(57)【要約】本明細書において、ヒト組織因子（ＴＦ）に特異的に結合する抗体、抗ＴＦ抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）、及び該抗体またはＡＤＣを含む組成物が提供される。また、本明細書において、該抗体またはＡＤＣの作製方法及び使用方法、例えば、治療方法及び診断方法が提供される。2021509823.tif 000072
2021509823.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト組織因子（ＴＦ）の細胞外ドメインに結合する単離されたヒト抗体であって、ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する、前記単離されたヒト抗体。
【請求項２】
（１）前記単離された抗体が、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成を阻害せず、かつ
（２）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、
請求項０に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項３】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項０または２に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項４】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項０〜３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項５】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項０〜３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項６】
トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成を阻害しない、請求項０に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項７】
トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない、請求項０に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項８】
アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減しない、請求項７に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項９】
アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させない、請求項７または８に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１０】
トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させない、請求項７〜９のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１１】
トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１２】
アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持する、請求項１１に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１３】
アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持する、請求項１１または１２に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１４】
トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護する、請求項１１〜１３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１５】
ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１６】
ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉しない、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１７】
ヒトＴＦへの結合についてヒトＦＶＩＩａと競合しない、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１８】
トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、かつヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合しない、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１９】
トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、かつヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合しない、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項２０】
トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、かつヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合しない、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項２１】
ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害する、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項２２】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項２３】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における前記変異が、Ｋ１４９Ｎである、請求項２２に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項２４】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項２５】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８における前記変異が、Ｋ６８Ｎである、請求項２４に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項２６】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項２７】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における前記変異が、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである、請求項２６に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項２８】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項２９】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項３０】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項３１】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項３２】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項３３】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項３４】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項３５】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項３６】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項３７】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項３８】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における前記変異が、Ｋ１４９Ｎであり、かつ
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８における前記変異が、Ｋ６８Ｎである、
請求項３７に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項３９】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項４０】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における前記変異が、Ｋ１４９Ｎであり、
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８における前記変異が、Ｋ６８Ｎであり、かつ
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における前記変異が、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである、
請求項３９に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項４１】
カニクイザルＴＦに結合する、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項４２】
マウスＴＦに結合する、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項４３】
ウサギＴＦに結合する、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項４４】
ブタＴＦに結合する、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項４５】
ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減する、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項４６】
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、かつ
（ｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項４７】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における前記変異が、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである、請求項４６に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項４８】
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、かつ
（ｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項４９】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における前記変異が、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである、請求項４８に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項５０】
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ
（ｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項５１】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における前記変異が、Ｋ１４９Ｎであり、かつ
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における前記変異が、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである、
請求項５０に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項５２】
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ
（ｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項５３】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における前記変異が、Ｋ１４９Ｎであり、かつ
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における前記変異が、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである、
請求項５２に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項５４】
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ
（ｄ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項５５】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における前記変異が、Ｋ１４９Ｎであり、かつ
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における前記変異が、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである、
請求項５４に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項５６】
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｂ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ
（ｄ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項５７】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における前記変異が、Ｋ１４９Ｎであり、かつ
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における前記変異が、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである、
請求項５６に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項５８】
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｃ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、
（ｄ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、
（ｅ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、
（ｆ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、
（ｇ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｈ）マウスＴＦに結合し、かつ
（ｉ）ウサギＴＦに結合する、
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項５９】
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、
（ｃ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、
（ｅ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、
（ｆ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、
（ｇ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、
（ｈ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、
（ｉ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｊ）マウスＴＦに結合し、かつ
（ｋ）ウサギＴＦに結合する、
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項６０】
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、
（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、
（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、
（ｅ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｆ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、
（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、
（ｈ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、
（ｉ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、
（ｊ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、
（ｋ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、
（ｌ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、
（ｍ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｎ）マウスＴＦに結合し、かつ
（ｏ）ウサギＴＦに結合する、
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項６１】
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｃ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、
（ｄ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、
（ｅ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、
（ｆ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、
（ｇ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｈ）マウスＴＦに結合し、
（ｉ）ウサギＴＦに結合し、
（ｊ）ブタＴＦに結合し、かつ
（ｋ）ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減する、
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項６２】
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、
（ｃ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、
（ｅ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、
（ｆ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、
（ｇ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、
（ｈ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、
（ｉ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｊ）マウスＴＦに結合し、
（ｋ）ウサギＴＦに結合し、
（ｌ）ブタＴＦに結合し、かつ
（ｍ）ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減する、
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項６３】
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、
（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、
（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、
（ｅ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｆ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、
（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、
（ｈ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、
（ｉ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、
（ｊ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、
（ｋ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、
（ｌ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、
（ｍ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｎ）マウスＴＦに結合し、
（ｏ）ウサギＴＦに結合し、
（ｐ）ブタＴＦに結合し、かつ
（ｑ）ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減する、
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項６４】
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、
（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、
（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、
（ｅ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｆ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、
（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、
（ｈ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、
（ｉ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、
（ｊ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、
（ｋ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、
（ｌ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、
（ｍ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｎ）マウスＴＦに結合し、
（ｏ）ウサギＴＦに結合し、
（ｐ）ブタＴＦに結合し、
（ｑ）ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減し、
（ｒ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｓ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
（ｔ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｕ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
（ｖ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
（ｗ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
（ｘ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｙ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｚ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ａａ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｂｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ
（ｃｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項６５】
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、
（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、
（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、
（ｅ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｆ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、
（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、
（ｈ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、
（ｉ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、
（ｊ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、
（ｋ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、
（ｌ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、
（ｍ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｎ）マウスＴＦに結合し、
（ｏ）ウサギＴＦに結合し、
（ｐ）ブタＴＦに結合し、
（ｑ）ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減し、
（ｒ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｋ１４９Ｎを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｓ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｋ６８Ｎを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
（ｔ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｕ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
（ｖ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
（ｗ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
（ｘ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｙ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｚ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ａａ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｂｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ
（ｃｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項６６】
ヒトＴＦへの結合について、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体と競合する、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項６７】
ヒトＴＦへの結合について、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体と競合する、請求項６４に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項６８】
ヒトＴＦへの結合について、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体と競合する、請求項６４に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項６９】
２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体が結合する、同じヒトＴＦのエピトープに結合する、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項７０】
２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体が結合する、同じヒトＴＦのエピトープに結合する、請求項６９に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項７１】
４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体が結合する、同じヒトＴＦのエピトープに結合する、請求項６９に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項７２】
２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項７３】
前記３つの重鎖ＣＤＲ及び前記３つの軽鎖ＣＤＲが、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、Ｃｏｎｔａｃｔ、またはＩＭＧＴ番号付けを用いて決定される、請求項７２に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項７４】
２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項７５】
４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項７６】
２５Ａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項７７】
２５Ａ３と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項７８】
２５Ａ５と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項７９】
２５Ａ５−Ｔと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項８０】
２５Ｇと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項８１】
２５Ｇ１と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項８２】
２５Ｇ９と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項８３】
４３Ｂと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項８４】
４３Ｂ１と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項８５】
４３Ｂ７と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項８６】
４３Ｄと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項８７】
４３Ｄ７と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項８８】
４３Ｄ８と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項８９】
４３Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項９０】
４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項７２または７３に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項９１】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１４のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項９２】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５２のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項９３】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９０のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項９４】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３６のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３７のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項９５】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２８のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項９６】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６６のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項９７】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０４のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項９８】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５６のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項９９】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９４のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１００】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３２のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１０１】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５６９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７０のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１０２】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０８のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１０３】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４６のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１０４】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８４のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１０５】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２２のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１０６】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１０７】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１０８】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１０９】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８００に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１１０】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６４のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１１１】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６８のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６９のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１１２】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７０のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７１のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１１３】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７０のＶＬ配列を含む、請求項０〜７３のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１１４】
２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１１５】
２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体を含む、請求項１１４に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１１６】
４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体を含む、請求項１１４に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１１７】
２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からなる、先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１１８】
２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体からなる、請求項１１７に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１１９】
４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からなる、請求項１１７に記載の単離されたヒト抗体。
【請求項１２０】
２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、単離された抗体。
【請求項１２１】
ヒト、ヒト化、またはキメラである、請求項１２０に記載の単離された抗体。
【請求項１２２】
前記３つの重鎖ＣＤＲ及び前記３つの軽鎖ＣＤＲが、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、Ｃｏｎｔａｃｔ、またはＩＭＧＴ番号付けを用いて決定される、請求項１２０または１２１に記載の単離された抗体。
【請求項１２３】
２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１２４】
２５Ａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１２５】
２５Ａ３と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１２６】
２５Ａ５と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１２７】
２５Ａ５−Ｔと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１２８】
２５Ｇと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１２９】
２５Ｇ１と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１３０】
２５Ｇ９と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１３１】
４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１３２】
４３Ｂと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１３３】
４３Ｂ１と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１３４】
４３Ｂ７と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１３５】
４３Ｄと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１３６】
４３Ｄ７と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１３７】
４３Ｄ８と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１３８】
４３Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１３９】
４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１４０】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１４のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１４１】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５２のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１４２】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９０のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１４３】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３６のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３７のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１４４】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２８のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１４５】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６６のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１４６】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０４のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１４７】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５６のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１４８】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９４のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１４９】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３２のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１５０】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５６９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７０のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１５１】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０８のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１５２】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４６のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１５３】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８４のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１５４】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２２のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１５５】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１５６】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１５７】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１５８】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８００に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１５９】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６４のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１６０】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６８のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６９のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１６１】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７０のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７１のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１６２】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７０のＶＬ配列を含む、請求項１２０〜１２２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１６３】
２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体を含む、請求項１２０〜１６２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１６４】
２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体を含む、請求項１６３のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１６５】
４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体を含む、請求項１６３のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１６６】
２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からなる、請求項１２０〜１６３のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１６７】
２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体からなる、請求項１６６のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１６８】
４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からなる、請求項１６６のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１６９】
ヒトＴＦへの結合について、１Ｆと表記される抗体、１Ｇと表記される抗体、２９Ｄと表記される抗体、２９Ｅと表記される抗体、３９Ａと表記される抗体、または５４Ｅと表記される抗体と競合する、単離された抗体。
【請求項１７０】
ヒト、ヒト化、またはキメラである、請求項１６９に記載の単離された抗体。
【請求項１７１】
ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害する、請求項１６９または１７０に記載の単離された抗体。
【請求項１７２】
カニクイザルＴＦに結合する、請求項１６９〜１７１のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１７３】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、請求項１６９〜１７２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１７４】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜９３がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜９８と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、請求項１６９〜１７２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１７５】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、請求項１６９〜１７２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１７６】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜８５及び９２〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、請求項１６９〜１７２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１７７】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、かつ
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜９３がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜９８と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、
請求項１６９〜１７２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１７８】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、かつ
前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜８５及び９２〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、
請求項１６９〜１７２のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１７９】
１Ｆと表記される抗体、１Ｇと表記される抗体、２９Ｄと表記される抗体、２９Ｅと表記される抗体、３９Ａと表記される抗体、４３Ｅａと表記される抗体、または５４Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１６９〜１７８のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１８０】
前記３つの重鎖ＣＤＲ及び前記３つの軽鎖ＣＤＲが、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、Ｃｏｎｔａｃｔ、またはＩＭＧＴ番号付けを用いて決定される、請求項１７９に記載の単離された抗体。
【請求項１８１】
１Ｆと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１７９または１８０に記載の単離された抗体。
【請求項１８２】
１Ｇと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１７９または１８０に記載の単離された抗体。
【請求項１８３】
２９Ｄと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１７９または１８０に記載の単離された抗体。
【請求項１８４】
２９Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１７９または１８０に記載の単離された抗体。
【請求項１８５】
３９Ａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１７９または１８０に記載の単離された抗体。
【請求項１８６】
５４Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１７９または１８０に記載の単離された抗体。
【請求項１８７】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８のＶＬ配列を含む、請求項１６９〜１８０のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１８８】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６のＶＬ配列を含む、請求項１６９〜１８０のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１８９】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４２のＶＬ配列を含む、請求項１６９〜１８０のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１９０】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８０のＶＬ配列を含む、請求項１６９〜１８０のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１９１】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１８のＶＬ配列を含む、請求項１６９〜１８０のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１９２】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６０のＶＬ配列を含む、請求項１６９〜１８０のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１９３】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項１６９〜１８０のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１９４】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８６に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８９に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９０に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項１６９〜１８０のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１９５】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項１６９〜１８０のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１９６】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項１６９〜１８０のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１９７】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６２のＶＬ配列を含む、請求項１６９〜１８０のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１９８】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６６のＶＬ配列を含む、請求項１６９〜１８０のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項１９９】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６８のＶＬ配列を含む、請求項１６９〜１８０のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項２００】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７２のＶＬ配列を含む、請求項１６９〜１８０のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項２０１】
１Ｆと表記される抗体、１Ｇと表記される抗体、２９Ｄと表記される抗体、２９Ｅと表記される抗体、３９Ａと表記される抗体、または５４Ｅと表記される抗体を含む、請求項１６９〜２００のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項２０２】
１Ｆと表記される抗体、１Ｇと表記される抗体、２９Ｄと表記される抗体、２９Ｅと表記される抗体、３９Ａと表記される抗体、または５４Ｅと表記される抗体からなる、請求項１６９〜２０１のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項２０３】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、単離された抗体。
【請求項２０４】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、単離された抗体。
【請求項２０５】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８６に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８９に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９０に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、単離された抗体。
【請求項２０６】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、単離された抗体。
【請求項２０７】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８００に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、単離された抗体。
【請求項２０８】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、単離された抗体。
【請求項２０９】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、単離された抗体。
【請求項２１０】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、単離された抗体。
【請求項２１１】
Ｏｃｔｅｔ  ＱＫ３８４またはＢｉａｃｏｒｅアッセイによって測定するとき、５０ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、５ｎＭ以下、１ｎＭ以下、０．５ｎＭ以下、または０．１ｎＭ以下のＫＤでヒトＴＦに結合する、先行請求項のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項２１２】
モノクローナル抗体である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項２１３】
多重特異性である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項２１４】
Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、１本鎖抗体分子、二重可変ドメイン抗体、単一可変ドメイン抗体、直鎖状抗体、またはＶドメイン抗体である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項２１５】
前記抗体が足場を含み、任意選択で、前記足場がＦｃ、任意選択でヒトＦｃである、先行請求項のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項２１６】
ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、及びＩｇＭから選択されるクラスの重鎖定常領域を含む、請求項２１５に記載の単離された抗体。
【請求項２１７】
前記ＩｇＧクラス、かつＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４から選択されるサブクラスの重鎖定常領域を含む、請求項２１６に記載の単離された抗体。
【請求項２１８】
ＩｇＧ１の重鎖定常領域を含む、請求項２１７に記載の単離された抗体。
【請求項２１９】
前記Ｆｃが１つまたは複数の修飾を含み、前記１つまたは複数の修飾が、前記１つまたは複数の修飾を含まない前記Ｆｃと比較して、増加した半減期、増加した抗体依存性細胞傷害作用（ＡＤＣＣ）、増加した抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）、増加した補体依存性細胞傷害作用（ＣＤＣ）、または減少したエフェクター機能をもたらす、請求項２１５〜２１８のいずれか１項に記載の単離された抗体。
【請求項２２０】
ヒトＴＦへの結合について先行請求項のいずれか１項に記載の抗体と競合する、単離された抗体。
【請求項２２１】
先行請求項のいずれか１項に記載の抗体が結合する前記ヒトＴＦのエピトープに結合する、単離された抗体。
【請求項２２２】
先行請求項のいずれか１項に記載の抗体、そのＶＨ、そのＶＬ、その軽鎖、その重鎖、またはその抗原結合部分をコードする、単離されたポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドの組。
【請求項２２３】
請求項２２２に記載のポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドの組を含む、ベクターまたはベクターの組。
【請求項２２４】
請求項２２２に記載のポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチドの組または請求項２２３に記載のベクターもしくはベクターの組を含む、宿主細胞。
【請求項２２５】
抗体の生産方法であって、請求項２２４に記載の宿主細胞により前記抗体を発現させる工程と、前記発現された抗体を単離する工程とを含む、前記方法。
【請求項２２６】
請求項０〜２２１のいずれか１項に記載の抗体と、薬学的に許容される賦形剤とを含む、薬学的組成物。
【請求項２２７】
その必要がある対象における疾患または病態の処置方法または予防方法であって、前記対象に、有効量の請求項０〜２２１のいずれか１項に記載の抗体または請求項２２６に記載の薬学的組成物を投与する工程を含む、前記方法。
【請求項２２８】
前記疾患または病態が、がんである、請求項２２７に記載の方法。
【請求項２２９】
前記がんが頭頸部癌である、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３０】
前記がんが卵巣癌である、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３１】
前記がんが胃癌である、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３２】
前記がんが食道癌である、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３３】
前記がんが子宮頸癌である、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３４】
前記がんが前立腺癌である、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３５】
前記がんが膵臓癌である、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３６】
前記がんが、エストロゲン受容体陰性（ＥＲ−）、プロゲステロン受容体陰性（ＰＲ−）、及びＨＥＲ２陰性（ＨＥＲ２−）の三重陰性乳癌である、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３７】
前記がんが膠芽腫である、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３８】
前記がんが肺癌である、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３９】
前記がんが膀胱癌である、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２４０】
前記がんが黒色腫である、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２４１】
前記がんが腎臓癌である、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２４２】
前記疾患または病態が血管新生を伴う、請求項２２７に記載の方法。
【請求項２４３】
血管新生を伴う前記疾患または病態が、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、糖尿病性網膜症、またはがんである、請求項２４２に記載の方法。
【請求項２４４】
前記疾患または病態が血管炎症を伴う、請求項２２７に記載の方法。
【請求項２４５】
１つまたは複数の追加の治療剤を前記対象に投与する工程をさらに含む、請求項２２７〜２４４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４６】
前記追加の治療剤が、前記抗体と同じ薬学的組成物中で製剤化される、請求項２４５に記載の方法。
【請求項２４７】
前記追加の治療剤が、前記抗体とは異なる薬学的組成物中で製剤化される、請求項２４５に記載の方法。
【請求項２４８】
前記追加の治療剤が、前記抗体を投与する前に投与される、請求項２４５に記載の方法。
【請求項２４９】
前記追加の治療剤が、前記抗体を投与した後に投与される、請求項２４５に記載の方法。
【請求項２５０】
前記追加の治療剤が、前記抗体と同時に投与される、請求項２４５に記載の方法。
【請求項２５１】
疾患または病態を有するかあるいは有することが疑われる対象におけるＴＦの検出方法であって、（ａ）前記対象から試料を受け取る工程と、（ｂ）前記試料を請求項０〜２２１のいずれか１項に記載の抗体と接触させることによって、前記試料中でのＴＦの存在またはレベルを検出する工程とを含む、前記方法。
【請求項２５２】
前記疾患または病態が、がんである、請求項２５１に記載の方法。
【請求項２５３】
前記がんが頭頸部癌である、請求項２５２に記載の方法。
【請求項２５４】
前記がんが卵巣癌である、請求項２５２に記載の方法。
【請求項２５５】
前記がんが胃癌である、請求項２５２に記載の方法。
【請求項２５６】
前記がんが食道癌である、請求項２５２に記載の方法。
【請求項２５７】
前記がんが子宮頸癌である、請求項２５２に記載の方法。
【請求項２５８】
前記がんが前立腺癌である、請求項２５２に記載の方法。
【請求項２５９】
前記がんが膵臓癌である、請求項２５２に記載の方法。
【請求項２６０】
前記がんが、エストロゲン受容体陰性（ＥＲ−）、プロゲステロン受容体陰性（ＰＲ−）、及びＨＥＲ２陰性（ＨＥＲ２−）の三重陰性乳癌である、請求項２５２に記載の方法。
【請求項２６１】
前記がんが膠芽腫である、請求項２５２に記載の方法。
【請求項２６２】
前記がんが肺癌である、請求項２５２に記載の方法。
【請求項２６３】
前記がんが膀胱癌である、請求項２５２に記載の方法。
【請求項２６４】
前記がんが黒色腫である、請求項２５２に記載の方法。
【請求項２６５】
前記がんが腎臓癌である、請求項２５２に記載の方法。
【請求項２６６】
前記疾患または病態が血管新生を伴う、請求項２５１に記載の方法。
【請求項２６７】
血管新生を伴う前記疾患または病態が、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、糖尿病性網膜症、またはがんである、請求項２６６に記載の方法。
【請求項２６８】
前記疾患または病態が血管炎症を伴う、請求項２５１に記載の方法。
【請求項２６９】
疾患または病態を有するかあるいは有することが疑われる対象におけるＴＦの検出方法であって、（ａ）前記対象に請求項０〜２２１のいずれか１項に記載の抗体を投与する工程と、（ｂ）前記対象においてＴＦの存在またはレベルを検出する工程とを含む、前記方法。
【請求項２７０】
前記疾患または病態が、がんである、請求項２６９に記載の方法。
【請求項２７１】
前記がんが頭頸部癌である、請求項２７０に記載の方法。
【請求項２７２】
前記がんが卵巣癌である、請求項２７０に記載の方法。
【請求項２７３】
前記がんが胃癌である、請求項２７０に記載の方法。
【請求項２７４】
前記がんが食道癌である、請求項２７０に記載の方法。
【請求項２７５】
前記がんが子宮頸癌である、請求項２７０に記載の方法。
【請求項２７６】
前記がんが前立腺癌である、請求項２７０に記載の方法。
【請求項２７７】
前記がんが膵臓癌である、請求項２７０に記載の方法。
【請求項２７８】
前記がんが、エストロゲン受容体陰性（ＥＲ−）、プロゲステロン受容体陰性（ＰＲ−）、及びＨＥＲ２陰性（ＨＥＲ２−）の三重陰性乳癌である、請求項２７０に記載の方法。
【請求項２７９】
前記がんが膠芽腫である、請求項２７０に記載の方法。
【請求項２８０】
前記がんが肺癌である、請求項２７０に記載の方法。
【請求項２８１】
前記がんが膀胱癌である、請求項２７０に記載の方法。
【請求項２８２】
前記がんが黒色腫である、請求項２７０に記載の方法。
【請求項２８３】
前記がんが腎臓癌である、請求項２７０に記載の方法。
【請求項２８４】
前記疾患または病態が血管新生を伴う、請求項２６９に記載の方法。
【請求項２８５】
血管新生を伴う前記疾患または病態が、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、糖尿病性網膜症、またはがんである、請求項２８４に記載の方法。
【請求項２８６】
前記疾患または病態が血管炎症を伴う、請求項２６９に記載の方法。
【請求項２８７】
請求項０〜２２１のいずれか１項に記載の抗体または請求項２２６に記載の薬学的組成物と、使用説明書とを含む、キット。
【請求項２８８】
抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、前記抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、前記抗体を前記細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートであって、前記抗体が、ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位で前記ヒト組織因子（ＴＦ）の細胞外ドメインに結合する、前記抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２８９】
（１）前記抗体が、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成を阻害せず、かつ
（２）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、
請求項２８８に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２９０】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項２８８または２８９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２９１】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２  ＨＩ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項２８８〜２９０のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２９２】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項２８８〜２９０のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２９３】
前記抗体が、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成を阻害しない、請求項２８８に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２９４】
前記抗体が、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない、請求項２８８に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２９５】
前記抗体が、アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減しない、請求項２９４に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２９６】
前記抗体が、アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させない、請求項２９４または２９５に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２９７】
前記抗体が、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させない、請求項２９４〜２９６のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２９８】
前記抗体が、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する、請求項２８８〜２９７のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２９９】
前記抗体が、アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持する、請求項２９８に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３００】
前記抗体が、アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持する、請求項２９８または２９９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３０１】
前記抗体が、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護する、請求項２９８〜３００のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３０２】
前記抗体が、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する、請求項２８８〜３０１のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３０３】
前記抗体が、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉しない、請求項２８８〜３０２のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３０４】
前記抗体が、ヒトＴＦへの結合についてヒトＦＶＩＩａと競合しない、請求項２８８〜３０３のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３０５】
前記抗体が、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、かつヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合しない、請求項２８８〜３０４のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３０６】
前記抗体が、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、かつヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合しない、請求項２８８〜３０５のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３０７】
前記抗体が、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、かつヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合しない、請求項２８８〜３０６のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３０８】
前記抗体が、ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害する、請求項２８８〜３０７のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３０９】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、請求項２８８〜３０８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３１０】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における前記変異が、Ｋ１４９Ｎである、請求項３０９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３１１】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、請求項２８８〜３１０のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３１２】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８における前記変異が、Ｋ６８Ｎである、請求項３１１に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３１３】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、請求項２８８〜３１２のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３１４】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における前記変異が、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである、請求項３１３に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３１５】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、請求項２８８〜３１４のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３１６】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、請求項２８８〜３１５のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３１７】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、請求項２８８〜３１６のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３１８】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、請求項２８８〜３１７のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３１９】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、請求項２８８〜３１８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３２０】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、請求項２８８〜３１９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３２１】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、請求項２８８〜３２０のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３２２】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、請求項２８８〜３２１のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３２３】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、請求項２８８〜３２２のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３２４】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、
請求項２８８〜３２３のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３２５】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における前記変異が、Ｋ１４９Ｎであり、かつ
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８における前記変異が、Ｋ６８Ｎである、
請求項３２４に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３２６】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、
請求項２８８〜３２５のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３２７】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における前記変異が、Ｋ１４９Ｎであり、
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８における前記変異が、Ｋ６８Ｎであり、かつ
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における前記変異が、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである、
請求項３２６に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３２８】
前記抗体がカニクイザルＴＦに結合する、請求項２８８〜３２７のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３２９】
前記抗体がマウスＴＦに結合する、請求項２８８〜３２８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３３０】
前記抗体がウサギＴＦに結合する、請求項２８８〜３２９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３３１】
前記抗体がブタＴＦに結合する、請求項２８８〜３３０のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３３２】
前記抗体が、
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、かつ
（ｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、
請求項２８８〜３３１のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３３３】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における前記変異が、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである、請求項３３２に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３３４】
前記抗体が、
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、かつ
（ｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、
請求項２８８〜３３３のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３３５】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における前記変異が、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである、請求項３３４に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３３６】
前記抗体が、
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ
（ｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、
請求項２８８〜３３５のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３３７】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における前記変異が、Ｋ１４９Ｎであり、かつ
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における前記変異が、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである、
請求項３３６に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３３８】
前記抗体が、
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ
（ｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、
請求項２８８〜３３７のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３３９】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における前記変異が、Ｋ１４９Ｎであり、かつ
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における前記変異が、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである、
請求項３３８に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３４０】
前記抗体が、
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ
（ｄ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、
請求項２８８〜３３９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３４１】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における前記変異が、Ｋ１４９Ｎであり、かつ
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における前記変異が、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである、
請求項３４０に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３４２】
前記抗体が、
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｂ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ
（ｄ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、
請求項２８８〜３４１のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３４３】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における前記変異が、Ｋ１４９Ｎであり、かつ
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における前記変異が、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである、
請求項３４２に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３４４】
前記抗体が、
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｃ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、
（ｄ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、
（ｅ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、
