉｎ  ｖｉｖｏ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２０１０；１８４（７）：３４６１−９．Ｅｐｕｂ  ２０１０／０３／０３．ｄｏｉ：１０．４０４９／ｊｉｍｍｕｎｏｌ．０９０２５９３．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２０１９４７１７；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ２９８０９４９．
２８．Ｍａｃｉｖｅｒ  ＮＪ，Ｊａｃｏｂｓ  ＳＲ，Ｗｉｅｍａｎ  ＨＬ，Ｗｏｆｆｏｒｄ  ＪＡ，Ｃｏｌｏｆｆ  ＪＬ，Ｒａｔｈｍｅｌｌ  ＪＣ．Ｇｌｕｃｏｓｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｉｎ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ｉｓ  ａ  ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｐｒｏｃｅｓｓ  ｗｉｔｈ  ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｎ  ｉｍｍｕｎｅ  ｃｅｌｌ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｓｕｒｖｉｖａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ．２００８；８４（４）：９４９−５７．Ｅｐｕｂ  ２００８／０６／２６．ｄｏｉ：１０．１１８９／ｊｌｂ．０１０８０２４．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１８５７７７１６；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ２６３８７３１．
２９．Ｆｏｘ  ＣＪ，Ｈａｍｍｅｒｍａｎ  ＰＳ，Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  ＣＢ．Ｆｕｅｌ  ｆｅｅｄｓ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ：ｅｎｅｒｇｙ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｔ−ｃｅｌｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２００５；５（１１）：８４４−５２．Ｅｐｕｂ  ２００５／１０／２２．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｒｉ１７１０．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１６２３９９０３．
３０．Ｃｈａｍ  ＣＭ，Ｇａｊｅｗｓｋｉ  ＴＦ．Ｇｌｕｃｏｓｅ  ａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ  ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ＩＦＮ−ｇａｍｍａ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐ７０Ｓ６  ｋｉｎａｓｅ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｉｎ  ＣＤ８＋  ｅｆｆｅｃｔｏｒ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２００５；１７４（８）：４６７０−７．Ｅｐｕｂ  ２００５／０４／０９．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１５８１４６９１．
３１．Ｒａｔｈｍｅｌｌ  ＪＣ，Ｅｌｓｔｒｏｍ  ＲＬ，Ｃｉｎａｌｌｉ  ＲＭ，Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  ＣＢ．Ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ａｋｔ  ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  ｒｅｓｔｉｎｇ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｓｉｚｅ，ＣＤ２８−ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｇｒｏｗｔｈ，ａｎｄ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ  ａｎｄ  ｌｙｍｐｈｏｍａ．Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２００３；３３（８）：２２２３−３２．Ｅｐｕｂ  ２００３／０７／２９．ｄｏｉ：１０．１００２／ｅｊｉ．２００３２４０４８．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１２８８４２９７．
３２．Ｂｒａｎｄ  Ｋ，Ｎｅｔｚｋｅｒ  Ｒ，Ａｕｌｗｕｒｍ  Ｕ，Ｈｅｒｍｆｉｓｓｅ  Ｕ，Ｆａｂｉａｎ  Ｄ，Ｗｅｉｇｅｒｔ  Ｃ，Ｓｃｈａｅｆｅｒ  Ｄ，Ｈａｍｍ−Ｋｕｅｎｚｅｌｍａｎｎ  Ｂ．Ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  ｔｈｙｍｏｃｙｔｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ｖｉａ  ｒｅｄｏｘ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｇｌｙｃｏｌｙｔｉｃ  ｇｅｎｅｓ．Ｒｅｄｏｘ  Ｒｅｐ．２０００；５（１）：５２−４．Ｅｐｕｂ  ２０００／０７／２５．ｄｏｉ：１０．１１７９／ｒｅｒ．２０００．５．１．５２．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１０９０５５４７．
３３．Ｆｉｎｌａｙ  ＤＫ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｇｌｕｃｏｓｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｉｎ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ：ｎｅｗ  ｉｎｓｉｇｈｔ  ｉｎｔｏ  ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  Ｐｈｏｓｐｈｏｉｎｏｓｉｔｉｄｅ  ３−ｋｉｎａｓｅｓ．Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２０１２；３：２４７．Ｅｐｕｂ  ２０１２／０８／１５．ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｉｍｍｕ．２０１２．００２４７．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２２８９１０６９；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ３４１３０１０．
３４．Ｈａｌｅｓｔｒａｐ  ＡＰ，Ｍｅｒｅｄｉｔｈ  Ｄ．Ｔｈｅ  ＳＬＣ１６  ｇｅｎｅ  ｆａｍｉｌｙ−ｆｒｏｍ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ（ＭＣＴｓ）ｔｏ  ａｒｏｍａｔｉｃ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ  ａｎｄ  ｂｅｙｏｎｄ．Ｐｆｌｕｇｅｒｓ  Ａｒｃｈ．２００４；４４７（５）：６１９−２８．ｄｏｉ：１０．１００７／ｓ００４２４−００３−１０６７−２．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１２７３９１６９．
３５．Ｈａｌｅｓｔｒａｐ  ＡＰ．Ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ  ａｃｉｄ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ．Ｃｏｍｐｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２０１３；３（４）：１６１１−４３．ｄｏｉ：１０．１００２／ｃｐｈｙ．ｃ１３０００８．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２４２６５２４０．
３６．Ｈａｌｅｓｔｒａｐ  ＡＰ．Ｔｈｅ  ＳＬＣ１６  ｇｅｎｅ  ｆａｍｉｌｙ  −  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｒｏｌｅ  ａｎｄ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ｍｏｌ  Ａｓｐｅｃｔｓ  Ｍｅｄ．２０１３；３４（２−３）：３３７−４９．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｍａｍ．２０１２．０５．００３．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２３５０６８７５．
３７．Ｈａｌｅｓｔｒａｐ  ＡＰ．Ｔｈｅ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ｆａｍｉｌｙ−−Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ．ＩＵＢＭＢ  Ｌｉｆｅ．２０１２；６４（１）：１−９．ｄｏｉ：１０．１００２／ｉｕｂ．５７３．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２２１３１３０３．
３８．Ｈａｌｅｓｔｒａｐ  ＡＰ，Ｗｉｌｓｏｎ  ＭＣ．Ｔｈｅ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ｆａｍｉｌｙ−−ｒｏｌｅ  ａｎｄ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ．ＩＵＢＭＢ  Ｌｉｆｅ．２０１２；６４（２）：１０９−１９．ｄｏｉ：１０．１００２／ｉｕｂ．５７２．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２２１６２１３９．
３９．Ｒｕｓｕ  Ｖ，Ｈｏｃｈ  Ｅ，Ｍｅｒｃａｄｅｒ  ＪＭ，Ｔｅｎｅｎ  ＤＥ，Ｇｙｍｒｅｋ  Ｍ，Ｈａｒｔｉｇａｎ  ＣＲ，ＤｅＲａｎ  Ｍ，ｖｏｎ  Ｇｒｏｔｔｈｕｓｓ  Ｍ，Ｆｏｎｔａｎｉｌｌａｓ  Ｐ，Ｓｐｏｏｎｅｒ  Ａ，Ｇｕｚｍａｎ  Ｇ，Ｄｅｉｋ  ＡＡ，Ｐｉｅｒｃｅ  ＫＡ，Ｄｅｎｎｉｓ  Ｃ，Ｃｌｉｓｈ  ＣＢ，Ｃａｒｒ  ＳＡ，Ｗａｇｎｅｒ  ＢＫ，Ｓｃｈｅｎｏｎｅ  Ｍ，Ｎｇ  ＭＣＹ，Ｃｈｅｎ  ＢＨ，Ｃｏｎｓｏｒｔｉｕｍ  Ｍ，Ｃｏｎｓｏｒｔｉｕｍ  ＳＴＤ，Ｃｅｎｔｅｎｏ−Ｃｒｕｚ  Ｆ，Ｚｅｒｒｗｅｃｋ  Ｃ，Ｏｒｏｚｃｏ  Ｌ，Ａｌｔｓｈｕｌｅｒ  ＤＭ，Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ  ＳＬ，Ｆｌｏｒｅｚ  ＪＣ，Ｊａｃｏｂｓ  ＳＢＲ，Ｌａｎｄｅｒ  ＥＳ．Ｔｙｐｅ  ２  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｖａｒｉａｎｔｓ  Ｄｉｓｒｕｐｔ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ＳＬＣ１６Ａ１１  ｔｈｒｏｕｇｈ  Ｔｗｏ  Ｄｉｓｔｉｎｃｔ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．Ｃｅｌｌ．２０１７；１７０（１）：１９９−２１２  ｅ２０．Ｅｐｕｂ  ２０１７／０７／０１．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｃｅｌｌ．２０１７．０６．０１１．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２８６６６１１９．
４０．Ｆｒａｎｋ  Ｈ，Ｇｒｏｇｅｒ  Ｎ，Ｄｉｅｎｅｒ  Ｍ，Ｂｅｃｋｅｒ  Ｃ，Ｂｒａｕｎ  Ｔ，Ｂｏｅｔｔｇｅｒ  Ｔ．Ｌａｃｔａｔｕｒｉａ  ａｎｄ  ｌｏｓｓ  ｏｆ  ｓｏｄｉｕｍ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｌａｃｔａｔｅ  ｕｐｔａｋｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｃｏｌｏｎ  ｏｆ  ＳＬＣ５Ａ８−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ  ｍｉｃｅ．Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２００８；２８３（３６）：２４７２９−３７．ｄｏｉ：１０．１０７４／ｊｂｃ．Ｍ８０２６８１２００．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１８５６２３２４；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ３２５９８０９．
４１．Ｌｅｗｉｓ  ＩＡ，Ｃａｍｐａｎｅｌｌａ  ＭＥ，Ｍａｒｋｌｅｙ  ＪＬ，Ｌｏｗ  ＰＳ．Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｂａｎｄ  ３  ｉｎ  ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ  ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｆｌｕｘ  ｏｆ  ｒｅｄ  ｂｌｏｏｄ  ｃｅｌｌｓ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ．２００９；１０６（４４）：１８５１５−２０．Ｅｐｕｂ  ２００９／１０／２３．ｄｏｉ：１０．１０７３／ｐｎａｓ．０９０５９９９１０６．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１９８４６７８１；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ２７７３９８８．
４２．Ａｋａｓｈｉ  Ａ，Ｍｉｋｉ  Ａ，Ｋａｎａｍｏｒｉ  Ａ，Ｎａｋａｍｕｒａ  Ｍ．Ａｑｕａｐｏｒｉｎ  ９  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｓ  ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  ｌ−ｌａｃｔａｔｅ  ｔｏ  ｍａｉｎｔａｉｎ  ｒｅｔｉｎａｌ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｓｕｒｖｉｖａｌ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  Ｌｅｔｔｅｒｓ．２０１５；５８９：１８５−９０．Ｅｐｕｂ  ２０１５／０２／０１．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｎｅｕｌｅｔ．２０１５．０１．０６３．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２５６３７６９７．
４３．Ｆｉｓｃｈｅｒ  Ｋ，Ｈｏｆｆｍａｎｎ  Ｐ，Ｖｏｅｌｋｌ  Ｓ，Ｍｅｉｄｅｎｂａｕｅｒ  Ｎ，Ａｍｍｅｒ  Ｊ，Ｅｄｉｎｇｅｒ  Ｍ，Ｇｏｔｔｆｒｉｅｄ  Ｅ，Ｓｃｈｗａｒｚ  Ｓ，Ｒｏｔｈｅ  Ｇ，Ｈｏｖｅｓ  Ｓ，Ｒｅｎｎｅｒ  Ｋ，Ｔｉｍｉｓｃｈｌ  Ｂ，Ｍａｃｋｅｎｓｅｎ  Ａ，Ｋｕｎｚ−Ｓｃｈｕｇｈａｒｔ  Ｌ，Ａｎｄｒｅｅｓｅｎ  Ｒ，Ｋｒａｕｓｅ  ＳＷ，Ｋｒｅｕｔｚ  Ｍ．Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｌａｃｔｉｃ  ａｃｉｄ  ｏｎ  ｈｕｍａｎ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｂｌｏｏｄ．２００７；１０９（９）：３８１２−９．Ｅｐｕｂ  ２００７／０１／２７．ｄｏｉ：１０．１１８２／ｂｌｏｏｄ−２００６−０７−０３５９７２．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１７２５５３６１．
４４．Ｍｉｃｈｎｅ  ＷＦ，Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒ  ＪＤ，Ｇｕｉｌｅｓ  ＪＷ，Ｔｒｅａｓｕｒｙｗａｌａ  ＡＭ，Ｗｅｉｇｅｌｔ  ＣＡ，Ｓｔａｎｓｂｅｒｒｙ  ＭＦ，ＭｃＡｖｏｙ  Ｅ，Ｓｈａｈ  ＣＲ，Ｂａｉｎｅ  Ｙ，Ｓａｗｕｔｚ  ＤＧ，ｅｔ  ａｌ．Ｎｏｖｅｌ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｆａｃｔｏｒ  ｏｆ  ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ（ＮＦＡＴ）−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ｂｅｔａ−ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ：ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  ａｎｄ  ａｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ａｇｅｎｔｓ．Ｊ  ＭｅｄＣｈｅｍ．１９９５；３８（１４）：２５５７−６９．Ｅｐｕｂ  １９９５／０７／０７．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：７６２９７９６．
４５．Ｐａｈｌｍａｎ  Ｃ，Ｑｉ  Ｚ，Ｍｕｒｒａｙ  ＣＭ，Ｆｅｒｇｕｓｏｎ  Ｄ，Ｂｕｎｄｉｃｋ  ＲＶ，Ｄｏｎａｌｄ  ＤＫ，Ｅｋｂｅｒｇ  Ｈ．Ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ａ  ｓｅｒｉｅｓ  ｏｆ  ｎｏｖｅｌ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ＭＣＴ−１．Ｔｒａｎｓｐｌ  Ｉｎｔ．２０１３；２６（１）：２２−９．ｄｏｉ：１０．１１１１／ｊ．１４３２−２２７７．２０１２．０１５７９．ｘ．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２３１３７３３９．
４６．Ｏｖｅｎｓ  ＭＪ，Ｄａｖｉｅｓ  ＡＪ，Ｗｉｌｓｏｎ  ＭＣ，Ｍｕｒｒａｙ  ＣＭ，Ｈａｌｅｓｔｒａｐ  ＡＰ．ＡＲ−Ｃ１５５８５８  ｉｓ  ａ  ｐｏｔｅｎｔ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ  ＭＣＴ１  ａｎｄ  ＭＣＴ２  ｔｈａｔ  ｂｉｎｄｓ  ｔｏ  ａｎ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｓｉｔｅ  ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ  ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ  ｈｅｌｉｃｅｓ  ７−１０．Ｔｈｅ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ．２０１０；４２５（３）：５２３−３０．ｄｏｉ：１０．１０４２／ＢＪ２００９１５１５．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１９９２９８５３；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ２８１１４２５．
４７．Ｂｕｅｎｏ  Ｖ，Ｂｉｎｅｔ  Ｉ，Ｓｔｅｇｅｒ  Ｕ，Ｂｕｎｄｉｃｋ  Ｒ，Ｆｅｒｇｕｓｏｎ  Ｄ，Ｍｕｒｒａｙ  Ｃ，Ｄｏｎａｌｄ  Ｄ，Ｗｏｏｄ  Ｋ．Ｔｈｅ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ（ＭＣＴ１）ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ＡＲ−Ｃ１１７９７７，ａ  ｎｏｖｅｌ  ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓａｎｔ，ｐｒｏｌｏｎｇｓ  ａｌｌｏｇｒａｆｔ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｍｏｕｓｅ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．２００７；８４（９）：１２０４−７．ｄｏｉ：１０．１０９７／０１．ｔｐ．００００２８７５４３．９１７６５．４１．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１７９９８８７８．
４８．Ｍｕｒｒａｙ  Ｃ．Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＭＣＴ１：Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＭＣＴ１：Ｒｏｌｅ  ｉｎ  ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｎａｔ．Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ．，１（７）：３７１−６  ２００９．
４９．ｖａｎ  Ｈａｓｓｅｌｔ  ＰＭ，Ｆｅｒｄｉｎａｎｄｕｓｓｅ  Ｓ，Ｍｏｎｒｏｅ  ＧＲ，Ｒｕｉｔｅｒ  ＪＰ，Ｔｕｒｋｅｎｂｕｒｇ  Ｍ，Ｇｅｅｒｌｉｎｇｓ  ＭＪ，Ｄｕｒａｎ  Ｋ，Ｈａｒａｋａｌｏｖａ  Ｍ，ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｚｗａａｇ  Ｂ，Ｍｏｎａｖａｒｉ  ＡＡ，Ｏｋｕｒ  Ｉ，Ｓｈａｒｒａｒｄ  ＭＪ，Ｃｌｅａｒｙ  Ｍ，Ｏ′Ｃｏｎｎｅｌｌ  Ｎ，Ｗａｌｋｅｒ  Ｖ，Ｒｕｂｉｏ−Ｇｏｚａｌｂｏ  ＭＥ，ｄｅ  Ｖｒｉｅｓ  ＭＣ，Ｖｉｓｓｅｒ  Ｇ，Ｈｏｕｗｅｎ  ＲＨ，ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｓｍａｇｔ  ＪＪ，Ｖｅｒｈｏｅｖｅｎ−Ｄｕｉｆ  ＮＭ，Ｗａｎｄｅｒｓ  ＲＪ，ｖａｎ  Ｈａａｆｔｅｎ  Ｇ．Ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  １  ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ａｎｄ  ｋｅｔｏｎｅ  ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．２０１４；３７１（２０）：１９００−７．Ｅｐｕｂ  ２０１４／１１／１３．ｄｏｉ：１０．１０５６／ＮＥＪＭｏａ１４０７７７８．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２５３９０７４０．
５０．Ｇｕｉｌｅ  ＳＤ，Ｂａｎｔｉｃｋ  ＪＲ，Ｃｈｅｓｈｉｒｅ  ＤＲ，Ｃｏｏｐｅｒ  ＭＥ，Ｄａｖｉｓ  ＡＭ，Ｄｏｎａｌｄ  ＤＫ，Ｅｖａｎｓ  Ｒ，Ｅｙｓｓａｄｅ  Ｃ，Ｆｅｒｇｕｓｏｎ  ＤＤ，Ｈｉｌｌ  Ｓ，Ｈｕｔｃｈｉｎｓｏｎ  Ｒ，Ｉｎｇａｌｌ  ＡＨ，Ｋｉｎｇｓｔｏｎ  ＬＰ，Ｍａｒｔｉｎ  Ｉ，Ｍａｒｔｉｎ  ＢＰ，Ｍｏｈａｍｍｅｄ  ＲＴ，Ｍｕｒｒａｙ  Ｃ，Ｐｅｒｒｙ  ＭＷ，Ｒｅｙｎｏｌｄｓ  ＲＨ，Ｔｈｏｒｎｅ  ＰＶ，Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ  ＤＪ，ＷｉｔｈｎａｌｌＪ．Ｐｏｔｅｎｔ  ｂｌｏｃｋｅｒｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ＭＣＴ１：ｎｏｖｅｌ  ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ．Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ．２００６；１６（８）：２２６０−５．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｂｍｃｌ．２００６．０１．０２４．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１６４５５２５６．
５１．Ｋｉｍ  Ｙ，Ｃｈｏｉ  ＪＷ，Ｌｅｅ  ＪＨ，Ｋｉｍ  ＹＳ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｌａｃｔａｔｅ／Ｈ（＋）ｓｙｍｐｏｒｔｅｒｓ  ＭＣＴ１  ａｎｄ  ＭＣＴ４  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｃｈａｐｅｒｏｎｅ  ＣＤ１４７  ｐｒｅｄｉｃｔｓ  ｔｕｍｏｒ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｃｌｅａｒ  ｃｅｌｌ  ｒｅｎａｌ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ：ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｔｈｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ａｔｌａｓ  ｄａｔａ  ａｎａｌｙｓｅｓ．Ｈｕｍａｎ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ．２０１５；４６（１）：１０４−１２．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｈｕｍｐａｔｈ．２０１４．０９．０１３．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２５４５６３９５．
５２．Ｈｏｎｇ  ＣＳ，Ｇｒａｈａｍ  ＮＡ，Ｇｕ  Ｗ，Ｅｓｐｉｎｄｏｌａ  Ｃａｍａｃｈｏ  Ｃ，Ｍａｈ  Ｖ，Ｍａｒｅｓｈ  ＥＬ，Ａｌａｖｉ  Ｍ，Ｂａｇｒｙａｎｏｖａ  Ｌ，Ｋｒｏｔｅｅ  ＰＡ，Ｇａｒｄｎｅｒ  ＢＫ，Ｂｅｈｂａｈａｎ  ＩＳ，Ｈｏｒｖａｔｈ  Ｓ，Ｃｈｉａ  Ｄ，Ｍｅｌｌｉｎｇｈｏｆｆ  ＩＫ，Ｈｕｒｖｉｔｚ  ＳＡ，Ｄｕｂｉｎｅｔｔ  ＳＭ，Ｃｒｉｔｃｈｌｏｗ  ＳＥ，Ｋｕｒｄｉｓｔａｎｉ  ＳＫ，Ｇｏｏｄｇｌｉｃｋ  Ｌ，Ｂｒａａｓ  Ｄ，Ｇｒａｅｂｅｒ  ＴＧ，Ｃｈｒｉｓｔｏｆｋ  ＨＲ．ＭＣＴ１  Ｍｏｄｕｌａｔｅｓ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  Ｐｙｒｕｖａｔｅ  Ｅｘｐｏｒｔ  ａｎｄ  Ｇｒｏｗｔｈ  ｏｆ  Ｔｕｍｏｒｓ  ｔｈａｔ  Ｃｏ−ｅｘｐｒｅｓｓ  ＭＣＴ１  ａｎｄ  ＭＣＴ４．Ｃｅｌｌ  Ｒｅｐｏｒｔｓ．２０１６；１４（７）：１５９０−６０１．Ｅｐｕｂ  ２０１６／０２／１６．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｃｅｌｒｅｐ．２０１６．０１．０５７．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２６８７６１７９；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ４８１６４５４．
５３．Ｙｉｎ  Ｙ，Ｃｈｏｉ  ＳＣ，Ｘｕ  Ｚ，Ｐｅｒｒｙ  ＤＪ，Ｓｅａｙ  Ｈ，Ｃｒｏｋｅｒ  ＢＰ，Ｓｏｂｅｌ  ＥＳ，Ｂｒｕｓｋｏ  ＴＭ，Ｍｏｒｅｌ  Ｌ．Ｎｏｒｍａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＣＤ４＋  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｒｅｖｅｒｓｅｓ  ｌｕｐｕｓ．Ｓｃｉ  Ｔｒａｎｓｌ  Ｍｅｄ．２０１５；７（２７４）：２７４ｒａ１８．Ｅｐｕｂ  ２０１５／０２／１３．ｄｏｉ：１０．１１２６／ｓｃｉｔｒａｎｓｌｍｅｄ．ａａａ０８３５．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２５６７３７６３；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ５２９２７２３．
５４．Ｂｕｃｋ  ＭＤ，Ｏ′Ｓｕｌｌｉｖａｎ  Ｄ，Ｐｅａｒｃｅ  ＥＬ．Ｔ  ｃｅｌｌ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｄｒｉｖｅｓ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ．Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．２０１５；２１２（９）：１３４５−６０．Ｅｐｕｂ  ２０１５／０８／１２．ｄｏｉ：１０．１０８４／ｊｅｍ．２０１５１１５９．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２６２６１２６６；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ４５４８０５２．
５５．Ｄｏｈｅｒｔｙ  ＪＲ，Ｙａｎｇ  Ｃ，Ｓｃｏｔｔ  ＫＥ，Ｃａｍｅｒｏｎ  ＭＤ，Ｆａｌｌａｈｉ  Ｍ，Ｌｉ  Ｗ，Ｈａｌｌ  ＭＡ，Ａｍｅｌｉｏ  ＡＬ，Ｍｉｓｈｒａ  ＪＫ，Ｌｉ  Ｆ，Ｔｏｒｔｏｓａ  Ｍ，Ｇｅｎａｕ  ＨＭ，Ｒｏｕｎｂｅｈｌｅｒ  ＲＪ，Ｌｕ  Ｙ，Ｄａｎｇ  ＣＶ，Ｋｕｍａｒ  ＫＧ，Ｂｕｔｌｅｒ  ＡＡ，Ｂａｎｎｉｓｔｅｒ  ＴＤ，Ｈｏｏｐｅｒ  ＡＴ，Ｕｎｓａｌ−Ｋａｃｍａｚ  Ｋ，Ｒｏｕｓｈ  ＷＲ，Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ  ＪＬ．Ｂｌｏｃｋｉｎｇ  ｌａｃｔａｔｅ  ｅｘｐｏｒｔ  ｂｙ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｍｙｃ  ｔａｒｇｅｔ  ＭＣＴ１  Ｄｉｓａｂｌｅｓ  ｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓ  ａｎｄ  ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．２０１４；７４（３）：９０８−２０．Ｅｐｕｂ  ２０１３／１１／２９．ｄｏｉ：１０．１１５８／０００８−５４７２．ＣＡＮ−１３−２０３４．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２４２８５７２８；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ３９４６４１５．
５６．Ｗａｎｇ  Ｒ，Ｄｉｌｌｏｎ  ＣＰ，Ｓｈｉ  ＬＺ，Ｍｉｌａｓｔａ  Ｓ，Ｃａｒｔｅｒ  Ｒ，Ｆｉｎｋｅｌｓｔｅｉｎ  Ｄ，ＭｃＣｏｒｍｉｃｋ  ＬＬ，Ｆｉｔｚｇｅｒａｌｄ  Ｐ，Ｃｈｉ  Ｈ，Ｍｕｎｇｅｒ  Ｊ，Ｇｒｅｅｎ  ＤＲ．Ｔｈｅ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｆａｃｔｏｒ  Ｍｙｃ  ｃｏｎｔｒｏｌｓ  ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ  ｕｐｏｎ  Ｔ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．２０１１；３５（６）：８７１−８２．Ｅｐｕｂ  ２０１１／１２／２７．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｉｍｍｕｎｉ．２０１１．０９．０２１．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２２１９５７４４；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ３２４８７９８．
５７．Ｃｈｏ  ＫＳ，Ｙａｍａｄａ  Ｔ，Ｗｙｎｎ  Ｃ，Ｂｅｈａｎｎａ  ＨＡ，Ｈｏｎｇ  ＩＣ，Ｍａｎａｖｅｓ  Ｖ，Ｎａｋａｎｉｓｈｉ  Ｔ，Ｈｉｒｏｓｅ  Ｊ，Ａｂｅ  Ｙ，Ｊｉａｎｇ  Ｈ，Ｔａｍｕｒａ  Ｋ，Ｓａｉｔａ  Ｙ．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｇｒａｆｔ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｂｙ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ−１  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．２０１０；９０（１２）：１２９９−３０６．Ｅｐｕｂ  ２０１０／１１／１６．ｄｏｉ：１０．１０９７／ＴＰ．０ｂ０１３ｅ３１８１ｆｆ８８１８．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２１０７６３８０．
