(57)【要約】  物理的に分離された、凍結乾燥抗原及びアジュバント成分（凍結乾燥粒子の形態であることができる）を含むワクチン製剤、並びにそのような製剤の使用及び製造方法が記載される。再構成された製剤も記載される。【選択図】図1
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
塩基性条件下でのアルミニウム化合物とリン酸化合物との間での反応の生成物を含む、乾燥アルミニウムアジュバント。
【請求項２】
アジュバントが凍結乾燥ビーズである、請求項１に記載の乾燥アルミニウムアジュバント。
【請求項３】
生成物が、リン酸アルミニウム、非晶質ヒドロキシリン酸アルミニウム、非晶質ヒドロキシリン酸硫酸アルミニウム又は水酸化アルミニウムである、請求項１〜２のいずれか１項に記載の乾燥アルミニウムアジュバント。
【請求項４】
（１）請求項１〜３のいずれか１項の乾燥アルミニウムアジュバント；
（２）乾燥抗原又は（３）水に溶かした抗原、及び、任意に、
（４）水
を含む製造物であって、
ここで、成分（１）、成分（２）又は（３）、及び、存在する場合、成分（４）が、それぞれ互いに物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されている製造物。
【請求項５】
成分（１）、（２）又は（３）、及び、存在する場合（４）の１以上が、塩、緩衝剤、保存剤、界面活性剤及び／又は糖をさらに含む、請求項４に記載の製造物。
【請求項６】
塩がＮａＣｌであり、緩衝剤がヒスチジンであり、界面活性剤がポリソルベートであり、保存剤がｍ−クレゾール若しくはフェノールであり、そして、糖がトレハロース若しくはショ糖である、請求項５に記載の製造物。
【請求項７】
成分（１）及び／又は（２）が、凍結乾燥ビーズとして提供される、請求項４に記載の製造物。
【請求項８】
成分（１）及び（２）がそれぞれ凍結乾燥ビーズとして提供され、そして、製造物が、成分（１）及び成分（２）凍結乾燥ビーズの混合物を含む第１の容器、及び、任意に、存在する場合は成分（４）を含む第２の容器を含む、請求項７に記載の製造物。
【請求項９】
請求項４〜８のいずれか１項の成分を組み合わせることを含む、ワクチンの製造方法。
【請求項１０】
（ａ）下記成分：
（１）乾燥アルミニウム塩；
（２）乾燥リン酸塩；及び任意に、
（３）水若しくは（４）水に溶かした抗原
［ここで、成分（１）、成分（２）、及び、存在する場合は、成分（３）又は（４）は、物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されている。］；又は、（ｂ）下記成分：
（１）乾燥アルミニウム塩；
（２）乾燥リン酸塩；
（３）任意に水；及び
（５）乾燥抗原
［ここで、成分（１）、成分（２）、及び、存在する場合は成分（３）、及び、成分（５）は、物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されている。］
を含む製造物。
【請求項１１】
（ａ）において、成分（３）又は（４）が存在しない、請求項１０に記載の製造物。
【請求項１２】
（ａ）において、成分（１）、成分（２）、及び、存在する場合成分（３）又は（４）の１以上が、塩、保存剤、緩衝剤、界面活性剤及び／又は糖をさらに含み；又は、（ｂ）において、成分（１）、成分（２）、成分（５）、及び存在する場合は成分（３）の１以上が、塩、保存剤、緩衝剤、界面活性剤及び／又は糖をさらに含む、請求項１０に記載の製造物。
【請求項１３】
塩がＮａＣｌであり、緩衝剤がヒスチジンであり、界面活性剤がポリソルベートであり、そして、糖がショ糖、トレハロース若しくはそれらの組み合わせである、請求項１２に記載の製造物。
【請求項１４】
成分（１）、（２）及び（５）が、凍結乾燥ビーズとして提供される、請求項１０に記載の製造物。
【請求項１５】
請求項１０に記載の製造物であって、ここで、
（ａ）において、成分（１）及び（２）がそれぞれ凍結乾燥ビーズとして提供され、そして、製造物は、成分（１）及び（２）凍結乾燥ビーズの混合物を含む第１の容器、及び、任意に、存在する場合は、成分（３）又は（４）を含む第２の容器、を含み；
（ｂ）において、成分（１）、（２）及び（５）がそれぞれ凍結乾燥ビーズとして提供され、製造物は、（ｉ）成分（１）、（２）及び（５）凍結乾燥ビーズの混合物を含む第１の容器、及び、任意に、存在する場合は成分（３）を含む第２の容器；又は、（ｉｉ）成分（１）及び（２）凍結乾燥ビーズの混合物を含む第１の容器、任意に、存在する場合は成分（３）を含む第２の容器、及び、成分（５）凍結乾燥ビーズを含む第３の容器、を含む、
請求項１０に記載の製造物。
【請求項１６】
抗原が、
タンパク質；
毒素若しくはトキソイド；
多糖；
１以上の肺炎球菌多糖−タンパク質複合体；
肺炎球菌多糖−タンパク質複合体の３３〜２１価混合物、肺炎球菌多糖−タンパク質複合体の２１〜１５価混合物、肺炎球菌多糖−タンパク質複合体の１５〜７価混合物、又は１価肺炎球菌多糖−タンパク質複合体；
肺炎球菌多糖−タンパク質複合体の３３価混合物；
肺炎球菌多糖−タンパク質複合体の２１価混合物；
肺炎球菌多糖−タンパク質複合体の１５価混合物；
１価血清型３肺炎球菌多糖−タンパク質複合体；又は
１価血清型１９Ａ肺炎球菌多糖−タンパク質複合体
である、請求項４〜８及び１０〜１５のいずれか１項に記載の製造物。
【請求項１７】
肺炎球菌多糖に結合したタンパク質が、ＣＲＭ１９７、ジフテリア毒素断片Ｂ（ＤＴＦＢ）、ＤＴＦＢＣ８、ジフテリアトキソイド（ＤＴ）、破傷風トキソイド（ＴＴ）、ＴＴの断片Ｃ、百日咳トキソイド、コレラトキソイド、髄膜炎菌外膜タンパク質複合体（ＯＭＰＣ）、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＬＴ、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＳＴ、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）からの外毒素Ａ、分類不可能インフルエンザ菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ）からのタンパク質Ｄ、及びこれらの組み合わせから選択されるキャリアタンパク質である、請求項１６に記載の製造物。
【請求項１８】
請求項１６〜１７のいずれか１項の製造物中の成分を組み合わせることを含む、ワクチンの製造方法。
【請求項１９】
下記成分：
（１）乾燥された抗原（ｉ）若しくは溶液での抗原（ｉｉ）；
（２）乾燥アルミニウム含有及び／又はカルシウム含有試薬；及び
（３）乾燥リン酸試薬及び、任意に、塩基
を含む製造物であって；
ここで、成分（１）、（２）及び（３）のそれぞれが、他成分から物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されており；
ここで、前記アルミニウム含有及び／又はカルシウム含有試薬及び前記リン酸試薬及び任意に塩基は、水で再構成される時に反応してアジュバントを形成する、製造物。
【請求項２０】
成分（１）（ｉ）、成分（２）及び成分（３）が、それぞれ凍結乾燥ビーズとして提供される、請求項１９に記載の製造物。
【請求項２１】
成分（１）（ｉ）、成分（２）及び成分（３）がそれぞれ凍結乾燥ビーズとして提供され、そして、製造物が、成分（１）（ｉ）、成分（２）及び成分（３）凍結乾燥ビーズの混合物を含む第１の容器、及び、任意に、水を含む第２の容器を含む、請求項１９に記載の製造物。
【請求項２２】
請求項１９に記載の製造物の成分（１）〜（３）を組み合わせることを含む、ワクチンの製造方法。
【請求項２３】
（１）約５以下のｐＨを有し、実質的に透明である、アルミニウム塩及びリン酸塩を含む溶液；及び
（２）（１）の溶液に加えた時に反応及び沈殿を引き起こすのに十分な塩基及び抗原を含む溶液；又は（１）の溶液に加えた時に反応及び沈殿を引き起こすのに十分な塩基及び抗原を含む乾燥組成物
を含み；
ここで、（１）及び（２）のそれぞれは、物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されている製造物。
【請求項２４】
（１）の溶液が、アルミニウム塩、リン酸塩、水を含み、そして、４未満のｐＨであり、（２）の溶液若しくは乾燥組成物が、抗原、緩衝剤（ｐＨ６．０以上）、糖及び塩を含む、請求項２３に記載の製造物。
【請求項２５】
請求項２３〜２４のいずれか１項に記載の製造物の成分（１）及び（２）を組み合わせることを含む、ワクチンの製造方法。
【請求項２６】
（１）アルミニウム塩を含む溶液；及び
（２）リン酸塩、抗原、及び塩基を含む溶液［ここで、リン酸塩及び塩基は、（１）の溶液と組み合わせた時に、アルミニウム及びリン酸塩を反応させて沈殿させる十分な量で存在する。］
を含む製造物であって、
ここで、溶液（１）及び（２）のそれぞれは、物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されている製造物。
【請求項２７】
請求項２６に記載の製造物の成分（１）及び（２）を組み合わせることを含む、ワクチンの製造方法。
【請求項２８】
塩基性条件下でアルミニウム化合物とリン酸化合物との間の反応の生成物であるアジュバントの成分を保存する方法であって、反応が全く起こらない条件下でアルミニウム及びリン酸化合物を一緒に保存することを含む方法。
【請求項２９】
反応が全く起こらない条件が、
（ａ）アルミニウム化合物及びリン酸化合物、及び、任意に塩基を物理的に分離した状態に維持することによる；又は
（ｂ）アルミニウム化合物及びリン酸化合物をｐＨ約５未満で一緒に保存することによる、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
（ａ）が、乾燥状態のアルミニウム化合物及び乾燥状態のリン酸化合物を単一の容器若しくは機器に保存することを含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
対象者に免疫付与する方法であって、請求項４、１０、１５、１９、２３及び２６のいずれか１項に記載の製造物の成分を組み合わせてワクチン製剤を形成し、そして、ワクチン製剤を対象者に投与することを含む方法。
【請求項３２】
対象者における感染性疾患又はがんの治療又は予防方法であって、請求項３１に記載の方法によって対象者を免疫化することを含む方法。
【請求項３３】
乾燥される成分が、凍結乾燥、マイクロ波真空乾燥又は噴霧乾燥される、請求項４、１０、１５、１９、２３及び２６のいずれか１項に記載の製造物。
【請求項３４】
乾燥された成分がリオスフィア（ｌｙｏｓｐｈｅｒｅ）である、請求項３３に記載の製造物。
【請求項３５】
対象者における感染性疾患又はがんを治療又は予防するためのワクチン製剤を形成するための、請求項４、１０、１５、１９、２３及び２６のいずれか１項に記載の製造物の成分の使用。
【請求項３６】
対象者における感染性疾患又はがんの治療又は予防のためのワクチン製剤の製造用の、請求項４、１０、１５、１９、２３及び２６のいずれか１項に記載の製造物の成分。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、対象者のワクチン接種に有用なワクチン製剤を提供する。
【背景技術】
【０００２】
典型的には、液体製剤中のアルミニウムアジュバント（単独又はワクチン抗原とともに）は、冷凍によってダメージを受ける。近年、アルミニウムアジュバントに対する冷凍ダメージを防止若しくは低減することができる製剤がいくつか報告されているが、アジュバント及びワクチンの冷凍ダメージを防止する方法及び組成物は、非常に価値があると考えられる。さらに、ワクチン熱安定性を高め、そして、ワクチンの製造、パッケージ化、貯蔵及び使用における柔軟性を高める方法及び組成物が非常に価値が高いと考えられる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】米国特許第５６５６５９７号
【特許文献２】国際公開ＷＯ２０１３０６６７６９号
【特許文献３】国際公開ＷＯ２０１４０９３２０６号
【特許文献４】国際公開ＷＯ２０１５０５７５４０号
【特許文献５】国際公開ＷＯ２０１５０５７５４１号
【特許文献６】国際公開ＷＯ２０１５０５７５４８号
【特許文献７】米国特許第４，３８９，７９４号
【特許文献８】米国特許第４，６６４，９２４号
【特許文献９】米国特許第４，８０９，５９６号
【特許文献１０】米国特許第４，８８２，８５１号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
さらに、例えば、長期間にわたるワクチン成分の組み合わせによって有効性や免疫原性が低下するが、短期間の組み合わせはワクチンにはダメージを与えず、有利である可能性がある場合がある。本発明を適用することで、これら全ての分野において進歩があるものと考えられる。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、最終の容器又は送達機器におけるアルミニウムアジュバント及び／又はアルミニウムアジュバントワクチンの調製方法を提供する。本発明の１実施形態において、アルミニウムアジュバントは、リン酸アルミニウム、非晶質ヒドロキシリン酸アルミニウム及び／又は水酸化アルミニウム（例えば、Ｍｅｒｃｋリン酸アルミニウムアジュバント（ＭＡＰＡ）又はＭｅｒｃｋアルミニウムアジュバント（ＭＡＡ））を含む。
【０００６】
１実施形態において、本発明は、塩基性条件下でのアルミニウム化合物とリン酸化合物の間の反応の生成物を含む乾燥アルミニウムアジュバントを提供する。特定の実施形態において、アジュバントは、凍結乾燥ビーズ（ｌｙｏｂｅａｄ）であり、さらなる実施形態において、その生成物はリン酸アルミニウム、非晶質ヒドロキシリン酸アルミニウム、非晶質ヒドロキシリン酸硫酸アルミニウム又は水酸化アルミニウムである。
【０００７】
本発明は、下記の成分：
（１）請求項１〜３のいずれか１項の乾燥アルミニウムアジュバント；
（２）乾燥抗原若しくは（３）水に溶かした抗原、及び、任意に、
（４）水
を含む製造物であって、
成分（１）、成分（２）若しくは（３）、及び、存在する場合、成分（４）が、それぞれ互いに物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されている製造物を提供する。
【０００８】
特定の実施形態において、成分（１）、（２）又は（３）、及び、存在する場合（４）のさらに一つが、塩、緩衝剤、保存剤、界面活性剤及び／又は糖をさらに含む。
【０００９】
特定の実施形態において、塩はＮａＣｌであり、緩衝剤はヒスチジンであり、界面活性剤はポリソルベートであり、保存剤はｍ−クレゾール若しくはフェノールであり、糖はトレハロース若しくはショ糖である。
【００１０】
特定の実施形態において、成分（１）及び／又は（２）は、凍結乾燥ビーズとして提供される。
【００１１】
特定の実施形態において、成分（１）及び（２）はそれぞれ凍結乾燥ビーズとして提供され、そして、製造物は、成分（１）及び成分（２）凍結乾燥ビーズの混合物を含む第１の容器、及び、任意に、存在する場合に成分（４）を含む第２の容器を含む。
【００１２】
本発明はさらに、上記成分を組み合わせることを含む、ワクチンの製造方法を提供する。
【００１３】
本発明はさらに、（ａ）下記成分：
（１）乾燥アルミニウム塩；
（２）乾燥リン酸塩；及び任意に、
（３）水若しくは（４）水に溶かした抗原
［ここで、成分（１）、成分（２）、及び存在する場合に成分（３）若しくは（４）は、物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されている。］；又は、（ｂ）下記成分：
（１）乾燥アルミニウム塩；
（２）乾燥リン酸塩；
（３）任意に水；及び
（５）乾燥抗原
［ここで、成分（１）、成分（２）、及び、存在する場合成分（３）、及び成分（５）は、物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されている。］
を含む製造物を提供する。
【００１４】
（ａ）の特定の実施形態において、成分（３）又は（４）は存在しない。
【００１５】
（ａ）の特定の実施形態において、成分（１）、成分（２）、及び存在する場合成分（３）若しくは（４）の１以上が、塩、保存剤、緩衝剤、界面活性剤及び／又は糖をさらに含み；又は（ｂ）の特定の実施形態において、成分（１）、成分（２）、成分（５）、及び存在する場合に成分（３）の１以上が、塩、保存剤、緩衝剤、界面活性剤及び／又は糖をさらに含む。
【００１６】
特定の実施形態において、塩はＮａＣｌであり、緩衝剤はヒスチジンであり、界面活性剤はポリソルベートであり、糖はショ糖、トレハロース又はそれらの組み合わせである。
【００１７】
特定の実施形態において、成分（１）、（２）及び（５）は、凍結乾燥ビーズとして提供される。
【００１８】
（ａ）の特定の実施形態において、成分（１）及び（２）はそれぞれ凍結乾燥ビーズとして提供され、製造物は、成分（１）及び（２）凍結乾燥ビーズの混合物を含む第１の容器、及び、任意に、存在する場合は成分（３）若しくは（４）を含む第２の容器を含み；（ｂ）の特定の実施形態において、成分（１）、（２）、及び（５）はそれぞれ凍結乾燥ビーズとして提供され、製造物は、（ｉ）成分（１）、（２）及び（５）凍結乾燥ビーズの混合物を含む第１の容器、及び、任意に、存在する場合は成分（３）を含む第２の容器；又は、（ｉｉ）成分（１）及び（２）凍結乾燥ビーズの混合物を含む第１の容器を含み、任意に、存在する場合は成分（３）を含む第２の容器、及び、成分（５）凍結乾燥ビーズを含む第３の容器、を含む。
【００１９】
上記製造物のさらなる実施形態において、抗原は、
タンパク質；
毒素若しくはトキソイド；
多糖；
１以上の肺炎球菌多糖−タンパク質複合体；
肺炎球菌多糖−タンパク質複合体の３３〜２１価混合物、肺炎球菌多糖−タンパク質複合体の２１〜１５価混合物、肺炎球菌多糖−タンパク質複合体の１５〜７価混合物、又は１価肺炎球菌多糖−タンパク質複合体；
肺炎球菌多糖−タンパク質複合体の３３価混合物；
肺炎球菌多糖−タンパク質複合体の２１価混合物；
肺炎球菌多糖−タンパク質複合体の１５価混合物；
１価血清型３肺炎球菌多糖−タンパク質複合体；又は
１価血清型１９Ａ肺炎球菌多糖−タンパク質複合体
である。
【００２０】
さらなる実施形態において、肺炎球菌多糖に結合したタンパク質は、ＣＲＭ１９７、ジフテリア毒素断片Ｂ（ＤＴＦＢ）、ＤＴＦＢＣ８、ジフテリアトキソイド（ＤＴ）、破傷風トキソイド（ＴＴ）、ＴＴの断片Ｃ、百日咳トキソイド、コレラトキソイド、髄膜炎菌外膜タンパク質複合体（ＯＭＰＣ）、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＬＴ、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＳＴ、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）からの外毒素Ａ、分類不可能インフルエンザ菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ）からのタンパク質Ｄ、及びこれらの組み合わせから選択されるキャリアタンパク質である。
【００２１】
本発明はさらに、既に開示されている製造物中で成分を組み合わせることを含むワクチンの製造方法を提供する。
【００２２】
本発明はさらに、下記成分：
（１）乾燥された抗原（ｉ）若しくは溶液での抗原（ｉｉ）；
（２）乾燥アルミニウム含有及び／又はカルシウム含有試薬；及び
（３）乾燥リン酸試薬、及び、任意に、塩基
を含む製造物であって；
ここで、成分（１）、（２）及び（３）のそれぞれは、他成分から物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されており；そして
ここで、前記アルミニウム含有及び／又はカルシウム含有試薬及び前記リン酸試薬及び任意に塩基を水で再構成される時に反応して、アジュバントを形成する、製造物を提供する。
【００２３】
製造物のさらなる実施形態において、成分（１）（ｉ）、成分（２）及び成分（３）はそれぞれ、凍結乾燥ビーズとして提供される。
【００２４】
製造物のさらなる実施形態において、成分（１）（ｉ）、成分（２）及び成分（３）はそれぞれ凍結乾燥ビーズとして提供され、そして、製造物は、成分（１）（ｉ）、成分（２）、及び成分（３）凍結乾燥ビーズの混合物を含む第１の容器、及び任意に、水を含む第２の容器を含む。
【００２５】
本発明はさらに、上記製造物の成分（１）〜（３）を組み合わせることを含む、ワクチンの製造方法を提供する。
【００２６】
本発明はさらに、
（１）約５以下のｐＨを有し、実質的に透明である、アルミニウム塩及びリン酸塩を含む溶液；及び
（２）（１）の溶液に加えた時に反応及び沈殿を引き起こすのに十分な塩基、及び抗原を含む溶液；又は（１）の溶液に加えた時に反応及び沈殿を引き起こすのに十分な塩基、及び抗原を含む乾燥組成物
を含み；
ここで、（１）及び（２）のそれぞれは、物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されている製造物を提供する。
【００２７】
製造物のさらなる実施形態において、（１）の溶液は、アルミニウム塩、リン酸塩、水、及び４未満のｐＨを含み、（２）の溶液若しくは乾燥組成物は、抗原、緩衝剤（ｐＨ６．０以上）、糖及び塩を含む。
【００２８】
本発明はさらに、上記製造物の成分（１）及び（２）を組み合わせることを含む、ワクチンの製造方法を提供する。
【００２９】
本発明はさらに、
（１）アルミニウム塩を含む溶液；及び
（２）リン酸塩、抗原及び塩基を含む溶液［ここで、リン酸塩及び塩基は、（１）の溶液と組み合わせた時に、アルミニウム及びリン酸塩を反応させて沈殿させる十分な量で存在する。］
を含む製造物であって、
ここで、溶液（１）及び（２）のそれぞれは、物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されている製造物を提供する。
【００３０】
本発明はさらに、上記製造物の成分（１）及び（２）を組み合わせることを含む、ワクチンの製造方法を提供する。
【００３１】
本発明はさらに、塩基性条件下でアルミニウム化合物とリン酸化合物との間の反応の生成物であるアジュバントの成分を保存する方法であって、反応が全く起こらない条件下でアルミニウム化合物及びリン酸化合物を一緒に保存することを含む方法を提供する。
【００３２】
製造物のさらなる実施形態において、反応が全く起こらない条件は、
（ａ）アルミニウム化合物及びリン酸化合物、及び任意に塩基を物理的に分離した状態に維持することにより；又は
（ｂ）アルミニウム化合物及びリン酸化合物をｐＨ約５未満で一緒に保存することによる。
【００３３】
