(57)【要約】【課題】消化管環境でのアセチルサリチル酸の制御放出のためのマイクロカプセルを提供する。【解決手段】本発明は、アセチルサリチル酸の制御放出マイクロカプセルであり、セルロース系フィルム形成ポリマー誘導体、粘着防止剤、可塑剤、潤滑剤、および、ビニル系フィルム形成ポリマー誘導体の混合物からなるコーティング材で被覆された１００〜１０００μｍの粒子径を有するアセチルサリチル酸の粒子からなる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
消化管環境でのアセチルサリチル酸（ＡＳＡ）の制御放出のためのマイクロカプセルであって、
被覆され、かつ、投与量Ｄ７５〜３２０ｍｇの１回投与で経口的に摂取された場合に、ヒトのインビボでの穏健なＡＳＡ吸収動態を、少なくとも２４時間にわたって誘発することを意図した、１００〜１０００μｍの粒子径を有するアセチルサリチル酸の粒子からなり、
前記ＡＳＡ吸収が、
−経口摂取後の時間ｔが０．４時間である場合の被吸収部分Ｄの１０％以下であり、
−ｔ＝３．９時間の場合の被吸収部分Ｄの５０重量％以下であり、
−ｔ＝２３時間の場合の被吸収部分Ｄの９０重量％以下であり、
ｔが±１０％の範囲内になり得る、
ことを特徴とするマイクロカプセル。
【請求項２】
吸収が、２４〜４８時間の期間にわたって、下記の方法に従って行われることを特徴とする請求項１記載のマイクロカプセル：
−ｔ＝０．４〜５時間では被吸収部分の１０％、
−ｔ＝３．９〜２５時間では被吸収部分の５０％、
−ｔ＝２３〜４５時間では被吸収部分の９０％。
【請求項３】
コーティング操作で用いられるＡＳＡの粒子が、２５０〜８００μｍ、好ましくは３００〜５００μｍの範囲内であることを特徴とする請求項１記載のマイクロカプセル。
【請求項４】
コーティング材が、マイクロカプセルの全重量に対して、５〜５０重量％、好ましくは１０〜４０重量％、特に好ましくは１０〜３５重量％存在することを特徴とする請求項１ないし３のいずれか１つに記載のマイクロカプセル。
【請求項５】
コーテイング材が、
−少なくとも１つの消化管環境内で不溶性のフィルム形成ポリマー（Ｐ１）、
−少なくとも１つの水溶性ポリマー（Ｐ２）、
−少なくとも１つの固形潤滑充填剤、および、
−少なくとも１つの疎水性可塑剤
を含有するコーティング組成物からなることを特徴とする請求項１ないし４のいずれか１つに記載のマイクロカプセル。
【請求項６】
コーティング組成物が、以下のように量的に規定されることを特徴とする請求項１ないし５のいずれか１つに記載のマイクロカプセル（乾燥重量％で表す）：
−Ｐ１  ：６０〜８５％、好ましくは、７０〜８０％
−Ｐ２  ：２〜２０％、好ましくは、５〜１５％
−潤滑剤：２〜２０％、好ましくは、８〜２０％
−可塑剤：２〜２０％、好ましくは、５〜１５％。
【請求項７】
Ｐ１は、ゼイン、エチルセルロース、塩化ビニル、酢酸ビニル、および／またはそれらのコポリマー、エチルおよび／またはメチルアクリレートおよび／またはメタクリレートをベースとするコポリマー、および、これらの製品全ての混合物から選択されることを特徴とする請求項１ないし６のいずれか１つに記載のマイクロカプセル。
【請求項８】
Ｐ２が以下の製品から選択されることを特徴とする請求項１ないし７のいずれか１つに記載のマイクロカプセル：
−ポリビニルピロリドン、
−ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシメチルエチルセルロースおよびメチルセルロースのような水溶性セルロース誘導体、
−酢酸ビニル／クロトン酸コポリマー、
−無水マレイン酸／メチルビニルエーテルコポリマー、および、
−上記製品の全ての誘導体および混合物。
【請求項９】
固形潤滑充填剤が、以下の化合物から選択されることを特徴とする請求項１ないし８のいずれか１つに記載のマイクロカプセル：ステアリン酸のアルカリ金属土類塩、ケイ酸マグネシウム、カオリン、タルク、シリカ、および、これらの混合物。
【請求項１０】
可塑剤が、以下の化合物の少なくとも１つからなることを特徴とする請求項１ないし９のいずれか１つに記載のマイクロカプセル：グリセロールのステアリン酸塩、フタル酸塩、クエン酸塩、セバシン酸塩、セチルアルコールのエステル、ヒマシ油、クチン、および、合成樹脂。
【請求項１１】
コーティング組成物が、エチルセルロース７４±２％（乾燥重量百分率）、ステアリン酸マグネシウム１０±２％、ポリビニルピロリドン８±２％およびヒマシ油９±２％を含有することを特徴とする請求項１ないし１０のいずれか１つに記載のマイクロカプセル。
【請求項１２】
タルク、コロイド状シリカまたは両方の混合物抗固化剤少なくとも１つを０．５〜５％、好ましくは１．５％混合することを特徴とする請求項１ないし１１のいずれか１つに記載のマイクロカプセル。
【請求項１３】
実質的に以下の工程からなる請求項１ないし１２のいずれか１つに記載のマイクロカプセルの製造方法：
ａ）−Ｐ１、Ｐ２、潤滑剤および可塑剤を溶媒系中に混合することによるコーティング組成物を調製する工程、
ｂ）−組成物／溶媒系混合物を、アセチルサリチル酸の粒子に塗布する工程、
ｃ）−得られたマイクロカプセルを乾燥する工程、および、
ｄ）−適当な場合に、少なくとも１つのと後者を混合する工程。
【請求項１４】
溶媒系が、以下のリストから選択される化合物で構成されることを特徴とする請求項１３記載の方法：
ケトン類、エステル類、塩素系溶媒、アルコール類、好ましくは脂肪族アルコール、アルカン類およびこれらの混合物、好ましくは、Ｃ１〜Ｃ６の化合物、特に好ましくは、アセトン、メチルエチルケトン、メタノール、エタノール、イソプロパノール、シクロヘキサンおよび塩化メチレン。
【請求項１５】
コーティング組成物／溶媒系混合物が、移動するＡＳＡ粒子の上にスプレーにより塗布され、前記移動は、好ましくは機械的攪拌または送風（流動化）により引き起こされることを特徴とする請求項１３または１４のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１６】
請求項１ないし１２のいずれか１つに記載および／または請求項１３ないし１５のいずれか１つに記載の方法により製造されるマイクロカプセルの、その他のプロスタグランジンに比較してトロンボキサンの阻害に対する生化学的選択性を有するアスピリンのガレヌス製剤の調製への使用。
【請求項１７】
請求項１ないし１２のいずれか１つに記載および／または請求項１３ないし１５のいずれか１つに記載の方法により製造されるマイクロカプセルの、血小板凝集阻害剤として有用なアスピリンのガレヌス製剤の調製への使用。
【請求項１８】
請求項１ないし１２のいずれか１つに記載および／または請求項１３ないし１５のいずれか１つに記載の方法により製造されるマイクロカプセルの、心臓血管疾病および危険を防止および／または治療する活性を有するアスピリンのガレヌス製剤の調製への使用。
【請求項１９】
ＡＳＡ等価物を、２０〜５００ｍｇ、好ましくは、５０〜４００ｍｇおよび特に好ましくは７５〜３２０ｍｇ含有する錠剤、散剤またはゼラチンカプセルの形で提供される請求項１６ないし１８のいずれか１つに記載の新規なガレヌス製剤。
【請求項２０】
ＡＳＡ等価物をそれぞれ７５〜３２０ｍｇ含有する１回毎日投与形態で経口投与される請求項１９に記載の新規なガレヌス製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、消化管環境でのアセチルサリチル酸の制御放出のためのマイクロカプセルに関する。アセチルサリチル酸の制御放出とは、アセチルサリチル酸の放出の動態を、消化管管路の全長にわたって制御することを意味すると理解される。
本発明はさらに上記マイクロカプセルの製造方法に関する。
【０００２】
本発明の薬学的な目的は、特に、トロンボキサンの生産に対して特異的なシクロオキシゲナーゼを、血小板凝集の阻害を最適化することを可能にするその他のプロスタグランジン（プロスタサイクリン）を除き、選択的に阻害して、心臓血管疾病および危険を防止および／または治療することである。
【０００３】
市販名「アスピリン」または略語「ＡＳＡ」は、本明細書でアセチルサリチル酸を表わすために使用される。
【背景技術】
【０００４】
新規な制御放出剤形の研究および開発は、製薬産業における長年の間の変わらない興味の対象になっている。実際に、一般的な用語に、活性成分の放出の動態を制御することは、所望の期間にわたって安定した血漿レベルに活性成分を維持し、同時に、活性成分の突然の大量放出と関連する副作用を減少させることを可能にする。
