(57)【要約】  開示されるのは、大気汚染物質分子及び紫外（ＵＶ）線に対する局所的保護のための方法であって、ａ）第１の生体適合性ポリマー（ＰＢ１）によって大気汚染物質分子に対する反発性及び付着防止性の両方であるポリマーマトリックスを生成するステップ、ｂ）紫外線の影響下で、第２の生体適合性ポリマー（ＰＢ２）がグラフト結合した第１の半導体コロイド（Ｃｏｌ−１）によって、ポリマーマトリックスに浸透した汚染物質分子を光触媒分解し、結果としてフリーラジカルが形成されるステップ、ｃ）少なくとも２つの酸化防止剤によって該フリーラジカルを中和させるステップであって、酸化防止剤は、第１の酸化防止剤（ＡｎｔｉＯｘ−１）が共有結合でグラフト結合した第２の半導体コロイド（Ｃｏｌ−２）の形態にある第１の酸化防止剤であって、第２のグラフト結合したコロイド（Ｃｏｌ−２）が紫外線の影響下で自己再生する、第１の酸化防止剤、及び酸化防止剤とグラフト結合したコロイドの形態では存在しない第２の酸化防止剤（ＡｎｔｉＯｘ−２）である、ステップ、ならびにｄ）第２の酸化防止剤（ＡｎｔｉＯｘ−２）によってポリマーマトリックスを安定化するステップ、を含む方法が開示されている。【特許請求の範囲】
【請求項１】
大気汚染物質分子及び紫外（ＵＶ）線に対する局所的保護、有利には皮膚及び／又は粘膜及び／又は皮膚付属器上に保護を提供する方法であって、
ａ）第１の生体適合性ポリマー（ＢＰ１）によって、皮膚及び／又は粘膜及び／又は皮膚付属器上に、大気汚染物質分子に対して反発性及び付着防止性の両方であるポリマーマトリックスを形成するステップ、
ｂ）紫外線の影響下で、第１の生体適合性ポリマー（ＢＰ１）とは異なる第２の生体適合性ポリマー（ＢＰ２）と共有結合でグラフト結合した第１の半導体コロイド（Ｃｏｌ−１）によって、ポリマーマトリックス内に浸透した汚染物質分子を光触媒分解し、それによりフリーラジカルの形成をもたらすステップ、
ｃ）少なくとも２つの酸化防止剤、すなわち、
第１の酸化防止剤（ＡｎｔｉＯｘ−１）と共有結合でグラフト結合した第２の半導体コロイド（Ｃｏｌ−２）の形態の、第１の酸化防止剤であって、第２のグラフト結合したコロイド（Ｃｏｌ−２）が、次の機序：
・第２のコロイド（Ｃｏｌ−２）から第１の酸化防止剤（ＡｎｔｉＯｘ−１）に向けての電子の移動による第１の酸化防止剤（ＡｎｔｉＯｘ−１）の再生、及び
・紫外線への曝露による第２のコロイド（Ｃｏｌ−２）の再生、
による紫外線の作用の下で自己再生している、第１の酸化防止剤、及び
−酸化防止剤とグラフト結合したコロイドの形態ではない第２の酸化防止剤（ＡｎｔｉＯｘ−２）
によってフリーラジカルを中和させるステップ、ならびに
ｄ）第２の酸化防止剤（ＡｎｔｉＯｘ−２）によってポリマーマトリックスを安定化するステップ、
を含む、上記方法。
【請求項２】
第２の酸化防止剤が第１の生体適合性ポリマーにグラフト結合していることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
請求項１又は請求項２によって定義される方法を実施するのに適した局所化粧組成物であって、
−第１の生体適合性ポリマー、
−第２の生体適合性ポリマーとグラフト結合している第１のコロイド、
−第１の酸化防止剤とグラフト結合した第２のコロイドの形態にある第１の酸化防止剤、及び
−酸化防止剤とグラフト結合しているコロイドの形態にはない第２の酸化防止剤、を含むことを特徴とする、上記局所化粧組成物。
【請求項４】
第２の酸化防止剤が第１の生体適合性ポリマーにグラフト結合していることを特徴とする、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
半導体コロイドＣｏｌ−１及び／又はＣｏｌ−２が、Ｃ、Ｓｉ、Ｇｅ、Ｓｎ、Ｓ、Ｓｅ、Ｔｅ、Ｂ、Ｎ、Ｐ、Ａｓ、Ａｌ、Ｓｂ、Ｇａ、Ｉｎ、Ｃｄ、Ｚｎ、Ｏ、Ｃｕ、Ｃｌ、Ｐｂ、Ｔｌ、Ｂｉ、Ｔｉ、Ｕ、Ｂａ、Ｓｒ、Ｌｉ、Ｎｂ、Ｌａ、Ｉ、Ｍｏ、Ｍｎ、Ｃａ、Ｆｅ、Ｎｉ、Ｅｕ、Ｃｒ、Ｂｒ、Ａｇ、Ｐｔ、Ｈｇ及びこれらの組み合わせを含む群から選択される少なくとも１つの元素によって構成されることを特徴とする、請求項３又は請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
