(57)【要約】  ＣＧＲＰペプチドを含むカルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）受容体アンタゴニストであるペプチド複合体が開示されており、ここでペプチドの少なくとも一つのアミノ酸が脂質含有部分に共有結合している。そのような複合体を含む医薬組成物およびキット、そのような複合体を製造する方法、およびそのようなアンタゴニストの使用も開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドを含むペプチド複合体であって、ここでペプチドの少なくとも一つのアミノ酸が脂質含有部分に共有結合されており、ここでペプチド複合体はＣＧＲＰ受容体アンタゴニストである、ペプチド複合体。
【請求項２】
カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドを含むペプチド複合体であって、ここでペプチドの少なくとも一つのアミノ酸がスルフィド基の硫黄原子を介して脂質含有部分に共有結合されており、ここでペプチド複合体はＣＧＲＰ受容体アンタゴニストである、ペプチド複合体。
【請求項３】
前記ペプチド複合体は、ＣＧＲＰ受容体におけるα−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）のアンタゴニスト力価（ｐＡ2）より約１０倍未満、５倍未満、３倍未満、２倍未満、１倍未満の値より大きいアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）を有する、またはたとえば、本明細書の実施例に記載されるｃＡＭＰアッセイにより測定されるように、ＣＧＲＰ受容体におけるＣＧＲＰ８−３７のアンタゴニスト力価（ｐＡ2）に等しい値より大きいアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）を有する、請求項１または２に記載のペプチド複合体。
【請求項４】
前記ペプチド複合体は、たとえば好適なげっ歯類モデル、たとえばラットモデルで測定されるように、α−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）の半減期よりも少なくとも２、３、４、５、１０、２０、３０、４０、または５０倍長い半減期を有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項５】
前記少なくとも一つのアミノ酸は、システインまたはホモシステインである、請求項１〜４のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項６】
前記少なくとも一つのアミノ酸は、システインである、請求項１〜５のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項７】
前記ペプチド複合体は、脂質含有部分に結合した一つのアミノ酸のみを含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項８】
前記ペプチド複合体は、脂質含有部分にそれぞれ結合した二つ以上のアミノ酸を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項９】
前記脂質含有部分は、それぞれが少なくとも４個または少なくとも６個の鎖結合原子（chain-linked atom）を含む一つまたは複数の直鎖または分岐脂肪族、またはヘテロ脂肪族鎖を含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項１０】
前記脂質含有部分は、一つまたは複数の飽和または不飽和脂肪酸エステルを含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項１１】
前記脂質含有部分は、化学式（Ａ）のものであり：
【化１】
2021501784.tif 000044
ここで、
＊は、脂質含有部分が結合しているアミノ酸のスルフィド基の硫黄原子への結合を表す；
ＺおよびＺ1は、Ｏ−、−ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ2−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−、および−ＮＲＣ（Ｏ）ＮＲ−からなる群からそれぞれ独立に選択される；
Ｒは水素またはＣ1-6脂肪族である；
ｍは０〜４の整数である；
ｎは１または２である；
ｍの各々の例におけるＲ1およびＲ2は、それぞれ独立に水素、Ｃ1-6脂肪族である；またはＲ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、それぞれ独立に水素、またはＣ1-6脂肪族である；またはＲ3はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｌ1およびＬ2は、それぞれ独立にＣ5-21脂肪族、またはＣ4-20ヘテロ脂肪族である；ここで：
Ｒ3がＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである場合、Ｒ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルではない；および
ｍが２〜４の整数である場合、１個以下のＲ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；および
ここで、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｌ1、およびＬ2のいずれかに存在する脂肪族、アルキル、またはヘテロ脂肪族は、一つまたは複数の独立に選択された任意の置換基で任意に置換される、
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項１２】
Ｒは水素、Ｃ1-6アルキル、またはＣ3-6シクロアルキルである；
ｍは０〜４の整数である；
ｎは１または２である；
ｍの各々の例におけるＲ1およびＲ2は、それぞれ独立に水素、Ｃ1-6アルキル、またはＣ3-6シクロアルキルである；またはＲ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、それぞれ独立に水素、Ｃ1-6アルキル、またはＣ3-6シクロアルキルである；またはＲ3はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｌ1およびＬ2は、それぞれ独立にＣ5-21アルキル、Ｃ5-21アルケニル、またはＣ4-20ヘテロアルキルである；
ここで、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｌ1、およびＬ2のいずれかに存在するアルキル、アルケニル、シクロアルキルまたはヘテロアルキルは、一つまたは複数の独立に選択された任意の置換基で任意に置換される、
請求項１１に記載のペプチド複合体。
【請求項１３】
Ｒは水素、またはＣ1-6アルキルである；
ｍは０〜４の整数である；
ｎは１または２である；
ｍの各々の例におけるＲ1およびＲ2は、それぞれ独立に水素、またはＣ1-6アルキルである；またはＲ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、それぞれ独立に水素、またはＣ1-6アルキルである；またはＲ3はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｌ1およびＬ2は、それぞれ独立にＣ5-21アルキル、Ｃ5-21アルケニル、またはＣ4-20ヘテロアルキルである；
ここで、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｌ1、およびＬ2のいずれかに存在するアルキル、アルケニル、またはヘテロアルキルは、一つまたは複数の独立に選択された任意の置換基で任意に置換される、
請求項１１または１２に記載のペプチド複合体。
【請求項１４】
ＺおよびＺ1は、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、および−Ｃ（Ｏ）Ｓ−からそれぞれ独立に選択され、好ましくは−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である、請求項１１〜１３のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項１５】
前記脂質含有部分は、化学式（Ｉ）のものであり、
【化２】
2021501784.tif 000045
ここで、
ｍ、Ｌ1、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、請求項１〜１４のいずれか一項で定義されている通りである；およびＺ1は存在する場合、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である、
請求項１１〜１４のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項１６】
ｍは０〜２の整数である、請求項１１〜１５のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項１７】
ｍは０または１である、請求項１１〜１６のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項１８】
ｍは０である、請求項１１〜１７のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項１９】
ｍの各々の例におけるＲ1およびＲ2は、それぞれ独立に水素である、請求項１１〜１８のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項２０】
Ｒ4およびＲ5は、それぞれ水素である、請求項１１〜１９のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項２１】
Ｒ3は水素またはＣ1-6アルキルである、請求項１１〜２０のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項２２】
前記脂質含有部分は、化学式（ＩＶ）のものであり：
【化３】
2021501784.tif 000046
ここで、
Ｒ3はＬ2−Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ2、またはＬ2−Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ2ＣＨ2である；および
Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立にＣ5-21アルキル、Ｃ5-21アルケニル、またはＣ4-20ヘテロアルキルである；
請求項１１〜２０のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項２３】
Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立にＣ5-21アルキルである、請求項１１〜２２のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項２４】
Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立にＣ9-21アルキルである、請求項１１〜２３のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項２５】
Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立に直鎖Ｃ15アルキルである、請求項１１〜２４のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項２６】
Ｒ3はＬ2−Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ2ＣＨ2である、請求項１１〜２０および２２〜２５のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項２７】
Ｒ3は水素である、請求項１１〜２５のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項２８】
一つまたは複数の独立に選択される任意の置換基は、ハロ、ＣＮ、ＮＯ2、ＯＨ、ＮＨ2、ＮＨＲx、ＮＲxＲy、Ｃ1-6ハロアルキル、Ｃ1-6ハロアルコキシ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ2、Ｃ（Ｏ）ＮＨＲx、Ｃ（Ｏ）ＮＲxＲy、ＳＯ2Ｒx、ＯＲy、ＳＲx、Ｓ（Ｏ）Ｒx、Ｃ（Ｏ）Ｒx、およびＣ1-6脂肪族から選択される；ここでＲxおよびＲyはそれぞれ独立にＣ1-6脂肪族、たとえばＣ1-6アルキルである、請求項１１〜２７のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項２９】
前記ペプチドのＮ末端基は−ＮＲaＲbであり、ここでＲaおよびＲbはそれぞれ独立に水素、アルキル、シクロアルキル、アシル、アリール、またはアリールアルキルである；および／または前記ペプチドのＣ末端基は−ＣＨ2ＯＲc、−Ｃ（Ｏ）ＯＲc、または−Ｃ（Ｏ）ＮＲcＲdであり、ここでＲcおよびＲdはそれぞれ独立に水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、またはアリールアルキルである、請求項１〜２８のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項３０】
前記ペプチドのＮ末端基は−ＮＨ2または−ＮＨ（アシル）、たとえば−ＮＨＡｃである；および／または前記ペプチドのＣ末端基は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ2である、請求項１〜２９のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項３１】
前記ペプチドは式：
Ｚ−Ｘａａ8Ｘａａ9Ｘａａ10Ｘａａ11Ｌｅｕ12Ｘａａ13Ｘａａ14Ｘａａ15Ｌｅｕ16Ｘａａ17Ｘａａ18Ｘａａ19Ｘａａ20Ｘａａ21Ｘａａ22Ｘａａ23Ｘａａ24Ｘａａ25Ｘａａ26Ｐｈｅ27Ｘａａ28Ｘａａ29 Ｔｈｒ30Ｘａａ31Ｖａｌ32Ｇｌｙ33Ｘａａ34Ｘａａ35Ｘａａ36Ｐｈｅ37［配列番号：１］
のアミノ酸配列を含む、またはからなるペプチド複合体であって、
ここで：
Ｚは存在しない、またはＸａａ1Ｘａａ2Ｘａａ3Ｘａａ4Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ2Ｘａａ3Ｘａａ4Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ3Ｘａａ4Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ4Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ6Ｘａａ7またはＸａａ7であって、
ここで：
Ｘａａ1はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、セリン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、スレオニン、チロシン、またはシステインである；
Ｘａａ2はシステイン、セリン、アラニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、スレオニン、チロシンである；
Ｘａａ3はアスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミン、グリシン、セリン、スレオニン、チロシン、またはシステインである；
Ｘａａ4はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、フェニルアラニン、チロシン、バリン、イソロイシン、またはシステインである；
Ｘａａ5はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、またはトリプトファンである；
Ｘａａ6はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、チロシン、フェニルアラニン、バリン、イソロイシン、またはシステインである；
Ｘａａ7はシステイン、セリン、アラニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、スレオニン、フェニルアラニン、またはチロシンである；
Ｘａａ8はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、またはスレオニンである；
Ｘａａ9はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、チロシン、バリン、イソロイシン、またはシステインである；
Ｘａａ10はヒスチジン、リジン、アルギニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、アラニン、グリシン、バリン、ロイシン、またはイソロイシンである；
Ｘａａ11はアルギニン、リジン、ヒスチジン、グルタミン、またはアスパラギンである；
Ｘａａ13はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、セリン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、スレオニン、チロシン、またはシステインである；
Ｘａａ14はグリシン、プロリン、アラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、チロシン、システイン、グルタミン酸、またはアスパラギン酸である；
Ｘａａ15はロイシン、イソロイシン、バリン、アラニン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、プロリン、またはトリプトファンである；
Ｘａａ17はセリン、スレオニン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、アルギニン、リジン、ヒスチジン、グルタミン、アスパラギン、またはシステインである；
Ｘａａ18はアルギニン、リジン、ヒスチジン、グルタミン、またはアスパラギンである；
Ｘａａ19はセリン、スレオニン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、またはシステインである；
Ｘａａ20はグリシン、プロリン、アラニン、ベータアラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、またはチロシンである；
Ｘａａ21はグリシン、プロリン、アラニン、ベータアラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、またはチロシンである；
Ｘａａ22はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、またはトリプトファン、またはスレオニンである；
Ｘａａ23はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、またはスレオニンである；
Ｘａａ24はリジン、アルギニン、グルタミン、アスパラギン、またはヒスチジンである；
Ｘａａ25はアスパラギン、グルタミン、グリシン、セリン、スレオニン、チロシン、フェニルアラニン、アラニン、グルタミン酸、アスパラギン酸、またはシステインである；
Ｘａａ26はアスパラギン、グルタミン、グリシン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、チロシン、またはシステインである；
Ｘａａ28はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、またはスレオニンである；
Ｘａａ29はプロリン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、グリシン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、またはトリプトファンである；
Ｘａａ31はアスパラギン、グルタミン、グリシン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、チロシン、グルタミン酸、アスパラギン酸、またはシステインである；
Ｘａａ34はセリン、スレオニン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、またはシステインである；
Ｘａａ35はリジン、アルギニン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アスパラギン酸、またはグルタミン酸である；
および
Ｘａａ36はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、またはトリプトファンである；
ここで、Ｘａａ1〜Ｘａａ11、Ｘａａ13〜Ｘａａ15、Ｘａａ17〜Ｘａａ26、Ｘａａ28、Ｘａａ29、Ｘａａ31、およびＸａａ34〜Ｘａａ36の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
請求項１〜３０のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項３２】
Ｚは存在しない、またはＸａａ1Ｘａａ2Ｘａａ3Ｘａａ4Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7もしくはＸａａ7である、請求項３１に記載のペプチド複合体。
【請求項３３】
ａ）  Ｘａａ1はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、グリシン、またはスレオニンである；
ｂ）  Ｘａａ2はシステイン、セリン、またはアラニンである；
ｃ）  Ｘａａ3はアスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、またはグルタミンである；
ｄ）  Ｘａａ4はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、またはセリンである；
ｅ）  Ｘａａ5はアラニン、バリン、ロイシン、またはイソロイシンである；
ｆ）  Ｘａａ6はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、またはセリンである；
ｇ）  Ｘａａ7はシステイン、セリン、またはアラニンである；
ｈ）  Ｘａａ8はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、またはメチオニンである；
ｉ）  Ｘａａ9はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、またはセリンである；
ｊ）  Ｘａａ10はヒスチジン、リジン、またはアルギニンである；
ｋ）  Ｘａａ11はアルギニン、リジン、またはヒスチジンである；
ｌ）  Ｘａａ13はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、グリシン、またはスレオニンである；
ｍ）  Ｘａａ14はグリシン、プロリン、アラニン、アスパラギン酸、またはグルタミン酸である；
ｎ）  Ｘａａ15はロイシン、イソロイシン、バリン、アラニン、メチオニン、またはフェニルアラニンである；
ｏ）  Ｘａａ17はセリン、スレオニン、アラニン、アルギニン、リジン、またはヒスチジンである；
ｐ）  Ｘａａ18はアルギニン、リジン、またはヒスチジンである；
ｑ）  Ｘａａ19はセリン、スレオニン、またはアラニンである；
ｒ）  Ｘａａ20はグリシン、プロリン、またはアラニンである；
ｓ）  Ｘａａ21はグリシン、プロリン、またはアラニンである；
ｔ）  Ｘａａ22はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、またはメチオニンである；
ｕ）  Ｘａａ23はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、またはスレオニンである；
ｖ）  Ｘａａ24はリジン、アルギニン、またはヒスチジンである；
ｗ）  Ｘａａ25はアスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、アラニンである；
ｘ）  Ｘａａ26はアスパラギン、セリン、グルタミン酸、またはグルタミンである；
ｙ）  Ｘａａ28はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、またはスレオニンである；
ｚ）  Ｘａａ29はプロリン、アラニン、またはグリシンである；
ａａ）  Ｘａａ31はアスパラギン、グルタミン、グルタミン酸、またはアスパラギン酸である；
ｂｂ）  Ｘａａ34はセリン、スレオニン、またはアラニンである；
ｃｃ）  Ｘａａ35はリジン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸、またはグルタミン酸である；
ｄｄ）  Ｘａａ36はアラニン、バリン、ロイシン、またはイソロイシンである；または
ｅｅ）  ａ）〜ｄｄ）のいずれか二つ以上の任意の組み合わせ；
ここで、Ｘａａ1〜Ｘａａ11、Ｘａａ13〜Ｘａａ15、Ｘａａ17〜Ｘａａ26、Ｘａａ28、Ｘａａ29、Ｘａａ31、およびＸａａ34〜Ｘａａ36の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
請求項３１または３２に記載のペプチド複合体。
【請求項３４】
ａ）  Ｘａａ1はアラニン、またはセリンである；
ｂ）  Ｘａａ2はシステインである；
ｃ）  Ｘａａ3はアスパラギン酸、またはグルタミン酸である；
ｄ）  Ｘａａ4はスレオニンである；
ｅ）  Ｘａａ5はアラニンである；
ｆ）  Ｘａａ6はスレオニンである；
ｇ）  Ｘａａ7はシステインである；
ｈ）  Ｘａａ8はバリンである；
ｉ）  Ｘａａ9はスレオニンである；
ｊ）  Ｘａａ10はヒスチジンである；
ｋ）  Ｘａａ11はアルギニンである；
ｌ）  Ｘａａ13はアラニンである；
ｍ）  Ｘａａ14はグリシン、またはアスパラギン酸である；
ｎ）  Ｘａａ15はロイシンである；
ｏ）  Ｘａａ17はセリン、またはアルギニンである；
ｐ）  Ｘａａ18はアルギニンである；
ｑ）  Ｘａａ19はセリンである；
ｒ）  Ｘａａ20はグリシンである；
ｓ）  Ｘａａ21はグリシンである；
ｔ）  Ｘａａ22はバリン、またはメチオニンである；
ｕ）  Ｘａａ23はバリン、またはロイシンである；
ｖ）  Ｘａａ24はリジンである；
ｗ）  Ｘａａ25はアスパラギン、またはセリンである；
ｘ）  Ｘａａ26はアスパラギン、セリン、またはグルタミン酸である；
ｙ）  Ｘａａ28はバリンである；
ｚ）  Ｘａａ29はプロリンである；
ａａ）  Ｘａａ31はアスパラギン、またはアスパラギン酸である；
ｂｂ）  Ｘａａ34はセリンである；
ｃｃ）  Ｘａａ35はリジン、またはグルタミン酸である；
ｄｄ）  Ｘａａ36はアラニンである；または
ｅｅ）  ａ）〜ｄｄ）のいずれか二つ以上の任意の組み合わせ；
ここで、Ｘａａ1〜Ｘａａ11、Ｘａａ13〜Ｘａａ15、Ｘａａ17〜Ｘａａ26、Ｘａａ28、Ｘａａ29、Ｘａａ31、およびＸａａ34〜Ｘａａ36の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
請求項３１〜３３のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項３５】
上記ペプチドは、式：
Ｚ−Ｘａａ8Ｔｈｒ9Ｘａａ10Ｘａａ11Ｌｅｕ12Ａｌａ13Ｘａａ14Ｌｅｕ15Ｌｅｕ16Ｘａａ17Ｘａａ18Ｘａａ19Ｇｌｙ20Ｘａａ21Ｘａａ22Ｘａａ23Ｘａａ24Ｘａａ25Ａｓｎ26Ｐｈｅ27Ｖａｌ28Ｐｒｏ29Ｔｈｒ30Ｘａａ31Ｖａｌ32Ｇｌｙ33Ｓｅｒ34Ｘａａ35Ａｌａ36Ｐｈｅ37［配列番号：２］
のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる、ペプチド複合体であって、
ここで：
Ｚは存在しない、またはＸａａ1Ｘａａ2Ｘａａ3Ｔｈｒ4Ａｌａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ2Ｘａａ3Ｔｈｒ4Ａｌａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ3Ｔｈｒ4Ａｌａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｔｈｒ4Ａｌａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ａｌａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ6Ｘａａ7またはＸａａ7であって、
ここで：
ａ）  Ｘａａ1はアラニン、またはセリンである；
ｂ）  Ｘａａ2はシステイン、またはホモシステインである；
ｃ）  Ｘａａ3はアスパラギン酸、またはアスパラギンである；
ｄ）  Ｘａａ6はスレオニン、システイン、またはホモシステインである；
ｅ）  Ｘａａ7はシステイン、またはホモシステインである；
ｆ）  Ｘａａ8はバリン、システイン、またはホモシステインである；
ｇ）  Ｘａａ10はヒスチジン、システイン、またはホモシステインである；
ｈ）  Ｘａａ11はアルギニン、システイン、またはホモシステインである；
ｉ）  Ｘａａ14はグリシン、またはアスパラギン酸である；
ｊ）  Ｘａａ17はセリン、アルギニン、システイン、またはホモシステインである；
ｋ）  Ｘａａ18はアルギニン、システイン、またはホモシステインである；
ｌ）  Ｘａａ19はセリン、システイン、またはホモシステインである；
ｍ）  Ｘａａ21はグリシン、システイン、またはホモシステインである；
ｎ）  Ｘａａ22はバリン、またはメチオニンである；
ｏ）  Ｘａａ23はバリン、またはロイシンである；
ｐ）  Ｘａａ24はリジン、システイン、またはホモシステインである；
ｑ）  Ｘａａ25はアスパラギン、セリン、またはアスパラギン酸である；
ｒ）  Ｘａａ31はアスパラギン、またはアスパラギン酸である；および
ｓ）  Ｘａａ36はリジン、グルタミン酸、システイン、またはホモシステインである；
ここで、ペプチド中の少なくとも一つのシステインまたはホモシステインは、脂質含有部分に共有結合している、
請求項３１〜３４のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項３６】
Ｘａａ6〜Ｘａａ8、Ｘａａ10、Ｘａａ11、Ｘａａ17〜Ｘａａ19、Ｘａａ21、Ｘａａ24、およびＸａａ35の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
請求項３１〜３５のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項３７】
Ｘａａ7、Ｘａａ8、Ｘａａ11、Ｘａａ24、およびＸａａ35の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
請求項３１〜３６のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項３８】
Ｘａａ7、Ｘａａ8、Ｘａａ24、およびＸａａ35の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
請求項３１〜３７のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項３９】
Ｘａａ6〜Ｘａａ8、Ｘａａ10、Ｘａａ11、Ｘａａ17〜Ｘａａ19、Ｘａａ21、Ｘａａ24、およびＸａａ35の一つまたは二つは、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
請求項３１〜３８のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項４０】
Ｘａａ7、Ｘａａ8、Ｘａａ11、Ｘａａ24、およびＸａａ35の一つまたは二つは、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
請求項３１〜３９のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項４１】
Ｘａａ6〜Ｘａａ8、Ｘａａ10、Ｘａａ11、Ｘａａ17〜Ｘａａ19、Ｘａａ21、Ｘａａ24、およびＸａａ35の二つ以上は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
請求項３１〜４０のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項４２】
Ｘａａ7、Ｘａａ8、Ｘａａ11、Ｘａａ24、およびＸａａ35の二つ以上は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
請求項３１〜４１のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項４３】
前記ペプチドは、
ａ）  配列番号：３のアミノ酸配列；
ｂ）  配列番号：３の２５個以上の連続したアミノ酸；
ｃ）  配列番号：３のアミノ酸７〜３７；
ｄ）  配列番号：３のアミノ酸８〜３７；
ｅ）  配列番号：４のアミノ酸配列；
ｆ）  配列番号：４の２５個以上の連続したアミノ酸；
ｇ）  配列番号：４のアミノ酸７〜３７；
ｈ）  配列番号：４のアミノ酸８〜３７；または
ｉ）  ａ）〜ｈ）のいずれか一つで定義された配列と少なくとも約６０％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、またはからなるａ）〜ｈ）のいずれか一つの機能的バリアント；
を含み、またはからなり、ここで配列内の一つまたは複数のアミノ酸は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
請求項１〜３０のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項４４】
前記ペプチドは、以下から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなる、ペプチド複合体であって、ここで配列内の一つまたは複数のアミノ酸は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、請求項１〜４４のいずれか一項に記載のペプチド複合体：
ａ）  配列番号：３または配列番号：４のアミノ酸２〜３７；
ｂ）  配列番号：３または配列番号：４のアミノ酸３〜３７；
ｃ）  配列番号：３または配列番号：４のアミノ酸４〜３７；
ｄ）  配列番号：３または配列番号：４のアミノ酸５〜３７；
ｅ）  配列番号：３または配列番号：４のアミノ酸６〜３７；または
ｆ）  ａ）〜ｅ）のいずれか一つで定義された配列と少なくとも約６０％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、またはからなるａ）〜ｈ）のいずれか一つの機能的バリアント。
【請求項４５】
前記アミノ酸配列は、請求項４３のａ）〜ｈ）または請求項４４のａ）〜ｅ）で定義された配列と少なくとも約９０％の配列同一性を有する、請求項４３（ｉ）または請求項４４（ｆ）のペプチド複合体。
【請求項４６】
前記ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の１〜１１位、１３〜１５位、１７〜２６位、２８位、２９位、３１位、および３４〜３６位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む、請求項４３〜４５のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項４７】
前記ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の６〜８位、１０位、１１位、１７〜１９位、２１位、２４位、および３５位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む、請求項４３〜４６のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項４８】
前記ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の６〜８位、１０位、１１位、２１位、２４位、および３５位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む、請求項４３〜４７のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項４９】
前記ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の７位、８位、１１位、２４位、および３５位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む、請求項４３〜４８のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項５０】
前記ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の７位、８位、２４位、および３５位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む、請求項４３〜４９のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項５１】
前記ペプチドの前記Ｎ末端アミノ酸は、脂質含有部分に共有結合している、請求項１〜５０のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項５２】
前記ペプチドは、
ａ）  アミノ酸Ｘａａ1〜Ｘａａ7を含むペプチドの領域、または配列番号：３もしくは配列番号：４のアミノ酸１〜７に対応するペプチドの領域；
ｂ）  アミノ酸Ｘａａ8〜Ｘａａ18を含むペプチドの領域、または配列番号：３もしくは配列番号：４のアミノ酸８〜１８に対応するペプチドの領域；
ｃ）  アミノ酸Ｘａａ19〜Ｘａａ26を含むペプチドの領域、または配列番号：３もしくは配列番号：４のアミノ酸１９〜２６に対応するペプチドの領域；
ｄ）  アミノ酸Ｘａａ27〜Ｘａａ37を含むペプチドの領域、または配列番号：３もしくは配列番号：４のアミノ酸２７〜３７に対応するペプチドの領域；
ｅ）  ａ）〜ｄ）の二つ以上の任意の組み合わせ；
の中の脂質含有部分に共有結合した一つまたは複数のアミノ酸を含む、請求項１〜５１のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項５３】
前記ペプチドは、脂質含有部分に共有結合した約１〜約５個のアミノ酸を含む、請求項１〜５２のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項５４】
前記ペプチドは、脂質含有部分に共有結合した約１〜約３個のアミノ酸を含む、請求項１〜５３のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項５５】
前記ペプチドは、脂質含有部分に共有結合した１個または２個のアミノ酸を含む、請求項１〜５３のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項５６】
前記脂質含有部分に共有結合したアミノ酸はシステインまたはホモシステインであり、前記脂質含有部分はシステインまたはホモシステインのスルフィド基の硫黄原子を介して共有結合している、請求項１〜５５のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項５７】
前記ペプチドは、
ａ）  ＡＸＤＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５］；
ｂ）  ＸＸＤＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６］；
ｃ）  ＡＸＸＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７］；
ｄ）  ＡＸＤＸＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８］；
ｅ）  ＡＸＤＴＸＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９］；
ｆ）  ＡＸＤＴＡＸＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０］；
ｇ）  ＸＤＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１］；
ｈ）  ＤＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２］；
ｉ）  ＸＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３］；
ｊ）  ＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１４］；
ｋ）  ＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１５］；
ｌ）  ＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１６］；
ｍ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１７］；
ｎ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１８］；
ｏ）  ＶＸＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１９］；
ｐ）  ＶＴＸＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２０］；
ｑ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２１］；
ｒ）  ＶＴＨＲＬＸＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２２］；
ｓ）  ＶＴＨＲＬＡＸＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２３］；
ｔ）  ＶＴＨＲＬＡＧＸＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２４］；
ｕ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＸＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２５］；
ｖ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＸＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２６］；
ｗ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＸＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２７］；
ｘ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＸＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２８］；
ｙ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＸＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２９］；
ｚ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＸＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３０］；
ａａ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＸＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３２］；
ｂｂ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３３］；
ｃｃ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＸＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３４］；
ｄｄ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＸＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３５］；
ｅｅ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＸＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３６］；
ｆｆ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＸＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３７］；
ｇｇ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＸＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３８］；
ｈｈ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＸＫＡＦ  ［配列番号：３９］；
ｉｉ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：４０］；
ｊｊ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＸＦ  ［配列番号：４１］；
ｋｋ）  ＡＸＮＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４２］；
ｌｌ）  ＸＸＮＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４３］；
ｍｍ）  ＡＸＸＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４４］；
ｎｎ）  ＡＸＮＸＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４５］；
ｏｏ）  ＡＸＮＴＸＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４６］；
ｐｐ）  ＡＸＮＴＡＸＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４７］；
ｑｑ）  ＸＮＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４８］；
ｒｒ）  ＮＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４９］；
ｓｓ）  ＡＸＮＸＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５０］；
ｔｔ）  ＸＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５１］；
ｕｕ）  ＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５２］；
ｖｖ）  ＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５３］；
ｗｗ）  ＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５４］；
ｘｘ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５５］；
ｙｙ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５６］；
ｚｚ）  ＶＸＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５７］；
ａａａ）  ＶＴＸＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５８］；
ｂｂｂ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５９］；
ｃｃｃ）  ＶＴＨＲＬＸＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６０］；
ｄｄｄ）  ＶＴＨＲＬＡＸＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６１］；
ｅｅｅ）  ＶＴＨＲＬＡＧＸＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６２］；
ｆｆｆ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＸＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６３］；
ｇｇｇ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＸＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６４］；
ｈｈｈ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＸＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６５］；
ｉｉｉ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＸＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６６］；
ｊｊｊ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＸＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６７］；
ｋｋｋ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＸＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６８］；
ｌｌｌ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＸＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６９］；
ｍｍｍ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７０］；
ｎｎｎ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＸＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７１］；
ｏｏｏ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＸＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７２］；
ｐｐｐ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＸＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７３］；
ｑｑｑ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＸＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７４］；
ｒｒｒ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＸＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７５］；
ｓｓｓ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＸＫＡＦ  ［配列番号：７６］；
ｔｔｔ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：７７］；または
ｕｕｕ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＸＦ  ［配列番号：７８］；
から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなるペプチド複合体であって、ここでＸはシステインまたはホモシステインであり、ここで前記ペプチド中の少なくとも一つのＸは脂質含有部分に共有結合している、
請求項１〜５６のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項５８】
前記ペプチドは、
ａ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１７］；
ｂ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１８］；
ｃ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３３］；
ｄ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：４０］；
ｅ）  ＡＸＤＴＡＸＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０］；
ｆ）  ＶＴＸＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２０］；
ｇ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２１］；
ｈ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＸＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２９］；
ｉ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５５］；
ｊ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５６］；
ｋ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７０］；
ｌ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：７７］；
ｍ）  ＡＸＮＴＡＸＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４７］；
ｎ）  ＶＴＸＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５８］；
ｏ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５９］；または
ｐ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＸＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６７］；
から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなるペプチド複合体であって、ここでＸはシステインまたはホモシステインであり、ここで前記ペプチド中の少なくとも一つのＸは脂質含有部分に共有結合している、
請求項１〜５７のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項５９】
前記ペプチドは、
ａ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７９］；
ｂ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８０］；
ｃ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＣＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８１］；
ｄ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：８２］；
ｅ）  ＡＣＤＴＡＣＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８３］；
ｆ）  ＶＴＣＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８４］；
ｇ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８５］；
ｈ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＣＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８６］；
ｉ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８７］；
ｊ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８８］；
ｋ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＣＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８９］；
ｌ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：９０］；
ｍ）  ＡＣＮＴＡＣＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９１］；
ｎ）  ＶＴＣＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９２］；
ｏ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９３］；または
ｐ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＣＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９４］；
から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなるペプチド複合体であって、ここで前記ペプチド中の少なくとも一つのＣは脂質含有部分に共有結合している、
請求項１〜５８のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項６０】
前記ペプチドは、
ａ）  ＸＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１００］；
ｂ）  ＸＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０１］；
ｃ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０２］；
ｄ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１０３］；
ｅ）  ＸＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０４］；
ｆ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０５］；
ｇ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１０６］；
ｈ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０７］；
ｉ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１０８］；
ｊ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１０９］；
ｋ）  ＸＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１０］；
ｌ）  ＸＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１１］；
ｍ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１２］；
ｎ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１１３］；
ｏ）  ＸＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１４］；
ｐ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１５］；
ｑ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１１６］；
ｒ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１７］；
ｓ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１１８］；または
ｔ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１１９］；
から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなるペプチド複合体であって、ここでＸはシステインまたはホモシステインであり、ここで前記ペプチド中の少なくとも二つのＸは脂質含有部分に共有結合している、
請求項１〜５９のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項６１】
前記ペプチドは、
ａ）  ＣＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２０］；
ｂ）  ＣＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２１］；
ｃ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＣＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２２］；
ｄ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１２３］；
ｅ）  ＣＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２４］；
ｆ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＣＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２５］；
ｇ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１２６］；
ｈ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＣＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９９］；
ｉ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１２７］；
ｊ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＣＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１２８］；
ｋ）  ＣＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２９］；
ｌ）  ＣＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３０］；
ｍ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＣＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３１］；
ｎ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１３２］；
ｏ）  ＣＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３３］；
ｐ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＣＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３４］；
ｑ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１３５］；
ｒ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＣＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３６］；
ｓ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１３７］；または
ｔ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＣＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１３８］；
から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなるペプチド複合体であって、ここで前記ペプチド中の少なくとも二つのＣは脂質含有部分に共有結合している、
請求項１〜６０のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【請求項６２】