（ｆ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、
（ｇ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｈ）マウスＴＦに結合し、かつ
（ｉ）ウサギＴＦに結合する、
請求項２８８〜３４３のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３４５】
前記抗体が、
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、
（ｃ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、
（ｅ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、
（ｆ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、
（ｇ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、
（ｈ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、
（ｉ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｊ）マウスＴＦに結合し、かつ
（ｋ）ウサギＴＦに結合する、
請求項２８８〜３４４のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３４６】
前記抗体が、
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、
（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、
（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、
（ｅ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｆ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、
（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、
（ｈ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、
（ｉ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、
（ｊ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、
（ｋ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、
（ｌ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、
（ｍ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｎ）マウスＴＦに結合し、かつ
（ｏ）ウサギＴＦに結合する、
請求項２８８〜３４５のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３４７】
前記抗体が、
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｃ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、
（ｄ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、
（ｅ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、
（ｆ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、
（ｇ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｈ）マウスＴＦに結合し、
（ｉ）ウサギＴＦに結合し、かつ
（ｊ）ブタＴＦに結合する、
請求項２８８〜３４６のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３４８】
前記抗体が、
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、
（ｃ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、
（ｅ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、
（ｆ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、
（ｇ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、
（ｈ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、
（ｉ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｊ）マウスＴＦに結合し、
（ｋ）ウサギＴＦに結合し、かつ
（ｌ）ブタＴＦに結合する、
請求項２８８〜３４７のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３４９】
前記抗体が、
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、
（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、
（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、
（ｅ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｆ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、
（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、
（ｈ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、
（ｉ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、
（ｊ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、
（ｋ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、
（ｌ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、
（ｍ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｎ）マウスＴＦに結合し、
（ｏ）ウサギＴＦに結合し、かつ
（ｐ）ブタＴＦに結合する、
請求項２８８〜３４８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３５０】
前記抗体が、
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、
（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、
（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、
（ｅ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｆ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、
（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、
（ｈ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、
（ｉ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、
（ｊ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、
（ｋ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、
（ｌ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、
（ｍ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｎ）マウスＴＦに結合し、
（ｏ）ウサギＴＦに結合し、
（ｐ）ブタＴＦに結合し、
（ｑ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｒ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
（ｓ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｔ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
（ｕ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
（ｖ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
（ｗ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｘ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｙ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｚ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ａａ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ
（ｂｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、
請求項２８８〜３４９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３５１】
前記抗体が、
（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、
（ｂ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、
（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、
（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、
（ｅ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、
（ｆ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、
（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、
（ｈ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、
（ｉ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、
（ｊ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、
（ｋ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、
（ｌ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、
（ｍ）カニクイザルＴＦに結合し、
（ｎ）マウスＴＦに結合し、
（ｏ）ウサギＴＦに結合し、
（ｐ）ブタＴＦに結合し、
（ｑ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｋ１４９Ｎを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｒ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｋ６８Ｎを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
（ｓ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｔ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
（ｕ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
（ｖ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
（ｗ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｘ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｙ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ｚ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、
（ａａ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ
（ｂｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、
請求項２８８〜３５０のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３５２】
前記抗体が、ヒトＴＦへの結合について、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体と競合する、請求項２８８〜３５１のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３５３】
前記抗体が、ヒトＴＦへの結合について、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体と競合する、請求項３５２に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３５４】
前記抗体が、ヒトＴＦへの結合について、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体と競合する、請求項３５２に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３５５】
前記抗体が、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体が結合する、同じヒトＴＦのエピトープに結合する、請求項２８８〜３５４のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３５６】
前記抗体が、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体が結合する、同じヒトＴＦのエピトープに結合する、請求項３５５に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３５７】
前記抗体が、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体が結合する、同じヒトＴＦのエピトープに結合する、請求項３５５に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３５８】
前記抗体が、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項２８８〜３５７のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３５９】
前記３つの重鎖ＣＤＲ及び前記３つの軽鎖ＣＤＲが、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、Ｃｏｎｔａｃｔ、またはＩＭＧＴ番号付けを用いて決定される、請求項３５８に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３６０】
前記抗体が、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３６１】
前記抗体が、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３６２】
前記抗体が、２５Ａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３６３】
前記抗体が、２５Ａ３と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３６４】
前記抗体が、２５Ａ５と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３６５】
前記抗体が、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３６６】
前記抗体が、２５Ｇと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３６７】
前記抗体が、２５Ｇ１と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３６８】
前記抗体が、２５Ｇ９と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３６９】
前記抗体が、４３Ｂと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３７０】
前記抗体が、４３Ｂ１と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３７１】
前記抗体が、４３Ｂ７と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３７２】
前記抗体が、４３Ｄと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３７３】
前記抗体が、４３Ｄ７と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３７４】
前記抗体が、４３Ｄ８と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３７５】
前記抗体が、４３Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３７６】
前記抗体が、４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３５８または３５９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３７７】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１４のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３７８】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５２のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３７９】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９０のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３８０】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３６のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３７のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３８１】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２８のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３８２】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６６のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３８３】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０４のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３８４】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５６のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３８５】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９４のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３８６】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３２のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３８７】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５６９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７０のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３８８】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０８のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３８９】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４６のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３９０】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８４のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３９１】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２２のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３９２】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３９３】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３９４】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３９５】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８００に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３９６】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６４のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３９７】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６８のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６９のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３９８】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７０のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７１のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３９９】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７０のＶＬ配列を含む、請求項２８８〜３５９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４００】
前記抗体が、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体を含む、請求項２８８〜３９９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４０１】
前記抗体が、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体を含む、請求項４００に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４０２】
前記抗体が、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体を含む、請求項４００に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４０３】
前記抗体が、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からなる、請求項２８８〜４０２のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４０４】
前記抗体が、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体からなる、請求項４０３に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４０５】
前記抗体が、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からなる、請求項４０３に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４０６】
ＦＶＩＩａの存在が、ＦＶＩＩａの不在と比較して、前記抗体薬物コンジュゲートの活性に干渉しない、請求項２８８〜４０５のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４０７】
ＦＶＩＩａの存在が、ＦＶＩＩａの不在と比較して、前記抗体薬物コンジュゲートの活性を維持する、請求項２８８〜４０６のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４０８】
抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、前記抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、前記抗体を前記細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートであって、前記抗体が、ヒトＴＦへの結合について、１Ｆと表記される抗体、１Ｇと表記される抗体、２９Ｄと表記される抗体、２９Ｅと表記される抗体、３９Ａと表記される抗体、または５４Ｅと表記される抗体と競合する、前記抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４０９】
前記抗体が、ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害する、請求項４０８に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４１０】
前記抗体がカニクイザルＴＦに結合する、請求項４０８または４０９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４１１】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、請求項４０８または４１０に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４１２】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜９３がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜９８と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、請求項４０８または４１０に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４１３】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、請求項４０８または４１０に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４１４】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜８５及び９２〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、請求項４０８または４１０に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４１５】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、かつ
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜９３がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜９８と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、
請求項４０８または４１０に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４１６】
生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた前記抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、かつ
前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜８５及び９２〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、前記抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、
請求項４０８または４１０に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４１７】
前記抗体が、１Ｆと表記される抗体、１Ｇと表記される抗体、２９Ｄと表記される抗体、２９Ｅと表記される抗体、３９Ａと表記される抗体、４３Ｅａと表記される抗体、または５４Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項４０８〜４１６のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４１８】
前記３つの重鎖ＣＤＲ及び前記３つの軽鎖ＣＤＲが、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、Ｃｏｎｔａｃｔ、またはＩＭＧＴ番号付けを用いて決定される、請求項４１７に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４１９】
前記抗体が、１Ｆと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項４１７または４１８に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４２０】
前記抗体が、１Ｇと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項４１７または４１８に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４２１】
前記抗体が、２９Ｄと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項４１７または４１８に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４２２】
前記抗体が、２９Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項４１７または４１８に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４２３】
前記抗体が、３９Ａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項４１７または４１８に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４２４】
前記抗体が、５４Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項４１７または４１８に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４２５】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８のＶＬ配列を含む、請求項４０８〜４１８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４２６】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６のＶＬ配列を含む、請求項４０８〜４１８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４２７】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４２のＶＬ配列を含む、請求項４０８〜４１８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４２８】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８０のＶＬ配列を含む、請求項４０８〜４１８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４２９】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１８のＶＬ配列を含む、請求項４０８〜４１８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４３０】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６０のＶＬ配列を含む、請求項４０８〜４１８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４３１】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項４０８〜４１８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４３２】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８６に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８９に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９０に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項４０８〜４１８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４３３】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項４０８〜４１８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４３４】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項４０８〜４１８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４３５】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６２のＶＬ配列を含む、請求項４０８〜４１８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４３６】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６６のＶＬ配列を含む、請求項４０８〜４１８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４３７】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６８のＶＬ配列を含む、請求項４０８〜４１８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４３８】
前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７２のＶＬ配列を含む、請求項４０８〜４１８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４３９】
前記抗体が、１Ｆと表記される抗体、１Ｇと表記される抗体、２９Ｄと表記される抗体、２９Ｅと表記される抗体、３９Ａと表記される抗体、または５４Ｅと表記される抗体を含む、請求項４０８〜４３８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４４０】
前記抗体が、１Ｆと表記される抗体、１Ｇと表記される抗体、２９Ｄと表記される抗体、２９Ｅと表記される抗体、３９Ａと表記される抗体、または５４Ｅと表記される抗体からなる、請求項４０８〜４３９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４４１】
抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、前記抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、前記抗体を前記細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートであって、前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、前記抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４４２】
抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、前記抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、前記抗体を前記細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートであって、前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、前記抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４４３】
抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、前記抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、前記抗体を前記細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートであって、前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８６に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８９に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９０に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、前記抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４４４】
抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、前記抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、前記抗体を前記細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートであって、前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、前記抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４４５】
抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、前記抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、前記抗体を前記細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートであって、前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８００に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、前記抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４４６】
抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、前記抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、前記抗体を前記細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートであって、前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、前記抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４４７】
抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、前記抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、前記抗体を前記細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートであって、前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、前記抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４４８】
抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、前記抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、前記抗体を前記細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートであって、前記抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、前記抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４４９】
前記抗体が、ヒト、ヒト化、またはキメラである、請求項２８８〜４４８のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４５０】
前記抗体が、Ｏｃｔｅｔ  ＱＫ３８４またはＢｉａｃｏｒｅアッセイによって測定するとき、５０ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、５ｎＭ以下、１ｎＭ以下、０．５ｎＭ以下、または０．１ｎＭ以下のＫＤでヒトＴＦに結合する、請求項２８８〜４４９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４５１】
前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項２８８〜４４９のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４５２】
前記抗体が多重特異性である、請求項２８８〜４５１のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４５３】
前記抗体が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、１本鎖抗体分子、二重可変ドメイン抗体、単一可変ドメイン抗体、直鎖状抗体、またはＶドメイン抗体である、請求項２８８〜４５２のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４５４】
前記抗体が足場を含み、任意選択で、前記足場がＦｃ、任意選択でヒトＦｃである、請求項２８８〜４５３のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４５５】
前記抗体が、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、及びＩｇＭから選択されるクラスの重鎖定常領域を含む、請求項４５４に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４５６】
前記抗体が、前記ＩｇＧクラス、かつＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４から選択されるサブクラスの重鎖定常領域を含む、請求項４５５に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４５７】
前記抗体が、ＩｇＧ１の重鎖定常領域を含む、請求項４５６に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４５８】
前記Ｆｃが１つまたは複数の修飾を含み、前記１つまたは複数の修飾が、前記１つまたは複数の修飾を含まない前記Ｆｃと比較して、増加した半減期、増加した抗体依存性細胞傷害作用（ＡＤＣＣ）、増加した抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）、増加した補体依存性細胞傷害作用（ＣＤＣ）、または減少したエフェクター機能をもたらす、請求項４５４〜４５７のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４５９】
抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、前記抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、前記抗体を前記細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートであって、前記抗体が、ヒトＴＦへの結合について請求項２８８〜４５８のいずれか１項に記載の抗体と競合する、前記抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４６０】
抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、前記抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、前記抗体を前記細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートであって、前記抗体が、請求項２８８〜４５９のいずれか１項に記載の抗体が結合する前記ヒトＴＦのエピトープに結合する、前記抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４６１】
前記細胞傷害性薬剤が、血管新生阻害剤、アポトーシス促進剤、有糸分裂阻害剤、キナーゼ阻害剤、アルキル化剤、ホルモン、ホルモンアゴニスト、ホルモンアンタゴニスト、ケモカイン、薬物、プロドラッグ、毒素、酵素、代謝拮抗物質、抗生物質、アルカロイド、または放射性同位体を含む、請求項２８８〜４６０のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４６２】
前記細胞傷害性薬剤が、カリケアマイシン、カンプトテシン、カルボプラチン、イリノテカン、ＳＮ−３８、カルボプラチン、カンプトテカン（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃａｎ）、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ドセタキセル、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ドキソルビシン、エトポシド、イダルビシン、トポテカン、ビンカアルカロイド、マイタンシノイド、マイタンシノイド類似体、ピロロベンゾジアゼピン、タキソイド、デュオカルマイシン、ドラスタチン、及びアウリスタチンのうちの少なくとも１つを含む、請求項２８８〜４６１のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４６３】
前記リンカーが、不安定リンカー、酸不安定リンカー、光不安定リンカー、荷電リンカー、ジスルフィド含有リンカー、ペプチダーゼ感受性リンカー、β−グルクロニドリンカー、ジメチルリンカー、チオ−エーテルリンカー、または親水性リンカーを含む、請求項２８８〜４６２のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４６４】
前記リンカーが、切断可能なリンカーである、請求項２８８〜４６３のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４６５】
前記リンカーが、切断不可能なリンカーである、請求項２８８〜４６３のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項４６６】
請求項２８８〜４６５のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲートと、薬学的に許容される賦形剤とを含む、薬学的組成物。
【請求項４６７】
その必要がある対象における疾患または病態の処置方法または予防方法であって、前記対象に、有効量の請求項２８８〜４６５のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲートまたは請求項４６６に記載の薬学的組成物を投与する工程を含む、前記方法。
【請求項４６８】
前記疾患または病態が、がんである、請求項４６７に記載の方法。
【請求項４６９】
前記がんが頭頸部癌である、請求項４６８に記載の方法。
【請求項４７０】
前記がんが卵巣癌である、請求項４６８に記載の方法。
【請求項４７１】
前記がんが胃癌である、請求項４６８に記載の方法。
【請求項４７２】
前記がんが食道癌である、請求項４６８に記載の方法。
【請求項４７３】
前記がんが子宮頸癌である、請求項４６８に記載の方法。
【請求項４７４】
前記がんが前立腺癌である、請求項４６８に記載の方法。
【請求項４７５】
前記がんが膵臓癌である、請求項４６８に記載の方法。
【請求項４７６】
前記がんが、エストロゲン受容体陰性（ＥＲ−）、プロゲステロン受容体陰性（ＰＲ−）、及びＨＥＲ２陰性（ＨＥＲ２−）の三重陰性乳癌である、請求項４６８に記載の方法。
【請求項４７７】
前記がんが膠芽腫である、請求項４６８に記載の方法。
【請求項４７８】
前記がんが肺癌である、請求項４６８に記載の方法。
【請求項４７９】
前記がんが膀胱癌である、請求項４６８に記載の方法。
【請求項４８０】
前記がんが黒色腫である、請求項４６８に記載の方法。
【請求項４８１】
前記がんが腎臓癌である、請求項４６８に記載の方法。
【請求項４８２】
１つまたは複数の追加の治療剤を前記対象に投与する工程をさらに含む、請求項４６７〜４８１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４８３】
前記追加の治療剤が、前記抗体薬物コンジュゲートと同じ薬学的組成物中で製剤化される、請求項４８２に記載の方法。
【請求項４８４】
前記追加の治療剤が、前記抗体薬物コンジュゲートとは異なる薬学的組成物中で製剤化される、請求項４８２に記載の方法。
【請求項４８５】
前記追加の治療剤が、前記抗体薬物コンジュゲートを投与する前に投与される、請求項４８２に記載の方法。
【請求項４８６】
前記追加の治療剤が、前記抗体薬物コンジュゲートを投与した後に投与される、請求項４８２に記載の方法。
【請求項４８７】
前記追加の治療剤が、前記抗体薬物コンジュゲートと同時に投与される、請求項４８２に記載の方法。
【請求項４８８】
疾患または病態を有するかあるいは有することが疑われる対象におけるＴＦの検出方法であって、（ａ）前記対象に請求項２８８〜４６５のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲートを投与する工程と、（ｂ）前記対象においてＴＦの存在またはレベルを検出する工程とを含む、前記方法。
【請求項４８９】
前記疾患または病態が、がんである、請求項４８８に記載の方法。
【請求項４９０】
前記がんが頭頸部癌である、請求項４８９に記載の方法。
【請求項４９１】
前記がんが卵巣癌である、請求項４８９に記載の方法。
【請求項４９２】
前記がんが胃癌である、請求項４８９に記載の方法。
【請求項４９３】
前記がんが食道癌である、請求項４８９に記載の方法。
【請求項４９４】
前記がんが子宮頸癌である、請求項４８９に記載の方法。
【請求項４９５】
前記がんが前立腺癌である、請求項４８９に記載の方法。
【請求項４９６】
前記がんが膵臓癌である、請求項４８９に記載の方法。
【請求項４９７】
前記がんが、エストロゲン受容体陰性（ＥＲ−）、プロゲステロン受容体陰性（ＰＲ−）、及びＨＥＲ２陰性（ＨＥＲ２−）の三重陰性乳癌である、請求項４８９に記載の方法。
【請求項４９８】
前記がんが膠芽腫である、請求項４８９に記載の方法。
【請求項４９９】
前記がんが肺癌である、請求項４８９に記載の方法。
【請求項５００】
前記がんが膀胱癌である、請求項４８９に記載の方法。
【請求項５０１】
前記がんが黒色腫である、請求項４８９に記載の方法。
【請求項５０２】
前記がんが腎臓癌である、請求項４８９に記載の方法。
【請求項５０３】
請求項２８８〜４６５のいずれか１項に記載の抗体薬物コンジュゲートまたは請求項４６６に記載の薬学的組成物と、使用説明書とを含む、キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２０１８年１月４日に出願された米国仮出願第６２／６１３，５４５号、２０１８年１月４日に出願された同第６２／６１３，５６４号、２０１８年３月２２日に出願された同第６２／６４６，７８８号、２０１８年８月２日に出願された同第６２／７１３，７９７号、及び２０１８年８月２日に出願された同第６２／７１３，８０４号の利益を主張するものであり、これらの各々は参照によりその全体が本明細書に援用される。
【０００２】
配列表
本願は、ＥＦＳ−Ｗｅｂを介して提出された、参照によりその全体が本明細書に援用される配列表を含む。２０ＸＸ年ＸＸ月ＸＸ日に作成された該ＡＳＣＩＩの写しは、ＸＸＸＸＸＵＳ＿ｓｅｑｕｅｎｃｅｌｉｓｔｉｎｇ．ｔｘｔと名付けられ、Ｘ，ＸＸＸ，ＸＸＸバイトのサイズである。
【背景技術】
【０００３】
背景
血液凝固は、凝血をもたらす複合の一連の過程を伴う。組織因子（ＴＦ）は、これらの凝固過程において重要な役割を果たす。ＴＦは、セリンプロテアーゼ第ＶＩＩａ因子（ＦＶＩＩａ）の細胞表面受容体である。ＴＦ／ＦＶＩＩａ複合体は、不活性なプロテアーゼ第Ｘ因子（ＦＸ）から活性なプロテアーゼ第Ｘａ因子（ＦＸａ）への変換を触媒する。ＦＸａ及びその補因子ＦＶａは、プロトロンビナーゼ複合体を形成し、これがプロトロンビンからトロンビンを生成する。トロンビンは、可溶性のフィブリノゲンを不溶性のフィブリン鎖に変換するとともに、多くの他の凝固関連過程を触媒する。
【０００４】
ＴＦは、複数の種類の固形腫瘍上で過剰発現される。がんにおいて、ＴＦ／ＦＶＩＩａシグナル伝達は、血管新生、腫瘍進行、及び転移を支持し得る。増加したＴＦ発現はまた、滲出型加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）及び糖尿病性網膜症を含めた多くの他の疾患においても炎症及び／または血管新生を誘導し得る。
【発明の概要】
【０００５】
概要
本明細書においては、ヒト組織因子（ＴＦ）に特異的に結合する抗体、抗ＴＦ抗体薬物コンジュゲート、及び関連する方法が提供される。
【０００６】
一態様では、本明細書において、ヒト組織因子（ＴＦ）の細胞外ドメインに結合する単離されたヒト抗体が提供され、該抗体は、ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する。
【０００７】
一部の実施形態では、（１）該単離された抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成を阻害せず、かつ（２）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０００８】
一部の実施形態では、（１）該単離された抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成をより低い程度に阻害し、かつ（２）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０００９】
一部の実施形態では、（１）該単離された抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成をより高い程度に許容し、かつ（２）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【００１０】
一部の実施形態では、（１）該単離された抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成をより少ない量だけ阻害し、かつ（２）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【００１１】
一部の実施形態では、（１）該単離された抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成をより多い量だけ許容し、かつ（２）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【００１２】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【００１３】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【００１４】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【００１５】
一部の実施形態では、該単離された抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成を阻害しない。
【００１６】
一部の実施形態では、該単離された抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成をより低い程度に阻害する。
【００１７】
一部の実施形態では、該単離された抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成をより高い程度に許容する。
【００１８】
一部の実施形態では、該単離された抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成をより少ない量だけ阻害する。
【００１９】
一部の実施形態では、該単離された抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成をより多い量だけ許容する。
【００２０】
一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない。一部の実施形態では、該抗体は、アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減しない。一部の実施形態では、該抗体は、アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させない。一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させない。一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する。一部の実施形態では、該抗体は、アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持する。一部の実施形態では、該抗体は、アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持する。一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護する。
【００２１】
一部の実施形態では、該抗体は、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する。一部の実施形態では、該抗体は、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉しない。
【００２２】
一部の実施形態では、該抗体は、ヒトＴＦへの結合についてヒトＦＶＩＩａと競合しない。
【００２３】
一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、かつヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合しない。
【００２４】
一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、かつヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合しない。
【００２５】
一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、かつヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合しない。
【００２６】
一部の実施形態では、該抗体は、ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害する。
【００２７】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎである。
【００２８】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８における変異は、Ｋ６８Ｎである。
【００２９】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【００３０】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【００３１】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【００３２】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【００３３】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【００３４】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【００３５】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【００３６】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【００３７】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【００３８】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【００３９】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎであり、かつＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８における変異は、Ｋ６８Ｎである。
【００４０】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ���Ｏ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎであり、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８における変異は、Ｋ６８Ｎであり、かつＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【００４１】
一部の実施形態では、該抗体は、カニクイザルＴＦに結合する。一部の実施形態では、該抗体は、マウスＴＦに結合する。一部の実施形態では、該抗体は、ウサギＴＦに結合する。一部の実施形態では、該抗体は、ブタＴＦに結合する。
【００４２】
一部の実施形態では、該抗体は、ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減する。
【００４３】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、かつ（ｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【００４４】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、かつ（ｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【００４５】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ（ｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎであり、かつＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【００４６】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ（ｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎであり、かつＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【００４７】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ（ｄ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎであり、かつＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【００４８】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｂ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ（ｄ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎであり、かつＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【００４９】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｃ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、（ｄ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、（ｅ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、（ｆ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、（ｇ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｈ）マウスＴＦに結合し、かつ（ｉ）ウサギＴＦに結合する。
【００５０】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、（ｃ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、（ｅ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、（ｆ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、（ｇ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、（ｈ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、（ｉ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｊ）マウスＴＦに結合し、かつ（ｋ）ウサギＴＦに結合する。
【００５１】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、（ｅ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｆ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、（ｈ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、（ｉ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、（ｊ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、（ｋ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、（ｌ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、（ｍ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｎ）マウスＴＦに結合し、かつ（ｏ）ウサギＴＦに結合する。
【００５２】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｃ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、（ｄ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、（ｅ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、（ｆ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、（ｇ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｈ）マウスＴＦに結合し、（ｉ）ウサギＴＦに結合し、（ｊ）ブタＴＦに結合し、かつ（ｋ）ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減する。
【００５３】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、（ｃ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、（ｅ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、（ｆ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、（ｇ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、（ｈ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、（ｉ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｊ）マウスＴＦに結合し、（ｋ）ウサギＴＦに結合し、（ｌ）ブタＴＦに結合し、かつ（ｍ）ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減する。
【００５４】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、（ｅ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｆ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、（ｈ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、（ｉ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、（ｊ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、（ｋ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、（ｌ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、（ｍ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｎ）マウスＴＦに結合し、（ｏ）ウサギＴＦに結合し、（ｐ）ブタＴＦに結合し、かつ（ｑ）ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減する。
【００５５】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、（ｅ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｆ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、（ｈ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、（ｉ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、（ｊ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、（ｋ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、（ｌ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、（ｍ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｎ）マウスＴＦに結合し、（ｏ）ウサギＴＦに結合し、（ｐ）ブタＴＦに結合し、（ｑ）ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減し、（ｒ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｓ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、（ｔ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｕ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外���メインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、（ｖ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、（ｗ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、（ｘ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｙ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｚ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ａａ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにお���るアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｂｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ（ｃｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【００５６】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、（ｅ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｆ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、（ｈ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、（ｉ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、（ｊ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、（ｋ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、（ｌ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、（ｍ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｎ）マウスＴＦに結合し、（ｏ）ウサギＴＦに結合し、（ｐ）ブタＴＦに結合し、（ｑ）ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減し、（ｒ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｋ１４９Ｎを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｓ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｋ６８Ｎを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、（ｔ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｕ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該���離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、（ｖ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、（ｗ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、（ｘ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｙ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｚ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ａａ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１���９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｂｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ（ｃｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【００５７】
一部の実施形態では、該抗体は、ヒトＴＦへの結合について、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体と競合する。
【００５８】
一部の実施形態では、該抗体は、ヒトＴＦへの結合について、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体と競合する。
【００５９】
一部の実施形態では、該抗体は、ヒトＴＦへの結合について、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体と競合する。
【００６０】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体が結合する、同じヒトＴＦのエピトープに結合する。
【００６１】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体が結合する、同じヒトＴＦのエピトープに結合する。
【００６２】
一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体が結合する、同じヒトＴＦのエピトープに結合する。
【００６３】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ  Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ  Ｒｅｇｉｏｎｓ）（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該３つの重鎖ＣＤＲ及び該３つの軽鎖ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、Ｃｏｎｔａｃｔ、またはＩＭＧＴ番号付けを用いて決定される。
【００６４】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。
【００６５】
一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。
【００６６】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａ３と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａ５と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ｇと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ｇ１と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ｇ９と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂ１と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂ７と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｄと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｄ７と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｄ８と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。
【００６７】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３６のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３７のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５６９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２２のＶＬ配列を含む。
【００６８】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８００に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【００６９】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６８のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６９のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７０のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７１のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７０のＶＬ配列を含む。
【００７０】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体を含む。
【００７１】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体を含む。
【００７２】
一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体を含む。
【００７３】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からなる。
【００７４】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体からなる。
【００７５】
一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からなる。
【００７６】
別の態様では、本明細書において、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む、単離された抗体が提供される。
【００７７】
一部の実施形態では、該抗体は、ヒト、ヒト化、またはキメラである。
【００７８】
一部の実施形態では、該３つの重鎖ＣＤＲ及び該３つの軽鎖ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、Ｃｏｎｔａｃｔ、またはＩＭＧＴ番号付けを用いて決定される。
【００７９】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。
【００８０】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａ３と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａ５と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ｇと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ｇ１と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ｇ９と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。
【００８１】
一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。
【００８２】
一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂ１と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂ７と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｄと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｄ７と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｄ８と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。
【００８３】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３６のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３７のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５６９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２２のＶＬ配列を含む。
【００８４】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８００に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【００８５】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６８のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６９のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７０のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７１のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７０のＶＬ配列を含む。
【００８６】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体を含む。
【００８７】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体を含む。
【００８８】
一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体を含む。
【００８９】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からなる。
【００９０】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体からなる。
【００９１】
一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からなる。
【００９２】
別の態様では、本明細書において、ヒトＴＦへの結合について、１Ｆと表記される抗体、１Ｇと表記される抗体、２９Ｄと表記される抗体、２９Ｅと表記される抗体、３９Ａと表記される抗体、または５４Ｅと表記される抗体と競合する、単離された抗体が提供される。
【００９３】
一部の実施形態では、該抗体は、ヒト、ヒト化、またはキメラである。
【００９４】
一部の実施形態では、該抗体は、ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害する。
【００９５】
一部の実施形態では、該抗体は、カニクイザルＴＦに結合する。
【００９６】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【００９７】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜９３がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜９８と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【００９８】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【００９９】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜８５及び９２〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０１００】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、かつ該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜９３がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜９８と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０１０１】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該単離された抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、かつ該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜８５及び９２〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該単離された抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０１０２】
一部の実施形態では、該抗体は、１Ｆと表記される抗体、１Ｇと表記される抗体、２９Ｄと表記される抗体、２９Ｅと表記される抗体、３９Ａと表記される抗体、４３Ｅａと表記される抗体、または５４Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該３つの重鎖ＣＤＲ及び該３つの軽鎖ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、Ｃｏｎｔａｃｔ、またはＩＭＧＴ番号付けを用いて決定される。
【０１０３】
一部の実施形態では、該抗体は、１Ｆと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、１Ｇと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２９Ｄと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２９Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、３９Ａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、５４Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。
【０１０４】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６０のＶＬ配列を含む。