半導体コロイドＣｏｌ−１及び／又はＣｏｌ−２が酸化亜鉛（ＺｎＯ）、又は酸化チタン（ＴｉＯ２）のコロイドであることを特徴とする、請求項３〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
請求項３又は請求項６に記載の組成物であって、
−第１の生体適合性ポリマーが、多糖であり、
−第１及び第２のコロイドが、酸化亜鉛のコロイド又はルチル型二酸化チタン（ＴｉＯ２）のコロイドであり、
−第２の生体適合性ポリマーが、ポリビニルピロリドン、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール、ポリ塩化ビニル、スチレン系、ポリアミド、アクリラート、及びこれらの混合物を含む群から選択され、ならびに
−第１の酸化防止剤及び／又は第２の酸化防止剤が、フェノールアルデヒド又はフェノール酸及びこれらの複合体を含む群から選択され、第１の酸化防止剤が、第２の酸化防止剤とは有利に異なっている、上記組成物。
【請求項８】
多糖がプルランであることを特徴とする、請求項３〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
第２の生体適合性ポリマーがポリビニルピロリドンであることを特徴とする、請求項３〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
第１の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１と共有結合でグラフト結合した第２の半導体コロイドＣｏｌ−２が、
−酸化亜鉛（ＺｎＯ）又は酸化チタン（ＴｉＯ２）のコロイドである第２のコロイドＣｏｌ−２、
−フェノールアルデヒド又はフェノール酸である第１の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１、及び
−Ｃｏｌ−２とＡｎｔｉＯｘ−１との間に配置されたスペーサーアームの形態の共有結合グラフト結合であって、スペーサーアームが、１〜８個の範囲の炭素を、好ましくは２〜４個の範囲の炭素を含み、それ自体をコロイドＣｏｌ−２に共有結合することができるアルコキシシラン官能基と、それ自体を酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１に結合することができるヒドロキシル型、ホスファート型、又はアミン型の官能基とを有する共有グラフト結合、から形成されることを特徴とする、請求項３〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
以下の特徴を有する、請求項３〜１０のいずれか一項に記載の組成物：
−第１の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１は、２−ヒドロキシベンズアルデヒド、３−ヒドロキシベンズアルデヒド、４−ヒドロキシベンズアルデヒド、及び３，４ジヒドロキシベンズアルデヒドを含む群から選択され、かつ
−スペーサーアームは有利には３−（アミノプロピル）トリエトキシシランである。
【請求項１２】
第２の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−２が没食子酸であることを特徴とする、請求項３〜１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
−第１の生体適合性ポリマーは、没食子酸とグラフト結合したプルランであり、第１の生体適合性ポリマーは、組成物の０．１質量％〜２０質量％の範囲で、有利には０．５質量％〜１０質量％の範囲で、好ましくは０．８質量％〜５質量％の範囲であり、
−第１のコロイドは、ＰＶＰとグラフト結合した酸化亜鉛コロイドであり、第１のコロイドは、組成物の０．１質量％〜３０質量％の範囲で、有利には１質量％〜２０質量％の範囲で、好ましくは、５質量％〜９質量％の範囲であり、及び
