(57)【要約】  本発明は、免疫療法、特に免疫チェックポイント阻害剤若しくは抗がんワクチン、又は抗血管新生治療に対する応答性を回復することができる、化合物、方法、組成物及び使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
免疫療法又は抗血管新生剤、特に抗VEGF治療に対する耐性を呈する又は呈する疑いがある固体腫瘍がん又は血液学的悪性腫瘍の治療での使用のための、NOX4阻害剤、NOX4/1阻害剤、及びNOX1阻害剤から選択されるNOX阻害剤であって、前記NOX4阻害剤、NOX4/1阻害剤、又はNOX1阻害剤が、抗がん免疫療法剤又は抗血管新生剤と組み合わせて投与される、NOX阻害剤。
【請求項２】
がんワクチン又は少なくとも1つの免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせた使用のための、NOX4阻害剤及びNOX4/1阻害剤から選択される、請求項1に記載の使用のためのNOX阻害剤。
【請求項３】
PD-1阻害剤と組み合わせた使用のための、請求項2に記載の使用のためのNOX阻害剤。
【請求項４】
腫瘍溶解性及び抗単純ヘルペスウイルスワクチンから選択されるがんワクチンと組み合わせた使用のための、請求項2に記載の使用のためのNOX阻害剤。
【請求項５】
α-CD40、α-CD27、α-GITR、α-OX40、又はα-41BBのようなCD8+T細胞アゴニストと組み合わせた使用のための、請求項1に記載の使用のためのNOX阻害剤。
【請求項６】
腫瘍浸潤リンパ球、T細胞受容体T細胞、及びキメラ抗原受容体細胞を含む、養子T細胞導入療法と組み合わせた使用のための、請求項1に記載の使用のためのNOX阻害剤。
【請求項７】
少なくとも1つの抗血管新生剤と組み合わせた使用のための、NOX1阻害剤及びNOX1/4阻害剤から選択される、請求項1に記載の使用のためのNOX阻害剤。
【請求項８】
ピラゾロピリジンNOX4又はNOX4/1阻害剤、ピラゾリンジオンNOX4又はNOX4/1阻害剤、及びアミドチアゾールNOX1又はNOX4/1阻害剤から選択される、請求項1に記載の使用のためのNOX阻害剤。
【請求項９】
2,5-二置換ベンゾオキサゾール、及びベンゾチアゾールNOX4阻害剤から選択される、請求項1から6のいずれか一項に記載の使用のためのNOX阻害剤。
【請求項１０】
前記NOX阻害剤が、式(I)
【化１】
2021501216.tif 000018
(式中、G1は、H、任意に置換されたアルキル、例えばアミノカルボニルアルキル(例としてフェニルアセトアミド)、任意に置換されたC3〜C8シクロアルキルアルキル、任意に置換されたヘテロシクロアルキルアルキル、任意に置換されたアリールアルキル、例えば任意に置換されたフェニルアルキル、例として任意に置換されたフェニルメチル(例としてフェニルメチル又は3-メチルフェニルメチル又は4-フルオロベンジル又は2-クロロベンジル又は4-クロロベンジル又は4-メチルベンジル又は4-ブロモベンジル);及び、任意に置換されたヘテロアリールアルキル、例えば任意に置換されたピリジンアルキル、例としてピリジン-2-イルメチルから選択され; G2は、H;任意に置換されたアルキル;任意に置換されたアルケニル;任意に置換されたアルキニル;任意に置換されたアリール、例えば任意に置換されたフェニル(例としてフェニル又は4-フルオロフェニル又は4-メトキシフェニル又は4-ニトロフェニル又は2-クロロフェニル又は2-メチルフェニル又は4-(トリフルオロメチル)フェニル又は4-(トリフルオロメトキシ)フェニル又は2,5-ジフルオロフェニル又は2-メトキシフェニル);任意に置換されたアルキルアリール;任意に置換されたアリールアルキル;任意に置換されたヘテロアリール、例えば任意に置換されたベンゾチアゾリル(例として1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)又は任意に置換されたピリジニル(例としてピリジン-2-イル);任意に置換されたアルキルヘテロアリール;任意に置換されたヘテロアリールアルキル;任意に置換されたアルケニルアリール;任意に置換されたアリールアルケニル;任意に置換されたアルケニルヘテロアリール;任意に置換されたヘテロアリールアルケニル;任意に置換されたC3〜C8シクロアルキル;任意に置換されたヘテロシクロアルキル;任意に置換されたアルキルC3〜C8シクロアルキル;任意に置換されたC3〜C8シクロアルキルアルキル;任意に置換されたアルキルヘテロシクロアルキル及び任意に置換されたヘテロシクロアルキルアルキルから選択され; G3は、H;任意に置換されたアルキル、例えばメチル又はエチル;任意に置換されたアルケニル;任意に置換されたアルキニル;任意に置換されたアリール、例えば任意に置換されたフェニル(例としてフェニル
);任意に置換されたアルキルアリール;任意に置換されたアリールアルキル;任意に置換されたヘテロアリール;任意に置換されたアルキルヘテロアリール;任意に置換されたヘテロアリールアルキル;任意に置換されたアルケニルアリール;任意に置換されたアリールアルケニル;任意に置換されたアルケニルヘテロアリール;任意に置換されたヘテロアリールアルケニル;任意に置換されたC3〜C8シクロアルキル;任意に置換されたヘテロシクロアルキル;任意に置換されたアルキルC3〜C8シクロアルキル;任意に置換されたC3〜C8シクロアルキルアルキル;任意に置換されたアルキルヘテロシクロアルキル及び任意に置換されたヘテロシクロアルキルアルキルから選択され; G4は、H、任意に置換されたアルキル、例えば任意に置換されたペンチル(例としてイソペンチル)又は任意に置換されたヘテロアルキル、例えば任意に置換されたメトキシ(例として2-メトキシエチル);任意に置換されたアルケニル;任意に置換されたアルキニル;任意に置換されたアリール;任意に置換されたアルキルアリール;任意に置換されたアリールアルキル、例えば任意に置換されたフェニルメチル(例として、安息香酸メチル若しくは安息香酸ベンジル)又は任意に置換されたフェニルエチル(例として2-フェニルエチル、4-メトキシフェニルエチル);任意に置換されたヘテロアリール;任意に置換されたアルキルヘテロアリール;任意に置換されたヘテロアリールアルキル、例えば任意に置換されたチオフェニルアルキル、例として任意に置換されたチオフェニルメチル(例としてチオフェン-2-イルメチル)又は任意に置換されたイミダゾリルアルキル、例として任意に置換されたイミダゾリルエチル(例としてイミダゾール-4-イルエチル)又は任意に置換されたインドリルアルキル、例として任意に置換されたインドリルエチル(例としてインドール-3-イルエチル)又は任意に置換されたフラニルアルキル、例として任意に置換されたフラニルメチル(例としてフラン-2-イルメチル)又は任意に置換されたベンゾジオキソリルアルキル、例として任意に置換されたベンゾジオキソリルメチル(例として1,3-ベンゾジオキソール-5-イルメチル)又は任意に置換されたピリジニルアルキル、例として任意に置換されたピリジニルメチル(例としてピリジン-3-イルメチ
ル若しくはピリジン-2-イルメチル);任意に置換されたアルケニルアリール;任意に置換されたアリールアルケニル;任意に置換されたアルケニルヘテロアリール;任意に置換されたヘテロアリールアルケニル;任意に置換されたC3〜C8シクロアルキル;任意に置換されたヘテロシクロアルキル、例えば任意に置換されたモルホリニル(例として5-モルホリン-4-イル)又は任意に置換されたピペラジニル(例として4-メチルピペラジニル)又は任意に置換されたピペリジニル(例として4-メチルベンジル)ピペリジン-4-イル);任意に置換されたアルキルC3〜C8シクロアルキル;及び任意に置換されたC3〜C8シクロアルキルアルキル;任意に置換されたアルキルヘテロシクロアルキル及び任意に置換されたヘテロシクロアルキルアルキル、例えば任意に置換されたモルホリニルアルキル、例として任意に置換されたモルホリニルプロピル(例として3-(モルホリン-4-イル)プロピル))任意に置換されたモルホリニルエチル(例として2-モルホリン-4-イルエチル);又は任意に置換されたピペラジニルアルキル、例として任意に置換されたピペラジニルエチル(例として2-(4-アセチルピペラジン-1-イル)エチル若しくは2-(4-ヘキサノイルピペラジン-1-イル)エチル)又は任意に置換されたピロリジニルアルキル、例として任意に置換されたピロリジニルプロピル(例として3-(2-オキソピロリジン-1-イル)プロピル)又は任意に置換されたテトラヒドロフラニルアルキル、例として任意に置換されたテトラヒドロフラニルメチル(例としてテトラヒドロフラン-2-イルメチル)から選択され; G5は、H、任意に置換されたアルキル;任意に置換されたアルケニル;任意に置換されたアルキニル;任意に置換されたアリール;任意に置換されたアルキルアリール;任意に置換されたアリールアルキル;任意に置換されたヘテロアリール;任意に置換されたアルキルヘテロアリール;任意に置換されたヘテロアリールアルキル;任意に置換されたアルケニルアリール;任意に置換されたアリールアルケニル;任意に置換されたアルケニルヘテロアリール;任意に置換されたヘテロアリールアルケニル;任意に置換されたC3〜C8シクロアルキル;任意に置換されたヘテロシクロアルキル;任意に置換されたアルキルC3〜C8シクロアルキル;任意に置換されたC3〜C8シクロアルキルアルキル;任意に置換されたアルキルヘテロシクロアルキル及び任意に置換されたヘテロシクロアルキルアルキルから選択される)
のNOX4又はNOX4/1阻害剤、並びに、その薬学的に許容される塩及び薬学的に活性な誘導体である、請求項1から6のいずれか一項に記載の使用のためのNOX阻害剤。
【請求項１１】
式(II)
【化２】
2021501216.tif 000019
(式中、Arは、任意に置換されたフェニル、例えばハロゲン、例えばクロロで任意に置換されたフェニル(例として2-クロロフェニル)又はアルコキシで任意に置換されたフェニル(例としてメトキシ)であり; G1及びG4は、Hであり; G2は、任意に置換されたC1〜C6アルキル(例としてメチル)及び任意に置換されたフェニル(例えばハロゲンで任意に置換されたフェニル、例えば3-クロロフェニル、4-クロロフェニル、2-フルオロフェニル、3-フルオロフェニル、4-フルオロフェニル、4-クロロ-2-フルオロフェニル、5-クロロ-2-フルオロフェニル、アミノ又はアルキルアミノ又はアルコキシで任意に置換されたフェニル、例えば3-ジメチルアミノフェニル、2-トリメチルアミノフェニル、3-メチルアミノフェニル、3-アミノフェニル、4-メトキシフェニル)から選択され; G3は、H、任意に置換されたC1〜C6アルキル(例としてメチル、アルコキシで置換されたC1〜C6アルキル、例としてメトキシエチル、例えば2-メトキシエチル)、任意に置換されたヘテロアリールC1〜C6アルキル、例として任意に置換されたピリジニルC1〜C6アルキル(例として任意に置換されたピリジニルメチル、例としてピリジニル-2イルメチル、ピリジニル-3イルメチル、6-メトキシピリジン-3-イルメチル、2-メトキシピリジン-4-イルメチル)若しくは任意に置換されたピラジニルC1〜C6アルキル(例としてピラジニル-2-イルメチル)及び任意に置換されたアルコキシC1〜C6アルキル、例えばメトキシエチル(例として2メトキシエチル)から選択されるか、又は、G2及びG3は一緒になって、2つの窒素原子を含む任意に置換された7員ヘテロシクロアルキル環を形成し、ここで2つの窒素が、任意に置換されたC1-C3アルキル部分を介して結合する)
のNOX4又はNOX4/1阻害剤、並びに、その互変異性体、幾何異性体、任意で活性形態、及び薬学的に許容される塩である、請求項1から6のいずれか一項に記載の使用のためのNOX阻害剤。
【請求項１２】
G2及びG3は一緒になって、2つの窒素原子を含む任意に置換された7員ヘテロシクロアルキル環を形成して、以下の式(I'):
【化３】
2021501216.tif 000020
(式中、Ar、G1及びG5は、本明細書で定義され;G6、G8〜G10は、Hであり;G7は、任意に置換されたC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたフェニルで任意に置換されたC1〜C6アルキル(例として任意に置換されたフェニルで任意に置換されたメチル、例えばベンジル、ハロゲンで置換されたフェニルで任意に置換されたメチル、例えば2-クロロベンジル、3-クロロベンジル、4-クロロベンジル、アルコキシで置換されたフェニルで任意に置換されたメチル、例えば2-メトキシベンジル、3-メトキシベンジル、4-メトキシベンジル)、任意に置換されたアリールC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたフェニルC1〜C6アルキル(例としてベンジル、2-クロロベンジル、3-クロロベンジル、4-クロロベンジル、2-メトキシベンジル、3-メトキシベンジル、4-メトキシベンジル)及び任意に置換されたヘテロアリールC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたピリジニルC1〜C6アルキル(例として任意に置換されたピリジニルメチル、例としてピリジニル-2イルメチル、ピリジニル-3イルメチル)又は任意に置換されたフラニルC1〜C6アルキル(例として任意に置換されたフラニルメチル、例としてフラン-3イルメチル)から選択される)の化合物を形成する、
式(II)のNOX4又はNOX4/1阻害剤、並びに、その互変異性体、幾何異性体、任意で活性形態、及び薬学的に許容される塩である、請求項1から6のいずれか一項に記載の使用のためのNOX阻害剤。
【請求項１３】
式(III):
【化４】
2021501216.tif 000021
(式中、Xは、CR1及びNから選択され;Yは、CH又はNから選択され; A1は、-OCHR5-、-NR4-CHR5-、-CH2NR4-及び-CH2-O-から選択され; R1は、H、ハロゲン及び任意に置換されたC1〜C6アルキルから選択され; R2は、H、ハロゲン(例としてクロロ、フルオロ)、任意に置換されたアルコキシ、例えば任意に置換されたメトキシ(例としてメトキシ、(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)メトキシ、ピペリジン-4-イルメトキシ)又は任意に置換されたエトキシ(例として2-(ジメチルアミノ)エトキシ、2-ヒドロキシエトキシ、1-フェニルエトキシ、2-メトキシエトキシ)、任意に置換されたアルコキシC1〜C6アルキル、任意に置換されたC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたメチル、任意に置換されたアミノ、例えば任意に置換されたC1〜C6アルキルアミノ(例としてメチルアミノ、テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)メチル)アミノ、(1-メチルピペリジン-4-イル)メチル)アミノ、ジメチルアミノ、任意に置換されたエチルアミノ、例えば2-モルホリノエチルアミノ又は2-(ジメチルアミノ)エチルアミノ又はメトキシエチルアミノ、任意に置換されたメチルアミノ、例えば1-メチル-1H-イミダゾール-4-イルメチルアミノ又は2-ヒドロキシエチル)アミノ、任意に置換されたプロピルアミノ、例えばジメチルアミノプロピルアミノ)、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、例えば任意に置換されたピペラジン(例としてメチルピペラジン-1-イル)、任意に置換されたC1〜C6アルキルヘテロシクロアルキル、例えば任意に置換されたC1〜C6アルキルピペラジン(例としてメチルピペラジン-1-イル)、任意に置換されたアミノC1〜C6アルキル、任意に置換されたアルコキシC1〜C6アルキル、-O-R8及び-NR9R10から選択され; R3は、式-(CHR6)n-A2の基であるか、又は、R3は、A1からの部分CHR5と、任意に置換されたアリール、例えば任意に置換されたフェニル(例としてフェニル若しくはハロゲンで置換されたフェニル、例えばアルコキシ、例としてメトキシで置換されたフルオロフェニル)及び任意に置換されたヘテロアリール、例えば任意に置換された1,3-ジヒドロ-1H-インデニル(例として1-(ジメチルアミノ)-2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル、2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル、2,3-ジヒドロ-1H-インデン-1-イル)又は任意に置換された6,7-ジヒドロ-5H-シクロペンタピリジニル(例として6,7-ジヒドロ-5H-シクロペンタ[b]ピリジン-5-イル、2-メチルピリジン-3-イル、5-メチルピリジン-2-イル)又は任意に置換された1,2,3,4-テトラヒドロナフタレニル(例として1,2,3,4-テトラヒドロナフタレン-1-イル)又は任意に置換された2,3-ジヒドロベンゾフラニル(例として2,3-ジヒドロベンゾフラン-3-イル、2,3-ジヒドロ-1H-インデン-1-イル)又は任意に置換されたチアジアゾリル(例として1,3,4-チアジアゾール-2-イル)又は任意に置換されたイソオキサゾリル(例として5-メチルイソオキサゾール-3-イル)又は任意に置換されたピラゾリル(例として1-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)又は任意に置換されたイミダゾリル(例として1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)から選択される任意に置換された環を形成するか、又は、R3は、A1からの部分NR4と、任意に置換されたアリール及び任意に置換されたヘテロアリール、例えば任意に置換されたイソインドリニル(例としてイソインドリン-2-イル、1H-インドール-1-イル))から選択される任意に置換された環を形成し;nは、0〜4の整数(例えば0、1、2、3又は4)であり; R4は、H及び任意に置換されたアルキル、例えば任意に置換されたメチルから選択され; A2は、任意に置換されたアリール、例えば任意に置換されたフェニル(例としてメトキシフェニル、フルオロフェニル、クロロフェニル)、任意に置換されたヘテロアリール、例えば任意に置換されたピリジン(例としてピリジン-2-イル、ピリジン-3-イル、ピリジン-4-イル、2-メチルピリジン-3-イル、5-メチルピリジン-2-イル)又は任意に置換されたピラゾリル(例として1,3ジメチル-1H-ピラゾール-5-イル、1-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)又は任意に置換されたチアジアゾリル(例として1,3,4-チアジアゾール-2-イル)又は任意に置換されたイミダゾリル(例として1H-イミダゾール-4-イル、1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル、1-メチル-1H-イミダゾール-5-イル)又は任意に置換された1,2,4-トリアゾリル(例として1-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-5-イル)又は任意に置換されたイソオキサゾリル(例として1-シクロプロピルイソオキサゾール-3-イル)又は任意に置換されたオキサジアゾリル(例として5-メチル-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル)又は任意に置換されたピリミジニル(例としてピリミジニル-2-イル)から選択される任意に置換された環であり; R5は、H、任意に置換されたC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたメチル(例としてメトキシメチル、3,3-ジフルオロピロリジン-1-イルメチル、4-メチルピペラジン-1-イルメチル、ヒドロキシルメチル)又は任意に置換されたエチル又は任意に置換されたプロピル(例としてメチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、2-プロパノリル、ヒドロキシルイソプロピル)、任意に置換されたアミノC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたアミノメチル(例としてジメチルアミノメチル、メチルアミノメチル)、任意に置換されたアルコキシC1〜C6アルキル、任意に置換されたヘテロシクロアルキルC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたヘテロシクロアルキルメチル、例えば任意に置換されたピロリジンC1〜C6アルキル(例として3,3-ジフルオロピロリジン-1-イルメチル)又は置換されたピペラジンC1〜C6アルキル(例として4-メチルピペラジン-1-イルメチル)又はヘテロシクロアルキルエチル、例えば任意に置換されたモルホリノC1〜C6アルキル(例としてモルホリノメチル、モルホリノエチル)又は任意に置換されたピロリジンC1〜C6アルキル(例としてピロリジンメチル、ピロリジンエチル)、任意に置換されたアミノカルボニル(例としてジメチルアミノカルボニル)、任意に置換されたC2〜C8シクロアルキル、例えば任意に置換されたシクロプロピル及び任意に置換されたアミノC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたアミノエチル(例としてジメチルアミノエチル)又は任意に置換されたアミノメチル(例としてジメチルアミノメチル)から選択され; R6は、H、任意に置換されたC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたメチル、任意に置換されたアミノ、任意に置換されたC1〜C6アルキルアミノ(例としてジメチルアミノ)及びヒドロキシから選択され、ここでR6基は、独立して、繰返し単位(CHR6)毎に選択され; R7は、H、ハロゲン(例としてフルオロ)及び任意に置換されたC1〜C6アルキル、例えばメチルから選択され; R8は、H、任意に置換されたC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたメチル又は任意に置換されたエチル(例としてメトキシエチル、2-(ジメチルアミノ)エチル、ヒドロキシエチル)、任意に置換されたアミノC1〜C6アルキル、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、任意に置換されたC2〜C8シクロアルキル、任意に置換されたヘテロシクロアルキルC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたヘテロシクロアルキルメチル、例えば任意に置換されたテトラヒドロピランC1〜C6アルキル(例としてテトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)又は任意に置換されたピペリジンアルキル(例として1-メチルピペリジン-4-イル)、任意に置換されたC2〜C8シクロアルキルC1〜C6アルキル、任意に置換されたアルコキシ、任意に置換されたアミノC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたアミノエチル(例として2-(ジメチルアミノ)エチル);任意に置換されたアリールC1〜C6アルキル及び任意に置換されたヘテロアリールC1〜C6アルキルから選択され;R9及びR10は、独立して、H、任意に置換されたC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたメチル(例として1-メチル-1H-イミダゾール-4-イル)メチル))又は任意に置換されたエチル(例として2-メトキシエチル)、任意に置換されたアミノC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたアミノエチル(例としてジメチルアミノエチル)又は、例えば任意に置換されたアミノプロピル(例としてジメチルアミノ)プロピル)、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、例えば任意に置換されたピペリジン(例として1-メチルピペリジン)、任意に置換されたC2〜C8シクロアルキル、任意に置換されたヘテロシクロアルキルC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたヘテロシクロアルキルエチル、例えば任意に置換されたモルホリノC1〜C6アルキル(例として2-モルホリノエチル)又は任意に置換されたヘテロシクロアルキルメチル、例えば任意に置換されたテトラヒドロフランC1〜C6アルキル(例としてテトラヒドロ-2H-ピラン-4-イルメチル)又はピペリジンC1〜C6アルキル(例として1-メチルピペリジン-4-イル)メチル又は任意に置換されたイミダゾリルC1〜C6アルキル(例として1-メチル-1H-イミダゾール-4-イル)メチル)任意に置換されたC2〜C8シクロアルキルC1〜C6アルキル、任意に置換されたアルコキシ、任意に置換されたアルコキシC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたアルコキシエチル(例として2-メトキシエチル)、任意に置換されたアリールC1〜C6アルキル及び任意に置換されたヘテロアリールC1〜C6アルキル、例えばヘテロアリールC1〜C6アルキルメチル、例えば任意に置換されたイミダゾリルC1〜C6アルキル(例として1-メチル-1H-イミダゾール-4-イルメチル)、任意に置換されたアミノC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたアミノエチル又は任意に置換されたアミノプロピル(例として2-(ジメチルアミノ)エチル、2-(ジメチルアミノ)プロピル))から選択される)
のNOX1又はNOX4/1阻害剤、並びに、その互変異性体、幾何異性体、任意で活性形態、薬学的に許容される塩及び薬学的に活性な誘導体である、請求項1又は8に記載の使用のためのNOX阻害剤。
【請求項１４】
式(IV):
【化５】
2021501216.tif 000022
(式中、環(A)は、フェニル基と縮合する非芳香族の5〜7員複素環を表し;前記5〜7員複素環は、1つの酸素環原子、及び、独立して酸素又は窒素から選択される任意で1つの追加環ヘテロ原子を含有し;前記5〜7員複素環は、独立して、非置換若しくは一置換若しくは二置換であり、置換基は、独立して、
・環式酸素及び/若しくは環式窒素原子に対するアルファ位における環炭素原子に結合する、1つのオキソ置換基;及び/若しくは
・遊離原子価を有する環式窒素原子に結合する、1つのC1-3アルキル;若しくは
・同じ環炭素原子に結合する、2つのフルオロ置換基、
から選択され、
Lは、-NH-CO-*又は-CO-NH-*を表し、アスタリスク(*)は、ベンゾオキサゾー/ベンゾチアゾール部分と結合する結合を示し;Xは、O若しくはSを表し、並びに
Yは、
-NR1R2(R1は、R1は、C1〜4アルキル;ジ-(C1〜3アルキル)アミノ、ヒドロキシ若しくはC1〜3アルコキシで一置換されているC2〜4アルキル;C3〜5シクロアルキル-L1であって、L1が、直接結合若しくはC1〜3アルキレンを表し、C3〜5シクロアルキルが、任意で1つの酸素環原子を含有し、前記C3〜5シクロアルキルが、非置換であるか、若しくはメチル若しくはフルオロで一置換されている、C3〜5シクロアルキル-L1;若しくは、C3〜5シクロアルキルで環式窒素原子において置換されている、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル若しくはピロリジン-3-イル基であって、前記C3〜5シクロアルキルが、任意で1つの酸素環原子を含有する、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル若しくはピロリジン-3-イル基を表し;及び、R2は、水素、C1〜3アルキル、若しくはC3〜5シクロアルキルを表す)を表すか、若しくは、
Yは、モルホリン-4-イル;2-オキソ-ピロリジン-1-イル;1,1-ジオキシドチオモルホリン-4-イル;若しくは、任意でオキセタン-3-イル若しくはC1〜3アルキルで、4位で一置換されたピペラジン-1-イル;若しくは、アゼチジン-1-イル、ピロリジン-1-イル若しくはピペリジン-1-イルから選択される、飽和した4〜7員単環式ヘテロシクリルであって、前記アゼチジン-1-イル、ピロリジン-1-イル若しくはピペリジン-1-イルが、独立して、非置換であるか、若しくは、
・同じ環炭素原子に結合する、2つのフルオロ置換基;若しくは、
・非置換フェニル、若しくは非置換若しくは6員ヘテロアリールから選択される1つの置換基;若しくは、
・ヒドロキシ; C1〜3アルコキシ;-CO-C1〜4アルコキシ;ジ(C1〜3アルキル)アミノ;及び、ジ(C1〜3アルキル)アミノ、ヒドロキシ若しくはC1〜3アルコキシで一置換されたC1〜3アルキルから選択される1つの置換基;若しくは、
・2つの置換基であって、前記置換基の1つがC1〜4アルキルであり、もう1つが独立してヒドロキシ若しくはジ(C1〜3アルキル)アミノから選択される、2つの置換基;若しくは、
・モルホリン-4-イル;1,1-ジオキシドチオモルホリン-4-イル;若しくは、任意でC1〜3アルキルで、4位で一置換されたピペラジン-1-イルから選択される、1つの置換基;
・独立して、非置換であるか、若しくはヒドロキシで一置換されているか、若しくはメチル及びヒドロキシで二置換されている、アゼチジン-1-イル、ピロリジン-1-イル若しくはピペリジン-1-イルから選択される、1つの置換基
で置換されている、飽和した4〜7員単環式ヘテロシクリルを表すか、
若しくは、Yは、少なくとも1つの窒素原子を含有する飽和した7〜11員の縮合式、架橋式、若しくはスピロ二環式ヘテロシクリルであって、前記窒素原子が、ベンゾオキサゾール/ベンゾチアゾール部分と結合し、前記ヘテロシクリルが、任意で、独立して酸素、窒素及び硫黄から選択される任意で1つの追加環ヘテロ原子を含有し、非置換であるか、若しくは
-  環式硫黄環原子での2つのオキソ置換基;若しくは、
-  遊離原子価を有する環式窒素原子に結合する、1つのC1〜3アルキル置換基
で置換されている、飽和した7〜11員の縮合式、架橋式、若しくはスピロ二環式ヘテロシクリルを表す)
のNOX4又はNOX4/1阻害剤、又は、その薬学的に許容される塩である、請求項1から6のいずれか一項に記載の使用のためのNOX阻害剤。
【請求項１５】
以下の群:
2-(2-クロロフェニル)-4-メチル-5-(ピリジン-2-イルメチル)-1H-ピラゾロ[4,3-c]ピリジン-3,6(2H,5H)-ジオン;
2-(2-クロロフェニル)-4-[3-(ジメチルアミノ)フェニル]-5-メチル-1H-ピラゾロ[4,3-c]ピリジン-3,6(2H,5H)-ジオン;
4-(2-フルオロ-4-メトキシフェニル)-2-(2-メトキシフェニル)-5-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[4,3-c]ピリジン-3,6(2H,5H)-ジオン; 
(R)-3-メトキシ-4-(2-モルホリノ-1-フェニルエトキシ)-N-(5-(ピリジン-4-イル)-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)ベンズアミド;
10-ベンジル-2-(2-クロロフェニル)-2,3,8,9,10,11-ヘキサヒドロ-1H-ピラゾロ[4',3':3,4]ピリド[1,2-a][1,4]ジアゼピン-1,5(7H)-ジオン; 
(S)-3-メトキシ-4-(1-フェニルエトキシ)-N-(5-(ピリジン-4-イル)-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)ベンズアミド;
(R)-4-(2-ヒドロキシ-1-フェニルエトキシ)-3-メトキシ-N-(5-(ピリジン-4-イル)-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)ベンズアミド、及び
(R)-4-(2-ジメチルアミノ-1-フェニルエトキシ)-3-メトキシ-N-(5-(ピリジン-4-イル)-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)ベンズアミド
から選択されるNOX4阻害剤又はNOX4/1阻害剤又はNOX1阻害剤である、請求項1から14のいずれか一項に記載の使用のためのNOX阻害剤。
【請求項１６】
前記抗がん免疫療法剤が、T-Vec(イムリジック、タリモジーン・ラハーパレプベック)のような抗単純ヘルペスウイルスワクチン、養子細胞免疫療法、ペムブロリズマブ(キイトルーダ)、ニボルマブ(オプジーボ)のようなPD-1阻害剤、又はアテゾリズマブ(テセントリク)、アベルマブ(バベンチオ)、デュルバルマブ(イミフィンジ)のようなPD-L1阻害剤、又はイピリムマブ(ヤーボイ)のようなCTLA-4阻害剤のような免疫チェックポイント阻害剤のような、がんワクチンから選択される、請求項1に記載の使用のためのNOX4阻害剤又はNOX4/1阻害剤。
【請求項１７】
抗血管新生剤と組み合わせて投与される、請求項1に記載の使用のためのNOX1/4阻害剤又はNOX1阻害剤。
【請求項１８】
前記抗血管新生剤が、ベバシズマブ及びスニチニブから選択される抗VEGF剤である、請求項17に記載の使用のためのNOX1/4阻害剤又はNOX1阻害剤。
【請求項１９】
固体腫瘍がんが、肺がん(小細胞及び非小細胞)、乳がん、卵巣がん、子宮頚部がん、子宮がん、頭頚部がん、黒色腫、肝細胞癌、結腸がん、直腸がん、結腸直腸癌、腎がん、前立腺がん、胃がん、気管支がん、膵がん、膀胱がん、肝がん、及び脳がん、特に神経膠芽細胞腫から選択される、請求項1から18のいずれか一項に記載の使用のためのNOX4阻害剤又はNOX4/1阻害剤又はNOX1阻害剤。
【請求項２０】
血液学的悪性腫瘍が、リンパ腫又は白血病である、請求項1から19のいずれか一項に記載の使用のためのNOX4阻害剤又はNOX4/1阻害剤又はNOX1阻害剤。 
【請求項２１】
