(57)【要約】  本発明は、ＣＤ１２３に特異的に結合する抗体を提供する。本発明は、さらにそのような抗体を含む免疫コンジュゲート（例えば抗体薬物コンジュゲートまたはＡＤＣ）、抗体をコードする核酸およびそのような抗体を得る方法に関する。本発明は、さらにＣＤ１２３を発現する細胞と関係する症状（例えば癌または自己免疫疾患）の処置のためのこれらの抗体およびＡＤＣの使用に関する療法的方法に関する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＣＤ１２３に特異的に結合する単離された抗体であって、該抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、２４、３２、４４、５１または６４のアミノ酸配列を含むＶＨの３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７、２８、３９、４８、５７、または７１のアミノ酸配列を含むＶＬの３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む抗体。
【請求項２】
請求項１に記載の抗体であって、該ＶＨが、（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、３３、５２もしくは６５のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；（ｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、２５、３４、４５、５３もしくは６６のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；および（ｉｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９、３５、４６もしくは６７のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３を含み；かつ／または該ＶＬ領域が、（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８、４０、５８もしくは７２のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；（ｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９、４２、６０もしくは７４のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；および（ｉｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０、４２、６０もしくは７４のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３を含む抗体。
【請求項３】
請求項２に記載の抗体であって、該ＶＨが、（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；（ｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；および（ｉｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３を含み；かつ／または該ＶＬが、（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；（ｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；および（ｉｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３を含む抗体。
【請求項４】
請求項３に記載の抗体であって、該ＶＨが、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４において示される配列もしくはＣＤＲ内にない残基における１つもしくはいくつかの保存的アミノ酸置換を有するそのバリアントを含み、かつ／または該ＶＬが、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８において示されるアミノ酸配列もしくはＣＤＲ内にないアミノ酸における１つもしくはいくつかのアミノ酸置換を有するそのバリアントを含む抗体。
【請求項５】
請求項３に記載の抗体であって、該抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０において示される配列を含む軽鎖およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７において示される配列を含む重鎖を含む抗体。
【請求項６】
ＣＤ１２３に特異的に結合する単離された抗体であって、該抗体が、ＡＴＣＣ受入番号ＰＴＡ−１２４２８３を有する発現ベクターにより生成された重鎖可変領域およびＡＴＣＣ受入番号ＰＴＡ−１２４２８４を有する発現ベクターにより生成された軽鎖可変領域を含む抗体。
【請求項７】
ＣＤ１２３に特異的に結合し、ＣＤＲへの結合に関して請求項１〜６のいずれか１項に記載の抗体と競合する抗体。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の抗体であって、該抗体が、特定の部位において操作されたアシルドナーグルタミン含有タグを含む抗体。
【請求項９】
請求項８に記載の抗体であって、該アシルドナーグルタミン含有タグが、Ｑ、ＬＱＧ、ＬＬＱＧＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７）、ＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８）、ＬＳＬＳＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９）、ＧＧＧＬＬＱＧＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０）、ＧＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１）、ＬＬＱ、ＧＳＰＬＡＱＳＨＧＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２）、ＧＬＬＱＧＧＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３）、ＧＬＬＱＧＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８４）、ＧＬＬＱ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８５）、ＬＬＱＬＬＱＧＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６）、ＬＬＱＧＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７）、ＬＬＱＹＱＧＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８）、ＬＬＱＧＳＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８９）、ＬＬＱＹＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９０）、ＬＬＱＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９１）、ＳＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９２）、ＬＬＱＬＱ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９３）、ＬＬＱＬＬＱ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９４）、ＬＬＱＧＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９５）、ＬＬＱＧＰＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９６）、ＬＬＱＧＰＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９７）、ＧＧＬＬＱＧＰＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９８）、ＧＧＬＬＱＧＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９９）、ＬＬＱＧＰＧＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１００）、ＬＬＱＧＰＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０１）、ＬＬＱＧＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０２）、ＬＬＱＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０３）、ＬＬＱＰＧＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０４）、ＬＬＱＡＰＧＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０５）、ＬＬＱＧＡＰＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０６）、ＬＬＱＧＡＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０７）およびＬＬＱＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０８）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む抗体。
【請求項１０】
請求項１１に記載の抗体であって、該アシルドナーグルタミン含有タグが、ＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８）である抗体。
【請求項１１】
請求項９または１０に記載の抗体であって、該抗体が、さらに位置２２２、３４０、または３７０においてアミノ酸改変を含む抗体。
【請求項１２】
請求項１１に記載の抗体であって、該アミノ酸改変が、リジンからアルギニンへの置換である抗体。
【請求項１３】
請求項１２に記載の抗体であって、該アミノ酸改変が、Ｋ２２２Ｒである抗体。
【請求項１４】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の抗体であって、該抗体が、リンカーを含む抗体。
【請求項１５】
請求項１４に記載の抗体であって、該リンカーが、切断可能なリンカーである抗体。
【請求項１６】
請求項１４または１５に記載の抗体であって、該リンカーが、Ａｃ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（アセチル−リジン−グリシン）、アミノカプロン酸、Ａｃ−Ｌｙｓ−β−Ａｌａ（アセチル−リジン−β−アラニン）、アミノ−ＰＥＧ２（ポリエチレングリコール）−Ｃ２、アミノ−ＰＥＧ３−Ｃ２、アミノ−ＰＥＧ６−Ｃ２、Ａｃ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ（アセチル−リジン−バリン−シトルリン−ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル）、アミノ−ＰＥＧ６−Ｃ２−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ、アミノカプロイル−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ、［（３Ｒ，５Ｒ）−１−｛３−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］プロパノイル｝ピペリジン−３，５−ジイル］ビス−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ、［（３Ｓ，５Ｓ）−１−｛３−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］プロパノイル｝ピペリジン−３，５−ジイル］ビス−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ、プトレッシンおよびＡｃ−Ｌｙｓ−プトレッシンからなる群から選択される抗体。
【請求項１７】
請求項１６に記載の抗体であって、該リンカーが、Ａｃ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ（アセチル−リジン−バリン−シトルリン−ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル）である抗体。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれか１項に記載の抗体のコンジュゲートであって、該抗体が、薬剤にコンジュゲートされているコンジュゲート。
【請求項１９】
請求項１８に記載のコンジュゲートであって、該薬剤が、細胞毒性薬剤、免疫調節剤、イメージング剤、療法的タンパク質、バイオポリマーおよびオリゴヌクレオチドからなる群から選択されるコンジュゲート。
【請求項２０】
請求項１９に記載のコンジュゲートであって、該細胞毒性薬剤が、アントラサイクリン、オーリスタチン、カンプトテシン、コンブレタスタチン、ＣＢＩ二量体、シクロプロピルピロロインドリン（ＣＰＩ）二量体、ＣＴＩ二量体、ドラスタチン、デュオカルマイシン、エンジイン、ゲルダナマイシン、インドリノベンゾジアゼピン二量体、メイタンシン、ピューロマイシン、ピロロベンゾジアゼピン二量体、タキサン、ビンカアルカロイド、チューブリシン、ヘミアステリン、スプライセオスタチン、プラジエノライド、ならびに、それらの立体異性体、同配体、類似体または誘導体からなる群から選択されるコンジュゲート。
【請求項２１】
請求項１９または２０に記載のコンジュゲートであって、該細胞毒性薬剤が、ＣＰＩ二量体であるコンジュゲート。
【請求項２２】
請求項２１に記載のコンジュゲートであって、該ＣＰＩ二量体が、Ｃ３１Ｈ３１Ｃｌ２Ｎ４Ｏ７Ｐ、またはＣ３１Ｈ３１Ｃｌ２Ｎ４Ｏ７Ｐ・Ｃ２ＨＦ３Ｏ２を含むその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物であるコンジュゲート。
【請求項２３】
請求項１９〜２１のいずれか１項に記載の抗体のコンジュゲートであって、該コンジュゲートが、式：抗体−（アシルドナーグルタミン含有タグ）−（リンカー）−（細胞毒性薬剤）を含むコンジュゲート。
【請求項２４】
請求項２３に記載のコンジュゲートであって、該アシルドナーグルタミン含有タグが、アミノ酸配列ＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８）を含み、該リンカーが、アセチル−リジン−バリン−シトルリン−ｐ−アミノベンジルオキシカルボニルを含むコンジュゲート。
【請求項２５】
請求項２３または２４に記載のコンジュゲートであって、該アシルドナーグルタミン含有タグが、位置Ｅ２９４〜Ｎ２９７において抗体中に挿入されるコンジュゲート。
【請求項２６】
請求項１８〜２５のいずれか１項に記載のコンジュゲートであって、該コンジュゲートが、ＫａｂａｔのＥＵインデックスの番号付けに従って抗体の位置２２２においてリジンからアルギニンへのアミノ酸置換を含むコンジュゲート。
【請求項２７】
療法上有効量の請求項１〜１７のいずれか１項に記載の抗体または請求項１８〜２６のいずれか１項に記載のコンジュゲートおよび薬学的に許容可能なキャリヤーを含む医薬組成物。
【請求項２８】
請求項１〜１７のいずれか１項に記載の抗体をコードするヌクレオチド配列を含む単離されたポリヌクレオチド。
【請求項２９】
請求項２８に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
【請求項３０】
請求項１〜１７のいずれか１項に記載の抗体を組み換え的に産生する、単離された宿主細胞。
【請求項３１】
抗体を生成する方法であって、結果として該抗体の産生をもたらす条件下で請求項３０に記載の宿主細胞を培養し、該抗体を該宿主細胞または培養物から単離することを含む方法。
【請求項３２】
対象においてＣＤ１２３を発現する細胞に関係する症状を処置する方法であって、それを必要とする対象に有効量の請求項２７に記載の医薬組成物を投与することを含む方法。
【請求項３３】
請求項３２に記載の方法であって、該症状が癌である方法。
【請求項３４】
請求項３３に記載の方法であって、該癌が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞新生物（ＢＰＤＣＮ）、有毛細胞白血病、Ｂ細胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、多発性骨髄腫、悪性形質細胞新生物、ホジキンリンパ腫、結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫、カーラー病および骨髄腫症、形質細胞白血病、形質細胞腫、Ｂ細胞性前リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、濾胞性リンパ腫、バーキットリンパ腫、辺縁帯リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、大細胞リンパ腫、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、骨髄性白血病、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症（Ｗａｌｄｅｎｓｔｒｏｍ’ｓ  ｍａｃｒｏｇｌｏｂｕｌｉｅｎｅｍｉａ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、粘膜関連リンパ組織リンパ腫、小細胞型リンパ球性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、原発性縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫（ｌｙｍｐｈｏｐｌａｓｍａｃｔｙｉｃ  ｌｙｍｐｈｏｍａ）、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症、結節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、脾臓辺縁帯リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、リンパ腫様肉芽腫症、Ｔ細胞／組織球豊富型大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫、原発性皮膚びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（下肢型）、高齢者のＥＢＶ陽性びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、炎症を伴うびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、ＡＬＫ陽性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、形質芽細胞リンパ腫、ＨＨＶ８関連単多中心性キャッスルマン病で生じる大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫およびバーキットリンパ腫の間の中間の特徴を有する未分類のＢ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫および古典的ホジキンリンパ腫の間の中間の特徴を有する未分類のＢ細胞リンパ腫ならびに他のＢ細胞関連リンパ腫からなる群から選択される癌である方法。
【請求項３５】
請求項３４に記載の方法であって、該癌が、ＡＭＬである方法。
【請求項３６】
ＣＤ１２３を発現する悪性細胞を有する対象において腫瘍の成長または進行を抑制する方法であって、それを必要とする対象に有効量の請求項２７に記載の医薬組成物を該対象に投与することを含む方法。
【請求項３７】
対象においてＣＤ１２３を発現する悪性細胞の転移を抑制する方法であって、それを必要とする対象に有効量の請求項２７に記載の医薬組成物を該対象に投与することを含む方法。
【請求項３８】
ＣＤ１２３を発現する悪性細胞を有する対象において腫瘍の退縮を誘導する方法であって、それを必要とする対象に有効量の請求項２７に記載の医薬組成物を該対象に投与することを含む方法。
【請求項３９】
抗体をＡｃＬｙｓＶａｌＣｉｔＰＡＢＣ−ＤＭＡＥ−ＣＯ＿ＣＰＩ−０００６３８３１４（ＡｃＬｙｓＰＡＢＣ−ＣＰＩ−８３１４）にコンジュゲートするための方法であって、以下の工程：
抗体およびＡｃＬｙｓＰＡＢＣ−ＣＰＩ−８３１４を３０〜１００ｍＭ  ＫＰＯ４および１５０〜２００ｍＭ  ＮａＣｌを含む緩衝液中に含む組成物を調製し；
細菌性トランスグルタミナーゼを該組成物に添加し；そして
該組成物をインキュベートして該抗体の該ＡｃＬｙｓＰＡＢＣ−ＣＰＩ−８３１４へのコンジュゲーションを可能にする；
を含む方法。
【請求項４０】
請求項３９に記載の方法であって、該組成物のｐＨが７である方法。
【請求項４１】
請求項３９または４０に記載の方法であって、該組成物が、抗体１ｍｇあたり０．５〜２単位（Ｕ）の細菌性トランスグルタミナーゼを含む方法。
【請求項４２】
請求項３９〜４１のいずれか１項に記載の方法であって、該組成物が、抗体１ｍｇあたり１Ｕの細菌性トランスグルタミナーゼを含む方法。
【請求項４３】
請求項３９〜４２のいずれか１項に記載の方法であって、該ＡｃＬｙｓＰＡＢＣ−ＣＰＩ−８３１４が、該抗体に対して１０倍モル過剰で存在する方法。
【請求項４４】
請求項３９〜４３のいずれか１項に記載の方法であって、該組成物が、連続的に混合しながら２５℃で一夜インキュベートされる方法。
【請求項４５】
請求項３９〜４４のいずれか１項に記載の方法であって、該組成物が、さらに７．５％（ｖ／ｖ）のジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含む方法。
【請求項４６】
請求項３９〜４５のいずれか１項に記載の方法であって、該緩衝液が、３０ｍＭ  ＫＰＯ４および１５０ｍＭ  ＮａＣｌを含む方法。
【請求項４７】
請求項３９〜４５のいずれか１項に記載の方法であって、該緩衝液が、１００ｍＭ  ＫＰＯ４および２００ｍＭ  ＮａＣｌを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
配列リストへの参照
本出願は、ＥＦＳ−Ｗｅｂを介して電子出願されており、．ｔｘｔ形式の電子的に提出された配列リストを含む。．ｔｘｔファイルは、２０１７年１０月２７日に作成された、７８ＫＢのサイズを有する“ＰＣ７２３３３＿ＳＥＱ＿ＬＩＳＴ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ”と題された配列リストを含有する。この．ｔｘｔファイルに含有される配列リストは、本明細書の一部であり、それは参照により本明細書にそのまま援用される。
【０００２】
本発明は、抗体、例えばＣＤ１２３に特異的に結合する完全長抗体に関する。本発明は、さらにＣＤ１２３抗体を含むコンジュゲート（例えば、抗体−薬物コンジュゲートまたは“ＡＤＣ”）、ＣＤ１２３抗体またはそれらのコンジュゲートを含む組成物、ならびに、ＣＤ１２３抗体またはそれらのコンジュゲートをＣＤ１２３を発現している細胞（例えば癌）と関係する症状を処置するために使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
ＣＤ１２３は、インターロイキン−３受容体のアルファ鎖（ＩＬ−３ＲαまたはＩＬ３ＲＡａ）であり、それは、共通のベータ鎖ＣＤ１３１とヘテロ二量体を形成してＩＬ−３のシグナルを伝達するのを助ける。ＩＬ−３の生物学的役割は、多能性細胞の生存および増殖を刺激することである。ＣＤ１２３は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞の増殖の刺激に関与していると信じられており、腫瘍生物学において直接的な機能を有する。ＣＤ１２３は、患者における再発と関係する細胞集団である白血病幹細胞（ＬＳＣ）上で高頻度で発現されている。正常なヒト組織では、ＣＤ１２３発現は、大部分が造血細胞、特に形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）に限られており、それは、ヒトにおける末梢血単核細胞の０．４％未満を構成する。先天免疫の構成要素として、ｐＤＣは、ウイルスおよび細菌性の刺激に反応して大量の１型インターフェロン（ＩＦＮ−α／β）を産生する。重要なことには、ＣＤ１２３は、造血幹細胞上では発現されていない。
【０００４】
白血病、リンパ腫および骨髄腫の新規の症例は、２０１７年に米国で診断された推定１，６８８，７８０件の新規の癌症例の１０．２％を占めると予想されている。ＣＤ１２３は、その発現率が８０％より大きい急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を含む様々な血液悪性腫瘍においてがん細胞上で発現されている。ＣＤ１２３を発現する血液癌細胞の例は、芽球および白血病幹細胞を含む。ＣＤ１２３の発現と関係する疾患は、ＡＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ；低リスクおよび高リスク）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ、すべての亜型）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）および芽球性形質細胞様樹状細胞新生物（ＢＰＤＣＮ）を含む。
【０００５】
現在、これらの疾患に関する処置は、５０種類を超える個々の薬物を含み、他の薬物が、研究中および臨床試験中である。放射線療法も、血液癌を処置するために一般的に用いられており、時々それは、薬物療法と一緒に施される。免疫療法、遺伝子療法および個別化医療も、用いられる。しかし、これらの療法は、重大な副作用および有害な反応を有し得る。従って、ＣＤ１２３（ＩＬ−３Ｒα）を発現する血液癌に関する新規の改善された処置に関する必要性が、存在する。
【発明の概要】
【０００６】
本明細書で開示される発明は、ＣＤ１２３に結合する抗体およびＣＤ１２３に結合する抗体を含むコンジュゲート、例えば抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）ならびに障害を処置するためにそのような抗体およびＡＤＣを調製し、使用する方法に向けられている。
【０００７】
本明細書で提供されるのは、ＣＤ１２３に特異的に結合する抗体である。ある態様において、本発明は、ＣＤ１２３に特異的に結合する単離された抗体を提供し、ここで、その抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、２４、３２、４４、５１または６４のアミノ酸配列を含むＶＨの３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７、２８、３９、４８、５７、または７１のアミノ酸配列を含むＶＬの３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある態様において、ＶＨは、（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、３３、５２または６５のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；（ｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、２５、３４、４５、５３または６６のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；および（ｉｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９、３５、４６または６７のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３を含むことができる。ある態様において、ＶＬ領域は、（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８、４０、５８または７２のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；（ｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９、４２、６０または７４のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；および（ｉｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０、４２、６０または７４のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３を含むことができる。ある態様において、ＶＨは、（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；（ｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；および（ｉｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３を含むことができる。ある態様において、ＶＬは、（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；（ｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；および（ｉｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３を含むことができる。ある態様において、ＶＨは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４において示される配列もしくはＣＤＲ内にない残基における１つもしくはいくつかの保存的アミノ酸置換を有するそのバリアントを含むことができ、かつ／またはＶＬは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８において示されるアミノ酸配列もしくはＣＤＲ内にないアミノ酸における１つもしくはいくつかのアミノ酸置換を有するそのバリアントを含むことができる。ある態様において、抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０において示される配列を含む軽鎖およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７において示される配列を含む重鎖を含むことができる。
【０００８】
ＣＤ１２３に特異的に結合し、ＡＴＣＣ受入番号ＰＴＡ−１２４２８３を有する発現ベクターにより生成された重鎖可変領域およびＡＴＣＣ受入番号ＰＴＡ−１２４２８４を有する発現ベクターにより生成された軽鎖可変領域を含む単離された抗体も、提供される。
【０００９】
ＣＤ１２３に特異的に結合し、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、２４、３２、４４、５１または６４のアミノ酸配列を含むＶＨの３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域（ＶＨ）；およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７、２８、３９、４８、５７または７１のアミノ酸配列を含むＶＬの３つのＣＤＲを含むＶＬを含む抗体とＣＤ１２３への結合に関して競合する単離された抗体も、提供される。
【００１０】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、８および９のアミノ酸配列を含むＶＨならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８、１９および２０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む単離されたＣＤ１２３抗体も、提供される。
【００１１】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、２５および９のアミノ酸配列を含むＶＨならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８、１９および２０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む単離されたＣＤ１２３抗体も、提供される。
【００１２】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３、３４および３５のアミノ酸配列を含むＶＨならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０、４１および４２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む単離されたＣＤ１２３抗体も、提供される。
【００１３】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３、４５および４６のアミノ酸配列を含むＶＨならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０、４１および４２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む単離されたＣＤ１２３抗体も、提供される。
【００１４】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５２、５３および５４のアミノ酸配列を含むＶＨならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５８、５９および６０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む単離されたＣＤ１２３抗体も、提供される。
【００１５】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６５、６６および６７のアミノ酸配列を含むＶＨならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２、７３および７４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む単離されたＣＤ１２３抗体も、提供される。
【００１６】
