(57)【要約】本開示は、抗菌性シソマイシン型アミノグリコシド化合物を調製するための新規方法、ならびにそのような方法に有用な関連する中間体およびその結晶形態に関する。本開示は、拡張可能であり、商業規模で再現可能であり、収率が良好な、プラゾマイシンを含む式（９）の化合物を調製するためのプロセスを提供する。これらのプロセスは、反応条件の新しい組み合わせの実験および開発により得られた新規中間化合物を提供することができる反応を含む。プロセスはまた、特定の中間体の結晶化を含み得る。これらの特定の中間体の結晶化は、予想外にも、精製の改善（例えば、不純物がより低いこと）に寄与し、従来の精製方法と比較して精製を簡素化することができる。【選択図】図１
2021500354.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを調製するためのプロセスであって、
（ａ）式（１）の化合物：
【化１９８】
2021500354.tif 000220
（１）
またはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、１−｛［（ｐ−ニトロベンジル）オキシ］カルボニル｝−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＰＮＺ−Ｂｔ）と接触させて、前記式（２）の化合物：
【化１９９】
2021500354.tif 000221
（２）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、形成することを含み、
式中、
【化２００】
2021500354.tif 000222
は、単結合または二重結合であり、
Ｒ１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、
Ｒ２は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、
Ｒ３は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルである、プロセス。
【請求項２】
工程（ａ）が、ジクロロメタン、メタノール、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される溶媒の存在下で行われる、請求項１に記載のプロセス。
【請求項３】
前記ＰＮＺ−Ｂｔが、前記式（１）の化合物またはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーに対して、約１．０〜１．２モル当量で存在する、請求項１または２に記載のプロセス。
【請求項４】
工程（ｂ１）または（ｂ２）：
（ｂ１）Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３がＨである場合、前記式（２）の化合物をＢｏｃ保護基試薬と接触させて、式（３）の化合物：
【化２０１】
2021500354.tif 000223
（３）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得る工程、あるいは
（ｂ２）Ｒ１、Ｒ２、またはＲ３のうちの１つ以上が、独立して、Ｃ１〜Ｃ３アルキルである場合、最初に前記Ｃ１〜Ｃ３アルキルを除去し、次いで、前記式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させて、式（３）の化合物：
【化２０２】
2021500354.tif 000224
（３）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得る工程をさらに含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項５】
前記Ｂｏｃ保護基試薬が、Ｂｏｃ２ＯまたはＢｏｃ−ＯＮｂである、請求項４に記載のプロセス。
【請求項６】
工程（ｂ１）または（ｂ２）が、ルイス酸の存在下で行われる、請求項４または５に記載のプロセス。
【請求項７】
前記ルイス酸が、Ｚｎ（ＯＡｃ）２、ＺｎＣｌ２、またはＺｎ（ＯＰｉｖ）２である、請求項６に記載のプロセス。
【請求項８】
前記ルイス酸が、銅イオンまたはニッケルイオンを含む、請求項６に記載のプロセス。
【請求項９】
工程（ｂ１）または（ｂ２）が、トリエチルアミンの存在下で行われる、請求項４〜８のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１０】
工程（ｂ１）または（ｂ２）が、メタノールの存在下で行われる、請求項４〜８のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１１】
（ｃ）前記式（３）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化２０３】
2021500354.tif 000225
と接触させて、式（４）の化合物：
【化２０４】
2021500354.tif 000226
（４）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、請求項４〜１０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１２】
工程（ｃ）が、活性化試薬およびペプチド結合試薬の存在下で行われる、請求項１１に記載のプロセス。
【請求項１３】
前記活性化試薬が、ＨＯＢｔである、請求項１２に記載のプロセス。
【請求項１４】
前記活性化試薬が、
【化２０５】
2021500354.tif 000227
に対して、約０．０５〜１．０モル当量で存在する、請求項１３に記載のプロセス。
【請求項１５】
前記ペプチド結合試薬が、ＥＤＡＣまたはＰｙＢＯＰである、請求項１２に記載のプロセス。
【請求項１６】
前記ペプチド結合試薬が、
【化２０６】
2021500354.tif 000228
に対して、約１．０〜１．４モル当量で存在する、請求項１５に記載のプロセス。
【請求項１７】
工程（ｃ）が、酸性条件で行われる、請求項１１〜１６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１８】
前記酸性条件が、ｐＨ約４〜７である、請求項１７に記載のプロセス。
【請求項１９】
前記酸性条件が、ｐＨ約５である、請求項１７に記載のプロセス。
【請求項２０】
式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製することをさらに含む、請求項１１〜１９のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項２１】
前記式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することをさらに含む、請求項１１〜２０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項２２】
（ｄ）前記式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させて、式（５）の化合物：
【化２０７】
2021500354.tif 000229
（５）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、請求項１１〜２１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項２３】
前記Ｂｏｃ保護基試薬が、Ｂｏｃ２Ｏである、請求項２２に記載のプロセス。
【請求項２４】
工程（ｄ）が、アルコールの存在下で行われる、請求項２２または２３に記載のプロセス。
【請求項２５】
前記アルコールが、メタノールである、請求項２４に記載のプロセス。
【請求項２６】
工程（ｄ）が、最大約６０℃の温度で行われる、請求項２２〜２５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項２７】
（ｅ）前記式（５）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、ＰＮＺ脱保護試薬と接触させて、式（６）の化合物：
【化２０８】
2021500354.tif 000230
（６）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、請求項２２〜２６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項２８】
前記ＰＮＺ脱保護試薬が、亜ジチオン酸ナトリウムである、請求項２７に記載のプロセス。
【請求項２９】
式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製することをさらに含む、請求項２７または２８に記載のプロセス。
【請求項３０】
前記式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することをさらに含む、請求項２７〜２９のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項３１】
（ｆ）前記式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化２０９】
2021500354.tif 000231
（式中、ＬＧ１が、離脱基である）と接触させて、式（７）の化合物：
【化２１０】
2021500354.tif 000232
（７）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、請求項２７〜３０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項３２】
前記離脱基が、ヨードである、請求項３１に記載のプロセス。
【請求項３３】
前記
【化２１１】
2021500354.tif 000233
が、前記式（６）の化合物に対して、約１．０〜１．５モル当量で存在する、請求項３１に記載のプロセス。
【請求項３４】
工程（ｆ）が、実質的に水を含まない条件で行われる、請求項３１〜３３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項３５】
工程（ｆ）が、アセトニトリル、アセトン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される溶媒の存在下で行われる、請求項３１〜３４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項３６】
工程（ｆ）が、ＮａＨＣＯ３の存在下で行われる、請求項３１〜３５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項３７】
工程（ｆ）が、約３０℃〜４０℃の温度で行われる、請求項３１〜３６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項３８】
１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）を反応混合物に添加することをさらに含む、請求項３１〜３７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項３９】
式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製することをさらに含む、請求項３１〜３８のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項４０】
前記式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することをさらに含む、請求項３１〜３９のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項４１】
（ｇ）前記式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ除去試薬と接触させて、式（８）の化合物：
【化２１２】
2021500354.tif 000234
（８）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、請求項３１〜４０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項４２】
前記Ｂｏｃ除去試薬が、ＴＦＡであり、それにより、式（８）の化合物のＴＦＡ塩またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得る、請求項４１に記載のプロセス。
【請求項４３】
前記ＴＦＡ塩を除去して、式（８）の化合物、またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、請求項４２に記載のプロセス。
【請求項４４】
（ｈ）酸で塩形成を行い、式（８）の化合物の塩またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、請求項４１または４３に記載のプロセス。
【請求項４５】
工程（ｈ）における前記酸が硫酸であり、それにより、式（９）の化合物の硫酸塩：
【化２１３】
2021500354.tif 000235
またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー（式中、ｘが１〜５である）を得る、請求項４４に記載のプロセス。
【請求項４６】
Ｒ１、Ｒ２、またはＲ３が、Ｈである、請求項１〜３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項４７】
【化２１４】
2021500354.tif 000236
が、二重結合である、請求項１〜４６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項４８】
式（１）〜（３）中の炭素原子１、３、４、５、６、１’、２’、１”、２”、３”、および４”における立体化学が、式（Ｘ）のように示され、
【化２１５】
2021500354.tif 000237
が、水素または部分への結合点を示す、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のプロセス：
【化２１６】
2021500354.tif 000238
（Ｘ）。
【請求項４９】
式（４）〜（９）中の炭素原子１、３、４、５、６、１’、２’、１”、２”、３”、４”、および１−ｚにおける立体化学が、式（Ｙ）のように示され、
【化２１７】
2021500354.tif 000239
が、水素または部分への結合点を示す、請求項１１〜４７のいずれか一項に記載のプロセス：
【化２１８】
2021500354.tif 000240
（Ｙ）。
【請求項５０】
式（５）の化合物：
【化２１９】
2021500354.tif 000241
（５）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを調製するためのプロセスであって、前記プロセスが、
（ａ）式（４）の化合物：
【化２２０】
2021500354.tif 000242
（４）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させることを含み、式中、
【化２２１】
2021500354.tif 000243
が、単結合または二重結合である、プロセス。
【請求項５１】
前記式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、式（３）の化合物：
【化２２２】
2021500354.tif 000244
（３）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化２２３】
2021500354.tif 000245
と接触させることによって調製される、請求項５０に記載のプロセス。
【請求項５２】
前記式（３）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、
（ｂ１）式（２ａ）の化合物：
【化２２４】
2021500354.tif 000246
（２ａ）、
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させること、あるいは
（ｂ２）式（２）の化合物：
【化２２５】
2021500354.tif 000247
（２）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー中のＣ１〜Ｃ３アルキルを除去し
（式中、Ｒ１が、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ｒ２が、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ｒ３が、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ｒ１、Ｒ２、またはＲ３のうちの１つ以上が、独立して、Ｃ１〜Ｃ３アルキルである）、
次いで、前記式（２）の化合物をＢｏｃ保護基試薬と接触させることによって調製される、請求項５１に記載のプロセス。
【請求項５３】
前記式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、式（１）の化合物：
【化２２６】
2021500354.tif 000248
（１）
またはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、１−｛［（ｐ−ニトロベンジル）オキシ］カルボニル｝−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＰＮＺ−Ｂｔ）と接触させることによって調製される、請求項５２に記載のプロセス。
【請求項５４】
前記Ｂｏｃ保護基試薬が、Ｂｏｃ２Ｏである、請求項５０〜５３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項５５】
工程（ａ）、（ｂ１）、または（ｂ２）が、アルコールの存在下で行われる、請求項５０〜５４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項５６】
前記アルコールが、メタノールである、請求項５５に記載のプロセス。
【請求項５７】
工程（ａ）、（ｂ１）、または（ｂ２）が、最大約６０℃の温度で行われる、請求項５０〜５６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項５８】
（ｅ）前記式（５）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、ＰＮＺ脱保護試薬と接触させて、式（６）の化合物：
【化２２７】
2021500354.tif 000249
（６）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、請求項５０〜５７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項５９】
前記ＰＮＺ脱保護試薬が、亜ジチオン酸ナトリウムである、請求項５８に記載のプロセス。
【請求項６０】
式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製することをさらに含む、請求項５０〜５９のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６１】
前記式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することをさらに含む、請求項５０〜６０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６２】
（ｆ）前記式（６）の化合物を
【化２２８】
2021500354.tif 000250
（式中、ＬＧ１が離脱基である）と接触させて、式（７）の化合物：
【化２２９】
2021500354.tif 000251
（７）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、請求項５０〜６１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６３】
前記離脱基が、ヨードである、請求項６２に記載のプロセス。
【請求項６４】
【化２３０】
2021500354.tif 000252
が、前記式（６）の化合物に対して、約１．０〜１．５モル当量で存在する、請求項６２に記載のプロセス。
【請求項６５】
工程（ｆ）が、実質的に水を含まない条件で行われる、請求項６２〜６４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６６】
工程（ｆ）が、アセトニトリル、アセトン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される溶媒の存在下で行われる、請求項６２〜６５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６７】
工程（ｆ）が、ＮａＨＣＯ３の存在下で行われる、請求項６２〜６６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６８】
工程（ｆ）が、約３０℃〜４０℃の温度で行われる、請求項６２〜６７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６９】
１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）を反応混合物に添加することをさらに含む、請求項６２〜６８のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７０】
式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製することをさらに含む、請求項６２〜６９のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７１】
前記式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することをさらに含む、請求項６２〜７０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７２】
（ｇ）前記式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ除去試薬と接触させて、式（８）の化合物：
【化２３１】
2021500354.tif 000253
（８）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、請求項６２〜７１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７３】
前記Ｂｏｃ除去試薬が、ＴＦＡであり、それにより、式（８）の化合物のＴＦＡ塩またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得る、請求項７２に記載のプロセス。
【請求項７４】
前記ＴＦＡ塩を除去して、式（８）の化合物、またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、請求項７３に記載のプロセス。
【請求項７５】
（ｈ）酸で塩形成を行い、式（８）の化合物の塩またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、請求項７２または７４に記載のプロセス。
【請求項７６】
工程（ｈ）における前記酸が硫酸であり、それにより、式（９）の化合物の硫酸塩：
【化２３２】
2021500354.tif 000254
またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー（式中、ｘは１〜５である）を得る、請求項７５に記載のプロセス。
【請求項７７】
式（７）の化合物：
【化２３３】
2021500354.tif 000255
（７）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを調製するためのプロセスであって、前記プロセスが、
（ｆ）式（６）の化合物、
【化２３４】
2021500354.tif 000256
（６）またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化２３５】
2021500354.tif 000257
と接触させることを含み、式中、ＬＧ１が、脱離基であり、
【化２３６】
2021500354.tif 000258
が、単結合または二重結合である、プロセス。
【請求項７８】
前記式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、式（５）の化合物：
【化２３７】
2021500354.tif 000259
（５）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
ＰＮＺ脱保護試薬と接触させることによって調製される、請求項７７に記載のプロセス。
【請求項７９】
前記式（５）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、式（４）の化合物：
【化２３８】
2021500354.tif 000260
（４）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させることによって調製される、請求項７８に記載のプロセス。
【請求項８０】
前記式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、式（３）の化合物：
【化２３９】
2021500354.tif 000261
（３）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化２４０】
2021500354.tif 000262
と接触させることによって調製される、請求項７９に記載のプロセス。
【請求項８１】
前記式（３）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、
（ｂ１）式（２ａ）の化合物：
【化２４１】
2021500354.tif 000263
（２ａ）、
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させること、あるいは
（ｂ２）式（２）の化合物：
【化２４２】
2021500354.tif 000264
（２）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー中のＣ１〜Ｃ３アルキルを除去し
（式中、Ｒ１が、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ｒ２が、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ｒ３が、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ｒ１、Ｒ２、またはＲ３のうちの１つ以上が、独立して、Ｃ１〜Ｃ３アルキルである）、
次いで、式（２）の化合物をＢｏｃ保護基試薬と接触させることによって調製される、請求項８０に記載のプロセス。
【請求項８２】
前記式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、式（１）の化合物：
【化２４３】
2021500354.tif 000265
（１）
またはそのエナンチオマーまたはそのジアステレオマーを、１−｛［（ｐ−ニトロベンジル）オキシ］カルボニル｝−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＰＮＺ−Ｂｔ）と接触させることによって調製される、請求項８１に記載のプロセス。
【請求項８３】
前記離脱基が、ヨードである、請求項７７〜８２のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８４】
【化２４４】
2021500354.tif 000266
が、前記式（６）の化合物に対して、約１．０〜１．５モル当量で存在する、請求項８３に記載のプロセス。
【請求項８５】
工程（ｆ）が、実質的に水を含まない条件で行われる、請求項７７〜８４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８６】
工程（ｆ）が、アセトニトリル、アセトン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される溶媒の存在下で行われる、請求項７７〜８５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８７】
工程（ｆ）が、ＮａＨＣＯ３の存在下で行われる、請求項７７〜８６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８８】
工程（ｆ）が、約３０℃〜４０℃の温度で行われる、請求項７７〜８７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８９】
１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）を反応混合物に添加することをさらに含む、請求項７７〜８８のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９０】
式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製することをさらに含む、請求項７７〜８９のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９１】
前記式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することをさらに含む、請求項７７〜９０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９２】
（ｇ）前記式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ除去試薬と接触させて、式（８）の化合物：
【化２４５】
2021500354.tif 000267
（８）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、請求項７７〜９１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９３】
前記Ｂｏｃ除去試薬が、ＴＦＡであり、それにより、式（８）の化合物のＴＦＡ塩、もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得る、請求項９２に記載のプロセス。
【請求項９４】
前記ＴＦＡ塩を除去して、式（８）の化合物、またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、請求項９３に記載のプロセス。
【請求項９５】
（ｈ）酸で塩形成を行い、式（８）の化合物の塩またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることを含む、請求項９２または９４に記載のプロセス。
【請求項９６】
工程（ｈ）における前記酸が、硫酸であり、それにより、式（９）の化合物の硫酸塩：
【化２４６】
2021500354.tif 000268
またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー（式中、ｘは１〜５である）を得る、請求項９５に記載のプロセス。
【請求項９７】
【化２４７】
2021500354.tif 000269
が、二重結合である、請求項５０〜９６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９８】
式（４）の化合物：
【化２４８】
2021500354.tif 000270
（４）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー。
【請求項９９】
前記式（４）の化合物が、以下の式：
【化２４９】
2021500354.tif 000271
（４ａ）
である、請求項９８に記載の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物。
【請求項１００】
結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）カルバメート、式（４ａ）、またはその溶媒和物。
【請求項１０１】
結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）カルバメート、式（４ａ）、またはその溶媒和物を調製するためのプロセスであって、
（ａ）式（４ａ）またはその塩もしくはその溶媒和物をアセトニトリルで処理して溶液を生成することと、
（ｂ）工程（ａ）からの前記溶液を加熱することと、
（ｃ）工程（ｂ）の前記加熱溶液に水を添加することと、
（ｄ）工程（ｃ）からの前記溶液を冷却することと、
（ｅ）工程（ｄ）からの前記溶液に種結晶を充填することと、
（ｆ）得られた固体を単離して、結晶性の式（４ａ）またはその溶媒和物を得ることと、を含む、プロセス。
【請求項１０２】
結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、またはその溶媒和物。
【請求項１０３】
結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、またはその溶媒和物を調製するためのプロセスであって、
（ａ）式（６）またはその塩もしくはその溶媒和物を酢酸イソプロピル（ＩＰＡｃ）で処理して溶液を生成することと、
（ｂ）工程（ａ）の前記溶液に水を添加して混合物を生成することと、
（ｃ）工程（ｂ）からの前記混合物にジクロロメタンを添加して混合物を生成することと、
（ｄ）工程（ｃ）からの前記混合物に種結晶を充填することと、
（ｅ）得られた固体を単離して、結晶性の式（６ａ）またはその溶媒和物を得ることと、を含む、プロセス。
【請求項１０４】
工程（ｄ）が、低温で行われる、請求項１０３に記載のプロセス。
【請求項１０５】
式（７）の化合物：
【化２５０】
2021500354.tif 000272
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー。
【請求項１０６】
前記式（７）の化合物が、以下の式：
【化２５１】
2021500354.tif 000273
（７ａ）
である、請求項１０５に記載の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物。
【請求項１０７】
結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ジヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、またはその溶媒和物。
【請求項１０８】
結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、またはその溶媒和物を調製するためのプロセスであって、
（ａ）式（７ａ）またはその塩もしくはその溶媒和物を酢酸イソプロピル（ＩＰＡｃ）で処理して溶液を生成することと、
（ｂ）工程（ａ）の前記溶液にアセトニトリルを添加して混合物を生成することと、
（ｃ）工程（ｂ）からの前記混合物に種結晶を充填することと、
（ｄ）得られた固体を単離して、結晶性の式（７ａ）またはその溶媒和物を得ることと、を含む、プロセス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１７年１０月１９日に出願された米国仮出願第６２／５７４，５４４号の利益を主張し、その内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
政府利益の陳述
本発明は、契約番号ＨＨＳＯ１００２０１００００４６Ｃ下での米生物医学先端研究開発局、事前準備対応担当次官補局、中央政府予算（Ｏｆｆｉｃｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｅｃｒｅｔａｒｙ）、保健福祉省からの政府の資金でなされた。政府は本発明において一定の権利を有する。
【０００３】
本開示は、抗菌性アミノグリコシド化合物を調製するための新規方法、ならびにそのような方法において有用な関連する中間体および中間体の結晶形態に関する。
【背景技術】
【０００４】
現在、全ての入院患者のうちの少なくとも３０％が抗生物質による１回以上の治療を受け、何百万人もの潜在的に致死性の感染症を治癒している。これらの医薬品は、医師に利用可能な医薬品のうちの最も誤用されるものとなっている。しかしながら、抗菌剤を広く使用した結果の１つとして、抗生物質耐性の病原体が出現しており、その結果、新しい薬剤に対するニーズがますます高まっている。
【０００５】
新しい薬剤の抗菌活性が最初に試験される場合、感受性および耐性のパターンが通常定義される。微生物は、抗生物質の存在下で生存することを可能にする一連の巧妙な変化を進化させるので、残念ながら、この活性スペクトルは、その後に顕著な程度へと変化し得る。薬剤耐性のメカニズムは、微生物間によって異なり、薬剤間によって異なる。
【０００６】
多剤耐性グラム陰性細菌に対して活性を有する新しいアミノグリコシド抗生物質を開発する努力により、６’−およびＮ−１位で修飾されたシソマイシンおよびネオマイシン類似体がもたらされている。１−Ｎ位の選択的官能化のための特定の合成技術が既知である。１−Ｎ位の選択的修飾は、典型的には、保護基を利用する多工程手順で達成される。最初に、アミノグリコシド足場の１−Ｎおよび３”Ｎ位を、二価金属イオン（通常は、亜鉛、ニッケル、銅、またはコバルト）との遷移金属複合体を形成することによって遮断する。次いで、標準的な窒素保護基を利用して（典型的には、これらのアミンは、カルバメートまたはアセテートとして保護される）、全ての他の位（６’−２’−および３−Ｎ）を保護する。６’−２’−および３−Ｎ位を保護して、遷移金属錯体を除去し、１−Ｎ位を高選択的に修飾する。この時点で、６’−２’−および３−Ｎ位を典型的には保護し、唯一の残りの遊離アミンは、典型的なアシル化またはアルキル化反応において１−Ｎアミンよりも反応が遅い、第二級３”Ｎアミンである。
【０００７】
対照的に、６’−Ｎ位の選択的官能化は、依然として厄介な問題である。６’−Ｎ位は、様々な反応条件に対して最も反応性の高い位置であり、従来の方法は、６’−Ｎアミンを官能化または保護するために、この比較的高い反応性に依存している。しかしながら、６’−Ｎと他の位（特に２’−、３−、および１−Ｎ）との間で反応性の差は大きくない。その結果、６’−Ｎ位を直接官能化する試みは、異性体副生成物および過剰反応副生成物（二官能化または三官能化アミノグリコシド誘導体）の形成によって複雑化する。高量の副生成物の形成は、米国特許第８，３８３，５９６号、同第８，８２２，４２４号、同第９，２６６，９１９号、同第９，６８８，７１１号、および米国公開第２０１２−０２１４７５９号に記載されているものなどの６’−Ｎ官能化アミノグリコシド誘導体の産生に多大な時間およびコストがかかる精製手順の実施を必要とする。
薬剤の発見および開発プロセスを加速するため、アミノグリコシド抗生物質を合成するための新しい方法が、細菌感染の治療のための潜在的に新しい薬剤である一連の化合物を提供するために必要である。本開示は、これらのニーズを満たし、さらなる関連する利点を提供し得る。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】米国特許第８，３８３，５９６号明細書
【特許文献２】米国特許第８，８２２，４２４号明細書
【特許文献３】米国特許第９，２６６，９１９号明細書
【特許文献４】米国特許第９，６８８，７１１号明細書
【特許文献５】米国特許出願公開第２０１２−０２１４７５９号明細書
【発明の概要】
【０００９】
簡潔に述べると、本開示は、抗菌性アミノグリコシド化合物を調製するための新規方法、ならびに新規方法で使用される新規の中間体および特定の中間体の結晶形態に関する。
【００１０】
本開示は、拡張可能であり、商業規模で再現可能であり、収率が良好な、プラゾマイシンを含む式（９）の化合物を調製するためのプロセスを提供する。これらのプロセスは、反応条件の新しい組み合わせの実験および開発により得られた新規中間化合物を提供することができる反応を含む。プロセスはまた、特定の中間体の結晶化を含み得る。これらの特定の中間体の結晶化は、予想外にも、精製の改善（例えば、不純物がより低いこと）に寄与し、従来の精製方法と比較して精製を簡素化することができる。
【００１１】
本開示の一態様は、式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを調製するためのプロセスであって、（ａ）式（１）の化合物：
【化１】