少なくとも1つの抗がん免疫療法剤及び少なくとも1つの薬学的に許容される担体を組み合わせた、少なくとも1つのNOX4阻害剤又はNOX4/1阻害剤又はNOX1阻害剤を含有する医薬組成物。
【請求項２２】
抗がん免疫療法剤が、抗単純ヘルペスウイルスワクチンのようながんワクチンである、請求項21に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
抗がん免疫療法剤が、ペムブロリズマブ(キイトルーダ)、ニボルマブ(オプジーボ)のようなPD-1阻害剤である、請求項1から8のいずれか一項に記載の使用のためのNOX4阻害剤若しくはNOX4/1阻害剤若しくはNOX1阻害剤、又は請求項18に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
免疫療法又は抗血管新生剤、特に抗VEGF治療に対する耐性を呈する又は呈する疑いがある固体腫瘍がん又は血液学的悪性腫瘍に罹患している対象を治療するための方法であって、抗がん免疫療法剤又は抗血管新生剤と組み合わせて、有効量の1つ又は複数のNOX4阻害剤又はNOX4/1阻害剤又はNOX1阻害剤を、それを必要とする対象に投与する工程を含む方法。
【請求項２５】
対象において、抗がん免疫療法に対する応答性を回復する又は増強する、特に免疫療法的治療に対する感受性を回復する、とりわけコールドな腫瘍をホットな状態にするための方法であって、抗がん免疫療法剤と組み合わせて、有効量の1つ若しくは複数のNOX4阻害剤若しくはNOX4/1阻害剤若しくはNOX1阻害剤、又はその医薬製剤を、それを必要とする対象に投与する工程を含む方法。
【請求項２６】
対象において、抗がん抗血管新生に対する応答性を回復する又は増強する、特に抗VEGF治療に対する感受性を回復する、又は抗VEGF治療に対する耐性を防ぐための方法であって、抗血管新生剤と組み合わせて、有効量の1つ若しくは複数のNOX4阻害剤若しくはNOX4/1阻害剤若しくはNOX1阻害剤、又はその医薬製剤を、それを必要とする対象に投与する工程を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、がん免疫療法又は抗VEGF治療と組み合わせた固形がんの治療のための、NADPHオキシダーゼ(NOX)阻害剤、特にNOX4又はNOX4/1デュアル又はNOX1阻害剤の使用、並びに関連する配合剤及びレジメンに関する。
【背景技術】
【０００２】
がん細胞は、放射線療法、化学療法及び標的療法のような治療をもたらす、低酸素症、代謝要求の上昇、ゲノム不安定性、免疫監視、栄養不足、転移及びストレス後の変化する環境のような多数の細胞ストレスに直面する。
【０００３】
NADPHオキシダーゼ(NOX)は、6つの膜貫通ドメインを有し、電子を、生体膜を越えて運搬する酵素のファミリーである。このような酵素は、がんの発症及び進行に関与し、癌遺伝子の活性化及び腫瘍抑制タンパク質の不活性化を通して特定の細胞膜及びマイクロドメインで作用する、レドックス感受性シグナル伝達経路を広範囲で特異的に調節する、専用の、活性酸素種を産生する酵素である。NOX酵素は、特にがん細胞に対する適応ストレス反応の重要部分であり、これにより、これらの細胞を適応させ、生存させることが可能であるとみなされる(Block等、2012年、Nature Reviews、627〜637頁)。
【０００４】
NOX発現の顕著な誘導は、腫瘍環境内のがん細胞及び宿主細胞において報告されている。
【０００５】
腫瘍微小環境及びがん細胞の間の相互作用は、腫瘍の増殖及び転移に対して主要な役割を果たすことが認識されている。がん関連線維芽細胞(CAF)は、腫瘍間質において見出される最も豊富な細胞である。CAF及びそれらの線維芽細胞から筋線維芽細胞への分化転換により腫瘍増殖が起こり、この分化転換は多数のがん腫における予後不良と一般的に相関する。CAFが「悪性の特徴の多く」を促進するが、近年の研究では、免疫チェックポイント阻害剤及びがんワクチンのようながん免疫療法、並びに転移に進展するそれらの傾向に対する治療応答が低い「免疫的にコールド(immune cold)」として示される、CAF豊富ながんとの腫瘍免疫回避を促進する役割に注目している。
【０００６】
更に、高CAF含有量は、緻密性間質、及び、間質液圧が高まるので薬物送達に対する障壁として作用する緻密性腫瘍微小環境を誘発し、腫瘍において化学療法の集積不良をもたらす。
【０００７】
特に、黒色腫は、例外的に攻撃性で治療抵抗性のヒトのがんとして知られている。免疫チェックポイント阻害剤を使用する免疫療法の開発を含め、過去10年にわたり進歩してきたが、切除不能なステージIII、ステージIV及び再発性黒色腫に対する治療において、制限応答速度、重い副作用及び予後不良は依然として課題である。黒色腫は、悪性メラノサイトにより駆動されるだけでなく、腫瘍間質の線維芽細胞、内皮細胞及び免疫細胞を含む、新生物細胞及び非悪性細胞集団の間の改変された情報伝達により駆動される。CAFは、細胞外マトリックス(ECM)、並びに疾患組織及び分泌化学的因子の構造を再構築するが、これは、腫瘍増殖、血管新生、炎症、及び転移を促進することによる形質転換処理を一斉に促進し、薬物耐性に寄与する。NOX4が、多数のがんにおいて筋線維芽細胞性CAF分化を調節することが近年明らかになったが(Hanley等、2018年、J Natl Cancer Inst.、110)、CAFの由来、並びに、CAFががんの進行及び薬物耐性に寄与する正確な機構は、依然としてほとんど理解されていない。更に、Hanley等、2018年は、NOX4阻害での補助的な治療として任意の特定の抗がん免疫療法剤を対象としていなかった。
【０００８】
免疫療法は、黒色腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、頭頚部がん、腎細胞がん、膀胱がん、卵巣がん、子宮内膜がん、子宮頸がん、子宮肉腫、胃がん、食道がん、結腸がん、肝細胞癌、乳がん、メルケル細胞癌、甲状腺がん、ホジキンリンパ腫、ろ胞性リンパ腫、びまん性大細胞型B細胞性リンパ腫、菌状息肉腫、末梢性T細胞性リンパ腫のようないくつかのがん腫にわたって効果的な治療戦略としての関心の対象であり続け、エフェクター機構を刺激することから、阻害及び抑制機構を相殺することに及ぶ様々なアプローチを含む。エフェクター免疫細胞を活性化する戦略として、新生物細胞に対する免疫応答の効能を高める患者自身の免疫系の能力を高める、腫瘍抗原でのワクチン接種、又は抗原提示の増強が挙げられる(Yaddnapudi等、2013年、Cancer vaccines, Oncoimmunology、2(3)、e23403)。追加の刺激戦略は、養子細胞療法(ACT)、全身性の抗腫瘍免疫を開始するための腫瘍溶解性ウイルス(OV)の投与、及び、T細胞活性を高める腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーのメンバーを標的とする抗体の使用を包含する。免疫抑制機構を中和する戦略として、化学療法(シクロホスファミド)、制御性T細胞を消滅させる抗体(CD25標的抗体)、並びにCTLA-4、PD1及びPD-L1のような免疫チェックポイント分子に対する抗体が挙げられる。
【０００９】
がん免疫療法の分野は、近年、2010年の前立腺がんの治療のための自己由来の細胞免疫療法、sipuleucel-Tの承認(Topalian等、2011年、J. Clin. Oncol.、29:4828〜36頁)、並びに、2011年及び2014年の黒色腫の治療のための抗細胞傷害性Tリンパ球関連タンパク質4(CTLA-4)抗体、イピリムマブ及び抗プログラム細胞死タンパク質1(PD1)抗体の承認(Sharma等、2015年、Cell、161:205〜14頁)により主に奨励されている。
【００１０】
効果的な抗がん効果は、黒色腫及び非小細胞肺がんのような高変異負荷を伴うがん腫において観察される最高奏効率での、細胞傷害性Tリンパ球関連タンパク質4(CTLA-4)及びプログラム死1(PD-1)/PD-1リガンド(PD-L1)を標的とする免疫チェックポイント阻害の使用によって証明されている(Andrews等、2017年、Journal for ImmunoTherapy of Cancer、25:10)。しかし、30〜40%の患者のみに観察され、患者の大半が先天性耐性を示すPD-1阻害に対する他覚的な反応を伴うこれらの治療剤には、大きな制約が存在する。抗PD-1療法に対する獲得耐性はまた、後に疾患進行を示す応答者のおよそ4分の1で問題である(Ribas等、2016年、JAMA、315:1600〜9頁)。
【００１１】
更に、固体がんの抗がん治療に対する耐性はまた抗血管新生療法で観察され、有益な効果が促進されるにもかかわらず、患者は必然的に耐性を生じ、頻繁に著しく良好な全生存期間が示されないので、抗VEGF療法の使用での高い関心事となっている(Gardner等、2017年、Chapter 第19章、Anti-VEGF Therapy in Cancer: A Double-Edged Sword、http://dx.doi.org/10.5772/66763、抗PDGF剤)。
【００１２】
したがって、がんワクチン、養子細胞療法、免疫チェックポイント阻害、及び腫瘍溶解性ウイルスのようながん免疫療法、並びに抗血管新生療法における様々な戦略の最近の開発、また更に、それらの効力が直面する制限の観点から、固体がんに対して、特に、免疫療法又は抗血管新生療法に対する耐性が生じる傾向があるがんに対して効果的であり、免疫療法若しくは抗血管新生治療に対する感度を回復することが可能であり又はがんワクチン治療を増強する抗がん療法を開発する必要性が増している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】WO 2008/113856
【特許文献２】WO 10/ 035217
【特許文献３】WO 10/035219
【特許文献４】WO 10/035220
【特許文献５】WO 10/035221
【特許文献６】WO 11/036651
【特許文献７】WO 2013/068972
【特許文献８】WO 2015/049655
【特許文献９】WO 2016/098005
【特許文献１０】WO 2016/207785
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】Block等、2012年、Nature Reviews、627〜637頁
【非特許文献２】Hanley等、2018年、J Natl Cancer Inst.、110
【非特許文献３】Yaddnapudi等、2013年、Cancer vaccines, Oncoimmunology、2(3)、e23403
【非特許文献４】Topalian等、2011年、J. Clin. Oncol.、29:4828〜36頁
【非特許文献５】Sharma等、2015年、Cell、161:205〜14頁
【非特許文献６】Andrews等、2017年、Journal for ImmunoTherapy of Cancer、25:10
【非特許文献７】Ribas等、2016年、JAMA、315:1600〜9頁
【非特許文献８】Gardner等、2017年、Chapter 第19章、Anti-VEGF Therapy in Cancer: A Double-Edged Sword、http://dx.doi.org/10.5772/66763
【非特許文献９】Gaggini等、2011年、Bioorganic and Medicinal chemistry、第19巻(23)、6989〜6999頁
【非特許文献１０】Martin等、2007年、Ann. Rev. Genomics Hum. Genet.、8:81〜108頁
【非特許文献１１】Huang等、2008年、Expert. Opin. Ther. Targets、12(5)、637〜645頁
【非特許文献１２】Bartlett等、2013年、Molecular Cancer 2、12:103
【非特許文献１３】Fukuhara等、2016年、Cancer Sci、107(10)、1373〜1379頁
【非特許文献１４】Perica等、2015年、Rambam Maimonides Med J、6(1)、e0004
【非特許文献１５】Iwai等、2017年、Journal of Biomedical Science、24:26
【非特許文献１６】Mishra、2017年、Future Oncol. doi: 10.2217/fon-2017-0115
【非特許文献１７】Soto Chervin等、2016年、F1000Research 2016、5(F1000 Faculty Rev):803
【非特許文献１８】June等、2018年、Science、359:1361〜1365頁
【非特許文献１９】Kochenderfer等、2010年、Blood 116、4099〜4102頁
【非特許文献２０】Porter等、2011年、N. Engl. J. Med.、365、725〜733頁
【非特許文献２１】Brentjens等、2013年、Sci. Transl. Med.、5、177ra38
【非特許文献２２】Grupp等、2013年、N. Engl. J. Med.、368、1509〜1518頁
【非特許文献２３】The Science and Practice of Pharmacy (Remington: The Science & Practice of Pharmacy)、第22版、2012年、Lloyd編、Allen, Pharmaceutical Press社
【非特許文献２４】Rice等、2002年、J Immunol.、169:3908〜13頁
【非特許文献２５】Rice等、2008年、Nat Rev Cancer、8:108〜20頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
本発明は、異なるがん細胞株において筋線維芽細胞性CAF表現型を復帰し、in vitro及び/又はin vivoの両方における多数のCAF豊富な腫瘍モデル(TC1+CAF[HNSCCモデル]、4T1+CAF[乳がん]、MMTV-PyVT(乳がん)、MMTV-Her2/neu(乳がん))において腫瘍増殖を抑制する、NOX4の薬理学的阻害の最近発見された能力(Hanley等、2018年、J Natl Cancer Inst.、110)が、相乗的にがん免疫療法を増強するか、又は抗VEGF治療で誘発された耐性を元に戻すのに有用であるという予想外の知見を対象とする。
【００１６】
本発明は、NOX4/1デュアル阻害剤が、免疫療法に対する感度を回復することができる、並びに/又は、免疫療法及び抗血管新生療法に対する応答を改善することができるという予想外の知見を対象とする。
【００１７】
本発明は、免疫療法に対する応答性の回復、特に、HPVのようながんワクチン、並びに、例えばPD-1阻害剤、PD-L1阻害剤及びCTLA-4阻害剤での免疫チェックポイント阻害の応答性の回復に有用な組成物及び方法を対象とする。
【００１８】
特に、本発明は、NOX4阻害剤が、抗腫瘍免疫療法に対する感度を回復することができる、及び/又は、免疫療法に対する応答を改善することができるという予想外の知見を対象とする。
【００１９】
特に、本発明は、NOX1阻害剤が、抗血管新生療法に対する応答を改善することができるという予想外の知見を対象とする。
【００２０】
本発明は、抗血管新生療法に対する応答性の回復、特に、抗VEGF治療の応答性の回復に、及び/又は、抗VEGF治療に対する耐性の出現を低減若しくは回避するために有用な組成物及び方法を更に対象とする。
【課題を解決するための手段】
【００２１】
本発明の第一の態様は、免疫療法又は抗血管新生剤、特に抗VEGF治療に対する耐性を呈する又は呈する疑いがある固体腫瘍がんの治療での使用のためのNOX4阻害剤又はNOX4/1デュアル又はNOX1阻害剤であって、抗がん免疫療法剤又は抗血管新生剤と組み合わせて投与される、NOX4(又はNOX4/1又はNOX1)阻害剤を提供する。
【００２２】
本発明の別の態様は、免疫療法又は抗血管新生剤、特に抗VEGF治療に対する耐性を呈する又は呈する疑いがある固体腫瘍がんの治療のための医薬組成物を調製するための1つ又は複数のNOX4又はNOX4/1デュアル又はNOX1阻害剤の使用であって、前記1つ又は複数のNOX4又はNOX4/1又はNOX1阻害剤が、抗がん免疫療法剤又は抗血管新生剤と組み合わせて投与される、使用を提供する。
【００２３】
本発明の別の態様は、少なくとも1つの抗がん免疫療法剤又は少なくとも1つの追加の高血管新生剤、及び、少なくとも1つの薬学的に許容されるその担体、賦形剤又は添加剤と組み合わせた、本発明による少なくとも1つのNOX4又はNOX4/1又はNOX1阻害剤を含有する医薬組成物、並びに、その互変異性体、幾何異性体、任意で活性形態、及び薬学的に許容される塩に関する。
【００２４】
本発明の別の態様は、免疫療法又は抗血管新生剤、特に抗VEGF治療に対する耐性を呈する又は呈する疑いがある固体腫瘍がんに罹患している対象を治療するための方法であって、抗がん免疫療法剤又は抗血管新生剤と組み合わせて、有効量の1つ又は複数のNOX4又はNOX4/1又はNOX1阻害剤を、それを必要とする対象に投与する工程を含む方法に関する。
【００２５】
