(57)【要約】  本発明は、膵臓疾患の診断用組成物に関し、より詳細には、膵癌を診断できる組成物、これを含む診断用キット及び前記組成物を用いて診断のための情報を提供する方法に関する。本発明は、膵癌の発病可能性を正確に予測又は把握でき、さらに、他の種類の癌とも効果的に区別して診断できる。また、本発明では、個体から得た血液、血清又は血漿などから得られた単核球を用いて非侵襲的な方法で簡単且つ迅速に膵癌が診断できる。【選択図】  図３
2021524285.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤を含む膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項２】
前記組成物は、目的とする個体から分離された液体生検（ｌｉｑｕｉｄ  ｂｉｏｐｓｙ）に対するものである、請求項１に記載の膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項３】
前記組成物は、目的とする個体から分離された単核球、顆粒球又はエクソソームに対するものである、請求項１に記載の膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項４】
前記組成物は、インターロイキン１０受容体又は該インターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤を含む、請求項１に記載の膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項５】
前記組成物は、インターロイキン２２受容体又は該インターロイキン２２受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤をさらに含む、請求項４に記載の膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項６】
前記組成物は、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤をさらに含む、請求項４に記載の膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項７】
前記タンパク質の発現レベルを測定する製剤は、前記タンパク質に特異的に結合する抗体、オリゴペプチド、リガンド、ＰＮＡ（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）及びアプタマー（ａｐｔａｍｅｒ）からなる群から選ばれる１種以上を含む、請求項１に記載の膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項８】
前記ｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤は、前記ｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー、プローブ及びアンチセンスヌクレオチドからなる群から選ばれる１種以上を含む、請求項１に記載の膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項９】
前記膵臓疾患は膵癌である、請求項１に記載の膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか一項に記載の診断用組成物を含む、膵臓疾患の診断用キット。
【請求項１１】
前記キットは、ＲＴ−ＰＣＲキット、ＤＮＡチップキット、ＥＬＩＳＡキット、プロテインチップキット、ラピッド（ｒａｐｉｄ）キット又はＭＲＭ（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｒｅａｃｔｉｏｎ  ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ）キットである、請求項１０に記載の膵臓疾患の診断用キット。
【請求項１２】
目的とする個体から分離された生検に対して、インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含む、膵臓疾患の診断のための情報提供方法。
【請求項１３】
前記生検は、液体生検（ｌｉｑｕｉｄ  ｂｉｏｐｓｙ）である、請求項１２に記載の情報提供方法。
【請求項１４】
前記生検は、個体から分離された単核球、顆粒球及びエクソソームのいずれか１種以上を含む、請求項１２に記載の情報提供方法。
【請求項１５】
前記生検から、インターロイキン１０受容体又はインターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含む、請求項１２に記載の情報提供方法。
【請求項１６】
前記生検から、インターロイキン２２受容体又は該インターロイキン２２受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階をさらに含む、請求項１５に記載の情報提供方法。
【請求項１７】
前記生検から、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階をさらに含む、請求項１６に記載の情報提供方法。
【請求項１８】
前記目的とする個体から分離された生検から測定された前記タンパク質又は前記ｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群における発現レベルよりも高い場合、膵臓疾患の発病可能性が高いと判定する、請求項１２に記載の情報提供方法。
【請求項１９】
前記目的とする個体から分離された生検から測定された前記インターロイキン２２受容体又は該インターロイキン２２受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群における発現レベルよりも高い場合、膵臓疾患の発病可能性が高いと判定する、請求項１６に記載の情報提供方法。
【請求項２０】
前記膵臓疾患は、膵癌である、請求項１２に記載の情報提供方法。
【請求項２１】
治療を受けた膵臓疾患の患者から分離された生検から、インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含む、疾患の再発可能性を予測するための情報提供方法。
【請求項２２】
前記生検は、液体生検（ｌｉｑｕｉｄ  ｂｉｏｐｓｙ）である、請求項２１に記載の情報提供方法。
【請求項２３】
前記患者から分離された生検から測定された前記タンパク質又は前記ｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群における発現レベルよりも高い場合、膵臓疾患の再発可能性が高いと判定する、請求項２１に記載の情報提供方法。
【請求項２４】
前記膵臓疾患は、膵癌である、請求項２１に記載の情報提供方法。
【請求項２５】
（ａ）膵臓疾患の患者から分離した生検から、インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階；
（ｂ）前記患者に候補薬剤を投与する段階；及び
（ｃ）前記候補薬剤の投与後に前記患者から分離した生検から、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含む、疾患治療用薬物スクリーニング方法。
【請求項２６】
前記生検は、液体生検（ｌｉｑｕｉｄ  ｂｉｏｐｓｙ）である、請求項２５に記載の薬物スクリーニング方法。
【請求項２７】
前記（ｃ）段階で測定したタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルが、前記（ａ）段階で測定された前記タンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルに比べて減少した場合、前記候補薬剤を疾患の治療剤として選別する段階をさらに含む、請求項２５に記載の薬物スクリーニング方法。
【請求項２８】
前記膵臓疾患は、膵癌である、請求項２５に記載の薬物スクリーニング方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、膵臓疾患を診断できる組成物に関し、より詳細には、膵癌などを診断できる組成物、これを含む診断用キット及び前記組成物を用いて診断のための情報を提供する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
現代人の主要疾患の一つである癌の治療方法及び診断方法に関する研究は、発病頻度の高い肺癌、肝癌、胃癌などを中心に比較的活発に行われている。しかし、発病頻度の低い食道癌、大腸癌、膵癌などに対する研究は相対的に低調な実情にある。特に、膵癌は、初期には別に症状がなく、既に全身転移が起きてこそ痛みと体重減少などの症状が現れるのが普通であり、治癒率が比較的低いため、定期的な診断が非常に重要である。臨床症状は殆ど徐々に発病し、食欲減退、疲れやすさ、体重減少が最も一般的な症状である。膵癌は５年生存率が１〜４％、中央生存期間が５ヶ月である致命的な癌で、人体癌の中でも一番不良な予後を示している。しかも、診断時に患者の８０〜９０％が、完治を期待する根治的切除が不可能な状態で発見されるため、予後が不良で、治療は主に抗癌療法に依存している。このため、膵癌はいかなる人体癌よりも早期診断法の開発が切に望まれる癌である。
【０００３】
現在まで、膵癌に効果があるとされる５−フルオロユラシル（５−ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ）、ゼムシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）、タルセバ（ｔａｒｃｅｖａ）を含むいくつかの抗癌剤の治療効果は極めて低調であり、抗癌治療に対する反応率は１５％前後に過ぎず、これらの事実は、膵癌患者の予後を向上させるためには、より効果的な早期診断法及び治療法の開発が切実であること示唆する。
【０００４】
膵臓癌の診断は、胃、十二指腸のＸ線造影検査、皮膚及び肝を通じた胆道撮影と逆行性内視鏡胆道撮影術などによって行われてきたが、最近では超音波撮影及び電算化単層撮影が最も多く用いられている。これらの方法により疾病の病変が発見される場合、より精密な組織検査を行い、比較的正確な検査結果を得ることもできるが、上記の診断方法は精度に劣ったり、患者に苦痛を与えるなど、その実行方法が非常に不便であるため、被検者がそれを忌避する実情である。したがって、簡便かつ迅速に膵臓癌か否かを診断できる検査方法の開発が望まれている。
【０００５】
これと関連して、韓国特許第１０−０８１９１２２号は、マトリリン（ｍａｔｒｉｌｉｎ）、トランスチレチン（ｔｒａｎｓｔｈｙｒｅｔｉｎ）及びストラティフィン（ｓｔｒａｔｉｆｉｎ）を膵癌マーカーとして用いた技術を開示しており、韓国特許公開第２０１２−００８２３７２号は、様々な膵癌マーカーを用いた技術を開示している。また、韓国特許公開第２００９−０００３３０８号は、個体の血液試料からＲＥＧ４タンパク質の発現量を検出して膵癌を診断する方法を開示しており、韓国特許公開第２０１２−０００９７８１号は、個体の膵癌診断に必要な情報を提供するために、個体から分離した癌組織のうちＸＩＳＴ  ＲＮＡの発現量を測定する分析方法を、韓国特許公開第２００７−０１１９２５０号は、正常ヒトの膵臓組織と比較してヒト膵癌組織において別に発現した新規遺伝子ＬＢＦＬ３１３ファミリーを開示しており、米国出願公開第２０１１／０２９４１３６号は、ケラチン８タンパク質などのバイオマーカーを用いた膵癌診断方法を開示している。しかし、マーカーごとにその診断効率及び正確性に大きな差があり、より優れた効果を有するマーカーの発掘が必要である。
【０００６】
そこで、本発明の発明者らは、膵臓疾患の中でも特に膵癌の早期診断に有用なマーカーを開発するために鋭意努力した結果、膵癌患者から分離した液体生検（ｌｉｑｕｉｄ  ｂｉｏｐｓｙ）においてインターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）又はインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）又はそのｍＲＮＡの発現が特異的に増加することを発見し、本発明を完成するに至った。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の一目的は、インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）又はインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）のタンパク質、又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定し、膵臓疾患、自己免疫疾患、アレルギー、グレーヴス病（Ｇｒａｖｅ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、橋本病（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ’ｓ  ｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ）、自己免疫リンパ増殖症候群（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｌｙｍｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＡＬＰＳ）、重症筋無力症（ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ  ｇｒａｖｉｓ）、川崎病（Ｋａｗａｓｋａｉ  ｄｉｓｅａｓｅ）又は乾癬（ｐｓｏｒｉａｓｉｓ）などの疾患、好ましくは膵癌を簡便且つ正確に診断できる組成物を提供しようとする。
【０００８】
本発明の他の目的は、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のタンパク質、又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定し、前記疾患を簡便且つ正確に診断できるキットを提供しようとする。
【０００９】
本発明のさらに他の目的は、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のタンパク質、又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定し、前記疾患を診断するための情報を提供する方法を提供しようとする。
【００１０】
本発明のさらに他の目的は、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のタンパク質、又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定し、前記疾患の再発しか否かを診断するための情報を提供する方法を提供しようとする。
【００１１】
本発明のさらに他の目的は、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のタンパク質、又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定し、前記疾患を治療するための薬物をスクリーニングする方法を提供しようとする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
前記目的を達成するために、本発明は、インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤を含む膵臓疾患の診断用組成物を提供する。
【００１３】
本発明はまた、前記診断用組成物を含む、膵臓疾患の診断用キットを提供する。
【００１４】
本発明はまた、目的とする個体から分離された生検に対してインターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含む、膵臓疾患の診断のための情報提供方法を提供する。
【００１５】
本発明はまた、治療を受けた膵臓疾患の患者から分離された生検から、インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含む、疾患の再発可能性を予測するための情報提供方法を提供する。
【００１６】
本発明はまた、（ａ）膵臓疾患の患者から分離した生検から、インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階；
（ｂ）前記患者に候補薬剤を投与する段階；及び
（ｃ）前記候補薬剤の投与後に前記患者から分離した生検から、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含む、疾患治療用薬物スクリーニング方法を提供する。
【００１７】
本発明はまた、前記膵臓疾患を診断する用途のためのインターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤を含む組成物を提供する。
【００１８】
本発明はまた、目的とする個体から分離された生検に対してインターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含む、膵臓疾患の診断方法を提供する。
【００１９】
本発明はまた、前記膵臓疾患診断のためのインターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤を含む組成物の用途を提供する。
【００２０】
本発明はまた、前記膵臓疾患診断のための製剤を製造するためのインターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤を含む組成物の使用を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】実施例１でＦＡＣＳ分析を用いて正常対照群、膵癌患者、膵炎患者、肺癌患者及び大腸癌患者から採取した血液中の総単核球細胞数とＩＬ−２２が発現する単核球細胞数との比率を％で示すものである。
【図２】実施例１でＦＡＣＳ分析を用いて正常対照群、膵癌患者、膵炎患者、肺癌患者及び大腸癌患者から採取した血液中の総単核球細胞数とＩＬ−２２Ｒが発現する単核球細胞数との比率を％で示すものである。
【図３】実施例１でＦＡＣＳ分析を用いて正常対照群、膵癌患者、膵炎患者、肺癌患者及び大腸癌患者から採取した血液中の総単核球細胞数とＩＬ−１０Ｒが発現する単核球細胞数との比率を％で示すものである。
【図４】実施例２で正常対照群、膵癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液中の単核球細胞においてＩＬ−１０ＲＢのｍＲＮＡ発現レベルを比較したグラフである。
【図５】実施例２で正常対照群、膵癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液中の単核球細胞においてＩＬ−２２ＲＡのｍＲＮＡ発現レベルを比較したグラフである。
【図６】実施例３で正常対照群、膵癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液中の単核球細胞においてＩＬ−２２のｍＲＮＡ発現レベルを比較したグラフである。
【図７】実施例３で正常対照群、膵癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液中の単核球細胞においてＩＬ−２９のｍＲＮＡ発現レベルを比較したグラフである。
