(57)【要約】本発明は、一般に、脳虚血または脳梗塞を含むがこれらに限定されない認知障害および神経障害の治療または予防のための神経保護剤としての環状プロリルグリシン（「環状ＰＧ」または「ｃＰＧ」）およびその類似体および模倣体の使用に関する。本発明は、てんかん、周産期の非窒息症、無酸素症、脳外傷、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病などの慢性神経変性疾患の治療および予防、ならびに抗痙攣薬としての治療薬を提供する。本発明はまた、一般に、剤形を調製するための製造方法を提供する。本発明はさらに一般に、うつ病および他の精神障害の治療または予防のための神経保護剤および神経再生剤としての環状プロリルグリシンおよびその類似体および模倣体の使用に関する。
2021524864.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
傷害または疾患による損傷の結果としてのニューロンおよびグリア細胞の損失を再生させる方法であって、
ａ）ニューロンおよびグリア細胞の損失の再生を必要とする対象を提供すること；および
ｂ）環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類縁体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、あるいは環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ぶ）、またはそれらの組み合わせを、新しいニューロンおよびグリア細胞を再生させるのに有効な量で前記対象に投与すること；
を含み、
前記対象において、前記ニューロンが再生され、前記グリア細胞の損失が再生され、
前記ｃＰＧ化合物が、中枢神経系における神経新生剤として機能し、
傷害または疾患による損傷の結果としての前記ニューロンおよびグリア細胞の損失が再生される、方法。
【請求項２】
前記投与が、薬剤学的に許容される担体を含む医薬組成物の形態である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ｃＰＧ化合物の前記有効量が、体重１ｋｇあたり約１μｇから約１００ｍｇである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記投与が人工脳脊髄液との組み合わせである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記投与が静脈内投与である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記投与が、神経保護剤、インスリン様成長因子−Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）またはインスリン様成長因子−ＩＩ（ＩＧＦ−ＩＩ）と組み合わされる、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記投与が、抗炎症剤、抗インテグリンα４サブユニット試薬と組み合わされる、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
傷害または疾患による損傷の結果としての損傷を受けたニューロンおよびグリア細胞の損失を修復する方法であって、
ａ）前記ニューロンおよびグリア細胞の損失の再生を必要とする対象を提供すること；および
ｂ）環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類縁体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ぶ）またはそれらの組み合わせを、新しいニューロンおよびグリアを再生させるのに有効な量で投与すること；
を含み、
前記対象において、前記ニューロンが再生され、前記グリア細胞の損失が再生され；前記ｃＰＧ化合物が、中枢神経系におけるニューロレスキュー剤として機能し、前記傷害または疾患による損傷の結果としての損傷を受けたニューロンおよびグリア細胞の損失が修復される、方法。
【請求項９】
環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−２−アルキルプロリン、または環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）またはその組み合わせが、体重１ｋｇあたり約１μｇから約１００ｍｇである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記投与が、その薬学的に許容される担体を含む医薬組成物の形態である、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
前記投与が人工脳脊髄液との組み合わせである、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
前記投与が、神経保護剤、インスリン様成長因子−Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）またはインスリン様成長因子−ＩＩ（ＩＧＦ−ＩＩ）と組み合わされる、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
前記投与が抗炎症剤と組み合わされる、請求項８に記載の方法。
【請求項１４】
必要とする哺乳類の疾患、傷害、または状態によって引き起こされる認知障害を軽減または緩和する方法であって、
ａ）疾患、傷害、または状態によって引き起こされる認知障害の軽減または緩和を必要としている哺乳動物を提供すること；
ｂ）薬学的に有効な量の環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）またはそれらの組み合わせを前記哺乳動物に投与すること；
を含み、
前記疾患が、アルツハイマー病、ハンチントン病、レビー小体病、認知症、および多病巣性認知症、記憶喪失、アルツハイマー病に伴う注意欠陥症状、アルツハイマー病に伴う神経変性、混合血管性認知症、退行性認知症、老年前認知症、老年性認知症、パーキンソン病に伴う認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性からなる群から選択され、
前記傷害が、神経毒性傷害、脳低酸素／虚血、外傷性脳傷害、冠動脈バイパス手術からなる群から選択され、前記状態が、正常な加齢、加齢性記憶喪失、記憶障害、コリン作動性低機能、脳内血管狭窄または閉塞、神経炎症、軽度認知障害、脳萎縮、前頭側頭葉変性、ピック病、ＨＩＶ感染、ダウン症、およびシナプス可塑性の喪失からなる群から選択され、
前記哺乳動物は、アルツハイマー病、記憶喪失、アルツハイマー病に関連した注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連した神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、前老年期認知症、老人性認知症、パーキンソン病に関連した認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性を含む疾患、傷害または状態によって引き起こされる認知障害が緩和または軽減される、方法。
【請求項１５】
前記環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−２−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせは、水溶液と、１種以上の薬剤学的に許容される賦形剤、添加剤、担体またはアジュバントとを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ぶ）、またはそれらの組み合わせは、錠剤またはカプセル中の１種以上の賦形剤、担体、添加剤、アジュバントまたは結合剤をさらに含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記障害が、軽度認知障害、アルツハイマー病、記憶喪失、アルツハイマー病に関連する注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連する神経変性、混合血管由来の認知症、変性由来の認知症、老年期前の認知症、老年性認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
前記環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ぶ）、またはそれらの組み合わせが、経口、腹腔内、血管内、末梢循環、皮下、眼窩内、眼球内、髄腔内、膀胱内、外用、輸液、植込み、エアゾール、吸入、瘢痕化、カプセル内、筋肉内、経鼻、頬、経皮、肺、直腸、経膣、またはそれらの組み合わせの投与経路により投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
前記薬剤学的に有効な量が、前記哺乳動物のキログラム質量あたり約０．００１ミリグラム（ｍｇ／ｋｇ）の下限値と、前記哺乳動物の約１００ｍｇ／ｋｇの上限値とを有する、請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】
前記認知障害がコリン作動性低機能によって引き起こされる、請求項１４に記載の方法。
【請求項２１】
前記コリン作動性低機能がスコポラミンによって引き起こされる、請求項１４に記載の方法。
【請求項２２】
前記認知障害が、前記哺乳動物の海馬の顆粒細胞層（ＣＡ１）におけるグルタミン酸受容体の減少によって引き起こされる、請求項１４に記載の方法。
【請求項２３】
記環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせが、前記哺乳動物の海馬の顆粒細胞層（ＣＡ１）におけるＡＭＰＡ受容体の増加を引き起こす、請求項１４に記載の方法。
【請求項２４】
前記環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせが、前記哺乳動物の海馬の顆粒細胞層（ＣＡ１）および錐体細胞層（ＣＡ３）領域において、前記ｃＰＧ化合物によって引き起こされる神経細胞の可塑性を増加させる、請求項１４に記載の方法。
【請求項２５】
前記脳低酸素／虚血が外傷性脳損傷によって引き起こされる、請求項１４に記載の方法。
【請求項２６】
前記認知障害が多発梗塞性認知症によって引き起こされる、請求項１４に記載の方法。
【請求項２７】
前記認知障害が冠動脈バイパス手術（ＣＡＢＧ）によって引き起こされる、請求項１４に記載の方法。
【請求項２８】
前記認知障害が、アルツハイマー病に起因する認知障害、記憶喪失、アルツハイマー病に関連する注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連する神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、老年期前の認知症、老人性認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性である、請求項１４に記載の方法。
【請求項２９】
必要とする哺乳動物における疾患、傷害または状態に起因または関連する軽度認知機能障害の症状を予防する方法であって、
ａ．疾患、傷害または状態に起因する認知障害の予防を必要とする哺乳類を提供すること；
ｂ．薬学的に有効な量の環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせを前記哺乳動物に投与すること；
を含み、
前記疾患が、アルツハイマー病、ハンチントン病、レビー小体病、認知症、および多病巣性認知症、記憶喪失、アルツハイマー病に伴う注意欠陥症状、アルツハイマー病に伴う神経変性、混合血管性認知症、退行性認知症、老年前認知症、老年性認知症、パーキンソン病に伴う認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性からなる群から選択される、方法。
【請求項３０】
必要とする哺乳動物における疾患、傷害、または状態に起因または関連する軽度認知機能障害の症状を治療する方法であって、
ａ．疾患、傷害、または状態に起因する認知障害の治療を必要とする哺乳類を提供すること；
ｂ．薬学的に有効な量の環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせを前記哺乳動物に投与すること；
を含み、
前記疾患が、アルツハイマー病、ハンチントン病、レビー小体病、認知症、および多病巣性認知症、記憶喪失、アルツハイマー病に伴う注意欠陥症状、アルツハイマー病に伴う神経変性、混合血管性認知症、退行性認知症、老年前認知症、老年性認知症、パーキンソン病に伴う認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性からなる群から選択される、方法。
【請求項３１】
必要とする哺乳動物における疾患、傷害、または状態に起因または関連する哺乳動物における神経細胞の成長またはシナプス形成を増加させる方法であって、
ａ．神経細胞の成長またはシナプス形成の増加を必要とする哺乳動物を提供すること；
ｂ．薬学的に有効な量の環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類縁体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−２−アルキルプロリン、または環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせを含む組成物の有効量を前記哺乳動物に投与すること；
を含み、
前記疾患が、アルツハイマー病、ハンチントン病、レビー小体病、認知症、および多病巣性認知症、記憶喪失、アルツハイマー病に伴う注意欠陥症状、アルツハイマー病に伴う神経変性、混合血管性認知症、変性性認知症、老人性認知症、老人性認知症、パーキンソン病に伴う認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性からなる群から選択される、方法。
【請求項３２】
神経変性障害、虚血性障害、神経外傷、学習および記憶障害、またはそれらの組み合わせである中枢神経系障害の少なくとも１つの症状を示す患者の神経組織における神経新生を、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン）または環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせ、またはｃＰＧ化合物と同じ、実質的に同じ、または類似の機能を有するその機能性または活性アナログ、バリアント、誘導体、およびそれらの組み合わせを投与することによって調節する方法であって、その薬剤は、患者における神経新生を調節し、それにより患者の神経組織における神経新生を調節する、方法。
【請求項３３】
前記神経系障害が、アルツハイマー病、パーキンソン病およびパーキンソン障害、ハンチントン病多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、シャイ・ドレーガー症候群、進行性上核麻痺、レビー小体型疾患、脊髄虚血、虚血性脳卒中、脳梗塞、脊髄損傷、がん関連脳・脊髄損傷、多病棟認知症、老人性認知症、軽度認知障害、うつ病、外傷性損傷である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記神経新生の調節が、前記神経組織におけるＧＰＣＲ受容体の活性化によって行われる、請求項３２に記載の方法。
【請求項３５】
薬剤が、１日あたり約０．１ｍｇから約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．５ｍｇから約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．２ｍｇから約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇから約５０ｍｇ／ｋｇ／日、または約１０マイクログラムから約１００ｍｇ／ｋｇ／日の環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせの量で投与される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３６】
対象のうつ病または他の心理的障害を治療する方法であって、
ａ．うつ病またはその他の心理的障害の治療を必要とする対象を提供すること；および
ｂ．薬学的に有効な量の環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシルアルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせを前記対象に投与すること；
を含み、前記対象はうつ病または他の心理的障害の治療を受けている、方法。
【請求項３７】
前記環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせが、水溶液と、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤、添加剤、担体またはアジュバントとを含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはその組み合わせが、錠剤またはカプセル中の１つ以上の賦形剤、担体、添加剤、アジュバントまたは結合剤をさらに含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項３９】
前記環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせが、経口、腹腔内、血管内、末梢循環、皮下、眼窩内、眼球内、髄腔内、膀胱内、外用、輸液、植込み、エアゾール、吸入、瘢痕化、カプセル内、筋肉内、経鼻、頬、経皮、肺、直腸、経膣、またはそれらの組み合わせの投与経路により投与される、請求項３６に記載の方法。
【請求項４０】
前記薬学的に有効な量が、前記哺乳動物の約０．１ミリグラム／キログラム質量（ｍｇ／ｋｇ）の下限値および前記哺乳動物の約１０ミリグラム／ｋｇの上限値を有する、請求項３６に記載の方法。
【請求項４１】
前記薬剤学的に有効な量が、経口的に投与される１日あたり約２０ｍｇから約８０ｍｇの間であり、医師の処方箋命令により、一部の重症例では１日あたり約１００ｍｇまでであり得る、請求項３６に記載の方法。
【請求項４２】
それを必要としている対象のうつ病または他の精神障害の症状を予防する方法であって、
ａ．うつ病または他の精神障害の予防を必要とする対象を提供すること；
ｂ．薬学的に有効な量の環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシルアルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせを前記対象に投与すること；
を含み、前記対象はうつ病または他の精神障害の症状の発症が予防される、方法。
【請求項４３】
うつ病または他の精神障害の症状を治療する方法であって、
ａ．うつ病または他の精神障害の治療を必要とする対象を提供すること；
ｂ．薬学的に有効な量の環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせを前記哺乳動物に投与すること；
を含み、前記対象はうつ病または他の精神障害の症状が治療される、方法。
【請求項４４】
気鬱状態にある患者を治療する方法であって、
ａ．うつ病または他の精神疾患の治療を必要とする対象を提供すること；
ｂ．気鬱（mental depression）に苦しんでいる患者に、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類縁体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせの薬剤学的に有効な量（例えば、１日あたり２０ｍｇから８０ｍｇ、これらに限定されない）を投与する；
ことを含み、前記対象は気鬱が治療される、方法。
【請求項４５】
それを必要としている対象におけるうつ病または他の精神障害の症状を軽減または緩和するための方法であって、
ａ．うつ病または他の精神障害の軽減または緩和を必要とする対象を提供すること；
ｂ．薬学的に有効な量の環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせを前記哺乳動物に投与すること；
を含み、前記対象はうつ病または他の精神障害の症状が緩和される、方法。
【請求項４６】
それを必要としている対象におけるうつ病または他の精神障害のカスケードを介入または予防するための方法であって、
ａ．うつ病または他の精神障害の介入または予防を必要とする対象を提供すること；
ｂ．薬学的に有効な量の環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））（総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせを前記哺乳動物に投与すること；
を含み、前記対象はうつ病または他の精神障害の症状が予防される、方法。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の相互参照】
【０００１】
本出願は、２０１８年５月２２日に出願された米国特許出願第６２／６７４，８５５号、２０１８年５月１５日に出願された米国特許出願第６２／６７１，４８５号、および２０１８年５月１５日に出願された米国特許出願第６２／６７１，４６６号の優先権の利益を主張し、これらの各々はそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
発明家ロイド・フン・ロイ・トランは、ロイ・Ｈからの法名変更を反映する。
【技術分野】
【０００２】
本発明は、一般に、ジケトピペラジンに構造的に関連する新規な環状ジペプチド化合物およびその治療的使用のための方法に関する。特に、本発明は、そのような化合物の神経保護活性および神経新生活性に関する。特に、本発明は、認知障害および関連する神経変性疾患および精神障害の治療および予防における、環状プロリルグリシン（「環状ＧＰ」または「ｃＰＧ」）およびｃＰＧ類似体、およびｃＰＧ化合物、薬学的に有効なその類似体、ならびにそれらの医薬組成物の使用に関する。本発明はまた、一般に、神経細胞およびグリア細胞を再生する材料および方法、または損傷した神経細胞およびグリア細胞を修復する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
軽度認知障害（ＭＣＩ）とは、年齢や学歴に応じて予想される以上に認知機能が低下している状態をいう。軽度認知障害とは、記憶などの認知機能に障害があり、年齢的には標準を超えているが、認知症の特徴である認知症には至らないものをいう。ＭＣＩの有病率は年齢によって異なる。年齢別のＭＣＩ有病率は以下の通りです。６０〜６４歳で６．７％、６５〜６９歳で８．４％、７０〜７４歳で１０．１％、７５〜７９歳で１４．８％、８０〜８４歳で２５．２％となっている。ＭＣＩを持つ人の半数以上が５年以内に認知症に進行する（非特許文献: 10.1212/WNL.0000000000004826.:https://en.wikipedia.org/wiki/PubMed_Identifier “\o”PubMed Identifier 29282327.）。
【０００４】
認知症は、記憶力や他の思考能力の低下に関連した症状のグループを説明する総合的な用語であり、日常活動を実行する人の能力を低下させるのに十分な重度の。アルツハイマー型認知症は、認知症の６０〜８０％を占めている。脳卒中の後に発症する血管性認知症は、認知症の中で２番目に多いタイプである。しかし、認知症の症状を引き起こす疾患は他にもたくさんあり、甲状腺の問題やビタミン不足などの可逆的なものもある。認知症の症状は様々ですが、以下の中核となる精神機能のうち少なくとも２つが著しく障害されていなければ認知症とは言えません：記憶、コミュニケーション、言語、集中力と注意力、推論力と判断力、視覚知覚です。
【０００５】
２０１８年には、米国で５５０万人以上、世界で５０００万人以上がアルツハイマー病に罹患している。参照：アルツハイマー病インターナショナルの世界アルツハイマーレポート２０１８）今後数十年間のアルツハイマー病の有病率の増加は、先進国と発展途上国を問わず、社会的・医療的システムに大きなプレッシャーをもたらすと予想されている。この病気と関連する疾患の進行や症状を止めたり、実質的に遅らせたり、遅らせたり、そうでなければ改善したり、快適さや緩和ケアを提供したりする治療法に対する長い間のアンメットニーズがある。
【０００６】
２０世紀初頭の先駆的な研究者であるラモン・イ・カハルは、次のように書いている：「脳の機能的な特殊化は、ニューロンに２つの大きな裂け目を課した。発達が終わると、軸索と樹状突起の成長と再生の源泉が取り返しのつかないほどに枯渇してしまうのは、このためである」（非特許文献２（神経中枢の微細な解剖学に関する新しいアイデア））。この仮説は、以前は１９世紀後半から２０世紀半ばまでさかのぼって神経科学の基本原理とされていたが、今では無効であることが証明された。
【０００７】
1966年、AltmanとGopalは、齧歯類の海馬をはじめとする脳の他の領域で、成体哺乳類の神経新生の証拠が発見されたことを示した。彼は、特に嗅球における神経新生の持続性に言及して、前前脳における細胞の増殖と移動が見られる出生後の神経新生のオートラジオグラフィーと組織学的研究を報告した（非特許文献３ (https://doi.org/10.1002/cne.901240303)）。
【０００８】
アルトマンの実験では、無傷の成体哺乳類の脳、神経再生は中枢神経系（ＣＮＳ）の機能と構造を維持している。チミジン−Ｈ３を６日齢と１３日齢のラットに腹腔内注射し、その後１時間から６０日間生存させた。短期間生存した動物から得られたオートラジオグラフィーデータを用いて、局所細胞増殖率を推定した。生存期間の長い動物は、生殖部位から移動チャネルを経て標的部位への新しい細胞の移動を推論し、その分化様式を決定するために使用された。マイクロニューロンの形成と分化は乳児期の間も続いているが、ほとんどの構造物ではその速度は低下している。小脳皮質の外顆粒層では、細胞の増殖が非常に高い速度で継続し、そこから分子層と内部顆粒層に細胞が移動する。
【０００９】
成体の再生ニューロンが既存の脳回路に統合され、神経障害の改善に寄与することが明らかになっている（非特許文献４）。
【００１０】
興味深いことに、神経新生は嗅球や海馬のレベルだけではなく、神経細胞のレベルでも発生していることが観測されている。この点で、このプロセスは、成体マウスの黒質でも発生することが示唆されており、神経変性疾患の治療のための研究の新しい分野を切り開いている (非特許文献５)。
【００１１】
Ｇｕｏ−ｌｉ  Ｍｉｎｇのレビュー論文によると、出生後のラット海馬で神経前駆体が発見されて以来、研究者たちは、ヒトを含むすべての哺乳類の中枢神経系（ＣＮＳ）の離散的な領域で、神経前駆体からの活発な神経前駆体が生涯にわたって継続していることを今、しっかりと確立している（非特許文献６）。
【００１２】
成体神経発生の発生過程と制御については、増殖、運命特定、神経細胞の成熟、標的化、新生神経細胞のシナプス統合などの理解に大きな進展がみられている。
【００１３】
これらの領域で機能的な神経幹細胞（ＮＳＣ）を維持する正確なメカニズムは解明されていないが、ＮＳＣは特定の病理学的条件に反応して神経細胞やグリアを回復させる能力を示している。
【００１４】
うつ病は、気分が持続的に落ち込んだり、活動への関心が薄れたりして、日常生活に著しい支障をきたすことを特徴とする精神衛生上の障害です。遺伝子、ストレスなどの要因、脳の化学的性質など、多くの要因がうつ病を引き起こす可能性がある。オックスフォード大学の疫学精神医学教授ジョン・ゲッデス氏によると、「うつ病は、私たちが持っている世界的な障害の単一の最大の貢献者であり、人類にとっての大きな課題である」とし、世界で約３億５０００万人に影響を与え、２００５年から２０１５年にかけてインスタンスは２０％近く増加している（世界保健機関（ＷＨＯ）と疾病対策センター）。
【００１５】
近年、精神的なうつ病の研究とその治療法の研究に多くの研究努力が費やされている。市販されている多くの薬は、うつ病を改善することができるが、いずれも望ましくない副作用を持っている。最近では、うつ病の重大な副作用の一つとして、自殺が報告されており、これが事実上、精神疾患による死亡原因の唯一のものとなっている。
【００１６】
本発明は、重篤な副作用を伴わないうつ病の治療方法を提供する。この方法によれば、環状プロリルグリシンおよびその薬学的に有効な類似体は、うつ病に苦しんでいる患者の潜在的な治療法として実証されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１７】
【非特許文献１】Petersen RC, Lopez O, Armstrong MJ, Getchius T, Ganguli M, Gloss D, Gronseth GS, Marson D, Pringsheim T, Day GS, Sager M, Stevens J, Rae-Grant A (January 2018). “Practice guideline update summary: Mild cognitive impainnent - Report of the Guideline Development, Dissemination, and implementation Subcommittee of the American Academy of Neurology”. Neurology. Special article. 90 (3): 1-10.
