(57)【要約】本発明は、ＮＡＤ＋の欠乏に関連する障害及び疾患の治療に有用な式（Ｉ）のニコチンアミドモノヌクレオチドの無機塩及び組成物に関する：【化４８】2021524865.tif 000052（式中、Ａ、Ｍ１、ｋ、Ｒ１及びＲ２は、本明細書に記載されているとおりである）。本開示の別の態様は、加齢関連不妊症を治療または予防する方法であって、それを必要とする対象に、有効量の式（Ｉ）の塩、またはそのエナンチオマー、立体異性体、もしくは互変異性体を投与することを含む、方法に関する。
2021524865.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の塩：
【化３１】
2021524865.tif 000035
またはそのエナンチオマー、立体異性体、もしくは互変異性体、
（式中、
Ａは、ＮＲａＲｂであり；
Ｍ１は、無機カチオンであり；
Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、または−［ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ］ｎ−Ｒａであり、
またはＲ１及びＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換された５員複素環式環を形成し；
Ｒａ及びＲｂは、独立して、各存在において、Ｈ、またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、前記アルキルは、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されており；
ｋは、１または２であり；
ｎは、１〜８の整数であり、
但し、Ｍ１は、Ｎａではない）。
【請求項２】
Ｍ１は、Ｌｉ＋、Ｋ＋、Ｒｂ＋、Ｃｓ＋、Ｂｅ２＋、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｓｒ２＋、Ｚｎ２＋、及びＢａ２＋からなる群から選択されるカチオンである、請求項１に記載の塩。
【請求項３】
Ｍ１は、Ｋ＋である、請求項１〜２のいずれか１項に記載の塩。
【請求項４】
Ｍ１は、Ｌｉ＋である、請求項１〜２のいずれか１項に記載の塩。
【請求項５】
Ｍ１は、Ｒｂ＋である、請求項１〜２のいずれか１項に記載の塩。
【請求項６】
Ｒ１は、Ｈである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の塩。
【請求項７】
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ３アルキルである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の塩。
【請求項８】
Ｒ２は、Ｈである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の塩。
【請求項９】
Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ３アルキルである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の塩。
【請求項１０】
【化３２】
2021524865.tif 000036
【化３３】
2021524865.tif 000037
【化３４】
2021524865.tif 000038
及び
【化３５】
2021524865.tif 000039
からなる群から選択される、請求項１に記載の塩。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の塩及び薬学的に許容可能な担体を含む薬学的組成物。
【請求項１２】
加齢関連不妊症を治療または予防する方法であって、それを必要とする対象に、有効量の式Ｉの塩：
【化３６】
2021524865.tif 000040
またはそのエナンチオマー、立体異性体、もしくは互変異性体、
（式中、
Ａは、ＮＲａＲｂであり；
Ｍ１は、無機カチオンであり；
Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、または−［ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ］ｎ−Ｒａであり、
またはＲ１及びＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換された５員複素環式環を形成し；
Ｒａ及びＲｂは、独立して、各存在において、Ｈ、またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、前記アルキルは、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されており；
ｋは、１または２であり；
ｎは、１〜８の整数である）
を投与することを含む、前記方法。
【請求項１３】
不妊症を治療または予防する方法であって、それを必要とする対象に、有効量の式Ｉの塩：
【化３７】
2021524865.tif 000041
またはそのエナンチオマー、立体異性体、もしくは互変異性体、
（式中、
Ａは、ＮＲａＲｂであり；
Ｍ１は、無機カチオンであり；
Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、または−［ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ］ｎ−Ｒａであり、
またはＲ１及びＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換された５員複素環式環を形成し；
Ｒａ及びＲｂは、独立して、各存在において、Ｈ、またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、前記アルキルは、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されており；
ｋは、１または２であり；
ｎは、１〜８の整数である）
を投与することを含む、前記方法。
【請求項１４】
卵母細胞または胚盤胞の質及び成熟を改善する方法であって、前記卵母細胞または胚盤胞を、加齢関連不妊症の治療を必要とする対象への着床前に、有効量の式Ｉの塩：
【化３８】
2021524865.tif 000042
またはそのエナンチオマー、立体異性体、もしくは互変異性体、
（式中、
Ａは、ＮＲａＲｂであり；
Ｍ１は、無機カチオンであり；
Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、または−［ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ］ｎ−Ｒａであり、
またはＲ１及びＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換された５員複素環式環を形成し；
Ｒａ及びＲｂは、独立して、各存在において、Ｈ、またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、前記アルキルは、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されており；
ｋは、１または２であり；
ｎは、１〜８の整数である）
と接触させることを含む、前記方法。
【請求項１５】
卵母細胞または胚盤胞の質及び成熟を改善する方法であって、前記卵母細胞または胚盤胞を、加齢関連不妊症の治療を必要とする対象への着床前に、有効量の
【化３９】
2021524865.tif 000043
またはそのエナンチオマー、立体異性体、もしくは互変異性体、
（式中、
Ａは、ＮＲａＲｂであり；
Ｍ１は、無機カチオンであり；
Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、または−［ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ］ｎ−Ｒａであり、
またはＲ１及びＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換された５員複素環式環を形成し；
Ｒａ及びＲｂは、独立して、各存在において、Ｈ、またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、前記アルキルは、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されており；
ｋは、１または２であり；
ｎは、１〜８の整数である）
の塩と接触させることを含む、前記方法。
【請求項１６】
前記卵母細胞または胚盤胞は、前記塩を含有するＩＶＦ培地で培養される、請求項１４または１５に記載の方法。
【請求項１７】
式Ｉの塩：
【化４０】
2021524865.tif 000044
またはそのエナンチオマー、立体異性体、もしくは互変異性体、
（式中、
Ａは、ＮＲａＲｂであり；
Ｍ１は、無機カチオンであり；
Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、または−［ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ］ｎ−Ｒａであり、
またはＲ１及びＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換された５員複素環式環を形成し；
Ｒａ及びＲｂは、独立して、各存在において、Ｈ、またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、前記アルキルは、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されており；
ｋは、１または２であり；
ｎは、１〜８の整数である）
の、加齢関連障害を治療するための薬剤の製造における使用。
【請求項１８】
式Ｉの塩：
【化４１】
2021524865.tif 000045
またはそのエナンチオマー、立体異性体、もしくは互変異性体、
（式中、
Ａは、ＮＲａＲｂであり；
Ｍ１は、無機カチオンであり；
Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、または−［ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ］ｎ−Ｒａであり、
またはＲ１及びＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換された５員複素環式環を形成し；
Ｒａ及びＲｂは、独立して、各存在において、Ｈ、またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、前記アルキルは、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されており；
ｋは、１または２であり；
ｎは、１〜８の整数である）
の、不妊症を治療するための薬剤の製造における使用。
【請求項１９】
式Ｉの塩：
【化４２】
2021524865.tif 000046
またはそのエナンチオマー、立体異性体、もしくは互変異性体、
（式中、
Ａは、ＮＲａＲｂであり；
Ｍ１は、無機カチオンであり；
Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、または−［ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ］ｎ−Ｒａであり、
またはＲ１及びＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換された５員複素環式環を形成し；
Ｒａ及びＲｂは、独立して、各存在において、Ｈ、またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、前記アルキルは、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されており；
ｋは、１または２であり；
ｎは、１〜８の整数である）
の、加齢関連不妊症を治療するための薬剤の製造における使用。
【請求項２０】
式Ｉの塩：
【化４３】
2021524865.tif 000047
の調製のためのプロセスであって、式ＩＩの化合物
【化４４】
2021524865.tif 000048
を、式Ｉの生成物塩を製造するのに有効な条件下で金属−アルカリ水酸化物と接触させることを含む、前記プロセス。
【請求項２１】
前記金属−アルカリ水酸化物は、式ＩＩの前記化合物の溶液に滴下添加される、請求項２０に記載のプロセス。
【請求項２２】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの受精のための細胞培養培地であって：
式Ｉの塩：
【化４５】
2021524865.tif 000049
またはそのエナンチオマー、立体異性体、もしくは互変異性体、
（式中、
Ａは、ＮＲａＲｂであり；
Ｍ１は、無機カチオンであり；
Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、または−［ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ］ｎ−Ｒａであり、
またはＲ１及びＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換された５員複素環式環を形成し；
Ｒａ及びＲｂは、独立して、各存在において、Ｈ、またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、前記アルキルは、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されており；
ｋは、１または２であり；
ｎは、１〜８の整数である）；及び
培養剤
を含む、前記細胞培養培地。
【請求項２３】
前記培養剤は、無機塩、エネルギー基質、アミノ酸、キレート剤、ｐＨ指示剤、抗生物質、血清、ビタミン、成長因子、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項２２に記載の細胞培養培地。
【請求項２４】
前記無機塩は、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、硫酸マグネシウム、塩化カリウム、重炭酸ナトリウム、塩化ナトリウム、リン酸一ナトリウム、リン酸二ナトリウム、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項２３に記載の細胞培養培地。
【請求項２５】
前記エネルギー基質は、グルコース、ピルベート、ラクテート、ピルベート、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項２３に記載の細胞培養培地。