【図８】実施例４で正常対照群、膵癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液中の単核球細胞においてＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１のｍＲＮＡ発現レベルを比較したグラフである。
【図９】実施例４で正常対照群、膵癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液中の単核球細胞においてＩＦＮＬＲ１アイソフォーム３のｍＲＮＡ発現レベルを比較したグラフである。
【図１０】実施例５で膵癌患者の手術の前と後に患者から採取した血液中の総単核球細胞数とＩＬ−２２が発現する単核球細胞数との比率を％で示すものである。
【図１１】実施例５で膵癌患者の手術の前と後に患者から採取した血液中の総単核球細胞数とＩＬ−２２Ｒが発現する単核球細胞数との比率を％で示すものである。
【図１２】実施例５で膵癌患者の手術の前と後に患者から採取した血液中の総単核球細胞数とＩＬ−１０Ｒが発現する単核球細胞数との比率を％で示すものである。
【図１３】実施例６で膵癌患者の手術前及び手術後３ケ月経過時点で患者から採取した血液中の総単核球細胞数とＩＬ−１０Ｒが発現する単核球細胞数との比率を測定した後、対応のあるｔ検定（ｐａｉｒｅｄ  Ｔ  ｔｅｓｔ）で分析した結果を示すグラフである。
【図１４】実施例７で正常対照群、膵癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液中のエクソソームにおいてＩＬ−１０ＲＢのｍＲＮＡ発現レベルを比較したグラフである。
【図１５】実施例７で正常対照群、膵癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液中のエクソソームにおいてＩＬ−２２ＲＡのｍＲＮＡ発現レベルを比較したグラフである。
【図１６】実施例７で正常対照群、膵癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液中のエクソソームにおいてＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１のｍＲＮＡ発現レベルを比較したグラフである。
【図１７】実施例８で正常対照群、膵癌患者、膵炎患者及び胆管癌患者から採取した血液中のエクソソームにおいてＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１（ＬＲ）及びＧＰＣ−１（Ｍ）のｍＲＮＡ発現レベルを比較したグラフである。
【図１８】実施例８で膵癌患者の予測のためのＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１（ＬＲ）バイオマーカーの組合せに対してスコア（ｓｃｏｒｅ）分析した結果である。
【図１９】実施例９で正常対照群、膵癌患者、膵炎患者及び胆管癌患者から採取した血液中の単核球（ＰＢＭＣ）においてＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）のｍＲＮＡ発現レベルを比較したグラフである。
【図２０】実施例９で膵癌患者の予測のためのＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）バイオマーカーの様々な組合せに対してスコア（ｓｃｏｒｅ）分析した結果である。
【図２１】実施例９で膵癌患者の予測のためのＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）バイオマーカーの様々な組合せに対してスコア（ｓｃｏｒｅ）分析した結果である。
【図２２】実施例１０で正常対照群、膵癌患者、胆嚢癌患者及び胆管癌患者から採取した血液中の単核球（ＰＢＭＣ）でＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１（ＬＲ）及びＩＬ−２９（Ｌ）のｍＲＮＡ発現レベルを比較したグラフである。
【図２３】実施例１１でＦＡＣＳ分析を用いて、膵癌患者の血液中の総単核球細胞数とＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１を発現する細胞との比率を分析した結果である。
【図２４】実施例１１でＦＡＣＳ分析を用いて、慢性膵炎患者の血液中の総単核球細胞数とＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１を発現する細胞との比率を分析した結果である。
【図２５】実施例１２で正常対照群、膵癌患者、急性膵炎患者及び慢性膵炎患者から採取した血液中の総単核球細胞数とＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）又はＩＬ−２２（Ａ）が発現する単核球細胞数との比率を％で示すものである。
【図２６】実施例１２でＦＡＣＳ分析を用いて、膵癌患者の予測のためのＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）バイオマーカーのスコア（ｓｃｏｒｅ）分析を行った結果である。
【図２７】実施例１３で外科的切除術を受けた膵癌患者の手術の前と後に採取した血液から分離した単核球においてＩＬ−１０ＲＢ、ＩＬ−２２ＲＡ、ＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１、ＩＬ−２２及びＧＰＣ−１のそれぞれのｍＲＮＡ発現レベルを測定した結果を示すグラフである。
【図２８】実施例１４で外科的切除術を受けた膵癌患者の手術の前と後に採取した血液から分離した単核球においてＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）、ＩＬ−２２（Ａ）、ＣＥＡ及びＣＡ１９−９のそれぞれのｍＲＮＡ発現レベルを測定した結果と、手術の前と後に前記総単核球細胞数とＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）、ＩＬ−２２（Ａ）及びＣＡ１９−９が発現する細胞数との比率を示すグラフである。
【図２９】実施例１４で外科的切除術を受けた膵癌患者の手術の前と後に採取した血液から分離した単核球においてＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）、ＩＬ−２２（Ａ）、ＣＥＡ及びＣＡ１９−９のそれぞれのｍＲＮＡ発現レベルを測定した結果、及び手術の前と後に前記総単核球細胞数とＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）、ＩＬ−２２（Ａ）及びＣＡ１９−９が発現する細胞数との比率を示すグラフである。
【図３０】実施例１４で外科的切除術を受けた膵癌患者の手術の前と後に採取した血液から分離した単核球においてＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）、ＩＬ−２２（Ａ）、ＣＥＡ及びＣＡ１９−９のそれぞれのｍＲＮＡ発現レベルを測定した結果、及び手術の前と後に前記総単核球細胞数とＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）、ＩＬ−２２（Ａ）及びＣＡ１９−９が発現する細胞数との比率を示すグラフである。
【図３１】実施例１４で外科的切除術を受けた膵癌患者の手術の前と後に採取した血液から分離した単核球においてＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）、ＩＬ−２２（Ａ）、ＣＥＡ及びＣＡ１９−９のそれぞれのｍＲＮＡ発現レベルを測定した結果である。
【図３２】実施例１４で外科的切除術を受けた膵癌患者の手術の前と後に採取した血液から分離した単核球においてＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）、ＩＬ−２２（Ａ）、ＣＥＡ及びＣＡ１９−９のそれぞれのｍＲＮＡ発現レベルを測定した結果である。
【図３３】実施例１５で抗癌化学療法を受けた膵癌患者の治療の前と後に採取した血液から分離した単核球においてＩＬ−１０ＲＢ、ＩＬ−２２ＲＡ、ＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１、ＩＬ−２２、ＩＬ−２９及びＧＰＣ−１のそれぞれのｍＲＮＡ発現レベルを測定した結果である。
【図３４】実施例１６でＦＡＣＳ分析を用いて抗癌化学療法を受けた膵癌患者の治療の前と後に採取した血液から分離した総単核球細胞数とＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）を発現する細胞数との比率を分析した結果である。
【図３５】実施例１７で膵癌患者から採取した血液から分離した単核球に対して、ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）に特異的な抗体を用いてＦＡＣＳ分離及びギムザ染色を行った結果である。
【図３６】実施例１７で急性膵炎患者から採取した血液から分離した単核球に対して、ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）に特異的な抗体を用いてＦＡＣＳ分離及びギムザ染色を行った結果である。
【図３７】実施例１８で膵癌患者から採取した血液から分離した全血細胞に対して、ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）に特異的な抗体を用いてＦＡＣＳ分離及びＨ＆Ｅ染色を行った結果である。
【図３８】実施例１９で膵癌患者から採取した血液から分離した全血細胞に対して転写体分析を用いてＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１（ＬＲ）を発現する細胞を分離した結果である。
【図３９】実施例２０の実験設計図である
【図４０】実施例２０でマウスにＰａｎｃ−１細胞及びＡｐｓｃ細胞を注入した後の膵臓及び脾臓の写真である。
【図４１】実施例２０でマウスにＰａｎｃ−１細胞及びＡｐｓｃ細胞を注入した後、膵臓組織に対してＨ＆Ｅ染色を行った写真である。
【図４２】実施例２０でマウスにＰａｎｃ−１細胞及びＡｐｓｃ細胞を注入した後、膵臓に浸潤した免疫細胞（Ｂ細胞）に対して、ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）に特異的な抗体を用いてＦＡＣＳ分析を行った結果である。
【図４３】実施例２０でマウスにＰａｎｃ−１細胞及びＡｐｓｃ細胞を注入した後、膵臓に浸潤した免疫細胞（樹枝状細胞及び大食細胞）に対して、ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）に特異的な抗体を用いてＦＡＣＳ分析を行った結果である。
【図４４】実施例２０でマウスにＰａｎｃ−１細胞及びＡｐｓｃ細胞を注入した後、膵臓に浸潤した免疫細胞（好中球細胞）に対して、ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）に特異的な抗体を用いてＦＡＣＳ分析を行った結果である。
【図４５】実施例２１で正常対照群及び膵癌患者から採取した血液から分離した単核球においてＩＬ−２８ａ、ＩＬ−２８ｂアイソフォーム１及びＩＬ−２８ｂアイソフォーム２のそれぞれのｍＲＮＡ発現レベルを測定した結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
特に断りのない限り、本明細書で使われる全ての技術的及び科学的用語は、本発明の属する技術の分野における熟練した専門家によって通常理解されるのと同じ意味を有する。一般に、本明細書における命名法は、本技術分野でよく知られており、通常用いられるものである。
【００２３】
膵癌は、初期には別に症状がなく、既に全身転移が起きてこそ痛みと体重減少などの症状が現れるのが普通であり、治癒率が比較的低いため、定期的な診断が非常に重要である。臨床症状は殆ど徐々に発病し、食欲減退、疲れやすさ、体重減少が最も一般的な症状である。膵癌は５年生存率が１〜４％、中央生存期間が５ヶ月である致命的な癌で、人体癌の中でも一番不良な予後を示している。しかも、診断時に患者の８０〜９０％が、完治を期待する根治的切除が不可能な状態で発見されるため、予後が不良で、治療は主に抗癌療法に依存している。このため、膵癌はいかなる人体癌よりも早期診断法の開発が切に望まれる癌である。
【００２４】
本発明者らは、膵臓疾患の中でも特に膵癌の早期診断に有用なマーカーを開発するために鋭意努力した結果、膵癌患者から分離した液体生検（ｌｉｑｕｉｄ  ｂｉｏｐｓｙ）においてインターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）又はインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）又はそのｍＲＮＡの発現が特異的に増加することを発見した。
【００２５】
したがって、本発明は、一観点において、インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤を含む膵臓疾患の診断用組成物に関する。
【００２６】
本発明の診断用組成物を用いて発病の有無又は発病可能性を予測できる疾患の種類には、膵臓疾患、自己免疫疾患、アレルギー、グレーヴス病（Ｇｒａｖｅ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、橋本病（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ’ｓ  ｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ）、自己免疫リンパ増殖症候群（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｌｙｍｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＡＬＰＳ）、重症筋無力症（ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ  ｇｒａｖｉｓ）、川崎病（Ｋａｗａｓｋａｉ  ｄｉｓｅａｓｅ）及び乾癬（ｐｓｏｒｉａｓｉｓ）などがあるが、これに制限されるものではない。
【００２７】
特に、本発明では、前記診断用組成物を用いて、膵臓疾患として、膵癌（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）又は膵炎（ｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ）が診断でき、より好ましくは、膵癌が診断できる。具体的に、本発明の診断用組成物は、正常群と膵癌の患者群を区別して検出又は診断できる。のみならず、他の種類の癌、例えば肺癌又は大腸癌などと区別して膵癌を選別的に検出又は診断することもできる。
【００２８】
本発明において、前記“膵癌（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）”とは、膵臓細胞に起源する癌を意味する。膵癌には様々な種類があるが、膵管細胞で発生した膵管腺癌種が９０％程度を占めていることから、通常、膵癌とは膵管腺癌腫のことを指す。その他に、嚢腫性癌（嚢腺癌）、内分泌腫瘍などがある。膵癌患者の約５〜１０％は遺伝素因を持っているが、膵癌患者において膵癌の家族歴がある場合は約７．８％程度で、一般人の膵癌発生率０．６％に比べて頻度が高い。膵癌は５年生存率が５％以下で、予後が非常に悪い癌である。その理由は、たいてい、癌が進行してから発見されるため、発見当時に手術切除が可能な場合は２０％前後であり、肉眼では完全に切除されたように見えても、微細転移によって生存率の向上が小さく、抗癌剤及び放射線治療に対する反応が低いからである。このため、生存率を向上させるに最も重要な方法は、症状がないか非特異的であるうちに早期に見つけて手術することである。
【００２９】
本発明において、前記“膵炎（ｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ）”とは、膵臓（ｐａｎｃｒｅａｓ）で炎症によって生ずる疾病であり、急性膵炎（ａｃｕｔｅ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ）及び晩成膵炎（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ）がある。膵液（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｊｕｉｃｅ）はアミラーゼ（ａｍｙｌａｓｅ、炭水化物を加水分解する。）、トリプシン（ｔｒｙｐｓｉｎ、タンパク質の加水分解に作用する。）、リパーゼ（ｌｉｐａｓｅ、脂肪の加水分解に作用する。）のような消化酵素を含む。膵炎は酒の飲み過ぎ（ａｌｃｏｈｏｌ  ａｂｕｓｅ）、胆石（ｇａｌｌｓｔｏｎｅｓ）などによって膵液が円滑に流れず、前記酵素が膵臓の自己分解を誘発して発生する以外にも、代謝障害、薬物、腹部損傷などの種々の原因などによって発生する。膵炎は、膵臓腺細胞の損傷、広範囲な癲癇性浮腫み、出血及び損傷部位への好中球性顆粒球の移動を誘発する膵臓の炎症性疾患である。膵炎は大きく２類型に分けられるが、癲癇性浮腫み（ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ  ｅｄｅｍａ）及び膵臓周辺の脂肪性壊死（ｐｅｒｉｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｆａｔ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ）が発見される軽症（ｍｉｌｄ  ｔｙｐｅ）の膵炎と、膵臓周辺（ｐｅｒｉｐａｎｃｒｅａｔｉｃ）及び膵臓内部（ｉｎｔｒａｐａｎｃｒｅａｔｉｃ）の広範囲な脂肪性壊死、膵実質壊死（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｐａｒｅｎｃｈｙｍａｌ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ）、出血を伴う重症（ｓｅｖｅｒｅ  ｔｙｐｅ）の膵炎とがある（Ｂａｎｋ  ＰＡ．，Ａｍ．Ｊ．ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．，８９，ｐｐ１５１−１５２，１９９４．；  Ｂｒａｄｌｅｙ  ＥＬ．，Ａｒｃｈ．Ｓｕｒｇ．，１２８，ｐｐ５８６−５９０，１９９３）。
【００３０】
また、本発明において、前記“自己免疫疾患”とは、個体の自己組職に対して起きて指定された非悪性疾患又は障害である。全ての正常個体において一番重要な特性の一つは、自己（ｓｅｌｆ）を構成している抗原物質に対しては有害に反応しないが、非自己（ｎｏｎ−ｓｅｌｆ）抗原に対してはそれを認識して反応して除去することである。自己抗原に対する生体の無反応を免疫不応答（ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ  ｕｎｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ）又は寛容（ｔｏｌｅｒａｎｃｅ）と言う。しかし、自己寛容を誘導又は維持する際に異常が発生すると、自己抗原に対して免疫反応が起こり、その結果、自己組職を攻撃する現象が発生するが、この過程によって発生する疾患を自己免疫疾患と言う。前記自己免疫疾患は自分の臓器組織又はその成分に対して抗体が生産される炎症性疾患であり、多数の組職と臓器に慢性的な全身性炎症を招く疾病を総称することができる。
