(57)【要約】  例えば、グルココルチコイド(GC)の細胞への標的特異的送達に有用であるタンパク質ステロイドコンジュゲートが本明細書に記載される。【選択図】図３
2021509908.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(III)の化合物:
【化１】
2021509908.tif 000599
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくは誘導体
(式中:
R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;
両Rxは水素であり;且つ、SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は式(III)中のＬに結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)、-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)、
【化２】
2021509908.tif 000600
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は式(III)中のLに対するものである)、-CH2-NH-(式中、Nは式(III)中のLに結合する)、
【化３】
2021509908.tif 000601
(式中、Nは式(III)中のLに結合する)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(III)中のLに結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(III)中のLに結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(III)中のLに結合する)、又は
【化４】
2021509908.tif 000602
(式中、X4は式(III)中のLに結合する)であるか;或いは
両Rxはフルオロであり;且つ、SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(III)中のLに結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-X1b-(式中、X1bは式(III)中のLに結合する)、
【化５】
2021509908.tif 000603
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は式(III)中のLに対するものである)、-CH2-NH-(式中、Nは式(III)中のLに結合する)、
【化６】
2021509908.tif 000604
(式中、Nは式(III)中のLに結合する)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(III)中のLに結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(III)中のLに結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、-C(O)-N(R5)-(C1-C10-アルキレン)-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(III)中のLに結合する)、又は
【化７】
2021509908.tif 000605
(式中、X4は式(III)中のLに結合する)であり;且つ
X1は-N(C1-6アルキル)-であり;
X1bは、-S-、-NH-、又は-N(C1-6アルキル)-であり;
X2は-NH-であり;
X3は-CH2-であるか、X3は-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-(式中、C(O)はX4に結合する)であるか、或いはX3は-C(O)-であり;
X4は-O-であり;
R5は、H、-OH、-OCH3、又はC1-6アルキルであり;
R50及びR50aは、独立に、水素又はC1-C6-アルキルであり;
Rd、Re、及びRfは、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-CH2C(O)OH又は-CH2C(O)O(アルキル)である)であり;且つ
mは0又は1であり;
zは、両端を含む1〜30から選択される整数であり;
Lはリンカーであり;且つ
BAは結合剤である)。
【請求項２】
式(II)の化合物:
【化８】
2021509908.tif 000606
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくは誘導体
(式中:
R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;
両Rxは水素であり;SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、
【化９】
2021509908.tif 000607
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は式(II)中の(L3)0-1に対するものである)、-CH2-NH-(式中、Nは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、
【化１０】
2021509908.tif 000608
(式中、Nは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(II)中の(L3)0-1に結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(II)中の(L3)0-1に結合する)、又は
【化１１】
2021509908.tif 000609
(式中、X4は式(II)中のL3に結合する)であるか;或いは
両Rxはフルオロであり;SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-X1b-(式中、X1bは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、
【化１２】
2021509908.tif 000610
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は式(II)中の(L3)0-1に対するものである)、
【化１３】
2021509908.tif 000611
-CH2-NH-(式中、Nは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、
【化１４】
2021509908.tif 000612
(式中、Nは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(II)中の(L3)0-1に結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、-C(O)-N(R5)-(C1-C10-アルキレン)-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(II)中の(L3)0-1に結合する)、又は
【化１５】
2021509908.tif 000613
(式中、X4は式(II)中の(L3)0-1に結合する)であり;且つ
X1は-N(C1-6アルキル)-であり;
X1bは、-S-、-NH-、又は-N(C1-6アルキル)-であり;
X2は-NH-であり;
X3は-CH2-であるか、X3は-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-(式中、C(O)はX4に結合する)であるか、或いはX3は-C(O)-であり;
X4は-O-であり;
R5は、H、-OH、-OCH3、又はC1-6アルキルであり;
R50及びR50aは、独立に、水素又はC1-C6-アルキルであり;
Rd、Re、及びRfは、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-CH2C(O)OH又は-CH2C(O)O(アルキル)である)であり;且つ
mは0又は1であり;
RGは反応性基であり;
L2は連結リンカーであり;且つ
L3は、存在する場合、自壊型リンカーである)。
【請求項３】
R4が、直鎖又は分岐鎖のアルキルである、請求項１又は２記載の化合物。
【請求項４】
R4がアリールである、請求項１又は２記載の化合物。
【請求項５】
R4がアリールアルキルである、請求項１又は２記載の化合物。
【請求項６】
R4がN-含有ヘテロシクロアルキルである、請求項１又は２記載の化合物。
【請求項７】
R4がR配置にある、請求項１〜６のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８】
両Rxが水素であり;且つ、SPが、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は、式(III)中のＬ又は式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは、式(III)中のＬ又は式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは、式(III)中のＬ又は式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは、式(III)中のL又は式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは、式(III)中のL又は式(II)中の(L3)0-1に結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は、式(III)中のL又は式(II)中の(L3)0-1に結合する)、又は
【化１６】
2021509908.tif 000614
(式中、X4は、式(III)中のL又は式(II)中の(L3)0-1に結合する)であるか;或いは
両Rxがフルオロであり;且つ、SPが、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(III)中のL又は式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-X1b-(式中、X1bは式(III)中のL又は式(II)中の(L3)0-1に結合する)、
【化１７】
2021509908.tif 000615
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は、式(III)中のL又は式(II)中の(L3)0-1に対するものである)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは、式(III)中のL又は式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは、式(III)中のL又は式(II)中の(L3)0-1に結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、又は-C(O)-N(R5)-(C1-C10-アルキレン)-C(O)NH-X2-(式中、X2は、式(III)中のL又は式(II)中の(L3)0-1に結合する)である、請求項１〜７のいずれか一項記載の化合物。
【請求項９】
SPが-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-である、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１０】
SPが-C(O)-C2-C5-アルキレン-C(O)-である、請求項１〜９のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１１】
SPが-C(O)-CH2CH2-C(O)-である、請求項１〜１０のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１２】
SPが-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-である、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１３】
SPが-C(O)-N(R5)-C1-C5-アルキレン-C(O)NH-NH-である、請求項１〜８及び１２のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１４】
SPが-C(O)-N(R5)-CH2-C(O)NH-NH-である、請求項１〜８、１２、及び１３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１５】
R5が、H又はC1-6アルキルである、請求項１〜８及び１２〜１４のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１６】
R5が、H又は-CH3である、請求項１〜８及び１２〜１５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１７】
SPが
【化１８】
2021509908.tif 000616
である、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１８】
SPが
【化１９】
2021509908.tif 000617
であり、mが1である、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１９】
SPが
【化２０】
2021509908.tif 000618
であり、mが1であり、Rfが、-H又は-OHである、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２０】
SPが
【化２１】
2021509908.tif 000619
であり、mが1であり、Rfが-Hである、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２１】
SPが
【化２２】
2021509908.tif 000620
であり、mが1であり、Rfが-OHである、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２２】
SPが
【化２３】
2021509908.tif 000621
であり、mが0である、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２３】
SPが
【化２４】
2021509908.tif 000622
であり、X3が-CH2-である、請求項１〜８及び１７〜２２のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２４】
SPが
【化２５】
2021509908.tif 000623
であり、X3が-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-である、請求項１〜８及び１７〜２２のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２５】
SPが
【化２６】
2021509908.tif 000624
であり、X3が-C(O)-である、請求項１〜８及び１７〜２２のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２６】
Rd及びReが、独立に、-H又は-OHである、請求項１〜８及び１７〜２５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２７】
Rd及びReが-Hである、請求項１〜８及び１７〜２５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２８】
Rd及びReが-OHである、請求項１〜８及び１７〜２５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２９】
SPが-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-である、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３０】
SPが-(直鎖C1-C3-アルキレン)-NR50C(O)-(直鎖C1-C3-アルキレン)-NR50a-である、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３１】
SPが、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-であり、各C1-C10-アルキレンが、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３２】
SPが-(分岐鎖C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-ヒドロキシ-アルキレン)-NR50aである、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３３】
R50及びR50aが、独立に、水素又はメチルである、請求項１〜８及び２９〜３２のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３４】
R50及びR50aがそれぞれ水素である、請求項１〜８及び２９〜３２のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３５】
R50及びR50aがそれぞれメチルである、請求項１〜８及び２９〜３２のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３６】
両Rxが水素である、請求項１〜３５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３７】
両Rxが水素であり、且つ、SPが、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-又は-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-である、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３８】
両Rxが水素であり、且つ、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-である、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３９】
両Rxが水素であり、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-C2-C5-アルキレン-X1-である、請求項１〜８及び３８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４０】
両Rxが水素であり、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-CH2CH2-X1-である、請求項１〜８、３８、及び３９のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４１】
両Rxが水素であり、SPが-C(O)-N(CH3)-C2-C5-アルキレン-N(CH3)-である、請求項１〜８、３８、及び３９のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４２】
両Rxが水素であり、SPが-C(O)-N(CH3)-CH2CH2-N(CH3)-である、請求項１〜８及び３８〜４１のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４３】
両Rxがフルオロである、請求項１〜３５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４４】
両Rxがフルオロであり、SPが、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-X1b-又は-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-X1b-である、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４５】
SPが、-C(O)-N(H)-(C1-C6-アルキレン)-X1b-又は-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C6-アルキレン)-X1b-である、請求項４４のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４６】
X1bがSである、請求項４４又は４５記載の化合物。
【請求項４７】
X1bが、NH又はN(C1-6アルキル)である、請求項４４又は４５記載の化合物。
【請求項４８】
X1bが、NH又はN(CH3)である、請求項４４又は４５記載の化合物。
【請求項４９】
両Rxがフルオロであり、SPが
【化２７】
2021509908.tif 000625
である、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５０】
SPが-CH2-NH-である、請求項１〜７のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５１】
SPが
【化２８】
2021509908.tif 000626
である、請求項１〜７のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５２】
両Rxが水素であるか、或いは両Rxがフルオロであり、且つ、SPが
【化２９】
2021509908.tif 000627
であるか;
或いは両Rxがフルオロであり、且つ、SPが
【化３０】
2021509908.tif 000628
であり;式中、上記構造の左側の結合点がL又は(L3)0-1に結合する、請求項１〜７のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５３】
zが、両端を含む1〜10から選択される、請求項１及び３〜５２のいずれか一項記載の式(III)の化合物。
【請求項５４】
zが、両端を含む2〜4から選択される、請求項１及び３〜５３のいずれか一項記載の式(III)の化合物。
【請求項５５】
zが4である、請求項１及び３〜５４のいずれか一項記載の式(III)の化合物。
【請求項５６】
zが2である、請求項１及び３〜５４のいずれか一項記載の式(III)の化合物。
【請求項５７】
BAが、抗体又は抗体断片を含む、請求項１及び３〜５６のいずれか一項記載の式(III)の化合物。
【請求項５８】
BAが、以下の構造
【化３１】
2021509908.tif 000629
を含む抗体であり、ここで、Abが、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片、又は二重特異性抗体であり;RがC2-4-アルキレンであり、nが両端を含む1〜10から選択される整数であり、且つzが両端を含む1〜10から選択される整数である、請求項１及び３〜５７のいずれか一項記載の式(III)の化合物。
【請求項５９】
BAが、以下の構造
【化３２】
2021509908.tif 000630
を有する抗体であり、ここで、Abが、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片、又は二重特異性抗体であり;RがC2-4-アルキレンであり;且つnが両端を含む2〜4から選択される整数である、請求項１及び３〜５９のいずれか一項記載の式(III)記載の化合物。
【請求項６０】
BAがMSR1を含む、請求項１及び３〜５９のいずれか一項記載の式(III)の化合物。
【請求項６１】
Lが-L1-L2-(L3)0-1-であり、L1がBAに結合し、L3がSPに結合し;且つ、L1が反応性基残基であり;L2が連結リンカーであり;且つL3が、存在する場合、自壊型リンカーである、請求項１及び３〜６０のいずれか一項記載の式(III)の化合物。
【請求項６２】
Lが-L1-L2-L3-である、請求項１及び３〜６１のいずれか一項記載の式(III)の化合物。
【請求項６３】
L1が、
【化３３】
2021509908.tif 000631
又はその位置異性体若しくは異性体の混合物;
【化３４】
2021509908.tif 000632
又はそのステロ異性体若しくは立体異性体の混合物(式中、Sは、前記反応性基残基がBAに結合するシステイン残基上のS原子を指す);及び
【化３５】
2021509908.tif 000633
(式中、Nは、前記反応性基残基がBAに結合するリジン残基上のN原子を指す)から選択される、請求項６１又は６２記載の式(III)の化合物。
【請求項６４】
RGが
【化３６】
2021509908.tif 000634
から選択される、請求項２〜５２のいずれか一項記載の式(II)の化合物。
【請求項６５】
RGが
【化３７】
2021509908.tif 000635
である、請求項２〜５２のいずれか一項記載の式(II)の化合物。
【請求項６６】
RGが
【化３８】
2021509908.tif 000636
である、請求項２〜５２のいずれか一項記載の式(II)の化合物。
【請求項６７】
RGが
【化３９】
2021509908.tif 000637
である、請求項２〜５２のいずれか一項記載の式(II)の化合物。
【請求項６８】
式(III)の化合物に関して、Lが-L1-L2-L3)0-1-であり;且つ、
SPが-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-である場合、式(II)又は(III)の化合物中のL3が
【化４０】
2021509908.tif 000638
(式中、NH基はL2に結合する)であるか;或いは
SPが、-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-、-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは、-NH-又は-N(C1-6アルキル)-である)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-X1b-(式中、X1bは、-NH-又は-N(C1-6アルキル)-である)、
【化４１】
2021509908.tif 000639
-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている):又は-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-である場合、式(II)又は(III)の化合物中のL3が
【化４２】
2021509908.tif 000640
(式中、NH基はL2に結合する)であるか;或いは
式(II)又は(III)の化合物中のL3が存在しない、請求項１〜６７のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６９】
式(III)の化合物に関して、Lが-L1-L2-L3)0-1-であり;式(II)又は(III)の化合物中のL2が、PEG、ジ-ペプチド残基、トリペプチド、テトラペプチド、ペンタペプチド、-C(O)CH2CH2C(O)-、CD、若しくは-CH2CH2CH2CH2CH2C(O)-、又はこれらの任意の組合せを含む、請求項１〜６８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７０】
式(III)の化合物に関して、Lが-L1-L2-L3)0-1-であり;式(II)又は(III)の化合物中のL2が
【化４３】
2021509908.tif 000641
若しくはシクロデキストリン残基(CD);又はこれらの任意の組合せを含む、請求項１〜６８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７１】
式(III)の化合物に関して、Lが-L1-L2-L3)0-1-であり;式(II)又は(III)の化合物中のL2が、
【化４４】
2021509908.tif 000642
若しくはCD、又はこれらの任意の組合せを含む、請求項１〜６８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７２】
CDが、下記からなる群から選択される、請求項６９〜７１のいずれか一項記載の化合物
【表１】
2021509908.tif 000643
2021509908.tif 000644
。
【請求項７３】
式(III)の化合物に関して、Lが-L1-L2-L3)0-1-であり;式(II)又は(III)の化合物中のL2-(L3)0-1-が
【表２】
2021509908.tif 000645
2021509908.tif 000646
2021509908.tif 000647
2021509908.tif 000648
を含む、請求項１〜６７のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７４】
前記化合物が:
【表３】
2021509908.tif 000649
2021509908.tif 000650
2021509908.tif 000651
2021509908.tif 000652
2021509908.tif 000653
(式中、BAは、以下の構造
【化４５】
2021509908.tif 000654
を有する抗体であり、式中、Abは、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片、又は二重特異性抗体であり;RはC2-4-アルキレンであり;nは、両端を含む2〜4から選択される整数である)である、請求項１記載の化合物。
【請求項７５】
AbがMSR1である、請求項７４記載の化合物。
【請求項７６】
下記から選択される化合物:
【表４】
2021509908.tif 000655
2021509908.tif 000656
2021509908.tif 000657
2021509908.tif 000658
2021509908.tif 000659
2021509908.tif 000660
2021509908.tif 000661
。
【請求項７７】
式(I)による化合物:
【化４６】
2021509908.tif 000662
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくは誘導体
(式中:
R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;
a)両Rxは水素であり;且つ
R3は、-C(O)RZ;-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b;-CH2NH2;又は
【化４７】
2021509908.tif 000663
であり;
RZは、-C4-10-アルキレン-C(O)OH;-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b(式中、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている);
【化４８】
2021509908.tif 000664
又はNR15R15aであり;
R15は、H又はC1-C6アルキルであり、R15aは、-(C1-C10-アルキレン)-SH又は-(C1-6-アルキレン)-C(O)NHNH2であり;
b)両Rxはフルオロであり;且つ
R3は、-C(O)RZ;-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b;-CH2NH2;又は
【化４９】
2021509908.tif 000665
であり;
RZは、-C4-10-アルキレン-C(O)OH;-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b(式中、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている);
【化５０】
2021509908.tif 000666
又はNR16R16aであり;
R16は、H又はC1-C6アルキルであり、R16aは、-(C1-C10-アルキレン)-SH、-(C1-C10-アルキレン)-NH2、-(C1-C10-アルキレン)-NH(C1-6アルキル)、
【化５１】
2021509908.tif 000667
又は-(C1-6-アルキレン)-C(O)NHNH2であり;且つ
各R50、R50a、及びR50bは、独立に、水素又はC1-C6-アルキルであり;
Rc、Rd、Re、及びRfのうち1つは-CH2ORgであり、その他は、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-(C1-6-アルキレン)-C(O)OH又は-(C1-6-アルキレン)-C(O)O(アルキル)である)であるか;或いは、Rc、Rd、Re、及びRfのうち1つはヒドロキシアルキルであり、その他は-Hであり;且つ
mは0又は1である)。
【請求項７８】
R4がアルキルである、請求項７７記載の化合物。
【請求項７９】
R4がR配置にある、請求項７７又は７８記載の化合物。
【請求項８０】
a)両Rxが水素であり;且つ
R3が、-C(O)RZ;-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b;又は
【化５２】
2021509908.tif 000668
であり;
RZが、-C4-10-アルキレン-C(O)OH;-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b(式中、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている);又はNR15R15aであり;
R15が、H又はC1-C6アルキルであり、R15aが、-(C1-C10-アルキレン)-SH又は-(C1-6-アルキレン)-C(O)NHNH2であり;
b)両Rxがフルオロであり;且つ
R3が、-C(O)RZ;-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b;又は
【化５３】
2021509908.tif 000669
であり;
RZが、-C4-10-アルキレン-C(O)OH;-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b(式中、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている);又はNR16R16aであり;
R16が、H又はC1-C6アルキルであり、R16aが、-(C1-C10-アルキレン)-SH、-(C1-C10-アルキレン)-NH2、-(C1-C10-アルキレン)-NH(C1-6アルキル)、
【化５４】
2021509908.tif 000670
又は-(C1-6-アルキレン)-C(O)NHNH2であり;且つ、請求項７７〜７９のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８１】
R3が、-C(O)RZであり、RZが
【化５５】
2021509908.tif 000671
又は-CH2NH2である、請求項７７〜７９のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８２】
R3が-C(O)RZである、請求項７７〜８０のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８３】
RZが-C4-10-アルキレン-C(O)OHである、請求項８２記載の化合物。
【請求項８４】
RZが-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b(式中、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)である、請求項８２記載の化合物。
【請求項８５】
R3が
【化５６】
2021509908.tif 000672
(式中、mは1である)である、請求項７７〜８０のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８６】
R3が
【化５７】
2021509908.tif 000673
であり、mが1であり、Rc、Rd、Re、及びRfのうち1つが-CH2ORgであり、その他が、独立に、-H、-OH、又はヒドロキシアルキルである、請求項７７〜８０のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８７】
R3が
【化５８】
2021509908.tif 000674
であり、mが1であり、Rc、Rd、Re、及びRfのうち1つがヒドロキシアルキルであり、その他が-Hである、請求項７７〜８０のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８８】
R3が-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50bである、請求項７７〜８０のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８９】
両Rxが水素である、請求項７７〜８８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項９０】
両Rxがフルオロである、請求項７７〜８８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項９１】
両Rxが水素であり、R3が-C(O)RZであり、RZがNR15R15aである、請求項７７〜８０のいずれか一項記載の化合物。
【請求項９２】
R15がHである、請求項９１記載の化合物。
【請求項９３】
両Rxがフルオロであり、R3が-C(O)RZであり、RZがNR16R16aである、請求項７７〜８０記載の化合物。
【請求項９４】
R16がHである、請求項９３記載の化合物。
【請求項９５】
下記から選択される化合物:
【表５】
2021509908.tif 000675
2021509908.tif 000676
2021509908.tif 000677
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、若しくは立体異性体。
【請求項９６】
下記から選択される化合物
【表６】
2021509908.tif 000678
(式中、Abは、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片、又は二重特異性抗体である);又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、若しくは立体異性体。
【請求項９７】
以下の式の1つによる化合物:
【表７】
2021509908.tif 000679
2021509908.tif 000680
2021509908.tif 000681
2021509908.tif 000682
2021509908.tif 000683
2021509908.tif 000684
2021509908.tif 000685
(式中、BAは、以下の構造
【化５９】
2021509908.tif 000686
を有する抗体であり、Abは、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片、又は二重特異性抗体であり;RはC2-4-アルキレンであり;且つnは、両端を含む2〜4から選択される整数である)。
【請求項９８】
AbがMSR1である、請求項９４又は９５記載の化合物。
【請求項９９】
グルココルチコイド受容体シグナリングと関連する疾患、障害、又は病態を治療する方法であって、前記疾患、障害、又は病態を有する患者に、治療上有効な量の請求項１、６３、及び６８〜７５のいずれか一項記載の式(III)の化合物、又は請求項９６〜９８のいずれか一項記載の化合物を投与することを含む、前記方法。
【請求項１００】
前記疾患、障害、又は病態が、炎症性の疾患、障害、又は病態である、請求項９９記載の方法。
【請求項１０１】
前記化合物のコンジュゲートされていないステロイドペイロードの投与と関連する副作用が減少する、請求項９９又は１００記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
(関連出願の相互参照)
本願は、2018年1月8日に出願された「ステロイド及びその抗体コンジュゲート(Steroids and Antibody Conjugates Thereof)」という名称の米国仮特許出願第62/614,905号の優先権及び利益を主張する。この仮特許出願の内容は、全目的のために全体として引用により本明細書に組みこまれる。
【０００２】
(配列表)
本願は、EFS-WebによりASCIIフォーマットで提出された配列表を含み、それは引用により全体として本明細書に組みこまれる。前記ASCIIコピーは、2019年1月3日に作成され、114581_00228_ST25.txtという名前であり、サイズは11,186バイトである。
【０００３】
(分野)
ステロイド、そのタンパク質(例えば抗体)コンジュゲート、並びに該ステロイド及びコンジュゲートを投与することによる疾患、障害、及び病態を治療する方法が本明細書に提供される。
【背景技術】
【０００４】
(背景)
抗体-薬物コンジュゲート(ADC)は、生物活性のある低分子薬に共有結合しており、そのため抗体の標的特異性と低分子薬の作用機序及び効力が組み合わさった抗体である。ADCの治療的有用性は、癌治療で確認されており、試験の現在進行中の主な焦点である。ADCETRIS(登録商標)(ベントルキシマブ(bentruximab)ベドチン)及びKADCYLA(登録商標)(アド-トラスツズマブエムタンシン)は、特定の癌の種類の治療に認可されたADCであり、数種の他のADCも現在臨床開発されている。
【０００５】
グルココルチコイド(GC)はグルココルチコイド受容体(GR)に結合する低分子ステロイドであり、抗炎症及び免疫抑制療法に利用されている。しかし、多くの細胞型におけるグルココルチコイド受容体の遍在的発現のため、グルココルチコイド治療は、ほとんどの器官系への毒性により損なわれている。そのため、グルココルチコイド投与から生じる副作用、特に非標的細胞におけるグルココルチコイド受容体の活性化から生じる副作用を最小限にする、新規なグルココルチコイド並びに新規な療法の両方が必要とされている。本開示は、本開示が関連する分野における上述の必要性並びに他の満たされていない必要性に対する解決策を提供する。グルココルチコイドペイロードを含む抗体-薬物コンジュゲートも本開示に含まれる。
【発明の概要】
【０００６】
(概要)
種々の疾患、障害、又は病態の治療に有用な化合物及び方法が本明細書に提供される。
【０００７】
第1の態様は、式(III)の化合物:
【化１】
2021509908.tif 000003
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくは誘導体を対象とする
(式中:
R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;
両Rxは水素であり;且つ、SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は式(III)中のＬに結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)、-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)、
【化２】
2021509908.tif 000004
(右側にある(すなわちNの)結合点は式(III)中のLに対するものである)、-CH2-NH-(式中、Nは式(III)中のLに結合する)、
【化３】
2021509908.tif 000005
(式中、Nは式(III)中のLに結合し、Arは、任意に置換されたアリーレン又は任意に置換されたヘテロアリーレンである)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(III)中のLに結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(III)中のLに結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(III)中のLに結合する)、又は
【化４】
2021509908.tif 000006
(式中、X4は式(III)中のLに結合する)であるか;或いは
両Rxはフルオロであり;且つ、SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(III)中のLに結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-X1b-(式中、X1bは式(III)中のLに結合する)、
【化５】
2021509908.tif 000007
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は式(III)中のLに対するものである)、-CH2-NH-(式中、Nは式(III)中のLに結合する)、
【化６】
2021509908.tif 000008
(式中、Nは式(III)中のLに結合し、Arは、任意に置換されたアリーレン又は任意に置換されたヘテロアリーレンである)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(III)中のLに結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(III)中のLに結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、-C(O)-N(R5)-(C1-C10-アルキレン)-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(III)中のLに結合する)、又は
【化７】
2021509908.tif 000009
(式中、X4は式(III)中のLに結合する)であり;且つ
X1は-N(C1-6アルキル)-であり;
X1bは、-S-、-NH-、又は-N(C1-6アルキル)-であり;
X2は-NH-であり;
X3は-CH2-であるか、X3は-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-(式中、C(O)はX4に結合する)であるか、或いはX3は-C(O)-であり;
X4は-O-であり;
R5は、H、-OH、-OCH3、又はC1-6アルキルであり;
R50及びR50aは、独立に、水素又はC1-C6-アルキルであり;Rd、Re、及びRfは、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-CH2C(O)OH又は-CH2C(O)O(アルキル)である)であり;且つ
mは0又は1であり;
zは、両端を含む1〜30から選択される整数であり;
Lはリンカーであり;且つ
BAは結合剤である)。
【０００８】
第2の態様は、式(I)による化合物:
【化８】
2021509908.tif 000010
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくは誘導体を対象とする
(式中:
R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;
a)両Rxは水素であり;且つ
R3は、-C(O)RZ;-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b;-CH2NH2;又は
【化９】
2021509908.tif 000011
であり;
RZは、-C4-10-アルキレン-C(O)OH;-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b(式中、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている);
【化１０】
2021509908.tif 000012
(式中、Arは、任意に置換されたアリール又はヘテロアリールである);又はNR15R15aであり;
R15は、H又はC1-C6アルキルであり、R15aは、-(C1-C10-アルキレン)-SH又は-(C1-6-アルキレン)-C(O)NHNH2であり;
b)両Rxはフルオロであり;且つ
R3は、-C(O)RZ;-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b;-CH2NH2;又は
【化１１】
2021509908.tif 000013
であり;
RZは、-C4-10-アルキレン-C(O)OH;-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b(式中、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている);
【化１２】
2021509908.tif 000014
(式中、Arは、任意に置換されたアリール又はヘテロアリールである);又はNR16R16aであり;
R16は、H又はC1-C6アルキルであり、R16aは、-(C1-C10-アルキレン)-SH、-(C1-C10-アルキレン)-NH2、-(C1-C10-アルキレン)-NH(C1-6アルキル)、
【化１３】
2021509908.tif 000015
又は-(C1-6-アルキレン)-C(O)NHNH2であり;且つ
各R50、R50a、及びR50bは、独立に、水素又はC1-C6-アルキルであり;
Rc、Rd、Re、及びRfのうち1つは-CH2ORgであり、その他は、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-(C1-6-アルキレン)-C(O)OH又は-(C1-6-アルキレン)-C(O)O(アルキル)である)であるか;或いは、Rc、Rd、Re、及びRfのうち1つはヒドロキシアルキルであり、その他は-Hであり;且つ
mは0又は1である)。
【０００９】
第3の態様は、式(II)の化合物:
【化１４】
2021509908.tif 000016
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくは誘導体を対象とする
(式中:
R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;
両Rxは水素であり;SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、
【化１５】
2021509908.tif 000017
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は式(II)中の(L3)0-1に対するものである)、-CH2-NH-(式中、Nは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、
【化１６】
2021509908.tif 000018
(式中、Nは式(II)中の(L3)0-1に結合し、Arは、任意に置換されたアリーレン又は任意に置換されたヘテロアリーレンである)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(II)中の(L3)0-1に結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(II)中の(L3)0-1に結合する)、又は
【化１７】
2021509908.tif 000019
(式中、X4は式(II)中のL3に結合する)であるか;或いは
両Rxはフルオロであり;SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-X1b-(式中、X1bは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、
【化１８】
2021509908.tif 000020
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は式(II)中の(L3)0-1に対するものである)、-CH2-NH-(式中、Nは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、
【化１９】
2021509908.tif 000021
(式中、Nは式(II)中の(L3)0-1に結合し、Arは、任意に置換されたアリーレン又は任意に置換されたヘテロアリーレンである)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(II)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(II)中の(L3)0-1に結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、-C(O)-N(R5)-(C1-C10-アルキレン)-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(II)中の(L3)0-1に結合する)、又は
【化２０】
2021509908.tif 000022
(式中、X4は式(II)中の(L3)0-1に結合する)であり;且つ
X1は-N(C1-6アルキル)-であり;
X1bは、-S-、-NH-、又は-N(C1-6アルキル)-であり;
X2は-NH-であり;
X3は-CH2-であるか、X3は-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-(式中、C(O)はX4に結合する)であるか、或いはX3は-C(O)-であり;
X4は-O-であり;
R5は、H、-OH、-OCH3、又はC1-6アルキルであり;
R50及びR50aは、独立に、水素又はC1-C6-アルキルであり;
Rd、Re、及びRfは、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-CH2C(O)OH又は-CH2C(O)O(アルキル)である)であり;且つ
mは0又は1であり;
RGは反応性基であり;
L2は連結リンカー(connecting linker)であり;且つ
L3は、存在する場合、自壊型リンカー(self-immolative linker)である)。
【００１０】
別の態様は、式(I)、式I-P、式I-P-1、式(III-P)、式III-P-1、式(3000)、又は式(III)の化合物、並びに医薬として許容し得る担体、希釈剤、及び/又は賦形剤を含む医薬組成物を対象とする。
別の態様は、種々の疾患、障害、又は病態の治療に有用な方法であって、式I、式I-P、式I-P-1、式(III-P)、式III-P-1、式(3000)、若しくは式(III)の化合物を投与すること又は式I、式I-P、式I-P-1、式(III-P)、式III-P-1、式(3000)、若しくは式(III)の化合物、並びに医薬として許容し得る担体、希釈剤、及び/又は賦形剤を含む医薬組成物を投与することを含む方法を対象とする。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
(図面の簡単な説明)
【図１】図1A、1B、及び1C、は、実施例7で試験されたステロイド-ADCのGR活性化を示す。
【図２】図2は、実施例7で試験されたステロイド-ADCのGR活性化を示す。
【図３】図3は、スキーム1.スペーサー-ブデソニド1c〜1e、1g〜1i、及び1j〜1lの合成を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
(詳細な説明)
(A.  定義)
本明細書で使用される通り、「アルキル」は、一価の飽和炭化水素基部分を指す。特記されない限り、アルキルは非置換であり、直鎖でも、分岐鎖でも、環式、すなわちシクロアルキルでもよい。アルキルとしては、1〜20個の炭素原子を有するもの、すなわちC1-20アルキル;1〜12個の炭素原子を有するもの、すなわちC1-12アルキル;1〜8個の炭素原子を有するもの、すなわちC1-8アルキル;1〜6個の炭素原子を有するもの、すなわちC1-6アルキル;及び1〜3個の炭素原子を有するもの、すなわちC1-3アルキルがあるが、これらに限定されない。シクロアルキルは、アルキルのサブセットであり、3〜20個の炭素原子を有する基、すなわちC3-20アルキル;3〜12個の炭素原子を有する基、すなわちC3-12アルキル;3〜10個の炭素原子を有する基、すなわちC3-10アルキル;3〜8個の炭素原子を有する基、すなわちC3-8アルキル;及び3〜6個の炭素原子を有する基、すなわちC3-6アルキルがあるが、これらに限定されない。アルキル部分の例としては、メチル、エチル、n-プロピル、i-プロピル、n-ブチル、s-ブチル、t-ブチル、i-ブチル、ペンチル部分、ヘキシル部分、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、及びシクロヘキシルがあるが、これらに限定されない。
【００１３】
「アルキレン」は、本明細書に定義される二価アルキルである。
【００１４】
本明細書で使用される「アミノアルキル」は、1又は2つの-NH2基により置換されたアルキル基を意味する。
【００１５】
本明細書で使用される通り、「アルケニル」は、少なくとも2つの炭素原子及び1つ以上の非芳香族炭素-炭素二重結合を含む一価炭化水素基部分を指す。アルケニルは、特記されない限り非置換であり、直鎖でも、分岐鎖でも、環式でもあり得る。アルケニルとしては、2〜20個の炭素原子を有するもの、すなわちC2-20アルケニル;2〜12個の炭素原子を有するもの、すなわちC2-12アルケニル;2〜8個の炭素原子を有するもの、すなわちC2-8アルケニル;2〜6個の炭素原子を有するもの、すなわちC2-6アルケニル;及び2〜4個の炭素原子を有するもの、すなわちC2-4アルケニルがあるが、これらに限定されない。シクロアルケニルは、アルケニルのサブセットであり、3〜20個の炭素原子を有する基、すなわちC3-20アルケニル;3〜12個の炭素原子を有する基、すなわちC3-12アルケニル;3〜10個の炭素原子を有する基、すなわちC3-10アルケニル;3〜8個の炭素原子を有する基、すなわちC3-8アルケニル;及び3〜6個の炭素原子を有する基、すなわちC3-6アルケニルがあるが、これらに限定されない。アルケニル部分の例としては、ビニル、プロペニル、ブテニル、及びシクロヘキセニルがあるが、これらに限定されない。
【００１６】
「アルケニレン」は、本明細書に定義される二価アルケニルである。
【００１７】
本明細書で使用される通り、「アルキニル」は、少なくとも2つの炭素原子及び1つ以上の炭素-炭素三重結合を含む一価炭化水素基部分を指す。アルキニルは、特記されない限り非置換であり、直鎖でも、分岐鎖でも、環式でもあり得る。アルキニルとしては、2〜20個の炭素原子を有するもの、すなわちC2-20アルキニル;2〜12個の炭素原子を有するもの、すなわちC2-12アルキニル;2〜8個の炭素原子を有するもの、すなわちC2-8アルキニル;2〜6個の炭素原子を有するもの、すなわちC2-6アルキニル;及び2〜4個の炭素原子を有するもの、すなわちC2-4アルキニルがあるが、これらに限定されない。シクロアルキニルは、アルキニルのサブセットであり、3〜20個の炭素原子を有する基、すなわちC3-20アルキニル;3〜12個の炭素原子を有する基、すなわちC3-12アルキニル;3〜10個の炭素原子を有する基、すなわちC3-10アルキニル;3〜8個の炭素原子を有する基、すなわちC3-8アルキニル;及び3〜6個の炭素原子を有する基、すなわちC3-6アルキニルがあるが、これらに限定されない。アルキニル部分の例としては、エチニル、プロピニル、及びブチニルがあるが、これらに限定されない。
【００１８】
「アルキニレン」は、本明細書に定義される二価アルキニルである。
【００１９】
本明細書で使用される通り、「アルコキシ」は、一価の飽和炭化水素基部分であって、該炭化水素が酸素原子への単結合を有し、酸素原子上に位置する、例えばエトキシではCH3CH2-Oである、一価の飽和炭化水素基部分である。アルコキシ置換基は、アルコキシ置換基のこの酸素原子を介して、それが置換する化合物に結合する。アルコキシは、特記されない限り非置換であり、直鎖でも、分岐鎖でも、環式、すなわちシクロアルコキシでもあり得る。アルコキシとしては、1〜20個の炭素原子を有するもの、すなわちC1-20アルコキシ;1〜12個の炭素原子を有するもの、すなわちC1-12アルコキシ;1〜8個の炭素原子を有するもの、すなわちC1-8アルコキシ;1〜6個の炭素原子を有するもの、すなわちC1-6アルコキシ;及び1〜3個の炭素原子を有するもの、すなわちC1-3アルコキシがあるが、これらに限定されない。シクロアルコキシは、アルコキシのサブセットであり、3〜20個の炭素原子を有する基、すなわちC3-20アルコキシ;3〜12個の炭素原子を有する基、すなわちC3-12アルコキシ;3〜10個の炭素原子を有する基、すなわちC3-10アルコキシ;3〜8個の炭素原子を有する基、すなわちC3-8アルコキシ;及び3〜6個の炭素原子を有する基、すなわちC3-6アルコキシがあるが、これらに限定されない。アルコキシ部分の例としては、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、i-プロポキシ、n-ブトキシ、s-ブトキシ、t-ブトキシ、i-ブトキシ、ペンチルオキシ部分、ヘキシルオキシ部分、シクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシ、及びシクロヘキシルオキシがあるが、これらに限定されない。
【００２０】
本明細書で使用される通り、「アリール」は、環原子が炭素原子である少なくとも1つの芳香環を含む単環式又は多環式環系のラジカルである一価部分を指す。アリールは任意に置換されている(substittued)。アリールが単環式である場合、アリールはフェニルである。アリールが、多環式、例えば二環式又は三環式である場合、該環の少なくとも1つは芳香族であり、他の環は芳香族でも部分不飽和でもあり得る。アリール部分の例としては、6〜20個の環炭素原子を有するもの、すなわちC6-20アリール;6〜15個の環炭素原子を有するもの、すなわちC6-15アリール、及び6〜10個の環炭素原子を有するもの、すなわちC6-10アリールがあるが、これらに限定されない。アリール部分の例としては、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、フルオレニル、アズレニル、アンスリル、フェナントリル、及びピレニルがあり、これらに限定される。
【００２１】
本明細書で使用される通り、「アリーレン」は、本明細書に定義される二価アリール基を指す。いくつかの実施態様において、アリーレンは、分子の残りへの結合点を与えない炭素の1つの上で任意に置換されている。いくつかの実施態様において、アリーレンは任意に置換されていない。いくつかの実施態様において、アリーレンはフェニレンである。いくつかの実施態様において、アリーレンは、任意に置換された
【化２１】
2021509908.tif 000023
である。いくつかの実施態様において、アリーレンは、任意に置換されていない
【化２２】
2021509908.tif 000024
である。いくつかの実施態様において、
【化２３】
2021509908.tif 000025
中のフェニレンは任意に置換されている。いくつかの実施態様において、
【化２４】
2021509908.tif 000026
中のフェニレンは任意に置換されていない。
【００２２】