【非特許文献２】Ramon y Cajal, Santiago; L. Azoulay (1894). Les nouvelles idees sur la structure du systeme nerveux chez l'homme et chez les vertebres'
【非特許文献３】Altman J.（1966）and D. Gopal. “Autoradiographic and histological evidence of postnatal hippocampal neurogenesis in rats” Journal of Comparison Neurology- Volume 124, Issue 3, June 1965
【非特許文献４】Nakatomi H. Kuriu T. Okabe S. Yamamoto S. Hatano O. Kawahara N. Tamura A. Kirino T. Nakafuku M- Regeneration of hippocampal pyramidal neurons after ischemic brain injury by recruitment of endogenous neural progenitors. Cell 110:429-441, 2002
【非特許文献５】Zhao M. Momma S. Delfani K. Carlen M. Cassidy R M. Johansson C B. Brismar Brismar H. Shupliakov O. Frisen J. Janson A M (2003) Evidence for neurogenesis in the adult mammalian substantia nigra. Proc Natl Acad Sci USA 100:7925-7930
【非特許文献６】Guo-li Ming H. S. (2005) “Adult Neurogenesis in the Mammalian Central Nervous System”. Annu. Rev. Neurosci.28: 223-250.PMID 16022595
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明の一態様は、動物およびヒトにおける疾患および傷害の治療および予防に適した環状プロリルグリシン化合物を提供する。環状ＰＧは、ｃＰＧ、ｃＰＧ類似体、ｃＰＧペプチドミメティクス、および生体内でｃＰＧまたはｃＰＧ類似体の形成を促進または引き起こす関連化合物を含む群から選択される。
【００１９】
ｃＰＧ類似体の一例は、サイクリック（グリシル−Ｌ−プロリル−Ｌ−プロリル）であるか、またはサイクリックまたは本明細書ではｃ（ＰＧ）３と称される）と略される。
【００２０】
ＣＰＧ類似体の別の例は、本明細書において「ｃＧＡＬ」と称される環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−アルキルプロリンである。
【００２１】
ｃＰＧ、ｃ（ＰＧ）３、ｃＧＡＬ、および環状グリシリル−２−メチル−プロリン、ならびにそれらの薬学的に許容される塩を総称して、本明細書では「ｃＰＧ化合物」と呼ぶ。
【００２２】
また、環状グリシル−２−メチル−プロリンは、化合物の環状グリシル−２−アルキルプロリン）群に属する化合物である。
【００２３】
さらに、本明細書に開示されているか、または別の方法で当技術分野で知られているｃＰＧ化合物、その誘導体、その類縁体、および同様のもののいずれかを、薬学的に許容される塩の形で提供することができる。
【００２４】
好ましくは、ｃＰＧ化合物は、薬学的に許容される担体のような薬学的に許容される組成物中で投与される。
【００２５】
より好ましくは、組成物は、成長因子および関連誘導体（インスリン様成長因子−Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）、インスリン様成長因子−Ｉｌ（ＩＧＦ−ＩＩ）、ＧＰＥ、形質転換成長因子−Ｉｌ）から選択される化合物と組み合わせて、ｃＰＧ化合物の治療量をさらに含む。アクチビン、成長ホルモン、神経成長因子、成長ホルモン結合タンパク質、ＪＱＦ結合タンパク質（特にＪＧＦＢＰ−３）、塩基性線維芽細胞成長因子、酸性線維芽細胞成長因子、ｈｓｔ／Ｋｆｇｋ遺伝子産物、ＦＧＦ−３、ＦＧＦ−４、ＦＧＦ−６、カラチノサイト成長因子、アンドロゲン誘導成長因子。ＦＧＦファミリーの追加のメンバーは、例えば、ｉｎｔ−２、線維芽細胞成長因子相同因子−１（ＦＨＦ−１）ＦＨＦ−２  ＦＨＦ−３およびＦＨＦ−４、カラチノサイト成長因子２、グリア活性化因子、ＦＧＦ−１０およびＦＧＦ−１６、毛様体神経栄養因子、脳由来成長因子を含む。ニューロトロフィン３、ニューロトロフィン４、骨モルフォジェニックプロテイン２（ＢＭＰ−２）、グリア細胞株由来の神経栄養因子、活性依存性神経栄養因子、サイトカイン白血病抑制因子、オンコスタチンＭ、インターロイキン）、β，α，χまたはコンセンサスインターフェロン、ＴＮＦ−α。クロメチアゾール；キヌレン酸、マックス、ＦＫ５０６［タクロリムス］、Ｌ−スレオ−１−フェニル−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−プロパノール、アンドレノコルチコトロピン−（４−９＿アナログ［ＯＲＧ２７６６］およびジゾルシピン［ＭＫ−８０１］、セレギリン；グルタミン酸アリ、例えば、ＮＰＳｌ  ５Ｏ６、ＧＶ１５０５  ２６０、ＭＫ−８０１、ＧＶ１５０５２６．２，３−ジヒドロキシ−６−ニトロ−７−スルファモイルベンゾ（ｆ）キノキサリン（ＮＢＱＸ）、ＬＹ３０３０７０およびＬＹ３００１６４のようなＡＭＰＡアリ；抗ＭＡｄＣＡＭ−１ｌｍＡｂ  ＭＥＣＡ−３６７のようなアドレシンＭＡｄＣＡＭ−１および／またはインテグリンα４受容体（α４β１およびα４β７）に向けられた抗炎症剤（ＡＴＣＣアクセッション番号ＨＢ−９４７８）、インターフェロンβＬｂおよびインターフェロンアルファコン−１を含むインターフェロン。
【００２６】
好ましくは、ｃＰＧ化合物は、敗血症性ショック、虚血、サイトカインの投与、サイトカインの過剰発現、潰瘍、胃炎、潰瘍性大腸炎、クローン病に起因する疾患および傷害に応答して生じる細胞損傷または細胞死の治療または予防に使用することができる。糖尿病、関節リウマチ、喘息、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、脳卒中、肝硬変、移植拒絶反応、脳脊髄炎、髄膜炎、膵炎、腹膜炎、血管炎、リンパ球性絨毛膜炎糸球体腎炎ぶどう膜炎、緑内障、眼瞼炎、カラジオン、アレルギー性眼疾患、角膜潰瘍、角膜炎、白内障、網膜障害、加齢黄斑変性症、視神経炎イレウス、炎症性サイトカインの過剰産生による炎症、出血性ショックアナフィラキシーショック、火傷、細菌、ウイルス、真菌、寄生虫によって誘導される炎症性サイトカインの過剰生産につながる感染症、血液透析、慢性疲労症候群、脳卒中、がん、炎症性サイトカインの過剰生産に伴う心血管疾患。心臓病、心肺バイパス、虚血・再灌流障害、炎症性サイトカインの過剰産生に伴う虚血・再灌流、中毒性ショック症候群、成人呼吸窮迫症候群、悪液質、心筋炎、自己免疫疾患、湿疹。乾癬、心不全、皮膚炎、じんま疹、脳虚血、全身性エリテマトーデス、エイズ、エイズ性認知症、慢性神経変性疾患、慢性疼痛、プリアピズム、嚢胞性線維症、筋萎縮性側索硬化症、統合失調症、うつ病。月経前症候群、不安、中毒、片頭痛、ハンチントン病、てんかん、消化管運動障害、肥満、嚥下障害、神経芽細胞腫、マラリア、血液がん、骨髄線維症、肺損傷、移植片対宿主病、頭部損傷中枢神経系外傷、肝炎、腎不全、Ｃ型慢性肝炎、パラコート中毒、移植拒絶および保存、生殖能力増強、細菌転座、循環ショック、外傷性ショック、血液透析、二日酔い、およびそれらの２つ以上の組み合わせ。
【００２７】
好ましくは、ｃＰＧ化合物は、神経損傷または疾患によりミエリンが枯渇した哺乳動物における軸索のミエリン化の回復に使用することができる。
【００２８】
好ましくは、ｃＰＧ化合物は、外傷、毒素曝露、窒息または低酸素−虚血、周産期低酸素−虚血傷害、中枢神経系白質に対する傷害または疾患、急性脳傷害、多発性硬化症を含む慢性神経変性疾患、および急性播種性脳脊髄炎、視神経炎、横筋炎、デヴィック病、白質症を含む脱髄性疾患および障害のために枯渇している骨髄化の回復に使用することができる。非炎症性病変、進行性多焦点性白質脳症、および中枢性乳頭筋融解症などの疾患。
【００２９】
好ましくは、ｃＰＧ化合物は、ＩＧＦ−１またはインターフェロンと組み合わせて投与することができる。
【００３０】
別の関連する態様は、本発明は、少なくとも１つのｃＰＧ化合物を投与することにより、傷害および疾患に応答して細胞損傷または細胞死を治療または予防する方法に関する。
【００３１】
好ましくは、ｃＰＧ化合物は、体重１キログラムあたり約１μｇ〜約１５０ｍｇの間で投与することができる。ｃＰＧの投与に適した投与量は、例えば、好ましくは、体重１キログラムあたり約０．１ｍｇから約１００ｍｇの間、体重１キログラムあたり約１ｍｇから約１００ｍｇの間、体重１キログラムあたり約５ｍｇから約７０ｍｇの間、体重１キログラムあたり約１０ｍｇから約５０ｍｇの間、または体重１キログラムあたり約２０ｍｇから約４０ｍｇの間で投与することができるが、これらに限定されるものではない。ｃＰＧの投与量、投与経路、投与レジームは、疾患、障害、状態によって異なる場合がある。一例として、軽度の認知障害では、アルツハイマー病の場合よりも、同じまたは異なる投与経路を用いた投与量が低い場合がある。
【００３２】
例えば、軽度の認知障害を有する患者の典型的な投与量は、１日あたり約０．２ｍｇから約１ｍｇの間で経口投与することができる（例えば、１カプセル２０ｍｇまたは２カプセルを１日あたり医師の処方箋に基づいて服用する）。一方、より重度のアルツハイマー病または重度の外傷性脳損傷の特許は、１日あたり約５０ｍｇから約３００ｍｇの範囲で静脈内投与することができる。特定の疾患、障害、または状態に対する投与量、投与経路、およびレジームの特定は、一般的に、または特定の対象または患者に対して評価することができる。
【００３３】
本発明のさらなる態様は、神経損傷または疾患のために修復された骨髄化を必要とする哺乳動物における軸索の骨髄化を修復する方法であって、ｃＰＧ化合物の治療量を投与することからなる方法に関するものであり、ここで、ｃＰＧ化合物はｃＰＧからなる。哺乳動物における軸索の骨髄化を回復するのに有効な、ｃ（ＰＧ）３およびｃＧＡＬのような生物学的に活性なｃＰＧアナログ、生物学的に活性なｃＰＧペプチドミメティック、ｃＰＧの濃度を増加させる化合物、またはｃＰＧアナログの濃度を増加させる化合物。本発明の１つの態様において、治療量のｃＰＧ化合物を投与することからなる軸索の骨髄化を回復させる方法は、再骨髄化を促進するためにアストロサイトを刺激することからなる。本発明の別の態様において、治療用量のｃＰＧ化合物を投与することからなる軸索の骨髄化を回復させる方法は、ミエリンを生成するためにオリゴデンドロサイトを刺激することからなる。
【００３４】
本発明のさらに別の態様において、軸索の骨髄化を修復する方法は、修復された骨髄化を必要とする哺乳動物に、ＩＧＦ−Ｉまたはインターフェロンから選択される化合物と組み合わせてｃＰＧ化合物の治療量を投与することからさらになる。本発明の一態様において、軸索の骨髄化を回復させる方法は、治療用量のｃＰＧ化合物をＩＧＦ−Ｉまたはインターフェロンと組み合わせて投与して、アストロサイトを刺激して再骨髄化を促進することからなる。本発明の別の態様において、軸索の骨髄化を回復させる方法は、治療用量のｃＰＧ化合物をＩＧＦ−Ｉまたはインターフェロンと組み合わせて投与して、オリゴデンドロサイトを刺激してミエリンを生成させることからなる。好ましい実施形態では、インターフェロンは、インターフェロンβ１ｂ（Ｂｅｔａｓｅｒｏｎ）からなる。さらなる最も好ましい実施形態では、インターフェロンは、コンセンサスインターフェロン（Ｉｎｆｅｒｇｅｎ（登録商標）、インターフェロンアルファコン−ｌ）からなる。
【００３５】
本発明のさらに別の態様において、傷害および疾患に応答して細胞の損傷および死を治療または予防する方法は、治療用量のｃＰＧ化合物、好ましくは、哺乳動物の体重１ｋｇあたり約１０μｇから約ｌ５０ｍｇの間の量のｃＰＧを投与することからなるが、これらに限定されるものではない。ｃＰＧの投与に適した量は、例えば、好ましくは、体重１ｋｇあたり約０．１ｍｇから約１００ｍｇの間、体重１ｋｇあたり約１ｍｇから約１００ｍｇの間、体重１ｋｇあたり約５ｍｇから約７０ｍｇの間、体重１ｋｇあたり約１０ｍｇから約５０ｍｇの間、または体重１ｋｇあたり約２０ｍｇから約４０ｍｇの間の量であるが、これらに限定されない。ｃＰＧの投与量、投与経路、投与レジームは、疾患、障害、状態によって異なる場合がある。一例として、軽度の認知障害では、アルツハイマー病の場合よりも、同じまたは異なる投与経路を用いた投与量が低い場合がある。例えば、軽度の認知機能障害を有する患者の典型的な投与量は、経口投与で１日約１０ｍｇ〜約５０ｍｇ（１カプセル２０ｍｇを１日１カプセル、医師の処方により１日２カプセル服用）であり得る。一方、より重度のアルツハイマー病または重度の外傷性脳損傷の特許は、１日あたり約５０ｍｇから約３００ｍｇの範囲で静脈内投与することができる。特定の疾患、障害、または状態に対する投与量、投与経路、およびレジームの詳細は、一般的に、または特定の対象または患者に対して評価することができる。
【００３６】
本発明のさらに別の態様において、軸索の骨髄化を回復させることを必要とする哺乳動物に、軸索の骨髄化を回復させる方法は、哺乳動物の体重１ｋｇあたり約１ｍｇから約１０ｍｇのＩＧＦ−Ｉ、または哺乳動物の体重１ｋｇあたり約１．０μｇから約１０μｇのＩＧＦ−Ｉのインターフェロンと組み合わせた治療量のｃＰＧ化合物を投与することをさらに含む。好ましい実施形態では、インターフェロンはインターフェロンβである。ｃＰＧの投与に適した投与量は、例えば、好ましくは、体重１ｋｇあたり約０．１ｍｇ〜約１００ｍｇ、体重１ｋｇあたり約１ｍｇ〜約１００ｍｇ、体重１ｋｇあたり約５ｍｇ〜約７０ｍｇ、体重１ｋｇあたり約１０ｍｇ〜約５０ｍｇ、または体重１ｋｇあたり約２０ｍｇ〜約４０ｍｇであり得るが、これらに限定されるものではない。ｃＰＧの投与量、投与経路、投与レジームは、疾患、障害、状態によって異なる場合がある。一例として、軽度の認知障害は、アルツハイマー病の場合よりも、同じまたは異なる投与経路を使用して、より低い用量を有することができる。例えば、軽度の認知機能障害を有する患者の典型的な投与量は、経口投与される１日あたり約１０ｍｇ〜約４０ｍｇであり得る（医師の処方により、１日あたり２０ｍｇのカプセルを１カプセルまたは２カプセル服用する）。一方、より重度のアルツハイマー病または重度の外傷性脳損傷の特許は、１日あたり約５０ｍｇから約３００ｍｇの範囲で静脈内投与することができる。特定の疾患、障害、または状態に対する投与量、投与経路、およびレジームの特定は、一般的に、または特定の対象または患者に対して評価することができる。
【００３７】
ｃＰＧ化合物の投与からなる、傷害および疾患に応答して細胞の損傷および死を治療または予防する方法のさらに好ましい実施形態では、ｃＰＧ化合物は、哺乳動物の心室へのシャントを介して哺乳動物に投与される。
【００３８】
ｃＰＧ化合物の投与からなる、傷害および疾患に応答して細胞の損傷および死を治療または予防する方法のさらなる好ましい実施形態では、ｃＰＧ化合物は、末梢投与により哺乳動物に投与される。
【００３９】
本発明は、低酸素−虚血性傷害後のミエリン産生を促進するために成熟アストロサイトを刺激する方法であって、哺乳動物のＣＮＳにおけるｃＰＧの活性濃度および／またはｃＰＧの類似体の濃度を増加させるステップを含む、治療方法を提供する。
【００４０】
最も好ましくは、哺乳動物のＣＮＳ内で増加されるＩＧＦ−Ｉ自体の有効量である。これは、ｃＰＧ、ｃ（ＰＧ）３またはｃＧＡＬまたはｃＧＭｅＰのようなｃＰＧ化合物の直接投与によって効果を得ることができ、実際にはこれが好ましい。しかしながら、ＩＧＦ−Ｉの有効量を間接的に増加させる化合物（例えば、患者内で切断されてｃＰＧを放出するプロドラッグ）の投与を排除することはできない。
【００４１】
活性化合物（ＩＧＦ−Ｉまたはその類似体またはその模倣体）は、単独で、または好ましいように、医薬組成物の一部として投与することができる。
【００４２】
組成物は、ＣＮＳに直接投与することができる。後者の投与経路は、例えば、側方脳静脈注射、局所注射、または患者の脳の側方脳静脈内に外科的に挿入されたシャントを含むことができる。
【００４３】
好都合には、多発性硬化症などの脱髄性疾患の予防または治療において、ｃＰＧ化合物を投与することにより、オリゴデンドロサイトにおけるミエリン産生の刺激および促進、および成熟アストロサイトによる再髄化の支持、刺激および促進が促進される。
【００４４】
本明細書に完全に参照により明示的に組み込まれた米国公開特許出願ＵＳ２０１００２４７４８３Ａ１に一般に記載されているように、環状プロリルグリシン（「環状ＰＧ」または「ｃＰＧ」）は、以下の構造を有する。
【化１】
2021524864.tif 000003
（この構造および化合物は、ＮＡ−８３１としても知られており、これらの用語は、本明細書において互換性を持って使用される）。
【００４５】
本発明は、ｃＰＧと構造的に関連する新規なジケトピペラジンを含む。
【００４６】
本発明の１つの態様は、以下に記載される構造式および置換基を有する新規な環状化合物を提供する。
【化２】
2021524864.tif 000004
（本明細書において「ｃＧＡＬ」と称する）。
【００４７】
式中、Ｒは、飽和分岐、直鎖または環状炭化水素ラジカルを指す「アルキル」であり得る。例示的なアルキル基としては、メチル、エチル、イソプロピル、シクロプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロプロピルメチル、ヘキシル等が挙げられる。
【００４８】
式中、Ｒは、基を参照するアリルであり得る、構造式Ｈ２Ｃ＝ＣＨ−ＣＨ２Ｒを有する置換基であり、ここで、Ｒは、分子の残りの部分である。
【００４９】
Ｒがメチルである場合、シクログリシル−２−アルキルプロリンを含む本発明の一態様は、（８ａｓ）−メチル−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−１，４−ジオンであり、これは、シクログリシル−２−メチルプロライムまたはシクロＧＭｅＰまたはｃＧＭｅＰと称される。
【００５０】
【化３】
2021524864.tif 000005
（これは、ポリペプチドの供給者、例えばＢａｃｈｅｍ  Ａｍｅｒｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．（Ｔｏｒｒａｎｃｅ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，ＵＳＡ）から入手可能である））。
【００５１】
一般に、ｃ（ＰＧ）３およびｃＧＡＬは、ペプチドおよび修飾ペプチド合成の技術分野における通常の当業者にはすでによく知られているような方法によって調製することができる。例えば、ボダンツキー（Ｂｏｄａｎｚｓｋｙ）を参照のこと。ペプチド合成の原理、ベルリン、ニューヨーク。Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ  １９９３を参照のこと。本発明のジケトピペラジン化合物の合成は、実施例で論じたような固相合成によるものであってもよいし、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄら（１９６３  Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．：８５，２１４９−２１５６．ジケトピペラジン合成の具体例は、Ｆｉｓｃｈｅｒ，２００３，Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ．９：９−３５およびそこに記載されている参考文献に記載されている。当技術分野における通常の技術を有する者は、その技術および利用可能な知識、および本開示を考慮に入れて、本発明の化合物のための１つまたは複数の好適な合成方法を開発することに何ら困難を生じないであろう。
【００５２】
本願において、化合物の名称および構造および略語が提供される本項に特に限定されないが、様々な化合物は、本明細書に含まれる本発明の全ての態様で使用することができる。例えば、ｃＰＧが本明細書中に記載されている場合、ｃＰＧ化合物およびｃＧＡＬなどの関連誘導体である本項（および本出願全体）の他のすべての化合物は、本明細書中に記載されている様々な状態の治療方法に限定されるものではないが、本明細書中に記載されている様々な状態の治療方法に限定されるものではない、その部分および他の記載に含まれる。
【００５３】
【化４】
2021524864.tif 000006
（１つの可能性のある構造）
【００５４】
環状（グリシル−Ｌ−プロリル−Ｌ−プロリル）の化学合成は、チャールズＭ．デバーとエルカンＲ．ブラウトによるIsrael Journal of Chemistry, Vol. 12, Nos. 1-2, 1974, pp. 15-29 “CYCLIC Peptides VII: The Synthesis and Characterization of Cyclic Peptides with Repeating Pro-Gly Sequences”に掲載されているように実施された。
【００５５】
Ｃｙｃ／ｏ（グリシル−Ｌ−プロリル−グリシル−Ｌ−プロリル）の合成
ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（２０ｍＬ、硫酸ナトリウム上で乾燥）に溶解したｐ−ニトロフェニルエステル塩酸塩（５００ｍｇ）の溶液を、室温で試薬グレードのピリジン５００ｍＬに６時間かけて攪拌しながら滴下添加した。鮮やかな黄色の混合物を室温で４８時間にわたって絶えず撹拌した。溶媒を４５°のロータリーエバポレーター高真空ポンプシステムにより除去した。残渣を２０ｍｌのアセトンで洗浄し、これはｐ−ニトロフェノールおよび塩酸ピリジンを溶解したが、ペプチド画分を不溶化したままにした。不溶性物質とアセトンをフラスコに移し、アセトンを４５°で蒸発させた。次いで、材料を最小のＤＭＦに溶解させた。白色の微結晶沈殿物は、ＤＭＦと複合体を形成したＣｙｃ／ｏ（グリシル−Ｌ−プロリル−グリシル−Ｌ−プロリル）（１５５ｍｇ、収率２８％）であることが示された。この物質の１００ｍｇのメタノール−エーテルからの結晶化により、ＤＭＦを含まない結晶性のシクロ（プロ−Ｇｌｙ）３（５５ｍｇ）が得られた。
化学分析  Ｃ２１Ｈ３０Ｎ６Ｏ６Ｈ２Ｏのために計算された。Ｃ、５２．４９；Ｈ、６．７１；Ｎ、１７．４９。元素分析では、Ｃ、５２．６０；Ｈ、６．８１；Ｎ、１７．３８を発見した。
【００５６】
まだ他の態様において、本発明は、疾患、障害、または状態、例えばアルツハイマー病および認知機能の障害などの関連状態を含むがこれらに限定されない、疾患、障害、または状態を治療するために、薬学的に許容される賦形剤または担体、および上記で与えられた構造式を有する環状ＧＰまたはその類似体の治療上有効な量を含む医薬組成物を提供する。
【００５７】
さらなる態様では、本発明は、認知障害を有する動物を治療する方法を提供し、この方法は、環状ＧＰまたはその類似体からなる組成物の有効量をその動物に投与することからなる。さらなる態様では、治療される動物はヒトである。
【００５８】
本発明の一態様は、一般に、神経疾患および傷害の治療的治療に向けられている。表現的には、任意の作用機序に限定されることを望まず、単に任意の作用機序を提案するだけで、本発明者（ｓ）は、本発明が、部分的には、神経新生、特に、神経幹細胞、または前駆細胞の増殖を誘導することに基づくことができることを提案する。本発明の一態様に従って、環状プロリルグリシンおよびその類似体（「ｃＰＧ化合物」）は、神経細胞における増殖および／または分化を促進および誘導する重要な神経発生調節剤として作用する。
【００５９】
「神経新生」は、本明細書において、インビボまたはインビトロでの神経細胞の増殖、分化、遊走、または生存を意味すると定義される。本発明の好ましい態様では、神経細胞は、成体、胎児、または胚性神経幹細胞または前駆細胞であり得る。神経前駆細胞はまた、細胞数の純増加または細胞生存率の純増加を指す。本明細書で使用されるように、「ＮＳＣ」は、少なくとも、すべての脳幹細胞、すべての脳前駆細胞、およびすべての脳前駆細胞を含むであろう。
【００６０】
これまでに、ｃＡＭＰおよび／またはＣａ２＋のレベルが増加すると、成体神経幹細胞の増殖が誘発されることが示されている。いくつかのケースでは、この誘導はＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）の活性化に続く。ＧＰＣＲリガンドを介して細胞内のｃＡＭＰおよび／またはＣａ２＋レベルを増加させることは、成体神経幹細胞の増殖を誘導することができる。
【００６１】
Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）は、Ｇタンパク質リンク型受容体（ＧＰＬＲ）としても知られており、細胞外の分子を検出し、細胞内のシグナル伝達経路を活性化し、最終的には細胞応答を活性化する受容体の大規模なタンパク質ファミリーを構成している。
【００６２】
これらの受容体に結合し活性化するリガンドには、光感受性化合物、臭気、フェロモン、ホルモン、神経伝達物質などがあり、その大きさは、低分子からペプチド、大型タンパク質まで様々である。哺乳類の脳内のＧＰＣＲは、セロトニン、ドーパミン、ＧＡＢＡ、グルタミン酸など、いくつかの異なる神経伝達物質を結合する。Ｇタンパク質共役型受容体は、多くの疾患に関与しており、現代のすべての医薬品の約３４％の標的でもある。
【００６３】
本発明の１つの態様は、提案されている機構によって限定されるものではなく、ｃＰＧおよびその類似体が、ｃＡＭＰおよび／またはＣａ２＋の細胞内レベルを調節する神経発生調節剤として作用し得ることを含み、ｃＰＧは、ｃＡＭＰを増加させる（例えば、合成を増加させるかまたは分解を減少させることによって）および／またはＣａ２＋を増加させる（例えば、流入を増加させるかまたは流出を減少させることによって）ことが可能であることが化学的および生物学的に示されてきた。
【００６４】
本発明の一態様は、損傷した神経組織の再生を促進するための新規な方法を記載しており、この方法は、神経組織の成長を促進するためにグリア細胞の成長速度を低下させることができる有効量のシクロプロリルグリシン（ｃＰＧ）およびその類似体を投与することからなる。
【００６５】
ニューロンはグリア細胞またはアストロサイトに密接に取り囲まれている。ニューロンが損傷または切断された後にニューロンの再生を達成するための困難さの一つは、グリア細胞が増殖して再生ニューロンに対する障壁を形成することである。その結果、予想される接着部位へのニューロンのさらなる移動が阻害され、構造と機能の再生が停止する。アストロサイトや結合組織の瘢痕の形成や進行性壊死は、神経細胞の機能再生に悪影響を及ぼすことが観察されている。
【００６６】
従って、本発明の一態様は、哺乳動物（例えばヒト）における損傷神経組織の再生を促進する方法であって、有効量のｃＰＧ化合物（ｃＰＧおよびその類似体）を損傷部位に投与することからなる。
【００６７】
本明細書で提供される実験のいくつかの目的は、ニューロンおよびグリア細胞を再生する方法、または請求されるように損傷したニューロンおよびグリア細胞を修復する方法のためのイネーブルメントを提供することである。
【００６８】
本発明の１つの態様は、うつ病および他の心理的障害を治療するために、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）およびその製薬学的に活性な類似体が、神経細胞の調節剤として作用することを含む。Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体（「ＮＭＤＡ受容体」）は、神経細胞に見られるグルタミン酸受容体およびイオンチャネルタンパク質である。ＮＭＤＡ受容体は、３種類のイオントロピー性グルタミン酸受容体のうちの１つであり、他の受容体はＡＭＰＡ受容体と海稲酸受容体である。ＮＭＤＡ受容体は、グルタミン酸とグリシンが結合すると活性化され、活性化されると正に荷電したイオンが細胞膜を流れるようになる。[Furukawa, Hiroyasu; Singh, Satinder K; Mancussol, Romina; Gouaux, Eric (November 2005). “Subunit arrangement and function in NMDA. Receptors”. Nature. 438 (7065): 185-92. doi: 10.1038/nature04089. PM I D 16281028.]