−第２のコロイドは、フェノールアルデヒド又はフェノール酸又はこれらの複合体とグラフト結合した酸化亜鉛のコロイドであり、第２のコロイドは、組成物の０．１質量％〜１０質量％の範囲で、有利には０．５質量％〜５質量％の範囲で、好ましくは０．６質量％〜２質量％の範囲である、
を特徴とする、請求項３〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
組成物が、保湿剤、粘度制御剤、及び水を含む群から選択される少なくとも１つの添加物をさらに含むことを特徴とする、請求項３〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
請求項３〜１４のいずれか一項に記載の組成物が
−組成物の０．１質量％〜２０質量％の範囲で、有利には１質量％〜１０質量％の範囲で、好ましくは２質量％〜６質量％の範囲であるグリセロール、
−組成物の０．１質量％〜２０質量％の範囲、有利には０．２質量％〜１０質量％の範囲、好ましくは０．５質量％〜５質量％の範囲であるグアーガム、及び
−組成物の３０質量％〜９９．５質量％の範囲、有利には５０質量％〜９０質量％の範囲、好ましくは７０質量％〜８５質量％の範囲である水
をさらに含むことを特徴とする、組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、大気中に存在する汚染物質分子への曝露によって、及び／又は紫外線への曝露によって誘発される有害作用に対する局所的保護を提供する方法に関する。
【０００２】
本発明の使用分野は、特に化粧品、より具体的には汚染防止保護及び日焼け止めの分野に関する。
【背景技術】
【０００３】
皮膚は多機能器官であり、最大の領域に広がる人体の器官でもある。皮膚は、外部環境からの（衝撃、汚染、病原体、又は紫外線からの）保護、温度調節、ホルモン合成（ビタミンＤ、及びさまざまなホルモン）、又は免疫機能を含む、いくつかの基本的な機能を実行する。
【０００４】
皮膚は、持続的に再生され、時間の影響を受ける器官である。皮膚が加齢すると、皮膚の細胞の再生は鈍化する。最も古い細胞が蓄積し、くすんだ又は透明感のない様相及び元気のない皮膚の印象を与え、皮膚は乾燥して薄くなる。並行して、真皮の変化が現れ、脂肪組織及び筋肉組織が喪失するので、支持が失われる。これが皮膚の加齢の過程である。
【０００５】
分子の観点から、皮膚の加齢は細胞修復機序の劣化に関連している。皮膚の加齢は、最初に、遺伝的にプログラムされた個々の「生物時計」によって、次に、「フリーラジカル」として公知の有毒物質によって引き起こされる酸化的損傷に耐える細胞の能力によって決定される。これが、本質的な起源である加齢である。
【０００６】
並行して、外因性の加齢は、各個人に固有の環境要因及び行動によって誘導される。例として、このような外的要因には、喫煙、天然もしくは人工の大気汚染物質への曝露、ストレス、日光への曝露、アルコール消費、又は糖分の多い食事が含まれる。
【０００７】
天然及び人工起源の大気汚染物質の毒性は、フリーラジカル開始反応剤としての該大気汚染物質の活性に関連していることが公知である。
【０００８】
「天然の大気汚染物質」とは、二酸化硫黄又はオゾンなどの自然活動（火山、鉱石、海洋など）によって生成される汚染物質の粒子及び分子を意味する。
【０００９】
「人工の大気汚染物質」とは、多環芳香族炭化水素（ＰＡＨ）、重金属、又は農薬など、人為的活動（工場、自動車エンジンなど）によって生成される汚染物質の粒子及び分子を意味する。
【００１０】
いくつかのこのような汚染物質分子は、炎症、細胞加齢の加速、又はある特定の皮膚癌さえ引き起こすことができる。このような化合物のうち、残留性有機汚染物質（ＰＯＰ）は、健康に最も危険な大気汚染物質の一部である。該ＰＯＰは概して、皮膚の表面に結合する。該ＰＯＰが吸収された後、酸化ストレス現象が起こり、皮膚加齢プロセスが加速する。
【００１１】
同様に、紫外（ＵＶ）線は、細胞の酸化ストレスを引き起こす過剰な酸化促進剤の出現を直接的に又は間接的にもたらす。
【００１２】