本明細書で使用される通り、「アリールアルキル」は、アルキル化合物がアリール置換基により置換されたアルキル化合物のラジカルである一価部分を指し、すなわち、芳香族化合物は、アルキル基への単結合を含み、該ラジカルはアルキル基上に位置している。アリールアルキル基は、示される化学構造にアルキル基を介して結合する。いくつかの実施態様において、アリールアルキルとしては、ベンジル、フェニルエタ-1-イル、及びフェニルエタ-2-イルなどがある。特記されない場合、アリールアルキルは非置換である。しかし、置換される場合、アリールアルキル、すなわちアリール基及び/又はアルキル基は、本明細書に開示の通り置換される。アリールアルキルの例としては、ベンジルがあるが、これに限定されない。
【００２３】
本明細書で使用される通り、「ハロアルキル」は、ハロゲンから選択される少なくとも1つの置換基、例えば、F、Cl、Br、又はIを含む、本明細書に定義されるアルキルを指す。いくつかの実施態様において、アルキルは、独立に選択される、1、2、3、又は4つのハロ原子により置換されている。
【００２４】
本明細書で使用される通り、「ハロアルコキシ」は、ハロゲンから選択される少なくとも1つの置換基、例えば、F、Cl、Br、又はIを含む、上記で定義されたアルコキシを指す。
【００２５】
本明細書で使用される通り、「ヘテロアルキル」は、1つ以上の炭素原子がヘテロ原子に置き換えられたアルキルを指す。本明細書で使用される通り、「ヘテロアルケニル」は、1つ以上の炭素原子がヘテロ原子に置き換えられたアルケニルを指す。本明細書で使用される通り、「ヘテロアルキニル」は、1つ以上の炭素原子がヘテロ原子に置き換えられたアルキニルを指す。好適なヘテロ原子としては、窒素、酸素、及び硫黄原子があるが、これらに限定されず、それらは独立に選択される。ヘテロアルキルは、特記されない限り非置換である。ヘテロアルキル部分の例としては、アミノアルキル、スルホニルアルキル、スルフィニルアルキルがあるが、これらに限定されない。ヘテロアルキル部分の例としては、メチルアミノ、メチルスルホニル、及びメチルスルフィニルもあるが、これらに限定されない。
【００２６】
本明細書で使用される通り、「ヘテロアリール」は、環原子が、炭素原子及び少なくとも1つの酸素、硫黄、窒素、又はリン原子を含む芳香族化合物のラジカルである一価部分を指す。ヘテロアリールには、単環式、縮合二環式、又は縮合三環式ラジカルがあり、単環式ラジカルを含む環は芳香族であり、二環式又は三環式ラジカルを含む縮合環の少なくとも1つは芳香族である。縮合二環式ラジカルとしては架橋環系がある。ヘテロアリール部分の例としては、5〜20個の環原子;5〜15個の環原子;及び5〜10個の環原子を有するものがあるが、これらに限定されない。ヘテロアリールは任意に置換されている。いくつかの実施態様において、ヘテロアリール環は、1、2、3、又は4つの(いくつかの実施態様において、1、2、又は3つの;いくつかの実施態様において1又は2つの;いくつかの実施態様において1つの)酸素、硫黄、窒素、及び/又はリン原子を含み、それらは独立に選択される。いくつかの実施態様において、ヘテロアリールは、1,2,4-トリアゾリル、1,3,5-トリアゾリル、フタルイミジル、ピリジニル、ピロリル、イミダゾリル、チエニル、フラニル、インドリル、2,3-ジヒドロ-1H-インドリル(例えば、2,3-ジヒドロ-1H-インドール-2-イル又は2,3-ジヒドロ-1H-インドール-5-イルなどを含む)、イソインドリル、インドリニル、イソインドリニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾジオキソール-4-イル、ベンゾフラニル、シンノリニル、インドリジニル、ナフチリジン-3-イル、フタラジン-3-イル、フタラジン-4-イル、プテリジニル、プリニル、キナゾリニル、キノキサリニル、テトラゾイル(tetrazoyl)、ピラゾリル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、ベンゾオキサゾリル、キノリニル、イソキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル(例えば、テトラヒドロイソキノリン-4-イル又はテトラヒドロイソキノリン-6-イルなどを含む)、ピロロ[3,2-c]ピリジニル(例えば、ピロロ[3,2-c]ピリジン-2-イル又はピロロ[3,2-c]ピリジン-7-イルなどを含む)、ベンゾピラニル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニルである。
【００２７】
本明細書で使用される通り、「ヘテロアリーレン」は、本明細書に定義される二価ヘテロアリールを指す。いくつかの実施態様において、ヘテロアリーレンは、分子の残りへの結合点を与えない炭素又は置換可能な窒素の1つの上で任意に置換されている。いくつかの実施態様において、ヘテロアリーレンは任意に置換されていない。いくつかの実施態様において、ヘテロアリーレンはピリジン-ジイルである。
【００２８】
本明細書で使用される通り、「ヘテロシクロアルキル」は、1つ以上の炭素原子が独立に選択されるヘテロ原子に置き換えられている、「アルキル」で先に定義されたシクロアルキルを指す。好適なヘテロ原子としては、窒素、酸素、及び硫黄原子があるが、これらに限定されない。特記されない限り、ヘテロシクロアルキルは非置換である。ヘテロシクロアルキル部分の例としては、モルホリニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、ジオキソラニル、ジチオラニル、オキサニル、又はチアニルがあるが、これらに限定されない。
【００２９】
本明細書で使用される通り、「ヒドロキシアルキレン」は、少なくとも1つのヒドロキシを含む、本明細書に定義されるアルキレンを指す。いくつかの実施態様において、アルキレンは、1、2、3、又は4つのヒドロキシ原子により置換されている。
【００３０】
本明細書で使用される通り、「N-含有ヘテロシクロアルキル」は、1つ以上の炭素原子がヘテロ原子に置き換えられており、少なくとも1つのヘテロ原子が窒素原子である、「アルキル」において先に定義されたシクロアルキルを指す。好適なヘテロ原子は、独立に選択され、窒素の他に、酸素及び硫黄原子があるが、これらに限定されない。N-含有ヘテロシクロアルキルは任意に置換されている。N-含有ヘテロシクロアルキル部分の例としては、モルホリニル、ピペリジニル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、又はチアゾリジニルがあるが、これらに限定されない。
【００３１】
本明細書で使用される通り、ラジカル部分(例えば、任意に置換されたアリーレン、任意に置換されたヘテロアリーレン、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたアルキル、及び任意に置換されたアリールアルキル)を説明するのに使用される場合の「任意に置換された」は、そのような部分が、その部分内の置換可能な原子の上の1つ以上の置換基に任意に結合していることを意味する。そのような置換基の例としては、ハロ、シアノ、ニトロ、ハロアルキル、アジド、エポキシ、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、
【化２５】
2021509908.tif 000027
(式中、RA、RB、及びRCは、各出現で独立に、水素原子、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリール、又はヘテロシクロアルキルであるか、或いは、RAとRBは、それらが結合している原子と共に、飽和又は不飽和複素環(すなわちヘテロシクロアルキル又はヘテロアリール)を形成し、該環は任意に置換されており、窒素環原子に加えて、1つ以上の環原子は、任意に、窒素、酸素、硫黄、及びリンから独立に選択されるヘテロ原子である)があるが、これらに限定されない。特定の実施態様において、ラジカル部分が、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、又は任意に置換された飽和若しくは不飽和複素環(すなわちヘテロシクロアルキル又はヘテロアリール)により任意に置換されている場合、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、又は任意に置換された飽和若しくは不飽和複素環(すなわちヘテロシクロアルキル又はヘテロアリール)上の該置換基は、それらが置換されている場合、さらなる置換基によりさらに任意に置換されている置換基により置換されない。いくつかの実施態様において、本明細書に記載の基が任意に置換されている場合、該基に結合した該置換基は、特記されない限り非置換であり、すなわち、置換基としての任意に置換されたアリーレンは、置換されたアリーレンによりさらに置換されない。
【００３２】
本明細書で使用される通り、「結合剤」は、所与の結合パートナーと特異的に結合することが可能なタンパク質系又はペプチド系分子を指す。いくつかの実施態様において、結合剤は、抗体又はその抗原結合断片である。いくつかの実施態様において、結合剤はアルブミンではない。
【００３３】
本明細書で使用される通り、「アミド合成条件」は、例えば、カルボン酸、活性化カルボン酸、又はアシルハライドとアミンとの反応により、アミドの形成を促進するのに好適な反応条件を指す。いくつかの実施態様において、「アミド合成条件」は、カルボン酸とアミンとの間のアミド結合の形成を促進するのに好適な反応条件を指す。これらの実施態様の一部において、カルボン酸は、最初に活性化カルボン酸に変換されてから、該活性化カルボン酸がアミンと反応して、アミドが形成される。アミドの形成をもたらす好適な条件としては、ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)、ジイソプロピルカルボジイミド(DIC)、(ベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリス(ジメチルアミノ)ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(BOP)、(ベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyBOP)、(7-アザベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyAOP)、ブロモトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyBrOP)、O-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(HBTU)、O-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート(TBTU)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム3-オキシドヘキサフルオロホスフェート(HATU)、2-エトキシ-1-エトキシカルボニル-1,2-ジヒドロキノリン(EEDQ)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド(EDC)、2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリジニウムヘキサフルオロホスフェート(CIP)、2-クロロ-4,6-ジメトキシ-1,3,5-トリアジン(CDMT)、及びカルボニルジイミダゾール(CDI)を含むがこれらに限定されない、カルボン酸とアミンとの間の反応をもたらす試薬を利用するものがあるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、カルボン酸は、最初に活性化カルボン酸エステルに変換されてから、アミンと反応して、アミド結合が形成される。特定の実施態様において、カルボン酸を試薬と反応させる。試薬は、カルボン酸を脱プロトン化し、次いで、該脱プロトン化したカルボン酸によるプロトン化した試薬への求核攻撃の結果として、該脱プロトン化したカルボン酸との生成物複合体を形成することにより、該カルボン酸を活性化する。特定のカルボン酸に関して、この活性化エステルは、変換前のカルボン酸よりも、その後にアミンによる求核攻撃を受けやすい。これにより、アミド結合形成が起こる。したがって、カルボン酸は活性化されている状態で記載される。例示的な試薬としてはDCC及びDICがある。
【００３４】
本明細書で使用される通り、「治療上有効な量」は、疾患若しくは障害の治療若しくは管理中である患者に治療効果を与えるのに充分であるか、又は疾患若しくは障害と関連する1つ以上の症状を遅延若しくは最低限にするのに充分である(化合物の)量を指す。
【００３５】
本明細書で使用される通り、「医薬として許容し得る塩」は、患者への投与に好適な塩を指す。好適な塩としては、引用により本明細書に組みこまれるBergeらの文献("Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci., 1977, 66:1)に開示されたものがあるが、これらに限定されない。塩の例としては、酸により誘導された、塩基により誘導された、有機、無機、アミン、及びアルカリ又はアルカリ土類金属塩、例えば、非限定的に、カルシウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、塩化水素酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、及びサリチル酸などの塩があるが、これらに限定されない。
【００３６】
特定の基、部分、置換基、及び原子は、該基、部分、置換基、原子が結合している原子を示す結合若しくは複数の結合と交差するか又はそれらをキャッピングする波線と共に示されている。例えば、以下のように示されるプロピル基:
【化２６】
2021509908.tif 000028
により置換されているフェニル基は、以下の構造:
【化２７】
2021509908.tif 000029
を有する。本明細書で使用される場合、環原子間の結合を介して環式基(例えば、芳香族、ヘテロ芳香族、縮合環、及び飽和又は不飽和のシクロアルキル又はヘテロシクロアルキル)に結合した置換基を示す図は、別途規定されない限り、該環式基が、本明細書に記載されるか又は本開示が関係する分野で公知である技法に従って、環式基中の任意の環位置で又は縮合環基中の任意の環上で、その置換基により置換され得ることを示すことが意図される。例えば、下付き文字qが両端を含む0〜4から選択される整数であり、且つ置換基R1の位置が総称的に記載されている、すなわち、結合線構造のいずれの頂点にも、すなわち、特定の環炭素原子に直接結合していない基
【化２８】
2021509908.tif 000030
は、置換基R1が特定の環炭素原子に結合している基の以下の非限定的な例を含む:
【化２９】
2021509908.tif 000031
。
【００３７】
化合物名称と構造が矛盾するか又は食い違う場合、例えばNMR特性化データにより提供される状況がそうでないと示し得る場合を除き、構造が優先する。
【００３８】
本明細書で使用される通り、句「反応性基(reactive group)」(「RG」)は、抗体、修飾抗体、又はその抗原結合断片の反応性部位(reactive portion)と反応する官能基又は部分を指す。特定の実施態様において、「反応性基」は、抗体又はその抗原結合断片上のシステイン又はリジン残基と反応する官能基又は部分(例えば、マレイミド又はNHSエステル)である。特定の実施態様において、「反応性基」は、クリックケミストリー反応を受けることが可能である官能基又は部分である。前記クリックケミストリー反応のいくつかの実施態様において、反応性基は、アジドとの1,3環化付加反応を受けることが可能であるアルキンを含む。そのような好適な反応性基としては、歪みアルキン、例えば歪み促進型アルキン-アジド環化付加(SPAAC)に好適なもの、シクロアルキン、例えば、シクロオクチン、芳香環化アルキン、及び銅触媒の非存在下でアジドとの1,3環化付加反応を受けることが可能であるアルキンがあるが、これらに限定されない。好適なアルキンとしては、DIBAC(DIBAC部分の-C(O)CH2CH2C(O)-部位がL2によりカバーされている)、DIBO(DIBO部分の-O-部位がL2によりカバーされている)、BARAC(BARAC部分の
【化３０】
2021509908.tif 000032
部位がL2によりカバーされている)、DIFO(-O-部位がL2によりカバーされている)、置換アルキン、例えば、フッ素化されたアルキン、アザ-シクロアルキン、BCN、及びその誘導体もあるが、これらに限定されない。そのような反応性基を含むリンカー-ペイロードは、アジド基により官能化された抗体をコンジュゲートするのに有用である。そのような官能化抗体としては、アジド-ポリエチレングリコール基により官能化された抗体がある。特定の実施態様において、そのような官能化抗体は、少なくとも1つのグルタミン残基を含む抗体、例えば、重鎖Q295(EU付番)を、式H2N-LL-N3(式中、LLは二価ポリエチレングリコール基である)による化合物と、酵素トランスグルタミナーゼの存在下で反応させることにより誘導される。
【００３９】
いくつかの実施態様において、反応性基(RG)は、アルキン、例えば
【化３１】
2021509908.tif 000033
であり、クリックケミストリーにより、アジド、例えば
【化３２】
2021509908.tif 000034
と反応して、クリックケミストリー生成物、例えば
【化３３】
2021509908.tif 000035
その位置異性体、又はその混合物を形成し得る。いくつかの実施態様において、反応性基は、アルキン、例えば
【化３４】
2021509908.tif 000036
(式中、L2は-OCH2C(O)-を包含する)であり、クリックケミストリーにより、アジド、例えば
【化３５】
2021509908.tif 000037
と反応して、クリックケミストリー生成物、例えば
【化３６】
2021509908.tif 000038
を形成し得る。いくつかの実施態様において、反応性基は、アルキン、例えば
【化３７】
2021509908.tif 000039
であり、クリックケミストリーにより、アジド、例えば
【化３８】
2021509908.tif 000040
と反応して、クリックケミストリー生成物、例えば
【化３９】
2021509908.tif 000041
その位置異性体、又はその混合物を形成し得る。いくつかの実施態様において、反応性基は、官能基、例えば
【化４０】
2021509908.tif 000042
であり、抗体又はその抗原結合断片上のシステイン残基と反応して、そこに結合、例えば
【化４１】
2021509908.tif 000043
を形成し、ここで、Abは抗体又はその抗原結合断片を指し、Sは該官能基がAbに結合するシステイン残基上のS原子を指す。いくつかの実施態様において、反応性基は、官能基、例えば
【化４２】
2021509908.tif 000044
であり、抗体又はその抗原結合断片上のリジン残基と反応して、そこに、結合、例えば
【化４３】
2021509908.tif 000045
を形成し、ここで、Abは抗体又はその抗原結合断片を指し、Nは、該官能基がAbに結合するリジン残基上のN原子を指す。
【００４０】
本明細書で使用される通り、「反応性基残基」(-L1-)は、クリックケミストリーの生成物を含む、リンカー部分中の官能基と結合剤(BA)の反応性部位との反応の生成物を指す。反応性基残基は、結合剤のアミノ酸上の反応性基の反応により形成され、結合剤(例えば抗体)及び連結リンカーと結合している。いくつかの実施態様において、反応性基残基は、1,2,3-テトラゾールを含む基であり、すなわちアルキンとアジドとの反応により形成される。いくつかの実施態様において、反応性基残基は
【化４４】
2021509908.tif 000046
(a)であり(式中、Sは、(a)がAbに結合するシステイン残基上のS原子を指す)、
【化４５】
2021509908.tif 000047
と、抗体又はその抗原結合断片上のシステイン残基との反応により形成される。いくつかの実施態様において、反応性基残基は
【化４６】
2021509908.tif 000048
であり、ここで、Nはリジン残基上のN原子を指し、官能基、例えば
【化４７】
2021509908.tif 000049
と、抗体又はその抗原結合断片上のリジン残基との反応により形成される。
【００４１】
いくつかの実施態様において、リンカー-L-は含み、L1は、以下の部分:
【化４８】
2021509908.tif 000050
による反応性基残基、その位置異性体、又はその混合物であり、式中、
【化４９】
2021509908.tif 000051
は、結合剤への結合である。いくつかの実施態様において、リンカー-L-は含み、L1は、以下の部分:
【化５０】
2021509908.tif 000052
による反応性基残基、その位置異性体、又はその混合物であり、式中、
【化５１】
2021509908.tif 000053
は結合剤への結合である。いくつかの実施態様において、リンカー-L-は含み、L1は、以下の部分:
【化５２】
2021509908.tif 000054
による反応性基残基(式中、-OCH2C(O)-はL2により包含される)、その位置異性体、又はその混合物であり、式中、
【化５３】
2021509908.tif 000055
は結合剤への結合である。いくつかの実施態様において、リンカー-L-は含み、L1は、以下の部分:
【化５４】
2021509908.tif 000056
による反応性基残基、その位置異性体、又はその混合物であり、式中、
【化５５】
2021509908.tif 000057
は結合剤への結合である。いくつかの実施態様において、リンカー-L-は含み、L1は、以下の部分:
【化５６】
2021509908.tif 000058
による反応性基残基であり、式中、
【化５７】
2021509908.tif 000059
は、抗体又はその抗原結合断片上のシステインへの結合である。いくつかの実施態様において、リンカー-L-は含み、L1は、以下の部分:
【化５８】
2021509908.tif 000060
による反応性基残基であり、式中、
【化５９】
2021509908.tif 000061
は、抗体又はその抗原結合断片のリジンへの結合である。これらの例において、結合剤への結合は、直接又はリンカーを経由する。特定の実施態様において、結合剤は、アジドにより修飾されて、リンカー-L-又はL1への連結が容易になり、反応性基残基が形成される。
【００４２】
本明細書で使用される通り、「連結リンカー」(L2)は、切断性又は非切断性の二価の基を指す。切断性リンカーは、内在化後の細胞内代謝により切断される、例えば、加水分解、還元、又は酵素反応により切断されるリンカーである。非切断性リンカーは、結合したペイロードを、内在化後の抗体のリソソーム分解によって放出するリンカーである。好適な連結リンカーとしては、酸不安定性リンカー、加水分解不安定性リンカー、酵素切断性リンカー、還元不安定性リンカー、及び非切断性リンカーがあるが、これらに限定されない。好適なリンカーとしては、グルクロニド、スクシンイミド-チオエーテル、ポリエチレングリコール(PEG)単位、ヒドラゾン、マル-カプロイル(mal-caproyl)単位、ジスルフィド単位(例えば、-S-S-、-S-C(R1bR2b)-(式中、R1b及びR2bは、独立に、水素又はヒドロカルビルである)、カルバマート単位、パラ-アミノ-ベンジル単位(PAB)、ホスファート単位、例えば、モノ-、ビス-、若しくはトリス-ホスファート単位、及びペプチド単位、例えば、バリン-シトルリン残基単位を含むがこれに限定されない、2、3、4、5、6、7、8、若しくはそれ以上のアミノ酸残基を含むペプチド単位であるか又はこれらを含むものがあるが、これらに限定されない。本明細書で使用される通り、「カプロイル」は-(CH2)5-C(O)-基を意味する。いくつかの実施態様において、L2はシクロデキストリン(CD)を含む。いくつかの実施態様において、L2は、-C(O)CH2CH2C(O)-、-C(O)CH2CH2CH2C(O)-、-OCH2C(O)-、-O-、又は
【化６０】
2021509908.tif 000062
を含む。
【００４３】
本明細書で使用される通り、(L3)中の「自壊型リンカー」は、当業者に公知であるそのような基を指す。特定の実施態様において、自壊性基は、p-アミノベンジル(PAB)、すなわち
【化６１】
2021509908.tif 000063
又はその誘導体である。有用な誘導体としては、p-アミノベンジルオキシ、すなわち
【化６２】
2021509908.tif 000064
及びp-アミノベンジルオキシカルボニル(PABC)、すなわち
【化６３】
2021509908.tif 000065
がある。当業者は、自壊性基が、ペイロードからリンカーの残りの原子を放出する化学反応を実施することが可能であることを認識するだろう。
【００４４】
(B.  ステロイドペイロード)
本明細書に記載のコンジュゲートに好適なステロイドとしては、ブデソニド及びそのプロドラッグ、ブデソニドアナログ又は誘導体(フッ素化されたアナログ及び誘導体を含む)及びそのプロドラッグ、並びに表Aに列記されたステロイド及びそのプロドラッグがある。いくつかの実施態様において、抗体-薬物コンジュゲートは、ブデソニド、ブデソニドのプロドラッグ、ブデソニドアナログ又は誘導体(フッ素化されたアナログ及び誘導体を含む)、ブデソニドアナログ又は誘導体(フッ素化されたアナログ及び誘導体を含む)のプロドラッグ、表A中のステロイド、又は表A中のステロイドのプロドラッグを、抗体の標的抗原との結合の後に放出する。表Aにおいて、以下の化合物は、式(III)、式(III-P)、式III-P-1、又は(3000)の化合物のBAに、-C(O)CH2OH基のヒドロキシを介して、すなわち-C(O)CH2-O-SP-L-により、又はマプラコラトのヒドロキシを介して、すなわち-O-SP-L-により結合し;或いは、式(II)、式(II-P)、式II-P-1、又は(2000)の化合物のRGに、-C(O)CH2OH基のヒドロキシを介して、すなわち-C(O)CH2-O-SP-(L3)0-1-L2-により、又はマプラコラトのヒドロキシを介して、すなわち-O-SP-(L3)0-1-L2-により結合する。
表A
【表１】
2021509908.tif 000066
2021509908.tif 000067
2021509908.tif 000068
2021509908.tif 000069
2021509908.tif 000070
【００４５】
いくつかの又はいずれかの実施態様において、式(3000)又は式(2000)の化合物は、表A中のステロイドのプロドラッグを含み、ここで、SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは、式(3000)中のL又は式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-X1b-(式中、X1bは、式(3000)中のL又は式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、
【化６４】
2021509908.tif 000071
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は、式(3000)中のL又は式(2000)中の(L3)0-1に対するものである)、-CH2-NH-(式中、Nは、式(3000)中のL又は式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、
【化６５】
2021509908.tif 000072
(式中、Nは、式(3000)中のL又は式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは、式(3000)中のL又は式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは、式(3000)中のL又は式(2000)中の(L3)0-1に結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、-C(O)-N(R5)-(C1-C10-アルキレン)-C(O)NH-X2-(式中、X2は、式(3000)中のL又は式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、又は
【化６６】
2021509908.tif 000073
(式中、X4は、式(3000)中のL又は式(2000)中の(L3)0-1に結合する)である。
【００４６】
いくつかの実施態様において、式(I-P)の化合物:
【化６７】
2021509908.tif 000074
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくは誘導体、
(式中:
R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;
R3は、-C(O)RZ又は
【化６８】
2021509908.tif 000075
であり;
RZは、-C4-10-アルキレン-C(O)OH又はNR15R15aであり;
R15は、H又はアルキルであり、R15aは-(C1-6-アルキレン)-C(O)NHNH2であり;
Rc、Rd、Re、及びRfのうち1つは-CH2ORgであり、その他は、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-(C1-6-アルキレン)-C(O)OH又は-(C1-6-アルキレン)-C(O)O(アルキル)である)であるか;或いは、Rc、Rd、Re、及びRfのうち1つはヒドロキシアルキルであり、その他は-Hであり;且つ
mは0又は1である)。
【００４７】
いくつかの実施態様において、式(I-P-1)による化合物:
【化６９】
2021509908.tif 000076
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくは誘導体、
(式中:
R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;
R3は、-C(O)RZ又は
【化７０】
2021509908.tif 000077
であり;
RZは、-C4-10-アルキレン-C(O)OH又はNR5R5aであり;
R15は、H又はアルキルであり、R15aは-(C1-6-アルキレン)-C(O)NHNH2であり;
Rc、Rd、Re、及びRfのうち1つは-CH2ORgであり、その他は、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-(C1-6-アルキレン)-C(O)OH又は-(C1-6-アルキレン)-C(O)O(アルキル)である)であるか;或いは、Rc、Rd、Re、及びRfのうち1つはヒドロキシアルキルであり、その他は-Hであり;且つ
mは0又は1である)。
【００４８】
いくつかの実施態様において、R4がアルキルである、式(I)、式(I-P)、又は式(I-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、R4はシクロアルキルではない。これらの実施態様のいくつかにおいて、R4は、直鎖又は分岐鎖のアルキルである。これらの実施態様のいくつかにおいて、R4はアリールである。これらの実施態様のいくつかにおいて、R4はアリールアルキルである。これらの実施態様のいくつかにおいて、R4はN-含有ヘテロシクロアルキルである。いくつかの実施態様において、R4は、非限定的に、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、又はノニルなどのアルキルである。いくつかの実施態様において、R4はメチルである。いくつかの実施態様において、R4はエチルである。いくつかの実施態様において、R4はn-プロピルである。いくつかの実施態様において、R4はi-プロピルである。いくつかの実施態様において、R4はn-ブチルである。いくつかの実施態様において、R4はi-ブチルである。いくつかの実施態様において、R4はt-ブチルである。いくつかの実施態様において、R4はsec-ブチルである。いくつかの実施態様において、R4はペンチルである。いくつかの実施態様において、R4はヘキシルである。いくつかの実施態様において、R4はヘプチルである。いくつかの実施態様において、R4は、オクチル又はノニルである。いくつかの実施態様において、R4は、非限定的に、フェニル、フェノール、又はナフチルなどのアリールである。いくつかの実施態様において、R4はフェニルである。いくつかの実施態様において、R4はナフチルである。いくつかの実施態様において、R4は、非限定的に、チエニルなどのヘテロアリールである。いくつかの実施態様において、R4は、非限定的に、ベンジルなどのアリールアルキルである。いくつかの実施態様において、R4は、非限定的に、ピペリジニルなどのN-含有ヘテロシクロアルキルである。式(I)のいくつかの実施態様において、両Rxは水素である。式(I)のいくつかの実施態様において、両Rxはフルオロである。
【００４９】
いくつかの又はいずれかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、R3が、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b又は-C(O)RZであり、RZが、NR16R16a又は-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b(式中、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)である、式(I)の化合物が述べられる。
【００５０】
式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの実施態様において、両Rxは水素であり、R3は-C(O)RZである。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZは-C4-10-アルキレン-C(O)OHである。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZは-C4-6-アルキレン-C(O)OHである。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZは-C4-アルキレン-C(O)OHである。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZは-C5-アルキレン-C(O)OHである。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZは-C6-アルキレン-C(O)OHである。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZはNR15R15aである。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R15は、H又はC1-3-アルキルであり、R15aは-(C1-3-アルキレン)-C(O)NHNH2である。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R15は、H又はメチルであり、R15aは-(C1-3-アルキレン)-C(O)NHNH2である。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R15はHであり、R15aは-(C1-3-アルキレン)-C(O)NHNH2である。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R15はメチルであり、R15aは-(C1-3-アルキレン)-C(O)NHNH2である。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R15はHであり、R15aは-(C1-アルキレン)-C(O)NHNH2である。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R15はメチルであり、R15aは-(C1-アルキレン)-C(O)NHNH2である。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R15は、H又はC1-C6アルキルであり、R15aは-(C1-C10-アルキレン)-SHである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R15は、H又はC1-C3アルキルであり、R15aは-(C1-C10-アルキレン)-SHである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R15は、H又はCH3であり、R15aは-(C1-C10-アルキレン)-SHである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZは、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b(式中、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)である。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZは、-(分岐鎖C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-ヒドロキシ-アルキレン)-NR50aR50bである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZは-(分岐鎖C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-アルキレン)-NR50aR50bである。
【００５１】
いくつかの実施態様において、
a)両Rxが水素であり;且つ
R3が、-C(O)RZ;-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b;又は
【化７１】
2021509908.tif 000078
であり;
RZが、-C4-10-アルキレン-C(O)OH;-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b(式中、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている);又はNR15R15aであり;
R15が、H又はC1-C6アルキルであり、R15aが、-(C1-C10-アルキレン)-SH又は-(C1-6-アルキレン)-C(O)NHNH2であるか;或いは
b)両Rxがフルオロであり;且つ
R3が、-C(O)RZ;-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b;又は
【化７２】
2021509908.tif 000079
であり;
RZが、-C4-10-アルキレン-C(O)OH;-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b(式中、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている);又はNR16R16aであり;
R16が、H又はC1-C6アルキルであり、R16aが、-(C1-C10-アルキレン)-SH、-(C1-C10-アルキレン)-NH2、-(C1-C10-アルキレン)-NH(C1-6アルキル)、
【化７３】
2021509908.tif 000080
又は-(C1-6-アルキレン)-C(O)NHNH2であり;且つ
各R50、R50a、及びR50bが、独立に、水素又はC1-C6-アルキルであり;
Rc、Rd、Re、及びRfのうち1つが-CH2ORgであり、その他が、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-(C1-6-アルキレン)-C(O)OH又は-(C1-6-アルキレン)-C(O)O(アルキル)である)であるか;或いは、Rc、Rd、Re、及びRfのうち1つがヒドロキシアルキルであり、その他が-Hであり;且つ
mが0又は1である、式(I)の化合物が提供される。
【００５２】
式(I)のいくつかの実施態様において、両Rxはフルオロであり、R3は-C(O)RZである。いくつかの又はいずれかの実施態様(embosdiments)において、Rzは
【化７４】
2021509908.tif 000081
である。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZは-C4-10-アルキレン-C(O)OHである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZは-C4-6-アルキレン-C(O)OHである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZは-C4-アルキレン-C(O)OHである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZは-C5-アルキレン-C(O)OHである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZは-C6-アルキレン-C(O)OHである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZはNR16R16aである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R16は、H又はC1-3-アルキルであり、R16aは-(C1-3-アルキレン)-C(O)NHNH2である。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R16は、H又はメチルであり、R16aは-(C1-3-アルキレン)-C(O)NHNH2である。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R16はHであり、R16aは-(C1-3-アルキレン)-C(O)NHNH2である。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R16はメチルであり、R16aは-(C1-3-アルキレン)-C(O)NHNH2である。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R16はHであり、R16aは-(C1-アルキレン)-C(O)NHNH2である。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R16はメチルであり、R16aは-(C1-アルキレン)-C(O)NHNH2である。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R16は、H又はC1-C6アルキルであり、R16aは-(C1-C10-アルキレン)-SHである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R16は、H又はC1-C3アルキルであり、R16aは-(C1-C10-アルキレン)-SHである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R16は、H又はCH3であり、R16aは-(C1-C10-アルキレン)-SHである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R16は、H又はC1-C6アルキルであり、R16aは-(C1-C10-アルキレン)-NH2である。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R16は、H又はC1-C3アルキルであり、R16aは-(C1-C10-アルキレン)-NH2である。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R16は、H又はCH3であり、R16aは-(C1-C10-アルキレン)-NH2である。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R16は、H又はC1-C6アルキルであり、R16aは-(C1-C10-アルキレン)-NH(C1-6アルキル)である。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R16は、H又はC1-C3アルキルであり、R16aは-(C1-C10-アルキレン)-NH(C1-6アルキル)である。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R16は、H又はCH3であり、R16aは-(C1-C10-アルキレン)-NH(C1-6アルキル)である。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZは-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50b(式中、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)である。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZは-(分岐鎖C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-ヒドロキシ-アルキレン)-NR50aR50bである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、RZは-(分岐鎖C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-アルキレン)-NR50aR50bである。
【００５３】
式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの実施態様において、両Rxは水素であり、R3は-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50bである。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R3は-(C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-アルキレン)-NR50aR50bである。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R3は-(C1-C3-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C3-アルキレン)-NR50aR50bである。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R3は-(直鎖C1-C3-アルキレン)-NR50C(O)-(直鎖C1-C3-アルキレン)-NR50aR50bである。
【００５４】
式(I)のいくつかの実施態様において、両Rxはフルオロであり、R3は-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50aR50bである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R3は-(C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-アルキレン)-NR50aR50bである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R3は-(C1-C3-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C3-アルキレン)-NR50aR50bである。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、R3は-(直鎖C1-C3-アルキレン)-NR50C(O)-(直鎖C1-C3-アルキレン)-NR50aR50bである。
【００５５】
式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの実施態様において、両Rxは水素であり、R3は
【化７５】
2021509908.tif 000082
である。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの実施態様において、mは0である。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの実施態様において、mは1である。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの実施態様において、mは1であり、Rfは-H又は-OHである。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの実施態様において、mは1である。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの実施態様において、mは1であり、Rc、Rd、Re、及びRfのうち1つは-CH2ORgであり、その他は、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-(C1-6-アルキレン)-C(O)OH又は-(C1-6-アルキレン)-C(O)O(アルキル)である)である。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの実施態様において、mは1であり、Rcは-CH2ORgであり、その他は、独立に、-H、-OH、又はヒドロキシアルキルである。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの実施態様において、mは1であり、Rc、Rd、Re、及びRfのうち1つはヒドロキシアルキルであり、その他は-Hである。式(I)、(I-P)、又は(I-P-1)のいくつかの実施態様において、mは1であり、Rcはヒドロキシアルキルであり、Rd、Re、及びRfは-Hである。
【００５６】
式(I)のいくつかの実施態様において、両Rxはフルオロであり、R3は
【化７６】
2021509908.tif 000083
である。式(I)のいくつかの実施態様において、mは0である。式(I)のいくつかの実施態様において、mは1である。式(I)のいくつかの実施態様において、mは1であり、Rfは-H又は-OHである。式(I)のいくつかの実施態様において、mは1である。式(I)のいくつかの実施態様において、mは1であり、Rc、Rd、Re、及びRfのうち1つは-CH2ORgであり、その他は、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-(C1-6-アルキレン)-C(O)OH又は-(C1-6-アルキレン)-C(O)O(アルキル)である)である。式(I)のいくつかの実施態様において、mは1であり、Rcは-CH2ORgであり、その他は、独立に、-H、-OH、又はヒドロキシアルキルである。式(I)のいくつかの実施態様において、mは1であり、Rc、Rd、Re、及びRfのうち1つはヒドロキシアルキルであり、その他は-Hである。式(I)のいくつかの実施態様において、mは1であり、Rcはヒドロキシアルキルであり、Rd、Re、及びRfは-Hである。
【００５７】
式(I)のいくつかの実施態様において、両Rxはフルオロであり、R3は
【化７７】
2021509908.tif 000084
である。
【００５８】
いくつかの又はいずれかの実施態様において、式(Z)による化合物:
【化７８】
2021509908.tif 000085
(式中
R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;
両Rxは水素であるか、或いは両Rxはフルオロであり;且つ
SPは-CH2NH-(式中、NHはHに結合する)であるか、或いは、SPは
【化７９】
2021509908.tif 000086
(式中、SPのNHは式(Z)中のHに結合する)であるか、或いは、SPは
【化８０】
2021509908.tif 000087
(式中、SPのNは、式(Z)中のHに結合する)である)。いくつかの又はいずれかの実施態様において、両Rxは水素である。いくつかの又はいずれかの実施態様において、両Rxはフルオロである。いくつかの又はいずれかの実施態様において、R4はアルキルである。これらの実施態様のいくつかにおいて、R4は直鎖アルキルである。いくつかの実施態様において、R4は、非限定的に、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、又はノニルなどのアルキルである。いくつかの実施態様において、R4はメチルである。いくつかの実施態様において、R4はエチルである。いくつかの実施態様において、R4はn-プロピルである。いくつかの実施態様において、R4はi-プロピルである。いくつかの実施態様において、R4はn-ブチルである。いくつかの実施態様において、R4はi-ブチルである。いくつかの実施態様において、R4はt-ブチルである。いくつかの実施態様において、R4はsec-ブチルである。いくつかの実施態様において、R4はペンチルである。いくつかの実施態様において、R4はヘキシルである。いくつかの実施態様において、R4はヘプチルである。いくつかの実施態様において、R4は、オクチル又はノニルである。いくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-CH2NH-(式中、NHはHに結合する)である。いくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは
【化８１】
2021509908.tif 000088
(式中、NHは式(Formaul)(Z)中のHに結合する)である。いくつかの又はいずれかの実施態様において、R4はアルキルであり、両Rxはフルオロであり、SPは
【化８２】
2021509908.tif 000089
(式中、NHは式(Z)中のHに結合する)である。いくつかの実施態様において、式(Z)の化合物は
【化８３】
2021509908.tif 000090
である。いくつかの実施態様において、式(Z)の化合物は
【化８４】
2021509908.tif 000091
である。いくつかの実施態様において、式(Z)の化合物は
【化８５】
2021509908.tif 000092
である。いくつかの実施態様において、式(Z)の化合物は
【化８６】
2021509908.tif 000093
である。
【００５９】
本明細書に記載のコンジュゲートに好適なステロイドとしては、以下の表中のものがある。
表1.ブデソニド-スペーサー(ブデソニド-SP)
【表２】
2021509908.tif 000094
2021509908.tif 000095
2021509908.tif 000096
2021509908.tif 000097
2021509908.tif 000098
又はその立体異性体又は立体異性体の混合物(misture);及び任意に、その医薬として許容し得る塩、溶媒和物、又は立体異性体。いくつかの場合に、上記構造のそれぞれの中の
【化８７】
2021509908.tif 000099
のn-プロピルは、R配置、すなわちアスタリスクにより示される炭素にある。いくつかの場合に、上記構造のそれぞれの中の
【化８８】
2021509908.tif 000100
のn-プロピルは、S配置、すなわちアスタリスクにより示される炭素にある。いくつかの場合に、上記構造のそれぞれの中の
【化８９】
2021509908.tif 000101
のn-プロピルは、R配置とS配置の混合物であり、すなわちアスタリスクにより示される炭素にある。いくつかの場合に、上記構造のそれぞれの中の
【化９０】
2021509908.tif 000102
のn-プロピルは、R配置とS配置の混合物であり、すなわちアスタリスクにより示される炭素にあり、該R:S混合物は、約1:1、約2:1、約3;1、約4:1、約5:1、約6;1、約7:1、約8:1、約9:1、又は約10:1である。
【００６０】
式(I)のいくつかの実施態様において、式1d、1e、1g、1h、101a、101b、101c、101d、102c、102d、102e、102f、103a、103b、104a、若しくは104bの化合物又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、若しくは立体異性体が提供される。式(I)のいくつかの実施態様において、式1d、1e、1g、若しくは1hの化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、若しくは立体異性体が提供される。いくつかの実施態様において、式1d、1e、1g、1h、101a、101b、101c、101d、102c、102d、102e、102f、103a、103b、104a、及び104bの化合物のn-プロピルはR配置にある。いくつかの実施態様において、式1d、1e、1g、1h、101a、101b、101c、101d、102c、102d、102e、102f、103a、103b、104a、及び104bの化合物のn-プロピルはS配置にある。いくつかの実施態様において、式1d、1e、1g、1h、101a、101b、101c、101d、102c、102d、102e、102f、103a、103b、104a、及び104bの化合物のn-プロピルは、R配置とS配置の混合物である。いくつかの実施態様において、式1d、1e、1g、1h、101a、101b、101c、101d、102c、102d、102e、102f、103a、103b、104a、及び104bの化合物のn-プロピルは、R配置とS配置の混合物であり、該R:S混合物は、約1:1、約2:1、約3;1、約4:1、約5:1、約6;1、約7:1、約8:1、約9:1、又は約10:1である。
【００６１】
本明細書に記載のステロイドペイロードの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、結晶形、非結晶形、多形体、位置異性体、立体異性体、代謝物、及び生理学的付加物は、本開示の範囲内に含まれる。
【００６２】
(C.  タンパク質ステロイドコンジュゲート)
本明細書に記載のステロイドのタンパク質コンジュゲートが本明細書に提供される。そのようなコンジュゲートとしては、上記B項に記載の化合物に、例えば、本明細書に記載の-L-及び-L1-L2-(L3)0-1-を介して共有結合しているタンパク質、例えば、抗体又はその抗原結合断片がある。
【００６３】
いくつかの又はいずれかの実施態様において、式(3000)の化合物:
BA-(L-SP-D)z
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくは誘導体が述べられる
(式中
Dは、
a)
【化９１】
2021509908.tif 000103
(式中、式(a)中の両Rxは水素であり;R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;且つ、SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は式(3000)中のLに結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(3000)中のLに結合する)、-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(3000)中のLに結合する)、
【化９２】
2021509908.tif 000104
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は式(3000)中のLに対するものである)、-CH2-NH-(式中、Nは式(3000)中のLに結合する)、
【化９３】
2021509908.tif 000105
(式中、Nは式(3000)中のLに結合し、Arは、任意に置換されたアリーレン(いくつかの実施態様において
【化９４】
2021509908.tif 000106
)又は任意に置換されたヘテロアリーレンである)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(3000)中のLに結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(3000)中のLに結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(3000)中のLに結合する)、又は
【化９５】
2021509908.tif 000107
(式中、X4は式(3000)中のLに結合する)であるか;或いは
式中、式(a)中の両Rxはフルオロであり;R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;且つ、SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(3000)中のLに結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-X1b-(式中、X1bは式(3000)中のLに結合する)、
【化９６】
2021509908.tif 000108
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は式(3000)中のLに対するものである)、-CH2-NH-(式中、Nは式(3000)中のLに結合する)、
【化９７】
2021509908.tif 000109
(式中、Nは式(3000)中のLに結合し、Arは、任意に置換されたアリーレン(いくつかの実施態様において
【化９８】
2021509908.tif 000110
)又は任意に置換されたヘテロアリーレンである)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(3000)中のLに結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(3000)中のLに結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、-C(O)-N(R5)-(C1-C10-アルキレン)-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(3000)中のLに結合する)、又は
【化９９】
2021509908.tif 000111
(式中、X4は式(3000)中のLに結合する)である);並びに
b)上記表A中の化合物(ここで、表A中の化合物は、式(3000)の化合物のBAに、-C(O)CH2OH基のヒドロキシを介して、すなわち-C(O)CH2-O-SP-L-により、又はマプラコラトのヒドロキシを介して、すなわち-O-SP-L-により結合する)
から選択され:
X1は-N(C1-6アルキル)-であり;
X1bは、-S-、-NH-、又は-N(C1-6アルキル)-であり;
X2は-NH-であり;
X3は-CH2-であるか、X3は-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-(式中、C(O)はX4に結合する)であるか、或いはX3は-C(O)-であり;
X4は-O-であり;
R5は、H、-OH、-OCH3、又はC1-6アルキルであり;
R50及びR50aは、独立に、水素又はC1-C6-アルキルであり;
Rd、Re、及びRfは、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-CH2C(O)OH又は-CH2C(O)O(アルキル)である)であり;且つ
mは0又は1であり;
zは、両端を含む1〜30から選択される整数であり;
Lはリンカーであり;且つ
BAは結合剤である)。
【００６４】
いくつかの又はいずれかの実施態様において、式(III-P)の化合物:
【化１００】
2021509908.tif 000112
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくは誘導体が述べられる