ある態様において、本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体は、特定の部位において操作されたアシルドナーグルタミン含有タグ（ａｃｙｌ  ｄｏｎｏｒ  ｇｌｕｔａｍｉｎｅ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｔａｇ）を含むことができる。ある態様において、タグは、Ｑ、ＬＱＧ、ＬＬＱＧＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７）、ＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８）、ＬＳＬＳＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９）、ＧＧＧＬＬＱＧＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０）、ＧＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１）、ＬＬＱ、ＧＳＰＬＡＱＳＨＧＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２）、ＧＬＬＱＧＧＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３）、ＧＬＬＱＧＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８４）、ＧＬＬＱ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８５）、ＬＬＱＬＬＱＧＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６）、ＬＬＱＧＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７）、ＬＬＱＹＱＧＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８）、ＬＬＱＧＳＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８９）、ＬＬＱＹＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９０）、ＬＬＱＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９１）、ＳＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９２）、ＬＬＱＬＱ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９３）、ＬＬＱＬＬＱ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９４）、ＬＬＱＧＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９５）、ＬＬＱＧＰＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９６）、ＬＬＱＧＰＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９７）、ＧＧＬＬＱＧＰＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９８）、ＧＧＬＬＱＧＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９９）、ＬＬＱＧＰＧＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１００）、ＬＬＱＧＰＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０１）、ＬＬＱＧＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０２）、ＬＬＱＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０３）、ＬＬＱＰＧＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０４）、ＬＬＱＡＰＧＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０５）、ＬＬＱＧＡＰＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０６）、ＬＬＱＧＡＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０７）およびＬＬＱＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０８）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むことができる。ある態様において、グルタミン含有タグは、ＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８）である。
【００１７】
ある態様において、本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体は、位置２２２、３４０、または３７０においてアミノ酸改変を含むことができる。ある態様において、アミノ酸改変は、リジンからアルギニンへの置換であることができる。ある態様において、アミノ酸改変は、Ｋ２２２Ｒであることができる。
【００１８】
ある態様において、本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体は、リンカーを含むことができる。ある態様において、リンカーは、切断可能である。ある態様において、リンカーは、Ａｃ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（アセチル−リジン−グリシン）、アミノカプロン酸、Ａｃ−Ｌｙｓ−β−Ａｌａ（アセチル−リジン−β−アラニン）、アミノ−ＰＥＧ２（ポリエチレングリコール）−Ｃ２、アミノ−ＰＥＧ３−Ｃ２、アミノ−ＰＥＧ６−Ｃ２、Ａｃ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ（アセチル−リジン−バリン−シトルリン−ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル）、アミノ−ＰＥＧ６−Ｃ２−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ、アミノカプロイル−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ、［（３Ｒ，５Ｒ）−１−｛３−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］プロパノイル｝ピペリジン−３，５−ジイル］ビス−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ、［（３Ｓ，５Ｓ）−１−｛３−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］プロパノイル｝ピペリジン−３，５−ジイル］ビス−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ、プトレッシンおよびＡｃ−Ｌｙｓ−プトレッシンからなる群から選択されることができる。ある態様において、リンカーは、Ａｃ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ（アセチル−リジン−バリン−シトルリン−ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル）であることができる。
【００１９】
ある態様において、本明細書で記載される抗体は、定常領域を含む。ある態様において、抗体は、ヒト化抗体である。ある態様において、抗体は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２もしくはＩｇＧ２Δａ、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４サブクラスの抗体である。ある態様において、抗体は、ＩｇＧ１抗体である。ある態様において、抗体は、Ｎ６０Ｇ変異を含む。
【００２０】
薬剤にコンジュゲートされた本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体を含むコンジュゲートも、提供される。ある態様において、薬剤は、細胞毒性薬剤、免疫調節剤、イメージング剤、療法的タンパク質、バイオポリマーおよびオリゴヌクレオチドからなる群から選択されることができる。ある態様において、薬剤は、細胞毒性薬剤であることができる。ある態様において、細胞毒性薬剤は、アントラサイクリン、オーリスタチン、カンプトテシン、コンブレタスタチン、ＣＢＩ二量体、シクロプロピルピロロインドリン（ＣＰＩ）二量体、ＣＴＩ二量体、ドラスタチン、デュオカルマイシン、エンジイン、ゲルダナマイシン、インドリノベンゾジアゼピン二量体、メイタンシン、ピューロマイシン、ピロロベンゾジアゼピン二量体、タキサン、ビンカアルカロイド、チューブリシン（ｔｕｂｕｌｙｓｉｎ）、ヘミアステリン、スプライセオスタチン（ｓｐｌｉｃｅｏｓｔａｔｉｎ）、プラジエノライド（ｐｌａｄｉｅｎｏｌｉｄｅ）、ならびに、それらの立体異性体、同配体、類似体または誘導体からなる群から選択されることができる。ある態様において、細胞毒性薬剤は、ＣＰＩ二量体であることができる。ある態様において、ＣＰＩ二量体は、ＣＰＩ−８３１４である。ある態様において、ＣＰＩ二量体は、以下の構造を有することができる：
【００２１】
【化１】
2021500055.tif 000003
【００２２】
。
ある態様において、細胞毒性薬剤は、次のＩＵＰＡＣ名を有することができる：（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−［（３−｛［（１Ｓ）−１−（クロロメチル）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，６−ジヒドロピロロ［３，２−ｅ］インドール−３（２Ｈ）−イル］カルボニル｝ビシクロ［１．１．１］ペンタ−１−イル）カルボニル］−１−メチル−３，６，７，８−テトラヒドロピロロ［３，２−ｅ］インドール−４−イル  二水素  ホスフェート。ある態様において、細胞毒性薬剤は、Ｃ３１Ｈ３１Ｃｌ２Ｎ４Ｏ７Ｐまたは薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物であることができる。ある態様において、細胞毒性薬剤は、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）塩形態：Ｃ３１Ｈ３１Ｃｌ２Ｎ４Ｏ７Ｐ・Ｃ２ＨＦ３Ｏ２であることができる。
【００２３】
他の態様において、細胞毒性薬剤は、ＭＭＡＤ（モノメチルオーリスタチンＤ）、０１０１（２−メチルアラニル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−｛［（１Ｓ）−２−フェニル−１−（１，３−チアゾール−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド）、３３７７（Ｎ，２−ジメチルアラニル−Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−４−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（１Ｓ）−１−カルボキシル−２−フェニルエチル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−２−メトキシ−１−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−４−オキソブチル｝−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド）、０１３１（２−メチル−Ｌ−プロリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（１Ｓ）−１−カルボキシ−２−フェニルエチル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（2-methyl-L-proly-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-carboxy-2-phenylethyl]amino}-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl}-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-N-methyl-L-valinamide））または０１２１（２−メチル−Ｌ−プロリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ）−１−メトキシ−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（2-methyl-L-proly-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-methoxy-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino}-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl}-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-N-methyl-L-valinamide））であることができる。
【００２４】
ある態様において、コンジュゲートは、次の式を含むことができる：抗体−（アシルドナーグルタミン含有タグ）−（リンカー）−（細胞毒性薬剤）。ある態様において、アシルドナーグルタミン含有タグは、アミノ酸配列ＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８）を含むことができ、リンカーは、アセチル−リジン−バリン−シトルリン−ｐ−アミノベンジルオキシカルボニルを含むことができる。ある態様において、アシルドナーグルタミン含有タグは、位置Ｅ２９４〜Ｎ２９７において抗体中に挿入されることができる。ある態様において、コンジュゲートは、さらにＫａｂａｔのＥＵインデックスの番号付けに従って抗体の位置２２２においてリジンからアルギニンへのアミノ酸置換（Ｋ２２２Ｒ）を含むことができる。
【００２５】
療法上有効量の本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体または本明細書で記載されるＣＤ１２３  ＡＤＣおよび薬学的に許容可能なキャリヤーを含む医薬組成物も、提供される。
本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体をコードするヌクレオチド配列を含む単離されたポリヌクレオチドも、提供される。そのようなポリヌクレオチドを含むベクターも、提供される。
【００２６】
本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体のいずれかを組み換え的に産生する、単離された宿主細胞も、提供される。結果として抗体の産生をもたらす条件下でそのような宿主細胞を培養することおよび宿主細胞または培養物から抗体を単離することを含む、抗体を生成する方法も、提供される。
【００２７】
対象においてＣＤ１２３を発現する細胞に関係する症状を処置する方法であって、それを必要とする対象に本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体のいずれかまたは抗体のいずれかのコンジュゲートおよび薬学的に許容可能なキャリヤーを含む療法上有効量の医薬組成物を投与することを含む方法も、提供される。ある態様において、症状は、癌である。ある態様において、癌は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞新生物（ＢＰＤＣＮ）、有毛細胞白血病、Ｂ細胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、多発性骨髄腫、悪性形質細胞新生物、ホジキンリンパ腫、結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫、カーラー病および骨髄腫症、形質細胞白血病、形質細胞腫、Ｂ細胞性前リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、濾胞性リンパ腫、バーキットリンパ腫、辺縁帯リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、大細胞リンパ腫、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、骨髄性白血病、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症（Ｗａｌｄｅｎｓｔｒｏｍ’ｓ  ｍａｃｒｏｇｌｏｂｕｌｉｅｎｅｍｉａ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、粘膜関連リンパ組織リンパ腫、小細胞型リンパ球性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、原発性縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫（ｌｙｍｐｈｏｐｌａｓｍａｃｔｙｉｃ  ｌｙｍｐｈｏｍａ）、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症、結節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、脾臓辺縁帯リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、リンパ腫様肉芽腫症、Ｔ細胞／組織球豊富型大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫、原発性皮膚びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（下肢型）、高齢者のＥＢＶ陽性びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、炎症を伴うびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、ＡＬＫ陽性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、形質芽細胞リンパ腫、ＨＨＶ８関連多中心性キャッスルマン病で生じる大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫およびバーキットリンパ腫の間の中間の特徴を有する未分類のＢ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫および古典的ホジキンリンパ腫の間の中間の特徴を有する未分類のＢ細胞リンパ腫ならびに他のＢ細胞関連リンパ腫からなる群から選択される癌であることができる。ある態様において、癌は、ＡＭＬである。
【００２８】
ＣＤ１２３を発現する悪性細胞を有する対象において腫瘍の成長または進行を抑制する方法であって、それを必要とする対象に本明細書で提供されるＣＤ１２３抗体のいずれかまたは抗体のいずれかのコンジュゲートおよび薬学的に許容可能なキャリヤーを含む療法上有効量の医薬組成物を投与することを含む方法も、提供される。
【００２９】
対象においてＣＤ１２３を発現する悪性細胞の転移を抑制する方法であって、それを必要とする対象に本明細書で提供されるＣＤ１２３抗体のいずれかまたは抗体のいずれかのコンジュゲートおよび薬学的に許容可能なキャリヤーを含む療法上有効量の医薬組成物を投与することを含む方法も、提供される。
【００３０】
ＣＤ１２３を発現する悪性細胞を有する対象において腫瘍の退縮を誘導する方法であって、それを必要とする対象に本明細書で提供されるＣＤ１２３抗体のいずれかまたは抗体のいずれかのコンジュゲートおよび薬学的に許容可能なキャリヤーを含む療法上有効量の医薬組成物を投与することを含む方法も、提供される。
【００３１】
別の側面において、本発明は、それを必要とする対象においてＣＤ１２３発現と関係する症状（例えば癌または自己免疫障害）を処置するための本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む有効量の組成物（例えば医薬組成物）を提供する。ある態様において、有効量の組成物（例えば医薬組成物）は、ＣＤ１２３を発現する悪性細胞を有する対象において腫瘍の成長または進行を抑制するための本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む。ある態様において、それを必要とする対象においてＣＤ１２３を発現する悪性細胞の転移を抑制するための本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む有効量の組成物（例えば医薬組成物）が、提供される。ある態様において、有効量の組成物（例えば医薬組成物）は、ＣＤ１２３を発現する悪性細胞を有する対象において腫瘍の退縮を誘導するための本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む。
【００３２】
別の側面において、本発明は、それを必要とする対象におけるＣＤ１２３発現と関係する症状（例えば癌または自己免疫障害）の処置における使用のための本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを提供する。ある態様において、ＣＤ１２３を発現する悪性細胞を有する対象において腫瘍の成長または進行を抑制するための本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣが、提供される。ある態様において、それを必要とする対象においてＣＤ１２３を発現する悪性細胞の転移を抑制するための本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣが、提供される。ある態様において、ＣＤ１２３を発現する悪性細胞を有する対象において腫瘍の退縮を誘導するための本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣが、提供される。
【００３３】
別の側面において、本発明は、ＣＤ１２３発現と関係する症状（例えば癌または自己免疫障害）を処置するための医薬品の製造における本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの使用を提供する。ある態様において、腫瘍の成長または進行を抑制するための医薬品の製造における本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの使用が、提供される。ある態様において、ＣＤ１２３を発現する悪性細胞の転移を抑制するための医薬品の製造における本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの使用が、提供される。ある態様において、腫瘍の退縮を誘導するための医薬品の製造における本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの使用が、提供される。
【００３４】
本明細書において、抗体をＡｃＬｙｓＶａｌＣｉｔＰＡＢＣ−ＤＭＡＥ−ＣＯ＿ＣＰＩ−０００６３８３１４（ＡｃＬｙｓＰＡＢＣ−ＣＰＩ−８３１４）にコンジュゲートするための方法も、提供される。ある態様において、その方法は、抗体およびＡｃＬｙｓＰＡＢＣ−ＣＰＩ−８３１４を３０〜１００ｍＭ  ＫＰＯ４および１５０〜２００ｍＭ  ＮａＣｌを含む緩衝液中に含む組成物を調製し；細菌性トランスグルタミナーゼを組成物に添加し；そして組成物をインキュベートして抗体のＡｃＬｙｓＰＡＢＣ−ＣＰＩ−８３１４へのコンジュゲーションを可能にすることを含む。ある態様において、組成物のｐＨは、７である。ある態様において、組成物は、抗体１ｍｇあたり０．５〜２単位（Ｕ）の細菌性トランスグルタミナーゼを含む。ある態様において、組成物は、抗体１ｍｇあたり１Ｕの細菌性トランスグルタミナーゼを含む。ある態様において、ＡｃＬｙｓＰＡＢＣ−ＣＰＩ−８３１４は、抗体に対して１０倍モル過剰で存在する。ある態様において、組成物は、連続的に混合しながら２５℃で一夜インキュベートされる。ある態様において、組成物は、さらに７．５％（ｖ／ｖ）のジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含む。ある態様において、緩衝液は、３０ｍＭ  ＫＰＯ４および１５０ｍＭ  ＮａＣｌを含む。ある態様において、緩衝液は、１００ｍＭ  ＫＰＯ４および２００ｍＭ  ＮａＣｌを含む。ある態様において、抗体は、抗腫瘍抗体である。ある態様において、抗腫瘍抗体は、ＣＤ１２３抗体である。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】図１は、ＩＬ−３プラス抗体（“Ａｂ”）で処理された細胞の分析からのウエスタンブロットの結果を示している。７Ｇ３は、ベンチマーク抗体であり、３Ｄ１、１８Ｇ３および１６Ｄ６は、ＣＤ１２３抗体であり；８．８は、ＣＤ１２３に結合しない陰性対照抗体である。ＳＴＡＴ５、リン酸化されたＳＴＡＴ５およびアクチンのレベルが、分析された。
【図２】図２は、ビヒクルまたはＣＤ１２３−ＡＤＣ（ＣＤ１２３−１８Ｇ３−ＣＰＩ）のどちらかによる処置後の動物モデルにおける末梢血（左のグラフ）および骨髄（右のグラフ）中に残存する腫瘍細胞の百分率を示す代表的なフローサイトメトリー分析を示している。
【図３】図３は、示された用量においてビヒクルまたはＣＤ１２３−ＡＤＣのどちらかで処置された動物の生存の長さ（日単位）を要約したグラフを示している。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
本明細書で開示される発明は、ＣＤ１２３（例えばヒトＣＤ１２３）に特異的に結合する抗体および抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を提供する。本発明は、これらの抗体をコードするポリヌクレオチド、これらの抗体を含む組成物ならびにこれらの抗体を作製および使用する方法も提供する。本発明は、対象においてＣＤ１２３発現と関係する障害、例えば癌または自己免疫疾患を処置するための方法も提供する。
【００３７】
一般的技法
本発明の実施は、別途示されない限り、分子生物学（組み換え技法を含む）、微生物学、細胞生物学、生化学および免疫学の従来の技法を用いると考えられ、それは、当業者の技術の範囲内である。そのような技法は、文献、例えば以下の文献において完全に説明されている：Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 第２版(Sambrook et al., 1989) Cold Spring Harbor Press; Oligonucleotide Synthesis (M.J. Gait, 編者, 1984); Methods in Molecular Biology, Humana Press; Cell Biology: A Laboratory Notebook (J.E. Gellis, 編者, 1998) Academic Press; Animal Cell Culture (RI. Freshney, 編者, 1987); Introduction to Cell and Tissue Culture (J.P. Mather and P.E. Roberts, 1998) Plenum Press; Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures (A. Doyle, J.B. Griffiths, and D.G. Newell, 編者, 1993-1998) J. Wiley and Sons; Methods in Enzymology (Academic Press, Inc.); Handbook of Experimental Immunology (D.M. Weir and C.C. Blackwell, 編者); Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells (J.M. Miller and M.P. Calos, 編者, 1987); Current Protocols in Molecular Biology (F .M. Ausubel et al., 編者, 1987); PCR: The Polymerase Chain Reaction, (Mullis et al., 編者, 1994); Current Protocols in Immunology (J.E. Coligan et al., 編者, 1991); Short Protocols in Molecular Biology (Wiley and Sons, 1999); lmmunobiology (C.A. Janeway and P. Travers, 1997); Antibodies (P. Finch, 1997); Antibodies: a practical approach (D. Catty., 編者, IRL Press, 1988-1989); Monoclonal antibodies: a practical approach (P. Shepherd and C. Dean, 編者, Oxford University Press, 2000); Using antibodies: a laboratory manual (E. Harlow and D. Lane (Cold Spring Harbor Laboratory Press), 1999); The Antibodies (M. Zanetti and J.D. Capra, 編者Harwood Academic Publishers, 1995)。
【００３８】
定義
“抗体”は、標的、例えば炭水化物、ポリヌクレオチド、脂質、ポリペプチド等に免疫グロブリン分子の可変領域中に位置する少なくとも１つの抗原認識部位を通して特異的に結合することができる免疫グロブリン分子である。本明細書で用いられる際、その用語は、完全なポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体だけでなく、その抗原結合フラグメント（例えばＦａｂ、Ｆａｂ'、Ｆ（ａｂ'）２、Ｆｖ）、単鎖抗体（ＳｃＦｖ）および単一ドメイン抗体（例えばサメおよびラクダ抗体を含む）ならびに抗体を含む融合タンパク質ならびに抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子のあらゆる他の改変された構成も包含する。抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＡまたはＩｇＭ（またはそのサブクラス）のようなあらゆるクラスの抗体を含み、抗体は、特定のクラスのものである必要はない。その重鎖の定常領域の抗体アミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンは、異なるクラスに割り当てられることができる。免疫グロブリンの５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧおよびＩｇＭが存在し、これらのいくつかは、さらにサブクラス（イソ型）、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２に分けられ得る。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常領域は、それぞれアルファ、デルタ、イプシロン、ガンマおよびミューと呼ばれる。異なるクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造および三次元配置は、周知である。
【００３９】
抗体の“抗原結合フラグメント”または“抗原結合部分”という用語は、本明細書で用いられる際、所与の抗原（例えばＣＤ１２３）に特異的に結合する能力を保持する完全な抗体の１つ以上のフラグメントを指す。抗体の抗原結合機能は、完全な抗体のフラグメントによって実施され得る。抗体の“抗原結合フラグメント”という用語の範囲内に包含される結合フラグメントの例は、Ｆａｂ；Ｆａｂ'；Ｆ（ａｂ'）２；重鎖可変領域（ＶＨ）およびＣＨ１ドメインからなるＦｄフラグメント；抗体の単一のアームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖフラグメント；単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）フラグメント(Ward et al., Nature 341:544-546, 1989)ならびに単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。
【００４０】
標的（例えばＣＤ１２３タンパク質）に“優先的に結合する”または“特異的に結合する”（本明細書において互換的に用いられている）抗体、ＡＤＣまたはポリペプチドは、当該技術で十分に理解されている用語であり、そのような特異的または優先的な結合を決定するための方法も、当該技術で周知である。分子は、それが、特定の細胞または物質と、それが代わりの細胞または物質と反応または会合するよりも頻繁に、より急速に、より大きな持続時間で、および／またはより大きな親和性で反応または会合する場合、“特異的結合”または“優先的結合”を示すと言われる。抗体は、それが、それが他の物質に結合するよりも大きい親和性、結合力で、より容易に、および／またはより大きな持続時間で結合する場合、標的に“特異的に結合する”または“優先的に結合する”。例えば、ＣＤ１２３エピトープに特異的または優先的に結合する抗体は、このエピトープに、それが他のＣＤ１２３エピトープまたは非ＣＤ１２３エピトープに結合するよりも大きい親和性、結合力で、より容易に、および／またはより大きな持続時間で結合する抗体である。この定義を読むことにより、例えば第１標的に特異的または優先的に結合する抗体（または部分もしくはエピトープ）は、第２標的に特異的または優先的に結合することもしないこともできることも、理解される。従って、“特異的結合”または“優先的結合”は、（それは排他的結合を含むことができるが）必ずしも排他的結合を必要としない。一般に、結合への言及は、優先的結合を意味するが、必ず優先的結合を意味するわけではない。
【００４１】
抗体の“可変領域”は、抗体軽鎖の可変領域または抗体重鎖の可変領域を指し、それは単独または組み合わせのどちらでもよい。当該技術で既知であるように、重鎖および軽鎖の可変領域は、それぞれ超可変領域としても知られている３個の相補性決定領域（ＣＤＲ）により連結された４個のフレームワーク領域（ＦＲ）からなる。それぞれの鎖中のＣＤＲは、ＦＲにより近接して一緒に保持されており、他の鎖からのＣＤＲと共に、抗体の抗原結合部位の形成に寄与している。ＣＤＲを決定するための少なくとも２つの技法が存在する：（１）異種間の配列の変動性に基づくアプローチ（すなわち、Kabat et al. Sequences of Proteins of Immunological Interest, (第5版, 1991, 国立衛生研究所、メリーランド州ベセスダ))；および（２）抗原−抗体複合体の結晶学的研究に基づくアプローチ(Al-lazikani et al., 1997, J. Molec. Biol. 273:927-948)。本明細書で用いられる際、ＣＤＲは、どちらかのアプローチにより、または両方のアプローチの組み合わせにより定められたＣＤＲを指すことができる。
【００４２】