【０１０５】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８６に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８９に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９０に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０１０６】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７２のＶＬ配列を含む。
【０１０７】
一部の実施形態では、該抗体は、１Ｆと表記される抗体、１Ｇと表記される抗体、２９Ｄと表記される抗体、２９Ｅと表記される抗体、３９Ａと表記される抗体、または５４Ｅと表記される抗体を含む。
【０１０８】
一部の実施形態では、該抗体は、１Ｆと表記される抗体、１Ｇと表記される抗体、２９Ｄと表記される抗体、２９Ｅと表記される抗体、３９Ａと表記される抗体、または５４Ｅと表記される抗体からなる。
【０１０９】
別の態様では、本明細書において、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、単離された抗体が提供される。
【０１１０】
別の態様では、本明細書において、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、単離された抗体が提供される。
【０１１１】
別の態様では、本明細書において、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８６に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８９に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９０に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、単離された抗体が提供される。
【０１１２】
別の態様では、本明細書において、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、単離された抗体が提供される。
【０１１３】
別の態様では、本明細書において、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８００に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、単離された抗体が提供される。
【０１１４】
別の態様では、本明細書において、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、単離された抗体が提供される。
【０１１５】
別の態様では、本明細書において、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、単離された抗体が提供される。
【０１１６】
別の態様では、本明細書において、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、単離された抗体が提供される。
【０１１７】
一部の実施形態では、該抗体は、Ｏｃｔｅｔ  ＱＫ３８４またはＢｉａｃｏｒｅアッセイによって測定するとき、５０ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、５ｎＭ以下、１ｎＭ以下、０．５ｎＭ以下、または０．１ｎＭ以下のＫＤでヒトＴＦに結合する。
【０１１８】
一部の実施形態では、該抗体は、モノクローナル抗体である。
【０１１９】
一部の実施形態では、該抗体は、多重特異性である。
【０１２０】
一部の実施形態では、該抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、１本鎖抗体分子、二重可変ドメイン抗体、単一可変ドメイン抗体、直鎖状抗体、またはＶドメイン抗体である。
【０１２１】
一部の実施形態では、該抗体は足場を含み、任意選択で、該足場はＦｃ、任意選択でヒトＦｃである。一部の実施形態では、該抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、及びＩｇＭから選択されるクラスの重鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＩｇＧクラス、かつＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４から選択されるサブクラスの重鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＩｇＧ１の重鎖定常領域を含む。
【０１２２】
一部の実施形態では、該Ｆｃは１つまたは複数の修飾を含み、該１つまたは複数の修飾は、該１つまたは複数の修飾を含まない該Ｆｃと比較して、増加した半減期、増加した抗体依存性細胞傷害作用（ＡＤＣＣ）、増加した抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）、増加した補体依存性細胞傷害作用（ＣＤＣ）、または減少したエフェクター機能をもたらす。
【０１２３】
別の態様では、本明細書において、ヒトＴＦへの結合について上記のいずれかの抗体と競合する、単離された抗体が提供される。
【０１２４】
別の態様では、本明細書において、上記のいずれかの抗体が結合するヒトＴＦのエピトープに結合する、単離された抗体が提供される。
【０１２５】
別の態様では、本明細書において、上記のいずれかの抗体、そのＶＨ、そのＶＬ、その軽鎖、その重鎖、またはその抗原結合部分をコードする、単離されたポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドの組が提供される。
【０１２６】
別の態様では、本明細書において、上記のポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドの組を含む、ベクターまたはベクターの組が提供される。
【０１２７】
別の態様では、本明細書において、上記のポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチドの組または上記のベクターもしくはベクターの組を含む、宿主細胞が提供される。
【０１２８】
別の態様では、本明細書において、抗体の生産方法であって、上記の宿主細胞により該抗体を発現させることと、該発現された抗体を単離することと、を含む、該方法が提供される。
【０１２９】
別の態様では、本明細書において、上記のいずれかの抗体と、薬学的に許容される賦形剤とを含む、薬学的組成物が提供される。
【０１３０】
別の態様では、本明細書において、疾患または病態の処置または予防を必要とする対象における該疾患または病態の処置方法または予防方法であって、該対象に、有効量の上記のいずれかの抗体または上記の薬学的組成物を投与することを含む、該方法が提供される。
【０１３１】
一部の実施形態では、疾患または病態は、がんである。一部の実施形態では、がんは、頭頸部癌である。一部の実施形態では、がんは、卵巣癌である。一部の実施形態では、がんは、胃癌である。一部の実施形態では、がんは、食道癌である。一部の実施形態では、がんは、子宮頸癌である。一部の実施形態では、がんは、前立腺癌である。一部の実施形態では、がんは、膵臓癌である。一部の実施形態では、がんは、エストロゲン受容体陰性（ＥＲ−）、プロゲステロン受容体陰性（ＰＲ−）、及びＨＥＲ２陰性（ＨＥＲ２−）の三重陰性乳癌である。一部の実施形態では、がんは、膠芽腫である。一部の実施形態では、がんは、肺癌である。一部の実施形態では、がんは、膀胱癌である。一部の実施形態では、がんは、黒色腫である。一部の実施形態では、がんは、腎臓癌である。
【０１３２】
一部の実施形態では、疾患または病態は、血管新生を伴う。一部の実施形態では、血管新生を伴う疾患または病態は、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、糖尿病性網膜症、またはがんである。一部の実施形態では、疾患または病態は、血管炎症を伴う。
【０１３３】
一部の実施形態では、該方法は、１つまたは複数の追加の治療剤を該対象に投与することをさらに含む。一部の実施形態では、追加の治療剤は、該抗体と同じ薬学的組成物中で製剤化される。一部の実施形態では、追加の治療剤は、該抗体とは異なる薬学的組成物中で製剤化される。一部の実施形態では、追加の治療剤は、該抗体を投与する前に投与される。一部の実施形態では、追加の治療剤は、該抗体を投与した後に投与される。一部の実施形態では、追加の治療剤は、該抗体と同時に投与される。
【０１３４】
別の態様では、本明細書において、疾患または病態を有するか、または有することが疑われる対象におけるＴＦの検出方法であって、（ａ）該対象から試料を受け取ることと、（ｂ）該試料を上記のいずれかの抗体と接触させることによって、該試料中でのＴＦの存在またはレベルを検出することと、を含む、該方法が提供される。
【０１３５】
一部の実施形態では、疾患または病態は、がんである。一部の実施形態では、がんは、頭頸部癌である。一部の実施形態では、がんは、卵巣癌である。一部の実施形態では、がんは、胃癌である。一部の実施形態では、がんは、食道癌である。一部の実施形態では、がんは、子宮頸癌である。一部の実施形態では、がんは、前立腺癌である。一部の実施形態では、がんは、膵臓癌である。一部の実施形態では、がんは、エストロゲン受容体陰性（ＥＲ−）、プロゲステロン受容体陰性（ＰＲ−）、及びＨＥＲ２陰性（ＨＥＲ２−）の三重陰性乳癌である。一部の実施形態では、がんは、膠芽腫である。一部の実施形態では、がんは、肺癌である。一部の実施形態では、がんは、膀胱癌である。一部の実施形態では、がんは、黒色腫である。一部の実施形態では、がんは、腎臓癌である。
【０１３６】
一部の実施形態では、疾患または病態は、血管新生を伴う。一部の実施形態では、血管新生を伴う疾患または病態は、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、糖尿病性網膜症、またはがんである。一部の実施形態では、疾患または病態は、血管炎症を伴う。
【０１３７】
別の態様では、本明細書において、疾患または病態を有するか、または有することが疑われる対象におけるＴＦの検出方法であって、（ａ）該対象に上記のいずれかの抗体を投与することと、（ｂ）該対象においてＴＦの存在またはレベルを検出することと、を含む、該方法が提供される。
【０１３８】
一部の実施形態では、疾患または病態は、がんである。一部の実施形態では、がんは、頭頸部癌である。一部の実施形態では、がんは、卵巣癌である。一部の実施形態では、がんは、胃癌である。一部の実施形態では、がんは、食道癌である。一部の実施形態では、がんは、子宮頸癌である。一部の実施形態では、がんは、前立腺癌である。一部の実施形態では、がんは、膵臓癌である。一部の実施形態では、がんは、エストロゲン受容体陰性（ＥＲ−）、プロゲステロン受容体陰性（ＰＲ−）、及びＨＥＲ２陰性（ＨＥＲ２−）の三重陰性乳癌である。一部の実施形態では、がんは、膠芽腫である。一部の実施形態では、がんは、肺癌である。一部の実施形態では、がんは、膀胱癌である。一部の実施形態では、がんは、黒色腫である。一部の実施形態では、がんは、腎臓癌である。
【０１３９】
一部の実施形態では、疾患または病態は、血管新生を伴う。一部の実施形態では、血管新生を伴う疾患または病態は、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、糖尿病性網膜症、またはがんである。一部の実施形態では、疾患または病態は、血管炎症を伴う。
【０１４０】
別の態様では、本明細書において、上記のいずれかの抗体または上記の薬学的組成物と、使用説明書とを含む、キットが提供される。
【０１４１】
別の態様では、本明細書において、抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、該抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、該抗体を該細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートが提供され、該抗体は、ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒト組織因子（ＴＦ）の細胞外ドメインに結合する。
【０１４２】
一部の実施形態では、（１）該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成を阻害せず、かつ（２）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０１４３】
一部の実施形態では、（１）該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成をより低い程度に阻害し、かつ（２）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０１４４】
一部の実施形態では、（１）該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成をより高い程度に許容し、かつ（２）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０１４５】
一部の実施形態では、（１）該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成をより少ない量だけ阻害し、かつ（２）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０１４６】
一部の実施形態では、（１）該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成をより多い量だけ許容し、かつ（２）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０１４７】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０１４８】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２  ＨＩ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０１４９】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０１５０】
一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成を阻害しない。
【０１５１】
一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成をより低い程度に阻害する。
【０１５２】
一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成をより高い程度に許容する。
【０１５３】
一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成をより少ない量だけ阻害する。
【０１５４】
一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む参照抗体と比較して、ヒトトロンビン生成をより多い量だけ許容する。
【０１５５】
一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない。一部の実施形態では、該抗体は、アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減しない。一部の実施形態では、該抗体は、アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させない。一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させない。一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する。一部の実施形態では、該抗体は、アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持する。一部の実施形態では、該抗体は、アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持する。一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護する。
【０１５６】
一部の実施形態では、該抗体は、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する。一部の実施形態では、該抗体は、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉しない。
【０１５７】
一部の実施形態では、該抗体は、ヒトＴＦへの結合についてヒトＦＶＩＩａと競合しない。
【０１５８】
一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、かつヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合しない。
【０１５９】
一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、かつヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合しない。
【０１６０】
一部の実施形態では、該抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、かつヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合しない。
【０１６１】
一部の実施形態では、該抗体は、ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害する。
【０１６２】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎである。
【０１６３】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８における変異は、Ｋ６８Ｎである。
【０１６４】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【０１６５】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０１６６】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０１６７】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０１６８】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０１６９】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０１７０】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０１７１】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０１７２】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０１７３】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０１７４】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎであり、かつＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８における変異は、Ｋ６８Ｎである。
【０１７５】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎであり、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８における変異は、Ｋ６８Ｎであり、かつＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【０１７６】
一部の実施形態では、該抗体は、カニクイザルＴＦに結合する。一部の実施形態では、該抗体は、マウスＴＦに結合する。一部の実施形態では、該抗体は、ウサギＴＦに結合する。一部の実施形態では、該抗体は、ブタＴＦに結合する。
【０１７７】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、かつ（ｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【０１７８】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、かつ（ｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【０１７９】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ（ｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎであり、かつＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【０１８０】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ（ｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎであり、かつＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【０１８１】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ（ｄ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎであり、かつＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【０１８２】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｂ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ（ｄ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎであり、かつＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【０１８３】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｃ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、（ｄ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、（ｅ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、（ｆ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、（ｇ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｈ）マウスＴＦに結合し、かつ（ｉ）ウサギＴＦに結合する。
【０１８４】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、（ｃ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、（ｅ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、（ｆ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、（ｇ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、（ｈ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、（ｉ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｊ）マウスＴＦに結合し、かつ（ｋ）ウサギＴＦに結合する。
【０１８５】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、（ｅ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｆ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、（ｈ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、（ｉ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、（ｊ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、（ｋ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、（ｌ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、（ｍ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｎ）マウスＴＦに結合し、かつ（ｏ）ウサギＴＦに結合する。
【０１８６】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｃ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、（ｄ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、（ｅ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、（ｆ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、（ｇ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｈ）マウスＴＦに結合し、（ｉ）ウサギＴＦに結合し、かつ（ｊ）ブタＴＦに結合する。
【０１８７】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、（ｃ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、（ｅ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、（ｆ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、（ｇ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、（ｈ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、（ｉ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｊ）マウスＴＦに結合し、（ｋ）ウサギＴＦに結合し、かつ（ｌ）ブタＴＦに結合する。
【０１８８】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、（ｅ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｆ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、（ｈ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、（ｉ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、（ｊ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、（ｋ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、（ｌ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、（ｍ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｎ）マウスＴＦに結合し、（ｏ）ウサギＴＦに結合し、かつ（ｐ）ブタＴＦに結合する。
【０１８９】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、（ｅ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｆ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、（ｈ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、（ｉ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、（ｊ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、（ｋ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、（ｌ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、（ｍ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｎ）マウスＴＦに結合し、（ｏ）ウサギＴＦに結合し、（ｐ）ブタＴＦに結合し、（ｑ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｒ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、（ｓ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｔ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、（ｕ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、（ｖ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、（ｗ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｘ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｙ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｚ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ａａ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７��１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ（ｂｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０１９０】
一部の実施形態では、該抗体は、（ａ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、（ｂ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減せず、（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させず、（ｄ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させず、（ｅ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、（ｆ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持し、（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持し、（ｈ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護し、（ｉ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、（ｊ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、（ｋ）ヒトＴＦへの結合についてＦＶＩＩａと競合せず、（ｌ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、（ｍ）カニクイザルＴＦに結合し、（ｎ）マウスＴＦに結合し、（ｏ）ウサギＴＦに結合し、（ｐ）ブタＴＦに結合し、（ｑ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｋ１４９Ｎを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｒ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｋ６８Ｎを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、（ｓ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｔ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、（ｕ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、（ｖ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、（ｗ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｘ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｙ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ｚ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、（ａａ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ���８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ（ｂｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０１９１】
一部の実施形態では、該抗体は、ヒトＴＦへの結合について、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体と競合する。
【０１９２】
一部の実施形態では、該抗体は、ヒトＴＦへの結合について、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体と競合する。
【０１９３】
一部の実施形態では、該抗体は、ヒトＴＦへの結合について、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体と競合する。
【０１９４】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体が結合する、同じヒトＴＦのエピトープに結合する。
【０１９５】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体が結合する、同じヒトＴＦのエピトープに結合する。
【０１９６】
一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体が結合する、同じヒトＴＦのエピトープに結合する。
【０１９７】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該３つの重鎖ＣＤＲ及び該３つの軽鎖ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、Ｃｏｎｔａｃｔ、またはＩＭＧＴ番号付けを用いて決定される。
【０１９８】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。
【０１９９】
一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。
【０２００】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａ３と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａ５と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ｇと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ｇ１と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ｇ９と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂ１と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂ７と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｄと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｄ７と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｄ８と表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｅａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。
【０２０１】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３６のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３７のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５６９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２２のＶＬ配列を含む。
【０２０２】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８００に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０２０３】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６８のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６９のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７０のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７１のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７０のＶＬ配列を含む。
【０２０４】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体を含む。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体を含む。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体を含む。
【０２０５】
一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、２５Ｇ９と表記される抗体、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からなる。一部の実施形態では、該抗体は、２５Ａと表記される抗体、２５Ａ３と表記される抗体、２５Ａ５と表記される抗体、２５Ａ５−Ｔと表記される抗体、２５Ｇと表記される抗体、２５Ｇ１と表記される抗体、または２５Ｇ９と表記される抗体からなる。一部の実施形態では、該抗体は、４３Ｂと表記される抗体、４３Ｂ１と表記される抗体、４３Ｂ７と表記される抗体、４３Ｄと表記される抗体、４３Ｄ７と表記される抗体、４３Ｄ８と表記される抗体、４３Ｅと表記される抗体、または４３Ｅａと表記される抗体からなる。
【０２０６】
別の態様では、本明細書において、抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、該抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、該抗体を該細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートが提供され、該抗体は、ヒトＴＦへの結合について、１Ｆと表記される抗体、１Ｇと表記される抗体、２９Ｄと表記される抗体、２９Ｅと表記される抗体、３９Ａと表記される抗体、または５４Ｅと表記される抗体と競合する。
【０２０７】
一部の実施形態では、該抗体は、ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害する。
【０２０８】
一部の実施形態では、該抗体は、カニクイザルＴＦに結合する。
【０２０９】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０２１０】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜９３がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜９８と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０２１１】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０２１２】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜８５及び９２〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０２１３】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、かつ該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜９３がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜９８と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０２１４】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、かつ該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基７８〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基７７〜８５及び９２〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０２１５】
一部の実施形態では、該抗体は、１Ｆと表記される抗体、１Ｇと表記される抗体、２９Ｄと表記される抗体、２９Ｅと表記される抗体、３９Ａと表記される抗体、４３Ｅａと表記される抗体、または５４Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該３つの重鎖ＣＤＲ及び該３つの軽鎖ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、Ｃｏｎｔａｃｔ、またはＩＭＧＴ番号付けを用いて決定される。
【０２１６】
一部の実施形態では、該抗体は、１Ｆと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、１Ｇと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２９Ｄと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、２９Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、３９Ａと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、該抗体は、５４Ｅと表記される抗体からの３つ全ての重鎖ＣＤＲ及び３つ全ての軽鎖ＣＤＲを含む。
【０２１７】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６０のＶＬ配列を含む。
【０２１８】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８６に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８９に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９０に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０２１９】
一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７２のＶＬ配列を含む。
【０２２０】
一部の実施形態では、該抗体は、１Ｆと表記される抗体、１Ｇと表記される抗体、２９Ｄと表記される抗体、２９Ｅと表記される抗体、３９Ａと表記される抗体、または５４Ｅと表記される抗体を含む。一部の実施形態では、該抗体は、１Ｆと表記される抗体、１Ｇと表記される抗体、２９Ｄと表記される抗体、２９Ｅと表記される抗体、３９Ａと表記される抗体、または５４Ｅと表記される抗体からなる。
【０２２１】
別の態様では、本明細書において、抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、該抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、該抗体を該細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートが提供され、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０２２２】
別の態様では、本明細書において、抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、該抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、該抗体を該細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートが提供され、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０２２３】
別の態様では、本明細書において、抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、該抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、該抗体を該細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートが提供され、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８６に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８９に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９０に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０２２４】
別の態様では、本明細書において、抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、該抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、該抗体を該細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートが提供され、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９１に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９４に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０２２５】
別の態様では、本明細書において、抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、該抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、該抗体を該細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートが提供され、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９７に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８００に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０２２６】
別の態様では、本明細書において、抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、該抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、該抗体を該細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートが提供され、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０５に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０８に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０２２７】
別の態様では、本明細書において、抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、該抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、該抗体を該細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートが提供され、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７２に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７３に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７４に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７５に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７６に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７７に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０２２８】
別の態様では、本明細書において、抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、該抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、該抗体を該細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートが提供され、該抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７８に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７９に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８０に記載の配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８１に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８２に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８３に記載の配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０２２９】
一部の実施形態では、該抗体は、ヒト、ヒト化、またはキメラである。
【０２３０】
一部の実施形態では、該抗体は、Ｏｃｔｅｔ  ＱＫ３８４またはＢｉａｃｏｒｅアッセイによって測定するとき、５０ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、５ｎＭ以下、１ｎＭ以下、０．５ｎＭ以下、または０．１ｎＭ以下のＫＤでヒトＴＦに結合する。
【０２３１】
一部の実施形態では、該抗体は、モノクローナル抗体である。
【０２３２】
一部の実施形態では、該抗体は、多重特異性である。
【０２３３】
一部の実施形態では、該抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、１本鎖抗体分子、二重可変ドメイン抗体、単一可変ドメイン抗体、直鎖状抗体、またはＶドメイン抗体である。
【０２３４】
一部の実施形態では、該抗体は足場を含み、任意選択で、該足場はＦｃ、任意選択でヒトＦｃである。一部の実施形態では、該抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、及びＩｇＭから選択されるクラスの重鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＩｇＧクラス、かつＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４から選択されるサブクラスの重鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、該抗体は、ＩｇＧ１の重鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、該Ｆｃは１つまたは複数の修飾を含み、該１つまたは複数の修飾は、該１つまたは複数の修飾を含まない該Ｆｃと比較して、増加した半減期、増加した抗体依存性細胞傷害作用（ＡＤＣＣ）、増加した抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）、増加した補体依存性細胞傷害作用（ＣＤＣ）、または減少したエフェクター機能をもたらす。
【０２３５】
別の態様では、本明細書において、抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、該抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、該抗体を該細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートが提供され、該抗体は、ヒトＴＦへの結合について上記のいずれかの抗体と競合する。
【０２３６】
別の態様では、本明細書において、抗ヒト組織因子（抗ｈＴＦ）抗体、該抗体に連結された細胞傷害性薬剤、及び任意選択で、該抗体を該細胞傷害性薬剤に連結するリンカーを含む、抗体薬物コンジュゲートが提供され、該抗体は、上記のいずれかの抗体が結合するヒトＴＦのエピトープに結合する。
【０２３７】
一部の実施形態では、細胞傷害性薬剤は、血管新生阻害剤、アポトーシス促進剤、有糸分裂阻害剤、キナーゼ阻害剤、アルキル化剤、ホルモン、ホルモンアゴニスト、ホルモンアンタゴニスト、ケモカイン、薬物、プロドラッグ、毒素、酵素、代謝拮抗物質、抗生物質、アルカロイド、または放射性同位体を含む。一部の実施形態では、細胞傷害性薬剤は、カリケアマイシン、カンプトテシン、カルボプラチン、イリノテカン、ＳＮ−３８、カルボプラチン、カンプトテカン（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃａｎ）、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ドセタキセル、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ドキソルビシン、エトポシド、イダルビシン、トポテカン、ビンカアルカロイド、マイタンシノイド、マイタンシノイド類似体、ピロロベンゾジアゼピン、タキソイド、デュオカルマイシン、ドラスタチン、及びアウリスタチンのうちの少なくとも１つを含む。
【０２３８】
一部の実施形態では、リンカーは、不安定リンカー、酸不安定リンカー、光不安定リンカー、荷電リンカー、ジスルフィド含有リンカー、ペプチダーゼ感受性リンカー、β−グルクロニド−リンカー、ジメチルリンカー、チオ−エーテルリンカー、または親水性リンカーを含む。一部の実施形態では、リンカーは、切断可能なリンカーである。一部の実施形態では、リンカーは、切断不可能なリンカーである。
【０２３９】
別の態様では、本明細書において、上記のいずれかの抗体薬物コンジュゲートと、薬学的に許容される賦形剤とを含む、薬学的組成物が提供される。
【０２４０】
別の態様では、本明細書において、疾患または病態の処置または予防を必要とする対象における該疾患または病態の処置方法または予防方法であって、該対象に、有効量の上記のいずれかの抗体薬物コンジュゲートまたは上記の薬学的組成物を投与することを含む、該方法が提供される。
【０２４１】
一部の実施形態では、疾患または病態は、がんである。一部の実施形態では、がんは、頭頸部癌である。一部の実施形態では、がんは、卵巣癌である。一部の実施形態では、がんは、胃癌である。一部の実施形態では、がんは、食道癌である。一部の実施形態では、がんは、子宮頸癌である。一部の実施形態では、がんは、前立腺癌である。一部の実施形態では、がんは、膵臓癌である。一部の実施形態では、がんは、エストロゲン受容体陰性（ＥＲ−）、プロゲステロン受容体陰性（ＰＲ−）、及びＨＥＲ２陰性（ＨＥＲ２−）の三重陰性乳癌である。一部の実施形態では、がんは、膠芽腫である。一部の実施形態では、がんは、肺癌である。一部の実施形態では、がんは、膀胱癌である。一部の実施形態では、がんは、黒色腫である。一部の実施形態では、がんは、腎臓癌である。
【０２４２】
一部の実施形態では、該方法は、１つまたは複数の追加の治療剤を該対象に投与することをさらに含む。一部の実施形態では、追加の治療剤は、該抗体薬物コンジュゲートと同じ薬学的組成物中で製剤化される。一部の実施形態では、追加の治療剤は、該抗体薬物コンジュゲートとは異なる薬学的組成物中で製剤化される。一部の実施形態では、追加の治療剤は、該抗体薬物コンジュゲートを投与する前に投与される。一部の実施形態では、追加の治療剤は、該抗体薬物コンジュゲートを投与した後に投与される。一部の実施形態では、追加の治療剤は、該抗体薬物コンジュゲートと同時に投与される。
【０２４３】
別の態様では、本明細書において、疾患または病態を有するか、または有することが疑われる対象におけるＴＦの検出方法であって、（ａ）該対象に上記のいずれかの抗体薬物コンジュゲートを投与することと、（ｂ）該対象においてＴＦの存在またはレベルを検出することと、を含む、該方法が提供される。
【０２４４】
一部の実施形態では、疾患または病態は、がんである。一部の実施形態では、がんは、頭頸部癌である。一部の実施形態では、がんは、卵巣癌である。一部の実施形態では、がんは、胃癌である。一部の実施形態では、がんは、食道癌である。一部の実施形態では、がんは、子宮頸癌である。一部の実施形態では、がんは、前立腺癌である。一部の実施形態では、がんは、膵臓癌である。一部の実施形態では、がんは、エストロゲン受容体陰性（ＥＲ−）、プロゲステロン受容体陰性（ＰＲ−）、及びＨＥＲ２陰性（ＨＥＲ２−）の三重陰性乳癌である。一部の実施形態では、がんは、膠芽腫である。一部の実施形態では、がんは、肺癌である。一部の実施形態では、がんは、膀胱癌である。一部の実施形態では、がんは、黒色腫である。一部の実施形態では、がんは、腎臓癌である。
【０２４５】
別の態様では、本明細書において、上記のいずれかの抗体薬物コンジュゲートまたは上記の薬学的組成物と、使用説明書とを含む、キットが提供される。
【０２４６】
本発明のこれら及び他の特徴、態様、及び利点は、以下の説明及び添付図面に関してより良く理解されるようになろう。
【図面の簡単な説明】
【０２４７】
【図１】Ａ及びＢは、ヒトＴＦ陽性細胞への抗ＴＦ抗体の結合を示す。Ａは、ＨＣＴ−１１６細胞に結合した抗体の蛍光強度中央値（ＭＦＩ）を群１、２５、及び２９からの抗体の濃度に対してプロットしたもの、ならびに報告可能な細胞ＥＣ５０を示す。Ｂは、ＨＣＴ−１１６細胞に結合した抗体の蛍光強度中央値を群３９、４３、及び５４からの抗体の濃度に対してプロットしたもの、ならびに報告可能な細胞ＥＣ５０を示す。Ｂにおけるアイソタイプ対照は、Ａ及びＢの両方に適用される。
【図２】Ａ及びＢは、マウスＴＦ陽性細胞への抗ＴＦ抗体の結合を示す。Ａは、マウスＴＦを組換え的に発現するＣＨＯ細胞（ＣＨＯ−ｍＴＦ）に結合した抗体の蛍光強度中央値（ＭＦＩ）を、群１、２５、及び２９からの抗体の濃度に対してプロットしたもの、ならびに報告可能な細胞ＥＣ５０を示す。Ｂは、ＣＨＯ−ｍＴＦ細胞に結合した抗体の蛍光強度中央値を群３９、４３、及び５４からの抗体の濃度に対してプロットしたもの、ならびに報告可能な細胞ＥＣ５０を示す。Ｂにおけるアイソタイプ対照は、Ａ及びＢの両方に適用される。
【図３】Ａ及びＢは、抗ＴＦ抗体の存在下でのトロンビン生成を示す。Ａは、群１、２５、２９、３９、４３、及び５４からの抗ＴＦ抗体のタイトレーションの存在下で、カルシウム及びトロンビン基質の添加前に抗体インキュベーションを用いずにトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって測定したときのピークＩＩａ／トロンビン生成（ピークＩＩａ％）を示す。Ｂは、群１、２５、２９、３９、４３、及び５４からの抗ＴＦ抗体のタイトレーションの存在下で、カルシウム及びトロンビン基質の添加前に１０分間の抗体インキュベーションを用いてトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって測定したときのピークＩＩａ／トロンビン生成（ピークＩＩａ％）を示す。
【図４】Ａ及びＢは、抗ＴＦ抗体の存在下でのＦＸａ変換を示す。Ａは、群１、２５、及び２９からの抗ＴＦ抗体のタイトレーションの存在下でのＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＴＦ：ＦＶＩＩａによるＦＸａ変換の百分率（ＦＸａ％）を示す。Ｂは、群３９、４３、及び５４からの抗ＴＦ抗体のタイトレーションの存在下でのＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＴＦ：ＦＶＩＩａによるＦＸａ変換の百分率（ＦＸａ％）を示す。報告される濃度でのＦＸａ変換％は、抗体不在のＦＸａ変換反応に対して算出される。Ｂにおけるアイソタイプ対照は、Ａ及びＢの両方に適用される。
【図５】Ａ及びＢは、抗ＴＦ抗体の存在下でのＦＶＩＩａ結合を示す。Ａは、群１、２５、及び２９からの抗ＴＦ抗体のタイトレーションの存在下でのＴＦ陽性ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＦＶＩＩａ結合の百分率（ＦＶＩＩａ％）を示す。Ｂは、群３９、４３、及び５４からの抗ＴＦ抗体のタイトレーションの存在下でのＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＦＶＩＩａ結合の百分率（ＦＶＩＩａ％）を示す。報告される濃度でのＦＶＩＩａ結合％は、抗体不在のＦＶＩＩａ結合に対して算出される。Ｂにおけるアイソタイプ対照は、Ａ及びＢの両方に適用される。
【図６Ａ】抗ＴＦ抗体の存在下でのＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を示す。群１、２５、及び２９からの抗ＴＦ抗体のタイトレーションの存在下でのＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＩＬ８の濃度（ＩＬ８濃度）を示す。
【図６Ｂ】抗ＴＦ抗体の存在下でのＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を示す。群３９、４３、及び５４からの抗ＴＦ抗体のタイトレーションの存在下でのＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＩＬ８の濃度（ＩＬ８濃度）を示す。図６Ｂにおける対照は、図６Ａ及び図６Ｂの両方に適用される。
【図６Ｃ】抗ＴＦ抗体の存在下でのＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を示す。群１、２５、及び２９からの抗ＴＦ抗体のタイトレーションの存在下でのＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＧＭ−ＣＳＦの濃度（ＧＭ−ＣＳＦ濃度）を示す。
【図６Ｄ】抗ＴＦ抗体の存在下でのＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を示す。群３９、４３、及び５４からの抗ＴＦ抗体のタイトレーションの存在下でのＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＧＭ−ＣＳＦの濃度（ＧＭ−ＣＳＦ濃度）を示す。図６Ｄにおける対照は、図６Ｃ及び図６Ｄの両方に適用される。
【図７】Ａ及びＢは、ＴＦ陽性細胞による抗ＴＦ抗体の細胞内移行を示す。Ａは、群１、２５、及び２９からの抗ＴＦ抗体、ならびにモノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）にコンジュゲートされたヒトＦｃに対する二次抗体の添加後の、ＴＦ陽性Ａ４３１細胞培養物の細胞生存能を示す。Ｂは、群３９、４３、及び５４からの抗ＴＦ抗体、ならびにモノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）にコンジュゲートされたヒトＦｃに対する二次抗体の添加後の、ＴＦ陽性Ａ４３１細胞培養物の細胞生存能を示す。Ｂにおけるアイソタイプ対照は、Ａ及びＢの両方に適用される。
【図８】Ａ及びＢは、抗ＴＦ抗体の存在下でのトロンビン生成を示す。Ａは、群２５、３９、４３、及び抗ＴＦ  Ｍ１５９３からの抗ＴＦ抗体のタイトレーションの存在下で、カルシウム及びトロンビン基質の添加前に抗体インキュベーションを用いずにトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって測定したときのピークＩＩａ／トロンビン生成（ピークＩＩａ％）を示す。Ｂは、群２５、３９、４３、及び抗ＴＦ  Ｍ１５９３からの抗ＴＦ抗体のタイトレーションの存在下で、カルシウム及びトロンビン基質の添加前に１０分間の抗体インキュベーションを用いてトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって測定したときのピークＩＩａ／トロンビン生成（ピークＩＩａ％）を示す。
【図９】Ａ及びＢは、ＴＦ陽性細胞における抗ＴＦ  ＡＤＣ誘導性細胞死を示す。Ａは、ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＭＭＡＥにコンジュゲートされた抗ＴＦ抗体（３〜４のＤＡＲ）のタイトレーションとの３日間のインキュベーション後のＴＦ陽性Ａ４３１細胞の細胞生存能を示す。Ｂは、ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＭＭＡＥにコンジュゲートされた抗ＴＦ抗体（３〜４のＤＡＲ）のタイトレーションとの４日間のインキュベーション後のＴＦ陽性ＨＰＡＦ−ＩＩ細胞の細胞生存能を示す。
【図１０】Ａ及びＢは、異種移植モデルにおける腫瘍サイズに対する抗ＴＦ  ＡＤＣの効果を示す。Ａは、Ａ４３１異種移植モデルにおける抗ＴＦ  ＡＤＣの有効性を示す。Ｂは、ＨＰＡＦ−ＩＩ異種移植モデルにおける抗ＴＦ  ＡＤＣの有効性を示す。矢印は、ＡＤＣまたはビヒクル（ＰＢＳ）の５ｍｇ／ｋｇで週１回、３週間にわたる投薬による処置を示す。
【図１１】頭頸部癌の患者由来の異種移植モデルにおける腫瘍サイズに対する抗ＴＦ  ＡＤＣの効果を示す。矢印は、抗ＴＦ  ＡＤＣまたはＩｇＧ１対照ＡＤＣの５ｍｇ／ｋｇで週１回、２週間にわたる投薬による処置を示す。
【図１２】Ａ及びＢは、ヒトＴＦ陽性がん細胞への抗ＴＦ抗体の結合を示す。Ａは、Ａ４３１細胞に結合した抗体の蛍光強度中央値（ＭＦＩ）を群１、２５、２９、３９、４３、及び５４からの抗体の濃度に対してプロットしたものを示す。報告可能な細胞ＥＣ５０及びそれらの９５％信頼区間が一覧表示される。Ｂは、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞に結合した抗体の蛍光強度中央値を群２５、２９、３９、及び４３からの抗体の濃度に対してプロットしたものを示す。報告可能な細胞ＥＣ５０及びそれらの９５％信頼区間が一覧表示される。
【図１３】Ａ、Ｂ、及びＣは、抗ＴＦ抗体の存在下でのトロンビン生成を示す。Ａは、１００ｎＭの群１、２５、及び２９からの抗ＴＦ抗体ならびに以前に生成された抗ＴＦ抗体ＴＦ−０１１、５Ｇ９、及び１０Ｈ１０（表４４のプレート１上の試料）の不在または存在下でのトロンビン生成曲線を示す。Ｂは、１００ｎＭの群３９、４３、及び５４からの抗ＴＦ抗体（表４４のプレート２上の試料）の不在または存在下でのトロンビン生成曲線を示す。Ｃは、抗ＴＦ抗体のタイトレーションの不在または存在下でのピークトロンビン濃度を示す。３連のデータセットの平均値が示される。平均値の標準偏差が表４４に一覧表示される。
【図１４】Ａ及びＢは、抗ＴＦ抗体ＴＦ−０１１、５Ｇ９、及び１０Ｈ１０の存在下でのＴＦ：ＦＶＩＩａ依存性ＦＸａ変換及びＦＶＩＩ結合を示す。Ａは、抗ＴＦ抗体ＴＦ−０１１、５Ｇ９、及び１０Ｈ１０のタイトレーションの不在または存在下での、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の細胞表面上でのＦＸからＦＸａへのＴＦ：ＦＶＩＩａ依存性変換を示す。Ｂは、抗ＴＦ抗体ＴＦ−０１１、５Ｇ９、及び１０Ｈ１０とのＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞のプレインキュベーション後の、これらの抗ＴＦ抗体のタイトレーションの不在または存在下でのＦＶＩＩ結合を示す。ＦＶＩＩと２５％以上の競合を示した抗体に関して、ＩＣ５０が報告される。
【図１５】Ａ及びＢは、未標識の競合抗体のタイトレーションとのＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞のプレインキュベーション後の、当該細胞へのＡ４８８コンジュゲート２５Ａ３抗ＴＦ抗体の結合パーセント（結合％）を示す。Ａは、群１、２５、２９、３９、４３、及び５４からの未標識の競合抗体とのプレインキュベーション後の２５Ａ３の結合パーセントを示す。Ｂは、未標識の競合抗体ＴＦ−０１１、５Ｇ９、及び１０Ｈ１０とのプレインキュベーション後の２５Ａ３の結合パーセントを示す。２５Ａ３と競合する抗体のＩＣ５０値が一覧表示される。
【図１６】Ａ及びＢは、未標識の競合抗体のタイトレーションとのＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞のプレインキュベーション後の、当該細胞へのＡ４８８コンジュゲート４３Ｄ７抗ＴＦ抗体の結合パーセント（結合％）を示す。Ａは、群１、２５、２９、３９、４３、及び５４からの未標識の競合抗体とのプレインキュベーション後の４３Ｄ７の結合パーセントを示す。Ｂは、未標識の競合抗体ＴＦ−０１１、５Ｇ９、及び１０Ｈ１０とのプレインキュベーション後の４３Ｄ７の結合パーセントを示す。４３Ｄ７と競合する抗体のＩＣ５０値が一覧表示される。
【図１７】Ａ及びＢは、未標識の競合抗体のタイトレーションとのＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞のプレインキュベーション後の、当該細胞へのＡ４８８コンジュゲート３９Ａ抗ＴＦ抗体の結合パーセント（結合％）を示す。Ａは、群１、２５、２９、３９、４３、及び５４からの未標識の競合抗体とのプレインキュベーション後の３９Ａの結合パーセントを示す。Ｂは、未標識の競合抗体ＴＦ−０１１、５Ｇ９、及び１０Ｈ１０とのプレインキュベーション後の３９Ａの結合パーセントを示す。３９Ａと競合する抗体のＩＣ５０値が一覧表示される。
【図１８】Ａ、Ｂ、及びＣは、細胞生存能アッセイ及び細胞内移行アッセイによって測定したときの抗ＴＦ抗体の細胞内移行を示す。Ａは、抗ＴＦ抗体のタイトレーションから３日後のＴＦ陽性Ａ４３１細胞培養物の細胞生存能を示す。Ｂは、モノメチルアウリスタチンＦにコンジュゲートされたヒトＦｃに対するＦａｂ断片（Ｆａｂ：ＭＭＡＦ）と複合体化された抗ＴＦ抗体のタイトレーションから３日後の、ＴＦ陽性Ａ４３１細胞培養物の細胞生存能を示す。抗ＴＦ抗体Ｆａｂ：ＭＭＡＦ複合体のＩＣ５０が一覧表示される。Ｃは、Ａ４８８にコンジュゲートされた抗ＴＦ抗体の細胞内移行を示す。４時間でのＡ４８８コンジュゲート抗ＴＦ抗体の細胞内移行パーセントが一覧表示される。
【図１９】Ａ、Ｂ、及びＣは、ヒトＴＦ陽性ＨＣＴ−１１６細胞への抗ＴＦ抗体及びＡＤＣの結合を示す。Ａは、ＨＣＴ−１１６細胞への抗ＴＦ抗体の結合を示す。Ｂは、ＨＣＴ−１１６細胞への抗ＴＦ  ＡＤＣの結合を示す。Ｃは、報告可能な細胞ＥＣ５０及びそれらの９５％信頼区間を一覧表示する。
【図２０】Ａ、Ｂ、及びＣは、抗ＴＦ  ＡＤＣのタイトレーション後のＡ４３１細胞の細胞生存能を示す。Ａは、連続的な７２時間のインキュベーションを伴う抗ＴＦ  ＡＤＣのタイトレーション後の細胞生存能を示す。Ｂは、４時間のインキュベーション、続いて過剰のＡＤＣの除去及びさらに６８時間の培養を伴う、抗ＴＦ  ＡＤＣのタイトレーション後の細胞生存能を示す。Ｃは、ＡＤＣの報告可能なＩＣ５０値を一覧表示する。
【図２１】Ａ、Ｂ、及びＣは、抗ＴＦ  ＡＤＣのインビトロでの有効性に対するＦＶＩＩａの効果を示す。Ａは、ＦＶＩＩａの不在下での、４時間のインキュベーション、続いて過剰のＡＤＣの除去及びさらに６８時間の培養を伴う、抗ＴＦ  ＡＤＣのタイトレーション後の細胞生存能を示す。Ｂは、ＦＶＩＩａの存在下での、４時間のインキュベーション、続いて過剰のＡＤＣの除去及びさらに６８時間の培養を伴う、抗ＴＦ  ＡＤＣのタイトレーション後の細胞生存能を示す。Ｃは、報告可能なＩＣ５０値を一覧表示する。
【図２２Ａ】抗ＴＦ  ＡＤＣのタイトレーション後の追加のがん細胞株の細胞生存能を示す。抗ＴＦ抗体５Ｇ９を用いた種々の細胞株におけるＴＦのコピー数を示す。平均値の標準誤差及び測定値の数（ｎ）もまた提示される。
【図２２Ｂ】抗ＴＦ  ＡＤＣのタイトレーション後の追加のがん細胞株の細胞生存能を示す。抗ＴＦ  ＭＭＡＥ  ＡＤＣのタイトレーションの不在または存在下での７２時間の培養後のＨＣＴ−１１６細胞の細胞生存能を示す。
【図２２Ｃ】抗ＴＦ  ＡＤＣのタイトレーション後の追加のがん細胞株の細胞生存能を示す。抗ＴＦ  ＭＭＡＥ  ＡＤＣのタイトレーションの不在または存在下での７２時間の培養後のＣＨＯ細胞の細胞生存能を示す。
【図２２Ｄ】抗ＴＦ  ＡＤＣのタイトレーション後の追加のがん細胞株の細胞生存能を示す。抗ＴＦ  ＭＭＡＥ  ＡＤＣのタイトレーションの不在または存在下での５日間の培養後のＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の細胞生存能を示す。
【図２２Ｅ】抗ＴＦ  ＡＤＣのタイトレーション後の追加のがん細胞株の細胞生存能を示す。抗ＴＦ  ＭＭＡＥ  ＡＤＣのタイトレーションの不在または存在下での５日間の培養後のＨＰＡＦ−ＩＩ細胞の細胞生存能を示す。
【図２３】Ａ及びＢは、抗ＴＦ  ２５Ａ３  ＭＭＡＥ  ＡＤＣ（２５Ａ３−ｖｃ−ＭＭＡＥ）またはアイソタイプ対照ＭＭＡＥ  ＡＤＣ（アイソタイプ対照−ｖｃ−ＭＭＡＥ）での処置後の微小管ネットワークの染色を示す。Ａは、処置後のＡ４３１細胞の微小管ネットワークの染色を示す。Ｂは、処置後のＨＰＡＦ−ＩＩ細胞の微小管ネットワークの染色を示す。スケールバー、１０ミクロン。
【図２４】Ａ及びＢは、サイトカイン処置後のＴＦ発現、及びサイトカインで処置されたヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）の生存能に対する抗ＴＦ  ＡＤＣの効果を示す。Ａは、分析前に炎症性サイトカインカクテルで３、６、もしくは２０時間処置された、または炎症性サイトカインカクテルなしでのＨＵＶＥＣ上の表面ＴＦのコピー数を示す。Ｂは、抗ＴＦ  ＭＭＡＥ  ＡＤＣまたはアイソタイプ対照ＭＭＡＥ  ＡＤＣのタイトレーションの存在下での４日間の培養後の、炎症性サイトカインで処置されたＨＵＶＥＣ培養物の細胞生存能を示す。
【図２５】Ａ、Ｂ、及びＣは、抗ＴＦ  ＡＤＣのタイトレーションで２４時間処置されたＨＵＶＥＣまたはＨＣＴ−１１６細胞におけるＧ２／Ｍ期停止の定量を示す。Ａは、炎症性サイトカインの不在下で抗ＴＦ  ＡＤＣのタイトレーションを用いたＨＵＶＥＣのｐＨ３陽性細胞の百分率（ｐＨ３％）を示す。Ｂは、炎症性サイトカインの存在下で抗ＴＦ  ＡＤＣのタイトレーションを用いたＨＵＶＥＣのｐＨ３陽性細胞の百分率（ｐＨ３％）を示す。Ｃは、抗ＴＦ  ＡＤＣのタイトレーションを用いたＨＣＴ−１１６細胞のｐＨ３陽性細胞の百分率（ｐＨ３％）を示す。
【図２６】Ａ及びＢは、フローサイトメトリーによって分析した、抗ＴＦ  ＡＤＣ処置を用いたかまたは用いないｐＨ３陽性ＨＣＴ−１１６細胞の百分率を示す。Ａは、１０ｎＭのアイソタイプ−ｖｃ−ＭＭＡＥの処置後のｐＨ３対ＤＮＡ含量のドットプロットを示す。Ｂは、１０ｎＭの２５Ａ−ｖｃ−ＭＭＡＥの処置後のｐＨ３対ＤＮＡ含量のドットプロットを示す。
【図２７】Ａ及びＢは、ＭＭＡＥに対するＨＵＶＥＣ及びＨＣＴ−１１６細胞の感受性を示す。Ａは、２４時間のＭＭＡＥ処置の不在または存在下でのｐＨ３陽性ＨＵＶＥＣの百分率（ｐＨ３％）を示す。Ｂは、２４時間のＭＭＡＥ処置の不在または存在下でのｐＨ３陽性ＨＣＴ−１１６細胞の百分率（ｐＨ３％）を示す。
【図２８】ウェスタンブロッティングによる、抗リン酸化Ｅｒｋ１／２抗体及び抗Ｅｒｋ１／２抗体を用いたＥｒｋリン酸化の分析を示す。ｐＥｒｋ誘導値が一覧表示される。
【図２９】Ａ、Ｂ、及びＣは、ＴＦ陽性Ａ４３１細胞とのレポーターＪｕｒｋａｔ細胞株の６時間のインキュベーション後の、抗体依存性細胞傷害作用（ＡＤＣＣ）レポーターの発光を示す。Ａは、抗ＴＦ抗体のタイトレーションの不在または存在下でのＡＤＣＣレポーターの発光を示す。Ｂは、抗ＴＦ  ＡＤＣのタイトレーションの不在または存在下でのＡＤＣＣレポーターの発光を示す。Ｃは、各抗ＴＦ抗体またはＡＤＣについてのＡＤＣＣレポーターの発光のＥＣ５０値を一覧表示する。
【図３０】Ａ及びＢは、ＨＰＡＦ−ＩＩ異種移植モデルにおける抗ＴＦ  ＡＤＣのインビボでの有効性を示す。Ａは、抗ＴＦ  ＡＤＣの５ｍｇ／ｋｇで３週間にわたる毎週の処置後の平均腫瘍体積を示す。Ｂは、抗ＴＦ  ＡＤＣの２ｍｇ／ｋｇで２週間にわたる毎週の処置後の平均腫瘍体積を示す。２１日目の平均腫瘍体積（平均値）及び腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）百分率が一覧表示される。各ＡＤＣとビヒクル対照との間の平均腫瘍体積の比較に関するＰ値もまた一覧表示される。さらに、研究の終了時（Ａでは５９日目及びＢでは３９日目）の部分退縮（ＰＲ）、完全退縮（ＣＲ）、及び無腫瘍生存個体（ＴＦＳ）動物の数もまた一覧表示される。
【図３１】Ａ及びＢは、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１異種移植モデルにおける抗ＴＦ  ＡＤＣのインビボでの有効性を示す。Ａは、抗ＴＦ  ＡＤＣの４ｍｇ／ｋｇで２週間にわたる毎週の処置後の平均腫瘍体積を示す。Ｂは、抗ＴＦ  ＡＤＣの２ｍｇ／ｋｇで２週間にわたる毎週の処置後の平均腫瘍体積を示す。２５日目（図３１Ａ）及び２７日目（図３１Ｂ）の平均腫瘍体積及び腫瘍成長阻害が一覧表示される。各ＡＤＣとビヒクル対照との間の平均腫瘍体積の比較に関するＰ値もまた一覧表示される。さらに、研究の終了時（Ａでは４９日目及びＢでは４１日目）の部分退縮（ＰＲ）、完全退縮（ＣＲ）、及び無腫瘍生存個体（ＴＦＳ）動物の数もまた一覧表示される。
【図３２】ＨＰＡＦ−ＩＩ異種移植モデルにおけるコンジュゲートされていない抗ＴＦ抗体の１０ｍｇ／ｋｇで２週間にわたる毎週の処置後の平均腫瘍体積を示す。１５日目の平均腫瘍体積が一覧表示される。
【図３３Ａ】患者由来の異種移植（ＰＤＸ）モデルにおける抗ＴＦ  ＡＤＣのインビボでの有効性を示す。頭頸部癌のＰＤＸモデルにおける抗ＴＦ  ＡＤＣの処置後の平均腫瘍体積を示す。４４日目の平均腫瘍体積及び腫瘍成長阻害が一覧表示される。各ＡＤＣとアイソタイプ対照との間の平均腫瘍体積の比較に関するＰ値もまた一覧表示される。さらに、研究の終了時（６０日目）の部分応答個体（ＰＲ）、完全応答個体（ＣＲ）、及び無腫瘍生存個体（ＴＦＳ）動物の数もまた一覧表示される。
【図３３Ｂ】患者由来の異種移植（ＰＤＸ）モデルにおける抗ＴＦ  ＡＤＣのインビボでの有効性を示す。卵巣癌のＰＤＸモデルにおける抗ＴＦ  ＡＤＣの処置後の平均腫瘍体積を示す。１５日目の平均腫瘍体積及び腫瘍成長阻害が一覧表示される。各ＡＤＣとアイソタイプ対照との間の平均腫瘍体積の比較に関するＰ値もまた一覧表示される。さらに、研究の終了時（４６日目）の部分応答個体（ＰＲ）、完全応答個体（ＣＲ）、及び無腫瘍生存個体（ＴＦＳ）動物の数もまた一覧表示される。
【図３３Ｃ】患者由来の異種移植（ＰＤＸ）モデルにおける抗ＴＦ  ＡＤＣのインビボでの有効性を示す。胃腺癌のＰＤＸモデルにおける抗ＴＦ  ＡＤＣの処置後の平均腫瘍体積を示す。２５日目の平均腫瘍体積及び腫瘍成長阻害が一覧表示される。各ＡＤＣとアイソタイプ対照との間の平均腫瘍体積の比較に関するＰ値もまた一覧表示される。さらに、研究の終了時（４６日目）の部分応答個体（ＰＲ）、完全応答個体（ＣＲ）、及び無腫瘍生存個体（ＴＦＳ）動物の数もまた一覧表示される。
【図３４】Ａ及びＢは、ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおける抗ＴＦ抗体の投与後の病変サイズの変化を示す。Ａは、それぞれ抗ＴＦ抗体２５Ｇ９、４３Ｄ８、１Ｇ、及び２９Ｄの硝子体内投与後の、蛍光眼底造影（ＦＡ）によって測定したときの７日目（ベースライン）から１４日目までの病変サイズの変化百分率を示す。Ｂは、それぞれ抗ＴＦ抗体２５Ｇ９、４３Ｄ８、１Ｇ、及び２９Ｄの硝子体内投与後の、蛍光眼底造影（ＦＡ）によって測定したときの７日目（ベースライン）から２８日目までの病変サイズの変化百分率を示す。
【図３５】ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおける、それぞれ抗ＴＦ抗体２５Ｇ９の６００μｇ、２ｍｇ、及び４ｍｇでの硝子体内投与後の、蛍光眼底造影（ＦＡ）によって測定したときの７日目（ベースライン）から２８日目までの病変サイズの変化を示す。
【図３６−１】キメラＴＦ構築物のＣｌｕｓｔａｌ  Ｏｍｅｇａによるアライメントを示す。ラットの配列が太字で強調表示される。「＊（アスタリスク）」は、完全に保存された単一の残基を有する位置を示す。「：（コロン）」は、Ｇｏｎｎｅｔ  Ｐｅｒｃｅｎｔ  Ａｃｃｅｐｔｅｄ  Ｍｕｔａｔｉｏｎ  ２５０行列においてスコアリング＞０．５におよそ等しい、特性の類似度が高い群間での保存を示す。「．（ピリオド）」は、Ｇｏｎｎｅｔ  Ｐｅｒｃｅｎｔ  Ａｃｃｅｐｔｅｄ  Ｍｕｔａｔｉｏｎ  ２５０行列においてスコアリング≦０．５かつ＞０におよそ等しい、特性の類似度が低い群間での保存を示す。
【図３６−２】図３６−１の続きの図である。
【図３６−３】図３６−２の続きの図である。
【図３６−４】図３６−３の続きの図である。
【図３７】キメラＴＦ構築物のＣｌｕｓｔａｌ  Ｏｍｅｇａによるアライメントを示す。ヒト配列が太字で強調表示される。「＊（アスタリスク）」は、完全に保存された単一の残基を有する位置を示す。「：（コロン）」は、Ｇｏｎｎｅｔ  Ｐｅｒｃｅｎｔ  Ａｃｃｅｐｔｅｄ  Ｍｕｔａｔｉｏｎ  ２５０行列においてスコアリング＞０．５におよそ等しい、特性の類似度が高い群間での保存を示す。「．（ピリオド）」は、Ｇｏｎｎｅｔ  Ｐｅｒｃｅｎｔ  Ａｃｃｅｐｔｅｄ  Ｍｕｔａｔｉｏｎ  ２５０行列においてスコアリング≦０．５かつ＞０におよそ等しい、特性の類似度が低い群間での保存を示す。
【図３８】キメラＴＦ構築物のＣｌｕｓｔａｌ  Ｏｍｅｇａによるアライメントを示す。ラットの配列が太字で強調表示される。「＊（アスタリスク）」は、完全に保存された単一の残基を有する位置を示す。「：（コロン）」は、Ｇｏｎｎｅｔ  Ｐｅｒｃｅｎｔ  Ａｃｃｅｐｔｅｄ  Ｍｕｔａｔｉｏｎ  ２５０行列においてスコアリング＞０．５におよそ等しい、特性の類似度が高い群間での保存を示す。「．（ピリオド）」は、Ｇｏｎｎｅｔ  Ｐｅｒｃｅｎｔ  Ａｃｃｅｐｔｅｄ  Ｍｕｔａｔｉｏｎ  ２５０行列においてスコアリング≦０．５かつ＞０におよそ等しい、特性の類似度が低い群間での保存を示す。
【図３９Ａ】選択のＴＦ構築物に対する系列２５及び４３、ｈ５Ｇ９、ならびに１０Ｈ１０からの抗ＴＦ抗体のタイトレーション曲線を示す。ヒトＴＦ構築物に対する抗ＴＦ抗体のタイトレーション曲線を示す。
【図３９Ｂ】選択のＴＦ構築物に対する系列２５及び４３、ｈ５Ｇ９、ならびに１０Ｈ１０からの抗ＴＦ抗体のタイトレーション曲線を示す。ラットＴＦ構築物に対する抗ＴＦ抗体のタイトレーション曲線を示す。
【図３９Ｃ】選択のＴＦ構築物に対する系列２５及び４３、ｈ５Ｇ９、ならびに１０Ｈ１０からの抗ＴＦ抗体のタイトレーション曲線を示す。キメラヒト−ラットＴＦ構築物ｈＴＦ＿Ｋ６８Ｎに対する抗ＴＦ抗体のタイトレーション曲線を示す。
【図３９Ｄ】選択のＴＦ構築物に対する系列２５及び４３、ｈ５Ｇ９、ならびに１０Ｈ１０からの抗ＴＦ抗体のタイトレーション曲線を示す。キメラヒト−ラットＴＦ構築物ｈＴＦ＿Ｋ１４９Ｎに対する抗ＴＦ抗体のタイトレーション曲線を示す。
【図３９Ｅ】選択のＴＦ構築物に対する系列２５及び４３、ｈ５Ｇ９、ならびに１０Ｈ１０からの抗ＴＦ抗体のタイトレーション曲線を示す。キメラヒト−ラットＴＦ構築物ｈＴＦ＿Ｎ１７１Ｈ＿Ｔ１９７Ｋに対する抗ＴＦ抗体のタイトレーション曲線を示す。
【図３９Ｆ】選択のＴＦ構築物に対する系列２５及び４３、ｈ５Ｇ９、ならびに１０Ｈ１０からの抗ＴＦ抗体のタイトレーション曲線を示す。キメララット−ヒトＴＦ構築物ｒ１４１−１９４＿ｈに対する抗ＴＦ抗体のタイトレーション曲線を示す。
【発明を実施するための形態】
【０２４８】
詳細な説明
１．定義
別途規定されない限り、本明細書で使用される全ての専門用語、表記、及び他の科学用語は、当業者に一般的に理解される意味を有することを意図する。一部の実例では、一般的に理解される意味を有する用語が明確にするため及び／または参照を容易にするために本明細書で定義され、かかる定義の本明細書への組み込みは、必ずしも当該技術分野で通常理解されているものに対する差異を表すものとして解釈されるべきではない。本明細書に記載されるかまたは参照される技法及び手順は、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  ４ｔｈ  ｅｄ．（２０１２）Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹに記載される、広く利用される分子クローニング手法等の、当業者に通常よく理解されており、当業者によって従来の手法を用いて一般的に採用されるものである。必要に応じて、市販のキット及び試薬の使用を伴う手順は通常、別途注記のない限り、製造業者が規定するプロトコル及び条件に従って実施される。
【０２４９】
本明細書で使用されるとき、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈上そうでないとする明確な指示がない限り、複数の参照対象を含む。「〜を含む」、「等の」という用語、及びそれらの同等物は、別途具体的に指示されない限り、限定のない組み込みを伝えることを意図する。
【０２５０】
本明細書で使用されるとき、「〜を含むこと」という用語はまた、別途具体的に指示されない限り、列挙される要素「からなる」及び列挙される要素「から本質的になる」実施形態を具体的に含む。
【０２５１】
「約」という用語は、示される値、ならびにその値の前後の範囲を示し、かつ包含する。ある特定の実施形態では、「約」という用語は、指定される値±１０％、±５％、または±１％を示す。ある特定の実施形態では、適用可能な場合、「約」という用語は、指定される値（複数可）±その値（複数可）の１標準偏差を示す。
【０２５２】
「組織因子」、「ＴＦ」、「血小板組織因子」、「第ＩＩＩ因子」、「トロンボプラスチン」、及び「ＣＤ１４２」という用語は、細胞によって天然に発現されるか、またはＴＦ遺伝子を形質移入された細胞によって発現されるＴＦ、またはＴＦの任意のバリアント（例えば、スプライスバリアント及びアレルバリアント）、アイソフォーム、及び種のホモログを指して本明細書で互換的に使用される。一部の態様では、ＴＦタンパク質は、霊長類（例えば、サルまたはヒト）、齧歯類（例えば、マウスまたはラット）、イヌ、ラクダ、ネコ、ウシ、ヤギ、ウマ、ブタ、またはヒツジによって天然に発現されるＴＦタンパク質である。一部の態様では、ＴＦタンパク質は、ヒトＴＦ（ｈＴＦ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０９）である。一部の態様では、ＴＦタンパク質は、カニクイザルＴＦ（ｃＴＦ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１３）である。一部の態様では、ＴＦタンパク質は、マウスＴＦ（ｍＴＦ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１７）である。一部の態様では、ＴＦタンパク質は、ブタＴＦ（ｐＴＦ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２４）である。ＴＦは、セリンプロテアーゼ第ＶＩＩａ因子の細胞表面受容体である。それは多くの場合、血管を取り囲むある特定の細胞によって、及び一部の疾患場面で構成的に発現される。
【０２５３】
「抗体薬物コンジュゲート」または「ＡＤＣ」という用語は、任意選択で１つまたは複数のリンカーを通して、１つまたは複数の細胞傷害性薬剤にコンジュゲートされた抗体を含むコンジュゲートを指す。「抗ＴＦ抗体薬物コンジュゲート」または「抗ＴＦ  ＡＤＣ」という用語は、任意選択で１つまたは複数のリンカーを通して、１つまたは複数の細胞傷害性薬剤にコンジュゲートされた抗ＴＦ抗体を含むコンジュゲートを指す。
【０２５４】
本明細書で使用される「細胞傷害性薬剤」という用語は、細胞機能を阻害するかもしくは阻止する、及び／または細胞死もしくは細胞破壊を引き起こす物質を指す。細胞傷害性薬剤は、血管新生阻害剤、アポトーシス促進剤、有糸分裂阻害剤、キナーゼ阻害剤、アルキル化剤、ホルモン、ホルモンアゴニスト、ホルモンアンタゴニスト、ケモカイン、薬物、プロドラッグ、毒素、酵素、代謝拮抗物質、抗生物質、アルカロイド、または放射性同位体であり得る。代表的な細胞傷害性薬剤には、カリケアマイシン、カンプトテシン、カルボプラチン、イリノテカン、ＳＮ−３８、カルボプラチン、カンプトテカン（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃａｎ）、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ドセタキセル、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ドキソルビシン、エトポシド、イダルビシン、トポテカン、ビンカアルカロイド、マイタンシノイド、マイタンシノイド類似体、ピロロベンゾジアゼピン、タキソイド、デュオカルマイシン、ドラスタチン、アウリスタチン、及びそれらの誘導体が含まれる。
【０２５５】
「リンカー」は、１つの組成物を別の組成物に接続する、例えば、抗体を薬剤に接続する分子を指す。本明細書に記載されるリンカーは、抗体を細胞傷害性薬剤にコンジュゲートすることができる。代表的なリンカーには、不安定リンカー、酸不安定リンカー、光不安定リンカー、荷電リンカー、ジスルフィド含有リンカー、ペプチダーゼ感受性リンカー、β−グルクロニド−リンカー、ジメチルリンカー、チオ−エーテルリンカー、及び親水性リンカーが含まれる。リンカーは、切断可能または切断不可能であり得る。
【０２５６】
「免疫グロブリン」という用語は、１対の軽（Ｌ）鎖及び１対の重（Ｈ）鎖の２対のポリペプチド鎖を一般に含む、構造的に関連するタンパク質のクラスを指す。「無傷の免疫グロブリン」において、これらの鎖の４つ全ては、ジスルフィド結合によって相互接続されている。免疫グロブリンの構造は、特徴がよく解明されている。例えば、Ｐａｕｌ，Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ７ｔｈ  ｅｄ．，Ｃｈ．５（２０１３）Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡを参照されたい。簡潔に述べると、各重鎖は典型的に、重鎖可変領域（ＶＨ）及び重鎖定常領域（ＣＨ）を含む。重鎖定常領域は典型的に、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３と略称される３つのドメインを含む。各軽鎖は典型的に、軽鎖可変領域（ＶＬ）及び軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は典型的に、ＣＬと略称される１つのドメインを含む。
【０２５７】
「抗体」という用語は、本明細書で最も広義に使用され、抗原またはエピトープに特異的に結合する１つまたは複数の抗原結合ドメインを含む、ある特定の種類の免疫グロブリン分子を含む。抗体には、無傷の抗体（例えば、無傷の免疫グロブリン）、抗体断片、及び多重特異性抗体が具体的に含まれる。
【０２５８】
「代替的足場（ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ  ｓｃａｆｆｏｌｄ）」という用語は、１つまたは複数の領域が抗原またはエピトープに特異的に結合する１つまたは複数の抗原結合ドメインをもたらすように多様化され得る、分子を指す。一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、抗体の特異性及び親和性と類似した特異性及び親和性をもって抗原またはエピトープに結合する。代表的な代替的足場には、フィブロネクチン（例えば、Ａｄｎｅｃｔｉｎｓ（商標））、βサンドイッチ（例えば、ｉＭａｂ）、リポカリン（例えば、Ａｎｔｉｃａｌｉｎｓ（登録商標））、ＥＥＴＩ−ＩＩ／ＡＧＲＰ、ＢＰＴＩ／ＬＡＣＩ−Ｄ１／ＩＴＩ−Ｄ２（例えば、Ｋｕｎｉｔｚドメイン）、チオレドキシンペプチドアプタマー、プロテインＡ（例えば、Ａｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標））、アンキリンリピート（例えば、ＤＡＲＰｉｎ）、ガンマ−Ｂ−クリスタリン／ユビキチン（例えば、Ａｆｆｉｌｉｎｓ）、ＣＴＬＤ３（例えば、テトラネクチン）、フィノマー（Ｆｙｎｏｍｅｒｓ）、及び（ＬＤＬＲ−Ａモジュール）（例えば、アビマー（Ａｖｉｍｅｒｓ））に由来するものが含まれる。代替的足場に関する追加の情報は、Ｂｉｎｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，２００５  ２３：１２５７−１２６８、Ｓｋｅｒｒａ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎ．ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２００７  １８：２９５−３０４、及びＳｉｌａｃｃｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１４，２８９：１４３９２−１４３９８に提供され、これらの各々は参照によりその全体が援用される。