【請求項２６】
前記アミノ酸は、必須アミノ酸である、請求項２３に記載の細胞培養培地。
【請求項２７】
前記必須アミノ酸は、アルギニン、システイン、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項２６に記載の細胞培養培地。
【請求項２８】
前記アミノ酸は、非必須アミノ酸である、請求項２３に記載の細胞培養培地。
【請求項２９】
前記非必須アミノ酸は、アラニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、プロリン、セリン、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項２８に記載の細胞培養培地。
【請求項３０】
前記キレート剤は、クラスロキレート、アセチルアセトン、アミノポリカルボン酸、ＡＴＭＰ、ＢＡＰＴＡ、ＢＤＴＨ２、クエン酸、クリプタンド、デフェラシロックス、２，３−ジヒドロ安息香酸、２，３−ジメルカプト−１−プロパンスルホン酸、ジメルカプトコハク酸、ＤＯＴＡ、ＤＴＰＭＰ、ＥＤＤＨＡ、ＥＤＤＳ、ＥＤＴＭＰ、エチドロン酸、ｆｕｒａ−２、グルコン酸、ホモクエン酸、イミノ二酢酸、Ｉｎｄｏ−１、ニトリル三酢酸、ペンテト酸（ＤＴＰＡ）、ホスホネート、フィトケラチ、ポリアスパラギン酸、ポリアスパラギン酸ナトリウム、クエン酸三ナトリウム、トランスフェリン、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項２３に記載の細胞培養培地。
【請求項３１】
前記ｐＨ指示剤は、フェノールレッド、ブロモチモールブルー、アリザリンレッド、９−アミノアクリジン、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項２３に記載の細胞培養培地。
【請求項３２】
前記抗生物質は、アクチノマイシンＤ、アンピシリン、カルベニシリン、セフォタキシム、ホスミドマイシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ペニシリン、ポリミキシンＢ、ストレプトマイシン、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項２３に記載の細胞培養培地。
【請求項３３】
前記血清は、ヒト血清アルブミン、ウシ血清アルブミン、ウシ胎児血清、合成血清、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項２３に記載の細胞培養培地。
【請求項３４】
前記ビタミンは、アスコルビン酸、ビオチン、メナジオン重亜硫酸ナトリウム、マイトマイシンＣ、ピリドキサミン二塩酸塩、酢酸レチニル、（−）−リボフラビン、（＋）−Ｌ−アスコルビン酸ナトリウム、（＋）−α−トコフェロール、ビタミンＢ１２、塩酸チアミン、ｉ−イノシトール、塩酸ピリドキサール、ニコチンアミド、葉酸、Ｄ−パントテン酸カルシウム、塩化コリン、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項２３に記載の細胞培養培地。
【請求項３５】
前記成長因子は、アドレノメデュリン、アンジオポエチン、骨形態形成タンパク質、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、表皮成長因子、エフリン、エリスロポエチン、線維芽細胞成長因子、成長分化因子−９、肝細胞成長因子、インスリン、インスリン様成長因子、インターロイキン、ケラチノサイト成長因子、遊走刺激因子、マクロファージ刺激タンパク質、ミオスタチン、ニューロトロフィン、ｔ細胞成長因子、トロンボポエチン、形質転換成長因子、腫瘍壊死因子−アルファ、血管内皮成長因子、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項２３に記載の細胞培養培地。
【請求項３６】
前記細胞培養培地は、卵母細胞、接合子、胚盤胞、またはそれらの任意の組み合わせをさらに含む、請求項２２に記載の細胞培養培地。
【請求項３７】
請求項２０に記載のプロセスによって製造される式Ｉの塩：
【化４６】
2021524865.tif 000050
またはそのエナンチオマー、立体異性体、もしくは互変異性体、
（式中、
Ａは、ＮＲａＲｂであり；
Ｍ１は、無機カチオンであり；
Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、または−［ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ］ｎ−Ｒａであり、
またはＲ１及びＲ２、それらが結合している原子と一緒になって、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換された５員複素環式環を形成し；
Ｒａ及びＲｂは、独立して、各存在において、Ｈ、またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、前記アルキルは、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されており；
ｋは、１または２であり；
ｎは、１〜８の整数である）。
【請求項３８】
前記塩は、
【化４７】
2021524865.tif 000051
である、請求項３７に記載の塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２０１８年５月１５日に出願された米国仮出願第６２／６７１，８０７号に対する優先権及びその利益を主張し、その内容はそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本発明は、加齢に関連する障害及び疾患の治療に有用なニコチンアミドモノヌクレオチドの無機塩及びその組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
加齢は、生物学的、物理的、及び生化学的なプロセスを含む複雑な相互作用の結果であり、これは、様々な病気及び他のアウトカムとして現れる細胞及び器官の機能不全を引き起こす。例えば、女性の生殖能力は、加齢の影響を著しく受けやすい。例えば、米国疾病管理センター（ＵＳＡ  Ｃｅｎｔｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ）は、生殖補助技術（ＡＲＴ）に関連する妊娠の割合及び出生の割合は、３０代半ば以降の女性の間で、単胎生児出生をもたらすＡＲＴサイクルのおよそ２５％から４０歳までに１４％に徐々に減少したと報告している（Ｃｅｎｔｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ａｎｄ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．２０１１  Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｕｍｍａｒｙ  Ｒｅｐｏｒｔ．Ａｔｌａｎｔａ（ＧＡ）：ＵＳ  Ｄｅｐｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ；２０１３）。この傾向は４０歳超で著しく増加し、ＣＤＣは、４４歳を超える女性が、非常に低い成功可能性を有すると報告している。生児出生及び単胎生児出生の割合は、このグループにおいて約１％まで低下した。女性の年齢は、自身の卵子（卵母細胞）が使用される場合、生児出生の機会に影響を及ぼす最も重要な要因であると一般的に考えられている。
【０００３】
加齢による卵母細胞の質的劣化は、受胎能力の低下における基礎的要因であることが理解される。より高齢の女性では、例えば、卵母細胞は、異常な染色体分裂を受けやすく、ミトコンドリアの質の低下、低いＡＴＰ生成、酸化ストレスの増加、及び抗酸化レベルの低下を示すことが報告されている（Ｎｅｌｓｏｎ  ＳＭ，Ｔｅｌｆｅｒ  ＥＥ，Ａｎｄｅｒｓｏｎ  ＲＡ．Ｔｈｅ  ａｇｅｉｎｇ  ｏｖａｒｙ  ａｎｄ  ｕｔｅｒｕｓ：ｎｅｗ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｉｎｓｉｇｈｔｓ．Ｈｕｍ  Ｒｅｐｒｏｄ  Ｕｐｄａｔｅ．２０１３；１９：６７−８３．；Ｗｉｌｄｉｎｇ  Ｍ．Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｒｉｓｋｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｍａｔｅｒｎａｌ  ａｇｉｎｇ（ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ）．Ｆｅｒｔｉｌ  Ｓｔｅｒｉｌ．２０１５；１０３：１３９７−４０１；３．Ｍｅｌｄｒｕｍ  ＤＲ，Ｃａｓｐｅｒ  ＲＦ，Ｄｉｅｚ−Ｊｕａｎ  Ａ，Ｓｉｍｏｎ  Ｃ，Ｄｏｍａｒ  ＡＤ，Ｆｒｙｄｍａｎ  Ｒ．Ａｇｉｎｇ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ  ａｆｆｅｃｔ  ｇａｍｅｔｅ  ａｎｄ  ｅｍｂｒｙｏ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ：ｃａｎ  ｗｅ  ｉｎｔｅｒｖｅｎｅ？Ｆｅｒｔｉｌ  Ｓｔｅｒｉｌ．２０１６；１０５：５４８−５９）。
【０００４】
前述のすべての理由のため、卵母細胞は、加齢プロセスに対する影響を有し、さらに、加齢関連不妊症に対処する可能性を提供することが予期される治療様式の評価のための優れた標的組織を表す。
【０００５】
加齢を治療するためのそのような可能性のある１つの治療様式は、ＮＡＤ＋の治療レベルを高める薬剤を含む。ＮＡＤ＋は、様々な代謝機能をサポートするために必要な細胞プロセスの必須成分である。ＮＡＤ＋の古典的役割は、解糖、脂肪酸ベータ酸化、またはトリカルボン酸サイクルなどの多くの基礎的代謝プロセスにおいて、細胞の酸化還元反応を触媒し、還元されてＮＡＤＨになる補酵素である。また、これらの役割を果たすために、ＮＡＤ＋は、ポリ−ＡＤＰ−リボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）、サーチュイン、及びＣＤ３８／１５７外酵素などのＮＡＤ＋消費酵素の基質として重要な役割を有する。これらのＮＡＤ＋消費酵素は、多くの基礎的細胞プロセスを媒介することが知られている。
【０００６】
ＮＡＤ＋を合成するための５つの主要な前駆体及び中間体：トリプトファン、ニコチンアミド、ニコチン酸（ＮＡ）、ニコチンアミドリボシド（ＮＲ）、及びニコチンアミドモノヌクレオチド（ＮＭＮ）が存在する。ＮＡＤ＋は、アミノ酸トリプトファンが複数の酵素的工程を介してニコチン酸モノヌクレオチド（ＮａＭＮ）に変換することによってデノボ合成され得る。ＮａＭＮは、ＮＭＮ／ＮａＭＮアデニリルトランスフェラーゼ（ＮＭＮＡＴ）によってニコチン酸ジヌクレオチド（ＮａＡＤ＋）に変換され、次いでＮＡＤ＋シンターゼによってＮＡＤ＋にアミド化される。
【０００７】
哺乳動物では、ＮＡＤ＋生合成の主要な経路は、ニコチンアミドからのサルベージ経路である。ニコチンアミドは、この経路における律速酵素であるニコチンアミドホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＮＡＭＰＴ）によって重要なＮＡＤ＋中間体であるＮＭＮに変換される。次いでＮＭＮＡＴは、ＮＭＮをＮＡＤ＋に変換する。ＮＡＭＰＴは、細胞ＮＡＤ＋レベルの制御に重要な役割を果たす。一方、ニコチン酸は、ニコチン酸ホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＮＰＴ）によってＮａＭＮに変換される。ＮＲは、ＮＲ１６をリン酸化するニコチンアミドリボースキナーゼ、すなわち、ＮＭＲＫ１及びＮＭＲＫ２（ＮＲＫ１及びＮＲＫ２としても知られている）によってＮＭＮに変換される必要がある。適切なＮＡＤ＋生合成の維持は、細胞の生存及び機能にとって最重要である。正常なＮＡＤ＋恒常性からの悪化は、酸化還元反応に必要なＮＡＤ＋／ＮＡＤＨプールだけでなく、重要な細胞機能のためのＮＡＤ＋依存性酵素の活性にも実質的に影響を及ぼす。
【０００８】
現在では、ＮＡＤ＋レベルが、加齢の過程の間に細胞、組織／器官、及び生物レベルで低下するというコンセンサスになりつつある。ＮＡＤ＋消費酵素の活性は、このＮＡＤ＋低下によって影響を受け、広範囲の加齢関連病態生理に寄与している。
【０００９】
ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドは、還元酸化反応及びエネルギー代謝に関連するいくつかの酵素の機能にとって必須の酵素共因子である。（Ｋａｔｒｉｎａ  Ｌ．Ｂｏｇａｎ  ＆  Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｂｒｅｎｎｅｒ，Ｎｉｃｏｔｉｎｉｃ  Ａｃｉｄ，Ｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ  ａｎｄ  Ｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ  Ｒｉｂｏｓｉｄｅ：Ａ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＮＡＤ＋Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ  Ｖｉｔａｍｉｎｓ  ｉｎ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎｓ，２８，Ａｎｎｕａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ  １１５（２００８）。ＮＡＤ＋は、アミノ酸、脂肪酸及び炭水化物のエネルギー代謝において電子担体として機能する（Ｂｏｇａｎ  ＆  Ｂｒｅｎｎｅｒ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｕｔｒ．２００８，２８，１１５−１３０）。ＮＡＤ＋は、酸化還元反応のため、ならびにＤＮＡ修復、エネルギー代謝、細胞生存及び概日リズム（これらはすべて加齢プロセスにおいて重要であることが示されている）の制御において、ＰＡＲＰ（ポリアデノシド二リン酸リボースポリメラーゼ）及びサーチュイン（ＳＩＲＴ１〜ＳＩＲＴ７）によるシグナル伝達のための基質として重要である（Ｂｒｏｎｋｏｗｓｋｉ，Ｍ．Ｓ．＆  Ｓｉｎｃｌａｉｒ，Ｄ．，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｍｏｌｅ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏ．，１７，６７９−６９０，（２０１６））。ＮＡＤ＋濃度の上昇は、酵母、ハエ及びマウスにおける加齢を遅らせる（Ｍｏｕｃｈｉｒｏｕｄ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ  １５４，４６４−４７１，（２０１４））。また、最近では、ＮＡＤ＋がタンパク質−タンパク質相互作用を直接制御し、その調節は、がん及び放射線被曝から保護し、加齢に対する直接的影響を有し得ることも実証されている（Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３５５，１３１２−１３１７，２０１７）。よって、ＮＭＮ及びＮＲなどのＮＡＤ＋中間体を使用した介入は、利用可能なＮＡＤ＋を復元させることによって系を強化し、加齢に関連する生理的衰えを緩和し得るという考えを支持する証拠物が増えている。