【００３１】
具体的に、本発明において、前記自己免疫疾患は、リウマチ関節炎（Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ、ＳＬＥ）、全身性エリテマトーデス（ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｌｕｐｕｓ  ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ）、クローン病（Ｃｒｏｈｎｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、潰瘍性大腸炎（ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ  ｃｏｌｉｔｉｓ）、多発性硬化症（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、ブドウ膜炎（ｕｖｅｉｔｉｓ）、自己免疫髄膜炎（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ）、シェーグレン症侯群（Ｓｊｏｇｒｅｎ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、硬皮症（ｓｃｌｅｒｏｄｅｒｍａ）、ウェゲナー肉芽腫症（ｗｅｇｅｎｅｒ’ｓ  ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｓｉｓ）、類肉腫症（ｓａｒｃｏｉｄｏｓｉｓ）、敗血症性ショック、涙腺炎、脳卒中、動脈硬化症、血管再狭窄、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、蕁麻疹、結膜炎、乾癬、全身性炎症反応症候群、多発性筋炎、皮膚筋炎、結節性多発関節炎、混合結合組職病、痛風、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、糖尿性網膜症、多発性硬化症、晩成甲状腺炎、セリアック病、重症筋無力症、尋常性天疱瘡、ウイルス疾患、細菌性疾患、動脈硬化、血管腫、血管繊維腫、再灌流障害又は心臓肥大症などを含むことができるが、これに制限されるものではない。
【００３２】
本発明において、前記“アレルギー（ａｌｌｅｒｇｙ）”とは、‘アトピー疾患（ａｔｏｐｉｃ  ｄｉｓｏｒｄｅｒ）’と同じ意味で使用でき、異物、すなわち、アレルゲン（ａｌｌｅｒｇｅｎ）に対する特異で変形された反応を示す生化学的現象によって発生した疾患を意味できる。
【００３３】
本発明において、前記アレルギーは、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、湿疹、喘息、過敏症、アレルギー性鼻炎（ａｌｌｅｒｇｉｃ  ｒｈｉｎｉｔｉｓ）、アレルギー性結膜炎（ａｌｌｅｒｇｉｃ  ｃｏｎｊｕｎｃｔｉｖｉｔｉｓ）、アレルギー性皮膚炎、蕁麻疹、昆虫アレルギー、食品アレルギー又は薬品アレルギーなどであり得るが、これに制限されるものではない。
【００３４】
本発明において、前記“診断”とは、特定の疾病又は疾患に対する対象（ｓｕｂｊｅｃｔ）の感受性（ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ）を判定すること、対象が特定の疾病又は疾患を現在持っているかを判定すること、特定の疾病又は疾患にかかった対象の予後（ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ）（例えば、前転移性又は転移性癌状態の同定、癌の段階決定又は治療に対する癌の反応性決定）を判定すること、又はテラメトリックス（ｔｈｅｒａｍｅｔｒｉｃｓ）（例えば、治療効能に対する情報を提供するために客体の状態をモニタリングすること）を含む。本発明の目的上、前記診断は、前述した疾患の発病の有無又は発病可能性（危険性）を確認することである。
【００３５】
本発明の前記診断用組成物は、好ましくは、インターロイキン１０受容体又は該インターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤を含むことができる。また、本発明において前記診断用組成物は、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質、又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤をさらに含むことによって、前記疾患の診断時に正確度を上げることができる。
【００３６】
本発明の前記診断用組成物は、好ましくは、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれのタンパク質の発現レベルを測定する製剤を含むことができる。
【００３７】
本発明の前記診断用組成物は、好ましくは、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤を含むことができる。
【００３８】
本発明の前記診断用組成物は、好ましくは、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターロイキン２２受容体のそれぞれのタンパク質の発現レベルを測定する製剤を含むことができる。
【００３９】
本発明の前記診断用組成物は、好ましくは、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターロイキン２２受容体のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤を含むことができる。
【００４０】
本発明の前記診断用組成物は、好ましくは、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターロイキン２２のそれぞれのタンパク質の発現レベルを測定する製剤を含むことができる。
【００４１】
本発明の前記診断用組成物は、好ましくは、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターロイキン２２のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤を含むことができる。
【００４２】
本発明の前記診断用組成物は、好ましくは、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体及び前記インターロイキン２２のそれぞれのタンパク質の発現レベルを測定する製剤を含むことができる。
【００４３】
本発明の前記診断用組成物は、好ましくは、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体及び前記インターロイキン２２のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤を含むことができる。
【００４４】
本発明の前記診断用組成物は、好ましくは、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１又はインターロイキン２８Ｂアイソフォーム２のタンパク質の発現レベルを測定する製剤を含むことができる。
【００４５】
本発明の前記診断用組成物は、好ましくは、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１又はインターロイキン２８Ｂアイソフォーム２をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤を含むことができる。
【００４６】
本発明において、前記“インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１０Ｒ）”とは、ＩＩ型サイトカインレセプターのことを指し、２個のαサブユニットと２個のβサブユニットとで構成される４分子体に該当する。αサブユニットは、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、肥満細胞（ｍａｓｔ  ｃｅｌｌｓ）及び樹枝状細胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ）のような造血細胞で発現し、βサブユニットは多様に発現する。本発明において、前記インターロイキン１０受容体は、好ましくは配列番号１で表示されるインターロイキン１０受容体のβサブユニット（ＩＬ−１０ＲＢ）であり得る。
【００４７】
本発明において、前記“インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）”はＩＩ型サイトカインレセプターであり、α１サブユニットとβ２サブユニットのヘテロ二量体（ｈｅｔｅｒｏｄｉｍｅｒ）に該当し、インターロイキン２２（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ２２）に結合する。本発明において、前記インターロイキン２２受容体は、好ましくは、配列番号２で表示されるインターロイキン２２受容体α１サブユニット（ＩＬ−２２ＲＡ１）であり得る。
【００４８】
本発明において、前記“インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）”は、細胞免疫反応を仲裁する、ＩＬ−１０ファミリー又はＩＬ−１０スーパーファミリー（ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２４及びＩＬ−２６）と呼ばれるサイトカインのグループに属するサイトカインである。前記インターロイキン２２は、ＩＬ−１０Ｒ２及びＩＬ−２２Ｒ１のサブユニットで構成されるヘテロ二量体細胞表面受容体に結合する。本発明において、前記インターロイキン２２は、配列番号３のアミノ酸配列で表示可能である。
【００４９】
本発明において、前記“インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）”は‘インターフェロンラムダ２（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ２）’とも呼ばれ、ウイルス感染によって上向き調節されるＩＩＩ型インターフェロンに該当する。前記インターロイキン２８Ａは、上皮細胞でＩＬ−１０Ｒベータ及びＩＬ−２８Ｒアルファ／ＩＦＮ−ラムダＲ１を含む受容体複合体と相互作用できる。本発明において、前記インターロイキン２８Ａは、配列番号４のアミノ酸配列で表示可能である。
【００５０】
本発明において、前記“インターロイキン２８Ｂ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ，ＩＬ−２８Ｂ）”は‘インターフェロンラムダ３（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ ３，ＩＦＮＬ３）’とも呼ばれ、Ｉ型インターフェロン及びＩＬ−１０ファミリーと関連したサイトカインに該当する。前記インターロイキン２８Ｂ、インターロイキン２８Ａ及びインターロイキン２９の遺伝子は、１９ｑ１３にマッピングされた染色体領域にサイトカイン遺伝子クラスターを形成する。これらの３個の遺伝子によってコードされるサイトカインの発現は、ウイルス感染によって誘導される。このような３個のサイトカインは、インターロイキン１０受容体ベータ（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｂｅｔａ，ＩＬ１０ＲＢ）及びインターロイキン２８受容体アルファ（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｌｐｈａ，ＩＬ２８ＲＡ）からなる異種二重体クラスＩＩサイトカイン受容体（ｃｌａｓｓ  ＩＩ  ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ）と相互作用する。本発明において、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１は、配列番号５のアミノ酸配列で表示可能であり、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２は、配列番号６のアミノ酸配列で表示可能である。
【００５１】
本発明において、前記“インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）”は‘インターフェロンラムダ−１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ−１）’とも呼ばれ、染色体１９番に位置するインターロイキン２９遺伝子によってコードされるタンパク質であり、螺旋形のサイトカインファミリー（ｈｅｌｉｃａｌ  ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ｆａｍｉｌｙ）に属し、ＩＩＩ型インターフェロンに該当する。前記インターロイキン２９は、微生物に対する宿主防御に重要な役割を果たし、その発現レベルは、ウイルスに感染された細胞で非常に増加している。本発明において、前記インターロイキン２９は、配列番号７のアミノ酸配列で表示可能である。
【００５２】
本発明において、前記“インターフェロンラムダ受容体１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １，ＩＦＮＬＲ１）”は、ＩＩ型サイトカイン受容体ファミリーに属する遺伝子によってコードされるタンパク質であり、インターロイキン１０受容体ベータサブユニットと結合して受容体複合体（ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｃｏｍｐｌｅｘ）を形成する。このような受容体複合体は、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂ及びインターロイキン２９と相互作用できる。本発明において、前記インターフェロンラムダ受容体１は、配列番号８のアミノ酸配列で表示されるインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）であり得る。
【００５３】
本発明において、前記インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子の発現レベルは、目的とする個体から分離された生検から、好ましくは液体生検（ｌｉｑｕｉｄ  ｂｉｏｐｓｙ）である、例えば、血液、血清又は血漿から分離された細胞又はエクソソーム、より好ましくは、前記液体生検から分離された単核球、顆粒球又はエクソソームから測定できる。
【００５４】
従来では、様々な疾患、具体的には膵臓疾患の診断のためにバイオマーカーの発現レベルを測定するために、主に膵臓組織から細胞を分離した後、前記細胞内のバイオマーカーの発現レベルを測定した。このように膵臓疾患、好ましくは膵癌の診断のために膵臓組織から細胞を分離しなければならない面倒さと、膵癌の初期には特に自覚症状がないことから膵癌の初期診断がほとんど不可能であるという不具合があった。
【００５５】
しかしながら、本発明では、目的とする個体から分離された血液、血清又は血漿の液体生検、又はこれから分離された単核球、顆粒球又はエクソソームにおいて、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定することによって、迅速で簡単ながらも非常に正確に、膵癌を含む様々な疾患の発病の有無と発病可能性を診断することができる。
【００５６】
具体的に、前記のように、目的とする個体から分離された生検、又は液体生検、又は前記液体生検から分離された単核球、顆粒球又はエクソソームから、本発明に係るマーカーの発現レベルを測定する場合、患者を開腹して組織（例えば、膵臓組織）から組織細胞を分離するなどの侵襲過程が不要であり、前記単核球、顆粒球又はエクソソームを含む生検を獲得することが略５分以内で済み、前記単核球、顆粒球又はエクソソームから本発明に係る様々な疾患バイオマーカーの発現レベルを測定することも略２時間以内で済むので、非常に迅速で簡便に疾患の発病の有無又は発病可能性を確認することができる。
【００５７】
本発明において、前記インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１の発現レベルを測定する製剤は、特に制限しないが、好ましくは、前記インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれのタンパク質に特異的に結合する抗体、オリゴペプチド、リガンド、ＰＮＡ（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）及びアプタマー（ａｐｔａｍｅｒ）からなる群から選ばれる１種以上を含むことができる。
【００５８】
本発明において、前記“タンパク質の発現水準測定”とは、膵臓癌を含む本発明の疾患を診断するために生物学的試料で膵臓疾患の診断用マーカーであるインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のタンパク質の存在有無と発現程度を確認する過程を意味する。前記受容体の発現レベル測定又は比較分析方法には、プロテインチップ分析、免疫測定法、リガンドバインディングアッセイ、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ（Ｍａｔｒｉｘ  Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｉｍｅ  ｏｆ  Ｆｌｉｇｈｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）分析、ＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ（Ｓｕｌｆａｃｅ  Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｉｍｅ  ｏｆ  Ｆｌｉｇｈｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）分析、放射線免疫分析、放射免疫拡散法、オクタロニー免疫拡散法、ロケット兔役電気泳動、組織免疫染色、補体固定分析法、２次元電気泳動分析、液状クロマトグラフィー質量分析（ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，ＬＣ−ＭＳ）、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ（ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ／Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）、ウェスタンブロット及びＥＬＩＳＡ（ｅｎｚｙｍｅ  ｌｉｎｋｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ  ａｓｓａｙ）などがあるが、これに制限されるものではない。
【００５９】