前記ペプチド複合体およびα−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）はそれぞれ独立に、ＣＧＲＰ受容体における第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）およびＣＧＲＰ受容体における第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）を有する、請求項１〜６１項のいずれか１項に記載のペプチド複合体；
ここで、ＣＧＲＰ受容体における第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）は、受容体およびペプチド複合体またはα−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）をインキュベートした後であり、アンタゴニスト力価値を決定する前に受容体を洗浄しない場合の値である；
ここで、ＣＧＲＰ受容体における第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）は、受容体およびペプチド複合体またはα−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）をインキュベートした後であり、アンタゴニスト力価値を決定する前に受容体を洗浄した後の値である；
ここで、第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）は、第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）より小さい；および
ペプチド複合体の第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）およびペプチド複合体の第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）の間のアンタゴニスト力価の変化倍率の減少は、α−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）の第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）およびα−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）の第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）の間のアンタゴニスト力価の変化倍率の減少より小さい。
【請求項６３】
ペプチド複合体の第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）およびペプチド複合体の第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）の間のアンタゴニスト力価の変化倍率の減少は、約５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、９、８、７、６、５、４、３、または２未満であり、ここでＣＧＲＰ受容体におけるアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）は、ｃＡＭＰアッセイによって測定され、およびここでＣＧＲＰ受容体は、たとえば本明細書の実施例に記載されるように、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１  ＣＧＲＰ受容体である、請求項６２に記載のペプチド複合体。
【請求項６４】
ペプチド複合体の第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）およびペプチド複合体の第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）の間のアンタゴニスト力価の変化倍率の減少は、約２０、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、または２未満であり、ここでＣＧＲＰ受容体におけるアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）は、ｃＡＭＰアッセイによって測定され、およびここでＣＧＲＰ受容体は、たとえば本明細書の実施例に記載されるように、ＣＴＲ／ＲＡＭＰ１  ＡＭＹ１  ＣＧＲＰ受容体である、請求項６２または６３に記載のペプチド複合体。
【請求項６５】
請求項１〜６４のいずれか一項に記載のペプチド複合体；および薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項６６】
治療有効量の請求項１〜６４のいずれか一項に記載のペプチド複合体の対象への投与を含む、それを必要とする対象におけるＣＣＧＲ受容体を拮抗する方法。
【請求項６７】
治療有効量の請求項１〜６４のいずれか一項に記載のペプチド複合体の対象への投与を含む、それを必要とする対象においてＣＧＲＰ受容体が介在または調節する、または過剰なＣＧＲＰ受容体活性化を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法、
【請求項６８】
治療有効量の請求項１〜６４のいずれか一項に記載のペプチド複合体を対象に投与することを含む、それを必要とする対象における血管拡張の増加に関連する、またはそれを特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法。
【請求項６９】
治療有効量の請求項１〜６４のいずれか一項に記載のペプチド複合体を対象に投与することを含む、それを必要とする対象における熱傷、循環性ショック、更年期の顔面紅潮、喘息、敗血症、神経性炎症、炎症性皮膚疾患（たとえば、乾癬および接触性皮膚炎）、アレルギー性鼻炎、関節障害（たとえば、関節炎、および顎関節障害、好ましくは関節炎）、悪液質（たとえば、がん誘発性悪液質）、疼痛、たとえば頭蓋顔面痛障害（たとえば、片頭痛、頭痛、三叉神経痛、および歯痛、好ましくは片頭痛）、および代謝障害または症候群（たとえば、肥満、ＩＩ型糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、および血栓症）からなる群から選択される疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法。
【請求項７０】
疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は片頭痛または頭痛（たとえば、群発頭痛、および外傷後頭痛）である、請求項６７〜６９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７１】
前記方法は、
（Ａ）カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドのアミノ酸を含むアミノ酸複合体を提供し、ここでアミノ酸はスルフィド基の硫黄原子を介して脂質含有部分に共有結合されている；および
アミノ酸複合体のアミノ酸を一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドにカップリングして、請求項１〜６４のいずれか一項に記載のペプチド複合体を提供すること；または
（Ｂ）カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドのペプチド断片を含むペプチド複合体を提供し、ここでペプチド断片の少なくとも一つのアミノ酸がスルフィド基の硫黄原子を介して脂質含有部分に共有結合している；および
ペプチド複合体のアミノ酸を一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドにカップリングして、請求項１〜６４のいずれか一項に記載のペプチド複合体を提供すること
を含む、請求項１〜６４のいずれか一項に記載のペプチド複合体を製造するための方法。
【請求項７２】
炭素―炭素二重結合を含む、脂質含有結合パートナー、および
チオールを含む少なくとも一つのアミノ酸を含む、アミノ酸含有結合パートナーを
脂質含有結合パートナーをアミノ酸含有結合パートナーに結合させるのに有効な条件下で、
反応させることを含む、請求項１〜６４のいずれか一項に記載のペプチド複合体を製造するための方法。
【請求項７３】
ＣＧＲＰ受容体は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１  ＣＧＲＰ受容体、またはＣＴＲ／ＲＡＭＰ１  ＡＭＹ１  ＣＧＲＰ受容体である、請求項１〜７２のいずれか一項に記載のペプチド複合体、医薬組成物、または方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、概して、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）受容体のアンタゴニストであるペプチド複合体、そのような複合体を含む医薬組成物およびキット、そのような複合体を製造する方法、ならびにそのようなアンタゴニストの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＣＧＲＰは、ヒトにおいて二つの型（α−、およびβ−ＣＧＲＰ）で存在する、感覚神経ペプチドである。ＣＧＲＰの二つの型の両方は、３７アミノ酸配列で構成されているが、異なる遺伝子によってコードされており、そして３つのアミノ酸によって互いに異なる。
【０００３】
ＣＧＲＰおよびその関連受容体は、中枢神経系および末梢神経系の両方に見られ、炎症および／または侵害受容において役割を果たす細胞型で発現している。このように、ＣＧＲＰは、全身の様々な細胞、たとえば血管、感覚神経節、および胃腸管、ならびに臓器、たとえば例として皮膚、肺、腎臓、および心臓に見られる。
【０００４】
ＣＧＲＰは感覚神経に貯蔵され、ニューロンの脱分極に応答してニューロンから放出される。ＣＧＲＰは、関連する受容体に結合して活性化することにより、その効果を発揮する。ＣＧＲＰ受容体の活性化は片頭痛と関連付けられている。ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストは、片頭痛およびＣＧＲＰ受容体に関連する他の様々な疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）および疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）、ならびに代謝障害または症候群等の他の様々な疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）および疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療のための有望な標的となる。
【０００５】
既知のＣＧＲＰ受容体アンタゴニストは、ペプチドアンタゴニスト、たとえばＣＧＲＰ断片ＣＧＲＰ8-37、および非ペプチドアンタゴニスト、たとえば「ゲパント」クラスのアンタゴニスト、たとえばどちらも片頭痛の治療について研究されている、オルセゲパント（ＢＩＢＮ４０９６ＢＳ）およびテルカゲパント（ＭＫ０９７４）がある。
【０００６】
さらなるＣＧＲＰアンタゴニストの継続的なニーズがある。本発明の目的は、このニーズを満たすために何らかの方法をとり、および／または少なくとも公衆に有用な選択肢を提供することである。
【０００７】
本発明の他の目的は、例としてのみ与えられている以下の記載から明らかになるであろう。
【０００８】
特許明細書、他の外部文書、または他の情報源が参照されているこの明細書では、これは一般に、本発明の特徴を議論するための文脈を提供する目的のためである。特に明記しない限り、そのような外部文書への言及は、そのような文書またはそのような情報源が、いずれの法域においても先行技術であるか、または当技術分野における一般的な一般知識の一部を形成することの承認として解釈されるべきではない。
【発明の概要】
【０００９】
第一の態様では、本発明は、概して、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドを含むペプチド複合体にあり、ここでペプチドの少なくとも一つのアミノ酸が脂質含有部分に共有結合されており、ここでペプチド複合体はＣＧＲＰ受容体アンタゴニストである。
【００１０】
以下の実施形態および選好（ｐｒｅｆｅｒｅｎｃｅ）は、単独で、または任意の二つ以上の任意の組み合わせで、本明細書の任意の態様に関連してもよい。
【００１１】
様々な実施形態では、少なくとも一つのアミノ酸は、アミノ酸のヘテロ原子を介して脂質含有部分に共有結合されている。
【００１２】
様々な実施形態では、ヘテロ原子は、アミノ酸の側鎖のものである。
【００１３】
様々な実施形態では、少なくとも一つのアミノ酸は、スルフィド基の硫黄原子を介して脂質含有部分に共有結合されている。
【００１４】
別の態様では、本発明は、概して、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドを含むペプチド複合体にあり、ここでペプチドの少なくとも一つのアミノ酸は、スルフィド基の硫黄原子を介して脂質含有部分に共有結合されており、ここでペプチド複合体はＣＧＲＰ受容体アンタゴニストである。
【００１５】
一部の実施形態では、ペプチド複合体は、ＣＧＲＰ受容体におけるα−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）のアンタゴニスト力価（ｐＡ2）より約１０倍未満、５倍未満、３倍未満、２倍未満、１倍未満の値より大きいアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）を有する、またはたとえば、本明細書の実施例に記載されるｃＡＭＰアッセイにより測定されるように、ＣＧＲＰ受容体におけるＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）のアンタゴニスト力価（ｐＡ2）に等しい値より大きいアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）を有する。
【００１６】
一部の実施形態では、ＣＧＲＰ受容体は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１  ＣＧＲＰ受容体、またはＣＴＲ／ＲＡＭＰ１  ＡＭＹ１  ＣＧＲＰ受容体である。
【００１７】
一部の実施形態では、ペプチド複合体は、たとえば好適なげっ歯類モデル、たとえばラットモデルで測定されるように、α−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）の半減期よりも少なくとも２、３、４、５、１０、２０、３０、４０、または５０倍長い半減期を有する。
【００１８】
一部の実施形態では、ペプチド複合体およびα−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）はそれぞれ独立に、ＣＧＲＰ受容体における第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）およびＣＧＲＰ受容体における第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）を有する；
ここで、ＣＧＲＰ受容体における第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）は、受容体およびペプチド複合体またはα−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）をインキュベートした後であり、アンタゴニスト力価値を決定する前に受容体を洗浄しない場合の値である；
ここで、ＣＧＲＰ受容体における第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）は、受容体およびペプチド複合体またはα−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）をインキュベートした後であり、アンタゴニスト力価値を決定する前に受容体を洗浄した後の値である；
ここで、第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）は、第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）より小さい；および
ペプチド複合体の第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）およびペプチド複合体の第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）の間のアンタゴニスト力価の変化倍率の減少は、α−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）の第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）およびα−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）の第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）の間のアンタゴニスト力価の変化倍率の減少より小さい。
【００１９】
様々な実施形態では、ＣＧＲＰ受容体におけるアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）は、たとえば、本明細書の実施例に記載されるｃＡＭＰアッセイにより測定され、任意にここでＣＧＲＰ受容体は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１  ＣＧＲＰ受容体、またはＣＴＲ／ＲＡＭＰ１  ＡＭＹ１  ＣＧＲＰ受容体である。
【００２０】
様々な実施形態では、ペプチド複合体の第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）およびペプチド複合体の第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）の間のアンタゴニスト力価の変化倍率の減少は、約５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、９、８、７、６、５、４、３、または２未満であり、ここでＣＧＲＰ受容体におけるアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）は、ｃＡＭＰアッセイによって測定され、ここでＣＧＲＰ受容体は、たとえば本明細書の実施例に記載されるように、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１  ＣＧＲＰ受容体である。
【００２１】
様々な実施形態では、ペプチド複合体の第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）およびペプチド複合体の第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）の間のアンタゴニスト力価の変化倍率の減少は、約２０、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、または２未満であり、ここでＣＧＲＰ受容体におけるアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）は、ｃＡＭＰアッセイによって測定され、ここでＣＧＲＰ受容体は、たとえば本明細書の実施例に記載されるように、ＣＴＲ／ＲＡＭＰ１  ＡＭＹ１  ＣＧＲＰ受容体である。
【００２２】
様々な実施形態では、ペプチド複合体のアンタゴニスト力価における変化倍率の減少は、α−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）のアンタゴニスト力価における変化倍率の減少よりも、少なくとも約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、２０、２５、５０、１００、２５０、または５００倍小さい。
【００２３】
特定の実施形態では、少なくとも一つのアミノ酸は、システインまたはホモシステインである。例示的な実施形態では、少なくとも一つのアミノ酸は、システインである。
【００２４】
例示的な実施形態では、ペプチド複合体は、脂質含有部分に結合した一つのアミノ酸のみを含む。他の実施形態では、ペプチド複合体は、脂質含有部分にそれぞれ結合した二つ以上のアミノ酸を含む。
【００２５】
一部の実施形態では、脂質含有部分は、それぞれが少なくとも４個または少なくとも６個の鎖結合原子（ｃｈａｉｎ−ｌｉｎｋｅｄ  ａｔｏｍ）を含む一つまたは複数の直鎖または分岐脂肪族、またはヘテロ脂肪族鎖を含む。
【００２６】
特定の実施形態では、脂質含有部分は、一つまたは複数の飽和または不飽和脂肪酸エステルを含む。
【００２７】
様々な実施形態では、脂肪酸は飽和している。
【００２８】
一部の実施形態では、脂質含有部分は、化学式（Ａ）のものであり：
【化１】
2021501784.tif 000002
ここで、
＊は、脂質含有部分が結合しているアミノ酸のスルフィド基の硫黄原子への結合を表す；
ＺおよびＺ1は、Ｏ−、−ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ2−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−、および−ＮＲＣ（Ｏ）ＮＲ−からなる群からそれぞれ独立に選択される；
Ｒは水素またはＣ1-6脂肪族である；
ｍは０〜４の整数である；
ｎは１または２である；
ｍの各々の例におけるＲ1およびＲ2は、それぞれ独立に水素、Ｃ1-6脂肪族である；またはＲ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、それぞれ独立に水素、またはＣ1-6脂肪族である；またはＲ3はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｌ1およびＬ2は、それぞれ独立にＣ5-21脂肪族、またはＣ4-20ヘテロ脂肪族である；ここで：
Ｒ3がＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである場合、Ｒ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルではない；および
ｍが２〜４の整数である場合、１個以下のＲ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；および
ここで、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｌ1、およびＬ2のいずれかに存在する脂肪族、アルキル、またはヘテロ脂肪族は、一つまたは複数の独立に選択された任意の置換基で任意に置換される。
【００２９】
一部の実施形態では、
Ｒは水素、Ｃ1-6アルキル、またはＣ3-6シクロアルキルである；
ｍは０〜４の整数である；
ｎは１または２である；
ｍの各々の例におけるＲ1およびＲ2は、それぞれ独立に水素、Ｃ1-6アルキル、またはＣ3-6シクロアルキルである；またはＲ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、それぞれ独立に水素、Ｃ1-6アルキル、またはＣ3-6シクロアルキルである；またはＲ3はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｌ1およびＬ2は、それぞれ独立にＣ5-21アルキル、Ｃ5-21アルケニル、またはＣ4-20ヘテロアルキルである；
ここで、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｌ1、およびＬ2のいずれかに存在するアルキル、アルケニル、シクロアルキルまたはヘテロアルキルは、一つまたは複数の独立に選択された任意の置換基で任意に置換される。
【００３０】
一部の実施形態では、
Ｒは水素、またはＣ1-6アルキルである；
ｍは０〜４の整数である；
ｎは１または２である；
ｍの各々の例におけるＲ1およびＲ2は、それぞれ独立に水素、またはＣ1-6アルキルである；またはＲ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、それぞれ独立に水素、またはＣ1-6アルキルである；またはＲ3はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｌ1およびＬ2は、それぞれ独立にＣ5-21アルキル、Ｃ5-21アルケニル、またはＣ4-20ヘテロアルキルである；
ここで、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｌ1、およびＬ2のいずれかに存在するアルキル、アルケニル、またはヘテロアルキルは、一つまたは複数の独立に選択された任意の置換基で任意に置換される。
【００３１】
一部の実施形態では、ＺおよびＺ1は、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、および−Ｃ（Ｏ）Ｓ−からそれぞれ独立に選択され、好ましくは−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である。
【００３２】
特定の実施形態では、脂質含有部分は、化学式（Ｉ）のものであり、
【化２】
2021501784.tif 000003
ここで、
ｍ、Ｌ1、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、本明細書の実施形態のいずれかで定義されている通りである；およびＺ1は存在する場合、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である。
【００３３】
一部の実施形態では、ｍは０〜２の整数である。特定の実施形態では、ｍは０または１である。例示的な実施形態では、ｍは０である。
【００３４】
特定の実施形態では、ｍの各々の例におけるＲ1およびＲ2は、それぞれ独立に水素である。
【００３５】
特定の実施形態では、Ｒ4およびＲ5は、それぞれ水素である。
【００３６】
一部の実施形態では、Ｒ3は水素またはＣ1-6アルキルである。
【００３７】
一部の実施形態では、脂質含有部分は、化学式（ＩＶ）のものであり：
【化３】
2021501784.tif 000004
ここで、
Ｒ3はＬ2−Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ2、またはＬ2−Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ2ＣＨ2である；および
Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立にＣ5-21アルキル、Ｃ5-21アルケニル、またはＣ4-20ヘテロアルキルである。
【００３８】
特定の実施形態では、Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立にＣ5-21脂肪族、たとえばＣ9-21脂肪族、Ｃ11-21脂肪族、またはＣ9、Ｃ11、Ｃ13、Ｃ15、Ｃ17、またはＣ19脂肪族である。
【００３９】
特定の実施形態では、Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立にＣ5-21アルキルである。様々な実施形態では、Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立にＣ9-21アルキルである。一部の実施形態では、Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立にＣ11-21アルキルである。
【００４０】
様々な例示的な実施形態では、Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立にＣ9、Ｃ11、Ｃ13、Ｃ15、Ｃ17、またはＣ19アルキル、好ましくはｎ−アルキルである。
【００４１】
具体的に企図される様々な実施形態では、Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立にＣ15アルキルである。特定の実施形態では、Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立に直鎖Ｃ15アルキルである。
【００４２】
様々な実施形態では、Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立に９〜２１個の炭素原子の直鎖を含む。
【００４３】
一部の実施形態では、Ｒ3はＬ2−Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ2ＣＨ2である。一部の実施形態では、Ｒ3はＬ2−Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ2である。例示的な実施形態では、Ｒ3は水素である。
【００４４】
一つの実施形態では、Ｌ1はＣ5-21アルキルであり；ｍは０であり；Ｒ3は水素、Ｌ2−Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ2またはＬ2−Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ2ＣＨ2であり；Ｌ2はＣ11-21アルキルであり；そしてＲ4およびＲ5はそれぞれ水素である。
【００４５】
一つの実施形態では、Ｌ1はＣ5-21アルキルであり；ｍは０であり；Ｒ3は水素であり；Ｌ2はＣ11-21アルキルであり；そしてＲ4およびＲ5はそれぞれ水素である。
【００４６】
一つの実施形態では、Ｌ1はＣ5-21アルキルであり；ｍは０であり；Ｒ3はＬ2−Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ2であり；Ｌ2はＣ11-21アルキルであり；そしてＲ4およびＲ5はそれぞれ水素である。
【００４７】
一つの実施形態では、Ｌ1はＣ5-21アルキルであり；ｍは０であり；Ｒ3はＬ2−Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ2ＣＨ2であり；Ｌ2はＣ11-21アルキルであり；そしてＲ4およびＲ5はそれぞれ水素である。
【００４８】
当業者は、特定の実施形態において、部分Ｌ1−Ｚ1−およびＬ2−Ｚ2−は、脂肪酸基、たとえば、脂肪酸エステルであってもよいことを理解するであろう。
【００４９】
様々な実施形態では、部分Ｌ1−Ｚ1−およびＬ2−Ｚ2−は、飽和または不飽和脂肪酸エステルであってもよい。一部の実施形態では、脂肪酸は飽和している。
【００５０】
様々な実施形態では、脂肪酸はＣ4-22脂肪酸である。一部の実施形態では、脂肪酸は、Ｃ6-22脂肪酸である。特定の実施形態では、脂肪酸はＣ10-22脂肪酸である。特定の具体的に企図される実施形態では、脂肪酸はＣ12-22脂肪酸である。様々な例示的な実施形態では、脂肪酸はＣ10、Ｃ12、Ｃ14、Ｃ16、Ｃ18、またはＣ20脂肪酸である。
【００５１】
一部の実施形態では、脂肪酸はデカン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキン酸、パルミトレイン酸、オレイン酸、エライジン酸、リノール酸、α−リノレン酸、およびアラキドン酸である。様々な実施形態では、脂肪酸はデカン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、またはステアリン酸である。
【００５２】
特定の例示的な実施形態では、脂肪酸はパルミチン酸である（そして部分Ｌ1−Ｚ1−およびＬ2−Ｚ2−は、それぞれパルミトイル基である）。
【００５３】
様々な実施形態では、一つまたは複数の独立に選択される任意の置換基は、ハロ、ＣＮ、ＮＯ2、ＯＨ、ＮＨ2、ＮＨＲx、ＮＲxＲy、Ｃ1-6ハロアルキル、Ｃ1-6ハロアルコキシ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ2、Ｃ（Ｏ）ＮＨＲx、Ｃ（Ｏ）ＮＲxＲy、ＳＯ2Ｒx、ＯＲy、ＳＲx、Ｓ（Ｏ）Ｒx、Ｃ（Ｏ）Ｒx、およびＣ1-6脂肪族から選択される；ここでＲxおよびＲyはそれぞれ独立にＣ1-6脂肪族、たとえばＣ1-6アルキルである。
【００５４】
一部の実施形態では、上記任意の置換基は非置換である。
【００５５】
様々な実施形態では、ペプチドのＮ末端基は−ＮＲaＲbであり、ここでＲaおよびＲbはそれぞれ独立に水素、アルキル、シクロアルキル、アシル、アリール、またはアリールアルキルである；および／またはペプチドのＣ末端基は−ＣＨ2ＯＲc、−Ｃ（Ｏ）ＯＲc、または−Ｃ（Ｏ）ＮＲcＲdであり、ここでＲcおよびＲdはそれぞれ独立に水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、またはアリールアルキルである。
【００５６】
様々な実施形態では、ペプチドのＮ末端基は−ＮＨ2または−ＮＨ（アシル）、たとえば−ＮＨＡｃである；および／またはペプチドのＣ末端基は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ2である。
【００５７】
例示的な実施形態では、ペプチドのＮ末端基は−ＮＨ2である。
【００５８】
例示的な実施形態では、ペプチドのＣ末端基は−Ｃ（Ｏ）ＮＲcＲdである。
【００５９】
例示的な実施形態では、ペプチドのＣ末端基は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ2である。
【００６０】
様々な実施形態では、ペプチド複合体はリポペプチドである。
【００６１】
一部の実施形態では、ペプチドは式：
Ｚ−Ｘａａ8Ｘａａ9Ｘａａ10Ｘａａ11Ｌｅｕ12Ｘａａ13Ｘａａ14Ｘａａ15Ｌｅｕ16Ｘａａ17Ｘａａ18Ｘａａ19Ｘａａ20Ｘａａ21Ｘａａ22Ｘａａ23Ｘａａ24Ｘａａ25Ｘａａ26Ｐｈｅ27Ｘａａ28Ｘａａ29 Ｔｈｒ30Ｘａａ31Ｖａｌ32Ｇｌｙ33Ｘａａ34Ｘａａ35Ｘａａ36Ｐｈｅ37［配列番号：１］
のアミノ酸配列を含む、またはからなるペプチド複合体であって、
ここで：
Ｚは存在しない、またはＸａａ1Ｘａａ2Ｘａａ3Ｘａａ4Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ2Ｘａａ3Ｘａａ4Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ3Ｘａａ4Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ4Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ6Ｘａａ7またはＸａａ7であって、
ここで：
Ｘａａ1はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、セリン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、スレオニン、チロシン、またはシステインである；
Ｘａａ2はシステイン、セリン、アラニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、スレオニン、チロシンである；
Ｘａａ3はアスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミン、グリシン、セリン、スレオニン、チロシン、またはシステインである；
Ｘａａ4はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、フェニルアラニン、チロシン、バリン、イソロイシン、またはシステインである；
Ｘａａ5はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、またはトリプトファンである；
Ｘａａ6はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、チロシン、フェニルアラニン、バリン、イソロイシン、またはシステインである；
Ｘａａ7はシステイン、セリン、アラニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、スレオニン、フェニルアラニン、またはチロシンである；
Ｘａａ8はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、またはスレオニンである；
Ｘａａ9はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、チロシン、バリン、イソロイシン、またはシステインである；
Ｘａａ10はヒスチジン、リジン、アルギニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、アラニン、グリシン、バリン、ロイシン、またはイソロイシンである；
Ｘａａ11はアルギニン、リジン、ヒスチジン、グルタミン、またはアスパラギンである；
Ｘａａ13はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、セリン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、スレオニン、チロシン、またはシステインである；
Ｘａａ14はグリシン、プロリン、アラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、チロシン、システイン、グルタミン酸、またはアスパラギン酸である；
Ｘａａ15はロイシン、イソロイシン、バリン、アラニン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、プロリン、またはトリプトファンである；
Ｘａａ17はセリン、スレオニン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、アルギニン、リジン、ヒスチジン、グルタミン、アスパラギン、またはシステインである；
Ｘａａ18はアルギニン、リジン、ヒスチジン、グルタミン、またはアスパラギンである；
Ｘａａ19はセリン、スレオニン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、またはシステインである；
Ｘａａ20はグリシン、プロリン、アラニン、ベータアラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、またはチロシンである；
Ｘａａ21はグリシン、プロリン、アラニン、ベータアラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、またはチロシンである；
Ｘａａ22はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、またはトリプトファン、またはスレオニンである；
Ｘａａ23はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、またはスレオニンである；
Ｘａａ24はリジン、アルギニン、グルタミン、アスパラギン、またはヒスチジンである；
Ｘａａ25はアスパラギン、グルタミン、グリシン、セリン、スレオニン、チロシン、フェニルアラニン、アラニン、グルタミン酸、アスパラギン酸、またはシステインである；
Ｘａａ26はアスパラギン、グルタミン、グリシン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、チロシン、またはシステインである；
Ｘａａ28はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、またはスレオニンである；
Ｘａａ29はプロリン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、グリシン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、またはトリプトファンである；
Ｘａａ31はアスパラギン、グルタミン、グリシン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、チロシン、グルタミン酸、アスパラギン酸、またはシステインである；
Ｘａａ34はセリン、スレオニン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、またはシステインである；
Ｘａａ35はリジン、アルギニン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アスパラギン酸、またはグルタミン酸である；
および
Ｘａａ36はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、またはトリプトファンである；
ここで、Ｘａａ1〜Ｘａａ11、Ｘａａ13〜Ｘａａ15、Ｘａａ17〜Ｘａａ26、Ｘａａ28、Ｘａａ29、Ｘａａ31、およびＸａａ34〜Ｘａａ36の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている。
【００６２】
一部の実施形態では、Ｚは存在しない、またはＸａａ1Ｘａａ2Ｘａａ3Ｘａａ4Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、またはＸａａ7である。
【００６３】
一部の実施形態では、
ａ）  Ｘａａ1はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、グリシン、またはスレオニンである；
ｂ）  Ｘａａ2はシステイン、セリン、またはアラニンである；
ｃ）  Ｘａａ3はアスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、またはグルタミンである；
ｄ）  Ｘａａ4はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、またはセリンである；
ｅ）  Ｘａａ5はアラニン、バリン、ロイシン、またはイソロイシンである；
ｆ）  Ｘａａ6はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、またはセリンである；
ｇ）  Ｘａａ7はシステイン、セリン、またはアラニンである；
ｈ）  Ｘａａ8はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、またはメチオニンである；
ｉ）  Ｘａａ9はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、またはセリンである；
ｊ）  Ｘａａ10はヒスチジン、リジン、またはアルギニンである；
ｋ）  Ｘａａ11はアルギニン、リジン、またはヒスチジンである；
ｌ）  Ｘａａ13はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、グリシン、またはスレオニンである；
ｍ）  Ｘａａ14はグリシン、プロリン、アラニン、アスパラギン酸、またはグルタミン酸である；
ｎ）  Ｘａａ15はロイシン、イソロイシン、バリン、アラニン、メチオニン、またはフェニルアラニンである；
ｏ）  Ｘａａ17はセリン、スレオニン、アラニン、アルギニン、リジン、またはヒスチジンである；
ｐ）  Ｘａａ18はアルギニン、リジン、またはヒスチジンである；
ｑ）  Ｘａａ19はセリン、スレオニン、またはアラニンである；
ｒ）  Ｘａａ20はグリシン、プロリン、またはアラニンである；
ｓ）  Ｘａａ21はグリシン、プロリン、またはアラニンである；
ｔ）  Ｘａａ22はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、またはメチオニンである；
ｕ）  Ｘａａ23はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、またはスレオニンである；
ｖ）  Ｘａａ24はリジン、アルギニン、またはヒスチジンである；
ｗ）  Ｘａａ25はアスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、アラニンである；
ｘ）  Ｘａａ26はアスパラギン、セリン、グルタミン酸、またはグルタミンである；
ｙ）  Ｘａａ28はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、またはスレオニンである；
ｚ）  Ｘａａ29はプロリン、アラニン、またはグリシンである；
ａａ）  Ｘａａ31はアスパラギン、グルタミン、グルタミン酸、またはアスパラギン酸である；
ｂｂ）  Ｘａａ34はセリン、スレオニン、またはアラニンである；
ｃｃ）  Ｘａａ35はリジン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸、またはグルタミン酸である；
ｄｄ）  Ｘａａ36はアラニン、バリン、ロイシン、またはイソロイシンである；または
ｅｅ）  ａ）〜ｄｄ）のいずれか二つ以上の任意の組み合わせ；
ここで、Ｘａａ1〜Ｘａａ11、Ｘａａ13〜Ｘａａ15、Ｘａａ17〜Ｘａａ26、Ｘａａ28、Ｘａａ29、Ｘａａ31、およびＸａａ34〜Ｘａａ36の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
【００６４】
一部の実施形態では、
ａ）  Ｘａａ1はアラニン、またはセリンである；
ｂ）  Ｘａａ2はシステインである；
ｃ）  Ｘａａ3はアスパラギン酸、またはグルタミン酸である；
ｄ）  Ｘａａ4はスレオニンである；
ｅ）  Ｘａａ5はアラニンである；
ｆ）  Ｘａａ6はスレオニンである；
ｇ）  Ｘａａ7はシステインである；
ｈ）  Ｘａａ8はバリンである；
ｉ）  Ｘａａ9はスレオニンである；
ｊ）  Ｘａａ10はヒスチジンである；
ｋ）  Ｘａａ11はアルギニンである；
ｌ）  Ｘａａ13はアラニンである；
ｍ）  Ｘａａ14はグリシン、またはアスパラギン酸である；
ｎ）  Ｘａａ15はロイシンである；
ｏ）  Ｘａａ17はセリン、またはアルギニンである；
ｐ）  Ｘａａ18はアルギニンである；
ｑ）  Ｘａａ19はセリンである；
ｒ）  Ｘａａ20はグリシンである；
ｓ）  Ｘａａ21はグリシンである；
ｔ）  Ｘａａ22はバリン、またはメチオニンである；
ｕ）  Ｘａａ23はバリン、またはロイシンである；
ｖ）  Ｘａａ24はリジンである；
ｗ）  Ｘａａ25はアスパラギン、またはセリンである；
ｘ）  Ｘａａ26はアスパラギン、セリン、またはグルタミン酸である；
ｙ）  Ｘａａ28はバリンである；
ｚ）  Ｘａａ29はプロリンである；
ａａ）  Ｘａａ31はアスパラギン、またはアスパラギン酸である；
ｂｂ）  Ｘａａ34はセリンである；
ｃｃ）  Ｘａａ35はリジン、またはグルタミン酸である；
ｄｄ）  Ｘａａ36はアラニンである；または
ｅｅ）  ａ）〜ｄｄ）のいずれか二つ以上の任意の組み合わせ；
ここで、Ｘａａ1〜Ｘａａ11、Ｘａａ13〜Ｘａａ15、Ｘａａ17〜Ｘａａ26、Ｘａａ28、Ｘａａ29、Ｘａａ31、およびＸａａ34〜Ｘａａ36の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている。
【００６５】
一部の実施形態では、ペプチドは、式：
Ｚ−Ｘａａ8Ｔｈｒ9Ｘａａ10Ｘａａ11Ｌｅｕ12Ａｌａ13Ｘａａ14Ｌｅｕ15Ｌｅｕ16Ｘａａ17Ｘａａ18Ｘａａ19Ｇｌｙ20Ｘａａ21Ｘａａ22Ｘａａ23Ｘａａ24Ｘａａ25Ａｓｎ26Ｐｈｅ27Ｖａｌ28Ｐｒｏ29 Ｔｈｒ30Ｘａａ31Ｖａｌ32Ｇｌｙ33Ｓｅｒ34Ｘａａ35Ａｌａ36Ｐｈｅ37［配列番号：２］
のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、
ここで：  Ｚは存在しない、またはＸａａ1Ｘａａ2Ｘａａ3Ｔｈｒ4Ａｌａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ2Ｘａａ3Ｔｈｒ4Ａｌａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ3Ｔｈｒ4Ａｌａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｔｈｒ4Ａｌａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ａｌａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ6Ｘａａ7またはＸａａ7であって、
ここで：
ａ）  Ｘａａ1はアラニン、またはセリンである；
ｂ）  Ｘａａ2はシステイン、またはホモシステインである；
ｃ）  Ｘａａ3はアスパラギン酸、またはアスパラギンである；
ｄ）  Ｘａａ6はスレオニン、システイン、またはホモシステインである；
ｅ）  Ｘａａ7はシステイン、またはホモシステインである；
ｆ）  Ｘａａ8はバリン、システイン、またはホモシステインである；
ｇ）  Ｘａａ10はヒスチジン、システイン、またはホモシステインである；
ｈ）  Ｘａａ11はアルギニン、システイン、またはホモシステインである；
ｉ）  Ｘａａ14はグリシン、またはアスパラギン酸である；
ｊ）  Ｘａａ17はセリン、アルギニン、システイン、またはホモシステインである；
ｋ）  Ｘａａ18はアルギニン、システイン、またはホモシステインである；
ｌ）  Ｘａａ19はセリン、システイン、またはホモシステインである；
ｍ）  Ｘａａ21はグリシン、システイン、またはホモシステインである；
ｎ）  Ｘａａ22はバリン、またはメチオニンである；
ｏ）  Ｘａａ23はバリン、またはロイシンである；
ｐ）  Ｘａａ24はリジン、システイン、またはホモシステインである；
ｑ）  Ｘａａ25はアスパラギン、セリン、またはアスパラギン酸である；
ｒ）  Ｘａａ31はアスパラギン、またはアスパラギン酸である；および
ｓ）  Ｘａａ36はリジン、グルタミン酸、システイン、またはホモシステインである；
ここで、ペプチド中の少なくとも一つのシステインまたはホモシステインは、脂質含有部分に共有結合している。
【００６６】
一部の実施形態では、Ｘａａ6〜Ｘａａ8、Ｘａａ10、Ｘａａ11、Ｘａａ17〜Ｘａａ19、Ｘａａ21、Ｘａａ24、およびＸａａ35の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている。
【００６７】
一部の実施形態では、Ｘａａ7、Ｘａａ8、Ｘａａ11、Ｘａａ24、およびＸａａ35の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている。
【００６８】
一部の実施形態では、Ｘａａ7、Ｘａａ8、Ｘａａ24、およびＸａａ35の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている。
【００６９】
一部の実施形態では、Ｘａａ6〜Ｘａａ8、Ｘａａ10、Ｘａａ11、Ｘａａ17〜Ｘａａ19、Ｘａａ21、Ｘａａ24、およびＸａａ35の一つまたは二つは、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている。
【００７０】
一部の実施形態では、Ｘａａ7、Ｘａａ8、Ｘａａ11、Ｘａａ24、およびＸａａ35の一つまたは二つは、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている。
【００７１】
一部の実施形態では、Ｘａａ6〜Ｘａａ8、Ｘａａ10、Ｘａａ11、Ｘａａ17〜Ｘａａ19、Ｘａａ21、Ｘａａ24、およびＸａａ35の二つ以上は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている。
【００７２】
一部の実施形態では、Ｘａａ7、Ｘａａ8、Ｘａａ11、Ｘａａ24、およびＸａａ35の二つ以上は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている。
【００７３】
一部の実施形態では、ペプチドは、
ａ）  配列番号：３のアミノ酸配列；
ｂ）  配列番号：３の２５個以上の連続したアミノ酸；
ｃ）  配列番号：３のアミノ酸７〜３７；
ｄ）  配列番号：３のアミノ酸８〜３７；
ｅ）  配列番号：４のアミノ酸配列；
ｆ）  配列番号：４の２５個以上の連続したアミノ酸；
ｇ）  配列番号：４のアミノ酸７〜３７；
ｈ）  配列番号：４のアミノ酸８〜３７；または
ｉ）  ａ）〜ｈ）のいずれか一つで定義された配列と少なくとも約６０％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、またはからなるａ）〜ｈ）のいずれか一つの機能的バリアント；
を含み、またはからなり、ここで配列内の一つまたは複数のアミノ酸は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている。
【００７４】
一部の実施形態では、アミノ酸配列は、上記の実施形態のａ）〜ｈ）で定義された配列と少なくとも約９０％の配列同一性を有する。
【００７５】
一部の実施形態では、ペプチドは、
ａ）  配列番号：３または配列番号：４のアミノ酸２〜３７；
ｂ）  配列番号：３または配列番号：４のアミノ酸３〜３７；
ｃ）  配列番号：３または配列番号：４のアミノ酸４〜３７；
ｄ）  配列番号：３または配列番号：４のアミノ酸５〜３７；
ｅ）  配列番号：３または配列番号：４のアミノ酸６〜３７；または
ｆ）  ａ）〜ｅ）のいずれか一つで定義された配列と少なくとも約６０％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、またはからなるａ）〜ｈ）のいずれか一つの機能的バリアント；
から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなり、ここで配列内の一つまたは複数のアミノ酸は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている。
【００７６】
一部の実施形態では、一部の実施形態では、アミノ酸配列は、上記の実施形態のａ）〜ｅ）で定義された配列と少なくとも約９０％の配列同一性を有する。
【００７７】
一部の実施形態では、ペプチドは、上記の実施形態の任意のＣＧＲＰペプチドアミノ酸配列の機能的バリアントを含み、またはからなり、ここで機能的バリアントのアミノ酸配列は、上記の実施形態のＣＧＲＰペプチドアミノ配列に対して少なくとも約６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有する。
【００７８】
様々な実施形態では、ペプチドは、
ａ）  配列番号：３のアミノ酸配列；
ｂ）  配列番号：９５のアミノ酸配列；
ｃ）  配列番号：９６のアミノ酸配列；
ｄ）  配列番号：４のアミノ酸配列；
ｅ）  配列番号：９７のアミノ酸配列；
ｆ）  配列番号：３１のアミノ酸配列；
を含む、またはからなり、ここで配列内の少なくとも一つのシステインは、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である。
【００７９】
一部の実施形態では、ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の１〜１１位、１３〜１５位、１７〜２６位、２８位、２９位、３１位、および３４〜３６位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む。
【００８０】
一部の実施形態では、ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の６〜８位、１０位、１１位、１７〜１９位、２１位、２４位、および３５位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む。
【００８１】
一部の実施形態では、ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の６〜８位、１０位、１１位、２１位、２４位、および３５位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む。
【００８２】
一部の実施形態では、ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の６〜８位、１０位、１１位、２１位、２４位、および３５位に対応する１、２、３、４、または５個のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む。
【００８３】
一部の実施形態では、ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の７位、８位、２４位、および３５位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む。
【００８４】
一部の実施形態では、ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の７位、８位、１１位、２４位、および３５位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む。
【００８５】
一部の実施形態では、ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の７位、８位、２４位、および３５位に対応する１、２、３、または４個のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む。
【００８６】
一部の実施形態では、ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の７位、８位、１１位、２４位、および３５位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む。
【００８７】
一部の実施形態では、ペプチドのＮ末端アミノ酸は、脂質含有部分に共有結合している。
【００８８】
一部の実施形態では、ペプチドは、
ａ）  アミノ酸Ｘａａ1〜Ｘａａ7を含むペプチドの領域、または配列番号：３もしくは配列番号：４のアミノ酸１〜７に対応するペプチドの領域；
ｂ）  アミノ酸Ｘａａ8〜Ｘａａ18を含むペプチドの領域、または配列番号：３もしくは配列番号：４のアミノ酸８〜１８に対応するペプチドの領域；
ｃ）  アミノ酸Ｘａａ19〜Ｘａａ26を含むペプチドの領域、または配列番号：３もしくは配列番号：４のアミノ酸１９〜２６に対応するペプチドの領域；
ｄ）  アミノ酸Ｘａａ27〜Ｘａａ37を含むペプチドの領域、または配列番号：３もしくは配列番号：４のアミノ酸２７〜３７に対応するペプチドの領域；
ｅ）  ａ）〜ｄ）の二つ以上の任意の組み合わせ；
の中の脂質含有部分に共有結合した一つまたは複数のアミノ酸を含む。
【００８９】
一部の実施形態では、ペプチドは、脂質含有部分に共有結合した約１〜約５個のアミノ酸を含む。
【００９０】
一部の実施形態では、ペプチドは、脂質含有部分に共有結合した約１〜約３個のアミノ酸を含む。
【００９１】
一部の実施形態では、ペプチドは、脂質含有部分に共有結合した１個または２個のアミノ酸を含む。
【００９２】
一部の実施形態では、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸はシステインまたはホモシステインである。
【００９３】
一部の実施形態では、システインまたはホモシステインは、システインまたはホモシステインのスルフィド基の硫黄原子を介して脂質含有部分に共有結合している。
【００９４】
一部の実施形態では、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸はシステインまたはホモシステインであり、脂質含有部分はシステインまたはホモシステインのスルフィド基の硫黄原子を介して共有結合している。
【００９５】
一部の実施形態では、ペプチドはＣ末端アミド（つまり、Ｃ末端アミノ酸はアミド化されている）を含む。一部の実施形態では、ペプチドはＮ末端アシル基、たとえばアセチル基（つまり、Ｎ末端アミノ酸はアセチル化されている）を含む。
【００９６】
一部の実施形態では、ペプチドは、
ａ）  ＡＸＤＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５］；
ｂ）  ＸＸＤＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６］；
ｃ）  ＡＸＸＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７］；
ｄ）  ＡＸＤＸＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８］；
ｅ）  ＡＸＤＴＸＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９］；
ｆ）  ＡＸＤＴＡＸＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０］；
ｇ）  ＸＤＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１］；
ｈ）  ＤＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２］；
ｉ）  ＸＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３］；
ｊ）  ＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１４］；
ｋ）  ＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１５］；
ｌ）  ＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１６］；
ｍ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１７］；
ｎ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１８］；
ｏ）  ＶＸＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１９］；
ｐ）  ＶＴＸＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２０］；
ｑ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２１］；
ｒ）  ＶＴＨＲＬＸＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２２］；
ｓ）  ＶＴＨＲＬＡＸＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２３］；
ｔ）  ＶＴＨＲＬＡＧＸＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２４］；
ｕ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＸＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２５］；
ｖ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＸＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２６］；
ｗ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＸＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２７］；
ｘ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＸＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２８］；
ｙ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＸＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２９］；
ｚ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＸＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３０］；
ａａ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＸＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３２］；
ｂｂ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３３］；
ｃｃ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＸＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３４］；
ｄｄ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＸＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３５］；
ｅｅ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＸＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３６］；
ｆｆ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＸＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３７］；
ｇｇ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＸＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３８］；
ｈｈ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＸＫＡＦ  ［配列番号：３９］；
ｉｉ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：４０］；
ｊｊ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＸＦ  ［配列番号：４１］；
ｋｋ）  ＡＸＮＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４２］；
ｌｌ）  ＸＸＮＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４３］；
ｍｍ）  ＡＸＸＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４４］；
ｎｎ）  ＡＸＮＸＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４５］；
ｏｏ）  ＡＸＮＴＸＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４６］；
ｐｐ）  ＡＸＮＴＡＸＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４７］；
ｑｑ）  ＸＮＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４８］；
ｒｒ）  ＮＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４９］；
ｓｓ）  ＡＸＮＸＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５０］；
ｔｔ）  ＸＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５１］；
ｕｕ）  ＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５２］；
ｖｖ）  ＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５３］；
ｗｗ）  ＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５４］；
ｘｘ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５５］；
ｙｙ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５６］；
ｚｚ）  ＶＸＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５７］；
ａａａ）  ＶＴＸＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５８］；
ｂｂｂ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５９］；
ｃｃｃ）  ＶＴＨＲＬＸＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６０］；
ｄｄｄ）  ＶＴＨＲＬＡＸＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６１］；
ｅｅｅ）  ＶＴＨＲＬＡＧＸＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６２］；
ｆｆｆ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＸＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６３］；
ｇｇｇ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＸＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６４］；
ｈｈｈ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＸＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６５］；
ｉｉｉ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＸＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６６］；
ｊｊｊ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＸＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６７］；
ｋｋｋ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＸＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６８］；
ｌｌｌ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＸＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６９］；
ｍｍｍ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７０］；
ｎｎｎ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＸＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７１］；
ｏｏｏ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＸＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７２］；
ｐｐｐ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＸＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７３］；
ｑｑｑ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＸＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７４］；
ｒｒｒ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＸＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７５］；
ｓｓｓ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＸＫＡＦ  ［配列番号：７６］；
ｔｔｔ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：７７］；または
ｕｕｕ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＸＦ  ［配列番号：７８］；
から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなり、ここでＸはシステインまたはホモシステインであり、ここでペプチド中の少なくとも一つのＸは脂質含有部分に共有結合している。
【００９７】
一部の実施形態では、ペプチドは、
ａ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１７］；
ｂ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１８］；
ｃ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３３］；
ｄ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：４０］；
ｅ）  ＡＸＤＴＡＸＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０］；
ｆ）  ＶＴＸＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２０］；
ｇ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２１］；
ｈ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＸＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２９］；
ｉ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５５］；
ｊ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５６］；
ｋ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７０］；
ｌ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：７７］；
ｍ）  ＡＸＮＴＡＸＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４７］；
ｎ）  ＶＴＸＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５８］；
ｏ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５９］；または
ｐ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＸＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６７］；
から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなり、ここでＸはシステインまたはホモシステインであり、ここでペプチド中の少なくとも一つのＸは脂質含有部分に共有結合している。
【００９８】
一部の実施形態では、ここでペプチドは、
ａ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７９］；
ｂ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８０］；
ｃ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＣＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８１］；
ｄ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：８２］；
ｅ）  ＡＣＤＴＡＣＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８３］；
ｆ）  ＶＴＣＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８４］；
ｇ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８５］；
ｈ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＣＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８６］；
ｉ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８７］；
ｊ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８８］；
ｋ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＣＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８９］；
ｌ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：９０］；
ｍ）  ＡＣＮＴＡＣＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９１］；
ｎ）  ＶＴＣＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９２］；
ｏ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９３］；または
ｐ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＣＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９４］；
から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなり、ここでペプチド中の少なくとも一つのＣは脂質含有部分に共有結合している。
【００９９】
一部の実施形態では、ペプチドは、
ａ）  ＸＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１００］；
ｂ）  ＸＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０１］；
ｃ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０２］；
ｄ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１０３］；
ｅ）  ＸＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０４］；
ｆ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０５］；
ｇ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１０６］；
ｈ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０７］；
ｉ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１０８］；
ｊ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１０９］；
ｋ）  ＸＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１０］；
ｌ）  ＸＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１１］；
ｍ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１２］；
ｎ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１１３］；
ｏ）  ＸＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１４］；
ｐ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１５］；
ｑ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１１６］；
ｒ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１７］；
ｓ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１１８］；または
ｔ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１１９］；
から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなり、ここでＸはシステインまたはホモシステインであり、ここでペプチド中の少なくとも二つのＸは脂質含有部分に共有結合している。
【０１００】
一部の実施形態では、ペプチドは、
ａ）  ＣＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２０］；
ｂ）  ＣＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２１］；
ｃ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＣＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２２］；
ｄ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１２３］；
ｅ）  ＣＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２４］；
ｆ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＣＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２５］；
ｇ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１２６］；
ｈ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＣＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９９］；
ｉ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１２７］；
ｊ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＣＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１２８］；
ｋ）  ＣＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２９］；
ｌ）  ＣＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３０］；
ｍ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＣＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３１］；
ｎ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１３２］；
ｏ）  ＣＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３３］；
ｐ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＣＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３４］；
ｑ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１３５］；
ｒ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＣＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３６］；
ｓ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１３７］；または
ｔ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＣＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１３８］；
から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなり、ここでペプチド中の少なくとも二つのＣは脂質含有部分に共有結合している。
【０１０１】
別の態様では、本発明は、概して、本発明のペプチド複合体；および薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物にある。
【０１０２】
別の態様では、本発明は、概して、本発明のペプチド／複合体；および使用説明書を含むキットにある。
【０１０３】
別の態様では、本発明は、概して、治療有効量の本発明のペプチド複合体の対象への投与を含む、それを必要とする対象におけるＣＣＧＲ受容体を拮抗する方法にある。
【０１０４】
別の態様では、本発明は、概して、治療有効量の本発明のペプチド複合体の対象への投与を含む、それを必要とする対象においてＣＧＲＰ受容体が介在または調節する、または過剰なＣＧＲＰ受容体活性化を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法にある。
【０１０５】
別の態様では、本発明は、治療有効量の本発明によるペプチド複合体を対象に投与することを含む、それを必要とする対象における血管拡張の増加に関連する、またはそれを特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法に関する。
【０１０６】
別の態様では、本発明は、概して、治療有効量の本発明のペプチド複合体を対象に投与することを含む、それを必要とする対象における熱傷、循環性ショック、更年期の顔面紅潮、喘息、敗血症、神経性炎症、炎症性皮膚疾患（たとえば、乾癬および接触性皮膚炎）、アレルギー性鼻炎、関節障害（たとえば、関節炎、および顎関節障害、好ましくは関節炎）、悪液質（たとえば、がん誘発性悪液質）、疼痛、たとえば頭蓋顔面痛障害（たとえば、片頭痛、頭痛、三叉神経痛、および歯痛、好ましくは片頭痛）、および代謝障害または症候群（たとえば、肥満、ＩＩ型糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、および血栓症）からなる群から選択される疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法にある。
【０１０７】
別の態様では、本発明は、概して、ＣＧＲＰ受容体の拮抗における使用のための本発明のペプチド複合体にある。
【０１０８】
別の態様では、本発明は、概して、ＣＧＲＰ受容体が介在または調節する、または過剰なＣＧＲＰ受容体活性化を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療における使用のための本発明のペプチド複合体にある。
【０１０９】
別の態様では、本発明は、血管拡張の増加に関連する、または血管拡張の増加を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療における使用のための本発明のペプチド複合体に関する。
【０１１０】
別の態様では、本発明は、概して、熱傷、循環性ショック、更年期の顔面紅潮、喘息、敗血症、神経性炎症、炎症性皮膚疾患（たとえば、乾癬および接触性皮膚炎）、アレルギー性鼻炎、関節障害（たとえば、関節炎、および顎関節障害、好ましくは関節炎）、悪液質（たとえば、がん誘発性悪液質）、疼痛、たとえば頭蓋顔面痛障害（たとえば、片頭痛、頭痛、三叉神経痛、および歯痛、好ましくは片頭痛）、および代謝障害または症候群（たとえば、肥満、ＩＩ型糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、および血栓症）からなる群から選択される疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療における使用のための本発明のペプチド複合体にある。
【０１１１】
別の態様では、本発明は、概して、ＣＧＲＰ受容体を拮抗する薬剤の製造における本発明のペプチド複合体の使用にある。
【０１１２】
別の態様では、本発明は、概して、ＣＧＲＰ受容体が介在または調節する、または過剰なＣＧＲＰ受容体活性化を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療のための薬剤の製造における本発明のペプチド複合体の使用にある。
【０１１３】
別の態様では、本発明は、血管拡張の増加に関連する、または血管拡張の増加を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療のための薬剤の製造における本発明のペプチド複合体の使用に関する。
【０１１４】
別の態様では、本発明は、概して、熱傷、循環性ショック、更年期の顔面紅潮、喘息、敗血症、神経性炎症、炎症性皮膚疾患（たとえば、乾癬および接触性皮膚炎）、アレルギー性鼻炎、関節障害（たとえば、関節炎、および顎関節障害、好ましくは関節炎）、悪液質（たとえば、がん誘発性悪液質）、疼痛、たとえば頭蓋顔面痛障害（たとえば、片頭痛、頭痛、三叉神経痛、および歯痛、好ましくは片頭痛）、および代謝障害または症候群（たとえば、肥満、ＩＩ型糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、および血栓症）からなる群から選択される疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療の薬剤の製造における本発明のペプチド複合体の使用にある。
【０１１５】
別の態様では、本発明は、概して、細胞および本発明のペプチド複合体を、ＣＧＲＰ受容体を拮抗するのに有効な量で接触させることを含む、ＣＧＲＰ受容体を拮抗する方法にある。
【０１１６】
様々な実施形態では、ＣＧＲＰ受容体の拮抗は、ＣＧＲＰ受容体が介在または調節する、または過剰なＣＧＲＰ受容体活性化を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療を含む。
【０１１７】
様々な実施形態では、ＣＧＲＰ受容体の拮抗は、細胞および本発明のペプチド複合体を、ＣＧＲＰ受容体を拮抗するのに有効な量で接触させることを含む。
【０１１８】
様々な実施形態では、疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は、熱傷、循環性ショック、更年期の顔面紅潮、喘息、敗血症、神経性炎症、炎症性皮膚疾患（たとえば、乾癬および接触性皮膚炎）、アレルギー性鼻炎、関節障害（たとえば、関節炎、および顎関節障害、好ましくは関節炎）、悪液質（たとえば、がん誘発性悪液質）、疼痛、たとえば頭蓋顔面痛障害（たとえば、片頭痛、頭痛、三叉神経痛、および歯痛、好ましくは片頭痛）、および代謝障害または症候群（たとえば、肥満、ＩＩ型糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、および血栓症）からなる群から選択される。
【０１１９】
様々な実施形態では、疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は、熱傷、循環性ショック、更年期の顔面紅潮、喘息、敗血症、神経性炎症、炎症性皮膚疾患（たとえば、乾癬および接触性皮膚炎）、アレルギー性鼻炎、関節障害（たとえば、関節炎、および顎関節障害、好ましくは関節炎）、疼痛、たとえば頭蓋顔面痛障害（たとえば、片頭痛、頭痛、三叉神経痛、および歯痛、好ましくは片頭痛）、および代謝障害または症候群（たとえば、肥満、ＩＩ型糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、および血栓症）からなる群から選択される。
【０１２０】
様々な実施形態では、疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は、疼痛または代謝障害から選択される。
【０１２１】
様々な実施形態では、疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は、疼痛である。
【０１２２】
様々な実施形態では、疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は、片頭痛または頭痛（たとえば、群発頭痛、および外傷後頭痛）である。
【０１２３】
様々な実施形態では、疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は、片頭痛である。
【０１２４】
様々な実施形態では、炎症性皮膚疾患は、酒さ、乾癬、および接触性皮膚炎である。様々な実施形態では、炎症性皮膚疾患は、酒さである。
【０１２５】
別の態様では、本発明は、概して、本発明のペプチド複合体を製造するための方法にあり、当該方法は、
（Ａ）カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドのアミノ酸を含むアミノ酸複合体を提供し、ここでアミノ酸はスルフィド基の硫黄原子を介して脂質含有部分に共有結合されている；および
アミノ酸複合体のアミノ酸を一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドにカップリングして、本発明のペプチド複合体を提供すること；または
（Ｂ）カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドのペプチド断片を含むペプチド複合体を提供し、ここでペプチド断片の少なくとも一つのアミノ酸がスルフィド基の硫黄原子を介して脂質含有部分に共有結合している；および
ペプチド複合体のアミノ酸を一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドにカップリングして、本発明のペプチド複合体を提供すること
を含む。
【０１２６】
様々な実施形態では、ペプチド断片を含むアミノ酸複合体またはペプチド複合体は、固相担体に結合している；またはアミノ酸複合体またはペプチド複合体は、固相に結合したアミノ酸またはペプチドと結合している。
【０１２７】
様々な実施形態では、ペプチド断片を含むアミノ酸複合体またはペプチド複合体は、固相担体に結合している。
【０１２８】
別の態様では、本発明は、概して、本発明のペプチド複合体の製造のための方法にあり、当該方法は、
炭素―炭素二重結合を含む、脂質含有結合パートナー、および
チオールを含む少なくとも一つのアミノ酸を含む、アミノ酸含有結合パートナーを
脂質含有結合パートナーをアミノ酸含有結合パートナーに結合させるのに有効な条件下で、
反応させることを含む。
【０１２９】
様々な実施形態では、上記条件は、チオールによる炭素―炭素二重結合のヒドロチオール化によって、脂質含有結合パートナーをアミノ酸含有結合パートナーに結合させるのに有効である。
【０１３０】
一部の実施形態では、チオールを含む少なくとも一つのアミノ酸は、システイン、またはホモシステインである。例示的な実施形態では、チオールを含む少なくとも一つのアミノ酸は、システインである。
【０１３１】
一つの実施形態では、脂質含有結合パートナーは、それぞれが少なくとも４個または少なくとも６個の鎖結合原子（ｃｈａｉｎ−ｌｉｎｋｅｄ  ａｔｏｍ）を含む一つまたは複数の直鎖または分岐脂肪族、またはヘテロ脂肪族鎖を含む。
【０１３２】
一つの具体的に企図される実施形態では、一つまたは複数の鎖は脂肪族である。一つの具体的に企図される実施形態では、一つまたは複数の鎖は飽和している。一部の実施形態では、一つまたは複数の鎖は一つまたは複数のアリール基で置換されている。
【０１３３】
一部の実施形態では、一つまたは複数の鎖は少なくとも４、６、８、１０、１２、または１４個の鎖結合原子（ｃｈａｉｎ−ｌｉｎｋｅｄ  ａｔｏｍ）を含む。一部の実施形態では、一つまたは複数の鎖は４〜２２、６〜２２、８〜２２、１０〜２２、１２〜２２、または１４〜２２個の鎖結合原子（ｃｈａｉｎ−ｌｉｎｋｅｄ  ａｔｏｍ）を含む。
【０１３４】
一つの実施形態では、一つまたは複数の鎖は、ヘテロ原子含有官能基によって炭素―炭素二重結合を含む部分に共有結合されている。ヘテロ原子含有官能基の例は、エーテル、アミン、スルフィド、スルホキシド、スルホン、エステル、アミド、カーボネート、カルバメート、および尿素基を含むが、これらに限定されない。
【０１３５】
例示的な実施形態では、一つまたは複数の鎖は、エステル官能基によって炭素―炭素二重結合を含む部分に共有結合される。
【０１３６】
一つの実施形態では、脂質含有結合パートナーは、一つまたは複数の飽和または不飽和脂肪酸エステルを含む。一つの実施形態では、一つまたは複数の脂肪酸エステルは、炭素―炭素二重結合を含む部分に共有結合される。一つの実施形態では、エステルは、脂肪酸のカルボキシル基および炭素―炭素二重結合を含む部分のアルコールのエステルである。
【０１３７】
一つの例示的な実施形態では、脂質含有結合パートナーは、一つまたは二つの脂肪酸エステルを含む。特に企図される実施形態では、脂質含有結合パートナーは、一つの脂肪酸エステルを含む。
【０１３８】
特定の実施形態では、脂肪酸エステルは、炭素―炭素二重結合を含むアルコールのエステルである。一つの実施形態では、アルコールは、一価、二価、または三価のＣ2-6脂肪族アルコールである。別の実施形態では、アルコールは、一価または二価のＣ2-4脂肪族アルコールである。一つの例示的な実施形態では、アルコールは、一価のＣ2脂肪族または一価もしくは二価のＣ3脂肪族アルコールである。具体的に企図される実施形態では、アルコールは一価のＣ2アルコールである。
【０１３９】
具体的に企図される実施形態では、アルコールはビニルアルコールである。
【０１４０】
様々な実施形態では、脂質含有結合パートナーは、化学式（Ａ−１）の化合物である：
【０１４１】
【化４】
2021501784.tif 000005
【０１４２】
ここで、
ＺおよびＺ1は、Ｏ−、−ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ2−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−、および−ＮＲＣ（Ｏ）ＮＲ−からなる群からそれぞれ独立に選択される；
Ｒは水素またはＣ1-6脂肪族である；
ｍは０〜４の整数である；
ｎは１または２である；
ｍの各々の例におけるＲ1およびＲ2は、それぞれ独立に水素、Ｃ1-6脂肪族である；またはＲ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、それぞれ独立に水素、またはＣ1-6脂肪族である；またはＲ3はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｌ1およびＬ2は、それぞれ独立にＣ5-21脂肪族、またはＣ4-20ヘテロ脂肪族である；
ここで：
Ｒ3がＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである場合、Ｒ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルではない；および
ｍが２〜４の整数である場合、１個以下のＲ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；および
ここで、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｌ1、およびＬ2のいずれかに存在する脂肪族、アルキル、またはヘテロ脂肪族は、一つまたは複数の独立に選択された任意の置換基で任意に置換される。
【０１４３】
様々な実施形態では、脂質含有結合パートナーは、化学式（ＩＩ）の化合物である：
【０１４４】
【化５】
2021501784.tif 000006
【０１４５】
ここで、
ｍ、Ｌ1、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、本明細書の実施形態のいずれかで定義されている通りである；およびＺ1は存在する場合、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である。
【０１４６】
様々な実施形態では、Ｚ、Ｚ1、Ｒ、ｍ、ｎ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｌ1、および／またはＬ2は、化学式（Ａ）または（Ｉ）の部分について、本明細書の実施形態のいずれかで定義されている通りである。
【０１４７】
様々な実施形態では、脂質含有結合パートナーは、脂肪酸のビニルエステル、たとえばパルミチン酸ビニルである。
【０１４８】
様々な実施形態では、方法は以下を含む。
脂質含有結合パートナー、およびカルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドを含む、アミノ酸含有結合パートナーを反応させて本発明のペプチド複合体を提供すること。ここでペプチドの少なくとも一つのアミノ酸は、チオールを含む。
【０１４９】
様々な実施形態では、方法は以下を含む。
脂質含有結合パートナー、およびカルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドのペプチド断片を含むアミノ酸含有結合パートナーを反応させてペプチド複合体を提供すること。ここで、ペプチド断片の少なくとも一つのアミノ酸は、チオールを含む；および
ペプチド複合体のアミノ酸を一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドにカップリングして、本発明のペプチド複合体を提供すること。
【０１５０】
様々な実施形態では、方法は以下を含む。
脂質含有結合パートナー、およびカルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドのアミノ酸を含むアミノ酸含有結合パートナーを反応させてアミノ酸複合体を提供すること。ここで、アミノ酸はチオールを含む；および
アミノ酸複合体のアミノ酸を一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドにカップリングして、本発明のペプチド複合体を提供すること。
【０１５１】
様々な実施形態では、方法は、脂質含有結合パートナーおよび固相担体に結合したアミノ酸含有結合パートナーを反応させて、固相結合アミノ酸複合体またはペプチド複合体を提供することを含む。
【０１５２】
様々な実施形態では、方法は、一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドを固相結合アミノ酸複合体またはペプチド複合体にカップリングして、固相結合ペプチド複合体を提供することを含む。
【０１５３】
様々な実施形態では、固相結合ペプチド複合体は、本発明のペプチド複合体のアミノ酸配列を有する。
【０１５４】
様々な実施形態では、方法は、ペプチド複合体を固相から切断することをさらに含む。
【０１５５】
様々な実施形態では、一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドは、ＳＰＰＳによってカップリングされる。すなわち、一部の実施形態では、方法は、ＳＰＰＳによって一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドをカップリングすることを含む。
【０１５６】
様々な実施形態では、方法は以下を含む。
固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）によってアミノ酸含有結合パートナーのペプチドのアミノ酸配列を合成すること；
脂質含有結合パートナーおよび固相に結合したアミノ酸含有結合パートナーを反応させて、固相結合ペプチド複合体を提供すること；および
ペプチド複合体を固相から切断して本発明のペプチド複合体を提供すること。
【０１５７】
様々な実施形態では、方法は以下を含む。
ＳＰＰＳによってアミノ酸含有結合パートナーのペプチドのアミノ酸配列を合成すること；
アミノ酸含有結合パートナーを固相から切断すること；および
脂質含有結合パートナーおよびアミノ酸含有結合パートナーを反応させて本発明のペプチド複合体を提供すること。
【０１５８】
様々な実施形態では、方法は以下を含む。
ＳＰＰＳによってアミノ酸含有結合パートナーのペプチド断片のアミノ酸配列を合成すること；
脂質含有結合パートナーおよび固相結合アミノ酸含有結合パートナーを反応させて固相結合ペプチド複合体を提供すること；
固相結合ペプチド複合体の一つのアミノ酸を、ＳＰＰＳによって一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドにカップリングして、本発明のペプチド複合体のアミノ酸配列を有する固相結合ペプチド複合体を提供すること；および
ペプチド複合体を固相から切断して本発明のペプチド複合体を提供すること。
【０１５９】
様々な実施形態では、方法は以下を含む。
ＳＰＰＳによってアミノ酸含有結合パートナーのペプチド断片のアミノ酸配列を合成すること；
アミノ酸含有結合パートナーを固相から切断すること；
脂質含有結合パートナーおよびアミノ酸含有結合パートナーを反応させてペプチド複合体を提供すること；および
ペプチド複合体のアミノ酸を一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドとカップリングして、本発明のペプチド複合体を提供すること。
【０１６０】
様々な実施形態では、方法は以下を含む。
ペプチド断片を含むペプチド複合体のアミノ酸および必要に応じて一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドをＳＰＰＳによって固相結合アミノ酸またはペプチドにカップリングして、本発明のペプチド複合体のアミノ酸配列を有する固相結合ペプチド複合体を提供すること；および
ペプチド複合体を固相から切断して、本発明のペプチド複合体を提供すること。
【０１６１】
様々な実施形態では、方法は以下を含む。
アミノ酸複合体のアミノ酸および必要に応じて一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドをＳＰＰＳによって固相結合アミノ酸またはペプチドにカップリングして、本発明のペプチド複合体のアミノ酸配列を有する固相結合ペプチド複合体を提供すること；および
ペプチド複合体を固相から切断して、本発明のペプチド複合体を提供すること。
【０１６２】
様々な実施形態では、方法は、ペプチドまたはペプチド複合体のＮ末端アミノ酸のＮα−アミノ基をアシル化、たとえばアセチル化することを含む。
【０１６３】
様々な実施形態では、方法は、ＳＰＰＳの間のペプチド凝集を低減する一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチド、たとえば、シュードプロリンジペプチド、たとえばＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ［ψ（Ｍｅ，Ｍｅ）Ｐｒｏ］−ＯＨをカップリングすることを含む。
【０１６４】
様々な実施形態では、方法は以下を含む。
保護基で保護されたチオールを含む少なくとも一つのアミノ酸を含む、保護されたアミノ酸含有結合パートナーを提供すること；および
チオールから保護基を除去して、アミノ酸含有結合パートナーを提供すること。
【０１６５】
様々な実施形態では、保護されたアミノ酸含有結合パートナーは、一つまたは複数の保護基で保護された一つまたは複数の追加のアミノ酸を含む。
【０１６６】
様々な実施形態において、保護されたアミノ酸含有結合パートナーは、チオールを含む少なくとも一つのアミノ酸の保護基とは異なる一つまたは複数の保護基で保護された一つまたは複数の追加のアミノ酸を含む；および方法は、チオールを含む少なくとも一つのアミノ酸のチオールから保護基を選択的に除去して、アミノ酸含有結合パートナーを提供することを含む。
【０１６７】
様々な実施形態では、ペプチドを固相担体から切断する際に、一つまたは複数またはすべての保護基が除去される。
【０１６８】
様々な実施形態では、ＳＰＰＳはＦｍｏｃ−ＳＰＰＳである。
【０１６９】
一つの実施形態では、脂質含有結合パートナーをアミノ酸含有結合パートナーに結合するのに有効な条件は、一つまたは複数のフリーラジカルの生成を含む。
【０１７０】
一部の実施形態では、一つまたは複数のフリーラジカルの生成は、熱的および／または光化学的に開始される。特定の実施形態では、一つまたは複数のフリーラジカルの生成は、フリーラジカル開始剤の熱分解および／または光化学的分解によって開始される。例示的な実施形態では、一つまたは複数のフリーラジカルの生成は、熱開始剤の熱分解または光化学開始剤の光化学的分解によって開始される。
【０１７１】
一部の実施形態では、フリーラジカル開始剤の熱分解は、反応混合物を好適な温度で加熱することを含む。一部の実施形態では、反応混合物は、約４０℃〜約２００℃、約５０℃〜約１８０℃、約６０℃〜約１５０℃、約６５℃〜約１２０℃、約７０℃〜約１１５℃、約７５℃〜約１１０℃、または約８０℃〜約１００℃の温度で加熱される。他の実施形態では、反応混合物は、少なくとも約４０℃、少なくとも約５０℃、少なくとも約６０℃、または少なくとも約６５℃の温度で加熱される。具体的に企図される一つの実施形態では、反応混合物は、約９０℃の温度で加熱される。
【０１７２】
一部の実施形態では、フリーラジカル開始剤の光化学的分解は、好ましくは天然に存在するアミノ酸の側鎖と適合する周波数を有する、紫外線による照射を含む。具体的に企図される実施形態では、紫外線は、約３６５  ｎｍの波長を有する。例示的な実施形態では、フリーラジカル開始剤の光化学的分解は、ほぼ周囲温度で行われる。
【０１７３】
具体的に企図される一つの実施形態では、熱開始剤は、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）であり、および／または光開始剤は、２，２−ジメトキシ−２−フェニルアセトフェノン（ＤＭＰＡ）である。
【０１７４】
具体的な実施形態では、反応は液体媒体中で行われる。一つの実施形態では、液体媒体は溶媒を含む。一つの実施形態では、溶媒は、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、１，２−ジクロロエタン、およびそれらの混合物からなる群から選択される。具体的に企図される一つの実施形態では、溶媒は、ＮＭＰ、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、またはそれらの混合物を含む。
【０１７５】
具体的に企図される一つの実施形態では、溶媒は、ＤＭＳＯまたはＮＭＰを含む。例示的な実施形態では、溶媒はＮＭＰを含む。一部の実施形態では、溶媒はＤＭＦを含む。
【０１７６】
一部の実施形態では、反応は、副産物の形成を阻害する、および／または所望の複合体の収率または変換を改善する一つまたは複数の添加剤の存在下で行われる。
【０１７７】
様々な実施形態では、一つまたは複数の添加剤は、外来チオール、酸、オルガノシラン、またはそれらの任意の二つ以上の組み合わせである。
【０１７８】
一部の例示的な実施形態では、外来または外因性（ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ）チオールは、還元グルタチオン（ＧＳＨ）、２，２’−（エチレンジオキシ）ジエタンチオール（ＤＯＤＴ）、１，４−ジチオスレイトール（ＤＴＴ）、タンパク質、および立体障害チオールからなる群から選択される。
【０１７９】
様々な実施形態では、酸添加剤は無機強酸または有機強酸である。様々な実施形態では、酸は強有機酸である。様々な実施形態では、酸はＴＦＡである。
【０１８０】
様々な実施形態では、オルガノシランは、トリアルキルシラン、たとえばＴＩＰＳである。
【０１８１】
一部の実施形態では、一つまたは複数の添加剤は、ＴＦＡ、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン、ＴＩＰＳ、およびそれらの任意の二つ以上の組み合わせからなる群から選択される。
【０１８２】
特定の実施形態では、一つまたは複数の添加剤は、酸および外来チオールの組み合わせ、たとえばＴＦＡおよびｔｅｒｔ―ブチルメルカプタンである。
【０１８３】
他の実施形態では、一つまたは複数の添加剤は、酸およびオルガノシランの組み合わせ、たとえば、ＴＦＡおよびＴＩＰＳである。
【０１８４】
他の実施形態では、一つまたは複数の添加剤は、外来チオールおよびオルガノシラン、および必要に応じて酸の組み合わせ、たとえばｔ−ＢｕＳＨおよびＴＩＰＳ、およびＴＦＡである。
【０１８５】
一部の実施形態では、反応は、約５分〜約４８時間、５分〜約２４時間、約５分〜約１２時間、約５分〜約６時間、約５分〜約３時間、５分〜２時間、または約５分〜約１時間の期間で行われる。例示的な実施形態では、反応は、約５分〜約１時間の期間で行われる。一部の実施形態では、反応は、結合パートナーの一つが少なくとも約７０％、８０％、９０％、９５％、９７％、９９％、または１００％消費されるまで行われる。
【０１８６】
特定の実施形態において、反応は、実質的に無酸素の条件下で行われる。
【０１８７】
様々な実施形態では、脂質含有結合パートナーは、アミノ酸含有結合パートナーに対して化学量論的に過剰である。様々な実施形態では、脂質含有結合パートナーとアミノ酸含有結合パートナーのモル比は少なくとも７：１である。
【０１８８】
一つの実施形態では、アミノ酸含有結合パートナーは、ペプチド含有結合パートナーであり、脂質含有結合パートナーは、ペプチド含有結合パートナーのペプチドに結合される。一部の実施形態では、脂質含有結合パートナーは、アミノ酸含有結合パートナーのアミノ酸またはペプチド含有結合パートナーのペプチドに結合される。特定の実施形態では、脂質含有結合パートナーは、アミノ酸含有結合パートナーのアミノ酸に結合される。
【０１８９】
様々な実施形態では、ペプチド複合体はリポペプチドであり、この方法はリポペプチドを作製するためのものである。
【０１９０】
様々な実施形態において、アミノ酸含有結合パートナーは、ペプチド含有結合パートナーである。一つの実施形態では、アミノ酸含有結合パートナーは、ペプチドからなる。一つの実施形態では、ペプチド含有結合パートナーはペプチドからなる。
【０１９１】
様々な実施形態では、脂質含有部分が結合しているアミノ酸複合体またはペプチド複合体のアミノ酸は、システイン残基である。
【０１９２】
様々な実施形態では、アミノ酸含有結合パートナーは、システイン、保護システイン（Ｎα−アミンおよび／またはカルボキシル保護システインを含む）、またはシステイン残基を含むペプチド（Ｎα−アミンまたはカルボキシル保護システイン残基を含む）、たとえば、Ｎ末端システイン残基（Ｎα−アミン保護システイン残基を含む）である。
【０１９３】
様々な実施形態では、アミノ酸含有結合パートナーは、アミノ酸、たとえばシステイン（Ｎα−アミノおよび／またはＣ末端保護システインを含む）からなる。
【０１９４】
様々な実施形態では、アミノ酸含有結合パートナーのＣ末端は保護基で保護され、および／またはアミノ酸含有結合パートナーのＮα−アミノ基は保護基で保護される。
【０１９５】
様々な実施形態では、アミノ酸のＣ末端のカルボキシル基は、カルボキシル保護基またはカルボキサミド保護基で保護され、および／またはアミノ酸のＮα−アミノ基は、アミノ保護基で保護される。
【０１９６】
様々な実施形態では、アミノ酸のＣ末端のカルボキシル基は、カルボキシル保護基で保護され、および／またはアミノ酸のＮα−アミノ基は、アミノ保護基で保護される。
【０１９７】
一部の実施形態では、ペプチドのＣ末端のカルボキシル基は、カルボキシル保護基で保護され、および／またはペプチドのＮα−アミノ基は、アミノ保護基で保護される。
【０１９８】
一部の実施形態では、アミノ保護基は、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｃｂｚ（カルボキシベンジル）、ノシル（ｏ−またはｐ−ニトロフェニルスルホニル）、Ｂｐｏｃ（２−（４−ビフェニル）イソプロポキシカルボニル）、およびＤｄｅ（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソヘキシリデン）である。
【０１９９】
様々な実施形態では、アミノ保護基はＢｏｃまたはＦｍｏｃである。一部の実施形態では、アミノ保護基はＦｍｏｃである。
【０２００】
一部の実施形態では、カルボキシル保護基はｔｅｒｔ−ブチル、ベンジル、またはアリルである。
【０２０１】
様々な実施形態では、カルボキサミド保護基はＤｍｃｐまたはトリチルである。
【０２０２】
特定の実施形態では、アミノ酸含有結合パートナーの一つまたは複数のアミノ酸の一つまたは複数の反応性官能基は、保護されていない。
【０２０３】
特定の実施形態では、アミノ酸含有結合パートナーはペプチドを含み、ここで反応するチオール以外のチオールを除き、当該ペプチドのアミノ酸の側鎖の反応性官能基は、保護されていない。
【０２０４】
特定の実施形態では、アミノ酸複合体のアミノ酸の一つまたは複数の反応性官能基は保護されていない。特定の実施形態では、ペプチド複合体の一つまたは複数のアミノ酸の一つまたは複数の反応性官能基は保護されていない。
【０２０５】
一つの実施形態では、アミノ酸含有結合パートナーおよび／またはペプチド複合体は、合成ペプチドを含む。一部の実施形態では、合成ペプチドは、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）を含む方法によって調製されたペプチドである。
【０２０６】
様々な実施形態では、方法は、アミノ酸複合体のアミノ酸またはペプチド複合体のアミノ酸をペプチドのアミノ酸またはアミノ酸にカップリングして、ペプチド複合体を提供することを含む。
【０２０７】
様々な実施形態では、方法は、アミノ酸複合体のアミノ酸をペプチドのアミノ酸またはアミノ酸にカップリングして、ペプチド複合体を提供することを含む。
【０２０８】
一部の実施形態では、ペプチドのカップリングは、一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドを個別にカップリングすることを含む。
【０２０９】
一部の実施形態では、カップリングはＳＰＰＳを含む。
【０２１０】
一部の実施形態では、方法は以下を含む。
固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）によってペプチドのアミノ酸配列を合成すること；
アミノ酸複合体のアミノ酸またはペプチド複合体のアミノ酸を固相結合ペプチドにＳＰＰＳによってカップリングしてペプチド複合体、たとえば本発明のペプチド複合体を提供すること。
【０２１１】
一部の実施形態では、方法は以下を含む。
脂質含有結合パートナーおよびアミノ酸含有結合パートナーを反応させてアミノ酸またはペプチド複合体を提供すること；
固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）によってペプチドのアミノ酸配列を合成すること；
アミノ酸複合体のアミノ酸またはペプチド複合体のアミノ酸を固相結合ペプチドにＳＰＰＳによってカップリングしてペプチド複合体、たとえば本発明のペプチド複合体を提供すること。
【０２１２】
一部の実施形態では、方法は以下を含む。
固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）によってペプチド含有結合パートナーのペプチドのアミノ酸配列を合成すること；および
本明細書に記載の実施形態のいずれかに従って、固相担体から切断する前または後に脂質含有結合パートナーおよびペプチド含有結合パートナーを反応させること。
【０２１３】
一部の実施形態では、方法は以下を含む。
固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）によってペプチド含有結合パートナーのペプチドのアミノ酸配列を合成すること；および
本明細書に記載の実施形態のいずれかに従って、脂質含有結合パートナーおよび固相結合ペプチド含有結合パートナーを反応させること。
【０２１４】
例示的な実施形態では、方法は以下を含む。
ＳＰＰＳによってペプチド含有結合パートナーのペプチドのアミノ酸配列を合成すること、
固相担体からペプチドを切断すること；および
本明細書に記載の実施形態のいずれかに従って、脂質含有結合パートナーおよびペプチド含有結合パートナーを反応させること。
【０２１５】
一つの実施形態では、ペプチド含有結合パートナーを、脂質含有結合パートナーとの反応の前に精製しない。
【０２１６】
一つの実施形態では、方法は、ペプチド複合体を反応媒体から分離すること、および任意でペプチド複合体を精製することをさらに含む。
【０２１７】
様々な実施形態では、アミノ酸複合体のアミノ酸は、アミノ酸のα炭素でのエピマー化を低減する条件下で結合される。様々な実施形態では、条件は、約３５、３０、２５、２０、１５、１０、１０、５、３、２、または１モル％未満のアミノ酸がエピマー化されるようなものである。
【０２１８】
様々な実施形態では、エピマー化を低減する条件は、カップリング試薬としてのＰｙＢＯＰの使用を含む。様々な実施形態では、条件は、ＰｙＢＯＰおよび２，４，６−トリメチルピリジンの使用を含む。
【０２１９】
特定の実施形態では、ペプチド複合体および／またはアミノ酸含有結合パートナーは、天然に存在するアミノ酸のみを含む。他の実施形態では、ペプチド複合体および／またはアミノ酸含有結合パートナーのアミノ酸残基の７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、または９９％以上は、天然に存在するアミノ酸である。
【０２２０】
当業者は、ペプチド複合体および／またはペプチド含有結合パートナーのペプチドが、本明細書に記載されるように、本明細書に記載されるような他の様々な部分に任意に置換、修飾、または結合されうることを理解する。
【０２２１】
別の態様では、本発明は、概して、本発明の方法によって製造された本発明のペプチド複合体にある。
【０２２２】
本明細書に開示されるある範囲の数（たとえば、１〜１０）への言及は、その範囲内のすべての有理数（たとえば、１、１．１、２、３、３．９、４、５、６、６．５、７、８、９、および１０）およびその範囲内の任意の範囲の有理数（たとえば、２〜８、１．５〜５．５、および３．１〜４．７）への言及も組み込むことを意図する。したがって、本明細書で明示的に開示されるすべての範囲のすべての部分範囲は、本明細書で明示的に開示される。これらは具体的に意図されているものの例に過ぎず、列挙された最低値と最高値の間のすべての可能な数値の組み合わせは、同様の方法で本出願において明示的に述べられていると見なされるべきである。
【０２２３】
本発明はまた、概して、本出願の明細書において個別にまたは集合的に参照または示される部分、要素および特徴、ならびに任意の二つ以上の前記部分、要素または特徴の任意またはすべての組み合わせにあってもよい。そして、本発明が関連する技術分野で既知の同等物を有する特定の整数が本明細書で言及される場合、そのような既知の同等物は、あたかも個別に述べられているかのように本明細書に組み込まれると見なされる。
【０２２４】
本発明は、上記に広く定義されているが、当業者は、本発明がそれに限定されず、本発明は以下の説明が例を示す実施形態も含むことを理解するであろう。
【０２２５】
本発明は、添付の図面を参照して説明される。
【図面の簡単な説明】
【０２２６】
【図１】図１および２は、それぞれＣＧＲＰおよびＡＭＹ1受容体におけるアンタゴニストＡ４の濃度の増加のある場合またはない場合におけるＣＧＲＰ刺激環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）生成の濃度反応曲線を示す。３つの独立した実験からの平均データが示される。図１および２のそれぞれについて、黒丸はアンタゴニストの非存在下におけるｃＡＭＰ生成に対応するデータ点を表し、四角は１０  ｎＭのアンタゴニストＡ４の存在下におけるｃＡＭＰ生成に対応するデータ点を表し、上向きの三角形は、３０  ｎＭのアンタゴニストＡ４の存在下におけるｃＡＭＰ生成に対応するデータ点を表し、下向きの三角形は、１００  ｎＭのアンタゴニストＡ４の存在下におけるｃＡＭＰ生成に対応するデータ点を表す。
【図２】図１および２は、それぞれＣＧＲＰおよびＡＭＹ1受容体におけるアンタゴニストＡ４の濃度の増加のある場合またはない場合におけるＣＧＲＰ刺激環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）生成の濃度反応曲線を示す。３つの独立した実験からの平均データが示される。図１および２のそれぞれについて、黒丸はアンタゴニストの非存在下におけるｃＡＭＰ生成に対応するデータ点を表し、四角は１０  ｎＭのアンタゴニストＡ４の存在下におけるｃＡＭＰ生成に対応するデータ点を表し、上向きの三角形は、３０  ｎＭのアンタゴニストＡ４の存在下におけるｃＡＭＰ生成に対応するデータ点を表し、下向きの三角形は、１００  ｎＭのアンタゴニストＡ４の存在下におけるｃＡＭＰ生成に対応するデータ点を表す。
【図３】図３および４は、それぞれ実施例のセクションの方法で説明されている洗浄工程がある場合とない場合の、ＣＧＲＰ受容体でのアンタゴニストＡまたはアンタゴニストＡ４の非存在下または存在下におけるＣＧＲＰ刺激ｃＡＭＰ生成の濃度反応曲線を示す。単一の実験からの３反復の平均データが示される。図３の黒丸は、アンタゴニストの非存在下でのｃＡＭＰ生成に対応するデータ点を表し、下向きの三角形は、洗浄工程で３００  ｎＭのアンタゴニストＡの存在下でのｃＡＭＰ生成に対応するデータ点を表す。四角は、洗浄ステップなしの３００  ｎＭのアンタゴニストＡの存在下でのｃＡＭＰ生成に対応するデータ点を表す。
【図４】図４の黒丸は、アンタゴニストの非存在下でのｃＡＭＰ生成に対応するデータ点を表し、下向きの三角形は、洗浄工程で３００  ｎＭのアンタゴニストＡ４の存在下でのｃＡＭＰ生成に対応するデータ点を表す。四角は、洗浄工程なしの３００  ｎＭのアンタゴニストＡ４の存在下でのｃＡＭＰ生成に対応するデータ点を表す。
【図５】図５は、実施例のセクションの方法に記載したように、媒体（生理食塩水＋０．１％ＢＳＡ＋３．２％ＤＭＳＯ）または９６０  ｎｍｏｌ／ｋｇのアンタゴニストＡまたはアンタゴニストＡ４を事前に投与した後のマウスの耳におけるカプサイシン誘発血管拡張を示す。生理食塩水、アンタゴニストＡ、またはアンタゴニストＡ４の４つの独立した実験からの平均±平均誤差の合計を示す。−３、−２、および−１分の時点は、カプサイシンを耳に適用する前のベースラインレーザードップラー信号（ｂａｓｅｌｉｎｅ  ｌａｓｅｒ  ｄｏｐｐｌｅｒ  ｓｉｇｎａｌ）を示す。１〜１５分の時点は、カプサイシンを耳に適用した後の血管拡張フラックス信号を示す。すべてのデータは−３、−２、および−１分におけるベースラインデータの平均に正規化されており、したがって１００％の正規化されたベースラインを超えるパーセンテージの増加を示す。黒丸はアンタゴニストの非存在下での媒体群に対応するデータ点を表し、白丸はアンタゴニストＡによる治療に対応するデータ点を表し、四角はアンタゴニストＡ４による治療に対応するデータ点を表す。
【図６】図６は、図５に対応する曲線解析中の領域を示す。各データ点は、４つの独立した実験からの平均±平均誤差を組み合わせた独立した実験を表す。
【発明を実施するための形態】
【０２２７】
発明の詳細な説明
本明細書および特許請求の範囲において使用される用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、「少なくとも一部からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ａｔ  ｌｅａｓｔ  ｉｎ  ｐａｒｔ  ｏｆ）」を意味する。用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」を含む本明細書および特許請求の範囲における各記述を解釈する場合、それ以外の特徴、またはその用語が前についている特徴も存在してもよい。関連用語、たとえば「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」も同様に解釈される。
【０２２８】
本明細書で使用する場合、用語「および／または」は、「および」または「または」またはその両方を意味する。
【０２２９】
本明細書で使用する、名詞に続く「（複数可）」は、名詞の複数形および／または単数形を意味する。
【０２３０】
本明細書に記載の化合物には、不斉中心が存在する場合がある。不斉中心は、キラル炭素原子の三次元空間における置換基の配置に応じて、（Ｒ）または（Ｓ）と命名される。ジアステレオマー、エナンチオマー、およびエピマー形態、ならびにｄ−異性体およびｌ−異性体を含む、化合物のすべての立体化学異性体、ならびに立体化学異性体の鏡像異性的に豊富なおよびジアステレオ異性的に豊富な混合物を含むそれらの混合物は、本発明の範囲内である。
【０２３１】
個々のエナンチオマーは、市販のエナンチオピュアな出発原料からの合成的に、またはエナンチオマー混合物を調製し、混合物を個々のエナンチオマーに分割することによって調製することができる。分割法は、エナンチオマー混合物のジアステレオマー混合物への変換、およびたとえば再結晶化またはクロマトグラフィーによるジアステレオマーの分離、および当技術分野で知られている任意の他の適切な方法を含む。定義された立体化学の出発原料は、市販されているか、または製造されてもよく、そして必要な場合、当該分野で周知の技術によって分割されてもよい。
【０２３２】
本明細書に記載される化合物はまた、シス、トランス、シン、アンチ、ｅｎｔｇｅｇｅｎ（Ｅ）、およびｚｕｓａｍｍｅｎ（Ｚ）異性体を含む、配座異性体または幾何異性体として存在してもよい。そのような異性体およびそれらの任意の混合物はすべて、本発明の範囲内である。
【０２３３】
また、記載されている化合物の互変異性体またはその混合物も本発明の範囲内である。当業者によって理解されるように、多種多様な官能基および他の構造が互変異性を示しうる。例は、ケト／エノール、イミン／エナミン、およびチオケトン／エンチオール互変異性を含むが、これらに限定されない。
【０２３４】
本明細書に記載の化合物は、化合物の一つまたは複数の原子が異なる同位体で置換されている、アイソトポログおよびアイソトポマーとしても存在してもよい。好適な同位体は、たとえば、1Ｈ、2Ｈ（Ｄ）、3Ｈ（Ｔ）、12Ｃ、13Ｃ、14Ｃ、16Ｏ、および18Ｏを含む。そのような同位体を本明細書に記載の化合物に組み込むための手順は、当業者には明らかであろう。本明細書に記載の化合物のアイソトポログおよびアイソトポマーもまた、本発明の範囲内である。
【０２３５】
また、薬学的に許容される塩を含む、本明細書に記載の化合物の塩も本発明の範囲内である。このような塩は、塩基性窒素含有基の酸付加塩、塩基付加塩、および第四級塩を含む。
【０２３６】
酸付加塩は、遊離塩基形態の化合物を無機酸または有機酸と反応させることにより調製することができる。無機酸の例は、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、およびリン酸を含むが、これらに限定されない。有機酸の例は、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、フマル酸、ピルビン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、ステアリン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、イセチオン酸、スルファニル酸、アジピン酸、酪酸、およびピバル酸を含むが、これらに限定されない。
【０２３７】
塩基付加塩は、遊離塩基形態の化合物を無機酸または有機酸と反応させることにより調製することができる。無機塩基付加塩の例は、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、および他の生理学的に許容される金属塩、たとえばアルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、または亜鉛塩を含む。有機塩基付加塩の例は、アミン塩、たとえば、トリメチルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、およびエチレンジアミンの塩を含む。
【０２３８】
化合物中の塩基性窒素含有基の第四級塩は、たとえば、化合物を、塩化、臭化、ヨウ化メチル、エチル、プロピル、およびブチル等のハロゲン化アルキル、硫酸ジメチル、ジエチル、ジブチル、ジアミル等の硫酸ジアルキルと反応させることによって調製することができる。
【０２３９】
本明細書に記載の化合物は、様々な溶媒との溶媒和物として形成または存在してもよい。溶媒が水である場合、溶媒和物は、水和物、たとえば、一水和物、二水和物、または三水和物と呼ばれうる。本明細書に記載の化合物のすべての溶媒和形態および非溶媒和形態は、本発明の範囲内である。
【０２４０】