【０２５９】
「抗原結合ドメイン」という用語は、抗原またはエピトープに特異的に結合することができる抗体の部分を意味する。抗原結合ドメインの一例は、抗体のＶＨ−ＶＬ二量体によって形成される抗原結合ドメインである。抗原結合ドメインの別の例は、Ａｄｎｅｃｔｉｎの第１０フィブロネクチンＩＩＩ型ドメインからのある特定のループの多様化によって形成される抗原結合ドメインである。抗原結合ドメインは、抗体及びキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、例えば抗体またはｓｃＦｖ等の抗体断片に由来するＣＡＲを含めた、種々の関連で見出すことができる。
【０２６０】
「完全長抗体」、「無傷の抗体」、及び「全抗体」という用語は、天然に存在する抗体構造と実質的に類似した構造を有し、かつＦｃ領域を含む重鎖を有する抗体を指して、本明細書で互換的に使用される。例えば、ＩｇＧ分子を指して使用されるとき、「完全長抗体」は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む抗体である。
【０２６１】
「Ｆｃ領域」という用語は、天然に存在する抗体においてＦｃ受容体及び補体系のある特定のタンパク質と相互作用する、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を意味する。種々の免疫グロブリンのＦｃ領域、及びその中に含まれるグリコシル化部位の構造は、当該技術分野で既知である。参照によりその全体が援用される、Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒ  ａｎｄ  Ｃａｖａｃｉｎｉ，Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２０１０，１２５：Ｓ４１−５２を参照されたい。Ｆｃ領域は、天然に存在するＦｃ領域であっても、または当該技術分野もしくは本開示の他の箇所に記載されるように修飾されたＦｃ領域であってもよい。
【０２６２】
ＶＨ及びＶＬ領域は、より保存された領域が散在する、超可変性をもつ複数の領域（「超可変領域（ＨＶＲ）」、別名「相補性決定領域」（ＣＤＲ））にさらに細分されてもよい。より保存された領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。各ＶＨ及びＶＬは通常、以下の順序（Ｎ末端からＣ末端へ）、すなわちＦＲ１−ＣＤＲ１−ＦＲ２−ＣＤＲ２−ＦＲ３−ＣＤＲ３−ＦＲ４で配置された、３つのＣＤＲ及び４つのＦＲを含む。ＣＤＲは、抗原結合に関与し、抗体の抗原特異性及び結合親和性に影響を及ぼす。参照によりその全体が援用される、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ  ５ｔｈ  ｅｄ．（１９９１）Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤを参照されたい。
【０２６３】
「相補性決定領域（ＣＤＲ）」は、免疫グロブリン（Ｉｇまたは抗体）ＶＨのβシートフレームワークの非フレームワーク領域内にある３つの超可変領域（Ｈ１、Ｈ２、またはＨ３）のうちの１つ、または抗体ＶＬのβシートフレームワークの非フレームワーク領域内にある３つの超可変領域（Ｌ１、Ｌ２、またはＬ３）のうちの１つを指す。ＣＤＲは、フレームワーク領域配列内に散在する可変領域配列である。ＣＤＲは、当該技術分野でよく認識されており、例えば、Ｋａｂａｔにより、抗体可変（Ｖ）ドメイン内で最大の超可変性をもつ領域として定義されている。Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ，１９７７，２５２：６６０９−６６１６及びＫａｂａｔ，Ａｄｖ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｈｅｍ，１９７８，３２：１−７５を参照されたく、これらの各々は参照によりその全体が援用される。ＣＤＲはまた、Ｃｈｏｔｈｉａにより、保存されたβシートフレームワークの一部ではなく、故に、様々な立体構造を適合させることができる残基として構造的に定義されている。参照によりその全体が援用される、Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ，１９８７，１９６：９０１−９１７を参照されたい。Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａ命名法は両方とも、当該技術分野で周知である。ＡｂＭ、Ｃｏｎｔａｃｔ、及びＩＭＧＴもまたＣＤＲを定義した。古典的な抗体可変ドメイン内のＣＤＲの位置は、多数の構造の比較によって決定されている。Ｍｏｒｅａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ，２０００，２０：２６７−２７９及びＡｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ，１９９７，２７３：９２７−４８を参照されたく、これらの各々は参照によりその全体が援用される。超可変領域内の残基の数は異なる抗体において様々であるため、古典的な位置に相対的な追加の残基は、古典的な可変ドメインの番号付けスキーム（Ａｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉら（上記参照））における残基番号の隣のａ、ｂ、ｃ等により慣習的に番号付けされる。かかる用語法は当業者に周知である。
【０２６４】
いくつかの超可変領域の境界付けが用いられており、これらが本明細書に含まれる。ＫａｂａｔのＣＤＲは、配列の可変性に基づいており、最も一般的に使用される。参照によりその全体が援用される、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，ＤＩＡＮＥ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ：２７１９を参照されたい。Ｃｈｏｔｈｉａは、構造的ループの箇所を代わりに参照する（Ｃｈｏｔｈｉａ及びＬｅｓｋ（上記参照））。ＡｂＭの超可変領域は、ＫａｂａｔのＣＤＲとＣｈｏｔｈｉａの構造的ループとの間の折衷案を表し、Ｏｘｆｏｒｄ  ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアによって使用される。Ｃｏｎｔａｃｔの超可変領域は、利用可能な複合体結晶構造の分析に基づく。これらの超可変領域の各々からの残基は、表１に記述される。
【０２６５】
より最近では、普遍的な番号付けシステムであるＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ（ＩＭＧＴ）Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ（商標）が開発され、広く採用されている。参照によりその全体が援用される、Ｌｅｆｒａｎｃ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｅｖ  Ｃｏｍｐ  Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００３，２７：５５−７７を参照されたい。ＩＭＧＴは、ヒト及び他の脊椎動物の免疫グロブリン（ＩＧ）、Ｔ細胞受容体（ＴＲ）、及び主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）に特化している、統合された情報システムである。ＩＭＧＴのＣＤＲは、アミノ酸配列及び軽鎖または重鎖内の箇所の両方の点から参照される。免疫グロブリン可変ドメインの構造内のＣＤＲの「箇所」は種の間で保存されており、ループと呼ばれる構造で存在するため、構造的特徴に従って可変ドメイン配列をアライメントする番号付けシステムを用いることにより、ＣＤＲ及びフレームワーク残基が容易に特定される。Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、及びＩＭＧＴ番号付けの間の対応関係もまた、当該技術分野で周知である（Ｌｅｆｒａｎｃら（上記参照））。本明細書に示される代表的なシステムは、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａのＣＤＲ定義を組み合わせたものである。
【０２６６】
（表１）
2021509823.tif 000003
【０２６７】
任意の脊椎動物種由来の軽鎖は、その定常ドメインの配列に基づいて、カッパ（κ）及びラムダ（λ）と呼ばれる２つの種類のうちの１つに割り当てることができる。
【０２６８】
任意の脊椎動物種由来の重鎖は、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭの５つの異なるクラス（またはアイソタイプ）のうちの１つに割り当てることができる。これらのクラスはまた、それぞれα、δ、ε、γ、及びμとも表記される。ＩｇＧ及びＩｇＡクラスは、配列及び機能の差異に基づいてサブクラスにさらに分割される。ヒトは、以下のサブクラス、すなわちＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２を発現する。
【０２６９】
「定常領域」または「定常ドメイン」という用語は、抗体の抗原への結合には直接関与しないが、Ｆｃ受容体との相互作用等の種々のエフェクター機能を示す、軽鎖及び重鎖のカルボキシ末端部分を指す。これらの用語は、免疫グロブリン分子における、抗原結合部位を含有する免疫グロブリンの他方の部分である可変ドメインと比べて、より保存されたアミノ酸配列を有する部分を指す。定常ドメインは、重鎖のＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３ドメインならびに軽鎖のＣＬドメインを含有する。
【０２７０】
「ＥＵ番号付けスキーム」は一般に、抗体の重鎖定常領域における残基を指す際に使用される（例えば、Ｋａｂａｔら（上記参照）に報告される通り）。別途定めのない限り、ＥＵ番号付けスキームは、本明細書に記載される抗体の重鎖定常領域における残基を指して使用される。
【０２７１】
「抗体断片」は、無傷の抗体の抗原結合領域または可変領域等の、無傷の抗体の一部分を含む。抗体断片には、例えば、Ｆｖ断片、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ’断片、ｓｃＦｖ（ｓＦｖ）断片、及びｓｃＦｖ−Ｆｃ断片が含まれる。
【０２７２】
「Ｆｖ」断片は、１つの重鎖可変ドメイン及び１つの軽鎖可変ドメインが非共有結合性で連結された二量体を含む。
【０２７３】
「Ｆａｂ」断片は、重鎖及び軽鎖可変ドメインに加えて、軽鎖及び重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）の定常ドメインを含む。Ｆａｂ断片は、例えば、組換え法によって、または完全長抗体のパパイン消化によって、生成されてもよい。
【０２７４】
「Ｆ（ａｂ’）２」断片は、ヒンジ領域の近くでジスルフィド結合によって接合された２つのＦａｂ’断片を含有する。Ｆ（ａｂ’）２断片は、例えば、組換え法によって、または無傷の抗体のペプシン消化によって、生成されてもよい。Ｆ（ａｂ’）断片は、例えば、β−メルカプトエタノールでの処置によって、解離され得る。
【０２７５】
「１本鎖Ｆｖ」または「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体断片は、１本のポリペプチド鎖にＶＨドメイン及びＶＬドメインを含む。ＶＨ及びＶＬは通常、ペプチドリンカーによって連結される。Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ  Ａ．（１９９４）を参照されたい。任意の好適なリンカーが使用されてもよい。一部の実施形態では、リンカーは、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２３）である。一部の実施形態では、ｎ＝１、２、３、４、５、または６である。参照によりその全体が援用される、Ｉｎ  Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ  Ｍ．＆  Ｍｏｏｒｅ  Ｇ．Ｐ．（Ｅｄｓ．），Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｖｏｌ．１１３（ｐｐ．２６９−３１５）．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋにおける、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ．からの抗体を参照されたい。
【０２７６】
「ｓｃＦｖ−Ｆｃ」断片は、Ｆｃドメインに結合させたｓｃＦｖを含む。例えば、Ｆｃドメインは、ｓｃＦｖのＣ末端に結合させてもよい。Ｆｃドメインは、ｓｃＦｖにおける可変ドメインの向き（すなわち、ＶＨ−ＶＬまたはＶＬ−ＶＨ）に応じて、ＶＨまたはＶＬに続いてもよい。当該技術分野で既知の、または本明細書に記載される任意の好適なＦｃドメインが使用されてもよい。
【０２７７】
「単一ドメイン抗体」という用語は、抗体の一方の可変ドメインが他方の可変ドメインの存在なしに抗原に特異的に結合する、分子を指す。単一ドメイン抗体、及びその断片については、Ａｒａｂｉ  Ｇｈａｈｒｏｕｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９９８，４１４：５２１−５２６及びＭｕｙｌｄｅｒｍａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．，２００１，２６：２３０−２４５に記載され、これらの各々は参照によりその全体が援用される。単一ドメイン抗体はまた、ｓｄＡｂまたはナノボディとしても知られる。
【０２７８】
「多重特異性抗体」は、２つ以上の異なるエピトープに共同して特異的に結合する２つ以上の異なる抗原結合ドメインを含む抗体である。これらの２つ以上の異なるエピトープは、同じ抗原上（例えば、細胞によって発現される単一のＴＦ分子）または異なる抗原上（例えば、ＴＦ分子及び非ＴＦ分子）のエピトープであってもよい。一部の態様では、多重特異性抗体は、２つの異なるエピトープに結合する（すなわち、「二重特異性抗体」）。一部の態様では、多重特異性抗体は、３つの異なるエピトープに結合する（すなわち、「三重特異性抗体」）。一部の態様では、多重特異性抗体は、４つの異なるエピトープに結合する（すなわち、「四重特異性抗体」）。一部の態様では、多重特異性抗体は、５つの異なるエピトープに結合する（すなわち、「五重特異性抗体」）。一部の態様では、多重特異性抗体は、６つ、７つ、８つ、またはそれよりも多くの異なるエピトープに結合する。各結合特異性は、任意の好適な結合価で存在してもよい。多重特異性抗体の例は、本開示の他の箇所で提供される。
【０２７９】
「単一特異性抗体」は、単一のエピトープに特異的に結合する１つまたは複数の結合部位を含む抗体である。単一特異性抗体の例は、二価（すなわち、２つの抗原結合ドメインを有する）でありながら、２つの抗原結合ドメインの各々で同じエピトープを認識する、天然に存在するＩｇＧ分子である。結合特異性は、任意の好適な結合価で存在してもよい。
【０２８０】
「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に同種の抗体の集団からの抗体を指す。実質的に同種の抗体の集団は、モノクローナル抗体の生産中に正常に発生し得るバリアントを除いて、実質的に類似しており、同じエピトープ（複数可）に結合する抗体を含む。かかるバリアントは通常、少量でのみ存在する。モノクローナル抗体は典型的に、複数の抗体からの単一の抗体の選択を含む過程によって得られる。例えば、選択過程は、ハイブリドーマクローン、ファージクローン、酵母クローン、細菌クローン、または他の組換えＤＮＡクローンのプール等の、複数のクローンからの固有のクローンの選択であり得る。選択された抗体は、例えば、標的に対する親和性を改善する（「親和性成熟」）、抗体をヒト化する、細胞培養物中でのその生産を改善する、及び／または対象におけるその免疫原性を低減するように、さらに改変され得る。
【０２８１】
「キメラ抗体」という用語は、重鎖及び／または軽鎖の一部分が特定の供給源または種に由来する一方で、重鎖及び／または軽鎖の残りの部分が異なる供給源または種に由来する、抗体を指す。
【０２８２】
非ヒト抗体の「ヒト化」型は、非ヒト抗体に由来する配列を最小限に含有するキメラ抗体である。ヒト化抗体は通常、ヒト抗体（レシピエント抗体）において、１つまたは複数のＣＤＲからの残基が、非ヒト抗体（ドナー抗体）の１つまたは複数のＣＤＲからの残基と置き換えられているものである。ドナー抗体は、所望の特異性、親和性、または生物学的効果を有する、マウス、ラット、ウサギ、ニワトリ、または非ヒト霊長類抗体等の任意の好適な非ヒト抗体であり得る。一部の事例では、レシピエント抗体の選択されたフレームワーク領域の残基が、ドナー抗体からの対応するフレームワーク領域の残基と置き換えられている。ヒト化抗体はまた、レシピエント抗体またはドナー抗体のいずれにも見出されない残基を含んでもよい。かかる修飾は、抗体機能をさらに改良するために行われ得る。さらなる詳細については、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９８６，３２１：５２２−５２５、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９８８，３３２：３２３−３２９、及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，１９９２，２：５９３−５９６を参照されたく、これらの各々は参照によりその全体が援用される。
【０２８３】
「ヒト抗体」は、ヒトもしくはヒト細胞によって産生される抗体のアミノ酸配列、または（例えば、ヒト供給源から得られたか、または新規に設計された）ヒト抗体のレパートリーもしくはヒト抗体コード配列を利用する非ヒト供給源に由来する抗体のアミノ酸配列に対応する、アミノ酸配列をもつものである。ヒト抗体は、ヒト化抗体を具体的に除外するものである。
【０２８４】
「単離された抗体」または「単離された核酸」は、その天然環境の構成成分から分離された、及び／または回収された抗体または核酸である。天然環境の構成成分には、酵素、ホルモン、及び他のタンパク質性または非タンパク質性の材料が含まれ得る。一部の実施形態では、単離された抗体は、例えば、スピニングカップシークエネーターの使用によって、Ｎ末端アミノ酸配列または内部アミノ酸配列の少なくとも１５残基を得るのに十分な程度に精製される。一部の実施形態では、単離された抗体は、クーマシーブルーまたは銀染色による検出を用いた還元または非還元条件下でのゲル電気泳動（例えば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）によって、均一になるまで精製される。一部の実施形態では、単離された抗体には、当該抗体の天然環境の少なくとも１つの構成成分が存在しないことから、組換え細胞内の本来の場所にある抗体が含まれてもよい。一部の態様では、単離された抗体または単離された核酸は、少なくとも１つの精製ステップによって調製される。一部の実施形態では、単離された抗体または単離された核酸は、少なくとも８０重量％、８５重量％、９０重量％、９５重量％、または９９重量％まで精製される。一部の実施形態では、単離された抗体または単離された核酸は、少なくとも８０体積％、８５体積％、９０体積％、９５体積％、または９９体積％まで精製される。一部の実施形態では、単離された抗体または単離された核酸は、少なくとも８５重量％、９０重量％、９５重量％、９８重量％、９９重量％〜１００重量％の抗体または核酸を含む溶液として提供される。一部の実施形態では、単離された抗体または単離された核酸は、少なくとも８５体積％、９０体積％、９５体積％、９８体積％、９９体積％〜１００体積％の抗体または核酸を含む溶液として提供される。
【０２８５】
「親和性」は、分子（例えば、抗体）の単一の結合部位と、その結合パートナー（例えば、抗原またはエピトープ）との間の非共有結合性の相互作用の合計の強度を指す。別途指示されない限り、本明細書で使用されるとき、「親和性」は、結合対のメンバー（例えば、抗体と抗原またはエピトープとの）間の１：１相互作用を反映する、固有の結合親和性を指す。分子Ｘの、そのパートナーＹに対する親和性は、解離平衡定数（ＫＤ）によって表すことができる。解離平衡定数に寄与する動態学的成分は、下記にさらに詳述される。親和性は、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標））またはバイオレイヤー干渉法（例えば、ＦＯＲＴＥＢＩＯ（登録商標））等の、本明細書に記載される方法を含めた、当該技術分野で既知の一般的な方法によって測定することができる。
【０２８６】
抗体の標的分子への結合に関して、特定の抗原（例えば、ポリペプチド標的）または特定の抗原上のエピトープ「に結合する」、「特異的結合」、それ「に特異的に結合する」、それ「に特異的な」、それ「に選択的に結合する」、及びそれ「に選択的な」という用語は、（例えば、非標的分子との）非特異的または非選択的な相互作用とは測定できるほどに異なる結合を意味する。特異的結合は、例えば、標的分子への結合を測定し、それを非標的分子への結合と比較することによって、測定することができる。特異的結合はまた、標的分子上で認識されるエピトープを模倣する対照分子との競合によって決定することもできる。その実例では、抗体の標的分子への結合が対照分子によって競合的に阻害される場合、特異的結合が指示される。一部の態様では、非標的分子に対するＴＦ抗体の親和性は、ＴＦに対する親和性の約５０％未満である。一部の態様では、非標的分子に対するＴＦ抗体の親和性は、ＴＦに対する親和性の約４０％未満である。一部の態様では、非標的分子に対するＴＦ抗体の親和性は、ＴＦに対する親和性の約３０％未満である。一部の態様では、非標的分子に対するＴＦ抗体の親和性は、ＴＦに対する親和性の約２０％未満である。一部の態様では、非標的分子に対するＴＦ抗体の親和性は、ＴＦに対する親和性の約１０％未満である。一部の態様では、非標的分子に対するＴＦ抗体の親和性は、ＴＦに対する親和性の約１％未満である。一部の態様では、非標的分子に対するＴＦ抗体の親和性は、ＴＦに対する親和性の約０．１％未満である。
【０２８７】
本明細書で使用される「ｋｄ」（秒−１）という用語は、特定の抗体−抗原間相互作用の解離速度定数を指す。この値はまた、ｋオフ値とも称される。
【０２８８】
本明細書で使用される「ｋａ」（Ｍ−１×秒−１）という用語は、特定の抗体−抗原間相互作用の会合速度定数を指す。この値はまた、ｋオン値とも称される。
【０２８９】
本明細書で使用される「ＫＤ」（Ｍ）という用語は、特定の抗体−抗原間相互作用の解離平衡定数を指す。ＫＤ＝ｋｄ／ｋａである。一部の実施形態では、抗体の親和性は、かかる抗体とその抗原との間の相互作用に関するＫＤの点から記述される。明確にするために、当該技術分野で既知であるように、より小さいＫＤ値はより大きい親和性相互作用を示す一方で、より大きいＫＤ値はより低い親和性相互作用を示す。
【０２９０】
本明細書で使用される「ＫＡ」（Ｍ−１）という用語は、特定の抗体−抗原間相互作用の会合平衡定数を指す。ＫＡ＝ｋａ／ｋｄである。
【０２９１】
「親和性成熟」抗体は、親抗体（すなわち、改変された抗体の由来となるか、またはその設計の元となる抗体）と比べて、（例えば、１つまたは複数のＣＤＲまたはＦＲにおいて）１つまたは複数の改変を有し、その結果、当該改変（複数可）をもたない親抗体と比較して、抗体のその抗原に対する親和性が改善される抗体である。一部の実施形態では、親和性成熟抗体は、標的抗原に対してナノモル濃度またはピコモル濃度の親和性を有する。親和性成熟抗体は、当該技術分野で既知の様々な方法を用いて生産されてもよい。例えば、Ｍａｒｋｓら（参照によりその全体が援用される、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１９９２，１０：７７９−７８３）は、ＶＨ及びＶＬドメインのシャフリングによる親和性成熟について記載している。ＣＤＲ及び／またはフレームワーク残基のランダム変異誘発が、例えば、Ｂａｒｂａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９９４，９１：３８０９−３８１３、Ｓｃｈｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ，１９９５，１６９：１４７−１５５、Ｙｅｌｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９５，１５５：１９９４−２００４、Ｊａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９５，１５４：３３１０−３３１９９、及びＨａｗｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９２，２２６：８８９−８９６により記載され、これらの各々は参照によりその全体が援用される。
【０２９２】
「Ｆｃエフェクター機能」は、抗体のＦｃ領域によって媒介される生物学的活性を指し、その活性は抗体のアイソタイプに応じて様々であり得る。抗体エフェクター機能の例としては、補体依存性細胞傷害作用（ＣＤＣ）を活性化するようなＣ１ｑ結合、抗体依存性細胞傷害作用（ＡＤＣＣ）、及び抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）を活性化するようなＦｃ受容体結合が挙げられる。
【０２９３】
２つ以上の抗体の関連において本明細書で使用されるとき、「〜と競合する」または「〜と交差競合する」という用語は、２つ以上の抗体が抗原（例えば、ＴＦ）への結合を競合することを示す。１つの代表的なアッセイでは、ＴＦが表面上にコーティングされて、第１のＴＦ抗体と接触させられ、その後、第２のＴＦ抗体が添加される。別の代表的なアッセイでは、第１のＴＦ抗体が表面上にコーティングされて、ＴＦと接触させられ、次いで、第２のＴＦ抗体が添加される。いずれのアッセイにおいても、第１のＴＦ抗体の存在が第２のＴＦ抗体の結合を低減する場合、それらの抗体は、互いに競合する。「〜と競合する」という用語はまた、１つの抗体が別の抗体の結合を低減するが、これらの抗体を逆の順序で添加する場合は競合が何ら観察されない、抗体の組み合わせも含む。しかしながら、一部の実施形態では、第１及び第２の抗体は、それらが添加される順序を問わず、互いの結合を阻害する。一部の実施形態では、１つの抗体は、別の抗体のその抗原へ結合を、少なくとも２５％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％低減する。当業者は、ＴＦに対する抗体の親和性及び抗体の結合価に基づいて、競合アッセイに使用される抗体の濃度を選択することができる。この定義に記載されるアッセイは例示的なものであり、当業者は、任意の好適なアッセイを利用して、抗体が互いに競合するかどうかを決定することができる。好適なアッセイは、例えば、Ｃｏｘ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，”ｉｎ  Ａｓｓａｙ  Ｇｕｉｄａｎｃｅ  Ｍａｎｕａｌ［インターネット］、２０１４年１２月２４日更新（ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｂｏｏｋｓ／ＮＢＫ９２４３４／、２０１５年９月２９日にアクセス）、Ｓｉｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，２００１，４４：３０−３７、及びＦｉｎｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ａｎａｌ．，２０１１，５４：３５１−３５８に記載され、これらの各々は参照によりその全体が援用される。実施例８に提供されるように、群２５の抗体及び群４３の抗体は、ヒトＴＦへの結合について互いに競合する一方で、群１、２９、３９、及び５４からの抗体は、ヒトＴＦへの結合について群２５及び４３の抗体と競合しない。
【０２９４】
本明細書で使用されるとき、ヒト抗原に特異的に結合する抗体は、ＦｏｒｔｅＢｉｏ  Ｏｃｔｅｔにおいてマウス抗原とのＫＤ値が測定され得る場合、マウス起源の同じ抗原に結合すると見なされる。ヒト抗原に特異的に結合する抗体は、マウス抗原に対するＫＤ値が、その対応するヒト抗原に対する対応するＫＤ値の２０倍以下である場合、マウス起源の同じ抗原と「交差反応性」であると見なされる。例えば、米国特許第８，７２２，０４４号、同第８，９５１，５２５号、及び同第８，９９９，３３３号（これらの各々は参照により全目的で本明細書に援用される）に記載される抗体Ｍ１５９３、参照によりその全体が援用される、Ｎｇｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ，１２０（６）：１２６１−１２６７に記載されるヒト化５Ｇ９抗体、ならびに参照によりその全体が援用される、Ｈｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ，２０１２，Ｊ  Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ，５３（１１）：１７４８−１７５４に記載されるキメラＡＬＴ−８３６抗体は、マウスＴＦに結合しない。実施例１及び２に提供されるように、群２５及び４３からのＴＦ抗体は、マウスＴＦに結合し、例えば、ＴＦ抗体である２５Ｇ、２５Ｇ１、２５Ｇ９、及び４３Ｄ８は、マウスＴＦと交差反応性である。
【０２９５】
本明細書で使用されるとき、ヒト抗原に特異的に結合する抗体は、カニクイザルサル抗原に対するＫＤ値が、その対応するヒト抗原に対する対応するＫＤ値の１５倍以下である場合、カニクイザルサル起源の同じ抗原と「交差反応性」であると見なされる。実施例１に提供されるように、群１、２５、２９、３９、４３、及び５４からの試験された全ての抗体は、カニクイザルサルＴＦと交差反応性である。
【０２９６】
「エピトープ」という用語は、抗体が特異的に結合する抗原の一部分を意味する。エピトープは、表面上で接触可能なアミノ酸残基及び／または糖側鎖を含むことが多く、特定の３次元構造特性、ならびに特定の電荷特性を有してもよい。立体構造エピトープ及び非立体構造エピトープは、変性溶媒の存在下で前者への結合が失われ得るが、後者への結合が失われないであろう点で識別される。エピトープは、結合に直接関与するアミノ酸残基、及び結合に直接関与しない他のアミノ酸残基を含んでもよい。抗体が結合するエピトープは、例えば、異なる点変異を有するＴＦバリアント、またはキメラＴＦバリアントへの抗体結合に関する試験等の、エピトープ決定のための既知の技法を用いて決定することができる。
【０２９７】
ポリペプチド配列と参照配列との間の「同一性」パーセントは、最大の配列同一性パーセントを達成するようにこれらの配列をアライメントし、必要であればギャップを導入した後に、参照配列におけるアミノ酸残基と同一である、ポリペプチド配列におけるアミノ酸残基の百分率として定義される。アミノ酸配列同一性パーセントを決定する目的でのアライメントは、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ、ＭＥＧＡＬＩＧＮ（ＤＮＡＳＴＡＲ）、ＣＬＵＳＴＡＬＷ、ＣＬＵＳＴＡＬ  ＯＭＥＧＡ、またはＭＵＳＣＬＥソフトウェア等の一般公開されているコンピュータソフトウェアを用いて、当業者の技能の範囲内にある種々の方式で達成することができる。当業者は、比較されている配列の全長にわたって最大のアライメントを達成するために必要とされる任意のアルゴリズムを含めて、配列をアライメントするための適切なパラメータを決定することができる。
【０２９８】
「保存的置換」または「保存的アミノ酸置換」は、あるアミノ酸の、化学的または機能的に類似したアミノ酸との置換を指す。類似したアミノ酸を提供する保存的置換の表は、当該技術分野で周知である。例として、表２〜４に提供されるアミノ酸の群は、一部の実施形態において、互いに保存的置換と見なされる。
【０２９９】
（表２）ある特定の実施形態において互いに保存的置換と見なされる選択されたアミノ酸の群
2021509823.tif 000004
【０３００】
（表３）ある特定の実施形態において互いに保存的置換と見なされる追加の選択されたアミノ酸の群
2021509823.tif 000005
【０３０１】
（表４）ある特定の実施形態において互いに保存的置換と見なされるさらなる選択されたアミノ酸の群
2021509823.tif 000006
【０３０２】
追加の保存的置換は、例えば、Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ２ｎｄ  ｅｄ．（１９９３）Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ＆  Ｃｏ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹに見出され得る。親抗体においてアミノ酸残基の１つまたは複数の保存的置換を行うことによって生成された抗体は、「保存的修飾バリアント」と称される。
【０３０３】
「アミノ酸」という用語は、天然に存在する２０個の一般的なアミノ酸を指す。天然に存在するアミノ酸には、アラニン（Ａｌａ、Ａ）、アルギニン（Ａｒｇ、Ｒ）、アスパラギン（Ａｓｎ、Ｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ、Ｄ）、システイン（Ｃｙｓ、Ｃ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ、Ｅ）、グルタミン（Ｇｌｎ、Ｑ）、グリシン（Ｇｌｙ、Ｇ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ、Ｈ）、イソロイシン（Ｉｌｅ、Ｉ）、ロイシン（Ｌｅｕ、Ｌ）、リジン（Ｌｙｓ、Ｋ）、メチオニン（Ｍｅｔ、Ｍ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ、Ｆ）、プロリン（Ｐｒｏ、Ｐ）、セリン（Ｓｅｒ、Ｓ）、トレオニン（Ｔｈｒ、Ｔ）、トリプトファン（Ｔｒｐ、Ｗ）、チロシン（Ｔｙｒ、Ｙ）、及びバリン（Ｖａｌ、Ｖ）が含まれる。
【０３０４】
本明細書で使用される「ベクター」という用語は、それが連結されている別の核酸を伝播させることができる核酸分子を指す。この用語は、ベクターが導入された宿主細胞のゲノムに組み込まれたベクターのみならず、自己複製型核酸構造としてのベクターを含む。ある特定のベクターは、それらが作動的に連結されている核酸の発現を指示することが可能である。かかるベクターは、本明細書で「発現ベクター」と称される。
【０３０５】
「宿主細胞」、「宿主細胞株」、及び「宿主細胞培養物」という用語は、互換的に使用され、外因性核酸が導入された細胞、及びかかる細胞の子孫を指す。宿主細胞には、「形質転換体」（または「形質転換細胞」）及び「形質移入体」（または「形質移入細胞」）が含まれ、これらは各々、形質転換または形質移入された初代細胞及びそれらに由来する子孫を含む。かかる子孫は、核酸の内容が親細胞と完全に同一でない場合があり、変異を含有し得る。
【０３０６】
「処置すること」という用語（及び「処置する」または「処置」等のその変形）は、それを必要とする対象において疾患または病態の自然経過を変化させようとする臨床的介入を指す。処置は、予防のため、及び臨床病理経過中の両方で行うことができる。望ましい処置の効果には、疾患の発生または再発の予防、症状の緩和、疾患の任意の直接的または間接的な病理学的帰結の縮小、転移の予防、疾患進行速度の減少、病状の回復または一時的緩和、及び寛解または予後の改善が含まれる。
【０３０７】
本明細書で使用されるとき、「治療上有効量」または「有効量」という用語は、本明細書に提供される抗体または薬学的組成物の、対象に投与されたときに疾患または障害を処置するのに有効である量を指す。
【０３０８】
本明細書で使用されるとき、「対象」という用語は、哺乳類対象を意味する。代表的な対象には、ヒト、サル、イヌ、ネコ、マウス、ラット、ウシ、ウマ、ラクダ、ヤギ、ウサギ、ブタ、及びヒツジが含まれる。ある特定の実施形態では、対象は、ヒトである。一部の実施形態では、対象は、本明細書に提供される抗体で処置され得る疾患または病態を有する。一部の態様では、疾患または病態は、がんである。一部の態様では、疾患または病態は、血管新生または血管炎症を伴う。ある特定の態様では、血管新生を伴う疾患または病態は、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、糖尿病性網膜症、またはがんである。
【０３０９】
「添付文書」という用語は、治療製品または診断製品の適応症、用法、投薬量、投与、併用療法、禁忌症、及び／または使用に関する警告についての情報を含む、当該治療製品または診断製品の商業的パッケージ（例えば、キット）に通例含まれる説明書を指して使用される。
【０３１０】
「化学療法剤」は、がんの処置において有用な化学物質を指す。化学療法剤には、がんの成長を促進し得るホルモンの効果を調節する、低減する、遮断する、または阻害するように作用する「抗ホルモン剤」または「内分泌療法薬」が含まれる。
【０３１１】
「細胞分裂阻害剤」という用語は、インビトロまたはインビボのいずれかで細胞の成長を停止させる化合物または組成物を指す。一部の実施形態では、細胞分裂阻害剤は、Ｓ期で細胞の百分率を低減する薬剤である。一部の実施形態では、細胞分裂阻害剤は、Ｓ期で細胞の百分率を、少なくとも約２０％、少なくとも約４０％、少なくとも約６０％、または少なくとも約８０％低減する。
【０３１２】
「薬学的組成物」という用語は、その中に含有される活性成分の生物学的活性が対象を処置する際に有効であることができるような形態であり、かつ薬学的組成物中に提供される量で対象にとって許容できないほどに有毒である追加の構成成分を何ら含有しない調製物を指す。
【０３１３】
「調節する」及び「調節」という用語は、列挙される可変要素を低減するかもしくは阻害すること、または代替として、活性化するかもしくは増加させることを指す。
【０３１４】
「増加させる」及び「活性化する」という用語は、列挙される可変要素の１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、１００％、２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍、またはそれを超える増加を指す。
【０３１５】
「低減する」及び「阻害する」という用語は、列挙される可変要素の１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍、またはそれを超える減少を指す。
【０３１６】
「作動させる」という用語は、受容体の活性化に関連する生物学的応答を誘導するための、受容体のシグナル伝達の活性化を指す。「アゴニスト」は、受容体に結合して、それを作動させる実体である。
【０３１７】
「拮抗する」という用語は、受容体の活性化に関連する生物学的応答を阻害するための、受容体のシグナル伝達の阻害を指す。「アンタゴニスト」は、受容体に結合して、それに拮抗する実体である。
【０３１８】
２．ＴＦ抗体
２．１．ＴＦ結合
本明細書において、ＴＦに特異的に結合する単離された抗体が提供される。一部の態様では、ＴＦは、ｈＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０９）である。一部の態様では、ＴＦは、ｃＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１３）である。一部の態様では、ＴＦは、ｍＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１７）である。一部の態様では、ＴＦは、ウサギＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３２）である。一部の態様では、ＴＦは、ｐＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２４）である。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ｈＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０９）、ｃＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１３）、ｍＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１７）、ウサギＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３２）、及びｐＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２４）に特異的に結合する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ｈＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０９）、ｃＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１３）、ｍＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１７）、及びｐＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２４）に特異的に結合する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ｈＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０９）、ｃＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１３）、及びｍＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１７）に特異的に結合する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ｈＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０９）及びｃＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１３）に特異的に結合する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ｍＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１７）に結合しない。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ｐＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２４）に結合しない。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ウサギＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３２）に結合しない。
【０３１９】
種々の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒトＴＦの細胞外ドメイン（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０）に特異的に結合する。
【０３２０】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎである。
【０３２１】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８における変異は、Ｋ６８Ｎである。
【０３２２】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【０３２３】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０３２４】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０３２５】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０３２６】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０３２７】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０３２８】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０３２９】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０３３０】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０３３１】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０３３２】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎであり、かつＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８における変異は、Ｋ６８Ｎである。
【０３３３】
一部の実施形態では、生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超であり、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される��列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満であり、かつ本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合は、本明細書に提供される抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９における変異は、Ｋ１４９Ｎであり、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８における変異は、Ｋ６８Ｎであり、かつＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７における変異は、Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋである。
【０３３４】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、参照抗体Ｍ１５９３と比較して、ヒトトロンビン生成の阻害において不活性であり、該参照抗体Ｍ１５９３は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を含む。
【０３３５】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する。
【０３３６】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉しない。
【０３３７】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒトＴＦへの結合についてヒトＦＶＩＩａと競合しない。
【０３３８】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒトＴＦの細胞外ドメインに結合し、ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、かつトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する。
【０３３９】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒトＴＦの細胞外ドメインに結合し、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、かつヒトＴＦへの結合についてヒトＦＶＩＩａと競合しない。
【０３４０】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦの細胞外ドメインに結合し、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、かつヒトＴＦへの結合についてヒトＦＶＩＩａと競合しない。
【０３４１】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害する。
【０３４２】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減する。
【０３４３】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦの細胞外ドメインに結合し、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、ヒトＴＦへの結合についてヒトＦＶＩＩａと競合せず、かつカニクイザル及びマウスＴＦに結合する。
【０３４４】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦの細胞外ドメインに結合し、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害せず、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容し、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合し、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉せず、ヒトＴＦへの結合についてヒトＦＶＩＩａと競合せず、カニクイザル、マウス、及びブタＴＦに結合し、かつブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減する。
【０３４５】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒトＴＦの細胞外ドメインに結合し、ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害し、かつカニクイザルＴＦに結合する。
【０３４６】
２．２．ＴＦ抗体の配列
２．２．１．ＶＨドメイン
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９から選択されるＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１３のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５１のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８９のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３６のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２７のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６５のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０３のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４１のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７９のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１７のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５５のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９３のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３１のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５６９のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０７のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４５のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８３のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２１のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５９のＶＨ配列を含む。
【０３４７】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９に提供される例示的なＶＨ配列に対して少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、または９９％の同一性を有する、ＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、２０個、２１個、２２個、２３個、２４個、または２５個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９に提供されるＶＨ配列を含む。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、この段落に記載される抗体は、本明細書で「バリアント」と称される。一部の実施形態では、かかるバリアントは、例えば、親和性成熟、部位特異的変異誘発、ランダム変異誘発、または当該技術分野で既知の、もしくは本明細書に記載される任意の他の方法によって、本明細書に提供される配列に由来する。一部の実施形態では、かかるバリアントは、本明細書に提供される配列には由来せず、例えば、抗体を得るための本明細書に提供される方法に従って新規に単離され得る。
【０３４８】
２．２．２．ＶＬドメイン
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０から選択されるＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３７のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６０のＶＬ配列を含む。
【０３４９】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０に提供される例示的なＶＬ配列に対して少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、または９９％の同一性を有する、ＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、２０個、２１個、２２個、２３個、２４個、または２５個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０に提供されるＶＬ配列を含む。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、この段落に記載される抗体は、本明細書で「バリアント」と称される。一部の実施形態では、かかるバリアントは、例えば、親和性成熟、部位特異的変異誘発、ランダム変異誘発、または当該技術分野で既知の、もしくは本明細書に記載される任意の他の方法によって、本明細書に提供される配列に由来する。一部の実施形態では、かかるバリアントは、本明細書に提供される配列には由来せず、例えば、抗体を得るための本明細書に提供される方法に従って新規に単離され得る。
【０３５０】
２．２．３．ＶＨ−ＶＬの組み合わせ
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９から選択されるＶＨ配列、ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０から選択されるＶＬ配列を含む。
【０３５１】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３６のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３７のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５６９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６０のＶＬ配列を含む。
【０３５２】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９に提供される例示的なＶＨ配列に対して少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、または９９％の同一性を有するＶＨ配列、ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０に提供される例示的なＶＬ配列に対して少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、または９９％の同一性を有するＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、２０個、２１個、２２個、２３個、２４個、または２５個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９に提供されるＶＨ配列、ならびに最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、２０個、２１個、２２個、２３個、２４個、または２５個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０に提供されるＶＬ配列を含む。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、この段落に記載される抗体は、本明細書で「バリアント」と称される。一部の実施形態では、かかるバリアントは、例えば、親和性成熟、部位特異的変異誘発、ランダム変異誘発、または当該技術分野で既知の、もしくは本明細書に記載される任意の他の方法によって、本明細書に提供される配列に由来する。一部の実施形態では、かかるバリアントは、本明細書に提供される配列には由来せず、例えば、抗体を得るための本明細書に提供される方法に従って新規に単離され得る。
【０３５３】
２．２．４．ＣＤＲ
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９から選択されるＶＨドメインの１〜３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９から選択されるＶＨドメインの２〜３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９から選択されるＶＨドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の態様では、該ＣＤＲは、代表的なＣＤＲである。一部の態様では、該ＣＤＲは、ＫａｂａｔのＣＤＲである。一部の態様では、該ＣＤＲは、ＣｈｏｔｈｉａのＣＤＲである。一部の態様では、該ＣＤＲは、ＡｂＭのＣＤＲである。一部の態様では、該ＣＤＲは、ＣｏｎｔａｃｔのＣＤＲである。一部の態様では、該ＣＤＲは、ＩＭＧＴのＣＤＲである。
【０３５４】
一部の実施形態では、該ＣＤＲは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９のＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、またはＣＤＲ−Ｈ３と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有するＣＤＲである。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ１は、最大１個、２個、３個、４個、または５個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９から選択されるＶＨドメインのＣＤＲ−Ｈ１である。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ２は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９から選択されるＶＨドメインのＣＤＲ−Ｈ２である。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９から選択されるＶＨドメインのＣＤＲ−Ｈ３である。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、この段落に記載される抗体は、本明細書で「バリアント」と称される。一部の実施形態では、かかるバリアントは、例えば、親和性成熟、部位特異的変異誘発、ランダム変異誘発、または当該技術分野で既知の、もしくは本明細書に記載される任意の他の方法によって、本明細書に提供される配列に由来する。一部の実施形態では、かかるバリアントは、本明細書に提供される配列には由来せず、例えば、抗体を得るための本明細書に提供される方法に従って新規に単離され得る。
【０３５５】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０から選択されるＶＬドメインの１〜３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０から選択されるＶＬドメインの２〜３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０から選択されるＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の態様では、該ＣＤＲは、代表的なＣＤＲである。一部の態様では、該ＣＤＲは、ＫａｂａｔのＣＤＲである。一部の態様では、該ＣＤＲは、ＣｈｏｔｈｉａのＣＤＲである。一部の態様では、該ＣＤＲは、ＡｂＭのＣＤＲである。一部の態様では、該ＣＤＲは、ＣｏｎｔａｃｔのＣＤＲである。一部の態様では、該ＣＤＲは、ＩＭＧＴのＣＤＲである。
【０３５６】
一部の実施形態では、該ＣＤＲは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、またはＣＤＲ−Ｌ３と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有するＣＤＲである。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｌ１は、最大１個、２個、３個、４個、または５個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０から選択されるＶＬドメインのＣＤＲ−Ｌ１である。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｌ２は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０から選択されるＶＬドメインのＣＤＲ−Ｌ２である。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｌ３は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０から選択されるＶＬドメインのＣＤＲ−Ｌ３である。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、この段落に記載される抗体は、本明細書で「バリアント」と称される。一部の実施形態では、かかるバリアントは、例えば、親和性成熟、部位特異的変異誘発、ランダム変異誘発、または当該技術分野で既知の、もしくは本明細書に記載される任意の他の方法によって、本明細書に提供される配列に由来する。一部の実施形態では、かかるバリアントは、本明細書に提供される配列には由来せず、例えば、抗体を得るための本明細書に提供される方法に従って新規に単離され得る。
【０３５７】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９から選択されるＶＨドメインの１〜３つのＣＤＲ、ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０から選択されるＶＬドメインの１〜３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９から選択されるＶＨドメインの２〜３つのＣＤＲ、ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０から選択されるＶＬドメインの２〜３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９から選択されるＶＨドメインの３つのＣＤＲ、ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０から選択されるＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の態様では、該ＣＤＲは、代表的なＣＤＲである。一部の態様では、該ＣＤＲは、ＫａｂａｔのＣＤＲである。一部の態様では、該ＣＤＲは、ＣｈｏｔｈｉａのＣＤＲである。一部の態様では、該ＣＤＲは、ＡｂＭのＣＤＲである。一部の態様では、該ＣＤＲは、ＣｏｎｔａｃｔのＣＤＲである。一部の態様では、該ＣＤＲは、ＩＭＧＴのＣＤＲである。
【０３５８】
一部の実施形態では、該ＣＤＲは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９のＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、またはＣＤＲ−Ｈ３と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性、ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、またはＣＤＲ−Ｌ３と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有するＣＤＲである。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ１は、最大１個、２個、３個、４個、または５個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９から選択されるＶＨドメインのＣＤＲ−Ｈ１であり、ＣＤＲ−Ｈ２は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９から選択されるＶＨドメインのＣＤＲ−Ｈ２であり、ＣＤＲ−Ｈ３は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、７５、１１３、１５１、１８９、２２７、２６５、３０３、３４１、３７９、４１７、４５５、４９３、５３１、５６９、６０７、６４５、６８３、７２１、及び７５９から選択されるＶＨドメインのＣＤＲ−Ｈ３であり、ＣＤＲ−Ｌ１は、最大１個、２個、３個、４個、５個、または６個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０から選択されるＶＬドメインのＣＤＲ−Ｌ１であり、ＣＤＲ−Ｌ２は、最大１個、２個、３個、または４個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０から選択されるＶＬドメインのＣＤＲ−Ｌ２であり、かつＣＤＲ−Ｌ３は、最大１個、２個、３個、４個、または５個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８、７６、１１４、１５２、１９０、２２８、２６６、３０４、３４２、３８０、４１８、４５６、４９４、５３２、５７０、６０８、６４６、６８４、７２２、及び７６０から選択されるＶＬドメインのＣＤＲ−Ｌ３である。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、この段落に記載される抗体は、本明細書で「バリアント」と称される。一部の実施形態では、かかるバリアントは、例えば、親���性成熟、部位特異的変異誘発、ランダム変異誘発、または当該技術分野で既知の、もしくは本明細書に記載される任意の他の方法によって、本明細書に提供される配列に由来する。一部の実施形態では、かかるバリアントは、本明細書に提供される配列には由来せず、例えば、抗体を得るための本明細書に提供される方法に従って新規に単離され得る。
【０３５９】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３、４１、７９、１１７、１５５、１９３、２３１、２６９、３０７、３４５、３８３、４２１、４５９、４９７、５３５、５７３、６１１、６４９、６８７、及び７２５から選択されるＣＤＲ−Ｈ３を含む。一部の態様では、ＣＤＲ−Ｈ３は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３、４１、７９、１１７、１５５、１９３、２３１、２６９、３０７、３４５、３８３、４２１、４５９、４９７、５３５、５７３、６１１、６４９、６８７、及び７２５のＣＤＲ−Ｈ３と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有する。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３、４１、７９、１１７、１５５、１９３、２３１、２６９、３０７、３４５、３８３、４２１、４５９、４９７、５３５、５７３、６１１、６４９、６８７、及び７２５から選択されるＣＤＲ−Ｈ３である。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、この段落に記載される抗体は、本明細書で「バリアント」と称される。一部の実施形態では、かかるバリアントは、例えば、親和性成熟、部位特異的変異誘発、ランダム変異誘発、または当該技術分野で既知の、もしくは本明細書に記載される任意の他の方法によって、本明細書に提供される配列に由来する。一部の実施形態では、かかるバリアントは、本明細書に提供される配列には由来せず、例えば、抗体を得るための本明細書に提供される方法に従って新規に単離され得る。
【０３６０】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、４０、７８、１１６、１５４、１９２、２３０、２６８、３０６、３４４、３８２、４２０、４５８、４９６、５３４、５７２、６１０、６４８、６８６、及び７２４から選択されるＣＤＲ−Ｈ２を含む。一部の態様では、ＣＤＲ−Ｈ２は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、４０、７８、１１６、１５４、１９２、２３０、２６８、３０６、３４４、３８２、４２０、４５８、４９６、５３４、５７２、６１０、６４８、６８６、及び７２４のＣＤＲ−Ｈ２と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有する。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ２は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、４０、７８、１１６、１５４、１９２、２３０、２６８、３０６、３４４、３８２、４２０、４５８、４９６、５３４、５７２、６１０、６４８、６８６、及び７２４から選択されるＣＤＲ−Ｈ２である。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、この段落に記載される抗体は、本明細書で「バリアント」と称される。一部の実施形態では、かかるバリアントは、例えば、親和性成熟、部位特異的変異誘発、ランダム変異誘発、または当該技術分野で既知の、もしくは本明細書に記載される任意の他の方法によって、本明細書に提供される配列に由来する。一部の実施形態では、かかるバリアントは、本明細書に提供される配列には由来せず、例えば、抗体を得るための本明細書に提供される方法に従って新規に単離され得る。
【０３６１】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１、３９、７７、１１５、１５３、１９１、２２９、２６７、３０５、３４３、３８１、４１９、４５７、４９５、５３３、５７１、６０９、６４７、６８５、及び７２３から選択されるＣＤＲ−Ｈ１を含む。一部の態様では、ＣＤＲ−Ｈ１は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１、３９、７７、１１５、１５３、１９１、２２９、２６７、３０５、３４３、３８１、４１９、４５７、４９５、５３３、５７１、６０９、６４７、６８５、及び７２３のＣＤＲ−Ｈ１と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有する。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ１は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１、３９、７７、１１５、１５３、１９１、２２９、２６７、３０５、３４３、３８１、４１９、４５７、４９５、５３３、５７１、６０９、６４７、６８５、及び７２３から選択されるＣＤＲ−Ｈ１である。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、この段落に記載される抗体は、本明細書で「バリアント」と称される。一部の実施形態では、かかるバリアントは、例えば、親和性成熟、部位特異的変異誘発、ランダム変異誘発、または当該技術分野で既知の、もしくは本明細書に記載される任意の他の方法によって、本明細書に提供される配列に由来する。一部の実施形態では、かかるバリアントは、本明細書に提供される配列には由来せず、例えば、抗体を得るための本明細書に提供される方法に従って新規に単離され得る。
【０３６２】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３、４１、７９、１１７、１５５、１９３、２３１、２６９、３０７、３４５、３８３、４２１、４５９、４９７、５３５、５７３、６１１、６４９、６８７、及び７２５から選択されるＣＤＲ−Ｈ３、ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、４０、７８、１１６、１５４、１９２、２３０、２６８、３０６、３４４、３８２、４２０、４５８、４９６、５３４、５７２、６１０、６４８、６８６、及び７２４から選択されるＣＤＲ−Ｈ２を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３、４１、７９、１１７、１５５、１９３、２３１、２６９、３０７、３４５、３８３、４２１、４５９、４９７、５３５、５７３、６１１、６４９、６８７、及び７２５から選択されるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、４０、７８、１１６、１５４、１９２、２３０、２６８、３０６、３４４、３８２、４２０、４５８、４９６、５３４、５７２、６１０、６４８、６８６、及び７２４から選択されるＣＤＲ−Ｈ２、ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１、３９、７７、１１５、１５３、１９１、２２９、２６７、３０５、３４３、３８１、４１９、４５７、４９５、５３３、５７１、６０９、６４７、６８５、及び７２３から選択されるＣＤＲ−Ｈ１を含む。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３、４１、７９、１１７、１５５、１９３、２３１、２６９、３０７、３４５、３８３、４２１、４５９、４９７、５３５、５７３、６１１、６４９、６８７、及び７２５のＣＤＲ−Ｈ３と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有し、ＣＤＲ−Ｈ２は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、４０、７８、１１６、１５４、１９２、２３０、２６８、３０６、３４４、３８２、４２０、４５８、４９６、５３４、５７２、６１０、６４８、６８６、及び７２４のＣＤＲ−Ｈ２と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有し、かつＣＤＲ−Ｈ１は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１、３９、７７、１１５、１５３、１９１、２２９、２６７、３０５、３４３、３８１、４１９、４５７、４９５、５３３、５７１、６０９、６４７、６８５、及び７２３のＣＤＲ−Ｈ１と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有する。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３、４１、７９、１１７、１５５、１９３、２３１、２６９、３０７、３４５、３８３、４２１、４５９、４９７、５３５、５７３、６１１、６４９、６８７、及び７２５から選択されるＣＤＲ−Ｈ３であり、ＣＤＲ−Ｈ２は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、４０、７８、１１６、１５４、１９２、２３０、２６８、３０６、３４４、３８２、４２０、４５８、４９６、５３４、５７２、６１０、６４８、６８６、及び７２４から選択されるＣＤＲ−Ｈ２であり、かつＣＤＲ−Ｈ１は、最大１個、２個、３個、４個、または５個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  Ｎ���：１、３９、７７、１１５、１５３、１９１、２２９、２６７、３０５、３４３、３８１、４１９、４５７、４９５、５３３、５７１、６０９、６４７、６８５、及び７２３から選択されるＣＤＲ−Ｈ１である。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、この段落に記載される抗体は、本明細書で「バリアント」と称される。一部の実施形態では、かかるバリアントは、例えば、親和性成熟、部位特異的変異誘発、ランダム変異誘発、または当該技術分野で既知の、もしくは本明細書に記載される任意の他の方法によって、本明細書に提供される配列に由来する。一部の実施形態では、かかるバリアントは、本明細書に提供される配列には由来せず、例えば、抗体を得るための本明細書に提供される方法に従って新規に単離され得る。
【０３６３】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、４４、８２、１２０、１５８、１９６、２３４、２７２、３１０、３４８、３８６、４２４、４６２、５００、５３８、５７６、６１４、６５２、６９０、及び７２８から選択されるＣＤＲ−Ｌ３を含む。一部の態様では、ＣＤＲ−Ｌ３は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、４４、８２、１２０、１５８、１９６、２３４、２７２、３１０、３４８、３８６、４２４、４６２、５００、５３８、５７６、６１４、６５２、６９０、及び７２８のＣＤＲ−Ｌ３と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有する。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｌ３は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、４４、８２、１２０、１５８、１９６、２３４、２７２、３１０、３４８、３８６、４２４、４６２、５００、５３８、５７６、６１４、６５２、６９０、及び７２８から選択されるＣＤＲ−Ｌ３である。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、この段落に記載される抗体は、本明細書で「バリアント」と称される。一部の実施形態では、かかるバリアントは、例えば、親和性成熟、部位特異的変異誘発、ランダム変異誘発、または当該技術分野で既知の、もしくは本明細書に記載される任意の他の方法によって、本明細書に提供される配列に由来する。一部の実施形態では、かかるバリアントは、本明細書に提供される配列には由来せず、例えば、抗体を得るための本明細書に提供される方法に従って新規に単離され得る。
【０３６４】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、４３、８１、１１９、１５７、１９５、２３３、２７１、３０９、３４７、３８５、４２３、４６１、４９９、５３７、５７５、６１３、６５１、６８９、及び７２７から選択されるＣＤＲ−Ｌ２を含む。一部の態様では、ＣＤＲ−Ｌ２は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、４３、８１、１１９、１５７、１９５、２３３、２７１、３０９、３４７、３８５、４２３、４６１、４９９、５３７、５７５、６１３、６５１、６８９、及び７２７のＣＤＲ−Ｌ２と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有する。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｌ２は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、４３、８１、１１９、１５７、１９５、２３３、２７１、３０９、３４７、３８５、４２３、４６１、４９９、５３７、５７５、６１３、６５１、６８９、及び７２７から選択されるＣＤＲ−Ｌ２である。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、この段落に記載される抗体は、本明細書で「バリアント」と称される。一部の実施形態では、かかるバリアントは、例えば、親和性成熟、部位特異的変異誘発、ランダム変異誘発、または当該技術分野で既知の、もしくは本明細書に記載される任意の他の方法によって、本明細書に提供される配列に由来する。一部の実施形態では、かかるバリアントは、本明細書に提供される配列には由来せず、例えば、抗体を得るための本明細書に提供される方法に従って新規に単離され得る。
【０３６５】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４、４２、８０、１１８、１５６、１９４、２３２、２７０、３０８、３４６、３８４、４２２、４６０、４９８、５３６、５７４、６１２、６５０、６８８、及び７２６から選択されるＣＤＲ−Ｌ１を含む。一部の態様では、ＣＤＲ−Ｌ１は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４、４２、８０、１１８、１５６、１９４、２３２、２７０、３０８、３４６、３８４、４２２、４６０、４９８、５３６、５７４、６１２、６５０、６８８、及び７２６のＣＤＲ−Ｌ１と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有する。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｌ１は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４、４２、８０、１１８、１５６、１９４、２３２、２７０、３０８、３４６、３８４、４２２、４６０、４９８、５３６、５７４、６１２、６５０、６８８、及び７２６から選択されるＣＤＲ−Ｌ１である。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、この段落に記載される抗体は、本明細書で「バリアント」と称される。一部の実施形態では、かかるバリアントは、例えば、親和性成熟、部位特異的変異誘発、ランダム変異誘発、または当該技術分野で既知の、もしくは本明細書に記載される任意の他の方法によって、本明細書に提供される配列に由来する。一部の実施形態では、かかるバリアントは、本明細書に提供される配列には由来せず、例えば、抗体を得るための本明細書に提供される方法に従って新規に単離され得る。
【０３６６】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、４４、８２、１２０、１５８、１９６、２３４、２７２、３１０、３４８、３８６、４２４、４６２、５００、５３８、５７６、６１４、６５２、６９０、及び７２８から選択されるＣＤＲ−Ｌ３、ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、４３、８１、１１９、１５７、１９５、２３３、２７１、３０９、３４７、３８５、４２３、４６１、４９９、５３７、５７５、６１３、６５１、６８９、及び７２７から選択されるＣＤＲ−Ｌ２を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、４４、８２、１２０、１５８、１９６、２３４、２７２、３１０、３４８、３８６、４２４、４６２、５００、５３８、５７６、６１４、６５２、６９０、及び７２８から選択されるＣＤＲ−Ｌ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、４３、８１、１１９、１５７、１９５、２３３、２７１、３０９、３４７、３８５、４２３、４６１、４９９、５３７、５７５、６１３、６５１、６８９、及び７２７から選択されるＣＤＲ−Ｌ２、ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４、４２、８０、１１８、１５６、１９４、２３２、２７０、３０８、３４６、３８４、４２２、４６０、４９８、５３６、５７４、６１２、６５０、６８８、及び７２６から選択されるＣＤＲ−Ｌ１を含む。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｌ３は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、４４、８２、１２０、１５８、１９６、２３４、２７２、３１０、３４８、３８６、４２４、４６２、５００、５３８、５７６、６１４、６５２、６９０、及び７２８のＣＤＲ−Ｌ３と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有し、ＣＤＲ−Ｌ２は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、４３、８１、１１９、１５７、１９５、２３３、２７１、３０９、３４７、３８５、４２３、４６１、４９９、５３７、５７５、６１３、６５１、６８９、及び７２７のＣＤＲ−Ｌ２と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有し、かつＣＤＲ−Ｌ１は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４、４２、８０、１１８、１５６、１９４、２３２、２７０、３０８、３４６、３８４、４２２、４６０、４９８、５３６、５７４、６１２、６５０、６８８、及び７２６のＣＤＲ−Ｌ１と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有する。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｌ３は、最大１個、２個、３個、４個、または５個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、４４、８２、１２０、１５８、１９６、２３４、２７２、３１０、３４８、３８６、４２４、４６２、５００、５３８、５７６、６１４、６５２、６９０、及び７２８から選択されるＣＤＲ−Ｌ３であり、ＣＤＲ−Ｌ２は、最大１個、２個、３個、または４個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、４３、８１、１１９、１５７、１９５、２３３、２７１、３０９、３４７、３８５、４２３、４６１、４９９、５３７、５７５、６１３、６５１、６８９、及び７２７から選択されるＣＤＲ−Ｌ２であり、かつＣＤＲ−Ｌ１は、最大１個、２個、３個、４個、５個、または６個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４、４２、８０、１１８、１５６、���９４、２３２、２７０、３０８、３４６、３８４、４２２、４６０、４９８、５３６、５７４、６１２、６５０、６８８、及び７２６から選択されるＣＤＲ−Ｌ１である。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、この段落に記載される抗体は、本明細書で「バリアント」と称される。一部の実施形態では、かかるバリアントは、例えば、親和性成熟、部位特異的変異誘発、ランダム変異誘発、または当該技術分野で既知の、もしくは本明細書に記載される任意の他の方法によって、本明細書に提供される配列に由来する。一部の実施形態では、かかるバリアントは、本明細書に提供される配列には由来せず、例えば、抗体を得るための本明細書に提供される方法に従って新規に単離され得る。
【０３６７】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３、４１、７９、１１７、１５５、１９３、２３１、２６９、３０７、３４５、３８３、４２１、４５９、４９７、５３５、５７３、６１１、６４９、６８７、及び７２５から選択されるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、４０、７８、１１６、１５４、１９２、２３０、２６８、３０６、３４４、３８２、４２０、４５８、４９６、５３４、５７２、６１０、６４８、６８６、及び７２４から選択されるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１、３９、７７、１１５、１５３、１９１、２２９、２６７、３０５、３４３、３８１、４１９、４５７、４９５、５３３、５７１、６０９、６４７、６８５、及び７２３から選択されるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、４４、８２、１２０、１５８、１９６、２３４、２７２、３１０、３４８、３８６、４２４、４６２、５００、５３８、５７６、６１４、６５２、６９０、及び７２８から選択されるＣＤＲ−Ｌ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、４３、８１、１１９、１５７、１９５、２３３、２７１、３０９、３４７、３８５、４２３、４６１、４９９、５３７、５７５、６１３、６５１、６８９、及び７２７から選択されるＣＤＲ−Ｌ２、ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４、４２、８０、１１８、１５６、１９４、２３２、２７０、３０８、３４６、３８４、４２２、４６０、４９８、５３６、５７４、６１２、６５０、６８８、及び７２６から選択されるＣＤＲ−Ｌ１を含む。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３、４１、７９、１１７、１５５、１９３、２３１、２６９、３０７、３４５、３８３、４２１、４５９、４９７、５３５、５７３、６１１、６４９、６８７、及び７２５のＣＤＲ−Ｈ３と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有し、ＣＤＲ−Ｈ２は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、４０、７８、１１６、１５４、１９２、２３０、２６８、３０６、３４４、３８２、４２０、４５８、４９６、５３４、５７２、６１０、６４８、６８６、及び７２４のＣＤＲ−Ｈ２と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有し、ＣＤＲ−Ｈ１は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１、３９、７７、１１５、１５３、１９１、２２９、２６７、３０５、３４３、３８１、４１９、４５７、４９５、５３３、５７１、６０９、６４７、６８５、及び７２３のＣＤＲ−Ｈ１と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有し、ＣＤＲ−Ｌ３は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、４４、８２、１２０、１５８、１９６、２３４、２７２、３１０、３４８、３８６、４２４、４６２、５００、５３８、５７６、６１４、６５２、６９０、及び７２８のＣＤＲ−Ｌ３と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有し、ＣＤＲ−Ｌ２は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、４３、８１、１１９、１５７、１９５、２３３、２７１、３０９、３４７、３８５、４２３、４６１、４９９、５３７、５７５、６１３、６５１、６８９、及び７２７のＣＤＲ−Ｌ２と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有し、かつＣＤＲ−Ｌ１は、���ＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４、４２、８０、１１８、１５６、１９４、２３２、２７０、３０８、３４６、３８４、４２２、４６０、４９８、５３６、５７４、６１２、６５０、６８８、及び７２６のＣＤＲ−Ｌ１と少なくとも約５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の同一性を有する。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３、４１、７９、１１７、１５５、１９３、２３１、２６９、３０７、３４５、３８３、４２１、４５９、４９７、５３５、５７３、６１１、６４９、６８７、及び７２５から選択されるＣＤＲ−Ｈ３であり、ＣＤＲ−Ｈ２は、最大１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、４０、７８、１１６、１５４、１９２、２３０、２６８、３０６、３４４、３８２、４２０、４５８、４９６、５３４、５７２、６１０、６４８、６８６、及び７２４から選択されるＣＤＲ−Ｈ２であり、ＣＤＲ−Ｈ１は、最大１個、２個、３個、４個、または５個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１、３９、７７、１１５、１５３、１９１、２２９、２６７、３０５、３４３、３８１、４１９、４５７、４９５、５３３、５７１、６０９、６４７、６８５、及び７２３から選択されるＣＤＲ−Ｈ１であり、ＣＤＲ−Ｌ３は、最大１個、２個、３個、４個、または５個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、４４、８２、１２０、１５８、１９６、２３４、２７２、３１０、３４８、３８６、４２４、４６２、５００、５３８、５７６、６１４、６５２、６９０、及び７２８から選択されるＣＤＲ−Ｌ３であり、ＣＤＲ−Ｌ２は、最大１個、２個、３個、または４個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、４３、８１、１１９、１５７、１９５、２３３、２７１、３０９、３４７、３８５、４２３、４６１、４９９、５３７、５７５、６１３、６５１、６８９、及び７２７から選択されるＣＤＲ−Ｌ２であり、かつＣＤＲ−Ｌ１は、最大１個、２個、３個、４個、５個、または６個のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４、４２、８０、１１８、１５６、１９４、２３２、２７０、３０８、３４６、３８４、４２２、４６０、４９８、５３６、５７４、６１２、６５０、６８８、及び７２６から選択されるＣＤＲ−Ｌ１である。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、この段落に記載される抗体は、本明細書で「バリアント」と称される。一部の実施形態では、かかるバリアントは、例えば、親和性成熟、部位特異的変異誘発、ランダム変異誘発、または当該技術分野で既知の、もしくは本明細書に記載される任意の他の方法によって、本明細書に提供される配列に由来する。一部の実施形態では、かかるバリアントは、本明細書に提供される配列には由来せず、例えば、抗体を得るための本明細書に提供される方法に従って新規に単離され得る。