本発明において、前記“抗体”とは、抗原と特異的に結合して抗原抗体反応を起こす物質のことを指す。本発明の目的上、抗体は、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１に対して特異的に結合する抗体を意味する。本発明の抗体は、多クローン抗体、単クローン抗体及び組み換え抗体のいずれも含む。前記抗体は、当該分野に公知の技術を用いて容易に製造することができる。例えば、多クローン抗体は、前記インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１の抗原を動物に注射し、動物から採血して抗体を含む血清を得る過程を含む当該分野に公知の方法によって生産することができる。このような多クローン抗体は、ヤギ、ウサギ、ヒツジ、サル、ウマ、ブタ、ウシ、イヌなどの任意の動物から製造できる。また、単クローン抗体は、当業界に公知のハイブリドーマ方法（ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  ｍｅｔｈｏｄ；Ｋｏｈｌｅｒ及びＭｉｌｓｔｅｉｎ（１９７６）Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ６：５１１−５１９参照）、又はファージ抗体ライブラリー技術（Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８，１９９１；Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８，１−５９７，１９９１参照）を用いて製造できる。前記方法で製造された抗体は、ゲル電気泳動、透析、塩沈殿、イオン交換クロマトグラフィー、親和性クロマトグラフィーなどの方法を用いて分離、精製できる。また、本発明の抗体は、２個の全長の軽鎖及び２個の全長の重鎖を有する完全な形態の他に、抗体分子の機能的な断片も含む。抗体分子の機能的な断片は、少なくとも抗原結合機能を保有している断片を意味し、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）、Ｆ（ａｂ’）２及びＦｖなどがある。
【００６０】
本発明において、前記“ＰＮＡ（Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ）”とは、人工的に合成された、ＤＮＡ又はＲＮＡに類似する重合体のことを指し、１９９１年デンマークコペンハーゲン大学のＮｉｅｌｓｅｎ、Ｅｇｈｏｌｍ、Ｂｅｒｇ及びＢｕｃｈａｒｄｔ教授によって初めて紹介された。ＤＮＡは、リン酸−リボース糖骨格を有するのに対し、ＰＮＡは、ペプチド結合によって連結された反復したＮ−（２−アミノエチル）−グリシン骨格を有し、これによって、ＤＮＡ又はＲＮＡに対する結合力と安定性が大きく増加し、分子生物学、診断分析及びアンチセンス治療法に用いられている。ＰＮＡは、文献［Ｎｉｅｌｓｅｎ  ＰＥ，Ｅｇｈｏｌｍ  Ｍ，Ｂｅｒｇ  ＲＨ，Ｂｕｃｈａｒｄｔ  Ｏ（Ｄｅｃｅｍｂｅｒ１９９１）。“Ｓｅｑｕｅｎｃｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ＤＮＡ  ｂｙ  ｓｔｒａｎｄ  ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ  ｗｉｔｈ  ａ  ｔｈｙｍｉｎｅ−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ｐｏｌｙａｍｉｄｅ”．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５４（５０３７）：１４９７−１５００］に詳細に開示されている。
【００６１】
本発明において、前記“アプタマー”はオリゴ核酸又はペプチド分子のことを指し、アプタマーの一般的な内容は文献［Ｂｏｃｋ  ＬＣ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３５５（６３６０）：５６４６（１９９２）；Ｈｏｐｐｅ−Ｓｅｙｌｅｒ  Ｆ，Ｂｕｔｚ  Ｋ  “Ｐｅｐｔｉｄｅ  ａｐｔａｍｅｒｓ：ｐｏｗｅｒｆｕｌ  ｎｅｗ  ｔｏｏｌｓ  ｆｏｒ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ”．Ｊ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ．７８（８）：４２６３０（２０００）；Ｃｏｈｅｎ  ＢＡ，Ｃｏｌａｓ  Ｐ，Ｂｒｅｎｔ  Ｒ．“Ａｎ  ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ  ｃｅｌｌ−ｃｙｃｌｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｆｒｏｍ  ａ  ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  ｌｉｂｒａｒｙ”．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．９５（２４）：１４２７２７（１９９８）］に詳細に開示されている。
【００６２】
本発明に係る診断用組成物において、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤は、前記インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれをコードする遺伝子のｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー、プローブ及びアンチセンスヌクレオチドからなる群から選ばれる１種以上を含むことができる。本発明に係るインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１の情報は知られているので、当業者であれば、それに基づいて、前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを容易にデザインできよう。
【００６３】
本発明において、前記“ｍＲＮＡの発現レベル測定”とは、膵癌を含む本発明の疾患を診断するために生物学的試料でインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡ存在の有無と発現程度を確認する過程でｍＲＮＡの量を測定することを意味する。そのための分析方法には、逆転写重合酵素反応（ＲＴ−ＰＣＲ）、競合的逆転写重合酵素反応（Ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ  ＲＴ−ＰＣＲ）、実時間逆転写重合酵素反応（Ｒｅａｌ−ｔｉｍｅ  ＲＴ−ＰＣＲ）、ＲＮａｓｅ保護分析法（ＲＰＡ；ＲＮａｓｅ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ａｓｓａｙ）、ノーザンブロット（Ｎｏｒｔｈｅｒｎ  ｂｌｏｔｔｉｎｇ）、ＤＮＡチップなどがあるが、これに制限されるものではない。
【００６４】
本発明において、前記“プライマー”とは標的遺伝子配列を認知する断片のことを指し、正方向及び逆方向のプライマー対を含むが、好ましくは、特異性及び敏感性を有する分析結果を提供するプライマー対である。プライマーの核酸配列が試料内に存在する非標的配列と不一致する配列であって、相補的なプライマー結合部位を含有する標的遺伝子配列だけを増幅し、非特異的増幅を誘発しないプライマーであるとき、高い特異性が与えられ得る。
【００６５】
本発明において、前記“プローブ”とは、試料内の検出しようとする標的物質と特異的に結合できる物質を意味し、前記結合によって、特異的に試料内の標的物質の存在が確認できる物質を意味する。プローブの種類は、当業界で通常用いられる物質であり、制限はないが、好ましくは、ＰＮＡ（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）、ＬＮＡ（ｌｏｃｋｅｄ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ＲＮＡ又はＤＮＡであり得、最も好ましくは、ＰＮＡである。より具体的に、前記プローブは、バイオ物質として生物から由来したり、これと類似するもの又は生体外で製造されたものを含み、例えば、酵素、タンパク質、抗体、微生物、動植物細胞及び器官、神経細胞、ＤＮＡ、及びＲＮＡであり得、ＤＮＡは、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、オリゴヌクレオチドを含み、ＲＮＡは、ゲノムＲＮＡ、ｍＲＮＡ、オリゴヌクレオチドを含み、タンパク質の例としては抗体、抗原、酵素、ペプチドなどを含むことができる。
【００６６】
本発明において、前記“ＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄｓ）”とは、２’−Ｏ，４’−Ｃメチレンブリッジを含む核酸アナログを意味する［Ｊ  Ｗｅｉｌｅｒ，Ｊ  Ｈｕｎｚｉｋｅｒ  ａｎｄ  Ｊ  Ｈａｌｌ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ（２００６）１３，４９６．５０２］。ＬＮＡヌクレオシドは、ＤＮＡとＲＮＡの一般的な核酸塩基を含み、ワトソン・クリック（Ｗａｔｓｏｎ−Ｃｒｉｃｋ）塩基対規則にしたがって塩基対を形成できる。しかし、メチレンブリッジによる分子の‘ｌｏｃｋｉｎｇ’によって、ＬＮＡはワトソン・クリック結合において理想的な形状を形成できなくなる。ＬＮＡがＤＮＡ又はＲＮＡオリゴヌクレオチドに含まれると、ＬＮＡはより迅速に相補的ヌクレオチド鎖と対を成し、二重螺旋の安全性を高めることができる。
【００６７】
本発明において、前記“アンチセンス”は、アンチセンスオリゴマーがワトソン・クリック塩基対形成によってＲＮＡ内の標的配列と混成化され、標的配列内で典型的にｍＲＮＡとＲＮＡ：オリゴマーヘテロ二量体の形成を許容する、ヌクレオチド塩基の配列及びサブユニット間バックボーンを有するオリゴマーを意味する。オリゴマーは、標的配列に対する正確な配列相補性又は近似相補性を有することができる。
【００６８】
本発明は、他の観点において、本発明に係る診断用組成物を含む疾患の診断用キットに関する。
【００６９】
本発明の診断用キットを用いて発病の有無又は発病可能性を予測できる疾患の種類には、膵臓疾患、自己免疫疾患、アレルギー、グレーヴス病、橋本病、自己免疫リンパ増殖症候群、重症筋無力症、川崎病、乾癬などがあるが、これに制限されるものではない。
【００７０】
特に、本発明では、前記診断用キットを用いて膵臓疾患として、膵癌又は膵炎が診断でき、より好ましくは膵癌が診断できる。具体的に、本発明のキットを使用する場合、正常群と膵癌の患者群を区別して検出又は診断できる。のみならず、他の種類の癌、例えば肺癌又は大腸癌などと区別して膵癌を選別的に検出又は診断することもできる。
【００７１】
本発明において、前記キットは、ＲＴ−ＰＣＲキット、ＤＮＡチップキット、ＥＬＩＳＡキット、プロテインチップキット、ラピッド（ｒａｐｉｄ）キット又はＭＲＭ（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｒｅａｃｔｉｏｎ  ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ）キットであるが、これに制限されるものではない。
【００７２】
本発明の前記疾患の診断用キットは、分析方法に適する１種又はそれ以上の他の構成成分組成物、溶液又は装置をさらに含むことができる。
【００７３】
例えば、前記診断用キットは、逆転写重合酵素反応を行うために必要な必須要素をさらに含むことができる。逆転写重合酵素反応キットは、マーカータンパク質をコードする遺伝子に対して特異的なプライマー対を含む。プライマーは、前記遺伝子の核酸配列に特異的な配列を有するヌクレオチドであり、約７ｂｐ〜５０ｂｐの長さ、より好ましくは約１０ｂｐ〜３０ｂｐの長さを有することができる。また、対照群遺伝子の核酸配列に特異的なプライマーを含むことができる。その他、逆転写重合酵素反応キットは、テストチューブ又は他の適切な容器、反応緩衝液（ｐＨ及びマグネシウム濃度は多様である。）、デオキシヌクレオチド（ｄＮＴＰｓ）、Ｔａｑ−ポリメラーゼ及び逆転写酵素のような酵素、ＤＮａｓｅ、ＲＮａｓｅ抑制剤ＤＥＰＣ−水（ＤＥＰＣ−ｗａｔｅｒ）、滅菌水などを含むことができる。
【００７４】
また、本発明の診断用キットは、ＤＮＡチップを行うために必要な必須要素を含むことができる。ＤＮＡチップキットは、遺伝子又はその断片に該当するｃＤＮＡ又はオリゴヌクレオチド（ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）が付着している基板、及び蛍光標識プローブを作製するための試薬、製剤、酵素などを含むことができる。また、基板は対照群遺伝子又はその断片に該当するｃＤＮＡ又はオリゴヌクレオチドを含むことができる。
【００７５】
また、本発明の診断用キットは、ＥＬＩＳＡを行うために必要な必須要素を含むことができる。ＥＬＩＳＡキットは、前記タンパク質に対して特異的な抗体を含む。抗体は、マーカータンパク質に対する特異性及び親和性が高く、他のタンパク質に対する交差反応性が殆どない抗体で、単クローン抗体、多クローン抗体又は組換え抗体である。また、ＥＬＩＳＡキットは、対照群タンパク質に特異的な抗体を含むことができる。その他、ＥＬＩＳＡキットは、結合した抗体を検出できる試薬、例えば、標識された２次抗体、発色団（ｃｈｒｏｍｏｐｈｏｒｅｓ）、酵素（例えば、抗体とコンジュゲ−トされる。）及びその基質又は抗体と結合可能な他の物質などを含むことができる。
【００７６】
本発明は、さらに他の観点において、目的とする個体から分離された生検から、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含む、疾患の診断のための情報提供方法に関する。
【００７７】
本発明の情報提供方法において発病の有無又は発病可能性を予測できる疾患の種類には、膵臓疾患、自己免疫疾患、アレルギー、グレーヴス病、橋本病、自己免疫リンパ増殖症候群、重症筋無力症、川崎病又は乾癬などであるが、これに制限されるものではない。
【００７８】
本発明では、前記の疾患の中でも特に膵臓疾患として、膵癌又は膵炎、より好ましくは膵癌の発病の有無と発病可能性を比較的正確に診断及び予測できる。
【００７９】
本発明の情報提供方法によれば、正常群と膵癌の患者群を区別して検出又は診断できるだけでなく、他の種類の癌、例えば肺癌又は大腸癌などと区別して膵癌を選別的に検出又は診断することもできる。
【００８０】
本発明において、前記自己免疫疾患及びアレルギーの具体的な種類は、本発明の診断用組成物に記載した通りであり、以下、その重複記載は省略する。
【００８１】
本発明において、前記“目的とする個体”とは、前記列挙した疾患の発病の有無が不確実な個体であり、発病可能性が高い個体を意味する。
【００８２】
また、本発明において、前記個体から分離された“生検”とは、発病可能性が高い患者の皮膚を切開せず、中空針などを生体内器官に刺し込んで病理組織学的検査用として採取した組織であり、例えば、患者の組織、細胞、血液、血清、血漿、唾液又は客談などを含むことができ、好ましくは、液体生検として患者の血液、血清又は血漿であり、より好ましくは、前記液体生検から分離された単核球、顆粒球又はエクソソームであり得る。
【００８３】
従来では、膵臓疾患の診断のために、バイオマーカーの発現レベルを測定するには主に疾患の発生が予測される組織（例えば、膵臓組織）から細胞を分離した後、前記細胞内のバイオマーカーの発現レベルを測定した。しかし、本発明では、目的とする個体から分離された血液、血清又は血漿内に含まれた単核球、顆粒球又はエクソソームにおいて本発明に係る疾患バイオマーカーの発現レベルを測定し、簡単で迅速ながらも非常に正確に本発明の疾患として膵癌などの発病の有無及び発病可能性を予測することができる。
【００８４】
具体的に、前記のように、単核球、顆粒球又はエクソソームにおいて本発明に係るマーカーの発現レベルを測定する場合、患者を開腹して疾患組織から組織細胞を分離するなどの侵襲過程が不要であり、前記単核球、顆粒球又はエクソソームを含む生検を獲得するまで略５分以内で済み、前記単核球、顆粒球又はエクソソームから本発明に係るバイオマーカーの発現レベルを測定することも略２時間以内で済むので、非常に迅速で簡便に疾患の発病の有無又は発病可能性を確認することができる。
【００８５】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記のように分離された生検から、バイオマーカーとしてインターロイキン１０受容体又は該インターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。また、本発明の情報提供方法では、前記生検からインターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階をさらに含むことによって、前記疾患の診断時に正確度をより高めることができる。
【００８６】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれのタンパク質の発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【００８７】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【００８８】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターロイキン２２受容体のそれぞれのタンパク質の発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【００８９】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターロイキン２２受容体のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【００９０】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターロイキン２２のそれぞれのタンパク質の発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【００９１】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターロイキン２２のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【００９２】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体及び前記インターロイキン２２のそれぞれのタンパク質の発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【００９３】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体及び前記インターロイキン２２のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【００９４】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１又はインターロイキン２８Ｂアイソフォーム２のタンパク質の発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【００９５】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１又はインターロイキン２８Ｂアイソフォーム２のタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【００９６】