2021500354.tif 000003
（１）
またはそのエナンチオマーまたはそのジアステレオマーを、１−｛［（ｐ−ニトロベンジル）オキシ］カルボニル｝−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＰＮＺ−Ｂｔ）と接触させて、式（２）の化合物：
【化２】
2021500354.tif 000004
（２）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを形成することを含み、式中、
【化３】
2021500354.tif 000005
は、単結合または二重結合であり、Ｒ１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ｒ２は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ｒ３は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルである、プロセスに関する。特定のそのような実施形態では、工程（ａ）は、ジクロロメタン、メタノール、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される溶媒の存在下で行われる。いくつかの実施形態では、ＰＮＺ−Ｂｔは、式（１）の化合物またはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーに対して、約１．０〜１．２モル当量で存在する。
【００１２】
前述または以下のいくつかの実施形態では、
【化４】
2021500354.tif 000006
は、単結合または二重結合である。前述または以下の特定の実施形態では、
【化５】
2021500354.tif 000007
は、単結合である。前述または以下の他の実施形態では、
【化６】
2021500354.tif 000008
は、二重結合である。前述または以下のいくつかの実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、またはＲ３は、Ｈである。
【００１３】
本開示の別の態様は、工程（ｂ１）または（ｂ２）：（ｂ１）Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３がＨである場合、式（２）の化合物をＢｏｃ保護基試薬と接触させて、式（３）の化合物：
【化７】
2021500354.tif 000009
（３）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得る工程；あるいは（ｂ２）Ｒ１、Ｒ２、またはＲ３のうちの１つ以上が、独立して、Ｃ１〜Ｃ３アルキルである場合、最初に前記Ｃ１〜Ｃ３アルキルを除去し、次いで、式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させて、式（３）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得る工程をさらに含む、プロセスに関する。特定のそのような実施形態では、Ｂｏｃ保護基試薬は、Ｂｏｃ２ＯまたはＢｏｃ−ＯＮｂである。いくつかの実施形態では、工程（ｂ１）または（ｂ２）は、ルイス酸の存在下で行われる。特定のそのような実施形態では、ルイス酸は、Ｚｎ（ＯＡｃ）２、ＺｎＣｌ２、またはＺｎ（ＯＰｉｖ）２である。いくつかの実施形態では、ルイス酸は、銅イオンまたはニッケルイオンを含む。いくつかの実施形態では、工程（ｂ１）または（ｂ２）は、トリエチルアミンの存在下で行われる。特定の実施形態では、工程（ｂ１）または（ｂ２）は、メタノールの存在下で行われる。
【００１４】
本開示の一態様は、（ｃ）式（３）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化８】
2021500354.tif 000010
と接触させて、式（４）の化合物：
【化９】
2021500354.tif 000011
（４）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含むプロセスに関する。特定のそのような実施形態では、工程（ｃ）は、活性化試薬およびペプチド結合試薬の存在下で行われる。特定のそのような実施形態では、活性化試薬は、ＨＯＢｔである。特定のそのような実施形態では、活性化試薬は、
【化１０】
2021500354.tif 000012
に対して、約０．０５〜１．０モル当量で存在する。いくつかの実施形態では、ペプチド結合試薬は、ＥＤＡＣまたはＰｙＢＯＰである。特定のそのような実施形態では、ペプチド結合試薬は、
【化１１】
2021500354.tif 000013
に対して、約１．０〜１．４モル当量で存在する。
【００１５】
いくつかの実施形態では、工程（ｃ）は、酸性条件で行われる。特定のそのような実施形態では、酸性条件は、ｐＨ約４〜７である。特定のそのような実施形態では、酸性条件は、ｐＨ約５である。
【００１６】
本開示の一態様は、式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製することをさらに含むプロセスに関する。いくつかの実施形態では、該プロセスは、式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することをさらに含む。
【００１７】
本開示の別の態様は、（ｄ）式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させて、式（５）の化合物：
【化１２】
2021500354.tif 000014
（５）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含むプロセスに関する。特定のそのような実施形態では、Ｂｏｃ保護基試薬は、Ｂｏｃ２Ｏである。いくつかの実施形態では、工程（ｄ）は、アルコールの存在下で行われる。特定のそのような実施形態では、アルコールは、メタノールである。いくつかの実施形態では、工程（ｄ）は、最大約６０℃の温度で行われる。
【００１８】
本開示の一態様は、（ｅ）式（５）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、ＰＮＺ脱保護試薬と接触させて、式（６）の化合物：
【化１３】
2021500354.tif 000015
（６）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含むプロセスに関する。特定のそのような実施形態では、ＰＮＺ脱保護試薬は、亜ジチオン酸ナトリウムである。
【００１９】
本開示の別の態様は、式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製することをさらに含むプロセスに関する。いくつかの実施形態では、該プロセスは、式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することをさらに含む。
【００２０】
いくつかの実施形態では、該プロセスは、（ｆ）式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化１４】
2021500354.tif 000016
（式中、ＬＧ１は、離脱基である）と接触させて、式（７）の化合物：
【化１５】
2021500354.tif 000017
（７）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む。特定のそのような実施形態では、離脱基は、ヨードである。いくつかの実施形態では、
【化１６】
2021500354.tif 000018
は、式（６）の化合物に対して、約１．０〜１．５モル当量で存在する。いくつかの実施形態では、工程（ｆ）は、実質的に水を含まない条件で行われる。特定の実施形態では、工程（ｆ）は、アセトニトリル、アセトン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される溶媒の存在下で行われる。いくつかの実施形態では、工程（ｆ）は、ＮａＨＣＯ３の存在下で行われる。特定の実施形態では、工程（ｆ）は、約３０℃〜４０℃の温度で行われる。いくつかの実施形態では、工程（ｆ）は、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）を反応混合物に添加することをさらに含む。
【００２１】
本開示の一態様は、式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製することをさらに含むプロセスに関する。本開示の別の態様は、式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することをさらに含むプロセスに関する。
【００２２】
本開示の別の態様は、（ｇ）式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ除去試薬と接触させて、式（８）の化合物：
【化１７】
2021500354.tif 000019
（８）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含むプロセスに関する。工程（ｇ）のいくつかの実施形態では、Ｂｏｃ除去試薬はＴＦＡであり、それにより、式（８）の化合物のＴＦＡ塩またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得る。いくつかの実施形態では、該プロセスは、ＴＦＡ塩を除去して、式（８）の化合物、またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む。
【００２３】
本開示の一態様は、（ｈ）酸で塩形成を行い、式（８）の化合物の塩またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含むプロセスに関する。いくつかの実施形態では、工程（ｈ）における酸は、硫酸であり、それにより、式（９）の化合物の硫酸塩：
【化１８】
2021500354.tif 000020
またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得る（式中、ｘは１〜５である）。
【００２４】
以下または前述のいずれかのいくつかの実施形態では、式（１）〜（３）中の炭素原子１、３、４、５、６、１’、２’、１”、２”、３”、および４”における立体化学は、式（Ｘ）のように示され、式中、
【化１９】
2021500354.tif 000021
は、水素または部分への結合点を示す：
【化２０】
2021500354.tif 000022
（Ｘ）。
【００２５】
以下または前述のいずれかのいくつかの実施形態では、式（４）〜（９）中の炭素原子１、３、４、５、６、１’、２’、１”、２”、３”、４”、および１−ｚにおける立体化学は、式（Ｙ）のように示され、式中、
【化２１】
2021500354.tif 000023
は、水素または部分への結合点を示す：
【化２２】
2021500354.tif 000024
（Ｙ）。
【００２６】
本開示の一態様は、式（５）の化合物：
【化２３】
2021500354.tif 000025
（５）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを調製するためのプロセスであって、該プロセスが、（ａ）式（４）の化合物：
【化２４】
2021500354.tif 000026
（４）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させることを含み、式中、
【化２５】
2021500354.tif 000027
は、単結合または二重結合である、プロセスに関する。いくつかの実施形態では、式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーは、式（３）の化合物：
【化２６】
2021500354.tif 000028
（３）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化２７】
2021500354.tif 000029
と接触させることによって調製される。
【００２７】
他の実施形態では、式（３）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーは、（ｂ１）式（２ａ）の化合物：
【化２８】
2021500354.tif 000030
（２ａ）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させるか、あるいは（ｂ２）式（２）の化合物：
【化２９】
2021500354.tif 000031
（２）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー中のＣ１〜Ｃ３アルキルを除去し（式中、Ｒ１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ｒ２は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ｒ３は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ｒ１、Ｒ２、またはＲ３のうちの１つ以上は、独立して、Ｃ１〜Ｃ３アルキルである）、次いで、式（２）の化合物をＢｏｃ保護基試薬と接触させることによって調製される。
【００２８】
いくつかの実施形態では、式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーは、式（１）の化合物：
【化３０】
2021500354.tif 000032
（１）
またはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、１−｛［（ｐ−ニトロベンジル）オキシ］カルボニル｝−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＰＮＺ−Ｂｔ）と接触させることによって調製される。特定の実施形態では、工程（ａ）、（ｂ１）、または（ｂ２）におけるＢｏｃ保護基試薬は、Ｂｏｃ２Ｏである。いくつかの実施形態では、工程（ａ）、（ｂ１）、または（ｂ２）は、アルコールの存在下で行われる。特定のそのような実施形態では、アルコールは、メタノールである。いくつかの実施形態では、工程（ａ）、（ｂ１）、または（ｂ２）は、最大約６０℃の温度で行われる。
【００２９】
本開示の一態様は、式（７）の化合物：
【化３１】
2021500354.tif 000033
（７）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを調製するためのプロセスであって、該プロセスが、（ｆ）式（６）の化合物、
【化３２】
2021500354.tif 000034
（６）またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化３３】
2021500354.tif 000035
と接触させることを含み、式中、ＬＧ１は、脱離基であり、
【化３４】
2021500354.tif 000036
は、単結合または二重結合である、プロセスに関する。特定のそのような実施形態では、離脱基は、ヨードである。いくつかの実施形態では、
【化３５】
2021500354.tif 000037
は、式（６）の化合物に対して、約１．０〜１．５モル当量で存在する。いくつかの実施形態では、工程（ｆ）は、実質的に水を含まない条件で行われる。特定の実施形態では、工程（ｆ）は、アセトニトリル、アセトン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される溶媒の存在下で行われる。いくつかの実施形態では、工程（ｆ）は、ＮａＨＣＯ３の存在下で行われる。いくつかの実施形態では、工程（ｆ）は、約３０℃〜４０℃の温度で行われる。いくつかの実施形態では、工程（ｆ）は、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）を反応混合物に添加することをさらに含む。
【００３０】
本開示の別の態様は、式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、式（５）の化合物：
【化３６】
2021500354.tif 000038
（５）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、ＰＮＺ脱保護試薬と接触させることによって調製されるプロセスに関する。
【００３１】
本開示の一態様は、式（４）の化合物：
【化３７】
2021500354.tif 000039
（４）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーに関する。特定のそのような実施形態では、式（４）の化合物は、以下の式：
【化３８】
2021500354.tif 000040
（４ａ）、
またはその塩もしくはその溶媒和物である。
【００３２】
本開示の別の態様は、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）カルバメート、式（４ａ）、またはその溶媒和物に関する。
【００３３】
本開示の一態様は、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）カルバメート、式（４ａ）、またはその溶媒和物を調製するためのプロセスであって、
（ａ）式（４ａ）またはその塩もしくはその溶媒和物をアセトニトリルで処理して溶液を生成することと、
（ｂ）工程（ａ）からの溶液を加熱することと、
（ｃ）工程（ｂ）の加熱溶液に水を添加することと、
（ｄ）工程（ｃ）からの溶液を冷却することと、
（ｅ）工程（ｄ）からの溶液に種結晶を充填することと、
（ｆ）得られた固体を単離して、結晶性の式（４ａ）またはその溶媒和物を得ることと、を含むプロセスに関する。
【００３４】
本開示の別の態様は、結晶性（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、またはその溶媒和物に関する。
【００３５】
本開示の一態様は、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、またはその溶媒和物を調製するためのプロセスであって、
（ａ）式（６）またはその塩もしくはその溶媒和物を酢酸イソプロピル（ＩＰＡｃ）で処理して溶液を生成することと、
（ｂ）工程（ａ）の溶液に水を添加して混合物を生成することと、
（ｃ）工程（ｂ）からの混合物にジクロロメタンを添加して混合物を生成することと、
（ｄ）工程（ｃ）からの混合物に種結晶を充填することと、
（ｅ）得られた固体を単離して、結晶性の式（６ａ）またはその溶媒和物を得ることと、を含むプロセスに関する。
特定のそのような実施形態では、工程（ｄ）は、低温で行われる。
【００３６】
本開示の別の態様は、式（７）の化合物：
【化３９】
2021500354.tif 000041
その塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーに関する。特定のそのような実施形態では、式（７）の化合物は、式：
【化４０】
2021500354.tif 000042
（７ａ）
またはその塩もしくはその溶媒和物である。
【００３７】
本開示の一態様は、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、またはその溶媒和物に関する。
【００３８】
本開示の別の態様は、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、またはその溶媒和物を調製するためのプロセスであって、
（ａ）式（７ａ）またはその塩もしくは溶媒和物を酢酸イソプロピル（ＩＰＡｃ）で処理して溶液を生成することと、
（ｂ）工程（ａ）の溶液にアセトニトリルを添加して混合物を生成することと、
（ｃ）工程（ｂ）からの混合物に種結晶を充填することと、
（ｄ）得られた固体を単離して、結晶性の式（７ａ）またはその溶媒和物を得ることと、を含むプロセスに関する。
【００３９】
本開示の詳細は、以下の付随の説明に記載される。本明細書に記載される方法および材料と同様または同等の方法および材料を本開示の実施または試験において使用することができるが、例示的な方法および材料をここに説明する。本開示の他の特徴、目的、および利点は、本説明および特許請求の範囲から明らかであろう。本明細書および添付の特許請求の範囲では、単数形は、文脈が明らかに別段の指示をしていない限り、複数も含む。別段の定義がない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本開示が属する当業者によって一般的に理解される意味と同じ意味を有する。本明細書で引用される全ての特許および刊行物は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【００４０】
本明細書に記載の各実施形態は、単独であってもよいし、または任意の１つ以上の他の実施形態と組み合わせであってもよい。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
本開示の様々な態様は、付随の図面を参照することによって例示される。
【００４２】
【図１】化合物４ａのＸＲＰＤスペクトルを示す。
【図２】化合物４ａのＴＧＡプロファイルを示す。
【図３】化合物４ａのＤＳＣプロファイルを示す。
【図４】化合物６ａのＸＲＰＤスペクトルを示す。
【図５】化合物６ａのＴＧＡプロファイルを示す。
【図６】化合物６ａのＤＳＣプロファイルを示す。
【図７】化合物７ａのＸＲＰＤスペクトルを示す。
【図８】化合物７ａのＴＧＡプロファイルを示す。
【図９】化合物７ａのＤＳＣプロファイルを示す。
【発明を実施するための形態】
【００４３】
本開示は、抗菌性アミノグリコシド化合物を調製するための新規方法、ならびにそのような方法において有用な中間体および特定の中間体の特定の結晶形態に関する。
【００４４】
上記で説明したように、本開示は、商業規模で拡張可能であり、再現性があり、収率が良好な、硫酸プラゾマイシンを含む式（９）の化合物を調製するためのプロセスを提供する。該プロセスは、特定の新規中間化合物を提供することができる反応および条件の組み合わせを含む。該プロセスはまた、特定の実施形態では、特定の中間体の結晶化も含み、該結晶化は、驚くべきことに、精製プロセス（例えば、不純物を除去し、それにより、不純物レベルを低下させることによる）を助け、したがって、従来の精製プロセスと比較してより容易な精製を提供する。
【００４５】
一態様では、本開示は、式（２）の化合物：
【化４１】
2021500354.tif 000043
（２）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー（式中、
【化４２】
2021500354.tif 000044
は、単結合または二重結合であり、Ｒ１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ｒ２は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ｒ３は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルである）を調製するためのプロセスに関する。
【００４６】
別の態様では、本開示は、式（３）の化合物：
【化４３】
2021500354.tif 000045
（３）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー（式中、
【化４４】
2021500354.tif 000046
は、単結合または二重結合である）を調製するためのプロセスに関する。
【００４７】
一態様では、本開示は、式（４）の化合物：
【化４５】
2021500354.tif 000047
（４）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー（式中、
【化４６】
2021500354.tif 000048
は、単結合または二重結合である）を調製するためのプロセスに関する。
【００４８】
別の態様では、本開示は、式（５）の化合物：
【化４７】
2021500354.tif 000049
（５）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー（式中、
【化４８】
2021500354.tif 000050
は、単結合または二重結合である）を調製するためのプロセスに関する。
【００４９】
一態様では、本開示は、式（６）の化合物：
【化４９】
2021500354.tif 000051
（６）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー（式中、
【化５０】
2021500354.tif 000052
は、単結合または二重結合である）を調製するためのプロセスに関する。
【００５０】
別の態様では、本開示は、式（７）の化合物：
【化５１】
2021500354.tif 000053
（７）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー（式中、
【化５２】
2021500354.tif 000054
は、単結合または二重結合である）を調製するためのプロセスに関する。
【００５１】
いくつかの態様では、本開示は、式（８）の化合物：
【化５３】
2021500354.tif 000055
（８）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー（式中、
【化５４】
2021500354.tif 000056
は、単結合または二重結合である）を調製するためのプロセスに関する。
【００５２】
別の態様では、本開示は、式（９）の化合物の硫酸塩：
【化５５】
2021500354.tif 000057
またはその溶媒和物またはそのエナンチオマーまたはそのジアステレオマー（式中、ｘは、１〜５であり、
【化５６】
2021500354.tif 000058
は、単結合または二重結合である）を調製するためのプロセスに関する。
【００５３】
いくつかの実施形態では、式（１）〜（３）中の炭素原子１、３、４、５、６、１’、２’、１”、２”、３”、および４”における立体化学は、式（Ｘ）のように示され、式中、
【化５７】
2021500354.tif 000059
は、水素または部分への結合点を示す：
【化５８】
2021500354.tif 000060
（Ｘ）。
【００５４】
いくつかの実施形態では、式（４）〜（９）中の炭素原子１、３、４、５、６、１’、２’、１”、２”、３”、４”、および１−ｚにおける立体化学は、式（Ｙ）のように示され、式中、
【化５９】
2021500354.tif 000061
は、水素または部分への結合点を示す：
【化６０】
2021500354.tif 000062
（Ｙ）。
【００５５】
一態様では、本開示は、式（４）の化合物：
【化６１】
2021500354.tif 000063
（４）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーに関する。
【００５６】
いくつかの実施形態では、式（４）の化合物：
【化６２】
2021500354.tif 000064
（４ａ）
またはその塩もしくはその溶媒和物である。
【００５７】
いくつかの実施形態では、本開示はまた、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）カルバメート、式（４ａ）、またはその溶媒和物に関する。
【００５８】
いくつかの実施形態では、本開示はまた、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）：
【化６３】
2021500354.tif 000065
（６ａ）
またはその溶媒和物に関する。
【００５９】
一態様では、本開示は、式（７）の化合物：
【化６４】
2021500354.tif 000066
その塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーに関する。
【００６０】
いくつかの実施形態では、式（７）の化合物は、式：
【化６５】
2021500354.tif 000067
（７ａ）
またはその塩もしくはその溶媒和物である。
【００６１】
いくつかの実施形態では、本開示は、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、またはその溶媒和物に関する。
【００６２】
用語および略語
本開示で使用される「ａ」および「ａｎ」という冠詞は、冠詞の文法的主語のうちの１つまたは２つ以上（すなわち、少なくとも１つ）を指し得る。例には、「要素」は、１つの要素または２つ以上の要素を意味する。
【００６３】
本開示で使用される場合、「および／または」は、別段で指示がない限り、「および」または「または」のいずれかを意味し得る。
【００６４】
本明細書で使用される場合、
【化６６】
2021500354.tif 000068
は、単結合または二重結合を指し得る。
【００６５】
「アルキル」は、直鎖または分枝鎖飽和炭化水素を指し得る。Ｃ１〜Ｃ３アルキル基は、１〜３個の炭素原子を含む。Ｃ１〜Ｃ３アルキル基の例には、メチル、エチル、およびプロピルが含まれるが、これらに限定されない。
【００６６】
「Ｂｏｃ保護基試薬」は、アミン基にＢｏｃ保護基を取り付けるために使用され得る試薬を指し得る。Ｂｏｃ保護基試薬の例には、Ｂｏｃ無水物（Ｂｏｃ２Ｏ）、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルイミダゾール、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシイミノ）−２−フェニルアセトニトリル、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルチオ）−４，６−ジメチルピリミジン、１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，２，４−トリアゾール、ｔｅｒｔ−ブチルフェニルカーボネート、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシ）フタルイミド、ｔｅｒｔ−ブチル２，４，５−トリクロロフェニルカーボネート、およびｔｅｒｔ−ブチル（（４Ｒ，７Ｓ）−１，３−ジオキソ−１，３，３ａ，４，７，７ａ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−４，７−メタノイソインドール−２−イル）カーボネート（Ｂｏｃ−ＯＮｂ）が含まれるが、これらに限定されない。
【００６７】
「Ｂｏｃ除去試薬」は、アミン基上のＢｏｃ保護基を切断するために使用され得る試薬を指し得る。Ｂｏｃ除去試薬の例には、ＴＦＡ、リン酸水溶液、メタンスルホン酸（ＭＳＡまたはＭｓＯＨ）、ＳｎＣｌ４、ＨＣｌ／ジオキサン、およびＨＣｌ／ＭｅＯＨが含まれるが、これらに限定されない。Ｂｏｃ除去試薬のさらなる例には、ＨＣｌ、Ｈ２ＳＯ４、およびＰＴＳＡ（ｐ−トルエンスルホン酸またはトシル酸）が含まれる。
【００６８】
「ルイス酸」は、ドナー化合物から電子対を受け取り得る化合物またはイオン種を指し得る。ルイス酸の例には、Ｚｎ（ＯＡｃ）２、ＺｎＣｌ２、Ｚｎ（ＯＰｉｖ）２が含まれるが、これらに限定されない。さらに、銅およびニッケル陽イオンなどの他の金属陽イオンは、ルイス酸として作用し得る。
【００６９】
「ＰＮＺ保護基試薬」は、アミン基にｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル保護基を取り付けるために使用され得る試薬を指し得る。ＰＮＺ保護基試薬の例には、１−｛［（ｐ−ニトロベンジル）オキシ］カルボニル｝−１Ｈ−ベンゾトリアゾールおよび４−ニトロベンジル１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−カルボキシレートが含まれるが、これらに限定されない。
【００７０】
「１−｛［（ｐ−ニトロベンジル）オキシ］カルボニル｝−１Ｈ−ベンゾトリアゾール」または「ＰＮＺ−Ｂｔ」という用語は、下記の式を指し得る。
【化６７】
2021500354.tif 000069
【００７１】
「４−ニトロベンジル１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−カルボキシレート」という用語は、下記の式を指し得る。
【化６８】
2021500354.tif 000070
【００７２】
「ＰＮＺ脱保護試薬」は、アミン基上のｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル保護基を切断するために使用され得る試薬を指し得る。ＰＮＺ脱保護剤の例には、亜ジチオン酸ナトリウム、およびＨ２およびＰｄ／ＣまたはＰｔＯ２による水素化が含まれるが、これらに限定されない。
【００７３】
本明細書で使用される「保護基」という用語は、合成手順中に望ましくない反応からヒドロキシル基およびアミノ基を含むがこれらに限定されない反応性基を保護するための、当該技術分野で既知である不安定な化学部分を指し得る。保護基で保護されたヒドロキシル基およびアミノ基は、本明細書においてそれぞれ「保護されたヒドロキシル基」および「保護されたアミノ基」と称される。保護基は、典型的には、他の反応性部位における反応中に部位を保護し、次いで、除去して、元のままの保護されていない基とするかまたはさらなる反応のために利用可能であるようにするために、選択的かつ／または直交的に使用することができる。当該技術分野で既知の保護基は、一般に、Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第３版，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９９）に記載される。基は、前駆体として本明細書に記載のアミノグリコシドに選択的に組み込まれ得る。例えば、アミノ基は、合成における所望の点でアミノ基に化学的に変換され得るアジド基として本明細書に記載の化合物に配置され得る。一般に、基は、適切なときに最終基に変換するために、親分子の他の領域を修飾する反応に対して不活性である前駆体として保護されるかまたは存在する。さらに、代表的な保護基または前駆体基は、Ａｇｒａｗａｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｆｏｒ  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ，Ｅｄｓ，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ；Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ，１９９４；Ｖｏｌ．２６  ｐｐ．１−７２で説明されている。「ヒドロキシル保護基」の例には、ｔ−ブチル、ｔ−ブトキシメチル、メトキシメチル、テトラヒドロピラニル、１−エトキシエチル、１−（２−クロロエトキシ）エチル、２−トリメチルシリルエチル、ｐ−クロロフェニル、２，４−ジニトロフェニル、ベンジル、２，６−ジクロロベンジル、ジフェニルメチル、ｐ−ニトロベンジル、トリフェニルメチル、トリメチルシリル、トリエチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル（ＴＢＤＰＳ）、トリフェニルシリル、ベンゾイルフォルメート、アセテート、クロロアセテート、トリクロロアセテート、トリフルオロアセテート、ピバレート、ベンゾエート、ｐ−フェニルベンゾエート、９−フルオレニルメチルカーボネート、メシレート、およびトシレートが含まれるが、これらに限定されない。「アミノ保護基」の例には、２−トリメチルシリルエトキシカルボニル（Ｔｅｏｃ）、１−メチル−１−（４−ビフェニリル）エトキシカルボニル（Ｂｐｏｃ）、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、アリルオキシカルボニル（Ａｌｌｏｃ）、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル（ＰＮＺ）、ホルミル、アセチル、トリハロアセチル（例えば、トリフルオロアセチル）、ベンゾイル、ニトロフェニルアセチル、２ニトロベンゼンスルホニル、フタルイミド、およびジチアスクシノイルが含まれるが、これらに限定されない。
【００７４】
式（９）の化合物およびその中間体の調製：
本開示は、以下の構造を有する式（９）の化合物：
【化６９】
2021500354.tif 000071
またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー（式中、
【化７０】
2021500354.tif 000072
は、単結合または二重結合であり、ｘは、１〜５である）の合成のためのプロセス、方法、試薬、および中間体を含む。
【００７５】
いくつかの実施形態では、式（９）の化合物は、以下の構造を有する硫酸プラゾマイシン：
【化７１】
2021500354.tif 000073
またはその溶媒和物であり、式中、ｘは、１〜５である。
【００７６】
硫酸プラゾマイシンは、（２”Ｒ，３”Ｒ，４”Ｒ，５”Ｒ）−２”−［（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−アミノ−６−［（２’”Ｓ）−４’”−アミノ−２’”−ヒドロキシブタンアミド）アミノ］−３−［（２’Ｓ，３’Ｒ）−３’−アミノ−６’−（（２−ヒドロキシエチルアミノ）メチル）−３’，４’−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２’−イルオキシ］−２−ヒドロキシシクロヘキシルオキシ］−５”−メチル−４”−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３”，５”−ジオール硫酸塩とも称され得る。プラゾマイシンは、
６’−（ヒドロキシルエチル）−１−（ＨＡＢＡ）−シソマイシン；
６’−（２−ヒドロキシ−エチル）−１−（４−アミノ−２（Ｓ）−ヒドロキシ−ブチリル）−シソマイシン；
（２Ｓ）−４−アミノ−Ｎ−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−５−アミノ−４−［［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−６−［（２−ヒドロキシエチルアミノ）メチル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ］−２−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）オキサン−２−イル］オキシ−３−ヒドロキシシクロヘキシル］−２−ヒドロキシブタンアミド；
ブタンアミド、４−アミノ−Ｎ−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−５−アミノ−４−［［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−３，４−ジヒドロ−６−［［（２−ヒドロキシエチル）アミノ］メチル］−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ］−２−［［３−デオキシ−４−Ｃ−メチル−３−（メチルアミノ）−β−Ｌ−アラビノピラノシル］オキシ］−３−ヒドロキシシクロヘキシル］−２−ヒドロキシ−、（２Ｓ）−；
Ｄ−ストレプタミン、Ｏ−２−アミノ−２，３，４，６−テトラデオキシ−６−［（２−ヒドロキシエチル）アミノ］−ａ−Ｄ−グリセロ−ヘキセ−４−エノピラノシル−（１→４）−Ｏ−［３−デオキシ−４−Ｃ−メチル−３−（メチルアミノ）−ｂ−Ｌ−アラビノピラノシル−（１→６）］−Ｎ１−［（２Ｓ）−４−アミノ−２−ヒドロキシ−１−オキソブチル］−２−デオキシ−；
Ｏ−２−アミノ−２，３，４，６−テトラデオキシ−６−［（２−ヒドロキシエチル）アミノ］−ａ−Ｄ−グリセロ−ヘキセ−４−エノピラノシル−（１→４）−Ｏ−［３−デオキシ−４−Ｃ−メチル−３−（メチルアミノ）−ｂ−Ｌ−アラビノピラノシル−（１→６）］−Ｎ１−［（２Ｓ）−４−アミノ−２−ヒドロキシ−１−オキソブチル］−２−デオキシ−Ｄ−ストレプタミン；および
（２Ｓ）−４−アミノ−Ｎ−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−５−アミノ−４−｛［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−６−｛［（２−ヒドロキシエチル）アミノ］メチル｝−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−２−｛［３−デオキシ−４−Ｃ−メチル−３−（メチルアミノ）−β−Ｌ−アラビノピラノシル］オキシ｝−３−ヒドロキシシクロヘキシル］−２−ヒドロキシブタンアミドとも称され得る。
【００７７】
プラゾマイシンの慣用的な原子番号付けを以下に示す。