【００１０】
ＮＡＤ＋は、アミノ酸トリプトファンからデノボ合成され得るが、このプロセスは、すべての組織で生じるわけではなく、ほとんどの細胞は、主に食事源を介して利用可能となる他の細胞内中間体からＮＡＤ＋を再生するためのサルベージ経路（上述）に依存することが必要となる（Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ  Ｒ．Ｍａｒｔｅｎｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｃｏｍｍｕｎ．９，１２８６，（２０１８）及びＢｏｇａｎ，Ｋ．Ｌ．＆  Ｂｒｅｎｎｅｒ，Ｃ．，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｕｔｒ．２８，１１５−１３０，（２００８））。ニコチン酸及びニコチンアミドのような他のＮＡＤ前駆体もまた、ＮＡＤ細胞生物利用可能性を高めるために投与され得る。しかしながら、ニコチン酸の臨床的に関連するレベルは、治療用量で望ましくないフラッシングに関連しており（ＭａｃＫａｙ，Ｄ．，Ｈａｔｈｃｏｃｋ，Ｊ．＆  Ｇｕａｒｎｅｒｉ，Ｅ．，Ｎｕｔｒ．Ｒｅｖ．７０，３５７−３６６（２０１２））、ニコチンアミドは、ＮＡＤの濃度の上昇にもかかわらずサーチュインを確実には活性化しない（阻害さえし得る）（Ｂｉｔｔｅｒｍａｎ，Ｋ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７，４５０９９−４５１０７（２００２）；Ｇｕａｎ，Ｘ．，ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ．９，ｅ１０７７２９（２０１４）；及びＴｒａｍｍｅｌｌ，Ｓ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔ．Ｃｏｍｍｕｎ．７，１２９４８（２０１６））。そのため、ニコチン酸またはニコチンアミドの投与は、加齢に伴う健康及び機能を維持するために広く採用される可能性は低い。
【００１１】
ニコチン酸及びニコチンアミドとは対照的に、ニコチンアミドモノヌクレオチド（ＮＭＮ）またはニコチンアミドリボシド（ＮＲ）などのＮＡＤ＋代謝物の投与は、ＮＡＤ＋のレベルを増加させるようであり、動物モデルにおいて複数の生理的機能を改善する（Ｙｏｓｈｉｎｏ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｍｅｔａｂ．１４，５２８−５３６（２０１１）；Ｍｉｌｌｓ，Ｋ．Ｆ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｍｅｔａｂ．２４，７９５−８０６（２０１６）；及びＦｒｅｄｅｒｉｃｋ，Ｄ．Ｗ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｍｅｔａｂ．２４，２６９−２８２（２０１６））。これらの代謝物のうち少なくとも１つは、ヒトにおいてよく忍容され、ＮＡＤレベルの上昇及び生理的機能の改善につながることが報告されているが、この探索的研究の知見を確認するためにはさらなる研究が必要である（Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ  Ｒ．Ｍａｒｔｅｎｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｃｏｍｍｕｎ．９，１２８６，（２０１８））。さらに、最近の研究では、ＮＲの単回用量は、健康なヒトにおいて血液細胞ＮＡＤ＋代謝を用量依存的様式で刺激することが示され（Ｔｒａｍｍｅｌｌ，Ｓ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｃｏｍｍｕｎ．７，１２９４８（２０１６））、この代謝物の限界を示している。しかしながら、既知のＮＡＤ＋代謝物の多くは、様々な生理的環境において不安定であり、よって、そのような代謝物を必要とする患者においてＮＡＤ＋レベルを高めるための前記患者への投与用の実行可能な薬学的薬物とはならない。
重要な細胞及び生理的経路においてＮＡＤ＋が果たす中心的役割を考慮すると、疾患状態においてまたは加齢プロセスの間にＮＡＤ＋レベルを上昇させ得る改善した特性を有する新規な安定剤を開発することが、ヒトの状態を改善するために必要である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Ｃｅｎｔｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ａｎｄ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．２０１１  Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｕｍｍａｒｙ  Ｒｅｐｏｒｔ．Ａｔｌａｎｔａ（ＧＡ）：ＵＳ  Ｄｅｐｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ；２０１３
【非特許文献２】Ｎｅｌｓｏｎ  ＳＭ，Ｔｅｌｆｅｒ  ＥＥ，Ａｎｄｅｒｓｏｎ  ＲＡ．Ｔｈｅ  ａｇｅｉｎｇ  ｏｖａｒｙ  ａｎｄ  ｕｔｅｒｕｓ：ｎｅｗ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｉｎｓｉｇｈｔｓ．Ｈｕｍ  Ｒｅｐｒｏｄ  Ｕｐｄａｔｅ．２０１３；１９：６７−８３
【非特許文献３】Ｗｉｌｄｉｎｇ  Ｍ．Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｒｉｓｋｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｍａｔｅｒｎａｌ  ａｇｉｎｇ（ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ）．Ｆｅｒｔｉｌ  Ｓｔｅｒｉｌ．２０１５；１０３：１３９７−４０１
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本明細書では、驚くべきことに細胞ＮＡＤ＋レベルをＮＭＮよりも高い程度まで増加させるＮＭＮの無機塩が提供される。
【００１４】
本開示の一態様は、式（Ｉ）の塩：（Ｉ）、
【化１】
2021524865.tif 000003
ならびにそのエナンチオマー、立体異性体、及び互変異性体、
（式中、
Ａは、ＮＲａＲｂであり；
Ｍ１は、無機カチオンであり；
Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、または−［ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ］ｎ−Ｒａであり、
またはＲ１及びＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換された５員複素環式環を形成し；
Ｒａ及びＲｂは、独立して、各存在において、Ｈ、またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、そのアルキルは、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されており；
ｋは、１または２であり；
ｎは、１〜８の整数であり、
但し、Ｍ１は、Ｎａではない）に関する。
【００１５】
本開示の別の態様は、薬学的に許容可能な担体と併せられた式Ｉａの塩、またはその薬学的に許容可能な塩を含む薬学的組成物に関する。
【００１６】
本開示の別の態様は、加齢関連不妊症を治療または予防する方法であって、それを必要とする対象に、有効量の式（Ｉ）の塩、またはそのエナンチオマー、立体異性体、もしくは互変異性体を投与することを含む、方法に関する。
【００１７】
本開示の別の態様は、不妊症を治療または予防する方法であって、それを必要とする対象に、有効量の式（Ｉ）の塩、またはそのエナンチオマー、立体異性体、もしくは互変異性体を投与することを含む、方法に関する。
【００１８】
本開示の別の態様は、加齢関連不妊症を治療するための薬剤の製造において使用するための、式（Ｉ）の塩、またはそのエナンチオマー、立体異性体、もしくは互変異性体に関する。
【００１９】
本開示の別の態様は、不妊症の治療において使用するための薬剤の製造において使用するための式（Ｉ）の塩、またはそのエナンチオマー、立体異性体、もしくは互変異性体に関する。
【００２０】
別の態様では、本発明は、加齢関連障害を治療または予防する方法であって、それを必要とする対象に、治療的有効量の式Ｉの塩の薬学的組成物を投与することを含む、方法に関する。
【００２１】
本開示の別の態様は、卵母細胞の質及び成熟を改善する方法であって、それを必要とする対象に、治療的有効量の式Ｉの塩を投与することを含む、方法に関する。
【００２２】
本開示の別の態様は、加齢関連障害を治療するための薬剤の製造における式（Ｉ）の塩、またはそのエナンチオマー、立体異性体、もしくは互変異性体の使用に関する。
【００２３】
別の態様では、本発明は、加齢関連不妊症の治療のための、対象への着床前のｅｘ  ｖｉｖｏでの式（Ｉ）の塩での卵母細胞の治療を含む。
【００２４】
別の態様では、本発明は、加齢関連不妊症の治療のための、対象への着床前のｅｘ  ｖｉｖｏでの式（Ｉ）の塩での胚盤胞の治療を含む。
【００２５】
別の態様では、本発明は、不妊症の治療のための、対象への着床前のｅｘ  ｖｉｖｏでの式（Ｉ）の塩での卵母細胞の治療を含む。
【００２６】
別の態様では、本発明は、不妊症の治療のための、対象への着床前のｅｘ  ｖｉｖｏでの式（Ｉ）の塩での胚盤胞の治療を含む。
【００２７】
別の態様では、式（Ｉ）の塩は、加齢関連障害の治療における使用のためのｅｘ  ｖｉｖｏでの細胞の治療における使用のための溶液中の成分として提供される。いくつかの実施形態では、加齢関連障害は、加齢関連不妊症である。他の態様では、式（Ｉ）の塩は、不妊症の治療における使用のためのｅｘ  ｖｉｖｏでの細胞の治療における使用のための溶液中の成分として提供される。
【００２８】
本開示の別の態様は、式（Ｉ）の塩を調製するためのプロセスであって、式Ｉの塩を生成するのに有効な好適な条件下で式ＩＩのニコチンアミドモノヌクレオチド誘導体を金属−アルカリ水酸化物と接触させることを含む、プロセスに関する。
【００２９】
本開示はまた、疾患または障害からの回復を加速させる方法に関する。その方法は、それを必要とする対象に、前記疾患の指示された治療と組み合わせて有効量の式（Ｉ）の塩を投与することを含む。
【００３０】
別の態様では、本開示は、式（Ｉ）の１つ以上の塩及び培養剤を含むｉｎ  ｖｉｔｒｏでの受精のための細胞培養培地に関する。
【００３１】
本開示の別の態様は、式Ｉの塩を生成するのに有効な好適な条件下で式ＩＩのニコチンアミドモノヌクレオチド誘導体を金属−アルカリ水酸化物と接触させることを含むプロセスによって調製された式Ｉの塩に関する。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
本開示は、他のそのような障害の中でも加齢関連不妊症などの加齢関連障害を治療または予防するのに有用な式（Ｉ）の塩及びそれを含む組成物に関する。本開示の方法は、抗加齢プロセスを予防または改善し、細胞復元プロセスを補助することによって様々な疾患及び障害の治療に使用され得る。
【００３３】
式（Ｉ）の塩は、強力であり、臨床的に達成可能な用量で有効であり、様々な潜在的な投薬形態で安定であり、許容可能な溶解度、許容可能なｐＨを有し、結晶性であり、水を吸収する傾向が低く、取り扱いの容易性を示し、これらのすべてが薬剤の開発、製造及び使用と一致する。また、本明細書に開示される塩は、細胞ＮＡＤ＋レベルの増加に対する生物学的活性の増加を提供する。
【００３４】
本開示の一態様は、式Ｉの塩
【化２】
2021524865.tif 000004
（式中、Ａ、ｋ、Ｍ１、Ｒ１及びＲ２は、本明細書に記載されているとおりである）に関する。
【００３５】
冠詞「ａ」及び「ａｎ」は、本開示において、その冠詞の文法的目的語の１つまたは２つ以上（すなわち、少なくとも１つ）を指すために使用される。一例として、「要素（ａｎ  ｅｌｅｍｅｎｔ）」は、１つの要素または２つ以上の要素を意味する。
【００３６】
用語「及び／または」は、特に示されない限り、本開示において、「及び」あるいは「または」のいずれかを意味するために使用される。
【００３７】
用語「任意に置換されている」は、所定の化学部分（例えば、アルキル基）が、他の置換基（例えば、ヘテロ原子）に結合することができる（しかし、必須ではない）ことを意味すると理解される。例えば、任意に置換されているアルキル基は、完全飽和アルキル鎖（すなわち、純粋な炭化水素）であり得る。あるいは、同じ任意に置換されたアルキル基は、水素とは異なる置換基を有し得る。例えば、鎖に沿った任意の点で、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、または本明細書に記載されている他の任意の置換基に結合し得る。したがって、用語「任意に置換されている」は、所定の化学部分が他の官能基を含有する可能性を有するが、必ずしも任意のさらなる官能基を有するわけではないことを意味する。記載された基の任意置換に使用される好適な置換基には、限定されないが、ハロゲン、オキソ、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＣＨ２ＣＮ、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ６）ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、−Ｏ−（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、−Ｏ−（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニル、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＯＣ（Ｏ）（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｃ（Ｏ）（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）２、−ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｓ（Ｏ）２（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｓ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、及びＳ（Ｏ）Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）２が含まれる。置換基は、任意に、それ自体が置換されていてもよい。「任意に置換されている」は、また、本明細書で使用されるとき、置換されていること、または非置換であることを指し、これらの意味は下記に記載されている。