【００６９】
ＮＭＤＡ受容体チャネルは、中枢神経系（ＣＮＳ）の発達過程において、シナプス可塑性やシナプス形成に重要な役割を果たしている。ＮＭＤＡ受容体が過剰に活性化されると、Ｃａ２＋が過剰に流入して興奮毒性を引き起こし、神経変性疾患に関与していることが示唆されている。したがって、ＮＭＤＡ受容体をブロックすることは、理論的には、このような疾患の治療に有用であると考えられます。
【００７０】
ＮＭＤＡ受容体は、グリシンとグルタミン酸が結合すると活性化されるイオンチャネルタンパク質受容体です。受容体は、３つの異なるサブユニットによって複数の細胞内タンパク質と相互作用する異性体複合体である。ＮＲ１、ＮＲ２、ＮＲ３の３つのサブユニットによって複数の細胞内タンパク質と相互作用する異性体複合体である。ＮＲ１には、１つの遺伝子からの代替スプライシングによって生成された８つの異なるサブユニットがある。ＮＲ２サブユニットは４つの異なるＮＲ２サブユニット（Ａ−Ｄ）があり、ＮＲ３ＡおよびＮＲ３Ｂサブユニットが報告されている。６つの別々の遺伝子がＮＲ２とＮＲ３をコードしている。[Loftis J. M., Janowsky A. (2003). “The N-methyl-D-aspartate receptor subunit NR2B: localization, functional properties, regulation, and clinical implications”. Pharmacol Ther. 97 (1): 55-85. doi: l 0. 016/sO 163-7258(02)00302-9.]。
【００７１】
ＮＭＤＡ受容体のアゴニストまたはアロステリックモジュレーター、特にＮＲ２Ｂサブユニット含有チャネルは、大うつ病性障害の治療薬として研究されている（G. Sanacora, 2008, Nature Rev. Drug Disc. 7: 426-437）。ＮＲ２Ｂサブユニットは、学習、記憶、処理、摂食行動などの活動の調節に関与しているだけでなく、人間の錯乱の数に関与している。ＮＭＤＡ受容体に関連する基本的な構造と機能は、ＮＲ２Ｂサブユニットに起因していると考えられる。
【００７２】
また、ＮＲ２ＢのＮ末端ドメインには、アロステリックで非競合的な結合部位が確認されている。ＮＲ２サブユニットは、哺乳類の脳の主要な興奮性神経伝達物質受容体の一つであるグルタミン酸の結合部位として機能している。[Yoshimura Y, Ohmura T, Komatsu Y (July 2003). “Two forms of synaptic plasticity with distinct dependence on age, experience, and NMDA receptor subtype in rat visual cortex”. The Journal of Neuroscience. 23 (16): 6557-66. PMID 12878697]。
【００７３】
ＮＲ２Ｂはラットの大脳新皮質の年齢および視覚経験に依存した可塑性と関連しており、ＮＲ２Ｂ／ＮＲ２Ａ比の増加は若い動物の興奮性ＬＴＰの強さと直接相関している。このことは、発達する大脳皮質回路の経験依存的な洗練に寄与していると考えられます。
【００７４】
ＮＭＤＡ受容体のＮＲ２Ｂサブユニットの役割は、さまざまな抗うつ薬の作用において実証されている。[Poleszak E, Wlaz P, Szewczyk B, Wlaz A, Kasperek R, Wrobel A, Nowak G (2011) A complex interaction between glycine/NMDA receptors and serotonergic/noradrenergic antidepressants in the forced swim test in mice. J Neural Transm 1 18: 1535-1546]。
【００７５】
Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）は、Ｇタンパク質リンク型受容体（ＧＰＬＲ）としても知られており、細胞外の分子を検出し、細胞内のシグナル伝達経路を活性化し、最終的には細胞応答を活性化する受容体の大規模なタンパク質ファミリーを構成している。
【００７６】
哺乳類の脳内のＧＰＣＲは、セロトニン、ドーパミン、ＧＡＢＡ、グルタミン酸など、いくつかの異なる神経伝達物質を結合している。Ｇタンパク質共役型受容体は多くの疾患に関与しており、現代のすべての医薬品の約３４％が標的となっている。
【００７７】
本発明の１つの態様は、うつ病および他の心理的障害を治療するために、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）およびその製薬学的に活性な類似体が神経細胞調節剤として作用することを含む。明示的には任意のメカニズムに限定されないが、１つの可能なメカニズムは、ｃＡＭＰおよび／またはＣａ２＋の細胞内レベルの調節である。ここで、ｃＰＧは、ｃＡＭＰを（例えば、合成を増加させるかまたは分解を減少させることによって）および／またはＣａ２＋を（例えば、流入を増加させるかまたは流出を減少させることによって）増加させることができることが化学的および生物学的に示されている。
【００７８】
また、環状プロリルグリシンおよびその薬剤活性アナログは、ＮＲ２ＢのＮ末端ドメインに選択的に結合することが示されており、ヒトにおける抗うつ反応を持続させる可能性がある。
【００７９】
本発明は、環状プロリルグリシン（「ｃＰＧ」）およびその薬学的に活性な類似体の技術的利点を提供し、これらは一緒に、ＮＲ２Ｂ受容体に対するリガンドであり、中枢神経系の様々な障害の治療に有用であり得る、ｃＰＧ化合物として知られている。さらに、ｃＰＧ化合物は、例えば、それらの作用機序、結合性、阻害効力、標的選択性、溶解性、安全性プロファイル、またはバイオアベイラビリティのうちの１つ以上に関して、医薬的用途に利点を提供する。
【００８０】
本発明の方法を実施するにあたり、うつ病患者は、適切な投与経路およびレジームを使用して、薬学的に有効な用量レベルで物質の組み合わせを投与される。物質は、活性物質が適切な担体と結合された単一の投与単位の形態で投与されてもよく、または活性物質が適切な担体と個別に結合された別々の投与単位で投与されてもよい。別々に投与する場合、投与は同時投与であってもよいし、選択された時間間隔であってもよい。
【００８１】
投与は好ましくは経口投与であり、担体または担体はこれを考慮して選択される。このような態様であるが、両物質の投与の他の態様、および個々の材料との混合態様は、本発明の一部であると考えられる。
【００８２】
材料の投与量レベルは、使用される特定の材料および治療される患者の状態の重症度によって異なるであろう。環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）は、体重１ｋｇあたり約０．１ｍｇ〜約１０ｍｇの量で使用される。１日あたり約２０ｍｇから約８０ｍｇの用量で経口投与することが推奨され、医師の処方命令に従って、いくつかの重症例では１日あたり約１００ｍｇまでの用量で投与することができる。
【００８３】
本発明の医薬組成物は、従来から採用されている医薬用担体と関連した有効成分を利用して調製される。本発明の組成物は、一般に、抗うつ効果を達成するために経口投与することが企図される。これは、錠剤、カプセル剤、粉末、懸濁液、溶液、シロップなどの投与形態のいずれであってもよく、徐放性製剤を含む。本明細書および特許請求の範囲で使用される用語の投与形態は、単一または複数の投与量で投与される物理的に離散的な単位を指し、各単位は、必要な希釈剤、担体またはビヒクルと関連して所定量の活性物質を含む。活性物質の量は、そのようなユニットの１つまたは複数の投与時に所望の治療効果をもたらすように計算された量である。
【００８４】
粉末は、活性物質を適当な容器サイズに粉砕し、同様に粉砕した希釈剤の医薬用担体、例えばデンプンのような食用炭水化物材料と混合することにより調製される。甘味料、香料、防腐剤、分散剤、着色剤も存在し得る。
【００８５】
カプセルは、上記のように粉末混合物を調製し、形成されたゼラチンシースを充填することにより製造される。粉末混合物には、ファイリング操作の前にアジュバントとしてタルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムなどの潤滑剤を添加してもよく、流動性を向上させるためにコロイダルシリカなどの滑沢剤を添加してもよく、カプセルを摂取したときの薬剤の有用性を向上させるために崩壊剤または可溶化剤を添加してもよい。
【００８６】
錠剤は、粉末混合物を調製し、造粒またはスラッグし、滑沢剤および崩壊剤を添加し、圧搾して錠剤とする。粉末混合物は、活性物質を適当に粉砕したものを、デンプン、ショ糖、カオリン、リン酸二カルシウムなどの希釈剤または塩基と混合することにより調製される。粉末混合物は、シロップ、デンプンペースト、アカシア粘液、またはセルロース系材料またはポリマー系材料の溶液などのバインダーで湿潤させ、スクリーンを通して強制的に造粒することにより調製することができる。造粒の代替として、粉末混合物を錠剤機に通し、得られた不完全に形成されたスラグを顆粒に砕くことができる。顆粒は、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱物油の添加によって、錠剤形成ダイへの付着を防止するために潤滑化することができる。潤滑された混合物は、その後、圧縮されて錠剤になる。
【００８７】
薬剤はまた、自由流動性の不活性担体と組み合わせて、造粒またはスラッギングのステップを経ることなく、直接錠剤に圧縮することができる。シェラックのシーリングコート、糖またはポリマー材料のコーティング、およびワックスのポリッシュコートからなる保護コーティングを提供することができる。異なる単位用量を区別するために、これらのコーティングに染料を添加することができる。
【００８８】
シロップおよびエリキシルのような経口液体製剤は、所定の量、例えばティースプーン１杯が所定量の化合物を含むように、単位用量の形態で調製することができる。シロップは、エリキシルは非毒性のアルコールビヒクルの使用を介して調製されている間に、適切に風味のあるショ糖水溶液に化合物を溶解することによって調製することができる。懸濁液は、薬物を不溶性である非毒性のビヒクル中に分散させることによって調製することができる。
【００８９】
本発明の１つの重要な実施形態では、特に固体医薬製剤を調製するために、活性薬物の薬剤学的に許容される非毒性の酸付加塩が使用される。このような薬剤学的に許容される非毒性の酸付加塩には、有機酸および無機酸の両方に由来するものが含まれ、例えば、限定されないが、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、酢酸、乳酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、アコニット酸、フタル酸、酒石酸、エンボニック酸、エンエンエン酸およびそのような酸が挙げられる。
【００９０】
本発明は、主に経口投与を想定しているが、他の態様も確かに除外されない。非経口適用のためのアンプルを調製することができ、好ましくは、活性物質の水溶性塩および可能な緩衝物質を水溶液中に含む。
【００９１】
活性物質が配合された経口投与用または非経口投与用に設計された液体組成物においては、活性物質の安定性を保証するために注意を払わなければならない。
【００９２】
活性物質を別々に投与する場合には、個々の組成物を上記の方法で調製する。これらの個々の組成物は、次に、例えば、複数の離散粒子の中に両方の成分を含む多層錠剤または単一カプセルのように、分離した同一性を維持しながら、そのようにして投与するか、または単一の投与単位に組み合わせて投与することができる。
【００９３】
本発明のより良い理解は、以下の実施例および図面を参照して得られるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００９４】
【図１】提案されているシス−ＧＰＥの環状プロリルグリシンとグルタミン酸への代謝経路を示す図である。
【図２】環状プロリルグリシンが金属イオンを結合するように作用することが提案されているメカニズムを示している。
【図３】小脳微小移植片（microexplant）（Ｐ４）におけるグルタミン酸の毒性と環状ＧＰによるレスキュー効果を図示したものである。
【図４】Ｐ４−小脳微小移植片内でモニターされた環状ＧＰによる毒性の予防を図示したものである。
【図５】６−ＯＨＤＡ病変後の機能回復に対するｃＰＧの効果を図示したものである。
【図６】プラットフォームに到達するまでの時間を示している。認知機能に対する環状プロリルグリシンの効果を評価するために使用される学習と記憶のモリス水迷路（ＭＷＭ）モデル。
【図７】ｃＰＧ、ｃＧＭｅＰおよびｃ（ＰＧ）３薬剤溶液の心室下領域におけるＢｒｄＵ＋細胞／３００μｍへの影響を示すグラフ。
【図８】ｃＰＧ、ｃ（ＰＧ）３、ｃＧＭｅＰおよび薬剤溶液の歯状回におけるＢｒｄＵ＋細胞／３００μｍへの影響を示す。
【図９】集中力・計数力の向上を示したものである。
【図１０】短期記憶力の向上を示す図である。
【図１１】長期記憶力の向上を説明するための図である。
【図１２】オリエンテーションへの影響を説明する図である。
【図１３】日常生活動作とセルフケアの改善を説明するための図である。
【図１４】感情への影響の説明図である。
【図１５】認知能力への影響を説明するための図である。
【発明を実施するための形態】
【００９５】
本発明は、その特定の実施形態を参照して説明される。本発明の他の態様は、図面を参照して理解することができる。図面は、上記のテキストおよび添付の図面にも提供されており、以下にさらに提供され、その位置でそれらの説明が提供されている。
【００９６】
以下の実施例は、例示のためだけに与えられたものであり、本発明の範囲を限定するものと取られてはならない。
【００９７】
ＩＧＦ１がトリペプチドＧＰＥやｄｅｓ  ＩＧＦに代謝される過程は、驚くべきことにその一部に過ぎないことが分かってきました。
【００９８】
ＧＰＥのシス異性体は、さらに分解して環状のプロリルグリシンとグルタミン酸を形成することができる。これを図１に示す。
【００９９】
環状ＰＧ構造は、血液脳関門を横断するのに十分に小さい。
【０１００】
また、図２に示すように、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｃｏ２＋などの金属イオンを結合するためのリガンドを提供することができ、キレート剤として機能することができるような分子構造となっている。
【０１０１】
エージェントとしてのｃＰＧの可能性のある役割は、コンパニオン分解生成物、グルタミン酸によってさらにサポートされている。
【０１０２】
グルタミン酸は、脳疾患と関連していることが知られている。（Johnston, G.A.R. in Roberts P.J. et al Editors, Glutamate: Transmitter in the Central Nervous System, John Wiley & Sons, 1981, pp.77-87）。
【０１０３】
本明細書で使用されるように、ｃＰＧ化合物は、ｃＰＧの生物学的活性と類似または同一の生物学的活性を有する化合物であり、ｃＰＧ化合物は、ｃＰＧ、生物学的に活性なｃＰＧ類似体、生物学的に活性なｃＰＧ模倣物、および哺乳動物中のｃＰＧおよびｃＰＧ類似体の濃度を増加させる化合物からなる。ＣＰＧ化合物は、ＩＧＦ−Ｉ化合物の切り捨て部分などのｃＰＧ分子、および他の化学的および生物学的類似体および模倣物を含む。．
【０１０４】
本明細書で使用されるように、「ｃＰＧ類似体」とは、ＣＮＳにおけるｍＧｌｕＲ受容体に効果的に結合し、ＣＮＳ神経細胞に対して同等の神経保護効果を促進することができる、ｃＰＧの任意の類似体、天然に存在するｃＰＧ類似体、またはその変種を意味する。ＣＰＧ類似体の例としては、ｃ（ＰＧ）３および環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリンが挙げられる。
【０１０５】
用語「ｃＰＧ分子」は、より長いＩＧＦ−Ｉ化合物のペプチドフラグメントおよび切り捨てられた部分、ならびに他の化学的および生物学的類似体および模倣体を含み、ｃＰＧ化合物は、中性の傷害または疾患に苦しんでいる哺乳動物の治療に使用することができる。特に、ｃＰＧ化合物は、神経損傷または疾患に苦しんでいるヒト患者の治療に使用することができる。さらに一般的には、本発明の組成物および方法は、敗血症性ショック、虚血などの傷害または疾患に起因する、神経損傷または潜在的なアポトーシスおよび／または壊死性細胞死に苦しんでいる、ヒト患者などの哺乳動物の治療に使用されることを見いだす。サイトカインの投与、サイトカインの過剰発現、潰瘍、胃炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、糖尿病、関節リウマチ、喘息、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、脳卒中、肝硬変、移植拒絶、移植拒絶、脳脊髄炎。髄膜炎、膵炎、腹膜炎、血管炎、リンパ球性絨毛膜炎、糸球体腎炎、ぶどう膜炎、緑内障、眼瞼炎、カラジオン、アレルギー性眼疾患、角膜潰瘍、角膜炎、白内障、網膜障害、加齢黄斑変性症、視神経炎イレウス。炎症性サイトカインの過剰産生による炎症、出血性ショック、アナフィラキシーショック、熱傷、細菌・ウイルス・真菌・寄生虫による炎症性サイトカインの過剰産生につながる感染症、血液透析、慢性疲労症候群、脳卒中癌、炎症性サイトカインの過剰産生に伴う心血管疾患、心臓病、心肺バイパス、虚血・再灌流障害、炎症性サイトカインの過剰産生に伴う虚血・再灌流、中毒性ショック症候群、成人呼吸窮迫症候群悪液質、心筋炎、自己免疫疾患、湿疹、乾癬、心不全、皮膚炎、じんま疹、脳虚血、全身性エリテマトーデス、エイズ、エイズ性認知症、慢性神経変性疾患、慢性疼痛、プリアピズム、嚢胞性線維症、筋萎縮性側索硬化症。統合失調症、うつ病、月経前症候群、不安、依存症、片頭痛、ハンチントン病、てんかん、消化管運動障害、肥満、嚥下障害、神経芽腫、マラリア、血液がん、骨髄線維症、肺損傷、移植片対宿主病頭部外傷、中枢神経系外傷、肝炎、腎不全、Ｃ型慢性肝炎、パラコート中毒、移植拒絶および保存、生殖能力増強、細菌転座、循環ショック、外傷性ショック、血液透析、二日酔い、およびそれらの２つ以上の組み合わせ。
【０１０６】
さらに、ｃＰＧおよびその類似体、例えばｃ（ＰＧ）３およびｃＧＭｅＰは、周産期低酸素−虚血性傷害のような急性脳損傷の結果としての白質損傷（insult）に苦しんでいる哺乳動物を治療するために使用することができるが、これらに限定されるものではない。または、慢性神経損傷または多発性硬化症などの神経変性疾患、または急性播種性脳脊髄炎、視神経炎、横筋炎、デヴィック病、白質症などの炎症性関与を含む他の脱髄性疾患および障害から、非炎症性関与、進行性多巣性白質脳症、中枢性ポンティヌス髄融解症。このような疾患や損傷に苦しんでいる患者は、再骨髄化を開始することができる治療プロトコールによって大きな利益を得ることができる。
【０１０７】
本発明は、外傷、毒素曝露、アフィキシアまたは低酸素−虚血の形での損傷に続くミエリン産生の誘導に適用され、癌、ウイルス感染症、自己免疫疾患、神経疾患および傷害、心血管疾患の形での傷害または疾患に応答するアポトーシスの治療または予防に適用される。
【０１０８】
ｃ（ＰＧ）３およびｃＧＡＬを含むがこれらに限定されないｃＰＧまたはその類縁体を用いた治療は、例えば選択的手術の前などのように、傷害の前に（変更するだけでなく）行うことができる。関連する選択的な手順の例としては、脳の小葉の引っ込みが脳浮腫につながる可能性がある神経外科、または避けられない小さな塞栓が７５％のケースのいくつかで脳機能の検出可能な障害につながると言われている弁置換などの心臓の操作が含まれます。
【０１０９】
薬理学と効用
ｃＰＧは、細胞死の過程で抗壊死性および抗アポトーシスとして作用することができる。生体内でのその抗アポトーシス活性および抗壊死活性は、細胞数によって測定することができる。ｃＰＧはまた、インビトロで測定することができる（Gudasheva T.A. et al. FEBS Letters, Vol. 391, Issues 1-2, 5 August 1996, pp. 149-152）。ＣＮＳ損傷は、例えば、永久的な神経学的欠損認知機能の程度、および／または発作障害の傾向によって臨床的に測定され得る。（Rakic L.J et al, in Rakic L.J et al Peptide and Amino Acid Transport Mechanisms in The Central Nervous System, 1988, The MacMillan Press Ltd．Press Ltd. (London) pp.167-181）。
【０１１０】
医薬組成物およびその投与
本発明の一部としてのｃＧＰ自体は、細胞損傷およびプログラムされた死、ならびにミエリン産生の誘導を予防または治療するために使用することができる。通常、これは、患者へのｃＧＰの直接投与によって行われる。所望であれば、ｃＰＧ化合物およびその類似体の組み合わせを、薬学的に許容される組成物中に投与することができる。
【０１１１】
当業者であれば、他の形態のｃＰＧおよびその類似体の投与を排除する意図が出願人側にないことを理解するであろう。例として、ｃＰＧと担体からなるｃＰＧのプロドラッグを投与することにより、ＣＮＳにおけるｃＰＧの有効量を増加させることができ、ｃＰＧと担体は、患者内で切断または消化されやすい連結によって連結されている。投与後にｃＰＧを放出するために切断または消化される任意の適切な連結体を採用することができる。
【０１１２】
さらに、ｃＰＧレベルは、患者のＣＮＳ内から活性なｃＰＧを発現することが可能な細胞株を含むインプラントを介して増加することが想定されている。
【０１１３】
ｃＰＧおよびその類似体のプロドラッグを投与することもできる。その場合、プロドラッグは、対象内で代謝されるか、または他の方法で変化して、ｃＰＧを形成する。ＣＰＧおよびその類似体、例えば、ｃ（ＰＧ）３および環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロライムなどが挙げられるが、これらに限定されないは、医薬品または医薬製剤の一部として投与することができる。これには、ｃＰＧを薬剤学的に適切な担体、アジュバントまたは賦形剤と組み合わせることが含まれます。担体、アジュバントまたは賦形剤の選択は、もちろん通常、採用される投与経路に依存する。
【０１１４】
投与経路は様々であり、どのような適切な投与経路であってもよい。ｃＰＧの利点は、末梢的に投与できることである。すなわち、ＣＮＳで効果を発揮するためには、患者のＣＮＳに直接投与する必要はない。
【０１１５】
当技術分野で知られている任意の末梢経路を採用することができる。これらは、例えば、末梢循環への注射、皮下注射、眼窩内注射、眼科注射、髄腔内注射、膀胱内注射、局所注射、点滴（例えば、制御された放出デバイスまたは浸透圧ポンプまたは皮膚パッチのようなミニポンプを使用する）、移植、エアゾール、吸入、瘢痕化、腹腔内注射、カプセル内注射、筋肉内注射、鼻腔内注射、経口注射、頬骨注射、肺注射、直腸注射または膣注射などの非経口経路を含むことができるが、これらに限定されるものではない。本発明の組成物は、上述の神経疾患に対する治療を提供するために、治療上有効な量（例えば、患者の病態を除去または軽減する量）でヒトまたは他の哺乳動物への非経口投与のために製剤化することができる。
【０１１６】
好ましい投与経路としては、皮下注射（例えば、０．９％塩化ナトリウムに溶解したもの）または経口投与（カプセルに入れたもの）の２つが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１７】
また、場合によっては、患者のＣＮＳにｃＰＧ化合物を直接投与することが望ましい場合があることも理解されるであろう。ここでも、これは、任意の適切な直接投与経路によって達成され得る。例としては、側脳静脈注射による投与、または患者の脳の側脳静脈内に外科的に挿入されたシャントを介した投与が挙げられる。
【０１１８】
投与されるべきｃＰＧ化合物の有効量の計算は、当技術分野における通常の熟練者の熟練の範囲内であり、当技術分野に熟練した者にとっては日常的なものであろう。言うまでもなく、最終的に投与される量は、投与経路、および治療されるべき神経障害または状態の性質に依存する。好ましくは、ｃＰＧ化合物は、投与量が中心的に投与される場合には、体重１ｋｇあたり約１μｇから約ｌ００ｍｇの間で投与される。ｃＰＧの投与に適した投与量は、例えば、体重１キログラムあたり約０．１ｍｇ〜約１０ｍｇの間、または体重１キログラムあたり約１ｍｇ〜約５ｍｇの間で投与される。