本発明において、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１の発現レベルを測定する製剤は、特に制限しないが、好ましくは前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれに特異的に結合する抗体、オリゴペプチド、リガンド、ＰＮＡ（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）及びアプタマー（ａｐｔａｍｅｒ）からなる群から選ばれる１種以上を含むことができる。
【００９７】
好ましくは、本発明において、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１の発現レベルは、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１に特異的に結合する抗体を用いて測定及び比較できる。前記抗体と生物学的試料内の該当のタンパク質が抗原−抗体複合体を形成するようにし、これを検出する方法を用いる。
【００９８】
一方、本発明では、前記タンパク質の発現レベルの測定又は比較分析方法には、プロテインチップ分析、免疫測定法、リガンドバインディングアッセイ、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ（Ｍａｔｒｉｘ  Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｉｍｅ  ｏｆ  Ｆｌｉｇｈｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）分析、ＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ（Ｓｕｌｆａｃｅ  Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｉｍｅ  ｏｆ  Ｆｌｉｇｈｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）分析、放射線免疫分析、放射免疫拡散法、オクタロニー免疫拡散法、ロケット兔役電気泳動、組織免疫染色、補体固定分析法、２次元電気泳動分析、液状クロマトグラフィー質量分析（ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，ＬＣ−ＭＳ）、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ（ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ／Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）、ウェスタンブロット及びＥＬＩＳＡ（ｅｎｚｙｍｅ  ｌｉｎｋｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ  ａｓｓａｙ）などがあるが、これに制限されるものではない。
【００９９】
また、本発明において、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤は、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー、プローブ及びアンチセンスヌクレオチドからなる群から選ばれる１種以上を含むことができる。本発明に係る前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９及び前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１の情報は知られているので、当業者であれば、それに基づいて、前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを容易にデザインできよう。
【０１００】
本発明では、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルの測定又は比較は、逆転写酵素重合酵素反応、競合的逆転写酵素重合酵素反応、実時間逆転写酵素重合酵素反応、ＲＮａｓｅ保護分析法、ノーザンブロット又はＤＮＡチップなどを用いることができるが、これに制限されるものではない。前記測定方法によって正常対照群におけるｍＲＮＡ発現量と疾患発病の有無を診断しようとする個体のｍＲＮＡ発現量を確認することができ、これらの発現量の程度を比較することによって、膵癌などの疾患の発病可能性かあるか否かが診断又は予測できる。
【０１０１】
本発明において、前記目的とする個体から分離された生検から測定されたインターロイキン１０受容体又は該インターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群における発現レベルよりも高い場合、疾患の中でも特に膵臓疾患の発病可能性が高いと判定でき、より好ましくは、正常対照群における発現レベルの２倍以上、３倍以上、４倍以上、５倍以上、６倍以上、７倍以上、８倍以上又は９倍以上である場合、膵臓疾患の発病可能性が高いと判定できる。
【０１０２】
本発明において、前記目的とする個体から分離された生検から測定されたインターロイキン１０受容体の発現レベルとして、例えばインターロイキン１０受容体を発現する細胞数の比率が正常対照群に比べて３倍〜２０倍、４倍〜１８倍、５倍〜１３倍、７倍〜１１倍、又は８倍〜１０倍である場合、膵臓疾患、具体的には膵癌の発病可能性が高いと判定できる。好ましくは、前記目的とする個体から分離された生検から測定されたインターロイキン１０受容体の発現レベルが正常対照群における発現レベルの８倍〜１０倍増加した場合、膵臓疾患、具体的には膵癌の発病可能性が高いと判定できる。
【０１０３】
また、本発明において、前記目的とする個体から分離された生検から測定された前記インターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群における発現レベルの２倍〜２０倍、２倍〜１５倍、２．５倍〜１５倍、２倍〜１０倍又は２．５倍〜１０倍である場合、膵臓疾患、具体的には膵癌の発病可能性が高いと判定できる。好ましくは、前記目的とする個体から分離された生検から測定された前記インターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群における発現レベルの２．５倍〜１０倍増加した場合、膵臓疾患、具体的には膵癌の発病可能性が高いと判定できる。
【０１０４】
また、本発明では、前記目的とする個体から分離された生検から測定された前記インターロイキン２２受容体又は該インターロイキン２２受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群における発現レベルよりも高い場合、疾患の中でも特に膵臓疾患の発病可能性が高いと判定でき、より好ましくは、正常対照群における発現レベルの１．５倍以上、２倍以上、３倍以上、４倍以上、５倍以上又は６倍以上である場合、膵臓疾患の発病可能性が高いと判定できる。
【０１０５】
また、本発明において、前記目的とする個体から分離された生検から測定された前記インターロイキン２２受容体の発現レベルとして、例えば前記インターロイキン２２受容体を発現する細胞数の比率が正常対照群に比べて２倍〜１０倍、２倍〜１０倍、３倍〜９倍、４倍〜８倍、５倍〜７倍、又は６倍〜７倍である場合、膵臓疾患、具体的には膵癌の発病可能性が高いと判定できる。また、本発明において、前記目的とする個体から分離された生検から測定された前記インターロイキン２２受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群に比べて１．５倍〜１０倍、１．５倍〜９倍、１．５倍〜８倍、又は２倍〜７倍である場合、膵臓疾患、具体的には膵癌の発病可能性が高いと判定できる。
【０１０６】
本発明において、前記目的とする個体から分離された生検から測定されたインターロイキン２２又は前記インターロイキン２２をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群における発現レベルよりも高い場合、疾患の中でも特に膵臓疾患の発病可能性が高いと判定でき、より好ましくは、正常対照群における発現レベルの２倍以上、３倍以上、４倍以上、５倍以上又は６倍以上である場合、膵臓疾患の発病可能性が高いと判定できる。
【０１０７】
また、本発明において、前記目的とする個体から分離された生検から測定された前記インターロイキン２２の発現レベルとして、例えば前記インターロイキン２２を発現する細胞数の比率が正常対照群に比べて３倍〜１６倍、４倍〜１５倍、４倍〜１３倍、５倍〜１０倍、５倍〜８倍、５倍〜７倍、又は６倍〜７倍である場合、膵臓疾患、具体的には膵癌の発病可能性が高いと判定できる。
【０１０８】
また、本発明において、前記目的とする個体から分離された生検から測定された前記インターロイキン２２をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群に比べて２倍〜１５倍、２．５倍〜１５倍、３倍〜１３倍、３．５倍〜１３倍、４倍〜１３倍、又は４倍〜１０倍である場合、膵臓疾患、具体的には膵癌の発病可能性が高いと判定できる。
【０１０９】
本発明において、前記目的とする個体から分離された生検から測定されたインターロイキン２９又は前記インターロイキン２９をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群における発現レベルよりも高い場合、疾患の中でも特に膵臓疾患の発病可能性が高いと判定でき、より好ましくは、正常対照群における発現レベルの２倍以上、３倍以上、４倍以上、５倍以上又は６倍以上である場合、膵臓疾患の発病可能性が高いと判定できる。
【０１１０】
また、本発明において、前記目的とする個体から分離された生検から測定された前記インターロイキン２９の発現レベルとして、例えば前記インターロイキン２９を発現する細胞数の比率が正常対照群に比べて３倍〜１６倍、４倍〜１５倍、４倍〜１３倍、５倍〜１０倍、５倍〜８倍、５倍〜７倍、又は６倍〜７倍である場合、膵臓疾患、具体的には膵癌の発病可能性が高いと判定できる。
【０１１１】
また、本発明において、前記目的とする個体から分離された生検から測定された前記インターロイキン２９をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群に比べて２倍〜１５倍、２．５倍〜１５倍、３倍〜１３倍、３．５倍〜１３倍、４倍〜１３倍、又は４倍〜１０倍である場合、膵臓疾患、具体的には膵癌の発病可能性が高いと判定できる。
【０１１２】
本発明において、前記目的とする個体から分離された生検から測定されたインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群における発現レベルよりも高い場合、疾患の中でも特に膵臓疾患の発病可能性が高いと判定でき、より好ましくは、正常対照群における発現レベルの１．５倍以上、２倍以上、３倍以上、４倍以上、５倍以上又は６倍以上である場合、膵臓疾患の発病可能性が高いと判定できる。
【０１１３】
また、本発明において、前記目的とする個体から分離された生検から測定された前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１の発現レベルとして、例えば前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１を発現する細胞数の比率が正常対照群に比べて３倍〜１６倍、４倍〜１５倍、４倍〜１３倍、５倍〜１０倍、５倍〜８倍、５倍〜７倍、又は６倍〜７倍である場合、膵臓疾患、具体的には膵癌の発病可能性が高いと判定できる。
【０１１４】
また、本発明において、前記目的とする個体から分離された生検から測定された前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群に比べて１．５倍〜１５倍、２倍〜１５倍、２．５倍〜１５倍、３倍〜１３倍、３．５倍〜１３倍、４倍〜１３倍、又は４倍〜１０倍である場合、膵臓疾患、具体的には膵癌の発病可能性が高いと判定できる。
【０１１５】
本発明では、前記のように、インターロイキン１０受容体のマーカー、好ましくはインターロイキン１０受容体及びインターロイキン２２受容体のマーカー、より好ましくはインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体と、それに加えてインターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１の少なくとも一つのマーカーの発現レベルを測定することによって膵癌の発病可能性を高い正確度で診断できる。
【０１１６】
さらに、本発明において、前記のように、目的とする個体から分離された生検から、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定して疾患、特に膵臓疾患、好ましくは膵癌の発病可能性が高いと予測又は診断する場合、前記目的とする個体に対してその疾患に対する薬剤投与（膵癌に対する抗癌剤など）、遺伝子治療、放射線治療、又は免疫治療などの適切な治療を行う段階をさらに含むことができる。
【０１１７】
本発明は、さらに他の観点において、治療を受けた患者から分離された生検から、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含む、疾患の再発可能性を予測するための情報を提供する方法に関する。
【０１１８】
本発明の情報提供方法において、再発の有無又は再発可能性を予測できる疾患の種類には、膵臓疾患、自己免疫疾患、アレルギー、グレーヴス病、橋本病、自己免疫リンパ増殖症候群、重症筋無力症、川崎病又は乾癬などであるが、これに制限されるものではない。
【０１１９】
本発明では、前記１疾患の中でも特に膵臓疾患として、膵癌又は膵炎、より好ましくは、膵癌の再発可能性を比較的正確に診断及び予測することができる。
【０１２０】
本発明の情報提供方法によれば、膵癌患者のうち、治療後に再発可能性の高い患者群と再発可能性の低い患者群とを区別して検出又は診断できる。
【０１２１】
本発明において、前記治療を受けた患者は、前記列挙した疾患が発病しているか或いは発病可能性が高いため、手術、薬物治療、遺伝子治療、放射線治療及び免疫治療のいずれか１種以上の治療を受けた患者であり、例えば、前記治療後２ヶ月以上、３ヶ月以上又は６ヶ月以上が経過した患者を意味する。
【０１２２】
従来では膵癌の早期診断が難しいだけでなく、治療後再発可能性を診断することはほぼ不可能であった。しかし、本発明では、目的とする個体である治療を受けた患者から分離された生検、好ましくは液体生検として例えば血液、血清又は血漿内に含まれた単核球、顆粒球又はエクソソームにおいて本発明に係る疾患バイオマーカーの発現レベルを測定することによって、迅速で簡単ながらも非常に正確に膵癌の再発可能性が予測できる。
【０１２３】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記のように分離された生検からバイオマーカーとしてインターロイキン１０受容体又は該インターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。また、本発明の情報提供方法では、前記生検からインターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階をさらに含むことによって、前記疾患の再発可能性の予測時に正確度をより高めることができる。
【０１２４】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれのタンパク質の発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１２５】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１２６】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターロイキン２２受容体のそれぞれのタンパク質の発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１２７】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターロイキン２２受容体のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１２８】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターロイキン２２のそれぞれのタンパク質の発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１２９】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターロイキン２２のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１３０】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体及び前記インターロイキン２２のそれぞれのタンパク質の発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１３１】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体及び前記インターロイキン２２のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１３２】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１又はインターロイキン２８Ｂアイソフォーム２のタンパク質の発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１３３】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１又はインターロイキン２８Ｂアイソフォーム２のタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１３４】
本発明において、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１の発現レベルを測定する製剤は、特に制限しないが、好ましくは、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれに特異的に結合する抗体、オリゴペプチド、リガンド、ＰＮＡ（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）及びアプタマー（ａｐｔａｍｅｒ）からなる群から選ばれる１種以上を含むことができる。
【０１３５】
好ましくは、本発明において、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１の発現レベルは、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１に特異的に結合する抗体を用いて測定及び比較することができる。前記抗体と生物学的試料内の該当タンパク質が抗原−抗体複合体を形成するようにし、これを検出する方法を用いる。