【０３６８】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３６９】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４３のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３７０】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３７１】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１５のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１６のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１７のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１８のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１９のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２０のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３７２】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５３のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５４のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５５のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５６のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５７のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５８のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３７３】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８４のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８５のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８６のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８７のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８８のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８９のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３７４】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９１のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９２のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９３のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９４のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９５のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９６のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３７５】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２９のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３０のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３１のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３２のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３３のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３４のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３７６】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６７のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６８のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６９のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７０のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７１のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７２のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３７７】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０５のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０６のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０７のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０８のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０９のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１０のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３７８】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４３のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４４のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４５のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４６のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４７のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４８のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３７９】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８１のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８２のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８３のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８４のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８５のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８６のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３８０】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１９のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２０のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２１のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２２のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２３のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２４のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３８１】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５７のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５８のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５９のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４６０のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４６１のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４６２のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３８２】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９５のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９６のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９７のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９８のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９９のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５００のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３８３】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３３のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３４のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３５のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３６のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３７のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３８のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３８４】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７１のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７２のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７３のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７４のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７５のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７６のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３８５】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０９のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６１０のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６１１のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６１２のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６１３のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６１４のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３８６】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４７のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４８のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４９のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６５０のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６５１のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６５２のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３８７】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８５のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８６のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８７のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８８のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８９のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６９０のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３８８】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、代表的な番号付けシステムによって決定するとき、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２３のＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２４のＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２５のＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２６のＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２７のＣＤＲ−Ｌ２、及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２８のＣＤＲ−Ｌ１を含む。
【０３８９】
２．２．５．コンセンサス配列
一部の実施形態では、本明細書において、第１のファミリーの抗体が提供され、かかるファミリーの抗体は、以下の６つのＣＤＲ配列、すなわち、（ａ）配列Ｇ−Ｆ−Ｔ−Ｆ−Ｓ−Ｘ１−Ｙ−Ａ−Ｍ−Ｘ２（ここで、Ｘ１は、ＤまたはＳであり、Ｘ２は、ＡまたはＧである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７３）を有するＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）配列Ｘ３−Ｉ−Ｓ−Ｇ−Ｓ−Ｇ−Ｇ−Ｌ−Ｔ−Ｙ−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ｓ−Ｖ−Ｋ−Ｇ（ここで、Ｘ３は、ＡまたはＴである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７４）を有するＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）配列ＡＰＹＧＹＹＭＤＶ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７５）を有するＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）配列ＲＡＳＱＳＩＳＳＷＬＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７６）を有するＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）配列ＫＡＳＳＬＥＳ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７７）を有するＣＤＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列ＱＱＹＫＳＹＩＴ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７８）を有するＣＤＲ−Ｌ３を含む。一部の実施形態では、かかるファミリーの抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書において、かかる第１のファミリー内にある抗体が提供される。
【０３９０】
一部の実施形態では、本明細書において、第２のファミリーの抗体が提供され、かかるファミリーの抗体は、以下の６つのＣＤＲ配列、すなわち、（ａ）配列Ｇ−Ｙ−Ｔ−Ｆ−Ｘ１−Ｘ２−Ｙ−Ｇ−Ｉ−Ｓ（ここで、Ｘ１は、ＤまたはＲであり、Ｘ２は、ＳまたはＶである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７９）を有するＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）配列Ｗ−Ｘ３−Ａ−Ｐ−Ｙ−Ｘ４−Ｇ−Ｎ−Ｔ−Ｎ−Ｙ−Ａ−Ｑ−Ｋ−Ｌ−Ｑ−Ｇ（ここで、Ｘ３は、ＩまたはＶであり、Ｘ４は、ＳまたはＮである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８０）を有するＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）配列Ｄ−Ａ−Ｇ−Ｔ−Ｙ−Ｓ−Ｐ−Ｘ５−Ｇ−Ｙ−Ｇ−Ｍ−Ｄ−Ｖ（ここで、Ｘ５は、ＦまたはＹである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８１）を有するＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）配列Ｘ６−Ａ−Ｓ−Ｘ７−Ｓ−Ｉ−Ｘ８−Ｘ９−Ｗ−Ｌ−Ａ（ここで、Ｘ６は、ＲまたはＱであり、Ｘ７は、Ｑ、Ｅ、またはＨであり、Ｘ８は、Ｓ、Ｄ、またはＮであり、Ｘ９は、ＳまたはＮである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８２）を有するＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）配列Ｘ１０−Ａ−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｌ−Ｅ−Ｘ１３（ここで、Ｘ１０は、ＫまたはＳであり、Ｘ１１は、ＳまたはＹであり、Ｘ１２は、Ｓ、Ｙ、またはＮであり、Ｘ１３は、ＳまたはＹである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８３）を有するＣＤＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列Ｑ−Ｘ１４−Ｆ−Ｑ−Ｘ１５−Ｌ−Ｐ−Ｐ−Ｆ−Ｔ（ここで、Ｘ１４は、Ｑ、Ｌ、またはＲであり、Ｘ１５は、ＳまたはＫである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８４）を有するＣＤＲ−Ｌ３を含む。一部の実施形態では、かかるファミリーの抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６３のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書において、かかる第２のファミリー内にある抗体が提供される。
【０３９１】
一部の実施形態では、本明細書において、第３のファミリーの抗体が提供され、かかるファミリーの抗体は、以下の６つのＣＤＲ配列、すなわち、（ａ）配列Ｇ−Ｆ−Ｔ−Ｆ−Ｘ１−Ｓ−Ｘ２−Ｇ−Ｍ−Ｈ（ここで、Ｘ１は、ＨまたはＲであり、Ｘ２は、ＲまたはＹである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８５）を有するＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）配列ＶＩＴＹＤＧＩＮＫＹＹＡＤＳＶＥＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８６）を有するＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）配列ＤＧＶＹＹＧＶＹＤＹ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８７）を有するＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）配列ＫＳＳＱＳＶＬＦＳＳＮＮＫＮＹＬＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８８）を有するＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）配列ＷＡＳＴＲＥＳ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８９）を有するＣＤＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列ＱＱＦＨＳＹＰＬＴ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９０）を有するＣＤＲ−Ｌ３を含む。一部の実施形態では、かかるファミリーの抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６６のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書において、かかる第３のファミリー内にある抗体が提供される。
【０３９２】
一部の実施形態では、本明細書において、第４のファミリーの抗体が提供され、かかるファミリーの抗体は、以下の６つのＣＤＲ配列、すなわち、（ａ）配列ＧＧＴＦＳＳＮＡＩＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９１）を有するＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）配列ＳＩＩＰＩＩＧＦＡＮＹＡＱＫＦＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９２）を有するＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）配列ＤＳＧＹＹＹＧＡＳＳＦＧＭＤＶ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９３）を有するＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）配列ＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９４）を有するＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）配列ＧＡＳＴＲＡＴ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９５）を有するＣＤＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列ＥＱＹＮＮＬＰＬＴ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９６）を有するＣＤＲ−Ｌ３を含む。一部の実施形態では、かかるファミリーの抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書において、かかる第４のファミリー内にある抗体が提供される。
【０３９３】
一部の実施形態では、本明細書において、第５のファミリーの抗体が提供され、かかるファミリーの抗体は、以下の６つのＣＤＲ配列、すなわち、（ａ）配列Ｇ−Ｇ−Ｓ−Ｘ１−Ｓ−Ｓ−Ｇ−Ｘ２−Ｙ−Ｗ−Ｓ（ここで、Ｘ１は、ＩまたはＬであり、Ｘ２は、ＱまたはＹである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９７）を有するＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）配列Ｅ−Ｉ−Ｘ３−Ｘ４−Ｓ−Ｇ−Ｓ−Ｔ−Ｒ−Ｙ−Ｎ−Ｐ−Ｓ−Ｌ−Ｋ−Ｓ（ここで、Ｘ３は、ＹまたはＧであり、Ｘ４は、ＹまたはＡである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９８）を有するＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）配列Ｄ−Ｘ５−Ｐ−Ｙ−Ｙ−Ｙ−Ｘ６−Ｇ−Ｇ−Ｙ−Ｙ−Ｙ−Ｙ−Ｍ−Ｄ−Ｖ（ここで、Ｘ５は、ＴまたはＡであり、Ｘ６は、Ｅ、Ｇ、またはＤである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９９）を有するＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）配列Ｒ−Ａ−Ｓ−Ｘ７−Ｓ−Ｖ−Ｘ８−Ｓ−Ｓ−Ｘ９−Ｌ−Ａ（ここで、Ｘ７は、Ｑ、Ｅ、またはＤであり、Ｘ８は、ＳまたはＤであり、Ｘ９は、ＹまたはＦである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８００）を有するＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）配列Ｇ−Ａ−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｒ−Ｘ１２−Ｘ１３（ここで、Ｘ１０は、Ｓ、Ｄ、Ｆ、またはＹであり、Ｘ１１は、ＳまたはＴであり、Ｘ１２は、ＡまたはＱであり、Ｘ１３は、ＴまたはＮである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０１）を有するＣＤＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列Ｑ−Ｑ−Ｘ１４−Ｇ−Ｖ−Ｖ−Ｐ−Ｙ−Ｔ（ここで、Ｘ１４は、Ｖ、Ａ、またはＤである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０２）を有するＣＤＲ−Ｌ３を含む。一部の実施形態では、かかるファミリーの抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６９のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書において、かかる第５のファミリー内にある抗体が提供される。
【０３９４】
一部の実施形態では、本明細書において、第６のファミリーの抗体が提供され、かかるファミリーの抗体は、以下の６つのＣＤＲ配列、すなわち、（ａ）配列ＧＹＴＦＡＮＹＹＭＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０３）を有するＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）配列ＩＩＮＰＳＧＧＩＴＶＹＡＱＫＦＱＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０４）を有するＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）配列ＧＧＳＫＶＡＡＬＡＦＤＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０５）を有するＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）配列ＱＡＳＱＤＩＳＮＳＬＮ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０６）を有するＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）配列ＤＡＳＮＬＥＴ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０７）を有するＣＤＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列ＱＱＹＮＦＨＰＬＴ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０８）を有するＣＤＲ−Ｌ３を含む。一部の実施形態では、かかるファミリーの抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７１のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７２のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書において、かかる第６のファミリー内にある抗体が提供される。
【０３９５】
一部の実施形態では、本明細書において、第７のファミリーの抗体が提供され、かかるファミリーの抗体は、以下の６つのＣＤＲ配列、すなわち、（ａ）配列Ｇ−Ｙ−Ｔ−Ｆ−Ｄ−Ｘ１−Ｙ−Ｇ−Ｉ−Ｓ（ここで、Ｘ１は、ＶまたはＡである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７２）を有するＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）配列Ｗ−Ｉ−Ａ−Ｐ−Ｙ−Ｘ２−Ｇ−Ｎ−Ｔ−Ｎ−Ｙ−Ａ−Ｑ−Ｋ−Ｌ−Ｑ−Ｇ（ここで、Ｘ２は、ＮまたはＳである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７３）を有するＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）配列Ｄ−Ａ−Ｇ−Ｔ−Ｙ−Ｓ−Ｐ−Ｆ−Ｇ−Ｙ−Ｇ−Ｍ−Ｄ−Ｖ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７４）を有するＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）配列Ｘ３−Ａ−Ｓ−Ｘ４−Ｓ−Ｉ−Ｘ５−Ｘ６−Ｗ−Ｌ−Ａ（ここで、Ｘ３は、ＲまたはＱであり、Ｘ４は、ＱまたはＥであり、Ｘ５は、ＳまたはＮであり、Ｘ６は、ＳまたはＮである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７５）を有するＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）配列Ｋ−Ａ−Ｘ７−Ｘ８−Ｌ−Ｅ−Ｘ９（ここで、Ｘ７は、ＳまたはＹであり、Ｘ８は、ＳまたはＮであり、Ｘ９は、ＳまたはＹである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７６）を有するＣＤＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列Ｑ−Ｘ１０−Ｆ−Ｑ−Ｘ１１−Ｌ−Ｐ−Ｐ−Ｆ−Ｔ（ここで、Ｘ１０は、ＱまたはＬであり、Ｘ１１は、ＳまたはＫである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７７）を有するＣＤＲ−Ｌ３を含む。一部の実施形態では、かかるファミリーの抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６８のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６９のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書において、かかる第７のファミリー内にある抗体が提供される。
【０３９６】
一部の実施形態では、本明細書において、第８のファミリーの抗体が提供され、かかるファミリーの抗体は、以下の６つのＣＤＲ配列、すなわち、（ａ）配列Ｇ−Ｙ−Ｔ−Ｆ−Ｒ−Ｓ−Ｙ−Ｇ−Ｉ−Ｓ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７８）を有するＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）配列Ｗ−Ｖ−Ａ−Ｐ−Ｙ−Ｘ１−Ｇ−Ｎ−Ｔ−Ｎ−Ｙ−Ａ−Ｑ−Ｋ−Ｌ−Ｑ−Ｇ（ここで、Ｘ１は、ＳまたはＮである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７９）を有するＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）配列Ｄ−Ａ−Ｇ−Ｔ−Ｙ−Ｓ−Ｐ−Ｙ−Ｇ−Ｙ−Ｇ−Ｍ−Ｄ−Ｖ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８０）を有するＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）配列Ｘ２−Ａ−Ｓ−Ｘ３−Ｓ−Ｉ−Ｘ４−Ｓ−Ｗ−Ｌ−Ａ（ここで、Ｘ２は、ＲまたはＱであり、Ｘ３は、ＱまたはＨであり、Ｘ４は、ＳまたはＤである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８１）を有するＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）配列Ｘ５−Ａ−Ｓ−Ｘ６−Ｌ−Ｅ−Ｓ（ここで、Ｘ５は、ＫまたはＳであり、Ｘ６は、ＳまたはＹである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８２）を有するＣＤＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列Ｑ−Ｘ７−Ｆ−Ｑ−Ｓ−Ｌ−Ｐ−Ｐ−Ｆ−Ｔ（ここで、Ｘ７は、Ｑ、Ｌ、またはＲである）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８３）を有するＣＤＲ−Ｌ３を含む。一部の実施形態では、かかるファミリーの抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７０のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７１のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、本明細書において、かかる第８のファミリー内にある抗体が提供される。
【０３９７】
２．２．６．抗体バリアントの機能的特性
上記及び本開示の他の箇所に記載されるように、本明細書において、本明細書に提供される例示的な抗体配列に対する同一性パーセント、または本明細書に提供される例示的な抗体配列と比較したアミノ酸残基の置換に基づいて定義される、抗体バリアントが提供される。
【０３９８】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ｈＴＦに対して特異性を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ｃＴＦに対して特異性を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ｍＴＦに対して特異性を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ｈＴＦ及びｃＴＦに対して特異性を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ｈＴＦ及びｍＴＦに対して特異性を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ｃＴＦ及びｍＴＦに対して特異性を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ｈＴＦ、ｃＴＦ、及びｍＴＦに対して特異性を有する。
【０３９９】
一部の実施形態では、本明細書に提供される例示的な抗体配列に由来する抗体のバリアントは、ＫＤによって測定するとき、ｈＴＦに対して、かかる例示的な抗体の親和性の約１．５倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、または約１０倍以内である親和性を保持する。一部の実施形態では、本明細書に提供される例示的な抗体配列に由来する抗体のバリアントは、ＫＤによって測定するとき、ｃＴＦに対して、かかる例示的な抗体の親和性の約１．５倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、または約１０倍以内である親和性を保持する。一部の実施形態では、本明細書に提供される例示的な抗体配列に由来する抗体のバリアントは、ＫＤによって測定するとき、ｍＴＦに対して、かかる例示的な抗体の親和性の約１．５倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、または約１０倍以内である親和性を保持する。一部の実施形態では、本明細書に提供される例示的な抗体配列に由来する抗体のバリアントは、ＫＤによって測定するとき、ｈＴＦ及びｃＴＦの両方に対して、かかる例示的な抗体の親和性の約１．５倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、または約１０倍以内である親和性を保持する。一部の実施形態では、本明細書に提供される例示的な抗体配列に由来する抗体のバリアントは、ＫＤによって測定するとき、ｈＴＦ及びｍＴＦの両方に対して、かかる例示的な抗体の親和性の約１．５倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、または約１０倍以内である親和性を保持する。一部の実施形態では、本明細書に提供される例示的な抗体配列に由来する抗体のバリアントは、ＫＤによって測定するとき、ｃＴＦ及びｍＴＦの両方に対して、かかる例示的な抗体の親和性の約１．５倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、または約１０倍以内である親和性を保持する。一部の実施形態では、本明細書に提供される例示的な抗体配列に由来する抗体のバリアントは、ＫＤによって測定するとき、ｈＴＦ、ｃＴＦ、及びｍＴＦの３つ全てに対して、かかる例示的な抗体の親和性の約１．５倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、または約１０倍以内である親和性を保持する。
【０４００】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、本明細書に記載される１つまたは複数のアッセイまたは生物学的効果によって測定するとき、ＴＦシグナル伝達を阻害する能力を保持する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、血液凝固過程におけるＴＦの正常な機能を保持する。
【０４０１】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ＴＦへの結合を、それぞれ本開示の表１３に提供されるような１Ｆ、１Ｇ、２５Ａ、２５Ａ３、２５Ａ５、２５Ａ５−Ｔ，２５Ｇ、２５Ｇ１、２５Ｇ９、２９Ｄ、２９Ｅ、３９Ａ、４３Ｂ、４３Ｂ１、４３Ｂ７、４３Ｄ、４３Ｄ７、４３Ｄ８、４３Ｅ、４３Ｅａ、及び５４Ｅから選択される抗体と競合する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ＴＦへの結合を、２５Ａ、２５Ａ３、２５Ａ５、２５Ａ５−Ｔ、２５Ｇ、２５Ｇ１、及び２５Ｇ９から選択される抗体と競合する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ＴＦへの結合を、４３Ｂ、４３Ｂ１、４３Ｂ７、４３Ｄ、４３Ｄ７、４３Ｄ８、４３Ｅ、及び４３Ｅａから選択される抗体と競合する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ＴＦへの結合を、２５Ａ、２５Ａ３、２５Ａ５、２５Ａ５−Ｔ、２５Ｇ、２５Ｇ１、２５Ｇ９、４３Ｂ、４３Ｂ１、４３Ｂ７、４３Ｄ、４３Ｄ７、４３Ｄ８、４３Ｅ、及び４３Ｅａから選択される抗体と競合する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ＴＦへの結合を、１Ｆ、１Ｇ、２９Ｄ、２９Ｅ、３９Ａ、または５４Ｅから選択される抗体と競合する。
【０４０２】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない。
【０４０３】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉しない。
【０４０４】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ヒトＴＦへの結合についてヒトＦＶＩＩａと競合しない。
【０４０５】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害する。
【０４０６】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、マウスＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１７）に結合する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、該抗体のｈＴＦに対する親和性よりも低い親和性（より高いＫＤによって示される）でマウスＴＦに結合する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ｍＴＦに結合しない。
【０４０７】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ブタＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２４）に結合する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、該抗体のｈＴＦに対する親和性よりも低い親和性（より高いＫＤによって示される）でブタＴＦに結合する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、ｐＴＦに結合しない。
【０４０８】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のバリアントは、かかる抗体と同じＴＦのエピトープに結合する。
【０４０９】
２．２．７．抗体の他の機能的特性
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、以下の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１つまたは複数を有する：（ａ）ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する、（ｂ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない、（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減しない、（ｄ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させない、（ｅ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させない、（ｆ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する、（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持する、（ｈ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持する、（ｉ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護する、（ｊ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する、（ｋ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉しない、（ｌ）ヒトＴＦへの結合についてヒトＦＶＩＩａと競合しない、（ｍ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害する、（ｎ）カニクイザルＴＦに結合する、（ｏ）マウスＴＦに結合する、（ｐ）ウサギＴＦに結合する、（ｑ）ブタＴＦに結合する、（ｒ）ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減する、（ｓ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｔ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、（ｕ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｖ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、１〜７７ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ���８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、（ｗ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、（ｘ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、（ｙ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｚ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ａａ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｂｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメイ���との間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｃｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、ならびに（ｄｄ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの３個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの４個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの５個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの６個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの７個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの８個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの９個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１０個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１１個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１２個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１３個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１４個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１５個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１６個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１７個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１８個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１９個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２０個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２１個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２２個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２３個を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２４個を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２５個を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２６個を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２７個を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２８個を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２９個を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの３０個全てを有する。
【０４１０】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、以下の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１つまたは複数を有する：（ａ）ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する、（ｂ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない、（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減しない、（ｄ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させない、（ｅ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させない、（ｆ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する、（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持する、（ｈ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持する、（ｉ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護する、（ｊ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する、（ｋ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉しない、（ｌ）ヒトＴＦへの結合についてヒトＦＶＩＩａと競合しない、（ｍ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害する、（ｎ）カニクイザルＴＦに結合する、（ｏ）マウスＴＦに結合する、（ｐ）ウサギＴＦに結合する、（ｑ）ブタＴＦに結合する、（ｒ）ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減する、（ｓ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｋ１４９Ｎを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｔ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｋ６８Ｎを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、（ｕ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｖ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラ���トＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、（ｗ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、（ｘ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、（ｙ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｚ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦ細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ａａ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｂｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、���ＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｃｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、ならびに（ｄｄ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの３個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの４個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの５個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの６個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの７個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの８個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの９個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１０個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１１個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１２個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１３個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１４個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１５個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１６個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１７個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１８個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの１９個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２０個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２１個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２２個以上を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２３個を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２４個を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２５個を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２６個を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２７個を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２８個を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２９個を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、前述の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの３０個全てを有する。
【０４１１】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、以下の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２つ以上を含む特性の組み合わせを示す：（ａ）ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する、（ｂ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない、（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減しない、（ｄ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させない、（ｅ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させない、（ｆ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する、（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持する、（ｈ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持する、（ｉ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護する、（ｊ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する、（ｋ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉しない、（ｌ）ヒトＴＦへの結合についてヒトＦＶＩＩａと競合しない、（ｍ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害する、（ｎ）カニクイザルＴＦに結合する、（ｏ）マウスＴＦに結合する、（ｐ）ウサギＴＦに結合する、（ｑ）ブタＴＦに結合する、（ｒ）ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減する、（ｓ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｔ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基６８に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、（ｕ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｖ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳ��Ｑ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、（ｗ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、（ｘ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、（ｙ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｚ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ａａ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｂｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦ���細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｃｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、ならびに（ｄｄ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０４１２】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、以下の（ａ）〜（ｄｄ）に列挙される特性のうちの２つ以上を含む特性の組み合わせを示す：（ａ）ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する、（ｂ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない、（ｃ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を低減しない、（ｄ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を増加させない、（ｅ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を減少させない、（ｆ）トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する、（ｇ）アイソタイプ対照と比較して、トロンビン生成曲線上のトロンビンピーク（ピークＩＩａ）を維持する、（ｈ）アイソタイプ対照と比較して、アッセイ開始からトロンビン生成曲線上のトロンビンピークまでの時間（ｔｔピーク）を維持する、（ｉ）トロンビン生成曲線下面積によって決定するとき、アイソタイプ対照と比較して、内因性トロンビン産生能（ＥＴＰ）を保護する、（ｊ）ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する、（ｋ）ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力に干渉しない、（ｌ）ヒトＴＦへの結合についてヒトＦＶＩＩａと競合しない、（ｍ）ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害する、（ｎ）カニクイザルＴＦに結合する、（ｏ）マウスＴＦに結合する、（ｐ）ウサギＴＦに結合する、（ｑ）ブタＴＦに結合する、（ｒ）ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを低減する、（ｓ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｋ１４９Ｎを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｔ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｋ６８Ｎを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、（ｕ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｖ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示���れる配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、（ｗ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基３９〜７７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基３８〜７６と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、（ｘ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基９４〜１０７がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基９９〜１１２と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である、（ｙ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４６〜１５８がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１５１〜１６３と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｚ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜２１９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜２２４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ａａ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１８９がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１９４と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｂｂ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１５９〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１６４〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結���が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、（ｃｃ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１６７〜１７４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のラットＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１７２〜１７９と置き換えられたヒトＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である、ならびに（ｄｄ）生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３８に示される配列のアミノ酸残基１４１〜１９４がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のヒトＴＦの細胞外ドメインにおけるアミノ酸残基１３６〜１８９と置き換えられたラットＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％超である。
【０４１３】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、以下に列挙される特性の組み合わせを示す：ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない、ならびに生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０４１４】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、以下に列挙される特性の組み合わせを示す：ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する；トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない；ならびに生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０４１５】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、以下に列挙される特性の組み合わせを示す：ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する；トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する；ならびに生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０４１６】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、以下に列挙される特性の組み合わせを示す：ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する；トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する；ならびに生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０４１７】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、以下に列挙される特性の組み合わせを示す：ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する；トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない；生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である；ならびに生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０４１８】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、以下に列挙される特性の組み合わせを示す：ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する；トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない；生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｋ１４９Ｎを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である；ならびに生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０４１９】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、以下に列挙される特性の組み合わせを示す：ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する；トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する；生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である；ならびに生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０４２０】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、以下に列挙される特性の組み合わせを示す：ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する；トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する；生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｋ１４９Ｎを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である；ならびに生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０４２１】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、以下に列挙される特性の組み合わせを示す：ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する；トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない；カニクイザルＴＦに結合する；生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である；ならびに生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０４２２】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、以下に列挙される特性の組み合わせを示す：ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する；トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない；カニクイザルＴＦに結合する；生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｋ１４９Ｎを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である；ならびに生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０４２３】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、以下に列挙される特性の組み合わせを示す：ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する；トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する；カニクイザルＴＦに結合する；生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１４９に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である；ならびに生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のアミノ酸残基１７１及び１９７に変異を含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０４２４】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、以下に列挙される特性の組み合わせを示す：ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは別個のヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する；トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定するとき、ヒトトロンビン生成を許容する；カニクイザルＴＦに結合する；生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｋ１４９Ｎを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である；ならびに生細胞染色アッセイにおいてアイソタイプ対照と比べた該抗体の蛍光強度中央値によって決定するとき、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列の変異Ｎ１７１Ｈ及びＴ１９７Ｋを含むバリアントＴＦの細胞外ドメインとの間の結合が、該抗体と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１０に示される配列のＴＦの細胞外ドメインとの間の結合の５０％未満である。
【０４２５】
２．３．ＴＦ抗体の親和性及び他の特性
２．３．１．ＴＦ抗体の親和性
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体の、ＫＤによって示されるＴＦに対する親和性は、約１０−５Ｍ未満、約１０−６Ｍ未満、約１０−７Ｍ未満、約１０−８Ｍ未満、約１０−９Ｍ未満、約１０−１０Ｍ未満、約１０−１１Ｍ未満、または約１０−１２Ｍ未満である。一部の実施形態では、当該抗体の親和性は、約１０−７Ｍ〜１０−１２Ｍである。一部の実施形態では、当該抗体の親和性は、約１０−７Ｍ〜１０−１１Ｍである。一部の実施形態では、当該抗体の親和性は、約１０−７Ｍ〜１０−１０Ｍである。一部の実施形態では、当該抗体の親和性は、約１０−７Ｍ〜１０−９Ｍである。一部の実施形態では、当該抗体の親和性は、約１０−７Ｍ〜１０−８Ｍである。一部の実施形態では、当該抗体の親和性は、約１０−８Ｍ〜１０−１２Ｍである。一部の実施形態では、当該抗体の親和性は、約１０−８Ｍ〜１０−１１Ｍである。一部の実施形態では、当該抗体の親和性は、約１０−９Ｍ〜１０−１１Ｍである。一部の実施形態では、当該抗体の親和性は、約１０−１０Ｍ〜１０−１１Ｍである。
【０４２６】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるｃＴＦに対する抗体のＫＤ値は、ｈＴＦに対する抗体のＫＤ値の１５倍以下である。一部の実施形態では、本明細書で提供されるｃＴＦに対する抗体のＫＤ値は、ｈＴＦに対する抗体のＫＤ値の１０倍以下である。一部の実施形態では、本明細書で提供されるｃＴＦに対する抗体のＫＤ値は、ｈＴＦに対する抗体のＫＤ値の８倍以下である。一部の実施形態では、本明細書で提供されるｃＴＦに対する抗体のＫＤ値は、ｈＴＦに対する抗体のＫＤ値の５倍以下である。一部の実施形態では、本明細書で提供されるｃＴＦに対する抗体のＫＤ値は、ｈＴＦに対する抗体のＫＤ値の３倍以下である。一部の実施形態では、本明細書で提供されるｃＴＦに対する抗体のＫＤ値は、ｈＴＦに対する抗体のＫＤ値の２倍以下である。
【０４２７】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるｍＴＦに対する抗体のＫＤ値は、ｈＴＦに対する抗体のＫＤ値の２０倍以下である。一部の実施形態では、本明細書で提供されるｍＴＦに対する抗体のＫＤ値は、ｈＴＦに対する抗体のＫＤ値の１５倍以下である。一部の実施形態では、本明細書で提供されるｍＴＦに対する抗体のＫＤ値は、ｈＴＦに対する抗体のＫＤ値の１０倍以下である。一部の実施形態では、本明細書で提供されるｍＴＦに対する抗体のＫＤ値は、ｈＴＦに対する抗体のＫＤ値の５倍以下である。一部の実施形態では、本明細書で提供されるｍＴＦに対する抗体のＫＤ値は、ｈＴＦに対する抗体のＫＤ値の２倍以下である。
【０４２８】
一部の実施形態では、表５に記載のように、本明細書で提供される抗体の、Ｂｉａｃｏｒｅによって測定されたＫＤによって示されるｈＴＦに対する親和性は、約０．３１ｎＭ、約６．２０ｎＭ、約０．３６ｎＭ、約０．０８ｎＭ、約２３．０ｎＭ、約０．９４ｎＭ、約１３．３ｎＭ、約０．４７ｎＭ、約０．０９ｎＭ、約１．７５ｎＭ、約０．０７ｎＭ、約０．１４ｎＭ、約２．０９ｎＭ、約０．０６ｎＭ、約０．１５ｎＭ、約１．４６ｎＭ、約１．６０ｎＭ、及び約０．４２ｎＭから選択される。一部の実施形態では、ＫＤによって示されるそのような親和性は、約２３．０ｎＭ〜約０．０６ｎＭの範囲である。一部の実施形態では、そのようなものは、約２３．０ｎＭ以下である。
【０４２９】
一部の実施形態では、表５に記載のように、本明細書で提供される抗体の、ＦｏｒｔｅＢｉｏによって測定されたＫＤによって示されるｈＴＦに対する親和性は、約１．２８ｎＭ、約２．２０ｎＭ、約８．４５ｎＭ、約１．６７ｎＭ、約０．６４ｎＭ、約２１．９ｎＭ、約３．９７ｎＭ、約３５．８ｎＭ、約３．３０ｎＭ、約２．３２ｎＭ、約０．８３ｎＭ、約２．４０ｎＭ、約０．９６ｎＭ、約０．８６ｎＭ、約３．８４ｎＭ、約１．０２ｎＭ、約１．６１ｎＭ、約２．５２ｎＭ、約２．２８ｎＭ、及び約１．５９ｎＭから選択される。一部の実施形態では、ＫＤによって示されるそのような親和性は、約３５．８ｎＭ〜約０．６４ｎＭの範囲である。一部の実施形態では、そのようなＫＤは、約３５．８ｎＭ以下である。
【０４３０】
一部の実施形態では、表５に記載のように、本明細書で提供される抗体の、Ｂｉａｃｏｒｅによって測定されたＫＤによって示されるｃＴＦに対する親和性は、約０．２６ｎＭ、約５．４２ｎＭ、約０．２１ｎＭ、約０．０４ｎＭ、約１８．０ｎＭ、約０．７８ｎＭ、約１６．４ｎＭ、約５．０６ｎＭ、約０．０８ｎＭ、約５．６４ｎＭ、約０．１２ｎＭ、約０．２４ｎＭ、約５．６６ｎＭ、約０．３９ｎＭ、約５．６９ｎＭ、約６．４２ｎＭ、及び約１．８３ｎＭから選択される。一部の実施形態では、ＫＤによって示されるそのような親和性は、約１８．０ｎＭ〜約０．０４ｎＭの範囲である。一部の実施形態では、そのようなＫＤは、約１８．０ｎＭ以下である。
【０４３１】
一部の実施形態では、表５に記載のように、本明細書で提供される抗体の、ＦｏｒｔｅＢｉｏによって測定されたＫＤによって示されるｃＴＦに対する親和性は、約１．４３ｎＭ、約２．７０ｎＭ、約７．６５ｎＭ、約１．３６ｎＭ、約０．７６ｎＭ、約１７．５ｎＭ、約４．９９ｎＭ、約４２．９ｎＭ、約１２．０ｎＭ、約１５．０ｎＭ、約０．５７ｎＭ、約３．４０ｎＭ、約１．０５ｎＭ、約０．９４ｎＭ、約４．１２ｎＭ、約１．１１ｎＭ、約１．９６ｎＭ、約４．０７ｎＭ、約２．７１ｎＭ、及び約４．１６ｎＭから選択される。一部の実施形態では、ＫＤによって示されるそのような親和性は、約４２．９ｎＭ〜約０．５７ｎＭの範囲である。一部の実施形態では、そのようなＫＤは、約４２．９ｎＭ以下である。
【０４３２】
一部の実施形態では、表５に記載のように、本明細書で提供される抗体の、Ｂｉａｃｏｒｅによって測定されたＫＤによって示されるｍＴＦに対する親和性は、約５．４ｎＭ、約２．９ｎＭ、約２１ｎＭ、及び約２．４ｎＭから選択される。一部の実施形態では、ＫＤによって示されるそのような親和性は、約２１ｎＭ〜約２．４ｎＭの範囲である。一部の実施形態では、そのようなＫＤは、約２１ｎＭ以下である。
【０４３３】
一部の実施形態では、表５に記載のように、本明細書で提供される抗体の、ＦｏｒｔｅＢｉｏによって測定されたＫＤによって示されるｍＴＦに対する親和性は、約２６３ｎＭ、約１３１ｎＭ、約１８８ｎＭ、約１１４ｎＭ、約３４．２ｎＭ、約９．１６ｎＭ、約１６１ｎＭ、約７２．１ｎＭ、約３６０ｎＭ、約２８１ｎＭ、約４１．４ｎＭ、約６．１２ｎＭ、約１２１ｎＭ、及び約１４０ｎＭから選択される。一部の実施形態では、ＫＤによって示されるそのような親和性は、約３６０ｎＭ〜約６．１２ｎＭの範囲である。一部の実施形態では、そのようなＫＤは、約３６０ｎＭ以下である。
【０４３４】
一部の実施形態では、図１Ａ及び１Ｂに記載のように、本明細書で提供される抗体の、ヒトＴＦ陽性ＨＣＴ−１１６細胞によって測定されたＥＣ５０によって示されるｈＴＦに対する親和性は、約５０ｐＭ、約５８ｐＭ、約１６９ｐＭ、約７７ｐＭ、約８８ｐＭ、約１３４ｐＭ、約８５ｐＭ、約２３７ｐＭ、約１５２ｐＭ、約３９ｐＭ、約５５９ｐＭ、約２８０ｐＭ、約２５５ｐＭ、約１４７ｐＭ、約９４ｐＭ、約１１７ｐＭ、約６８７ｐＭ、約５３２ｐＭ、及び約２３９ｐＭから選択される。一部の実施形態では、そのような親和性は、約６８７ｐＭ〜約３９ｐＭの範囲である。一部の実施形態では、そのようなＥＣ５０は、約６８７ｐＭ以下である。
【０４３５】
一部の実施形態では、図２Ａ及び図２Ｂに記載のように、本明細書で提供される抗体の、マウスＴＦ陽性ＣＨＯ細胞によって測定されたＥＣ５０によって示されるｍＴＦに対する親和性は、約４５５ｎＭ、約８７ｎＭ、約１１ｎＭ、約３．９ｎＭ、約３．０ｎＭ、約３．４ｎＭ、約２５５ｎＭ、約２．９ｎＭ、約３．６ｎＭ、及び約４．０ｎＭから選択される。一部の実施形態では、そのような親和性は、約４５５ｎＭ〜約２．９ｎＭの範囲である。一部の実施形態では、そのようなＥＣ５０は、約４５５ｐＭ以下である。
【０４３６】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるｐＴＦに対する抗体のＫＤ値は、ｈＴＦに対する抗体のＫＤ値の２０倍以下である。一部の実施形態では、本明細書で提供されるｐＴＦに対する抗体のＫＤ値は、ｈＴＦに対する抗体のＫＤ値の１５倍以下である。一部の実施形態では、本明細書で提供されるｐＴＦに対する抗体のＫＤ値は、ｈＴＦに対する抗体のＫＤ値の１０倍以下である。一部の実施形態では、本明細書で提供されるｐＴＦに対する抗体のＫＤ値は、ｈＴＦに対する抗体のＫＤ値の５倍以下である。一部の実施形態では、本明細書で提供されるｐＴＦに対する抗体のＫＤ値は、ｈＴＦに対する抗体のＫＤ値の２倍以下である。
【０４３７】
一部の実施形態では、表４０に記載のように、本明細書で提供される抗体の、Ｂｉａｃｏｒｅによって測定されたＫＤによって示されるｐＴＦに対する親和性は、３．３１ｎＭまたは１２．９ｎＭである。
【０４３８】
２．３．２．ＴＦ抗体の存在下でのトロンビンの生成
一部の実施形態では、本明細書で提供されるＴＦ抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、ヒトトロンビン生成を阻害しない。特定の実施形態では、本明細書で提供されるＴＦ抗体は、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、ヒトトロンビン生成を可能にする。
【０４３９】
一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、トロンビン生成ピークのパーセント（ピークＩＩａ％）は少なくとも４０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも５０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも６０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも７０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも８０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも９０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも９５％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも９９％である。
【０４４０】
一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも４０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも５０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも６０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも７０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも８０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも９０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも９５％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも９９％である。
【０４４１】
一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも６０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも７０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも８０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも９０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも９５％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ピークＩＩａ％は少なくとも９９％である。
【０４４２】
一部の実施形態では、表６及び表３７に記載のように、１００ｎＭのＴＦ抗体の存在下でのピークＩＩａ％は、抗体のプレインキュベーションを含まないトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）で決定するとき、抗体を含まない対照条件と比較して、約９９％、約１００％、約１０３％、約６４％、約５２％、約８７％、約９６％、約９８％、及び約５３％から選択される。一部の実施形態では、そのようなピークＩＩａ％は、約５２％〜約１０３％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなピークＩＩａ％は、約５２％以上である。
【０４４３】
一部の実施形態では、表６及び表３７に記載のように、５０ｎＭのＴＦ抗体の存在下でのピークＩＩａ％は、抗体のプレインキュベーションを含まないトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）で決定するとき、抗体を含まない対照条件と比較して、約９９％、約１００％、約１０３％、約６７％、約５８％、約８９％、約９６％、約９８％、約６８％、約６２％、及び約８８％から選択される。一部の実施形態では、そのようなピークＩＩａ％は、約５８％〜約１０３％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなピークＩＩａ％は、約５８％以上である。
【０４４４】
一部の実施形態では、表６及び表３７に記載のように、１０ｎＭのＴＦ抗体の存在下でのピークＩＩａ％は、抗体のプレインキュベーションを含まないトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）で決定するとき、抗体を含まない対照条件と比較して、約１００％、約９９％、約１０３％、約８７％、約８３％、約９５％、約９８％、約８６％、及び約９６％から選択される。一部の実施形態では、そのようなピークＩＩａ％は、約８３％〜約１０３％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなピークＩＩａ％は、約８３％以上である。
【０４４５】
一部の実施形態では、表７及び表３８に記載のように、１００ｎＭのＴＦ抗体の存在下でのピークＩＩａ％は、１０分の抗体のプレインキュベーションを含むトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）で決定するとき、抗体を含まない対照条件と比較して、約１０８％、約１０５％、約１１１％、約５８％、約４７％、約９１％、約１０３％、約１０９％、約１０７％、及び約４５％から選択される。一部の実施形態では、そのようなピークＩＩａ％は、約４５％〜約１１１％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなピークＩＩａ％は、約４５％以上である。
【０４４６】
一部の実施形態では、表７及び表３８に記載のように、５０ｎＭのＴＦ抗体の存在下でのピークＩＩａ％は、１０分の抗体のプレインキュベーションを含むトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）で決定するとき、抗体を含まない対照条件と比較して、約１０７％、約１０４％、約１１４％、約６２％、約４９％、約８７％、約１０５％、約１０９％、約５５％、及び約９２％から選択される。一部の実施形態では、そのようなピークＩＩａ％は、約４９％〜約１１４％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなピークＩＩａ％は、約４９％以上である。
【０４４７】
一部の実施形態では、表７及び表３８に記載のように、１０ｎＭのＴＦ抗体の存在下でのピークＩＩａ％は、１０分の抗体のプレインキュベーションを含むトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）で決定するとき、抗体を含まない対照条件と比較して、約１０５％、約１１４％、約７６％、約６８％、約９４％、約１０８％、約１０４％、約７４％、及び約９３％から選択される。一部の実施形態では、そのようなピークＩＩａ％は、約６８％〜約１１４％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなピークＩＩａ％は、約６８％以上である。
【０４４８】
一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、内因性トロンビンポテンシャルのパーセント（ＥＴＰ％）は少なくとも８０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって判定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＥＴＰ％は少なくとも９０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって判定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＥＴＰ％は少なくとも９５％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＥＴＰ％は少なくとも９９％である。