(式中:
R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;
SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は式(III)中のＬに結合する)、-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(III)中のLに結合する)、又は
【化１０１】
2021509908.tif 000113
(式中、X4は式(III)中のLに結合する)であり;
X1は-N(C1-3アルキル)-であり;
X2は-NH-であり;
X3は-CH2-であるか、X3は-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-(式中、C(O)はX4に結合する)であるか、或いはX3は-C(O)-であり;
X4は-O-であり;
R5は、H、-OH、-OCH3、又はアルキルであり;
Rd、Re、及びRfは、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-CH2C(O)OH又は-CH2C(O)O(アルキル)である)であり;且つ
mは0又は1であり;
zは、両端を含む1〜30から選択される整数であり;
Lはリンカーであり;且つ
BAは結合剤である)。
【００６５】
いくつかの又はいずれかの実施態様において、式(III-P-1)の化合物:
【化１０２】
2021509908.tif 000114
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくは誘導体が述べられる
(式中:
R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;
SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は式(III)中のＬに結合する)、-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(III)中のLに結合する)、又は
【化１０３】
2021509908.tif 000115
(式中、X4は式(III)中のLに結合する)であり;
X1は-N(C1-3アルキル)-であり;
X2は-NH-であり;
X3は-CH2-であるか、X3は-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-(式中、C(O)はX4に結合する)であるか、或いはX3は-C(O)-であり;
X4は-O-であり;
R5は、H、-OH、-OCH3、又はアルキルであり;
Rd、Re、及びRfは、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-CH2C(O)OH又は-CH2C(O)O(アルキル)である)であり;且つ
mは0又は1であり;
zは、両端を含む1〜30から選択される整数であり;
Lはリンカーであり;且つ
BAは結合剤である)。
【００６６】
いくつかの実施態様において、R4がアルキルである、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、R4はシクロアルキルではない。これらの実施態様のいくつかにおいて、R4は、直鎖又は分岐鎖のアルキルである。これらの実施態様のいくつかにおいて、R4はアリールである。これらの実施態様のいくつかにおいて、R4はアリールアルキルである。これらの実施態様のいくつかにおいて、R4はN-含有ヘテロシクロアルキルである。いくつかの実施態様において、R4は、非限定的に、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、又はノニルなどのアルキルである。いくつかの実施態様において、R4はメチルである。いくつかの実施態様において、R4はエチルである。いくつかの実施態様において、R4はn-プロピルである。いくつかの実施態様において、R4はi-プロピルである。いくつかの実施態様において、R4はn-ブチルである。いくつかの実施態様において、R4はi-ブチルである。いくつかの実施態様において、R4はt-ブチルである。いくつかの実施態様において、R4はsec-ブチルである。いくつかの実施態様において、R4はペンチルである。いくつかの実施態様において、R4はヘキシルである。いくつかの実施態様において、R4はヘプチルである。いくつかの実施態様において、R4は、オクチル又はノニルである。いくつかの実施態様において、R4は、非限定的に、フェニル、フェノール、又はナフチルなどのアリールである。いくつかの実施態様において、R4はフェニルである。いくつかの実施態様において、R4はナフチルである。いくつかの実施態様において、R4は、非限定的に、チエニルなどのヘテロアリールである。いくつかの実施態様において、R4は、非限定的に、ベンジルなどのアリールアルキルである。いくつかの実施態様において、R4は、非限定的に、ピペリジニルなどのN-含有ヘテロシクロアルキルである。いくつかの又はいずれかの実施態様において、両Rxは水素である。いくつかの又はいずれかの実施態様において、両Rxはフルオロである。いくつかの実施態様において、R4はR配置にある。いくつかの実施態様において、R4はS配置にある。いくつかの実施態様において、R4は、R配置とS配置の混合物である。いくつかの実施態様において、R4は、R配置とS配置の混合物であり、該R:S混合物は、約1:1、約2:1、約3;1、約4:1、約5:1、約6;1、約7:1、約8:1、約9:1、又は約10:1である。
【００６７】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり;且つ、SPが、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のＬに結合する);-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のＬに結合する);-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のＬに結合する);-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のＬに結合する);-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のＬに結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている);-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のＬに結合する);又は
【化１０４】
2021509908.tif 000116
(式中、X4は、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のＬに結合する)であるか;或いは
両Rxがフルオロであり;且つ、SPが、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のＬに結合する);-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-X1b-(式中、X1bは、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のＬに結合する);
【化１０５】
2021509908.tif 000117
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は式(III)中のLに対するものである);-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のＬに結合する);-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のLに結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、又は-C(O)-N(R5)-(C1-C10-アルキレン)-C(O)NH-X2-(式中、X2は、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のＬに結合する)である、式(III)の化合物が提供される。
【００６８】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり、且つ、SPが、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-C2-C5-アルキレン-C(O)-である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-CH2CH2-C(O)-である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。
【００６９】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、SPが-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-C2-C5-アルキレン-C(O)-である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-CH2CH2-C(O)-である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。
【００７０】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり、SPが-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1が、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のL3に結合する)である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1が、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のL3に結合する)である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、X1が-N(C1-3アルキル)-である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-C2-C5-アルキレン-X1-である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-CH2CH2-X1-である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(CH3)-C2-C5-アルキレン-N(CH3)-である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(CH3)-CH2CH2-N(CH3)-である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。
【００７１】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、SPが-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(III)中のL3に結合する)又は-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-X1b-(式中、X1bは式(III)中のLに結合する)である、式(III)の化合物の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(III)中のL3に結合する)である、式(III)の化合物の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-C1-C6-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(III)中のL3に結合する)である、式(III)の化合物の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-C1-C3-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(III)中のL3に結合する)である、式(III)の化合物の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-CH2CH2-X1b-である、式(III)の化合物の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-C2-C5-アルキレン-N(CH3)-である、式(III)の化合物の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-C2-C5-アルキレン-N(CH2CH3)-である、式(III)の化合物の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-CH2CH2-N(CH3)-である、式(III)の化合物の化合物が本明細書に述べられる。
【００７２】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、SPが-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(III)中のL3に結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C6-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(III)中のL3に結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C3-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(III)中のL3に結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、X1bが-N(C1-3アルキル)-である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-C2-C5-アルキレン-X1b-である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-CH2CH2-X1b-である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(CH3)-C2-C5-アルキレン-N(CH3)-である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(CH2CH3)-C2-C5-アルキレン-N(CH2CH3)-である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(CH3)-CH2CH2-N(CH3)-である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。
【００７３】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、SPが
【化１０６】
2021509908.tif 000118
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は式(III)中のLに対するものである)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。
【００７４】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり、SPが、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)、又は-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが、-C(O)-N(H)-(C1-C6-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)、又は-C(O)-N(C1-3アルキル)-(C1-C6-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-(C1-C6-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-(C1-C6-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。
【００７５】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、SPが、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)、又は-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが、-C(O)-N(H)-(C1-C6-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)、又は-C(O)-N(C1-3アルキル)-(C1-C6-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-(C1-C6-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-(C1-C6-アルキレン)-S-(式中、Sは式(III)中のＬに結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。
【００７６】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり、SPが-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(III)中のLに結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-アルキレン)-NR50a-である。式(III)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(C1-C3-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C3-アルキレン)-NR50a-である。式(III)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(直鎖C1-C3-アルキレン)-NR50C(O)-(直鎖C1-C3-アルキレン)-NR50a-である。
【００７７】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、SPが-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(III)中のLに結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-アルキレン)-NR50a-である。式(III)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(C1-C3-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C3-アルキレン)-NR50a-である。式(III)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(直鎖C1-C3-アルキレン)-NR50C(O)-(直鎖C1-C3-アルキレン)-NR50a-である。
【００７８】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり、SPが-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50a-は式(III)中のLに結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。式(III)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(分岐鎖C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-ヒドロキシ-アルキレン)-NR50a-である。式(III)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(分岐鎖C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-アルキレン)-NR50a-である。
【００７９】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、SPが-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50a-は式(III)中のLに結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。式(III)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(分岐鎖C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-ヒドロキシ-アルキレン)-NR50a-である。式(III)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(分岐鎖C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-アルキレン)-NR50a-である。
【００８０】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり、SPが-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(III)中のL3に結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(R5)-C1-C5-アルキレン-C(O)NH-NH-である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(R5)-CH2-C(O)NH-NH-である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、R5が、H又はアルキルである、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、R5が、H又はCH3である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。
【００８１】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、SPが-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(III)中のL3に結合する)である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(R5)-C1-C5-アルキレン-C(O)NH-NH-である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(R5)-CH2-C(O)NH-NH-である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、R5が、H又はアルキルである、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、R5が、H又はCH3である、式(III)の化合物が本明細書に述べられる。
【００８２】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり、SPが
【化１０７】
2021509908.tif 000119
(式中、X4は、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のL3に結合する)である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、SPが
【化１０８】
2021509908.tif 000120
(式中、X4は、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のL3に結合する)である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが
【化１０９】
2021509908.tif 000121
であり、X3が-CH2-である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが
【化１１０】
2021509908.tif 000122
であり、X3が-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-(式中、C(O)はX4に結合する)である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが
【化１１１】
2021509908.tif 000123
であり、X3が-C(O)-である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、Rd、Re、及びRfが、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-CH2C(O)OH又は-CH2C(O)O(アルキル)である)である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、Rd及びReが、独立に、-H又は-OHである、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、mが0である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、mが1である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、mが1であり、Rfが、-H又は-OHである、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。
【００８３】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり、SPが、-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のL3に結合する)であり;SPが
【化１１２】
2021509908.tif 000124
(式中、X3は-CH2-であり、mは1であり、Rd、Re、及びRfは-Hである)であるか;或いはSPが
【化１１３】
2021509908.tif 000125
(式中、X3は-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-(式中、C(O)はX4に結合する)であり、mは1であり、Rd、Re、及びRfは-Hである)である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、SPが、-C(O)-N(CH3)-CH2CH2-N(CH3)-、
【化１１４】
2021509908.tif 000126
である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、SPが、-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中のL3に結合する)であり;SPが
【化１１５】
2021509908.tif 000127
(式中、X3は-CH2-であり、mは1であり、Rd、Re、及びRfは-Hである)であるか;或いは、SPが
【化１１６】
2021509908.tif 000128
(式中、X3は-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-(式中、C(O)はX4に結合する)であり、mは1であり、Rd、Re、及びRfは-Hである)である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、SPが、-C(O)-N(CH3)-CH2CH2-N(CH3)-、
【化１１７】
2021509908.tif 000129
である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。
【００８４】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであるか、或いは両Rxが水素であり、或いはRxがこのパラグラフで明示される通りであり;SPが、
【化１１８】
2021509908.tif 000130
（両Rxがフルオロである場合）
【化１１９】
2021509908.tif 000131
（両Rxがフルオロである場合）
【化１２０】
2021509908.tif 000132
である、式(III)の化合物が提供される。
【００８５】
いくつかの実施態様において、zが1である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。特定の実施態様において、zは2である。いくつかの他の実施態様において、zは3である。特定の実施態様において、zは4である。いくつかの実施態様において、zは5である。いくつかの他の実施態様において、zは6である。特定の実施態様において、zは7である。いくつかの他の実施態様において、zは8である。特定の実施態様において、zは9である。いくつかの実施態様において、zは10である。いくつかの他の実施態様において、zは11である。いくつかの他の実施態様において、zは12である。いくつかの他の実施態様において、zは13である。いくつかの他の実施態様において、zは14である。いくつかの他の実施態様において、zは15である。いくつかの他の実施態様において、zは15である。いくつかの他の実施態様において、zは16である。いくつかの他の実施態様において、zは17である。いくつかの他の実施態様において、zは18である。特定の実施態様において、zは19である。いくつかの他の実施態様において、zは20である。いくつかの他の実施態様において、zは21である。いくつかの他の実施態様において、zは22である。いくつかの他の実施態様において、zは23である。いくつかの他の実施態様において、zは24である。いくつかの他の実施態様において、zは25である。いくつかの他の実施態様において、zは26である。いくつかの他の実施態様において、zは27である。いくつかの他の実施態様において、zは28である。いくつかの他の実施態様において、zは29である。いくつかの他の実施態様において、zは30である。いくつかの実施態様において、zは、両端を含む1〜15から選択される整数である。特定の実施態様において、zは、1〜10から選択される。特定の実施態様において、zは、1〜5から選択される。特定の実施態様において、zは、2〜5から選択される。特定の実施態様において、zは、2〜4から選択される。
【００８６】
いくつかの実施態様において、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)中の-L-又は-L1-L2-(L3)0-1-は、結合剤(例えば抗体又はその抗原結合断片)を、本明細書に述べられるペイロード化合物(例えばステロイド)と連結、接続、又は結合する任意の二価の基又は部分を指す。一般的に、本明細書に記載の抗体コンジュゲートのための好適な-L-及び-L1-L2-(L3)0-1-は、抗体の循環半減期を利用するのに十分に安定であり、同時に、該コンジュゲートの抗原媒介性内在化の後にそのペイロードを放出することができるものである。リンカーは、切断性でも、非切断性でもあり得る。切断性リンカーは、内在化後の細胞内代謝により切断される、例えば、加水分解、還元、又は酵素反応により切断されるリンカーである。非切断性リンカーは、結合したペイロードを、内在化後の抗体のリソソーム分解によって放出するリンカーである。好適なリンカーとしては、酸不安定性リンカー、加水分解不安定性リンカー、酵素切断性リンカー、還元不安定性リンカー、自壊性リンカー、及び非切断性リンカーがあるが、これらに限定されない。好適なリンカーとしては、グルクロニド、スクシンイミド-チオエーテル、ポリエチレングリコール(PEG)単位、カルバマート、ヒドラゾン、マル-カプロイル単位、ジスルフィド単位(例えば、-S-S-、-S-S-C(R1b)(R2b)-(式中、R1b及びR2bは、独立に、水素又はヒドロカルビルである)、パラ-アミノ-ベンジル(PAB)単位、ホスファート単位、例えば、モノ-、ビス-、及びトリス-ホスファート単位、ペプチド、例えば、2、3、4、5、6、7、8、又はそれ以上のアミノ酸単位を含むペプチド単位、例えば、非限定的に、バリン-シトルリン単位、バリン-アラニン単位、バリン-アルギニン単位、バリン-リジン単位、-リジン-バリン-シトルリン単位、及び-リジン-バリン-アラニン単位などであるか、又はこれらを含むものもあるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、-L-及び-L1-L2-(L3)0-1-は、式(II)(及びその実施態様)の「反応性基」(RG)と、抗体の反応性部位との反応から誘導される。連結基は、BAをペイロードに橋掛けする任意の二価部分である。連結基は、BA、ペイロード、及びシクロデキストリン部分を橋掛けする任意の三価部分でもあり得る。いくつかの実施態様において、-L-及び-L1-L2-(L3)0-1-は三価であり、連結基中の三価基(例えばリジン残基)に結合したシクロデキストリン部分を含む。-L-及び-L1-L2-(L3)0-1-は、反応性基残基を含み、それは、抗体、修飾抗体、又はその抗原結合断片の反応性部位と反応する官能基又は部分である。
【００８７】
いくつかの実施態様において、L及び-L1-L2-(L3)0-1-が
【化１２１】
2021509908.tif 000133
若しくはその位置異性体若しくは異性体の混合物;
【化１２２】
2021509908.tif 000134
若しくはその立体異性体若しくは立体異性体の混合物(式中、Sは、該反応性基残基がBAに結合するシステイン残基上のS原子を指す);又は
【化１２３】
2021509908.tif 000135
(式中、Nは、該反応性基残基がBAに結合するリジン残基上のN原子を指す)を含む、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。
【００８８】
いくつかの実施態様において、L及び-L1-L2-L3-が
【化１２４】
2021509908.tif 000136
を含む、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。
【００８９】
いくつかの実施態様において、L及び-L1-L2-(L3)0-1-が
【化１２５】
2021509908.tif 000137
若しくはその位置異性体若しくは異性体の混合物;
【化１２６】
2021509908.tif 000138
若しくはその立体異性体若しくは立体異性体の混合物、(式中、Sは、反応性基残基がBAに結合するシステイン残基上のS原子を指す);又は
【化１２７】
2021509908.tif 000139
(式中、Nは、該反応性基残基がBAに結合するリジン残基上のN原子を指す)を含み;且つL及び-L1-L2-(L3)0-1-が
【化１２８】
2021509908.tif 000140
を含む、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。
【００９０】
いくつかの実施態様において、Lが-L1-L2-(L3)0-1-である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、L3は存在する。いくつかの実施態様において、L3は存在しない。
【００９１】
いくつかの実施態様において、Lが-L1-L2-(L3)0-1-であり、L1が
【化１２９】
2021509908.tif 000141
又はその位置異性体若しくは異性体の混合物;
【化１３０】
2021509908.tif 000142
又はその立体異性体若しくは立体異性体の混合物(式中、Sは、反応性基残基がBAに結合するシステイン残基上のS原子を指す);及び
【化１３１】
2021509908.tif 000143
(式中、Nは、該反応性基残基がBAに結合するリジン残基上のN原子を指す)から選択される、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、Lが-L1-L2-(L3)0-1-であり、L1が
【化１３２】
2021509908.tif 000144
である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、Lが-L1-L2-(L3)0-1-であり、L1が
【化１３３】
2021509908.tif 000145
である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、Lが-L1-L2-(L3)0-1-であり、L1が
【化１３４】
2021509908.tif 000146
である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、Lが-L1-L2-(L3)0-1-であり、L1が
【化１３５】
2021509908.tif 000147
である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、Lが-L1-L2-(L3)0-1-であり、L1が
【化１３６】
2021509908.tif 000148
である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。
【００９２】
いくつかの実施態様において、Lが-L1-L2-(L3)0-1-であり、SPが-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-である場合、L3が
【化１３７】
2021509908.tif 000149
(式中、NH基はL2に結合する)であるか;又は、SPが、-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-若しくは-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-である場合、L3が
【化１３８】
2021509908.tif 000150
(式中、NH基はL2に結合する)であるか;又はSPが
【化１３９】
2021509908.tif 000151
である場合、L3が存在しない、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、Lが-L1-L2-(L3)-であり、SPが-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-である場合、L3が
【化１４０】
2021509908.tif 000152
(式中、NH基はL2に結合する)である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、Lが-L1-L2-(L3)0-1-であり、SPが、-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-又は-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-である場合、L3が
【化１４１】
2021509908.tif 000153
(式中、NH基はL2に結合する)である、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、Lが-L1-L2-(L3)0-1-であり、SPが
【化１４２】
2021509908.tif 000154
である場合、L3が存在しない、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。
【００９３】
いくつかの実施態様において、Lが-L1-L2-(L3)0-1-であり、L2が
【化１４３】
2021509908.tif 000155
-OCH2C(O)-、若しくはシクロデキストリン残基(CD);又はこれらの組合せを含む、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、Lが-L1-L2-(L3)0-1-であり、L2が
【化１４４】
2021509908.tif 000156
若しくはCD、又はこれらの組合せを含む、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、Lが-L1-L2-(L3)0-1-であり、L2がCDを含み、CDが、下記からなる群から選択される、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される
【表３】
2021509908.tif 000157
2021509908.tif 000158
。
【００９４】
いくつかの実施態様において、Lが-L1-L2-(L3)0-1-であり、-L2-(L3)0-1-が下記を含む、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される
【表４】
2021509908.tif 000159
2021509908.tif 000160
2021509908.tif 000161
2021509908.tif 000162
。
【００９５】
いくつかの実施態様において、L2が
【化１４５】
2021509908.tif 000163
(L1aは反応性基残基であり;
CDはシクロデキストリンであり;
AA4は三価リンカーであり;
AA5はペプチド残基であり;
PEGはポリエチレングリコールであり;
aは、両端を含む0〜5から選択される整数である)
を含む、式(III)、(III-P)、又は(III-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、AA4はアミノ酸残基であり;AA5は、ジ-ペプチド残基、トリ-ペプチド残基、テトラ-ペプチド残基(resiude)、又はペンタ-ペプチド残基であり;PEGはポリエチレングリコール残基であり;ここで、
【化１４６】
2021509908.tif 000164
は、示される化学基が式中の隣接する基に結合する原子を示し、CDは、各場合で独立に、存在しないか、又はシクロデキストリン残基であり、ここで、少なくとも1つのCDが存在し、下付き文字aは、両端を含む0〜5から選択される整数であり;これらの例において、下付き文字aは、0、1、2、3、4、又は5である。いくつかの実施態様において、下付き文字aは0である。いくつかの実施態様において、下付き文字aは1である。いくつかの実施態様において、下付き文字aは2である。いくつかの実施態様において、下付き文字aは3である。いくつかの実施態様において、下付き文字aは4である。いくつかの実施態様において、下付き文字aは5である。いくつかの実施態様において、AA4又はAA5のいずれか1つは、各場合で独立に、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、若しくはシトルリン、これらの誘導体、又はこれらの組合せから選択されるアミノ酸を含む。特定の実施態様において、AA4は、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、若しくはシトルリン、これらの誘導体、又はこれらの組合せから選択されるアミノ酸である。特定の実施態様において、AA4は、リジン又はリジンの誘導体である。特定の実施態様において、AA4はリジンである。特定の実施態様において、AA4はD-リジンである。特定の実施態様において、AA4はL-リジンである。特定の実施態様において、AA5はジ-ペプチド残基である。特定の実施態様において、該AA5はバリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、該AA5はシトルリン-バリンである。いくつかの実施態様において、該AA5はバリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、該AA5はアラニン-バリンである。いくつかの実施態様において、該AA5はバリン-グリシンである。いくつかの実施態様において、該AA5はグリシン-バリンである。特定の実施態様において、該AA5はトリ-ペプチド残基である。いくつかの実施態様において、該AA5はグルタミン酸-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、該AA5はグルタミン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、該AA5はリジン-バリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、該AA5はリジン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、該AA5はグルタミン酸-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、該AA5はテトラ-ペプチド残基である。いくつかの実施態様において、該AA5はグリシン-グリシン-フェニルアラニン-グリシンである。いくつかの実施態様において、該AA5はテトラ-ペプチド残基である。いくつかの実施態様において、該AA5はグリシン-グリシン-グリシン-グリシン-グリシンである。
【００９６】
特定の実施態様において、反応性基残基は、RGと、抗体又はその抗原結合断片上のシステイン又はリジン残基との反応から誘導される。特定の実施態様において、反応性基残基はクリックケミストリー反応から誘導される。前記クリックケミストリー反応のいくつかの実施態様において、L1は、アルキンとアジドとの間の1,3環化付加反応から誘導される。そのような反応性基残基の非限定的な例としては、歪みアルキン、例えば歪み促進型アルキン-アジド環化付加(SPAAC)に好適なもの、シクロアルキン、例えば、シクロオクチン、芳香環化アルキン、及び銅触媒の非存在下でアジドとの1,3環化付加反応を受けることが可能であるアルキンから誘導されるものがある。好適なL1としては、DIBAC(DIBAC部分の-C(O)CH2CH2C(O)-部位がL2によりカバーされている)、DIBO(DIBO部分の-O-部位がL2によりカバーされている)、BARAC(BARAC部分の
【化１４７】
2021509908.tif 000165
部位がL2によりカバーされている)、置換アルキン、例えばフッ素化されたアルキン、アザ-シクロアルキン、BCN、及びこれらの誘導体から誘導された部分もあるが、これらに限定されない。そのような反応性基残基を含むコンジュゲートは、アジド基により官能化された抗体から誘導することができる。そのような官能化抗体としては、アジド-ポリエチレングリコール基により官能化された抗体がある。特定の実施態様において、そのような官能化抗体は、少なくとも1つのグルタミン残基を含む抗体を、式H2N-LL-N3による化合物(式中、LLは二価ポリエチレングリコール基である)と、酵素トランスグルタミナーゼ、例えば微生物トランスグルタミナーゼの存在下で反応させることにより誘導される。抗体の好適なグルタミン残基としては、Q295、又は挿入若しくは突然変異、例えば、N297Q突然変異により誘導されたものがある。
【００９７】
いくつかの実施態様において、本明細書に記載のコンジュゲートのBAは、抗体又はその抗原結合断片である。いくつかの実施態様において、本明細書に記載のコンジュゲートはアジド-官能化抗体から誘導される。特定の実施態様において、本明細書に記載のコンジュゲートのBAは:
【化１４８】
2021509908.tif 000166
である(式中、Abは抗体又はその抗原結合断片であり、nは、両端を含む1〜10から選択される整数であり、zは、リンカーペイロード部分の数であり、
【化１４９】
2021509908.tif 000167
は、L、又は-L1-L2-(L3)0-1-への結合、例えば、アルキンとアジドとの間の1,3-環化付加反応から誘導される部分への結合である)。特定の実施態様において、zは3である。特定の実施態様において、zは、2又は4であり、すなわち、コンジュゲートは、2又は4つのリンカーペイロード部分を含む。
【００９８】
いくつかの実施態様において、-L-及び-L1-L2-L3-は、式(LA);
-L1-(SP1)q-(A)z-(NRa)s-(B)t-(CH2)u-(O)v-(SP2)w-
(LA);
の二価部分である
(式中、L1は本明細書に定義される通りであり;
Aは、アミノ酸又はペプチドであり;
Raは、H又はアルキルであり;
Bは、アリール、ヘテロアリール、又はヘテロシクロアルキルであり(ここで、アリール、ヘテロアリール、又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、-OH、又は-NRaRbにより任意に置換されている);
SP1及びSP2は、独立に、スペーサー基であり;且つ、q、z、s、t、u、v、及びwは、各場合で独立に、0又は1である)。
【００９９】
いくつかの他の実施態様において、-L-及び-L1-L2-(L3)0-1-は、式(LB);
-L1-(SP1)q-(A)z-(NRa)s-(B)t-(CH2)u-(O)v-(SP2)w-
(LB);
の三価部分である
(式中、L1は本明細書に定義される通りであり;
Aは、トリペプチド又はテトラペプチドであり、ここで、該トリペプチド又はテトラペプチド中のアミノ酸の少なくとも1つが、シクロデキストリン部分に直接又は間接的に結合し;
Raは、H又はアルキルであり;
Bは、アリール、ヘテロアリール、又はヘテロシクロアルキルであり(ここで、アリール、ヘテロアリール、又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、-OH、又は-NRaRbにより任意に置換されている);
SP1及びSP2は、独立に、スペーサー基であり;且つ、q、z、s、t、u、v、及びwは、各場合で独立に、0又は1である)。
【０１００】
いくつかの実施態様において、シクロデキストリン(CD)は、リジンアミノ酸残基などのアミノ酸残基に直接結合する。これは、CDが、リジンアミノ酸共有結合性リンカーから1結合位置離れていることを意味する。これらの実施態様のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、ペイロード部分にも直接結合する。これは、該共有結合性リンカーが、本明細書に述べられるステロイドペイロードなどがあるがこれに限定されないペイロードから1結合位置離れていることを意味する。これらの実施態様のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーはCD部分にも直接結合する。これは、該共有結合性リンカーが、本明細書に述べられるCD(複数可)などのCDから1結合位置離れていることを意味する。これらの実施態様のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、リジンアミノ酸又はこれらの誘導体である。
【０１０１】
いくつかの実施態様において、CDは、連結基(例えば、L、-L2-(L3)0-1-、及び-L1-L2-(L3)0-1)中の共有結合性リンカーに間接的に結合する。これは、該CDが、共有結合性リンカーから1を超える結合位置離れていることを意味する。これは、該CDが共有結合性リンカーの別の部分を介して結合していることも意味する。例えば、該CDは、共有結合性リンカーに結合したポリエチレングリコール基に結合したマレイミド基に結合し得る。これらの実施態様のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、ペイロード部分にも間接的に結合している。これは、該共有結合性リンカーが、本明細書に述べられるステロイドペイロードなどがあるがこれに限定されないペイロードから1を超える結合位置離れていることを意味する。これは、該共有結合性リンカーが、別の部分を介して該ペイロードに結合していることも意味する。例えば、該共有結合性リンカーは、ペイロードに結合し得るパラ-アミノベンゾイルに結合し得るVal-Ala又はVal-Citなどがあるがこれらに限定されないジペプチドに結合し得る。これらの実施態様のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、シクロデキストリン部分にも間接的に結合する。これは、該共有結合性リンカーが、本明細書に述べられるシクロデキストリンなどのシクロデキストリンから1を超える結合位置離れていることを意味する。これは、該共有結合性リンカーが、別の部分を介して該シクロデキストリンに結合していることも意味する。例えば、該共有結合性リンカーは、シクロデキストリンに結合し得る反応性基に結合し得るポリエチレングリコール基に結合し得る。これらの実施態様のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、リジンアミノ酸又はこれらの誘導体である。
【０１０２】
いくつかの実施態様において、-L-及び-L1-L2-(L3)0-1-は-L1-(SP1)q-(A)z-である。いくつかの実施態様において、-L-及び-L1-L2-(L3)0-1-は-L1-(SP1)q-(A)2-である。いくつかの実施態様において、-L-及び-L1-L2-(L3)0-1-は、式(LA1)
【化１５０】
2021509908.tif 000168
(式中、RAA1及びRAA2は、それぞれ、独立に、アミノ酸側鎖である)の部分である。式LA1のいくつかの実施態様において、SP1は二価ポリエチレングリコール基であり、L1は、アルキンとアジドとの間の反応の1,3-環化付加反応生成物である。
【０１０３】
いくつかの実施態様において、-L-及び-L1-L2-(L3)0-1-は-L1-(SP1)q-(A)z-である。いくつかの実施態様において、-L-及び-L1-L2-(L3)0-1-は-L1-(SP1)q-(A)2-である。いくつかの実施態様において、-L-及び-L1-L2-(L3)0-1-は、式(LB1)
【化１５１】
2021509908.tif 000169
(式中、RAA1及びRAA2は、それぞれ、独立に、アミノ酸側鎖である)の部分である。RAA3は、シクロデキストリン部分に直接又は間接的に結合するアミノ酸側鎖である。式LB1のいくつかの実施態様において、SP1は二価ポリエチレングリコール基であり、L1は、アルキンとアジドとの間の反応の1,3-環化付加反応生成物である。
【０１０４】
いくつかの実施態様において、-L-又は-L1-L2-L3-は、以下の構造:
-L1-(SP1)q-Z1-Z2-Z30-1-
を有する
(式中:
L1、SP1は本明細書に定義される通りであり;
qは0又は1であり;
Z1は、ポリエチレングリコール又はカプロイル基であり;
Z2は、ジペプチド、トリペプチド、又はテトラペプチドであり;且つ
Z3は、PAB基である)。
特定の実施態様において、L1は、クリックケミストリー反応性基から誘導され、Z1はポリエチレングリコール基である。特定の実施態様において、L1-(SP1)q-Z1-は:
【化１５２】
2021509908.tif 000170
若しくはこれらの混合物;又は
【化１５３】
2021509908.tif 000171
である。いくつかの実施態様において、該ジペプチドはバリン-シトルリン又はバリンアラニンである。いくつかの実施態様において、該トリペプチドはグルタミン酸-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、該テトラペプチドは、グリシン-グリシン-フェニルアラニン-グリシンである。
【０１０５】
いくつかの実施態様において、本明細書においてL1は、クリックケミストリー反応性基から誘導される。いくつかの実施態様において、L1は:
【化１５４】
2021509908.tif 000172
若しくはその混合物;
【化１５５】
2021509908.tif 000173
又は
【化１５６】
2021509908.tif 000174
若しくはその混合物であり;式中、
【化１５７】
2021509908.tif 000175
は結合剤への結合である。
【０１０６】
いくつかの他の例において、本明細書において、L1は、抗体又はその抗原結合断片上のシステイン又はリジン残基と反応する基から選択される。いくつかの実施態様において、L1は
【化１５８】
2021509908.tif 000176
であり;式中、
【化１５９】
2021509908.tif 000177
は、結合剤、例えば抗体のシステインへの結合である。いくつかの実施態様において、L1は
【化１６０】
2021509908.tif 000178
である。
【０１０７】
いくつかの実施態様において、SP1は:
【化１６１】
2021509908.tif 000179
から選択される。
いくつかの実施態様において、SP1は
【化１６２】
2021509908.tif 000180
である。いくつかの他の例において、SP1は
【化１６３】
2021509908.tif 000181
である。他の例において、SP1は
【化１６４】
2021509908.tif 000182
である。さらに他の例において、SP1は
【化１６５】
2021509908.tif 000183
である。いくつかの他の例において、SP1は
【化１６６】
2021509908.tif 000184
である。上記例のいずれにおいても、下付き文字a、b、及びcは、独立に、各場合において、両端を含む1〜20から選択される整数である。
【０１０８】
いくつかの実施態様において、RAA3は
【化１６７】
2021509908.tif 000185
から選択される(式中、CDはシクロデキストリン部分である)。いくつかの実施態様において、RAA3は
【化１６８】
2021509908.tif 000186
から選択される。
【０１０９】
いくつかの実施態様において、SP1は:
【化１６９】
2021509908.tif 000187
から選択される。
【０１１０】
いくつかの実施態様において、SP1は
【化１７０】
2021509908.tif 000188
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化１７１】
2021509908.tif 000189
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化１７２】
2021509908.tif 000190
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化１７３】
2021509908.tif 000191
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化１７４】
2021509908.tif 000192
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化１７５】
2021509908.tif 000193
である。
【０１１１】
いくつかの実施態様において、SP1は
【化１７６】
2021509908.tif 000194
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化１７７】
2021509908.tif 000195
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化１７８】
2021509908.tif 000196
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化１７９】
2021509908.tif 000197
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化１８０】
2021509908.tif 000198
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化１８１】
2021509908.tif 000199
である。
【０１１２】
いくつかの実施態様において、-L1-L2-は:
【化１８２】
2021509908.tif 000200
若しくはその混合物;
【化１８３】
2021509908.tif 000201
若しくはその混合物;
【化１８４】
2021509908.tif 000202
若しくはその混合物;又は
【化１８５】
2021509908.tif 000203
を含む(式中、b、c、及びdは、独立に、各場合において、両端を含む1〜20から選択される整数である)。これらの実施態様のいくつかにおいて、下付き文字b、c、及びdは、独立に、各場合において、両端を含む1〜6から選択される整数である。
【０１１３】
いくつかの実施態様において、-SP1は:
【化１８６】
2021509908.tif 000204
若しくはその混合物;
【化１８７】
2021509908.tif 000205
若しくはその混合物;
【化１８８】
2021509908.tif 000206
から選択される。
【０１１４】
いくつかの実施態様において、Aは、バリン-シトルリン、シトルリン-バリン、リジン-フェニルアラニン、フェニルアラニン-リジン、バリン-アスパラギン、アスパラギン-バリン、スレオニン-アスパラギン、アスパラギン-スレオニン、セリン-アスパラギン、アスパラギン-セリン、フェニルアラニン-アスパラギン、アスパラギン-フェニルアラニン、ロイシン-アスパラギン、アスパラギン-ロイシン、イソロイシン-アスパラギン、アスパラギン-イソロイシン、グリシン-アスパラギン、アスパラギン-グリシン、グルタミン酸-アスパラギン、アスパラギン-グルタミン酸、シトルリン-アスパラギン、アスパラギン-シトルリン、アラニン-アスパラギン、又はアスパラギン-アラニンから選択されるペプチドである。
【０１１５】
いくつかの実施態様において、Aは、バリン-シトルリン又はシトルリン-バリンである。
【０１１６】
いくつかの実施態様において、Aは、バリン-アラニン又はアラニン-バリンである。
【０１１７】
いくつかの実施態様において、Aは、リジン-バリン-アラニン又はアラニン-バリン-リジンである。
【０１１８】
いくつかの実施態様において、Aは、リジン-バリン-シトルリン又はシトルリン-バリン-リジンである。
【０１１９】
いくつかの実施態様において、Aは、グルタミン酸-バリン-シトルリン又はシトルリン-バリン-グルタミン酸である。
【０１２０】
いくつかの実施態様において、Aはバリンである。
【０１２１】
いくつかの実施態様において、Aはアラニンである。
【０１２２】
いくつかの実施態様において、Aはシトルリンである。
【０１２３】
いくつかの実施態様において、Aは
【化１８９】
2021509908.tif 000207
である。これらの実施態様のいくつかにおいて、RAA1はアミノ酸側鎖であり、RAA2はアミノ酸側鎖である。
【０１２４】
いくつかの実施態様において、Aは
【化１９０】
2021509908.tif 000208
である。これらの実施態様のいくつかにおいて、RAA1はアミノ酸側鎖であり、RAA2はアミノ酸側鎖であり、RAA3は、シクロデキストリン部分に直接又は間接的に結合しているアミノ酸側鎖である。
【０１２５】
いくつかの実施態様において、Aは
【化１９１】
2021509908.tif 000209
である。
【０１２６】
いくつかの実施態様において、Aは
【化１９２】
2021509908.tif 000210
である。
【０１２７】
いくつかの実施態様において、Aは
【化１９３】
2021509908.tif 000211
である。