【０１３６】
一方、本発明では、前記タンパク質発現レベル測定又は比較分析方法には、プロテインチップ分析、免疫測定法、リガンドバインディングアッセイ、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ（Ｍａｔｒｉｘ  Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｉｍｅ  ｏｆ  Ｆｌｉｇｈｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）分析、ＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ（Ｓｕｌｆａｃｅ  Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｉｍｅ  ｏｆ  Ｆｌｉｇｈｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）分析、放射線免疫分析、放射免疫拡散法、オクタロニー免疫拡散法、ロケット兔役電気泳動、組織免疫染色、補体固定分析法、２次元電気泳動分析、液状クロマトグラフィー質量分析（ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，ＬＣ−ＭＳ）、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ（ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ／Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）、ウェスタンブロット及びＥＬＩＳＡ（ｅｎｚｙｍｅ  ｌｉｎｋｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ  ａｓｓａｙ）などがあるが、これに制限されるものではない。
【０１３７】
また、本発明において、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤は、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー、プローブ及びアンチセンスヌクレオチドからなる群から選ばれる１種以上を含むことができる。本発明に係る前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９及び前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１の情報は知られているので、当業者であれば、それに基づいて、前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを容易にデザインできよう。
【０１３８】
本発明では、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルの測定又は比較は、逆転写酵素重合酵素反応、競合的逆転写酵素重合酵素反応、実時間逆転写酵素重合酵素反応、ＲＮａｓｅ保護分析法、ノーザンブロット又はＤＮＡチップなどを用いることができるが、これに制限されるものではない。前記測定方法によって正常対照群におけるｍＲＮＡ発現量と疾患発病の有無を診断しようとする個体のｍＲＮＡ発現量を確認することができ、これらの発現量の程度を比較することによって膵癌などの疾患の再発可能性が否かを診断又は予測できる。
【０１３９】
本発明において、前記治療を受けた患者から分離された生検から測定されたインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群における発現レベルよりも高い場合、疾患の中でも特に膵癌の再発可能性が高いと判定できる。
【０１４０】
本発明において、前記治療を受けた患者から分離された生検から測定されたインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子の発現レベルが治療前の同一患者における発現レベルよりも高い場合、疾患の中でも特に膵癌の再発可能性が高いと判定できる。
【０１４１】
本発明では、前記のように、インターロイキン１０受容体のマーカー、好ましくはインターロイキン１０受容体及びインターロイキン２２受容体のマーカー、より好ましくは、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体と、それに加えてインターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１の少なくとも一つのマーカーの発現レベルを測定することによって、膵癌の再発可能性を高い正確度で予測できる。
【０１４２】
さらに、本発明において、前記のように、目的とする個体から分離された生検から、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定して疾患、特に膵癌の再発可能性が高いと予測又は診断する場合、前記目的とする個体に対してその疾患に対する薬剤投与（膵癌に対する抗癌剤など）、遺伝子治療、放射線治療、又は免疫治療などの適切な治療を行う段階をさらに含むことができる。
【０１４３】
本発明は、さらに他の観点において、（ａ）疾患患者から分離した生検から、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階；
（ｂ）前記患者に候補薬剤を投与する段階；及び
（ｃ）前記候補薬剤の投与後に前記患者から分離した生検から、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含む、疾患治療用薬物スクリーニング方法に関する。
【０１４４】
本発明の薬物スクリーニング方法において、薬物の効用性或いは感受性を予測できる疾患の種類には、膵臓疾患、自己免疫疾患、アレルギー、グレーヴス病、橋本病、自己免疫リンパ増殖症候群、重症筋無力症、川崎病又は乾癬などがあるが、これに制限されるものではない。
【０１４５】
本発明では、上記の疾患の中でも特に膵臓疾患として、膵癌又は膵炎、より好ましくは膵癌に対する治療用薬物の効用性又は感受性を比較的正確に予測できる。
【０１４６】
本発明において、前記自己免疫疾患及びアレルギーの具体的な種類は、本発明の診断用組成物に記載した通りであり、以下、その重複記載は省略する。
【０１４７】
また、本発明において、前記疾患患者から分離された生検は、疾患が発病しているか或いは発病可能性が高い患者の皮膚を切開せず、中空針などを生体内器官刺し込んで病理組織学的検査用に採取した組織であり、例えば、患者の組織、細胞、血液、血清、血漿、唾液又は客談などを含むことができ、好ましくは、患者の血液、血清又は血漿であり得、より好ましくは、前記血液、血清又は血漿から分離された単核球、顆粒球又はエクソソームであり得る。
【０１４８】
本発明の薬物スクリーニング方法では、好ましくは、前記（ａ）及び（ｃ）段階で患者から分離された生検に対してバイオマーカーとしてインターロイキン１０受容体又は該インターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。また、本発明では、前記（ａ）及び（ｃ）段階で患者から分離された生検に対してインターロイキン１０受容体又はこれをコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルの他にも、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルをさらに測定する段階をさらに含むことによって、前記疾患に対する治療用薬物の感受性の予測時にその正確度をさらに高めることができる。
【０１４９】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれのタンパク質の発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１５０】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１５１】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターロイキン２２受容体のそれぞれのタンパク質の発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１５２】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターロイキン２２受容体のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１５３】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターロイキン２２のそれぞれのタンパク質の発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１５４】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体及び前記インターロイキン２２のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１５５】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体及び前記インターロイキン２２のそれぞれのタンパク質の発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１５６】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体及び前記インターロイキン２２のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１５７】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１又はインターロイキン２８Ｂアイソフォーム２のタンパク質の発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１５８】
本発明の情報提供方法では、好ましくは、前記生検から、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１又はインターロイキン２８Ｂアイソフォーム２のタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含むことができる。
【０１５９】
本発明において、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１の発現レベルを測定するための製剤は、特に制限しないが、好ましくは、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、インターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれに特異的に結合する抗体、オリゴペプチド、リガンド、ＰＮＡ（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）及びアプタマー（ａｐｔａｍｅｒ）からなる群から選ばれる１種以上を含むことができる。
【０１６０】
好ましくは、本発明において、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１の発現レベルは、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれに特異的に結合する抗体を用いて測定及び比較することができる。前記抗体と生物学的試料内の該当タンパク質が抗原−抗体複合体を形成するようにし、これを検出する方法を用いる。
【０１６１】
一方、本発明では、前記タンパク質発現レベル測定又は比較分析方法には、プロテインチップ分析、免疫測定法、リガンドバインディングアッセイ、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ（Ｍａｔｒｉｘ  Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｉｍｅ  ｏｆ  Ｆｌｉｇｈｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）分析、ＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ（Ｓｕｌｆａｃｅ  Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｉｍｅ  ｏｆ  Ｆｌｉｇｈｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）分析、放射線免疫分析、放射免疫拡散法、オクタロニー免疫拡散法、ロケット兔役電気泳動、組織免疫染色、補体固定分析法、２次元電気泳動分析、液状クロマトグラフィー質量分析（ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，ＬＣ−ＭＳ）、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ（ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ／Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）、ウェスタンブロット及びＥＬＩＳＡ（ｅｎｚｙｍｅ  ｌｉｎｋｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ  ａｓｓａｙ）などがあるが、これに制限されるものではない。
【０１６２】
また、本発明において、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定するための製剤は、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のそれぞれをコードする遺伝子のｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー、プローブ及びアンチセンスヌクレオチドからなる群から選ばれる１種以上を含むことができる。本発明に係る前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９及び前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１の情報は知られているので、当業者であれば、それに基づいて、前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを容易にデザインできよう。
【０１６３】
本発明では、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルの測定又は比較は、逆転写酵素重合酵素反応、競合的逆転写酵素重合酵素反応、実時間逆転写酵素重合酵素反応、ＲＮａｓｅ保護分析法、ノーザンブロット又はＤＮＡチップなどを用いることができるが、これに制限されるものではない。前記測定方法によって正常対照群におけるｍＲＮＡ発現量と疾患発病の有無を診断しようとする個体のｍＲＮＡ発現量を確認することができ、これらの発現量の程度を比較することによって、膵癌などの疾患の発病可能性かあるか否かが診断又は予測できる。
【０１６４】
本発明では、前記（ｃ）段階で測定したインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルが、（ａ）段階で測定された同一バイオマーカーに対する発現レベルよりも減少した場合、前記候補薬剤を疾患の治療に適した治療剤として選別する段階をさらに含むことができる。
【０１６５】
本発明は、さらに他の観点において、前記膵臓疾患を診断する用途のためのインターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤を含む組成物に関する。
【０１６６】
本発明は、さらに他の観点において、目的とする個体から分離された生検に対してインターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する段階を含む、膵臓疾患の診断方法に関する。
【０１６７】
本発明は、さらに他の観点において、前記膵臓疾患診断のためのインターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤を含む組成物の用途に関する。
【０１６８】
本発明は、さらに他の観点において、前記膵臓疾患診断のための製剤を製造するためのインターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２，ＩＬ−２２）、インターロイキン２８Ａ（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ａ，ＩＬ−２８Ａ）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）、インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２，ＩＬ−２８Ｂ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９，ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ  １，ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）からなる群から選ばれる１種以上のタンパク質又は該タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現レベルを測定する製剤を含む組成物の使用に関する。
【０１６９】
以下、実施例を用いて本発明をより詳細に説明する。これらの実施例は単に本発明を例示するためのものであり、本発明の範囲がこれらの実施例によって制限されるものとして解釈されないことは、当業界における通常の知識を有する者にとって明らかであろう。
【０１７０】
［準備例１］
Ｈｉｓｔｏｐａｑ  １０７７はＳｉｇｍａから購入し、Ｂｒｅｆｅｌｄｉｎ  ＡはＢｉｏｌｅｇｅｎｄから購入した。抗体としてＡｌｅｘａ  ６４７抗ＩＬ−２２、及びＰＥ抗マウスＩＬ−１０Ｒは、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入し、ＰｅｒＣＰマウスＩＬ−２２ＲはＲ＆Ｄから購入した。また、ＦＡＣＳバッファ（ｂｕｆｆｅｒ）としては、ＢＳＡ（ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ  ａｌｂｕｍｉｎ）が０．５％含まれたＰＢＳ（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｂｕｆｆｅｒｅｄ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）を使用した。細胞固定用バッファ（ｆｉｘａｔｉｏｎ  ｂｕｆｆｅｒ）及びパーム／ウォッシュバッファ（Ｐｅｒｍ／ｗａｓｈ  ｂｕｆｆｅｒ）もＢｉｏｌｅｇｅｎｄから購入した。
【０１７１】
［実施例１］