可変ドメインの“ＣＤＲ”は、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａの定義、ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａ両方の蓄積、ＡｂＭ、接触、および／もしくは立体構造的定義または当該技術で周知のあらゆるＣＤＲ決定の方法に従って同定される可変領域内のアミノ酸残基である。抗体のＣＤＲは、Ｋａｂａｔらにより最初に定義された超可変領域として同定されることができる。例えば、Kabat et al., 1992, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 第5版、ＮＩＨ公衆衛生局、ワシントンＤ．Ｃを参照。ＣＤＲの位置は、Ｃｈｏｔｈｉａらにより最初に記載された構造的ループ構造として同定されることもできる。例えば、Chothia et al., Nature 342:877-883, 1989を参照。ＣＤＲ同定への他のアプローチは、ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａの間の折衷案であり、Ｏｘｆｏｒｄ  ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェア（現在Ａｃｃｅｌｒｙｓ（登録商標））を用いて得られる“ＡｂＭ定義”、またはMacCallum et al., J. Mol. Biol., 262:732-745, 1996において述べられている観察された抗原接触に基づくＣＤＲの“接触定義”を含む。本明細書においてＣＤＲの“立体構造的定義”と呼ばれる別のアプローチでは、ＣＤＲの位置は、抗原結合にエンタルピー的寄与をする残基として同定されることができる。例えば、Makabe et al., Journal of Biological Chemistry, 283:1156-1166, 2008を参照。さらに他のＣＤＲ境界の定義は、上記のアプローチの１つに厳密には従わない可能性があるが、それでもなおＫａｂａｔ  ＣＤＲの少なくとも一部と重複するであろうが、それらは、特定の残基もしくは残基の群またはさらにはＣＤＲ全体が抗原結合に著しくは影響をおよぼさないという予測または実験的発見を考慮して、短く、または長くなっている可能性がある。本明細書で用いられる際、ＣＤＲは、アプローチの組み合わせを含め、当該技術で既知のあらゆるアプローチにより定められたＣＤＲを指すことができる。本明細書で用いられる方法は、これらのアプローチのいずれかに従って定められたＣＤＲを利用することができる。１つより多くのＣＤＲを含有するあらゆる所与の態様に関して、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、拡張、ＡｂＭ、接触および／または立体構造的定義のいずれに従って定められることもできる。
【００４３】
用語“ポリペプチド”、“オリゴペプチド”、“ペプチド”および“タンパク質”は、本明細書においてあらゆる長さの、好ましくは比較的短い（例えば１０〜１００アミノ酸）アミノ酸の鎖を指すために互換的に用いられている。その鎖は、線状または分枝状であることができ、それは、改変されたアミノ酸を含むことができ、および／または非アミノ酸により遮られることができる。その用語は、天然に、または介入により改変されているアミノ酸鎖も包含する；例えば、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質付加、アセチル化、リン酸化、またはあらゆる他の操作もしくは改変、例えば標識構成要素とのコンジュゲーション。例えば、１個以上のアミノ酸の類似体（例えば非天然アミノ酸等が含まれる）、ならびに当該技術で既知の他の改変を含有するポリペプチドも、その定義内に含まれる。ポリペプチドは、単一の鎖または会合した鎖として存在することができることは、理解されている。
【００４４】
本発明の抗体は、当該技術で周知の技法、例えば組み換え技術、ファージディスプレイ技術、合成技術もしくはそのような技術の組み合わせまたは当該技術で容易に知られている他の技術を用いて生成されることができる（例えば、Jayasena, S.D., Clin. Chem., 45: 1628-50, 1999およびFellouse, F.A., et al, J. MoI. Biol., 373(4):924-40, 2007を参照）。
【００４５】
当該技術で既知であるように、“ポリヌクレオチド”または“核酸”は、本明細書において互換的に用いられているように、あらゆる長さのヌクレオチドの鎖を指し、ＤＮＡおよびＲＮＡを含む。ヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、修飾ヌクレオチドもしくは塩基、および／またはそれらの類似体、またはＤＮＡもしくはＲＮＡポリメラーゼによって鎖の中に組み込まれ得るあらゆる基質であることができる。ポリヌクレオチドは、修飾ヌクレオチド、例えばメチル化されたヌクレオチドおよびそれらの類似体を含むことができる。存在する場合、ヌクレオチド構造に対する改変は、鎖の組み立ての前または後に付与されることができる。ヌクレオチドの配列は、非ヌクレオチド構成要素により遮られることができる。ポリヌクレオチドは、重合後に、例えば標識構成要素とのコンジュゲーションによりさらに改変されることができる。他のタイプの改変は、例えば、“キャップ”、天然存在ヌクレオチドの１つ以上の類似体による置換、ヌクレオチド間改変、例えば非荷電連結（例えばメチルホスホネート類、ホスホトリエステル類、ホスホルアミデート類（ｐｈｏｓｐｈｏａｍｉｄａｔｅｓ）、カルバメート類等）による、および荷電した連結（例えばホスホロチオエート類、ホスホロジチオエート類等）による改変、例えばタンパク質（例えばヌクレアーゼ、毒素、抗体、シグナルペプチド、ポリＬ−リジン等）のようなペンダント部分を含有する改変、インターカレーター（例えばアクリジン、ソラレン等）による改変、キレーター（例えば金属、放射性金属、ホウ素、酸化性金属等）を含有する改変、アルキル化剤を含有する改変、改変された連結（例えばアルファアノマー核酸等）による改変ならびにポリヌクレオチド（単数または複数）の非改変形態を含む。さらに、糖中に通常存在するヒドロキシル基のいずれも、例えばホスホネート基、ホスフェート基により置き換えられる、標準的な保護基により保護される、もしくは追加のヌクレオチドへの追加の連結を用意するために活性化されることができ、または固体支持体にコンジュゲートされることができる。５’および３’末端ＯＨは、リン酸化されていることができ、またはアミンもしくは１〜２０炭素原子の有機性キャッピング基部分により置換されていることもできる。他のヒドロキシルも、標準的な保護基に誘導体化されることができる。ポリヌクレオチドは、例えば２’−Ｏ−メチル−、２’−Ｏ−アリル、２’−フルオロ−または２’−アジド−リボース、炭素環式糖類似体、アルファまたはベータアノマー糖類、エピマー糖類、例えばアラビノース、キシロース類またはリキソース類、ピラノース糖類、フラノース糖類、セドヘプツロース類、非環式類似体および脱塩基ヌクレオシド類似体、例えばメチルリボシドを含む、当該技術で一般的に知られているリボースまたはデオキシリボース糖類の類似形態を含有することもできる。１個以上のホスホジエステル結合が、代替の連結基により置き換えられることができる。これらの代替の連結基は、ホスフェートがＰ（Ｏ）Ｓ（“チオエート”）、Ｐ（Ｓ）Ｓ（“ジチオエート”）、（Ｏ）ＮＲ２（“アミデート”）、Ｐ（Ｏ）Ｒ、Ｐ（Ｏ）ＯＲ’、ＣＯまたはＣＨ２（“ホルムアセタール（ｆｏｒｍａｃｅｔａｌ）”）により置き換えられている態様を含むが、それに限定されず、ここで、それぞれのＲまたはＲ’は、独立してＨ、または場合によりエーテル（−Ｏ−）結合、アリール、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニルもしくはアラルキル（ａｒａｌｄｙｌ）を含有する置換もしくは非置換アルキル（１〜２０Ｃ）である。ポリヌクレオチド中の全部の結合が同一である必要はない。先行する記載は、ＲＮＡおよびＤＮＡを含む本明細書で言及される全てのポリヌクレオチドに適用される。
【００４６】
当技術分野で知られているように、抗体の“定常領域”は、抗体軽鎖の定常領域または抗体重鎖の定常領域（単独または組み合わせの両方）を指す。
本明細書で用いられる際、“実質的に純粋な”は、すなわち少なくとも５０％純粋である（すなわち汚染物質を含まない）、より好ましくは少なくとも９０％純粋である、より好ましくは少なくとも９５％純粋である、さらにもっと好ましくは少なくとも９８％純粋である、最も好ましくは少なくとも９９％純粋である物質を指す。
【００４７】
“宿主細胞”は、ポリヌクレオチド挿入物の組み込みのためのベクター（単数または複数）のためのレシピエントであることができる、またはレシピエントであった個々の細胞または細胞培養物を含む。宿主細胞は、単一の宿主細胞の子孫を含み、その子孫は、天然、偶発的、または故意の変異のため、必ずしも元の親細胞と（形態において、またはゲノムＤＮＡ補体（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ）において）完全に同一ではない可能性がある。宿主細胞は、インビボで本発明のポリヌクレオチド（単数または複数）をトランスフェクションされた細胞を含む。
【００４８】
当該技術で既知であるように、用語“Ｆｃ領域”は、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために用いられる。“Ｆｃ領域”は、天然配列のＦｃ領域またはバリアントのＦｃ領域であることができる。免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は変動し得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、通常は、位置Ｃｙｓ２２６におけるアミノ酸残基から、またはＰｒｏ２３０から、そのカルボキシル末端まで及ぶように定義される。Ｆｃ領域における残基の番号付けは、Ｋａｂａｔ（Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 第5版、国立衛生研究所公衆衛生局、メリーランド州ベセスダ、1991）におけるような、ＥＵ指針の番号付けである。免疫グロブリンのＦｃ領域は、一般に２つの定常領域ＣＨ２およびＣＨ３を含む。
【００４９】
用語“競合する”は、本明細書で抗体に関して用いられる際、第１抗体またはその抗原結合フラグメント（または部分）が、エピトープに、第１抗体のその同族のエピトープとの結合の結果が、第２抗体の存在下で、第２抗体の非存在下での第１抗体の結合と比較して検出可能であるほどに低下するように、第２抗体またはその抗原結合部分の結合に十分に類似した様式で結合することを意味する。しかし、第２抗体のそのエピトープへの結合も、第１抗体の存在下で検出可能であるほどに低下するという代替（ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ）は、必ずしも当てはまらない可能性がある。すなわち、第１抗体は、第２抗体のそのエピトープへの結合を、第２抗体が第１抗体のそのそれぞれのエピトープへの結合を阻害することなく阻害することができる。しかし、それぞれの抗体が、他方の抗体のその同族のエピトープまたはリガンドとの結合を、同程度、より大きい程度、またはより低い程度までのいずれであれ、検出可能であるほどに阻害する場合、その抗体は、それらのそれぞれのエピトープ（単数または複数）の結合に関して互いと“交差競合する”と言われる。競合する、および交差競合する抗体は、両方とも本発明に包含される。そのような競合または交差競合が起こる機序（例えば立体障害、立体構造変化、または共通のエピトープもしくはその一部への結合）にかかわらず、当業者は、本明細書で提供される教示に基づいて、そのような競合する、および／または交差競合する抗体は、本明細書で開示される方法に包含され、そのために有用であり得ることを理解するであろう。
【００５０】
“天然配列Ｆｃ領域”は、天然に存在するＦｃ領域のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。“バリアントＦｃ領域”は、少なくとも１つのアミノ酸改変によって天然配列Ｆｃ領域のアミノ酸配列とは異なるが天然配列Ｆｃ領域の少なくとも１つのエフェクター機能を保持するアミノ酸配列を含む。ある態様において、バリアントＦｃ領域は、天然配列Ｆｃ領域と、または親ポリペプチドのＦｃ領域と比較して少なくとも１つのアミノ酸置換、例えば天然配列Ｆｃ領域中または親ポリペプチドのＦｃ領域中に約１個〜約１０個のアミノ酸置換、好ましくは約１個〜約５個のアミノ酸置換を有する。本明細書におけるバリアントＦｃ領域は、好ましくは天然配列Ｆｃ領域との、および／または親ポリペプチドのＦｃ領域との少なくとも約８０％の配列同一性、最も好ましくはそれとの少なくとも約９０％の配列同一性、より好ましくはそれとの少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％の配列同一性を有するであろう。
【００５１】
本明細書で用いられる際、用語“ＣＤ１２３”は、ＣＤ１２３の活性の少なくとも一部を保持するＣＤ１２３のあらゆる形態およびそのバリアントを指す。ヒトＣＤ１２３への特定の参照によるように、異なることが示されない限り、ＣＤ１２３は、全ての哺乳類種、例えば、ヒト、イヌ、ネコ、ウマおよびウシの天然配列ＣＤ１２３を含む。典型的なＣＤ１２３配列が、表１において示されている。
【００５２】
【表１−１】
2021500055.tif 000004
【００５３】
【表１−２】
2021500055.tif 000005
【００５４】
本明細書で用いられる際、“ＣＤ１２３抗体”は、ＣＤ１２３に特異的に結合し、ＣＤ１２３によって媒介される生物学的活性および／または下流の事象（単数または複数）を調節する抗体を指す。ある態様において、ＣＤ１２３抗体は、アンタゴニスト抗体である。ＣＤ１２３アンタゴニスト抗体は、ＣＤ１２３によって媒介される下流の事象、例えばＩＬ−３結合および／または下流のシグナル伝達、ＳＴＡＴ５のリン酸化ならびに多能性細胞の生存を含むＣＤ１２３の生物学的活性を（有意にを含むあらゆる程度まで）遮断、拮抗、抑制または低減する抗体を包含する。ＣＤ１２３抗体およびＣＤ１２３抗体−薬物コンジュゲート（“ＣＤ１２３  ＡＤＣ”）の例が、本明細書において提供されている。
【００５５】
本明細書で用いられる際、“処置”は、有益なまたは所望の臨床結果を得るためのアプローチである。本発明の目的に関して、有益なまたは所望の臨床結果は、以下の１以上を含むが、それらに限定されない：新生物または癌性細胞の増殖の低減（または破壊）、新生物細胞の転移の抑制、ＣＤ１２３と関係する疾患（例えば癌または自己免疫疾患）の寛解、ＣＤ１２３と関係する疾患（例えば癌または自己免疫疾患）の結果もたらされる症状の減少、ＣＤ１２３と関係する疾患（例えば癌または自己免疫疾患）に罹患している人の生活の質の上昇、ＣＤ１２３と関係する疾患（例えば癌または自己免疫疾患）を処置するために必要とされる他の薬物療法の用量の減少、ＣＤ１２３と関係する疾患（例えば癌または自己免疫疾患）の進行の遅延、ＣＤ１２３と関係する疾患（例えば癌または自己免疫疾患）の治療および／またはＣＤ１２３と関係する疾患（例えば癌または自己免疫疾患）を有する対象の生存期間の延長。
【００５６】
“改善すること”は、ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３ＡＤＣを投与しない場合と比較した１以上の症状の減少または向上を意味する。“改善すること”は、症状の持続時間の短縮または低減も含む。
【００５７】
本明細書で用いられる際、薬物、化合物または医薬組成物の“有効投与量”または“有効量”は、あらゆる１以上の有益な、または所望の療法的結果を達成するために十分な量である。予防的使用に関して、有益な結果または所望の結果は、疾患の生化学的、組織学的および／または行動上の症状、その合併症ならびに疾患の発現の間に存在する中間的な病理学的表現型を含む疾患の危険性を排除もしくは低減すること、その重症度を低下させること、またはその開始を遅らせることを含む。療法的使用に関して、有益な結果または所望の結果は、様々なＣＤ１２３と関係する疾患もしくは症状（例えば、限定ではなく、癌）の１以上の症状の発生率の低減もしくは改善、疾患を処置するために必要とされる他の薬物療法の用量の減少、別の薬物療法の作用の増進、および／または対象のＣＤ１２３と関係する疾患の進行の遅延のような臨床的結果を含む。有効投与量は、１回以上の投与において投与されることができる。本発明の目的に関して、薬物、化合物、または医薬組成物の有効投与量は、予防的または療法的処置を（直接または間接的のどちらでも）成し遂げるために十分な量である。臨床的文脈において理解される際、薬物、化合物、または医薬組成物の有効投与量は、別の薬物、化合物、または医薬組成物と合わせて達成される可能性があり、またはそうでない可能性もある。従って、“有効投与量”は、１種類以上の療法剤を投与する文脈において考えられることができ、単剤は、１種類以上の他の薬剤と合わせて望ましい結果が達成され得る、または達成される場合に、有効量で与えられていると考えられることができる。
【００５８】
“個体”または“対象”は、哺乳類、より好ましくはヒトである。哺乳類は、家畜、スポーツ用動物、ペット、霊長類、ウマ、イヌ、ネコ、マウスおよびラットも含むが、それらに限定されない。
【００５９】
本明細書で用いられる際、“ベクター”は、宿主細胞において対象の１以上の遺伝子（単数または複数）または配列（単数または複数）を送達する、好ましくは発現することができるコンストラクトを意味する。ベクターの例は、ウイルスベクター、ネイキッドＤＮＡまたはＲＮＡ発現ベクター、プラスミド、コスミドまたはファージベクター、陽イオン性凝縮剤と会合したＤＮＡまたはＲＮＡ発現ベクター、リポソーム中に封入されたＤＮＡまたはＲＮＡ発現ベクター、および特定の真核細胞、例えばプロデューサー細胞を含むが、それらに限定されない。
【００６０】
本明細書で用いられる際、“発現制御配列”は、核酸の転写を方向付ける核酸配列を意味する。発現制御配列は、プロモーター、例えば構成的もしくは誘導性プロモーター、またはエンハンサーであることができる。発現制御配列は、転写されるべき核酸配列に作動的に（ｏｐｅｒａｂｌｙ）連結されている。
【００６１】
本明細書で用いられる際、“薬学的に許容可能なキャリヤー”または“薬学的に許容可能な賦形剤”は、有効成分と組み合わせられた際にその成分が生物学的活性を保持することを可能にし、かつ対象の免疫系と非反応性であるあらゆる材料を含む。例は、標準的な医薬用キャリヤー、例えばリン酸緩衝生理食塩水溶液、水、エマルジョン、例えば油／水エマルジョン、および様々なタイプの湿潤剤の全てを含むが、それらに限定されない。エアロゾルまたは非経口投与に関する好ましい希釈剤は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）または正常（０．９％）生理食塩水である。そのようなキャリヤーを含む組成物は、周知の従来の方法により配合される（例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, 第18版, A. Gennaro, 編者, Mack Publishing Co., Easton, PA, 1990;およびRemington, The Science and Practice of Pharmacy 第21版 Mack Publishing, 2005を参照）。
【００６２】
用語“アシルドナーグルタミン含有タグ”または“グルタミンタグ”は、本明細書で用いられる際、トランスグルタミナーゼのアミンアクセプターの役目を果たす１個以上のＧｌｎ残基（単数または複数）を含有するポリペプチドまたはタンパク質を指す。例えば、国際公開第２０１２０５９８８２号および国際公開第２０１５０１５４４８号を参照、それは、参照によりそのまま本明細書に援用される。
【００６３】
用語“ｋｏｎ”は、本明細書で用いられる際、抗体の抗原に対する会合に関する速度定数を指す。具体的には、速度定数（ｋｏｎおよびｋｏｆｆ）および平衡解離定数が、ＩｇＧおよびＣＤ１２３タンパク質（例えばＣＤ１２３−Ｆｃ融合タンパク質）を用いて測定される。
【００６４】
用語“ｋｏｆｆ”は、本明細書で用いられる際、抗体の抗体／抗原複合体からの解離に関する速度定数を指す。
用語“ＫＤ”は、本明細書で用いられる際、抗体−抗原相互作用の平衡解離定数を指す。
【００６５】
本明細書における“約”値またはパラメーターへの言及は、その値またはパラメーター自体に向けられている態様を含む（および記載する）。例えば、“約Ｘ”に言及する記載は、“Ｘ”の記載を含む。数値範囲は、範囲を定める数値を含む。
【００６６】
本明細書で用いられる際、ＣＰＩは、１，２，８，８，８ａ−テトラヒドロシクロプロパ［ｃ］ピロロロ［３，２−ｅ］インドール−４（５Ｈ）−オンまたはその置換もしくは誘導体化された形態を指す。ＣＰＩは、８−（クロロメチル）−１−メチル−３，６，７，８−テトラヒドロピロロ［３，２−ｅ］インドール−４−オールとしても知られているＣＰＩのセコ形態（ｓｅｃｏ  ｆｏｒｍ）もしくはセコ−ＣＰＩまたはその置換もしくは誘導体化された形態（単数または複数）も指すことができる。
【００６７】
本明細書において態様が言語“含んでいる”と共に記載されている箇所ではどこでも、“からなる”および／または“から本質的になる”の用語で記載される他の点で類似の態様も提供されていることは、理解されている。
【００６８】
本発明の側面または態様がマーカッシュ群または代替物の他のグループ分けの観点から記載されている場合、本発明は、全体として列挙されている群全体だけでなく、群の各メンバーを個々に包含し、そして主な群のすべての可能な部分群を包含するだけでなく、群のメンバーの１つ以上を欠いた主な群も包含する。本発明は、特許請求される発明における群のメンバーのいずれかの１つ以上の明示的な除外も想定している。
【００６９】
別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術の当業者により一般的に理解されている意味と同じ意味を有する。矛盾する場合には、定義を含む本明細書が支配するであろう。本明細書および特許請求の範囲全体を通して、語“含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）”またはバリエーション、例えば“含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）”もしくは“含むこと”は、記載された整数または整数の群を含むことを暗に示すが、他の整数または整数の群を除外することを暗に示すことは一切ないことは、理解されるであろう。文脈によって別途要求されない限り、単数形の用語は複数形を含むものとし、複数形の用語は単数形を含むものとする。
【００７０】
典型的な方法および材料が本明細書において記載されているが、本明細書で記載された方法および材料と類似の、または均等な方法および材料も、本発明の実施または試験において使用されることができる。材料、方法、および例は、説明的なものであり、限定することを意図したものではない。
【００７１】
ＣＤ１２３抗体および抗体−薬物コンジュゲート
本発明は、ＣＤ１２３（例えばヒトＣＤ１２３（例えばＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１））に結合する抗体および抗ＣＤ１２３抗体を含むコンジュゲート（例えば抗体−薬物コンジュゲートまたはＡＤＣ）を提供し、それは、以下の特徴のいずれか１つ以上により特性付けられる：（ａ）対象においてＣＤ１２３を発現する悪性細胞と関係する症状（例えば癌、例えば、限定ではなく、ＡＭＬ、Ｂ−ＡＬＬ、ＨＣＬ等）の１つ以上の症状を処置、予防、改善する；（ｂ）（ＣＤ１２３を発現する悪性腫瘍を有する）対象における腫瘍の成長または進行を抑制する；（ｃ）（ＣＤ１２３を発現する１個以上の悪性細胞を有する）対象におけるＣＤ１２３を発現する癌（悪性）細胞の転移を抑制する；（ｄ）ＣＤ１２３を発現する腫瘍の退縮（例えば長期退縮）を誘導する；および（ｅ）ＣＤ１２３を発現する悪性細胞において細胞毒性活性を発揮する。
【００７２】
本発明において有用な抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体フラグメント（例えばＦａｂ、Ｆａｂ'、Ｆ（ａｂ'）２、Ｆｖ、Ｆｃ等）、キメラ抗体、二重特異性抗体、ヘテロコンジュゲート抗体、単鎖（ＳｃＦｖ）、その変異体、抗体部分を含む融合タンパク質（例えばドメイン抗体）、ヒト化抗体、ならびに要求される特異性の抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子のあらゆる他の改変された構成（抗体のグリコシル化バリアント、抗体のアミノ酸配列バリアントおよび共有結合的に改変された抗体を含む）を包含し得る。抗体は、マウス由来、ラット由来、ヒト由来またはあらゆる他の由来（キメラ抗体またはヒト化抗体を含む）であることができる。ある態様において、本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体は、モノクローナル抗体である。例えば、ＣＤ１２３抗体は、ヒト化モノクローナル抗体、ヒト抗体またはキメラモノクローナル抗体であることができる。
【００７３】
ある態様において、抗体は、例えば、限定ではなく、免疫応答を誘発する増大した可能性を有する定常領域のような、改変された定常領域を含むことができる。例えば、定常領域は、例えばＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＡまたはＦｃγＩＩＩのようなＦｃガンマ受容体に対する増大した親和性を有するように改変されていることができる。ある態様において、抗体は、免疫学的に不活性である、すなわち免疫応答を誘発する低減した可能性を有する定常領域を含むことができる。ある態様において、定常領域は、Eur. J. Immunol., 29:2613-2624, 1999；ＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＧＢ９９／０１４４１号；および／または英国特許出願第９８０９９５１８号において記載されているように改変される。Ｆｃは、ヒトＩｇＧ１、ヒトＩｇＧ２、ヒトＩｇＧ３またはヒトＩｇＧ４であることができる。Ｆｃは、Ａ３３０Ｐ３３１→Ｓ３３０Ｓ３３１の変異を含有するヒトＩｇＧ２（ＩｇＧ２Δａ）であることができ、ここで、アミノ酸残基は、野生型ＩｇＧ２配列を参照して番号付けされている。Eur. J. Immunol., 29:2613-2624, 1999。ある態様において、抗体は、以下の変異：(Armour et al., Molecular Immunology 40 585-593, 2003): Ｅ２３３Ｆ２３４Ｌ２３５→Ｐ２３３Ｖ２３４Ａ２３５を含むＩｇＧ４の定常領域（ＩｇＧ４Δｃ）を含み、ここで、番号付けは、野生型ＩｇＧ４を参照している。さらに別の態様において、Ｆｃは、欠失Ｇ２３６を伴なうヒトＩｇＧ４  Ｅ２３３Ｆ２３４Ｌ２３５→Ｐ２３３Ｖ２３４Ａ２３５（ＩｇＧ４Δｂ）である。別の態様において、Ｆｃは、ヒンジ安定化変異Ｓ２２８→Ｐ２２８を含有するあらゆるヒトＩｇＧ４  Ｆｃ（ＩｇＧ４、ＩｇＧ４ΔｂまたはＩｇＧ４Δｃ）である(Aalberse et al., Immunology 105, 9-19, 2002)。別の態様において、Ｆｃは、脱グリコシル化Ｆｃであることができる。
【００７４】
ある態様において、定常領域は、定常領域中のグリコシル化認識配列の一部であるオリゴ糖付着残基（例えばＡｓｎ２９７）および／または隣接する残基を変異させることによって脱グリコシル化されることができる。ある態様において、定常領域は、Ｎ連結型グリコシル化に関して酵素的に脱グリコシル化される。定常領域は、Ｎ連結型グリコシル化に関して酵素的に、またはグリコシル化欠損宿主細胞中での発現により脱グリコシル化されることができる。
【００７５】
ＣＤ１２３に対する抗体の結合親和性を決定する１つの方法は、抗体の単機能性Ｆａｂフラグメントの結合親和性を測定することによる。単機能性Ｆａｂフラグメントを得るために、抗体（例えばＩｇＧ）は、パパインで切断される、または組換え的に発現されることができる。抗体のＣＤ１２３  Ｆａｂフラグメントの親和性は、泳動緩衝液（０．０１Ｍ  ＨＥＰＥＳ，ｐＨ  ７．４，０．１５  ＮａＣｌ，３ｍＭ  ＥＤＴＡ，０．００５％  ｖ／ｖ  界面活性剤Ｐ２０）を用いて、予め固定されたストレプトアビジンセンサーチップ（ＳＡ）または抗マウスＦｃもしくは抗ヒトＦｃを備えた表面プラズモン共鳴（Ｂｉａｃｏｒｅ（商標）３０００（商標）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）システム，Ｂｉａｃｏｒｅ（商標），ＩＮＣ，ニュージャージー州ピスカタウェイ）によって決定されることができる。ビオチン化またはＦｃ融合ヒトＣＤ１２３は、ＨＢＳ−ＥＰ緩衝液中に０．５μｇ／ｍＬ未満の濃度まで希釈され、２つの範囲の抗原密度（詳細な速度論的研究のための５０〜２００応答単位（ＲＵ）またはスクリーニングアッセイのための８００〜１，０００ＲＵのどちらか）を達成するために可変接触時間を用いて個々のチップチャンネルにわたって注入されることができる。再生研究は、２５％ｖ／ｖエタノール中２５ｍＭ  ＮａＯＨは結合したＦａｂを効果的に除去する一方で２００回を超える注入に関してチップ上のＣＤ１２３の活性を維持することを示している。典型的には、精製されたＦａｂ試料の系列希釈物（０．１〜１０×推定されるＫＤの濃度に及ぶ）が、１００μＬ／分で１分間注入され、２時間に至るまでの解離時間が、可能になる。Ｆａｂタンパク質の濃度は、既知の濃度（アミノ酸分析によって決定される）のＦａｂを標準として用いて、ＥＬＩＳＡおよび／またはＳＤＳ−ＰＡＧＥ電気泳動によって決定される。速度論的会合速度（ｋｏｎ）および解離速度（ｋｏｆｆ）は、データを１：１  ラングミュア結合モデル（Karlsson, R. Roos, H. Fagerstam, L. Petersson, B. (1994). Methods Enzymology 6. 99-110）にＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎプログラムを用いて全体的に当てはめることにより同時に得られる。平衡解離定数（ＫＤ）の値は、ｋｏｆｆ／ｋｏｎとして計算される。このプロトコルは、ヒトＣＤ１２３、別の哺乳類のＣＤ１２３（例えばマウスＣＤ１２３、ラットＣＤ１２３または霊長類ＣＤ１２３）ならびにＣＤ１２３の異なる形態（例えばグリコシル化ＣＤ１２３）を含むあらゆるＣＤ１２３に対する抗体の結合親和性の決定における使用に適している。抗体の結合親和性は、一般に２５℃で測定されるが、３７℃で測定されることもできる。本明細書で記載されるようなＣＤ１２３抗体のＣＤ１２３（例えばヒトＣＤ１２３（例えば（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）に対する結合親和性（ＫＤ）は、約０．００２ｎＭ〜約６５００ｎＭであり得る。ある態様において、結合親和性は、約６５００ｎｍ、６０００ｎｍ、５９８６ｎｍ、５５６７ｎｍ、５５００ｎｍ、４５００ｎｍ、４０００ｎｍ、３５００ｎｍ、３０００ｎｍ、２５００ｎｍ、２１３４ｎｍ、２０００ｎｍ、１５００ｎｍ、１０００ｎｍ、７５０ｎｍ、５００ｎｍ、４００ｎｍ、３００ｎｍ、２５０ｎｍ、２００ｎＭ、１９３ｎＭ、１００ｎＭ、９０ｎＭ、５０ｎＭ、４５ｎＭ、４０ｎＭ、３５ｎＭ、３０ｎＭ、２５ｎＭ、２０ｎＭ、１９ｎＭ、１８ｎＭ、１７ｎＭ、１６ｎＭ、１５ｎＭ、１０ｎＭ、８ｎＭ、７．５ｎＭ、７ｎＭ、６．５ｎＭ、６ｎＭ、５．５ｎＭ、５ｎＭ、４ｎＭ、３ｎＭ、２ｎＭ、１ｎＭ、０．５ｎＭ、０．３ｎＭ、０．１ｎＭ、０．０１ｎＭまたは０．００２ｎＭのいずれかである。ある態様において、結合親和性は、約６５００ｎｍ、６０００ｎｍ、５５００ｎｍ、５０００ｎｍ、４０００ｎｍ、３０００ｎｍ、２０００ｎｍ、１０００ｎｍ、９００ｎｍ、８００ｎｍ、２５０ｎＭ、２００ｎＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭ、３０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、７．５ｎＭ、７ｎＭ、６．５ｎＭ、６ｎＭ、５ｎＭ、４．５ｎＭ、４ｎＭ、３．５ｎＭ、３ｎＭ、２．５ｎＭ、２ｎＭ、１．５ｎＭ、１ｎＭまたは０．５ｎＭのいずれかより小さい。
【００７６】
本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体は、当該技術で知られているあらゆる方法により作製されることができる。ハイブリドーマ細胞株の生成に関して、宿主動物の免疫処置の経路およびスケジュールは、一般に、本明細書においてさらに記載されるような抗体の刺激および産生のための確立された従来の技法に合わせる。ヒトおよびマウス抗体の産生のための一般的な技法は、当該技術で知られている、および／または本明細書で記載されている。
【００７７】
ある態様において、ＣＤ１２３抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、２４、３２、４４、５１または６４のアミノ酸配列を含むＶＨの３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含むことができる。本発明のある側面において、抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７、２８、３９、４８、５７または７１のアミノ酸配列を含むＶＬの３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。本発明のある側面において、抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、２４、３２、４４、５１または６４のアミノ酸配列を含むＶＨの３つのＣＤＲを含むＶＨおよびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７、２８、３９、４８、５７または７１のアミノ酸配列を含むＶＬの３つのＣＤＲを含むＶＬを含む。他の態様において、ＣＤ１２３抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、８および９のアミノ酸配列を含むＶＨならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８、１９および２０のアミノ酸配列を含むＶＬを含むことができる。他の態様において、ＣＤ１２３抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、２５および９のアミノ酸配列を含むＶＨならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８、１９および２０のアミノ酸配列を含むＶＬを含むことができる。他の態様において、ＣＤ１２３抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３、３４および３５のアミノ酸配列を含むＶＨならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０、４１および４２のアミノ酸配列を含むＶＬを含むことができる。他の態様において、ＣＤ１２３抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３、４５および４６のアミノ酸配列を含むＶＨならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０、４１および４２のアミノ酸配列を含むＶＬを含むことができる。他の態様において、ＣＤ１２３抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５２、５３および５４のアミノ酸配列を含むＶＨならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５８、５９および６０のアミノ酸配列を含むＶＬを含むことができる。他の態様において、ＣＤ１２３抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６５、６６および６７のアミノ酸配列を含むＶＨならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２、７３および７４のアミノ酸配列を含むＶＬを含むことができる。
【００７８】