製造物のさらなる実施形態において、（ａ）は、乾燥状態の前記アルミニウム化合物及び乾燥状態の前記リン酸化合物を単一の容器若しくは機器に保存することを含む。
【００３４】
本発明はさらに、対象者に免疫付与する方法であって、請求項４、１０、１５、１９、２３及び２６のいずれか１項の製造物の成分を組み合わせてワクチン製剤を形成し、そしてワクチン製剤を対象者に投与することを含む方法を提供する。特定の実施形態において、方法は、対象者における感染性疾患又はがんの治療又は予防に用いられる。
【００３５】
本発明は、乾燥される成分が、凍結乾燥、マイクロ波真空乾燥又は噴霧乾燥される、本明細書で開示の製造物を提供する。さらなる実施形態において、前記乾燥成分はリオスフィア（ｌｙｏｓｐｈｅｒｅ）である。
【００３６】
本発明はさらに、対象者における感染性疾患又はがんを治療又は予防するためのワクチン製剤を形成するための、本明細書で開示の製造物の成分の使用を提供する。
【００３７】
本発明はさらに、対象者における感染性疾患又はがんの治療又は予防のためのワクチン製剤の製造のための本明細書で開示の製造物の成分を提供する。
【００３８】
本発明はさらに、次の成分：（１）乾燥アルミニウムアジュバント；及び（２）抗原、及び、任意に（３）水を含む組成物を含む製造物（例えば、機器又は容器）であって、ここで、（ｉ）抗原が水に溶解しており、又は（ｉｉ）組成物がさらに、凍結乾燥した抗原を含み；ここで、（１）及び（２）及び（３）が、物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されている製造物を提供する。成分（１）及び／又は（２）及び／又は（３）は、任意に、塩（例えば、ＮａＣｌ）、緩衝剤、保存剤（例えば、ｍ−クレゾール又はフェノール）、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０又はポリソルベート８０）、及び／又は糖（例えば、ショ糖又はトレハロース）をさらに含む。
【００３９】
本発明はまた、下記の成分：（１）凍結乾燥したアルミニウム塩；（２）凍結乾燥したリン酸化合物；及び（３）任意に水及び／又は抗原（例えば、タンパク質；毒素又はトキソイド；多糖；多糖−タンパク質複合体；タンパク質又は複数のタンパク質に結合した３３価肺炎球菌多糖複合体；タンパク質（例えば、ジフテリア毒素）に結合した２１価肺炎球菌多糖；タンパク質に結合した１５価肺炎球菌多糖；タンパク質に結合した１価３型肺炎球菌多糖；又はタンパク質に結合した１価１９Ａ型肺炎球菌多糖）を含む組成物を含む製造物であって、ここで、（１）、（２）及び（３）は、物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されている製造物も提供する。例えば、本発明の１実施形態において、水は抗原を含まず、及び／又は、製造物はさらに、（１）、（２）及び（３）から物理的に分離された（４）凍結乾燥抗原を含む。（１）〜（４）のいずれか１以上が、塩、保存剤、緩衝剤、界面活性剤及び／又は糖を含んでいても良い。
【００４０】
本発明はまた、（１）凍結乾燥されているか溶液である抗原；（２）凍結乾燥したアルミニウム−及び／又はカルシウム含有試薬；及び（３）凍結乾燥したリン酸試薬及び、任意に塩基を含む組成物を含む製造物であって、ここで、各成分（１）、（２）及び（３）がそれぞれ、他の成分から物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されており；そしてここで、前記アルミニウム−及び／又はカルシウム含有試薬及び前記リン酸試薬及び任意に塩基が、水による再構成時に反応してアジュバントを形成する製造物を提供する。
【００４１】
（１）実質的に透明なｐＨ約５以下を有するアルミニウム塩及びリン酸塩を含む溶液；及び（２）（ｉ）（１）に加えた時に前記反応及び沈殿を生じさせるのに十分な塩基及び抗原を含む溶液；又は（ｉｉ）再構成したとき、（１）に加えた時に前記反応及び沈殿を生じさせるのに十分な塩基及び抗原を含む凍結乾燥組成物を含む組成物を含む製造物であって；ここで、各成分（１）及び（２）は、物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されている、製造物も本発明によって提供される。
【００４２】
本発明はまた、（１）アルミニウム塩を含む溶液；及び（２）リン酸塩、抗原及び塩基を含む溶液［ここで、リン酸塩及び塩基は、（１）と組み合わせた時に、アルミニウム及びリン酸塩の反応及び沈殿を生じさせるのに十分な量で存在する］を含む組成物を含む製造物であって；ここで、各成分（１）及び（２）が、物理的に分離され、そして一緒にパッケージ化されている、製造物を提供する。
【００４３】
さらに、本発明は、塩基性条件下でのアルミニウム化合物とリン酸化合物との間の反応の生成物であるアジュバントの成分を保存する方法であって、反応が全く起こらない条件下で［例えば、ここで、反応が全く起こらない条件は、（ｉ）アルミニウム化合物及びリン酸化合物、及び任意に塩基を、物理的に分離した状態に維持すること；又は（ｉｉ）アルミニウム化合物及びリン酸化合物を、ｐＨ約４未満で一緒に保存することである。］、アルミニウム化合物及びリン酸化合物を一緒に保存することを含む方法も提供する。本発明の１実施形態において、（ｉ）は、単一の容器又は機器中で、凍結乾燥状態のアルミニウム化合物及び凍結乾燥状態のリン酸化合物を保存することを含む。
【００４４】
本発明は、本明細書に記載の製造品のいずれかの成分を組み合わせる段階を含むワクチン製剤の製造方法も提供する。そのような方法はさらに、得られたワクチン製剤を処置を必要とする対象者に投与する段階を含むことができる。そのような方法の生成物によって対象者に免疫付与することで、対象者における感染性疾患若しくはがんを治療若しくは予防する方法も、その方法の生成物であり、その方法の生成物自体も本発明の一部である。
【００４５】
本発明はさらに、対象者における感染性疾患又はがんを治療若しくは予防するためのワクチン製剤を作るための、本明細書に開示の製造物の成分の使用を提供する。本発明はさらに、対象者における感染性疾患若しくはがんの治療若しくは予防のためのワクチン製剤の製造のための本明細書で開示の製造物の成分を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００４６】
【図１】クラスＡ実施形態：（１）プレフォーム乾燥アルミニウムアジュバント及び（２）液体を含むバイアル。
【図２】静的光散乱粒径分布（製剤＃１、冷凍なし；製剤＃１、冷凍及び解凍；製剤＃２、アルミニウムアジュバント凍結乾燥ビーズ、再構成後；及び製剤＃３、アルミニウムアジュバント凍結乾燥ビーズ、再構成後）。
【図３】静的光散乱粒径分布（製剤＃２、沈降、冷凍、解凍；製剤＃２ビーズとして冷凍、凍結乾燥、再構成）。
【図４】クラスＡ実施形態：（１）プレフォーム乾燥アルミニウムアジュバント；（２）製剤した抗原；及び（３）液体を含むバイアル。
【図５】静的光散乱粒径分布（製剤＃１、冷凍なし；製剤＃３、再構成アルミニウムアジュバント凍結乾燥ビーズ；製剤＃６Ａ、共再構成アルミニウムアジュバント及び抗原からのワクチン；製剤＃６Ｂ、共再構成アルミニウムアジュバント及び抗原からのワクチン；製剤＃１、冷凍及び解凍）。
【図６】クラスＢ実施形態：（１）アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の一部を含む乾燥製剤；（２）反応物の他のものを含む乾燥製剤及び（３）液体を含むバイアル。
【図７】静的光散乱粒径分布（製剤＃１、冷凍なし；製剤＃７＋８Ａの凍結乾燥ビーズ、一緒に再構成；製剤＃７＋８Ｂの凍結乾燥ビーズ、一緒に再構成；製剤＃１、冷凍及び解凍）。
【図８】クラスＢ実施形態：（１）アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の一部（例えば、アルミニウム含有化合物）を含む乾燥製剤；（２）他の反応物を含む乾燥製剤；（３）液体；及び（４）製剤した抗原を含むバイアル。
【図９】静的光散乱粒径分布（プレフォームアルミニウムアジュバントの凍結乾燥ビーズ及び抗原の凍結乾燥ビーズの共再構成からの多価ワクチン；アルミニウム試薬凍結乾燥ビーズ及びアルミニウムアジュバントを形成するリン酸試薬凍結乾燥ビーズ（次に、それを用いて、抗原凍結乾燥ビーズを再構成する。）の共再構成からの多価ワクチン、抗原を含まない冷凍・解凍アルミニウムアジュバント（製剤＃１））。
【図１０】クラスＢ実施形態、さらにクラスＣ実施形態。製剤中に（１）アルミニウム−及びリン酸含有化合物の溶液と、液体（２）又は凍結乾燥（３）抗原を含むバイアル。
【図１１】クラスＢ実施形態、さらにクラスＣ実施形態：（１）アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の一部を含む乾燥製剤及び（２）他の反応物を含む液体を含むバイアル。
【図１２】クラスＢ実施形態。（１）アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の一部を含む乾燥製剤、（２）他の反応物を含む乾燥製剤；（３）抗原を含む乾燥製剤；及び（４）液体を含むバイアル。
【図１３】静的光散乱粒径分布（製剤＃７及び８Ａの凍結乾燥ビーズの再構成で形成されたアルミニウムアジュバント；製剤＃４、７及び８Ａの凍結乾燥ビーズの再構成で形成されたワクチン）。
【図１４】クラスＣ実施形態：（１）アルミニウム含有化合物及びリン酸含有化合物を含むが、アルミニウムアジュバント沈殿を完了させるのに十分な塩基を含まない溶液、及び（２）アルミニウムアジュバント沈殿反応を完了させるのに必要な塩基の残りを提供する緩衝剤又は塩又は塩基を含む溶液を含むバイアル。
【図１５】抗原効力のＥＬＩＳＡアッセイ。
【図１６】蛍光分光分析。
【図１７】クラスＣ実施形態：（１）アルミニウム含有化合物を含む溶液、及び（２）リン酸含有化合物又はアルミニウムアジュバント沈殿反応を完了させるのに十分なリン酸化合物及び／又は塩基を提供する緩衝剤若しくは塩若しくは塩基を含む溶液を含むバイアル。
【図１８】クラスＣ実施形態。（１）アルミニウム含有化合物の溶液、及び（２）４種類の異なる抗原（タンパク質、細菌、毒素又はトキソイド）及びリン酸化合物ｐＨ８の溶液を含むバイアル。
【００４７】
＊図面の簡単な説明で引用の製剤番号は、特定の図に相当する実施例に記載のものである。
【発明を実施するための形態】
【００４８】
本発明のワクチン製剤（例えば、製造物で提供されるもの）は、一般に使用されるワクチン製剤及びそのような製剤の製造方法に勝る大きな利点を提供する。本発明は、懸濁液を凍結乾燥する必要性なしで、一部の実施形態における凍結乾燥ワクチン製剤の形成を容易にする。懸濁液の凍結乾燥又は抗原とアルミニウム（Ａｌ）−若しくはカルシウム（Ｃａ）含有アジュバントの間のプレフォーム複合体の凍結乾燥は技術的に困難であり、典型的には、そのような段階を回避するのが望ましい。Ａｌ−又はＣａ含有アジュバントは水系懸濁液を形成することから、そのようなアジュバントについて凍結乾燥を行う凍結乾燥ワクチン製剤の形成は困難であろう。
【００４９】
従って、本発明は、懸濁液を凍結乾燥する必要性を回避して凍結乾燥製剤を形成する方法を提供し、即ち、ここで、アジュバントのＡｌ−又はＣａ含有成分を溶液から凍結乾燥し、そして、他のアジュバント成分又は反応物−リン酸化合物含有試薬又は塩基（これも、溶液から凍結乾燥される。）から物理的に分離する。従って、一部の実施形態において、アジュバント成分（又は反応物）の溶液のみを凍結乾燥する。他の実施形態において、プレフォームアルミニウムアジュバントの冷凍誘発凝集は、十分な再懸濁状態の懸濁液の小液滴を極めて急速に凍結乾燥粒子として冷凍することで回避される。上記実施形態のいずれかのさらなる拡大実施形態において、抗原を、アジュバント又はアジュバント反応物から物理的に分離し、抗原−アジュバント複合体の凍結乾燥を回避することができる。
【００５０】
本発明のワクチン製剤は、冷凍及び解凍の場合に物理的に安定な状態に維持可能であることからも有利である。アルミニウムアジュバントの冷凍及び解凍は、一般に起こることであり、アジュバントの望ましくない凝集に至る可能性がある。アジュバント成分（又は反応物）を凍結乾燥する場合、懸濁液の冷凍は起こらず、冷凍によるダメージは回避される。アルミニウムアジュバント懸濁液の凍結乾燥粒子を調製した後、それらは、その後の冷凍に関連するダメージから保護される。
【００５１】
物理的に分離されている凍結乾燥製剤成分に関して本明細書で使用される「物理的に分離された」は、当該成分を実質的に組み合わせ又は混和状態に維持することを指す。例えば、２若しくは３の異なる種類の凍結乾燥粒子を、単一容器中に互いに接触した状態で入れることができ、それら成分はほとんど組み合わせたり混和していないことから、物理的に分離されている。本発明の別の実施形態では、物理的に分離された成分は、別個の容器若しくは機器又はそのような容器若しくは機器内の別個の区画に入った状態であることができる。物理的に分離された成分は、単一の製造物中に一緒にパッケージ化することができ、例えば、前記別個の容器若しくは機器を一緒にパッケージ化することができる。
【００５２】
凍結乾燥粒子は、例えば、ビーズ若しくは球体の形その他の形状を取る、凍結乾燥材料のバラバラの粒子である。凍結乾燥粒子は、リオスフィア（ｌｙｏｓｐｈｅｒｅ）、スフィアオン（ｓｐｈｅｒｅｏｎ）又は凍結乾燥ビーズとも称することができる。一部の実施形態において、リオスフィア（ｌｙｏｓｐｈｅｒｅ）直径は、約２〜約１２ｍｍ、好ましくは２〜８ｍｍ、例えば２．５〜６ｍｍ又は２．５〜５ｍｍである。一部の実施形態において、リオスフィア（ｌｙｏｓｐｈｅｒｅ）の体積は、約２０〜５５０μＬ、好ましくは２０〜１００μＬ、例えば２０〜５０μＬである。リオスフィア（ｌｙｏｓｐｈｅｒｅ）がほとんど球形ではない実施形態では、リオスフィア（ｌｙｏｓｐｈｅｒｅ）の大きさは、長い方の寸法の短い方の寸法に対する比率であるアスペクト比に関して記述することができる。リオスフィア（ｌｙｏｓｐｈｅｒｅ）のアスペクト比は、０．５〜２．５、好ましくは０．７５〜２、例えば１〜１．５であることができる。
【００５３】
「対象者」は、哺乳動物、例えば、ヒト、非ヒト霊長類、マウス、イヌ、ネコ、ウサギ、ウシ又はウマである。
【００５４】
Ｉ．アルミニウム化合物及びアジュバント
本発明のアジュバントには、アルミニウム塩又はアルミニウム塩の反応生成物及び別の化合物、例えばリン酸化合物及び／又は塩基である。例えば、Ｈａｒｌｏｗ，Ｅ及びＤ．Ｌａｎｅ（１９８８；Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）及びＮｉｃｋｌａｓ，Ｗ．（１９９２；Ａｌｕｍｉｎｕｍ  ｓａｌｔｓ．Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １４３：４８９−４９３）を参照する。アルミニウム塩であるアジュバントは、例えば、アルミナ水和物、アルミナ白、アルミナ三水和物（ＡＴＨ）、アルミニウム水和物、アルミニウム三水和物、Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ（登録商標）、Ａｄｊｕｐｈｏｓ（登録商標）、Ｓｕｐｅｒｆｏｓ、Ａｍｐｈｏｇｅｌ（登録商標）、水酸化アルミニウム（ＩＩＩ）、ヒドロキシリン酸硫酸アルミニウム（ＡＡＨＳ及び／又はＭＡＡとも称される）、Ｍｅｒｃｋリン酸アルミニウムアジュバント（ＭＡＰＡ、ＡＰＡとも称される）、非晶質アルミナ、三水和アルミナ、又は三水酸化アルミニウムであることができる。ＭＡＰＡは、ヒドロキシリン酸アルミニウムの水系懸濁液である。ＭＡＰＡは、塩化アルミニウム及びリン酸ナトリウムを１：１体積比で混合してヒドロキシリン酸アルミニウムを沈殿させることで製造される。混合プロセス後、材料を高剪断ミキサーでサイズ低下して、単分散粒径分布とする。次に、生成物を、生理食塩水に対して透析濾過し、水蒸気滅菌する。
【００５５】
乾燥（例えば、凍結乾燥）アルミニウムアジュバントは、懸濁液として調製され、次に乾燥させたアルミニウムアジュバントである。本発明の１実施形態において、乾燥アルミニウムアジュバントは、ＭＡＰＡ（Ｍｅｒｃｋリン酸アルミニウムアジュバント）又はＭＡＡ（Ｍｅｒｃｋアルミニウムアジュバント。ＭＡＰＡは当業界で公知である；ＵＳ特許第９５７３８１１号を参照する）である。ＭＡＡは、「非晶質ヒドロキシリン酸硫酸アルミニウム」とも称される。例えば、Ｃａｕｌｆｉｅｌｄら、Ｈｕｍａｎ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ  ３（４）：１３９−１４５を参照する。プレフォーム乾燥アルミニウムアジュバントで使用可能と考えられる別の種類のアルミニウムアジュバントは、水酸化アルミニウムである。
【００５６】
ＭＡＰＡアジュバントの製造方法は、
（ａ）一定ｐＨを維持する緩衝剤の存在下に、規定のＰ／Ａｌモル比でアルミニウム塩（Ａｌ）の溶液をリン酸塩（Ｐ）の溶液と共混合して、ヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントを沈殿させる段階［ここで、前記共混合では、アルミニウム塩の溶液及びリン酸塩の溶液を同時及び連続的に組み合わせることを含み、前記規定のＰ／Ａｌ比は２．０〜３．５の範囲である。］；そして（ｂ）緩衝剤交換溶液との緩衝剤交換によって、過剰のリン酸塩、緩衝剤又は他の残留塩の少なくとも８０％を元の反応物から除去する段階を含む。
【００５７】
本発明の１実施形態において、アルミニウムアジュバントは、例えば下記の特性の１以上を有するヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントである。
【００５８】
４．２〜６．９、４．７〜６．４又は４．７〜５．４のゼロ電荷のゼータ電位点（ＰＺＣ）；
４０ミクロン未満、特定の実施形態では２〜１０ミクロン又は３〜６ミクロンの凝集体粒径体積直径中央値（例えば静的光散乱によって測定されるｄ（ｖ，０．５））；
３．０〜８．０の範囲内のｐＨ、又は特定の実施形態においては４．５〜７．２の範囲内のｐＨ、又は４．５〜５．５の範囲内のｐＨ；又は
０．６〜１．２の最終沈殿固体で測定されるＰ／Ａｌモル比；ある種の実施形態において、その比は０．８〜１．２又は０．９〜１．１である。
【００５９】
ＩＩ．製造品
本発明は、本明細書で論じられているワクチン若しくはそれの成分を保持及び／又は投与するための製造品を提供する。製造物の成分は、典型的には製造品内で物理的に分離された状態に維持されている製剤、例えばワクチン製剤の成分を含む。前記成分は物理的に分離された状態で維持されるが、それらは典型的には、共通の製造品中に一緒にパッケージ化されている。そのような製造品は、前記成分を含むキットであることができる。例えば、前記成分は、１以上の容器及び／又は１以上の機器中にあることができる。追加のパッケージ化材料を用いて、製造品の成分、例えば、箱又は包装材料及び／又は製品パンフレットを含むようにすることができる。
【００６０】
製造物は、例えばバイアル、例えば、例えばキャップ付きのプラスチック又はガラスバイアルのような１以上の容器中に成分を含むことができる。製造物は、それ自体、製剤の成分を含む容器若しくは機器であることができる。本発明の１実施形態において、成分は、容器又は機器内の別個の区画に含む。例えば、本発明の１実施形態において、機器は、成分が異なる区画に含む多区画注入機器である。
【００６１】
製造物は、１以上の機器、例えば注射機器中に成分を含むことができる。注射機器は、ワクチンのような物質を、非経口経路、例えば筋肉、皮下若しくは静脈経路を介して患者身体に導入する機器であることができる。例えば、注射機器は、注射器（例えば、ワクチンを予め充填したもの、例えば自己注射器）であることができ、それは、例えば、注射される流体（例えば、抗体又はそれの断片若しくは医薬組成物を含む）を保持するためのシリンダー若しくは円筒部、流体の注入のために皮膚及び／又は血管を刺し通す針；及び、シリンダーから、そして針穴を通って流体を押し出すためのプランジャーを含む。本発明の１実施形態において、ワクチンを含む注射機器は、静脈（ＩＶ）注射機器である。そのような機器は、カニューレ又はトロカール／針を通って患者身体に導入される流体を保持するためのバッグ若しくは貯留部につながっていても良いチューブにつながっていても良いカニューレ又はトロカール／針中のワクチンを含む。ワクチンは、本発明の１実施形態において、トロカール及びカニューレを対象者の静脈に挿入してから機器内に導入することができ、その挿入されたカニューレからトロカールを外す。そのＩＶ機器は、例えば、末梢静脈（例えば、手若しくは腕の）に；上大静脈又は下大静脈、又は右心房内に（例えば、中心ＩＶ）；又は鎖骨下静脈、内頸静脈若しくは大腿静脈に挿入することができ、そして例えば、上大静脈若しくは右心房（例えば、中心静脈ライン）に達するまで心臓に向かって進めることができる。本発明の１実施形態において、注射機器は自己注射器；ジェット式注射器又は外部輸液ポンプである。ジェット式注射器は、表皮を貫通してワクチンを患者身体に導入する高圧の狭い液体ジェットを用いる。外部輸液ポンプは、ワクチンを制御された量で患者身体に送達する医療機器である。外部輸液ポンプは、電気的又は機械的に動かすことができる。異なるポンプは異なる形態で動作するものであり、例えば、シリンジポンプは注射器の貯留部に流体を保持し、可動式のピストンが流体送達を制御し、エラストマーポンプは伸縮性のバルーン貯留部に流体を保持し、バルーンの弾性壁からの圧力が流体送達を駆動する。蠕動ポンプでは、一組のローラーが、可撓性管系の長さ方向に挟んで押し下げ、流体を進める。多チャンネルポンプでは、流体を、複数の貯留部から複数の速度で送達することができる。
【００６２】
ワクチンは、無針皮下注射機器；例えば米国特許第６，６２０，１３５号；同６，０９６，００２号；同５，３９９，１６３号；同５，３８３，８５１号；同５，３１２，３３５号；同５，０６４，４１３号；同４，９４１，８８０号；同４，７９０，８２４号又は同４，５９６，５５６号に開示の機器を用いて投与することもできる。
【００６３】
本明細書に開示のワクチンは、注入によって投与することもできる。ワクチンを投与するための公知のインプラント及びモジュールの例には、制御された速度で投薬するための埋込式微量注入ポンプを開示している米国特許第４，４８７，６０３号；正確な注入速度で医薬を送達するための医薬注入ポンプを開示している米国特許第４，４４７，２３３号；連続薬剤送達のための流量可変の埋込式注入装置を開示している米国特許第４，４４７，２２４号；多チャンバ区画を有する浸透式薬剤送達システムを開示している米国特許第４，４３９，１９６号で開示されているものがある。多くの他のそのようなインプラント、送達システム及びモジュールは当業者には公知であり、本発明の医薬組成物を含むものが本発明の範囲に含まれる。
【００６４】