【０１１９】
医薬品に含有させるために、ｃＰＧ化合物は、スイスのブーブンドルフのＢａｃｈｅｍ  ＡＧのような適切な商業的供給源から得ることができる。あるいは、ｃＰＧは、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄらのステップワイズ固相合成法（1963 J. Amer.Chem.Soc.: 85, 2149-2156）。代替的な合成は、応用Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓモデル４３０Ａのような市販のペプチドシンセサイザーの使用に関与することができる。
【０１２０】
ｃＧＡＬは、ペプチドおよび類似体の合成の当業者にはよく知られているような方法によって調製することができる。例。による「ペプチド合成の原理」、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ１９９３年発行。
【０１２１】
Ｃ（ＰＧ）３は、チャールズＭ．デバーとエルカンＲ．Ｂｌｏｕｔ．ｐｕによる、Israel Journal of Chemistry, Vol. 12, Nos. 1-2, 1974, pp. 15-29, “CYCLIC Peptides VII: The Synthesis and Characterization of Cyclic Peptides with Repeating Pro-Gly Sequences”で公開されている方法によって調製することができる。
【０１２２】
一般的な命題として、１回の投与量あたり非経口的に投与されるｃＰＧ化合物の総薬剤学的に有効な量は、投与量反応曲線によって測定できる範囲にあるであろう。人は、増加する量のｃＰＧ化合物を患者に投与し、患者の血清レベルをｃＰＧについて確認することができる。採用されるべきｃＰＧ化合物の量は、これらのｃＰＧの血清レベルに基づいてモルベースで計算することができる。
【０１２３】
具体的には、化合物の適切な投与量を決定するための１つの方法は、体液または血液液などの生体液中のｃＰＧレベルを測定することを伴う。そのようなレベルの測定は、ＲＩＡおよびＥＬＩＳＡを含む任意の手段によって行うことができる。ｃＰＧレベルを測定した後、流体は、単回投与または複数回投与を用いて化合物と接触される。この接触ステップの後、流体中のｃＰＧレベルを再測定する。流体中のｃＰＧレベルが、分子が投与されるべき所望の有効性をもたらすのに十分な量だけ低下した場合、最大の有効性をもたらすように分子の用量を調整することができる。この方法は、インビトロまたはインビボで実施することができる。好ましくは、この方法は、インビボで実施され、すなわち、哺乳動物から流体を抽出し、ｃＰＧレベルを測定した後、本明細書の化合物を、単一用量または複数用量を用いて哺乳動物に投与し（すなわち、接触ステップは、哺乳動物への投与によって達成される）、次いで、哺乳動物から抽出された流体からｃＰＧレベルを再測定する。
【０１２４】
本発明の化合物はまた、好適には、徐放性組成物によって投与されてもよい。徐放性組成物の好適な例としては、成形品、例えばフィルム、またはマイクロカプセルの形態の半透過性ポリマーマトリックスが挙げられる。徐放性マトリックスは、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号；ＥＰ５８，４８１号）、Ｌ−グルタミン酸およびγ−エチル−Ｌ−グルタミン酸のコポリマー（Ｓｉｄｍａｎら、１９８３）、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）（Ｌａｎｇｅｒら、１９８１）、エチレンビニルアセテート（Ｌａｎｇｅｒら、上掲）、またはポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸（ＥＰ１３３，９８８号）を含む。持続放出性組成物はまた、リポソームに捕捉された化合物を含む。化合物を含むリポソームは、それ自体公知の方法によって調製される。ＤＥ特許３，２１８，１２１号；Ｅｐｓｔｅｉｎら、１９８５；Ｈｗａｎｇら、１９８０；ＥＰ特許５２，３２２号；ＥＰ特許３６，６７６号；ＥＰ特許８８，０４６号；ＥＰ１４３，９４９号；ＥＰ１４２，６４１号；日本国特許出願第８３−１１８００８号；米国特許第４，４８５，０４５号および第４，４８５，０４５号；ならびにＥＰ１０２，３２４号。通常、リポソームは、脂質含有量が約３０ｍｏｌパーセント以上のコレステロールであり、選択された割合は最も効果的な治療のために調整されている、小さい（約２００オングストロームから約８００オングストロームまで）一枚膜タイプのものである。
【０１２５】
より長い寿命を有するＰＥＧ化ペプチドもまた、例えば、１９９５年１１月３０日に発行されたＷＯ９５／３２００３に記載されたコンジュゲート技術に基づいて採用することができる。
【０１２６】
非経口投与が好ましい場合、化合物は、一般に、単位用量の注射可能な形態（溶液、懸濁液、または乳剤）で、それぞれを所望の濃度で、製薬学的に、または非経口的に受容可能な担体、すなわち、採用される用量および濃度において受容者に無毒であり、かつ製剤の他の成分と適合性のある担体と混合することによって製剤化される。
【０１２７】
一般に、製剤は、化合物を液体担体または細分化された固体担体またはその両方と接触させることによって調製される。次いで、必要に応じて、所望の製剤に成形する。好ましくは、担体は非経口的な担体であり、より好ましくは、レシピエントの血液と等張性の溶液である。このような担体ビヒクルの例としては、水、生理食塩水、リンゲル溶液、緩衝液、ブドウ糖溶液などが挙げられる。また、固定油、オレイン酸エチルなどの非水性ビヒクルを使用してもよい。
【０１２８】
担体は、等張性および化学的安定性を高める物質などの添加剤をさらに含んでもよい。このような物質は、採用される用量および濃度において、受領者に無毒であり、リン酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩、酢酸塩、および他の有機酸またはそれらの塩などの緩衝剤；アスコルビン酸などの酸化防止剤；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド、例えば、ポリアルギニンまたはトリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリンなどのタンパク質；ヒドロフリン酸塩などのタンパク質；使用される用量および濃度において、受領者に無毒である。ポリアルギニンまたはトリペプチド；血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン；グルタミン酸、アスパラギン酸、ヒスチジンまたはアルギニンなどのアミノ酸。単糖類、二糖類、およびセルロースまたはその誘導体、グルコース、マンノース、トレハロース、またはデキストリンなどの他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；マンニトールまたはソルビトールなどの糖アルコール；ナトリウムなどの対イオン；ポリソルベート、ポロキサマー、またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤；および／または中性塩、例えば、以下のようなものが挙げられる。ｇ．，ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＭｇＣｌ２、ＣａＣｌ２など。
【０１２９】
ｃＰＧ化合物は、典型的には約５．５から約８．０の間のｐＨでこのようなビヒクルに配合される。錠剤、カプセルなどに組み込まれてもよい典型的なアジュバントとしては、アカシア、コーンスターチ、ゼラチンなどの結合剤；微結晶セルロースなどの賦形剤；コーンスターチやアルギン酸などの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤；ショ糖や乳糖などの甘味剤；ペパーミント、ウィンターグリーン、チェリーなどの香料などが挙げられる。剤形がカプセルである場合には、上記の材料に加えて、脂肪油等の液体担体を含有していてもよい。他にも、種々の種類の材料をコーティング剤として使用してもよいし、投与単位の物理的形態の修飾剤として使用してもよい。シロップまたはエリキシルは、活性化合物、ショ糖のような甘味料、プロピルパラベンのような防腐剤、着色剤、およびチェリーのような香料を含んでいてもよい。注射用の無菌組成物は、従来の薬学的慣行に従って製剤化することができる。例えば、水またはゴマ油、落花生油、または綿実油のような天然に存在する植物油、またはオレイン酸エチルのような合成脂肪性ビヒクルのようなビヒクルへの活性化合物の溶解または懸濁が所望され得る。緩衝剤、防腐剤、酸化防止剤などは、受け入れられた製薬慣行に従って組み込むことができる。
【０１３０】
治療的投与に使用される化合物は無菌でなければならない。無菌性は、無菌濾過膜（例えば、０．２ミクロンの膜）を通した濾過によって容易に達成される。治療用組成物は、一般に、無菌アクセスポートを有する容器、例えば、静脈内溶液バッグまたは皮下注射針によって穿孔可能なストッパーを有するバイアルに入れられる。
【０１３１】
化合物は通常、単位用量または複数用量容器、例えば密閉されたガラスアンプルまたはバイアルに、水溶液または再構成のための凍結乾燥製剤として保存されます。凍結乾燥製剤の例として、ｌ０ｍＬバイアルに化合物の無菌濾過された１％（ｗ／ｖ）水溶液５ｍＬを充填し、得られた混合物を凍結乾燥する。輸液は、凍結乾燥した化合物を静菌性の注射用水を用いて再構成することにより調製される。
【０１３２】
本明細書のｃＰＧ化合物と、血中の総ｃＰＧを増加させるか、またはｃＰＧの効果を増強する１つ以上の他の適切な試薬との併用療法もまた企図される。これらの試薬は、一般に、本明細書のｃＰＧ化合物が生成したｃＰＧを放出することを可能にする。
【０１３３】
さらに、本発明の一態様には、哺乳動物を治療するために、ｃＰＧ化合物がペプチドである場合には、ｃＰＧ化合物をコードする核酸を用いて、遺伝子治療を用いることが含まれる。一般に、遺伝子治療は、哺乳動物におけるｃＰＧレベルを増加させる（または過剰発現させる）ために使用される。ｃＰＧペプチドをコードする核酸は、この目的のために使用することができる。アミノ酸配列がわかれば、遺伝子コードの縮退性を利用して複数の核酸分子を生成し、その中から遺伝子治療に用いるものを選択することができる。
【０１３４】
遺伝子治療の目的で核酸（オプションでベクターに含まれる）を患者の細胞に導入するには、インビボとエクシボの２つの主要なアプローチがある。ｉｎ  ｖｉｖｏでの導入では、核酸を患者に直接、通常はｃＰＧ化合物を必要とする部位に注入する。ｅｘ  ｖｉｖｏ治療のために、患者の細胞を除去し、核酸をこれらの単離された細胞に導入し、改変された細胞を、直接、または例えば、患者に移植される多孔質膜内にカプセル化して、患者に投与する。例えば、米国特許第４，８９２，５３８号および第５，２８３，１８７号を参照のこと。
【０１３５】
生殖可能な細胞に核酸を導入するために利用可能な様々な技術がある。技術は、核酸がｉｎ  ｖｉｔｒｏで培養細胞に導入されるか、または目的とする宿主の細胞内でｉｎ  ｖｉｖｏに導入されるかによって異なる。インビトロでの哺乳類細胞への核酸導入に適した技術としては、リポソーム、エレクトロポレーション、マイクロインジェクション、細胞融合、ＤＥＡＥ−デキストラン、リン酸カルシウム沈殿法などが挙げられる。本遺伝子のｅｘ  ｖｉｖｏ送達のために一般的に使用されるベクターは、レトロウイルスである。
【０１３６】
現在好ましいインビボ核酸導入技術は、ウイルスベクター（例えば、アデノウイルス、単純ヘルペスＩ型ウイルス、またはアデノ随伴ウイルスなど）によるトランスフェクション、および脂質ベースの系（遺伝子の脂質媒介導入のための有用な脂質は、例えば、ＤＯＴＭＡ、ＤＯＰＥおよびＤＣ−Ｃｈｏｌである）を含む。いくつかの状況では、核酸源に、標的細胞を標的とする薬剤、例えば、細胞表面膜タンパク質または標的細胞に特異的な抗体、標的細胞上の受容体に対するリガンドなどを提供することが望ましい。リポソームを用いる場合には、エンドサイトーシスに関連する細胞表面膜タンパク質に結合するタンパク質を標的化および／または取り込みを促進するために、例えば、特定の細胞型にトロピックなキャプシドタンパク質またはその断片、サイクリングで内部化を受けるタンパク質の抗体、細胞内局在化を標的とし、細胞内半減期を高めるタンパク質などを使用することができる。受容体媒介エンドサイトーシスの技術は、例えば、Ｗｕら、１９８７；Ｗａｇｎｅｒら、１９９０）によって記載されている。現在知られている遺伝子マーキングおよび遺伝子治療プロトコルのレビューについては、Ａｎｄｅｒｓｏｎ  １９９２を参照のこと。また、ＷＯ９３／２５６７３およびそこに引用された文献も参照のこと。
【０１３７】
本発明ではキットも考えられている。典型的なキットは、薬剤学的に許容される緩衝液中のｃＰＧ化合物からなるｃＰＧ化合物製剤を収容する容器、好ましくはバイアル、および使用者が製剤を使用するように指示する製品インサートまたはラベルのような指示書からなるであろう。
【０１３８】
本発明の特定の態様は、神経変性状態を伴う加齢に伴う認知障害の治療における、または明らかな神経変性を伴わない認知障害が見出される状況でのｃＰＧの使用を含む。
【０１３９】
そのような他の薬剤は、例えば、成長因子および関連する誘導体、例えば、インスリン様成長因子−Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）、インスリン様成長因子−ＩＩ（ＩＧＦ−ＩＩ）、成長ホルモン、神経成長因子、成長ホルモン結合タンパク質、および／またはＩＧＦ結合タンパク質からなる非限定的なグループから選択することができる。
【０１４０】
治療への応用
本発明の組成物および方法は、認知障害に苦しんでいるヒト患者などの動物の治療において使用を見出す。さらに一般的には、本発明の組成物および方法は、記憶障害、軽度の認知障害、アルツハイマー病、レビー小体病、前頭側頭葉変性症、血管性認知症、頭部外傷に伴う脳萎縮に起因する認知症を含む認知症、ハンチントン病、パーキンソン病、またはダウン症候群に苦しんでいるヒト患者および対象などの哺乳動物の治療における使用を見いだすが、これらに限定されない。
【０１４１】
医薬品組成物とその投与
環状ＰＧ化合物は、医薬または医薬製剤の一部として投与することができる。これは、本発明の化合物を任意の薬学的に適切な担体、アジュバントまたは賦形剤と組み合わせることを含むことができる。担体、アジュバントまたは賦形剤の選択は、もちろん通常、採用される投与経路に依存する。
【０１４２】
一般に、本発明の化合物は、治療される疾患に対する他の従来の治療剤と単独でまたは組み合わせて、当技術分野で知られている通常の様式のいずれかによって、治療上有効な量で投与される。治療上有効な量は、治療される疾患または傷害、その重症度、治療される動物の年齢および相対的な健康状態、化合物（複数可）の効力、および他の要因に応じて変化し得る。環状プロリルグリシンの治療上有効な量は、動物の質量１キログラムあたり０．０１〜１０ミリグラムの範囲であり得、０．０１〜０．１ｍｇ／ｋｇのような低用量は、脳脊髄液を介した投与、例えば脳静脈内投与による投与に適しており、０．１〜１０ｍｇ／ｋｇのような高用量は、経口投与、全身投与（例えば経皮投与）、または非経口投与（例えば静脈内投与）のような方法での投与に適している。当技術分野における通常の技術を有する者は、その技術および本開示を考慮して、不必要な実験を行うことなく、所与の疾患または傷害に対する本発明の化合物の治療上有効な量を決定することができるであろう。
【０１４３】
環状プロリルグリシンおよびｃＰＧ化合物は、当技術分野で知られている任意の末梢経路を介して経口的または末梢的に投与することができる。これらは、例えば、末梢循環への注射、皮下注射、眼窩内注射、眼科注射、髄腔内注射、膀胱内注射、局所注射、静脈内注射、エアゾール注射、吸入注射、瘢痕化注射、腹腔内注射、カプセル内注射、筋肉内注射、経鼻注射、頬杖注射、経皮注射、肺注射、直腸注射または経膣注射などの非経口的な経路を含むことができるが、これらに限定されない。
【０１４４】
患者の便宜のために、本発明の環状プロリルグリシン化合物およびｃＰＧ化合物を経口投与することができる。組成物中の本発明の化合物の量は、組成物の種類、単位投与量の大きさ、賦形剤の種類、および当技術分野の通常の当業者にはよく知られている他の要因に応じて大きく変化し得る。一般に、最終的な組成物は、体重５０〜１２０ｋｇの典型的な成人に対して５ｍｇ〜５０ｍｇのｃＰＧ、または残部が賦形剤または賦形剤である１×１０−５％〜３×１０−４重量％（％ｗ）で構成されてもよい。
【０１４５】
他の便利な投与経路は、皮下注射または静脈内注入（例えば、活性ｃＰＧは、０．９％塩化ナトリウムまたはデキストロースのような生理学的に適合性のある担体に溶解される）、またはＣＮＳへの直接投与を含む。定位装置および動物のＣＮＳの正確な地図を使用して、化合物を神経損傷の部位に直接注入することができる。
【０１４６】
中枢神経系における化合物の有効量は、本発明の化合物と担体とからなるプロドラッグ形態の化合物の投与によって増加させることができ、ここで、担体は、患者内で切断または消化されやすい連結によって本発明の化合物に結合される。投与後に切断または消化される任意の適切な連結体を採用することができる。
【０１４７】
ただし、申請者側には、他の行政形態を排除する意図はない。
【０１４８】
本発明の他の実施形態では、動物における神経機能の回復は、例えば、から選択される別の神経保護剤と組み合わせて、環状プロリルグリシンまたはｃＰＧ化合物の治療量を投与することを含むことができる。成長因子および関連する誘導体（インスリン様成長因子−Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）、インスリン様成長因子−ＩＩ（ＩＧＦ−ＩＩ）、トランスフォーミング成長因子−β１、アクチビン、成長ホルモン、神経成長因子、成長ホルモン結合タンパク質、ＩＧＦ結合タンパク質、ケラチノサイト成長因子、アンドロゲン誘導成長因子。ＦＧＦファミリーの追加のメンバーには、例えば、線維芽細胞成長因子同族体−１（ＦＨＦ−１）、ＦＨＦ−２、ＦＨＦ−３およびＦＨＦ−４、ケラチノサイト成長因子２、脳由来成長因子、ニューロトロフィン３、およびニューロトロフィン４が含まれる。他の実施形態の神経保護治療剤は、クロメタゾール、キヌレン酸、セマックス、タクロリムス；グルタミン酸アゴニスト、例えば、ＮＰＳ１５０６、ＧＶ１５０５２６０、ＭＫ−８０１、ＧＶ１５０５２６；２，３−ジヒドロキシ−６−ニトロ−７−スルファモイルベンゾ（ｆ）キノキサリン（ＮＢＱＸ）のようなＡＭＰＡアリである。抗ＭＡｄＣＡＭ−１ｍＡｂ  ＭＥＣＡ−３６７（ＡＴＣＣ  アクセッション番号ＨＢ−９４７８）などが挙げられる。）
【０１４９】
環状プロリルグリシン化合物は、好適には、徐放性組成物によって投与することができる。徐放性組成物の好適な例は、例えば、成形品、フィルム、またはマイクロカプセルの形態の半透過性ポリマーマトリックスを含む。
【０１５０】
非経口投与のために、一実施形態では、環状プロリルグルカインまたはｃＰＧ化合物は、一般に、それぞれを所望の純度の程度で、単位用量の注射可能な形態（溶液、懸濁液、またはエマルジョン）で、薬学的に、または非経口的に許容される担体、例えば、採用される用量および濃度において受領者に無毒であり、かつ製剤の他の成分と適合性のある担体と混合することによって製剤化される。
【０１５１】
一般に、環状プロリルグリシンまたはｃＰＧ化合物を液体担体または細分化された固体担体またはその両方と均一かつ親密に接触させることにより、製剤が調製される。次いで、必要に応じて、所望の製剤に成形する。好ましくは、担体は非経口担体であり、鉱石は、好ましくは、レシピエントの血液と等張性の溶液である。このようなキャリアビヒクルの例としては、水、生理食塩水、リンゲル溶液、緩衝液、ブドウ糖溶液などが挙げられる。固定油およびオレイン酸エチルなどの非水性ビヒクルもまた、本明細書において有用である。
【０１５２】
環状プロリルグリシンまたはｃＰＧ化合物は、典型的には４．５から約８のｐＨでそのようなビヒクルに配合される。前述の賦形剤、担体、または安定化剤の特定の使用は、化合物の塩の形成をもたらすことが理解されるであろう。最終的な調製物は、安定な液体または凍結乾燥固体であってもよい。
【０１５３】
医薬組成物中の環状プロリルグリシンまたはｃＰＧ化合物の製剤はまた、アジュバントを含むことができる。錠剤、カプセルなどに組み込むことができる代表的なアジュバントとしては、アカシア、コーンスターチ、ゼラチンなどの結合剤；微結晶セルロースなどの賦形剤；コーンスターチやアルギン酸などの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤；ショ糖や乳糖などの甘味剤；ペパーミント、ウィンターグリーン、チェリーなどの香料などが挙げられる。剤形が錠剤である場合、環状プロリルグリシンまたはｃＰＧ化合物および組成物は、結合剤および任意に、平滑なコーティングを含むことができる。剤形がカプセルである場合、上記の材料に加えて、脂肪油などの液体担体を含んでいてもよい。様々なタイプの他の材料が、コーティングとして、または投与形態の物理的形態の修飾剤として使用されてもよい。シロップまたはエリキシルは、活性化合物、ショ糖のような甘味料、プロピルパラベンのような防腐剤、着色剤、およびチェリーのような香料を含んでいてもよい。注射用の無菌組成物は、従来の薬学的慣行に従って製剤化することができる。例えば、水またはゴマ油、落花生油、または綿実油のような天然に存在する植物油、またはオレイン酸エチルのような合成脂肪性ビヒクルのようなビヒクルへの活性化合物の溶解または懸濁が所望され得る。
【０１５４】
注射、静脈内投与および他の侵襲的な投与経路のために、環状プロリルグリシンまたはｃＰＧ化合物は、好ましくは無菌である。無菌化は、当技術分野で知られている任意の方法、例えば、無菌濾過膜（例えば、０．２ミクロン膜）を介して濾過することによって達成され得る。治療用組成物は、一般に、無菌アクセスポートを有する容器、例えば、皮下注射針によって穿刺可能なストッパーを有する静脈内溶液バッグまたはバイアルに入れられる。
【０１５５】
本発明の好ましい態様
本発明の第一の態様は、傷害または疾患による損傷の結果としてのニューロンおよびグリア細胞の喪失を再生する方法を含み、以下のステップを含む。ａ）前記再生ニューロンおよびグリア細胞の損失を必要とする対象を提供するステップと、ｂ）前記対象に、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）を、新しいニューロンおよびグリアを再生するのに有効な量で投与するステップと、を含む、方法。ここで、前記対象において、ニューロンが再生され、グリア細胞の損失が再生される；ここで、さらに、前記ｃＰＧ化合物が、中枢神経系における神経新生剤として機能する；および、傷害または疾患による損傷の結果としてのニューロンおよびグリア細胞の損失が再生される、さらなる方法。
【０１５６】
ニューロンの再生とは、一般的には、ニューロン、グリア、軸索、ミエリン、またはシナプスの再生または修復を意味する。研究者らは、神経の損傷や変性のプロセスを効果的に制御し、自然修復能力を高め、神経細胞置換や神経リハビリテーションなどの他の再生戦略の有効性を高める微小環境を作り出すための新しいツールを開発している。実験７と実験８では、傷害や病気による損傷の結果として失われた神経細胞とグリア細胞を再生する方法を説明している。
【０１５７】
本発明の別の態様は、投与が、薬学的に許容される担体を含む医薬組成物の形態である場合を含む。
【０１５８】
本発明のさらなる態様は、ここで、ｃＰＧ化合物の有効量が、体重１ｋｇあたり約１μｇ〜約１００ｍｇであることを含む。
【０１５９】
本発明のさらなる態様は、投与が人工脳脊髄液と組み合わせて行われる場合を含む。
【０１６０】
本発明の別の態様は、投与が静脈内投与である場合を含む。
【０１６１】
本発明のさらなる態様は、投与が、神経保護剤、インスリン様成長因子−ＩＩ（ＩＧＦ−Ｉ）またはインスリン様成長因子−ＩＩＩ（ＩＧＦ−ＩＩ）と組み合わされる場合を含む。
【０１６２】
投与が抗炎症剤、抗インテグリンα４サブユニット試薬と組み合わされる本発明のさらなる態様。
【０１６３】