【０１２８】
いくつかの実施態様において、Aは
【化１９４】
2021509908.tif 000212
である(式中、
【化１９５】
2021509908.tif 000213
は、シクロデキストリン部分への直接又は間接的な結合を表す)。
【０１２９】
上記のいずれかを含むいくつかの実施態様において、CDは、各場合で独立に、下記から選択される。
【表５】
2021509908.tif 000214
2021509908.tif 000215
いくつかの実施態様において、CDは
【化１９６】
2021509908.tif 000216
である。
いくつかの実施態様において、CDは
【化１９７】
2021509908.tif 000217
である。
いくつかの実施態様において、CDは
【化１９８】
2021509908.tif 000218
である。
いくつかの実施態様において、CDは
【化１９９】
2021509908.tif 000219
である。
いくつかの実施態様において、CDは
【化２００】
2021509908.tif 000220
である。
いくつかの実施態様において、CDは
【化２０１】
2021509908.tif 000221
である。
【０１３０】
いくつかの実施態様において、Aは
【化２０２】
2021509908.tif 000222
又はその異性体である。
【０１３１】
いくつかの実施態様において、RaはHである。
【０１３２】
いくつかの実施態様において、Raはアルキルである。
【０１３３】
いくつかの実施態様において、Raは、メチル、エチル、n-プロピル、i-プロピル、n-ブチル、t-ブチル、i-ブチル、又はペンチルである。
【０１３４】
いくつかの実施態様において、Bはアリールである。
【０１３５】
いくつかの実施態様において、Bはフェニルである。
【０１３６】
いくつかの実施態様において、Bは、フェニル又はピリジニルである。
【０１３７】
本明細書のいくつかの実施態様において、Bは:
【化２０３】
2021509908.tif 000223
である。これらの例において、R10は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化２０４】
2021509908.tif 000224
NRaRb、又はアジドである。これらの例において、下付き文字p及びmは、独立に、各場合において、両端を含む0〜4から選択される整数から選択される。
【０１３８】
本明細書のいくつかの実施態様において、Bは:
【化２０５】
2021509908.tif 000225
である。これらの例において、pは、0、1、2、3、又は4である。これらの実施態様のいくつかにおいて、R1は、各出現で独立に、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、又はハロである。いくつかの実施態様において、R1はアルキルである。いくつかの実施態様において、R1はアルコキシである。いくつかの実施態様において、R1はハロアルキルである。いくつかの実施態様において、R1はハロである。
【０１３９】
式(LA)のいくつかの実施態様において、-(NRa)s-(B)t-(CH2)u-(O)v-(SP2)wは:
【化２０６】
2021509908.tif 000226
である。
【０１４０】
本明細書に記載のL又はL1-L2-(L3)0-1の実施態様のいずれにおいても、1つ以上の増強基(enhancement groups)を、L又はL1-L2-(L3)0-1中のいずれかのアミノ酸の側鎖に連結できる。増強基を連結するための有用なアミノ酸としては、リジン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン、グルタミン酸、及びシトルリンがある。増強基への連結は、アミノ酸側鎖への直接的な結合でよく、或いは、連結はスペーサー及び/又は反応性基を介して間接的でもよい。有用なスペーサー及び反応性基としては、本明細書に記載のあらゆるものがある。該増強基は、当業者により有用であると考えられるいずれの基でもよい。例えば、該増強基は、化合物、ペイロード、リンカーペイロード、又は抗体コンジュゲートに、生物学的、生化学的、合成的な、可溶化の、画像化の、検出の、及び反応性の効果などを含むがこれらに限定されない有益な効果を付与するいずれの基でもよい。特定の実施態様において、該増強基は親水性基である。特定の実施態様において、増強基はシクロデキストリンである。特定の実施態様において、増強基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、ヘテロアルキレニルスルホン酸、ヘテロアルキレニルタウリン、ヘテロアルキレニルリン酸若しくはホスファート、ヘテロアルキレニルアミン(例えば、四級アミン)、又はヘテロアルキレニル糖である。特定の実施態様において、糖としては、非限定的に、単糖、二糖、及び多糖がある。例示的な単糖としては、グルコース、リボース、デオキシリボース、キシロース、アラビノース、マンノース、ガラクトース、フルクトースなどがある。特定の実施態様において、糖は、グルクロン酸など、さらにグルクロニドなどの抱合型(すなわちグルクロン酸抱合による)を含む糖酸を含む。例示的な二糖としては、マルトース、スクロース、ラクトース、ラクチュロース、トレハロースなどがある。例示的な多糖としては、アミロース、アミロペクチン、グリコーゲン、イヌリン、セルロースなどがある。シクロデキストリンは、当業者に公知であるいずれのシクロデキストリンでもよい。特定の実施態様において、該シクロデキストリンは、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、若しくはγシクロデキストリン、又はその混合物である。特定の実施態様において、該シクロデキストリンはαシクロデキストリンである。特定の実施態様において、該シクロデキストリンはβシクロデキストリンである。特定の実施態様において、該シクロデキストリンはγシクロデキストリンである。特定の実施態様において、該増強基は、コンジュゲートの残りの溶解度(solublity)を改善することが可能である。
【０１４１】
特定の実施態様において、増強基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、ヘテロアルキレニルスルホン酸、ヘテロアルキレニルタウリン、ヘテロアルキレニルリン酸又はホスファート、ヘテロアルキレニルアミン(例えば、四級アミン)、又はヘテロアルキレニル糖である。特定の実施態様において、糖としては、非限定的に、単糖、二糖、及び多糖がある。例示的な単糖としては、グルコース、リボース、デオキシリボース、キシロース、アラビノース、マンノース、ガラクトース、フルクトースなどがある。特定の実施態様において、糖としては、グルクロン酸など、さらにグルクロニドなどの抱合型(すなわちグルクロン酸抱合による)を含む糖酸がある。例示的な二糖としては、マルトース、スクロース、ラクトース、ラクチュロース、トレハロースなどがある。例示的な多糖としては、アミロース、アミロペクチン、グリコーゲン、イヌリン、セルロースなどがある。シクロデキストリンは、当業者に公知であるいずれのシクロデキストリンでもよい。特定の実施態様において、該シクロデキストリンは、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、若しくはγシクロデキストリン、又はその混合物である。特定の実施態様において、該シクロデキストリンはαシクロデキストリンである。特定の実施態様において、該シクロデキストリンはβシクロデキストリンである。特定の実施態様において、該シクロデキストリンはγシクロデキストリンである。特定の実施態様において、該増強基は、コンジュゲートの残りの溶解度を改善することが可能である。特定の実施態様において、該アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、置換又は非置換である。特定の実施態様において、該アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2である(式中、nは、1、2、3、4、又は5であり、mは、1、2、3、4、又は5である)。一実施態様において、該アルキル又はアルキレニルスルホン酸は-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、該ヘテロアルキル又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3Hである(nは、1、2、3、4、又は5である)。別の実施態様において、該アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hである(nは、1、2、3、4、又は5である)。別の実施態様において、該アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hである(式中、mは、1、2、3、4、又は5である)。別の実施態様において、該アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2である(nは、1、2、3、4、又は5である)。別の実施態様において、該アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2である(nは、1、2、3、4、又は5である)。別の実施態様において、該アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2である(式中、mは、1、2、3、4、又は5である)。
【０１４２】
表1から選択された化合物にコンジュゲートされた抗体又はその抗原結合断片を含む抗体-薬物コンジュゲートが本明細書に提供される。いくつかの実施態様において、該化合物は、式1d、1e、1g、又は1hによるものである。
【０１４３】
Dが、ブデソニドプロドラッグ又はブデソニドアナログ若しくは誘導体(フッ素化されたアナログ及び誘導体を含む)のプロドラッグであり、Ab、BA、L、及びSPが、本明細書に記載のいずれかの実施態様に定義された通りである、式Ab-L-SP-D又はBA-L-SP-Dの抗体-薬物コンジュゲートも本明細書に提供される。いくつかの実施態様において、Ab-L-SP-D及びBA-L-SP-DのD並びに式(II)及び(III)の
【化２０７】
2021509908.tif 000227
は、下記から選択される:
【化２０８】
2021509908.tif 000228
2021509908.tif 000229
2021509908.tif 000230
。Ab-L-SP-D、BA-L-SP-D、及び式(III)のいくつかの実施態様において、SPは、D又は
【化２０９】
2021509908.tif 000231
を放出することが可能な部分である。いくつかの実施態様において、生理的条件下で、LとSPの間の結合は切断されて、ステロイドプロドラッグ、すなわちH-SP-D又は
【化２１０】
2021509908.tif 000232
が放出され、SPとDの間の結合又はSPと
【化２１１】
2021509908.tif 000233
の間の結合は、その後に切断されて、生物活性のあるステロイドが放出される。いくつかの実施態様において、上記構造のそれぞれの中の
【化２１２】
2021509908.tif 000234
のn-プロピルは、R配置、すなわちアスタリスクにより示される炭素にある。いくつかの実施態様において、上記構造のそれぞれの中の
【化２１３】
2021509908.tif 000235
のn-プロピルは、S配置、すなわちアスタリスクにより示される炭素にある。いくつかの実施態様において、上記構造のそれぞれの中の
【化２１４】
2021509908.tif 000236
のn-プロピルは、R配置とS配置の混合物であり、すなわちアスタリスクにより示される炭素にある。いくつかの実施態様において、上記構造のそれぞれの中の
【化２１５】
2021509908.tif 000237
のn-プロピルはR配置とS配置の混合物であり、すなわちアスタリスクにより示される炭素にあり、該R:S混合物は、約1:1、約2:1、約3;1、約4:1、約5:1、約6;1、約7:1、約8:1、約9:1、又は約10:1である。
【０１４４】
(表3.  抗体-薬物コンジュゲート)
以下の式を有する抗体-ステロイドコンジュゲートも本明細書に述べられる:
【表６】
2021509908.tif 000238
2021509908.tif 000239
2021509908.tif 000240
2021509908.tif 000241
2021509908.tif 000242
2021509908.tif 000243
2021509908.tif 000244
2021509908.tif 000245
2021509908.tif 000246
2021509908.tif 000247
(式中、BAは、以下の構造
【化２１６】
2021509908.tif 000248
を有する抗体を含み、式中、Abは、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片、又は二重特異性抗体であり;RはC2-4-アルキレンであり;且つ、nは、両端を含む2〜4から選択される整数である)。いくつかの実施態様において、上記構造のそれぞれの中の
【化２１７】
2021509908.tif 000249
のn-プロピルは、R配置、すなわちアスタリスクにより示される炭素にある。いくつかの実施態様において、上記構造のそれぞれの中の
【化２１８】
2021509908.tif 000250
のn-プロピルは、S配置、すなわちアスタリスクにより示される炭素にある。いくつかの実施態様において、上記構造のそれぞれの中の
【化２１９】
2021509908.tif 000251
のn-プロピルはR配置とS配置の混合物であり、すなわちアスタリスクにより示される炭素にある。いくつかの実施態様において、上記構造のそれぞれの中の
【化２２０】
2021509908.tif 000252
のn-プロピルはR配置とS配置の混合物であり、すなわちアスタリスクにより示される炭素にあり、該R:S混合物は、約1:1、約2:1、約3;1、約4:1、約5:1、約6;1、約7:1、約8:1、約9:1、又は約10:1である。
【０１４５】
特定の実施態様において、BAは抗体であり、zは、両端を含む1〜30から選択される整数である。いくつかの実施態様において、zは、両端を含む1〜4から選択される整数である。いくつかの実施態様において、zは4である。いくつかの実施態様において、zは2である。
【０１４６】
ブデソニド、ブデソニドのプロドラッグ、ブデソニドアナログ若しくは誘導体(フッ素化されたアナログ及び誘導体を含む)、又はブデソニドアナログ若しくは誘導体(フッ素化されたアナログ及び誘導体を含む)のプロドラッグの結合剤コンジュゲートも本明細書に提供される。
【０１４７】
本開示に提供されるコンジュゲートのいずれかのための好適な結合剤としては、抗体、リンフォカイン、ホルモン、成長因子、ウイルス受容体、インターロイキン、又は任意の他の細胞結合若しくはペプチド結合分子若しくは物質があるが、これらに限定されない。
【０１４８】
いくつかの実施態様において、該結合剤は抗体である。本明細書で使用される用語「抗体」は、特定の抗原に特異的に結合するか、又はそれと特異的に相互作用する少なくとも1つの相補性決定領域(CDR)を含む、あらゆる抗原結合分子又は分子複合体を意味する。用語「抗体」は、4つのポリペプチド鎖、ジスルフィド結合により相互接続した2つの重鎖(H)及び2つの軽鎖(L)を含む免疫グロブリン分子、並びにその多量体(例えば、IgM)を含む。各重鎖は、重鎖可変領域(本明細書でHCVR又はVHと略される)及び重鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は、3つのドメイン、CH1、CH2、及びCH3を含む。各軽鎖は、軽鎖可変領域(本明細書でLCVR又はVLと略される)及び軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は、1つのドメイン(CL1)を含む。VH及びVL領域は、フレームワーク領域(FR)と呼ばれるより保存されている領域が点在している、相補性決定領域(CDR)と呼ばれる超可変領域にさらに分類できる。各VH及びVLは、3つのCDR及び4つのFRから構成され、以下の順:FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4でアミノ-末端からカルボキシ-末端に配列されている。いくつかの実施態様において、抗体(又はその抗原結合部分)のFRは、ヒト生殖細胞系配列に同一であり得るか、又は天然若しくは人工的に修飾されていることがある。アミノ酸共通配列は、2つ以上のCDRの対比分析(side-by-side analysis)に基づいて定義され得る。
【０１４９】
本明細書で使用される用語「抗体」は、完全な抗体分子の抗原結合断片も含む。本明細書で使用される、抗体の「抗原結合部分」、抗体の「抗原結合断片」などの用語は、抗原に特異的に結合して複合体を形成する、天然に存在する、酵素的に得ることができる、合成の、又は遺伝子操作されたあらゆるポリペプチド又は糖タンパク質を含む。抗体の抗原結合断片は、例えば、タンパク分解的消化又は抗体可変ドメイン及び任意に定常ドメインをコードするDNAの操作及び発現を含む組換え遺伝子操作法などの任意の好適な標準技法を利用して、完全な抗体分子から誘導できる。そのようなDNAは、公知であり、且つ/又は例えば、商業的供給源、DNAライブラリー(例えばファージ-抗体ライブラリーを含む)から容易に利用可能であるか、又は合成できる。DNAをシーケンシングし、化学的に又は分子生物学的技法を利用して操作して、例えば、1つ以上の可変及び/又は定常ドメインを好適な構成に配置することも、コドンを導入し、システイン残基を作りだし、アミノ酸を修飾、付加、又は欠失させることもできる。
【０１５０】
抗体のアミノ酸配列は、任意の公知の付番規定(numbering schemes)、例えば、Kabatら(「Kabat」付番規定);Al-Lazikaniらの文献(1997, J. Mol. Biol., 273:927-948)(「Chothia」 付番規定);MacCallumらの文献(1996, J. Mol. Biol. 262:732-745)(「Contact」付番規定);Lefrancらの文献(Dev. Comp. Immunol., 2003, 27:55-77)(「IMGT」付番規定);並びにHonegge及び Pluckthunの文献(J. Mol. Biol., 2001, 309:657-70)(「AHo」付番規定)により記載されるものなどを利用して付番できる。特記されない限り、本明細書で使用される付番規定はKabat付番規定である。抗体重鎖定常領域中の残基に言及する際には、「EU付番規定」が一般的に使用される(例えば、Kabatらに報告される通り、前掲)。しかし、付番規定の選択は、配列の差異が存在しない場合に配列の差異を暗示することを意図せず、当業者は、1つ以上の抗体のアミノ酸配列を調査することにより、配列位置を容易に確認することができる。
【０１５１】
いくつかの実施態様において、BA抗体は、以下の構造を有する官能化抗体である:
【化２２１】
2021509908.tif 000253
いくつかの実施態様において、Rは、アルキレン、アルケニレン、又はアルキニレンである。いくつかの実施態様において、Rはアルキレンである。いくつかの実施態様において、RはC2-4-アルキレンである。特定の実施態様において、Rはエチレンである。特定の実施態様において、nは3である。特定の実施態様において、zは、2又は4である。
【０１５２】
いくつかの実施態様において、BA抗体は、抗PSMA抗体でも抗CD70抗体でもない。
【０１５３】
BA抗原結合断片の非限定的な例としては:(i)Fab断片;(ii)F(ab')2断片;(iii)Fd断片;(iv)Fv断片;(v)一本鎖Fv(scFv)分子;(vi)dAb断片;及び(vii)抗体の超可変領域を模するアミノ酸残基からなる最小認識単位(例えば、CDR3ペプチドなど単離された相補性決定領域(CDR))、又は拘束性(constrained)FR3-CDR3-FR4ペプチドがある。他の操作された分子、例えば、ドメイン特異的抗体、シングルドメイン抗体、ラクダ抗体(VHH断片)、ドメイン欠損抗体(domain-deleted antibodies)、キメラ抗体、CDR-グラフト抗体、ダイアボディ、トリアボディ(triabodies)、テトラボディ(tetrabodies)、ミニボディ、ナノボディ(例えば、一価ナノボディ、二価ナノボディなど)、小モジュラー免疫医薬(small modular immunopharmaceuticals(SMIP))、及びサメ可変IgNARドメインなども、本明細書で使用される「抗原結合断片」という表現内に包含される。
【０１５４】
抗体の抗原結合断片は、典型的には、少なくとも1つの可変ドメインを含む。該可変ドメインは、任意のサイズ又はアミノ酸組成でもよく、一般的に、1つ以上のフレームワーク配列に隣接するか、それらとインフレームである少なくとも1つのCDRを含む。VHドメインがVLドメインと会合している抗原結合断片において、VH及びVLドメインは、互いに対して任意の好適な配列であり得る。例えば、可変領域は二量体で、VH-VH、VH-VL又はVL-VL二量体を含み得る。或いは、抗体の抗原結合断片は、単量体のVH又はVLドメインを含み得る。
【０１５５】
特定の実施態様において、抗体の抗原結合断片は、少なくとも1つの定常ドメインに共有結合している少なくとも1つの可変ドメインを含み得る。本開示の抗体の抗原結合断片内に見出し得る可変ドメイン及び定常ドメインの非限定的な例示的配置としては:(i) VH-CH1;(ii)VH-CH2;(iii)VH-CH3;(iv)VH-CH1-CH2;(v)VH-CH1-CH2-CH3;(vi)VH-CH2-CH3;(vii)VH-CL;(viii)VL-CH1;(ix)VL-CH2;(x)VL-CH3;(xi)VL-CH1-CH2;(xii)VL-CH1-CH2-CH3;(xiii) VL-CH2-CH3;及び(xiv)VL-CLがある。先に列記された例示的な配置のいずれかを含む、可変ドメイン及び定常ドメインの任意の配置において、可変ドメイン及び定常ドメインは、互いに直接連結していても、完全又は部分的なヒンジ又はリンカー領域により連結していてもよい。ヒンジ領域は、単一のポリペプチド分子中の隣接する可変ドメイン及び/又は定常ドメインの間に柔軟な又は半ば柔軟な連結をもたらす少なくとも2つ(例えば、5、10、15、20、40、60又はそれより多い)アミノ酸からなり得る。さらに、本開示の抗体の抗原結合断片は、互いに且つ/又は1つ以上の単量体VH若しくはVLドメインと(例えば、ジスルフィド結合(複数可)により)非共有結合的に会合している、先に列記された可変及び定常ドメイン配置のいずれかのホモ二量体又はヘテロ二量体(又は他のマルチマー)を含み得る。
【０１５６】
完全な抗体分子と同様に、抗原結合断片は、単一特異性でも、多重特異性(例えば二重特異性)でもあり得る。抗体の多重特異性抗原結合断片は、典型的には少なくとも2つの異なる可変ドメインを含み、各可変ドメインは、別な抗原に、又は同じ抗原上の異なるエピトープに特異的に結合することが可能である。本明細書に開示される例示的な二重特異性抗体フォーマットを含む任意の多重特異性抗体フォーマットを、当技術分野で利用可能な定型的な技法を利用して、本開示の抗体の抗原結合断片の状況での使用のために適合させることができる。
【０１５７】
本開示の抗体は、補体依存性細胞傷害(CDC)又は抗体依存性細胞傷害(ADCC)により機能し得る。「補体依存性細胞傷害」(CDC)は、補体の存在下での本開示の抗体による抗原発現細胞の溶解を指す。「抗体依存性細胞傷害」(ADCC)は、Fc受容体(FcR)を発現する非特異的な細胞傷害性細胞(例えば、ナチュラルキラー(NK)細胞、好中球、及びマクロファージ)が、標的細胞上の結合抗体を認識し、それにより標的細胞の溶解をもたらす、細胞媒介性の反応を指す。CDC及びADCCは、当技術分野に周知であり利用可能なアッセイを利用して測定できる(例えば、米国特許第5,500,362号及び同第5,821,337号、並びにClynesらの文献((1998) Proc. Natl. Acad. Sci.(USA) 95:652-656)を参照されたい)。抗体の定常領域は、補体を固定し、細胞依存性の細胞傷害を媒介する抗体の能力において重要である。そのため、抗体のアイソタイプは、抗体が細胞傷害を媒介するのに望ましいかどうかに基づいて選択され得る。
【０１５８】
本明細書の化合物に有用な抗体としてはヒト抗体がある。本明細書で使用される用語「ヒト抗体」は、ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列から誘導された可変領域及び定常領域を有する抗体を含むものとする。ヒト抗体は、例えば、CDR、特にCDR3中に、ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列によりコードされないアミノ酸残基(例えば、インビトロでのランダムな若しくは部位特異的な突然変異誘発によるか、又はインビボでの体細胞突然変異によって導入された突然変異)を含み得る。しかし、本明細書で使用される用語「ヒト抗体」は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖細胞系から誘導されたCDR配列がヒトフレームワーク配列に移植された抗体を含まないものとする。用語「ヒト抗体」は、天然に存在する未修飾の生物中に、修飾又はヒト介入/操作なしに通常存在する天然に存在する分子を含まない。
【０１５９】
抗体は、いくつかの実施態様において、組換えヒト抗体であり得る。本明細書で使用される用語「組換えヒト抗体」は、組換え手段により調製、発現、作製、又は単離された全ヒト抗体、例えば、宿主細胞にトランスフェクトされた組換え発現ベクターを用いて発現された抗体(以下でさらに記載する)、組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリーから単離された抗体(以下でさらに記載する)、ヒト免疫グロブリン遺伝子についてトランスジェニックである動物(例えば、マウス)から単離された抗体(例えば、Taylorらの文献((1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295)を参照)、又はヒト免疫グロブリン遺伝子配列の他のDNA配列へのスプライシングを伴う任意の他の手段により調製、発現、作製、若しくは単離された抗体を含むものとする。そのような組換えヒト抗体は、ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列から誘導された可変領域及び定常領域を有する。しかし、特定の実施態様において、そのような組換えヒト抗体は、インビトロ突然変異誘発(又は、ヒトIg配列に関してトランスジェニックである動物が利用される場合、インビボの体性突然変異誘発)を受け、そのため、該組換え抗体のVH及びVL領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖細胞系VH及びVL配列から誘導されてそれらに関連するが、インビボでヒト抗体生殖細胞系レパートリー内に天然に存在しない可能性がある配列である。
【０１６０】
ヒト抗体は、ヒンジの不均一性と関連する2種の形態で存在し得る。一形態において、免疫グロブリン分子は、二量体が鎖間重鎖ジスルフィド結合により結合している、約150〜160kDaの安定な4鎖コンストラクトを含む。第2の形態において、二量体は鎖間ジスルフィド結合により連結せず、共有結合した軽鎖及び重鎖から構成される約75〜80kDaの分子が形成される(半抗体)。これらの形態は、親和性精製の後ですら、分離するのが極めて困難であった。
【０１６１】
種々のインタクトなIgGアイソタイプにおける第2の形態の出現頻度は、非限定的に、抗体のヒンジ領域アイソタイプと関連する構造的な違いによるものである。ヒトIgG4ヒンジのヒンジ領域中の単一のアミノ酸置換により、第2の形態の出現を、ヒトIgG1ヒンジを使用して典型的に観察されるレベルまで著しく減少させることができる(Angalらの文献((1993) Molecular Immunology 30:105))。本開示は、例えば産生において、所望の抗体形態の収率を改善するのに望ましくなり得る1つ以上の突然変異を、ヒンジ、CH2、又はCH3領域に有する抗体を包含する。
【０１６２】
本明細書の化合物に有用な抗体は、単離された抗体であり得る。本明細書で使用される「単離された抗体」は、同定され、その天然の環境の少なくとも1つの構成要素から分離且つ/又は回収された抗体を意味する。例えば、生物の少なくとも1つの構成要素、又は抗体が天然に存在するか若しくは天然に産生される組織若しくは細胞からから分離若しくは除去された抗体は、本開示の目的のための「単離された抗体」である。単離された抗体は、組換え細胞内のインサイチュの抗体も含む。単離された抗体は、少なくとも1つの精製又は単離工程にかけられた抗体である。特定の実施態様によると、単離された抗体は、他の細胞物質及び/又は化学物質を実質的に含まないことがある。
【０１６３】
本明細書に開示される化合物に有用な抗体は、重鎖及び軽鎖可変ドメインのフレームワーク及び/又はCDR領域中に、抗体が由来した対応する生殖細胞系配列と比べて1つ以上のアミノ酸置換、挿入、及び/又は欠失を含み得る。そのような突然変異は、本明細書に開示されるアミノ酸配列を、例えば、公的な抗体配列データベースから利用可能な生殖細胞系配列と比べることにより容易に確認できる。本開示は、本明細書に開示されるアミノ酸配列のいずれかから誘導された抗体、及びその抗原結合断片であって、1つ以上のフレームワーク及び/又はCDR領域内の1つ以上のアミノ酸が、抗体が由来した生殖細胞系配列の対応する残基(複数可)に、又は別のヒト生殖細胞系配列の対応する残基(複数可)に、又は対応する生殖細胞系残基(複数可)の保存的アミノ酸置換に突然変異させられた(そのような配列変化を、本明細書において、集合的に「生殖細胞系突然変異」と称する)抗体、及びその抗原結合断片を含む。当業者は、本明細書に開示の重鎖及び軽鎖可変領域配列から出発して、1つ以上の個別の生殖細胞系突然変異又はその組合せを含む多くの抗体及び抗原結合断片を容易に製造できる。特定の実施態様において、VH及び/又はVLドメイン内のフレームワーク及び/又はCDR残基の全てを突然変異させて、抗体が由来した元の生殖細胞系配列にみられる残基に戻す。他の実施態様において、特定の残基のみ、例えば、FR1の最初の8つのアミノ酸内若しくはFR4の最後の8つのアミノ酸内にみられる突然変異した残基のみ、又はCDR1、CDR2、若しくはCDR3内にみられる突然変異した残基のみを突然変異させて、元の生殖細胞系配列に戻す。他の実施態様において、フレームワーク及び/又はCDR残基(複数可)の1つ以上を、異なる生殖細胞系配列(すなわち、抗体がもともと由来する生殖細胞系配列とは異なる生殖細胞系配列)の対応する残基(複数可)に突然変異させる。さらに、本開示の抗体は、例えば、特定の個別の残基が特定の生殖細胞系配列の対応する残基に変異させられる一方で、元の生殖細胞系配列とは異なる特定の他の残基が維持されるか、又は異なる生殖細胞系配列の対応する残基に突然変異させられる、フレームワーク及び/又はCDR領域内の2つ以上の生殖細胞系突然変異の任意の組合せを含み得る。いったん得られると、1つ以上の生殖細胞系突然変異を含む抗体及び抗原結合断片は、改善された結合特異性、増加した結合親和性、改善又は増強された拮抗性又は作動性の生物学的性質(場合によって)、減少した免疫原性など、1つ以上の所望の性質に関して容易に試験できる。
【０１６４】
いくつかの実施態様において、該抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片(Fab、Fab'、及びF(ab)2、ミニボディ、ダイアボディ、トリボディなど)、又は二重特異性抗体であり得る。本明細書の抗体は、それぞれ引用により全体として組み込まれている米国特許第6,596,541号及び米国特許出願公開第2012/0096572号に記載の方法を利用してヒト化され得る。
【０１６５】
結合剤が抗体である場合、それは、ポリペプチドであり膜貫通分子(例えば、受容体)又はグリコシル化若しくはリン酸化され得る成長因子であり得る抗原結合パートナーに結合する。
【０１６６】
結合剤が結合する好適な標的としては、ステロイドの選択的な送達が望ましい、あらゆる標的/抗原がある。いくつかの実施態様において、結合剤は、下記から選択される標的に結合する抗体、修飾抗体、又はその抗原結合断片である:AXL、BAFFR、BCMA、BCR-リスト構成要素、BDCA2、BDCA4、BTLA、BTNL2 BTNL3、BTNL8、BTNL9、C10orf54、CCR1、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR9、CCR10、CD11c、CD137、CD138、CD14、CD168、CD177、CD19、CD20、CD209、CD209L、CD22、CD226、CD248、CD25、CD27、CD274、CD276、CD28、CD30、CD300A、CD33、CD37、CD38、CD4、CD40、CD44、CD45、CD46、CD47、CD48、CD5、CD52、CD55、CD56、CD59、CD62E、CD68、CD69、CD70、CD74、CD79a、CD79b、CD8、CD80、CD86、CD90.2、CD96、CLEC12A、CLEC12B、CLEC7A、CLEC9A、CR1、CR3、CRTAM、CSF1R、CTLA4、CXCR1/2、CXCR4、CXCR5、DDR1、DDR2、DEC-205、DLL4、DR6、FAP、FCamR、FCMR、FcR's、Fire、GITR、HER2、HHLA2、HLAクラスII、HVEM、ICOSLG、IFNLR1、IL10R1、IL10R2、IL12R、IL13RA1、IL13RA2、IL15R、IL17RA、IL17RB、IL17RC、IL17RE、IL20R1、IL20R2、IL21R、IL22R1、IL22RA、IL23R、IL27R、IL29R、IL2Rg、IL31R、IL36R、IL3RA、IL4R、IL6R、IL5R、IL7R、IL9R、インテグリン、LAG3、LIFR、MAG/シグレック-4、MMR、MSR1、NCR3LG1、NKG2D、NKp30、NKp46、PDCD1、PRLR、PROKR1、PVR、PVRIG、PVRL2、PVRL3、RELT、SIGIRR、シグレック-1、シグレック-10、シグレック-5、シグレック-6、シグレック-7、シグレック-8、シグレック-9、SIRPA、SLAMF7、TACI、TCR-リスト構成要素/会合体、PTCRA、TCRb、CD3z、CD3、TEK、TGFBR1、TGFBR2、TGFBR3、TIGIT、TLR2、TLR4、TNF-α、TROY、TSLPR、TYRO、VLDLR、VSIG4、及びVTCN1。いくつかの実施態様において、該結合剤は、アダリムマブ又はインフリキシマブである。いくつかの実施態様において、該結合剤は、アレムツズマブ、ムロモナブ、リツキシマブ、トシツズマブ(tosituzumab)、又は作動性抗体(免疫刺激が、意図される作用機序の一部になり得る)である。
【０１６７】
本明細書で使用されるプロラクチン受容体、「PRLR」などの表現は、引用により全体として本明細書に組み込まれているWO2015026907号の配列番号:404に述べられているアミノ酸配列を含むヒトプロラクチン受容体を指す。表現「PRLR」は、単量体PRLR分子と多量体PRLR分子の両方を含む。本明細書で使用される通り、表現「単量体ヒトPRLR」は、多量体化ドメインを全く含まず有することもなく、通常の条件下で、別のPRLR分子への直接的な物理的接続なしに単一のPRLR分子として存在するPRLRタンパク質又はその部分を意味する。例示的な単量体PRLR分子は、WO2015026907号の配列番号:401のアミノ酸配列(例えば、WO2015026907号の実施例3参照)を含む、本明細書で「hPRLR.mmh」と称される分子である。本明細書で使用される通り、表現「二量体ヒトPRLR」は、リンカー、共有結合、非共有結合により、又は抗体Fcドメインなどの多量体化ドメインにより互いに接続している2つのPRLR分子を含むコンストラクトを意味する。例示的な二量体PRLR分子は、WO2015026907号の配列番号:402のアミノ酸配列(例えば、WO2015026907号の実施例3参照)を含む、本明細書で「hPRLR.mFc」と称される分子である。
【０１６８】
WO2015026907号の表1に列記された例示的な抗PRLR抗体は、例示的な抗PRLR抗体の重鎖可変領域(HCVR)、軽鎖可変領域(LCVR)、重鎖相補性決定領域(HCDR1、HCDR2、及びHCDR3)、及び軽鎖相補性決定領域(LCDR1、LCDR2、及びLCDR3)のアミノ酸配列識別子(identifiers) -又はそれに対して少なくとも90%、少なくとも95%、少なくとも98%、若しくは少なくとも99%の配列同一性を有するその実質的に類似な配列を述べる。WO2015026907号の表2は、例示的な抗PRLR抗体のHCVR、LCVR、HCDR1、HCDR2 HCDR3、LCDR1、LCDR2、及びLCDR3の核酸配列識別子-又はそれに対して少なくとも90%、少なくとも95%、少なくとも98%、若しくは少なくとも99%の配列同一性を有するその実質的に類似な配列を述べる。
【０１６９】
いくつかの実施態様において、リンカー-ペイロード又はペイロードにコンジュゲートされる抗体又はその抗原結合断片は、ヒトプロラクチン受容体(PRLR)を標的とする抗体であり得る。例示的な抗PRLR抗体は、例えばWO 2015/026907号に見出すことができる。いくつかの実施態様において、抗PRLR抗体は、配列番号:17を含む重鎖相補性決定領域(HCDR)-1;配列番号:19を含むHCDR2;配列番号:20を含むHCDR3;配列番号:22を含む軽鎖相補性決定領域(LCDR)-1;配列番号:23を含むLCDR2;及び配列番号:24を含むLCDR3を含む。いくつかの実施態様において、抗PRLR抗体は、配列番号:17を含む重鎖可変領域(HCVR) 及び配列番号:21を含む軽鎖可変領域(LCVR)を含む。前記実施態様のいずれかにおいて、該抗PRLR抗体は、抗体機能又は結合の不全を起こさずにグルタミン残基をある位置で挿入する部位特異的突然変異導入により調製できる。例えば、前記実施態様のいずれかにおいて、該抗PRLR抗体はAsn297Gln(N297Q)突然変異を含み得る。N297Q突然変異を有するそのような抗体は、1つ以上のさらなる天然に存在するグルタミン残基をその可変領域にも含み得るが、それは、トランスグルタミナーゼに接近しやすく、したがって、ペイロード又はリンカー-ペイロードへのコンジュゲーションが可能である(表B)。
表B.例示的な抗体H1H6958N(抗PRLR)の配列
【表７】
2021509908.tif 000254
【０１７０】
提供される化合物又はコンジュゲートの実施態様のいずれかにおいて、BAは、PRLRに結合する抗体又はその抗原結合断片である。提供される化合物又はコンジュゲートの実施態様のいずれかにおいて、BAは抗体又はその抗原結合断片であり、コンジュゲーションは少なくとも1つのQ295残基を介する。提供される化合物又はコンジュゲートの実施態様のいずれかにおいて、BAは抗体又はその抗原結合断片であり、コンジュゲーションは2つのQ295残基を介する。提供される化合物又はコンジュゲートの実施態様のいずれかにおいて、BAは、N297Q抗体又はその抗原結合断片である。提供される化合物又はコンジュゲートの実施態様のいずれかにおいて、BAは、N297Q抗体又はその抗原結合断片であり、コンジュゲーションは、少なくとも1つのQ295及び少なくとも1つのQ297残基を介する。提供される化合物又はコンジュゲートの実施態様のいずれかにおいて、BAは、N297Q抗体又はその抗原結合断片であり、コンジュゲーションは、2つのQ295残基及び2つのQ297残基を介する。特定の実施態様において、付番は、EU付番方式によるものである。
【０１７１】
上記実施態様のいずれかにおいて、BAは抗MSR1抗体である。特定の実施態様において、BAは、抗MSR1抗体H1H21234Nである。特定の実施態様において、BAは、抗MSR1抗体H1H21234N N297Qである。特定の実施態様において、BAは、配列番号:2によるHCVR及び配列番号:10によるLCVRを含む抗MSR1抗体である。特定の実施態様において、BAは、それぞれ配列番号:4、6、8、12、14、及び16によるHCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、及びLCDR3のうち1、2、3、4、5、又は6つを含む抗MSR1抗体である。特定の実施態様において、該HCVRは配列番号:1によりコードされている。特定の実施態様において、該LCVRは配列番号:9によりコードされている。特定の実施態様において、HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、及びLCDR3のうちの1、2、3、4、5、又は6つは、それぞれ、ポリヌクレオチド配列配列番号:3、5、7、11、13、及び15によりコードされている。N297Qは、1つ以上の残基297がアスパラギン(N)からグルタミン(Q)に突然変異していることを示す。好ましくは、各残基297はQに突然変異している。好ましい実施態様において、付番はEU付番方式によるものである。このパラグラフの特定の実施態様において、zは1〜4である。特定の実施態様において、zは、1、2、3、又は4である。特定の実施態様において、zは2である。特定の実施態様において、zは4である。
【表８】
2021509908.tif 000255
【０１７２】
結合剤、例えば抗体又は抗原結合分子は、該抗体又は抗原結合分子内の特定のアミノ酸での接続により該結合剤に結合したリンカーを含み得る。本開示のこの態様の状況で使用できる例示的なアミノ酸接続としては、例えば、リジン(例えば、US 5,208,020号;US 2010/0129314号;Hollanderらの文献(Bioconjugate Chem., 2008, 19:358-361);WO 2005/089808号;US 5,714,586号;US 2013/0101546号;及びUS 2012/0585592号参照)、システイン(例えば、US 2007/0258987号;WO 2013/055993号;WO 2013/055990号;WO 2013/053873号;WO 2013/053872号;WO 2011/130598号;US 2013/0101546号;及びUS 7,750,116号参照)、セレノシステイン(例えば、WO 2008/122039号;及びHoferらの文献(Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 2008, 105:12451-12456)参照)、ホルミルグリシン(例えば、Carricoらの文献(Nat. Chem. Biol., 2007, 3:321-322);Agarwalらの文献(Proc. Natl. Acad. Sci.,USA,2013,110:46-51)、及びRabukaらの文献(Nat. Protocols, 2012, 10:1052-1067)参照)、非天然アミノ酸(例えば、WO 2013/068874号、及びWO 2012/166559号参照)、及び酸性アミノ酸(例えば、WO 2012/05982号参照)がある。リンカーは、トランスグルタミナーゼ系化学酵素的コンジュゲーションによりグルタミンを介してコンジュゲートできる(例えば、Dennlerらの文献(Bioconjugate Chem. 2014, 25, 569-578)参照)。リンカーは、炭水化物への接続によっても(例えば、US 2008/0305497号、WO 2014/065661号、及びRyanらの文献(Food & Agriculture Immunol., 2001, 13:127-130)参照)、ジスルフィドリンカーへの接続によっても(例えば、WO 2013/085925号、WO 2010/010324号、WO 2011/018611号、WO 2014/197854号、及びShaunakらの文献(Nat. Chem. Biol., 2006, 2:312-313)参照)、抗原-結合タンパク質にコンジュゲートできる。いくつかの実施態様において、結合剤は抗体であり、該抗体はリジン残基によりリンカーに結合している。いくつかの実施態様において、該抗体はシステイン残基によりリンカーに結合している。
【０１７３】
上記実施態様のいずれかにおいて、BAは抗PRLR抗体である。特定の実施態様において、BAは抗PRLR抗体H1H6958Nである。特定の実施態様において、BAは、抗PRLR抗体H1H6958N N297Qである。特定の実施態様において、BAは、配列番号:17によるHCVR及び配列番号:21によるLCVRを含む抗PRLR抗体である。特定の実施態様において、BAは、それぞれ配列番号:18、19、20、22、23、及び24によるHCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、及びLCDR3のうちの1、2、3、4、5、又は6を含む抗PRLR抗体である。N297Qは、1つ以上の残基297がアスパラギン(N)からグルタミン(Q)に突然変異していることを示す。好ましくは、各残基297はQに突然変異している。好ましい実施態様において、付番はEU付番方式によるものである。このパラグラフの特定の実施態様において、kは1〜4である。特定の実施態様において、kは、1、2、3、又は4である。特定の実施態様において、kは4である。
【０１７４】
(D.  化合物を調製する方法)
本明細書に記載のコンジュゲートは、本明細書に記載のリンカー-ペイロードを、結合剤、例えば抗体と、標準的なコンジュゲーション条件下でカップリングすることにより合成できる(例えば、全体を引用により本明細書に組みこむ、Drug Deliv. 2016 Jun;23(5):1662-6;AAPS Journal, Vol. 17, No. 2, March 2015;及び Int. J. Mol. Sci. 2016, 17, 561参照)。リンカー-ペイロードは、対象とするペイロード及び結合剤をペイロードと接続する部分(又はその一部)として最終的に作用する連結部分を含む合成中間体である。リンカー-ペイロードは、結合剤と反応して本明細書に記載のコンジュゲートを形成する反応性基を含む。結合剤が抗体である場合、該抗体は、該抗体の1つ以上のシステイン、リジン、又は他の残基を介してリンカー-ペイロードにカップリングできる。リンカーペイロードは、例えば、該抗体を還元剤、例えばジチオスエリトール(dithiotheritol)に供して、該抗体のジスルフィド結合を切断し、該還元された抗体を、例えばゲル濾過により任意に精製し、その後に該抗体を、反応性部分、例えばマレイミド基を含むリンカー-ペイロードと反応させることによりシステイン残基にカップリングできる。好適な溶媒としては、水、DMA、DMF、及びDMSOがあるが、これらに限定されない。反応性基、例えば、活性化エステル又は酸ハライド基を含むリンカー-ペイロードは、リジン残基にカップリングできる。好適な溶媒としては、水、DMA、DMF、及びDMSOがあるが、これらに限定されない。コンジュゲートは、例えば、サイズ排除クロマトグラフィー、透析、及び限外濾過/透析濾過を含む公知のタンパク質技法を利用して精製できる。
【０１７５】
(リンカー-ステロイド中間体)
抗体-薬物コンジュゲートの調製に有用である、式(2000)によるリンカー-ステロイド
RG-L2-(L3)0-1-SP-D
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくは誘導体が本明細書に提供される
(式中
Dは、
a)
【化２２２】
2021509908.tif 000256
(式中、式(a)中の両Rxは水素であり;R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;且つ、SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、
【化２２３】
2021509908.tif 000257
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は式(2000)中の(L3)0-1に対するものである)、-CH2-NH-(式中、Nは式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、
【化２２４】
2021509908.tif 000258
(式中、Nは式(2000)中の(L3)0-1に結合し、Arは、任意に置換されたアリーレン(いくつかの実施態様において、
【化２２５】
2021509908.tif 000259
)又は任意に置換されたヘテロアリーレンである)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(2000)中の(L3)0-1に結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、又は
【化２２６】
2021509908.tif 000260
(式中、X4は式(2000)中の(L3)0-1に結合する)であるか;或いは
式(a)中の両Rxはフルオロであり;R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;且つ、SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-X1b-(式中、X1bは式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、
【化２２７】
2021509908.tif 000261
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は式(2000)中の(L3)0-1に対するものである)、-CH2-NH-(式中、Nは式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、
【化２２８】
2021509908.tif 000262
(式中、Nは式(2000)中の(L3)0-1に結合し、Arは、任意に置換されたアリーレン(いくつかの実施態様において、
【化２２９】
2021509908.tif 000263
)又は任意に置換されたヘテロアリーレンである)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(2000)中の(L3)0-1に結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、-C(O)-N(R5)-(C1-C10-アルキレン)-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(2000)中の(L3)0-1に結合する)、又は
【化２３０】
2021509908.tif 000264
(式中、X4は式(2000)中の(L3)0-13に結合する)である);並びに
b)上記表A中の化合物(ここで、表A中の化合物は、式(2000)の化合物のRGに、-C(O)CH2OH基のヒドロキシを介して、すなわち-C(O)CH2-O-SP-(L3)0-1-により、又はマプラコラトのヒドロキシを介して、すなわち-O-SP-(L3)0-1-により連結する)
から選択され:
X1は-N(C1-6アルキル)-であり;
X1bは、-S-、-NH-、又は-N(C1-6アルキル)-であり;
X2は-NH-であり;
X3は-CH2-であるか、X3は-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-(式中、C(O)はX4に結合する)であるか、或いはX3は-C(O)-であり;
X4は-O-であり;
R5は、H、-OH、-OCH3、又はC1-6アルキルであり;
R50及びR50aは、独立に、水素又はC1-C6-アルキルであり;
Rd、Re、及びRfは、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-CH2C(O)OH又は-CH2C(O)O(アルキル)である)であり;且つ
mは0又は1であり;
RGは反応性基であり;
L2は連結リンカーであり;且つ
L3は、存在する場合、自壊型リンカーである)。
【０１７６】
抗体-薬物コンジュゲートの調製に有用である、式(II)によるリンカー-ステロイドが本明細書に提供される
【化２３１】
2021509908.tif 000265
式中、RG、L2、L3、SP、R4、及びRxは本明細書に定義される通りである。
【０１７７】
いくつかの又はいずれかの実施態様において、式(II-P)の化合物:
【化２３２】
2021509908.tif 000266
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくは誘導体が以下に述べられる
(式中:
R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;
SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は式(II)中のL3に結合する)、-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(II)中のL3に結合する)、又は
【化２３３】
2021509908.tif 000267
(式中、X4は式(II)中のL3に結合する)であり;
X1は-N(C1-3アルキル)-であり;
X2は-NH-であり;
X3は-CH2-であるか、X3は-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-(式中、C(O)はX4に結合する)であるか、或いはX3は-C(O)-であり;
X4は-O-であり;
R5は、H、-OH、-OCH3、又はアルキルであり;
Rd、Re、及びRfは、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-CH2C(O)OH又は-CH2C(O)O(アルキル)である)であり;且つ
mは0又は1であり;
RGは反応性基であり;
L2は連結リンカーであり;且つ
L3は、存在する場合、自壊型リンカーである)。
【０１７８】
いくつかの又はいずれかの実施態様において、式(II-P-1)の化合物:
【化２３４】
2021509908.tif 000268
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくは誘導体が以下に述べられる
(式中:
R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;
SPは、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は式(II)中のL3に結合する)、-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(II)中のL3に結合する)、又は
【化２３５】
2021509908.tif 000269
(式中、X4は式(II)中のL3に結合する)であり;
X1は-N(C1-3アルキル)-であり;
X2は-NH-であり;
X3は-CH2-であるか、X3は-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-(式中、C(O)はX4に結合する)であるか、或いはX3は-C(O)-であり;
X4は-O-であり;
R5は、H、-OH、-OCH3、又はアルキルであり;
Rd、Re、及びRfは、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-CH2C(O)OH又は-CH2C(O)O(アルキル)である)であり;且つ
mは0又は1であり;
RGは反応性基であり;
L2は連結リンカーであり;且つ
L3は、存在する場合、自壊型リンカーである)。
【０１７９】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの又はいずれかの実施態様において、両Rxはフルオロである。
【０１８０】
いくつかの実施態様において、R4がアルキルである、式(II)、(II-P)、及び(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、R4はシクロアルキルではない。これらの実施態様のいくつかにおいて、R4は、直鎖又は分岐鎖のアルキルである。これらの実施態様のいくつかにおいて、R4はアリールである。これらの実施態様のいくつかにおいて、R4はアリールアルキルである。これらの実施態様のいくつかにおいて、R4はN-含有ヘテロシクロアルキルである。いくつかの実施態様において、R4は、非限定的に、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、又はノニルなどのアルキルである。いくつかの実施態様において、R4はメチルである。いくつかの実施態様において、R4はエチルである。いくつかの実施態様において、R4はn-プロピルである。いくつかの実施態様において、R4はi-プロピルである。いくつかの実施態様において、R4はn-ブチルである。いくつかの実施態様において、R4はi-ブチルである。いくつかの実施態様において、R4はt-ブチルである。いくつかの実施態様において、R4はsec-ブチルである。いくつかの実施態様において、R4はペンチルである。いくつかの実施態様において、R4はヘキシルである。いくつかの実施態様において、R4はヘプチルである。いくつかの実施態様において、R4は、オクチル又はノニルである。いくつかの実施態様において、R4は、非限定的に、フェニル、フェノール、又はナフチルなどのアリールである。いくつかの実施態様において、R4はフェニルである。いくつかの実施態様において、R4はナフチルである。いくつかの実施態様において、R4は、非限定的に、チエニルなどのヘテロアリールである。いくつかの実施態様において、R4は、非限定的に、ベンジルなどのアリールアルキルである。いくつかの実施態様において、R4は、非限定的に、ピペリジニルなどのN-含有ヘテロシクロアルキルである。いくつかの実施態様において、両Rxが水素である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの又はいずれかの実施態様において、両Rxはフルオロである。いくつかの実施態様において、R4はR配置にある。いくつかの実施態様において、R4はS配置にある。いくつかの実施態様において、R4は、R配置とS配置の混合物である。いくつかの実施態様において、R4は、R配置とS配置の混合物であり、該R:S混合物は、約1:1、約2:1、約3;1、約4:1、約5:1、約6;1、約7:1、約8:1、約9:1、又は約10:1である。
【０１８１】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり;且つ、SPが、-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は式(II)中のLに結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中のLに結合する)、-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中のLに結合する)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(II)中のLに結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(II)中のLに結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(II)中のLに結合する)、又は
【化２３６】
2021509908.tif 000270
(式中、X4は式(II)中のLに結合する)であるか;或いは
両Rxがフルオロであり;且つ、SPが、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(II)中のLに結合する)、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-X1b-(式中、X1bは式(II)中のLに結合する)、
【化２３７】
2021509908.tif 000271
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は式(II)中のLに対するものである)、-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(II)中のLに結合する)、-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(III)中のLに結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)、又は-C(O)-N(R5)-(C1-C10-アルキレン)-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(II)中のLに結合する)である、式(II)の化合物が提供される。
【０１８２】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり、且つSPが-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-C2-C5-アルキレン-C(O)-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-CH2CH2-C(O)-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。
【０１８３】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、且つSPが-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-C2-C5-アルキレン-C(O)-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-CH2CH2-C(O)-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり、且つSPが-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)中のL3に結合する)である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)中のL3に結合する)である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、X1が-N(C1-3アルキル)-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-C2-C5-アルキレン-X1-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-CH2CH2-X1-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(CH3)-C2-C5-アルキレン-N(CH3)-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(CH3)-CH2CH2-N(CH3)-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。