対象者にワクチンを投与する方法であって、製剤の成分を組み合わせ、そして、対象者に、得られたワクチンを、例えば本明細書に記載の注射機器を用いて注射することを含む方法が本発明の一部を形成する。前記成分を組み合わせ、及び／又は対象者に注射する段階は、臨床医又は対象者自身が行うことができる。
【００６５】
ＩＩＩ．製剤
本発明は、例えば容器又は機器中に一緒にパッケージ化されている成分を含む組成物を含む製造品を提供する。成分は、一緒にパッケージ化されているが、物理的に分離された状態に維持されていることができる。
【００６６】
上記のように、本発明は、本発明のワクチン製剤の成分を組み合わせることを含むワクチンの製造方法を含む。乾燥成分及び液体を組み合わせてワクチンを形成する場合、それらは再構成される。乾燥成分の再構成は、当業界で共有されている技術である。本発明の１実施形態において、再構成は、組み合わせた成分を、例えば室温（例えば、約２０〜２５℃）で又は冷蔵（例えば、約４℃）下に、一定期間保存若しくはインキュベートする段階を含むことができる。インキュベーション又は保存は、例えば１分間、３０分間、１時間、８時間又は２４時間であることができる。
【００６７】
本発明の１実施形態において、組換え後には、そのようなインキュベーションも保存も行わず、ワクチンを対象者に投与するか、あるいは、直後に別の形で用いることができる。
【００６８】
本発明の１実施形態において、再構成は、合わせた成分を回転若しくは攪拌（例えば、優しく）する段階を含む。
【００６９】
本発明の１実施形態において、再構成は、例えば肉眼観察によって、全ての固体の液体成分による実質的に完全な溶解若しくは懸濁を確認する段階を含む。
【００７０】
上記の再構成のために製剤の成分を組み合わせ、そして、得られたワクチンを例えば本明細書で述べた注射機器によって対象者に注射することを含む、対象者にワクチンを投与する方法が本発明の一部を形成する。成分を再構成し、及び／又は再構成した製剤を注射する段階は、臨床医又は対象者自身が行うことができる。
【００７１】
本発明の１実施形態において、下記のように、成分は、アルミニウム化合物の反応を引き起こして沈殿し得るアルミニウムアジュバントを形成するのに不十分な塩基がある条件下で維持される（例えば、約４以下などの酸性ｐＨ条件下）。アジュバントを形成するのに十分な塩基及び反応は、成分の組み合わせで生じる。溶液が実質的に透明なままである場合、そのような沈殿がないことは明らかである。「実質的に透明な」溶液は、約０、例えば、紫外線波長と可視光波長の間で（例えば、２６０ｎＭ、２８０ｎｍ又は６００ｎＭ）約０の光学密度を有し得；及び／又は、肉眼観察で実質的に粒子状物が含まれ得ない。
【００７２】
概して、本発明は、
（Ａ）プレフォームアルミニウムアジュバントから作られる凍結乾燥ビーズを含む；
（Ｂ）再構成で反応してアルミニウムアジュバントを形成する乾燥型の化合物（例えば、凍結乾燥ビーズ）を含む；及び
（Ｃ）他の必要な反応物が提供される場合に反応してアルミニウムアジュバントを形成する化合物の液体製剤を含む、
三つの分類のアジュバントワクチンを含む。
【００７３】
いくつかの例が、複数のクラスの構成員であることができる。各実施形態クラス（Ａ、Ｂ及びＣ）について、本明細書でさらに説明する。
【００７４】
本発明の（Ａ）実施形態の１例は、予め作られたアルミニウムアジュバントから製造されるアルミニウムアジュバント凍結乾燥ビーズに関する。例えば、図１を参照する。本発明は、そのようなアルミニウムアジュバント及び任意に液体を含む製造物を含む。そのような製造物は、アルミニウムアジュバント（例えば、乾燥アルミニウムアジュバント、例えば、１以上の凍結乾燥ビーズ）を含み、アジュバントの再構成に使用できる任意の液体から物理的に分離された状態に維持されており、一緒にパッケージ化されている。その液体は、製造物の一部であってもそうでなくても良い。そのような液体は、水；及び任意に塩、緩衝剤、界面活性剤及び／又は賦形剤；任意に抗原）（例えば、多糖−タンパク質結合抗原）；任意に別のアジュバント；及び／又は任意に保存剤を含むことができる。
【００７５】
本発明の１実施形態において、液体は、水及び抗原、及び、任意に１以上の他の成分を含む。
【００７６】
本発明は、製造物の成分を組み合わせることを含むワクチンの形成方法並びにそのような方法の生成物を含む。成分を組み合わせ、そして、そのワクチンを対象者に注射すること（例えば、本明細書で記述の注射機器を用いて）を含む、対象者（例えば、ヒト）にワクチンを投与する方法も、本発明の一部を形成する。
【００７７】
例えば、そのような実施形態は、例えば下記に記載の前凍結乾燥組成（乾燥、例えば凍結乾燥後の濃度）を有する乾燥（例えば、１以上の凍結乾燥ビーズ）ＭＡＰＡを含む。
【００７８】
アルミニウムアジュバント；及び、塩若しくはアルミニウムアジュバント、糖、塩及び塩基（例えば、アミノ酸、例えばヒスチジン又はヒスチジン塩基）；又は１２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント；１５０ｍＭ塩化ナトリウム、又は６２５〜１２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬのＭＡＰＡ；１６〜２３％（重量／体積）トレハロース；３５〜７０ｍＭ  ＮａＣｌ；０．５〜０．８ｍＭヒスチジン塩基；又は、例えば１２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント；１６％（重量／体積）トレハロース；７０ｍＭ塩化ナトリウム；及び、０．５ｍＭヒスチジン塩基；又は６２５ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント；２３％（重量／体積）トレハロース；３５ｍＭ塩化ナトリウム；及び、０．８ｍＭヒスチジン塩基を含む。
【００７９】
本発明のクラスＡ実施形態の別の例は、冷凍又は解凍誘発の凝集をほとんど生じることのない、乾燥アルミニウムアジュバント、例えば、凍結乾燥ビーズ（予め作られたアルミニウムアジュバントから調製）、及び、乾燥抗原、例えば１以上の凍結乾燥ビーズの共再構成によるワクチン調製に関する。例えば、図４を参照する。
【００８０】
本発明のそのような実施形態において、次の３成分が、物理的に分離された状態である：プレフォーム乾燥アルミニウムアジュバント（例：凍結乾燥ビーズ）；及び、製剤した抗原及び液体［水；任意に塩、緩衝剤、界面活性剤及び／又は賦形剤（例えば、リン酸緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤、デキストロース又は浸透圧調節剤としてのＮａＣｌ）；任意に抗原；任意に別のアジュバント（例えば、例えば本明細書に記載の１以上の免疫刺激分子）；及び、任意に１以上の保存剤を含んでいても良い］。
【００８１】
本明細書で定義される場合、「アジュバント」は、本発明の免疫原性組成物の免疫原性を増強するのに役立つ物質である。免疫アジュバントは、単独で投与された場合、例えば、無いか又は弱い抗体価又は細胞媒介免疫応答を誘発する免疫原性が弱い抗原に対する免疫応答を増強し、抗原に対する抗体価を高め、及び／又は個人の免疫反応を達成するのに効果的な抗原の用量を下げ得る。従って、アジュバントは、しばしば免疫応答をブーストするために与えられ、当業者によく知られている。組成物の有効性を増強するための適切なアジュバントは、限定されるものではないが：
（１）水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウム、硫酸アルミニウムなどのアルミニウム塩（ミョウバン）、
（２）例えば、（ａ）Ｍｏｄｅｌ  １１０Ｙマイクロフルイダイザー（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ、Ｎｅｗｔｏｎ、ＭＡ）のようなマイクロフルイダイザーを使用したサブミクロン粒子に製剤化された５％スクアレン、０．５％Ｔｗｅｅｎ８０、及び０．５％Ｓｐａｎ８５（様々な量のＭＴＰ−ＰＥを含有していてもよい）を含むＭＦ５９（国際特許出願公開第９０／１４８３７号）、（ｂ）サブミクロンの乳濁液にマイクロ流動化されるか、又はより大きな粒子サイズの乳濁液を生じさせるために渦攪拌された、１０％スクアレン、０．４％Ｔｗｅｅｎ８０、５％プルロニックブロックポリマーＬ１２１、及びｔｈｒ−ＭＤＰを含有するＳＡＦ、（ｃ）２％スクアレン、０．２％Ｔｗｅｅｎ８０、並びに米国特許第４，９１２，０９４号に記載された３−Ｏ−脱アシル化モノリン脂質Ａ（ＭＰＬ（商標））、トレハロースジミコレート（ＴＤＭ）、及び細胞壁骨格（ＣＷＳ）、好ましくはＭＰＬ＋ＣＷＳ（Ｄｅｔｏｘ（商標））からなる群からの１以上の細菌細胞壁成分を含有するＲｉｂｉ（商標）アジュバント系（ＲＡＳ）、（Ｃｏｒｉｘａ，Ｈａｍｉｌｔｏｎ，ＭＴ）、及び（ｄ）Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ  ＩＳＡのような水中油型乳濁液製剤（ムラミルペプチド（以下に定義される）又は細菌細胞壁成分などの他の特定の免疫刺激剤の有無にかかわらず）、
（３）Ｑｕｉｌ  Ａ又はＳＴＩＭＵＬＯＮ（商標）ＱＳ−２１（Ａｎｔｉｇｅｎｉｃｓ、Ｆｒａｍｉｎｇｈａｍ、ＭＡ）のようなサポニンアジュバント（例えば、米国特許第５，０５７，５４０号を参照されたい）が使用され得るか、又はＩＳＣＯＭ（コレステロール、サポニン、リン脂質、及び両親媒性タンパク質の組合せにより形成される免疫刺激複合体）及びＩｓｃｏｍａｔｒｉｘ（商標）（ＩＳＣＯＭと本質的に同じ構造を有するが、タンパク質は有さない）のようなそこから生じる粒子、
（４）細菌性リポポリサッカライド、Ｃｏｒｉｘａから入手可能であり、米国特許第６，１１３，９１８号に記載されているアミノアルキルグルコサミンリン酸化合物（ＡＧＰ）のような合成脂質Ａ類縁体、又はその誘導体又は類縁体；そのようなＡＧＰの１つは、２−［（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］エチル２−デオキシ−４−Ｏ−ホスホノ−３−Ｏ−［（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル］−２−［（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］−ｂ−Ｄ−グルコピラノシドであり、これは、５２９としても知られており（以前はＲＣ５２９として知られていた）、水性形態又は安定な乳濁液として製剤化される、
（５）（１以上の）ＣｐＧモチーフを含有するオリゴヌクレオチドのような合成ポリヌクレオチド（米国特許第６，２０７，６４６号）、
（６）インターロイキン（例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８など）などのサイトカイン、インターフェロン（例えば、ガンマインターフェロン）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、共刺激分子Ｂ７−１及びＢ７−２など、及び／又は
（７）補体成分Ｃ３ｄの三量体のような補体
を含む。
【００８２】
別の実施形態では、アジュバントは、上記のアジュバントの２、３又はそれ以上の混合物、例えば、ＳＢＡＳ２（３−脱アシル化モノホスホリルリピドＡ及びＱＳ２１も含有する水中油型エマルション）である。
【００８３】
ムラミルペプチドは、Ｎ−アセチル−ムラミル−Ｌ−トレオニル−Ｄ−イソグルタミン（ｔｈｒ−ＭＤＰ）、Ｎ−アセチル−ノルムラミル−Ｌ−アラニン−２−（１′−２′ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）−エチルアミン（ＭＴＰ−ＰＥ）などを含むが、これらに限定されるものではない。
【００８４】
ある実施形態では、上記のように、アジュバントは、アルミニウム塩である。アルミニウム塩アジュバントは、ミョウバン沈殿ワクチン又はミョウバン吸着ワクチンとすることができる。１実施形態において、そのワクチンは、アルミニウムアジュバント上に予め吸収させる。アルミニウム塩アジュバントは、当技術分野においてよく知られており、例えば、Ｈａｒｌｏｗ，Ｅ．及びＤ．Ｌａｎｅ（１９８８；Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）及びＮｉｃｋｌａｓ，Ｗ．（１９９２；Ａｌｕｍｉｎｕｍ  ｓａｌｔｓ．Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １４３：４８９−４９３）に記載されている。アルミニウム塩は、水和アルミナ、アルミナ水和物、アルミナ三水和物（ＡＴＨ）、アルミニウム水和物、アルミニウム三水和物、Ａｄｊｕｐｈｏｓ（登録商標）、Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ（登録商標）、Ｓｕｐｅｒｆｏｓ、Ａｍｐｈｏｇｅｌ（登録商標）、水酸化アルミニウム（ＩＩＩ）、ヒドロキシリン酸アルミニウム硫酸塩（場合により、ＡＡＨＳ又はＭＡＡと称される）、Ｍｅｒｃｋリン酸アルミニウムアジュバント（ＭＡＰＡ）、非晶質アルミナ、三水和アルミナ又はトリヒドロキシアルミニウムを含むが、これらに限定されるものではない。
【００８５】
上記で記載のアジュバント、抗原及び液体を含む製造物は、本発明の一部を形成する。本発明は、アジュバント、抗原及び液体並びにそのような方法の生成物を組み合わせることを含む、ワクチンの製造方法を含む。前記成分を組み合わせ、そして、そのワクチンを対象者に注射すること（例えば、本明細書に記載の注射機器によって）を含む、対象者（例えば、ヒト）にワクチンを投与する方法も、本発明の一部を形成する。
【００８６】
本発明の１実施形態において、そのような本発明のアルミニウムアジュバントは、乾燥（例えば、１以上の凍結乾燥ビーズ）ＭＡＰＡ、例えば前凍結乾燥：（ｉ）１２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント；１６％（重量／体積）トレハロース；７０ｍＭ塩化ナトリウム；及び、０．５ｍＭヒスチジン塩基；又は、（ｉｉ）６２５ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント；２３％（重量／体積）トレハロース；３５ｍＭ塩化ナトリウム；及び、０．８ｍＭヒスチジン塩基を含む。
【００８７】
本発明の１実施形態において、そのような抗原は、ＰＣＶ抗原、例えば、２１価、３３価、１５価、１価の３型及び／又は１価の１９Ａ型肺炎球菌多糖タンパク質複合体抗原を含む製剤を含み、例えば、ここで、抗原成分は、乾燥前に、製剤：３２０ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰｓ（肺炎球菌多糖）ＣＲＭ−ＰｎＰｓ複合体抗原；１００ｍＭヒスチジン；２０％（重量／体積）トレハロース；５０ｍＭ塩化ナトリウム；及び０．１％ポリソルベート２０をｐＨ６〜７．５で含む。
【００８８】
本発明の１実施形態において、ワクチンは、一つの抗原（「一価」）又は複数抗原（「多価」、又は「組み合わせ」）を含み、それは、乾燥（例えば、１以上の凍結乾燥ビーズ）アルミニウムアジュバントを乾燥（例えば、１以上の凍結乾燥ビーズ）製剤化抗原若しくは複数抗原と共パッケージ化することで調製することができる。本発明の１実施形態において、アルミニウムアジュバント成分は、乾燥前に、例えば、凍結乾燥（ｉ）１２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント；１５０ｍＭ塩化ナトリウム；及び２３％（重量／体積）トレハロース、ショ糖及び／又はそれらの組み合わせ；又は、（ｉｉ）６２５ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント；２３％（重量／体積）トレハロース；３５ｍＭ塩化ナトリウム；及び、０．８ｍＭヒスチジン塩基を含む。
【００８９】
本発明の１実施形態において、抗原は、乾燥前に、例えば凍結乾燥、２０％（重量／体積）トレハロース；５０ｍＭヒスチジン（塩基）；５０ｍＭヒスチジン塩酸塩；３２０ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰｓ（肺炎球菌多糖体）複合体抗原、１９Ａ型；５０ｍＭ塩化ナトリウム；及び０．１％ポリソルベート２０をｐＨ６で含む。
【００９０】
本発明の１実施形態において、抗原は、乾燥前に、例えば凍結乾燥、２０％（重量／体積）トレハロース；１００ｍＭヒスチジン（塩基）；３２０ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰｓ（肺炎球菌多糖体）複合体抗原、１５の複合体の異なる種類の多糖との混合物；５０ｍＭ塩化ナトリウム；及び０．１％ポリソルベート２０をｐＨ７．５で含む多抗原組成物である。
【００９１】
本発明の１実施形態において、製剤は、乾燥アルミニウムアジュバント（例えば、１以上の凍結乾燥ビーズ）及び乾燥抗原（例えば、１以上の凍結乾燥ビーズ）の液体による再構成後に、１３．２％（重量／体積）トレハロース；２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント；６４ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰｓ複合体抗原、全ての１９Ａ型（Ａ）又は１５のＰｎＰｓ型（Ｂ）；２４ｍＭ塩化ナトリウム；２０．３ｍＭヒスチジン（塩基）；及び０．０２％ポリソルベート２０を含む混合物を含む。
【００９２】
本発明のクラスＢ実施形態の１例は、物理的に分離されている（そして、単一容器中に一緒にパッケージ化されていても良い）溶液及びリン酸塩／塩基を含むアルミニウムの分かれた凍結乾燥ビーズ、及び、やはり凍結乾燥ビーズとは物理的に分離されている、例えば第２の別の容器に入っている液体に関する。アルミニウム及びリン酸塩／塩基が、液体と組み合わせた時に、バイアル中又は再構成チャンバ中で反応して、アルミニウムアジュバントを形成することができる。
【００９３】
本発明のそのような実施形態において、反応物の一部（例えば、下記の三つの反応物）は反応物の他のものから物理的に分離された状態を維持されており、反応物の一部又は全てが乾燥されている。例えば、アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の一部（例えば、アルミニウム含有化合物）を含む乾燥製剤（例えば、１以上の凍結乾燥ビーズ）；及びアルミニウムアジュバントを形成するのに必要な他の反応物（例えば、リン酸含有化合物及び／又は塩基）を含む乾燥製剤（例えば、１以上の凍結乾燥ビーズ）、及び、例えば、水；任意に塩、緩衝剤、界面活性剤及び／又は賦形剤；任意に抗原；任意に別のアジュバント；及び／又は任意に保存剤を含む液体である。
【００９４】
上記で記載の物理的に分離されたアルミニウム含有成分、リン酸塩／塩基含有成分及び液体を含む製造物は、本発明の一部を形成する。アルミニウム、リン酸塩／塩基及び液体を組み合わせることを含むワクチンの製造方法は、そのような方法の生成物とともに、本発明の一部を形成する。前記成分を組み合わせ、そして、ワクチンを対象者に注射すること（例えば、本明細書に記載の注射機器で）を含む、対象者（例えば、ヒト）へのワクチンの投与方法も、本発明の一部を形成する。
【００９５】
本発明の１実施形態において、アルミニウム含有成分は、乾燥前に、例えば凍結乾燥前に、９２．６６ｍＭ塩化アルミニウム及び２５％（重量／体積）トレハロースを含む。
【００９６】
本発明の１実施形態において、リン酸塩／塩基含有成分は、乾燥前に、例えば凍結乾燥前に、９２．６６ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム及び２５％（重量／体積）トレハロース；又は９２．４７ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム及び２４．９５％（重量／体積）トレハロース；又は９２．２９ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム及び２４．９％（重量／体積）トレハロースを含む。
【００９７】
再構成すると、沈殿反応に十分な塩基が提供されている場合、アルミニウム化合物がリン酸化合物若しくは塩基と反応して、アルミニウムアジュバントが形成されることで、アルミニウムアジュバントを形成することができる。
【００９８】
本発明の１実施形態において、リン酸塩／塩基による再構成で形成される前記アルミニウムアジュバントは、（ｉ）１２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント；１５０ｍＭ塩化ナトリウム；及び１６％（重量／体積）トレハロース、ショ糖及び／又はこれらの組み合わせ；又は（ｉｉ）１２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント；１６％（重量／体積）トレハロース；７０ｍＭ塩化ナトリウム；及び０．５ｍＭヒスチジン塩基を含む。
【００９９】
本発明の１実施形態において、アルミニウム含有成分は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、９２．６６ｍＭ塩化アルミニウム；及び２５％（重量／体積）トレハロースを含む。
【０１００】
本発明の１実施形態において、リン酸塩／塩基含有成分は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、９２．６６ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム；及び２５％（重量／体積）トレハロースを含む。
【０１０１】
本発明の１実施形態において、リン酸塩／塩基含有成分は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、９２．４７ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム；２４．９５％（重量／体積）トレハロース；及び１０ｍＭ水酸化ナトリウムを含む。
【０１０２】
本発明の１実施形態において、リン酸塩／塩基含有成分は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、９２．２９ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム；２４．９％（重量／体積）トレハロース；及び２０ｍＭ水酸化ナトリウムを含む。
【０１０３】
本発明のクラスＢ実施形態の別の例は、液体と組み合わせた場合にバイアル中（又は再構成チャンバ中）で反応してアルミニウムアジュバントを形成する、アルミニウム含有溶液及びリン酸塩／塩基含有溶液（例えば、一緒にパッケージ化されている）の物理的に分離された凍結乾燥ビーズの再構成によるワクチン（アルミニウムアジュバント及び抗原）の製造に関する。そのような新たに形成されたアルミニウムアジュバント懸濁液を用いて抗原凍結乾燥ビーズを再構成して、完全なワクチンを形成することができる。