本発明の第二の態様は、傷害または疾患による損傷の結果として損傷を受けたニューロンおよびグリア細胞の損失を修復する方法を含み、以下のステップを含む。ａ）前記ニューロンおよびグリア細胞損失の再生を必要とする対象を提供するステップ；およびｂ）前記対象に、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）を、新しいニューロンおよびグリアを再生するのに有効な量で投与するステップ；を含む。ここで、前記ニューロンが再生され、前記グリア細胞の損失が前記対象において再生される；ここで、前記ｃＰＧが中枢神経系におけるニューロレスキュー剤として機能し、さらにここで、傷害または疾患による損傷の結果として損傷を受けたニューロンおよびグリア細胞の損失が修復される、方法。
【０１６４】
損傷したニューロンを修復することは、一般に、ニューロンおよびグリアの損失を防止するために損傷したニューロンを修復するための再構築的技術またはプロセスを指す。本発明は、外傷性、無酸素性、感染性、および免疫学的な副作用に続いて損傷したニューロンおよびグリアを修復することができる方法を記載している。軸索を再生させることができず、死んだニューロンを入れ替えることができないという古い教義は、もはや通用しない。特に、実験７と実験８では、神経細胞、グリア、薬理学的介入による修復過程が記述されている。
【０１６５】
本発明の別の態様は、ここで、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−２−アルキルプロリン、または環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）が、体重１ｋｇあたり約１μｇから約１００ｍｇであることを含む。
【０１６６】
本発明のさらなる態様は、投与が、その薬学的に許容される担体を含む医薬組成物の形態である場合を含む。
【０１６７】
本発明のさらなる態様は、投与が人工脳脊髄液と組み合わせて行われる場合を含む。
【０１６８】
本発明の別の態様は、投与が神経保護剤、インスリン様成長因子−Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）またはインスリン様成長因子−ＩＩＩ（ＩＧＦ−ＩＩ）と組み合わされる場合を含む。
【０１６９】
本発明のさらなる態様は、本明細書において、投与が抗炎症剤と組み合わされることを含む。
【０１７０】
本発明の第３の態様は、疾患、損傷または状態を必要としている哺乳動物における疾患、損傷または状態に起因する認知機能障害を緩和または軽減する方法を含み、以下の工程を含む。ａ）疾患、損傷または状態によって引き起こされる認知機能障害の緩和または軽減を必要とする哺乳動物を提供すること；およびｂ）前記哺乳動物に、薬剤学的に有効な量の環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）を投与すること、からなる方法。ここで、前記疾患が、アルツハイマー病、ハンチントン病、レビー小体病、認知症、および多病巣性認知症、記憶喪失、アルツハイマー病に関連した注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連した神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、老年期前の認知症、老年性認知症、パーキンソン病に関連した認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性からなる群から選択され、前記疾患が、アルツハイマー病、ハンチントン病、レビー小体病、認知症、および多病巣性認知症からなる群から選択される。前記傷害が、神経毒性傷害、脳低酸素／虚血、外傷性脳傷害、冠動脈バイパス手術からなる群から選択され、前記状態が正常な老化である場合、加齢に伴う記憶喪失、記憶障害、コリン作動性低機能、脳内血管の狭窄または閉塞、神経炎症、軽度認知障害、脳萎縮、前頭側頭葉変性、ピック病、ＨＩＶ感染、ダウン症、およびシナプス可塑性の喪失からなる群から選択される場合、さらにさらに、前記哺乳動物が、アルツハイマー病、記憶喪失、アルツハイマー病に関連する注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連する神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、前老年期認知症、老人性認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性上核麻痺または皮質基底変性を含む疾患、傷害または状態によって引き起こされる認知障害の緩和または軽減のためであるところである。
【０１７１】
認知障害の緩和は、一般的に、記憶、思考、言語、およびその他の思考プロセスに関連する症状を緩和することができる方法を指す。さらに、気分、焦燥感、および他の行動の問題にも役立つことがある。
【０１７２】
本発明の別の態様は、ここで、前記環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−２−アルキルプロリン、または環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物、またはそれらの組み合わせと呼ばれる）が、水溶液と、１種以上の薬学的に許容される賦形剤、添加剤、担体、またはアジュバントとを含むことを含む。
【０１７３】
本発明のさらなる態様は、前記環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせが、錠剤またはカプセル中の１種または複数の賦形剤、担体、添加剤、アジュバントまたは結合剤をさらに含む、ことを含む、ことを含む。
【０１７４】
本発明のさらなる態様は、ここで、障害が、軽度認知障害、アルツハイマー病、記憶喪失、アルツハイマー病に関連する注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連する神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、老年前認知症、老年性認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性である場合を含む。
【０１７５】
本発明の別の態様は、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−２−アルキルプロリン、または環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）が、経口、腹腔内、血管内、末梢循環、皮下、眼窩内、眼球内、脊椎内、膀胱内、外用、点滴、植込み、エアゾール、吸入、瘢痕化、カプセル内、筋肉内、経鼻、頬、経皮、肺、直腸、経膣、またはそれらの組み合わせの投与経路により投与される場合を含む。
【０１７６】
本発明の別の態様は、薬学的に有効な量が、前記哺乳動物のキログラム質量（ｍｇ／ｋｇ）あたり約０．００１ミリグラムの下限および約１００ｍｇ／ｋｇの上限を有することを含む。
【０１７７】
本発明のさらなる態様は、認知障害がコリン作動性低機能によって引き起こされる場合を含む。
【０１７８】
本発明のさらなる態様は、前記認知障害が、前記哺乳動物の海馬の顆粒細胞層（ＣＡ１）におけるグルタミン酸受容体の減少によって引き起こされることを含む。
【０１７９】
本発明の別の態様は、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−２−アルキルプロリン、または環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはその組み合わせと呼ばれる）が、前記哺乳動物の海馬の顆粒細胞層（ＣＡ１）におけるＡＭＰＡ受容体の増加を引き起こすことを含む。
【０１８０】
本発明のさらなる態様は、ここで、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−２−アルキルプロリン、または環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））を含む。ｃＰＧ化合物またはその組み合わせと総称され、前記哺乳類の海馬の顆粒細胞層（ＣＡ１）および錐体細胞層（ＣＡ３）領域において、前記ｃＰＧ化合物によって引き起こされる神経細胞の可塑性の増加を引き起こす。
【０１８１】
本発明のさらなる態様は、外傷性脳損傷によって引き起こされる脳低酸素／虚血を含む。
【０１８２】
本発明の別の態様では、ここで、認知機能障害が多指腸性認知症によって引き起こされることを含む。
【０１８３】
本発明のさらなる態様は、ここで、認知障害が冠動脈バイパス手術（ＣＡＢＧ）によって引き起こされることを含む。
【０１８４】
本発明のさらなる態様は、ここで、アルツハイマー病に起因する認知障害、記憶喪失、アルツハイマー病に関連する注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連する神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、老年期前の認知症、老年性認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性の核上麻痺または皮質基底変性を含む。
【０１８５】
本発明の第４の態様は、疾患、損傷、または状態によって引き起こされた、またはそれに関連した軽度の認知機能障害の症状を、必要としている哺乳動物において予防する方法を含み、以下を含む。ａ）疾患、傷害または状態によって引き起こされる認知機能障害の予防を必要とする哺乳動物を提供すること；ｂ）環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）の薬剤学的に有効な量を該哺乳動物に投与すること。ここで、疾患が、アルツハイマー病、ハンチントン病、レビー小体病、認知症、および多病巣性認知症、記憶喪失、アルツハイマー病に関連した注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連した神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、前老年期認知症、老人性認知症、パーキンソン病に関連した認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性からなる群から選択される。
【０１８６】
軽度認知障害の症状を予防することは、一般的には症状の段階を予防し、主に病気のリスクを減らすために行われる行動を指す。一般的に、認知症における予防は、一次予防、二次予防、三次予防と呼ばれている。
【０１８７】
退行性認知症では、二次予防段階は軽度の認知機能障害の段階に当てはまる。この段階では、症状はあるが、認知症を構成するほど重度ではない。したがって、ＭＣＩを有する対象を対象としたｃＰＧ化合物の治療は、二次予防試験と考えられる。
【０１８８】
三次予防とは、一度発症してしまった病気の進行を食い止めることを目的とした治療法のことを指す。軽度の認知障害を持つ人の障害を軽減し、長期的な予後を改善することを目的としている。
【０１８９】
本発明の第５の態様は、疾患、損傷、または状態によって引き起こされた、またはそれに関連した軽度の認知障害の症状を、治療を必要とする哺乳動物において治療する方法を含み、以下を含む。ａ）疾患、傷害または状態によって引き起こされる認知機能障害の治療を必要としている哺乳動物を提供すること；ｂ）環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）の薬剤学的に有効な量を該哺乳動物に投与すること。ここで、疾患が、アルツハイマー病、ハンチントン病、レビー小体病、認知症、および多病巣性認知症、記憶喪失、アルツハイマー病に関連した注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連した神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、前老年期認知症、老人性認知症、パーキンソン病に関連した認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性からなる群から選択される。
【０１９０】
軽度認知障害の症状を治療することは、一般に、認知機能、すなわち思考のプロセスを治療することを意味し、学習、読解、会話、筆記などの能力を含むが、これに限定されない。軽度認知障害（ＭＣＩ）の患者は、日常活動を管理するために必要なこれらの重要な認知能力を保持しているが、最近の出来事や最近取得した情報を記憶することが困難である。長期記憶はそのまま残る傾向がある。特に、実験１２、軽度認知障害を有するアルツハイマー型認知症患者を対象とした臨床試験を参照のこと。
【０１９１】
神経細胞は、すべての特殊化された動物の細胞の中で最も古いものの一つです。その構造は、他のクラスの細胞のそれとは似ていません。神経成長発達の中心的な課題は、いかにして軸索と樹状突起を成長させ、適切なパートナーを見つけ、それらと選択的にシナプスを形成して機能的なネットワークを構築するかということです。
【０１９２】
本発明の第６の態様は、以下を含む、疾患、損傷、またはそれに関連して引き起こされた、またはそれを必要とする哺乳動物におけるニューロンの成長またはシナプス形成を増加させる方法を含む。ａ）神経細胞の成長またはシナプス形成を増加させることを必要とする哺乳動物を提供すること；ｂ）環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧと呼ばれる）またはそれらの組み合わせからなる薬学的に有効な量の組成物を哺乳動物に投与すること、を含む。ここで、疾患が、アルツハイマー病、ハンチントン病、レビー小体病、認知症、および多病巣性認知症、記憶喪失、アルツハイマー病に関連する注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連する神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、前老年期認知症、老年期認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性からなる群から選択される場合
【０１９３】
本発明の第７の態様は、疾患、傷害、または状態によって引き起こされる認知障害を軽減または緩和する方法を必要とする哺乳動物に提供する方法を含み、以下を含む。ａ）疾患、損傷または状態によって引き起こされる認知機能障害の軽減または緩和を必要とする哺乳動物を提供すること；およびｂ）環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）の薬剤学的に有効な量を該哺乳動物に投与すること。ここで、疾患が、アルツハイマー病、ハンチントン病、レビー小体病、認知症、および多病巣性認知症、記憶喪失、アルツハイマー病に関連した注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連した神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、前老年期認知症、老人性認知症、パーキンソン病に関連した認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性からなる群から選択される。前記傷害が、神経毒性傷害、脳低酸素／虚血、外傷性脳傷害、冠動脈バイパス手術からなる群から選択され、前記状態が正常な老化である場合、加齢に伴う記憶喪失、記憶障害、コリン作動性低機能、脳内血管の狭窄または閉塞、神経炎症、軽度認知障害、脳萎縮、前頭側頭葉変性、ピック病、エイズ感染、ダウン症、およびシナプス可塑性の喪失からなる群から選択される場合、さらにさらに、前記哺乳動物が、アルツハイマー病、記憶喪失、アルツハイマー病に関連する注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連する神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、前老年期認知症、老人性認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性上核麻痺または皮質基底変性を含む疾患、傷害または状態によって引き起こされる認知障害の緩和または軽減のためであるところである。
【０１９４】
本発明の別の態様は、ここで、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−２−アルキルプロリン、または環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物、またはそれらの組み合わせと呼ばれる）が、水溶液と、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤、添加剤、担体、またはアジュバントとから構成されることを含む。
【０１９５】
本発明のさらなる態様は、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−アルキルプロリン、または環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせが、錠剤またはカプセル中の１つまたは複数の賦形剤、担体、添加剤、アジュバントまたは結合剤からなるものをさらに含む、ことを含む。
【０１９６】
本発明のさらなる態様は、ここで、障害が、軽度認知障害、アルツハイマー病、記憶喪失、アルツハイマー病に関連する注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連する神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、老年前認知症、老年性認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性である場合を含む。
【０１９７】
本発明の別の態様は、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−２−アルキルプロリン、または環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）が経口、腹腔内、血管内、末梢循環、皮下、眼窩内、眼球内、脊椎内、膀胱内、外用、点滴、植込み、エアゾール、吸入、瘢痕化、カプセル内、筋肉内、経鼻、頬、経皮、肺、直腸、経膣、またはそれらの組み合わせの投与経路により投与される場合を含む。
【０１９８】
本発明のさらなる態様は、薬学的に有効な量が、前記哺乳動物のキログラム質量（ｍｇ／ｋｇ）あたり約０．００１ミリグラムの下限および約１００ｍｇ／ｋｇの上限を有することを含む。
【０１９９】
本発明のさらなる態様は、認知障害がコリン作動性低機能によって引き起こされる場合を含む。
【０２００】
本発明の別の態様は、コリン作動性低機能がスコポラミンによって引き起こされる場合を含む。
【０２０１】
本発明のさらなる態様は、ここで、認知障害が、加齢性記憶喪失、認知障害、ＭＣＩ（「軽度認知障害」）、アルツハイマー病、記憶喪失、アルツハイマー病に伴う注意欠陥症状、アルツハイマー病に伴う神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、老年期前の認知症、老年性認知症、パーキンソン病に伴う認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性である場合を含む。
【０２０２】
本発明のさらなる態様は、前記認知障害が、前記哺乳動物の海馬の顆粒細胞層（ＣＡ１）におけるグルタミン酸受容体の減少によって引き起こされることを含む。
【０２０３】
本発明の別の態様は、ｃＰＧ化合物が、前記哺乳動物の海馬の顆粒状細胞層（ＣＡ１）におけるＡＭＰＡ受容体の増加を引き起こすことを含む。
【０２０４】
本発明のさらなる態様は、ここで、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−２−アルキルプロリン、または環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ））を含む。ｃＰＧ化合物またはその組み合わせと総称され、前記哺乳類の海馬の顆粒細胞層（ＣＡ１）および錐体細胞層（ＣＡ３）領域において、前記ｃＰＧ化合物によって引き起こされる神経細胞の可塑性の増加を引き起こす。
【０２０５】
本発明のさらなる態様は、外傷性脳損傷によって引き起こされる脳低酸素／虚血を含む。
【０２０６】
本発明の別の態様では、ここで、認知機能障害が多指腸性認知症によって引き起こされることを含む。
【０２０７】
本発明のさらなる態様は、ここで、認知障害が冠動脈バイパス手術（ＣＡＢＧ）によって引き起こされることを含む。
【０２０８】
本発明のさらなる態様は、ここで、アルツハイマー病に起因する認知障害、記憶喪失、アルツハイマー病に関連する注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連する神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、老年期前の認知症、老年性認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性の核上麻痺または皮質基底変性を含む。
【０２０９】
本発明の８つの態様は、疾患、損傷、または状態によって引き起こされた、またはそれに関連した軽度の認知障害の症状を、必要としている哺乳動物において予防する方法を含み、以下を含む。ａ）疾患、傷害または状態によって引き起こされる認知機能障害の予防を必要とする哺乳動物を提供すること；およびｂ）環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧと呼ばれ、またはそれらの組み合わせ）の薬剤学的に有効な量を該哺乳動物に投与すること。ここで、疾患が、アルツハイマー病、ハンチントン病、レビー小体病、認知症、および多病巣性認知症、記憶喪失、アルツハイマー病に関連した注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連した神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、前老年期認知症、老人性認知症、パーキンソン病に関連した認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性からなる群から選択される。
【０２１０】
本発明の第９の態様は、治療を必要としている哺乳動物において、疾患、傷害、または状態によって引き起こされた、またはそれに関連した軽度の認知障害の症状を治療する方法を含み、以下を含む。ａ）疾患、傷害または状態によって引き起こされる認知機能障害の治療を必要とする哺乳動物を提供すること；およびｂ）環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）の薬剤学的に有効な量を該哺乳動物に投与すること。ここで、疾患が、アルツハイマー病、ハンチントン病、レビー小体病、認知症、および多病巣性認知症、記憶喪失、アルツハイマー病に関連した注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連した神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、前老年期認知症、老人性認知症、パーキンソン病に関連した認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性からなる群から選択される。
【０２１１】
本発明の第１０の態様は、以下を含む、疾患、損傷、またはそれに関連して引き起こされた、またはそれを必要とする哺乳動物におけるニューロンの成長またはシナプス形成を増加させる方法を含む。ａ）神経細胞の成長またはシナプス形成を増加させることを必要とする哺乳動物を提供すること；およびｂ）環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）の薬学的に有効な量からなる組成物の有効量を哺乳動物に投与することを含む。ここで、疾患が、アルツハイマー病、ハンチントン病、レビー小体病、認知症、および多病巣性認知症、記憶喪失、アルツハイマー病に関連した注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連した神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、前老年期認知症、老人性認知症、パーキンソン病に関連した認知症、進行性核上麻痺または皮質基底変性からなる群から選択される。
【０２１２】