【化７２】
2021500354.tif 000074
．
【００７８】
式（９）の化合物および式（９）の化合物の調製で得られる特定の中間体の調製プロセスは、以下のスキーム１に例示され、本明細書でより詳細に説明される。
スキーム１
【化７３】
2021500354.tif 000075
【００７９】
上述したように、本開示は、商業的な量にまで拡張可能であるだけでなく、そのような商業的規模においてバッチ間で確実に再現可能でもあり、かつ収率も良好である、硫酸プラゾマイシンを含む式（９）の化合物を調製するためのプロセスを提供する。したがって、本明細書に記載の合成方法および精製プロセスは、式（９）の化合物およびその中間体を調製するための拡張可能でありかつ経済的に有利なプロセスを概説し、該プロセスは、調製中に高価なおよび／または精緻な工程に依存せず、したがって、この方法は特に抗生物質の大規模な生産に適している。
【００８０】
該プロセスは、反応条件と工程の組み合わせにより新規中間化合物を得ることができる反応を含む。例えば、６’−Ｎ位の選択的官能化が課題であった。しかしながら、本開示に記載されるように、本明細書に記載の式（６）の化合物と式（７）の化合物との反応により、予想外にもモノアルキル化生成物が得られたが、通常の状況では、そのような反応は過剰アルキル化をもたらすことが予想される。
【００８１】
該プロセスはまた、特定の中間体の結晶化を含み得る。本明細書に記載されるように、特定の中間体の結晶化は、精製プロセス（例えば、不純物を低減する）を助け、従来の精製プロセスと比較して精製プロセスを簡素化する。例えば、従来の精製プロセスでは、より悪い純度および／または特性の単離化合物を提供し得る沈殿を含んだ。沈殿工程はまた、収率を低下させ、不純物レベルのバッチ間の変動をより高くし得る。本明細書に記載するように、結晶化は、不純物を除去するために作用することができる。さらに、最初に適切な結晶化条件を決定するには大きな努力が必要であるが、結晶化条件が決定されると、プロセスは簡単で再現可能である。例えば、結晶試料は、その後の結晶化の種結晶として使用するために、前のラウンドの結晶化から回収することができる。以下に説明するように、式（４）、（６）、および（７）の化合物は結晶化することができる。
【００８２】
本明細書に記載の化合物および化合物の製造プロセスは、本明細書に記載の化合物の塩を含み得る。代表的な塩には、例えば、水溶性および非水溶性塩、例えば、酢酸塩、アムソネート（４，４−ジアミノスチルベン−２，２−ジスルホン酸塩）、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、酪酸塩、カルシウム、エデト酸カルシウム、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クエン酸塩、クラブラン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストル酸塩（ｅｓｔｏｌａｔｅ）、エシル酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩（ｇｌｕｃｅｐｔａｔｅ）、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩（ｇｌｙｃｏｌｌｙｌａｒｓａｎｉｌａｔｅ）、ヘキサフルオロリン酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、セチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸、ラウリン酸塩、マグネシウム、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、臭化メチル酸塩、メチル硝酸塩、メチル硫酸塩、ムチン酸塩、ナプシル酸塩（ｎａｐｓｙｌａｔｅ）、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミンアンモニウム塩、３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩（１，１−メテン−ビス−２−ヒドロキシ−３−ナフトエ酸塩、エインボネート（ｅｉｎｂｏｎａｔｅ）、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ピクリン酸塩、ポリガラクツロ酸塩、プロピオン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、スルホサリチル酸塩、スラメート、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、トリエチオジ、および吉草酸塩が含まれるが、これらに限定されない。
【００８３】
塩はまた、酸付加塩を含み得る。「酸付加塩」は、遊離塩基の生物学的有効性および特性を保持し、かつ、生物学的にまたはその他望ましくないものではなく、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などが含まれるがこれらに限定されない無機酸、および酢酸、２，２−ジクロロ酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、４−アセトアミド安息香酸、樟脳酸、カンファー−１０−スルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、炭酸、ケイ皮酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデシル硫酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチジン酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、２−オキソ−グルタル酸、グリセロリン酸、グリコール酸、馬尿酸、イソ酪酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、ナフタレン−ｌ、５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ｌ−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、ニコチン酸、オレイン酸、オロト酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、プロピオン酸、ピログルタミン酸、ピルビン酸、サリチル酸、４−アミノサルチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、酒石酸、チオシアン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、ウンデシレン酸などが含まれるがこれらに限定されない有機酸で形成される塩を指し得る。
【００８４】
本明細書に記載の化合物および化合物の製造プロセスは、本明細書に記載の化合物の溶媒和物を含み得る。「溶媒和物」という用語は、溶質および溶媒によって形成される、変動化学量論（ｓｔｏｉｃｈｉｏｍｅｔｒｙ）の複合体を指し得る。本開示の目的のためのそのような溶媒は、溶質の生物活性を妨ぎ得ない。好適な溶媒の例には、水、ＭｅＯＨ、ＥｔＯＨ、およびＡｃＯＨが含まれ得るが、これらに限定されない。水が溶媒分子である溶媒和物は、典型的には水和物と称される。水和物は、化学量論量の水を含む組成物および変動量の水を含む組成物を含み得る。
【００８５】
当業者は、本明細書に記載の化合物のうちのいずれかに立体中心が存在するかどうか、および化合物の製造プロセスを認識するであろう。したがって、本開示は、（立体化学が本明細書で特定されていない限り）可能な立体異性体の両方を含み、ラセミ化合物だけでなく、個々のエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーも含む。さらに、当業者は、本明細書に記載の化合物について位置異性体または幾何異性体が存在するかどうかを認識するであろう。したがって、本開示は、（異性体が本明細書で特定されていない限り）全ての可能な位置異性体または幾何異性体を含む。本明細書に示される構造において、任意の特定のキラル原子の立体化学が特定されていないか、または幾何学的もしくは位置異性体が特定されていない場合、全ての立体異性体および幾何学的もしくは位置異性体が企図され、本明細書に記載の化合物および化合物の製造プロセスに含まれる。立体化学または幾何学的もしくは位置異性体が特定されている場合、その立体化学または幾何学的もしくは位置異性体がそのように特定および定義される。
【００８６】
「立体異性体」という用語は、同じ数および種類の原子を有し、それらの原子間で同じ結合接続を共有するが、３次元構造において異なる化合物セットを指し得る。「立体異性体」という用語は、この化合物セットの任意のメンバーを指し得る。例えば、立体異性体は、エナンチオマーまたはジアステレオマーであり得る。本明細書に記載の化合物および化合物の製造プロセスは、立体異性体を含み得る。
【００８７】
「エナンチオマー」という用語は、互いに重ね合わせることができない鏡像である立体異性体の対を指し得る。「エナンチオマー」という用語は、この立体異性体の対の単一のメンバーを指し得る。「ラセミ」という用語は、エナンチオマーの対の１：１混合物を指し得る。本明細書に記載の化合物および化合物の製造プロセスは、エナンチオマーを含み得る。本明細書に開示される各化合物は、（エナンチオマーが本明細書で特定されていない限り）化合物の一般構造に適合する全てのエナンチオマーを含み得る。化合物は、（立体化学が本明細書で特定されていない限り）ラセミ形態もしくはエナンチオマー的に純粋な形態または立体化学に関する任意の他の形態であり得る。いくつかの実施形態では、化合物は、（Ｓ）−エナンチオマーである。他の実施形態では、化合物は、（Ｒ）−エナンチオマーである。さらに他の実施形態では、化合物は、（＋）または（−）エナンチオマーである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、本明細書に記載の化合物の主に１つのエナンチオマーを提供するように豊富化させ得る。エナンチオマー的に豊富な（ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｉｃａｌｌｙ  ｅｎｒｉｃｈｅｄ）混合物は、例えば、少なくとも６０ｍｏｌパーセント、またはより好ましくは少なくとも７５、８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、９９、９９．５、もしくはさらに１００ｍｏｌパーセントの一方のエナンチオマーを含み得る。いくつかの実施形態では、一方のエナンチオマーが豊富な本明細書に記載の化合物は、他方のエナンチオマーが実質的になくてもよく、ここで、実質的にないとは、問題となっている物質が、例えば化合物混合物中で他方のエナンチオマーの量と比較して、１０％未満、もしくは５％未満、もしくは４％未満、もしくは３％未満、もしくは２％未満、もしくは１％未満を構成することを意味する。例えば、化合物混合物が９８  ｇの第１のエナンチオマーおよび２ｇの第２のエナンチオマーを含む場合、９８ｍｏｌ％の第１のエナンチオマーのおよび２ｍｏｌ％のみの第２のエナンチオマーを含むと言うであろう。
【００８８】
「ジアステレオマー」という用語は、単結合の周りの回転によって重ね合わせることができない立体異性体のセットを指し得る。例えば、シスおよびトランス二重結合、二環系でのエンドおよびエキソ置換、ならびに異なる相対配置を有する複数の立体幾何中心を含む化合物は、ジアステレオマーであるとみなす。「ジアステレオマー」との用語は、この化合物セットの任意のメンバーを指し得る。提示されるいくつかの例では、合成経路により、単一のジアステレオマーまたはジアステレオマーの混合物を生成し得る。本明細書に記載の化合物および化合物の製造プロセスは、ジアステレオマーを含み得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、本明細書に開示される化合物の主に１つのジアステレオマーを提供するように豊富化され得る。ジアステレオマー的に豊富な混合物は、例えば、少なくとも６０ｍｏｌパーセント、またはより好ましくは、少なくとも７５、９９、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００ｍｏｌパーセントの一方のジアステレオマーを含み得る。
【００８９】
さらに、本明細書に記載の化合物および化合物の製造プロセスは、全ての幾何異性体および位置異性体を含む。例えば、本明細書に記載の化合物が二重結合または縮合環を組み込む場合、シス形態およびトランス形態の両方ならびに混合物が本開示の範囲内に包含され得る。化合物が二重結合を含む場合、置換基は、（本明細書で配置が特定されていない限り）ＥまたはＺ配置であり得る。化合物が二置換シクロアルキルを含む場合、シクロアルキル置換基は、（配置が本明細書で特定されていない限り）シスまたはトランス配置を有し得る。
【００９０】
本明細書に記載の化合物は、全ての同位体標識化合物をさらに含み得る。「同位体」または「放射標識」化合物は、１つ以上の原子が、典型的に天然に見られる（すなわち、天然に存在する）原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を有する原子によって置き換えられたまたは置換された化合物である。例えば、いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物において、水素原子は、１つ以上の重水素または三重水素によって置き換えられまたは置換され得る。本開示の特定の同位体標識化合物、例えば、放射性同位体を組み込んだ化合物は、薬剤および／または基質組織分布研究において有用であり得る。放射性同位体三重水素、すなわち３Ｈ、および炭素１４、すなわち１４Ｃは、それらの組み込みの容易性および既存の検出手段に照らして、この目的に特に有用である。重水素などのより重い同位体、すなわち、２Ｈでの置換は、より大きな代謝安定性、例えば、インビボ半減期の増加または投与量要件の低減に起因する特定の治療上の利点を提供し得、したがって、いくつかの状況で好ましいものであり得る。本明細書に記載の化合物に組み込まれ得る好適な同位体には、２Ｈ（重水素についてはＤとしても記載されている）、３Ｈ（三重水素についてはＴとしても記載されている）、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１３Ｎ、１５Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ、１８Ｆ、３５Ｓ、３６Ｃｌ、８２Ｂｒ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ、７７Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、および１３１Ｉが含まれるが、これらに限定されない。陽電子放出同位体、例えば１１Ｃ、１８Ｆ、１５Ｏ、および１３Ｎでの置換は、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）研究において有用であり得る。
【００９１】
本明細書に記載の式のいずれかの化合物は、本明細書に提供されるガイダンスと併せて、以下の合成スキームおよび実施例によって部分的に記載される有機合成の当該技術分野で既知の方法によって調製され得る。以下に記載されるスキームでは、感受性基または反応性基に対する保護基が、一般原理または本明細書に提供されるガイダンスに従う化学に従って必要に応じて使用され得ることを理解されたい。保護基は、有機合成の標準的な方法（Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」，  第３版，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  １９９９）に従って操作され得る。これらの基は、本明細書に提供される詳細な教示に基づいて、当業者には容易に明白である方法を用いて、化合物合成の都合の良い工程で除去され得る。選択プロセスならびに反応条件およびそれらの実行順序は、本開示と一致するものである。
【００９２】
以下のスキーム２〜５はまた、式（９）の化合物およびその中間体の合成を例示する。
スキーム２：式（４）の化合物の合成
【化７４】
2021500354.tif 000076
【００９３】
スキーム２は、式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの合成を示す。スキーム２では、Ｒ１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ｒ２は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ｒ３は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、
【化７５】
2021500354.tif 000077
は、単結合または二重結合である。
【００９４】
式（２）の化合物の合成
スキーム２を続けて参照すると、いくつかの実施形態では、スキーム２に詳述される反応は、最大約６０℃の温度で行われる。式（１）の化合物、またはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、ＰＮＺ保護基試薬と接触させて、式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを形成し得る。いくつかの実施形態では、ＰＮＺ保護基試薬は、１−｛［（ｐ−ニトロベンジル）オキシ］カルボニル｝−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＰＮＺ−Ｂｔ）および４−ニトロベンジル１Ｈ−ベンゾー［ｄ］イミダゾール−１−カルボキシレートから選択される。いくつかの実施形態では、ＰＮＺ保護基試薬は、ＰＮＺ−Ｂｔである。
【００９５】
特定のそのような実施形態では、ＰＮＺ保護基試薬は、式（１）の化合物またはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーに対して、約１．０〜１．２モル当量で反応中に存在し得る。いくつかの実施形態では、式（１）の化合物またはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーとＰＮＺ保護基試薬との間の反応は、ジクロロメタン、アルコール、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される溶媒の存在下で行われ得る。特定のそのような実施形態では、アルコールは、メタノールである。メタノールの存在は、Ｒ１、Ｒ２、および／またはＲ３がＨである場合、反応の選択性を増加させ得る。他の実施形態では、式（１）の化合物またはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーとＰＮＺ保護基試薬との間の反応は、ジクロロメタン、エタノール、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される溶媒の存在下で行われ得る。
【００９６】
いくつかの実施形態では、式（２）の化合物は、実質的に精製することなく、次の反応において使用することができる。
【００９７】
特定の実施形態では、式（１）の化合物またはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー中のＲ１、Ｒ２、およびＲ３はＨである。特定のそのような実施形態では、式（２）の化合物は、式（２ａ）の化合物：
【化７６】
2021500354.tif 000078
（２ａ）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーである。特定のそのような実施形態では、
【化７７】
2021500354.tif 000079
は、二重結合である。
【００９８】
いくつかの実施形態では、ＰＮＺ保護基試薬と接触させる式（１）の化合物は、シソマイシン遊離塩基（以下に示す）であり得る
【化７８】
2021500354.tif 000080
．
特定のそのような実施形態では、式（２）の化合物は、式（２ｂ）の化合物：
【化７９】
2021500354.tif 000081
またはその塩もしくはその溶媒和物である。
【００９９】
式（３）の化合物の合成
スキーム２を続けて参照すると、式（３）の化合物：
【化８０】
2021500354.tif 000082
（３）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーは、式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーから合成され得る。特定のそのような実施形態では、
【化８１】
2021500354.tif 000083
は、二重結合である。
【０１００】
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３がＨである場合、式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）保護基試薬と接触させて、式（３）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得てもよい。他の実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、またはＲ３のうちの１つ以上が、独立して、Ｃ１〜Ｃ３アルキルである場合、１つ以上のＣ１〜Ｃ３アルキル基を除去し、式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させて、式（３）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得てもよい。
【０１０１】
いくつかの実施形態では、Ｂｏｃ保護基試薬は、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート、Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニルオキシ）−５−ノルボルネン−エンド−２，３−ジカルボキシミド、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルイミダゾール、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシイミノ）−２−フェニルアセトニトリル、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルチオ）−４，６−ジメチルピリミジン、１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，２，４−トリアゾール、ｔｅｒｔ−ブチルフェニルカーボネート、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシ）フタルイミド、またはｔｅｒｔ−ブチル２，４，５−トリクロロフェニルカーボネートである。いくつかの実施形態では、Ｂｏｃ保護基試薬は、Ｂｏｃ２Ｏ（Ｂｏｃ無水物；ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート）またはＢｏｃ−ＯＮｂ（Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニルオキシ）−５−ノルボルネン−エンド−２，３−ジカルボキシミド）である。特定のそのような実施形態では、Ｂｏｃ保護基試薬は、Ｂｏｃ２Ｏである。特定のそのような実施形態では、Ｂｏｃ保護基試薬は、Ｂｏｃ−ＯＮｂである。
【０１０２】
式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーとＢｏｃ保護基試薬との間の反応は、ルイス酸の存在下で行われ得る。特定のそのような実施形態では、ルイス酸は、Ｚｎ（ＯＡｃ）２、ＺｎＣｌ２、またはＺｎ（ＯＰｉｖ）２である。代替的に、式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーとＢｏｃ保護基試薬との間の反応はまた、銅イオンまたはニッケルイオンを含むルイス酸の存在下で行われ得る。
【０１０３】
さらに、式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーとＢｏｃ保護基試薬との間の反応は、アミンの存在下で行われ得る。いくつかの実施形態では、アミンは、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデス−７−エン（ＤＢＵ）、ピリジン、ピペリジン、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、２，６−ルチジン、ジメチルアニリン、Ｎ−メチルピリリドン、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルイミダゾール、Ｎ−エチルジメチルアミン、トリメチルアミン、またはトリエチルアミンである。いくつかの実施形態では、アミンは、トリエチルアミンである。
【０１０４】
さらに、式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーとＢｏｃ保護基試薬との間の反応は、アルコールの存在下で行われ得る。特定のそのような実施形態では、アルコールは、メタノールである。
【０１０５】
いくつかの実施形態では、式（３）の化合物は、実質的に精製することなく次の反応において使用することができる。
【０１０６】
いくつかの実施形態では、式（３）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーは、式（２ｂ）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物を、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させることによって合成した、式（３ａ）の化合物：
【化８２】
2021500354.tif 000084
またはその塩もしくはその溶媒和物であり得る。
【０１０７】
式（４）の化合物の合成
スキーム２を続けて参照すると、式（３）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化８３】
2021500354.tif 000085
と接触させて、式（４）の化合物：
【化８４】
2021500354.tif 000086
（４）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得てもよい。特定のそのような実施形態では、
【化８５】
2021500354.tif 000087
は、二重結合である。
【０１０８】
式（３）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーと
【化８６】
2021500354.tif 000088
との間の反応は、活性化試薬およびペプチド結合試薬の存在下で行われ得る。
【０１０９】
活性化試薬は、カルボン酸基のカルボニルを求核攻撃を受けやすいものに変換する試薬を指す。いくつかの実施形態では、活性化試薬は、ＨＡＴＵ、ＨＯＯＢｔ、ＨＯＳｕ、ＨＯＡｔ、ＤＭＡＰ、ＢＯＰ、ＰｙＢＯＰ、ＰｙＢｒＯＰ、ＰｙＡＯＰ、ＰｙＯｘｉｍ、ＤＥＰＢＴ、ＴＢＴＵ、ＨＢＴＵ、ＨＣＴＵ、ＨＤＭＣ、ＣＯＭＵ、ＣＤＩ、またはＨＯＢｔである。特定のそのような実施形態では、活性化試薬は、ＨＯＢｔである。いくつかの実施形態では、活性化試薬は、
【化８７】
2021500354.tif 000089
に対して、約０．０５〜１．０モル当量で存在する。
【０１１０】
いくつかの実施形態では、ペプチド結合試薬は、ＤＣＣ、ＥＤＣ、ＤＩＣ、ＷＳＣ、ＥＤＡＣ、またはＰｙＢＯＰである。いくつかの実施形態では、ペプチド結合試薬は、ＥＤＡＣまたはＰｙＢＯＰである。特定のそのような実施形態では、ペプチド結合試薬は、ＥＤＡＣである。いくつかの実施形態では、ペプチド結合試薬は、
【化８８】
2021500354.tif 000090
に対して、約１．０〜１．４モル当量で存在する。いくつかの実施形態では、ペプチド結合試薬は、
【化８９】
2021500354.tif 000091
に対して、約１．０、１．１、１．２、１．３、または１．４モル当量で存在する。
【０１１１】
式（３）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーと
【化９０】
2021500354.tif 000092
との間の反応は、酸性条件で行われ得る。特定のそのような実施形態では、酸性条件は、ｐＨ約４〜７である。特定のそのような実施形態では、酸性条件は、ｐＨ約５である。
【０１１２】
式（３）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーと
【化９１】
2021500354.tif 000093
との間の反応は、アルコールの存在下で行われ得る。特定のそのような実施形態では、アルコールは、メタノールである。
【０１１３】
式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーは、式（３ａ）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物を、
【化９２】
2021500354.tif 000094
と接触させることによって合成した、式（４ａ）の化合物
【化９３】
2021500354.tif 000095
またはその塩もしくはその溶媒和物であり得る。
【０１１４】
本開示は、式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製することを含むプロセスをさらに提供する。本開示はまた、例えば、実施例１において以下に記載されるように、式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することを含むプロセスも提供する。
【０１１５】
本明細書に記載されるように、特定の条件下での特定の結晶化工程は、不純物を除去することにより精製を助け得る。さらに、結晶化条件が確立されれば、精製の１つの手段として結晶化を使用することにより、従来の精製方法と比較して、収率が良好であることおよびバッチ間での不純物の変動が低下することの両方をもたらすことができる。
スキーム３：式（６）の化合物の合成
【化９４】
2021500354.tif 000096
【０１１６】
スキーム３は、式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの合成を示す。
【化９５】
2021500354.tif 000097
は、単結合または二重結合である。
【０１１７】
式（５）の化合物の合成
スキーム３を続けて参照すると、式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させて、式（５）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得てもよい。特定のそのような実施形態では、
【化９６】
2021500354.tif 000098
は、二重結合である。
【０１１８】
標準的なＢｏｃ保護基試薬は、この変換に使用され得、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルイミダゾール、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシイミノ）−２−フェニルアセトニトリル、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルチオ）−４，６−ジメチルピリミジン、１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，２，４−トリアゾール、ｔｅｒｔ−ブチルフェニルカーボネート、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシ）フタルイミド、ｔｅｒｔ−ブチル２，４，５−トリクロロフェニルカーボネート、Ｂｏｃ２Ｏ、およびＢｏｃ−ＯＮｂを含むがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、Ｂｏｃ保護基試薬は、Ｂｏｃ２Ｏである。
【０１１９】
いくつかの実施形態では、式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーとＢｏｃ保護基試薬との間の反応は、最大約６０℃の温度で行われ得る。いくつかの実施形態では、式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーとＢｏｃ保護基試薬との間の反応は、アルコールの存在下で行われ得る。特定のそのような実施形態では、アルコールは、メタノールまたはエタノールである。特定のそのような実施形態では、アルコールは、メタノールである。式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーとＢｏｃ保護基試薬との間の反応におけるアルコールの使用は、次の反応で用いるテレスコーピング（ｔｅｌｅｓｃｏｐｉｎｇ）を助け得る。
【０１２０】
いくつかの実施形態では、式（５）の化合物は、実質的に精製することなく次の反応において使用することができる。
【０１２１】
式（５）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーは、式（４ａ）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物をＢｏｃ保護基試薬と接触させることによって合成した、式（５ａ）の化合物：
【化９７】
2021500354.tif 000099
その塩もしくはその溶媒和物であり得る。
【０１２２】
式（６）の化合物の合成
スキーム３を続けて参照すると、式（５）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、ＰＮＺ脱保護試薬と接触させて、式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得てもよい。特定のそのような実施形態では、
【化９８】
2021500354.tif 000100
は、二重結合である。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、ＰＮＺ脱保護試薬は、亜ジチオン酸ナトリウムである。他の実施形態では、ＰＮＺ脱保護反応は、Ｈ２およびＰｄ／ＣまたはＰｔＯ２などの触媒による水素化であり得る。亜ジチオン酸ナトリウムは、より大規模で使用することが容易であり、化学選択性的であり、危険性が低く、特別な機器を使用する必要がないものであり得るので、水素化を必要とする脱保護反応よりも有利であり得る。
【０１２４】
式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーは、式（５ａ）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物をＰＮＺ脱保護試薬と接触させることによって合成した、式（６ａ）の化合物：
【化９９】
2021500354.tif 000101
またはその塩もしくはその溶媒和物であり得る。
【０１２５】
本開示は、式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製するためのプロセスをさらに提供する。本開示はまた、例えば実施例２において以下に記載されるように、式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することを含むプロセスを提供する。
【０１２６】
したがって、上記のように、この結晶化は、精製プロセス（例えば、不純物を低下させる）を助け、従来の精製方法と比較して精製プロセスを簡素化し、それにより、プロセス全体について大きな再現性をもたらし得る。
スキーム４：式（７）の化合物の合成
【化１００】
2021500354.tif 000102
【０１２７】
スキーム４は、式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの合成を示す。
【化１０１】
2021500354.tif 000103
は、単結合または二重結合である。いくつかの実施形態では、
【化１０２】
2021500354.tif 000104
は、二重結合である。
【０１２８】
式（６）の化合物から式（７）の化合物への反応は、アルキル化に関して驚くべきものである。通常の状況下では、式（６）の化合物上の基などの第一級アミンは、２回以上アルキル化する傾向がある。したがって、式（７）の化合物が第二級アミンを含む（例えば、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨで１回アルキル化される）ことは驚くべきことである。以下に説明するように、溶媒の選択および過剰アルキル化を防止するための試薬の使用を含む反応条件は、適切な部位でのモノアルキル化をもたらすことができる。
【０１２９】
式（７）の化合物の合成
スキーム４を続けて参照すると、式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化１０３】
2021500354.tif 000105
（式中、ＬＧ１は離脱基である）と接触させて、式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得てもよい。特定のそのような実施形態では、脱離基は、ヨード、ブロモ、またはクロロである。特定のそのような実施形態では、離脱基は、ヨードである。いくつかの実施形態では、
【化１０４】
2021500354.tif 000106
は、式（６）の化合物に対して、約１．０〜１．５モル当量で存在する。
【０１３０】
式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーと
【化１０５】
2021500354.tif 000107
との間の反応は、実質的に水を含まない条件下で行われ得る。いくつかの実施形態では、式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーと
【化１０６】
2021500354.tif 000108
との間の反応は、アセトニトリル、アセトン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される溶媒の存在下で行われ得る。アセトンは、反応の選択性を助け、モノアルキル化を促進し得る。アセトニトリルは、共沸物によって水を除去するために用い得る。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーと
【化１０７】
2021500354.tif 000109
との間の反応は、ＮａＨＣＯ３、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、硫酸ナトリウム、ＤＩＰＥＡ、リン酸ナトリウム、オルトギ酸トリメチル、およびヘキサメチルジシランの存在下で行われ得る。特定のそのような実施形態では、反応は、ＮａＨＣＯ３の存在下で行われる。いくつかの実施形態では、式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーと
【化１０８】
2021500354.tif 000110
との間の反応は、約３０℃〜４０℃の温度で行われ得る。特定のそのような実施形態では、温度は、約３５℃である。５０℃超の温度により、ジアルキル化された副生成物が形成され得る。
【０１３２】
式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーと
【化１０９】
2021500354.tif 000111
との間の反応は、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）を反応混合物に添加することによってクエンチされ得る。ＤＡＢＣＯは、実質的に反応を停止し、過剰アルキル化を防止するために使用され得る。代替的に、式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーと
【化１１０】
2021500354.tif 000112
との間の反応は、１−プロピルアミン、ピペリジン、ジエチルアミン、Ｎ−エチルジメチルアミン、トリエチルアミン、ＤＢＵ、ＭｅＯＨ、炭酸緩衝液、ジメチルアミン、システイン、ジエタノールアミン、またはＮａＯＨを添加することによってクエンチされ得る。
【０１３３】
いくつかの実施形態では、式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーは、式（６ａ）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物を
【化１１１】
2021500354.tif 000113
と接触させることによって合成した、式（７ａ）の化合物：