１．単核球（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｂｌｏｏｄ  ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ  ｃｅｌｌ；ＰＢＭＣ）の分離
膵癌患者３人、膵炎患者３人、正常対照群３人、肺癌患者３人、大腸癌患者３人からそれぞれ血液を採取して常温で保管した。血液の粘度が高いと単核球を分離し難いため、１Ｘ  ＰＢＳに１：１に希釈して準備した。１５ｍｌコニカルチューブ（ｃｏｎｉｃａｌ  ｔｕｂｅ）にフィコール（Ｈｉｓｔｏｐａｑ  １０７７，ｓｉｇｍａ）を血液と同じ体積で準備した。フィコール上に血液サンプルが混ざらないように添加した。加速と減速を最小限に抑えて４００ｇで３０分間遠心分離した。中途に白い細胞層（単核球）を別個に回収した後、ＰＢＳを添加して４００ｇで３分間遠心分離しながら洗浄した。洗浄された細胞を回収して５０μｌのＦＡＣＳバッファに再浮遊させた後、ＰＥ抗マウスＩＬ−１０Ｒ抗体及びＰｅｒＣＰマウスＩＬ−２２Ｒ抗体を添加してアイス（ｉｃｅ）で１時間培養した。その後、ＦＡＣＳバッファで２回洗浄し、ＦＡＣＳバッファ５００μｌに細胞を再浮遊させた。
【０１７２】
２．Ｂｒｅｆｅｌｄｉｎ  Ａの処理
収集した細胞を計数し、１×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍｌでペニシリン及びストレプトマイシンを２％含むＲＰＭＩ１６４０培地に入れた後、Ｂｒｅｆｅｌｄｉｎ  Ａを１Ｘで処理して６時間培養した。
【０１７３】
３．固定、透過（Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ）及び染色
培養された細胞を回収してＦＡＣＳバッファ（０．５％  ＢＳＡ  ｉｎ  ＰＢＳ）で２回洗浄した後、固定バッファを５００μｌずつ入れてアイスで３０分間固定した。次いで、ＦＡＣＳバッファで２番洗浄し、パ−ムバッファ（ｐｅｒｍ  ｂｕｆｆｅｒ）１ｍｌに再浮遊させた後に遠心分離を２０分間２回行った。その後、細胞を再び回収してパ−ムバッファ５０μｌに再浮遊させた後、Ａｌｅｘａ  ６４７抗ＩＬ−２２抗体を添加してアイスで１時間培養した。ＦＡＣＳで２回洗浄し、ＦＡＣＳバッファ５００μｌに再浮遊させた。
【０１７４】
４．ＦＡＣＳ分析
ＦＡＣＳ  Ｃａｌｉｂｕｒ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）を用いて、総単核球細胞数に対する、ＩＬ−１０Ｒ、ＩＬ−２２Ｒ又はＩＬ−２２が発現する細胞数を％で示した。その結果は、下記の表１及び図１〜３に示す。ただし、下記の表１で、データは平均±標準偏差で示し、統計的分析は、Ｄｕｎｎ’ｓ  ｐｏｓｔ  ｈｏｃ分析を用いたクラスカル‐ウォリス検定（Ｋｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ  ｔｅｓｔ）を用いて行った。
【０１７５】
【表１】
2021524285.tif 000003
【０１７６】
前記表１及び図１〜３に示すように、膵炎患者及び膵癌患者においてＩＬ−２２の発現レベルは、正常対照群におけるＩＬ−２２の発現レベルに比べてそれぞれ１．７倍及び０．９倍の程度に該当するのに対し、前記ＩＬ−２２が結合するＩＬ−１０Ｒの発現レベルは、膵炎患者では正常対照群に比べて略１４．８倍増加し、膵癌患者では正常対照群に比べて略９．０倍増加したことが確認できた。しかし、肺癌患者ではＩＬ−１０Ｒの発現レベルが正常対照群に比べて略２．７５倍増加し、大腸癌患者では正常対照群の発現レベルの略０．７８倍へと却って減少したことが確認できた。
【０１７７】
また、ＩＬ−２２Ｒの発現レベルと関連して、膵炎患者では正常対照群に比べて略１８．６６倍増加し、膵癌患者では正常対照群に比べて略６．５７倍が増加したことが確認できた。しかし、肺癌患者ではＩＬ−２２Ｒの発現レベルが正常対照群の発現レベルの略０．２８倍に減少し、大腸癌患者では正常対照群の発現レベルの略０．１７倍へと、発現レベルが顕著に減少したことが確認できた。
【０１７８】
また、ＩＬ−２２対比ＩＬ−２２Ｒの発現レベルと関連して、膵炎患者ではＩＬ−２２の発現レベルに比べてＩＬ−２２Ｒの発現レベルが略９．９３倍に、膵癌患者ではＩＬ−２２の発現レベルに比べてＩＬ−２２Ｒの発現レベルは６．３１倍に、ＩＬ−２２はＩＬ−２２Ｒに結合するにもかかわらず、ＩＬ−２２Ｒの発現レベルがＩＬ−２２に比べて有意に増加することが確認できた。しかし、肺癌患者ではＩＬ−２２の発現レベルに比べてＩＬ−２２Ｒの発現レベルが略１．１８倍で、大腸癌患者ではＩＬ−２２の発現レベルに比べてＩＬ−２２Ｒの発現レベルが略１．７６倍であり、ＩＬ−２２の発現レベルとＩＬ−２２Ｒの発現レベルが類似の結果を示した。
【０１７９】
このように、膵炎又は膵癌患者においてＩＬ−１０Ｒの発現レベルは、正常対照群や他の種類の疾患と明確に区別される発現様相を示すことが分かり、、膵炎及び膵癌も区別される発現様相を示すことを分かった。
【０１８０】
したがって、本発明では、前記の方法を用いて膵炎及び膵癌を高い正確度で検出及び診断できるだけでなく、膵炎と膵癌も区別して診断できる。
【０１８１】
［実施例２］
正常対照群４人、膵癌患者４人、胆管癌患者２人、胆嚢癌患者２人からそれぞれ血液を採取した後、前記実施例１と同じ方法で血中単核球（ＰＢＭＣ）を分離し、正常対照群に対比して、前記単核球においてＩＬ−１０Ｒベータサブユニット（ＩＬ−１０ＲＢ）とＩＬ−２２Ｒアルファサブユニット（ＩＬ−２２ＲＡ）のｍＲＮＡ発現レベルの比率を測定し、その結果を図４及び図５に示した。
【０１８２】
図４及び図５に示すように、正常対照群に対比して、膵癌患者から分離された単核球ではＩＬ−１０ＲＢ  ｍＲＮＡの発現レベルは略３倍、及びＩＬ−２２ＲＡ  ｍＲＮＡの発現レベルは略６倍程度増加したが、胆管癌及び胆嚢癌患者ではＩＬ−１０ＲＢ  ｍＲＮＡの発現レベルは略１〜２倍増加し、ＩＬ−２２ＲＡ  ｍＲＮＡの発現レベルは胆管癌患者で却って減少する傾向が確認できた。
【０１８３】
このことから、膵癌の場合、他の癌腫に比べて、単核球で発現するＩＬ−１０ＲＢ及びＩＬ−２２ＲＡ  ｍＲＮＡの発現レベルが顕著に増加することが確認できた。
【０１８４】
［実施例３］
正常対照群４人、膵癌患者４人、胆管癌患者２人、胆嚢癌患者２人からそれぞれ血液を採取した後、前記実施例１と同じ方法で血中単核球（ＰＢＭＣ）を分離し、正常対照群に対比して、前記単核球におけるＩＬ−２２とＩＬ−２９のｍＲＮＡ発現レベルの比率を測定し、その結果を図６及び図７に示した。
【０１８５】
図６及び図７に示すように、正常対照群に対比して、膵癌患者から分離された単核球ではＩＬ−２２ｍＲＮＡとＩＬ−２９ｍＲＮＡの発現レベルが４倍以上増加したのに対し、胆管癌患者では両マーカーともに発現レベルが減少し、胆嚢癌患者では略２〜３倍程しか増加しなかったことが確認できた。
【０１８６】
このことから、膵癌の場合、他の癌腫に比べて、単核球で発現するＩＬ−２２及びＩＬ−２９ｍＲＮＡの発現レベルが顕著に増加することが確認できた。
【０１８７】
［実施例４］
正常対照群４人、膵癌患者４人、胆管癌患者２人、胆嚢癌患者２人からそれぞれ血液を採取した後、前記実施例１と同じ方法で血中単核球（ＰＢＭＣ）を分離し、正常対照群に対比して、前記単核球においてＩＬ−２９と結合するインターフェロン受容体１アイソフォーム１（ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ  １）とインターフェロン受容体１アイソフォーム３（ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ３）のｍＲＮＡ発現レベルの比率を測定し、その結果を図８及び図９に示した。
【０１８８】
図８及び図９に示すように、正常対照群に対比して、膵癌患者から分離された単核球では、ＩＬ−２９と結合するインターフェロン受容体１アイソフォーム１のｍＲＮＡ発現レベルが３倍以上増加したが、胆管癌及び胆嚢癌患者では略１〜２倍程度しか増加しなかったことが確認できた。
【０１８９】
このことから、膵癌患者の場合、他の癌腫に比べて、単核球で発現するインターフェロン受容体１アイソフォーム１のｍＲＮＡの発現レベルが顕著に増加することが確認できた。
【０１９０】
［実施例５］
膵癌切除術を受けた膵癌患者に対して手術の前と後にそれぞれ血液を採取した後、前記実施例１と同じ方法で血中単核球（ＰＢＭＣ）を分離し、ＦＡＣＳ  Ｃａｌｉｂｕｒ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）を用いて総単核球細胞数対比ＩＬ−１０Ｒ、ＩＬ−２２Ｒ又はＩＬ−２２が発現する細胞数を％で示した。その結果を下記の表２及び図１０〜図１２に示した。
【０１９１】
【表２】
2021524285.tif 000004
【０１９２】
前記表２及び図１０〜図１２に示すように、膵癌患者において、切除術によって膵癌組織の総量（ｍａｓｓ）が減少すると、単核球におけるＩＬ−１０Ｒ、ＩＬ−２２及びＩＬ−２２Ｒの発現レベルが顕著に減少することが確認でき、特に、ＩＬ−１０Ｒの発現レベルが有意に減少したことが確認できた。
【０１９３】
［実施例６］
膵癌切除術を受けた膵癌患者に対して手術前及び手術後３ヶ月経過時点で血液を採取した後、前記実施例１と同じ方法で血中単核球（ＰＢＭＣ）を分離し、ＦＡＣＳ  Ｃａｌｉｂｕｒ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）を用いて総単核球細胞数対比ＩＬ−１０Ｒ（ｍａｒｋｅｒ  Ｃ）が発現する細胞の頻度を測定した後、対応のあるｔ検定（ｐａｉｒｅｄ  Ｔ  ｔｅｓｔ）で分析し、その結果を図１３に示した。
【０１９４】
図１３に示すように、切除術を用いて膵癌患者から癌組織を除去すると、手術前に比べて、ＩＬ−１０Ｒを発現する単核球の比率が有意に減少したことが確認できた。
【０１９５】
［実施例７］
正常対照群４人、膵癌患者４人、胆管癌患者２人、胆嚢癌患者２人からそれぞれ血液を採取した後、血漿（ｐｌａｓｍａ）内循環するエクソソーム（ｅｘｏｓｏｍｅ）を分離し、正常対照群に対比して、前記エクソソームにおいてＩＬ−１０ＲＢ、ＩＬ−２２ＲＡ及びＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１のそれぞれのｍＲＮＡ発現レベルの比率を測定し、その結果を図１４〜図１６に示した。
【０１９６】
図１４〜図１６に示すように、正常対照群に対比して、膵癌患者から分離されたエクソソームではＩＬ−１０ＲＢ  ｍＲＮＡの発現レベルは略４倍、ＩＬ−２２ＲＡ  ｍＲＮＡの発現レベルは略１．５倍、インターフェロン受容体１アイソフォーム１のｍＲＮＡ発現レベルは略２．５倍増加したことが確認できた。しかし、胆管癌患者から分離されたエクソソームでは、正常対照群に対比して、ＩＬ−１０ＲＢ  ｍＲＮＡの発現レベルは略１．５倍、インターフェロン受容体１アイソフォーム１のｍＲＮＡ発現レベルは略１．５倍しか増加せず、特にＩＬ−２２ＲＡ  ｍＲＮＡの発現レベルは正常対照群に比べて却って減少したことが確認できた。胆嚢癌患者も、その分離されたエクソソームではＩＬ−１０ＲＢ  ｍＲＮＡの発現レベルは正常対照群と同等なレベルを示し、ＩＬ−２２ＲＡとインターフェロン受容体１アイソフォーム１のｍＲＮＡの発現レベルは正常対照群に比べて略１．５倍以下に増加したことが確認できた。
【０１９７】
このことから、膵癌患者の場合、血漿から分離されるエクソソームで発現するＩＬ−１０ＲＢ、ＩＬ−２２ＲＡ及びインターフェロン受容体１アイソフォーム１のｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群又は他の癌腫に比べて顕著に増加することが確認できた。
【０１９８】
［実施例８］
正常対照群１１人、膵癌患者１０人、膵炎患者８人、胆管癌患者９人からそれぞれ血液を採取して血漿（ｐｌａｓｍａ）内循環するエクソソーム（ｅｘｏｓｏｍｅ）を分離し、ｑＲＴ−ＰＣＲを用いて各群でＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１（ＬＲ）のそれぞれのｍＲＮＡ発現レベルを測定し、その結果を図１７に示した。ただし、比較のために陽性対照群として、膵癌のバイオマーカーと 知られたＧＰＣ−１（Ｍ）ｍＲＮＡ発現レベルを測定し、その結果を図１７に共に示した。また、膵癌患者の予測のための前記ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１（ＬＲ）の組合せでスコア（ｓｃｏｒｅ）を分析してＡＵＣ、敏感度（ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ）及び特異度（ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ）を測定し、その結果を図１８に示した。
【０１９９】
図１７に示すように、膵癌患者から分離されたエクソソームでは、正常対照群に対比して、ＩＬ−１０ＲＢ  ｍＲＮＡ、ＩＬ−２２ＲＡ  ｍＲＮＡ及びＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１ｍＲＮＡの発現レベルが顕著に増加したことが確認できる。しかし、膵炎患者と胆管癌患者から分離されたエクソソームでは、前記ＩＬ−１０ＲＢ  ｍＲＮＡ、ＩＬ−２２ＲＡ  ｍＲＮＡ及びＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１ｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群と同等な発現レベルを示すことが確認できた。
【０２００】
また、図１８に示すように、膵癌の予測のために、膵癌患者群、正常対照群、膵炎患者群及び胆管癌患者群においてＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１（ＬＲ）の組合せでスコア分析を行った結果、敏感度は１．００、特異度は０．７４１又は０．８１８、ＡＵＣ  ０．９４８及び０．９６４と測定されたところ、予測正確度が非常に高いことを分かった。一方、従来膵癌バイオマーカーとして知られたＧＰＣ−１の場合、ｏｖｅｒａｌｌ  ｐ−ｖａｌｕｅもｐｏｓｔ−ｈｏｃ  ｐ−ｖａｌｕｅも統計的に有意でないことが分かる。
【０２０１】
［実施例９］
正常対照群２４人、膵癌患者４２人、膵炎患者７人、胆管癌患者１８人からそれぞれ血液を採取した後、それから単核球（ＰＢＭＣ）を分離し、ｑＲＴ−ＰＣＲを用いて各群においてＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）のそれぞれのｍＲＮＡ発現レベルを測定し、その結果を図１９に示した。また、膵癌患者の予測のための前記ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）の様々な組合せでスコア（ｓｃｏｒｅ）を分析し、測定されたＡＵＣ、敏感度（ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ）及び特異度（ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ）を測定し、その結果を図２０及び図２１に示した。
【０２０２】
図１９に示すように、膵癌患者から分離された単核球において正常対照群に対比して、ＩＬ−１０ＲＢ  ｍＲＮＡ、ＩＬ−２２ＲＡ  ｍＲＮＡ及びＩＬ−２２ｍＲＮＡの発現レベルが著しく増加したことが確認できる。しかし、膵炎患者と胆管癌患者から分離された単核球では、前記ＩＬ−１０ＲＢ  ｍＲＮＡ、ＩＬ−２２ＲＡ  ｍＲＮＡ及びＩＬ−２２ｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群と同等なレベルであるか或いは正常対照群に比べて増加したことが確認できた。
【０２０３】
また、図２０及び図２１に示すように、膵癌予測のために、膵癌患者群、正常対照群、膵炎患者群及び胆管癌患者群においてＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）の組合せ；ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）の組合せ；そしてＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）の組合せ；に対してスコア分析を行った結果、膵癌患者において、前記三つの組合せとも、敏感度、特異度及びＡＵＣが非常に高く測定され、膵癌予測の正確度が非常に高いことが分かり、特に、ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）の組合せにおいて予測正確度が顕著に高いことが確認できた。
【０２０４】
［実施例１０］
正常対照群４人、膵癌患者２人、胆嚢癌患者２人、胆管癌患者２人からそれぞれ血液を採取した後、それから単核球（ＰＢＭＣ）を分離し、ｑＲＴ−ＰＣＲを用いて各群においてＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１（ＬＲ）及びＩＬ−２９（Ｌ）のそれぞれのｍＲＮＡ発現レベルを測定し、正常対照群に対比して、前記ＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１（ＬＲ）ｍＲＮＡ及び前記ＩＬ−２９（Ｌ）ｍＲＮＡの発現レベルの比率を測定し、その結果を図２２に示した。
【０２０５】
図２２に示すように、膵癌患者から分離された単核球において正常対照群に比べて、ＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１ｍＲＮＡ及びＩＬ−２９ｍＲＮＡの発現レベルが顕著に増加したのに対し、胆嚢癌患者と胆管癌患者から分離された単核球では、前記ＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１ｍＲＮＡ及びＩＬ−２９ｍＲＮＡの発現レベルが正常対照群と同等なレベルに過ぎないことが確認できた。
【０２０６】
［実施例１１］
膵癌患者と慢性膵炎患者からそれぞれ血液を採取した後、それから単核球（ＰＢＭＣ）を分離し、ＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１に特異的な抗体を用いてＦＡＣＳ分析を行った。その結果をそれぞれ、図２３及び図２４に示した。
【０２０７】
図２３及び図２４に示すように、慢性膵炎患者に比べて、膵癌患者から分離された単核球においてＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１を発現する細胞の比率が増加し、前記ＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１タンパク質の発現レベルが増加したことが確認できた。
【０２０８】
［実施例１２］
正常対照群、膵癌患者、急性膵炎患者及び慢性膵炎患者からそれぞれ血液を採取した後、それから単核球（ＰＢＭＣ）を分離し、ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）のそれぞれに特異的な抗体を用いてＦＡＣＳ分析を行った後、各群において前記ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）のそれぞれを発現する細胞の比率を測定し、その結果を図２５に示した。また、前記ＦＡＣＳ分析結果を統計的に分析し、その結果を図２６に示した。