本発明の第１１の態様は、神経変性障害、虚血性障害、神経学的外傷、学習および記憶障害、またはそれらの組み合わせである中枢神経系障害の少なくとも１つの症状を示す患者の神経組織における神経新生を、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン）を投与することによって調節する方法を含む。または環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物、またはその組み合わせ、またはｃＰＧと同じ、実質的に同じ、または類似の機能を有するその機能性または活性アナログ、変種、誘導体、およびそれらの組み合わせであって、ここで、本剤は、患者における神経新生を調節し、それにより患者の神経組織における神経新生を調節する。
【０２１３】
神経発生とは、神経幹細胞や前駆細胞から新しいニューロンが発生し、成熟し、特殊化し、ニューロンネットワーク内に統合されて機能的になる過程である。神経組織における神経新生の調節とは、一般的にヒトの脳における神経細胞の成長を調節または制御する方法を指す。
【０２１４】
本発明の別の態様は、ここで、神経系の障害が、アルツハイマー病、パーキンソン病およびパーキンソン障害、ハンチントン病多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、シャイ・ドレーガー症候群、進行性核上麻痺、レビー小体型、脊髄虚血、虚血性脳卒中、脳梗塞、脊髄損傷、がん関連脳・脊髄損傷、多病棟認知症、老人性認知症、軽度認知障害、うつ病、外傷性損傷である場合を含む。
【０２１５】
本発明のさらなる態様は、前記神経新生の調節が、前記神経組織におけるＧＰＣＲ受容体の活性化によって行われることを含む。
【０２１６】
本発明のさらなる態様は、本発明のさらなる態様において、本剤が、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物、またはそれらの組み合わせと呼ばれる）の量で、約０．１ｍｇから約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．５ｍｇから約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．２ｍｇから約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇから約５０ｍｇ／ｋｇ／日、または約１０マイクログラムから約１００ｍｇ／ｋｇ／日。
【０２１７】
本発明の第１２の態様は、神経変性障害、虚血性障害、神経学的外傷、学習および記憶障害、またはそれらの組み合わせである中枢神経系障害の少なくとも１つの症状を示す患者の神経組織における神経新生を調節する方法を含む。前記患者に、前記患者の成人神経幹細胞を増加させ、前記障害の少なくとも１つの症状を軽減するのに十分な量の環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−２−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）を投与することによって、前記患者に、前記障害の少なくとも１つの症状を軽減することができる。
【０２１８】
本発明の別の態様は、ここで、障害が、アルツハイマー病、パーキンソン病およびパーキンソン障害、ハンチントン病多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、シャイ・ドレーガー症候群、進行性上核麻痺、レビー小体型疾患、脊髄虚血、虚血性脳卒中、脳梗塞、脊髄損傷、がん関連脳・脊髄損傷、多病床性認知症、老人性認知症、認知障害、うつ病、外傷性損傷、またはそれらの組み合わせであることを含む。
【０２１９】
本発明の別の態様は、ここで、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−アルキルプロリン、または環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物、またはそれらの組み合わせと呼ばれる）を、１日あたり体重１キログラムあたり約０．０１ｍｇ／ｋｇから約１００ｍｇまで投与することを含む。
【０２２０】
本発明の第１３の態様は、対象におけるうつ病または他の心理的障害を治療するための方法を含み、以下を含む。ａ）うつ病または他の心理的障害の治療を必要としている対象を提供すること；およびｂ）環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）の薬学的に有効な量を対象に投与すること；ここで、対象はうつ病または他の心理的障害の治療を受けることを特徴とする。
【０２２１】
うつ病の症状は軽度のものから重度のものまで様々で、次のようなものがあります：悲しい気持ちになったり、落ち込んだ気分になったり、かつて楽しんだ活動への興味や喜びがなくなったり、食欲の変化（ダイエットとは無関係の体重減少や増加）、睡眠障害や寝すぎ、エネルギーの喪失や疲労感の増加、思考障害、集中力の低下、決断力の低下、死や自殺の考えなど。
【０２２２】
本発明の別の態様は、ここで、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−２−アルキルプロリン、または環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物、またはそれらの組み合わせと呼ばれる）が、水溶液と、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤、添加剤、担体、またはアジュバントとから構成されることを含む。
【０２２３】
本発明のさらなる態様は、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−アルキルプロリン、または環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物と呼ばれる）、またはそれらの組み合わせが、錠剤またはカプセル中の１つまたは複数の賦形剤、担体、添加剤、アジュバントまたは結合剤からなることをさらに含む。
【０２２４】
本発明のさらなる態様は、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）が経口、腹腔内、血管内、末梢循環、皮下、眼窩内、眼球内、脊椎内、膀胱内、外用、点滴、植込み、エアゾール、吸入、瘢痕化、カプセル内、筋肉内、経鼻、頬、経皮、肺、直腸、経膣、またはそれらの組み合わせの投与経路により投与される場合を含む。
【０２２５】
本発明の別の態様は、薬学的に有効な量が、前記哺乳動物のキログラム質量（ｍｇ／ｋｇ）あたり約０．１ミリグラムの下限および約１０ミリグラム／ｋｇの上限を有することを含む。
【０２２６】
本発明のさらなる態様は、薬学的に有効な量が、経口的に投与される１日当たり約２０ｍｇから約８０ｍｇの間であり、かつ医師の処方命令により、いくつかの重篤な症例では１日当たり約１００ｍｇまでであり得ることを含む。
【０２２７】
本発明の第１３の態様は、うつ病または他の心理的障害の症状を予防することを必要としている対象に予防する方法を含み、以下を含む。ａ）うつ病または他の心理的障害の予防を必要としている対象を提供すること；ｂ）環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）の薬学的に有効な量を対象に投与すること；ここで、対象がうつ病または他の心理的障害の症状を発症するのを予防することを含む。
【０２２８】
うつ病の症状を予防することは、一般的に、人の感じ方、考え方、行動に悪影響を及ぼす医学的な病気を予防することを意味する。うつ病は、悲しみの感情や、かつて楽しんでいた活動への興味の喪失を引き起こす。うつ病は、様々な感情的・身体的問題を引き起こし、仕事や家庭での機能を低下させることがある。特に、実験１５を参照されたい。
【０２２９】
本発明の第１４の態様は、うつ病または他の心理的障害の治療を必要とする対象におけるうつ病または他の心理的障害の症状を治療する方法を含み、以下を含む。ａ）うつ病または他の心理的障害の治療を必要としている対象を提供すること；ｂ）環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類縁体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）の薬学的に有効な量を哺乳動物に投与すること；ここで、対象がうつ病または他の心理的障害の症状の治療を受けることを含む。
【０２３０】
うつ病の症状は軽度のものから重度のものまで様々で、次のようなものがあります：悲しい気持ちになったり、落ち込んだ気分になったり、かつて楽しんだ活動への興味や喜びがなくなったり、食欲の変化（ダイエットとは無関係の体重減少や増加）、睡眠障害や寝すぎ、エネルギーの喪失や疲労感の増加、思考障害、集中力の低下、決断力の低下、死や自殺の考えなど。
【０２３１】
本発明の第１５の態様は、精神的に抑うつ状態にある患者を治療するための方法を含み、以下を含む。ａ）うつ病または他の精神障害の治療を必要とする対象を提供すること。ｂ）精神的抑うつに苦しんでいる患者に、環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）の薬学的に有効な量（例えば、１日あたり２０ｍｇから８０ｍｇに限定されないが、これらに限定されない）を投与すること；ここで、対象は、精神的抑うつの治療を受けることができる。
【０２３２】
精神的に抑うつ状態にある患者の治療には、通常、小児、青年、若年成人の自殺念慮や行動のリスクを高める市販の抗うつ剤を短期的な試験で使用することが一般的であったが、本発明のｃＰＧは、副作用の少ない有効な抗うつ剤であることが実証されている。本発明において、ｃＰＧは、ほとんどまたは全く副作用のない有効な抗うつ剤として機能することが実証されている、実験１５を参照のこと。
【０２３３】
本発明の第１６の態様は、うつ病または他の心理的障害の症状を軽減または緩和するための方法を含み、以下を含む、うつ病または他の心理的障害を必要としている対象の症状を軽減または緩和するための方法である。ａ）うつ病または他の心理的障害の症状を軽減または緩和することを必要としている対象を提供すること；ｂ）環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、または環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）の薬学的に有効な量を哺乳動物に投与すること；ここで、対象がうつ病または他の心理的障害の症状を緩和することを含む。
【０２３４】
本発明の第１７の態様は、うつ病または他の心理的障害のカスケードを必要としている対象に介入または予防するための方法を含み、以下を含む。ａ）うつ病または他の心理的障害の介入または予防を必要としている対象を提供すること；ｂ）環状プロリルグリシン（ｃＰＧ）またはその類似体（環状（トリ（プロリルグリシン）または環状グリシル−２−アリルプロリン、環状グリシル−アルキルプロリンまたは環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＰＭｅＧ）、総称してｃＰＧ化合物またはそれらの組み合わせと呼ばれる）の薬学的に有効な量を哺乳動物に投与すること；ここで、前記対象がうつ病または他の心理的障害の症状を予防することを含む。
【０２３５】
うつ病の治療法は確立されているが、推定では、うつ病患者の大多数が適切なケアを受けていないことが示唆されている。時宜を得た介入は、大うつ病エピソードを持つ人へのケアの連続性モデルの重要な要素である。特に、実験１５を参照のこと。
【実施例】
【０２３６】
以下のインビトロおよびインビボでの研究は、認知障害の軽減における環状プロリルグリシンの有効性を実証している。これらは、限定することを意図したものではなく、本発明の他の組成物および方法は、不必要な実験を行うことなく開発することができる。以下の実験はすべて、動物倫理委員会および機関審査委員会によって承認されたガイドラインの下で開発されたプロトコルを使用して実施された。
【０２３７】
環状プロリルグリシンは、バケム（カリフォルニア州トーランス）およびＳｉｇｍａ（米国ムーア州セントルイス）のような商業的な供給者から入手可能である。
【０２３８】
実験１．
サイクリックＰＧは用量に関連した方法でグルタミン酸誘発の神経細胞死をｉｎ  ｖｉｔｒｏで予防する。
材料と方法：
小脳細胞培養カバースリップの作成とコーティング
１０個のカバースリップを大きなシャーレに入れ、７０％アルコールで５分間洗浄した後、ミリポアＨ２Ｏで洗浄した。カバースリップを空気乾燥させ、ポリ−Ｄ−リジン（ＰＢＳ中の１ｍｇ／ｍｌストック溶液、９０−１００μｌ）でコーティングし、３４℃で２時間インキュベートした。
【０２３９】
抽出
生後４日目のウィスターラットを用いた。ラットを１分間氷中に置き、頭部を断頭し、氷上で小脳を除去した。小脳組織を、大シャーレに入れた０．６５％グルコース補充ＰＢＳ（１０μｌ  ６５％ストックＤ（＋）グルコース／１ｍｌ  ＰＢＳ）の１ｍｌに入れ、より小さな切片に刻んで、２３Ｇ（０．４ｍｍ）の針を介して１ｍｌのインスリンシリンジでトリチュレートし、大シャーレ上のグルコース溶液に戻して潮吹きした。組織をふるいにかけ（１２５μｍの細孔サイズゲイザー）、遠心分離（６０ｇで２分間）を２回行い、無血清ＢＳＡ補填ＳＴＡＲＴ  Ｖ培地（Ｂｉｏｃｈｒｏｍ）への培地交換を行った。回目の遠心分離ステップは、１ｍｌのＳＴＡＲＴＡＲＴ  Ｖ培地で行った。マイクロエクスプローズは、ＳＴＡＲＴ  Ｖ培地の５００μｌに再構成し、氷上に置いた。
【０２４０】
小脳細胞の培養と固定化
ＰＤＬコーティングの２時間後、スライドをミリポアＨ２Ｏで洗浄し、空気乾燥させた。各スライドを小さな３５ｍｍシャーレに入れ、Ｖ／細胞懸濁液の４０μｌを添加した。組織は３４℃（沈降期間）で２時間インキュベートした。その後、スタートＶ中（１ｍｌ）をシャーレに添加し、３４℃／５％ＣＯ２／１００％湿度で４８時間培養した。細胞をＰＢＳで洗浄し、パラホルムアルデヒド（０．４％ＰＦＡの５００μｌが適用された、その後１．２％ＰＦＡ、その後３％ＰＦＡと最終的に４％ＰＦＡ−すべての固定溶液は、０．２％グルタルアルデヒドを含む）の増加濃度で２〜３分間固定した。最後に、マイクロエクスプランツをＰＢＳでリンスした。
【０２４１】
薬剤の適用
試験１については、１０μｌの毒素（Ｌ−グルタミン酸−１００ミリポア水で）をｃＰＧ（バケム社製、１０ｍＭストックをＰＢＳで調製し、１−１００ｎＭの間の最終濃度に希釈したもの）と同時に適用した。試験２については、グルタミン酸処理後６時間後にｃＰＧの投与を遅延させた。
【０２４２】
結果：
試験１：グルタミン酸処理は小脳ニューロンの８５％の喪失をもたらした。サイクリックＰＧは、グルタミン酸と同時に投与した場合、用量応答的にグルタミン酸誘発性神経細胞死を有意に減少させた（図３）。より低用量のｃＰＧ（１０〜１００ｎＭ）を投与した処置は、グルタミン酸誘発神経毒性からの有意な回復を示した。
【０２４３】
試験２：サイクリックＰＧは、グルタミン酸処理後６時間後に投与した場合、１〜１００ｎＭの用量範囲で、ビヒクル処理群と比較して有意にグルタミン酸誘導神経毒性からの回復を示した（図４）。
【０２４４】
さらに低用量のｃＰＧを投与すると、正常対照群に比べてニューロン数が有意に増加したことから、神経細胞の増殖と分化におけるｃＰＧの役割が示唆されました。
【０２４５】
結論
過剰なグルタミン酸は、活性なＮＭＤＡ受容体によって神経細胞の興奮毒性を引き起こす可能性がある。ｃＰＧは、直接または間接的なＮＭＤＡアゴニストとして作用し、グルタミン酸処理の直後または６時間後に投与すると、グルタミン酸誘発性の神経毒性を完全に防ぐことができました。ｃＰＧがＮＭＤＡ活性を阻害することができるｍＧｌｕ２／３受容体をアゴニストすることができることを考えると。ｃＰＧの事前ホルモンであるＧＰＥは、おそらくｍＧｌｕ２／３受容体に対するその抗作用のために、ｐＣＲＥＢの促進において部分的なＮＭＤＡ受容体であることが示されている。ｃＰＧは、遅延治療として有効であり、神経細胞の増殖を促進することができるので、アポトーシスを受けているニューロンの予防に関与することができる。
【０２４６】
実験２．
サイクリック（ｔｒｉ（ｐｒｏｌｙｌｇｌｙｃｙｌ）またはｃ（ＰＧ）３は、用量に関連した方法でｉｎ  ｖｉｔｒｏでのグルタミン酸誘発神経細胞死を抑制する。
材料と方法：（参照により本明細書に組み込まれている実験１については上記を参照のこと。）
【０２４７】
薬剤の適用
トキシン（Ｌ−グルタミン酸−１００ｍＭ、ミリポア水）１０μｌを、環状（トリ（プロリルグリシル））と同時に塗布した。（ニューロバイオメド，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）から入手した１０ｍＭのストックをＰＢＳで調製し、最終濃度を１−１００ｎＭに希釈したもの）を試験１に用いた。試験２については、グルタミン酸処理後６時間後に環状（トリ（プロリルグリシル））の投与を遅延させた。
【０２４８】
結果：
試験１：グルタミン酸投与により小脳神経細胞が８５％消失した。環状（トリ（プロリルグリシル））は、グルタミン酸と同時に投与すると、用量反応的にグルタミン酸誘発神経細胞死を５７％有意に減少させた。より低用量の環状（トリ（プロリルグリシル））を用いた治療は）（１０−１００ｎＭ）はグルタミン酸誘発性神経毒性からの有意な回復を示した。
【０２４９】
試験２：環状（トリ（プロリルグリシル）は、グルタミン酸処理後６時間後に投与した場合、１−１００ｎＭの用量範囲で、グルタミン酸誘発性神経毒性から約４３％の有意な回復を示したが、ビヒクル処理群と比較して改善が見られた。
【０２５０】
さらに低用量の環状（トリ（プロリルグリシル）を投与した場合も、正常対照群と比較してニューロン数が有意に増加したことから、神経細胞の増殖や分化にｃＰＧが果たす役割が示唆された。
【０２５１】
実験３
環状グリシル−２−メチルプロリンは、用量に関連した方法でグルタミン酸誘発の神経細胞死を予防する。
材料と方法：（参照により本明細書に組み込まれている実験１と実験２については上記参照
【０２５２】
薬剤の適用
試験１について、１０μｌの毒素（Ｌ−グルタミン酸−ミリポア水で１００ｍＭ）を、環状グリシル−２−メチルプロリン（ニューロバイオメド，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａから入手）、１０ｍＭストックをＰＢＳで調製し、最終濃度が１−１００ｎＭの間になるように希釈した）と同時に適用した。試験２については、グルタミン酸処理の６時間後にｃＰＧの投与を遅延させた。
【０２５３】
結果：
試験１：グルタミン酸処理は小脳ニューロンの８５％の喪失をもたらした。環状グリシル−２−メチルプロリンは、グルタミン酸と同時に投与した場合、用量反応的にグルタミン酸誘発性神経細胞死を６３％有意に減少させた。より低用量の環状グリシル−２−メチルプロリン（１０−１００ｎＭ）を投与した処置は、グルタミン酸誘発神経毒性からの有意な回復を示した。
【０２５４】
試験２：環状グリチル−２−メチルプロリンは、グルタミン酸処理後６時間後に投与した場合、１−１００ｎＭの用量範囲でグルタミン酸誘発神経毒性から約５８％有意に回復するという改善が、ビヒクル処理群と比較して示されました。
【０２５５】
さらに低用量の環状グリチル−２−メチルプロリンを投与した場合も、正常対照群に比べてニューロン数が有意に増加したことから、神経細胞の増殖と分化におけるｃＰＧの役割が示唆された。
【０２５６】
結論
過剰なグルタミン酸は、活性なＮＭＤＡ受容体によって神経細胞の興奮毒性を引き起こす可能性がある。環状ＰＧ類似体である環状（トリ（プロリルグリシル）および環状グリシル−２−メチルプロリンは、直接的または間接的なＮＭＤＡアゴニストとして作用することにより、グルタミン酸処理の直後または６時間後に投与された場合、グルタミン酸誘発性神経毒性を有意に防止した。
【０２５７】
ｃＰＧ化合物は、遅延治療として有効であり、神経細胞の増殖を促進させることができるため、アポトーシスを受ける神経細胞の予防に用いることができるが、これらに限定されない、例えば、環状（トリ（プロリルグリシル））、環状グリシル−２−メチルプロリンなどの環状ＰＧおよびその類縁体を用いることができる。
【０２５８】
実験４．
６−オーエイチディーエー誘発後の病変後のｃＰＧの効果。
材料と方法
２０匹の雄性ウィスターラット（２８０〜３１０グラム）を使用した。頭蓋骨を露出させた後、６−オーエイチディーエー（１％アスコルビン酸を含む２μリットル０．９％生理食塩水の塩基中の８μｇ）は、３％ハロセン麻酔下で座標ＡＰ＋４．７ミリメートル、Ｒ  １．６ｍｍｖ−８ミリメートルを使用して右内側前脳束（ＭＦＢ）に投与した。６−オーエイチディーエーは、１００μリットルのハミルトンシリンジにポリエチレンカテーテルを介して接続された２５Ｇの針を介して注入した。６−オーエイチディーエーを０．５μｌ／ｍｉｎの速度でマイクロダイアリシス注入ポンプで注入した。針は、ゆっくりと引き出される前に、さらに３分間、脳に残っていた。皮膚を２．０シルクで縫合し、ラットを麻酔から回復させた。ラットは、行動テスト中を除いて、すべての回で食べ物と水への自由なアクセスを持つホールディングルームに収容された。
【０２５９】
ｃＰＧは生理食塩水に溶解した。４種類の異なる用量のｃＰＧ（０、０．１、０．５、１ｍｇ／ｋｇ、バケム）を病変後２時間後に腹腔内投与した。
【０２６０】
７日後に、ラットに０．１ｍｇ／ｋｇのアポモルフィンを注射し、対側回転数／時間を記録し、コンピュータ化されたロタメーター（セントディエゴインスツルメンツ）を用いて計算した。実験者は治療群からの盲検化を行った。
【０２６１】
結果：
１ｍｇのｃＰＧを投与された群（ｎ＝５、１５４±６４）は、ビヒクルを投与された群（ｎ＝５、２９０±１８）と比較して、回転数が減少する傾向を示した。図５）。
【０２６２】
実験５
６−オーエイチディーエー誘発後の神経膠原病変後の環状（トリ（プロリルグリシル）の効果
材料と方法（実験１、実験２、実験３、実験４については上記を参照のこと）。
【０２６３】
環状（トリ（プロリルグリシル）を生理食塩水に溶解した。４種類の異なる用量の環状（トリ（プロリルグリシル）０、０．１、０．５、１ｍｇ／ｋｇ、ニューロバイオメッド）を病変後２時間後に腹腔内投与した。
【０２６４】
１ｍｇのシクロヘキシル（トリ（プロリルグリシル））で処理した群（ｎ＝５，１７２±６９）では、ビヒクル処理群（ｎ＝５，２９０±１８）に比べて回転数が減少する傾向が見られ、６−オーエイチディーエー誘発性神経節損傷における機能回復の改善におけるサイクリック（トリ（プロリルグリシル）の役割が示唆された。
【０２６５】
結論
環状（トリ（プロリルグリシル）は、６−オーエイチディーエー誘発後の神経−斜角病変の機能回復を用量依存的に改善した。
【０２６６】
このデータは、環状（トリ（プロリルグリシル）がパーキンソン病や他の神経障害の治療薬として使用できることを示している。
【０２６７】
実験６．
６−オーエイチディーエー誘発後の神経膠原病変後の環状グリシル−２−メチルプロリンの効果
材料と方法（上記の実験１から実験５までを参照のこと）。
【０２６８】
環状グリシル−２−メチルプロリン（ｃＧＭｅＰを生理食塩水に溶解した。４種類の用量のｃＧＭｅＰ（０、０．１、０．５、１ｍｇ／ｋｇ、ニューロバイオメド）を病変後２時間後に腹腔内投与した。
【０２６９】
１ｍｇのｃＧＭｅＰを投与された群（ｎ＝５、１３４±６９）は、ビヒクルで治療された群（ｎ＝５、２９２±２１）と比較して、回転数が有意に減少する傾向が見られたが、６−オーエイチディーエー誘発性神経節損傷における機能回復の改善におけるｃＧＭｅＰの役割を示唆している。
【０２７０】
結論
環状グリシル−２−メチルプロリンは、６−オーエイチディーエー誘発後の神経−斜角病変の機能回復を用量に関連した方法で改善した。
【０２７１】
このデータは、シクログリシル−２−メチルプロリンがパーキンソン病の治療薬として有効であることを示している。
【０２７２】
実験７．
学習と記憶のモリス水迷路（ＭＷＭ）モデルは認知機能上の環状プロリルグリシンの効果を評価するために使用される。
スコポラミン誘発性認知機能障害を有する動物にｃＰＧを投与すると、コリン作動性低下症に苦しむ人々に観察される治療上の改善と同様の臨床的改善が得られます。スコポラミンは、アルツハイマー病に伴うコリン作動性機能低下の動物モデルに一般的に使用されている。スコポラミン治療後に観察される機能障害には、ヒトのアルツハイマー病患者に見られるものが含まれている。このように、スコポラミン治療はヒトの疾患に見られる認知機能障害を合理的に予測することができる。さらに、スコポラミン治療は、神経変性疾患を持たないヒトの認知機能障害を模倣している。
【０２７３】
本研究の目的は、環状プロリルグリシンを調査し、その影響の認知欠損と情動状態（不安）を評価することであった。
【０２７４】
方法