【化１１２】
2021500354.tif 000114
またはその塩もしくはその溶媒和物であり得る。
【０１３４】
本開示は、式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製するためのプロセスをさらに提供する。本開示はまた、例えば実施例３において以下に記載されるように、式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することを含むプロセスを提供する。
【０１３５】
この結晶化は、精製プロセス（例えば、不純物を低下させる）を助け、従来の精製方法と比較して精製を簡素化し得る。結晶化はまた、不純物を除去するために作用することができる。
スキーム５：式（９）の化合物の合成
【化１１３】
2021500354.tif 000115
【０１３６】
スキーム５は、式（９）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの合成を示す。
【化１１４】
2021500354.tif 000116
は、単結合または二重結合であり、×は、１〜５である。いくつかの実施形態では、
【化１１５】
2021500354.tif 000117
は、二重結合である。いくつかの実施形態では、ｘは、２〜３である。
【０１３７】
式（８）の化合物の合成
スキーム５を続けて参照すると、式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ除去試薬と接触させて、式（８）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得てもよい。いくつかの実施形態では、Ｂｏｃ除去試薬は、ＴＦＡ、ＭｓＯＨ（メタンスルホン酸またはＣＨ３ＳＯ３Ｈ）、ＰＴＳＡ（ｐ−トルエンスルホン酸またはトシル酸）、Ｈ２ＳＯ４、またはＨＣｌである。いくつかの実施形態では、Ｂｏｃ除去試薬は、ＴＦＡまたはＭｓＯＨである。いくつかの実施形態では、Ｂｏｃ除去試薬はＴＦＡ、Ｈ２ＳＯ４、またはＨＣｌである。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、Ｂｏｃ除去試薬はＴＦＡであり、それにより、式（８）の化合物のＴＦＡ塩またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得る。脱保護反応が無水であることを必要とするので、ＴＦＡは、典型的には、この変換に使用される。
【０１３９】
Ｂｏｃ基を除去する工程は、反応直後に（例えば任意の精製前に）、基質の加水分解および化合物（ＩＭＰ−１）の存在をもたらし得る。
【化１１６】
2021500354.tif 000118
（ＩＭＰ−１）
特定の実施形態では、Ｂｏｃ基を除去する工程は、実質的な加水分解をもたらさず、反応の直後に（例えば任意の精製前に）、化合物（ＩＭＰ−１）の存在は最小化される。特定の実施形態では、化合物（ＩＭＰ−１）の存在または量は、ＨＰＬＣによって決定され得る。特定の実施形態では、化合物ＩＭＰ−１は、反応直後に（例えば任意の精製前に）、０〜７％、例えば約０、０．２、０．４、０．６、０．８、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、または７％の量で存在することができる。ＩＭＰ−１の量が０％である場合、この量は、当業者によって既知でありかつ日常的に使用される典型的な分析方法（例えば、ＨＰＬＣ）の検出レベル未満のレベルで、特定の不純物が存在することができることを示す。
【０１４０】
特定の実施形態では、酸は、ＴＦＡまたはＭｓＯＨであり、化合物ＩＭＰ−１の量は、反応直後に（例えば任意の精製前に）、約０〜７％であり得る。いくつかの場合では、酸は、ＴＦＡまたはＭｓＯＨであり、化合物ＩＭＰ−１の量は、反応直後に（例えば任意の精製前に）、約０〜２．５％であり得る。いくつかの場合では、酸は、ＴＦＡであり、化合物ＩＭＰ−１の量は、反応直後に（例えば任意の精製前に）、約０〜２．５％、例えば、約０、０．２、０．４、０．６、０．８、１、１．５、２、または２．５％であり得る。いくつかの場合では、酸は、ＭｓＯＨであり、化合物ＩＭＰ−１の量は、反応直後に（例えば任意の精製前に）、約０〜２．５％、例えば、約０．２、０．４、０．６、０．８、１、１．５、２、または２．５％であり得る。
【０１４１】
いくつかの場合では、酸は、ＨＣｌであり、化合物ＩＭＰ−１の量は、反応直後に（例えば任意の精製前に）、約０〜１％、例えば、約０、０．２、０．４、０．６、０．８、または１％であり得る。
【０１４２】
いくつかの場合では、酸は、Ｈ２ＳＯ４であり、化合物ＩＭＰ−１の量は、反応直後に（例えば任意の精製前に）、０〜７％、例えば、約０、０．２、０．４、０．６、０．８、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、または７％であり得る。
【０１４３】
式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、様々なＢｏｃ除去試薬と接触させる場合、ＩＭＰ−１の量は、Ｂｏｃ除去試薬の同一性に応じて変動し得る。下の表は、式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーと様々なＢｏｃ除去試薬との反応からのＩＭＰ−１の量を示す。
【表１２】
2021500354.tif 000119
【０１４４】
いくつかの実施形態では、式（８）の化合物は、実質的に精製することなく次の反応において使用することができる。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、式（８）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーは、式（７ａ）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物を、Ｂｏｃ除去試薬と接触させることによって合成した、式（８ａ）の化合物：
【化１１７】
2021500354.tif 000120
またはその溶媒和物であり得る。
【０１４６】
式（９）の化合物の合成
酸を用いた塩形成を行って、式（８）の化合物の塩またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得てもよい。式（８）の化合物が既にＴＦＡ塩などの塩である場合、塩を除去して、式（８）の化合物、その溶媒和物、そのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得た後、異なる塩を形成してもよい。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、塩形成工程における酸は硫酸であり、それにより、式（９）の化合物の硫酸塩：
【化１１８】
2021500354.tif 000121
またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー（式中、ｘは１〜５である）を得る。いくつかの実施形態では、ｘは、２〜３である。式（９）の化合物の硫酸塩は、他の塩と比較して向上した安定性を有し得る。いくつかの実施形態では、式（９）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーは、式（８ａ）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物で塩形成を行うことによって合成した、硫酸プラゾマイシン：
【化１１９】
2021500354.tif 000122
またはその溶媒和物（式中、ｘは、１〜５である）であり得る。いくつかの実施形態では、ｘは、２〜３である。
【０１４８】
結晶化合物およびその調製および特徴付け：
ある態様では、本開示は、式（９）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを合成するために使用され得る合成プロセスにおける中間体に関する。これらの中間体は、結晶形態であり得る。本開示は、式（９）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを合成するために使用され得る合成プロセスにおける結晶性中間体の製造方法を提供する。本開示の結晶性中間体は、ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、および熱重量分析（ｔｇａ）によって特徴付けられ得る。ＸＲＰＤ、ＤＳＣ、およびＴＧＡデータの収集方法、ならびに本開示の結晶性中間体の特性は、以下の実施例でさらに例示される。
化合物４および４ａ
【０１４９】
いくつかの実施形態では、式（９）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの合成における中間体は、式（４）の化合物：
【化１２０】
2021500354.tif 000123
（４）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーである。特定のそのような実施形態では、式（４）の化合物は、以下の式のもの：
【化１２１】
2021500354.tif 000124
（４ａ）、
またはその塩もしくはその溶媒和物である。特定のそのような実施形態では、式（４ａ）の化合物は、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）カルバメート、またはその溶媒和物である。
【０１５０】
いくつかの実施形態では、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）カルバメート、またはその溶媒和物は、ピーク位置が実質的に図１に示されるものに従ったＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）カルバメート、またはその溶媒和物は、図２に示されるＴＧＡトレースによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）カルバメート、またはその溶媒和物は、図３のＤＳＣプロファイルによって特徴付けられる。
【０１５２】
本開示は、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）カルバメート、式（４ａ）、またはその溶媒和物を調製するためのプロセスであって、
（ａ）式（４ａ）またはその塩もしくはその溶媒和物をアセトニトリルで処理して溶液を生成することと、
（ｂ）工程（ａ）からの溶液を加熱することと、
（ｃ）工程（ｂ）の加熱溶液に水を添加することと、
（ｄ）工程（ｃ）からの溶液を冷却することと、
（ｅ）工程（ｄ）からの溶液に種結晶を充填することと、
（ｆ）得られた固体を単離して、結晶性の式（４ａ）またはその溶媒和物を得ることと、を含む、プロセスに関する。
【０１５３】
結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）カルバメートを調製するためのいくつかの実施形態では、種晶添加（ｓｅｅｄｉｎｇ）を伴う７５±３℃での１．５％脱イオン（ＤＩ）水を含むアセトニトリル、続いて冷却を結晶化に使用し得る。さらに、結晶化は、６５±３℃または７０±３℃で行われ、続いて冷却し得る。いくつかの実施形態では、脱イオン（ＤＩ）水を含むまたは含まない１−プロパノールを、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）カルバメートの結晶化のために、アセトニトリルの代わりに使用し得る。検査した結晶化条件を実施例１および表５に要約する。
【０１５４】
化合物６ａ
いくつかの実施形態では、式（９）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの合成における中間体は、式（６ａ）の化合物：
【化１２２】
2021500354.tif 000125
またはその塩もしくはその溶媒和物である。特定のそのような実施形態では、本開示は、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、またはその溶媒和物を提供する。
【０１５５】
いくつかの実施形態では、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、またはその溶媒和物は、ピーク位置が実質的に図４および表１に示されるものに従ったＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、例えば表１に示されるようなＸＲＰＤパターンにおける回折角度に対して約±０．２°２θの変動がある。
【表１】
2021500354.tif 000126
【０１５６】
特定の実施形態では、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、またはその溶媒和物は、Ｘ線粉末回折での約６．１０、１０．６６、１２．１７、１７．６５、および１８．５５度における１つ以上の２θ値によって特徴付けられ、ここで、ＸＲＰＤパターンにおける回折角に対して約±０．２°２θの変動がある。
【０１５７】
いくつかの実施形態では、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、またはその溶媒和物は、図５に示されるＴＧＡトレースによって特徴付けられる。結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、またはその溶媒和物のＤＳＣにおける主な発熱事象は、２３１．８℃の左限温度および−５２．９ｋＪ／ｋｇのエネルギーで発生した（図６）。
【０１５８】
本開示は、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、またはその溶媒和物を調製するためのプロセスであって、
（ａ）式（６）またはその塩もしくはその溶媒和物を酢酸イソプロピル（ＩＰＡｃ）で処理して溶液を生成することと、
（ｂ）工程（ａ）の溶液に水を添加して混合物を生成することと、
（ｃ）工程（ｂ）からの混合物にジクロロメタンを添加して混合物を生成することと、
（ｄ）工程（ｃ）からの混合物に種結晶を充填することと、
（ｅ）得られた固体を単離して、結晶性の式（６ａ）またはその溶媒和物を得ることと、を含む、プロセスに関する。
【０１５９】
いくつかの実施形態では、工程（ｄ）は、低温で行われる。いくつかの実施形態では、工程（ｄ）は、約１５〜２５℃、例えば、約１５〜２０℃または約２０〜２５℃で行われる。
【０１６０】
結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメートを調製するためのプロセスのいくつかの実施形態では、１％の水を含むジクロロメタン／酢酸イソプロピル（５０／５０ｖ／ｖ）、２％の水を含む酢酸イソプロピル／ジクロロメタン（７１／２９ｖ／ｖ）、または８％の水を含む酢酸イソプロピル／ジクロロメタン（７１／２９ｖ／ｖ）を使用し得る。特定のそのような実施形態では、１％の水を含むジクロロメタン／酢酸イソプロピル（５０／５０ｖ／ｖ）を使用し得る。酢酸イソプロピルは、結晶化には必要ないが、抽出溶媒として存在し得る。１％の水を含むジクロロメタン／酢酸イソプロピル（５０／５０ｖ／ｖ）から粘着性固体として固体を単離した場合、濾過が容易であり得、いくつかの潮解（ｄｅｌｉｑｕｅｓｃｅｎｃｅ）が、２％および８％の両方の水を含む酢酸イソプロピル／ジクロロメタン（７１／２９ｖ／ｖ）から単離した固体から観察された。さらに、１％の水を含むジクロロメタン／酢酸イソプロピル（５０／５０ｖ／ｖ）から単離した材料は結晶性であった。しかしながら、２％の水を含む酢酸イソプロピル／ジクロロメタン（７１／２９ｖ／ｖ）から単離した材料は不規則であり、８％の水を含む酢酸イソプロピル／ジクロロメタン（７１／２９ｖ／ｖ）から単離した材料は少量のｘ線非晶質材料を含み得る。検査した結晶化条件を実施例２に要約する。
【０１６１】
化合物７および７ａ
いくつかの実施形態では、式（９）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの合成における中間体は、式（７）の化合物：
【化１２３】
2021500354.tif 000127
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーである。特定のそのような実施形態では、式（７）の化合物は、以下の式のもの：
【化１２４】
2021500354.tif 000128
（７ａ）
またはその塩もしくはその溶媒和物である。特定のそのような実施形態では、式（７ａ）の化合物は、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、またはその溶媒和物である。
【０１６２】
いくつかの実施形態では、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、またはその溶媒和物は、ピーク位置が実質的に図７および表２に示されるものに従ったＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、例えば表２に示されるように、ＸＲＰＤパターンにおける回折角度に対して約±０．２°２θの変動がある。
【表２】
2021500354.tif 000129
【０１６３】
特定の実施形態では、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、またはその溶媒和物は、Ｘ線粉末回折での約５．１７、７．３９、１０．８５、および１２．１７度における１つ以上の２θ値によって特徴付けられ、ここで、ＸＲＰＤパターンにおける回折角に対して約±０．２°２θの変動がある。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、またはその溶媒和物は、図８に示されるＴＧＡトレースによって特徴付けられる。結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、またはその溶媒和物のＤＳＣプロファイルを図９に示す。
【０１６５】
本開示は、結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、またはその溶媒和物を調製するためのプロセスであって、
（ａ）式（７ａ）またはその塩もしくは溶媒和物を酢酸イソプロピル（ＩＰＡｃ）で処理して溶液を生成することと、
（ｂ）工程（ａ）の溶液にアセトニトリルを添加して混合物を生成することと、
（ｃ）工程（ｂ）からの混合物に種結晶を充填することと、
（ｄ）得られた固体を単離して、結晶性の式（７ａ）またはその溶媒和物を得ることと、を含む、プロセスを提供する。
【０１６６】
結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメートを調製するためのプロセスのいくつかの実施形態では、種晶添加を伴って０．７５〜２％ｗ／ｗの水を添加した１０％ｖ／ｖ  ＩＰＡｃ／ＡＣＮを使用し得る。さらに、種晶添加温度での長い保持時間（例えば、６０℃〜６５℃で２時間超）および遅い冷却勾配（ｃｏｏｌｉｎｇ  ｒａｍｐ）（例えば、５〜１０℃／時間で６０℃から０℃まで低下）が、流動性スラリーを得るために使用され得る。結晶化の堅牢性（ｒｏｂｕｓｔｎｅｓｓ）を制御するのに、含水量を使用し得る。０．５〜２％の水を添加した結晶化は、一貫した回収率（例えば、一般に８０％超）とともにより再現性が高く、純度が向上し得る。この手順は、未反応の式（６ａ）の化合物、ペンタ−Ｂｏｃ不純物（例えば、６３％の除去を組み合わせる）、およびジアルキル化された副生成物（例えば、３６％の除去）を十分に除去し得、容易に濾過可能でありかつ洗浄可能な固体生成物を提供し得る。検査した結晶化条件を実施例３および表７〜１１に要約する。
【０１６７】
例示的実施形態
本開示のいくつかの実施形態は、以下の実施形態Ｉである。
【０１６８】
実施形態Ｉ−１。式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを調製するためのプロセスであって、
（ａ）式（１）の化合物：
【化１２５】
2021500354.tif 000130
（１）
またはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、１−｛［（ｐ−ニトロベンジル）オキシ］カルボニル｝−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＰＮＺ−Ｂｔ）と接触させて、式（２）の化合物：
【化１２６】
2021500354.tif 000131
（２）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、形成すること
式中、
【化１２７】
2021500354.tif 000132
は、単結合または二重結合であり、
Ｒ１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、
Ｒ２は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、
Ｒ３は、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキルである）を含む、プロセス。
【０１６９】
実施形態Ｉ−２。工程（ａ）が、ジクロロメタン、メタノール、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される溶媒の存在下で行われる、実施形態Ｉ−１に記載のプロセス。
【０１７０】
実施形態Ｉ−３。ＰＮＺ−Ｂｔが、式（１）の化合物またはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーに対して、約１．０〜１．２モル当量で存在する、実施形態Ｉ−１またはＩ−２に記載のプロセス。
【０１７１】
実施形態Ｉ−４。工程（ｂ１）または（ｂ２）：
（ｂ１）Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３がＨである場合、式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させて、式（３）の化合物：
【化１２８】
2021500354.tif 000133
（３）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得る工程、あるいは
（ｂ２）Ｒ１、Ｒ２、またはＲ３のうちの１つ以上が、独立して、Ｃ１〜Ｃ３アルキルである場合、最初に前記Ｃ１〜Ｃ３アルキルを除去し、次いで式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させて、式（３）の化合物：
【化１２９】
2021500354.tif 000134
（３）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得る工程をさらに含む、実施形態Ｉ−１〜Ｉ−３のいずれか１つに記載のプロセス。
【０１７２】
実施形態Ｉ−５。Ｂｏｃ保護基試薬が、Ｂｏｃ２ＯまたはＢｏｃ−ＯＮｂである、実施形態Ｉ−４に記載のプロセス。
【０１７３】
実施形態Ｉ−６。工程（ｂ１）または（ｂ２）が、ルイス酸の存在下で行われる、実施形態Ｉ−４またはＩ−５に記載のプロセス。
【０１７４】
実施形態Ｉ−７。ルイス酸が、Ｚｎ（ＯＡｃ）２、ＺｎＣｌ２、またはＺｎ（ＯＰｉｖ）２である、実施形態Ｉ−６に記載のプロセス。
【０１７５】
実施形態Ｉ−８。ルイス酸が、銅イオンまたはニッケルイオンを含む、実施形態Ｉ−６に記載のプロセス。
【０１７６】
実施形態Ｉ−９。工程（ｂ１）または（ｂ２）が、トリエチルアミンの存在下で行われる、実施形態Ｉ−４〜Ｉ−８のいずれか１つに記載のプロセス。
【０１７７】
実施形態Ｉ−１０。工程（ｂ１）または（ｂ２）が、メタノールの存在下で行われる、実施形態Ｉ−４〜Ｉ−８のいずれか１つに記載のプロセス。
【０１７８】
実施形態Ｉ−１１。
（ｃ）式（３）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化１３０】
2021500354.tif 000135
と接触させて、式（４）の化合物：
【化１３１】
2021500354.tif 000136
（４）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、実施形態Ｉ−４〜Ｉ−１０のいずれか１つに記載のプロセス。
【０１７９】
実施形態Ｉ−１２。工程（ｃ）が、活性化試薬およびペプチド結合試薬の存在下で行われる、実施形態Ｉ−１１に記載のプロセス。
【０１８０】
実施形態Ｉ−１３。活性化試薬が、ＨＯＢｔである、実施形態Ｉ−１２に記載のプロセス。
【０１８１】
実施形態Ｉ−１４。活性化試薬が、
【化１３２】
2021500354.tif 000137
に対して、約０．０５〜１．０モル当量で存在する、実施形態Ｉ−１３に記載のプロセス。
【０１８２】
実施形態Ｉ−１５。ペプチド結合試薬が、ＥＤＡＣまたはＰｙＢＯＰである、実施形態Ｉ−１２に記載のプロセス。
【０１８３】
実施形態Ｉ−１６。ペプチド結合試薬が、
【化１３３】
2021500354.tif 000138
に対して、約１．０〜１．４モル当量で存在する、実施形態Ｉ−１５に記載のプロセス。
【０１８４】
実施形態Ｉ−１７。工程（ｃ）が、酸性条件で行われる、実施形態Ｉ−１１〜Ｉ−１６のいずれか１つに記載のプロセス。
【０１８５】
実施形態Ｉ−１８。酸性条件が、ｐＨ約４〜７である、実施形態Ｉ−１７に記載のプロセス。
【０１８６】
実施形態Ｉ−１９。酸性条件が、ｐＨ約５である、実施形態Ｉ−１７に記載のプロセス。
【０１８７】
実施形態Ｉ−２０。式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製することをさらに含む、実施形態Ｉ−１１〜Ｉ−１９のいずれか１つに記載のプロセス。
【０１８８】
実施形態Ｉ−２１。式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することをさらに含む、実施形態Ｉ−１１〜Ｉ−２０のいずれか１つに記載のプロセス。
【０１８９】
実施形態Ｉ−２２。
（ｄ）式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させて、式（５）の化合物：
【化１３４】
2021500354.tif 000139
（５）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、実施形態Ｉ−１１〜Ｉ−２１のいずれか１つに記載のプロセス。
【０１９０】
実施形態Ｉ−２３。Ｂｏｃ保護基試薬が、Ｂｏｃ２Ｏである、実施形態Ｉ−２２に記載のプロセス。
【０１９１】
実施形態Ｉ−２４。工程（ｄ）が、アルコールの存在下で行われる、実施形態Ｉ−２２またはＩ−２３に記載のプロセス。
【０１９２】
実施形態Ｉ−２５。アルコールが、メタノールである、実施形態Ｉ−２４に記載のプロセス。
【０１９３】
実施形態Ｉ−２６。工程（ｄ）が、最大約６０℃の温度で行われる、実施形態Ｉ−２２〜Ｉ−２５のいずれか１つに記載のプロセス。
【０１９４】
実施形態Ｉ−２７。
（ｅ）式（５）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、ＰＮＺ脱保護試薬と接触させて、式（６）の化合物：
【化１３５】
2021500354.tif 000140
（６）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、実施形態Ｉ−２２〜Ｉ−２６のいずれか１つに記載のプロセス。
【０１９５】
実施形態Ｉ−２８。ＰＮＺ脱保護試薬が、亜ジチオン酸ナトリウムである、実施形態Ｉ−２７に記載のプロセス。
【０１９６】
実施形態Ｉ−２９。式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製することをさらに含む、実施形態Ｉ−２７またはＩ−２８に記載のプロセス。
【０１９７】
実施形態Ｉ−３０。式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することをさらに含む、実施形態Ｉ−２７〜Ｉ−２９のいずれか１つに記載のプロセス。
【０１９８】
実施形態Ｉ−３１。
（ｆ）式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化１３６】
2021500354.tif 000141
（式中、ＬＧ１が、離脱基である）と接触させて、式（７）の化合物：
【化１３７】
2021500354.tif 000142
（７）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、実施形態Ｉ−２７〜Ｉ−３０のいずれか１つに記載のプロセス。
【０１９９】
実施形態Ｉ−３２。脱離基が、ヨードである、実施形態Ｉ−３１に記載のプロセス。
【０２００】
実施形態Ｉ−３３。
【化１３８】
2021500354.tif 000143
が、式（６）の化合物に対して、約１．０〜１．５モル当量で存在する、実施形態Ｉ−３１に記載のプロセス。
【０２０１】
実施形態Ｉ−３４。工程（ｆ）が、実質的に水を含まない条件で行われる、実施形態Ｉ−３１〜Ｉ−３３のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２０２】
実施形態Ｉ−３５。工程（ｆ）が、アセトニトリル、アセトン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される溶媒の存在下で行われる、実施形態Ｉ−３１〜Ｉ−３４のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２０３】
実施形態Ｉ−３６。工程（ｆ）が、ＮａＨＣＯ３の存在下で行われる、実施形態Ｉ−３１〜Ｉ−３５のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２０４】
実施形態Ｉ−３７。工程（ｆ）が、約３０℃〜４０℃の温度で行われる、実施形態Ｉ−３１〜Ｉ−３６のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２０５】
実施形態Ｉ−３８。１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）を反応混合物に添加することをさらに含む、実施形態Ｉ−３１〜Ｉ−３７のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２０６】
実施形態Ｉ−３９。式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製することをさらに含む、実施形態Ｉ−３１〜Ｉ−３８のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２０７】
実施形態Ｉ−４０。式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することをさらに含む、実施形態Ｉ−３１〜Ｉ−３９のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２０８】
実施形態Ｉ−４１。
（ｇ）式（７）の化合物をＢｏｃ除去試薬と接触させて、式（８）の化合物：
【化１３９】
2021500354.tif 000144
（８）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、実施形態Ｉ−３１〜Ｉ−４０のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２０９】
実施形態Ｉ−４２。Ｂｏｃ除去試薬が、ＴＦＡであり、それにより、式（８）の化合物のＴＦＡ塩またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得る、実施形態Ｉ−４１に記載のプロセス。
【０２１０】
実施形態Ｉ−４２ａ。化合物（ＩＭＰ−１）
【化１４０】
2021500354.tif 000145
（ＩＭＰ−１）
が、反応直後に（例えば任意の精製前に）、７％未満の量で存在する、実施形態Ｉ−４１またはＩ−４２に記載のプロセス。
【０２１１】
実施形態Ｉ−４２ｂ。化合物（ＩＭＰ−１）
【化１４１】
2021500354.tif 000146
（ＩＭＰ−１）
が、反応直後に（例えば任意の精製前に）、２．５％未満の量で存在する、実施形態Ｉ−４１またはＩ−４２に記載のプロセス。
【０２１２】
実施形態Ｉ−４３。ＴＦＡ塩を除去して、式（８）の化合物、またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、実施形態Ｉ−４２に記載のプロセス。
【０２１３】
実施形態Ｉ−４４。
（ｈ）酸で塩形成を行い、式（８）の化合物の塩またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、プロセス実施形態Ｉ−４１またはＩ−４３。
【０２１４】
実施形態Ｉ−４５。工程（ｈ）における酸が硫酸であり、それにより、式（９）の化合物の硫酸塩：
【化１４２】
2021500354.tif 000147
またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー（式中、ｘは１〜５である）を得る、実施形態Ｉ−４４に記載のプロセス。
【０２１５】
実施形態Ｉ−４６。Ｒ１、Ｒ２、またはＲ３がＨである、実施形態Ｉ−１〜Ｉ−３のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２１６】
実施形態Ｉ−４７。
【化１４３】
2021500354.tif 000148
が二重結合である、実施形態Ｉ−１〜Ｉ−４６のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２１７】
実施形態Ｉ−４８。式（１）〜（３）中の炭素原子１、３、４、５、６、１’、２’、１”、２”、３”、および４”における立体化学が、式（Ｘ）のように示され、
【化１４４】
2021500354.tif 000149
が、水素または部分への結合点を示す、実施形態Ｉ−１〜Ｉ−１０のいずれか１つに記載のプロセス：
【化１４５】
2021500354.tif 000150
（Ｘ）。
【０２１８】
実施形態Ｉ−４９。式（４）〜（９）中の炭素原子１、３、４、５、６、１’、２’、１”、２”、３”、４”、および１−ｚにおける立体化学が、式（Ｙ）のように示され、
【化１４６】
2021500354.tif 000151
が、水素または部分への結合点を示す、実施形態Ｉ−１１〜Ｉ−４７のいずれか１つに記載のプロセス：
【化１４７】
2021500354.tif 000152
（Ｙ）。
【０２１９】
実施形態Ｉ−５０。式（５）の化合物：
【化１４８】
2021500354.tif 000153
（５）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを調製するためのプロセスであって、
該プロセスが、
（ａ）式（４）の化合物：
【化１４９】
2021500354.tif 000154
（４）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させることを含み、式中、
【化１５０】
2021500354.tif 000155
が、単結合または二重結合である、プロセス。
【０２２０】
実施形態Ｉ−５１。式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、式（３）の化合物：
【化１５１】
2021500354.tif 000156
（３）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化１５２】
2021500354.tif 000157
と接触させることによって調製される、実施形態Ｉ−５０に記載のプロセス。
【０２２１】
実施形態Ｉ−５２。式（３）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、
（ｂ１）式（２ａ）の化合物：
【化１５３】
2021500354.tif 000158
（２ａ）、
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬を接触させること、あるいは
（ｂ２）式（２）の化合物：
【化１５４】
2021500354.tif 000159
（２）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー中のＣ１〜Ｃ３アルキルを除去し
（式中、Ｒ１が、ＨまたはＣ１−Ｃ３アルキルであり、Ｒ２が、ＨまたはＣ１−Ｃ３アルキルであり、Ｒ３が、ＨまたはＣ１−Ｃ３アルキルであり、Ｒ１、Ｒ２、またはＲ３のうちの１つ以上が、独立して、Ｃ１−Ｃ３アルキルである）、
次いで、式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させることによって調製される、実施形態Ｉ−５１に記載のプロセス。
【０２２２】
実施形態Ｉ−５３。式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、式（１）の化合物：
【化１５５】
2021500354.tif 000160
（１）
またはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、１−｛［（ｐ−ニトロベンジル）オキシ］カルボニル｝−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＰＮＺ−Ｂｔ）と接触させることによって調製される、実施形態Ｉ−５２に記載のプロセス。
【０２２３】
実施形態Ｉ−５４。Ｂｏｃ保護基試薬が、Ｂｏｃ２Ｏである、実施形態Ｉ−５０〜Ｉ−５３のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２２４】
実施形態Ｉ−５５。工程（ａ）、（ｂ１）、または（ｂ２）が、アルコールの存在下で行われる、実施形態Ｉ−５０〜Ｉ−５４のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２２５】
実施形態Ｉ−５６。アルコールが、メタノールである、実施形態Ｉ−５５に記載のプロセス。
【０２２６】
実施形態Ｉ−５７。工程（ａ）、（ｂ１）、または（ｂ２）が、最大約６０℃の温度で行われる、実施形態Ｉ−５０〜Ｉ−５６のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２２７】
実施形態Ｉ−５８。
（ｅ）式（５）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、ＰＮＺ脱保護試薬と接触させて、式（６）の化合物：
【化１５６】
2021500354.tif 000161
（６）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、実施形態Ｉ−５０〜Ｉ−５７のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２２８】
実施形態Ｉ−５９。ＰＮＺ脱保護試薬が、亜ジチオン酸ナトリウムである、実施形態Ｉ−５８に記載のプロセス。
【０２２９】
実施形態Ｉ−６０。式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製することをさらに含む、実施形態Ｉ−５０〜Ｉ−５９のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２３０】
実施形態Ｉ−６１。式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することをさらに含む、実施形態Ｉ−５０〜Ｉ−６０のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２３１】
実施形態Ｉ−６２。
（ｆ）式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化１５７】
2021500354.tif 000162
（式中、ＬＧ１は離脱基である）と接触させて、式（７）の化合物：
【化１５８】
2021500354.tif 000163
（７）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、実施形態Ｉ−５０〜Ｉ−６１のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２３２】
実施形態Ｉ−６３。脱離基が、ヨードである、実施形態Ｉ−６２に記載のプロセス。
【０２３３】
実施形態Ｉ−６４。
【化１５９】
2021500354.tif 000164
が、式（６）の化合物に対して、約１．０〜１．５モル当量で存在する、実施形態Ｉ−６２に記載のプロセス。
【０２３４】
実施形態Ｉ−６５。工程（ｆ）が、実質的に水を含まない条件で行われる、実施形態Ｉ−６２〜Ｉ−６４のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２３５】