【０１８４】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、且つ、SPが、-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(II)中のL3に結合する)又は-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-X1b-(式中、X1bは、式(II)中の式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-C1-C6-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-C1-C3-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-CH2CH2-X1b-である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-C2-C5-アルキレン-N(CH3)-である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-C2-C5-アルキレン-N(CH2CH3)-である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-CH2CH2-N(CH3)-である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。
【０１８５】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、且つ、SPが-C(O)-N(C1-6アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C6-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C3-アルキレン-X1b-(式中、X1bは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、X1bが-N(C1-3アルキル)-である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-C2-C5-アルキレン-X1b-である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-CH2CH2-X1b-である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(CH3)-C2-C5-アルキレン-N(CH3)-である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(CH2CH3)-C2-C5-アルキレン-N(CH2CH3)-である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(CH3)-CH2CH2-N(CH3)-である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。
【０１８６】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、且つ、SPが
【化２３８】
2021509908.tif 000272
(式中、右側にある(すなわちNの)結合点は式(II)中のLに対するものである)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。
【０１８７】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり、且つ、SPが、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中の式(II)中のL3に結合する)、又は-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが、-C(O)-N(H)-(C1-C6-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中のL3に結合する)、又は-C(O)-N(C1-3アルキル)-(C1-C6-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-(C1-C6-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-(C1-C6-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。
【０１８８】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、且つ、SPが、-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中のL3に結合する)、又は-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中の式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが、-C(O)-N(H)-(C1-C6-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中のL3に結合する)、又は-C(O)-N(C1-3アルキル)-(C1-C6-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(H)-(C1-C6-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-6アルキル)-(C1-C10-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-(C1-C6-アルキレン)-S-(式中、Sは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。
【０１８９】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり、且つ、SPが-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは、-(C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-アルキレン)-NR50a-である。式(II)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(C1-C3-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C3-アルキレン)-NR50a-である。式(II)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(直鎖C1-C3-アルキレン)-NR50C(O)-(直鎖C1-C3-アルキレン)-NR50a-である。
【０１９０】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、且つ、SPが-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50aは式(II)中のL3に結合する)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。式(I)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-アルキレン)-NR50a-である。式(II)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(C1-C3-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C3-アルキレン)-NR50a-である。式(II)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(直鎖C1-C3-アルキレン)-NR50C(O)-(直鎖C1-C3-アルキレン)-NR50a-である。
【０１９１】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり、且つ、SPが-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50a-は式(II)中のL3に結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。式(II)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(分岐鎖C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-ヒドロキシ-アルキレン)-NR50a-である。式(II)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(分岐鎖C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-アルキレン)-NR50a-である。
【０１９２】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、且つ、SPが-C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C10-アルキレン)-NR50a-(式中、NR50a-は式(II)中のL3に結合し、各C1-C10-アルキレンは、独立に、1つ以上のヒドロキシにより任意に置換されている)である、式(II)の化合物が本明細書に述べられる。式(II)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(分岐鎖C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-ヒドロキシ-アルキレン)-NR50a-である。式(II)のいくつかの又はいずれかの実施態様において、SPは-(分岐鎖C1-C6-アルキレン)-NR50C(O)-(C1-C6-アルキレン)-NR50a-である。
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり、且つ、SPが-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)中のL3に結合する)である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(R5)-C1-C5-アルキレン-C(O)NH-NH-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(R5)-CH2-C(O)NH-NH-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、R5が、H又はアルキルである、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、R5が、H又はCH3である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。
【０１９３】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、且つ、SPが-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-(式中、X2は式(II)中のL3に結合する)である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(R5)-C1-C5-アルキレン-C(O)NH-NH-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-N(R5)-CH2-C(O)NH-NH-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、R5が、H又はアルキルである、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、R5が、H又はCH3である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。
【０１９４】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり、且つ、SPが
【化２３９】
2021509908.tif 000273
(式中、X4は、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)中のL3に結合する)である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、且つ、SPが
【化２４０】
2021509908.tif 000274
(式中、X4は、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)中のL3に結合する)である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが
【化２４１】
2021509908.tif 000275
であり、且つ、X3が-CH2-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが
【化２４２】
2021509908.tif 000276
であり、且つ、X3が-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-(式中、C(O)はX4に結合する)である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、SPが
【化２４３】
2021509908.tif 000277
であり、且つ、X3が-C(O)-である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、Rd、Re、及びRfが、独立に、-H、-OH、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、-C(O)OH、又は-CH2ORg(式中、各Rgは、独立に、-CH2C(O)OH又は-CH2C(O)O(アルキル)である)である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、Rd及びReが、独立に、-H又は-OHである、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、mが0である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、mが1である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、mが1であり、且つ、Rfが、-H又は-OHである、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。
【０１９５】
いくつかの実施態様において、両Rxが水素であり、且つ、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)中のL3に結合する)であるか;SPが
【化２４４】
2021509908.tif 000278
(式中、X3は-CH2-であり、mは1であり、Rd、Re、及びRfは-Hである)であるか;或いはSPが
【化２４５】
2021509908.tif 000279
(式中、X3は-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-(式中、C(O)はX4に結合する)であり、mは1であり、Rd、Re、及びRfは-Hである)である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、SPが、-C(O)-N(CH3)-CH2CH2-N(CH3)-、
【化２４６】
2021509908.tif 000280
である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであり、且つ、SPが-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-(式中、X1は、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)中のL3に結合する)であるか;SPが
【化２４７】
2021509908.tif 000281
(式中、X3は-CH2-であり、mは1であり、Rd、Re、及びRfは-Hである)であるか;或いはSPが
【化２４８】
2021509908.tif 000282
(式中、X3は-CH2-O-(C1-C10-アルキレン)-C(O)-(式中、C(O)はX4に結合する)であり、mは1であり、Rd、Re、及びRfは-Hである)である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、SPが、-C(O)-N(CH3)-CH2CH2-N(CH3)-、
【化２４９】
2021509908.tif 000283
である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が提供される。
【０１９６】
いくつかの実施態様において、両Rxがフルオロであるか、或いは両Rxが水素であるか、或いはRxがこのパラグラフに明示される通りであり、SPが下記である式(II)の化合物が提供される
【化２５０】
2021509908.tif 000284
(両Rxがフルオロである場合)
【化２５１】
2021509908.tif 000285
(両Rxがフルオロである場合)
【化２５２】
2021509908.tif 000286
。
【０１９７】
いくつかの実施態様において、RGが、
【化２５３】
2021509908.tif 000287
から選択される反応性基である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、RGが
【化２５４】
2021509908.tif 000288
である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、RGが
【化２５５】
2021509908.tif 000289
である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、RGが
【化２５６】
2021509908.tif 000290
である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、RGが
【化２５７】
2021509908.tif 000291
である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が本明細書に述べられる。
【０１９８】
いくつかの実施態様において、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)中の-L2-(L3)0-1-は、反応性基(式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)中のRG)を、本明細書に述べられるペイロード化合物(例えばステロイド)と連結、接続、又は結合する、任意の二価の基又は部分を指す。一般的に、好適な-L2-(L3)0-1-は、抗体の循環半減期を利用するのに十分に安定であり、同時に、該コンジュゲートの抗原媒介性内在化の後に、そのペイロードを放出することができるものである。-L2-(L3)0-1は、切断性リンカーでも、非切断性リンカーでもあり得る。切断性リンカーは、内在化後の細胞内代謝により切断され、例えば、加水分解、還元、又は酵素反応により切断されるリンカーである。非切断性リンカーは、結合したペイロードを、内在化後の抗体のリソソーム分解によって放出するリンカーである。好適なリンカーとしては、酸不安定性リンカー、加水分解不安定性リンカー、酵素切断性リンカー、還元不安定性リンカー、自壊性リンカー、及び非切断性リンカーがあるが、これらに限定されない。好適なリンカーとしては、グルクロニド、スクシンイミド-チオエーテル、ポリエチレングリコール(PEG)単位、カルバマート、ヒドラゾン、マル-カプロイル単位、ジスルフィド単位(例えば、-S-S-、-S-S-C(R1b)(R2b)-(式中、R1b及びR2bは、独立に、水素又はヒドロカルビルである)、パラ-アミノ-ベンジル(PAB)単位、ホスファート単位、例えば、モノ-、ビス-、及びトリス-ホスファート単位、ペプチド、例えば、2、3、4、5、6、7、8、又はそれ以上のアミノ酸単位を含むペプチド単位、例えば、非限定的に、バリン-シトルリン単位、バリン-アラニン単位、バリン-アルギニン単位、バリン-リジン単位、-リジン-バリン-シトルリン単位、及び-リジン-バリン-アラニン単位などであるか、又はこれらを含むものもあるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、-L2-(L3)0-1-は三価であり、-L2-(L3)0-1-中の三価基(例えばリジン残基)に結合したシクロデキストリン部分を含む。いくつかの実施態様において、L3は存在する。いくつかの実施態様において、L3は存在しない。
【０１９９】
いくつかの実施態様において、L2が
【化２５８】
2021509908.tif 000292
若しくはシクロデキストリン残基(CD);又はこれらの組合せを含む、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、L2が
【化２５９】
2021509908.tif 000293
若しくはCD、又はこれらの組合せを含む、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、L2が、下記からなる群から選択されるCDを含む、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が提供される
【表９】
2021509908.tif 000294
2021509908.tif 000295
。
【０２００】
いくつかの実施態様において、-L2-(L3)0-1-が
【表１０】
2021509908.tif 000296
2021509908.tif 000297
2021509908.tif 000298
を含む、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が提供される。
【０２０１】
いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-である場合、L3が
【化２６０】
2021509908.tif 000299
(式中、NH基はL2に結合する)であるか;或いは、SPが、-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-又は-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-である場合、L3が
【化２６１】
2021509908.tif 000300
(式中、NH基はL2に結合する)であるか;或いは、SPが
【化２６２】
2021509908.tif 000301
である場合、L3が存在しない、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、SPが-C(O)-C1-C10-アルキレン-C(O)-である場合、L3が
【化２６３】
2021509908.tif 000302
(式中、NH基はL2に結合する)である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、SPが、-C(O)-N(C1-3アルキル)-C1-C10-アルキレン-X1-又は-C(O)-N(R5)-C1-C10-アルキレン-C(O)NH-X2-である場合、L3が
【化２６４】
2021509908.tif 000303
(式中、NH基はL2に結合する)である、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が提供される。いくつかの実施態様において、SPが
【化２６５】
2021509908.tif 000304
である場合、L3が存在しない、式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物が提供される。
【０２０２】
以下の構造を有する化合物も本明細書に述べられる:
表2.ブデソニド-スペーサー-リンカー-反応性基
【表１１】
2021509908.tif 000305
2021509908.tif 000306
2021509908.tif 000307
2021509908.tif 000308
2021509908.tif 000309
2021509908.tif 000310
2021509908.tif 000311
2021509908.tif 000312
【０２０３】
結合剤、例えば抗体は、クリックケミストリー反応によってもコンジュゲートできる。前記クリックケミストリー反応のいくつかの実施態様において、リンカー-ペイロードは、反応性基、例えば、アジドとの1,3環化付加反応を受けることが可能なアルキンを含む。そのような好適な反応性基としては、歪みアルキン、例えば歪み促進型アルキン-アジド環化付加(SPAAC)に好適なもの、シクロアルキン、例えばシクロオクチン、芳香環化アルキン、及び銅触媒の非存在下でアジドとの1,3環化付加反応を受けることが可能なアルキンがあるが、これらに限定されない。好適なアルキンとしては、DIBAC、DIBO、BARAC、DIFO、置換アルキン、例えばフッ素化されたアルキン、アザ-シクロアルキン、BCN、及びこれらの誘導体もあるが、これらに限定されない。そのような反応性基を含むリンカー-ペイロードは、アジド基により官能化された抗体をコンジュゲートするのに有用である。そのような官能化抗体としては、アジド-ポリエチレングリコール基により官能化された抗体がある。特定の実施態様において、そのような官能化抗体は、少なくとも1つのグルタミン残基、例えば重鎖Q295を含む抗体を、式H2N-LL-N3(式中、LLは二価ポリエチレングリコール基である)による化合物と、酵素トランスグルタミナーゼの存在下で反応させることにより誘導される。便宜上、本明細書の特定の式において、抗体Abは、1つ以上の共有結合している-LL-N3基又はその残基を有する修飾抗体である。好ましくは、各-LL-N3は、抗体のグルタミン残基のアミノ酸側鎖に共有結合している。やはり好ましくは、該-LL-N3は、反応性基RGと反応して、リンカー-ペイロードへの共有結合を形成するか、又は形成することができる。やはり便宜上、本明細書の特定の式において、該LL-N3基は明確に描かれる。
【０２０４】
結合剤、例えば抗体を、本明細書に記載のリンカー-ペイロードと接触させることを含む、本明細書に記載のコンジュゲートを合成する方法が本明細書に述べられる。特定の実施態様において、該リンカー-ペイロードはシクロデキストリン部分を含む。
【０２０５】
式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)の化合物は、本明細書に記載のコンジュゲートの合成における合成中間体として有用なリンカー-ペイロードである。これらのリンカー-ペイロードは、抗体と反応して、本明細書に記載のコンジュゲートを形成できる反応性基を含む。
【０２０６】
式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)のいくつかの実施態様において、R4はアルキルである。式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)のいくつかの実施態様において、R4は、メチル、エチル、n-プロピル、i-プロピル、n-ブチル、s-ブチル、t-ブチル、i-ブチル、ペンチル部分、ヘキシル部分、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルである。式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)のいくつかの実施態様において、R4はアルキルである。式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)のいくつかの実施態様において、R4は、メチル、エチル、n-プロピル、i-プロピル、n-ブチル、s-ブチル、t-ブチル、i-ブチル、ペンチル部分、又はヘキシル部分である。式(II)、(II-P)、又は(II-P-1)のいくつかの実施態様において、R4はn-プロピルである。
【０２０７】
特定の実施態様において、RG-L2-(L3)0-1-は
【化２６６】
2021509908.tif 000313
であり;
【化２６７】
2021509908.tif 000314
は、アリール又はヘテロアリールであり;RGは、以下に定義される反応性基であり;SP1及びSP2は、それぞれ、各場合で独立に、存在しないか、又はスペーサー基残基であり、且つSP1は三価リンカーを含み;AA1は、アミノ酸残基を含む三価リンカーであり;AA2はペプチド残基であり;PEGはポリエチレングリコール残基であり;式中、
【化２６８】
2021509908.tif 000315
は、示される化学基が式中の隣接する基に結合する原子を示し、CDは、各場合で独立に、存在しないか、又はシクロデキストリン残基であり、ここで、少なくとも1つのCDが存在し、下付き文字qは、両端を含む0〜5から選択される整数である。これらの例において、下付き文字qは、0、1、2、3、4、又は5である。いくつかの実施態様において、下付き文字qは0である。いくつかの実施態様において、下付き文字qは1である。いくつかの実施態様において、下付き文字qは2である。いくつかの実施態様において、下付き文字qは3である。いくつかの実施態様において、下付き文字qは4である。いくつかの実施態様において、下付き文字qは5である。いくつかの実施態様において、AA1又はAA2のいずれか1つは、各場合で独立に、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、若しくはシトルリン、これらの誘導体、又はこれらの組合せから選択されるアミノ酸を含む。特定の実施態様において、AA1は、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、若しくはシトルリン、これらの誘導体、又はこれらの組合せから選択されるアミノ酸である。特定の実施態様において、AA1は、リジン又はリジンの誘導体である。特定の実施態様において、AA1はリジンである。特定の実施態様において、AA1はD-リジンである。特定の実施態様において、AA1はL-リジンである。特定の実施態様において、AA2は、ジ-ペプチド残基、トリ-ペプチド残基、テトラ-ペプチド残基(resiude)、又はペンタ-ペプチド残基である。特定の実施態様において、該AA2はジ-ペプチド残基である。特定の実施態様において、該AA2はバリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、該AA2はシトルリン-バリンである。いくつかの実施態様において、該AA2はバリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、該AA2はアラニン-バリンである。いくつかの実施態様において、該AA2はバリン-グリシンである。いくつかの実施態様において、該AA2はグリシン-バリンである。特定の実施態様において、該AA2はトリ-ペプチド残基である。いくつかの実施態様において、該AA2はグルタミン酸-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、該AA2はグルタミン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、該AA2はリジン-バリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、該AA2はリジン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、該AA2はグルタミン酸-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、該AA2はテトラ-ペプチド残基である。いくつかの実施態様において、該AA2はグリシン-グリシン-フェニルアラニン-グリシンである。いくつかの実施態様において、該AA2はペンタ-ペプチド残基である。いくつかの実施態様において、該AA2はグリシン-グリシン-グリシン-グリシン-グリシンである。いくつかの実施態様において、SP1は、各場合で独立に、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-、-C(O)-(CH2)u-C(O)-、-C(O)-NH-(CH2)v-、及びこれらの組合せからなる群から選択され、ここで、下付き文字eは両端を含む0〜4から選択される整数であり、下付き文字uは両端を含む1〜8から選択される整数であり、下付き文字vは両端を含む1〜8から選択される整数である。いくつかの実施態様において、SP2は、各場合で独立に、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-、-C(O)-(CH2)u-C(O)-、-C(O)-NH-(CH2)v-、及びこれらの組合せからなる群から選択され、ここで、下付き文字eは両端を含む0〜4から選択される整数であり、下付き文字uは両端を含む1〜8から選択される整数であり、下付き文字vは両端を含む1〜8から選択される整数である。
【０２０８】
特定の実施態様において、式(IIIc-R)の構造を有する化合物が本明細書に述べられる:
【化２６９】
2021509908.tif 000316
RGは反応性基であり;
CDはシクロデキストリンであり;
SP1はスペーサー基であり;
AA4はアミノ酸残基であり;
AA5はジペプチド残基であり;
PEGはポリエチレングリコールであり;
qは、両端を含む0〜5から選択される整数であり;
xは両端を含む0〜30から選択される整数であり;
R4は本明細書に定義される通りであり;
SP1及びSP2は、それぞれ、各場合で独立に、存在しないか、又はスペーサー基残基であり、ここで、SP1は三価リンカーを含み;AA4はアミノ酸残基を含む三価リンカーであり;AA5はジ-ペプチド残基であり;PEGはポリエチレングリコール残基であり;ここで、
【化２７０】
2021509908.tif 000317
は、示される化学基が式中の隣接する基に結合する原子を示し、CDは、各場合で独立に、存在しないか、又はシクロデキストリン残基であり、ここで、少なくとも1つのCDが存在し、下付き文字qは、両端を含む0〜5から選択される整数である;これらの例において、下付き文字qは、0、1、2、3、4、又は5である。いくつかの実施態様において、下付き文字qは0である。いくつかの実施態様において、下付き文字qは1である。いくつかの実施態様において、下付き文字qは2である。いくつかの実施態様において、下付き文字qは3である。いくつかの実施態様において、下付き文字qは4である。いくつかの実施態様において、下付き文字qは5である。いくつかの実施態様において、AA4又はAA5のいずれか1つは、各場合で独立に、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、若しくはシトルリン、これらの誘導体、又はこれらの組合せから選択されるアミノ酸を含む。特定の実施態様において、AA4は、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、若しくはシトルリン、これらの誘導体、又はこれらの組合せから選択されるアミノ酸である。特定の実施態様において、AA4はリジンである。特定の実施態様において、AA4は、リジン又はリジンの誘導体である。特定の実施態様において、該AA5はバリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、該AA5はシトルリン-バリンである。いくつかの実施態様において、該AA5はバリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、該AA5はアラニン-バリンである。いくつかの実施態様において、該AA5はバリン-グリシンである。いくつかの実施態様において、該AA5はグリシン-バリンである。いくつかの実施態様において、該AA5はグルタミン酸-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、該AA5はグルタミン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、該AA5はリジン-バリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、該AA5はリジン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、該AA5はグルタミン酸-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、SP1は、各場合で独立に、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-、-C(O)-(CH2)u-C(O)-、-C(O)-NH-(CH2)v-、及びこれらの組合せからなる群から選択され、式中、下付き文字eは両端を含む0〜4から選択される整数であり、下付き文字uは両端を含む1〜8から選択される整数であり、下付き文字vは両端を含む1〜8から選択される整数である。いくつかの実施態様において、SP2は、各場合で独立に、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-、-C(O)-(CH2)u-C(O)-、-C(O)-NH-(CH2)v-、及びこれらの組合せからなる群から選択され、式中、下付き文字eは両端を含む0〜4から選択される整数であり、下付き文字uは両端を含む1〜8から選択される整数であり、下付き文字vは両���を含む1〜8から選択される整数である。反応性基(RG)は、抗体、修飾抗体、又はその抗原結合断片の反応性部位と反応する官能基又は部分である。特定の実施態様において、「反応性基」は、抗体又はその抗原結合断片上のシステイン又はリジン残基と反応する官能基又は部分(例えば、マレイミド又はNHSエステル)である。特定の実施態様において、「反応性基」は、クリックケミストリー反応を受けることが可能である官能基又は部分である。前記クリックケミストリー反応のいくつかの実施態様において、該反応性基は、アジドとの1,3環化付加反応を受けることが可能なアルキンである。そのような好適な反応性基としては、歪みアルキン、例えば歪み促進型アルキン-アジド環化付加(SPAAC)に好適なもの、シクロアルキン、例えばシクロオクチン、芳香環化アルキン、及び銅触媒の非存在下でアルキンとの1,3環化付加反応を受けることが可能なアルキンがあるが、これらに限定されない。好適なアルキンとしては、DIBAC、DIBO、BARAC、置換アルキン、例えばフッ素化されたアルキン、アザ-シクロアルキン、BCN、及びこれらの誘導体もあるが、これらに限定されない。そのような反応性基を含むリンカー-ペイロードは、アジド基により官能化された抗体をコンジュゲートするのに有用である。そのような官能化抗体としては、アジド-ポリエチレングリコール基により官能化された抗体がある。特定の実施態様において、そのような官能化抗体は、少なくとも1つのグルタミン残基、例えば重鎖Q295を含む抗体を、式H2N-LL-N3による化合物(式中、LLは、例えば二価ポリエチレングリコール基であるか、或いは、LLは、ポリエチレングリコール及びシクロデキストリン部分を含む三価基である)と、酵素トランスグルタミナーゼの存在下で反応させることにより誘導される。いくつかの実施態様において、該反応性基は、アルキン、例えば
【化２７１】
2021509908.tif 000318
であり、クリックケミストリーにより、アジド、例えば
【化２７２】
2021509908.tif 000319
と反応して、クリックケミストリー生成物、例えば
【化２７３】
2021509908.tif 000320
その位置異性体又はその混合物を形成し得る。いくつかの実施態様において、該反応性基は、アルキン、例えば
【化２７４】
2021509908.tif 000321
であり、クリックケミストリーにより、アジド、例えば
【化２７５】
2021509908.tif 000322
と反応して、クリックケミストリー生成物、例えば
【化２７６】
2021509908.tif 000323
を形成し得る。いくつかの実施態様において、該反応性基は、アルキン、例えば
【化２７７】
2021509908.tif 000324
であり、クリックケミストリーにより、アジド、例えば
【化２７８】
2021509908.tif 000325
と反応して、クリックケミストリー生成物、例えば
【化２７９】
2021509908.tif 000326
その位置異性体、又はその混合物を形成し得る。いくつかの実施態様において、該反応性基は、官能基、例えば
【化２８０】
2021509908.tif 000327
であり、抗体又はその抗原結合断片上のシステイン残基と反応して、それへの結合、例えば
【化２８１】
2021509908.tif 000328
を形成するが、式中、Abは抗体又はその抗原結合断片を指し、Sは、該官能基がAbに結合するシステイン残基上のS原子を指す。いくつかの実施態様において、該反応性基は、官能基、例えば
【化２８２】
2021509908.tif 000329
であり、抗体又はその抗原結合断片上のリジン残基と反応して、それへの結合、例えば
【化２８３】
2021509908.tif 000330
を形成するが、式中、Abは抗体又はその抗原結合断片を指し、-NH-は、該官能基がAbに結合するリジン残基の末端を指す。いくつかの実施態様において、官能基が結合するリジン残基上のこのN原子は、本明細書において、結合の上の文字N、例えば
【化２８４】
2021509908.tif 000331
として示される。
【０２０９】
いくつかの実施態様において、RG-L2-(L3)0-1-は、式(LA)の一価部分である;
RG-(SP1)q-(A)z-(NRa)s-(B)t-(CH2)u-(O)v-(SP2)w-
(LA);
(式中、RGは反応性基であり;
Aは、アミノ酸又はペプチドであり;
Raは、H又はアルキルであり;
Bは、アリール、ヘテロアリール、又はヘテロシクロアルキルであり(式中、アリール、ヘテロアリール、又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、-OH、又は-N-RaRbにより任意に置換されている);
SP1及びSP2は、独立に、スペーサー基であり;且つ、q、z、s、t、u、v、及びwは、各場合で独立に、0又は1である)。
【０２１０】
いくつかの実施態様において、RG-L2-(L3)0-1-はRG-(SP1)q-(A)z-である。いくつかの実施態様において、RG-L2-(L3)0-1-はRG-(SP1)q-(A)2-である。いくつかの実施態様において、RG-L2-(L3)0-1-は、式(LA1)の部分である
【化２８５】
2021509908.tif 000332
(式中、RAA1及びRAA2は、それぞれ、独立に、アミノ酸側鎖である)。式LA1のいくつかの実施態様において、SP1は二価ポリエチレングリコール基であり、RGは、アジドとの1,3-環化付加反応を受けることが可能なアルキンを含む基である。
【０２１１】
いくつかの実施態様において、RG-L2-(L3)0-1-は以下の構造を有する:
RG-(SP1)q-Z1-Z2-Z30-1-
(式中:
RG、SP1、及びqは本明細書に定義される通りであり;
Z1は、ポリエチレングリコール又はカプロイル基であり;
Z2はジペプチドであり;且つ
Z3はPAB基である)。
【０２１２】
いくつかの他の実施態様において、-L1-L2-(L3)0-1-は、式(LB)の三価部分である;
-L1-(SP1)q-(A)z-(NRa)s-(B)t-(CH2)u-(O)v-(SP2)w-
(LB);
(式中、L1は本明細書に定義される通りであり;
Aは、トリペプチド又はテトラペプチドであり、ここで、該トリペプチド又はテトラペプチド(tetrapepetide)中のアミノ酸の少なくとも1つは、シクロデキストリン部分に直接又は間接的に結合しており;
Raは、H又はアルキルであり;
Bは、アリール、ヘテロアリール、又はヘテロシクロアルキルであり(ここで、アリール、ヘテロアリール、又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、-OH、又は-NRaRbにより任意に置換されている);
SP1及びSP2は、独立に、スペーサー基であり;且つ、式LBにおいて、q、z、s、t、u、v、及びwは、各場合で独立に、0又は1である)。
【０２１３】
いくつかの実施態様において、シクロデキストリン(CD)は、リジンアミノ酸残基などのアミノ酸残基に直接結合している。これは、CDが、該リジンアミノ酸共有結合性リンカーから1結合位置離れていることを意味する。これらの実施態様のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーはペイロード部分にも直接結合している。これは、該共有結合性リンカーが、本明細書に述べられるステロイドペイロードなどがあるがこれに限定されないペイロードから1結合位置離れていることを意味する。これらの実施態様のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーはCD部分にも直接結合している。これは、該共有結合性リンカーが、本明細書に述べられるCD(複数可)などのCDから1結合位置離れていることを意味する。これらの実施態様のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、リジンアミノ酸又はこれらの誘導体である。
【０２１４】
いくつかの実施態様において、CDは、連結基(例えば、L、-L2-(L3)0-1-、及び-L1-L2-(L3)0-1)中の共有結合性リンカーに間接的に結合している。これは、該CDが、該共有結合性リンカーから1結合位置よりも大きく離れていることを意味する。これは、該CDが該共有結合性リンカーに別の部分を介して結合していることも意味する。例えば、該CDは、該共有結合性リンカーに結合しているポリエチレングリコール基に結合しているマレイミド基に結合し得る。これらの実施態様のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、ペイロード部分にも間接的に結合している。これは、該共有結合性リンカーが、本明細書に述べられるステロイドペイロードなどがあるがこれに限定されないペイロードから1結合位置より大きく離れていることを意味する。これは、該共有結合性リンカーが、該ペイロードに別の部分を介して結合していることも意味する。例えば、該共有結合性リンカーは、Val-Ala又はVal-Citなどがあるがこれらに限定されないジペプチドに結合し得るが、それは、該ペイロードに結合し得るパラ-アミノベンゾイルに結合し得る。これらの実施態様のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、シクロデキストリン部分にも間接的に結合している。これは、該共有結合性リンカーが、本明細書に述べられるシクロデキストリンなどのシクロデキストリンから1結合位置より大きく離れていることを意味する。これは、該共有結合性リンカーが、該シクロデキストリンに別の部分を介して結合していることも意味する。例えば、該共有結合性リンカーは、シクロデキストリンに結合し得る反応性基に結合し得るポリエチレングリコール基に結合し得る。これらの実施態様のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、リジンアミノ酸又はこれらの誘導体である。
【０２１５】
いくつかの実施態様において、-L1-L2-(L3)0-1-は-L1-(SP1)q-(A)z-である。いくつかの実施態様において、-L1-L2-(L3)0-1-は-L1-(SP1)q-(A)2-である。いくつかの実施態様において、-L1-L2-(L3)0-1-は、式(LB1)の部分である
【化２８６】
2021509908.tif 000333
(式中、RAA1及びRAA2は、それぞれ、独立に、アミノ酸側鎖である)。RAA3は、シクロデキストリン部分に直接又は間接的に結合しているアミノ酸側鎖である。式LB1のいくつかの実施態様において、SP1は二価ポリエチレングリコール基であり、L1は、アルキンとアジドの間の反応の1,3-環化付加反応生成物である。
【０２１６】
いくつかの実施態様において、Aは
【化２８７】
2021509908.tif 000334
である。これらの実施態様のいくつかにおいて、RAA1はアミノ酸側鎖であり、RAA2はアミノ酸側鎖であり、RAA3は、シクロデキストリン部分に直接又は間接的に結合しているアミノ酸側鎖である。
【０２１７】
いくつかの実施態様において、Aは
【化２８８】
2021509908.tif 000335
であり、式中
【化２８９】
2021509908.tif 000336
は、シクロデキストリン部分への直接的又は間接的な結合を表す。
【０２１８】
前記のもののいずれかを含む、いくつかの実施態様において、CDは、各場合で独立に、下記から選択される
【表１２】
2021509908.tif 000337
2021509908.tif 000338
。いくつかの実施態様において、CDは
【化２９０】
2021509908.tif 000339
である。いくつかの実施態様において、CDは
【化２９１】
2021509908.tif 000340
である。いくつかの実施態様において、CDは
【化２９２】
2021509908.tif 000341
である。いくつかの実施態様において、CDは
【化２９３】
2021509908.tif 000342
である。いくつかの実施態様において、CDは
【化２９４】
2021509908.tif 000343
である。いくつかの実施態様において、CDは
【化２９５】
2021509908.tif 000344
である。
【０２１９】
いくつかの実施態様において、Aは
【化２９６】
2021509908.tif 000345
である。
【０２２０】
いくつかの実施態様において、本明細書のRGは、クリックケミストリー反応性基から選択される。
【０２２１】
いくつかの他の例において、本明細書のRGは、抗体又はその抗原結合断片上のシステイン又はリジン残基と反応する基から選択される。
【０２２２】
いくつかの実施態様において、RGは
【化２９７】
2021509908.tif 000346
(式中、-OCH2C(O)-は-L2-により包含される)、
【化２９８】
2021509908.tif 000347
である。いくつかの実施態様において、RGは
【化２９９】
2021509908.tif 000348
である。他の例において、RGは
【化３００】
2021509908.tif 000349
である。いくつかの他の例において、RGは
【化３０１】
2021509908.tif 000350
である。いくつかの実施態様において、RGは
【化３０２】
2021509908.tif 000351
である。他の例において、RGは
【化３０３】
2021509908.tif 000352
である。他の例において、RGは
【化３０４】
2021509908.tif 000353
であり、式中、-OCH2C(O)-は-L2-により包含されている。
【０２２３】
いくつかの実施態様において、SP1は-L2-により包含されている。いくつかの実施態様において、SP1は、下記から選択され得る:
【化３０５】
2021509908.tif 000354
。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３０６】
2021509908.tif 000355
である。いくつかの他の例において、SP1は
【化３０７】
2021509908.tif 000356
である。他の例において、SP1は
【化３０８】
2021509908.tif 000357
である。さらに他の例において、SP1は
【化３０９】
2021509908.tif 000358
である。いくつかの他の例において、SP1は
【化３１０】
2021509908.tif 000359
である。
【０２２４】
上記例のいずれにおいても、下付き文字a、b、及びcは、独立に、各場合において、両端を含む1〜20から選択される整数である。
【０２２５】
いくつかの実施態様において、SP1は-L2-により包含される。化合物のいずれかにおいて、SP1は
【化３１１】
2021509908.tif 000360
である。
【０２２６】
いくつかの実施態様において、SP1は-L2-により包含されている。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３１２】
2021509908.tif 000361
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３１３】
2021509908.tif 000362
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３１４】
2021509908.tif 000363
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３１５】
2021509908.tif 000364
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３１６】
2021509908.tif 000365
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３１７】
2021509908.tif 000366
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３１８】
2021509908.tif 000367
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３１９】
2021509908.tif 000368
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３２０】
2021509908.tif 000369
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３２１】
2021509908.tif 000370
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３２２】
2021509908.tif 000371
である。
【０２２７】
いくつかの実施態様において、SP1は-L2-により包含されている。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３２３】
2021509908.tif 000372
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３２４】
2021509908.tif 000373
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３２５】
2021509908.tif 000374
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３２６】
2021509908.tif 000375
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３２７】
2021509908.tif 000376
である。いくつかの実施態様において、SP1は
【化３２８】
2021509908.tif 000377
である。
【０２２８】
いくつかの実施態様において、RG-SP1(式中、SP1は-L2-により包含されている)は、
下記からなる群から選択され得る:
【化３２９】
2021509908.tif 000378
(式中、b、c、及びdは、独立に、各場合において、両端を含む1〜20から選択される整数である)。これらの実施態様のいくつかにおいて、下付き文字b、c、及びdは、独立に、各場合において、両端を含む1〜6から選択される整数である。
【０２２９】
いくつかの実施態様において、RG-SP1-は
【化３３０】
2021509908.tif 000379
である。いくつかの実施態様において、RG-SP1は
【化３３１】
2021509908.tif 000380
である。いくつかの実施態様において、RG-SP1は
【化３３２】
2021509908.tif 000381
である。いくつかの実施態様において、RG-SP1は
【化３３３】
2021509908.tif 000382
である。いくつかの実施態様において、RG-SP1は
【化３３４】
2021509908.tif 000383
である。いくつかの実施態様において、RG-SP1は
【化３３５】
2021509908.tif 000384
である。いくつかの実施態様において、RG-SP1は
【化３３６】
2021509908.tif 000385
である。いくつかの実施態様において、RG-SP1は
【化３３７】
2021509908.tif 000386
である。
【０２３０】
該化合物のいずれかにおいて、RG-SP1は
【化３３８】
2021509908.tif 000387
である。
【０２３１】
いくつかの実施態様において、Aは、バリン-シトルリン、シトルリン-バリン、リジン-フェニルアラニン、フェニルアラニン-リジン、バリン-アスパラギン、アスパラギン-バリン、スレオニン-アスパラギン、アスパラギン-スレオニン、セリン-アスパラギン、アスパラギン-セリン、フェニルアラニン-アスパラギン、アスパラギン-フェニルアラニン、ロイシン-アスパラギン、アスパラギン-ロイシン、イソロイシン-アスパラギン、アスパラギン-イソロイシン、グリシン-アスパラギン、アスパラギン-グリシン、グルタミン酸-アスパラギン、アスパラギン-グルタミン酸、シトルリン-アスパラギン、アスパラギン-シトルリン、アラニン-アスパラギン、又はアスパラギン-アラニンから選択されるペプチドである。
【０２３２】
いくつかの実施態様において、Aは、バリン-シトルリン又はシトルリン-バリンである。
【０２３３】
いくつかの実施態様において、Aは、バリン-アラニン又はアラニン-バリンである。
【０２３４】
いくつかの実施態様において、Aは、グルタミン酸-バリン-シトルリン又はシトルリン-バリン-グルタミン酸である。
【０２３５】
いくつかの実施態様において、Aはバリンである。
【０２３６】
いくつかの実施態様において、Aはアラニンである。
【０２３７】
いくつかの実施態様において、Aはシトルリンである。
【０２３８】
いくつかの実施態様において、Aは
【化３３９】
2021509908.tif 000388
である。これらの実施態様のいくつかにおいて、RAA1はアミノ酸側鎖であり、RAA2はアミノ酸側鎖である。
【０２３９】
いくつかの実施態様において、Aは
【化３４０】
2021509908.tif 000389
である。
【０２４０】
いくつかの実施態様において、Aは
【化３４１】
2021509908.tif 000390
である。
【０２４１】
いくつかの実施態様において、RaはHである。
【０２４２】
いくつかの実施態様において、Raはアルキルである。
【０２４３】
いくつかの実施態様において、Raは、メチル、エチル、n-プロピル、i-プロピル、n-ブチル、t-ブチル、i-ブチル、又はペンチルである。
【０２４４】
いくつかの実施態様において、Bはアリールである。
【０２４５】
いくつかの実施態様において、Bはフェニルである。
【０２４６】
いくつかの実施態様において、Bは、フェニル又はピリジニルである。
【０２４７】
本明細書のいくつかの実施態様において、Bは:
【化３４２】
2021509908.tif 000391
である。
【０２４８】
これらの例において、R10は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化３４３】
2021509908.tif 000392
NRaRb、又はアジドである。これらの例において、下付き文字p及びmは、独立に、各場合において、両端を含む0〜4から選択される整数である。本明細書のいくつかの実施態様において、Bは
【化３４４】
2021509908.tif 000393
である。
【０２４９】
これらの例において、pは、0、1、2、3、又は4である。これらの実施態様のいくつかにおいて、R1は、各出現で独立に、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、又はハロである。いくつかの実施態様において、R1はアルキルである。いくつかの実施態様において、R1はアルコキシである。いくつかの実施態様において、R1はハロアルキルである。いくつかの実施態様において、R1はハロである。
【０２５０】
式(LA)のいくつかの実施態様において、-(NRa)s-(B)t-(CH2)u-(O)v-(SP2)wは:
【化３４５】
2021509908.tif 000394
である。
【０２５１】
ブデソニド、ブデソニドのプロドラッグ、ブデソニドアナログ若しくは誘導体(フッ素化されたアナログ及び誘導体を含む)、又はブデソニドアナログ若しくは誘導体(フッ素化されたアナログ及び誘導体を含む)のプロドラッグのリンカー-ペイロードの本明細書に提供される。いくつかの実施態様において、以下の構造を有するリンカー-ペイロードも本明細書に提供される:
【化３４６】
2021509908.tif 000395
(式中、RG、R4、L2、L3、及びSPは本明細書に定義される通りである)。
【０２５２】
(E.  医薬組成物及び治療の方法)
本開示は、疾患、病態、若しくは障害、例えば炎症性疾患及び自己免疫疾患を治療し、又はその症状を管理する方法であって、治療上有効な量の1種以上の本明細書に開示の化合物を投与することを含む方法を含む。グルココルチコイド受容体、グルココルチコイド結合、及び/又はグルココルチコイド受容体シグナリングと関連するあらゆる疾患、障害、又は病態が含まれる。そのような方法は、本明細書に記載のステロイドペイロード又はそのタンパク質コンジュゲートを患者に投与することを含む。そのため、グルココルチコイド受容体と関連する疾患、障害、又は病態を治療する方法であって、式(I)、式I-P、式I-P-1、式(III-P)、式III-P-1、式(3000)、又は(III)の化合物を、前記疾患、障害、又は病態を有する患者に投与することを含む方法が本開示に含まれる。
【０２５３】
本開示は、特定の障害又は病態を予防する方法であって、治療上有効な量の本明細書に開示の化合物の1種以上を投与することを含む方法も含む(すなわち予防的な使用)。例としては、CD3二重特異性抗体(bispecifics)のサイトカイン放出症候群、及びCAR T細胞など養子細胞療法、全身性IL-2投与、移植片対宿主病、並びに手術後の悪心及び嘔吐を予防することがあるが、これらに限定されない。例としては、アレムツズマブ、ムロモナブ、リツキシマブ、トシツズマブ、及び免疫刺激が意図される作用機序の一部であり得る作動性Abなどの治療用抗体もあるが、これらに限定されない。
【０２５４】