【０１０４】
本発明のそのような実施形態において、次の４成分が物理的に分離された状態に維持されている：アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の一部（例えば、アルミニウム含有化合物）を含む乾燥製剤（例えば、１以上の凍結乾燥ビーズ）；及び、一緒にパッケージ化することができるアルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の他のもの（例えば、リン酸含有化合物及び／又は塩基）を含む乾燥製剤（例えば、１以上の凍結乾燥ビーズ）；及び、（ｉ）水；任意に塩、緩衝剤、界面活性剤及び／又は賦形剤；任意に抗原；任意に別のアジュバント；及び／又は任意に保存剤を含む液体；及び、（ｉｉ）凍結乾燥（例えば、凍結乾燥ビーズ）抗原。
【０１０５】
本発明の製造物のさらなる実施形態において、反応物を含む乾燥成分は、共通の容器中にあり；乾燥抗原は、第２の容器中にあり；そして、液体は、第３の容器中にある。例えば、図８を参照する。
【０１０６】
本発明は、物理的に分離されているが一緒にパッケージ化することができる二つの乾燥成分、並びに液体（他の成分から物理的に分離されている）及び抗原（他の成分から物理的に分離されている）を含む製造物を含む。前記成分を組み合わせることを含むワクチンの製造方法並びにそのような方法の生成物も本発明の一部を形成する。前記成分を組み合わせ、そして、対象者にワクチンを注射すること（例えば、本明細書で記載の注射機器を用いて）を含む、対象者（例えば、ヒト）にワクチンを投与する方法も、本発明の一部を形成する。
【０１０７】
本発明の１実施形態において、アルミニウム含有成分は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、９２．６６ｍＭ塩化アルミニウム及び２５％トレハロース（重量／体積）を含む。
【０１０８】
本発明の１実施形態において、リン酸塩／塩基含有成分は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、９２．６６ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム及び２５％（重量／体積）トレハロースを含む。
【０１０９】
本発明の１実施形態において、抗原含有成分は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、ｐＨ６で３２０ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰｓ（肺炎球菌多糖）複合体抗原；５０ｍＭヒスチジン塩基；５０ｍＭヒスチジン塩酸塩；２０％（重量／体積）トレハロース；５０ｍＭ塩化ナトリウム；及び０．１％ポリソルベート２０を含む１５価抗原製剤を含む。
【０１１０】
本発明の１実施形態において、アルミニウム含有成分は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、９２．６６ｍＭ塩化アルミニウム；及び２５％（重量／体積）トレハロースを含む。
【０１１１】
本発明の１実施形態において、アルミニウム及びリン酸塩／塩基含有成分の組み合わせによって形成されるアルミニウムアジュバント成分は、再構成すると、６２５ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント；２３％（重量／体積）トレハロース；３５ｍＭ塩化ナトリウム；及び０．８ｍＭヒスチジン塩基を含む。
【０１１２】
本発明の１実施形態において、リン酸塩／塩基含有成分は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、９２．６６ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム；及び２５％（重量／体積）トレハロースを含む。
【０１１３】
本発明の１実施形態において、抗原含有成分は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、ｐＨ６で、２０％（重量／体積）トレハロース；５０ｍＭヒスチジン（塩基）；５０ｍＭヒスチジン塩酸塩；３２０ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰｓ（肺炎球菌多糖）ＣＲＭ−ＰｎＰｓ複合体抗原；５０ｍＭ塩化ナトリウム；及び０．１％ポリソルベート２０を含む。
【０１１４】
本発明の別の実施形態は、アルミニウム−及びリン酸含有化合物の液体溶液（まだ、反応してアルミニウムアジュバント懸濁液を形成していない）を液体（クラスＣ実施形態）又は凍結乾燥（クラスＢ及びクラスＣの両方の実施形態）状態で製剤された抗原と組み合わせて、１以上の抗原の存在下にアルミニウムアジュバントを形成する反応を生じさせることによる、１価及び多価ＨＰＶワクチンの製造に関する。
【０１１５】
本発明のそのような実施形態において、下記の成分が、物理的に分離された状態で維持されている：
（１）アルミニウムアジュバント懸濁液を形成する反応を完結させるのに十分な塩基を含まないアルミニウム−及びリン酸含有化合物の溶液（例えば、ｐＨ約５以下、例えば、約１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、又は５）、及び
（２）抗原を含み得る塩基源として役立ち得る液体、又は
（３）乾燥、例えば凍結乾燥抗原［ここで、その製剤された抗原は、抗原存在下でのアルミニウムアジュバント沈殿反応の完結を可能とする緩衝剤、塩及び／又は塩基を含む。］。
【０１１６】
本発明は、（ｉ）物理的に分離された上記で記載の（１）及び（２）；又は（ｉｉ）物理的に分離された上記で記載の（１）及び（３）を含む製造品を包含する。
【０１１７】
（１）と（２）；又は（１）と（３）を組み合わせることを含むワクチンの形成方法並びにそのような方法の生成物は、本発明の一部である。前記成分を組み合わせ、そして、ワクチンを対象者に注射すること（例えば、本明細書に記載の注射機器で）を含む、対象者（例えば、ヒト）にワクチンを投与する方法も、本発明の一部を形成する。
【０１１８】
本発明の１実施形態において、
（１）は、等体積の３７．０８ｍＭ塩化アルミニウム水溶液と３３．３８ｍＭリン酸ナトリウムｐＨ７．０水溶液を酸性ｐＨ（例えば、約４以下）で混和して、１８．５４ｍＭ塩化アルミニウム、１６．６９ｍＭリン酸ナトリウムを得ることで得られる溶液を含み；
（２）は、（５０、８０、又は７５）ｍＭ二塩基リン酸ナトリウム、（５０、２０、又は２５）ｍＭ一塩基リン酸ナトリウム、１６０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １６型、５ｍＭヒスチジン、１２５ｍＭ塩化ナトリウム、０．００５％ポリソルベート８０／水を含み；及び／又は
（３）は、凍結乾燥された（２０又は４２．５）ｍＭヒスチジン塩基、４．５％ショ糖、ＨＰＶ  ＶＬＰ  ６型（４０ｍｃｇ／ｍＬ）、１１型（８０ｍｃｇ／ｍＬ）、１６型（８０ｍｃｇ／ｍＬ）、及び１８型（４０ｍｃｇ／ｍＬ）、１２５ｍＭ塩化ナトリウム、０．００５％ポリソルベート８０を含む。
【０１１９】
アルミニウム−及びリン酸含有化合物の溶液（アルミニウムアジュバント懸濁液を形成する反応を完結させるのに十分な塩基を含まない（例えば、ｐＨ約５以下、例えば、約１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５又は５））は、単一ＶＬＰ型又は複数ＶＬＰ型の製剤されたＨＰＶウィルス様粒子と混合することができる。製剤された抗原とともに存在する緩衝剤は、不足していた塩基を提供して、抗原存在下にアルミニウムアジュバントを形成する反応を起こすことができる。これらの反応は、ワクチンバイアル又は送達機器での場合にあり得るように、小体積で（例えば１ｍＬに１ｍＬを加える）行うことができる。
【０１２０】
本発明の１実施形態において、アルミニウムアジュバントを形成するのに十分な塩基を含まない（例えば、ｐＨ約５以下、例えば、約１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５又は５で）アルミニウム及びリン酸含有成分（１）は、（ｉ）１８．５４ｍＭ塩化アルミニウム・６水和物；１６．６９ｍＭリン酸ナトリウム；及び水中、酸性ｐＨ；又は（ｉｉ）９．２７ｍＭ塩化アルミニウム・６水和物；８．３４ｍＭリン酸ナトリウム；及び、水中、酸性ｐＨ、を含む。
【０１２１】
本発明の１実施形態において、前記抗原（３）は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、
（Ａ）（ｉ）５０ｍＭ二塩基リン酸ナトリウム；５０ｍＭ一塩基リン酸ナトリウム；１６０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １６型；５ｍＭヒスチジン；１２５ｍＭ塩化ナトリウム；及び、０．００５％ポリソルベート８０；水中；又は（ｉｉ）８０ｍＭ二塩基リン酸ナトリウム；２０ｍＭ一塩基リン酸ナトリウム；１６０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １６型；５ｍＭヒスチジン；１２５ｍＭ塩化ナトリウム；及び０．００５％ポリソルベート８０；水中；又は
（Ｂ）（ｉ）７５ｍＭ二塩基リン酸ナトリウム；２５ｍＭ一塩基リン酸ナトリウム；１６０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １６型；５ｍＭヒスチジン；１２５ｍＭ塩化ナトリウム；及び、０．００５％ポリソルベート８０；水中；又は（ｉｉ）２０ｍＭヒスチジン塩基；４．５％ショ糖；４０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  ６型；８０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １１型；８０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １６型；４０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １８型；１２５ｍＭ塩化ナトリウム；０．００５％ポリソルベート８０；水中、又は
（Ｃ）（ｉ）４２．５ｍＭヒスチジン塩基；４．５％ショ糖；４０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  ６型；８０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １１型；８０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １６型；４０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １８型；１２５ｍＭ塩化ナトリウム；及び０．００５％ポリソルベート８０；水中
を含む。
【０１２２】
クラスＢ及びクラスＣの両方で適合する別の実施形態は、アルミニウム含有化合物及びリン酸含有化合物を含む液体溶液（前記溶液自体は、沈殿固体と反応して、アルミニウムアジュバント懸濁液を形成しない）の、アルミニウムアジュバント形成反応を完了させるのに必要な塩基を提供する乾燥（例えば、凍結乾燥又は噴霧乾燥）製剤との組み合わせによるアルミニウムアジュバントの製造に関する。
【０１２３】
本発明のそのような実施形態において、次の二つの成分が、物理的に分離された状態で維持されている：アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の一部（例えば、リン酸塩及び／又は緩衝剤及び／又は塩基、任意に緩衝剤及び／又は賦形剤、任意に追加のアジュバント、任意に保存剤により製剤化した抗原）を含む乾燥（例えば、凍結乾燥若しくは噴霧乾燥）製剤、並びに、水；アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な他の反応物（例えば、アルミニウムアジュバント沈殿反応を完了するのに十分な塩基を含まない（例えば、ｐＨ約５以下、例えば、約１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、又は５）アルミニウム含有化合物及びリン酸含有化合物）；任意に緩衝剤、塩、界面活性剤及び／又は賦形剤；任意に追加のアジュバント；及び／又は任意に保存剤を含む液体。
【０１２４】
本発明は、物理的に分離された乾燥（例えば、凍結乾燥若しくは噴霧乾燥）製剤及び液体を含む製造物、並びに前記成分を組み合わせることを含むワクチンの製造方法並びにそのような方法の生成物を提供する。成分を組み合わせ、そして、ワクチンを対象者に注射すること（例えば、本明細書に記載の注射機器で）を含む、対象者（例えば、ヒト）へのワクチンの投与方法も、本発明の一部を形成している。
【０１２５】
例えば、本発明の１実施形態において、乾燥（例えば、噴霧乾燥若しくは凍結乾燥）製剤は、乾燥前で、１％ショ糖、９％マンニトール、５０ｍＭリン酸化合物、ｐＨ７．４又はｐＨ７．８；又は、乾燥（例えば、噴霧乾燥若しくは凍結乾燥）前で、６％ショ糖、１００ｍＭヒスチジン、ｐＨ６．０又は７．０又は７．４を含む。
【０１２６】
本発明の１実施形態において、液体成分は、酸性ｐＨで１０．４９ｍＭ塩化アルミニウム、９．４４ｍＭリン酸ナトリウム／水を含む。
【０１２７】
本発明の１実施形態において、液体は、酸性ｐＨで１０．４９ｍＭ塩化アルミニウム；９．４４ｍＭリン酸ナトリウム／水を含む。
【０１２８】
本発明の１実施形態において、乾燥成分は、乾燥（例えば、凍結乾燥又は噴霧乾燥）前で、（ｉ）６％ショ糖；１００ｍＭヒスチジン；ｐＨ７．６、凍結乾燥品；又は（ｉｉ）６％ショ糖；１００ｍＭヒスチジン；ｐＨ７．０、凍結乾燥品；又は（ｉｉｉ）６％ショ糖；１００ｍＭヒスチジン；ｐＨ６．０、凍結乾燥品；又は（ｉｖ）１％ショ糖；９％マンニトール；５０ｍＭリン酸化合物；ｐＨ７．４、噴霧乾燥品；又は（ｖ）１％ショ糖；９％マンニトール；５０ｍＭリン酸化合物；ｐＨ７．８、噴霧乾燥品を含む。
【０１２９】
別のクラスＢ実施形態は、アルミニウム含有溶液、リン酸塩／塩基含有溶液、及び製剤された抗原及び液体の凍結乾燥ビーズの共パッケージ化によって、抗原存在下でのアルミニウムアジュバントの反応及び形成を可能とすることによる、ワクチンの製造に関する。
【０１３０】
本発明のそのような実施形態において、次の成分が、物理的に分離された状態に維持されている：アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の一部（例えば、アルミニウム含有化合物）を含む乾燥（例えば、凍結乾燥）製剤；及びアルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の他のもの（例えば、リン酸含有化合物及び／又は塩基）を含む乾燥（例えば、凍結乾燥）製剤；及び抗原を含む乾燥（例えば、凍結乾燥）製剤、ここで、これらのいずれかは、保存剤を含んでいても良い；及び水；任意に緩衝剤、塩、界面活性剤及び／又は賦形剤；任意に抗原；任意に追加のアジュバント；及び任意に保存剤を含む液体。
【０１３１】
本発明の製造物の好ましい実施形態では、全ての乾燥成分を共通の容器に入れ、液体成分は別の容器に入れる。例えば、図１２を参照する。
【０１３２】
本発明は、全てが互いに物理的に分離された状態に維持されている前記乾燥（例えば、凍結乾燥）製剤及び液体を含む製造物、並びに前記成分を組み合わせることを含むワクチンの製造方法及び、そのような方法の生成物を提供する。成分を組み合わせ、そして、対象者にワクチンを注射すること（例えば、本明細書に記載の注射機器で）を含む、ワクチンを対象者（例えば、ヒト）に投与する方法も、本発明の一部を形成する。
【０１３３】
本発明の１実施形態において、アルミニウム含有成分は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、９２．６６ｍＭ塩化アルミニウム及び２５％（重量／体積）トレハロースを含む。
【０１３４】
本発明の１実施形態において、リン酸含有成分は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、９２．６６ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム及び２５％（重量／体積）トレハロースを含む。
【０１３５】
本発明の１実施形態において、抗原含有成分は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、３２０ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰｓ（肺炎球菌多糖）複合体抗原（多糖１９Ａ型）；１００ｍＭヒスチジン；２０％（重量／体積）トレハロース；５０ｍＭ塩化ナトリウム；及び０．１％ポリソルベート２０；ｐＨ７．５を含む。
【０１３６】
本発明の１実施形態において、抗原含有成分は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、２０％（重量／体積）トレハロース；１００ｍＭヒスチジン（塩基）；３２０ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰＳ（肺炎球菌多糖）複合体抗原（多糖１９Ａ型）；５０ｍＭ塩化ナトリウム；及び０．１％ポリソルベート２０を含む。
【０１３７】
本発明の１実施形態において、アルミニウム含有成分は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、９２．６６ｍＭ塩化アルミニウム及び２５％（重量／体積）トレハロースを含む。
【０１３８】
本発明の１実施形態において、リン酸含有成分は、乾燥前、例えば凍結乾燥前に、９２．６６ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム及び２５％（重量／体積）トレハロースを含む。
【０１３９】
本発明のクラスＣ実施形態には、他の必要な反応物（液体又は乾燥）と組み合わせた時に反応してアルミニウムアジュバントを形成する化合物の液体製剤を含む。例えば、二つの液体溶液を容器に加えて、アルミニウムアジュバントを形成することができる（任意に、抗原、塩、緩衝剤、賦形剤、洗浄剤、界面活性剤、保存剤、安定剤、色素、指示剤の存在下で）。
【０１４０】
例えば、本発明の実施形態において、次の二つの成分が、物理的に分離された状態に維持されている：アルミニウム含有化合物及びリン酸含有化合物を含むが、アルミニウムアジュバント沈殿反応を完了させるのに十分な塩基を含まない（例えば、ｐＨ約５以下、例えば、約１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、又は５）溶液を含むアルミニウム／リン酸含有成分；及び（例えば、等体積の）アルミニウムアジュバント沈殿反応を完了させるのに必要な塩基の残りの部分を提供する緩衝剤又は塩又は塩基を含む溶液を含み、任意に抗原及び／又は他の成分を含む成分。
【０１４１】
本発明は、物理的に分離された状態に維持されているアルミニウム／リン酸含有成分及び緩衝剤／塩／塩基提供成分を含む製造物を提供する。前記成分を組み合わせることを含むワクチンの製造方法も、そのような方法の生成物とともに、本発明の一部を形成する。成分を組み合わせ、そして、ワクチンを対象者に注射すること（例えば、本明細書に記載の注射機器で）を含む、ワクチンを対象者（例えば、ヒト）に投与する方法も、本発明の一部を形成する。
【０１４２】
本発明の１実施形態において、アルミニウム／リン酸含有成分は、酸性ｐＨで１８．５４ｍＭ塩化アルミニウム（塩化アルミニウム・６水和物から）及び１６．６９ｍＭリン酸ナトリウム（例えば、等体積の３７．０８ｍＭ塩化アルミニウム及び３３．３８ｍＭリン酸ナトリウムｐＨ７の混合物から調製）／水を含む。
【０１４３】
本発明の１実施形態において、緩衝剤／塩／塩基提供成分は、１２８ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰｓ（肺炎球菌多糖）複合体抗原、例えば、１５の異なる多糖型との複合体；８０ｍＭヒスチジン、ｐＨ７．０；６％ショ糖；１５０ｍＭ塩化ナトリウム；水の混合物を含む。
【０１４４】
本発明の１実施形態において、アルミニウム／リン酸含有成分は、酸性ｐＨで１８．５４ｍＭ塩化アルミニウム・６水和物；１６．６９ｍＭリン酸ナトリウム／水を含む。
【０１４５】
本発明の１実施形態において、アルミニウム／リン酸含有成分及び塩基提供成分の組み合わせ後の生成物は、ｐＨ５．９で水中６４ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰＳ（肺炎球菌多糖）複合体抗原（例えば、１５の異なる多糖型との複合体）；４０ｍＭヒスチジン；３％ショ糖；１００ｍＭ塩化ナトリウム；２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバントを含む。
【０１４６】
本発明の別のクラスＣ実施形態は、例えば自動バイアル充填ラインでのアルミニウム含有溶液及びリン酸塩／塩基含有溶液の迅速な順次添加によるアルミニウムアジュバントの製造に関する。本発明の１実施形態において、二つの液体溶液を、例えば充填ラインを用いてバイアルに充填して、それによってアルミニウムアジュバントを形成し（任意に、抗原、塩、緩衝剤、賦形剤、洗浄剤、界面活性剤、保存剤、安定剤、色素、指示剤の存在下に）、直後にバイアルにストッパーを施す。
【０１４７】
本発明のそのような実施形態において、次の成分が、物理的に分離された状態に維持されている：アルミニウム含有化合物を含む溶液を含むアルミニウム含有成分；及び、例えば、等体積の、アルミニウムアジュバント沈殿反応を完了させるのに十分なリン酸塩及び／又は塩基を提供するリン酸含有化合物又は緩衝剤又は塩又は塩基、及び、任意に抗原及び／又は他の成分を含む溶液、を含む、リン酸塩／塩基含有成分。溶液は逆の順序で加えることができ、添加体積を、所望に応じて等体積とならないように意図的に設計することができよう。
【０１４８】
本発明は、物理的に分離された状態に維持されたアルミニウム含有成分及びリン酸塩／塩基含有成分を含む製造物を提供する。本発明の１実施形態において、製造物は、例えば、それぞれ物理的に分離された成分を含む１以上の貯留部を含む実験室若しくは工場設定で、バイアルに充填する装置である。本発明はまた、成分並びにそのような方法の生成物を組み合わせることを含むワクチンの製造方法を提供する。成分を組み合わせ、そして、ワクチンを対象者に注射すること（例えば、本明細書に記載の注射機器で）を含む、ワクチンを対象者（例えば、ヒト）に投与する方法も、本発明の一部を形成する。