実施形態Ｉ−６６。工程（ｆ）が、アセトニトリル、アセトン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される溶媒の存在下で行われる、実施形態Ｉ−６２〜Ｉ−６５のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２３６】
実施形態Ｉ−６７。工程（ｆ）が、ＮａＨＣＯ３の存在下で行われる、実施形態Ｉ−６２〜Ｉ−６６のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２３７】
実施形態Ｉ−６８。工程（ｆ）が、約３０℃〜４０℃の温度で行われる、実施形態Ｉ−６２〜Ｉ−６７のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２３８】
実施形態Ｉ−６９。１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）を反応混合物に添加することをさらに含む、実施形態Ｉ−６２〜Ｉ−６８のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２３９】
実施形態Ｉ−７０。式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製することをさらに含む、実施形態Ｉ−６２〜Ｉ−６９のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２４０】
実施形態Ｉ−７１。式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することをさらに含む、実施形態Ｉ−６２〜Ｉ−７０のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２４１】
実施形態Ｉ−７２。
（ｇ）式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ除去試薬と接触させて、式（８）の化合物：
【化１６０】
2021500354.tif 000165
（８）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、実施形態Ｉ−６２〜Ｉ−７１のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２４２】
実施形態Ｉ−７３。Ｂｏｃ除去試薬が、ＴＦＡであり、それにより、式（８）の化合物のＴＦＡ塩またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得る、実施形態Ｉ−７２に記載のプロセス。
【０２４３】
実施形態Ｉ−７４。ＴＦＡ塩を除去して、式（８）の化合物、またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、実施形態Ｉ−７３に記載のプロセス。
【０２４４】
実施形態Ｉ−７５。
（ｈ）酸で塩形成を行い、式（８）の化合物の塩またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、実施形態Ｉ−７２またはＩ−７４に記載のプロセス。
【０２４５】
実施形態Ｉ−７６。工程（ｈ）における酸が硫酸であり、それにより、式（９）の化合物の硫酸塩：
【化１６１】
2021500354.tif 000166
またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー（式中、ｘは１〜５である）を得る、実施形態Ｉ−７５に記載のプロセス。
【０２４６】
実施形態Ｉ−７７。式（７）の化合物：
【化１６２】
2021500354.tif 000167
（７）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを調製するためのプロセスであって、該プロセスが、
（ｆ）式（６）の化合物、
【化１６３】
2021500354.tif 000168
（６）またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化１６４】
2021500354.tif 000169
とさせることを含み、式中、ＬＧ１が、脱離基であり、
【化１６５】
2021500354.tif 000170
が、単結合または二重結合である、プロセス。
【０２４７】
実施形態Ｉ−７８。式（６）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、式（５）の化合物：
【化１６６】
2021500354.tif 000171
（５）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、ＰＮＺ脱保護試薬と接触させることによって調製される、実施形態Ｉ−７７に記載のプロセス。
【０２４８】
実施形態Ｉ−７９。式（５）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、式（４）の化合物：
【化１６７】
2021500354.tif 000172
（４）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させることによって調製される、実施形態Ｉ−７８に記載のプロセス。
【０２４９】
実施形態Ｉ−８０。式（４）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、式（３）の化合物：
【化１６８】
2021500354.tif 000173
（３）
その塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、
【化１６９】
2021500354.tif 000174
と接触させることによって調製される、実施形態Ｉ−７９に記載のプロセス。
【０２５０】
実施形態Ｉ−８１。式（３）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、
（ｂ１）式（２ａ）の化合物：
【化１７０】
2021500354.tif 000175
（２ａ）、
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ保護基試薬と接触させること、または
（ｂ２）式（２）の化合物：
【化１７１】
2021500354.tif 000176
（２）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー中のＣ１〜Ｃ３アルキルを除去し
（式中、Ｒ１が、ＨまたはＣ１−Ｃ３アルキルであり、Ｒ２が、ＨまたはＣ１−Ｃ３アルキルであり、Ｒ３が、ＨまたはＣ１−Ｃ３アルキルであり、Ｒ１、Ｒ２、またはＲ３のうちの１つ以上が、独立して、Ｃ１−Ｃ３アルキルである）、
次いで、式（２）の化合物をＢｏｃ保護基試薬と接触させることによって調製される、実施形態Ｉ−８０に記載のプロセス。
【０２５１】
実施形態Ｉ−８２。式（２）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーが、式（１）の化合物：
【化１７２】
2021500354.tif 000177
（１）
またはそのエナンチオマーまたはそのジアステレオマーを、１−｛［（ｐ−ニトロベンジル）オキシ］カルボニル｝−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＰＮＺ−Ｂｔ）と接触させることによって調製される、実施形態Ｉ−８１に記載のプロセス。
【０２５２】
実施形態Ｉ−８３。脱離基が、ヨードである、実施形態Ｉ−７７〜Ｉ−８２のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２５３】
実施形態Ｉ−８４。
【化１７３】
2021500354.tif 000178
が、式（６）の化合物に対して、約１．０〜１．５モル当量で存在する、実施形態Ｉ−８３に記載のプロセス。
【０２５４】
実施形態Ｉ−８５。工程（ｆ）が、実質的に水を含まない条件で行われる、実施形態Ｉ−７７〜Ｉ−８４のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２５５】
実施形態Ｉ−８６。工程（ｆ）が、アセトニトリル、アセトン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される溶媒の存在下で行われる、実施形態Ｉ−７７〜Ｉ−８５のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２５６】
実施形態Ｉ−８７。工程（ｆ）が、ＮａＨＣＯ３の存在下で行われる、実施形態Ｉ−７７〜Ｉ−８６のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２５７】
実施形態Ｉ−８８。工程（ｆ）が、約３０℃〜４０℃の温度で行われる、実施形態Ｉ−７７〜Ｉ−８７のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２５８】
実施形態Ｉ−８９。１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）を反応混合物に添加することをさらに含む、実施形態Ｉ−７７〜Ｉ−８８のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２５９】
実施形態Ｉ−９０。式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーの結晶形態を調製することをさらに含む、実施形態Ｉ−７７〜Ｉ−８９のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２６０】
実施形態Ｉ−９１。式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを単離することをさらに含む、実施形態Ｉ−７７〜Ｉ−９０のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２６１】
実施形態Ｉ−９２。
（ｇ）式（７）の化合物、またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを、Ｂｏｃ除去試薬と接触させて、式（８）の化合物：
【化１７４】
2021500354.tif 000179
（８）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、実施形態Ｉ−７７〜Ｉ−９１のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２６２】
実施形態Ｉ−９３。Ｂｏｃ除去試薬が、ＴＦＡであり、それにより、式（８）の化合物のＴＦＡ塩またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得る、実施形態Ｉ−９２に記載のプロセス。
【０２６３】
実施形態Ｉ−９４。ＴＦＡ塩を除去して、式（８）の化合物またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、実施形態Ｉ−９３に記載のプロセス。
【０２６４】
実施形態Ｉ−９５。
（ｈ）酸で塩形成を行い、式（８）の化合物の塩またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマーを得ることをさらに含む、実施形態Ｉ−９２またはＩ−９４のプロセス。
【０２６５】
実施形態Ｉ−９６工程（ｈ）における酸は硫酸であり、それにより、式（９）の化合物の硫酸塩：
【化１７５】
2021500354.tif 000180
またはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー（式中、ｘは１〜５である）を得る、実施形態Ｉ−９５に記載のプロセス。
【０２６６】
実施形態Ｉ−９７。
【化１７６】
2021500354.tif 000181
が、二重結合である、実施形態Ｉ−５０〜Ｉ−９６のいずれか１つに記載のプロセス。
【０２６７】
実施形態Ｉ−９８。式（４）の化合物：
【化１７７】
2021500354.tif 000182
（４）
またはその塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー。
【０２６８】
実施形態Ｉ−９９式（４）の化合物が、式：
【化１７８】
2021500354.tif 000183
（４ａ）
またはその塩もしくはその溶媒和物である、実施形態Ｉ−９８に記載のプロセス。
【０２６９】
実施形態Ｉ−１００。結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）カルバメート、式（４ａ）、またはその溶媒和物。
【０２７０】
実施形態Ｉ−１０１。結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）カルバメート、式（４ａ）、またはその溶媒和物を調製するためのプロセスであって、
（ａ）式（４ａ）またはその塩もしくはその溶媒和物をアセトニトリルで処理して溶液を生成することと、
（ｂ）工程（ａ）からの溶液を加熱することと、
（ｃ）工程（ｂ）の加熱溶液に水を添加することと、
（ｄ）工程（ｃ）からの溶液を冷却することと、
（ｅ）工程（ｄ）からの溶液に種結晶を充填することと、
（ｆ）得られた固体を単離して、結晶性の式（４ａ）またはその溶媒和物を得ることと、を含む、プロセス。
【０２７１】
実施形態Ｉ−１０２。結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、またはその溶媒和物。
【０２７２】
実施形態Ｉ−１０３。結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、またはその溶媒和物を調製するためのプロセスであって、
（ａ）式（６ａ）またはその塩もしくは溶媒和物を酢酸イソプロピル（ＩＰＡｃ）で処理して溶液を生成することと、
（ｂ）工程（ａ）の溶液に水を添加して混合物を生成することと、
（ｃ）工程（ｂ）からの混合物にジクロロメタンを添加して混合物を生成することと、
（ｄ）工程（ｃ）からの混合物に種結晶を充填することと、
（ｅ）得られた固体を単離して、結晶性の式（６ａ）またはその溶媒和物を得ることと、を含むプロセス。
【０２７３】
実施形態Ｉ−１０４。工程（ｄ）が、低温で行われる、実施形態Ｉ−１０３に記載のプロセス。
【０２７４】
実施形態Ｉ−１０５。式（７）の化合物：
【化１７９】
2021500354.tif 000184
その塩もしくはその溶媒和物もしくはそのエナンチオマーもしくはそのジアステレオマー。
【０２７５】
実施形態Ｉ−１０６。式（７）の化合物が、以下の式：
【化１８０】
2021500354.tif 000185
（７ａ）
またはその塩もしくはその溶媒和物である、実施形態Ｉ−１０５の化合物。
【０２７６】
実施形態Ｉ−１０７。結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ジヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、またはその溶媒和物。
【０２７７】
実施形態Ｉ−１０８。結晶性ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ジヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、またはその溶媒和物を調製するためのプロセスであって、
（ａ）式（７ａ）またはその塩もしくは溶媒和物を酢酸イソプロピル（ＩＰＡｃ）で処理して溶液を生成することと、
（ｂ）工程（ａ）の溶液にアセトニトリルを添加して混合物を生成することと、
（ｃ）工程（ｂ）からの混合物に種結晶を充填することと、
（ｄ）得られた固体を単離して、結晶性の式（７ａ）またはその溶媒和物を得ることと、を含むプロセス。
【実施例】
【０２７８】
本開示は、以下の実施例によってさらに例示され、該実施例は、範囲または真意において本開示を本明細書に記載される特定の手順に限定するものとして解釈されるべきではない。実施例は、特定の実施形態を例示するために提供され、それにより本開示の範囲に制限されることを意図するものではないことを理解されたい。本開示の真意および／または付随の特許請求の範囲から逸脱することなく、当業者にそれ自身を示唆し得る様々な他の実施形態、修正、およびその等価物に対してリゾートを有し得ることをさらに理解されたい。
【０２７９】
別段の記載がない限り、出発成分は、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｌａｎｃａｓｔｅｒ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｉｎｃ．、Ｍａｙｂｒｉｄｇｅ、Ｍａｔｒｉｘ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、ＴＣＩ、およびＦｌｕｏｒｏｃｈｅｍ（米国）などの供給源から入手するか、もしくは当業者に既知の供給源に従って合成されるか（例えば、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ、およびＳｔｒｕｃｔｕｒｅ，第５版（Ｗｉｌｅｙ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ２０００））、または本明細書に記載されるように調製され得る。
【０２８０】
シソマイシン遊離塩基は、発酵グリコシドであり、Ｚｈｅｊｉａｎｇ  Ｚｈｅｎｙｕａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．から入手した。Ｂｏｃ−（Ｓ）−ＨＡＢＡは、Ｓｅｎｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ＡＧまたはＰｏｒｔｏｎ  Ｆｉｎｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ．から入手した。ＰＮＺ−Ｂｔは、Ｌｕｘｅｍｂｏｕｒｇ  ＢｉｏＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＬＴＤ（ＫＩＮＳＹ  Ｓ．Ｌ．）、またはＰｏｒｔｏｎ  Ｆｉｎｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ．から入手した。２−ヨードエタノールは、Ｄｏｎａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（ポーランド）から入手した。
【０２８１】
以下の略語は、別段の指示がない限り、以下の意味を有し、本明細書で使用されかつ定義されていない任意の他の略語は、それらの標準的な一般的に受け入れられている意味を有する。
％ａ／ａ：面積標準化パーセント
Ａｃ：アセテート
ＡＣＮ：アセトニトリル
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ＢｏｃＯ２：ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートまたは無水Ｂｏｃ
Ｂｏｃ−ＯＮｂ：ｔｅｒｔ−ブチル（（４Ｒ，７Ｓ）−１，３−ジオキソ−１，３，３ａ，４，７，７ａ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−４，７−メタノイソインドール−２−イル）カーボネート
ＤＡＢＣＯ：  １，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン
ＤＢＵ：  １，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデス−７−エン
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＩ：脱イオン水
ＤＩＰＥ：ジイソプロイルエーテル
ＤＩＰＥＡ：  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド、
ＤＳＣ：示差走査熱量測定
ＥＤＡＣ：  Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩
ＥｔＯＨ：エタノール
ＧＣ：ガスクロマトグラフィー
ｈまたはｈｒ：時間
ＨＡＢＡ：  ４−アミノ−２−ヒドロキシ−ブタン酸
ＨＣｌ：塩酸
ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物
ＨＰＬＣ：高性能液体クロマトグラフィー
ＩＰＡ：イソプロピルアルコール
ＩＰＡｃ：酢酸イソプロピル
ＬＣ／ＭＳ：液体クロマトグラフィー／質量分析
ＭｅＣＮ：アセトニトリル
ＭｅＯＨ：メタノール
ｍｉｎ：分
ＭＴＢＥ：メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル
ＮａＯＨ：水酸化ナトリウム
ＰＮＺ−Ｂｔ：１−｛［（ｐ−ニトロベンジル）オキシ］カルボニル｝−１Ｈ−ベンゾトリアゾール
ｐｐｍ：百万分率
ＰｒＯＨ：プロパノール
ＰｙＢＯＰ：（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＲＴまたはｒｔ：室温
ＴＢＤＭＳ：ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル
ＴＥＡ：トリエチルアミン
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＧＡ：：熱重量分析
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＵＰＬＣ：超性能液体クロマトグラフィー
ＵＶ：紫外線
ｖ／ｖ：体積分率
ｖｏｌまたはｖｏｌｓ：体積
％ｗ／ｗ：重量パーセント（ｗｅｉｇｈｔ  ｆｏｒ  ｗｅｉｇｈｔ  ｐｅｒｃｅｎｔ）
ｗｔ：重量
ＸＲＰＤ：Ｘ線粉体回折
Ｚｎ（ＯＰｉｖ）２：ピバル酸亜鉛
【０２８２】
Ｘ線粉体回折
ＸＲＰＤパターンを、Ｏｐｔｉｘの長い微小焦点源を使用して生成されたＣｕ放射線の入射ビームを使用するＰａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｘ’Ｐｅｒｔ  ＰＲＯ  ＭＰＤ回折計で収集した。楕円傾斜型多層膜ミラー（ｅｌｌｉｐｔｉｃａｌｌｙ  ｇｒａｄｅｄ  ｍｕｌｔｉｌａｙｅｒ  ｍｉｒｒｏｒ）を使用して、Ｃｕ  Ｋαｘ線の焦点を検体を経由してかつ検出器に集めた。分析前に、シリコン検体（ＮＩＳＴ  ＳＲＭ  ６４０ｄ）を分析して、Ｓｉ１１１ピークの観察位置がＮＩＳＴ認定位置と一致していることを確かめた。試料の検体を３μｍ厚フィルム間に挟み、透過型幾何形状において分析した。ビームストップ、短い散乱線除去エクステンション（ｓｈｏｒｔ  ａｎｔｉｓｃａｔｔｅｒ  ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ）、および散乱防止ナイフエッジを使用して、空気によって発生するバックグランドを最小限に抑えた。入射および回折ビーム用のソーラースリットを使用して、軸発散により拡大するのを最小限に抑えた。回折パターンを、検体から２４０ｍｍに位置する走査型位置敏感型検出器（Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ）およびＤａｔａ  Ｃｏｌｌｅｃｔｏｒソフトウェアｖ．２．２ｂを使用して収集した。
【０２８３】
熱分析
０℃〜３００℃の温度勾配を有するＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  ＤＳＣを用いて、１０℃／分の速度で、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を行った。標準的なアルミニウムパンを使用した。
【０２８４】
熱重量分析（ＴＧＡ）はＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  ２９５０熱重量分析器を使用して行った。温度較正は、ニッケルおよびＡｌｕｍｅＩ（商標）を使用して行った。各試料を白金パンに入れ、ＴＧ加熱炉に入れた。加熱炉を窒素パージ下で加熱した。
【０２８５】
実施例１−化合物４ａの合成プロトコル
化合物４ａの一般的な合成プロトコルを以下に詳述する。
【化１８１】
2021500354.tif 000186
パート１：化合物２ｂの合成
【化１８２】
2021500354.tif 000187
【０２８６】
シソマイシン遊離塩基（１．０ｋｇ±１％、２．２３ｍｏｌ）を反応器に充填し、続いてＭｅＯＨ（３．９６ｋｇ±５％または５Ｌ±５％）、次いでＤＣＭ（６．６４ｋｇ±５％または５Ｌ±５％）を充填する。次いで、温度を１５±５℃に安定させ、混合物を撹拌して完全溶解を達成する。溶解を助けるために、温度を約３０℃まで上昇させることができる。溶解後、混合物を１５±５℃の温度に冷却する。別の混合タンク中で、ＰＮＺ−Ｂｔ［（０．６９６ｋｇ）±１％，２．３３ｍｏｌ）］をＤＣＭ（１８．５９ｋｇ±５％または１４Ｌ±５％）に溶解する。１５±５℃のバッチ温度を維持しながら、ＰＮＺ−Ｂｔ溶液を約１〜約４時間の期間にわたって反応器に充填する。ＰＮＺ−Ｂｔ溶液を調製するとき、ＰＮＺ−Ｂｔの溶解を容易にするために、充填タンクジャケットを約３５℃以上に加熱しない。ＰＮＺ−Ｂｔの完全な溶解は必要ない。
【０２８７】
ＰＮＺ−Ｂｔ溶液の充填に使用される充填システムをＤＣＭ（１．３３ｋｇ±５％または１Ｌ±５％）ですすぎ、すすぎ液を反応器に送り込む（Ｔバッチ＝１５±５℃）。バッチを１５±５℃で撹拌し、反応完了のために内容物をサンプリングする。シソマイシンの含有量がＨＰＬＣ分析によって評価される面積で約２．０％以下である場合（使用するＨＰＬＣ法については表３を参照のこと）、反応が完了したとみなす。最初の試料は、ＰＮＺ−Ｂｔ充填完了の約１５分間〜１２時間後に採取される。いくつかの実施形態では、最初の試料は、ＰＮＺ−Ｂｔ充填完了の約３０分後に採取される。ＤＣＭ溶液中の追加のＰＮＺ−Ｂｔを、反応を完了させるために必要に応じて充填する。追加のＰＮＺ−Ｂｔの充填量は、以下の式で計算される：充填＝Ｐ１＊Ｄ１／（１００−Ｄ１±１％、式中、Ｐ１＝ｋｇでの最初に充填したＰＮＺ−Ｂｔの量、およびＤ１＝ＨＰＬＣによる％面積での未消費シソマイシン量。反応が完了したら、残留体積が５Ｌ±５％となるまで、バッチを、真空下にて、約４０℃以下のジャケット温度（例えば、１０〜４０℃）で濃縮する。
【０２８８】
次いで、化合物２ｂを含む反応器にＭｅＯＨ（５．５４ｋｇ±５％または７．００Ｌ±５％）を充填する。次の反応（パート２）の前に、混合物を約２５℃以下の温度（例えば、０〜２５℃）で約４８時間以下（例えば、０〜４８時間）維持することができる。
【表３】
2021500354.tif 000188
パート２：化合物３ａの合成
【化１８３】
2021500354.tif 000189
【０２８９】
約２７℃〜約３５℃（標的約３３℃）のバッチ温度を維持しながら、トリエチルアミン［（１．４８Ｌ）±２％または（１．０８ｋｇ±２％）］をパート１の最後で言及した化合物２ｂを含む反応器に充填する。トリエチルアミンの充填に使用する充填システムをＭｅＯＨ（２．３８ｋｇ±５％または３．００Ｌ±５％）ですすぎ、すすぎ液を反応混合物に添加する。バッチ温度を約２７℃〜約３５℃（標的約３３℃）に安定させる。Ｚｎ（ＯＡｃ）２・２Ｈ２Ｏ（１．６３ｋｇ±２％）をバッチに充填し、酢酸亜鉛二水和物の充填に使用する充填システムをＭｅＯＨ（２．３８ｋｇ±５％、または３．００Ｌ±５％）ですすぎ、反応混合物にすすぎを添加する。混合物を約２７℃〜約３５℃（標的約３３℃）で約３０分間〜１２時間撹拌する。特定の実施形態では、混合物を約２７℃〜約３５℃（標的約３３℃）で約６０分間以下撹拌する。
【０２９０】
別の混合タンク中に、ＭｅＯＨ（１．５８ｋｇ±５％または２．００Ｌ±５％）中のＢｏｃ２Ｏ［（２．５５ｋｇ）±２％、１１．７ｍｏｌ］の溶液を調製する。約２７℃〜約３５℃（標的約３３℃）のバッチ温度を維持しながら、調製したＢｏｃ２Ｏ溶液を約１５分間〜１２時間にわたって反応器に充填する。特定の実施形態では、約２７℃〜約３５℃（標的約３３℃）のバッチ温度を維持しながら、調製されたＢｏｃ２Ｏ溶液を約１時間以下にわたって反応器に充填する。Ｂｏｃ２Ｏ溶液に使用される充填システムをメタノール（０．１６ｋｇ±５％または０．２０Ｌ±５％）ですすぎ、すすぎ液を反応器に添加する。
【０２９１】
バッチを約２０〜４０℃の標的温度で約３〜２４時間保持し、試料内容物を反応完了についてサンプリングする。特定の実施形態では、バッチを約３３℃の標的温度で約５時間以下保持し、試料内容物を反応完了についてサンプリングする。化合物３ａに対するモノ−Ｂｏｃ−化合物２ｂ中間体：
【化１８４】
2021500354.tif 000190
の含有量がＨＰＬＣ分析による面積で約２．０％以下である場合（使用されるＨＰＬＣ法については表４を参照のこと）、反応が完了したとみなす。反応完了を確認するために最初に採取する試料を約１５分間〜１２時間後に採取する。特定の実施形態では、反応完了を確認するために採取する最初の試料を約５時間以上後に採取し、その後の試料（必要に応じて）を約３時間の間隔で採取する。この保持中のバッチ温度は、約２７〜３５℃の範囲外としない。特定の場合では、追加のＢｏｃ２Ｏを充填して反応を完了させる。上記で調製したＢｏｃ２Ｏ溶液に使用されるのと同じ濃度のＢｏｃ２Ｏで充填を行う。充填するＢｏｃ２Ｏ量は、以下の式に従って計算される：充填＝Ｐ２＊２＊Ｄ２／［１００−（２＊Ｄ２０］±２％、式中、Ｐ２＝ｋｇでの最初に充填したＢｏｃ２Ｏの量、およびＤ２＝ＨＰＬＣによる％面積での残留モノ−Ｂｏｃ−化合物２ｂの量。
【０２９２】
反応が完了したら、残留体積が１２Ｌ±５％となるまで、反応混合物を、真空下にて、約４０℃以下のジャケット温度（例えば、２０〜４０℃）で濃縮する。約２０℃〜約３０℃のバッチ温度を維持し、この温度範囲で約１５分間〜１２時間保持しながら、約２５％ｗ／ｗ（５．４６ｋｇ±５％または６．００Ｌ±５％）のアンモニアを充填する。特定の実施形態では、約２０℃〜約３０℃のバッチ温度を維持し、この温度範囲で約１時間以下保持しながら、約２５％ｗ／ｗ（５．４６ｋｇ±５％または６．００Ｌ±５％）のアンモニアを充填する。添加により発熱する。
【０２９３】
ＤＣＭ（１３．２８ｋｇ±５％または１０．００Ｌ±５％）をバッチに充填し、内容物を２５±５℃で約１２分間〜１２時間撹拌する。特定の実施形態では、ＤＣＭ（１３．２８ｋｇ±５％または１０．００Ｌ±５％）をバッチに充填し、内容物を２５±５℃で約３０分間以下撹拌する。内容物を約３０分間〜１２時間沈降させ、分離する。特定の実施形態では、内容物を少なくとも約４５分間以上沈降させ、分離する。有機相（下部の相）を受容器に移し、水相を廃棄のために排出する。生成物は有機相中にある。
【０２９４】
有機相を再び反応器に充填する。混合タンク中で混合される約２５％ｗ／ｗ（２．２８ｋｇ±５％または２．５０Ｌ±５％）のアンモニアおよびＤＩ水（２．５ｋｇ±５％または２．５Ｌ±５％）を有機相に充填し、２５±５℃で約１５分間〜１２時間撹拌する。特定の実施形態では、混合タンク中で混合される約２５％ｗ／ｗ（２．２８ｋｇ±５％または２．５０Ｌ±５％）のアンモニアおよびＤＩ水（２．５ｋｇ±５％または２．５Ｌ±５％）を有機相に充填し、２５±５℃で約３０分間以下撹拌する。内容物を約３０分間〜１２時間沈降させ、分離する。特定の実施形態では、内容物を少なくとも約４５分間沈降させ、分離する。有機相（下部の相）を受容器に移し、水相を廃棄のために排出する。生成物は有機相中にある。
【０２９５】
有機相を反応器に充填し、ＭｅＯＨ（０．７９ｋｇ±５％または１．００Ｌ±５％）を有機相に充填し、２５±５℃で約１５〜約３０分間撹拌する。ＤＩ水（５．０ｋｇ±５％、または５．０Ｌ±５％）を混合物に充填し、２５±５℃で約１５分間〜１２時間撹拌する。特定の実施形態では、ＤＩ水（５．０ｋｇ±５％、または５．０Ｌ±５％）を混合物に充填し、２５±５℃で約３０分間以下撹拌する。内容物を約３０分間〜１２時間沈降させ、分離する。特定の実施形態では、内容物を少なくとも約１時間以上沈降させ、分離する。有機相（下部の相）を受容器に移し、水相を廃棄のために排出する。生成物は有機相中にある。
【０２９６】
有機相を再び反応器に充填する。ＭｅＯＨ（１．９８ｋｇ±５％または２．５０Ｌ±５％）を有機相に充填し、２５±５℃で約１５〜約３０分間撹拌する。ＤＩ水（５．０ｋｇ±５％または５．０Ｌ±５％）を混合物に充填し、２５±５℃で約１５分間〜１２時間撹拌する。特定の実施形態では、ＤＩ水（５．０ｋｇ±５％、または５．０Ｌ±５％）を混合物に充填し、２５±５℃で約３０分間以下撹拌する。内容物を約３０分間〜１２時間沈降させ、分離する。特定の実施形態では、内容物を少なくとも約２時間以上沈降させ、分離する。有機相（下部の相）を受容器に移し、水相を廃棄のために排出する。生成物は有機相中にある。残留体積が約９Ｌ±５％となるまで、バッチを約４０℃以下（例えば、２０〜４０℃）のジャケット温度で真空下とする。混合物を約２５℃以下（例えば、０〜２５℃）の温度で約４８時間以下（例えば、０〜４８時間）維持することができる。
【表４】
2021500354.tif 000191
パート３：化合物４ａの合成
【化１８５】
2021500354.tif 000192
【０２９７】
２０±５℃の反応温度を維持しながら、ＤＩ水（０．５ｋｇ±５％または０．５Ｌ±５％）を化合物３ａを含むパート２の混合物に充填する。Ｂｏｃ−（Ｓ）−ＨＡＢＡ［（０．５１２ｋｇ）±２％、２．３４ｍｏｌ］を反応混合物に充填し、温度を２０±５℃の範囲内に維持する。Ｂｏｃ−（Ｓ）−ＨＡＢＡの充填に使用される充填システムをＤＣＭ（０．２７ｋｇ±５％または０．２０Ｌ±５％）ですすぎ、すすぎ液を反応混合物に添加する。混合物を２０±５℃のバッチ温度で撹拌する。
【０２９８】
２０±５℃の反応温度を維持しながら、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（ＨＯＢｔ・Ｈ２Ｏ、０．０５７ｋｇ±２％、０．４２ｍｏｌ）を充填する。ＨＯＢｔ・Ｈ２Ｏの充填に使用される充填システムをＤＣＭ（０．２７ｋｇ±５％または０．２Ｌ±５％）ですすぎ、すすぎ液を反応混合物に添加する。
【０２９９】
２０±５℃の温度範囲を維持しながら、バッチのｐＨを５．０±０．２に調整する。バッチｐＨは、２Ｍ  ＨＣｌ溶液を添加することによって（必要に応じて）調整される。必要な酸性溶液を、濃縮ＨＣｌ（１．３９２ｋｇ±５％または１．１８Ｌ±５％）をＤＩ水（６．００ｋｇ±５％または６．００Ｌ±５％）に添加することによって別の好適な容器中で調製する。ｐＨ調整は、典型的には、約３．５〜約４．５Ｌ／ｋｇの充填を必要とする。特定の場合では、ｐＨが約４．８未満（例えば、約５．０＋／−０．２）に低下する場合、２Ｍ  ＮａＯＨの溶液を（必要に応じて）添加して、バッチｐＨを所定の５．０±０．２の範囲内とする。特定の例では、必要に応じて、塩基性溶液をＮａＯＨ（０．５６ｋｇ±５％）およびＤＩ水（７．０ｋｇ±５％または７．０Ｌ±５％）から好適な容器中で調製する。
【０３００】
２０±５℃の温度範囲を維持しながら、ＥＤＡＣ［（０．４４７ｋｇ）±２％、２．３３ｍｏｌ］をバッチに充填する。ＥＤＡＣの充填に使用される充填システムをＤＣＭ（０．２７ｋｇ±５％または０．２０Ｌ±５％）ですすぎ、すすぎ液を反応混合物に添加する。混合物を２０±５℃の反応温度で約１５分間〜６時間撹拌し、反応完了についてサンプリングする。特定の実施形態では、混合物を２０±５℃の反応温度で約１時間以下撹拌し、反応完了についてサンプリングされる。化合物４ａに対する化合物３ａの含有量がＨＰＬＣ分析（表４に要約した方法）による面積で約１．０％以下である場合、反応は完了したとみなすことができる。ｐＨを各サンプリングで確認し、必要に応じて調整し、ｐＨ約４．８〜約６．０を維持する。特定の場合では、必要に応じて、ＨＣｌまたはＮａＯＨ溶液を上記のように添加する。最初の試料を約１５分間〜６時間の保持時間後に採取する。特定の実施形態では、最初の試料を約１時間の保持時間後に回収する。特定の実施形態では、追加の試料を約３時間の間隔で回収する。２つの試料を回収した後に反応が完了しない場合、以下の式に従って追加のＥＤＡＣおよびＢｏｃ−（Ｓ）−ＨＡＢＡを充填し、反応を完了させる。充填＝Ｐ３＊Ｄ３／（１００−Ｄ３）、式中、Ｐ３＝ｋｇでの最初に充填したＥＤＡＣまたはＢｏｃ−（Ｓ）−ＨＡＢＡの量、およびＤ３＝ａ／ａ％での未消費化合物３ａ量。
【０３０１】
完了したら、２０±５℃の反応温度を維持しながら、ＭｅＯＨ（１．５８ｋｇ±５％または２．００Ｌ±５％）を反応物に充填する。次いで、２０±５℃のバッチ温度を維持しながら、ＤＣＭ（１５．９４ｋｇ±５％または１２．００Ｌ±５％）を反応物に充填する。次いで、２０±５℃のバッチ温度を維持しながら、ＤＩ水（５．０ｋｇ±５％または５．０Ｌ±５％）を反応物に充填する。バッチｐＨは、２５±５℃の温度を維持しながら、２Ｍ  ＮａＯＨ溶液を添加することによって（必要に応じて）、約９．０〜約１０．０に調整する。ｐＨ調整は、典型的には、約３．５〜約４．５Ｌ／ｋｇの２Ｍ  ＮａＯＨ充填を必要とする。バッチｐＨが１０．０を超える場合、２Ｍ  ＨＣｌ溶液を充填して所定の範囲を達成する。混合物を約２０℃〜約３８℃の温度で約１５分間〜１２時間撹拌する。特定の実施形態では、混合物を約２０℃〜約３８℃の温度で約３０分間以下撹拌する。次いで、内容物を約３０分間〜１２時間沈降させ、分離する。特定の実施形態では、次いで内容物を少なくとも約１時間以上沈降させ、分離する。有機相（下部の相）を受容器に移し、水相を廃棄のために排出する。生成物は有機相中にある。約２０℃〜約３８℃の間でバッチ温度を維持しながら、有機相を再びＭｅＯＨ（２．３８ｋｇ±５％または３．００Ｌ±５％）に反応器に充填する。次いで、ＤＩ水（７．０ｋｇ±５％、または７．０Ｌ±５％）を混合物に充填し、約２０℃〜約３８℃の温度で約１５分間〜１２時間撹拌する。特定の実施形態では、ＤＩ水（７．０ｋｇ±５％または７．０Ｌ±５％）を次いで混合物に充填し、約２０℃〜約３８℃の温度で約３０分間以下撹拌する。内容物を約３０分間〜１２時間沈降させ、分離する。特定の実施形態では、内容物を少なくとも約１時間以上沈降させ、分離する。有機相（下部の相）を受容器に移し、水相を廃棄のために排出する。生成物は有機相中にある。残留体積が約１０Ｌ±５％となるまで、バッチを約４０℃以下（例えば、２０〜４０℃）のジャケット温度で真空下にて濃縮する。
【０３０２】
パート４：化合物４  ａの結晶化
アセトニトリル（７．８７ｋｇ±５％または１０．００Ｌ±５％）をパート３のバッチに約５分間〜４時間充填する。特定の実施形態では、アセトニトリル（７．８７ｋｇ±５％または１０．００Ｌ±５％）をパート３のバッチに約１０分間以上充填する。混合物を約４０℃以下（例えば、２０〜４０℃）のジャケット温度で真空下にて濃縮して、約１０Ｌ±５％の最終残留体積を得る。アセトニトリル（７．８７ｋｇ±５％または１０．００Ｌ±５％）をバッチに充填し、約４０℃以下（例えば、２０〜４０℃）のジャケット温度で真空下にて濃縮して、約１０Ｌ±５％の最終残留体積を得る。次いで、アセトニトリル（変動量）を充填して、約２５Ｌ±５％の最終バッチ体積を達成する。反応器の内容物は、白色固体の濃厚な（ｔｈｉｃｋ）不透明スラリーである。
【０３０３】
次いでバッチを加熱還流し（約８２℃）、約５分間〜１２時間保持する。特定の実施形態では、次いで、バッチを加熱還流し（約８２℃）、約１５分間以下保持する。保持期間中、全ての固体が溶解しないことが予想される。還流を維持しながら、混合物にＤＩ水（０．３７５ｋｇ±５％、または０．３７５Ｌ±５％）を充填する。バッチを約３０〜約６０分間撹拌し、均一溶液を達成する。約３０〜６０分以内に均一溶液が得られない場合、追加の部分（ｐｏｒｔｉｏｎ）のＤＩ水（０．１２５ｋｇ±５％または０．１２５Ｌ±５％）を充填して、残留固体を溶解させる。より多くの水を添加することは、典型的には、品質に対して僅かな有益な効果を有するが、より低い収量をもたらし得る。均一溶液を得たら、バッチを約１５分間〜１２時間にわたって７５±３℃の温度に冷却する。特定の実施形態では、均一溶液を得たら、バッチを約１時間以下にわたって７５±３℃の温度に冷却する。
【０３０４】
７５±３℃の温度を維持しながら、バッチに化合物４ａ種（０．０１ｋｇ±２％）を充填する。種スラリー充填容器およびラインをアセトニトリル（０．０８ｋｇ±５％または０．１０Ｌ±５％）ですすぎ、すすぎ液をバッチに添加する。次いで、バッチを約１５分間〜１２時間撹拌する。特定の実施形態では、次いで、バッチを約３０分以上撹拌する。バッチを３０分間〜１２時間にわたって５０±５℃の温度に冷却し、適度な撹拌でさらに約２〜１２時間保持して、濃厚なスラリーを得る。特定の実施形態では、バッチを約２時間以上にわたって５０±５℃の温度に冷却し、適度な撹拌でさらに約２〜１２時間保持して、濃厚なスラリーを得る。バッチを約１〜２４時間にわたって約−５〜約５℃の温度範囲に冷却し、さらに約４〜１２時間保持する。特定の実施形態では、バッチを約−５〜約５℃の温度範囲に約１時間以上冷却し、さらに約４〜１２時間保持する。バッチを濾過し、脱液し（ｄｅｌｉｑｕｏｒｅｄ）、濾過ケーキを０±５℃のアセトニトリル（０．７９ｋｇ±５％または１．００Ｌ±５％）で洗浄し、脱液する。
【０３０５】
