(57)【要約】  提供されるのは、特に、例えば、ＭＥＤＩ６０１２のような組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）酵素などの単離精製されたレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）酵素を含んでなる、特定の治療的有効用量と投与レジメンを用いて、心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状を有し、又はそのリスクがある対象を治療する方法である。記載される用量のｒｈＬＣＡＴの投与を伴う方法は、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）及びアポリポタンパク質Ａ１（ａｐｏＡ１）の血清レベルを増加させ、治療対象のアポリポタンパク質Ｂの血清レベルを低下させ、又は測定できる程に増加させず、したがって心疾患、心臓関連疾患及び冠動脈疾患の治療をもたらす。対象に投与されるｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の記載される投与レジメン及び用量を伴う方法は、虚血性脳卒中、心筋細胞アポトーシス、動脈硬化症の進行などに対する保護をはじめとする、対象の心臓、心筋、及び心血管系の保護をさらに提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
単離精製されたレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）酵素の１つ又は複数の用量をそれを必要とする対象に２０〜２０００ｍｇの投与量で投与するステップ
を含んでなり、各用量が約１分間〜約３時間の時間をかけて投与され、前記対象における心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状が治療される、対象における心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療する方法。
【請求項２】
前記対象が、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管疾患（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、家族性又は後天性心筋梗塞、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全心、ＥＦ温存型心不全、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状を有する、請求項１に記載される方法。
【請求項３】
前記対象が、安定型冠動脈疾患（ＣＡＤ）を有する、請求項１又は請求項２に記載される方法。
【請求項４】
前記対象に投与されるＬＣＡＴの１つ又は複数の用量が、２４ｍｇ、４０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、１２０ｍｇ、１５０ｍｇ、２４０ｍｇ、３００ｍｇ、６００ｍｇ、８００ｍｇ、又は１６００ｍｇから選択される量である、請求項１〜３のいずれか一項に記載される方法。
【請求項５】
前記対象に投与されるＬＣＡＴの１つ又は複数の用量が、３００ｍｇ、１５０ｍｇ、及び１００ｍｇから選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載される方法。
【請求項６】
前記ＬＣＡＴの１つ又は複数の用量が、３００ｍｇの量の第１の用量と、前記第１の用量の約４８時間±８時間後に投与される１５０ｍｇの量の第２の用量とを含んでなる、請求項５に記載される方法。
【請求項７】
前記ＬＣＡＴの１つ又は複数の用量が、３００ｍｇの量の第１の用量；前記第１の用量の約４８時間±８時間後に投与される１５０ｍｇの量の第２の用量；及び前記第２の用量の約１週間後に投与される１００ｍｇの量の第３の用量を含んでなる、請求項５の方法。
【請求項８】
前記ＬＣＡＴの１つ又は複数の用量が、３００ｍｇの量の第１の用量；前記第１の用量の約４８時間±８時間後に投与される１５０ｍｇの量の第２の用量；及び前記第２の用量の約１週間後に投与される１用量当たり１００ｍｇの量の少なくとも４回の後続用量を含んでなる、請求項５に記載される方法。
【請求項９】
前記ＬＣＡＴの１つ又は複数の用量が、前記対象に静脈内投与される、請求項１〜８のいずれか一項に記載される方法。
【請求項１０】
前記ＬＣＡＴの１つ又は複数の用量が、静注を介して前記対象に投与される、請求項１〜９のいずれか一項に記載される方法。
【請求項１１】
ＬＣＡＴが、約３０分間〜１時間の時間をかけて前記対象に静脈内投与される、請求項９に記載される方法。
【請求項１２】
ＬＣＡＴが、約１〜３分間の時間をかけて静注によって前記対象に投与される、請求項１０に記載される方法。
【請求項１３】
ＬＣＡＴが、３００ｍｇの量の１用量で前記対象に投与される、請求項５に記載される方法。
【請求項１４】
ＬＣＡＴの１用量が、約１〜３分の時間内に静注によって前記対象に投与される、請求項１３に記載される方法。
【請求項１５】
ＬＣＡＴが、第１の用量が３００ｍｇの量であり、第２の用量が１５０ｍｇの量である、２用量で前記対象に投与される、請求項５に記載される方法。
【請求項１６】
ＬＣＡＴが、第１の用量が３００ｍｇの量であり；第２の用量が１５０ｍｇの量であり；第３の用量が１００ｍｇの量である、３用量で前記対象に投与される、請求項５に記載される方法。
【請求項１７】
ＬＣＡＴが、第１の用量が３００ｍｇの量であり；第２の用量が１５０ｍｇの量であり；第３〜６の用量が１００ｍｇの量である、６用量で前記対象に投与される、請求項５に記載される方法。
【請求項１８】
第２の用量のＬＣＡＴが、前記第１の用量後、約４８時間±８時間以内に前記対象に投与される、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載される方法。
【請求項１９】
第３の用量のＬＣＡＴが、前記第２の用量後、約１週間以内に前記対象に投与される、請求項１６〜１８のいずれか一項に記載される方法。
【請求項２０】
ＬＣＡＴの第２の用量が前記第１の用量後、約４８時間±８時間以内に前記対象に投与され、ＬＣＡＴの第３の用量が前記第２の用量後、約１週間以内に前記対象に投与され；それ以降ＬＣＡＴの第４〜６の用量が毎週投与される、請求項１７に記載される方法。
【請求項２１】
少なくとも第１の用量のＬＣＡＴが、静注によって前記対象に投与される、請求項１５〜２０のいずれか一項に記載される方法。
【請求項２２】
ＬＣＡＴが、皮下（ＳＣ）注射を介して前記対象に投与される、請求項１〜４のいずれか一項に記載される方法。
【請求項２３】
ＬＣＡＴが、８０ｍｇ又は６００ｍｇの用量でＳＣ注射によって前記対象に投与される、請求項２２に記載される方法。
【請求項２４】
前記ＬＣＡＴの投与が、前記対象における高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）及び／又はアポリポタンパク質Ａ１（ａｐｏＡ１）の内因性レベルを増加させる、請求項１〜２１のいずれか一項に記載される方法。
【請求項２５】
前記６００ｍｇの用量でのＳＣ注射によるＬＣＡＴの投与が、前記対象におけるアポリポタンパク質Ａ１（ａｐｏＡ１）の内因性レベルを増加させる、請求項２３に記載される方法。
【請求項２６】
前記ＬＣＡＴの投与が、前記対象におけるアポリポタンパク質Ｂ（ａｐｏＢ）の内因性レベルを増加させない、請求項１〜２５のいずれか一項に記載される方法。
【請求項２７】
前記単離精製されたＬＣＡＴが、組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）である、請求項１〜２６のいずれか一項に記載される方法。
【請求項２８】
前記ｒｈＬＣＡＴが、ＭＥＤＩ６０１２（配列番号２）である、請求項２７に記載される方法。
【請求項２９】
前記治療対象の受診時に、約１〜５時間の時間をかけて静脈内（ＩＶ）注入によって前記対象に送達される２５０〜５００ｍｇの量の負荷用量の単離精製されたレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）酵素をそれを必要とする対象に投与するステップ
を含んでなる、前記対象における心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療する方法。
【請求項３０】
前記ＬＣＡＴの負荷用量が、３００ｍｇの量で前記対象に投与される、請求項２９に記載される方法。
【請求項３１】
前記ＬＣＡＴの負荷用量が、約１〜３分間の時間かけて前記対象に投与される、請求項３０に記載される方法。
【請求項３２】
前記ＬＣＡＴの負荷用量が、約１分間の時間かけて前記対象に投与される、請求項３１に記載される方法。
【請求項３３】
前記負荷用量後に、ＬＣＡＴの１つ又は複数の用量が前記対象に投与される、請求項２９〜３２のいずれか一項に記載される方法。
【請求項３４】
前記負荷用量後に、１００〜２００ｍｇの量のＬＣＡＴが前記対象に投与される、請求項３３に記載される方法。
【請求項３５】
前記負荷用量後に、１５０ｍｇの量のＬＣＡＴが前記対象に投与される、請求項３４に記載される方法。
【請求項３６】
前記１００〜２００ｍｇ用量又は前記１５０ｍｇ用量後に、１００〜１５０ｍｇの量のＬＣＡＴが前記対象に投与される、請求項３３〜３５のいずれか一項に記載される方法。
【請求項３７】
前記１００〜２００ｍｇ用量又は前記１５０ｍｇ用量後に、１００ｍｇの量のＬＣＡＴが前記対象に投与される、請求項３６に記載される方法。
【請求項３８】
前記１００〜２００ｍｇ用量又は前記１５０ｍｇ用量の約１週間後に、１用量当たり８０〜１５０ｍｇの量のＬＣＡＴの少なくとも４回の毎週用量が前記対象に投与される、請求項３４又は請求項３５に記載される方法。
【請求項３９】
前記１００〜２００ｍｇ用量又は前記１５０ｍｇ用量の約１週間後に、１用量当たり１００ｍｇの量のＬＣＡＴの少なくとも４回の毎週用量が前記対象に投与される、請求項３４又は請求項３５に記載される方法。
【請求項４０】
前記負荷用量後に、前記ＬＣＡＴの１つ又は複数の用量が、静注及び／又はＩＶ輸液によって前記対象に静脈内投与される、請求項３３〜３９のいずれか一項に記載される方法。
【請求項４１】
前記単離精製されたＬＣＡＴが、組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）である、請求項２９〜４０のいずれか一項に記載される方法。
【請求項４２】
前記ｒｈＬＣＡＴが、ＭＥＤＩ６０１２（配列番号２）である、請求項４１に記載される方法。
【請求項４３】
各用量が２０〜５００ｍｇの量のＬＣＡＴを含んでなる、２用量以上の単離精製されたレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）酵素をそれを必要とする対象に非経口的に投与して、前記対象における心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療するステップを含んでなる、対象における心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療する方法。
【請求項４４】
前記対象に投与される前記ＬＣＡＴの２用量以上が、３００ｍｇ、１５０ｍｇ、又は１００ｍｇから選択される量である、請求項４３に記載される方法。
【請求項４５】
１日目に投与される３００ｍｇの用量；３日目に投与される１５０ｍｇの用量；１０日目に投与される１００ｍｇの用量を含んでなる、ＬＣＡＴの３用量が前記対象に投与され；任意選択的に、ＬＣＡＴの後続用量が前記１０日目の投与後に、約３０日までの所定の時間間隔で、又はそれ以上の時間間隔で、前記対象に投与される、請求項４３又は請求項４４に記載される方法。
【請求項４６】
ＬＣＡＴが、静注及び／又は静脈内輸液によって前記対象に静脈内投与される、請求項４３〜４５のいずれか一項に記載される方法。
【請求項４７】
前記対象が、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管疾患（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、家族性又は後天性心筋梗塞、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全心、ＥＦ温存型心不全、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状を有する、請求項２９〜４６のいずれか一項に記載される方法。
【請求項４８】
前記単離精製されたＬＣＡＴが、組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）である、請求項４３〜４７のいずれか一項に記載される方法。
【請求項４９】
前記ｒｈＬＣＡＴが、ＭＥＤＩ６０１２（配列番号２）である、請求項４８に記載される方法。
【請求項５０】
前記治療対象が安定型ＣＶＤを有する、請求項４９に記載される方法。
【請求項５１】
２００〜５００ｍｇの量の単離精製されたレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）酵素の第１の用量をそれを必要とする対象に静脈内投与するステップと、
前記第１の用量のおよそ４８時間±８時間後に、１００〜２００の量の前記ＬＣＡＴ酵素の第２の用量を前記対象に静脈内投与して、前記対象における心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療するステップと
を含んでなる、対象における心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療する方法。
【請求項５２】
前記ＬＣＡＴの第１の用量が３００ｍｇであり、前記ＬＣＡＴの第２の用量が１００ｍｇ又は１５０ｍｇである、請求項５１に記載される方法。
【請求項５３】
前記ＬＣＡＴの第１の用量が３００ｍｇであり、前記ＬＣＡＴの第２の用量が１５０ｍｇである、請求項５２に記載される方法。
【請求項５４】
少なくとも第１の用量のＬＣＡＴが、静注によって前記対象に投与される、請求項５１〜５３のいずれか一項に記載される方法。
【請求項５５】
前記静注による投与が約１〜３分間の時間にわたる、請求項５４に記載される方法。
【請求項５６】
前記第２の用量の約１週間後に、１００〜１５０ｍｇの量のＬＣＡＴを前記対象に静脈内投与するステップをさらに含んでなる、請求項５１〜５５のいずれか一項に記載される方法。
【請求項５７】
前記第２の用量の約１週間後に前記対象に投与されるＬＣＡＴの用量が、約１００ｍｇの量である、請求項５６に記載される方法。
【請求項５８】
前記第２の用量後に１００〜２００ｍｇの量のＬＣＡＴの少なくとも４回の毎週投与を前記対象に静脈内投与するステップをさらに含んでなる、請求項５１〜５５のいずれか一項に記載される方法。
【請求項５９】
前記第２の用量後の前記ＬＣＡＴの少なくとも４回の毎週用量が、１００ｍｇの量である、請求項５８に記載される方法。
【請求項６０】
前記単離精製されたＬＣＡＴが、組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）である、請求項５１〜５９のいずれか一項に記載される方法。
【請求項６１】
前記ｒｈＬＣＡＴが、ＭＥＤＩ６０１２（配列番号２）である、請求項６０に記載される方法。
【請求項６２】
前記対象が、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管疾患（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、家族性又は後天性心筋梗塞、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全心、ＥＦ温存型心不全、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状を有する、請求項５１〜６１のいずれか一項に記載される方法。
【請求項６３】
２００〜５００ｍｇの量の第１の用量の単離精製されたレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）酵素ＭＥＤＩ６０１２を前記対象に静脈内投与するステップと；
前記第１の用量の約４８時間±８時間後に、１００〜２００ｍｇの量の第２の用量のＬＣＡＴ酵素ＭＥＤＩ６０１２を前記対象に静脈内投与するステップと；
前記第２の用量の約７〜１０日後に、１００〜１５０ｍｇの量の第３の用量のＬＣＡＴ酵素ＭＥＤＩ６０１２を前記対象に静脈内投与して、前記対象の心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療するステップと
を含んでなる、心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を有する対象を治療する方法。
【請求項６４】
前記ＬＣＡＴ酵素ＭＥＤＩ６０１２の第１の用量が３００ｍｇであり；前記ＭＥＤＩ６０１２の第２の用量が１５０ｍｇであり；前記ＭＥＤＩ６０１２の第３の用量が１００ｍｇである、請求項６３に記載される方法。
【請求項６５】
前記少なくとも第１の用量のＬＣＡＴ酵素ＭＥＤＩ６０１２が、静注によって前記対象に投与される、請求項６３又は請求項６４に記載される方法。
【請求項６６】
前記対象が、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管疾患（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、家族性又は後天性心筋梗塞、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全心、ＥＦ温存型心不全、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状を有する、請求項６３〜６５のいずれか一項に記載される方法。
【請求項６７】
３００ｍｇの量の組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）酵素ＭＥＤＩ６０１２の第１の負荷用量を約１〜５分間の時間をかけて静注によって前記対象に投与するステップと；
前記第１の用量の約４８時間±８時間後に、１５０〜８ｍｇの量の第２の用量のＬＣＡＴ酵素ＭＥＤＩ６０１２を前記対象に静脈内投与するステップと；
前記第２の用量の約７日後に、１００ｍｇの量のＬＣＡＴ酵素ＭＥＤＩ６０１２の第３の用量を前記対象に静脈内投与して、高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）及び／又はアポリポタンパク質（ａｐｏｐｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ）Ａ１（ａｐｏＡ１）の内因性レベルを増加させ、それによって前記対象における心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療するステップと
を含んでなる、心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を有する対象における高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）及び／又はアポリポタンパク質（ａｐｏｐｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ）Ａ１（ａｐｏＡ１）の内因性レベルを増加させる方法。
【請求項６８】
前記ＭＥＤＩ６０１２の第１の用量及び後続用量が、約１〜３分間の時間をかけて静注によって前記対象に投与される、請求項６７に記載される方法。
【請求項６９】
急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管疾患（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、家族性又は後天性心筋梗塞、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全心、ＥＦ温存型心不全、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状を有する、請求項６７又は請求項６８に記載される方法。
【請求項７０】
前記単離精製されたＬＣＡＴ酵素又はＭＥＤＩ６０１２の用量又は第１の用量が、前記対象が病院又は医療施設を受診してから約１〜３分以内に前記対象に投与される、請求項１〜６９のいずれか一項に記載される方法。
【請求項７１】
前記単離精製されたＬＣＡＴ酵素又はＭＥＤＩ６０１２の投与が、前記対象における高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）及び／又はアポリポタンパク質Ａ１（ａｐｏＡ１）の内因性レベルを増加させ、前記対象におけるアポリポタンパク質Ｂ（ａｐｏＢ）の内因性レベルを低下させ、又は変化させない、請求項１〜７０のいずれか一項に記載される方法。
【請求項７２】
前記単離精製されたＬＣＡＴ酵素又はＭＥＤＩ６０１２の投与が、内因性低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）を増加させず、ＶＬ−ＨＤＬ及びＶＶＬ−ＨＤＬの増加がわずか又は皆無であることをさらに特徴とする、請求項１〜７１のいずれか一項に記載される方法。
【請求項７３】
前記単離精製されたＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与が、前記対象における心筋細胞死を防止して動脈硬化性プラークを減少させることによって、心筋保護効果を与える、請求項１〜７２のいずれか一項に記載される方法。
【請求項７４】
前記対象がスタチン薬を服用している、請求項１〜７３のいずれか一項に記載される方法。
【請求項７５】
ＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２が、１つ又は複数の治療薬、医薬品、又は化合物と組み合わされて前記対象に投与される、請求項１〜７４のいずれか一項に記載される方法。
【請求項７６】
前記１つ又は複数の治療薬、医薬品、又は化合物が、スタチン薬、ＰＣＳＫ９阻害剤、又はその他のコレステロール低下剤である、請求項７５に記載される方法。
【請求項７７】
前記スタチン薬、ＰＣＳＫ９阻害剤、又はその他のコレステロール低下剤が、アトルバスタチン（ＬＩＰＩＴＯＲ）、フルバスタチン（ＬＥＳＣＯＬ）、ロバスタチン（ＭＥＶＡＣＯＲ、ＡＬＴＯＰＲＥＶ）、ピタバスタチン（ＬＩＶＡＬＯ）、プラバスタチン（ＰＲＡＶＡＣＨＯＬ）、ロスバスタチン（ＣＲＥＳＴＯＲ）及びシムバスタチン（ＺＯＣＯＲ）、エボロクマブ（ＲＥＰＡＴＨＡ（登録商標））又はアリロクマブ（ＰＲＡＬＵＥＮＴ（登録商標））から選択される、請求項７６に記載される方法。
【請求項７８】
ＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２が、前記１つ又は複数の治療薬、医薬品又は化合物の投与の前、投与と同時に、投与の後、又は投与とは異なる時点で、前記対象に投与される、請求項７５〜７７のいずれか一項に記載される方法。
【請求項７９】
単離精製されたレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）酵素を心疾患、心血管疾患及び／又はその症状を有する対象に、８０〜５００ｍｇの用量で非経口投与するステップ
を含んでなり、前記対象へのＬＣＡＴの投与後、前記対象で内因性ＨＤＬ−Ｃレベルが約１分間から少なくとも６時間以内に増加し、及び／又は内因性ａｐｏＡ１レベルが約１２〜２４時間以内に増加し、それによって前記対象における心臓病治療効果、心筋保護効果、及び抗アテローム発生効果を提供する、対象における心臓病治療効果、心筋保護効果、及び抗アテローム発生効果を提供する方法。
【請求項８０】
前記ＬＣＡＴの投与が、前記対象における心筋線維症及び肥大化を予防することによって、心臓病治療効果、心筋保護効果、及び抗アテローム発生効果を提供する、請求項７９に記載される方法。
【請求項８１】
ＬＣＡＴが３００ｍｇの用量で投与される、請求項７９又は請求項８０に記載される方法。
【請求項８２】
前記非経口用量の約４８時間±８時間後に、１２５〜２５０ｍｇの量のＬＣＡＴの第２の用量を前記対象に投与するステップをさらに含んでなる、請求項７９〜８１のいずれか一項に記載される方法。
【請求項８３】
前記ＬＣＡＴの第２の用量が、１５０ｍｇの量で前記対象に投与される、請求項８２に記載される方法。
【請求項８４】
前記ＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１の内因性レベルが、ＬＣＡＴの投与後少なくとも１４日間にわたり上昇したままである、請求項７９〜８３のいずれか一項に記載される方法。
【請求項８５】
ＬＣＡＴが前記対象に静脈内投与される、請求項７９〜８４のいずれか一項に記載される方法。
【請求項８６】
前記ＬＣＡＴの非経口用量が、約１〜３分間の時間をかけて静注によって前記対象に投与される、請求項７９〜８５のいずれか一項に記載される方法。
【請求項８７】
前記対象が、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管疾患（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、家族性又は後天性心筋梗塞、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全心、ＥＦ温存型心不全、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状を有する、請求項７９〜８６のいずれか一項に記載される方法。
【請求項８８】
前記単離精製されたＬＣＡＴが、組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）である、請求項７９〜８７のいずれか一項に記載される方法。
【請求項８９】
前記ｒｈＬＣＡＴが、ＭＥＤＩ６０１２（配列番号２）である、請求項８８に記載される方法。
【請求項９０】
内因性ＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１レベルが、ＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与後、約９０分〜約６時間以内に前記対象の血清又は血漿中で増加する、請求項１〜８８のいずれか一項に記載される方法。
【請求項９１】
ＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与後に、対照レベルと比較して、前記対象の血清又は血漿中で内因性ＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１レベルが約９０分以内に約５０％増加し、及び／又は前記対象の血清又は血漿中で内因性ＨＤＬ−Ｃレベルが約６時間目までに少なくとも９０％増加する、請求項９０に記載される方法。
【請求項９２】
ａｐｏＡ１レベルが、前記ＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与後、前記対象において少なくとも７日間にわたり上昇したままである、請求項９０又は請求項９１に記載される方法。
【請求項９３】
前記ＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与が、脳卒中、虚血性脳卒中、心筋損傷、腎臓損傷、肝臓損傷、又は梗塞サイズの増大の１つ又は複数の発生又は悪化から前記対象を保護する、請求項１〜９２のいずれか一項に記載される方法。
【請求項９４】
前記対象の医療専門家又は医療施設の受診時に、４０〜５００ｍｇの量の単離精製されたレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）、組換えヒトレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ｒｈＬＣＡＴ）、又はＭＥＤＩ６０１２の第１の用量を前記対象に静脈内投与するステップと；
前記第１の用量後、所定の間隔で、４０〜３００ｍｇの量のＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の第２の用量と、少なくとも１つの後続維持用量とを前記対象に静脈内投与するステップと
を含んでなる、心疾患、心臓−関連疾患、冠動脈疾患及び／又はそれらの症状を有し、又はそのリスクを有する対象において、高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）及び／又はアポリポタンパク質Ａ１（ａｐｏＡ１）の内因性濃度を増加させ、アポリポタンパク質Ｂ（ａｐｏＢ）の内因性濃度は増加させない方法。
【請求項９５】
前記第１の用量のＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２が、４０ｍｇ、１２０ｍｇ、１５０ｍｇ、又は３００ｍｇから選択される量で前記対象に投与される、請求項９４に記載される方法。
【請求項９６】
前記第１の用量のＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２が、３００ｍｇの量で前記対象に投与される、請求項９４又は請求項９５に記載される方法。
【請求項９７】
前記ＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２の第１の用量が、約１〜３分間の時間をかけて静注によって前記対象に投与される、請求項９４〜９６のいずれか一項に記載される方法。
【請求項９８】
前記第２の用量のＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２が、４０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、１２０ｍｇ、又は１５０ｍｇから選択される量で前記対象に投与される、請求項９４〜９７のいずれか一項に記載される方法。
【請求項９９】
前記ＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２の第２の用量が、１５０ｍｇの量で前記対象に投与される、請求項９８に記載される方法。
【請求項１００】
前記第２の用量のＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２が、前記第１の用量の約４８時間±８時間後に、前記対象に投与される、請求項９８又は請求項９９に記載される方法。
【請求項１０１】
前記ＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２の少なくとも１つの後続維持用量が、前記第２の用量後に、４０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、１２０ｍｇ、又は１５０ｍｇから選択される量で前記対象に投与される、請求項９４〜１００のいずれか１項に記載される方法。
【請求項１０２】
前記ＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２の少なくとも１つの後続維持用量が、１００ｍｇの量で前記対象に投与される、請求項１０１に記載される方法。
【請求項１０３】
前記ＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２の少なくとも１つの後続維持用量が、前記第２の用量の約１週間後に前記対象に投与される、請求項１０１又は請求項１０２に記載される方法。
【請求項１０４】
前記ＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２の少なくとも１つの後続維持用量が、静注によって前記対象に投与される、請求項１０１又は請求項１０２に記載される方法。
【請求項１０５】
ＭＥＤＩ６０１２（配列番号２）が前記対象に投与される、請求項９４〜１０４のいずれか一項に記載される方法。
【請求項１０６】
前記対象が、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管疾患（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、家族性又は後天性心筋梗塞、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全心、ＥＦ温存型心不全、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状を有し、又は有するリスクがある、請求項９４〜１０５のいずれか一項に記載される方法。
【請求項１０７】
前記対象が、スタチン薬、ＰＣＳＫ９阻害剤、又は抗コレステロール薬物療法を併行して受けている、請求項９４〜１０６のいずれか一項に記載される方法。
【請求項１０８】
前記方法が、心筋細胞のアポトーシスを減少させる、請求項１〜１０７のいずれか一項に記載される方法。
【請求項１０９】
前記方法が、心筋細胞の増殖をもたらす、請求項１〜１０８のいずれか一項に記載される方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
世界保健機構（Ｔｈｅ  Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ）によると、心血管疾患は、世界的に罹患率及び死亡率の主要原因である。２０１５年には、世界中で心血管疾患による約１７７０万人の死者が発生しており、この年の全世界の死亡者数の３１％に相当した。これらの死亡者数のうち、推定７４０万人は冠動脈心疾患（ＣＨＤ）によって引き起こされ、６７０万人は脳卒中によって引き起こされた。米国疾病対策予防センター（Ｃｅｎｔｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ａｎｄ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）によると、心疾患は、依然として米国のほとんどの民族の男女双方の主要な死亡原因であり、毎年約６３万人が死亡している。冠動脈心疾患は、米国における最も一般的なタイプの心疾患であり；２０１５年の死亡者数は３６万人を超えている。心疾患及び関連する冠動脈疾患と症候群は、今後１０年以上にわたり、世界的な死亡率の主要原因であり続けると予測されている。
【背景技術】
【０００２】
心臓及び冠動脈疾患は、心血管疾患患者に影響を及ぼすだけでなく、増加中の肥満症及び／又は糖尿病などの代謝障害に苦しんでいる個人にとって深刻な健康問題となっており、これは心血管リスクの増加につながることが多い。罹患した個人の医療サービス、薬物療法、及び失われた生産性のコストは、米国で毎年合計で約２０００億ドルになることから、心疾患及び関連健康状態は莫大な経済損失をもたらす。
【０００３】
ヒトにおける動脈硬化症は、動脈中のコレステロール蓄積によって特徴付けられる病的状態である。コレステロールは、動脈壁に存在する泡沫細胞中に蓄積し、それによってこれらの血管の内腔を狭小化して、血流の減少を引き起こす。動脈硬化症の発症は、血清中の高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）の濃度に反比例し、例えば、低いＨＤＬ濃度は心血管疾患のリスク増加に関連している。
【０００４】
肝臓によって分泌される血漿酵素であるレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）は、遊離コレステロールとホスファチジルコリン（レシチン）からのコレステリルエステル（ＣＥ）の生成を触媒する。ＬＣＡＴは、コレステロール逆輸送（ＲＣＴ）の過程において役割を果たすことが提案されている。ＲＣＴの最初の段階では、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）結合カセットＡ１（ＡＢＣＡ１）によって、遊離コレステロールが、プラーク中のマクロファージから、プレβ−ＨＤＬ及びＨＤＬのその他のより小さい粒子形態などの血漿受容体へ流出する。ＬＣＡＴは、ＨＤＬの遊離コレステロールをＣＥに変換し、ＨＤＬが組織から追加的なコレステロールを除去する能力を高め、細胞からのコレステロール流出の勾配を維持する。ＲＣＴプロセスにおけるＬＣＡＴの役割は、心疾患を有する患者におけるＬＣＡＴ活性低下とプレβ−ＨＤＬ増加の所見に一致する一方で、患者におけるＨＤＬ、ＬＣＡＴ、及び心疾患の機能的相互関係に関しては、矛盾したデータと所見が存在している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
心臓及び冠動脈疾患に罹患した個人の増加し続ける人数、そしてその地球規模での影響を考えると、冠動脈疾患をはじめとする異なるタイプの心疾患及びこれらの病状のリスクを軽減又は緩和する治療方法が緊急に必要である。本明細書に記載される新たに開発された治療的及び保護的治療方法は、急性及び慢性心疾患、ＣＨＤ、冠動脈疾患などを有する個人に、不可欠で本質的な治療法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
以下に記載されるように、本開示は、単離精製されたレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）酵素、特に、単離精製されたヒトＬＣＡＴ、又は本明細書中でＭＥＤＩ６０１２と称される組換え的に生成された（組換え体）ヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）の有効用量と投与レジメンによって、対象、特に哺乳類対象、より具体的には、慢性又は急性の心疾患、心臓関連疾患、冠動脈心疾患、心血管疾患、脳血管疾患、動脈硬化性疾患及び／又はそれらの症状を有するヒト対象を治療する治療的及び予防的方法を特徴とする。記載される方法は、天然に存在する環境、又は組換え細胞材料から、単離精製されたＬＣＡＴ酵素、特に、ヒトＬＣＡＴ酵素の使用を包含する。単離精製されたヒトＬＣＡＴ酵素は、ｒｈＬＣＡＴ酵素を包含する。特定の実施形態では、ｒｈＬＣＡＴ酵素は本明細書でＭＥＤＩ６０１２と称される。「単離精製されたヒトＬＣＡＴ」、「ＬＣＡＴ」、「ｒｈＬＣＡＴ」、及びＭＥＤＩ６０１２という用語は、本明細書で同義的に使用されてもよいことが理解されるであろう。
【０００７】
体内では、ＬＣＡＴ酵素は血流中に見られ、体内からの過剰なコレステロールの排除に重要な役割を果たしていると考えられているコレステロール逆輸送（ＲＣＴ）系の重要な因子として存在する。ＬＣＡＴはまた、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）、又は「善玉」コレステロールの血清及び血漿中レベルを全身的に管理する上で、極めて重要であると考えられている。心血管動脈と末梢動脈の双方においてコレステロールが蓄積する過程は、動脈硬化症とその臨床的続発症（例えば、心臓麻痺（心筋梗塞（ＭＩ）としても知られる）、虚血性心疾患、脳卒中、虚血性脳卒中、末梢血管疾患及びそれらの症状など）をもたらし得ることから、体内の全身コレステロール蓄積のプロセスを低減、遅延、又は逆転させることは、心疾患及び動脈硬化症の治療又は予防に効果的である。
【０００８】
本明細書に記載される方法は、治療対象の血清（又は血漿）中のＬＣＡＴ活性のレベルを全身的に増加させるように、対象に投与される単離精製されたＬＣＡＴ酵素の用量と投与レジメンを提供し、次に治療を受けている対象の動脈中の遊離又は非エステル化コレステロールの蓄積を減少させる（例えば、遅くする、減少させる、又は逆転させる）ことによって、心疾患、心臓関連病状及び疾患及び心血管疾患、並びにそれらの症状に対する、治療法の利点並びに保護効果をもたらす。さらに、本方法は、本明細書に記載されるような対象における心筋線維症及び肥大化を予防することによって、その他の心臓病治療効果、心臓保護効果、及び抗アテローム発生（アテローム保護）効果、並びに心筋保護効果を提供する。
【０００９】
本開示に従って、本明細書に記載され本方法において実施される、単離精製されたＬＣＡＴ酵素、すなわち、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の有効用量と投与レジメンでの使用は、前述の心疾患及び／又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を有する対象のための第一選択治療と、これらの疾患及び症状の様々な形態を有する対象のための有効な維持療法及び治療との双方を提供する。本明細書に記載される方法は、心疾患、心臓関連及び心血管疾患及び病状のための標準治療（ＳｏＣ）に利点を提供し、また、別の心臓又は心臓血管治療レジメンに続いて再発した対象に対して、治療法の利点を提供してもよい。
【００１０】
本明細書に記載される一態様で提供されるのは、対象における心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療するために、２０〜２０００ｍｇの量の１つ又は複数の用量の単離精製されたＬＣＡＴ酵素を１分間〜３時間程度の時間をかけて、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、対象における心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療する方法である。方法の一実施形態では、単離精製されたＬＣＡＴ酵素は、組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）酵素、又はＭＥＤＩ６０１２である。方法のいくつかの実施形態では、対象は、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管病（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、心不全（ＨＦ）、うっ血性ＨＦ、入院性ＨＦ、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全、ＥＦ温存型心不全、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、非ＳＴＥＭＩ；又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、末梢動脈疾患、心筋梗塞、虚血性心筋症、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状などの家族性又は後天性の心疾患又は心疾患（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）に関連し又はそれに付随する、疾病、病理、又は病状を有する。特定の実施形態では、対象は、安定型冠動脈疾患（ＣＡＤ）を有する。方法の特定の実施形態では、対象に投与されるＬＣＡＴ酵素の１つ又は複数の用量は、２０ｍｇ、２４ｍｇ、４０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２４０ｍｇ、３００ｍｇ、６００ｍｇ、８００ｍｇ又は１６００ｍｇから選択される量である。方法のその他の特定の実施形態では、ＬＣＡＴ酵素の１つ又は複数の用量は、３００ｍｇ、１５０ｍｇ、及び１００ｍｇから選択される量で対象に投与される。方法の一実施形態では、ＬＣＡＴの１つ又は複数の用量は、３００ｍｇの量の第１の用量と、第１の用量の約４８時間±８時間後に投与される１５０ｍｇの量の第２の用量とを含んでなる。方法の別の実施形態では、ＬＣＡＴの１つ又は複数の用量は、３００ｍｇの量の第１の用量；第１の用量の約４８時間±８時間後に投与される１５０ｍｇの量の第２の用量；及び第２の用量の約１週間後に投与される１００ｍｇの量の第３の用量を含んでなる。方法のなおも別の実施形態では、ＬＣＡＴの１つ又は複数の用量は、３００ｍｇの量の第１の用量；第１の用量の約４８時間±８時間後に投与される１５０ｍｇの量の第２の用量；及び第２の用量の約１週間後に投与される１用量当たり１００ｍｇの量の少なくとも４回の後続用量を含んでなる。方法の一実施形態では、ＬＣＡＴの１つ又は複数の用量が、対象に静脈内投与される。一実施形態では、ＬＣＡＴの１つ又は複数の用量が、静注を介して対象に投与される。一実施形態では、ＬＣＡＴは、約３０分間〜１時間の時間をかけて対象に静脈内投与される。一実施形態では、ＬＣＡＴは、約１〜３分間の時間をかけて静注によって対象に投与される。別の実施形態では、ＬＣＡＴは、３００ｍｇの量の１用量で対象に投与される。一実施形態では、ＬＣＡＴの１用量は、約１〜３分間の時間内に���注によって対象に投与される。別の実施形態では、ＬＣＡＴは、第１の用量が３００ｍｇの量であり、第２の用量が１５０ｍｇの量である、２用量で対象に投与される。別の実施形態では、ＬＣＡＴは、第１の用量が３００ｍｇの量であり；第２の用量が１５０ｍｇの量であり；第３の用量が１００ｍｇの量である、３用量で対象に投与される。別の実施形態では、ＬＣＡＴは、第１の用量が３００ｍｇの量であり；第２の用量が１５０ｍｇの量であり；第３〜６の用量が１００ｍｇの量である、６用量で対象に投与される。方法の一実施形態では、ＬＣＡＴの第２の用量は、第１の用量後、約４８時間±８時間以内に対象に投与される。方法の別の実施形態では、ＬＣＡＴの第３の用量は、第２の用量後、約１週間以内に対象に投与される。一実施形態では、ＬＣＡＴの第２の用量は第１の用量後、約４８時間±８時間以内に対象に投与され、ＬＣＡＴの第３の用量は第２の用量後、約１週間以内に対象に投与され；それ以降ＬＣＡＴの第４〜６の用量が毎週投与される。前述の一実施形態では、ＬＣＡＴの少なくとも第１の用量は、静注によって対象に投与される。別の実施形態では、ＬＣＡＴは、例えば、８０ｍｇ又は６００ｍｇの用量で皮下（ＳＣ）注射を介して対象に投与される。一実施形態では、６００ｍｇの用量でのＳＣ注射によるＬＣＡＴの投与は、対象におけるアポリポタンパク質Ａ１（ａｐｏＡ１）の内因性レベルを増加させる。上述の方法の別の実施形態では、ＬＣＡＴの投与は、対象における高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）及び／又はアポリポタンパク質Ａ１（ａｐｏＡ１）の内因性レベルを増加させる。方法の別の実施形態では、ＬＣＡＴの投与は、対象のアポリポタンパク質Ｂ（ａｐｏＢ）の内因性レベルを増加させない。前述のいずれかの実施形態では、単離精製されたＬＣＡＴは、組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）である。特定の実施形態では、ｒｈＬＣＡＴは、ＭＥＤＩ６０１２（配列番号２）である。