本発明の別の態様は、対象において、抗がん免疫療法に対する応答性を回復する又は増強する、特に免疫療法的治療に対する感受性を回復する、とりわけコールド(cold)な腫瘍をホット(hot)な状態にするための方法であって、抗がん免疫療法剤と組み合わせて、有効量の1つ若しくは複数のNOX4若しくはNOX4/1若しくはNOX1阻害剤、又はその医薬製剤を、それを必要とする対象に投与する工程を含む方法に関する。
【００２６】
本発明の別の態様は、対象において、抗がん抗血管新生に対する応答性を回復する又は増強する、特に、抗VEGF治療に対する感受性を回復する、又は抗VEGF治療に対する耐性を防ぐための方法であって、抗血管新生剤と組み合わせて、有効量の1つ若しくは複数のNOX4若しくはNOX4/1若しくはNOX1阻害剤、又はその医薬製剤を、それを必要とする対象に投与する工程を含む方法に関する。
【００２７】
本発明の他の特徴及び利点は、以下の詳細な説明から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１Ａ】実施例1に記載される通り、がん細胞が、乳房脂肪パッドへと同所的に、がん関連線維芽細胞(CAF)と同時に注射された場合、腫瘍4T1へDCD8+T細胞が再配置すると、NOX4阻害剤(GKT)での治療の効果を示す。mm3で表せる腫瘍体積の増加、対、(1)腫瘍細胞とCAF及びビヒクルとの組合せ、又は、(2)腫瘍細胞とCAF及びNOX4阻害剤との組合せのいずれかの注射(矢印)後の日数。
【図１Ｂ】実施例1に記載される通り、がん細胞が、乳房脂肪パッドへと同所的に、がん関連線維芽細胞(CAF)と同時に注射された場合、腫瘍4T1へDCD8+T細胞が再配置すると、NOX4阻害剤(GKT)での治療の効果を示す。腫瘍において、SMA陽性CAFを減らすNOX4阻害剤での治療の効能を示す、免疫化学法及びその定量化。
【図１Ｃ】実施例1に記載される通り、がん細胞が、乳房脂肪パッドへと同所的に、がん関連線維芽細胞(CAF)と同時に注射された場合、腫瘍4T1へDCD8+T細胞が再配置すると、NOX4阻害剤(GKT)での治療の効果を示す。NOX4阻害剤での治療の結果、腫瘍辺縁部から腫瘍の中心部へ、CD8+T細胞が再配置することを示す、免疫化学法(及びその定量化)。
【図２Ａ】実施例1に記載される通り、MC38がん細胞が、治療されるマウスに、がん関連線維芽細胞(CAF)と同時に注射される、CAF豊富な腫瘍における治療応答でのαPD1とNOX4阻害剤(GKT)との組合せの効果を示す。ビヒクル単独(Ctl)、αPD1、NOX4阻害剤(GKT)単独、又は組合せαPD1+NOX4阻害剤(GKT)の効果を、注射後の腫瘍増殖に関して比較する。
【図２Ｂ】実施例1に記載される通り、MC38がん細胞が、治療されるマウスに、がん関連線維芽細胞(CAF)と同時に注射される、CAF豊富な腫瘍における治療応答でのαPD1とNOX4阻害剤(GKT)との組合せの効果を示す。組合せαD1/NOX4阻害剤での治療の結果、αPD1単独と比較して、腫瘍辺縁部から腫瘍の中心部へ、CD8+T細胞が再配置することを示す、免疫化学法及びその定量化。
【図２Ｃ】実施例1に記載される通り、MC38がん細胞が、治療されるマウスに、がん関連線維芽細胞(CAF)と同時に注射される、CAF豊富な腫瘍における治療応答でのαPD1とNOX4阻害剤(GKT)との組合せの効果を示す。様々な群のKaplan Meier生存曲線。
【図３Ａ】実施例2に記載される通り、抗腫瘍ワクチン接種とNOX4阻害剤(GKT)との組合せの効果を示す。ワクチン単独及び対照と比較した、組合せワクチン/GKTで治療されたマウスへの注射後の腫瘍増殖。
【図３Ｂ】実施例2に記載される通り、抗腫瘍ワクチン接種とNOX4阻害剤(GKT)との組合せの効果を示す。組合せワクチン/NOX4阻害剤での治療の結果、ワクチン単独と比較して、腫瘍辺縁部から腫瘍の中心部へ、CD8+T細胞が再配置することを示す、免疫化学法及びその定量化。
【図３Ｃ】実施例2に記載される通り、抗腫瘍ワクチン接種とNOX4阻害剤(GKT)との組合せの効果を示す。様々な群のKaplan Meier生存曲線。
【図４】実施例3に記載される通り、対照と比較して、CD45-/CD31+/GP38細胞により測定される血管新生を阻害する、抗血管新生剤と選択的NOX1阻害剤(GKT2)の組合せの効能を示す(*p<0.05; **p<0.01; ***p<0.005; ****p<0.001)。
【図５】WTマウスと比較したNOX1-KOマウスの腫瘍サイズの成長、及び、これらのマウスの腫瘍増殖が低減する抗VEGFR2抗体(DC101)の効果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本明細書で使用される表現「NOX阻害剤」とは、NOX4及び/又はNOX1を全体的に又は部分的に阻害する、ブロックする、減弱する、又は妨害することができる任意の物質を指す。用語は、化合物が、酵素の酵素活性、細胞局在、タンパク質の安定性、メッセンジャーRNA又はタンパク質の発現に影響を及ぼすとして直接定義される。好ましくは、NOX4/NOX1阻害剤は、組換えタンパク質NOX4/1のようなNOXアイソフォームNOX4/1タンパク質のみを発現する膜を使用する無細胞アッセイで、酵素活性及びROS産生を低減できなければならない。ゆえに、用語「阻害剤」とは、限定されないが、NADPHオキシダーゼ4及び/又はNADPHオキシダーゼ1の活性を完全に又は部分的に阻害する分子を含むことを意図する。特定の実施形態によると、NOX4/1阻害剤は、他のNOXタンパク質、例えばNOX2及び/又はNOX3/5と比較して、NOX4及び/又はNOX1に対する主要なNOX阻害活性成分を有する。特定の実施形態によると、NOX4/1阻害剤は、他のNOXタンパク質より少なくとも約5倍高いNOX4/1での主要なNOX阻害活性を有する。
【００３０】
例えば、NOX4/1阻害剤は、小分子、ペプチド、ペプチド模倣体、キメラタンパク質、天然若しくは非天然タンパク質、核酸由来のポリマー(例えば、DNA及びRNAアプタマー、siRNA、shRNA、PNA、若しくはLNA)、活性を拮抗するNOX4/1との融合タンパク質、中和抗NOX4/1抗体のような抗体アンタゴニスト、又は、このようなNOX4/1アンタゴニストの発現を誘導する遺伝子療法ベクターを含む。
【００３１】
特に、NOX4/1阻害剤は、Gaggini等、2011年、Bioorganic and Medicinal chemistry、第19巻(23)、6989〜6999頁に記載されるもののような機能的ROS産生アッセイにおいて、5マイクラモラー未満の阻害係数Kiを呈する薬剤である。例えば、NOX4/1阻害剤は、組換えタンパク質NOX4又はNOX1のようなNOXアイソフォームNOX4又はNOX1タンパク質のみを発現する膜を使用する無細胞アッセイで、約30〜300ナノモラーのような約1microM未満の範囲で、ROS産生を阻害する薬剤である。
【００３２】
用語「siRNA」とは、低分子干渉RNAを指し、これは、標的遺伝子から標的mRNAをノックダウンするか、又はサイレンシングすることができる二本鎖RNA(約19〜23ヌクレオチド)である。人工siRNAは、あらゆる種類の細胞において一過性又は安定なトランスフェクションを生成するために、オリゴヌクレオチドとして化学合成されるか、又は、ショートヘアピン型RNAとしてプラスミド若しくはウイルスベクター(アデノウイルス、レトロウイルス若しくはレンチウイルス)にクローニングされるかのいずれかであり得る(Martin等、2007年、Ann. Rev. Genomics Hum. Genet.、8:81〜108頁;Huang等、2008年、Expert. Opin. Ther. Targets、12(5)、637〜645頁)。
【００３３】
表現「固体腫瘍がん」として、神経膠芽細胞腫、肺がん(小細胞及び非小細胞)、乳がん、卵巣がん、子宮頚部がん、子宮がん、頭頚部がん、黒色腫、肝細胞癌、結腸がん、直腸がん、結腸直腸癌、腎がん、前立腺がん、胃がん、気管支がん、膵がん、膀胱がん、肝がん、及び脳がん、特に神経膠芽細胞腫が挙げられる。
【００３４】
本明細書で使用される場合、「治療」及び「治療すること」等とは、一般に、所望の薬理学的及び生理学的な効果を得ることを意味する。本明細書で使用される用語「治療」は、哺乳動物、特にヒトの疾患のあらゆる治療を包含し、疾患を阻害する、即ち、その発症を停止するか、又は、疾患を緩和する、即ち、腫瘍増殖停止若しくは後退のような疾患及び/若しくはその症状若しくは状態の後退をもたらすことを含む。
【００３５】
本明細書で使用される用語「対象」とは、哺乳動物を指す。例えば、本発明で考慮される哺乳動物として、ヒト、霊長類、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ、実験用齧歯動物、イヌ等のような家畜が挙げられる。
【００３６】
本明細書で使用される用語「有効量」とは、求められている組織、システム、動物、又はヒトにおいて生物学的又は医学的応答を誘発する、本発明による少なくとも1つの粒子又はその医薬製剤の量を指す。一実施形態において、有効量は、治療される疾患又は状態の症状を緩和するための「治療有効量」である。典型的には、有効量は、未治療の対照がん細胞の増殖の観察された若しくは予測された速度と比較してがん細胞増殖の速度を低減するように、がん細胞の増殖を阻害するため、即ち、がん細胞増殖及び/若しくは移行の速度の何らかの遅延、がん細胞増殖及び/若しくは移行の停止、又はがん細胞の死滅のために使用され得る。用語「増殖を阻害する」とはまた、がん細胞又は腫瘍のサイズの縮小又は消失、並びにその転移能の低下を指すことができる。好ましくは、細胞レベルでのこのような阻害は、患者のがんの、サイズを縮小する、増殖を延期する、侵襲性を低減する、又は、転移を防ぐ若しくは阻害することができる。当業者は、様々な適切な兆候のいずれかから、がん細胞増殖が阻害されているかどうかを容易に決定することができる。
【００３７】
本発明による治療の「効能」という用語は、本発明による使用又は方法に応じて疾患の過程での変化に基づいて測定できる。本発明によるがんの治療の効能は、腫瘍体積の減少、及び/若しくは、無進行の生存期間の延長、並びに/又は、対象の高い健康及び幸福(例えばがんを抑制すること)により測定することができる。がん細胞増殖の阻害は、例えば細胞周期の特定の期でのがん細胞の停止、例として細胞周期のG2/M期での停止により証明し得る。がん細胞増殖の阻害はまた、磁気共鳴撮像、コンピュータ断層撮影、PET、SPECT、光音響撮像、X線、及び、蛍光撮像/励起のような周知の撮像法を使用して証明することができる。がん細胞増殖はまた、例えば循環する癌胎児性抗原、前立腺特異性抗原、又は、がん細胞増殖と相関される他のがん特異性抗原のレベルを決定することにより間接的に決定することができる。
【００３８】
特に、本発明による組合せ治療の効能は、腫瘍サイズの縮小、又は、腫瘍若しくはがん腫に関連する任意のバイオマーカーの消失により評価することができる。
【００３９】
個々の置換基の定義により別段制限されない限り、用語「置換」とは、「C1〜C6アルキル」、「C2〜C6アルケニル」、「C2〜C6アルキニル」、「C3〜C8シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」、「C1〜C6アルキルアリール」、「C1〜C6アルキルヘテロアリール」、「C1〜C6アルキルシクロアルキル」、「C1〜C6アルキルヘテロシクロアルキル」、「アミノ」、「アルキルアミノ」、「アミノスルホニル」、「アンモニウム」、「アルコキシ」、「アシル」、「アシルアミノ」、「アミノカルボニル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「スルフィニル」、「スルホニル」、「スルホンアミド」、「アルコキシ」、「アルコキシカルボニル」、「カルバメート」、「スルファニル」、「ハロゲン」、トリハロメチル、シアノ、ヒドロキシ、メルカプト、ニトロ等からなる群から選択される1〜5個の置換基で置換された基を指す。
【００４０】
用語「薬学的に許容される塩又は錯体」とは、本発明の以下に示す化合物の塩又は錯体を指す。このような塩の例として、限定されないが、本発明の化合物と、アルカリ金属(ナトリウム、カリウム若しくはリチウム)、アルカリ土類金属(例えばカルシウム若しくはマグネシウム)からなる群で選択されるもののような金属カチオンの、水酸化物、カルボネート、ビカルボネート等のような有機若しくは無機塩基との、又は、有機第一、第二若しくは第三アルキルアミンとの反応により形成される塩基付加塩が挙げられる。このような塩の他の例として、限定されないが、本発明の化合物と、塩酸、臭化水素酸、硫酸、パラトルエンスルホン酸、2-ナフタレンスルホン酸、カンホスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、シュウ酸等のような有機又は無機酸との反応により形成される酸付加塩が挙げられる。
【００４１】
「薬学的に活性な誘導体」とは、レシピエントに投与するとすぐに、本明細書に開示される活性を直接的又は間接的にもたらすことができる任意の化合物を指す。
【００４２】
本発明によるNOX4/NOX1阻害剤
一実施形態において、本発明は、ROS産生の機能的アッセイにおいて、60nM以下〜300nMの範囲のNOX4及び/又はNOX1に対する阻害係数(Ki)を呈するNOX4又はNOX4/1又はNOX1阻害剤であって、NOX2、NOX3及びNOX5から選択される他のNOXに対する阻害活性が、1マイクロモラー超である、NOX4又はNOX4/1又はNOX1阻害剤を提供する。
【００４３】
特定の実施形態によると、本発明によるNOX4又はNOX4/NOX1又はNOX1阻害剤は、ピラゾロピリジン化合物、ピラゾリンジオン化合物、又はアミドチアゾール化合物であって、例えばWO 2008/113856、WO 10/ 035217、WO 10/035219、WO 10/035220、WO 10/035221、WO 11/036651、WO 2013/068972、WO 2015/049655及びWO 2016/098005に記載されている。
【００４４】
別の特定の実施形態によると、本発明によるNOX4阻害剤は、2,5-二置換ベンゾオキサゾール、及びベンゾチアゾール誘導体であり、例えばWO 2016/207785に記載されている。
【００４５】
一実施形態において、本発明は、NOX4阻害剤、式(I)
【００４６】
【化１】
2021501216.tif 000002
【００４７】
(式中、G1は、H、任意に置換されたアルキル、例えばアミノカルボニルアルキル(例としてフェニルアセトアミド)、任意に置換されたC3〜C8シクロアルキルアルキル、任意に置換されたヘテロシクロアルキルアルキル、任意に置換されたアリールアルキル、例えば任意に置換されたフェニルアルキル、例として任意に置換されたフェニルメチル(例としてフェニルメチル又は3-メチルフェニルメチル又は4-フルオロベンジル又は2-クロロベンジル又は4-クロロベンジル又は4-メチルベンジル又は4-ブロモベンジル);及び、任意に置換されたヘテロアリールアルキル、例えば任意に置換されたピリジンアルキル、例としてピリジン-2-イルメチルから選択され; G2は、H;任意に置換されたアルキル;任意に置換されたアルケニル;任意に置換されたアルキニル;任意に置換されたアリール、例えば任意に置換されたフェニル(例としてフェニル又は4-フルオロフェニル又は4-メトキシフェニル又は4-ニトロフェニル又は2-クロロフェニル又は2-メチルフェニル又は4-(トリフルオロメチル)フェニル又は4-(トリフルオロメトキシ)フェニル又は2,5-ジフルオロフェニル又は2-メトキシフェニル);任意に置換されたアルキルアリール;任意に置換されたアリールアルキル;任意に置換されたヘテロアリール、例えば任意に置換されたベンゾチアゾリル(例として1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)又は任意に置換されたピリジニル(例としてピリジン-2-イル);任意に置換されたアルキルヘテロアリール;任意に置換されたヘテロアリールアルキル;任意に置換されたアルケニルアリール;任意に置換されたアリールアルケニル;任意に置換されたアルケニルヘテロアリール;任意に置換されたヘテロアリールアルケニル;任意に置換されたC3〜C8シクロアルキル;任意に置換されたヘテロシクロアルキル;任意に置換されたアルキルC3〜C8シクロアルキル;任意に置換されたC3〜C8シクロアルキルアルキル;任意に置換されたアルキルヘテロシクロアルキル及び任意に置換されたヘテロシクロアルキルアルキルから選択され; G3は、H;任意に置換されたアルキル、例えばメチル又はエチル;任意に置換されたアルケニル;任意に置換されたアルキニル;任意に置換されたアリール、例えば任意に置換されたフェニル(例としてフェニル