【００３８】
本明細書で使用されるとき、用語「置換されている」は、特定の基または部分が１つ以上の適切な置換基を有し、その置換基が、１つ以上の位置で特定の基または部分に接続し得ることを意味する。例えば、シクロアルキルで置換されているアリールは、シクロアルキルが、結合によって、またはアリールと融合して２個以上の共通の原子を共有することによって、アリールの１個の原子に接続していることを示し得る。
【００３９】
本明細書で使用されるとき、用語「非置換」は、特定の基が置換基を有さないことを意味する。
【００４０】
特に明確に定義されない限り、用語「アリール」は、フェニル、ビフェニル、またはナフチルなどの単環式または二環式基を含む、１〜３つの芳香環を有する環式芳香族炭化水素基を指す。２つの芳香環（二環式など）を含有する場合、アリール基の芳香環は、一点で接合され得る（例えば、ビフェニル）、または縮合され得る（例えば、ナフチル）。アリール基は、任意に、１つ以上の置換基、例えば１〜５つの置換基で任意の結合点において置換されていてもよい。例示的な置換基には、−Ｈ、−ハロゲン、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、−Ｏ−（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニル、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＯＣ（Ｏ）（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｃ（Ｏ）（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ＮＨ２、ＮＨ（（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）、Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）２、−Ｓ（Ｏ）２−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｓ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、及びＳ（Ｏ）Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）２が含まれるがこれらに限定されない。置換基は、任意に、それ自体が置換されていてもよい。さらに、２つの縮合環を含有する場合、本明細書で定義されるアリール基は、完全芳香族環と縮合した飽和または部分飽和環を有し得る。これらのアリール基の例示的な環系には、フェニル、ビフェニル、ナフチル、アントラセニル、フェナレニル、フェナントレニル、インダニル、インデニル、テトラヒドロナフタレニル、テトラヒドロベンゾアヌレニルなどが含まれるがこれらに限定されない。
【００４１】
特に明記しない限り、「ヘテロアリール」とは、Ｎ、Ｏ、またはＳから選択される１つ以上の環ヘテロ原子を含有し、残りの環原子がＣである５〜２４個の環原子の一価の単環式または多環式芳香族ラジカルを意味する。本明細書中で定義するヘテロアリールはまた、ヘテロ原子がＮ、Ｏ、またはＳから選択される二環式ヘテロ芳香族基を意味する。芳香族ラジカルは、本明細書に記載されている１つ以上の置換基で任意に独立して置換されている。例には、フリル、チエニル、ピロリル、ピリジル、ピラゾリル、ピリミジニル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、ピラジニル、インドリル、チオフェン−２−イル、キノリル、ベンゾピラニル、イソチアゾリル、チアゾリル、チアジアゾール、インダゾール、ベンズイミダゾリル、チエノ［３，２−ｂ］チオフェン、トリアゾリル、トリアジニル、イミダゾ［１，２−ｂ］ピラゾリル、フロ［２，３−ｃ］ピリジニル、イミダゾ［１，２−ａ］ピリジニル、インダゾリル、ピロロ［２，３−ｃ］ピリジニル、ピロロ［３，２−ｃ］ピリジニル、ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリジニル、チエノ［３，２−ｃ］ピリジニル、チエノ［２，３−ｃ］ピリジニル、チエノ［２，３−ｂ］ピリジニル、ベンゾチアゾリル、インドリル、インドリニル、インドリノニル、ジヒドロベンゾチオフェニル、ジヒドロベンゾフラニル、ベンゾフラン、クロマニル、チオクロマニル、テトラヒドロキノリニル、ジヒドロベンゾチアジン、ジヒドロベンゾキサニル、キノリニル、イソキノリニル、１，６−ナフチリジニル、ベンゾ［ｄｅ］イソキノリニル、ピリド［４，３−ｂ］［１，６］ナフチリジニル、チエノ［２，３−ｂ］ピラジニル、キナゾリニル、テトラゾロ［１，５−ａ］ピリジニル、［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジニル、イソインドリル、ピロロ［２，３−ｂ］ピリジニル、ピロロ［３，４−ｂ］ピリジニル、ピロロ［３，２−ｂ］ピリジニル、イミダゾ［５，４−ｂ］ピリジニル、ピロロ［１，２−ａ］ピリミジニル、テトラヒドロピロロ［１，２−ａ］ピリミジニル、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１□２−ピロロ［２，１−ｂ］ピリミジン、ジベンゾ［ｂ，ｄ］チオフェン、ピリジン−２−オン、フロ［３，２−ｃ］ピリジニル、フロ［２，３−ｃ］ピリジニル、１Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］［１，４］チアジニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、フロ［２，３−ｂ］ピリジニル、ベンゾチオフェニル、１，５−ナフチリジニル、フロ［３，２−ｂ］ピリジン、［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジニル、ベンゾ［１，２，３］トリアゾリル、イミダゾ［１，２−ａ］ピリミジニル、［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｂ］ピリダジニル、ベンゾ［ｃ］［１，２，５］チアジアゾリル、ベンゾ［ｃ］［１，２，５］オキサジアゾール、１，３−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−オン、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［１，５−ｂ］［１，２］オキサジニル、４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジニル、チアゾロ［５，４−ｄ］チアゾリル、イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾリル、チエノ［２，３−ｂ］ピロリル、３Ｈ−インドリル、及びそれらの誘導体が含まれるがこれらに限定されない。さらに、２つの縮合環を含有する場合、本明細書で定義されるヘテロアリール基は、完全芳香族環と縮合した飽和または部分飽和環を有し得る。これらのヘテロアリール基の例示的な環系には、インドリニル、インドリノニル、ジヒドロベンゾチオフェニル、ジヒドロベンゾフラン、クロマニル、チオクロマニル、テトラヒドロキノリニル、ジヒドロベンゾチアジン、３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリニル、２，３−ジヒドロベンゾフラン、インドリニル、インドリル、及びジヒドロベンゾオキサニルが含まれる。
【００４２】
ハロゲンまたは「ハロ」とは、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素を指す。
【００４３】
アルキルとは、１〜１２個の炭素原子を含有する直鎖または分枝鎖の飽和炭化水素を指す。（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基の例には、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、イソプロピル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソペンチル、ネオペンチル、及びイソヘキシルが含まれるがこれらに限定されない。
【００４４】
「アルコキシ」とは、その鎖に末端「Ｏ」を含有する１〜１２個の炭素原子を含有する直鎖または分枝鎖の飽和炭化水素、すなわち、−Ｏ（アルキル）を指す。アルコキシ基の例には、限定されないが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ｔ−ブトキシ、またはペントキシ基が含まれる。
【００４５】
「アルケニル」とは、２〜１２個の炭素原子を含有する直鎖または分枝鎖の不飽和炭化水素を指す。「アルケニル」基は、その鎖に少なくとも１つの二重結合を含有する。アルケニル基の二重結合は、非共役であるか、または他の不飽和基に共役することができる。アルケニル基の例には、エテニル、プロペニル、ｎ−ブテニル、イソ−ブテニル、ペンテニル、またはヘキセニルが含まれる。アルケニル基は、非置換であっても、置換されていてもよい。アルケニルは、本明細書で定義されるとき、分枝鎖または直鎖であり得る。
【００４６】
「アルキニル」とは、２〜１２個の炭素原子を含有する直鎖または分枝鎖の不飽和炭化水素を指す。「アルキニル」基は、その鎖に少なくとも１つの三重結合を含有する。アルケニル基の例には、エチニル、プロパルギル、ｎ−ブチニル、イソ−ブチニル、ペンチニル、またはヘキシニルが含まれる。アルキニル基は、非置換であっても、置換されていてもよい。
【００４７】
用語「アルキレン」または「アルキレニル」は、二価のアルキルラジカルを指す。上述の一価アルキル基のいずれも、アルキルから第２の水素原子を引き抜くことによってアルキレンとなり得る。本明細書で定義されるとき、アルキレンはまた、Ｃ１〜Ｃ６アルキレンであり得る。アルキレンは、さらにＣ１〜Ｃ４アルキレンであり得る。典型的なアルキレン基には、−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−、−Ｃ（ＣＨ３）２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、
−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−などが含まれるがこれらに限定されない。
【００４８】
「シクロアルキル」とは、３〜１８個の炭素原子（例えば−Ｃ３〜Ｃ１０）を含有する単環式または多環式飽和炭素環（例えば、縮合、架橋、またはスピロ環）を意味する。シクロアルキル基の例には、限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプタニル、シクロオクタニル、ノルボラニル、ノルボレニル、ビシクロ［２．２．２］オクタニル、またはビシクロ［２．２．２］オクテニルが含まれる。
【００４９】
「ヘテロシクリル」または「ヘテロシクロアルキル」とは、炭素及び酸素、窒素、または硫黄から得られるヘテロ原子を含有する単環式または多環式環（例えば、縮合、架橋、またはスピロ環）であって、環炭素またはヘテロ原子の間で共有される非局在化□電子（芳香族性）が存在しないものを意味する。ヘテロシクロアルキルは、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２員環であり得る。ヘテロシクロアルキル環構造は、１つ以上の置換基によって置換されていてもよい。置換基は、任意に、それ自体が置換されていてもよい。ヘテロシクリル環の例には、オキセタニル、アゼタジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ピロリジニル、オキサゾリニル、オキサゾリジニル、チアゾリニル、チアゾリジニル、ピラニル、チオピラニル、テトラヒドロピラニル、ジオキサリニル、ピペリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、チオモルホリニルＳ−オキシド、チオモルホリニルＳ−ジオキシド、ピペラジニル、アゼピニル、オキセピニル、ジアゼピニル、トロパニル、オキサゾリジノニル、及びホモトロパニルが含まれるがこれらに限定されない。本開示によれば、３〜１０員ヘテロシクリルとは、３〜１０個の原子を含有する飽和または部分飽和非芳香環構造であって、Ｎ、Ｏ、またはＳの群から選択される少なくとも１つのヘテロ原子が存在するものを指す。
【００５０】
用語「ヒドロキシアルキル」は、アルキル基が１つ以上の−ＯＨ基で置換されている、上記に定義されたアルキル基を意味する。ヒドロキシアルキル基の例には、ＨＯ−ＣＨ２−、ＨＯ−ＣＨ２−ＣＨ２−及びＣＨ３−ＣＨ（ＯＨ）−が含まれる。
【００５１】
用語「ハロアルキル」は、本明細書で使用されるとき、１つ以上のハロゲンで置換されている本明細書で定義されたアルキル基を指す。ハロアルキル基の例には、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、トリクロロメチルなどが含まれるがこれらに限定されない。
【００５２】
用語「ハロアルコキシ」は、本明細書で使用されるとき、１つ以上のハロゲンで置換されている本明細書で定義されたアルコキシ基を指す。ハロアルキル基の例には、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、ペンタフルオロエトキシ、トリクロロメトキシなどが含まれるがこれらに限定されない。
【００５３】
用語「シアノ」は、本明細書で使用されるとき、三重結合によって窒素原子に結合した炭素原子を有する置換基、すなわち、Ｃ≡Ｎを意味する。
【００５４】
用語「アミン」は、本明細書で使用されるとき、第１級（Ｒ−ＮＨ２、Ｒ≠Ｈ）、第２級（Ｒ２−ＮＨ、Ｒ２≠Ｈ）及び第３級（Ｒ３−Ｎ、Ｒ≠Ｈ）アミンを指す。置換アミンは、少なくとも１個の水素原子が置換基に置き換えられているアミンを意味することが意図される。