５８．Ｅｋｂｅｒｇ  Ｈ，Ｑｉ  Ｚ，Ｐａｈｌｍａｎ  Ｃ，Ｖｅｒｅｓｓ  Ｂ，Ｂｕｎｄｉｃｋ  ＲＶ，Ｃｒａｇｇｓ  ＲＩ，Ｈｏｌｎｅｓｓ  Ｅ，Ｅｄｗａｒｄｓ  Ｓ，Ｍｕｒｒａｙ  ＣＭ，Ｆｅｒｇｕｓｏｎ  Ｄ，Ｋｅｒｒｙ  ＰＪ，Ｗｉｌｓｏｎ  Ｅ，Ｄｏｎａｌｄ  ＤＫ．Ｔｈｅ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ−１（ＭＣＴ−１）ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ＡＲ−Ｃ１１７９７７，ｉｎｄｕｃｅｓ  ｄｏｎｏｒ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ，ｒｅｄｕｃｉｎｇ  ａｃｕｔｅ  ａｎｄ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ａｌｌｏｇｒａｆｔ  ｒｅｊｅｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒａｔ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．２００７；８４（９）：１１９１−９．ｄｏｉ：１０．１０９７／０１．ｔｐ．００００２８７５４１．５３３８９．ｂｅ．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１７９９８８７６．
５９．Ｄｕｒｒｂａｃｈ  Ａ，Ｆｒａｎｃｏｉｓ  Ｈ．Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｌａｃｔａｔｅ  ｆｌｕｘ：ａ  ｎｅｗ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｌｌｏｇｅｎｉｃ  ｉｍｍｕｎｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ．Ｔｒａｎｓｐｌ  Ｉｎｔ．２０１３；２６（１）：２０−１．Ｅｐｕｂ  ２０１２／１２／１５．ｄｏｉ：１０．１１１１／ｔｒｉ．１２０３５．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２３２３７５７８．
６０．Ｒｕｂｔｓｏｖ  ＹＰ，Ｎｉｅｃ  ＲＥ，Ｊｏｓｅｆｏｗｉｃｚ  Ｓ，Ｌｉ  Ｌ，Ｄａｒｃｅ  Ｊ，Ｍａｔｈｉｓ  Ｄ，Ｂｅｎｏｉｓｔ  Ｃ，Ｒｕｄｅｎｓｋｙ  ＡＹ．Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅａｇｅ  ｉｎ  ｖｉｖｏ．Ｓｃｉｅｎｃｅ．２０１０；３２９（５９９９）：１６６７−７１．Ｅｐｕｂ  ２０１０／１０／１２．ｄｏｉ：１０．１１２６／ｓｃｉｅｎｃｅ．１１９１９９６．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２０９２９８５１；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ４２６２１５１．
６１．Ｓａｋａｇｕｃｈｉ  Ｓ，Ｖｉｇｎａｌｉ  ＤＡ，Ｒｕｄｅｎｓｋｙ  ＡＹ，Ｎｉｅｃ  ＲＥ，Ｗａｌｄｍａｎｎ  Ｈ．Ｔｈｅ  ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２０１３；１３（６）：４６１−７．Ｅｐｕｂ  ２０１３／０５／１８．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｒｉ３４６４．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２３６８１０９７．
６２．Ｈｏｅｐｐｌｉ  ＲＥ，Ｗｕ  Ｄ，Ｃｏｏｋ  Ｌ，Ｌｅｖｉｎｇｓ  ＭＫ．Ｔｈｅ  ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ  ｏｆ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｂｉｏｌｏｇｙ：ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ，ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ，ａｎｄ  ｔｈｅ  ｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅ．Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２０１５；６：６１．Ｅｐｕｂ  ２０１５／０３／０６．ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｉｍｍｕ．２０１５．０００６１．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２５７４１３３８；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ４３３２３５１．
６３．Ｖｅｔｔｅｒ  Ｉ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＦＬＩＰＲ  ｈｉｇｈ  ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ  ｃａｌｃｉｕｍ  ａｓｓａｙｓ  ｆｏｒ  ｉｏｎ  ｃｈａｎｎｅｌｓ  ａｎｄ  ＧＰＣＲｓ．Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ．２０１２；７４０：４５−８２．Ｅｐｕｂ  ２０１２／０３／２９．ｄｏｉ：１０．１００７／９７８−９４−００７−２８８８−２＿３．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２２４５３９３８．
６４．Ｍａｎｎｉｎｇ  Ｆｏｘ  ＪＥ，Ｍｅｒｅｄｉｔｈ  Ｄ，Ｈａｌｅｓｔｒａｐ  ＡＰ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ４  ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｔｅｓ  ｉｔｓ  ｒｏｌｅ  ｉｎ  ｌａｃｔｉｃ  ａｃｉｄ  ｅｆｆｌｕｘ  ｆｒｏｍ  ｓｋｅｌｅｔａｌ  ｍｕｓｃｌｅ．Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ．２０００；５２９  Ｐｔ  ２：２８５−９３．Ｅｐｕｂ  ２０００／１２／０２．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１１１０１６４０；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ２２７０２０４．
６５．Ｍｕｒｒａｙ  ＣＭ，Ｈｕｔｃｈｉｎｓｏｎ  Ｒ，Ｂａｎｔｉｃｋ  ＪＲ，Ｂｅｌｆｉｅｌｄ  ＧＰ，Ｂｅｎｊａｍｉｎ  ＡＤ，Ｂｒａｚｍａ  Ｄ，Ｂｕｎｄｉｃｋ  ＲＶ，Ｃｏｏｋ  ＩＤ，Ｃｒａｇｇｓ  ＲＩ，Ｅｄｗａｒｄｓ  Ｓ，Ｅｖａｎｓ  ＬＲ，Ｈａｒｒｉｓｏｎ  Ｒ，Ｈｏｌｎｅｓｓ  Ｅ，Ｊａｃｋｓｏｎ  ＡＰ，Ｊａｃｋｓｏｎ  ＣＧ，Ｋｉｎｇｓｔｏｎ  ＬＰ，Ｐｅｒｒｙ  ＭＷ，Ｒｏｓｓ  ＡＲ，Ｒｕｇｍａｎ  ＰＡ，Ｓｉｄｈｕ  ＳＳ，Ｓｕｌｌｉｖａｎ  Ｍ，Ｔａｙｌｏｒ−Ｆｉｓｈｗｉｃｋ  ＤＡ，Ｗａｌｋｅｒ  ＰＣ，Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ  ＹＭ，Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ  ＤＪ，Ｗｒｉｇｈｔ  Ａ，Ｄｏｎａｌｄ  ＤＫ．Ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ＭＣＴ１  ｉｓ  ａ  ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｎａｔ  Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ．２００５；１（７）：３７１−６．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１６３７０３７２．
６６．Ｂｉｒｓｏｙ  Ｋ，Ｗａｎｇ  Ｔ，Ｐｏｓｓｅｍａｔｏ  Ｒ，Ｙｉｌｍａｚ  ＯＨ，Ｋｏｃｈ  ＣＥ，Ｃｈｅｎ  ＷＷ，Ｈｕｔｃｈｉｎｓ  ＡＷ，Ｇｕｌｔｅｋｉｎ  Ｙ，Ｐｅｔｅｒｓｏｎ  ＴＲ，Ｃａｒｅｔｔｅ  ＪＥ，Ｂｒｕｍｍｅｌｋａｍｐ  ＴＲ，Ｃｌｉｓｈ  ＣＢ，Ｓａｂａｔｉｎｉ  ＤＭ．ＭＣＴ１−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｏｆ  ａ  ｔｏｘｉｃ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ｉｓ  ａｎ  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｓｔｒａｔｅｇｙ  ｆｏｒ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｇｌｙｃｏｌｙｔｉｃ  ｔｕｍｏｒｓ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ．２０１３；４５（１）：１０４−８．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｇ．２４７１．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２３２０２１２９；ＰＭＣＩＤ：３５３０６４７．
６７．Ｙｏｕｍ  ＹＨ，Ｎｇｕｙｅｎ  ＫＹ，Ｇｒａｎｔ  ＲＷ，Ｇｏｌｄｂｅｒｇ  ＥＬ，Ｂｏｄｏｇａｉ  Ｍ，Ｋｉｍ  Ｄ，Ｄ′Ａｇｏｓｔｉｎｏ  Ｄ，Ｐｌａｎａｖｓｋｙ  Ｎ，Ｌｕｐｆｅｒ  Ｃ，Ｋａｎｎｅｇａｎｔｉ  ＴＤ，Ｋａｎｇ  Ｓ，Ｈｏｒｖａｔｈ  ＴＬ，Ｆａｈｍｙ  ＴＭ，Ｃｒａｗｆｏｒｄ  ＰＡ，Ｂｉｒａｇｙｎ  Ａ，Ａｌｎｅｍｒｉ  Ｅ，Ｄｉｘｉｔ  ＶＤ．Ｔｈｅ  ｋｅｔｏｎｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ  ｂｅｔａ−ｈｙｄｒｏｘｙｂｕｔｙｒａｔｅ  ｂｌｏｃｋｓ  ＮＬＲＰ３  ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．２０１５；２１（３）：２６３−９．Ｅｐｕｂ  ２０１５／０２／１７．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｍ．３８０４．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２５６８６１０６；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ４３５２１２３．
６８．Ｂａｌａｓｕｂｒａｍａｎｉａｍ  Ｓ，Ｌｅｗｉｓ  Ｂ，Ｇｒｅｅｄ  Ｌ，Ｍｅｉｌｉ  Ｄ，Ｆｌｉｅｒ  Ａ，Ｙａｍａｍｏｔｏ  Ｒ，Ｂｉｌｉｃ  Ｋ，Ｔｉｌｌ  Ｃ，Ｓａｓｓ  ＪＯ．Ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｕｓ  Ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  １（ＭＣＴ１，ＳＬＣ１６Ａ１）Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ａｓ  ａ  Ｃａｕｓｅ  ｏｆ  Ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ  Ｋｅｔｏａｃｉｄｏｓｉｓ．ＪＩＭＤ  Ｒｅｐ．２０１６；２９：３３−８．Ｅｐｕｂ  ２０１５／１１／２７．ｄｏｉ：１０．１００７／８９０４＿２０１５＿５１９．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２６６０８３９２；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ５０５９２０３．
６９．Ｐｈｉｌｐ  ＮＪ，Ｏｃｈｒｉｅｔｏｒ  ＪＤ，Ｒｕｄｏｙ  Ｃ，Ｍｕｒａｍａｔｓｕ  Ｔ，Ｌｉｎｓｅｒ  ＰＪ．Ｌｏｓｓ  ｏｆ  ＭＣＴ１，ＭＣＴ３，ａｎｄ  ＭＣＴ４  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒｅｔｉｎａｌ  ｐｉｇｍｅｎｔ  ｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ  ａｎｄ  ｎｅｕｒａｌ  ｒｅｔｉｎａ  ｏｆ  ｔｈｅ  ５Ａ１１／ｂａｓｉｇｉｎ−ｎｕｌｌ  ｍｏｕｓｅ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ＆Ｖｉｓｕａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ．２００３；４４（３）：１３０５−１１．Ｅｐｕｂ  ２００３／０２／２６．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１２６０１０６３．
７０．Ｖａｉｈｋｏｎｅｎ  ＬＫ，Ｐｏｓｏ  ＡＲ．Ｉｎｔｅｒｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  ｖａｒｉａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｏｔａｌ  ａｎｄ  ｃａｒｒｉｅｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｌａｃｔａｔｅ  ｉｎｆｌｕｘ  ｉｎｔｏ  ｒｅｄ  ｂｌｏｏｄ  ｃｅｌｌｓ．Ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ．１９９８；２７４（４  Ｐｔ  ２）：Ｒ１０２５−３０．Ｅｐｕｂ  １９９８／０５／１２．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：９５７５９６５．
７１．Ｍｅｒｅｚｈｉｎｓｋａｙａ  Ｎ，Ｆｉｓｈｂｅｉｎ  ＷＮ，Ｄａｖｉｓ  ＪＩ，Ｆｏｅｌｌｍｅｒ  ＪＷ．Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ＭＣＴ１  ｃＤＮＡ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｓｙｍｐｔｏｍａｔｉｃ  ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｉｎ  ｌａｃｔａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ．Ｍｕｓｃｌｅ  ＆  Ｎｅｒｖｅ．２０００；２３（１）：９０−７．Ｅｐｕｂ  １９９９／１２／１１．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１０５９０４１１．
７２．Ｋｏｈｏ  ＮＭ，Ｖａｉｈｋｏｎｅｎ  ＬＫ，Ｐｏｓｏ  ＡＲ．Ｌａｃｔａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｉｎ  ｒｅｄ  ｂｌｏｏｄ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ．Ｅｑｕｉｎｅ  Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ  Ｊｏｕｒｎａｌ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ．２００２（３４）：５５５−９．Ｅｐｕｂ  ２００２／１０／３１．ｄｏｉ：１０．１１１１／ｊ．２０４２−３３０６．２００２．ｔｂ０５４８２．ｘ．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１２４０５７５０．
７３．Ｋｏｈｏ  ＮＭ，Ｒａｅｋａｌｌｉｏ  Ｍ，Ｋｕｕｓｅｌａ  Ｅ，Ｖｕｏｌｌｅ  Ｊ，Ｐｏｓｏ  ＡＲ．Ｌａｃｔａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｉｎ  ｃａｎｉｎｅ  ｒｅｄ  ｂｌｏｏｄ  ｃｅｌｌｓ．Ａｍ  Ｊ  Ｖｅｔ  Ｒｅｓ．２００８；６９（８）：１０９１−６．Ｅｐｕｂ  ２００８／０８／０５．ｄｏｉ：１０．２４６０／ａｊｖｒ．６９．８．１０９１．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１８６７２９７６．
７４．Ｋｏｈｏ  ＮＭ，Ｈｙｙｐｐａ  Ｓ，Ｐｏｓｏ  ＡＲ．Ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ（ＭＣＴ）ａｓ  ｌａｃｔａｔｅ  ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  ｅｑｕｉｎｅ  ｍｕｓｃｌｅ  ａｎｄ  ｒｅｄ  ｂｌｏｏｄ  ｃｅｌｌｓ．Ｅｑｕｉｎｅ  Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ  Ｊｏｕｒｎａｌ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ．２００６（３６）：３５４−８．Ｅｐｕｂ  ２００７／０４／０４．ｄｏｉ：１０．１１１１／ｊ．２０４２−３３０６．２００６．ｔｂ０５５６８．ｘ．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１７４０２４４７．
７５．Ｄｅｕｔｉｃｋｅ  Ｂ．Ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｉｎ  ｒｅｄ  ｂｌｏｏｄ  ｃｅｌｌｓ：ｋｉｎｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．１９８９；１７３：３００−２９．Ｅｐｕｂ  １９８９／０１／０１．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２６７４６１４．
７６．Ｄｕｂｉｎｓｋｙ  ＷＰ，Ｒａｃｋｅｒ  Ｅ．Ｔｈｅ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ｌａｃｔａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ．Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ．１９７８；４４（１）：２５−３６．Ｅｐｕｂ  １９７８／１２／０８．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：３２３９８．
７７．Ｐａｔｔｉｌｌｏ  ＲＥ，Ｇｌａｄｄｅｎ  ＬＢ．Ｒｅｄ  ｂｌｏｏｄ  ｃｅｌｌ  ｌａｃｔａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｉｎ  ｓｉｃｋｌｅ  ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  ｓｉｃｋｌｅ  ｃｅｌｌ  ｔｒａｉｔ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ．２００５；９９（３）：８２２−７．Ｅｐｕｂ  ２００５／０５／１４．ｄｏｉ：１０．１１５２／ｊａｐｐｌｐｈｙｓｉｏｌ．００２３５．２００５．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１５８９０７５５．
７８．Ｐｏｏｌｅ  ＲＣ，Ｃｒａｎｍｅｒ  ＳＬ，Ｈｏｌｄｕｐ  ＤＷ，Ｈａｌｅｓｔｒａｐ  ＡＰ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌ−ｌａｃｔａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ａｎｄ  ｂａｎｄ  ３−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ａｎｉｏｎ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｉｎ  ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｎｏｖｅｌ  ｓｔｉｌｂｅｎｅｄｉｓｕｌｐｈｏｎａｔｅ  Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−ｔｅｔｒａｂｅｎｚｙｌ−４，４′−ｄｉａｍｉｎｏｓｔｉｌｂｅｎｅ−２，２′−ｄｉｓｕｌｐｈｏ  ｎａｔ  ｅ（ＴＢｅｎｚＤＳ）．Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ  ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  Ａｃｔａ．１９９１；１０７０（１）：６９−７６．Ｅｐｕｂ  １９９１／１１／１８．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１７５１５４０．
７９．Ｌｅｎｇａｃｈｅｒ  Ｓ，Ｎｅｈｉｒｉ−Ｓｉｔａｙｅｂ  Ｔ，Ｓｔｅｉｎｅｒ  Ｎ，Ｃａｒｎｅｉｒｏ  Ｌ，Ｆａｖｒｏｄ  Ｃ，Ｐｒｅｉｔｎｅｒ  Ｆ，Ｔｈｏｒｅｎｓ  Ｂ，Ｓｔｅｈｌｅ  ＪＣ，Ｄｉｘ  Ｌ，Ｐｒａｌｏｎｇ  Ｆ，Ｍａｇｉｓｔｒｅｔｔｉ  ＰＪ，Ｐｅｌｌｅｒｉｎ  Ｌ．Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ｄｉｅｔ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｏｂｅｓｉｔｙ  ａｎｄ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｐｅｒｔｕｒｂａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｈａｐｌｏｉｎｓｕｆｆｉｃｉｅｎｔ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  １  ｍｉｃｅ．ＰｌｏＳ  Ｏｎｅ．２０１３；８（１２）：ｅ８２５０５．Ｅｐｕｂ  ２０１３／１２／２５．ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００８２５０５．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２４３６７５１８；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ３８６７３５０．
８０．Ｌｅｅ  Ｙ，Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ＢＭ，Ｌｉ  Ｙ，Ｌｅｎｇａｃｈｅｒ  Ｓ，Ｆａｒａｈ  ＭＨ，Ｈｏｆｆｍａｎ  ＰＮ，Ｌｉｕ  Ｙ，Ｔｓｉｎｇａｌｉａ  Ａ，Ｊｉｎ  Ｌ，Ｚｈａｎｇ  ＰＷ，Ｐｅｌｌｅｒｉｎ  Ｌ，Ｍａｇｉｓｔｒｅｔｔｉ  ＰＪ，Ｒｏｔｈｓｔｅｉｎ  ＪＤ．Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｇｌｉａ  ｍｅｔａｂｏｌｉｃａｌｌｙ  ｓｕｐｐｏｒｔ  ａｘｏｎｓ  ａｎｄ  ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅ  ｔｏ  ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ．Ｎａｔｕｒｅ．２０１２；４８７（７４０８）：４４３−８．Ｅｐｕｂ  ２０１２／０７／１８．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎａｔｕｒｅ１１３１４．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２２８０１４９８；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ３４０８７９２．
８１．Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ＢＭ，Ｔｓｉｎｇａｌｉａ  Ａ，Ｖｉｄｅｎｓｋｙ  Ｓ，Ｌｅｅ  Ｙ，Ｊｉｎ  Ｌ，Ｆａｒａｈ  ＭＨ，Ｌｅｎｇａｃｈｅｒ  Ｓ，Ｍａｇｉｓｔｒｅｔｔｉ  ＰＪ，Ｐｅｌｌｅｒｉｎ  Ｌ，Ｒｏｔｈｓｔｅｉｎ  ＪＤ．Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｉｎ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  １（ＭＣＴ１）ｉｎ  ｍｉｃｅ  ｄｅｌａｙｓ  ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｎｅｒｖｅｓ  ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ｓｃｉａｔｉｃ  ｎｅｒｖｅ  ｃｒｕｓｈ．Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ．２０１５；２６３：３２５−３８．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｅｘｐｎｅｕｒｏｌ．２０１４．１０．０１８．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２５４４７９４０．
８２．Ｙａｎ  Ｗ．Ｍａｌｅ  ｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ  ｃａｕｓｅｄ  ｂｙ  ｓｐｅｒｍｉｏｇｅｎｉｃ  ｄｅｆｅｃｔｓ：ｌｅｓｓｏｎｓ  ｆｒｏｍ  ｇｅｎｅ  ｋｎｏｃｋｏｕｔｓ．Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．２００９；３０６（１−２）：２４−３２．Ｅｐｕｂ  ２００９／０６／０２．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｍｃｅ．２００９．０３．００３．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１９４８１６８２；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ５４３８２６０．
８３．Ｍｕｒｄｏｃｈ  Ｆ，Ｇｏｌｄｂｅｒｇ  Ｅ．Ｍａｌｅ  ｃｏｎｔｒａｃｅｐｔｉｏｎ：ａｎｏｔｈｅｒ  Ｈｏｌｙ  Ｇｒａｉｌ．Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ  ２０１４；２４（２）：４１９−２４．Ｅｐｕｂ  Ｅｐｕｂ  ２０１３  Ｄｅｃ  ７．ｄｏｉ：ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｂｍｃｌ．２０１３．１２．００４．
８４．Ｓｅｘｔｏｎ  ＪＺ，Ｄａｎｓｈｉｎａ  ＰＶ，Ｌａｍｓｏｎ  ＤＲ，Ｈｕｇｈｅｓ  Ｍ，Ｈｏｕｓｅ  ＡＪ，Ｙｅｈ  ＬＡ，Ｏ′Ｂｒｉｅｎ  ＤＡ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＫＰ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ａｎｄ  Ｉｍｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  Ｈｉｇｈ  Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ  Ｓｃｒｅｅｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｐｅｒｍ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｉｓｏｆｏｒｍ  ｏｆ  Ｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ  ３−Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  Ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ（ＧＡＰＤＨＳ）．Ｃｕｒｒ  Ｃｈｅｍ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ．２０１１；５：３０−４１．Ｅｐｕｂ  ２０１１／０７／１６．ｄｏｉ：１０．２１７４／１８７５３９７３０１１０５０１００３０．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２１７６０８７７；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ３１３４９４４．
８５．Ｈａｌｆｏｒｄ  ＳＥＲ，Ｊｏｎｅｓ  Ｐ，Ｗｅｄｇｅ  Ｓ，Ｈｉｒｓｃｈｂｅｒｇ  Ｓ，Ｋａｔｕｇａｍｐｏｌａ  Ｓ，Ｖｅａｌ  Ｇ，Ｐａｙｎｅ  Ｇ，Ｂａｃｏｎ  Ｃ，Ｐｏｔｔｅｒ  Ｓ，Ｇｒｉｆｆｉｎ  Ｍ，Ｃｈｅｎａｒｄ−Ｐｏｉｒｉｅｒ  Ｍ，Ｐｅｔｒｉｄｅｓ  Ｇ，Ｈｏｌｄｅｒ  Ｇ，Ｋｅｕｎ  ＨＣ，Ｂａｎｅｒｊｉ  Ｕ，Ｐｌｕｍｍｅｒ  ＥＲ．Ａ  ｆｉｒｓｔ−ｉｎ−ｈｕｍａｎ  ｆｉｒｓｔ−ｉｎ−ｃｌａｓｓ（ＦＩＣ）ｔｒｉａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  １（ＭＣＴ１）ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ＡＺＤ３９６５  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｕｒｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ．２０１７；３５（１５＿ｓｕｐｐｌ）：２５１６−．ｄｏｉ：１０．１２００／ＪＣＯ．２０１７．３５．１５＿ｓｕｐｐｌ．２５１６．
８６．Ｓｍｉｔｈ  ＡＪ．Ｎｅｗ  ｈｏｒｉｚｏｎｓ  ｉｎ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ：ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ  ａｎｄ  ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ  ｖｅｒｓｕｓ  ｓｍａｌｌ−ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．Ｊ  Ｂｉｏｍｏｌ  Ｓｃｒｅｅｎ．２０１５；２０（４）：４３７−５３．Ｅｐｕｂ  ２０１４／１２／１７．ｄｏｉ：１０．１１７７／１０８７０５７１１４５６２５４４．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２５５１２３２９．
８７．Ｊｏｎｅｓ  ＴＤ，Ｃｒｏｍｐｔｏｎ  ＬＪ，Ｃａｒｒ  ＦＪ，Ｂａｋｅｒ  ＭＰ．Ｄｅｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｉｎ：Ｄｉｍｉｔｒｏｖ  ＡＳ，ｅｄｉｔｏｒ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ．Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ：Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ；２００９．ｐ．４０５−２３．
８８．Ｋｉｒｋ  Ｐ，Ｗｉｌｓｏｎ  ＭＣ，Ｈｅｄｄｌｅ  Ｃ，Ｂｒｏｗｎ  ＭＨ，Ｂａｒｃｌａｙ  ＡＮ，Ｈａｌｅｓｔｒａｐ  ＡＰ．ＣＤ１４７  ｉｓ  ｔｉｇｈｔｌｙ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｌａｃｔａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ  ＭＣＴ１  ａｎｄ  ＭＣＴ４  ａｎｄ  ｆａｃｉｌｉｔａｔｅｓ  ｔｈｅｉｒ  ｃｅｌｌ  ｓｕｒｆａｃｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｔｈｅ  ＥＭＢＯ  Ｊｏｕｒｎａｌ．２０００；１９（１５）：３８９６−９０４．ｄｏｉ：１０．１０９３／ｅｍｂｏｊ／１９．１５．３８９６．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１０９２１８７２；ＰＭＣＩＤ：３０６６１３．
８９．Ｔｏｌｅｉｋｉｓ  Ｌ，Ｆｒｅｎｚｅｌ  Ａ．Ｃｌｏｎｉｎｇ  ｓｉｎｇｌｅ−ｃｈａｉｎ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｆｒａｇｍｅｎｔｓ（ＳｃＦｖ）ｆｒｏｍ  ｈｙｒｂｉｄｏｍａ  ｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ．２０１２；９０７：５９−７１．Ｅｐｕｂ  ２０１２／０８／２２．ｄｏｉ：１０．１００７／９７８−１−６１７７９−９７４−７＿３．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２２９０７３４５．