);任意に置換されたアルキルアリール;任意に置換されたアリールアルキル;任意に置換されたヘテロアリール;任意に置換されたアルキルヘテロアリール;任意に置換されたヘテロアリールアルキル;任意に置換されたアルケニルアリール;任意に置換されたアリールアルケニル;任意に置換されたアルケニルヘテロアリール;任意に置換されたヘテロアリールアルケニル;任意に置換されたC3〜C8シクロアルキル;任意に置換されたヘテロシクロアルキル;任意に置換されたアルキルC3〜C8シクロアルキル;任意に置換されたC3〜C8シクロアルキルアルキル;任意に置換されたアルキルヘテロシクロアルキル及び任意に置換されたヘテロシクロアルキルアルキルから選択され; G4は、H、任意に置換されたアルキル、例えば任意に置換されたペンチル(例としてイソペンチル)又は任意に置換されたヘテロアルキル、例えば任意に置換されたメトキシ(例として2-メトキシエチル);任意に置換されたアルケニル;任意に置換されたアルキニル;任意に置換されたアリール;任意に置換されたアルキルアリール;任意に置換されたアリールアルキル、例えば任意に置換されたフェニルメチル(例として、安息香酸メチル若しくは安息香酸ベンジル)又は任意に置換されたフェニルエチル(例として2-フェニルエチル、4-メトキシフェニルエチル);任意に置換されたヘテロアリール;任意に置換されたアルキルヘテロアリール;任意に置換されたヘテロアリールアルキル、例えば任意に置換されたチオフェニルアルキル、例として任意に置換されたチオフェニルメチル(例としてチオフェン-2-イルメチル)又は任意に置換されたイミダゾリルアルキル、例として任意に置換されたイミダゾリルエチル(例としてイミダゾール-4-イルエチル)又は任意に置換されたインドリルアルキル、例として任意に置換されたインドリルエチル(例としてインドール-3-イルエチル)又は任意に置換されたフラニルアルキル、例として任意に置換されたフラニルメチル(例としてフラン-2-イルメチル)又は任意に置換されたベンゾジオキソリルアルキル、例として任意に置換されたベンゾジオキソリルメチル(例として1,3-ベンゾジオキソール-5-イルメチル)又は任意に置換されたピリジニルアルキル、例として任意に置換されたピリジニルメチル(例としてピリジン-3-イルメチ
ル若しくはピリジン-2-イルメチル);任意に置換されたアルケニルアリール;任意に置換されたアリールアルケニル;任意に置換されたアルケニルヘテロアリール;任意に置換されたヘテロアリールアルケニル;任意に置換されたC3〜C8シクロアルキル;任意に置換されたヘテロシクロアルキル、例えば任意に置換されたモルホリニル(例として5-モルホリン-4-イル)又は任意に置換されたピペラジニル(例として4-メチルピペラジニル)又は任意に置換されたピペリジニル(例として4-メチルベンジル)ピペリジン-4-イル);任意に置換されたアルキルC3〜C8シクロアルキル;及び任意に置換されたC3〜C8シクロアルキルアルキル;任意に置換されたアルキルヘテロシクロアルキル及び任意に置換されたヘテロシクロアルキルアルキル、例えば任意に置換されたモルホリニルアルキル、例として任意に置換されたモルホリニルプロピル(例として3-(モルホリン-4-イル)プロピル))任意に置換されたモルホリニルエチル(例として2-モルホリン-4-イルエチル);又は任意に置換されたピペラジニルアルキル、例として任意に置換されたピペラジニルエチル(例として2-(4-アセチルピペラジン-1-イル)エチル若しくは2-(4-ヘキサノイルピペラジン-1-イル)エチル)又は任意に置換されたピロリジニルアルキル、例として任意に置換されたピロリジニルプロピル(例として3-(2-オキソピロリジン-1-イル)プロピル)又は任意に置換されたテトラヒドロフラニルアルキル、例として任意に置換されたテトラヒドロフラニルメチル(例としてテトラヒドロフラン-2-イルメチル)から選択され; G5は、H、任意に置換されたアルキル;任意に置換されたアルケニル;任意に置換されたアルキニル;任意に置換されたアリール;任意に置換されたアルキルアリール;任意に置換されたアリールアルキル;任意に置換されたヘテロアリール;任意に置換されたアルキルヘテロアリール;任意に置換されたヘテロアリールアルキル;任意に置換されたアルケニルアリール;任意に置換されたアリールアルケニル;任意に置換されたアルケニルヘテロアリール;任意に置換されたヘテロアリールアルケニル;任意に置換されたC3〜C8シクロアルキル;任意に置換されたヘテロシクロアルキル;任意に置換されたアルキルC3〜C8シクロアルキル;任意に置換されたC3〜C8シクロアルキルアルキル;任意に置換されたアルキルヘテロシクロアルキル及び任意に置換されたヘテロシクロアルキルアルキルから選択される)
並びに、その薬学的に許容される塩及び薬学的に活性な誘導体を提供する。
【００４８】
別の実施形態において、本発明は、NOX4/1阻害剤、式(II)
【００４９】
【化２】
2021501216.tif 000003
【００５０】
(式中、Arは、任意に置換されたフェニル、例えばハロゲン、例えばクロロで任意に置換されたフェニル(例として2-クロロフェニル)又はアルコキシで任意に置換されたフェニル(例としてメトキシ)であり; G1及びG4は、Hであり; G2は、任意に置換されたC1〜C6アルキル(例としてメチル)及び任意に置換されたフェニル(例えばハロゲンで任意に置換されたフェニル、例えば3-クロロフェニル、4-クロロフェニル、2-フルオロフェニル、3-フルオロフェニル、4-フルオロフェニル、4-クロロ-2-フルオロフェニル、5-クロロ-2-フルオロフェニル、アミノ又はアルキルアミノ又はアルコキシで任意に置換されたフェニル、例えば3-ジメチルアミノフェニル、2-トリメチルアミノフェニル、3-メチルアミノフェニル、3-アミノフェニル、4-メトキシフェニル)から選択され; G3は、H、任意に置換されたC1〜C6アルキル(例としてメチル、アルコキシで置換されたC1〜C6アルキル、例としてメトキシエチル、例えば2-メトキシエチル)、任意に置換されたヘテロアリールC1〜C6アルキル、例として任意に置換されたピリジニルC1〜C6アルキル(例として任意に置換されたピリジニルメチル、例としてピリジニル-2イルメチル、ピリジニル-3イルメチル、6-メトキシピリジン-3-イルメチル、2-メトキシピリジン-4-イルメチル)若しくは任意に置換されたピラジニルC1〜C6アルキル(例としてピラジニル-2-イルメチル)及び任意に置換されたアルコキシC1〜C6アルキル、例えばメトキシエチル(例として2メトキシエチル)から選択されるか、又は、G2及びG3は一緒になって、2つの窒素原子を含む任意に置換された7員ヘテロシクロアルキル環を形成し、ここで2つの窒素が、任意に置換されたC1〜C3アルキル部分を介して結合する)
並びに、その互変異性体、幾何異性体、任意で活性形態、及び薬学的に許容される塩を提供する。
【００５１】
特定の実施形態において、本発明は、式(II)のNOX4/1阻害剤、並びに、その互変異性体、幾何異性体、任意で活性形態、及び薬学的に許容される塩を提供し、ここで、G2及びG3は一緒になって、2つの窒素原子を含む任意に置換された7員ヘテロシクロアルキル環を形成して、以下の式(I'):
【００５２】
【化３】
2021501216.tif 000004
【００５３】
(式中、Ar、G1及びG5は、本明細書で定義され;G6、G8〜G10は、Hであり;G7は、任意に置換されたC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたフェニルで任意に置換されたC1〜C6アルキル(例として任意に置換されたフェニルで任意に置換されたメチル、例えばベンジル、ハロゲンで置換されたフェニルで任意に置換されたメチル、例えば2-クロロベンジル、3-クロロベンジル、4-クロロベンジル、アルコキシで置換されたフェニルで任意に置換されたメチル、例えば2-メトキシベンジル、3-メトキシベンジル、4-メトキシベンジル)、任意に置換されたアリールC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたフェニルC1〜C6アルキル(例としてベンジル、2-クロロベンジル、3-クロロベンジル、4-クロロベンジル、2-メトキシベンジル、3-メトキシベンジル、4-メトキシベンジル)及び任意に置換されたヘテロアリールC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたピリジニルC1〜C6アルキル(例として任意に置換されたピリジニルメチル、例としてピリジニル-2イルメチル、ピリジニル-3イルメチル)又は任意に置換されたフラニルC1〜C6アルキル(例として任意に置換されたフラニルメチル、例としてフラン-3イルメチル)から選択される)
の化合物を形成する。
【００５４】
特定の実施形態において、本発明は、本発明による使用のための式(II)の化合物であって、G2が、任意に置換されたC1〜C6アルキルである、化合物を提供する。
【００５５】
別の特定の実施形態において、本発明は、本発明による使用のための式(II)の化合物であって、G2が、任意に置換されたフェニルである、化合物を提供する。
【００５６】
別の特定の実施形態において、本発明は、本発明による使用のための式(II)の化合物であって、G3が、任意に置換されたC1〜C6アルキルである、化合物を提供する。
【００５７】
別の特定の実施形態において、本発明は、本発明による使用のための式(II)の化合物であって、G3が、任意に置換されたピリジニルC1〜C6アルキルのような任意に置換されたヘテロアリールC1〜C6アルキルである、化合物を提供する。
【００５８】
別の特定の実施形態において、本発明は、本発明による使用のための式(II)の化合物であって、G2及びG3が一緒になって、2つの窒素原子を含む任意に置換された7員ヘテロシクロアルキル環を形成して、式(I')(G7は任意に置換されたC1〜C6アルキルである)の以下の化合物を形成する、化合物を提供する。
【００５９】
別において、本発明は、本発明による使用のための式(II)の化合物であって、G2及びG3が一緒になって、2つの窒素原子を含む任意に置換された7員ヘテロシクロアルキル環を形成して、式(I')(G7は任意に置換されたアリールC1〜C6アルキルである)の以下の化合物を形成する、化合物を提供する。
【００６０】
別において、本発明は、本発明による使用のための式(I)の化合物であって、G2及びG3が一緒になって、2つの窒素原子を含む任意に置換された7員ヘテロシクロアルキル環を形成して、式(I')(G7は任意に置換されたヘテロアリールC1〜C6アルキルである)の以下の化合物を形成する、化合物を提供する。
【００６１】
別の特定の実施形態によると、本発明によるNOX1阻害剤は、アミドチアゾール誘導体であり、例えばWO 2016/098005に記載されている。
【００６２】
別の実施形態において、本発明は、式(III):
【００６３】
【化４】
2021501216.tif 000005
【００６４】
(式中、Xは、CR1及びNから選択され; Yは、CH又はNから選択され; A1は、-OCHR5-、-NR4-CHR5-、-CH2NR4-及び-CH2-O-から選択され; R1は、H、ハロゲン及び任意に置換されたC1〜C6アルキルから選択され; R2は、H、ハロゲン(例としてクロロ、フルオロ)、任意に置換されたアルコキシ、例えば任意に置換されたメトキシ(例としてメトキシ、(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)メトキシ、ピペリジン-4-イルメトキシ)又は任意に置換されたエトキシ(例として2-(ジメチルアミノ)エトキシ、2-ヒドロキシエトキシ、1-フェニルエトキシ、2-メトキシエトキシ)、任意に置換されたアルコキシC1〜C6アルキル、任意に置換されたC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたメチル、任意に置換されたアミノ、例えば任意に置換されたC1〜C6アルキルアミノ(例としてメチルアミノ、テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)メチル)アミノ、(1-メチルピペリジン-4-イル)メチル)アミノ、ジメチルアミノ、任意に置換されたエチルアミノ、例えば2-モルホリノエチルアミノ又は2-(ジメチルアミノ)エチルアミノ又はメトキシエチルアミノ、任意に置換されたメチルアミノ、例えば1-メチル-1H-イミダゾール-4-イルメチルアミノ又は2-ヒドロキシエチル)アミノ、任意に置換されたプロピルアミノ、例えばジメチルアミノプロピルアミノ)、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、例えば任意に置換されたピペラジン(例としてメチルピペラジン-1-イル)、任意に置換されたC1〜C6アルキルヘテロシクロアルキル、例えば任意に置換されたC1〜C6アルキルピペラジン(例としてメチルピペラジン-1-イル)、任意に置換されたアミノC1〜C6アルキル、任意に置換されたアルコキシC1〜C6アルキル、-O-R8及び-NR9R10から選択され; R3は、式-(CHR6)n-A2の基であるか、又は、R3は、A1からの部分CHR5と、任意に置換されたアリール、例えば任意に置換されたフェニル(例としてフェニル若しくはハロゲンで置換されたフェニル、例えばアルコキシ、例としてメトキシで置換されたフルオロフェニル)及び任意に置換されたヘテロアリール、例えば任意に置換された1,3-ジヒドロ-1H-インデニル(例として1-(ジメチルアミノ)-2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル、2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル、2,3-ジヒドロ-1H-インデン-1-イル)又は任意に置換された6,7-ジヒドロ-5H-シクロペンタピリジニル(例として6,7-ジヒドロ-5H-シクロペンタ[b]ピリジン-5-イル、2-メチルピリジン-3-イル、5-メチルピリジン-2-イル)又は任意に置換された1,2,3,4-テトラヒドロナフタレニル(例として1,2,3,4-テトラヒドロナフタレン-1-イル)又は任意に置換された2,3-ジヒドロベンゾフラニル(例として2,3-ジヒドロベンゾフラン-3-イル、2,3-ジヒドロ-1H-インデン-1-イル)又は任意に置換されたチアジアゾリル(例として1,3,4-チアジアゾール-2-イル)又は任意に置換されたイソオキサゾリル(例として5-メチルイソオキサゾール-3-イル)又は任意に置換されたピラゾリル(例として1-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)又は任意に置換されたイミダゾリル(例として1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)から選択される任意に置換された環を形成するか、又は、R3は、A1からの部分NR4と、任意に置換されたアリール及び任意に置換されたヘテロアリール、例えば任意に置換されたイソインドリニル(例としてイソインドリン-2-イル、1H-インドール-1-イル))から選択される任意に置換された環を形成し;nは、0〜4の整数(例えば0��1、2、3又は4)であり; R4は、H及び任意に置換されたアルキル、例えば任意に置換されたメチルから選択され; A2は、任意に置換されたアリール、例えば任意に置換されたフェニル(例としてメトキシフェニル、フルオロフェニル、クロロフェニル)、任意に置換されたヘテロアリール、例えば任意に置換されたピリジン(例としてピリジン-2-イル、ピリジン-3-イル、ピリジン-4-イル、2-メチルピリジン-3-イル、5-メチルピリジン-2-イル)又は任意に置換されたピラゾリル(例として1,3ジメチル-1H-ピラゾール-5-イル、1-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)又は任意に置換されたチアジアゾリル(例として1,3,4-チアジアゾール-2-イル)又は任意に置換されたイミダゾリル(例として1H-イミダゾール-4-イル、1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル、1-メチル-1H-イミダゾール-5-イル)又は任意に置換された1,2,4-トリアゾリル(例として1-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-5-イル)又は任意に置換されたイソオキサゾリル(例として1-シクロプロピルイソオキサゾール-3-イル)又は任意に置換されたオキサジアゾリル(例として5-メチル-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル)又は任意に置換されたピリミジニル(例としてピリミジニル-2-イル)から選択される任意に置換された環であり; R5は、H、任意に置換されたC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたメチル(例としてメトキシメチル、3,3-ジフルオロピロリジン-1-イルメチル、4-メチルピペラジン-1-イルメチル、ヒドロキシルメチル)又は任意に置換されたエチル又は任意に置換されたプロピル(例としてメチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、2-プロパノリル、ヒドロキシルイソプロピル)、任意に置換されたアミノC