【００５５】
用語「アミノ」は、本明細書で使用されるとき、少なくとも１個の窒素原子を含有する置換基を意味する。特に、ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）またはアルキルアミノ、−Ｎ（アルキル）２またはジアルキルアミノ、アミド、カルバミド、尿素及びスルファミド置換基が、用語「アミノ」に含まれる。
【００５６】
本明細書中で使用する用語「オキソ」とは、「＝Ｏ」基を指す。
【００５７】
用語「異性体」は、同じ組成及び分子量を有するが、物理的及び／または化学的特性の点で異なる塩及び／または化合物を指す。この構造的差異は、構成（幾何異性体）または偏光平面を回転させる能力（立体異性体）であり得る。立体異性体に関して、式（Ｉ）の塩は、１個以上の不斉炭素原子を有し得、ラセミ体、ラセミ混合物及び個別の鏡像異性体またはジアステレオマーとして生じ得る。
【００５８】
用語「カチオン」は、すべての有機及び無機の正に荷電したイオンを企図している。式（Ｉ）の化合物中のカチオンには、“Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅ”，Ｓｔａｈｌ，Ｈ．ａｎｄ  Ｗｅｒｍｕｔｈ，Ｃ．，ｅｄ．，Ｖｅｒｌａｇ  Ｈｅｌｖｅｔｉｃａ  Ｃｈｅｍｉｃａ  Ａｃｔａ，Ｚｕｒｉｃｈ，Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００２に記載されているものが含まれ得るがこれらに限定されない。
【００５９】
用語「無機カチオン」は、任意の正に荷電した無機原子または原子の群を指す。例示的な無機カチオンは、アルカリ金属（例えば、リチウム、ナトリウム、及びカリウム）、アルカリ土類金属（例えば、カルシウム及びマグネシウム）、第二マンガン、第一鉄、コバルト、タリウム、第一マンガン、及びアンモニウム（ＮＨ４＋）である。
【００６０】
用語「分解する」は、本明細書で使用されるとき、化学的に分解することを意味する。分解は、それが化学結合の破壊または新たな化学結合の形成を伴うという点で、溶融とは区別される。分解の方法には、加水分解、溶媒分解、熱分解、または酸化が含まれ得る。
【００６１】
本開示は、有効量の開示される塩と、薬学的に許容可能な担体とを含む薬学的組成物も含む。代表的な「薬学的に許容可能な塩」には、例えば、水溶性及び水不溶性塩、例えば、酢酸塩、アムソン酸塩（４，４−ジアミノスチルベン−２，２−二硫酸塩）、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、酪酸塩、カルシウム、エデト酸カルシウム、カンシル酸、炭酸塩、塩化物、クエン酸塩、クラブラン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストル酸塩、エシル酸塩、フマル酸塩、フィウナル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、マグネシウム、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチル臭化物、メチル硝酸塩、メチル硫酸塩、ムカート（ｍｕｃａｔｅ）、ナプシル酸塩、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミンアンモニウム塩、３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩（１，１−メテン−ビス−２−ヒドロキシ−３−ナフトエ酸塩、エンボン酸塩）、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ピクリン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、プロピオン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、スルホサリチル酸塩、スラメート（ｓｕｒａｍａｔｅ）、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、トリエチオジド、及び吉草酸塩が含まれる。
【００６２】
「患者」または「対象」とは、哺乳動物、例えば、ヒト、マウス、ラット、モルモット、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、またはサル、チンパンジー、ヒヒ、もしくはアカゲザルなど非ヒト霊長類である。
【００６３】
「有効量」とは、塩及び／または薬学的組成物に関連して使用される場合、本明細書に記載されている対象の疾患を治療または予防するのに有効な量である。
【００６４】
用語「担体」は、本開示で使用されるとき、担体、賦形剤及び希釈剤を包含し、対象のある器官または身体の一部から別の器官または身体の一部への薬学的薬剤の運搬または輸送に関与する物質、組成物、または液体もしくは固体充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒などのビヒクル、または封入物質を意味する。
【００６５】
本明細書で使用されるとき、用語「治療する」または「治療」は、用語「予防する」と同義であり、疾患の発症の延期、疾患の発症の予防、及び／または発症するかまたは発症すると予期されるそのような症状の重症度を低下させることを示すことを意味する。したがって、これらの用語には、既存の疾患症状を改善すること、追加の症状を予防すること、症状の根本的な原因を改善もしくは予防すること、障害または疾患を阻害すること、例えば、障害または疾患の発症を阻止すること、障害または疾患を緩和すること、障害または疾患の退行を引き起こすこと、疾患または疾患によって引き起こされた状態を緩和すること、または疾患または疾患の症状を停止もしくは軽減することが含まれる。
【００６６】
用語「障害」は、特に示されない限り、本開示において、疾患、状態、または疾病という用語を意味するために使用され、それらの用語と交換可能に使用される。
【００６７】
用語「投与する」、「投与すること」、または「投与」は、本開示で使用されるとき、開示される塩または組成物を対象に直接投与すること、あるいは対象の身体に当量の活性化合物を形成し得る、その塩のプロドラッグ誘導体もしくは類似体または組成物を対象に投与することのいずれかを指す。
【００６８】
用語「卵母細胞」は、用語「卵子」と同義であり、本開示では、雌の哺乳動物の母細胞または生殖細胞を意味するために使用される。
【００６９】
用語「接合子」は、本開示では、受精中に卵母細胞及び精子の融合から形成された受精卵またはディプロイド細胞を意味するために使用される。
【００７０】
用語「胚盤胞」は、本開示では、内側の細胞塊または胚結節、空洞、及び外側の層またはトロホブラストからなる細胞分化が生じた哺乳動物の胚を意味するために使用される。
【００７１】
本開示の塩
本開示は、加齢関連不妊症などの加齢及び細胞復元に関連する疾患及び障害の治療に有用な式（Ｉ）の塩、ならびにそのエナンチオマー、立体異性体、及び互変異性体に関する。
【００７２】
いくつかの実施形態では、式Ｉの塩は、式（Ｉａ）の構造
Ｉａ：
【化３】
2021524865.tif 000005
を有する。
【００７３】
いくつかの実施形態では、式Ｉの塩は、式Ｉｂの構造：
【化４】
2021524865.tif 000006
を有する。
【００７４】
いくつかの実施形態では、式Ｉの塩は、式Ｉｃの構造：
【化５】
2021524865.tif 000007
を有する。
【００７５】
いくつかの実施形態では、式Ｉの塩は、式Ｉｄの構造：
【化６】
2021524865.tif 000008
を有する。
【００７６】
いくつかの実施形態では、式Ｉの塩は、式Ｉｅの構造：
【化７】
2021524865.tif 000009
を有する。
【００７７】
いくつかの実施形態では、式Ｉの塩は、式Ｉｆの構造：
【化８】
2021524865.tif 000010
を有する。
【００７８】
いくつかの実施形態では、式Ｉの塩は、式Ｉｇの構造：
【化９】
2021524865.tif 000011
を有する。
【００７９】
いくつかの実施形態では、式Ｉの塩は、式Ｉｋの構造：
【化１０】
2021524865.tif 000012
を有する。
【００８０】
いくつかの実施形態では、式Ｉの塩は、式Ｉｌの構造：
【化１１】
2021524865.tif 000013
を有する。
【００８１】
いくつかの実施形態では、式Ｉの塩は、式Ｉｍの構造：
【化１２】
2021524865.tif 000014
を有する。
【００８２】
いくつかの実施形態では、式Ｉの塩は、式Ｉｎの構造：
【化１３】
2021524865.tif 000015
を有する。
【００８３】
いくつかの実施形態では、式Ｉの塩は、式Ｉｏの構造：
【化１４】
2021524865.tif 000016
を有する。
【００８４】
いくつかの実施形態では、式Ｉの塩は、式Ｉｐの構造：
【化１５】
2021524865.tif 000017
を有する。
【００８５】
いくつかの実施形態では、式Ｉの塩は、式Ｉｑの構造；
【化１６】
2021524865.tif 000018
を有する。
【００８６】
いくつかの実施形態では、式Ｉの塩は、式Ｉｒの構造：
【化１７】
2021524865.tif 000019
を有する。
【００８７】
いくつかの実施形態では、式Ｉの塩は、式Ｉｓの構造：
【化１８】
2021524865.tif 000020
を有する。
【００８８】
式Ｉの塩の一実施形態では、Ａは、ＮＲａＲｂである。
【００８９】
式Ｉの塩の別の実施形態では、Ｍ１は、カチオンである。別の実施形態では、Ｍ１は、カチオン性原子である。別の実施形態では、Ｍ１は、Ｌｉ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｒｂ＋、Ｃｓ＋、Ｂｅ２＋、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｓｒ２＋、Ｚｎ２＋、及びＢａ２＋であるがこれらに限定されない。別の実施形態では、Ｍ１は、Ｌｉ＋である。別の実施形態では、Ｍ１は、Ｎａ＋である。別の実施形態では、Ｍ１は、Ｋ＋である。別の実施形態では、Ｍ１は、Ｒｂ＋である。別の実施形態では、Ｍ１は、Ｃｓ＋である。Ｍ１はまた、Ｃａ２＋、Ｂｅ２＋、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｓｒ２＋、Ｚｎ２＋、及びＢａ２＋などの二価カチオンであり得る。一実施形態では、Ｍ１は、Ｃａ２＋である。
【００９０】
本発明のいくつかの実施形態では、Ｒａは、独立して、各出現において、Ｈ、またはＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒａは、Ｈである。他の実施形態では、Ｒａは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒａは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、または（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒａは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択される１つ以上の置換基で置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒａは、１つ以上のＣ２〜Ｃ６アルケニルで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒａは、１つ以上のＣ２〜Ｃ６アルキニルで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒａは、１つ以上の（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒａは、１つ以上の（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキルで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒａは、１つ以上の（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリールで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒａは、１つ以上の（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒａは、メチルである。他の実施形態では、Ｒａは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、または（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で置換されたメチルである。
【００９１】
本発明のいくつかの実施形態では、Ｒｂは、独立して、各出現において、Ｈ、またはＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒｂは、Ｈである。他の実施形態では、Ｒｂは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒｂは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、または（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒｂは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択される１つ以上の置換基で置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒｂは、１つ以上のＣ２〜Ｃ６アルケニルで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒｂは、１つ以上のＣ２〜Ｃ６アルキニルで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒｂは、１つ以上の（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒｂは、１つ以上の（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキルで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒｂは、１つ以上の（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリールで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒｂは、１つ以上の（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである。他の実施形態では、Ｒｂは、メチルである。他の実施形態では、Ｒｂは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、または（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で置換されたメチルである。