【０００５】
制御放出剤形は、特に、記載されている利益だけでなく、より良い局所寛容性を許す利益およびこれらの活性成分の薬理学的若しくは薬物速度論的特性を修正する利益を提供する限りは、アスピリンのような特定の活性成分の場合に有益である。
【０００６】
アスピリンに関する限りでは、鎮痛剤、解熱剤および抗炎症剤としての使用が知られている。血小板凝集阻害剤としてアスピリンの特性が、最近例証されている。アスピリンは、血小板凝集に対して、シクロオキシゲナーゼを阻害することにより作用する。シクロオキシゲナーゼは、血小板中でのアラキドン酸のトロンボキサンへの変換を触媒する。トロンボキサンは、強力な血管収縮薬および血小板凝集刺激剤である。
【０００７】
血小板シクロオキシゲナーゼの阻害は、アスピリンによるアセチル化の結果である。このアセチル化は、肝臓の中を最初に通過する間に肝臓で行われる。
【０００８】
しかしながら、このメカニズムは、急速に飽和に達し、肝臓で脱アセチル化されていないアスピリンは、体循環の中を通過し、その他の細胞、特に、血管および胃の内皮でシクロオキシゲナーゼのアセチル化を起こす。
【０００９】
血管および胃の内皮のシクロオキシゲナーゼは、プロスタサイクリンの形成を触媒する。プロスタサイクリンは、トロンボキサンとは反対に、血管拡張剤、血小板凝集阻害剤、および、細胞保護剤である。従って、血管および胃のシクロオキシゲナーゼの阻害により、プロスタサイクリンおよびその他のプロスタグランジン（ＰＧＥ）の阻害が起こり、血小板凝集に対する所望の効果と逆になるだけでなく、アスピリンの消化管粘膜に対する副作用も起こす。このような生体における異なるプロスタグランジンの目に見えない阻害の現象は、大抵、アスピリンのジレンマとして言及される。このことは化学者によく知れており、文献に広く記載されている。
【００１０】
従って、門脈循環での血小板に対するアスピリンの直接作用を助長する一方で、体循環中のアスピリンの量を最少にすることにより、血管壁のシクロオキシゲナーゼに対する影響を最少にすることが最も重要である。
【００１１】
例えば、ＦＲ−Ａ−２  ５３９  ９９５に開示されているのような処方が知られているが、アスピリンの放出が早すぎるために、上述の結果を達成できていない。
【００１２】
特許出願  ＦＲ−Ａ−２  ５３９  ９９５は、胃の寛容性を改善し、薬物放出の持続時間を延長することを意図した、アスピリンを含有する微小顆粒を開示する。これらの微小顆粒は、活性成分の全てを十二指腸の環境に４時間以内に放出するように処方されている。
【００１３】
アスピリンは、所望の放出の動態が得られるまで、ポリビドン賦形剤およびフタル酸エチルの混合物中のアスピリンの層並びに陰イオンメタクリル酸ポリマーの層の連続コーティング操作により直径約５００〜６００μｍの担体粒子に結合されている。
【００１４】
ＦＲ−Ａ−２  ５３９  ９９５に開示された、主成分の１００％を４時間で放出するガレヌス製剤は、アスピリンの通常の使用（鎮痛、解熱および抗炎症）に適しているが、血漿凝集剤としてのアスピリンの投与には適していない。
【００１５】
上記で言及されたアスピリンのジレンマは、特許出願ＥＰ  ０  ４１１  ５９０に最初に認められる。このジレンマに直面し、前記特許出願の発明は、血小板凝集を阻害するための医薬調合剤からなる。この医薬調合剤は、コーティング材（例えば、アクリル／メタクリルコポリマー）の層で被覆されたＡＳＡの内芯を含有するマイクロカプセルからなり、このマイクロカプセル自体もアスピリンの外層で被覆されている。この調合剤によれば、ＡＳＡの吸収は、ＡＳＡ８０〜１２０ｍｇおよび１８０〜２２０ｍｇの２つの連続したパルスで起こる。
【００１６】
前記特許出願は、以下のジレンマを解決する調合剤の有効性を示す実験的事実を与えていない：
−トロンボキサンの阻害
−プロスタサイクリンおよびその他のプロスタグランジンの議論
−胃の寛容性。
【００１７】
それぞれのパルスでのＡＳＡの放出量は、それでも非常に短時間で非常に大量であり、肝臓のアスピリン脱アセチル化システムを飽和させる。
【００１８】
プロスタサイクリンの循環レベルを減少させずにトロンボキサンを阻害するアスピリンの従来技術のその他の提案は、特許出願ＥＰ  ０  ３７７  ４３９に開示されている。これらのガレヌス製剤は、アクリレート／メタクリレートコポリマー、ヒドロキシプロピルセルロースおよび塩化ナトリウムを含有するコーティング組成物で被覆されたアスピリンの顆粒である。得られるコーティング材は、顆粒の乾燥重量１０〜３５％に相当する。これらのガレヌス製剤は、４０ｍｇ〜１２０ｍｇの投与量で８時間にわたって５〜１５ｍｇ／時の放出動態を提供する。
【００１９】
概して言えば、前記特許出願ＥＰ  ０  ３７７  ４３９に開示された発明は、８時間に限られた期間内に放出されるＡＳＡの投与量を減少することにより、アスピリンのジレンマを軽減することを論理学的に提供する。２４時間にわたるトロンボキサンの完全な阻害に必要な時間の３分の１を治療学的にカバーしているにすぎないので、この発明は不十分である。
【００２０】
これらのヒトの血管閉塞性疾病の治療に使用するために提供されたガレヌス製剤は不十分である。実際に、健康なボランティアについての重要な研究の結果は、血清トロンボキサンの阻害が、活性成分５０ｍｇを含有する剤で８５％、活性成分７５ｍｇを含有する剤で９０％であり、プラセボ自体が、約１０％の阻害であることを示す。尿中トロンボキサンの測定によれば、それぞれ６０および７０％の阻害値が得られる。
【００２１】
血小板凝集に対する薬理学的効果については、トロンボキサン阻害は、９５％よりも大きくなければならない。さらに、１００％のトロンボキサン阻害は、コラーゲンおよびアデノシ二リン酸ンによって誘導される血小板凝集を防止するためには十分でないかもしれない。ついには、血小板の毎日の再生（健康な被験者で最初の量の１／６〜１／１０、危険な患者で１／４）、および、巨核球による急速な再生のためのトロンボキサンの生産は、毎日投与量の通常のアスピリンを服用する個人を、トロンボキサン阻害の最小百分率（９５％）よりも極めて十分に低くする。さらに、凝集阻害血管プロスタサイクリンの存在により凝集効果を正しくすることができる。凝集阻害血管プロスタサイクリン自体は、２５％程度に阻害される。従って、特許出願ＥＰ  ０  ３７７  ４３９のガレヌス製剤は、アスピリンのジレンマを解決していない。
【００２２】
さらに、これらのガレヌス製剤は、心筋梗塞の防止にも適していない。実際に、そのような心臓病の頻度は、午前４時〜８時および午後６時〜１０時の間に増加する。この現象は、朝晩の過剰凝集に起因するといえる。従って、トロンボキサンを阻害するように、ニクトヘメロン（ｎｙｃｔｈｅｍｅｒｏｎ）を通過して門脈にＡＳＡを招きいれることが一番重要である。このことは、特許出願ＥＰ０  ３７７  ４３９に開示されたガレヌス製剤では達成できない。
【特許文献１】ＥＰ０３７７４３９  Ａ１
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２３】
以上のような技術状況下において、本発明の必須な目的の一つは、
−特に血小板凝集阻害剤として２４時間にわたって活性であり、一日あたり１回投与するだけで２４時間にわたって治療学的に全てをカバーすることが可能であり、しかも、治療の総合的なコストを低減でき、
−トロンボキサンに対する生化学的選択性によりアスピリンのジレンマを十分な解決を提供して、最大の治療効果を達成し、
−生体が完全に寛容であり、かつ、
−簡単で迅速かつ経済的なプロセスで工業的に製造することができる、
ＡＳＡに基づくガレヌス製剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００２４】
すなわち、本出願人は、鋭意試験・研究を行った結果、以上で言及した明細書に関するような特別な目的のための薬剤剤形が、都合良く、ＡＳＡのインビボでの吸収が７５〜３２０ｍｇの投与量についての少なくも２４時間にわたる独特の動態プロフィールに従って行われる、注意深く選択されたサイズのフラクションのＡＳＡの被覆粒子からなることを証明する功をせしめた。前記プロフィールは、図１に示す曲線Ｃで表される。
【００２５】