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたアミノメチル(例としてジメチルアミノメチル、メチルアミノメチル)、任意に置換されたアルコキシC1〜C6アルキル、任意に置換されたヘテロシクロアルキルC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたヘテロシクロアルキルメチル、例えば任意に置換されたピロリジンC1〜C6アルキル(例として3,3-ジフルオロピロリジン-1-イルメチル)又は置換されたピペラジンC1〜C6アルキル(例として4-メチルピペラジン-1-イルメチル)又はヘテロシクロアルキルエチル、例えば任意に置換されたモルホリノC1〜C6アルキル(例としてモルホリノメチル、モルホリノエチル)又は任意に置換されたピロリジンC1〜C6アルキル(例としてピロリジンメチル、ピロリジンエチル)、任意に置換されたアミノカルボニル(例としてジメチルアミノカルボニル)、任意に置換されたC2〜C8シクロアルキル、例えば任意に置換されたシクロプロピル及び任意に置換されたアミノC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたアミノエチル(例としてジメチルアミノエチル)又は任意に置換されたアミノメチル(例としてジメチルアミノメチル)から選択され; R6は、H、任意に置換されたC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたメチル、任意に置換されたアミノ、任意に置換されたC1〜C6アルキルアミノ(例としてジメチルアミノ)及びヒドロキシから選択され、ここでR6基は、独立して、繰返し単位(CHR6)毎に選択され; R7は、H、ハロゲン(例としてフルオロ)及び任意に置換されたC1〜C6アルキル、例えばメチルから選択され; R8は、H、任意に置換されたC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたメチル又は任意に置換されたエチル(例としてメトキシエチル、2-(��メチルアミノ)エチル、ヒドロキシエチル)、任意に置換されたアミノC1〜C6アルキル、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、任意に置換されたC2〜C8シクロアルキル、任意に置換されたヘテロシクロアルキルC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたヘテロシクロアルキルメチル、例えば任意に置換されたテトラヒドロピランC1〜C6アルキル(例としてテトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)又は任意に置換されたピペリジンアルキル(例として1-メチルピペリジン-4-イル)、任意に置換されたC2〜C8シクロアルキルC1〜C6アルキル、任意に置換されたアルコキシ、任意に置換されたアミノC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたアミノエチル(例として2-(ジメチルアミノ)エチル);任意に置換されたアリールC1〜C6アルキル及び任意に置換されたヘテロアリールC1〜C6アルキルから選択され;R9及びR10は、独立して、H、任意に置換されたC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたメチル(例として1-メチル-1H-イミダゾール-4-イル)メチル))又は任意に置換されたエチル(例として2-メトキシエチル)、任意に置換されたアミノC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたアミノエチル(例としてジメチルアミノエチル)又は、例えば任意に置換されたアミノプロピル(例としてジメチルアミノ)プロピル)、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、例えば任意に置換されたピペリジン(例として1-メチルピペリジン)、任意に置換されたC2〜C8シクロアルキル、任意に置換されたヘテロシクロアルキルC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたヘテロシクロアルキルエチル、例えば任意に置換されたモルホリノC1〜C6アルキル(例として2-モルホリノエチル)又は任意に置換されたヘテロシクロアルキルメチル、例えば任意に置換されたテトラヒドロフランC1〜C6アルキル(例としてテトラヒドロ-2H-ピラン-4-イルメチル)又はピペリジンC1〜C6アルキル(例として1-メチルピペリジン-4-イル)メチル又は任意に置換されたイミダゾリルC1〜C6アルキル(例として1-メチル-1H-イミダゾール-4-イル)メチル)任意に置換されたC2〜C8シクロアルキルC1〜C6アルキル、任意に置換されたアルコキシ、任意に置換されたアルコキシC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたアルコキシエチル(例として2-メトキシエチル)、任意に置換されたアリールC1〜C6アルキル及び任意に置換されたヘテロアリールC1〜C6アルキル、例えばヘテロアリールC1〜C6アルキルメチル、例えば任意に置換されたイミダゾリルC1〜C6アルキル(例として1-メチル-1H-イミダゾール-4-イルメチル)、任意に置換されたアミノC1〜C6アルキル、例えば任意に置換されたアミノエチル又は任意に置換されたアミノプロピル(例として2-(ジメチルアミノ)エチル、2-(ジメチルアミノ)プロピル)から選択される)
のNOX1阻害剤、並びに、その互変異性体、幾何異性体、任意で活性形態、薬学的に許容される塩及び薬学的に活性な誘導体を提供する。
【００６５】
特定の実施形態において、本発明は、本発明による使用のための式(III)の化合物であって、Xが、CHである、化合物を提供する。
【００６６】
特定の実施形態において、本発明は、本発明による使用のための式(III)の化合物であって、Yが、CR1であり、特にCHである、化合物を提供する。
【００６７】
特定の実施形態において、本発明は、本発明による使用のための式(III)の化合物であって、R2が、任意に置換されたアルコキシ(例えばメトキシ)である、化合物を提供する。
【００６８】
特定の実施形態において、本発明は、本発明による使用のための式(III)の化合物であって、R7が、Hである、化合物を提供する。
【００６９】
特定の実施形態において、本発明は、本発明による使用のための式(III)の化合物であって、A1が、-OCHR5であり、特にR5が、任意に置換されたモルホリノC1〜C6アルキル(例えばモルホリノメチル)である、化合物を提供する。
【００７０】
別の特定の実施形態において、本発明は、本発明による使用のための式(III)の化合物であって、A1が、-OCHR5であり、特にR5が、任意に置換されたアミノC1〜C6アルキル(例えばジメチルアミノメチル)である、化合物を提供する。
【００７１】
別の特定の実施形態において、本発明は、本発明による使用のための式(III)の化合物であって、A1が、-OCHR5であり、特にR5が、任意に置換されたヒドロキシルC1〜C6アルキル(例えばヒドロキシメチル)である、化合物を提供する。
【００７２】
特定の実施形態において、本発明は、本発明による使用のための式(III)の化合物であって、R3が、式-(CHR6)n-A2の基であり、特にnが、0であり、A2が、任意に置換されたフェニル(例えばフェニル)である、化合物を提供する。
【００７３】
別の特定の実施形態によると、本発明によるNOX1阻害剤は、3-メトキシ-4-(2-モルホリノ-1-フェニルエトキシ)-N-(5-(ピリジン-4-イル)-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)ベンズアミドであり、特に(R)3-メトキシ-4-(2-モルホリノ-1-フェニルエトキシ)-N-(5-(ピリジン-4-イル)-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)ベンズアミドである。
【００７４】
別の実施形態において、式(IV):
【００７５】
【化５】
2021501216.tif 000006
【００７６】
(式中、環(A)は、フェニル基と縮合する非芳香族の5〜7員複素環を表し;前記5〜7員複素環は、1つの酸素環原子、及び、独立して酸素又は窒素から選択される任意で1つの追加環ヘテロ原子を含有し;前記5〜7員複素環は、独立して、非置換若しくは一置換若しくは二置換であり、置換基は、独立して:
・環式酸素及び/若しくは環式窒素原子に対するアルファ位における環炭素原子に結合する、1つのオキソ置換基;及び/若しくは
・遊離原子価を有する環式窒素原子に結合する、1つのC1〜3アルキル;若しくは
・同じ環炭素原子に結合する、2つのフルオロ置換基
から選択され;
Lは、-NH-CO-*又は-CO-NH-*を表し、アスタリスク(*)は、ベンゾオキサゾール/ベンゾチアゾール部分と結合する結合を示し;Xは、O若しくはSを表し、並びに
Yは、
-NR1R2(R1は、R1は、C1〜4アルキル;ジ-(C1〜3アルキル)アミノ、ヒドロキシ若しくはC1〜3アルコキシで一置換されているC2〜4アルキル;C3〜5シクロアルキル-L1であって、L1が、直接結合若しくはC1〜3アルキレンを表し、C3〜5シクロアルキルが、任意で1つの酸素環原子を含有し、前記C3〜5シクロアルキルが、非置換であるか、若しくはメチル若しくはフルオロで一置換されている、C3〜5シクロアルキル-L1;若しくは、C3〜5シクロアルキルで環式窒素原子において置換されている、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル若しくはピロリジン-3-イル基であって、前記C3〜5シクロアルキルが、任意で1つの酸素環原子を含有する、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル若しくはピロリジン-3-イル基を表し;及び、R2は、水素、C1〜3アルキル、若しくはC3〜5シクロアルキルを表す)を表すか、若しくは、
Yは、モルホリン-4-イル;2-オキソ-ピロリジン-1-イル;1,1-ジオキシドチオモルホリン-4-イル;若しくは、任意でオキセタン-3-イル若しくはC1〜3アルキルで、4位で一置換されたピペラジン-1-イル;若しくは、アゼチジン-1-イル、ピロリジン-1-イル若しくはピペリジン-1-イルから選択される、飽和した4〜7員単環式ヘテロシクリルであって、前記アゼチジン-1-イル、ピロリジン-1-イル若しくはピペリジン-1-イルが、独立して、非置換であるか、若しくは、
・同じ環炭素原子に結合する、2つのフルオロ置換基;若しくは、
・非置換フェニル、若しくは非置換若しくは6員ヘテロアリールから選択される1つの置換基;若しくは、
・ヒドロキシ; C1〜3アルコキシ;-CO-C1〜4アルコキシ;ジ(C1〜3アルキル)アミノ;及び、ジ(C1〜3アルキル)アミノ、ヒドロキシ若しくはC1〜3アルコキシで一置換されたC1〜3アルキルから選択される1つの置換基;若しくは、
・2つの置換基であって、前記置換基の1つがC1〜4アルキルであり、もう1つが独立してヒドロキシ若しくはジ(C1〜3アルキル)アミノから選択される、2つの置換基;若しくは、
・モルホリン-4-イル;1,1-ジオキシドチオモルホリン-4-イル;若しくは、任意でC1〜3アルキルで、4位で一置換されたピペラジン-1-イルから選択される、1つの置換基;
・独立して、非置換であるか、若しくはヒドロキシで一置換されているか、若しくはメチル及びヒドロキシで二置換されている、アゼチジン-1-イル、ピロリジン-1-イル若しくはピペリジン-1-イルから選択される、1つの置換基
で置換されている、飽和した4〜7員単環式ヘテロシクリルを表すか、
若しくは、Yは、少なくとも1つの窒素原子を含有する飽和した7〜11員の縮合式、架橋式、若しくはスピロ二環式ヘテロシクリルであって、前記窒素原子が、ベンゾオキサゾール/ベンゾチアゾール部分と結合し、前記ヘテロシクリルが、任意で、独立して酸素、窒素及び硫黄から選択される任意で1つの追加環ヘテロ原子を含有し、非置換であるか、若しくは
-  環式硫黄環原子での2つのオキソ置換基;若しくは、
-  遊離原子価を有する環式窒素原子に結合する、1つのC1〜3アルキル置換基
で置換されている、飽和した7〜11員の縮合式、架橋式、若しくはスピロ二環式ヘテロシクリルを表す)
のNOX4阻害剤、又は、その薬学的に許容される塩が提供される。
【００７７】
別の特定の実施形態において、本発明による使用のための式(I)の化合物であって、
【００７８】
【化６】
2021501216.tif 000007
【００７９】
2-(2-クロロフェニル)-4-メチル-5-(ピリジン-2-イルメチル)-1H-ピラゾロ[4,3-c]ピリジン-3,6(2H,5H)-ジオンである、化合物が提供される。
【００８０】
別の特定の実施形態において、本発明による使用のための式(I)の化合物であって、
【００８１】
【化７】
2021501216.tif 000008
【００８２】
2-(2-クロロフェニル)-4-[3-(ジメチルアミノ)フェニル]-5-メチル-1H-ピラゾロ[4,3-c]ピリジン-3,6(2H,5H)-ジオンである、化合物が提供される。
【００８３】
別の特定の実施形態において、本発明による使用のための式(I)の化合物であって、
【００８４】
【化８】
2021501216.tif 000009
【００８５】
4-(2-フルオロ-4-メトキシフェニル)-2-(2-メトキシフェニル)-5-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[4,3-c]ピリジン-3,6(2H,5H)-ジオンである、化合物が提供される。
【００８６】
別の特定の実施形態において、本発明による使用のための式(I')の化合物であって、
【００８７】
【化９】
2021501216.tif 000010
【００８８】
10-ベンジル-2-(2-クロロフェニル)-2,3,8,9,10,11-ヘキサヒドロ-1H-ピラゾロ[4',3':3,4]ピリド[1,2-a][1,4]ジアゼピン-1,5(7H)-ジオンである、化合物が提供される。
【００８９】
別の特定の実施形態において、本発明による使用のための式(IV)の化合物であって、
【００９０】
【化１０】
2021501216.tif 000011
【００９１】
(R)-3-メトキシ-4-(2-モルホリノ-1-フェニルエトキシ)-N-(5-(ピリジン-4-イル)-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)ベンズアミドである、化合物が提供される。
【００９２】
別の特定の実施形態において、本発明による使用のための式(IV)の化合物であって、
【００９３】
【化１１】
2021501216.tif 000012
【００９４】
(S)-3-メトキシ-4-(1-フェニルエトキシ)-N-(5-(ピリジン-4-イル)-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)ベンズアミドである、化合物が提供される。
【００９５】
別の特定の実施形態において、本発明による使用のための式(IV)の化合物であって、
【００９６】
【化１２】
2021501216.tif 000013
【００９７】
(R)-4-(2-ヒドロキシ-1-フェニルエトキシ)-3-メトキシ-N-(5-(ピリジン-4-イル)-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)ベンズアミドである、化合物が提供される。
【００９８】
別の特定の実施形態において、本発明による使用のための式(IV)の化合物であって、
【００９９】
【化１３】
2021501216.tif 000014
【０１００】
(R)-4-(2-ジメチルアミノ-1-フェニルエトキシ)-3-メトキシ-N-(5-(ピリジン-4-イル)-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)ベンズアミドである、化合物が提供される。
【０１０１】
別の特定の実施形態において、以下の群から選択される、本発明による化合物が提供される:
2-(2-クロロフェニル)-4-メチル-5-(ピリジン-2-イルメチル)-1H-ピラゾロ[4,3-c]ピリジン-3,6(2H,5H)-ジオン;
2-(2-クロロフェニル)-4-[3-(ジメチルアミノ)フェニル]-5-メチル-1H-ピラゾロ[4,3-c]ピリジン-3,6(2H,5H)-ジオン;
4-(2-フルオロ-4-メトキシフェニル)-2-(2-メトキシフェニル)-5-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[4,3-c]ピリジン-3,6(2H,5H)-ジオン;
(R)-3-メトキシ-4-(2-モルホリノ-1-フェニルエトキシ)-N-(5-(ピリジン-4-イル)-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)ベンズアミド;