代表的なＣＤ１２３抗体重鎖可変領域および軽鎖可変領域は、それぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、２４、３２、４４、５１および６４ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７、２８、３９、４８、５７および７１のアミノ酸配列を含むことができる。代表的なＣＤ１２３抗体の重鎖および軽アミノ鎖（ｌｉｇｈｔ  ａｍｉｎｏ  ｃｈａｉｎｓ）は、それぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５、２７、３７、４７、５５および６９ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３、３０、４３、４９、６２および７６のアミノ酸配列を含むことができる。代表的なＣＤ１２３抗体の配列が、表２．０において示されている。
【００７９】
【表２】
2021500055.tif 000006
【００８０】
本明細書で提供される典型的なＣＤ１２３抗体は、表２．１において示されている１８Ｇ３、ヒト化１８Ｇ３（ｈ１８Ｇ３）、１６Ｄ６、ヒト化１６Ｄ６（ｈ１６Ｄ６）、３Ｄ１および２０Ｄ７を含む。表２．１において示されている配列は、別途示されない限りアミノ酸配列である。
【００８１】
【表３−１】
2021500055.tif 000007
【００８２】
【表３−２】
2021500055.tif 000008
【００８３】
【表３−３】
2021500055.tif 000009
【００８４】
【表３−４】
2021500055.tif 000010
【００８５】
【表３−５】
2021500055.tif 000011
【００８６】
【表３−６】
2021500055.tif 000012
【００８７】
【表３−７】
2021500055.tif 000013
【００８８】
置換バリアントは、抗体分子中の少なくとも１個のアミノ酸残基が除去され、その位置に異なる残基が挿入されている。置換変異誘発に関する最も興味深い部位は、超可変領域を含むが、フレームワークの変更も、考えられる。保存的置換は、表３において“保存的置換”の見出しの下に示されている。そのような置換が結果として生物学的活性における変化をもたらす場合、表３において“典型的な置換”と呼ばれている、または以下でさらにアミノ酸のクラスを参照して記載されるような、より実質的な変更が、導入されることができ、そしてその生成物が、スクリーニングされることができる。
【００８９】
【表４】
2021500055.tif 000014
【００９０】
抗体の生物学的特性における実質的な改変は、（ａ）例えばβシートもしくはらせん状の立体構造のような、置換の領域におけるポリペプチド骨格の構造、（ｂ）標的部位における分子の電荷もしくは疎水性、または（ｃ）側鎖のかさ（ｂｕｌｋ）の維持へのそれらの作用において有意に異なる置換を選択することによって成し遂げられる。天然に存在する残基は、共通の側鎖特性に基づいて群に分けられる：
（１）非極性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）電荷を有しない極性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性（負に荷電している）：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性（正に荷電している）：Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖の配向に影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；および
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ。
【００９１】
非保存的置換は、これらのクラスの１つのメンバーを別のクラスのメンバーに交換することによってなされる。
なされ得る置換の１つのタイプは、例えば化学的に反応性であり得る抗体中の１個以上のシステインを別の残基、例えば（限定ではなく）アラニンまたはセリンに変更することである。例えば、非カノニカルシステインの置換が、あり得る。置換は、可変ドメインのＣＤＲまたはフレームワーク領域中または抗体の定常領域中でなされ得る。ある態様において、システインは、カノニカルである。抗体の適切な立体構造の維持に関与しないあらゆるシステイン残基も、一般に、分子の酸化的安定性を向上させ、異常な架橋を防ぐために、セリンで置換されることができる。逆に、特に抗体がＦｖフラグメントのような抗体フラグメントである場合、システイン結合（単数または複数）が、抗体に、その安定性を向上させるために追加されることができる。
【００９２】
本発明は、本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体の、またはその抗原結合フラグメントのコンジュゲートも提供し、ここで、抗体は、直接またはリンカーを介して間接的にのどちらかで、標的化免疫療法のための薬剤（例えば細胞毒性薬剤）にコンジュゲートされている（例えば抗体−薬物コンジュゲートまたはＡＤＣ）。例えば、細胞毒性薬剤は、細胞毒性薬剤部分の腫瘍（例えばＣＤ１２３を発現している腫瘍）への標的化された局所送達のために、本明細書で記載されているようにそのＣＤ１２３抗体に連結またはコンジュゲートされることができる。
【００９３】
細胞毒性薬剤または他の療法剤を抗体にコンジュゲートするための方法は、様々な刊行物において記載されている。例えば、化学修飾が、抗体において、リジン側鎖アミンによるかまたは鎖間ジスルフィド結合を還元することによって活性化されたシステインスルフヒドリル基によるかのどちらかで、コンジュゲーション反応が起こるためになされることができる。例えば、Tanaka et al., FEBS Letters 579:2092-2096, 2005およびGentle et al., Bioconjugate Chem. 15:658-663, 2004を参照。定められた化学量論を有する特定の薬物のコンジュゲーションのために抗体の特定の部位において操作された反応性システイン残基も、記載されている。例えば、Junutula et al., Nature Biotechnology, 26:925-932, 2008を参照。トランスグルタミナーゼおよびアミン（例えば反応性アミンを含むかまたは反応性アミンに取り付けられた細胞毒性薬剤）の存在下でアシルドナーグルタミン含有タグまたはポリペプチド操作により反応性にされた内因性グルタミン（すなわち、アシルドナーとして共有結合を形成する能力）を用いるコンジュゲーションも、国際公開第２０１２／０５９８８２号および第２０１５０１５４４８号において記載されており、それは、参照により本明細書にそのまま援用される。トランスグルタミナーゼは、タンパク質−グルタミンγ−グルタミルトランスフェラーゼ（ＥＣ  ２．３．２．１３）であり、それは、典型的にはリジン残基を有するグルタミン残基のｐＨ依存性トランスアミド化を触媒する。本明細書で記載される発明で使用されるトランスグルタミナーゼは、様々な源から得られるかもしくは作製されることができ、または１個以上の内因性グルタミン残基の１個以上のリジン残基もしくは１個以上の反応性アミンを含有するアミンドナー薬剤とのアミド基転移を触媒するように操作されることができる。トランスグルタミナーゼを使用してＡＤＣを調製するための方法は、例えば本明細書に参照によりそのまま援用される米国特許出願公開第２０１７００４３０３３号において記載されている。
【００９４】
ＡＤＣは、典型的にはリンカーの使用により薬剤にコンジュゲートされた抗体構成要素を含む。ある態様において、本明細書で開示されるＡＤＣは、操作されたグルタミン含有タグ、内因性グルタミン（すなわち、操作なしの天然グルタミン、例えば可変ドメイン、ＣＤＲ等中の天然グルタミン）および／または反応性内因性グルタミンを介してアミンドナー薬剤（例えばアミンドナー単位を有するリンカーに結合した小分子）に部位特異的にコンジュゲートされた抗体を含む。
【００９５】
内因性グルタミンは、抗体中の１個以上のアミノ酸（単数または複数）を、酵素的脱グリコシル化により、または操作されたトランスグルタミナーゼと反応させることにより改変（例えばアミノ酸欠失、挿入、置換または変異）することにより、反応性（すなわち、アミンおよびトランスグルタミナーゼの存在下でアシルドナーとして共有結合を形成する能力）にされることができる。従って、一側面において、式：抗体−（Ｔ−（Ｘ−Ｙ−Ｚａ）ｂ）ｃを含む抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）が、提供され、ここで、Ｔは、１）特定の部位で操作されたグルタミン含有タグ、２）内因性グルタミン、および／または３）抗体操作または操作されたトランスグルタミナーゼによって反応性にされた内因性グルタミンであり；Ｘは、アミンドナー単位であり；Ｙは、リンカーであり；そしてＺは、薬剤部分であり；Ｘ−Ｙ−Ｚは、グルタミン含有タグ、内因性グルタミンおよび／または反応性内因性グルタミンに部位特異的にコンジュゲートされたアミンドナー薬剤であり；ａは、１〜６の整数であり；ｂは、１〜６の整数であり；ｃは、１〜２０の整数であり；そしてここで、ａ、ｂおよびｃの積（薬物抗体比）は、少なくとも約１である。グルタミン含有タグ、内因性グルタミンおよび／または抗体上の反応性グルタミンならびに本明細書で記載されるアミンドナー薬剤（Ｘ−Ｙ−Ｚ）の両方が、トランスグルタミナーゼに関する基質であり、グルタミン含有タグおよび／または内因性／反応性グルタミンならびにアミンドナー薬剤の間の連結は、式ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯ−ＮＨ−の連結であり、ここで、ＮＨ−は、リンカーおよび薬剤部分に連結されている。
【００９６】
ある態様において、本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはコンジュゲートは、抗体の特定の部位（例えばカルボキシル末端、アミノ末端またはＣＤ１２３抗体中の別の部位）において操作されたアシルドナーグルタミン含有タグを含む。ある態様において、タグは、アミノ酸グルタミン（Ｑ）またはアミノ酸配列ＬＱＧ、ＬＬＱＧＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７）、ＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８）、ＬＳＬＳＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９）、ＧＧＧＬＬＱＧＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０）、ＧＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１）、ＬＬＱ、ＧＳＰＬＡＱＳＨＧＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２）、ＧＬＬＱＧＧＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３）、ＧＬＬＱＧＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８４）、ＧＬＬＱ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８５）、ＬＬＱＬＬＱＧＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６）、ＬＬＱＧＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７）、ＬＬＱＹＱＧＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８）、ＬＬＱＧＳＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８９）、ＬＬＱＹＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９０）、ＬＬＱＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９１）、ＳＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９２）、ＬＬＱＬＱ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９３）、ＬＬＱＬＬＱ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９４）、ＬＬＱＧＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９５）、ＬＬＱＧＰＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９６）、ＬＬＱＧＰＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９７）、ＧＧＬＬＱＧＰＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９８）、ＧＧＬＬＱＧＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９９）、ＬＬＱＧＰＧＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１００）、ＬＬＱＧＰＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０１）、ＬＬＱＧＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０２）、ＬＬＱＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０３）、ＬＬＱＰＧＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０４）、ＬＬＱＡＰＧＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０５）、ＬＬＱＧＡＰＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０６）、ＬＬＱＧＡＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０７）およびＬＬＱＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０８）を含む。
【００９７】
ある態様において、アシルドナーグルタミン含有タグは、例えば抗体重鎖中のアミノ酸残基Ｅ２９４〜Ｎ２９７を置き換えるＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８）を含む。
アシルドナーグルタミン含有タグおよび抗体の位置２２２、３４０または３７０（ＥＵ番号付けスキーム）におけるアミノ酸改変を含む単離された抗体も、提供され、ここで、その改変は、アミノ酸の削除、挿入、置換、変異またはそれらのあらゆる組み合わせである。ある態様において、アミノ酸改変は、リジンからアルギニンへの置換である（例えばＫ２２２Ｒ、Ｋ３４０ＲまたはＫ３７０Ｒ）。
【００９８】
本発明のＣＤ１２３抗体または抗原結合フラグメントにコンジュゲートされることができる薬剤は、細胞毒性薬剤、免疫調節剤、イメージング剤、療法用タンパク質、生体高分子またはオリゴヌクレオチドを含むが、それらに限定されない。
【００９９】
細胞毒性薬剤の例は、アントラサイクリン、オーリスタチン、ドラスタチン、コンブレタスタチン、デュオカルマイシン、ピロロベンゾジアゼピン二量体、インドリノベンゾジアゼピン二量体、エンジイン、ゲルダナマイシン、メイタンシン、ピューロマイシン、タキサン、ビンカアルカロイド、カンプトテシン、チューブリシン（ｔｕｂｕｌｙｓｉｎ）、ヘミアステリン、スプライセオスタチン（ｓｐｌｉｃｅｏｓｔａｔｉｎ）、プラジエノライド（ｐｌａｄｉｅｎｏｌｉｄｅ）、ならびに、それらの立体異性体、同配体、類似体または誘導体を含むが、それらに限定されない。
【０１００】
ある側面において、薬物／薬剤は、シクロプロピルピロロインドリン（ＣＰＩ）二量体、ＣＴＩ二量体またはＣＢＩ二量体である。ＣＰＩ二量体は、鎖間ＤＮＡ架橋および強力な細胞毒性を誘導する。参照により本明細書にそのまま援用されるＰＣＴ国際公開第２０１５／１１０９３５号は、本発明のＣＤ１２３  ＡＤＣにおいて有用であるＣＰＩおよびＣＢＩダイマーを開示しており、ＣＰＩダイマーおよびＣＢＩダイマーを生成する方法を提供している。例えば、薬剤（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−［（３−｛［（１Ｓ）−１−（クロロメチル）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，６−ジヒドロピロロ［３，２−ｅ］インドール−３（２Ｈ）−イル］カルボニル｝ビシクロ［１．１．１］ペンタ−１−イル）カルボニル］−１−メチル−３，６，７，８−テトラヒドロピロロ［３，２−ｅ］インドール−４−イル  二水素ホスフェート（“ＣＰＩ−８３１４二量体”としても知られている）は、構造：
【０１０１】
【化２】
2021500055.tif 000015
【０１０２】
を有し、式Ｃ３１Ｈ３１Ｃｌ２Ｎ４Ｏ７Ｐを有する。
アントラサイクリン類は、細菌ストレプトマイセス属（Ｓｔｒｅｐｏｍｙｃｅｓ）に由来し、白血病、リンパ腫、乳癌、子宮癌、卵巣癌および肺癌のような広い範囲の癌を処置するために使用されてきた。典型的なアントラサイクリン類は、ダウノルビシン、ドキソルビシン（すなわちアドリアマイシン）、エピルビシン、イダルビシン、バルルビシンおよびミトキサントロンを含むが、それらに限定されない。
【０１０３】
ドラスタチン類、ならびにそれらのペプチド性類似体および誘導体であるオーリスタチン類は、抗癌および抗真菌活性を有することが示されている非常に強力な抗有糸分裂剤である。例えば、米国特許第５，６６３，１４９号およびPettit et al., Antimicrob. Agents Chemother. 42:2961-2965, 1998を参照。典型的なドラスタチン類およびオーリスタチン類は、ドラスタチン１０、オーリスタチンＥ、オーリスタチンＥＢ（ＡＥＢ）、オーリスタチンＥＦＰ（ＡＥＦＰ）、ＭＭＡＤ（モノメチルオーリスタチンＤまたはモノメチルドラスタチン１０）、ＭＭＡＦ（モノメチルオーリスタチンＦまたはＮ−メチルバリン−バリン−ドライソロイシン−ドラプロイン−フェニルアラニン）、ＭＭＡＥ（モノメチルオーリスタチンＥまたはＮ−メチルバリン−バリン−ドライソロイシン−ドラプロイン−ノルエフェドリン）、５−ベンゾイル吉草酸−ＡＥエステル（ＡＥＶＢ）および他の新規のオーリスタチン類（例えば、米国特許出願公開第２０１３／０１２９７５３号において記載されているオーリスタチン類）を含むが、それらに限定されない。ある態様において、オーリスタチンは、０１０１（２−メチルアラニル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−｛［（１Ｓ）−２−フェニル−１−（１，３−チアゾール−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド）であり、次の構造を有する：
【０１０４】
【化３】
2021500055.tif 000016
【０１０５】
。
ある態様において、オーリスタチンは、３３７７（Ｎ，２−ジメチルアラニル−Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−４−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（１Ｓ）−１−カルボキシル−２−フェニルエチル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−２−メトキシ−１−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−４−オキソブチル｝−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド）であり、次の構造を有する：
【０１０６】
【化４】
2021500055.tif 000017
【０１０７】
。
ある態様において、オーリスタチンは、０１３１−ＯＭｅ（Ｎ，２−ジメチルアラニル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−３−｛［（２Ｓ）−１−メトキシ−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］アミノ｝−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチルＬ−バリンアミド）であり、次の構造を有する：
【０１０８】
【化５】
2021500055.tif 000018
【０１０９】
。
他の態様において、オーリスタチンは、０１３１（２−メチル−Ｌ−プロリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（１Ｓ）−１−カルボキシ−２−フェニルエチル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（2-methyl-L-proly-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-carboxy-2-phenylethyl]amino}-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl}-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-N-methyl-L-valinamide））であり、次の構造を有する：
【０１１０】
【化６】
2021500055.tif 000019
【０１１１】
。
他の態様において、オーリスタチンは、０１２１（２−メチル−Ｌ−プロリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ）−１−メトキシ−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（2-methyl-L-proly-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-methoxy-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino}-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl}-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-N-methyl-L-valinamide））であり、次の構造を有する：
【０１１２】
【化７】
2021500055.tif 000020
【０１１３】
。
カンプトテシンは、酵素トポイソメラーゼＩを阻害する細胞毒性キノリンアルカロイドである。カンプトテシンおよびその誘導体の例は、トポテカンおよびイリノテカン、ならびにそれらの代謝物、例えばＳＮ−３８を含むが、それらに限定されない。
【０１１４】
コンブレタスタチン類は、腫瘍における血管破壊特性を有する天然フェノール類である。典型的なコンブレタスタチン類およびそれらの誘導体は、コンブレタスタチンＡ−４（ＣＡ−４）およびオンブラブリンを含むが、それらに限定されない。
【０１１５】
デュオカルマイシンおよびＣＣ−１０６５は、細胞毒性効力を有するＤＮＡアルキル化剤である。Boger and Johnson, PNAS 92:3642-3649 (1995)を参照。典型的なデュオカルマイシンおよびＣＣ−１０６５は、（＋）−デュオカルマイシンＡおよび（＋）−デュオカルマイシンＳＡ、（＋）−ＣＣ−１０６５、ならびに以下の化合物を含むがそれらに限定されない国際出願ＰＣＴ／ＩＢ２０１５／０５０２８０において開示されているような化合物を含むが、それらに限定されない：
構造：
【０１１６】
【化８】
2021500055.tif 000021
【０１１７】
を有するＮ〜２〜−アセチル−Ｌ−リジル−Ｌ−バリル−Ｎ〜５〜−カルバモイル−Ｎ−［４−（｛［（２−｛［（｛（１Ｓ）−１−（クロロメチル）−３−［（５−｛［（１Ｓ）−１−（クロロメチル）−５−（ホスホノオキシ）−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−イル］カルボニル｝チオフェン−２−イル）カルボニル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−５−イル｝オキシ）カルボニル］（メチル）アミノ｝エチル）（メチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド、
構造：
【０１１８】
【化９】
2021500055.tif 000022
【０１１９】
を有するＮ〜２〜−アセチル−Ｌ−リジル−Ｌ−バリル−Ｎ〜５〜−カルバモイル−Ｎ−［４−（｛［（２−｛［（｛（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−［（３−｛［（１Ｓ）−１−（クロロメチル）−８−メチル−５−（ホスホノオキシ）−１，６−ジヒドロピロロ［３，２−ｅ］インドール−３（２Ｈ）−イル］カルボニル｝ビシクロ［１．１．１］ペンタ−１−イル）カルボニル］−１−メチル−３，６，７，８−テトラヒドロピロロ［３，２−ｅ］インドール−４−イル｝オキシ）カルボニル］（メチル）アミノ｝エチル）（メチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド、
構造：
【０１２０】
【化１０】
2021500055.tif 000023
【０１２１】
を有するＮ〜２〜−アセチル−Ｌ−リジル−Ｌ−バリル−Ｎ〜５〜−カルバモイル−Ｎ−［４−（｛［（２−｛［（｛（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−［（４−｛［（１Ｓ）−１−（クロロメチル）−８−メチル−５−（ホスホノオキシ）−１，６−ジヒドロピロロ［３，２−ｅ］インドール−３（２Ｈ）−イル］カルボニル｝ペンタシクロ［４．２．０．０〜２，５〜．０〜３，８〜．０〜４，７〜］オクタ−１−イル）カルボニル］−１−メチル−３，６，７，８−テトラヒドロピロロ［３，２−ｅ］インドール−４−イル｝オキシ）カルボニル］（メチル）アミノ｝エチル）（メチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド。
【０１２２】
エンジイン類は、９員環および１０員環または共役三重−二重−三重結合の環系の存在のどちらかにより特性付けられる抗腫瘍性細菌生成物のクラスである。典型的なエンジイン類は、カリケアマイシン、エスペラミシン、ウンシアラマイシン（ｕｎｃｉａｌａｍｉｃｉｎ）、ジネマイシン（ｄｙｎｅｍｉｃｉｎ）およびそれらの誘導体を含むが、それらに限定されない。
【０１２３】
ゲルダナマイシン類は、Ｈｓｐ９０（熱ショックタンパク質９０）に結合するベンゾキノンアンサマイシン系抗生物質であり、抗腫瘍薬として用いられてきた。典型的なゲルダナマイシン類は、１７−ＡＡＧ（１７−Ｎ−アリルアミノ−１７−デメトキシゲルダナマイシン）および１７−ＤＭＡＧ（１７−ジメチルアミノエチルアミノ−１７−デメトキシゲルダナマイシン）を含むが、それらに限定されない。
【０１２４】
ヘミアステリンおよびその類似体（例えばＨＴＩ−２８６）は、チューブリンに結合し、正常な微小管力学を混乱させ、化学量論量において微小管を脱重合する。
メイタンシン類またはそれらの誘導体であるメイタンシノイド類は、有糸分裂の間に微小管の形成をチューブリンの重合の阻害により阻害することにより、細胞の増殖を阻害する。Remillard et al., Science 189:1002-1005, 1975を参照。典型的なメイタンシン類およびメイタンシノイド類は、メルタンシン（ＤＭ１）およびその誘導体ならびにアンサミトシンを含むが、それらに限定されない。
【０１２５】
ピロロベンゾジアゼピン二量体類（ＰＢＤ類）およびインドリノ−ベンゾジアゼピン二量体類（ＩＧＮ類）は、二重鎖のＤＮＡに結合する、１以上のイミン官能基を含有する抗腫瘍剤またはその均等物である。ＰＢＤおよびＩＧＮ分子は、天然産物アトラマイシンに基づいており、プリン−グアニン−プリン配列を好む配列選択的な様式でＤＮＡと相互作用する。典型的なＰＢＤ類およびそれらの類似体は、ＳＪＧ−１３６を含むが、それに限定されない。
【０１２６】
スプライセオスタチン類およびプラジエノライド類は、スプライシングを阻害し、スプライソームであるＳＦ３ｂと相互作用する抗腫瘍性化合物である。スプライセオスタチン類の例は、スプライセオスタチンＡ、ＦＲ９０１４６４および
【０１２７】
【化１１】
2021500055.tif 000024
【０１２８】
の構造を有する（２Ｓ，３Ｚ）−５−｛［（２Ｒ，３Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−｛（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−７−（２−ヒドラジニル−２−オキソエチル）−４−ヒドロキシ−１，６−ジオキサスピロ［２．５］オクタ−５−イル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル｝−２，５−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル］アミノ｝−５−オキソペンタ−３−エン−２−イル  アセテートを含むが、それらに限定されない。
【０１２９】
プラジエノライド類の例は、プラジエノライドＢ、プラジエノライドＤまたはＥ７１０７を含むが、それらに限定されない。
タキサン類は、抗チューブリン剤または有糸分裂阻害剤として作用するジテルペン類である。典型的なタキサン類は、パクリタキセル（例えばＴＡＸＯＬ（登録商標））およびドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標））を含むが、それらに限定されない。
【０１３０】
チューブリシン類は、微小管を脱重合し、有糸分裂停止を誘導することが示されている粘液細菌の株から単離された天然産物である。典型的なチューブリシン類は、チューブリシンＡ、チューブリシンＢおよびチューブリシンＤを含むが、それらに限定されない。
【０１３１】
ビンカアルカロイド類も、抗チューブリン剤である。典型的なビンカアルカロイド類は、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン、およびビノレルビンを含むが、それらに限定されない。
【０１３２】
ある態様において、細胞毒性薬剤は、以下の化合物からなる群から選択される：ＭＭＡＤ（モノメチルオーリスタチンＤ）、０１０１（２−メチルアラニル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−｛［（１Ｓ）−２−フェニル−１−（１，３−チアゾール−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド）、３３７７（Ｎ，２−ジメチルアラニル−Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−４−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（１Ｓ）−１−カルボキシル−２−フェニルエチル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−２−メトキシ−１−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−４−オキソブチル｝−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド）、０１３１（２−メチル−Ｌ−プロリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（１Ｓ）−１−カルボキシ−２−フェニルエチル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（2-methyl-L-proly-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-carboxy-2-phenylethyl]amino}-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl}-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-N-methyl-L-valinamide））、０１３１−ＯＭｅ（Ｎ，２−ジメチルアラニル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−３−｛［（２Ｓ）−１−メトキシ−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］アミノ｝−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチルＬ−バリンアミド）、０１２１（２−メチル−Ｌ−プロリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ）−１−メトキシ−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（2-methyl-L-proly-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-methoxy-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino}-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl}-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-N-methyl-L-valinamide））および（２Ｓ，３Ｚ）−５−｛［（２Ｒ，３Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−｛（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−７−（２−ヒドラジニル−２−オキソエチル）−４−ヒドロキシ−１，６−ジオキサスピロ［２．５］オクタ−５−イル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル｝−２，５−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル］アミノ｝−５−オキソペンタ−３−エン−２−イル  アセテート。
【０１３３】
ある態様において、薬剤は、免疫調節剤である。免疫調節剤の例は、ガンシクロビル、エタネルセプト、タクロリムス、シロリムス、ボクロスポリン、シクロスポリン、ラパマイシン、シクロホスファミド、アザチオプリン、ミコフェノール酸モフェチル（ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌｇａｔｅ  ｍｏｆｅｔｉｌ）、メトトレキサート（ｍｅｔｈｏｔｒｅｘｔｒａｔｅ）、グルココルチコイドおよびその類似体、サイトカイン類、幹細胞増殖因子、リンホトキシン類、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、造血因子、インターロイキン類（例えば、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８、およびＩＬ−２１）、コロニー刺激因子（例えば、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）および顆粒球・マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ））、インターフェロン類（例えば、インターフェロン−α、−βおよび−γ）、“Ｓ１因子”と呼ばれる幹細胞増殖因子、エリスロポエチンおよびトロンボポエチン、あるいは、それらの組み合わせを含むが、それらに限定されない。