【００１１】
本明細書に記載される別の態様で提供されるのは、治療対象の受診時に、約１〜５分の時間をかけて静脈内（ＩＶ）注入によって対象に送達される２５０〜５００ｍｇの量の負荷用量の単離精製されたＬＣＡＴ酵素をそれを必要とする対象に投与するステップを含んでなる、対象における心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療する方法である。方法の一実施形態では、負荷用量のＬＣＡＴは、３００ｍｇの量で対象に投与される。方法の別の実施形態では、ＬＣＡＴの負荷用量は、約１〜３分間の時間をかけて対象に投与される。方法の別の実施形態では、ＬＣＡＴの負荷用量は、約１分間かけて対象に投与される。方法の別の実施形態では、ＬＣＡＴの１つ又は複数の用量は、負荷用量後に対象に投与される。一実施形態では、１００〜２００ｍｇの量のＬＣＡＴの用量が、負荷用量後に対象に投与される。別の実施形態では、１５０ｍｇの量のＬＣＡＴの用量が、負荷用量後に対象に投与される。別の実施形態では、１００〜１５０ｍｇの量のＬＣＡＴの用量が、１００〜２００ｍｇ又は１５０ｍｇの用量後に対象に投与される。別の実施形態では、１００ｍｇの量のＬＣＡＴの用量が、１００〜２００ｍｇ又は１５０ｍｇの用量後に対象に投与される。方法の別の実施形態では、１００〜２００ｍｇの用量又は１５０ｍｇの用量の約１週間後に、１用量当たり８０〜１５０ｍｇの量のＬＣＡＴの少なくとも４回の毎週用量が対象に投与される。方法の別の実施形態では、１００〜２００ｍｇの用量又は１５０ｍｇの用量の約１週間後に、１用量当たり１００ｍｇの量のＬＣＡＴの少なくとも４回の毎週用量が対象に投与される。別の実施形態では、負荷用量後に、ＬＣＡＴの１つ又は複数の用量が対象に静脈内投与される。方法の一実施形態では、単離精製されたＬＣＡＴは、組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）である。特定の実施形態では、ｒｈＬＣＡＴはＭＥＤＩ６０１２（配列番号２）である。
【００１２】
当業者によって理解されるように、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２などのＬＣＡＴ酵素の負荷用量、特に、１〜３分間かけて静注として対象に投与される負荷用量を含む記載される方法は、時間が最重要な病気及び病状の治療を容易にする。本明細書に記載され例示されるように、負荷用量を含むｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の記載される用量及び用量レジメンの患者への投与は、数分以内に患者のＨＤＬ−Ｃレベルを増加させ得る。したがって、本方法は、ＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１などの内因性産物のレベルを急速に増加させる活性剤ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の用量を提供し、限定することなく、急性ＭＩ、脳卒中、又は腎臓損傷などの急性疾患を呈する患者の治療的及び保護的治療を達成する。したがって、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２投与は、急性疾患、病理又は負傷の即時治療を必要とする患者にとって、非常に有利且つ最適である。
【００１３】
本明細書に記載される別の態様で提供されるのは、２用量以上の単離精製されたＬＣＡＴ酵素をそれ必要とする対象に非経口的に投与するステップを含んでなる、対象における心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療する方法であり、各用量は、対象の心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療するための２０〜５００ｍｇの量のＬＣＡＴを含んでなる。方法の一実施形態では、ＬＣＡＴの２用量以上が、３００ｍｇ、１５０ｍｇ、又は１００ｍｇから選択される量で対象に投与される。一実施形態では、ＬＣＡＴの３用量が対象に投与されて、１日目に投与される３００ｍｇの用量；３日目に投与される１５０ｍｇの用量；１０日目に投与される１００ｍｇの用量を含んでなり、任意選択的に、１０日目の投与後、ＬＣＡＴの後続用量が、約３０日までの時間間隔又はより長い所定の時間間隔で、対象に投与される。特定のその他の実施形態では、例えば、本明細書に記載されるような６用量などのＬＣＡＴの後続用量が、例えば、１０日目用量後、毎週などの所定の期間にわたり対象に投与される。一実施形態では、ＬＣＡＴは、静注及び／又は静脈内輸液によって対象に静脈内投与される。一実施形態では、対象は、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管疾患（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、家族性又は後天性心筋梗塞、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全、ＥＦ温存型心不全、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状を有する。一実施形態では、単離精製されたＬＣＡＴは、組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）である。特定の実施形態では、ｒｈＬＣＡＴは、ＭＥＤＩ６０１２（配列番号２）である。別の特定の実施形態では、治療対象は安定型ＣＶＤを有する。
【００１４】
本明細書に記載されるなおも別の態様で提供されるのは、２００〜５００ｍｇの量の単離精製されたレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）酵素の第１の用量をそれを必要とする対象に静脈内投与するステップと、第１の用量のおよそ４８時間±８時間後に、１００〜２００の量のＬＣＡＴ酵素の第２の用量を対象に静脈内投与して、対象における心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療するステップとを含んでなる、対象における心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療する方法である。方法の一実施形態では、ＬＣＡＴの第１の用量は３００ｍｇであり、ＬＣＡＴの第２の用量は１００ｍｇ又は１５０ｍｇである。特定の実施形態では、ＬＣＡＴの第１の用量は３００ｍｇであり、ＬＣＡＴの第２の用量は１５０ｍｇである。方法の一実施形態では、ＬＣＡＴの少なくとも第１の用量は、静注によって対象に投与される。方法の特定の実施形態では、静注による投与は約１〜３分間の時間をかけて行われる。一実施形態では、方法は、第２の用量の約１週間後に、１００〜１５０ｍｇの量のＬＣＡＴの用量を対象に静脈内投与するステップをさらに含んでなる。特定の実施形態では、第２の用量の約１週間後に対象に投与されるＬＣＡＴの用量は、１００ｍｇの量である。一実施形態では、方法は、第２の用量後に、１００〜２００ｍｇの量のＬＣＡＴの少なくとも４回の毎週用量を対象に静脈内投与するステップをさらに含んでなる。特定の実施形態では、第２の用量後のＬＣＡＴの少なくとも４回の毎週用量は、１００ｍｇの量である。一実施形態では、単離精製されたＬＣＡＴは、組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）である。特定の実施形態では、ｒｈＬＣＡＴは、ＭＥＤＩ６０１２（配列番号２）である。方法のいくつかの実施形態では、対象は、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管疾患（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、家族性又は後天性心筋梗塞、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全心、ＥＦ温存型心不全、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状を有する。
【００１５】
本明細書に記載されるなおも別の態様で提供されるのは、２００〜５００ｍｇの量の単離精製されたレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）酵素ＭＥＤＩ６０１２の第１の用量をそれを必要とする対象に投与するステップと；第１の用量の約４８時間±８時間後に、１００〜２００ｍｇの量の第２の用量のＬＣＡＴ酵素ＭＥＤＩ６０１２を対象に静脈内投与するステップと；第２の用量の約７〜１０日後に、１００〜１５０ｍｇの量の第３の用量のＬＣＡＴ酵素ＭＥＤＩ６０１２を対象に静脈内投与して、対象の心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療するステップとを含んでなる、対象における心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療する方法である。方法の一実施形態では、ＬＣＡＴ酵素ＭＥＤＩ６０１２の第１の用量は３００ｍｇであり；ＭＥＤＩ６０１２の第２の用量は１５０ｍｇであり；ＭＥＤＩ６０１２の第３の用量は１００ｍｇである。方法の一実施形態では、ＬＣＡＴ酵素ＭＥＤＩ６０１２の少なくとも第１の用量は、静注によって対象に投与される。
【００１６】
本明細書に記載されるなおも別の態様で提供されるのは、３００ｍｇの量の組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）酵素ＭＥＤＩ６０１２の第１の負荷用量を約１〜５分間かけて静脈内（ＩＶ）注入によって対象に静脈内投与するステップと；第１の用量の約４８時間±８時間後に、１５０ｍｇの量の第２の用量のＬＣＡＴ酵素ＭＥＤＩ６０１２を対象に静脈内投与するステップと；第２の用量の約７日後に、１００ｍｇの量のＬＣＡＴ酵素ＭＥＤＩ６０１２の第３の用量を対象に静脈内投与するステップとを含んでなる、心疾患又は心血管疾患及び／又はその症状を有する対象において、高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）及び／又はアポリポタンパク質（ａｐｏｐｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ）Ａ１（ａｐｏＡ１）の内因性レベルを増加させる方法であり、心疾患又は心血管疾患及び／又はその症状を治療し、対象における高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）及び／又はアポリポタンパク質（ａｐｏｐｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ）Ａ１（ａｐｏＡ１）内因性レベルを増加させ、それによって心疾患又は心血管疾患及び／又はその症状を治療する。方法の一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の第１の用量及び後続用量は、約１〜３分間の時間をかけて静注によって対象に投与される。
【００１７】
上記の態様のいずれか、又は本明細書に記述される方法の態様のいずれかの実施形態において、対象は、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管病（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、心不全（ＨＦ）、うっ血性ＨＦ、入院性ＨＦ、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全、ＥＦ温存型心不全、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、非ＳＴＥＭＩ、又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、末梢動脈疾患、心筋梗塞、虚血性心筋症、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状などの家族性又は後天性の心疾患又は心疾患（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）に関連し又はそれに付随する、疾病、病理、又は病状を有する。特定の実施形態では、治療対象は安定型ＣＶＤを有する。
【００１８】
上記の態様のいずれか、又は本明細書に記述される方法の態様のいずれかの実施形態において、単離精製されたＬＣＡＴ酵素又はＭＥＤＩ６０１２の用量（又は第１の用量）は、対象の医療施設（病院、診療所、救急センター、開業医院など）の受診時に、例えば、１〜５分間程度の時間内、又は１〜３分間程度の時間内など、即座に対象に投与される。
【００１９】
上記の態様のいずれか、又は本明細書に記述される方法の態様のいずれかの実施形態において、単離精製されたＬＣＡＴ酵素又はＭＥＤＩ６０１２の投与は、投与に続いて、対象における高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）及び／又はアポリポタンパク質Ａ１（ａｐｏＡ１）の内因性レベルを増加させる。方法のその他の実施形態では、ＬＣＡＴの投与は、投与に続いて、対象におけるアポリポタンパク質Ｂ（ａｐｏＢ）レベルを低下させ、又は変化させず、又は増加させる。前述の態様のいずれかの方法の別の実施形態では、単離精製されたＬＣＡＴ酵素又はＭＥＤＩ６０１２の投与は、内因性低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）を増加させず、巨大ＨＤＬ（ＶＬ−ＨＤＬ）粒子及び超巨大ＨＤＬ（ＶＶＬ−ＨＤＬ）粒子の増加をほとんど又は全く生じない。
【００２０】
上記の態様のいずれか、又は本明細書に記述される方法の態様のいずれかの実施形態において、単離精製されたＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与は、心筋細胞死を予防し、対象の動脈硬化性プラークを減少させることによって、心筋保護効果を与える。上記の態様のいずれか、又は本明細書に記述される方法の態様のいずれかの実施形態において、単離精製されたＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与は、心筋線維症及び肥大化を予防することによって、心筋保護効果を与える。
【００２１】
上記の態様のいずれか、又は本明細書に記述される方法の態様のいずれかの実施形態において、治療を受けている対象は、スタチン薬を服用している。
【００２２】
上記の態様のいずれか、又は本明細書に記述される方法の態様のいずれかの実施形態において、単離精製されたＬＣＡＴ酵素、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２は、１つ又は複数の治療薬、医薬品、又は化合物との併用で対象に投与される。一実施形態では、１つ又は複数の治療薬、医薬品、又は化合物は、スタチン薬、プロタンパクコンバクターゼサブチリシン／ケキシンタイプ９（ＰＣＳＫ９）酵素阻害剤（ＰＣＳＫ９ｉ）、又はその他のコレステロール低下剤である。方法の特定の実施形態では、スタチン薬、ＰＣＳＫ９阻害剤、又はその他のコレステロール低下剤は、アトルバスタチン（ＬＩＰＩＴＯＲ）、フルバスタチン（ＬＥＳＣＯＬ）、ロバスタチン（ＭＥＶＡＣＯＲ、ＡＬＴＯＰＲＥＶ）、ピタバスタチン（ＬＩＶＡＬＯ）、プラバスタチン（ＰＲＡＶＡＣＨＯＬ）、ロスバスタチン（ＣＲＥＳＴＯＲ）、シムバスタチン（ＺＯＣＯＲ）、エボロクマブ（ＲＥＰＡＴＨＡ（登録商標））、又はアリロクマブ（ＰＲＡＬＵＥＮＴ（登録商標））から選択される。方法のいくつかの実施形態では、ＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２は、１つ又は複数の治療薬、医薬品、又は化合物の投与前、投与と同時に、投与後、又は投与とは異なる時点で、対象に投与される。
【００２３】
本明細書に記載されるなおも別の態様で提供されるのは、単離精製されたＬＣＡＴ酵素を心疾患、心血管疾患及び／又はその症状を有する対象に、８０〜５００ｍｇの用量で非経口投与するステップを含んでなる、対象における心臓病治療効果、心筋保護効果、及び抗アテローム発生効果を提供する方法であり、内因性ＨＤＬ−Ｃレベルは、対象へのＬＣＡＴの投与後、約１分間〜少なくとも６時間以内に対象において増加し、及び／又は内因性ａｐｏＡ１レベルは、約１２〜２４時間以内に増加する。方法の一実施形態では、ＬＣＡＴの投与は、対象における心筋線維症及び肥大化を予防することによって、心臓病治療効果、心筋保護効果、及び抗アテローム発生効果を提供する。方法の特定の実施形態では、ＬＣＡＴは３００ｍｇの用量で投与される。別の実施形態では、方法は非経口用量の約４８時間±８時間後に、１２５〜２５０ｍｇの量のＬＣＡＴの第２の用量を対象に投与するステップをさらに含んでなる。特定の実施形態では、ＬＣＡＴの第２の用量は、１５０ｍｇの量で対象に投与される。方法の別の実施形態では、ＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１の内因性レベルは、ＬＣＡＴの投与後、少なくとも１４日間上昇したままである。方法の一実施形態では、ＬＣＡＴは対象に静脈内投与される。方法の特定の実施形態では、非経口ＬＣＡＴの用量は、約１〜３分間の時間をかけて静注によって対象に投与される。方法のいくつかの実施形態では、対象は、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管病（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、心不全（ＨＦ）、うっ血性ＨＦ、入院性ＨＦ、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全、ＥＦ温存型心不全、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、非ＳＴＥＭＩ、又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、末梢動脈疾患、心筋梗塞、虚血性心筋症、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状などの家族性又は後天性の心疾患又は心疾患（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）に関連し又はそれに付随する、疾病、病理、又は病状を有する。いくつかの実施形態では、方法は、心筋線維症及び肥大化を予防することによって、心臓病治療効果、心臓保護効果、及び抗アテローム発生効果、及び心筋保護効果をさらに提供する。方法の一実施形態では、単離精製されたＬＣＡＴは、組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）である。特定の実施形態では、ｒｈＬＣＡＴは、ＭＥＤＩ６０１２（配列番号２）である。
【００２４】
上記の態様のいずれか、又は本明細書に記述される方法の態様のいずれかの実施形態において、内因性ＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１レベルは、ＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与後、約９０分間〜約６時間以内に、対象から得られたサンプル（例えば、血清又は血漿）において増加する。一実施形態では、ＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与後に、対照レベルと比較して、対象の血清又は血漿中で内因性ＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１レベルが約９０分以内に約５０％増加し、及び／又は対象の血清又は血漿中で内因性ＨＤＬ−Ｃレベルが約６時間目までに少なくとも９０％増加する。なおも別の実施形態では、ａｐｏＡ１レベルは、ＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与後、対象において少なくとも７日間上昇したままである（対象の血清又は血漿中で検出されるように）。
【００２５】
上記の態様のいずれか、又は本明細書に記述される方法の態様のいずれかの実施形態において、ＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与は、脳卒中、虚血性脳卒中、心筋損傷、腎臓損傷、肝臓損傷、又は梗塞サイズの増大の１つ又は複数の発生又は悪化から対象を保護する。上記の態様のいずれか、又は本明細書に記述される方法の態様のいずれかの実施形態において、単離精製されたＬＣＡＴは、組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）酵素又はＭＥＤＩ６０１２である。
【００２６】
本明細書に記載されるなおも別の態様で提供されるのは、対象の医療専門家又は医療施設の受診時に、４０〜５００ｍｇの量の単離精製されたレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）、組換えヒトレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ｒｈＬＣＡＴ）、又はＭＥＤＩ６０１２の第１の用量を対象に静脈内投与するステップと；第１の用量後、所定の間隔で、４０〜３００ｍｇの量のＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の第２の用量と、少なくとも１つの後続維持用量とを対象に静脈内投与するステップとを含んでなる、心疾患、心臓関連疾患、冠動脈疾患及び／又はそれらの症状を有する又はリスクがある対象において、高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）及び／又はアポリポタンパク質Ａ１（ａｐｏＡ１）の内因性濃度を増加させて、アポリポタンパク質Ｂ（ａｐｏＢ）の内因性濃度を増加させない（すなわち、減少させ又はほとんど増加させない）方法である。方法の一実施形態では、ＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２の第１の用量は、２４ｍｇ、４０ｍｇ、１２０ｍｇ、１５０ｍｇ、又は３００ｍｇから選択される量で対象に投与される。方法の特定の実施形態では、ＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２の第１の用量は、３００ｍｇの量で対象に投与される。方法の別の特定の実施形態では、ＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２の第１の用量は、約１〜３分間の時間をかけて静注によって対象に投与される。方法の一実施形態では、ＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２の第２の用量は、４０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、１２０ｍｇ、又は１５０ｍｇから選択される量で対象に投与される。方法の特定の実施形態では、ＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２の第２の用量は、１５０ｍｇの量で対象に投与される。方法の一実施形態では、ＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２の第２の用量は、第１の用量の約４８時間±８時間後に対象に投与される。方法の一実施形態では、ＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２の少なくとも１つの後続維持用量は、第２の用量後、４０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、１２０ｍｇ、又は１５０ｍｇから選択される量で対象に投与される。特定の実施形態では、ＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２の少なくとも１つの後続維持用量は、１００ｍｇの量で対象に投与される。方法の別の実施形態では、ＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２の少なくとも１つの後続維持用量は、第２の用量の約１週間後に対象に投与される。方法の別の実施形態では、ＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２の少なくとも１つの後続維持用量は、静注によって対象に投与される。特定の実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２（配列番号２）が対象に投与される。方法のその他の実施形態では、対象は、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管病（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、心不全（ＨＦ）、うっ血性ＨＦ、入院性ＨＦ、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全、ＥＦ温存型心不全、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、非���ＴＥＭＩ、又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、末梢動脈疾患、心筋梗塞、虚血性心筋症、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状などの家族性又は後天性の心疾患又は心疾患（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）に関連し又はそれに付随する、疾病、病理、又は病状を有し、又は有するリスクがある。方法の別の実施形態では、対象は、スタチン薬、ＰＣＳＫ９阻害剤、又は抗コレステロール薬物療法を併行して受けている。
【００２７】
本開示は、本明細書で開示される方法に従って、心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を有する対象の治療で使用するためのｒｈＬＣＡＴ及びＭＥＤＩ６０１２をはじめとするＬＣＡＴもまた提供する。本開示は、本明細書で開示される方法に従って、心疾患又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を有する対象を治療するための薬剤の製造のためのｒｈＬＣＡＴ及びＭＥＤＩ６０１２をはじめとするＬＣＡＴの使用もまた提供する。
【００２８】
本開示のその他の特徴及び利点は、詳細な説明及び特許請求の範囲から明らかになるであろう。
【００２９】
定義
特に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術的及び科学的用語は、本発明が属する分野の当業者によって一般に理解される意味を有する。以下の参考文献は、本開示で使用される用語の多くの一般的な定義を当業者に提供する：Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（２ｎｄ  ｅｄ．１９９４）；Ｔｈｅ  Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｗａｌｋｅｒ  ｅｄ．，１９８８）；Ｔｈｅ  Ｇｌｏｓｓａｒｙ  ｏｆ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，５ｔｈ  Ｅｄ．，Ｒ．Ｒｉｅｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ（１９９１）；及びＨａｌｅ  ＆  Ｍａｒｈａｍ，Ｔｈｅ  Ｈａｒｐｅｒ  Ｃｏｌｌｉｎｓ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９９１）。本明細書の用法では、以下の用語は、特に指定されない限り、下でそれらに帰するとされる意味を有する。
【００３０】
「薬剤」という用語は、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド（又はその断片）、核酸分子、小化合物、薬物、又は医薬品を指す。
【００３１】
「改善する」とは、疾患又は病状の発生又は進行を減少させ、低下させ、低減し、抑制し、減衰させ、停止させ、阻害し、遮断し、又は安定化させることを意味する。
【００３２】
「レシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）」（ホスファチジルコリンステロールアシルトランスフェラーゼとしても知られる）は、血漿リポタンパク質の細胞外代謝において、並びに血液及び組織からのコレステロールの除去において、役割を果たす酵素である。肝臓で合成され、血漿中に分泌されるＬＣＡＴ酵素は、遊離コレステロール及びホスファチジルコリン（レシチン）からのコレステリルエステル（ＣＥ）の生成を触媒し、コレステロールを血液及び組織から運び出すのを助ける。ＬＣＡＴは、ＨＤＬ−Ｃの遊離コレステロール成分のエステル化を通じてＨＤＬ−ＣＥを産生する役割を担っていることから、ＬＣＡＴのレベル、機能、及び／又は活性を増加させると、組織への送達に利用可能なＨＤＬ−ＣＥの量もまた増加する。ヒトでは、血漿中のＣＥの約９０％がＬＣＡＴによって形成され、反応は、ほとんどが高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）上で生じてα−ＬＣＡＴ活性と称され、またより少ない程度に、アポリポタンパク質Ｂ（ａｐｏＢ）含有粒子上でも生じてβ−ＬＣＡＴ活性と称される。ＬＣＡＴによるコレステロールのエステル化は、ＨＤＬの小さな円盤状形態（プレβ−ＨＤＬ及びα４−ＨＤＬ）から、より長い半減期を有するＨＤＬのより大きな球状形態（α１−３−ＨＤＬ）への成熟を促進することによって、ＨＤＬレベルを維持するのに役立つ。ヒトでは、ほとんどのＨＤＬ−ＣＥは、コレステリルエステル転送タンパク質（ＣＥＴＰ）によって、最終的にトリグリセリドと引き換えに移行して、超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）、中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）、及び低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）に移行する。このプロセスによって、コレステロールがそこで他の組織に再分配され又は体内から除去される肝臓に、コレステロールを送り戻すリポタンパク質が、より効率的に運べるコレステロールの形態がもたらされる。本明細書の用法では、「ＬＣＡＴ酵素」は、組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）酵素又はＭＥＤＩ６０１２などの単離精製されたＬＣＡＴ酵素を指す。
【００３３】
「ヒトＬＣＡＴポリペプチド」は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受入番号Ｐ０４１８０−１又はＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿０００２２０．１と、少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％又は約９９％のアミノ酸配列同一性を有し、ＬＣＡＴ酵素活性及び／又は機能を有するポリペプチド又はその断片を意味する。（配列番号１：以下）。
【化１】
2021501793.tif 000002
【００３４】
「ＭＥＤＩ６０１２（組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）ポリペプチド）」は、ＬＣＡＴ酵素活性及び／又は機能を有する、以下の配列番号２に示されるような４１６アミノ酸のポリペプチド又はその断片；又は配列番号２のアミノ酸配列と、少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％又は約９９％のアミノ酸配列同一性を有し、ＬＣＡＴ酵素活性及び／又は機能を有するポリペプチド又はその断片を意味する。
【化２】
2021501793.tif 000003
【００３５】
ヒトＬＣＡＴポリペプチドのポリヌクレオチドコード配列は、以下に提示される（１３２３ヌクレオチド（ｎｔｓ））。ＮＣＢＩ  ＣＣＤＳ受入番号１０８５４．１（以下の配列番号３）のヒトＬＣＡＴの核酸配列と、少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％又は約９９％ヌクレオチド配列同一性を有するポリヌクレオチド又はその断片は、本開示に包含される。
【化３】
2021501793.tif 000004
【００３６】
ヒトＬＣＡＴ  ｃＤＮＡのクローニング及び配列決定法は、Ｊ．ＭｃＬｅａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８３：２３３５−２３３９に報告され；ヒトＬＣＡＴの完全な遺伝子配列は、Ｊ．ＭｃＬｅａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，１４：９３９７−９４０６に報告される。
【００３７】
ＭＥＤＩ６０１２（旧称ＡＣＰ５０１）は、分離精製された組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）酵素である。ＭＥＤＩ６０１２（ｒｈＬＣＡＴ）は、４１６アミノ酸で構成されるおよそ６０キロダルトンのグリコシル化単鎖タンパク質であり、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞培養物中で生成され単離精製される。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２は、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）を有する患者における標準治療の補助として虚血性イベントのリスクを低減し、高リスク心筋梗塞を有する患者における心血管（ＣＶ）死亡及び心不全（ＨＦ）入院のリスクを低減するための治療方法で使用される。ＭＥＤＩ６０１２及びＡＣＰ５０１は同一のアミノ酸配列を有しているため、同じ分子実体と考えられる。ＭＥＤＩ６０１２は、以前のＡＣＰ５０１と比較して、タンパク質１ｍｇ当たりのより高い酵素活性、並びに製品関連及びプロセス関連のより高い純度を提供するように製造されている。
【００３８】
「バイオマーカー」又は「マーカー」は、本明細書の用法では、疾患に関連したタンパク質、核酸分子、臨床指標、又はその他の分析物を一般に指す。一実施形態では、マーカーは、例えば、心疾患、心血管疾患、又は冠動脈疾患などの疾患を有する対象から得られた生物学的サンプル中に、対照サンプル又は参照中に存在するレベルと比較して、示差的に存在する。一実施形態では、マーカーは、例えばＭＥＤＩ６０１２などの薬剤で治療された対象において、例えば、プラセボで治療された対象からのサンプル中の同じＰＤマーカーのレベルなどの対照と比較して、対象から得られたサンプル（例えば、血液、血漿、又は血清）中のそのレベルを測定又は定量することによって評価される、薬力学的（ＰＤ）マーカーである。ＰＤバイオマーカーは、所与の薬剤、例えば、薬剤、化合物、又は医薬品が、１つ又は複数の薬理学的又は生理学的効果を生じているかどうかを判定するために、定量的及び／又は定性的に評価され得るマーカー、標的、又は決定因子である。ＰＤバイオマーカーは、生物中の標的に対する、薬物の直接的又は間接的効果（活性）の指標であり、薬剤用量及び／又は薬剤レジメン、標的効果、及び生物学的応答との関連性又はつながりを調べるのに有用であってもよい。
【００３９】
心疾患又は心疾患（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）は、心筋の組織及び細胞（心筋細胞と称される）を含む、心臓に影響を及ぼすあらゆる種類の疾患を指す。心臓病は、心筋梗塞（心臓発作又は冠動脈血栓症として知られている）をはじめとするいくつかの障害又は病状を包含し、血流が遮断されて酸素の欠乏がもたらされ、心筋の一部が損傷し又は破壊される。冠動脈疾患は、心臓に栄養、酸素、及び血液を供給する冠動脈の疾患又は損傷を伴い、通常は、動脈の開口部を狭めて心臓／心筋への血流を低下させるプラーク（コレステロールを含有する）の沈着及び蓄積から帰結する。
【００４０】
心血管疾患（ＣＶＤ）は、冠動脈心疾患（心筋に供給する血管の疾患）；脳血管疾患（脳に供給する血管の疾患）；末梢動脈疾患（腕及び脚に供給する血管の疾患）；リウマチ性心疾患（連鎖球菌によって引き起こされるリウマチ熱からの心筋及び心臓弁の損傷）；先天性心疾患（出生時に存在する心臓構造の奇形）；深部静脈血栓症及び肺塞栓症（剥がれて心臓及び肺に移動し得る脚静脈内の血栓）をはじめとする、一群の心臓及び血管の双方の障害である。心臓発作及び脳卒中は、慢性的な結果／後遺症を伴う急性のイベントであり、主に心臓又は脳への血液の流れを妨げる閉塞によって引き起こされる。この最も一般的な理由は、心臓又は脳に血液を供給する血管内壁上の脂肪性沈着物の蓄積である。脳卒中はまた、脳内血管からの出血又は血栓によっても引き起こされ得る。心臓発作及び脳卒中の原因は、通常は、タバコの使用、不健康な食生活及び肥満、身体的な運動不足及びアルコールの有害な使用、高血圧、糖尿病、高脂血症、及び遺伝的素因などのリスク因子の組み合わせの存在である。
【００４１】
「ＨＤＬ」は、「高密度リポタンパク質」の頭字語である。再構成ＨＤＬ（ｒＨＤＬ）は、アポリポタンパク質Ａ１（ａｐｏＡ１）、リン脂質（例えば、レシチン）、及びコレステリルエステル（ＣＥ）の複合体；又はａｐｏＡ１、リン脂質（例えば、レシチン）、コレステロール、及びコレステリルエステル（ＣＥ）の複合体を指す。ａｐｏＡ１、リン脂質、及びＣＥと複合体形成したＨＤＬは、ＨＤＬ粒子とも称される。ｒＨＤＬを生成するのに使用されてもよいリン脂質としては、ホスファチジルコリン、スフィンゴミエリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、カルジオリピン、又はそれらの混合物が挙げられる。天然ＨＤＬは、血漿又は血清から単離され、ＨＤＬ、タンパク質（ａｐｏＡ１など）、コレステロール、及びコレステリルエステルを含有する粒子を指す。「ＨＤＬ−Ｃ」は、エステル化コレステロール及び非エステル化コレステロールの双方を含有してもよい、ＨＤＬを指す（「Ｃ」は、コレステロール（Ｃ）及びコレステリルエステル（ＣＥ）の双方からなる総コレステロールを表す）。「ＨＤＬ−ＣＥ」は、ＨＤＬのコレステリルエステル成分を指す。ＡｐｏＡ１は、ＨＤＬ粒子に関連した主要なタンパク質であり、コレステロール逆輸送において役割を果たす。ＨＤＬ粒子１個当たりのａｐｏＡ１タンパク質の数は可変であり、ａｐｏＡ１タンパク質の数及びＨＤＬ粒子に含まれるコレステロールの量もまた可変である。
【００４２】
本明細書の用法では、「判定する」、「評価する」、「アッセイする」、「測定する」及び「検出する」、及び「同定する」という用語は、定量的及び定性的判定の双方を指し、したがって、「判定する」という用語は、本明細書で「アッセイする」、「測定する」などと同義的に使用される。定量的判定が意図される場合、分析物、物質、タンパク質などの「量を判定する」という語句が使用される。定性的及び／又は定量的判定が意図される場合、分析物の「レベルを判定する」又は分析物を「検出する」という語句が使用される。
【００４３】
「疾患」とは、細胞、組織、又は臓器の正常な機能を損傷し、妨害し、又は調節不全にする、あらゆる病状又は障害を意味する。特に、心疾患（ｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）は、心疾患（ｈｅａｒｔ  ｄｉｓｅａｓｅ）とも称される。本明細書で言及される心臓及び冠動脈又は末梢動脈の疾患及びこれらに関連した疾患としては、例として、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管病（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、心不全（ＨＦ）、うっ血性ＨＦ、入院性ＨＦ、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全、ＥＦ温存型心不全、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、非ＳＴＥＭＩ、又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、末梢動脈疾患、心筋梗塞、虚血性心筋症、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状などの家族性又は後天性の心疾患又は心疾患（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）に関連し又はそれに付随する、疾病、病理、又は病状が挙げられる。このような疾患、病状及び／又はその症状は、対象において急性又は慢性であってもよく、限定は意図されない。
【００４４】
「単離された」、「精製された」又は「生物学的に純粋な」という用語は、天然状態で見られる通常はそれに付随する成分を様々な程度に含まない物質を指す。「単離する」は、元の供給源又は環境からのある程度の分離を示す。「精製する」は、単離よりも高い分離度を示す。「精製された」又は「生物学的に純粋な」タンパク質は、いかなる不純物もタンパク質の生物学的特性に実質的に影響を及ぼしたり、その他の有害な帰結を引き起こしたりしないように、その他の材料を十分に含まない。すなわち、核酸又はペプチドは、本明細書の用法では、組換えＤＮＡ技術によって生成されるときは、細胞材料、ウイルス材料又は培養培地を実質的に含まず、又は化学合成されるときは、化学物質前駆体又はその他の化学物質を実質的に含まない場合に、精製されている。純度及び均質性は、典型的には、例えば、ポリアクリルアミドゲル電気泳動、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、質量分析法などの分析化学技術を使用して判定される。「精製された」という用語は、核酸又はタンパク質が、電気泳動ゲルにおいて本質的に１つのバンドを生じさせることを意味し得る。例えば、リン酸化又はグリコシル化などの修飾を受け得るタンパク質については、異なる修飾は、別々に精製され得る、異なる単離されたタンパク質を生じさせてもよい。
【００４５】