酸化促進剤又はフリーラジカルは、不対電子を有する化学種（分子又は原子）として定義してもよい。最も頻度の高いフリーラジカルは、ヒドロキシルラジカル（ＯＨ●）、超酸化物（Ｏ２●−）、一酸化窒素（ＮＯ●）、チオール（ＲＳ●）、又はペルオキシル（ＲＯ２●−）である。フリーラジカルが酸素に相当する場合、ラジカルは、一重項酸素（１Ｏ２）又は超酸化物アニオン（Ｏ２●−）など、「活性酸素種」又は「ＲＯＳ」と呼ばれる。
【００１３】
フリーラジカルは、周囲の分子に対して非常に反応性の高い不対電子により不安定にされている化学分子である。フリーラジカルは、隣接する分子を損なうように中和された酸化促進剤であり、隣接する分子は次に、フリーラジカルになり、これに隣接する分子もまた同じである。この現象は連鎖反応によって伝搬し、このことが酸化ストレスを構成する。
【００１４】
実際、各酸化促進分子は、安定化するために、すなわち中和するために、少なくとも１つの電子を付加する必要がある。
【００１５】
皮膚は、日常的に周囲の環境からの攻撃に直面している。このような攻撃から自身を防御するために、ヒトの身体は、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）、グルタチオンペルオキシダーゼ、又はカタラーゼなどの酸化防止剤を使用した有効な防御系を発達させた。しかしながら、過剰量のフリーラジカルが生成されると、不均衡が確立し、酸化防止剤防御系が圧倒され、皮膚組織に損傷をもたらす。
【００１６】
ＳＯＤの活性は、超酸化物アニオン（Ｏ２●−）を二酸素（Ｏ２）及び過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）へと不均化する触媒活性に対応する。この反応の生成物は、不対電子を有さない場合でさえ、酸素フリーラジカルと見なされ、該生成物は、反応性が高く有害である。例として、鉄の存在下で、過酸化水素は分解し、ほとんどの有機構造に対して毒性の高いヒドロキシルラジカルＯＨ●を生成する。このような生成物は、超酸化物アニオンの不均化の反応によって生成される二次ＲＯＳであると見なされる。
【００１７】
生理学的条件下では、このような不均化は緩徐であり、超酸化物アニオンの半減期が延長され、該二次ＲＯＳの生成によって生体高分子の有害な酸化が生じる。残念ながら、このようなＲＯＳの毒性は、超酸化物アニオンの毒性よりもかなり大きい。
【００１８】
ＳＯＤは、超酸化物アニオンの不均化を触媒し、それゆえ加速させることにより、超酸化物の半減期を短縮させ、したがって、超酸化物アニオンの不均化の反応に二次的に生成されるＲＯＳの酸化促進効果を制限する。
【００１９】
さらに、ＳＯＤはまた、他のＲＯＳ、例えば、１Ｏ２又はＲＯＯを除去することもできる。
【００２０】
実際、ＳＯＤは、すべてのＲＯＳと反応して、それらを安定化し、多電子移動を介してそれらの酸化促進活性を防止する又は中和させることができる酵素である。
【００２１】
それゆえ、該タンパク質は、ＲＯＳを除去するための、それゆえ酸化ストレスを除去するための機序に不可欠な触媒活性を提供する。
【００２２】
化粧品では、数多くの製品が、内在性起源及び／又は外因性起源の加齢に対抗するための「抗フリーラジカル」作用としても公知の抗酸化作用を生じるように設計されている。
【００２３】
現在、ある特定の「汚染防止」組成物は、汚染物質分子に対して付着防止されている特性又は該汚染分子を保管する特性を、皮膚の表面のフィルム中に有することにより、皮膚組織への該汚染物質分子の有害作用を低減させる。
【００２４】
しかしながら、付着防止作用はそれ自体、すべての汚染物質分子が皮膚に向かって通過するのを防止する上で有効であることが示されていない。したがって、汚染物質粒子は皮膚の細胞と接触し、皮膚の加齢を引き起こす。
【００２５】
特に、汚染物質分子をフィルム内に捕捉して保管することに関しては、ｐＨ又は熱の影響の下でフィルムが劣化すると潜在的に有害であることが示されている。実際、このような状況では、高濃度の汚染物質分子が皮膚と接触し、皮膚に浸透して、上述の有害な機序を開始する。
【００２６】
並行して、及び紫外線への曝露と関係する有害作用を除去するために、現行の化粧組成物は、親油性又は親水性であるさまざまな有機的もしくは無機的な日焼け止めの使用、及び／又は完全には有効ではない酸化防止剤の使用を必要とする。
【００２７】