【０１３４】
ある態様において、薬剤部分は、イメージング剤（例えば蛍光体またはキレート剤）、例えばフルオレセイン、ローダミン、ランタニド蛍光体およびそれらの誘導体またはキレート剤に結合した放射性同位体である。蛍光体の例は、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）（例えば５−ＦＩＴＣ）、フルオレセインアミダイト（ＦＡＭ）（例えば５−ＦＡＭ）、エオシン、カルボキシフルオレセイン、エリスロシン、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）（例えばＡｌｅｘａ  ３５０、４０５、４３０、４８８、５００、５１４、５３２、５４６、５５５、５６８、５９４、６１０、６３３、６４７、６６０、６８０、７００、または７５０）、カルボキシテトラメチルローダミン（ＴＡＭＲＡ）（例えば５−ＴＡＭＲＡ）、テトラメチルローダミン（ＴＭＲ）およびスルホローダミン（ＳＲ）（例えばＳＲ１０１）を含むが、それらに限定されない。キレート剤の例は、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−Ｎ，Ｎ'，Ｎ''，Ｎ'''−四酢酸（ＤＯＴＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸（ＮＯＴＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナン，１−グルタル酸−４，７−酢酸（デフェロキサミン）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）および１，２−ビス（ｏ−アミノフェノキシ）エタン−Ｎ，Ｎ，Ｎ'，Ｎ'−四酢酸）（ＢＡＰＴＡ）を含むが、それらに限定されない。
【０１３５】
蛍光体の例は、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）（例えば５−ＦＩＴＣ）、フルオレセインアミダイト（ＦＡＭ）（例えば５−ＦＡＭ）、エオシン、カルボキシフルオレセイン、エリスロシン、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）（例えばＡｌｅｘａ  ３５０、４０５、４３０、４８８、５００、５１４、５３２、５４６、５５５、５６８、５９４、６１０、６３３、６４７、６６０、６８０、７００、または７５０）、カルボキシテトラメチルローダミン（ＴＡＭＲＡ）（例えば５−ＴＡＭＲＡ）、テトラメチルローダミン（ＴＭＲ）、およびスルホローダミン（ＳＲ）（例えばＳＲ１０１）を含むが、それらに限定されない。
【０１３６】
ある態様において、療法用または診断用の放射性同位体または他の標識（例えばＰＥＴまたはＳＰＥＣＴ標識）が、本明細書で記載されるような抗ＣＤ１２３抗体または抗原結合フラグメントへのコンジュゲーションのために薬剤中に組み込まれることができる。放射性同位体または他の標識の例は、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｎ、１４Ｃ、１５Ｎ、１５Ｏ、３５Ｓ、１８Ｆ、３２Ｐ、３３Ｐ、４７Ｓｃ、５１Ｃｒ、５７Ｃｏ、５８Ｃｏ、５９Ｆｅ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、７５Ｓｅ、７６Ｂｒ、７７Ｂｒ、８６Ｙ、８９Ｚｒ、９０Ｙ、９４Ｔｃ、９５Ｒｕ、９７Ｒｕ、９９Ｔｃ、１０３Ｒｕ、１０５Ｒｈ、１０５Ｒｕ、１０７Ｈｇ、１０９Ｐｄ、１１１Ａｇ、１１１Ｉｎ、１１３Ｉｎ、１２１Ｔｅ、１２２Ｔｅ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１２５Ｔｅ、１２６Ｉ、１３１Ｉ、１３１Ｉｎ、１３３Ｉ、１４２Ｐｒ、１４３Ｐｒ、１５３Ｐｂ、１５３Ｓｍ、１６１Ｔｂ、１６５Ｔｍ、１６６Ｄｙ、１６６Ｈ、１６７Ｔｍ、１６８Ｔｍ、１６９Ｙｂ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１８９Ｒｅ、１９７Ｐｔ、１９８Ａｕ、１９９Ａｕ、２０１Ｔｌ、２０３Ｈｇ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉ、２１２Ｐｂ、２１３Ｂｉ、２２３Ｒａ、２２４Ａｃおよび２２５Ａｃを含むが、それらに限定されない。
【０１３７】
ある態様において、薬剤は、毒素、ホルモン、酵素および成長因子を含むがそれらに限定されない療法的タンパク質である。
毒素タンパク質（またはポリペプチド）の例は、ジフテリア（ｄｉｐｔｈｔｈｅｒｉａ）（例えばジフテリアＡ鎖）、シュードモナス属の外毒素および内毒素、リシン（例えばリシンＡ鎖）、アブリン（例えばアブリンＡ鎖）、モデッシン（例えばモデッシンＡ鎖）、アルファ−サルシン、アレウリテス・フォルディ（Ａｌｅｕｒｉｔｅｓ  ｆｏｒｄｉｉ）タンパク質、ジアンチンタンパク質、リボヌクレアーゼ（ＲＮアーゼ）、ＤＮアーゼＩ、スタフィロコッカス属の腸毒素Ａ、ヨウシュヤマゴボウの抗ウイルスタンパク質、ゲロニン、ジフテリア（ｄｉｐｈｔｈｅｒｉｎ）毒素、フィトラカ・アメリカーナ（Ｐｈｙｔｏｌａｃａ  ａｍｅｒｉｃａｎａ）タンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、およびＰＡＰ−Ｓ）、モモルディカ・カランティア（ｍｏｍｏｒｄｉｃａ  ｃｈａｒａｎｔｉａ）阻害剤、クルシン、クロチン、サポナリア・オフィシナリス（ｓａｐａｏｎａｒｉａ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）阻害剤、ミトゲリン（ｍｉｔｏｇｅｌｌｉｎ）、レストリクトシン、フェノマイシン（ｐｈｅｎｏｍｙｃｉｎ）、エノマイシン（ｅｎｏｍｙｃｉｎ）、トリコテセン類（ｔｒｉｃｏｔｈｅｃｅｎｅｓ）、阻害剤シスチンノット（ＩＣＫ）ペプチド（例えばセラトトキシン類（ｃｅｒａｔｏｔｏｘｉｎｓ））、ならびにコノトキシン（例えばＫＩＩＩＡまたはＳｍＩＩＩａ）を含むが、それらに限定されない。
【０１３８】
ある態様において、薬剤は、生体適合性ポリマーである。本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体または抗原結合フラグメントは、血清半減期および生理活性を増大させるために、かつ／またはインビボでの半減期を延長するために、生体適合性ポリマーにコンジュゲートさせることができる。生体適合性ポリマーの例は、水溶性ポリマー、例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）またはその誘導体および双性イオン含有生体適合性ポリマー（例えばホスホリルコリン含有ポリマー）を含む。
【０１３９】
ある態様において、薬剤は、オリゴヌクレオチド、例えばアンチセンスオリゴヌクレオチドである。
別の側面において、本発明は、本明細書で記載される抗体のコンジュゲートを提供し、ここで、コンジュゲートは、式：抗体−（アシルドナーグルタミン含有タグ）−（リンカー）−（細胞毒性薬剤）を含み、ここで、アシルドナーグルタミン含有タグは、抗体の特定の部位において（例えば重鎖もしくは軽鎖のカルボキシル末端において、抗体重鎖中の残基Ｔ１３５の後で、または別の部位において）設計されており、ここで、タグは、リンカー（例えば１個以上の反応性アミン（例えば第一級アミンＮＨ２）を含有するリンカー）にコンジュゲートされており、かつここで、リンカーは、細胞毒性薬剤（例えばＭＭＡＤまたは他のオーリスタチン類、例えば０１０１、０１３１もしくは３３７７）にコンジュゲートされている。
【０１４０】
１個以上の反応性アミンを含有するリンカーの例は、Ａｃ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（アセチル−リジン−グリシン）、アミノカプロン酸、Ａｃ−Ｌｙｓ−β−Ａｌａ（アセチル−リジン−β−アラニン）、アミノ−ＰＥＧ２（ポリエチレングリコール）−Ｃ２、アミノ−ＰＥＧ３−Ｃ２、アミノ−ＰＥＧ６−Ｃ２（またはアミノ  ＰＥＧ６−プロピオニル）、Ａｃ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ（アセチル−リジン−バリン−シトルリン−ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル）、アミノ−ＰＥＧ６−Ｃ２−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ、アミノカプロイル−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ、［（３Ｒ，５Ｒ）−１−｛３−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］プロパノイル｝ピペリジン−３，５−ジイル］ビス−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ、［（３Ｓ，５Ｓ）−１−｛３−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］プロパノイル｝ピペリジン−３，５−ジイル］ビス−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ、プトレッシンまたはＡｃ−Ｌｙｓ−プトレッシンを含むが、それらに限定されない。
【０１４１】
ある態様において、（リンカー）−（細胞毒性薬剤）は、Ｎ２−アセチル−Ｌ−リジル−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−［４−（｛［（２−｛［（｛（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−［（３−｛［（１Ｓ）−１−（クロロメチル）−８−メチル−５−（ホスホノオキシ）−１，６−ジヒドロピロロ［３，２−ｅ］インドール−３（２Ｈ）−イル］カルボニル｝ビシクロ［１．１．１］ペンタ−１−イル）カルボニル］−１−メチル−３，６，７，８−テトラヒドロピロロ［３，２−ｅ］インドール−４−イル｝オキシ）カルボニル］（メチル）アミノ｝エチル）（メチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド、分子式Ｃ６３Ｈ８２Ｃｌ２Ｎ１３Ｏ１５Ｐであり、構造：
【０１４２】
【化１２】
2021500055.tif 000025
【０１４３】
を有する。
ある態様において、（リンカー）−（細胞毒性薬剤）は、Ｃ６３Ｈ８２Ｃｌ２Ｎ１３Ｏ１５Ｐのトリフルオロ酢酸塩形態であり、次の構造：
【０１４４】
【化１３】
2021500055.tif 000026
【０１４５】
を有する。
上記のトリフルオロ酢酸塩形態に関する式は、Ｃ６３Ｈ８２Ｃｌ２Ｎ１３Ｏ１５Ｐ・Ｃ２ＨＦ３Ｏ２である。
【０１４６】
ある態様において、ＡＤＣは、１）抗体−ＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８）−Ａｃ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ−ＣＰＩ−８３１４である。ある態様において、アシルドナーグルタミン含有タグは、例えば抗体重鎖中のアミノ酸残基Ｅ２９４〜Ｎ２９７を置き換えているＬＬＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８）を含む。ある態様において、ＡＤＣは、位置Ｋ２２２（ヒンジ中）におけるアミノ酸改変を含む。ある態様において、改変は、Ｋ２２２Ｒである。抗体の例は、ｈ１８Ｇ３、１８Ｇ３、ｈ１８Ｇ３、１６Ｄ６、ｈ１６Ｄ６、３Ｄ１および２０Ｄ７を含むが、それらに限定されない。
【０１４７】
ある態様において、本発明は、本明細書で記載された抗体もしくはＡＤＣ、または本明細書で記載された方法により作製され、本明細書で記載された特徴を有する抗体もしくはＡＤＣを含む医薬組成物を含む組成物を包含する。本明細書で用いられる際、組成物は、ＣＤ１２３に結合する１以上の抗体またはＡＤＣを含む。これらの組成物は、さらに当該技術で周知である適切な賦形剤、例えば緩衝剤を含む薬学的に許容可能な賦形剤を含むことができる。
【０１４８】
ＣＤ１２３抗体およびそのＡＤＣを使用する方法
本発明の抗体およびＡＤＣは、療法的処置法および診断的処置法を含むがそれらに限定されない様々な適用において有用である。
【０１４９】
一側面において、本発明は、対象におけるＣＤ１２３発現と関係する症状を処置するための方法を提供する。ある態様において、対象におけるＣＤ１２３発現と関係する症状を処置する方法は、本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む有効量の組成物（例えば医薬組成物）をそれを必要とする対象に投与することを含む。ＣＤ１２３発現と関係する症状は、異常なＣＤ１２３発現、変化したかまたは異所性のＣＤ１２３発現、ＣＤ１２３を発現する悪性細胞および増殖性障害（例えば癌）または自己免疫障害を含むが、それらに限定されない。
【０１５０】
従って、ある態様において、対象において癌を処置する方法であって、それを必要とする対象に本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む有効量の組成物を投与することを含む方法が、提供される。本明細書で用いられる際、癌は、例えば、限定ではなく、多発性骨髄腫、悪性形質細胞新生物、ホジキンリンパ腫、結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫、カーラー病および骨髄腫症、形質細胞白血病、形質細胞腫、Ｂ細胞性前リンパ球性白血病、毛様細胞白血病（ＨＣＬ）、Ｂ細胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ、Ｂ−ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、濾胞性リンパ腫、バーキットリンパ腫、辺縁帯リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、大細胞リンパ腫、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、芽球性形質細胞様樹状細胞新生物（ＢＰＤＣＮ）、骨髄性白血病、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、粘膜関連リンパ組織リンパ腫、小細胞型リンパ球性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、原発性縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫（ｌｙｍｐｈｏｐｌａｓｍａｃｔｙｉｃ  ｌｙｍｐｈｏｍａ）、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症、結節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、脾臓辺縁帯リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、リンパ腫様肉芽腫症、Ｔ細胞／組織球豊富型大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫、原発性皮膚びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（下肢型）、高齢者のＥＢＶ  陽性びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、炎症を伴うびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、ＡＬＫ陽性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、形質芽細胞リンパ腫、ＨＨＶ８関連多中心性キャッスルマン病で生じる大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫およびバーキットリンパ腫の間の中間の特徴を有する未分類のＢ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫および古典的ホジキンリンパ腫の間の中間の特徴を有する未分類のＢ細胞リンパ腫ならびに他のＢ細胞関連リンパ腫であることができる。ある態様において、癌は、ＡＭＬ、Ｂ−ＡＬＬ、ＢＰＤＣＮ、ＮＨＬまたはＨＣＬである。
【０１５１】
ある態様において、ＣＤ１２３を発現する悪性細胞を有する対象において腫瘍の成長または進行を抑制する方法であって、それを必要とする対象に本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む有効量の組成物を投与することを含む方法が、提供される。他の態様において、対象においてＣＤ１２３を発現する細胞の転移を抑制する方法であって、それを必要とする対象に本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む有効量の組成物を投与することを含む方法が、提供される。他の態様において、対象において悪性細胞における腫瘍退縮を誘導する方法であって、それを必要とする対象に本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む有効量の組成物を投与することを含む方法が、提供される。
【０１５２】
ある態様において、対象において自己免疫障害を処置する方法であって、それを必要とする対象に本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む有効量の組成物を投与することを含む方法が、提供される。
【０１５３】
本明細書で用いられる際、自己免疫障害は、全身性エリテマトーデス、リウマチ様関節炎、糖尿病（Ｉ型）、多発性硬化症、アディソン病、セリアック病、皮膚筋炎、グレーヴス病、橋本甲状腺炎、橋本脳症、重症筋無力症、悪性貧血、反応性関節炎、シェーグレン症候群、急性散在性脳脊髄炎、無ガンマグロブリン血症、筋萎縮性側索硬化症、強直性脊椎炎、抗リン脂質症候群、抗シンテターゼ症候群、アトピー性アレルギー、アトピー性皮膚炎、自己免疫性腸症、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患、自己免疫性リンパ増殖症候群、自己免疫性末梢神経障害、自己免疫性膵炎、自己免疫性多内分泌腺症候群（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｐｏｌｙｅｎｄｏｒｃｒｉｎｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、自己免疫性プロゲステロン皮膚炎、自己免疫性血小板減少性紫斑病、自己免疫性蕁麻疹、自己免疫性ブドウ膜炎、ベーチェット病、キャッスルマン病、寒冷凝集素症、クローン病、皮膚筋炎、好酸球性筋膜炎、胃腸類天疱瘡、グッドパスチャー症候群、ギラン・バレー症候群、化膿性汗腺炎、特発性血小板減少性紫斑病、ナルコレプシー、尋常性天疱瘡、悪性貧血、多発性筋炎、原発性胆汁性肝硬変（ｐｒｉｍａｒｙ  ｂｉｌｌａｒｙ  ｃｉｒｒｈｏｓｉｓ）、再発性多発軟骨炎（ｒｅｌａｐｓｉｎｇ  ｐｏｌｙｃｈｒｏｎｄｒｉｔｉｓ）、リウマチ熱、側頭動脈炎、横断性脊髄炎、潰瘍性大腸炎、未分化結合組織疾患、血管炎およびウェゲナー肉芽腫症を含むが、それらに限定されない。
【０１５４】
別の側面において、本発明は、それを必要とする対象においてＣＤ１２３発現と関係する症状（例えば癌または自己免疫障害）を処置するための本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む有効量の組成物（例えば医薬組成物）を提供する。ある態様において、ＣＤ１２３を発現する悪性細胞を有する対象において腫瘍の成長または進行を抑制するための本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む有効量の組成物（例えば医薬組成物）が、提供される。ある態様において、それを必要とする対象においてＣＤ１２３を発現する悪性細胞の転移を抑制するための本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む有効量の組成物（例えば医薬組成物）が、提供される。ある態様において、ＣＤ１２３を発現する悪性細胞を有する対象において腫瘍の退縮を誘導するための本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む有効量の組成物（例えば医薬組成物）が、提供される。
【０１５５】
別の側面において、本発明は、それを必要とする対象におけるＣＤ１２３発現と関係する症状（例えば癌または自己免疫障害）の処置における使用のための本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを提供する。ある態様において、ＣＤ１２３を発現する悪性細胞を有する対象において腫瘍の成長または進行を抑制するための本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣが、提供される。ある態様において、それを必要とする対象においてＣＤ１２３を発現する悪性細胞の転移を抑制するための本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣが、提供される。ある態様において、ＣＤ１２３を発現する悪性細胞を有する対象において腫瘍の退縮を誘導するための本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣが、提供される。
【０１５６】
別の側面において、本発明は、ＣＤ１２３発現と関係する症状（例えば癌または自己免疫障害）を処置するための医薬品の製造における本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの使用を提供する。ある態様において、腫瘍の成長または進行を抑制するための医薬品の製造における本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの使用が、提供される。ある態様において、ＣＤ１２３を発現する悪性細胞の転移を抑制するための医薬品の製造における本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの使用が、提供される。ある態様において、腫瘍の退縮を誘導するための医薬品の製造における本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの使用が、提供される。
【０１５７】
別の側面において、ＣＤ１２３発現と関係する症状を検出、診断および／またはモニタリングする方法が、提供される。例えば、本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体は、イメージング剤および酵素−基質標識のような検出可能な部分で標識されることができる。本明細書で記載される抗体は、インビボ画像化（例えばＰＥＴまたはＳＰＥＣＴ）のようなインビボ診断アッセイまたは染色試薬のために使用されることもできる。
【０１５８】
ある態様において、本明細書で記載される方法は、さらに追加の療法形態で対象を処置する工程を含む。ある態様において、追加の療法形態は、化学療法、放射線、手術、ホルモン療法および／または追加の免疫療法を含むがそれらに限定されない追加の抗癌療法である。
【０１５９】
ある態様において、追加の療法形態は、本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣに加えて１種類以上の療法剤を投与することを含む。１種類以上の療法剤は、例えば第２抗体（例えば抗ＶＥＧＦ（血管内皮増殖因子）抗体（例えばＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標））、抗ＨＥＲ２抗体（例えばＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標））、抗ＣＤ２５抗体、抗ＣＤ３３抗体、抗ＣＤ２０抗体（例：ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標））、抗ムチン様糖タンパク質抗体、抗ＴＮＦ抗体、抗ＰＤ−１抗体もしくはＰＤ−Ｌ１抗体および／または上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）抗体（例えばＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標））、血管新生阻害剤、細胞毒性薬剤（例えばアントラサイクリン類（例えばダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、バルビシンおよびミトキサントロン）、タキサン（例えばパクリタキセルおよびドセタキセル）、ドラスタチン、デュオカルマイシン、エンジイン、ゲルダナマイシン、メイタンシン、ピューロマイシン、ビンカアルカロイド（例えばビンクリスチン）、トポイソメラーゼ阻害剤（例えばエトポシド）、チューブリシン、ピリミジン類似体（例えばフルオロウラシル）、白金含有薬剤（例えばシスプラチン、カルボプラチンおよびオキサリプラチン）、アルキル化剤（例えばメルファラン、シクロホスファミドまたはカルムスチン）およびヘミアステリン）、免疫調節剤（例えばプレドニゾン）、抗炎症剤（例えばデキサメタゾン）、アロマターゼ阻害剤（例えばアナストロゾール、エキセメスタン、レトロゾール、ボロゾール、ホルメスタンまたはテストラクトン）、プロテアソーム阻害剤（例えばボルテゾミブ、例えばＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）(［（１Ｒ）−３−メチル−１−［［（２Ｓ）−１−オキソ−３−フェニル−２−［（ピラジニルカルボニル）アミノ］プロピル］アミノ］ブチル］ボロン酸））ならびに他の薬剤、例えばタモキシフェンであることができるが、それらに限定されない。
【０１６０】
例えば、ある態様において、ＡＭＬを処置する方法であって、それを必要とする対象に本明細書で記載されているＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣならびに１種類の他の療法剤、例えば化学療法剤またはサリドマイドもしくはその誘導体（例えばレナリドマイド）を含む有効量の組成物を投与することを含む方法が、提供される。ある態様において、その１種類の他の療法剤は、ボルテゾミブ（例えばＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標））、メルファラン、プレドニゾン、ドキソルビシン、レナリドマイド、サリドマイド、プレドニゾン、カルムスチン、エトポシド、シスプラチン、シクロホスファミドおよびビンクリスチンからなる群から選択される。ある態様において、その他の療法剤は、ボルテゾミブ（例えばＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標））、メルファランまたはプレドニゾンである。ある態様において、対象は、再発しているかまたは以前のＡＭＬ療法に対して抵抗性である。
【０１６１】
ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣは、あらゆる適切な経路を介して個体に投与されることができる。本明細書で記載される例は、限定的であることが意図されているのではなく、利用可能な技法を説明することが意図されていることは、当業者には理解されるはずである。従って、ある態様において、ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣは、既知の方法に従って、例えば静脈内投与、例えば大量瞬時投与としての静脈内投与またはある期間にわたる連続注入による静脈内投与で、筋内、腹腔内、脳脊髄内、頭蓋内、経皮、皮下、関節内、舌下、滑液包内、ガス注入経由、髄腔内、経口、吸入または局所的経路により投与される。投与は、全身的、例えば静脈内投与、または局所的であることができる。ジェット噴霧器および超音波噴霧器を含む、液体配合物のための商業的に入手可能な噴霧器は、投与のために有用である。液体配合物は、直接噴霧されることができ、凍結乾燥された粉末は、再構成後に噴霧されることができる。あるいは、ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣは、フルオロカーボン配合物および計量吸入器を用いてエアロゾル化されることができ、または凍結乾燥および製粉された粉末として吸入されることもできる。
【０１６２】
一態様において、ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣは、部位特異的または標的化された局所送達技法により投与される。部位特異的または標的化された局所送達技法の例は、ＣＤ１２３抗体もしくはＣＤ１２３  ＡＤＣの様々な埋め込み式のデポー源、または局所送達カテーテル、例えば注入カテーテル、留置カテーテル、もしくは針カテーテル、人工移植片、外膜ラップ、シャントおよびステントもしくは他の埋め込み式のデバイス、部位特異的担体、直接注射、または直接適用を含む。例えば、ＰＣＴ国際公開第００／５３２１１号および米国特許第５，９８１，５６８号を参照。
【０１６３】
ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの様々な配合物が、投与のために用いられることができる。ある態様において、ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣは、ニートで（ｎｅａｔ）投与されることができる。ある態様において、ＣＤ１２３抗体（またはＣＤ１２３  ＡＤＣ）および薬学的に許容可能な賦形剤は、様々な配合物中にあることができる。薬学的に許容可能な賦形剤は、当該技術で既知であり、薬理学的に有効な物質の投与を容易にする比較的不活性な物質である。例えば、賦形剤は、形態もしくは粘稠性を与える、または希釈剤の役目を果たすことができる。適切な賦形剤は、安定剤、湿潤および乳化剤、モル浸透圧濃度を変動させるための塩類、封入剤、緩衝剤および皮膚浸透増進剤を含むが、それらに限定されない。非経口および非経口ではない薬物送達のための賦形剤ならびに配合物が、Remington, The Science and Practice of Pharmacy 第２１版 Mack Publishing, 2005において述べられている。
【０１６４】
ある態様において、これらの薬剤は、（例えば腹腔内、静脈内、皮下、筋内等での）注射による投与のために配合されている。従って、これらの薬剤は、薬学的に許容可能なビヒクル、例えば生理食塩水、リンガー液、デキストロース溶液等と組み合わせられることができる。個々の投与計画、すなわち用量、タイミングおよび反復は、特定の個人およびその個人の病歴に依存するであろう。
【０１６５】
本明細書で記載されたＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣは、注射（例えば腹腔内、静脈内、皮下、筋内等）による投与を含め、あらゆる適切な方法を用いて投与されることができる。ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣは、本明細書で記載されたように、吸入により投与されることもできる。一般に、ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの投与に関して、最初の候補投与量は、約２ｍｇ／ｋｇであることができる。本発明の目的に関して、典型的な一日投与量は、上記で言及された要因に応じて、約３μｇ／ｋｇ〜３０μｇ／ｋｇ〜３００μｇ／ｋｇ〜３ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇまで、１００ｍｇ／ｋｇまたはより多い量までのいずれの範囲である可能性もある。例えば、約１ｍｇ／ｋｇ、約２．５ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、および約２５ｍｇ／ｋｇの投与量が、用いられることができる。数日またはより長い期間にわたる反復投与に関して、症状に応じて、処置は、症状の所望の抑制が起こるまで、または例えば腫瘍成長／進行もしくは癌細胞の転移を抑制するもしくは遅延させるための十分な療法レベルが達成されるまで維持される。ある典型的な投与計画は、約２ｍｇ／ｋｇのＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの初期用量を投与し、続いて約１ｍｇ／ｋｇの毎週維持用量を投与すること、または続いて約１ｍｇ／ｋｇの維持用量を隔週で投与することを含む。別の典型的な投与計画は、毎週または３週間ごとに約０．２１、約０．５または約０．８ｍｇ／ｋｇの初期用量を投与することを含む。他の典型的な投与計画は、増大する容量（例えば１ｍｇ／ｋｇの初期用量および毎週またはより長い時間間隔での１以上のより高い容量への徐々の増大）を投与することを含む。他の投与計画も、従事者が達成することを望む薬物動態的減衰のパターンに応じて有用である可能性がある。例えば、ある態様において、週に１〜４回の投与が、意図されている。他の態様において、月１回または２ヶ月ごともしくは３ヶ月ごとに１回の投与が、意図されている。この療法の進行は、従来の技法およびアッセイにより容易にモニターされる。投与計画（用いられるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む）は、時間の経過に伴い変動することができる。
【０１６６】
本発明の目的に関して、ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの適切な投与量は、用いられるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣ（またはその組成物）、処置されるべき症状のタイプおよび重症度、薬剤が療法的目的のために投与されるかどうか、以前の療法、対象の病歴および薬剤への応答、投与される薬剤に関する対象のクリアランス速度、ならびに主治医の裁量に依存するであろう。典型的には、臨床医は、ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを、所望の結果を達成する投与量に達するまで投与するであろう。用量および／または頻度は、処置の過程にわたって変動することができる。経験的な考慮すべき事柄、例えば半減期は、一般に投与量の決定に寄与するであろう。例えば、ヒト免疫系と適合可能である抗体、例えばヒト化抗体または完全なヒト抗体は、抗体の半減期を延長するためおよび抗体がホストの免疫系により攻撃されるのを防ぐために用いられることができる。投与の頻度は、療法の過程にわたって決定および調節されることができ、一般に、症状の処置および／または抑制および／または改善および／または遅延、例えば腫瘍成長の抑制または遅延等に基づくが、必ずそうであるわけではない。あるいは、ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの持続的連続放出配合物が、適切である可能性がある。持続放出を達成するための様々な配合物およびデバイスが、当該技術で既知である。
【０１６７】
一態様において、ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣに関する投与量は、そのＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの１回以上の投与（単数または複数）を与えられてきた個人において経験的に決定されることができる。個人は、ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３アンタゴニストの増加する投与量を与えられる。有効性を評価するため、疾患の指標が、追跡されることができる。
【０１６８】