従って、本発明は、消化管環境でのアセチルサリチル酸の制御放出のためのマイクロカプセルであって、被覆され、かつ、投与量Ｄ７５〜３２０ｍｇの１回投与で経口的に摂取された場合に、ヒトのインビボでの穏健なＡＳＡ吸収動態を、少なくとも２４時間にわたって誘発することを意図した、１００〜１０００μｍのサイズを有するアセチルサリチル酸の粒子からなり、
前記ＡＳＡ吸収が、
−経口摂取後の時間ｔが０．４時間である場合の被吸収部分Ｄの１０％以下であり、
−ｔ＝３．９時間の場合の被吸収部分Ｄの５０重量％以下であり、
−ｔ＝２３時間の場合の被吸収部分Ｄの９０重量％以下であり、
ｔが±１０％の範囲内になり得る、
ことを特徴とするマイクロカプセルである。
【００２６】
これらの有利な点は、ＥＰ−Ａ−０  ３７７  ４３９が公知の高投与量剤形が適当でないことを教示する限りでは、極めて驚くべき、思いがけないものであり、８時間にわたるＡＳＡの制御放出のための低投与量システムを用意することにより、前者を改めることができる。従って、特に、プロスタサイクリンについて有害な影響を与え得る範囲がどのようなものか知られている高投与量剤形に新たな興味を持つことは、自明なステップではない。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２７】
本発明の好ましい態様では、吸収は、２４時間〜４８時間の範囲にわたって次のように行われる。：
−ｔ＝０．４〜５時間では被吸収部分の１０％、
−ｔ＝３．９〜２５時間では被吸収部分の５０％、
−ｔ＝２３〜４５時間では被吸収部分の９０％。
【００２８】
図１の曲線Ｃは、本発明のマイクロカプセルにより引き起こされたインビボでの吸収プロフィールの上限を、３２０ｍｇの投与量での時間の関数として示す。
【００２９】
この吸収は、最初の投与量Ｄの被吸収部分に対する吸収された％で表される。この曲線Ｃは、一般的なデコンボリューション（ｄｅｃｏｎｖｏｌｕｔｉｏｎ）分析（Ｍｉｌｏ  ＧＩＢＡＬＤＩ  ａｎｄ  Ｄ．ＰＥＲＲＩＥＲ，  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ，  ２ｎｄ  ｅｄ．，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ  Ｉｎｃ．，１９８３，  ｐ．１４５−１６７）により、アスペジック（ＡＳＰＥＧＩＣ）（登録商標）（コントロールの剤形）と同等のＡＳＡ３５０ｍｇおよび本発明のマイクロカプセルと同等のゼラチンカプセルの形のＡＳＡ３２０ｍｇの経口投与後の時間の関数としての血漿濃度の平均曲線から得られる。
【００３０】
この場合、時間の関数としての血漿濃度のために選ばれたトレーサー分子は、必然的に、サリチル酸（ＳＡ）、ＡＳＡの代謝産物である。ＳＡの血漿濃度は、ＨＰＬＣで測定される。
【００３１】
本発明のマイクロカプセルの定義の中ででてくる、０．４、３．９、および２３時間の臨界点は、もちろん、この曲線の上で見出される。
【００３２】
この曲線Ｃより上では、肝臓のＡＳＡ脱アセチル化メカニズムが飽和する。曲線Ｃの下側の領域に含まれる全てのＡＳＡのインビボでの吸収プロフィールは、本発明に由来していると考えなければならない。
【００３３】
本発明の好ましい態様では、マイクロカプセルは、曲線Ｃと４８時間内で１００％吸収を導く理論直線ＤＴの間の領域に含まれるＡＳＡのインビボでの吸収プロフィールを有している。
【００３４】
この本発明の必須の特色の一つを構成するインビボ吸収曲線Ｃは、トロンボキサンの最大阻害およびプロスタサイクリンおよびその他のプロスタグランジンの最小阻害を誘導および達成することに関しては、決定要因である。
【００３５】
これらの顕著な結果が、寛容、特に胃の寛容の制限、または、マイクロカプセルの実現性および産業上の実行可能性を破ることなく得られることに留意することが重要である。
【００３６】
アスピリンの放出動態は、カプセル化されるアスピリンの粒子径に従って変化する。
【００３７】
例えば、アスピリン８０％およびコーティング材２０％を含有する粒子径１００μｍのアスピリンの粒子から得られる本発明のマイクロカプセルは、インビトロで、５時間後に４０〜５０％のアスピリン、１０時間後に８０％、１６時間後に９０％、２４時間後に１００％を消化管環境内に放出する。
【００３８】
より遅い放出性の本発明のその他のマイクロカプセルは、例えば、アスピリン８０％およびコーティング材２０％を含有する、３１５〜４００μｍ潤の平均粒子径を有するアスピリンの粒子から得ることができる。これらの粒子は、インビトロで、５時間後に３５％のアスピリン、１０時間後に６０％、２４時間後に１００％を消化管環境内に放出する。
【００３９】
本発明の好ましい変形例では、コーティング操作に使用したＡＳＡの粒子が、２５０〜８００μｍ、好ましくは、３００〜５００μｍの粒子径を有する。
【００４０】
都合良くは、コーティング材は、マイクロカプセルの全重量に対して、５〜５０重量％、好ましくは１０〜４０重量％、特に好ましくは１０〜３５重量％存在する。
【００４１】
コーティング材は、本発明の基礎的な外観の一つをなし、上記インビボ吸収曲線は、当業者が比較的安易に（例えば、試行錯誤により）、意図した薬理学的効果を達成することを可能にする、コーティング材のコーティング特性（特に、コーティング材の性質）を決定するために有用なモデルを構成する。
【００４２】
都合良くは、コーティング材は、
−少なくとも１つの消化管環境内で不溶性のフィルム形成ポリマー（Ｐ１）、
−少なくとも１つの水溶性ポリマー（Ｐ２）、
−少なくとも１つの固形潤滑充填剤、および、
−少なくとも１つの疎水性可塑剤
を含有するコーティング組成物からなる。
【００４３】
本発明のその他の新しい特色は、上述のコーティング組成物の中で表される。その特色は、本発明の意図する結果を得るためにその機能が組み合わされる４つの化合物の不随意な選択からなる。
【００４４】
好ましくは、コーティング組成物は、次のように量的に規定される（乾燥重量％で表す）。
【００４５】
−Ｐ１：６０〜８５％、好ましくは、７０〜８０％
−Ｐ２：２〜２０％、好ましくは、５〜１５％
−潤滑剤：２〜２０％、好ましくは、８〜２０％
−可塑剤：２〜２０％、好ましくは、５〜１５％
本発明の都合が良い態様では、フィルム形成ポリマーＰ１は、少なくとも１つの３５〜１２０℃の沸点を有する有機溶媒中で溶解する。
【００４６】
都合良くは、Ｐ２は、Ｐ１のための溶媒に溶解する水溶性ポリマーである。
【００４７】
さらに、固形潤滑充填剤は、好ましくは、水およびＰ１のための溶媒に不溶性である。
【００４８】
本発明のコーティング材の量的規定の変形例では、コーティング材は、ポリマー誘導体Ｐ１１０〜３０重量部、ポリマー誘導体Ｐ２１〜３重量部、固形潤滑充填剤２〜４重量部、および、可塑剤１〜３重量部を含有する。
【００４９】
本発明の顕著な特徴によれば、Ｐ１は、次の製品から選択される：ゼイン、エチルセルロース、塩化ビニル、酢酸ビニル、および／またはそれらのコポリマー、エチルおよび／またはメチルアクリレートおよび／またはメタクリレートをベースとするコポリマー（例えば、登録商標ＥＵＤＲＡＧＩＴ  ＲＬおよび／またはＲＳで販売されている製品）、および、これらの製品全ての混合物。
【００５０】
限定を暗示することなく、エチルセルロースは、化合物Ｐ１に特に適当であることを強調しなければならない。
【００５１】
Ｐ２は、好ましくは次の製品から選択される。
【００５２】
−ポリビニルピロリドン、
−ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシメチルエチルセルロースおよびメチルセルロースのような水溶性セルロース誘導体、
−酢酸ビニル／クロトン酸コポリマー、
−無水マレイン酸／メチルビニルエーテルコポリマー、および、
−上記製品の全ての誘導体および混合物。
【００５３】
通常は、本発明のコーティング操作を行うためにＰ１に好ましく混合されるのはポリビニルピロリドンである。
【００５４】
相補的な固形潤滑充填剤は、次の化合物から選択される：ステアリン酸のアルカリ金属土類塩、ケイ酸マグネシウム、カオリン、タルク、シリカ、および、これらの混合物。
【００５５】
本発明の組成物の最後の成分は、可塑剤である。可塑剤は、以下の製品の少なくとも１つからなる：
−グリセロール、プロピレングリコール、トリアセチンのようなグリコールのステアリン酸塩
−クエン酸塩
−フタル酸塩（例えば、フタル酸ジメチル、フタル酸ジエチル、またはフタル酸ジブチル）