「単離されたポリヌクレオチド」は、核酸分子が由来する生物の天然に存在するゲノム中で遺伝子に隣接する遺伝子を含まない、核酸（例えば、ＤＮＡ）を意味する。したがって、この用語は、例えば、ベクターに組み込まれた組換えＤＮＡ、自律的に複製するプラスミド若しくはウイルスに組み込まれた組換えＤＮＡ、又は原核生物若しくは真核生物のゲノムＤＮＡに組み込まれた組換えＤＮＡ、又はその他の配列とは独立した別個の分子（例えば、ＰＣＲ又は制限エンドヌクレアーゼ消化によって生成されたｃＤＮＡ又はゲノム若しくはｃＤＮＡフラグメント）として存在する組換えＤＮＡを含む。さらに、用語は、ＤＮＡ分子から転写されたＲＮＡ分子、並びに１つ又は複数の追加的なポリペプチド配列をコードするハイブリッド遺伝子の一部である組換えＤＮＡを含む。
【００４６】
「単離されたポリペプチド」は、それが天然に付随する成分から分離された、又は単離又は精製処理中に存在する成分から分離された、単離されたＬＣＡＴ又は組換えヒトＬＣＡＴ酵素などの本開示のポリペプチドを意味する。典型的には、ポリペプチドは、それが自然に結合している、タンパク質及び天然に存在する有機分子を少なくとも６０重量％含まない場合に、単離されている。好ましくは、調製物の少なくとも７５重量％、より好ましくは少なくとも９０重量％、最も好ましくは少なくとも９９重量％は、本開示のポリペプチドである。本開示の単離されたポリペプチドは、例えば、天然源からの抽出によって、このようなポリペプチドをコードする組換え核酸の発現によって；又はタンパク質を化学的に合成することによって得られてもよい。純度は、例えば、カラムクロマトグラフィー、ポリアクリルアミドゲル電気泳動、又はＨＰＬＣ分析などの任意の適切な方法によって測定され得る。
【００４７】
「用量」という用語は、例えば、治療又は治療法の利益などのために、薬剤に対する必要性を有する対象又は患者に（投与経路の限定することなく）投与される、小分子又は生物学的のような、薬剤、医薬品、化合物などの治療薬の測定された分量、量、又は濃度を指す。
【００４８】
「用量又は投与レジメン」は、本明細書の用法では、例えば、数日間、数週間、数ヶ月、数年間などの所定の治療期間（治療の長さ）にわたり、特定の投与頻度（薬剤が投与される回数）で対象に投与される、（ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２などのＬＣＡＴの）用量又は投与量を指す。
【００４９】
本明細書で使用される「負荷用量」は、例えば、体内の薬物の量又は濃度を適切な治療レベルに維持するより低用量又は維持用量の薬物を投与する前に、ｒｈＬＣＡＴ（ＭＥＤＩ６０１２）などの薬物の比較的大きな量又は濃度（ボーラス用量など）を治療過程の開始時に投与し、対象における薬物、特に体内からのクリアランスが遅い（全身半減期が長い）薬物の初期効果、曝露又は影響を提供することを指す。一般に、負荷用量を提供することは、体内で薬物の治療レベルに達するのに要する時間を加速させる。より具体的には、ＬＣＡＴ（例えば、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２）が記載される用量で投与される本明細書に記載される方法では、負荷用量は、例えば、ＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１のレベル又は量の増加などの所望のＰＤ効果が達成されるまでの時間を加速させる。負荷用量の計算は、一般に４つの変数、すなわち、薬剤の所望のピーク濃度、Ｃｐ；体内での薬物の分布容積、Ｖｄ；薬物の生物学的利用能、Ｆ；及び体内で活性な薬物（又は薬物の塩の形態）の割合、Ｓを伴う。負荷用量は、次のように計算されてもよい：
【数１】
2021501793.tif 000005
静脈内投与される薬剤では、薬物が血流中に直接導入されるため、生物学的利用能Ｆは１に等しくなる。
【００５０】
「維持用量」は、体内の薬物の量又は濃度を適切な治療レベルに維持する、単離精製されたＬＣＡＴ（例えば、本明細書に記載されるｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２）などの薬物又は薬剤の用量を指す。薬物又は薬剤の維持用量は、薬物又は薬剤の初回用量（例えば、負荷用量）又は以前の用量の投与後に、所定時間で及び／又は反復所定時間間隔で（例えば、毎週、毎月など）、投与されることが多い。薬物又は薬剤の維持用量は、典型的には、負荷用量よりも低く又は著しくより低い。薬物又は薬剤の維持用量は、初回用量又は負荷用量、又は以前の用量に続いて、長期間にわたり対象に投与されてもよい。
【００５１】
コレステロール逆輸送（ＲＣＴ）は、胆汁中の再利用又は排泄のために、コレステロールが血漿コンパートメントを介して末梢組織から肝臓に戻る、正味移動をもたらす多段階過程である。細胞コレステロール流出は、ＬＣＡＴと連携して作用する高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）によって媒介される。ＲＣＴ経路の主要なステップは、細胞からの遊離コレステロールの排出とプレβＨＤＬによる結合、レシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）によるＨＤＬ結合コレステロールのエステル化、コレステリルエステル転送タンパク質（ＣＥＴＰ）が媒介するＨＤＬとａｐｏＢ含有粒子間のコレステリルエステルとトリグリセリドの交換、及び肝リパーゼ（ＨＬ）が媒介する肝臓によるコレステロールとトリグリセリドの取り込みである。したがって、ＨＤＬに蓄積するコレステリルエステルは、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）受容体による、ＨＤＬ含有アポリポタンパク質の肝臓への取り込み（粒子の取り込み）；スカベンジャー受容体Ｂ１（ＳＲＢ１）が関与する、肝臓又はその他の組織へのＨＤＬコレステリルエステルの選択的取り込み；又はコレステリルエステル転移タンパク質の活性の結果としてのトリグリセリドに富むリポタンパク質への移行と、トリグリセリドに富むリポタンパク質残遺物の肝臓へのその後の取り込みなど、いくつかの異なる運命をたどり得る。
【００５２】
「参照」又は「対照」は、プラセボなどの比較基準を意味する。
【００５３】
治療の文脈における「応答性」は、治療を受け易いことを意味する。
【００５４】
「生物学的サンプル」又は「サンプル」は、対象から得られた任意の液体、細胞又は組織を意味する。いくつかの実施形態では、生物学的サンプルは、血液、血清、血漿、脳脊髄液、気管支肺胞洗浄液、痰、涙、唾液、尿、精液、糞便などである。細胞又は組織のサンプルを適当な緩衝液中でさらに処理して、その中で細胞及び組織の細胞内成分が提供される、ホモジネート又は懸濁液が生成されてもよい。特定の実施形態では、血液、血漿、又は血清サンプルは、バイオマーカー及びマーカー（例えば、ＰＤマーカー）の検出及び定量化のために利用される。
【００５５】
「対象」は、ヒト患者などのヒト、非ヒト霊長類、又はウシ、ウマ、イヌ、ヒツジ、又はネコ科動物などの非ヒト哺乳類をはじめとするが、これに限定されるものではない、哺乳類を意味する。一実施形態では、対象はヒトである。一実施形態では、対象は、心臓（ｈｅａｒｔ）（心臓（ｃａｒｄｉａｃ））の病状又は疾患、又は心血管疾患又は症候群、及び／又はその症状を有する、又はそのリスクを有する、又はその治療を受けている、ヒト患者である。一実施形態では、心臓の病状を有する対象は、動脈硬化症又は冠動脈疾患を有してもよい。
【００５６】
本明細書で提供される範囲は、最初に記載される値と最後に記載される値を含む、範囲内の全ての値の省略表現であると理解される。例えば、１〜５０までの範囲は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、又は５０からなる群から任意の数、数の組み合わせ、又はサブ範囲を含むものと理解される。
【００５７】
「医薬組成物」又は「製剤」は、ヒトをはじめとする、動物又は哺乳類などの対象における医薬的使用に適した組成物（生理学的に許容される組成物）を指す。医薬組成物は、治療的又は予防的有効量のＭＥＤＩ６０１２と、薬学的に許容可能な賦形剤、担体、ビヒクル、又は希釈剤とを含んでなる。一実施形態では、医薬組成物は、活性成分（ＭＥＤＩ６０１２又はｒｈＬＣＡＴ）；及び担体を構成する不活性成分；並びに任意の２つ以上の成分の組み合わせ、複合体又は凝集から、又は成分の１つ又は複数の解離から、又は成分の１つ又は複数のその他の各種反応又は相互作用から、直接的又は間接的に生じる任意の生成物を含んでなる、組成物を包含する。一実施形態では、医薬組成物は、任意選択的に、別の生物学的活性剤、化合物、薬剤、又は医薬を含む。したがって、本開示の医薬組成物は、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２と、薬学的に許容可能な賦形剤、担体、ビヒクル、又は希釈剤とを混合することによって製造される、任意の組成物を包含する。
【００５８】
「薬学的に許容可能な担体」は、リン酸塩緩衝食塩水、任意選択的に別の生物学的活性剤、デキストロースの水性（例えば、５％）溶液、及びエマルション（例えば、油／水又は水／油エマルション）などの標準的な薬学的担体、緩衝剤などのいずれかを指す。賦形剤の非限定的例としては、アジュバント、結合剤、充填剤、希釈剤、崩壊剤、乳化剤、湿潤剤、潤滑剤、滑剤、甘味剤、香味剤、及び着色剤が挙げられる。適切な薬学的担体、賦形剤、ビヒクル、及び希釈剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９ｔｈ  Ｅｄ．（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，１９９５（又はこの参考文献の最新版））にあり得る。組成物又は製剤に含めるのに適した薬学的担体は、典型的には、例えばＭＥＤＩ６０１２などの活性剤の意図された投与様式に依存する。例示的な投与様式としては、経腸（例えば、経口）又は非経口（例えば、皮下、筋肉内、静脈内又は腹腔内注射；静脈内輸液、又は局所、経皮、又は経粘膜投与）が挙げられる。
【００５９】
「薬学的に許容可能な塩」は、金属塩（例えば、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウムなど）、及びアンモニア又は有機リン酸の塩をはじめとするが、これに限定されるものではない、医薬的使用のための化合物に製剤化され得る塩を指す。
【００６０】
「薬学的に許容可能」、「生理学的に許容可能」、又は「薬理学的に許容可能」は、生物学的、生理学的、又は別の様式で有害でない物質を指し、すなわち、物質は、いかなる望ましくない生物学的効果も引き起こすことなく、又は有害な様式で、それがその中に含まれる組成物の成分のいずれかと、又は個体の身体上若しくは体内に存在するいかなる成分と相互作用することなく、個体に投与されてもよい。
【００６１】
「生理学的状態」は、ヒトなどの動物又は哺乳類の体内の状態を指す。生理学的状態としては、体温と、生理学的イオン強度、ｐＨ、及び酵素などの水性環境とが挙げられるが、これらに限定されない。生理学的状態はまた、正常なヒト体温（約３７℃）又は正常なヒト血液ｐＨ（約７．４）など、大部分の対象に存在する「正常」な状態と異なる、特定の対象の体内の状態も包含する。
【００６２】
本明細書の用法では、「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、「治療」などの用語は、障害及び／又はそれに関連した症状を軽減、減少、軽減、緩和、抑止、又は改善することを指す。除外されるものではないが、障害又は病状を治療することは、障害、病状又はそれに関連した症状を完全に除去することを必要としないことが理解されるであろう。「治療」は、予防的治療又は治療的治療又は診断的治療を指してもよい。特定の実施形態では、「治療」は、治療目的、予防目的、又は診断目的のために、化合物又は組成物を対象に投与することを指す。
【００６３】
記載される方法に従って、治療すること又は治療は、本明細書に記載されるような活性成分（単離精製されたＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２）の投与を含む。一実施形態では、単離精製されたＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２は、それを必要とする対象に静脈内投与される。当該技術分野の当業者によって理解されるように、静脈内投与は、一般に、単離精製されたＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２などの活性成分、治療薬、物質、薬剤、又は薬物を対象の静脈又は血管に提供又は送達し、活性成分を対象の体循環に送達することを指す。静脈内投与は、例えば、シリンジ及び針又はカテーテルの手段による、静脈内注射又は静脈内輸液等を含んでなってもよい。静脈内注射又は輸液は、活性成分が、チューブを通じて輸液バッグ内に送達され、次にカテーテル及び／又は対象の体内に配置されたポートを通じて、医師によって慣例的及び実際的に決定される流速で、輸液バッグから対象内に送達されるような、プラスチックチューブ及び輸液バッグ（例えば、輸液セット）の使用を伴ってもよい。静脈内注射又は輸液は、ポンプの使用によって又は点滴を介して行われてもよい。例として、限定することなく、対象への静脈内輸液による、単離精製されたＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２などの活性成分又は薬物療法の投与は、例えば、約３０分間〜約１時間以上、又は約１時間超などの時間にわたり行われてもよい。
【００６４】
一実施形態では、静脈内投与は、静注を含んでなってもよく、これは、単離精製されたＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ、又はＭＥＤＩ６０１２などの活性成分又は薬物療法を対象の静脈又は血管へ送達すること（例えば、シリンジを通じた注射による）と理解される。静注は、静脈内ライン、針、又はカテーテルを通じて送達されてもよい。特定の実施形態では、静注は、典型的には、例えば、限定されるものではないが、３０秒間〜３分間程度の期間、又は１〜１０分間程度の時間、又は１〜５分間程度の時間、又は１〜３分間程度の時間、又は１〜２分間程度の時間、又は１分間程度の時間などの比較的短時間をかけてシリンジを介して手動で対象に送達される、単離精製されたＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２（薬物又は薬物療法）の静脈内注射又は輸液を指す。静注は、典型的には、シリンジを介して対象に投与される。静注は、シリンジを通じて、短い又は長いＩＶラインから、対象の静脈又は血管内に送達されてもよい。特定の実施形態では、単離精製されたＬＣＡＴ、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２は、１〜３分間程度の時間をかけて静注によって対象に投与される。
【００６５】
「予防的治療」（予防的又は保護的治療など）は、疾患、病理、又は病状を発症するリスク、又は疾患、病理、又は病状のより深刻な又は重篤な形態を発症するリスクを低減し、減少させ、緩和し、又は除去する目的で、疾患の徴候を示さない、又は疾患の初期徴候のみを示す、又は疾患を有するリスクがある対象に施される治療である。本開示のｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２化合物又はその組成物は、対象が疾患、病理又は状態を発症する可能性を低減させるために、又は対象に疾患、病理又は病状が発症した場合にその重症度を最小化するために、予防的又は保護的治療として投与されてもよい。
【００６６】
「治療的」治療は、徴候又は症状を低減し、減少させ、緩和し、又は除去する目的で、疾患又は病理の徴候又は症状を示す対象に施される治療である。疾患又は病理の徴候又は症状は、限定することなく、生化学的、行動的、細胞性、表現型、遺伝子型、組織学的、機能的、身体的、主観的、又は客観的であってもよい。本開示の組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）又はＭＥＤＩ６０１２はまた、治療的治療として又は診断のために投与されてもよい。
【００６７】
本明細書の用法では、障害又は病状を「予防する」治療薬は、統計的なサンプルにおいて、未治療の対照又は参照サンプルと比較して、治療済みサンプル中の障害又は病状の発生を低減させる；又は未処理参照又は対照サンプルと比較して、障害又は病状の１つ又は複数の症状の発症を遅延させ又は重症度を低減させる、化合物又は物質を指す。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２は、本明細書に記載される方法における予防的治療薬である。
【００６８】
「有効量」という用語は、対象の健康状態、病理、又は疾患に関連した、又は診断目的のために、所望の結果（例えば、症状の減少、緩和、除去、又は改善）を生じるのに十分な投与量を指す。所望の結果は、用量又は投与量が投与される対象における、主観的又は客観的改善を含んでなってもよい。「治療的有効量」は、健康に対する有益な効果を生じるのに有効な薬剤の量を指す。任意の特定の患者に対する特定の投与レベルと頻度は、用いられる特定の化合物の活性；その化合物の生物学的利用能、代謝安定性、排泄速度及び作用の長さ；化合物の投与の様式及び時間；患者の年齢、体重、総体的な健康、性別、及び食生活；患者の特定の病状の重症度をはじめとする、様々な要因に任意に依存することが理解されるであろう。
【００６９】
「タンパク質」、「ペプチド」、及び「ポリペプチド」という用語は、長さ又は翻訳後修飾（例えば、グリコシル化又はリン酸化）に関係なく、アミノ酸鎖を指す。したがって、本明細書では、用語は、アミノ酸残基のポリマーを指すために同義的に使用され得る。用語はまた、１つ又は複数のアミノ酸残基が、対応する天然アミノ酸の人工的な化学模倣薬である、アミノ酸ポリマーにも適用される。したがって、「ポリペプチド」という用語は、完全長の天然に存在するタンパク質；並びに完全長の天然に存在するタンパク質に対応し、又は天然に存在するタンパク質の特定のドメイン若しくは部分に対応する、組換え又は合成によって製造されたポリペプチドを含む。用語はまた、原核細胞における発現を促進するために、アミノ末端メチオニンが付加された成熟タンパク質も包含する。ポリペプチドは化学合成され得て、又は組換えＤＮＡ法によって合成され得て；又はそれらは標準的な生化学的精製法に従って、それらがその中で天然に発現された組織から精製され得る。「機能的ポリペプチド」は、例えば、ＬＣＡＴ酵素タンパク質などの所与のタンパク質又はポリペプチドの１つ又は複数の生物学的機能又は活性を有する。機能的ポリペプチドは、ヒトＬＣＡＴタンパク質の標準配列であると考えられるものから修飾された、一次アミノ酸配列を含有してもよい。好ましくは、このような修飾は、タンパク質の正常な機能又は活性を変化させず、又は実質的に変化させない、保存的アミノ酸置換である。ポリペプチド断片、部分、又はセグメントは、特定の配列からの少なくとも約６個の連続したアミノ酸、より典型的には少なくとも約１０〜１２個の連続したアミノ酸の一続きのアミノ酸残基を指す。
【００７０】
本開示のＬＣＡＴなどのポリペプチドをコードする核酸分子（ポリヌクレオチド）は、例えば、ヒトＬＣＡＴなどの開示されたポリペプチド、又はその断片をコードする、任意の核酸分子を含む。このような核酸分子は、内因性核酸配列と１００％同一である必要はないが、典型的には実質的な同一性を示すであろう。内因性配列との「実質的同一性」を有するポリヌクレオチドは、典型的には、二本鎖核酸分子の少なくとも１本の鎖とハイブリダイズできる。内因性配列との「実質的同一性」を有するポリヌクレオチドは、典型的には、二本鎖核酸分子の少なくとも１本の鎖とハイブリダイズできる。「ハイブリッド形成する」は、様々なストリンジェンシー条件下で、相補的ポリヌクレオチド配列（例えば、遺伝子）又はその一部の間に、二本鎖分子を形成するための対形成を意味する。（例えば、Ｗａｈｌ，Ｇ．Ｍ．ａｎｄ  Ｓ．Ｌ．Ｂｅｒｇｅｒ，１９８７，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．，１５２：３９９；Ｋｉｍｍｅｌ，Ａ．Ｒ．，１９８７，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．，１５２：５０７を参照されたい）。
【００７１】
４１６アミノ酸のヒトＬＣＡＴをコードする、ゲノムＤＮＡが単離された。（例えば、米国特許第６，６３５，６１４号明細書を参照されたい）。マウスからのＬＣＡＴのヌクレオチド及び推定アミノ酸配列は、ＣＨ．Ｗａｒｄｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｊ．Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．，２６４：２１５７３−８１に記載される。哺乳類のＬＣＡＴ（特に、ヒトＬＣＡＴ）、又はその酵素的に活性な対立遺伝子変異は、記載される方法において有用であってもよく、ＬＣＡＴの酵素活性を保有する酵素の断片を含むその他の変異型についても同様である。ポリヌクレオチド又は遺伝子の文脈における「対立遺伝子変異」は、集団において２つ以上の形態で存在する遺伝子の代替形態（対立遺伝子）である。ポリペプチドレベルでは、「対立遺伝子変異」は、一般に、１つだけ、又は最大で数個のアミノ酸置換だけ互いに異なる。ポリヌクレオチド又はポリペプチドの「種変異」は、異なる生物種間で、多様性が天然に存在するものである。
【００７２】
非限定的な例として、ストリンジェントな塩濃度は、通常、約７５０ｍＭのＮａＣｌ及び７５ｍＭのクエン酸三ナトリウム未満、好ましくは約５００ｍＭのＮａＣｌ及び５０ｍＭのクエン酸三ナトリウム未満、より好ましくは約２５０ｍＭのＮａＣｌ及び２５ｍＭのクエン酸三ナトリウム未満である。低ストリンジェンシーハイブリダイゼーションは、例えば、ホルムアミドなどの有機溶媒の非存在下で得られ得る一方で、高ストリンジェンシーハイブリダイゼーションは、少なくとも約３５％のホルムアミド、より好ましくは少なくとも約５０％のホルムアミドの存在下で得られ得る。ストリンジェントな温度条件としては、通常、少なくとも約３０℃、より好ましくは少なくとも約３７℃、最も好ましくは少なくとも約４２℃の温度が挙げられる。ハイブリダイゼーション時間、例えば、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）などの界面活性剤の濃度、及びキャリアＤＮＡの包含又は排除などの変動する追加のパラメータは、当業者に良く知られている。様々なレベルのストリンジェンシーは、必要に応じてこれらの様々な条件を組み合わせることで達成される。特定の実施形態では、ハイブリダイゼーションは、７５０ｍＭのＮａＣｌ、７５ｍＭのクエン酸三ナトリウム、及び１％ＳＤＳ中で３０℃で行われる。別の特定の実施形態では、ハイブリダイゼーションは、５００ｍＭのＮａＣｌ、５０ｍＭのクエン酸三ナトリウム、１％ＳＤＳ、３５％ホルムアミド、及び１００μｇ／ｍｌの変性サケ精子ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）中で、３７℃で行われる。別の特定の実施形態では、ハイブリダイゼーションは、２５０ｍＭのＮａＣｌ、２５ｍＭのクエン酸三ナトリウム、１％ＳＤＳ、５０％ホルムアミド、及び２００μｇ／ｍｌのｓｓＤＮＡ中で、４２℃で行われる。これらの条件の有用なバリエーションは、当業者には容易に明らかであろう。
【００７３】
ほとんどの用途では、ハイブリダイゼーションに続く洗浄ステップもまた、ストリンジェンシーによって変動する。洗浄ストリンジェンシー条件は、塩濃度及び温度によって定義され得る。上記のように、塩濃度を下げ又は温度を上げることによって、洗浄ストリンジェンシーを高め得る。例えば、洗浄ステップのためのストリンジェントな塩濃度は、約３０ｍＭのＮａＣｌ及び３ｍＭのクエン酸三ナトリウム未満であり、特に、約１５ｍＭのＮａＣｌ及び１．５ｍＭのクエン酸三ナトリウム未満であろう。洗浄ステップのためのストリンジェントな温度条件としては、通常、少なくとも約２５℃、又は少なくとも約４２℃、又は少なくとも約６８℃の温度が挙げられる。特定の実施形態では、洗浄ステップは、３０ｍＭのＮａＣｌ、３ｍＭのクエン酸三ナトリウム、及び０．１％ＳＤＳ中で、２５℃で行われる。別の特定の実施形態では、洗浄ステップは、１５ｍＭのＮａＣｌ、１．５ｍＭのクエン酸三ナトリウム、及び０．１％ＳＤＳ中で、４２℃で行われる。別の特定の実施形態では、洗浄ステップは、１５ｍＭのＮａＣｌ、１．５ｍＭのクエン酸三ナトリウム、及び０．１％ＳＤＳ中で、６８℃で行われる。これらの条件の追加的なバリエーションは、当業者には容易に明らかであろう。ハイブリダイゼーション技術は、当業者に良く知られており、例えば、Ｂｅｎｔｏｎ  ａｎｄ  Ｄａｖｉｓ（Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９６：１８０，１９７７）；Ｇｒｕｎｓｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｈｏｇｎｅｓｓ（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，７２：３９６１，１９７５）；Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，２００１）；Ｂｅｒｇｅｒ  ａｎｄ  Ｋｉｍｍｅｌ（Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，１９８７，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）；及びＳａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋに記載される。
【００７４】
「実質的に同一」は、参照アミノ酸配列又は核酸配列と、少なくとも５０％の同一性を示すポリペプチド又は核酸分子を意味する。このような配列は、比較のために使用される配列と、アミノ酸レベル又は核酸で、少なくとも６０％、又は少なくとも８０％又は８５％、又は少なくとも９０％、９５％、又は９９％の同一性を有してもよい。
【００７５】
配列同一性は通常、配列解析ソフトウェアを使用して測定される（例えば、Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｐａｃｋａｇｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｅｎｔｅｒ，１７１０  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ａｖｅｎｕｅ，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．５３７０５；ＢＬＡＳＴ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＧＡＰ、又はＰＩＬＥＵＰ／ＰＲＥＴＴＹＢＯＸプログラム）。このようなソフトウェアは、様々な置換、欠失、及び／又はその他修飾について、相同性の程度を割り当てることによって、同一又は類似の配列を適合させる。保存的置換としては、典型的には、以下のアミノ酸グループ内の置換が挙げられる：グリシン、アラニン；バリン、イソロイシン、ロイシン；アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミン；セリン、スレオニン；リジン、アルギニン；及びフェニルアラニン、チロシン。同一性の程度を決定するための例示的なアプローチでは、ＢＬＡＳＴプログラムが使用されてもよく、ｅ−３〜ｅ−１００の間の確率スコアは、密接に関連した配列を示唆する。
【００７６】
本開示において、「含んでなる（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含んでなる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含有する」、及び「有する」などは、米国特許法においてそれらに帰するとされる意味を有し得て、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」などを意味し得て；「から本質的になる」又は「本質的になる」は、同様に米国特許法において帰するとされる意味を有し、用語は開放型であり、列挙されたものの基本的又は新規な特性が、列挙されたものを超える存在によって変更されない限り、列挙されたものを超える存在を許容するが、先行技術の実施形態は除外される。
【００７７】
具体的に記載されており又はその文脈から明らかでない限り、「又は」という用語は、本明細書の用法では包括的であると理解される。具体的に記載されており又は文脈から明らかでない限り、「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」という用語は、本明細書の用法では単数形又は複数形であると理解される。
【００７８】
具体的に記載されており又は文脈から明らかでない限り、「約」という用語は、本明細書の用法では、例えば、平均の２標準偏差内などの当該技術分野の通常の許容差の範囲内として理解される。「約」という用語は、記載値の５％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％、０．１％、０．０５％、又は０．０１％以内を指すと理解される。文脈から明らかである場合を除き、本明細書で提供される全ての数値は、約という用語によって修正される。
【００７９】
本明細書で提供される任意の組成物又は方法は、本明細書で提供されるその他の組成物及び方法のいずれか１つ又は複数と組み合わされ得る。
【図面の簡単な説明】
【００８０】
【図１】本明細書の実施例１に記載される、第ＩＩａ相単回漸増用量（ＳＡＤ）臨床試験（ＳＡＤ臨床試験Ｄ５７８０Ｃ００００２）のデザインの図式的概観を提示する。この試験に登録されたコホートは、安定型冠動脈疾患（ＣＡＤ）を有し、スタチン治療を受けていた集団を代表した。この試験には、最近の不安定型狭心症又は心筋梗塞（ＭＩ）、脳卒中、一過性虚血発作（ＴＩＡ）又はミニ脳卒中、又は血管介入がある対象は含まれていなかった。試験からは、６０ｍｇ／ｄＬを超えるＨＤＬ−Ｃレベル、７５歳を超える男女、１５０ｍｇ／ｄＬを超えるＬＤＬ−Ｃ値（標準的な臨床検査による直接測定）、５００ｍｇ／ｄＬを超えるトリグリセリド（ＴＧ）レベルを有した対象が、さらに除外された。図１では、「活性」という用語は、静脈内（ＩＶ）投与によって送達される２４ｍｇ、８０ｍｇ、２４０ｍｇ、及び８００ｍｇ；及び皮下（ＳＣ）注射によって送達される８０ｍｇ及び６００ｍｇの示された用量で、各コホートの対象に投与されたＭＥＤＩ６０１２  ｒｈＬＣＡＴ酵素を指す。「ｐｂｏ」という用語は、試験において対象に投与されたプラセボを指す。
【図２Ａ−２Ｂ】本明細書の実施例１に記載される第ＩＩａ相ＳＡＤ試験で判定されたような、プラセボと比較した、２４、８０、２４０、又は８００ｍｇの用量でＭＥＤＩ６０１２を静脈内（ＩＶ）投与を介して投与された対象における、ＬＤＬ−Ｃの経時的な血清濃度（レベル）（標準的な臨床検査による直接測定）のグラフを示す。図２Ａは、ＭＥＤＩ６０１２の単回ＩＶ用量を投与された対象における、経時的なＬＤＬ−Ｃの血清濃度（標準的な臨床検査による直接測定）を示す。図２Ｂは、図２Ａで記載されるような、ＭＥＤＩ６０１２の単回ＩＶ用量を投与された対象における、経時的なＬＤＬ−Ｃの血清濃度（標準的な臨床検査による直接測定）のベースラインからの変化を示す。
【図３Ａ−３Ｂ】本明細書の実施例１に記載される第ＩＩａ相ＳＡＤ試験で判定されたような、プラセボと比較した、２４、８０、２４０、又は８００ｍｇの用量でＭＥＤＩ６０１２を静脈内（ＩＶ）投与を介して投与された対象における、血清中のアポリポタンパクＢ（ａｐｏＢ）の経時的な濃度を示すグラフである。図３Ａは、ＭＥＤＩ６０１２の単回ＩＶ用量（２４、８０、２４０又は８００ｍｇのＩＶ用量）を投与された対象における、経時的なａｐｏＢの血清濃度を示す。図３Ｂは、図３Ａで記載されるような、ＭＥＤＩ６０１２の単回ＩＶ用量を投与された対象における、経時的なａｐｏＢの血清濃度のベースラインからの変化を示す。
【図４Ａ−４Ｄ】本明細書の実施例１に記載される第ＩＩａ相ＳＡＤ試験で判定されたような、プラセボと対比した、８０ｍｇ又は６００ｍｇの用量でＭＥＤＩ６０１２を皮下（ＳＣ）投与によって与えられた対象における、又はプラセボと対比した、２４ｍｇ、８０ｍｇ、２４０ｍｇ、又は８００ｍｇの用量でＭＥＤＩ６０１２を静脈内（ＩＶ）投与によって与えられた対象における、経時的なＨＤＬ−Ｃの血清濃度のグラフを示す。図４Ａは、プラセボ対照と比較した、ＭＥＤＩ６０１２のＳＣ用量（８０ｍｇ又は６００ｍｇの用量）を投与された対象における、経時的なＨＤＬ−Ｃの血清濃度を示す。図４Ｂは、プラセボ対照と比較した、ＭＥＤＩ６０１２のＳＣ用量（８０ｍｇ又は６００ｍｇの用量）を投与された対象における、経時的なＨＤＬ−Ｃの血清濃度のベースラインからの変化を示す。図４Ｃは、プラセボ対照と比較した、ＭＥＤＩ６０１２のＩＶ用量（２４ｍｇ、８０ｍｇ、２４０ｍｇ、又は８００ｍｇの用量）を投与された対象における、経時的なＨＤＬ−Ｃの血清濃度を示す。図４Ｄは、プラセボ対照と比較した、ＭＥＤＩ６０１２のＩＶ用量（２４ｍｇ、８０ｍｇ、２４０ｍｇ、又は８００ｍｇの用量）を投与された対象における、経時的なＨＤＬ−Ｃの血清濃度のベースラインからの変化を示す。
【図５Ａ−５Ｂ】本明細書の実施例１に記載される第ＩＩａ相ＳＡＤ試験で判定されたような、プラセボと比較した、８０又は６００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２を皮下（ＳＣ）投与を介して投与された対象における、ＬＤＬ−Ｃの経時的な血清濃度（レベル）（標準的な臨床検査による直接測定）のグラフを示す。図５Ａは、ＭＥＤＩ６０１２の単回ＳＣ用量（８０又は６００ｍｇのＳＣ用量）を投与された対象における、経時的なＬＤＬ−Ｃの血清濃度（標準的な臨床検査による直接測定）を示す。図５Ｂは、図５Ａで記載されるような、ＭＥＤＩ６０１２の単回ＳＣ用量を投与された対象における、経時的なＬＤＬ−Ｃの血清濃度（標準的な臨床検査による直接測定）のベースラインからの変化を示す。
【図６Ａ−６Ｂ】本明細書の実施例１に記載される第ＩＩａ相ＳＡＤ試験で判定されたような、プラセボと比較した、８０又は６００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２を皮下（ＳＣ）投与を介して投与された対象における、血清中のａｐｏＢの経時的な濃度を示すグラフである。図６Ａは、ＭＥＤＩ６０１２の単回ＳＣ用量（８０ｍｇ又は６００ｍｇのＳＣ用量）を投与された対象における、経時的なａｐｏＢの血清濃度を示す。図６Ｂは、図６Ａで記載されるような、ＭＥＤＩ６０１２の単回ＳＣ用量を投与された対象における、経時的なａｐｏＢの血清濃度のベースラインからの変化を示す。
【図７Ａ−７Ｄ】本明細書の実施例１に記載される第ＩＩａ相ＳＡＤ試験で判定されたような、プラセボと対比した、８０ｍｇ又は６００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２を皮下（ＳＣ）投与によって与えられた対象における、又は２４ｍｇ、８０ｍｇ、２４０ｍｇ、又は８００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２を静脈内（ＩＶ）投与によって与えられた対象における、経時的なａｐｏＡ１の血清濃度のグラフを示す。図７Ａは、ＭＥＤＩ６０１２のＳＣ用量（８０ｍｇ又は６００ｍｇの用量）を投与された対象における、経時的なａｐｏＡ１の血清濃度を示す。図７Ｂは、ＭＥＤＩ６０１２のＳＣ用量（８０ｍｇ又は６００ｍｇの用量）を投与された対象における、経時的なａｐｏＡ１の血清濃度のベースラインからの変化を示す。図７は、プラセボ対照と比較した、ＭＥＤＩ６０１２のＩＶ用量（２４ｍｇ、８０ｍｇ、２４０ｍｇ、又は８００ｍｇの用量）を投与された対象における、経時的なａｐｏＡ１の血清濃度を示す。図７Ｄは、プラセボ対照と比較した、ＭＥＤＩ６０１２のＩＶ用量（２４ｍｇ、８０ｍｇ、２４０ｍｇ、又は８００ｍｇの用量）を投与された対象における、経時的なａｐｏＡ１の血清濃度のベースラインからの変化を示す。
【図８Ａ−８Ｄ】本明細書の実施例２の複数回漸増用量（ＭＡＤ）臨床試験（ＭＡＤ臨床試験Ｄ５７８０Ｃ００００５）で記載されるような、プラセボと比較した、ＭＥＤＩ６０１２の投与後にコホート１〜３の対象から得られたサンプルで測定された、ＨＤＬ−Ｃ（図８Ａ）、ＨＤＬ−ＣＥ（図８Ｂ）、ａｐｏＡ１（図８Ｃ）、及びＣＥ（図８Ｄ）の経時的な血清濃度のベースラインからの変化を示すグラフを提示する。経時的なＨＤＬ−Ｃ、ＨＤＬ−ＣＥ、ａｐｏＡ１、及びＣＥの用量依存的増加は、ＭＡＤ試験において、プラセボと比較した、ＭＥＤＩ６０１２の複数回投与レジメン（すなわち、１、８、１５日目に静脈内投与された４０ｍｇ、１２０ｍｇ、又は３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２）を受けたコホート１〜３の対象で見られた。対象からのサンプルで測定された前述の生成物（バイオマーカー）の用量依存的増加は、当業者によって理解されるように、ＬＣＡＴの作用機序と一致する。
【図９Ａ−９Ｂ】本明細書の実施例２のＭＡＤ試験で記載されるような、ＭＥＤＩ６０１２の投与後のコホート１〜３の対象におけるＬＤＬ−Ｃレベルを示す、グラフ及び濃度曲線下面積（ＡＵＣ）箱ひげ図を提示する。図９Ａは、（上記の図８Ａ〜８Ｄ及び実施例２に記載されるような）プラセボと比較した、コホート１〜３の対象から得られたサンプルのＬＤＬ−Ｃの経時的な血清濃度（標準的な臨床検査による直接測定）のベースラインからの変化を示す。図９Ｂは、実施例２のＭＡＤ試験における、コホート１及び２の対象のＬＤＬ−ＣのＡＵＣ０−９６ｈを示す。ＬＤＬ−Ｃの増加は、１２０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の第１の用量後、及び４０ｍｇと１２０ｍｇの双方の第３の用量後に観察された。しかし、ＬＤＬ−Ｃの増加は、対象で同時に測定されたａｐｏＢの静的な（又は減少した）レベルの観点から、有害と考えられなかった。（以下の図１０Ａ及び１０Ｂを参照されたい）。
【図１０Ａ−１０Ｂ】本明細書中の実施例２のＭＡＤ試験で記載されるような、ＭＥＤＩ６０１２の投与後のコホート１〜３の対象におけるａｐｏＢレベルを示す、グラフ及びＡＵＣ箱ひげ図を提示する。図１０Ａは、（上記の図８Ａ〜８Ｄ及び実施例２に記載されるような）プラセボと比較した、コホート１〜３の対象から得られたサンプルの経時的なａｐｏＢの血清濃度のベースラインからの変化を示す。図１０Ｂは、実施例２のＭＡＤ試験における、コホート１及び２の対象のａｐｏＢのＡＵＣ０−９６ｈを示す。ａｐｏＢの増加は観察されず、ＭＥＤＩ６０１２の用量と投与レジメンに関連したＬＤＬ粒子の有害な増加がなかったことが示唆された。
【図１１Ａ−１１Ｂ】本明細書の実施例２のＭＡＤ試験で記載されるような、プラセボと比較した、ＭＥＤＩ６０１２の用量（８０ｍｇ、１２０ｍｇ、又は３００ｍｇ）の投与後にコホート１〜３の対象から得られたサンプルで測定された、総コレステロール（ＴＣ）（図１１Ａ）及び遊離コレステロール（ＦＣ）（図１１Ｂ）の経時的な血清濃度のベースラインからの変化を示すグラフを提示する。
【図１２Ａ−１２Ｂ】本明細書の実施例２及び３に記載されるような、１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、及び３２０ｍｇの示された量のＭＥＤＩ６０１２の負荷用量を対象に１分間かけて静注を介して投与した後の対象のサンプル（血清）における、モデル化／シミュレーション解析によって予測され予期された、ベースライン補正済みＨＤＬレベル（図１２Ａ）及びＡｐｏＡ１レベル（図１２Ｂ）をｍｇ／ｄＬ単位で示すグラフを提示する。上記及び下記の図の説明で言及されるモデル化／シミュレーション解析及び評価は、主に、本明細書の実施例１及び２に記載されるような単回漸増用量（ＳＡＤ）及び複数回漸増用量（ＭＡＤ）臨床試験から得られたデータ及び結果に基づいて実施された。
【図１３Ａ−１３Ｂ】１日目に３００ｍｇ（負荷用量）；３日目に１５０ｍｇ；１０日目に１００ｍｇ（維持用量）のＭＥＤＩ６０１２の投与レジメンを対象に１分間かけて静注を介して投与したモデル化／シミュレーション解析によって予測され予期された、経時的なベースライン補正済みＨＤＬ濃度（図１３Ａ）及びａｐｏＡ１濃度（図１３Ｂ）をｍｇ／ｄＬ単位で示すグラフを提示する。
【図１４Ａ】プラセボと比較した、ＭＥＤＩ６０１２の静脈内投与（ＩＶ）又は皮下投与（ＳＣ）後のＬＣＡＴ酵素用量のモデル化／シミュレーション解析の選択基準としてのＨＤＬ２の増加を示すグラフを提示する。図に示されるのは、２４ｍｇ、８０ｍｇ、２４０ｍｇ、又は８００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２のＩＶ投与後、又は８０ｍｇ又は６００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２のＳＣ投与後の経時的なＨＤＬ２（ｍｇ／ｄＬ）の血清レベルである。ＨＤＬ２は、心保護因子であるスフィンゴシン−１−リン酸（Ｓ１Ｐ）をより容易に受け入れる、有益な心保護因子ＨＤＬのサブクラスである。観察されたように、２４０ｍｇを超える量のＭＥＤＩ６０１２の用量は、ＨＤＬ２のさらなる増加をもたらさなかった。
【図１４Ｂ−１４Ｃ】Ｓａｔｔｌｅｒ，Ｋ．ｅｔ  ａｌ．（２０１５，Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．，６６：１４７０−１４８５）によって報告されるように、ＨＤＬ２がＨＤＬ−３と比較して、より多くのスフィンゴシン−１−リン酸（Ｓ１Ｐ）を保有し、受け入れるＨＤＬ亜種であることを示す。
【図１５Ａ−１５Ｄ】６０ｍｇ／ｄＬ（ベースライン＝３５）を超える血清ＨＤＬ−Ｃ濃度を達成するＭＥＤＩ６０１２の負荷用量と維持用量の選択基準を用いた、モデリング／シミュレーション解析結果に基づいて、予測されたベースライン補正済みＨＤＬ−Ｃ濃度（ｍｇ／ｄＬ）を経時的に示すグラフを提示する。図１５Ａは、異なる負荷用量（ＬＤ）（１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、又は３２０ｍｇのＬＤ）のＭＥＤＩ６０１２と、１６０ｍｇの維持用量のＭＥＤＩ６０１２を使用した、経時的なＨＤＬ−Ｃ濃度（ｍｇ／ｄＬ）の予測され予期された結果を示す。図１５Ｂは、異なる負荷用量（ＬＤ）（１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、又は３２０ｍｇのＬＤ）のＭＥＤＩ６０１２と、１００ｍｇの維持用量のＭＥＤＩ６０１２を使用した、経時的なＨＤＬ−Ｃ濃度（ｍｇ／ｄＬ）の予測され予期された結果を示す。図１５Ｃは、異なる負荷用量（ＬＤ）（１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、又は３２０ｍｇのＬＤ）のＭＥＤＩ６０１２と、１２０ｍｇの維持用量のＭＥＤＩ６０１２を使用した、経時的なＨＤＬ−Ｃ濃度（ｍｇ／ｄＬ）の予測され予期された結果を示す。図１５Ｄは、異なる負荷用量（ＬＤ）（１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、又は３２０ｍｇのＬＤ）のＭＥＤＩ６０１２と、８０ｍｇの維持用量のＭＥＤＩ６０１２を使用した、経時的なＨＤＬ−Ｃ濃度（ｍｇ／ｄＬ）の予測され予期された結果を示す。
【図１６Ａ−１６Ｄ】定常状態ａｐｏＡ１レベルを維持するＭＥＤＩ６０１２の負荷用量と維持用量の選択基準を用いた、モデリング／シミュレーション解析結果に基づいて、予測されたベースライン補正済みａｐｏＡ１濃度（ｍｇ／ｄＬ）を経時的に示すグラフを提示する。図１６Ａは、異なる負荷用量（ＬＤ）（１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、又は３２０ｍｇのＬＤ）のＭＥＤＩ６０１２と、１６０ｍｇの維持用量のＭＥＤＩ６０１２を使用した、経時的なａｐｏＡ１濃度（ｍｇ／ｄＬ）の予測され予期された結果を示す。図１６Ｂは、異なる負荷用量（ＬＤ）（１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、又は３２０ｍｇのＬＤ）のＭＥＤＩ６０１２と、１００ｍｇの維持用量のＭＥＤＩ６０１２を使用した、経時的なａｐｏＡ１濃度（ｍｇ／ｄＬ）の予測され予期された結果を示す。図１６Ｃは、異なる負荷用量（ＬＤ）（１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、又は３２０ｍｇのＬＤ）のＭＥＤＩ６０１２と、１２０ｍｇの維持用量のＭＥＤＩ６０１２を使用した、経時的なａｐｏＡ１濃度（ｍｇ／ｄＬ）の予測され予期された結果を示す。図１６Ｄは、異なる負荷用量（ＬＤ）（１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、又は３２０ｍｇのＬＤ）のＭＥＤＩ６０１２と、８０ｍｇの維持用量のＭＥＤＩ６０１２を使用した、経時的なａｐｏＡ１濃度（ｍｇ／ｄＬ）の予測され予期された結果を示す。