【００９２】
さらなる実施形態では、Ｒ１は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、または−［ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ］ｎ−Ｒａである。別の実施形態では、Ｒ１は、Ｈである。別の実施形態では、Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。別の実施形態では、Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキルである。別の実施形態では、Ｒ１は、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。別の実施形態では、Ｒ１は、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａである。別の実施形態では、Ｒ１は、−［ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ］ｎ−Ｒａである。別の実施形態では、Ｒ１は、Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。
【００９３】
一実施形態では、Ｒ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、または−［ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ］ｎ−Ｒａである。別の実施形態では、Ｒ２は、Ｈである。別の実施形態では、Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。別の実施形態では、Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキルである。別の実施形態では、Ｒ２は、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。別の実施形態では、Ｒ２は、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａである。別の実施形態では、Ｒ２は、−［ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ］ｎ−Ｒａである。別の実施形態では、Ｒ１は、Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。
【００９４】
式Ｉの塩のさらなる実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、５員複素環式環を形成し得る。式Ｉの塩のなおさらなる実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）Ｃ６〜Ｃ１４アリール、及び（Ｃ０〜Ｃ３アルキレン）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で置換された５員複素環式環を形成し得る。
【００９５】
別の実施形態では、ｎは、各出現において、１、２、３、４、５、６、７、または８である。別の実施形態では、ｎは、１である。別の実施形態では、ｎは、２である。別の実施形態では、ｎは、３である。別の実施形態では、ｎは、４である。別の実施形態では、ｎは、５である。別の実施形態では、ｎは、６である。別の実施形態では、ｎは、７である。別の実施形態では、ｎは、８である。
【００９６】
一実施形態では、ｋは、１である。別の実施形態では、ｋは、２である。
【００９７】
別の実施形態では、式（Ｉ）の塩は、群：
【化１９】
2021524865.tif 000021
【化２０】
2021524865.tif 000022
【化２１】
2021524865.tif 000023
【化２２】
2021524865.tif 000024
及び
【化２３】
2021524865.tif 000025
から選択される。
【００９８】
塩の調製のための方法
本開示の塩は、標準化学を含む様々な方法によって製造され得る。好適な合成経路は、以下で提供されるスキームに示されている。
【００９９】
本開示の別の態様は、式（Ｉ）の塩を調製するためのプロセスに関する。そのプロセスは、式（ＩＩ）のニコチンアミドモノヌクレオチド誘導体を、式（Ｉ）の生成物塩を生成するのに有効な好適な条件下で金属−アルカリ水酸化物と接触させることを含む。
【０１００】
一実施形態では、本塩を調製するプロセスは、反応が生じる雰囲気を窒素化することを含む。別の実施形態では、本塩の調製における第１の工程は、ヌクレオチドを窒素で充填し、次いで脱イオン水を添加してＮＭＮの溶液を生成することを含む。一実施形態では、第２の工程は、得られたＮＭＮの溶液に金属−アルカリ水酸化物を滴下添加してｐＨを約６．５に上昇させることを含む。
【０１０１】
本発明の一実施形態では、式（Ｉ）の塩を調製するプロセスは、式（ＩＩ）の化合物
【化２４】
2021524865.tif 000026
を、式（Ｉ）の塩を製造するのに有効な条件下で金属−アルカリ水酸化物と接触させることを含む。
【０１０２】
一実施形態では、金属−アルカリ水酸化物は、ＬｉＯＨ、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、Ｍｇ（ＯＨ）２、Ｃａ（ＯＨ）２、Ｚｎ（ＯＨ）２、及びＢａ（ＯＨ）２から選択される。
【０１０３】
本明細書に記載されているプロセスは、式（Ｉ）の塩の高い純度だけでなく、式（Ｉ）の塩の安定な形態を達成するための物質、試薬及び反応物の添加の順序を提供する。上述の添加の順序の逆転、すなわち、水性金属−アルカリ水酸化物への固体モノヌクレオチド（ＮＭＮ）の添加は、早期分解の影響を受けやすい実質的に不純な生成物をもたらす。したがって、塩の形成は、単に物質、試薬及び反応物を任意の順序で混合することの必然的な結果ではなく、むしろ、記載される段階的添加が、逆の順序で試薬を混合することによって生成される生成物と比較して、式（Ｉ）のより安定で可溶性の塩を生成するようである。
【０１０４】
理論によって限定されることを望むものではなく、固体のＮＭＮを水性塩基に添加し、許容可能な純度の所望の生成物ではなく、分解生成物であるニコチンアミド及びリボースを含む実質的に不純な生成物が得られる条件下では、式Ｉの塩のグリコシド結合は、増大した分解のリスクの影響を受けやすいと仮定される。
【０１０５】
本開示はまた、以下の合成スキーム１によって部分的に示されるように、有機合成の技術分野で知られている式（Ｉ）の塩を調製するための類似の方法を想定している。
【０１０６】
当業者は、式（Ｉ）の塩に立体中心が存在するかどうかを認識する。したがって、本出願は、（合成で特定されない限り）可能な立体異性体の両方を含み、ラセミ塩だけでなく、個々のエナンチオマー及び／またはジアステレオマーも同様に含む。化合物または塩が単一のエナンチオマーまたはジアステレオマーとして所望される場合、それは、立体特異的合成によって、または最終生成物もしくは任意の好都合な中間体の分割によって得られ得る。最終生成物、中間体、または出発物質の分割は、当該技術分野で知られている任意の好適な方法によって影響を受け得る。例えば、“Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ”ｂｙ  Ｅ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ，Ｓ．Ｈ．Ｗｉｌｅｎ，ａｎｄ  Ｌ．Ｎ．Ｍａｎｄｅｒ（Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，１９９４）を参照されたい。
【０１０７】
本明細書に記載されている塩及び化合物は、市販の出発物質から製造され得るか、または既知の有機、無機、及び／または酵素プロセスを使用して合成され得る。
【０１０８】
式（Ｉ）の塩は、有機合成の当業者によく知られている多数の方法で調製され得る。例として、式（Ｉ）の塩は、合成有機化学の技術分野で知られている合成方法、または当業者に理解されるようなその類型と共に、以下に記載される方法を使用して合成され得る。これらの方法には、以下に記載されるそれらの方法が含まれるがこれらに限定されない。式（Ｉ）の塩は、様々な中間体を組み立てるシーケンスを含む一般的スキーム１に概説された工程に従うことによって合成され得る。出発物質は、市販されているか、または報告された文献における既知の手順によってもしくは例示されるように製造される。
スキーム１
【化２５】
2021524865.tif 000027
【０１０９】
本明細書に記載されている式（Ｉ）の塩は、スキーム１に概説された一般的手順に従って調製され得る。前駆体及び市販のニコチンアミドモノヌクレオチドの縮合は一般に、好適な溶媒（例えば、メタノールと水との混合物）の存在下で金属−アルカリ水酸化物を用いて行われる。混合物を加熱して、溶媒を徐々に蒸発させる。また、得られた混合物を凍結乾燥させて、好適な温度及び圧力の条件下で所望の生成物塩が得られ得る。
【０１１０】
上述のプロセスから得られたエナンチオマー、ジアステレオマー、シス／トランス異性体の混合物は、分離の特質に応じて、キラル塩技術、順相、逆相またはキラルカラムを使用するクロマトグラフィーによってそれらの単一成分に分離され得る。
【０１１１】
上記に示された記載及び式において、基Ｍ＋は、別段示される場合を除き、上記で定義されたとおりのＭ１を表すことが理解されるべきである。さらに、合成目的のため、一般的スキーム１の塩は、本明細書で定義されるような式（Ｉ）の塩の一般的合成方法論を例示するために、選択されたラジカルを有する代表例にすぎない。
【０１１２】
また、本明細書に開示される塩は、中性電荷を有すること、及び式Ｉの構造は、必要に応じて、塩が中性電荷を示すことを可能にするために対イオンを用いてバランスがとられ得る属の代表にすぎないことが理解される。そのような対イオンには、限定されないが、臭素、塩素、及びトリフラートが含まれ得る。一実施形態では、本開示の塩は、溶液から単離することを必要とすることなく、ｉｎ  ｓｉｔｕで生成され得る。いくつかの実施形態では、本明細書で企図される塩は、別々の１：１または１：２の塩であり得る。本明細書に記載されている塩はまた、他の比、例えば、１：１．５、１：５、及び１：１０で存在し得る。
【０１１３】
塩を使用する方法
本開示の別の態様は、加齢、細胞劣化、及び／または細胞復元に関連する疾患または障害を治療または予防する方法に関する。そのような疾患及び障害の非限定的な例には、不妊症、加齢関連不妊症、眼機能の加齢関連喪失、骨密度の低下、肥満及びインスリン不感症が含まれる。一実施形態では、式（Ｉ）の塩は、加齢関連不妊症の治療に有用である。式（Ｉ）の塩の別の実施形態では、不妊症の治療に有用である。
【０１１４】
本開示の別の態様は、加齢関連疾患または障害を治療または予防する方法に関する。その方法は、それを必要とする対象に、治療的有効量の式Ｉの塩の薬学的組成物を投与することを含む。
【０１１５】
本開示のさらに別の態様は、卵母細胞または胚盤胞の質及び成熟を改善する方法に関する。その方法は、卵母細胞または胚盤胞を式（Ｉ）の塩を含むＩＶＦ培地と有効期間接触させることを含む。
【０１１６】
別の態様では、本開示は、式（Ｉ）の塩を含有する培地を提供する。式（Ｉ）の塩は、卵子、卵母細胞及び／または胚盤胞を、不妊症または加齢関連不妊症に罹患している対象への着床前にＮＡＤ＋生成を増強させるために必要な期間、曝露するための培地中で有用である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の塩を含む培地が提供される。いくつかの実施形態では、培地は、卵子、卵母細胞または胚盤胞が存在する成熟及び発達の段階に応じて、卵子、卵母細胞または胚盤胞に必要な様々な試薬及び因子を含む。例えば、培地は、以下の表１に列挙されるＩＶＦ培地に有用な薬剤または因子を含有し得る：
【表１】
2021524865.tif 000028
【０１１７】
また、式（Ｉ）の１つ以上の塩及び培養剤を含むｉｎ  ｖｉｔｒｏでの受精のための細胞培養液も提供される。
【０１１８】
一実施形態では、培養剤は、無機塩、エネルギー基質、アミノ酸、キレート剤、ｐＨ指示剤、抗生物質、血清、ビタミン、成長因子、またはそれらの任意の組み合わせである。一実施形態では、無機塩は、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、硫酸マグネシウム、塩化カリウム、重炭酸ナトリウム、塩化ナトリウム、リン酸一ナトリウム、リン酸二ナトリウム、またはそれらの任意の組み合わせである。
【０１１９】
一実施形態では、エネルギー基質は、グルコース、ピルベート、ラクテート、ピルベート、またはそれらの任意の組み合わせである。
【０１２０】
一実施形態では、アミノ酸は、必須アミノ酸である。一実施形態では、必須アミノ酸は、アルギニン、システイン、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、またはそれらの任意の組み合わせである。
【０１２１】
一実施形態では、アミノ酸は、非必須アミノ酸である。
【０１２２】
一実施形態では、非必須アミノ酸は、アラニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、プロリン、セリン、またはそれらの任意の組み合わせである。
【０１２３】
一実施形態では、キレート剤は、クラスロキレート、アセチルアセトン、アミノポリカルボン酸、ＡＴＭＰ、ＢＡＰＴＡ、ＢＤＴＨ２、クエン酸、クリプタンド、デフェラシロックス、２，３−ジヒドロ安息香酸、２，３−ジメルカプト−１−プロパンスルホン酸、ジメルカプトコハク酸、ＤＯＴＡ、ＤＴＰＭＰ、ＥＤＤＨＡ、ＥＤＤＳ、ＥＤＴＭＰ、エチドロン酸、ｆｕｒａ−２、グルコン酸、ホモクエン酸、イミノ二酢酸、Ｉｎｄｏ−１、ニトリル三酢酸、ペンテト酸（ＤＴＰＡ）、ホスホネート、フィトケラチ、ポリアスパラギン酸、ポリアスパラギン酸ナトリウム、クエン酸三ナトリウム、トランスフェリン、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、またはそれらの任意の組み合わせである。
【０１２４】
一実施形態では、ｐＨ指示剤は、フェノールレッド、ブロモチモールブルー、アリザリンレッド、９−アミノアクリジン、またはそれらの任意の組み合わせである。
【０１２５】