【０１４９】
本発明の１実施形態において、アルミニウム含有成分は、１８．５３ｍＭ塩化アルミニウム／水を含む。
【０１５０】
本発明の１実施形態において、リン酸塩／塩基含有成分は、１００ｍＭリン酸ナトリウム／水、ｐＨ８．１；或いは、１００ｍＭリン酸ナトリウム、９％（重量／体積）ショ糖／水、ｐＨ８．１；又は１００ｍＭＴｒｉｓ（即ち、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）、１８．５３ｍＭリン酸ナトリウム／水、ｐＨ８．１を含む。
【０１５１】
本発明の１実施形態において、アルミニウム含有成分は、１８．５３ｍＭ塩化アルミニウム／水を含む。
【０１５２】
本発明の１実施形態において、リン酸塩／塩基含有成分は、（ｉ）１００ｍＭリン酸ナトリウム、ｐＨ８．１／水、又は（ｉｉ）１００ｍＭリン酸ナトリウム；９％（重量／体積）ショ糖；ｐＨ８．１／水、又は（ｉｉｉ）１００ｍＭ  Ｔｒｉｓ（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンとも称される）；１８．５３ｍＭリン酸ナトリウム；ｐＨ８．１／水を含む。
【０１５３】
本発明のさらなるクラスＣ実施形態は、例えば、アルミニウム含有化合物の溶液をリン酸塩／塩基及び抗原を含む第２の溶液と混合して、抗原存在下にアルミニウムアジュバントを反応及び生成させることにより、最終体積約１２ｍＬ（ワクチンの多用量容器の体積に相当すると考えられる）で製造される、多抗原アルミニウムアジュバントワクチンの製造に関する。
【０１５４】
本発明の１実施形態において、次の二成分が、物理的に分離された状態に維持されている：アルミニウム含有化合物の溶液を含むアルミニウム含有成分；及び抗原の存在下にアルミニウムアジュバント沈殿反応の完了を可能とする４種類の異なる抗原（タンパク質細菌毒素又はトキソイド）及び緩衝剤及び塩基源としてのリン酸塩ｐＨ８の溶液を含む抗原含有成分。例えば、本発明の１実施形態において、各成分について、等体積、例えば６ｍＬを用いる。
【０１５５】
本発明は、物理的に分離された状態に維持されているアルミニウム含有成分及び抗原含有成分を含む製造物を提供する。
【０１５６】
本発明は、成分を組み合わせることを含むワクチンの製造方法並びにそのような方法の生成物も提供する。成分を組み合わせ、そして、ワクチンを対象者に注射すること（例えば、本明細書に記載の注射機器で）を含む、ワクチンを対象者（例えば、ヒト）に投与する方法も、本発明の一部を形成する。
【０１５７】
本発明の１実施形態において、アルミニウム含有成分は、１８．５４又は１８．５３ｍＭ塩化アルミニウム／水を含む。
【０１５８】
本発明の１実施形態において、抗原含有成分は、１００ｍＭリン酸ナトリウム、ｐＨ８、９％ショ糖／水を、４種類の抗原、例えば抗原１（２０ｍｃｇ／ｍＬ  ｖｐｉ＿５ｍＴｃｄＡ、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．Ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）からの組換え変異体毒素）；抗原２（２０ｍｃｇ／ｍＬ  ｎａｐ＿５ｍＴｃｄＢ、ホルムアルデヒド処理、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．Ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）からの組換えトキソイド）；抗原３（５．６ｍｃｇ／ｍＬ  ３ｍＣｄｔＡ、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．Ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）からの組換え変異体毒素サブユニット）；及び、抗原４（４４．４ｍｃｇ／ｍＬ  ＣｄｔＢ、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．Ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）からの毒素サブユニット）とともに含む。
【０１５９】
本発明の１実施形態において、抗原含有成分は、１００ｍＭリン酸ナトリウム、ｐＨ８、及び９％ショ糖を含む溶液中、２０ｍｃｇ／ｍＬ  ５ｍＴｃｄＡ；２０ｍｃｇ／ｍＬ  ５ｍＴｃｄＢ；５．６ｍｃｇ／ｍＬ  ３ｍＣｄｔＡ；及び４４．４ｍｃｇ／ｍＬ  ＣｄｔＢからなる群から選択されるＣ．ディフィシル（Ｃ．Ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）関連の１以上の抗原を含む。
【０１６０】
本発明のワクチン組成物は、界面活性剤を含むことができる。本発明の製剤で有用な界面活性剤には、ノニオン系界面活性剤、例えばポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類（ポリソルベート類、商標名Ｔｗｅｅｎ（登録商標）下で販売（Ｕｎｉｑｕｅｍａ  Ａｍｅｒｉｃａｓ  ＬＬＣ，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥ））、例えばポリソルベート−２０（ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート）、ポリソルベート−４０（ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミテート）、ポリソルベート−６０（ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート）、及びポリソルベート−８０（ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート）；ポリオキシエチレンアルキルエーテル類、例えばＢｒｉｊ（登録商標）５８（Ｕｎｉｑｕｅｍａ  Ａｍｅｒｉｃａｓ  ＬＬＣ，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥ）及びＢｒｉｊ（登録商標）３５；ポロクサマー類（例えば、ポロクサマー１８８）；Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）Ｘ−１００（Ｕｎｉｏｎ  Ｃａｒｂｉｄｅ  Ｃｏｒｐ．，Ｈｏｕｓｔｏｎ，ＴＸ）及びＴｒｉｔｏｎ（登録商標）Ｘ−ｌ  １４；ＮＰ４０；Ｓｐａｎ２０、Ｓｐａｎ４０、Ｓｐａｎ６０、Ｓｐａｎ６５、Ｓｐａｎ８０及びＳｐａｎ８５；エチレン及びプロピレングリコールのコポリマー（例えば、ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）シリーズのノニオン系界面活性剤、例えばｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ６８、ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）１０Ｒ５、ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１０８、ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１２７、ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ３８、ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｌ４４、ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｌ６２（ＢＡＳＦ  Ｃｏｒｐ．，Ｌｕｄｗｉｇｓｈａｆｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）；及びドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）を含み、これらに限定されるものではない。
【０１６１】
本発明の１実施形態において、本発明の組成物は、リン酸化合物；例えば、リン酸塩、例えばリン酸ナトリウム又はリン酸カリウムを含む。
【０１６２】
本発明の１実施形態において、本発明の組成物は、塩基、例えば、ヒスチジン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、ＨＥＰＥＳ、ＮａＯＨ、ＫＯＨ又はイミダゾールを含む。
【０１６３】
本発明の１実施形態において、本発明の組成物は、保存剤、例えば、抗菌性保存剤、例えば、ｍ−クレゾール、フェノール又はベンジルアルコールを含む。
【０１６４】
ＩＶ．抗原
本発明の抗原は、物質を投与された対象者（例えば、ヒト）において、その物質に対する免疫応答を引き起こすのに十分な免疫原性を有する物質であり得る。本発明のワクチン中の抗原は、凍結乾燥されているか、液体状態に維持されているが、アジュバント若しくはアジュバント成分から物理的に分離されていることができる。
【０１６５】
抗原の例には、ポリペプチド、核酸、多糖若しくは多糖のタンパク質への複合体、トキソイド、サブユニット（例えば、ウィルスの）、ウィルス様粒子、生ウィルス、スプリットウィルス、弱毒化ウィルス、不活化ウィルス、エンベロープウィルス又はこれらのいずれかの組み合わせを含む。
【０１６６】
本発明の１実施形態において、抗原は、多糖−ポリペプチド抗原、例えば肺炎球菌（例えば、肺炎連鎖球菌（Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａ））多糖（例えば、細胞被膜糖）−タンパク質（例えば、ジフテリアタンパク質）複合体である。本発明の１実施形態において、複合体は、タンパク質（例えば、ジフテリアタンパク質）に結合した肺炎連鎖球菌（Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）の細胞被膜（ｃａｐｔｕｒｅ）糖を含み、例えば、前記細胞被膜糖は、ジフテリアタンパク質と結合した細菌である肺炎連鎖球菌（Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の７種類の血清型（４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆ及び２３Ｆ）のものである。本発明の１実施形態において、複合体は、分類不能型インフルエンザ菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ）、破傷風トキソイドキャリアタンパク質及び／又はジフテリアトキソイドキャリアタンパク質由来のタンパク質Ｄなどのタンパク質に結合した肺炎球菌多糖体血清型１、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆ及び２３Ｆを含む。本発明の１実施形態において、複合体は、ジフテリアタンパク質に結合した肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）被膜多糖、例えばジフテリアｃｒｍ１９７タンパク質などのタンパク質に結合した肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）１、３、４、５、６ａ、６ｂ、７ｆ、９ｖ、１４、１８ｃ、２３ｆ、１９ａ及び１９ｆ型被膜多糖を含む。本発明の１実施形態において、１以上のキャリアタンパク質に結合した肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、６Ｄ、６Ｅ、６Ｇ、６Ｈ、７Ｆ、７Ａ、７Ｂ、７Ｃ、８、９Ａ、９Ｌ、９Ｎ、９Ｖ、１０Ｆ、１０Ａ、１０Ｂ、１０Ｃ、１１Ｆ、１１Ａ、１１Ｂ、１１Ｃ、１１Ｄ、１１Ｅ、１２Ｆ、１２Ａ、１２Ｂ、１３、１４、１５Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１６Ａ、１７Ｆ、１７Ａ，１８Ｆ、１８Ａ、１８Ｂ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、１９Ｂ、１９Ｃ、２０Ａ、２０Ｂ、２１、２２Ｆ、２２Ａ、２３Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、２４Ａ、２４Ｂ、２５Ｆ、２５Ａ、２７、２８Ｆ、２８Ａ、２９、３１、３２Ｆ、３２Ａ、３３Ｆ、３３Ａ、３３Ｂ、３３Ｃ、３３Ｄ、３３Ｅ，３４、３５Ｆ、３５Ａ、３５Ｂ、３５Ｃ、３６、３７、３８、３９、４０、４１Ｆ、４１Ａ、４２、４３、４４、４５、４６、４７Ｆ、４７Ａ、４８、ＣＷＰＳ１、ＣＷＰＳ２、ＣＷＰＳ３の少なくとも一つからの被膜多糖を含む多糖−タンパク質複合体の１以上である。
【０１６７】
抗原として使用可能なウィルスの例には、アデノウィルス、鳥インフルエンザ、コクサッキーウィルス、サイトメガロウィルス、デング熱ウィルス、エボラウィルス、エプスタイン・バールウィルス、ウマ脳炎ウィルス、フラビウィルス、ヘパドナウィルス、Ａ型肝炎ウィルス、Ｂ型肝炎ウィルス、Ｃ型肝炎ウィルス、Ｄ型肝炎ウィルス、Ｅ型肝炎ウィルス、単純疱疹ウィルス、ヒト免疫不全ウィルス、ヒトパピローマ・ウィルス、インフルエンザウィルス、日本脳炎ウィルス、ＪＣウィルス、麻疹ウィルス、マールブルグ・ウィルス、ムンプス・ルブラウィルス、オルトミクソウィルス、パラインフルエンザウィルス、パルボウィルス、ピコルナ・ウィルス、ポリオウィルス、ポックス・ウィルス、狂犬病ウィルス、レオウィルス、呼吸器合胞体ウィルス、レトロウィルス、ラブドウィルス、ライノウィルス、リフトバレー熱ウィルス、ロタウィルス、風疹ウィルス、麻疹ウィルス、天然痘ウィルス、トガウィルス、豚インフルエンザ・ウィルス、水痘帯状疱疹ウィルス、大痘瘡、小痘瘡及び／又は黄熱病ウィルスを含み、これらに限定されるものではない。そのようなウィルスは、全ウィルス（例えば、生存、弱毒化又は不活化）又はそのようなウィルスのサブユニットであり得る。
【０１６８】
抗原として使用可能なウィルスの例には、麻疹ウイルス、ムンプス・ウィルス（ムンプス・ルブラウィルス）、風疹ウィルス、水痘帯状疱疹ウィルス又はそれらの全ての４若しくは３の組み合わせ（例えば、麻疹、ムンプス及び風疹）を含む。
【０１６９】
１実施形態において、抗原は、ボレリア（Ｂｏｒｒｅｌｉａ）属種、バチルス・アントラシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）、ボレリア・ブルグドルフェリ（Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ）、ボルデテラ・ペルツシス（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、カンフィロバクター・ジェジュニ（Ｃａｍｐｈｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ）、クラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ）属種、クラミジアル・プシッタシ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｌ  ｐｓｉｔｔａｃｉ）、クラミジアル・トラコマチス（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｌ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属種、クロストリジウム・テタニ（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ）、クロストリジウム・ボツリヌム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）、クロストリジウム・ペルフリンゲンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、コリネバクテリウム・ジフテリアエ（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）、コクシエラ（Ｃｏｘｉｅｌｌａ）属種、エンテロコッカス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）属種、エーリキア（Ｅｒｌｉｃｈｉａ）属種、エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）、フランシセラ・ツラレンシス（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ）、ヘモフィルス（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ）属種、ヘモフィルス・インフルエンザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、ヘモフィルス・パラインフルエンザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属種、レジオネラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ）属種、レジオネラ・ニューモフィラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）、レプトスピロシス・インテロガンス（Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒｏｓｉｓ  ｉｎｔｅｒｒｏｇａｎｓ）、リステリア（Ｌｉｓｔｅｒｉａ）属種、リステリア・モノシトゲネス（Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）、マイコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属種、マイコバクテリウム・ツベルクロシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、マイコバクテリウム・レプラエ（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｅｐｒａｅ）、マイコプラズマ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ）属種、マイコプラズマ・ニューモニエ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ナイセリア（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）属種、ナイセリア・メニンギチジス（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）、ネイッセリア・ゴノロエアエ（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）、肺炎球菌（Ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃｕｓ）属種、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属種、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）属種、サルモネラ・ティフィ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ）、サルモネラ・エンテリカ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｃａ）、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属種、リケッチア（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ）属種、リケッチア・リケッチイ（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ  ｒｉｃｋｅｔｓｉｉ）、リケッチア・ティフィ（Ｒｉｃｋｅｔ��ｓｉａ  ｔｙｐｈｉ）、シゲラ（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）属種、スタフィロコッカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）属種、スタフィロコッカス・オーレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属種、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ストレプトコッカス・ピロゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｒｏｇｅｎｅｓ）、ストレプトコッカス・ミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ）、トレポネーマ（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ）属種、トレポネーマ・パリズム（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐａｌｌｉｄｕｍ）、ビブリオ（Ｖｉｂｒｉｏ）属種、ビブリオ・コレラエ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ）及びエルシニア（Ｙｅｒｓｉｎｉａ）属種から選択される１以上の細菌から取られる。そのような細菌は、全細胞（例えば、生存、弱毒化又は不活化）又はそのような細菌のポリペプチド又は多糖であることができる。
【０１７０】