【０４４９】
一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって判定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＥＴＰ％は少なくとも８０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって判定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＥＴＰ％は少なくとも９０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＥＴＰ％は少なくとも９５％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって判定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＥＴＰ％は少なくとも９９％である。
【０４５０】
一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって判定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＥＴＰ％は少なくとも８０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって判定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＥＴＰ％は少なくとも９０％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＥＴＰ％は少なくとも９５％である。一部の実施形態では、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって判定されるとき、抗体を含まない対照条件と比較して、１０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＥＴＰ％は少なくとも９９％である。
【０４５１】
一部の実施形態では、表６及び表３７に記載のように、１００ｎＭのＴＦ抗体の存在下でのＥＴＰ％は、抗体のプレインキュベーションを含まないトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）で決定するとき、抗体を含まない対照条件と比較して、約１０８％、約１０３％、約１０９％、約１００％、約９６％、約１０２％、約１０５％、及び約９２％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＥＴＰ％は、約９２％〜約１０９％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＥＴＰ％は、約９２％以上である。
【０４５２】
一部の実施形態では、表６及び表３７に記載のように、５０ｎＭのＴＦ抗体の存在下でのＥＴＰ％は、抗体のプレインキュベーションを含まないトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）で決定するとき、抗体を含まない対照条件と比較して、約１０８％、約１０３％、約１１１％、約１０１％、約９７％、約１０４％、約１０６％、約９３％、約９６％、及び約１０５％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＥＴＰ％は、約９３％〜約１１１％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＥＴＰ％は、約９３％以上である。
【０４５３】
一部の実施形態では、表６及び表３７に記載のように、１０ｎＭのＴＦ抗体の存在下でのＥＴＰ％は、抗体のプレインキュベーションを含まないトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）で決定するとき、抗体を含まない対照条件と比較して、約１０６％、約１０９％、約１０５％、約１０４％、約１０７％、約９９％、約１０１％、及び約１０２％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＥＴＰ％は、約９９％〜約１０９％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＥＴＰ％は、約９９％以上である。
【０４５４】
一部の実施形態では、表７及び表３８に記載のように、１００ｎＭのＴＦ抗体の存在下でのＥＴＰ％は、１０分の抗体のプレインキュベーションを含むトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）で決定するとき、抗体を含まない対照条件と比較して、約１１０％、約１０４％、約１０６％、約９８％、約９５％、約１０８％、約１０７％、約９６％、約９２％、及び約１０３％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＥＴＰ％は、約９２％〜約１１０％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＥＴＰ％は、約９２％以上である。
【０４５５】
一部の実施形態では、表７及び表３８に記載のように、５０ｎＭのＴＦ抗体の存在下でのＥＴＰ％は、１０分の抗体のプレインキュベーションを含むトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）で決定するとき、抗体を含まない対照条件と比較して、約１１０％、約１０６％、約１０８％、約１０３％、約９６％、約１０９％、約１０２％、約１０４％、約９４％、及び約９８％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＥＴＰ％は、約９４％〜約１１０％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＥＴＰ％は、約９４％以上である。
【０４５６】
一部の実施形態では、表７及び表３８に記載のように、１０ｎＭのＴＦ抗体の存在下でのＥＴＰ％は、１０分の抗体のプレインキュベーションを含むトロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）で決定するとき、抗体を含まない対照条件と比較して、約１０７％、約１０６％、約１１０％、約１０３％、約１００％、約１０５％、約１０２％、及び約１０１％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＥＴＰ％は、約１００％〜約１１０％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＥＴＰ％は、約１００％以上である。
【０４５７】
２．３．３．ＴＦ抗体の存在下でのＦＸａの変換
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ヒトＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは異なるヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する。ある特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力を妨害しない。
【０４５８】
一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ変換の百分率（ＦＸａ％）は少なくとも７５％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも８０％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも８５％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも９０％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも９５％である。
【０４５９】
一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも７５％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも８０％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも８５％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも９０％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも９５％である。
【０４６０】
一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、２５ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも７５％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、２５ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも８０％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、２５ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも８５％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、２５ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも９０％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、２５ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも９５％である。
【０４６１】
一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１２．５ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも７５％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１２．５ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも８０％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１２．５ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも８５％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１２．５ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも９０％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１２．５ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は少なくとも９５％である。
【０４６２】
一部の実施形態では、表８に記載のように、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭのＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は、約８９％、約９６％、約１１６％、約１０８％、約１１７％、約１０５％、約１１２％、約１０６％、約１０３％、約１１１％、約９８％、及び約１０１％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＦＸａ％は、約８９％〜約１１７％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＦＸａ％は、約８９％以上である。
【０４６３】
一部の実施形態では、表８に記載のように、抗体を含まない対照条件と比較して、５０ｎＭのＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は、約９４％、約９３％、約７８％、約１０２％、約９９％、約１０４％、約１０５％、約１０８％、約１０７％、約９７％、及び約１０６％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＦＸａ％は、約７８％〜約１０８％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＦＸａ％は、約７８％以上である。
【０４６４】
一部の実施形態では、表８に記載のように、抗体を含まない対照条件と比較して、２５ｎＭのＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は、約８１％、約８９％、約８５％、約１０９％、約９６％、約９７％、約１０８％、約１０４％、約１０３％、約１１２％、及び約８９％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＦＸａ％は、約８１％〜約１１２％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＦＸａ％は、約８１％以上である。
【０４６５】
一部の実施形態では、表８に記載のように、抗体を含まない対照条件と比較して、１２．５ｎＭのＴＦ抗体の存在下で、ＦＸａ％は、約８７％、約８９％、約８２％、約９９％、約１０１％、約９８％、約１１３％、約１０６％、約１１５％、約１１０％、約１２０％、約８５％、及び約１０８％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＦＸａ％は、約８２％〜約１２０％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＦＸａ％は、約８２％以上である。
【０４６６】
２．３．４．ＴＦ抗体の存在下でのＦＶＩＩａの結合
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ヒトＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは異なるヒトＴＦ結合部位でヒトＴＦに結合する。ある特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ヒトＴＦへの結合に関してヒトＦＶＩＩａと競合しない。
【０４６７】
一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、２５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ結合の百分率（ＦＶＩＩａ％）は少なくとも７５％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、２５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも８０％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、２５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも８５％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、２５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも９０％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、２５０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも９５％である。
【０４６８】
一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、８３ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも７５％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、８３ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも８０％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、８３ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも８５％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、８３ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも９０％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、８３ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも９５％である。
【０４６９】
一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、２８ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも７５％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、２８ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも８０％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、２８ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも８５％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、２８ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも９０％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、２８ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも９５％である。
【０４７０】
一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、９．２５ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも７５％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、９．２５ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも８０％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、９．２５ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも８５％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、９．２５ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも９０％である。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、９．２５ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は少なくとも９５％である。
【０４７１】
一部の実施形態では、表９に記載のように、抗体を含まない対照条件と比較して、２５０ｎＭのＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は、約９８％、約８７％、約８０％、約９２％、約９５％、約８９％、約９１％、約９７％、約９４％、約１０１％、及び約９６％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＦＶＩＩａ％は、約８０％〜約１０１％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＦＶＩＩａ％は、約８０％以上である。
【０４７２】
一部の実施形態では、表９に記載のように、抗体を含まない対照条件と比較して、８３ｎＭのＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は、約９７％、約８８％、約７７％、約９３％、約９４％、約９１％、約９８％、約１００％、及び約９２％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＦＶＩＩａ％は、約７７％〜約１００％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＦＶＩＩａ％は、約７７％以上である。
【０４７３】
一部の実施形態では、表９に記載のように、抗体を含まない対照条件と比較して、２８ｎＭのＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は、約１０１％、約８７％、約７９％、約９６％、約９３％、約９５％、約９８％、約１００％、約１０２％、約９９％、約９２％、及び約９１％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＦＶＩＩａ％は、約７９％〜約１０２％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＦＶＩＩａ％は、約７９％以上である。
【０４７４】
一部の実施形態では、表９に記載のように、抗体を含まない対照条件と比較して、９．２５ｎＭのＴＦ抗体の存在下で、ＦＶＩＩａ％は、約１００％、約９０％、約７６％、約９７％、約９３％、約９９％、約９８％、約１０２％、約１０１％、及び約９５％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＦＶＩＩａ％は、約７６％〜約１０２％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＦＶＩＩａ％は、約７６％以上である。
【０４７５】
２．３．５．ＴＦ抗体の存在下でのＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害する。一部の実施形態では、ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達の阻害は、ＩＬ８の減少によって測定される。一部の実施形態では、ＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達の阻害は、ＧＭ−ＣＳＦの減少によって測定される。
【０４７６】
一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、インターロイキン８濃度（ＩＬ８  ｃｏｎｃ）は少なくとも７０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８  ｃｏｎｃは少なくとも８０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８  ｃｏｎｃは少なくとも９０％減少する。
【０４７７】
一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、４０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８  ｃｏｎｃは少なくとも７０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、４０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８  ｃｏｎｃは少なくとも８０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、４０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８  ｃｏｎｃは少なくとも９０％減少する。
【０４７８】
一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１６ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８  ｃｏｎｃは少なくとも６０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１６ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８  ｃｏｎｃは少なくとも７０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１６ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８  ｃｏｎｃは少なくとも８０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１６ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８  ｃｏｎｃは少なくとも９０％減少する。
【０４７９】
一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、６．４ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８  ｃｏｎｃは少なくとも５０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、６．４ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８  ｃｏｎｃは少なくとも６０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、６．４ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８  ｃｏｎｃは少なくとも７０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、６．４ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８  ｃｏｎｃは少なくとも８０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、６．４ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８  ｃｏｎｃは少なくとも９０％減少する。
【０４８０】
一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子濃度（ＧＭ−ＣＳＦ  ｃｏｎｃ）は少なくとも７０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ  ｃｏｎｃは少なくとも８０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ  ｃｏｎｃは少なくとも９０％減少する。
【０４８１】
一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、４０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ  ｃｏｎｃは少なくとも７０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、４０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ  ｃｏｎｃは少なくとも８０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、４０ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ  ｃｏｎｃは少なくとも９０％減少する。
【０４８２】
一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１６ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ  ｃｏｎｃは少なくとも６０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１６ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ  ｃｏｎｃは少なくとも７０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１６ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ  ｃｏｎｃは少なくとも８０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、１６ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ  ｃｏｎｃは少なくとも９０％減少する。
【０４８３】
一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、６．４ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ  ｃｏｎｃは少なくとも５０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、６．４ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ  ｃｏｎｃは少なくとも６０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、６．４ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ  ｃｏｎｃは少なくとも７０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、６．４ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ  ｃｏｎｃは少なくとも８０％減少する。一部の実施形態では、抗体を含まない対照条件と比較して、６．４ｎＭ以上のＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ  ｃｏｎｃは少なくとも９０％減少する。
【０４８４】
一部の実施形態では、表１０に記載のように、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭのＴＦ抗体の存在下で、インターロイキン８の百分率（ＩＬ８％）は、約２％、約９％、約８％、約６％、約１３％、約１％、約３％、約４％、及び約５％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＩＬ８％は、約１％〜約１３％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＩＬ８％は、約１３％以下である。
【０４８５】
一部の実施形態では、表１０に記載のように、抗体を含まない対照条件と比較して、４０ｎＭのＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８％は、約２％、約８％、約７％、約１０％、約１４％、約４％、約５％、及び約６％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＩＬ８％は、約２％〜約１４％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＩＬ８％は、約１４％以下である。
【０４８６】
一部の実施形態では、表１０に記載のように、抗体を含まない対照条件と比較して、１６ｎＭのＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８％は、約２％、約３％、約１０％、約８％、約７％、約１６％、約９％、約１５％、約５％、及び約６％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＩＬ８％は、約２％〜約１６％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＩＬ８％は、約１６％以下である。
【０４８７】
一部の実施形態では、表１０に記載のように、抗体を含まない対照条件と比較して、６．４ｎＭのＴＦ抗体の存在下で、ＩＬ８％は、約３％、約４％、約１１％、約９％、約１４％、約２２％、約１２％、約６％、約５％、約１５％、約２１％、及び約８％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＩＬ８％は、約３％〜約２２％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＩＬ８％は、約２２％以下である。
【０４８８】
一部の実施形態では、表１１に記載のように、抗体を含まない対照条件と比較して、１００ｎＭのＴＦ抗体の存在下で、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子の百分率（ＧＭ−ＣＳＦ％）は、約６％、約７％、約２２％、約２０％、約１２％、約１９％、約１７％、約２５％、約５％、約１４％、約１１％、及び約１０％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＧＭ−ＣＳＦ％は、約５％〜約２５％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＧＭ−ＣＳＦ％は、約２５％以下である。
【０４８９】
一部の実施形態では、表１１に記載のように、抗体を含まない対照条件と比較して、４０ｎＭのＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ％は、約６％、約７％、約１９％、約１５％、約１８％、約１６％、約２６％、約５％、約１３％、約１１％、及び約１０％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＧＭ−ＣＳＦ％は、約５％〜約２６％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＧＭ−ＣＳＦ％は、約２６％以下である。
【０４９０】
一部の実施形態では、表１１に記載のように、抗体を含まない対照条件と比較して、１６ｎＭのＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ％は、約６％、約７％、約２２％、約１９％、約１４％、約３２％、約１７％、約２６％、約５％、約１２％、約１３％、約９％、約１１％、及び約１５％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＧＭ−ＣＳＦ％は、約５％〜約３２％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＧＭ−ＣＳＦ％は、約３２％以下である。
【０４９１】
一部の実施形態では、表１１に記載のように、抗体を含まない対照条件と比較して、６．４ｎＭのＴＦ抗体の存在下で、ＧＭ−ＣＳＦ％は、約８％、約９％、約２４％、約２０％、約１８％、約３９％、約３４％、約１５％、約２１％、約１６％、約１７％、及び約１０％から選択される。一部の実施形態では、そのようなＧＭ−ＣＳＦ％は、約８％〜約３９％の範囲である。一部の実施形態では、そのようなＧＭ−ＣＳＦ％は、約３９％以下である。
【０４９２】
２．３．６．ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおける病変サイズの減少
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルにおいて病変サイズを減少させる。一部の実施形態では、病変サイズの減少はフルオレセイン血管造影法（ＦＡ）によって測定される。
【０４９３】
一部の実施形態では、ブタＣＮＶモデルにおける病変サイズは、抗ＴＦ抗体投与の７日後に少なくとも５％減少する。一部の実施形態では、ブタＣＮＶモデルにおける病変サイズは、抗ＴＦ抗体投与の７日後に少なくとも１０％減少する。一部の実施形態では、ブタＣＮＶモデルにおける病変サイズは、抗ＴＦ抗体投与の７日後に少なくとも２０％減少する。一部の実施形態では、ブタＣＮＶモデルにおける病変サイズは、抗ＴＦ抗体投与の７日後に少なくとも４０％減少する。一部の実施形態では、ブタＣＮＶモデルにおける病変サイズは、抗ＴＦ抗体投与の７日後に少なくとも６０％減少する。
【０４９４】
一部の実施形態では、ブタＣＮＶモデルにおける病変サイズは、抗ＴＦ抗体投与の２１日後に少なくとも１０％減少する。一部の実施形態では、ブタＣＮＶモデルにおける病変サイズは、抗ＴＦ抗体投与の２１日後に少なくとも２０％減少する。一部の実施形態では、ブタＣＮＶモデルにおける病変サイズは、抗ＴＦ抗体投与の２１日後に少なくとも４０％減少する。一部の実施形態では、ブタＣＮＶモデルにおける病変サイズは、抗ＴＦ抗体投与の２１日後に少なくとも６０％減少する。一部の実施形態では、ブタＣＮＶモデルにおける病変サイズは、抗ＴＦ抗体投与の２１日後に少なくとも８０％減少する。
【０４９５】
２．４．生殖系列
本明細書で提供される抗体は、任意の適切なＶＨ及びＶＬの生殖系列配列を含み得る。
【０４９６】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＨ領域は、ＶＨ３生殖系列に由来する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＨ領域は、ＶＨ１生殖系列に由来する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＨ領域は、ＶＨ４生殖系列に由来する。
【０４９７】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＨ領域は、ＶＨ３−２３生殖系列に由来する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＨ領域は、ＶＨ１−１８生殖系列に由来する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＨ領域は、ＶＨ３−３０生殖系列に由来する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＨ領域は、ＶＨ１−６９生殖系列に由来する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＨ領域は、ＶＨ４−３１生殖系列に由来する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＨ領域は、ＶＨ４−３４生殖系列に由来する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＨ領域は、ＶＨ１−４６生殖系列に由来する。
【０４９８】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＬ領域は、ＶＫ１生殖系列に由来する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＬ領域は、ＶＫ４生殖系列に由来する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＬ領域は、ＶＫ３生殖系列に由来する。
【０４９９】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＬ領域は、ＶＫ１−０５生殖系列に由来する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＬ領域は、ＶＫ４−０１生殖系列に由来する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＬ領域は、ＶＫ３−１５生殖系列に由来する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＬ領域は、ＶＫ３−２０生殖系列に由来する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＶＬ領域は、ＶＫ１−３３生殖系列に由来する。
【０５００】
２．５．単一特異性及び多重特異性のＴＦ抗体
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は単一特異性抗体である。
【０５０１】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は多重特異性抗体である。
【０５０２】
一部の実施形態では、本明細書で提供される多重特異性抗体は、１つを超える抗原に結合する。一部の実施形態では、多重特異性抗体は２つの抗原に結合する。一部の実施形態では、多重特異性抗体は３つの抗原に結合する。一部の実施形態では、多重特異性抗体は４つの抗原に結合する。一部の実施形態では、多重特異性抗体は５つの抗原に結合する。
【０５０３】
一部の実施形態では、本明細書で提供される多重特異性抗体は、ＴＦ抗原上の１つを超えるエピトープに結合する。一部の実施形態では、多重特異性抗体はＴＦ抗原上の２つのエピトープに結合する。一部の実施形態では、多重特異性抗体はＴＦ抗原上の３つのエピトープに結合する。
【０５０４】
当該技術分野では多くの多重特異性抗体構築物が知られており、本明細書で提供される抗体は、任意の適切な多重特異性の適切なコンストラクトの形態で提供することができる。
【０５０５】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、それぞれが共通の軽鎖可変領域と対形成している少なくとも２つの異なる重鎖可変領域を含む免疫グロブリンを含む（すなわち、「共通軽鎖抗体」）。共通軽鎖可変領域は、２つの異なる重鎖可変領域のそれぞれと異なる抗原結合ドメインを形成する。参照によりその全体が援用される、Ｍｅｒｃｈａｎｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１９９８，１６：６７７−６８１を参照されたい。
【０５０６】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、そのような免疫グロブリンの重鎖または軽鎖の１つまたは複数のＮ末端またはＣ末端に結合した抗体またはそのフラグメントを含む免疫グロブリンを含む。参照によりその全体が援用される、Ｃｏｌｏｍａ  ａｎｄ  Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１９９７，１５：１５９−１６３を参照されたい。一部の態様では、そのような抗体は四価の二重特異性抗体を含む。
【０５０７】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、少なくとも２つの異なる重鎖可変領域及び少なくとも２つの異なる軽鎖可変領域を含むハイブリッド免疫グロブリンを含む。参照によりその各々の全体が援用される、Ｍｉｌｓｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ，１９８３，３０５：５３７−５４０；及びＳｔａｅｒｚ  ａｎｄ  Ｂｅｖａｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８６，８３：１４５３−１４５７を参照されたい。
【０５０８】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、多重特異性を有さない副産物の形成を低減するための改変を伴う免疫グロブリン鎖を含む。一部の態様では、抗体は、参照によりその全体が援用される、米国特許第５，７３１，１６８号に記載されるような、１つまたは複数の「ノブ−イントゥー−ホール」を含む。
【０５０９】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、Ｆｃヘテロ多量体の組み立てを促進するための１つまたは複数の静電的改変を伴う免疫グロブリン鎖を含む。参照によりその全体が援用されるＷＯ２００９／０８９００４を参照されたい。
【０５１０】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は二重特異性一本鎖分子を含む。参照によりその各々の全体が援用される、Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，１９９１，１０：３６５５−３６５９；及びＧｒｕｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９４，１５２：５３６８−５３７４を参照されたい。
【０５１１】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、ポリペプチドリンカーによって接続された重鎖可変ドメインと軽鎖可変ドメインを含み、ここで、リンカーの長さは、望ましい多重特異性を有する多重特異性抗体の組み立てを促進するように選択される。例えば、単一特異的ｓｃＦｖは、重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインが、１２個を超えるアミノ酸残基のポリペプチドリンカーによって接続されている場合に、一般的に形成される。参照によりその各々の全体が援用される米国特許第４，９４６，７７８号及び米国特許第５，１３２，４０５号を参照されたい。一部の実施形態では、ポリペプチドリンカー長を１２個未満のアミノ酸残基に減少させると、同じポリペプチド鎖上の重鎖及び軽鎖可変ドメインの対形成が妨げられ、１つの鎖由来の重鎖及び軽鎖可変ドメインと別の鎖の相補ドメインとの対形成が可能になる。したがって、得られる抗体は多重特異性を有し、各結合部位の特異性は複数のポリペプチド鎖によって寄与される。３〜１２アミノ酸残基のリンカーによって結合された重鎖及び軽鎖可変ドメインを含むポリペプチド鎖は、主に二量体（ダイアボディと呼ばれる）を形成する。リンカーが０〜２アミノ酸残基の場合、三量体（トリアボディと呼ばれる）及び四量体（テトラボディと呼ばれる）が優先される。しかしながら、オリゴマー化の正確なタイプは、リンカー長に加えて、アミノ酸残基の組成と各ポリペプチド鎖の可変ドメインの順序（例えば、ＶＨ−リンカー−ＶＬ対ＶＬ−リンカー−ＶＨ）に依存するようである。当業者は、所望の多重特異性に基づいて適切なリンカー長を選択することができる。
【０５１２】
一部の実施形態では、多重特異性抗体はダイアボディを含む。参照によりその全体が援用される、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９３，９０：６４４４−６４４８を参照されたい。一部の実施形態では、多重特異性抗体はトリアボディを含む。参照によりその全体が援用される、Ｔｏｄｏｒｏｖｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２００１，２４８：４７−６６を参照されたい。一部の実施形態では、多重特異性抗体はテトラボディを含む。参照によりその全体が援用される同文献を参照されたい。
【０５１３】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、三重特異性Ｆ（ａｂ’）３誘導体を含む。参照によりその全体が援用される、Ｔｕｔｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９１，１４７：６０−６９を参照されたい。
【０５１４】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は架橋抗体を含む。参照によりその各々の全体が援用される、米国特許第４，６７６，９８０号；Ｂｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８５，２２９：８１−８３；Ｓｔａｅｒｚ，ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ，１９８５，３１４：６２８−６３１；及びＥＰ０４５３０８２を参照されたい。
【０５１５】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、ロイシンジッパーによって組み立てられた抗原結合ドメインを含む。参照によりその全体が援用される、Ｋｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９２，１４８：１５４７−１５５３を参照されたい。
【０５１６】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は相補的タンパク質ドメインを含む。一部の態様では、相補的タンパク質ドメインは、アンカードメイン（ＡＤ）ならびに二量体化及びドッキングドメイン（ＤＤＤ）を含む。一部の実施形態では、ＡＤとＤＤＤは互いに結合するため、「ドックアンドロック」（ＤＮＬ）アプローチを介して多重特異性抗体構造の組み立てが可能になる。二重特異性抗体、三重特異性抗体、四重特異性抗体、五重特異性抗体、及び六重特異性抗体を含む、多くの特異性の抗体を組み立てることができる。相補的タンパク質ドメインを含む多重特異性抗体は、例えば、その各々の全体が参照により本明細書に援用される、米国特許第７，５２１，０５６号；同第７，５５０，１４３号；同第７，５３４，８６６号；及び同第７，５２７，７８７号に記載されている。
【０５１７】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、参照によりその全体が援用される、米国特許出願公開第２００８／００６９８２０号に記載されているような二重作用Ｆａｂ（ＤＡＦ）抗体を含む。
【０５１８】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、２つの親分子を還元した後、２つの親分子を混合し、再酸化してハイブリッド構造を組み立てることによって形成された抗体を含む。参照によりその全体が援用される、Ｃａｒｌｒｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，２０１１，６：ｅ２２５３３を参照されたい。
【０５１９】
一部の実施形態では、多重特異性抗体はＤＶＤ−Ｉｇ（商標）を含む。ＤＶＤ−Ｉｇ（商標）は、２つ以上の抗原に結合できる二重可変ドメイン免疫グロブリンである。ＤＶＤ−Ｉｇ（商標）は、参照によりその全体が援用される、米国特許第７，６１２，１８１号に記載されている。
【０５２０】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、ＤＡＲＴ（商標）を含む。ＤＡＲＴ（商標）は、参照によりその全体が援用される、Ｍｏｏｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２０１１，１１７：４５４−４５１に記載されている。
【０５２１】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、ＤｕｏＢｏｄｙ（登録商標）を含む。ＤｕｏＢｏｄｉｅｓ（登録商標）は、参照によりその各々の全体が援用される、Ｌａｂｒｉｊｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，２０１３，１１０：５１４５−５１５０；Ｇｒａｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１３，５：９６２−９７２；及びＬａｂｒｉｊｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，２０１４，９：２４５０−２４６３に記載されている。
【０５２２】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、別の抗体またはフラグメントに結合した抗体フラグメントを含む。結合は、共有結合または非共有結合であり得る。結合が共有結合である場合、それは融合タンパク質の形態であっても、化学リンカーを介したものであってもよい。他の抗体に結合した抗体フラグメントを含む多重特異性抗体の例証的な例には、四価の二重特異性抗体が含まれ、ｓｃＦｖはＩｇＧ由来のＣＨ３のＣ末端に融合される。Ｃｏｌｏｍａ  ａｎｄ  Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１９９７，１５：１５９−１６３を参照されたい。他の例には、Ｆａｂ分子が免疫グロブリンの定常領域に結合している抗体が含まれる。参照によりその全体が援用される、Ｍｉｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３，１７０：４８５４−４８６１を参照されたい。本明細書に記載されているかまたは当該技術分野で知られている任意のフラグメントを含む、任意の適切なフラグメントを使用することができる。
【０５２３】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、ＣｏｖＸ−Ｂｏｄｙを含む。ＣｏｖＸ−Ｂｏｄｙは、例えば、参照によりその全体が援用される、Ｄｏｐｐａｌａｐｕｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，２０１０，１０７：２２６１１−２２６１６に記載されている。
【０５２４】
一部の実施形態では、多重特異性抗体はＦｃａｂ抗体を含み、ここでは１つまたは複数の抗原結合ドメインがＦｃ領域に導入されている。Ｆｃａｂ抗体は、参照によりその全体が援用される、Ｗｏｚｎｉａｋ−Ｋｎｏｐｐ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．Ｄｅｓ．Ｓｅｌ．，２０１０，２３：２８９−２９７に記載されている。
【０５２５】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、ＴａｎｄＡｂ（登録商標）抗体を含む。ＴａｎｄＡｂ（登録商標）抗体は、参照によりその各々の全体が援用される、Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９９，２９３：４１−５６、及びＺｈｕｋｏｖｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２０１３，１２２：５１１６に記載されている。
【０５２６】
一部の実施形態では、多重特異性抗体はタンデムＦａｂを含む。タンデムＦａｂは、参照によりその全体が援用されるＷＯ２０１５／１０３０７２に記載されている。
【０５２７】
一部の実施形態では、多重特異性抗体はＺｙｂｏｄｙ（商標）を含む。Ｚｙｂｏｄｉｅｓ（商標）は、参照によりその全体が援用される、ＬａＦｌｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１３，５：２０８−２１８に記載されている。
【０５２８】
２．６．グリコシル化バリアント
ある特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、グリコシル化の程度を増加、減少、または排除するように改変されてもよい。ポリペプチドのグリコシル化は、典型的には「Ｎ結合型」または「Ｏ結合型」のいずれかである。
【０５２９】
「Ｎ結合型」グリコシル化は、アスパラギン残基の側鎖への炭水化物部分の結合を指す。トリペプチド配列アスパラギン−Ｘ−セリン及びアスパラギン−Ｘ−トレオニン（Ｘはプロリン以外の任意のアミノ酸）は、炭水化物部分がアスパラギン側鎖に酵素的に結合するための認識配列である。したがって、ポリペプチドにおけるこれらのトリペプチド配列のうちのいずれかの存在は、潜在的なグリコシル化部位を作り出す。
【０５３０】
「Ｏ結合型」グリコシル化は、糖Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、またはキシロースのうちの１つがヒドロキシアミノ酸、最も一般的にはセリンまたはトレオニンに結合することを指すが、５−ヒドロキシプロリンまたは５−ヒドロキシリジンも使用され得る。
【０５３１】
本明細書で提供される抗体へのまたはそこからのＮ結合型グリコシル化部位の付加または削除は、１つまたは複数の上述のトリペプチド配列が作製または除去されるようにアミノ酸配列を改変することによって達成できる。Ｏ結合型グリコシル化部位の付加または削除は、抗体の配列内または（場合によっては）抗体配列への１つまたは複数のセリンまたはトレオニン残基の付加、削除、または置換によって達成できる。
【０５３２】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、天然に存在する抗体とは異なるグリコシル化モチーフを含む。本明細書で提供される抗体において、任意の適切な天然に存在するグリコシル化モチーフを改変することができる。免疫グロブリンの構造及びグリコシル化特性は、例えば、当該技術分野で公知であり、そして例えば、参照によりその全体が援用される、Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒ  ａｎｄ  Ｃａｖａｃｉｎｉ，Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２０１０，１２５：Ｓ４１−５２において要約されている。
【０５３３】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、アスパラギン２９７（Ａｓｎ２９７）に結合するオリゴ糖が改変されたＩｇＧ１  Ｆｃ領域を含む。哺乳動物細胞によって産生される天然に存在するＩｇＧ１抗体は、典型的には、Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７へのＮ結合によって一般的に結合している分岐した二分岐オリゴ糖を含む。参照によりその全体が援用される、Ｗｒｉｇｈｔ  ｅｔ  ａｌ．，ＴＩＢＴＥＣＨ，１９９７，１５：２６−３２を参照されたい。Ａｓｎ２９７に結合したオリゴ糖には、マンノース、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース、及びシアル酸などの様々な炭水化物、ならびに二分岐オリゴ糖構造の「ステム」内のＧｌｃＮＡｃに結合したフコースが含まれる。
【０５３４】
一部の実施形態では、Ａｓｎ２９７に結合したオリゴ糖が修飾されて、ＡＤＣＣが変更された抗体が作製される。一部の実施形態では、ＡＤＣＣを改善するためにオリゴ糖が改変されている。一部の実施形態では、ＡＤＣＣを低減するためにオリゴ糖が改変されている。
【０５３５】
一部の態様では、本明細書で提供される抗体は、天然に存在するＩｇＧ１ドメインと比較して、Ａｓｎ２９７位でフコース含量が減少したＩｇＧ１ドメインを含む。そのようなＦｃドメインは改善されたＡＤＣＣを有することが知られている。参照によりその全体が援用される、Ｓｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２００２，２７７：２６７３３−２６７４０を参照されたい。一部の態様では、そのような抗体は、Ａｓｎ２９７位にフコースをいっさい含まない。フコースの量は、例えば、参照によりその全体が援用される、ＷＯ２００８／０７７５４６に記載されているような任意の適切な方法を使用して決定することができる。
【０５３６】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＧｌｃＮＡｃによって二分される抗体のＦｃ領域に結合した二分岐オリゴ糖などの二分されたオリゴ糖を含む。そのような抗体バリアントは、減少したフコシル化、及び／または改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。そのような抗体バリアントの例は、例えば、参照によりその各々の全体が援用される、ＷＯ２００３／０１１８７８、米国特許第６，６０２，６８４号、及び米国特許出願公開第２００５／０１２３５４６号に記載されている。
【０５３７】
明細書で提供される抗体に組み込まれ得る他の例示的なグリコシル化バリアントは、例えば、参照によりその各々の全体が援用される、米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８号、同第２００４／００９３６２１号、同第２００３／０１５７１０８号、同第２００３／０１１５６１４号、同第２００２／０１６４３２８号、同第２００４／００９３６２１号、同第２００４／０１３２１４０号、同第２００４／０１１０７０４号、同第２００４／０１１０２８２号、同第２００４／０１０９８６５；国際特許出願公開第２０００／６１７３９号、同第２００１／２９２４６号、同第２００３／０８５１１９号、同第２００３／０８４５７０号、同第２００５／０３５５８６号、同第２００５／０３５７７８号、同第２００５／０５３７４２号、同第２００２／０３１１４０号；Ｏｋａｚａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２００４，３３６：１２３９−１２４９；及びＹａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．，２００４，８７：６１４−６２２に記載されている。
【０５３８】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、Ｆｃ領域に結合したオリゴ糖に少なくとも１つのガラクトース残基を有するＦｃ領域を含む。そのような抗体バリアントは、改善されたＣＤＣ機能を有し得る。そのような抗体バリアントの例は、例えば、参照によりその各々の全体が援用される、ＷＯ１９９７／３００８７；ＷＯ１９９８／５８９６４；及びＷＯ１９９９／２２７６４に記載されている。
【０５３９】
脱フコシル化抗体を産生できる細胞株の例には、タンパク質のフコシル化が欠損しているＬｅｃ１３  ＣＨＯ細胞（参照によりその各々の全体が援用される、Ｒｉｐｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．，１９８６，２４９：５３３−５４５；米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８号；ＷＯ２００４／０５６３１２を参照されたい）、ならびにα−１，６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子またはＦＵＴ８ノックアウトＣＨＯ細胞などのノックアウト細胞株（参照によりその各々の全体が援用される、Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．，２００４，８７：６１４−６２２；Ｋａｎｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，２００６，９４：６８０−６８８；及びＷＯ２００３／０８５１０７を参照されたい）が含まれる。
【０５４０】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は脱グリコシル化抗体である。脱グリコシル化抗体は、当該技術分野で公知の、または本明細書に記載されている任意の方法を使用して生成することができる。一部の態様では、抗体を改変して全てのグリコシル化部位を除去することにより、脱グリコシル化抗体が生成される。一部の態様では、グリコシル化部位は抗体のＦｃ領域からのみ削除される。一部の態様では、脱グリコシル化抗体は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）などのグリコシル化ができない生物で抗体を発現させることによって、または無細胞反応混合物で抗体を発現させることによって生成される。
【０５４１】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、天然のＩｇＧ１抗体と比較して低減したエフェクター機能を有する定常領域を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体のＦｃ領域の定常領域のＦｃ受容体に対する親和性は、そのようなＦｃ受容体に対する天然ＩｇＧ１定常領域の親和性よりも低い。
【０５４２】
２．７．Ｆｃ領域のアミノ酸配列バリアント
ある特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、天然に存在するＦｃ領域と比較して、１つまたは複数のアミノ酸置換、挿入、または欠失を伴うＦｃ領域を含む。一部の態様では、そのような置換、挿入、または欠失により、安定性、グリコシル化、またはその他の特性が改変された抗体がもたらされる。一部の態様では、そのような置換、挿入、または欠失により、脱グリコシル化抗体がもたらされる。
【０５４３】
一部の態様では、本明細書で提供される抗体のＦｃ領域は、Ｆｃ受容体に対する親和性が改変された抗体、またはより免疫学的に不活性な抗体をもたらすように改変される。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体バリアントは、全てではないが、一部のエフェクター機能を有する。そのような抗体は、例えば、抗体の半減期がｉｎ  ｖｉｖｏで重要であるが、特定のエフェクター機能（例えば、補体活性化及びＡＤＣＣ）が不必要または有害である場合に有用であり得る。
【０５４４】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＦｃ領域は、ヒンジ安定化変異Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ｅのうちの１つまたは複数を含むヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域である。参照によりその全体が援用される、Ａａｌｂｅｒｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００２，１０５：９−１９を参照されたい。一部の実施形態では、ＩｇＧ４  Ｆｃ領域は、以下の変異のうちの１つまたは複数を含む：Ｅ２３３Ｐ、Ｆ２３４Ｖ、及びＬ２３５Ａ。参照によりその全体が援用される、Ａｒｍｏｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３，４０：５８５−５９３を参照されたい。一部の実施形態では、ＩｇＧ４  Ｆｃ領域はＧ２３６位に欠失を含む。
【０５４５】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＦｃ領域は、Ｆｃ受容体結合を減少させる１つまたは複数の変異を含むヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域である。一部の態様では、１つまたは複数の変異は、Ｓ２２８（例えば、Ｓ２２８Ａ）、Ｌ２３４（例えば、Ｌ２３４Ａ）、Ｌ２３５（例えば、Ｌ２３５Ａ）、Ｄ２６５（例えば、Ｄ２６５Ａ）、及びＮ２９７（例えば、Ｎ２９７Ａ）から選択される残基中に存在する。一部の態様では、抗体はＰＶＡ２３６変異を含む。ＰＶＡ２３６は、ＩｇＧ１のアミノ酸の２３３位から２３６位までのアミノ酸配列ＥＬＬＧまたはＩｇＧ４のＥＦＬＧが、ＰＶＡによって置換されることを意味する。参照によりその全体が援用される米国特許第９，１５０，６４１号を参照されたい。
【０５４６】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＦｃ領域は、参照によりその各々の全体が援用される、Ａｒｍｏｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９９，２９：２６１３−２６２４；ＷＯ１９９９／０５８５７２；及び／または英国特許出願第９８０９９５１８号に記載されている。
【０５４７】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＦｃ領域は、変異Ａ３３０Ｓ及びＰ３３１Ｓのうちの１つまたは複数を含むヒトＩｇＧ２  Ｆｃ領域である。
【０５４８】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＦｃ領域は、２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７、及び３２９から選択される１つまたは複数の位置にアミノ酸置換を有する。参照によりその全体が援用される米国特許第６，７３７，０５６号を参照されたい。そのようなＦｃ変異体には、２６５位、２６９位、２７０位、２９７位、及び３２７位のアミノ酸のうちの２つ以上で置換されたＦｃ変異体が含まれ、２６５及び２９７残基がアラニンで置換されたいわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ変異体が含まれる。参照によりその全体が援用される米国特許第７，３３２，５８１号を参照されたい。一部の実施形態では、抗体は、アミノ酸２６５位にアラニンを含む。一部の実施形態では、抗体は、アミノ酸２９７位にアラニンを含む。
【０５４９】
ある特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、Ｆｃ領域の２９８位、３３３位、及び３３４位のうちの１つまたは複数での置換など、ＡＤＣＣを改善する１つまたは複数のアミノ酸置換を有するＦｃ領域を含む。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、参照によりその全体が援用される、Ｌａｚａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，２００６，１０３：４００５−４０１０に記載されるように、２３９位、３３２位、及び３３０位での１つまたは複数のアミノ酸置換を有するＦｃ領域を含む。
【０５５０】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、Ｃ１ｑ結合及び／またはＣＤＣを改善または低下させる１つまたは複数の改変を含む。参照によりその各々の全体が援用される、米国特許第６，１９４，５５１号；ＷＯ９９／５１６４２；及びＩｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２０００，１６４：４１７８−４１８４を参照されたい。
【０５５１】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、半減期を増加させるために１つまたは複数の改変を含む。増加した半減期、及び新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への改善された結合を有する抗体は、例えば、参照によりその各々の全体が援用される、Ｈｉｎｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００６，１７６：３４６−３５６；及び米国特許出願公開第２００５／００１４９３４号に記載されている。このようなＦｃバリアントには、１つまたは複数の以下のＦｃ領域の残基に置換を有するものが含まれる：ＩｇＧの２３８、２５０、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１４、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４、４２８、及び４３４。
【０５５２】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、参照によりその各々の全体が援用される、米国特許第７，３７１，８２６号、同第５，６４８，２６０号、及び同第５，６２４，８２１号；Ｄｕｎｃａｎ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ，１９８８，３２２：７３８−７４０；ならびにＷＯ９４／２９３５１に記載されるように、１つまたは複数のＦｃ領域バリアントを含む。
【０５５３】
２．８．ピログルタミン酸
当該技術分野で知られているように、組換えタンパク質のＮ末端にあるグルタミン酸（Ｅ）とグルタミン（Ｑ）の両方が自発的に環化して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏでピログルタミン酸（ｐＥ）を形成することができる。参照によりその全体が援用される、Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１１，２８６：１１２１１−１１２１７を参照されたい。
【０５５４】
一部の実施形態では、Ｎ末端位置にｐＥ残基を有するポリペプチド配列を含む抗体が本明細書で提供される。一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、Ｎ末端残基がＱからｐＥに変換されたポリペプチド配列を含む抗体である。一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、Ｎ末端残基がＥからｐＥに変換されたポリペプチド配列を含む抗体である。
【０５５５】
２．９．システイン操作抗体バリアント
ある特定の実施形態では、本明細書で提供されるのは、抗体の１つまたは複数の残基がシステイン残基で置換されている「ｔｈｉｏＭＡｂ」としても知られるシステイン操作抗体である。特定の実施形態では、置換された残基は、抗体の溶媒がアクセス可能な部位に存在する。そのような残基をシステインで置換することにより、反応性チオール基が抗体の溶媒がアクセス可能な部位に導入され、抗体を他の部分、例えば薬物部分またはリンカー薬物部分にコンジュゲートさせて、例えばイムノコンジュゲートを作製することができる。
【０５５６】
ある特定の実施形態では、以下の残基のうちの１つまたは複数がシステインで置換されていてもよい：軽鎖のＶ２０５；重鎖Ｆｃ領域のＡ１１８；及び重鎖Ｆｃ領域のＳ４００。システイン操作抗体は、例えば、参照によりその全体が援用される米国特許第７，５２１，５４１号に記載されているように生成できる。
【０５５７】
３．抗ＴＦ抗体薬物コンジュゲート
本明細書で提供されるのは、ＴＦに特異的に結合する抗体と細胞傷害性薬剤とを含む抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）である。一部の実施形態では、細胞傷害性薬剤は抗ＴＦ抗体に直接的に連結している。一部の実施形態では、細胞傷害性薬剤は抗ＴＦ抗体に間接的に連結している。
【０５５８】
一部の実施形態では、ＡＤＣはさらにリンカーを含む。一部の実施形態では、リンカーは抗ＴＦ抗体を細胞傷害性薬剤に連結している。
【０５５９】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＣは、１の薬物抗体比（ＤＡＲ）を有する。一部の実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＣは、２のＤＡＲを有する。本明細書で提供されるＡＤＣは、３のＤＡＲを有する。本明細書で提供されるＡＤＣは、４のＤＡＲを有する。一部の実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＣは、５のＤＡＲを有する。一部の実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＣは、１〜２、１〜３、１〜４、１〜５、２〜３、２〜４、２〜５、３〜４、３〜５、４〜５、１、２、３、４、または５のＤＡＲを有する。一部の実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＣは、５を超えるＤＡＲを有する。一部の実施形態では、ＤＡＲは、ＵＶ／ｖｉｓ分光法、疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）、及び／または飛行時間検出と質量特性評価を伴う逆相液体クロマトグラフィー分離（ＲＰ−ＵＰＬＣ／質量分析）によって測定される。
【０５６０】
４．ＴＦ抗体の作製方法
４．１．ＴＦ抗原調製
本明細書で提供される抗体の単離に使用されるＴＦ抗原は、インタクトなＴＦまたはＴＦのフラグメントであってよい。ＴＦ抗原は、例えば、単離されたタンパク質または細胞の表面で発現するタンパク質の形態であってよい。
【０５６１】
一部の実施形態では、ＴＦ抗原は、天然に存在しないアミノ酸配列または翻訳後修飾を有するＴＦタンパク質などの、ＴＦの天然に存在しないバリアントである。
【０５６２】
一部の実施形態では、ＴＦ抗原は、例えば、細胞内または膜貫通配列、またはシグナル配列の除去によって短縮されている。一部の実施形態では、ＴＦ抗原はそのＣ末端でヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインまたはポリヒスチジンタグに融合されている。
【０５６３】
４．２．モノクローナル抗体を作製する方法
モノクローナル抗体は、例えば、Ｋｏｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９７５，２５６：４９５−４９７  （参照によりその全体が援用される）によって最初に記載された、ハイブリドーマ法を使用して、及び／または組換えＤＮＡによって（例えば、参照によりその全体が援用される米国特許第４，８１６，５６７号を参照されたい）、得ることができる。モノクローナル抗体はまた、例えば、ファージディスプレイライブラリーを使用して（例えば、参照によりその全体が援用される米国特許第８，２５８，０８２号を参照されたい）、または代替的に酵母ベースのライブラリーを使用して（例えば、参照によりその全体が援用される米国特許第８，６９１，７３０号を参照されたい）、得ることができる。
【０５６４】
ハイブリドーマ法では、マウス、または他の適切な宿主動物は、免疫されて免疫に使用されたタンパク質に特異的に結合する抗体を産生するか、または産生することができるリンパ球を誘発する。代替的に、リンパ球をｉｎ  ｖｉｔｒｏで免疫化できる。次いで、リンパ球を、ポリエチレングリコールなどの適切な融合剤を使用して骨髄腫細胞と融合させ、ハイブリドーマ細胞を形成する。参照によりその全体が援用される、Ｇｏｄｉｎｇ  Ｊ．Ｗ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ３ｒｄ  ｅｄ．（１９８６）  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡを参照されたい。
【０５６５】
ハイブリドーマ細胞を、好ましくは、未融合の親の骨髄腫細胞の増殖または生存を阻害する１つまたは複数の物質を含む適切な培養培地中に播種し、増殖させる。例えば、親の骨髄腫細胞が、酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴまたはＨＰＲＴ）を欠く場合、ハイブリドーマ用の培地は、典型的には、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の増殖を防ぐ物質である、ヒポキサンチン、アミノプテリン、及びチミジンを含む（ＨＡＴ培地）。
【０５６６】
有用な骨髄腫細胞は、効率的に融合し、選択された抗体産生細胞による抗体の安定した高レベルの産生をサポートし、ＨＡＴ培地の有無などの培地条件に感受性である。これらのうち、好ましい骨髄腫細胞株は、ＭＯＰ−２１及びＭＣ−１１マウス腫瘍（Ｓａｌｋ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃｅｌｌ  Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  Ｃｅｎｔｅｒ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡから入手可能）に由来するもの、ならびにＳＰ−２またはＸ６３−Ａｇ８−６５３細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤから入手可能）などのマウス骨髄腫株である。ヒト骨髄腫及びマウス−ヒトヘテロ骨髄腫細胞株もまた、ヒトモノクローナル抗体の産生について記載されている。参照によりその全体が援用される、Ｋｏｚｂｏｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９８４，１３３：３００１を参照されたい。
【０５６７】
所望の特異性、親和性、及び／または生物活性の抗体を産生するハイブリドーマ細胞の同定後、選択されたクローンは、限界希釈手順によってサブクローニングされ、標準的な方法によって増殖することができる。Ｇｏｄｉｎｇ、前出を参照されたい。この目的のために好適な培地として、例えば、Ｄ−ＭＥＭまたはＲＰＭＩ−１６４０培地が挙げられる。さらＲＰＭＩ−１６４０に、ハイブリドーマ細胞を動物中の腹水腫瘍としてｉｎ  ｖｉｖｏで増殖させることもできる。
【０５６８】
モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、従来の手順を用いて（例えば、モノクローナル抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することのできるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）容易に単離してシーケンシングすることができる。したがって、ハイブリドーマ細胞は、所望の特性を有する抗体をコードするＤＮＡの有用な供給源として役立ち得る。単離したら、ＤＮＡを発現ベクターに入れ、細菌（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ）、酵母（例えば、サッカロミセスまたはピチア属種）、ＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、または他の方法では抗体を産生しない骨髄腫細胞などの宿主細胞にトランスフェクトし、モノクローナル抗体を産生する。
【０５６９】
４．３．キメラ抗体を作製する方法
キメラ抗体を作製する例示的な方法は、例えば、参照によりその各々の全体が援用される米国特許第４，８１６，５６７号、及びＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８４，８１：６８５１−６８５５に記載されている。一部の実施形態では、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、またはサルなどの非ヒト霊長類に由来する可変領域）をヒト定常領域と組み合わせるために組換え技術を使用することによって作製される。
【０５７０】
４．４．ヒト化抗体を作製する方法
ヒト化抗体は、非ヒトモノクローナル抗体の構造部分の大部分または全てを対応するヒト抗体配列で置き換えることにより生成できる。その結果、抗原特異的可変、またはＣＤＲのみが非ヒト配列からなるハイブリッド分子が生成される。ヒト化抗体を得る方法には、例えば、参照によりその各々の全体が援用されるＷｉｎｔｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ，１９９１，３４９：２９３−２９９；Ｒａｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９９８，９５：８９１０−８９１５；Ｓｔｅｉｎｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０００，２７５：３６０７３−３６０７８；Ｑｕｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９８９，８６：１００２９−１００３３；ならびに米国特許第５，５８５，０８９号、同第５，６９３，７６１号、同第５，６９３，７６２号、及び同第６，１８０，３７０号に記載されている。
【０５７１】
４．５．ヒト抗体を作製する方法
ヒト抗体は、例えば、トランスジェニック動物（例えば、ヒト化マウス）を使用することにより、当該技術分野で知られている様々な技術によって生成することができる。例えば、参照によりその各々の全体が援用される、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９９３，９０：２５５１；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９９３，３６２：２５５−２５８；Ｂｒｕｇｇｅｒｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｙｅａｒ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏ．，１９９３，７：３３；ならびに米国特許第５，５９１，６６９号、同第５，５８９，３６９号、及び同第５，５４５，８０７号を参照されたい。ヒト抗体はまた、ファージディスプレイライブラリーから誘導することもできる（例えば、参照によりその各々の全体が援用される、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９１，２２７：３８１−３８８；Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９１，２２２：５８１−５９７；ならびに米国特許第５，５６５，３３２号及び同第５，５７３，９０５号を参照されたい）。ヒト抗体はまた、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで活性化されたＢ細胞によって生成することもできる（例えば、参照によりその各々の全体が援用される、米国特許第５，５６７，６１０号及び同第５，２２９，２７５号を参照されたい）。ヒト抗体は、酵母ベースのライブラリーに由来することもできる（例えば、参照によりその全体が援用される米国特許第８，６９１，７３０号を参照されたい。
【０５７２】
４．６．抗体フラグメントを作製する方法
本明細書で提供される抗体フラグメントは、本明細書に記載される例示的な方法または当該技術分野で公知の方法を含む、任意の適切な方法によって作製され得る。適切な方法には、組換え技術及び抗体全体のタンパク質分解消化が含まれる。例示的な抗体フラグメントを作製する方法は、例えば、参照によりその全体が援用されるＨｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．，２００３，９：１２９−１３４に記載されている。ｓｃＦｖ抗体を作製する方法は、例えば、参照によりその各々の全体が援用される、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ  ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９−３１５（１９９４）；ＷＯ９３／１６１８５；ならびに米国特許第５，５７１，８９４号及び同第５，５８７，４５８号に記載されている。
【０５７３】
４．７．代替足場の作製方法
本明細書で提供される代替足場は、本明細書に記載される例示的な方法または当該技術分野で公知の方法を含む、任意の適切な方法によって作製され得る。例えば、Ａｄｎｅｃｔｉｎｓ（商標）を調製する方法は、参照によりその全体が援用されるＥｍａｎｕｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１１，３：３８−４８に記載されている。ｉＭａｂを調製する方法は、参照によりその全体が援用される、米国特許出願公開第２００３／０２１５９１４号に記載されている。Ａｎｔｉｃａｌｉｎｓ（登録商標）を調製する方法は、参照によりその全体が援用されるＶｏｇｔ  ａｎｄ  Ｓｋｅｒｒａ，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２００４，５：１９１−１９９に記載されている。Ｋｕｎｉｔｚドメインを調製する方法は、参照によりその全体が援用されるＷａｇｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．＆  Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．，１９９２，１８６：１１８−１１４５に記載されている。チオレドキシンペプチドアプタマーを調製する方法は、参照によりその全体が援用されるＧｅｙｅｒ  ａｎｄ  Ｂｒｅｎｔ，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．，２０００，３２８：１７１−２０８に提供されている。アフィボディを調製する方法は、参照によりその全体が援用されるＦｅｒｎａｎｄｅｚ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２００４，１５：３６４−３７３に提供されている。ＤＡＲＰｉｎを調製する方法は、参照によりその全体が援用されるＺａｈｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２００７，３６９：１０１５−１０２８に提供されている。Ａｆｆｉｌｉｎを調製する方法は、参照によりその全体が援用されるＥｂｅｒｓｂａｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２００７，３７２：１７２−１８５に提供されている。Ｔｅｔｒａｎｅｃｔｉｎを調製する方法は、参照によりその全体が援用されるＧｒａｖｅｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０００，２７５：３７３９０−３７３９６に提供されている。Ａｖｉｍｅｒを調製する方法は、参照によりその全体が援用されるＮａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２００５，２３：１５５６−１５６１に提供されている。Ｆｙｎｏｍｅｒを調製する方法は、参照によりその全体が援用されるＳｉｌａｃｃｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１４，２８９：１４３９２−１４３９８に提供されている。
【０５７４】
代替足場のさらなる情報については、参照によりその各々の全体が援用される、Ｂｉｎｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，２００５  ２３：１２５７−１２６８；及びＳｋｅｒｒａ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎ．ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２００７  １８：２９５−３０４に提供されている。
【０５７５】
４．８．多重特異性抗体を作製する方法
本明細書で提供される多重特異性抗体は、本明細書に記載される例示的な方法または当該技術分野で公知の方法を含む、任意の適切な方法によって作製され得る。共通軽鎖抗体を作製する方法は、参照によりその全体が援用される、Ｍｅｒｃｈａｎｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１９９８，１６：６７７−６８１に記載されている。四価二重特異性抗体を作製する方法は、参照によりその全体が援用される、Ｃｏｌｏｍａ  ａｎｄ  Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１９９７，１５：１５９−１６３に記載されている。ハイブリッド免疫グロブリンを作製する方法は、参照によりその各々の全体が援用される、Ｍｉｌｓｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ，１９８３，３０５：５３７−５４０；及びＳｔａｅｒｚ  ａｎｄ  Ｂｅｖａｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８６，８３：１４５３−１４５７に記載されている。ノブ−イントゥー−ホールを有する免疫グロブリンを作製する方法は、参照によりその全体が援用される、米国特許第５，７３１，１６８号に記載されている。静電的改変を有する免疫グロブリンを作製する方法は、参照によりその全体が援用される、ＷＯ  ２００９／０８９００４に提供されている。二重特異性一本鎖抗体を作製する方法は、参照によりその各々の全体が援用される、Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，１９９１，１０：３６５５−３６５９；及びＧｒｕｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９４，１５２：５３６８−５３７４に記載されている。そのリンカー長が変化し得る一本鎖抗体を作製する方法は、参照によりその各々の全体が援用される、米国特許第４，９４６，７７８号及び同第５，１３２，４０５号に記載されている。ディアボディを作製する方法は、参照によりその全体が援用されるＨｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９３，９０：６４４４−６４４８に記載されている。トリアボディを作製する方法は、参照によりその全体が援用されるＴｏｄｏｒｏｖｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２００１，２４８：４７−６６に記載されている。三重特異性Ｆ（ａｂ’）３誘導体を作製する方法は、参照によりその全体が援用されるＴｕｔｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９１，１４７：６０−６９に記載されている。架橋抗体を作製する方法は、参照によりその各々の全体が援用される米国特許第４，６７６，９８０号；Ｂｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８５，２２９：８１−８３；Ｓｔａｅｒｚ，ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ，１９８５，３１４：６２８−６３１；及びＥＰ０４５３０８２に記載されている。ロイシンジッパーによって組み立てられる抗原結合ドメインを作製する方法は、参照によりその全体が援用されるＫｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９２，１４８：１５４７−１５５３に記載されている。ＤＮＬアプローチによって抗体を作製する方法は、参照によりその各々の全体が援用される、米国特許第７，５２１，０５６号；同第７，５５０，１４３号；同第７，５３４，８６６号；及び同第７，５２７，７８７号に記載されている。抗体のハイブリッドを作製する方法は、例えばそのような抗体について、参照によりその全体が援用されるＷＯ９３／０８８２９に記載されている。ＤＡＦ抗体を作製する方法は、参照によりその全体が援用される、米国特許出願公開第２００８／００６９８２０号に記載されている。還元及び酸化を介して抗体を作製する方法は、参照によりその全体が援用されるＣａｒｌｒｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，２０１１，６：ｅ２２５３３に記載されている。ＤＶＤ−Ｉｇ（商標）を作製する方法は、参照によりその全体が援用される、米国特許第７，６１２，１８１号に記載されている。ＤＡＲＴ（商標）を作製する方法は、参照によりその全体が援用される、Ｍｏｏｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２０１１，１１７：４５４−４５１に記載されている。ＤｕｏＢｏｄｉｅｓ（登録商標）を作製する方法は、参照によりその各々の全体が援用される、Ｌａｂｒｉｊｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，２０１３，１１０：５１４５−５１５０；Ｇｒａｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１３，５：９６２−９７２；及びＬａｂｒｉｊｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，２０１４，９：２４５０−２４６３に記載されている。ＩｇＧ由来のＣＨ３のＣ末端に融合されたｓｃＦｖを含む抗体を作製する方法は、参照によりその全体が援用される、Ｃｏｌｏｍａ  ａｎｄ  Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１９９７，１５：１５９−１６３に記載されている。Ｆａｂ分子が免疫グロブリンの定常領域に結合している抗体を作製する方法は、参照によりその全体が援用される、Ｍｉｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３，１７０：４８５４−４８６１に記載されている。ＣｏｖＸ−Ｂｏｄｙを作製する方法は、参照によりその全体が援用されるＤｏｐｐａｌａｐｕｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，２０１０，１０７：２２６１１−２２６１６に記載されている。Ｆｃａｂ抗体を作製する方法は、参照によりその全体が援用される、Ｗｏｚｎｉａｋ−Ｋｎｏｐｐ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．Ｄｅｓ．Ｓｅｌ．，２０１０，２３：２８９−２９７に記載されている。ＴａｎｄＡｂ（登録商標）抗体を作製する方法は、参照によりその各々の全体が援用される、Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９９，２９３：４１−５６、及びＺｈｕｋｏｖｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２０１３，１２２：５１１６に記載されている。タンデムＦａｂを作製する方法は、参照によりその全体が援用されるＷＯ２０１５／１０３０７２に記載されている。Ｚｙｂｏｄｉｅｓ（商標）を作製する方法は、参照によりその全体が援用される、ＬａＦｌｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１３，５：２０８−２１８に記載されている。