−特にパルミチン酸セチルのようなセチルアルコールのエステル、
−セバシン酸塩
−酒石酸塩
−ヒマシ油
−クチン、および、
−合成樹脂（例えば、セライト（Ｃｅｒｉｔ；登録商標））。
【００５６】
好ましい固形充填剤および好ましい可塑剤は、それぞれ、ステアリン酸マグネシウムおよびヒマシ油である。
【００５７】
より容易に使用されるコーティング組成物の例としては、エチルセルロース（Ｐ１）／ポリビニルピロリドン（Ｐ２）／ステアリン酸マグネシウム／ヒマシ油を含有する組成物が挙げることができる。それぞれのコンポーネントは、次の好ましい割合（乾燥重量）で含まれている：
−  ７４±２
−  ８±２、
−  １０±２
−  ８±２％
このコーティング組成物は、本発明の新しい特色の一つを構成する。その特色は、上記４つの化合物の親密な組み合わせにより特徴づけられる。
【００５８】
本発明のマイクロカプセルを構成する被覆粒子の固化の問題を防止するために、好ましくは、タルク、コロイド状シリカまたは両方の混合物で構成される抗固化剤の少なくとも１つを、この組成物に添加する用意がなされる。
【００５９】
通常は、本発明のＡＳＡの粒子は、有機溶媒または複数の有機溶媒の混合物中に懸濁された、コーティング材を構成する上述の親密な組み合わせでスプレーすることにより被覆される。
【００６０】
本発明のその他の課題を構成するコーティング方法は、マイクロカプセル化技術の一般的なパターンに適合する。このマイクロカプセルか技術の主なものは、Ｃ．ＤＵＶＥＲＮＥＹおよびＪ．Ｐ．ＢＥＮＯＩＴの文献（Ｌ’ａｃｔｕａｌｉ  ｅｃｈｉｍｉｑｕｅ  、１９８６年１２月）に概略が述べられている。より正確には、問題の技術は、フィルムコーティングによるマイクロカプセル化である。
【００６１】
好ましくは、このコーティング方法は、実質的に以下の工程からなる：
ａ）−Ｐ１、Ｐ２、潤滑剤および可塑剤を溶媒系中に混合することによるコーティング組成物を調製する工程、
ｂ）−組成物／溶媒系混合物を、アセチルサリチル酸の粒子に塗布する工程、
ｃ）−得られたマイクロカプセルを乾燥する工程、および、
ｄ）−適当な場合に、少なくとも１つのと後者を混合する工程。
【００６２】
溶媒系のコンポーネントの一部を構成するのに適した溶媒の例は、ケトン類、エステル類、塩素系溶媒、アルコール類（好ましくは脂肪族アルコール）、アルカン類、および、これらの混合物である。
【００６３】
これらの溶媒は、都合良くは、Ｃ１〜Ｃ６の化合物であり、特に好ましくは、アセトン、メチルエチルケトン、メタノール、エタノール、イソプロパノール、シクロヘキサンおよび塩化メチレンである。
【００６４】
本発明で使用可能なコーティングの方法論をより詳細に考慮した場合、コーティング組成物／溶媒系混合物は、スプレーにより移動するＡＳＡ粒子の上に塗布されることが説明できる。この移動は、好ましくは、機械的攪拌または送風（流動化）により引き起こされる。
【００６５】
所望の吸収動態を持つ本発明のマイクロカプセルを得るために、７５〜３２０ｍｇの投与量Ｄについて、７５〜５００μｍ、特に３００〜５００μｍの平均粒子径を有するＡＳＡの粒子をカプセル化する必要がある。
【００６６】
本発明の方法を実施するのに好ましいモードでは、次の工程が用意されている：
ａ１）−まず最初に、アセトン／アルカノール比が５０／５０〜７０／３０（Ｖ／Ｖ）であるようなアセトン／アルカノール混合物か、シクロヘキサン、トルエン、四塩化炭素、クロロホルムおよび塩化メチレンから選択される溶媒のいずれか一方の溶液として、水溶性ポリマーＰ２１〜３重量部あたりフィルム形成ポリマーＰ１１０〜３０重量部および可塑剤１〜３重量部を含有する混合物を調製する工程、
ａ２）−ビニル系ポリマーＰ２１〜３重量部に対して潤滑剤２〜４重量部を先の工程で調製した溶液に懸濁する工程、
ｂ）−得られた混合物を、流動床中の活性成分の微粒子の上にスプレーする工程、
ｃ）−マイクロカプセルを、スプレー工程の最後に流動床の中で次いでオーブン中で乾燥する工程、および、
ｄ）−得られたマイクロカプセルを、ビニル系ポリマーＰ２１〜３重量部に対して粘着防止剤０．５〜２重量部と混合する工程。
【００６７】
ｂ）−得られた混合物を、流動床中の活性成分の微粒子の上にスプレーする工程、
ｃ）−マイクロカプセルを、スプレー工程の最後に流動床の中で次いでオーブン中で乾燥する工程、および、
ｄ）−得られたマイクロカプセルを、ビニル系ポリマーＰ２１〜３重量部に対して粘着防止剤０．５〜２重量部と混合する工程。
【００６８】
好ましくは、工程ｂ）において、アルカノールを添加してアセトン／アルカノール比を６０／４０（Ｖ／Ｖ）にするか、同じ溶媒を添加する。
【００６９】
本明細書において、アルカノールは、１〜６の炭素原子を有する脂肪族アルコール、好ましくイソプロパノールを意味するものと理解される。
【００７０】
本発明の方法を実施するのに好ましいモードでは、マイクロカプセルは、コーティングの後に乾燥される。
【００７１】
上述の方法で得られるマイクロカプセルは、その他のプロスタグランジンに比較してトロンボキサンの阻害に対する生化学的選択性を有する新規なアスピリンのガレヌス製剤の調製に使用できる。特に、血小板凝集阻害剤として有用な新規なガレヌス製剤の調製、および／または、より正確には、心臓血管疾病および危険を防止および／または治療する活性を有する新規なガレヌス製剤の調製に使用できる。
【００７２】
さらに、本発明は、これらの構造、提供方法および組成が新規なガレヌス製剤に関する。都合よくは、このガレヌス製剤は、活性成分を、２０〜５００ｍｇ、好ましくは、５０〜４００ｍｇおよび特に好ましくは７５〜３２０ｍｇ含有する錠剤、散剤またはゼラチンカプセルの形で提供される。かかるガレヌス製剤は、好ましくは、１錠あたりＡＳＡ等価物７５〜３２０ｍｇを含有する１回毎日投与形態で経口投与される。
【００７３】
同じゼラチンカプセル、錠剤または散剤の一つの中に、吸収動態が異なるが、発明の特徴的な枠組み（図１の曲線Ｃのプロフィール）の範囲内である、少なくとも２つのタイプのマイクカプセルを混合することは価値があるを注意すべきである。
【００７４】
その他の特色によれば、本発明は、トロンボキサンの過剰に関連する病理学的障害、特に、心臓血管疾病および危険の予防および／または治療方法に関する。この方法は、本発明のマイクロカプセルおよび／またはガレヌス製剤の、好ましくは７５〜３２０ｍｇのＡＳＡ等価物の１回毎日投与による経口投与からなる。
【００７５】
本発明のマイクロカプセルが、薬理学的条件において非常に有効であり、生体により完全に寛容（特に、胃寛容性）であり、種々の適当なガレヌス製剤で提供可能であり、さらに、簡単かつ安価に得られることは、上述のテキストから明らかである。
【００７６】
本発明は、以下の実施例でより明確に理解される。実施例は、単に例示のための手段であり、本発明の明確な理解を提供し、異なる態様および／または遂行方法のモード並びに様々な利点を説明するために役立つ。
【実施例】
【００７７】
例１：流動床造粒機でのカプセル化によるアスピリンベースのマイクロカプセルの調製
１．１−マイクロカプセル  Ｍ１：
アスピリンの微粒子１６０ｍｇを被覆するために、エチルセルロース（ｓｔａｎｄａｒｄｓ  ＵＳＰ  ＸＸＩＩ）２１．５ｍｇ、ポリビニドロン（フランス薬局方第１０版）２ｍｇおよびヒマシ油（フランス薬局方第１０版）２ｍｇをアセトン３１１ｍｇに溶解する。イソプロパノール２０８ｍｇを得られた溶液に添加した。次いで、ステアリン酸マグネシウム３ｍｇを溶液に縣濁させる。得られた混合物を攪拌し、この攪拌を、次のコーティング操作まで維持する。
【００７８】
アスピリンの微粒子２１１０ｇを、ＧＬＡＴＴ  ＧＰＣＣ３流動床装置に充填し、１．１６〜２ｍ２／分の流速で流動させる。流動床に入れられる空気の温度は、５５℃であり、一定に維持する。
【００７９】
一定に撹拌し続けられた上記コーティング懸濁液７２１９ｇを、蠕動ポンプにより、直径１．２ｍｍの注入ノズルに送り込み、前記微粒子の上にスプレー圧力２．８ｘ１０５Ｐａで連続的にスプレーする。
【００８０】
約１０分間の予熱段階の後、蠕動ポンプの出力を１分あたりコーティング懸濁液３０ｇをスプレーするように調節する。
【００８１】
次に、マイクロカプセルを、減速した流動化流速（１．１６ｍ３／分）で１５〜３０分間乾燥する。次いで、マイクロカプセルをチャンバーから取り出し、トレーの上に広げる。このトレーをオーブン中に５０℃で約１時間放置する。