いくつかの実施態様において、該疾患、障害、又は病態は、喘息、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、アレルギー性皮膚炎、薬物過敏反応、花粉症(anaphylactic rhinitis)、通年性又は季節性アレルギー性鼻炎、及び血清病を含むがこれらに限定されないアレルギー状態;皮膚のかゆみ、脂漏性皮膚炎、神経皮膚炎、湿疹、水疱性疱疹状皮膚炎、剥脱性紅皮症、菌状息肉症、天疱瘡、及び重度の多形紅斑(スティーヴンス・ジョンソン症候群)を含むがこれらに限定されない皮膚科疾患及び病態;原発性又は続発性の副腎皮質機能不全、先天性副腎過形成症、癌に伴う高カルシウム血症、及び非化膿性甲状腺炎を含むがこれらに限定されない内分泌障害;胃腸疾患;後天性(自己免疫)溶血性貧血、先天性(赤血球性)再生不良性貧血(ダイアモンド・ブラックファン貧血)、成人の特発性血小板減少性紫斑病、赤芽球ろう、及び続発性血小板減少症を含むがこれらに限定されない血液疾患;旋毛虫症;くも膜下ブロック又は切迫ブロックを伴う結核性髄膜炎;白血病及びリンパ腫を含むがこれらに限定されない新生物疾患;多発性硬化症の急性増悪、原発性又は転移性脳腫瘍と関連する脳浮腫、開頭、又は頭部損傷を含むがこれらに限定されない神経系疾患;交感性眼炎、側頭動脈炎、ぶどう膜炎、眼球乾燥症、及び外用コルチコステロイドに不応性の眼の炎症性状態を含むがこれらに限定されない眼病;特発性ネフローゼ症候群のタンパク尿の利尿若しくは寛解のための、又は紅斑性狼蒼によるものを含むがこれらに限定されない腎疾患;ベリリウム症、適切な抗結核化学療法と同時に使用される場合の劇症又は播種状肺結核、特発性好酸球性肺炎、症候性サルコイドーシスを含むがこれらに限定されない呼吸器疾患;並びに急性痛風関節炎における(患者が急性エピソード又は増悪を乗り越えることができるための)短期投与のための補助療法としての使用、急性リウマチ性心臓炎、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、若年性関節リウマチを含む関節リウマチを含むがこれらに限定されないリウマチ性疾患、並びに皮膚筋炎、多発筋炎、口内炎、及び全身性エリテマトーデスにおける使用である。
【０２５５】
いくつかの実施態様において、自己免疫疾患、アレルギー、関節炎、喘息、呼吸障害、血液疾患、癌、コラーゲン疾患、結合組織疾患、皮膚疾患、眼疾患、内分泌の問題、免疫疾患、炎症性疾患、腸疾患、胃腸疾患、神経疾患、臓器移植状態、リウマチ性疾患、皮膚疾患、腫脹状態、創傷治癒状態、及びこれらの組合せから選択される疾患、障害、又は病態を治療する方法であって、本明細書に記載のステロイドペイロード又はそのコンジュゲートを投与することを含む方法が本明細書に述べられる。
【０２５６】
いくつかの実施態様において、該自己免疫疾患は、多発性硬化症、自己免疫性肝炎、帯状疱疹、全身性エリテマトーデス(すなわち狼瘡)、重症筋無力症、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、及びサルコイドーシスから選択される。いくつかの実施態様において、該呼吸障害は、喘息、慢性呼吸器疾患、慢性閉塞性肺疾患、気管支炎症、及び急性気管支炎から選択される。いくつかの実施態様において、該癌は、白血病、リンパ芽球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫(NHL)、及び多発性骨髄腫から選択される。いくつかの実施態様において、該コラーゲン疾患は全身性エリテマトーデスである。いくつかの実施態様において、該眼疾患は角膜炎である。いくつかの実施態様において、該内分泌の問題は、アジソン病、副腎不全、副腎皮質機能不全、副腎皮質の(adrenocortical)、及び先天性副腎過形成症から選択される。いくつかの実施態様において、該炎症性疾患は、白内障手術後の炎症、関節炎症、免疫性炎症、腱炎症、滑液包炎、上顆炎、クローン病、炎症性腸疾患、脂肪性肺臓炎  甲状腺炎、蕁麻疹(urticaria)(蕁麻疹(hives))、心膜炎、ネフローゼ症候群、及びぶどう膜炎から選択される。いくつかの実施態様において、該腸疾患は、コラーゲン性大腸炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、及び炎症性腸疾患から選択される。いくつかの実施態様において、該リウマチ性疾患は、関節リウマチ、リウマチ性多発筋痛症、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、及び全身性エリテマトーデスから選択される。いくつかの実施態様において、該皮膚疾患は、乾癬、湿疹、及びツタウルシから選択される。いくつかの実施態様において、該神経疾患は慢性炎症性脱髄性多発根ニューロパチーである。
【０２５７】
いくつかの実施態様において、本明細書に記載の化合物は、ショック、脳浮腫、及び移植片対宿主病を含むがこれらに限定されない急性炎症性事象を治療するために患者に投与される。いくつかの実施態様において、本明細書に記載の化合物は、血液系悪性腫瘍と関連するもの、例えば、白血病、リンパ腫、及び骨髄腫を含むがこれらに限定されないリンパ球溶解作用を治療するために投与される。
【０２５８】
いくつかの実施態様において、炎症の減少を必要とする対象の炎症を減少させる方法であって、それを必要とする対象に、治療上有効な量の本明細書の記載のステロイド又はそのコンジュゲートを投与することを含む方法が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、免疫系の調節を必要とする対象の免疫系を調節する方法であって、それを必要とする対象に、治療上有効な量の本明細書の記載のステロイド又はそのコンジュゲートを投与することを含む方法が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、コルチゾールレベルの調節を必要とする対象のコルチゾールレベルを調節する方法であって、それを必要とする対象に、治療上有効な量の本明細書の記載のステロイド又はそのコンジュゲートを投与することを含む方法が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、リンパ球遊走の減少を必要とする対象のリンパ球遊走を減少させる方法であって、それを必要とする対象に、治療上有効な量の本明細書の記載のステロイド又はそのコンジュゲートを投与することを含む方法が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、癌による高カルシウム血症、メニエール病、片頭痛、群発頭痛、重度のアフタ性潰瘍、喉頭炎、重度結核、梅毒に対するヘルクスハイマー反応、非代償性心不全、アレルギー性鼻炎、又は鼻ポリープを治療する方法であって、それを必要とする対象に、本明細書に記載のステロイドペイロード又はそのコンジュゲートを投与することを含む方法が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、本明細書に開示の化合物を、炎症性腸疾患、クローン病、又は潰瘍性大腸炎の治療に使用できる。いくつかの実施態様において、該疾患、障害、又は病態は、喘息、皮膚の感染症、及び眼の感染症を含むがこれらに限定されない慢性炎症性病態である。いくつかの実施態様において、本明細書に記載の化合物は、臓器移植を受けている患者の免疫抑制に使用される。
【０２５９】
いくつかの実施態様において、本明細書に記載のステロイドペイロード及びそのコンジュゲートは、統合失調症、薬物中毒、心的外傷後ストレス障害(PTSD)、及び気分障害、物質濫用、ストレス、並びに不安などの精神疾患を含むがこれらに限定されないGRシグナリングと関連する神経疾患を治療するために患者に投与される。
【０２６０】
いくつかの実施態様において、本明細書に記載のステロイドペイロード及びそのコンジュゲートは、眼の炎症(例えば、結膜炎、角膜炎、ぶどう膜炎)、黄斑浮腫、及び黄斑変性を含むがこれらに限定されない視覚系疾患を治療するために患者に投与される。いくつかの実施態様において、本明細書に記載のステロイドペイロード及びそのコンジュゲートは、心血管疾患を治療するために患者に投与される。いくつかの実施態様において、本明細書に記載のステロイドペイロード及びそのコンジュゲートは、グルコース及び/又は肝臓の代謝障害を治療するために患者に投与される。いくつかの実施態様において、本明細書に記載のステロイドペイロード及びそのコンジュゲートは、筋骨格系疾患を治療するために患者に投与される。いくつかの実施態様において、本明細書に記載のステロイドペイロード及びそのコンジュゲートは、湿疹及び乾癬などの皮膚の炎症性病態を治療するために患者に投与される。
【０２６１】
本明細書に記載のタンパク質コンジュゲートは、そのステロイドペイロードの特定の細胞又は器官系への標的化送達の手段を提供し、それにより、遊離のコンジュゲートされていないステロイドペイロードの投与から生じる副作用が減少又は予防される。減少又は予防すべきそのような潜在的な副作用の例としては、引用により全体として本明細書に組み込まれるDecadron(登録商標)(デキサメタゾム(dexamethasome))の認可された薬物ラベルに列記されているものがある。いくつかの実施態様において、減少又は予防すべき副作用は、血圧上昇;ナトリウム貯留;水/体液貯留(浮腫、血管性浮腫、肺浮腫);カリウムの排泄増加;可逆的な視床下部-下垂体副腎(HPA)軸の抑制;治療の離脱後の潜在的なコルチコステロイド欠乏;感染症にかかりやすいこと;全身性真菌感染症の増悪;小児及び成人患者の水痘の重症度の悪化;小児及び成人患者の麻疹の重症度の悪化;後嚢下白内障;視神経の潜在的損傷を伴う緑内障;細菌、真菌、又はウイルスによる続発性の眼の感染症の確立の増大(enhancement of the establishment);視神経炎の新たなエピソードの増加;カポジ肉腫;薬剤誘発性の続発性副腎皮質機能不全;活動性又は潜伏性消化性潰瘍、憩室炎、手術直後の(fresh)腸の吻合、及び非特異性潰瘍性大腸炎が存在する場合の穿孔のリスク増加;胃腸の穿孔の後の腹膜刺激;骨形成の減少;骨吸収の増加;骨芽細胞機能の阻害;小児患者の骨成長の阻害;あらゆる年齢での骨粗鬆症の発生;急性ミオパチー(おそらく眼及び呼吸器の筋肉を含み、潜在的に四肢不全麻痺を起こす);クレアチニンキナーゼの上昇;多幸感、不眠、気分変動、人格変化、及び重度うつ病から、明らかな精神病の兆候にわたる精神錯乱;既存の情緒不安定又は精神病の傾向の悪化;眼内圧亢進;徐脈;心停止;心律動異常;心臓肥大;循環虚脱;鬱血性心不全;脂肪塞栓症;高血圧;早産児の肥大型心筋症;亜急性心筋梗塞後の心破裂;失神;頻脈;血栓塞栓症;血栓性静脈炎;血管炎;ざ瘡;アレルギー性皮膚炎;鮫肌;斑状出血及び点状出血;紅斑;創傷治癒障害;多汗;発疹;皮膚線条;皮膚試験への反応の抑制;薄くか弱い皮膚;頭毛が薄くなること;じんましん;炭水化物及び糖への耐性の減少;クッシング様状態の発生;高血糖症;糖尿;多毛症(hirsutism);多毛症(hypertrichosis);糖尿病におけるインスリン又は経口血糖降下剤の要求量増加(インスリン抵抗性);潜伏性糖尿病の兆候;月経不順;続発性の副腎皮質及び下垂体の不応答性(特に、ストレスの時;外傷;手術;又は病気の場合);小児患者における成長抑制;かかりやすい患者における鬱血性心不全;体液貯留;低カリウム血症性アルカローシス;カリウム喪失;ナトリウム貯留;腹部膨満;血清肝臓酵素レベルの上昇(通常中止と同時に可逆的);肝腫大;食欲増加;悪心;膵炎;穿孔及び出血の可能性がある消化性潰瘍;小腸及び大腸の穿孔(特に、炎症性腸疾患の患者);潰瘍性食道炎;タンパク質異化による負の窒素バランス;大腿骨頭及び上腕骨頭の無菌壊死;筋肉量低下;筋力低下;骨粗鬆症;長骨の病的骨折;ステロイドミオパチー;腱断裂;脊椎圧迫骨折;痙攣;うつ病;情緒不安定;多幸感;頭痛;通常治療の中止後の乳頭浮腫を伴う頭蓋内圧増加(偽脳腫瘍);不眠;気分変動;神経炎;神経障害;感覚異常;人格変化;精神障害;めまい;眼球突出;緑内障;眼内圧上昇;後嚢下白内障;異常な脂肪蓄積;感染に対する抵抗減少;しゃっくり;精子の運動性及び数の���加又は減少;倦怠;満月様顔貌;及び体重増加;並びに薬物間相互作用と関連する副作用から選択される。いくつかの実施態様において、減少又は予防すべき副作用は、薬物間相互作用と関連するものである。いくつかの実施態様において、減少又は予防すべき副作用は、コルチコステロイドと、コルチコステロイドによる副腎抑制の減弱を含むアミノグルテチミド;低カリウム血症、心臓肥大、及び鬱血性心不全の発症を含む、アムホテリシンB注射とカリウム枯渇剤(potassium-depleting agents);コルチコステロイドクリアランスの著しい減少を含む抗生物質;重症筋無力症の患者に重度の衰弱をもたらすことを含む抗コリンエステラーゼ剤;ワルファリンへの反応の阻害を含む経口抗凝固剤;血糖値の上昇を含む抗糖尿病剤;イソニアジドの血清濃度の減少を含む抗結核剤;コルチコステロイドのクリアランスの増加を含むコレスチラミン;シクロスポリンとコルチコステロイドの両方の活性並びに痙攣の発生率の増加を含むシクロスポリン;インドメタシンにより治療されている患者における偽陰性結果を含むデキサメタゾン抑制試験(DST)干渉;低カリウム血症による不整脈のリスク増加を含むジギタリスグリコシド; コルチコステロイドの代謝クリアランスの増大による血液レベルの減少及び生理的活性の低下を含むエフェドリン;特定のコルチコステロイドの肝臓代謝の減少及び関連するその効果の増加を含む、経口避妊薬を含むエストロゲン;コルチコステロイドの代謝の増大を含む、肝臓酵素誘導剤、阻害剤、及び基質(チトクロムP450 3A4(CYP 3A4)酵素活性を誘導する薬物、例えば、バルビツレート、フェニトイン、カルバマゼピン、リファンピン);コルチコステロイドの血漿濃度増加の可能性を含む、CYP 3A4を阻害する薬物(例えば、ケトコナゾール、エリスロマイシンなどのマクロライド抗生物質); CYP 3A4により代謝される薬物(例えば、インジナビル、エリスロマイシン)であって、それらのクリアランス増加による血漿濃度の減少を含む、CYP 3A4により代謝される薬物; 特定のコルチコステロイドの最高60%の代謝減少による、コルチコステロイド副作用のリスク増加及びコルチコステロイド離脱の間に潜在的に副腎不全を起こす副腎コルチコステロイド合成の阻害を含むケトコナゾール;胃腸の副作用のリスク増加及びサリチレートのクリアランス増加を含む非ステロイド性抗炎症薬(NSAIDS);フェニトインレベルの増加又は減少、発作制御の変更を含むフェニトイン;皮膚試験に対する反応の抑制を含む皮膚試験;中毒性皮膚壊死症を含むサリドマイド;並びに抗体応答の阻害又は弱毒生ワクチンに含まれるなんらかの生物の複製の増強による、トキソイド及び生ワクチン又は不活化ワクチンへの応答減少を含むワクチンの使用からの薬物間相互作用と関連するものである。
【０２６２】
そのため、グルココルチコイド受容体と関連する疾患、障害、又は病態を治療する方法であって、式(III)のコンジュゲートを、前記疾患、障害、又は病態を有する患者に投与することを含み、前記コンジュゲートの遊離のステロイドペイロードの投与と関連する副作用が低減される方法が本明細書に提供される。さらに、式(III-P)、式III-P-1、式(3000)、又は式(III)の化合物を細胞に送達する方法であって、前記細胞を、式(III-P)、式III-P-1、式(3000)、又は式(III)の化合物のタンパク質コンジュゲートと接触させることを含み、該タンパク質コンジュゲートが、前記細胞の表面抗原と結合する抗体又はその抗原結合断片を含む方法が本明細書に提供される。
【０２６３】
本明細書に記載される化合物は、単独でも、1種以上のさらなる治療剤と共にも投与することができる。該1種以上のさらなる治療剤は、本明細書に記載の化合物の投与の直前に、その投与と同時に、又はその投与の直後に投与することができる。本開示は、本明細書に記載の化合物のいずれかを1種以上のさらなる治療剤と組み合わせて含む医薬組成物、及びそのような組合せを、それを必要としている対象に投与することを含む治療方法も含む。
【０２６４】
好適なさらなる治療剤としては:第2のグルココルチコイド、自己免疫治療剤、ホルモン剤、生物製剤、又はモノクローナル抗体があるが、これらに限定されない。好適な治療剤としては、本明細書に述べられる化合物の任意の医薬として許容し得る塩、酸、又は誘導体もあるが、これらに限定されない。
【０２６５】
本明細書に記載の化合物は、抗ウイルス剤、抗生物質、鎮痛剤、コルチコステロイド、ステロイド、酸素、酸化防止剤、COX阻害剤、心臓保護剤(cardioprotectants)、金属キレート化剤、IFN-γ、及び/又はNSAIDと組み合わせて、投与及び/又は共製剤(co-formulated)することもできる。
【０２６６】
本明細書に記載の方法のいくつかの実施態様において、複数用量の本明細書に記載の化合物(又は本明細書に記載の化合物と本明細書に言及されるさらなる治療剤のいずれかの組合せを含む医薬組成物)を規定の時間経過にわたって対象に投与することができる。本開示のこの態様による方法は、対象に、複数用量の本明細書に記載の化合物を順次投与することを含む。本明細書で使用される場合、「順次投与する」とは、各々の用量の該化合物が、異なる時点で、例えば、所定の間隔(例えば、時間、日、週、又は月)で区切られた異なる日に、対象に投与されることを意味する。本開示は、患者に、単一の初回用量の本明細書に記載の化合物、その後、1以上の二次用量の該化合物、及び任意にその後、1以上の三次用量の該化合物を順次投与することを含む方法を含む。
【０２６７】
「初回用量」、「二次用量」、及び「三次用量」という用語は、本明細書に記載の化合物の投与の時系列を指す。したがって、「初回用量」は、治療レジメンの開始時に投与される用量(別名、「ベースライン用量」)であり;「二次用量」は、初回用量の後に投与される用量であり;「三次用量」は、二次用量の後に投与される用量である。初回用量、二次用量、及び三次用量は全て、同じ量の本明細書に記載の化合物を含有し得るが、通常、投与の頻度に関して互いに異なり得る。ある実施態様において、初回用量、二次用量、及び/又は三次用量に含まれる化合物の量は、治療経過中、互いに変化する(例えば、必要に応じて、上方調整又は下方調整される)。ある実施態様において、2以上の(例えば、2、3、4、又は5)用量が治療レジメンの開始時に「ローディング用量」として投与され、その後、より低い頻度で投与される後続の用量(例えば、「維持用量」)として投与される。
【０２６８】
本開示のある例示的な実施態様において、各々の二次及び/又は三次用量は、直前の用量から1〜26週間(例えば、1、11/2、2、21/2、3、31/2、4、41/2、5、51/2、6、61/2、7、71/2、8、81/2、9、91/2、10、101/2、11、111/2、12、121/2、13、131/2、14、141/2、15、151/2、16、161/2、17、171/2、18、181/2、19、191/2、20、201/2、21、211/2、22、221/2、23、231/2、24、241/2、25、251/2、26、261/2週間、又はそれより長い期間)後に投与される。本明細書で使用される「直前の用量」という語句は、一連の複数回の投与において、介入用量のない順序で、そのまさに次の用量の投与前に患者に投与される化合物の用量を意味する。
【０２６９】
本開示のこの態様による方法は、患者に、任意の数の二次及び/又は三次用量の化合物を投与することを含み得る。例えば、ある実施態様において、単一の二次用量のみが患者に投与される。他の実施態様において、2以上(例えば、2、3、4、5、6、7、8、又はそれより多く)の二次用量が患者に投与される。同様に、ある実施態様において、単一の三次用量のみが患者に投与される。他の実施態様において、2以上(例えば、2、3、4、5、6、7、8、又はそれより多く)の三次用量が患者に投与される。投与レジメンは、特定の対象の生涯にわたって無期限に、又はそのような治療がもはや治療的に必要でなくなるかもしくは有益でなくなるまで実施することができる。
【０２７０】
複数の二次用量を含む実施態様において、各々の二次用量は、他の二次用量と同じ頻度で投与されてもよい。例えば、各々の二次用量は、患者に、直前の用量から1〜2週間後又は1〜2カ月後に投与されてもよい。同様に、複数の三次用量を含む実施態様において、各々の三次用量は、他の三次用量と同じ頻度で投与されてもよい。例えば、各々の三次用量は、患者に、直前の用量から2〜12週間後に投与されてもよい。本開示のある実施態様において、二次及び/又は三次用量が患者に投与される頻度は、治療レジメンの経過にわたって変化し得る。投与の頻度はまた、臨床検査後の個々の患者の必要性に応じて、医師により、治療経過中に調整されてもよい。
【０２７１】
本開示は、2〜6のローディング用量が、第一の頻度(例えば、週に1回、2週間毎に1回、3週間毎に1回、月に1回、2カ月毎に1回など)で患者に投与され、その後、2以上の維持用量がより低い頻度で患者に投与される投与レジメンを含む。例えば、本開示のこの態様によれば、ローディング用量が月に1回の頻度で投与される場合、維持用量は、6週間毎に1回、2カ月毎に1回、3カ月毎に1回などで、患者に投与されてもよい。
【０２７２】
本開示は、本明細書に記載の化合物及び/又はコンジュゲート、例えば、式(I)、式I-P、式I-P-1、式(III-P)、式III-P-1、式(3000)、及び式(III)の化合物の医薬組成物、例えば、本明細書に記載の化合物、その塩、立体異性体、多形体、並びに医薬として許容し得る担体、希釈剤、及び/又は賦形剤を含む組成物を含む。好適な担体、希釈剤、及び賦形剤の例としては:適切な組成物pHの維持のためのバッファー(例えば、クエン酸塩バッファー、コハク酸塩バッファー、酢酸塩バッファー、リン酸塩バッファー、乳酸塩バッファー、シュウ酸塩バッファーなど)、担体タンパク質(例えば、ヒト血清アルブミン)、ナノ粒子、食塩水、ポリオール(例えば、トレハロース、スクロース、キシリトール、ソルビトールなど)、界面活性剤(例えば、ポリソルベート20、ポリソルベート80、ポリオキソレートなど)、抗菌薬、及び抗酸化剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２７３】
いくつかの実施態様において、疾患、障害、又は病態を治療する方法であって、前記障害を有する患者に、治療上有効な量の、式(I)、式I-P、式I-P-1、式(III-P)、式III-P-1、式(3000)、若しくは式(III)の化合物、又はその医薬組成物を投与することを含む方法が本明細書に述べられる。
【０２７４】
いくつかの実施態様において、疾患、障害、又は病態を治療する方法であって、前記障害を有する患者に、治療上有効な量の本明細書に述べられる化合物又はその医薬組成物を投与することを含む方法が本明細書に述べられる。
【０２７５】
いくつかの実施態様において、免疫疾患、自己免疫疾患、炎症、喘息、又は炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎からなる群から選択される疾患、障害、又は病態を治療する方法が本明細書に述べられる。
【０２７６】
いくつかの実施態様において、本明細書に記載のコンジュゲートを投与することを含む、ステロイド送達が治療効果を達成できる抗原、例えば、細胞表面発現抗原を標的化することにより、疾患、障害、又は病態を治療する方法が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、該抗原は、AXL、BAFFR、BCMA、BCR-リスト構成要素、BDCA2、BDCA4、BTLA、BTNL2 BTNL3、BTNL8、BTNL9、C10orf54、CCR1、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR9、CCR10、CD11c、CD137、CD138、CD14、CD168、CD177、CD19、CD20、CD209、CD209L、CD22、CD226、CD248、CD25、CD27、CD274、CD276、CD28、CD30、CD300A、CD33、CD37、CD38、CD4、CD40、CD44、CD45、CD47、CD46、CD48、CD5、CD52、CD55、CD56、CD59、CD62E、CD68、CD69、CD70、CD74、CD79a、CD79b、CD8、CD80、CD86、CD90.2、CD96、CLEC12A、CLEC12B、CLEC7A、CLEC9A、CR1、CR3、CRTAM、CSF1R、CTLA4、CXCR1/2、CXCR4、CXCR5、DDR1、DDR2、DEC-205、DLL4、DR6、FAP、FCamR、FCMR、FcR's、Fire、GITR、HHLA2、HLAクラスII、HVEM、ICOSLG、IFNLR1、IL10R1、IL10R2、IL12R、IL13RA1、IL13RA2、IL15R、IL17RA、IL17RB、IL17RC、IL17RE、IL20R1、IL20R2、IL21R、IL22R1、IL22RA、IL23R、IL27R、IL29R、IL2Rg、IL31R、IL36R、IL3RA、IL4R、IL6R、IL5R、IL7R、IL9R、インテグリン、LAG3、LIFR、MAG/シグレック-4、MMR、MSR1、NCR3LG1、NKG2D、NKp30、NKp46、PDCD1、PROKR1、PVR、PVRIG、PVRL2、PVRL3、RELT、SIGIRR、シグレック-1、シグレック-10、シグレック-5、シグレック-6、シグレック-7、シグレック-8、シグレック-9、SIRPA、SLAMF7、TACI、TCR-リスト構成要素/会合体、PTCRA、TCRb、CD3z、CD3、TEK、TGFBR1、TGFBR2、TGFBR3、TIGIT、TLR2、TLR4、TROY、TSLPR、TYRO、VLDLR、VSIG4、又はVTCN1である。いくつかの実施態様において、該抗原はIL2R-γである。
【０２７７】
いくつかの実施態様において、免疫疾患、自己免疫疾患、炎症性疾患、皮膚疾患、又は胃腸疾患から選択される疾患、障害、又は病態を治療する方法が本明細書に述べられる。
【０２７８】
いくつかの実施態様において、該疾患は、クローン病、潰瘍性大腸炎、クッシング症候群、副腎不全、又は先天性副腎過形成症である。
【０２７９】
いくつかの実施態様において、該疾患は、炎症、喘息、又は炎症性腸疾患である。
【０２８０】
いくつかの実施態様において、該疾患は、多発性硬化症、関節リウマチ、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、乾癬、又は湿疹から選択される自己免疫疾患である。
【０２８１】
いくつかの実施態様において、化学療法の副作用を減少させるか又は改善する方法であって、前記障害を有する患者に、治療上有効な量の本明細書に記載の化合物又は組成物を投与することを含む方法が本明細書に述べられる。
【０２８２】
いくつかの実施態様において、免疫抑制療法の副作用を減少させるか又は改善する方法であって、前記障害を有する患者に、治療上有効な量の本明細書に記載の化合物又は組成物を投与することを含む方法が本明細書に述べられる。
【０２８３】
いくつかの実施態様において、癌を治療する方法であって、前記障害を有する患者に、治療上有効な量の本明細書に記載の化合物又は組成物を投与することを含む方法が本明細書に述べられる。いくつかの実施態様において、該癌は、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫(NHL)、又は多発性骨髄腫、並びにその他から選択される。
【実施例】
【０２８４】
(F.  実施例)
【０２８５】
特定の実施態様が以下の非限定的な例により説明される。
【０２８６】
試薬及び溶媒は、他に明示されていない限り、Sinopharm Chemical Reagent社(SCRC)、Sigma-Aldrich社、Alfa社、又は他の供給業者などの商業的供給源から得た。
【０２８７】
1H NMR及び他のNMRスペクトルは、Bruker AVIII 400又はBruker AVIII 500で記録した。データは、Nutsソフトウェア又はMestReNovaソフトウェアにより処理し、プロトンシフトを百万分率(ppm)で内部標準テトラメチルシランから低磁場に測定した。
【０２８８】
HPLC-MS測定は、以下の条件を利用してAgilent 1200 HPLC/6100 SQ Systemで実施した。
【０２８９】
HPLC-MS測定の方法Aは、移動相として:A:水(0.01%トリフルオロ酢酸TFA)及びB:アセトニトリル(0.01% TFA)を含んでいた。勾配相は5%のBであり、15分の期間にわたり1.0mL/分の流量で95%のBに増加させた。使用したカラムは、SunFire C18、4.6×50mm、3.5μmであった。カラム温度は50℃であった。検出器は、アナログ-デジタル変換器ELSD(蒸発光散乱検出器、以下で「ADC ELSD」と称する)、DAD(ダイオードアレイ検出器、214nm及び254nm)、及びエレクトロスプレーイオン化-大気圧イオン化(ES-API)を含んでいた。
【０２９０】
HPLC-MS測定の方法Bは、移動相として:A:水(10mM NH4HCO3)及びB:アセトニトリルを含んでいた。勾配相は5%のBであり、15分の期間にわたり1.0mL/分の流量で95%のBに増加させた。使用したカラムは、XBridge C18、4.6×50 mm、3.5μmであった。カラム温度は50℃であった。検出器は、ADC ELSD、DAD(214nm及び254nm)、及び質量選択検出器(MSD ES-API)を含んでいた。
【０２９１】
LC-MS測定は、以下の条件を利用してAgilent 1200 HPLC/6100 SQ Systemで実施した。
【０２９２】
LC-MS測定の方法Aは、WATERS 2767装置で実施した。カラムは、Shimadzu Shim-Pack、PRC-ODS、20×250mm、15μmであり、2つを直列につないだ。移動相は、A:水(0.01% TFA)及びB:アセトニトリル(0.01% TFA)であった。勾配相は5%のBであり、3分の期間にわたり1.8〜2.3mL/分の流量で95%のBに増加させた。使用したカラムは、SunFire C18、4.6×50mm、3.5μmであった。カラム温度は50℃であった。検出器は、アナログ-デジタル変換器ELSD(蒸発光散乱検出器)、DAD(ダイオードアレイ検出器)(214nm及び254nm)、及びES-APIを含んでいた。
【０２９３】
LC-MS測定の方法Bは、Gilson GX-281装置で実施した。カラムは、Xbridge Prep C18 10 um OBD、19×250mmであった。移動相は、A:水(10mM NH4HCO3)及びB:アセトニトリルであった。勾配相は5%のBであり、3分の期間にわたり1.8〜2.3mL/分の流量で95%のBに増加させた。使用したカラムは、XBridge C18、4.6×50mm、3.5μmであった。カラム温度は50℃であった。検出器は、ADC ELSD、DAD(214nm及び254nm)、及び質量選択検出器(MSD)(ES-API)を含んでいた。
【０２９４】
分取高圧液体クロマトグラフィー(Prep-HPLC)を、Gilson GX-281装置で実施した。2種の溶媒系を使用したが、一方は酸性で、もう一方は塩基性であった。酸性溶媒系は、Waters SunFire 10μm C18カラム(100Å、250×19mm)を含んでいた。分取HPLCの溶媒Aは、水中0.05% TFAであり、溶媒Bはアセトニトリルであった。溶離条件は、20分の期間にわたり30mL/分の流量で溶媒Bが5%から100%に増加する直線勾配であった。塩基性溶媒系は、Waters Xbridge 10μm C18カラム(100Å、250×19mm)を含んでいた。分取HPLCの溶媒Aは、水中10mM炭酸水素アンモニウム(NH4HCO3)であり、溶媒Bはアセトニトリルであった。溶離条件は、20分の期間にわたり30mL/分の流量で、溶媒Bが5%から100%に増加する直線勾配であった。
【０２９５】
フラッシュクロマトグラフィーは、Agela Flashカラムシリカ-CSによりBiotage装置で実施した。逆相フラッシュクロマトグラフィーは、他に明確に示されていない限り、Boston ODS又はAgela C18によりBiotage装置で実施した。
【０２９６】
以下の略語を、実施例中及び明細書全体で使用する:
【表１３】
2021509908.tif 000396
2021509908.tif 000397
2021509908.tif 000398
【０２９７】
(調製方法)
(実施例1)
図3中のスキーム1は、反応性基を含むブデソニド-スペーサー、コハク酸(化合物1c)、カルバマートアナログ(1d、1e)、THP-アナログ(1g及び1h)、グルコースアナログ(1i及び1j)、リン酸アナログ(1k及び1l)、及び市販のリン酸アナログ(1m)の合成を示す。
【０２９８】
(中間体3a)
(1-[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)オキシ]ピロリジン-2,5-ジオン(3a))
【化３４７】
2021509908.tif 000399
ブデソニド1a(0.10g、0.26mmol)のDCM(1mL)溶液に、ビス(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル)カーボナート(71mg、0.30mmol)、トリエチルアミン(47mg、0.52mmol)及びDMAP(3.0mg、触媒)を加えた。該反応混合物を、15〜25℃で12時間、ブデソニドが消費されるまで撹拌し、それをLCMSによりモニターした。次いで、該反応混合物をDCMで希釈し、水により洗浄した。有機溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾過後、該溶液を真空中で濃縮し、残渣(粗製3a)を精製せずに次の工程に直接使用した。(93mg、収率71%)。ESI m/z:572.2(M+H)+。
【０２９９】
実施例1c
4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}-4-オキソブタン酸(1c)
【化３４８】
2021509908.tif 000400
WO2015005459号;WO2013074988号;Research in Pharmaceutical Science, 2011, 6(2), 107-116;及び International Journal of Pharmaceutics, 2009, 365(1-2), 69-76を参照されたい。
【０３００】
ブデソニド(1a、0.10g、0.26mmol)のDCM(1mL)溶液に、無水コハク酸(30mg、0.30mmol)、トリエチルアミン(47mg、0.52mmol)及びDMAP(3mg、触媒、0.02mmol)を加えた。該混合物を、室温で12時間、ブデソニドが消費されるまで撹拌し、それをTLC及びLCMSによりモニターした。次いで、該反応混合物をDCMで希釈し、水で洗浄した。有機溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾過後、該溶液を真空中で濃縮し、残渣を分取HPLCにより精製すると、標記化合物1c(22mg、収率18%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:531.3 (M + H)+。
【化３４９】
2021509908.tif 000401
【０３０１】
(実施例1d)
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-メチル-N-[2-(メチルアミノ)エチル]カルバマート(1d))
【化３５０】
2021509908.tif 000402
粗製の中間体3a(63mg、0.11mmol)のDCM(5mL)溶液に、N,N'-ジメチルエタン-1,2-ジアミン(28mg、0.32mmol)及びトリエチルアミン(38mg、0.38mmol)を室温で加えた。生じた混合物を、3aのほとんどが消費されるまで室温で2時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。揮発物を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、1d(4mg、収率4.5%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:545.3 (M + H)+。
【化３５１】
2021509908.tif 000403
【０３０２】
(実施例1e)
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-[(ヒドラジンカルボニル)メチル]カルバマート(1e))
【化３５２】
2021509908.tif 000404
DMF(3mL)中の粗製の3a(0.16g、0.28mmol)の混合物に、Boc-2-(2-アミノアセチル)ヒドラジン(80mg、0.42mmol)及びトリエチルアミン(85mg、0.84mmol)を加えた。該反応混合物を25℃で16時間撹拌し、中間体3aが消費され、それをLCMSによりモニターした。次いで、該混合物を水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾過後、該溶液を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中30〜50%酢酸エチル)により精製すると、Boc-1e(70mg)を白色の固体として与え(ESI m/z:646(M+H)+)、それをDCM(2mL)に溶解させた。該溶液にTFA(1mL)を0℃で滴加した。該混合物を、25℃で2時間、Boc-1eが消費されるまで撹拌し、それをLCMSによりモニターした。揮発物を真空中で除去し、残渣を分取HPLCにより精製すると、標記化合物1e(7mg、収率12%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:546(M+H)+。
【０３０３】
(実施例1g)
((1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-8-(2-{[6-(ヒドロキシメチル)オキサン-2-イル]オキシ}アセチル)-9,13-ジメチル-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-16-オン(1g))
【化３５３】
2021509908.tif 000405
ブデソニド(1a、50mg、0.12mmol)の無水DCM(4mL)溶液に、(3,4-ジヒドロ-2H-ピラン-2-イル)メタノール(0.11g、0.93mmol)及びp-トルエンスルホン酸(31mg、0.18mmol)を0℃で加えた。該反応混合物を室温で4日間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。揮発物を真空中で除去し、残渣をDMFに溶解させ、分取HPLC(方法B)により分離すると、標記化合物1g(13mg、収率20%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:545(M+H)+。
【０３０４】
(実施例1h)
(メチル2-[(6-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}オキサン-2-イル)メトキシ]アセタート(1h))
【化３５４】
2021509908.tif 000406
(3,4-ジヒドロ-2H-ピラン-2-イル)メタノール(2.0g、18mmol)のTHF(30mL)溶液に、水素化ナトリウム(鉱油中60%、0.88g、22mmol)を、少しずつ0℃で窒素保護下で加えた。該懸濁液を、0℃で、水素発生が終わるまで撹拌した。次いで、生じた混合物に、エチル2-ブロモアセタート(4.0g、26mmol)のTHF(18mL)溶液を加えた。該混合物を、出発物質がLCMSによりほとんど消費されるまで、室温で一晩撹拌した。0℃に冷却した後、反応物を、窒素保護下で水によりクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機溶液を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中0〜8%酢酸エチル)により精製すると、エチル2-((3,4-ジヒドロ-2H-ピラン-2-イル)メトキシ)アセタート(0.70g、収率21％)を無色の油として与えた。
【化３５５】
2021509908.tif 000407
【０３０５】
ブデソニド(1a、0.11g、0.25mmol)の無水DCM(8mL)溶液に、上記で得られたエチル2-((3,4-ジヒドロ-2H-ピラン-2-イル)メトキシ)アセタート(0.35g、1.9mmol)及びp-トルエンスルホン酸(66mg、0.35mmol)を0℃で加えた。該反応混合物を室温で4時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。揮発物を真空中で除去し、残渣をDMFに溶解させ、分取HPLC(方法A)により分離すると、標記化合物1h(46mg、収率29%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:617(M+H)+。
【０３０６】
(実施例1i)
((1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-6-プロピル-8-(2-{[(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)オキサン-2-イル]オキシ}アセチル)-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.002,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-16-オン(1i、エピマーを含む))
【化３５６】
2021509908.tif 000408
DCM(15mL)中のブデソニド(1a、0.22g、0.50mmol)及びアセトブロモ-α-D-グルコース(0.33g、0.80mmol)の混合物に、4Åモレキュラーシーブ(1.0g)を加え、該混合物を室温で30分間撹拌し、それに続いてトリフルオロメタンスルホン酸銀(0.19g、0.75mmol)を0℃で加えた。該懸濁液を、暗所で、室温で週末にわたり(72時間)、窒素保護下で撹拌した。該混合物をセライトに通して濾過し、濾液を真空中で濃縮した。残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、Ac-1i(25mg、収率9.2%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:761 (M + H)+。
【化３５７】
2021509908.tif 000409
【０３０７】
上記で得られた化合物Ac-1i(30mg、39μmol)の水(1mL)及びメタノール(3mL)中の溶液に、水酸化リチウム一水和物(17mg、0.40mmol)を0℃で加えた。0℃で1時間撹拌した後、該混合物を分取HPLC(方法B)により直接精製すると、1i(24mg、収率98％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:593 (M + H)+。
【化３５８】
2021509908.tif 000410
【０３０８】
(実施例1j)
((2S,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.002,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}オキサン-2-カルボン酸(1j、エピマーを含む))
【化３５９】
2021509908.tif 000411
アセトブロモ-α-D-グルコースをアセトブロモ-α-D-グルクロン酸メチルエステルに代える以外、1iと類似な手順に従って、化合物1j(24mg、2工程で収率9.2％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:607 (M + H)+。
【化３６０】
2021509908.tif 000412
【０３０９】
(実施例1k)
((2, 2113エトキシ)({2 1H)S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)13オキシ)({2 1H), 3.30-3.28(m, 1H), 2.70-2.62(m, 1H), 2.40-2.36(m, 1H)2,9.04,8.013,18]イコサ)({2 1H), 3.30-3.28オキソエトキシ})ホスフィン酸(1k))
【化３６１】
2021509908.tif 000413
トリエチルアミン(0.67g、6.6mmol)のクロロホルム(4mL)溶液に、オキシ塩化リン(0.51mg、3.3mmol)を0℃で加え、それに続いてブデソニド(1a、1.3g、3.0mmol)のクロロホルム(4mL)溶液を加えた。20℃で2時間撹拌した後、該混合物を0℃に冷却し、Boc-エタノールアミン(0.41mg、2.6mmol)のクロロホルム(4mL)及びピリジン(3mL)中の溶液を加えた。反応がLCMSにより完了するまで20℃で1時間撹拌した後、該反応混合物を0℃の水(2mL)の添加によりクエンチした。該混合物を20℃で一晩撹拌した。揮発物を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、粗製のBoc-1k(330mg、17%)を黄色の膜として与えた。ESI m/z:676(M+Na)+。
【０３１０】
Boc-1k(0.18g、0.28mmol)のDCM(5mL)溶液に、トリフルオロ酢酸(0.5mL)を0℃で加えた。生じた混合物を、BocがLCMSにより完全に除去されるまで23℃で2時間撹拌した。揮発物を真空中で除去した。残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、1kを白色の固体として与えた(90mg、収率59％)。ESI m/z:554 (M + H)+。
【化３６２】
2021509908.tif 000414
分析HPLC:＞99.9%、保持時間:3.90分(方法B)。
【０３１１】
(実施例1l)
((2-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}エトキシ)ホスホン酸)
J. Am. Chem. Soc., 2016, 138(4), 1430-1445; WO2015153401号;及び Phosphorus, Sulfur and Silicon and the Related Elements, 2000, 165, 83-90を参照されたい。
【化３６３】
2021509908.tif 000415
【０３１２】
THF(16mL)中のFmoc-エタノールアミン(1.1g、3.9mmol)の混合物に、ジホスホリルクロリド(2.2g、8.8mmol)をシリンジにより-40℃で加えた。LCMSによりモニターして出発物質が完全に消費されるまで-40℃で1時間撹拌した後、該反応混合物を水(1mL)により-40℃でクエンチし、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(200mL)により処理し、10〜20℃に一晩保った。生じた混合物を濃HClによりpH 2に酸性化し、次いで酢酸エチルで抽出した。合わせた有機溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮すると、粗製の標記化合物(1.6g、粗製)を白色の固体として与え、それをさらに精製せずに次の工程に使用した。ESI m/z:364(M+H)+。
【０３１３】
((2-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}エトキシ)({[ヒドロキシ({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ})ホスホリル]オキシ})ホスフィン酸(Fmoc-1l))
【化３６４】
2021509908.tif 000416
Fmoc-エタノールアミンをブデソニド(1a、0.86g、20mmol)に代えた以外上記手順に従って、ホスホン酸ブデソニド中間体1a-PO3H2(1.1g、粗製)が白色の固体として得られた(ESI m/z:551(M+H)+)。
【０３１４】
粗製の(2-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}エトキシ)ホスホン酸(0.29g、0.80mmol)のDMF(5mL)溶液に、トリエチルアミン(81mg、0.80mmol)及び1,1'-カルボニルジイミダゾール(CDI、0.32g、2.0mmol)を10℃で加えた。該混合物を10〜20℃で30分間撹拌してから、上記で得られたホスホン酸ブデソニド中間体1a-PO3H2(0.41g、0.80mmol)及び塩化亜鉛(0.87g、6.4mmol)を、該反応混合物に加えた。生じた混合物を10〜20℃で一晩撹拌し、出発物質はLCMSによると完全に消費された。次いで、該反応を希HCl水溶液(1N、50mL)によりクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機溶液を濃縮し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、Fmoc-1l(0.32g、収率47%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:856(M+H)+。
【０３１５】
((2-アミノエトキシ)({[ヒドロキシ({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ})ホスホリル]オキシ})ホスフィン酸(1l))
【化３６５】
2021509908.tif 000417
WO2015153401号を参照されたい。
【０３１６】
Fmoc-1l(0.10g、0.12mmol)のDCM(2mL)溶液に、ピペリジン(67mg、0.79mmol)を10℃で加えた。該反応混合物を10〜20℃で16時間撹拌した。化合物Fmoc-1lはLCMSによると完全に消費された。揮発物を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、1l(50mg、収率68%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:634 (M + H)+。
【化３６６】
2021509908.tif 000418
分析HPLC:＞99.9%、保持時間:2.74分(方法B)。
【０３１７】
以下の表1aは、記載された方法を利用して製造されたステロイドを表す。
表1a-化合物の構造及び化学的・物理的性質
【表１４】
2021509908.tif 000419
2021509908.tif 000420
2021509908.tif 000421
2021509908.tif 000422
【０３１８】
スキーム2.  VC-PABスペーサー-ブデソニドの合成
【化３６７】
2021509908.tif 000423
(MC-スペーサー-ブデソニド(2a及び2c)の合成の一般的手順A)
【化３６８】
2021509908.tif 000424
スキーム2中のvcPAB-ブデソニド(4a A=CO、1.0当量)又はアミン9(1.0当量)のDMF(10mgアミンあたり約1mL)溶液に、以下の表中の活性化NHSエステル5(1.5〜3.0当量)及びDIPEA(2.0当量)を室温で加えた。該反応混合物を室温で一晩撹拌すると、NHSエステル及びアミンのほとんどがLCMSスペクトルによると消費された。濾過後に、該反応溶液を分取HPLC又は逆相フラッシュクロマトグラフィーにより直接精製すると、所望のアミド2(収率約17％)を白色の固体として与えた。
【表１５】
2021509908.tif 000425
c. TFA塩
【０３１９】
(酸からのアミド2b、2l、2m-前駆体の合成の一般的手順B)
【化３６９】
2021509908.tif 000426
【表１６】
2021509908.tif 000427
DMF又はDCM又はTHF(5mgの5あたり1mL)中の酸5(1.0〜1.5当量)の溶液に、DIPEA(2.0〜5.0当量)及びHATU(1.4〜2.2当量)を室温で加えた。生じた混合物をこの温度で0.5〜1時間撹拌してから、vcPAB-ブデソニド(4、1.0当量)を加えた。該反応混合物を、LCMSによりモニターしてアミンが完全に消費されるまで、室温で3〜16時間撹拌した。該反応混合物をメンブランに通して濾過し、次いで、濾過(filtration)を分取HPLC又は逆相フラッシュクロマトグラフィーにより分離すると、アミド2(収率21〜54％)を白色の固体として与えた。さらなる詳細は、以下の表中にある。
【表１７】
2021509908.tif 000428
【０３２０】
(中間体7及び10の合成の一般的手順C)
【化３７０】
2021509908.tif 000429
【表１８】
2021509908.tif 000430
中間体6(1.2〜1.4当量)のDMF溶液に、HATU(1.5〜1.7当量)を室温で加えた。得られた溶液を室温で1時間撹拌した。この懸濁液に、vcPAB-ブデソニド(4a、1.0当量)のDMF(4aのmgあたり0.10mL)溶液を加え、その後にNMM(2.3〜3.0当量)を加えた。該反応混合物を室温で16時間撹拌すると、透明になった。該反応を、化合物4aが完全に消費されるまでLCMSによりモニターした。次いで、該反応混合物に、ジエチルアミン(過剰)を加え、次いで生じた混合物を、LCMSによりFmocが除去されるまで、室温で1〜3時間撹拌した。揮発物を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法A)により精製すると、化合物7(化合物4aから収率18％)を与え、又は分取HPLC(方法B)により精製すると、化合物10(5-%収率)を白色の固体として与えた。さらなる詳細は以下の表中にある。
【表１９】
2021509908.tif 000431
【０３２１】
(カルバマート2j、2k、2r、及び2sの合成の一般的手順D)
【化３７１】
2021509908.tif 000432
混合物を、LCMSによりモニターしてPNP活性化エステルが完全に消費されるまで、室温で3〜24時間撹拌した。該反応混合物をメンブランに通して濾過し、濾液を分取HPLCにより直接分離すると、化合物2(ジアステレオ異性体あり又はなし、収率11〜63％)を白色の固体(複数可)として与えた。さらなる詳細は以下の表中にある。
【表２０】
2021509908.tif 000433
【０３２２】
(2a〜dの合成)
ブデソニド-リンカー2a〜dを、スキーム2による3種の手法から調製した。最初の手法は、ブデソニド3aの活性化エステルから得られたvcPAB-ブデソニド(4a)とリンカー5との直接アミドカップリング反応であった。第2の手法は、vcPAB-ブデソニド(4a)と中間体6aの最初のアミドカップリング反応によるブデソニド-リンカー7の生成と、それに続くガラクトース-アジド(8a)との3+2環化による中間体9の生成、及び最後に5との第2のアミドカップリング反応によるものであった。第3の手法は、4と中間体6bとの最初のアミドカップリング反応、それに続く5bとのアミド形成、及び連続的にアセトンの脱保護により2dを与えることによるものであった。
【０３２３】
(中間体4a)
【化３７２】
2021509908.tif 000434
乾燥DMF(10mL)中の1.4mmol)に、Boc-vc-PAB(12a)[WO2008/34124 A2号](0.59g、1.2mmol)、DMAP(0.30g、2.4mmol)及びピリジン(0.29g、3.7mmol)を加えた。該混合物を、3aがLCMSにより完全に消費されるまで、室温で16時間撹拌した。該反応混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(水中50〜80%アセトニトリル)により直接精製すると、中間体Boc-4a(0.74g、収率38%、ESI m/z:936(M+H)+)を白色の固体として与え、それをDCM(40mL)に溶解させた。5mLの該DCM溶液(94mg Boc-4aを含む)に、TFA(0.5mL)を0℃で滴加した。LCMSによりモニターしてBoc-4aが消費されるまで室温で1.5時間撹拌した後、生じた混合物を真空中で濃縮すると、粗製の標記生成物4a(83mg、ブデソニドからの収率34%)を、そのTFA塩として無色の油として与え、それを精製せずに次の工程合成に使用できる。20mgの粗製の4aを分取HPLC(方法B)により精製すると、純粋な4a(8mg)を血漿安定性試験用の遊離塩基として与えた。ESI m/z:836 (M + H)+。
【化３７３】
2021509908.tif 000435
【０３２４】
(実施例2a)
(N-[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-[(4-{[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)オキシ]メチル}フェニル)カルバモイル]ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-6-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ヘキサンアミド(2a))
【化３７４】
2021509908.tif 000436
一般的手順Aに従って、標記化合物2a(10mg、収率17％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:1029(M+H)+。分析HPLC:92.5%、保持時間:7.66分(方法A)。
【０３２５】
(実施例2b)
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタナム(oxobutanam)-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-イド)-N-[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-[(4-{[({2ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)オキシ]メチル}フェニル)カルバモイル]ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド(2b))
【化３７５】
2021509908.tif 000437
一般的手順Bに従って、標記化合物2b(3.0mg、収率21％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:686 (M/2 + H)+。
【化３７６】
2021509908.tif 000438
分析HPLC:96.9%、保持時間:8.10分(方法B)。
【０３２６】
(実施例2c)
((2R)-2-アミノ-N-[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-[(4-{[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)オキシ]メチル}フェニル)カルバモイル]ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]ヘキサンアミド(7))
【化３７７】
2021509908.tif 000439
ESI m/z:565 (M/2 + H)+。
【化３７８】
2021509908.tif 000440
【０３２７】
((2R)-2-アミノ-N-[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-[(4-{[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)オキシ]メチル}フェニル)カルバモイル]ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-6-[2-({1-[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)オキサン-2-イル]-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル}オキシ)アセトアミド]ヘキサンアミド(9))
【化３７９】
2021509908.tif 000441
濾過の後で、9の生じた溶液を直接次の工程に直接使用した。ESI m/z:667(M/2+H)+
【０３２８】
(N-[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-[(4-{[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)オキシ]メチル}フェニル)カルバモイル]ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-[2-({1-[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)オキサン-2-イル]-4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル}オキシ)アセトアミド]ペンチル]-1-(2,5-ジオキソピロール-1-イル)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド(Mc-PEG4-N(糖-COT)Lys-vc-PAB-ブデソニド)(2c))
【化３８０】
2021509908.tif 000442
ESI m/z:831 (M/2 + H)+。
【化３８１】
2021509908.tif 000443
分析HPLC:97.6%、保持時間:7.63分(方法A)。
【０３２９】
(実施例2d)
((2R)-2-アミノ-N-[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-[(4-{[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)オキシ]メチル}フェニル)カルバモイル]ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-N'-[(2S)-2-[(4R,5R)-5-[(4R)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-イル]-2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-イル]-2-ヒドロキシエチル]ペンタンジアミド(10))
【化３８２】
2021509908.tif 000444
一般的手順Cに従って、化合物10(13mg、収率5%)が白色の固体として得られた。ESI m/z:605 (M/2 + H)+。
【化３８３】
2021509908.tif 000445
【０３３０】
((2R)-2-アミノ-N-[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-[(4-{[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)オキシ]メチル}フェニル)カルバモイル]ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-N'-[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-ペンタヒドロキシヘキシル]ペンタンジアミド(10A))
【化３８４】
2021509908.tif 000446
DCM(1mL)中の化合物10(13mg、11μmol)の混合物に、TFA(1mL)を滴加した。該混合物を室温で1時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。揮発物を真空中で除去すると、粗製の脱保護生成物10A(13mg)を薄黄色の油として与え、それをさらに精製せずに次の工程に使用した。ESI m/z:565(M/2+H)+。
【０３３１】
((2R)-N-[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-[(4-{[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)オキシ]メチル}フェニル)カルバモイル]ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-2-[1-(2,5-ジオキソピロール-1-イル)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-N'-[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-ペンタヒドロキシヘキシル]ペンタンジアミド(2d))