【図１７】小ＬＤＬ−Ｐの量の減少を達成する異なる用量（静脈内投与又はＳＣ投与）のＭＥＤＩ６０１２について観察された、経時的な総小ＬＤＬ粒子（ＬＤＬ−Ｐ）（ｎｍｏｌ／Ｌ）を示すグラフを提示する。ＭＥＤＩ６０１２用量群は、プラセボと比較した、２４ｍｇ、８０ｍｇ、２４０ｍｇ、及び８００ｍｇのＩＶ投与と、８０ｍｇの量のＳＣ投与とを含んだ。小ＬＤＬ−Ｐの減少は、８０ｍｇ（ＩＶ）の量のＭＥＤＩ６０１２用量で約４０〜４１％、２４０ｍｇ（ＩＶ）の量のＭＥＤＩ６０１２用量で８０％と判定された。
【図１８Ａ−１８Ｄ】最小又は皆無のＣＥの蓄積をもたらすＭＥＤＩ６０１２の負荷用量と維持用量の選択基準を用いた、モデリング／シミュレーション解析結果に基づいて、予測されたベースライン補正済みコレステリルエステル（ＣＥ）（ｍｇ／ｄＬ）を経時的に示すグラフを提示する。図１８Ａは、異なる負荷用量（ＬＤ）（１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、又は３２０ｍｇのＬＤ）のＭＥＤＩ６０１２と、１６０ｍｇの維持用量のＭＥＤＩ６０１２を使用した、経時的なＣＥ濃度（ｍｇ／ｄＬ）の予測され予期された結果を示す。図１８Ｂは、異なる負荷用量（ＬＤ）（１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、又は３２０ｍｇのＬＤ）のＭＥＤＩ６０１２と、１００ｍｇの維持用量のＭＥＤＩ６０１２を使用した、経時的なＣＥ濃度（ｍｇ／ｄＬ）の予測され予期された結果を示す。図１８Ｃは、異なる負荷用量（ＬＤ）（１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、又は３２０ｍｇのＬＤ）のＭＥＤＩ６０１２と、１２０ｍｇの維持用量のＭＥＤＩ６０１２を使用した、経時的なＣＥ濃度（ｍｇ／ｄＬ）の予測され予期された結果を示す。図１８Ｄは、異なる負荷用量（ＬＤ）（１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、又は３２０ｍｇのＬＤ）のＭＥＤＩ６０１２と、８０ｍｇの維持用量のＭＥＤＩ６０１２を使用した、経時的なＣＥ濃度（ｍｇ／ｄＬ）の予測され予期された結果を示す。
【図１９Ａ−１９Ｄ】適したＣＥの蓄積を達成するＭＥＤＩ６０１２の負荷用量と維持用量の選択基準を用いた、モデリング／シミュレーション解析結果に基づいて、予測されたベースライン補正済みコレステリルエステル（ＣＥ）（ｍｇ／ｄＬ）を経時的に示すグラフを提示する。図１９Ａは、異なる負荷用量（ＬＤ）（１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、又は３２０ｍｇのＬＤ）のＭＥＤＩ６０１２と、１６０ｍｇの維持用量のＭＥＤＩ６０１２を使用した、経時的なＨＤＬ−ＣＥ濃度（ｍｇ／ｄＬ）の予測され予期された結果を示す。図１９Ｂは、異なる負荷用量（ＬＤ）（１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、又は３２０ｍｇのＬＤ）のＭＥＤＩ６０１２と、１００ｍｇの維持用量のＭＥＤＩ６０１２を使用した、経時的なＨＤＬ−ＣＥ濃度（ｍｇ／ｄＬ）の予測され予期された結果を示す。図１９Ｃは、異なる負荷用量（ＬＤ）（１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、又は３２０ｍｇのＬＤ）のＭＥＤＩ６０１２と、１２０ｍｇの維持用量のＭＥＤＩ６０１２を使用した、経時的なＨＤＬ−ＣＥ濃度（ｍｇ／ｄＬ）の予測され予期された結果を示す。図１９Ｄは、異なる負荷用量（ＬＤ）（１６０ｍｇ、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、２８０ｍｇ、又は３２０ｍｇのＬＤ）のＭＥＤＩ６０１２と、８０ｍｇの維持用量のＭＥＤＩ６０１２を使用した、経時的なＨＤＬ−ＣＥ濃度（ｍｇ／ｄＬ）の予測され予期された結果を示す。図１８Ａ〜１８Ｄ及び図１９Ａ〜１９Ｄはどちらも、ＣＥ蓄積が起こる一方で、それはＬＤＬで起こり、ＨＤＬ−ＣＥでは起こらないことを示す。記載される方法に従って、対象に投与されるＬＣＡＴ（例えば、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２）の維持用量は、最小又は皆無のＣＥ蓄積をもたらす用量である。
【図２０Ａ−Ｄ】ＳＡＤ試験の対象への投与後に、ＬＣＡＴ酵素（ＭＥＤＩ６０１２）の活性に起因する、わずか又は皆無のＶＶＶＬ−ＨＤＬ粒子と、わずかなＶＬ−ＨＤＬ粒子（ｍｇ／ｄＬ）を達成した、ＭＥＤＩ６０１２の観察された用量を示すグラフを提示する。解析結果から観察されるように、２４０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量は、ＶＶＬ−ＨＤＬの２ｍｇ／ｄＬの増加と、ＶＬ−ＨＤＬの１７ｍｇ／ｄＬの増加をもたらした。８０ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２は、ＶＶＬ−ＨＤＬの皆無の増加と、ＶＬ−ＨＤＬの２ｍｇ／ｄＬの増加をもたらした。
【図２１Ａ−２１Ｃ】は、Ｂｏｓｃｈ，Ｒ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｏｓｔｅｒ  ｅｎｔｉｔｌｅｄ“Ａ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ−ｂａｓｅｄ  ｍｏｄｅｌ  ｉｓ  ａｂｌｅ  ｔｏ  ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ  ｅｘｐｌａｉｎ  ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｒｈＬＣＡＴ  ａｎｄ  ＨＤＬ  ｍｉｍｅｔｉｃｓ  ｏｎ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  ｏｆ  ｒｅｖｅｒｓｅ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ，”ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ  ａｔ  ｔｈｅ  ２０１５  Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  Ａｐｐｒｏａｃｈ  Ｇｒｏｕｐ  ｉｎ  Ｅｕｒｏｐｅ（ＰＡＧＥ）Ｍｅｅｔｉｎｇ，Ｈｅｒｓｏｎｉｓｓｏｓ，Ｃｒｅｔｅ，Ｇｒｅｅｃｅ（後述の実施例３）によって報告されるように、コレステロール輸逆送（ＲＣＴ）に関連したｒｈＬＣＡＴ  ＡＣＰ５０１投与のために実施されたモデル化に基づいて、ＭＡＤ試験のコホート４に対するＭＥＤＩ６０１２のＩＶ投与のために実施されたモデル化／予測に用いられた、モデル化パラメータの概略図を提示する。図２１Ａは、モデル特性の図式的概観を示す。図２１Ｂは、ＲＣＴのための統合モデルの概略図を示す。図２１Ａ及び２１Ｂでは、１）血流中の小プレβ−ＨＤＬ粒子が、末梢組織からコレステロールを獲得することを示す。２）ＬＣＡＴが、コレステロールのＣＥへの変換を触媒することを示す。３）ＣＥがＨＤＬ粒子の中心に移動し、それを大α−ＨＤＬにすることを示す。４）αＨＤＬ中のＣＥが、肝臓上のＣＥＴＰ及びＬＤＬ受容体によって、４ａ）直接又は４ｂ）ＬＤＬを介して、肝臓に戻されることを示す。概略図中、太字パラメータ：文献値に固定；黒色パラメータ：定常状態条件（ｋ８４は１０ｈ−１に固定）に基づいて導出；灰色パラメータ：ＣＳＬ１１２データを含めた後にＮｏｎｍｅｍで再推定。図２１Ｃは、ＨＤＬ−Ｃ及びａｐｏＡ１の、図２１Ａ及び２１Ｂに示されるような１つのモデルへの統合の説明を提示する。
【図２２Ａ−２２Ｂ】本明細書の実施例３に記載されるＭＡＤ試験で判定されたような、プラセボと比較した、３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量（１日目）と、それに続く１５０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量（３日目）と、それに続く１００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量（１０日目）を静注によって投与された対象における、経時的なＨＤＬ−Ｃの血清濃度を示すグラフである。図２２Ａは、プラセボ対照と比較した、ＭＥＤＩ６０１２の静注投与レジメンを投与された対象における、経時的なＨＤＬ−Ｃの血清濃度を示す。図２２Ｂは、プラセボ対照と比較した、ＭＥＤＩ６０１２の静注投与レジメンを投与された対象における、経時的なＨＤＬ−Ｃの血清濃度のベースラインからの変化を示す。
【図２３Ａ−２３Ｂ】本明細書の実施例３に記載されるＭＡＤ試験で判定されたような、プラセボと比較した、３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量（１日目）と、それに続く１５０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量（３日目）と、それに続く１００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量（１０日目）を静注によって投与された対象における、経時的なＬＤＬ−Ｃの血清濃度（レベル）（標準的な臨床検査による直接測定）を示すグラフである。図２３Ａは、ＭＥＤＩ６０１２の静注投与レジメン投与された対象における、経時的な血清濃度ＬＤＬ−Ｃ（標準的な臨床検査による直接測定）を示す。図２３Ｂは、ＭＥＤＩ６０１２の静注投与レジメンを投与された対象における、経時的なＬＤＬ−Ｃの血清濃度（標準的な臨床検査による直接測定）のベースラインからの変化を示す。
【図２４Ａ−２４Ｂ】本明細書の実施例３に記載されるＭＡＤ試験で判定されたような、プラセボと比較した、３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量（１日目）と、それに続く１５０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量（３日目）と、それに続く１００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量（１０日目）を静注によって投与された対象における、血清中のアポリポタンパクＢ（ａｐｏＢ）の濃度を示すグラフである。図２４Ａは、は、ＭＥＤＩ６０１２の静注投与レジメンンを投与された対象における、経時的なａｐｏＢの血清濃度を示す。図２４Ｂは、ＭＥＤＩ６０１２の静注投与レジメンを投与された対象における、経時的なａｐｏＢの血清濃度のベースラインからの変化を示す。
【図２５Ａ−２５Ｂ】本明細書の実施例３に記載されるＭＡＤ試験で判定されたような、プラセボと比較した、３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量（１日目）と、それに続く１５０ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２（３日目）、それに続く１００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２（１０日目）を静注によって投与された対象における、経時的なａｐｏＡ１の血清濃度を示すグラフである。図２５Ａは、は、ＭＥＤＩ６０１２の静注投与レジメンンを投与された対象における、経時的なａｐｏＡ１の血清濃度を示す。図２５Ｂは、ＭＥＤＩ６０１２の静注投与レジメンを投与された対象における、経時的なａｐｏＡ１の血清濃度のベースラインからの変化を示す。
【図２６Ａ】ＭＡＤ試験のコホート３及びコホート４（０日目〜７０日目）におけるＭＥＤＩ６０１２投与からの観察データ（個々のデータ点：丸及び四角）と比較した、モデル化／シミュレーション解析（実線及び破線）から得られたベースライン補正済みＨＤＬ−Ｃレベルを示す。上記及び下記の図の説明で言及されるモデル化／シミュレーション解析は、主に、本明細書の実施例１及び２に記載されるようなＳＡＤ及びＭＡＤ臨床試験から得られたデータ及び結果に基づいて実施された。
【図２６Ｂ】ＭＡＤ試験単独（０日目〜７０日目まで）のコホート４における、ＭＥＤＩ６０１２投与からの予測モデル（破線）及び観察データ（丸）を示す。
【図２６Ｃ】ＭＡＤ試験のコホート３及びコホート４（０日目〜５日目）におけるＭＥＤＩ６０１２投与からの観察データ（個々のデータ点：丸及び四角）と比較した、モデル化／シミュレーション解析（実線及び破線）から得られたベースライン補正済みＨＤＬ−Ｃレベルを示す。
【図２７Ａ−Ｄ】本明細書の実施例２及び３で定義されるような、ＭＡＤ試験の全コホート（コホート１〜４）からの観察結果を示す。ＭＡＤ試験のコホート１の対象は、１、８、及び１５日目に、４０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２をＩＶ輸液を介して投与された。ＭＡＤ試験のコホート２の対象は、１、８、及び１５日目に、１２０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２をＩＶ輸液を介して投与された。ＭＡＤ試験のコホート３の対象は、１、８、及び１５日目に、３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２をＩＶ輸液を介して投与された。ＭＡＤ試験のコホート４の対象は、１日目に３００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２、それに続いて３日目に１５０ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２、それに続いて１０日目に１００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２を静注を介して投与された。図２７Ａは、ＭＡＤ試験のコホート１〜４からの観察された経時的なＨＤＬ−Ｃの血清濃度のベースラインからの変化を示す。図２７Ｂは、ＭＡＤ試験のコホート１〜４からの観察された経時的なＡｐｏＡ１の血清濃度のベースラインからの変化を示す。図２７Ｃは、ＭＡＤ試験のコホート１〜４からの観察された経時的なＬＤＬ−Ｃ（直接）の血清濃度のベースラインからの変化を示す。図２７Ｄは、ＭＡＤ試験のコホート１〜４からの観察された経時的なＡｐｏＢの血清濃度のベースラインからの変化を示す。
【図２８Ａ−２８Ｄ】本明細書の実施例２及び３のＭＡＤ試験で記載されるような、ＭＥＤＩ６０１２の投与後におけるコホート１〜４からの対象のＨＤＬ−Ｃ、ＡｐｏＡ１、ＬＤＬ−Ｃ、及びＡｐｏＢのレベルを示す、第１の用量及び第３の用量の０〜９６時間後における、濃度曲線下面積（ＡＵＣ）箱ひげ図を提示する。図２８Ａは、ＭＡＤ試験のコホート１〜４の対象のＨＤＬ−ＣのＡＵＣ０−９６ｈを示す。図２８Ｂは、ＭＡＤ試験のコホート１〜４の対象のＡｐｏＡ１のＡＵＣ０−９６ｈを示す。図２８Ｃは、ＭＡＤ試験のコホート１〜４の対象のＬＤＬ−ＣのＡＵＣ０−９６ｈを示す。図２８Ｄは、ＭＡＤ試験のコホート１〜４の対象のＡｐｏＢのＡＵＣ０−９６ｈを示す。
【発明を実施するための形態】
【００８１】
本開示は、本明細書に記載されるような新たに開発された、臨床的に有益な用量と投与レジメンで、精製単離されたヒトレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）酵素、特に、本明細書でＭＥＤＩ６０１２と称される（以前はＡＣＰ５０１として知られていた）組換えヒトレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ｒｈＬＣＡＴ）酵素をそれを必要とする対象（患者）に投与することによって、心疾患、冠動脈心疾患及び／又はその他の心臓関連疾患及び病状を治療しそれから保護する方法を特徴とする。
【００８２】
本方法は、いくつかの心臓関連疾患及び病状を治療するために、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の対象（患者）への投与を介して、治療的及び／又は予防的有効用量のＬＣＡＴ酵素を提供する。方法は、遊離コレステロールをコレステリルエステル（ＣＥ）にエステル化するのに積極的な役割を果たすＬＣＡＴ酵素を対象に直接提供して、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）粒子の成熟を促進し、例えば、心疾患及び動脈硬化症のリスク低下に関連したａｐｏＡ１及び／又は機能的なＨＤＬ−Ｃなどの脂質代謝産物の治療的血漿及び血清濃度を高めて維持する。したがって、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２などのＬＣＡＴ酵素の用量と投与レジメンを伴う現在記載されている方法は、例えば、即時及び長期的心機能と全身の健康状態を脅かす、慢性又は急性心臓イベントを経験している患者などのそれを必要とする対象（患者）に、脳卒中（虚血性脳卒中）、動脈硬化症、心筋梗塞、又は心筋細胞アポトーシスなどの心臓及び心臓関連の疾患及び病理学に対する、効果的な治療及び保護を提供する。
【００８３】
特に、本方法は、例えば、原因を限定することなく、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管病（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、心不全（ＨＦ）、うっ血性ＨＦ、入院性ＨＦ、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全、ＥＦ温存型心不全、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、非ＳＴＥＭＩ、又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、末梢動脈疾患、心筋梗塞、虚血性心筋症、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状などの家族性又は後天性の心疾患又は心疾患（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）に関連し又はそれに付随する、疾病、病理、又は病状などの心疾患、冠動脈心疾患及び／又はその他の心臓関連疾患又は病状を有する対象を治療するための、記載される用量のｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の使用、及びｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２投与スケジュールを伴う治療レジメンに関する、効果的な治療法の利益を提供する。
【００８４】
本方法の実施は、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２で治療された対象におけるＬＣＡＴ酵素の増加、ひいては酵素活性の増加をもたらし、これは次に、対象においてＣＥレベルを増加させるようなコレステリルエステル（ＣＥ）を生成する。したがって、ＬＣＡＴ活性レベルの増加及び／又はコレステリルエステルの産生は、治療的投与及び治療の有効性のマーカーの役割を果たしてもよい。本明細書に記載される方法は、心疾患又は冠動脈疾患を有する患者などのそれを必要とする対象において、ＬＣＡＴ活性を治療レベルまで増加させるために、ＬＣＡＴを活性化するか、又はＬＣＡＴ活性化剤としての役割を果たすｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２を投与することをさらに包含する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される用量と投与レジメンに従ったｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与は、小分子又は生物製剤（例えば、ペプチド、ポリペプチド又はモノクローナル抗体）などの別のタイプのＬＣＡＴ活性化剤を含み得る。
【００８５】
本方法の実施はまた、例えば、ＣＡＤ又はＭＩなどの心疾患又は心血管系疾患のリスクの減少に関連したａｐｏＡ１及び／又はＨＤＬ−Ｃなどのバイオマーカーの血清及び血漿中濃度（レベル）の増加をもたらし、体内における心疾患又は心血管系疾患によって引き起こされる有害な影響の改善をもたらす。方法はまた、心疾患又は治療の有害な転帰のリスクの増加に関連した、ＬＤＬ−Ｃ粒子及びａｐｏＢなどのバイオマーカーの濃度（レベル）の変化又は改変を（又は減少さえも）もたらさない。「投与又は用量レジメン」、「治療レジメン」、「投与スケジュール」、及び「治療スケジュール」という用語は、本明細書で同義的に使用されるものと理解される。「対象」及び「患者」という用語もまた、本明細書で同義的に使用される。
【００８６】
レシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）酵素
肝臓によって産生され分泌される血漿酵素糖タンパク質であるレシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）は、血漿リポタンパク質中に存在する遊離（非エステル化）コレステロール及びホスファチジルコリン（レシチン）からのコレステリルエステル（ＣＥ）生成を触媒する。ヒトでは、血漿中のＣＥの約９０％がＬＣＡＴ酵素によって形成され、この反応は主にＨＤＬ（α−ＬＣＡＴ活性）上で起こり、より少ない程度でアポリポタンパク質Ｂ（ａｐｏＢ）含有粒子（β−ＬＣＡＴ活性）上で起こる。ＬＣＡＴによるコレステロールのエステル化は、小型円盤形態のＨＤＬ（プレβ−ＨＤＬ及びα４−ＨＤＬ粒子と称される）から、半減期がより長いより大型の球状形態のＨＤＬ（α１−３−ＨＤＬ粒子と称される）への成熟を促進することにより、ＨＤＬ（ＨＤＬ−ＣＥ）レベルを維持するのに役立つ。ヒトでは、ほとんどのＨＤＬ−コレステリルエステル（ＨＤＬ−ＣＥ）は、コレステリルエステル転送タンパク質（ＣＥＴＰ）によって、最終的に、トリグリセリド（ＴＧ）と引き換えに、超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）、中密度リポタンパク質、及び低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）に移行する。
【００８７】
血清中のＬＣＡＴ又はＬＣＡＴ活性の量又は濃度は、例えば、蛍光定量アッセイなどの当業者に知られているいくつかの方法を用いて判定され得る。ＬＣＡＴの質量は、例えば、競合二重抗体放射免疫アッセイによって判定され得る。血清又は血液サンプル中の絶対的なＬＣＡＴ活性を測定し、コレステロールのエステル化率を測定するための、日常的方法もまた知られている。Ｊ．Ｊ．Ａｌｂｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．，１２９：７６３−７８３；及びＭ．Ｐ．Ｔ．Ｇｉｌｌｅｔｔ  ａｎｄ  Ｊ．Ｓ．Ｏｗｅｎｓ，Ｃｈａｐｔｅｒ  ７ｂ，Ｅｄｓ．：Ｃ．Ａ．Ｃｏｎｖｅｒｓｅ  ａｎｄ  Ｅ．Ｒ．Ｓｋｉｎｎｅｒ，ｉｎ  Ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｎａｌｙｓｉｓ−Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ｐｐ．１８７−２０１を参照されたい。非限定的な例として、ＬＣＡＴ活性は、酵素と、アポリポタンパク質Ａ１（ａｐｏＡ１）を含む放射性標識レシチンコレステロールリポソーム基質とのインキュベーション後に、放射性標識コレステロールのコレステリルエステルへの変換を測定することによって判定され得る。内因性コレステロールエステル化率は、微量の放射性コレステロールで標識された新鮮な血漿を、４℃で［１４Ｃ］コレステロール・アルブミン混合物と平衡化してインキュベーションした後に、標識されたコレステロールからコレステリルエステルへの変換率を測定することによって判定され得る。（米国特許第６，６３５，６１４号明細書を参照されたい）。内因性コレステロールエステル化率は、血清中に存在するＬＣＡＴ活性の量だけでなく、血漿中に存在する基質と補因子の性質と量も反映するので、治療用ＬＣＡＴ活性のより良い尺度である。このようにして、コレステロールのエステル化率は、必ずしも生体内のＬＣＡＴの質量又は絶対的なＬＣＡＴ活性のどちらかに比例するものではない。別の方法では、ＬＣＡＴによる遊離コレステロールのエステル化コレステロールへの変換は、ＬＣＡＴ基質として二重標識ホスファチジルコリン（レシチン）を使用して測定され得る。未切断では、二重標識基質中のフルオロフォアは消光状態にあり、ホスファチジルコリンのｓｎ−２位でのＬＣＡＴによる加水分解に際して、蛍光性モノマー鎖が生成し、蛍光マイクロプレートリーダーで定量化され得る定量する。（Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌａｂｓ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）。
【００８８】
ＭＥＤＩ６０１２−組換えヒトＬＣＡＴ
ＭＥＤＩ６０１２（旧称：ＡＣＰ５０１）は、細胞培養中のチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞から製造され、単離精製された、４１６アミノ酸からなるおよそ６０キロダルトンのグリコシル化一本鎖酵素タンパク質である、組換えヒト（ｒｈ）レシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）（ｒｈＬＣＡＴ）である。ＭＥＤＩ６０１２及びＡＣＰ５０１は同一のアミノ酸配列を有しているため、同じ分子実体と考えられる。ＣＨＯ細胞培養から得られたＭＥＤＩ６０１２生成物は、タンパク質１ｍｇ当たりの酵素活性が高く、生成物関連及びプロセス関連純度が高く、ヒトへの使用に有利である。
【００８９】
本開示は、急性又は慢性心（心臓）疾患、心血管疾患、冠動脈疾患、動脈硬化性心血管疾患（ＣＶＤ）、急性冠症候群（ＡＣＳ）及び／又はそれらの症状の重篤な悪影響を治療し、低減し、又は改善させるために、投与レジメンにおいて対象に投与される治療用量のｒｈＬＣＡＴ、ＭＥＤＩ６０１２が提供される方法を包含する。一実施形態では、ＡＣＳを有する患者における標準治療の補助として、虚血性イベントのリスクを低減するために、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の治療的投与を伴う方法が提供される。別の実施形態では、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の有効投与量の投与は、対象における心筋線維症及び肥大化を予防することによって、心臓病治療効果、心臓保護効果、及び抗アテローム発生（アテローム保護）効果及び心筋保護効果を与える。その他の実施形態では、有効投与量のｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与は、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管病（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、心不全（ＨＦ）、うっ血性ＨＦ、入院性ＨＦ、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全、ＥＦ温存型心不全、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、非ＳＴＥＭＩ、又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、末梢動脈疾患、心筋梗塞、虚血性心筋症、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状などの家族性又は後天性の心疾患又は心疾患（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）に関連し又はそれに伴う、疾病、病理、又は病状を治療し及び／又はそれらに対する保護効果を提供する。
【００９０】
特定の理論に拘束されることは望まないが、心疾患及び／又は急性冠動脈疾患を有する患者へのＭＥＤＩ６０１２の投与は、冠動脈の動脈硬化性プラークからのコレステロールをはじめとする、組織からのコレステロールの動員を上方制御し、組織の安定化及び結果的な主要有害心臓血管イベントの再発リスクの減少がもたらされる。ＭＥＤＩ６０１２は、強化された、ＨＤＬ成熟、ＨＤＬ機能、及び除去のための組織から肝臓へのコレステロール逆輸送（ＲＣＴ）を有益に提供する。さらに、本明細書に記載され例示されるように、患者へのＭＥＤＩ６０１２の投与「ＭＥＤＩ６０１２投与」は、忍容性が良好であり、それが送達される患者に臨床病理又は有害な身体状態の変化を引き起こさない。
【００９１】
動脈硬化性心血管疾患（ＣＶＤ）の基礎疾患である動脈硬化症は、罹患した患者の重大な併存疾患及び死亡率に関連した進行性の病状である。動脈内の過剰なコレステロールは、炎症、内皮依存性血管緊張低下、プラーク不安定性促進などの数多くの有害作用を誘発する。プラークが不安定になると、不安定型狭心症及び心臓発作をはじめとする生命を脅かす様々な臨床症状である、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、すなわち、非ＳＴ波及びＳＴ波上昇心筋梗塞（それぞれ、非ＳＴＥＭＩ（ＮＳＴＥＭＩ）及びＳＴＥＭＩ）の原因となり得る。
【００９２】
プラーク破裂は、線維性キャップの溶解によって引き起こされ；溶解自体は、活性化された炎症細胞からのメタロプロテアーゼ（コラゲナーゼ）の放出に起因し、血小板の活性化と凝集、凝固経路の活性化、及び血管収縮がそれに続く。ＡＣＳの典型的な又は標準的な治療法では、例えば、アスピリンをはじめとする抗血小板剤、及び経口投与され得るクロピドグレルやプラスグレルやチカグレロールなどのアデノシン二リン酸受容体拮抗剤、並びにＩＶ投与されるＩＩｂ／ＩＩＩａ受容体拮抗剤であるアブシキシマブ、エプチフィバタイド、及びチロフィバンなどの血小板凝集及び／又は血栓形成を迅速に阻害する薬物に焦点が置かれている。
【００９３】
一般に使用される抗凝固剤としては、低分子量ヘパリン、トロンビン阻害剤、及びＸａ因子阻害剤が挙げられる。これまでのところ、薬物療法並びに経皮的冠動脈介入（ＰＣＩ）；バルーン血管形成術及びステント留置術では、原因となる病変のみに焦点が置かれており、破裂に対するプラーク脆弱性の根本的な原因（すなわち、コレステロール沈着）に適切に対処したり、その他の部位での新たなプラーク破裂のリスクを低減したりはしない。スタチンによる長期脂質低下療法は、血漿低密度リポ蛋白コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）を低下させることで、一次的及び二次的双方の心血管（ＣＶ）イベントリスクを低下させるものの、スタチンは動脈を詰まらせたプラークを急性的に安定化させない。
【００９４】
本明細書に記載される方法は、患者の心臓及び心血管疾患の治療、並びに心血管疾患の病状とその症状の改善のためのいくつかの肯定的な転帰を有する有利且つ有益な治療、すなわち、頸動脈及び末梢血管系の双方に有効であり得る、プラークコレステロールの迅速な除去、ＡＣＳ患者における脆弱なプラークの安定化、心筋細胞のアポトーシスの予防、及び後続の虚血性イベントの可能性の低下を患者にもたらす、治療的（及び心臓保護的及び心筋保護的）用量及び用量レジメンで、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２を投与することを伴う。
【００９５】
本明細書に記載されるような対象へのｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の用量及び投与レジメンの投与を伴う方法は、急性心筋梗塞（ＭＩ）において心臓保護的である、ＨＤＬ（ＨＤＬ−Ｃ）及び／又はａｐｏＡ１の増加を提供する。ＬＣＡＴの投与は、ＨＤＬ及び／又はａｐｏＡ１の双方のレベルを急速に増加させることから、治療法は急性期治療に特に有利である。本明細書に記載される方法の利点と利益は、より高レベルのＨＤＬ−ＣがＭＩ後の患者において心臓保護的であり；ＨＤＬ又はａｐｏＡ１模倣薬の輸液が、急性ＭＩの動物モデルにおいて、心筋梗塞サイズを減少させ左心室の収縮機能を改善することを確立した、疫学的及び前臨床試験の報告とよく一致している。例として、低いＨＤＬ−Ｃを有する患者では、ベースライン冠動脈心疾患（ＣＨＤ）を除外した後でさえも、梗塞後駆出率（ＥＦ）がより低く（Ｗａｎｇ  ＴＤ，ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ａｍ  Ｊ  Ｃａｒｄｉｏｌ，８１：５３１−５３７；Ｋｅｍｐｅｎ  ＨＪ，ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ｊ  Ｌａｂ  Ｃｌｉｎ  Ｍｅｄ，１０９：１９−２６）；急性ＭＩの２つの異なるマウスモデルにおけるａｐｏＡ１模倣ＣＳＬ−１１１の輸液は、生存可能な心筋の５４％〜６１％の増加、梗塞サイズの２１％〜２６％の減少、梗塞領域での白血球と好中球の動員の減少を実証し（Ｈｅｙｗｏｏｄ，Ｓ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ，２０１７，Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．，９（４１１），ＤＯＩ：１０．１１２６／ｓｃｉｔｒａｎｓｌｍｅｄ．ａａｍ６０８４）；虚血再灌流のウサギモデルにおけるａｐｏＡ１模倣薬ＥＴＣ−２１６の輸液は、梗塞サイズの顕著な減少をもたらし（Ｍａｒｃｈｅｓｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ．，３１１（３）：１０２３−３１）；マウスモデルにおけるＭＩの２週間前のａｐｏＡ１のアデノウイルス移入は、対照よりも１．５倍高いａｐｏＡ１レベルを達成し、生存率の向上（約２倍）、梗塞拡大の減衰、左心室（ＬＶ）拡張の抑制、及び血行動態の改善を示し（Ｇｏｒｄｔｓ  ｅｔ  ａｌ，２０１３，Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ，２０，１０５３−１０６１）；虚血再灌流のマウスモデルにおけるＨＤＬと比較した、ＨＤＬとその構成要素であるスフィンゴシン−１−リン酸（Ｓ１Ｐ）との輸液は、ＨＤＬ単独での梗塞サイズの２０％の減少、及びＨＤＬとＳ１Ｐでの梗塞サイズの４０％の減少を示し（Ｔｈｅｉｌｍｅｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ，２００６，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，１１４：１４０３−１４０９）；ＡｐｏＡ１の輸液は、ＲＩＳＫ／ＳＡＦＥ生存促進キナーゼ経路（Ａｋｔ、ＥＲＫ１／２、ＳＴＡＴ−３）を介して、ウィスター系ラットにおける梗塞サイズを減少させた（Ｋａｌａｋｅｃｈ  ｅｔ  ａｌ，２０１４，ＰＬｏＳ  ＯＮＥ，９（９）：ｅ１０７９５０）。Ｇｏｒｄｔ  ｅｔ  ａｌ及びＭａｒｃｈｅｓｉ  ｅｔ  ａｌによって報告されたａｐｏＡ１の増加は、本明細書の用量でのＭＥＤＩ６０１２（ｒｈＬＣＡＴ）の投与後に見いだされたａｐｏＡ１の増加に類似する。したがって、本明細書に記載されるような方法は、ＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１のレベルを増加させることによって、急性期治療にとって、及び心筋梗塞サイズを減少させる可能性にとって、特に有益であるＭＥＤＩ６０１２の用量を提供する。梗塞サイズが小さいほど、より良い臨床転帰、すなわち、より少ない心不全とより良い生存率が予測される（Ｓｔｏｎｅ，Ｇ．Ｗ．ｅｔ  ａｌ．，２０１６，Ｊ  Ａｍ  Ｃｏｌｌ  Ｃａｒｄｉｏｌ，６７（１４）：１６７４−８３）。
【００９６】
ｒｈＬＣＡＴ（ＭＥＤＩ６０１２）の投与を伴う治療方法
本明細書に記載される方法は、例えば、限定することなく、心疾患、冠動脈心疾患、又は冠動脈疾患（動脈硬化症）を有する対象などの治療を必要とする対象へのｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２（又はその薬学的に許容可能な組成物又は製剤）の用量と投与スケジュール（本明細書では、投与レジメン又は治療レジメンとも称される）との投与に関連した、医学的及び臨床的な利益をもたらす。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される治療方法は、ヒト対象における臨床試験の結果に基づいて開発された。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される治療方法は、前臨床試験結果、並びに臨床試験データ及びヒト対象における結果に基づく、生体外モデル化及びシミュレーション解析から開発された。全ての場合において、方法は、限定的及び／又は管理可能な望ましくない副作用又はオフターゲット効果で、治療された個体において好ましく有利な治療的及び保護的結果を達成するために、対象に投与されるｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の用量、及びｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２を伴う投与レジメンの発見、並びに驚くほど有益な有効性をもたらした。
【００９７】
本明細書に記載されるような対象へのｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の用量及び投与レジメンの投与後における有益な治療効果は、治療（投与）レジメンの最中及びその後に、治療対象から得られた、例えば、血液、血漿又は血清などの生物学的サンプル中のコレステロール及び脂質代謝のいくつかの異なる成分の濃度（レベル）を測定し評価することによって、評価された。
【００９８】
ｒｈＬＣＡＴ（ＭＥＤＩ６０１２）を伴う単回用量治療方法
一般に単回漸増用量（ＳＡＤ）試験は、通常は臨床試験ユニット又はＣＲＵにおける臨床状況で、化合物又は薬剤の単回用量を与えられた小人数の対象が関与する試験である。試験中、対象は安全性について綿密にモニターされ、所定時間にわたり薬物動態（ＰＫ）評価が実施される。化合物の忍容性が良好であり、ＰＫデータが概ね期待通りであると見なされた場合、承認されたプロトコルに従って、同一グループ内で又は健常対象の別のグループ内で、用量の漸増が行われる。用量の漸増は、通常、規定の最大曝露に達しない限り、又は耐容できない副作用が明らかにならない限り、プロトコルに従って最大用量に達するまで継続される。さらに、より高い用量レベルにおける曝露の予測を困難にするような、前出の用量と曝露の間の比例関係の証拠がある場合は、用量の漸増は中断されてもよい（又は計画よりも慎重に進められてもよい）。ＳＡＤ試験は、通常、最大曝露のための並行設計の連続的な群を含み、又は用量直線性に関するより多くの情報を提供するためのクロスオーバーデザインであってもよい。バイアスの影響を最小化するために、対象は通常、コンピュータで生成された統計的無作為化コードを使用して、無作為に治療に割り当てられる。このような試験はまた、通常、プラセボ対照されて、観察された効果が試験薬物によるのか、又は環境条件によるのかが判定され、しばしば単一（対象）の盲検法で実施されて、用量漸増に関する情報に基づく決定を可能にし、安全性及びＰＫデータが治験責任医師のレビューに利用できる。
【００９９】
一態様では、本開示は、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管疾患（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、心筋梗塞などの心臓病又は心疾患に関連し又はそれに伴う疾患又は病状及び／又はそれらの症状を有する対象を治療するための活性薬物、すなわち、例えば、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２などの単離精製されたＬＣＡＴ酵素の１つ又は複数の用量の投与を伴う、本明細書に記載されるような治療方法を提供する。特定の実施形態では、例えば、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２などの単離精製されたＬＣＡＴ酵素の単回用量が、方法で投与される。別の特定の実施形態では、対象は安定型冠動脈疾患（ＣＡＤ）を有する。このような投与方法は、部分的には、対象にＭＥＤＩ６０１２の様々な用量が投与され、対象の応答、並びにコレステロール及び脂質代謝成分、生成物及び副生成物（例えば、薬力学的（ＰＤ）マーカー）のレベルが、ＭＥＤＩ６０１２の投与後に評価される、ＳＡＤ臨床試験に基づいて開発された。（実施例１を参照されたい）。このようなＰＤマーカーは、対象へのＭＥＤＩ６０１２の投与前、投与中及び／又は投与後に、対象から得られたサンプル中で評価されてもよい。評価されるＰＤマーカーとしては、限定することなく、そのレベルが評価され及び／又は測定されて、総コレステロール（ＴＣ）、非エステル化遊離コレステロール（ＦＣ）、コレステリルエステル（ＣＥ）、ＨＤＬ−エステル化コレステロール（ＨＤＬ−ＣＥ）、ＨＤＬ−非エステル化コレステロール（ＨＤＬ−ＵＣ）、非ＨＤＬ−Ｃ、非ＨＤＬ−ＣＥ、非ＨＤＬ−ＵＣ、ＬＤＬ−Ｃ（標準的な臨床検査による直接測定）、ＶＬＤＬ−Ｃ、ＴＧ、ａｐｏＢ、ａｐｏＡＩ、ａｐｏＡＩＩ、ａｐｏＣＩＩＩ、又はａｐｏＥをはじめとするが、これに限定されるものではない、コレステロール及び脂質経路に対するＭＥＤＩ６０１２の効果が記述され定量化される、ＨＤＬ−Ｃ、並びに追加的な脂質及びリポタンパク質が挙げられる。例として、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）などの免疫アッセイを使用して、プレβ１−ＨＤＬが特性決定され定量化されてもよい。ＨＤＬ、ＬＤＬ、及びＶＬＤＬのリポタンパク質のサイズ及び粒子数は、核磁気共鳴（ＮＭＲ）（ＬｉｐｏＳｃｉｅｎｃｅ，Ｉｎｃ．，Ｒａｌｅｉｇｈ，ＮＣ）によって特性決定され得る。一実施形態では、対象から得られるサンプルは、血液、血清、又は血漿サンプルである。
【０１００】
一実施形態では、方法は、ＭＥＤＩ６０１２を２０〜２０００ｍｇの量でそれを必要とする対象に投与することを伴う。一実施形態では、２４〜１６００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２が対象に投与される。一実施形態では、２４〜８００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２が対象に投与される。いくつかの実施形態では、それらの間の値を含めて、２０、２４、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１２０、１４０、１５０、１６０、１８０、２００、２２０、２４０、２６０、２８０、３００、３２０、３４０、３６０、３８０ｍｇ、４００、４２０、４４０、４６０、４８０、５００、５２０、５４０、５６０、５８０、６００、６２０、６４０、６６０、６８０、７００、７２０、７４０、７６０、７８０、８００、８２２０、８４０、８６０、８８０、９００、９２０、９４０、９６０、９８０、１０００、１０２０、１０４０、１０６０、１０８０、１１００、１２００、１３００、１４００、１６００、１７００、１８００、１９００、又は２０００ミリグラム（ｍｇ）の用量のＭＥＤＩ６０１２がそれを必要とする対象に投与される。当該技術分野の当業者によって理解されるように、例えば、体重約８０ｋｇの冠動脈疾患（ＣＡＤ）を有する患者などの典型的な患者では、２４ｍｇの用量はおよそ０．３ｍｇ／ｋｇと同等であり；８０ｍｇの用量はおよそ１ｍｇ／ｋｇと同等であり；２４０ｍｇの用量はおよそ３ｍｇ／ｋｇと同等であり；８００ｍｇの用量はおよそ１０ｍｇ／ｋｇと同等であり；１６００ｍｇの用量はおよそ２０ｍｇ／ｋｇと同等である。いくつかの実施形態では、それを必要とする対象は、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管病（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、心不全（ＨＦ）、うっ血性ＨＦ、入院性ＨＦ、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全、ＥＦ温存型心不全、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、非ＳＴＥＭＩ、又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、末梢動脈疾患、心筋梗塞、虚血性心筋症、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状などの家族性又は後天性の心疾患又は心疾患（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）に関連し又はそれに付随する、疾病、病理、又は病状に苦しんでいる。特定の実施形態では、対象は安定型冠動脈疾患（ＣＡＤ）を有する。