【００８２】
１．２−マイクロカプセル  Ｍ２：
３００〜５００μｍの粒子径を有するＡＳＡの微粒子２１００ｍｇに、Ｍ１について上記説明したように、ＧＬＡＴＴ  ＧＰＣＣ  ３装置で、次の組成を有するコーティング懸濁液を用いてフィルムを被覆した。
【００８３】
−ＥＵＤＲＡＧＩＴ  ＲＳ  １００            ３６２．８ｇ
−フタル酸ジブチル                            ３６．２ｇ
−微粒子化タルク                            １０７．１ｇ
−ヒドロキシプロピルメチルセルロース          １８．４ｇ
−アセトン                                ２９０２．０ｇ
−イソプロパノール                        ４３５３．０ｇ
１．３−マイクロカプセル  Ｍ３：
３００〜５００μｍの粒子径を有するＡＳＡの微粒子２１１０ｍｇに、Ｍ１について上記説明したように、ＧＬＡＴＴ  ＧＰＣＣ  ３装置で、次の組成を有するコーティング懸濁液を用いてフィルムを被覆した。
【００８４】
−ゼイン                                ３０８．７ｇ
−グリセロールトリアセテート              ３０．９ｇ
−微粒子化タルク                          ９２．６ｇ
−ステアリン酸マグネシウム                ５８．９ｇ
−ポリビニルピロリドン                    ３０．９ｇ
−塩化メチレン                        ３０８７．０ｇ
−メタノール                          ３０８７．０ｇ
【００８５】
例２：本発明のＡＳＡマイクロカプセルに基づいた薬剤剤形の調製
次に、例１の方法で得られたマイクロカプセルＭ１を、コロイド状シリカおよびタルクと混合する。
【００８６】
次いで、得られた混合物を、所望の単位投与量（３２０．１６０または８０ｍｇ）に従ってサイズ０、１または２のゼラチンカプセルに分配した。
【００８７】
使用したカプセル充填装置は、１時間あたり５０００ユニット最大許容量を有するＺａｎｕｓｓｉ  Ｌである。ゼラチンカプセルは、予めチェック（色、質）しておき、ユニットは、カプセル充填工程の間チェックする。次に、最終製品を、各製品について規定および適応された新しい仕様（外観、平均重量、投与量、崩壊性、溶解性、不純物のアッセイ）に従ってチェックする。
【００８８】
例３：マイクロカプセルの溶解速度の分析定量
マイクロカプセル、ゼラチンカプセルおよび錠剤のインビトロにおける溶解性を、欧州薬局方第２版、題名「固形経口用剤形の溶解性試験」（“Ｅｓｓａｉ  ｄｅ  ｌａ  ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｄｅｓ  ｆｏｒｍｅｓ  ｏｒａｌｅ  ｓｏｌｉｄｅｓ”）の指図に従ってチェックした。最後の剤形（ゼラチンカプセルおよび錠剤）についてはバスケット装置を使用した。このバスケット装置は、マイクロカプセルの溶解性を測定するために選択した。このバスケット装置は、円筒容器、スターラーおよび温度制御浴からなる。溶解溶媒は、ｐＨ７．２のリン酸緩衝液であり、前記薬局方の勧告に従って調製した。アスピリンのコントロール溶液は、活性成分６１ｍをｐＨ７．２の溶媒に溶解して全量２０ｍｌとして調製した。試験は、溶解溶媒９００ｍｌ中で３７℃±０．５で、１００ｒｐｍの回転速度で行う。１つのゼラチンカプセルの等価物を、溶解溶媒中に入れて、溶媒１０ｍｌを、実験開始後０，１，２，４，６，８，１２および２４時間後に取り出す。ＡＳＡがＳＡに加水分解する可能性を考慮し、２６５ｎｍのＡＳＡおよびＳＡの等吸収点での吸収を測定することにより、溶解したアスピリンの量を定量した。
【００８９】
図２は、４０ｋｇのバッチについて定量された、例１のマイクロカプセルＭ１についての放出されたアスピリンの百分率を時間の関数として示す。
【００９０】
図３は、上記条件で、０，３，９および１２か月の保存の後に測定された、放出プロフィールを示す。
【００９１】
例４：放出制御カプセル化アスピリン（ＣＲＡ）の毒性試験
例１で調製したアスピリンのマイクロカプセルＭ１を、市販の白色粉末状のアスピリン（ＣＡ）との比較による毒性試験に付した。これらの２つの薬剤剤形のアスピリンの急性毒性は、ラットに投与して比較したところ同等であった。
【００９２】
ａ）方法：
製品の２つの各製剤を、１０匹のＳＤラット（雄５匹、雌５匹）の群に、１０ｍｇ／ｋｇの量で０．５％カルボキシメチルセルロース中懸濁液として経口投与した。本発明の制御放出性アスピリンは２５００ｍｇ／ｋｇの投与量で投与し、市販のアスピリンは、７４０，１１１０，１６７０および２５００ｍｇ／ｋｇの投与量で投与した。全ての動物は、治療前に水食（ｗａｔｅｒ  ｄｉｅｔ）を採らせた。
【００９３】
死亡率、生存している動物の一般行動および体重変化を、製品の１回投与後１４日間追跡した。解剖病理学的試験は、死亡しているかまたは試験の終わりに犠牲にされた各動物について行った。
【００９４】
ＬＤ５０は、フィニー法により計算した。
【００９５】
ｂ）結果：
＊ＣＡ：
ＣＡ製品を、投与量７４０，１１１０，１６７０および２５００ｍｇ／ｋｇで投与した後、投与に関係する自発的活動の下落および起毛を、治療後数時間にわたって観察した。
【００９６】
投与に関係する体重増加の僅かな下落が、１〜５日の間に認められたが、その後試験の終わりまで、何ら結果は得られなかった。
【００９７】
試験中に死亡した動物の解剖においては、投与量７４０および１１１０ｍｇ／ｋｇでは、肉眼で見える異常は何ら認められなかった。投与量１６７０および２５００ｍｇ／ｋｇでの投与後数時間で死亡した動物は、肝臓の異常なやや黒色の呈色、消化管の壁が厚くなったことによる変色および胃での赤みがかった溢血点を有することが観察された。これらのサインは、著しい胃の不耐性の特徴である。
【００９８】
＊ＣＲＡ：
投与量２５００ｍｇ／ｋｇのＣＲＡを用いて治療した動物の一般行動および体重変化は、試験が終了するまで正常である。
【００９９】
死亡またはまたは試験の終わりに犠牲にされた動物の解剖では、いかなる肉眼で見える異常を見出せなかった。
【０１００】
ｃ）結論
上記実験条件下では、ＣＡ製品のラットに経口投与した場合のＬＤ５０は、１４３２ｍｇ／ｋｇである。９５％の確率閾値についての信頼区間の上限および下限は、それぞれ、９３６ｍｇ／ｋｇおよび２３９４ｍｇ／ｋｇであった。本発明のＣＲＡのラットに経口投与した場合のＬＤ５０は、２５００ｍｇ／ｋｇ以上であった。この投与量では、行動異常または主要器官の異常は観察されなかった。
【０１０１】
例５：３２時間にわたる放出制御カプセル化アスピリンの薬物動態試験
この試験は、ヒトについて行なわれ、本発明のマイクロカプセルのバイオアベイラビリティを測定し、血漿トロンボキサンＢ２の測定による血小板シクロオキシゲナーゼの阻害の程度を証明した。
【０１０２】
さらに便宜上、次の略号を以下の明細書で使用できる：
−ＣＲＡ：本発明の制御放出カプセル化アスピリン（例１のＭ１）、
−ＡＳＡ：アセチルサリチル酸
−ＳＡ：サリチル酸。
【０１０３】
薬物動態試験を、１２人の男性ボランティアについて実施した。彼らは、血液生化学的疾病、出血性疾病、アレルギー性疾病および胃腸病の何れにも悩まされておらず、１日に１０本以上喫煙せず、しかも、治療学的試験に参加せず、かつ、試験前３ヶ月以内に献血をしていなかった。これらの被験者は、試験前１５日以内に何ら薬物を服用していなかった。
【０１０４】
各被験者は、水２５０ｍｌで、２つのゼラチンカプセル（各カプセルにはＡＳＡ１６０ｍｇが含有されている）、または、アスペジック２袋（１袋投与量２５０ｍｇを含み、他の１つの袋は、投与量１００ｍｇを含み、すなわちＡＳＡ３５０ｍｇである）を服用した。
【０１０５】
このゼラチンカプセルおよび袋は、空腹時の少なくとも１０時間後に服用させた。
【０１０６】
薬物投与後４時間で食事を与えた。
【０１０７】
ａ）血漿中の活性成分の定量
薬物投与前、および、治療後０．５，１，１．５，２，３，４，５，６，８，１２，１６，２４および３２時間に被験者から血液サンプルを採取した。
【０１０８】