１実施形態において、抗原は、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属種、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属種、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ）、カンジダ・トロピカリス（Ｃａｎｄｉｄａ  ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ）、クリプトコッカス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属種、クリプトコッカス・ネオフォルマンス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）、エンタモエバ・ヒストリチカ（Ｅｎｔａｍｏｅｂａ  ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ）、ヒストプラズマ・カプスラツム（Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ  ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ）、リーシュマニア（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ）属種、ノカルジア・アステロイデス（Ｎｏｃａｒｄｉａ  ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ）、プラスモジウム・ファルシパルム（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）、トキソプラズマ・ゴンジイ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｇｏｎｄｉｉ）、トコモナス・バギナリス（Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ  ｖａｇｉｎａｌｉｓ）、トキソプラズマ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ）属種、トキソプラズマ・ブルセイ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｂｒｕｃｅｉ）、シストソーマ・マンソニ（Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ  ｍａｎｓｏｎｉ）、フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属種、及び／又はトリコフィトン（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ）属種から選択される１以上の真菌から取られる。そのような真菌は、全細胞（例えば、生存、弱毒化又は不活化）又はそのような真菌のポリペプチド若しくは多糖であることができる。
【０１７１】
１実施形態において、抗原は、プラスモジウム（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ）属種、トキソプラズマ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ）属種、エンタモエバ（Ｅｎｔａｍｏｅｂａ）属種、バベシア（Ｂａｂｅｓｉａ）属種、トリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ）属種、リーシュマニア（Ｌｅｓｈｍａｎｉａ）属種、ニューモシスティス（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ）属種、トリコモナス（Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ）属種、ジアルジア（Ｇｉａｒｄｉａ）属種及び／又はシソストマ（Ｓｃｈｉｓｏｓｔｏｍａ）属種から選択される１以上の寄生生物から取られる。そのような寄生生物は、全細胞（例えば、生存、弱毒化又は不活化）又はそのような寄生生物のポリペプチド若しくは多糖であることができる。
【０１７２】
本発明の１実施形態において、有効成分は核酸である。例えば、本発明の１実施形態において、核酸は、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ＳｉＲＮＡ、ｍＲＮＡなどから選択される。
【０１７３】
本発明の１実施形態において、有効成分はトキソイドである。例えば、本発明の１実施形態において、トキソイドは、ジフテリアトキソイド又は破傷風トキソイド又はＣ．ディフィシル（Ｃ．Ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）からのトキソイドである。
【０１７４】
本発明の１実施形態において、有効成分は、ウィルスのサブユニットである。例えば、本発明の１実施形態において、ウィルスサブユニットは、インフルエンザウィルス、単純ヘルペスウィルス、呼吸器合胞体ウィルスＦタンパク質、ＨＩＶ、ＶＳＶからの糖タンパク質などから選択される。
【０１７５】
本発明の１実施形態において、有効成分は、ウィルス様粒子（ＶＬＰ）である。例えば、本発明の１実施形態において、ＶＬＰは、ヒトパピロマウィルス又はサイトメガロウィルスのウィルス様粒子である。
【０１７６】
本発明の１実施形態において、有効成分はスプリットウィルスである。例えば、本発明の１実施形態において、スプリットウィルスはインフルエンザウィルスである。
【０１７７】
本発明の１実施形態において、抗原は、抗がんワクチンで用いることができる抗がん抗原である。例えば、抗原は、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）、例えばｇｐ１００、テセモチド、葉酸結合タンパク質（ＦＢＰ）、ＡＥ３７、ＧＰ２、Ｅ７５（ネリペピムト−Ｓ）、ＨＥＲ２／ｎｅｕ又はリンドペプムトであることができる。本発明の１実施形態において、抗がん抗原は、ウィルスに結合している。
【０１７８】
Ｖ．乾燥
本発明は、再構成前に、１以上の成分が、乾燥、例えば凍結乾燥されているワクチンを含む。水分が除去されて水のような液体が実質的に存在しない固体が得られる場合、組成物は乾燥されている。乾燥組成物は、例えば、凍結乾燥、マイクロ波真空乾燥（例えば、リオスフィア（ｌｙｏｓｐｈｅｒｅ）の）、噴霧乾燥、パルス燃焼乾燥又はドラム乾燥されたものであることができる。例えば、Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｆｏｏｄ，ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ．Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ  ｏｒ  Ｘｕ＆Ｓｕｎａｄａ，Ｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｕｌｌ（Ｔｏｋｙｏ）５５（１１）：１５４５−５０（２００７）を参照する。凍結乾燥製剤成分は、粒子、例えば凍結乾燥材料のペレット、ビーズ又は球の形態であることができる。例えば、Ａ．Ｓ．Ｍｕｊｕｍｄａｒ（２００７）．Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｄｒｙｉｎｇ．ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓを参照する。
【０１７９】
本発明の１実施形態において、凍結乾燥又は乾燥は、プレフォームアルミニウムアジュバントのようなワクチン成分を含む液滴に液体窒素を直接接触させることを除外する方法によって行う。
【０１８０】
本発明の１実施形態において、製剤成分は、冷凍し、その冷凍組成物を低圧下とすることで成分中の水を昇華させることで凍結乾燥される。例えば、本発明の１実施形態において、成分は、三段階凍結乾燥プロセス：下記の前冷凍、一次乾燥及び二次乾燥を課させる。
【０１８１】
成分を、最初にそれの共晶温度（例えば、−５０℃〜−１０５℃以下）以下まで冷却する前冷凍。
【０１８２】
次に、冷凍成分を低圧（例えば、真空又は部分真空、例えば、約１、２又は３ミリバールの圧力）下とすることで、サンプル中の水を昇華させる一次乾燥。低温及び定圧とした場合、成分が乾燥マトリクスのように見えるまで、その圧力を続ける。
【０１８３】
一次乾燥が終わって全ての氷が昇華した後、結合した水分が生成物中にまだ存在し得る二次乾燥。残留水をより高い温度で除去する。このプロセスは、結合した水が生成物から脱着することから、等温脱着と称される。
【０１８４】
リオスフィア（ｌｙｏｓｐｈｅｒｅ）は、例えば、液滴の形態での少量液体（例えば、約２０、５０、１００又は２５０μＬ）を、その液滴が完全な状態に維持されるように、固体の平坦表面上に乗せることで作ることができる。本発明の１実施形態において、その表面は、例えば約−１８０℃〜約−１９６℃又は約−１８０℃〜約−２７３℃の温度のプレート、例えば金属プレートである。例えば、本発明の１実施形態において、液体は、ディスペンス先端によって表面上に乗せる。本発明の１実施形態において、液体は、約３ｍＬ／分〜約７５ｍＬ／分、約５ｍＬ／分〜約７５ｍＬ／分；約３ｍＬ／分〜約６０ｍＬ／分、約２０ｍＬ／分〜約７５ｍＬ／分；及び約２０ｍＬ／分〜約６０ｍＬ／分のディスペンス速度でディスペンスされる。本発明の１実施形態において、ディスペンスされる小分け量は、２５０μＬであり、ディスペンス速度は約５ｍＬ／分〜約７５ｍＬ／分であり、小分け量は１００μＬであり、ディスペンス速度は約３ｍＬ／分〜約６０ｍＬ／分である。本発明の１実施形態において、ディスペンス先端と液体がディスペンスされる表面の間の隙間は、約０．１ｃｍ以上（例えば、約０．５ｃｍ又は０．１ｃｍ〜１ｃｍ又は０．１ｃｍ〜０．７５ｃｍ）である。表面上に乗ると、液滴は冷凍され、乾燥される。リオスフィア（ｌｙｏｓｐｈｅｒｅ）の製造方法は、当業界で公知である。例えば、ＵＳ５６５６５９７；ＷＯ２０１３０６６７６９；ＷＯ２０１４０９３２０６；ＷＯ２０１５０５７５４０；ＷＯ２０１５０５７５４１又はＷＯ２０１５０５７５４８を参照する。
【０１８５】
本発明の１実施形態において、製剤成分は、マイクロ波真空乾燥によって乾燥される。マイクロ波真空乾燥は、減圧下で行う乾燥方法であり、水の沸点及び大気中の酸素含有量が相対的に低い。例えば、本発明の１実施形態において、製剤成分は、単一液滴としての少量液体を、それが表面に接触し冷凍ペレットとしてその表面上で凍結する時に単一液滴として液滴が維持されるように、表面温度を約−９０℃以下とした固体表面上にディスペンスし；そして、大気圧以下の圧力下に冷凍ペレットにマイクロ波照射を行って、球体のような乾燥ペレットを製造することで作られる。例えば、米国特許第４，３８９，７９４号；同４，６６４，９２４号；同４，８０９，５９６号；同４，８８２，８５１号を参照する。
【０１８６】
本発明の１実施形態において、製剤の成分は噴霧乾燥される。噴霧乾燥は、液体混合物又は溶液を粉末に変換するプロセスである。これは、液体から水分成分を除去することで行う。その液体を、例えば、ノズルを通して、チャンバ中に噴霧し、そのチャンバには同時に熱風を吹き込んでいる。溶液の液滴がノズルから放出され、そして、熱風と接触させるので、各液滴の含水量が除去され、それを液体から粉末形態に変える。
【０１８７】
ＶＩ．治療方法
本発明は、本発明のワクチン製剤を再構成し、そして対象者に製剤を導入すること（例えば、製剤の注射）を含む、処置を必要とする対象者にワクチンを投与する方法を提供する。本発明は、本発明の再構成ワクチン製剤を投与することによる、感染性疾患若しくはがんの治療若しくは予防方法、又は抗原に対して対象者を免疫化／ワクチン接種する方法も含む。本発明の１実施形態において、感染性疾患は、細菌感染、ウィルス感染、真菌感染及び／又は寄生生物感染である。
【０１８８】
本発明のワクチン製剤に関して「投与する」という用語は、対象者の身体への本発明の製剤を導入すること、例えば、筋肉注射、皮下注射、静脈注射、皮内注射、経口導入、経鼻導入を指す。
【０１８９】
本発明の１実施形態において、当該方法は、対象者が、臨床医からワクチン製剤を自己投与する指導を受けること、そして、その臨床医の指導に応えて製剤を再構成し、そして、その製剤を対象者自身の身体に自己投与することを含む。本発明の１実施形態において、当該方法は、ワクチン製剤の再構成及び対象者身体への投与、例えば、臨床医による対象者への投与を含む。
【０１９０】
本発明の１実施形態において、ウィルス感染は、アデノウィルス、鳥インフルエンザ、コクサッキーウィルス、サイトメガロウィルス、デング熱ウィルス、エボラウィルス、エプスタイン・バールウィルス、ウマ脳炎ウィルス、フラビウィルス、ヘパドナウィルス、Ａ型肝炎ウィルス、Ｂ型肝炎ウィルス、Ｃ型肝炎ウィルス、Ｄ型肝炎ウィルス、Ｅ型肝炎ウィルス、単純疱疹ウィルス、ヒト免疫不全ウィルス、ヒトパピローマ・ウィルス、インフルエンザウィルス、日本脳炎ウィルス、ＪＣウィルス、麻疹ウィルス、マールブルグ・ウィルス、ムンプス・ルブラウィルス、オルトミクソウィルス、パラインフルエンザウィルス、パルボウィルス、ピコルナ・ウィルス、ポリオウィルス、ポックス・ウィルス、狂犬病ウィルス、レオウィルス、呼吸器合胞体ウィルス、レトロウィルス、ラブドウィルス、ライノウィルス、リフトバレー熱ウィルス、ロタウィルス、風疹ウィルス、麻疹ウィルス、天然痘ウィルス、トガウィルス、豚インフルエンザ・ウィルス、水痘帯状疱疹ウィルス、大痘瘡、小痘瘡及び／又は黄熱病ウィルスから選択されるウィルスによるものである。
【０１９１】
例えば、本発明の１実施形態において、細菌感染は、ボレリア（Ｂｏｒｒｅｌｉａ）属種、バチルス・アントラシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）、ボレリア・ブルグドルフェリ（Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ）、ボルデテラ・ペルツシス（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、カンフィロバクター・ジェジュニ（Ｃａｍｐｈｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ）、クラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ）属種、クラミジアル・プシッタシ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｌ  ｐｓｉｔｔａｃｉ）、クラミジアル・トラコマチス（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｌ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属種、クロストリジウム・テタニ（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ）、クロストリジウム・ボツリヌム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）、クロストリジウム・ペルフリンゲンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、コリネバクテリウム・ジフテリアエ（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）、コクシエラ（Ｃｏｘｉｅｌｌａ）属種、エンテロコッカス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）属種、エーリキア（Ｅｒｌｉｃｈｉａ）属種、エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）、フランシセラ・ツラレンシス（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ）、ヘモフィルス（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ）属種、ヘモフィルス・インフルエンザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、ヘモフィルス・パラインフルエンザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属種、レジオネラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ）属種、レジオネラ・ニューモフィラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）、レプトスピロシス・インテロガンス（Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒｏｓｉｓ  ｉｎｔｅｒｒｏｇａｎｓ）、リステリア（Ｌｉｓｔｅｒｉａ）属種、リステリア・モノシトゲネス（Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）、マイコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属種、マイコバクテリウム・ツベルクロシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、マイコバクテリウム・レプラエ（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｅｐｒａｅ）、マイコプラズマ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ）属種、マイコプラズマ・ニューモニエ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ナイセリア（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）属種、ナイセリア・メニンギチジス（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）、ネイッセリア・ゴノロエアエ（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）、肺炎球菌（Ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃｕｓ）属種、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属種、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）属種、サルモネラ・ティフィ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ）、サルモネラ・エンテリカ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｃａ）、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属種、リケッチア（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ）属種、リケッチア・リケッチイ（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ  ｒｉｃｋｅｔｓｉｉ）、リケッチア・テ��フィ（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ  ｔｙｐｈｉ）、シゲラ（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）属種、スタフィロコッカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）属種、スタフィロコッカス・オーレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属種、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ストレプトコッカス・ピロゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｒｏｇｅｎｅｓ）、ストレプトコッカス・ミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ）、トレポネーマ（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ）属種、トレポネーマ・パリズム（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐａｌｌｉｄｕｍ）、ビブリオ（Ｖｉｂｒｉｏ）属種、ビブリオ・コレラエ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ）及びエルシニア（Ｙｅｒｓｉｎｉａ）属種から選択される細菌によるものである。
【０１９２】
例えば、本発明の１実施形態において、真菌感染は、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属種、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属種、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ）、カンジダ・トロピカリス（Ｃａｎｄｉｄａ  ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ）、クリプトコッカス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属種、クリプトコッカス・ネオフォルマンス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）、エンタモエバ・ヒストリチカ（Ｅｎｔａｍｏｅｂａ  ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ）、ヒストプラズマ・カプスラツム（Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ  ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ）、リーシュマニア（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ）属種、ノカルジア・アステロイデス（Ｎｏｃａｒｄｉａ  ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ）、プラスモジウム・ファルシパルム（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）、トキソプラズマ・ゴンジイ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｇｏｎｄｉｉ）、トコモナス・バギナリス（Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ  ｖａｇｉｎａｌｉｓ）、トキソプラズマ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ）属種、トキソプラズマ・ブルセイ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｂｒｕｃｅｉ）、シストソーマ・マンソニ（Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ  ｍａｎｓｏｎｉ）、フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属種、及びトリコフィトン（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ）属種から選択される真菌によるものである。