本発明における方法のＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの投与は、例えば受容者の生理的障害、投与の目的が療法的か予防的か、および当業者に既知の他の要因に応じて連続的または断続的であることができる。ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの投与は、予め選択された期間にわたって本質的に連続的であることができ、または一連の間隔の空いた用量におけることもできる。
【０１６９】
ある態様において、１種類より多くのＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣが、存在していることができる。少なくとも１種類、少なくとも２種類、少なくとも３種類、少なくとも４種類、少なくとも５種類の異なる、またはより多くのＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣが、存在していることができる。一般に、それらのＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣは、互いに悪影響を及ぼさない相補的活性を有することができる。例えば、以下のＣＤ１２３抗体の１種類以上が、用いられることができる：ＣＤ１２３上のあるエピトープに向けられた第１ＣＤ１２３抗体およびＣＤ１２３上の異なるエピトープに向けられた第２ＣＤ１２３抗体。
【０１７０】
本発明に従って用いられるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの療法用配合物は、所望の程度の純度を有する抗体を任意の薬学的に許容可能なキャリヤー、賦形剤、または安定剤（Remington, The Science and Practice of Pharmacy 第21版 Mack Publishing, 2005）と混合することにより、凍結乾燥された配合物または水溶液の形態で、貯蔵のために調製される。許容可能なキャリヤー、賦形剤、または安定剤は、利用される投与量および濃度において受容者に対して非毒性であり、緩衝剤、例えばホスフェート、シトレート、および他の有機酸；塩類、例えば塩化ナトリウム；アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤；保存剤（例えば、塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール；アルキルパラベン類、例えばメチルまたはプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；およびｍ−クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えばポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、もしくはリジン；グルコース、マンノース、もしくはデキストリン類を含む単糖類、二糖類、および他の炭水化物；キレート剤、例えばＥＤＴＡ；糖類、例えばスクロース、マンニトール、トレハロースもしくはソルビトール；塩形成対イオン、例えばナトリウム；金属複合体（例えばＺｎ−タンパク質複合体）；および／または非イオン性界面活性剤、例えばＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）もしくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含むことができる。
【０１７１】
ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含有するリポソームは、当該技術において既知の方法、例えばEpstein, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82:3688, 1985; Hwang, et al., Proc. Natl Acad. Sci. USA 77:4030, 1980;ならびに米国特許第４，４８５，０４５号および第４，５４４，５４５号において記載されている方法により調製される。増進された循環時間を有するリポソームは、米国特許第５，０１３，５５６号において開示されている。特に有用なリポソームは、ホスファチジルコリン、コレステロールおよびＰＥＧ誘導体化ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ−ＰＥ）を含む脂質組成物を用いた逆相蒸発法により生成されることができる。リポソームは、定められた孔径のフィルターを通して押し出され、所望の直径を有するリポソームを生成する。
【０１７２】
有効成分は、コロイド状薬物送達システム（例えばリポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子およびナノカプセル）において、またはマクロエマルジョンにおいて、例えばコアセルベーション技法により、または界面重合により調製されたマイクロカプセル（例えばそれぞれヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチンマイクロカプセルおよびポリ−（メチルメタクリレート）マイクロカプセル）中に捕捉されることもできる。そのような技法は、Remington, The Science and Practice of Pharmacy 第21版 Mack Publishing, 2005において開示されている。
【０１７３】
持続放出製剤が、調製されることができる。持続放出製剤の適切な例は、抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスを含み、そのマトリックスは、形作られた物、例えば薄膜またはマイクロカプセルの形態である。持続放出マトリックスの例は、ポリエステル類、ヒドロゲル類（例えば、ポリ(２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）、またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド類（米国特許第３，７７３，９１９号）、Ｌ−グルタミン酸および７エチル−Ｌ−グルタメート（７  ｅｔｈｙｌ−Ｌ−ｇｌｕｔａｍａｔｅ）のコポリマー、非分解性エチレン−酢酸ビニル、分解性乳酸−グリコール酸コポリマー、例えばＬＵＰＲＯＮ  ＤＥＰＯＴ（商標）（乳酸−グリコール酸コポリマーおよび酢酸ロイプロリドからなる注射用マイクロスフェア）、スクロース酢酸イソブチルならびにポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸を含む。
【０１７４】
インビボ投与のために用いられる予定の配合物は、無菌でなければならない。これは、例えば滅菌濾過膜を通した濾過により容易に成し遂げられる。療法用ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣ組成物は、一般に、無菌のアクセスポートを有する容器、例えば皮下注射針により突き刺し可能な栓を有する静脈内溶液バッグまたはバイアル中に配置される。
【０１７５】
本発明の組成物は、経口、非経口もしくは直腸投与、または吸入もしくはガス注入（ｉｎｓｕｆｆｌａｔｉｏｎ）による投与のための単位剤形、例えば錠剤、丸剤、カプセル、粉末、顆粒、溶液もしくは懸濁液、または坐剤であることができる。
【０１７６】
固体組成物、例えば錠剤を調製するため、主要な有効成分が、医薬用キャリヤー、例えば従来の打錠用成分、例えばトウモロコシデンプン、ラクトース、スクロース、ソルビトール、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、リン酸二カルシウムまたはガム、および他の医薬用希釈剤、例えば水と混合されて、本発明の化合物またはその非毒性の薬学的に許容可能な塩の均質な混合物を含有する固体前配合（ｐｒｅｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）組成物を形成する。これらの前配合組成物が均質であると言及する場合、その組成物が等しく有効な単位剤形、例えば錠剤、丸剤およびカプセル中にすぐに細分されることができるように、有効成分が組成物全体にわたって均等に分散していることが意味されている。次いで、この固体前配合組成物は、０．１〜約５００ｍｇの本発明の有効成分を含有する上記のタイプの単位剤形中に細分される。新規組成物の錠剤または丸剤は、延長された作用の利点を与える剤形を提供するために、コートされるか、または他の方法で調合されることができる。例えば、錠剤または丸剤は、内部投薬構成要素および外部投薬構成要素を含むことができ、後者は前者を覆う外膜の形態である。２つの構成要素は、胃における崩壊に耐える役目を果たし、内部の構成要素が完全な状態で十二指腸中へと通過することまたはその放出が遅延することを可能にする腸溶層により隔てられていることができる。様々な材料が、そのような腸溶層またはコーティングのために用いられることができ、そのような材料は、いくつかのポリマー性の酸ならびにポリマー性の酸のシェラック、セチルアルコールおよび酢酸セルロースのような材料との混合物を含む。
【０１７７】
適切な表面活性剤は、特に非イオン性薬剤、例えばポリオキシエチレンソルビタン類（例えばＴｗｅｅｎ（商標）２０、４０、６０、８０または８５）および他のソルビタン類（例えばＳｐａｎ（商標）２０、４０、６０、８０または８５）を含む。表面活性剤を含む組成物は、好都合には０．０５〜５％の表面活性剤を含むと考えられ、それは０．１〜２．５％であることができる。他の成分、例えばマンニトールまたは他の薬学的に許容可能なビヒクルが、必要に応じて添加されることができることは、理解されるであろう。
【０１７８】
適切なエマルジョンは、商業的に入手可能な脂肪エマルジョン、例えばＩｎｔｒａｌｉｐｉｄ（商標）、Ｌｉｐｏｓｙｎ（商標）、Ｉｎｆｏｎｕｔｒｏｌ（商標）、Ｌｉｐｏｆｕｎｄｉｎ（商標）およびＬｉｐｉｐｈｙｓａｎ（商標）を用いて調製されることができる。有効成分は、予め混合されたエマルジョン組成物中で溶解させることができ、あるいはそれは油（例えばダイズ油、ベニバナ油、綿実油、ゴマ油、トウモロコシ油またはアーモンド油）中で溶解させることもでき、リン脂質（例えば卵リン脂質、ダイズリン脂質またはダイズレシチン）および水との混合の際にエマルジョンが形成される。エマルジョンの張性を調節するために、他の成分、例えばグリセロールまたはグルコースが添加されることができることは、理解されるであろう。適切なエマルジョンは、典型的には２０％までの、例えば５〜２０％の油を含有するであろう。脂肪エマルジョンは、０．１〜１．０μｍ、特に０．１〜０．５μｍの脂肪液滴を含むことができ、５．５〜８．０の範囲のｐＨを有することができる。
【０１７９】
エマルジョン組成物は、ＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣをＩｎｔｒａｌｉｐｉｄ（商標）またはその構成要素（ダイズ油、卵リン脂質、グリセロールおよび水）と混合することにより調製されたエマルジョン組成物であることができる。
【０１８０】
吸入またはガス注入のための組成物は、薬学的に許容可能な水性もしくは有機性溶媒中の溶液および懸濁液、またはそれらの混合物、ならびに粉末を含む。液体または固体組成物は、上記で述べられたような適切な薬学的に許容可能な賦形剤を含有することができる。ある態様において、組成物は、局所または全身作用のために、経口または経鼻呼吸経路により投与される。好ましくは無菌の薬学的に許容可能な溶媒中の組成物は、ガスの使用により噴霧されることができる。噴霧された溶液は、噴霧デバイスから直接呼吸されることができ、または噴霧デバイスは、フェイスマスク、テントもしくは断続的陽圧呼吸模擬装置に取り付けられることができる。溶液、懸濁液または粉末組成物は、好ましくは経口または経鼻で、配合物を適切な方法で送達するデバイスから投与されることができる。
【０１８１】
組成物
本発明の方法で使用される組成物は、有効量の本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む。そのような組成物の例ならびにどのように配合するかは、より前の節および以下においても記載されている。ある態様において、組成物は、１以上のＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む。例えば、ＣＤ１２３抗体は、ヒトＣＤ１２３を認識する。ある態様において、ＣＤ１２３抗体は、ヒト抗体、ヒト化抗体またはキメラ抗体である。ある態様において、ＣＤ１２３抗体は、抗体に媒介される溶解またはＡＤＣＣのような所望の免疫応答を誘発することができる定常領域を含む。他の態様において、ＣＤ１２３抗体は、抗体に媒介される溶解またはＡＤＣＣのような望まれない、または望ましくない免疫応答を誘発しない定常領域を含む。他の態様において、ＣＤ１２３抗体は、抗体の１つ以上のＣＤＲ（単数または複数）（例えば１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、またはある態様において６つ全部のＣＤＲ）を含む。
【０１８２】
組成物は、１種類より多くのＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣ（例えばＣＤ１２３の異なるエピトープを認識するＣＤ１２３抗体の混合物）を含むことができることが、理解されている。他の典型的な組成物は、同じエピトープ（単数または複数）を認識する１種類より多くのＣＤ１２３抗体もしくはＣＤ１２３  ＡＤＣまたはＣＤ１２３（例えばヒトＣＤ１２３）の異なるエピトープに結合する異なる種のＣＤ１２３抗体もしくはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む。
【０１８３】
ある態様において、ＣＤ１２３抗体は、１種類以上の追加の療法剤の投与との組み合わせで投与されることができる。これらは、化学療法剤、ワクチン、ＣＡＲ−Ｔ細胞ベースの療法、放射線療法、サイトカイン療法、ワクチン、ＣＤ１２３二重特異性抗体、他の免疫抑制経路の阻害剤、血管新生の阻害剤、Ｔ細胞活性化剤、代謝経路の阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、アデノシン経路の阻害剤、インライタ、ＡＬＫ阻害剤およびスニチニブを含むがそれらに限定されないチロシンキナーゼ阻害剤、ＢＲＡＦ阻害剤、後成的修飾剤、ＩＤＯ１阻害剤、Ｔｒｅｇ細胞の、および／または骨髄系由来サプレッサー細胞の阻害剤または枯渇剤（ｄｅｐｌｅｔｏｒ）、ＪＡＫ阻害剤、ＳＴＡＴ阻害剤、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤、生物療法剤（ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、他の成長因子受容体、ＣＤ２０、ＣＤ４０、ＣＤ−４０Ｌ、ＣＴＬＡ−４、ＯＸ−４０、４−１ＢＢ、ＣＤ１２３、ＰＤ−Ｌ１、ＴＩＧＩＴおよびＩＣＯＳに対する抗体を含むがそれらに限定されない）、免疫原性薬剤（例えば減弱した癌性細胞、腫瘍抗原、抗原提示細胞、例えば腫瘍由来の抗原または核酸でパルスされた樹状細胞、免疫刺激性サイトカイン（例えばＩＬ−２、ＩＦＮα２、ＧＭ−ＣＳＦ）および免疫刺激性サイトカイン、例えばＧＭ−ＣＳＦ（それに限定されない）をコードする遺伝子をトランスフェクションされた細胞）を含むが、それらに限定されない。化学療法剤の例は、以下の薬剤を含む：アルキル化剤、例えばチオテパおよびシクロホスファミド；アルキルスルホネート類、例えばブスルファン、インプロスルファンおよびピポスルファン；アジリジン類、例えばベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）、およびウレドーパ；エチレンイミン類およびメチルアメラミン類（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅｓ）（アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミドおよびトリメチロールメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）を含む）；アセトゲニン類（特にブラタシンおよびブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体であるトポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシンおよびビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン類（特にクリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（その合成類似体であるＫＷ−２１８９およびＣＢＩ−ＴＭＩを含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンジスタチン（ｓｐｏｎｇｉｓｔａｔｉｎ）；ナイトロジェンマスタード、例えばクロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベンビチン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン、プレドニムスチン、トロフォスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソウレア（ｎｉｔｒｏｓｕｒｅａｓ）、例えばカルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン；抗生物質、例えばエンジイン系抗生物質（例えばカリケアマイシ���、特にカリケアマイシンガンマ１ＩおよびカリケアマイシンファイＩ１、例えばAgnew, Chem. Intl. Ed. Engl., 33:183-186 (1994)を参照）；ダイネミシン（ｄｙｎｅｍｉｃｉｎ）（ダイネミシンＡを含む）；ビスホスホネート類、例えばクロドロネート；エスペラミシン；ならびにネオカルジノスタチン発色団および関連する色素タンパク質エンジイン系抗生物質発色団）、アクラシノマイシン類（ａｃｌａｃｉｎｏｍｙｓｉｎｓ）、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン類、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン（ｃａｍｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルチノフィリン、クロモマイシン類、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシンおよびデオキシドキソルビシンを含む）、ペグ化リポソームドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン類、例えばマイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン類、ぺプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗剤、例えばメトトレキサートおよび５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸類似体、例えばデノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート；プリン類似体、例えばフルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えばアンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン；アンドロゲン類、例えばカルステロン、ドロモスタノロンプロピオネート、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗副腎薬、例えばアミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補充剤、例えばフォリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ  ａｃｉｄ）；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド（ａｌｄｏｐｈｏｓｐｈａｒｎｉｄｅ  ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ）；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトレキサート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）；デフォファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）；デメコルチン；ジアジコン；エフロルニチン（ｅｌｆｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダミン；メイタンシノイド類、例えばメイタンシンおよびアンサマイトシン類；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン類（特にＴ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡおよびアングイジン）；ウレタン；ビンデシン���ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（“Ａｒａ−Ｃ”）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド類、例えばパクリタキセルおよびドセタキセル；クロラムブシル；ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えばシスプラチンおよびカルボプラチン；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイド類、例えばレチノイン酸；カペシタビン；ならびに上記のいずれかの薬学的に許容可能な塩類、酸または誘導体。例えばタモキシフェン、ラロキシフェン、ドロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストンおよびトレミフェン（Ｆａｒｅｓｔｏｎ）を含む抗エストロゲン類および選択的エストロゲン受容体調節薬（ＳＥＲＭ）のような腫瘍に対するホルモン作用を制御または阻害するように作用する抗ホルモン剤；副腎におけるエストロゲン産生を制御する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、例えば４（５）−イミダゾール類、アミノグルテチミド、酢酸メゲストロール、エキセメスタン、フォルメスタン、ファドロゾール、ボロゾール、レトロゾールおよびアナストロゾール；ならびに抗アンドロゲン薬、例えばフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリドおよびゴセレリン；ならびに上記のいずれかの薬学的に許容可能な塩類、酸または誘導体も、含まれる。
【０１８４】
ある態様において、ＣＤ１２３抗体は、免疫チェックポイント調節因子を標的とする１種類以上の他の療法剤、例えば（限定ではなく）ＣＤ１２３、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４、ＬＡＧ−３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、Ｂ７−ＤＣ（ＰＤ−Ｌ２）、Ｂ７−Ｈ５、Ｂ７−Ｈ６、Ｂ７−Ｈ８、Ｂ７−Ｈ２、Ｂ７−１、Ｂ７−２、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳ−Ｌ、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ２、ＣＤ４７、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ４８、ＣＤ５８、ＣＤ２２６、ＣＤ１５５、ＣＤ１１２、ＬＡＩＲ１、２Ｂ４、ＢＴＬＡ、ＣＤ１６０、ＴＩＭ１、ＴＩＭ−３、ＴＩＭ４、ＶＩＳＴＡ（ＰＤ−Ｈ１）、ＯＸ４０、ＯＸ４０Ｌ、ＧＩＴＲ、ＧＩＴＲＬ、ＣＤ７０、ＣＤ２７、４−１ＢＢ、４−ＢＢＬ、ＤＲ３、ＴＬ１Ａ、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ３０、ＣＤ３０Ｌ、ＬＩＧＨＴ、ＨＶＥＭ、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１、ＣＤ１５０）、ＳＬＡＭＦ２（ＣＤ４８）、ＳＬＡＭＦ３（ＣＤ２２９）、ＳＬＡＭＦ４（２Ｂ４、ＣＤ２４４）、ＳＬＡＭＦ５（ＣＤ８４）、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ−Ａ）、ＳＬＡＭＣＦ７（ＣＳ１）、ＳＬＡＭＦ８（ＢＬＡＭＥ）、ＳＬＡＭＦ９（ＣＤ２Ｆ）、ＣＤ２８、ＣＥＡＣＡＭ１（ＣＤ６６ａ）、ＣＥＡＣＡＭ３、ＣＥＡＣＡＭ４、ＣＥＡＣＡＭ５、ＣＥＡＣＡＭ６、ＣＥＡＣＡＭ７、ＣＥＡＣＡＭ８、ＣＥＡＣＡＭ１−３ＡＳ、ＣＥＡＣＡＭ３Ｃ２、ＣＥＡＣＡＭ１−１５、ＰＳＧ１−１１、ＣＥＡＣＡＭ１−４Ｃ１、ＣＥＡＣＡＭ１−４Ｓ、ＣＥＡＣＡＭ１−４Ｌ、ＩＤＯ、ＴＤＯ、ＣＣＲ２、ＣＤ３９−ＣＤ７３−アデノシン経路（Ａ２ＡＲ）、ＢＴＫ類、ＴＩＫ類、ＣＸＣＲ２、ＣＣＲ４、ＣＣＲ８、ＣＣＲ５、ＶＥＧＦ経路、ＣＳＦ−１または自然免疫応答調節因子を標的とする薬剤と合わせて用いられる。ある態様において、ＣＤ１２３抗体は、例えば抗ＰＤ−Ｌ１アンタゴニスト抗体、例えばＢＭＳ−９３６５５９（ＭＤＸ−１１０５）；ＣＤ１２３抗体、例えばニボルマブ、ペンブロリズマブおよびピディリズマブ；抗ＣＴＬＡ−４アンタゴニスト抗体、例えばイピリムマブ；抗ＬＡＧ−３アンタゴニスト抗体、例えばＢＭＳ−９８６０１６およびＩＭＰ７０１；抗ＴＩＭ−３アンタゴニスト抗体；抗Ｂ７−Ｈ３アンタゴニスト抗体、例えばＭＧＡ２７１；抗ＶＩＳＴＡアンタゴニスト抗体；抗ＴＩＧＩＴアンタゴニスト抗体；抗ＣＤ２８アンタゴニスト抗体；抗ＣＤ８０抗体；抗ＣＤ８６抗体；抗Ｂ７−Ｈ４アンタゴニスト抗体；抗ＩＣＯＳアゴニスト抗体；抗ＣＤ２８アゴニスト抗体；自然免疫応答調節因子（例えばＴＬＲ類、ＫＩＲ、ＮＫＧ２Ａ）およびＩＤＯ阻害剤と合わせて用いられる。ある態様において、ＣＤ１２３抗体は、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）アゴニスト、例えばＰＦ−０５０８２５６６またはＢＭＳ−６６３５１３と合わせて用いられる。ある態様において、ＣＤ１２３抗体は、ＯＸ４０アゴニスト、例えば抗ＯＸ−４０アゴニスト抗体と合わせて用いられる。ある態様において、ＣＤ１２３抗体は、ＧＩＴＲアゴニスト、例えば抗ＧＩＴＲアゴニスト抗体、例えば（限定ではなく）ＴＲＸ５１８と合わせて用いられる。ある態様において、ＣＤ１２３抗体は、ＩＤＯ阻害剤と合わせて用いられる。ある態様において、ＣＤ１２３抗体は、サイトカイン療法、例えば（限定ではなく）ＩＬ−１５、ＣＳＦ−１、ＭＣＳＦ−１等と合わせて用いられる。
【０１８５】
ある態様において、ＣＤ１２３抗体は、１種類以上の他の療法用抗体、例えば（限定ではなく）ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ４０、ＣＤ５２またはＣＣＲ４を標的とする抗体と合わせて用いられる。
【０１８６】
ある態様において、ＣＤ１２３抗体療法は、他の薬剤処置に数分〜数週間の範囲の間隔で先行することができ、または他の薬剤処置の数分〜数週間の範囲の間隔後に行われることができる。他の薬剤および／またはタンパク質もしくはポリヌクレオチドが別々に投与される態様において、一般に、本発明の薬剤および組成物がまだ対象に対して有利に組み合わせられた作用を発揮することができるであろうように、各送達の間でかなりの期間が経過しないことを確実にするであろう。そのような場合には、両方の治療法（ｍｏｄａｌｉｔｉｅｓ）を、互いに約１２〜２４時間以内、より好ましくは互いに約６〜１２時間以内に施すことができることが、意図されている。しかし、ある状況では、それぞれの投与の間に数日（２、３、４、５、６または７）〜数週間（１、２、３、４、５、６、７または８）が経過する場合、投与のための期間をかなり延長することが、望ましい可能性がある。
【０１８７】
ある態様において、ＣＤ１２３抗体組成物は、クリゾチニブ、パルボシクリブ、ゲムシタビン、シクロホスファミド、フルオロウラシル、ＦＯＬＦＯＸ、フォリン酸、オキサリプラチン、アキシチニブ、リンゴ酸スニチニブ、トファシチニブ、ベバシズマブ、リツキシマブおよびトラスツズマブ（ｔｒａｚｔｕｚｕｍａｂ）から選択される第２の薬剤を含む。
【０１８８】
ある態様において、ＣＤ１２３抗体組成物は、さらに手術、放射線療法、化学療法、標的療法、免疫療法、ホルモン療法、血管新生阻害および緩和ケアからなる含む群から選択される伝統的な療法を含む処置計画と組み合わせられる。
【０１８９】
本発明において用いられる組成物は、凍結乾燥された配合物または水溶液の形態で、さらに薬学的に許容可能なキャリヤー、賦形剤、または安定剤を含むことができる(Remington: The Science and practice of Pharmacy 第21版, 2005, Lippincott Williams and Wilkins, 編者K. E. Hoover)。許容可能なキャリヤー、賦形剤、または安定剤は、その投与量および濃度において受容者に対して非毒性であり、緩衝剤、例えばホスフェート、シトレート、および他の有機酸；アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤；保存剤（例えば、塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール；アルキルパラベン類、例えばメチルまたはプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；およびｍ−クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えばポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、もしくはリジン；グルコース、マンノース、もしくはデキストラン類を含む単糖類、二糖類、および他の炭水化物；キレート剤、例えばＥＤＴＡ；糖類、例えばスクロース、マンニトール、トレハロースもしくはソルビトール；塩形成対イオン、例えばナトリウム；金属複合体（例えばＺｎ−タンパク質複合体）；および／または非イオン性界面活性剤、例えばＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）もしくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含むことができる。薬学的に許容可能な賦形剤は、本明細書においてさらに記載される。
【０１９０】
ポリヌクレオチド、ベクターおよび宿主細胞
本発明は、本発明の抗体をコードする単離されたポリヌクレオチドならびにそのポリヌクレオチドを含むベクターおよび宿主細胞も提供する。別の側面において、本発明は、本発明のポリヌクレオチドのいずれかを含む組成物（例えば医薬組成物）を提供する。ある態様において、組成物は、本明細書で記載される抗体のいずれかをコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターを含む。別の側面において、本発明は、本明細書で記載されるポリヌクレオチドのいずれかを作製する方法を提供する。
【０１９１】
あらゆるそのような配列に相補的なポリヌクレオチドも、本発明に包含される。ポリヌクレオチドは、一本鎖（コードまたはアンチセンス）または二本鎖であることができ、ＤＮＡ（ゲノム、ｃＤＮＡまたは合成）またはＲＮＡ分子であることができる。ＲＮＡ分子は、イントロンを含有し、１対１の様式でＤＮＡ分子に対応するＨｎＲＮＡ分子、およびイントロンを含有しないｍＲＮＡ分子を含む。追加のコードまたは非コード配列が、本発明のポリヌクレオチド内に存在していることができるが、存在している必要はなく、ポリヌクレオチドは、他の分子および／または支持体材料に連結されていることができるが、連結されている必要はない。
【０１９２】
ポリヌクレオチドは、ネイティブ配列（すなわち抗体またはその一部をコードする内因性配列）を含むことができ、またはそのような配列のバリアントを含むことができる。ポリヌクレオチドのバリアントは、ネイティブの免疫反応性分子と比較してコードされたポリペプチドの免疫反応性が減少しないように１つ以上の置換、付加、欠失および／または挿入を含有する。コードされたポリペプチドの免疫反応性に対する作用は、一般に、本明細書で記載されるように評価され得る。バリアントは、好ましくは天然抗体またはその一部をコードするポリヌクレオチド配列に対して少なくとも約７０％の同一性、より好ましくは少なくとも約８０％の同一性、さらにもっと好ましくは少なくとも約９０％の同一性、最も好ましくは少なくとも約９５％の同一性を示す。
【０１９３】
２つのポリヌクレオチドまたはポリペプチド配列は、以下に記載されるように、最大限の一致のためにアラインメントされた際にその２つの配列中のヌクレオチドまたはアミノ酸の配列が同じである場合、“同一”であると言われる。２つの配列間の比較は、典型的には、比較ウィンドウにわたって配列を比較して配列が類似する局所領域を同定および比較することにより実施される。本明細書で使用される“比較ウィンドウ”は、少なくとも約２０個、通常は約３０〜約７５個または約４０〜約５０個の連続する位置のセグメントを指し、ここで、ある配列が、同じ数の連続する位置の参照配列に対して、２つの配列が最適にアラインメントされた後に比較されることができる。
【０１９４】
比較のための配列の最適なアラインメントは、生物情報学ソフトウェアのＬａｓｅｒｇｅｎｅスイート（ＤＮＡＳＴＡＲ，Ｉｎｃ．，ウィスコンシン州マディソン）においてＭｅｇａｌｉｇｎプログラムを用いて、初期設定のパラメーターを用いて実施されることができる。このプログラムは、以下の参考文献において記載されているいくつかのアラインメントスキームを取り入れている：Dayhoff, M.O., 1978, A model of evolutionary change in proteins - Matrices for detecting distant relationships. In Dayhoff, M.O. (編者) Atlas of Protein Sequence and Structure, National Biomedical Research Foundation, ワシントンDC Vol. 5, 補遺 3, pp. 345-358; Hein J., 1990, Unified Approach to Alignment and Phylogenes pp. 626-645 Methods in Enzymology vol. 183, Academic Press, Inc., カリフォルニア州サンディエゴ; Higgins, D.G. and Sharp, P.M., 1989, CABIOS 5:151-153; Myers, E.W. and Muller W., 1988, CABIOS 4:11-17; Robinson, E.D., 1971, Comb. Theor. 11:105; Santou, N., Nes, M., 1987, Mol. Biol. Evol. 4:406-425; Sneath, P.H.A. and Sokal, R.R., 1973, Numerical Taxonomy the Principles and Practice of Numerical Taxonomy, Freeman Press, カリフォルニア州サンディエゴ; Wilbur, W.J. and Lipman, D.J., 1983, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80:726-730.