10-ベンジル-2-(2-クロロフェニル)-2,3,8,9,10,11-ヘキサヒドロ-1H-ピラゾロ[4',3':3,4]ピリド[1,2-a][1,4]ジアゼピン-1,5(7H)-ジオン;
(S)-3-メトキシ-4-(1-フェニルエトキシ)-N-(5-(ピリジン-4-イル)-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)ベンズアミド;
(R)-4-(2-ヒドロキシ-1-フェニルエトキシ)-3-メトキシ-N-(5-(ピリジン-4-イル)-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)ベンズアミド、及び
(R)-4-(2-ジメチルアミノ-1-フェニルエトキシ)-3-メトキシ-N-(5-(ピリジン-4-イル)-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)ベンズアミド。
【０１０２】
特定の態様によると、がんワクチン又は少なくとも1つの免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせた使用のための、NOX4阻害剤及びNOX4/1阻害剤から選択されるNOX阻害剤が提供される。
【０１０３】
更に特定の態様によると、がんワクチン又は少なくとも1つの免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせた使用のための、NOX4阻害剤及びNOX4/1阻害剤から選択されるNOX阻害剤が提供される。
【０１０４】
別の更に特定の態様によると、がんワクチンと組み合わせた使用のための、NOX4阻害剤及びNOX4/1阻害剤から選択されるNOX阻害剤が提供される。
【０１０５】
別に更に特定の態様によると、少なくとも1つの抗血管新生剤と組み合わせた使用のための、NOX1阻害剤及びNOX1/4阻害剤から選択されるNOX阻害剤が提供される。
【０１０６】
本発明による抗がん免疫療法剤
本発明にしたがって使用することができる抗がん免疫療法剤は、Bartlett等、2013年、Molecular Cancer 2、12:103(例えばタリモジーン・ラハーパレプベック(イムリジック))又はFukuhara等、2016年、Cancer Sci、107(10)、1373〜1379頁に記載されるような腫瘍溶解性又は抗単純ヘルペスウイルスワクチン、Perica等、2015年、Rambam Maimonides Med J、6(1)、e0004に記載されるような養子細胞免疫療法、Iwai等、2017年、Journal of Biomedical Science、24:26若しくはMishra、2017年、Future Oncol. doi: 10.2217/fon-2017-0115若しくはSoto Chervin等、2016年、F1000Research 2016、5(F1000 Faculty Rev):803(例えばペムブロリズマブ(キイトルーダ)、ニボルマブ(オプジーボ))に記載されるもののようなPD-1阻害剤、アテゾリズマブ(テセントリク)、アベルマブ(バベンチオ)、デュルバルマブ(イミフィンジ)のようなPD-L1阻害剤、又はイピリムマブ(ヤーボイ)のようなCTLA-4阻害剤のような免疫チェックポイント阻害剤のようながんワクチンを包含する。
【０１０７】
別の特定の態様によると、本発明による免疫チェックポイント阻害剤は、T細胞免疫グロブリン及びムチンドメイン3(TIM3)、リンパ球活性化遺伝子-3(LAG3)、T細胞免疫グロブリン及びITIMドメイン(TIGIT)、又は、B及びTリンパ球アッテネータ(BTLA)阻害剤から選択され得る。
【０１０８】
特定の態様によると、本発明による免疫チェックポイント阻害剤は、PD-1阻害剤である。
【０１０９】
特定の態様によると、本発明による抗がんワクチンは、DNA、RNA、ペプチド、及び腫瘍溶解性ウイルスワクチンを包含する。
【０１１０】
更に、より一般的に、CD8+T細胞の腫瘍への浸潤が、多くの免疫療法の根幹をなすので、本発明による組合せ及び組み合わせた使用はまた、June等、2018年、Science、359:1361〜1365頁に記載されるような腫瘍浸潤リンパ球(TIL)、T細胞受容体(TCR)T細胞、及びキメラ抗原受容体(CAR)T細胞を含む養子T細胞導入療法に有用である。TILは、転移性黒色腫の患者において持続性のある完全応答を誘発することが示されている。CAR T細胞は、血液学的悪性腫瘍の治療に著しい利点を生じさせるが(Kochenderfer等、2010年、Blood 116、4099〜4102頁;Porter等、2011年、N. Engl. J. Med.、365、725〜733頁; Brentjens等、2013年、Sci. Transl. Med.、5、177ra38; Grupp等、2013年、N. Engl. J. Med.、368、1509〜1518頁)、腫瘍微小環境は、固体がんにおける好結果に対して重大な障壁のままである。
【０１１１】
同様に、本発明にしたがって使用することができる免疫療法剤は、α-CD40、α-CD27、α-41BB、α-OX40、GITRのようなCD8+T細胞アゴニストを包含する。
【０１１２】
本発明による組合せで使用するための抗血管新生剤
本発明にしたがって使用することができる抗血管新生剤は、Gardner等、2017年(上記)に記載されるような抗VEGF剤、特にベバシズマブ又はスニチニブを包含する。
【０１１３】
組成物
本発明は、組成物としての薬剤又は治療剤、及び、免疫療法又は抗血管新生剤、特に抗VEGF治療に対する耐性を呈する又は呈する疑いがある固体腫瘍がんに罹患している患者、好ましくは哺乳動物の患者、最も好ましくはヒトの患者を治療するための方法を提供する。
【０１１４】
本発明の医薬組成物は、本明細書に記載されるあらゆる形態で1つ又は複数の化合物を含有することができる。本発明の組成物は、ミョウバン、可溶化剤、安定剤、抗菌剤、緩衝剤、着色化剤、着香剤、補助剤等のような、1つ又は複数の薬学的に許容される追加成分を更に含む。
【０１１５】
本発明の化合物は、従来利用される補助剤、担体、賦形剤又は添加剤と共に、医薬組成物及びその単位投与量の形態にすることができ、このような形態において、小袋剤、錠剤若しくは充填カプセル剤中の粉末のような固体、若しくは溶液剤、懸濁剤、乳剤、エリキシル剤、鼻腔スプレー剤、若しくはこれらを充填したカプセル剤のような液体(全て、経口用)として、又は、非経口用(皮下を含む)の滅菌した注射可能な溶液剤の形態において、利用することができる。このような医薬組成物及びその単位剤形は、追加の活性化合物若しくは成分を伴うか、又はそれを伴わずに、従来の比の成分を含み得、このような単位剤形は、利用するために意図した1日投与量の範囲に応じて、任意の適切な有効量の活性成分を含有し得る。本発明による組成物は、好ましくは、経口、舌下、経鼻、及び皮下である。
【０１１６】
本発明の組成物はまた、液体製剤であり得、限定されないが、水性又は油性懸濁剤、溶液剤、乳剤、シロップ剤、スプレー剤、及びエリキシル剤を含む。経口投与に適した液体形態として、緩衝剤、懸濁化剤及び分散化剤、着色剤、香料等を伴う、適切な水性又は非水性ビヒクルが挙げられ得る。組成物はまた、使用前に、水又は他の適切なビヒクルで復元するための乾燥生成物として製剤化することができる。このような液体調製物は、添加物質を含有し得、限定されないが、懸濁化剤、乳化剤、非水性ビヒクル及び保存剤を含む。懸濁化剤として、限定されないが、ソルビトールシロップ剤、メチルセルロース、グルコース/砂糖シロップ剤、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲル剤、及び水素化食用脂が挙げられる。乳化剤として、限定されないが、レシチン、モノオレイン酸ソルビタン、及びアカシアが挙げられる。非水性ビヒクルとして、限定されないが、食用油、アーモンド油、精留ココナツ油、油性エステル、プロピレングリコール、及びエチルアルコールが挙げられる。保存剤として、限定されないが、p-ヒドロキシ安息香酸メチル又はプロピル、及びソルビン酸が挙げられる。更なる材料並びに加工技術等は、The Science and Practice of Pharmacy (Remington: The Science & Practice of Pharmacy)、第22版、2012年、Lloyd編、Allen, Pharmaceutical Press社に記載されており、これは、参照により本明細書に組み込まれる。
【０１１７】
本発明の固体組成物は、従来の手法で製剤化された小袋剤、錠剤若しくはロゼンジ剤中の粉末の形態であり得る。例えば、経口又は舌下投与用の小袋剤、錠剤及びカプセル剤は、従来の添加剤を含有し得、限定されないが、結合化剤、充填剤、滑沢剤、崩壊剤、及び湿潤化剤を含む。結合化剤として、限定されないが、シロップ剤、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、デンプンの粘質物、及びポリビニルピロリドンが挙げられる。充填剤として、限定されないが、ラクトース、砂糖、微結晶セルロース、トウモロコシデンプン、リン酸カルシウム及びソルビトールが挙げられる。滑沢剤として、限定されないが、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルク、ポリエチレングリコール、及びシリカが挙げられる。崩壊剤として、限定されないが、ジャガイモデンプン、及びナトリウムデンプングリコレートが挙げられる。湿潤化剤として、限定されないが、ラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。錠剤は、当該技術分野に周知の方法にしたがってコーティングすることができる。
【０１１８】
注射可能な組成物は、典型的には、注射可能な滅菌生理食塩水若しくはリン酸緩衝生理食塩水、又は当該技術分野で公知の他の注射可能な担体に基づく。
【０１１９】
本発明の組成物はまた、非経口投与用に製剤化し得、限定されないが、注射又は連続注入を含む。注射用の製剤は、油性又は水性ビヒクルにおける懸濁剤、溶液剤、又は乳剤の形態であり得、限定されないが、懸濁化剤、安定化剤、及び分散化剤を含む製剤を含有し得る。組成物はまた、限定されないが、発熱物質を含まない滅菌水を含む、適切なビヒクルで復元するための粉末形態で生成され得る。
【０１２０】
本発明の組成物はまた、デポ調製物として製剤化され得るが、これは、注入又は筋肉内注射により投与され得る。組成物は、(例えば、許容できる油中の乳剤としての)適切なポリマー性若しくは疎水性物質、イオン交換樹脂で、又は、(例えば、難溶性塩としての)難溶性誘導体として製剤化することができる。
【０１２１】
本発明の化合物はまた、持続放出型で、又は持続放出性薬物送達システムから投与することができる。代表的な持続放出物質の記載はまた、Remingtonのpharmaceutical sciencesに組み込まれた資料で見出すことができる。
【０１２２】
投与の様式
本発明の組成物は、あらゆる手法で投与することができ、限定されないが、経口、非経口、舌下、バッカル投与を介する、経鼻、病変内、又はそれらの組合せを含む。非経口投与として、限定されないが、皮下及び筋肉内が挙げられる。本発明の組成物はまた、移植の形態で投与することができるが、これは、組成物の徐放並びに徐放性i.v.注入を可能とする。特定の実施形態において、1つ又は複数のNOX4、NOX4/1又はNOX1阻害剤は、経口投与される。
【０１２３】
個体に対して単回又は複数回用量として投与される投与量は、薬物動態特性、患者の状態及び特色(年齢、体重、健康、身体寸法)、症状の程度、治療の頻度、並びに所望の効果を含む、様々な因子によって異なる。
【０１２４】
組合せ
本発明の一実施形態によると、本発明によるNOX4、NOX4/1又はNOX1阻害剤、及びその医薬製剤は、抗がん免疫療法剤、特に抗がんワクチン、又は少なくとも1つのPD-1、PD-L1若しくはCTLA4阻害剤のような少なくとも1つの免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて投与される。
【０１２５】
本発明は、NOX4、NOX4/1若しくはNOX1阻害剤、又はその医薬製剤の投与を包含し、NOX4/1阻害剤又はその医薬製剤は、抗がん免疫療法剤の前に又は同時に、例えば同じ製剤によって同時に又は異なる製剤によって、特に異なる製剤化経路によって別々に、個体に投与される。
【０１２６】
本発明の特定の態様によると、本発明によるNOX4、NOX4/1又はNOX1阻害剤、及びその医薬製剤は、治療の期間中、及び、抗がん免疫療法剤又は抗血管新生治療の投与の前の長期的に(例えば毎日又は毎週)投与される。
【０１２７】
本発明の別の特定の態様によると、本発明によるNOX4、NOX4/1又はNOX1阻害剤、及びその医薬製剤は、抗がん免疫療法剤と同時に投与される。
【０１２８】
本発明の別の特定の態様によると、抗がん免疫療法剤は、がんを治療、安定化、防止、及び/又は遅延するのに有用な物質、例えば固体腫瘍を対象とし、転移の確立を制御するための従来の化学療法で使用する物質、又はプログラム細胞死を誘発することにより作用する任意の他の分子と組み合わせる等の、がんの治療に有用な他の治療レジメン又は共試薬(例えば多数の薬物レジメン)と組み合わせて、例えば、血管新生阻害剤(例えば上記のGardner等、2017年に記載されるような抗VEGF剤)、免疫療法剤(例えば組換えサイトカイン、インターフェロン、インターロイキン、ハーセプチン(登録商標)等の組換え抗体)、及び化学療法剤(例えばシスプラチン、パクリタキセル、メトトレキサート、5-フルオロウラシル、ゲムシタビン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ドキソルビシン、テモゾロミド)から選択される共試薬と組み合わせて、治療有効量で投与することができる。特に、本発明の別の特定の態様によると、抗がん免疫療法剤は、血管内皮細胞増殖因子(VEGF)の少なくとも1つの阻害剤(例えばベバシズマブ、スニチニブ阻害剤)、塩基性線維芽細胞増殖因子(bFGF)の少なくとも1つの阻害剤、又は低酸素誘導因子-1(HIF-1)の少なくとも1つの阻害剤と組み合わせる等の、がんの治療に有用な他の治療レジメン又は共試薬(例えば多数の薬物レジメン)と組み合わせて、治療有効量で投与することができる。
【０１２９】
前記抗がん免疫療法剤と同時に投与されるNOX4/1阻害剤又はその医薬製剤は、同じ又は異なる組成で又はその組成内で、同じ又は異なる投与経路により投与することができる。
【０１３０】
患者
一実施形態において、本発明による対象は、免疫療法又は抗血管新生剤、特に抗VEGF治療に対する耐性を呈する又は呈する疑いがある固体腫瘍がん、特に低応答性固体腫瘍がんに罹患している対象である。
【０１３１】
特定の実施形態において、本発明による対象は、肺がん(小細胞及び非小細胞)、乳がん、卵巣がん、子宮頚部がん、子宮がん、頭頚部がん、黒色腫、肝細胞癌、結腸がん、直腸がん、結腸直腸癌、腎がん、前立腺がん、胃がん、気管支がん、膵がん、膀胱がん、肝がん、及び脳がん、特に神経膠芽細胞腫から選択される固体腫瘍がんに罹患している対象である。
【０１３２】
特定の実施形態において、本発明による対象は、固体腫瘍がんに罹患している対象であり、高いα平滑筋アクチン(α-SMA)発現を有する。
【０１３３】
別の特定の実施形態において、本発明による対象は、肝細胞癌(HCC)に罹患している対象である。
【０１３４】
別の特定の実施形態において、本発明による対象は、頭頚部がんに罹患している対象である。
【０１３５】
別の特定の実施形態において、本発明による対象は、黒色腫に罹患している対象である。
【０１３６】
別の特定の実施形態において、本発明による対象は、結腸がんに罹患している対象である。
【０１３７】
別の特定の実施形態において、本発明による対象は、肺癌に罹患している対象である。
【０１３８】
別の特定の実施形態において、本発明による対象は、乳がんに罹患している対象である。
【０１３９】
別の特定の実施形態において、本発明による対象は、肝細胞癌又は肝がんに罹患している対象である。
【０１４０】
別の特定の実施形態において、本発明による対象は、直腸がん又は結腸直腸癌に罹患している対象である。
【０１４１】
別の特定の実施形態において、本発明による対象は、腎がんに罹患している対象である。
【０１４２】
別の特定の実施形態において、本発明による対象は、膵がんに罹患している対象である。
【０１４３】
別の特定の実施形態において、本発明による対象は、脳がん、特に神経膠芽細胞腫に罹患している対象である。
【０１４４】
別の特定の実施形態において、本発明による対象は、別の併用治療又は遺伝的素因により、抗がん免疫療法に対する耐性又は部分耐性が生じる危険にある固体腫瘍がんを有する対象である。
【０１４５】
別の特定の実施形態において、本発明による対象は、リンパ腫又は白血病のような血液学的悪性腫瘍の対象である。
【０１４６】
本発明による使用