９０．Ｇｌｅｉｃｈｍａｎｎ  Ｅ，Ｖａｎ  Ｅｌｖｅｎ  ＥＨ，Ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｖｅｅｎ  ＪＰ．Ａ  ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｌｕｐｕｓ  ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ（ＳＬＥ）−ｌｉｋｅ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｉｎ  ｍｉｃｅ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ａｂｎｏｒｍａｌ  Ｔ−Ｂ  ｃｅｌｌ  ｃｏｏｐｅｒａｔｉｏｎ．Ｐｒｅｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ  ｏｆ  ＳＬＥ．Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．１９８２；１２（２）：１５２−９．Ｅｐｕｂ  １９８２／０２／０１．ｄｏｉ：１０．１００２／ｅｊｉ．１８３０１２０２１０．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：６９７８８１８．
９１．Ｃｈｕ  ＹＷ，Ｇｒｅｓｓ  ＲＥ．Ｍｕｒｉｎｅ  ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｇｒａｆｔ−ｖｅｒｓｕｓ−ｈｏｓｔ  ｄｉｓｅａｓｅ：ｉｎｓｉｇｈｔｓ  ａｎｄ  ｕｎｒｅｓｏｌｖｅｄ  ｉｓｓｕｅｓ．Ｂｉｏｌ  Ｂｌｏｏｄ  Ｍａｒｒｏｗ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．２００８；１４（４）：３６５−７８．Ｅｐｕｂ  ２００８／０３／１８．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｂｂｍｔ．２００７．１２．００２．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：１８３４２７７８；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ２３７６０５０．
９２．Ｌｉｕ  Ｊ，Ｗａｎｇ  Ｌ，Ｚｈａｏ  Ｆ，Ｔｓｅｎｇ  Ｓ，Ｎａｒａｙａｎａｎ  Ｃ，Ｓｈｕｒａ  Ｌ，Ｗｉｌｌｉｎｇｈａｍ  Ｓ，Ｈｏｗａｒｄ  Ｍ，Ｐｒｏｈａｓｋａ  Ｓ，Ｖｏｌｋｍｅｒ  Ｊ，Ｃｈａｏ  Ｍ，Ｗｅｉｓｓｍａｎ  ＩＬ，Ｍａｊｅｔｉ  Ｒ．Ｐｒｅ−Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａ  Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ  Ａｎｔｉ−ＣＤ４７  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｗｉｔｈ  Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ．ＰｌｏＳ  Ｏｎｅ．２０１５；１０（９）：ｅ０１３７３４５．ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．０１３７３４５．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２６３９００３８；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ４５７７０８１．
９３．Ｋｅｌｌｅｙ  Ｍ，Ａｈｅｎｅ  ＡＢ，Ｇｏｒｏｖｉｔｓ  Ｂ，Ｋａｍｅｒｕｄ  Ｊ，Ｋｉｎｇ  ＬＥ，ＭｃＩｎｔｏｓｈ  Ｔ，ＹａｎｇＪ．Ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ  ｃｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ａｄｄｒｅｓｓ  ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ａｎｔｉ−ｄｒｕｇ  ａｎｔｉｂｏｄｙ（ＡＤＡ）ｏｎ  ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｂｉｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ｉｎ  ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ．ＡＡＰＳＪ．２０１３；１５（３）：６４６−５８．Ｅｐｕｂ  ２０１３／０４／０２．ｄｏｉ：１０．１２０８／ｓ１２２４８−０１３−９４６８−４．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２３５４３６０１；ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ３６９１４１９．
９４．Ｗａｒｂｕｒｇ，Ｏ．Ｏｎ  ｔｈｅ  ｏｒｉｇｉｎ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９５６，７２３，３０９−３１４．
９５．Ｋｏｐｐｅｎｏｌ，Ｗ．Ｈ．；Ｂｏｕｎｄｓ，Ｐ．Ｌ；Ｄａｎｇ，Ｃ．Ｖ．Ｏｔｔｏ  Ｗａｒｂｕｒｇ′ｓ  ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓ  ｔｏ  ｃｕｒｒｅｎｔ  ｃｏｎｃｅｐｔｓ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ  ２０１１，７７，３２５−３２７．
９６．Ｄｏｈｅｒｔｙ，Ｊ．Ｒ．；Ｙａｎｇ，Ｃ；Ｓｃｏｔｔ，Ｋ．；Ｃａｍｅｒｏｎ  Ｍ．Ｄ．；Ｆａｌｌａｈｉ，Ｍ．；Ｌｉ，Ｗ；Ｈａｌｌ，Ｍ．Ａ．；Ａｍｅｌｉｏ，Ａ．Ｌ．；Ｍｉｓｈｒａ，Ｊ．Ｋ．；Ｌｉ，Ｆ；Ｔｏｒｔｏｓａ，Ｍ．；Ｇｅｎａｕ，Ｈ．Ｍ．；Ｒｏｕｎｂｅｈｌｅｒ，Ｒ．Ｊ．；Ｙｕｎｇｉ，Ｌ．；Ｄａｎｇ，Ｃ．Ｖ．；Ｋｕｍａｒ，Ｋ．Ｇ．；Ｂｕｔｌｅｒ，Ａ．Ａ．；Ｂａｎｎｉｓｔｅｒ，Ｔ．Ｄ．；Ｈｏｏｐｅｒ，Ａ．Ｔ．；Ｕｎｓａｌ−Ｋａｃｍａｚ，Ｋ．；Ｒｏｕｓｈ，Ｗ．Ｒ．；ａｎｄ  Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ，Ｊ．Ｌ．Ｂｌｏｃｋｉｎｇ  ｌａｃｔａｔｅ  ｅｘｐｏｒｔ  ｂｙ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ  ｔｈｅ  ｍｙｃ  ｔａｒｇｅｔ  ＭＣＴ１  ｄｉｓａｂｌｅｓ  ｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓ  ａｎｄ  ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０１４，７４，９０８−９２０．
９７．Ｕｌｌａｈ，Ｍ．Ｓ．；Ｄａｖｉｅｓ，Ａ．Ｊ．；Ｈａｌｅｓｔｒａｐ，Ａ．Ｐ．Ｔｈｅ  ｐｌａｓｍａ  ｍｅｍｂｒａｎｅ  ｌａｃｔａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ＭＣＴ４，ｂｕｔ  ｎｏｔ  ＭＣＴ１，ｉｓ  ｕｐ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｂｙ  ｈｙｐｏｘｉａ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ａ  ＨＩＦ−１ａ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００６，２８７，９０３０−９０３７．
９８．Ｄａｎｇ，Ｃ．Ｖ．Ｔｈｅ  ｉｎｔｅｒｐｌａｙ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ＭＹＣ  ａｎｄ  ＨＩＦ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｗａｒｂｕｒｇ  ｅｆｆｅｃｔ．Ｅｒｎｓｔ  Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  Ｆｏｕｎｄ  Ｓｙｍｐ．Ｐｒｏｃ．２００７，３５−５３．
９９．Ｖａｕｐｅｌ，Ｐ．；Ｍａｙｅｒ，Ａ．Ｈｙｐｏｘｉａ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ：ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ  ａｎｄ  ｉｍｐａｃｔ  ｏｎ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｏｕｔｃｏｍｅ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  Ｒｅｖ．２００７，２６，２２５−２３９．
１００．Ｋｉｚａｋａ−Ｋｏｎｄｏｈ，Ｓ．；Ｉｎｏｕｅ，Ｍ．；Ｈａｒａｄａ，Ｈ．；Ｈｉｒａｏｋａ，Ｍ．Ｔｕｍｏｒ  ｈｙｐｏｘｉａ：ａ  ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｃｉ．２００３，９４，１０２１  −１０２８．
１０１．Ｏｔｏｎｋｏｓｋｉ，Ｔ；Ｊｉａｏ，Ｈ；Ｋａｍｉｎｅｎ−Ａｈｏｌａ，Ｎ；ｅｔ  ａｌ．Ｐｈｙｓｉｃａｌ  ｅｘｅｒｃｉｓｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｈｙｐｏｇｌｙｃｅｍｉａ  ｃａｕｓｅｄ  ｂｙ  ｆａｉｌｅｄ  ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ  ｏｆ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  １  ｉｎ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｂｅｔａ  ｃｅｌｌｓ．Ａｍ  Ｊ  Ｈｕｍ  Ｇｅｎｅｔ  ２００７；８７，４６７−４７４．
１０２．Ｚｈａｏ，Ｃ；Ｗｉｌｓｏｎ，Ｍ．Ｃ；Ｓｃｈｕｉｔ，Ｆ，；Ｈａｌｅｓｔｒａｐ，Ａ．Ｐ．；Ｒｕｔｔｅｒ，Ｇ．Ａ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｏｆ  ｌａｃｔａｔｅ／ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ｉｓｏｆｏｒｍｓ  ｉｎ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｉｓｌｅｔｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｅｘｏｃｒｉｎｅ  ｐａｎｃｒｅａｓ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ２００１；５０，３６１−３６６．
１０３．Ｏｔｏｎｋｏｓｋｉ，Ｔ．；Ｋａｍｉｎｅｎ，Ｎ，；Ｕｓｔｉｎｏｖ，Ｊ，；ｅｔ  ａｌ．Ｐｈｙｓｉｃａｌ  ｅｘｅｒｃｉｓｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｈｙｐｅｒｉｎｓｕｌｉｎｅｍｉｃ  ｈｙｐｏｇｌｙｃｅｍｉａ  ｉｓ  ａｎ  ａｕｔｏｓｏｍａｌ−ｄｏｍｉｎａｎｔ  ｔｒａｉｔ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ  ｂｙ  ａｂｎｏｒｍａｌ  ｐｙｒｕｖａｔｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｉｎｓｕｌｉｎ  ｒｅｌｅａｓｅ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ２００３；５２，１９９−２０４．
１０４．Ｐｕｌｌｅｎ  Ｔ．Ｊ，；Ｓｙｌｏｗ，Ｌ，；Ｓｕｎ，Ｇ．；Ｈａｌｅｓｔｒａｐ，Ａ．Ｐ．；Ｒｉｃｈｔｅｒ，Ｅ．Ａ．；Ｒｕｔｔｅｒ，Ｇ．Ａ．Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ−１（Ｓｌｃ１６ａ１  ）ｉｎ  Ｍｏｕｓｅ  Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｂｅｔａ−Ｃｅｌｌｓ  Ｌｅａｄｓ  ｔｏ  Ｒｅｌａｔｉｖｅ  Ｈｙｐｅｒｉｎｓｕｌｉｎｉｓｍ  Ｄｕｒｉｎｇ  Ｅｘｅｒｃｉｓｅ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ２０１２，６１，１７１９−１７２５．
１０５．Ｒｏｎｃａｒｏｌｏ  ＭＧ，Ｙｓｓｅｌ  Ｈ，Ｔｏｕｒａｉｎｅ  ＪＬ，Ｂｅｔｕｅｌ  Ｈ，Ｄｅ  Ｖｒｉｅｓ  ＪＥ，Ｓｐｉｔｓ  Ｈ．Ａｕｔｏｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｃｌｏｎｅｓ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｆｏｒ  ｃｌａｓｓ  Ｉ  ａｎｄ  ｃｌａｓｓ  ＩＩ  ＨＬＡ  ａｎｔｉｇｅｎｓ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｆｒｏｍ  ａ  ｈｕｍａｎ  ｃｈｉｍｅｒａ．Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．１９８８  Ｍａｙ  １；１６７（５）：１５２３−１５３４
１０６．Ｂａｃｃｈｅｔｔａ  Ｒ，Ｂｉｇｌｅｒ  Ｍ，Ｔｏｕｒａｉｎｅ  ＪＬ，Ｐａｒｋｍａｎ  Ｒ，Ｔｏｖｏ  ＰＡ，Ａｂｒａｍｓ  Ｊ，ｄｅ  Ｗａａｌ  Ｍａｌｅｆｙｔ  Ｒ，ｄｅ  Ｖｒｉｅｓ  ＪＥ，Ｒｏｎｃａｒｏｌｏ  ＭＧ．Ｈｉｇｈ  ｌｅｖｅｌｓ  ｏｆ  ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ａｒｅ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｔｏｌｅｒａｎｃｅ  ｉｎ  ＳＣＩＤ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ＨＬＡ  ｍｉｓｍａｔｃｈｅｄ  ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ．Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．１９９４；１７９（２）：４９３−５０２．
１０７．Ｗｉｎｆｒｉｅｄ  Ｂａｒｃｈｅｔ，Ｊｅｆｆｒｅｙ  Ｄ．Ｐｒｉｃｅ，Ｍａｒｉｎａ  Ｃｅｌｌａ，Ｍａｒｃｏ  Ｃｏｌｏｎｎａ，Ｓａｎｄｒａ  Ｋ．ＭａｃＭｉｌｌａｎ，Ｊ．Ｐｅｒｒｅｎ  Ｃｏｂｂ，Ｐａｕｌ  Ａ．Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｋｅｎｎｅｔｈ  Ｍ．Ｍｕｒｐｈｙ，Ｊｏｈｎ  Ｐ．Ａｔｋｉｎｓｏｎ，ａｎｄ  Ｃｌａｕｄｉａ  Ｋｅｍｐｅｒ．Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｓｕｐｐｒｅｓｓ  Ｔ−ｃｅｌｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｂｕｔ  ａｌｌｏｗ  ｆｏｒ  ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ−ｃｅｌｌ  ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ．Ｂｌｏｏｄ．２００６  Ｆｅｂ  １５；１０７（４）：１４９７−１５０４．
ＭＣＴ１および抗ＭＣＴ１抗体配列
ヒトＭＣＴ１アミノ酸配列
配列番号：１
ＭＰＰＡＶＧＧＰＶＧＹＴＰＰＤＧＧＷＧＷＡＶＶＩＧＡＦＩＳＩＧＦＳＹＡＦＰＫＳＩＴＶＦＦＫＥＩＥＧＩＦＨＡＴＴＳＥＶＳＷＩＳＳＩＭＬＡＶＭＹＧＧＧＰＩＳＳＩＬＶＮＫＹＧＳＲＩＶＭＩＶＧＧＣＬＳＧＣＧＬＩＡＡＳＦＣＮＴＶＱＱＬＹＶＣＩＧＶＩＧＧＬＧＬＡＦＮＬＮＰＡＬＴＭＩＧＫＹＦＹＫＲＲＰＬＡＮＧＬＡＭＡＧＳＰＶＦＬＣＴＬＡＰＬＮＱＶＦＦＧＩＦＧＷＲＧＳＦＬＩＬＧＧＬＬＬＮＣＣＶＡＧＡＬＭＲＰＩＧＰＫＰＴＫＡＧＫＤＫＳＫＡＳＬＥＫＡＧＫＳＧＶＫＫＤＬＨＤＡＮＴＤＬＩＧＲＨＰＫＱＥＫＲＳＶＦＱＴＩＮＱＦＬＤＬＴＬＦＴＨＲＧＦＬＬＹＬＳＧＮＶＩＭＦＦＧＬＦＡＰＬＶＦＬＳＳＹＧＫＳＱＨＹＳＳＥＫＳＡＦＬＬＳＩＬＡＦＶＤＭＶＡＲＰＳＭＧＬＶＡＮＴＫＰＩＲＰＲＩＱＹＦＦＡＡＳＶＶＡＮＧＶＣＨＭＬＡＰＬＳＴＴＹＶＧＦＣＶＹＡＧＦＦＧＦＡＦＧＷＬＳＳＶＬＦＥＴＬＭＤＬＶＧＰＱＲＦＳＳＡＶＧＬＶＴＩＶＥＣＣＰＶＬＬＧＰＰＬＬＧＲＬＮＤＭＹＧＤＹＫＹＴＹＷＡＣＧＶＶＬＩＩＳＧＩＹＬＦＩＧＭＧＩＮＹＲＬＬＡＫＥＱＫＡＮＥＱＫＫＥＳＫＥＥＥＴＳＩＤＶＡＧＫＰＮＥＶＴＫＡＡＥＳＰＤＱＫＤＴＤＧＧＰＫＥＥＥＳＰＶ
ＭＣＴ１  Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）ＶＨ
配列番号：２
ＱＶＱＬＫＡＴＧＰＧＬＶＱＰＴＱＴＬＳＩＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＴＰＧＫＧＬＥＷＭＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＳＥＦＫＳＲＬＳＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＦＬＫＭＮＳＬＫＴＤＤＴＧＶＹＹＣＡＲＮＳＷＹＨＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＡＳＶＴＶＳＳ
ＭＣＴ１  Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）ＶＬ
配列番号：３
ＮＩＨＬＴＱＳＰＳＬＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＬＳＣＫＧＳＱＮＩＮＮＹＬＡＷＦＱＱＫＦＧＥＴＰＫＬＬＩＹＮＲＨＮＬＱＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＮＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＦＣＹＱＹＳＤＧＹＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ
ＭＣＴ１  Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）ＶＨ  ＣＤＲ１
配列番号：４
ＧＦＳＬＴＮＹＨ
ＭＣＴ１  Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）ＶＨ  ＣＤＲ２
配列番号：５
ＩＲＳＳＧＮＴ
ＭＣＴ１  Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）ＶＨ  ＣＤＲ３
配列番号：６
ＡＲＮＳＷＹＨＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧ
ＭＣＴ１  Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）ＶＬ  ＣＤＲ１
配列番号：７
ＱＮＩＮＮＹ
ＭＣＴ１  Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）ＶＬ  ＣＤＲ２
配列番号：８
ＮＲＨ
ＭＣＴ１  Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）ＶＬ  ＣＤＲ３
配列番号：９
ＹＱＹＳＤＧＹＴ
Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）
＞ＩＮＸ３１０＿ＶＨ
配列番号：１０
ＱＶＱＬＫＡＴＧＰＧＬＶＱＰＴＱＴＬＳＩＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＴＰＧＫＧＬＥＷＭＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮ
ＳＥＦＫＳＲＬＳＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＦＬＫＭＮＳＬＫＴＤＤＴＧＶＹＹＣＡＲＮＳＷＹＨＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＡ
ＳＶＴＶＳＳ
＞ＩＮＸ３１０＿ＶＬ
配列番号：１１
ＮＩＨＬＴＱＳＰＳＬＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＬＳＣＫＧＳＱＮＩＮＮＹＬＡＷＦＱＱＫＦＧＥＴＰＫＬＬＩＹＮＲＨＮＬＱＴＧＩＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＮＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＦＣＹＱＹＳＤＧＹＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ
Ａｂ２（ＩＮＸ３５２）
＞ＩＮＸ３５２＿ＶＨ
配列番号：１２
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮ
ＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＳＷＹＨＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴ
ＬＶＴＶＳＳ
＞ＩＮＸ３５２｜ＩＮＸ３５６｜ＩＮＸ３６４＿ＶＬ
配列番号：１３
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＫＶＴＩＴＣＲＧＳＱＮＩＮＮＹＬＡＷＦＱＱＫＰＧＫＴＰＡＬＬＩＹＮＲＨＮＬＱＳＧＶＰＳ
ＲＦＲＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＹＣＹＱＹＳＤＧＹＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ
Ａｂ３（ＩＮＸ３５６）
＞ＩＮＸ３５６＿ＶＨ
配列番号：１４
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮ
ＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＳＷＹＨＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴ
ＭＶＴＶＳＳ
＞ＩＮＸ３５２｜ＩＮＸ３５６｜ＩＮＸ３６４＿ＶＬ
配列番号：１５
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＫＶＴＩＴＣＲＧＳＱＮＩＮＮＹＬＡＷＦＱＱＫＰＧＫＴＰＡＬＬＩＹＮＲＨＮＬＱＳＧＶＰＳ
ＲＦＲＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＹＣＹＱＹＳＤＧＹＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ
Ａｂ４（ＩＮＸ３６４）
＞ＩＮＸ３６４＿ＶＨ
配列番号：１６
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮ
ＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＳＷＹＨＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴ
ＬＶＴＶＳＳ
＞ＩＮＸ３５２｜ＩＮＸ３５６｜ＩＮＸ３６４＿ＶＬ
配列番号：１７
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＫＶＴＩＴＣＲＧＳＱＮＩＮＮＹＬＡＷＦＱＱＫＰＧＫＴＰＡＬＬＩＹＮＲＨＮＬＱＳＧＶＰＳ
ＲＦＲＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＹＣＹＱＹＳＤＧＹＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ
サイレントＩｇＧ１（定常）
Ｅ２６９Ｒ／Ｋ３２２Ａ
＞ＩｇＧ１＿ＩＮＸ＿Ｓｉｌｅｎｔ
配列番号：１８
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳ
ＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧ
ＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＲＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮ
ＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＡＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥ
ＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷ
ＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）可変重鎖ポリペプチド
配列番号：１９
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＳＷＹＨＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴ
ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）重鎖ポリペプチド
ａＭＣＴ１＿Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ＿ＶＨ１＿ｈＩｇＧ１＿ＩＮＸｓｉｌｅｎｔ＿ＨＣ
配列番号：２０
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＳＷＹＨＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＲＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＡＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）可変重鎖ポリペプチド
配列番号：２１
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）重鎖ポリペプチド
ａＭＣＴ１＿Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ＿ＶＨ２＿ｈＩｇＧ１＿ＩＮＸｓｉｌｅｎｔ＿ＨＣ
配列番号：２２
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）可変重鎖ポリペプチド
配列番号：２３
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）重鎖ポリペプチド
ａＭＣＴ１＿Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ＿ＶＨ３＿ｈＩｇＧ１＿ＩＮＸｓｉｌｅｎｔ＿ＨＣ
配列番号：２４
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）可変重鎖ポリペプチド
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）重鎖ポリペプチド
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）可変重鎖ポリペプチド
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）重鎖ポリペプチド
＞ａＭＣＴ１＿Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ＿ＶＨ＿ＡｍｂＣｏｎｓ＿ｈＩｇＧ１＿ＩＮＸｓｉｌｅｎｔ＿ＨＣ
配列番号：２８
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）可変重鎖ポリペプチド
配列番号：２９
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）重鎖ポリペプチド
ａＭＣＴ１＿Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ＿ＶＨ＿ＡｍｂＭｏｄ＿ｈＩｇＧ１＿ＩＮＸｓｉｌｅｎｔ＿ＨＣ
配列番号：３０
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）可変重鎖ポリペプチド
配列番号：３１
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）重鎖ポリペプチド
ａＭＣＴ１＿Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ＿ＶＨ＿ＡｍｂＡｇｇ＿ｈＩｇＧ１＿ＩＮＸｓｉｌｅｎｔ＿ＨＣ
配列番号：３２
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）可変軽鎖ポリペプチド
配列番号：３３
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）軽鎖ポリペプチド
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配列番号：３４
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）可変軽鎖ポリペプチド
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）軽鎖ポリペプチド
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）可変軽鎖ポリペプチド
配列番号：３７
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）軽鎖ポリペプチド
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）可変軽鎖ポリペプチド
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）軽鎖ポリペプチド
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）可変軽鎖ポリペプチド
配列番号：４３
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ヒト化Ａｂ１（ＩＮＸ３１０）軽鎖ポリペプチド
ａＭＣＴ１＿Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ＿ＶＬ＿ＡｍｂＡｇｇ＿ｈＫａｐｐａ＿ＬＣ
配列番号：４４
ＮＩＱＭＴＱＳＰＳＬＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＳＣＫＧＳＱＮＩＮＮＹＬＡＷＦＱＱＫＦＧＱＰＰＫＬＬＩＹＮＲＨＮＬＱＴＧＩＰＳ
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Ａｂ５（ＩＮＸ４０２）
＞ＶＨ  配列番号：４５
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＞ＬＣ  配列番号：４６
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Ａｂ６（ＩＮＸ４０３）
＞ＶＨ  配列番号：４７
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＞ＶＬ  配列番号：４８
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＫＶＴＩＴＣＲＧＳＱＮＩＮＮＹＬＡＷＦＱＱＫＰＧＫＴＰＡＬＬＩＹＮＲＨＮＬＱＳＧＶＰＳＲＦＲＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＹＣＹＱＹＳＤＧＹＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ
Ａｂ７（ＩＮＸ４０４）
＞ＶＨ  配列番号４９
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＞ＶＬ  配列番号５０
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＫＶＴＩＴＣＲＧＳＱＮＩＮＮＹＬＡＷＦＱＱＫＰＧＫＴＰＡＬＬＩＹＮＲＨＮＬＱＳＧＶＰＳＲＦＲＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＹＣＹＱＹＳＤＧＹＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ
Ａｂ８（ＩＮＸ４０５）
＞ＶＨ  配列番号：５１
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＞ＶＬ  配列番号：５２
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Ａｂ９（ＩＮＸ４０６）
＞ＶＨ  配列番号：５３
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＫＷＩＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：５４
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＫＶＴＩＴＣＲＧＳＱＮＩＮＮＹＬＡＷＦＱＱＫＰＧＫＴＰＡＬＬＩＹＮＲＨＮＬＱＳＧＶＰＳＲＦＲＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＹＣＹＱＹＳＤＧＹＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ
Ａｂ１０（ＩＮＸ４０７）
＞ＶＨ  配列番号５５
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＞ＶＬ  配列番号：５６
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Ａｂ１１（ＩＮＸ４０８）
＞ＶＨ  配列番号：５７