生成物を約５５℃以下（例えば、０〜５５℃）の温度で真空下にて乾燥させる。乾燥時の損失が約１％ｗ／ｗ以下である場合、乾燥は完了したとみなす。生成物を乾燥窒素の吹付下で乾燥させる。乾燥後の生成物を好適なふるい操作で砕塊し得る。シソマイシン遊離塩基から化合物４ａまでの３工程にわたる収率は約６５％である。
【０３０６】
約７０％の高収率、少なくとも約８８．０８％以上の高純度（結晶化前の材料の純度は約７７．７５％であった）、および混合物の濾過が容易であるため、７５±３℃で１．５％  ＤＩ水を用いたアセトニトリル中での種晶添加結晶化、続いて冷却を選択し得る。しかしながら、いくつかの結晶化手順を試験した後に、７５±３℃で１．５％ＤＩ水を用いたアセトニトリル、続いて冷却を選択した。これらは表５に詳述されている。アセトニトリルとの共溶媒としての水（約１．５％）の使用により、結晶化に必要な処理体積が低減し得る。
【表５−１】
2021500354.tif 000193
【表５−２】
2021500354.tif 000194
【表５−３】
2021500354.tif 000195
【表５−４】
2021500354.tif 000196
【表５−５】
2021500354.tif 000197
【０３０７】
パート５：化合物４ａの特性決定データ
化合物４ａのＸＲＰＤスペクトルを図１に示す。化合物４ａのＴＧＡは、２５〜１８９℃において０．１重量％の変化しかなかったので無水／非溶媒和材料と一致し、これは低揮発性内容物を示唆した（図２）。化合物４ａのＤＳＣプロファイルを図３に示す。
【０３０８】
実施例２−化合物６ａの合成プロトコル
化合物６ａの一般的な合成プロトコルを以下に詳述する。
【化１８６】
2021500354.tif 000198
パート１：化合物５ａの合成
【化１８７】
2021500354.tif 000199
【０３０９】
化合物４ａ（１．０ｋｇ±１％）およびＭｅＯＨ（７．９２ｋｇ±５％または１０．００Ｌ±５％）を反応器に充填する。混合物を５０±５℃の温度に加熱する。５０±５℃の温度を維持しながら、メタノール（０．２０ｋｇ±５％または０．２５Ｌ±５％）中のＢｏｃ２Ｏ（０．２５５ｋｇ±２％）の溶液を反応器に添加する。メタノール（０．２０ｋｇ±５％または０．２５Ｌ±５％）とともにＢｏｃ２Ｏ溶液の充填に使用する充填システムをすすぎ、５０±５℃の温度を維持しながら、すすぎ液を反応混合物に添加する。反応完了までバッチを５０±５℃で保持する。化合物４ａの含有量がＨＰＬＣによる面積で約３．０％以下である場合（使用するＨＰＬＣ法については表６を参照のこと）、反応が完了したとみなすことができる。分析用の最初の試料を反応時間の約１５分間〜１２時間後に回収する。特定の実施形態では、分析用の最初の試料を反応時間の３時間後に回収し、必要に応じて、その後の試料を約３時間の間隔で回収する。反応を完了するために必要な場合、メタノール溶液中の追加のＢｏｃ２Ｏを反応混合物に添加する。追加する量は、以下の式に従って算出する：充填＝Ｐ１×（Ａ２／［１００−Ａ２］）±１％、式中、Ｐ１＝反応において初期に充填されたＢｏｃ２Ｏの量（ｋｇ）、およびＡ２＝ａ／ａ％での最後の試料中の未消費化合物４ａの量。
【０３１０】
反応が完了したら、バッチを２０±５℃に安定させる。バッチをこの温度範囲で最大約５５時間（例えば、０〜５５時間）保持することができる。
【表６】
2021500354.tif 000200
パート２：化合物６ａの合成
【化１８８】
2021500354.tif 000201
【０３１１】
脱イオン水（７．７８ｋｇ±５％または７．７８Ｌ±５％）を反応器に充填し、固体水酸化ナトリウム（０．３９ｋｇ±１％）を添加し、続いて視覚的に溶解するまで撹拌する。脱イオン水の一部を、水酸化ナトリウムの充填後および／または亜ジチオン酸ナトリウムの充填後に充填し、これらの材料の充填に使用する充填デバイスをすすぐために使用し得る。温度を約０〜５℃に安定させる。溶液の温度を約０℃〜約５℃に保ちながら、亜ジチオン酸ナトリウム（１．１９６ｋｇ±１％）を塩基性水溶液に添加する。添加中の温度を高くすることにより、生成物の純度が低くなり得る。混合物を約０〜５℃で５分間〜１２時間撹拌する。特定の実施形態では、混合物を約０〜５℃で約１５分間以下撹拌する。ジチオナイト溶液は、Ｎａ２Ｓ２Ｏ４充填から約０〜４時間以内に使用しなければならない。特定の実施形態では、ジチオナイト溶液は、Ｎａ２Ｓ２Ｏ４充填から約９０分以内に使用しなければならない。
【０３１２】
混合物の温度を約−５℃〜約１５℃未満に維持しながら、パート１の反応混合物を約１〜８時間（例えば、１〜４時間）にわたって塩基性亜ジチオン酸ナトリウム溶液に添加する。特定の実施形態では、混合物の温度を約１０℃未満に維持しながら、パート１の反応混合物を約１〜４時間にわたって塩基性亜ジチオン酸ナトリウム溶液に添加する。添加により発熱し、添加をより速くすることにより、ガム状の固形物が得られる。反応混合物の充填に使用する充填システムをメタノール（０．４０ｋｇ±５％または０．５０Ｌ±５％）ですすぎ、すすぎ液をバッチに添加する。バッチを約１〜４時間の期間にわたって約２５℃〜約３０℃の温度に加熱する。特定の実施形態では、バッチを約２時間の期間にわたって約２５℃〜約３０℃の温度に加熱する。典型的には、最大ジャケット温度は、約２５〜３５℃であり、約１０℃以下（例えば、０〜１０℃）のジャケット温度とバッチ温度との間のΔＴを維持する。特定の実施形態では、最大ジャケット温度は約３０℃であり、約１０℃以下のジャケット温度とバッチ温度との間のΔＴを維持する。反応が完了するまでバッチを約２５〜３０℃の温度で撹拌する。より高い反応温度により、不純物の量が多くなり得る。
【０３１３】
０．４３以下の相対保持時間でのピークの内容物：
【化１８９】
2021500354.tif 000202
がＨＰＬＣによって約３．０％ａ／ａ以下である場合（表６に詳述する方法と同じ）、反応が完了したとみなす。特定の実施形態では、最初の試料を加熱期間の終了時に採取し、その後の試料を約３時間間隔で採取する。
【０３１４】
反応が完了したら、混合物を、真空下にて、約２０〜４０℃のジャケット温度で最終体積１３Ｌ±５％まで蒸留する。特定の実施形態では、反応が完了したら、混合物を、真空下にて、約３５℃以下のジャケット温度で最終体積１３Ｌ±５％まで蒸留する。約２５〜４０℃の温度を維持しながら、ＩＰＡｃ（３．４９ｋｇ±５％または４．００Ｌ±５％）をバッチに充填する。次いで、約２５〜４０℃の温度を維持しながら、脱イオン水（７．０ｋｇ±５％または７．０Ｌ±５％）をバッチに充填する。混合物を約３０〜４０℃の温度で約１５分間〜１２時間撹拌する。特定の実施形態では、混合物を約３０〜４０℃の温度で約２０分以上撹拌する。一部の未溶解の塩の存在でも支障なく相分離が進み得る限り、塩の完全な溶解は必要ない。
【０３１５】
撹拌を停止し、層を約３０分間〜１２時間分離させる。特定の実施形態では、撹拌を停止し、層を約１時間以上分離させる。水相（水相１）を受容器に移す。生成物豊富な有機相（有機相１）を別の受容器に移す。約２５〜４０℃の温度を維持しながら、ＩＰＡｃ（１．７４ｋｇ±５％または２．００Ｌ±５％）を水相１に充填する。混合物を３５±５℃の温度で約１５分間〜１２時間撹拌する。特定の実施形態では、混合物を３５±５℃の温度で約２０分以上撹拌する。塩は約３０℃未満で沈殿し得る。撹拌を停止し、層を約３０分間〜１２時間分離させる。特定の実施形態では、撹拌を停止し、層を約１時間以上分離させる。下部の水相（水相２）を廃棄する。
【０３１６】
有機相１および２を好適な受容器中で合わせる。約６．５％ｗ／ｗの重炭酸ナトリウム水溶液を、ＮａＨＣＯ３（０．４２ｋｇ±５％）を脱イオン水（６．００ｋｇ±５％または６．００Ｌ±５％）に溶解させることによって調製する。この溶液の温度を２５±５℃に安定させる。約２〜６Ｌの６．５％ｗ／ｗＮａＨＣＯ３溶液を合わせた有機相に充填する。特定の実施形態では、約３Ｌの６．５％ｗ／ｗＮａＨＣＯ３溶液を合わせた有機相に充填する。溶液を２５±５℃の温度で約１５分間〜１２時間撹拌する。特定の実施形態では、溶液を２５±５℃の温度で約２０分以上撹拌する。次いで、撹拌を停止し、層を０〜４８時間程度分離させる。特定の実施形態では、次いで、撹拌を停止し、層を約１時間以上分離させる。下部の水相を廃棄する。有機相（有機相３）を約２５℃以下（例えば、０〜２５℃）で約０〜４８時間維持し得る。特定の実施形態では、下部の水相を廃棄する。有機相（有機相３）を約２５℃以下で最大約２４時間維持し得る。
【０３１７】
約２〜６Ｌの６．５％ｗ／ｗ  ＮａＨＣＯ３溶液を有機相３に充填する。特定の実施形態では、約３Ｌの６．５％ｗ／ｗＮａＨＣＯ３溶液を有機相３に充填する。混合物を２５±５℃の温度で約３０分間〜１２時間撹拌する。特定の実施形態では、混合物を２５±５℃の温度で約２０分以上撹拌する。次いで、撹拌を停止し、層を約１時間以上分離させる。下部の水相を廃棄する。有機相（有機相４）を約２０〜２５℃以下で最大約２４時間維持し得る。特定の実施形態では、有機相（有機相４）を約２５℃以下で最大約２４時間維持し得る。
【０３１８】
有機相４を、真空下にて、約５０℃以下（例えば、２０〜５０℃）のジャケット温度で３Ｌ±５％の最終体積まで蒸留する。ＩＰＡｃ（２．６２ｋｇ±５％またを３．００Ｌ±５％）をバッチに充填する混合物を、真空下にて、約５０℃以下（例えば、２０〜５０℃）のジャケット温度でて３Ｌ±５％の最終体積まで蒸留する。ＩＰＡｃ（２．６２ｋｇ±５％または３．００Ｌ±５％）をバッチに充填する。次いで、混合物を、真空下にて、約５０℃以下（例えば、２０〜５０℃）のジャケット温度で４．５Ｌ±５％の最終体積まで蒸留する。次いで、約３５〜４０℃の温度を維持しながら、脱イオン水（０．１３５ｋｇ±５％または０．１３５Ｌ±５％）をバッチに充填する。バッチの温度を約１５〜約３０℃に調節する。約１５〜３０℃の温度を維持しながら、ＤＣＭ（５．９８ｋｇ±５％または４．５０Ｌ±５％）をバッチに充填する。いくつかの場合では、化合物６ａの完全な溶解が達成されたにもかかわらず、混合物は濁っている。
【０３１９】
約２０〜２５℃の温度を維持しながら、化合物６ａ種（０．０２ｋｇ±２％）をバッチ溶液に充填する。結晶化は観察されるが、結晶化速度は遅くなり得る。混合物を約２０〜２５℃の温度で約１〜２時間混ぜ、スラリーが現れる。スラリーが観察されない場合、混合物を約１５〜２０℃の温度に冷却し、約１５〜２０℃の温度を約１〜約２時間維持しながら、追加の化合物６ａ種（０．０２ｋｇ±２％）をバッチ溶液に添加する。その後、スラリーが現れる。種晶添加中および種晶添加後の温度を低くすることにより、純度は低くなるが、収率は高くなり得る。
【０３２０】
バッチを約１５〜２５℃に冷却し、この温度範囲で約１８〜２４時間撹拌する。バッチを約１〜１２時間にわたって約５℃〜約−５℃の温度に冷却し、この温度範囲で約６〜１２時間撹拌しながら保持する。特定の実施形態では、バッチを約２時間にわたって約５℃〜約５℃の温度に冷却し、約６〜１２時間撹拌しながらこの温度範囲で保持する。このエージング時間は収率に重要である。バッチを好適なフィルタに排出し、脱液する。湿ケーキを約５℃〜−５℃のＤＣＭ溶液（１．３３ｋｇ±５％または１．００Ｌ±５％）で洗浄し、続いて脱液する。生成物を、真空下にて、約４５℃以下（例えば、０〜４５℃）で乾燥させる。乾燥時の損失が約１％ｗ／ｗ以下の場合、乾燥は完了する。生成物を、真空下にて、窒素吹付で乾燥させ得る。生成物を乾燥操作後にふるいをかけ得る。化合物４ａから化合物６ａまでの２工程にわたる収率は、約８５％である。蒸留の最終体積、ＤＣＭ量、含水量、種晶添加およびエージング温度、ならびに種晶添加後のエージング時間などの変動のうちのいくつかをより厳しくすることにより、典型的な純度結果を伴う典型的な結晶化を提供し得る。水は収率に影響を及ぼし得るが、生成物の質とは関係がないようである。
【０３２１】
パート３：化合物６ａの結晶化条件の最適化
約１％の水を含むジクロロメタン／酢酸イソプロピル（５０／５０ｖ／ｖ）、約２％の水を含む酢酸イソプロピル／ジクロロメタン（７１／２９ｖ／ｖ）、および約８％の水を含む酢酸イソプロピル／ジクロロメタン（７１／２９ｖ／ｖ）中の化合物６ａの溶解度は、温度に強い依存性を示す。高温では、約１％の水を含むジクロロメタン／酢酸イソプロピル（５０／５０ｖ／ｖ）中で限定的な溶解度が観察され得、約２％の水を含む酢酸イソプロピル／ジクロロメタン（７１／２９ｖ／ｖ）および８％の水を含む酢酸イソプロピル／ジクロロメタン（７１／２９ｖ／ｖ）中で中程度の溶解度が観察され得る。曇点は全て、反応器が約６〜８℃の最低温度に達すると発生し、全ての条件下で大きな準安定域幅を示す可能性がある。約１％の水を含むジクロロメタン／酢酸イソプロピル（５０／５０ｖ／ｖ）中の約７．９ｍｇ／ｍＬでは、雲点は約６〜８℃で約３時間および８時間まで発生しない。これらの結果は、種晶添加の使用がなければ、主な核生成事象（自発的核生成）のタイミングについて不一致となることが予想され得ることを示し得る。さらに、核生成は、高い過飽和レベルで一貫して発生し、時には、低い結晶化度、結晶欠陥、例えば、溶媒の含有、および／または小さな粒子の形成をもたらす。
【０３２２】
溶解度および準安定域幅の決定実験からの各溶媒系からの選択された試料を真空濾過によって単離する。固体を約１％の水を含むジクロロメタン／酢酸イソプロピル（５０／５０ｖ／ｖ）から単離した場合、濾過の問題は認められない。しかし、約２％および約８％の両方の水を含む酢酸イソプロピル／ジクロロメタン（７１／２９ｖ／ｖ）から単離した固体からは、粘着性固体およびいくつかの潮解が観察される。約１％の水を含むジクロロメタン／酢酸イソプロピル（５０／５０ｖ／ｖ）から単離した材料は結晶性である。約２％の水を含む酢酸イソプロピル／ジクロロメタン（７１／２９ｖ／ｖ）から単離した材料は不規則であり、約８％の水を含む酢酸イソプロピル／ジクロロメタン（７１／２９ｖ／ｖ）から単離した材料は少量のｘ線非晶質材料を含み得る。
【０３２３】
パート４：化合物６ａの特性決定データ
化合物６ａのＸＲＰＤスペクトルを図４に示し、ピーク位置は表１に列挙するものに実質的に従う。化合物６ａのＴＧＡは、２４．１〜７８．６℃で４．５重量％の損失を示した（図５）。化合物６ａのＤＳＣにおける主な発熱事象は、２３１．８℃の左限界温度および−５２．９ｋＪ／ｋｇのエネルギーで発生した（図６）。
【０３２４】
実施例３：化合物７ａの合成プロトコル
化合物７ａの一般的な合成プロトコルを以下に詳述する。
パート１：化合物７ａの合成
【化１９０】
2021500354.tif 000203
【０３２５】
化合物６ａ（１．０ｋｇ±１％）およびアセトニトリル（３．９４ｋｇ±５％＜＞５．００Ｌ±５％）を反応器に充填する。混ぜながら温度を約１５℃〜約３０℃で安定させる。溶液は濁っていてもよい。混合物を、真空下にて、約４５℃の最高温度（例えば、２０〜４５℃）で２Ｌ±５％の最終体積まで蒸留する。
【０３２６】
カール・フィッシャー（Ｋａｒｌ  Ｆｉｓｃｈｅｒ）による含水量の決定のために試料を採取する。含水量が約０．３０％ｗ／ｗ以下である場合、反応を次の工程に進める。さもなくば、アセトニトリル（２．３６ｋｇ±５％＜＞３．００Ｌ±５％）を反応器に充填し、蒸留後の溶液中の含水量がカール・フィッシャーによる約０．３０％ｗ／ｗ以下になるまで蒸留を繰り返す。
【０３２７】
反応混合物を約３０℃〜約１５℃の温度に冷却し、アセトン（３．９４ｋｇ±５％＜＞５．００Ｌ±５％）を反応器に充填する。アセトンの一部を重炭酸ナトリウムおよび／または２−ヨードエタノール充填後に充填し、これらの充填に使用する充填システムをすすぐために使用し得る。
【０３２８】
反応混合物を約３３℃〜約３７℃の温度に加熱する（標的は約３５℃である）。約３３℃〜約３７℃の反応混合物の温度を維持しながら（標的は約３５℃である）、重炭酸ナトリウム（０．１７７ｋｇ±２％）を反応器に充填する。反応混合物の温度を約３３℃〜約３７℃に維持しながら（標的は約３５℃である）、２−ヨードエタノール（０．２２６ｋｇ±２％＜＞０．１０２Ｌ±２％）を反応混合物に充填する。化合物７ａに対する化合物６ａの含有量がＨＰＬＣによる面積で約２．５％以下になるまで、反応混合物を約３３℃〜約３７℃の温度で（標的は約３５℃である）混ぜる。反応を完了するために必要な場合、追加の２−ヨードエタノールを反応混合物に添加する。Ｋｇでの追加の２−ヨードエタノールの量は、以下の式を用いて計算される：［Ｐ２ｘＤ／（１００−Ｄ）］±２％、式中、Ｐ２は、反応中に最初に充填されたｋｇでの２−ヨードエタノールの量であり、Ｄは、最後のプロセス内（ｉｎ−ｐｒｏｃｅｓｓ）対照試料中のＨＰＬＣによる％面積での非消費化合物６ａの含有量である。面積パーセントは、ＨＰＬＣ−ＵＶによって決定される：Ｚｏｒｂａｘ  ＳＢ−ＣＮ、３．５μｍ、１５０ｘ４．６ｍｍ、Ａ：２５ｍＭ  Ｋ２ＨＰＯ４；Ｂ：アセトニトリル勾配：２５分間で５〜８０％Ｂ、５分間保持；５分間再平衡、流量：１．０ｍＬ／分、ＵＶ：２１０ｎｍ、カラム温度：３０℃。
【０３２９】
完了したら、反応混合物を約２５℃〜約２０℃の温度に冷却する。約２０℃〜約２５℃の温度を維持しながら、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ、０．２４ｋｇ±２％）を反応混合物に充填し、ＧＣによる２−ヨードエタノールの含有量が該方法の乾燥時の損失より低くなるまで（＜０．００３％ｗ／ｗ）、この温度範囲で混ぜる。ＧＣ法は、０．３２ｍｍのＩ．Ｄ．を備えた５０ｃｍＤＢ−１カラムを使用する。最初のオーブン温度は約７０℃であり、約１分保持し、続いて勾配を約１０℃／分間〜約２５０℃とする。約１５℃〜約３０℃の温度を維持しながら、脱イオン水（５．００ｋｇ±５％＜＞５．００Ｌ±５％）を混合物に添加する。この添加により発熱する。約１５℃〜約３０℃の温度を維持しながら、酢酸イソプロピル（４．３６ｋｇ±５％＜＞５．００Ｌ±５％）を添加し、混合物を約１５℃〜約３０℃の温度で約５分間〜１２時間混ぜる。特定の実施形態では、約１５℃〜約３０℃の温度を維持しながら、酢酸イソプロピル（４．３６ｋｇ±５％＜＞５．００Ｌ±５％）を添加し、混合物を約１５℃〜約３０℃の温度で約２０分以上混ぜる。次いで、混ぜることを停止し、層を約３０分間〜１２時間分離させる。特定の実施形態では、次いで、混ぜることを停止し、層を少なくとも約３０分間以上分離させる。水相１（下部の相）を排出し、有機相１を受容器中に排出する。生成物は有機相中にある。
【０３３０】
酢酸イソプロピル（２．６２ｋｇ±５％＜＞３．００Ｌ±５％）を水相１に添加し、混合物を約１５℃〜約３０℃の温度で約１５分間〜１２時間混ぜる。特定の実施形態では、酢酸イソプロピル（２．６２ｋｇ±５％＜＞３．００Ｌ±５％）を水相１に添加し、混合物を約１５℃〜約３０℃の温度で約２０分以上混ぜる。混ぜることを停止し、層を少なくとも約３０分間以上（例えば、３０分間〜１２時間）分離させる。水相２（下部の相）を廃棄のために排出する。有機相２を受容器に排出する。生成物は有機相中にあり、有機相１および２を合わせる。
【０３３１】
塩化ナトリウム水溶液を、塩化ナトリウム（技術（ｔｅｃｈｎｉｃａｌ））（２．００ｋｇ±１％）を脱イオン水（５．８０ｋｇ±５％＜＞５．８０Ｌ±５％）に溶解することによって調製する。約２〜６Ｌの塩化ナトリウム水溶液を合わせた有機相に充填し、混合物を約１５℃〜約３０℃の温度で約１５分間〜１２時間混ぜる。特定の実施形態では、約３Ｌの塩化ナトリウム水溶液を合わせた有機相に充填し、混合物を約１５℃〜約３０℃の温度で約２０分以上混ぜる。混ぜることを停止し、層を約１５分間〜１２時間分離させる。特定の実施形態では、混ぜることを停止し、層を少なくとも約３０分間以上分離させる。水相３（下部の相）を廃棄のために排出する。生成物を含む有機相３を受容器中に排出する。
【０３３２】
約２〜６Ｌの塩化ナトリウム水溶液を合わせた有機相に充填し、混合物を約１５℃〜約３０℃の温度で約１５分間〜１２時間混ぜる。特定の実施形態では、約３Ｌの塩化ナトリウム水溶液を合わせた有機相に充填し、混合物を約１５℃〜約３０℃の温度で約２０分以上混ぜる。混ぜることを停止し、層を少なくとも約３０分間以上（例えば、３０分間〜１２時間）分離させる。水相４（下部の相）を廃棄のために排出する。生成物を含む有機相４を受容器中に排出する。
【０３３３】
有機相を、真空下にて、約２０〜５０℃（例えば、５０℃）の最大ジャケット温度で２Ｌ±５％の最終体積まで蒸留する。アセトニトリル（８．０３ｋｇ±５％＜＞１０．２０Ｌ±５％）を混合物に充填し、混合物を、真空下にて、約２０〜５０℃（例えば、５０℃）の最大ジャケット温度で７．２Ｌ±５％の最終体積まで蒸留する。酢酸イソプロピル（０．７０ｋｇ±５％＜＞０．８０Ｌ±５％）および脱イオン水（０．０９５ｋｇ±２％＜＞０．０９５Ｌ±２％）を溶液に充填し、溶液を約７０℃〜約８０℃の温度に加熱し、化合物７ａの完全な溶解を確実にする。
【０３３４】
化合物７ａの溶液を約６５℃〜約６０℃の温度に冷却する。種を添加する前に結晶化が生じた場合、完全に溶解するまで、混合物を再び約７０℃〜約８０℃の温度に加熱し得る。種を添加する前に、混合物を約６５℃〜約６０℃の温度に冷却する。約６０℃〜約６５℃の温度を維持しながら、化合物７ａ種（０．０２ｋｇ±５％ｋｇ）を化合物７ａの溶液に充填する。化合物７ａ種の充填に使用する充填システムをアセトニトリル（０．０４ｋｇ±５％＜＞０．０５Ｌ±５％）ですすぎ、すすぎ液を反応混合物に添加する。混合物を約６０℃〜約６５℃の温度で約４〜約６時間混ぜる。非常に濃厚な懸濁液が形成される。
【０３３５】
混合物を約１２時間にわたって約５℃〜約０℃の温度に冷却し、この温度範囲で約１〜約２時間混ぜる。標的冷却速度は約５〜１０℃／時間である。生成物を濾過し、約０℃〜約５℃の温度に予め冷却したアセトニトリル（２．８３ｋｇ±５％＜＞３．６０Ｌ±５％）で洗浄する。次いで、生成物を、真空下にて、約４５℃以下（例えば、０〜４５℃）の温度で、乾燥時の損失が約１％ｗ／ｗ以下になるまで乾燥させる。生成物を窒素吹付で乾燥させる。乾燥中または乾燥後に生成物をふるいにかけ得る。化合物７ａの収率は約９０％である。
【０３３６】
パート２：ハロエタノールによる６’アミンアルキル化の最適化
６’アミノアルキル化のいくつかの条件を試験した後に、ＡＣＮの共沸蒸留を選択し、続いて、アセトン、２−ヨードエタノール、および重炭酸ナトリウムを添加し、ＤＡＢＣＯを使用して反応物をクエンチした。
【０３３７】
６’アミンをハロエタノールでアルキル化する２つのアプローチを最初に調べた。第１のアプローチでは、６’アミンをｏ−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（ノシル−Ｃｌ））を使用して活性化して、対応する６’アミノノシレート（ｎｏｓｙｌａｔｅ）を得た。２−ヨードまたは２−ブロモエタノールを使用したノシレートのその後のアルキル化は、ＴＢＤＭＳヒドロキシル保護の有無にかかわらず最適ではなく、溶媒（例えば、ＴＨＦ、ＡＣＮ、またはＤＭＦ）、塩基（例えば、ＤＩＰＥＡまたはＫ２ＣＯ３）および温度（例えば、周囲〜約８０℃）の変化によってほとんど改善されなかった。第２のアプローチは、ＮａＩおよびＮａ２ＣＯ３の存在下で、周囲温度で２−ブロモエタノールを使用して直接６’アミンアルキル化することにより、より完全な変換およびより清浄な粗生成物が得られる可能性があった。２−ブロモエタノール、ヨウ化ナトリウム、および炭酸ナトリウム条件をさらなる評価および進展のために選択した。
【０３３８】
約２〜約３モル当量の２−ブロモエタノールにより、反応条件が改善することが見出され、僅かに少ないジアルキル化された副生成物が約２当量で形成された。変換範囲は約５１〜６８％であり、６５％超の変換を達成するためには約１〜２当量のＮａＩが必要であった。しかしながら、ブロモエタノールおよびヨウ化ナトリウムは、反応混合物に対する水の可能な有意な寄与要因として同定された。反応混合物中の水は、結果に対して最適ではなく、より高いレベルのジアルキル化された副生成物と相関性がある可能性があった。化合物６ａによっても、潜在的に、有意な水がバッチに寄与したが、これは、アセトニトリルを使用した共沸蒸留によって除去することができた。エタノールまたは後に影響を受けた生成物沈殿物（イソプロパノール）など、他の共沸溶媒は、潜在的に有効性が低かった。アセトンは、アルキル化反応のための可能な好ましい溶媒として同定された。理論によって限定されないが、アルキル化を妨げ得た潜在的なアセトンイミニウム種の中間体がＬＣ／ＭＳの証拠に基づいて推定された。理論によって制限されないが、バッチ中の水がこの仮定されたイミンの形成を阻害したかまたは該イミンを不安定化させ、これにより、ジアルキル化された副生成物の形成が可能となった可能性がある。理論によって限定されないが、乾燥剤としての炭酸ナトリウムの役割は、該炭酸ナトリウムが炭酸リチウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、重炭酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、およＤＩＰＥＡよりも高い収率をもたらすので重要であり得る。約−１０℃、約０℃、および約２３℃と比較して約３５℃の反応温度では、最小相対量のジアルキル化された副生成物とともに最大相対度の変換がもたらされた。より高い反応温度（例えば、約５０℃）は、より多くのジアルキル化された副生成物の形成をもたらし得る。
【０３３９】
しかしながら、ブロモエタノールおよびヨウ化ナトリウムは、副生成物の形成をもたらす反応混合物中の水の主な寄与物である可能性があり、２−ヨードエタノールをインサイチューで生成するために使用され、２−ヨードエタノールも試験した。ブロモエタノールはまた、２−ヨードエタノールよりも非常に遅い反応をもたらした。アセトン中の約１．２モル当量の２−ヨードエタノールの使用は、約３５℃、約２４時間で約８６％の収率の化合物７ａを得るのに十分であり、化合物６ａはわずか約２％であり、ジアルキル化された不純物は約２．６％であった。約１．１モル当量の２−ヨードエタノールの使用により、収率約８３％の化合物７ａが得られ、化合物６ａは約６．９％であり、ジアルキル化された不純物は約１．５％であり、約１．５モル当量の２−ヨードエタノールの使用により、収率約８７％の化合物７ａが得られ、化合物６ａは約１．９％であり、ジアルキル化された不純物は約２．３％であった。より長い反応時間（約４１時間または約４８時間）は、化合物６ａをさらに消費せずに、化合物７ａの減少をもたらし得る。ＮａＨＣＯ３は、反応のための塩基として試験され、Ｎａ２ＣＯ３、Ｎａ２ＳＯ４、トリメチルアミン、オルトギン酸トリメチル、およびヘキサメチルジシラザンよりも好ましいものであり得る。Ｎａ２ＣＯ３は、ＮａＨＣＯ３およびＮａ２ＳＯ４と比較して、反応終了時に比較的により高い最終ｐＨおよびより高い量のジアルキル化された副生成物をもたらし、Ｎａ２ＳＯ４は、単離された生成物中に新たな不純物の発生をもたらした。ジメチルアミン、トリメチルアミン、ジエタノールアミン、水酸化ナトリウム水溶液、ＤＢＵ、システイン、およびＭｅＯＨなどの試験された他のスカベンジャーが、プロセス内および単離された生成物レベルの間で約６３〜１０３０％のジアルキル化された副生成物の増加を示し、このことは、残留２−ヨードエタノールが破壊され得ないことを示唆しているので、ＤＡＢＣＯは、過剰２−ヨードエタノールに対する好ましいクエンチ剤であり得る。
【０３４０】
約５体積のＡＣＮ中の化合物６ａの共沸乾燥は、アセトン、２−ヨードエタノール、および重炭酸ナトリウムを用いたアミンアルキル化反応に良好に作用し、続いてＤＡＢＣＯが反応をクエンチすることが見出された。約５体積のアセトン、ＮａＨＣＯ３、および約１．２モル当量の２−ヨードエタノールと、約２〜４０℃の反応温度と、の組み合わせ条件により、低レベルのジアルキル化された副生成物とともに２％未満の化合物６ａが達成された。特定の実施形態では、約５体積のアセトン、ＮａＨＣＯ３、および約１．２モル当量の２−ヨードエタノールと、約３５℃の反応温度と、の組み合わせ条件により、低レベルのジアルキル化された副生成物とともに２％未満の化合物６ａが達成された。さらに、塩水を用い、酸および塩基抽出を用いずに、簡素化したワークアップを使用して調製された化合物７ａの品質が、酸および塩基抽出を用いた長期のワークアップよりも優れているものであり得ることが見出された。また、食塩水洗浄による水洗浄の置き換えは、生成物品質の損失を伴わずに約１５パーセントのモル収率の増加と相関した。
【０３４１】
パート３：化合物７ａの結晶化条件の最適化
種晶添加を伴う、約０．７５〜２％ｗ／ｗ水を添加した約８体積の１０％ｖ／ｖ  ＩＰＡｃ／ＡＣＮからの粗化合物７ａの結晶化前に、いくつかの結晶化手順を試験した（表７〜１１を参照のこと）。さらに、種晶添加温度での長い保持時間（約６０℃〜約６５℃で２時間超）および遅い冷却勾配（約５〜１０℃／時間で約６０℃〜約０℃まで低下）が、流動性スラリーを得るのに最適であり得る。この手順は、未反応化合物６ａ、ペンタ−Ｂｏｃ不純物（約６３％の除去を組み合わせる）、およびジアルキル化された副生成物（約３６％の除去）を十分に除去し、容易に濾過可能でありかつ洗浄可能な固体生成物を提供し得る。生成物が針状または棒状結晶となったので、ＩＰＡｃ／ＡＣＮからの結晶化合物７ａの脱液特性により、母液中の不純物の除去が改善し得る。対照的に、ＩＰＡｃおよびｎ−ヘプタンを用いた実験により、非晶質材料が生成され、これを濾過してゆっくりと脱液し、不純物を生成物中に残留させた。
【表７】
2021500354.tif 000204
（ａ）濃厚な、混ぜることが不能なスラリー。濾過を可能にするために、追加の溶媒（一般的に５体積）を添加した。
【表８−１】
2021500354.tif 000205
【表８−２】
2021500354.tif 000206
（ａ）スラリー（ｂ）アセトニトリルおよびヘプタンは、室温で非混和性である。（ｃ）濃厚な、撹拌不能なスラリー。濾過を可能にするために、追加の溶媒（一般的に５体積）を添加した。（ｄ）固体化合物７ａを添加したが、種として機能しなかった。（ｅ）結晶化により、結晶が４時間にわたって形成され、次いでほぼ還流加熱させて固体を溶解した。溶液を室温に冷却し、１５時間混ぜた後に固体を回収した。結晶化プロセスをゆっくり冷却した場合、得られた生成物は細い針様の形態を有した。
【表９−１】
2021500354.tif 000207
【表９−２】
2021500354.tif 000208
（ａ）１Ｌ反応器中の固体質量。
【表１０−１】
2021500354.tif 000209
【表１０−２】
2021500354.tif 000210
（ａ）０．５％に調整した含水量、（ｂ）１％に調整した含水量、（ｃ）２．７％に調整した含水量、（ｄ）３回の温度サイクル６５〜４０、７０〜４０、７０〜０；形成された結晶は「棒状」であった、（ｅ）使用した乾燥種、（ｆ）「棒状」（針状ではない）の化合物７ａを種晶添加した。
【表１１−１】
2021500354.tif 000211
【表１１−２】
2021500354.tif 000212
（Ａ）含水量を約０．３％に調整した、（ｂ）含水量を０．５％に調整した、（ｃ）おそらく含水量の不適切な調整に起因する低い回収、（Ｄ）３．５％に調整した含水量。この項目は、生成物の損失および試薬の除去を調べるために、酸／塩基ワークアップの代わりに食塩水洗浄手順を使用した。表中の他の項目は、酸／塩基ワークアップの代わりに水洗浄手順のみを使用した。
【０３４２】
結晶化の堅牢性を制御するには、含水量が重要であり得る。約０〜２％の水を添加して、変動的な準安定域を決定した。約０％の水の添加（水分約０．２〜０．３％）による「無水」での実施により、約５５〜６０℃で透明点を有し、周囲温度未満（約８〜１５℃）で曇点を有する広い準安定域が生じた。約０．５〜２％の水を添加することにより、準安定域がかなり狭くなり、より高い温度では透明点を伴った。この観察は、混合物中のある程度のレベルの水（最初は約０．５〜１％）が結晶化をより再現可能かつ堅牢にし得ることを示唆した。化合物６ａから化合物７ａへのワークアップ中のＩＰＡｃからＡＣＮへの共沸乾燥溶媒交換後におけるカール・フィッシャー水の決定により、溶液がほぼ乾燥していることが示されたので（約２００ｐｐｍ水）、共沸乾燥後に行う結晶化を非常に広い準安定域を有する無水様式で操作した。これは非常にゆっくりとした脱飽和をもたらし、自発的な核形成の機会を高め得る。約０．５〜２％の水を添加した結晶化は、一貫した回収率（概して約８０％超）およびより高い純度を伴って、再現性がより高くなり得る。
【０３４３】
パート４：化合物７ａの特性決定データ
化合物７ａのＸＲＰＤスペクトルを図７に示し、ピーク位置は表２に列挙するものに実質的に従う。化合物７ａのＴＧＡプロファイルを図８に示す。化合物７ａのＤＳＣプロファイルを図９に示す。
実施例４：硫酸プラゾマイシンの合成
【化１９１】
2021500354.tif 000213
パート１：化合物８ａの合成
【化１９２】
2021500354.tif 000214
【０３４４】
化合物７ａ（１．０ｋｇ±１％、１．００ｍｏｌ）を反応器に充填する。ジクロロメタン（５．０Ｌ±５％）を充填し、混合物を約０〜５℃に冷却する。トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、３．０Ｌ±５％、３９．５ｍｏｌ）を、約０〜５℃の温度を維持する速度で混合物に充填する。次いで、混合物を約２０〜２５℃に加熱し、約１〜２時間混ぜる。次いで、混合物を、真空下にて、約２０〜４０℃の反応器ジャケット温度を維持しながら３Ｌ±５％の最終体積まで蒸留する。特定の実施形態では、次いで、混合物を、真空下にて、約３０℃の反応器ジャケット温度を維持しながら３Ｌ±５％の最終体積まで蒸留する。次いで、混合物を約２０〜２５℃に冷却し、次いで約１〜４時間混ぜた後、約０〜１０℃に冷却する。次いで、約０〜１０℃の温度を維持しながら、得られた溶液を水（約２．５Ｌ、約０〜５℃に予め冷却された）を充填した反応器に充填する。
【０３４５】
反応器に酢酸イソプロピル（ＩＰＡｃ、３．０Ｌ±５％）を充填し、混合物を約２０〜３０分間混ぜた後に混ぜることを停止し、層を分離させる。下部の水層（水相１）を排出し、水（約０．５Ｌ±５％）を充填することによって有機相を２回抽出し、混合物を約１５分間〜１２時間混ぜた後、混ぜることを停止し、層を分離させる。特定の実施形態では、下部の水層（水相１）を排出し、有機相を水で充填することによって２回抽出し（約０．５Ｌ±５％）、混合物を約３０分間混ぜた後、混ぜることを停止し、層を分離させる。各下部の水層（水相２および３）を回収し、水相１と合わせる。次いで、合わせた水相をＩＰＡｃで３回洗浄し、ＩＰＡｃを充填し（３．０Ｌ±５％）、約２０〜３０分間混ぜることによってＴＦＡを除去した後、混ぜることを停止し、層を分離させる。下部の水相を排出し、ｐＨを測定してｐＨ＞２．０を確かめる。ｐＨが２．０以下である場合、ｐＨが約２．０超となるまでＩＰＡｃ洗浄を繰り返す。
パート２：硫酸プラゾマイシンの合成
【化１９３】
2021500354.tif 000215
【０３４６】
次いで、パート１の水相を９．０Ｌ±５％の最終体積まで水で希釈し、ｐＨが約５．８〜約６．２の間になるまでアンモニア水溶液（約２５％のアンモニア（４ｋｇ±５％）を水（９６ｋｇ±５％）に希釈することによってから調製したもの）で処理する。伝導率を測定して、伝導率が約２０ｍＳ／ｃｍ以下（例えば、０〜２０ｍＳ／ｃｍ）であることを確かめる。伝導率が２０ｍＳ／ｃｍ超である場合、追加の水を添加して、約２０ｍＳ／ｃｍ以下（例えば、０〜２０ｍＳ／ｃｍ）の伝導率にする。
【０３４７】
アンモニア形態に予め変換されたＡｍｂｅｒｌｉｔｅ  ＣＧ−５０（１型）樹脂（２．１７ｋｇ）を含むイオン交換カラムに溶液を充填することにより、粗化合物８ａＴＦＡ塩溶液をイオン交換クロマトグラフィーによって精製する。カラムを水（１カラム体積±５％）で溶出してトリフルオロ酢酸アンモニウムを溶出させ、次いで、アンモニア水溶液（約２５％のアンモニア（２．０ｋｇ±５％）を水（９６．０ｋｇ±５％）に希釈することによって調製されたもの）で溶出させる。クロマトグラフィーを紫外線吸収によってモニタリングする。画分を回収し、ＵＰＬＣによって分析し、約９５％超（面積）の化合物８ａ遊離塩基（ＴＦＡ塩を含まない化合物）を有する画分をプールする。
【０３４８】
合わせたクロマトグラフィー画分をフィルタ（多孔性≦５ミクロン）に通し、フィルタを水（１Ｌ±５％）ですすぐ。約０〜１０℃の温度を維持しながら、得られた溶液をＤｏｗ  Ｆｉｌｍｔｅｃ  ＸＬＥ膜を介してナノ濾過して１６Ｌ±５％の最終体積まで濃縮した。次いで、Ｄｏｗ  Ｆｉｌｍｔｅｃ  ＸＬＥ膜を介して透析することによって、アンモニアを除去する。
【０３４９】
化合物８ａ遊離塩基の溶液を約０〜５℃に冷却し、ｐＨが約６．０〜６．５になるまで硫酸水溶液（純粋な硫酸（０．５１ｋｇ±５％）をＤＩ水（０．７２Ｌ±５％）に溶解することによって調製したもの）で処理する。得られた硫酸プラゾマイシン溶液を活性炭フィルタ（Ｒ５５ＳＰ）に通し、フィルタを水で洗浄する。
【０３５０】
溶液をＤｏｗ  Ｆｉｌｍｔｅｃ  ＸＬＥ膜を用いてナノ濾過によって濃縮し、次いで０．２２ミクロンフィルタを通して濾過する。次いで、噴霧乾燥装置の出口温度を約６０〜１００℃に維持しながら、得られた溶液を噴霧乾燥装置に供給し、非晶質固体として硫酸プラゾマイシンを回収する。
実施例５：シソマイシンからの４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタナミド）−３−（（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）の調製手順の例。
【化１９４】
2021500354.tif 000216
【０３５１】
実施例５ａ
オーバーヘッド撹拌器を備えたジャケット付きガラス反応器に、シソマイシン遊離塩基（３００．０ｇ、０．６７０ｍｏｌ、ＫＦ＝５．６５）、続いてメタノール（１５００ｍＬ）およびジクロロメタン（１５００ｍＬ）を充填した。溶解後、反応温度を１５℃で安定させた。ジクロロメタン（４２００ｍＬ）中のｐ−ニトロベンジルベンゾトリアゾールカルバメート（２０７ｇ、０．６９４ｍｏｌ、１．０４当量）の溶液を、反応温度を約１５℃に維持しながら３時間にわたって反応器に添加した。ジクロロメタン（３００ｍＬ）ですすいで、添加を完了した。３０分後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（シソマイシンの消費）によって完了したとみなした。粗反応混合物を真空下にて最終体積１５００ｍＬまで濃縮した。メタノール（４５００ｍＬ）を反応混合物に充填し、真空下にて第２の濃縮を行って４５００ｍＬの体積標的とした。
【０３５２】
メタノール（９００ｍＬ）を反応混合物に充填し、温度を２７．５℃で安定させた。トリエチルアミン（４４２ｍＬ、３．１８９ｍｏｌ、４．７６当量）および酢酸亜鉛二水和物（４８７ｇ、２．２１９ｍｏｌ、３．３１当量）を順次充填し、混合物を１時間混ぜた。メタノール（６００ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（７５９ｇ、３．４７８ｍｏｌ、５．１９当量）の予め調製した溶液を７０分間にわたって反応溶液に添加した。メタノール（６０ｍＬ）ですすいで、移しを完了した。添加後、反応物を２７．５℃で９．５時間混ぜ、その時点で、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−４，６−ジアミノ−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、およびモノ−Ｂｏｃ保護中間体＝４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−４，６−ジアミノ−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート）によって完了したとみなした。粗反応混合物を、真空下にて、３６００ｍＬの最終体積まで濃縮した。温度を２０〜３０℃に安定させ、１．５時間にわたって２５％のアンモニア（１８００ｍＬ）を添加して反応物をクエンチした（注意：添加により発熱、２０〜３０℃の反応温度を維持するように添加速度を制御した）。ジクロロメタン（３０００ｍＬ）を添加し、二相混合物を２０分間混ぜ、その後撹拌を停止し、層を分離させた。下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ１）を受容器に移し、上部の枯渇水層（ＡＱ１）を廃棄物に移した。ＯＰ１を、水（７５０ｍＬ）および２５％アンモニア（７５０ｍＬ）を充填した反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ２）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ２）を廃棄物に移した。ＯＰ２を、メタノール（３００ｍＬ）および水（１５００ｍＬ）を充填した反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ３）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ３）を廃棄物に移した。ＯＰ３を、メタノール（３００ｍＬ）および水（１５００ｍＬ）を充填した反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ４）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ４）を廃棄物に移した。最終の洗浄した有機相（ＯＰ４）を反応器に戻し、真空下にて２７００ｍＬの体積まで濃縮した。
【０３５３】