研究の最初の部分は、モリス水迷路記憶モデルにおける環状プロリルグリシンの急性試験に関与した。ＭＷＭ試験は、ラットの空間記憶を評価するために最も頻繁に使用される試験の１つであり、一般的に空間記憶に対する疾患や治療の影響を正確に予測することがよく知られている。したがって、ＭＷＭテストは、ヒトの対象における疾患や治療の影響を反映している。
【０２７５】
ＭＷＭの標準的な手順に従った。不透明な水を入れた円形のプール（水深８０ｃｍ×直径１５０ｃｍ）を使用し、温度は２０℃に維持した。水面下１ｃｍにプラットフォームを隠し、白旗（１０ｃｍ×１０ｃｍ）は、視覚的な手がかりのためのプラットフォームの上２０ｃｍと空間的な手がかりのための開始位置との関係で３時の位置のいずれかに配置されていた。実験の１日目から４日目に、ラットは試験の各日（習慣化段階）で６回（６０秒ずつ）の試行で記憶獲得試行を受けた。プラットフォームに到達するまでの潜伏時間を記録し、平均潜伏時間の毎日の減少は、隠されたプラットフォームがどこにあったかを学習する能力を測定するために使用されました。
【０２７６】
実験５日目に、正常、非老化ウィスターラットをグループに分け、生理食塩水（Ｎ＝１２）またはスコポラミン（０．５ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．、Ｎ＝１２）のいずれかを投与して記憶障害を誘発させた。スコポラミンはプローブテスト開始の３０分前に投与した。
【０２７７】
スコポラミン処理後１０分後、環状プロリルグリシンを１０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝１６）で経口投与し、ビヒクル処理した動物には、同一の処理プロトコール（ｎ＝１５）を用いて希釈剤を経口投与した。
【０２７８】
【表１】
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【０２７９】
次に、ｃＰＧの急性効果を、スコポラミン誘発性記憶障害を有する動物と、記憶障害のない年齢をマッチさせた対照動物を用いて試験し、記憶処理に対する直接的な薬理学的効果を決定した。実験群を以下の表１に詳述する。
【０２８０】
５日目に、プラットフォームを取り外した状態でプローブＭＷＭ試験を実施した。試験は６回、各試験の最大持続時間は６０秒で、試験間に少なくとも５分間の休息をとった）。）ラットがプラットフォームの近くを泳いでいる時間は、非空間的な戦略を用いた場合とは対照的に、ラットがプラットフォームの位置を特定するために視覚的および空間的な手がかりにどれだけ依存しているかを示す指標となりました。データはＡｎｙ−ｍａｚｅ（ｖ４．２）ソフトウェアを使用して収集・分析した。
【０２８１】
行動テストから生成されたデータは、年齢群間の差を決定するために一方向ＡＮＯＶＡを用いて分析された。行動テストの結果の経過を調べるためには、時間点を従属因子として扱う二元配置分散分析を用いた。データ分析にはＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ｖｅｒｓｉｏｎ３．０２を使用した。
【０２８２】
結果
スコポラミンによる処置は、処置した動物の空間記憶の獲得を有意に障害した（４日目のプラットフォームまでの時間はコントロールの約２０８％）。環状プロリルグリシン（２０ｍｇ／ｋｇ；毎日）は、スコポラミンによって誘発された認知障害を有意に逆転させた（図６）。
【０２８３】
これらの結果から、ＮＡ−８３１は、学習した水没台を見つける技能（空間記憶）の検索にコリン陽性作用を示し、軽度認知障害のある患者さんにも有効であることが確認されました。
【０２８４】
実験８．
ブロモデオキシウリジンを用いたｃＰＧおよびその類似体ｃ（ＰＧ）３およびｃＧＭｅＰの試験による神経新生の決定
目的
本実験の目的は、脳室下帯や海馬の歯状回を含む神経原性の高い領域にＢｒｄＵを共投与したラットにおいて、ｃＰＧとその類縁体であるｃ（ＰＧ）３とｃＧＭｅＰを腹腔内投与した場合の影響を調べることである。
【０２８５】
実験方法。
約２５０〜２７０ｇ（新生児ではない）の雄のウィスターラットを使用した。すべての動物実験は、国内および国際的なガイドラインに準拠して実施した。ケアは、動物のための苦しみを最小限に抑えるために取られた。動物は、研究の開始前に１週間順応させることができました。動物は、通常の明暗期間とケージごとに５匹の動物のグループで標準化された条件の下で収容された。動物は研究期間中、餌と水を自由に摂取できるようにした。
【０２８６】
雄ウィスターラット（Ｎ＝１０）に、３種類の神経新生調節剤ｃＰＧ、ｃ（ＰＧ）３およびｃＧＭｅＰを０．１％ラット血清アルブミン（ＲＳＡ）中、１０ｍｇ／ｋｇで別途腹腔内投与した。陰性対照（ｎ＝１２）、ビヒクル群には生理食塩水（０．１％ＲＳＡ中）を注射した。ブロモデオキシウリジン（ＢｒｄＵ；５０ｍｇ／ｋｇ）を化合物と共に共投与した。腹腔内注射は１２時間間隔で７日間行った。動物は８日目に灌流した。ラットは１２時間の明暗レジームで飼育した。灌流では、動物を氷冷リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）５０ｍｌで経頭蓋的に灌流した後、ＰＢＳ中の４％パラホルムアルデヒド１００ｍｌで灌流した。脳は、４℃で２４時間、セクショニングの前に少なくとも３日間、ＰＢＳ中の４％パラホルムアルデヒドで除去した後に固定した。経頭蓋注入の手順は、以下の手順で構成されている。
【０２８７】
動物を０．１グラム単位で秤量し、ペントバルビタールナトリウムおよびケタミン／キシラジンを投与した。動物を、１０〜１５分間加熱したケージに入れた。ラットは、化学ヒュームフード内の発泡スチロール作業面に前足と後足を固定した仰臥位（顔を上向きにして仰向けに寝かせた）で固定した。切開は、ちょうど鎖骨に舟状突起の下から胸郭正中線に沿って外科用ハサミで皮膚を介して行われた。２つの追加の皮膚切開は、横方向に腹側胸郭の基部に沿って吻側突起から行われた。優しく吻側と横方向に皮膚の２つのフラップを反映させ、完全に胸郭フィールドを公開することを確認してください。吻合突起の軟骨を鈍器で把持し、わずかに盛り上げて先の尖ったハサミを挿入した。胸骨と内側肋骨挿入部の間に胸筋と胸郭を切開し、切開部を鎖骨のレベルまで吻合延長した。両側の胸壁からの横隔膜はシザーカットで分離した。反射胸郭は、心臓や他の胸郭臓器を露出させるために横方向に１８Ｇの針でテープまたはピン留めされた。心嚢は穏やかに鈍器で把持し、完全に開いて引き裂かれた。拍動している心臓を鈍性鉗子で固定し、１−２ｍｍの切開を左心室に行った。２４ＧＸ２５．４ｍｍの動物給餌針バルナス先端（ハーバード装置猫。摂食針は、解剖顕微鏡を使用して大動脈弓の基部にスレッドされた。針の基部は、止血栓を使用して切開部位の上に左心室にクランプした。右心房を直ちにハサミで切開し、血流の最初の兆候でヘパリン化生理食塩水の注入を開始し（ステージ１灌流液）、右心房を出る流体が完全に透明になるまで続けた。生理食塩水灌流液をアルデヒド系固定剤（ステージ２灌流液）に変更し、動物に注入した固定剤の合計２０〜３０ｍｌに変更した。動物を大きな外科用ハサミで断頭した。脳を除去し、パラフィンに埋め込んだ。切片は、凍結ミクロトームを使用して調製し、ＢｒｄＵの免疫染色前に−２０℃で凍結保護剤で保存した。切片は、ビオチン化ヤギ抗マウスＩｇＧとペアになったマウス抗ＢｒｄＵとＢｒｄＵのために免疫染色し、ＡＢＣエリートキット（Ｖｅｃｔｏｒｌａｂ、メーカーの指示に従う）を使用して可視化した。
【０２８８】
標準的な光顕微鏡技術を用いて、各切片および脳の関連領域におけるＢｒｄＵ陽性細胞の総数をカウントした。分析および定量化は、増殖性脳領域、脳室下帯、および海馬の歯状回旋筋について実施した。ここに記載されていない他の実験的詳細は、当技術分野の当業者に知られており、例えば、Pencea V et al. J. Neurosci Sep. 1 (2001). 21 (l 7):6706-17に記載されている。
【０２８９】
結果
特筆すべきは、０．１％ＲＳＡで１０ｍｇ／ｋｇのｃＰＧ、ｃ（ＰＧ）３およびｃＧＭｅＰを１日２回、ＢｒｄＵと共投与したラットに腹腔内注入したところ、脳室下帯や海馬の歯状回を含む神経原性の高い領域の新生細胞数（ＢｒｄＵ陽性）が有意に増加した（ノンパラメトリック一方向ＡＮＯＶＡ）ことであった（図７および図８）。
【０２９０】
結論
以上のことから、ｃＰＧ、ｃ（ＰＧ）３、ｃＧＭｅＰは神経幹細胞の増殖効果を示すことが明らかになった。
【０２９１】
実験９
ｃＰＧを用いた損傷神経組織の再生の決定
試験には産後４日目のウィスターラット１０匹を用いた。ラットを２群に分け、一方を薬液で処理した５匹の群、他方を０．９％塩化ナトリウム（生理食塩水）溶液で処理した５匹の群に分けた。ｃＰＧ（バケム社製、０．９％塩化ナトリウム（生理食塩水）溶液に調製した１０ｍＭ溶液）を含む薬液を０．７５ｍｌの容量で１日４回投与し、傷害部位を徹底的に浸水させた。
【０２９２】
脊髄を粉砕した２日後、ラットの硬膜を開き、ポリエチレンチューブは、一端の開口部が直接脊髄の負傷部分の上に横たわるように、椎骨棘と隣接する軟部組織に縫合された。チューブは、その他の端が頭蓋骨の基部に出てくるように、皮下トンネルを通ってもたらされた。シリンジアダプタは、薬剤を注入するための外部開口部に取り付けられていた。すべての実験は、２つのグループで二重盲検に基づいて行われた：５匹の動物の一方のグループは生理食塩水に１０ｍＭのｃＰＧの薬液で処理され、他方のグループは０．９％塩化ナトリウム（生理食塩水）溶液で処理された。すべての動物の処理は、動物を殺し、組織学的切片を調製した後、１４日間継続した。
【０２９３】
結果
薬物処理した動物では、生理食塩水で処理した動物に比べて、神経線維による病変部への浸潤が大きかった。薬物処理した動物では、神経線維は病変部に大量に入り込み、もはや縦方向には向きを変えず、全方向に無造作に成長していた。線維はしばしばうねるようにして静脈状になっており、３〜６本の軸索を含む小さな束になっていることが多かった。軸索の大きさは非常に細かく、そのほとんどが直径３〜７ミクロンであった。スライドをコード化してランダム化すると、薬物処理した動物と生理食塩水処理した動物の標本を区別するのに困難はなかった。最も神経の成長が盛んなのは、ｃＰＧで処理した動物であった。
【０２９４】
結論
本実施例は、傷害部位に前記組成物を十分に入浴させるか、またはその他の方法で接触させることにより、神経の再生が促進されることを示した。前記組成物を損傷部位に直接投与すると、損傷した神経組織の再生が促進される。
【０２９５】
実験１０
環状（グリシル−Ｌ−プロリル−Ｌ−プロリル）の損傷神経組織の再生
試験には産後４日目のウィスター１０匹のラットを用いた。ラットを２群に分け、一方を薬液で処理した５匹の群と、他方を０．９％塩化ナトリウム（生理食塩水）溶液で処理した５匹の群とに分けた。Ｎｅｕｒｏｂｉｏｍｅｄ社（カリフォルニア州サンノゼ）から入手した環状（グリシル−Ｌ−プロリル−Ｌ−プロリル）またはｃ（ＰＧ）３を１０ｍＭ含有する薬剤溶液を、０．０．９％塩化ナトリウム（生理食塩水）溶液で調製した１０ｍＭ溶液を０．７５ｍｌの容量で１日４回投与し、傷害部位を徹底的に浸水させた。
【０２９６】
脊髄を粉砕した２日後、ラットの硬膜を開き、ポリエチレンチューブは、一端の開口部が直接脊髄の負傷部分の上に横たわるように、椎骨棘と隣接する軟部組織に縫合された。チューブは、その他の端が頭蓋骨の基部に出てくるように、皮下トンネルを通ってもたらされた。シリンジアダプタは、薬剤を注入するための外部開口部に取り付けられていた。すべての実験は、２つの群で二重盲検に基づいていた：５匹の動物の１つの群は、生理食塩水で１０ｍＭのｃ（ＰＧ）３の薬液で処理し、５匹の動物の他の群は、０．９％の塩化ナトリウム（生理食塩水）溶液で処理した。すべての動物の処理は、動物を殺し、組織学的切片を調製した後、１４日間継続した。
【０２９７】
結果
結果は、ｃＰＧを用いた上記の実験と同様である。ｃ（ＰＧ）で処理した動物では、神経線維は、もはや縦方向には配向しておらず、むしろ全方向に無秩序に成長しているような大量に病変部位に成長していた。線維はしばしばうねるようにして静脈状になり、３〜６本の軸索を含む小さな束になっていることが多かった。軸索は非常に細径で、そのほとんどが直径３〜７ミクロンであった。
【０２９８】
スライドをコード化してランダム化したところ、薬物処理した動物と生理食塩水処理した動物の標本を区別することに困難はなかった。最も神経の増殖が盛んなのは、ｃ（ＰＧ）３で処理した動物であった。
【０２９９】
損傷部位に前記組成物を十分に浸漬することにより、神経の再生が促進される。前記組成物は、傷害部位に直接投与することも含めて、傷害部位に投与することにより、損傷した神経組織の再生を促進する。
【０３００】
実験１１
環状グリシル−２−メチルプロリンの損傷神経組織の再生
試験には産後４日目のウィスター１０匹のラットを用いた。ラットを２群に分け、一方を薬液で処理した５匹の群と、他方を０．９％塩化ナトリウム（生理食塩水）溶液で処理した５匹の群とに分けた。環状グリシル−２−メチルプロリンを１０ｍＭ含有する薬液、すなわちｃＧＭｅＰ（ニューロバイオメド社製、０．９％塩化ナトリウム（生理食塩水）溶液に調製した１０ｍＭ溶液）を１日４回、０．７５ｍｌの容量で投与し、傷害部位を徹底的に浸水させた。
【０３０１】
脊髄を粉砕した２日後、ラットの硬膜を開き、ポリエチレンチューブは、一端の開口部が直接脊髄の負傷部分の上に横たわるように、椎骨棘と隣接する軟部組織に縫合された。チューブは、その他の端が頭蓋骨の基部に出てくるように、皮下トンネルを通ってもたらされた。シリンジアダプタは、薬剤を注入するための外部開口部に取り付けられていた。すべての実験は、２つの群で二重盲検に基づいて行われた：５匹の動物のうちの１つの群は生理食塩水で１０ｍＭのｃＧＭｅＰの薬液で処理され、５匹の動物の他の群は０．９％塩化ナトリウム（生理食塩水）溶液で処理された。すべての動物の処理は、動物を殺し、組織学的切片を調製した後、１４日間継続した。
【０３０２】
結果
結果は、ｃＰＧを用いた上記の実験と同様である。ｃＧＭｅＰで処理した動物では、神経線維は、もはや縦方向には配向していないが、むしろ全方向に無秩序に成長するような大量に病変部位に成長した。線維はしばしばうねるようにして静脈状になっており、３〜６本の軸索を含む小さな束になっていることが多かった。軸索は非常に細径で、そのほとんどが直径３〜７ミクロンである。
【０３０３】
スライドをコード化してランダム化したところ、薬物処理した動物と生理食塩水処理した動物の標本を区別することに困難はなかった。最も神経の増殖が盛んなのは、ｃＧＭｅＰで処理した動物であった。
【０３０４】
神経の再生は、傷害部位に前記組成物を接触させることによって促進されるが、これに限定されるものではない。前記組成物は、損傷部位に直接投与すると、損傷した神経組織の再生を促進する。
【０３０５】
実験１２
軽度の認知障害を有するアルツハイマー病患者を対象とした臨床試験。
軽度認知障害（ＭＣＩ）とは、年齢や学歴に応じて予想される以上に認知機能が低下している状態をいう。軽度認知障害とは、記憶などの認知機能に障害があり、年齢的には標準を超えているが、認知症の特徴である認知症には至らないものをいう。
【０３０６】
集団ベースの研究では、軽度の認知障害は６５歳以上の成人で３％から１５％である。ＭＣＩ患者の半数以上が５年以内に認知症に進行している。
【０３０７】
認知症が発症してからの治療よりも、この段階での治療の方が最大の効果が得られるので、軽度認知障害の発見は重要です。
【０３０８】
材料と方法
血管由来の軽度認知障害を有するアルツハイマー型認知症患者を対象に、ＮＡ−８３１（別名：環状プロリルグリシン）の無作為化臨床試験を実施した。ＮＡ−８３１は１日１回１０ｍｇの１カプセルを１２週間にわたって経口投与された。試験に参加したアルツハイマー型認知症患者は３２名であった。
【０３０９】
含有基準
−スクリーニング時の年齢が５５〜８５歳（含む）の男性または女性。
−自己申告による記憶の不平不満、配偶者または同伴者による必要に応じた裏付け。
−ウェクスラー記憶尺度ＩＩＩ（ＷＭＳ−ＩＩＩ））の年齢調整済み論理的記憶ＩＩスコア≦５．
−ミニ精神状態試験（ＭＭＳＥ）≧２４。
−疫学研究センター（疫学研究センター−うつ病：ＣＥＳ−Ｄ）スコア＜２７。
−正常な甲状腺機能（ＴＳＨ、ＴＳ３、Ｔ４が正常範囲内と定義されている。
−毎回の試験訪問時に８時間以内にアルコール飲料を摂取しないことに同意すること。
−インフォームドコンセントに署名し、ＣＴＢとその他のすべてのテストとプロトコルに記載されている手順を完了する意志と能力があること。
−女性対象は、少なくとも２年間、外科的に無菌であるか、閉経後でなければならない。閉経後２年未満の場合は、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）≧４０ｍＩＵ／ｍＬを得なければならない。
【０３１０】
除外基準
−重大で未治療の精神疾患や中枢神経系の疾患（統合失調症、パーキンソン病、脳卒中など）があり、試験の評価や手順に支障をきたす可能性がある、または追加のリスクをもたらす可能性がある対象。
−非合併性うつ病の既往歴のある対象は、以下の場合に参加できる。
−寛解していて、少なくとも２ヶ月間安定した抗うつ薬を服用している場合。
−重大な頭部外傷に続き、持続的な神経学的異常または既知の脳構造的異常を有する履歴。
−過去１年間に脳卒中や一過性脳虚血発作（ＴＩＡ）、原因不明の意識消失を起こしたことがある方
−不安定狭心症、心筋梗塞、慢性心不全、または臨床的に有意な伝導異常の既往歴がスクリーニング受診１回目に先立つ１年以内にある。
−過去１年以内のアルコールまたは物質の乱用または依存の履歴。
−急性感染性副鼻腔炎
−鼻中隔の手術による修正、または２年以上前に鼻中隔または「鼻折れ」の手術による修正、または３０歳未満で口蓋裂の手術による修正を除いて、鼻または鼻咽頭の外部構造または内部構造の異常の既往歴または存在。
−認知の率直な鈍化を引き起こすことが知られている薬の使用
−スクリーニング後３ヶ月以内のアルツハイマー型認知症治療薬または治験薬の使用
−試験の評価に支障をきたすと判断された、または安全性に懸念があると判断された全身疾患の既往歴または現在の重篤な疾患。
−睡眠時無呼吸症候群の未治療または睡眠時無呼吸症候群の治療歴が３ヶ月未満の方。
−スクリーニング期間前または期間中の３０日以内に臨床的に重要な全身疾患または重篤な感染症がある場合
−慢性疾患のために許可されている薬のうち、スクリーニング訪問１回目の前に少なくとも４週間安定していない用量での使用、またはスクリーニング訪問１回目の前に少なくとも８週間安定していない用量でのＡＤ治療薬の使用。
−臨床検査値の異常、具体的には以下のような場合。アラニントランスアミナーゼ（ＡＬＴ）またはアスパラギン酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）＞２х正常値の上限（ＵＬＮ）、血液学的検査値が正常値の下限の８０％未満、クレアチニンが２ｍｇ／ｄＬ以上、その他の臨床検査値またはバイタルサインが臨床的に重要であると治験責任医師が判断した場合。
−スクリーニング前３０日以内に治験薬、生物学的製剤、または装置を使用していたこと。
−過去３ヶ月以内に全身麻酔を必要とする手術、または試験期間中に全身麻酔を必要とする手術を計画している。
−試験手順の禁忌事項
−認知障害の一因となり、有害事象（ＡＥ）のリスクを高める可能性のある薬剤の使用、または認知検査の実施や試験手続きを完了する能力を損なう可能性のある薬剤の使用。
【０３１１】
評価
１）器質性障害患者における向精神薬の臨床薬理作用の統一的評価」に基づいた症状の重症度を評価する尺度で、精神病理学的症状の治療力学や薬剤の向精神作用の特徴を客観的に定量的に把握することができる。
２）ミニ精神状態検査（ＭＭＳＥ）は、注意力、記憶力、グノーシス、発話力、称賛、計数の各項目の認知機能を評価する神経心理学的検査で構成されている。
３）認知障害の個々の構成要素の重症度を評価する簡単な認知評価尺度（ＢＣＲＳ）。
４）認知能力スクリーニング試験（ＣＣＳＥ）とは、方向性、記憶力、計数、物体を推論したりグループ化したりする能力などの認知機能を評価するテストで構成されている。
５）臨床世界印象尺度（臨床グローバル印象尺度）は、重症度、「全体的な改善」の程度、治療効果、治療中の副作用の有無、重症度などを調査し、薬剤の治療効果を耐容性、安全性とともに定量的に評価する尺度である。
６）生化学的検査（ＡＳＴ、ＡＬＴ）を含む一般的な血液検査、尿検査からなる検査室分析。
７）ＥＣＧの跡。
【０３１２】
結果
血管由来の軽度認知障害を有する患者の精神状態は、ミニメンタルステート検査（ＭＭＳＥ）、簡単な認知評価尺度（ＢＣＲＳ）、認知能力スクリーニング検査（ＣＣＳＥ）を含む評価によって定義されたが、これに限定されるものではない。
【０３１３】
ＮＡ−８３１の患者における治療作用には、神経症様症状や認知障害の減少が含まれている。
【０３１４】
その結果を表２に示す。
【表２】
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【０３１５】
ＷはＷｉｌｃｏｘｏｎ符号付き順位検定で、従属性のあるｔ−検定に相当するノンパラメトリック検定である。これは、同じ参加者の２つのスコアのセットを比較するために使用される。これは、ある時点から別の時点へのスコアの変化を調査したい場合や、個人が２つ以上の条件にさらされている場合に起こる。
【０３１６】
臨床医は、薬物治療期間の前と後の疲労に関して患者の状態に違いがあったかどうかを理解するためにＷｉｌｃｏｘｏｎ符号ランク検定を使用した。
【０３１７】
ＮＡ−８３１は、ｐ＜０．０１で以下の機能を有意に改善することが示されていることに注目されたい：
−疲労の軽減
−不安を軽減する
−イライラを軽減する
−ラビリティーの向上
−夜間の起床時の乱れを減らす
−日中の眠気を軽減する
−夜行性睡眠時間の改善
【０３１８】
ＮＡ−８３１の治療効果の解析は、本試験に参加した全患者を対象に、ミニメンタルステート検査（ＭＭＳＥ）、簡単な認知評価尺度（ＢＣＲＳ）、認知能力スクリーニング検査（ＣＣＳＥ）を含む評価方法で実施された。
【０３１９】
アルツハイマー病特許におけるＮＡ−８３１の有効性に関する臨床データは、以下のように要約され、強調されている。
【０３２０】
ＮＡ−８３１は、患者の集中力と計数能力を向上させることがわかった。グラフでは、４２日目から８４日目までの統計データであるブリーフ認知評価尺度の測定を時間に対してプロットしたところ、ｐ値は０．０１以下となりました。これは、患者の集中力や計数能力の向上に有意な効果があることを意味している。図９を参照されたい。
【０３２１】
アルツハイマー型認知症の患者さんの短期記憶力がどんどん悪くなっていくのはよくある症状である。ＮＡ−８３１は短期記憶だけでなく、長期記憶も改善する。図１０を参照されたい。
【０３２２】
また、アルツハイマー型認知症の患者さんの長期記憶力はどんどん悪くなっていきます。ＮＡ−８３１は短期記憶だけでなく、長期記憶も改善する。図１１を参照されたい。
【０３２３】
アルツハイマー型認知症の患者さんは、病気の初期段階では自宅にいても方向感覚が失われていることが多いです。ＮＡ−８３１は、方向感覚を改善し、時間と場所の感覚を回復させます。図１２を参照されたい。
【０３２４】
アルツハイマー型認知症の患者さんは、病気が進行すると自分で介護ができなくなる。この薬は、患者の日常生活動作やセルフケアの能力を向上させます。図１３を参照されたい。
【０３２５】
ミニメンタルステート検査（ＭＭＳＥ）は、認知障害を測定するために臨床や研究の場で広く使用されている３０点の質問紙である。ＮＡ−８３１の情動への影響は、１日目の平均２３．５（軽度障害）から８４日目の平均２９．７５（正常）へとＭＭＳＥが有意に改善していることが示された。図１４を参照されたい。
【０３２６】
ＮＡ−８３１は、軽度の認知障害を有する患者に対して高い有効性が認められ、全患者の９２．５％で顕著な改善が認められ、７．５％の患者ではほとんど改善が認められなかった。図１５を参照されたい。
【０３２７】
結論
環状プロリルグリシンは、グルタミン酸誘発性の神経毒性を減少または防止し、神経保護作用を有し、神経細胞の変性または細胞死を抑制することができることを示している。
【０３２８】
実験１３
静脈内投与後の動物におけるｃＰＧとＮＲ２Ｂ−ｓｕｂｔｙｐｅ受容体の関係を調べるためのアッセイ
本実験では、８〜１０週齢の雄性ＣＤ−１マウス（ｎ＝１２）を、１０％ジメチルアセトアミド、４０％ＰＥＧ−４００、３０％ヒドロキシプロピルベタシクロデキストリン、３０％水からなるビヒクルに環状プロリルグリシン（０．１０ｍｇ／ｍｌ）を加えたものを静脈内投与し、投与１５分後に断頭法で前脳を採取した。脳サンプルは直ちに凍結し、−８０℃で保存した。
【０３２９】