ここで使用される一般的な化学用語は通常の意味を有する。
【０２４１】
用語「脂肪族」は、飽和および不飽和、非芳香族、直鎖、分岐、非環式、および環式炭化水素を含むことを意図している。当業者は、脂肪族基が、たとえば、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、およびシクロアルケニル基、ならびにそれらのハイブリッド、たとえば（シクロアルキル）アルキル、（シクロアルケニル）アルキルおよび（シクロアルキル）アルケニル基を含むことを理解するであろう。様々な実施形態では、脂肪族基は、１〜１２、１〜８、１〜６、または１〜４個の炭素原子を含む。一部の実施形態では、脂肪族基は、５〜２１個、９〜２１個、または１１〜２１個の炭素原子、たとえば、１１、１３、１５、１７、または１９個からの炭素原子を含む。一部の実施形態では、脂肪族基は飽和している。
【０２４２】
用語「ヘテロ脂肪族」は、一つまたは複数の鎖および／または環炭素原子が独立してヘテロ原子、好ましくは酸素、窒素および硫黄から選択されるヘテロ原子で置換されている脂肪族基を含むことを意図している。一部の実施形態では、ヘテロ脂肪族は飽和している。ヘテロ脂肪族基の例は、直鎖または分岐鎖のヘテロアルキル基を含むが、これらに限定されない。
【０２４３】
用語「アルキル」は、飽和直鎖および分岐鎖炭化水素基を含むことを意図している。一部の実施形態では、アルキル基は、１〜１２、１〜１０、１〜８、１〜６、または１〜４個の炭素原子を有する。一部の実施形態では、アルキル基は、５〜２１個、９〜２１個、または１１〜２１個の炭素原子、たとえば、１１、１３、１５、１７、または１９個からの炭素原子を含む。直鎖アルキル基の例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、およびｎ−オクチルを含むが、これらに限定されない。分岐アルキル基の例は、イソプロピル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ネオペンチル、イソペンチル、および２，２−ジメチルプロピルを含むが、これらに限定されない。
【０２４４】
用語「アルケニル」は、二つの炭素原子の間に少なくとも一つの二重結合を有する直鎖および分岐鎖アルキル基を含むことを意図している。一部の実施形態では、アルケニル基は、２〜１２、２〜１０、２〜８、２〜６、または２〜４個の炭素原子を有する。一部の実施形態では、アルケニル基は、５〜２１個、９〜２１個、または１１〜２１個の炭素原子、たとえば、１１、１３、１５、１７、または１９個からの炭素原子を含む。一部の実施形態では、アルケニル基は、１、２、または３つの炭素−炭素二重結合を有する。アルケニル基の例は、ビニル、アリル、−ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ3）、−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2、−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2、および−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ（ＣＨ3）を含むが、これらに限定されない。
【０２４５】
用語「アルキニル」は、二つの炭素原子間に少なくとも一つの三重結合を有する直鎖および分岐鎖アルキル基を含むことを意図している。一部の実施形態では、アルキニル基は、２〜１２、２〜１０、２〜８、２〜６、または２〜４個の炭素原子を有する。一部の実施形態では、アルキニル基は、１、２、または３つの炭素−炭素三重結合を有する。例は、-Ｃ≡ＣＨ、−Ｃ≡ＣＨ3、−ＣＨ2Ｃ≡ＣＨ3、および−Ｃ≡ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ2ＣＨ3）2を含むが、これらに限定されない。
【０２４６】
用語「ヘテロアルキル」は、一つまたは複数の鎖状炭素原子がヘテロ原子、好ましくは酸素、窒素、および硫黄からなる群から選択されるヘテロ原子で置換されているアルキル基を含むことを意図している。ヘテロアルキル基は、たとえば、ポリエチレングリコール基およびポリエチレングリコールエーテル基等を含む。
【０２４７】
用語「シクロアルキル」は、単環式、二環式または三環式アルキル基を含むことを意図している。一部の実施形態では、シクロアルキル基は、環中に３〜１２、３〜１０、３〜８、３〜６、または３〜５個の炭素原子を有する。一部の実施形態では、シクロアルキル基は５または６個の環炭素原子を有する。単環式シクロアルキル基の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、およびシクロオクチルを含むが、これらに限定されない。一部の実施形態では、シクロアルキル基は、３〜８、３〜７、３〜６、４〜６、３〜５または４〜５個の環炭素原子を有する。二環式および三環式環系は、架橋、スピロ、および縮合シクロアルキル環系を含む。二環式および三環式環シクロアルキル系の例は、ビシクロ［２．１．１］ヘキサニル、ビシクロ［２．２．１］ヘプタニル、アダマンチル、およびデカリニルを含むが、これらに限定されない。
【０２４８】
用語「シクロアルケニル」は、二つの炭素原子間に少なくとも一つの二重結合を有する非芳香族シクロアルキル基を含むことを意図している。一部の実施形態では、シクロアルケニル基は、１、２、または３つの二重結合を有する。一部の実施形態では、シクロアルケニル基は、環（単数または複数）内に４〜１４、５〜１４、５〜１０、５〜８、または５〜６個の炭素原子を有する。一部の実施形態では、シクロアルケニル基は、５、６、７、または８個の環炭素原子を有する。シクロアルケニル基の例は、シクロヘキセニル、シクロペンテニル、シクロヘキサジエニル、ブタジエニル、ペンタジエニル、およびヘキサジエニルを含む。
【０２４９】
用語「アリール」は、環ヘテロ原子を含まない環状芳香族炭化水素基を含むことを意図している。アリール基は、単環式、二環式および三環式環系を含む。アリール基の例は、フェニル、アズレニル、ヘプタレニル、ビフェニル、フルオレニル、フェナントレニル、アントラセニル、インデニル、インダニル、ペンタレニル、およびナフチルを含むが、これらに限定されない。一部の実施形態では、アリール基は、環（単数または複数）内に６〜１４、６〜１２、または６〜１０個の炭素原子を有する。一部の実施形態では、アリール基は、フェニルまたはナフチルである。アリール基は、芳香族−脂肪族縮合環系を含む。例は、インダニルおよびテトラヒドロナフチルを含むが、これらに限定されない。
【０２５０】
用語「アリールアルキル」は、本明細書で定義されるアリール基で置換された、本明細書で定義されるアルキル基を指す。アリールアルキル基は、アルキル基を介して親分子部分に結合する。アリールアルキル基の例は、ベンジル、２−フェニルエチル、３−フェニルプロピル、２−ナフト−２−イルエチル等を含むが、これらに限定されない。
【０２５１】
用語「アシル」は、Ｒn−Ｃ（Ｏ）−基を含むことを意図し、ここでＲnは、本明細書で定義される脂肪族、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、アリールアルキル基である。特定の実施形態では、Ｒnは、本明細書で定義されるアルキル基、たとえばアセチル基である。
【０２５２】
用語「ハロ」または「ハロゲン」は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩを含むことを意図している。
【０２５３】
用語「ヘテロ原子」は、酸素、窒素、硫黄、セレニウム、またはリンを含むことを意図している。一部の実施形態では、ヘテロ原子は酸素、窒素、および硫黄からなる群から選択される。
【０２５４】
本明細書で使用する場合、用語「置換」は、置換基が結合している各原子の通常の原子価を超えない条件で、そして置換により安定な化合物が得られるという条件で、示された基の一つまたは複数の水素が一つまたは複数の独立に選択された好適な置換基で置き換えられることを意味することを意図している。様々な実施形態では、本明細書に記載の化合物の任意の置換基は、ハロ、ＮＯ2、ＯＨ、ＮＨ2、ＮＨＲx、ＮＲxＲy、Ｃ1-6ハロアルキル、Ｃ1-6ハロアルコキシ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ2、Ｃ（Ｏ）ＮＨＲx、Ｃ（Ｏ）ＮＲxＲy、ＳＯ2Ｒx、ＯＲy、ＳＲx、Ｓ（Ｏ）Ｒx、Ｃ（Ｏ）Ｒx、およびＣ1-6脂肪族を含むが、これらに限定されない；ここでＲxおよびＲyはそれぞれ独立にＣ1-6脂肪族、たとえばＣ1-6アルキルである。
【０２５５】
本明細書で使用される用語「カルボキシル保護基」は、カルボキシル基のＯＨ基を提供するために容易に除去でき、合成手順中の望ましくない反応からカルボキシル基を保護する基を意味する。そのような保護基は、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅらによって編集されたＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  （Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９９）およびＦｅｒｎａｎｄｏ  Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ  （ｗｉｔｈ  Ａｌｂｅｒｔ  Ｉｓｉｄｒｏ−Ｌｌｏｂｅｔ  ａｎｄ  Ｍｅｒｃｅｄｅｓ  Ａｌｖａｒｅｚ）の「Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄ−Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ」  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ２００９  （１０９）２４５５−２５０４に記載されている。例は、アルキルおよびシリル基、たとえばメチル、エチル、ｔｅｒｔ−ブチル、メトキシメチル、２，２，２−トリクロロエチル、ベンジル、ジフェニルメチル、トリメチルシリル、およびｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル等を含むが、これらに限定されない。
【０２５６】
本明細書で使用される用語「アミン保護基」は、アミン基のＮＨ2基を提供するために容易に除去でき、合成手順中の望ましくない反応からアミン基を保護する基を意味する。そのような保護基は、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅらによって編集されたＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  （Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９９）およびＦｅｒｎａｎｄｏ  Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ  （ｗｉｔｈ  Ａｌｂｅｒｔ  Ｉｓｉｄｒｏ−Ｌｌｏｂｅｔ  ａｎｄ  Ｍｅｒｃｅｄｅｓ  Ａｌｖａｒｅｚ）の「Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄ−Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ」  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ２００９  （１０９）２４５５−２５０４に記載されている。例は、アシルおよびアシルオキシ基、たとえば、アセチル、クロロアセチル、トリクロロアセチル、ｏ−ニトロフェニルアセチル、ｏ−ニトロフェノキシ−アセチル、トリフルオロアセチル、アセトアセチル、４−クロロブチリル、イソブチリル、ピコリノイル、アミノカプロイル、ベンゾイル、メトキシカルボニル、９−フルオレニルメトキシカルボニル、２，２，２−トリフルオロエトキシカルボニル、２−トリメチルシリルエトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル、２，４−ジクロロベンジルオキシカルボニル等を含むが、これらに限定されない。さらなる例は、Ｃｂｚ（カルボキシベンジル）、Ｎｏｓｙｌ（ｏ−またはｐ−ニトロフェニルスルホニル）、Ｂｐｏｃ（２−（４−ビフェニル）イソプロポキシカルボニル）、およびＤｄｅ（１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソヘキシリデン）エチル）を含む。
【０２５７】
本明細書で使用される用語「カルボキサミド保護基」は、カルボキサミド基のＮＨ2基を提供するために容易に除去でき、合成手順中の望ましくない反応からカルボキサミド基を保護する基を意味する。そのような保護基は、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅらによって編集されたＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  （Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９９）およびＦｅｒｎａｎｄｏ  Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ  （ｗｉｔｈ  Ａｌｂｅｒｔ  Ｉｓｉｄｒｏ−Ｌｌｏｂｅｔ  ａｎｄ  Ｍｅｒｃｅｄｅｓ  Ａｌｖａｒｅｚ）の「Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄ−Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ」  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ２００９  （１０９）２４５５−２５０４に記載されている。例は、９−キサンテニル、トリチル（Ｔｒｔ）、メチルトリチル（Ｍｔｔ）、シクロプロピルジメチルカルビニール（Ｃｐｄ）、およびジメチルシクロプロピルメチル（Ｄｍｃｐ）を含むが、これらに限定されない。
【０２５８】
ペプチド複合体
本発明は、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドを含むペプチド複合体に関する。ここでペプチドの少なくとも一つのアミノ酸は、スルフィド基の硫黄原子を介して脂質含有部分に共有結合されており、ここでペプチドはＣＧＲＰ受容体アンタゴニストである。
【０２５９】
本発明者らは、驚くべきことに、実施例に示すように、本発明の特定のペプチド複合体がＣＧＲＰ受容体のアンタゴニストとして有用な活性を有することを見出した。
【０２６０】
α−ＣＧＲＰおよびβ−ＣＧＲＰはそれぞれ３７個のアミノ酸を含み、３つのアミノ酸が異なる。ヒト野生型α−ＣＧＲＰおよびβ−ＣＧＲＰの配列は次の通りである：
【０２６１】
α−ＣＧＲＰ：  ＡＣＤＴＡＴＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３］
β−ＣＧＲＰ：  ＡＣＮＴＡＴＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４］
【０２６２】
α−ＣＧＲＰおよびβ−ＣＧＲＰは下記の領域を含む：分子内のジスルフィド結合は、２位と７位のシステイン間に形成されるアミノ酸１〜７を含むジスルフィド結合されたＮ末端領域、アミノ酸８〜１８を含むアルファヘリックス領域、アミノ酸１９〜２６を含むヒンジ領域、およびアミノ酸２７〜３７を含む受容体結合領域。本発明のペプチド複合体は、これらの４つの領域のいずれか一つ以上において脂質含有部分に共有結合した一つまたは複数のアミノ酸を含んでもよい。
【０２６３】
ＣＧＲＰは、Ｇタンパク質共役受容体−受容体活性修飾タンパク質（ＲＡＭＰ１）に関連するカルシトニン受容体様受容体（ＣＬＲ）を含む、ＣＧＲＰ受容体として知られている受容体に結合する。ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１受容体複合体は、たとえば、血管平滑筋および／または内皮細胞等の多くの細胞型に存在する。さらに、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１受容体複合体は、感覚運動的結合（ｓｅｎｓｏｒｙ  ａｎｄ  ｍｏｔｏｒ  ｃｏｎｎｅｃｔｉｏｎ）が限られている多くの細胞型に存在し、その結果、ＣＧＲＰもホルモンの役割を果たす可能性があると考えられている。二番目に高い親和性ＣＧＲＰ受容体は、ＲＡＭＰ１に関連する、関連するＧタンパク質共役受容体であるカルシトニン受容体（ＣＴＲ）によって形成される。この受容体はＡＭＹ1受容体である。この受容体は感覚ニューロンにも見出される。
【０２６４】
ＣＧＲＰ受容体のアンタゴニストは、受容体結合部位への結合について、天然のリガンドであるＣＧＲＰと競合する。ＣＧＲＰまたはＣＧＲＰ受容体アゴニストの結合とは異なり、アンタゴニストとＣＧＲＰ受容体の相互作用は、受容体の活性化を引き起こさない。一度結合すると、ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストは、ＣＧＲＰ結合部位を直接閉塞するか、またはＣＧＲＰ結合を妨げるアロステリックな方法で、ＣＧＲＰのＣＧＲＰ受容体への結合をブロックし、通常はＣＧＲＰ受容体結合でトリガーされる下流の細胞内シグナル伝達経路を妨げる。
【０２６５】
本明細書で使用される「ＣＧＲＰペプチド」は、温度、ｐＨ、およびイオン強度の生理学的条件下でＣＧＲＰ受容体に優先的に結合するペプチドを指す。ＣＧＲＰ受容体は、上記のＣＬＲ／ＲＡＭＰ１受容体およびＣＴＲ／ＲＡＭＰ１受容体（ＡＭＹ1受容体）を含む。ＣＧＲＰペプチドはＣＬＲ／ＲＡＭＰ１受容体；ＡＭＹ1受容体；またはＣＬＲ／ＲＡＭＰ１受容体とＡＭＹ1受容体の両方に結合する可能性がある。本発明の目的のために、ＣＧＲＰペプチドは、完全な天然ＣＧＲＰペプチド配列を含むもの、および目的の天然ＣＧＲＰ配列に対する天然ＣＧＲＰ配列の改変（たとえば、本明細書でさらに記載する、アミノ酸置換、挿入、欠失、および／またはアミノ末端切断）を含む非天然ＣＧＲＰペプチドアナログを含む。これは、たとえば、天然ヒトαＣＧＲＰ配列またはヒトβＣＧＲＰ配列であるが、これらに限定されない任意の既知のＣＧＲＰ配列であってもよい。様々な実施形態では、ＣＧＲＰ受容体はヒトＣＧＲＰ受容体である。
【０２６６】
本明細書で使用される「ＣＧＲＰ受容体アンタゴニスト」は、温度、ｐＨ、およびイオン強度の生理学的条件下における完全長天然αＣＧＲＰまたはβＣＧＲＰによるＣＧＲＰ受容体活性化を拮抗、ブロック、減少、低減、妨害、または阻害する、ＣＧＲＰペプチド、本発明のペプチド複合体、非ＣＧＲＰペプチドまたは非ペプチド分子を含むペプチドを指す。ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストは、完全および部分アンタゴニストを含む。本発明は、拮抗作用の特定のメカニズムに依存しない。たとえば、ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストは、競合的アンタゴニストまたは非競合的アンタゴニストとして作用してもよい。このようなアンタゴニスト活性は、実施例を含む、本明細書に記載の方法により、および既知のｉｎ  ｖｉｔｒｏ法またはｉｎ  ｖｉｖｏ機能アッセイ法により検出することができる（たとえば、Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｎ−ｔｅｒｍｉｎｕｓ  ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｔｈｅ  Ｃ−ｔｅｒｍｉｎｕｓ  ｏｆ  ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ  ｇｅｎｅ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｐｅｐｔｉｄｅ（８−３７）  ｐｒｏｄｕｃｅ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ  ｗｉｔｈ  ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  ａｆｆｉｎｉｔｙ，  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ４６：２４２７−２４３５  （２００３）を参照）。
【０２６７】
ＣＧＲＰ受容体における本発明のペプチド複合体のアンタゴニスト活性は、アンタゴニスト力価値（ｐＡ2）の観点から定義されてもよい。ＣＧＲＰ受容体における本発明のペプチド複合体のアンタゴニスト活性は、既知のＣＧＲＰ受容体アンタゴニストであるヒト野生型α−ＣＧＲＰ８−３７のアンタゴニスト活性と比較されてもよい。本発明のペプチド複合体は、一部の実施形態では、ＣＧＲＰ８−３７のアンタゴニスト力価（ｐＡ2）よりも１０倍（すなわち、１０倍）低い値よりも大きいアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）を有しうる。好ましくは、本発明のペプチド複合体は、ＣＧＲＰ８−３７のアンタゴニスト力価（ｐＡ2）値と同様またはそれ以上のアンタゴニスト力価（ｐＡ2）値を有する。アンタゴニスト力価は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１  ＣＧＲＰ受容体またはＣＴＲ／ＲＡＭＰ１  ＡＭＹ１  ＣＧＲＰ受容体に対するものであってもよい。ＣＧＲＰ受容体における本発明のペプチド複合体およびヒト野生型α−ＣＧＲＰ８−３７のアンタゴニスト力価（ｐＡ2）値は、たとえば、本明細書の実施例に記載されているようなｃＡＭＰベースのアッセイを使用することにより得ることができる。他の好適なアッセイは、当業者には明らかであろう。
【０２６８】
理論に縛られることを望まないが、本発明者らは、本発明の特定のペプチド複合体は、本発明のペプチド複合体、たとえばＣＧＲＰ８−３７に存在する共有結合した脂質含有部分（単数または複数）を欠くＣＧＲＰ受容体アンタゴニストであるＣＧＲＰペプチドと比較して半減期が増加している可能性があると考えている。一部の実施形態における本発明のペプチド複合体は、ヒト野生型α−ＣＧＲＰ８−３７の半減期よりも少なくとも２倍（すなわち２倍）長い半減期を有しうる。半減期は、たとえば、好適なげっ歯類モデル、好ましくはラットモデルにおいて、当技術分野で知られている任意の好適な方法によって測定することができる。
【０２６９】
さらに、本発明者らは、本発明の特定のペプチド複合体が特定のＣＧＲＰ受容体で長期または持続的なアンタゴニスト活性を示し、受容体を洗浄した後でもアンタゴニスト活性を示し続けることを見出した。本明細書の実施例に記載されているように、これはヒト野生型α−ＣＧＲＰ８−３７では観察されない。理論に縛られることを望まないが、本発明者らは、この長期または持続的なアンタゴニスト活性は、受容体との安定した結合相互作用等の安定した相互作用の形成に起因すると考えている。ペプチド複合体は、受容体およびペプチド複合体をインキュベートした後、およびアンタゴニスト力価値を決定する前に受容体を洗浄しなかった後、ＣＧＲＰ受容体における第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）を有し、受容体およびペプチド複合体をインキュベートした後、およびその後アンタゴニスト力価値を決定する前に受容体を洗浄した後、第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）を有してもよい。第二のアンタゴニスト力価値は第一のアンタゴニスト力価値より低いが、アンタゴニスト力価の変化倍率の低下は、同じアッセイにおけるα−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）のアンタゴニスト力価の変化倍率の低下よりも小さい。ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１  ＣＧＲＰ受容体のためのｃＡＭＰアッセイで測定すると、ペプチド複合体の第一および第二のアンタゴニスト力価値間のアンタゴニスト力価の変化倍率の減少は、約５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、９、８、７、６、５、４、３、または２未満であってもよい。あるいは、またはさらに、ＣＴＲ／ＲＡＭＰ１  ＡＭＹ１  ＣＧＲＰ受容体のｃＡＭＰアッセイで測定した場合、ペプチド複合体の第一および第二のアンタゴニスト力価値間のアンタゴニスト力価の変化倍率の減少は、約２０、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、または２未満であってもよい。
【０２７０】
ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストであるＣＧＲＰペプチドを含む様々なＣＧＲＰペプチドが明らかにされており、本発明における使用に好適である。現在明らかにされているかどうかにかかわらず、すべてのＣＧＲＰペプチドおよびＣＧＲＰ受容体アンタゴニストであるＣＧＲＰペプチドは、本明細書で考えられる。
【０２７１】
ＣＧＲＰ受容体の既知のアンタゴニストは、ペプチドアンタゴニスト、たとえばＣＧＲＰ断片ＣＧＲＰ８−３７を含む。ヒト野生型α−ＣＧＲＰ８−３７およびβ−ＣＧＲＰ８−３７の配列は次の通りである：
【０２７２】
α−ＣＧＲＰ８−３７：  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９６］
β−ＣＧＲＰ８−３７：  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３１］
【０２７３】
一部の実施形態では、ＣＧＲＰペプチドは、ＣＧＲＰ８−３７またはその機能的バリアントを含むか、またはそれらからなり、ここで少なくとも一つのアミノ酸は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸であるか、またはアミノ酸で置換されている。例は、配列番号：１、２、３〜１８、４２〜５５、７９、８０、８３、８４、８７、８８、９１〜９５、および９７を含むか、またはそれらからなるペプチドを含む。
【０２７４】
他の実施形態では、ＣＧＲＰペプチドは、全長ＣＧＲＰまたはその機能的バリアントを含み、ここで少なくとも一つのアミノ酸は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸であるか、またはアミノ酸で置換されている。一部の実施形態では、全長ＣＧＲＰペプチドまたはその機能的バリアントは、たとえば脂質含有部分に共有結合した一つまたは複数のアミノ酸での置換を含む、ジスルフィド結合Ｎ末端領域の一つまたは複数の置換により、部分的または完全に、α−ＣＧＲＰまたはβ−ＣＧＲＰによる一つまたは複数のＣＧＲＰ受容体への結合または受容性活性化作用を阻害するように修飾されている。他の実施形態では、ＣＧＲＰペプチドは、Ｎ末端が切断されたＣＧＲＰペプチドまたはその機能的バリアント、たとえば、少なくとも一つのアミノ酸が、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸であるか、または置換されているＣＧＲＰ７−３７を含む。例は、配列番号：１、２、３〜１８、４２〜５５、７９、８０、８３、８４、８７、８８、９１〜９５、および９７を含むか、またはそれらからなるペプチドを含む。
【０２７５】
一つまたは複数のアミノ酸置換、たとえば一つまたは複数の保存的アミノ酸置換を含む、ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストであるＣＧＲＰペプチドを含むＣＧＲＰペプチドも企図している。
【０２７６】
「保存的アミノ酸置換」は、アミノ酸残基が、化学的に類似または誘導体化された側鎖を有する別の残基で置換されるものである。たとえば、類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当技術分野で定義されている。これらのファミリーは、たとえば、塩基性側鎖を有するアミノ酸（たとえば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖を有するアミノ酸（たとえば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖を有するアミノ酸（たとえば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖を含むアミノ酸（たとえば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、ベータ分岐側鎖を含むアミノ酸（たとえば、スレオニン、バリン、イソロイシン）および芳香族側鎖を有するアミノ酸（たとえば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を含む。Ｎ−アルキル化アミノ酸（たとえば、Ｎ−メチルアミノ酸）、Ｄ−アミノ酸、β−アミノ酸、およびγ−アミノ酸を含むがこれに限定されない非天然アミノ酸で置換されたペプチドと同様に、アミノ酸アナログ（たとえば、リン酸化またはグリコシル化アミノ酸）も本発明において企図している。
【０２７７】
ＣＧＲＰアンタゴニストであるＣＧＲＰペプチドを含む、ＣＧＲＰペプチドの断片およびバリアントもまた、具体的に企図している。
【０２７８】
ペプチドの「断片」は、ペプチドの部分配列である。本発明のペプチド複合体との関連で、ペプチドの「断片」は、典型的には、酵素または結合活性に必要な機能を実行する、および／またはペプチドの三次元構造、たとえばポリペプチドの三次元構造を提供する、ペプチドの部分配列である。本明細書に記載の合成方法との関連で、ペプチドの「断片」（または「ペプチド断片」）は、その部分配列が生物学的機能を実行するかどうかにかかわらず、ペプチドの任意の部分配列を指す。
【０２７９】
本明細書で使用される用語「バリアント」は、たとえば、具体的に同定された配列とは異なるペプチド配列を含むペプチド配列を指し、ここで一つまたは複数のアミノ酸残基が欠失、置換、または付加されている。バリアントは、天然に存在するバリアントまたは天然に存在しないバリアントである。バリアントは同じ種または他の種に由来し、ホモログ、パラログおよびオーソログを包含してもよい。用語「機能的バリアント」は、野生型ペプチドの生物学的活性と同じまたは類似の生物活性を有するペプチドのバリアントを指す。たとえば、ＣＧＲＰペプチドの機能的バリアント、たとえばＣＧＲＰ８−３７は、本明細書に記載の方法を使用して決定されうる、類似のＣＧＲＰ受容体拮抗作用を示すＣＧＲＰペプチドのバリアントである。ペプチドに関して用語「変異体」は、本明細書で定義されるペプチドのすべての形態を包含する。バリアントおよび本明細書に記載のペプチドの配列間の配列同一性の程度は、ＮＣＢＩ（ｆｔｐ：／／ｆｔｐ．ｎｃｂｉ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｂｌａｓｔ／）から公開されているプログラムのＢＬＡＳＴ一式（ｓｕｉｔｅ）（バージョン２．２．１２；２００５年８月２８日）を使用して、候補アミノ酸配列を本明細書に記載される配列、たとえば完全長ＣＧＲＰまたはＣＧＲＰ８−３７と比較することにより決定することができる。
【０２８０】
用語「α−アミノ酸」または「アミノ酸」は、α−炭素と呼ばれる炭素に結合したアミノ基とカルボキシル基の両方を含む分子を指す。好適なアミノ酸は、天然に存在するアミノ酸のＤ異性体およびＬ異性体の両方、ならびに有機合成または他の代謝経路によって調製された天然に存在しないアミノ酸を含むが、これらに限定されない。文脈上他を意味しない限り、本明細書で使用される場合、アミノ酸という用語は、アミノ酸アナログを含むことを意図する。特定の実施形態では、本発明のペプチド複合体は、天然に存在するアミノ酸のみを含む。
【０２８１】
用語「天然に存在するアミノ酸」は、自然に合成されたペプチドで一般的に見られ、一文字の略語Ａ、Ｒ、Ｎ、Ｃ、Ｄ、Ｑ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｋ、Ｍ、Ｆ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、Ｙ、およびＶで知られている２０個のアミノ酸のいずれか一つを指す。
【０２８２】
また、非標準アミノ酸による一つまたは複数のアミノ酸置換を含むＣＧＲＰ受容体アンタゴニストであるＣＧＲＰペプチドを含むＣＧＲＰペプチドも企図している。
【０２８３】
本明細書で使用される用語「非標準アミノ酸」は、（ペプチドまたはタンパク質において）天然に稀なアミノ酸、または非天然アミノ酸残基を含む。非標準アミノ酸は、２０個の天然アミノ酸のうちにない、Ｄ型またはＬ型のアミノ酸を含む。「非標準アミノ酸」は、アミノ酸に構造的に類似しており、アミノ酸に置換することができる分子を含み、アミノ基とカルボキシル基の間の一つまたは複数の追加のメチレン基の含有（例：α−アミノβ−カルボキシ酸）、または同様の反応基によるアミノ基またはカルボキシ基の置換（例：二級アミンまたは三級アミンによる一級アミンの置換（例：Ｎ−メチル−アミノ酸）、または置換基またはカルボキシ基のエステルまたはカルボキサミドによる置換）；
アミノ酸側鎖は、α−炭素ではなく、Ｎα−アミノ基の窒素原子に付加されているペプトイド；α，α−二置換アミノ酸、たとえばα−炭素がアミノ酸の側鎖に加えてアルキル基で置換されているα−アルキルアミノ酸；
およびα−炭素は二つのアミノ基で置換されているα，α−二置換アミノ酸、を除いて、本明細書で定義されるアミノ酸と構造的に同一である化合物を含むが、これらに限定されない。非標準アミノ酸の他の例は、たとえば、立体配座的に制限されたアミノ酸を含み得る。
【０２８４】
非標準アミノ酸の例は、以下を含むが、これらに限定されない（Ｌ型またはＤ型；括弧内に省略）：シトルリン（Ｃｉｔ）、ホモシトルリン（ｈＣｉｔ）、Ｎα−メチルシトルリン（ＮＭｅＣｉｔ）、Ｎα−メチルホモシトルリン（Ｎα−ＭｅＨｏＣｉｔ）、オルニチン（Ｏｒｎ）、Ｎα−メチルオルニチン（Ｎα−ＭｅＯｒｎまたはＮＭｅＯｒｎ）、サルコシン（Ｓａｒ）、ホモリジン（ｈＬｙｓまたはｈＫ）、ホモアルギニン（ｈＡｒｇまたはｈＲ）、ホモグルタミン（ｈＱ）、Ｎα−メチルアルギニン（ＮＭｅＲ）、Ｎα−メチルロイシン（Ｎα−ＭｅＬまたはＮＭｅＬ）、Ｎ−メチルホモリジン（ＮＭｅＨｏＫ）、Ｎα−メチルグルタミン（ＮＭｅＱ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、ノルバリン（Ｎｖａ）、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン（Ｔｉｃ）、オクタヒドロインドール−２−カルボン酸（Ｏｉｃ）、３−（１−ナフチル）アラニン（１−Ｎａｌ）、３−（２−ナフチル）アラニン（２−Ｎａｌ）、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン（Ｔｉｃ）、２−インダニルグリシン（Ｉｇｌ）、パラ−ヨードフェニルアラニン（ｐＩ−Ｐｈｅ）、パラ−アミノフェニルアラニン（４ＡｍＰまたは４−Ａｍｉｎｏ−Ｐｈｅ）、４−グアニジノフェニルアラニン（Ｇｕｆ）、ニトロフェニルアラニン（ｎｉｔｒｏｐｈｅ）、アミノフェニルアラニン（ａｍｉｎｏｐｈｅまたはＡｍｉｎｏ−Ｐｈｅ）、ベンジルフェニルアラニン（ｂｅｎｚｙｌｐｈｅ）、γ−カルボキシグルタミン酸（γ−ｃａｒｂｏｘｙｇｌｕ）、ヒドロキシプロリン（ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏ）、ｐ−カルボキシル−フェニルアラニン（Ｃｐａ）、α−アミノアジピン酸（Ａａｄ）、Ｎα−メチルバリン（ＮＭｅＶａｌ）、Ｎα−メチルロイシン（ＮＭｅＬｅｕ）、Ｎα−メチルノルロイシン（ＮＭｅＮｌｅ）、シクロペンチルグリシン（Ｃｐｇ）、シクロヘキシルグリシン（Ｃｈｇ）、アセチルアルギニン（ａｃｅｔｙｌａｒｇ）、α，β−ジアミノプロピオン酸（Ｄｐｒ）、α，γ−ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐ）、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、４−メチル−フェニルアラニン（ＭｅＰｈｅ）、β，β−ジフェニル−アラニン（ＢｉＰｈＡ）、アミノ酪酸（Ａｉｂ）、ベータ−アラニン、ベータ−アミノプロピオン酸、ピペリジン酸、アミノカプリオン酸、アミノヘプタン酸、アミノピメリン酸、デスモシン、ジアミノピメリン酸、Ｎ−エチルグリシン、Ｎ−エチルアスパラギン、ヒドロキシリジン、アロヒドロキシリジン、イソデスモシン、アロイソロイシン、Ｎ−メチルグリシン、Ｎ−メチルイソロイシン、Ｎ−メチルバリン、４−ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、γ−カルボキシグルタミン酸、ε−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルリジン、ε−Ｎ−アセチルリジン、Ｏ−ホスホセリン、Ｎ−アセチルセリン、Ｎ−ホルミルメチオニン、３−メチルヒスチジン、５−ヒドロキシリジン、ω−メチルアルギニン、および他の同様のアミノ酸、およびこれらのいずれかの誘導体化された形態。
【０２８５】
一部の実施形態では、天然に存在しないアミノ酸による一つまたは複数のアミノ酸置換は、酵素的タンパク質分解に対するＣＧＲＰペプチドの感受性を低下させるために行う。この感受性の低下は、エキソペプチダーゼまたはエンドペプチダーゼのプロテアーゼ結合部位または切断部位に対する影響が原因である可能性がある。そのような置換の例は、一つ以上のアルギニンまたは一つ以上のリジンのＤ−アルギニン、Ｎ−メチルアルギニン、シトルリン、ジメチルアルギニン、ホモアルギニン、Ｎ−メチルシトルリン、ホモシトルリン、４−グアニジノフェニルアラニン、Ｄ−リジン、Ｎ−メチルリジン、ホモリジン、４−アミノフェニルアラニンまたはオルニチンへの置換を含む。
【０２８６】
用語「ポリペプチド」および「ペプチド」等は、本明細書では互換的に使用され、任意の長さのアミノ酸残基の任意のポリマーを指す。ポリマーは、線状または非線状（たとえば、分岐）であってもよく、修飾されたアミノ酸またはアミノ酸アナログを含んでもよい。この用語は、自然に、または介入によって、たとえばジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化、またはその他の修飾または操作、たとえば標識または生理活性成分との結合によって修飾されたアミノ酸ポリマーも包含する。
【０２８７】
特に明記しない限り、当技術分野の範囲内である分子生物学、微生物学、細胞生物学、生化学および免疫学の従来の技術を、本明細書に記載の方法を実施する際に使用することができる。そのような技術は、文献、たとえば、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，  ｓｅｃｏｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ  （Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８９）；  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  （Ｍ．Ｊ．  Ｇａｉｔ，  ｅｄ．，  １９８４）；  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  （Ｒ．Ｉ．  Ｆｒｅｓｈｎｅｙ，  ｅｄ．，  １９８７）；  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  （Ｄ．Ｍ．  Ｗｅｉｒ  ＆  Ｃ．Ｃ．  Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ，  ｅｄｓ．）；  Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  Ｖｅｃｔｏｒｓ  ｆｏｒ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｃｅｌｌｓ  （Ｊ．Ｍ．  Ｍｉｌｌｅｒ  ＆  Ｍ．Ｐ．  Ｃａｌｏｓ，  ｅｄｓ．，  １９８７）；  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  （Ｆ．Ｍ．  Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，  ｅｄｓ．，  １９８７）；  ＰＣＲ：  Ｔｈｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ，  （Ｍｕｌｌｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，  ｅｄｓ．，  １９９４）；  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  （Ｊ．Ｅ．  Ｃｏｌｉｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ｅｄｓ．，  １９９１）；  Ｔｈｅ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  （Ｄａｖｉｄ  Ｗｉｌｄ，  ｅｄ．，  Ｓｔｏｃｋｔｏｎ  Ｐｒｅｓｓ  ＮＹ，  １９９４）；  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  （Ｈａｒｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，  ｅｄｓ．，  １９８７）；  およびＭｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  （Ｒ．  Ｍａｓｓｅｙｅｆｆ，  Ｗ．Ｈ．  Ａｌｂｅｒｔ，  ａｎｄ  Ｎ．Ａ．  Ｓｔａｉｎｅｓ，  ｅｄｓ．，  Ｗｅｉｎｈｅｉｍ：  ＶＣＨ  Ｖｅｒｌａｇｓ  ｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ  ｍｂＨ，  １９９３）で詳細に説明されている。
【０２８８】
脂質含有部分は、たとえば、アミノ酸の側鎖のヘテロ原子、たとえばスルフィド基の硫黄原子を介して、本発明のペプチド複合体のＣＧＲＰペプチドの少なくとも一つのアミノ酸に共有結合される（すなわち、共有結合される）。様々な構造の脂質含有部分について、本明細書での使用を企図する。脂質含有部分は脂質を含み、たとえばそれを介して脂質がアミノ酸に結合する一つまたは複数の他の部分を含んでもよい。本明細書で使用する用語「脂質」は、特に明記しない限り、油、脂肪、脂肪酸およびそれらのエステル等を含むがこれらに限定されない、有機溶媒に可溶な物質を指す。様々な実施形態では、脂質または脂質含有部分は、親油性および／または疎水性である。
【０２８９】
調製方法
本発明のペプチド複合体は、本明細書に記載される方法および手順を使用して調製できる。本発明の化合物を調製するための他の好適な方法は、当業者には明らかであろう。
【０２９０】
本発明のペプチド複合体は、本明細書に記載の方法および手順を使用して、容易に入手可能な出発原料から調製できる。典型的または好ましいプロセス条件（たとえば、反応温度、時間、反応物のモル比、溶媒、圧力等）が示される場合、特に明記しない限り、他のプロセス条件も使用できることが理解される。最適な反応条件は、使用する特定の反応物によって異なる。
【０２９１】
特定の官能基が望ましくない反応を受けるのを防ぐために、従来の保護基が必要な場合がある。保護および脱保護の必要性ならびに適切な保護基の選択は、当業者により容易に決定できる。様々な官能基のための好適な保護基、ならびに特定の官能基を保護および脱保護するための好適な条件は、当技術分野で周知である（たとえば、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＧ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第三版、Ｗｉｌｅｙ、ニューヨーク州、１９９９）
【０２９２】
方法および反応に有用な出発原料は市販されているか、または、たとえばＦｉｅｓｅｒ  ａｎｄ  Ｆｉｅｓｅｒ’ｓ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｖｏｌｕｍｅｓ  １−１５  （Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，  １９９１），  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，  Ｖｏｌｕｍｅｓ  １−４０  （Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，  １９９１），  Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  （Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，  ４th  Ｅｄｉｔｉｏｎ），  ａｎｄ  Ｌａｒｏｃｋ’ｓ  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ  （ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  Ｉｎｃ．，  １９８９）等の標準的な参考書に記載されている既知の手順またはそれらの改変によって調製することができる。
【０２９３】
様々な出発原料、中間体、および化合物は、従来の技術、たとえば沈殿、濾過、結晶化、蒸発、蒸留、およびクロマトグラフィーを適切に使用して、単離および精製することができる。化合物の特性評価は、融点、質量スペクトル、核磁気共鳴、および他の様々な分光分析による等の従来の方法を使用して行うことができる。
【０２９４】
本発明は、本発明のペプチド複合体を製造する方法に関し、当該方法は、
（Ａ）カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドのアミノ酸を含むアミノ酸複合体を提供し、ここでアミノ酸はスルフィド基の硫黄原子を介して脂質含有部分に共有結合されている；および
アミノ酸複合体のアミノ酸を一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドにカップリングして、本発明のペプチド複合体を提供すること；または
（Ｂ）カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドのペプチド断片を含むペプチド複合体を提供し、ここでペプチド断片の少なくとも一つのアミノ酸がスルフィド基の硫黄原子を介して脂質含有部分に共有結合している；および
ペプチド複合体のアミノ酸を一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドにカップリングして、本発明のペプチド複合体を提供すること
を含む。
【０２９５】
本発明は、また、本発明のペプチド複合体を製造する方法に関し、当該方法は、
炭素―炭素二重結合を含む、脂質含有結合パートナー、および
チオールを含む少なくとも一つのアミノ酸を含む、アミノ酸含有結合パートナーを
脂質含有結合パートナーをアミノ酸含有結合パートナーに結合させるのに有効な条件下で、
反応させることを含む。
【０２９６】
本発明は、また、本発明の方法によって製造された本発明のペプチド複合体に関する。
【０２９７】
（Ａ）のカルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドのアミノ酸を含むアミノ酸複合体、または（Ｂ）のカルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドのペプチド断片を含むペプチド複合体は、当技術分野で既知の方法またはそれに類似した方法によって提供することができる。そのような方法は、国際公開第２０１４／２０７７０８  Ａ２号、国際公開第２０１６／１０３１９２  Ａ１号、および国際公開第２０１７／１４５０９７  Ａ２号に記載されている結合方法を含み、これらのそれぞれは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２９８】
このような方法はまた、本発明のチオール−エン反応に基づく結合方法を含む。
【０２９９】
チオール−エン反応は、非芳香族炭素―炭素二重結合を横切る（ａｃｒｏｓｓ）チオールの付加を含む（すなわち、炭素―炭素二重結合のヒドロチオール化）。本発明の方法では、アミノ酸含有結合パートナーはチオールを含み、脂質含有結合パートナーは炭素―炭素二重結合を含む。反応における脂質含有結合パートナーおよびアミノ酸含有結合パートナーは、本明細書に記載の実施形態のいずれかで定義されている通りである。
【０３００】
反応はフリーラジカル機構を介して進行する。反応には、開始、重合またはカップリング、および終了の三つの異なるフェーズがある。ラジカルの生成により、求電子性のチイルラジカルが発生し、エン基全体に伝播して、炭素中心ラジカルを形成する。
【０３０１】
典型的には、炭素中心ラジカルは、追加のチオール分子からの連鎖移動によってクエンチされて、最終的なヒドロチオール化生成物を与えうる。しかしながら、一部の実施形態では、使用される反応条件に応じて、炭素中心ラジカルは、脂質含有結合パートナーの第二の分子の炭素―炭素二重結合と反応して、ビス付加生成物（またはビス付加物）を提供しうる。ここで、チオールからの硫黄原子は、第一の脂質含有結合パートナーの炭素―炭素二重結合由来の炭素原子に結合しており、第一の脂質含有結合パートナーの炭素―炭素二重結合由来の炭素原子は第二の脂質含有結合パートナーの炭素―炭素二重結合由来の炭素原子に結合している。好ましくは、第一の脂質含有結合パートナーおよび第二の脂質含有結合パートナーは同一である。二つの経路は競合すると考えられている。本発明の方法は、そのようなモノおよびビス脂質の両方を含む結合パートナー付加生成物の調製を包含する。
【０３０２】
一部の実施形態では、アミノ酸含有結合パートナーは、ペプチド含有結合パートナーである。他の実施形態では、アミノ酸含有結合パートナーは、（ペプチドとは対照的に）アミノ酸を含む、本質的にそれからなる、またはそれからなる。
【０３０３】
一部の実施形態では、アミノ酸含有結合パートナーはＣＧＲＰペプチドのペプチドを含み、ペプチドの少なくとも一つのアミノ酸はチオールを含む。そのような実施形態の一部では、脂質含有結合パートナーとの反応は、本発明のペプチド複合体を提供する。
【０３０４】
他の実施形態では、アミノ酸含有結合パートナーは、ＣＧＲＰペプチドのペプチド断片を含み、ここでペプチド断片の少なくとも一つのアミノ酸は、チオールを含む。他の実施形態では、アミノ酸含有結合パートナーは、ＣＧＲＰペプチドのアミノ酸を含み、ここでアミノ酸はチオールを含む。そのような実施形態の一部では、脂質含有結合パートナーとの反応により、アミノ酸複合体またはペプチド複合体が提供され、これを一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドに結合して、本発明のペプチド複合体を提供することができる。
【０３０５】
当技術分野で知られている任意の方法によって、反応中に一つまたは複数のフリーラジカルを生成することができる。フリーラジカルは、熱的および／または光化学的に生成されてもよい。一つまたは複数のフリーラジカル開始剤を使用して、フリーラジカルの生成を開始することができる。適切なフリーラジカル開始剤は、熱開始剤および光開始剤を含む。
【０３０６】
フリーラジカルは、加熱により熱開始剤から発生する。熱開始剤の分解および結果として生じるフリーラジカル形成の速度は、開始剤および開始剤が加熱される温度に依存する。一般に、温度が高いほど分解が速くなる。当業者は、過度の実験をすることなく、開始剤を加熱するための適切な温度を選択することができるであろう。多くの熱開始剤は市販されている。熱開始剤の例は、ｔｅｒｔ−アミルペルオキシベンゾエート、１，１’−アゾビス（シクロヘキサンカルボニトリル）、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）、過酸化ベンゾイル、ｔｅｒｔ―ブチルヒドロペルオキシド、ｔｅｒｔ−ブチルペルアセテート、ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシド、ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシベンゾエート、ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシイソプロピルカルボネート、過酸化ラウロイル、過酢酸、および過硫酸アンモニウムを含むが、これらに限定されない。
【０３０７】
フリーラジカルは、光の照射により光開始剤から発生する可能性がある。光開始剤の分解およびフリーラジカル形成を誘発するのに必要な光の周波数は、開始剤に依存する。多くの光開始剤は紫外線で開始することができる。特定の波長または波長範囲の光を使用して、開始剤に選択的に照射することができ、ここで脂質含有結合パートナーまたはアミノ酸含有結合パートナー、たとえばペプチド含有結合パートナーは、感光性基を含む。本発明の方法の特定の実施形態では、約３６５  ｎｍの周波数が使用される。この周波数の光は一般に、天然アミノ酸の側鎖と互換性がある。
【０３０８】
広範囲にわたる光開始剤が市販されている。光開始剤の例は、アセトフェノン、アニソイン、アントラキノン、アントラキノン−２−スルホン酸、ベンジル、ベンゾイン、ベンゾインエチルエーテル、ベンゾインイソブチルエーテル、ベンゾインメチルエーテル、ベンゾフェノン、３，３’、４，４’−ベンゾフェノンテトラカルボン酸二無水物、４−ベンゾイルビフェニル、２−ベンジル−２−（ジメチルアミノ）−４’−モルホリノブチロフェノン、４’−ビス（ジエチルアミノ）ベンゾフェノン、４，４’−ビス（ジメチルアミノ）ベンゾフェノン、カンファーキノン、２−クロロチオキサンテン−９−オン、ジベンゾスベレノン、２，２−ジエトキシアセトフェノン、４，４’−ジヒドロキシベンゾフェノン、２，２−ジメトキシ−２−フェニルアセトフェノン（ＤＭＰＡ）、４−（ジメチルアミノ）ベンゾフェノン、４，４’−ジメチルベンジル、２，５−ジメチルベンゾフェノン、３，４−ジメチルベンゾフェノン、４’−エトキシアセトフェノン、２−エチルアントラキノン、３’−ヒドロキシアセトフェノン、４’−ヒドロキシアセトフェノン、３−ヒドロキシベンゾフェノン、４−ヒドロキシベンゾフェノン、１−ヒドロキシシクロヘキシルフェニルケトン、２−ヒドロキシ−２−メチルプロピオフェノン、２−メチルベンゾフェノン、３−メチルベンゾフェノン、メチルベンゾイルホルメート、２−メチル−４’−（メチルチオ）−２−モルホリノプロピオフェノン、フェナントレンキノン、４’−フェノキシアセトフェノン、およびチオキサンテン−９−オンを含むが、これらに限定されない。
【０３０９】
当業者は、たとえば、脂質含有結合パートナー、アミノ酸含有結合パートナー、および反応混合物中に存在する他の任意の成分の性質を考慮した方法における使用のための適切なフリーラジカル開始剤を選択することができるであろう。一部の実施形態では、開始剤は、チオールを含む出発原料に対して、約２０：１〜約０．０５：１、約１０：１〜約０．０５：１、約５：１〜約０．０５：１、約３：１〜約０．０５：１の化学量論比で反応に存在する。
【０３１０】
脂質含有結合パートナーおよびアミノ酸含有結合パートナーは、既知の合成化学技術またはその改変を使用して調製できる（たとえば、Ｌｏｕｉｓ  Ｆ  Ｆｉｅｓｅｒ  ａｎｄ  Ｍａｒｙ  Ｆ，  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｖ．  １−１９，  Ｗｉｌｅｙ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  （１９６７−１９９９  ｅｄ．）、または補遺を含むＢｅｉｌｓｔｅｉｎｓ  Ｈａｎｄｂｕｃｈ  ｄｅｒ  ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ  Ｃｈｅｍｉｅ，  ４，  Ａｕｆｌ．  Ｅｄ．  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ  Ｂｅｒｌｉｎ  （ｔｈｅ  Ｂｅｉｌｓｔｅｉｎ  ｏｎｌｉｎｅ  ｄａｔａｂａｓｅからも入手可能）、または一部の実施形態では、市販の場合がある。
【０３１１】
たとえば、ｍ、Ｌ1、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、本明細書の実施形態のいずれかで定義されている通りである；およびＺ1は存在する場合、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である、化学式（ＩＩ）の脂質含有結合パートナー化合物は、
【０３１２】
【化６】
2021501784.tif 000007
【０３１３】
ＸはＯＨまたは好適な脱離基である化学式（ＶＩ）の化合物
【０３１４】
【化７】
2021501784.tif 000008
【０３１５】
を、ＹはＨ、金属、または半金属、またはアシル（たとえば、アルキルカルボニル）である式（ＶＩＩ）の化合物：
【０３１６】
【化８】
2021501784.tif 000009
【０３１７】
と、エステル化（Ｙがアシル基である場合、エステル交換）に有効な条件下で反応させることで調製できる。
【０３１８】
エステル化の方法は、当技術分野でよく知られている。たとえば、Ｘがクロロである場合、反応は、好適な溶媒中、塩基、たとえばピリジンまたはトリエチルアミンの存在下で行うことができる。酸塩化物は、その場でより反応性の高い種（たとえば、ヨウ化ナトリウムを使用して対応するヨウ化物に）に変換することができる。反応が行われる温度は、酸の種類および使用される溶媒の反応性に依存する。
【０３１９】
たとえば、化学式（ＩＩ）のビニルエステルは、酸または金属触媒を用いた酢酸ビニル（それ自体、酢酸およびアセチレンまたは酢酸およびエチレンの好適な触媒上での反応により工業的に製造される）とのエステル交換により製造されうる。たとえば、欧州特許番号第０３７６０７５  Ａ２号およびＳ．  Ｋ．  Ｋａｒｍｅｅ，  Ｊ．  Ｏｉｌ  Ｐａｌｍ  Ｒｅｓ．，  ２０１２，  １５１８−１５２３を参照のこと。
【０３２０】
化学式（ＩＩ）のビニルエステルはまた、触媒（通常、パラジウムまたはルテニウム錯体）の存在下で、末端アセチレンにカルボン酸を付加することにより調製されうる。たとえば、Ｖ．  Ｃａｄｉｅｒｎｏ，  Ｊ．  Ｆｒａｎｃｏｓ，  Ｊ．  Ｇｉｍｅｎｏ  Ｏｒｇａｎｏｍｅｔａｌｌｉｃｓ，  ２０１１，  ３０，  ８５２−８６２；  Ｓ．  Ｗｅｉ，  Ｊ．  Ｐｅｄｒｏｎｉ，  Ａ．  Ｍｅｉｓｓｎｅｒ，  Ａ．  Ｌｕｍｂｒｏｓｏ，  Ｈ．−Ｊ．  Ｄｒｅｘｌｅｒ，  Ｄ．  Ｈｅｌｌｅｒ，  Ｂ．  Ｂｒｅｉｔ，  Ｃｈｅｍ．  Ｅｕｒ．  Ｊ．，  ２０１３，  １９，  １２０６７−１２０７６を参照のこと。非末端アセチレンも反応させることができる。たとえば、Ｎ．  Ｔｓｕｋａｄａ，  Ａ．  Ｔａｋａｈａｓｈｉ，  Ｙ．  Ｉｎｏｕｅ，  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，  ２０１１，  ５２，  ２４８−２５０、およびＭ．  Ｒｏｔｅｍ，  Ｙ．  Ｓｈｖｏ，  Ｊ．  Ｏｒｇａｎｏｍｅｔａｌｌｉｃ  Ｃｈｅｍ．  １９９３，  ４４８，  １５９−２０４を参照のこと。
【０３２１】
化学式（ＩＩ）のビニルエステルを調製するための方法のさらなる例は、以下を含む：ジビニル水銀と芳香族および脂肪族酸［たとえば、Ｄ．  Ｊ．  Ｆｏｓｔｅｒ，  Ｅ．  Ｔｏｂｌｅｒ，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  １９６１，  ８３，  ８５１を参照のこと］；  ＡｇＦの存在下でのトリメトキシ（ビニル）シランによるアレーンカルボン酸のＣｕ（ＩＩ）触媒エステル化［たとえば、Ｆ．  Ｌｕｏ，  Ｃ．  Ｐａｎ，  Ｐ．  Ｑｉａｎ，  Ｊ．  Ｃｈｅｎｇ，  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ２０１０，  ２００５を参照のこと］；２  ｍｏｌ−％の［ＡｕＣｌ（ＰＰｈ3）］および２  ｍｏｌ−％のＡｇＯＡｃからなる触媒系を用いた、酢酸ビニルから一級および二級アルコール、さらにはカルボン酸へのビニル転移反応［たとえば、Ａ．  Ｎａｋａｍｕｒａ，  Ｍ．  Ｔｏｋｕｎａｇａ，  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．  ２００８，  ４９，  ３７２９を参照のこと］；およびＩｒ錯体（［Ｉｒ（ｃｏｄ）Ｃｌ］2／Ｐ（ＯＭｅ）3）を触媒とするトランスビニル化［たとえば、Ｈ．  Ｎａｋａｇａｗａ，  Ｙ．  Ｏｋｉｍｏｔｏ，  Ｓ．  Ｓａｋａｇｕｃｈｉ，  Ｙ．  Ｉｓｈｉｉ，  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．  ２００３，  ４４，  １０３を参照のこと］を含む。化学式（ＩＩ）の化合物を調製するための他の好適な方法は、当業者には明らかであろう。
【０３２２】
化学式（ＶＩ）の多数の化合物が市販されている。他のものは、市販の前駆体から標準的な合成化学技術を用いて調製することができる。たとえば、Ｘがクロロである化学式（ＶＩ）の化合物は、好適な溶媒または溶媒の混合物中で、対応するカルボン酸を塩化チオニルで処理して調製することができる。同様に、化学式（ＶＩＩ）の化合物も市販されているか、または標準的な合成化学技術を使用して市販の前駆体から調製することができる。
【０３２３】
脂質含有結合パートナーおよびアミノ酸含有結合パートナーならびに反応混合物中に存在する他の成分が反応容器に導入される順序は、変動してもよい。反応はワンポット法として行うことができる。
【０３２４】
反応における脂質含有結合パートナーおよびアミノ酸含有結合パートナーの比率も変動してもよい。一部の実施形態では、組み合わされた（すなわち、合計で）第一の脂質含有結合パートナーおよび第二の脂質含有結合パートナーとアミノ酸含有結合パートナーのモル比は、少なくとも７：１、たとえば８：１、９：１、１０：１、２０：１、３０：１、３５：１、４０：１、５０：１、６０：１、または７０：１である。
【０３２５】
反応は、任意の好適な温度で行うことができる。一部の実施形態では、反応は、約−２５℃〜約２００℃、約−１０℃〜約１５０℃、約０℃〜約１２５℃、およそ周囲温度〜約１００℃の温度で行われる。一部の実施形態では、反応は周囲温度で行われる。一部の実施形態では、反応は周囲温度より高い温度で行われる。一つの実施形態では、反応は、４０〜２００℃、５０〜１５０℃、６０〜１００℃、６５〜９０℃、または７０〜８０℃の温度で行われる。
【０３２６】
反応が行われる温度は、反応でフリーラジカルがどのように生成されるかに依存しうる。使用される温度は、反応の速度を制御するように選択することができ、反応の進行中に制御して、反応の速度を制御することができる。フリーラジカルが熱的に（たとえば、熱開始剤を用いて）生成される場合、反応は一般に周囲温度を超える温度で行われる。温度は、フリーラジカルが発生する種の反応性に依存する。フリーラジカルが光化学的に生成される場合、反応は、有利には周囲温度で行われうる。特定の実施形態では、反応速度を遅くするために反応混合物を冷却するか、または反応速度を増加させるために逆に反応混合物を加熱することが望ましい場合がある。当業者は、出発原料および存在する他の反応物質の反応性を考慮して、方法を行うための適切な温度を選択することができるであろう。反応が行われる温度は、当技術分野で知られている好適な方法によって反応混合物を加熱または冷却することによって制御することができる。熱は、たとえば、反応容器内の熱交換器、反応容器を囲む加熱ジャケットを使用して、または反応容器を加熱された液体（たとえば、油浴または砂浴）に浸すことによって、反応混合物に加えられてもよい。特定の例示的な実施形態では、反応混合物は、マイクロ波照射によって加熱される。
【０３２７】
反応の進行は、任意の好適な手段によって、たとえば、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）または高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によってモニターしてもよい。出発原料の少なくとも一つの消費によりモニターされるように、反応は実質的に完了するまで進行することが許容される。一部の実施形態では、反応は、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９９％のアミノ酸含有結合パートナーが消費されるまで行われる。出発原料の消費は、任意の好適な方法、たとえば、ＨＰＬＣによってモニターすることができる。一部の実施形態では、反応は、１分〜７日、５分〜７２時間、１０分〜４８時間、１０分〜２４時間の期間にわたって進行することが許容される。他の実施形態では、反応は、７２時間未満、４８時間未満、２４時間未満、１２時間未満、６時間未満、４時間未満、２時間未満、または１時間未満の期間進行することが許容される。
【０３２８】
反応混合物は、当技術分野で知られている任意の好適な方法、たとえば、磁気または機械的撹拌機を用いて混合することができる。使用される方法は、反応が行われる規模に依存しうる。
【０３２９】
反応は一般に液体反応媒体中で行われる。液体反応媒体は溶媒を含んでもよい。好適な溶媒の例は、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、クロロホルム、四塩化炭素、水、メタノール、エタノール、ジメチルスルホキシド、トリフルオロ酢酸、酢酸、アセトニトリル、およびそれらの混合物を含む。溶媒は、出発原料および存在する他の反応物質、たとえばフリーラジカル開始剤の溶解度に基づいて選択されてもよい。一部の実施形態では、脂質含有結合パートナーは疎水性である。アミノ酸含有結合パートナーの疎水性または親水性は、たとえば、ペプチド含有結合パートナーのペプチドのアミノ酸配列に応じて異なりうる。当業者は、過度の実験をすることなく、適切な溶媒または溶媒の混合物を選択することができるであろう。
【０３３０】
反応は、実質的に無酸素の条件下で行うことができる。酸素は、反応で形成されたフリーラジカルをクエンチする場合がある。反応混合物を、実質的に無酸素である不活性ガス（たとえば、窒素またはアルゴン）で脱気して、フリーラジカルが生成される前に、溶存酸素を除去してもよい。あるいは、反応混合物の個々の成分を、反応容器内で混合する前に、実質的に無酸素である不活性ガスで脱気してもよい。反応は、実質的に酸素を含まない不活性ガスの雰囲気下で行うことができる。この方法は、周囲圧力で行うことができる。
【０３３１】
望ましくない副生成物の形成を阻害する、および／または所望の生成物の収率または変換を改善する一つまたは複数の添加剤を、本発明のチオレン法における反応混合物に含めてもよい。添加剤は、一般に、方法の反応または任意の後続の工程に悪影響を与えることなく、望ましくない副生成物の形成を最小限にするのに十分な量で使用される。一つまたは複数の添加剤は、外来チオール、酸、オルガノシラン、またはそれらの任意の二つ以上の組み合わせであってもよい。
【０３３２】