水（１５０ｍＬ）、Ｂｏｃ−（Ｓ）−ＨＡＢＡ（１５３ｇ、０．６９８ｍｏｌ、１．０４当量）、および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１７ｇ、０．１２５ｍｏｌ、０．１９当量）を反応器に添加した。各固体充填物（Ｂｏｃ−（Ｓ）−ＨＡＢＡおよび１−ヒドロキシベンゾトリアゾール）の後、ジクロロメタン（６０ｍＬ）を使用して充填システムをすすぎ流した。２Ｍ塩酸（１２５０ｍＬ）を使用して、反応混合物のｐＨを５．５に調整した。ｐＨ調整後、１−エチル−３−（３’ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸（１３３ｇ、０．６９４ｍｏｌ、１．０３当量）を反応混合物に充填した。ジクロロメタン（６０ｍＬ）を使用して、固体充填物をすすぎ流した。７０分後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ（４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−４−アミノ−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）ｍｅｔの消費）によって完了したとみなした。メタノール（６００ｍＬ）を反応混合物に充填し、続いてジクロロメタン（３６００ｍＬ）および水（１５００ｍＬ）を充填した。水酸化ナトリウム（１２００ｍＬ）を使用して、ｐＨを９．５に調整した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物が豊富な有機層（ＯＰ５）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ５）を廃棄物に移した。ＯＰ５、続いて水（２１００ｍＬ）を反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ６）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ６）を廃棄物に移した。ＯＰ６を反応器に戻し、真空下にて３０００ｍＬの最終体積まで濃縮した。アセトニトリル（３０００ｍＬ）を反応器に充填し、混合物を真空下にて３０００ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。アセトニトリル（３０００ｍＬ）を反応器に充填し、混合物を真空下にて３０００ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。アセトニトリル（約４５００ｍＬ）を反応混合物に７５００ｍＬの最終体積標的まで充填した。
【０３５４】
混合物を加熱還流し（８３℃）、２つの部分の水（７５ｍＬおよび３８ｍＬ）を順次添加して溶液を生成した。溶液を７５℃に冷却し、その後、４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）、種（３ｇ、０．００２９ｍｏｌ、０．００４当量）を反応混合物に充填した。新たに形成されたスラリーを５時間にわたって３℃に冷却し、さらに４時間にわたって０〜５℃で混ぜた。混合物を濾過し、アセトニトリル（３００ｍＬの２つの部分）で洗浄し、真空下にて乾燥して、４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）、（３４５．１９ｇ、モル収率５０％）を得た。
【０３５５】
実施例５ｂ
オーバーヘッド撹拌器を備えたジャケット付きガラス反応器に、シソマイシン遊離塩基（３００．０ｇ、０．６７０ｍｏｌ、１当量、ＫＦ＝５．６５）、続いてメタノール（１５００ｍＬ）およびジクロロメタン（１５００ｍＬ）を充填した。溶解後、反応温度を１５℃で安定させた。ジクロロメタン（４２００ｍＬ）中のｐ−ニトロベンジルベンゾトリアゾールカルバメート（２０７ｇ、０．６９４ｍｏｌ、１．０４当量）の溶液を、反応温度を約１５℃に維持しながら３時間にわたって反応器に添加した。ジクロロメタン（３００ｍＬ）ですすいで、添加を完了した。３０分後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（シソマイシンの消費）によって完了したとみなした。粗反応混合物を、真空下にて最終体積１５００ｍＬまで濃縮した。
【０３５６】
メタノール（４５００ｍＬ）を反応混合物に充填し、温度を２０℃で安定させた。トリエチルアミン（４９８ｍＬ、３．５９３ｍｏｌ、５．３６当量）および酢酸亜鉛二水和物（４２５ｇ、１．９３５ｍｏｌ、２．８９当量）を順次充填し、混合物を１時間混ぜた。予め調製したメタノール（６００ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（８９４ｇ、４．０９６ｍｏｌ、６．１１当量）の溶液を、８０分間にわたって反応溶液に添加した。メタノール（６０ｍＬ）ですすいで、移しを完了した。添加後、反応物を２０℃で５時間混ぜ、その時点で、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−４，６−ジアミノ−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、およびモノ−Ｂｏｃ保護中間体＝４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−４，６−ジアミノ−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメートの消費）によって完了したとみなした。粗反応混合物を真空下にて３０００ｍＬの最終体積まで濃縮した。温度を２０〜３０℃で安定させ、１．５時間にわたって２５％のアンモニア（１５００ｍＬ）を添加して反応物をクエンチした（注意：添加により発熱、２０〜３０℃の反応温度を維持するように添加速度を制御した）。ジクロロメタン（３０００ｍＬ）を添加し、二相混合物を混ぜ、その後、撹拌を停止し、層を分離させた。下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ１）を受容器に移し、上部の枯渇水層（ＡＱ１）を廃棄物に移した。ＯＰ１を、水（７５０ｍＬ）および２５％アンモニア（７５０ｍＬ）を充填した反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ２）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ２）を廃棄物に移した。ＯＰ２を、メタノール（２２５ｍＬ）および水（１５００ｍＬ）を充填した反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ３）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ３）を廃棄物に移した。ＯＰ３を、メタノール（２２５ｍＬ）および水（１５００ｍＬ）を充填した反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ４）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ４）を廃棄物に移した。最終の洗浄した有機相（ＯＰ４）を反応器に戻し、真空下にて２７００ｍＬの体積まで濃縮した。
【０３５７】
水（１５０ｍＬ）、Ｂｏｃ−（Ｓ）−ＨＡＢＡ（１５３ｇ、０．６９８ｍｏｌ、１．０４当量）、および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１７ｇ、０．１２６ｍｏｌ、０．１９当量）を反応器に添加した。各固体（Ｂｏｃ−（Ｓ）−ＨＡＢＡおよび１−ヒドロキシベンゾトリアゾール）の充填後、ジクロロメタン（６０ｍＬ）を使用して充填システムをすすぎ流した。２Ｍの塩酸（１０９８ｍＬ）を使用して、反応混合物のｐＨを６．２に調整した。ｐＨ調整後、１−エチル−３−（３’ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸（１３３ｇ、０．６９４、１．０３当量）を反応混合物に充填した。ジクロロメタン（６０ｍＬ）を使用して、固体充填物をすすぎ流した。２時間後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ（４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−４−アミノ−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）ｍｅｔの消費）によって完了したとみなした。メタノール（５２５ｍＬ）を反応混合物に充填し、続いてジクロロメタン（３６００ｍＬ）および水（１５００ｍＬ）を充填した。水酸化ナトリウム（３６５ｍＬ）を使用して、ｐＨを８．５に調整した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物が豊富な有機層（ＯＰ５）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ５）を廃棄物に移した。ＯＰ５、続いて水（２１００ｍＬ）を反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ６）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ６）を廃棄物に移した。ＯＰ６を反応器に戻し、真空下にて３０００ｍＬの最終体積まで濃縮した。アセトニトリル（３０００ｍＬ）を反応器に充填し、混合物を真空下にて３０００ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。アセトニトリル（３０００ｍＬ）を反応器に充填し、混合物を真空下にて３０００ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。アセトニトリル（約６０００ｍＬ）を反応混合物に９０００ｍＬの最終体積標的まで充填した。
【０３５８】
混合物を加熱還流し（８３℃）、２つの部分の水（７５ｍＬおよび３８ｍＬ）を順次添加して溶液を生成した。溶液を７５℃に冷却し、その後、４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）、種（３ｇ、０．００２９ｍｏｌ、０．００４当量）を反応混合物に充填した。新たに形成されたスラリーを５時間にわたって３℃に冷却し、さらに４時間にわたって０〜５℃で混ぜた。混合物を濾過し、アセトニトリル（３００ｍＬの２つの部分）で洗浄し、真空下にて乾燥させて、４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）、（３４０．６８ｇ、モル収率４９％）を得た。
【０３５９】
実施例５ｃ
オーバーヘッド撹拌器ジャケット付きガラス反応器に、シソマイシン遊離塩基（３００．０ｇ、０．６７０ｍｏｌ、１当量、ＫＦ＝５．６５）、続いてメタノール（１５００ｍＬ）およびジクロロメタン（１５００ｍＬ）を充填した。溶解後、反応温度を１５℃で安定させた。ジクロロメタン（４２００ｍＬ）中のｐ−ニトロベンジルベンゾトリアゾールカルバメート（１８９ｇ、０．６６４ｍｏｌ、０．９９当量）の溶液を、反応温度を約１５℃で維持しながら３時間にわたって反応器に添加した。ジクロロメタン（３００ｍＬ）ですすいで、添加を完了した。２９分後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（シソマイシンの消費）によって完了したとみなした。粗反応混合物を真空下にて最終体積１５００ｍＬまで濃縮した。メタノール（４５００ｍＬ）を反応混合物に充填し、真空下にて第２の濃縮を行って４５００ｍＬの体積標的とした。
【０３６０】
メタノール（９００ｍＬ）を反応混合物に充填し、温度を３５℃で安定させた。トリエチルアミン（３８５ｍＬ、２．７７７ｍｏｌ、４．１４当量）および酢酸亜鉛二水和物（５４９ｇ、２．５０１ｍｏｌ、３．７３当量）を順次充填し、混合物を１時間混ぜた。予め調製したメタノール（６００ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（６２０ｇ、２．８４１ｍｏｌ、４．２４）の溶液を６０分間にわたって反応溶液に添加した。メタノール（６０ｍＬ）ですすいで、移しを完了した。添加後、反応物を３５℃で５時間混ぜ、その時点で、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−４，６−ジアミノ−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、およびモノ−Ｂｏｃ保護中間体＝４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−４，６−ジアミノ−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメートの消費）によって完了したとみなした。粗反応混合物を真空下にて最終体積４２００ｍＬまで濃縮した。温度を２０〜３０℃で安定させ、２５％のアンモニア（２１００ｍＬ）を１時間２７分にわたって添加して反応物をクエンチした（注意：添加により発熱、反応温度を２０〜３０℃で維持するように添加速度を制御した）。ジクロロメタン（３０００ｍＬ）を添加し、二相混合物を２０分間混ぜ、その後撹拌を停止し、層を分離させた。下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ１）を受容器に移し、上部の枯渇水層（ＡＱ１）を廃棄物に移した。ＯＰ１を、水（７５０ｍＬ）および２５％アンモニア（７５０ｍＬ）を充填した反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ２）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ２）を廃棄物に移した。ＯＰ２を、メタノール（３７５ｍＬ）および水（１５００ｍＬ）を充填した反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ３）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ３）を廃棄物に移した。ＯＰ３を、メタノール（３７５ｍＬ）および水（１５００ｍＬ）を充填した反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ４）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ４）を廃棄物に移した。最終の洗浄した有機相（ＯＰ４）を反応器に戻し、真空下にて２７００ｍＬの体積まで濃縮した。
【０３６１】
水（１５０ｍＬ）、Ｂｏｃ−（Ｓ）−ＨＡＢＡ（１５３ｇ、０．６９８ｍｏｌ、１．０４当量）、および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１７ｇ、０．１２６ｍｏｌ、０．１９当量）を反応器に添加した。各固体（Ｂｏｃ−（Ｓ）−ＨＡＢＡおよび１−ヒドロキシベンゾトリアゾール）の充填後、ジクロロメタン（６０ｍＬ）を使用して充填システムをすすぎ流した。２Ｍ塩酸（１２５０ｍＬ）を使用して、反応混合物のｐＨを４．８に調整した。ｐＨ調整後、１−エチル−３−（３’ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸（１３３ｇ、０．６９４ｍｏｌ、１．０３当量）を反応混合物に充填した。ジクロロメタン（６０ｍＬ）を使用して、固体充填物をすすぎ流した。７０分後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ（４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−４−アミノ−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）ｍｅｔの消費）によって完了したとみなした。メタノール（６７５ｍＬ）を反応混合物に充填し、続いてジクロロメタン（３６００ｍＬ）および水１５００ｍＬ）を充填した。水酸化ナトリウム（１２６４ｍＬ）を使用して、ｐＨを１０．５に調整した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物が豊富な有機層（ＯＰ５）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ５）を廃棄物に移した。ＯＰ５、続いて水（２１００ｍＬ）を反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ６）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ６）を廃棄物に移した。ＯＰ６を反応器に戻し、真空下にて３０００ｍＬの最終体積まで濃縮した。アセトニトリル（３０００ｍＬ）を反応器に充填し、混合物を真空下にて３０００ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。アセトニトリル（３０００ｍＬ）を反応器に充填し、混合物を真空下にて３０００ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。アセトニトリル（約３０００ｍＬ）を反応混合物に６０００ｍＬの最終体積標的まで充填した。
【０３６２】
混合物を加熱還流し（８３℃）、２つの部分の水（７５ｍＬおよび３８ｍＬ）を順次添加して溶液を生成した。溶液を７５℃に冷却し、その後、４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）、種（３ｇ、０．００２９ｍｍｏｌ、０．００４当量）を反応混合物に充填した。新たに形成されたスラリーを５時間にわたって３℃に冷却し、さらに４時間にわたって０〜５℃で混ぜた。混合物を濾過し、アセトニトリル（３００ｍＬの２つの部分）で洗浄し、真空下にて乾燥させて、４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）、（３４７．０３ｇ、収率５０％）を得た。
【０３６３】
実施例５ｄ
オーバーヘッド撹拌器を備えたジャケット状のガラス反応器に、シソマイシン遊離塩基（９０．０ｇ、ＫＦ＝５．６５）に続いて、メタノール（４５０ｍＬ）およびジクロロメタン（４５０ｍＬ）を充填した。溶解後、反応温度を１５℃で安定させた。ジクロロメタン（１２６０ｍＬ）中のｐ−ニトロベンジルベンゾトリアゾールカルバメート（６２ｇ）の溶液を、反応温度を約１５℃で維持しながら３時間にわたって反応器に添加した。ジクロロメタン（９０ｍＬ）ですすいで、添加を完了した。３２分後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（シソマイシンの消費）によって完了したとみなした。粗反応混合物を真空下にて最終体積４５０ｍＬまで濃縮した。
【０３６４】
メタノール（１３５０ｍＬ）を反応混合物に充填し、反応物をさらに真空下にて１３５０ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。第２の部分のメタノール（２７０ｍＬ）を反応混合物に充填し、温度を２７．５℃で安定させた。トリエチルアミン（１３２ｍＬ、０．９５２ｍｏｌ、４．７４当量）および酢酸亜鉛二水和物（１４６ｇ、０．６６５ｍｏｌ、３．３１当量）を順次充填し、混合物を１時間混ぜた。予め調製したメタノール（１８０ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（２２８ｇ、１．０４５ｍｏｌ、５．１９当量）の溶液を７０分間にわたって反応溶液に添加した。メタノール（１８ｍＬ）ですすいで、移しを完了した。添加後、反応物を２７．５℃で１３時間撹拌し、その時点で、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−４，６−ジアミノ−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、およびモノ−Ｂｏｃ保護中間体＝４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−４，６−ジアミノ−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメートの消費）によって完了したとみなした。粗反応混合物を真空下にて最終体積１０８０ｍＬまで濃縮した。温度を２０〜３０℃で安定させ、３７分間にわたって２５％のアンモニア（５４０ｍＬ）を添加して反応物をクエンチした（注意：添加により発熱、反応温度を２０〜３０℃で維持するように添加速度を制御した）。ジクロロメタン（９００ｍＬ）を添加し、二相混合物を２０分間混ぜ、その後、撹拌を停止し、層を分離させた。下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ１）を受容器に移し、上部の枯渇水層（ＡＱ１）を廃棄物に移した。ＯＰ１を、水（２２５ｍＬ）および２５％アンモニア（２２５ｍＬ）を充填した反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ２）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ２）を廃棄物に移した。ＯＰ２を、メタノール（９０ｍＬ）および水（４５０ｍＬ）を充填した反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ３）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ３）を廃棄物に移した。ＯＰ３を、メタノール（９０ｍＬ）および水（４５０ｍＬ）を充填した反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ４）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ４）を廃棄物に移した。最終の洗浄した有機相（ＯＰ４）を反応器に戻し、真空下にて８１０ｍＬの体積まで濃縮した。
【０３６５】
水（４５ｍＬ）、Ｂｏｃ−（Ｓ）−ＨＡＢＡ（４６ｇ、０．２１０ｍｏｌ、１．０４当量）、および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（５ｇ、０．０３７ｍｏｌ、０．１８当量）を反応器に添加した。各固体（Ｂｏｃ−（Ｓ）−ＨＡＢＡおよび１−ヒドロキシベンゾトリアゾール）の充填後、ジクロロメタン（１８ｍＬ）を使用して充填システムをすすぎ流した。２Ｍ塩酸（３８０ｍＬ）を使用して、反応混合物のｐＨを５．５に調整した。ｐＨ調整後、１−エチル−３−（３’ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸（４０ｇ、０．２０９ｍｏｌ、１．０４当量）を反応混合物に充填した。ジクロロメタン（１８ｍＬ）を使用して、固体充填物をすすぎ流した。２時間４０分後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ（４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−４−アミノ−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）ｍｅｔの消費）によって完了したとみなした。メタノール（１８０ｍＬ）を反応混合物に充填し、続いてジクロロメタン（１０８０ｍＬ）および水（４５０ｍＬ）を充填した。水酸化ナトリウム（４００ｍＬ）を使用して、ｐＨを９．５に調整した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物が豊富な有機層（ＯＰ５）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ５）を廃棄物に移した。ＯＰ５、続いて水（６３０ｍＬ）を反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ６）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ６）を廃棄物に移した。ＯＰ６を反応器に戻し、真空下にて３０００ｍＬの最終体積まで濃縮した。アセトニトリル（９００ｍＬ）を反応器に充填し、混合物を真空下にて９００ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。アセトニトリル（９００ｍＬ）を反応器に充填し、混合物を真空下にて９００ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。アセトニトリル（約１３５０ｍＬ）を反応混合物に２２５０ｍＬの最終体積標的まで充填した。
【０３６６】
混合物を加熱還流し（約８０℃）、２つの部分の水（２３ｍＬおよび１１ｍＬ）を順次添加して溶液を生成した。溶液を７５℃に冷却し、その後、４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）、種（１ｇ、０．００１０ｍｏｌ、０．００５当量）を反応混合物に充填した。新たに形成されたスラリーを５時間にわたって３℃に冷却し、さらに４時間にわたって０〜５℃で混ぜた。混合物を濾過し、アセトニトリル（３００ｍＬの２つの部分）で洗浄し、真空下にて乾燥させて、４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）、（１０５．４３ｇ、モル収率５１％）を得た。
【０３６７】
実施例５ｅ
オーバーヘッド撹拌器を備えたジャケット付きガラス反応器に、シソマイシン遊離塩基（３００．０ｇ、０．６７０ｍｏｌ、１当量、ＫＦ＝５．６５）、続いてメタノール（１５００ｍＬ）およびジクロロメタン（１５００ｍＬ）を充填した。溶解後、反応温度を１５℃で安定させた。ジクロロメタン（４２００ｍＬ）中のｐ−ニトロベンジルベンゾトリアゾールカルバメート（２２６ｇ、０．７５８ｍｏｌ、１．１３当量）の溶液を、反応温度を約１５℃に維持しながら３時間にわたって反応器に添加した。ジクロロメタン（３００ｍＬ）ですすいで、添加を完了した。３０分後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（シソマイシンの消費）によって完了したとみなした。粗反応混合物を真空下にて最終体積１５００ｍＬまで濃縮した。メタノール（４５００ｍＬ）を反応混合物に充填し、真空下にて第２の濃縮を行って４５００ｍＬの体積標的とした。
【０３６８】
メタノール（９００ｍＬ）を反応混合物に充填し、温度を２０℃で安定させた。トリエチルアミン（４９８ｍＬ、３．５９３ｍｏｌ、５．３６当量）および酢酸亜鉛二水和物（４２５ｇ、１．９３６ｍｏｌ、２．８９当量）を順次充填し、混合物を１時間混ぜた。予め調製したメタノール（６００ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（８９４ｇ、４．０９６ｍｏｌ、６．１１当量）の溶液を６０分間にわたって反応溶液に添加した。メタノール（６０ｍＬ）ですすいで、移しを完了した。添加後、反応物を２０．０℃で９時間撹拌し、その時点で、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−４，６−ジアミノ−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、およびモノ−Ｂｏｃ保護中間体＝４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−４，６−ジアミノ−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメートの消費）によって完了したとみなした。粗反応混合物を真空下にて３０００ｍＬの最終体積まで濃縮した。温度を２０〜３０℃で安定させ、１０９分間にわたって２５％のアンモニア（１５００ｍＬ）を添加して反応物をクエンチした（注意：添加により発熱、反応温度を２０〜３０℃で維持するように添加速度を制御した）。ジクロロメタン（３０００ｍＬ）を添加し、二相混合物を２０分間混ぜ、その後撹拌を停止し、層を分離させた。下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ１）を受容器に移し、上部の枯渇水層（ＡＱ１）を廃棄物に移した。ＯＰ１を、水（７５０ｍＬ）および２５％アンモニア（７５０ｍＬ）を充填した反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ２）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ２）を廃棄物に移した。ＯＰ２を、メタノール（２２５ｍＬ）および水（１５００ｍＬ）を充填した反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ３）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ３）を廃棄物に移した。ＯＰ３を、メタノール（２２５ｍＬ）および水（１５００ｍＬ）を充填した反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ４）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ４）を廃棄物に移した。最終の洗浄した有機相（ＯＰ４）を反応器に戻し、真空下にて２７００ｍＬの体積まで濃縮した。
【０３６９】
水（１５０ｍＬ）、Ｂｏｃ−（Ｓ）−ＨＡＢＡ（１５３ｇ、０．６９８ｍｏｌ、１．０４当量）、および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１７ｇ、０．１２６ｍｏｌ、０．１９当量）を反応器に添加した。各固体（Ｂｏｃ−（Ｓ）−ＨＡＢＡおよび１−ヒドロキシベンゾトリアゾール）の充填後、ジクロロメタン（６０ｍＬ）を使用して充填システムをすすぎ流した。２Ｍの塩酸（１１１２ｍＬ）を使用して、反応混合物のｐＨを６．２に調整した。ｐＨ調整後、１−エチル−３−（３’ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸（１３３ｇ、０６９４ｍｏｌ、１．０３当量）を反応混合物に充填した。ジクロロメタン（６０ｍＬ）を使用して、固体充填物をすすぎ流した。４時間後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ（４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−２−（（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−４−アミノ−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）ｍｅｔの消費）によって完了したとみなした。メタノール（５２５ｍＬ）を反応混合物に充填し、続いてジクロロメタン（３６００ｍＬ）および水１５００ｍＬ）を充填した。水酸化ナトリウム（４３０ｍＬ）を使用して、ｐＨを８．５に調整した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物が豊富な有機層（ＯＰ５）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ５）を廃棄物に移した。ＯＰ５、続いて水（２１００ｍＬ）を反応器に戻した。層を撹拌によって混合し、次いで分離させ、その後、下部の生成物豊富な有機層（ＯＰ６）を受容器に移し、上部の水層（ＡＱ６）を廃棄物に移した。ＯＰ６を反応器に戻し、真空下にて３０００ｍＬの最終体積まで濃縮した。アセトニトリル（３０００ｍＬ）を反応器に充填し、混合物を真空下にて３０００ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。アセトニトリル（３０００ｍＬ）を反応器に充填し、混合物を真空下にて３０００ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。アセトニトリル（約６０００ｍＬ）を反応混合物に９０００ｍＬの最終体積標的まで充填した。
【０３７０】
混合物を加熱還流し（８３℃）、２つの部分の水（７５ｍＬおよび３８ｍＬ）を順次添加して溶液を生成した。溶液を８０℃に冷却し、その後、４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）、種（３ｇ、０．００２９ｍｏｌ、０．００４当量）を反応混合物に充填した。新たに形成されたスラリーを５時間にわたって３℃に冷却し、さらに４時間にわたって０〜５℃で混ぜた。混合物を濾過し、アセトニトリル（３００ｍＬの２つの部分）で洗浄し、真空下にて乾燥させて、４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）、（３６４．８ｇ、モル収率５３％）を得た。
実施例６：４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）からのｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）の調製手順の例。
【化１９５】
2021500354.tif 000217
【０３７１】
実施例６ａ
オーバーヘッド撹拌器を備えたジャケット付きガラス反応器（反応器Ａ）に、４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）、（３２０ｇ、０．３１１ｍｏｌ、１当量）を充填した。メタノール（３２００ｍＬ）を反応器に充填し、温度を４５〜５５℃（４７℃）で安定させた。メタノール（８０ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（８１．６０ｇ、０．３７４ｍｏｌ、１．２０当量）の予め調製した溶液を３分間にわたって反応溶液に添加した。メタノール（８０ｍＬ）ですすいで、充填を完了した。３時間後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）の消費）によって完了したとみなした。
【０３７２】
オーバーヘッド撹拌器を備えた第２のジャケット付きガラス反応器（反応器Ｂ）に、水（２８１０ｇ）および水酸化ナトリウム（１３１ｇ、３．２７５ｍｏｌ、１０．５２当量）を充填した。この塩基性溶液を１０℃に冷却した。亜ジチオン酸ナトリウム（４０２ｇ）を溶液に充填し、温度を１２．５℃で安定させた。
【０３７３】
中間体ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメートを含む反応混合物（反応器Ａ）を、亜ジチオン酸塩反応混合物の温度を１２．５℃で維持しながら、１時間にわたって亜ジチオン酸ナトリウム混合物（反応器Ｂ）に移した。メタノール（１６０ｍＬ）を充填して、移しを完了した。添加終了時に、反応混合物を３時間にわたって２０℃に加熱した。１４時間後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（（（（（４−アミノベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメートの消費）によって完了したとみなした。反応物を、真空下にて、３５℃の最大ジャケット温度で最終体積４１６０ｍＬまで濃縮した。酢酸イソプロピル（１２８０ｍＬ）および水（１９２０ｍＬ）を反応混合物に充填した。層を３５℃で撹拌することによって混合し、次いで分離させ、その後、下部の水層（ＡＰ１）および上部の有機層（ＯＰ１）を受容器に移した。ＡＰ１を反応器に戻し、さらに別の部分の酢酸イソプロピル（６４０ｍＬ）で抽出して、水層２（ＡＰ２）および有機層（ＯＰ２）を生成した。ＡＰ２を廃棄物に送り、ＯＰ２を反応器中でＯＰ１と合わせた。この合わせた生成物豊富な有機溶液を、２つの部分の６．５％重炭酸ナトリウム溶液（９６０ｍＬの２つの部分）で洗浄した。洗浄した有機相を、真空下にて、９６０ｍＬの体積標的まで濃縮した。酢酸イソプロピル（９６０ｍＬ）を反応器に充填し、第２の共沸蒸留を９６０ｍＬの体積標的まで行った。別の部分の酢酸イソプロピル（９６０ｍＬ）を反応器に充填し、第３の共沸蒸留を１１２０ｍＬの体積標的まで行った。温度を３７．５℃で安定させ、水（１７ｍＬ）を混合物に充填して、１．５％ｗ／ｗのＫＦを達成した。ジクロロメタン（１１２０ｍＬ）を反応器に充填し、温度を１０．７℃で安定させた。混合物に、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、（６．４ｇ、０．００６７ｍｏｌ、０．０２当量）を種晶添加した。１つの部分のジクロロメタン（３２ｍＬ）を使用して、種をすすぎ流した。種晶添加混合物を１０℃で２時間混ぜ、２時間の期間にわたって０℃に冷却した。スラリーをさらに３．５時間混ぜ、その後、これを濾過し、ジクロロメタン（３２０ｍＬ）で洗浄した。単離した材料を真空オーブン中で乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、（２５９．６６ｇ、モル収率８８％）を得た。
【０３７４】
実施例６ｂ
オーバーヘッド撹拌器を備えたジャケット付きガラス反応器（反応器Ａ）に、４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）、（３２０ｇ、０．３１１ｍｏｌ、１当量）を充填した。メタノール（３２００ｍＬ）を反応器に充填し、温度を４５〜５５℃（５０℃）で安定させた。メタノール（８０ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（８１．６０ｇ、０．３７４ｍｏｌ、１．２０当量）の予め調製した溶液を５分間にわたって反応溶液に添加した。メタノール（８０ｍＬ）ですすいで、充填を完了した。５時間後、メタノール（１．９ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（１．９２ｇ）の予め調製した溶液の追加の部分を反応溶液に添加した。１時間後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）の消費）によって完了したとみなした。
【０３７５】
オーバーヘッド撹拌器を備えた第２のジャケット付きガラス反応器（反応器Ｂ）に、水（２４９０ｇ）および水酸化ナトリウム（１２５ｇ、３．１２５ｍｏｌ、１０．０４当量）を充填した。この塩基性溶液を５℃に冷却した。亜ジチオン酸ナトリウム（３８３ｇ、２．２００ｍｏｌ、７．０７当量）を溶液に充填し、温度を７．５℃で安定させた。
【０３７６】
中間体ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメートを含む反応混合物（反応器Ａ）を、亜ジチオン酸塩反応混合物の温度を７．５℃で維持しながら、１時間にわたって亜ジチオン酸ナトリウム混合物（反応器Ｂ）に移した。メタノール（１６０ｍＬ）を充填して、移しを完了した。添加終了時に、反応混合物を２時間にわたって２７．５℃に加熱した。７時間後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（（（（（４−アミノベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメートの消費）によって完了したとみなした。反応物を、真空下にて、３５℃の最大ジャケット温度で最終体積４１６０ｍＬまで濃縮した。酢酸イソプロピル（１２８０ｍＬ）および水（１９２０ｍＬ）を反応混合物に充填した。層を３５℃で撹拌することによって混合し、次いで分離させ、その後、下部の水層（ＡＰ１）および上部の有機層（ＯＰ１）を受容器に移した。ＡＰ１を反応器に戻し、さらに別の部分の酢酸イソプロピル（６４０ｍＬ）で抽出して、水層２（ＡＰ２）および有機層（ＯＰ２）を生成した。ＡＰ２を廃棄物に送り、ＯＰ２を反応器中でＯＰ１と合わせた。この合わせた生成物豊富な有機溶液を、２つの部分の６．５％重炭酸ナトリウム溶液（９６０ｍＬの２つの部分）で洗浄した。洗浄した有機相を、真空下にて、９６０ｍＬの体積標的まで濃縮した。酢酸イソプロピル（９６０ｍＬ）を反応器に充填し、第２の共沸蒸留を９６０ｍＬの体積標的まで行った。別の部分の酢酸イソプロピル（９６０ｍＬ）を反応器に充填し、第３の共沸蒸留を１４４０ｍＬの体積標的まで行った。温度を３７．５℃で安定させ、水（４２ｍＬ）を混合物に充填して、２．９％ｗ／ｗのＫＦを達成した。ジクロロメタン（１４４０ｍＬ）を反応器に充填し、温度を２２．５℃で安定させた。混合物に、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、（６．４ｇ、０．００６７ｍｏｌ、０．０２当量）を種晶添加した。１つの部分のジクロロメタン（３２ｍＬ）を使用して、種をすすぎ流した。種晶添加混合物を２２．５℃で２時間混ぜ、２時間の期間にわたって０℃に冷却した。スラリーをさらに３．５時間混ぜ、その後、これを濾過し、ジクロロメタン（３２０ｍＬ）で洗浄した。単離した材料を真空オーブン中で乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、（２５７．７７ｇ、収率８７％）を得た。
【０３７７】
実施例６ｃ