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＞ＶＬ  配列番号：５８
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Ａｂ１２（ＩＮＸ４０９）
＞ＶＨ  配列番号：５９
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＞ＶＬ  配列番号６０
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Ａｂ１３（ＩＮＸ４１０）
＞ＶＨ  配列番号：６１
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＞ＶＬ  配列番号：６２
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Ａｂ１４（ＩＮＸ４１１）
＞ＶＨ  配列番号６３
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ＶＬ  配列番号：６４
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Ａｂ１５（ＩＮＸ４１２）
＞ＶＨ  配列番号：６５
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＞ＶＬ  配列番号：６６
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Ａｂ１６（ＩＮＸ４１３）
＞ＶＨ  配列番号６７
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＞ＶＬ  配列番号：６８
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Ａｂ１７（ＩＮＸ４１４）
＞ＶＨ  配列番号：６９
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＫＲＷＶＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号７０
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Ａｂ１８（ＩＮＸ４１５）
＞ＶＨ  配列番号７１
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＭＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号７２
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Ａｂ１９（ＩＮＸ４１６）
＞ＶＨ  配列番号７３
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＲＷＶＨＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号７４
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Ａｂ２０（ＩＮＸ４１７）
＞ＶＨ  配列番号７５
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＶＱＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：７６
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Ａｂ２１（ＩＮＸ４１８）
＞ＶＨ  配列番号７７
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＶＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：７８
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Ａｂ２２（ＩＮＸ４１９）
＞ＶＨ  配列番号７９
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＶＱＧＳＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号８０
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Ａｂ２３（ＮＸ４２０）
＞ＶＨ  配列番号８１
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＦＶＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＬＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号８２
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＫＶＴＩＴＣＲＧＳＱＮＩＮＮＹＬＡＷＦＱＱＫＰＧＫＴＰＡＬＬＩＹＮＲＨＮＬＱＳＧＶＰＳＲＦＲＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＹＣＹＱＹＳＤＧＹＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ
Ａｂ２４（ＩＮＸ４２１）
＞ＶＨ  配列番号：８３
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＩＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＬＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号８４
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Ａｂ２５（ＩＮＸ４２２）
＞ＶＨ  配列番号８５
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＶＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＬＭＤＡＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：８６
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＫＶＴＩＴＣＲＧＳＱＮＩＮＮＹＬＡＷＦＱＱＫＰＧＫＴＰＡＬＬＩＹＮＲＨＮＬＱＳＧＶＰＳＲＦＲＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＹＣＹＱＹＳＤＧＹＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ
Ａｂ２６（ＩＮＸ４２３）
＞ＶＨ  配列番号：８７
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＶＱＧＷＷＹＳＰＧＹＹＬＭＤＡＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号８８
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Ａｂ２７（ＩＮＸ４２４）
＞ＶＨ  配列番号：８９
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＭＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＬＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号９０
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Ａｂ２８（ＩＮＸ４２５）
＞ＶＨ  配列番号：９１
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＲＷＶＨＧＴＹＦＳＰＧＹＹＬＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：９２
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＫＶＴＩＴＣＲＧＳＱＮＩＮＮＹＬＡＷＦＱＱＫＰＧＫＴＰＡＬＬＩＹＮＲＨＮＬＱＳＧＶＰＳＲＦＲＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＹＣＹＱＹＳＤＧＹＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ
Ａｂ２９（ＩＮＸ４２６）
＞ＶＨ  配列番号：９３
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＶＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＬＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：９４
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＫＶＴＩＴＣＲＧＳＱＮＩＮＮＹＬＡＷＦＱＱＫＰＧＫＴＰＡＬＬＩＹＮＲＨＮＬＱＳＧＶＰＳＲＦＲＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＹＣＹＱＹＳＤＧＹＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ
Ａｂ３０（ＩＮＸ４２７）
＞ＶＨ  配列番号９５
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＞ＶＬ  配列番号：９６
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＫＶＴＩＴＣＲＧＳＱＮＩＮＮＹＬＡＷＦＱＱＫＰＧＫＴＰＡＬＬＩＹＮＲＨＮＬＱＳＧＶＰＳＲＦＲＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＹＣＹＱＹＳＤＧＹＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ
Ａｂ３１（ＩＮＸ４２８）
＞ＶＨ  配列番号：９７
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＳＷＹＨＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：９８
ＥＩＶＬＴＱＳＰＤＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＮＣＫＳＳＱＳＶＦＹＮＳＹＮＲＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＱＱＹＹＳＴＰＳＦＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ
Ａｂ３２（ＩＮＸ４２９）
＞ＶＨ  配列番号：９９
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＳＷＹＨＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号１００
ＡＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＮＹＬＡＷＦＱＱＫＰＧＫＡＰＫＳＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＤＳＰＰＹＴＦＧＬＧＴＫＬＥＩＫ
Ａｂ３３（ＩＮＸ４３０）
＞ＶＨ  配列番号：１０１
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＳＷＹＨＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１０２
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＡＭＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＴＬＱＳＧＶＡＳＲＦＳＧＲＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＤＩＬＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
Ａｂ３４（ＩＮＸ４３１）
＞ＶＨ  配列番号：１０３
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＳＷＹＨＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１０４
ＥＩＶＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＮＹＬＡＷＦＱＱＫＰＧＫＡＰＫＳＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＫＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＮＧＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＴＤＳＬＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ
Ａｂ３５（ＩＮＸ４３２）
＞ＶＨ  配列番号：１０５
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＳＷＹＨＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号１０６
ＮＩＨＬＴＱＳＰＳＬＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＬＳＣＫＧＳＱＮＩＮＮＹＬＡＷＦＱＱＫＦＧＥＴＰＫＬＬＩＹＮＲＨＮＬＱＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＮＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＦＣＹＱＹＳＤＧＹＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ
Ａｂ３６（ＩＮＸ４３３）
＞ＶＨ  配列番号：１０７
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＳＷＹＨＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１０８
ＮＩＨＬＴＱＳＰＳＬＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＬＳＣＫＧＳＱＮＩＮＮＹＬＡＷＦＱＱＫＦＧＥＴＰＫＬＬＩＹＮＲＨＮＬＱＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＮＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＦＣＹＱＹＳＤＧＹＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ
Ａｂ３７（ＩＮＸ４３４）
＞ＶＨ  配列番号：１０９
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＳＷＲＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１１０
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＡＭＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＴＬＱＳＧＶＡＳＲＦＳＧＲＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＤＩＬＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
Ａｂ３８（ＩＮＸ４３５）
＞ＶＨ  配列番号：１１１
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＦＶＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１１２
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＡＭＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＴＬＱＳＧＶＡＳＲＦＳＧＲＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＤＩＬＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
Ａｂ３９（ＩＮＸ４３６）
＞ＶＨ  配列番号：１１３
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＞ＶＬ  配列番号：１１４
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Ａｂ４０（ＩＮＸ４３７）
＞ＶＨ  配列番号：１１５
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＞ＶＬ  配列番号：１１６
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Ａｂ４１（ＩＮＸ４３８）
＞ＶＨ  配列番号：１１７
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＞ＶＬ  配列番号：１１８
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Ａｂ４２（ＩＮＸ４３９）
＞ＶＨ  配列番号：１１９
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＞ＶＬ  配列番号：１２０
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Ａｂ４３（ＩＮＸ４４０）
＞ＶＨ  配列番号：１２１
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＳＷＹＨＧＴＹＷＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１２２
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Ａｂ４４（ＩＮＸ４４１）
＞ＶＨ  配列番号：１２３
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＞ＶＬ  配列番号：１２４
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Ａｂ４５（ＩＮＸ４４２）
＞ＶＨ  配列番号：１２５
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＞ＶＬ  配列番号：１２６
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Ａｂ４６（ＩＮＸ４４３）
＞ＶＨ  配列番号：１２７
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＳＷＹＨＧＴＹＦＳＰＧＹＹＬＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１２８
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Ａｂ４７（ＩＮＸ４４４）
＞ＶＨ  配列番号：１２９
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＫＲＷＶＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１３０
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Ａｂ４８（ＩＮＸ４４５）
＞ＶＨ  配列番号：１３１
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＭＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１３２
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Ａｂ４９（ＩＮＸ４４６）
＞ＶＨ  配列番号：１３３
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＲＷＶＨＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１３４
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Ａｂ５０（ＩＮＸ４４７）
＞ＶＨ  配列番号：１３５
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＶＱＧＴＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１３６
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＡＭＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＴＬＱＳＧＶＡＳＲＦＳＧＲＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＤＩＬＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
Ａｂ５１（ＩＮＸ４４８）
＞ＶＨ  配列番号：１３７
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＶＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１３８
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Ａｂ５２（ＩＮＸ４４９）
＞ＶＨ  配列番号：１３９
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＶＱＧＳＹＹＳＰＧＹＹＶＭＤＡＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１４０
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Ａｂ５３（ＩＮＸ４５０）
＞ＶＨ  配列番号：１４１
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＦＶＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＬＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１４２
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Ａｂ５４（ＩＮＸ４５１）
＞ＶＨ  配列番号：１４３
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＩＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＬＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１４４
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Ａｂ５５（ＩＮＸ４５２）
＞ＶＨ  配列番号：１４５
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＶＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＬＭＤＡＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１４６
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Ａｂ５６（ＩＮＸ４５３）
＞ＶＨ  配列番号：１４７
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＶＱＧＷＷＹＳＰＧＹＹＬＭＤＡＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１４８
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Ａｂ５７（ＩＮＸ４５４）
＞ＶＨ  配列番号：１４９
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＭＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＬＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１５０
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Ａｂ５８（ＩＮＸ４５５）
＞ＶＨ  配列番号：１５１
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＲＷＶＨＧＴＹＦＳＰＧＹＹＬＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１５２
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＡＭＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＴＬＱＳＧＶＡＳＲＦＳＧＲＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＤＩＬＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
Ａｂ５９（ＩＮＸ４５６）
＞ＶＨ  配列番号：１５３
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＶＨＧＴＷＹＳＰＧＹＹＬＭＤＡＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１５４
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＡＭＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＴＬＱＳＧＶＡＳＲＦＳＧＲＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＤＩＬＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
Ａｂ６０（ＩＮＸ４５７）
＞ＶＨ  配列番号：１５５
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＨＬＱＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＦＩＲＳＳＧＮＴＥＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＶＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＲＷＶＱＧＳＹＹＳＰＧＹＹＬＭＤＡＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳ
＞ＶＬ  配列番号：１５６
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＡＭＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＴＬＱＳＧＶＡＳＲＦＳＧＲＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＤＩＬＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
Ａｂ６１（ＭＣＴ１  ３３０３  Ａ０７またはＬＭ−１８３）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：１６１）
ＧＦＤＦＳＮＹ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：１６２）
ＧＤＳＡＳＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：１６３）
ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴ
ＨＣタンパク質（配列番号：１６４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＮＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＧＤＳＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＬＲＬＱＬＮＧＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＴＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：１６５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＡＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＴＧＧＣＧＡＣＡＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：１６６）
ＳＧＧＧＧＳＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：１６７）
ＤＮＤＫＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：１６８）
ＧＳＡＧＮＳＧＡ
ＬＣタンパク質（配列番号：１６９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＬＧＧＴＶＫＩＴＣＳＧＧＧＧＳＹＧＷＹＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＤＮＤＫＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＡＴＬＴＩＴＧＶＲＡＥＤＥＡＶＹＹＣＧＳＡＧＮＳＧＡＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：１７０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＧＧＴＧＧＣＡＧＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＡＴＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＡＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＧＡＣＡＡＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＡＧＣＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＴＣＧＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＧＣＡＧＴＧＣＡＧＧＣＡＡＴＡＧＴＧＧＴＧＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ６２（ＬＭ−１８５またはＭＣＴ１  ３３０３  Ｂ０４−１）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：１７１）
ＧＦＤＦＳＮＹ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：１７２）
ＧＤＳＡＳＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：１７３）
ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴ
ＨＣタンパク質（配列番号：１７４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＮＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＧＤＳＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＬＲＬＱＬＮＧＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＴＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：１７５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＡＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＴＧＧＣＧＡＣＡＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：１７６）
ＳＧＧＳＳＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：１７７）
ＹＮＤＫＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：１７８）
ＧＳＲＤＳＳＧＡＤＬ
ＬＣタンパク質（配列番号：１７９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＬＧＧＴＶＫＩＴＣＳＧＧＳＳＹＧＷＦＱＱＫＳＰＧＳＡＬＶＴＬＩＹＹＮＤＫＲＰＳＮＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＧＩＬＴＩＳＧＶＱＡＥＤＥＡＶＹＹＣＧＳＲＤＳＳＧＡＤＬＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：１８０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＣＡＧＣＡＧＴＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＴＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＴＴＧＴＣＡＣＴＣＴＧＡＴＣＴＡＴＴＡＣＡＡＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＡＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＧＣＡＴＴＴＴＧＡＣＣＡＴＣＴＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＧＧＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＧＣＡＧＴＧＧＴＧＣＴＧＡＴＣＴＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ６３（ＬＭ−１８６またはＭＣＴ１  ３３０８  Ｂ０４−２）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：１８１）
ＧＦＳＦＳＳＲ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：１８２）
ＤＮＤＧＧＹＰ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：１８３）
ＧＡＹＧＧＧＷＹＡＡＳＳＩＤＡ
ＨＣタンパク質（配列番号：１８４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＧＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＳＦＳＳＲＧＭＦＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＤＮＤＧＧＹＰＮＹＧＳＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＲＱＳＴＶＲＬＱＬＮＮＬＲＡＤＤＴＧＴＹＹＣＡＫＧＡＹＧＧＧＷＹＡＡＳＳＩＤＡＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：１８５）
ＧＴＣＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＴＣＣＴＴＣＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＴＧＣＧＧＧＴＡＴＴＧＡＴＡＡＴＧＡＴＧＧＴＧＧＴＴＡＣＣＣＡＡＡＣＴＡＣＧＧＧＴＣＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＡＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＣＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＡＧＧＧＴＧＣＴＴＡＴＧＧＴＧＧＴＧＧＴＴＧＧＴＡＴＧＣＣＧＣＴＡＧＴＡＧＣＡＴＣＧＡＣＧＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：１８６）
ＳＧＧＶＧＱＷＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：１８７）
ＤＮＴＮＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：１８８）
ＡＮＴＹＳＤＧＮＤＡＰ
ＬＣタンパク質（配列番号：１８９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＰＧＥＡＶＫＩＴＣＳＧＧＶＧＱＷＹＧＷＦＱＱＫＡＰＧＳＡＰＶＴＶＩＨＤＮＴＮＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＧＴＬＴＩＴＧＶＱＡＥＤＥＡＶＹＦＣＡＮＴＹＳＤＧＮＤＡＰＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：１９０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＣＧＧＧＡＧＡＡＧＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＡＧＴＧＧＡＧＧＴＧＴＣＧＧＣＣＡＧＴＧＧＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＴＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＣＡＴＧＡＣＡＡＣＡＣＣＡＡＣＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＧＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＣＧＡＡＴＡＣＡＴＡＣＡＧＣＧＡＣＧＧＴＡＡＴＧＡＴＧＣＴＣＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ６４（ＬＭ−１８８またはＭＣＴ１  ３３０８  Ｅ０８）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：１９１）
ＧＦＴＦＳＳＲ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：１９２）
ＤＮＤＧＧＹＰ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：１９３）
ＧＡＹＧＧＧＷＹＡＡＳＳＩＤＡ
ＨＣタンパク質（配列番号：１９４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＧＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＴＦＳＳＲＧＭＦＷＶＲＲＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＤＮＤＧＧＹＰＮＹＧＳＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＲＱＳＴＶＲＬＱＬＮＮＬＲＡＤＤＴＧＴＹＹＣＡＫＧＡＹＧＧＧＷＹＡＡＳＳＩＤＡＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：１９５）
ＧＴＣＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＡＣＣＴＴＣＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＧＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＴＧＣＧＧＧＴＡＴＴＧＡＴＡＡＴＧＡＴＧＧＴＧＧＴＴＡＣＣＣＡＡＡＣＴＡＣＧＧＧＴＣＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＡＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＣＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＡＧＧＧＴＧＣＴＴＡＴＧＧＴＧＧＴＧＧＴＴＧＧＴＡＴＧＣＣＧＣＴＡＧＴＡＧＣＡＴＣＧＡＣＧＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：１９６）
ＳＧＧＶＧＱＷＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：１９７）
ＤＮＴＮＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：１９８）
ＡＮＴＹＳＤＧＮＤＡＰ
ＬＣタンパク質（配列番号：１９９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＰＧＥＡＶＫＩＴＣＳＧＧＶＧＱＷＹＧＷＦＱＱＫＡＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＤＮＴＮＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＧＴＬＴＩＴＧＶＱＡＥＤＥＡＶＹＦＣＡＮＴＹＳＤＧＮＤＡＰＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：２００）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＣＧＧＧＡＧＡＡＧＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＡＧＴＧＧＡＧＧＴＧＴＣＧＧＣＣＡＧＴＧＧＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＴＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＧＡＣＡＡＣＡＣＣＡＡＣＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＧＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＣＧＡＡＴＡＣＡＴＡＣＡＧＣＧＡＣＧＧＴＡＡＴＧＡＴＧＣＴＣＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ６５（ＬＭ−１８９またはＭＣＴ１  ３３０８  Ｇ１２）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：２０１）
ＧＦＳＦＳＳＲ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：２０２）
ＤＮＤＧＧＹＰ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：２０３）
ＧＡＹＧＧＧＷＹＡＡＳＳＩＤＡ
ＨＣタンパク質（配列番号：２０４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＧＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＳＦＳＳＲＧＭＦＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＤＮＤＧＧＹＰＮＹＧＳＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＲＱＳＴＶＲＬＱＬＮＮＬＲＡＤＤＴＧＴＹＹＣＡＫＧＡＹＧＧＧＷＹＡＡＳＳＩＤＡＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：２０５）
ＧＴＣＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＴＣＣＴＴＣＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＴＧＣＧＧＧＴＡＴＴＧＡＴＡＡＴＧＡＴＧＧＴＧＧＴＴＡＣＣＣＡＡＡＣＴＡＣＧＧＧＴＣＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＡＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＣＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＡＧＧＧＴＧＣＴＴＡＴＧＧＴＧＧＴＧＧＴＴＧＧＴＡＴＧＣＣＧＣＴＡＧＴＡＧＣＡＴＣＧＡＣＧＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：２０６）
ＳＧＧＧＧＧＷＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：２０７）
ＤＮＴＮＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：２０８）
ＡＮＴＤＳＤＧＮＤＡＰ
ＬＣタンパク質（配列番号：２０９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＰＧＥＴＶＫＩＴＣＳＧＧＧＧＧＷＹＧＷＹＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＤＮＴＮＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＧＴＬＴＩＴＧＶＱＡＥＤＥＡＶＹＦＣＡＮＴＤＳＤＧＮＤＡＰＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：２１０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＧＡＡＣＣＣＧＧＧＡＧＡＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＧＧＴＧＧＣＧＧＣＴＧＧＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＡＴＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＧＡＣＡＡＣＡＣＣＡＡＣＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＧＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＣＧＡＡＴＡＣＡＧＡＣＡＧＣＧＡＣＧＧＴＡＡＴＧＡＴＧＣＴＣＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ６６（ＬＭ−１９０またはＭＣＴ１  ３３０８  Ｈ０２）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：２１１）
ＧＦＳＦＳＳＲ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：２１２）
ＤＮＤＧＧＹＰ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：２１３）
ＧＡＹＧＧＧＷＹＡＡＳＳＩＤＡ
ＨＣタンパク質（配列番号：２１４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＧＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＳＦＳＳＲＧＭＦＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＤＮＤＧＧＹＰＮＹＧＳＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＲＱＳＴＶＲＬＱＬＮＮＬＲＡＤＤＴＧＴＹＹＣＡＫＧＡＹＧＧＧＷＹＡＡＳＳＩＤＡＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：２１５）
ＴＣＣＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＴＣＣＴＴＣＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＴＧＣＧＧＧＴＡＴＴＧＡＴＡＡＴＧＡＴＧＧＴＧＧＴＴＡＣＣＣＡＡＡＣＴＡＣＧＧＧＴＣＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＡＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＣＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＡＧＧＧＴＧＣＴＴＡＴＧＧＴＧＧＴＧＧＴＴＧＧＴＡＴＧＣＣＧＣＴＡＧＴＡＧＣＡＴＣＧＡＣＧＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：２１６）
ＳＧＧＶＧＱＷＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：２１７）
ＤＮＴＫＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：２１８）
ＡＮＴＹＳＤＧＮＤＡＰ
ＬＣタンパク質（配列番号：２１９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＬＧＥＡＶＫＩＴＣＳＧＧＶＧＱＷＹＧＷＹＱＱＫＡＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＤＮＴＫＲＰＳＮＩＰＳＲＦＳＧＳＡＳＧＳＴＡＴＬＴＩＴＧＶＲＡＥＤＥＡＶＹＦＣＡＮＴＹＳＤＧＮＤＡＰＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：２２０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＡＡＧＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＡＧＴＧＧＡＧＧＴＧＴＣＧＧＣＣＡＧＴＧＧＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＧＡＣＡＡＣＡＣＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＡＡＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＧＣＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＡＧＣＣＡＣＡＣＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＡＧＴＣＣＧＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＣＧＡＡＴＡＣＡＴＡＣＡＧＣＧＡＣＧＧＴＡＡＴＧＡＴＧＣＴＣＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ６７（ＬＭ−１９３またはＭＣＴ１  ３３１０  Ａ０７）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：２２１）
ＧＦＤＦＳＮＹ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：２２２）
ＧＤＳＡＳＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：２２３）
ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴ
ＨＣタンパク質（配列番号：２２４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＮＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＧＤＳＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＬＲＬＱＬＮＧＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＴＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：２２５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＡＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＴＧＧＣＧＡＣＡＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：２２６）
ＳＧＧＳＧＳＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：２２７）
ＹＮＤＫＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：２２８）
ＧＳＡＧＮＳＧＡ
ＬＣタンパク質（配列番号：２２９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＬＧＧＴＶＫＩＴＣＳＧＧＳＧＳＹＧＷＦＲＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＹＮＤＫＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＡＴＬＴＩＴＧＶＲＡＥＤＥＡＶＹＦＣＧＳＡＧＮＳＧＡＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：２３０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＡＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＡＧＴＧＧＣＡＧＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＴＣＣＧＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＴＡＣＡＡＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＡＧＣＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＧＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＧＴＧＣＡＧＧＣＡＡＣＡＧＴＧＧＴＧＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ６８（ＬＭ−１９４またはＭＣＴ１  ３３１０  Ｂ０７−１）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：２３１）
ＧＦＤＦＳＳＹ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：２３２）
ＧＤＧＡＳＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：２３３）
ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＴＧＧＩＤＴ
ＨＣタンパク質（配列番号：２３４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＳＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＡＹＶＡＧＩＧＤＧＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＶＲＬＱＬＮＮＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＡＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＴＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：２３５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＧＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＣＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＣＧＧＣＧＡＣＧＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＡＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：２３６）
ＳＧＧＧＧＳＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：２３７）
ＹＮＤＫＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：２３８）
ＧＳＡＧＮＳＧＡ
ＬＣタンパク質（配列番号：２３９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＬＧＧＴＶＫＩＴＣＳＧＧＧＧＳＹＧＷＦＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＹＮＤＫＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＡＴＬＴＩＴＧＶＲＡＥＤＥＡＶＹＦＣＧＳＡＧＮＳＧＡＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：２４０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＧＧＴＧＧＣＡＧＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＴＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＴＡＣＡＡＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＡＧＣＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＧＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＧＴＧＣＡＧＧＣＡＡＣＡＧＴＧＧＴＧＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ６９（ＬＭ−１９５またはＭＣＴ１  ３３１０  Ｂ０７−２）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：２４１）
ＧＦＤＦＳＳＹ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：２４２）
ＧＤＧＡＳＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：２４３）
ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＴＧＧＩＤＴ
ＨＣタンパク質（配列番号：２４４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＳＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＡＹＶＡＧＩＧＤＧＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＬＲＬＱＬＮＧＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＡＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＴＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：２４５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＧＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＣＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＣＧＧＣＧＡＣＧＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＡＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：２４６）
ＳＧＧＧＧＳＹＧ
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ＹＮＤＫＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：２４８）
ＧＳＡＧＮＳＧＡ
ＬＣタンパク質（配列番号：２４９）
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ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：２５０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＧＧＴＧＧＣＡＧＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＴＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＴＡＣＡＡＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＡＧＣＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＧＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＧＴＧＣＡＧＧＣＡＡＣＡＧＴＧＧＴＧＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
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ＧＦＤＦＳＳＹ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：２５２）
ＧＮＳＡＳＹ
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ＰＳＤＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴ
ＨＣタンパク質（配列番号：２５４）
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ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：２５５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＧＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＴＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＴＧＧＣＡＡＣＡＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＡＡＣＣＴＴＣＣＧＡＴＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：２５６）
ＳＧＧＧＧＳＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：２５７）
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ＧＳＡＧＮＳＧＡ
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ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：２６０）
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Ａｂ７１（ＬＭ−１９８またはＭＣＴ１  ３３１０  Ｅ０３）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：２６１）
ＧＦＤＦＳＮＹ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：２６２）
ＧＤＳＡＳＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：２６３）
ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴ
ＨＣタンパク質（配列番号：２６４）
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ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：２６５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＡＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＴＧＧＣＧＡＣＡＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＧＣＡＣＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：２６６）
ＳＧＧＧＧＳＹＧ
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ＹＮＤＫＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：２６８）