特に汚染及び／又は紫外線によって誘導される酸化ストレスに対する保護は、現行では、例えば、植物抽出物の酸化防止剤の利点を使用することに基づいている。しかしながら、このような製剤は皮膚に浸透し、該製剤は複雑であり、とりわけ溶媒及び防腐剤を含む非常に多数の成分を使用しており、該成分の無害性が短期間又は長期間という点で必ずしも確立されているとは限らない。
【００２８】
それゆえ、該製剤にもかかわらず、提案された解決策の大部分の有効性は十分ではないようである。
【００２９】
現行では、好ましくは大気汚染によって誘導される酸化ストレスから保護するために、特に有効かつ単純な製剤の解決策は開示されていない。
【発明の概要】
【００３０】
本発明が解決することを提案する課題は、大気汚染物質分子への曝露及び／又は紫外線への曝露の有害作用を除去するための、上述の欠点に悩まされない保護方法及び組成物を開発するという課題である。
【００３１】
本出願者は、予期せぬことに、大気汚染物質分子及び／又は紫外線への曝露によって形成される活性酸素種の有害作用、特に酸化ストレスの現象に対する局所的保護を提案することを可能にする方法を開発した。
【００３２】
それゆえ、本発明の利点は以下にある。
−限られた数の化合物を実装すること、
−汚染物質分子の付着防止及びそれへの反発による汚染防止「バリア」作用を初めて提案すること、
−すべての種類のフリーラジカルを中和させること、ならびに
−生体接着特性、酸化防止剤特性、保湿特性を提案すること。
【００３３】
以下の説明では、「汚染物質分子」及び「汚染物質粒子」という用語は、同じ汚染物質の実体を説明するために、区別することなく使用される。
【００３４】
本発明は、大気汚染物質分子及び紫外（ＵＶ）線からヒトを局所的に保護する方法を最初に提供するものであり、該方法は、以下のステップを含む。
ａ）第１の生体適合性ポリマー（ＢＰ１）によって、皮膚及び／又は粘膜及び／又は皮膚付属器上に、大気汚染物質分子に対して付着防止性及び反発性の両方であるポリマーマトリックスを形成するステップ、
ｂ）紫外線の影響下で、第１の生体適合性ポリマー（ＢＰ１）とは異なる第２の生体適合性ポリマー（ＢＰ２）と共有結合でグラフト結合した第１の半導体コロイド（Ｃｏｌ−１）によって、ポリマーマトリックス内に浸透した汚染物質分子を光触媒分解し、それによりフリーラジカルの形成をもたらすステップ、
ｃ）該第１の酸化防止剤（ＡｎｔｉＯｘ−１）と共有結合でグラフト結合した第２の半導体コロイド（Ｃｏｌ−２）の形態で、第１の酸化防止剤によって該フリーラジカルを中和させ、第２のグラフト結合した半導体コロイド（Ｃｏｌ−２）が、電磁放射、好ましくは紫外線の作用の下で、次の機序によって自己再生するステップ：
・第２の半導体コロイド（Ｃｏｌ−２）から該第１の酸化防止剤（ＡｎｔｉＯｘ−１）に向けての電子の移動による第１の酸化防止剤（ＡｎｔｉＯｘ−１）の再生、及び
・電磁放射、好ましくは紫外線への曝露による第２の半導体コロイド（Ｃｏｌ−２）の再生、ならびに
ｄ）第２の酸化防止剤（ＡｎｔｉＯｘ−２）によってポリマーマトリックスを安定化するステップ。
【００３５】
有利には、第２の酸化防止剤（ＡｎｔｉＯｘ−２）は、ステップｃ）によって説明されるように、該フリーラジカルを中和させることに関与する。
【００３６】
好ましくは、第２の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−２は、第１の生体適合性ポリマーＢＰ１にグラフト結合する。
【００３７】
化粧品は概して、使用されるまでに、製造の間（原材料、包装、敷地内の雰囲気、紫外線、スタッフによる取り扱いなど）、又は消費者が使用のために分注又は手に取った際のいずれかにおいてすでに汚染されている。残念ながら、このような汚染は化粧品の早期劣化を生じ、該劣化が使用を不適切にするか、又は消費者を危険にする。このような分解は、特に、フリーラジカルによって誘導される化合物の酸化によって引き起こされることがある。
【００３８】
１つの解決策は、製剤の酸化を制限しかつ製品を経時的により良好に保存するよう、フリーラジカルを除去することにある。
【００３９】