好ましくは、“配列同一性の百分率”は、２つの最適にアラインメントされた配列を少なくとも２０個の位置の比較のウィンドウにわたって比較することによって決定され、ここで、比較ウィンドウ中のポリヌクレオチドまたはポリペプチド配列の一部は、（追加または欠失を含まない）参照配列と比較して、２つの配列の最適なアラインメントのために、２０パーセント以下、通常は５〜１５パーセントまたは１０〜１２パーセントの付加または欠失（すなわちギャップ）を含んでいることができる。その百分率は、両方の配列中に同一の核酸塩基またはアミノ酸残基が存在する位置の数を決定してマッチする位置の数を得て、マッチする位置の数を参照配列中の位置の総数（すなわちウィンドウサイズ）で割り、その結果を１００倍して配列同一性の百分率を得ることによって計算される。
【０１９５】
バリアントはまた（または代わりに）、天然遺伝子またはその一部もしくは相補配列に実質的に相同であることができる。そのようなポリヌクレオチドバリアントは、天然の抗体をコードする天然存在ＤＮＡ配列（または相補配列）に対して適度にストリンジェントな条件下でハイブリダイズすることができる。
【０１９６】
適切な“適度にストリンジェントな条件”は、５×ＳＳＣ、０．５％ＳＤＳ、１．０ｍＭ  ＥＤＴＡ（ｐＨ８．０）の溶液中で予備洗浄し；５０℃〜６５℃、５×ＳＳＣにおいて一夜ハイブリダイズさせ；その後０．１％ＳＤＳを含有する２×、０．５×および０．２×ＳＳＣのそれぞれで６５℃で２０分間、２回洗浄することを含む。
【０１９７】
本明細書で用いられる際、“高度にストリンジェントな条件”または“高ストリンジェンシー条件”は、（１）洗浄のために低イオン強度および高温、例えば０．０１５Ｍ塩化ナトリウム／０．００１５Ｍクエン酸ナトリウム／０．１％ドデシル硫酸ナトリウムを５０℃で使用する；（２）ハイブリダイゼーションの間に変性剤、例えばホルムアミド、例えば５０％（ｖ／ｖ）ホルムアミドを、０．１％ウシ血清アルブミン／０．１％Ｆｉｃｏｌｌ／０．１％ポリビニルピロリドン／５０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．５）と共に、７５０ｍＭ塩化ナトリウム、７５ｍＭクエン酸ナトリウムと共に、４２℃で使用する；または（３）５０％ホルムアミド、５×ＳＳＣ（０．７５Ｍ  ＮａＣｌ、０．０７５Ｍクエン酸ナトリウム）、５０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ６．８）、０．１％ピロリン酸ナトリウム、５×Ｄｅｎｈａｒｄｔ溶液、超音波処理されたサケ精子ＤＮＡ（５０μｇ／ｍｌ）、０．１％  ＳＤＳおよび１０％デキストラン硫酸を４２℃で使用し、０．２×ＳＳＣ（塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム）中で４２℃で洗浄し、５０％ホルムアミド中で５５℃で洗浄し、続いて５５℃におけるＥＤＴＡを含有する０．１×ＳＳＣからなる高ストリンジェンシー洗浄を行う条件である。当業者は、プローブの長さ等のような要因に適合させるために必要に応じて温度、イオン強度等をどのように調整するかを認識するであろう。
【０１９８】
当業者は、遺伝暗号の縮重の結果として本明細書で記載されるポリペプチドをコードする多くのヌクレオチド配列が存在することを理解するであろう。これらのポリヌクレオチドのいくつかは、あらゆる天然遺伝子のヌクレオチド配列に対する最小限の相同性を有する。それでもなお、コドン使用頻度における違いによって変動するポリヌクレオチドは、本発明によって特に意図されている。さらに、本明細書で提供されるポリヌクレオチド配列を含む遺伝子の対立遺伝子は、本発明の範囲内である。対立遺伝子は、ヌクレオチドの欠失、付加および／または置換のような１以上の変異の結果として変化している内因性遺伝子である。結果として生じるｍＲＮＡおよびタンパク質は、変化した構造または機能を有し得るが、有する必要はない。対立遺伝子は、標準的な技法（例えばハイブリダイゼーション、増幅および／またはデータベース配列比較）を用いて同定されることができる。
【０１９９】
本発明のポリヌクレオチドは、化学合成、組換え法またはＰＣＲを用いて得られることができる。化学的ポリヌクレオチド合成の方法は、当該分野で周知であり、本明細書で詳細に記載される必要はない。当業者は、本明細書で提供される配列および商業的なＤＮＡ合成装置を使用して所望のＤＮＡ配列を生成することができる。
【０２００】
組換え法を用いてポリヌクレオチドを調製するために、所望の配列を含むポリヌクレオチドが、適当なベクター中に挿入されることができ、そのベクターが、本明細書でさらに論じるように、今度は複製および増幅のために適当な宿主細胞中に導入されることができる。ポリヌクレオチドは、当技法分野で既知のあらゆる手段により宿主細胞中に挿入されることができる。細胞は、直接的な取り込み、エンドサイトーシス、トランスフェクション、Ｆ接合（Ｆ−ｍａｔｉｎｇ）または電気穿孔法によって外因性ポリヌクレオチドを導入することにより形質転換される。一度導入されると、外因性ポリヌクレオチドは、組み込まれないベクター（例えばプラスミド）として細胞内で維持されることができ、または宿主細胞ゲノム中に組み込まれることができる。そうして増幅されたポリヌクレオチドは、当該技術内で周知の方法により宿主細胞から分離されることができる。例えばSambrook et al., 1989を参照。
【０２０１】
あるいは、ＰＣＲは、ＤＮＡ配列の複製を可能にする。ＰＣＲ技術は、当該技術で周知であり、米国特許第４，６８３，１９５号、第４，８００，１５９号、第４，７５４，０６５号および第４，６８３，２０２号ならびにPCR: The Polymerase Chain Reaction, Mullis et al. 編集, Birkauswer Press, Boston, 1994において記載されている。
【０２０２】
ＲＮＡは、単離されたＤＮＡを適当なベクター中で使用し、それを適当な宿主細胞中に挿入することにより得られることができる。細胞が複製し、ＤＮＡがＲＮＡに転写された際、次いでＲＮＡは、例えばSambrook et al., 1989（上記）において述べられているような当業者に周知の方法を用いて単離されることができる。
【０２０３】
適切なクローニングベクターは、標準的な技法に従って構築されることができ、または当該技術で利用可能な多数のクローニングベクターから選択されることができる。選択されるクローニングベクターは使用されることが意図される宿主細胞に応じて異なり得るが、有用なクローニングベクターは、一般に自己複製する能力を有すると考えられ、特定の制限エンドヌクレアーゼに関する単一の標的を有することができ、かつ／またはそのベクターを含有するクローンの選択において使用されることができるマーカーに関する遺伝子を有することができる。適切な例は、プラスミドおよび細菌性ウイルス、例えばｐＵＣ１８、ｐＵＣ１９、Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ（例えばｐＢＳ  ＳＫ＋）およびその誘導体、ｍｐ１８、ｍｐ１９、ｐＢＲ３２２、ｐＭＢ９、ＣｏｌＥ１、ｐＣＲ１、ＲＰ４、ファージＤＮＡならびにシャトルベクター、例えばｐＳＡ３およびｐＡＴ２８を含む。これらおよび多くの他のクローニングベクターは、ＢｉｏＲａｄ、ＳｔｒａｔｅｇｅｎｅおよびＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎのような商業的な供給業者から入手可能である。
【０２０４】
発現ベクターは、一般に本発明のポリヌクレオチドを含有する複製可能なポリヌクレオチドコンストラクトである。発現ベクターは、エピソームとしてまたは染色体ＤＮＡの一体部分としてのどちらかで宿主細胞中で複製可能でなければならないことが、暗示されている。適切な発現ベクターは、プラスミド、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、レトロウイルス、コスミドを含むウイルスベクターおよびＰＣＴ国際公開第８７／０４４６２号において開示されている発現ベクター（単数または複数）を含むが、それらに限定されない。ベクター構成要素は、一般に以下のものの１つ以上を含むが、それらに限定されない：シグナル配列；複製起点；１つ以上のマーカー遺伝子；適切な転写調節エレメント（例えばプロモーター、エンハンサーおよびターミネーター）。発現（すなわち翻訳）のためには、通常は１つ以上の翻訳調節エレメント、例えばリボソーム結合部位、翻訳開始部位および停止コドンも、必要とされる。
【０２０５】
対象のポリヌクレオチドを含有するベクターは、電気穿孔法、塩化カルシウム、塩化ルビジウム、リン酸カルシウム、ＤＥＡＥ−デキストランまたは他の物質を用いたトランスフェクション；微粒子銃（ｍｉｃｒｏｐｒｏｊｅｃｔｉｌｅ  ｂｏｍｂａｒｄｍｅｎｔ）；リポフェクション；および感染（例えばベクターがワクシニアウイルスのような感染性因子である場合）を含むいくつかの適切な手段のいずれかによって宿主細胞中に導入されることができる。ベクターまたはポリヌクレオチドの導入の選択は、しばしば宿主細胞の特徴に依存するであろう。
【０２０６】
本発明は、本明細書で記載されたポリヌクレオチドのいずれかを含む宿主細胞も提供する。異種ＤＮＡを過剰発現することが可能なあらゆる宿主細胞は、対象の抗体、ポリペプチドまたはタンパク質をコードする遺伝子を単離する目的で使用されることができる。哺乳類宿主細胞の非限定的な例は、ＣＯＳ細胞、ＨｅＬａ細胞およびＣＨＯ細胞を含むが、それらに限定されない。ＰＣＴ国際公開第８７／０４４６２号も参照。適切な非哺乳類宿主細胞は、原核生物（例えば大腸菌またはＢ．サブティリス（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｌｉｓ）および酵母（例えば出芽酵母、分裂酵母；またはＫ．ラクティス（Ｋ．ｌａｃｔｉｓ））を含む。好ましくは、宿主細胞は、宿主細胞中の対応する内因性抗体または（存在する場合は）対象のタンパク質のレベルよりも約５倍高いレベル、より好ましくは約１０倍高いレベル、さらにもっと好ましくは約２０倍高いレベルでｃＤＮＡを発現する。ＣＤ１２３への特異的結合に関する宿主細胞のスクリーニングは、免疫アッセイまたはＦＡＣＳによって達成される。対象の抗体またはタンパク質を過剰発現する細胞が、同定されることができる。
【０２０７】
キット
本発明は、即席の方法での使用のためのキットも提供する。本発明のキットは、本明細書で記載されるＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣを含む１つ以上の容器および本明細書で記載される本発明の方法のいずれかに従う使用のための説明書を含む。一般に、これらの説明書は、上記の療法的処置のためのＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの投与の記載を含む。
【０２０８】
本明細書で記載されたＣＤ１２３抗体またはＣＤ１２３  ＡＤＣの使用に関する説明書は、一般に、意図される処置に関する投与量、投与スケジュール、および投与経路に関する情報を含む。容器は、単位用量、バルク包装（例えば多数回用量包装）または小単位用量であることができる。本発明のキット中に供給される説明書は、典型的にはラベルまたは添付文書（例えばキット中に含まれる紙シート）上に書かれた説明書であるが、機械で読み取り可能な説明書（例えば磁気または光学記憶ディスク上に保持された説明書）も許容可能である。
【０２０９】
本発明のキットは、適切な包装中にある。適切な包装は、バイアル、ボトル、広口瓶、柔軟な包装（例えば密封されたマイラまたはプラスチックの袋）等を含むが、それらに限定されない。特定のデバイス、例えば吸入器、経鼻投与デバイス（例えばアトマイザー）またはミニポンプのような注入デバイスとの組み合わせでの使用のための包装も、意図されている。キットは、無菌のアクセスポートを有することができる（例えば、その容器は、皮下注射針により突き刺し可能な栓を有する静脈内溶液バッグまたはバイアルであることができる）。容器も、無菌のアクセスポートを有することができる（例えば、容器は、皮下注射針により突き刺し可能な栓を有する静脈内溶液バッグまたはバイアルであることができる）。組成物中の少なくとも１種類の有効薬剤は、ＣＤ１２３抗体である。容器は、さらに第２の薬学的に有効な薬剤を含むことができる。
【０２１０】
キットは、場合により追加の構成要素、例えば緩衝剤および判断情報を提供することができる。通常は、キットは、容器およびその容器上のまたはその容器と関係するラベルまたは添付文書（単数または複数）を含む。
【０２１１】
生物学的寄託
本発明の代表的な材料は、２０１７年６月２９日にアメリカ合衆国培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ）に寄託された。ＡＴＣＣ受入番号ＰＴＡ−１２４２８３を有するベクターは、ヒト化ＣＤ１２３抗体重鎖配列をコードするポリヌクレオチドであり、ＡＴＣＣ受入番号ＰＴＡ−１２４２８４を有するベクターは、ヒト化ＣＤ１２３抗体軽鎖配列をコードするポリヌクレオチドである。その寄託は、特許手続上の微生物の寄託の国際承認に関するブダペスト条約およびその下での規制（ブダペスト条約）の規定の下でなされた。これは、寄託の生存可能な培養物の維持を寄託の日から３０年間保証する。寄託は、ブダペスト条約の条件の下でＡＴＣＣにより入手可能になり、Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．およびＡＴＣＣの間の合意の対象であると考えられ、それは、関連する米国特許の交付の際に、またはあらゆる米国または外国特許出願の公共への公開（ｌａｙｉｎｇ  ｏｐｅｎ）の際に（どちらが先に到来しても）、寄託の培養物の子孫の公共への恒久的かつ無制限の入手可能性を保証し、アメリカ合衆国特許商標庁長官により３５  Ｕ．Ｓ．Ｃ．１２２項およびそれに従う長官の規則（３７  Ｃ．Ｆ．Ｒ．  １．１４項を含み、特に８８６  ＯＧ  ６３８に関連する）に従ってそれに対する権利を有すると決定された者への子孫の入手可能性を保証する。
【０２１２】
本出願の譲受人は、寄託された材料の培養物が適切な条件下で培養された際に死んだ、または失われた、または破壊されたはずである場合、その材料が、通知された時点で速やかに同じ材料の別のものと交換されるであろうことに同意している。寄託された材料の入手可能性は、その特許法に従っていずれかの政府の権限の下で与えられた権利に違反して本発明を実施するためのライセンスとして解釈されるべきではない。
【実施例】
【０２１３】
以下の実施例は、説明的な目的のためだけに提供され、本発明の範囲を限定することは一切意図されていない。実際、本明細書において示され、記載されたものに加えて、本発明の様々な改変が、前記から当業者に明らかになり、添付された特許請求の範囲内に入るであろう。
【０２１４】
実施例１：ＣＤ１２３抗体薬物コンジュゲートのインビトロ細胞毒性
この実施例は、様々なＣＤ１２３  ＡＤＣの細胞毒性を説明する。
この研究では、様々なＣＤ１２３  ＡＤＣの細胞毒性が、以下のＡＭＬ細胞株における２Ｄインビトロ細胞毒性アッセイを用いて試験された：ＭＯＬＭ１３、ＭＶ４１１、ＪＶＭ３、Ｇｒａｎａｔａ５１９、ＯＣＩ−ＡＭＬ３、ＮＢ４およびＨＬ６０。表４は、使用されたそれぞれの細胞の各々に関するＣＤ１２３の発現レベルを示している。
【０２１５】
【表５】
2021500055.tif 000027
【０２１６】
試験されたＡＤＣの最初の群は、ＡｃＬｙｓＶａｌＣｉｔＰＡＢＣリンカーを有するＣＰＩにコンジュゲートされたＣＤ１２３  ＡＤＣであった。これらのＡＤＣは、１８Ｇ３−ＣＰＩ、１６Ｄ６−ＣＰＩ、３Ｄ１−ＣＰＩおよび２０Ｄ７−ＣＰＩであり、そのそれぞれが、約２の薬物：抗体比（ＤＡＲ）を有する。ＣＤ１２３  ＡＤＣの調製は、下記の実施例５において詳細に記載されている。約２のＤＡＲを有するＣＰＩ薬剤（“Ｎｅｇ．８．８”）を有する対照ＩｇＧ（ＣＤ１２３に結合しないＩｇＧ）が、陰性対照として用いられた。
【０２１７】
２Ｄインビトロ細胞毒性アッセイのため、ＡＭＬ細胞が、以下の用量のＡＤＣまたは対照と共に９６時間インキュベートされた：１００ｎｇ／ｍｌ、２５ｎｇ／ｍｌ、６．２５ｎｇ／ｍｌ、１．５６ｎｇ／ｍｌ、０．３９ｎｇ／ｍｌ、０．０９ｎｇ／ｍｌ、０．０２４ｎｇ／ｍｌ、０．００６ｎｇ／ｍｌ、０．００２ｎｇ／ｍｌおよび０．０００４ｎｇ／ｍｌ。細胞生存度が、ＣｅｌｌｔｉｔｅｒＧｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ、ウィスコンシン州マディソン）を用いて測定され、発光が、Ｖｉｃｔｏｒプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、マサチューセッツ州ウォルサム）を用いて決定された。５０％阻害値（ＩＣ５０）の計算は、ＸＬｆｉｔ（ＩＤＢＳ、マサチューセッツ州ボストン）４パラメーター曲線当てはめを用いて生成された。結果が、表５において要約されている。
【０２１８】
【表６】
2021500055.tif 000028
【０２１９】
結果は、ＣＤ１２３−ＣＰＩはＣＤ１２３を発現する細胞に対して細胞毒性であり、それらは非特異的ＣＰ１（Ｎｅｇ８．８−ＣＰＩ）よりも細胞毒性が高いことを示している。例えば、ＭＯＬＭ１３細胞において、ＣＤ１２３  ＡＤＣ  １８Ｇ３−ＣＰＩ、１６Ｄ６−ＣＰＩおよび３Ｄ１−ＣＰＩのＩＣ５０は、それぞれ０．２５±０．０４ｎｇ／ｍｌ、０．２２±０．０５ｎｇ／ｍｌ、０．３３±０．０６ｎｇ／ｍｌおよび０．３２±０．１４ｎｇ／ｍｌである。対照的に、Ｎｅｇ．８．８−ＣＰＩのＩＣ５０は、＞８８．４３±１８．６６であった（表５、最後の横列）。約２のＤＡＲを有するＮｅｇ．８．８−ＣＰＩは、試験された最高用量において実質的により活性が低かった（表５、最後の横列）。示されたＣＤ１２３  ＡＤＣのＩＣ５０値は、細胞上のＣＤ１２３発現のレベルとよく相関している（表４および５）。例えば、高レベルのＣＤ１２３を発現するＭＶ４１１細胞における１８Ｇ３−ＣＰＩのＩＣ５０は、０．４１±０．０７である。対照的に、低レベルのＣＤ１２３を発現するＮＢ４細胞における１８Ｇ３−ＣＰＩのＩＣ５０は、６３．９２±３６．０８であり、ＣＤ１２３を発現しないＨＬ６０細胞における１８Ｇ３−ＣＰＩのＩＣ５０は、８４．４±３３．３０より大きい。
【０２２０】
ＣＤ１２３−１８Ｇ３  ＡＤＣが、異なる薬剤にコンジュゲートされた場合、ｉＰｒ−カリケアマイシンまたはＣＴＩ（グルクロニド）の両方が、類似した細胞毒性作用を有する。ｉＰｒ−カリケアマイシン（“ｉＰｒ”）にコンジュゲートされた１８Ｇ３に関する細胞毒性アッセイの結果が、表６において要約されている。ＣＴＩ（グルクロニド）にコンジュゲートされた１８Ｇ３に関する細胞毒性アッセイの結果が、表７において要約されている。
【０２２１】
【表７】
2021500055.tif 000029
【０２２２】
【表８】
2021500055.tif 000030
【０２２３】
これらのデータは、約２のＤＡＲを有するＣＤ１２３−ＡＤＣはＣＤ１２３を発現している癌細胞株において活性であり、細胞死を誘導するが、ＣＤ１２３を発現しない細胞では不活性であることを実証している。これは、これらのＡＤＣの効力および特異性を実証している。
【０２２４】
実施例２：インターロイキン−３（ＩＬ−３）シグナル伝達経路ならびにＣＤ１２３抗体およびＡＤＣの細胞毒性
この実施例は、ＩＬ−３シグナル伝達をブロックするＣＤ１２３抗体の能力およびＣＤ１２３  ＡＤＣの細胞毒性を説明する。
【０２２５】