ＧＳＧＤＳＳＧＧＩ
ＬＣタンパク質（配列番号：２６９）
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ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：２７０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＧＧＴＧＧＣＡＧＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＴＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＴＡＣＡＡＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＣＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＴＣＧＡＣＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＧＴＧＧＡＧＡＣＡＧＣＡＧＴＧＧＴＧＧＴＡＴＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ７２（ＬＭ−１９９またはＭＣＴ１  ３３１０  Ｅ０４）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：２７１）
ＧＦＤＦＳＮＹ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：２７２）
ＧＤＳＡＳＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：２７３）
ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴ
ＨＣタンパク質（配列番号：２７４）
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ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：２７５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＧＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＡＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＴＧＧＣＧＡＣＡＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：２７６）
ＳＧＧＧＧＳＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：２７７）
ＹＮＤＫＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：２７８）
ＧＳＡＧＮＳＧＡ
ＬＣタンパク質（配列番号：２７９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＬＧＧＴＶＫＩＴＣＳＧＧＧＧＳＹＧＷＦＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＹＮＤＫＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＧＴＬＴＩＴＧＶＲＡＥＤＥＡＶＹＦＣＧＳＡＧＮＳＧＡＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：２８０）
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Ａｂ７３（ＬＭ−２０１またはＭＣＴ１  ３３１０  Ｈ０９）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：２８１）
ＧＦＤＦＳＳＹ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：２８２）
ＧＤＧＡＳＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：２８３）
ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＴＧＧＩＤＴ
ＨＣタンパク質（配列番号：２８４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＳＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＡＹＶＡＧＩＧＤＧＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＶＲＬＱＬＮＮＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＡＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＴＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：２８５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＧＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＣＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＣＧＧＣＧＡＣＧＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＡＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：２８６）
ＳＧＧＧＧＳＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：２８７）
ＹＮＤＫＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：２８８）
ＧＳＡＧＮＳＧＡ
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ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＬＧＥＴＶＫＩＴＣＳＧＧＧＧＳＹＧＷＦＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＹＮＤＫＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＡＴＬＴＩＴＧＶＲＡＥＤＥＡＶＹＦＣＧＳＡＧＮＳＧＡＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：２９０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＡＧＧＡＧＡＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＧＧＴＧＧＣＡＧＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＴＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＴＡＣＡＡＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＡＧＣＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＧＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＧＴＧＣＡＧＧＣＡＡＣＡＧＴＧＧＴＧＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ７４（ＬＭ−２０２またはＭＣＴ１  ３３１０  Ｈ１２）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：２９１）
ＧＦＤＦＳＳＹ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：２９２）
ＧＤＧＡＳＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：２９３）
ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＴＧＧＩＤＴ
ＨＣタンパク質（配列番号：２９４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＳＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＡＹＶＡＧＩＧＤＧＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＶＲＬＱＬＮＮＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＡＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＴＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：２９５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＧＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＣＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＣＧＧＣＧＡＣＧＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＡＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：２９６）
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ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：２９７）
ＹＮＤＫＲＰＳ
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ＬＣタンパク質（配列番号：２９９）
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ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：３００）
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Ａｂ７５（ＬＭ−２０３またはＭＣＴ１  ３３１１  Ａ０７）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：３０１）
ＧＦＤＦＳＮＹ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：３０２）
ＧＤＳＡＳＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：３０３）
ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴ
ＨＣタンパク質（配列番号：３０４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＮＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＧＤＳＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＬＲＬＱＬＮＧＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＴＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：３０５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＡＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＴＧＧＣＧＡＣＡＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：３０６）
ＳＧＧＳＧＳＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：３０７）
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ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：３０８）
ＧＳＡＤＳＴＧＡＧＭ
ＬＣタンパク質（配列番号：３０９）
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ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：３１０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＣＴＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＡＧＴＧＧＣＡＧＣＴＡＣＧＧＣＴＧＧＴＴＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＡＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＣＴＧＡＴＣＴＡＴＧＣＴＡＡＴＡＣＣＡＡＣＡＧＡＣＣＣＴＣＡＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＴＧＧＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＡＴＣＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＧＧＡＧＴＧＣＡＧＡＣＡＧＣＡＣＴＧＧＴＧＣＴＧＧＴＡＴＧＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ７６（ＬＭ−２０４またはＭＣＴ１  ３３１１  Ｂ１１）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：３１１）
ＧＦＤＦＳＮＹ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：３１２）
ＧＤＳＡＳＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：３１３）
ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴ
ＨＣタンパク質（配列番号：３１４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＮＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＧＤＳＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＬＲＬＱＬＮＧＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＴＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：３１５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＡＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＴＧＧＣＧＡＣＡＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：３１６）
ＳＧＧＧＧＳＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：３１７）
ＹＮＤＫＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：３１８）
ＧＳＡＧＮＳＧＡ
ＬＣタンパク質（配列番号：３１９）
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ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：３２０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＧＧＴＧＧＣＡＧＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＴＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＴＡＣＡＡＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＧＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＧＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＧＴＧＣＡＧＧＣＡＡＣＡＧＴＧＧＴＧＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ７７（ＬＭ−２０５またはＭＣＴ１  ３３１１  Ｃ０５）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：３２１）
ＧＦＤＦＳＮＹ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：３２２）
ＧＤＳＡＳＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：３２３）
ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴ
ＨＣタンパク質（配列番号：３２４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＲＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＮＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＧＤＳＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＬＲＬＱＬＮＧＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＴＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：３２５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＧＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＡＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＴＧＧＣＧＡＣＡＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：３２６）
ＳＧＧＧＧＳＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：３２７）
ＹＮＤＫＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：３２８）
ＧＳＡＧＮＳＧＡ
ＬＣタンパク質（配列番号：３２９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＬＧＧＴＶＫＩＴＣＳＧＧＧＧＳＹＧＷＦＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＹＮＤＫＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＧＴＬＴＩＴＧＶＲＡＥＤＥＡＶＹＦＣＧＳＡＧＮＳＧＡＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：３３０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＧＧＴＧＧＣＡＧＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＴＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＴＡＣＡＡＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＡＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＧＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＧＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＧＴＧＣＡＧＧＣＡＡＣＡＧＴＧＧＴＧＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ７８（ＬＭ−２０６またはＭＣＴ１  ３３１１  Ｆ１０）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：３３１）
ＧＦＤＦＳＮＹ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：３３２）
ＧＤＳＡＳＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：３３３）
ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴ
ＨＣタンパク質（配列番号：３３４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＡＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＮＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＧＤＳＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＬＲＬＱＬＮＧＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＴＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：３３５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＧＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＡＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＴＧＧＣＧＡＣＡＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：３３６）
ＳＧＧＧＧＳＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：３３７）
ＹＮＤＫＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：３３８）
ＧＳＡＧＮＳＧＡ
ＬＣタンパク質（配列番号：３３９）
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ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：３４０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＧＧＴＧＧＣＡＧＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＴＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＴＡＣＡＡＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＧＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＧＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＧＴＧＣＡＧＧＣＡＡＣＡＧＴＧＧＴＧＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ７９（ＬＭ−２０７またはＭＣＴ１  ３３１１  Ｇ０９）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：３４１）
ＧＦＤＦＳＮＹ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：３４２）
ＧＤＳＡＳＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：３４３）
ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴ
ＨＣタンパク質（配列番号：３４４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＮＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＧＤＳＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＬＲＬＱＬＮＧＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＴＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：３４５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＡＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＴＧＧＣＧＡＣＡＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：３４６）
ＳＧＧＧＧＳＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：３４７）
ＹＮＤＫＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：３４８）
ＧＳＡＧＮＳＧＡ
ＬＣタンパク質（配列番号：３４９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＬＧＧＴＶＫＩＴＣＳＧＧＧＧＳＹＧＷＦＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＹＮＤＫＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＧＴＬＴＩＴＧＶＲＡＥＤＥＡＶＹＦＣＧＳＡＧＮＳＧＡＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：３５０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＧＧＴＧＧＣＡＧＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＴＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＴＡＣＡＡＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＧＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＧＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＧＴＧＣＡＧＧＣＡＡＣＡＧＴＧＧＴＧＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ８０（ＬＭ−２０８またはＭＣＴ１  ３３１２  Ｈ１０）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：３５１）
ＧＦＳＦＳＳＲ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：３５２）
ＤＮＤＧＧＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：３５３）
ＧＡＹＧＧＧＷＹＡＡＳＳＩＤＡ
ＨＣタンパク質（配列番号：３５４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＧＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＳＦＳＳＲＧＭＦＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＤＮＤＧＧＹＰＮＹＧＳＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＲＱＳＴＶＲＬＱＬＮＮＬＲＡＤＤＴＧＴＹＹＣＡＫＧＡＹＧＧＧＷＹＡＡＳＳＩＤＡＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：３５５）
ＧＴＣＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＴＣＣＴＴＣＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＴＧＣＧＧＧＴＡＴＴＧＡＴＡＡＴＧＡＴＧＧＴＧＧＴＴＡＣＣＣＡＡＡＣＴＡＣＧＧＧＴＣＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＡＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＣＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＡＧＧＧＴＧＣＴＴＡＴＧＧＴＧＧＴＧＧＴＴＧＧＴＡＴＧＣＣＧＣＴＡＧＴＡＧＣＡＴＣＧＡＣＧＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：３５６）
ＳＧＧＧＳＳＳＹＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：３５７）
ＤＮＮＫＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：３５８）
ＡＮＴＹＳＤＧＮＤＡＰ
ＬＣタンパク質（配列番号：３５９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＫＳＧＥＴＶＫＩＴＣＳＧＧＧＳＳＳＹＹＧＷＹＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＤＮＮＫＲＰＳＮＩＰＳＱＦＳＧＳＫＳＧＳＴＳＴＬＴＩＴＧＶＱＡＤＤＥＡＶＹＦＣＡＮＴＹＳＤＧＮＤＡＰＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：３６０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＧＴＣＡＧＧＡＧＡＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＧＧＴＡＧＣＡＧＣＡＧＣＴＡＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＡＴＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＡＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＧＡＣＡＡＣＡＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＡＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＡＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＴＧＧＣＴＣＣＡＣＡＡＧＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＣＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＣＧＡＡＴＡＣＡＴＡＣＡＧＣＧＡＣＧＧＴＡＡＴＧＡＴＧＣＴＣＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ８１（ＬＭ−２０９またはＭＣＴ１  ３３１３  Ａ１１）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：３６１）
ＧＦＳＦＳＳＲ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：３６２）
ＤＮＤＧＧＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：３６３）
ＧＡＹＧＧＧＷＹＡＡＳＳＩＤＡ
ＨＣタンパク質（配列番号：３６４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＡＬＳＬＩＣＫＡＳＧＦＳＦＳＳＲＧＭＦＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＤＮＤＧＧＹＰＮＹＧＳＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＲＱＳＴＶＲＬＱＬＮＮＬＲＡＤＤＴＧＴＹＹＣＡＫＧＡＹＧＧＧＷＹＡＡＳＳＩＤＡＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：３６５）
ＧＴＣＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＧＣＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＡＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＴＣＣＴＴＣＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＴＧＣＧＧＧＴＡＴＴＧＡＴＡＡＴＧＡＴＧＧＴＧＧＴＴＡＣＣＣＡＡＡＣＴＡＣＧＧＧＴＣＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＡＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＣＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＡＧＧＧＴＧＣＴＴＡＴＧＧＴＧＧＴＧＧＴＴＧＧＴＡＴＧＣＣＧＣＴＡＧＴＡＧＣＡＴＣＧＡＣＧＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：３６６）
ＳＧＧＶＧＱＷＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：３６７）
ＤＮＴＮＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：３６８）
ＡＮＴＹＳＤＧＮＤＡＰ
ＬＣタンパク質（配列番号：３６９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＰＧＥＡＶＫＩＴＣＳＧＧＶＧＱＷＹＧＷＹＱＱＫＡＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＤＮＴＮＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＮＴＬＴＩＴＧＶＱＡＥＤＥＡＶＹＦＣＡＮＴＹＳＤＧＮＤＡＰＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：３７０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＣＧＧＧＡＧＡＡＧＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＡＧＴＧＧＡＧＧＴＧＴＣＧＧＣＣＡＧＴＧＧＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＧＡＣＡＡＣＡＣＣＡＡＣＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＣＧＡＡＴＡＣＡＴＡＣＡＧＣＧＡＣＧＧＴＡＡＴＧＡＴＧＣＴＣＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ８２（ＬＭ−２１０またはＭＣＴ１  ３３１３  Ｂ１０）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：３７１）
ＧＦＳＦＳＳＲ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：３７２）
ＤＮＤＧＧＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：３７３）
ＧＡＹＧＧＧＷＹＡＡＳＳＩＤＡ
ＨＣタンパク質（配列番号：３７４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＧＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＳＦＳＳＲＧＭＦＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＤＮＤＧＧＹＰＮＹＧＳＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＲＱＳＴＶＲＬＱＬＮＮＬＲＡＤＤＴＧＴＹＹＣＡＫＧＡＹＧＧＧＷＹＡＡＳＳＩＤＡＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：３７５）
ＧＴＣＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＴＣＣＴＴＣＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＴＧＣＧＧＧＴＡＴＴＧＡＴＡＡＴＧＡＴＧＧＴＧＧＴＴＡＣＣＣＡＡＡＣＴＡＣＧＧＧＴＣＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＡＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＴＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＣＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＡＧＧＧＴＧＣＴＴＡＴＧＧＴＧＧＴＧＧＴＴＧＧＴＡＴＧＣＣＧＣＴＡＧＴＡＧＣＡＴＣＧＡＣＧＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：３７６）
ＳＧＧＶＧＱＷＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：３７７）
ＤＮＡＮＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：３７８）
ＡＮＴＹＳＤＧＮＤＡＰ
ＬＣタンパク質（配列番号：３７９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＰＧＥＡＶＫＩＴＣＳＧＧＶＧＱＷＹＧＷＹＱＱＫＡＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＤＮＡＮＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＧＴＬＴＩＴＧＶＱＡＥＤＥＡＶＹＦＣＡＮＴＹＳＤＧＮＤＡＰＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：３８０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＣＧＧＧＡＧＡＡＧＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＡＧＴＧＧＡＧＧＴＧＴＣＧＧＣＣＡＧＴＧＧＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＣＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＧＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＣＧＡＡＴＡＣＡＴＡＣＡＧＣＧＡＣＧＧＴＡＡＴＧＡＴＧＣＴＣＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ８３（ＬＭ−２１１またはＭＣＴ１  ３３０９  Ｂ０１）
ＣＤＲ１−ＨＣ（配列番号：３８１）
ＧＦＳＦＳＳＲ
ＣＤＲ２−ＨＣ（配列番号：３８２）
ＤＮＤＧＧＹ
ＣＤＲ３−ＨＣ（配列番号：３８３）
ＧＡＹＧＧＧＷＹＡＡＳＳＩＤＡ
ＨＣタンパク質（配列番号：３８４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＡＬＳＬＩＣＫＡＳＧＦＳＦＳＳＲＧＭＦＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＤＮＤＧＧＹＰＮＹＧＳＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＲＱＳＴＶＲＬＱＬＮＮＬＲＡＤＤＴＧＴＹＹＣＡＫＧＡＹＧＧＧＷＹＡＡＳＳＩＤＡＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：３８５）
ＧＴＣＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＧＣＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＡＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＴＣＣＴＴＣＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＴＧＣＧＧＧＴＡＴＴＧＡＴＡＡＴＧＡＴＧＧＴＧＧＴＴＡＣＣＣＡＡＡＣＴＡＣＧＧＧＴＣＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＡＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＣＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＡＧＧＧＴＧＣＴＴＡＴＧＧＴＧＧＴＧＧＴＴＧＧＴＡＴＧＣＣＧＣＴＡＧＴＡＧＣＡＴＣＧＡＣＧＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ（配列番号：３８６）
ＳＧＧＶＧＱＷＹＧ
ＣＤＲ２−ＬＣ（配列番号：３８７）
ＤＮＴＮＲＰＳ
ＣＤＲ３−ＬＣ（配列番号：３８８）
ＡＮＴＹＳＤＧＮＤＡＰ
ＬＣタンパク質（配列番号：３８９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＰＧＥＡＶＫＩＴＣＳＧＧＶＧＱＷＹＧＷＹＱＱＫＡＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＤＮＴＮＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＮＴＬＴＩＴＧＶＱＡＥＤＥＡＶＹＦＣＡＮＴＹＳＤＧＮＤＡＰＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：３９０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＣＧＧＧＡＧＡＡＧＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＡＧＴＧＧＡＧＧＴＧＴＣＧＧＣＣＡＧＴＧＧＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＧＡＣＡＡＣＡＣＣＡＡＣＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＣＧＡＡＴＡＣＡＴＡＣＡＧＣＧＡＣＧＧＴＡＡＴＧＡＴＧＣＴＣＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ８４（ＬＭ−１８４またはＭＣＴ１  ３３０３  Ｃ０３）
ＣＤＲ１−ＨＣ    ＧＦＤＦＳＮＹ（配列番号：３９１）
ＣＤＲ２−ＨＣ    ＧＤＳＡＳＹ（配列番号：３９２）
ＣＤＲ３−ＨＣ    ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴ（配列番号：３９３）
ＨＣタンパク質（配列番号：３９４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＮＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＧＤＳＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＬＲＬＱＬＮＧＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＴＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：３９５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＡＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＴＧＧＣＧＡＣＡＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ    ＳＧＧＴＹＳＹＧ（配列番号：３９６）
ＣＤＲ２−ＬＣ    ＱＮＤＫＲＰＳ（配列番号：３９７）
ＣＤＲ３−ＬＣ    ＧＳＧＤＴＴＧＧＩ（配列番号：３９８）
ＬＣタンパク質（配列番号：３９９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＰＧＥＴＶＫＩＴＣＳＧＧＴＹＳＹＧＷＦＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＱＮＤＫＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＧＴＬＴＩＴＧＶＱＡＥＤＥＡＶＹＦＣＧＳＧＤＴＴＧＧＩＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：４００）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＣＡＧＧＡＧＡＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＧＧＣＡＣＣＴＡＴＡＧＴＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＴＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＣＡＡＡＡＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＧＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＧＴＧＧＡＧＡＣＡＣＣＡＣＣＧＧＴＧＧＴＡＴＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ８５  （ＬＭ−１８７またはＭＣＴ１  ３３０８  Ｂ０７）
ＣＤＲ１−ＨＣ    ＧＦＧＦＴＮＹ（配列番号：４０１）
ＣＤＲ２−ＨＣ    ＳＳＧＧＡＹ（配列番号：４０２）
ＣＤＲ３−ＨＣ    ＡＰＣＧＳＷＣＧＷＧＹＴＧＶＤＮＩＤＡ（配列番号：４０３）
ＨＣタンパク質（配列番号：４０４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＬＶＳＬＶＣＫＡＳＧＦＧＦＴＮＹＥＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＦＶＳＳＧＧＡＹＡＤＹＡＰＡＶＫＧＲＡＴＩＴＲＤＮＧＱＳＴＶＲＬＱＬＶＮＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＴＲＡＰＣＧＳＷＣＧＷＧＹＴＧＶＤＮＩＤＡＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：４０５）
ＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＣＴＧＧＴＣＡＧＴＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＡＡＴＴＡＴＧＡＧＡＴＣＣＡＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＣＧＧＴＴＴＴＧＴＴＡＧＴＡＧＴＧＧＴＧＧＴＧＣＴＴＡＣＧＣＡＧＡＴＴＡＣＧＣＧＣＣＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＡＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＧＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＣＣＡＧＡＧＣＴＣＣＴＴＧＴＧＧＴＡＧＴＴＧＧＴＧＴＧＧＴＴＧＧＧＧＴＴＡＴＡＣＴＧＧＴＧＴＣＧＡＴＡＡＣＡＴＣＧＡＣＧＣＧＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ    ＳＧＧＧＲＧＳＨＹＧ（配列番号：４０６）
ＣＤＲ２−ＬＣ    ＡＮＮＱＲＰＳ（配列番号：４０７）
ＣＤＲ３−ＬＣ    ＧＧＹＤＳＧＡＴ（配列番号：４０８）
ＬＣタンパク質（配列番号：４０９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＰＧＧＩＶＫＩＴＣＳＧＧＧＲＧＳＨＹＧＷＹＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＬＩＹＡＮＮＱＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＥＳＧＳＴＡＴＬＴＩＴＧＶＱＡＥＤＥＡＶＹＦＣＧＧＹＤＳＧＡＴＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：４１０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＧＡＡＣＣＣＡＧＧＡＧＧＡＡＴＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＧＧＴＣＧＣＧＧＣＡＧＣＣＡＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＡＴＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＣＴＧＡＴＣＴＡＴＧＣＴＡＡＣＡＡＣＣＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＧＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＧＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＣＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＴＧＧＣＴＡＣＧＡＣＡＧＣＧＧＴＧＣＴＡＣＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ８６（ＬＭ−１９１またはＭＣＴ１  ３３１０  Ａ０１）
ＣＤＲ１−ＨＣ    ＧＦＤＦＳＮＹ（配列番号：４１１）
ＣＤＲ２−ＨＣ    ＧＤＳＡＳＹ（配列番号：４１２）
ＣＤＲ３−ＨＣ    ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴ（配列番号：４１３）
ＨＣタンパク質（配列番号：４１４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＮＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＧＤＳＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＬＲＬＱＬＮＧＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＴＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：４１５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＡＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＴＧＧＣＧＡＣＡＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ    ＳＧＳＳＧＳＹＧ（配列番号：４１６）
ＣＤＲ２−ＬＣ    ＹＮＤＫＲＰＳ（配列番号：４１７）
ＣＤＲ３−ＬＣ    ＧＳＹＧＳＴＤＡＡＩ（配列番号：４１８）
ＬＣ  Ｐｒｏｔｅｉｎ（配列番号：４１９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＳＰＧＧＴＶＫＩＴＣＳＧＳＳＧＳＹＧＷＹＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＹＮＤＫＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＧＴＬＴＩＴＧＶＱＡＥＤＥＡＶＹＦＣＧＳＹＧＳＴＤＡＡＩＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：４２０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＣＧＣＧＡＧＣＣＣＡＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＡＧＴＡＧＴＧＧＣＡＧＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＡＴＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＡＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＴＡＣＡＡＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＧＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＧＣＴＡＣＧＧＣＡＧＣＡＣＴＧＡＴＧＣＴＧＣＴＡＴＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ８７（ＬＭ−１９２またはＭＣＴ１  ３３１０  Ａ０２−１）
ＣＤＲ１−ＨＣ    ＧＦＤＦＳＮＹ（配列番号：４２１）
ＣＤＲ２−ＨＣ    ＧＤＳＡＳＹ（配列番号：４２２）
ＣＤＲ３−ＨＣ    ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴ（配列番号：４２３）
ＨＣタンパク質（配列番号：４２４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＮＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＧＤＳＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＬＲＬＱＬＮＧＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＴＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：４２５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＡＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＴＧＧＣＧＡＣＡＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ    ＳＧＧＹＳＳＹＧ（配列番号：４２６）
ＣＤＲ２−ＬＣ    ＹＮＡＫＲＰＳ（配列番号：４２７）
ＣＤＲ３−ＬＣ    ＧＴＡＤＲＳＳＴＡＬ（配列番号：４２８）
ＬＣタンパク質（配列番号：４２９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＬＧＧＴＶＫＩＴＣＳＧＧＹＳＳＹＧＷＹＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＬＩＹＹＮＡＫＲＰＳＮＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＡＴＬＴＩＴＧＶＱＡＥＤＥＡＶＹＦＣＧＴＡＤＲＳＳＴＡＬＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：４３０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＴＡＣＡＧＣＡＧＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＡＴＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＣＴＧＡＴＣＴＡＴＴＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＡＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＡＧＣＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＣＴＧＣＡＧＡＣＡＧＧＡＧＣＡＧＴＡＣＴＧＣＴＴＴＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ８８（ＬＭ−１９６またはＭＣＴ１  ３３１０  Ｃ０１）
ＣＤＲ１−ＨＣ    ＧＦＤＦＳＳＹ（配列番号：４３１）
ＣＤＲ２−ＨＣ    ＧＤＧＡＳＹ（配列番号：４３２）
ＣＤＲ３−ＨＣ    ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＴＧＧＩＤＴ（配列番号：４３３）
ＨＣタンパク質（配列番号：４３４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＳＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＡＹＶＡＧＩＧＤＧＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＶＲＬＱＬＮＮＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＡＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＴＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：４３５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＧＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＣＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＣＧＧＣＧＡＣＧＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＡＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ    ＳＧＧＳＧＳＹＧ（配列番号：４３６）
ＣＤＲ２−ＬＣ    ＹＮＤＫＲＰＳ（配列番号：４３７）
ＣＤＲ３−ＬＣ    ＧＳＧＤＲＳＹＤＧＭ（配列番号：４３８）
ＬＣタンパク質（配列番号：４３９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＰＧＥＴＶＥＩＴＣＳＧＧＳＧＳＹＧＷＹＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＨＹＮＤＫＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＡＳＧＳＴＡＴＬＴＩＴＧＶＱＶＥＤＥＡＶＹＦＣＧＳＧＤＲＳＹＤＧＭＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：４４０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＣＧＧＧＡＧＡＡＡＣＣＧＴＣＧＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＡＧＴＧＧＣＡＧＣＴＡＣＧＧＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＣＡＴＴＡＣＡＡＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＧＣＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＡＧＣＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＴＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＧＴＧＧＡＧＡＣＡＧＧＡＧＴＴＡＴＧＡＴＧＧＴＡＴＧＴＴＣＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ８９（ＬＭ−２００またはＭＣＴ１  ３３１０  Ｆ１２）
ＣＤＲ１−ＨＣ    ＧＦＤＦＳＮＹ（配列番号：４４１）
ＣＤＲ２−ＨＣ    ＧＤＳＡＳＹ（配列番号：４４２）
ＣＤＲ３−ＨＣ    ＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴ（配列番号：４４３）
ＨＣタンパク質（配列番号：４４４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＮＹＥＭＬＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＶＡＧＩＧＤＳＡＳＹＳＡＹＧＶＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＬＲＬＱＬＮＧＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＴＫＡＳＥＧＳＹＷＹＹＥＡＧＧＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：４４５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＡＣＴＡＣＧＡＡＡＴＧＣＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＴＧＧＣＧＡＣＡＧＴＧＣＴＡＧＴＴＡＣＴＣＡＧＣＡＴＡＣＧＧＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＣＣＡＡＡＧＣＴＴＣＣＧＡＧＧＧＴＴＣＣＴＡＣＴＧＧＴＡＴＴＡＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ    ＳＧＧＳＳＴＹＧ（配列番号：４４６）
ＣＤＲ２−ＬＣ    ＲＮＤＮＲＰＳ（配列番号：４４７）
ＣＤＲ３−ＬＣ    ＧＳＡＤＳＳＧＡＩ（配列番号：４４８）
ＬＣタンパク質（配列番号：４４９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＬＧＧＴＶＥＩＴＣＳＧＧＳＳＴＹＧＷＹＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＲＮＤＮＲＰＳＮＩＰＳＲＦＳＧＳＫＹＧＳＴＧＴＬＴＩＴＧＶＱＡＥＤＥＡＶＹＬＣＧＳＡＤＳＳＧＡＩＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：４５０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＧＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＡＧＣＡＧＣＡＣＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＡＧＧＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＧＡＣＣＣＴＣＡＡＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＡＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＧＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＡＴＧＴＧＧＧＡＧＴＧＣＡＧＡＣＡＧＣＡＧＴＧＧＴＧＣＴＡＴＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ９０  （ＭＣＴ１  ３３０８  Ａ０５）
ＣＤＲ１−ＨＣ    ＧＦＳＦＳＧＦ（配列番号：４５１）
ＣＤＲ２−ＨＣ    ＤＤＧＧＳＳ（配列番号：４５２）
ＣＤＲ３−ＨＣ    ＤＴＡＡＣＴＹＰＣＧＳＹＶＨＴＩＤＴ（配列番号：４５３）
ＨＣタンパク質（配列番号：４５４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＡＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＳＦＳＧＦＳＭＧＷＶＲＱＴＰＧＫＧＬＥＷＶＡＧＩＤＤＧＧＳＳＴＹＹＧＡＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＶＲＬＱＬＳＮＬＲＡＥＤＴＧＩＹＹＣＡＲＤＴＡＡＣＴＹＰＣＧＳＹＶＨＴＩＤＴＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：４５５）
ＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＧＣＧＣＴＣＡＧＴＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＴＣＣＴＴＣＡＧＴＧＧＴＴＴＣＡＧＣＡＴＧＧＧＴＴＧＧＧＴＧＣＧＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＡＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＧＧＧＴＣＧＣＴＧＧＴＡＴＴＧＡＴＧＡＴＧＧＴＧＧＣＡＧＴＡＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＧＧＧＧＣＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＧＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＴＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＡＧＡＴＡＣＴＧＣＴＧＣＴＴＧＴＡＣＴＴＡＴＣＣＴＴＧＴＧＧＴＴＣＴＴＡＴＧＴＧＣＡＴＡＣＧＡＴＡＧＡＣＡＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ    ＳＧＧＧＧＤＹＧ（配列番号：４５６）
ＣＤＲ２−ＬＣ    ＹＳＤＫＲＰＰ（配列番号：４５７）
ＣＤＲ３−ＬＣ    ＧＧＷＤＤＴＮＧＧＩ（配列番号：４５８）
ＬＣタンパク質（配列番号：４５９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＬＧＧＴＶＫＩＴＣＳＧＧＧＧＤＹＧＷＦＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＹＳＤＫＲＰＰＮＩＰＳＲＦＳＧＳＬＳＧＳＴＡＴＬＴＩＴＧＶＱＡＥＤＥＡＶＹＹＣＧＧＷＤＤＴＮＧＧＩＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：４６０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＧＧＴＧＧＣＧＡＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＴＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＴＡＣＡＧＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＣＴＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＡＧＣＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＧＴＧＧＣＴＧＧＧＡＣＧＡＴＡＣＴＡＡＴＧＧＴＧＧＴＡＴＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ９１  （ＭＣＴ１  ３３０９  Ｄ０７）
ＣＤＲ１−ＨＣ    ＧＦＳＦＳＳＹ（配列番号：４６１）
ＣＤＲ２−ＨＣ    ＲＳＳＧＳＳ（配列番号：４６２）
ＣＤＲ３−ＨＣ    ＡＧＣＳＤＣＷＲＳＴＰＧＲＩＤＡ（配列番号：４６３）
ＨＣタンパク質（配列番号：４６４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＧＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＳＦＳＳＹＧＭＧＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＦＩＡＧＩＲＳＳＧＳＳＴＹＹＧＡＡＶＫＧＲＡＴＩＴＲＤＮＧＱＳＴＶＲＬＱＬＮＮＬＲＡＥＤＴＡＴＹＹＣＡＫＡＧＣＳＤＣＷＲＳＴＰＧＲＩＤＡＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：４６５）
ＡＣＧＡＡＴＴＣＧＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＴＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＴＣＣＴＴＣＡＧＣＡＧＴＴＡＴＧＧＣＡＴＧＧＧＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＴＣＡＴＣＧＣＧＧＧＴＡＴＴＡＧＡＡＧＣＡＧＴＧＧＴＡＧＴＡＧＣＡＣＡＴＡＣＴＡＣＧＧＧＧＣＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＡＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＡＡＧＣＴＧＧＴＴＧＴＡＧＴＧＡＴＴＧＴＴＧＧＣＧＴＡＧＴＡＣＴＣＣＴＧＧＴＡＧＧＡＴＣＧＡＣＧＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＤＲ１−ＬＣ    ＳＧＳＳＳＧＹＧＹＧ（配列番号：４６６）
ＣＤＲ２−ＬＣ    ＴＮＴＮＲＰＳ（配列番号：４６７）
ＣＤＲ３−ＬＣ    ＧＳＹＤＳＮＴＹＬＧＬ（配列番号：４６８）
ＬＣタンパク質（配列番号：４６９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＬＧＧＴＶＥＩＴＣＳＧＳＳＳＧＹＧＹＧＷＹＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＬＩＹＴＮＴＮＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＴＳＧＳＴＮＴＬＴＩＡＧＶＱＡＥＤＥＡＶＹＹＣＧＳＹＤＳＮＴＹＬＧＬＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：４７０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＧＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＡＧＴＡＧＣＡＧＴＧＧＣＴＡＴＧＧＴＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＡＴＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＡＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＣＴＧＡＴＣＴＡＴＡＣＴＡＡＣＡＣＣＡＡＣＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＧＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＣＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＡＣＡＴＴＡＡＣＧＡＴＣＧＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＡＴＴＧＴＧＧＧＡＧＣＴＡＣＧＡＣＡＧＣＡＡＣＡＣＴＴＡＴＣＴＴＧＧＴＣＴＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ９２（ＭＣＴ１  ３３１０  Ａ０５）
ＣＤＲ１−ＨＣ    ＧＦＴＦＳＳＹ（配列番号：４７１）
ＣＤＲ２−ＨＣ    ＳＫＤＧＧＳＤ（配列番号：４７２）
ＣＤＲ３−ＨＣ    ＧＩＧＶＧＮＩＤＡ（配列番号：４７３）
ＨＣタンパク質（配列番号：４７４）
ＡＶＴＬＤＥＳＥＧＧＬＨＴＰＧＧＧＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＴＦＳＳＹＡＭＹＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＹＩＳＫＤＧＧＳＤＴＡＹＥＴＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＤＧＱＳＴＶＲＬＱＬＮＮＬＲＡＥＤＴＡＴＹＹＣＡＲＧＩＧＶＧＮＩＤＡＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：４７５）
ＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＴＡＣＡＣＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＡＣＣＴＴＣＡＧＣＡＧＴＴＡＴＧＣＣＡＴＧＴＡＣＴＧＧＡＴＣＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＣＧＣＣＴＡＴＡＴＴＡＧＣＡＡＧＧＡＴＧＧＴＧＧＴＡＧＴＧＡＣＡＣＡＧＣＡＴＡＣＧＡＧＡＣＡＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＧＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＡＧＧＴＡＴＴＧＧＴＧＴＴＧＧＴＡＡＣＡＴＣＧＡＣＧＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＣ
ＣＤＲ１−ＬＣ    ＳＧＳＳＳＧＹＧＹＧ（配列番号：４７６）
ＣＤＲ２−ＬＣ    ＴＮＴＮＲＰＳ（配列番号：４７７）
ＣＤＲ３−ＬＣ    ＧＳＹＤＳＮＴＹＬＧＬ（配列番号：４７８）
ＬＣタンパク質（配列番号：４７９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＬＧＥＴＶＫＩＴＣＳＧＴＳＤＮＮＹＦＧＷＹＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＧＮＤＫＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＡＴＬＴＩＴＧＶＱＡＤＤＥＡＶＹＦＣＧＳＹＤＴＹＶＮＤＤＩＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：４８０）
ＧＣＣＣＴＧＡｃＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＡＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＡＣＴＡＧＴＧＡＣＡＡＴＡＡＣＴＡＣＴＴＴＧＧＴＴＧＧＴＡＴＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＧＧＴＧＡＴＣＴＡＴＧＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＣＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＣＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＧＣＴＡＴＧＡＣＡＣＣＴＡＴＧＴＴＡＡＴＧＡＴＧＡＴＡＴＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＡ
Ａｂ９３（ＭＣＴ１  ３３１０  Ａ１２）
ＣＤＲ１−ＨＣ    ＧＦＤＦＳＳＹ（配列番号：４８１）
ＣＤＲ２−ＨＣ    ＹＫＤＧＧＳＤ（配列番号：４８２）
ＣＤＲ３−ＨＣ    ＧＩＧＩＧＮＩＤＡ（配列番号：４８３）
ＨＣタンパク質（配列番号：４８４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＧＬＳＬＶＣＫＡＳＧＦＤＦＳＳＹＡＭＹＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＹＩＹＫＤＧＧＳＤＴＡＹＥＴＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＤＧＱＳＴＭＲＬＱＬＮＮＬＲＡＥＤＴＡＴＹＹＣＡＲＧＩＧＩＧＮＩＤＡＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：４８５）
ＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＧＴＴＴＧＡＣＴＴＣＡＧＣＡＧＴＴＡＣＧＣＣＡＴＧＴＡＣＴＧＧＡＴＣＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＣＧＣＣＴＡＴＡＴＴＴＡＣＡＡＧＧＡＴＧＧＴＧＧＴＡＧＴＧＡＣＡＣＡＧＣＡＴＡＣＧＡＧＡＣＡＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＧＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＴＧＣＣＡＧＡＧＧＴＡＴＴＧＧＴＡＴＴＧＧＴＡＡＣＡＴＣＧＡＣＧＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＣ
ＣＤＲ１−ＬＣ    ＳＧＮＳＤＮＮＹＦＧ（配列番号：４８６）
ＣＤＲ２−ＬＣ    ＧＮＤＫＲＰＳ（配列番号：４８７）
ＣＤＲ３−ＬＣ    ＧＳＹＤＴＹＶＮＤＤＭ（配列番号：４８８）
ＬＣタンパク質（配列番号：４８９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＰＧＧＴＶＥＩＴＣＳＧＮＳＤＮＮＹＦＧＷＦＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＹＧＮＤＫＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＡＴＬＴＩＴＧＶＱＡＤＤＥＡＶＹＦＣＧＳＹＤＴＹＶＮＤＤＭＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：４９０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＣＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＧＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＡＡＴＡＧＴＧＡＣＡＡＴＡＡＣＴＡＣＴＴＴＧＧＣＴＧＧＴＴＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＡＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＴＡＴＧＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＣＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＣＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＧＣＴＡＣＧＡＣＡＣＣＴＡＴＧＴＣＡＡＴＧＡＴＧＡＣＡＴＧＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＴ
Ａｂ９４  （ＭＣＴ１  ３３１１  Ｂ０４）
ＣＤＲ１−ＨＣ    ＧＦＴＦＳＳＦ（配列番号：４９１）
ＣＤＲ２−ＨＣ    ＳＮＤＧＧＧ（配列番号：４９２）
ＣＤＲ３−ＨＣ    ＧＧＧＡＳＳＩＤＡ（配列番号：４９３）
ＨＣタンパク質（配列番号：４９４）
ＡＶＴＬＤＥＳＥＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＧＳＧＦＴＦＳＳＦＮＭＦＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＦＶＡＡＶＳＮＤＧＧＧＴＷＹＡＴＡＶＫＧＲＡＴＩＳＫＤＮＧＱＳＴＶＲＬＱＬＮＮＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＡＲＧＧＧＡＳＳＩＤＡＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：４９５）
ＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＧＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＡＣＣＴＴＣＡＧＣＡＧＣＴＴＣＡＡＣＡＴＧＴＴＣＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＡＴＴＣＧＴＣＧＣＴＧＣＴＧＴＴＡＧＣＡＡＴＧＡＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＡＣＡＴＧＧＴＡＣＧＣＧＡＣＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＡＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＡＧＧＴＧＧＴＧＧＴＧＣＣＡＧＴＡＧＴＡＴＣＧＡＣＧＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＣ
ＣＤＲ１−ＬＣ    ＳＧＧＳＧＲＹＧ（配列番号：４９６）
ＣＤＲ２−ＬＣ    ＡＮＴＫＲＰＳ（配列番号：４９７）
ＣＤＲ３−ＬＣ    ＧＳＩＤＮＮＹＶＧＩ（配列番号：４９８）
ＬＣタンパク質（配列番号：４９９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＰＧＥＴＶＫＩＴＣＳＧＧＳＧＲＹＧＷＹＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＶＩＲＡＮＴＫＲＰＳＤＩＰＳＲＦＳＧＳＫＳＧＳＴＧＴＬＴＩＴＧＶＱＶＥＤＥＡＶＹＦＣＧＳＩＤＮＮＹＶＧＩＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：５００）
ＧＣＣＣＴＧＡｃＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＡＡＡＣＣＣＡＧＧＡＧＡＡＡＣＣＧＴＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＡＧＴＧＧＣＡＧＧＴＡＣＧＧＣＴＧＧＴＡＴＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＡＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＴＧＡＴＣＡＧＧＧＣＴＡＡＣＡＣＣＡＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＧＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＡＣＧＧＧＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＴＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＧＣＡＴＡＧＡＣＡＡＣＡＡＣＴＡＴＧＴＴＧＧＴＡＴＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＡ
Ａｂ９５（ＭＣＴ１  ３３１１  Ｂ０７）
ＣＤＲ１−ＨＣ    ＧＦＴＩＳＳＹ（配列番号：５０１）
ＣＤＲ２−ＨＣ    ＳＧＳＧＲＹ（配列番号：５０２）
ＣＤＲ３−ＨＣ    ＤＧＧＧＮＹＷＮＡＡＧＧＩＤＡ（配列番号：５０３）
ＨＣタンパク質（配列番号：５０４）
ＡＶＴＬＤＥＳＧＧＧＬＱＴＰＧＧＴＬＳＬＶＣＫＧＳＧＦＴＩＳＳＹＴＭＱＷＶＲＱＡＰＤＫＧＬＥＹＶＡＳＩＳＧＳＧＲＹＴＧＹＧＡＡＶＫＧＲＡＴＩＳＲＤＮＧＱＳＴＶＲＬＱＬＮＮＬＲＡＥＤＴＧＴＹＹＣＡＫＤＧＧＧＮＹＷＮＡＡＧＧＩＤＡＷＧＨＧＴＥＶＩＶＳＳ
ＨＣ  ＤＮＡ（配列番号：５０５）
ＧＣＣＧＴＧＡＣＧＴＴＧＧＡＣＧＡＧＴＣＣＧＧＧＧＧＣＧＧＣＣＴＣＣＡＧＡＣＧＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＧＣＴＣＡＧＣＣＴＣＧＴＣＴＧＣＡＡＧＧＧＣＴＣＣＧＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＴＴＡＣＡＣＣＡＴＧＣＡＧＴＧＧＧＴＧＣＧＡＣＡＧＧＣＧＣＣＣＧＡＣＡＡＧＧＧＧＴＴＧＧＡＡＴＡＴＧＴＣＧＣＣＡＧＴＡＴＴＡＧＣＧＧＣＡＧＴＧＧＴＡＧＡＴＡＣＡＣＡＧＧＣＴＡＣＧＧＧＧＣＧＧＣＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＣＴＣＧＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＡＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＧＣＴＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＣＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＡＡＧＡＴＧＧＴＧＧＴＧＧＴＡＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＴＧＣＴＧＣＴＧＧＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＧＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＣＧＧＧＡＣＣＧＡＡＧＴＣＡＴＣＧＴＣＴＣＣＴＣＣ
ＣＤＲ１−ＬＣ    ＳＧＧＳＳＴＹＧ（配列番号：５０６）
ＣＤＲ２−ＬＣ    ＮＤＤＥＲＰＳ（配列番号：５０７）
ＣＤＲ３−ＬＣ    ＧＮＥＤＳＳＡＧＫＧＧＩ（配列番号：５０８）
ＬＣタンパク質（配列番号：５０９）
ＡＬＴＱＰＳＳＶＳＡＮＬＧＧＴＶＥＩＴＣＳＧＧＳＳＴＹＧＷＹＱＱＫＳＰＧＳＡＰＶＴＬＩＹＮＤＤＥＲＰＳＮＩＰＳＲＦＳＧＳＴＳＤＦＴＧＴＬＴＩＴＧＶＱＡＤＤＥＡＶＹＦＣＧＮＥＤＳＳＡＧＫＧＧＩＦＧＡＧＴＴＬＴＶＬ
ＬＣ  ＤＮＡ（配列番号：５１０）
ＧＣＣＣＴＧＡＣＴＣＡＧＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＴＧＴＣＡＧＣＧＡＡＣＣＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＧＴＣＧＡＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＴＣＣＧＧＧＧＧＴＡＧＣＡＧＣＡＣＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＣＴＣＣＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＣＴＧＴＣＡＣＴＣＴＧＡＴＴＴＡＴＡＡＴＧＡＴＧＡＴＧＡＧＡＧＡＣＣＣＴＣＧＡＡＣＡＴＣＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＣＡＣＡＴＣＣＧＡＣＴＴＣＡＣＧＧＧＣＡＣＡＴＴＡＡＣＣＡＴＣＡＣＴＧＧＧＧＴＣＣＡＡＧＣＣＧＡＣＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＡＴＴＴＣＴＧＴＧＧＧＡＡＴＧＡＡＧＡＣＡＧＣＡＧＴＧＣＴＧＧＴＡＡＡＧＧＴＧＧＣＡＴＡＴＴＴＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＡ
【図１】
2021509822.tif 000013
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図７Ｄ】
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【図７Ｅ】
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【図７Ｆ】
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【図７Ｇ】
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【図７Ｈ】
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【図７Ｉ】
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【図７Ｊ】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１２Ｃ】
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【図１２Ｄ】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８Ａ】
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【図１８Ｂ】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９】
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【図５０】
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【図５１】
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【図５２】
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【図５３】
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【図５４】
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【図５５】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】令和2年8月18日(2020.8.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトＭＣＴ１に結合する、抗体またはその抗原結合フラグメントであって、以下：
（ｉ）以下の残基：Ｔ４１、Ｅ４６、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｋ２８９、Ｈ２９２、Ｙ２９３、Ｋ２９７、Ｇ４１７、Ｉ４７、およびＤ４１８のうちの１つまたはそれ以上を含むエピトープ、
（ｉｉ）少なくとも３つの残基を含むエピトープであって、前記残基のうちの少なくとも１、２、または３個全てが、Ｔ４１、Ｅ４６、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｋ２８９、Ｈ２９２、Ｙ２９３、Ｇ４１７、Ｉ４７、およびＤ４１８から選択される残基を含む、エピトープ、
（ｉｉｉ）残基Ｔ４１、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｙ２８７、Ｇ４１７、およびＤ４１８を含むエピトープ、
（ｉｖ）残基Ｔ４１、Ｓ２８５、およびＳ２８６を含むエピトープ、
（ｖ）残基Ｔ４１、Ｉ４７、Ｓ２８５、Ｓ２８６、Ｇ４１７、およびＤ４１８を含むエピトープ、
（ｖｉ）残基Ｅ４６、Ｋ２８９、およびＨ２９２を含むエピトープ、または
（ｖｉｉ）残基Ｋ２９７、Ｙ２９３、およびＨ２９２を含むエピトープ
から選択されるヒトＭＣＴ１のエピトープに結合する、抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項２】
前記抗体またはその抗原結合フラグメントが、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４個のアミノ酸残基を含む重鎖ＣＤＲ３配列を含む、請求項１に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項３】
ヒトＭＣＴ１に結合する抗体またはその抗原結合フラグメントであって、配列番号４、５、６のアミノ酸配列をそれぞれ有するＶＨ  ＣＤＲ１、２、および３、ならびに配列番号７、８、９のアミノ酸配列をそれぞれ有するＶＬ  ＣＤＲ１、２、および３を含む、抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項４】
請求項３に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント由来のヒト化抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項５】
最大でも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個のＣＤＲ残基が、請求項３に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントのＣＤＲに対して変異している、請求項３に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント由来の、親和性成熟抗ＭＣＴ１抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項６】
最大でも１、２、３、４、５、６、または７個のＣＤＲ残基が、請求項３に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントのＣＤＲに対して変異している、請求項５に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項７】
最大でも１、２、３、または４個のＣＤＲ残基が、請求項３に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントのＣＤＲに対して変異している、請求項５に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項８】
前記抗体またはその抗原結合フラグメントが、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４の重鎖および／または軽鎖定常領域を含み、定常領域（複数可）が、適宜変異されて、少なくとも１つのエフェクター機能を損なうかまたは増強し、前記エフェクター機能が、ＦｃＲ結合、補体結合、ＡＤＣＣ機能、ＦｃＲＮ結合、およびグリコシル化から選択される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項９】
前記抗体またはその抗原結合フラグメントが、活性化ヒトＴ細胞またはＢ細胞の表面上のヒトＭＣＴ１に結合することにより、以下の特性：
（ｉ）乳酸の輸送を阻害する、
（ｉｉ）ブロモピルビン酸の輸送を阻害する、
（ｉｉｉ）モノカルボン酸、ピルビン酸、ロイシン、バリンおよびイソロイシンに由来する分岐鎖オキソ酸、ケトン体、アセト酢酸、ベータ−ヒドロキシ酪酸、酢酸、乳酸、細胞栄養素、代謝産物、イオン、ホルモン、脂質、およびケトンのうちの１つまたはそれ以上の輸送を阻害する、
（ｉｖ）ＣＤ３／ＣＤ２８刺激Ｔ細胞の増殖を阻害する、
（ｖ）前記活性化Ｔ細胞もしくはＢ細胞の増殖を阻害する、
（ｖｉ）１つ以上の炎症性サイトカインの産生を阻害する、
（ｖｉｉ）エフェクターＴ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、および／もしくはＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の活性および／もしくは数を減少させる、
（ｖｉｉｉ）制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の割合もしくは活性を増加させる、
（ｉｘ）混合リンパ球反応における同種異系活性化を阻害する、
（ｘ）または上記のいずれかの組み合わせ
のうちの１つまたはそれ以上を引き起こす、請求項１〜８のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１０】
薬学的有効量の請求項１〜９のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１〜９のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントをコードする、ポリヌクレオチド。
【請求項１２】
請求項１１に記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
【請求項１３】
請求項１２に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
【請求項１４】
抗ＭＣＴ１抗体またはその抗原結合フラグメントを産生する方法であって、前記抗体またはその抗原結合フラグメントの発現を可能にする条件下で、請求項１３に記載の宿主細胞を培養することと、前記培養培地または宿主細胞から前記抗体またはその抗原結合フラグメントを回収することとを含む、方法。
【請求項１５】
自己免疫状態、アレルギー状態、炎症状態、代謝障害、癌、移植レシピエント、細胞療法レシピエント、ＥＩＨＩ状態、または多嚢胞腎疾患（ＡＤＰＫＤ）の治療で使用するための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記自己免疫状態が、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、関節リウマチ（ＲＡ）、乾癬、多発性硬化症、強皮症、または特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）である、請求項１５に記載の使用のための抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または医薬組成物。
【請求項１７】
前記癌が、ＭＣＴ１を発現する、請求項１５に記載の使用のための抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または医薬組成物。
【請求項１８】
エフェクターＴ細胞もしくはＢ細胞の活性もしくは数の阻害、またはサプレッサーＴもしくはＴｒ１細胞の活性もしくは数の増加で使用するための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または請求項１０に記載の医薬組成物。
【国際調査報告】
2021509822.tif 000083
2021509822.tif 000084
2021509822.tif 000085
2021509822.tif 000086
2021509822.tif 000087
2021509822.tif 000088