一実施形態では、抗生物質は、アクチノマイシンＤ、アンピシリン、カルベニシリン、セフォタキシム、ホスミドマイシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ペニシリン、ポリミキシンＢ、ストレプトマイシン、またはそれらの任意の組み合わせである。
【０１２６】
一実施形態では、血清は、ヒト血清アルブミン、ウシ血清アルブミン、ウシ胎児血清、合成血清、またはそれらの任意の組み合わせである。
【０１２７】
一実施形態では、ビタミンは、アスコルビン酸、ビオチン、メナジオン重亜硫酸ナトリウム、マイトマイシンＣ、ピリドキサミン二塩酸塩、酢酸レチニル、（−）−リボフラビン、（＋）−Ｌ−アスコルビン酸ナトリウム、（＋）−α−トコフェロール、ビタミンＢ１２、塩酸チアミン、ｉ−イノシトール、塩酸ピリドキサール、ニコチンアミド、葉酸、Ｄ−パントテン酸カルシウム、塩化コリン、またはそれらの任意の組み合わせである。
【０１２８】
一実施形態では、成長因子は、アドレノメデュリン、アンジオポエチン、骨形態形成タンパク質、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、表皮成長因子、エフリン、エリスロポエチン、線維芽細胞成長因子、成長分化因子−９、肝細胞成長因子、インスリン、インスリン様成長因子、インターロイキン、ケラチノサイト成長因子、遊走刺激因子、マクロファージ刺激タンパク質、ミオスタチン、ニューロトロフィン、ｔ細胞成長因子、トロンボポエチン、形質転換成長因子、腫瘍壊死因子−アルファ、血管内皮成長因子、またはそれらの任意の組み合わせである。
【０１２９】
一実施形態では、細胞培養培地は、卵母細胞、接合子、胚盤胞、またはそれらの任意の組み合わせをさらに含む。
【０１３０】
また、式（Ｉ）の１つ以上の塩を含む、卵母細胞または胚盤胞の成熟に必要な様々な薬剤、及び因子を含むＩＶＦ培地のためのキットも提供される。これらの薬剤及び共因子は、不妊症または加齢関連不妊症のための治療を必要とする患者への着床前に卵母細胞または胚盤胞を曝露するのに使用する直前にＩＶＦ培地を生成するために溶液に溶解され得る。
【０１３１】
本発明はまた、加齢、細胞復元、細胞劣化、または不妊症を治療するための薬剤の製造のための式Ｉの塩ならびにそのエナンチオマー、立体異性体、及び互変異性体の使用に関する。所定の実施形態では、治療される不妊症は、加齢関連不妊症である。
【０１３２】
本発明の別の態様は、式Ｉの塩及び薬学的に許容可能な担体を含む薬学的組成物である。
【０１３３】
本発明の別の態様は、式Ｉの塩及び治療的有効量の１つ以上の追加の治療剤を含む薬学的に許容可能な担体を含む薬学的組成物である。
【０１３４】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の塩または本発明の塩及び薬学的に許容可能な担体を含む薬学的組成物の投与は、細胞周期及び細胞生存の変化を誘導する。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の塩または本発明の塩及び薬学的に許容可能な担体を含む薬学的組成物の投与は、加齢に関連する障害または疾患の予防的変化を誘導する。
【０１３６】
開示される塩の投与は、治療剤のための任意の投与様式を介して達成され得る。これらの様式には、経口、経鼻、非経口、経皮、皮下、経膣、頬部、直腸または局所投与様式などの全身または部分的投与が含まれる。
【０１３７】
意図される投与様式に応じて、開示される組成物は、時には単位投薬量による、従来の薬務と一致した、例えば、注射剤、錠剤、坐剤、丸剤、徐放性カプセル剤、エリキシル剤、チンキ剤、乳剤、シロップ剤、粉末剤、液剤、懸濁剤などの固体、半固体、または液体剤形であり得る。同様に、それらは、静脈内（ボーラス及び輸注の両方）、腹腔内、皮下、または筋肉内形態でも投与することができ、すべての使用形態は、薬学の技術分野の当業者によく知られている。
【０１３８】
薬学的組成物は、従来の混合、造粒またはコーティング方法にそれぞれ従って調製され得、本薬学的組成物は、重量または体積で約０．１％〜約９９％、約５％〜約９０％、または約１％〜約２０％の開示される塩を含有し得る。
【０１３９】
一実施形態では、本発明は、本発明の少なくとも１つの薬学的に許容可能な塩、及び、任意に、１つ以上の薬学的に許容可能な担体、添加剤、または賦形剤を混合することによって本発明の薬学的組成物を調製する方法に関する。
【０１４０】
別の実施形態では、本発明は、本発明の少なくとも１つの薬学的に許容可能な塩及び１つ以上の追加の治療剤を混合することによって本発明の薬学的組成物を調製する方法に関する。
【０１４１】
式（Ｉ）の塩の有効な投薬量は、記載される方法において使用される場合、その状態の治療の必要性に応じて、約０．５ｍｇ〜約５０００ｍｇの開示される塩の範囲である。インビボまたはインビトロでの使用のための組成物は、約０．５、５、２０、５０、７５、１００、１５０、２５０、５００、７５０、１０００、１２５０、２５００、３５００、もしくは５０００ｍｇ、またはこの用量リストのある量から別の量までの範囲の開示される塩を含有し得る。１つの実施形態において、本組成物は、刻み目を付けることができる錠剤の形態である。
【０１４２】
開示される塩を利用する投薬量レジメンは、患者の種類、種、年齢、体重、性別及び医学的状態、治療される状態の重篤度、投与経路、患者の腎機能または肝機能、ならびに用いられる特定の開示される塩を含む様々な要因に従って選択される。当該技術分野における通常の技術を有する医師または獣医であれば、その状態を予防する、それに対抗する、またはその進行を停止させるのに必要な薬物の有効量を容易に決定及び処方することができる。
【０１４３】
例示的な薬学的組成物は、本発明の塩及び薬学的に許容可能な担体、例えば、ａ）希釈剤、例えば、精製水、トリグリセリド油、例えば、硬化もしくは部分硬化植物油もしくはそれらの混合物、コーン油、オリーブ油、ヒマワリ油、ベニバナ油、魚油、例えば、ＥＰＡもしくはＤＨＡ、またはそれらのエステルもしくはトリグリセリドもしくはそれらの混合物、オメガ−３脂肪酸もしくはその誘導体、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロース、ナトリウム、サッカリン、グルコース、及び／またはグリシン、ｂ）滑沢剤、例えば、シリカ、滑石、ステアリン酸、そのマグネシウムもしくはカルシウム塩、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、及び／またはポリエチレングリコール、錠剤の場合さらに、ｃ）結合剤、例えば、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、デンプンペースト、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、炭酸マグネシウム、天然糖、例えば、グルコースもしくはベータ−ラクトース、コーン甘味料、天然及び合成ガム、例えば、アカシア、トラガカント、もしくはアルギン酸ナトリウム、ワックス及び／またはポリビニルピロリドン、所望される場合、ｄ）崩壊剤、例えば、デンプン、寒天、メチルセルロース、ベントナイト、キサンタンガム、アルギン酸もしくはそのナトリウム塩、または発泡性混合物、ｅ）吸収剤、着色剤、風味剤、及び甘味料、ｆ）乳化剤または分散剤、例えば、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）  ８０、Ｌａｂｒａｓｏｌ、ＨＰＭＣ、ＤＯＳＳ、Ｃａｐｒｏｙｌ  ９０９、Ｌａｂｒａｆａｃ、Ｌａｂｒａｆｉｌ、Ｐｅｃｅｏｌ、Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ、Ｃａｐｍｕｌ  ＭＣＭ、Ｃａｐｍｕｌ  ＰＧ−１２、Ｃａｐｔｅｘ  ３５５、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ、Ｖｉｔａｍｉｎ  Ｅ  ＴＧＰＳ、もしくは他の許容可能な乳化剤、ならびに／あるいはｇ）塩の吸収を向上させる薬剤、例えば、シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−シクロデキストリン、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ２００を含む錠剤及びゼラチンカプセル剤である。
【０１４４】
式（Ｉ）の塩から薬学的組成物を調製するために、不活性で薬学的に許容可能な担体は、固体または液体のいずれかであり得る。固体調製物には、粉末、錠剤、分散性顆粒、カプセル、カシェ及び坐剤が含まれる。粉末及び錠剤は、約５〜約９５パーセントの活性成分を含み得る。好適な固体担体は、当該技術分野で知られており、例えば、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖またはラクトースである。錠剤、粉末、カシェ及びカプセルは、経口投与に好適な固体投薬形態として使用され得る。様々な組成物のための薬学的に許容可能な担体及び製造方法の例は、Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ（ｅｄ．），Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，（１９９０），Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａで見ることができる。
【０１４５】
液体調製物には、溶液、懸濁液及び乳剤が含まれる。例えば、非経口注射のための水または水−プロピレングリコール溶液または経口溶液、懸濁液及び乳剤のための甘味剤及び不透明化剤の添加である。液体調製物にはまた、鼻腔内投与のための溶液が含まれ得る。
【０１４６】
液体（特に注射用）の組成物は、例えば、溶解、分散などによって調製され得る。例えば、開示される塩は、例えば、水、生理食塩水、水性デキストロース、グリセロール、エタノールなどの薬学的に許容可能な溶媒に溶解されるか、または混合され、それによって注射用等張性溶液または懸濁液が形成される。開示される化合物を可溶化するために、アルブミン、カイロミクロン粒子、または血清タンパク質などのタンパク質が使用され得る。
【０１４７】
非経口注射剤投与は一般に、皮下、筋肉内または静脈内注射及び輸注のために使用される。注射剤は、液体溶液もしくは懸濁液または注射前に液体に溶解するのに好適な固体形態のいずれかとして従来の形態で調製され得る。
【０１４８】
吸入に好適なエアロゾル調製物は、溶液及び粉末形態の固体を含み得、これらは、不活性圧縮ガス、例えば、窒素などの薬学的に許容可能な担体と組み合わされ得る。
【０１４９】
また、使用の直前に、経口または非経口のいずれかの投与のための液体形態調製物に変換されることが意図された固体形態調製物である。そのような液体形態には、溶液、懸濁液及び乳剤が含まれる。
【実施例】
【０１５０】
本開示は、以下の実施例及び合成スキームによってさらに例示され、これらは、本開示の範囲または趣旨を本明細書に記載の特定の手順に限定するものと解釈されるべきではない。実施例は、ある特定の実施形態を例示するために提供されること及びそれによって本開示の範囲に対するいかなる制限も意図されないことが理解されるべきである。本開示の趣旨及び／または添付の特許請求の範囲から逸脱することなく、それら自体を当業者に示唆し得る、様々な他の実施形態、修正及びその均等物に対する手段が取られてもよいことがさらに理解されるべきである。
【０１５１】
本明細書に開示される以下の塩は、限定されないが、ＫＣｌ、ＮａＣｌ、ＬｉＣｌ、ＮａＯＨ、ＬｉＯＨ、またはＫＯＨなどの試薬を含む一般的合成方法論を使用して調製した。メタノール、エタノール、水、酢酸、エチレングリコール、イソプロパノールなどの好適な溶媒も使用した。
以下の実施例及び本明細書の他の箇所で使用される略語は以下である：
ＡｃＯＨ  酢酸
ａｎｈ．  無水
ａｔｍ  気圧
ａｑ．  水性
ｂｒ  ブロード
Ｂｏｃ  ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ブライン  飽和水性塩化ナトリウム
ｎ−ＢｕＬｉ  ｎ−ブチルリチウム
ｎ−ＢｕＯＨ  ｎ−ブタノール
Ｃａｌｃ’ｄ  計算済
ＣＤＣｌ３  重水素化クロロホルム
ＣＤＩ  カルボニルジイミダゾール
クロロホルム−ｄ  重水素化クロロホルム
ｄ  二重項
ｄｄ  二重項の二重項
ｄｔ  三重項の二重項
Ｄ２Ｏ  重水素化水（酸化重水素）
ＤＣＥ  ジクロロエタン
ＤＣＭ  ジクロロメタン
ＤＩＡＤ  ジイソプロピルアゾジカルボキシレート
ＤＩＰＥＡ  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡｃ  Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド
ＤＭＡＰ  Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン
ＤＭＥ  １，２−ジメトキシエタン
ＤＭＥＤＡ  Ｎ，Ｎ’−ジメチルエチレンジアミン
ＤＭＦ  Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ  ジメチルスルホキシド
ＤＭＳＯ−ｄ６  重水素化ジメチルスルホキシド
ＥＤＡ  エチレンジアミン
ＥＤＣ  １−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
Ｅｔ２Ｏ  ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ  酢酸エチル
ＥｔＯＨ  エタノール
ＥＳＩ  エレクトロスプレーイオン化
ｇ  グラム
ｈ  時間（複数可）
Ｈ  水素
１Ｈ  ＮＭＲ  核磁気共鳴（陽子核）
ＨＡＴＵ  ［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート
ＨＢＴＵ  ３−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−３Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−オキシドヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＢｔ  ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ  高圧（または高速）液体クロマトグラフィー
Ｈｚ  ヘルツ
Ｊ  カップリング定数
ＫＨＣＯ３  炭酸水素カリウム
ＫＨＭＤＳ  カリウムヘキサメチルジシラジド
ＫＯＡｃ  酢酸カリウム
ＬＣＭＳ  液体クロマトグラフィー質量分析
ＬＨＭＤＳ  リチウムヘキサメチルジシラジド
［＃］Ｍ  モル濃度
ｍ  多重項
［Ｍ＋Ｈ］＋  分子イオンプラス水素
［Ｍ−ｔＢｕ＋Ｈ］＋  分子イオンマイナスｔｅｒｔ−ブチルプラス水素