Ｒ．ＪＡＭＥＳ  ら（Ｒ．ＪＡＭＥＳ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｃｈｒｏｍ，  Ｂｉｏｍｅｄ．  Ａｐｐｌ．，  １９８４，  ３１０，  ３４３−３５２）の方法を適合させたものにより、血漿中のＡＳＡおよびＳＡをアッセイした。この方法の概略は次の通りである。
【０１０９】
内標準溶液（３，４，５−トリメトキシベンズアルデヒド、２５μｇ／ｍｌ）５０μｌおよび３０％過塩素酸５０μｌを、血漿０．５ｍｌに添加し、アスピリンの加水分解を防止するためにフッ化カリウムを混合する。
【０１１０】
この混合物を、渦巻状に３０秒間攪拌し、５分間、３０００ｒｐｍで遠心した。上澄み相約２０μｌをクロマトグラフィー分析に使用した。
【０１１１】
分離は、Ｌｉｎｃｈｒｏｓｐｈｅｒ  １００  ＲＰ−１８カラム（５μｍ，２５０ｘ４ｍｍ；メルク）上で、アセトニトリル／メタノール／０．０８５％  Ｈ３ＰＯ４（１０／４０／５０ｖ／ｖ／ｖ）の移動相を用いて行った。移動相の流速は、１ｍｌ／分に固定し、検出は２３０ｎｍのＵＶで行った。
【０１１２】
ＡＳＡおよびＳＡの平均血漿濃度を決定し、表１に表した。
【０１１３】
【表１】
2008019274.tif 000002
これらの結果は、図４および図５に図解する通りである。図４および図５は、それぞれ、ＡＳＡおよびＳＡの平均血漿濃度（ｍｇ／ｍｌ）の変化を時間の関数として示す（ＣＲＡおよびアスペジックコントロール）。
【０１１４】
アセチルサリチル酸は２時間に達するまでには血漿中で検出可能になり、４および５時間後には、０．２５μｇ／ｍｌ以下の極めて低い濃度である。サリチル酸は、極めて急速に、８〜２４時間の間に非高平部（０．８〜１．８μｇ／ｍｌ）に到達するまで上昇した濃度で検出可能になる。
【０１１５】
ＡＵＣ（曲線の下の領域）は、アスペジックに対するＣＲＡのバイオアベリラビリティが、約７２％であることを示す。さらに、ＳＡは、アスペジックを投与した後１６時間に達するまでしか検出可能でないが、一方、ＣＲＡを投与した後３２時間後まで検出可能である。
【０１１６】
これらの結果は、本発明のマイクロカプセルが、アセチルサリチル酸が、肝臓の中を最初に通過する間に完全に脱アセチル化され、血小板シクロオキシゲナーゼを阻害し、一方で、末梢性シクロオキシゲナーゼの活性を完全なままにしておくような制御放出動態を得ることを可能にすることを示す。
【０１１７】
ｂ）血漿中のトロンボキサンＢ２のアッセイ
治療後、１，２，３，４，５，６，８，１２，１６，２４および３２時間後に、被験者から血液サンプルを採取した。
【０１１８】
サンプルは、水浴（３７℃）中に１時間放置し、次いで遠心する。次に、血清を除去し、２つのチューブに分配し、分析に必要になるまで凍結する。
【０１１９】
トロンボキサンＢ２の測定方法は、特異的な抗トロンボキサン抗体および対応する酵素トレーサー、すなわち、アセチルコリンエステラーゼと結合したトロンボキサンをＢ２、を使用した酵素免疫測定法である。
【０１２０】
この方法は、抗ウサギＩｇＧモノクローナルマウス免疫グロブリンで被覆された９６ウエルを有するマイクロタイタープレートを用いた競合的アッセイである。この特異的な抗トロンボキサンＢ２抗体、標準または生物学的サンプルおよびトレーサーを５０μｌの容量で添加した。
【０１２１】
反応および希釈は、アルブミンを含有するリン酸緩衝液中で行われる。４℃で一晩インキュベーションした後、プレートを洗浄し、次いで、エルルマンズ試薬（Ｅｌｌｍａｎ’ｓ  ｒｅａｇｅｎｔ）を含有する酵素基質を各ウエルに分配する。振とうして呈色を発現させた後、２４時間後、分光光度計を用いて４１４ｎｍにおける吸光度を測定する。
【０１２２】
発現された呈色は、サンプル中に存在するトロンボキサンＢ２の量に比例している。得られた結果を以下の表２に表す。
【０１２３】
【表２】
2008019274.tif 000003
本発明のカプセル化アスピリン３２０ｍｇを投与した後の最大阻害が８時間後に得られ、投与後３２時間でもいまだ高かった（８８．２％）。
血清中のトロンボキサンＢ２の濃度は急速に下落し、本発明の製剤が効果的にＡＳＡを放出するが、対象的に、ＡＳＡは全身循環中で認められないことを証明する。
【０１２４】
以上の結果は、本発明のアスピリンをベースにした放出制御マイクロカプセルの投与は、血小板シクロオキシゲナーゼの阻害を可能にすることを証明する。
【０１２５】
例６：  コーティングしたマイクロカプセル化ＡＳＡの、２８日間の繰り返し投与後の薬物動態および臨床薬理の研究、並びに通常の剤形との比較
１２名の健康なボランティア男性を、くじ引きによって得られたランダム化スケジュールに従って、下記  ２種類の処置の一方または他方に割り当てた。Ａ群には、カプセル化ＡＳＡの  ３２０ｍｇゼラチンカプセル  １カプセル（例１のマイクロカプセルＭ１）を２８日間毎朝経口投与した。Ｂ群には、液状の非カプセル化コントロールＡＳＡ３５０ｍｇを２８日間毎朝投与した。
【０１２６】
両ケースにおいて、被検者は水２００ｍｌを用いる処置を受けた。
【０１２７】
被検者を３群に分け、異なる日数で研究を開始した。各々の期間中、アスピリンおよびその代謝物であるサリチル酸のアッセイのため、各被検者から血液サンプル（５ｍｌ）を採取した。採取は、Ｄ１およびＤ２８の処置投与前、Ｄ１の下記時間（Ｈ０は処置投与のまさにその時間）：５分、１０分、１５分、Ｈ０．５、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３、Ｈ４、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ８、Ｈ１２およびＨ１６、Ｄ５およびＤ１４のＨ０．５、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３、Ｈ４、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ８、Ｈ１２およびＨ１６、Ｄ２８のＤ５およびＤ１４と同じ時間とそれに続くＨ２４、Ｈ３６およびＨ４８に行ない、さらにＤ４２の早朝１サンプルを採取した。
【０１２８】
血清トロンボキサンＢ２の測定のためのサンプル（５ｃｌ）を、Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４、Ｄ５、Ｄ１４、Ｄ２１、Ｄ２７、Ｄ２８およびＤ４２の毎日の処置投与の前に採取した。
【０１２９】
アスピリンおよびその代謝物であるサリチル酸のアッセイのための血液サンプルは、毎日の処置の前に、Ｄ１、Ｄ５、Ｄ１４およびＤ２８には短い静脈内カテーテルを介するシリンジを用いて、他の日には直接針を刺すことにより採取した。この血液を、氷中に据えられ、ナトリウムヘパリネート５０μｌ（１０００単位／ｍｌ）およびフッ化ナトリウムの５０％水溶液５０μｌを収容するバキュテナ・チューブ（Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ  ｔｕｂｅ）に直ちに注ぎ、穏やかに２分間振盪した後、４℃で３分間６０００ｒｐｍで遠心した。球状残渣から急速に分離する血漿を２本の適当にラベル付けしたガラスチューブに移し、−２０℃で直ちに凍結した。
ａ）尿サンプル
各々の期間中、クレアチン尿素のアッセイ並びに血小板および血管プロスタグランジンの測定のために、各被検者から尿サンプルを採取した。
【０１３０】
Ｄ１、Ｄ２、Ｄ１４、Ｄ２７およびＤ２８の午前７時に朝の尿を集めた。被検者は、６時間尿が得られるように、真夜中から午前１時の間に膀胱を空にし、朝までに再び用を足さないように要請された。朝の小用は被検者が起床する前に行なった。採集した各サンプルのうち：
−  ２０ｍｌはクレアチン尿素アッセイを行なうために分析し、
−  ４０ｍｌは適当にラベル付けした２本の２０ｍｌポリプロピレンチューブに移して−２０℃で直ちに凍結した。
ｂ）出血時間の測定：
各々の期間中、Ｄ０、次いでＤ２７の処置投与直前に出血時間を測定した。
【０１３１】
方法：出血時間はデュークス法（Ｄｕｋｅ’ｓ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）（予めエーテルで消毒した耳たぶ前面の皮膚の切開）により測定した。形成される血液の滴を、３０秒毎に、押し付けることなくブロッティングペーパー片に集めた。出血時間は、それ以降は出血が止まる時間である。
ｃ）胃の寛容性：
各々の期間中、胃鏡検査により胃の寛容性を評価した。
【０１３２】
１以上の実質的な病変が観察された場合には、その被検者は研究から除外した。
【０１３３】