【０１０１】
一実施形態では、方法は、ＭＥＤＩ６０１２の用量をそれを必要とする対象に非経口的に投与することを伴う。一実施形態では、方法は、ＭＥＤＩ６０１２の用量をそれを必要とする対象に静脈内投与することを伴う。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の用量は、静脈内（ＩＶ）輸液によって対象に投与される。一実施形態では、方法は、ＭＥＤＩ６０１２の用量をそれを必要とする対象に皮下投与することを伴う。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の用量は、数分間〜数時間の時間をかけて対象に静脈内投与される。一実施形態では、方法は、特に、心臓の病状、心血管疾患、又は動脈硬化の病状を有する対象が、医療施設（例えば、病院、診療所、救急センター、開業医院）を受診し、又は医療専門家又は臨床医が同席し、又は対象へのＭＥＤＩ６０１２の用量の投与を補助できる場所を受診した後に、それらの間の時間を含めて、３０秒間、１分間、３分間、５分間、１０分間、１５分間、３０分間、１時間、２時間、３時間、４時間、又は５時間程度の時間をかけて、ＭＥＤＩ６０１２の用量をＩＶ又はＳＣ送達によって対象に投与することを伴う。
【０１０２】
一実施形態では、方法は、心臓の病状又は動脈硬化の病状を有する対象が、医療施設又は場所を受診した時に、例えば、３０秒間〜１０分間程度の時間をかけて、又は１〜５分間程度の時間をかけて、又は１〜３分間程度の時間をかけて、又は１〜２分間程度の時間をかけて、及びそれらの間の時間をかけて、即座に又は数分間などの短時間内に、ＭＥＤＩ６０１２の用量を対象に投与することを伴う。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２は、上に記載されるような短時間で、静注によって対象に静脈内投与される。一実施形態では、ボーラス用量又は負荷用量のＭＥＤＩ６０１２が、静注によって対象に静脈内投与される。その他の実施形態では、方法は、対象が医療施設又は場所を受診した後のより長期間にわたり、又は対象が医療施設又は場所に滞在する間に、ＩＶ輸液によって又はＳＣ投与（例えば、ＳＣ注射）によって、ＭＥＤＩ６０１２の用量を対象に投与することを伴う。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の用量は、３０分〜３時間程度の時間をかけて、又は１分〜３時間程度の時間をかけて、ＩＶ輸液によって対象に投与される。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の用量は、３０分間〜１時間程度の時間をかけて、ＩＶ輸液によって対象に投与される。特定の実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の用量は、１時間程度の時間をかけて、ＩＶ輸液によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、２４、８０、２４０、６００、８００ｍｇ、又は１６００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２が、対象に静脈内投与される。一実施形態では、２４ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２が対象に静脈内投与される。一実施形態では、８０ｍｇの用量が対象に静脈内投与される。一実施形態では、２４０ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２が対象に静脈内投与される。一実施形態では、６００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２が対象に静脈内投与される。一実施形態では、８００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２が対象に静脈内投与される。前述の実施形態のいずれかにおいて、上述のＭＥＤＩ６０１２の用量の１つ又は複数が、対象に静脈内投与される。
【０１０３】
一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の用量は、例えば、皮下（ＳＣ）輸液又は注射によって、対象に皮下投与される。一実施形態では、８０又は６００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２が対象に皮下投与される。特定の実施形態では、８０ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２が、対象に皮下投与される。特定の実施形態では、６００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２が、対象に皮下投与される。前述の実施形態のいずれかにおいて、上述のＭＥＤＩ６０１２の用量の１つ又は複数が、対象に皮下投与される。
【０１０４】
本明細書に記載される方法の任意の態様のいくつかの実施形態では、対象は、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管病（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、心不全（ＨＦ）、うっ血性ＨＦ、入院性ＨＦ、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全、ＥＦ温存型心不全、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、非ＳＴＥＭＩ、又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、末梢動脈疾患、心筋梗塞、虚血性心筋症、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状などの家族性又は後天性の心疾患又は心疾患（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）に関連し又はそれに付随する、疾病、病理、又は病状を有する。一実施形態では、対象は心筋梗塞を有していた。一実施形態では、対象は、例えば、急性又は慢性心疾患などの急性又は慢性疾患及び／又は例えば、安定型冠動脈疾患などの関連冠動脈疾患を有する。特定の実施形態では、対象は安定型冠動脈疾患（ＣＡＤ）を有する。
【０１０５】
本明細書に記載される方法の任意の態様のいくつかの実施形態では、例えば、心疾患及び／又は動脈硬化性疾患を有する対象などの対象にＭＥＤＩ６０１２を投与した後に、ＰＤマーカーＨＤＬ、（ＨＤＬ−コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）又はＨＤＬ−エステル化コレステロール（ＨＤＬ−ＣＥ）とも称される）、エステル化コレステロール（ＣＥ）、又はアポリポタンパク質Ａ１（ａｐｏＡ１）の１つ又は複数のレベル又は濃度が増加する（迅速に又は長期にわたり）。ＰＤマーカーのレベルは、対象から得られた生物学的サンプル中で測定され又は定量化されてもよい。生物学的サンプルとしては、血液、血清、血漿、尿、唾液などの体液サンプルが挙げられてもよい。血清又は血漿サンプルは、ＭＥＤＩ６０１２を投与された対象におけるＰＤマーカー分析に特に適する。特定の例として、本明細書に記載される方法の実施は、本方法に従ってＬＣＡＴ（ＭＥＤＩ６０１２）の用量を投与された対象において、約９０分以内に血清中のＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１レベルのおよそ５０％の増加をもたらし、６時間までに血清中の少なくともＨＤＬ−Ｃの少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも１００％の増加をもたらす。さらに、ａｐｏＡ１レベルは、ＭＥＤＩ６０１２の静脈内輸液又は皮下投与後に、少なくとも７日間にわたり上昇したままである。
【０１０６】
本明細書の実施例１は、スタチン療法を受けている安定型冠動脈疾患（ＣＡＤ）患者へのＭＥＤＩ６０１２  ｒｈＬＣＡＴ酵素の単回漸増非経口用量の投与を評価するために実施された、ＳＡＤ試験を記載する。ＭＥＤＩ６０１２の単回用量は、静脈内輸液又は皮下注射によって対象に投与された。単回輸液は、ＨＤＬコレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）、ＨＤＬコレステリルエステル（ＨＤＬ−ＣＥ）、及び総ＣＥを用量依存的に増加させるが、これは対象におけるＬＣＡＴ酵素の典型的な作用機序と一致する。試験に基づき、ＭＥＤＩ６０１２の単回用量は、８０ｍｇ〜２４０ｍｇの用量でピークに達する、アポリポタンパク質Ａ１（ａｐｏＡ１）の用量依存的増加を引き起こしたと判定された。
【０１０７】
別の実施形態では、例えば、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、又は８００ｍｇなどの２４０ｍｇ以上の用量で、それを必要とする対象に投与されるｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２などのＬＣＡＴは、例えば、当該技術分野で公知の方法を使用してコレステロール流出能力を評価することによって判定されるように、ＨＤＬコレステロール粒子の機能を改善する。別の実施形態では、より少ない量のＬＣＡＴ（例えば、２０〜２００ｍｇ又は２０〜１５０ｍｇ、又は２０〜１００ｍｇ）の複数回用量の投与もまた、記載される量のｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２を投与された対象におけるＨＤＬコレステロール粒子の機能を改善してもよい。
【０１０８】
別の実施形態では、それを必要とする対象に１００ｍｇ用量以下の用量で投与された、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２などのＬＣＡＴは、ＬＤＬ粒子中のＣＥの蓄積を引き起こさない。したがって、１００ｍｇ以下の用量でのｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与を伴う本明細書に記載される方法は、ＬＤＬ粒子中のＣＥ蓄積なしに、種々の心臓、心臓関連、心血管系、及び冠動脈疾患の治療を提供する。したがって、本明細書に記載される投与方法は、ＬＤＬ−ＣＥ蓄積が、ＬＣＡＴ治療を受けている対象における用量制限パラメータとして評価及び／又はモニターされるという条件で、様々な用量と投与レジメンを使用してＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２）を長期投与することを包含する。
【０１０９】
なおも別の実施形態では、記載される用量と投与レジメンでのそれを必要とする対象へのＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２）の投与を伴う方法は、アテロームを発生させる小ＬＤＬ粒子の減少をもたらす。本明細書で言及されるように、８０ｍｇの用量のｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２を使用して、小ＬＤＬ粒子の約４０％の減少が観察され、２４０ｍｇ及び８００ｍｇの量のｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の用量を使用して、小ＬＤＬ粒子の約８０％の減少が観察された。
【０１１０】
ｒｈＬＣＡＴ（ＭＥＤＩ６０１２）を伴う複数回用量治療方法
一般に、複数回用量の投与された化合物又は薬物のＰＫ及び薬物動力学（ＰＤ）を解明するために、複数回漸増用量試験が、通常は臨床試験ユニット（ＣＲＵ）内で実施される。用量レベル及び投与間隔（すなわち、連続投与の間の時間）は、単回用量試験で得られたデータに基づいて、安全であると予測されるものが選択される。対象から生物学的サンプルを採取して分析することで、ＰＫプロファイルを決定し、化合物又は薬物が体内でどのようにプロセスされるかをより良く理解できるようになる。複数回投与では、投与された化合物又は薬物の蓄積があるかどうかを識別することが、ＰＫ解析の重要な部分である。ＳＡＤ試験と同様に、ＭＡＤ試験における用量漸増は、厳密な安全性とＰＫ基準を満たしたプロトコルに従って進行させる。用量レベル及び投与頻度は、薬物レベルが数日間定常状態で最適に維持され、適切な安全性パラメータをモニターできるように、対象の体循環内で治療薬物レベルを達成するように選択される。予期された治療用量レベルで、及びそれを超えるレベルで、２〜３つの用量レベルを試験し、反復用量投与の「安全マージン」を決定することが普通である。
【０１１１】
一態様では、本開示は、活性ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の複数回用量を投与して、心（心臓）疾患、心血管疾患及び／又は動脈硬化性疾患を有する対象、又は心筋梗塞と闘っている対象を治療することを伴う、本明細書に記載されるような治療方法を提供する。このような投与方法は、反復用量のＭＥＤＩ６０１２が対象に投与され、ＭＥＤＩ６０１２の投与後に、対象の応答と、コレステロール及び脂質代謝成分、生成物及び副生成物（例えば、薬力学的（ＰＤ）マーカー）のレベルも評価された、臨床試験設定で実行される複数回漸増用量（ＭＡＤ）試験に基づいて、開発され決定された。ＳＡＤ試験に関して上述されるように、対象へのＭＥＤＩ６０１２の投与前、投与中及び／又は投与後に、対象から得たサンプル中で評価されてもよい、このようなＰＤマーカーとしては、ＨＤＬ−Ｃ；並びにコレステロール経路に対するＭＥＤＩ６０１２の効果を完全に理解し説明するために、そのレベルが評価及び／又は測定される、追加的な脂質及びリポタンパク質が挙げられるが、これらに限定されない。評価されるＰＤマーカーとしては、総コレステロール（ＴＣ）、遊離コレステロール（ＦＣ）、コレステリルエステル（ＣＥ）、ＨＤＬ−エステル化コレステロール（ＨＤＬ−ＣＥ）、ＨＤＬ−非エステル化コレステロール（ＨＤＬ−ＵＣ）、非ＨＤＬ−Ｃ、非ＨＤＬ−ＣＥ、非ＨＤＬ−ＵＣ、ＬＤＬ−Ｃ（直接測定）、ＶＬＤＬ−Ｃ、ＴＧ、ａｐｏＢ、ａｐｏＡＩ、ａｐｏＡＩＩ、ａｐｏＣＩＩＩ、ａｐｏＥが挙げられるが、これらに限定されない。例として、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）などの免疫アッセイを使用して、プレβ１−ＨＤＬが特性決定され定量化されてもよい。ＨＤＬ、ＬＤＬ、ＶＬＤＬなどのリポタンパク質のサイズ及び粒子数は、核磁気共鳴（ＮＭＲ）（ＬｉｐｏＳｃｉｅｎｃｅ，Ｉｎｃ．，Ｒａｌｅｉｇｈ，ＮＣ）によって特性決定され得る。
【０１１２】
一態様では、本開示は、治療中に２回以上の（反復）用量のＭＥＤＩ６０１２が、罹患した対象に投与される、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管病（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、心不全（ＨＦ）、うっ血性ＨＦ、入院性ＨＦ、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全、ＥＦ温存型心不全、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、非ＳＴＥＭＩ、又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、末梢動脈疾患、心筋梗塞、虚血性心筋症、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状などの家族性又は後天性の心疾患又は心疾患（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）に関連し又はそれに付随する、疾病、病理、又は病状に苦しんでいる対象を治療する方法を提供する。特定の実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の各投与量が２５ｍｇ〜２０００ｍｇであり、又はＭＥＤＩ６０１２の各投与量が３０ｍｇ〜８００ｍｇであり、又はＭＥＤＩ６０１２の各投与量が３０ｍｇ〜５００ｍｇであり、又はＭＥＤＩ６０１２の各投与量が３０ｍｇ〜３００ｍｇであり、又はＭＥＤＩ６０１２の各投与量が４０ｍｇ〜５００ｍｇであり、又はＭＥＤＩ６０１２の各投与量が４０ｍｇ〜３００ｍｇである、３用量のＭＥＤＩ６０１２が、それを必要とする罹患した対象に投与される方法が提供される。いくつかの実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の各投与量は、それらの間の値を含めて、２５ｍｇ、３０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７０ｍｇ、８０ｍｇ、９０ｍｇ、１００ｍｇ、１２０ｍｇ、１３０ｍｇ、１４０ｍｇ、１５０ｍｇ、１６０ｍｇ、１８０ｍｇ、１９０ｍｇ、２００ｍｇ、２２０ｍｇ、２３０ｍｇ、２４０ｍｇ、２５０ｍｇ、２６０ｍｇ、２８０ｍｇ、２９０ｍｇ、３００ｍｇ、３２０ｍｇ、３３０ｍｇ、３４０ｍｇ、３５０ｍｇ、３６０ｍｇ、３８０ｍｇ、３９０ｍｇ、４００ｍｇ、４２０ｍｇ、４３０ｍｇ、４４０ｍｇ、４５０ｍｇ、４６０ｍｇ、４８０ｍｇ、４９０ｍｇ、又は５００ｍｇである。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の用量は、例えば、静脈内（ＩＶ）輸液によって、又は静注によって、静脈内投与される。一実施形態では、対象は、３つの異なる時点で４０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２を静脈内投与される。特定の実施形態では、方法は、４０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の第１の用量；第１の用量の約１週間後の４０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の第２の用量；及び第２の用量の約１週間後の４０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の第３の用量が、それを必要とする対象に静脈内投与される、ＭＥＤＩ６０１２投与レジメンを包含し、例えば、４０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２が、１、８、及び１５日目に対象に投与される。別の特定の実施形態では、方法は、１２０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の第１の用量；第１の用量の約１週間後の１２０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の第２の用量；及び第２の用量の約１週間（ｗｅｅｋ  ａｂｏｕｔ  ｏｎｅ  ｗｅｅｋ）後の１２０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の第３の用量が、それを必要とする対象に静脈内投与される、ＭＥＤＩ６０１２投与レジメンを包含し、例えば、１���０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２が、１、８、及び１５日目に対象に投与される。別の特定の実施形態では、方法は、３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の第１の用量；第１の用量の約１週間後の３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の第２の用量；及び第２の用量の約１週間後の３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の第３の用量が、それを必要とする対象に静脈内投与される、ＭＥＤＩ６０１２投与レジメンを包含し、例えば、３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２が、１、８、及び１５日目に対象に投与される。前述の方法のいずれかの実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２は、例えば、静脈内（ＩＶ）輸液によって、又は静注によって、対象に静脈内投与される。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２は、１〜１０分間程度、又は１〜５分間程度、又は１〜３分間程度、又は１〜２分間程度の時間をかけて、静注によって静脈内投与される。別の実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２は、３０分間〜１時間を超える程度の時間（例えば、１〜５時間）、又はより具体的には１時間程度の時間などのより長い時間をかけて、ＩＶ輸液によって静脈内投与される。特定の実施形態では、対象は安定型ＣＶＤを有する。
【０１１３】
負荷用量を伴うｒｈＬＣＡＴ（ＭＥＤＩ６０１２）の投与方法
本開示の別の態様によれば、統計的モデル化データ及び予測転帰、並びに本明細書に記載されるようなｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与及び投与レジメンを伴う臨床試験から得られた結果は、ＭＥＤＩ６０１２の負荷用量及びＭＥＤＩ６０１２の後続用量（維持用量とも称される）を、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管病（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、心不全（ＨＦ）、うっ血性ＨＦ、入院性ＨＦ、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全、ＥＦ温存型心不全、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、非ＳＴＥＭＩ、又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、末梢動脈疾患、心筋梗塞、虚血性心筋症、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状などの家族性又は後天性の心疾患又は心疾患（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）に関連し又はそれに付随する、疾病、病理、又は病状を有する対象に投与することを伴う方法から得られた、予期された利益及び成功裏の治療を支持する。ＭＥＤＩ６０１２の投与のための負荷用量を含む複数回用量アプローチを伴うこのような方法は、対象の心臓（又は心臓関連）疾患、心血管疾患などを治療し、またＨＤＬ、ＨＤＬ−ＣＥ、ＣＥ及び／又はａｐｏＡ１の１つ又は複数などのＰＤバイオマーカーも増加させる一方で、ａｐｏＢのレベルの増加を引き起こさず、これは、複数回用量治療方法を受けている対象において、観察されたＬＤＬ−Ｃレベルの増加に、重篤な影響、悪影響、又は有害な影響が関連していないことを示唆する。
【０１１４】
例えば、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２などのＬＣＡＴの負荷用量を含む記載される方法、より詳細には、約１〜３分間かけて静注として対象に投与される負荷用量を含む記載される方法は、時間が最重要な疾患及び病状の治療を可能にする。その他の薬物とは異なり、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２は、負荷用量をはじめとする、記載される用量及び用量レジメンに従って投与され、数分以内にＨＤＬ−Ｃレベルを増加させ得る。したがって、記載される方法におけるｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の迅速な作用は、急性ＭＩ、脳卒中、及び急性腎臓損傷を迅速且つ効果的に治療し得る。ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与のこの特徴は、特に、前述のいずれかなどの、急性疾患、病理又は負傷などの即時の緊急治療を必要とする患者に対して特に効果的であり得る、非常に好ましく決定的に重要な治療を提供する。
【０１１５】
別の態様では、１日目を投与初日として、毎週、又は１、３、及び１０日目などの所定の間隔で用量が投与される、３用量のＭＥＤＩ６０１２をそれを必要とする対象に投与することを含むＩＶ投与レジメンを伴う、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管病（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、心不全（ＨＦ）、うっ血性ＨＦ、入院性ＨＦ、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全、ＥＦ温存型心不全、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、非ＳＴＥＭＩ、又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、末梢動脈疾患、心筋梗塞、虚血性心筋症、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状などの家族性又は後天性の心疾患又は心疾患（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）に関連し又はそれに付随する、疾病、病理、又は病状について対象が治療される方法が提供される。特定の実施形態では、方法は、上述の心臓又は心血管疾患又は病状の１つ又は複数を有する対象（それを必要とする対象）に、２００〜８００ｍｇ程度の量、又は２５０〜６００ｍｇ程度の量、又は２００〜５００ｍｇ程度の量、又は２５０〜５００ｍｇ程度の量、又は３００〜５００ｍｇ程度の量、又は３００ｍｇ程度の量の負荷又はボーラス用量のＭＥＤＩ６０１２を投与することを伴う。
【０１１６】
別の特定の実施形態では、方法は、上述の心臓又は心血管疾患又は病状の１つ又は複数を有する対象（それを必要とする対象）に、２００〜８００ｍｇ程度の量、又は２５０〜６００ｍｇ程度の量、又は２００〜５００ｍｇ程度の量、又は２５０〜５００ｍｇ程度の量、又は３００〜５００ｍｇ程度の量、又は３００ｍｇ程度の量（１日目用量）のＭＥＤＩ６０１２の第１の（負荷）用量；それに続いて、１日目用量の４８時間程度の後に対象に投与される、５０〜３００ｍｇ程度の量、又は１００〜２５０ｍｇ程度の量、又は１００〜２００ｍｇ程度の量、又は１００〜１５０ｍｇ程度の量、又は１５０ｍｇ程度の量のＭＥＤＩ６０１２の第２の（又は維持）用量（３日目用量）；それに続いて、３日目用量の約７〜１０日、又は７日、又は約１週間後に対象に投与される、５０〜３００ｍｇ程度の量、又は１００〜２００ｍｇ程度の量、又は１００〜１５０ｍｇ程度の量、又は１００ｍｇ程度の量のＭＥＤＩ６０１２の第３の（維持）用量（１０日目用量）を投与することを伴う。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の用量は、静脈内投与を介して対象に投与される。一実施形態では、前述の方法は、少なくともＭＥＤＩ６０１２の第１の用量は、１〜５分間程度の時間をかけて、又は１〜３分間程度の時間をかけて、又は１〜２分間程度の時間をかけて、静注によって対象に静脈内投与される。前述の方法のいくつかの実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の全ての用量は、１〜５分程度の時間をかけて、又は１〜３分程度の時間をかけて、静注によって対象に投与される。前述の実施形態では、静注は、例えば、負荷又はボーラス用量投与のために、１分間程度の時間をかけて、対象に投与される。前述の方法のいずれかの実施形態では、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与時間は、記載される投与時間、時間間隔、又は期間の±８時間程度の時間内であってもよい。
【０１１７】
特定の態様では、３００ｍｇの量のＭＥＤＩ６０１２の負荷（第１の）用量（１日目用量）をそれを必要とする対象に投与すること；それに続いて、１日目用量の４８時間程度の後に１５０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量（第２の又は維持用量）を対象に投与すること（３日目用量）；それに続いて、３日目用量の約７日間後に１００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量（第３の又は第３の維持用量）を対象に投与すること（１０日目用量）、を含む静脈内ＩＶ投与レジメンを伴う、心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管疾患（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、ＭＩなどの心臓病又は心疾患に関連し又はそれに伴う疾患又は病状及び／又はそれらの症状について対象が治療される方法が提供される。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の用量は、対象に静脈内投与される。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の用量の１つ又は複数が、静脈内（ＩＶ）注入を介して対象に投与される。前述の方法の実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の用量の１つ又は複数は、１〜１０分間程度、又は１〜５分間程度、又は１〜３分間程度、又は１〜２分間程度、又は１分間程度の時間をかけて、静注輸液によって対象に投与される。前述の方法の特定の実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の用量の１つ又は複数は、１〜３分間程度の時間をかけて、静注輸液によって対象に投与される。前述の方法の特定の実施形態では、対象は安定型動脈硬化性ＣＶＤを有する。前述の方法の実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２投与間隔は、記載される投与時間又は期間の±８時間以内であってもよい。
【０１１８】
別の特定の態様では、１日目に、２００〜８００ｍｇ程度の用量、又は２５０〜６００ｍｇ程度の量、又は３２０〜５００ｍｇ程度の量、又は３００〜５００ｍｇ程度の量、又は３００ｍｇ程度の量で、ＭＥＤＩ６０１２を対象に静脈内投与すること、それに続いて、それ以降所定の時間間隔で、５０〜３００ｍｇ程度、又は１００〜２５０ｍｇ程度の量、又は１００〜１５０ｍｇ程度の量、又は１５０ｍｇ程度の量の第２の用量で、ＭＥＤＩ６０１２を静脈内投与することを含んでなる２用量レジメンを伴う、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管病（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、心不全（ＨＦ）、うっ血性ＨＦ、入院性ＨＦ、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全、ＥＦ温存型心不全、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、非ＳＴＥＭＩ、又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、末梢動脈疾患、心筋梗塞、虚血性心筋症、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状などの家族性又は後天性の心疾患又は心疾患（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）に関連し又はそれに付随する、疾病、病理、又は病状について対象が治療される方法が提供される。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の第２の用量は、１日目用量の１〜１０日程度の後に投与される。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の第２の用量は、１日目用量の３日（例えば、４８時間±８時間）後に投与される。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の用量の少なくとも１つは、静注によって対象に投与される。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の第１及び第２の用量は、どちらも静注によって対象に投与される。実施形態では、静注は、１〜１０分間程度、又は１〜５分間程度又はそれを超える、又は１〜３分間程度、又は１〜２分間程度、又は１分間程度の時間をかけて投与される。前述の方法の特定の実施形態では、対象は安定型動脈硬化性ＣＶＤを有する。
【０１１９】
なおも別の態様では、所定の間隔で６用量のＭＥＤＩ６０１２を対象に静脈内投与することを伴う、急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管病（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、心不全（ＨＦ）、うっ血性ＨＦ、入院性ＨＦ、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全、ＥＦ温存型心不全、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、非ＳＴＥＭＩ、又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、末梢動脈疾患、心筋梗塞、虚血性心筋症、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状などの家族性又は後天性の心疾患又は心疾患（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）に関連し又はそれに付随する、疾病、病理、又は病状について対象が治療される方法が提供される。
【０１２０】
一実施形態では、方法は、１日目に、２００〜８００ｍｇ程度、又は２５０〜６００ｍｇ程度の量、又は３００〜５００ｍｇ程度の量、又は３００ｍｇ程度の量の第１の用量で、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２を対象に静脈内投与する、３用量レジメンを含んでなる。１日目用量に続いて、１日目用量の３日（例えば、４８時間±８時間）後など、１日目用量の約１〜５日後に、５０〜３００ｍｇ程度、又は１００〜２５０ｍｇ程度の量、又は１００〜１５０ｍｇ程度の量、又は１５０ｍｇ程度の量の用量で、ＭＥＤＩ６０１２が対象に静脈内投与される（「３日目用量」と称される）。３日目用量に続いて、それ以降、毎週、又は３日目用量の１０、１７、２４、及び３１日後などの定期的間隔で、１００〜２５０ｍｇ程度、又は１００〜１５０ｍｇ程度の量、又は１００ｍｇ程度の量の用量で、ＭＥＤＩ６０１２が対象に静脈内投与される。一実施形態では、投与レジメンは、第１の負荷用量を含む、３用量又は６用量のｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２を包含する。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の用量の少なくとも１つは、静注によって対象に静脈内投与される。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の用量の少なくとも２つは、静注によって対象に投与される。一実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の１日目用量及び３日目用量は、静注によって対象に投与される。一実施形態では、静注は１〜１０分間程度の時間をかけて、又は１〜５分間程度の時間をかけて、又は１〜３分間程度の時間をかけて、又は１〜２分間程度の時間をかけて投与される。特定の実施形態では、静注は、１〜３分間程度又は１〜２分間程度の時間をかけて投与される。
【０１２１】
別の特定の実施形態では、方法は、１日目に３００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２をそれを必要とする対象に静注によって静脈内投与すること、それに続いて、１日目用量の３日（４８時間±８時間）後に、１５０ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２を静注によって静脈内投与すること、それに続いて、３日目用量の１０、１７、２４、及び３１日後に、約１００ｍｇの毎週用量のＭＥＤＩ６０１２を静脈内投与することを含んでなる６用量レジメンを伴う。いくつかの実施形態では、用量は、１０、１７、２４、及び３１日目に、静注によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、対象は心血管疾患、安定型ＣＡＤ、安定型動脈硬化性ＣＶＤ、又は急性ＳＴ上昇型（ｅｌｅｖａｔｉｏｎ）心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）を有する。
【０１２２】
前述の方法のいずれかの態様において、記載されるような対象の治療は、マーカーＨＤＬ、ＨＤＬ−Ｃ、ＨＤＬ−ＣＥ、ＣＥ、及び／又はａｐｏＡ１の１つ又は複数の血液、血漿、又は血清レベルの増加をもたらす。一実施形態では、マーカーレベルの増加は用量依存的である。前述の方法のいずれかの態様において、記載されるような対象の治療は、ａｐｏＢの血液、血漿、又は血清中レベルの減少をもたらす。前述の方法のいずれかの態様において、記載されるような対象の治療は、ａｐｏＢの血液、血漿、又は血清レベルの増加又は有意な変化をほとんど又は全く生じない。一実施形態では、ＬＤＬ又はＬＤＬ−Ｃマーカーレベルの評価されたあらゆる増加は、ａｐｏＢレベルの減少、又はわずか又は皆無の増加によって相殺される。一実施形態では、マーカーレベルの減少は用量依存的である。方法のその他の実施形態では、本明細書に記載される用量と投与レジメンに従ったＭＥＤＩ６０１２の投与は、例えば、心筋細胞のアポトーシスを減少させ、血清中の非ＨＤＬ関連コレステロールのレベルを減少させ、過剰なコレステロール又はＬＤＬ−Ｃを組織及び体内から排除又は除去することによって、治療対象における心臓及び／又はアテローム保護効果をもたらす。
【０１２３】
本明細書の実施例２は、安定型動脈硬化性ＣＶＤ患者へのＭＥＤＩ６０１２  ｒｈＬＣＡＴ酵素の複数回漸増非経口用量の投与を評価するために実施された、ＭＡＤ臨床試験を記載する。ＭＥＤＩ６０１２の用量は、対象に静脈内投与された。反復用量のＭＥＤＩ６０１２が対象に投与されたＭＡＤ試験の結果は、ＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１の増加率が用量依存的であり、したがって、方法に関連した治療及び保護効果をもたらすことを実証した。
【０１２４】
ｒｈＬＣＡＴ（ＭＥＤＩ６０１２）投与を伴うその他の治療方法
本開示は、患者が、病院、救急処置室、診療所、緊急医療施設、医院などを受診した直後に、心臓の病状、病理、又は疾患を有する患者に、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の用量を有利に提供する方法を包含する。本方法の実施に従って、本明細書に記載されるようなＭＥＤＩ６０１２の用量及びＭＥＤＩ６０１２投与を伴う投与レジメンを患者に提供することは、有利には、患者のＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１の血清レベルを上昇させ、患者の血清ａｐｏＢのレベルに悪影響を及ぼさず、それによって、数週間などの期間にわたり維持される、迅速な心筋保護及びアテローム保護効果をもたらす。これは、ＭＥＤＩ６０１２の第１の用量の投与後における、例えば、維持用量などのＭＥＤＩ６０１２の後続用量を伴う投与レジメンが患者に提供される場合；又は投与レジメンが、例えば、静注によるボーラス用量としてのＭＥＤＩ６０１２の第１の負荷用量と、それに続き、対象にそれ以降投与される、例えば、本明細書に記載されるようなＭＥＤＩ６０１２の維持用量などの後続用量を伴う場合に、特に効果的である。
【０１２５】
別の態様では、本開示は、ＨＤＬ−Ｃ、ＣＥ、ＨＤＬ−ＣＥ及び／又はａｐｏＡ１から選択される、１つ又は複数の薬力学的（ＰＤ）マーカーのレベル又は量を増加させる方法、及び／又はａｐｏＢのレベルを減少させ、又はわずか又は皆無の変化を引き起こす方法、及び／又は急性又は慢性心疾患、心血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、安定型ＣＡＤ、動脈硬化症、動脈硬化性心血管病（ＣＶＤ）、安定型ＣＶＤ、不安定型ＣＶＤ、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、心不全（ＨＦ）、うっ血性ＨＦ、入院性ＨＦ、駆出率（ＥＦ）低下を伴う心不全、ＥＦ温存型心不全、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、非ＳＴＥＭＩ、又は脳卒中、虚血性脳卒中、心筋疾患、末梢動脈疾患、心筋梗塞、虚血性心筋症、非虚血性心筋症、化学療法誘発性心筋症、脳血管疾患、急性又は慢性腎疾患及び／又はそれらの症状などの家族性又は後天性の心疾患又は心疾患（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ｈｅａｒｔ  ｏｒｃａｒｄｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）に関連し又はそれに付随する、疾病、病理、又は病状に苦しんでいる対象におけるアテローム発生小ＬＤＬ粒子の数を減少させる方法を提供する。方法は、上述のＰＤマーカーの増加、減少、又はわずか又は皆無の変化をもたらすのに有効な量で、ＭＥＤＩ６０１２（ｒｈＬＣＡＴ）の用量を対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、２４、８０、２４０、３００、６００、又は８００ｍｇなどのＭＥＤＩ６０１２の用量の１つ又は複数の、対象への静脈内又は皮下投与を伴う。一実施形態では、８０、２４０、３００、又は８００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の少なくとも１用量が、３０分間〜１時間の時間をかけて対象に静脈内投与される。特定の実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２用量の静脈内投与の時間は１時間である。別の実施形態では、８０又は６００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の少なくとも１用量が、ＳＣ注射によって対象に投与される。その他の実施形態では、方法は、例えば、ＭＥＤＩ６０１２の２用量、３用量、又は６用量などのＭＥＤＩ６０１２の複数用量又は反復用量の対象への静脈内投与を伴う。方法の特定の実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２の第１の用量は、２００〜５００ｍｇの量、より具体的には３００ｍｇの量で投与される負荷用量であり、その後、本明細書に記載されるような定期的間隔で投与されるＭＥＤＩ６０１２の１又は２用量（維持用量）がそれに続く。一実施形態では、負荷用量は、１〜５分間程度、又は１〜３分間程度、又は１〜２分間程度の時をかけて静注投与される。