この研究は、ＣＤ１２３抗体クローンのいずれかがＣＤ１２３／ＩＬ−３Ｒα発現ＴＦ−１細胞においてＩＬ−３結合部位に競合的に結合するかどうかを決定するために実施された。ＣＤ１２３／ＩＬ−３Ｒα発現ＴＦ−１細胞が、２０ｎｇ／ｍｌのＩＬ−３および以下のＣＤ１２３抗体と共インキュベーションされた：１００ｎｇ／ｍｌ、２５ｎｇ／ｍｌ、６．２５ｎｇ／ｍｌ、１．５６ｎｇ／ｍｌ、０．３９ｎｇ／ｍｌ、０．０９ｎｇ／ｍｌ、０．０２４ｎｇ／ｍｌ、０．００６ｎｇ／ｍｌ、０．００２ｎｇ／ｍｌおよび０．０００４ｎｇ／ｍｌの用量での３Ｄ１、１８Ｇ３および１６Ｄ６。ＣＤ１２３抗体７Ｇ３が、ＩＬ−３シグナル伝達経路を遮断することが示されているベンチマーク抗体として使用され、Ｎｅｇ  ８．８抗体が、陰性対照として使用された。細胞生存率を測定するＣＴＧアッセイのために、細胞は、３７℃で４日間処理された。処理期間後、細胞は、収集され、タンパク質が、調製された。ＳＴＡＴ５、リン酸化ＳＴＡＴ５およびアクチンレベルが、ウエスタンブロット分析を用いて分析された。ウェスタンブロットの結果が、図１において示されている。
【０２２６】
下流のシグナル伝達タンパク質であるリン酸化ＳＴＡＴ５（“ホスホ−Ｓｔａｔ５”）の存在は、ＩＬ−３シグナル伝達経路の活性化を示す。ＴＦ−１細胞のＩＬ−３単独またはＩＬ−３＋Ｎｅｇ．８．８対照抗体（“８．８”）による処理は、ホスホ−Ｓｔａｔ５の存在によって示されるように、ＩＬ−３シグナル伝達を活性化した（図１）。ＣＤ１２３抗体７Ｇ３での処置は、ＩＬ−３シグナル伝達を遮断する。ＣＤ１２３抗体３Ｄ１も、この経路を遮断した。対照的に、ＣＤ１２３抗体１８Ｇ３および１６Ｄ６は、ＩＬ−３に媒介されるＳＴＡＴ５リン酸化を遮断しなかった。
【０２２７】
ＣＤ１２３−１８Ｇ３−ＣＰＩおよびＣＤ１２３−１６Ｄ６−ＣＰＩの細胞毒性は、ＩＬ−３の存在下でもなお維持されている（表８）。
【０２２８】
【表９】
2021500055.tif 000031
【０２２９】
実施例３：ＣＤ１２３−ＡＤＣのインビボでの有効性
本実施例は、ＣＤ１２３  ＡＤＣのインビボでの有効性を説明する。
ＣＤ１２３  ＡＤＣの抗腫瘍活性が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞株異種移植片モデルを用いて、インビボで試験された。下記のそれぞれのモデルに関して、最初の用量が、第０日目に与えられた。腫瘍は、少なくとも週１回測定され、それらの体積が、式：腫瘍体積（ｍｍ３）＝０．５×（腫瘍の幅２）（腫瘍の長さ）で計算された。各処置群に関する平均腫瘍体積（±平均値の標準誤差）が、１０匹の動物を含めて計算された。全ての動物実験は、実験動物ケア評価認証協会によって認定された施設において、施設動物実験委員会のガイドラインおよび適切な動物研究の承認の下で実施された。ＣＤ１２３  ＡＤＣは、類別された（ａｓｓｏｒｔｅｄ）遺伝子変異または過剰発現した遺伝子および／もしくはタンパク質を有する細胞株において、用量依存的様式で高い有効性を実証した。
【０２３０】
Ａ．  Ｈ．１  ＭＯＬＭ１３  ＡＭＬ異種移植片
ＣＤ１２３  ＡＤＣの抗腫瘍活性が、ＮＯＤ／ＳＣＩＤ免疫不全マウスにおいて、ヒト腫瘍のインビボ成長に対して調べられた。皮下（ｓｃ）ＡＭＬモデルに関して、５×１０６個のＭＯＬＭ１３細胞が、メスのマウスの脇腹に皮下移植された。腫瘍が２００ｍｍ３の平均体積に達した際に、動物は、様々な処置群の間での腫瘍の大きさの均一性を確実にするために病期分類された（ｓｔａｇｅｄ）。ＭＯＬＭ１３  ＡＭＬ  ｓｃ異種移植片モデルは、ＰＢＳビヒクル、０．３ｍｇ／ｋｇもしくは１ｍｇ／ｋｇでのＣＤ１２３−ＣＰＩ（１８Ｇ３、１６Ｄ６または３Ｄ１）、または０．３ｍｇ／ｋｇもしくは１ｍｇ／ｋｇでの対照Ｎｅｇ−８．８−ＣＰＩを、４日ごとに４回（Ｑ４ｄｘ４）静脈内投与された。データが、表９において要約されている。
【０２３１】
【表１０−１】
2021500055.tif 000032
【０２３２】
【表１０−２】
2021500055.tif 000033
【０２３３】
ＣＤ１２３−ＣＰＩは、Ｎｅｇ．８．８−ＣＰＩと比較して有意に腫瘍を抑制した（表９）。０．３ｍｇ／ｋｇの用量では、３種類のＣＤ１２３  ＡＤＣ：１８Ｇ３−ＣＰＩ、１６Ｄ６−ＣＰＩおよび３Ｄ１−ＣＰＩの全てが細胞毒性であった。１７日目までに、各群における１０匹の動物のうちの１０匹が、腫瘍の退縮を示している。これらのマウスの全ては、少なくとも試験終了時である６０日目までは、腫瘍がない状態を維持していた。ＣＤ１２３  ＡＤＣの１ｍｇ／ｋｇの用量では、腫瘍の退縮は、より早く、１２日目までに起こった。
【０２３４】
これらのデータは、ＣＤ１２３−ＣＰＩがＭＯＬＭ１３  ＡＭＬ異種移植片腫瘍の増殖を抑制することを実証している。
より低い用量でのＣＤ１２３−ＡＤＣの有効性を試験するため、インビボでの有効性試験が、同じＭＯＬＭ１３モデルを用いて実施された。動物は、上記の通りに処置された。以下で表１０において示されているように、０．１ｍｇ／ｋｇでのＣＤ１２３−ＣＰＩは、全てのマウスにおいて、非常に有効に、そして用量依存的様式で腫瘍の成長を抑制した（表１０、中央の縦列“１８Ｇ３−ＣＰＩ”および“１６Ｄ６−ＣＰＩ”）。対照的に、Ｎｅｇ．８．８−ＣＰＩで処置されたマウスにおける腫瘍は、成長し続けた（表１０、右の縦列“Ｎｅｇ．８．８−ＣＰＩ”）。
【０２３５】
【表１１−１】
2021500055.tif 000034
【０２３６】
【表１１−２】
2021500055.tif 000035
【０２３７】
ＣＤ１２３−１８Ｇ３−ＣＴＩの有効性を試験するため、インビボでの有効性試験が、同じＭＯＬＭ１３モデルを用いて実施された。動物は、上記の通りに処置された。表１１において示されているように、ＣＤ１２３−１８Ｇ３−ＣＴＩでの処置は、マウスにおいて用量依存的様式で腫瘍の成長を抑制した。対照的に、Ｎｅｇ．８．８−ＣＴＩで処置されたマウスにおける腫瘍は、成長し続けた。
【０２３８】
【表１２−１】
2021500055.tif 000036
【０２３９】
【表１２−２】
2021500055.tif 000037
【０２４０】
Ｂ．  Ｈ．２  ＭＶ４−１１  ＡＭＬ異種移植片
ヒト腫瘍の成長に対するＣＤ１２３  ＡＤＣの作用が、免疫不全マウスを用いて評価された。皮下（ｓｃ）ＡＭＬモデルに関して、５×１０６個のＭＶ４−１１細胞が、メスのＮＯＤ−ＳＣＩＤマウスの脇腹に皮下移植された。腫瘍が２００ｍｍ３の平均体積に達した際に、動物は、様々な処置群の間での腫瘍の大きさの均一性を確実にするために病期分類された。ＭＶ４−１１  ＡＭＬ  ｓｃ異種移植片動物は、ＰＢＳビヒクル、ＣＤ１２３−ＣＰＩまたは８．８−ＣＰＩを、以下の用量：０．１、０．３および０．６ｍｇ／ｋｇで、４日ごとに４回（Ｑ４ｄｘ４）静脈内投与された。データが、表１２において要約されている。ＣＤ１２３−１８Ｇ３−Ｈ１６−ＣＰＩが、Ｎｅｇ  ８．８−ＣＰＩおよびＰＢＳビヒクルに対して比較された。
【０２４１】
ＣＤ１２３−ＣＰＩの０．６ｍｇ／ｋｇ用量は、この試験で試験された最も強力なＡＤＣであり、６５日目までに、まだ試験中である１０匹の動物のうちの１０匹は、腫瘍がないままであった。０．３ｍｇ／ｋｇ用量においてさえも、１０匹のマウスのうちの９匹は、２５日目頃に腫瘍の退縮を示し、６５日目に試験が終了するまで腫瘍がない状態を維持した。そのデータは、ＣＤ１２３−ＣＰＩがＭＶ４−１１異種移植片腫瘍の成長を抑制することを実証している。
【０２４２】
【表１３】
2021500055.tif 000038
【０２４３】
ＣＤ１２３−ＣＴＩの有効性を試験するために、インビボ有効性試験が、同じＭＶ４−１１モデルを用いて実施された。動物は、上記の通りに処置された。表１３において示されているように、ＣＤ１２３−ＣＴＩは、やはりマウスにおいて腫瘍成長を用量依存的様式で抑制しているが、Ｎｅｇ．８．８−ＣＴＩで処置したマウス中の腫瘍は、成長し続けている。
【０２４４】
【表１４−１】
2021500055.tif 000039
【０２４５】
【表１４−２】
2021500055.tif 000040
【０２４６】
これらの結果は、ＣＤ１２３−ＡＤＣが腫瘍の処置において非常に有効であることを実証している。
実施例４：ＣＤ１２３−ＡＤＣのインビボでの有効性
この実施例は、ＡＭＬ患者由来の播種性異種移植片（ＡＭＬ  ＰＤＸ）を用いてＣＤ１２３−ＡＤＣのインビボでの有効性を説明する。
【０２４７】
ＣＤ１２３−ＣＰＩの効力が、免疫不全マウスにおいて、適切な同意手続きに従って得られた患者の骨髄細胞を用いて確立された播種モデルにおけるインビボ成長に対して試験された。表１４は、この研究で使用された患者の試料の要約を提供する。
【０２４８】
【表１５】
2021500055.tif 000041
【０２４９】
その試験に関して、１．０×１０６個の患者の骨髄細胞が、照射されたＮＳＧマウスの側方尾静脈中に静脈内注射された。その試験は、ヒトＣＤ４５＋／ＣＤ１２３＋／ＣＤ３３＋細胞（フローサイトメトリー染色により測定された際に末梢血中１２〜５５％）の生着に基づいて段階分けおよびランダム化された。ＡＭＬ  ＰＤＸマウスは、ＰＢＳビヒクルまたは１８Ｇ３−ＣＰＩを７日ごとに２回（Ｑ７ｄｘ２）静脈内投与された。２回目／最後の用量の約３〜５日後に、屠殺されたマウスから末梢血および骨髄が、回収された。屠殺された動物の骨髄および血液中に残っている腫瘍細胞が、フローサイトメトリーにより分析された。結果が、図２中のグラフおよび表１５において要約されている。表１５において、数字は、末梢血および骨髄中の残存している腫瘍細胞の百分率を表す。
【０２５０】
それぞれの試験は、群あたり約６〜１０匹のマウスを有する。データは、ＣＤ１２３  ＡＤＣが末梢血および骨髄の両方において用量依存的な様式で腫瘍細胞数を低減するのに有効であることを実証している（図２および表１５）。
【０２５１】
【表１６−１】
2021500055.tif 000042
【０２５２】
【表１６−２】
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【０２５３】
ＣＤ１２３−１８Ｇ３−ＣＰＩが腫瘍を有するマウスの全生存期間を増大させることができるかどうかを決定するために、生存試験が、末梢血が高い生着、すなわち平均で約３２％を示している際のＰＤＸ２４０７を用いて実施された。マウスは、ＰＢＳビヒクルまたはＣＤ１２３−ＣＰＩを７日ごとに２回（Ｑ７ｄｘ２）静脈内投与され、毎日モニターされた。マウスが不活発および体重減少のような臨床徴候を示した場合、（実験動物ケア評価認証協会に従って、施設動物実験委員会のガイドラインの下で）マウスは、安楽死させられた。
【０２５４】
結果が、図３のグラフにおいて要約されている。ＣＤ１２３−１８Ｇ３−ＣＰＩによる処置は、腫瘍を有する動物の全生存期間を用量依存的な様式で延長している。具体的には、０．１ｍｇ／ｋｇの用量のＣＤ１２３−１８Ｇ３−ＣＰＩによる処置は、生存期間を約２５％延長し、０．３ｍｇ／ｋｇの用量のＣＤ１２３−１８Ｇ３−ＣＰＩによる処置は、生存期間の長さをおおよそ２倍にした（図３）。
【０２５５】
これらの結果は、ＣＤ１２３−ＡＤＣによる処置がＡＭＬの退行を誘導し、進行を抑制し、生存期間を延長することを実証している。
実施例５：ＣＤ１２３抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）の調製
この実施例は、ｈ１８Ｇ３−ＡｃＬｙｓＶａｌＣｉｔＰＡＢＣ−ＤＭＡＥ−ＣＯ＿ＣＰＩ−０００６３８３１４、ＣＤ１２３  ＡＤＣ（本明細書において“１８Ｇ３−ＣＰＩ”または“ＣＤ１２３−１８Ｇ３−ＣＰＩ”とも呼ばれる）のコンジュゲーションおよび調製を説明する。
【０２５６】
１８Ｇ３−ＣＰＩは、ＣＤ１２３ヒト化ｍＡｂ  １８Ｇ３（上記の表２．０および２．１の“ｈ１８Ｇ３”を参照）、ＡｃＬｙｓＶａｌＣｉｔＰＡＢＣリンカーおよびシクロプロピルピロロインドリン（ＣＰＩ）薬剤で構成されるＡＤＣである。Ｋ２２２Ｒ、Ｅ２９５Ｌ、Ｑ２９５Ｌ、Ｙ２９６Ｑ、Ｎ２９７Ｇ変異が、アッパーヒンジおよびＦｃにおいて、トランスグルタミナーゼによって触媒されるＣＰＩ薬剤の部位特異的コンジュゲーションを可能にするために導入された。ＣＤ１２３−１８Ｇ３−Ｈ１６−Ｎ６０Ｇ−Ｋ２２２Ｒヒト化ＩｇＧ１抗体（本明細書において“ｈ１８Ｇ３”と呼ばれる）の軽鎖および重鎖アミノ酸配列は、以下の通りである：
軽鎖：
【０２５７】
【化１４】
2021500055.tif 000044
【０２５８】
重鎖：
【０２５９】
【化１５】
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【０２６０】
Ｈ１６部位特異的変異配列は、上記で太字の斜体になっており、５つのＨ１６部位特異的トランスグルタミナーゼ変異Ｋ２２２Ｒ（ヒンジ中）、Ｅ２９４Ｌ、Ｑ２９５Ｌ、Ｙ２９６ＱおよびＮ２９７Ｇを含む。ＬＬＱＧ配列は、トランスグルタミナーゼに関する認識タグであり、リンカー薬剤は、Ｑ２９６においてコンジュゲートされる。ＣＤＲ−Ｈ２中のＧ（下線が引かれている）は、Ｎ６０Ｇ変異である。
【０２６１】
リンカー薬剤であるＡｃＬｙｓＶａｌＣｉｔＰＡＢＣ−ＤＭＡＥ−ＣＯ＿ＣＰＩは、アミノ酸Ｑ２９６において部位特異的にコンジュゲートされている。ＡｃＬｙｓＶａｌＣｉｔＰＡＢＣ−ＤＭＡＥ−ＣＯ＿ＣＰＩ−０００６３８３１４リンカー薬剤の構造が、以下で示されている。
【０２６２】
【化１６】
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【０２６３】
ｈ１８Ｇ３は、細菌性トランスグルタミナーゼ（Ｓｉｇｍａ、４５Ｕ／ｍｇタンパク質）の使用を介してＡｃＬｙｓＶａｌＣｉｔＰＡＢＣ−ＤＭＡＥ−ＣＯ＿ＣＰＩ−０００６３８３１４リンカー薬剤にコンジュゲートされた。特に、抗体は、１００ｍＭ  ＫＰＯ４、２００ｍＭ  ＮａＣｌを含有する緩衝液（ｐＨ７）中に交換された。リンカー薬剤は、７．５％（ｖ／ｖ）のジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の存在下で抗体に対して１０倍モル過剰量で添加された。酵素反応は、抗体１ｍｇあたり１Ｕの細菌性トランスグルタミナーゼの添加によって開始され、連続的に混合しながら２５℃で一夜インキュベートされた。
【０２６４】
反応混合物は、１５％イソプロピルアルコールと共に室温で３０分間インキュベートされた。次いで、それは、４体積の１Ｍ  ＫＰＯ４緩衝液中に希釈され、Ｂｕｔｙｌ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ＨＰカラム（ＧＥ  Ｌｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いた疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）を介して精製された。方法は、結合のために１Ｍ  ＫＰＯ４、５０ｍＭトリス、ｐＨ７を利用し、ＡＤＣは、１０ＣＶにわたって５０ｍＭトリス、ｐＨ７で溶離された。ＨＩＣ精製された化合物は、２０ｍＭヒスチジン、８５ｍｇ／ｍＬスクロース、ｐＨ５．８の最終緩衝液中に透析された。ＡＤＣは、純度に関してＳＥＣおよび薬物抗体比を計算するために逆相クロマトグラフィーによりさらに特徴付けられた。タンパク質濃度は、ＵＶ分光光度計により決定された。
【０２６５】
リード抗体は、ＣＨＯプールで評価された際に７００ｍｇ／Ｌに至るまでの非常に良好な発現を有し、３工程の精製後に８８％の回収率（ｙｉｅｌｄ  ｒｅｃｏｖｅｒｙ）および９９％の純度を有する。１８Ｇ３は、精製後にＤＡＲ  １．９〜２．０および５５〜６０％のコンジュゲーション収率を達成することによって評価されるように、コンジュゲーションにおいて非常に良好な性能を示した。結果として得られたＡＤＣであるＣＤ１２３−１８Ｇ３−Ｈ１６−Ｎ６０Ｇ−Ｋ２２２Ｒ−ｈＧ１−（Ｑ）ＡｃＬｙｓＶａｌＣｉｔＰＡＢＣ−ＤＭＡＥ−ＣＯ＿ＣＰＩは、良好な熱安定性および分子の完全性を示した。
【０２６６】
実施例６：トランスグルタミナーゼを用いてＡｃＬｙｓＶａｌＣｉｔＰＡＢＣ−ＤＭＡＥ−ＣＯ＿ＣＰＩ−０００６３８３１４に抗体をコンジュゲートする方法
この実施例は、抗体のリンカー薬剤ＡｃＬｙｓＶａｌＣｉｔＰＡＢＣ−ＤＭＡＥ−ＣＯ＿ＣＰＩ−０００６３８３１４（本明細書においてＡｃＬｙｓＰＡＢＣ−ＣＰＩ−８３１４とも呼ばれる）へのコンジュゲーションを説明する。
【０２６７】
ＣＰＩリンカー−細胞毒性薬剤のコンジュゲーション。ＡｃＬｙｓＰＡＢＣ−ＣＰＩ−８３１４（構造は上記で実施例５において示されている）の抗体のＨ１６部位へのコンジュゲーションは、様々な異なるパラメーター、例えばモル濃度および塩組成、ｐＨ、酵素濃度、時間ならびに温度を変動させることによって最適化された（表１６）。簡潔には、抗体は、表１６において示されている条件のそれぞれにおいて適切な緩衝液およびｐＨに緩衝液交換された。１０倍モル過剰量のＡｃＬｙｓＰＡＢＣ−ＣＰＩ−８３１４リンカー薬剤が、抗体に添加され、５〜１０％のジメチルスルホキシドが、リンカー薬剤を反応混合物中で可溶化させるために添加された。細菌性トランスグルタミナーゼ（０．５〜５Ｕ／抗体１ｍｇ）の添加後、反応混合物は、明記された時間および温度で連続的に混合された。未反応のリンカー薬剤およびトランスグルタミナーゼ酵素は、サイズ排除クロマトグラフィーおよび／または疎水性相互作用クロマトグラフィーのどちらかにより除去された。薬物抗体比は、ＬＣＭＳまたはＲＰ−ＨＰＬＣにより計算された。
【０２６８】
様々な条件に関する抗体薬物比（ＤＡＲ）によって測定された場合のコンジュゲーション効率が、表１６において示されている。例えば、抗体が３０ｍＭ  ＫＰＯ４、１５０ｍＭ  ＮａＣｌを含有するｐＨ７の緩衝液中に交換された場合、１．６のＤＡＲが、達成された。
【０２６９】
ＣＤ３３、ＣＤ１２３、Ｈｅｒ２、ＰＲＬＲ、ＣＤ２２および他の抗原（抗原を含む）を標的とする抗体が、リンカー薬剤ＡｃＬｙｓＶａｌＣｉｔＰＡＢＣ−ＤＭＡＥ−ＣＯ＿ＣＰＩ−０００６３８３１４に、これらの最適化された条件を用いてコンジュゲートされた。
【０２７０】
【表１７】
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【０２７１】
開示された教示は、様々な適用、方法、キットおよび組成物を参照して記載されてきたが、様々な変更および修正が、本明細書における教示および下記の特許請求される発明から逸脱することなくなされることができることは、理解されるであろう。前述の実施例は、開示された教示をより良く説明するために提供されており、本明細書で与えられた教示の範囲を限定することは、意図されていない。本教示は、これらの典型的な態様に関して記載されてきたが、当業者は、これらの典型的な態様の数多くのバリエーションおよび修正が、過度の実験操作なしに可能であることを容易に理解するであろう。全てのそのようなバリエーションおよび修正は、本教示の範囲内である。
【０２７２】
特許、特許出願、論文、教科書等を含む本明細書で引用された全ての参考文献およびその中で引用されている参考文献は、それらがまだ引用されていない範囲まで（ｔｏ  ｔｈｅ  ｅｘｔｅｎｔ  ｔｈａｔ  ｔｈｅｙ  ａｒｅ  ｎｏｔ  ａｌｒｅａｄｙ）、参照により本明細書にそのまま援用される。援用された文献および類似の資料の１つ以上が本出願（定義された用語、用語の使用法、記載された技法等を含むがそれらに限定されない）と異なる、または矛盾する場合、本出願が支配する。
【０２７３】
前述の記載および実施例は、本発明の特定の具体的な態様を詳述し、本発明者らによって意図される最高の方式を記載している。しかし、どれだけ前記のことがテキストにおいて詳細に見え得るとしても、本発明は、多くの方法で実施されることができ、本発明は、添付された特許請求の範囲およびそのあらゆる均等物に従って解釈されるべきであることは、理解されるであろう。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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