翌日、投与された脳サンプルを氷上で２０〜３０分間解凍した後、５０ｍＭ  ＫＨ２ＰＯ４（ＫＯＨでｐＨを７．４に調整）、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．００５％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ  １００およびプロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｆｉｓｃｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）からなる低温ホモジナイゼーションバッファー中でポリトロンを用いて１０秒間ホモジナイズした。粗ホモジネートをＤｏｕｎｃｅホモジナイザー（Ｔｈｏｍａｓ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いてさらにホモジナイズし、全動物からのホモジナイズされた膜アリコートをガッシュ凍結し、さらに使用するまで−８０℃で保存した。全ホモジナイズ工程は氷上で行った。
【０３３０】
占有率を決定するために、膜ホモジネートを氷上で解凍し、２５ゲージの針を用いて針状ホモジナイズした。ホモジナイズしたメンブレン（６．４ｍｇ／ｍｌ）を９６ウェルプレートに添加し、次いで３Ｈ  Ｒｏ２５−６９８１（６ｎＭ）を添加した。反応混合物を４℃でシェーカー上で５分間インキュベートし、次いでＧＦ／Ｂ分画プレート（０．５％  ＰＥＩで室温で１時間処理）上に採取した。分配プレートを５０℃で３０分間乾燥させ、マイクロシンチレーション２０で１５分間インキュベートし、卓上マイクロプレートシンチレーション・ルミネセンスカウンター（パーキンエルマー社製トップカウントモデルＮＸＴ）で読み取った。各投与群または化合物群は４匹の動物で構成された。対照群の動物にはビヒクルのみを投与した。各動物からの膜をアッセイプレートに３回に分けて添加した。非特異的結合は、ビヒクル投与動物からの膜ホモジネートを含むウェルに１０μＭのＲｏ２５−６９８１を添加して決定した。
【０３３１】
次式を用いて、比カウント（specific count）／分を各動物に対する化合物の各投与量での占有率に換算した：
【数１】
2021524864.tif 000009
【０３３２】
この方法を用いて、ｃＰＧ化合物は３ｍｇ／Ｋｇの静脈内投与で９３％のＮＲ２Ｂ受容体占有率を示した。薬物濃度は質量分析法により測定した。その結果、血漿中の薬物濃度は１０７４ｎＭであり、脳組織中の薬物濃度は１６３２ｎＭであった。
【０３３３】
その結果、静脈内投与後の動物において、ｃＰＧが脳内常駐型ＮＲ２Ｂサブタイプ受容体を占有し、本化合物およびその類縁体が薬理学的に有効であることが明らかになった。
【０３３４】
実験１４：マウス強制水泳試験（ｍＦＳＴ）
強制水泳試験（ＦＳＴ）は、前臨床試験で抗うつ化合物を評価するために使用される動物モデルである。ＦＳＴは、ポルソルトらの方法と同様に、修正を加えて実施した（Porsolt RD, Bertin A, Jalfre M. Behavioral despair in mice: a primary screening test for antidepressants. Arch Int Pharmacodyn Ther 1977; 229:327-36）。
【０３３５】
この実験では、マウスは水で満たされた脱出不可能なシリンダーの中を強制的に泳がされます。この条件では、マウスは最初は逃げようとし、最終的には不動の行動をとるようになるが、この行動は受動的なストレス対処戦略、あるいは抑うつ状態に似た行動と解釈されます。プラスチック製の箱の中にスイムタンクを配置した。各水槽は円柱の高さまで不透明なプラスチックシートで区切られていた。一度に３匹のマウスを試験対象とした。水（水深２０ｃｍ、２４〜２５℃に維持）を入れたガラス製の円筒（高さ４６ｃｍ×直径２０ｃｍ）の中にマウスを入れて６分間泳がせた。この水位では、マウスの尾は容器の底に触れない。マウスが水中でもがくことなく受動的に浮いたままで、鼻や頭を水面から浮かせておくために必要な動きだけをしているときに不動と判定した。不動の持続時間は、試験の合計６分間の間に評価し、不動の持続時間（ｓｅｃ）で表した。各マウスは１回のみ試験した。各セッションの終了時に、マウスを乾いた布で乾燥させ、低体温を防ぐために保温毛布の上に置かれた自宅のケージに戻した。水は各試験の後に交換した。
【０３３６】
ＦＳＴで得られた結果を、各実験群の動物の不動時間の算術平均値（秒単位で与えられた）±平均値の標準誤差（ＳＥＭ）として示した。
【０３３７】
被験薬が運動活性に影響を及ぼす可能性があり、ＦＳＴで偽陽性・偽陰性の影響を受けるリスクを避けるために、動物活動計オプトバリメックス−４オートトラック（コロンバスインスツルメンツ社、米国）を用いて自発的な運動活性を測定した。この装置は、蓋付き透明ケージ４個（４３×４３×３２ｃｍ）、４個の赤外線エミッタ（各エミッタは１６個のレーザービームを有する）のセット、および動物の動きを監視する４個の検出器から構成されている。それぞれのマウスをケージに１０分間入れた。自発的な運動量は、ＦＳＴで分析した時間間隔に対応する２分目から６分目までの間に評価した。
【０３３８】
さらに、すべての試験セッションはビデオカメラ（Ｓｏｎｙ  Ｈａｎｄｉｃａｍ，Ｍｏｄｅｌ：ＤＣＲ−ＨＣ３８Ｅ；ＰＡＬ）で記録され、スコアリングはＦｏｒｃｅｄ  Ｓｗｉｍ  Ｓｃａｎ，Ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．０ソフトウェア（Ｃｌｅｖｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．，Ｒｅｓｔｏｎ，Ｖａ．，ＵＳＡ；Hayashi E, Shimamura M, Kuratani K, Kinoshita M, Hara H. Automated experimental system capturing three behavioral components during murine forced swim test. Life Sci. 2011 Feb. 28; 88(9-10):41 1-7;およびYuan P, Tragon T, Xia M, Leclair C A, Skoumbourdis A P, Zheng W, Thomas C J, Ffuang R, Austin C P, Chen G, Guitart X. Phosphodiesterase 4 inhibitors enhance sexual pleasure-seeking activity in rodents. Pharmacol Biochem Behav. 2011; 98(3):349-55を参照されたい）。
【０３３９】
泳ぐ３０分前に１２匹のマウスにシクロプロピルグリシン（濃度０．１０ｍｇ／ｍｌ）を静脈内投与し、６分間の不動時間を記録した。ＦＳＴ終了後、マウスを急速断頭法により安楽死させ、血漿と脳のサンプルを採取し、−８０℃で保存した。マウス強制泳動試験では、ｃＰＧ化合物を生理食塩水（０．９０％塩化ナトリウム）ビヒクル中に５ｍＬ／Ｋｇの投与量で静脈内投与した。化合物は、これらの条件下で１ｍｇ／Ｋｇで不動時間の統計的に有意な減少を示した。この用量での薬物濃度は血漿中２３７＋／−１２８ｎＭ、脳内６３２＋／−１７３ｎＭであった。ＮＲ２Ｂ受容体占有率は、上記で報告されたように決定され、７３％であると決定された。ｃＰＧアナログは、これらの同じ条件下で、１ｍｇ／ｋｇでの不動時間の統計的に有意な減少を示した。薬物濃度は、血漿中２１５ｎＭであった。ＮＲ２Ｂ受容体占有率は６８％と決定された。
【０３４０】
その結果、環状プロリルグリシン（ＮＡ−８３１）化合物は抗うつ作用を示すことがわかった。
【０３４１】
実験１５
臨床試験：大うつ病性障害患者を対象とした環状プロリルグリシン（ＮＡ−８３１）の二重盲検、無作為化、プラセボ対照、アクティブリファレンス試験
序章
環状プロリルグリシン（ＮＡ−８３１）は、抗うつ薬として開発中の新規化合物です。前臨床試験のデータから、これらの親和性は臨床的に有用であり、治療用量での作用機序に関与していると考えられている。ＮＡ−８３１は、ラットの前頭前野および海馬において、セロトニン（５−ＨＴ）、ノルアドレナリン、ドーパミン、アセチルコリン、ヒスタミンの細胞外レベルを増加させ、ラットの前頭前野および海馬において、セロトニン（５−ＨＴ）、ノルアドレナリン、ドーパミン、アセチルコリン、ヒスタミンの細胞外レベルを増加させる。本臨床試験の目的は，成人大うつ病性障害（ＭＤＤ）患者を対象に，ＮＡ−８３１の２つの固定用量（２０ｍｇ／ｄおよび４０ｍｇ／ｄ）とプラセボの６週間投与後の有効性，安全性および忍容性を検討することであった。活性基準としてベンラファキシンＸＲを使用した。
【０３４２】
方法
この無作為化二重盲検、固定用量、プラセボ対照、アクティブリファレンス試験では、３２例の無作為化患者を、良好な臨床実践［ＩＣＨ（１９９６）調和型三者間ガイドラインＥ６：良好な臨床実践のためのガイドライン（http://www.fda.gov/downloads/drugs/guidancecomplianceregulatoryinformation/guidances/ucm073122.pdf）］およびヘルシンキ宣言［ＷＭＡ（１９６４）．ヒトを対象とする医学研究の倫理原則（http://www.wma.net/en/30publications/10policies/ b3/）世界医師会］の原則に従って募集した。各地の倫理委員会が研究デザインを承認し、資格のある患者は参加前に書面によるインフォームドコンセントを行った。
【０３４３】
資格のある患者は、６週間の二重盲検治療期間中、４つの治療群のいずれかに均等に（１：１：１：１：１）無作為に割り付けられた。無作為化された患者さんには、各診察時に１週間分のウォレットカードが渡され、１日２カプセルを毎日同じ時間（できれば午前中）に経口投与するよう指示されました。ＮＡ−８３１は２０ｍｇ／日または４０ｍｇ／日を６週間、ベンラファキシンは７５ｍｇ／日を６週間投与した。有効性と忍容性は、スクリーニング時、ベースライン時、１、２、３、４、５、６週後に評価した。投与終了後４週間後に安全性フォローアップのために患者に連絡した。
【０３４４】
主な入力基準
ＤＳＭ−ＩＶ−ＴＲ基準による現在の大うつ病エピソードを呈するＭＤＤ患者は、男女いずれかの外来患者で、年齢が２０〜６５歳（平均＝３９．７±８．５）（ベースライン訪問時にＭｏｎｔｇｏｍｅｒｙ−Åｓｂｅｒｇうつ病評価尺度（ＭＡＤＲＳ）（Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ＆Åｓｂｅｒｇ、１９７９）の合計スコアが≧３０の場合、本研究に含まれた[Montgomery S Asberg M (1979). A new depression scale designed to be sensitive to change. British Journal of Psychiatry 134, 382-389. https://doi.org/10.1192/bjp.134.4.382]。
【０３４５】
患者は、Ｍｉｎｉ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ  Ｉｎｔｅｒｖｉｅｗ[Sheehan DV Lecrubier Y Sheenan KH Amorim P et al. (1998). The Mini-International Neuropsychiatric Interview (M.I.N.I.). Journal of Clinical Psychiatry 59 (Suppl. 20), 22-33, quiz 34-57]を使用して評価して、Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ａｎｄ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｎｔａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（ＤＳＭ−ＩＶ−ＴＲ）に定義されているＭＤＤ以外の現在の精神疾患を有していた場合、または躁病または低躁病エピソード、精神病的特徴を有する大うつ病を含む統合失調症またはその他の精神病的障害、精神遅滞、器質的精神障害、または一般的な医学的状態による精神障害の現在または過去の病歴、過去６ヶ月以内の物質乱用障害、臨床的に重要な神経学的障害（てんかんを含む）の存在または病歴、神経変性疾患、または研究に支障をきたす可能性のあるＡｘｉｓ  ＩＩ障害の存在または病歴を有して場合には、除外された。
【０３４６】
また、研究者の臨床的判断に基づいて自殺の危険性が高い患者、ＭＡＤＲＳスケールの１０項目（自殺念慮）でスコアが≧５の患者、正式な行動療法や体系的な心理療法を受けている患者、妊娠中や授乳中の患者、過敏症であることが知られているか、ベンラファキシンに無反応であるか、または現在の抑うつ症状が、少なくとも６週間の間に２回の適切な抗うつ薬治療に抵抗性があると研究者が判断したか、または以前にＮＡ−８３１に曝露されたことがある人も除外された。
【０３４７】
また、ベースライン前または試験期間中に以下の向精神薬を２週間以内に服用していた場合も除外された。可逆的または非可逆的なモノアミン酸化酵素阻害剤、ＳＳＲＩ（５週間以内のフルオキセチン）、ＳＮＲＩ、三環系抗うつ薬、精神作用のある漢方薬、抗うつ作用の増強に使用される薬物またはその他の抗うつ薬、経口抗精神病薬および抗躁薬、またはドーパミンアリ、任意の抗不安薬（ベンゾジアゼピンを含む）を服用している場合。および任意の抗痙攣薬、セロトニン作動薬ｓ、麻薬性鎮痛薬または咳止め薬、抗不整脈薬、経口抗凝固薬、プロトンポンプ阻害薬、ステロイド、シサプリド、マクロライド系抗生物質、抗真菌薬、抗高血圧薬、全ての抗炎症薬、抗片頭痛薬、シュードエフェドリン、低脂血症薬、およびインスリンのエピソード的使用。不眠症に対するゾルピデム、ゾピクロン、ザレプロンの時折の使用が認められた。
【０３４８】
試験中に妊娠した場合、安全性／有効性の観点から患者の最善の利益となると治験責任医師が判断した場合、臨床検査値が正常範囲外で臨床的に有意であった場合、自殺の重大なリスクがあると判断された場合、ＭＡＤＲＳの項目１０（自殺念慮）で点数が０点の場合、患者の無作為化コードが破られた場合、参加の同意が取り消された場合、６日以上連続して試験薬を服用しなかった場合、または追跡調査の対象から外れた場合、患者は試験から取り消された。重篤な有害事象（ＳＡＥ）が発生した場合、患者は試験から取り消される可能性がありました。有害事象（ＡＥ）が研究中止に寄与した場合は、常にそれが研究中止の主な理由とみなされた。
【０３４９】
効能評価
患者はベースラインから６週目までＭＡＤＲＳを用いて評価された。評価者トレーニングは、評価者間の信頼性を高めるために実施され、経験豊富な治験責任医師が監督した。患者を研究に組み入れる前に評価者トレーニングに積極的に参加した治験責任医師のみが患者の評価を行うことができた。患者の評価は、可能な限り、各訪問先で同じ研究者によって評価された。
【０３５０】
治療への配分
薬物は同一の外観のカプセルとして投与された。ベースラインの訪問時に選択基準を満たした患者が、コンピュータで作成された無作為化リストに従って二重盲検治療に割り付けられた。無作為化リストの詳細は研究者には知られておらず、密封された不透明な封筒に入っていた。各研究部位では、順次登録された患者には、４つのブロックで利用可能な最も低い無作為化番号が割り当てられた。研究者、研究担当者、参加者はすべて、研究期間中、治療の割り当てを盲検化した。
【０３５１】
分析セット
安全性解析はすべて、試験薬を少なくとも１回以上服用した無作為化された全患者を対象とした全患者群（ＡＰＴＳ）に基づいて行われました。すべての有効性解析は、修正されたｉｎｔｅｎｔ−ｔｏ−ｔｒｅａｔセット（ＩＴＴ）、すなわち完全解析セット（ＦＡＳ）に基づいて行われ、ＡＰＴＳに含まれるすべての患者さんは、ベースライン後の有効なＭＡＤＲＳ総合スコア評価を少なくとも１回受けた患者さんで構成されている。
【０３５２】
一次有効性解析
４つの仮説が一次有効性解析に含まれており、前の仮説が棄却される限り、有意水準５％の階層的検定法を用いて多重性を完全に調整した。検定の順序は、６週目に２０ｍｇ投与とプラセボの間で差がない、６週目に４０ｍｇ投与とプラセボの間で差がない、１週目に２０ｍｇ投与とプラセボの間で差がない、１週目に４０ｍｇ投与とプラセボの間で差がない、というものであった。統計モデルは、治療法と部位を固定因子とし、ベースラインのＭＡＤＲＳスコアを共変量としたＭＡＤＲＳ総合スコア（ＦＡＳ、ＬＯＣＦ）のベースラインからの変化の共分散分析（ＡＮＣＯＶＡ）とした。主な有効性解析は、ＡＮＣＯＶＡとＭＭＲＭ（リピート測定の混合モデルの両方を用いて、観察例（ＯＣ）データに対して繰り返し実施した。
【０３５３】
許容範囲の評価
治験責任医師が観察した、または患者から自発的に報告されたすべての副作用（ＡＥ）（併発疾患や新たな疾患の変化を含む）を記録した。ＡＥは、規制活動のための医療辞書（規制活動のための医療辞書バージョン１０．０）に準拠した最低レベルの用語を用いてコード化した。ポスホック解析として、ＦＤＡに記載されている自殺に関連する可能性のあるＡＥについて、安全性データベースを優先タームおよび逐語タームレベルで検索した［Ｌａｕｇｈｒｅｎ  Ｔ（２００６）自殺性に関するメモランダム（http://www.fda.gov/ohrms/dockets/ac/06/briefing/2006-4272b1-01-fda.pdf）］。
【０３５４】
結果
患者のベースライン特性
ＡＰＴＳは３２人の患者で構成された（プラセボ、８人；ベンラファキシン、８人；２０ｍｇ  ＮＡ−８３１、８人；４０ｍｇ  ＮＡ−８３１、８人）。ベースライン時の患者の人口統計学的または臨床的特徴において、治療群間に臨床的に関連性のある、または統計学的に有意な差は認められなかった（表３）。患者の平均年齢（±Ｓ．Ｄ．）は３９．７±８．５歳、５９．４％が女性であった。ベースラインの平均ＭＡＤＲＳ総合スコアは３４．０であり，重度のうつ病患者群であることを示し，平均ＣＧＩ−Ｓスコア５．１と一致していた。患者は登録の約１０年前に最初のＭＤＥと診断された。各治療群の７４％から８０％の患者は以前にＭＤＥを発症しており、現在のエピソードは登録の約５ヶ月前に開始されていた。
【０３５５】
【表３】
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【０３５６】
研究からの離脱
様々な理由で試験を中止したのは、プラセボ群１名、４０ｍｇ  ＮＡ−８３１群１名、Ｖｅｎｌａｆａｘｉｎｅ群２名の計４名のみでした。８７％以上の患者が試験を終了した。
【０３５７】
有効性
事前に定義された主要評価項目である有効性評価において、ＮＡ−８３１の両用量は、多剤間対照解析において、６週目のＭＡＤＲＳ総スコア（ＦＡＳ、ＬＯＣＦ）のベースラインからの平均変化率（ＦＡＳ、ＬＯＣＦ）において、プラセボに対して統計学的に有意（ｐ＜０．０００１）に優れており、プラセボとの平均治療差は７．７点（２０ｍｇ）および８．５点（４０ｍｇ）であった（表４）。また、ベンラファキシンは６週目にも統計学的に有意（ｐ＜０．０００１）にプラセボより優れており、プラセボとの平均治療差は７．２ポイント（ＬＯＣＦ）であった。ＭＭＲＭを用いた解析で得られた６週目の推定治療差および名目ｐ値は、ＡＮＣＯＶＡ解析で得られた値と同様であった５．７±１．３（２０ｍｇ  ＮＡ−８３１）、７．８±１．３（４０ｍｇ  ＮＡ−８３１）、５．６±１．３（ベンラファキシン）、いずれもｐ＜０．０００１］（表２）。
【０３５８】
【表４】
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【０３５９】
認容性と安全性
６週間の治療期間中、プラセボ群では約６０％、ベンラファキシン群では７５％の患者に１回以上のＡＥが認められた。２０ｍｇのＮＡ−８３１群では１２．５％、４０ｍｇのＮＡ−８３群では１２．５％の患者のみがＡＥを発症していた。
【０３６０】
ＡＥが原因で退会した患者は合計１０例（３３．３％）で、プラセボ群１例（１０％）、ＮＡ−８３１  ２０ｍｇ群１例（１２．５％）、ベンラファキシン群２例（２５％）で退会はなかった。
【０３６１】
活性型ＮＡ−８３１投与群で報告された最も一般的なＡＥは、軽度の頭痛と口渇であった。ベンラファキシン投与群では、大多数の患者さんが吐き気、激しい頭痛、力の喪失、視界のぼやけ、胸の痛み、心拍の速さや不規則さ、自殺念慮などを報告している。
【０３６２】
結論
本試験の目的は、ＭＤＤ患者を対象としたＮＡ−８３１の有効性、安全性、忍容性を評価することであった。試験方法と患者集団の妥当性を検証する目的で、有効参考薬であるベンラファキシンＸＲが含まれており、主要な有効性解析において有効性が認められました。ＮＡ−８３１の両用量は、一次有効性解析においてプラセボと比較して有意な改善を示した。
【０３６３】
ＭＡＤＲＳでの活性型治療とプラセボの差は、欧州当局が承認した抗うつ薬の平均１６％単位と比較して、３２．５％単位の奏効率の臨床的意義のある差となる［Melander H Salmonson T Abadie E van Zwieten-Boot B (2008). A regulatory apologia - A review of placebo-controlled studies in regulatory submissions of new-generation antidepressants. European Neuropsychopharmacology 18, 623-627. https://doi.Org/l0.l016/j.euroneuro.2008.06.003］。
【０３６４】
結論として、本試験におけるＮＡ−８３１の６週間の投与は、ＭＤＤ患者の抑うつ症状や不安症状の軽減に忍容性が高く、効果的であった。
【０３６５】
本発明は、その特定の実施形態を参照して説明される。本発明の他の特徴および他の実施形態は、当技術分野の当業者であれば、不必要な実験および合理的な成功の可能性なしに製造することができる。それらおよび他の実施形態のすべては、本発明の一部であると考えられる。
【０３６６】
本発明の利点
環状ペプチド、特にＩＧＦ−Ｉを超える環状ペプチドを用いた本発明によって提供されるいくつかの利点には、以下が含まれる。
【０３６７】
有効成分は、インビトロでも組換え技術などの他の手段でも合成が容易である。
【０３６８】
ペプチドは低分子であるため、体内や区画間（血液脳関門、粘膜など）で容易に拡散することができ、投与方法の選択や傷害部位への到達性が向上する。
【０３６９】
ｃＰＧ、ｃ（ＰＧ）３、ｃＧＭｅＰは非常に安定した分子であり、免疫系に課題を与える可能性が低いため、長期間投与してもよいし、予防的に投与してもよい。
【０３７０】
本発明は、ｍＧｌｕＲｓ、特に２／３を調節することにより、脳障害や変性疾患を予防し、長期的な脳の回復効果をもたらす新規な治療法を提供するものである。
【０３７１】
ＩＧＦ−１誘導を調節する役割を持つｃＰＧは、成長の副作用の可能性が少ない、さらなる神経保護を提供する。
【０３７２】
結論
環状プロリルグリシンは、グルタミン酸誘発性の神経毒性を減少または防止し、神経保護作用を有し、神経細胞の変性または細胞死を抑制することができることを示している。
【０３７３】
本発明は、その特定の実施形態を参照して説明される。本発明の他の特徴および他の実施形態は、当技術分野の当業者であれば、不必要な実験および合理的な成功の可能性なしに製造することができる。それらおよび他の実施形態のすべては、本発明の一部であると考えられる。
【０３７４】
本発明の様々な実施形態が上記に記載されているが、それらは例示の方法で提示されているだけであり、限定ではないことが理解されるべきである。当業者であれば、添付の特許請求の範囲に定義されているように、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、形態および詳細の様々な変更がそこで行われ得ることが理解されるであろう。したがって、本発明の幅および範囲は、上述した例示的な実施形態のいずれによっても制限されるべきではなく、以下の請求項およびその等価物に従って定義されるべきである。
【０３７５】
本出願で参照される特許文献および科学論文を含むすべての出版物は、参考文献を含め、すべての目的のために、個々の出版物が個別に参考文献として組み込まれている場合と同様の範囲で、その全体が参照により組み込まれている。すべての見出しは読者の便宜のためのものであり、特に指定がない限り、見出しに続く文章の意味を制限するために使用すべきではない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【国際調査報告】
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