【０５７６】
４．９．バリアントを作製する方法
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、例えば、ファージディスプレイに基づく親和性成熟技術を使用して生成され得る、親抗体の親和性成熟バリアントである。簡潔に述べると、１つまたは複数のＣＤＲ残基を変異させ、バリアント抗体またはその一部をファージ上に提示し、親和性についてスクリーニングすることができる。このような改変は、ＣＤＲ「ホットスポット」、または体細胞成熟プロセス中に高頻度で変異を受けるコドンによってコードされる残基（参照によりその全体が援用される、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２００８，２０７：１７９−１９６を参照されたい）、及び／もしくは抗原と接触する残基で行われ得る。
【０５７７】
エラープローンＰＣＲ、鎖シャッフリング、及びトリヌクレオチド特異的変異導入（ＴＲＩＭ）などのオリゴヌクレオチド特異的変異導入を含む、抗体をコードするポリヌクレオチド配列（複数可）に可変性を導入するために、任意の適切な方法を使用できる。一部の態様では、一部のＣＤＲ残基（他えば、一度に４〜６残基）が無作為化される。抗原結合に関与するＣＤＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング変異導入またはモデリングを用いて特異的に同定され得る。ＣＤＲーＨ３及びＣＤＲＬ３は、変異のために特に標的化されることが多い。
【０５７８】
可変領域及び／またはＣＤＲへの多様性の導入を使用して、二次ライブラリーを生成することができる。次いで、二次ライブラリーをスクリーニングして、改善された親和性を有する抗体バリアントを同定する。二次ライブラリーを構築及び再選択することによる親和性成熟は、例えば、参照によりその全体が援用される、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００１，１７８：１−３７に記載されている。
【０５７９】
４．１０．ベクター、宿主細胞、及び組換え方法
ＴＦ抗体をコードする単離された核酸、核酸を含むベクター、ならびにベクター及び核酸を含む宿主細胞、ならびに抗体を産生するための組換え技術も提供される。
【０５８０】
抗体の組換え産生について、それをコードする核酸（複数可）は、さらなるクローニング（すなわち、ＤＮＡの増幅）、または発現のために単離して複製可能なベクターに挿入することができる。一部の態様では、核酸は、例えば、参照によりその全体が援用される、米国特許第５，２０４，２４４号に記載されているように、相同組換えによって生成されてもよい。
【０５８１】
多くの種々のベクターが当該技術分野において公知である。ベクター成分は、例えば、参照によりその全体が援用される、米国特許第５，５３４，６１５号に記載されるように、一般に、以下のうちの１つまたは複数を含む：シグナル配列、複製起点、１つまたは複数のマーカー遺伝子、エンハンサーエレメント、プロモーター、及び転写終結配列。
【０５８２】
適切な宿主細胞の例示的な例を以下に提供する。これらの宿主細胞は限定を意味するものではなく、任意の適切な宿主細胞を使用して、本明細書で提供される抗体を産生することができる。
【０５８３】
適切な宿主細胞には、任意の原核細胞（例えば、細菌）、下等真核細胞（例えば、酵母）、または高等真核細胞（例えば、哺乳動物）が含まれる。適切な原核生物には、グラム陰性またはグラム陽性生物などの真正細菌、例えば、エシェリキア属（Ｅ．ｃｏｌｉ）、エンテロバクター属、エルウィニア属、クレブシエラ属、プロテウス属、サルモネラ属（Ｓ．ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）、セラチア属（Ｓ．ｍａｒｃｅｓｃａｎｓ）、シゲラ属、バシラス属（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ及びＢ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、シュードモナス属（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、ならびにストレプトマイセス属が含まれる。１つの有用なＥ．ｃｏｌｉクローニング宿主はＥ．ｃｏｌｉ  ２９４であるが、Ｅ．ｃｏｌｉ  Ｂ、Ｅ．ｃｏｌｉ  Ｘ１７７６、及びＥ．ｃｏｌｉ  Ｗ３１１０などの他の系統もまた適切である。
【０５８４】
原核生物に加えて、糸状菌または酵母などの真核微生物も、ＴＦ抗体をコードするベクターの適切なクローニングまたは発現宿主である。Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、または一般的なパン酵母は、一般的に使用されている下等真核生物の宿主微生物である。しかしながら、Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｐｏｍｂｅ、クリベロミセス属（Ｋ．ｌａｃｔｉｓ、Ｋ．ｆｒａｇｉｌｉｓ、Ｋ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ、Ｋ．ｗｉｃｋｅｒａｍｉｉ、Ｋ．ｗａｌｔｉｉ、Ｋ．ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｒｕｍ、Ｋ．ｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｓ、及びＫ．ｍａｒｘｉａｎｕｓ）、ヤロウイア属、Ｐｉｃｈｉａ  ｐａｓｔｏｒｉｓ、カンジダ属（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｉａ、Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ  ｃｒａｓｓａ、シュワンニオミセス（Ｓｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓ）属（Ｓ．ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ）、ならびに糸状菌、例えば、ペニシリウム属、トリポクラディウム属、ならびにアスペルギルス属（Ａ．ｎｉｄｕｌａｎｓ及びＡ．ｎｉｇｅｒ）などの他の多くの属、種、及び系統が利用可能であり、有用である。
【０５８５】
有用な哺乳動物宿主細胞には、ＣＯＳ−７細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）、マウスセルトリ細胞、アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ−７６）などが含まれる。
【０５８６】
本発明のＴＦ抗体を産生するために使用される宿主細胞は、様々な培地で培養できる。例えば、Ｈａｍ’ｓ  Ｆ１０、基礎培地（ＭＥＭ）、ＲＰＭＩ−１６４０、ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）などの市販の培地は、宿主細胞の培養に適している。さらに、Ｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚ．，１９７９，５８：４４；Ｂａｒｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８０，１０２：２５５；、ならびに米国特許第４，７６７，７０４号、同第４，６５７，８６６号、同第４，９２７，７６２号、同第４，５６０，６５５号、及び同第５，１２２，４６９号；またはＷＯ９０／０３４３０及びＷＯ８７／００１９５に記載されている培地のうちの任意のものを使用できる。前述の参照文献の各々は、参照によりその全体を援用する。
【０５８７】
これらの培地はいずれも、必要に応じて、ホルモン及び／または他の増殖因子（インスリン、トランスフェリン、もしくは上皮細胞増殖因子など）、塩類（塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、及びリン酸など）、緩衝液（ＨＥＰＥＳなど）、ヌクレオチド（アデノシン及びチミジンなど）、抗生物質、微量元素（通常、マイクロモル範囲の最終濃度で存在する無機化合物として定義される）、ならびにグルコースまたは同等のエネルギー源を補充できる。任意の他の必要なサプリメントも、当業者に知られているであろう適切な濃度で含まれ得る。
【０５８８】
温度、ｐＨなどのような培養条件は、発現のために選択された宿主細胞で以前に使用されたものであり、当業者には明らかであろう。
【０５８９】
組換え技術を使用する場合、抗体は細胞内、ペリプラズム空間で産生されるか、または培地に直接分泌される。抗体が細胞内で産生される場合、最初のステップとして、宿主細胞または溶解フラグメントのいずれかである粒子状残屑が、例えば遠心分離または限外濾過によって除去される。例えば、Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（参照によりその全体が援用される、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１９９２，１０：１６３−１６７）は、Ｅ．ｃｏｌｉのペリプラズム空間に分泌される抗体を単離するための手順を記載している。簡潔に述べると、細胞ペーストは、酢酸ナトリウム（ｐＨ３．５）、ＥＤＴＡ、及びフェニルメチルスルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）の存在下で約３０分かけて解凍される。細胞残屑は遠心分離により除去することができる。
【０５９０】
一部の実施形態では、抗体は無細胞系において産生される。一部の態様では、無細胞系は、参照によりその全体が援用される、Ｙｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１２，４：２１７−２２５に記載されているような、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ転写及び翻訳系である。一部の態様では、無細胞系は、真核細胞由来または原核細胞由来の無細胞抽出物を利用する。一部の態様では、原核細胞はＥ．ｃｏｌｉである。抗体の無細胞発現は、例えば、抗体が細胞内に不溶性凝集物として蓄積する場合、またはペリプラズム発現からの収量が低い場合に有用であり得る。
【０５９１】
抗体が培地に分泌される場合、そのような発現系からの上清は、通常、最初に市販のタンパク質濃縮フィルター、例えばＡｍｉｃｏｎ（登録商標）またはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ（登録商標）Ｐｅｌｌｃｏｎ（登録商標）限外濾過ユニットを使用して濃縮される。ＰＭＳＦなどのプロテアーゼ阻害剤は、タンパク質分解を阻害するために前述のステップのいずれかに含まれてもよく、抗生物質は、外来性汚染物質の増殖を防ぐために含まれてもよい。
【０５９２】
細胞から調製された抗体組成物は、例えば、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、及びアフィニティークロマトグラフィーを用いて精製でき、ここでアフィニティークロマトグラフィーが特に有用な精製技術である。親和性リガンドとしてのプロテインＡの適合性は、抗体中に存在する任意の免疫グロブリンＦｃドメインの種及びアイソタイプに依存する。プロテインＡは、ヒトγ１、γ２、またはγ４重鎖を含む抗体の精製に使用できる（参照によりその全体が援用される、Ｌｉｎｄｍａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．，１９８３，６２：１−１３）。プロテインＧは、全てのマウスアイソタイプ及びヒトγ３に有用である（参照によりその全体が援用される、Ｇｕｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，１９８６，５：１５６７−１５７５）。
【０５９３】
親和性リガンドが付着するマトリックスは、ほとんどの場合はアガロースであるが、他のマトリックスも利用可能である。制御細孔ガラスまたはポリ（スチレンジビニル）ベンゼン等の機械的に安定なマトリックスは、アガロースで達成され得るよりも速い流速及び短い処理時間を可能にする。抗体がＣＨ３ドメインを含む場合、ＢａｋｅｒＢｏｎｄ  ＡＢＸ（登録商標）樹脂が精製に有用である。
【０５９４】
イオン交換カラムでの分画、エタノール沈殿、逆相ＨＰＬＣ、シリカでのクロマトグラフィー、ヘパリンＳｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標）でのクロマトグラフィー、クロマトフォーカシング、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、及び硫酸アンモニウム沈殿など、タンパク質精製の他の技法も利用でき、当業者によって適用され得る。
【０５９５】
任意の予備精製ステップ（複数可）に続いて、対象の抗体及び混入物を含む混合物を、約２．５〜約４．５の間のｐＨで、一般に低塩濃度（例えば約０〜約０．２５Ｍ塩）の溶離緩衝液を用いる低ｐＨ疎水性相互作用クロマトグラフィーに供することができる。
【０５９６】
５．細胞傷害性薬剤
一部の実施形態では、本明細書において提供されるＡＤＣは細胞傷害性薬剤を含む。本明細書で提供される細胞傷害性薬剤は、当該技術分野で公知の様々な抗腫瘍剤または抗がん剤を含む。一部の実施形態では、細胞傷害性薬剤は、がん細胞の破壊を引き起こす。一部の実施形態では、細胞傷害性薬剤は、がん細胞の増殖または増殖を阻害する。
【０５９７】
適切な細胞傷害性薬剤には、抗血管新生剤、アポトーシス促進剤、抗有糸分裂剤、抗キナーゼ剤、アルキル化剤、ホルモン、ホルモンアゴニスト、ホルモンアンタゴニスト、ケモカイン、薬物、プロドラッグ、毒素、酵素、代謝拮抗剤、抗生物質、アルカロイド、及び放射性同位元素が含まれる。
【０５９８】
一部の実施形態では、細胞傷害性薬剤は、カリケアマイシン、カンプトテシン、カルボプラチン、イリノテカン、ＳＮ−３８、カルボプラチン、カンプトテカン、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ドセタキセル、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ドキソルビシン、エトポシド、イダルビシン、トポテカン、ビンカアルカロイド、メイタンシノイド、メイタンシノイド類似体、ピロロベンゾジアゼピン、タキソイド、デュオカルマイシン、ドラスタチン、オーリスタチン及びそれらの誘導体のうちの少なくとも１つを含む。ある特定の実施形態では、細胞傷害性薬剤は、モノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）である。
【０５９９】
一部の実施形態では、細胞傷害性薬剤は、放射性同位元素、金属キレート剤、酵素、蛍光化合物、生物発光化合物、または化学発光化合物などの診断薬である。
【０６００】
一部の実施形態では、細胞傷害性薬剤は、例えば、ＸＭＴ−１２６７などの改善された安全性プロファイルの細胞傷害性ペイロード、及びＴｒａｉｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ，２０１８，１８１：１２６−１４２に記載されているような他の細胞傷害性ペイロードである。
【０６０１】
６．リンカー
一部の実施形態では、本明細書において提供されるＡＤＣはリンカーを含む。一部の実施形態では、非結合リンカーは２つの反応性末端、抗体コンジュゲーション反応性末端及び細胞傷害性薬剤コンジュゲーション反応性末端を含む。リンカーの抗体コンジュゲーション反応性末端は、抗体のシステインチオールまたはリジンアミン基、通常は二重結合などのチオール反応基、クロロ、ブロモ、もしくはヨードなどの脱離基、Ｒ−スルファニル基もしくはスルホニル基、またはカルボキシル基などのアミン反応性基を介して抗体にコンジュゲートできる。リンカーの細胞傷害性薬剤コンジュゲーション反応性末端は、サイトトキシン上の塩基性アミンまたはカルボキシル基、通常はカルボキシル基または塩基性アミン基とのアミド結合の形成を通じて細胞傷害性薬剤にコンジュゲートできる。
【０６０２】
一部の実施形態では、リンカーはカテプシン切断不可能なリンカーである。一部の実施形態では、リンカーは切断可能なリンカーである。一部の実施形態では、細胞傷害性薬剤がＡＤＣから細胞内に放出される。
【０６０３】
ＡＤＣの適切なリンカーには、不安定なリンカー、酸に不安定なリンカー（例えば、ヒドラゾンリンカー）、光に不安定なリンカー、荷電リンカー、ジスルフィド含有リンカー、ペプチダーゼ感受性リンカー（例えば、シトルリン−バリンまたはフェニルアラニン−リジンなどのバリン及び／またはシトルリンなどのアミノ酸を含むペプチドリンカー）、β−グルクロニドリンカー（例えば、Ｇｒａａｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ  Ｐｈａｒｍ  Ｄｅｓ，２００２，８：１３９１−１４０３を参照されたい）、ジメチルリンカー（例えば、Ｃｈａｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９２，５２：１２７−１３１；米国特許第５，２０８，０２０号を参照されたい）、チオ−エーテルリンカー、または親水性リンカー（例えば、Ｋｏｖｔｕｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２０１０，７０：２５２８−２５３７を参照されたい）が含まれる。ある特定の実施形態では、細胞傷害性薬剤は、バリン−シトルリン（ｖｃ）リンカーを使用して抗体にコンジュゲートされる。
【０６０４】
７．抗体薬物コンジュゲートを作製する方法
本明細書で提供される抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）は、ＢＭＰＳ、ＥＭＣＳ、ＧＭＢＳ、ＨＢＶＳ、ＬＣ−ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＭＰＢＨ、ＳＢＡＰ、ＳＩＡ、ＳＩＡＢ、ＳＭＣＣ、ＳＭＢＰ、ＳＭＰＨ、スルホ−ＥＭＣＳ、スルホ−ＧＭＢＳ、スルホ−ＫＭＵＳ、スルホ−ＭＢＳ、スルホＳＩＡＢ、スルホ−ＳＭＣＣ、及びスルホ−ＳＭＰＢ、及びＳＶＳＢ（スクシンイミジル−（４−ビニルスルホン）ベンゾエート））などの様々な二機能性タンパク質カップリング剤を使用して作製できる。例えば、リシン免疫毒素は、Ｖｉｔｅｔｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８７，２３８：１０９８に記載されるように調製することができる。さらに、ＡＤＣは、当該技術分野、例えば、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，２ｎｄ  Ｅｄ．，Ｇ．Ｔ．Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，ｅｄ．，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，２００８に開示されているような任意の適切な方法を使用して調製することができる。
【０６０５】
一部の実施形態では、ＡＤＣは部位特異的コンジュゲーション技法で作製され、均一な薬物ローディングをもたらし、抗原結合または薬物動態が変動したＡＤＣサブポピュレーションを回避する。一部の実施形態では、重鎖と軽鎖の位置にシステイン置換を含む「チオマブ」は、免疫グロブリンの折りたたみと組み立てを妨害せず、抗原結合を変更しない反応性チオール基を提供するように設計されている（Ｊｕｎｕｔｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．，２００８，３３２：４１−５２；Ｊｕｎｕｔｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，２００８，２６：９２５−９３２）。一部の実施形態では、セレノシステインは、終止からセレノシステイン挿入までに停止コドンＵＧＡを再コード化することにより、抗体配列に共翻訳的に挿入され、他の天然アミノ酸の存在下でセレノシステインの求核セレノールグループでの部位特異的共有コンジュゲーションを可能にする（例えば、Ｈｏｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，２００８，１０５：１２４５１−１２４５６；Ｈｏｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００９，４８（５０）：１２０４７−１２０５７を参照されたい）。ある特定の実施形態では、ＡＤＣはＢｅｈｒｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍ，２０１５，１２：３９８６−９８に記載されているように合成された。
【０６０６】
８．アッセイ
当該技術分野で知られている様々なアッセイを使用して、本明細書で提供される抗ＴＦ抗体及び抗ＴＦ  ＡＤＣを同定及び特徴付けることができる。
【０６０７】
８．１．結合、競合、エピトープマッピングアッセイ
本明細書で提供される抗体の特異的抗原結合活性は、本開示のいずこかに記載するように、ＳＰＲ、ＢＬＩ、ＲＩＡ、及びＭＳＤ−ＳＥＴの使用を含む、任意の適切な方法によって評価することができる。さらに、抗原結合活性はＥＬＩＳＡアッセイ及びウエスタンブロットアッセイによって評価することができる。
【０６０８】
２つの抗体、または抗体と別の分子（例えば、ＴＦの１つまたは複数のリガンド）の間の競合を測定するためのアッセイは、本開示のいずこか、及び、例えば、参照によりその全体が援用されるＨａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  ｃｈ．１４，１９８８，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙに記載されている。
【０６０９】
本明細書で提供される抗体が結合するエピトープをマッピングするためのアッセイは、例えば、参照によりその全体が援用される、Ｍｏｒｒｉｓ  “Ｅｐｉｔｏｐｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，”  ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｖｏｌ．６６，１９９６，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．に記載されている。一部の実施形態では、エピトープはペプチド競合によって決定される。一部の実施形態では、エピトープは質量分析によって決定される。一部の実施形態では、エピトープは結晶学によって決定される。
【０６１０】
８．２．トロンビン生成、ＦＸａ変換、及びＴＦシグナル伝達アッセイ
本明細書で提供される抗体の存在下でのトロンビン生成は、本開示のいずこかに記載されているように、トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）によって決定することができる。
【０６１１】
本明細書で提供される抗体の存在下でＦＸａ変換を測定するためのアッセイは、本開示のいずこかに記載されている。
【０６１２】
ＴＦシグナル伝達の阻害は、ＩＬ８及びＧＭ−ＣＳＦなどのＴＦシグナル伝達によって調節されるサイトカインの産生を測定することによって決定できる。ＩＬ８及び／またはＧＭ−ＣＳＦレベルを決定するためのアッセイは、本開示のいずこか、及び、例えば、Ｈｊｏｒｔｏｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２００４，１０３：３０２９−３０３７に提供されている。
【０６１３】
８．３．エフェクター機能のアッセイ
本明細書で提供される抗体による処理後のエフェクター機能は、参照によりその各々の全体が援用される、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９１，９：４５７−４９２；米国特許第５，５００，３６２，５，８２１，３３７号；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８６，８３：７０５９−７０６３；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８５，８２：１４９９−１５０２；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１９８７，１６６：１３５１−１３６１；Ｃｌｙｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９８，９５：６５２−６５６；ＷＯ２００６／０２９８７９；ＷＯ２００５／１００４０２；Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，１９９６，２０２：１６３−１７１；Ｃｒａｇｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２００３，１０１：１０４５−１０５２；Ｃｒａｇｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｌｏｏｄ，２００４，１０３：２７３８−２７４３；及びＰｅｔｋｏｖａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ’ｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００６，１８：１７５９−１７６９に記載されているものを含む、当該技術分野で公知の様々なｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏアッセイを使用して評価することができる。
【０６１４】
８．４．細胞傷害性アッセイ及びＩｎ  Ｖｉｖｏ研究
本明細書で提供される抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）の細胞傷害性を評価するためのアッセイは、本開示のいずこかに記載されている。
【０６１５】
本明細書で提供されるＡＤＣのｉｎ  ｖｉｖｏ効力を評価するための免疫不全マウスにおける異種移植片研究は、本開示のいずこかに記載されている。
【０６１６】
ＡＤＣのｉｎ  ｖｉｖｏ効力を評価するための免疫適格マウスにおける同系研究は、本開示のいずこかに記載されている。
【０６１７】
８．５．免疫組織化学（ＩＨＣ）アッセイ
患者試料におけるＴＦ発現を評価するための免疫組織化学（ＩＨＣ）アッセイは、本開示のいずこかに記載されている。
【０６１８】
８．６．キメラコンストラクトマッピング及びエピトープビニングアッセイ
本明細書で提供される抗ヒトＴＦ抗体間のエピトープ結合の相違は、本開示のいずこかに記載されるように、キメラＴＦコンストラクトマッピング実験及びエピトープビニングアッセイによって決定され得る。
【０６１９】
９．医薬組成物
本明細書で提供される抗体またはＡＤＣは、任意の適切な医薬組成物に製剤化され、任意の適切な投与経路によって投与され得る。適切な投与経路には、硝子体内、動脈内、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、鼻腔内、非経口、肺、及び皮下経路が含まれるが、これらに限定されない。
【０６２０】
医薬組成物は、１つまたは複数の医薬賦形剤を含み得る。任意の適切な医薬賦形剤を使用することができ、当業者は適切な医薬賦形剤を選択することができる。したがって、以下に提供される医薬賦形剤は、例示的であり、限定的ではないことが意図されている。追加の医薬品添加剤には、例えば、参照によりその全体が援用される、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，Ｒｏｗｅ  ｅｔ  ａｌ．（Ｅｄｓ．）  ６ｔｈ  Ｅｄ．（２００９）に記載されているものが含まれる。
【０６２１】
９．１．非経口剤形
ある特定の実施形態では、ここに提供される抗体またはＡＤＣは非経口剤形として製剤化される。非経口剤形は、皮下、静脈内（注入及びボーラス注射を含む）、筋肉内、及び動脈内を含むがこれらに限定されない様々な経路によって対象に投与することができる。それらの投与は通常、汚染物質に対する対象の自然な防御を回避するため、非経口剤形は、通常、無菌であるか、または対象への投与前に滅菌することができる。非経口剤形の例には、注射の準備ができている溶液、注射用の薬学的に許容されるビヒクルに溶解または懸濁する準備ができている乾燥（例えば、凍結乾燥）製品、注射の準備ができている懸濁液、及び乳濁液が含まれるが、これらに限定されない。
【０６２２】
１０．投与量及び単位剤形
ヒトの治療では、予防的または治療的な治療法、及び治療される対象に固有の年齢、体重、状態、その他の要因に応じて、医師が最も適切と考える薬量を決定する。
【０６２３】
ある特定の実施形態では、本明細書で提供される組成物は、医薬組成物または単回単位剤形である。本明細書で提供される医薬組成物及び単回単位剤形は、予防的または治療的有効量の１つまたは複数の予防的または治療的抗体またはＡＤＣを含む。
【０６２４】
障害またはその１つまたは複数の症状の予防または治療に効果的である抗体／ＡＤＣまたは組成物の量は、疾患または状態の性質及び重症度、ならびに抗体／ＡＤＣが投与される経路によって変動し得る。頻度及び投与量はまた、投与される特定の治療法（例えば、治療剤または予防剤）、障害、疾患、または状態の重症度、投与経路、ならびに対象の年齢、体重、応答性、過去の病歴に応じて、各対象に特有の要因によって異なり得る。有効量は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたは動物モデル試験系から得られた用量反応曲線から推定することができる。
【０６２５】
当業者には容易に分かるように、異なる治療的有効量は、異なる疾患及び状態に適用可能であり得る。同様に、そのような障害を予防、管理、治療、または改善するのに十分であるが、本明細書で提供される抗体またはＡＤＣに関連する副作用を引き起こすのに不十分、またはそれを軽減するのに十分な量も、本明細書で提供される投薬量及び投与頻度スケジュールに包含される。さらに、対象が本明細書で提供される組成物の複数回の投与量を投与される場合、投与量の全てが同じである必要はない。例えば、対象に投与される投与量は、組成物の予防効果または治療効果を改善するために増加され得るか、または特定の対象が経験している１つまたは複数の副作用を低減するために減少され得る。
【０６２６】
本開示のいずこかでより詳細に論じられるように、本明細書で提供される抗体またはＡＤＣは、任意選択で、疾患または障害を予防または治療するのに有用な１つ以上または複数の追加の薬剤と共に投与され得る。そのような追加の薬剤の有効量は、製剤中に存在するＡＤＣの量、障害または治療の種類、及び当該技術分野で公知のまたは本明細書に記載の他の要因に依存し得る。
【０６２７】
１１．治療用途
治療用途では、本発明の抗体またはＡＤＣは、当該技術分野で公知のもの及び上述したものなどの薬学的に許容される剤形で哺乳動物、一般にヒトに投与される。例えば、本発明の抗体またはＡＤＣは、ボーラスとして静脈内に、または一定期間にわたる連続注入によって、硝子体内、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、関節内、滑膜内、髄腔内、または腫瘍内経路でヒトに投与することができる。抗体またはＡＤＣはまた、腫瘍周囲、病変内、または病変周囲経路によって適切に投与され、局所的ならびに全身的な治療効果を発揮する。腹腔内経路は、例えば、卵巣腫瘍の治療において特に有用であり得る。
【０６２８】
本明細書で提供される抗体またはＡＤＣは、ＴＦが関与する任意の疾患または状態の治療に有用であり得る。一部の実施形態では、疾患または状態は、抗ＴＦ抗体またはＡＤＣによる治療から利益を得ることができる疾患または状態である。
【０６２９】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体またはＡＤＣは、医薬としての使用のために提供される。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体またはＡＤＣは、医薬の製造または調製での使用のために提供される。一部の実施形態では、医薬は、抗ＴＦ抗体またはＡＤＣの恩恵を受けることができる疾患または状態の治療用である。
【０６３０】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗ＴＦ抗体またはＡＤＣの有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象の疾患または状態を治療する方法である。
【０６３１】
一部の実施形態では、抗ＴＦ抗体またはＡＤＣによる治療から利益を得ることができる疾患または状態はがんである。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗ＴＦ抗体またはＡＤＣは、がんの治療用の医薬としての使用のために提供される。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗ＴＦ抗体またはＡＤＣは、がんの治療用の医薬の製造または調製での使用のために提供される。一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗ＴＦ抗体またはＡＤＣの有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象のがんを治療する方法である。
【０６３２】
ＴＦは、卵巣癌（参照によりその各々の全体が援用される、Ｓａｋｕｒａｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｇｙｎｅｃｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ，２０１７，２７：３７−４３；Ｋｏｉｚｕｍｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｍａｒｋ  Ｃａｎｃｅｒ，２０１５，７：１−１３を参照されたい）、子宮頸癌（参照によりその全体が援用される、Ｃｏｃｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，ＢＭＣ  Ｃａｎｃｅｒ，２０１１，１１：２６３を参照されたい）、頭頸部癌（参照によりその全体が援用される、Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＢＭＣ  Ｃａｎｃｅｒ，２０１７，１７：５７２を参照されたい）、前立腺癌（参照によりその各々の全体が援用される、Ｙａｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｖｅｓｔ．，２００９，２７：４３０−４３４；Ａｂｄｕｌｋａｄｉｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｕｍ  Ｐａｔｈｏｌ．，２００９，３１：４４３−４４７を参照されたい）、膵臓癌（参照によりその全体が援用される、Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ，２０１７，８：５９０８６−５９１０２を参照されたい）、トリプルネガティブ乳癌（参照によりその全体が援用される、Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ，２０１７，８：５９０８６−５９１０２を参照されたい）、膠芽細胞腫（参照によりその各々の全体が援用される、Ｇｕａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２００２，３５：３２１−３２５；Ｃａｒｎｅｉｒｏ−Ｌｏｂｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｔｈｒｏｍｂ  Ｈａｅｍｏｓｔ，２００９，７：１８５５−１８６４を参照されたい）、肺癌（参照によりその各々の全体が援用される、Ｙｅｈ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，２０１３，８：ｅ７５２８７；Ｒｅｇｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ  Ｃｈｅｍ．，２００９，５５：１８３４−４２を参照されたい）、胃癌（参照によりその全体が援用される、Ｌｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．，２０１２，１０７：１１２５−１１３０を参照されたい）、食道癌（参照によりその全体が援用される、Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｃｔａ  Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．，２０１０，３：２３３−２３９を参照されたい）、膀胱癌（参照によりその全体が援用される、Ｐａｔｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．，２００８，１２２：１５９２−１５９７を参照されたい）、黒色腫（参照によりその全体が援用される、Ｂｒｏｍｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ．，１９９５，９２：８２０５−８２０９を参照されたい）、及び腎臓癌（参照によりその全体が援用される、Ｓｉｌｖａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ  Ｂｒａｚ  Ｊ  Ｕｒｏｌ．，２０１４，４０：４９９−５０６を参照されたい）などの様々な種類のがんの血栓症、転移、腫瘍増殖、及び／または腫瘍血管新生に関与している。
【０６３３】
任意の適切ながんが、本明細書で提供される抗体またはＡＤＣによって治療され得る。一部の実施形態では、がんは頭頚部癌である。一部の実施形態では、がんは、卵巣癌である。一部の実施形態では、がんは、胃癌である。一部の実施形態では、がんは、食道癌である。一部の実施形態では、がんは、子宮頸癌である。一部の実施形態では、がんは、前立腺癌である。一部の実施形態では、がんは、膵臓癌である。一部の実施形態では、癌はエストロゲン受容体陰性（ＥＲ−）、プロゲステロン受容体陰性（ＰＲ−）、及びＨＥＲ２陰性（ＨＥＲ２−）のトリプルネガティブ乳癌である。一部の実施形態では、がんは、膠芽細胞腫である。一部の実施形態では、がんは、肺癌である。一部の実施形態では、がんは、膀胱癌である。一部の実施形態では、がんは、黒色腫である。一部の実施形態では、がんは、腎臓癌である。抗ＴＦ抗体またはＡＤＣによって治療できるがんの種類に関する追加情報は、参照によりその全体が援用される、ｖａｎ  ｄｅｎ  Ｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２０１２，１１９：９２４−９３２に提供されている。
【０６３４】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗体またはＡＤＣの有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象のがんの発症を遅延する方法である。
【０６３５】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗体またはＡＤＣの有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象のがんの発症を予防する方法である。
【０６３６】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗体またはＡＤＣの有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象の腫瘍のサイズを低減する方法である。
【０６３７】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗体またはＡＤＣの有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象の転移の数を低減する方法である。
【０６３８】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗体またはＡＤＣの有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象の全生存期間、生存期間中央値、または無増悪生存期間を延長する方法である。
【０６３９】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗体またはＡＤＣの有効量を対象に投与することにより、標準治療の治療に耐性になった対象を治療する方法である。
【０６４０】
一部の実施形態では、抗ＴＦ抗体による治療から利益を得ることができる疾患または状態は、血管新生を伴う疾患または状態である。ある特定の実施形態では、血管新生を伴う疾患または状態は加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）である。ある特定の実施形態では、血管新生を伴う疾患または状態は糖尿病性網膜症である。ある特定の実施形態では、血管新生を伴う疾患または状態はがんである。一部の実施形態では、抗ＴＦ抗体による治療から利益を得ることができる疾患または状態は、血管炎症を伴う疾患または状態である。
【０６４１】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗ＴＦ抗体は、血管新生を伴う疾患または状態の治療用の医薬としての使用のために提供される。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗ＴＦ抗体は、血管新生を伴う疾患または状態の治療用の医薬の製造または調製での使用のために提供される。ある特定の実施形態では、血管新生を伴う疾患または状態は加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）である。ある特定の実施形態では、血管新生を伴う疾患または状態は糖尿病性網膜症である。ある特定の実施形態では、血管新生を伴う疾患または状態はがんである。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗ＴＦ抗体は、血管炎症を伴う疾患または状態の治療用の医薬としての使用のために提供される。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗ＴＦ抗体は、血管炎症を伴う疾患または状態の治療用の医薬の製造または調製での使用のために提供される。
【０６４２】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗ＴＦ抗体の有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象の血管新生を伴う疾患または状態を治療する方法である。ある特定の実施形態では、血管新生を伴う疾患または状態は加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）である。ある特定の実施形態では、血管新生を伴う疾患または状態は糖尿病性網膜症である。ある特定の実施形態では、血管新生を伴う疾患または状態はがんである。一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗ＴＦ抗体の有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象の血管炎症を伴う疾患または状態を治療する方法である。
【０６４３】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗体の有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象の血管新生を伴う疾患または状態の発症を遅延する方法である。
【０６４４】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗体の有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象の血管新生を伴う疾患または状態の発症を予防する方法である。
【０６４５】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗体の有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象の加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）の発症を遅延する方法である。
【０６４６】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗体の有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象の加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）の発症を予防する方法である。
【０６４７】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗体の有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象の糖尿病性網膜症の発症を遅延する方法である。
【０６４８】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗体の有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象の糖尿病性網膜症の発症を予防する方法である。
【０６４９】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗体の有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象の血管炎症を伴う疾患または状態の発生を遅延する方法である。
【０６５０】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される抗体の有効量を対象に投与することにより、それを必要とする対象の血管炎症を伴う疾患または状態の発生を予防する方法である。
【０６５１】
１２．組み合わせ療法
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体またはＡＤＣは、少なくとも１つの追加の治療剤と共に投与される。本明細書で提供される抗体またはＡＤＣと共に、任意の適切な追加の治療剤を投与することができる。一部の態様では、追加の治療剤は、放射線、細胞傷害性薬剤、化学療法剤、細胞増殖抑制剤、抗ホルモン剤、免疫刺激剤、抗血管新生剤、及びそれらの組み合わせから選択される。
【０６５２】
追加の治療剤は、任意の適切な手段によって投与され得る。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体またはＡＤＣ及び追加の治療剤は同じ医薬組成物に含まれる。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体またはＡＤＣ及び追加の治療剤は異なる医薬組成物に含まれる。
【０６５３】
本明細書で提供される抗体またはＡＤＣ及び追加の治療剤が異なる医薬組成物に含まれる実施形態では、抗体またはＡＤＣの投与は、追加の治療剤の投与の前、同時、及び／または後に起こり得る。
【０６５４】
１３．診断方法
対象からの細胞上のＴＦの存在を検出するための方法も提供される。そのような方法は、例えば、本明細書に提供される抗体またはＡＤＣによる治療に対する応答性を予測及び評価するために使用され得る。
【０６５５】
一部の実施形態では、この方法を使用して、疾患または状態を有するか、またはその疑いがある対象のＴＦを検出することができる。一部の実施形態では、方法は（ａ）対照から試料を受け取ることと、（ｂ）試料を本明細書で提供される抗体と接触させることにより、試料中のＴＦの存在またはレベルを検出することと、を含む。一部の実施形態では、方法は（ａ）本明細書で提供される抗体を対象に投与することと、（ｂ）対象におけるＴＦの存在またはレベルを検出することと、を含む。一部の実施形態では、疾患または状態はがんである。一部の実施形態では、がんは頭頚部癌である。一部の実施形態では、がんは、卵巣癌である。一部の実施形態では、がんは、胃癌である。一部の実施形態では、がんは、食道癌である。一部の実施形態では、がんは、子宮頸癌である。一部の実施形態では、がんは、前立腺癌である。一部の実施形態では、がんは、膵臓癌である。一部の実施形態では、癌はエストロゲン受容体陰性（ＥＲ−）、プロゲステロン受容体陰性（ＰＲ−）、及びＨＥＲ２陰性（ＨＥＲ２−）のトリプルネガティブ乳癌である。一部の実施形態では、がんは、膠芽細胞腫である。一部の実施形態では、がんは、肺癌である。一部の実施形態では、がんは、膀胱癌である。一部の実施形態では、がんは、黒色腫である。一部の実施形態では、がんは、腎臓癌である。一部の実施形態では、疾患または状態は血管新生を伴う。ある特定の実施形態では、血管新生を伴う疾患または状態は加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）である。ある特定の実施形態では、血管新生を伴う疾患または状態は糖尿病性網膜症である。ある特定の実施形態では、血管新生を伴う疾患または状態はがんである。一部の実施形態では、疾患または状態は血管炎症を伴う。
【０６５６】
一部の実施形態では、方法は（ａ）本明細書で提供されるＡＤＣを対象に投与することと、（ｂ）対象におけるＴＦの存在またはレベルを検出することと、を含む。一部の実施形態では、疾患または状態はがんである。一部の実施形態では、がんは頭頚部癌である。一部の実施形態では、がんは、卵巣癌である。一部の実施形態では、がんは、胃癌である。一部の実施形態では、がんは、食道癌である。一部の実施形態では、がんは、子宮頸癌である。一部の実施形態では、がんは、前立腺癌である。一部の実施形態では、がんは、膵臓癌である。一部の実施形態では、癌はエストロゲン受容体陰性（ＥＲ−）、プロゲステロン受容体陰性（ＰＲ−）、及びＨＥＲ２陰性（ＨＥＲ２−）のトリプルネガティブ乳癌である。一部の実施形態では、がんは、膠芽細胞腫である。一部の実施形態では、がんは、肺癌である。一部の実施形態では、がんは、膀胱癌である。一部の実施形態では、がんは、黒色腫である。一部の実施形態では、がんは、腎臓癌である。
【０６５７】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は蛍光標識とコンジュゲートされている。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は放射性標識とコンジュゲートされている。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は酵素標識とコンジュゲートされている。
【０６５８】
一部の実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＣは蛍光標識を含む。一部の実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＣは放射性標識を含む。一部の実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＣは酵素標識を含む。
【０６５９】
一部の実施形態では、そのような細胞によって発現されるＴＦの相対量が決定される。ＴＦを発現する細胞の割合及びそのような細胞によって発現されるＴＦの相対量は、任意の適切な方法によって決定することができる。一部の実施形態では、このような測定を行うためにフローサイトメトリーが使用される。一部の実施形態では、このような測定を行うために蛍光支援細胞選別（ＦＡＣＳ）が使用される。
【０６６０】
１４．キット
本明細書で提供される抗体またはＡＤＣを含むキットも提供される。本明細書に記載されるように、キットは、疾患または障害の治療、予防、及び／または診断に使用され得る。
【０６６１】
一部の実施形態では、キットは、容器と、容器上または容器に付着されたラベルまたは添付文書を含む。好適な容器は、例えば、瓶、バイアル、注射器、及びＩＶ溶液バッグを含む。容器は、ガラスまたはプラスチック等の様々な材料から形成することができる。容器は、それ自体で、または別の組成物と組み合わされたときに、疾患または障害を治療、予防及び／または診断するのに有効な組成物を保持する。容器は無菌のアクセスポートを有していてもよい。例えば、容器が静脈内溶液バッグまたはバイアルである場合、それは針によって穴を開けることができるポートを有することができる。組成物中の少なくとも１つの活性剤は、本明細書で提供される抗体またはＡＤＣである。ラベルまたは添付文書は、組成物が、選択された状態を治療するために使用されることを表示する。
【０６６２】
一部の実施形態では、キットは（ａ）本明細書で提供される抗体またはＡＤＣを含む第１の組成物が含まれる第１の容器と、（ｂ）さらなる治療剤を含む第２の組成物が中に含まれる第２の容器と、を含む。本発明のこの実施形態におけるキットは、組成物が特定の状態を治療するために使用できることを示す添付文書をさらに含み得る。
【０６６３】
代替的に、またはさらに、キットは、薬学的に許容される賦形剤を含む第２（または第３）の容器をさらに含み得る。一部の態様では、賦形剤は緩衝剤である。キットは、フィルター、針、及び注射器を含む、商業的及び使用者の観点から望ましい他の物質をさらに含み得る。
【実施例】
【０６６４】
以下は、本発明の方法及び組成物の実施例である。本明細書で提供される一般的な説明を前提として、様々な他の実施形態が実施されてもよいことが理解されよう。
【０６６５】
以下は、本発明を実施するための特定の実施形態の例である。実施例は、例示の目的のためにのみ提供され、本発明の範囲を限定することを意図するものでは決してない。使用される数字（例えば、量、温度等）に関して正確さを確実にするための努力がなされてきたが、いくらかの実験誤差及び偏差が当然に考慮されるべきである。
【０６６６】
本発明の実施は、別途示されない限り、当該技術分野の技術水準の範囲内のタンパク質化学、生化学、組換えＤＮＡ技術、及び薬理学の従来の方法を使用する。そのような技術は、文献で完全に説明されている。例えば、Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ（Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９３）；Ａ．Ｌ．Ｌｅｈｎｉｎｇｅｒ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｗｏｒｔｈ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．，ｃｕｒｒｅｎｔ  ａｄｄｉｔｉｏｎ）；Ｓａｍｂｒｏｏｋ，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９８９）；Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（Ｓ．Ｃｏｌｏｗｉｃｋ  ａｎｄ  Ｎ．Ｋａｐｌａｎ  ｅｄｓ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ：Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０）；Ｃａｒｅｙ  ａｎｄ  Ｓｕｎｄｂｅｒｇ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３ｒｄ  Ｅｄ．（Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ）  Ｖｏｌｓ  Ａ  ａｎｄ  Ｂ（１９９２）を参照されたい。
【０６６７】
実施例１：ＴＦ抗体の生成
ヒト、カニクイザル、及びマウスのＴＦ細胞外ドメイン（ＥＣＤ）フラグメントは、Ｃ末端のＨｉｓまたはＦｃγフラグメントの融合体として発現した。Ｅｘｐｉ２９３細胞（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ，ＵＳＡ）に、製造元の推奨に従って、ヒト、カニクイザル、またはマウスのＴＦ  ＥＣＤ−Ｈｉｓ６（ＴＦ−Ｈｉｓ；それぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１１、８１５、及び８１９）をコードするｐｃＤＮＡ３．１Ｖ５−ＨｉｓＡ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、またはヒト、カニクイザル、またはマウスのＴＦ  ＥＣＤ−Ｆｃ（ＴＦ−Ｆｃ；それぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１２、８１６、及び８２０）をコードするｐＦＵＳＥ−ｈＩｇＧ１−Ｆｃ（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）を一過性にトランスフェクトした。Ｈｉｓタグ付きタンパク質の場合、遠心分離によって細胞を除去した細胞培養上清は、３３０ｍＭ塩化ナトリウム及び１３．３ｍＭイミダゾールで前処理された。推奨手順を使用して、ＴＦ−Ｈｉｓ６及びＴＦ−Ｆｃタンパク質を、それぞれ、ＨｉｓＴｒａｐ  ＨＰ及びＭａｂＳｅｌｅｃｔ  ＳｕＲｅカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｂｉｏ−Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｒｌｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡ，ＵＳＡ）によるアフィニティークロマトグラフィーによって精製した。Ｅｘｐｉ２９３で発現したＦＶＩＩ−Ｆｃは、ＭａｂＳｅｌｅｃｔ  ＳｕＲｅカラムによるアフィニティークロマトグラフィー、続いてサイズ排除クロマトグラフィーによって精製された。ＴＦ−Ｈｉｓ６及びＴＦ−Ｆｃタンパク質は、推奨されているように１５倍モル過剰のＳｕｌｆｏ−ＮＨＳ−ＳＳ−ｂｉｏｔｉｎによりビオチン化された（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）。非標識及びビオチン化タンパク質は、Ｓｕｐｅｒｄｅｘ  ２００  Ｉｎｃｒｅａｓｅ  １０／３００  ｃｏｌｕｍｎ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｂｉｏ−Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用したサイズ排除クロマトグラフィーによってさらに精製された。
【０６６８】
ヒトＴＦに対するヒト抗体は、以下に記載するように、スクリーニング抗原としてビオチン化組換えＴＦタンパク質を使用して、Ａｄｉｍａｂ（商標）酵母ベースの抗体提示によって生成された。ヒトＴＦに対する全ての抗体を、カニクイザル、及びマウスＴＦとの交差反応性について評価した。ヒト、カニクイザル、及びマウスのＴＦに対する抗体の結合活性を表５に示す。
【０６６９】
Ｉ．抗ＴＦ抗体を単離するためのライブラリー調査及び選択手法
ナイーブライブラリーの選択
以前に述べられたように、それぞれ約１０９個の多様性の８つのナイーブなヒト合成酵母ライブラリーが設計、生成、及び増殖された（例えば、ＷＯ２００９０３６３７９；ＷＯ２０１０１０５２５６；ＷＯ２０１２００９５６８；Ｘｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ  Ｄｅｓ  Ｓｅｌ．，２０１３，２６（１０）：６６３−７０を参照されたい）。単量体のヒトＴＦ選択のための８つのナイーブライブラリーを使用して、８つの並列した選択を実行した。
【０６７０】
最初の２ラウンドの選別では、本質的に説明されている（Ｓｉｅｇｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，２００４，２８６（１−２）：１４１−５３）ように、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  ＭＡＣＳシステムを利用した磁気ビーズ選別技法が実行された。簡単に言うと、酵母細胞（約１０１０細胞／ライブラリー）を、０．１％ＢＳＡを含むＦＡＣＳ洗浄緩衝液ＰＢＳ中、室温で１５分間、１０ｎＭのビオチン化ヒトＴＦ  Ｆｃ融合抗原と共にインキュベートした。５０ｍＬの氷冷洗浄緩衝液で１回洗浄した後、細胞ペレットを４０ｍＬの洗浄緩衝液に再懸濁し、５００μｌのストレプトアビジンＭｉｃｒｏＢｅａｄｓ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ，Ｂｅｒｇｉｓｃｈ  Ｇｌａｄｂａｃｈ，Ｇｅｒｍａｎｙ；カタログ番号１３０−０４８−１０１）を酵母に添加し、４℃で１５分間インキュベートした。次に、酵母をペレット化し、５ｍＬの洗浄緩衝液に再懸濁し、ＭＡＣＳ  ＬＳカラム（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ，Ｂｅｒｇｉｓｃｈ  Ｇｌａｄｂａｃｈ，Ｇｅｒｍａｎｙ；カタログ番号１３０−０４２−４０１）にロードした。５ｍＬをロードした後、カラムを３ｍＬのＦＡＣＳ洗浄緩衝液で３回洗浄した。次いで、カラムを磁場から取り出し、酵母を５ｍＬの増殖培地で溶離し、一晩増殖させた。
【０６７１】
ＭＡＣＳの２ラウンドに続いて、フローサイトメトリー（ＦＡＣＳ）を使用して、次の４ラウンドの選別を実行した。ＦＡＣＳの最初のラウンドでは、約５×１０７の酵母をペレット化し、洗浄緩衝液で３回洗浄し、マウス及び／またはカニクイザルのＴＦ抗原のビオチン化Ｆｃ融合タンパク質それぞれ１０ｎＭと共に、室温で１０〜１５分間インキュベートした。次いで、酵母を２回洗浄し、１：１００に希釈したＬＣ−ＦＩＴＣ（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，Ａｌａｂａｍａ；カタログ番号２０６２−０２）と、１：５００に希釈したＳＡ−６３３（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｇｒａｎｄ  Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹ；カタログ番号Ｓ２１３７５）、または１：５０に希釈したＥＡ−ＰＥ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ  Ｌｏｕｉｓ；カタログ番号Ｅ４０１１）と、二次試薬とで、４°Ｃで１５分間染色した。氷冷洗浄緩衝液で２回洗浄した後、細胞ペレットを０．４ｍＬの洗浄緩衝液に再懸濁し、ストレーナーでキャップした選別チューブに移した。ＦＡＣＳ  ＡＲＩＡソーター（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用してソーティングを行い、ＴＦ結合について選択するためのソートゲートを決定した。ＦＡＣＳの最初のラウンドから選択されたマウスとカニクイザルの集団を増殖させ、選択培地での継代培養により増殖した。ＦＡＣＳの２ラウンド、３ラウンド、及び４ラウンドは、陽性選別でＴＦ結合物を濃縮し、陰性選別でＣＨＯ細胞の可溶性膜タンパク質を使用して非特異的結合物の数を減らした（例えば、ＷＯ２０１４１７９３６３及びＸｕｅｔ  ａｌ．，ＰＥＤＳ，２０１３，２６（１０）：６６３−７０を参照されたい）。選別の最後のラウンドの後、酵母を播種し、シーケンスした。
【０６７２】
ナイーブセレクションで同定されたクローンの親和性成熟
ナイーブの結果（上述）由来の重鎖を使用して、軽鎖多様化ライブラリーを調製し、それを追加の選択ラウンドに使用した。特に、重鎖可変領域は４番目のナイーブ選択ラウンドの結果から抽出され、１×１０６の多様性の軽鎖ライブラリーに形質変換された。
【０６７３】
最初の選択ラウンドでは、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  ＭＡＣＳビーズと抗原としての１０ｎＭビオチン化ヒトＴＦ  Ｆｃ−ｆｕｓｉｏｎを使用した。ＭＡＣＳビーズの選択に続いて、１０ｎＭのカニクイザルとマウスＦｃ融合ＴＦ、またはビオチン化Ｆｃ融合ＴＦ抗原もしくはビオチン化モノマーＨＩＳフォームのヒト、マウス、もしくはカニクイザルＴＦを使用して、上述のように３ラウンドのＦＡＣＳ選別を実行した。各ＦＡＣＳ選択ラウンドからの個々のコロニーをシーケンシングした。
【０６７４】
ナイーブまたは軽鎖の多様化の選択から同定されたリードの最適化
リードクローンの最適化は、３つの成熟戦略を利用して実行された：ＣＤＲ−Ｈ１とＣＤＲ−Ｈ２の多様化；ＣＤＲ−Ｈ１とＣＤＲ−Ｈ２多様性プール最適化後のＣＤＲ−Ｈ３の多様化；選択したＣＤＲ−Ｌ１とＣＤＲ−Ｌ２多様性プール内でのＣＤＲ−Ｌ３の多様化。
【０６７５】
ＣＤＲ−Ｈ１及びＣＤＲ−Ｈ２の選択：ナイーブまたは軽鎖多様化手順のいずれかから選択されたクローンのＣＤＲ−Ｈ３は、１×１０８の多様性のＣＤＲ−Ｈ１及びＣＤＲ−Ｈ２バリアントを含む既製のライブラリーに再混合され、ビオチン化Ｆｃ融合カニクイザルＴＦ抗原、ビオチン化カニクイザルＨＩＳ−ＴＦ抗原、及び／またはビオチン化ヒトＨＩＳ−ＴＦを使用して選択が実行された。親和性圧力は、室温での平衡条件下でビオチン化ＨＩＳ−ＴＦ抗原の濃度を下げること（１ｎＭまで）を使用して適用した。
【０６７６】
ＣＤＲ−Ｈ３／ＣＤＲ−Ｈ１／ＣＤＲ−Ｈ２の選択：ＣＤＲ−Ｈ３と、ＣＤＲ−Ｈ３のいずれかの側にある相同隣接領域を含むオリゴは、ＩＤＴに注文された。ＣＤＲ−Ｈ３のアミノ酸位置は、ＣＤＲ−Ｈ３全体のオリゴごとに２つの位置でＮＮＫ多様性を介して多様化した。ＣＤＲ−Ｈ３オリゴは、ＣＤＲ−Ｈ３の隣接領域にアニールするプライマーを使用して二本鎖にされた。重鎖可変領域の残りのＦＲ１からＦＲ３は、上で選択したＣＤＲ−Ｈ１とＣＤＲ−Ｈ２の多様性から単離された、改善された親和性を有する抗体のプールから増幅された。次いで、二本鎖ＣＤＲ−Ｈ３オリゴ、ＦＲ１からＦＲ３のプールされたフラグメント、及び重鎖発現ベクターを、親の軽鎖をすでに含む酵母に形質転換することにより、ライブラリーを作成した。選択は、ＦＡＣＳ選別を使用して、前のサイクルと同様に実行された。ＦＡＣＳラウンドは、非特異的結合、種の交差反応性、及び親和性圧力を評価し、選別を実行して、目的の特性を持つ集団を得た。これらの選択の親和性圧力は、ＣＤＲ−Ｈ１及びＣＤＲ−Ｈ２の選択で上述したように実行された。
【０６７７】
ＣＤＲ−Ｌ３／ＣＤＲ−Ｌ１／ＣＤＲ−Ｌ２の選択：ＣＤＲ−Ｌ３と、ＣＤＲ−Ｌ３のいずれかの側にある相同隣接領域を含むオリゴは、ＩＤＴに注文された。ＣＤＲ−Ｌ３のアミノ酸位置は、ＣＤＲ−Ｌ３全体のオリゴごとに１つの位置でＮＮＫ多様性を介して多様化した。ＣＤＲ−Ｌ３オリゴは、ＣＤＲ−Ｌ３の隣接領域にアニールするプライマーを使用して二本鎖にされた。軽鎖可変領域の残りのＦＲ１からＦＲ３は、上で選択したＣＤＲ−Ｌ１とＣＤＲ−Ｌ２の多様性から単離された、改善された親和性を有する抗体のプールから増幅された。次いで、二本鎖ＣＤＲ−Ｌ３オリゴ、ＦＲ１からＦＲ３のプールされたフラグメント、及び軽鎖発現ベクターを、親の重鎖をすでに含む酵母に形質転換することにより、ライブラリーを作成した。選択は、ＦＡＣＳ選別を使用して、前のサイクルと同様に実行された。ＦＡＣＳラウンドは、非特異的結合、種の交差反応性、及び親和性圧力を評価し、選別を実行して、目的の特性を持つ集団を得た。親和性圧力には、濃度調整、及び抗原のプレ複合化における親のＦａｂの組み込みが含まれていた。
【０６７８】
ＩＩ．ＩｇＧ及びＦａｂの生成と精製
さらなる特性評価のために十分な量の選択された抗体を生成するために、酵母クローンを飽和状態まで成長させ、次いで、３０℃で４８時間振盪しながら誘導した。誘導後、酵母細胞をペレット化し、上清を精製のために回収した。プロテインＡカラムを使用してＩｇＧを精製し、ｐＨ２．０の酢酸で溶離した。Ｆａｂフラグメントはパパイン消化によって生成され、ＣａｐｔｕｒｅＳｅｌｅｃｔ  ＩｇＧ−ＣＨ１アフィニティーマトリックス（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号１９４３２００２５０）で精製された。
【０６７９】
実施例２：結合親和性アッセイ
抗ＴＦ抗体の反応速度測定は、Ｏｃｔｅｔ  ＱＫ３８４（Ｐａｌｌ  ＦｏｒｔｅＢｉｏ，Ｆｒｅｍｏｎｔ，ＣＡ，ＵＳＡ）またはＢｉａｃｏｒｅ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｂｉｏ−Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）で実行された。
【０６８０】
ＦｏｒｔｅＢｉｏ親和性測定は、概して以前に説明されている（Ｅｓｔｅｐ  ｅｔ  ａｌ．，ＭＡｂｓ．２０１３  Ｍａｒ−Ａｐｒ；５（２）：２７０−８）ように実行された。簡潔に述べると、ＦｏｒｔｅＢｉｏ親和性測定は、ＡＨＣセンサーにＩｇＧをオンラインでロードすることにより実行された。センサーは、アッセイ緩衝液で３０分間オフラインで平衡化され、次いでベースラインの確立のために６０秒間オンラインでモニターされた。ＩｇＧがロードされたセンサーを１００ｎＭ抗原（ヒト、カニクイザル、またはマウスＴＦ）に３分間曝露し、その後オフレート測定のためにアッセイ緩衝液に３分間移した。代替的に、ビオチン化ＴＦモノマーをＳＡセンサーにロードした後、溶液中で１００ｎＭの抗体Ｆａｂに曝露することで、結合測定値が得られた。速度論的データは、１：１ラングミュア結合モデルを使用して分析及び適合され、ＫＤは、ｋオフをｋオンで割ることによって計算された。Ｏｃｔｅｔベースの実験で測定されたＴＦ抗体のＫＤ値を表５に示す。
【０６８１】
Ｂｉａｃｏｒｅベースの測定では、アミンカップリングキット（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｂｉｏ−Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して、抗体をＣＭ５またはＣ１チップに共有結合させた。抗ＴＦ抗体と２５ｎＭで開始する５００ｎＭまでのＴＦ−Ｈｉｓの５点３倍濃度調整物との結合を３００秒間測定した。その後、抗ＴＦ抗体とＴＦ−Ｈｉｓの間の解離を１８００秒まで測定した。速度論的データを分析し、１：１結合モデルを使用してグローバルに適合させた。Ｂｉａｃｏｒｅベースの実験で測定されたＴＦ抗体のＫＤ値を表５に示す。
【０６８２】
表５に示すように、ＫＤで示されるｈＴＦに対する抗体の親和性は１０−７Ｍ〜１０−１１Ｍである。全ての抗ｈＴＦ抗体はｃＴＦと交差反応する。さらに、群２５及び４３の全ての抗ｈＴＦ抗体は、ｍＴＦへの結合活性を示す。抗ｈＴＦ抗体２５Ｇ、２５Ｇ１、２５Ｇ９、及び４３Ｄ８は、ｍＴＦと交差反応する。マウスＴＦに対して結合活性と交差反応性を示す他の既知のヒトまたはヒト化抗ｈＴＦモノクローナル抗体は存在しない。これは、群２５及び４３の抗体が新規ＴＦエピトープに結合することを示す。
【０６８３】
（表５）抗体反応速度
2021509823.tif 000007
結合なし＊：結合なしから弱い結合、報告可能なＫＤなし
ｎｄ＊：未決定
【０６８４】
実施例３：細胞ベースの結合アッセイ
ヒトＴＦの内因性発現を有するＨＣＴ１１６細胞は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）から入手し、推奨どおりに維持した。マウスＴＦを発現するＦｌｐ−Ｉｎ−ＣＨＯ細胞は、Ｃ末端ＦＬＡＧタグを有する全長マウスＴＦをコードするｐｃＤＮＡ５／ＦＲＴベクター（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によって、推奨されるようにＦｌｐ−Ｉｎ−ＣＨＯ細胞のトランスフェクションによって生成された。マウスＴＦ陽性ＣＨＯクローンは、組織培養処理した９６ウェルプレートで限界希釈することにより単離した。
【０６８５】
細胞ベースの抗体結合は、参照によりその全体が援用される、Ｌｉａｏ−Ｃｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，２０１５，１０：ｅ０１２４７０８に以前に記載されるように評価された。Ｃｅｌｌｓｔｒｉｐｐｅｒ（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）によって収集した１．２×１０５細胞を、氷上で２時間、２５０ｎＭまたは１００ｎＭで開始する抗ヒトＴＦ  ＩｇＧ１またはＦａｂ抗体の１２点の１：３希釈濃度調整物と共にインキュベートした。２回洗浄した後、ＩｇＧ１またはＦａｂで標識された細胞を、それぞれ、１５０ｎＭのヤギフィコエリトリン（ＰＥ）Ｆ（ａｂ’）２フラグメントヤギ抗ヒトＩｇＧ、Ｆｃγフラグメント特異的（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ，ＵＳＡ）またはＦＩＴＣ標識Ｆ（ａｂ’）２フラグメントヤギ抗ヒトカッパ（ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｉｏｔｅｃｈ，Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，ＡＬ，ＵＳＡ）と共に氷上で３０分間インキュベートした。２回洗浄した後、死細胞をＴＯ−ＰＲＯ−３ヨージド（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で標識し、試料をＣｙｔｏＦＬＥＸフローサイトメーター（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｂｒｅａ，ＣＡ，ＵＳＡ）またはＮｏｖｏｃｙｔｅフローサイトメーター（ＡＣＥＡ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）で分析した。各希釈での蛍光強度中央値（ＭＦＩ）をプロットし、Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ，Ｌａ  Ｊｏｌｌａ，ＣＡ，ＵＳＡ）の４パラメータ結合モデルを使用して細胞のＥＣ５０を導出した。ヒトＴＦ陽性ＨＣＴ−１１６細胞に対する抗ＴＦ抗体の結合の結果を図１Ａ及び１Ｂに示す。マウスＴＦを発現するＣＨＯ細胞に対する抗ＴＦ抗体の結合の結果を図２Ａ及び２Ｂに示す。
【０６８６】
図１Ａ及び１Ｂの全ての抗ｈＴＦ抗体は、ヒトＴＦ陽性ＨＣＴ−１１６細胞に対して高い親和性を示し、ＥＣ５０は約６８７ｐＭ〜約３９ｐＭの範囲である。図２Ａ及び２Ｂに示すように、群２５及び４３の抗体は、約４５５ｎＭ〜約２．９ｎＭの範囲のＥＣ５０でマウスＴＦを発現するＣＨＯ細胞に対する結合を示す。マウスＴＦに対する結合活性は、群２５及び４３の抗ｈＴＦ抗体に特有の特性である。これは、マウスモデルによるこれらの抗体の前臨床試験に有利である。
【０６８７】
実施例４：トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）
ＴＧＡアッセイは、ＳＴＡＧＯが製造及び販売する校正済み自動トロンボグラム（ＣＡＴ）装置を使用して実行された。試験方法の設計は、血漿源がクエン酸塩／ＣＴＩ中のＮＰＰであることを除いて、標準のＣＡＴアッセイ測定と同等であった。抗ＴＦ抗体を０、１０、５０、及び１００ｎＭに濃度調整し、トウモロコシトリプシン阻害剤（クエン酸／ＣＴＩ）１００マイクログラム／ｍＬを補充した１１ｍＭクエン酸で収集した通常のプール血漿（ＮＰＰ）と混合した。再脂質化したＴＦを９６ウェルアッセイプレートに加え、続いて抗体／ＮＰＰ混合物を添加した。１０分間のインキュベーション後、または再脂質化ＴＦと抗体／ＮＰＰを混合した直後に、カルシウムとトロンビン基質の添加によりトロンビン生成が開始された。ＳＴＡＧＯソフトウェアは、次のパラメータを報告するために使用された：ピークＩＩａ（生成された最高のトロンビン濃度［ｎＭ］）；ラグタイム（ＩＩａ生成までの時間［分］）；ＥＴＰ（内因性トロンビンポテンシャル、曲線下面積［ｎＭ×分］）；ｔｔピーク（ピークＩＩａまでの時間［分］）。同じプレート上の抗体なしの血漿対照と比較した、各抗体の存在下でのトロンビン生成ピークのパーセント（ピークＩＩａ％）及び内因性トロンビンポテンシャルのパーセント（ＥＴＰ％）も報告された。
【０６８８】
カルシウム及びトロンビン基質の添加前に抗体インキュベーションなしでの、１Ｆ、２５Ａ、２５Ａ３、２５Ｇ１、２９Ｅ、３９Ａ、４３Ｂ１、４３Ｄ７、４３Ｅａ、及び５４Ｅから選択された各抗体の存在下でのピークＩＩａ、ラグタイム、ＥＴＰ、ｔｔピーク、ピークＩＩａ％、及びＥＴＰ％を表６に示す。カルシウム及びトロンビン基質の添加前に１０分間の抗体インキュベーションを伴った、１Ｆ、２５Ａ、２５Ａ３、２５Ｇ１、２９Ｅ、３９Ａ、４３Ｂ１、４３Ｄ７、４３Ｅａ、及び５４Ｅから選択された各抗体の存在下でのピークＩＩａ、ラグタイム、ＥＴＰ、ｔｔピーク、ピークＩＩａ％、及びＥＴＰ％を表７に示す。カルシウム及びトロンビン基質の添加前の抗体インキュベーションなしの抗ＴＦ抗体の濃度調整の存在下でのピークＩＩａ％を、図３Ａにプロットする。カルシウム及びトロンビン基質の添加前の１０分間の抗体インキュベーションを伴う抗ＴＦ抗体の濃度調整の存在下でのピークＩＩａ％を、図３Ｂにプロットする。
【０６８９】
ピークＩＩａ％は、２５Ａ、２５Ａ３、及び２５Ｇ１を含む群２５の抗体の存在下で９０％を超えている。ＥＴＰ％は、２５Ａ、２５Ａ３、及び２５Ｇ１を含む群２５の抗体の存在下で１００％を超えている。ピークＩＩａ％は、４３Ｂ１、４３Ｄ７、及び４３Ｅａを含む群４３の抗体の存在下で４０％を超えている。ＥＴＰ％は、４３Ｂ１、４３Ｄ７、及び４３Ｅａを含む群４３の抗体の存在下で９０％を超えている。
【０６９０】
このデータは、群２５及び４３の抗体が正常なトロンビン生成を可能にするため、トロンビン生成の阻害剤ではないことを示している。
【０６９１】
（表６）抗体プレインキュベーションなしのトロンビン生成アッセイ
2021509823.tif 000008
＊ソフトウェアがＥＴＰを計算できないときに「Ｎｏ  Ｔａｉｌ  Ｆｏｕｎｄ」エラーを有した群。
【０６９２】
（表７）１０分間の抗体プレインキュベーションを伴うトロンビン生成アッセイ
2021509823.tif 000009
＊ソフトウェアがＥＴＰを計算できないときに「Ｎｏ  Ｔａｉｌ  Ｆｏｕｎｄ」エラーを有した群。
【０６９３】
実施例５：ＦＸａ変換アッセイ
ＴＦに対するヒト抗体の存在下でＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力を評価するために、５×１０４のＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）を組織培養処理した黒色９６ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−Ｏｎｅ，Ｍｏｎｒｏｅ，ＮＣ，ＵＳＡ）に播種した。細胞培養培地を除去し、１．５ｍＭ  ＣａＣｌ２を含むＨＥＰＥＳ緩衝液に２００ｎＭの最終濃度のＦＸを添加した後、細胞を３７℃で１５分間、濃度調整物と共にインキュベートした。最終濃度が２０ｎＭのＦＶＩＩａを含むＴＦ：ＦＶＩＩａバイナリー複合体を再構成し、細胞を３７℃で５分間インキュベートした。エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）で反応をクエンチした後、生成されたＦＸａを、Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒｏｎｅ  ３５５励起フィルター、Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒｏｎｅ  ４６０吸収フィルター、ＬＡＮＣＥ／ＤＥＬＦＩＡトップミラーを備えたＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ，ＵＳＡ）で、５０μＭのＳＮ−７  ６−アミノ−１−ナフタレンスルホンアミドベースの蛍光基質（Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｅｓｓｅｘ  Ｊｕｎｃｔｉｏｎ，ＶＴ，ＵＳＡ）によって測定した。抗体なし対照と比較した抗ＴＦ抗体の濃度調整物の存在下でのＦＸａ変換百分率（ＦＸａ％）を表８にまとめ、図４Ａ及び４Ｂにプロットする。
【０６９４】
ＦＸａ変換百分率は、２５Ａ、２５Ａ３、２５Ｇ、２５Ｇ１、２５Ｇ５、２５Ｇ９、４３Ｂ、４３Ｂ１、４３Ｂ７、４３Ｄ、４３Ｄ７、４３Ｄ８、４３Ｅ、及び４３Ｅａを含む、群２５及び４３の異なる濃度の抗体の存在下で約７８％〜約１２０％の範囲である。
【０６９５】
このデータは、群２５及び４３の抗ＴＦ抗体が、ＴＦ：ＦＶＩＩａを介したＦＸからのＦＸａへの変換を阻害しないことを示している。このデータは、群２５及び４３の抗ＴＦ抗体が、ＦＸが結合するヒトＴＦ結合部位とは異なるヒトＴＦ結合部位を有していることも示している。
【０６９６】
（表８）ＦＸａ変換％
2021509823.tif 000010
【０６９７】
実施例６：ＦＶＩＩａ競合アッセイ
ＦＶＩＩ−Ｆｃコンジュゲートは、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４８８  ５−スルホ−ジクロロフェノールエステル（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して生成された。ゲルろ過（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）により、コンジュゲート調製物から過剰なＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ色素を除去した。
【０６９８】
ＦＶＩＩａとＴＦに対するヒト抗体との競合を評価するために、ＴＦ陽性ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）を最初に、ＴＦに対するヒト抗体の濃度調整物と共に氷上で１時間インキュベートした。続いて、Ａｌｅｘａ４８８にコンジュゲートした最終濃度２０ｎＭのＦＶＩＩ−Ｆｃを抗体細胞混合物に添加した。氷上でさらに１時間インキュベートした後、細胞を洗浄し、生細胞識別色素で染色し、フローサイトメトリーで分析した。生細胞からのＡｌｅｘａ４８８蛍光データは、蛍光強度中央値を使用して要約された。ＦＶＩＩ−Ｆｃ結合は、ＦＶＩＩ−Ｆｃ結合％＝［ＭＦＩ抗体標識細胞−ＭＦＩ未染色細胞］／［ＭＦＩＩｇＧ１対照標識細胞−ＭＦＩ未染色細胞］で要約された。抗体なし対照と比較した抗ＴＦ抗体濃度調整物の存在下でのＦＶＩＩａ結合の百分率（ＦＶＩＩａ％）を表９に要約し、図５Ａ及び５Ｂにプロットする。
【０６９９】
ＦＶＩＩａ結合百分率は、２５Ａ、２５Ａ３、２５Ｇ、２５Ｇ１、２５Ｇ５、２５Ｇ９、４３Ｂ、４３Ｂ１、４３Ｂ７、４３Ｄ、４３Ｄ７、４３Ｄ８、４３Ｅ、及び４３Ｅａを含む、群２５及び４３の異なる濃度の抗体の存在下で約７６％〜約１０２％の範囲である。
【０７００】
このデータは、群２５及び４３の抗ＴＦ抗体が、ヒトＴＦへの結合に関してＦＶＩＩａと競合しないことを示している。このデータは、群２５及び４３の抗ＴＦ抗体が、ＦＶＩＩａが結合するヒトＴＦ結合部位とは異なるヒトＴＦ結合部位を有していることも示している。
【０７０１】
（表９）抗ＴＦ抗体のＦＶＩＩａとの競合
2021509823.tif 000011
【０７０２】
実施例７：ＴＦシグナル伝達アッセイ
ＩＬ−８及びＧＭ−ＣＳＦタンパク質レベルは、Ｈｊｏｒｔｏｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２００４，１０３：３０２９−３０３７に以前に記載されているように測定された。ＬｅｉｂｏｖｉｔｚのＬ−１５培地で２時間血清飢餓状態にしたＴＦ陽性ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）を、１００ｎＭの抗ＴＦ抗体で開始する８点の１：２．５の濃度調整と共にインキュベートした。３７℃で３０分後、ＦＶＩＩａ（ＮｏｖｏＳｅｖｅｎ  ＲＴ，Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ，Ｂａｇｓｖａｅｒｄ，Ｄｅｎｍａｒｋ）を最終濃度２０ｎＭで細胞に添加した。５時間後、細胞培養上清を回収し、ＩＬ８またはＧＭ−ＣＳＦに対するＥＬＩＳＡで推奨通りに分析した（Ｒ＆Ｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ，ＵＳＡ）。組換えＩＬ８またはＧＭ−ＣＳＦ（Ｒ＆Ｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ，ＵＳＡ）を使用した標準曲線をＰｒｉｓｍで使用し、細胞培養上清のサイトカイン濃度を計算した。報告された抗体濃度でのＩＬ８パーセント及びＧＭ−ＣＳＦパーセント（ＩＬ８％及びＧＭ−ＣＳＦ％）は、抗体なし対照と比較して計算された。抗ＴＦ抗体濃度調整物を伴うＩＬ８の濃度を図６Ａ及び６Ｂにプロットし、異なる抗体濃度でのＩＬ８％を表１０に示す。抗ＴＦ抗体濃度調整物を伴うＧＭ−ＣＳＦの濃度を図６Ｃ及び６Ｄにプロットし、異なる抗体濃度でのＩＬ８％を表１１に示す。
【０７０３】
ＩＬ８濃度は、６．４ｎＭ以上の濃度の抗ＴＦ抗体の存在下で７５％を超えて減少した。ＧＭ−ＣＳＦ濃度は、６．４ｎＭ以上の濃度の抗ＴＦ抗体の存在下で６０％を超えて減少した。
【０７０４】
このデータは、試験された全ての抗ＴＦ抗体がＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害することを示している。
【０７０５】
（表１０）ＩＬ８の阻害
2021509823.tif 000012
【０７０６】
（表１１）ＧＭ−ＣＳＦの阻害
2021509823.tif 000013
【０７０７】
実施例８：抗体競合アッセイ
Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ抗体は、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４８８  ５−スルホ−ジクロロフェノールエステル（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して生成された。ゲルろ過（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）により、抗体色素コンジュゲート調製物から過剰なＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ色素を除去した。
【０７０８】
最初のＴＦに対するヒト抗体と２５Ａとの競合を評価するために、ＴＦ陽性Ａ４３１細胞（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）を最初に、ＴＦに対する最初のヒト抗体の濃度調整物と共に氷上で１時間インキュベートした。続いて、Ａｌｅｘａ４８８にコンジュゲートした最終濃度２０ｎＭの２５Ａを抗体細胞混合物に添加した。氷上でさらに１時間インキュベートした後、細胞を洗浄し、生細胞識別色素で染色し、フローサイトメトリーで分析した。生細胞からのＡｌｅｘａ４８８蛍光データは、蛍光強度中央値を使用して要約された。２５Ａ結合は、２５Ａ結合％＝［ＭＦＩ抗体標識細胞−ＭＦＩ未染色細胞］／［ＭＦＩＩｇＧ１対照標識細胞−ＭＦＩ未染色細胞］で要約された。
【０７０９】
最初のＴＦに対するヒト抗体と４３Ｅａとの競合を評価するために、ＴＦ陽性Ａ４３１細胞（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）を最初に、ＴＦに対する最初のヒト抗体の濃度調整物と共に氷上で１時間インキュベートした。続いて、Ａｌｅｘａ４８８にコンジュゲートした最終濃度２０ｎＭの４３Ｅａを抗体細胞混合物に添加した。氷上でさらに１時間インキュベートした後、細胞を洗浄し、生細胞識別色素で染色し、フローサイトメトリーで分析した。生細胞からのＡｌｅｘａ４８８蛍光データは、蛍光強度中央値を使用して要約された。４３Ｅａ結合は、４３Ｅａ結合％＝［ＭＦＩ抗体標識細胞−ＭＦＩ未染色細胞］／［ＭＦＩＩｇＧ１対照標識細胞−ＭＦＩ未染色細胞］で要約された。
【０７１０】
２５Ａ結合％及び４３Ｅａ結合％を表１２に示す。群２５及び群４３の抗体は、２５Ａ結合％及び４３Ｅａ結合％を１０％未満に減少させた。
【０７１１】
このデータは、群２５の抗体と群４３の抗体がヒトＴＦへの結合について互いに競合し、ヒトＴＦの同じまたは重複するエピトープに結合する可能性があることを示している。
【０７１２】
（表１２）抗ＴＦ抗体と抗体クローン２５Ａまたは４３Ｅａとの競合
2021509823.tif 000014
【０７１３】
実施例９：細胞生存率アッセイ
抗ＴＦ抗体の細胞内移行を評価するために、細胞傷害性アッセイを実施した。簡潔に述べると、細胞を３８４ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−Ｏｎｅ，Ｍｏｎｒｏｅ，ＮＣ，ＵＳＡ）に、４０μｌの培地中で１ウェルあたり４×１０３細胞で播種した。抗体とチューブリン阻害剤モノメチルオーリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）（Ｍｏｒａｄｅｃ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）にコンジュゲートした二次抗ヒトＦｃ抗体を、それぞれ５及び３０ｎＭから開始して段階的に希釈した。プレートを３日間インキュベートした後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（ＣＴＧ）アッセイ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ，ＵＳＡ）で溶解した。ＣＴＧの発光をＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダーで測定し、４回の反復の平均と標準偏差をＰｒｉｓｍでグラフ化した。各抗ＴＦ抗体について、ＩＣ５０とそれに関連する９５％信頼区間は、４パラメータ結合モデルを使用してＰｒｉｓｍで計算された。
【０７１４】
図７Ａ及び７Ｂは、発光のレベル及び計算されたＩＣ５０によって示されるような細胞生存率を示す。
【０７１５】
このデータは、群１、２５、２９、３９、４３、及び５４からの試験された全ての抗ＴＦ抗体が、ＴＦ陽性Ａ４３１細胞の生存率を低下させるのに効果的であったことを示している。
【０７１６】
実施例１０：トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）
ＴＧＡアッセイは、ＳＴＡＧＯが製造及び販売する校正済み自動トロンボグラム（ＣＡＴ）装置を使用して実行された。試験方法の設計は、血漿源がトウモロコシトリプシン阻害剤（クエン酸塩／ＣＴＩ）を補充したクエン酸塩中の正常プール血漿（ＮＰＰ）であることを除いて、標準のＣＡＴアッセイ測定と同等であった。抗ＴＦ抗体を０、１０、５０、及び１００ｎＭに濃度調整し、トウモロコシトリプシン阻害剤（クエン酸／ＣＴＩ）１００マイクログラム／ｍＬを補充した１１ｍＭクエン酸で収集した通常のプール血漿（ＮＰＰ）と混合した。再脂質化したＴＦを９６ウェルアッセイプレートに加え、続いて抗体／ＮＰＰ混合物を添加した。１０分間のインキュベーション後、または再脂質化ＴＦと抗体／ＮＰＰを混合した直後に、カルシウムとトロンビン基質の添加によりトロンビン生成が開始された。ＳＴＡＧＯソフトウェアは、次のパラメータを報告するために使用された：ピークＩＩａ（生成された最高のトロンビン濃度［ｎＭ］）；ラグタイム（ＩＩａ生成までの時間［分］）；ＥＴＰ（内因性トロンビンポテンシャル、曲線下面積［ｎＭ×分］）；ｔｔピーク（ピークＩＩａまでの時間［分］）。同じプレート上の抗体なしの血漿対照と比較した、各抗体の存在下でのトロンビン生成ピークのパーセント（ピークＩＩａ％）及び内因性トロンビンポテンシャルのパーセント（ＥＴＰ％）も報告された。
【０７１７】
カルシウム及びトロンビン基質の添加前に抗体インキュベーションなしでの、２５Ａ、２５Ａ３、２５Ａ５、３９Ａ、４３Ｂ１、４３Ｄ７、４３Ｅａ、及びＭ１５９３から選択された各抗体の存在下でのピークＩＩａ、ラグタイム、ＥＴＰ、ｔｔピーク、ピークＩＩａ％、及びＥＴＰ％を表３７に示す。カルシウム及びトロンビン基質の添加前に１０分間の抗体インキュベーションを伴った、２５Ａ、２５Ａ３、２５Ａ５、３９Ａ、４３Ｂ１、４３Ｄ７、４３Ｅａ、及びＭ１５９３から選択された各抗体の存在下でのピークＩＩａ、ラグタイム、ＥＴＰ、ｔｔピーク、ピークＩＩａ％、及びＥＴＰ％を表３８に示す。カルシウム及びトロンビン基質の添加前の抗体インキュベーションなしの抗ＴＦ抗体の濃度調整の存在下でのピークＩＩａ％を、図８Ａにプロットする。カルシウム及びトロンビン基質の添加前の１０分間の抗体インキュベーションを伴う抗ＴＦ抗体の濃度調整の存在下でのピークＩＩａ％を、図８Ｂにプロットする。Ｍ１５９３抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２１のＶＨ配列とＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２２のＶＬ配列を有する。
【０７１８】
抗体のプレインキュベーションなしで、ピークＩＩａ％は、２５Ａ、２５Ａ３、及び２５Ａ５を含む群２５の抗体の存在下で９５％以上である。１０分間の抗体のプレインキュベーションを伴って、ピークＩＩａ％は、２５Ａ、２５Ａ３、及び２５Ａ５を含む群２５の抗体の存在下で１００％以上である。群２５からの試験された抗体の存在下では、ＥＴＰ％は９９％以上である。
【０７１９】
抗体のプレインキュベーションなしで、ピークＩＩａ％は、４３Ｂ１、４３Ｄ７、及び４３Ｅａを含む群４３の抗体と、抗ＴＦ抗体Ｍ１５９３の存在下で、５０％を超えているが、９６％以下である。１０分間の抗体のプレインキュベーションを伴って、ピークＩＩａ％は、４３Ｂ１、４３Ｄ７、及び４３Ｅａを含む群４３の抗体と、抗ＴＦ抗体Ｍ１５９３の存在下で、４０％を超えているが、９３％以下である。群４３からの試験された抗体とＭ１５９３抗体の存在下では、ＥＴＰ％は９２％以上である。
【０７２０】
このデータは、群２５及び４３の抗体が正常なトロンビン生成を可能にするため、トロンビン生成の阻害剤ではないことを示している。トロンビン生成ピークのパーセント（ピークＩＩａ％）は、群４３の抗体及びＭ１５９３抗体と比較して、群２５の抗体の存在下でより大きい。
【０７２１】
（表３７）抗体プレインキュベーションなしのトロンビン生成アッセイ
2021509823.tif 000015
＊ソフトウェアがＥＴＰを計算できないときに「Ｎｏ  Ｔａｉｌ  Ｆｏｕｎｄ」エラーを有した群。
【０７２２】
（表３８）１０分間の抗体プレインキュベーションを伴うトロンビン生成アッセイ
2021509823.tif 000016
＊ソフトウェアがＥＴＰを計算できないときに「Ｎｏ  Ｔａｉｌ  Ｆｏｕｎｄ」エラーを有した群。
【０７２３】
実施例１１：抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）の合成
抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）はＢｅｈｒｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍ，２０１５，１２：３９８６−９８に記載されているように合成された。リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、ｐＨ７．４中の５ｍｇ／ｍＬの抗体は、２．５モル当量のトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィンで還元された。３７℃で２時間後、部分的に還元された抗体を室温まで冷却し、１時間３〜５モル当量のＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＭＭＡＥ（マレイミドカプロイル−バリン−シトルリン−ｐ−アミノベンゾイルオキシカルボニル−モノメチルオーリスタチンＥ）にコンジュゲートした。反応物をＰＢＳに緩衝液交換して、小分子量試薬を除去した。得られたＡＤＣの薬物抗体比（ＤＡＲ）は３〜４であった。ＤＡＲは次の式で決定された。吸光度（２４８ｎｍ）／吸光度（２８０ｎｍ）＝（ｎ×ＥｘＰＡＢ［２４８ｎｍ］＋Ｅｘ抗体［２４８ｎｍ］）／（ｎ×ＥｘＰＡＢ［２８０ｎｍ］＋Ｅｘ抗体［２８０ｎｍ］）。ここでｎはＤＡＲの変数であり、ＥｘはＰＡＢと抗体の消衰係数である。疎水性相互作用クロマトグラフィーとサイズ排除クロマトグラフィーを使用して、それぞれ、吸光度ベースのＤＡＲ推定を確証し、ＡＤＣ調製物が少なくとも９５％単量体であることを確認した。