本発明者らは、一部の実施形態では、反応混合物中に添加物として外来性または外因性チオールを含めることにより、望ましくない副生成物の形成が減少することを見出した。外来チオールは、一部の実施形態では、所望のチオレン反応の効率または変換を増加させうる。好適な外来チオールの例は、還元型グルタチオン、ＤＯＤＴ、ＤＴＴ、タンパク質、立体障害チオール等を含むが、これらに限定されない。一部の実施形態では、外来チオールはＤＴＴである。他の実施形態では、外来チオールは、立体障害チオールである。好適な立体障害のある外来チオールの非限定的な例は、ｔｅｒｔ―ブチルメルカプタンおよび１−メチルプロピルメルカプタンを含む。
【０３３３】
様々な実施形態では、外来チオールは、反応において化学量論比でアミノ酸含有結合パートナーに対して２００：１〜約０．０５：１、１００：１〜０．０５：１、８０：１〜０．０５：１、６０：１〜０．０５：１、４０：１〜０．０５：１、２０：１〜約０．０５：１、１０：１〜約０．５：１、５：１〜約１：１、または３：１〜約１：１で存在する。特定の実施形態では、ｔ−ＢｕＳＨ等の立体障害チオールは、反応において化学量論比でアミノ酸含有結合パートナーに対して約１００：１〜０．０５：１、たとえば約８０：１、約４０：１、または約３：１で存在する。理論に縛られることを望まないが、発明者らは、特定の実施形態において、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン等の外来チオールがプロトンを提供して、反応中の伝播により形成される炭素中心ラジカル中間体をクエンチし、得られるｔｅｒｔ−ブチル−チイルラジカルがアミノ酸含有結合パートナーから別のモルのチイルラジカルを生成することにより、反応を伝播すると考えている。
【０３３４】
一部の実施形態における酸の含有もまた、望ましくない副産物の形成を低減しうる。酸は、強い無機酸、たとえばＨＣｌ、または有機酸、たとえばＴＦＡであってもよい。特定の実施形態では、添加剤はＴＦＡである。理論に縛られることを望まないが、発明者らは、反応混合物のｐＨを下げると、リジン等の残基の電子が豊富な側鎖がプロトン化し、単一の電子移動に関与してラジカル種を形成する可能性があると考えている。様々な実施形態では、反応混合物は、０．０１〜２５、０．０１〜１５、０．０１〜１０、または１〜１０％ｖ／ｖの酸添加剤を含む。特定の実施形態では、反応混合物は、１〜１０％のＴＦＡ、たとえば５％のＴＦＡを含む。
【０３３５】
発明者らは、反応混合物中に添加物としてｔｅｒｔ−ブチルメルカプタンおよびＴＦＡの両方を含む一部の実施形態において、望ましくない副生成物の形成を低減し、出発原料の所望の生成物への変換を増加できることを見出した。したがって、特定の例示的な実施形態では、反応混合物は、酸および外因性チオールの組み合わせ、たとえば、強有機酸および立体障害チオールの組み合わせ、たとえば、ＴＦＡおよびｔｅｒｔ−ブチルメルカプタンの組み合わせを含む。
【０３３６】
オルガノシランもまた、チオレン反応における添加剤として含まれてもよい。オルガノシランはラジカルベースの還元剤であり、その活性はケイ素原子の置換基を変えることで調整できる。様々な実施形態では、オルガノシランは、式（Ｒq）3ＳｉＨの化合物であり、ここで少なくとも一つのＲqが水素ではないという条件で、各場合におけるＲqは、独立して、水素または有機基、たとえば、アルキルまたはアリールである。オルガノシランの例は、トリエチルシラン（ＴＥＳ）、トリフェニルシラン、ジフェニルシラン、トリイソプロピルシラン（ＴＩＰＳ）等を含むが、これらに限定されない。様々な実施形態では、オルガノシランは、トリアルキルシラン、例えば、ＴＩＰＳまたはＴＥＳである。理論に縛られることを望まないが、発明者らは、外来チオールと同様に、特定の実施形態では、ＴＩＰＳ等のオルガノシランが水素供与体として作用して、所望の複合体を提供し、反応の伝播を促進できると考えている。様々な実施形態では、オルガノシランは、反応において化学量論比でアミノ酸含有結合パートナーに対して２００：１〜約０．０５：１、１００：１〜０．０５：１、８０：１〜０．０５：１、６０：１〜０．０５：１、４０：１〜０．０５：１、２０：１〜約０．０５：１、１０：１〜約０．５：１、５：１〜約１：１、または３：１〜約１：１で存在する。特定の実施形態では、トリアルキルシラン、たとえばＴＩＰＳは、反応において化学量論比でアミノ酸含有結合パートナーに対して０．０５：１、１００：１〜０．０５：１、たとえば約８０：１または約４０：１で存在する。
【０３３７】
オルガノシランは、外来チオールと組み合わせて添加剤として使用することができる。あるいは、オルガノシランは、外来チオールの代わりに使用されてもよい。ＴＦＡ等の酸も存在する場合もある。
【０３３８】
反応において形成された生成物および所望の生成物への変換は、たとえば、ＨＰＬＣによって測定されうる。
【０３３９】
反応混合物中の脂質含有結合パートナーおよびアミノ酸含有結合パートナーの濃度もそれぞれ、反応に影響を与える可能性がある。当業者は、反応混合物中の脂質含有結合パートナーおよびペプチド含有結合パートナーの濃度を変化させて、たとえば、過度の実験をせずに収率と純度を最適化することができるだろう。一部の実施形態では、チオールを含む出発原料は、約０．０５  ｍＭ〜約１  Ｍ、約０．５  ｍＭ〜約１  Ｍ、約１  ｍＭ〜約１  Ｍの濃度で存在する。一部の実施形態では、濃度は少なくとも約０．０５  ｍＭ、０．５  ｍＭ、または１  ｍＭである。一部の実施形態では、アルケンを含む出発原料の濃度は、少なくとも約０．０５  ｍＭ、０．５  ｍＭ、または１  ｍＭである。
【０３４０】
一部の実施形態では、アミノ酸複合体またはペプチド複合体は、結合反応後に反応媒体から分離され、必要に応じて精製される。複合体は、当技術分野で知られている任意の好適な方法を使用して、たとえば沈殿によって反応媒体から分離することができる。一部の実施形態では、アミノ酸または複合体は、それを反応媒体から分離した後に精製される。たとえば、複合体は、一つまたは複数の好適な溶媒を使用するＨＰＬＣにより精製されてもよい。
【０３４１】
本発明のペプチド複合体は、本発明の方法で使用されるペプチド複合体、使用されるアミノ酸含有結合パートナー、および／またはカップリングされるペプチドによって生成され、合成ペプチドを含んでもよい。合成ペプチドは、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）を使用して調製してもよい。
【０３４２】
したがって、本発明の方法において、ペプチドまたはペプチド複合体、たとえば本発明のペプチド複合体を提供するための一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドのカップリングは、ＳＰＰＳによって行ってもよい。
【０３４３】
合成ペプチドはまた、液相ペプチド合成によって調製してもよい。
【０３４４】
固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）
ＳＰＰＳの基本原理は、リンカー分子を介して固相担体、通常はレジン粒子に固定された成長中のポリペプチド鎖へのアミノ酸の段階的付加である。これにより、ポリペプチド鎖が完成すると切断と精製が可能になる。簡単に言えば、固相レジン担体と出発アミノ酸はリンカー分子を介して互いに結合している。このようなレジン−リンカー−酸マトリックスは市販されている。
【０３４５】
レジンに結合されるアミノ酸は、そのＮα末端が化学保護基によって保護されている。アミノ酸は側鎖保護基を有していてもよい。そのような保護基は、カップリングされるアミノ酸のカルボキシル基とレジンに結合したペプチド鎖の保護されていないＮαアミノ基との間に新しいペプチド結合を形成するプロセス中に望ましくないまたは有害な反応が起こるのを防ぐ。
【０３４６】
カップリングされるアミノ酸は、ペプチド鎖のＮ末端アミノ酸の保護されていないＮαアミノ基と反応し、ペプチド鎖の鎖長が１アミノ酸増加する。カップリングされるアミノ酸のカルボキシル基は、ペプチド鎖のＮαアミノ基との反応を促進するために、好適な化学的活性化剤で活性化されてもよい。次に、ペプチド鎖のＮ末端アミノ酸のＮα保護基を除去して、次のアミノ酸残基とのカップリングに備える。この手法は、可能な場合は常に自動化を魅力的なものにする多くの反復的な工程で構成されている。当業者は、たとえば収束ペプチド（ｃｏｎｖｅｒｇｅｎｔ  ｐｅｐｔｉｄｅ）合成が望まれる場合、ペプチドは、個々のアミノ酸の代わりに固相結合アミノ酸またはペプチドのＮαアミノ基に結合されうることを理解するであろう。
【０３４７】
アミノ酸の所望の配列が達成されると、ペプチドは、リンカー分子で固相担体から切断される。
【０３４８】
ＳＰＰＳは、連続フロー法またはバッチフロー法を使用して行われてもよい。連続フローでは、分光光度計を介して反応の進行をリアルタイムでモニターできるが、二つの明確な欠点がある−レジン上のペプチドと接触する試薬が希釈されること、および固相レジンの物理的なサイズの制約によりスケールが制限されることである。バッチフローはフィルター反応容器で起こり、反応物にアクセスでき、手動または自動で追加できるため便利である。
【０３４９】
Ｎαアミノ末端を保護するために、二種類の保護基が一般的に使用されている。「Ｂｏｃ」（ｔｅｒｔ―ブチルオキシカルボニル）および「Ｆｍｏｃ」（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）である。Ｂｏｃ法用の試薬は比較的安価であるが、腐食性が高く、高価な機器およびより厳密な予防策が必要である。より高価ではあるが、腐食性の少ない試薬を使用するＦｍｏｃ法が一般的に好まれる。
【０３５０】
ＳＰＰＳの場合、様々な固相支持相を利用できる。合成に使用される固相担体は、合成レジン、合成ポリマーフィルム、または合成目的に好適なケイ素またはケイ酸塩表面（たとえば、細孔性ガラス（ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｐｏｒｅ  ｇｌａｓｓ））であってもよい。一般に、レジンが使用され、一般的にはポリスチレン懸濁液、またはポリスチレン−ポリエチレングリコール、またはポリマー担体、たとえばポリアミドが使用される。
【０３５１】
Ｂｏｃ−化学に好適なリンカーで官能化されたレジンの例は、ＰＡＭレジン、オキシムレジンSS、フェノールレジン、臭素化Ｗａｎｇレジン、および臭素化ＰＰＯＡレジンを含む。Ｆｍｏｃ−化学に好適なレジンの例は、アミノメチルポリスチレンレジン、ＡＭＰＢ−ＢＨＡレジン、Ｓｉｅｂｅｒアミドレジン、Ｒｉｎｋ酸レジン、Ｔｅｎｔａｇｅｌ  Ｓ  ＡＣレジン、２−クロロトリチルクロリドレジン、２−クロロトリチルアルコールレジン、ＴｅｎｔａＧｅｌ  Ｓ  Ｔｒｔ−ＯＨレジン、Ｋｎｏｒｒ−２−クロロトリチルレジン、ヒドラジン−２−クロロトリチルレジン、ＡＮＰレジン、Ｆｍｏｃ光硬化性レジン、ＨＭＢＡ−ＭＢＨＡレジン、ＴｅｎｔａＧｅｌ  Ｓ  ＨＭＢレジン、Ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｓａｆｅｔｙ  ＣａｔｃｈレジンＢＡ１レジン、およびＦｍｏｃ−ヒドロキシルアミン−２−クロロトリチルレジンを含む。その他のレジンは、ＰＬ  Ｃｌ−Ｔｒｔレジン、ＰＬ−Ｏｘｉｍｅレジン、ＰＬ−ＨＭＢＡレジンを含む。一般的にレジンは交換可能である。
【０３５２】
各レジンについて、出発モノマーまたはサブユニットの結合に関する適切なカップリング条件が文献で知られている。
【０３５３】
固相担体の調製は、担体を適切な溶媒（たとえば、ジメチルホルムアミド）に溶媒和することを含む。固相は、通常、溶媒和の間に体積が増加し、これにより、ペプチド合成を実行するために利用可能な表面積が増加する。
【０３５４】
次に、リンカー分子を、ペプチド鎖を固相担体に接続するための担体に結合する。リンカー分子は一般に、最終的な切断がＣ末端に遊離酸またはアミドを提供するように設計されている。リンカーは通常、レジン固有のものではない。リンカーの例は、ペプチド酸、たとえば４−ヒドロキシメチルフェノキシアセチル−４’−メチルベンズヒドリルアミン（ｈｙｄｒｏｘｙｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｏｘｙａｃｅｔｙｌ−４’−ｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｙｈｙｄｒｙｌａｍｉｎｅ：ＨＭＰ）、またはペプチドアミドたとえばベンズヒドリルアミン誘導体を含む。
【０３５５】
ペプチド配列の第一のアミノ酸は、リンカーが固相担体に結合した後、またはペプチド配列の第一のアミノ酸を含むリンカーを使用して固相担体に結合した後にリンカーに結合することができる。アミノ酸を含むリンカーは市販されている。
【０３５６】
次の工程は、第一のアミノ酸のＮα−アミノ基を脱保護することである。Ｆｍｏｃ  ＳＰＰＳの場合、Ｎα−アミノ基の脱保護は、穏やかな塩基処理（たとえば、ピペラジンまたはピペリジン）で行ってもよい。側鎖保護基は、中程度の酸分解（たとえば、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ））によって除去できる。Ｂｏｃ  ＳＰＰＳの場合、Ｎα−アミノ基の脱保護は、たとえばＴＦＡを使用して行ってもよい。
【０３５７】
脱保護に続いて、ペプチド結合の形成によりアミノ酸鎖の伸長またはカップリングが進行する。このプロセスは、結合されるアミノ酸のＣα−カルボキシル基の活性化を必要とする。これは、たとえば、ｉｎ  ｓｉｔｕ試薬、予め形成された対称無水物、活性エステル、酸ハロゲン化物、またはウレタン保護Ｎ−カルボキシ無水物を使用して達成することができる。ｉｎ  ｓｉｔｕ法は、同時の活性化およびカップリングを可能にする。カップリング試薬は、カルボジイミド誘導体、たとえば、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドまたはＮ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミドを含む。カップリング試薬は、ベンゾトリアゾールのウロニウムまたはホスホニウム塩誘導体も含む。そのようなウロニウムおよびホスホニウム塩の例は、ＨＢＴＵ（Ｏ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＢＯＰ（ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＰｙＢＯＰ（ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＰｙＡＯＰ、ＨＣＴＵ（Ｏ−（１Ｈ−６−クロロ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＴＣＴＵ（Ｏ−１Ｈ−６−クロロベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロホウ酸塩）、ＨＡＴＵ（Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＴＡＴＵ（Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロホウ酸塩）、ＴＯＴＵ（Ｏ−［シアノ（エトキシカルボニル）メチレンアミノ］−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロホウ酸塩）、およびＨＡＰｙＵ（Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）オキシビス−（ピロリジノ）−ウロニウムヘキサフルオロホスフェート）を含む。一部の実施形態では、カップリング試薬はＨＢＴＵ、ＨＡＴＵ、ＢＯＰ、またはＰｙＢＯＰである。
【０３５８】
所望のアミノ酸配列が合成された後、ペプチドはレジンから切断される。このプロセスで使用される条件は、ペプチドおよび側鎖保護基のアミノ酸組成の感度に依存する。一般的に、切断は、保護基およびリンカーに由来する反応性カルボニウムイオンをクエンチするために、複数の捕捉剤を含む環境で行われる。一般的な切断剤は、たとえば、ＴＦＡおよびフッ化水素（ＨＦ）を含む。一部の実施形態では、ペプチドがリンカーを介して固相担体に結合される場合、ペプチド鎖は、リンカーからペプチドを切断することによって、固相担体から切断される。
【０３５９】
ペプチドをレジンから切断するために使用される条件は、付随して一つまたは複数の側鎖保護基を除去することができる。一部の実施形態では、ペプチドを固相担体から切断する際に、一つ以上またはすべての保護基が除去される。
【０３６０】
ＳＰＰＳでの保護基の使用は十分に確立されている。一般的な保護基の例は、アセトアミドメチル（Ａｃｍ）、アセチル（Ａｃ）、アダマンチルオキシ（ＡｄａＯ）、ベンゾイル（Ｂｚ）、ベンジル（Ｂｚｌ）、２−ブロモベンジル、ベンジルオキシ（ＢｚｌＯ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）、ベンジルオキシメチル（Ｂｏｍ）、２−ブロモベンジルオキシカルボニル（２−Ｂｒ−Ｚ）、ｔｅｒｔ−ブトキシ（ｔＢｕＯ）、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ｔｅｒｔ−ブトキシメチル（Ｂｕｍ）、ｔｅｒｔ−ブチル（ｔＢｕ）、ｔｅｒｔ−ブチルチオ（ｔＢｕｔｈｉｏ）、２−クロロベンジルオキシカルボニル（２−Ｃｌ−Ｚ）、シクロヘキシルオキシ（ｃＨｘＯ）、２，６−ジクロロベンジル（２，６−ＤｉＣｌ−Ｂｚｌ）、４，４’−ジメトキシベンズヒドリル（Ｍｂｈ）、１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソ−シクロヘキシリデン）３−メチル−ブチル（ｉｖＤｄｅ）、４−｛Ｎ−［１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソ−シクロヘキシリデン）３−メチルブチル］−アミノ）ベンジルオキシ（ＯＤｍａｂ）、２，４−ジニトロフェニル（Ｄｎｐ）、フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、ホルミル（Ｆｏｒ）、メシチレン−２−スルホニル（Ｍｔｓ）、４−メトキシベンジル（ＭｅＯＢｚｌ）、４−メトキシ−２，３，６−トリメチル−ベンゼンスルホニル（Ｍｔｒ）、４−メトキシトリチル（Ｍｍｔ）、４−メチルベンジル（ＭｅＢｚｌ）、４−メチルトリチル（Ｍｔｔ）、３−ニトロ−３−ピリジンスルフェニル（Ｎｐｙｓ）、２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル（Ｐｂｆ）、２，２，５，７，８−ペンタメチル−クロマン−６−スルホニル（Ｐｍｃ）、トシル（Ｔｏｓ）、トリフルオロアセチル（Ｔｆａ）、トリメチルアセトアミドメチル（Ｔａｃｍ）、トリチル（Ｔｒｔ）およびキサンチル（Ｘａｎ）を含むが、これらに限定されない。
【０３６１】
ペプチドのアミノ酸の側鎖の一つまたは複数が、たとえば追加のカルボキシル、アミノ、ヒドロキシまたはチオール基等の官能基を含む場合、追加の保護基が必要になる場合がある。たとえば、Ｆｍｏｃ戦略を使用する場合、Ｍｔｒ、Ｐｍｃ、ＰｂｆをＡｒｇの保護に使用できる；Ｔｒｔ、ＴｍｏｂはＡｓｎおよびＧｌｎの保護に使用できる；Ｂｏｃは、Ｔｒｐ及びＬｙｓの保護に使用できる；ｔＢｕはＡｓｐ、Ｇｌｕ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒの保護に使用できる；ならびにＡｃｍ、ｔＢｕ、ｔＢｕｔｈｉｏ、Ｔｒｔ、およびＭｍｔはＣｙｓの保護に使用できる。当業者は、多数の他の好適な組み合わせがあることを理解するであろう。
【０３６２】
上記で概説したＳＰＰＳの方法は、当技術分野でよく知られている。たとえば、Ａｔｈｅｒｔｏｎ  ａｎｄ  Ｓｈｅｐｐａｒｄ，  “Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：  Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，”  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：  ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，  １９８９；  Ｓｔｅｗａｒｔ  ａｎｄ  Ｙｏｕｎｇ：  “Ｓｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ２ｎｄ  Ｅｄ．，”  Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，  Ｉｌｌｉｎｏｉｓ：  Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，  １９８４；  Ｊｏｎｅｓ，  “Ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，”  Ｏｘｆｏｒｄ：  Ｃｌａｒｅｎｄｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，  １９９４；  Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  ８５：２１４６−２１４９  （１９６３）；  Ｍａｒｇｌｉｎ，  Ａ．  ａｎｄ  Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，  Ｒ．Ｂ．  Ａｎｎｕ．  Ｒｅｖ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  ３９：８４１−６６  （１９７０）；およびＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ  Ｒ．Ｂ．  ＪＡＭＡ．  ２１０（７）：１２４７−５４ （１９６９）；および“Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  −  Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ”  （Ｗ．Ｃ．  Ｃｈａｎ  ａｎｄ  Ｐ．Ｄ．  Ｗｈｉｔｅ，  ｅｄｓ．  Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，  ２０００）を参照のこと。ペプチドまたはポリペプチドの自動合成のための装置は、製造元、たとえばＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ／Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  （Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，  ＣＡ）から工業的に容易に入手可能であり、製造元の指示に従って操作できる。
【０３６３】
レジンからの切断に続いて、ペプチドは、反応媒体から、たとえば遠心分離または濾過によって分離できる。次に、ペプチドをその後、一つまたは複数の好適な溶媒を使用したＨＰＬＣによって精製することができる。
【０３６４】
一部の実施形態では、ペプチド含有結合パートナーは、レジンからのペプチドの切断後に精製することなく、本発明の方法で使用することができる。
【０３６５】
一部の実施形態では、本発明の方法は、ペプチド含有結合パートナーを使用して行うことができ、ここでペプチドは、Ｎα−アミノ基保護基または側鎖保護基を含まない。反応は一般に、チオールおよび非芳香族炭素―炭素二重結合の反応に選択的である。
【０３６６】
一部の実施形態では、方法は、保護基で保護されたチオールを含む少なくとも一つのアミノ酸を含む保護されたアミノ酸含有結合パートナーを提供すること；およびチオールから保護基を除去して、アミノ酸含有結合パートナーを提供することを含む。保護されたアミノ酸含有結合パートナーは、保護基で保護された一つまたは複数の追加のアミノ酸を含んでもよい。一つまたは複数の追加の保護アミノ酸の保護基は、チオール保護基とは異なり、チオール保護基を選択的に除去して、脂質含有結合パートナーとの反応を促進することができる。
【０３６７】
本発明の方法における望ましくない競合反応を防ぐために、保護基を有するペプチド含有結合パートナー（たとえば、ペプチドの他のシステイン残基に）中の、脂質含有結合パートナーと反応するチオール基以外のチオール基を保護することが必要である場合がある。そのようなチオール基は、ペプチド中に存在する一つまたは複数の他の保護基を除去するために、またはレジンからペプチドを切断するために使用される条件下で除去できない保護基で保護されうる。通常、ペプチドは、適切な保護基を有するアミノ酸を使用して合成される。当業者は、過度の実験をすることなく適切な保護基を選択することができるであろう。
【０３６８】
アミノ酸含有結合パートナーおよび／または脂質含有結合パートナーは、反応する脂質含有結合パートナーの炭素−炭素二重結合に加えて、一つまたは複数の不飽和炭素−炭素結合を含んでもよい。当業者は、そのような実施形態において反応する炭素−炭素二重結合に対するチオールの選択性は、たとえば、一つまたは複数の追加の不飽和炭素−炭素結合に対する炭素−炭素二重結合の立体的および／または電子的環境に依存する場合があることを理解するであろう。特定の実施形態では、反応する炭素−炭素二重結合は、アミノ酸含有結合パートナーおよび脂質含有結合パートナー中の他の不飽和炭素−炭素結合に対して活性化される。特定の実施形態では、反応する炭素−炭素二重結合は、ペプチド含有結合パートナーおよび脂質含有結合パートナー中の他の不飽和炭素−炭素結合に対して活性化される。
【０３６９】
一部の実施形態では、本発明のペプチド複合体のＮ末端アミノ酸のＮα−アミノ基は、アシル化、たとえばアセチル化されている。したがって、一部の実施形態では、本発明の方法は、ペプチドまたはペプチド複合体のＮ末端アミノ酸のＮα−アミノ基をアシル化、たとえばアセチル化することを含みうる。
【０３７０】
ペプチド含有結合パートナーおよび／またはペプチド複合体がＳＰＰＳによって合成されている場合、レジンからの切断の前または後にアシル化を行ってもよい。一部の実施形態では、方法は、レジンからの切断の前にＮ末端アミノ基をアシル化することを含む。一部の実施形態では、方法は、アミノ酸複合体のＮ末端アミノ酸のＮα−アミノ基または脂質含有部分が結合されるペプチド複合体のアミノ酸残基をアシル化、たとえばアセチル化することを含む。
【０３７１】
アミノ酸のＮα−アミノ基のアシル化は、好適な溶媒、たとえばＤＭＦ中、塩基の存在下でアミノ酸またはペプチドをアシル化剤と反応させることにより行うことができる。アシル化剤の非限定的な例は、酸ハロゲン化物、酸塩化物、たとえば、塩化アセチル、および酸無水物、たとえば、無水酢酸を含む。このような薬剤は、市販されているか、または当技術分野で周知の方法によって調製することができる。好適な塩基の非限定的な例は、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−メチルモルホリン等を含む。
【０３７２】
ＳＰＰＳ中にペプチド凝集を低減する一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドは、本明細書に記載されるペプチドの合成中にカップリングされてもよい。そのような薬剤は当技術分野でよく知られている。例は、シュードプロリンジペプチド、たとえばＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ［ψ（Ｍｅ，Ｍｅ）Ｐｒｏ］−ＯＨ等を含むが、これらに限定されない。シュードプロリンジペプチドは、セリンまたはスレオニン由来のオキサゾリジンおよびシステイン由来のチアゾリジンを含む。ジペプチドは、標準的なカップリング法を用いてペプチド配列に導入され、任意のアミノ酸−Ｓｅｒ、アミノ酸−Ｔｈｒ、アミノ酸−Ｃｙｓジペプチドモチーフを置換する。天然の配列は、固相担体からのペプチドの脱保護および切断によって再生される。一部の実施形態では、一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドはカップリングされ、凝集を低減する切断可能な可溶基（ｓｏｌｕｂｉｓｉｎｇ  ｇｒｏｕｐ）を形成する。
【０３７３】
本発明の方法は、一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドをカップリングすることを含んでもよい。一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドはＳＰＰＳによってカップリングされてもよい。一部の実施形態では、一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドのすべてがＳＰＰＳによってカップリングされる。
【０３７４】
一部の実施形態では、方法は、アミノ酸複合体のアミノ酸を一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドにカップリングして、本発明のペプチド複合体を提供することを含む。一部の実施形態では、方法は、アミノ酸複合体のアミノ酸を、ＳＰＰＳによって固相担体に結合されたアミノ酸またはペプチドにカップリングすることを含む。一部の実施形態では、方法は、アミノ酸複合体のアミノ酸を、ＳＰＰＳによって固相担体に結合されたペプチドにカップリングすることを含む。方法は、ＳＰＰＳによって固相担体に結合されたペプチドを合成することを含んでもよい。
【０３７５】
一部の実施形態では、方法は、アミノ酸複合体のアミノ酸またはペプチド複合体のアミノ酸を一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドにカップリングして、本発明のペプチド複合体を提供することを含む。カップリングは本明細書に記載されるようにＳＰＰＳによって行われてもよい。
【０３７６】
一つの実施形態では、カップリングされるペプチド複合体のペプチドは固相担体に結合されており、方法は、カップリングされるペプチド複合体のアミノ酸を一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドにカップリングして、固相結合ペプチド複合体を提供することを含む。カップリングは、本明細書に記載されるように、ＳＰＰＳによって行われてもよい。
【０３７７】
代替の実施形態では、方法はペプチド複合体のアミノ酸をＳＰＰＳによって固相担体に結合しているアミノ酸またはペプチドにカップリングして固相結合ペプチド複合体を提供することを含む。
【０３７８】
当業者は、本明細書に記載されるように、アミノ酸またはペプチドを別のアミノ酸またはペプチドにカップリングすることは、典型的にはアミノ酸のＮα末端もしくは一つのカップリングパートナーのペプチドのアミノ酸およびアミノ酸のＣ末端もしくは他のカップリングパートナーのペプチドのアミノ酸の間のペプチド結合を形成することを含むことを理解するだろう。
【０３７９】
一部の実施形態では、本発明の方法は、ＳＰＰＳによるペプチド含有結合パートナーのペプチドのアミノ酸配列の合成；およびペプチド含有結合パートナーを脂質含有結合パートナーと反応させることを含む。
【０３８０】
一部の実施形態では、ＳＰＰＳによるペプチド含有結合パートナーのペプチドのアミノ酸配列の合成は、一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドを固相担体に結合したアミノ酸またはペプチドにカップリングしてペプチドまたはその一部のアミノ酸配列を提供することを含む。
【０３８１】
アミノ酸含有結合パートナー、たとえばペプチド含有結合パートナーは、固相担体に結合しているときに脂質含有結合パートナーと反応させてもよい。あるいは、ペプチド含有結合パートナーは、反応、たとえば脂質含有結合パートナーとの反応の前に、固相担体から切断され、任意に精製されてもよい。
【０３８２】
合成されたペプチドの同一性の確認は、たとえば、アミノ酸合成、質量分析、エドマン分解等によって簡便に達成することができる。
【０３８３】
本発明の方法は、本発明のペプチド複合体を液体反応媒体から分離することをさらに含んでもよい。当該分野で公知の任意の好適な分離方法、たとえば、沈殿および濾過を使用してもよい。複合体はその後、たとえば一つまたは複数の好適な溶媒を使用したＨＰＬＣによって精製してもよい。
【０３８４】
したがって、ペプチド複合体は、純粋または精製されたもの、または実質的に純粋または精製されたものであってもよい。
【０３８５】
本明細書で使用される場合、「精製された」は絶対的な純度を必要としない；むしろ、それは問題の材料が以前の状況よりも純粋であるという相対的な用語として意図されている。実際には、材料は、典型的には、たとえば、様々な他の成分を除去するために分画に供されており、得られた材料は、その所望の生物学的活性（単数または複数）を実質的に保持している。用語「実質的に精製された」は、製造中にそれらが結合している可能性がある他の構成要素が少なくとも約６０％、好ましくは少なくとも約７５％、最も好ましくは少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％以上が除去されている材料を指す。 
【０３８６】
使用
本発明者らは、本発明のペプチド複合体が有用なＣＧＲＰ受容体アンタゴニスト活性を有することを見出した。
【０３８７】
したがって、本発明は、有効量の本発明のペプチド複合体を対象に投与することを含む、それを必要とする対象においてＣＧＲＰ受容体を拮抗する方法に関する。
【０３８８】
本発明はまた、治療上有効量の本発明のペプチド複合体を対象に投与することを含む、それを必要とする対象においてＣＧＲＰ受容体が介在または調節する、または過剰なＣＧＲＰ受容体活性化を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法に関する。
【０３８９】
本発明はまた、治療有効量の本発明によるペプチド複合体を対象に投与することを含む、それを必要とする対象における血管拡張の増加に関連する、またはそれを特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法に関する。本発明はまた、血管拡張の増加のための（ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｓａｍｅ）、本発明のペプチド複合体の使用、および血管拡張の増加における使用のため（ｆｏｒ  ｕｓｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｓａｍｅ）の本発明のペプチド複合体に関する。血管拡張の増加に関連する、またはそれを特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は、好ましくはＣＧＲＰ受容体が介在または調節する、または過剰なＣＧＲＰ受容体活性化を特徴とする。一部の実施形態では、疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は、たとえば、細小血管イベントにおけるＣＧＲＰまたはＣＧＲＰ受容体活性化を伴う任意の形態の低血圧を含んでもよい。一部の実施形態では、疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は、鼻閉である。そのような実施形態の一部では、ペプチド複合体はうっ血除去薬として作用し、局所的に、たとえば鼻スプレーとして投与してもよい。
【０３９０】
本発明はまた、治療有効量の本発明のペプチド複合体を対象に投与することを含む、それを必要とする対象における熱傷、循環性ショック、更年期の顔面紅潮、喘息、敗血症、神経性炎症、炎症性皮膚疾患（たとえば、乾癬および接触性皮膚炎）、アレルギー性鼻炎、関節障害（たとえば、関節炎、および顎関節障害、好ましくは関節炎）、悪液質（たとえば、がん誘発性悪液質）、疼痛、たとえば頭蓋顔面痛障害（たとえば、片頭痛、頭痛、三叉神経痛、および歯痛、好ましくは片頭痛）、および代謝障害または症候群（たとえば、肥満、ＩＩ型糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、および血栓症）からなる群から選択される疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法に関する。
【０３９１】
様々な実施形態では、本発明は、疼痛または代謝障害から選択される疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法に関する。
【０３９２】
様々な実施形態では、本発明は、疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）が疼痛である、疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法に関する。
【０３９３】
様々な実施形態では、本発明は、疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は、片頭痛または頭痛（たとえば、群発頭痛および外傷後頭痛）である、疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法に関する。
【０３９４】
様々な実施形態では、本発明は、疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は、片頭痛である、疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法に関する。
【０３９５】
本発明はまた、ＣＧＲＰ受容体を拮抗するのに使用するためのペプチド複合体、およびＣＧＲＰ受容体を拮抗する際のペプチド複合体の使用に関する。
【０３９６】
本発明はまた、ＣＧＲＰ受容体が介在または調節する、または過剰なＣＧＲＰ受容体活性化を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療における使用のためのペプチド複合体、またはＣＧＲＰ受容体が介在または調節する、および過剰なＣＧＲＰ受容体活性化を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療におけるペプチド複合体の使用に関する。
【０３９７】
本発明はまた、ＣＧＲＰ受容体に拮抗するための医薬品の製造における使用のためのペプチド複合体、およびＣＧＲＰ受容体に拮抗するための医薬品の製造におけるペプチド複合体の使用、ならびに、ＣＧＲＰ受容体が介在または調節する、または過剰なＣＧＲＰ受容体活性化を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療のための医薬品の製造における使用のためのペプチド複合体、およびＣＧＲＰ受容体が介在または調節する、または過剰なＣＧＲＰ受容体活性化を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療のための医薬品の製造におけるペプチド複合体の使用に関する。
【０３９８】
当業者は、本明細書に記載されるペプチド複合体が様々な疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）および疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療するために有用であることを理解するであろう。ＣＧＲＰ受容体が介在する疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）および疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の例は、熱傷、循環性ショック、更年期の顔面紅潮、喘息、敗血症、神経性炎症、炎症性皮膚疾患（たとえば、乾癬および接触性皮膚炎）、アレルギー性鼻炎、関節障害（たとえば、関節炎、および顎関節障害、好ましくは関節炎）、悪液質（たとえば、がん誘発性悪液質）、疼痛、たとえば頭蓋顔面痛障害（たとえば、片頭痛、頭痛、三叉神経痛、および歯痛、好ましくは片頭痛）、および代謝障害または症候群（たとえば、肥満、ＩＩ型糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、および血栓症）を含むが、これらに限定されない。たとえば、代謝障害の治療に関して、たとえば減量療法として、動物試験は、ＣＧＲＰ作用の遮断がエネルギー消費の増加を通じて減量を促進できることを示した。したがって、一部の実施形態では、本明細書に記載のペプチド複合体は、たとえば代謝障害の治療における減量療法に有用である可能性がある。
【０３９９】
本発明はまた、熱傷、循環性ショック、更年期の顔面紅潮、喘息、敗血症、神経性炎症、炎症性皮膚疾患（たとえば、乾癬および接触性皮膚炎）、アレルギー性鼻炎、関節障害（たとえば、関節炎、および顎関節障害、好ましくは関節炎）、悪液質（たとえば、がん誘発性悪液質）、疼痛、たとえば頭蓋顔面痛障害（たとえば、片頭痛、頭痛、三叉神経痛、および歯痛、好ましくは片頭痛）、および代謝障害または症候群（たとえば、肥満、ＩＩ型糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、および血栓症）からなる群から選択される疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療のための医薬品の製造における使用のためのペプチド複合体、および製造におけるペプチド複合体の使用に関する。
【０４００】
本発明はまた、ＣＧＲＰ受容体が介在または調節する、または過剰なＣＧＲＰ受容体活性化を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療するためのＣＧＲＰ受容体の拮抗における使用のためのペプチド複合体、および拮抗におけるペプチド複合体の使用、および拮抗の方法に関する。
【０４０１】
本発明はまた、熱傷、循環性ショック、更年期の顔面紅潮、喘息、敗血症、神経性炎症、炎症性皮膚疾患（たとえば、乾癬および接触性皮膚炎）、アレルギー性鼻炎、関節障害（たとえば、関節炎、および顎関節障害、好ましくは関節炎）、悪液質（たとえば、がん誘発性悪液質）、疼痛、たとえば頭蓋顔面痛障害（たとえば、片頭痛、頭痛、三叉神経痛、および歯痛、好ましくは片頭痛）、および代謝障害または症候群（たとえば、肥満、ＩＩ型糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、および血栓症）からなる群から選択される疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療するための本発明のペプチド複合体の使用に関する。
【０４０２】
したがって、本発明はまた、治療有効量の本発明のペプチド複合体を対象に投与することを含む、そのような疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療するための方法に関する。
【０４０３】
本発明はまた、そのような疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療するための医薬品の製造における使用のためのペプチド複合体、およびそのような疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療するための医薬品の製造におけるペプチド複合体の使用に関する。
【０４０４】
本発明はまた、細胞とＣＧＲＰ受容体を拮抗するのに有効な量の本発明によるペプチド複合体を接触させることを含む、ＣＧＲＰ受容体を拮抗する方法に関する。
【０４０５】
「対象」は、ヒトまたは非ヒト動物、好ましくは哺乳動物である脊椎動物、好ましくはヒトである。非ヒト哺乳動物は、家畜、たとえばウシ、ヒツジ、ブタ、シカ、およびヤギ；スポーツアニマルおよびコンパニオンアニマル（ｓｐｏｒｔ  ａｎｄ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ  ａｎｉｍａｌ）、たとえばイヌ、ネコ、およびウマ；ならびに実験動物、たとえばマウス、ラット、ウサギ、およびモルモットを含むが、これらに限定されない。
【０４０６】
本明細書で使用される用語「治療」、および関連用語、たとえば「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」および「治療する（ｔｒｅａｔ）は、特に明記しない限り、一般に、何らかの望ましい治療効果が達成されるヒトまたは非ヒト対象の治療に関する。治療効果は、たとえば、疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の阻害、軽減、改善、停止、または予防であってもよい。
【０４０７】
「治療有効量」（または「有効量」）は、臨床結果を含む、有益なまたは所望の結果をもたらすのに十分な量である。治療有効量は、様々な投与経路による一回または複数回の投与で投与することができる。対象に投与される治療有効量は、たとえば、投与の目的、投与様式、任意の同時投与される化合物の性質および投与量、ならびに対象の特性、たとえば全体的な健康、他の疾患、年齢、性別、遺伝子型、体重、および薬物耐性に依存する。当業者は、これらの他の関連する要因を考慮して適切な投与量を決定することができるであろう。
【０４０８】
ペプチド複合体の有効性は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏとｉｎ  ｖｉｖｏの両方で評価できる。たとえば、ペプチド複合体は、ＣＧＲＰ受容体のアンタゴニストとして作用するその能力について、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで試験することができる。ｉｎ  ｖｉｖｏ研究のために、ペプチド複合体は、たとえば注射によって動物（たとえば、マウス）に投与されてもよく、そしてその効果が評価されうる。たとえば、本明細書の実施例に記載するように、本発明のペプチド複合体をマウスに注射し、片頭痛治療の代替生物学的尺度である表面血流への影響を、レーザードップラーイメージングを使用して測定してもよい。結果に基づいて、適切な投与量範囲および投与経路を決定することができる。
【０４０９】
ペプチド複合体は、典型的には、本明細書に記載の本発明の医薬組成物の形態で投与される。組成物は、単回投与または複数回投与計画として投与されてもよい。
【０４１０】
ペプチド複合体は、単一の治療薬として、または一つまたは複数の他の追加の治療薬と組み合わせて使用または投与することができる。ペプチド複合体および一つまたは複数の追加の治療薬は、同時に、連続して、または別々に使用または投与することができる。一つまたは複数の追加の治療薬は、治療される疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）または他の所望の治療効果に依存するであろう。当業者に知られているように、一つまたは複数の追加の治療薬を、特定の薬剤について示されたまたは承認された治療量で使用することができる。一部の実施形態において、本発明の二つ以上のペプチド複合体は、組み合わせて使用または投与される。二つ以上のペプチド複合体は、同時に、連続して、または別々に使用または投与されてもよい。
【０４１１】
本発明はまた、受容体を拮抗するのに有効な量の本発明のペプチド複合体と細胞を接触させることを含む、ＣＧＲＰ受容体を拮抗する方法に関する。細胞は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｉｎ  ｖｉｖｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏであってもよい。細胞がｉｎ  ｖｉｖｏである特定の実施形態では、ペプチド複合体を対象に投与することにより、細胞をペプチド複合体と接触させることができる。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、またはｅｘ  ｖｉｖｏでの細胞中のＣＧＲＰ受容体を拮抗または阻害する方法は、たとえば、様々な診断試験または実験室研究において有用でありうる。
【０４１２】
医薬組成物
本発明はさらに、本発明のペプチド複合体；および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物に関する。
【０４１３】
医薬組成物は、有効量のペプチド複合体を含む。医薬組成物は、本発明の二つ以上のペプチド複合体を含んでもよい。
【０４１４】
用語「薬学的に許容される担体」は、ペプチド複合体と一緒に対象に投与することができる担体（たとえば、アジュバントまたは媒体）を指し、これは一般に安全で非毒性であり、生物学的にもその他の点でも望ましくないものではなく、動物ならびにヒトの医薬用途に適した担体を含む。
【０４１５】
組成物に使用できる薬学的に許容される担体は、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、自己乳化型薬物送達システム（ＳＥＤＤＳ）、たとえばｄ−ａ−トコフェロールポリエチレングリコール１０００コハク酸、医薬剤形で使用される界面活性剤、たとえばＴｗｅｅｎまたは他の類似のポリマー送達マトリックス、血清蛋白質、たとえばヒト血清アルブミン、緩衝物質、たとえばリン酸塩、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質、たとえば硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイドシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレンブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂を含むが、これらに限定されない。シクロデキストリン、たとえばα−、β−およびγ−シクロデキストリン、または化学修飾誘導体、たとえば２−および３−ヒドロキシプロピル−３−シクロデキストリンを含むヒドロキシアルキルシクロデキストリン、または他の可溶化誘導体もまた、送達を増強するために有利に使用できる。油性溶液または懸濁液はまた、長鎖アルコール希釈剤または分散剤、またはカルボキシメチルセルロースまたは類似の分散剤を含んでもよく、これらは、エマルジョンおよびまたは懸濁液等の薬学的に許容される剤形の処方において一般的に使用される。
【０４１６】
組成物は、経口投与または非経口投与（局所、皮下、筋肉内および静脈内を含む）を含むがこれらに限定されない、任意の選択された経路による対象への投与を可能にするように処方される。たとえば、組成物は、意図される投与経路および標準的な薬務に関して選択された、適切な薬学的に許容される担体（賦形剤、希釈剤、助剤、およびそれらの組み合わせを含む）と共に製剤化されてもよい。たとえば、組成物は、散剤、液剤、錠剤またはカプセル剤として経口的に、または軟膏、クリームまたはローションとして局所的に投与されてもよい。好適な製剤は、乳化剤、抗酸化剤、香味剤または着色剤を含む、必要に応じて追加の薬剤を含んでもよく、即時放出、遅延放出、改変放出（ｍｏｄｉｆｉｅｄ−ｒｅｌｅａｓｅ）、持続放出、パルス放出または制御放出に適合されうる。
【０４１７】
組成物は、非経口経路を介して投与することができる。非経口剤形の例は、水溶液、等張生理食塩水、または活性剤の５％グルコース、または他の周知の薬学的に許容される賦形剤を含む。たとえば、シクロデキストリン、または当業者によく知られている他の可溶化剤は、治療薬の送達のための医薬賦形剤として利用することができる。
【０４１８】
経口投与に好適な剤形の例は、錠剤、カプセル剤、ロゼンジ等の形態、または任意の液体形態、たとえばシロップ、水溶液、乳濁液等を含むが、これらに限定されず、治療有効量の組成物を提供することができる。カプセル剤は、ゼラチンまたはセルロース等の標準的な薬学的に許容される材料を含んでもよい。錠剤は、有効成分および固体担体および滑沢剤との混合物を圧縮することにより、従来の手順に従って製剤化することができる。固体担体の例は、デンプンおよび糖ベントナイトを含む。有効成分はまた、結合剤、たとえば、ラクトースまたはマンニトール、従来の充填剤、および打錠剤を含むハードシェル錠剤またはカプセル剤の形態で投与されてもよい。
【０４１９】
経皮投与に好適な剤形の例は、経皮パッチ、経皮包帯等を含むが、これらに限定されない。
【０４２０】
組成物の局所投与に好適な剤形の例は、皮膚に直接投与するか、パッド、パッチ等の中間体を介して投与するかに関係なく、任意のローション、スティック、スプレー、軟膏、ペースト、クリーム、ゲル等を含む。
【０４２１】
組成物の坐剤投与に好適な剤形の例は、身体開口部に挿入される任意の固体剤形、特に直腸、膣および尿道に挿入されるものを含む。
【０４２２】
組成物の注射に好適な剤形の例は、ボーラスを介した送達、たとえば静脈内注射、皮下（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、皮下（ｓｕｂｄｅｒｍａｌ）、および筋肉内投与または経口投与による単回または複数回投与を含む。
【０４２３】
組成物のデポー投与に好適な剤形の例は、有効成分が生分解性ポリマー、マイクロエマルジョン、リポソームのマトリックスに封入されているか、またはマイクロカプセル化されているペレットまたは固体形態を含む。
【０４２４】
組成物のための注入装置の例は、所望の数の投与量または定常状態の投与を提供するための注入ポンプを含み、埋め込み型薬物ポンプを含む。組成物用の埋め込み型注入装置の例は、有効成分が生分解性ポリマーまたは合成ポリマー、たとえばシリコーン、シリコーンゴム、シラスティックまたは類似のポリマーの内に封入または分散されている任意の固体形態を含む。
【０４２５】
組成物の経粘膜送達に好適な剤形の例は、浣腸、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム、噴霧溶液（ｎｅｂｕｌｉｓｅｄ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）、散剤のためのデポジトリ溶液（ｄｅｐｏｓｉｔｏｒｉｅｓ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）および有効成分に加えて、当該技術分野で適切であることが知られている担体などの担体を含む同様の製剤を含む。そのような剤形は、薬学的に許容される水性または有機溶媒中の溶液および／または懸濁液、またはそれらの混合物および／または粉末を含む組成物を含む、組成物の吸入または吹送に好適な形態を含む。組成物の経粘膜投与は、任意の粘膜を利用することができるが、通常、鼻、頬、膣および直腸の組織を利用する。組成物の経鼻投与に好適な製剤は、液体形態、たとえば、鼻スプレー、点鼻薬、またはポリマー粒子の水性または油性溶液を含むネブライザーによるエアロゾル投与によって投与することができる。製剤は、たとえば生理食塩水中の水溶液、ベンジルアルコールまたは他の好適な防腐剤、生体利用効率を高めるための吸収促進剤、フルオロカーボン、および／または当技術分野で既知の他の可溶化剤または分散剤を使用する溶液、として調製することができる。
【０４２６】
組成物の頬側または舌下投与に好適な剤形の例は、ロゼンジ、錠剤等を含む。組成物の眼投与に適した剤形の例は、薬学的に許容される水性または有機溶媒中の溶液および／または懸濁液を含む挿入物および／または組成物を含む。
【０４２７】
組成物の製剤の例は、たとえば、Ｓｗｅｅｔｍａｎ，  Ｓ．Ｃ．  （Ｅｄ．）．  Ｍａｒｔｉｎｄａｌｅ．  Ｔｈｅ  Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ，  ３３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｃｈｉｃａｇｏ，  ２００２，  ２４８３  ｐｐ．；  Ａｕｌｔｏｎ，  Ｍ．Ｅ．  （Ｅｄ．）  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ．  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍ  Ｄｅｓｉｇｎ．  Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ  Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ，  Ｅｄｉｎｂｕｒｇｈ，  ２０００，  ７３４  ｐｐ．；  ａｎｄ，  Ａｎｓｅｌ，  Ｈ．Ｃ，  Ａｌｌｅｎ，  Ｌ．Ｖ．  ａｎｄ  Ｐｏｐｏｖｉｃｈ，  Ｎ．Ｇ．  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  ７ｔｈ  Ｅｄ．，  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  １９９９，  ６７６  ｐｐに見られる。薬物送達システムの製造において使用される賦形剤は、たとえば、Ｋｉｂｂｅ，  Ｅ．Ｈ．  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，  ３ｒｄ  Ｅｄ．，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，  ２０００，  ６６５  ｐｐを含む当業者に既知の様々な出版物に記載されている。米国薬局方もまた、錠剤またはカプセル剤として製剤化されたものを含む、改変放出（ｍｏｄｉｆｉｅｄ−ｒｅｌｅａｓｅ）経口剤形の例を提供する。たとえば、持続放出および遅延放出の錠剤およびカプセル剤の薬物放出能力を決定するための特定の試験についても説明する、Ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ  ２３／Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ  １８，  Ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ  Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ，  Ｉｎｃ．，  Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ  ＭＤ，  １９９５  （以降「ＵＳＰ」）を参照のこと。持続放出および遅延放出の物品の薬物放出に関するＵＳＰ試験は、経過した試験時間に対する投薬単位からの薬物溶出に基づく。様々な試験装置および手順の説明がＵＳＰにある。持続放出剤形の分析に関するさらなるガイダンスは、Ｆ．Ｄ．Ａ．（食品医薬品局）によって提供されている（Ｇｕｉｄａｎｃｅ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ．  Ｅｘｔｅｎｄｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｒａｌ  ｄｏｓａｇｅ  ｆｏｒｍｓ：  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ，  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ／ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｓ．  Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，  ＭＤ：  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，  １９９７を参照のこと）。
【０４２８】
本明細書に記載の剤形は、治療される対象の単位用量としての使用に好適な物理的に別個の単位の形態であってもよく、各単位は、所望の治療効果を生じるように計算された所定量の活性物質を含む。
【０４２９】
医薬組成物中の有効成分の投与量レベルは、特定の患者、組成物、および投与様式に対して、患者に毒性がなく、所望の治療効果を達成するのに有効な有効成分の量（有効量）を提供するように変更してもよい。
【０４３０】
選択された投与量レベルは、使用される特定の組成物の活性、投与経路、投与時間、使用される特定のペプチド複合体の排泄速度、他の薬物、化合物および／または使用される特定の組成物と組み合わせて使用される物質、年齢、性別、体重、状態、全体的な健康状態および治療される患者の以前の病歴、および医療分野で周知の要因等に依存する。一般に、一日の量またはレジメンは、体重１キログラム（ｋｇ）あたりＣＧＲＰペプチド約１〜約１０，０００マイクログラム（μｇ）、好ましくは体重１キログラムあたり約１〜約５０００  μｇ、最も好ましくは体重１キログラムあたり約１〜約１０００  μｇであるべきである。
【０４３１】
キット
本発明はまた、本発明のペプチド複合体；および使用説明書を含むキットを提供する。
【０４３２】
ペプチド複合体は、典型的には医薬組成物の形態であり、容器内に含まれる。使用説明書は、ペプチド複合体が投与される治療方法を説明していてもよい。様々な実施形態では、使用説明書は、本明細書に示される疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）および疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法を説明する。
【０４３３】
容器は、医薬組成物を保持できる任意の容器、または他の密封された、または密封可能な装置であってもよい。例は、ボトル、アンプル、分画またはマルチチャンバーホルダーボトルを含み、ここで各分画またはチャンバーは、上記組成物の単一用量を含み、各分画が上記組成物の単一用量を含む分画ホイルパケット、または単一用量を分配するディスペンサーを含む。容器は、任意の従来の形状または形態であってもよく、薬学的に許容される材料、たとえば、紙または段ボール箱、ガラスまたはプラスチックのボトルまたはジャー、再密封可能なバッグ、または治療スケジュールに従ってパックから個々の量を取り出すブリスターパックでできている。使用される容器は、典型的には、含まれる剤形に依存する。単一剤形の場合、複数の容器を単一のパッケージで一緒に使用することができる。
【０４３４】
キットはまた、医薬組成物の単位用量を投与または測定するための装置を含んでもよい。装置は、たとえば、組成物が吸入可能な組成物である場合、吸入器を含んでもよい；組成物が注射可能な組成物である場合、注射器および針を含んでもよい；組成物が経口液体組成物である場合、注射器、スプーン、ポンプ、または容量マーキングのある、またはない容器であってもよい；または、キットに含まれる組成物の投与製剤に適した任意の他の測定または送達装置であってもよい。
【０４３５】
様々な実施形態では、キットは、たとえば別個の容器（ｖｅｓｓｅｌ）または容器（ｃｏｎｔａｉｎｅｒ）中に、一つまたは複数の追加の治療薬を、典型的には追加の治療薬および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物の形態で含んでもよい。
【０４３６】
以下の非限定的な実施例は、本発明を例示するために提供され、決してその範囲を限定するものではない。
【実施例】
【０４３７】
実施例１
本実施例は、本発明のペプチド複合体の調製のための方法を説明する。
【０４３８】
１．  概論
すべての溶媒と試薬は商業的供給元から購入し、それ以上精製せずに使用した。逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）用の溶媒は、ＨＰＬＣグレードとして購入した。Ｏ−（６−クロロベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＣＴＵ）、４−［（Ｒ，Ｓ）−α−［１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）］メトキシカルボニルアミノ］−２，４−ジメトキシ］フェノキシ酢酸（Ｆｍｏｃ−Ｒｉｎｋアミドリンカー）。Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳおよび他の反応は、無水溶媒を使用せずに空気雰囲気下で行われた。Ｆｍｏｃ−アミノ酸は、ＧＬ  Ｂｉｏｃｈｅｍ（上海、中国）から購入し、次の側鎖保護を備えている：Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ  （Ｔｒｔ＝トリチル）、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｍｍｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ｔＢｕ）−ＯＨ  （ｔＢｕ＝ｔｅｒｔ−ブチル）、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ  （Ｂｏｃ＝tert-ブチルオキシカルボニル）、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ。Ａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌ−ＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ（登録商標）は、ＰＣＡＳ  ＢｉｏＭａｔｒｉｘ  Ｉｎｃ．（ケベック、カナダ）から購入した。ギ酸、無水酢酸（Ａｃ2Ｏ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、ピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン（ＮＭＭ）、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）、トリイソプロピルシラン（ＴＩＳ）、６−クロロ−１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（６−Ｃｌ−ＨＯＢｔ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、ジエチルエーテル（Ｅｔ2Ｏ）、クロロホルム（ＣＨＣｌ3）、重水素化クロロホルム（ＣＤＣｌ3）、２，２−ジメトキシ−２−フェニルアセトフェノン（ＤＭＰＡ）、ｔｅｒｔ−ブチルチオール（ｔＢｕＳＨ）、パルミチン酸ビニル、およびデカン酸ビニルはＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（セントルイス、ミズーリ州）から購入した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（合成グレード）およびアセトニトリル（ＭｅＣＮ）（ＨＰＬＣグレード）は、Ｓｃｈａｒｌａｕ（バルセロナ、スペイン）から購入した。トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）はＨａｌｏｃａｒｂｏｎ（Ｒｉｖｅｒ  Ｅｄｇｅ、ニュージャージー）から購入した。ジクロロメタン（ＤＣＭ）は、ＥＣＰ  ｌｉｍｉｔｅｄ（オークランド、ニュージーランド）から購入した。ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）は、Ｒｏｍｉｌ  Ｌｉｍｉｔｅｄ（ケンブリッジ、イギリス）から購入した。酢酸エチルおよび石油エーテルは、Ｂｕｒｄｉｃｋ  ＆  Ｊａｃｋｓｏｎ（登録商標）（マスキーゴン、ミシガン州）から購入した。塩酸グアニジウム（ＧｎＨＣｌ）は、ＭＰ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ（サンタアナ、カリフォルニア州）から購入した。
【０４３９】
２．  精製および解析の基本手順