【化３８５】
2021509908.tif 000447
一般的手順Aに従って、標記化合物2d(3.5mg、4aからの全収率1%)が白色の固体として得られた。ESI m/z:829.7 (M/2 + H)+。
【化３８６】
2021509908.tif 000448
分析HPLC:＞99%、保持時間:6.40分(方法A)。
【０３３２】
(スキーム3.  2eの合成)
【化３８７】
2021509908.tif 000449
(実施例2e)
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-[(4-アミノフェニル)メチル]カルバマート(13))
【化３８８】
2021509908.tif 000450
4-アミノベンジルアミン(9.7mg、79μmol)及びDIPEA(12mg、93μmol)のTHF(10mL)溶液に、3a(24mg、44μmol)のTHF(5.0mL)溶液を室温で滴加した。該混合物を、LCMSによりモニターして3aが完全に消費されるまで室温で3時間撹拌した。揮発物を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、化合物13(5.6mg、収率22%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:579.2 (M + H)+。
【化３８９】
2021509908.tif 000451
【０３３３】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-({4-[(2S)-5-(カルバモイルアミノ)-2-[(2S)-2-[6-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]ペンタンアミド]フェニル}メチル)カルバマート(2e))
【化３９０】
2021509908.tif 000452
乾燥DMF(1.5mL)中のMC-VC-OH 5f(WO2014/191578 A1号)(5.7mg、12μmol)の混合物に、HATU(4.6mg、12μmol)及びNMM(4.0mg、40μmol)を室温で加えた。該混合物を室温で10分間撹拌してから、化合物13(4.7mg、8.1μmol)を該反応混合物に加えた。生じた混合物を室温で一晩撹拌した。化合物13が完全に消費され、所望の生成物がLCMSにより主要な生成物として検出された。該混合物を分取HPLCにより直接精製すると、標記化合物2e(2.9mg、収率35%)を白色の固体として与えた。ES m/z:1029.1(M+H)+、514.7(M/2+H)+。分析HPLC:＞99%、保持時間:7.54分(方法A)。
【０３３４】
(スキーム4.  リンカー-スペーサー-ブデソニド(エステルによる)2f及び2gの合成)
【化３９１】
2021509908.tif 000453
【表２１】
2021509908.tif 000454
(実施例2f)
(1-{4-[(2S)-5-(カルバモイルアミノ)-2-[(2S)-2-[6-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]ペンタンアミド]フェニル}メチル4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル}ブタンジオアート(2f))
【化３９２】
2021509908.tif 000455
1c(20mg、38μmol)のDMF(2mL)溶液に、MC-VCPAB(12b、0.11g、0.19mmol)、TBTU(63mg、0.19mmol)、HOBt(26mg、0.19mmol)及びDIPEA(41mg、0.19mmol)を室温で加えた。生じた混合物を70℃で12時間撹拌した。2fのさらなる生成物は形成されず、それをLCMSによりモニターした。該反応混合物を分取HPLC(方法A)により直接精製すると、標記化合物2f(2.6mg、収率6%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:1085.3 (M + H)+。
【化３９３】
2021509908.tif 000456
【０３３５】
(実施例2g)
(1-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル}ブタンジオアート(2g))
【化３９４】
2021509908.tif 000457
12bをDIBAC-suc-PEG4-vc-PAB(12c)に代えた以外、実施例2fの手順に従って、標記化合物2g(15mg、収率19%)が白色の固体として。ESI m/z:714 (M/2 + H)+。
【化３９５】
2021509908.tif 000458
分析HPLC:99.5%、保持時間:7.86分(方法B)。
【０３３６】
(スキーム5.  リンカー-スペーサー-ブデソニド2j〜2nの合成(アミド又はカルバマートによる))
【化３９６】
2021509908.tif 000459
スキーム5において、Budはブデソニドを指す。
【０３３７】
VC-PAB部分を有するほとんどのブデソニド-リンカー(2)を、3つの手法からアミド又はカルバマートにより合成した(スキーム5)。化合物1d、1eは、アミドカップリングにより別々にリンカーとコンジュゲートして、アミド又はカルバマートを与えた(スキーム5)。さらなる詳細は以下の表中にある。
【表２２】
2021509908.tif 000460
【０３３８】
(中間体4c)
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-(2-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル](メチル)アミノ}エチル)-N-メチルカルバマート(4c))
【化３９７】
2021509908.tif 000461
化合物1d(40mg、73μmol)のDMF(3mL)溶液に、Fmoc-vcPAB-PNP(11d、60mg、78μmol)、DMAP(9.0mg、74μmol)及びDIPEA(20mg、0.16mmol)を室温で加えた。該混合物を、LCMSによりモニターして出発物質のほとんどが消費されるまで、室温で3時間撹拌した。次いで、該反応混合物にピペリジン(1mL)を加えた。LCMSによりモニターして脱Fmoc反応が完了するまで室温で1時間撹拌した後に、該反応混合物を分取HPLC(方法B)により直接精製すると、化合物4c(9.0mg、収率13%、LCの第2のピーク)を白色の固体として与えた。ESI m/z:951(M+H)+、973(M+Na)+。
【０３３９】
(実施例2j)
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-({N'-[({4-[(2S)-5-(カルバモイルアミノ)-2-[(2S)-2-[6-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル]ヒドラジンカルボニル}メチル)カルバマート(2j))
【化３９８】
2021509908.tif 000462
ESI m/z:1144.3 (M + H)+。
【化３９９】
2021509908.tif 000463
【０３４０】
(実施例2k)
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-(2-{[({4-[(2S)-5-(カルバモイルアミノ)-2-[(2S)-2-[6-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル](メチル)アミノ}エチル)-N-メチルカルバマート(2k-A及び2k-B))
【化４００】
2021509908.tif 000464
一般的手順Dに従って、ジアステレオ異性体としての標記化合物2k-A(3.3mg、収率10%、LCの第2のピーク)及び2k-B(4.1mg、収率12%、LCの第1のピーク)が白色の固体として得れた。2k-A:ESI m/z:1143.4(M+H)+、保持時間:1.70分(方法A)。2k-B:ESI m/z:1143.4(M+H)+、保持時間:1.65分(方法A)。
【０３４１】
(実施例2l)
(ビシクロ[6.1.0]ノン-4-イン-9-イルメチルN-(14-{[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-[(4-{[({2-[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)(メチル)アミノ]エチル}(メチル)カルバモイル)オキシ]メチル}フェニル)カルバモイル]ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-イル)カルバマート(2l))
【化４０１】
2021509908.tif 000465
ESI m/z:687.5 (M/2 + H)+, 1396.8 (M + Na)+ (50%),
【化４０２】
2021509908.tif 000466
分析HPLC:＞99.9%、保持時間:9.40分(方法A)。
【０３４２】
(実施例2m)
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-(2-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-6-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-2-[6-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ヘキサンアミド]ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル](メチル)アミノ}エチル)-N-メチルカルバマート(2m-前駆体))
【化４０３】
2021509908.tif 000467
一般的手順Bに従って、粗製の化合物2m-前駆体(2mの前駆体)(5mg)が薄黄色の油として得られ、それを次の工程に直接使用した。ESI m/z:780(M/2+H)+
【０３４３】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-(2-{[({4-[(2S)-5-(カルバモイルアミノ)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-[6-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ヘキサンアミド]-6-[4-(3-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-3,4,5,13-テトラアザテトラシクロ[13.4.0.02,6.07,12]ノナデカ-1(15),2(6),4,7(12),8,10,16,18-オクタエン-13-イル)-4-オキソブタンアミド]ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル](メチル)アミノ}エチル)-N-メチルカルバマート(2m))
【化４０４】
2021509908.tif 000468
粗製の2m(5mg)のDMF(1mL)溶液に、CD-N3(8b、63mg、63μmol)を加えた。生じた混合物を室温で72時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。生じた混合物を分取HPLC(方法A)により直接精製すると、化合物2m(2mg、4cからの収率4%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:1278.8(M/2+H)+。分析HPLC:97.9%、保持時間:6.49分(方法A)。
【０３４４】
(実施例2n)
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-(2-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(4R)-4-アミノ-4-[(2-アジドエチル)カルバモイル]ブタンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル](メチル)アミノ}エチル)-N-メチルカルバマート(2n))
【化４０５】
2021509908.tif 000469
次いで、該反応混合物を室温で一晩撹拌した。化合物4cは、LCMSによると、完全に消費された。該混合物を分取HPLC(方法A)により分離し、凍結乾燥後に、Fmoc-2nが得られ(20mg)、それをDMF(2mL)に溶解させた。該DMF溶液に、ジエチルアミン(4滴、約0.08mL)を加えた。該反応混合物を、LCMSによりモニターして脱Fmoc反応が完了するまで、室温で2時間撹拌した。該混合物を濾過膜に通して濾過し、該溶液を分取HPLC(方法A)により精製すると、標記化合物2n(10mg、収率8.4%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:1147(M+H)+。分析HPLC:99.6%、保持時間:5.67分(方法A);7.72分(方法B)。
【０３４５】
(スキーム6.  リンカー-ブデソニド2q(THPアナログ)の合成)
【化４０６】
2021509908.tif 000470
(実施例2q)
((2S)-(3,4-ジヒドロ-2H-ピラン-2-イル)メチル2-(((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニルアミノ)-5-ウレイドペンタノアート(15))
【化４０７】
2021509908.tif 000471
DMF(5mL)中のFmoc-Cit-OH(14、0.29g、0.73mmol)の混合物に、DHP(0.10mg、0.88mmol)、TBTU(0.70g、2.2mmol)及びトリエチルアミン(0.37g、3.7mmol)を室温で加えた。生じた混合物を室温で24時間撹拌した。所望の質量の15%をLCMSにより検出した。反応を水(30mL)によりクエンチし、酢酸エチル(10mL×3)で抽出した。合わせた有機溶液を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗生成物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水中0〜100%アセトニトリル)により精製すると、標記化合物15(110mg、収率30%)を無色の油として与えた。ESI m/z:494(M+H)+。
【０３４６】
((6-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}オキサン-2-イル)メチル(2S)-2-アミノ-5-(カルバモイルアミノ)ペンタノアート(16))
【化４０８】
2021509908.tif 000472
化合物15(80mg、0.16mmol)の無水DCM(3mL)溶液に、ブデソニド(1a、70mg、0.16mmol)及びp-トルエンスルホン酸(42mg、0.24mmol)の無水DCM(2mL)溶液を、シリンジによりアルゴンバルーンの保護下で、室温で加えた。該反応混合物を30℃でアルゴンバルーン下で12時間撹拌した。LCMSによると、化合物15のほとんどが消費された。該反応混合物を室温に冷却し、該反応混合物にジエチルアミン(1mL)を加えた。該反応混合物を、LCMSによりモニターして脱Fmoc反応が完了するまで、室温で1時間撹拌した。揮発物を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、標記化合物16(17mg、収率31%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:702(M+H)+。
【０３４７】
((S)-2-(6-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ヘキサンアミド)-3-メチルブタン酸(5i))
【化４０９】
2021509908.tif 000473
L-バリン(0.12g、1.0mmol)の無水DMF(2mL)溶液に、化合物5a(0.31g、1.0mmol)及びトリエチルアミン(0.51g、5.0mmol)を室温で加えた。該反応混合物を、LCMSによりモニターして化合物5aが完全に消費されるまで、室温で8時間撹拌した。該反応混合物を濾過膜に通して濾過し、濾液を分取HPLC(方法A)により直接精製すると、標記化合物5i(0.14g、収率46%)を無色の油として与えた。ESI m/z:311(M+H)+。
【０３４８】
(6-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}オキサン-2-イル)メチル(2S)-5-(カルバモイルアミノ)-2-[(2S)-2-[6-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]ペンタノアート(2q))
【化４１０】
2021509908.tif 000474
化合物5i(5.8mg、19μmol)のDMF(1mL)溶液に、HATU(10mg、26μmol)及びDIPEA(6.6mg、51μmol)を室温で加えた。該混合物を室温で15分間撹拌し、次いで、該溶液に化合物16(12mg、17μmol)を室温で加えた。生じた混合物を、LCMSによりモニターして化合物5iが完全に消費されるまで、室温で4時間撹拌した。次いで、該反応混合物を濾過膜に通して濾過し、濾液を分取HPLC(方法A)により直接2回精製すると、標記化合物2q(2mg、収率12%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:995.3(M+H)+。分析HPLC:83.5%、保持時間:10.36分(方法B)。
【０３４９】
(スキーム7.  リンカー-ホスファート-ブデソニド2r及び2sの合成)
【化４１１】
2021509908.tif 000475
ホスファート-ブデソニドをBCN-PNP(11c)とカップリングすると、BCN-ホスファート-ブデソニド(化合物2r及び2s)を与えた(スキーム7)。
【０３５０】
(実施例2r)
({2-[({ビシクロ[6.1.0]ノン-4-イン-9-イルメトキシ}カルボニル)アミノ]エトキシ}({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ})ホスフィン酸(2r))
【化４１２】
2021509908.tif 000476
一般的手順Dに従って、化合物2r(40mg、収率61％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:730 (M + H)+。
【化４１３】
2021509908.tif 000477
分析HPLC:＞99.9%、保持時間:5.26分(方法B)。
【０３５１】
(実施例2s)
({2-[({ビシクロ[6.1.0]ノン-4-イン-9-イルメトキシ}カルボニル)アミノ]エトキシ}({[ヒドロキシ({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ})ホスホリル]オキシ})ホスフィン酸(2s))
【化４１４】
2021509908.tif 000478
ESI m/z:810 (M + H)+。
【化４１５】
2021509908.tif 000479
分析HPLC:＞99.9%、保持時間:4.03分(方法B)。
(中間体の実験手順)
表4.  主要中間体及び出発物質
【表２３】
2021509908.tif 000480
2021509908.tif 000481
2021509908.tif 000482
2021509908.tif 000483
【０３５２】
(スキーム8.  5eの合成)
【化４１６】
2021509908.tif 000484
((2R)-6-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4,6,8,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-2-[6-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ヘキサンアミド]ヘキサン酸(5e))
【化４１７】
2021509908.tif 000485
DMF(10mL)中のH-D-Lys(Boc)-OH(17、0.25g、1.0mmol)の混合物に、6-マレイミドカルプロン酸(carproic acid)-NHS(5a、0.31g、1.0mmol)及びジイソプロピルエチルアミン(DIPEA、0.26g、2.0mmol)を室温で加えた。該反応物を室温で一晩撹拌すると、化合物5aが完全に消費された。該混合物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水(0.05% TFA)中0〜100%アセトニトリル)により直接分離すると、中間体Boc-18(ESI m/z:440(M+H)+)を無色の油として与え、それをDCM(5mL)に溶解させた。該溶液に、TFA(0.5mL)を0℃で滴加し、該混合物を室温で1時間撹拌した。該反応物をLCMSによりモニターし、中間体Boc-18が完全に消費された。揮発物を真空中で除去すると、粗製の18(ESI m/z:340(M/2+H)+)を与え、それをさらに精製せずに次の工程に使用した。DMF(5mL)中の粗製の化合物18(0.21g、0.62mmol)の混合物に、活性化エステル19(0.20g、0.50mmol)及びDIPEA(50mg、0.39mmol)を室温で加えた。該反応混合物を室温で一晩撹拌した後、LCMSによりモニターして化合物19が完全に消費された。次いで、該反応混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(水中0〜100%アセトニトリル)により直接分離すると、標記化合物5e(0.10g、5aから3工程で収率20％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:627 (M + H)+。
【化４１８】
2021509908.tif 000486
【０３５３】
(スキーム9.  5gの合成)
【化４１９】
2021509908.tif 000487
((2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタン酸(5g))
【化４２０】
2021509908.tif 000488
化合物5c(0.30g、0.54mmol)のDMF(10mL)溶液に、HATU(0.31g、0.81mmol)及びDIPEA(0.14g、1.1mmol)を室温で加えた。該混合物を室温で15分間撹拌した。該反応溶液に、Val-Cit-OH(20(CAS番号159858-33-0)、0.21g、0.76mmol)を室温で加え、生じた混合物を、LCMSによりモニターしてほとんどの物質が消費されるまで、室温で3時間撹拌した。該反応混合物を濾過膜に通して濾過し、濾液を逆(reversed)フラッシュクロマトグラフィー(水(10mmol/L炭酸水素アンモニウム含む)中0〜100%アセトニトリル)により直接精製すると、標記中間体5g(0.25g、収率57%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:809.5(M+H)+。
【０３５４】
(スキーム10.  中間体5hの合成)
【化４２１】
2021509908.tif 000489
(tert-ブチル(4R)-4-[(2-アジドエチル)カルバモイル]-4-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}ブタノアート(22))
【化４２２】
2021509908.tif 000490
DCM(50mL)中のFmoc-D-Glu(OTBU)-OH(21、(104091-08-9)、0.30g、0.71mmol)及び2-アジドエタンアミン(87156-40-9、73mg、0.85mmol)の混合物に、HATU(0.41g、1.1mmol)及びトリエチルアミン(0.3mL)を室温で加えた。該反応混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、TLC及びLCMSによると、化合物21のほとんどが消費された。該反応混合物を水(50mL)により室温でクエンチした後、有機溶液を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣を分取-TLC(シリカゲル、石油エーテル/酢酸エチル(v/v=1)により溶離)により精製すると、標記化合物22(0.30g、収率76%)を粘性のある黄色の油として与えた。ESI m/z:494 (M + H)+。
【化４２３】
2021509908.tif 000491
【０３５５】
((4R)-4-[(2-アジドエチル)カルバモイル]-4-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}ブタン酸(5h))
【化４２４】
2021509908.tif 000492
生じた混合物を、TLC及びLCMSによりモニターして化合物22が完全に消費されるまで室温で2時間撹拌した。揮発物を真空中で除去すると、粗製の化合物5h(17mg、収率96%)を黄色の油として与え、それをさらに精製せずに次の工程に使用した。ESI m/z:438(M+H)+。
【０３５６】
(スキーム11.  中間体6aの合成)
【化４２５】
2021509908.tif 000493
((2R)-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]-2-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}ヘキサン酸(6a))
【化４２６】
2021509908.tif 000494
DMF(2mL)中の市販の化合物23(65mg、0.23mmol、CAS:1425803-45-7)の混合物に、Fmoc-D-Lys-OH(85mg、0.23mmol)及びトリエチルアミン(52mg、0.51mmol)を加えた。該反応混合物を室温で30分間撹拌した。該混合物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水(0.05% TFA)中0〜100%アセトニトリル)により直接分離すると、中間体6a(85mg、収率70%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:533 (M + H)+。
【化４２７】
2021509908.tif 000495
【０３５７】
(スキーム12.  中間体11b及び12cの合成)
【化４２８】
2021509908.tif 000496
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-{[4-(ヒドロキシメチル)フェニル]カルバモイル}ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド(12c))
【化４２９】
2021509908.tif 000497
該混合物を室温で15分間撹拌した。該反応溶液に、vc-PAB(24(159857-79-1)、0.21g、0.54mmol)を室温で加え、生じた混合物を、LCMSによりモニターしてほとんどの物質が消費されるまで、室温で3時間撹拌した。該反応混合物を濾過膜に通して濾過し、濾液を、逆フラッシュクロマトグラフィー(水(10mmol/L炭酸水素アンモニウム含む)中の0〜100%アセトニトリル)により直接精製すると、標記中間体12c(0.30g、収率60%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:617(M+H)+。
【０３５８】
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル4-ニトロフェニルカーボナート(11b))
【化４３０】
2021509908.tif 000498
化合物12c(0.15g、0.16mmol)のDMF(10mL)溶液に、ビス(4-ニトロフェニル)カーボナート(0.15g、0.49mmol)及びDIPEA(63mg、0.49mmol)を0℃で加えた。次いで、該混合物を、LCMSによりモニターして12cがほとんど消費されるまで、室温で3時間撹拌した。該反応混合物を濾過膜に通して濾過し、濾液を、逆フラッシュクロマトグラフィー(水(10mmol/L炭酸水素アンモニウム含む)中の0〜100%アセトニトリル)により直接精製すると、標記中間体11b(50mg、収率28%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:1079(M+H)+。
【０３５９】
以下の表5は、本明細書に記載の方法を利用して製造されたリンカーペイロードを表す。
表5.リンカー-ペイロードの例
【表２４】
2021509908.tif 000499
2021509908.tif 000500
2021509908.tif 000501
2021509908.tif 000502
表6.リンカー-ペイロードの特性化データ
【表２５】
2021509908.tif 000503
2021509908.tif 000504
【０３６０】
(リンカー-ペイロードLP1-4の合成)
(スキーム101.  ペイロード100、そのスペーサー-ペイロード101a〜d、及びリンカー-ペイロードLP1〜4の合成)
【化４３１】
2021509908.tif 000505
((1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-8-(2-ヒドロキシアセチル)-9,13-ジメチル-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-16-オン(100))
【化４３２】
2021509908.tif 000506
ヘプタン(900mL)中のフルオシノロンアセトニド(10g、22mmol)及びシリカゲル(100g)の混合物に、10℃未満のブチルアルデヒド(3.0mL、33mmol)を加え、該懸濁液を10〜20℃で30分間撹拌した。該混合物に、過塩素酸(70%、7.6mL、91mmol)を0℃で滴加した。次いで、該反応混合物を室温で一晩撹拌した。TLC及びLCMSによると、フルオシノロンアセトニドのほとんどが消費された。該反応混合物を石油エーテルで希釈し、飽和炭酸ナトリウム水溶液によりクエンチした。該懸濁液を濾過し、固体をDCM/メタノール(v/v=1:1)で洗浄した。合わせた濾液を真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中0〜1.5%メタノール)により精製すると、化合物100(8.0g、収率:78%)を白色の固体として与えた。ESI m/z:467.1(M+H)+。
【０３６１】
(1-[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)オキシ]ピロリジン-2,5-ジオン(101-1a))
【化４３３】
2021509908.tif 000507
化合物100(0.47g、1.0mmol)のDCM(20mL)溶液に、ビス(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル)カーボナート(0.28g、1.1mmol)、トリエチルアミン(0.40g、4.0mmol)及びDMAP(3.0mg、触媒)を加えた。該反応混合物を、化合物100が消費されるまで室温で4時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。次いで、該反応混合物をDCMで希釈し、水により洗浄した。有機溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾過後、該溶液を真空中で濃縮し、残渣(粗製の101-1a)を精製せずに次の工程に直接使用した。ESI m/z:608.2(M+H)+。
【０３６２】
((1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-8-{2-[(4-ニトロフェノキシカルボニル)オキシ]アセチル}-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-16-オン(101-1b))
【化４３４】
2021509908.tif 000508
THF(20mL)中の化合物100(0.80g、1.7mmol)、ビス(4-ニトロフェニル)カーボナート(1.6g、5.2mmol)及びDIPEA(1.1g、8.6mmol)の混合物を室温で4時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。該混合物を真空中で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中50%酢酸エチル)により精製すると、化合物101-1b(0.75g、69%収率)を無色の油として与えた。ESI m/z:632(M+H)+。
【０３６３】
(化合物101の一般的手順)
【化４３５】
2021509908.tif 000509
化合物101-1a又は101-1b(粗製、1.0mmolであると計算される)のDCM(20mL)溶液に、ジアミン101-2(a、b、c、又はd)(1.1mmol)及びDMAP(0.1mmol)を加えた。該反応混合物を室温で4時間撹拌してから、TFA(1mL)を加えた。該混合物を室温で30分間撹拌した(R13=Bocでは、該反応物を、LCMSによりモニターしてBocが完全に除去されるまで撹拌した)。生じた混合物を真空中で濃縮し、残渣を逆相フラッシュクロマトグラフィー(TFA水溶液(0.5%)中の50〜80%アセトニトリル)により精製すると、化合物101(a、b、c、又はd)を無色の油として与えた。
【０３６４】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-[2-(メチルアミノ)エチル]カルバマート(101a))
【化４３６】
2021509908.tif 000510
一般的手順に従い、化合物101-1aをBoc-ジアミン101-2aと共に使用して、化合物101a(0.38g、2工程で57%、TFA塩)が無色の油として得られた。ESI m/z:567(M+H)+。
【０３６５】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-メチル-N-[2-(メチルアミノ)エチル]カルバマート(101b))
【化４３７】
2021509908.tif 000511
一般的手順に従い、化合物101-1aをジアミン101-2bと共に使用して、化合物101b(0.45g、2工程で収率66％、TFA塩)が無色の油として得られた。ESI m/z:581(M+H)+。
【０３６６】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-エチル-N-[2-(エチルアミノ)エチル]カルバマート(101c))
【化４３８】
2021509908.tif 000512
一般的手順に従い、化合物101-1bをジアミン101-2cと共に使用して、化合物101c(24mg、2工程で収率18％、TFA塩)が無色の油として得られた。ESI m/z:609 (M + H)+。
【化４３９】
2021509908.tif 000513
【０３６７】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルピペラジン-1-カルボキシラート(101d))
【化４４０】
2021509908.tif 000514
一般的手順に従い、化合物101-1bをピペラジン(101-2d)と共にTFAによる処理なしで使用し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(DCM中0〜10%メタノール)により処理すると、化合物101d(0.21g、2工程で収率49％、遊離塩基)が無色の油として得られた。ESI m/z:579(M+H)+。
【０３６８】
(化合物101-3の一般的手順)
【化４４１】
2021509908.tif 000515
化合物101a、b又はd(0.20mmol)のDMF(3mL)溶液に、Fmoc-VC-PAB-PNP 11d(0.17g、0.22mmol)、HOBT(41mg、0.30mmol)及びDIPEA(77mg、0.60mmol)を加えた。該混合物を、室温で3時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。次いで、該混合物にピペリジン(0.3mL)を加えた。該反応混合物を、FmocがLCMSにより完全に除去されるまで、室温で1時間撹拌した。生じた混合物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(NH4HCO3水溶液(10mM)中の50〜80%アセトニトリル)により直接精製すると、化合物101-3a、b又はdを白色の固体として与えた。
【０３６９】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-(2-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル](メチル)アミノ}エチル)カルバマート(101-3a))
【化４４２】
2021509908.tif 000516
一般的手順に従い、化合物101aを使用して、化合物101-3a(0.11g、収率57％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:972(M+H)+。
【０３７０】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-メチル-N-[2-(メチルアミノ)エチル]カルバマート(101-3b))
【化４４３】
2021509908.tif 000517
一般的手順に従い、化合物101bを使用して、化合物101-3b(0.13g、収率65％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:986(M+H)+。
【０３７１】
(1-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル}ピペラジン-1,4-ジカルボキシラート(101-3d))
【化４４４】
2021509908.tif 000518
一般的手順に従い、化合物101d(58mg、0.10mmol)を使用して、化合物101-3d(52mg、収率53％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:984 (M + H)+。
【化４４５】
2021509908.tif 000519
【０３７２】
(化合物LP1、LP2、及びLP4の一般的手順)
【化４４６】
2021509908.tif 000520
化合物5c(34mg、60μmol)のDMF(1mL)溶液に、HATU(27mg、71μmol)及びDIPEA(20mg、0.15mmol)を加えた。該混合物を室温で5分間撹拌してから、化合物101-3a、b、又はd(50μmol)を該混合物に加えた。該混合物を室温で2時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。生じた混合物を分取HPLC(方法B)により直接精製すると、化合物LP1、2又は4を白色の固体として与えた。
【０３７３】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-(2-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル](メチル)アミノ}エチル)カルバマート(LP1))
【化４４７】
2021509908.tif 000521
一般的手順に従い、化合物101-3aを使用して、リンカー-ペイロードLP1(20mg、収率26％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:754(M/2+H)+。
【０３７４】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-(2-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル](メチル)アミノ}エチル)-N-メチルカルバマート(LP2))
【化４４８】
2021509908.tif 000522
一般的手順に従い、化合物101-3bを使用して、リンカー-ペイロードLP2(20mg、収率26％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:761 (M/2 + H)+。
【化４４９】
2021509908.tif 000523
【０３７５】
(1-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル}ピペラジン-1,4-ジカルボキシラート(LP4))
【化４５０】
2021509908.tif 000524
一般的手順に従い、化合物101-3dを使用して、リンカー-ペイロードLP4(35mg、収率44％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:760 (M/2 + H)+。
【化４５１】
2021509908.tif 000525
【０３７６】
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチルN-エチル-N-[2-(エチルアミノ)エチル]カルバマート(101-4))
【化４５２】
2021509908.tif 000526
DIBAC-suc-PEG4-vcPAB-PNP 11b(0.11g、0.10mmol)のDMF(5mL)溶液に、N,N'-ジエチルエチレンジアメ(diethylethylenediame)(58mg、0.50mmol)及びDMAP(1mg、0.01mmol)を加えた。該反応混合物を室温で4時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。生じた混合物を分取HPLC(方法B)により直接精製すると、化合物101-4を無色の油として与えた。ESI m/z:1056.6(M+H)+、529(M/2+H)+。
【０３７７】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-(2-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル](エチル)アミノ}エチル)-N-エチルカルバマート(LP3))
【化４５３】
2021509908.tif 000527
DMF(5mL)中の化合物101-4(16mg、15μmol)、101-1b(11mg、17μmol)及びDIPEA(4.0mg、31μmol)の混合物を室温で4時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。該反応混合物を分取HPLC(方法B)により直接精製すると、リンカー-ペイロードLP3(3mg、収率13％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:775 (M/2 + H)+。
【化４５４】
2021509908.tif 000528
【０３７８】
(システアミンプロドラッグ:リンカー-ペイロードLP5、6、7及びLP8の合成)
【化４５５】
2021509908.tif 000529
2-(ピリジン-2-イルジスルファニル)エタンアミン塩酸塩(102-1e)は、CAS 83578-21-6であり市販されている。tert-ブチル(2-メルカプトエチル)(メチル)カルバマート(102-1f)は、Eur. J. Med. Chem., 2015, 95, 483-491に従って合成した。
【０３７９】
endo-ビシクロ[6.1.0]ノン-4-イン-9-イルメチルN-(2-{2-[2-(2-アミノエトキシ)エトキシ]エトキシ}エチル)カルバマート(5f)をWO2016168769号に従って合成した。
【０３８０】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-[2-(ピリジン-2-イルジスルファニル)エチル]カルバマート(102-3e))
【化４５６】
2021509908.tif 000530
化合物101-1b(0.54g、0.86mmol)のアセトニトリル(10mL)溶液に、DIPEA(0.22g、1.7mmol)、102-1e(0.19g、0.86mmol)及びDMAP(10mg、86μmol)を加えた。該反応混合物を、101-1bがLCMSにより完全に消費されるまで、室温で48時間撹拌した。次いで、該混合物を濾過し、濾液を真空中で濃縮した。残留した油をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中20〜50%酢酸エチル)により精製すると、化合物102-3e(0.47g、収率80％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:679.2(M+H)+。
【０３８１】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-メチル-N-[2-(ピリジン-2-イルジスルファニル)エチル]カルバマート(102-3f))
【化４５７】
2021509908.tif 000531
102-1eを102-1fに代えた以外102-3eに類似の手順に従って、化合物102-3f(0.45g、収率75％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:693.2(M+H)+。
【０３８２】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-(2-スルファニルエチル)カルバマート(102e))
【化４５８】
2021509908.tif 000532
化合物102-3e(1.4g、2.1mmol)のクロロホルム(30mL)溶液に、トリエチルアミン(0.82mL、5.9mmol)及び1,4-ジチオスレイトール(クレラン試薬、DTT)(1.2g、7.8mmol)を加えた。該反応混合物を、室温で、窒素下で4時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。生じた混合物を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中50〜70%酢酸エチル)により精製すると、化合物102e(0.95g、収率83％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:570.2(M+H)+。
【０３８３】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルN-メチル-N-(2-スルファニルエチル)カルバマート(102f))
【化４５９】
2021509908.tif 000533
102-3eを102-3fに代えた以外102eに類似の手順に従って、化合物102f(0.97g、収率83％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:584.3(M+H)+。
【０３８４】
(3-({2-[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)アミノ]エチル}ジスルファニル)-3-メチルブタン酸(102-5e))
【化４６０】
2021509908.tif 000534
化合物102-3e(0.68g、1.0mmol)のメタノール(5mL)溶液に、化合物102-4(0.13g、1.0mmol)を加えた。該反応混合物を室温で18時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。次いで、生じた混合物を分取HPLC(方法B)により直接精製すると、化合物102-5e(0.39g、収率55％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:702.2(M+H)+。
【０３８５】
(3-({2-[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)(メチル)アミノ]エチル}ジスルファニル)-3-メチルブタン酸(102-5f))
【化４６１】
2021509908.tif 000535
102-3eを102-3fに代えた以外102-5eに類似の手順に従って、化合物102-5f(0.29g、収率40％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:716.3(M+H)+。
【０３８６】
(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル3-({2-[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)アミノ]エチル}ジスルファニル)-3-メチルブタノアート(LP5))
【化４６２】
2021509908.tif 000536
化合物102-5e(0.20g、0.29mmol)のDCM(10mL)溶液に、HOSu(73mg、0.64mmol)及びEDCI(0.12g、0.64mmol)を加え、該混合物を室温で24時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。生じた混合物をDCM(50mL)で希釈し、有機溶液を水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣を分取HPLC(方法A)により精製すると、LP5(85mg、収率37％)を無色の油として与えた。ESI m/z:799.3(M+H)+。
【０３８７】
(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル3-({2-[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)(メチル)アミノ]エチル}ジスルファニル)-3-メチルブタノアート(LP6))
【化４６３】
2021509908.tif 000537
102-5eを102-5fに代えた以外LP5に類似の手順に従って、化合物LP6(86mg、収率36％)が無色の油として得られた。ESI m/z:813.3(M+H)+。
【０３８８】
(endo-ビシクロ[6.1.0]ノン-4-イン-9-イルメチルN-{2-[2-(2-{2-[3-({2-[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)アミノ]エチル}ジスルファニル)-3-メチルブタンアミド]エトキシ}エトキシ)エトキシ]エチル}カルバマート(LP7))
【化４６４】
2021509908.tif 000538
化合物102-5e(0.20g、0.29mmol)のDMF(10mL)溶液に、HATU(0.11g、0.29mmol)及びDIPEA(75mg、0.58mmol)を加えた。該反応混合物を室温で10分間撹拌してから、化合物5f(0.11g、0.29mmol)を加えた。該反応混合物を室温で18時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。次いで、生じた混合物を分取HPLC(方法B)により直接精製すると、化合物LP7(0.16g、収率55％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:526.7(M/2+H)+。
【０３８９】
(endo-ビシクロ[6.1.0]ノン-4-イン-9-イルメチルN-{2-[2-(2-{2-[3-({2-[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}カルボニル)(メチル)アミノ]エチル}ジスルファニル)-3-メチルブタンアミド]エトキシ}エトキシ)エトキシ]エチル}カルバマート(LP8))
【化４６５】
2021509908.tif 000539
102-5eを102-5fに代えた以外LP7に類似の手順に従って、化合物LP8(0.13g、収率41％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:533.8(M/2+H)+。
【０３９０】
(AMOリンカー-ペイロードLP9〜11の合成)
(スキーム103A.  ペイロード103a、b、及びリンカー-ペイロードLP9-10の合成)
【化４６６】
2021509908.tif 000540
((2-(((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニルアミノ)アセトアミド)メチルアセタート(103-1))
【化４６７】
2021509908.tif 000541
THF(0.12L)及びトルエン(40mL)中のFmoc-Gly-Gly-OH(4.3g、12mmol)の混合物に、ピリジン(1.2mL、15mmol)及び四酢酸鉛(6.8g、15mmol)を加えた。該反応混合物を5時間還流し、それをLCMSによりモニターした。室温に冷却した後、該反応混合物をセライトに通して濾過して不溶性物質を除去し、濾液を真空中で濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解させ、該溶液を水及びブラインで洗浄した。有機溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中10%酢酸エチル)により精製すると、化合物103-1(3.0g、収率67％)を無色の固体として与えた。ESI m/z:391(M+Na)+。
【０３９１】
(9H-フルオレン-9-イルメチルN-{[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}メチル)カルバモイル]メチル}カルバマート(103-2a))
【化４６８】
2021509908.tif 000542
化合物103-1(0.37g、1.0mmol)及びブデソニド1a(1.3g、3.0mmol)のTHF(4mL)溶液に、カリウムtert-ブトキシド(0.22g、2.0mmol)を0℃で加えた。該反応混合物を室温で15分間撹拌し、それをTLCによりモニターした。反応溶液に酢酸エチル及び水を0℃で入れて、酢酸エチル及びクロロホルムで抽出した。合わせた有機溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中30〜35%酢酸エチル)により精製すると、化合物103-2a(0.19g、収率40％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:739(M+H)+。
【０３９２】
(9H-フルオレン-9-イルメチルN-{[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}メチル)カルバモイル]メチル}カルバマート(103-2b))
【化４６９】
2021509908.tif 000543
密封したチューブに、化合物103-1(0.30g、0.81mmol)及び化合物100(0.38g、0.81mmol)のDCM(4mL)溶液及びp-トルエンスルホン酸ピリジニウム(21mg、81μmol)を室温で加えた。該反応チューブを密封し、50℃で24時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。冷却後、該反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を分取HPLC(方法A)により精製すると、化合物103-2b(0.23g、収率37％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:775(M+H)+。
【０３９３】
(2-アミノ-N-({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}メチル)アセトアミド(103a))
【化４７０】
2021509908.tif 000544
化合物103-2a(0.10g、0.14mmol)のDMF(2mL)溶液に、ピペリジン(35mg、0.41mmol)を加えた。該反応混合物を、Fmocが完全に除去されるまで室温で2時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。生じた混合物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(TFA水溶液(0.05%)中0〜100%アセトニトリル)により直接精製すると、化合物103a(50mg、収率70％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:517.6(M+H)+。
【０３９４】
(2-アミノ-N-({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}メチル)アセトアミド(103b))
【化４７１】
2021509908.tif 000545
103-2aを103-2bに代えた以外103aに類似の手順に従って、化合物103b(0.26g、収率65％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:553.2(M/2+H)+。
【０３９５】
【化４７２】
2021509908.tif 000546
化合物105(b)を上記手順に従って調製した。
【０３９６】
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチルN-{[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}メチル)カルバモイル]メチル}カルバマート(LP9))
【化４７３】
2021509908.tif 000547
化合物103a(15mg、29μmol)のDMF(1.0mL)溶液に、化合物11b(30mg、28μmol)、HOBT(2.0mg、15μmol)及びDIPEA(7.7mg、60μmol)を加えた。該反応混合物を室温で2時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。該混合物を分取HPLC(方法B)により直接精製すると、リンカー-ペイロードLP9(5.0mg、収率11％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:729(M/2+H)+。
【０３９７】
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチルN-{[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}メチル)カルバモイル]メチル}カルバマート(LP10))
【化４７４】
2021509908.tif 000548
103aを103bに代えた以外LP9に類似な手順に従って、リンカー-ペイロードLP10(23mg、収率58％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:747.0 (M/2 + H)+;513.8 (LCMSにより切断されたフラグメント、NHCH2-Oで切断された小片)
【化４７５】
2021509908.tif 000549
【０３９８】
(スキーム103B.  リンカー-ペイロードLP11の合成)
【化４７６】
2021509908.tif 000550
((2S)-2-(2-{2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]アセトアミド}アセトアミド)-3-フェニルプロパン酸(103-3))
【化４７７】
2021509908.tif 000551
化合物5c(0.16g、0.29mmol)のDCM(20mL)溶液に、HOSu(73mg、0.64mmol)及びEDCI(0.12g、0.64mmol)を加えた。該混合物を、化合物5cがLCMSにより完全に消費されるまで、室温で24時間撹拌した。生じた混合物をDCM(50mL)で希釈し、有機溶液を水(50mL)及びブライン(50mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムにより乾燥させ、真空中で濃縮すると、OSu活性エステル(0.16g、収率84％)を無色の油として与え、それを次の工程に直接使用した。H-Gly-Gly-Phe-OH(10mg、36μmol)のDMF(0.5mL)溶液に、上記で得られたOSu活性エステル(23mg、36μmol)及びDIPEA(9.0mg、72μmol)を加えた。該反応混合物を室温で一晩撹拌した。該混合物を分取HPLC(方法B)により直接精製すると、化合物103-3(15mg、収率51％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:408.2(M/2+H)+。
【０３９９】
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-{[({[(1S)-1-({[({2-[(19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}メチル)カルバモイル]メチル}カルバモイル)-2-フェニルエチル]カルバモイル}メチル)カルバモイル]メチル}-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド(LP11))
【化４７８】
2021509908.tif 000552
化合物103-3(15mg、18μmol)のDMF(0.5mL)溶液に、HATU(14mg、36μmol)及びDIPEA(9.3mg、72μmol)を加えた。該反応混合物を室温で10分間撹拌してから、化合物103b(10mg、18μmol)を該混合物に加えた。次いで、該反応混合物を室温で一晩撹拌した。生じた混合物を分取HPLC(方法B)により直接精製すると、リンカー-ペイロードLP11(5.0mg、収率20％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:420.2(M/3+H)+。
【０４００】
(ジペプチドプロドラッグ:リンカー-ペイロードLP12の合成)
(スキーム104A.  ペイロード104aの合成)
【化４７９】
2021509908.tif 000553
α-アジドイソ酪酸104-1をOrg. Lett., 2001, 3(5), 781-783に従って合成した。
【０４０１】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル2-アジド-2-メチルプロパノアート(104-2a))
【化４８０】
2021509908.tif 000554
化合物100(0.10g、0.21mmol)のDCM(30mL)溶液に、化合物104-1(52mg、0.40mmol)、DCC(90mg、0.44mmol)及びDMAP(10mg)を加え、該混合物を室温で一晩撹拌し、それをLCMSによりモニターした。生じた混合物を真空中で濃縮し、残渣を分取HPLC(方法A)により精製すると、化合物104-2a(80mg、収率70％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:578.3(M+H)+。
【０４０２】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル2-アミノ-2-メチルプロパノアート(104-3a))
【化４８１】
2021509908.tif 000555