アスピリンおよびサリチル酸は、生物学的媒体における低レベルアッセイのために特別に開発されたＨＰＬＣ法を用いて分析した。血清トロンボキサンＢ２は、ＰＲＡＤＥＬＬＥＳ  ｅｔ  ａｌ  ［Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ５７，  １１７０−１１７３  （１９８５）；  Ａｎｎ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｌｉｎ．  ４３，  ４７５−４８４  （１９８５）］によって記述される酵素免疫測定法を用いて分析した。尿サンプルについては、  １１−デヒドロトロンボキサンＢ２、ジノルトロンボキサンＢ２およびジノル−６−ケトプロスタグランジンＦ１αを、前述の方法により、固相における前抽出および薄層クロマトグラフィによる精製を用いて分析した。この方法は、陰イオンイオン化検出器を用いる質量分析装置と結合したガスクロマトグラフィにより確認した［ＬＥＬＬＯＵＣＨＥ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｅ  ４０，  ２９７−３１０  （１９９０）］。
【０１３４】
図６は、カプセル化ＡＳＡ（ＣＲＡ）並びにコントロールＡＳＡによる血清トロンボキサンＢ２の生成阻害パーセンテージを示す。
【０１３５】
図７および８は、コントロールＡＳＡ並びにＣＲＡそれぞれによる、Ｄ０、Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４、Ｄ５、Ｄ１４、Ｄ２７、Ｄ２８およびＤ４２でのトロンボキサンＢ２の阻害を示す。ヒストグラムの各バーには濃度の標準偏差が示されている。
＊印は、対照日であるＤ０との比較で、トロンボキサンレベルの低下の統計的観点からの優位性を示す。これら通常の表記法は、以下の別の図の幾つかにおいても用いられる。
【０１３６】
トロンボキサンＢ２はトロンボキサンＡ２の代謝物であり、その合成は血小板シクロオキシゲナーゼによって触媒される。
【０１３７】
図９および１０は、横軸上の数字１ないし７に対応する異なる測定時点（Ｄ０、Ｄ１、Ｄ１４、Ｄ２１、Ｄ２７およびＤ２８）での、コントロールＡＳＡおよびＣＲＡそれぞれによる１１−デヒドロトロンボキサンＢ２の生成阻害を示す。
【０１３８】
図１１および１２は、横軸上の数字１ないし７に対応する異なる測定時点（Ｄ０、Ｄ１、Ｄ１４、Ｄ２１、Ｄ２７およびＤ２８）での、コントロールＡＳＡおよびカプセル化ＡＳＡ（ＣＲＡ）それぞれによる尿性トロンボキサンＢ２の生成阻害を示す。
【０１３９】
２，３−ジノルトロンボキサンの尿性排泄の２０％は血小板に起因しないが、トロンボキサンＢ２の尿性代謝物は２種類ある。
【０１４０】
図１３および１４は、横軸上の数字Ｕ０ないしＵ５に対応するＤ０、Ｄ１、Ｄ１４、Ｄ２１、Ｄ２７およびＤ２８での尿採取時の各々について、尿性ジノル−６−ケトプロスタグランジンＦ１αに対するコントロールＡＳＡおよびカプセル化ＡＳＡ（ＣＲＡ）それぞれの効果を示す。
【０１４１】
２，３−ジノル−６−ケトプロスタグランジンＦ１αは、血管および胃由来のプロスタサイクリン（プロスタグランジンＩ２）の尿性代謝物である。
【０１４２】
図１５および１６は、横軸上の数字１ないし７に対応する時期Ｄ０、Ｄ１、Ｄ１４、Ｄ２１、Ｄ２７およびＤ２８での、トロンボキサンＢ２の尿性排泄に対する、コントロールＡＳＡおよびカプセル化ＡＳＡ（ＣＲＡ）を用いる処置の影響を示す。
【０１４３】
図１７および１８は、横軸上の数字１ないし７に対応する時期Ｄ０、Ｄ１、Ｄ１４、Ｄ２１、Ｄ２７およびＤ２８での、６−ケトプロスタグランジンＦ１αの尿性排泄に対する、コントロールＡＳＡおよびＣＲＡを用いる処置の影響を示す。
【０１４４】
トロンボキサンＢ２および６−ケトプロスタグランジンＦ１αは、腎臓由来のトロンボキサンＢ２およびプロスタグランジンＦ１αの代謝物である。
【０１４５】
結果と上に示した図（図６ないし図１８）との比較は、カプセル化ＡＳＡが、血小板に起因するトロンボキサンに対して、コントロールＡＳＡと同程度の阻害能力（処置の３日目以降９６．９３％対９８．１５％）を有していることを明白に示している。この結果は、尿性代謝物の測定によって確認される（７７．８％対７５．６％および５１．９％対６８．９％）。
【０１４６】
反対に、カプセル化ＡＳＡはコントロールＡＳＡよりも、プロスタサイクリン（８．９％対４３．２％）および腎臓由来プロスタグランジン類（２３．８％対４２．８および１６．６％対３４．６％）に対しては、非常に弱い阻害しか示さない。
【０１４７】
このため、本発明によるカプセル化ＡＳＡの最大投与量３２０ｍｇでさえも、血小板に起因するプロスタグランジン類に対するバイオセレクティビティの増強を示す。８０ないし３２０ｍｇ、好ましくは１６０ｍｇの投与量（これは、１０ないし４０ｍｇ／時、好ましくは最初の５時間に２０ｍｇ、次いで次の１９時間に２ないし８ｍｇ／時、好ましくは４ｍｇ／時の速度でアスピリンを搬送する）は、血小板に起因するトロンボキサンの少なくとも９５％の阻害を引き起こし、血管性プロスタサイイクリンの９０％をこえる保護を提供する。
【０１４８】
このように記載される本発明は、アスピリンのジレンマに対する最適の解決法を提供し、１日投与量を１度に投与した後少なくとも２４時間の血小板凝集の危険性からの最適な保護を保証する。
【図面の簡単な説明】
【０１４９】
【図１】７５〜３２０ｍｇの投与量についての少なくも２４時間にわたるＡＳＡのインビボでの吸収の動態プロフィールを示す特性図。
【図２】４０ｋｇのバッチについて定量された例１のマイクロカプセルＭ１についての放出されたアスピリンの百分率を時間の関数として示す特性図。
【図３】０，３，９および１２か月の保存の後に測定された放出プロフィールを示す特性図。
【図４】ＡＳＡの平均血漿濃度（ｍｇ／ｍｌ）の変化を時間の関数として示す特性図。
【図５】ＳＡの平均血漿濃度（ｍｇ／ｍｌ）の変化を時間の関数として示す特性図。
【図６】カプセル化ＡＳＡ（ＣＲＡ）並びにコントロールＡＳＡによる血清トロンボキサンＢ２の生成阻害パーセンテージを示す特性図。
【図７】コントロールＡＳＡによるトロンボキサンＢ２の阻害を示す特性図。
【図８】ＣＲＡによるトロンボキサンＢ２の阻害を示す特性図。
【図９】異なる測定時点での、コントロールＡＳＡによる１１−デヒドロトロンボキサンＢ２の生成阻害を示す特性図。
【図１０】異なる測定時点でのＣＲＡによる１１−デヒドロトロンボキサンＢ２の生成阻害を示す特性図。
【図１１】異なる測定時点でのコントロールＡＳＡによる尿性トロンボキサンＢ２の生成阻害を示す特性図。
【図１２】異なる測定時点でのカプセル化ＡＳＡ（ＣＲＡ）による尿性トロンボキサンＢ２の生成阻害を示す特性図。
【図１３】尿採取時の各々について、尿性ジノル−６−ケトプロスタグランジンＦ１αに対するコントロールＡＳＡの効果を示す特性図。
【図１４】尿採取時の各々について、尿性ジノル−６−ケトプロスタグランジンＦ１αに対するカプセル化ＡＳＡ（ＣＲＡ）の効果を示す特性図。
【図１５】トロンボキサンＢ２の尿性排泄に対するコントロールＡＳＡを用いる処置の影響を示す特性図。
【図１６】トロンボキサンＢ２の尿性排泄に対するカプセル化ＡＳＡ（ＣＲＡ）を用いる処置の影響を示す特性図。
【図１７】６−ケトプロスタグランジンＦ１αの尿性排泄に対するコントロールＡＳＡを用いる処置の影響を示す特性図。
【図１８】６−ケトプロスタグランジンＦ１αの尿性排泄に対するＣＲＡを用いる処置の影響を示す特性図。
【図１】
2008019274.tif 000004
【図２】
2008019274.tif 000005
【図３】
2008019274.tif 000006
【図４】
2008019274.tif 000007
【図５】
2008019274.tif 000008
【図６】
2008019274.tif 000009
【図７】
2008019274.tif 000010
【図８】
2008019274.tif 000011
【図９】
2008019274.tif 000012
【図１０】
2008019274.tif 000013
【図１１】
2008019274.tif 000014
【図１２】
2008019274.tif 000015
【図１３】
2008019274.tif 000016
【図１４】
2008019274.tif 000017
【図１５】
2008019274.tif 000018