分析的逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）を、Ｚｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  Ｐｌｕｓ  Ｃ１８  ９５  Å、２．１  ｍｍ×５０  ｍｍ；１．８  μｍ  （０．２  ｍＬ／分）、ＸＴｅｒｒａ（登録商標）  ＭＳ−Ｃ１８  １１０  Å  ５  μｍ；４．６×１５０  ｍｍ  （１．０  ｍＬ／分）、またはＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ１８  １１０  Å、１０．０  ｍｍ×２５０  ｍｍ；５  μｍ  （５．０  ｍＬ／分）のいずれかをカラムとして４チャネルＵＶ検出器を装備し、指定された直線勾配を用いるＤｉｏｎｅｘ  ＵｌｔｉＭａｔｅ（登録商標）３０００で行い、ここで溶媒Ａは水（Ｈ2Ｏ）中の０．１％  ＴＦＡであり、ＢはＭｅＣＮ中の０．１％  ＴＦＡであった。
【０４４０】
ペプチドの質量は、カラムＡｇｉｌｅｎｔ  Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３、  ３．０  ｍｍ×１５０  ｍｍ；５  μｍ  （０．３  ｍＬ／分）を使用し、ＥＳＩをポジティブモードで使用し、そして指定された直線勾配を使用したＨＰ  Ｓｅｒｉｅｓ  １１００  ＭＳＤ  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒに接続されたＡｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  １１２０  Ｃｏｍｐａｃｔ  ＬＣで行われた分析的液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣＭＳ）によって確認された。ここで溶媒ＡはＨ2Ｏ中の０．１％ギ酸であり、ＢはＭｅＣＮ中の０．１％ギ酸であった。
セミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣは、Ｄｉｏｎｅｘ  ＵｌｔｉＭａｔｅ（登録商標）３０００またはＷａｔｅｒｓ  ６００Ｅ  ＳｙｓｔｅｍのいずれかとカラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ18  １１０  Å、１０．０  ｍｍ×２５０  ｍｍ；５  μｍ（指定されている場合、５  ｍＬ／分または３  ｍＬ／分）を備えたＷａｔｅｒｓ  ２４８７  ｄｕａｌ  ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ  ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ  ｄｅｔｅｃｔｏｒを使用して行った。（Ａ）０．１％  ＴＦＡ／Ｈ2Ｏおよび（Ｂ）０．１％  ＴＦＡ／ＭｅＣＮの直線勾配を、２１０  ｎｍでのＵＶ−Ｖｉｓ検出で使用した。セミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣクロマトグラムに使用される勾配系は、分析ＲＰ−ＨＰＬＣクロマトグラムから得られた溶出およびピークプロファイルに従って調整され、実験手順のセクションで明示されている。
【０４４１】
分析用薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ  Ｆ254  ２００  μｍ  （Ｍｅｒｃｋ）シリカプレートを使用して行った。次に、化合物を紫外蛍光によって可視化した。カラムクロマトグラフィーは、Ｇｒａｃｅ  Ｄａｖｉｓｏｎ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、  Ｄａｖａｓｉｌ  ＬＣ６０Ａ  ４０−６３  Ｍｉｃｒｏｎ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ  Ｓｉｌｉｃａ  Ｍｅｄｉａを用いて、示された溶出液で行った。
【０４４２】
核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルを１Ｈ核では４００  ＭＨｚ、１３Ｃ核では１００  ＭＨｚで動作するＢｒｕｋｅｒ  ＡＶＡＮＣＥ  ４００  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒに表示の通り、記録した。すべての化学シフトは、テトラメチルシラン（ＴＭＳ）からのδスケールで１００万分の１（ｐｐｍ）で報告され、残留溶媒ピーク（ＣＤＣｌ3：1Ｈ  ＮＭＲの場合はδ＝７．２６  ｐｐｍ、１３Ｃ  ＮＭＲの場合はδ＝７７．０  ｐｐｍ）が参照された。結合定数（Ｊ）はヘルツ（Ｈｚ）単位である。1Ｈ  ＮＭＲシフト値は、化学シフトδ、多重度（ｓ＝一重項、ｄ＝二重項、ｔ＝三重項、ｑ＝四重項、ｍ＝多重項、ｄｄ＝二重項の二重項、ｔｄ＝二重項の三重項、ｑｄ＝四重項の二重項）、結合定数（Ｈｚ単位のＪ）、相対積分、および帰属（ａｓｓｉｇｎｍｅｎｔ）として報告される。13Ｃ  ＮＭＲ値は、化学シフトδ、ハイブリダイゼーションおよび帰属の程度として報告される。
【０４４３】
３．  ペプチド合成の基本手順
ペプチドは、室温でＴｒｉｂｕｔｅ（商標）  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒまたはＰＳ３（商標）  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用するか、Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  ＋  Ａｌｓｔｒａ（商標）  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用して、自動化された９−フルオレニルメトキシカルボニル固相ペプチド合成（Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳ）によって合成された。成長するペプチド鎖の凝集を減らすために、Ｌｅｕ16−Ｓｅｒ17の代わりに、シュードプロリンジペプチド、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ［ψ(Me,Me)Ｐｒｏ］−ＯＨ  １．６が導入された。このシュードプロリンは、以下のスキーム１に示すように、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）とのレジン開裂時に未変性のＬｅｕ16−Ｓｅｒ17に変換される。
【０４４４】
【化９】
2021501784.tif 000010
スキーム１：ＴＦＡでの１．６のＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−ＯＨへの変換
【０４４５】
３．１  Ｆｍｏｃ−Ｒｉｎｋアミド―ＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ（登録商標）レジンの合成
Ｆｍｏｃ−Ｒｉｎｋアミドリンカーを備えたＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ（登録商標）レジンをペプチド合成の固体担体として使用した。Ｆｍｏｃ−Ｒｉｎｋアミドリンカー（２７０  ｍｇ、０．５  ｍｍｏｌ）を６−Ｃｌ−ＨＯＢｔ（８４．８  ｍｇ、０．５  ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（７７．４  μＬ、０．５  ｍｍｏｌ）を使用して、ＤＭＦ（２  ｍＬ）中で室温で２時間、アミノメチル−ＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ（登録商標）レジンにカップリングした。
【０４４６】
【化１０】
2021501784.tif 000011
【０４４７】
３．２  自動化されたＦｍｏｃ−ＳＰＰＳ
ＰＳ３（商標）  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用して、すべてのアミノ酸カップリングを単一のカップリングサイクルとして実行した。保護アミノ酸を、Ｆｍｏｃ保護アミノ酸（Ｆｍｏｃ−ＡＡ―ＯＨ）（０．５  Ｍ、０．５  ｍｍｏｌ）、ＨＣＴＵ（０．２３  Ｍ、０．４５  ｍｍｏｌ）、およびＮＭＭ（２．０  Ｍ、１．０  ｍｍｏｌ）を使用して、室温（ｒｔ）で２０分間取り込んだ。Ｆｍｏｃ脱保護は、２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液を使用して実行した（２×５分）。
【０４４８】
Ｔｒｉｂｕｔｅ（商標）  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用して、すべてのアミノ酸カップリングを単一のカップリングサイクルとして実行した。保護アミノ酸を、Ｆｍｏｃ−ＡＡ―ＯＨ（０．５  Ｍ、０．５  ｍｍｏｌ）、ＨＣＴＵ（０．２３  Ｍ、０．４５  ｍｍｏｌ）、およびＮＭＭ（２．０  Ｍ、１．０  ｍｍｏｌ）を使用して、室温で２０分間取り込んだ。Ｆｍｏｃ脱保護は、２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液を使用して実行した（２×５分）。
【０４４９】
Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  ＋  Ａｌｓｔｒａ（商標）  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用して、すべてのアミノ酸カップリングを単一のカップリングサイクルとして実行した。保護アミノ酸を、Ｆｍｏｃ−ＡＡ―ＯＨ（０．５  Ｍ、０．５  ｍｍｏｌ）、ＨＣＴＵ（０．５  Ｍ、０．４５  ｍｍｏｌ）、およびＮＭＭ（２．０  Ｍ、１．０  ｍｍｏｌ）を使用して、７５℃で５分間取り込んだ。Ｎ末端キャッピングは、２０％Ａｃ2ＯおよびＮＭＭ（２．０  Ｍ、０．１  ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（ｖ／ｖ）溶液を使用して、５分間、４回または５回のカップリングごとに実験手順で指定された場所で行った。Ｆｍｏｃ脱保護は、２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液を使用して実行した（２×５分）。
【０４５０】
ペプチドをトリフルオロ酢酸／トリイソプロピルシラン／水（ＴＦＡ／ＴＩＰＳ／Ｈ2Ｏ）（９５／２．５／２．５  ｖ／ｖ；５  ｍＬ）を用いて、ＣＥＭ（登録商標）  Ｄｉｓｃｏｖｅｒ  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ  ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで室温で２時間または３０℃で２０分間処理することによってレジンから切断した。粗ペプチドを沈殿させ、冷ジエチルエーテル（２×３０  ｍＬ）で粉砕し、分離（遠心分離）し、Ｎ2の弱い気流（ｌｉｇｈｔ  ｓｔｒｅａｍ）の下で濃縮し、その後０．１％  ＴＦＡを含むＨ2Ｏ／ＭｅＣＮ（１：１、３０  ｍＬ）で溶解し、凍結乾燥した。
【０４５１】
４．  パルミトイル化されたビルディングブロック  １．１の固相カップリングの基本手順
自動化されたＦｍｏｃ−ＳＰＰＳによって合成された脂質化ペプチドは、パルミトイル化ビルディングブロックの手動カップリング；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｓ−Ｐａｍ）−ＯＨ  １．１、またはＢｉｏｔａｇｅ（登録商標）  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  ＋  Ａｌｓｔｒａ（商標）  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを用いた自動カップリングのいずれかを利用した。
【０４５２】
保護アミノ酸１．１の手動カップリングは、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｓ−Ｐａｍ）―ＯＨ  １．１（０．０３  Ｍ、０．１  ｍｍｏｌ）、ＨＣＴＵ（２．３  Ｍ、０．０９  ｍｍｏｌ）、およびＮＭＭ（２．０  Ｍ、０．５  ｍｍｏｌ）を使用して、室温で１時間、単一のカップリングサイクルとして実行した。Ｆｍｏｃ脱保護は、２０％ピペリジンのＤＭＦ（ｖ／ｖ）溶液を使用して実行した（２×５分）。ペプチド配列の残りのアミノ酸は、ペプチド合成の基本手順で概説されている自動化Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳを使用してカップリングした（上記のセクション３を参照）。
【０４５３】
１．１の自動化カップリングには、Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  ＋  Ａｌｓｔｒａ（商標）  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを用いた。保護アミノ酸１．１のカップリングは、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｓ−Ｐａｍ）―ＯＨ  １．１（０．０３  Ｍ、０．１  ｍｍｏｌ）、ＨＣＴＵ（２．３  Ｍ、０．０９  ｍｍｏｌ）、およびＮＭＭ（２．０  Ｍ、０．５  ｍｍｏｌ）を使用して、７５℃で２０分間、単一のカップリングサイクルとして実行した。ペプチド配列の残りのアミノ酸は、ペプチド合成の基本手順で概説されている自動化Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳを使用してカップリングした（上記のセクション３を参照）。
【０４５４】
５．  システインアナログＡ１〜Ａ３およびＢの合成
５．１  Ｖ８Ｃ  ＣＧＲＰ8-37  Ａ１［配列番号：８０］の合成
【０４５５】
【化１１】
2021501784.tif 000012
【０４５６】
Ｔｒｉｂｕｔｅ（商標）  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用した自動化Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳを０．０５  ｍｍｏｌスケールでＶ８Ｃ  ＣＧＲＰ8-37  Ａ１の合成に使用し、続いてペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いてレジン開裂を行い、粗製Ａ１を白色固体（５８．４  ｍｇ、ＬＣＭＳによる６３％の純度に基づく２４％の収率）として得た；保持時間（Ｒt）  １２．４分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  ７８３．２  （［Ｍ＋４Ｈ］4+は７８３．４を要求する）。ＬＣＭＳは、Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜６５％Ｂを２１分（約３％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で室温で行った。ここでＡ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液。
【０４５７】
粗製ペプチドＡ１（１０  ｍｇ）のサンプルを、１５分間で０％Ｂ〜１５％Ｂ（約１％Ｂ／分）、その後３５０分で１５％Ｂ〜４０％Ｂ（約０．１％Ｂ／分）の勾配でＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ18カラムでＤｉｏｎｅｘＵｌｔｉＭａｔｅ（登録商標）３０００を使用してセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。
【０４５８】
分画（２．５  ｍＬ）を０．５分間隔で収集し、ＥＳＩ−ＭＳおよびＲＰ  ＨＰＬＣで分析した。正しいｍ／ｚで同定された分画を合わせ、凍結乾燥して、表題の化合物Ａ１を白色無定形固体（０．９８  ｍｇ、収率１６％、純度９３％）として得た；Ｒt  １４．３分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  ６２７．０（［Ｍ＋５Ｈ］5+は６２６．１を要求する）。ＲＰ−ＨＰＬＣは、ＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＭＳ−Ｃ１８カラム（５  μｍ；４．６×１５０  ｍｍ）を使用して、５〜６５％Ｂを２４分（約２．５％Ｂ／分）で１．０  ｍＬ／分で４５℃で行った。ここでＡ：０．１％ＴＦＡの水溶液、およびＢ：０．１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液。
【０４５９】
５．２  Ｋ２４Ｃ  ＣＧＲＰ8-37  Ａ２［配列番号：８１］の合成
【０４６０】
【化１２】
2021501784.tif 000013
【０４６１】
Ｔｒｉｂｕｔｅ（商標）  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用した自動化Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳを０．０５  ｍｍｏｌスケールでＫ２４Ｃ  ＣＧＲＰ8-37  Ａ２の合成に使用し、続いてペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いてレジン開裂を行い、粗製Ａ２を白色固体（５３．１  ｍｇ、ＬＣＭＳによる６２％の純度に基づく２１％の収率）として得た；Ｒt  １３．７分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  ７７６．０  （［Ｍ＋４Ｈ］4+は７７６．２を要求する）。粗製Ａ２（２５  ｍｇ）のサンプルを、７分間で０％Ｂ〜１４％Ｂ（約２％Ｂ／分）、その後１６０分で１４％Ｂ〜３０％Ｂ（約０．１％Ｂ／分）の勾配でＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ18カラムでＤｉｏｎｅｘＵｌｔｉＭａｔｅ（登録商標）３０００を使用してセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。
【０４６２】
分画（２．５  ｍＬ）を０．５分間隔で収集し、ＥＳＩ−ＭＳおよびＲＰ  ＨＰＬＣで分析した。正しいｍ／ｚで同定された分画を合わせ、凍結乾燥して、表題の化合物Ａ２を白色無定形固体（１．８  ｍｇ、収率１２％、純度９５％を超える）として得た；Ｒt  １３．５分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  ７７６．０（［Ｍ＋４Ｈ］4+は７７６．２を要求する）。ＲＰ−ＨＰＬＣは、Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して、５〜６５％Ｂを２１分（約３％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で室温で行った。ここでＡ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液。
【０４６３】
５．３  Ｋ３５Ｃ  ＣＧＲＰ8-37  Ａ３［配列番号：８２］の合成
【０４６４】
【化１３】
2021501784.tif 000014
【０４６５】
Ｔｒｉｂｕｔｅ（商標）  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用した自動化Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳを０．１  ｍｍｏｌスケールでＫ３５Ｃ  ＣＧＲＰ8-37  Ａ３の合成に使用し、続いてペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いてレジン開裂を行い、粗製Ａ３を白色固体（１１０  ｍｇ、ＬＣＭＳによる７０％の純度に基づく２５％の収率）として得た；Ｒt  １３．６分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  ７７６．０  （［Ｍ＋４Ｈ］4+は７７６．２を要求する）。ＬＣＭＳは、Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜６５％Ｂを２１分（約３％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で室温で行った。ここでＡ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液。
【０４６６】
粗製Ａ３（２５  ｍｇ）のサンプルを、１１分間で０％Ｂ〜２２％Ｂ（約２％Ｂ／分）、その後１３０分で２２％Ｂ〜３５％Ｂ（約０．１％Ｂ／分）の勾配でＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ18カラムでＤｉｏｎｅｘＵｌｔｉＭａｔｅ（登録商標）３０００を使用してセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。
【０４６７】
分画（２．５  ｍＬ）を０．５分間隔で収集し、ＥＳＩ−ＭＳおよびＲＰ  ＨＰＬＣで分析した。正しいｍ／ｚで同定された分画を合わせ、凍結乾燥して、表題の化合物Ａ３を白色無定形固体（７．９  ｍｇ、収率４５％、純度９５％）として得た；Ｒt  １２．２分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  ７７６．１（［Ｍ＋４Ｈ］4+は７７６．２を要求する）。ＲＰ−ＨＰＬＣは、ＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＭＳ−Ｃ１８カラム（５  μｍ；４．６×１５０  ｍｍ）を使用して、５〜６５％Ｂを２４分（約２．５％Ｂ／分）で１．０  ｍＬ／分で４５℃で行った。ここでＡ：０．１％ＴＦＡの水溶液、およびＢ：０．１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液。
【０４６８】
５．４  ＣＧＲＰ７−３７  Ｂ［配列番号：７９］の合成
【０４６９】
【化１４】
2021501784.tif 000015
【０４７０】
Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  ＋  Ａｌｓｔｒａ（商標）  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用した自動化Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳを０．０５  ｍｍｏｌスケールでＣＧＲＰ7-37  Ｂの合成に使用し、続いてペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いてレジン開裂を行い、粗製Ｂを白色固体（４９．５３  ｍｇ、ＬＣＭＳによる３１％の純度に基づく１０％の収率）として得た；Ｒt  １１．０分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  ６４６．７  （［Ｍ＋５Ｈ］5+は６４６．８を要求する）。ＬＣＭＳは、Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜６５％Ｂを２１分（約３％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で室温で行った。ここでＡ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液。
【０４７１】
粗製Ｂ（２７  ｍｇ）のサンプルを、１１分間で５％Ｂ〜２２％Ｂ（約１％Ｂ／分）、その後２００分で２２％Ｂ〜４２％Ｂ（約０．１％Ｂ／分）の勾配で４５℃でＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ18カラムでＤｉｏｎｅｘＵｌｔｉＭａｔｅ（登録商標）３０００を使用してセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。
【０４７２】
分画（２．５  ｍＬ）を０．５分間隔で収集し、ＥＳＩ−ＭＳおよびＲＰ  ＨＰＬＣで分析した。正しいｍ／ｚで同定された分画を合わせ、凍結乾燥して、表題の化合物Ｂを白色無定形固体（２．８５  ｍｇ、収率３４％、純度９７％）として得た；Ｒt  １４．３分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  ６４６．６（［Ｍ＋５Ｈ］5+は６４６．８を要求する）。ＲＰ−ＨＰＬＣは、Ｚｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  Ｐｌｕｓ−Ｃ１８カラム（１．８  μｍ；  ２．１×５０  ｍｍ）を使用して、５〜６５％Ｂを３０分（約２％Ｂ／分）で０．２  ｍＬ／分で４５℃で行った。ここでＡ：０．１％ＴＦＡの水溶液、およびＢ：０．１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液。
【０４７３】
６．  ペプチドおよびアミノ酸の液相システイン脂質化
６．１  脂質化条件Ａ
６．１．１  Ｖ８Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ４［配列番号：８０］の調製
【０４７４】
【化１５】
2021501784.tif 000016
【０４７５】
脱気したＮ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）（３２０  μＬ）、２，２−ジメトキシ−２−フェニルアセトフェノン（ＤＭＰＡ）（０．７７  ｍｇ、０．００３  ｍｍｏｌ）、パルミチン酸ビニル（２８  ｍｇ、０．０１  ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルチオール（ｔＢｕＳＨ）（２７  μＬ、０．２４  ｍｍｏｌ）、トリイソプロピルシラン（ＴＩＰＳ）（４９  μＬ、０．２４  ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）（１１  μＬ、０．０６  ｍｍｏｌ）の溶液で完全脱保護ペプチドＡ１（１０  ｍｇ、０．００３  ｍｍｏｌ）を処理した。反応をＵＶ光（３６５  ｎｍ）で４５分間照射した。次に、混合物をＧｎＨＣｌ（Ｈ2Ｏ中６  Ｍ）で希釈した。Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを３４分（約３％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で室温で行う（Ａ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）、ＬＣＭＳによる分析は、ペプチドＡ４（９％変換）の存在を確認した；Ｒt  １７．１分；ＭＳ：ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  ［Ｍ＋３Ｈ］3+ １１３８．４；  ｆｏｕｎｄ  １１３８．１.
【０４７６】
６．１．２  Ｋ２４Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ５［配列番号：８１］の調製
【０４７７】
【化１６】
2021501784.tif 000017
【０４７８】
脱気したＮＭＰ（３２０  μＬ）、ＤＭＰＡ（０．７７  ｍｇ、０．００３  ｍｍｏｌ）、パルミチン酸ビニル（２８  ｍｇ、０．０１  ｍｍｏｌ）、ｔＢｕＳＨ（２７  μＬ、０．２４  ｍｍｏｌ）、ＴＩＰＳ（４９  μＬ、０．２４  ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（１１  μＬ、０．０６  ｍｍｏｌ）の溶液で完全脱保護ペプチドＡ２（１０  ｍｇ、０．００３  ｍｍｏｌ）を処理した。次に、混合物をＧｎＨＣｌ（Ｈ2Ｏ中６  Ｍ）で希釈した。Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを３４分（約３％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で室温で行う（Ａ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）、ＬＣＭＳによる分析は、ペプチドＡ５（１８％変換）の存在を確認した；Ｒt  １８．８分；ＭＳ：ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  ［Ｍ＋４Ｈ］4+ ８４６．８；  ｆｏｕｎｄ  ８４６．７.
【０４７９】
６．１．３  Ｋ３５Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ６［配列番号：８２］の調製
【０４８０】
【化１７】
2021501784.tif 000018
【０４８１】
脱気したＮＭＰ（３２０  μＬ）、ＤＭＰＡ（０．７７  ｍｇ、０．００３  ｍｍｏｌ）、パルミチン酸ビニル（２８  ｍｇ、０．０１  ｍｍｏｌ）、ｔＢｕＳＨ（２７  μＬ、０．２４  ｍｍｏｌ）、ＴＩＰＳ（４９  μＬ、０．２４  ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（１１  μＬ、０．０６  ｍｍｏｌ）の溶液で完全脱保護ペプチドＡ３（１０  ｍｇ、０．００３  ｍｍｏｌ）を処理した。次に、混合物をＧｎＨＣｌ（Ｈ2Ｏ中６  Ｍ）で希釈した。Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを３４分（約３％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で室温で行う（Ａ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）、ＬＣＭＳによる分析は、ペプチドＡ６（１９％変換）の存在を確認した；Ｒt  １９．７分；ＭＳ：ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  ［Ｍ＋４Ｈ］4+ ８４６．８；  ｆｏｕｎｄ  ８４６．５.
【０４８２】
６．２  脂質化条件Ｂ
６．２．１  Ｋ３５Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ６［配列番号：８１］の調製
【０４８３】
【化１８】
2021501784.tif 000019
【０４８４】
脱気したＮＭＰ（３２０  μＬ）、ＤＭＰＡ（０．７７  ｍｇ、０．００３  ｍｍｏｌ）、パルミチン酸ビニル（５６  ｍｇ、０．０２  ｍｍｏｌ）、ｔＢｕＳＨ（２７  μＬ、０．２４  ｍｍｏｌ）、ＴＩＰＳ（４９  μＬ、０．２４  ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（１１  μＬ、０．０６  ｍｍｏｌ）の溶液で完全脱保護ペプチドＡ３（１０  ｍｇ、０．００３  ｍｍｏｌ）を処理した。次に、混合物をＧｎＨＣｌ（Ｈ2Ｏ中６  Ｍ）で希釈した。Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを３４分（約３％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で室温で行う（Ａ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）、ＬＣＭＳによる分析は、ペプチドＡ６（３４％変換）の存在を確認した；Ｒt  １９．７分；ＭＳ：ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  ［Ｍ＋４Ｈ］4+ ８４６．８；  ｆｏｕｎｄ  ８４６．６.
【０４８５】
粗製Ａ６（５  ｍｇ）のサンプルを、ＧｎＨＣｌ（Ｈ2Ｏ中６  Ｍ）に溶解し、３０分間で５％Ｂ〜６５％Ｂ（約４％Ｂ／分）の勾配でＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ18カラムでＤｉｏｎｅｘＵｌｔｉＭａｔｅ（登録商標）３０００を使用してセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。
【０４８６】
分画（１．５  ｍＬ）を０．５分間隔で収集し、ＥＳＩ−ＭＳおよびＲＰ  ＨＰＬＣで分析した。正しいｍ／ｚで同定された分画を合わせ、凍結乾燥して、表題の化合物Ａ６を白色無定形固体（０．２１  ｍｇ、ＬＣＭＳによる純度５９％）として得た；Ｒt  １６．１分；ＭＳ：ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  ［Ｍ＋４Ｈ］4+ ８４６．８；  ｆｏｕｎｄ  ８４６．７.ＬＣＭＳは、Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを２３分（約４．５％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で室温で行った（Ａ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）。
【０４８７】
６．３  脂質化条件Ｃ
６．３．１  Ｋ２４Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ５［配列番号：８１］の調製
【０４８８】
【化１９】
2021501784.tif 000020
【０４８９】
脱気したＮＭＰ（３１０  μＬ）、ＤＭＰＡ（１．５４  ｍｇ、０．００６  ｍｍｏｌ）、パルミチン酸ビニル（５６  ｍｇ、０．０２  ｍｍｏｌ）、ｔＢｕＳＨ（２７  μＬ、０．２４  ｍｍｏｌ）、ＴＩＰＳ（４９  μＬ、０．２４  ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（１１  μＬ、０．０６  ｍｍｏｌ）の溶液で完全脱保護ペプチドＡ２（１０  ｍｇ、０．００３  ｍｍｏｌ）を処理した。次に、混合物をＧｎＨＣｌ（Ｈ2Ｏ中６  Ｍ）で希釈した。Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを３４分（約３％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で室温で行う（Ａ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）、ＬＣＭＳによる分析は、ペプチドＡ５（１８％変換）の存在を確認した；Ｒt  １８．９分；ＭＳ：ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  ［Ｍ＋４Ｈ］4+ ８４６．８；  ｆｏｕｎｄ  ８４６．７.
【０４９０】
６．４  脂質化条件Ｄ
６．４．１  Ｋ２４Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ５［配列番号：８１］の調製
【０４９１】
【化２０】
2021501784.tif 000021
【０４９２】
脱気したＮＭＰ（２９５  μＬ）、ＤＭＰＡ（１．２  ｍｇ、０．００９  ｍｍｏｌ）、パルミチン酸ビニル（５９  ｍｇ、０．４２  ｍｍｏｌ）、ｔＢｕＳＨ（１４  μＬ、０．１２  ｍｍｏｌ）、ＴＩＰＳ（２５  μＬ、０．１２  ｍｍｏｌ）、およびＴＦＡ（５％  ｖ／ｖ）の溶液で完全脱保護ペプチドＡ２（５  ｍｇ、０．００１５  ｍｍｏｌ）を処理した。次に、混合物をＧｎＨＣｌ（Ｈ2Ｏ中６  Ｍ）で希釈した。Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３  Ｚｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  Ｐｌｕｓ−Ｃ１８カラム（１．８  μｍ；  ２．１×５０  ｍｍ）を使用して、５〜９５％Ｂを３５分（約３％Ｂ／分）で０．２  ｍＬ／分で４５℃で行う（Ａ：０．１％ＴＦＡの水溶液、およびＢ：０．１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液）ＲＰ−ＨＰＬＣは、、ペプチドＡ５（３７％変換）の存在を確認した；Ｒt  ２１．５分。
【０４９３】
７．  パルミトイル化アナログＡ４〜Ａ６およびＢ１のビルディングブロック合成
７．１  アミノ酸ビルディングブロック：（Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−アミノ−３−（（２−（パルミトイルオキシ）エチル）チオ）プロパン酸（Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｓ−Ｐａｍ）−ＯＨ）  １．１の合成
【０４９４】
【化２１】
2021501784.tif 000022
【０４９５】
Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ  １．３（２．１  ｇ）をＴＦＡ／ＤＣＭ（ｖ／ｖ、１：１、１５  ｍＬ）の溶液で室温で３時間処理した。次に、ＴＦＡ溶液をＮ2気流下で濃縮し、０．１％ＴＦＡを含むＨ2Ｏ／ＭｅＣＮ（１：１、３０  ｍＬ）で希釈し、凍結乾燥して白色無定形固体１．４（２０６０  ｍｇ、５９％）を得た；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ―ＭＳ）  ３４４．１  （［Ｍ＋Ｈ］+ ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ３４４．１）。固体（５００  ｍｇ、１．３９  ｍｍｏｌ）をパルミチン酸ビニル１．２（６１５  ｍｇ、２．１８  ｍｍｏｌ）およびＤＭＰＡ（３７４  ｍｇ、１．４５  ｍｍｏｌ）を含むＤＣＭ（５  ｍＬ）に溶解し、ＴＬＣが出発原料Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ−ＯＨ  １．４の完全な消費を確認するまで、溶液をＵＶ光（３６５  ｎｍ）で照射した。溶媒を真空下で蒸発させ、粗反応混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、３：２；続いてＭｅＯＨ／ＤＣＭ、５：９５）で精製し、得られた黄色油を凍結乾燥して、表題化合物１．１を淡黄色固体（２５５  ｍｇ、収率８６％）として得た；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ―ＭＳ）  ６２６．４  （［Ｍ＋Ｈ］+ ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ６４６．４）．  ［α］２１Ｄ−  ７．４  （ｃ  ０．０１２  ｉｎ  ＣＨＣｌ3）  （ｌｉｔ.  （Ｅｕｒ.  Ｊ.  Ｏｒｇ.  Ｃｈｅｍ. ２０１６,  ２６０８−２６１６）  −８．５  ｃ  ０．３９８，  ＭｅＯＨ）．  1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ；  ＣＤＣｌ3）：  δH  ＝  ７．７６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ２  ×  Ａｒ−Ｈ），  ７．６０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．６  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ２  ×  Ａｒ−Ｈ），  ７．３９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．４  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ２  ×  Ａｒ−Ｈ），  ７．３１  （ｍ，  ２Ｈ，  ２  ×  Ａｒ−Ｈ），  ５．７３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｎ−Ｈ），  ４．６６−４．６５  （ｍ，  １Ｈ，  α−ＣＨ），  ４．４４−４．４１  （ｍ，  ２Ｈ，  Ｆｍｏｃ−ＣＨ2），  ４．２４−４．２０  （ｍ，  ３Ｈ，  Ｆｍｏｃ−ＣＨ  ａｎｄ  Ｈ−４），  ３．１４  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １３．５，  Ｊ  ＝  ４．５，  ６．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  β−ＣＨ2a），  ３．０７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １４．２，  Ｊ  ＝  ５．３，  １Ｈ，  β−ＣＨ2b)，  ２．７８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ６．１  Ｈｚ，  ２Ｈ，  Ｈ−５），  ２．２９  （ｔ，  Ｊ  ＝  １５．２，  ２Ｈ，  Ｈ−５），  １．５８  （ｍ，  ２Ｈ，  Ｈ−６），  １．３１−１．２４  （ｍ，  ２６Ｈ），  ０．８８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．６，  ３Ｈ，  Ｈ−７）  ｐｐｍ．  13Ｃ  ＮＭＲ  （１００  ＭＨｚ；  ＣＤＣｌ3）：  δC  ＝  １７４．９  （Ｃ，  Ｃ＝Ｏ），  １７４．０  （Ｃ，  Ｃ＝Ｏ），  １５５．１  （Ｃ，  ＯＣＯＮＨ），  １４３．８  （ＣＨ，  ＡｒＣＨ），  １４３．８  （ＣＨ，  ＡｒＣＨ），  １４１．４  （ＣＨ，  ＡｒＣＨ），  １２７．９  （ＣＨ，  ＡｒＣＨ），  １２７．１  （ＣＨ，  ＡｒＣＨ），  １２０．１  （ＣＨ，  ＡｒＣＨ），  ６７．５  （ＣＨ2，  Ｆｍｏｃ−ＣＨ2），  ６３．２  （ＣＨ2，  β−ＣＨ2），  ５３．７  （ＣＨ，  α−ＣＨ），  ４７．２  （ＣＨ，  Ｆｍｏｃ−ＣＨ），  ３４．５  （ＣＨ2，  β−ＣＨ2），  ３４．３  （ＣＨ2，  Ｃ−５），  ３２．１  （ＣＨ2），  ３１．４  （ＣＨ2，  Ｃ−３），  ２９．７  （ＣＨ2），  ２９．６  （ＣＨ2），  ２９．５  （ＣＨ2），  ２９．４  （ＣＨ2），  ２９．３  （ＣＨ2），  ２５．０  （ＣＨ2），  ２２．８  （ＣＨ2），  １４．２  （ＣＨ3，  Ｃ−７）  ｐｐｍ。
【０４９６】
分光データおよび旋光度は、以前にＥｕｒ．  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  ２０１６，  ２６０８−２６１６で報告されたものとよく一致していた。
【０４９７】
７．２  Ｖ８Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ４［配列番号：８０］のビルディングブロック合成
【０４９８】
【化２２】
2021501784.tif 000023
【０４９９】
Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  ＋  Ａｌｓｔｒａ（商標）  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用した、自動化されたＦｍｏｃ−ＳＰＰＳをペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を使用して、０．０５  ｍｍｏｌスケールでレジン結合ＣＧＲＰ9-37の合成に使用し、その後、パルミトイル化されたビルディングブロック  １．１の固相カップリングの基本手順（上記のセクション４を参照）で概説した条件を使用して、手動でビルディングブロック１．１とカップリングし、Ｖ８Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ４を得た。次に、ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いてレジン開裂を行い、粗製Ａ４を淡桃色固体（８３．６  ｍｇ、ＬＣＭＳによる５９％の純度に基づく４９％の収率）として得た；Ｒｔ  １７．３分；  ｍ／ｚ  （ＥＳＩ―ＭＳ）  ６８３．３  （［Ｍ＋５Ｈ］5+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ６８３．３）。ＬＣＭＳは、Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを３１分（約３％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で室温で行った（Ａ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）。
【０５００】
粗製Ａ４（４０  ｍｇ）のサンプルを０．０５％  ＴＦＡのＤＭＳＯ／Ｈ2Ｏ（１：１）溶液に溶解し、５０分間で５％Ｂ〜５５％Ｂ（約１％Ｂ／分）、次に１５０分間で５５％Ｂ〜７０％Ｂ（約０．１％Ｂ／分）の勾配でＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ18カラムでＤｉｏｎｅｘＵｌｔｉＭａｔｅ（登録商標）３０００を使用してセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。
【０５０１】
分画（１．５  ｍＬ）を０．５分間隔で収集し、ＥＳＩ−ＭＳおよびＲＰ  ＨＰＬＣで分析した。正しいｍ／ｚで同定された分画を合わせ、凍結乾燥して、表題の化合物Ａ４を白色無定形固体（０．６４  ｍｇ、収率３％、純度９５％を超える）として得た；Ｒt  １８．７分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ―ＭＳ）  ６８３．２  （［Ｍ＋５Ｈ］5+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ６８３．３）。ＲＰ−ＨＰＬＣは、ＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＭＳ−Ｃ１８カラム（５  μｍ；４．６×１５０  ｍｍ）を使用して、５〜９５％Ｂを３０分（約３％Ｂ／分）で１．０  ｍＬ／分で４５℃で行った（Ａ：０．１％ＴＦＡの水溶液、およびＢ：０．１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液）。
【０５０２】
７．３  Ｋ２４Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ５［配列番号：８１］のビルディングブロック合成
【０５０３】
【化２３】
2021501784.tif 000024
【０５０４】
Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  ＋  Ａｌｓｔｒａ（商標）  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用した、自動化されたＦｍｏｃ−ＳＰＰＳをペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を使用して、０．０５  ｍｍｏｌスケールでレジン結合ＣＧＲＰ25-37の合成に使用し、パルミトイル化されたビルディングブロック  １．１の固相カップリングの基本手順（上記のセクション４を参照）で概説した条件を使用して、ビルディングブロック１．１を取り込んだ。ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説しているように、４残基ごとにＡｃ2Ｏキャッピングを行ってペプチド配列の伸長を続け、Ｋ２４Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ５を得た。次に、ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いてレジン開裂を行い、粗製Ａ５を白色固体（８６．９  ｍｇ、ＬＣＭＳによる４０％の純度に基づく２１％の収率）として得た；Ｒｔ  １５．１分；  ｍ／ｚ  （ＥＳＩ―ＭＳ）  ８４６．５  （［Ｍ＋４Ｈ］4+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ８４６．６）。
【０５０５】
粗製Ａ５のサンプル（４０  ｍｇ）を０．０５％  ＴＦＡのＤＭＳＯ／Ｈ2Ｏ（１：１）溶液に溶解し、３２分間で５％Ｂ〜３７％Ｂ（約１％Ｂ／分）、次に３６０分間で３７％Ｂ〜４５％Ｂ（約０．０５％Ｂ／分）の勾配でＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ18カラムでＤｉｏｎｅｘＵｌｔｉＭａｔｅ（登録商標）３０００を使用してセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。
【０５０６】
分画（１．５  ｍＬ）を０．５分間隔で収集し、ＥＳＩ−ＭＳおよびＲＰ  ＨＰＬＣで分析した。正しいｍ／ｚで同定された分画を合わせ、凍結乾燥して、表題の化合物Ａ５を白色無定形固体（１．１１  ｍｇ、収率７％、純度９５％を超える）として得た；Ｒt  １５．３分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ―ＭＳ）  ８４６．５  （［Ｍ＋４Ｈ］4+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ８４６．６）。ＬＣＭＳは、Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを２１分（約４．５％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で室温で行った（Ａ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）。
【０５０７】
７．４  Ｋ３５Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ６［配列番号：８２］のビルディングブロック合成
【０５０８】
【化２４】
2021501784.tif 000025
【０５０９】
Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  ＋  Ａｌｓｔｒａ（商標）  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用した、自動化されたＦｍｏｃ−ＳＰＰＳをペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を使用して、０．０５  ｍｍｏｌスケールでレジン結合ＣＧＲＰ36-37の合成に使用し、パルミトイル化されたビルディングブロック  １．１の固相カップリングの基本手順（上記のセクション４を参照）で概説した条件を使用して、ビルディングブロック１．１を取り込んだ。ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説しているように、５残基ごとにＡｃ2Ｏキャッピングを行ってペプチド配列の伸長を続け、Ｋ３５Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ６を得た。次に、ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いてレジン開裂を行い、粗製Ａ６を白色固体（４３．３  ｍｇ、ＬＣＭＳによる３３％の純度に基づく１４％の収率）として得た；Ｒｔ  １６．１分；  ｍ／ｚ  （ＥＳＩ―ＭＳ）  ８４６．５  （［Ｍ＋４Ｈ］4+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ８４６．６）。
【０５１０】
粗製Ａ６のサンプル（２１  ｍｇ）を０．０５％  ＴＦＡのＤＭＳＯ／Ｈ2Ｏ（１：１）溶液に溶解し、３５分間で５％Ｂ〜４０％Ｂ（約１％Ｂ／分）、次に２００分間で４０％Ｂ〜５０％Ｂ（約０．０５％Ｂ／分）の勾配でＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ18カラムでＤｉｏｎｅｘＵｌｔｉＭａｔｅ（登録商標）３０００を使用してセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。
【０５１１】
分画（２  ｍＬ）を０．５分間隔で収集し、ＥＳＩ−ＭＳおよびＲＰ  ＨＰＬＣで分析した。正しいｍ／ｚで同定された分画を合わせ、凍結乾燥して、表題の化合物Ａ６を白色無定形固体（０．６０  ｍｇ、収率９％、純度９５％）として得た；Ｒt  １６．０分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ―ＭＳ）  ８４６．６  （［Ｍ＋４Ｈ］4+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ８４６．６）。ＬＣＭＳは、Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを２１分（約４．５％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で室温で行った（Ａ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）。
【０５１２】
７．５  ７Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  ＣＧＲＰ7-37  Ｂ１［配列番号：７９］のビルディングブロック合成
【０５１３】
【化２５】
2021501784.tif 000026
【０５１４】
Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  ＋  Ａｌｓｔｒａ（商標）  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用した、自動化されたＦｍｏｃ−ＳＰＰＳをペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を使用して、０．０５  ｍｍｏｌスケールでレジン結合ＣＧＲＰ8-37の合成に使用し、次にパルミトイル化されたビルディングブロック  １．１の固相カップリングの基本手順（上記のセクション４を参照）で概説した条件を使用して、手動でビルディングブロック１．１とカップリングし、７Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  ＣＧＲＰ7-37  Ｂ１を得た。次に、ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いてレジン開裂を行い、粗製Ｂ１を白色固体（３８．６  ｍｇ、ＬＣＭＳによる４１％の純度に基づく１６％の収率）として得た；Ｒｔ  １４．３分；  ｍ／ｚ  （ＥＳＩ―ＭＳ）  ７０３．１  （［Ｍ＋５Ｈ］5+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ７０３．２）。ＬＣＭＳは、Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを２１分（約４．５％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で室温で行った（Ａ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）。
【０５１５】
粗製Ｂ１のサンプル（２１  ｍｇ）を０．０５％  ＴＦＡのＤＭＳＯ／Ｈ2Ｏ（１：１）溶液に溶解し、３０分間で５％Ｂ〜３５％Ｂ（約１％Ｂ／分）、次に３００分間で３５％Ｂ〜５０％Ｂ（約０．０５％Ｂ／分）の勾配でＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ18カラムでＤｉｏｎｅｘＵｌｔｉＭａｔｅ（登録商標）３０００を使用してセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。分画（１．５  ｍＬ）を０．５分間隔で収集し、ＥＳＩ−ＭＳおよびＲＰ  ＨＰＬＣで分析した。
【０５１６】
正しいｍ／ｚで同定された分画を合わせ、凍結乾燥して、表題の化合物Ｂ１を白色無定形固体（１．０８  ｍｇ、収率１３％、純度９５％）として得た；Ｒt  ２０．９分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ―ＭＳ）  ７０３．１  （［Ｍ＋４Ｈ］4+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ７０３．２）。ＲＰ−ＨＰＬＣは、ＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＭＳ−Ｃ１８カラム（５  μｍ；４．６×１５０  ｍｍ）を使用して、５〜９５％Ｂを３０分（約３％Ｂ／分）で１．０  ｍＬ／分で４５℃で行った（Ａ：０．１％ＴＦＡの水溶液、およびＢ：０．１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液）。
【０５１７】
８．  ペプチドおよびアミノ酸の固相システイン脂質化
８．１  Ｋ２４Ｃ（Ｓ−Ｄｅｘ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ８の合成
８．１．１  レジン結合Ｋ２４Ｃ（Ｍｍｔ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ２［配列番号：８１］の合成
【０５１８】
【化２６】
2021501784.tif 000027
【０５１９】
Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  ＋  Ａｌｓｔｒａ（商標）  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用した自動化Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳを０．０５  ｍｍｏｌスケールで、ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いて、レジン結合Ｋ２４Ｃ（Ｍｍｔ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ２の合成に使用した。レジン結合ペプチドの少量のビーズを、ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いて切断し、粗製Ａ２を白色固体（ＬＣＭＳによる４８％の純度）として得た；Ｒt  １１．４分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  １０３４．３  （［Ｍ＋３Ｈ］3+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  １０３４．５）。ＬＣＭＳは、Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを２３分（約４．５％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で室温で行った。ここでＡ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液。
【０５２０】
８．１．２  手順Ａ：レジン結合Ａ２からＫ２４Ｃ（Ｓ−Ｄｅｃ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ８［配列番号：８１］およびビスデカノエート生成物Ａ１０への脂質化
【０５２１】
【化２７】
2021501784.tif 000028
【０５２２】
レジン結合ペプチドＡ２（２０  ｍｇ、約０．００６  ｍｍｏｌのペプチドを含む）を、ＤＣＭ中の５％ＴＦＡおよび５％ＴＩＰＳ（ｖ／ｖ）で繰り返し処理して、モノメトキシトリチル（Ｍｍｔ）を除去した。次に、半脱保護されたレジン結合ペプチドを、脱気したＮＭＰ（３８１  μＬ）、ＤＭＰＡ（７．７  ｍｇ、０．０３  ｍｍｏｌ）、デカン酸ビニル  １．５（９４  μＬ、１．３９  ｍｍｏｌ）、およびＴＦＡ（２５  μＬ、５％  ｖ／ｖ）の溶液で処理した。反応をＵＶ光（３６５  ｎｍ）で１時間照射した。ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いて少量のレジン結合ペプチドを切断し、粗製Ａ８を白色固体として得た。Ｚｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  Ｐｌｕｓ−Ｃ１８カラム（１．８  μｍ；  ２．１×５０  ｍｍ）を使用して、５〜９５％Ｂを３５分（約３％Ｂ／分）で０．２  ｍＬ／分で４５℃で行ったＲＰ−ＨＰＬＣによる分析（ここでＡ：０．１％ＴＦＡの水溶液、およびＢ：０．１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液）でペプチドＡ８の存在を確認した；Ｒｔ  １８．３分（３５％変換；Ｒｔ  ２２．５分で６７％モノ−Ｓ−パルミトイル化生成物、３３％ビスデカノエート生成物 Ａ１０；  ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  ６９９．０  （［Ｍ＋５Ｈ］5+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ７００．９）。
【０５２３】
８．１．３  手順Ｂ：レジン結合Ａ２からＫ２４Ｃ（Ｓ−Ｄｅｃ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ８への脂質化
【０５２４】
レジン結合ペプチドＡ２（２０  ｍｇ、約０．００６  ｍｍｏｌのペプチドを含む）を、ＤＣＭ中の５％ＴＦＡおよび５％ＴＩＰＳ（ｖ／ｖ）で繰り返し処理して、Ｍｍｔを除去した。次に、半脱保護されたレジン結合ペプチドを、脱気したＮＭＰ（２２０  μＬ）、ＤＭＰＡ（３．０８  ｍｇ、０．０１２  ｍｍｏｌ）、デカン酸ビニル  １．５（１００  μＬ、０．４５  ｍｍｏｌ）、ｔＢＵＳＨ（５４  μＬ、０．４８  ｍｍｏｌ）、ＴＩＰＳ（９９  μＬ、０．４８  ｍｍｏｌ）、およびＴＦＡ（２５  μＬ、５  ｖ／ｖ％）の溶液で処理し、反応をＵＶ光（３６５  ｎｍ）で１時間照射した。ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いて少量のレジン結合ペプチドを切断し、粗製Ａ８を白色固体として得た。Ｚｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  Ｐｌｕｓ−Ｃ１８カラム（１．８  μｍ；  ２．１×５０  ｍｍ）を使用して、５〜６５％Ｂを２４分（約３％Ｂ／分）で０．２  ｍＬ／分で４５℃で行ったＲＰ−ＨＰＬＣによる分析（ここでＡ：０．１％ＴＦＡの水溶液、およびＢ：０．１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液）でペプチドＡ８の存在を確認した；Ｒｔ  １８．４分；  ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  １１００．３  （［Ｍ＋３Ｈ］3+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  １１００．３）。
【０５２５】
８．２  Ｖ８Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ４の合成
８．２．１  レジン結合Ｖ８Ｃ（Ｍｍｔ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ１［配列番号：８０］の合成
【０５２６】
【化２８】
2021501784.tif 000029
【０５２７】
ＰＳ３（商標）  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用した自動化Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳを０．０５  ｍｍｏｌスケールで、ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いて、レジン結合Ｖ８Ｃ（Ｍｍｔ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ１の合成に使用した。レジン結合ペプチドの少量のビーズを、ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いて切断し、粗製Ａ１を白色固体（ＬＣＭＳによる８４％の純度）として得た；Ｒt  １２．５分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  １０４４．１  （［Ｍ＋３Ｈ］3+；  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  １０４４．２）。ＬＣＭＳは、Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜６５％Ｂを２３分（約３％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で４０℃で行った。ここでＡ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液。
【０５２８】
８．２．２  手順Ａ：レジン結合Ａ１からＶ８Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  ＣＧＲＰ8-37  Ａ４［配列番号：８０］およびビスパルミトイル化生成物Ａ７への脂質化
【０５２９】
【化２９】
2021501784.tif 000030
【０５３０】
レジン結合ペプチドＡ１（２８２  ｍｇ、約０．０４  ｍｍｏｌのペプチドを含む）を、ＤＣＭ中の５％ＴＦＡおよび５％ＴＩＰＳ（ｖ／ｖ）で繰り返し処理して、Ｍｍｔを除去した。次に、半脱保護されたレジン結合ペプチドを、脱気したＮＭＰ（８．１  ｍＬ）、ＤＭＰＡ（５．１  ｍｇ、０．０２  ｍｍｏｌ）、パルミチン酸ビニル（３９３  ｍｇ、１．３９  ｍｍｏｌ）、ｔＢＵＳＨ（３５８  μＬ、３．２  ｍｍｏｌ）、ＴＩＰＳ（６５４  μＬ、３．２  ｍｍｏｌ）、およびＴＦＡ（５００  μＬ、５  ｖ／ｖ％）の溶液で処理し、反応をＵＶ光（３６５  ｎｍ）で１時間照射した。ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いて少量のレジン結合ペプチドを切断し、粗製Ａ４を白色固体として得た。Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを２３分（約４％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で４０℃で行ったＬＣＭＳによる分析（ここでＡ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）で、ペプチドＡ４の存在を確認した；Ｒｔ  １４．０分；  ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  １１３８．４  （［Ｍ＋３Ｈ］3+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  １１３８．４）；（２０％変換、８６％モノ−Ｓ−パルミトイル化生成物、Ｒt  ２０．３分で１４％ビスパルミトイル化生成物Ａ７；  ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  ７３９．９  （［Ｍ＋５Ｈ］5+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ７３９．８））。