【０７２４】
実施例１２：抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）の細胞傷害性アッセイ
ＡＤＣの細胞傷害性を評価するために、ＴＦ陽性Ａ４３１及びＨＰＡＦ−ＩＩ細胞を３８４ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−Ｏｎｅ，Ｍｏｎｒｏｅ，ＮＣ，ＵＳＡ）に、４０μｌの培地中で１ウェルあたり４×１０３細胞で播種した。ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＭＭＡＥにコンジュゲートした抗ＴＦ抗体を５ｎＭから開始して段階的に希釈した。プレートを３〜４日間インキュベートした後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（ＣＴＧ）アッセイ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ，ＵＳＡ）で溶解した。ＣＴＧの発光をＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダーで測定し、４回の反復の平均と標準偏差をＰｒｉｓｍでグラフ化した。各ＡＤＣについて、ＩＣ５０とそれに関連する９５％信頼区間は、４パラメータ結合モデルを使用してＰｒｉｓｍで計算された。
【０７２５】
図９Ａ及び９Ｂは、それぞれ、ＴＦ陽性Ａ４３１及びＨＰＡＦ−ＩＩ細胞におけるＣＴＧ発光及び計算されたＩＣ５０によって示される細胞生存率を示す。ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＭＭＡＥにコンジュゲートした群２５、４３、及び３９の抗ＴＦ抗体を含むＡＤＣは、ＴＦ陽性Ａ４３１及びＨＰＡＦ−ＩＩ細胞に細胞傷害性をもたらした。
【０７２６】
このデータは、抗ＴＦ抗体薬物コンジュゲートがｉｎ  ｖｉｔｒｏでＴＦ陽性細胞の生存率を低下させたことを示している。
【０７２７】
実施例１３：異種移植細胞株研究
免疫不全マウスにおける異種移植片研究は、ｉｎ  ｖｉｖｏでのＡＤＣの有効性を評価するために実行された。ＴＦ陽性Ａ４３１類表皮癌及びＨＰＡＦ−ＩＩ膵癌異種移植片を無胸腺ヌードマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）の側腹部に皮下移植した。腫瘍の平均サイズが１５０〜２００ｍｍ３に達したときに動物を無作為化し、週１回３週間、５ｍｇ／ｋｇの示されたＡＤＣまたはビヒクル（ＰＢＳ）で腹腔内（ｉ．ｐ．）に処理した。体重及び腫瘍サイズの評価を隔週で実行した。腫瘍サイズが１２００ｍｍ３に達するか、皮膚の潰瘍が明らかになった時点で、動物を試験から外し安楽死させた。
【０７２８】
図１０Ａ及び１０Ｂは、それぞれ、ＴＦ陽性Ａ４３１類表皮癌及びＨＰＡＦ−ＩＩ膵臓癌異種移植モデルにおける、ビヒクル処理群、ＩｇＧ１  ＡＤＣ処理群、及び抗ＴＦ  ＡＤＣ処理群の腫瘍サイズを示す。ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＭＭＡＥにコンジュゲートされた抗ＴＦ抗体２５Ａ及び４３Ｅａを含むＡＤＣは、ビヒクル処理群またはＩｇＧ１  ＡＤＣ処理群と比較して、両方の異種移植モデルにおいて腫瘍サイズを減少させた。
【０７２９】
このデータは、抗ＴＦ抗体薬物コンジュゲート２５Ａ−ｖｃ−ＭＭＡＥ及び４３Ｅａ−ｖｃ−ＭＭＡＥがｉｎ  ｖｉｖｏで腫瘍サイズを縮小するのに効果的であったことを示している。
【０７３０】
実施例１４：患者由来の異種移植（ＰＤＸ）モデルの研究
ＴＦ陽性の頭頸部癌患者由来の異種移植モデルが、無胸腺ヌードマウス（Ｅｎｖｉｇｏ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）で生成され、ｉｎ  ｖｉｖｏでのＡＤＣの有効性がさらに評価された。腫瘍は家畜で継代され、再移植のために採取された。研究動物の左側腹部に腫瘍片を片側移植し、腫瘍の平均サイズが１５０〜２００ｍｍ３に達したときに無作為に処理群に割り当てた。週１回２週間、動物を５ｍｇ／ｋｇの示されたＡＤＣで腹腔内（ｉ．ｐ．）に処理した。体重及び腫瘍サイズの評価を隔週で実行した。腫瘍サイズが１２００ｍｍ３に達するか、皮膚の潰瘍が明らかになった時点で、動物を試験から外し安楽死させた。
【０７３１】
図１１は、頭頸部癌患者由来の異種移植モデルにおけるＩｇＧ１  ＡＤＣ処理群と抗ＴＦ  ＡＤＣ処理群の腫瘍サイズを示す。ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＭＭＡＥにコンジュゲートされた抗ＴＦ抗体２５Ａ及び４３Ｅａを含むＡＤＣは、ＩｇＧ１  ＡＤＣ処理群と比較して、がん患者由来の異種移植モデルの腫瘍サイズを減少させた。
【０７３２】
このデータは、抗ＴＦ抗体薬物コンジュゲート２５Ａ−ｖｃ−ＭＭＡＥ及び４３Ｅａ−ｖｃ−ＭＭＡＥが、がん患者由来の異種移植モデルにおいてｉｎ  ｖｉｖｏで腫瘍サイズを縮小するのに効果的であったことを示している。
【０７３３】
実施例１５：ブタＴＦに対する結合親和性アッセイ
特定の抗体の能力をブタＴＦに対する結合について試験した。ブタＴＦのＢｉａｃｏｒｅベースの測定では、所定の抗ＴＦ抗体が、ＣＭ５チップ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｂｉｏ−Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に共有結合された抗ヒトＩｇＧ抗体によって捕捉された。抗ＴＦ抗体と１００ｎＭで開始するブタＴＦ−Ｈｉｓの５点の３倍濃度調整物との結合を１８０〜２４０秒間測定した。その後、抗ＴＦ抗体とＴＦ−Ｈｉｓの間の解離を１８００秒間測定した。速度論的データを分析し、１：１結合モデルを使用してグローバルに適合させた。Ｂｉａｃｏｒｅベースの実験で測定された、示されたＴＦ抗体のＫＤ値を表４０に示す。
【０７３４】
表４０に示すように、群２５と４３の抗ｈＴＦ抗体、２５Ｇ９と４３Ｄ８は、ブタＴＦに対して結合活性と交差反応性を示す。
【０７３５】
（表４０）ブタＴＦに対する抗体の動態
2021509823.tif 000017
結合なし＊：結合なしから弱い結合、報告可能なＫＤなし
【０７３６】
実施例１６：細胞ベースの結合アッセイ
ヒトＴＦ陽性がん細胞株Ａ４３１とＭＤＡ−ＭＢ−２３１及びＭａｃａｃａ  ｍｕｌａｔｔａのＴＦ陽性細胞株ＲＦ／６Ａは、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）から入手し、推奨どおりに維持した。
【０７３７】
細胞ベースの抗体結合は、参照によりその全体が援用される、Ｌｉａｏ−Ｃｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，２０１５，１０：ｅ０１２４７０８に以前に記載されるように評価された。Ｃｅｌｌｓｔｒｉｐｐｅｒ（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）によって収集した１．２×１０５細胞を、氷上で２時間、２５０ｎＭまたは１００ｎＭで開始する抗ヒトＴＦ  ＩｇＧ１抗体の１２点の１：３希釈濃度調整物と共にインキュベートした。２回洗浄した後、ＩｇＧ１抗体で標識された細胞を、それぞれ、１５０ｎＭのヤギフィコエリトリン（ＰＥ）Ｆ（ａｂ’）２フラグメントヤギ抗ヒトＩｇＧ、Ｆｃγフラグメント特異的（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ，ＵＳＡ）またはＦＩＴＣ標識Ｆ（ａｂ’）２フラグメントヤギ抗ヒトカッパ（ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｉｏｔｅｃｈ，Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，ＡＬ，ＵＳＡ）と共に氷上で３０分間インキュベートした。２回洗浄した後、死細胞をＴＯ−ＰＲＯ−３ヨージド（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で標識し、試料をＣｙｔｏＦＬＥＸフローサイトメーター（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｂｒｅａ，ＣＡ，ＵＳＡ）またはＮｏｖｏｃｙｔｅフローサイトメーター（ＡＣＥＡ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）で分析した。各希釈での蛍光強度中央値（ＭＦＩ）をプロットし、Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ，Ｌａ  Ｊｏｌｌａ，ＣＡ，ＵＳＡ）の４パラメータ結合モデルを使用して細胞のＥＣ５０を導出した。ＦＸ変換に実質的に影響を及ぼさない抗体（すなわち、２５Ａ、２５Ａ３、２５Ｇ１、４３Ｂ１、４３Ｄ７、及び４３Ｅａ）及びＦＸ変換を５０％を超えて阻害した抗体（すなわち、１Ｆ、２９Ｅ、３９Ａ、及び５４Ｅ）をアッセイに含めた。ヒトＴＦ陽性Ａ４３１細胞に対する抗ＴＦ抗体の結合の結果を図１２Ａに示す。ヒトＴＦ陽性ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞に対する抗ＴＦ抗体の結合の結果を図１２Ｂに示す。
【０７３８】
図１２Ａの全ての試験された抗ｈＴＦ抗体は、ヒトＴＦ陽性Ａ４３１細胞に対して高い親和性を示し、ＥＣ５０は約１．５０ｎＭ〜約０．３４ｎＭの範囲である。ＩｇＧ１アイソタイプ対照はＡ４３１細胞に結合しなかった（結合なし、ｎｂ）。図１２Ｂの全ての試験された抗ｈＴＦ抗体は、ヒトＴＦ陽性ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞に対して高い親和性を示し、ＥＣ５０は約１．５０ｎＭ〜約０．０６ｎＭの範囲である。ＩｇＧ１アイソタイプ対照はＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞に結合しなかった（結合なし、ｎｂ）。
【０７３９】
実施例２に記載され、表５に示されるように、抗ｈＴＦ抗体の結合親和性は、カニクイザル（Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）由来のＴＦで評価された。Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓのＴＦとＭａｃａｃａ  ｍｕｌａｔｔａのＴＦのタンパク質配列は同一である。カニクイザルに対するＴＦ特異的抗体の結合は、表４２に示すように、Ｍａｃａｃａ  ｍｕｌａｔｔａ  ＲＦ／６Ａ細胞株を使用して確認された。試験された全ての抗ｈＴＦ抗体は、ＴＦ陽性のＭａｃａｃａ  ｍｕｌａｔｔａ  ＲＦ／６Ａ細胞に対して高い親和性を示し、ＥＣ５０は約１．２８ｎＭ〜約０．１７ｎＭの範囲である。カニクイザルに結合する抗ＴＦ抗体の能力は、非ヒト霊長類モデルを用いたこれらの抗体の毒物学研究に有利である。
【０７４０】
（表４２）Ｍａｃａｃａ  ｍｕｌａｔｔａ  ＲＦ／６Ａ細胞に対する抗ＴＦ抗体の結合
2021509823.tif 000018
【０７４１】
実施例１７：Ｅ．Ｃｏｌｉ由来のＴＦに対する結合アッセイ
Ｅ．ｃｏｌｉ由来のＴＦは、ＯｍｐＡシグナル配列とＴＦ  ＥＣＤ−Ｈｉｓ６の間の融合物として発現され、アフィニティー及び陰イオン交換クロマトグラフィーにより精製された。抗ＴＦ抗体１Ｆ、２５Ａ、２５Ａ３、２５Ｇ１、２９Ｅ、３９Ａ、４３Ｂ１、４３Ｄ７、４３Ｅａ、及び５４ＥのＥｘｐｉ２９３またはＥ．ｃｏｌｉ由来のＴＦに対する結合は、タンパク質ＥＬＩＳＡ研究によって決定された。Ｅｘｐｉ２９３またはＥ．ｃｏｌｉ由来のＴＦ−Ｈｉｓでコーティングされたプレートを、増加する濃度の抗体と共にインキュベートした。ＨＲＰコンジュゲート二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ）とのインキュベーション後、発光データが得られ、Ｐｒｉｓｍを使用して９５％信頼区間でＥＣ５０を計算するために使用された。抗体のＥＣ５０及び９５％信頼区間を表４３に列挙する。
【０７４２】
（表４３）Ｅｘｐｉ２９３またはＥ．ｃｏｌｉ由来のＴＦに対する抗ＴＦ抗体の結合
2021509823.tif 000019
【０７４３】
試験された全ての抗ｈＴＦ抗体は、Ｅ．ｃｏｌｉ由来のＴＦに対して高い親和性を示し、ＥＣ５０は約０．６８ｎＭ〜約０．３１ｎＭの範囲であり、これはＥｘｐｉ２９３由来のＴＦに対する抗体の結合親和性（約０．９８ｎＭ〜０．４１ｎＭ）に匹敵する。これらの結果は、ヒト細胞株からのグリコシル化ＴＦに対して抗ＴＦ抗体を選択したが、タンパク質ＥＬＩＳＡで測定すると、抗体は同様の親和性でＥ．ｃｏｌｉ由来のＴＦに結合できることを示している。
【０７４４】
実施例１８：トロンビン生成アッセイ（ＴＧＡ）
ＴＧＡアッセイは、ＳＴＡＧＯが製造及び販売する校正済み自動トロンボグラム（ＣＡＴ）装置（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ  Ｓｔａｇｏ  ＳＡＳ，Ａｓｎｉｅｒｅｓ  ｓｕｒ  Ｓｅｉｎｅ，Ｆｒａｎｃｅ）を使用して実行された。参照によりその全体が援用される、Ｓａｍａｍａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｒｏｍｂ  Ｒｅｓ，２０１２，１２９：ｅ７７−８２を参照されたい。試験方法の設計は、血漿源が１００μｇ／ｍＬのトウモロコシトリプシン阻害剤（クエン酸塩／ＣＴＩ）を補充した１１ｍＭクエン酸塩中で採取された正常プール血漿（ＮＰＰ）であることを除いて、標準のＣＡＴアッセイ測定と同等であった。抗ＴＦ抗体を０、１０、５０及び１００ｎＭで濃度調整し、クエン酸／ＣＴＩ中でＮＰＰと混合した。再脂質化したＴＦを９６ウェルアッセイプレートに加え、続いて抗体／ＮＰＰ混合物を添加した。１０分間のインキュベーション後、または再脂質化ＴＦと抗体／ＮＰＰを混合した直後に、カルシウムとトロンビン基質の添加によりトロンビン生成が開始された。ＳＴＡＧＯソフトウェアは、次のパラメータを報告するために使用された：ピークＩＩａ（ロンビン生成曲線上の生成された最高のトロンビン濃度［ｎＭ］）；ラグタイム（アッセイ開始から１０ｎＭのトロンビンが形成されるまでの時間［分］）；ＥＴＰ（内因性トロンビンポテンシャル、曲線下面積［ｎＭ×分］）；ｔｔピーク（アッセイ開始からピークＩＩａまでの時間［分］）。同じプレート上の抗体なしの血漿対照と比較した、各抗体の存在下でのトロンビン生成ピークのパーセント（ピークＩＩａ％）、内因性トロンビンポテンシャルのパーセント（ＥＴＰ％）、及びｔｔピークパーセント（ｔｔピーク％）も報告された。本明細書で使用されるとき、「トロンビン生成アッセイ」（ＴＧＡ）という用語は、この実施例で使用されるＴＧＡを指す。
【０７４５】
カルシウム及びトロンビン基質の添加前に抗体インキュベーションなしでの、１Ｆ、２５Ａ、２５Ａ３、２５Ｇ１、２９Ｅ、３９Ａ、４３Ｂ１、４３Ｄ７、４３Ｅａ、５４Ｅ、ＴＦ−０１１、５Ｇ９、及び１０Ｈ１０から選択された各抗体の存在下でのピークＩＩａ、ラグタイム、ＥＴＰ、ｔｔピーク、ピークＩＩａ％、ＥＴＰ％、及びｔｔピーク％を表４４に示す。カルシウム及びトロンビン基質の添加前に１０分間の抗体インキュベーションを伴った、１Ｆ、２５Ａ、２５Ａ３、２５Ｇ１、２９Ｅ、３９Ａ、４３Ｂ１、４３Ｄ７、４３Ｅａ、５４Ｅ、ＴＦ−０１１、５Ｇ９、及び１０Ｈ１０から選択された各抗体の存在下でのピークＩＩａ、ラグタイム、ＥＴＰ、ｔｔピーク、ピークＩＩａ％、ＥＴＰ％、及びｔｔピーク％を表４５に示す。抗体プレインキュベーションなしの１００ｎＭ抗ＴＦ抗体の存在下でのトロンビン生成曲線を図１３Ａ及び１３Ｂにプロットする。抗体プレインキュベーションなしの抗ＴＦ抗体の濃度調整物の存在下でのトロンビン濃度のピークを図１３Ｃにプロットする。
【０７４６】
図１３Ａ、１３Ｂ、及び１３Ｃ、ならびに表４４に示すように、抗体のプレインキュベーションなしの条件下で、１００ｎＭの抗体濃度での、１Ｆ、２９Ｅ、３９Ａ、５４Ｅが、ピークＩＩａ濃度を、それぞれ９２、７６、９１、及び７０％減少させた。同様に、１００ｎＭの５Ｇ９及びＴＦ−０１１は、ピークＩＩａ濃度をそれぞれ９２％及び９１％阻害した。２つの最高濃度の１Ｆ、３９Ａ、５Ｇ９、及びＴＦ−０１１の存在下でトロンビン生成が大幅に減少し、内因性トロンビン生成（ＥＴＰ）の計算が妨げられ、ピークＩＩａ／トロンビン生成（ｔｔピーク）までの時間が５０ｎＭ及び１００ｎＭでそれぞれ少なくとも２８４％及び３５３％増加した。対照的に、群２５の抗体は、ピークＩＩａ濃度またはｔｔピークに９％以上影響を与えなかった。グループ４３の抗体と１０Ｈ１０は、ピークＩＩａ濃度に対して穏やかな干渉を示した。１００ｎＭの４３Ｂ１、４３Ｄ７、４３Ｅａ、及び１０Ｈ１０は、ピークＩＩａ濃度をそれぞれ３３、４４、１３、及び３４％低減した。さらに、１００ｎＭの４３Ｂ１、４３Ｄ７、及び１０Ｈ１０は、ｔｔピークで少なくとも２９％の増加を示した。しかしながら、群４３抗体及び１０Ｈ１０に対する、ピークＩＩａ濃度の観察された低下とｔｔピークの遅延は、ＥＴＰの１０％以上の低下をもたらさなかった。
【０７４７】
同様の結果が、１０分間の抗体プレインキュベーションを伴う条件下で表４５に示されている。１００ｎＭの抗体濃度では、１Ｆ、２９Ｅ、３９Ａ、５４ＥはピークＩＩａ濃度をそれぞれ９３、７２、９３、及び８７％減少させた。同様に、１００ｎＭの５Ｇ９及びＴＦ−０１１は、ピークＩＩａ濃度をそれぞれ９２％及び９１％阻害した。２つの最高濃度の１Ｆ、３９Ａ、５４Ｅ、及びＴＦ−０１１、ならびに、全ての試験された濃度の５Ｇ９の存在下でトロンビン生成が大幅に減少し、内因性トロンビン生成（ＥＴＰ）の計算が妨げられ、ピークＩＩａ／トロンビン生成（ｔｔピーク）までの時間が５０ｎＭ及び１００ｎＭでそれぞれ少なくとも３０３％及び３７１％増加した。対照的に、群２５の抗体は、ピークＩＩａ濃度を減少させず、ｔｔピークを増加させなかった。グループ４３の抗体と１０Ｈ１０は、ピークＩＩａ濃度に対して穏やかな干渉を示した。１００ｎＭの４３Ｂ１、４３Ｄ７、４３Ｅａ、及び１０Ｈ１０は、ピークＩＩａ濃度をそれぞれ４１、５６、１３、及び４８％低減した。さらに、１００ｎＭの４３Ｂ１、４３Ｄ７、及び１０Ｈ１０は、ｔｔピークで少なくとも３３％の増加を示した。しかしながら、群４３抗体及び１０Ｈ１０に対する、ピークＩＩａ濃度の観察された低下とｔｔピークの遅延は、ＥＴＰの１１％以上の低下をもたらさなかった。
【０７４８】
全体として、これらの結果は、３つ全てのＴＧＡパラメータ（ＥＴＰ、ピークＩＩａ濃度、及びｔｔピーク）を考慮に入れると、群２５の抗体が凝固カスケードの最後から２番目のステップで完全に不活性であることを示している。
【０７４９】
（表４４）抗体プレインキュベーションなしのトロンビン生成アッセイ
2021509823.tif 000020
2021509823.tif 000021
＊ソフトウェアがＥＴＰを計算できないときに「Ｎｏ  Ｔａｉｌ  Ｆｏｕｎｄ」エラーを有した群。
【０７５０】
（表４５）１０分間の抗体プレインキュベーションを伴うトロンビン生成アッセイ
2021509823.tif 000022
2021509823.tif 000023
＊ソフトウェアがＥＴＰを計算できないときに「Ｎｏ  Ｔａｉｌ  Ｆｏｕｎｄ」エラーを有した群。
【０７５１】
実施例１９：前述の抗ＴＦ抗体によるＦＸａ変換アッセイ及びＦＶＩＩａ競合アッセイ
以前に記載されたＴＦ特異的抗体ＴＦ−０１１、５Ｇ９、及び１０Ｈ１０（参照によりその各々の全体が援用される、Ｂｒｅｉｊ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ，２０１４，７４：１２１４−１２２６；Ｖｅｒｓｔｅｅｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２００８，１１１：１９０−１９９）は、ＦＸａ変換アッセイ及びＦＶＩＩａ競合アッセイで試験された。
【０７５２】
ＴＦに対するヒト抗体の存在下でＴＦ：ＦＶＩＩａがＦＸをＦＸａに変換する能力を評価するために、参照によりその全体が援用される、Ｌａｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ，２０１０，２８５：１９９５９−１９９６６に記載されているように、細胞ベースのＦＸ変換アッセイを実行した。簡潔に述べると、５×１０４のＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）を組織培養処理した黒色の９６ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−Ｏｎｅ，Ｍｏｎｒｏｅ，ＮＣ，ＵＳＡ）に播種し、一晩培養した。細胞培養培地を除去し、１．５ｍＭ  ＣａＣｌ２を含むＨＥＰＥＳ緩衝液に２００ｎＭの最終濃度のＦＸを添加した後、細胞を３７℃で１５分間、濃度調整物と共にインキュベートした。最終濃度が２０ｎＭのＦＶＩＩａを含むＴＦ：ＦＶＩＩａバイナリー複合体を再構成し、細胞を３７℃で５分間インキュベートした。黒色９４ウェルプレート中でエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）で反応をクエンチした後、生成されたＦＸａを、Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒｏｎｅ  ３５５励起フィルター、Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒｏｎｅ  ４６０吸収フィルター、ＬＡＮＣＥ／ＤＥＬＦＩＡトップミラーを備えたＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ，ＵＳＡ）で、５０μＭのＳＮ−７  ６−アミノ−１−ナフタレンスルホンアミドベースの蛍光基質（Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｅｓｓｅｘ  Ｊｕｎｃｔｉｏｎ，ＶＴ，ＵＳＡ）によって測定した。抗体なし対照と比較した抗ＴＦ抗体の濃度調整物の存在下でのＦＸａ変換百分率（ＦＸａ％）を図１４Ａにプロットする。
【０７５３】
ＦＶＩＩａとＴＦに対するヒト抗体との競合を評価するために、ＴＦ陽性ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）を最初に、ＴＦに対するヒト抗体の濃度調整物またはアイソタイプ対照と共に氷上で１時間インキュベートした。続いて、Ａｌｅｘａ４８８にコンジュゲートしたＦＶＩＩ−Ｆｃを２０ｎＭの最終濃度で抗体細胞混合物に添加した。氷上でさらに１時間インキュベートした後、細胞を洗浄し、生細胞識別色素で染色し、フローサイトメトリーで分析した。生細胞からのＡｌｅｘａ４８８蛍光データは、蛍光強度中央値（ＭＦＩ）を使用して要約された。ＦＶＩＩ−Ｆｃ結合は、ＦＶＩＩ−Ｆｃ結合％＝［ＭＦＩ抗体標識細胞−ＭＦＩ未染色細胞］／［ＭＦＩＩｇＧ１対照標識細胞−ＭＦＩ未染色細胞］で要約された。アイソタイプ対照と比較した抗ＴＦ抗体濃度調整物の存在下でのＦＶＩＩａ結合の百分率（ＦＶＩＩａ％）を図１４Ｂにプロットする。
【０７５４】
図１４Ａに示すように、ＴＦ−０１１及び５Ｇ９は、２５、５０、及び１００ｎＭの濃度でＦＸ変換を５７〜５９％及び６７〜７０％阻害した。１０Ｈ１０は、これら３つの濃度でＦＸ変換を有意に阻害しなかった。
【０７５５】
図１４Ｂに示すように、ＴＦ−０１１はＦＶＩＩと効果的に競合したが、５Ｇ９と１０Ｈ１０は、最高濃度の抗体でそれぞれ２５％と１０％未満の競合を示した。
【０７５６】
これらの結果は、５Ｇ９が主に基質ＦＸ結合と競合し、ＦＸ変換とトロンビン生成の阻害をもたらすことを示している。ＴＦ−０１１は、ＴＦに対する結合についてＦＶＩＩａと競合することにより、トロンビンの生成を阻害する。しかしながら、１０Ｈ１０は、ＴＦに対するＦＶＩＩａの結合に実質的に影響を与えることなく、ＴＦ−ＦＶＩＩａ媒介シグナル伝達を阻害する。これらの発見は、参照によりその全体の各々が援用される、Ｈｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ，１９９８，２７５：８７３−８９４；Ｒｕｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ，１９９１，２７８：７２９−７３３；及びＴｅｐｌｙａｋｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌ，２０１７，３６：１３９−１４４に記載されている以前の観察と一致する。
【０７５７】
実施例２０：抗体競合アッセイ
Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ抗体は、製造元のプロトコルに従って、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４８８  ５−スルホ−ジクロロフェノールエステル（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して生成された。ゲルろ過（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）により、抗体色素コンジュゲート調製物から過剰なＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ色素を除去した。
【０７５８】
最初のＴＦに対するヒト抗体と２５Ａ３との競合を評価するために、ＴＦ陽性ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）を最初に、ＴＦに対する最初のヒト抗体の濃度調整物と共に氷上で１時間インキュベートした。続いて、Ａｌｅｘａ４８８にコンジュゲートした最終濃度２０ｎＭの２５Ａ３を抗体細胞混合物に添加した。氷上でさらに１時間インキュベートした後、細胞を洗浄し、生細胞識別色素で染色し、フローサイトメトリーで分析した。生細胞からのＡｌｅｘａ４８８蛍光データは、蛍光強度中央値を使用して要約された。２５Ａ３結合は、２５Ａ３結合％＝［ＭＦＩ抗体標識細胞−ＭＦＩ未染色細胞］／［ＭＦＩＩｇＧ１対照標識細胞−ＭＦＩ未染色細胞］で要約された。
【０７５９】
最初のＴＦに対するヒト抗体と４３Ｄ７との競合を評価するために、ＴＦ陽性ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）を最初に、ＴＦに対する最初のヒト抗体の濃度調整物と共に氷上で１時間インキュベートした。続いて、Ａｌｅｘａ４８８にコンジュゲートした最終濃度２０ｎＭの４３Ｄ７を抗体細胞混合物に添加した。氷上でさらに１時間インキュベートした後、細胞を洗浄し、生細胞識別色素で染色し、フローサイトメトリーで分析した。生細胞からのＡｌｅｘａ４８８蛍光データは、蛍光強度中央値を使用して要約された。４３Ｄ７結合は、４３Ｄ７結合％＝［ＭＦＩ抗体標識細胞−ＭＦＩ未染色細胞］／［ＭＦＩＩｇＧ１対照標識細胞−ＭＦＩ未染色細胞］で要約された。
【０７６０】
最初のＴＦに対するヒト抗体と３９Ａとの競合を評価するために、ＴＦ陽性ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）を最初に、ＴＦに対する最初のヒト抗体の濃度調整物と共に氷上で１時間インキュベートした。続いて、Ａｌｅｘａ４８８にコンジュゲートした最終濃度２０ｎＭの３９Ａを抗体細胞混合物に添加した。氷上でさらに１時間インキュベートした後、細胞を洗浄し、生細胞識別色素で染色し、フローサイトメトリーで分析した。生細胞からのＡｌｅｘａ４８８蛍光データは、蛍光強度中央値を使用して要約された。３９Ａ結合は、３９Ａ結合％＝［ＭＦＩ抗体標識細胞−ＭＦＩ未染色細胞］／［ＭＦＩＩｇＧ１対照標識細胞−ＭＦＩ未染色細胞］で要約された。
【０７６１】
２５Ａ３結合％、４３Ｄ７結合％、及び３９Ａ結合％は、それぞれ図１５Ａ及び１５Ｂ、図１６Ａ及び１６Ｂ、ならびに図１７Ａ及び１７Ｂに示されている。群２５及び４３の抗体、５Ｇ９、ならびに１０Ｈ１０は、２５Ａ３結合％及び４３Ｄ７結合％を低減し、３９Ａ結合％を低減しなかった。群１、２９、３９、及び５４の抗体、ならびにＴＦ−０１１は、３９Ａ結合％を低減し、２５Ａ３結合％及び４３Ｄ７結合％を低減しなかった。
【０７６２】
抗体競合アッセイの結果は、群２５及び４３の抗体、５Ｇ９、ならびに１０Ｈ１０が、ヒトＴＦの同じまたは重複するエピトープに結合する可能性があるか、アロステリックメカニズムを介して相互のＴＦ結合に影響を与える可能性があることを示しているが、この開示のいずこかに記載されているように、キメラＴＦコンストラクトマッピング実験は、群２５の抗体、群４３の抗体、５Ｇ９、及び１０Ｈ１０が異なるエピトープに結合することを示している。さらに、抗体競合アッセイの結果は、群１、２９、３９、及び５４の抗体、ならびにＴＦ−０１１が、ヒトＴＦの同じまたは重複するエピトープに結合する可能性があるか、アロステリックメカニズムを介して相互のＴＦ結合に影響を与える可能性があることを示しているが、この開示のいずこかに記載されているように、キメラＴＦコンストラクトマッピング実験は、群２９、３９、及び５４の抗体がＴＦ−０１１のエピトープとは異なるエピトープに結合することを示している。
【０７６３】
実施例２１：抗ＴＦ抗体の細胞内移行
抗ＴＦ抗体の細胞内移行を評価するために、細胞傷害性アッセイが、参照によりその全体が援用される、Ｌｉａｏ−Ｃｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，２０１５，１０：ｅ０１２４７０８に記載されるように実行された。簡潔に述べると、細胞を３８４ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−Ｏｎｅ，Ｍｏｎｒｏｅ，ＮＣ，ＵＳＡ）に、４０μｌの培地中で１ウェルあたり４×１０３細胞で播種した。抗体とチューブリン阻害剤モノメチルオーリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）（Ｍｏｒａｄｅｃ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）にコンジュゲートした抗ヒトＦｃ  Ｆａｂを、それぞれ５及び３０ｎＭから開始して段階的に希釈した。ＭＭＡＦにコンジュゲートした抗ヒトＦｃ  Ｆａｂは、ＤＡＲが１．２〜１．５のヒトＩｇＧのＦｃ領域に特異的なポリクローナル抗体からなった。プレートを３日間インキュベートした後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（ＣＴＧ）アッセイ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ，ＵＳＡ）で溶解した。ＣＴＧの発光をＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダーで測定し、４回の反復の平均と標準偏差をＰｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ，Ｌａ  Ｊｏｌｌａ，ＣＡ，ＵＳＡ）でグラフ化した。各抗ＴＦ抗体について、ＩＣ５０とそれに関連する９５％信頼区間は、４パラメータ結合モデルを使用してＰｒｉｓｍで計算された。抗ＴＦ抗体及び抗ＴＦ抗体Ｆａｂ：ＭＭＡＦ複合体とのインキュベーション後の細胞生存率の結果を図１８Ａ及び１８Ｂに示す。ＩＣ５０値の９５％信頼区間を表４６に示す。
【０７６４】
抗ＴＦ抗体の細胞内移行はまた、細胞内移行した蛍光及びクエンチされた表面蛍光に基づく定量アッセイによって評価された。細胞表面の蛍光消光を、Ｌｉａｏ−Ｃｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，２０１５，１０：ｅ０１２４７０８に記載されるように評価した。簡潔に述べると、１．２×１０５のＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を、氷上で２時間、培地中で１００ｎＭのＡ４８８コンジュゲート抗体と共にプレインキュベートした。２回洗浄した後、細胞を冷培地に再懸濁し、３７℃で４時間までパルスした。細胞を急速に冷却し、３００ｎＭの抗Ａ４８８抗体（クローン１９Ａ）と共に、またはそれを伴わずに、氷上で３０分間インキュベートした。２回洗浄した後、死細胞をＤＡＰＩで標識し、試料をＮｏｖｏｃｙｔｅフローサイトメーター（ＡＣＥＡ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で分析した。各抗Ａ４８８  ｍＡｂ濃度での蛍光強度中央値（ＭＦＩ）をアイソタイプ対照に対して正規化して、正規化されたＭＦＩ百分率を取得した。細胞内移行した蛍光は、不完全な表面クエンチングを補正することにより、クエンチされた試料データとクエンチされていない試料データから計算された：１−（Ｎ１−Ｑ１）／（Ｎ１−（Ｎ１Ｑ０／Ｎ０））、ここでＮ１＝各時点（ｔ１）でのクエンチされていないＭＦＩ；Ｑ１＝ｔ１でのクエンチされたＭＦＩ；Ｑ０＝氷上で保持されている（ｔ０）試料についてのクエンチされたＭＦＩ；Ｎ０＝ｔ０でのクエンチされていないＭＦＩ。Ａ４８８にコンジュゲートした抗ＴＦ抗体の細胞内移行％を図１８Ｃに示す。
【０７６５】
Ｆａｂ：ＭＭＡＦはＴＦ特異的抗体のＦｃ領域に結合するため、これらの複合体の細胞取り込みが細胞死を引き起こす可能性がある。ＴＦ特異的抗体のみでは、ＴＦ陽性Ａ４３１細胞の３日間培養における細胞生存率に影響がなかった（図１８Ａ）が、Ｆａｂ：ＭＭＡＦと複合体を形成したＴＦ特異的抗体は、０．０７〜０．１４ｎＭのＩＣ５０値の範囲で用量依存的な細胞殺傷を示した（図１８Ｂ）。
【０７６６】
細胞取り込みは、蛍光標識されたＴＦ特異的抗体で確認された。細胞内移行した蛍光とクエンチされた表面蛍光に基づく定量アッセイでは、ＴＦ特異的抗体は、４時間のインキュベーション後に２８〜３７％の細胞内移行を示した（図１８Ｃ）。
【０７６７】
これらの結果は、試験された抗ＴＦ抗体がＴＦ陽性細胞への細胞内移行と毒素送達を薬用化できることを示している。
【０７６８】
（表４６）ランキング付きＡＤＣデータ（連続インキュベーション）
2021509823.tif 000024
【０７６９】
（表４７）ランキング付きＡＤＣデータ（４時間インキュベーション）
2021509823.tif 000025
【０７７０】
実施例２２：抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）の細胞ベースの結合アッセイ
ＡＤＣの細胞結合特性を評価するために、内因性ヒトＴＦ発現ＨＣＴ１１６細胞に対する抗ＴＦ抗体と抗ＴＦ  ＡＤＣの結合を、参照によりその全体が援用される、Ｌｉａｏ−Ｃｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，２０１５，１０：ｅ０１２４７０８に以前に記載されているように評価した。簡潔に述べると、Ｃｅｌｌｓｔｒｉｐｐｅｒ（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）によって収集した１．２×１０５細胞を、氷上で２時間、１００ｎＭで開始する抗ヒトＴＦ  抗体またはＡＤＣの１２点の１：３希釈濃度調整物と共にインキュベートした。２回洗浄した後、抗体またはＡＤＣで標識された細胞を、それぞれ、１５０ｎＭのヤギフィコエリトリン（ＰＥ）Ｆ（ａｂ’）２フラグメントヤギ抗ヒトＩｇＧ、Ｆｃγフラグメント特異的（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ，ＵＳＡ）またはＦＩＴＣ標識Ｆ（ａｂ’）２フラグメントヤギ抗ヒトカッパ（ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｉｏｔｅｃｈ，Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，ＡＬ，ＵＳＡ）と共に氷上で３０分間インキュベートした。２回洗浄した後、死細胞をＴＯ−ＰＲＯ−３ヨージド（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で標識し、試料をＣｙｔｏＦＬＥＸフローサイトメーター（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｂｒｅａ，ＣＡ，ＵＳＡ）またはＮｏｖｏｃｙｔｅフローサイトメーター（ＡＣＥＡ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）で分析した。各希釈での蛍光強度中央値（ＭＦＩ）をプロットし、Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ，Ｌａ  Ｊｏｌｌａ，ＣＡ，ＵＳＡ）の４パラメータ結合モデルを使用して細胞のＥＣ５０を導出した。図１９Ａ及び１９Ｂは、それぞれ抗ＴＦ抗体及び抗ＴＦ  ＡＤＣの結合曲線を示す。図１９Ｃは、報告可能な細胞のＥＣ５０と、抗ＴＦ抗体及びＡＤＣの９５％信頼区間を示す。
【０７７１】
図１９Ａ、１９Ｂ、及び１９Ｃに示すように、ＴＦ特異的ＡＤＣの細胞結合特性は、ＴＦ特異的抗体の細胞結合特性に匹敵する。これは、ＡＤＣのコンジュゲーションプロセスがＡＤＣのＴＦ特異的抗体部分の細胞結合特性を変化させなかったことを示している。
【０７７２】
実施例２３：抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）の細胞傷害性アッセイ
ＡＤＣの細胞傷害性を評価するために、Ａ４３１細胞を３８４ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−Ｏｎｅ）に播種した。ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＭＭＡＥにコンジュゲートした抗ＴＦ抗体を示すように段階的に希釈した。ＴＦ特異的ＡＤＣをＡ４３１細胞に添加し、７２時間または４時間のいずれかのインキュベーションを行った後、過剰なＡＤＣを除去し、さらに６８時間培養した。Ａ４３１細胞は、処理後にＣＴＧアッセイ試薬で溶解された。ＣＴＧの発光を測定し、４回の反復の平均と標準偏差をＰｒｉｓｍでグラフ化した。各ＡＤＣについて、ＩＣ５０とそれに関連する９５％信頼区間は、４パラメータ結合モデルを使用してＰｒｉｓｍで計算された。
【０７７３】
図２０Ａは、７２時間の連続インキュベーション後の抗ＴＦ  ＡＤＣの調製物での細胞生存率を示す。図２０Ｂは、４時間のインキュベーション、その後の過剰なＡＤＣの除去及びさらなる６８時間の培養後の抗ＴＦ  ＡＤＣの調製物での細胞生存率を示す。図２０Ｃは、連続処理とパルス処理の両方でのＡＤＣの報告可能なＩＣ５０値を示す。連続処理及びパルス処理のＩＣ５０の９５％信頼区間をそれぞれ表４６及び表４７に示す。
【０７７４】
どちらの処理も効果的な細胞殺傷をもたらし、７２時間のインキュベーションと比較して４時間のインキュベーション後に過剰なＡＤＣが培養物から除去された場合、ＩＣ５０は２．４〜４．７倍増加した。過剰な２５Ａ３及び３９Ａ  ＡＤＣの除去がＩＣ５０に与える影響は最も小さく、それぞれ０．０７及び０．０５ｎＭから２．７及び２．４倍に増加した。
【０７７５】
これらの結果は、ＴＦ特異的抗体と同様に、ＴＦ特異的ＡＤＣが実質的な細胞内移行を受けることを示している。
【０７７６】
実施例２４：ＦＶＩＩａの存在下での細胞傷害性アッセイ
ＦＶＩＩａがＴＦ特異的ＡＤＣの活動を妨害するかどうかを理解するために、ＦＶＩＩａの非存在下または存在下で、Ａ４３１細胞をＴＦ特異的ＡＤＣ（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＭＭＡＥにコンジュゲートした抗ＴＦ抗体）で４時間処理し、６８時間後に細胞生存率を測定した。Ａ４３１細胞は、抗ＴＦ  ＡＤＣ濃度調整物を添加する前に、５０ｎＭのＦＶＩＩａと共に、または伴わずに３０分間プレインキュベートした。細胞生存率は、ＣＴＧアッセイによって決定された。４回の反復の平均と標準偏差をＰｒｉｓｍでグラフ化した。各ＡＤＣについて、ＩＣ５０は、４パラメータ結合モデルを使用してＰｒｉｓｍで計算された。
【０７７７】
ＦＶＩＩａの非存在下または存在下での抗ＴＦ  ＡＤＣの濃度調整物後の細胞生存率を、それぞれ図２１Ａ及び２１Ｂに示す。ＦＶＩＩａの非存在下または存在下でのＡＤＣの報告可能なＩＣ５０値を図２１Ｃに示す。
【０７７８】
ＦＶＩＩａと競合したＡＤＣ（２９Ｅ、３９Ａ、５４Ｅ、及びＴＦ−０１１）は、ＦＶＩＩａの存在によって少なくとも２．３倍の悪影響を受けたが、ＦＶＩＩａと競合しなかったＡＤＣ（群２５及び４３の抗体）は、ＦＶＩＩａの非存在または存在下で同等に有効であった。
【０７７９】
これらの結果は、ＦＶＩＩａが群２５及び４３の抗ＴＦ  ＡＤＣの活性を妨害しないことを示している。
【０７８０】
実施例２５：追加のがん細胞株に対する細胞傷害性アッセイ
異なる細胞株の細胞表面のＴＦコピー数を評価するために、１．２×１０５の細胞を採取し、１３３ｎＭのマウスＩｇＧ２ａバックボーンの抗ヒトＴＦ抗体５Ｇ９と氷上で２時間インキュベートした。２回洗浄した後、ＱＩＦＩＫＩＴビーズ（Ａｇｉｌｅｎｔ）及び抗ＴＦ抗体で標識された細胞を１５０ｎＭのヤギフィコエリトリン（ＰＥ）Ｆ（ａｂ’）２フラグメントヤギ抗マウスＩｇＧ、Ｆｃ−ガンマフラグメント特異的（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）と共に氷上で３０分間インキュベートした。２回洗浄した後、死細胞をＴＯ−ＰＲＯ−３ヨウ化物（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で標識し、試料をＣｙｔｏＦＬＥＸフローサイトメーター（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ）で分析した。単一の生細胞をゲートした後、ＭＦＩはＦｌｏｗＪｏ（Ｆｌｏｗｊｏ，Ａｓｈｌａｎｄ，ＯＲ，ＵＳＡ）を使用して決定された。ＱＩＦＩＫＩＴビーズを使用した標準曲線は、コピー数を決定するために５パラメータ結合モデルを使用してＰｒｉｓｍで生成された。定量の下限は１．９×１０３の抗体結合部位（コピー数とも呼ばれる）であり、定量の上限は８．０×１０５の抗体結合部位であった。
【０７８１】
Ａ４３１、ＣＨＯ、ＨＣＴ−１１６、ＨＰＡＦ−ＩＩ、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、及びＲＦ／６ＡのＴＦコピー数を図２２Ａに列挙する。表面ＴＦのレベルは、Ａ４３１、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、及びＨＰＡＦ−ＩＩセルで１．９×１０５〜５．７×１０５の範囲であった。ＨＣＴ−１１６細胞は２．２×１０４コピーの表面ＴＦを発現し、ＣＨＯ細胞におけるＴＦ発現は定量限界（ＢＬＯＱ）未満であった。５Ｇ９はＭａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ  ＴＦと交差反応し、Ｍ．ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓとｍｕｌａｔｔａの間のＴＦタンパク質配列は同一であるため、Ｍ．ｍｕｌａｔｔａ細胞株ＲＦ／６Ａの表面ＴＦのレベルも認定された（１．７×１０４コピー）。
【０７８２】
抗ＴＦ  ＭＭＡＥ  ＡＤＣの濃度調整物の存在下でのＨＣＴ−１１６、ＣＨＯ、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、及びＨＰＡＦ−ＩＩ細胞の細胞生存率を、それぞれ図２２Ｂ、２２Ｃ、２２Ｄ、及び２２Ｅに示した。
【０７８３】
ＴＦ特異的ＡＤＣは、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１及びＨＰＡＦ−ＩＩがん細胞株の生存率を効果的に低減した（図２２Ｄ及び２２Ｅ）。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１及びＨＰＡＦ−ＩＩ細胞での活性と比較して、ＡＤＣはＨＣＴ−１１６細胞での効果が低く、最高濃度でいくらかの活性があり、報告可能なＩＣ５０値はなかった（図２２Ｂ）。ＴＦ特異的ＡＤＣは、ＣＨＯ培養の生存率に影響を及ぼさなかった（図２２Ｃ）。
【０７８４】
これらの結果は、抗ＴＦ  ＡＤＣの細胞傷害性がＴＦ陽性細胞に特異的であることを示している。
【０７８５】
Ａ４３１、ＨＰＡＦ−ＩＩ、及びＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞でのＡＤＣの細胞殺傷効果をランク付けすると、上位４つのＡＤＣは降順で３９Ａ、２９Ｅ、２５Ｇ１、及び２５Ａ３であった（表４６）。Ａ４３１細胞をＴＦ特異的ＡＤＣと４時間インキュベートした後、洗い流した場合上位４つのＡＤＣは降順で３９Ａ、２５Ｇ１、２５Ａ３及び２９Ｅであった（表４７）。したがって、凝固に影響を与えない上位２位のＡＤＣは、２５Ｇ１と２５Ａ３であった。
【０７８６】
実施例２６：抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）の存在下での細胞内微小管ネットワーク
ＡＤＣの作用機序を説明するために、細胞の細胞内微小管ネットワークの免疫蛍光が実行された。Ｔｈｅｕｎｉｓｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ，２００６，４０９：２５１−２８４を参照されたい。簡潔に述べると、Ａ４３１またはＨＰＡＦ−ＩＩ細胞を８ウェルポリ−Ｄ−リジン処理スライド（Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｉｎｃ，Ｃｏｒｎｉｎｇ，ＮＹ，ＵＳＡ）に播種した。１日後、培養培地を５ｎＭのＡＤＣを含む培地と交換した。２０時間のＡＤＣ曝露後、細胞を４％パラホルムアルデヒド（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によって室温で１５分間固定した。ＰＢＳで３回洗浄した後、細胞を０．３％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００及び５％正常ヤギ血清を含むＰＢＳで１時間透過処理した。次に、微小管ネットワークを、１％ＢＳＡ及び０．３％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００を含むＰＢＳ中の抗チューブリン（１１Ｈ１０）ウサギｍＡｂ（Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４８８コンジュゲート）（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｄａｎｖｅｒｓ，ＭＡ，ＵＳＡ）で３時間染色した。３回洗浄した後、ＤＡＰＩ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を含むＰｒｏＬｏｎｇ  Ｇｏｌｄ  Ａｎｔｉｆａｄｅ試薬を細胞に添加し、０．１７ｍｍカバースリップを使用してスライドを顕微鏡用にマウントした。画像の取得は、ｓＣＭＯＳカメラを備えたＤＭｉ８蛍光顕微鏡（Ｌｅｉｃａ  Ｍｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｂｕｆｆａｌｏ  Ｇｒｏｖｅ，ＩＬ，ＵＳＡ）で実行した。Ｌｅｉｃａ  ＬＡＳ  Ｘソフトウェアを使用して、システムに最適化された６〜７ミクロンのＺスタックを取得した。このＺスタックからの鮮明な２次元画像は、拡張被写界深度（ＥＤＦ）画像機能を使用して自動的に作成された。Ａ４３１またはＨＰＡＦ−ＩＩ細胞のチューブリン染色の代表的な画像をそれぞれ図２３Ａ及び２３Ｂに示す。
【０７８７】
アイソタイプ対照ＡＤＣは微小管ネットワークに影響を与えなかったが、２５Ａ３  ＡＤＣはＡ４３１とＨＰＡＦ−ＩＩの両方の細胞で微小管ネットワークを効果的に破壊した。
【０７８８】
これらの結果は、ＭＭＡＥベースの抗ＴＦ  ＡＤＣが細胞内微小管ネットワークの破壊を介してＴＦ陽性がん細胞に細胞傷害性を誘導することを示している。
【０７８９】
実施例２７：ＨＵＶＥＣにおける細胞傷害性アッセイ及びＧ２／Ｍ停止
ヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）の細胞表面のＴＦコピー数を評価するために、１．２×１０５のＨＵＶＥＣを採取し、１３３ｎＭのマウスＩｇＧ２ａバックボーンの抗ヒトＴＦ抗体５Ｇ９と氷上で２時間インキュベートした。２回洗浄した後、ＱＩＦＩＫＩＴビーズ（Ａｇｉｌｅｎｔ）及び抗ＴＦ抗体で標識された細胞を１５０ｎＭのヤギフィコエリトリン（ＰＥ）Ｆ（ａｂ’）２フラグメントヤギ抗マウスＩｇＧ、Ｆｃ−ガンマフラグメント特異的（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）と共に氷上で３０分間インキュベートした。２回洗浄した後、死細胞をＴＯ−ＰＲＯ−３ヨウ化物（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で標識し、試料をＣｙｔｏＦＬＥＸフローサイトメーター（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ）で分析した。単一の生細胞をゲートした後、ＭＦＩはＦｌｏｗＪｏ（Ｆｌｏｗｊｏ，Ａｓｈｌａｎｄ，ＯＲ，ＵＳＡ）を使用して決定された。ＱＩＦＩＫＩＴビーズを使用した標準曲線は、コピー数を決定するために５パラメータ結合モデルを使用してＰｒｉｓｍで生成された。定量の下限は１．９×１０３の抗体結合部位（コピー数とも呼ばれる）であり、定量の上限は８．０×１０５の抗体結合部位であった。
【０７９０】
傷害に応答して、炎症性及び血管新生因子は、血管系における表面ＴＦの発現を一時的に増加させる。参照によりその全体が援用される、Ｈｏｌｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２０１０，５９：２５９−５９２を参照されたい。細胞培養におけるＴＦの一時的な上方制御は、炎症性サイトカインの組み合わせ（５ｎｇ／ｍＬのＩＬ１−ベータ、２５ｎｇ／ｍＬのＴＮＦ−アルファ、及び５０ｎｇ／ｍＬのＶＥＧＦ）によってＨＵＶＥＣを処理することによって模倣された。図２４Ａに示すように、表面ＴＦレベルは、炎症性サイトカインの非存在下での２．４×１０３コピーから６時間のサイトカイン処理後の１．２×１０４コピーに増加した。表面ＴＦは６時間の処理と比較して２０時間のサイトカイン処理後約３倍低くなり、これはサイトカイン誘導ＴＦ上方制御が一過性であったことを示している。
【０７９１】
ＡＤＣ細胞傷害性アッセイでは、ＨＵＶＥＣ培養物を半分の面積の９６ウェルプレートに播種した。翌日、炎症性サイトカインとＡＤＣの濃度調整物の組み合わせを培養物に添加した。４日後、培養物の生存率をＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（ＣＴＧ）アッセイ試薬での溶解により評価した。図２４Ｂに示すように、炎症性サイトカイン処理ＨＵＶＥＣ培養の細胞生存率は、抗ＴＦ  ＡＤＣ、２５Ａ−ｖｃ−ＭＭＡＥ、及び４３Ｅａ−ｖｃ−ＭＭＡＥの影響を受けなかった。結果は、炎症性サイトカイン処理内皮細胞が抗ＴＦ  ＡＤＣに耐性があることを示している。
【０７９２】
内皮細胞の抗ＴＦ  ＡＤＣに対する耐性をさらに理解するために、サイトカインとＴＦ特異的ＡＤＣの添加後２４時間で細胞周期の進行を評価した。細胞周期のＧ２／Ｍ期での停止は、Ｔｈｅｕｎｉｓｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ，２００６，４０９：２５１−２８４に以前に記載されているように分析された。簡潔に述べると、低継代ＨＵＶＥＣ（Ｌｉｆｅｌｉｎｅ  Ｃｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ，ＭＤ，ＵＳＡ）はＶａｓｃｕＬｉｆｅ  ＶＥＧＦ−Ｍｖ内皮培地（Ｌｉｆｅｌｉｎｅ  Ｃｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で増殖し、ＨＣＴ−１１６細胞を１２ウェルプレートに播種した。翌日、培地を取り除き、新鮮な培地（サイトカインなし）または５ｎｇ／ｍＬのＩＬ１−ベータ、２５ｎｇ／ｍＬのＴＮＦ−アルファ、及び５０ｎｇ／ｍＬのＶＥＧＦを含む培地（サイトカインあり）と交換した。ＭＭＡＥに連結したＡＤＣまたは遊離ＭＭＡＥの濃度調整物を細胞に添加した。２４時間の処理後、細胞を氷冷７０％エタノールで固定した。続いて、細胞をフローサイトメトリー緩衝液（ＰＢＳ、１％ＦＢＳ、０．１％Ｔｒｉｔｏｎ）で洗浄し、１：１００希釈のリン酸化ヒストンＨ３（Ｓｅｒ１０）（Ｄ２Ｃ８  ＰＥコンジュゲート、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）で１時間染色した。２回洗浄した後、細胞を１００μｇ／ｍＬのＰｕｒｅＬｉｎｋ  ＲＮＡｓｅ  Ａ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で２０分間処理した後、生細胞識別色素ＴＯ−ＰＲＯ−３ヨージド（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を添加した。４０，０００のイベントがＮｏｖｏｃｙｔｅフローサイトメーターで収集された。Ｆｌｏｗｊｏデータ分析ソフトウェアでは、細胞ダブレットと異数性細胞は除外された。ｐＨ３シグナルをＤＮＡ含量に対してプロットし、ｐＨ３陽性細胞の百分率を決定した。
【０７９３】
炎症性サイトカインの非存在下または存在下でのＨＵＶＥＣに対する抗ＴＦ  ＡＤＣの濃度調整物によるｐＨ３陽性細胞の百分率（ｐＨ３％）を、それぞれ図２５Ａ及び２５Ｂに示す。ＨＣＴ−１１６細胞に対する抗ＴＦ  ＡＤＣの濃度調整物によるｐＨ３陽性細胞の百分率（ｐＨ３％）を図２５Ｃに示す。
【０７９４】
ＴＦ特異的ＡＤＣはＨＣＴ−１１６細胞における細胞周期のＧ２／Ｍ期での停止を誘発したが、ＡＤＣは炎症性サイトカイン処理を有しても有していなくても、ＨＵＶＥＣの細胞周期の進行に影響を与えなかった。図２６Ａ及び２６Ｂに示すように、ｐＨ３陽性ＨＣＴ−１１６細胞の百分率は、アイソタイプ−ｖｃ−ＭＭＡＥの処理と比較して、２５Ａ−ｖｃ−ＭＭＡＥの処理後に５倍増加した。
【０７９５】
図２７Ａ及び２７Ｂは、非コンジュゲートＭＭＡＥが、ＨＣＴ−１１６細胞とＨＵＶＥＣの両方でヒストンＨ３のリン酸化を同程度に増加させることを示し、内皮細胞における耐性がＭＭＡＥベースのＡＤＣに特異的であることを示している。
【０７９６】
まとめると、これらの結果は、抗ＴＦ  ＡＤＣが炎症性サイトカインの非存在下または存在下でのＨＵＶＥＣの生存率に影響を与えないことを示している。
【０７９７】
実施例２８：Ｅｒｋリン酸化アッセイ
Ｅｒｋリン酸化の評価のために、Ａ４３１細胞を培地中で６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）に一晩播種した。翌日、細胞を一度洗浄し、無血清培地で一晩血清飢餓状態にした。飢餓状態にした後、細胞を１００ｎＭの抗ＴＦ抗体と共に３７℃で３０分間プレインキュベートした。ＦＶＩＩａをウェルに５０ｎＭでスパイクし、ｐ−ＥＲＫ誘導のために３７℃で２０分間インキュベートした。誘導後、細胞をＨａｌｔ（商標）プロテアーゼとホスファターゼ阻害剤カクテル（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を含むＲＩＰＡ溶解抽出緩衝液で溶解した。ウエスタンブロットは、一次抗体としてのＰｈｏｓｐｈｏ−ｐ４４／４２  ＭＡＰＫ（Ｅｒｋ１／２）（Ｔｈｒ２０２／Ｔｙｒ２０４）及びｐ４４／４２  ＭＡＰＫ（Ｅｒｋ１／２）（１３７Ｆ５）（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）と、二次抗体としての、ペルオキシダーゼＡｆｆｉｎｉＰｕｒｅ  Ｄｏｎｋｅｙ抗ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）を使用して、２０μｇの細胞ライセートで実行した。ｐＥｒｋ及びＥｒｋの非飽和バンド強度は、Ａｍｅｒｓｈａｍ  ＡＩ６００（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）で測定された。各ｐＥｒｋ強度は、それぞれのＥｒｋ強度及び非抗体非ＦＶＩＩａ試料強度に対して正規化された。
【０７９８】
ｐＥｒｋとＥｒｋのウエスタンブロットの結果を図２８に示す。ＦＶＩＩａによる処理は、抗ＴＦ抗体の前処理なしの細胞培養でＥｒｋリン酸化を５．２倍誘導した。Ｅｒｋリン酸化の誘導は、１Ｆ、３９Ａ、及び５４Ｅによる前処理によって除去され（０．８〜１．２の誘導倍数）、２９Ｅと群２５及び４３のメンバーによって減衰した（２．０〜３．４の誘導倍数）。
【０７９９】
このデータは、Ｅｒｋリン酸化を評価すると、抗ＴＦ抗体がＦＶＩＩａ依存性ＴＦシグナル伝達を阻害することを示している。
【０８００】
実施例２９：抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）アッセイ
ＡＤＣＣ活性を評価するために、ＡＤＣＣ  Ｒｅｐｏｒｔｅｒ  Ｂｉｏａｓｓａｙ  Ｃｏｒｅ  Ｋｉｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を製造元のプロトコルに従って使用した。簡潔に述べると、Ａ４３１細胞をマイクロタイタープレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）に播種した。翌日、細胞を抗ＴＦ抗体またはＡＤＣの５０ｎＭで開始する１０点の１：３希釈の濃度調整物と共にインキュベートした。８：１のＡＤＣＣエフェクター対標的細胞の比率を各ウェルに添加し、３７℃で６時間インキュベートした。Ｂｉｏ−Ｇｌｏ（商標）ルシフェラーゼアッセイ試薬を各ウェルに添加して、Ｅｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ，ＵＳＡ）で発光を測定した。４回の反復の平均と標準偏差をＰｒｉｓｍでグラフ化した。各抗体及びＡＤＣについて、ＥＣ５０とそれに関連する９５％信頼区間は、４パラメータ結合モデルを使用してＰｒｉｓｍで計算された。
【０８０１】
抗ＴＦ抗体または抗ＴＦ  ＡＤＣのレプレセス濃度調整におけるレポータージャーカット細胞株とのインキュベーション後のＡＤＣＣレポーター発光を、それぞれ図２９Ａ及び２９Ｂに示す。各抗ＴＦ抗体またはＡＤＣのＡＤＣＣレポーター発光ＥＣ５０を図２９Ｃに列挙する。
【０８０２】
試験された全てのＴＦ特異的抗体とＡＤＣは、ルシフェラーゼ依存性の発光を引き起こし、ＥＣ５０値は０．１８〜０．４３ｎＭの範囲であった。
【０８０３】
これらのデータは、ＴＦ特異的抗体とＡＤＣの両方が、抗体のＩｇＧ１  Ｆｃドメインを介して抗体依存性細胞傷害作用（ＡＤＣＣ）を誘発できることを示している。
【０８０４】
実施例３０：細胞株由来異種移植（ＣＤＸ）モデルの研究
ｉｎ  ｖｉｖｏでのＡＤＣの有効性を評価するために、参照によりその全体が援用される、Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ，２０１５，５：ｅ３１６に記載されているように、免疫不全マウスにおける異種移植片研究を行った。簡潔に述べると、Ａ４３１類表皮癌及びＨＰＡＦ−ＩＩ膵癌細胞株を無胸腺ヌードマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）の側腹部に皮下移植した。動物を無作為化し、図に示すように処理した。体重及び腫瘍サイズの評価を隔週で実行した。腫瘍サイズが１２００ｍｍ３に達するか、皮膚の潰瘍が明らかになった時点で、動物を試験から外し安楽死させた。さらに、問題の治療群のＭＴＶ曲線は、サイズが原因で動物が研究から除外されると示さなかった。動物の世話は、施設のガイドラインに従って行われた。平均の標準誤差（ＳＥＭ）を伴う平均腫瘍体積（ＭＴＶ）を経時的にプロットした。治療効果は、ビヒクル群のいずれかの動物が腫瘍サイズが１２００ｍｍ３以上のために安楽死される前に、腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ％＝１００％×［１−（治療群の最終ＭＴＶ−初期ＭＴＶ）／（対照群の最終ＭＴＶ−初期ＭＴＶ）］）を計算することによって決定された。ＭＴＶ間の統計的比較は、一元配置ＡＮＯＶＡを使用して実行され、その後、全ての群を比較するＴｕｋｅｙの多重比較検定が実行された。ビヒクル対照群と比較した各ＡＤＣのＰ値が報告される。研究の最後に、腫瘍の部分退縮（ＰＲ）または完全退縮（ＣＲ）を示した動物の数を数えることにより、各処理群の有効性も決定した。ＰＲ応答では、腫瘍体積は、研究の過程で３回連続して測定した場合、１日目の体積の５０％以下であり、これらの測定の１回以上で１４ｍｍ３以上であった。ＣＲ応答では、３回の連続測定で腫瘍体積は１４ｍｍ３未満であった。研究終了時に動物がＣＲ応答を示したとき、その動物はＣＲではなく、無腫瘍生存個体（ＴＦＳ）として分類された。ＡＤＣの研究全体を通じて、ＡＤＣ処理による有意な体重の変化は観察されなかった。
【０８０５】
図３０Ａに示すように、ＨＰＡＦ−ＩＩ担腫瘍マウスは、無作為化後の１、８、及び１５日目に５ｍｇ／ｋｇのＡＤＣで処理された。ＴＦ−０１１  ＡＤＣの効果を、凝固に影響を与えなかった２つの群からの２つの代表的なクローン（すなわち、２５Ａ及び４３Ｅａ）と比較した。無作為化から２１日後、２５Ａ、４３Ｅａ、及びＴＦ−０１１  ＡＤＣの有効性は同等で、腫瘍増殖阻害は１３１〜１３６％の範囲であった。
【０８０６】
図３０Ｂに示す２番目のＨＰＡＦ−ＩＩ研究では、凝固に影響を与えた最高親和性抗体（すなわち、３９Ａ）と、群２５及び４３の様々な親和性を有する６つの抗体（すなわち、２５Ａ、２５Ａ３、２５Ｇ１、４３Ｅａ、４３Ｂ１、及び４３Ｄ７）が、２ｍｇ／ｋｇで２回投与した場合も同様に効果的であった。ＴＦ特異的ＡＤＣの腫瘍増殖阻害は２１日目に１２９〜１３９％の範囲であり、研究終了時に処理群あたり１０匹中の６〜９匹が無腫瘍生存個体として分類された。
【０８０７】
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１異種移植モデルでは、無作為化後１日目と８日目にＡＤＣを４または２ｍｇ／ｋｇで投与した。図３１Ａに示すように、全てのＴＦ特異的ＡＤＣは４ｍｇ／ｋｇで活性であり、腫瘍増殖阻害は６９〜１００％の範囲であり、ビヒクル対照群と比較して各ＴＦ特異的ＡＤＣの平均腫瘍体積に有意差があった。２５Ｇ１と他のＴＦ特異的ＡＤＣの間の平均腫瘍体積に顕著な違いが観察されたが、統計的に有意ではなかった（Ｐ＞０．０５）。
【０８０８】
図３１Ｂに示すように２ｍｇ／ｋｇのＡＤＣで、全てのＴＦ特異的抗体は、ビヒクル対照群と比較した平均腫瘍体積の有意差の程度が異なる、準最適な活性を示した。２５Ａ３、３９Ａ、及び４３Ｂ１は、ビヒクル対照群と比較して、平均腫瘍体積に最大程度の有意性を示した（Ｐ＜１×１０−４）。３９Ａと他の抗体の平均腫瘍体積の違いは、３９Ａと４３Ｅａの比較でのみ有意であった（Ｐ＜０．０５）。
【０８０９】
対照的に、２５Ａ、２５Ａ３、及び４３Ｅａの非コンジュゲート抗体は、ＨＰＡＦ−ＩＩ異種移植片モデルで１０ｍｇ／ｋｇを２回投与すると、実質的な抗がん活性を欠いた（図３２）。
【０８１０】
これらの結果は、ＴＦ特異的ＡＤＣが様々な投与計画の下でＨＰＡＦ−ＩＩ及びＭＤＡ−ＭＢ−２３１異種移植モデルで有効であることを示している。ＡＤＣの活性は、抗ＴＦ抗体の毒素送達によって引き起こされる。
【０８１１】
実施例３１：患者由来の異種移植（ＰＤＸ）モデルの研究
ＴＦ陽性のＰＤＸモデルを無胸腺ヌードマウス（Ｅｎｖｉｇｏ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）で実行し、ＡＤＣのｉｎ  ｖｉｖｏでの有効性を評価した。動物の世話は、施設のガイドラインに従って行われた。研究動物の左側腹部に片側に腫瘍片を片側移植した。
【０８１２】
免疫組織化学（ＩＨＣ）分析の場合、組織は、Ｒｉｐ  Ｔｉｄｅ（Ｍｏｓａｉｃ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｌａｋｅ  Ｆｏｒｅｓｔ，ＣＡ）を使用して、ウォーターバスにおいて９５〜９７°Ｃで４０分間前処理し、ベンチで１０分間冷却し、蒸留水で３回リンスし、Ｓｐｌａｓｈ−Ｔ緩衝液（Ｍｏｓａｉｃ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）で５分間リンスした。ＥｎＶｉｓｉｏｎペルオキシダーゼブロッキング試薬（ＥｎＶｉｓｉｏｎ＋マウスＨＲＰ検出キット、Ａｇｉｌｅｎｔ，Ｃａｒｐｉｎｔｅｒｉａ，ＣＡ）で組織切片を５分間ブロックし、続いてＳｐｌａｓｈ−Ｔ緩衝液で２回、各々５分間リンスした。次に、組織切片を抗ＴＦ抗体（マウスクローンＨＴＦ−１）またはマウス陰性対照試薬で３０分間染色し、続いてＳｐｌａｓｈ−Ｔ緩衝液で２回、各々５分間リンスした。組織切片の二次染色ステップは、ＥｎＶｉｓｉｏｎ＋マウスＨＲＰ（ＥｎＶｉｓｉｏｎ＋マウスＨＲＰ検出キット）で３０分間実行し、続いてＳｐｌａｓｈ−Ｔ緩衝液で２回、各々５分間リンスした。抗ＴＦ染色を視覚化するために、ＤＡＢ色素原（ＥｎＶｉｓｉｏｎ＋マウスＨＲＰ検出キット）で５分間組織切片を発色し、続いて蒸留水で１０回浸漬し、５分間リンスした。組織切片をヘマトキシリンで５分間対比染色した後、蒸留水で３回リンスした。
【０８１３】
動物を無作為化し、図に示すように処理した。腫瘍サイズが１２００ｍｍ３に達するか、皮膚の潰瘍が明らかになった時点で、動物を試験から外し安楽死させた。さらに、問題の治療群のＭＴＶ曲線は、サイズが原因で動物が研究から除外されると示さなかった。ＴＧＩと統計分析は、ＣＤＸ研究と同じ方法で実行された。ＰＤＸ研究のＣＲ及びＰＲ応答の定義は次のとおりであった：ＰＲ応答個体は、１日目にＭＴＶの３０％以下のＭＴＶを２回連続して測定した；ＣＲ応答個体は、２回の連続測定でＭＴＶを検出できなかった。研究終了時に動物がＣＲ応答を示したとき、その動物はＣＲではなく、ＴＦＳとして分類された。
【０８１４】
頭頸部扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）と卵巣腺癌ＰＤＸのＨスコアはそれぞれ２５０と２２０であったが、胃腺癌ＰＤＸのＨスコアは１５５であった（データ示さず）。担腫瘍マウスを無作為化すると、処理は毎週２回または３回のいずれかで行われ、用量は２．５〜５ｍｇ／ｋｇの範囲であった。全てのＰＤＸモデルで図３３Ａ、３３Ｂ、及び３３Ｃに示すように、アイソタイプ対照群と比較して、各ＴＦ特異的ＡＤＣの平均腫瘍体積の有意な減少が観察され（Ｐ＜１ｘ１０−４）、様々なＴＦ特異的ＡＤＣ間では有意差がなかった（Ｐ＞０．０５）。頭頸部及び卵巣のＰＤＸモデルでは、いずれの処理群でも、研究終了時に完全奏効個体及び無腫瘍生存個体の数は１０匹中２匹を超えなかった（図３３Ａ及び３３Ｂ）。しかしながら、胃のＰＤＸでは、２５Ａ処理群には２匹の部分応答個体、２匹の完全応答個体、３匹の無腫瘍生存個体がおり、ＴＦ−０１１群には、試験終了時に１匹の完全応答個体と５匹の無腫瘍生存個体が含まれていた（図３３Ｃ）。
【０８１５】
これらのデータは、群２５及び４３の抗ＴＦ  ＡＤＣ（すなわち、２５Ａ及び４３Ｅａ）が、チソツマブベドチン（ＴＦ−０１１）ＡＤＣと同等に有効であることを示している。
【０８１６】
実施例３２：ブタＣＮＶモデルの有効性研究
ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルでの有効性研究は、病変サイズの減少における４つの異なる抗ＴＦ抗体の効果を決定するために実行された。
【０８１７】
１０〜１２週齢の動物（ブタ／ハンプシャークロス）は、間接検眼鏡を介して送達される８１０ｎｍのダイオードレーザーを使用する両側レーザーを照射し、各動物の各眼の網膜静脈間に約６つの単一レーザースポットを作成した。有効性評価のために、２ｍｇの各抗ＴＦ抗体、それぞれ２５Ｇ９、４３Ｄ８、１Ｇ、及び２９Ｄを、レーザー処理後７日目に硝子体内投与した。ビヒクル対照群も研究に含まれた。総病変蛍光を決定するためのフルオレセイン血管造影法（ＦＡ）は、７日目（ベースライン）、１４日目、及び２８日目に実行された。ＦＡは、個々の病変ごとに補正総病変蛍光（ＣＴＬＦ）測定を使用して評価された。病変の境界をたどり、積分密度値を得た。次いで、積分密度測定値から病変に隣接する平均蛍光バックグラウンドを差し引くことにより、ＣＴＬＦを計算した。７日目から１４日目及び７日目から２８日目までの病変サイズの変化パーセントをそれぞれ図３４Ａ及び図３４Ｂに示す。
【０８１８】
７日目から１４日目まで、群２５と４３の抗ｈＴＦ抗体、２５Ｇ９と４３Ｄ８は、病変サイズを２０％を超えて縮小した。７日目から２８日目まで、抗ｈＴＦ抗体２５Ｇ９は、病変サイズを４０％を超えて縮小した。抗ｈＴＦ抗体１Ｇ及び２９Ｄは、ビヒクル対照群と比較して病変サイズを有意に減少させなかった。
【０８１９】
このデータは、群２５と４３の抗体、２５Ｇ９と４３Ｄ８が、ブタのＣＮＶモデルで病変サイズを縮小するのに効果的であることを示している。
【０８２０】
実施例３３：ブタＣＮＶモデルにおける２５Ｇ９の有効性
ブタ脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルでの有効性研究は、病変サイズを縮小する能力について抗ＴＦ抗体２５Ｇ９の異なる用量を比較するために実行された。
【０８２１】
１０〜１２週齢の動物（ブタ／ハンプシャークロス）は、間接検眼鏡を介して送達される８１０ｎｍのダイオードレーザーを使用する両側レーザーを照射し、各眼の網膜静脈間に約６つの単一レーザースポットを作成した。有効性評価のために、６００ｕｇ、２ｍｇ、及び４ｍｇの抗ＴＦ抗体２５Ｇ９をレーザー治療後７日目に硝子体内投与した。総病変蛍光を決定するためのフルオレセイン血管造影法（ＦＡ）は、７日目（ベースライン）及び２８日目に実行された。ＦＡは、個々の病変ごとに補正総病変蛍光（ＣＴＬＦ）測定を使用して評価された。病変の境界をたどり、積分密度値を得た。次いで、積分密度測定値から病変に隣接する平均蛍光バックグラウンドを差し引くことにより、ＣＴＬＦを計算した。７日目から２８日目までの病変サイズの変化パーセントを図３５に示す。
【０８２２】
７日目から２８日目まで、抗ｈＴＦ抗体２５Ｇ９は、用量依存的に病変サイズを縮小した。２５Ｇ９は、４ｍｇで病変サイズを５０％を超えて縮小した。このデータは、抗体２５Ｇ９が用量依存的にブタＣＮＶモデルの病変サイズを縮小するのに効果的であることを示している。
【０８２３】
実施例３４：ブタＴＦ及びウサギＴＦに対する結合親和性アッセイ
特定の抗体の能力をブタＴＦに対する結合について試験した。ブタＴＦのＢｉａｃｏｒｅベースの測定では、所定の抗ＴＦ抗体が、ＣＭ５チップ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｂｉｏ−Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に共有結合された抗ヒトＩｇＧ抗体によって捕捉された。抗ＴＦ抗体と１００ｎＭで開始するブタＴＦ−Ｈｉｓの５点の３倍濃度調整物との結合を１８０〜２４０秒間測定した。その後、抗ＴＦ抗体とＴＦ−Ｈｉｓの間の解離を１８００秒間測定した。速度論的データを分析し、１：１結合モデルを使用してグローバルに適合させた。Ｂｉａｃｏｒｅベースの実験で測定された、示されたＴＦ抗体のＫＤ値を表４８に示す。
【０８２４】
特定の抗体の能力をウサギＴＦに対する結合について試験した。ウサギＴＦのＢｉａｃｏｒｅベースの測定では、所定の抗ＴＦ抗体が、ＣＭ５チップ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｂｉｏ−Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に共有結合された抗ヒトＩｇＧ抗体によって捕捉された。抗ＴＦ抗体と１００ｎＭで開始するウサギＴＦ−Ｈｉｓの５点の３倍濃度調整物との結合を１８０〜２４０秒間測定した。その後、抗ＴＦ抗体とＴＦ−Ｈｉｓの間の解離を１８００秒間測定した。速度論的データを分析し、１：１結合モデルを使用してグローバルに適合させた。Ｂｉａｃｏｒｅベースの実験で測定された、示されたＴＦ抗体のＫＤ値を表４８に示す。
【０８２５】
表４８に示すように、群２５と４３の抗ｈＴＦ抗体は、ブタＴＦ及びウサギＴＦに対して結合活性と交差反応性を示す。対照的に、群１及び２９の抗体は、ブタＴＦまたはウサギＴＦに対して結合活性を示さない。
【０８２６】
（表４８）ブタ及びウサギＴＦに対する抗体の動態
2021509823.tif 000026
結合なし＊：結合なしから弱い結合、報告可能なＫＤなし
【０８２７】
実施例３５：免疫組織化学（ＩＨＣ）アッセイ
組織は、Ｒｉｐ  Ｔｉｄｅ（Ｍｏｓａｉｃ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｌａｋｅ  Ｆｏｒｅｓｔ，ＣＡ）を使用して、ウォーターバスにおいて９５〜９７°Ｃで４０分間前処理し、ベンチで１０分間冷却し、蒸留水で３回リンスし、Ｓｐｌａｓｈ−Ｔ緩衝液（Ｍｏｓａｉｃ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）で５分間リンスした。ＥｎＶｉｓｉｏｎペルオキシダーゼブロッキング試薬（ＥｎＶｉｓｉｏｎ＋マウスＨＲＰ検出キット、Ａｇｉｌｅｎｔ，Ｃａｒｐｉｎｔｅｒｉａ，ＣＡ）で組織切片を５分間ブロックし、続いてＳｐｌａｓｈ−Ｔ緩衝液で２回、各々５分間リンスした。次いで、組織切片を抗ＴＦ抗体（マウスクローンＨＴＦ−１）またはマウス陰性対照試薬で３０分間染色し、続いてＳｐｌａｓｈ−Ｔ緩衝液で２回、各々５分間リンスした。組織切片の二次染色ステップは、ＥｎＶｉｓｉｏｎ＋マウスＨＲＰ（ＥｎＶｉｓｉｏｎ＋マウスＨＲＰ検出キット）で３０分間実行し、続いてＳｐｌａｓｈ−Ｔ緩衝液で２回、各々５分間リンスした。抗ＴＦ染色を視覚化するために、ＤＡＢ色素原（ＥｎＶｉｓｉｏｎ＋マウスＨＲＰ検出キット）で５分間組織切片を発色し、続いて蒸留水で１０回浸漬し、５分間リンスした。組織切片をヘマトキシリンで５分間対比染色した後、蒸留水で３回リンスした。
【０８２８】
染色強度は、認定された解剖病理学者によって、０（陰性）から３（または「３＋」）までの半定量的整数スケールでスコア付けされた。各強度レベルで陽性に染色された細胞の百分率を記録した。スコア付けは、ＴＦの細胞膜への局在に基づいた。Ｈスコアは、染色強度のコンポーネントと陽性細胞の百分率を組み合わせたものである。０から３００までの値があり、次のように定義される：１×（１＋強度で染色された細胞の百分率）＋２×（２＋強度で染色された細胞の百分率）＋３×（３＋強度で染色された細胞の百分率）＝Ｈスコア。
【０８２９】
腎臓癌、頭頸部癌、卵巣癌、胃癌、前立腺癌、食道胃接合部癌、子宮頸癌、及び膠膠芽細胞腫の患者の組織切片が染色された。各Ｈスコア範囲内のスコアを持つ患者の数と各がんの患者の総数を表５０に示す。これらの結果は、ＴＦが、腎臓癌、頭頸部癌、卵巣癌、胃癌、前立腺癌、食道胃接合部癌、子宮頸癌、及び膠膠芽細胞腫で発現していることを示す。
【０８３０】
（表５０）ＩＨＣアッセイの結果
2021509823.tif 000027
【０８３１】
実施例３６：抗ＴＦ抗体のエピトープビニング
抗ヒトＴＦ抗体間のエピトープ結合の相違を確認するために、キメラＴＦコンストラクトマッピング実験を行った。このマッピング技法は、抗体エピトープの識別を可能にする。
【０８３２】
評価された全ての抗ヒトＴＦ抗体はラットＴＦに結合しないため、ラットＴＦ配列をキメラヒト−ラットＴＦコンストラクトの構築に使用した。キメラヒト−ラットコンストラクトの設計は、ＴＦ細胞外ドメインのＮ末端ドメインとＣ末端ドメイン（それぞれ細胞外ドメインのアミノ酸１〜１０７と１０８〜２１９）にガイドされ、整列を図３６に示す。図３６のコンストラクトを使用したキメラマッピングの結果に基づいて、ラットのアミノ酸セグメント１４１〜１９４をヒトの配列（ｈＴＦ細胞外ドメインのアミノ酸１３６〜１８９）に置き換え、整列を図３７に示す。１つまたは２つのヒト−ラット置換を備えた３つのヒトＴＦコンストラクト（ｈＴＦ＿Ｋ６８Ｎ、ｈＴＦ＿Ｋ１４９Ｎ、及びｈＴＦ＿Ｎ１７１Ｈ＿Ｔ１９７Ｋ）の設計は、１０Ｈ１０抗体について報告された接触残基Ｋ６８、Ｋ１４９、及びＮ１７１及びＴ１９７（Ｔｅｐｌｙａｋｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌ．，２０１７，３６：１３９−１４４）に基づいており、整列を図３８に示す。
【０８３３】
抗ヒトＴＦ抗体の様々なＴＦコンストラクトに対する結合を確立するために、ＴＦコンストラクトと緑色蛍光タンパク質マーカーを共発現するＤＮＡプラスミドをＨＥＫ２９３細胞にトランスフェクトした。抗体のサブセットについて、選択したＴＦコンストラクトで抗体濃度調整（２５０ｎＭから開始する１２点の１：３希釈系列）を評価した（図３９Ａ〜Ｆ）。これらの抗体濃度調整は、表５１及び５２で使用されている１５μｇ／ｍｌ（１００ｎＭ）の抗体濃度が、「ｈＴＦと比較したＴＦコンストラクトに対する抗体結合の百分率」を確立するのに適切であることを示した。トランスフェクションの２日後、細胞を組織培養プレートから回収し、１５μｇ／ｍｌの示された抗ＴＦ抗体で染色し、洗浄し、抗ヒトＩｇＧ−Ｆｃ  Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７ポリクローナル抗体で染色し、洗浄して、生細胞識別色素４’，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール、二塩酸塩で染色した。フローサイトメーターで８０，０００のライブイベントを取得し、蛍光マーカーでマークされた生細胞の抗ＴＦ抗体による染色の程度を分析した。各ＴＦ発現コンストラクトについてのアイソタイプ対照と比較した蛍光強度中央値を、ｈＴＦ発現コンストラクトについてのアイソタイプ対照と比較した蛍光強度の中央値で割り、結果の百分率を「ｈＴＦと比較したＴＦコンストラクトに対する抗体の結合の百分率」として表５１及び５２に列挙する。本明細書で使用されるとき、「生細胞染色アッセイ」という用語は、この実施例で使用される抗体結合アッセイを指す。
【０８３４】
全てのキメラＴＦコンストラクトがｈＴＦ対照コンストラクトの５０％〜１５０％のレベルで細胞表面に発現したという仮定は、抗体集合体の少なくとも１つの抗ヒトＴＦ抗体についての全てのＴＦコンストラクトについて満たされたが、ｈ１−１０７＿ｒコンストラクト（ヒトのアミノ酸セグメント１〜１０７がラットの配列に置き換えられている）は、例外であった。抗ヒトＴＦ抗体が細胞表面に発現したラットＴＦに結合しないことが予想された。表５１及び５２の「ｈＴＦと比較したＴＦコンストラクトに対する抗体結合の百分率」が５０％未満の場合、その抗体は表５３及び５４で結合物でない（０）とみなされた。表５１及び５２の「ｈＴＦと比較したＴＦコンストラクトに対する抗体結合の百分率」が５０％〜１５０％の場合、その抗体は表５３及び５４で結合物（１）とみなされた。
【０８３５】
各抗体は、表５３の非結合コンストラクトの組み合わせに基づいて、表５５のエピトープビンに割り当てられた。系列２５の抗体（２５Ａ、２５Ａ３、２５Ａ５−Ｔ、２５Ｇ１、及び２５Ｇ９）は、表５５でエピトープビン６と呼ばれる特有のエピトープに結合する。系列４３の抗体（４３Ｂ１、４３Ｄ７、４３Ｄ８、及び４３Ｅａ）もまた、表５５でエピトープビン７と呼ばれる特有のエピトープに結合する。系列２９の抗体（２９Ｅ）は、表５５でエピトープビン２と呼ばれる特有のエピトープに結合する。系列３９及び５４の抗体（３９Ａ及び５４Ｅ）は、表５５でエピトープビン３と呼ばれる特有のエピトープに結合する。
【０８３６】
系列２５及び４３の抗体は、ラットのアミノ酸１４１〜１９４がヒトの配列で置き換えられたキメラ構コンストラクトであるｒ１４１−１９４＿ｈに結合する抗体パネルの唯一の抗体である（図３９Ｆ；表５４）。さらに、Ｍ１５９３はｈＴＦ＿Ｋ６８Ｎに結合できないが、抗体パネルの他の全ての抗体はｈＴＦ＿Ｋ６８Ｎに結合する（図３９Ｃ；表５４）。系列２５及び４３の抗体のみがｈＴＦ＿Ｋ１４９Ｎに結合できない（図３９Ｄ；表５４）。系列２５の抗体のみがｈＴＦ＿Ｎ１７１Ｈ＿Ｔ１９７Ｋに結合できない（図３９Ｅ；表５４）。
【０８３７】
要約すると、これらの結果は、系統２５の抗体が、試験した他の全ての抗体と比較して、ヒトＴＦの特有のエピトープに結合することを示している。系統４３の抗体は、試験した他の全ての抗体と比較して、ヒトＴＦの特有のエピトープに結合する。系列２５と系統４３の抗体は、Ｍ１５９３とは異なるヒトＴＦのエピトープに結合する。
【０８３８】
（表５１）ｈＴＦと比較したＴＦコンストラクトに対する抗体結合パーセント
2021509823.tif 000028
【０８３９】
（表５２）ｈＴＦと比較したＴＦコンストラクトに対する抗体結合パーセント
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＊ラットのアミノ酸セグメントがヒトのセグメントに置き換えられ、２０個のアミノ酸の変化がもたらされた
【０８４０】
（表５３）ＴＦコンストラクトに対する抗体結合
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【０８４１】
（表５４）ＴＦコンストラクトに対する抗体結合
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＊ラットのアミノ酸セグメントがヒトのセグメントに置き換えられ、２０個のアミノ酸の変化がもたらされた
【０８４２】
（表５５）非結合キメラコンストラクトに基づくエピトープビン割り当て
2021509823.tif 000032
【０８４３】
本発明を特に好ましい実施形態及び様々な代替的な実施形態を参照して示し説明したが、本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく形態及び詳細に様々な変更を加えることができることは当業者には理解されよう。
【０８４４】
本明細書の本文内で引用された全ての参考文献、発行された特許及び特許出願は、あらゆる目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０８４５】
配列
（表１３）可変領域配列
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2021509823.tif 000034
2021509823.tif 000035
【０８４６】
（表１４）可変領域配列コンセンサス
2021509823.tif 000036
【０８４７】
（表１５）抗体１Ｆ−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000037
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ｐｌｕｓ  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８４８】
（表１６）抗体１Ｇ−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000038
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ｐｌｕｓ  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８４９】
（表１７）抗体２５Ａ−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000039
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ｐｌｕｓ  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８５０】
（表１８）抗体２５Ａ３−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000040
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ｐｌｕｓ  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８５１】
（表１９ａ）抗体２５Ａ５−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000041
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ｐｌｕｓ  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８５２】
（表１９ｂ）抗体２５Ａ５−Ｔ−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000042
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ｐｌｕｓ  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８５３】
（表２０）抗体２５Ｇ−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000043
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ｐｌｕｓ  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８５４】
（表２１）抗体２５Ｇ１−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000044
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ｐｌｕｓ  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８５５】
（表２２）抗体２５Ｇ９−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000045
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ｐｌｕｓ  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８５６】
（表２３）抗体２９Ｄ−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000046
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ｐｌｕｓ  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８５７】
（表２４）抗体２９Ｅ−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000047
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ｐｌｕｓ  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８５８】
（表２５）抗体３９Ａ−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000048
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ｐｌｕｓ  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８５９】
（表２６）抗体４３Ｂ−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000049
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ＆  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８６０】
（表２７）抗体４３Ｂ１−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000050
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ＆  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８６１】
（表２８）抗体４３Ｂ７−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000051
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ＆  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８６２】
（表２９）抗体４３Ｄ−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000052
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ＆  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８６３】
（表３０）抗体４３Ｄ７−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000053
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ＆  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８６４】
（表３１）抗体４３Ｄ８−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000054
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ＆  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８６５】
（表３２）抗体４３Ｅ−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000055
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ＆  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８６６】
（表３３）抗体４３Ｅａ−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000056
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ＆  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８６７】
（表３４）抗体５４Ｅ−ＣＤＲ配列
2021509823.tif 000057
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ｐｌｕｓ  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８６８】
（表３５）コンセンサスＣＤＲ
2021509823.tif 000058
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ｐｌｕｓ  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する。
【０８６９】
（表３６）ヒト、カニクイザル、及びマウスのＴＦ配列
2021509823.tif 000059
2021509823.tif 000060
【０８７０】
（表３９）抗ＴＦ抗体の配列
2021509823.tif 000061
【０８７１】
（表４１）ブタＴＦ配列
2021509823.tif 000062
【０８７２】
（表４９）ウサギＴＦ配列
2021509823.tif 000063
【０８７３】
（表５６）ラットＴＦ  ＥＣＤ及びキメラコンストラクトＥＣＤ配列
2021509823.tif 000064
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2021509823.tif 000068
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【０８７４】
（表５７）可変領域配列コンセンサス
2021509823.tif 000070
【０８７５】
（表５８）コンセンサスＣＤＲ
2021509823.tif 000071
＊例示的なＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ  ｐｌｕｓ  Ｃｈｏｔｈｉａによって決定されたアミノ酸を包含する
【図１】
2021509823.tif 000073
【図２】
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【図３】
2021509823.tif 000075
【図４】
2021509823.tif 000076
【図５】
2021509823.tif 000077
【図６Ａ】
2021509823.tif 000078
【図６Ｂ】
2021509823.tif 000079
【図６Ｃ】
2021509823.tif 000080
【図６Ｄ】
2021509823.tif 000081
【図７】
2021509823.tif 000082
【図８】
2021509823.tif 000083
【図９】
2021509823.tif 000084
【図１０】
2021509823.tif 000085
【図１１】
2021509823.tif 000086
【図１２】
2021509823.tif 000087
【図１３】
2021509823.tif 000088
【図１４】
2021509823.tif 000089
【図１５】
2021509823.tif 000090
【図１６】
2021509823.tif 000091
【図１７】
2021509823.tif 000092
【図１８】
2021509823.tif 000093
【図１９】
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【図２０】
2021509823.tif 000095
【図２１】
2021509823.tif 000096
【図２２Ａ】
2021509823.tif 000097
【図２２Ｂ】
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【図２２Ｃ】
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【図２２Ｄ】
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【図２２Ｅ】
2021509823.tif 000101
【図２３】
2021509823.tif 000102
【図２４】
2021509823.tif 000103
【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
2021509823.tif 000106
【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３Ａ】
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【図３３Ｂ】
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【図３３Ｃ】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６−１】
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【図３６−２】
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【図３６−３】
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【図３６−４】
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【図３７】
2021509823.tif 000121
【図３８】
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【図３９Ａ】
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【図３９Ｂ】
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【図３９Ｃ】
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【図３９Ｄ】
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【図３９Ｅ】
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【図３９Ｆ】
2021509823.tif 000128
【手続補正書】
【提出日】令和2年9月4日(2020.9.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2021509823000001.app
【国際調査報告】
2021509823.tif 000129
2021509823.tif 000130
2021509823.tif 000131
2021509823.tif 000132