ｍＣＰＢＡ  メタ−クロロパーオキシ安息香酸
Ｍｅ２ＮＨ  ジメチルアミン
Ｍｅ４ＮＢｒ  テトラメチルアンモニウムブロミド
ＭｅＣＮ  アセトニトリル
ＭｅＮＨ２  メチルアミン
ＭｅＯＨ  メタノール
メタノール−ｄ４  重水素化メタノール
２−ＭｅＴＨＦ  ２−メチルテトラヒドロフラン
ｍｇ  ミリグラム
ＭＨｚ  メガヘルツ
ｍｉｎ  分
ｍｍｏｌ  ミリモル
ｍＬ  ミリリットル
ＭＳ  質量分析
ＭＳ  ＥＳ  質量分析エレクトロスプレー
Ｍｓ２Ｏ  メタンスルホン酸無水物
ＭＴＢＥ  メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル
ＭＷ  マイクロ波
ｍ／ｚ  質量対電荷比
μＬ  マイクロリットル
Ｎ２  窒素
ＮａＨＣＯ３  重炭酸ナトリウム
ＮＭＮ  ニコチンアミドモノヌクレオチド
ＮＩＳ  Ｎ−ヨードスクシンイミド
ＮＭＰ  Ｎ−メチル−２−ピロリドン
ＮＭＲ  核磁気共鳴
ＰＥＰＰＳＩ−ｉＰｒ  ［１，３−ビス（２，６−ジイソプロピルフェニル）イミダゾール−２−イリデン］（３−クロロピリジル）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド
ＰｄＣｌ２（Ａｍｐｈｏｓ）  ビス（ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−ジメチルアミノフェニル）ホスフィン）
ジクロロパラジウム（ＩＩ）
Ｐｄ２（ｄｂａ）３  トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）
Ｐｄ（ＯＡｃ）２  酢酸パラジウム（ＩＩ）
ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）  ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）
ＰｄＣｌ２（ＭｅＣＮ）２  ビス（アセトニトリル）ジクロロパラジウム（ＩＩ）
ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２  ビス（トリフェニルホスフィンパラジウム（ＩＩ）ジクロリド
Ｐｄ（Ｐ（Ｃｙ）３）２Ｃｌ２  ジクロロビス（トリシクロヘキシルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）
Ｐｄ（ＰＰｈ３）４  テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）
Ｐｄ（ｔ−Ｂｕ３Ｐ）２  ビス（トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（０）
ｐＨ  水素イオン指数
ＰＭＢ  ４−メトキシベンジル
ＰＭＢＣｌ  ４−メトキシベンジルクロリド
ｐｐｍ  百万分率
ｐｒｅｐ  分取
ｐｙ  ピリジン
ｑ  四重項
ｑｄ  二重項の四重項
ｑｕａｎｔ．  定量的
ｑｕｉｎ．  五重項
ｑｕｉｎｄ  二重項の五重項
ＲＢＦ  丸底フラスコ
Ｒｔ  保持時間
ｒｔ  室温
ｓ  一重項
ｓａｔ．  飽和
ｓａｔ．ａｑ．  飽和水性
ＳＥＭＣｌ  ２−（トリメチルシリル）エトキシメチルクロリド
ｔ  三重項
ｔ−ＢｕＬｉ  ｔｅｒｔ−ブチルリチウム
ｔｄ  二重項の三重項
ＴＭＳ  トリメチルシリル
ＴＭＳＣｌ  トリメチルシリルクロリド
ｔｔ  三重項の二重項
Ｔ３Ｐ  ポリホスホン酸無水物
ＴＢＡＢ  テトラブチルアンモニウムブロミド
ＴＥＡ  トリエチルアミン
ＴＦＡ  トリフルオロ酢酸
ＴＦＡＡ  トリフルオロ酢酸無水物
ＴＨＦ  テトラヒドロフラン
ＴＬＣ  薄層クロマトグラフィー
ＴＰＰＯ  トリフェニルホスフィンオキシド
ＸａｎｔＰｈｏｓ  ４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン
ＸＰｈｏｓ  ２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，４’，６’−トリイソプロピルビフェニル
【０１５２】
実施例１．ナトリウム（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（３−カルバモイルピリジン−１−イウム−１−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メチルホスフェート（Ｉ−００１）の合成
【化２６】
2021524865.tif 000029
水凝縮器、ゴム隔膜及び内部温度計が装着された５０ｍＬの３ＮのＲＢＦにＮＭＮ（０．２００ｇ、０．５９８ｍｍｏｌ、１当量）及び４ｍｌの蒸留した脱イオン水を入れ、混合して溶液を形成した。この溶液を氷／水浴を使用して冷却して１０℃未満の内部温度とした（溶液のｐＨは３．３４であった）。次いでこの溶液に、温度が上昇することを防止するために、５．７０ｍｌの０．１ＭのＮａＯＨ溶液をシリンジを介して徐々に滴下添加した。この添加後のｐＨは、７．０１であった。次いでフラスコを除去し、外部３０℃で（これを超える温度は生成物の分解につながる）１ｍＢａｒ未満の油ポンプ引きに取り付けられた小クーゲル上に配置した。これにより水を徐々に除去する。受けフラスコが冷却されていることを確認する。乾燥させると、生成物は無色の固体となる。収率：８７．８ｍｇ（８３％）；融点：７９〜８３℃（分解、補正済）１３０℃でガス放出）；分析データ．１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ） δ ＝ ９．６２ （ｓ， １Ｈ）， ９．３５ （ｄ， １Ｈ）， ９．０１ （ｄ， １Ｈ）， ８．３２ （ｔ， １Ｈ）， ６．２１ （ｄ， １Ｈ）， ４．６９ （ｔ， １Ｈ）， ４．６５ （ｐ， １Ｈ）， ４．５０ （ｍ， １Ｈ）， ４．２３ （ｄｑ， １Ｈ）， ４．０５ （ｄｑ， １Ｈ） ｐｐｍ
【０１５３】
実施例２．カリウム（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（３−カルバモイルピリジン−１−イウム−１−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メチルホスフェート（Ｉ−００２）の合成
【化２７】
2021524865.tif 000030
水凝縮器及び内部温度計が装着された５０ｍＬの３ＮのＲＢＦにＮＭＮ（０．３００ｇ、０．８９７ｍｍｏｌ、１当量）及び５ｍｌの蒸留した脱イオン水を入れ、混合して溶液を形成した。この溶液を氷／水浴を使用して冷却して１０℃未満の内部温度とした。次いでこの溶液に、温度が上昇することを防止するために、８．７９ｍｌの０．１ＭのＫＯＨ溶液を徐々に滴下添加し、ｐＨは６．０〜６．２となった。次いでフラスコを除去し、無色の溶液を液体窒素を使用して凍結させた。フラスコを凍結させている間、それを凍結乾燥機に接続した。これにより水を徐々に除去する。乾燥させると、生成物は無色の固体となる。収率：３３４．１ｍｇ．融点：１０５．３〜１１１．８℃（分解、補正済）１３０℃でガス放出）。分析データ．１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ） δ ＝ ９．６１ （ｓ， １Ｈ）， ９．３５ （ｄ， １Ｈ）， ９．０２ （ｄ， １Ｈ）， ８．３３ （ｄｄ， １Ｈ）， ６．２１ （ｄ， １Ｈ）， ４．６８ （ｔ， １Ｈ）， ４．６５ （ｐ， １Ｈ）， ４．５０ （ｍ， １Ｈ）， ４．２５ （ｄｑ， １Ｈ）， ４．０８ （ｄｑ， １Ｈ） ｐｐｍ
【０１５４】
実施例３．カルシウム（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（３−カルバモイルピリジン−１−イウム−１−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メチルホスフェート（Ｉ−００３）の合成
【化２８】
2021524865.tif 000031
窒素下で水凝縮器、ゴム隔膜及び内部温度計が装着された５０ｍＬの２ＮのＲＢＦにＮＭＮ（０．１００ｇ、０．２９９ｍｍｏｌ、１当量）及び１５ｍｌの蒸留した脱イオン水を入れ、混合して溶液を形成した。この溶液を氷／水浴を使用して冷却して５℃未満の内部温度とした。次いでこの溶液にＣａＯＨ（１１．１ｍｇ、０．１４９ｍｍｏｌ、０．５０当量）を添加した。次の１０分間で撹拌された懸濁液は溶液となり、非常にかすかな固体の残留物だけが残存した。次いで得られた溶液を一晩凍結乾燥させて無色の固体を得た。収率：０．１０３ｇ．分析データ：１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ） δ ＝ ９．５５ （ｓ， ２Ｈ）， ９．３０ （ｄ， ２Ｈ）， ８．９８ （ｄ， ２Ｈ）， ８．２９ （ａｐｐ ｔ， ２Ｈ）， ６．１８ （ｄ， ２Ｈ）， ４．６２ （ｍ， ４Ｈ）， ４．４６ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２２ （ｍ， ２Ｈ）， ４．０３ （ｍ， ２Ｈ） ｐｐｍ。
【０１５５】
実施例４．マグネシウム（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（３−カルバモイルピリジン−１−イウム−１−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メチルホスフェート（Ｉ−００４）の合成
【化２９】
2021524865.tif 000032
窒素下で水凝縮器、ゴム隔膜及び内部温度計が装着された５０ｍＬの２ＮのＲＢＦにＮＭＮ（０．１００ｇ、０．２９９ｍｍｏｌ、１当量）及び１５ｍｌの蒸留した脱イオン水を入れ、混合して溶液を形成した。この溶液を氷／水浴を使用して冷却して５℃未満の内部温度とした。次いでこの溶液に炭酸マグネシウム（塩基性）（１２．６ｍｇ、０．１４９ｍｍｏｌ、０．５０当量）を添加した。次の１０分間で撹拌された懸濁液は溶液となり、非常にかすかな固体の残留物だけが残存した。ｐＨは５．８〜６．１であると測定された。次いで得られた溶液を一晩凍結乾燥させて無色の固体を得た。収率：０．１０５ｇ．分析データ：１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ） δ ＝ ９．３５ （ｓ， １Ｈ）， ９．２６ （ｄ， １Ｈ）， ８．９８ （ｄ， １Ｈ）， ８．２５ （ｔ， １Ｈ）， ６．２３ （ｄ， １Ｈ）， ４．６５ （ｐ， １Ｈ）， ４．５７ （ｔ， １Ｈ）， ４．４８ （ｍ， １Ｈ）， ４．３３ （ｄｑ， １Ｈ）， ４．１９ （ｄｑ， １Ｈ） ｐｐｍ。
【０１５６】
実施例５．リチウム（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（３−カルバモイルピリジン−１−イウム−１−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メチルホスフェート（Ｉ−００５）
【化３０】
2021524865.tif 000033
水凝縮器及び内部温度計が装着された５０ｍＬの２ＮのＲＢＦにＮＭＮ（０．１００ｇ、０．２９９ｍｍｏｌ、１当量）及び１５ｍｌの蒸留した脱イオン水を入れ、混合して溶液またはかすかな懸濁液（記１）を窒素下で形成した。この溶液を氷／水浴を使用して冷却した（溶液のｐＨ＝１．８）。次いでこの溶液に、温度が上昇することを防止するために、２．８４ｍｌの０．１ＭのＬｉＯＨ溶液をシリンジを介して徐々に滴下添加した。この添加の後、ｐＨは、６．４〜６．７となった。次いで溶液を１００ｍｌの１ＮのＲＢＦに移し、一晩凍結乾燥させた。これにより、かすかな黄色〜かすかなベージュ色の固体が生成した。収率：９５．０ｍｇ、９３．４％．融点：約１３０℃（分解−ガス放出、補正済）。分析データ：１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ） δ ＝ ９．５８ （ｓ， １Ｈ）， ９．３１ （ｄ， １Ｈ）， ８．９８ （ｄ， １Ｈ）， ８．２８ （ｔ， １Ｈ）， ６．１８ （ｄ， １Ｈ）， ４．６５ （ｔ， １Ｈ）， ４．５９ （ｐ， １Ｈ）， ４．４５ （ｍ， １Ｈ）， ４．１９ （ｄｑ， １Ｈ）， ４．０２ （ｄｑ， １Ｈ） ｐｐｍ。
【０１５７】
実施例６．ＮＡＤ細胞アッセイ
参照により本明細書に組み込まれるＺｈｕ及びＲａｎｄ，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ（２０１２）のＮＡＤ循環法に基づいてＮＡＤレベルをアッセイした。ＣＯＶ４３４細胞を６ウェルプレートにおいて維持し、示された化合物で２００ｕＭの濃度で４時間処理した。培地を除去し、プレートを低温ＰＢＳで洗浄し、細胞を１０ｍＭのニコチンアミド、５０ｍＭのトリスＨＣｌ、０．１％のＴｒｉｔｏｎ（登録商標）  Ｘ−１００を含有するＮＡＤ抽出緩衝液中で平らにした。細胞を超音波によって５秒間ホモジナイズし、サンプルを７，０００ｇで４度において５分間遠心分離した。アリコートを後のタンパク質アッセイのために採取し、次いでサンプルを１４，０００ｇで４度において３０分間、１０ｋＤａのアミコンフィルターに通してサンプルからタンパク質を除去した。２５μＬのサンプルを１００μＬのＡＤＨ循環ミックス（０．２ｍｇ／ｍｌのアルコール脱水素酵素、２％のエタノール、１００ｍＭのトリスｐＨ８．５）に添加して、各サンプルを技術的に三重に測定した。サンプルを室温で１０分間循環させ、続いて５０μＬのＭＴＴ／ＰＭＳ溶液（０．１ｍＭのフェナジンメトスルフェート、０．８ｍＭの３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド）、１００ｍＭのトリス−ＨＣｌ  ｐＨ８．５）を添加した。次いでプレートを１５分間インキュベートし、吸光度を５７０ｎＭで測定した。ＮＡＤ濃度を標準曲線から外挿し、ＢＣＡタンパク質アッセイによって決定されたタンパク質濃度に対して正規化した。
【０１５８】
上述したアッセイの結果を表２（以下）に示す。倍数増加は、比較される塩とその親対応物との間のモル当たりのモルでの直接的比較により得られる。
【表２】
2021524865.tif 000034
細胞ＮＡＤ＋試験から、ＮＭＮの無機塩が、ＮＭＮと比べて、ヒト卵巣細胞に由来するＣＯＶ４３４細胞においてＮＡＤ＋のレベルを増加させたことが驚くべきことに予想外に見出された。このような結果は、ＮＭＮの無機塩が、ＮＡＤ＋の欠乏に関連する疾患及び障害の治療に有用な分子であり得ることを実証している。
均等物
【０１５９】
当業者は、本明細書に具体的に記載されている特定の実施形態に対する多数の均等物を、慣用の実験を超えるものを使用せずに、認識し、または確認することができる。そのような均等物は、以下の特許請求の範囲に包含されることが意図されている。
【国際調査報告】
2021524865.tif 000053
2021524865.tif 000054