【０５３１】
次に、同じペプチジルレジンに対して反応を繰り返した。脱気したＮＭＰ（２．９  ｍＬ）、ＤＭＰＡ（５．１  ｍｇ、０．０２  ｍｍｏｌ）、パルミチン酸ビニル（７８６  ｍｇ、２．８  ｍｍｏｌ）、ｔＢＵＳＨ（３５８  μＬ、３．２  ｍｍｏｌ）、ＴＩＰＳ（６５４  μＬ、３．２  ｍｍｏｌ）、およびＴＦＡ（２５０  μＬ、５  ｖ／ｖ％）の溶液、および反応をＵＶ光（３６５  ｎｍ）で１時間照射した。ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いて少量のレジン結合ペプチドを切断し、粗製Ａ４を白色固体として得た。Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを２３分（約４％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で４０℃で行ったＬＣＭＳによる分析（ここでＡ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）で、ペプチドＡ４の存在を確認した；Ｒｔ  １４．０分；  ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  １１３８．４  （［Ｍ＋３Ｈ］3+；  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  １１３８．４）；（６５％変換、８６％モノ−Ｓ−パルミトイル化生成物、Ｒt  ２０．３分で１４％ビスパルミトイル化生成物Ａ７；  ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  ７３９．９  （［Ｍ＋５Ｈ］5+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ７３９．８））。
【０５３２】
次に、同じペプチジルレジンに対して再度反応を繰り返した。脱気したＮＭＰ（２．９  ｍＬ）、ＤＭＰＡ（１０．２  ｍｇ、０．０４  ｍｍｏｌ）、パルミチン酸ビニル（７８６  ｍｇ、２．８  ｍｍｏｌ）、ｔＢＵＳＨ（３５８  μＬ、３．２  ｍｍｏｌ）、ＴＩＰＳ（６５４  μＬ、３．２  ｍｍｏｌ）、およびＴＦＡ（２５０  μＬ、５  ｖ／ｖ％）の溶液、および反応をＵＶ光（３６５  ｎｍ）で１時間照射した。反応混合物を濾過および洗浄およびレジンの乾燥により除去した後、ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いて少量のレジン結合ペプチドを切断し、粗製Ａ４を白色固体として得た。Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを２３分（約４％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で４０℃で行ったＬＣＭＳによる分析（ここでＡ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）で、ペプチドＡ４の存在を確認した；Ｒｔ  １４．０分；  ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  １１３８．４  （［Ｍ＋３Ｈ］3+；  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  １１３８．４）；（８８％変換、９１％モノ−Ｓ−パルミトイル化生成物、Ｒt  ２０．３分で９％ビスパルミトイル化生成物Ａ７；  ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  ７３９．９  （［Ｍ＋５Ｈ］5+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ７３９．８））。
【０５３３】
同じペプチジルレジンに対して４回目に反応を繰り返した。脱気したＮＭＰ（２．９  ｍＬ）、ＤＭＰＡ（１０．２  ｍｇ、０．０４  ｍｍｏｌ）、パルミチン酸ビニル（７８６  ｍｇ、２．８  ｍｍｏｌ）、ｔＢＵＳＨ（３５８  μＬ、３．２  ｍｍｏｌ）、ＴＩＰＳ（６５４  μＬ、３．２  ｍｍｏｌ）、およびＴＦＡ（２５０  μＬ、５  ｖ／ｖ％）の溶液、および反応をＵＶ光（３６５  ｎｍ）で１時間照射した。反応混合物を濾過および洗浄およびレジンの乾燥により除去した後、ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いてレジン結合ペプチドを完全に切断し、粗製Ａ４を白色固体として得て、次にＴＦＡ（０．１％  ｖ／ｖ）を含むアセトニトリル／Ｈ2Ｏ（１：１  ｖ／ｖ）に溶解した。Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを２３分（約４．５％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で４０℃で行ったＬＣＭＳによる分析（ここでＡ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）で、ペプチドＡ４の存在を確認した（９１％変換、９７％モノ−Ｓ−パルミトイル化生成物；３６．６  ｍｇ、純度５５％に基づく収率２７％）；Ｒt  １３．９；  ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  １１３８．３  （［Ｍ＋３Ｈ］3+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  １１３８．４）。
【０５３４】
粗製Ａ４のサンプル（１５  ｍｇ）をＤＭＳＯに溶解し、３０分間で５％Ｂ〜３５％Ｂ（約１％Ｂ／分）、次に３００分間で３５％Ｂ〜５０％Ｂ（約０．０５％Ｂ／分）の勾配でＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ18カラムでＤｉｏｎｅｘＵｌｔｉＭａｔｅ（登録商標）３０００を使用してセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。分画（１．５  ｍＬ）を０．５分間隔で収集し、ＥＳＩ−ＭＳおよびＲＰ  ＨＰＬＣで分析した。正しいｍ／ｚで同定された分画を合わせ、凍結乾燥して、表題の化合物Ａ４を白色無定形固体（２．４３  ｍｇ、収率３０％、ＬＣＭＳによる純度９７％）として得た；Ｒt  １４．０分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ―ＭＳ）  １１３８．３  （［Ｍ＋４Ｈ］4+  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  １１３８．４）。ＬＣＭＳは、Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを２３分（約４．５％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で４０℃で行った（Ａ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）。
【０５３５】
８．２．３  手順Ｂ：固相システイン脂質化によるＡ４の合成のための代表的手順
レジン結合ペプチドＡ１（２８２  ｍｇ、約０．０４  ｍｍｏｌのペプチドを含む）を、ＤＣＭ中の５％ＴＦＡおよび５％ＴＩＰＳ（ｖ／ｖ）で繰り返し処理して、Ｍｍｔを除去した。次に、半脱保護されたレジン結合ペプチドを、脱気したＤＭＦ（２．８９  ｍＬ）、ＤＭＰＡ（１０．２  ｍｇ、０．０４  ｍｍｏｌ）、パルミチン酸ビニル  １．２（７８６  ｍｇ、２．８  ｍｍｏｌ）、ｔＢＵＳＨ（３５８．５  μＬ、３．２  ｍｍｏｌ）、ＴＩＰＳ（６５４．０  μＬ、３．２  ｍｍｏｌ）、およびＴＦＡ（５００  μＬ、５  ｖ／ｖ％）の溶液で処理し、ペプチドが約０．０１  ｍｏｌＬ-1の濃度で存在するようにした。反応を撹拌しながらＵＶ光（３６５  ｎｍ）で１時間照射した。反応混合物を濾過および洗浄およびレジンの乾燥により除去した後、レジン結合ペプチドをＴＦＡ／ＴＩＰＳ／Ｈ2Ｏ  （９５：２．５：２．５  ｖ／ｖ；  ５  ｍＬ）で室温で２時間処理した。ＴＦＡを窒素流で蒸発させ、ペプチドを氷冷ジエチルエーテルで沈殿させ、遠心分離で分離し、冷ジエチルエーテルで２回洗浄してから、次にＴＦＡ（０．１％  ｖ／ｖ）を含むＭｅＣＮ／Ｈ2Ｏ（１：１  ｖ／ｖ）に溶解した。Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用したＬＣＭＳによる分析で、ペプチドＡ４の存在を確認した（３６．６  ｍｇ、収率２７％、ＬＣＭＳによる純度５５％）。原料のサンプル（１５  ｍｇ）をＤＭＳＯに溶解し、セミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製してＡ４を白色無定形固体（２．４３  ｍｇ、収率３０％、ＬＣＭＳによる純度９７％）として得た；Ｒt  １４．０分；ＭＳ：  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  ［Ｍ＋３Ｈ］3+  １１３８．４；  ｆｏｕｎｄ  １１３８．３。ＬＣＭＳは、Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜９５％Ｂを２３分（約４．５％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で４０℃で行った（ここで、Ａ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）。
【０５３６】
９．  ペプチドＡ８、Ａ１０、およびＣ２の固相システイン脂質化
９．１  Ｒ１１Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  α−ＣＧＲＰ8-37  Ａ９［配列番号：８５］の合成
【０５３７】
【化３０】
2021501784.tif 000031
【０５３８】
Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  ＋  Ａｌｓｔｒａ（商標）  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用した自動化Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳを０．１  ｍｍｏｌスケールで、ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いて、Ｒ１１Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  α−ＣＧＲＰ8-37  Ａ８の合成に使用した。次に、レジン結合ペプチドをＴＦＡ／ＴＩＰＳ／Ｈ2Ｏ  （９５：２．５：２．５  ｖ／ｖ；  ５  ｍＬ）で室温で２時間処理した。ＴＦＡを窒素流で蒸発させ、ペプチドを氷冷ジエチルエーテルで沈殿させ、遠心分離で分離し、冷ジエチルエーテルで２回洗浄してから、次にＴＦＡ（０．１％  ｖ／ｖ）を含むＭｅＣＮ／Ｈ2Ｏ（１：１  ｖ／ｖ）に溶解し、凍結乾燥した。原料Ａ８を、さらに精製せずに、次の工程に使用した（４６．１  ｍｇ、ＬＣＭＳによる粗純度５５％；Ｒｔ  １２．１７分（流速１．０  ｍＬ／分、および５〜９５％Ｂを３０分間で直線勾配で、約３％Ｂ／分、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＭＳ  Ｃ１８カラム（５  μｍ；４．６×１５０  ｍｍ））；  ＭＳ：  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  ［Ｍ＋３Ｈ］3+  １０２５．１９；  ｆｏｕｎｄ  １０２４．９。次に、粗ペプチドを上記のセクション６の脂質化手順Ｄと類似の方法によってパルミトイル化し、セミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製してＲ１１Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  α−ＣＧＲＰ8-37  Ａ９を白色無定形固体（１８．５７  ｍｇ、ＲＰ−ＨＰＬＣによる純度９９％超）として得た；Ｒt  ４５．９４分（流速１．０  ｍＬ／分、および５〜９５％Ｂを９０分間で直線勾配で、約１％Ｂ／分、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＭＳ  Ｃ１８カラム（５  μｍ；４．６×１５０  ｍｍ））；  ＭＳ：  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  ［Ｍ＋３Ｈ］3+  １１１９．３５８；  ｆｏｕｎｄ  １１１８．９。バッファーＡ：０．１％ＴＦＡの水溶液（ｖ／ｖ）；バッファーＢ：０．１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液（ｖ／ｖ）。
【０５３９】
９．２  Ｒ１１Ｃ（Ｐａｍ）、Ｋ２４Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  α−ＣＧＲＰ8-37  Ａ１１［配列番号：９９］の合成
【０５４０】
【化３１】
2021501784.tif 000032
【０５４１】
Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  ＋  Ａｌｓｔｒａ（商標）  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用した自動化Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳを０．１  ｍｍｏｌスケールで、ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いて、Ｒ１１Ｃ  α−ＣＧＲＰ8-37  Ａ１０の合成に使用した。次に、レジン結合ペプチドをＴＦＡ／ＴＩＰＳ／Ｈ2Ｏ  （９５：２．５：２．５  ｖ／ｖ；  ５  ｍＬ）で室温で２時間処理した。ＴＦＡを窒素流で蒸発させ、ペプチドを氷冷ジエチルエーテルで沈殿させ、遠心分離で分離し、冷ジエチルエーテルで２回洗浄してから、次にＴＦＡ（０．１％  ｖ／ｖ）を含むＭｅＣＮ／Ｈ2Ｏ（１：１  ｖ／ｖ）に溶解し、凍結乾燥した。原料Ａ１０を、さらに精製せずに、次の工程に使用した（６１  ｍｇ、ＬＣＭＳによる粗純度７０％）；Ｒｔ  １２．６５分（流速１．０  ｍＬ／分、および５〜９５％Ｂを３０分間で直線勾配で、約３％Ｂ／分、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＭＳ  Ｃ１８カラム（５  μｍ；４．６×１５０  ｍｍ））；  ＭＳ：  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  ［Ｍ＋３Ｈ］3+  １０１６．８５；  ｆｏｕｎｄ  １０１６．４。次に、粗ペプチドを上記のセクション６の脂質化手順Ｄと類似の方法によってパルミトイル化し、セミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製してＲ１１Ｃ（Ｐａｍ）、Ｋ２４Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  α−ＣＧＲＰ8-37  Ａ１１を白色無定形固体（９．０７  ｍｇ、ＲＰ−ＨＰＬＣによる純度９９％超）として得た；Ｒt  ７０．５５分（流速１．０  ｍＬ／分、および５〜９５％Ｂを９０分間で直線勾配で、約１％Ｂ／分、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＭＳ  Ｃ１８カラム（５  μｍ；４．６×１５０  ｍｍ））；  ＭＳ：  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  ［Ｍ＋３Ｈ］3+  １２０５．１７４；  ｆｏｕｎｄ  １２０４．８。バッファーＡ：０．１％ＴＦＡの水溶液（ｖ／ｖ）；バッファーＢ：０．１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液（ｖ／ｖ）。
【０５４２】
９．３  Ｖ８Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  β−ＣＧＲＰ8-37  Ｃ３［配列番号：８８］の合成
【０５４３】
【化３２】
2021501784.tif 000033
【０５４４】
Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  ＋  Ａｌｓｔｒａ（商標）  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用した自動化Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳを０．１  ｍｍｏｌスケールで、ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いて、Ｖ８Ｃ  β−ＣＧＲＰ8-37  Ｃ２の合成に使用した。次に、レジン結合ペプチドをＴＦＡ／ＴＩＰＳ／Ｈ2Ｏ  （９５：２．５：２．５  ｖ／ｖ；  ５  ｍＬ）で室温で２時間処理した。ＴＦＡを窒素流で蒸発させ、ペプチドを氷冷ジエチルエーテルで沈殿させ、遠心分離で分離し、冷ジエチルエーテルで２回洗浄してから、次にＴＦＡ（０．１％  ｖ／ｖ）を含むＭｅＣＮ／Ｈ2Ｏ（１：１  ｖ／ｖ）に溶解し、凍結乾燥した。原料Ｃ２を、さらに精製せずに、次の工程に使用した（４６．９５  ｍｇ、ＬＣＭＳによる粗純度６２％）；Ｒｔ  １１．５５分（流速１．０  ｍＬ／分、および９５％Ｂを３０分間で直線勾配で、約３％Ｂ／分、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＭＳ  Ｃ１８カラム（５  μｍ；４．６×１５０  ｍｍ））；  ＭＳ：  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  ［Ｍ＋３Ｈ］3+  １０４５．８９；  ｆｏｕｎｄ  １０４５．６。次に、粗ペプチドを上記のセクション６の脂質化手順Ｄと類似の方法によってパルミトイル化し、セミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製してＶ８Ｃ（Ｓ−Ｐａｍ）  β−ＣＧＲＰ8-37  Ｃ３を白色無定形固体（９．１５  ｍｇ、ＲＰ−ＨＰＬＣによる純度９９％超）として得た；Ｒt  ４６．１５分（流速１．０  ｍＬ／分、および５〜９５％Ｂを９０分間で直線勾配で、約１％Ｂ／分、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＭＳ  Ｃ１８カラム（５  μｍ；４．６×１５０  ｍｍ））；  ＭＳ：  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  ［Ｍ＋３Ｈ］3+  １１４０．０５５；  ｆｏｕｎｄ  １１３９．８。バッファーＡ：０．１％ＴＦＡの水溶液（ｖ／ｖ）；バッファーＢ：０．１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液（ｖ／ｖ）。
【０５４５】
実施例２
１．  この実施例は、本発明のペプチド複合と比較して使用するためのペプチドの調製を説明した。ネイティブＣＧＲＰ8-37  Ａの合成［配列番号：９５］
【０５４６】
【化３３】
2021501784.tif 000034
【０５４７】
ＰＳ３（商標）  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用した自動化Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳを０．１  ｍｍｏｌスケールでＣＧＲＰ8-37  Ａの合成に用い、その後、ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いて、レジン開裂し、粗製Ａを白色固体（１７０  ｍｇ、ＲＰ−ＨＰＬＣによる６１％の純度に基づく３３％の収率）として得た；Ｒt  ２９．９分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  ６２６．０  （［Ｍ＋５Ｈ］5+；  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ６２６．１）。ＲＰ−ＨＰＬＣは、６０分間で５％Ｂ〜６５％Ｂ（約１％Ｂ／分）、５．０  ｍＬ／分で４５℃でＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ18カラム（５  μｍ；  １０．０×２５０  ｍｍ）を用いて行った（ここで、Ａ：０．１％ＴＦＡの水溶液、およびＢ：０．１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液）。
【０５４８】
粗製ペプチドＡ（１７０  ｍｇ）を、１３分間で０％Ｂ〜１３％Ｂ（約１％Ｂ／分）、その後３７０分で１３％Ｂ〜５０％Ｂ（約０．１％Ｂ／分）の勾配でＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ18カラムでＤｉｏｎｅｘＵｌｔｉＭａｔｅ（登録商標）３０００を使用してセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。
【０５４９】
分画（２．５  ｍＬ）を０．５分間隔で収集し、実施例１に記載のようにＥＳＩ−ＭＳおよびＲＰ  ＨＰＬＣで分析した。正しいｍ／ｚで同定された分画を合わせ、凍結乾燥して、表題の化合物Ａを白色無定形固体（１５．９  ｍｇ、収率１５％、純度９３％）として得た；Ｒt  １２．６分；ｍ／ｚ  （ＥＳＩ−ＭＳ）  ６２６．１（［Ｍ＋５Ｈ］5+は６２６．１を要求する）。ＬＣＭＳは、Ｚｏｒｂａｘ  ３００ＳＢ−Ｃ３カラム（５  μｍ；  ３．０×１５０  ｍｍ）を使用して５〜６５％Ｂを２１分（約３％Ｂ／分）で０．３  ｍＬ／分で室温で行った（ここでＡ：０．１％ギ酸の水溶液、およびＢ：０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液）。
【０５５０】
９．３．１  β−ＣＧＲＰ８−３７  Ｃ１  ［配列番号：３１］の合成
【０５５１】
【化３４】
2021501784.tif 000035
【０５５２】
Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  ＋  Ａｌｓｔｒａ（商標）  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを使用した自動化Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳを０．１  ｍｍｏｌスケールで、ペプチド合成の基本手順（上記のセクション３を参照）で概説した条件を用いて、β−ＣＧＲＰ8-37  Ｃ１の合成に使用した。次に、レジン結合ペプチドをＴＦＡ／ＴＩＰＳ／Ｈ2Ｏ  （９５：２．５：２．５  ｖ／ｖ；  ５  ｍＬ）で室温で２時間処理した。ＴＦＡを窒素流で蒸発させ、ペプチドを氷冷ジエチルエーテルで沈殿させ、遠心分離で分離し、冷ジエチルエーテルで２回洗浄してから、次にＴＦＡ（０．１％  ｖ／ｖ）を含むＭｅＣＮ／Ｈ2Ｏ（１：１  ｖ／ｖ）に溶解し、凍結乾燥した。原料をセミＲＰ−ＨＰＬＣで精製し、Ｃ１を白色無定形固体（５．０８  ｍｇ、ＲＰ−ＨＰＬＣによる純度９９％超）として得た；Ｒt  ２５．３１分（Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＭＳ  Ｃ１８カラム（５  μｍ；４．６×１５０  ｍｍ）、および５〜９５％Ｂを９０分間で直線勾配で、流速１．０  ｍＬ／分で約１％Ｂ／分、）。バッファーＡ：０．１％ＴＦＡの水溶液（ｖ／ｖ）；バッファーＢ：０．１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液（ｖ／ｖ）；ＭＳ：  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  ［Ｍ＋３Ｈ］3+  １０４４．５５９；  ｆｏｕｎｄ  １０４４．３。
【０５５３】
実施例３
この実施例は、ＣＧＲＰ受容体での本発明のペプチド複合体のアンタゴニスト活性の測定を説明する。
１．  トランスフェクトされたＣＧＲＰ受容体発現細胞におけるＣＧＲＰ誘発ｃＡＭＰ蓄積の拮抗作用
サル空胞化ウイルス（ＳＶ４０）形質転換アフリカミドリザル腎臓（Ｃｏｓ７）細胞に、カルシトニン受容体様受容体（ＣＬＲ）またはカルシトニン受容体（ＣＴＲ）を受容体活性調節タンパク質（ＲＡＭＰ１）とともに一過的にトランスフェクトし、ＣＧＲＰまたはＡＭＹ1(a)受容体を形成させた。
【０５５４】
Ｃｏｓ７細胞を、８％の熱不活性化ウシ胎児血清を補充したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）で培養し、３７℃の加湿した９５％空気／５％ＣＯ2インキュベーターに維持した。ポリエチレンイミンを使用したトランスフェクションの前日に、細胞を９６ウェルプレートに１５〜２０，０００細胞／ウェルで１００  μｌの培地にプレーティングした。
【０５５５】
実験当日、培地を１  ｍＭイソブチルメチルキサンチンおよび０．１％ウシ血清アルブミンを含む５０  μｌのＤＭＥＭで３０分間交換した。すべてのペプチドをアッセイ培地で希釈し、３０分のインキュベーション後、２５  μｌのアンタゴニストを添加し、その後すぐに２５  μｌのヒトアルファＣＧＲＰ（ｈαＣＧＲＰ）を添加し、総アッセイ容量を１００  μｌにした。ヒトアルファＣＧＲＰを追加したら、細胞を３７℃で１５分間インキュベートした。次に、培地をウェルから吸引し、氷冷した無水エタノールで反応を停止させた。エタノールを蒸発乾固し、ｃＡＭＰを市販のアッセイ（ＬＡＮＣＥ  Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して定量した。結果を図１および２ならびに表１に示す。
【０５５６】
別の特定の実験パラダイムでは、培地を１  ｍＭイソブチルメチルキサンチンおよび０．１％ウシ血清アルブミンを含むＤＭＥＭで３０分間交換した。この期間の後、２５  μｌのアンタゴニストまたは培地を、プレインキュベーション期間として３７℃で１５分間加えた。プレインキュベーション後、いくつかのウェルからアンタゴニストまたは培地を吸引し、リン酸緩衝生理食塩水で１回洗浄し、７５  μｌの新しい培地と交換した。アンタゴニストを含む他のウェルは洗浄しなかった。次に、ヒトアルファＣＧＲＰ（２５  μｌ）を加えて、総アッセイ容量を１００  μｌにした。ヒトアルファＣＧＲＰを追加したら、細胞を３７℃で１５分間インキュベートした。次に、培地をウェルから吸引し、氷冷した無水エタノールで反応を停止させた。エタノールを蒸発乾固し、ｃＡＭＰを市販のアッセイ（ＬＡＮＣＥ  Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して定量した。結果を図３および４ならびに表２に示す。
【０５５７】
２．  ＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞中のＣＧＲＰ誘発ｃＡＭＰ蓄積の拮抗作用
ＳＫ−Ｎ−ＭＣは、ＣＧＲＰ受容体を内生的に発現するヒト神経芽細胞腫由来の細胞である（Ｃｈｏｋｓｉ  ｅｔ  ａｌ，  ２００２）。細胞を、８％の熱不活性化ウシ胎児血清を補充したＤＭＥＭで培養し、３７℃の加湿した９５％空気／５％ＣＯ2インキュベーターに維持した。細胞を９６ウェルプレートに１５〜２０，０００細胞／ウェルで１００  μｌの培地にプレーティングした。
【０５５８】
実験当日、培地を１  ｍＭイソブチルメチルキサンチンおよび０．１％ウシ血清アルブミンを含むＤＭＥＭで３０分間交換した。この期間の後、アンタゴニストを添加し、続いてヒトアルファＣＧＲＰを添加した。ヒトアルファＣＧＲＰを追加したら、細胞を３７℃で１５分間インキュベートした。次に、培地をウェルから吸引し、氷冷した無水エタノールで反応を停止させた。エタノールを蒸発乾固し、ｃＡＭＰを市販のアッセイ（ＬＡＮＣＥ  Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して定量した。結果を以下の表１に示す。
【０５５９】
３．  アンタゴニスト力価値の計算
データは、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ７を使用して分析した。アンタゴニストのｐＫBまたはｐＡ2の値は、Ｇｌｏｂａｌ  Ｓｃｈｉｌｄ分析を使用して取得した。シルトスロープ（Ｓｃｈｉｌｄ  ｓｌｏｐｅ）が単一性と有意差がない場合、データをｐＫB値として表す。単一濃度のアンタゴニストを使用する場合、ｐＡ2値をアンタゴニストの力価を表すために使用する。
【０５６０】
４．  Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおけるカプサイシン誘発性耳血管拡張のｉｎ  ｖｉｖｏ拮抗作用
実験当日、ジメチルスルホキシド中のアンタゴニストＡおよびＡ４の１０  ｍＭストック溶液を、最終量０．１％ウシ血清アルブミンおよび３．２％ジメチルスルホキシドを含む生理食塩水媒体で希釈した。カプサイシン溶液は、無水エタノールにカプサイシン粉末（純度９５％以上）を溶解することにより３．０３  ｍｇ／ｍｌで構成した。動物実験は摂氏２０〜２１度に維持した部屋の中で行った。
【０５６１】
９６０  ｎｍｏｌ／ｋｇ（０．１％ＢＳＡおよび３．２％ジメチルスルホキシドを含む生理食塩水で１０  ｍｌ／ｋｇ）の用量のアンタゴニスト、または生理食塩水媒体（０．１％ＢＳＡおよび３．２％ジメチルスルホキシドを含む）を、それぞれ、麻酔の１０分前にＣ５７ＢＬ／６マウスに皮下投与した。ＡおよびＡ４の絶対注入量（ａｂｓｏｌｕｔｅ  ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ｖｏｌｕｍｅ）は、最終投与量が９６０  ｎｍｏｌ／ｋｇになるように調整した。次に、皮下投与したケタミンおよびキシラジンのそれぞれ１００  ｍｇ／ｋｇおよび１０  ｍｇ／  ｋｇ（１０  ｍｌ／ｋｇ）からなる混合物でマウスを麻酔した。次に、麻酔したマウスをＫｅｎｔ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃヒーティングパッドセットに置き、体温を約３７度に維持し、両耳がＭｏｏｒ  ＬＤＩ２−ＨＩＲレーザードップラーイメージャーに水平になるように頭を配置した。
【０５６２】
ケタミンおよびキシラジンを投与して麻酔をかけた後（８〜１０分）、カプサイシンを塗布する前に各マウスの両耳の血流を３分間スキャンして、ベースラインの血流を定義した。これらの研究は、レーザードップラーイメージャーおよびＭｏｏｒＬＤＩ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ６．１を利用して行った。これらのベースライン測定に続いて、カプサイシン溶液を耳あたり２０  μＬの容量で局所的に塗布した（背側に１０  μＬ、腹側に１０  μＬ）。反対側の耳に、無水エタノールを同じ容量および手順で対照として局所的に塗布した。すぐに、両耳をレーザードップラーイメージャーで１５分間スキャンして、カプサイシン誘発性血管拡張を捕捉した。
【０５６３】
４．１  血管拡張活性の計算
ＭｏｏｒＬＤＩ  Ｒｅｖｉｅｗ  ６．１およびＧｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ７ソフトウェアを使用して、各時点（分）での両耳（対照およびカプサイシン）の平均流動値（Ｍｅａｎ  ｆｌｕｘ  ｖａｌｕｅ）を分析した。平均流動値（Ｍｅａｎ  ｆｌｕｘ  ｖａｌｕｅ）を、ベースライン流動値（ｆｌｕｘ  ｖａｌｕｅ）の平均値に正規化した。正規化されたプロファイルベースラインの曲線下面積（ＡＵＣ）を各動物について測定し、グループ化して、異なる治療群間で比較した。統計分析は、一元配置分散分析およびＴｕｋｅｙの事後検定を使用して行った。
【０５６４】
５．  結果
図１および２は、ＣＧＲＰおよびＡＭＹ1受容体の両方の拮抗作用を示すＣＧＲＰ濃度反応曲線の右方向への移動を示す。
【０５６５】
内生的にＣＧＲＰ受容体を発現する、ヒトＣＧＲＰまたはＡＭＹ1受容体をトランスフェクトしたＣｏｓ−７細胞またはＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞においてＣＧＲＰペプチドアンタゴニストを使用した実験の結果を、表１に示す。表１のデータは、ｃＡＭＰアッセイから得られたＣＧＲＰアンタゴニストのアンタゴニスト力価値（表１のすべての値は、ｐＡ2であるＳＫ−Ｎ−ＭＣおよびＣ１、Ｃ３、Ａ６、Ａ９、およびＡ１１の値を除いて、ｐＫBである）を示す。括弧内に示すように、データはｎ回の独立した実験からの平均±標準誤差である。ＣＧＲＰ8-37と比較した一元配置分散分析、それに続くダネットの多重比較検定により、*ｐ＜０．０５、**ｐ＜０．０１、***ｐ＜０．００１。ＣＧＲＰおよびＡＭＹ1受容体のアンタゴニスト力価（アンタゴニストＡ、Ｂ、Ｂ１、Ａ４、Ａ５、およびＡ６のみ）を比較する、対応のないｔ検定により、#ｐ＜０．０５、##ｐ＜０．０１、###ｐ＜０．００１。
【０５６６】
【表１】
2021501784.tif 000036
【０５６７】
表１に基づいて、アンタゴニストＡ（ＣＧＲＰ8-37）と同等である、およびアンタゴニストＡよりも力価が高く、およびＡより力価が低い脂質化ＣＧＲＰペプチドアンタゴニストは合成されたと結論付けることができる。
【０５６８】
表１に基づいて、アンタゴニストＡよりもＣＧＲＰおよびＡＭＹ1受容体の間の選択性が低い脂質化ＣＧＲＰペプチドアンタゴニストは、合成されたと結論付けることもできる。
【０５６９】
表１に基づいて、小分子ＣＧＲＰ受容体アンタゴニスト、テルカゲパントと同等である、およびテルカゲパントよりも力価が高い脂質化ＣＧＲＰペプチドアンタゴニストは、合成されたと結論付けることもできる。
【０５７０】
図３および４は、洗浄後のアンタゴニストＡによる拮抗作用と比較して、洗浄後のアンタゴニストＡ４によるＣＧＲＰ受容体拮抗作用は保持されることを示す。
【０５７１】
洗浄なしの拮抗作用と比較した、洗浄後のヒトＣＧＲＰまたはＡＭＹ1受容体でトランスフェクトしたＣｏｓ−７細胞におけるＣＧＲＰ受容体アンタゴニストを用いた実験の結果を表２に示す。表２のデータは、ｃＡＭＰアッセイから得られたＣＧＲＰアンタゴニストのアンタゴニスト力価値を示す（表２のすべての値はｐＡ2である）。括弧内に示すように、データはｎ回の独立した実験からの平均±標準誤差である。洗浄なしと洗浄ありのアンタゴニスト力価を比較する対応のないｔ−検定により、*ｐ＜０．０５、***ｐ＜０．００１。
【０５７２】
【表２】
2021501784.tif 000037
【０５７３】
図５は、アンタゴニストＡおよびＡ４によるＣ５７ＢＬ／６マウスの耳のカプサイシン誘発血管拡張反応のｉｎ  ｖｉｖｏ減衰を示す。データはｎ回の独立した実験からの平均±標準誤差である。図６は、ＡＵＣで分析すると、対照と比較したＡおよびＡ４による血管拡張反応の減衰が有意であることを示す。
【０５７４】
図５および６に基づいて、アンタゴニストＡ４は、ｉｎ  ｖｉｖｏでカプサイシン誘発血管拡張を減衰させ、少なくともＡと同等であると結論付けることができる。
【０５７５】
表３は、洗浄によるヒトＣＧＲＰ受容体でのアンタゴニスト力価（ｐＡ2）の変化倍率の減少、および表２のデータについてアンタゴニストＡと比較したアンタゴニストＢ１、Ａ４、Ａ５、およびＡ６の変化倍率を示す。
【０５７６】
【表３】
2021501784.tif 000038
【０５７７】
工業上の利用可能性
本明細書に記載されるペプチド複合体は、有用なＣＧＲＰ受容体アンタゴニスト活性を有する。したがって、これらの化合物は、本明細書に記載されるようなＣＧＲＰ受容体によって媒介されるもの等の様々な疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）および疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療に有用である。そのような疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）および疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は、たとえば、熱傷、循環性ショック、更年期の顔面紅潮、喘息、敗血症、神経性炎症、炎症性皮膚疾患（たとえば、乾癬および接触性皮膚炎）、アレルギー性鼻炎、関節障害（たとえば、関節炎、および顎関節障害、好ましくは関節炎）、悪液質（たとえば、がん誘発性悪液質）、疼痛、たとえば頭蓋顔面痛障害（たとえば、片頭痛、頭痛、三叉神経痛、および歯痛、好ましくは片頭痛）、および代謝障害または症候群（たとえば、肥満、ＩＩ型糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、および血栓症）。
【０５７８】
以下の番号が付けられた段落は、本明細書で説明される本発明の態様および実施形態に関する。
【０５７９】
１．  カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドを含むペプチド複合体であって、ここでペプチドの少なくとも一つのアミノ酸が脂質含有部分に共有結合されており、ここでペプチド複合体はＣＧＲＰ受容体アンタゴニストである、ペプチド複合体。
【０５８０】
２．  カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドを含むペプチド複合体であって、ここでペプチドの少なくとも一つのアミノ酸がスルフィド基の硫黄原子を介して脂質含有部分に共有結合されており、ここでペプチド複合体はＣＧＲＰ受容体アンタゴニストである、ペプチド複合体。
【０５８１】
３．  上記ペプチド複合体は、ＣＧＲＰ受容体におけるα−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）のアンタゴニスト力価（ｐＡ2）より約１０倍未満、５倍未満、３倍未満、２倍未満、１倍未満の値より大きいアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）を有する、またはたとえば、本明細書の実施例に記載されるｃＡＭＰアッセイにより測定されるように、ＣＧＲＰ受容体におけるＣＧＲＰ８−３７のアンタゴニスト力価（ｐＡ2）に等しい値より大きいアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）を有する、段落１または２に記載のペプチド複合体。
【０５８２】
４．  上記ペプチド複合体は、たとえば好適なげっ歯類モデル、たとえばラットモデルで測定されるように、α−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）の半減期よりも少なくとも２、３、４、５、１０、２０、３０、４０、または５０倍長い半減期を有する、段落１〜３のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０５８３】
５．  上記少なくとも一つのアミノ酸は、システインまたはホモシステインである、段落１〜４のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０５８４】
６．  上記少なくとも一つのアミノ酸は、システインである、段落１〜５のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０５８５】
７．  上記ペプチド複合体は、脂質含有部分に結合した一つのアミノ酸のみを含む、段落１〜６のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０５８６】
８．  上記ペプチド複合体は、脂質含有部分にそれぞれ結合した二つ以上のアミノ酸を含む、段落１〜７のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【０５８７】
９．  上記脂質含有部分は、それぞれが少なくとも４個または少なくとも６個の鎖結合原子（ｃｈａｉｎ−ｌｉｎｋｅｄ  ａｔｏｍ）を含む一つまたは複数の直鎖または分岐脂肪族、またはヘテロ脂肪族鎖を含む、段落１〜８のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０５８８】
１０．  上記脂質含有部分は、一つまたは複数の飽和または不飽和脂肪酸エステルを含む、段落１〜９のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０５８９】
１１．  上記脂質含有部分は、化学式（Ａ）のものであり：
【化３５】
2021501784.tif 000039
ここで、
＊は、脂質含有部分が結合しているアミノ酸のスルフィド基の硫黄原子への結合を表す；
ＺおよびＺ1は、Ｏ−、−ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ2−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−、および−ＮＲＣ（Ｏ）ＮＲ−からなる群からそれぞれ独立に選択される；
Ｒは水素またはＣ1-6脂肪族である；
ｍは０〜４の整数である；
ｎは１または２である；
ｍの各々の例におけるＲ1およびＲ2は、それぞれ独立に水素、Ｃ1-6脂肪族である；またはＲ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、それぞれ独立に水素、またはＣ1-6脂肪族である；またはＲ3はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｌ1およびＬ2は、それぞれ独立にＣ5-21脂肪族、またはＣ4-20ヘテロ脂肪族である；ここで：
Ｒ3がＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである場合、Ｒ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルではない；および
ｍが２〜４の整数である場合、１個以下のＲ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；および
ここで、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｌ1、およびＬ2のいずれかに存在する脂肪族、アルキル、またはヘテロ脂肪族は、一つまたは複数の独立に選択された任意の置換基で任意に置換される、
段落１〜１０のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０５９０】
１２．  Ｒは水素、Ｃ1-6アルキル、またはＣ3-6シクロアルキルである；
ｍは０〜４の整数である；
ｎは１または２である；
ｍの各々の例におけるＲ1およびＲ2は、それぞれ独立に水素、Ｃ1-6アルキル、またはＣ3-6シクロアルキルである；またはＲ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、それぞれ独立に水素、Ｃ1-6アルキル、またはＣ3-6シクロアルキルである；またはＲ3はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｌ1およびＬ2は、それぞれ独立にＣ5-21アルキル、Ｃ5-21アルケニル、またはＣ4-20ヘテロアルキルである；
ここで、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｌ1、およびＬ2のいずれかに存在するアルキル、アルケニル、シクロアルキルまたはヘテロアルキルは、一つまたは複数の独立に選択された任意の置換基で任意に置換される、
段落１１に記載のペプチド複合体。
【０５９１】
１３．  Ｒは水素、またはＣ1-6アルキルである；
ｍは０〜４の整数である；
ｎは１または２である；
ｍの各々の例におけるＲ1およびＲ2は、それぞれ独立に水素、またはＣ1-6アルキルである；またはＲ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、それぞれ独立に水素、またはＣ1-6アルキルである；またはＲ3はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｌ1およびＬ2は、それぞれ独立にＣ5-21アルキル、Ｃ5-21アルケニル、またはＣ4-20ヘテロアルキルである；
ここで、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｌ1、およびＬ2のいずれかに存在するアルキル、アルケニル、またはヘテロアルキルは、一つまたは複数の独立に選択された任意の置換基で任意に置換される、
段落１１または１２に記載のペプチド複合体。
【０５９２】
１４．  ＺおよびＺ1は、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、および−Ｃ（Ｏ）Ｓ−からそれぞれ独立に選択され、好ましくは−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である、段落１１〜１３のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０５９３】
１５．  上記脂質含有部分は、化学式（Ｉ）のものであり、
【化３６】
2021501784.tif 000040
ここで、
ｍ、Ｌ1、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、段落１〜１４のいずれか一つで定義されている通りである；およびＺ1は存在する場合、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である、
段落１１〜１４のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０５９４】
１６．  ｍは０〜２の整数である、段落１〜１５のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０５９５】
１７．  ｍは０または１である、段落１〜１６のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０５９６】
１８．  ｍは０である、段落１〜１７のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０５９７】
１９．  ｍの各々の例におけるＲ1およびＲ2は、それぞれ独立に水素である、段落１〜１８のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０５９８】
２０．  Ｒ4およびＲ5は、それぞれ水素である、段落１〜１９のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０５９９】
２１．  Ｒ3は水素またはＣ1-6アルキルである、段落１１〜２０のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【０６００】
２２．  上記脂質含有部分は、化学式（ＩＶ）のものであり：
【化３７】
2021501784.tif 000041
ここで、
Ｒ3はＬ2−Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ2、またはＬ2−Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ2ＣＨ2である；および
Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立にＣ5-21アルキル、Ｃ5-21アルケニル、またはＣ4-20ヘテロアルキルである；
段落１１〜２０のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【０６０１】
２３．  Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立にＣ5-21アルキルである、段落１１〜２２のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６０２】
２４．  Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立にＣ9-21アルキルである、段落１１〜２３のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６０３】
２５．  Ｌ1およびＬ2はそれぞれ独立に直鎖Ｃ15アルキルである、段落１１〜２４のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６０４】
２６．  Ｒ3はＬ2−Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ2ＣＨ2である、段落１１〜２０および２２〜２５のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６０５】
２７．  Ｒ3は水素である、段落１１〜２５のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６０６】
２８．  一つまたは複数の独立に選択される任意の置換基は、ハロ、ＣＮ、ＮＯ2、ＯＨ、ＮＨ2、ＮＨＲx、ＮＲxＲy、Ｃ1-6ハロアルキル、Ｃ1-6ハロアルコキシ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ2、Ｃ（Ｏ）ＮＨＲx、Ｃ（Ｏ）ＮＲxＲy、ＳＯ2Ｒx、ＯＲy、ＳＲx、Ｓ（Ｏ）Ｒx、Ｃ（Ｏ）Ｒx、およびＣ1-6脂肪族から選択される；ここでＲxおよびＲyはそれぞれ独立にＣ1-6脂肪族、たとえばＣ1-6アルキルである、段落１１〜２７のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６０７】
２９．  上記ペプチドのＮ末端基は−ＮＲaＲbであり、ここでＲaおよびＲbはそれぞれ独立に水素、アルキル、シクロアルキル、アシル、アリール、またはアリールアルキルである；および／または上記ペプチドのＣ末端基は−ＣＨ2ＯＲc、−Ｃ（Ｏ）ＯＲc、または−Ｃ（Ｏ）ＮＲcＲdであり、ここでＲcおよびＲdはそれぞれ独立に水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、またはアリールアルキルである、段落１〜２８のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６０８】
３０．  上記ペプチドのＮ末端基は−ＮＨ2または−ＮＨ（アシル）、たとえば−ＮＨＡｃである；および／または上記ペプチドのＣ末端基は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ2である、段落１〜２９のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６０９】
３１．  上記ペプチドは式：
Ｚ−Ｘａａ8Ｘａａ9Ｘａａ10Ｘａａ11Ｌｅｕ12Ｘａａ13Ｘａａ14Ｘａａ15Ｌｅｕ16Ｘａａ17Ｘａａ18Ｘａａ19Ｘａａ20Ｘａａ21Ｘａａ22Ｘａａ23Ｘａａ24Ｘａａ25Ｘａａ26Ｐｈｅ27Ｘａａ28Ｘａａ29 Ｔｈｒ30Ｘａａ31Ｖａｌ32Ｇｌｙ33Ｘａａ34Ｘａａ35Ｘａａ36Ｐｈｅ37［配列番号：１］
のアミノ酸配列を含む、またはからなるペプチド複合体であって、
ここで：
Ｚは存在しない、またはＸａａ1Ｘａａ2Ｘａａ3Ｘａａ4Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ2Ｘａａ3Ｘａａ4Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ3Ｘａａ4Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ4Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ6Ｘａａ7またはＸａａ7であって、
ここで：
Ｘａａ1はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、セリン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、スレオニン、チロシン、またはシステインである；
Ｘａａ2はシステイン、セリン、アラニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、スレオニン、チロシンである；
Ｘａａ3はアスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミン、グリシン、セリン、スレオニン、チロシン、またはシステインである；
Ｘａａ4はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、フェニルアラニン、チロシン、バリン、イソロイシン、またはシステインである；
Ｘａａ5はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、またはトリプトファンである；
Ｘａａ6はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、チロシン、フェニルアラニン、バリン、イソロイシン、またはシステインである；
Ｘａａ7はシステイン、セリン、アラニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、スレオニン、フェニルアラニン、またはチロシンである；
Ｘａａ8はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、またはスレオニンである；
Ｘａａ9はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、チロシン、バリン、イソロイシン、またはシステインである；
Ｘａａ10はヒスチジン、リジン、アルギニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、アラニン、グリシン、バリン、ロイシン、またはイソロイシンである；
Ｘａａ11はアルギニン、リジン、ヒスチジン、グルタミン、またはアスパラギンである；
Ｘａａ13はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、セリン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、スレオニン、チロシン、またはシステインである；
Ｘａａ14はグリシン、プロリン、アラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、チロシン、システイン、グルタミン酸、またはアスパラギン酸である；
Ｘａａ15はロイシン、イソロイシン、バリン、アラニン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、プロリン、またはトリプトファンである；
Ｘａａ17はセリン、スレオニン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、アルギニン、リジン、ヒスチジン、グルタミン、アスパラギン、またはシステインである；
Ｘａａ18はアルギニン、リジン、ヒスチジン、グルタミン、またはアスパラギンである；
Ｘａａ19はセリン、スレオニン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、またはシステインである；
Ｘａａ20はグリシン、プロリン、アラニン、ベータアラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、またはチロシンである；
Ｘａａ21はグリシン、プロリン、アラニン、ベータアラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、またはチロシンである；
Ｘａａ22はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、またはトリプトファン、またはスレオニンである；
Ｘａａ23はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、またはスレオニンである；
Ｘａａ24はリジン、アルギニン、グルタミン、アスパラギン、またはヒスチジンである；
Ｘａａ25はアスパラギン、グルタミン、グリシン、セリン、スレオニン、チロシン、フェニルアラニン、アラニン、グルタミン酸、アスパラギン酸、またはシステインである；
Ｘａａ26はアスパラギン、グルタミン、グリシン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、チロシン、またはシステインである；
Ｘａａ28はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、またはスレオニンである；
Ｘａａ29はプロリン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、グリシン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、またはトリプトファンである；
Ｘａａ31はアスパラギン、グルタミン、グリシン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、チロシン、グルタミン酸、アスパラギン酸、またはシステインである；
Ｘａａ34はセリン、スレオニン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、トリプトファン、またはシステインである；
Ｘａａ35はリジン、アルギニン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アスパラギン酸、またはグルタミン酸である；
および
Ｘａａ36はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、メチオニン、またはトリプトファンである；
ここで、Ｘａａ1〜Ｘａａ11、Ｘａａ13〜Ｘａａ15、Ｘａａ17〜Ｘａａ26、Ｘａａ28、Ｘａａ29、Ｘａａ31、およびＸａａ34〜Ｘａａ36の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
段落１〜３０のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６１０】
３２．  Ｚは存在しない、またはＸａａ1Ｘａａ2Ｘａａ3Ｘａａ4Ｘａａ5Ｘａａ6Ｘａａ7もしくはＸａａ7である、段落３１に記載のペプチド複合体。
【０６１１】
３３．  ａ）  Ｘａａ1はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、グリシン、またはスレオニンである；
ｂ）  Ｘａａ2はシステイン、セリン、またはアラニンである；
ｃ）  Ｘａａ3はアスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、またはグルタミンである；
ｄ）  Ｘａａ4はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、またはセリンである；
ｅ）  Ｘａａ5はアラニン、バリン、ロイシン、またはイソロイシンである；
ｆ）  Ｘａａ6はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、またはセリンである；
ｇ）  Ｘａａ7はシステイン、セリン、またはアラニンである；
ｈ）  Ｘａａ8はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、またはメチオニンである；
ｉ）  Ｘａａ9はスレオニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、またはセリンである；
ｊ）  Ｘａａ10はヒスチジン、リジン、またはアルギニンである；
ｋ）  Ｘａａ11はアルギニン、リジン、またはヒスチジンである；
ｌ）  Ｘａａ13はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、グリシン、またはスレオニンである；
ｍ）  Ｘａａ14はグリシン、プロリン、アラニン、アスパラギン酸、またはグルタミン酸である；
ｎ）  Ｘａａ15はロイシン、イソロイシン、バリン、アラニン、メチオニン、またはフェニルアラニンである；
ｏ）  Ｘａａ17はセリン、スレオニン、アラニン、アルギニン、リジン、またはヒスチジンである；
ｐ）  Ｘａａ18はアルギニン、リジン、またはヒスチジンである；
ｑ）  Ｘａａ19はセリン、スレオニン、またはアラニンである；
ｒ）  Ｘａａ20はグリシン、プロリン、またはアラニンである；
ｓ）  Ｘａａ21はグリシン、プロリン、またはアラニンである；
ｔ）  Ｘａａ22はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、またはメチオニンである；
ｕ）  Ｘａａ23はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、またはスレオニンである；
ｖ）  Ｘａａ24はリジン、アルギニン、またはヒスチジンである；
ｗ）  Ｘａａ25はアスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、アラニンである；
ｘ）  Ｘａａ26はアスパラギン、セリン、グルタミン酸、またはグルタミンである；
ｙ）  Ｘａａ28はバリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、またはスレオニンである；
ｚ）  Ｘａａ29はプロリン、アラニン、またはグリシンである；
ａａ）  Ｘａａ31はアスパラギン、グルタミン、グルタミン酸、またはアスパラギン酸である；
ｂｂ）  Ｘａａ34はセリン、スレオニン、またはアラニンである；
ｃｃ）  Ｘａａ35はリジン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸、またはグルタミン酸である；
ｄｄ）  Ｘａａ36はアラニン、バリン、ロイシン、またはイソロイシンである；または
ｅｅ）  ａ）〜ｄｄ）のいずれか二つ以上の任意の組み合わせ；
ここで、Ｘａａ1〜Ｘａａ11、Ｘａａ13〜Ｘａａ15、Ｘａａ17〜Ｘａａ26、Ｘａａ28、Ｘａａ29、Ｘａａ31、およびＸａａ34〜Ｘａａ36の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
段落３１または３２に記載のペプチド複合体。
【０６１２】
３４．  ａ）  Ｘａａ1はアラニン、またはセリンである；
ｂ）  Ｘａａ2はシステインである；
ｃ）  Ｘａａ3はアスパラギン酸、またはグルタミン酸である；
ｄ）  Ｘａａ4はスレオニンである；
ｅ）  Ｘａａ5はアラニンである；
ｆ）  Ｘａａ6はスレオニンである；
ｇ）  Ｘａａ7はシステインである；
ｈ）  Ｘａａ8はバリンである；
ｉ）  Ｘａａ9はスレオニンである；
ｊ）  Ｘａａ10はヒスチジンである；
ｋ）  Ｘａａ11はアルギニンである；
ｌ）  Ｘａａ13はアラニンである；
ｍ）  Ｘａａ14はグリシン、またはアスパラギン酸である；
ｎ）  Ｘａａ15はロイシンである；
ｏ）  Ｘａａ17はセリン、またはアルギニンである；
ｐ）  Ｘａａ18はアルギニンである；
ｑ）  Ｘａａ19はセリンである；
ｒ）  Ｘａａ20はグリシンである；
ｓ）  Ｘａａ21はグリシンである；
ｔ）  Ｘａａ22はバリン、またはメチオニンである；
ｕ）  Ｘａａ23はバリン、またはロイシンである；
ｖ）  Ｘａａ24はリジンである；
ｗ）  Ｘａａ25はアスパラギン、またはセリンである；
ｘ）  Ｘａａ26はアスパラギン、セリン、またはグルタミン酸である；
ｙ）  Ｘａａ28はバリンである；
ｚ）  Ｘａａ29はプロリンである；
ａａ）  Ｘａａ31はアスパラギン、またはアスパラギン酸である；
ｂｂ）  Ｘａａ34はセリンである；
ｃｃ）  Ｘａａ35はリジン、またはグルタミン酸である；
ｄｄ）  Ｘａａ36はアラニンである；または
ｅｅ）  ａ）〜ｄｄ）のいずれか二つ以上の任意の組み合わせ；
ここで、Ｘａａ1〜Ｘａａ11、Ｘａａ13〜Ｘａａ15、Ｘａａ17〜Ｘａａ26、Ｘａａ28、Ｘａａ29、Ｘａａ31、およびＸａａ34〜Ｘａａ36の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
段落３１〜３３のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【０６１３】
３５．  上記ペプチドは、式：
Ｚ−Ｘａａ8Ｔｈｒ9Ｘａａ10Ｘａａ11Ｌｅｕ12Ａｌａ13Ｘａａ14Ｌｅｕ15Ｌｅｕ16Ｘａａ17Ｘａａ18Ｘａａ19Ｇｌｙ20Ｘａａ21Ｘａａ22Ｘａａ23Ｘａａ24Ｘａａ25Ａｓｎ26Ｐｈｅ27Ｖａｌ28Ｐｒｏ29Ｔｈｒ30Ｘａａ31Ｖａｌ32Ｇｌｙ33Ｓｅｒ34Ｘａａ35Ａｌａ36Ｐｈｅ37［配列番号：２］
のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる、ペプチド複合体であって、
ここで：
Ｚは存在しない、またはＸａａ1Ｘａａ2Ｘａａ3Ｔｈｒ4Ａｌａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ2Ｘａａ3Ｔｈｒ4Ａｌａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ3Ｔｈｒ4Ａｌａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｔｈｒ4Ａｌａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ａｌａ5Ｘａａ6Ｘａａ7、Ｘａａ6Ｘａａ7またはＸａａ7であって、
ここで：
ａ）  Ｘａａ1はアラニン、またはセリンである；
ｂ）  Ｘａａ2はシステイン、またはホモシステインである；
ｃ）  Ｘａａ3はアスパラギン酸、またはアスパラギンである；
ｄ）  Ｘａａ6はスレオニン、システイン、またはホモシステインである；
ｅ）  Ｘａａ7はシステイン、またはホモシステインである；
ｆ）  Ｘａａ8はバリン、システイン、またはホモシステインである；
ｇ）  Ｘａａ10はヒスチジン、システイン、またはホモシステインである；
ｈ）  Ｘａａ11はアルギニン、システイン、またはホモシステインである；
ｉ）  Ｘａａ14はグリシン、またはアスパラギン酸である；
ｊ）  Ｘａａ17はセリン、アルギニン、システイン、またはホモシステインである；
ｋ）  Ｘａａ18はアルギニン、システイン、またはホモシステインである；
ｌ）  Ｘａａ19はセリン、システイン、またはホモシステインである；
ｍ）  Ｘａａ21はグリシン、システイン、またはホモシステインである；