【０１２６】
別の態様では、本開示は、本明細書に記載される用量と投与レジメンに従って対象に投与されるＭＥＤＩ６０１２の用量が、ＨＤＬ粒子及び／又はＡｐｏＡ１を全身に及び細胞内に注入するように、ＨＤＬ−Ｃ及び／又はＨＤＬ−ＣＥレベルを増加させ、それによって、例えば、心筋細胞におけるアポトーシスイベントの減少がもたらされる、急性ＳＴ上昇型（ｅｌｅｖａｔｉｏｎ）心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）を経験している対象に、心筋保護を付与する方法を提供する。
【０１２７】
併用治療
別の実施形態では、ｒｈＬＣＡＴ酵素又はＭＥＤＩ６０１２は、別の薬物、薬物療法、又は治療薬又は化合物と併用して投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２は、スタチン薬、プロタンパク質コンバターゼサブチリシン／ケキシンタイプ９（ＰＣＳＫ９）酵素阻害剤（ＰＣＳＫ９ｉ）、その他のコレステロール低下剤及び薬物療法、心臓薬物療法などと併用して投与される。このような併用療法では、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２及び別の薬物、薬物療法などが、一緒に又は別々に、同時に、順次、又は異なる時点で、投与されてもよい。さらに、その他の薬物又は薬物療法が、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与と同時に、又はそれとは異なる時点で、対象に投与されてもよい。投与されてもよいスタチンとしては、限定することなく、アトルバスタチン（ＬＩＰＩＴＯＲ）、フルバスタチン（ＬＥＳＣＯＬ）、ロバスタチン（ＭＥＶＡＣＯＲ、ＡＬＴＯＰＲＥＶ）、ピタバスタチン（ＬＩＶＡＬＯ）、プラバスタチン（ＰＲＡＶＡＣＨＯＬ）、ロスバスタチン（ＣＲＥＳＴＯＲ）及びシムバスタチン（ＺＯＣＯＲ）、エボロクマブ（ＲＥＰＡＴＨＡ（登録商標））、又はアリロクマブ（ＰＲＡＬＵＥＮＴ（登録商標））が挙げられる。その他のコレステロール低下剤及び薬物療法としては、フェノフィブラート（フェノフィブリン酸（コリン））、コレスチラミン（ＱＵＥＳＴＲＡＮ）、アルトコール、コレスチラミンライト、コレスチポール、ナイアシン、スロ・ナイアシン、ナイアスパン、カデュエット、プレバリト、アンタラ、ビトリン１０−８０、コレスチド、ゲムフィブロジル、エゼチミブ（ＺＥＴＩＡ）及びエゼチミブ・シンバスタチン、トリグライド、プラールエント、リポフェン、レパタ、フィブリコール、ウェルコール、アリロクマブ、及びエボロクマブなどのコレステロール吸収阻害剤が挙げられてもよい。
【０１２８】
治療法の組み合わせ（例えば、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２と、その他の心臓治療薬及び／又はコレステロール低下剤との組み合わせ）の相乗効果は、心疾患、冠動脈心疾患及び／又は動脈疾患を有する対象への１つ又は複数の治療剤のより低い用量の使用、及び／又は治療剤のより低頻度の投与を可能にしてもよい。より低い用量の治療剤を利用する能力、及び／又はこのような治療剤をより低頻度で投与する能力は、心疾患又は冠動脈心疾患の治療における治療法の有効性を低下させることなく、対象への治療法の投与に関連した潜在的な毒性を低下させ得る。さらに、相乗効果は、心疾患又は冠動脈心疾患の管理、治療、又は改善における、治療剤の有効性の改善をもたらし得る。治療剤の組み合わせの相乗効果は、例えば、より高い用量で、単独で（単剤療法として）使用される各治療法の使用に関連した、有害な又は望ましくない副作用を回避又は軽減し得る。
【０１２９】
併用療法では、ＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２は、その他の薬物又は薬物療法と同じ医薬組成物に、任意選択的に含まれてもよい。代案としては、ＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２は、別個の医薬組成物であってもよく、１つ又は複数のその他の薬物又は薬物療法と同時に又は異なる時点で投与されてもよい。ＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２は、又はＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２を含んでなる医薬組成物は、その他の薬物又は薬物療法の投与の、又は薬物又は薬物療法を含んでなる医薬組成物の投与の前、同時、又は後に投与するのに適している。特定の場合では、対象へのＭＥＤＩ６０１２の投与は、別個に又は別個の組成物中で提供される、別の又はコンパニオン薬物又は薬物療法の投与時間と重複する。
【０１３０】
医薬組成物及び製剤
本開示は、ＬＣＡＴ酵素又はＭＥＤＩ６０１２と、１つ又は複数の製薬学的に許容される賦形剤、担体及び／又は希釈剤とを含んでなる、医薬組成物及び製剤の使用を包含する。特定の実施形態では、組成物は、１つ又は複数のその他の生物学的に活性な薬剤（例えば、プロテアーゼ阻害剤）を含んでなってもよい。
【０１３１】
賦形剤、担体、及び希釈剤の非限定的例としては、ビヒクル、液体、緩衝剤、等張化剤、添加剤、安定剤、保存料、可溶化剤、界面活性剤、乳化剤、湿潤剤、アジュバントなどが挙げられる。組成物は、液体（例えば、水、エタノール）；様々な緩衝液含有量（例えば、トリス−ＨＣｌ、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝剤）、ｐＨ、及びイオン強度の希釈剤；洗剤及び可溶化剤（例えば、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０）；抗酸化物質（例えば、メチオニン、アスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム）；保存料（例えば、チメロサール（Ｔｈｉｍｅｒｏｓｏｌ）、ベンジルアルコール、ｍ−クレゾール）；及び増量物質（例えば、乳糖、マンニトール、スクロース）を含有し得る。薬組成物の製剤における賦形剤、希釈剤、及び担体の使用は、当該技術分野で公知であり、例えば、その全体が参照により本明細書に援用される、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ｐａｇｅｓ  １４３５−１７１２，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．（Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ（１９９０））を参照されたい。
【０１３２】
非限定的な例として、担体は、希釈剤、ビヒクル及びアジュバント、並びにインプラント担体、及び活性成分と反応しない不活性且つ無毒の固体又は液体充填剤及びカプセル化材料を含み得る。担体の非限定的例としては、リン酸緩衝食塩水、生理学的食塩水、水、及びエマルション（例えば、油／水エマルション）が挙げられる。担体は、例えば、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコールなど）、植物油、及びそれらの混合物を含有する、溶媒又は分散媒体であり得る。
【０１３３】
非経口投与のためのＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２を含んでなる製剤は、例えば、液体溶液又は懸濁液として、注射前に液体媒体中で可溶化又は懸濁するのに適した固体形態として、又はエマルションとして調製され得る。滅菌注射液及び懸濁液は、適当な希釈剤、担体、溶媒（例えば、緩衝水溶液、リンゲル液、等張性塩化ナトリウム溶液）、分散剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤などを使用して、当該技術分野で公知の技術に従って製剤化され得る。滅菌不揮発性油、脂肪エステル、ポリオール及び／又はその他の不活性成分もまた使用され得る。さらに、非経口投与のための製剤は、抗酸化剤と、緩衝剤と、静菌剤と、製剤を意図される対象の血液に対して等張性にする溶質と、懸濁剤及び増粘剤を含有し得る水性及び非水性滅菌懸濁液とを含有し得る、水性滅菌注射液を含み得る。
【０１３４】
投与様式
本明細書に記載される投与レジメンに加えて、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２は、或いはｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２を含んでなる医薬組成物又は製剤は、タンパク質などの生物学的薬物を対象に投与及び／又は送達するのに適した様式と経路で、対象に投与され得る。一般に、適切な生物学的送達又は投与方法は、非経口投与様式又は経路を包含する。このような送達方法としては、限定することなく、皮下（ＳＣ）送達、皮下注射又は輸液、例えば、静脈内輸液又は注射又は静注などの静脈内（ＩＶ）送達が挙げられる。その他の送達及び投与様式又はレジメンとしては、限定することなく、関節内、動脈内、腹腔内、筋肉内、皮内、直腸内、経皮又はクモ膜下腔内が挙げられてもよい。特定の実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２又はｒｈＬＣＡＴは、例えば、静注又はＩＶ輸液などの静脈内投与によって、対象に提供される。別の特定の実施形態では、ＭＥＤＩ６０１２又はｒｈＬＣＡＴは、単回皮下注射などの皮下注射によって、対象に提供される。
【０１３５】
組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）又はＭＥＤＩ６０１２は、長期治療レジメンで投与され得る。組換えヒトＬＣＡＴ（ｒｈＬＣＡＴ）又はＭＥＤＩ６０１２は、本明細書に記載されるような期間にわたり投与され、治療されない期間がそれに続く。投与レジメン又は投与サイクルはまた、繰り返され得る。いくつかの実施形態では、治療（例えば、ＬＣＡＴ、ＭＥＤＩ６０１２又はｒｈＬＣＡＴの投与）は、初回治療としての負荷用量の投与を伴い、例えば、第１の又は負荷用量後の例えば、１、３、及び１０日目の複数の日を含んでなる期間にわたる、第２の用量及び／又は１つ又は複数の後続の維持用量がそれに続く。後続用量又は維持用量は、例えば、１週間、２週間、３週間、又は例えば４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間などのより長い期間などの週間間隔で、又は数ヶ月の間隔で、又は例えば、最初の用量、第２の用量、又はその後の用量後の数年間隔などのより長い間隔で、投与されてもよい。
【０１３６】
また、ＭＥＤＩ６０１２又はｒｈＬＣＡＴが、実行可能な限り、疾患部位又はその近傍で、例えば、輸液又は注射などの直接送達によって投与され得ることもまた、想定される。ＭＥＤＩ６０１２又はｒｈＬＣＡＴが、例えば心臓カテーテル又はステントによる標的作用部位へのデポーの埋め込みによって、投与され得ることもまた、想定される。ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の投与又は送達の代替的様式としては、舌の下側での舌下送達（例えば、舌下錠）、吸入（例えば、吸入器又はエアゾールスプレー）、鼻腔内送達、又は経皮送達（例えば、皮膚上のパッチの手段による）が挙げられてもよい。ＭＥＤＩ６０１２又はｒｈＬＣＡＴはまた、例えば、小球体、マイクロカプセル、リポソーム（非荷電又は荷電（例えば、カチオン性））、高分子微粒子（例えば、ポリアミド、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ（ラクチドグリコリド））、マイクロエマルションなどの適切な形態で提供される場合には、経口投与されてもよい。さらに、投与は、浸透圧ポンプ（例えば、アルゼットポンプ）又はミニポンプ（例えば、アルゼットミニ浸透圧ポンプ）によって行われてもよく、これによって、予め定められた期間にわたり、ＭＥＤＩ６０１２又はｒｈＬＣＡＴ、又はそれらの医薬組成物の制御された連続的及び／又は徐放性送達が可能になる。浸透圧ポンプ又はミニポンプは、標的部位又はその近傍に皮下移植され得る。
【０１３７】
本開示は、別段の指示がない限り、分子生物学（任意の組換え技術を含む）、微生物学、細胞生物学、生化学、及び免疫学の従来技術を包含し、これらは十分に当業者の技量の範囲内である。このような技術は、“Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ”，ｓｅｃｏｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｓａｍｂｒｏｏｋ，１９８９）；“Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”（Ｇａｉｔ，１９８４）；“Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ”（Ｆｒｅｓｈｎｅｙ，１９８７）；“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ”“Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ”（Ｗｅｉｒ，１９９６）；“Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  Ｖｅｃｔｏｒｓ  ｆｏｒ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｃｅｌｌｓ”（Ｍｉｌｌｅｒ  ａｎｄ  Ｃａｌｏｓ，１９８７）；“Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ”（Ａｕｓｕｂｅｌ，１９８７）；“ＰＣＲ：Ｔｈｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ”，（Ｍｕｌｌｉｓ，１９９４）；“Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ”（Ｃｏｌｉｇａｎ，１９９１）などの文献で詳細に説明される。これらの技術は、本明細書に記載されるようなＬＣＡＴポリヌクレオチド及びポリペプチドの製造に適用可能であり、したがってこのような技術は、本発明の製造及び実施において考慮されてもよい。
【０１３８】
以下の実施例は、本発明の治療方法をどのように作成して使用するかという、完全な開示及び説明を当業者に提供するために提示され、本発明者らが自らの発明と見なすものの範囲を限定することは意図されない。
【実施例】
【０１３９】
実施例１−安定型冠動脈疾患（ＣＡＤ）を有する対象におけるＭＥＤＩ６０１２の単回漸増用量（ＳＡＤ）試験
試験デザイン概要
安定型冠動脈疾患（ＣＡＤ）を有する成人対象において、第ＩＩａ相無作為化二重盲検（対象／治験責任医師盲検；スポンサー非盲検）プラセボ対照用量漸増試験を実施して、単回静脈内（ＩＶ／ＩＶ輸液）及び皮下（ＳＣ）用量のＭＥＤＩ６０１２の安全性、ＰＫ／ＰＤ、及び免疫原性を評価した。試験では、米国の１０の試験施設で合計４８人の対象が登録され、ＭＥＤＩ６０１２の静脈内投与を介した２４ｍｇ、８０ｍｇ、２４０ｍｇ、及び８００ｍｇ（コホート１〜４）の４つの用量レベル（コホート）；図１でコホート６及び７として示される、ＳＣ注射を介して投与されるＭＥＤＩ６０１２の８０ｍｇ及び６００ｍｇの２つの用量レベル（コホート）を評価した。各コホートで、８人の対象を６：２の比率で無作為化し、ＭＥＤＩ６０１２又はプラセボを投与した。ＩＶ用量コホートの場合、本試験では、治験薬としてのＭＥＤＩ６０１２を１時間のＩＶ輸液として投与した。ＳＣ投与の場合、シリンジ当たり最大１ｍＬの容積を含有する単回使用シリンジを使用して、治験薬としてのＭＥＤＩ６０１２を投与した。対象は、最大２８日間のスクリーニング期間を経た（併用薬物療法の休薬期間が必要な場合、このような対象には、最大４２日間のスクリーニング期間が許された）。対象は、無作為化及び用量投与の前夜（１日目）に試験センターに入所し、治験薬用量の７日後（８日目）まで試験センターに滞在した。対象は、治験薬の用量を与られた２８日後（２９日目の受診）まで追跡された。対象には、試験期間中、食生活及び運動をはじめとする健康的な生活習慣の維持が奨励された。
【０１４０】
統計解析
サンプルサイズ：ＳＡＤ試験の標的対象集団は、安定型ＣＡＤの既往の記録がある４０〜７５歳の成人男女であった。合計４８人の対象を試験した。各コホートは６：２の割合で無作為化された８人の対象を含み、ＭＥＤＩ６０１２又はプラセボが投与された。この単回漸増用量試験のサンプルサイズは、十分な安全性、忍容性、及びＰＫ／ＰＤデータを提供し、試験目的を達成するように経験的に決定された。８人の対象にＩＶ投与を介してプラセボを投与し、４人の対象にはＳＣ投与を介してプラセボを投与した。共通標準偏差を２８０、両側αを０．０５と仮定すると、現行のサンプルサイズは、ベースライン補正済みＨＤＬ−Ｃ  ＡＵＣ０−９６ｈについて、同一投与経路のプラセボと比較した、ＭＥＤＩ６０１２を投与された対象の各群の間で、１３００ｍｇ・時間／ｄＬの差を検知する９９％を超える検出力を提供した。
【０１４１】
主な関心のあるＰＤパラメータは、０〜９６時間（ＡＵＣ０−９６ｈ）の濃度曲線下面積（ＡＵＣ）のベースライン補正済みＨＤＬ−Ｃ面積であった。ＡＵＣは、台形ルールを用いて計算した。プラセボ群を組み合わせた治療群間の統計的比較は、ベースラインＨＤＬ−Ｃ及び治療群を補正することによって、共分散分析（ＡＮＣＯＶＡ）を用いて実施した。ＨＤＬ−Ｃ、ＴＣ、ＦＣ、ＣＥ、ＨＤＬ−ＣＥ、ＨＤＬ−ＵＣ、非ＨＤＬ−Ｃ、非ＨＤＬ−ＣＥ、非ＨＤＬ−ＵＣ、ＬＤＬ−Ｃ（標準的な臨床検査による直接測定）のＡＵＣ０−１６８ｈ並びにＡＵＣ０−９６ｈをはじめとするその他のエンドポイント、及びこれらのそれぞれのａｐｏＢを一次ＰＤエンドポイントについて同様に解析した。
【０１４２】
上記の脂質、リポタンパク質、アポリポタンパク質、並びにＶＬＤＬ−Ｃ、ＴＧ、プレβ１−ＨＤＬ、ａｐｏＡＩ、ａｐｏＡＩＩ、ａｐｏＣＩＩＩ、及びａｐｏＥのそれぞれについて、ベースラインと、プラセボ群と組み合わせた治療群とを補正することによって、ＡＮＣＯＶＡを用いて、各時点でのベースラインからの変化及びパーセント変化を解析し比較した。これらのそれぞれの最大応答及び最大応答時間について、記述統計値を治療群毎に提供した。ＡＤＡ発生率及び力価を各治療群毎に作表した。ＡＤＡが陽性であることが確認されたサンプルは、中和抗体（ｎＡｂ）力価を検査して解析し、同様に要約した。ＭＥＤＩ６０１２で治療された対象について、非コンパートメント解析を実施した。ＭＥＤＩ６０１２の質量及び活性の濃度時間プロファイルを用量コホート毎に要約した。報告されたＰＫパラメータには、Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、ＡＵＣ、ＳＣ生物学的利用能、及び終末半減期（ｔ１／２）が含まれた。
【０１４３】
一次及び二次試験目的
試験の一次安全性目的は、安定型ＣＡＤを有する対象における、単回漸増用量後のＭＥＤＩ６０１２の安全性を評価することであった。一次薬力学的（ＰＤ）目的は、ＭＥＤＩ６０１２の投与後における、ＨＤＬ−Ｃの用量反応を測定することであった。一次ＰＤ目的のエンドポイントは、ＨＤＬ−Ｃの用量後の０〜９６時間における、ベースライン補正済み曲線下面積（ＡＵＣ０−９６ｈ）を伴った。二次目的は、ＭＥＤＩ６０１２投与後におけるその他の主要なＰＤバイオマーカーの用量反応の測定；ＩＶ及びＳＣ投与されたＭＥＤＩ６０１２のＰＫプロファイルの確立；ＭＥＤＩ６０１２とプレβ１−ＨＤＬ基質との関係性の判定；及びＭＥＤＩ６０１２の免疫原性の可能性の評価を伴った。二次目的のエンドポイントは、その他の主要な脂質、リポタンパク質、及びアポリポタンパク質：総コレステロール（ＴＣ）、遊離コレステロール（ＦＣ）、コレステリルエステル（ＣＥ）、高密度リポタンパク質コレステリルエステル（ＨＤＬ−ＣＥ）、高密度リポタンパク質非エステル化コレステロール（ＨＤＬ−ＵＣ）、非ＨＤＬ−Ｃ、非ＨＤＬ−ＣＥ、非ＨＤＬ−ＵＣ、ＬＤＬ−Ｃ（直接測定）、超低密度リポタンパク質コレステロール（ＶＬＤＬ−Ｃ）、トリグリセリド（ＴＧ）、アポリポタンパク質（ａｐｏｐｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ）Ｂ（ａｐｏＢ）、アポリポタンパク質Ａ１（ａｐｏＡ１）、アポリポタンパク質ＡＩＩ（ａｐｏＡＩＩ）、アポリポタンパク質ＣＩＩＩ（ａｐｏＣＩＩＩ）、及びアポリポタンパク質Ｅ（ａｐｏＥ）の血清濃度の評価；ＭＥＤＩ６０１２質量の血清濃度の測定；プレβ１−ＨＤＬ粒子の評価；ＡＤＡ及びｎＡｂの力価を伴った。
【０１４４】
探索目的には、リポタンパク質のサイズ及び粒子数の調査；代替方法論を用いたＬＤＬ−Ｃレベルの検証；治療対象からのコレステロール流出をサポートする血漿の能力に対する、ＭＥＤＩ６０１２の効果の評価が含まれた。探索的目的エンドポイントには、ＭＥＤＩ６０１２活性の血清濃度の測定；ＨＤＬ、ＬＤＬ、及びＶＬＤＬの粒度並びに粒子数；超遠心分離（β−ｑｕａｎｔ）及びＦｒｉｅｄｅｗａｌｄ方程式によるＬＤＬ−Ｃの測定；及び例えば，Ｓｈａｍｂｕｒｅｋ，Ｒ．Ｄ．ｅｔ  ａｌ．，２０１６，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１１８：７３−８２；ｄｏｉ：１０．１１６１／ＣＩＲＣＲＥＳＡＨＡ．１１５．３０６２２３，２０１５に記載されるような、既知のプロトコルを用いた、ＨＤＬのＬＣＡＴエステル化活性アッセイによる全体的コレステロール流出の判定が含まれた。
【０１４５】
研究対象集団
研究対象集団は、臨床的に安定している既往のＣＡＤの記録がある成人によって構成された。この集団は、今後の臨床開発の標的集団である動脈硬化が確立しているが、臨床的に安定しており（安全性リスクがより低い）、バイオマーカーレベルの変動が少なく、堅牢なＰＫ／ＰＤ決定を可能にする患者を対象に、ＭＥＤＩ６０１２の安全性、ＰＫ、及びＰＤの評価を可能にするための最適なバランスをとっている。不安定型ＣＡＤ並びに不安定型又は進行性アンギナを有する対象は除外された。この試験では、健常対象集団は選択されなかった。この試験における安定型ＣＡＤ患者の使用は、健常対象集団よりもＡＣＳ集団と一致する可能性が高い脂質プロファイルを有する患者における、脂質プロファイルデータの取得を可能にした。さらに、先行研究又はＭＥＤＩ６０１２前臨床試験では、安定型ＣＡＤ患者へのＭＥＤＩ６０１２の単回用量投与を評価する際の安全上の懸念を示唆する安全シグナルはなかった。
【０１４６】
遺伝的に低いＬＤＬ受容体濃度（したがって高い又は非常に高いベースラインＬＤＬ）を有する対象の登録を避けるために、関心のある脂質／リポタンパク質の変化がそれに対して評価されるより均一な集団を提供するために、対象は、スクリーニング時に、１５０ｍｇ／ｄＬ以下のＬＤＬ−Ｃレベルで、標準治療（ＳｏＣ）としての安定したスタチンレジメンを服用していることが要求された。同様に、用量選択を容易にするＨＤＬ−Ｃレベルの上向きの移動について、試験対象間で一貫性を提供するために、ベースラインＨＤＬ−Ｃ値が高い対象（男性では６０ｍｇ／ｄＬを超え、女性では６５ｍｇ／ｄＬを超える）は除外された。
【０１４７】
一次エンドポイント、重要なＰＤエンドポイント、ＰＫエンドポイント、及び免疫原性エンドポイントの理論的根拠
一次ＰＤエンドポイントは、ベースライン補正済みＡＵＣ０−９６ｈとして解析された、ＨＤＬ−Ｃであった。ＨＤＬはｒｈＬＣＡＴの基質であることから、ＭＥＤＩ６０１２の有効性はＨＤＬ−Ｃレベルの変化と相関することが予期された。これは、ＭＥＤＩ６０１２輸液後にＨＤＬ−Ｃにおける堅牢で一過性の増加を示した、ＭＥＤＩ６０１２カニクイザル毒性学試験（無傷の内因性ｒｈＬＣＡＴ及び高レベルのＨＤＬ−Ｃを有する正常な動物）によって裏付けられる。ＨＤＬ−Ｃは、ＣＥよりも一貫性があり／変動が少ないアッセイエンドポイントであり；したがって試験ではＣＥがＰＤの二次エンドポイントとして選択された。
【０１４８】
ＭＥＤＩ６０１２投与の結果としてのこれらのマーカーの移動が、ＲＣＴシステム上の活性増大を裏付ける証拠を提供したことから、リポタンパク質及び脂質パネル成分が選択された。ＴＣは、全ての血漿リポタンパク質上の非エステル化及びエステル化コレステロールの合計を表す。ＨＤＬ−Ｃは、ＨＤＬ粒子に存在するコレステロールの量を表し、それはＨＤＬ−ＵＣ画分とＨＤＬ−ＣＥ画分にさらに分類され得る。ＭＥＤＩ６０１２はその酵素活性を通じて、一次ＰＤバイオマーカーであるＨＤＬ−Ｃの増加をもたらすことが予期された。ＴＣ、ＣＥ、及びＬＤＬ−Ｃレベルは、ＲＣＴにおけるｒｈＬＣＡＴの効果をさらに評価するマーカーであり、したがって二次ＰＤエンドポイントとして同定された。
【０１４９】
ＬＣＡＴの血清濃度（質量）を使用して、ＭＥＤＩ６０１２曝露を特性決定し毒性学的曝露に関連させた。ＰＫはまた、将来の臨床治験のための用量選択の情報を与えるのに役立つ、用量−曝露−ＰＤ応答関係を開発するためにも使用され得る。血漿ＬＣＡＴ活性は、安定型ＣＡＤ集団におけるＭＥＤＩ６０１２のＰＫとＰＤの関係を確立する上で、ＬＣＡＴ質量の代替手段を提供した。
【０１５０】
ＭＥＤＩ６０１２に対するＡＤＡの形成は、ＭＥＤＩ６０１２及び／又は内因性ＬＣＡＴの安全性、ＰＫ、及び／又はＰＤに影響を与える可能性があった。この化合物のＡＤＡの可能性を評価し、あらゆるｎＡｂの形成もまた特性決定した。
【０１５１】
探索的ＰＤエンドポイントの理論的根拠
リポタンパク質の粒度及び粒子数：プレβ１−ＨＤＬ（ＲＣＴに伴う第１のＨＤＬ粒子）は、ＡＢＣＡ１のａｐｏＡＩへの結合を通じて、末梢細胞でコレステロールを受容する、脂質の乏しい小さな円盤状粒子である。その結果生じる複合体は、次に追加的なコレステロールの取り込みによって、より大きな粒子であるプレβ２−ＨＤＬに変換される。コレステロールは、ＬＣＡＴの作用を介してエステル化され、ＬＣＡＴは、粒子をより大きな球形α３−ＨＤＬ粒子に変換し、次にそれはさらにα２−ＨＤＬに変換され、次にそれがより多くのコレステロールを取得するにつれてα１−ＨＤＬに変換される。エステル化反応は、コレステロールのＨＤＬへの移動を駆動する濃度勾配の維持を助けると考えられており、したがってＨＤＬがより多くのコレステロールを受け入れる能力を高める（Ｆｉｅｌｄｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ，１９９５ａ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，３６（２）：２１１−２８）。成熟ＨＤＬのＣＥは、肝臓（マイナー経路）による直接の選択的取り込み、又はＣＥＴＰの作用を介したａｐｏＢ含有リポタンパク質への移行のどちらかによって除去され；次にａｐｏＢ含有リポタンパク質は、肝臓の低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬｒ）経路（主要経路）を通じて除去される。ａｐｏＢ含有リポタンパク質のＣＥへの移行と、より大きくよりコレステロールに富むＬＤＬ粒子の最終的な成熟は、ＬＤＬｒを通じた取り込みを促進することが予期された。これが粒子数の増加なしに発生することが、重要である。細胞からのＦＣの流出、ＬＣＡＴによるＦＣのエステル化、及び肝臓によるＣＥの取り込みは、集合的にＲＣＴの重要な最初のステップである（Ｆｉｅｌｄｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ，１９９５ｂ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３４（４４）：１４２８８−９２；Ｍｉｌｌｅｒ，１９９０，Ｂａｉｌｌｉｅｒｅｓ  Ｃｌｉｎ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ．，４（４）：８０７−３２；Ｔａｌｌ  ｅｔ  ａｌ，２００８，Ｃｅｌｌ  Ｍｅｔａｂ．，７（５）：３６５−７５）。プロトコルで指定されたエンドポイントを選択してＨＤＬ成熟に対するＭＥＤＩ６０１２の生体内活性に関する情報を提供し、その作用機序への洞察を提供した。
【０１５２】
超遠心法によるＬＤＬ−Ｃの検証：Ｔｕｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２０１５．ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｍｅｄｐａｃｅ．ｃｏｍ／ＰＤＦ／Ｐｏｓｔｅｒｓ／ＰｏｓｔｅｒＤ１＿ＭＲＬ−２０１５ｐｄｆ）は、計算されたＬＤＬ−Ｃ（Ｆｒｉｅｄｅｗａｌｄ方程式による）、直接／均一（ｈｏｍｏｇｅｎｏｕｓ）ＬＤＬ−Ｃアッセイ（標準的な臨床検査による直接測定）、及び「判断基準」分離用超遠心（β−ｑｕａｎｔ）アッセイを比較した。ＬＤＬ−Ｃを計算するための式及び「直接」ＬＤＬ−Ｃ測定は、真のＬＤＬ−Ｃが７０ｍｇ／ｄＬ未満の場合に有意且つ臨床的に重要な差を示し、トリグリセリドの中程度の増加でさえ測定に大きな影響を有した。したがって、「判断基準」超遠心法（探索的）をこの治験に含めて、ＬＤＬ−Ｃ直接（二次測定）と計算されたＬＤＬ−Ｃ（探索的）の比較を提供し、ＬＣＡＴ機序及び患者集団に最適なＬＤＬ−Ｃ測定値の選択を容易にした。
【０１５３】
コレステロール流出及びＬＣＡＴエステル化アッセイ：これらは、上方制御されたＲＣＴ及びＨＤＬの機能性（ＨＤＬ−Ｃ及び粒度の変化を超える）の新規バイオマーカーであり、末梢組織からのコレステロール流出を上方制御するＭＥＤＩ６０１２の能力を測定する。
【０１５４】
材料と方法
治験薬／医薬品：本明細書に記載される試験及び方法で投与された治験薬／医薬品であるＭＥＤＩ６０１２は、ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ，ＬＬＣ社によって製造され、１０ｍＭリン酸ナトリウム、３００ｍＭスクロース、０．０６重量％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８、ｐＨ７．２を含有する緩衝液中の凍結乾燥粉末（滅菌注射用水による再構成時に１００ｍｇ／ｍＬ）として提供された。ＭＥＤＩ６０１２は、無菌の白色から灰白色の凍結乾燥粉末として提供された（５０ｍｇ／バイアル、公称）。０．６ｍＬの滅菌注射用水（ｓＷＦＩ）で再構成すると、ＭＥＤＩ６０１２は無色から黄色の溶液になる。
【０１５５】
試験に使用されたプラセボは、ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ，ＬＬＣ社によって製造され、１０ｍＭリン酸ナトリウム、３００ｍＭスクロース、０．０６％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８、ｐＨ７．２を含有する１０ｍＬの溶液として提供された。プラセボは、無色からわずかに黄色の無菌溶液として提供した。
【０１５６】
治験薬に加えて、ＩＶ輸液システムへのＭＥＤＩ６０１２製品の吸着を防止するために、輸液バッグ保護剤（ＩＶＢＰ）溶液を提供した。ＩＶＢＰは、２〜８℃（３６〜４６°Ｆ）で保存した。ＩＶＢＰは、１０ｍＭリン酸ナトリウム、３００ｍＭスクロース、及び０．０６％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８、ｐＨ７．２を含有する１０ｍＬの溶液として使用するために、提供された。ＩＶＢＰは、無色からわずかに黄色、透明からわずかに乳白色の液体として、１０Ｒバイアル内に提供された。凍結乾燥ＭＥＤＩ６０１２は、ＩＶＢＰ溶液では再構成されなかった。
【０１５７】
ＩＶ投与：各ＩＶ用量は、０．９％の生理食塩水ＩＶバッグ内の再構成されたＭＥＤＩ６０１２とＩＶＢＰ、又はプラセボとＩＶＢＰとの混合物として、対象に送達した。ＩＶＢＰは、ＩＶ用量のみで使用した。全てのＩＶコホートで、ＭＥＤＩ６０１２薬物又はプラセボ用量の添加前に、ＩＶＢＰを使用してＩＶバッグを事前調整した。各用量で、凍結乾燥ＭＥＤＩ６０１２医薬品バイアル、液状プラセボバイアル、液状ＩＶＢＰバイアルを検査し、活性医薬品用量又はプラセボ用量を調製する前に、０．９％（重量／体積、ｗ／ｖ）の生理食塩水をＩＶバッグに添加した。活性医薬品治療群では、ＭＥＤＩ６０１２の１用量当たりの必要バイアル数のみを再構成した。
【０１５８】
ＩＶＢＰと共に使用した場合、ＭＥＤＩ６０１２とプラスチック（ジ−２−エチルヘキシルフタレート（ＤＥＨＰ）非含有ポリオレフィンバッグ及びポリプロピレンシリンジ）との間に不適合性は観察されなかった。ポリエチレン／ポリ塩化ビニル（ＰＥ／ＰＶＣ）及びＰＶＣ  ＤＥＨＰ非含有ＩＶ延長ラインは、許容された。ラインは、０．２２又は０．２μｍのインラインフィルターを含んだ。インラインフィルターは典型的には、ポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）からできていた。セルロースベースのフィルターを含むラインは試験されていなかったため、ＭＥＤＩ６０１２と共に使用しなかった。
【０１５９】
ＭＥＤＩ６０１２製品、プラセボ、及びＩＶＢＰは、保存料を含有せず；そのため、あらゆる未使用部分は廃棄した。第１の治験薬バイアルを針で穿刺してから静脈内投与を開始するまでの使用中の合計保存時間は、室温で４時間、又は２℃〜８℃（３６°Ｆ〜４６°Ｆ）で２４時間を超えてはならない。保管時間がこれらの制限を超えた場合、新規用量を新規治験薬バイアル及びＩＶＢＰバイアルから調製した。調製された用量を２℃〜８℃（３６°Ｆ〜４６°Ｆ）で保管した場合、バイアルを室温に平衡化させ、ＩＶ投与前に検査して、投与するＭＥＤＩ６０１２の溶液が透明であることを確認した。
【０１６０】
ＳＣ投与：各ＳＣ用量は、再構成されたＭＥＤＩ６０１２又はプラセボとして送達した。ＭＥＤＩ６０１２と、ＳＣ投与に使用したポリカーボネート／ポリプロピレンシリンジとの間に、不適合性は観察されなかった。ＭＥＤＩ６０１２薬物及びプラセボは保存料を含有しなかったため、あらゆる未使用部分は廃棄した。第１の治験薬バイアルの針穿刺からＳＣ投与開始までの使用中の合計保管時間は、室温で４時間を超えなかった。貯蔵時間がこれらの制限を超えた場合、新規ＳＣ用量を新規バイアルから調製した。
【０１６１】
ＩＶ投与用ＭＥＤＩ６０１２又はプラセボの調製及び投与：２４ｍｇ〜１６００ｍｇの用量の混合物は、ＩＶＢＰを含有する、５０ｍＬのポリオレフィン０．９％生理食塩水ＩＶバッグ内で、一段階希釈を用いて調製した。試験では１６００ｍｇの用量が試験のために提案されていたものの、低用量のｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２を使用して有効性が判定されたため、この用量は対象で試験しなかった。調製された用量を０．２２又は０．２μｍのＰＥＳフィルター付きＰＶＣ（ＤＥＨＰ非含有）ＩＶ投与セットを使用して送達した。ＩＶ輸液によるＩＶ投与では、フィルターを含めたＩＶバッグの投与構成要素を取り付けて、投与ラインを輸液の直前にプライミングした。ＭＥＤＩ６０１２の用量は、約６０分間（±５分間）かけてＩＶ輸液として投与した。ＩＶバッグの完全輸液後、最大３０ｍＬの０．９％生理食塩水（又は延長セットの停滞容積の相当量）をＩＶバッグに添加して、ＩＶ投与セットのフラッシュを実施し、ＭＥＤＩ６０１２の用量の完全な送達を確認した。
【０１６２】
ＳＣ注射用ＭＥＤＩ６０１２又はプラセボの調製及び投与：ＭＥＤＩ６０１２の各皮下（ＳＣ）用量は、注射によって、シリンジによって送達された。ＭＥＤＩ６０１２薬物又はプラセボは、適切なサイズのシリンジ（ポリカーボネート／ポリプロピレン）又は滅菌ガラスバイアル（例えば、１０ｍＬ）内にプールされ、送達容積に基づいて投与され得た。用量は、２７Ｇの０．５インチ注射針を使用して送達した。さらに、ＩＶＢＰはＳＣ用量の調整に使用されなかった。
【０１６３】
治療及び用量投与モニタリング
試験では、ＭＥＤＩ６０１２投与の日を１日目と見なした。用量の当日、対象による最低６時間の一晩の絶食後、対象の起床後に可能な限りすぐに、ＭＥＤＩ６０１２治験薬を投与した。ＩＶ輸液では、ＭＥＤＩ６０１２製品をおよそ６０分間（±５分間）かけて投与した。ＳＣ注射では、２７Ｇの０．５インチ針を使用して、ＭＥＤＩ６０１２製品を下腹部に投与した。医薬品の用量を投与するために複数の注射が要求される場合は、別々の注射部位を使用した。個々の注射は、腹部に少なくとも３ｃｍ間隔で投与した。ＳＣ投与を介してインスリン又はその他の薬物療法もまた受けている対象では、これらの薬物療法の注射は、ＭＥＤＩ６０１２医薬品投与とは異なる場所で行った。腹部の皮膚表面をアルコールで拭いて準備し、風乾させた。
【０１６４】
皮膚をつまんで、ＳＣ組織を筋肉から分離した。針は、ＳＣ組織のほぼ半分まで９０度の角度で挿入した。ＭＥＤＩ６０１２治験薬は、穏やかな圧力を用いてＳＣ組織内に緩慢に注入した（１ｍＬシリンジ当たり少なくとも５秒間の持続時間が推奨された）。注射後、部位はマッサージしなかった。
【０１６５】
用量投与の前後に、生命徴候、ＥＣＧ評価、及び遠隔測定（ＩＶ投与用）を実施した。任意の外因性タンパク質と同様に、用量投与に対するアレルギー反応が起こりうる。そのため、急性アナフィラキシー反応を治療するための適切な薬剤と医療機器が即座に利用できるようにし、試験担当者は、アナフィラキシーを認識して治療するための訓練を受けた。
【０１６６】
試験期間中、対象は、処方されたスタチン療法を通常の処方用量で、及びＣＡＤなどの疾病のために処方された、例えば、血圧又は心臓薬物療法などのあらゆるその他の薬物療法を服用し続けた。
【０１６７】
治療群を割り当てる方法：対話型音声／ウェブ応答システム（ＩＸＲＳ）を使用して、対象を治療群に無作為化し、盲検化された治験薬キット番号を割り当てた。治験責任医師が、対象が適格性基準を満たしたことをＩＸＲＳに通知し、ＩＸＲＳが、盲検化された治験薬キット番号の割り当てを対象に提供したときに、対象は試験に無作為化されたと見なされた。
【０１６８】
各コホートで、８人の対象を６：２の比率で無作為化し、ＭＥＤＩ６０１２又はプラセボを投与した。各コホートに対して、センチネル投与アプローチを計画した。センチネル投与では、２人の対象を１：１の比率で無作為化し、ＭＥＤＩ６０１２又はプラセボを最初に投与した。コホートの残りの対象が投与される前に、２４時間以上の時間差が発生した。
【０１６９】
治験薬は、無作為化後２４時間以内に投与した。治験薬の投与に遅延があり、規定の時間枠内に投与されなかった場合は、即座に医療モニターに通知された。
【０１７０】
許可された併用薬物療法：試験に登録され、動脈硬化性ＣＶＤが確立していた対象は、現行の治療ガイドライン（例えば、ＡＨＡ／ＡＣＣＦ  Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｒｉｓｋ  Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｃｏｒｏｎａｒｙ  ａｎｄ  Ｏｔｈｅｒ  Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ，２０１１、及びＡＣＣ／ＡＨＡ  Ｂｌｏｏｄ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ，２０１３）に沿って管理され、一連の心臓保護薬物療法を受けていることが予期された対象には、スクリーニングから試験終了時まで、現行のレジメンを遵守することが要求された。治験担当医師は、以下に記載されるような「除外された」薬物療法を除いて、適切な支持療法を提供するために必要であると考えられる、併用薬物療法又は治療を処方した。具体的には、対象は、スタチン及び血圧薬物療法の通常の処方用量を服用し続け、輸血及び血液製剤；及び抗生物質、制吐剤、下痢止め、鎮痛剤による治療；及び適切と見なされる場合には施設のガイドラインに従ったその他のケアをはじめとする、完全な支持療法を試験期間中に受けた。
【０１７１】
脂質の管理に影響を及ぼすこともある、店頭薬、ハーブサプリメント、ビタミン剤などの併用薬物療法（スタチンを除く）は、最後の治験受診まで、スクリーニングから禁止された。対象は、最初に治験責任医師に相談することなく、店頭薬をはじめとするいかなる薬物療法も服用しないように指示された。脂質に対する影響のために、全身性アレルギー反応、試験ガイドラインで定義されるようなアナフィラキシー、又はその他の重篤な病状の治療に必要な場合を除き、全身性コルチコステロイドもまた、スクリーニング前の２８日以内及び試験期間中に禁止された。吸入、鼻腔内、局所、点眼、及び関節内コルチコステロイドは許可された。全身性コルチコステロイドの使用には、医療モニターと協議し許可を得ることが要求された。
【０１７２】
統計的評価
一般的な考察事項：データは、コホート、治療群、及び対象番号でソートされたリストで提供した。表形式の要約は、適切な場合、プラセボ群を組み合わせて治療群毎に（及びＩＶ経路とＳＣ経路を個別に）提示した。カテゴリーデータは、各カテゴリーの対象の数及び百分率によって要約した。連続変数は、平均、標準偏差、中央値、最小値、及び最大値をはじめとする、記述統計値によって要約した。ベースライン値は、治験薬の初回投与前の最後の有効な評価として定義した。
【０１７３】
解析集団の定義：Ａｓ−ｔｒｅａｔｅｄには、任意の治験薬（ＭＥＤＩ６０１２）を投与された全ての対象が含まれた。対象は、実際に受けた治療に従って解析された。ＰＫ集団には、少なくとも１つの検出可能なＬＣＡＴ血清濃度測定値を有した、Ａｓ−ｔｒｅａｔｅｄ集団の全ての対象が含まれた。
【０１７４】
サンプルサイズ及び検出力計算：試験は、合計４８人の対象を登録するようにデザインされた。各コホートは６：２の割合で無作為化された８人の対象を含み、ＭＥＤＩ６０１２又はプラセボが投与された。（図１）。この単回漸増用量試験のサンプルサイズは経験的に決定され、適切な安全性、忍容性、及びＰＫ／ＰＤデータを提供して試験目的を達成する一方で、できるだけ少数の対象を治験薬及び試験手順に曝すようにデザインされた。
【０１７５】
試験では、８人の対象にＩＶ投与を介してプラセボを投与し、４人の対象にＳＣ投与を介してプラセボを投与した。共通標準偏差を２８０、両側αを０．０５と仮定すると、現行のサンプルサイズは、ベースライン補正済みＨＤＬ−ＣＡＵＣ０−９６ｈについて、同一投与経路のプラセボと比較した、各ＭＥＤＩ６０１２群の間で、１３００ｍｇ・時間／ｄＬの差を検知する９９％を超える検出力を提供した。
【０１７６】
試験結果
ＳＡＤ試験は、一次ＰＤエンドポイントを満たし、予期された用量よりも低い用量でＨＤＬ−Ｃの用量依存的な増加を達成した。２４〜８００ｍｇの量で単回ＩＶ用量のＭＥＤＩ６０１２を対象に投与すると、高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）、高密度リポタンパク質コレステリルエステル（ＨＤＬ−ＣＥ）、及びＣＥの用量依存的な増加を実証し、ＬＣＡＴ酵素の作用機序と一致した。以下の表１に示されるように、ＨＤＬ−Ｃのベースライン補正済みＡＵＣ（０〜９６時間）に関して、統計的に有意な増加が、ＭＥＤＩ６０１２が２４ｍｇの用量で投与された群を除くＩＶ治療群全て（すなわち、８０ｍｇ、２４０ｍｇ、及び８００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２）で観察された。ＨＤＬ−ＣのＡＵＣ（０〜９６時間）増加は、用量依存的であると判定された。
【０１７７】
【表１】
2021501793.tif 000006
【０１７８】
以下の表２に示されるように、ＨＤＬ−Ｃのベースライン補正済みＡＵＣ（０〜１６８時間）に関して、統計的に有意な増加が、ＭＥＤＩ６０１２が２４ｍｇの用量で投与された群を除くＩＶ治療群全て（すなわち、８０ｍｇ、２４０ｍｇ、及び８００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２）で観察された。ＨＤＬ−ＣのＡＵＣ（０〜１６８時間）増加は、用量依存的であるようであった。
【０１７９】
【表２】
2021501793.tif 000007
【０１８０】
皮下（ＳＣ）ＭＥＤＩ６０１２治療集団では、６００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２をＳＣ投与によって与えられた対象の治療群で、ＨＤＬ−Ｃのベースライン補正済みＡＵＣ（０〜９６ｈ）に関して、統計的に有意な増加が観察された。これは、下の表３に示される：
【０１８１】
【表３】
2021501793.tif 000008
【０１８２】
さらに、以下の表４に示されるように、６００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２をＳＣ投与によって与えられた対象の治療群で、ＨＤＬのベースライン補正済みＡＵＣ（０〜１６８ｈ）に関して、統計的に有意な増加が観察された：
【０１８３】
【表４】
2021501793.tif 000009
【０１８４】