【０１９３】
例えば、本発明の１実施形態において、寄生生物感染は、プラスモジウム（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ）属種、トキソプラズマ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ）属種、エンタモエバ（Ｅｎｔａｍｏｅｂａ）属種、バベシア（Ｂａｂｅｓｉａ）属種、トリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ）属種、リーシュマニア（Ｌｅｓｈｍａｎｉａ）属種、ニューモシスティス（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ）属種、トリコモナス（Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ）属種、ジアルジア（Ｇｉａｒｄｉａ）属種及びシソストマ（Ｓｃｈｉｓｏｓｔｏｍａ）属種から選択される寄生生物によるものである。
【０１９４】
本発明の１実施形態において、がんは、メラノーマ、肺がん、結腸直腸がん、卵巣がん、肝臓がん、前立腺がん又は乳がんである。
【０１９５】
本発明の１実施形態において、ワクチンは、サイトカイン、ＧＭ−ＣＳＦ（顆粒球マクロファージコロニー刺激因子）、ＩＬ２、ＩＬ５又はＩＬ１０などの免疫刺激剤に関連する。
【０１９６】
「に関連する」という用語は、成分、免疫刺激剤のような別の剤とともにワクチン組成物を、例えば同時送達用に単独組成物に製剤することができ、又は２以上の組成物に別個に（例えば、キット）製剤することができることを示す。各成分は、他の成分を投与する時と異なる時点で対象者に投与することができる。例えば、各投与は、所定の期間をかけて間隔を置いて、非同時に（例えば、別個に又は順次）行うことができる。さらに、別個の成分を同一経路若しくは異なる経路によって対象者に投与することができる。他方の成分がワクチン組成物の一部として製剤されている場合、本発明の１実施形態では、それは、再構成されるまで他方の組成物成分から物理的に分離された状態に維持されている。
【０１９７】
下記の実施例は、本発明についての理解をさらに深めるためのものである。
【０１９８】
実施例１
本実施例は、予め作られたアルミニウムアジュバントからのアルミニウムアジュバント凍結乾燥ビーズの製造、及び冷凍若しくは解凍誘発の凝集をほとんど起こすことのない再構成を示す。
【０１９９】
以下の成分を用いて、本実施例で記載のワクチンを形成した。
【０２００】
（１）（２）で再構成したプレフォーム乾燥アルミニウムアジュバント（例：凍結乾燥ビーズ）
（２）以下を含む液体（図１参照）
・水
・任意に塩、緩衝剤、界面活性剤及び／又は賦形剤
・任意に抗原
・任意に追加のアジュバント
・任意に保存剤。
【０２０１】
本実施例における実施形態：
（１）ＭＡＰＡ（リン酸アルミニウムアジュバント）と製剤３又は製剤２の前凍結乾燥組成物の凍結乾燥ビーズ。
【０２０２】
表１．凍結乾燥前の濃度
【表１】
2021501144.tif 000003
【０２０３】
アルミニウムアジュバントの３種類の異なる製剤を調製した。
【０２０４】
製剤１
・１２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント
・１５０ｍＭ塩化ナトリウム
製剤２
・１２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント
・１６％（重量／体積）トレハロース
・７０ｍＭ塩化ナトリウム
・０．５ｍＭヒスチジン塩基
製剤３
・６２５ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント
・２３％（重量／体積）トレハロース
・３５ｍＭ塩化ナトリウム
・０．８ｍＭヒスチジン塩基
【０２０５】
製剤＃２及び＃３を、リオスフィア（ｌｙｏｓｐｈｅｒｅ）として調製した。即ち、懸濁液を混和し、深ウェル多チャンネルピペットプレートに充填し、そして、各懸濁液の小分け量５０μＬを、超低温金属表面上に滴下して（「ＣＲＹＯＭＥＫ」を用いて）、５０μＬ液滴が非常に急速に冷凍される（同様のプロセスを、ピペットを手で用い、液体窒素冷却した金属板上に１００μＬずつを滴下することによっても行った。）。これらのビーズを、それらが凍結乾燥されるまで冷凍状態に維持した（ターゲット：−７０℃以下）。凍結乾燥を、好適な凍結乾燥サイクルでＬＹＯＳＴＡＲＩＩユニットで行った。
【０２０６】
冷凍及び／又は解凍誘発凝集は、一般に、ワクチン又はアルミニウムアジュバントに対するダメージの証拠と解釈される。図２に示したように、１回も冷凍されたことがない製剤＃１中の機械的にサイズ低下したアジュバントは、静的光散乱によって測定される予想粒径分布を有していた。沈降、固体冷凍し、解凍した製剤＃１中のアジュバントは、かなりの凝集があった。製剤＃２及び＃３は、ビーズとして冷凍し、凍結乾燥し、水で再構成した後、１回も冷凍されたことがない製剤＃１中のアジュバントと一致する粒径分布を有していた。再構成した凍結乾燥ビーズは、冷凍及び解凍していた製剤＃１と比較して非常に異なる粒径分布を有していた。再構成した凍結乾燥ビーズは、冷凍及び冷凍液体及び冷凍乾燥ビーズとしての保存を行っていたが、凝集の証拠を示さなかった。乾燥ビーズは、室温以上で数時間、数日間、数週間及びそれ以上、物理的に安定なままであった。驚くべきことに、製剤＃２及び＃３からの再構成した凍結乾燥ビーズ間で粒径分布差が認められた。理論に拘束されることを望むものではないが、これは、相対的に低いアルミニウムアジュバント濃度、相対的に高いトレハロース濃度、相対的に低い塩化ナトリウム濃度、相対的に高いヒスチジン塩基濃度、及び／又はｐＨ差のためであろう。
【０２０７】
製剤２について、アルミニウムアジュバントの高トレハロース中懸濁液を、沈降、冷凍、及び次に解凍と、凍結乾燥ビーズとして冷凍（超低温プレート上への再懸濁した懸濁液の液滴をディスペンス）、凍結乾燥及び再構成との間で、比較を行った。静的光散乱測定（図３）に基づいて、恐らく高トレハロース濃度のために若干の冷凍−解凍保護があるように思われたが、同じ製剤についての凍結乾燥ビーズプロセスは、より小さい粒径を示し、凝集からかなり良好に保護された。
【０２０８】
実施例２
本実施例は、ほとんど冷凍又は解凍誘発凝集を起こすことなく、アルミニウムアジュバント凍結乾燥ビーズ（予め作られたアルミニウムアジュバントから製造）、及び抗原凍結乾燥ビーズの共再構成によりワクチンを製造することを示す。
【０２０９】
下記の成分を用いて、本実施例で記載のワクチンを形成した。
【０２１０】
（１）プレフォーム乾燥アルミニウムアジュバント（例：凍結乾燥ビーズ）
（２）（３）で再構成した製剤化抗原；
（３）以下を含む液体
・水
・任意に塩、緩衝剤、界面活性剤及び／又は賦形剤
・任意に抗原
・任意に追加のアジュバント
・任意に保存剤。
【０２１１】
図４を参照する。
【０２１２】
本実施例における実施形態：
（１）ＭＡＰＡと製剤３又は製剤２の前凍結乾燥組成物の凍結乾燥ビーズ
（２）１５価（図５にデータ）、１価３型（データは不図示）、１価１９Ａ型（図５にデータ）肺炎球菌多糖タンパク質複合体抗原を含むＰＣＶ抗原製剤であって、乾燥前に、
・３２０ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰｓ（肺炎球菌多糖）ＣＲＭ−ＰｎＰｓ複合体抗原
・１００ｍＭヒスチジン
・２０％（重量／体積）トレハロース
・５０ｍＭ塩化ナトリウム
・０．１％ポリソルベート２０
・ｐＨ６〜７．５、
を含む製剤。
【０２１３】
一つの抗原（「一価」）又は複数の抗原（「多価」、又は「組み合わせ」）を有するワクチンを、アルミニウムアジュバント（製剤＃３）の乾燥凍結乾燥ビーズを製剤化抗原若しくは抗原の凍結乾燥ビーズと共パッケージ化することで製造した。乾燥ビーズに水を加えて、アルミニウム−アジュバントワクチンを再構成した。
【０２１４】
製剤１
・１２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント
・１５０ｍＭ塩化ナトリウム
製剤３（アルミニウムアジュバントの凍結乾燥ビーズ）
・６２５ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント
・２３％（重量／体積）トレハロース
・３５ｍＭ塩化ナトリウム
・０．８ｍＭヒスチジン塩基
製剤４（抗原を含む凍結乾燥ビーズ用）
・２０％（重量／体積）トレハロース
・５０ｍＭヒスチジン（塩基）
・５０ｍＭヒスチジン塩酸塩
・３２０ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰｓ（肺炎球菌多糖体）複合体抗原、１９Ａ型
・５０ｍＭ塩化ナトリウム
・０．１％ポリソルベート２０
・ｐＨ６
製剤５（複数の異なる抗原を含む凍結乾燥ビーズ用）
・２０％（重量／体積）トレハロース
・１００ｍＭヒスチジン（塩基）
・３２０ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰｓ（肺炎球菌多糖体）複合体抗原、異なる種類の多糖との１５の複合体の混合物
・５０ｍＭ塩化ナトリウム
・０．１％ポリソルベート２０
・ｐＨ７．５
製剤６Ａ又は６Ｂ（製剤３＋製剤４、又は製剤３＋製剤５の凍結乾燥ビーズの再構成後の製剤）
・１３．２％（重量／体積）トレハロース
・２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント
・６４ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰｓ複合体抗原、全種類の１９Ａ型（Ａ）又は１５のＰｎＰｓ型を含む混合物（Ｂ）
・２４ｍＭ塩化ナトリウム
・２０．３ｍＭヒスチジン（塩基）
・０．０２％ポリソルベート２０。
【０２１５】
静的光散乱（ＳＬＳ）測定を行って、冷凍及び冷凍／解凍されたことがないアルミニウムアジュバント、及び再構成後のアルミニウムアジュバントの凍結乾燥ビーズの粒径分布を、アルミニウムアジュバント凍結乾燥ビーズと抗原凍結乾燥ビーズを共パッケージ化し、そして一緒に再構成することで製造されたワクチン（アルミニウムアジュバント＋１以上の抗原）とを比較した（図５）。この方法で調製されたワクチンは、全く冷凍されていないアルミニウムアジュバントと同様の粒径分布を示し、冷凍若しくは解凍凝集の証拠は示さなかった。
【０２１６】
実施例３
本実施例は、バイアル中（又は再構成チャンバ中）で、一緒にパッケージ化されているが分離されている、反応してアルミニウムアジュバントを形成するアルミニウム含有溶液及びリン酸塩／塩基含有溶液の凍結乾燥ビーズを再構成することによるアルミニウムアジュバントの製造を示す。
【０２１７】
下記の成分を用いて、本実施例で記載のワクチンを形成した。
【０２１８】
（１）アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の一部（例えば、アルミニウム含有化合物）を含む乾燥製剤
（２）アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の他のもの（例えば、リン酸含有化合物及び／又は塩基）を含む（３）で再構成した乾燥製剤
（３）以下を含む液体
・水
・任意に塩、緩衝剤、界面活性剤及び／又は賦形剤
・任意に抗原
・任意に別のアジュバント
・任意に保存剤。
【０２１９】
図６を参照する。
【０２２０】
本実施例における実施形態：
（凍結乾燥前の濃度）
（１）９２．６６ｍＭ塩化アルミニウム、２５％（重量／体積）トレハロース；
（２）９２．６６ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム、２５％（重量／体積）トレハロース； 
（２）９２．４７ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム、２４．９５％（重量／体積）トレハロース；又は
（２）９２．２９ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム、２４．９％（重量／体積）トレハロース。
【０２２１】
アルミニウムアジュバントは、沈殿反応を起こすのに十分な塩基が提供される場合、アルミニウム化合物含有溶液をリン酸含有溶液及び／又は塩基提供溶液と反応させることで製造することができる。アルミニウム及びリン酸含有溶液は、微粒子状懸濁液ではなく、アルミニウムアジュバントにダメージを与え得る冷凍−解凍誘発凝集を起こさない。バイアル中又は送達機器中で形成され、そして場合によっては、注射直前まで、アルミニウムアジュバントの形成を遅延させることで、冷凍−解凍誘発アジュバント凝集の回避を含む、製造及び輸送上の簡便性を達成することができる。
【０２２２】
アルミニウム含有化合物の一つの溶液、及びリン酸塩／塩基含有化合物の三つの溶液を調製した。
【０２２３】
製剤１
・１２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント
・１５０ｍＭ塩化ナトリウム
製剤２
・１２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント
・１６％（重量／体積）トレハロース
・７０ｍＭ塩化ナトリウム
・０．５ｍＭヒスチジン塩基
製剤７（アルミニウム含有化合物）
・９２．６６ｍＭ塩化アルミニウム
・２５％（重量／体積）トレハロース
製剤８Ａ（リン酸塩／塩基含有化合物）
・９２．６６ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム
・２５％（重量／体積）トレハロース
製剤８Ｂ（リン酸塩／塩基含有化合物）
・９２．４７ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム
・２４．９５％（重量／体積）トレハロース
・１０ｍＭ水酸化ナトリウム
製剤８Ｃ（リン酸塩／塩基含有化合物）
・９２．２９ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム
・２４．９％（重量／体積）トレハロース
・２０ｍＭ水酸化ナトリウム。
【０２２４】
製剤７の冷凍及び凍結乾燥ビーズを、製剤８の冷凍及び凍結乾燥ビーズと一緒にパッケージ化した（Ａ、Ｂ、又はＣ）。水の添加による凍結乾燥ビーズの再構成によってアルミニウムアジュバント沈殿反応が開始し、それは急速に起こった。得られたアルミニウムアジュバント懸濁液の粒径分布を静的光散乱によって測定し、冷凍及び冷凍／解凍されたことがない機械的にサイズ低下したアルミニウムアジュバント（製剤１）と比較した。粒径は、冷凍されたことがない生理食塩水中の機械的にサイズ低下したアルミニウムアジュバントより大きいように見えたが、冷凍−解凍によって凝集した同じアルミニウムアジュバントより有意に小さかった（図７）。生理食塩水中の機械的にサイズ低下したアルミニウムアジュバントよりサイズ上昇があるにも拘わらず、バイアル中若しくは機器中の再構成によるアルミニウムアジュバント形成反応は、製造及び輸送の柔軟性における大幅な改善、及び、冷凍−解凍凝集したアルミニウムアジュバントに勝る品質を表し得るものであり、別の試験とともにワクチンにおいて許容でき、有効であることを証明し得る。
【０２２５】
実施例４
本実施例は、バイアル中（又は再構成チャンバ中）で反応してアルミニウムアジュバントを形成する一緒にパッケージ化されているが分離されているアルミニウム含有溶液及びリン酸塩／塩基含有溶液の凍結乾燥ビーズの再構成によるワクチン（アルミニウムアジュバント＋抗原又は抗原）の製造、及びその新たに形成されたアルミニウムアジュバント懸濁液の使用による抗原凍結乾燥ビーズの再構成による完全ワクチンの形成を示す。
【０２２６】
下記の成分を用いて、本実施例に記載のワクチンを形成した。
【０２２７】
（１）アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の一部（例えば、アルミニウム含有化合物）を含む乾燥製剤
（２）（３）によって再構成される、アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の他のもの（例えば、リン酸含有化合物及び／又は塩基）を含む乾燥製剤
（３）以下を含む液体；
・水
・任意に塩、緩衝剤、界面活性剤及び／又は賦形剤
・任意に抗原
・任意に追加のアジュバント
・任意に保存剤
であって、再構成された、新たに形成されたアルミニウムアジュバントを用いて（４）を再構成するもの
（４）製剤された抗原。
【０２２８】
図８を参照する。
【０２２９】
本実施例における実施形態：
（１）９２．６６ｍＭ塩化アルミニウム、２５％（重量／体積）（乾燥前）
（２）９２．６６ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム、２５％（重量／体積）トレハロース（乾燥前）
（４）１５価抗原、乾燥前製剤：
・３２０ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰｓ（肺炎球菌多糖）複合体抗原
・５０ｍＭヒスチジン塩基
・５０ｍＭヒスチジン塩酸塩
・２０％（重量／体積）トレハロース
・５０ｍＭ塩化ナトリウム
・０．１％ポリソルベート２０
・ｐＨ６。
【０２３０】
１価（一つの抗原型）及び多価（複数の抗原型の組み合わせ）を、複数の方法によって製造した。
【０２３１】
方法１
・プレフォームアルミニウムアジュバントの凍結乾燥ビーズを製造する（機械的にサイズ低下）。
【０２３２】
・製剤された抗原又は抗原組み合わせの凍結乾燥ビーズを製造する。
【０２３３】
・アルミニウムアジュバント及び抗原の凍結乾燥ビーズを共パッケージ化する。
【０２３４】
・一緒に再構成する。
【０２３５】
方法２
・アルミニウム含有化合物の凍結乾燥ビーズを製造する。
【０２３６】
・リン酸塩／塩基含有化合物の凍結乾燥ビーズを製造する。
【０２３７】
・製剤された抗原又は抗原組み合わせの凍結乾燥ビーズを製造する。
【０２３８】
・アルミニウム及びリン酸塩／塩基含有化合物の凍結乾燥ビーズを共パッケージ化する。
【０２３９】
・再構成を行って、アルミニウムアジュバント形成反応を行わせる。
【０２４０】
・アルミニウムアジュバントを用いて、抗原凍結乾燥ビーズを再構成する。
【０２４１】
静的光散乱測定によって、粒径分布の比較を行った。本実施例中の比較のための関連製剤には、下記のものを含む。
【０２４２】
製剤１
・１２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント
・１５０ｍＭ塩化ナトリウム
製剤３
・６２５ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント
・２３％（重量／体積）トレハロース
・３５ｍＭ塩化ナトリウム
・０．８ｍＭヒスチジン塩基
製剤７（アルミニウム含有化合物）
・９２．６６ｍＭ塩化アルミニウム
・２５％（重量／体積）トレハロース
製剤８Ａ（リン酸塩／塩基含有化合物）
・９２．６６ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム
・２５％（重量／体積）トレハロース
製剤９（複数の異なる抗原を含む凍結乾燥ビーズ用）
・２０％（重量／体積）トレハロース
・５０ｍＭヒスチジン（塩基）
・５０ｍＭヒスチジン塩酸塩
・３２０ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰｓ（肺炎球菌多糖）ＣＲＭ−ＰｎＰｓ複合体抗原
・５０ｍＭ塩化ナトリウム
・０．１％ポリソルベート２０
・ｐＨ６。
【０２４３】
生理食塩水中の冷凍アルミニウムアジュバント（製剤１、冷凍及び解凍）は、冷凍−解凍凝集によってダメージを受けるのが一般に受け入れられている。方法１によって製造された多価ワクチン（予め作られた機械的にサイズ低下させたアルミニウムアジュバントの凍結乾燥ビーズ）によって、最も小さい粒径のアジュバントが得られた（図９）。方法２によって製造された多価ワクチン（共再構成時に反応してアルミニウムアジュバントを形成するアルミニウム及びリン酸塩／塩基含有化合物の凍結乾燥ビーズ）は相対的に大きい粒径を有していたが、それでもまだ、抗原を持たない冷凍−解凍凝集アルミニウムアジュバントより有意に小さかった。方法２から得られるその相対的に大きい粒径のワクチンの正確な性質についてはまだ十分に理解されていないが、それは冷凍−解凍凝集の結果ではない。機械的にサイズ低下したアルミニウムアジュバントの再構成凍結乾燥ビーズを用いて製造したワクチンよりサイズが大きいにも拘わらず、アルミニウム及びリン酸塩／塩基溶液のバイアル内若しくは機器内再構成によるアルミニウムアジュバント形成反応と、次に、その新たに形成されたアジュバントによる凍結乾燥抗原の再構成は、多くの現在のワクチンで存在する冷凍−解凍ダメージのリスクを回避することができ、製造及び輸送の柔軟性における大幅な改善を表すものと考えられる。さらなる試験を行えば、それはワクチンにおいて許容され、有効であることが証明できる。
【０２４４】
実施例５
本実施例は、アルミニウム−及びリン酸含有化合物の液体溶液（まだ、アルミニウムアジュバント懸濁液形成反応を行っていないもの）を液体状態又は凍結乾燥状態のいずれかの製剤化抗原と組み合わせることで、１以上の抗原存在下でアルミニウムアジュバント形成反応を行う、１価及び多価ＨＰＶワクチンの製造を示す。
【０２４５】
（１）アルミニウム−及びリン酸含有化合物の溶液（アルミニウムアジュバント懸濁液形成反応を完了するのに十分な塩基を含まない）を、製剤中、液体（２）若しくは凍結乾燥（３）抗原と組み合わせると、緩衝剤、塩、及び／又は塩基を含む製剤化抗原によって、抗原存在下でのアルミニウムアジュバント沈殿反応が完了する。図１０を参照する。
【０２４６】
本実施例における実施形態：
（１）等体積の３７．０８ｍＭ塩化アルミニウム／水と３３．３８ｍＭリン酸ナトリウムｐＨ７．０／水を混和し、酸性ｐＨの１８．５４ｍＭ塩化アルミニウム、１６．６９ｍＭリン酸ナトリウムとなる溶液。実施例５における比較の一部については、これをさらに水で１：１希釈する。
【０２４７】
（２）（５０、８０、又は７５）ｍＭ二塩基リン酸ナトリウム、（５０、２０、又は２５）ｍＭ一塩基リン酸ナトリウム、１６０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １６型、５ｍＭヒスチジン、１２５ｍＭ塩化ナトリウム、０．００５％ポリソルベート８０／水。