【０２０９】
図２５に示すように、急性或いは慢性膵炎患者に比べて、膵癌患者から分離された単核球においてＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）を発現する細胞の比率が増加し、これらのバイオマーカーの発現レベルが増加したことが確認できた。
【０２１０】
また、図２６に示すように、膵癌患者においてＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）に対する敏感度、特異度及びＡＵＣが非常に高く測定され、膵癌予測の正確度に非常に優れていることが分かった。
【０２１１】
［実施例１３］
外科的切除術を受けた膵癌患者１１人に対して手術の前と後に血液を採取し、それから単核球を分離した後、ｑＲＴ−ＰＣＲを用いて手術の前と後にＩＬ−１０ＲＢ、ＩＬ−２２ＲＡ、ＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１及びＩＬ−２２のそれぞれのｍＲＮＡ発現レベルを測定し、その結果を図２７に示した。ただし、比較のために、陽性対照群として、膵癌のバイオマーカーとして知られたＧＰＣ−１ｍＲＮＡ発現レベルも測定し、その結果を図２７に共に示した。
【０２１２】
図２７に示すように、外科的手術で膵癌を除去すると、手術の前に比較して、ＩＬ−１０ＲＢ、ＩＬ−２２ＲＡ、ＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１及びＩＬ−２２のｍＲＮＡ発現レベルがいずれも減少したことが確認できた。しかし、ＧＰＣ−１ｍＲＮＡ発現レベルは同等に維持されるか或いは一部増加する傾向を示すことが確認できた。
【０２１３】
［実施例１４］
外科的切除術を受けた後に再発した膵癌患者５人に対して、手術の前と手術後２ヶ月及び６ヶ月経過した時点に、そして再発した時点に血液を採取し、それから単核球を分離した後、ｑＲＴ−ＰＣＲを用いて手術の前と後にＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）のそれぞれのｍＲＮＡ発現レベルを測定し、ＦＡＣＳ分析を用いて、前記ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）を発現する細胞の比率を測定した。ただし、比較のために、陽性対照群として膵癌のバイオマーカーと知られたＣＥＡ及びＣＡ１９−９ｍＲＮＡ発現レベルを測定し、特に、ＣＡ１９−９については各時期別発現量の変化を測定した。各患者別前記実験結果を、図２８〜図３２に示した。
【０２１４】
図２８〜図３２に示すように、外科的手術で膵癌を除去したが、手術前と比較してＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）のいずれか一つでも発現レベルが有意に増加する場合、膵癌が再発することが確認できた。しかし、ＣＥＡ及びＣＡ１９−９は、手術後にも減少した発現レベルが維持され、ＣＡ１９−９は、手術後１０ヶ月の長時間が経過してこそ、その発現レベルが増加することが確認できた。
【０２１５】
このことから、本発明に係るＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＬ−２２（Ａ）バイオマーカーを用いる場合、膵癌の再発の有無を早期に高い正確度で予測できることが分かった。
【０２１６】
［実施例１５］
抗癌化学療法を受けた膵癌患者１２人に対して治療の前と後に血液を採取し、それから単核球を分離した後、ｑＲＴ−ＰＣＲを用いて治療の前と後にＩＬ−１０ＲＢ、ＩＬ−２２ＲＡ、ＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１、ＩＬ−２２及びＩＬ−２９のそれぞれのｍＲＮＡ発現レベルを測定し、その結果を図３３に示した。ただし、比較のために、陽性対照群として、膵癌のバイオマーカーと知られたＧＰＣ−１ｍＲＮＡ発現レベルも測定し、その結果を図３３に共に示した。
【０２１７】
図３３に示すように、膵癌患者に抗癌化学療法を行うと、その治療前に比較して、ＩＬ−１０ＲＢ、ＩＬ−２２ＲＡ、ＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１、ＩＬ−２２及びＩＬ−２９のｍＲＮＡ発現レベルがいずれも減少したことが確認できた。しかし、ＧＰＣ−１ｍＲＮＡ発現レベルは同等に維持されるか或いは一部増加する傾向を示すことが確認できた。
【０２１８】
［実施例１６］
抗癌化学療法を受けた後膵癌患者に対して治療前と、治療後３ヶ月が経過した時点に血液を採取し、それから単核球を分離した後、ＦＡＣＳ分析を用いて治療の前と後にＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）を発現する細胞の比率を測定し、その結果を図３４に示した。
【０２１９】
図３４に示すように、抗癌化学療法前にＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）を発現する細胞の比率は１２．９％であったが、抗癌化学療法後３．５２％に減少し、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）も、抗癌化学療法前にそれを発現する細胞の比率が１０．５％であったが、抗癌化学療法後１．０５％に減少したことが確認できた。
【０２２０】
［実施例１７］
膵癌患者と急性膵炎患者から血液を採取した後、それから単核球（ＰＢＭＣ）を分離し、ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）に特異的な抗体を用いてＦＡＣＳ染色を行った後、ＩＬ−１０ＲＢを発現する細胞（ＢＲ＋）とＩＬ−２２ＲＡを発現する細胞（ＡＲ＋）を分離し、ギムザ染色（Ｇｉｅｍｓａ  ｓｔａｉｎｉｎｇ）を行った。膵癌患者と急性膵炎患者における結果をそれぞれ、図３５及び図３６に示した。
【０２２１】
図３５及び図３６に見られるように、膵癌患者に対してＩＬ−１０ＲＢを発現する細胞（ＢＲ＋）とＩＬ−２２ＲＡを発現する細胞（ＡＲ＋）の形状を確認した結果、前記ＩＬ−１０ＲＢを発現する細胞（ＢＲ＋）は骨髄由来で、前記ＩＬ−２２ＲＡを発現する細胞（ＡＲ＋）はリンパ由来であって、互いに起源（ｏｒｉｇｉｎ）が異なっており、前記ＩＬ−２２ＲＡを発現する細胞（ＡＲ＋）がＩＬ−１０ＲＢを発現する細胞（ＢＲ＋）に比べて相対的に異種性（ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｏｕｓ）を示している。このとき、膵癌患者の場合、急性膵炎患者に比べてＩＬ−２２ＲＡを発現する細胞（ＡＲ＋）とＩＬ−１０ＲＢを発現する細胞（ＢＲ＋）の比率が非常に高いことが確認できた。
【０２２２】
［実施例１８］
膵癌患者から血液を分離し、ＥＤＴＡチューブに保管した後、４００ｇで５分間遠心分離を行った。プラズマは別途に保管し、ペレット（ｐｅｌｌｅｔ）にＲＢＣ溶血バッファ（ＲＢＣ  ｌｙｓｉｓ  ｂｕｆｆｅｒ）を入れて常温で３分間培養後にリン酸緩衝水溶液（ＰＢＳ）で洗浄した。このように分離した全血細胞（ｗｈｏｌｅ  ｂｌｏｏｄ  ｃｅｌｌｓ）に対して、ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）に特異的な抗体を用いてＦＡＣＳ染色を行った後、ＩＬ−２２ＲＡ及びＩＬ−１０ＲＢを発現する細胞（ＡＲ＋ＢＲ＋）とＩＬ−１０ＲＢを発現する細胞（ＢＲ＋）を分離し、Ｈ＆Ｅ染色を行った。その結果を図３７に示した。
【０２２３】
図３７に示すように、ＩＬ−２２ＲＡ及びＩＬ−１０ＲＢを発現する細胞（ＡＲ＋ＢＲ＋）とＩＬ−１０ＲＢを発現する細胞（ＢＲ＋）の形状を比較した結果、それらは互いに起源（ｏｒｉｇｉｎ）が異なっていることが分かった。
【０２２４】
［実施例１９］
膵癌患者から分離した血液から全血細胞（ｗｈｏｌｅ  ｂｌｏｏｄ  ｃｅｌｌｓ）を分離した後、ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）、ＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）及びＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１（ＬＲ）に特異的な抗体を用いてＦＡＣＳ染色を行った後、ＩＬ−２２ＲＡを発現する細胞（ＡＲ＋）、ＩＬ−１０ＲＢを発現する細胞（ＢＲ＋）及びＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１を発現する細胞（ＬＲ＋）を分離した後、転写体分析（ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅ  ａｎａｌｙｓｉｓ）を行った。その結果を図３８に示した。
【０２２５】
図３８に示すように、膵癌患者から得られた全血細胞に対して前記ＩＬ−２２ＲＡ、ＩＬ−１０ＲＢ及びＩＦＮＬＲ１アイソフォーム１を発現する細胞が確認できた。
【０２２６】
［実施例２０］
１．膵癌同所移植マウスモデルの準備
マウスの腹を切開し、膵尾部（ｐａｎｃｒｅａｓ  ｔａｉｌ）に膵癌細胞であるＰａｎｃ−１細胞とＡｓｐｃ細胞を２×１０６細胞／５０ｕｌの量で注入した。２週後に腹を切開し、膵癌が成長したことを確認した。
【０２２７】
２．膵臓細胞の分離
マウスから膵臓組織を分離した後、コラゲナーゼＸＩ（Ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ  ＸＩ）０．５ｍｇ／ｍｌ、ディスパーゼ１（Ｄｉｓｐａｓｅ１）０．２５ｍｇ／ｍｌ及びディスパーゼ２（Ｄｉｓｐａｓｅ２）０．２５ｍｇ／ｍｌを３７℃で１時間処理した。膵臓組織がどろどろとした状態に変わると、ストレーナー（ｓｔｒａｉｎｅｒ）に入れて粉砕した後、細胞だけを得て洗浄後に遠心分離した。沈殿した層の中から脂肪層を分離し、細胞だけを回収した後、Ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ  １０８３，１１１９を用いて単核球細胞（ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ  ｃｅｌｌ）、顆粒球（ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ）及びＲＢＣをそれぞれ分離した（８００ｇ／２５分）。分離された層のうち、血漿は別に保管し、ＲＢＣ以外の２細胞層を集めてＦＡＣＳ分析を行った。
【０２２８】
３．脾臓細胞の分離
マウスから脾臓組織を分離してストレーナーで粉砕した後、細胞だけを得、前記膵臓細胞の分離と同じ方法でｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ(R)を用いて分離を行った。
【０２２９】
４．全血細胞の分離
２ｍＭ  ＥＤＴＡが含まれたＰＢＳシリンジ（ｓｙｌｉｎｇｅ）にマウス血液を集めた後、４００ｇで５分間遠心分離後、血漿は別に保管し、下のペレット層を再浮遊（ｒｅｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ）させ、前記膵臓細胞の分離と同じ方法でｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ(R)を用いて分離を行った。
【０２３０】
前記実験の設計図は図３９に示し、膵癌細胞移植後の膵臓及び脾臓の写真は図４０に示し、膵臓組織のＨ＆Ｅ染色写真は図４１に示した。また、膵臓に浸潤した免疫細胞に対して、ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）に特異的な抗体を用いてＦＡＣＳ分析を行った結果は図４２及び図４３に示し、全血細胞の単核球及び顆粒球に対して、ＩＬ−１０ＲＢ（ＢＲ）及びＩＬ−２２ＲＡ（ＡＲ）に特異的な抗体を用いてＦＡＣＳ分析を行った結果は図４４に示した。
【０２３１】
図４０に示すように、Ｐａｎｃ−１細胞とＡｓｐｃ細胞を直接注入したマウスで膵癌が成長したことが確認でき、脾臓の大きさも増加したことが確認できた。また、図４１に示すように、正常対照群では正常な膵臓小胞（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ａｃｉｎｕｓ）、膵臓管（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｄｕｃｔｓ）及び膵臓島（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｉｓｌｅｔｓ）が観察されるのに対し、膵癌が成長した群では癌組織内に免疫細胞が浸潤され、結合組織が形成（ｄｅｓｍｏｐｌａｓｉａ）されたことが確認できた。
【０２３２】
図４２に示すように、膵癌に浸潤した免疫細胞に対してＦＡＣＳ分析を行った結果、正常対照群に比べて、Ｐａｎｃ−１細胞とＡｓｐｃ細胞を直接注入して膵癌が成長した群では、ＩＬ−２２ＲＡを発現するＢ細胞（ＡＲ＋）とＩＬ−１０ＲＢを発現するＢ細胞（ＢＲ＋）の比率が増加したことが確認できた。また、図４３からも、正常対照群に比べてＰａｎｃ−１細胞とＡｓｐｃ細胞を直接注入して膵癌が成長した群では、ＩＬ−２２ＲＡ及びＩＬ−１０ＲＢを発現したり、ＩＬ−１０ＲＢを発現する樹枝状細胞（ＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ＋細胞）と、ＩＬ−２２ＲＡ及びＩＬ−１０ＲＢを発現したり、ＩＬ−１０ＲＢを発現する大食細胞（ＣＤ１１ｂ＋Ｆ４／８０＋細胞）の比率が増加したことが確認できた。また、図４４に示すように、正常対照群に比べて、Ｐａｎｃ−１細胞を注入して膵癌が成長した群では、ＩＬ−２２ＲＡ又はＩＬ−１０ＲＢを発現する好中球細胞（ＣＤ１１ｂ＋Ｆ４／８０−Ｇｒ−１＋細胞）の比率が増加したことが確認できた。
【０２３３】
［実施例２１］
正常対照群３人及び膵癌患者３人から血液を採取した後に単核球を分離し、ｑＲＴ−ＰＣＲを用いてＩＬ−２８Ａ、ＩＬ−２８Ｂアイソフォーム１及びＩＬ−２８Ｂアイソフォーム２のそれぞれのｍＲＮＡ発現レベルを測定し、その結果を図４５に示した。
【０２３４】
図４５に示すように、正常対照群に比較して、膵癌患者の単核球においてＩＬ−２８Ａ  ｍＲＮＡ、ＩＬ−２８Ｂアイソフォーム１ｍＲＮＡ及びＩＬ−２８Ｂアイソフォーム２ｍＲＮＡ発現レベルが全て増加したことが確認できた。
【０２３５】
したがって、単核球において前記ＩＬ−２８Ａ、ＩＬ−２８Ｂアイソフォーム１及びＩＬ−２８Ｂアイソフォーム２の発現は膵癌診断のための有効なバイオマーカーに該当することが分かる。
【産業上の利用可能性】
【０２３６】
本発明は、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、前記インターロイキン２８Ａ、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム１、前記インターロイキン２８Ｂアイソフォーム２、インターロイキン２９及び／又はインターフェロンラムダ受容体１アイソフォーム１のバイオマーカーの発現レベルを測定することによって、膵臓疾患、自己免疫疾患、アレルギー、グレーヴス病、橋本病、乾癬、川崎病及び自己免疫リンパ増殖症候群などの様々な疾患、その中でも特に膵癌の発病の有無又は発病可能性を正確に予測又は診断可能にする。
【０２３７】
また、本発明では、個体から分離された液体生検から前記バイオマーカーの発現レベルを測定して疾患の発病の有無などを予測又は診断できるので、従来に比べて非侵襲的な方法で簡単で迅速ながらも非常に正確に膵癌などの疾患を診断することができる。
【０２３８】
以上、本発明内容における特定の部分を詳細に記述したところ、当業界における通常の知識を有する者にとって、このような具体的記述は単に好ましい実施様態であるだけで、それによって本発明の範囲が制限されない点は明らかであろう。したがって、本発明の実質的な範囲は、添付する請求項とそれらの等価物によって定義されるといえよう。
【図１】
2021524285.tif 000005
【図２】
2021524285.tif 000006
【図３】
2021524285.tif 000007
【図４】
2021524285.tif 000008
【図５】
2021524285.tif 000009
【図６】
2021524285.tif 000010
【図７】
2021524285.tif 000011
【図８】
2021524285.tif 000012
【図９】
2021524285.tif 000013
【図１０】
2021524285.tif 000014
【図１１】
2021524285.tif 000015
【図１２】
2021524285.tif 000016
【図１３】
2021524285.tif 000017
【図１４】
2021524285.tif 000018
【図１５】
2021524285.tif 000019
【図１６】
2021524285.tif 000020
【図１７】
2021524285.tif 000021
【図１８】
2021524285.tif 000022
【図１９】
2021524285.tif 000023
【図２０】
2021524285.tif 000024
【図２１】
2021524285.tif 000025
【図２２】
2021524285.tif 000026
【図２３】
2021524285.tif 000027
【図２４】
2021524285.tif 000028
【図２５】
2021524285.tif 000029
【図２６】
2021524285.tif 000030
【図２７】
2021524285.tif 000031
【図２８】
2021524285.tif 000032
【図２９】
2021524285.tif 000033
【図３０】
2021524285.tif 000034
【図３１】
2021524285.tif 000035
【図３２】
2021524285.tif 000036
【図３３】
2021524285.tif 000037
【図３４】
2021524285.tif 000038
【図３５】
2021524285.tif 000039
【図３６】
2021524285.tif 000040
【図３７】
2021524285.tif 000041
【図３８】
2021524285.tif 000042
【図３９】
2021524285.tif 000043
【図４０】
2021524285.tif 000044
【図４１】
2021524285.tif 000045
【図４２】
2021524285.tif 000046
【図４３】
2021524285.tif 000047
【図４４】
2021524285.tif 000048
【図４５】
2021524285.tif 000049
【配列表】
2021524285000001.app
【国際調査報告】
2021524285.tif 000050
2021524285.tif 000051
2021524285.tif 000052
2021524285.tif 000053
2021524285.tif 000054
2021524285.tif 000055
2021524285.tif 000056
2021524285.tif 000057
2021524285.tif 000058
2021524285.tif 000059
2021524285.tif 000060
2021524285.tif 000061
2021524285.tif 000062
2021524285.tif 000063