化合物104-2a(75mg、0.15mmol)のTHF(5mL)溶液に、PPh3(0.15g、0.57mmol)、水(5mL)及び濃HCl(1滴)を加え、該反応混合物を室温で一晩撹拌した。該混合物を真空中で濃縮し、DMFで希釈した。沈殿物を濾過により除いた。濾液を分取HPLC(方法A)により精製すると、化合物104-3a(45mg、収率54％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:552.3(M+H)+。
【０４０３】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル2-[(2S)-2-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]アミノ}-4-メチルペンタンアミド]-2-メチルプロパノアート(104-4a))
【化４８２】
2021509908.tif 000556
DMF(3mL)中のBoc-Leu-OH(20mg、87μmol)及びHATU(50mg、0.13mmol)の混合物に、DIPEA(30mg、0.23mmol)、DMAP(2mg)及び化合物104-3a(30mg、54μmol)を加えた。該混合物を室温で1時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。該混合物を分取HPLC(方法A)により直接精製すると、化合物104-4a(25mg、収率55％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:787.4(M+Na)+。
【０４０４】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル2-[(2S)-2-アミノ-4-メチルペンタンアミド]-2-メチルプロパノアート(104a))
【化４８３】
2021509908.tif 000557
DCM(1.5mL)中の化合物104-4a(25mg、33μmol)の混合物に、TFA(0.15mL)を加え、該混合物を、BocがLCMSにより完全に除去されるまで室温で1時間撹拌した。該反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を分取HPLC(方法A)により精製すると、化合物104a(13mg、収率61％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:665.4 (M + H)+。
【化４８４】
2021509908.tif 000558
【０４０５】
(スキーム104B.  リンカー-ペイロードLP12の合成)
【化４８５】
2021509908.tif 000559
(tert-ブチル(2S)-2-{[({4-[(2S)-5-(カルバモイルアミノ)-2-[(2S)-2-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}-3-メチルブタンアミド]ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル]アミノ}-4-メチルペンタノアート(104-5))
【化４８６】
2021509908.tif 000560
化合物11b(0.30g、0.39mmol)及びH-Leu-OTBU-OH(0.14g、0.63mmol)のDMF(3mL)溶液に、DIPEA(0.26g、2.0mmol)を加え、該反応混合物を室温で2時間撹拌した。生じた混合物を分取HPLC(方法A)により直接精製すると、化合物104-5(0.11g、収率35％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:815.4(M+H)+。
【０４０６】
((2S)-2-{[({4-[(2S)-5-(カルバモイルアミノ)-2-[(2S)-2-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}-3-メチルブタンアミド]ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル]アミノ}-4-メチルペンタン酸(104-6))
【化４８７】
2021509908.tif 000561
化合物104-5(25mg、31μmol)のDCM(4mL)溶液に、TFA(0.8mL)を加え、該混合物を室温で2時間撹拌した。生じた混合物を真空中で濃縮し、残渣を分取HPLC(方法A)により精製すると、化合物104-6(15mg、収率67％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:759.3(M+H)+。
【０４０７】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル2-[(2S)-2-{[({4-[(2S)-5-(カルバモイルアミノ)-2-[(2S)-2-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}-3-メチルブタンアミド]ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル]アミノ}-4-メチルペンタンアミド]-2-メチルプロパノアート(104-7a))
【化４８８】
2021509908.tif 000562
化合物104-5(20mg、26μmol)及び化合物104-3(17mg、32μmol)のDMF(2mL)溶液に、HATU(20mg、52μmol)、DIPEA(13mg、0.10mmol)及びDMAP(1mg)を加え、該反応混合物を室温で1時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。生じた混合物を分取HPLC(方法A)により直接精製すると、化合物104-7a(30mg、収率89％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:1293(M+H)+。
【０４０８】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル2-[(2S)-2-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル]アミノ}-4-メチルペンタンアミド]-2-メチルプロパノアート(104-8a))
【化４８９】
2021509908.tif 000563
化合物104-7a(25mg、19μmol)のDMF(2mL)溶液に、ピペリジン(0.2mL)を加え、該混合物を、FmocがLCMSにより完全に除去されるまで室温で30分間撹拌した。該反応混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(TFA水溶液(0.03%)中0〜50%アセトニトリル)により直ちに精製すると、化合物104-8a(20mg、収率95％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:1070.5(M+H)+。
【０４０９】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル2-[(2S)-2-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-({[endo-ビシクロ[6.1.0]ノン-4-イン-9-イルメトキシ]カルボニル}アミノ)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル]アミノ}-4-メチルペンタンアミド]-2-メチルプロパノアート(LP12))
【化４９０】
2021509908.tif 000564
化合物104-8a(20mg、26μmol)及び化合物5d(14mg、32μmol)のDMF(2mL)溶液に、HATU(22mg、58μmol)、DIPEA(15mg、0.12mmol)及びDMAP(1mg)を加え、該反応混合物を室温で2時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。生じた混合物を分取HPLC(方法A)により直接精製すると、リンカー-ペイロードLP12(10mg、収率21％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:747.6 (M/2 + H)+。
【化４９１】
2021509908.tif 000565
【０４１０】
(スキーム104C.  ペイロード104b及びそのリンカー-ペイロードLP13の合成)
【化４９２】
2021509908.tif 000566
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル(2S)-2-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}-4-メチルペンタノアート(104-2b))
【化４９３】
2021509908.tif 000567
化合物100(0.47g、1.0mmol)及びFmoc-Leu-OH(0.39g、1.1mmol)のDCM(10mL)溶液に、EDCI(0.23g、1.2mmol)及びDMAP(12mg、0.10mmol)を加えた。該混合物を室温で16時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。生じた混合物を水(50mL)で希釈し、DCM(50mL×2)で希釈した。合わせた有機溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中10〜50%酢酸エチル)により精製すると、化合物104-2b(0.52g、収率65％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:802.4(M+H)+。
【０４１１】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル(2S)-2-アミノ-4-メチルペンタノアート(104-3b))
【化４９４】
2021509908.tif 000568
化合物104-2b(0.50g、0.62mmol)のDCM(9mL)溶液に、ピペリジン(1mL)を加え、該反応混合物を、FmocがLCMSにより完全に除去されるまで室温で30分間撹拌した。生じた混合物を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(DCM中5〜10%メタノール)により精製すると、化合物104-3b(0.32g、収率90％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:580.3(M+H)+。
【０４１２】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル(2S)-2-[(2S)-2-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]アミノ}-3-ヒドロキシプロパンアミド]-4-メチルペンタノアート(104-4b))
【化４９５】
2021509908.tif 000569
DMF(3mL)中の化合物104-3b(0.32g、0.55mmol)及びBoc-Ser-OH(0.14g、0.66mmol)の混合物に、HATU(0.25g、0.66mmol)及びDIPEA(0.21g、1.6mmol)を室温で加えた。該混合物を室温で6時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。生じた混合物を真空中で濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中10〜50%酢酸エチル)により精製すると、化合物104-4b(0.34mg、収率80％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:767.4(M+H)+。
【０４１３】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-ヒドロキシプロンアミド]-4-メチルペンタノアートトリフルオロ酢酸塩(104b))
【化４９６】
2021509908.tif 000570
化合物104-4b(0.34g、0.44mmol)のDCM(5mL)溶液に、TFA(1mL)を加えた。該反応混合物を、BocがLCMSにより完全に除去されるまで室温で2時間撹拌した。生じた混合物を濃縮すると、残渣(0.33g、収率95％)は次の工程用に充分な純度であった。100mgの粗生成物を分取HPLC(方法A)によりさらに精製すると、化合物104b(80mg、収率80％)を黄色の固体として与えた。ESI m/z:667.3(M+H)+。
【０４１４】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル(2S)-2-[(2S)-2-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル]アミノ}-3-ヒドロキシプロパンアミド]-4-メチルペンタノアート(104-8b))
【化４９７】
2021509908.tif 000571
上記で新たに得られた粗製の化合物104b(0.10g、0.13mmol)のDMF(3mL)溶液に、Fmoc-vcPAB-PNP(11d)(0.12g、0.16mmol)、DMAP(16mg、0.13mmol)及びDIPEA(50mg、0.39mmol)を室温で加えた。該混合物を、出発物質のほとんどが消費されるまで室温で3時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。次いで、該反応混合物にピペリジン(1mL)を加えた。FmocがLCMSにより完全に除去されるまで室温で1時間撹拌した後に。該反応混合物を分取HPLC(方法B)により直接精製すると、化合物104-8b(28mg、収率20％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:536.8(M/2+H)+。
【０４１５】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル(2S)-2-[(2S)-2-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-({[endo-ビシクロ[6.1.0]ノン-4-イン-9-イルメトキシ]カルボニル}アミノ)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル]アミノ}-3-ヒドロキシプロパンアミド]-4-メチルペンタノアート(LP13))
【化４９８】
2021509908.tif 000572
化合物5d(10mg、22μmol)のDMF(1mL)溶液に、HATU(9mg、22μmol)及びDIPEA(8.0mg、62μmol)を連続的に室温で加えた。該混合物を室温で30分間撹拌し、それに続いて化合物104-8b(20mg、19μmol)のDMF(1mL)溶液を加えた。生じた混合物を、化合物104-8bが消費されるまで室温で2時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。メンブランス(membrance)に通して濾過した後、濾液を分取HPLC(方法B)により直接精製すると、リンカー-ペイロードLP13(10mg、収率35％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:748.4(M/2+H)+。
【０４１６】
(スキーム105.  LP18〜21の合成)
【化４９９】
2021509908.tif 000573
2021509908.tif 000574
(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-オアート(5-1c))
【化５００】
2021509908.tif 000575
化合物5c(160mg、0.290mmol)のDCM(20mL)溶液に、HOSu(73.3mg、0.637mmol)及びEDCI(122mg、0.637mmol)を加え、該混合物を室温で24時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。該反応混合物をDCM(50mL)で希釈し、有機層を水(50mL)及びブラインで洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、真空中で濃縮すると、化合物5-1c(159mg、収率84％)を無色の油として与え、それを次の工程に直接使用した。ESI m/z:650(M+H)+。
【０４１７】
(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル1-[({endo-ビシクロ[6.1.0]ノン-4-イン-9-イルメトキシ}カルボニル)アミノ]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-オアート(5-1d))
【化５０１】
2021509908.tif 000576
5cを5dに代えた以外5-1cに類似の手順に従って、化合物5-1d(150mg、収率54％)が無色の油として得られ、それをさらに精製せずに次の工程に直接使用した。ESI m/z:539(M+H)+。
【０４１８】
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチルN-{[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}メチル)カルバモイル]メチル}カルバマート(103-8b))
【化５０２】
2021509908.tif 000577
104bを103bに代えた以外104-8b(スキーム104C参照)に類似の手順に従って、化合物103-8b(28mg、収率20％)が白色の固体として得られた。ESI m/z:480(M/2+H)+。
【０４１９】
((4S)-4-アミノ-4-{[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-[(4-{[({[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}メチル)カルバモイル]メチル}カルバモイル)オキシ]メチル}フェニル)カルバモイル]ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ブタン酸(103-9a))
【化５０３】
2021509908.tif 000578
化合物Boc-L-Glu(OTBU)-OH(0.15g、0.50mmol)のDMF(5mL)溶液に、HATU(0.19g、0.50mmol)及びDIPEA(0.13g、1.0mmol)を加えた。該反応混合物混合物(mixture mixture)を室温で10分間撹拌してから、化合物103-8b(0.48g、0.50mmol)を該反応混合物に加えた。次いで、該反応混合物を、103-8bがLCMSにより完全に消費されるまで室温で3時間撹拌した。該混合物をEtOAcで抽出し、合わせた有機溶液を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をDCM(10mL)に溶解させた。該溶液にTFA(2mL)を加え、該反応混合物を室温で3時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。該反応混合物を濃縮し、残渣を分取HPLC(方法B)により直接精製すると、化合物103-9a(0.41g、収率75％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:536.8(M/2+H)+。
【０４２０】
((4R)-4-アミノ-4-{[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-[(4-{[({[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}メチル)カルバモイル]メチル}カルバモイル)オキシ]メチル}フェニル)カルバモイル]ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ブタン酸(103-9b))
【化５０４】
2021509908.tif 000579
Boc-L-Glu(OTBU)-OHをBoc-D-Glu(OTBU)-OHに代えた以外103-9aに類似の手順に従って、化合物103-9b(0.40g、収率74％)が白色の固体として。ESI m/z:536.8(M/2+H)+。
【０４２１】
((4S)-4-アミノ-4-{[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-({4-[({[(1S)-1-{[(2S)-1-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}-4-メチル-1-オキソペンタン-2-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバモイル}オキシ)メチル]フェニル}カルバモイル)ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ブタン酸(104-9a))
【化５０５】
2021509908.tif 000580
103-8bを104-8bに代えた以外103-9aに類似の手順に従って、化合物104-9a(0.39g、収率65％)が白色の固体として。ESI m/z:601.3(M/2+H)+。
【０４２２】
((4R)-4-アミノ-4-{[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-({4-[({[(1S)-1-{[(2S)-1-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}-4-メチル-1-オキソペンタン-2-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバモイル}オキシ)メチル]フェニル}カルバモイル)ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ブタン酸(104-9b))
【化５０６】
2021509908.tif 000581
103-8bを104-8bに代え、Boc-L-Glu(OTBU)-OHをBoc-D-Glu(OTBU)-OHに代えた以外、103-9aに類似な手順に従って、化合物104-9b(0.39g、収率65％)が白色の固体として。ESI m/z:601.3(M/2+H)+。
【０４２３】
((4S)-4-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-4-{[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-[(4-{[({[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}メチル)カルバモイル]メチル}カルバモイル)オキシ]メチル}フェニル)カルバモイル]ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ブタン酸(LP18))
【化５０７】
2021509908.tif 000582
化合物103-9a(57mg、53μmol)のDMF(1mL)溶液に、化合物5-1c(36mg、56μmol)及びDIPEA(27mg、0.21mmol)を加えた。該反応混合物を室温で4時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。次いで、生じた混合物を分取HPLC(方法B)により直接精製すると、化合物LP18(12mg、収率15％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:811.4(M/2+H)+。
【０４２４】
((4R)-4-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-4-{[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-[(4-{[({[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}メチル)カルバモイル]メチル}カルバモイル)オキシ]メチル}フェニル)カルバモイル]ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ブタン酸(LP19))
【化５０８】
2021509908.tif 000583
103-9aを103-9bに代えた以外LP18に類似な手順に従って、化合物LP19(14mg、収率17％)が白色の固体として。ESI m/z:811.4(M/2+H)+。
【０４２５】
((4S)-4-{1-[({endo-ビシクロ[6.1.0]ノン-4-イン-9-イルメトキシ}カルボニル)アミノ]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド}-4-{[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-({4-[({[(1S)-1-{[(2S)-1-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}-4-メチル-1-オキソペンタン-2-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバモイル}オキシ)メチル]フェニル}カルバモイル)ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ブタン酸(LP20))
【化５０９】
2021509908.tif 000584
化合物104-9a(64mg、53μmol)のDMF(1mL)溶液に、化合物5-1d(30mg、56μmol)及びDIPEA(27mg、0.21mmol)を加えた。該反応混合物を室温で4時間撹拌し、それをLCMSによりモニターした。次いで、生じた混合物を分取HPLC(方法B)により直接精製すると、化合物LP20(17mg、収率20％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:813.0(M/2+H)+。
【０４２６】
((4R)-4-{1-[({endo-ビシクロ[6.1.0]ノン-4-イン-9-イルメトキシ}カルボニル)アミノ]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド}-4-{[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-({4-[({[(1S)-1-{[(2S)-1-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}-4-メチル-1-オキソペンタン-2-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバモイル}オキシ)メチル]フェニル}カルバモイル)ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ブタン酸(LP21))
【化５１０】
2021509908.tif 000585
104-9aを104-9bに代えた以外LP20に類似な手順に従って、化合物LP21(14mg、収率17％)が白色の固体として。ESI m/z:813.0(M/2+H)+。
【０４２７】
以下の表5aは、本明細書に記載の方法を利用して製造されたリンカーペイロードを表す。
表5a.リンカー-ペイロードの例
【表２６】
2021509908.tif 000586
2021509908.tif 000587
2021509908.tif 000588
表6a.リンカー-ペイロードの特定化データ
【表２７】
2021509908.tif 000589
【０４２８】
(実施例2)
この実施例は、アルキン-リンカー-ペイロードの抗体への部位特異的コンジュゲーションの具体的手順を表す。
【０４２９】
この実施例において、部位特異的コンジュゲートを2工程で製造する。第1の工程はアジド-PEG3-アミン(前掲)などの小分子の、Q-タグを有する抗体へのMTG系酵素的結合である(例えば、WO2017/147542号)(以下で「MTG系」コンジュゲーション)。N297Q突然変異又はN297D突然変異を有する抗体は、酵素系部位特異的コンジュゲーションのためにMTGに結合するように支持(espoused)されているQ295/Q297又はQ295を有し、ここで、Q295及び/又はQ297はQタグであると定義された。第2の工程は、リンカー-ペイロードのアジド-官能化抗体への[2+3]環化付加による結合、例えば、アジドとシクロオクチンの間の1,3-双極子付加環化を利用する(別名、銅フリークリックケミストリー)。内容全体が全目的のために引用により全体として本明細書に組みこまれているBaskin, J. M.;Prescher, J. A.;Laughlin, S. T.;Agard, N. J.;Chang, P. V.;Miller, I. A.;Lo, A.;Codelli, J. A.;Bertozzi, C. R.の文献(PNAS 2007, 104(43), 16793-7)を参照されたい。反応性基(RG)がDIBAC部分である場合、コンジュゲーションは、アジド-官能化抗体と[2+3]環化付加により実施される。このプロセスにより、部位特異的で化学量論的なコンジュゲートが与えられる。
【０４３０】
[2+3]クリック反応によるADCコンジュゲーション。
【０４３１】
工程1:アジド-官能化抗体の調製。
【０４３２】
PBS(pH 6.5〜8.0)中の非グリコシル化ヒト抗体IgG(IgG1、IgG4など)又はN297Q突然変異(EU付番)を有するヒトIgG1アイソタイプを、200モル当量以上のアジド-dPEG3-アミン(MW=218.26g/mol)と混合する。生じた溶液をMTG(EC 2.3.2.13、Zedira, Darmstadt, Germany又はModernist Pantry[L# 210115A]から−ACTIVA TIは、Ajinomoto, Japan製のマルトデキストリンを含有する)(25U/mL;抗体のmgあたり5U MTG)と混合すると、0.5〜5mg/mLの抗体の最終濃度をもたらし、次いで、該溶液を、穏やかに振とうしながら37℃で4〜24時間インキュベートした。該反応をESI-MSによりモニターする。反応完了と同時に、過剰のアミン及びMTGをSEC又はプロテインAカラムクロマトグラフィーに除去すると、アジド-官能化抗体が生じる。この生成物をSDS-PAGE及びESI-MSにより特性化する。抗体の2部位に付加したアジド-dPEG3-アミンは、2DAR抗体-PEG3-アジドコンジュゲートについて204Daの増加をもたらす。
【０４３３】
工程2:クリックケミストリー反応を利用する、薬物の抗体への部位特異的コンジュゲートの調製。
【０４３４】
表7中のヒトIgG(IgG1、IgG4など)との部位特異的抗体薬物コンジュゲートは、アジド-官能化抗体とアルキン含有リンカー-ペイロードとの間の[2+3]クリック反応により調製される。詳細なコンジュゲーション手順は以下の通りである。リンカー-ペイロード(LP)が付いた部位特異的抗体コンジュゲートを、水性媒体(例えば、PBS、5%グリセロールを含有するPBS、HBS)中で、mAb-PEG3-N3(1〜3mg/mL)を、DMSO、DMF又はDMAなどの好適な有機溶媒に溶かされた6モル当量以上のLPと、24℃〜37℃で6時間以上インキュベートする(すなわち該反応混合物は5〜20%の有機溶媒、v/vを含む)ことにより調製する。反応の進行をESI-MSによりモニターし、mAb-PEG3-N3の非存在がコンジュゲーションの完了を示した。過剰量のLP及び有機溶媒を、PBSにより溶離するSECにより、又は酸性緩衝液により溶離するプロテインAカラムクロマトグラフィーとそれに続くTris(pH8.0)による中和により除去する。
【０４３５】
最終生成物を、超遠心分離により濃縮し、UV、SEC、SDS-PAGE及びESI-MSにより特性化する。
【０４３６】
(実施例3)
この実施例は、チオール-マレイミド反応を利用する、薬物の抗体への非部位特異的コンジュゲーション(conjugation)を製造する方法を表す。
【０４３７】
抗体システインによるコンジュゲーションは、Mol Pharm. 2015 Jun 1;12(6):1863-71に記載の方法に類似な記載の方法を利用して2工程で実施する。
【０４３８】
pH 7.5のモノクローナル抗体(mAb、50mM HEPES中10mg/ml、150mM NaCl)を、1mMジチオスレイトール(抗体のmgあたり0.006mg)又はTCEP(抗体に対して2.5モル当量)により37℃で30分間還元する。抗体の濃度を、Nanodrop(ThermoFisher Scientific社)での280nmの吸光度及び抗体の吸光係数に基づいて計算した。ゲル濾過(G-25、pH 4.5酢酸ナトリウム)の後、DMSO中のLP化合物(10mg/mL)を、還元された抗体に加え、該混合物を1M HEPES(pH 7.4)によりpH 7.0に調整した。該反応物を3〜14時間反応させる。生じたコンジュゲートをSECにより精製した。DAR(UV)値を、ncADCの測定された吸光度並びに抗体及びLP化合物の吸光係数を使用して決定する。
【０４３９】
(実施例4)
(ADCコンジュゲーション)
一例において、部位特異的コンジュゲートを、N297Q又はN297D変異抗体の、微生物トランスグルタミナーゼ(MTG EC 2.3.2.13, Zedira, Darmstadt, Germany)(本明細書で「MTG系」)2工程コンジュゲーションにより製造する。第1工程において、N297Q-変異抗体を、MTG系酵素反応により、アズディオ(azdio)-PEG3-アミンにより官能化する。例えば、全体として全目的のために引用により本明細書に組み込まれる2017年2月24日に出願された国際PCT特許出願第US17/19537号を参照されたい。第2工程において、アルキン-官能化リンカー-ペイロードを、[2+3]環化)により誘導されたアジド-官能化抗体とコンジュゲートされた[2+3] 1,3-双極子付加環化反応によりアジド-官能化抗体に結合する。このプロセスは、部位特異的で化学量論的なコンジュゲートを提供する。
【０４４０】
(実施例5)
以下の例は、表7に列記されたアジド-官能化抗体薬物コンジュゲートを製造する方法を表す。
【化５１１】
2021509908.tif 000590
【０４４１】
BupH(商標)(pH 7.6-7.8)中のヒトIgG1アイソタイプを有する非グリコシル化抗体を、200モル当量以上のアジド-dPEG3-アミン(MW. 218.26g/mol)と混合した。生じた溶液をトランスグルタミナーゼ(25U/mL;抗体のmgあたり5U MTG)と混合すると、0.5〜3mg/mLの抗体の最終濃度をもたらし、次いで、該溶液を、穏やかに振とうしながら37℃で4〜24時間インキュベートした。該反応をSDS-PAGE又はESI-MSによりモニターした。完了と同時に、過剰のアミン及びMTGを、サイズ排除クロマトグラフィー(SEC)により除去すると、アジド-官能化抗体が生じた。この生成物をSDS-PAGE及びESI-MSで分析した。抗体の2部位-Q295及びQ297-に付加したアジド-dPEG3-アミンは、4DAR非グリコシル化抗体-PEG3-アジドコンジュゲートについて804Daの増加をもたらす。
【０４４２】
以下の例は、クリックケミストリー反応を利用して、薬物の抗体への部位特異的コンジュゲーションを製造する方法を表す。
【０４４３】
N297Q突然変異を含むヒトIgG1との部位特異的非グリコシル化抗体薬物コンジュゲートを、アジド-官能化抗体とアルキン含有リンカー-ペイロードとの間の[2+3]クリック反応により調製した。具体的には、抗PRLR Ab-PEG3-N3を、2b、2g、2l、2r、又は2sにコンジュゲートし;抗HER2 Ab-PEG3-N3を2b、2g、2l、2r、又は2sにコンジュゲートした。これらの抗HER2抗体コンジュゲートを合成して、本明細書に記載のアッセイにおいてアイソタイプ対照として機能させた。以降で、便宜上、抗HER2抗体を「アイソタイプ」抗体と称する。
【０４４４】
詳細なコンジュゲーション手順は以下の通りである。リンカー-ペイロード(LP又は2)を有する部位特異的抗体コンジュゲートを、mAb-PEG3-N3(1〜3mg/mL)を水性媒体(例えば、PBS、5%グリセロールを含むPBS、HBS)中で、DMSO、DMF又はDMAなどの好適な有機溶媒に溶かされた6モル当量以上のLPと共に(すなわち該反応混合物は5〜20%の有機溶媒、v/vを含む)24℃〜37℃で6時間以上インキュベートすることにより調製した。反応の進行はESI-MSによりモニターし、mAb-PEG3-N3の非存在がコンジュゲーションの完了を示した。過剰量のLP及び有機溶媒を、PBSによる溶離によるSECにより、又は酸性緩衝液による溶離によるプロテインAカラムクロマトグラフィーとそれに続くTris(pH8.0)による中和により除去した。精製されたコンジュゲートを、SEC、SDS-PAGE、及びESI-MSにより分析した。表7に示されるものは、対応するLP由来のステロイド抗体コンジュゲート、それらの分子量、及びESI-DAR値のリストである。
【０４４５】
具体例において、0.800mL PBSg(PBS、5%グリセロール、pH 7.4)中のアジド-官能化抗体(1mg)を6モル当量の2b(濃度DMSO中10mg/mL)により6〜12時間室温で処理し、過剰なリンカーペイロード(LP)をサイズ排除クロマトグラフィー(SEC, Superdex 200 HR, GE Healthcare社)により除去した。最終生成物を超遠心分離により濃縮し、UV、SEC、SDS-PAGE及びESI-MSにより特性化した。
【０４４６】
(実施例6)
(ADCの特性化(Characeterization))
SDS-PAGEを使用して、ADCの完全性及び純度を分析する。
【０４４７】
1方法においてSDS-PAGEランニング条件は、非還元及び還元試料(2〜4μg)を、BenchMark Pre-Stained Protein Ladder(Invitrogen社、カタログ番号10748-010;L# 1671922.)と共に含み、それを、レーンあたり(1.0 mm×10ウェル)Novex 4-20%トリス-グリシンゲルにローディングし、180V、300mAで80分間電気泳動する。非還元試料は、Novexトリス-グリシンSDSバッファー(2×)(Invitrogen社、カタログ番号LC2676)を使用して調製し、還元試料は、10% 2-メカプトエタノール(mecaptoethanol)を含むSDS試料バッファー(2×)により調製する。
【０４４８】
SDS-PAGE上の抗体及びncADCの分子量は、非還元及び還元条件下で測定する。質量シフトは、質量変化の比較的低いパーセンテージにより、非還元条件下では明らかでないことがある。しかし、重鎖の質量は、裸の抗体からアジド-官能化抗体へ、さらにncADCコンジュゲートへと増加する。架橋物質は検出されることも、検出されないこともある。
【０４４９】
ADCを、純度に関してサイズ排除クロマトグラフィー(SEC)により分析する。
【０４５０】
抗体薬物コンジュゲートの純度を測定するために、サイズ排除クロマトグラフィーを実施する。分析的SEC実験を、Superdex 200(1.0×30cm)HRカラムで、PBS(pH 7.4)を使用して0.80mL/分の流量で、Waters 600装置を使用して実施し、Waters 2998 PDAを使用してλ280nmでモニターする。分析試料は、200μL PBS(pH 7.4)と30〜100μLの試験試料から構成されている。分取SEC精製は、Superdex 200 PG(2.6×60cm)カラムで、流量2mL/分でpH 7.4のPBSgにより溶離して、GE Healthcare社のAKTA装置を使用して実施し、λ280nmでモニターする。
【０４５１】
抗体及びADCを、以下にさらに記載される通りLC-ESI-MSによるインタクト質量分析により分析する。
【０４５２】
LC-ESI-MSによるADC試料のインタクト質量の測定を実施して、薬物-ペイロード分布プロファイルを決定し、平均DARを計算した。各試験試料(20〜50ng、5uL)を、Acquity UPLC Protein BEH C4カラム(10K psi、300Å、1.7μm、75μm×100 mm;カタログ番号186003810)にロードした。3分の脱塩の後、タンパク質を溶離させ、質量スペクトルを、Waters Synapt G2-Si質量分析計により得た。
【０４５３】
表7にまとめたものは、対応するLP(2b、2g、2l、2r、及び2s)由来のブデソニド-スペーサー-リンカー抗体コンジュゲート、裸の抗体のそれらの分子量、アジド-官能化抗体、LP、及びステロイドADC、並びにESI-DAR値である。表中で、Abは抗体を指し、Ab-N3はアジド-官能化抗体を指し、Ab-ステロイドコンジュゲートは、対応するLPを有する非細胞傷害性ステロイド抗体コンジュゲートを指す。表7にまとめられる通り、ほとんどの部位特異的なADCは4DARを有する。
表7.
【表２８】
2021509908.tif 000591
【０４５４】
(実施例7)
グルココルチコイド受容体(GR)コアクチベータールシフェラーゼレポーター細胞ベースアッセイを利用して、ブデソニド及び本明細書に記載のステロイドによる、時間の関数としてのGR活性化を分析した。
【０４５５】
アッセイ細胞株を生成させるために、HEK293細胞株を、ヒトの完全長PRLRを発現するように操作した。次いで、そのような安定な細胞株を、ルシフェラーゼ遺伝子がGRへのステロイド結合時に転写されるように、pBIND-GRベクター(カタログ番号E1581、Promega社)及びpGL4.35[Luc2P/9xGAL4UAS/Hygro]ベクター(カタログ番号E1370、Promega社)によりさらにトランスフェクトした。生じた安定な細胞株を本明細書でHEK293/PRLR/GRE-Lucと称する。
【０４５６】
HEK293/PRLR/GRE-Luc細胞中のステロイドの活性を、試験試薬の添加後24、48、及び72時間のインキュベーションで試験した。このアッセイのために、20,000細胞を96ウェルプレートに、10% FBS及びペンシリン(pencillin)/ストレプトマイシンを補ったDMEMを含む培地(完全培地)に播種し、一晩37℃で、5% CO2中で成長させた。遊離のステロイド及び/又はそれらのncADCの用量反応曲線を作成するために、100nM〜5.1pMの範囲の段階希釈された試薬を細胞に加え、24、48、及び72時間37℃でインキュベートした。ルシフェラーゼ活性を、100uLのOne-Glo(商標)試薬(Promega社、カタログ番号E6130)を添加し、室温(room tempersture)で5分間インキュベートすることにより測定し、相対発光単位(RLU)を、Victor照度計(Perkin Elmer社)で測定した。
【０４５７】
第1のアッセイランにおいて、抗PRLR Ab ncADC(抗PRLR Ab-2r、抗PRLR Ab-2s、及び抗PRLR Ab-2b)、アイソタイプAb ncADC(アイソタイプ(Isotpye) Ab-2r、アイソタイプAb-2s、及びアイソタイプAb-2b)及びブデソニド遊離ペイロードを、1つのアッセイランにおける24、48又は72時間のいずれかのインキュベーションと共に上述のプロトコルを利用して、HEK293/PRLR/GRE-Luc細胞ベースアッセイで試験した。第2のアッセイランにおいて、抗PRLR Ab ncADC(抗PRLR Ab-2b、抗PRLR Ab-2l、及び抗PRLR Ab-2g)、アイソタイプAb ncADC(アイソタイプAb-2b、アイソタイプAb-2l、及びアイソタイプAb-2g)、抗体単独(抗PRLR Ab及びアイソタイプAb)、及びブデソニド遊離ペイロードを、72時間のインキュベーションと共に上述のプロトコルを利用してHEK293/PRLR/GRE-Luc細胞ベースアッセイで試験した。EC50値を、GraphPad Prismを用いて10点反応曲線に対する4パラメータロジスティック方程式から決定した。ステロイドの送達は、HEK293/PRLR/GRE-Luc細胞中でLucレポーターの活性化をもたらすだろう。
【０４５８】
図1A〜C及び表8は、第1のアッセイランの結果を表す。図1A〜Cに示される通り、抗PRLR Ab-2bコンジュゲートは、24、48、及び72時間でHEK293/PRLR/GRE-Luc細胞中の活性化を誘発し、EC50値は全3時点で10nM以下であり、約15倍を超える、対照アイソタイプ-Ab-2bと比べた選択性を示した。抗PRLR Ab-2sコンジュゲートは、24、48、及び72時間でHEK293/PRLR/GRE-Luc細胞中で活性化を誘発したが、それは、対照アイソタイプ-2sと比べた選択性を示さなかった。抗PRLR Ab-2rコンジュゲートは、293/PRLR/GRE-Luc細胞中で活性化を誘発し、24及び48時間で5倍未満の選択性であったが、72時間でのみ活性化が増加してEC50が13.4nMであった。
【０４５９】
図2及び表9に示される通り第2のアッセイランにおいて、抗PRLR Ab-2bコンジュゲートは、HEK293/PRLR/GRE-Luc細胞中で活性化を誘発し、0.48nMのEC50を有し、対照アイソタイプ-Ab-2bと比べて約14倍の選択性を示した。抗PRLR Ab-2gコンジュゲートは、HEK293/PRLR/GRE-Luc細胞中で活性化を誘発し、1.9nMのEC50を、対照アイソタイプ-Ab-2gと比べて約3.7倍の選択性と共に有した。抗PRLR Ab-2lコンジュゲートは、HEK293/PRLR/GRE-Luc細胞中で活性化を誘発し、8.98nMのEC50を有したが、アイソタイプ-Ab-2lはこのアッセイにおいて活性化を示さなかった。
表8.
【表２９】
2021509908.tif 000592
表9.
【表３０】
2021509908.tif 000593
NAは活性でないことを意味する。
【０４６０】
(実施例8)
この実施例は、LPS誘発性サイトカイン放出のマウスモデルを説明する。
【０４６１】
この試験の目的は、マウスにおけるLPS誘発性サイトカイン放出の阻害時の試験化合物を評価することである。試験化合物を、LPS曝露の48時間前、24時間前、及び2時間前に投与し、血液試料中のTNF-α及びIL6を含むサイトカインレベルを、LPS曝露の2時間及び4時間の時点で測定した。
【０４６２】
材料及び試薬
【０４６３】
E.コリ(E. coli)K12から誘導したリポ多糖(LPS)は、Invivogen社(San Diego, California, USA, カタログ番号 Tlrl-eklps)から購入でき、デキサメタゾンはADAMAS社(Emeryville, CA, USA, カタログ番号50-02-2)から購入できる。マウスTNF-αELISAキットは、ebioscience(ThermoFisher Scientific社、カタログ番号88-7324)から購入できる。マウスIL6 ELISAキットは、ebioscience(ThermoFisher Scientific社、カタログ番号88-7064)から購入できる。
【０４６４】
実験方法
【０４６５】
動物飼育:
【０４６６】
全部で18匹のナイーブC57BL/6jマウスをこの試験で使用する。動物は雄性であり、試験の開始時に体重が18〜20gである。動物を、Shanghai Laboratory Animal Center, CAS(SLAC)から購入し、ChemPartner社のSPF環境にある動物飼育所に収容する。到着後、動物を、外被、四肢、開口部、及び姿勢又は動きの異常な徴候を含む健康状態に関してチェックし、7日より長く環境に順化させる。
【０４６７】
動物を、ケージあたり3匹のマウスで、SPF環境にあるIVCポリカーボネート靴箱型ケージ(shoebox cages)に収容する;動物の部屋のための環境制御は、20〜26℃の温度、40〜70%の湿度、及び12時間明/12時間暗のサイクルを維持するように設定する。
【０４６８】
標準飼料(SLAC-M01, Shanghai Laboratories Animal Center) 及び精製水(濾過済み、都市用水質)を、試験期間全体で適宜与える。
【０４６９】
実験手順
【０４７０】
グループ分け:試験開始前に、動物を無作為に6群(A〜F)に割り付ける。各群は3匹のマウスを含んでいた。A群はナイーブ対照として機能する;B群はデキサメタゾンを受け取り、陽性対照として機能した;C群を試験化合物により処置し、D〜F群を試験化合物により処置する。
【０４７１】
実験手順
【０４７２】
全マウスは、PBSに溶かされたLPSを、0.5mpkの投与量で、腹腔内注射により受け取る。A群のマウスはPBSを受け取り、B群のマウスはDex(5mpk)を受け取り、C群のマウスは4b(5mpk)をLPS曝露の2時間前に腹腔内注射により受け取り;D、E、及びF群のマウスは、5mpkの投与量で、腹腔内注射により、それぞれLPS曝露の2時間前、24時間前、及び48時間前に受け取った。
【０４７３】
血液試料を、LPS曝露後2時間及び4時間の時点で、ヘパリンを含むチューブに回収する。血液試料を遠心分離し、血漿試料を回収して、分析前に-80℃で保存する。
【０４７４】
血漿中のTNFαのレベルを、製造業者により推奨される標準手順に従ってELISAキットにより測定する。種々のPKパラメーターを測定する(例えば、Tmax、Cmax、終末相t1/2、AUClast、及びAUCINF)。
【０４７５】
血液試料を、LPS曝露後2時間及びaaで回収する;血漿中のTNF-αレベルを測定する。データを、一元ANOVA分析により、平均±SEM、A群に対して、*p＜0.05、**p＜0.01で表す。
【０４７６】
(実施例9)
(マウス樹状細胞)
エクスビボLPS誘発性炎症性免疫応答に対する試験化合物の効果を測定するために、CD11c+樹状細胞(DC)を、野生型C57Bl/6マウス(Jackon Labs、プロトコル番号426.0)の脾臓から単離する。脾臓DCを、コラゲナーゼD消化(400U/mLコラゲナーゼD(Rocheカタログ番号11088858001)、20  g/mL DNase I(Roche社カタログ番号10104159001)、HEPES-緩衝RPMI-1640中2% FCSを使用して単離し、37℃で25分間インキュベートする。インキュベーション後に、脾臓組織をRPMI-1640で洗浄し、70  mフィルターに通して濾過し、次いで、ACK溶解バッファー(Gibcoカタログ番号A1049201)を使用して1分間赤血球溶解を実施する。その後に、該細胞懸濁液を、RPMI-1640を使用して2回洗浄する。古典的DCは、単核細胞懸濁液から、CD11c磁気マイクロビーズ(Milteny Biotec社、カタログ番号130108338)を使用して単離する。簡潔に言うと、細胞懸濁液を、autoMACSランニングバッファー(Milteny Biotecカタログ番号130091221)により2回洗浄してから、Milteny Biotecの確立されたプロトコル通りにCD11c+マイクロビーズと共に4℃で30分間インキュベートする。CD11c+細胞を、陽性選択により単離し、洗浄し、10%のFBS(ThermoFisher Scientific社、カタログ番号10082147)及び1%のペニシリン-ストレプトマイシン(ThermoFisher Scientific社、カタログ番号11875093)]を含む完全-RPMI[RPMI-1640(ThermoFisher Scientific社、カタログ番号15140122)に懸濁させ、ウェルあたり2×105細胞での培養の前に計数した。対照の完全-RPMI、式(III)の化合物により処理された完全-RMPI(10nM及び100nMで)又はデキサメタゾン(Sigma社、カタログ番号D4902-25MG)により処理された完全-RMPI(10nM及び100nMで)を、96ウェル培養皿中の細胞に加える。DC/対照、試験化合物又はデキサメタゾン処理細胞を、24時間37℃でインキュベートしてから、10ng/mLのLPSにより24時間刺激した。
【０４７７】
(ヒトの樹状細胞)
ヒトの自然免疫細胞におけるエクスビボLPS誘発性炎症性免疫応答に対する試験化合物の効果を測定するために、CD14+単球(Lonza社、カタログ番号2W-400C)を単離し、ヒトIL4(50ng/mL)(Milteny Biotec社、カタログ番号130-093-922)及びヒトGM-CSF(100 ng/mL)(Milteny Biotec社、カタログ番号130093866)を補った、10%のFBS(ThermoFisher Scientific社、カタログ番号10082147)及び1%のペニシリン-ストレプトマイシン(ThermoFisher Scientific社、カタログ番号11875093)]を含む完全-RPMI [RPMI-1640(ThermoFisher Scientific社、カタログ番号15140122)の存在下で7日間培養する。IL4及びGM-CSFを含む完全-RPMIを3日ごとに替える。2種の特定の培養条件を開発する:条件1: CD14+単球を、対照完全-RPMI、試験化合物により処理された完全-RMPI(10nM及び100 nMで)又はデキサメタゾン(Sigma社)により処理された完全-RMPI(10nM及び100nMで)と共に丸7日間インキュベートする、又は条件2:CD14+単球を対照完全-RPMIと共に5日間インキュベートし、その後に第7日まで、対照完全-RMPI、試験化合物により処理された完全-RMPI(10nM及び100nMで)又はデキサメタゾン(Sigma社、カタログ番号D4902-25MG)により処理された完全-RMPI(10nM及び100nMで)とインキュベートする。第7日に、種々の実験群を10ng/mLのLPSにより24時間刺激する。
【０４７８】
(LPSエクスビボ曝露の24時間後の上清中のサイトカインの測定)
上清を、LPS曝露の24時間後に96ウェル丸底組織培養プレートに回収し、さらなる分析まで-20℃で保存する。上清中のサイトカイン濃度を、製造業者の説明書に従ってPro-inflammatory Panel 1(マウス)マルチプレックス免疫アッセイキット(MesoScale Discovery社、カタログ番号K15048D)又はPro-inflammatory Panel 1(ヒト)マルチプレックス免疫アッセイキット(MesoScale Discovery社、カタログ番号K15049D)を使用して測定する。簡潔に言うと、50  L/ウェルの較正用試料(calibrators)及び試料(希釈液で1:2に希釈)を、捕捉抗体でプレコートしてあるプレートに加え、700rpmで振とうしながら2時間室温でインキュベートする。次いで、プレートを0.05%(w/v)Tween-20を含む1×PBSで3回洗浄し、それに続いて、Diluent 45で希釈した25μLのDetection Antibody Solutionを加える。振とうしながら室温で2時間インキュベートした後に、プレートを3回洗浄し、150μLの2×Read Bufferを各ウェルに加えた。電気化学発光を、MSD Spector(登録商標)装置で直ちに読み取る。データ分析を、GraphPad Prism(商標)ソフトウェアを使用して実施する。群内の統計的有意性を、ターキー(Turkey)の多重比較事後検定(post test)による一元配置ANOVAにより決定し、平均の標準誤差(SEM±)を計算する。IL12p70、IL1β、IL6、KC-GRO、及びTNF-αの脾臓CD11c+ DCによる産生を測定する。IL12p70、IL1β、IL6、及びTNF-αのヒト単球由来DCによる発現を測定する。
【０４７９】
(実施例10)
(103aの血漿安定性)
血漿安定性を、以下のプロトコルに従って測定できる。
【０４８０】
事前加熱した0.05Mリン酸ナトリウム及び0.07M NaCl緩衝液、pH 7.4:14.505g/L Na2HPO4_12H2O、1.483g/L NaH2PO4 _ 2H2O及び4.095g/L NaClを、脱イオン水に溶解させた。次いで、該塩基性溶液をリン酸によりpH 7.40に滴定し、冷蔵状態で最長7日間保存した。実験の日にpHを確認し、7.4±0.1の規格外である場合調整した。
【０４８１】
血漿調製:凍結血漿を、37℃に配置して解凍した。該血漿を3,000rpmで8分間遠心分離して血餅を除き、ピペットで移し、上清を、実験で使用すべき血漿としてプールした。血漿のpHを確認し、記録して、pH 7.4〜pH 8の範囲内の場合のみ使用した。pH 8より高い場合、血漿を廃棄した。血漿の初期pHを、酸又はCO2によるバブリングによりpH 7.4に調整することはなかった。5% CO2インキュベーター及びPBS緩衝液を使用することにより、4時間の平衡透析時間の後に7.4のpHに達した。血漿を、使用するまで氷上に配置した。
【０４８２】
試験化合物及び参照化合物スパイキング溶液。0.5mM試験化合物スパイキング溶液A:10μLの10mM試験化合物ストック溶液を190μLのDMSOに加えた。0.02mMスパイキング溶液B:40μLのスパイキング溶液Aを、0.5% BSAを含む960μLの0.05mMリン酸ナトリウム緩衝液に加えた。
【０４８３】
血漿及びスパイキング溶液Bを37℃で5分間事前加温した。10μLの事前加温スパイキング溶液Bを、全時点(0、0.25、1、8、24時間)に指定されたウェルに加えた。0分では、400μLのIS含有ACNを0分のプレートのウェルに加え、次いで90μLの血漿を加えた。90μLの事前加温した血漿を、時点(0.25、1、8、24時間)に指定されたウェルに加え、計時を始めた。0.25、1、8、24時間で、400μLのIS含有ACNを、対応するプレートのウェルにそれぞれ加え、反応を停止させた。クエンチングの後、プレートをバイブレーター(IKA、MTS 2/4)上で10分間(600rpm/分)振とうし、次いで5594gで15分間遠心分離した(Thermo Multifuge x3R)。各ウェルからの50μLの上清を、LC/MS分析のために、50μLの超純水(Millipore、ZMQS50F01)を含む96ウェル試料プレートに移した。
【０４８４】
化合物103aのヒト血漿安定性データを以下の表に示す。
【化５１２】
2021509908.tif 000594
【表３１】
2021509908.tif 000595
BQL:定量限界未満
【０４８５】
(実施例11)
(リンカー-ペイロードのpH安定性)
ペイロード103a、b及びそれらのリンカー-ペイロードLP9、10の溶解度が乏しいため(＜0.02mg/mL DMSO水溶液(20%))、これらの化合物のpH安定性を試験しなかった。LP9をCD-N3によりクエンチすると、以下の化合物QLP9を与え、それは水溶性であり、pH安定性試験に使用した。
【化５１３】
2021509908.tif 000596
【０４８６】
化合物QLP9の合成:LP9(5mg、3.4μmol)のDMF(1.0mL)溶液に、化合物CD-N3(7.0mg、6.8μmol)を加えた。該反応混合物を室温で一晩撹拌し、それをLCMSによりモニターした。該反応混合物を分取HPLCにより直接精製すると、化合物QLP9(5mg、収率60％)を白色の固体として与えた。ESI m/z:819.0(M/3+H)+。
【０４８７】
緩衝液中でのpH安定性:DMSO、pH 5.0、7.4及び8.5 PBS緩衝液(20% DMSOを含む)中でのQLP9の安定性を試験すると、該化合物は、これらの溶液中で7日後に安定であった。
【０４８８】
(実施例12)
(細胞系グルココルチコイド受容体(GR)ルシフェラーゼレポーターアッセイ)
細胞系GR応答性ルシフェラーゼレポーターアッセイを利用して、本明細書に記載の化合物のGRアゴニスト活性を試験した。このアッセイにおいて、以下の物質を使用した。
【表３２】
2021509908.tif 000597
【０４８９】
アッセイ細胞株を生成させるために、HEK293細胞に、pBind-GR(Promega社、カタログ番号 E158A)及びpGL4.35 [Luc2P/9xGAL4UAS/Hygro](Promega社、カタログ番号E137A)ベクターを同時導入した。pBind-GRベクターは、酵母Gal4DNA-結合ドメイン及びGRリガンド結合ドメインからなる融合タンパク質を発現し、それは、ルシフェラーゼ発現ベクター中のGal4上流活性化配列(UAS)に結合でき、GRアゴニスト結合後にルシフェラーゼ発現を誘導する。細胞を少なくとも2週間G418+ハイグロマイシン中で選択した。得られた細胞株をHEK293/UASLuc/pBIND-GRと称する。
【０４９０】
細胞を、96ウェルプレート内に、20,000細胞/ウェルで、アッセイ培地(10% FBS、100単位/mLペニシリン、100μg/mLストレプトマイシン、53μg/mLグルタミン、500μg/mL G418、及び100μg/mLハイグロマイシンを補ったDME高グルコース)に、アッセイの1日前に播種した。試験化合物の3倍段階希釈液を100% DMSOで調製し、新たなアッセイ培地に移し、細胞に加えた。最終DMSO濃度を0.2%で一定に保ち、試験化合物最終濃度は100 nM〜0.015nMの範囲であった。プレート中の最後のウェルは、アッセイ培地及び0.2% DMSOのみを含むブランク対照(未処理ウェル)として作用し、3倍段階希釈の延長としてプロットした。
【０４９１】
48時間後に、ルシフェラーゼ活性を、One-Glo(商標)試薬(Promega社、カタログ番号E6130)の添加後に測定した。相対発光単位(RLU)を、Envision照度計(PerkinElmer社)で測定し、EC50値を、10点用量反応曲線に対する4パラメータロジスティック方程式を使用して決定した(GraphPad Prism)。シグナルノイズ比(S/N)を、用量反応曲線上の最高のRLUと未処理ウェル中のRLUの比をとることにより決定した。
【０４９２】
以下の表に示される通り、EC50値は51.8pM〜3.24nMの範囲であり、S/N値は12.4〜17.3の範囲であった。試験化合物100は、1a(ブデソニド)より5.6倍強力であり、デキサメタゾンより5.9倍強力であった。1aへのスペーサー結合による103aの生成は、1aと同等なEC50値をもたらした。同様に、100へのスペーサー結合による103bの生成は、100と同等なEC50値をもたらした。100へのスペーサー結合による105aの生成は、100の2.7分の1の効力であるEC50値をもたらした。S/N値は、全試験化合物にわたって同等であった。
GRアゴニストによるGR-レポーター活性
【表３３】
2021509908.tif 000598
【０４９３】
上記の実施態様及び実施例は、単に例示的で非限定的であることが意図される。当業者は、ルーチンの実験だけを用いて、特定の化合物、材料、及び手順の数多くの等価物を認識するか、又はそれらを確認することができるであろう。そのような等価物は全て、本範囲内にあると考えられ、添付の特許請求の範囲によって包含される。
【図１Ａ−Ｂ】
2021509908.tif 000687
【図１Ｃ】
2021509908.tif 000688
【図２】
2021509908.tif 000689
【図３−１】
2021509908.tif 000690
【図３−２】
2021509908.tif 000691
【手続補正書】
【提出日】令和2年10月20日(2020.10.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2021509908000001.app
【国際調査報告】
2021509908.tif 000692
2021509908.tif 000693
2021509908.tif 000694
2021509908.tif 000695
2021509908.tif 000696
2021509908.tif 000697
2021509908.tif 000698
2021509908.tif 000699
2021509908.tif 000700
2021509908.tif 000701
2021509908.tif 000702
2021509908.tif 000703
2021509908.tif 000704