一実施において、第１の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１及び第２の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−２は、特に紫外線への曝露の作用の下で、化粧品製剤において生成されるＲＯＳを除去することに関与する。
【００４０】
詳細には、本発明の方法は、汚染物質粒子に対する、ならびに汚染物質粒子の分解によって及び／又は紫外線によって生成されるフリーラジカルに対する複数レベルの保護を開発することにある。
【００４１】
「局所的保護」という用語は、皮膚及び／又は粘膜及び／又は皮膚付属器を保護することを意味するために使用される。
【００４２】
より明確にするために、「Ｃｏｌ−１／ＢＰ２」という用語は、第２の生体適合性ポリマーＢＰ２と共有結合でグラフト結合した第１の半導体コロイドを意味するために使用される。
【００４３】
より明確にするために、及び以下の説明の残りの部分では、「Ｃｏｌ−２／ＡｎｔｉＯｘ−１」という用語は、第１の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１と共有結合でグラフト結合した本発明の第２の半導体コロイドＣｏｌ−２によって形成される複合体を示すために使用される。
【００４４】
本発明の方法によって実施される付着防止性及び反発性ポリマーマトリックスは、非共有結合かつ可逆的である物理的及び／又は化学的相互作用によって皮膚に生体付着性であるという特性を有する３次元グリッドとして定義することができる。したがって、適用後、生体適合性ポリマーＢＰ１は、皮膚のマイクロレリーフに浸透し、生体付着性現象を促進することによって、化学結合、例えば、静電気力又は水素結合を実施することを可能にする。
【００４５】
この付着防止性及び反発性ポリマーマトリックスは、本発明によって提供される保護の第１の要素であり、「バリア」として、保護フィルムとして、及びマトリックス媒体の構造として作用する。
【００４６】
本発明の意味において、「バリア」という用語は、大気汚染物質分子に対して付着防止性及び反発性である効果を意味する。
【００４７】
詳細には、有利には導電性である有機ポリマー、第１の生体適合性ポリマーＢＰ１を実施することにより、連続した形で電荷をポリマーマトリックスに付与する。通常、ポリマーマトリックスの表面の電子は、安定性を回復させるために、より低い電子層に移動する傾向がある。この移動は、放出されるエネルギーと関係しており、結果としてポリマーマトリックスの表面エネルギーを変化させる。表面エネルギーのこの変化は、特に汚染物質粒子をはじくために、本発明の反発効果を引き起こす。言い換えれば、コロイドＣｏｌ−１及びＣｏｌ−２によって生成される反応、ならびにコロイドＣｏｌ−２の再生により、第１の生体適合性ポリマーのポテンシャルエネルギー曲面が有利には持続的に変化する。
【００４８】
本発明の意味において、「付着防止」は、該化合物の分離に対する機械的抵抗を生じる、２つの化合物間の物理的かつ密接な付着を防止する作用を意味するために使用される。
【００４９】
本発明の意味において、「反発性」とは、２つの物体又は２つの分子が互いに押し合う現象を意味し、電子エネルギーに依存する能動的な現象である。
【００５０】
本発明の付着防止性及び反発性ポリマーグリッドは、最大の汚染物質粒子の大部分、好ましくは生体適合性ポリマーＢＰ１の直径よりも大きな直径を有する汚染物質粒子の浸透を防止する。並行して、該マトリックスに浸透したより小さな粒子に比例して、生体適合性ポリマーＢＰ１の直径よりも小さな直径の粒子は、好ましくは、ポリマーグリッドによって捕捉される。
【００５１】
本発明の意味において、「ポリマー」という用語は、高分子から構成された、すなわち１個よりも多くのモノマーから構成された物質を意味する。有利には、生体適合性ポリマーＢＰ１は多糖である。ＢＰ１は、特に、プルラン、アラビノキシラン、セルロース、キチン、キサンタンガム、デキストラン、ウェランガム、ゲランガム、ジウタン、及びこれらの混合物を含む群から選択されることができる。
【００５２】