試験対象へのＭＥＤＩ６０１２の静脈内投与は、対象の血清中のＬＤＬ−Ｃレベルの用量依存的増加（図２Ａ及び２Ｂ）をもたらしたが、全てのＩＶ用量、すなわち２４、８０、２４０、８００ｍｇのレベルにわたり、ａｐｏＢの統計学的に有意な減少（図３Ａ及び３Ｂ）もまたもたらした。ＡｐｏＢは、男女の双方において、ＣＨＤのリスクの予測因子として、ＬＤＬ−Ｃよりも優れていることが報告されており、例えば、ａｐｏＢなどのアテローム発生粒子の数は、これらの粒子で輸送されるコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）の量よりも、リスクのさらに重要な指標の役割を果たし得る。（Ｖａｖｅｒｋｏｖａ，Ｈ．，２０１１，Ｃｌｉｎ  Ｌｉｐｉｄｏｌｏｇｙ，６（１）：３５−４８；Ｓｎｉｄｅｒｍａｎ，ＡＤ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｌａｎｃｅｔ，３６１：７７７−７８０で概説される）。全ての潜在的なアテローム発生リポタンパク質粒子は、ａｐｏＢの１つの分子のみと様々な量のコレステロールを含有することから、ａｐｏＢは、ＬＤＬ−Ｃよりも優れたアテローム発生リポタンパク質粒子数のマーカーとして機能する。したがって、本明細書に記載されるようなＭＥＤＩ６０１２の様々な用量及び用量レジメンの投与後のａｐｏＢの有意な減少の所見は、ＬＤＬ−Ｃの増加が観察されたにもかかわらず、ＭＥＤＩ６０１２が心血管疾患を有する対象の有益で保護的な治療に有意な利点を提供することを実証する。
【０１８５】
８０ｍｇ及び６００ｍｇの用量でＭＥＤＩ６０１２の皮下（ＳＣ）投与を受けた対象では、経時的なＨＤＬ−Ｃの血清濃度（図４Ａ）及び経時的なＨＤＬ−Ｃの血清濃度のベースラインからの変化（図４Ｂ）に基づいて、プラセボと比較して、双法の用量でＨＤＬ−Ｃの用量依存的増加が経時的に観察された。図５Ａ及び５Ｂに示されるように、ＳＣ投与によるＭＥＤＩ６０１２の全用量、すなわち８０ｍｇ及び６００ｍｇの投与にわたって、ＬＤＬ−Ｃレベルに有意な変化は観察されなかった。ＭＥＤＩ６０１２のＩＶ投与で見られた結果と同様に、プラセボと比較して、ＭＥＤＩ６０１２の双方のＳＣ用量について、ａｐｏＢの減少が経時的に観察された。（図６Ａ及び６Ｂ）。ＭＥＤＩ６０１２の投与は、ＭＥＤＩ６０１２をＳＣ投与によって与えられた６００ｍｇ用量群（図７Ａ及び７Ｂ）で、並びに経時的に対象に投与されたＭＥＤＩ６０１２の全てのＩＶ用量（２４ｍｇ、８０ｍｇ、２４０ｍｇ、及び８００ｍｇ）（図７Ｃ及び７Ｄ）で、経時的なａｐｏＡ１の血清濃度に統計学的に有意な増加をもたらした。
【０１８６】
２４ｍｇ、８０ｍｇ、２４０ｍｇ、８００ｍｇの用量でＭＥＤＩ６０１２を静脈内（ＩＶ）投与された対象では、経時的なＨＤＬ−Ｃの血清濃度（図４Ｃ）、及び経時的なＨＤＬ−Ｃの血清濃度のベースラインからの変化（図４Ｄ）に基づいて、プラセボと比較して、特に、各用量のおよそ８〜１２日の期間中に、経時的なＨＤＬ−Ｃの用量依存的増加が観察された。ＨＤＬ−Ｃの増加は、ＭＥＤＩ６０１２の指示された用量のＩＶ投与後、最初の２〜５日に、さらには８日後でさえ、特に顕著であった。
【０１８７】
さらなる結果は、方法が、アテローム発生作用物質であり、それらの小さいサイズのために血管壁に浸潤して血管を損傷し得る、小ＬＤＬ粒子（ＬＤＬ−Ｐ）で観察された減少に基づいて、抗動脈硬化発生効果をもたらすことを示した。特に、方法の結果は、８０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量では小ＬＤＬ−Ｐの減少が約４０〜４１％であり、２４０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量では小ＬＤＬ−Ｐの減少が約８０％であり、８００ｍｇの用量では追加的な増加がないことを実証した。これは、図１７に提示される結果によって示される。したがって、８０ｍｇ〜２４０ｍｇの量のＭＥＤＩ６０１２の用量は、有害なＬＤＬ−Ｐレベルの実質的な減少をもたらし、したがって記載される方法によってもたらされる、追加的な治療的並びに心臓及び心血管系の保護的な利益を提供する。
【０１８８】
要約すれば、ＳＡＤ試験は、スタチン療法が背景にある冠動脈心疾患（ＣＨＤ）患者におけるＭＥＤＩ６０１２（ＬＣＡＴ酵素）の単回輸液が、ＨＤＬコレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）、ＨＤＬコレステリルエステル（ＨＤＬ−ＣＥ）、及び総ＣＥの用量依存的増加を引き起こしたことを実証し；これはＬＣＡＴの作用機序と一致する。さらに、ＭＥＤＩ６０１２の単回投与は、アポリポタンパク質Ａ１（ＡｐｏＡ１）の用量依存的増加を引き起こし、８０ｍｇ〜２４０ｍｇの用量でピークに達した。
【０１８９】
実施例２−ＭＥＤＩ６０１２（ｒｈＬＣＡＴ）の反復用量による安定型動脈硬化性心血管疾患（ＣＶＤ）を有する対象の治療を伴う臨床治験
全体的な治験デザイン
第ＩＩａ相無作為化盲検プラセボ対照試験をデザインし、安定型動脈硬化性心血管疾患を有する対象へのＭＥＤＩ６０１２の毎週の反復投与を伴う複数（複数の漸増用量（ＭＡＤ））の安全性、薬物動態、及び薬物動力学を評価した。この用量漸増試験は、安定型動脈硬化性ＣＶＤを有する成人対象におけるＭＥＤＩ６０１２の反復用量の安全性、ＰＫ／ＰＤ、及び免疫原性を評価するために実行された。少なくとも３２人の対象を米国内のおよそ１０の試験施設にわたり無作為化して、（４０、１２０、３００ｍｇ）（コホート１〜３）；及び３００ｍｇの負荷（１回目）用量、それに続く４８時間後の１５０ｍｇの維持（２回目）用量、及び約１週間後（７日後）の１００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の維持（３回目）用量を含む、静注投与レジメン（コホート４、実施例３に記載されるとおり、後述）の４つのＭＥＤＩ６０１２の用量レベルを評価した。ＭＥＤＩ６０１２治験薬は、コホート１〜３の対象に、静脈内（ＩＶ）輸液を介して毎週投与した。コホート１〜３の試験対象におけるＭＥＤＩ６０１２投与の効果の評価は、本明細書に記載されるように、進行中の試験が進むにつれて行った。ＭＡＤ試験のコホート４は、後述の実施例３に記載される。
【０１９０】
各コホートで、８人の対象を６：２の比率で無作為化し、ＭＥＤＩ６０１２又はプラセボを投与した。コホート１〜３の対象では、ＭＥＤＩ６０１２治験薬を１時間のＩＶ輸液として静脈内投与し、患者データの特定の中間解析を行った。
【０１９１】
進行中のＭＡＤ試験では、コホート１〜３の対象は、最大２８日間のスクリーニング期間を受けた。異脂肪血症薬物療法又はサプリメントの休薬期間を要する対象では、５６日間のスクリーニング期間が許された。対象は、無作為化及び１回目の用量投与の前夜（−１日目）及び３回目の用量投与の前に試験センターに入所し、必要に応じて、試験センターに２４〜３６時間留まった。２回目の用量では、対象は投与後少なくとも８時間にわたり、入院患者として観察された。コホート４では、外来患者としての扱いが、４日目まで提供されてもよい。対象は、治験薬の最後の用量（コホート１〜３では７１日目の受診、コホート４では６６日目の受診）から５６日目まで、外来患者として追跡した。対象には、試験期間中、食生活及び運動をはじめとする健康的な生活習慣の維持が奨励された。
【０１９２】
標的対象の集団、治験薬、投与量、及び投与方法
この試験の標的対象集団には、安定型動脈硬化性ＣＶＤの既往の記録がある、６０〜８０歳の成人男性又は女性が含まれた。
【０１９３】
コホート１〜３におけるＭＥＤＩ６０１２治験薬の投与量及び投与様式は次のとおり：
コホート１：４０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２（ｎ＝６）又はプラセボ（ｎ＝２）を１、８、及び１５日目に静脈内；
コホート２：１２０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２（ｎ＝６）又はプラセボ（ｎ＝２）を１、８、及び１５日目に静脈内；及び
コホート３：３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２（ｎ＝６）又はプラセボ（ｎ＝２）を１、８、及び１５日目に静脈内。
【０１９４】
サンプルサイズ：上述されるように、進行中の試験に登録された少なくとも３２人の対象がコホート中にあり、それぞれ８人の対象が６：２の割合でＭＥＤＩ６０１２又はプラセボを与えられるように無作為化された。この複数回漸増用量試験のサンプルサイズは、試験目的を達成するために十分な安全性、忍容性、及びＰＫ／ＰＤデータを提供するように経験的に決定された。
【０１９５】
統計解析：安全性解析は、Ａｓ−ｔｒｅａｔｅｄ集団に基づいた。有害事象（ＡＥ）及び重篤有害事象の収集は、対象がインフォームド・コンセント文書に署名した後に開始して、治験受診の終了まで継続した。ＴＥＡＥ及びＴＥＳＡＥは、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｆｏｒ  Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ（ＭｅｄＤＲＡ）の最新バージョン（ＭｅｄＤＲＡ）によってコード化し、タイプの発生率、重症度、及び治験薬との関係を要約した。特定のＡＥは、百分率を算出するために、各対象毎に１回ずつカウントした。さらに、特定の対象内で同一ＡＥが複数回発生した場合は、最も高い重症度で最も高い関係性が認められたものを報告した。全てのＴＥＡＥとＴＥＳＡＥは全体的に要約し、ＭｅｄＤＲＡシステムの臓器クラスと優先使用語によって分類した。
【０１９６】
主な関心のあるＰＤパラメータは、ＨＤＬ−Ｃ、ＨＤＬ−ＣＥ、及びＣＥの第３の用量後０〜９６時間における、ベースライン補正済みＡＵＣ（ＡＵＣ０−９６ｈｒ用量３）である。ＡＵＣは、台形ルールを用いて計算した。プラセボ群を組み合わせた治療群間の統計的比較は、ベースラインＨＤＬ−Ｃ、ＨＤＬ−ＣＥ、及びＣＥ、並びに治療群を補正することによって、共分散分析（ＡＮＣＯＶＡ）を用いて実施した。ＡＵＣ０−９６ｈｒ用量１、ＡＵＣ０−１６８ｈｒ用量１、ＡＵＣ０−１６８ｈｒ用量３（１日目の時間０から用量３の１６８時間後までのＡＵＣ）、ＡＵＣ１−２２ｄ、ＨＤＬ−Ｃ、ＴＣ、ＦＣ、ＣＥ、ＨＤＬ−ＣＥ、ＨＤＬ−ＵＣ、非ＨＤＬ−Ｃ、非ＨＤＬ−ＣＥ、非ＨＤＬ−ＵＣ、ＬＤＬＣ（標準的な臨床検査による直接測定による）、ａｐｏＡ１、及びａｐｏＢをはじめとする、その他のエンドポイントは、一次ＰＤエンドポイントと同様に解析した。
【０１９７】
上記の脂質、リポタンパク質、アポリポタンパク質、並びにＶＬＤＬ−Ｃ、ＴＧ、プレβ１−ＨＤＬ、ａｐｏＡ１、ａｐｏＡＩＩ、ａｐｏＣＩＩＩ、及びａｐｏＥのそれぞれについて、ベースラインと、プラセボ群と組み合わせた治療群とを補正することによって、ＡＮＣＯＶＡを用いて、各時点でのベースラインからの変化及びパーセント変化を解析し比較した。ＡＮＣＯＶＡについては、データが正規分布していない場合、ランク変換したデータを用いて解析を実施した。
【０１９８】
最大バイオマーカー応答（Ｒｍａｘ）と最大バイオマーカー応答到達時間（［Ｒ］Ｔｍａｘ）についても、それぞれ治療群毎に記述統計値を提供した。
【０１９９】
評価された各治療群毎に、ＡＤＡ発症率及び力価を表にした。ＡＤＡが陽性であることが確認されたサンプルを検査し、ｎＡｂについて解析し、同様に要約した。
【０２００】
ＭＥＤＩ６０１２で治療された対象について、非コンパートメント解析を実施した。血清ＭＥＤＩ６０１２の質量及び活性の濃度時間プロファイルを用量コホート毎に要約した。報告すべきＰＫパラメータには、薬物の最大血漿濃度（Ｃｍａｘ）、最大濃度の時間（Ｔｍａｘ）、ＡＵＣ、蓄積率、及び終末半減期（ｔ１／２）が含まれた。ＰＫパラメータの記述統計値を提供した。
【０２０１】
適切な場合は、追加的なＰＫ解析を実施した。データが許す場合は集団ＰＫ解析を実施したが、臨床試験報告書（ＣＳＲ）では報告しなかった。
【０２０２】
一次解析：安全性、免疫原性、ＰＫ、ＰＤデータの一次解析は、最後に予定されていた受診（コホート１〜３の場合は７１日目）に先だって、最後の対象が終了又は脱落した後に実施し、ＣＳＲに報告した。
【０２０３】
試験の一次目的、二次目的、及び探索的目的
ＭＡＤ試験の一次安全性目的は、安定型動脈硬化性ＣＶＤを有する対象における、コホート１〜３では７１日目まで、コホート４では６６日目までの反復投与後に、ＭＥＤＩ６０１２の安全性を評価することであった（実施例３）。一次ＰＤ目的は、ＭＥＤＩ６０１２を繰り返し投与することで、そのレベルが試験中に評価された、ＰＤ  ＨＤＬ−Ｃ、ＨＤＬ−ＣＥ、及びＣＥの持続可能で可逆的な用量依存的応答が得られることを確立することであった。
【０２０４】
試験の二次目的は、反復用量投与後のＭＥＤＩ６０１２のＰＫプロファイルを確立すること；反復用量投与後の一連のＰＤバイオマーカーに対するＭＥＤＩ６０１２の効果を評価すること；及びＭＥＤＩ６０１２の免疫原性の可能性を評価することであった。この試験の探索的目的は、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ；及び低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）と超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ））のバイオマーカーのサイズ、組成、及び機能を探索することであった。
【０２０５】
試験エンドポイント
コホート１〜３に対する７１日目までの、治療中に発生した有害事象（ＴＥＡ）と治療中に発生した重篤有害事象（ＴＥＳＡＥ）の発生率、並びに１２誘導心電図、生命徴候、及び臨床検査室評価における重要な変化によって測定される、ＭＥＤＩ６０１２の安全性及び忍容性：
【０２０６】
一次ＰＤエンドポイント：ＨＤＬ−Ｃ、ＨＤＬ−ＣＥ、及びＣＥの第３の用量後０〜９６時間における、ベースライン補正済み濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ０−９６ｈｒ）。
【０２０７】
二次エンドポイント：ＭＥＤＩ６０１２質量及び活性のＰＫ。その他の重要な脂質及びリポタンパク質の血清濃度：ＣＥ、ＨＤＬ−ＣＥ、ＨＤＬ非エステル化コレステロール、（ＨＤＬ−ＵＣ）、非ＨＤＬ−Ｃ、非ＨＤＬ−ＣＥ、非ＨＤＬ−ＵＣ、低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）、総コレステロール（ＴＣ）、アポリポタンパク質Ｂ（ａｐｏＢ）、トリグリセリド（ＴＧ）、超低密度リポタンパク質コレステロール（ＶＬＤＬ−Ｃ）、遊離コレステロール（ＦＣ）、及びａｐｏＡ１、ａｐｏＡＩＩ、ａｐｏＣＩＩＩ、アポリポタンパク質Ｅ（ａｐｏＥ）、プレβ１−ＨＤＬ；及びＨＤＬ−Ｃの減少を伴う、抗薬物抗体（ＡＤＡ）とｎＡｂの発生。
【０２０８】
探索的エンドポイント：リポタンパク質の粒度、数、機能の測定、及び脂質代謝の変化の影響を評価するその他のアッセイ。
【０２０９】
試験デザイン用量理論的根拠
特定の理論による拘束は望まないが、ＭＥＤＩ６０１２の臨床開発の前提は、動脈硬化性ＣＶＤを有する患者におけるＭＥＤＩ６０１２（ｒｈＬＣＡＴ）の投与が、冠動脈、脳血管、及び末梢動脈中の動脈硬化性プラークからのコレステロールをはじめとする、組織からのコレステロールの動員を上方制御し、それらの安定化、及び再発性の主要有害ＣＶイベントのリスクの低下をもたらすことである。さらに、ＨＤＬ機能の予期された改善は、炎症の調節及び内皮機能の改善をもたらしてもよく、その影響は、主要有害ＣＶイベントの減少にもまた寄与してもよい。
【０２１０】
実施例１に示されるように、２４、８０、２４０、又は８００ｍｇのＩＶ及び８０又は６００ｍｇのＳＣの量で対象に投与されたＭＥＤＩ６０１２の単回投与は、許容他可能な安全性プロファイルと、ＨＤＬ−Ｃ、ＨＤＬ−ＣＥ、及びＣＥの用量依存的増加とを示した。したがって、ＭＥＤＩ６０１２を複数回漸増用量デザインを用いるＭＡＤ試験で評価して、臨床ＰＫ及びＰＤ、並びに反復用量設定におけるその安全性及び免疫原性を特性決定した。一次ＰＤエンドポイントが、標的対象集団における評価のために統計的に駆動され、第ＩＩａ相単回漸増用量試験（実施例１）のデータに基づくことから、プロトコルは第ＩＩａ相試験として識別される。
【０２１１】
第ＩＩａ相の複数回用量漸増試験は、安定型動脈硬化性ＣＶＤ集団におけるＭＥＤＩ６０１２の反復投与のＰＫ／ＰＤ、安全性、及び免疫原性データを提供するようにデザインした。この試験に参加した対象は、少なくとも１つの血管床（冠動脈、頸動脈、又は末梢動脈）内に動脈硬化症が確立していた。コホート１〜３では、対象に３回のＩＶ用量を毎週投与した。コホート４では、後述の実施例３に記載されるように、対象に、静注を介して１日目に負荷用量、及び３日目及び１０日目に維持用量を投与した。対象は、３回用量薬物レジメン及び試験期間に基づいて、脂質／リポタンパク質パラメータの一過性の変化を見てもよいことが予期される。本明細書に記載されるような反復投与レジメンを用いた、ＭＥＤＩ６０１２のより長期間の投与について、持続する治療法の利益が想定される。対象リスクは、不安定な又は高リスクの対象の登録を回避するための厳格な適格性基準、並びに有害事象（ＡＥ）、検査室パラメータ、生命徴候、及び心電図（ＥＣＧ）の綿密なモニターを通じて、最小化した。さらに、試験の過程で、ＰＫ、ＰＤ、及び免疫原性を継続的に評価した。
【０２１２】
試験の一次仮説は、ＭＥＤＩ６０１２の反復投与が、安定型動脈硬化性心血管疾患（ＣＶＤ）を有する対象において、許容可能な安全性プロファイルを示すこと；並びにＭＥＤＩ６０１２の反復投与が、高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）、コレステリルエステル（ＣＥ）、及び高密度リポタンパク質−コレステリルエステル（ＨＤＬ−ＣＥ）に、毎週又はより低頻度の薬剤の投与を可能にする、持続的で可逆的な用量依存的応答をもたらすことである。この試験の二次仮説は、（ｉ）ＭＥＤＩ６０１２の反復投与が、毎週又はより高頻度の薬剤の投与を可能にする、薬物動態（ＰＫ）プロファイル（レシチン−コレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ）質量及びＬＣＡＴ活性）をもたらすこと；（ｉｉ）ＭＥＤＩ６０１２の初期負荷用量と、それに続く４８時間後及び１週間後の用量からなるレジメンは、負荷用量なしと比較して、ＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１の急速な上昇、並びに７以上の薬力学的（ＰＤ）効果の維持をもたらすこと；（ｉｉｉ）ＭＥＤＩ６０１２の反復投与が、安定型動脈硬化性ＣＶＤを有する対象における、その他の重要な薬力学（ＰＤ）バイオマーカーの用量依存的応答をもたらすこと；及び（ｉｖ）ＭＥＤＩ６０１２の反復投与が、内因性ＬＣＡＴと交差反応してＨＤＬ−Ｃの減少をもたらす中和抗薬物抗体（ｎＡｂ）の発生をもたらさないことである。
【０２１３】
試験の一次目的、二次目的、及び探索目的及びエンドポイント。
試験の一次安全性目的は、安定型動脈硬化性ＣＶＤを有する対象における、コホート１〜３に対する７１日目までの、反復投与後のＭＥＤＩ６０１２の安全性の評価を伴う。一次ＰＤ目的は、ＭＥＤＩ６０１２の反復投与が、ＨＤＬ−Ｃ、ＨＤＬ−ＣＥ、及びＣＥに持続可能で可逆的な用量依存的応答をもたらすことを確立することである。
【０２１４】
一次安全性エンドポイントは、コホート１〜３に対する７１日目までの、ＴＥＡＥとＴＥＳＡＥの発生率、及び１２誘導ＥＣＧ、生命徴候、及び臨床検査室評価における臨床的に重要な変化によって測定される、ＭＥＤＩ６０１２の安全性及び忍容性を考慮に入れる。一次ＰＤエンドポイントは、ＨＤＬ−Ｃ、ＨＤＬ−ＣＥ、及びＣＥの第３の用量後の０〜９６時間における、ベースライン補正済み濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ０−９６ｈｒ）である。
【０２１５】
一次エンドポイントの理論的根拠：評価された対象におけるＭＥＤＩ６０１２の第３の用量後のベースライン補正済みＡＵＣ０−９６ｈｒとして、ＨＤＬ−Ｃ、ＨＤＬ−ＣＥ、及びＣＥの一次ＰＤエンドポイントを解析した。ｒｈＬＣＡＴは、ＨＤＬ中の遊離コレステロールをエステル化するであることから、ＭＥＤＩ６０１２の有効性は、ＨＤＬ−Ｃ、ＨＤＬ−ＣＥ、及びＣＥレベルの変化と相関することが予期される。この関係は、先行研究、及びＭＥＤＩ６０１２を投与された安定型ＣＡＤ対象のＳＡＤ試験（実施例１）に基づいても成り立った。これはまた、ＭＥＤＩ６０１２輸液後にＨＤＬ−Ｃにおける堅牢で一過性の増加を示した、ＭＥＤＩ６０１２カニクイザル毒性学試験（無傷の内因性ｒｈＬＣＡＴ及び高レベルのＨＤＬ−Ｃを有する正常な動物）によっても裏付けられる。
【０２１６】
二次目的は、反復用量投与後のＭＥＤＩ６０１２のＰＫプロファイルを確立すること；初期負荷用量と、それに続く４８時間後及び１週間後の用量のＭＥＤＩ６０１２のＰＤ効果を確立すること（コホート４のみ、実施例３）；毎週用量の反復投与後の一連のＰＤバイオマーカーに対するＭＥＤＩ６０１２の効果を評価すること；及びＭＥＤＩ６０１２の免疫原性の可能性を評価することである。
【０２１７】
二次エンドポイントは、ＭＥＤＩ６０１２質量及び活性のＰＫ；その他の重要な脂質及びリポタンパク質の血清濃度：ＣＥ、ＨＤＬ−ＣＥ、ＨＤＬ−ＵＣ、非ＨＤＬ−Ｃ、非ＨＤＬ−ＣＥ、非ＨＤＬ−ＵＣ、ＬＤＬ−Ｃ、ＴＣ、アポリポタンパク質Ｂ（ａｐｏＢ）、トリグリセリド（ＴＧ）、超低密度リポタンパク質コレステロール（ＶＬＤＬ−Ｃ）、ＦＣ、及びａｐｏＡ１、ａｐｏＡＩＩ、ａｐｏＣＩＩＩ、アポリポタンパク質Ｅ（ａｐｏＥ）、プレβ１高密度リポタンパク質（プレβ１−ＨＤＬ；及びＨＤＬ−Ｃの減少を伴う、ＡＤＡ及びｎＡｂの発生の評価を伴う。
【０２１８】
ＰＤ及びＰＫエンドポイントの理論的根拠：リポタンパク質及び脂質パネル成分を選択したのは、ＭＥＤＩ６０１２投与の結果としてのこれらのマーカーの移動が、単回漸増用量試験におけるコレステロール逆輸送（ＲＣＴ）系の活性増加を裏付ける証拠を提供したためである。総コレステロール（ＴＣ）は、全ての血漿リポタンパク質上の非エステル化及びエステル化コレステロールの合計を表す。ＨＤＬ−Ｃは、ＨＤＬ粒子に存在するコレステロールの量を表し、それはＨＤＬ−ＵＣ画分とＨＤＬ−ＣＥ画分にさらに分類され得る。ＭＥＤＩ６０１２はその酵素活性を通じて、一次ＰＤバイオマーカーであるＨＤＬ−Ｃの増加をもたらすことが予期される。ＴＣ及びＬＤＬ−Ｃは、ＲＣＴにおけるｒｈＬＣＡＴの効果をさらに評価することから、ＰＤの二次エンドポイントとして特定された。
【０２１９】
ＭＥＤＩ６０１２（質量）の血清濃度を使用して、ＭＥＤＩ６０１２曝露を特性決定した。ＰＫはまた、将来の臨床試験のための用量選択の情報を与えるのに役立つ、用量−曝露−ＰＤ応答関係を開発するためにも使用された。血清ＬＣＡＴ活動は、ＰＫとＰＤの関係性を確立する上で、ＬＣＡＴ質量の代替尺度を提供する。
【０２２０】
試験の探索的目的は、ＭＥＤＩ６０１２投与後に、ＨＤＬ（及び低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）及び超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ））のバイオマーカーのサイズ、組成、及び機能を探索することである。探索的エンドポイントは、リポタンパク質の粒、数、機能の測定、及び脂質代謝における変化の影響を評価するその他のアッセイを伴う。探索的ＰＤエンドポイントの理論的根拠（リポタンパク質の粒度及び粒子数）は、実施例１に記載されるＳＡＤ試験と同じであった。
【０２２１】
治療レジメン
ＭＡＤ試験のコホート１〜３では、３２人の対象が登録され、以下の表５に提示されるように、ＩＶ輸液を介したＭＥＤＩ６０１２の３つの用量レベル（４０、１２０、及び３００ｍｇ）と反復用量投与を評価した。ＰＤ及びＰＫは、試験治療群が利用可能になったときに解析した。
【０２２２】
【表５】
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【０２２３】
治験薬（ＭＥＤＩ６０１２）及び治療投与
ＭＡＤ試験のためのＭＥＤＩ６０１２治験薬、プラセボ、及びＩＶＢＰ溶液は、実施例１のＳＡＤ試験について記載されるとおりである。
【０２２４】
ＭＡＤ試験におけるコホート１〜３への輸液によるＭＥＤＩ６０１２の投与は、実施例１に記載されるＳＡＤ試験で使用されたものと同じプロトコルに従った。
【０２２５】
治療投与の場合、ＭＥＤＩ６０１２投与の初日を１日目と見なす。各投与日に、最低６時間の一晩の絶食後、起床後に可能な限りすぐに治験薬を対象に投与する。コホート１〜３では、ＭＥＤＩ６０１２治験薬をおよそ６０分間（±５分間）の時間をかけて、ＩＶ輸液を介して対象に投与する。試験中、対象は、スタチン療法などの処方されたその他の薬物療法を通常の処方量で、及び動脈硬化性ＣＶＤのために処方されたその他の薬物療法を服用し続ける。
【０２２６】
ＭＡＤ試験コホート１〜３の試験デザイン及び用量の理論的根拠
ＭＡＤ試験のコホート１〜３の用量は、ＭＥＤＩ６０１２の単回漸増用量試験のコホート１〜コホート３ＰＫ／ＰＤデータを統合した予備ＰＫ／ＰＤ解析（実施例１）に基づいて選択した。ＭＥＤＩ６０１２では、単回漸増用量（コホート１〜コホート３、２４〜２４０ｍｇのＩＶ）の投与後に、ＨＤＬ−Ｃ、ＨＤＬ−ＣＥ、及びＣＥをはじめとするＬＣＡＴ活性のバイオマーカーの用量依存的増加が観察された。
【０２２７】
統計的評価、解析集団（Ａｓ−ｔｒｅａｔａｔｅｄ集団）の定義とサンプルサイズ、及び検出力計算は、全て前出の実施例１のＳＡＤ試験について記載されるとおりである。
【０２２８】
試験結果
進行中のＭＡＤ試験のコホート１〜３の結果の解析は、これらの反復投与レジメン、すなわち、１、８、及び１５日目に、ＩＶ輸液によって対象に投与される４０ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２（コホート１）；１、８、及び１５日目に、ＩＶ輸液によって対象に投与される１２０ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２（コホート２）；及び１、８、及び１５日目に、ＩＶ輸液によって対象に投与される３００ｍｇの用量のＭＥＤＩ６０１２（コホート３）における試験対象へのＭＥＤＩ６０１２の投与が、ＬＣＡＴ酵素の作用機序と一致するＨＤＬ−Ｃ、ＨＤＬ−ＣＥ、ａｐｏＡ１、及びＣＥの用量依存的増加をもたらしたことを示した（図８Ａ〜８Ｄ）。
【０２２９】
ＬＤＬレベルの増加は、１２０ｍｇの第１の投与後に、及び４０ｍｇと１２０ｍｇの双方の第３の投与後に、観察された（図９Ａ及び９Ｂ）；しかし、ａｐｏＢの増加は見られなかった（図１０Ａ及び１０Ｂ）。ａｐｏＢが男女の双方でＬＤＬ−Ｃよりも優れたＣＨＤのリスク予測因子であり、これらの粒子に輸送されるコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）の量よりも、ａｐｏＢなどのアテローム発生粒子の数がさらに重要なリスク指標であることが、いくつかの報告で示されている。（Ｖａｖｅｒｋｏｖａ，Ｈ．，２０１１，Ｃｌｉｎ  Ｌｉｐｉｄｏｌｏｇｙ，６（１）：３５−４８；Ｓｎｉｄｅｒｍａｎ，ＡＤ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｌａｎｃｅｔ，３６１：７７７−７８０で概説される）。全ての潜在的なアテローム発生リポタンパク質粒子は、ａｐｏＢの１つの分子のみと、様々な量のコレステロールとを含有することから、ａｐｏＢは、ＬＤＬ−Ｃよりも優れたアテローム発生リポタンパク質粒子数のマーカーとして機能する。したがって、本明細書で実証されるように、ＬＣＡＴ（ＭＥＤＩ６０１２）を投与された対象における極微量又は皆無のａｐｏＢの増加は、ＬＤＬ−Ｃの増加が観察されたにもかかわらず、非常に有益で保護的な治療を反映する。
【０２３０】
図１１Ａ及び１１Ｂは、総コレステロール（ＴＣ）及び遊離コレステロール（ＦＣ）の血清濃度が、最高用量のＭＥＤＩ６０１２（３００ｍｇ）でのみプラセボと比較して上昇したことを示す。
【０２３１】
実施例３
ＭＡＤ試験のコホート４の用量選択基準
実施例１に記載されるようなＭＥＤＩ６０１２の単回漸増用量試験からのＰＤ観察、及び前述の実施例２に記載されるようなＭＡＤ試験で解析されたコホート（コホート１〜３）からのＰＤ観察は、ＨＤＬ−Ｃ及びａｐｏＡ１の増加速度が用量依存的であることを実証した。ＡＣＳ及び急性ＭＩなどの心疾患及び／又は心血管疾患を有する対象における追加的な試験では、第１及び第２のＭＥＤＩ６０１２の用量後にＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１の増加率を最大化させることは、（本明細書に記載されるＭＥＤＩ６０１２投与及びコホートにおける投与後にも見られるように）強化されたコレステロール逆輸送の抗動脈硬化作用と、ＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１の心臓保護効果とを組み合わることで、ＣＨＤ患者に複数の利益をもたらすことが予期されるという理論的根拠の基礎の役割を果たした（Ｇｏｒｄｔｓ  ｅｔ  ａｌ，２０１３，Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．，２０（１１）：１０５３−６１；Ｋａｌａｋｅｃｈ  ｅｔ  ａｌ，２０１４，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，９（９）：ｅ１０７９５０；Ｍａｒｃｈｅｓｉ  ｅｔ  ａｌ，２００４，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，３１１（３）：１０２３−３１；Ｒｉｃｈａｒｔ  ｅｔ  ａｌ，２０１５，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，１３２（Ｓｕｐｐｌ  ３）：Ａ１７００１−Ａ；及びＴｈｅｉｌｍｅｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ，２００６，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，１１４（１３）：１４０３−９の報告によっても裏付けられる）。したがって、静注による負荷用量のＭＥＤＩ６０１２のＩＶ投与と、それに続く４８時間後の用量、次に毎週の維持用量のＭＥＤＩ６０１２を検査するためのＭＡＤ臨床試験プロトコルに追加するために、コホート４をデザインした。
【０２３２】
コホート４試験の一次目的及びエンドポイント目的は、実施例２のコホート１〜３について記載されたものである。コホート４試験の二次目的は、初期負荷用量と、それに続く４８時間後及び１週間後の用量のＭＥＤＩ６０１２のＰＤ効果を確立することを伴う。
【０２３３】
コホート４が関与する試験では、これまでにＳＡＤ試験から得られた結果を考慮して（実施例１）、実施例２に記載されるようなコホート１〜３の対象から得られた結果を考慮して、本明細書に記載されるような、コホート４の投与レジメンに続くＰＤ／ＰＫ及び転帰を評価するために実施された解析的モデル化及びシミュレーション解析、及びデータを考慮して、心疾患及び／又は心血管疾患を効果的に治療することが予期される。
【０２３４】
治療対象における脂質及びタンパク質バイオマーカーに対する、静脈内投与されたｒｈＬＣＡＴ（ＭＥＤＩ６０１２）の用量の効果を予測するためのモデル化及びシミュレーション
コホート４の試験対象におけるＭＥＤＩ６０１２のＩＶ投与の有効用量と投与レジメンを決定するために、本明細書で実施されたモデル化及びシミュレーション解析ではＰＫ／ＰＤモデル構造を採用した。コホート４の用量選択を裏付けるモデル化及びシミュレーションのために、ＳＡＤ及びＭＡＤ試験（コホート１〜３）のＭＥＤＩ６０１２データを使用して、ＰＫ／ＰＤモデル構造を適用した。
【０２３５】
ＰＫ／ＰＤモデルは、ＰＫ／ＰＤデータを伴うコレステロール逆輸送（ＲＣＴ）プロセスのために開発された数理モデルと、ＡＣＰ５０１  ｒｈＬＣＡＴを伴う第ＩＩａ相試験の用量を選択するための公開データとに基づいた（Ｂｏｓｃｈ，Ｒ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｏｓｔｅｒ  ｅｎｔｉｔｌｅｄ”Ａ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ−ｂａｓｅｄ  ｍｏｄｅｌ  ｉｓ  ａｂｌｅ  ｔｏ  ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ  ｅｘｐｌａｉｎ  ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｒｈＬＣＡＴ  ａｎｄ  ＨＤＬ  ｍｉｍｅｔｉｃｓ  ｏｎ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  ｏｆ  ｒｅｖｅｒｓｅ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ，”ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ  ａｔ  ｔｈｅ  ２０１５  Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  Ａｐｐｒｏａｃｈ  Ｇｒｏｕｐ  ｉｎ  Ｅｕｒｏｐｅ（ＰＡＧＥ）Ｍｅｅｔｉｎｇ，Ｈｅｒｓｏｎｉｓｓｏｓ，Ｃｒｅｔｅ，Ｇｒｅｅｃｅ）。ヒトにおけるＲＣＴのバイオマーカーに対するｒｈＬＣＡＴ及びＨＤＬ模倣薬（ＨＤＬｍ）のＩＶ投与の効果を記述するために、ＡＣＰ５０１数理モデルを開発した。モデルは、異なる作用機序を有する２つの化合物からの文献及び試験データを統合することによって、ＨＤＬ粒子内の脂質バイオマーカーの時間依存的動力学を記述した。ＲＣＴに対するＨＤＬ模倣薬及びｒｈＬＣＡＴ製剤の効果をモデルに統合し、これは、プレβ−ＨＤＬからαＨＤＬへのＨＤＬ粒子の立体構造変化と、コレステロールの流出に対する立体構造変化の効果との双方を記述した。
【０２３６】
モデル化方法
モデル化では、ＭＥＤＩ６０１２、ＨＤＬ−Ｃ、ＣＥ、及びａｐｏＡ−Ｉデータが、臨床試験及び公開された研究から入手できた。Ｒ．Ｂｏｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．のモデル化と同様に、以下のように仮定された：
総ＨＤＬ−Ｃ＝ＨＤＬ−ＦＣ＋ＨＤＬ−ＣＥ及び総ＣＥ＝ＨＤＬ−ＣＥ＋ａｐｏＢ−ＣＥ
ＡＣＰ５０１及びＨＤＬの模倣薬と非常に類似したＰＫモデルを開発し、推定されたＰＫパラメータを統合モデルで修正した。ＬＣＡＴ酵素の活性と機能に関連する重要な経路と反応を同定し、システム固有のパラメータ値を取得するために、文献調査を実施した。ＰＤモデルをＭＥＤＩ６０１２のために開発し、モデルを更新して、ＬＣＡＴ活性に対するａｐｏＡ１の効果を記述した。最後に、モデルをＭＥＤＩ６０１２及びａｐｏＡ１のＩＶ投与後のＰＤデータに同時に適合させた。モデルは、ＨＤＬ模倣薬の２つの独立した臨床試験を用いて評価し、外的に規格認定された。
【０２３７】
上に記載されるＢｏｓｃｈ，Ｒ．ｅｔ  ａｌ．ｉｎ  ｔｈｅ  ２０１５  ＰＡＧＥ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ｐｏｓｔｅｒによって報告され、図２１Ａ〜２１Ｃに示されるように、モデル化に関連していくつかの仮定がなされた。
【０２３８】
ａｐｏＡ１の入力（プレβ形態での）はその合成を反映しており、一定であることが想定された。除去後のＨＤＬ粒子の組織修復（ｒｅｍｏｄｅｌｌｉｎｇ）によるａｐｏＡ１リードのリサイクルは、考慮されなかった。モデルでは、高用量のｒｈＬＣＡＴ輸液中のＬＣＡＴ活性に伴う速度制限段階が考慮される。
【０２３９】
組織中の遊離コレステロールは、血漿中の遊離コレステロールと比較して豊富であると想定され、したがって組織中の遊離コレステロール濃度は一定値に固定される。
【０２４０】
遊離コレステロールの流出は、２つのプロセスで記述され得ると想定される。１つのプロセスは、ＨＤＬの成熟に依存し；もう１つのプロセスは、α−ＨＤＬ中のａｐｏＡ１の濃度、及び組織中の遊離コレステロールの（一定の）濃度と比較したＨＤＬ−ＦＣの濃度に依存する。
【０２４１】
ＨＤＬ−ＣＥ、ＨＤＬ−ＦＣ、及びａｐｏＢ−ＣＥの除去率は文献値に固定される。（例えば、Ｏｕｇｕｅｒｒａｍ  Ｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ａ  ｎｅｗ  ｌａｂｅｌｉｎｇ  ａｐｐｒｏａｃｈ  ｕｓｉｎｇ  ｓｔａｂｌｅ  ｉｓｏｔｏｐｅｓ  ｔｏ  ｓｔｕｄｙ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｐｌａｓｍａ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｉｎ  ｈｕｍａｎｓ，Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，５１：５−１１）。
【０２４２】
ＨＤＬ−Ｃ（ＨＤＬ−ＣＥ及びＨＤＬ−ＦＣ）の除去は、ベースラインからの総ａｐｏＡ１の増加に伴って増加すると想定される。
【０２４３】
ＨＤＬからａｐｏＢ（ＬＤＬ／ＶＬＤＬ）へのＣＥの輸送は、ＨＤＬ−ＣＥ濃度に依存し、Ｅｍａｘモデルによって記述され得ると想定される。
【０２４４】
ＬＤＬ／ＶＬＤＬは個別に検討しなかったが、ａｐｏＢと併せて検討した。
【０２４５】
このモデル化結果は、ＨＤＬ模倣薬とｒｈＬＣＡＴによるＲＣＴの刺激は異なる作用機序に関連したものの、８コンパートメントの機構モデルは、観察された血漿ｒｈＬＣＡＴ濃度と、ＨＤＬ粒子内のコレステロールのエステル化及び非エステル化部分をはじめとする、関連性のあるバイオマーカーの経時変化との双方を適切に記述できたことを示した。ＶＰＣを用いた内部モデル及び外部モデルどちらの妥当性検証も、適切なモデル適合及び良好な予測性能を示した。ＨＤＬｃ  ＡＵＣは、末梢組織からのコレステロールの移動量と高い相関を示し、ＲＣＴに対する効果をｒｈＬＣＡＴとＨＤＬ模倣薬とで比較するのに役立たった。
【０２４６】
ＭＡＤ試験のコホート４に対する用量、予測転帰、及び結果
治療レジメン
ＭＡＤ試験におけるコホート４の治験薬（ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２）の投与量及び投与様式は、１日目に、３００ｍｇのｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２を対象に投与する（負荷用量）；４８時間（±８時間）目に、１５０ｍｇのｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２の第２の用量を対象に投与する（３日目の維持用量）；及び第２の用量の１週間後に、１００ｍｇの用量のｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２を対象に投与する（１０日目の維持用量）とおりであり、全て、以下の表６に提示されるように静注投与される。上述されるように、静注は、典型的には、例えば、限定されるものではないが、約１〜５分間の時間をかけて、又は約１〜３分間の時間をかけてなど、比較的短時間で手動で対象に送達される、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２（活性薬物又は薬物療法）の静脈内投与を指す。静注は、典型的には、シリンジを介して対象に投与される。静注は、シリンジを通じて、短い又は長いＩＶラインから、対象の静脈又は血管内に送達されてもよい。
【０２４７】
【表６】
2021501793.tif 000011
【０２４８】
ＭＥＤＩ６０１２治験薬は、コホート４で、フラッシュを含めて、およそ１〜３分間にわたる静注によって対象に投与される。より具体的には、ＭＡＤ試験における静注によるコホート４の対象へのＭＥＤＩ６０１２の投与又は送達では、各静注用量が、シリンジ及びＩＶ投与セットによって、再構成ＭＥＤＩ６０１２又はプラセボとして投与又は送達される。ＩＶＢＰは、コホート４の用量の調製には使用されない。ＭＥＤＩ６０１２と、シリンジ（ポリカーボネート／ポリプロピレン）とＩＶ投与ライン（ＰＥ／ＰＶＣ及びＰＶＣ  ＤＥＨＰ非含有）との間に、不適合性は観察されていない。ＩＶ投与、ラインは、０．２２又は０．２μｍのインラインＰＥＳフィルターを含有しなくてはならない。セルロースベースのフィルターを含有するラインは検査されていないため、ＭＥＤＩ６０１２では使用すべきでない。用量１（３００ｍｇ）は、３回の別々の注射として投与される。各注射は３０秒かけて投与され、各注射に１０ｍＬの生理食塩水フラッシュが続く。用量２（１５０ｍｇ）は、２回の別々の注射として投与される。各注射は３０秒かけて投与され、各注射に１０ｍＬの生理食塩水フラッシュが続く。用量３（１００ｍｇ）は、３０秒間かけて単回注射として投与され、１０ｍＬの生理食塩水フラッシュがそれに続く。ＭＥＤＩ６０１２及びプラセボは保存料を含有しないので、あらゆる未使用部分は廃棄しなくてはならない。第１の治験薬バイアルの針穿刺から静注投与開始までの使用中の合計保管時間は、室温で４時間を超えるべきでない。保管時間がこれらの制限を超える場合、新規用量を新規バイアルから調製しなくてはならない。
【０２４９】
上述のように、コホート４の負荷用量及び維持用量は、ＭＥＤＩ６０１２のＳＡＤ試験（実施例１）のＰＫ／ＰＤデータと、ＭＡＤ試験（実施例２）のＰＤデータとを統合した、ＰＫ／ＰＤ解析に基づいて選択した。推定ＰＫ／ＰＤパラメータに基づいて、ＲＣＴＰＫ／ＰＤモデルを使用したシミュレーションを実施し、ＭＥＤＩ６０１２が負荷用量及び維持用量で静注を介して投与された場合における、ＭＥＤＩ６０１２  ＰＫ及びＰＤ効果の範囲を特徴付ける、ＭＡＤ試験におけるコホート４の用量を選択した。１分間にわたるＩＶボーラスによって投与されるＭＥＤＩ６０１２（１６０、２００、２４０、２８０、及び３２０ｍｇ）の増加する負荷用量と、それに続く８０、１００、１２０、及び１６０ｍｇの毎週の維持用量によるＰＤ効果をシミュレートした。これらのシミュレーションから、より高用量のＭＥＤＩ６０１２を投与した場合、最初の９０分間でＨＤＬ−Ｃが５０％以上増加したことが認められた。
【０２５０】
上記のＲ．Ｂｏｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，のＰＫ／ＰＤモデル化及びシミュレーションに基づいて、ＭＥＤＩ６０１２及びコホート４投与のために実施されたＰＤ／ＰＫモデル化及びシミュレーションは、１日目の３００ｍｇの負荷用量；３日目の１５０ｍｇ維持用量；及び１０日目の１００ｍｇの維持用量を含んだ。それぞれ３日目及び１０日目の維持用量が負荷用量に続く投与レジメンは、ＨＤＬ−Ｃの上昇を１週間にわたり持続させる最適投与レジメンと考えられた。急性ＭＩ患者のほとんどが４８時間以上にわたり入院し、ＭＥＤＩ６０１２の半減期がおよそ４８時間であることから、３日目を選択した。４８時間用量の目的は、急性／亜急性ＭＩ設定におけるａｐｏＡ１の上昇を最初の１〜２週間にわたり延長することであった。このレジメンは、１週間を超えて、３０ｍｇ／ｄＬを超えるベースライン補正済みＨＤＬ−Ｃレベルをもたらした。患者における急性ＭＩ後の最初の週は、治療の心臓保護及び血管保護の側面に関して重要である。さらに、このレジメンは、ＭＥＤＩ６０１２の単回漸増用量試験で使用された、より高用量（最大８００ｍｇのＩＶ）で見られたピークに近い初期ａｐｏＡ１レベルをもたらし、したがって１週間を超えてａｐｏＡ１レベルを維持する。１０日目における１００ｍｇの維持用量は、コレステリルエステルの蓄積なしに系内のＨＤＬ−Ｃ、ａｐｏＡ１及び／又はコレステリルエステルの上昇を維持することから選択され、これが将来の研究のためのＭＥＤＩ６０１２のより長期の投与に適切な維持用量であるかどうかを判定するための検証中である。ＬＤＬの上昇が、ＬＤＬ粒子におけるＣＥの蓄積に続発することは明らかである。
【０２５１】