【０２４８】
（３）（２０又は４２．５）ｍＭヒスチジン塩基、４．５％ショ糖、ＨＰＶ  ＶＬＰ  ６型（４０ｍｃｇ／ｍＬ）、１１型（８０ｍｃｇ／ｍＬ）、１６型（８０ｍｃｇ／ｍＬ）、及び１８型（４０ｍｃｇ／ｍＬ）、１２５ｍＭ塩化ナトリウム、０．００５％ポリソルベート８０、凍結乾燥品。
【０２４９】
アルミニウム−及びリン酸含有化合物の溶液（アルミニウムアジュバント懸濁液形成反応を完了させるのに十分な塩基を含まない）を、単一ＶＬＰ型（液体製剤）又は複数ＶＬＰ型（凍結乾燥製剤）の製剤されたＨＰＶウィルス様粒子と混合した。製剤化抗原とともに存在する緩衝剤は、抗原存在下でのアルミニウムアジュバント形成反応を可能とするのに不足している塩基を提供した。これらの反応は、ワクチンバイアル又は送達機器中での場合のように小体積（例えば１ｍＬに１ｍＬを加える）で行った。アッセイを行って、アルミニウムアジュバント形成反応前後における抗原及びワクチンの特性を決定した。これらには、ｐＨ、動的光散乱によるウィルス様粒子平均粒径（アルミニウムアジュバント溶解後）、及びＢｉａｃｏｒｅによるウィルス様粒子相対効力（アルミニウムアジュバント溶解後）を含んだ。さらに試験を行うことで、バイアル又は送達機器中、抗原の存在下でのアルミニウムアジュバントの形成によって作られたＨＰＶワクチンが、許容でき、有効であることを証明することができる。
【０２５０】
製剤１１
・１８．５４ｍＭ塩化アルミニウム・６水和物
・１６．６９ｍＭリン酸ナトリウム
・水中、酸性ｐＨ
製剤１７
・５０ｍＭ二塩基リン酸ナトリウム
・５０ｍＭ一塩基リン酸ナトリウム
・１６０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １６型
・５ｍＭヒスチジン
・１２５ｍＭ塩化ナトリウム
・０．００５％ポリソルベート８０
・水中
製剤１８
・８０ｍＭ二塩基リン酸ナトリウム
・２０ｍＭ一塩基リン酸ナトリウム
・１６０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １６型
・５ｍＭヒスチジン
・１２５ｍＭ塩化ナトリウム
・０．００５％ポリソルベート８０
・水中
製剤１９
・７５ｍＭ二塩基リン酸ナトリウム
・２５ｍＭ一塩基リン酸ナトリウム
・１６０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １６型
・５ｍＭヒスチジン
・１２５ｍＭ塩化ナトリウム
・０．００５％ポリソルベート８０
・水中
製剤２０
・２０ｍＭヒスチジン塩基
・４．５％ショ糖
・４０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  ６型
・８０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １１型
・８０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １６型
・４０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １８型
・１２５ｍＭ塩化ナトリウム
・０．００５％ポリソルベート８０
・凍結乾燥
製剤２１
・４２．５ｍＭヒスチジン塩基
・４．５％ショ糖
・４０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  ６型
・８０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １１型
・８０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １６型
・４０ｍｃｇ／ｍＬのＨＰＶ  ＶＬＰ  １８型
・１２５ｍＭ塩化ナトリウム
・０．００５％ポリソルベート８０
・凍結乾燥
製剤２２
・９．２７ｍＭ塩化アルミニウム・６水和物
・８．３４ｍＭリン酸ナトリウム
・水中、酸性ｐＨ。
【０２５１】
表２．各種製剤の相対抗原性
【表２】
2021501144.tif 000004
【０２５２】
実施例６
本実施例は、アルミニウム含有化合物及びリン酸含有化合物を含む液体溶液（前記溶液は、自体で反応して、アルミニウムアジュバント懸濁液を形成して固体を沈殿させるものではない。）を、アルミニウムアジュバント形成反応を完了させるのに必要な塩基を提供する凍結乾燥若しくは噴霧乾燥製剤と組み合わせることによる、アルミニウムアジュバントの製造を示す。
【０２５３】
下記の成分を用いて、本実施例に記載のワクチンを形成した。
【０２５４】
（１）（２）で再構成される、アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の一部（例えば、リン酸塩及び／又は緩衝剤及び／又は塩基、任意に緩衝剤及び／又は賦形剤、任意に別のアジュバント、任意に保存剤とともに製剤された抗原）を含む乾燥製剤；
（２）以下を含む液体
・水
・アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の他のもの（例えば、アルミニウムアジュバント沈殿反応を完了させるのに十分な塩基を持たない、アルミニウム含有化合物及びリン酸含有化合物）
・任意に緩衝剤、塩、界面活性剤及び／又は賦形剤
・任意に別のアジュバント
・任意に保存剤。
【０２５５】
本実施例における実施形態：
（１）（噴霧乾燥前）：１％ショ糖、９％マンニトール、５０ｍＭリン酸塩、ｐＨ７．４又はｐＨ７．８を含む噴霧乾燥製剤；又は（選択肢１）（凍結乾燥前）６％ショ糖、１００ｍＭヒスチジン、ｐＨ６．０又は７．０又は７．４を含むバイアル中の凍結乾燥製剤
（２）１０．４９ｍＭ塩化アルミニウム、９．４４ｍＭリン酸ナトリウム、水中、酸性ｐＨ。
【０２５６】
凍結乾燥及び噴霧乾燥製剤を製造した。アルミニウム−及びリン酸含有化合物の溶液（アルミニウムアジュバント懸濁液と同じものではない）を凍結乾燥又は噴霧乾燥製剤に加えることで、アルミニウムアジュバントが形成された。アルミニウムアジュバント形成反応を起こさせるのに必要な量の塩基は、凍結乾燥又は噴霧乾燥製剤によって提供された。ワクチンの一部の静的光散乱測定からの最終ワクチンのｐＨ及び粒径中央値ｄ（０．５）を測定した。反応完了すると、凍結乾燥サンプル用に形成されたアルミニウムアジュバントの濃度は、２６６ｍｃｇＡｌ／ｍＬであろう。
【０２５７】
製剤２３
・１０．４９ｍＭ塩化アルミニウム
・９．４４ｍＭリン酸ナトリウム
・水中、酸性ｐＨ
製剤２４
・６％ショ糖
・１００ｍＭヒスチジン
・ｐＨ７．６、凍結乾燥
製剤２５
・６％ショ糖
・１００ｍＭヒスチジン
・ｐＨ７．０、凍結乾燥
製剤２６
・６％ショ糖
・１００ｍＭヒスチジン
・ｐＨ６．０、凍結乾燥
製剤２７
・１％ショ糖
・９％マンニトール
・５０ｍＭリン酸塩
・ｐＨ７．４、噴霧乾燥
製剤２８
・１％ショ糖
・９％マンニトール
・５０ｍＭリン酸塩
・ｐＨ７．８、噴霧乾燥。
【０２５８】
表３．各種製剤の粒径中央値
【表３】
2021501144.tif 000005
【０２５９】
実施例７
本実施例は、アルミニウム含有溶液、リン酸塩／塩基含有溶液、及び製剤化抗原の凍結乾燥ビーズの共パッケージ化によるワクチンの製造、及び液体による再構成による抗原存在下での反応及びアルミニウムアジュバント形成を示す。
【０２６０】
下記の成分を用いて、本実施例に記載のワクチンを形成した。
【０２６１】
（１）アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の一部（例えば、アルミニウム含有化合物）を含む乾燥製剤
（２）アルミニウムアジュバントを形成するのに必要な反応物の他のもの（例えば、リン酸含有化合物及び／又は塩基）を含む乾燥製剤
（３）抗原を含む乾燥製剤
１〜３のいずれも保存剤を含んでいても良く、（４）によって再構成される。
【０２６２】
（４）
・水
・任意に緩衝剤、塩、界面活性剤及び／又は賦形剤
・任意に抗原
・任意に別のアジュバント
・任意に保存剤
を含む液体。
【０２６３】
図１２を参照する。
【０２６４】
本実施例における実施形態：
（１）凍結乾燥前、９２．６６ｍＭ塩化アルミニウム、２５％（重量／体積）トレハロース
（２）凍結乾燥前、９２．６６ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム、２５％（重量／体積）トレハロース
（３）凍結乾燥前、以下を含む製剤化抗原
・３２０ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰｓ（肺炎球菌多糖）複合体抗原（多糖１９Ａ型）
・１００ｍＭヒスチジン
・２０％（重量／体積）トレハロース
・５０ｍＭ塩化ナトリウム
・０．１％ポリソルベート２０
・ｐＨ７．５。
【０２６５】
アルミニウム含有化合物の凍結乾燥ビーズ、リン酸塩／塩基含有化合物の凍結乾燥ビーズ、及び抗原製剤の凍結乾燥ビーズを製造した。これら３種類の凍結乾燥ビーズを共パッケージ化し、水で再構成することで、ワクチンを作った。再構成により、抗原存在下でのアルミニウムアジュバント形成反応が起こった。
【０２６６】
製剤４（１価複合体ワクチン（下記に示す１９Ａ型）を含む凍結乾燥ビーズ用）抗原
・２０％（重量／体積）トレハロース
・１００ｍＭヒスチジン（塩基）
・３２０ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰＳ（肺炎球菌多糖）複合体抗原（多糖１９Ａ型）
・５０ｍＭ塩化ナトリウム
・０．１％ポリソルベート２０
製剤７（アルミニウム含有化合物）
・９２．６６ｍＭ塩化アルミニウム
・２５％（重量／体積）トレハロース
製剤８Ａ（リン酸塩／塩基含有化合物）
・９２．６６ｍＭ三塩基リン酸ナトリウム
・２５％（重量／体積）トレハロース。
【０２６７】
図１３における粒径分析を参照する。アルミニウム含有化合物、リン酸塩／塩基含有化合物、及び抗原（再構成時に、抗原存在下で、アルミニウムアジュバントの形成を生じる。）を含む凍結乾燥ビーズを共パッケージ化（バイアル又は送達機器中）することで作られるワクチンは、許容され、有効であり得る。
【０２６８】
実施例８
本実施例は、抗原存在下でアルミニウムアジュバントを形成するアルミニウム及びリン酸塩／塩基含有化合物の反応による多価ワクチンの製造を示す。
【０２６９】
本実施例は、バイアル又は小容器に二つの液体溶液を充填して、アルミニウムアジュバントを形成することで（任意に、抗原、塩、緩衝剤、賦形剤、洗浄剤、界面活性剤、保存剤、安定剤、色素、指示剤の存在下に）製造される製剤に関する。
【０２７０】
１実施形態において（図１４を参照する）、
（１）アルミニウム含有化合物及びリン酸含有化合物を含むが、アルミニウムアジュバント沈殿反応を完了させるのに十分な塩基を持たない溶液をバイアルに加え、次に、等体積の
（２）アルミニウムアジュバント沈殿反応を完了させるのに必要な塩基の残りを提供する緩衝剤若しくは塩若しくは塩基を含み、任意に抗原及び／又は他の成分を含む溶液を加える。
【０２７１】
本実施例における実施形態：
（１）１８．５４ｍＭ塩化アルミニウム（塩化アルミニウム・６水和物から）、１６．６９ｍＭリン酸ナトリウム／水、酸性ｐＨ（等体積の３７．０８ｍＭ塩化アルミニウム及び３３．３８ｍＭリン酸ナトリウムｐＨ７の混合物から調製）
（２）以下を含む１５価ＰＣＶ抗原製剤
・１２８ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰｓ（肺炎球菌多糖）複合体抗原
・８０ｍＭヒスチジン、ｐＨ７．０
・６％ショ糖
・１５０ｍＭ塩化ナトリウム。
【０２７２】
ＥＬＩＳＡに基づく相対的効力及び多価ワクチンの蛍光スペクトラムを測定して、抗原の存在下で塩化アルミニウムをリン酸ナトリウム及び十分な塩基と反応させるプロセスが、アジュバント形成／沈殿反応を経験していない抗原と比較して測定される効力若しくは蛍光スペクトラムに悪影響を与えないことが示された。
【０２７３】
ここで、十分な塩基が存在しなかった場合、アルミニウム含有化合物及びリン酸含有化合物が反応して安定な沈殿アルミニウムアジュバントを製造しないであろうことが示された。製剤１１は、アジュバント形成反応に必要な十分な量の塩基を含まず、沈殿アジュバント固体の濁った懸濁液を形成するのではなく、透明のままである。不足している塩基は、８０ｍＭヒスチジン緩衝剤からの製剤１０と混合した場合に提供される。従って、反応に必要な塩基のごく一部を他の成分（本実施例では、アルミニウム含有化合物及びリン酸含有化合物）から離れた状態に維持することが、反応完了及びアルミニウムアジュバント懸濁液の形成を回避するのに十分であり得、懸濁液が形成する前の時点でアジュバント懸濁液の冷凍−解凍凝集の可能性が回避される。
【０２７４】
製剤１０
・１２８ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰＳ（肺炎球菌多糖）複合体抗原（１５の異なる多糖型との複合体）
・８０ｍＭヒスチジン、ｐＨ７．０
・６％ショ糖
・１５０ｍＭ塩化ナトリウム
・水中
製剤１１
・１８．５４ｍＭ塩化アルミニウム・６水和物
・１６．６９ｍＭリン酸ナトリウム
・水中、酸性ｐＨ
製剤１２
・６４ｍｃｇＰｎＰｓ／ｍＬＣＲＭ−ＰｎＰＳ（肺炎球菌多糖）複合体抗原（１５の異なる多糖型との複合体）
・４０ｍＭヒスチジン
・３％ショ糖
・１００ｍＭ塩化ナトリウム
・２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬアルミニウムアジュバント
・水中
・ｐＨ５．９。
【０２７５】
等体積の製剤１０及び製剤１１を混和して、製剤１２を得た。比較物として、等体積の製剤１０及び水を混和し、それによってアルミニウムアジュバントは形成されなかった。両方のサンプルについての抗原効力を、ＥＬＩＳＡアッセイを用いて測定し（図１５）、両方のサンプルの蛍光スペクトラムを測定した（図１６）。これらのアッセイにより、抗原存在下にアジュバント沈殿によって製造されるワクチンの構造及び抗原性は、無アルミニウムアジュバント比較物（又は「モック」）サンプルと同様に見えた。
【０２７６】
実施例９
本実施例は、自動バイアル充填ラインでのアルミニウム含有溶液及びリン酸塩／塩基含有溶液の迅速な順次添加によるアルミニウムアジュバントの製造を示す。
【０２７７】
本実施例は、充填ラインを用いて二つの液体溶液をバイアル中に充填して、アルミニウムアジュバント（任意に、抗原、塩、緩衝剤、賦形剤、洗浄剤、界面活性剤、保存剤、安定剤、色素、指示剤の存在下に）を形成し、次に直ちに反応停止することで形成される製剤に関する。
【０２７８】
例えば（図１７参照）、
（１）アルミニウム含有化合物を含む溶液を加え、次に等体積の
（２）アルミニウムアジュバント沈殿反応を完了させるのに十分なリン酸塩及び／又は塩基を提供するリン酸含有化合物又は緩衝剤又は塩又は塩基を含み、及び任意に抗原及び／又は他の成分を含む溶液。溶液を逆の順序で加えることができ、添加体積を、所望に応じて、意図的に等体積でないように設計することが可能であろう。
【０２７９】
本実施例における実施形態：
（１）１８．５３ｍＭ塩化アルミニウム／水
（２）１００ｍＭリン酸ナトリウム／水、ｐＨ８．１
（選択肢２）１００ｍＭリン酸ナトリウム、９％（重量／体積）ショ糖／水、ｐＨ８．１
（別の選択肢２）１００ｍＭ  Ｔｉｒｓ＊、１８．５３ｍＭリン酸ナトリウム／水、ｐＨ８．１
（＊Ｔｒｉｓは、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンとも称され、他の名称でも知られる。）
複数の溶液をバイアル又はワクチン一次容器に加えて、そのバイアル中で反応を行い、アルミニウムアジュバントを形成することを含むアルミニウムアジュバントの製造方法を示した。典型的なアルミニウムアジュバント製造アプローチと比べて、このアプローチにはいくつかの長所がある。他のアルミニウムアジュバント製造装置及びプロセスが必要なく、バイアル（又は一次容器）充填の既存ユニット操作にアルミニウムアジュバント製造のプロセスを組み込むものである。溶液を無菌濾過してから、無菌充填及びアルミニウムアジュバント形成を行うことができる。それは、プレフォームアルミニウムアジュバント懸濁液の処理及び充填に関連するいくつかの製造上の問題も解消する。溶液は、沈降して不均一になり得る懸濁液と比べて、製造時の作業が容易である。
【０２８０】
アルミニウム含有化合物の溶液及び三つのリン酸塩／塩基含有化合物の溶液のうちのそれぞれ（実証実験当たり一つ、下記にリストアップ）を、充填ライン上の２本の充填針を用いて３ｍＬワクチンバイアルに順次加えて、アルミニウムアジュバントをバイアル内で形成した。ディスペンスした各溶液の体積は、バイアル当たり０．５ｍＬであり、最終体積はバイアル当たり１ｍＬであった。バイアルには、充填ラインでストッパーを取り付けた。充填ラインの速度は、毎分約５３個のバイアルに設定した。
【０２８１】
製剤１３（アルミニウム含有溶液）
・１８．５３ｍＭ塩化アルミニウム
・水中
製剤１４（リン酸塩／塩基含有溶液）
・１００ｍＭリン酸ナトリウム
・ｐＨ８．１、水中
製剤１５（リン酸塩／塩基含有溶液）
・１００ｍＭリン酸ナトリウム
・９％（重量／体積）ショ糖
・ｐＨ８．１、水中
製剤１６（リン酸塩／塩基含有溶液）
・１００ｍＭ  Ｔｒｉｓ（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンとも称される）
・１８．５３ｍＭリン酸ナトリウム
・ｐＨ８．１、水中。
【０２８２】
両方の成分を加え、沈殿反応が完了した後、バイアル中のアルミニウムアジュバントの最終濃度は、２５０ｍｃｇＡｌ／ｍＬであろう。最終アルミニウムアジュバント懸濁液のｐＨを測定し、下記の表に挙げる。
【０２８３】
表４．各種製剤のｐＨ測定
【表４】
2021501144.tif 000006
【０２８４】
アルミニウムアジュバントは、予想された外観を持っており、手技による優しい反転や攪拌によって再懸濁させるのが非常に容易であり、少なくとも５年間、２〜８℃でストッパーを付けたバイアルで保存される。
【０２８５】
実施例１０
本実施例は、アルミニウム含有化合物の溶液とリン酸塩／塩基及び抗原を含む第２の溶液との混合による、反応と抗原存在下でのアルミニウムアジュバントの形成による複数抗原アルミニウムアジュバントワクチンの製造、並びにそのワクチンの対象者への投与を示す。
【０２８６】
本発明は、２つの液体溶液を、バイアル又は小容器＊に充填することで形成される製剤に関する（図１８参照）
（１）アルミニウム含有化合物の溶液を含み、そして
（２）抗原存在下にアルミニウムアジュバント沈殿反応を完了させるための四つの異なる抗原（タンパク質、細菌、毒素又はトキソイド）及び緩衝剤及び塩基源としてのリン酸塩ｐＨ８の溶液を含む。
（＊例えば、等体積、例えばそれぞれ６ｍＬを用いる。）
【０２８７】
本実施例における実施形態：
（１）１８．５４ｍＭ塩化アルミニウム／水．
（２）１００ｍＭリン酸ナトリウム、ｐＨ８、９％ショ糖／水、４種類の抗原：
・抗原１（２０ｍｃｇ／ｍＬ  ｖｐｉ＿５ｍＴｃｄＡ、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．Ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）からの組換え変異体毒素
・抗原２（２０ｍｃｇ／ｍＬ  ｎａｐ＿５ｍＴｃｄＢ、ホルムアルデヒド処理、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．Ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）からの組換えトキソイド）
・抗原３（５．６ｍｃｇ／ｍＬ  ３ｍＣｄｔＡ、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．Ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）からの組換え変異体毒素サブユニット）
・抗原４（４４．４ｍｃｇ／ｍＬ  ＣｄｔＢ、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．Ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）からの毒素サブユニット）
【０２８８】
塩化アルミニウム水溶液をリン酸ナトリウム水溶液及びショ糖水溶液中で製剤した複数種類の抗原と組み合わせて、抗原存在下にアルミニウムアジュバントを形成することで、複数抗原ワクチンを製造した。本方法によって製造したワクチンの体積は、ヒト又は動物対象者についてのほぼ複数用量ワクチン像（ｉｍａｇｅ）とした。ワクチンを対象者（ハムスター）に投与し、その対象者は数ヶ月の期間で４用量の投与をうけた。ワクチン接種を受けた後、抗原が存在するうちの二つについての群平均力価を、抗原／アルミニウム−アジュバント共沈殿ワクチンと３種類の異なる形態のプレフォームアルミニウムアジュバントとともに抗原を含む三つの他の試験群との間で比較した。
【０２８９】
製剤１３（アルミニウム含有溶液）
・１８．５３ｍＭ塩化アルミニウム
・水中
製剤２９
・Ｃ．ディフィシル（Ｃ．  Ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）関連の抗原
○２０ｍｃｇ／ｍＬ  ５ｍＴｃｄＡ
○２０ｍｃｇ／ｍＬ  ５ｍＴｃｄＢ
○５．６ｍｃｇ／ｍＬ  ３ｍＣｄｔＡ
○４４．４ｍｃｇ／ｍＬ  ＣｄｔＢ
・１００ｍＭリン酸ナトリウム、ｐＨ８
・９％ショ糖
・水中。
【０２９０】
等体積（各６ｍＬ）の製剤１３及び製剤２９を混合して、抗原存在下でアルミニウムアジュバントを形成した。ハムスターワクチン接種試験で調べた他のワクチンには、３種類の異なるプレフォームアルミニウムアジュバントと組み合わせた抗原を含む３種類の別のワクチンを含んだ。存在する抗原のうちの二つについてのワクチンにおける免疫原性（群の平均若しくは幾何平均ワクチン接種力価）を、表５に報告している。
【０２９１】
表５．ハムスター試験におけるワクチン免疫原性
【表５】
2021501144.tif 000007
【０２９２】
本明細書においては、例示の実施形態を参照しながら本発明について説明しているが、本発明は、それらに限定されないことは理解すべきである。当業界における通常の技術を持ち、本明細書における内容を知ることができる者であれば、本発明の範囲内である別の改変及び実施形態を認識するであろう。従って、本発明は、本明細書に添付の特許請求の範囲によってのみ限定される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【国際調査報告】
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