本発明の意味において、「生体適合性」という用語は、皮膚及び／又は粘膜及び／又は皮膚付属器と細胞適合性があり、かつヒト細胞に関して１％未満の細胞毒性を有する化合物を意味する。言い換えれば、該化合物は細胞の生存率に関してほぼ中性のままである。
【００５３】
このような細胞適合性は、試薬がテトラゾリウム塩ＭＴＴ（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド）である細胞生存率試験によって評価することができる。
【００５４】
ＭＴＴ試験は、ミトコンドリアの活性を検出するための比色法であり、構成要素の細胞毒性力を評価することができる。該ＭＴＴ試験は、試薬に含有されるテトラゾリウム環を、生細胞と活性細胞のミトコンドリアコハク酸脱水素酵素によってホルマザンへと還元することに基づいている。これにより、ミトコンドリア内で紫色の沈殿物が形成される。形成される沈殿物の量は、生細胞の量に比例する。細胞をＭＴＴとともに３７℃で約３時間インキュベートした後、細胞を１００％ＤＭＳＯ中で溶解する。分光光度法による５５０ｎｍでの光学密度のアッセイによって、生細胞の相対量を知ることができる。
【００５５】
また、生体適合性ポリマーＢＰ１によって、本発明の保護方法において実施される他の化合物の水性媒体中の分散を改善することもできる。したがって、その使用によって、該組成物が皮膚及び／又は粘膜及び／又は皮膚付属器に適用されたとき、場合によりＢＰ１へとグラフト化した、複合体Ｃｏｌ−１／ＢＰ２、Ｃｏｌ−２／ＡｎｔｉＯｘ−１及びＡｎｔｉｏｘ−２の均一な分布を得ることができる。
【００５６】
本発明の局所的保護の別の要素は、２つの要素、すなわち、第２の生体適合性ポリマーＢＰ２と共有結合でグラフト結合した第１の半導体コロイドＣｏｌ−１を含む複合体によって、ポリマーマトリックスに浸透した汚染物質粒子に関して光触媒作用を実施することにある。
【００５７】
コロイドＣｏｌ−１は、半導体であるために特別な特性、特に光触媒特性を有している。この特性は、活性種又はフリーラジカルを生成する目的で、コロイドがその環境、概して水及び酸素を酸化し及び還元することができるのは、光子エネルギーを吸収することによるものである。これらのフリーラジカルは、化学結合を切断することによって、及び／又は酸素化の程度を変化させることによって、汚染物質を分解する。この変換は、光触媒作用を受ける、つまり、ＵＶスペクトル（２００ｎｍ〜４００ｎｍ）及び可視光スペクトル（４００ｎｍ〜８００ｎｍ）において利用可能な光子を使用することによって触媒作用を受ける。次に、この反応により、不活性分子及びフリーラジカルが形成される。
【００５８】
上述から、本発明の組成物によって、光触媒活性を生じるために紫外線を捕捉／使用することができ、それにより、皮膚に到達及び浸透する紫外線の量を減少させ、制限し、及び低減させることができるようである。
【００５９】
第２の生体適合性ポリマーＢＰ２をＣｏｌ−１へとグラフト結合させることによって、コロイドＣｏｌ−１の光触媒活性を制御することができる。これにより、コロイドＣｏｌ−１の活性の不活性化剤又は「失活剤」の機能を実行する光安定剤化合物が形成される。
【００６０】
本発明の特徴にしたがって、第２の生体適合性ポリマーＢＰ２は、ポリビニルピロリドン、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール、ポリ塩化ビニル、スチレン、ポリアミド、アクリラート、及びこれらの混合物を含む群から選択される。
【００６１】
本発明の保護方法はまた、フリーラジカル、特に上述の光触媒反応によって生成されたフリーラジカルを中和するステップを実施することにもあり、それにより該フリーラジカルは、皮膚を損傷しない。
【００６２】
この中和ステップには、２つの要素、すなわち、コロイドＣｏｌ−２及び酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１を共有結合でまとめてグラフト結合させた該２つの要素を含む複合体が必要とされる。
【００６３】