ｎ）  Ｘａａ22はバリン、またはメチオニンである；
ｏ）  Ｘａａ23はバリン、またはロイシンである；
ｐ）  Ｘａａ24はリジン、システイン、またはホモシステインである；
ｑ）  Ｘａａ25はアスパラギン、セリン、またはアスパラギン酸である；
ｒ）  Ｘａａ31はアスパラギン、またはアスパラギン酸である；および
ｓ）  Ｘａａ36はリジン、グルタミン酸、システイン、またはホモシステインである；
ここで、ペプチド中の少なくとも一つのシステインまたはホモシステインは、脂質含有部分に共有結合している、
段落３１〜３４のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６１４】
３６．  Ｘａａ6〜Ｘａａ8、Ｘａａ10、Ｘａａ11、Ｘａａ17〜Ｘａａ19、Ｘａａ21、Ｘａａ24、およびＸａａ35の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
段落３１〜３５のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６１５】
３７．  Ｘａａ7、Ｘａａ8、Ｘａａ11、Ｘａａ24、およびＸａａ35の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
段落３１〜３６のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【０６１６】
３８．  Ｘａａ7、Ｘａａ8、Ｘａａ24、およびＸａａ35の一つまたは複数は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
段落３１〜３７のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【０６１７】
３９．  Ｘａａ6〜Ｘａａ8、Ｘａａ10、Ｘａａ11、Ｘａａ17〜Ｘａａ19、Ｘａａ21、Ｘａａ24、およびＸａａ35の一つまたは二つは、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
段落３１〜３８のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６１８】
４０．  Ｘａａ7、Ｘａａ8、Ｘａａ11、Ｘａａ24、およびＸａａ35の一つまたは二つは、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
段落３１〜３９のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【０６１９】
４１．  Ｘａａ6〜Ｘａａ8、Ｘａａ10、Ｘａａ11、Ｘａａ17〜Ｘａａ19、Ｘａａ21、Ｘａａ24、およびＸａａ35の二つ以上は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
段落３１〜４０のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【０６２０】
４２．  Ｘａａ7、Ｘａａ8、Ｘａａ11、Ｘａａ24、およびＸａａ35の二つ以上は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
段落３１〜４１のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【０６２１】
４３．  上記ペプチドは、
ａ）  配列番号：３のアミノ酸配列；
ｂ）  配列番号：３の２５個以上の連続したアミノ酸；
ｃ）  配列番号：３のアミノ酸７〜３７；
ｄ）  配列番号：３のアミノ酸８〜３７；
ｅ）  配列番号：４のアミノ酸配列；
ｆ）  配列番号：４の２５個以上の連続したアミノ酸；
ｇ）  配列番号：４のアミノ酸７〜３７；
ｈ）  配列番号：４のアミノ酸８〜３７；または
ｉ）  ａ）〜ｈ）のいずれか一つで定義された配列と少なくとも約６０％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、またはからなるａ）〜ｈ）のいずれか一つの機能的バリアント；
を含み、またはからなり、ここで配列内の一つまたは複数のアミノ酸は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、
段落１〜３０のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【０６２２】
４４．  上記ペプチドは、以下から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなる、ペプチド複合体であって、ここで配列内の一つまたは複数のアミノ酸は、脂質含有部分に共有結合したアミノ酸である、または置換されている、段落１〜４３のいずれか一つに記載のペプチド複合体：
ａ）  配列番号：３または配列番号：４のアミノ酸２〜３７；
ｂ）  配列番号：３または配列番号：４のアミノ酸３〜３７；
ｃ）  配列番号：３または配列番号：４のアミノ酸４〜３７；
ｄ）  配列番号：３または配列番号：４のアミノ酸５〜３７；
ｅ）  配列番号：３または配列番号：４のアミノ酸６〜３７；または
ｆ）  ａ）〜ｅ）のいずれか一つで定義された配列と少なくとも約６０％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、またはからなるａ）〜ｈ）のいずれか一つの機能的バリアント。
【０６２３】
４５．  上記アミノ酸配列は、段落４３のａ）〜ｈ）または段落４４のａ）〜ｅ）で定義された配列と少なくとも約９０％の配列同一性を有する、段落４３（ｉ）または段落４４（ｆ）のペプチド複合体。
【０６２４】
４６．  上記ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の１〜１１位、１３〜１５位、１７〜２６位、２８位、２９位、３１位、および３４〜３６位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む、段落４３〜４５のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６２５】
４７．  上記ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の６〜８位、１０位、１１位、１７〜１９位、２１位、２４位、および３５位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む、段落４３〜４６のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【０６２６】
４８．  上記ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の６〜８位、１０位、１１位、２１位、２４位、および３５位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む、段落４３〜４７のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【０６２７】
４９．  上記ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の７位、８位、１１位、２４位、および３５位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む、段落４３〜４８のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６２８】
５０．  上記ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の７位、８位、２４位、および３５位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む、段落４３〜４９のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６２９】
５１．  上記ペプチドは、配列番号：３または配列番号：４の７位、８位、１１位、２４位、および３５位に対応する一つまたは複数のアミノ酸位置で脂質含有部分に共有結合したアミノ酸を含む、段落４３〜５０のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６３０】
５２．  上記ペプチドの上記Ｎ末端アミノ酸は、脂質含有部分に共有結合している、段落１〜５１のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６３１】
５３．  上記ペプチドは、
ａ）  アミノ酸Ｘａａ1〜Ｘａａ7を含むペプチドの領域、または配列番号：３もしくは配列番号：４のアミノ酸１〜７に対応するペプチドの領域；
ｂ）  アミノ酸Ｘａａ8〜Ｘａａ18を含むペプチドの領域、または配列番号：３もしくは配列番号：４のアミノ酸８〜１８に対応するペプチドの領域；
ｃ）  アミノ酸Ｘａａ19〜Ｘａａ26を含むペプチドの領域、または配列番号：３もしくは配列番号：４のアミノ酸１９〜２６に対応するペプチドの領域；
ｄ）  アミノ酸Ｘａａ27〜Ｘａａ37を含むペプチドの領域、または配列番号：３もしくは配列番号：４のアミノ酸２７〜３７に対応するペプチドの領域；
ｅ）  ａ）〜ｄ）の二つ以上の任意の組み合わせ；
の中の脂質含有部分に共有結合した一つまたは複数のアミノ酸を含む、段落１〜５２のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６３２】
５４．  上記ペプチドは、脂質含有部分に共有結合した約１〜約５個のアミノ酸を含む、段落１〜５３のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６３３】
５５．  上記ペプチドは、脂質含有部分に共有結合した約１〜約３個のアミノ酸を含む、段落１〜５４のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６３４】
５６．  上記ペプチドは、脂質含有部分に共有結合した１個または２個のアミノ酸を含む、段落１〜５３のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６３５】
５７．  上記脂質含有部分に共有結合したアミノ酸はシステインまたはホモシステインであり、上記脂質含有部分はシステインまたはホモシステインのスルフィド基の硫黄原子を介して共有結合している、段落１〜５６のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６３６】
５８．  上記ペプチドは、
ａ）  ＡＸＤＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５］；
ｂ）  ＸＸＤＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６］；
ｃ）  ＡＸＸＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７］；
ｄ）  ＡＸＤＸＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８］；
ｅ）  ＡＸＤＴＸＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９］；
ｆ）  ＡＸＤＴＡＸＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０］；
ｇ）  ＸＤＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１］；
ｈ）  ＤＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２］；
ｉ）  ＸＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３］；
ｊ）  ＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１４］；
ｋ）  ＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１５］；
ｌ）  ＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１６］；
ｍ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１７］；
ｎ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１８］；
ｏ）  ＶＸＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１９］；
ｐ）  ＶＴＸＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２０］；
ｑ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２１］；
ｒ）  ＶＴＨＲＬＸＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２２］；
ｓ）  ＶＴＨＲＬＡＸＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２３］；
ｔ）  ＶＴＨＲＬＡＧＸＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２４］；
ｕ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＸＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２５］；
ｖ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＸＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２６］；
ｗ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＸＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２７］；
ｘ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＸＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２８］；
ｙ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＸＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２９］；
ｚ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＸＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３０］；
ａａ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＸＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３２］；
ｂｂ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３３］；
ｃｃ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＸＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３４］；
ｄｄ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＸＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３５］；
ｅｅ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＸＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３６］；
ｆｆ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＸＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３７］；
ｇｇ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＸＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３８］；
ｈｈ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＸＫＡＦ  ［配列番号：３９］；
ｉｉ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：４０］；
ｊｊ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＸＦ  ［配列番号：４１］；
ｋｋ）  ＡＸＮＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４２］；
ｌｌ）  ＸＸＮＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４３］；
ｍｍ）  ＡＸＸＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４４］；
ｎｎ）  ＡＸＮＸＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４５］；
ｏｏ）  ＡＸＮＴＸＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４６］；
ｐｐ）  ＡＸＮＴＡＸＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４７］；
ｑｑ）  ＸＮＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４８］；
ｒｒ）  ＮＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４９］；
ｓｓ）  ＡＸＮＸＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５０］；
ｔｔ）  ＸＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５１］；
ｕｕ）  ＴＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５２］；
ｖｖ）  ＡＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５３］；
ｗｗ）  ＴＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５４］；
ｘｘ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５５］；
ｙｙ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５６］；
ｚｚ）  ＶＸＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５７］；
ａａａ）  ＶＴＸＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５８］；
ｂｂｂ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５９］；
ｃｃｃ）  ＶＴＨＲＬＸＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６０］；
ｄｄｄ）  ＶＴＨＲＬＡＸＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６１］；
ｅｅｅ）  ＶＴＨＲＬＡＧＸＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６２］；
ｆｆｆ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＸＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６３］；
ｇｇｇ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＸＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６４］；
ｈｈｈ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＸＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６５］；
ｉｉｉ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＸＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６６］；
ｊｊｊ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＸＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６７］；
ｋｋｋ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＸＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６８］；
ｌｌｌ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＸＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６９］；
ｍｍｍ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７０］；
ｎｎｎ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＸＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７１］；
ｏｏｏ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＸＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７２］；
ｐｐｐ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＸＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７３］；
ｑｑｑ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＸＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７４］；
ｒｒｒ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＸＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７５］；
ｓｓｓ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＸＫＡＦ  ［配列番号：７６］；
ｔｔｔ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：７７］；または
ｕｕｕ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＸＦ  ［配列番号：７８］；
から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなるペプチド複合体であって、ここでＸはシステインまたはホモシステインであり、ここで上記ペプチド中の少なくとも一つのＸは脂質含有部分に共有結合している、
段落１〜５７のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６３７】
５９．  上記ペプチドは、
ａ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１７］；
ｂ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１８］；
ｃ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：３３］；
ｄ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：４０］；
ｅ）  ＡＸＤＴＡＸＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０］；
ｆ）  ＶＴＸＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２０］；
ｇ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２１］；
ｈ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＸＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：２９］；
ｉ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５５］；
ｊ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５６］；
ｋ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７０］；
ｌ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：７７］；
ｍ）  ＡＸＮＴＡＸＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：４７］；
ｎ）  ＶＴＸＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５８］；
ｏ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：５９］；または
ｐ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＸＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：６７］；
から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなるペプチド複合体であって、ここでＸはシステインまたはホモシステインであり、ここで上記ペプチド中の少なくとも一つのＸは脂質含有部分に共有結合している、
段落１〜５８のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６３８】
６０．  上記ペプチドは、
ａ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：７９］；
ｂ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８０］；
ｃ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＣＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８１］；
ｄ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：８２］；
ｅ）  ＡＣＤＴＡＣＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８３］；
ｆ）  ＶＴＣＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８４］；
ｇ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８５］；
ｈ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＣＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８６］；
ｉ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８７］；
ｊ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８８］；
ｋ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＣＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：８９］；
ｌ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：９０］；
ｍ）  ＡＣＮＴＡＣＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９１］；
ｎ）  ＶＴＣＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９２］；
ｏ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９３］；または
ｐ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＣＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９４］；
から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなるペプチド複合体であって、
ここで上記ペプチド中の少なくとも一つのＣは脂質含有部分に共有結合している、
段落１〜５９のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６３９】
６１．  上記ペプチドは、
ａ）  ＸＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１００］；
ｂ）  ＸＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０１］；
ｃ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０２］；
ｄ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１０３］；
ｅ）  ＸＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０４］；
ｆ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０５］；
ｇ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１０６］；
ｈ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１０７］；
ｉ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１０８］；
ｊ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＸＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１０９］；
ｋ）  ＸＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１０］；
ｌ）  ＸＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１１］；
ｍ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１２］；
ｎ）  ＸＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１１３］；
ｏ）  ＸＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１４］；
ｐ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１５］；
ｑ）  ＸＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１１６］；
ｒ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１１７］；
ｓ）  ＶＴＨＸＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１１８］；または
ｔ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＸＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＸＡＦ  ［配列番号：１１９］；
から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなるペプチド複合体であって、ここでＸはシステインまたはホモシステインであり、ここで上記ペプチド中の少なくとも二つのＸは脂質含有部分に共有結合している、
請求項１〜６０のいずれか一項に記載のペプチド複合体。
【０６４０】
６２．  上記ペプチドは、
ａ）  ＣＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２０］；
ｂ）  ＣＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２１］；
ｃ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＣＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２２］；
ｄ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１２３］；
ｅ）  ＣＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２４］；
ｆ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＣＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２５］；
ｇ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１２６］；
ｈ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＣＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：９９］；
ｉ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１２７］；
ｊ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＣＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１２８］；
ｋ）  ＣＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１２９］；
ｌ）  ＣＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３０］；
ｍ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＣＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３１］；
ｎ）  ＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１３２］；
ｏ）  ＣＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３３］；
ｐ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＣＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３４］；
ｑ）  ＣＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１３５］；
ｒ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＣＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ  ［配列番号：１３６］；
ｓ）  ＶＴＨＣＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１３７］；または
ｔ）  ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＣＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＣＡＦ  ［配列番号：１３８］；
から選択されるアミノ酸配列を含む、またはからなるペプチド複合体であって、ここで上記ペプチド中の少なくとも二つのＣは脂質含有部分に共有結合している、
段落１〜６１のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６４１】
６３．  上記ペプチド複合体およびα−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）はそれぞれ独立に、ＣＧＲＰ受容体における第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）およびＣＧＲＰ受容体における第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）を有する、段落１〜６２のいずれか１つに記載のペプチド複合体；
ここで、ＣＧＲＰ受容体における第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）は、受容体およびペプチド複合体またはα−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）をインキュベートした後であり、アンタゴニスト力価値を決定する前に受容体を洗浄しない場合の値である；
ここで、ＣＧＲＰ受容体における第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）は、受容体およびペプチド複合体またはα−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）をインキュベートした後であり、アンタゴニスト力価値を決定する前に受容体を洗浄した後の値である；
ここで、第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）は、第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）より小さい；および
ペプチド複合体の第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）およびペプチド複合体の第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）の間のアンタゴニスト力価の変化倍率の減少は、α−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）の第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）およびα−ＣＧＲＰ８−３７（配列番号：９６）の第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）の間のアンタゴニスト力価の変化倍率の減少より小さい。
【０６４２】
６４．    ペプチド複合体の第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）およびペプチド複合体の第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）の間のアンタゴニスト力価の変化倍率の減少は、約５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、９、８、７、６、５、４、３、または２未満であり、ここでＣＧＲＰ受容体におけるアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）は、ｃＡＭＰアッセイによって測定され、およびここでＣＧＲＰ受容体は、たとえば本明細書の実施例に記載されるように、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１  ＣＧＲＰ受容体である、段落６３に記載のペプチド複合体。
【０６４３】
６５．  ペプチド複合体の第一のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）およびペプチド複合体の第二のアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）の間のアンタゴニスト力価の変化倍率の減少は、約２０、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、または２未満であり、ここでＣＧＲＰ受容体におけるアンタゴニスト力価値（ｐＡ2）は、ｃＡＭＰアッセイによって測定され、およびここでＣＧＲＰ受容体は、たとえば本明細書の実施例に記載されるように、ＣＴＲ／ＲＡＭＰ１  ＡＭＹ１  ＣＧＲＰ受容体である、段落６３または６４に記載のペプチド複合体。
【０６４４】
６６．  段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体；および薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【０６４５】
６７．  段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体；および使用説明書を含むキット。
【０６４６】
６８．  治療有効量の段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体の対象への投与を含む、それを必要とする対象におけるＣＣＧＲ受容体を拮抗する方法。
【０６４７】
６９．  治療有効量の段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体の対象への投与を含む、それを必要とする対象においてＣＧＲＰ受容体が介在または調節する、または過剰なＣＧＲＰ受容体活性化を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法。
【０６４８】
７０．  治療有効量の段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体を対象に投与することを含む、それを必要とする対象における血管拡張の増加に関連する、またはそれを特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法。
【０６４９】
７１．  治療有効量の段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体を対象に投与することを含む、それを必要とする対象における熱傷、循環性ショック、更年期の顔面紅潮、喘息、敗血症、神経性炎症、炎症性皮膚疾患（たとえば、乾癬および接触性皮膚炎）、アレルギー性鼻炎、関節障害（たとえば、関節炎、および顎関節障害、好ましくは関節炎）、悪液質（たとえば、がん誘発性悪液質）、疼痛、たとえば頭蓋顔面痛障害（たとえば、片頭痛、頭痛、三叉神経痛、および歯痛、好ましくは片頭痛）、および代謝障害または症候群（たとえば、肥満、ＩＩ型糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、および血栓症）からなる群から選択される疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療する方法。
【０６５０】
７２．  ＣＧＲＰ受容体の拮抗における使用のための段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６５１】
７３．  ＣＧＲＰ受容体が介在または調節する、または過剰なＣＧＲＰ受容体活性化を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療における使用のための段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６５２】
７４．  血管拡張の増加に関連する、またはそれを特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療における使用のための段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６５３】
７５．  熱傷、循環性ショック、更年期の顔面紅潮、喘息、敗血症、神経性炎症、炎症性皮膚疾患（たとえば、乾癬および接触性皮膚炎）、アレルギー性鼻炎、関節障害（たとえば、関節炎、および顎関節障害、好ましくは関節炎）、悪液質（たとえば、がん誘発性悪液質）、疼痛、たとえば頭蓋顔面痛障害（たとえば、片頭痛、頭痛、三叉神経痛、および歯痛、好ましくは片頭痛）、および代謝障害または症候群（たとえば、肥満、ＩＩ型糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、および血栓症）からなる群から選択される疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療における使用のための段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０６５４】
７６．  ＣＧＲＰ受容体を拮抗するための医薬の製造における、段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体の使用。
【０６５５】
７７．  ＣＧＲＰ受容体が介在または調節する、または過剰なＣＧＲＰ受容体活性化を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療のための医薬の製造における、段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体の使用。
【０６５６】
７８．  血管拡張の増加に関連する、またはそれを特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療のための医薬の製造における、段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体の使用。
【０６５７】
７９．  熱傷、循環性ショック、更年期の顔面紅潮、喘息、敗血症、神経性炎症、炎症性皮膚疾患（たとえば、乾癬および接触性皮膚炎）、アレルギー性鼻炎、関節障害（たとえば、関節炎、および顎関節障害、好ましくは関節炎）、悪液質（たとえば、がん誘発性悪液質）、疼痛、たとえば頭蓋顔面痛障害（たとえば、片頭痛、頭痛、三叉神経痛、および歯痛、好ましくは片頭痛）、および代謝障害または症候群（たとえば、肥満、ＩＩ型糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、および血栓症）からなる群から選択される疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の治療のための医薬の製造における、段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体の使用。
【０６５８】
８０．  ＣＧＲＰ受容体を拮抗することが、ＣＧＲＰ受容体が介在または調節する、または過剰なＣＧＲＰ受容体活性化を特徴とする疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を治療することを含む、段落６８、７２、および７６のいずれか一つに記載の方法、使用のための化合物、または使用。
【０６５９】
８１．  疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は、熱傷、循環性ショック、更年期の顔面紅潮、喘息、敗血症、神経性炎症、炎症性皮膚疾患（たとえば、乾癬および接触性皮膚炎）、アレルギー性鼻炎、関節障害（たとえば、関節炎、および顎関節障害、好ましくは関節炎）、悪液質（たとえば、がん誘発性悪液質）、疼痛、たとえば頭蓋顔面痛障害（たとえば、片頭痛、頭痛、三叉神経痛、および歯痛、好ましくは片頭痛）、および代謝障害または症候群（たとえば、肥満、ＩＩ型糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、および血栓症）からなる群から選択される、段落６９、７３、７７、および８０のいずれか一つに記載の方法、使用のための化合物、または使用。
【０６６０】
８２．  疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は疼痛または代謝障害から選択される、段落６９〜７１、７３〜７５、および７７〜８１のいずれか一つに記載の方法、使用のための化合物、または使用。
【０６６１】
８３．  疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は疼痛である、段落６９〜７１、７３〜７５、および７７〜８２のいずれか一つに記載の方法、使用のための化合物、または使用。
【０６６２】
８４．  疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は片頭痛または頭痛（たとえば、群発頭痛、および外傷後頭痛）である、段落６９〜７１、７３〜７５、および７７〜８３のいずれか一つに記載の方法、使用のための化合物、または使用。
【０６６３】
８５．  疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）または疾患（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）は片頭痛である、段落６９〜７１、７３〜７５、および７７〜８４のいずれか一つに記載の方法、使用のための化合物、または使用。
【０６６４】
８６．  細胞およびＣＧＲＰ受容体を拮抗するのに有効な量の段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体を、接触させることを含む、ＣＧＲＰ受容体を拮抗する方法。
【０６６５】
８７．  上記方法は、
（Ａ）カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドのアミノ酸を含むアミノ酸複合体を提供し、ここでアミノ酸はスルフィド基の硫黄原子を介して脂質含有部分に共有結合されている；および
アミノ酸複合体のアミノ酸を一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドにカップリングして、段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体を提供すること；または
（Ｂ）カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドのペプチド断片を含むペプチド複合体を提供し、ここでペプチド断片の少なくとも一つのアミノ酸がスルフィド基の硫黄原子を介して脂質含有部分に共有結合している；および
ペプチド複合体のアミノ酸を一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドにカップリングして、段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体を提供すること
を含む、段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体を製造するための方法。
【０６６６】
８８．  ペプチド断片を含むアミノ酸複合体またはペプチド複合体は、固相担体に結合している；またはアミノ酸複合体またはペプチド複合体は、固相に結合したアミノ酸またはペプチドと結合している、段落８７に記載の方法。
【０６６７】
８９．  炭素―炭素二重結合を含む、脂質含有結合パートナー、および
チオールを含む少なくとも一つのアミノ酸を含む、アミノ酸含有結合パートナーを
脂質含有結合パートナーをアミノ酸含有結合パートナーに結合させるのに有効な条件下で、
反応させることを含む、段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体を製造するための方法。
【０６６８】
９０．  上記条件は、チオールによる炭素―炭素二重結合のヒドロチオール化によって、脂質含有結合パートナーをアミノ酸含有結合パートナーに結合させるのに有効である、段落８９の方法。
【０６６９】
９１．  上記チオールを含む少なくとも一つのアミノ酸はシステインまたはホモシステインである、段落８９または９０に記載の方法。
【０６７０】
９２．  上記チオールを含む少なくとも一つのアミノ酸はシステインである、段落８９〜９１のいずれか一つに記載の方法。
【０６７１】
９３．  上記脂質含有結合パートナーは、化学式（Ａ−１）の化合物であり：
【０６７２】
【化３８】
2021501784.tif 000042
【０６７３】
ここで、
ＺおよびＺ1は、Ｏ−、−ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ2−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−、および−ＮＲＣ（Ｏ）ＮＲ−からなる群からそれぞれ独立に選択される；
Ｒは水素またはＣ1-6脂肪族である；
ｍは０〜４の整数である；
ｎは１または２である；
ｍの各々の例におけるＲ1およびＲ2は、それぞれ独立に水素、Ｃ1-6脂肪族である；またはＲ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、それぞれ独立に水素、またはＣ1-6脂肪族である；またはＲ3はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；
Ｌ1およびＬ2は、それぞれ独立にＣ5-21脂肪族、またはＣ4-20ヘテロ脂肪族である；
ここで：
Ｒ3がＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである場合、Ｒ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルではない；および
ｍが２〜４の整数である場合、１個以下のＲ1はＬ2−Ｚ1−Ｃ1-6アルキルである；および
ここで、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｌ1、およびＬ2のいずれかに存在する脂肪族、アルキル、またはヘテロ脂肪族は、一つまたは複数の独立に選択された任意の置換基で任意に置換される、
段落８９〜９２のいずれか一つに記載の方法。
【０６７４】
９４．  上記脂質含有結合パートナーは、化学式（ＩＩ）の化合物であり：
【０６７５】
【化３９】
2021501784.tif 000043
【０６７６】
ここで、
ｍ、Ｌ1、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、およびＲ5は、段落９３で定義されている、または段落１１〜２８のいずれか一つで化学式（Ａ）または（Ｉ）の部分に定義されている；およびＺ1は存在する場合、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である、段落９３のいずれか一つの方法。
【０６７７】
９５．  Ｚ、Ｚ1、Ｒ、ｍ、ｎ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｌ1、および／またはＬ2は、段落９２もしくは９３に、または段落１１〜２８のいずれか一つにおける化学式（Ａ）もしくは（Ｉ）の部分に定義されている
【０６７８】
９６．  上記脂質含有結合パートナーは、脂肪酸のビニルエステル、たとえばパルミチン酸ビニルである、段落８９〜９５のいずれか一つに記載の方法。
【０６７９】
９７．  脂質含有結合パートナー、およびペプチドの少なくとも一つのアミノ酸はチオールを含む、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドを含む、アミノ酸含有結合パートナーを反応させて段落１〜６５のいずれか一つのペプチド複合体を提供することを含む、段落８９〜９６のいずれか一つに記載の方法。
【０６８０】
９８．  脂質含有結合パートナー、およびペプチドの少なくとも一つのアミノ酸はチオールを含む、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドのペプチド断片を含むアミノ酸含有結合パートナーを反応させること；および
ペプチド複合体のアミノ酸を一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドにカップリングして、段落１〜６５のいずれか一つのペプチド複合体を提供すること
を含む、段落８９〜９６のいずれか一つに記載の方法。
【０６８１】
９９．  脂質含有結合パートナー、およびアミノ酸がチオールを含むカルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ペプチドのアミノ酸を含むアミノ酸含有結合パートナーを反応させること；ならびに
アミノ酸複合体のアミノ酸を一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドにカップリングして、段落１〜６５のいずれか一つのペプチド複合体を提供すること
を含む、段落８９〜９６のいずれか一つに記載の方法。
【０６８２】
１００．  脂質含有結合パートナーおよび固相担体に結合したアミノ酸含有結合パートナーを反応させて、固相結合アミノ酸複合体またはペプチド複合体を提供することを含む、段落８９〜９９のいずれか一つに記載の方法。
【０６８３】
１０１．  一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドを固相結合アミノ酸複合体またはペプチド複合体にカップリングして、固相結合ペプチド複合体を提供することを含む、段落８７〜１００のいずれか一つに記載の方法。
【０６８４】
１０２．  固相結合ペプチド複合体は、段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体のアミノ酸配列を有する、段落８８、１００、および１０１のいずれか一つに記載の方法。
【０６８５】
１０３．  ペプチド複合体を固相から切断することをさらに含む、段落８８、１００〜１０２のいずれか一つに記載の方法。
【０６８６】
１０４．  一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドはＳＰＰＳによってカップリングされる、段落８７、８８、および９８〜１０３のいずれか一つに
【０６８７】
１０５．  固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）によってアミノ酸含有結合パートナーのペプチドのアミノ酸配列を合成すること；
脂質含有結合パートナーおよび固相に結合したアミノ酸含有結合パートナーを反応させて、固相結合ペプチド複合体を提供すること；および
ペプチド複合体を固相から切断して段落１〜６５のペプチド複合体を提供すること
を含む、段落９７、１００、および１０２〜１０４のいずれか一つに記載の方法。
【０６８８】
１０６．  ＳＰＰＳによってアミノ酸含有結合パートナーのペプチドのアミノ酸配列を合成すること；
アミノ酸含有結合パートナーを固相から切断すること；および
脂質含有結合パートナーおよびアミノ酸含有結合パートナーを反応させて段落１〜６５のペプチド複合体を提供すること
を含む、段落９７および１０２〜１０４のいずれか一つに記載の方法。
【０６８９】
１０７．  ペプチド断片を含むペプチド複合体のアミノ酸および必要に応じて一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドをＳＰＰＳによって固相結合アミノ酸またはペプチドにカップリングして、段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体のアミノ酸配列を有する固相結合ペプチド複合体を提供すること；および
ペプチド複合体を固相から切断して、段落１〜６５のペプチド複合体を提供すること
を含む、段落８７、８８、９８、および１００〜１０４のいずれか一つに記載の方法。
【０６９０】
１０８．  アミノ酸複合体のアミノ酸および必要に応じて一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチドをＳＰＰＳによって固相結合アミノ酸またはペプチドにカップリングして、段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体のアミノ酸配列を有する固相結合ペプチド複合体を提供すること；および
ペプチド複合体を固相から切断して、段落１〜６５のいずれか一つのペプチド複合体を提供すること
を含む、段落８７、８８、９９、および１００〜１０４のいずれか一つに記載の方法。
【０６９１】
１０９．  ペプチドまたはペプチド複合体のＮ末端アミノ酸のＮα−アミノ基をアシル化、たとえばアセチル化することを含む、段落８７〜１０８のいずれか一つに記載の方法。
【０６９２】
１１０．  ＳＰＰＳの間のペプチド凝集を低減する一つまたは複数のアミノ酸および／または一つまたは複数のペプチド、たとえば、シュードプロリンジペプチド、たとえばＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ［ψ（Ｍｅ，Ｍｅ）Ｐｒｏ］−ＯＨをカップリングすることを含む、段落８７〜１０９のいずれか一つに記載の方法。
【０６９３】
１１１．  保護基で保護されたチオールを含む少なくとも一つのアミノ酸を含む、保護されたアミノ酸含有結合パートナーを提供すること；および
チオールから保護基を除去して、アミノ酸含有結合パートナーを提供すること
を含む、段落８９〜１１０のいずれか一つに記載の方法。
【０６９４】
１１２．  保護されたアミノ酸含有結合パートナーは、チオールを含む少なくとも一つのアミノ酸の保護基とは異なる一つまたは複数の保護基で保護された一つまたは複数の追加のアミノ酸を含む；および方法は、チオールを含む少なくとも一つのアミノ酸のチオールから保護基を選択的に除去して、アミノ酸含有結合パートナーを提供する、段落１１１に記載の方法。
【０６９５】
１１３．  ペプチドを固相担体から切断する際に、一つまたは複数またはすべての保護基が除去される、段落８８、および１００〜１１２のいずれか一つに記載の方法。
【０６９６】
１１４．  ＳＰＰＳはＦｍｏｃ−ＳＰＰＳである、段落８８、および１００〜１１２のいずれか一つに記載の方法。
【０６９７】
１１５．  脂質含有結合パートナーをアミノ酸含有結合パートナーに結合するのに有効な条件は、熱開始剤の熱分解または光化学開始剤の光化学的分解によって開始される一つまたは複数のフリーラジカルの生成を含む、段落８９〜１１４のいずれか一つに記載の方法。
【０６９８】
１１６．  上記熱開始剤はＡＩＢＮである、および／または上記光化学開始剤はＤＭＰＡである、段落１１５に記載の方法。
【０６９９】
１１７．  フリーラジカル開始剤の光化学的分解は、約３６５  ｎｍの波長を有するＵＶ光の照射を含む、段落１１５または１１６に記載の方法。
【０７００】
１１８．  反応は溶媒を含む液体媒体中で行われ、当該溶媒はＮＭＰ、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、またはそれらの混合物を含む、段落８９〜１１７のいずれか一つに記載の方法。
【０７０１】
１１９．  反応は、副産物の形成を阻害する、および／または所望の複合体の収率または変換を改善する一つまたは複数の添加剤の存在下で行われる、段落８９〜１１８のいずれか一つに記載の方法。
【０７０２】
１２０．  上記一つまたは複数の添加剤は、外来チオール、酸、オルガノシラン、またはそれらの任意の二つ以上の組み合わせである、段落１１９に記載の方法。
【０７０３】
１２１．  外来チオールは立体障害チオール、たとえばｔｅｒｔ−ブチルメルカプタンである、段落１１９または１２０に記載の方法。
【０７０４】
１２２．  上記酸は有機強酸、たとえばＴＦＡである、段落１２０に記載の方法。
【０７０５】
１２３．  上記オルガノシランはトリアルキルシラン、たとえばＴＩＰＳである、段落１２０に記載の方法。
【０７０６】
１２４．  ＣＧＲＰ受容体は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１  ＣＧＲＰ受容体、またはＣＴＲ／ＲＡＭＰ１  ＡＭＹ１  ＣＧＲＰ受容体である、段落１〜１２３のいずれか一つに記載のペプチド複合体、医薬組成物、キット、方法、使用のためのペプチド複合体、使用、または製造方法。
【０７０７】
１２５．  段落８７〜１２３のいずれか一つの方法によって製造された、段落１〜６５のいずれか一つに記載のペプチド複合体。
【０７０８】
特許、特許出願、雑誌記事、書籍等を含むがこれらに限定されない、本明細書で言及される任意の文書は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本書で使用されているセクションの見出しは、組織化のみを目的としており、説明されている主題を制限するものとして解釈されるべきではない。
【０７０９】
本発明を、例として、また特定の実施形態を参照して説明してきたが、本発明の範囲から逸脱することなく、改変および／または改良を行うことができることを理解されたい。
【図１】
2021501784.tif 000047
【図２】
2021501784.tif 000048
【図３】
2021501784.tif 000049
【図４】
2021501784.tif 000050
【図５】
2021501784.tif 000051
【図６】
2021501784.tif 000052
【配列表】
2021501784000001.app
【国際調査報告】
2021501784.tif 000053
2021501784.tif 000054
2021501784.tif 000055
2021501784.tif 000056
2021501784.tif 000057
2021501784.tif 000058
2021501784.tif 000059