特定の選択基準は、予期された成功裏の結果、及び心臓保護の転帰、抗アテローム発生効果、及び皆無から最小の望ましくない影響を有した、コホート４の対象に投与されるＭＥＤＩ６０１２の投与レジメンに到達するための、モデル化とシミュレーション解析に関連していた。コホート４の対象に使用される用量を決定するためのモデル化及びシミュレーション解析及び評価では、いくつかの異なる心臓保護基準を検討した。モデル化解析のための１つの心保護基準には、第１の用量におけるＨＤＬ及びａｐｏＡ１の急激な増加が含まれた（モデル化データは、それぞれ図１２Ａ及び１２Ｂに示される）。ＨＤＬ−Ｃでは、３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の負荷用量は、６時間で約３９ｍｇ／ｄＬを達成した（図１２Ａ）。ａｐｏＡ１では、３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の負荷用量は、２４時間で１５ｍｇ／ｄＬを達成した（図１２Ｂ）。モデル化解析のための第２の心臓保護基準には、ＨＤＬ−Ｃ及びａｐｏＡ１レベルを２週間にわたり維持することが含まれた（モデリングデータは、それぞれ図１３Ａと１３Ｂに示される）。モデル化データに基づいて、３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の負荷用量と、それに続く負荷用量の４８時間後の１５０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量と、それに続く１０日目の１００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量は、ＨＤＬ−Ｃ及びａｐｏＡ１レベルを２週間にわたり維持すると判定され、ａｐｏＡ１は２週間にわたり最大レベル近くに維持された。（図１３Ａ及び１３Ｂ）。
【０２５２】
さらに、ＭＥＤＩ６０１２投与後、２週間にわたりＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１レベルを高く維持することは、ＭＩを有する患者が、疾患の急性期から亜急性期に転換できるようにして、心臓組織の線維症の修復を可能にし、その結果、心筋細胞の増殖及び死滅心筋細胞の置換をもたらす。モデル化解析の第３の心臓保護基準には、（より低密度のＨＤＬ３−ｃｈｏｌサブ画分のレベルと比較して）より高レベルで心臓保護及びアテローム発生保護効果に寄与する、ＨＤＬのＨＤＬ２（ＨＤＬ２−ｃｈｏｌ）サブ画分の増加が含まれた。図１４Ａは、ＩＶ又はＳＣ投与されたＭＥＤＩ６０１２の異なる用量における、ＨＤＬ２の増加を示す。２４０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量では、ＨＤＬ２は、およそ５５ｍｇ／ｄＬ増加すると予測された。図１４Ｂは、Ｓａｔｔｌｅｒ，Ｋ．ｅｔ  ａｌ．（２０１５，Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．，６６：１４７０−１４８５）によって報告されるように、ＨＤＬ２が、ＨＤＬ−３と比較してより多くのスフィンゴシン−１−リン酸（Ｓ１Ｐ）を保有して受け入れるＨＤＬの亜種であることを示す。
【０２５３】
コホート４の対象に使用される用量、特に維持用量を決定するためのモデル化及びシミュレーション解析及び評価では、いくつかの異なるアテローム保護（抗動アテローム発生）基準を検討した。モデル化解析のための１つの抗アテローム発生基準には、６０ｍｇ／ｄＬ（ベースライン（ＢＬ）＝３５）を超える血清／血漿中のＨＤＬ−Ｃ濃度に達していることが含まれた。モデル化は、６０ｍｇ／ｄＬを超えるＨＤＬ−Ｃレベルを達成する上で、ＭＥＤＩ６０１２の負荷用量がＨＤＬ−Ｃの定常状態レベルにほとんど影響を及ぼさず、およそ１００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の維持用量が必要であると予測した。これは、図１５Ａ〜１５Ｄに提示される結果によって示される。この試験の結果は、６５〜８０ｍｇ／ｄＬなどの約６０ｍｇ／ｄＬを超えるＨＤＬ−Ｃレベルは、６０ｍｇ／ｄＬのレベルよりも有意に高い心臓保護又はアテローム保護効果を対象に提供しないことを示している。モデル化解析の別の抗アテローム発生基準には、維持投与中のａｐｏＡ１レベルを定常状態に維持することが含まれた。モデル化では、ＭＥＤＩ６０１２の全ての用量（８０ｍｇ、１００ｍｇ、１２０ｍｇ、及び１６０ｍｇ）が、ａｐｏＡ１の定常状態レベルを達成することが予測された。これは、図１６Ａ〜１６Ｄに提示される結果によって示される。
【０２５４】
モデル化解析では、ＭＥＤＩ６０１２の様々な維持用量でのＬＤＬにおけるコレステリルエステル蓄積の望ましくない影響もまた検討された。モデル化及びシミュレーションは、８０〜１００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量がＣＥの過剰な蓄積を防ぐことを予測した。（図１８Ａ〜１８Ｄ）。モデル化に基づいて、様々な維持用量でＨＤＬ−ＣＥレベルにほとんど変化が見られなかったことは、コレステリルエステル蓄積がＨＤＬになかったことを示唆する。（図１９Ａ〜１９Ｄ）。ＬＤＬデータ自体はモデル化解析に含まれなかったものの、モデル化解析は、２４０ｍｇ以上のＭＥＤＩ６０１２の用量でＬＤＬレベルの増加を明らかにしたＳＡＤ試験から得られた結果の観察、並びに１２０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の単回用量によってＬＤＬレベルが増加し、４０ｍｇ又は１２０ｍｇの複数回用量によってＬＤＬ−Ｃが増加したが、これらの用量がａｐｏＢの増加を引き起こさなかったことを明らかにしたＭＡＤ試験の結果の観察によって、情報を与えられた。≧１２０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の維持用量では、ＬＤＬレベルは上昇するようであり、ＣＥは複数の投与で蓄積された；しかし、１００ｍｇでは蓄積が最小限であり、８０ｍｇではＣＥの損失が最小限であった。したがって、ＨＤＬ−ＣＥ及び観測されたＬＤＬ−Ｃプロファイルに基づいて、例えば、限定することなく、１２０ｍｇ以下の用量で、ＬＤＬにＣＥが蓄積しないようにコホート４の対象で使用するための、特により長期の投与のための、許容可能な維持用量を提供する高い維持用量では、ＣＥはＨＤＬでなくＬＤＬに蓄積すると判定された。
【０２５５】
臨床試験で検討された別の望ましくない影響は、超超低密度（ＶＶＬ）ＨＤＬ粒子（１７ｎＭを超える）が皆無であり、超低密度（ＶＬ）−ＨＤＬ粒子（１２．２〜１７ｎＭ）がわずかな状況であった。ＨＤＬ粒子のサイズが大きくなると、その機能は低下する。ＬＣＡＴ酵素、すなわちＭＥＤＩ６０１２は、より心臓保護的でアテローム保護的なＨＤＬのＨＤＬ３粒子サブ画分のＨＤＬ２粒子への変換に役割を果たす。（図２０）。モデル化解析は、２４０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量が、ＶＶＬ−ＨＤＬの２ｍｇ／ｄＬの増加、及びＶＬ−ＨＤＬの１７ｍｇ／ｄＬの増加をもたらすことを示唆した。８０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量は、ＶＶＬ−ＨＤＬの増加をもたらさず、ＶＬ−ＨＤＬの２ｍｇ／ｄＬの増加をもたらした。モデル化試験はまた、ＶＬ−ＨＤＬ粒子のＶＶＬ−ＨＤＬ粒子への有意な変換を回避するのに適したＭＥＤＩ６０１２の用量の判定を可能にする情報もまた提供した（図２０）。
【０２５６】
要約すれば、厳密なモデル化及びシミュレーションデータ、及びこれらのデータから予期された精度に基づいて、また臨床試験（並びに前臨床試験）からの観察データに基づいて提案された、ＭＥＤＩ６０１２の３用量後の投与レジメンは、良好に忍容され、収集されたＰＫ／ＰＤデータは、試験の目的を達成するために適切であることが予期される。モデル化及びシミュレーション解析に使用される選択基準は、有害な副作用なしに、対象の心臓又は心血管疾患及び／又はそれらの症状を治療するのに有効なＨＤＬ−Ｃ、ａｐｏＡ１、ＣＥ、及びその他のＰＤマーカーに、予期された増加を提供した。選択基準はさらに、ＬＣＡＴ酵素の作用機序に関連した治療有効性を提供することが予期される、治療レジメンの決定を可能にした。投与後４週間の追跡期間は、潜在的な安全性所見の可逆性を評価し、血清濃度（ＰＫ質量）が完全にクリアされて、ＰＤバイオマーカーがベースライン値に戻ったときのＭＥＤＩ６０１２の潜在的な免疫原性を特徴付けるのに適切であると見なされる。ＡＤＡ／ｎＡｂの結果としてＨＤＬ−Ｃが低下しないことを確実にするために、ＡＤＡ陽性の対象では、最初の４週間の追跡期間を超えるさらに４週間の期間が適切である。
【０２５７】
特に、上記のモデル化及びシミュレーション結果に基づいて、ＭＥＤＩ６０１２の特定の負荷用量及び維持用量の有効性及び達成は、コホート４が関与する複数回用量試験の成功裏の予後の達成を予測し得て、ひいては、予期された治療転帰と、投与及び投与レジメンが予測され予期された結果を提供する可能性との相関関係を検証した。モデル化解析並びに観測データに基づいて、３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の負荷用量（ＬＤ）と、それに続く１５０ｍｇ及び／又は１００ｍｇの維持用量（ＭＤ）は、心臓保護基準として、以下を達成することが予測される：（ｉ）負荷用量によるＨＤＬ及び／又はａｐｏＡ１の急激な増加（３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２のＬＤは、６時間で３９ｍｇ／ｄＬのＨＤＬ−Ｃレベルを達成し、２４時間で１５ｍｇ／ｄＬのａｐｏＡ１レベルを達成する）；（ｉｉ）２週間にわたるＨＤＬ−Ｃ及びａｐｏＡ１レベルの維持（３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の負荷用量と、それに続く４８時間目の１５０ｍｇの用量と、それに続く１０日目の１００ｍｇの用量は、ＨＤＬ−Ｃ及びａｐｏＡ１の双方の保護レベルを２週間にわたり維持し、ａｐｏＡ１レベルは、２週間にわたり最大レベルに維持される）；及び（ｉｉｉ）ＨＤＬ２レベルの増加（１００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量はＨＤＬ２レベルを約５５ｍｇ／ｄＬ増加させる）。
【０２５８】
３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の負荷用量（ＬＤ）と、それに続く１５０ｍｇ及び／又は１００ｍｇの維持用量（ＭＤ）は、抗アテローム発生基準として以下を達成することもまた予測される：（ｉ）６０ｍｇ／ｄＬを超えるＨＤＬ−Ｃ値（ＢＬ＝３５）の達成（１００ｍｇの維持用量は、ベースライン（ＢＬ）レベルを３５ｍｇ／ｄＬと仮定して、６０〜７０ｍｇ／ｄＬのＨＤＬ−Ｃレベルを維持する；（ｉｉ）定常状態ａｐｏＡ１レベルの維持）；小ＬＤＬ粒子の減少（３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の負荷用量は小ＬＤＬ−Ｐを８０％低下させ、維持用量はＬＤＬ−Ｐを４０〜５０％以上低下させる）；（ｉｉｉ）コレステロール流出調節タンパク質（ＣＥＲＰ）としても知られるＡＴＰ結合カセットトランスポーター（ＡＢＣＡ１）を通じたコレステロールの全体的な流出は、３００ｍｇの量のＭＥＤＩ６０１２の負荷用量によって増加することが予期される。
【０２５９】
３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の負荷用量（ＬＤ）と、それに続く１５０ｍｇ及び／又は１００ｍｇの維持用量（ＭＤ）は、投与後の望ましくない影響から保護することがさらに予測された。モデル化は、ａｐｏＢにおける予期される増加が皆無である；ＬＤＬ（ＬＤＬ−ＣＥ）におけるＬＤＬ−Ｃ又はコレステリルエステル蓄積の増加が皆無である、（ＭＥＤＩ６０１２の維持用量で予期されるＬＤＬ又はＬＤＬ−ＣＥにおける増加が、最小又は皆無である）；及びＶＶＬ−ＨＤＬの増加が皆無であり、ＶＬ−ＨＤＬの増加がほとんどない（負荷用量は、ＶＬ−ＨＤＬの増加及びＶＶＬ−ＨＤＬの最小限の増加を生じる；１００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の維持用量は、ＶＬ−ＨＤＬにおけるおよそ２ｍｇ／ｄＬの増加及びＶＶＬ−ＨＤＬにおける皆無の増加をもたらす）ことを予測した。上述のモデル化データと結果は、本明細書に詳述されるようなＭＥＤＩ６０１２活性成分の用量と投与レジメンを採用するようにデザインされた実際の治療方法の転帰を正確性と信頼性をもって予測し並びに検証する、信頼性の高い予測因子として機能する。
【０２６０】
治療レジメンの変更
上記のように、ＭＡＤ試験のコホート４は、６人の対象がｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２を与えられ、残りの２人の対象がプラセボ用量を与えられるようにデザインされた。しかし、無作為化に問題があり、２人の対象は手動で無作為化しなくてはならなかった。これにより、ｒｈＬＣＡＴ又はＭＥＤＩ６０１２を与えられたランダム化された７人の対象と、プラセボを与えられたランダム化された１人の対象のみがもたらされた。したがって、実際の試験治療レジメンは、以下の表６ａに提示されるとおりである。
【０２６１】
【表７】
2021501793.tif 000012
【０２６２】
さらに、プラセボ対象には、１０日目にプラセボの代わりに１００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量が投与され、１０日目に１００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２を投与されるように無作為化された試験対象の１人には、実際にはＭＥＤＩ６０１２の代わりにプラセボ用量が投与された。以下の表６ｂは、プラセボ対象（対象２００３０８１００１８）、及びＭＥＤＩ６０１２を与えられるように無作為化された試験対象（対象２００３０８１００２０）からのＰＫデータを示す。このアッセイは、ＭＥＤＩ６０１２に固有である。したがって、ＭＥＤＩ６０１２を投与されていないプラセボ対象は、２５００未満のＢＬＱ（Ｂｅｌｏｗ  Ｌｉｍｉｔ  ｏｆ  Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ；定量限界未満）以外を有してはならない。
【０２６３】
表６ｂが実証するように、１０日目の静注後の引き続く２つのサンプリングポイントでは、プラセボ対象は血漿中にＭＥＤＩ６０１２のレベルを示す。さらに、表６ｂは、１０日目に、ＭＥＤＩ６０１２を与えられるように無作為化された試験対象が、血漿中にＭＥＤＩ６０１２が検出されなかったため、代わりにプラセボ用量を投与されたことを実証する。さらに、プラセボ対象は、１０日目からスタチン薬物療法の服用を中止したと考えられ、そのためＬＤＬ−Ｃ及びＡｐｏＢのレベルは１０日目以降に上昇し始めた。
【０２６４】
【表８】
2021501793.tif 000013
【０２６５】
試験結果
ＭＡＤ試験のコホート４の結果の解析は、この投与レジメンにおける試験対象へのＭＥＤＩ６０１２の投与、すなわち、全て静注投与される、１日目に対象に投与される３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量（負荷用量）；４８時間目に対象に投与される１５０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の第２の用量（３日目の維持用量）；及び第２の用量の１週間後に対象に投与される１００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の用量（１０日目の維持用量）が、ＬＣＡＴ酵素の作用機序と一致するＨＤＬ−Ｃ及びＡｐｏＡ１の増加をもたらしたことを示した（図２２Ａ及び２２Ｂ、及び図２５Ａ及び２５Ｂ、及び表６ｃ〜ｅ）。ベースライン補正時に、各対象は自分自身の対照となることに留意することが重要である。
【０２６６】
【表９】
2021501793.tif 000014
【０２６７】
【表１０】
2021501793.tif 000015
【０２６８】
【表１１】
2021501793.tif 000016
【０２６９】
ＬＤＬレベルの増加（図２３Ａ及び２３Ｂ、及び表６ｆ）、並びに第３の用量後にベースラインに戻ったａｐｏＢの初期の減少（図２４Ａ及び２４Ｂ、及び表６ｇ）が観察された。全体として、ＬＤＬコレステロール含有量は増加したが、ＬＤＬ粒子数は増加しなかった。
【０２７０】
図２８Ａ〜２８Ｄは、本明細書の実施例２及び３のＭＡＤ試験で記載されるようなＭＥＤＩ６０１２の投与後における、コホート１〜４からの対象のＨＤＬ−Ｃ、ＡｐｏＡ１、ＬＤＬ−Ｃ、及びＡｐｏＢのレベルを示す、濃度曲線下面積（ＡＵＣ）箱ひげ図を提示する。ＨＤＬ−Ｃ及びＡｐｏＡ１における用量依存的増加が観察された（図２８Ａ及び２８Ｂを参照されたい）。ＬＤＬ−Ｃの増加は、１２０ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の第１の用量後、及び４０ｍｇと１２０ｍｇの双方の第３の用量後に観察された（図２８Ｃを参照されたい）。ＬＤＬ−Ｃの増加は、ＭＡＤ試験の３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２（コホート３）及びコホート４（静注）の双方の用量でもまた、観察された。しかし、ＬＤＬ−Ｃの増加は、対象で同時に測定されたＡｐｏＢの静的な（又は減少した）レベルの観点から、有害とは考えられなかった（図２８Ｄを参照されたい）。ＡｐｏＢの増加が観察されなかったことから、これはＭＥＤＩ６０１２の用量と投与レジメンに関連したＬＤＬ粒子の有害な増加がなかったことを示唆した。
【０２７１】
【表１２】
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【０２７２】
【表１３】
2021501793.tif 000018
【０２７３】
前述のとおり、ａｐｏＢが男女の双方でＬＤＬ−Ｃよりも優れたＣＨＤのリスク予測因子であり、これらの粒子に輸送されるコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）の量よりも、ａｐｏＢなどのアテローム発生粒子の数がさらに重要なリスク指標であることが、いくつかの報告で示されている。（Ｖａｖｅｒｋｏｖａ，Ｈ．，２０１１，Ｃｌｉｎ  Ｌｉｐｉｄｏｌｏｇｙ，６（１）：３５−４８；Ｓｎｉｄｅｒｍａｎ，ＡＤ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｌａｎｃｅｔ，３６１：７７７−７８０で概説される）。全ての潜在的なアテローム発生リポタンパク質粒子は、ａｐｏＢの１つの分子のみと様々な量のコレステロールを含有することから、ａｐｏＢは、ＬＤＬ−Ｃよりも優れたアテローム発生リポタンパク質粒子数のマーカーとして機能する。したがって、本明細書で実証されるように、ＬＣＡＴ（ＭＥＤＩ６０１２）を投与された対象における極微量又は皆無のａｐｏＢの増加は、ＬＤＬ−Ｃの増加が観察されたにもかかわらず、非常に有益で保護的な治療を反映する。
【０２７４】
図２６Ａは、ＭＡＤ試験のコホート３及びコホート４（０日目〜７０日目）の投与レジメン後における、ＭＥＤＩ６０１２投与からの観察データ（個々のデータ点：丸及び四角）と比較した、モデル化／シミュレーション解析（実線及び破線）から得られたベースライン補正済みＨＤＬ−Ｃレベルの比較を示す。コホート４からの観察データが単独で示されると、ＭＥＤＩ６０１２の投与後にＨＤＬ−Ｃの３つの異なるピークが観察され得る（図２６Ｂ）。図２６Ｃは、図２６Ａからの０日目〜５日目のデータを示す。これらのデータの比較から、ＳＡＤ試験及びＭＡＤ試験のコホート１〜２からのデータに対して実施された初期モデル化が、実際の観察データを非常に良く予測することが分かる。
【０２７５】
図２７Ａ〜Ｄは、本明細書の実施例２及び３で定義されるような、ＭＡＤ試験の全コホート（コホート１〜４）からの観察結果を示す。図２７Ａは、ＭＡＤ試験のコホート１〜４からの観察された経時的なＨＤＬ−Ｃの血清濃度のベースラインからの変化を示す。図２７Ｂは、ＭＡＤ試験のコホート１〜４からの観察された経時的なＡｐｏＡ１の血清濃度のベースラインからの変化を示す。図２７Ｃは、ＭＡＤ試験のコホート１〜４からの観察された経時的なＬＤＬ−Ｃ（直接）の血清濃度のベースラインからの変化を示す。図２７Ｄは、ＭＡＤ試験のコホート１〜４からの観察された経時的なＡｐｏＢの血清濃度のベースラインからの変化を示す。
【０２７６】
実施例４
急性ＳＴ上昇型（ｅｌｅｖａｔｉｏｎ）心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）におけるＭＥＤＩ６０１２の安全性と有効性を評価するための第ＩＩｂ相無作為化単盲検プラセボ対照治験
試験デザイン
第ＩＩｂ相無作為化単盲検プラセボ対照治験をデザインし、プラセボと比較して、及び標準的なケアに加えて、急性ＳＴＥＭＩを有する対象の心筋梗塞（ＭＩ）サイズの減少に対する、ＭＥＤＩ６０１２の安全性及び有効性を評価した。この試験では、およそ４０の施設で最大４１４人の対象が無作為化される。対象の最大６０％が心筋梗塞（ＴＩＭＩ）フローグレード０〜１の血栓症を有し、ＭＲイメージングを完了していることが予期される。したがって、目標は２５２人の対象が試験を完了し、一次予後の解析に含まれるようにすることである。
【０２７７】
対象は、２つのレジメン（２用量レジメン又は６用量レジメン）の１つに１：１の比率で無作為化する。各用量レジメン内で、対象を２：１の比率で無作為化し、ＭＥＤＩ６０１２又はプラセボを与える。中間解析で用量レジメンが中止された場合、対象を１：１の比率で無作為化し、残りの用量レジメンについてＭＥＤＩ６０１２又はプラセボを与える。治験には、３つの血管領域全てからの急性ＳＴ上昇型（ｅｌｅｖａｔｉｏｎ）心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）患者が登録されるが、非前壁ＳＴＥＭＩは登録された対象の５０％未満に制限される。原因血管が左主動脈又は左前下行動脈又はその分枝（異常起源性を含む）であれば、前壁ＳＴＥＭＩが定義される。対象は、急性ＳＴＥＭＩケアのために病院に到着した際に、適格性についてスクリーニングする。治験薬の最初の輸液に関する、インフォームド・コンセント／口頭での同意（地域の倫理委員会の要件に従う）に続いて、一次経皮的冠動脈介入（ＰＣＩ；１日目）の前に、好ましくは原因血管内でバルーンを膨らませる１０分前に、治験薬の負荷用量を静脈内（ＩＶ）注入を介して対象に与える。さらに、全ての対象において、高強度スタチン治療をできるだけ早期に、地域の基準に従って開始することが推奨される。１〜３日目に、対象は、ＣＭＲ、治験薬の輸液、採血及び検査、場合によっては冠動脈ＣＴＡをはじめとする、残りの試験手順について、インフォームド・コンセントを書面で提供する。
【０２７８】
試験では、２つの投与レジメンを検証する。２用量レジメン治療群では、全て、入院患者診察中に、第１のＭＥＤＩ６０１２の用量を一次ＰＣＩの前に投与し、第２の用量を４８時間（±８時間）後に投与する。６用量レジメン治療群では、どちらも入院患者診察中に、第１のＭＥＤＩ６０１２の用量を一次ＰＣＩの前に投与し、第２の用量を４８時間（±８時間）後に投与する。これらの用量に、外来患者としての４回の追加的な毎週用量（±１日）が続く。
【０２７９】
評価された試験結果としては、試験用量でのＭＥＤＩ６０１２の投与が、プラセボと比較して心筋梗塞を減少させ；収縮機能（左心室駆出率（ＥＦ））を改善し；プラセボと比較して非石灰化冠動脈プラークの退行を誘発し進行を低下させ；急性ＳＴＥＭＩを有する対象における許容可能な安全性及び免疫原性プロファイルを示し；虚血／再灌流傷害を低減させ；左心室（ＬＶ）の有害な組織修復を予防するという仮説が挙げられる。
【０２８０】
標的研究対象集団には、１２誘導心電図（ＥＣＧ）で急性ＳＴＥＭＩと診断されて病院を受診し、直近の症状の発症から６時間以内に一次ＰＣＩが計画されている（すなわち、６時間未満の継続的な症状）、３０歳〜８０歳の成人男性又は女性が含まれる。妊娠の可能性がある女性は、除外される。
【０２８１】
治療群及びレジメン
１）以下の治療法に２：１で無作為化された２用量レジメン：
１日目に３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の静注、及び３日目（４８時間（±８時間）に１５０ｍｇの静注）１日目及び３日目（４８時間（±８時間）にプラセボの静注）；
２）以下の治療法に２：１で無作為化された６用量レジメン：
１日目に３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２の静注、及び３日目（４８時間（±８時間））に１５０ｍｇの静注、及び１０、１７、２４、及び３１日目に１００ｍｇの静注；
３）１日目、３日目（４８時間（±８時間））、及び１０、１７、２４、及び３１日目にプラセボの静注。
【０２８２】
試験では、ＭＥＤＩ６０１２治療群に１３８人の登録された対象を含めて、少なくとも８２人の対象が、「プロトコル毎の一次解析集団」の定義を満たす、治療及び一次エンドポイント試験手順を完了することを確実にする。各プラセボ群は、投与レジメン当たり６９人の対象を有し、プラセボで治療された１３８人の対象がもたらされる（８２人の対象が治療及び一次エンドポイント試験手順を完了）。「治療の意図」（ＩＴＴ）集団には、無作為化された全ての対象が含まれる。「ａｓ−ｔｒｅａｔｅｄ集団」には、少なくとも１用量の治験薬を与られた全ての無作為化対象が含まれる。「一次有効性解析集団」には、ＴＩＭＩフローグレード０又は１を有する、治験薬による完全な治療過程を受けた全ての無作為化対象が含まれる。「有効性解析集団ＴＩＭＩ２〜３」には、ＴＩＭＩフローグレード２又は３を有する、治験薬の完全な治療過程を受けた全ての無作為化対象が含まれる。「有効性解析集団ＴＩＭＩ０〜３」には、ＴＩＭＩフローグレード０〜３を有する、治験薬の完全な治療過程を受けた全ての無作為化対象が含まれる。「ＣＴＡ解析集団」には、治験薬の完全な治療過程を受けた６用量レジメンの無作為化対象が含まれる。
【０２８３】
統計的方法
サンプルサイズ
治療群当たり８２人の対象は、ＭＥＤＩ６０１２の２用量群とプラセボ群、及びＭＥＤＩ６０１２の６用量群とプラセボ群の間で、心筋梗塞サイズの２５％の減少を検知する８０％の検出力を提供し、変動係数（ＣＶ）を０．６５と仮定した場合の両側αは０．０５である。初期血管造影における梗塞関連動脈のＴＩＭＩフローグレード２又は３の理由から、及び引き続く除外又はドロップアウトのその他の理由から、一次有効性解析集団からの４０％の除外率が予期され（Ｂｏｔｋｅｒ  ＨＥ  ｅｔ  ａｌ，２０１０，Ｌａｎｃｅｔ，３７５：７２７−７３４．Ｈａｕｓｅｎｌｏｙ  ＤＴ，ｅｔ  ａｌ．，２０１３，Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，９８，７−２７）、治療群当たり合計１３８人の対象が必要である。このサンプルサイズでは、ＭＥＤＩ６０１２群とプラセボ群間のＥＦの５％の絶対差を検知する検出力は、標準偏差を１０％と仮定した場合、８８％である。２５％の標準偏差、２０％の脱落率を仮定した場合、ＭＥＤＩ６０１２用量群の対象とプラセボ群の対象の間で、非石灰化冠動脈プラークの退行／進行の二次エンドポイントでは、指標ＣＴＡから１０〜１２週目のＣＴＡまでの非石灰化プラーク容積の１２ｍｍ３の変化を検知する検出力は、８０％を超えるであろう。
【０２８４】
統計解析：
梗塞サイズの一次有効性エンドポイントは、一次有効性解析集団に基づくデータの対数変換を伴うＴ検定を用いて解析する。梗塞サイズのエンドポイントはまた、有効性解析集団ＴＩＭＩ２−３、有効性解析集団ＴＩＭＩ０−３、及びＩＴＴ集団に基づいても解析する。駆出率、心筋質量、及び左心室容積は、データを対数変換することなく、梗塞サイズと同様の方法で解析する。非石灰化プラーク容積における指標ＣＴＡからの変化は、ＣＴＡ解析集団に基づきＴ検定を使用して解析する。対数変換を伴う０〜４８時間のクレアチンキナーゼ曲線下面積は、Ａｓ−ｔｒｅａｔｅｄ集団に基づきＴ検定を使用して解析する。
【０２８５】
安全性解析は、Ａｓ−ｔｒｅａｔｅｄ集団に基づく。有害事象（ＡＥ）及び重篤有害事象（ＳＡＥ）の収集は、対象がインフォームド・コンセント文書に署名した後に始まり、治験受診の終わりまで継続する。治療中に発生したＡＥ（ＴＥＡＥ）及び治療中に発生したＳＡＥ（ＴＥＳＡＥ）は、ＭｅｄｉｃａｌＤｉｃｔｉｏｎａｒｙｆｏｒＲｅｇｕｌａｔｏｒｙＡｃｔｉｖｉｔｉｅｓ（ＭｅｄＤＲＡ）の最新バージョンによってコード化し、タイプの発生率、重症度、及び治験薬との関係を要約する。特定のＡＥは、百分率を算出するために、各対象毎に１回ずつカウントする。さらに、特定の対象内で同一ＡＥが複数回発生する場合は、最も高い重症度で最も高い関係性が認められたものを報告する。全てのＴＥＡＥとＴＥＳＡＥは全体的に要約し、ＭｅｄＤＲＡシステムの臓器クラスと優先使用語によって分類する。
【０２８６】
生命徴候結果は、各時点で治療群毎に記述統計値を用いて要約する。心電図（ＥＣＧ）パラメータもまた評価し、治療群毎に記述的に要約する。抗薬物抗体（ＡＤＡ）の発生率と力価は、各治療グループ毎に一覧にする。ＡＤＡが陽性であることが確認されたサンプルを検査し、ｎＡｂについて解析し、同様に要約する。
【０２８７】
中間解析：
２つの中間解析が計画される。第１の中間解析の目的は、無益であること、及び用量レジメンを中止することに関する。これは、一次解析集団の３０％が、最後の治験受診を完了した後に実施される。第２の中間解析は、ＭＥＤＩ６０１２の将来の開発オプションに関する意思決定を加速するために計画され、ひとたび対象の６０％が最後の治験受診を完了したら実施する。
【０２８８】
治療群を割り当てる方法
対話型音声／ウェブ応答システム（ＩＸＲＳ）を使用して、対象を治療レジメンと群に無作為化し、盲検化された治験薬キット番号を割り当てる。治験責任医師が、対象が適格性基準を満たしたことをＩＸＲＳに通知して、ＩＸＲＳが、盲検化された治験薬キット番号の割り当てを対象に提供したときに、対象は試験に無作為化されたと見なされる。
【０２８９】
２つのレジメン（２用量レジメン又は６用量レジメン）の１つに対して、対象を１：１の比率で無作為化する。各用量レジメン内で、対象を２：１の比率で無作為化し、ＭＥＤＩ６０１２又はプラセボを与える。
＊ＭＥＤＩ６０１２、６用量レジメン（Ｎ＝１３８）
＊プラセボ、６用量レジメン（Ｎ＝６９）
＊ＭＥＤＩ６０１２、２用量レジメン（Ｎ＝１３８）
＊プラセボ、２用量レジメン（Ｎ＝６９）
中間解析で用量レジメンが中止された場合、対象を１：１の比率で無作為化し、残りの用量レジメンについてＭＥＤＩ６０１２又はプラセボを与える。
【０２９０】
治験薬の投与に遅延があり、規定の時間枠内に投与されない場合は、即座に医療モニターに通知しなくてはならない。
【０２９１】
前側ＭＩ患者と非前壁ＭＩ患者との分布は、試験過程にわたってモニターする。目標は、最終無作為化集団の約５０％が、前壁ＭＩであることである。したがって、非前壁ＭＩの数をＩＸＲＳを介してモニターする。
【０２９２】
エンドポイントの理論的根拠
一次エンドポイント：ＭＩ後１０〜１２週間の遅延強調心臓血管磁気共鳴（ＣＭＲ）イメージングで測定されたＬＶ質量の百分率としての梗塞サイズ。
【０２９３】
理論的根拠：ＣＭＲは梗塞サイズの評価の究極の判断基準と見なされており、心臓保護治験における最も関連性があるエンドポイントと見なされる（Ｈａｕｓｅｎｌｏｙ  ＤＴ，ｅｔ  ａｌ．，２０１３，Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，９８：７−２７）。１０〜１２週間で測定された梗塞サイズは、左心室（ＬＶ）の組織修復後の最終的な梗塞サイズを反映し、ＭＥＤＩ６０１２による治療の初期及び後期効果の双方を反映する（Ｍａｔｈｅｒ  ＡＮ，ｅｔ  ａｌ．，２０１１，Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ，２６１（１）：１１６−２６）。梗塞サイズは、ガドリニウム遅延強調ＭＲ画像上で、グラム単位のＬＶ質量で除したグラム単位の梗塞サイズとして測定する。梗塞サイズは、心不全による死亡及び入院をはじめとする、二次的主要有害心臓血管イベントの独立予測因子である（Ｓｔｏｎｅ  ＧＷ，ｅｔ  ａｌ．，２０１６，Ｊ  Ａｍ  Ｃｏｌｌ  Ｃａｒｄｉｏｌ．，６７（１４）：１６７４−８３；Ｗｕ  Ｅ，ｅｔ  ａｌ．，２００８，Ｈｅａｒｔ，９４：７３０−７３６）。梗塞サイズが５％増加する毎に、全死因死亡のリスクが１９％増加し、心不全入院のリスクが２０％増加する（Ｓｔｏｎｅ  ＧＷ，ｅｔ  ａｌ．，２０１６，Ｊ  Ａｍ  Ｃｏｌｌ  Ｃａｒｄｉｏｌ．，６７（１４）：１６７４−８３）。
【０２９４】
二次エンドポイント：
プラセボと比較したＭＩ後１０〜１２週間目にシネＭＲイメージングによって測定された駆出率（ＥＦ）。
【０２９５】
理論的根拠：駆出率は、ＬＶの収縮期機能として十分確立された尺度である。さらに、ＥＦの薬理学的改善は、心不全による死亡及び入院の減少と関連がある（Ｋｒａｍｅｒ  Ｄ，ｅｔ  ａｌ．，２０１０，Ｊ  Ａｍ  Ｃｏｌｌ  Ｃａｒｄｉｏｌ．，５６：３９２−４０６；Ｂｒｅａｔｈｅｔｔ  Ｋ，ｅｔ  ａｌ．，２０１６，Ｃｉｒｃ  Ｈｅａｒｔ  Ｆａｉｌ．，９：ｅ００２９６２）。ＥＦは、一回拍出量を拡張終期容積で除した比率として計算する。
【０２９６】
非石灰化プラーク容積（ＮＣＰＶ）の指標ＣＴＡからの変化は、プラセボと比較してＭＩ後１０〜１２週目の冠動脈における試験終了時のＣＴＡで測定する。
【０２９７】
理論的根拠：急性冠症候群（ＡＣＳ）、特に非ＳＴＥＭＩ  ＡＣＳで試験した場合、非石灰化プラーク容積（ＮＣＰＶ）は、Ａｇａｔｓｔｏｎカルシウムスコア及び総プラーク容積と比較して、主要有害心臓イベント（ＭＡＣＥ）のより良い予測因子である。ＮＣＰＶを２ｍｍ径以上の全ての血管で測定し、ｍｍ３で表す。ステントを有する冠動脈セグメント、又はそうでなければ解釈不能と考えられるセグメントは、解析の対象から除外される。
【０２９８】
０〜４８時間のクレアチン（ｃｒｅａｔｉｎｅｅ）キナーゼ（ＣＫ）曲線下面積
理論的根拠：この結果は、ＭＥＤＩ６０１２の効果が、主に第１の用量であるのか、６週間にわたり投与された複数回用量であるのかを判定するのを助ける。
【０２９９】
収縮末期及び拡張末期における心筋質量及びＬＶ容積
理論的根拠：ＬＶ容積及び心筋質量は臨床転帰の十分確立された予測因子であり、心臓血管磁気共鳴（ＣＭＲ）イメージングによって測定されるであろう。心室容積及び心筋質量をそれぞれｍＬ及びｇ単位で測定して、体表面積に索引付けする。
【０３００】
ＭＥＤＩ６０１２の安全性及び忍容性は、７０〜８４日目の最後の治験受診までの、治療中に発生した有害事象（ＴＥＡＥ）及び治療中に発生した重篤有害事象（ＴＥＳＡＥ）、抗薬物抗体（ＡＤＡ）及び中和抗体の発生率によって測定する。
【０３０１】
理論的根拠：さらなる安全性及び忍容性のデータは、さらなる薬物開発をサポートする。
【０３０２】
ＬＣＡＴ質量及びＡＤＡによって測定されるＰＫ及び免疫原性
理論的根拠：さらなるＰＫ及び免疫原性のデータは、将来の研究及びさらなる薬物開発において、用量の理論的根拠を裏付ける。
【０３０３】
探索的エンドポイント
大動脈における非石灰化動脈硬化性プラーク容積。理論的根拠：ＭＥＤＩ６０１２は、心臓外の血管のアテロームを退行を引き起こす可能性を有する。冠動脈ＣＴＡ中に；大動脈基部、近位上行大動脈、及び下行胸部大動脈のほとんどを画像化する。冠動脈と同様に、非石灰化動脈硬化性プラーク容積を大動脈において測定し、ＭＥＤＩ６０１２が心臓外のアテロームを後退させ得るかどうかを判定する。
【０３０４】
選択された用量の理論的根拠
前出の実施例１及び２に記載されるように、ＭＥＤＩ６０１２の単回漸増及び複数回漸増用量試験の結果は、ＨＤＬ−Ｃ及びａｐｏＡ１の増加率が用量依存的であることを実証した。前臨床試験は、ＡｐｏＡ１又はＨＤＬ粒子の輸液が、急性ＳＴＥＭＩ中に心筋保護を付与することを確立した。この試験は、急性期のＳＴＥＭＩ患者の治療を伴うことから、目的は、ＨＤＬ及びａｐｏＡ１を可能な限り迅速に増加させることである。したがって、１日目に、ＨＤＬ−Ｃの急速な上昇を達成するために、３００ｍｇのＭＥＤＩ６０１２又はプラセボの負荷用量を投与する。
【０３０５】
ＭＥＤＩ６０１２の単回漸増用量（ＳＡＤ）試験、及び複数回漸増用量（ＭＡＤ）試験のコホート１及び２からのデータ及びモデル化に基づいて、３００ｍｇの用量は、ＨＤＬ−Ｃを９０分後に５０％、６時間後に１００％増加させることが予期される（ＳＴＥＭＩ患者の平均ＨＤＬ−Ｃを３５ｍｇ／ｄＬと仮定した場合）。さらに、この用量は、単回漸増用量試験からのコレステロール流出容量データに基づいてＨＤＬ機能を改善し、巨大ＨＤＬ（ＶＶＬ−ＨＤＬ）粒子（１７ｎｍを超える）の最小限の上昇を引き起こすことが予期される。心筋梗塞の急性期及び亜急性期におけるＨＤＬ−Ｃ及び／又はａｐｏＡ１レベル／濃度を維持するために、ＭＥＤＩ６０１２又はプラセボ１５０ｍｇの第２の用量を第１の用量の４８時間後（およそ１半減期）に投与する。
【０３０６】
２用量レジメン（以下の表７）では、投与を第２の用量後に停止し、投与は入院患者設定でのみ行う。このレジメンは、対象が外来患者としてさらなる輸液のために戻る必要がない、短期間の治療であるという利点を有する。６用量レジメン（以下の表８）では、対象は、ベースラインの３００ｍｇの用量及び４８時間目の１５０ｍｇの用量を与えられ、その後、外来患者として４回の１００ｍｇの毎週用量がそれに続く。１００ｍｇの維持用量は、疫学研究で利益を付与するレベルに、及びＬＤＬ粒子中にＣＥの適用可能な蓄積をもたらさないレベルに、ＨＤＬ−Ｃを維持するために選択された。
【０３０７】
【表１４】
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【０３０８】
【表１５】
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【０３０９】
統計解析
有効性解析：梗塞サイズの一次有効性エンドポイントは、一次有効性解析集団に基づくデータの対数変換を伴うＴ検定を用いて解析する。梗塞サイズの一次有効性エンドポイントはまた、有効性解析集団ＴＩＭＩ２−３、有効性解析集団ＴＩＭＩ０−３、及びＩＴＴ集団に基づいても解析する。駆出率（ＥＦ）、心筋質量、及び左心室（ＬＶ）容積は、データを対数変換することなく、梗塞サイズと同様の方法で解析する。非石灰化プラーク容積における指標コンピュータ断層撮影血管造影（ＣＴＡ）からの変化は、ＣＴＡ解析集団に基づきＴ検定を使用して解析する。対数変換を伴う０〜４８時間のクレアチンキナーゼ曲線下面積は、ａｓ−ｔｒｅａｔｅｄ集団に基づきＴ検定を使用して解析する。
【０３１０】
中間解析：
２つの中間解析を計画する。第１の中間解析の目的は、無益であること、及び用量レジメンを中止することに関する。これは、一次解析集団の３０％が、最後の治験受診を完了した後に実施する。第２の中間解析は、将来のＭＥＤＩ６０１２開発に関する意思決定を加速するために計画され、ひとたび対象の６０％が最後の治験受診を完了したら実施する。中間解析の詳細は、盲検化解除前の中間解析計画に明記する。
【０３１１】
その他の実施形態
前述の説明から、本明細書に記載される本発明を様々な用途及び条件に適合させるために、本発明にバリエーション及び修正を加えてもよいことが明らかであろう。このような実施形態もまた、以下の特許請求の範囲内にある。
【０３１２】
本明細書の変数のあらゆる定義における要素のリストの詳述は、列挙された要素の任意の単一要素又は組み合わせ（又は下位組み合わせ）としての変数の定義を含む。本明細書における実施形態の詳述は、任意の単一実施形態としての、又は任意のその他の実施形態又はその部分と組み合わされた、その実施形態を含む。
【０３１３】
本明細書で言及された全ての特許及び刊行物は、あたかもそれぞれの独立した特許及び刊行物が本明細書に参照により援用されることが、具体的且つ個別に示されるのと同程度に、参照により援用される。
【図１】
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【図２Ａ−２Ｂ】
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【図３Ａ−３Ｂ】
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【図４−１】
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【図４−２】
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【図５Ａ−５Ｂ】
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【図６Ａ−６Ｂ】
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【図７−１】
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【図７−２】
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【図８−１】
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【図８−２】
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【図９Ａ−９Ｂ】
2021501793.tif 000032
【図１０Ａ−１０Ｂ】
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【図１１Ａ−１１Ｂ】
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【図１２Ａ−１２Ｂ】
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【図１３Ａ−１３Ｂ】
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【図１４】
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【図１５−１】
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【図１５−２】
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【図１６−１】
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【図１６−２】
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【図１７】
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【図１８−１】
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【図１８−２】
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【図１９−１】
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【図１９−２】
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【図２０Ａ−Ｄ】
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【図２１−１】
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【図２１−２】
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【図２２Ａ−２２Ｂ】
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【図２３Ａ−２３Ｂ】
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【図２４Ａ−２４Ｂ】
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【図２５Ａ−２５Ｂ】
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【図２６−１】
2021501793.tif 000054
【図２６−２】
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【図２７−１】
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【図２７−２】
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【図２８−１】
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【図２８−２】
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【配列表】
2021501793000001.app
【国際調査報告】
2021501793.tif 000060
2021501793.tif 000061