オーバーヘッド撹拌器を備えたジャケット付きガラス反応器（反応器Ａ）に、４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）、（３２０ｇ、０．３１１ｍｏｌ、１当量）を充填した。メタノール（３２００ｍＬ）を反応器に充填し、温度を４５〜５５℃（５０℃）で安定させた。メタノール（８０ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（８１．６０ｇ、０．３９４ｍｏｌ、１．２０当量）の予め調製した溶液を３分間にわたって反応溶液に添加した。メタノール（８０ｍＬ）ですすいで、充填を完了した。３時間後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）の消費）によって完了したとみなした。
【０３７８】
オーバーヘッド撹拌器を備えた第２のジャケット付きガラス反応器（反応器Ｂ）に、水（２１７０ｇ）および水酸化ナトリウム（１１８ｇ、２．９５０ｍｏｌ、９．４８当量）を充填した。この塩基性溶液を０℃に冷却した。亜ジチオン酸ナトリウム（３６４ｇ、２．０９１ｍｏｌ、６．７２当量）を溶液に充填し、温度を２．５℃で安定させた。
【０３７９】
中間体ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメートを含む反応混合物（反応器Ａ）を、亜ジチオン酸塩反応混合物の温度を２．５℃で維持しながら、５時間にわたって亜ジチオン酸ナトリウム混合物（反応器Ｂ）に移した。メタノール（１６０ｍＬ）を充填して、移しを完了した。添加終了時に、反応混合物を１時間にわたって３５℃に加熱した。３時間後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（（（（（４−アミノベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメートの消費）によって完了したとみなした。反応物を、真空下にて、３５℃の最大ジャケット温度で最終体積４１６０ｍＬまで濃縮した。酢酸イソプロピル（１２８０ｍＬ）および水（１９２０ｍＬ）を反応混合物に充填した。層を３５℃で撹拌することによって混合し、次いで分離させ、その後、下部の水層（ＡＰ１）および上部の有機層（ＯＰ１）を受容器に移した。ＡＰ１を反応器に戻し、さらに別の部分の酢酸イソプロピル（６４０ｍＬ）で抽出して、水層２（ＡＰ２）および有機層（ＯＰ２）を生成した。ＡＰ２を廃棄物に送り、ＯＰ２を反応器中でＯＰ１と合わせた。この合わせた生成物豊富な有機溶液を、２つの部分の６．５％重炭酸ナトリウム溶液（９６０ｍＬの２つの部分）で洗浄した。洗浄した有機相を、真空下にて、９６０ｍＬの体積標的まで濃縮した。酢酸イソプロピル（９６０ｍＬ）を反応器に充填し、第２の共沸蒸留を９６０ｍＬの体積標的まで行った。別の部分の酢酸イソプロピル（９６０ｍＬ）を反応器に充填し、第３の共沸蒸留を１７６０ｍＬの体積標的まで行った。温度を３７．５℃で安定させ、水（７１．２ｍＬ）を混合物に充填して、３．９％ｗ／ｗのＫＦを達成した。ジクロロメタン（１７６０ｍＬ）を反応器に充填し、温度を３５℃で安定させた。混合物に、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、（６．４ｇ、０．００６７ｍｏｌ、０．０２当量）を種晶添加した。１つの部分のジクロロメタン（３２ｍＬ）を使用して、種をすすぎ流した。種晶添加混合物を３５℃で２時間混ぜ、２時間の期間にわたって０℃に冷却した。スラリーをさらに３．５時間混ぜ、その後、これを濾過し、ジクロロメタン（３２０ｍＬ）で洗浄した。単離した材料を真空オーブン中で乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、（１０３．５ｇ、０．１０９ｍｏｌ、モル収率３５％）を得た。
【０３８０】
実施例６ｄ
オーバーヘッド撹拌器を備えたジャケット付きガラス反応器（反応器Ａ）に、４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）、（３２０ｇ、０．３１１ｍｏｌ、１当量）を充填した。メタノール（３２００ｍＬ）を反応器に充填し、温度を４５〜５５℃（４７℃）で安定させた。メタノール（８０ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（８１．６０ｇ、０．３７４ｍｏｌ、１．２０当量）の予め調製した溶液を３分間にわたって反応溶液に添加した。メタノール（８０ｍＬ）ですすいで、充填を完了した。６時間後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）の消費）によって完了したとみなした。
【０３８１】
オーバーヘッド撹拌器を備えた第２のジャケット付きガラス反応器（反応器Ｂ）に、水（２８１０ｇ）および水酸化ナトリウム（１３１．２ｇ、３．２８０ｍｏｌ、１０．５４当量）を充填した。この塩基性溶液を１０℃に冷却した。亜ジチオン酸ナトリウム（４０１．９ｇ、２．３０８ｍｏｌ、７．４２当量）を溶液に充填し、温度を１２．５℃で安定させた。
【０３８２】
中間体ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメートを含む反応混合物（反応器Ａ）を、亜ジチオン酸塩反応混合物の温度を１２．５℃で維持しながら、１時間にわたって亜ジチオン酸ナトリウム混合物（反応器Ｂ）に移した。メタノール（１６０ｍＬ）を充填して、移しを完了した。添加終了時に、反応混合物を３時間にわたって２０℃に加熱した。１８時間後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（（（（（４−アミノベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメートの消費）によって完了したとみなした。反応物を、真空下にて、３５℃の最大ジャケット温度で最終体積４１６０ｍＬまで濃縮した。酢酸イソプロピル（１２８０ｍＬ）および水（１９２０ｍＬ）を反応混合物に充填した。層を３５℃で撹拌することによって混合し、次いで分離させ、その後、下部の水層（ＡＰ１）および上部の有機層（ＯＰ１）を受容器に移した。ＡＰ１を反応器に戻し、さらに別の部分の酢酸イソプロピル（６４０ｍＬ）で抽出して、水層２（ＡＰ２）および有機層（ＯＰ２）を生成した。ＡＰ２を廃棄物に送り、ＯＰ２を反応器中でＯＰ１と合わせた。この合わせた生成物豊富な有機溶液を、２つの部分の６．５％重炭酸ナトリウム溶液（９６０ｍＬの２つの部分）で洗浄した。洗浄した有機相を、真空下にて、９６０ｍＬの体積標的まで濃縮した。酢酸イソプロピル（９６０ｍＬ）を反応器に充填し、第２の共沸蒸留を９６０ｍＬの体積標的まで行った。別の部分の酢酸イソプロピル（９６０ｍＬ）を反応器に充填し、第３の共沸蒸留を１２８０ｍＬの体積標的まで行った。温度を３７．５℃で安定させ、水（２６ｍＬ）を混合物に充填して、２．１％ｗ／ｗのＫＦを達成した。ジクロロメタン（１２８０ｍＬ）を反応器に充填し、温度を１５．１℃で安定させた。混合物に、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、（６．４ｇ、０．００６７ｍｏｌ、０．０２当量）を種晶添加した。１つの部分のジクロロメタン（３２ｍＬ）を使用して、種をすすぎ流した。種晶添加混合物を１５℃で２時間混ぜ、２時間の期間にわたって０℃に冷却した。スラリーをさらに３．５時間混ぜ、その後、これを濾過し、ジクロロメタン（３２０ｍＬ）で洗浄した。単離した材料を真空オーブン中で乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、（２５７．５ｇ、０．２７１ｍｏｌ、モル収率８７％）を得た。
【０３８３】
実施例６ｅ
オーバーヘッド撹拌器を備えたジャケット付きガラス反応器（反応器Ａ）に、４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）、（３２０ｇ、０．３１１ｍｏｌ、当量）を充填した。メタノール（３２００ｍＬ）を反応器に充填し、温度を４５〜５５℃（４７℃）で安定させた。メタノール（８０ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（８１．６０ｇ、０．３７４ｍｏｌ、１．２０当量）の予め調製した溶液を３分間にわたって反応溶液に添加した。メタノール（８０ｍＬ）ですすいで、充填を完了した。８時間後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（４−ニトロベンジル（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−６−イル）メチル）カルバメート、式（４ａ）の消費）によって完了したとみなした。
【０３８４】
オーバーヘッド撹拌器を備えた第２のジャケット付きガラス反応器（反応器Ｂ）に、水（２１７０ｇ）および水酸化ナトリウム（１１８．４ｇ、２．９６０ｍｏｌ、９．５１当量）を充填した。この塩基性溶液を０℃に冷却した。亜ジチオン酸ナトリウム（３６３．５ｇ、２．０８８ｍｏｌ、６．７１当量）を溶液に充填し、温度を２．５℃で安定させた。
【０３８５】
中間体ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（（（４−ニトロベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメートを含む反応混合物（反応器Ａ）を、亜ジチオン酸塩反応混合物の温度を２．５℃で維持しながら、５時間にわたって亜ジチオン酸ナトリウム混合物（反応器Ｂ）に移した。メタノール（１６０ｍＬ）を充填して、移しを完了した。添加終了時に、反応混合物を１時間にわたって３５℃に加熱した。４時間後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（（（（（４−アミノベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメートの消費）によって完了したとみなした。反応物を、真空下にて、３５℃の最大ジャケット温度で最終体積４１６０ｍＬまで濃縮した。酢酸イソプロピル（１２８０ｍＬ）および水（１９２０ｍＬ）を反応混合物に充填した。層を３５℃で撹拌することによって混合し、次いで分離させ、その後、下部の水層（ＡＰ１）および上部の有機層（ＯＰ１）を受容器に移した。ＡＰ１を反応器に戻し、さらに別の部分の酢酸イソプロピル（６４０ｍＬ）で抽出して、水層２（ＡＰ２）および有機層（ＯＰ２）を生成した。ＡＰ２を廃棄物に送り、ＯＰ２を反応器中でＯＰ１と合わせた。この合わせた生成物豊富な有機溶液を、２つの部分の６．５％重炭酸ナトリウム溶液（９６０ｍＬの２つの部分）で洗浄した。洗浄した有機相を、真空下にて、９６０ｍＬの体積標的まで濃縮した。酢酸イソプロピル（９６０ｍＬ）を反応器に充填し、第２の共沸蒸留を９６０ｍＬの体積標的まで行った。別の部分の酢酸イソプロピル（９６０ｍＬ）を反応器に充填し、第３の共沸蒸留を１６００ｍＬの体積標的まで行った温度を３７．５℃で安定させ、水（２９ｍＬ）を混合物に充填して、３．５％ｗ／ｗのＫＦを達成した。ジクロロメタン（１６００ｍＬ）を反応器に充填し、温度を３０℃で安定させた。混合物にｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、（６．４ｇ、０．００６７ｍｏｌ、０．０２当量）を種晶添加した。１つの部分のジクロロメタン（３２ｍＬ）を使用して、種をすすぎ流した。種晶添加混合物を３０℃で２時間混ぜ、２時間の期間にわたって０℃に冷却した。スラリーをさらに３．５時間混ぜ、その後、これを濾過し、ジクロロメタン（３２０ｍＬ）で洗浄した。単離した材料を真空オーブン中で乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、（２５９．５０ｇ、０．２７３ｍｏｌ、モル収率８８％）を得た。
実施例７：ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）からのｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）の調製手順の例。
【化１９６】
2021500354.tif 000218
【０３８６】
実施例７ａ
オーバーヘッド撹拌器を備えたジャケット付きガラス反応器に、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、（２５０ｇ、０．２６３ｍｏｌ、１当量）を充填した。アセトニトリル（１２５０ｍＬ）を反応器に充填し、温度を１５〜３０℃（２７．４℃）で安定させた。混合物を真空下にて５００ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。溶液をＫＦでの水含有量についてサンプリングし、０．２７％ｗ／ｗの結果を得た。追加の部分のアセトニトリル（７５０ｍＬ）を反応器に充填し、第２の共沸蒸留を行って５００ｍＬの体積標的にした。混合物をＫＦについてサンプリングし、０．０８％ｗ／ｗの結果を得た。反応温度を２９．９℃で安定させ、アセトン（１２５０ｍＬ）を混合物に充填した。反応物を加熱し、温度を４０℃で安定させた。重炭酸ナトリウム（４４．２５ｇ、０．５２７ｍｏｌ、２当量）を反応混合物に充填し、続いて２−ヨードエタノール（６５．２ｇ、２９．６ｍＬ、０．３７９ｍｏｌ、１．４４当量）を充填した。２３時間後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）の消費）によって完了したとみなした。反応物を２２．７℃に冷却し、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（６０．０ｇ、０．５３５ｍｏｌ、２．０３当量）を固体として充填した。２−ヨードエタノールの破壊をＧＣ法によってモニタリングし、１８時間後、この試薬のクエンチが完了したとみなした。水（１２５０ｍＬ）および酢酸イソプロピル（１２５０ｍＬ）を反応混合物に充填した。反応器内容物を２５分間撹拌し、層を分離させた。下部の水層（ＡＰ１）および上部の有機層（ＯＰ１）を受容器に回収した。ＡＰ１を反応器に戻し、第２の部分の酢酸イソプロピル（７５０ｍＬ）を充填した。反応器内容物を３０分間撹拌し、層を分離させた。下部の水層（ＡＰ２）および上部の有機層（ＯＰ２）を受容器に回収した。ＯＰ１およびＯＰ２を反応器中で合わせ、２つの部分の飽和塩化ナトリウム溶液（７５０ｍＬ、１００ｇのＮａＣｌ／２９０ｍＬの水を溶解させることによって調製したもの）で抽出した。洗浄した有機相（ＯＰ４）を真空下にて５００ｍＬの体積標的まで濃縮した。アセトニトリル（２５５０ｍＬ）を反応器に充填した。第２の共沸真空蒸留を２０５０ｍＬの体積標的まで行った。酢酸イソプロピル（２００ｍＬ）を混合物に充填した。２．０％のＫＦが得られるまで水（３５．４ｍＬ）を混合物に充填した。反応器内容物を７５℃に加熱し、そこでの溶液を得た。反応混合物を６５℃に冷却し、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、（５ｇ、０．００５０ｍｏｌ、０．０２当量）を種晶添加した。撹拌を６５℃で８時間維持し、その間に濃厚なスラリーが形成された。混合物を１２時間にわたって６５℃〜２．５℃に冷却した。スラリーを濾過し、アセトニトリル（９００ｍＬ）で洗浄し、真空オーブン中で乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、（２０３．８ｇ、０．２０５ｍｏｌ、収率７８％）を得た。
【０３８７】
実施例７ｂ
オーバーヘッド撹拌器を備えたジャケット付きガラス反応器に、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、（２５０ｇ、０．２６３ｍｏｌ、１当量）を充填した。アセトニトリル（１２５０ｍＬ）を反応器に充填し、温度を１５〜３０℃（３０℃）で安定させた。混合物を真空下にて５００ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。溶液をＫＦでの水含有量についてサンプリングし、０．１８％ｗ／ｗの結果を得た。追加の部分のアセトニトリル（７５０ｍＬ）を反応器に充填し、第２の共沸蒸留を５００ｍＬの体積標的まで行った。混合物をＫＦについてサンプリングし、０．０７５％ｗ／ｗの結果を得た。反応温度を２９．９℃で安定させ、アセトン（１２５０ｍＬ）を混合物に充填した。反応物を加熱し、温度を４０℃で安定させた。重炭酸ナトリウム（４４．２５ｇ、０．５２７ｍｏｌ、２．０当量）を反応混合物に充填し、続いて２−ヨードエタノール（５６．６ｇ、２５．７ｍＬ、０．３２９ｍｏｌ、１．２５当量）を充填した。５６時間後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）の消費）によって完了したとみなした。反応物を２２．７℃に冷却し、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（６０．０ｇ、０．５３５ｍｏｌ、２．０当量）を固体として充填した。２−ヨードエタノールの破壊をＧＣ法によってモニタリングし、１８時間後、この試薬のクエンチが完了したとみなした。水（１２５０ｍＬ）および酢酸イソプロピル（１２５０ｍＬ）を反応混合物に充填した。反応器内容物を２５分間撹拌し、層を分離させた。下部の水層（ＡＰ１）および上部の有機層（ＯＰ１）を受容器に回収した。ＡＰ１を反応器に戻し、第２の部分の酢酸イソプロピル（７５０ｍＬ）を充填した。反応器内容物を３０分間撹拌し、層を分離させた。下部の水層（ＡＰ２）および上部の有機層（ＯＰ２）を受容器に回収した。ＯＰ１およびＯＰ２を反応器中で合わせ、２つの部分の飽和塩化ナトリウム溶液（７５０ｍＬ、１００ｇのＮａＣｌ／２９０ｍＬの水を溶解させることによって調製したもの）で抽出した。洗浄した有機相（ＯＰ４）を真空下に５００ｍＬの体積標的まで濃縮した。アセトニトリル（２５５０ｍＬ）を反応器に充填した。第２の共沸真空蒸留を１８００ｍＬの体積標的まで行った。酢酸イソプロピル（２００ｍＬ）を混合物に充填した。１．４６％のＫＦが得られるまで水（２２．８ｍＬ）を混合物に充填した。反応器内容物を７５℃に加熱し、溶液を得た。反応混合物を６２．５℃に冷却し、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、（５ｇ、０．００５０ｍｏｌ、０．０２当量）を種晶添加した。撹拌を６２．５℃で５時間維持し、その間に濃厚なスラリーが形成された。混合物を１２時間にわたって６５℃〜２．５℃に冷却した。スラリーを濾過し、アセトニトリル（９００ｍＬ）で洗浄し、真空オーブン中で乾燥して、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、（２０８．１ｇ、０．２２０ｍｏｌ、モル収率８３％）を得た。
【０３８８】
実施例７ｃ
オーバーヘッド撹拌器を備えたジャケット付きガラス反応器に、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）、（２５０ｇ、０．２６３ｍｏｌ、１当量）を充填した。アセトニトリル（１２５０ｍＬ）を反応器に充填し、温度を１５〜３０℃（２４．３℃）で安定させた。混合物を真空下にて５００ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。溶液をＫＦでの水含有量についてサンプリングし、０．２２％ｗ／ｗの結果を得た。追加の部分のアセトニトリル（７５０ｍＬ）を反応器に充填し、第２の共沸蒸留を５００ｍＬの体積標的まで行った。混合物をＫＦについてサンプリングし、０．０９７％ｗ／ｗの結果を得た。反応温度を２９．９℃で安定させ、アセトン（１２５０ｍＬ）を混合物に充填した。反応物を加熱し、温度を２９．９℃で安定させた。重炭酸ナトリウム（４４．２５ｇ、０．５２７、２．０当量）を反応混合物に充填し、続いて２−ヨードエタノール（４４．４ｇ、２０．１４ｍＬ、０．２５８ｍｏｌ、０．９８当量）を充填した。４３時間後、追加の部分の２−ヨードエタノール（０．２５ｍＬ）を反応混合物に添加した。９．５時間後、第３の部分の２−ヨードエタノール（０．３ｍＬ）を反応混合物に添加した。さらに２時間後、反応物をサンプリングし、ＨＰＬＣ分析（ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−６−（アミノメチル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（６ａ）の消費）によって完了したとみなした。反応物を２２．７℃に冷却し、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（６０．０ｇ、０．５３５ｍｏｌ、２．０３当量）を固体として充填した。２−ヨードエタノールの破壊をＧＣ法によってモニタリングし、１０時間後、この試薬のクエンチが完了したとみなした。水（１２５０ｍＬ）および酢酸イソプロピル（１２５０ｍＬ）を反応混合物に充填した。反応器内容物を２５分間撹拌し、層を分離させた。下部の水層（ＡＰ１）および上部の有機層（ＯＰ１）を受容器に回収した。ＡＰ１を反応器に戻し、第２の部分の酢酸イソプロピル（７５０ｍＬ）を充填した。反応器内容物を３０分間撹拌し、層を分離させた。下部の水層（ＡＰ２）および上部の有機層（ＯＰ２）を受容器に回収した。ＯＰ１およびＯＰ２を反応器中で合わせ、２つの部分の飽和塩化ナトリウム溶液（７５０ｍＬ、１００ｇのＮａＣｌ／２９０ｍＬの水を溶解させることによって調製したもの）で抽出した。洗浄した有機相（ＯＰ４）を真空下に濃縮して５００ｍＬの体積標的にた。アセトニトリル（２５５０ｍＬ）を反応器に充填した。第２の共沸真空蒸留を行って１５５０ｍＬの体積標的にした。酢酸イソプロピル（２００ｍＬ）を混合物に充填した。０．８５％のＫＦが得られるまで水（１０．７ｍＬ）を混合物に充填した。反応器内容物を７５℃に加熱し、溶液を得た。反応混合物を５７℃に冷却し、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、（５ｇ、０．００５０ｍｏｌ、０．０２当量）を種晶添加した。撹拌を５７℃で２時間維持し、その間に濃厚なスラリーが形成された。混合物を１２時間にわたって６５℃〜２．５℃に冷却した。スラリーを濾過し、アセトニトリル（９００ｍＬ）で洗浄し、真空オーブン中で乾燥して、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、（２１８．１ｇ、０．２２０ｍｏｌ、モル収率８３％）を得た。
実施例８：Ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）からのプラゾマイシンの調製手順の例およびＣＧ−５０樹脂床の再生。
【化１９７】
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【０３８９】
実施例８ａ
オーバーヘッド撹拌器を備えたジャケット付きガラス反応器（反応器Ａ）に、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、（１５０ｇ、０．１５１ｍｏｌ、１当量）およびジクロロメタン（７５０ｍＬ）を充填した。混合物を０〜５℃（０．６℃）で混ぜた。トリフルオロ酢酸を、０〜５℃の温度を維持しながら反応混合物にゆっくり添加した［添加による発熱に注意］。添加終了時に、反応溶液を２２．５℃に加熱し、その温度で２時間保持した。反応混合物を、真空下にて、蒸留することによって４５０ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。濃縮反応混合物を２２．５℃でさらに２時間保持し、その後、温度を０〜１０℃（３．０℃）で安定させた。
【０３９０】
オーバーヘッド撹拌器を備えた第２のジャケット付きガラス反応器（反応器Ｂ）に水（３７５ｍＬ）を充填し、０℃〜５℃（２．５℃）の温度に冷却した。反応器Ａの内容物を、０〜１０℃の温度を維持しながら４５分間にわたって反応器Ｂの内容物に移した［添加による発熱に注意］。酢酸イソプロピルを反応混合物に充填し、二相混合物が生成された。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ１）および上部の有機層（ＯＰ１）を分離した。ＯＰ１を反応器に戻し、水（７５ｍＬ）を混合物に充填した。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ２）および上部の有機層（ＯＰ２）を回収した。ＯＰ２を反応器に戻し、水（７５ｍＬ）を充填した。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ３）および上部の有機層（ＯＰ３）を収集した。３つの生成物豊富な水層（ＡＰ１、ＡＰ２、およびＡＰ３）を反応器に戻し、合わせた。合わせた有機層のｐＨを０．１５として測定した。酢酸イソプロピル（４５０）を合わせた水相に充填した。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ４）および上部の有機層（ＯＰ４）を回収した。合わせたＡＰ４のｐＨを０．７３として測定した。ＡＰ４を反応器に戻した。酢酸イソプロピル（４５０）を反応器に充填した。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ５）および上部の有機層（ＯＰ５）を回収した。ＡＰ５のｐＨを１．７８として測定した。ＡＰ５を反応器に戻した。酢酸イソプロピル（４５０）を反応器に充填した。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ６）および上部の有機層（ＯＰ６）を回収した。ＡＰ６のｐＨを２．９５として測定した。ＡＰ６を反応器に戻し、ｐＨを１％アンモニア溶液（３４．７ｍＬ）を用いて５．８〜６．２（最終ｐＨ６．０１）に調整した。ｐＨ調整中に温度を０〜１０℃で維持した。１３５０ｍＬの最終体積まで、水（約８２０ｍＬ）を反応混合物に充填した。再びｐＨを測定し（５．６７）、１％のアンモニア溶液（１１．７ｍＬ）を使用して５．８〜６．２（６．０１）に調整した。溶液の伝導率を１５．３６ｍＳ／ｃｍとして測定した。
【０３９１】
粗プラゾマイシンのこの溶液を、水で満たしたヘッドスペースを有するアンモニウム形態のＣＧ−５０樹脂（３２５．５ｇ）を充填したＸＫ−５０／１００カラムに充填した。カラム温度を１３℃で安定させた。粗溶液を１０〜２０ｃｍ／ｈ（約９．２ｍＬ／分）の線流速によりダウンフロー様式で充填した。粗溶液を樹脂床に充填した後、水（１カラム体積、１６２０ｍＬ）を、１０〜２０ｃｍ／時（９．２ｍＬ／分）の線流速で、ダウンフロー様式で充填した。水の充填終了時に、０．４３％アンモニア溶液（５Ｌの水中の８６．７ｇの２５％アンモニアから調製したもの）を、２１０ｎｍでのＵＶ吸光度トレースから判断した際にプラゾマイシンがカラムから溶出するまで、カラムにダウンフロー様式で充填した。プラゾマイシンの溶出が完了したとみなされた後、カラムをダウンフロー様式で５％アンモニア溶液でさらに洗浄した。生成物豊富な画分（＃３６〜５８）を合わせて、６５２０ｍＬの精製されたプラゾマイシン遊離塩基溶液を得た。溶液のアンモニア含有量をイオンクロマトグラフィーにより２７２０μｇ／ｍＬとして測定し、プラゾマイシン遊離塩基濃度をＵＰＬＣにより１．１７％ｗ／ｖとして測定した。この溶液を、透析様式でＸＬＥ膜を使用した逆浸透によって、プラゾマイシン（％ｗ／ｖ）に対するアンモニア（μｇ／ｍＬ）が２０未満になるまで処理した。この基準を達成するために６ダイアボリューム（ｄｉａｖｏｌｕｍｅ）の水を処理した。透析プロセスによるアンモニア除去中、温度を１０℃未満に維持した。アンモニア除去プロセス後、６Ｍ硫酸溶液（５７．５）を使用して、精製されたプラゾマイシン溶液のｐＨを６．０に調整した。ｐＨ調整中の温度を０〜５℃で維持した。中和溶液を、７２Ｌ／時．ｍ２（１８ｍＬ／分）の流速で、予め洗浄したＺｅｔａｃａｒｂｏｎＲ５５炭カートリッジに通した。濾過後、カートリッジを水（１０６８ｍＬ）で洗浄し、洗浄物を濾過したプラゾマイシン溶液と合わせた。合わせた濾液および洗浄物を、ナノ濾過様式で、ＸＬＥ膜を用いた逆浸透を用いて５４０ｍＬに濃縮した。濃縮した溶液を０．２２ミクロンフィルタに通し、Ｂｕｃｈｉラボラトリ噴霧乾燥機を使用して噴霧乾燥により単離した（８９．０５ｇ、０．１０６ｍｏｌ、モル収率７０％）。
【０３９２】
実施例８ｂ−樹脂の再生
ＣＧ−５０樹脂（３２６ｇ）を含むＸＫ−５０／１００カラムを以下の工程によって再生した。１１０ｍＳ／ｃｍの伝導率が溶出液において達成されるまで、４％水酸化ナトリウム溶液（１１．８Ｌの水中の０．４９ｋｇのＮａＯＨ）をアップフロー様式で充填した。次いで、溶出液における１．５ｍＳ／ｃｍの伝導率が達成されるまで、水をアップフロー様式で充填した。溶出液におけるｍＳ／ｃｍの伝導率が達成されるまで、２％硫酸溶液（４．９Ｌの水中の０．１０ｋｇ濃硫酸から調製したもの）をアップフロー様式で充填した。４．８ｍＳ／ｃｍの最終伝導率が達成されるまで、水（４７８２ｍＬ）をアップフロー様式で充填した。２％アンモニア溶液（９．６Ｌの水中の４００ｇの２５％アンモニアから調製したもの）をアップフロー様式で充填した。溶出液の最終伝導率は、９７０μＳ／ｃｍ（ｐＨ１２．０４）であった。樹脂をフローなしで１時間沈降させた。水（３４１９ｍＬ）をダウンフロー様式で充填した（１３．１ｍＬ／分）。
【０３９３】
樹脂床充填を、トリフルオロ酢酸アンモニアパルスを適用することによって試験した。トリフルオロ酢酸アンモニウム（１．３９７ｇ）を水（１０６ｍＬ）中に溶解させることによって、トリフルオロ酢酸アンモニア溶液を調製した。この０．１Ｍトリフルオロ酢酸アンモニウム溶液（２７．５ｍＬ）を、液体ピストン様式でＣＧ−５０樹脂床の表面の真上に充填した。トリフルオロ酢酸アンモニウムパルスのＵＶ吸光度を２１０ｎｍにおいて観察することができるまで、水をダウンフロー様式で充填した。樹脂床は、充填され、かつ粗プラゾマイシンの精製に使用するのに好適であるとみなされた。
【０３９４】
実施例８ｃ
オーバーヘッド撹拌器を備えたジャケット付きガラス反応器（反応器Ａ）に、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、（１５０ｇ、０．１５１ｍｏｌ、１当量）およびジクロロメタン（７５０ｍＬ）を充填した。混合物を０〜５℃（０．０℃）で混ぜた。トリフルオロ酢酸を、０〜５℃の温度を維持しながら反応混合物にゆっくり添加した［添加による発熱に注意］。添加終了時に、反応溶液を２２．５℃に加熱し、その温度で１．５時間保持した。反応混合物を、真空下にて、蒸留することによって４５０ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。濃縮反応混合物を２２．５℃でさらに８時間保持し、その後、温度を０〜１０℃（５．０℃）で安定させた。
【０３９５】
オーバーヘッド撹拌器を備えた第２のジャケット付きガラス反応器（反応器Ｂ）に水（３７５ｍＬ）を充填し、０℃〜５℃（０．３℃）の温度に冷却した。反応器Ａの内容物を、０〜１０℃の温度を維持しながら１９分間にわたって反応器Ｂの内容物に移した［添加による発熱に注意］。酢酸イソプロピルを反応混合物に充填し、二相混合物が生成された。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ１）および上部の有機層（ＯＰ１）を分離した。ＯＰ１を反応器に戻し、水（７５ｍＬ）を混合物に充填した。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ２）および上部の有機層（ＯＰ２）を回収した。ＯＰ２を反応器に戻し、水（７５ｍＬ）を充填した。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ３）および上部の有機層（ＯＰ３）を収集した。３つの生成物豊富な水層（ＡＰ１、ＡＰ２、およびＡＰ３）を反応器に戻し、合わせた。合わせた有機層のｐＨを０．４９として測定した。酢酸イソプロピル（４５０）を合わせた水相に充填した。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ４）および上部の有機層（ＯＰ４）を回収した。合わせたＡＰ４のｐＨを０．８５として測定した。ＡＰ４を反応器に戻した。酢酸イソプロピル（４５０）を反応器に充填した。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ５）および上部の有機層（ＯＰ５）を回収した。ＡＰ５のｐＨを１．７２として測定した。ＡＰ５を反応器に戻した。酢酸イソプロピル（４５０）を反応器に充填した。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ６）および上部の有機層（ＯＰ６）を回収した。ＡＰ６のｐＨを２．８６として測定した。ＡＰ６を反応器に戻し、１％アンモニア溶液（２１ｍＬ）を用いて、ｐＨを５．８〜６．２（最終ｐＨ５．９９）に調整した。ｐＨ調整中に温度を０〜１０℃で維持した。１３５０ｍＬの最終体積まで、水（約８２０ｍＬ）を反応混合物に充填した。ｐＨを再び測定し（５．５４）、１％のアンモニア溶液（１０ｍＬ）を使用して５．８〜６．２（６．０１）に調整した。溶液の伝導率を１４．９２ｍＳ／ｃｍとして測定した。
【０３９６】
粗プラゾマイシンのこの溶液を、水を満たしたヘッドスペースを有するアンモニウム形態のＣＧ−５０樹脂（３２５．５ｇ）を充填したＸＫ−５０／１００カラムに充填した。カラム温度を２０℃で安定させた。粗溶液を１０〜２０ｃｍ／時（約９．２ｍＬ／分）の線流速によりダウンフロー様式で充填した。粗溶液を樹脂床に充填した後。水（１カラム体積、１６２０ｍＬ）を、１０〜２０ｃｍ／時（９．２ｍＬ／分）の線流速によりダウンフロー様式で充填した。水の充填終了時に、０．５０％アンモニア溶液（５Ｌの水中の１０２ｇの２５％アンモニアから調製したもの）を、２１０ｎｍにおけるＵＶ吸光度トレースから判断した際にプラゾマイシンがカラムから溶出するまで、ダウンフロー様式でカラムに充填した。アンモニア溶液を３８ｃｍ／時（１２．４ｍＬ／分）の線流速で充填した。生成物豊富な画分（＃３４〜５０）を合わせて、４８００ｍＬの精製されたプラゾマイシン遊離塩基溶液を得た。溶液のアンモニア含有量をイオンクロマトグラフィーにより３２００μｇ／ｍＬとして測定し、プラゾマイシン遊離塩基濃度をＵＰＬＣにより１．５２％ｗ／ｖとして測定した。この溶液を、透析様式でＸＬＥ膜を使用した逆浸透によって、プラゾマイシン（％ｗ／ｖ）に対するアンモニア（μｇ／ｍＬ）が２０未満になるまで処理した。この基準を達成するために９ダイアボリュームの水を処理した。透析プロセスによるアンモニア除去中、温度を１０℃未満に維持した。アンモニア除去プロセス後、精製されたプラゾマイシン溶液のｐＨを、６Ｍ硫酸溶液（５２．５）を使用して６．４７に調整した。ｐＨ調整中の温度を０〜５℃で維持した。中和溶液を、７２Ｌ／時．ｍ２（１５ｍＬ／分）の流速で、予め洗浄したＺｅｔａｃａｒｂｏｎ  Ｒ５５炭カートリッジに通した。濾過後、カートリッジを水（１０６８ｍＬ）で洗浄し、洗浄物を濾過したプラゾマイシン溶液と合わせた。合わせた濾液および洗浄物を、ナノ濾過様式で、ＸＬＥ膜を用いた逆浸透を用いて５４０ｍＬに濃縮した。濃縮した溶液を０．２２ミクロンフィルタに通し、Ｂｕｃｈｉラボラトリ噴霧乾燥機を使用して噴霧乾燥により単離した（８８．４２ｇ、０．１０６ｍｏｌ、モル収率７０％）。
【０３９７】
実施例８ｄ
オーバーヘッド撹拌器を備えたジャケット付きガラス反応器（反応器Ａ）に、ｔｅｒｔ−ブチル（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ヒドロキシブタンアミド）−３−（（（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−（（（（２−ヒドロキシエチル）アミノ）メチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−ヒドロキシシシシクロヘキシル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（メチル）カルバメート、式（７ａ）、（１５０ｇ、０．１５１ｍｏｌ、１当量）およびジクロロメタン（７５０ｍＬ）を充填した。混合物を０〜５℃（０．９℃）で混ぜた。トリフルオロ酢酸を、０〜５℃の温度を維持しながら反応混合物にゆっくり添加した［添加による発熱に注意］。添加終了時に、反応溶液を２２．５℃に加熱し、その温度で１．５時間保持した。反応混合物を、真空下にて、蒸留することによって４５０ｍＬの最終体積標的まで濃縮した。濃縮反応混合物を２２．５℃でさらに６時間保持し、その後、温度を０〜１０℃（６．５℃）で安定させた。
【０３９８】
オーバーヘッド撹拌器を備えた第２のジャケット付きガラス反応器（反応器Ｂ）に水（３７５ｍＬ）を充填し、０℃〜５℃（３．５℃）の温度に冷却した。反応器Ａの内容物を、０〜１０℃の温度を維持しながら７分間にわたって反応器Ｂの内容物に移した［添加による発熱に注意］。酢酸イソプロピルを反応混合物に充填し、二相混合物が生成された。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ１）および上部の有機層（ＯＰ１）を分離した。ＯＰ１を反応器に戻し、水（７５ｍＬ）を混合物に充填した。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ２）および上部の有機層（ＯＰ２）を回収した。ＯＰ２を反応器に戻し、水（７５ｍＬ）を充填した。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ３）および上部の有機層（ＯＰ３）を収集した。３つの生成物豊富な水層（ＡＰ１、ＡＰ２、およびＡＰ３）を反応器に戻し、合わせた。合わせた有機層のｐＨを０．４７として測定した。酢酸イソプロピル（４５０）を合わせた水相に充填した。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ４）および上部の有機層（ＯＰ４）を回収した。合わせたＡＰ４のｐＨを０．８３として測定した。ＡＰ４を反応器に戻した。酢酸イソプロピル（４５０）を反応器に充填した。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ５）および上部の有機層（ＯＰ５）を回収した。ＡＰ５のｐＨを１．９０として測定した。ＡＰ５を反応器に戻した。酢酸イソプロピル（４５０）を反応器に充填した。反応器内容物をオーバーヘッド撹拌器により混合し、次いで、撹拌を停止して層を分離させた。下部の生成物豊富な水層（ＡＰ６）および上部の有機層（ＯＰ６）を回収した。ＡＰ６のｐＨを３．１として測定した。ＡＰ６を反応器に戻し、１％アンモニア溶液（３５ｍＬ）を用いて、ｐＨを５．８〜６．２（最終ｐＨ６．０４）に調整した。ｐＨ調整中に温度を０〜１０℃で維持した。１３５０ｍＬの最終体積まで水（約８２０ｍＬ）を反応混合物に充填した。ｐＨを再び測定し（５．８３）、１％のアンモニア溶液（５ｍＬ）を使用して５．８〜６．２（６．０１）に調整した。溶液の伝導率を１５．２９ｍＳ／ｃｍとして測定した。
【０３９９】
この粗プラゾマイシン溶液を、水を満たしたヘッドスペースを有するアンモニウム形態のＣＧ−５０樹脂（３２５．５ｇ）を充填したＸＫ−５０／１００カラムに充填した。カラム温度を２７℃で安定させた。粗溶液を１０〜２０ｃｍ／時（約９．２ｍＬ／分）の線流速によりダウンフロー様式で充填した。粗溶液を樹脂床に充填した後。水（１カラム体積、１６２０ｍＬ）を、１０〜２０ｃｍ／時（９．２ｍＬ／分）の線流速によりダウンフロー様式で充填した。水の充填終了時に、０．５０％アンモニア溶液（５Ｌの水中の１０２ｇの２５％のアンモニアから調製したもの）を、２１０ｎｍでのＵＶ吸光度トレースから判断した際にプラゾマイシンがカラムから溶出するまで、ダウンフロー様式でカラムに充填した。アンモニア溶液を３８ｃｍ／時（１２．４ｍＬ／分）の線流速で充填した。生成物豊富な画分（＃３１〜４５）を合わせて、４０７２ｍＬの精製されたプラゾマイシン遊離塩基溶液を得た。溶液のアンモニア含有量をイオンクロマトグラフィーにより４０６０μｇ／ｍＬとして測定し、プラゾマイシン遊離塩基濃度をＵＰＬＣにより１．５２％ｗ／ｖとして測定した。この溶液を、透析様式でＸＬＥ膜を使用した逆浸透によって、プラゾマイシン（％ｗ／ｖ）に対するアンモニア（μｇ／ｍＬ）が２０未満になるまで処理した。この基準を達成するために５ダイアボリュームの水を処理した。透析プロセスによるアンモニア除去中、温度を１０℃未満に維持した。アンモニア除去プロセス後、精製されたプラゾマイシン溶液のｐＨを、６Ｍ硫酸溶液（５６）を使用して６．７４に調整した。ｐＨ調整中の温度を０〜５℃で維持した。中和溶液を、７２Ｌ／時．ｍ２（１５ｍＬ／分）の流速で、予め洗浄したＺｅｔａｃａｒｂｏｎ  Ｒ５５炭カートリッジに通した。濾過後、カートリッジを水（１０６８ｍＬ）で洗浄し、洗浄物を濾過したプラゾマイシン溶液と合わせた。合わせた濾液および洗浄物を、ナノ濾過様式で、ＸＬＥ膜を用いた逆浸透を用いて５４０ｍＬに濃縮した。濃縮した溶液を０．２２ミクロンフィルタに通し、Ｂｕｃｈｉラボラトリ噴霧乾燥機を使用して噴霧乾燥により単離した（９５．８６ｇ、０．１１４ｍｏｌ、収率７６％）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【国際調査報告】
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