【図１６】
2008019274.tif 000019
【図１７】
2008019274.tif 000020
【図１８】
2008019274.tif 000021
【手続補正書】
【提出日】平成19年11月1日(2007.11.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
消化管環境におけるアセチルサリチル酸（ＡＳＡ）の制御放出のためのマイクロカプセルであって、該マイクロカプセルは、投与量Ｄが７５〜３２０ｍｇのＡＳＡの１回投与で経口的に摂取された場合に、ヒトのインビボでの穏健なＡＳＡ吸収動態を少なくとも２４時間にわたって誘発するように設計された、１００〜１０００μｍの粒子径を有するコーティングされたアセチルサリチル酸の粒子からなり；
且つ前記コーティングの材料が、
（１）消化管環境内で不溶性であり且つコーティング組成物の全乾燥物の６０〜８５重量％の量で存在するフィルム形成ポリマー（Ｐ１）であって、ゼイン、エチルセルロース、塩化ビニル、酢酸ビニルおよび／またはそれらのコポリマー、エチルおよび／またはメチルアクリレートおよび／またはメタクリレートをベースとするコポリマー、およびこれら全ての混合物からなる群から選択される少なくとも１つのフィルム形成ポリマー（Ｐ１）と；
（２）コーティング組成物の全乾燥物の２〜２０重量％の量で存在する水溶性ポリマー（Ｐ２）であって
−ポリビニルピロリドン、
−ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、
ヒドロキシメチルエチルセルロースおよびメチルセルロースのような
水溶性セルロース誘導体、
−酢酸ビニル／クロトン酸コポリマー、
−無水マレイン酸／メチルビニルエーテルコポリマー、および、
−上記製品の誘導体および混合物；
から選択される少なくとも１つの水溶性ポリマー（Ｐ２）と；
（３）コーティング組成物の全乾燥物の２〜２０重量％の量で存在する固形潤滑充填剤であって、ステアリン酸のアルカリ土類金属塩、ケイ酸マグネシウム、カオリン、タルク、シリカ、およびこれらの混合物から選択される少なくとも１つの固形潤滑充填剤と；
（４）コーティング組成物の全乾燥物の２〜２０重量％の量で存在する疎水性可塑剤であって、グリセロールステアレート、フタレート、シトレート、セバケート、セチルアルコールのエステル、ヒマシ油、およびクチンのうちの少なくとも１つを含む少なくとも１つの可塑剤と；
を含むコーティング組成物からなり、
更に、上記組成物により提供される前記ＡＳＡ吸収が、
−経口摂取後の時間ｔが０．４時間のときの吸収画分がＤの１０％以下であり、
−ｔ＝３．９時間のときの吸収画分がＤの５０重量％以下であり、
−ｔ＝２３時間のときの吸収画分がＤの９０重量％以下であり、
ｔは±１０％の範囲内で与えられる
ことを特徴とするマイクロカプセル。
【請求項２】
前記吸収が、２４〜４８時間の期間にわたって、下記に従って行なわれることを特徴とする請求項１に記載のマイクロカプセル：
−ｔ＝０．４〜５時間で、吸収画分がＤの１０％、
−ｔ＝３．９〜２５時間で、吸収画分がＤの５０％、
−ｔ＝２３〜４５時間で、吸収画分がＤの９０％。
【請求項３】
前記コーティング操作で用いられるＡＳＡの粒子が、２５０〜８００μｍの範囲内であることを特徴とする請求項１に記載のマイクロカプセル。
【請求項４】
前記コーティング材が、マイクロカプセルの全重量に対して、乾燥重量で５〜５０重量％で存在することを特徴とする請求項１ないし３のいずれか１項に記載のマイクロカプセル。
【請求項５】
コーティング組成物が、エチルセルロース７４±２重量％、ステアリン酸マグネシウム１０±２重量％、ポリビニルピロリドン８±２重量％およびヒマシ油９±２重量％を含有することを特徴とする請求項１ないし４のいずれか１項に記載のマイクロカプセル。
【請求項６】
タルク、コロイド状シリカまたは両方の混合物から形成される少なくとも１の抗固化剤の０．５〜５％と混合されていることを特徴とする請求項１ないし５のいずれか１項に記載のマイクロカプセル。
【請求項７】
以下に示される放出プロフィール１または放出プロフィール２に従って、ＡＳＡを放出することを特徴とする請求項１ないし６のいずれか１項に記載のマイクロカプセル；
（１）プロフィール１：
ｐＨ７．２のリン酸緩衝液中で、
１．０時間後、１５．０％；
２．０時間後、２７．０％；
３．０時間後、３４．０％；
４．０時間後、３８．０％；
５．０時間後、５０．０％；
６．０時間後、５１．０％；
７．０時間後、５９．０％；
８．０時間後、６１．０％；
９．０時間後、６２．０％；
１０．０時間後、６５．０％；
１２．０時間後、７０．０％；
１４．０時間後、８１．０％；
１６．０時間後、８９．０％；
２４．０時間後、９５．０％；
（ここで、％の数値は、各経過時間までに放出されるＡＳＡの百分率を表す。）
のＡＳＡを放出する；
（２）プロフィール２
消化管環境内で、
５時間後、３５〜５０％；
１０時間後、６０〜８０％；
１６時間後、９０％以下；
２４時間後、９５〜１００％；
（ここで、％の数値は、各経過時間までに放出されるＡＳＡの百分率を表す。）
のＡＳＡを放出する。
【請求項８】
消化管環境内で、
５時間後、５０％以下；
１０時間後、８０％以下；
１６時間後、９０％以下；
２４時間後、１００％以下；
（ここで、％の数値は、各経過時間までに放出されるＡＳＡの百分率を表す。）
のＡＳＡを放出することを特徴とする請求項１ないし６のいずれか１項に記載のマイクロカプセル。
【請求項９】
実質的に以下の工程を具備する請求項１ないし８のいずれか１項に記載のマイクロカプセルの製造方法：
ａ）−Ｐ１、Ｐ２、潤滑剤および可塑剤を溶媒系中で混合することによりコーティング組成物を製造する工程、
ｂ）−該組成物／溶媒系混合物を、アセチルサリチル酸の粒子に塗布する工程、
ｃ）−得られたマイクロカプセルを乾燥する工程、および、
ｄ）−適切なときは、得られたマイクロカプセルに少なくとも１つの抗固化剤を混合する工程。
【請求項１０】
前記溶媒系が、以下のリストから選択された化合物から形成されることを特徴とする請求項９に記載の方法：
ケトン類、エステル類、塩素系溶媒、アルコール類、脂肪族アルコール、アルカン類、およびこれらの混合物、Ｃ１〜Ｃ６の化合物、アセトン、メチルエチルケトン、メタノール、エタノール、イソプロパノール、シクロヘキサンおよび塩化メチレン。
【請求項１１】
前記コーティング組成物／溶媒系混合物が、移動するＡＳＡ粒子の上にスプレーにより塗布され、前記移動は、機械的攪拌または送風による流動化により引き起こされることを特徴とする請求項９または１０に記載の方法。
【請求項１２】
トロンボキサンの阻害に対して生化学的選択性を有し、かつ請求項１ないし８のいずれか１項に記載のマイクロカプセル、および／または請求項９ないし１１のいずれか１項に記載の方法により得られるマイクロカプセルを含むアスピリン製剤。
【請求項１３】
血小板凝集阻害剤として使用され、かつ、請求項１ないし８のいずれか１項に記載のマイクロカプセル、および／または請求項９ないし１１のいずれか１項に記載の方法により得られたマイクロカプセルを含むアスピリン製剤。
【請求項１４】
心臓血管系疾患および危険を予防および／または治療することにおいて活性であり、請求項１ないし８のいずれか１項に記載のマイクロカプセル、および／または請求項９ないし１１のいずれか１項に記載の方法により得られるマイクロカプセルを含むアスピリン製剤。
【請求項１５】
２０から５００ｍｇのＡＳＡを含有する錠剤、粉末またはゼラチンカプセルの形態で存在する、請求項１２ないし１４のいずれか１項に記載のアスピリン製剤。
【請求項１６】
７５から３２０ｍｇの間のＡＳＡを夫々に含有する単回１日投与量で、経口投与される請求項１５に記載のアスピリン製剤。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５５】
本発明の組成物の最後の成分は、可塑剤である。可塑剤は、以下の製品の少なくとも１つからなる：
−グリセロール、プロピレングリコール、トリアセチンのようなグリコールのステアレート
−シトレート
−フタレート（例えば、フタル酸ジメチル、フタル酸ジエチル、またはフタル酸ジブチル）
−特にパルミチン酸セチルのようなセチルアルコールのエステル、
−セバケート
−タルタレート
−ヒマシ油
−クチン、および、
−合成樹脂（例えば、セリット（Ｃｅｒｉｔ；登録商標））。