特定の実施形態において、本発明は、組合せの形態での固体腫瘍がんの治療に有用な化合物、方法、使用及び組成物であって、少なくとも1つのNOX4/1阻害剤が、少なくとも1つの抗がん免疫療法剤と組み合わせて投与される、化合物、方法、使用及び組成物を提供する。
【０１４７】
本明細書に引用される文献は、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。本発明は、本明細書に記載される具体的な実施形態により範囲を制限されず、本発明の個々の態様の1つの例示として意図しており、機能的に同等な方法及び成分は、本発明の範囲内にある。実際に、本発明の様々な変形例は、本明細書で示され、記載されているものに加えて、上記の説明及び添付図面から、当業者に明らかになるだろう。このような変形例は、特許請求の範囲内にあることを意図する。
【０１４８】
本発明を記載してきたが、以下の実施例は、例示のために提示するが、限定されない。
【実施例】
【０１４９】
抗がん免疫療法剤に対する応答性を回復する又は増強するNOX4/1阻害剤の効能を、以下の通り試験することができる。
【０１５０】
(実施例1)
がんの治療におけるNOX4/1阻害剤及び抗PD1阻害剤の組合せ
本発明による組合せの効能を試験するために、以下の実験を、以下に記載されるようなマウスの異種移植片腫瘍モデルで行う。
【０１５１】
C38細胞(結腸がん)、CT26細胞(結腸がん)、LLC1細胞(肺癌)、B16F10細胞(黒色腫)、Hepa1-6細胞(肝がん)、又はRenca細胞(腎がん)からなる皮下異種移植片腫瘍を、C57Bl/6又はBalb/cマウス(2〜3月齢)の脇腹に皮下注射する。或いは、C57BL6マウス結腸腺癌細胞由来のMC-38細胞株、又はマウス4T1乳がんモデルを使用する。
【０１５２】
腫瘍が80〜200mm3の平均体積に達したら、組合せ治療を開始する。マウスは、個々の腫瘍体積によって、8〜17匹のマウスの異なる群に無作為化する。各群は、プラセボ、又は、NOX4/1阻害剤単独、又は、PD-1抗体単独、又はPD-1抗体と組み合わせたNOX4/1のいずれかを受ける。
【０１５３】
NOX4/1阻害剤、2-(2-クロロフェニル)-4-[3-(ジメチルアミノ)フェニル]-5-メチル-1H-ピラゾロ[4,3-c]ピリジン-3,6(2H,5H)-ジオン、又は、(R)-3-メトキシ-4-(2-モルホリノ-1-フェニルエトキシ)-N-(5-(ピリジン-4-イル)-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)ベンズアミドを、1.2%メチルセルロース及び0.8%ポリソルベート80(Sigma社)中において毎日(7日/週で)調製し、それぞれ60〜10mg/kg用量で強制飼養チューブを介した経口強制飼養によりそれぞれの群からの動物に投与する。
【０１５４】
PD-1阻害剤として、抗PD-1抗体(参照:BE0146、BioXcell社;クローン:RMP1-14、反応性:マウス;アイソタイプ:ラットIgG2a;保管条件:+4℃)を、マウスの腹腔の中(腹腔内、IP)に注射する。投与体積を、マウスの最新の個々の体重に対して10mL/Kgに調節する。
【０１５５】
腫瘍採取、及びT細胞浸潤を評価する免疫化学法
無作為化の14日後、単独の又は組み合わせたNOX4/1化合物の抗腫瘍活性が十分であるとみなされる場合に、1群当たり5匹のサテライトマウス由来の腫瘍を採取し、秤量し、腫瘍を2つの断片に切断する。1つの断片を、4mm厚さのスライスに切断し、4%の中性緩衝ホルマリン中に24〜48時間固定し、次いで、パラフィン(Histosec(登録商標)、Merck社、ダルムシュタット、ドイツ)に包理する。1つの断片を、組織凍結培地(Microm Microtech社、フランス)中に包理し、液体窒素で冷却されたイソペンタン中で急速凍結し、加工するまで80℃で保存する。CD3、CD4、及びCD8に対する免疫組織化学的染色を、標準的な技術(Biodoxis社、フランス)を使用して、パラフィン包理された組織切片で実施する。フィールド当たりのCD3、CD4、及びCD8免疫陽性細胞の数を計数する。
【０１５６】
腫瘍採取、及びT細胞浸潤を評価するフローサイトメトリー
無作為化の14日後、1群当たり4匹のマウス由来の腫瘍を採取する。
【０１５７】
全ての腫瘍を、RPMI培養培地(参照:BE12-702F、Lonza社、ヴェルヴィエ、ベルギー)中において採取した。腫瘍免疫浸潤細胞を、各採取したサンプルから、フローサイトメトリー分析により定量化する。次いで、各抗体の供給元により記載された手順にしたがって、選んだマーカーに対する抗体を添加する。FoxP3を除いた全ての抗体は、表面標識のためであり、FoxP3は、細胞内標識のためである。マウスサンプルにおけるエフェクターT細胞リンパ球(Teff:CD45、CD3、CD8)及び制御性T細胞リンパ球(Treg:CD45、CD3、CD4、FoxP3)に対するフローサイトメトリー分析で使用する抗体を、以下のTable 1(表1)に列挙する。
【０１５８】
【表１】
2021501216.tif 000015
【０１５９】
染色した細胞を、波長405nm、488nm、及び633nmの3つの励起レーザーを備えた、BD(商標)LSR IIフローサイトメーター(BD Biosciences社)で分析する。10,000個のmCD45+事象を、各サンプルで記録するまでか、又は2分間の最大持続期間のいずれかで、フローサイトメトリーデータを獲得する。
【０１６０】
動物モニタリング
全ての試験データは、動物の体重測定、腫瘍体積、カルテ及び死亡率記録、並びに治療を含むが、スケジュールし、記録する。生存及び行動は毎日記録する。体重は週に2回測定する。腫瘍の長さ及び幅は、週に2回ノギスで測定し、腫瘍の体積は、以下の式により推定する:
【０１６１】
【数１】
2021501216.tif 000016
【０１６２】
ヒトのエンドポイント。実験は、5週間後か、以下の場合に終了する。
・マウスにおいて、正常の体重の10%を超えるか、1,500mm3を超える腫瘍、
・不安定又は栄養を干渉する腫瘍、8mm超の潰瘍性腫瘍、出血の感染、
・組織びらん
・治療開始日/最大体重と比較して、モニタリングする2日間継続する20%の体重減少(モニタリング1日で30%)、
・疼痛、苦痛、又は苦悶の兆候:痛みの姿勢、痛みの表情、行動、
・低下した身体状態、るい痩、悪液質、脱水、
・外部刺激に対する随意反応の長時間の欠如、
・急速な努力性呼吸、貧血、著しい出血、
・神経学的兆候:旋回、痙攣、麻痺、
・体温の持続的な低下、
・腹部膨満。
【０１６３】
効能パラメーター
治療効能を、試験物質の効果の点から、対照動物と比較して、治療動物の腫瘍体積で評価する。抗腫瘍効能の以下の評価基準を決定する。
・個々の及び/又は平均(若しくはメジアン)腫瘍体積をもたらす、
・腫瘍倍化時間(DT)を計算する、
・治療群対対照群のメジアン腫瘍体積の比として定義される腫瘍増殖阻害率(T/C%)を計算する:
【０１６４】
【数２】
2021501216.tif 000017
【０１６５】
最適値は、達成される最大の腫瘍増殖阻害率を反映する、最小のT/C%比である。NCI標準によるT/C%比に対する効果的な基準は、* 42%である。体積V及びVに達する時間を計算する。体積Vを、実験データから演繹され、腫瘍増殖の指数期において選ばれる標的体積として定義する。各腫瘍に対して、標的体積Vに最も近い腫瘍体積は、腫瘍体積測定において選択される。この体積Vの値、及び腫瘍がこの体積に達する時間を記録する。各群に対して、腫瘍体積Vの平均、及びこの体積に達する時間の平均を計算する。マウスの生存率もまた、モニタリングし、効能パラメーターとして使用する。生存率曲線を描写する。
【０１６６】
MC38がん細胞(0.5×105)を使用する場合、これらを、リン酸緩衝生理食塩水(PBS)において、8〜10週齢のC57BL/6メスマウスの脇腹に皮下(s.c)注射する。MC38細胞は、単独で注射されるか、又は、6日間、2ng/mlのTGFβ1での注射の前にex vivoで前処理してCAF表現型を誘発させたC57BL/6結腸線維芽細胞(2.5×105)と混合させるかのいずれかである。
【０１６７】
4T1がん細胞(0.5×105)を使用する場合、これらを、PBSにおいて、8〜10週齢のメスマウスの上部乳房脂肪パッドにs.c注射する。細胞は、単独で注射されるか、又は、トランスジェニックBALBneuTの自然発生的な間質が豊富な乳腫瘍から単離された2.5×105のBALB/Cの乳CAFと混合させるかのいずれかである。
【０１６８】
腫瘍が触知されたら、NOX4阻害剤、2-(2-クロロフェニル)-4-[3-(ジメチルアミノ)フェニル]-5-メチル-1H-ピラゾロ[4,3-c]ピリジン-3,6(2H,5H)-ジオン(GKT137831)を、マウスに投与した。GKT137831を1.2%メチルセルロース(Sigma社)中、0.1%ポリソルベート(Sigma社)と再構築し、40mg/kgで、5回/週で経口強制飼養により投与した。対照マウスは、経口強制飼養によりビヒクルを摂取した。長期的な投与の間、15の初期用量を記載した通りに与えるが、50mg/kgで3週間、3回/週に減らし、次いで、60mg/kgで3週間、2回/週に減らした。抗PD-1抗体(Bioxcell社;RMP1-14)を、頭頂間(i.p)注射を介して与えた。1日おきに腫瘍が触知されたら300μgの抗体又はIgG2aアイソタイプ対照(Bioxcell社)を与え、トータルで3回の用量であった。
【０１６９】
図1に提示されるデータに対して、腫瘍は、最も長い幅及び長さを電子皮膚ノギスで2〜3日おきに測定した。腫瘍体積を、式4/3π×r3を使用して計算したが、半径(r)を腫瘍の幅及び長さの測定値から計算して、平均直径値を示した。マウスを、腫瘍体積に基づいて複数の群に無作為化した結果、治療開始前の群間の平均腫瘍体積の間に統計的な差異は起こらなかった。図1Aは、第15日、即ち治療の8日後、ビヒクル単独と比較して、マウスをNOX4阻害剤で治療した場合、腫瘍が著しく小さかったことを示す。更に、免疫化学法(上述のように実施)により、図1B及び図1Cで提示されるように、それぞれで、NOX4阻害剤での治療が腫瘍内のSMA陽性CAFを著しく低減し、その結果、腫瘍辺縁部から腫瘍の中心部にCD8+T細胞を再配置することが明らかになった。4T1乳がんモデルを使用して、これらの結果により、GKT治療は、低減した筋線維芽細胞(SMA陽性細胞)集団により示される通り、CAFの形成を阻害し、CD8+T細胞は、腫瘍に接近し、がん細胞を殺すことが可能であり、腫瘍サイズを小さくすることが明らかに示される。これは、CD8+T細胞を更に活性化するNOX4阻害剤及び抗がん免疫療法剤の組合せの有益な効果を支持する。
【０１７０】
このような組合せの有益な効果は、CAF豊富な腫瘍における治療応答を著しく改善するPD-1阻害剤(αPD1)とNOX4阻害剤GKT137831の組合せに対して、図2に提示される結果から更に支持される。腫瘍は、αPD1単独と比較して、マウスがαPD1/GKT831組合せで治療される場合、著しく小さかったし(図2A)、αPD1/GKT831組合せの投与に続いて、CD8+T細胞は、腫瘍辺縁部から腫瘍の中心部に著しく再配置し(図2B)、生存転帰はまた、αPD1単独と比較して、著しく増加する(図2C)。MC38結腸がんモデルを使用して、GKT/αPD1組合せ療法の有益な効果は、腫瘍体積が非常に著しく減少することを示すことによって確認された。この減少にはマウスの生存率増加が伴う。更に、この効果は、CD8+T細胞がNOX阻害剤の腫瘍に浸潤することで生じることが示された。これらの結果により、本発明のNOX4阻害剤、特にGKT137831が、全てのCAF豊富ながんのPD1併用療法に対する有力候補であることが強く示唆される。
【０１７１】
(実施例2)
がんの治療におけるNOX4/1阻害剤及びがんワクチンの組合せ
本発明による組合せの効能を試験するために、NOX4/1阻害剤を、抗HPVワクチンのようなワクチンの治療と組み合わせる。
【０１７２】
TC1がん細胞(0.5×105)(前立腺がん)を、リン酸緩衝生理食塩水(PBS)において、8〜10週齢のC57BL/6メスマウスの脇腹に皮下(s.c)注射した。TC1細胞は、単独で注射するか、又は、6日間、2ng/mlのTGFβ1での注射の前にex vivoで前処理してCAF表現型を誘発させたC57BL/6肺線維芽細胞(2.5×105)と混合させるかのいずれかだった。
【０１７３】
腫瘍は、最も長い幅及び長さを電子皮膚ノギスで2〜3日おきに測定した。腫瘍体積測定、マウス無作為化、及び経口強制飼養投与を、上述のように実施した。
【０１７４】
E7 HPV RAHYNIVTF(RAH、E749-57)(Rice等、2002年、J Immunol.、169:3908〜13頁;Rice等、2008年、Nat Rev Cancer、8:108〜20頁)の免疫優性CD8エピトープに縮合する破傷風C断片ドメイン1(Dom)をコードするDNAワクチンでのワクチン接種を、腫瘍が触知されたら、筋肉内注射(i.m)を介して投与した。PBS中の50μgのDNAを含有する注射を1回行い、任意の反復用量を、最初の免疫化後の3週間与えた。実施例1に記載されるように再構築されたNOX4阻害剤(GKT137831)の治療を、腫瘍が触知されたら、マウスに投与した。
【０１７５】
図3は、第24日に、腫瘍が、ワクチン単独と比較して、マウスが組合せワクチン/NOX4阻害剤で治療された場合、著しく小さかったので、NOX4阻害剤での抗腫瘍ワクチン接種の組合せが、CAF豊富な腫瘍における治療応答を著しく改善することを支持し、組合せワクチン/NOX4阻害剤の投与に続いて、CD8+T細胞は、腫瘍辺縁部から腫瘍の中心部に著しく再配置し(図3B)、生存転帰はまた、ワクチン単独と比較して、著しく増加する(図3C)。効果的な免疫療法には、チェックポイント阻害剤、T細胞アゴニスト、ワクチン接種、又は養子T細胞導入に基づいているかにかかわらず、腫瘍にCD8+エフェクターT細胞の存在が必要である。がん関連線維芽細胞は、多くの固体がんで見られ、がんからCD8+T細胞を排除することにより免疫療法を無効にすることから、腫瘍の免疫回避において主要な役割を担う。したがって、本発明のNOX阻害剤、特にGKT831が、4T1モデルにおいてSMA陽性細胞が減少することにより示される通り、CAFを効果的に標的化するので、腫瘍へのCD8+T細胞の浸潤を促進し、ワクチンベース及びPD1ベースの免疫療法に対する応答を回復する。これらのデータにより、本発明のNOX4阻害剤、特にGKT137831の組合せ免疫療法が、この種類の治療に対する反応速度を著しく改善することが示唆される。
【０１７６】
(実施例3)
がんの治療におけるNOX4/1阻害剤及び抗VEGF剤の組合せ
本発明による組合せの効能を試験するために、NOX4/1阻害剤を、抗VEGF剤の治療と組み合わせる。
【０１７７】
腫瘍のMC38異種移植片マウスモデルを、野生型C57/BL6マウス又はNOX1欠損(NOX1-KO)マウスにおいて、PBS(MC38に対して5.105)中に希釈したMC38腫瘍細胞を皮下注射することにより生成した。腫瘍が50mm3に達したら、抗VEGF:DC101又は無関係ラットIgG(対照として)のいずれかの精製抗体を、週に2回、腹腔内投与した。DC101を、1匹のマウス当たり1回の注射で600μgの用量で与えた。ビヒクル(VL)(即ちメチルセルロース及びTween 80)又はNOX1選択的阻害剤、(R)-3-メトキシ-4-(2-モルホリノ-1-フェニルエトキシ)-N-(5-(ピリジン-4-イル)-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)ベンズアミド(GKT2)(10mg/kgで1日2回)を、マウスの殺処分まで経口強制飼養により与えた。腫瘍サイズを、ノギスで測定し、腫瘍体積を式: (長さ*幅*厚さ)にしたがって決定した。腫瘍サイズを、5日おき(D-0〜D-15)にノギスで、in vivoで測定した。殺処分後、腫瘍をPFA(パラホルムアルデヒド)での固定をせずに取り出し、単離し、血管内皮細胞(CD45-/CD31+/GP38-)を、フローサイトメトリーにより分析した。
【０１７８】
図4は、高選択的NOX1阻害剤(GKT2)及び抗VEGF-R2ブロッキング抗体(DC101)の組合せが、血管新生を阻害することを可能とすることを示す。更に、GKT2及びDC101は、血管新生の阻害を高めるように相乗的に作用する。
【０１７９】
図5が示すところでは、NOX1-KOマウスの腫瘍は、WTマウスの腫瘍と比較して、増殖動態の低下を示し、これは、NOX1が明白に関与することを示す。更に、抗VEGFR2抗体(DC101)の治療は、NOX1欠損マウスにおいて腫瘍増殖を低減し、この効果は、WTマウスと比較して更に顕著である。これにより、VEGFR2及びNOX1シグナル伝達の間の作用の異なる機構を明白に示唆される。
【０１８０】
したがって、まとめると、これらのデータは、NOX1阻害剤、及び抗VEGF阻害剤のような抗血管新生剤の組合せが、腫瘍治療に対して相乗効果を達成することを可能とすることを支持する。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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