本発明の意味において、「ＡｎｔｉＯｘ−１」は、多電子移動によって、すなわち、少なくとも１個の電子又はＨ●を化学種へ移動させることによって、少なくとも１つの酸化促進剤を還元することができる有機分子を意味する。本発明にしたがって、この酸化防止剤は、半導体コロイドの表面に存在する利用可能な官能基と反応して本発明の複合体を生成することができる少なくとも１つの官能基を保有する。
【００６４】
酸化防止剤は、コロイドと酸化防止剤との間に、後述で「スペーサーアーム（複数可）」又は「前駆体（複数可）」と呼ばれる１つ以上の共有化学結合の形成によってグラフト結合する。
【００６５】
コロイドＣｏｌ−２は近接しているので、少なくとも１個の電子を酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１に移動させることができ、Ｃｏｌ−２のリザーバに電子が含有されている限り、及び酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１が電子を求めている限り、そのようにすることができる。このように移動した電子によって、酸化防止剤の抗ラジカル機能を再生することができる。酸化防止剤をコロイドへグラフト結合させることによって、少なくとも１個の電子を移動させるために必要な近接性を得ることができる。
【００６６】
酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１は、特に、少なくとも１つの芳香族周期にわたって少なくとも１個のヒドロキシル基（−ＯＨ）を含む化合物の群から選択されることができる。
【００６７】
有利には、酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１は、フェノール、すなわち、少なくとも１個のヒドロキシル基（−ＯＨ）、又はその誘導体もしくは複合体の少なくとも１個を有するフェニルである。
【００６８】
ＡｎｔｉＯｘ−１は、特に、以下の化粧品成分国際命名法（ＩＮＣＩ）名によって指定された化合物、すなわち、オクタデシルジ−ｔ−ブチル−４−ヒドロキシヒドロシンナマート、ペンタエリトリチルテトラ−ジ−ｔ−ブチルヒドロキシヒドロシンナマート、２，６−ビス（１，１−ジメチルエチル）−４−メチルフェノール、ビス−エチルヘキシルヒドロキシジメトキシベンジルマロナート、二酸化マンガン、コロイド状白金、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロキノン、テトラブチルエチリデンビスフェノール、重亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオグリコール酸、チオタウリン、チオクト酸、チオジプロピオン酸ジラウリル、アミノエタンスルフィン酸、クエン酸トリエチル、エリソルビン酸ナトリウム、ソルビチルフルフラール、エリソルビン酸、ペリリルアルコール、ピリジルオキシドｔ−ブチルニトロン、エルゴチオネイン、メラトニン、アセチルシステイン、システイン、リジン塩酸塩、カルノシン酸、チロシルヒスチジンＨＣｌ、ヒスチジン塩酸塩、ピリドキシンセリナート、スーパーオキシドジスムターゼ、アミノプロピルアスコルビルホスファート、アスコルビン酸、アスコルビン酸ポリペプチド、アスコルビン酸ジパルミタート、アスコルビン酸グリコシド、アスコルビルリノレアート、アスコルビルメチルシラノールペクチナート、アスコルビルパルミタート、アスコルビルテトライソパルミタート、アスコルビルトコフェリルマレアート、アスコルビルパルミタートホスファート三ナトリウム、アスコルビルスルファート二ナトリウム、アスコルビン酸カルシウム、メチルシラノールアスコルバート、アスコルビン酸ナトリウム、リン酸アスコルビルナトリウム、リン酸アスコルビル／コレステリルナトリウム、テトラヘキシルデシルアスコルバート、リン酸アスコルビルマグネシウム、トコフェロール、トコフェリルアセタート、トコフェリルリノレアート、トコフェリルリノレアート／オレアート、トコフェリルニコチナート、レチノイン酸トコフェリル、ナトリウムトコフェリルホスファート、ジオレイルトコフェリルメチルシラノール、カリウムアスコルビルトコフェリルホスファート、没食子酸ドデシル、エピガロカテキンガラートＥＧＣＧ、没食子酸プロピル、フェルラ酸エチル、フェルラ酸エチルヘキシル、キトサンアスコルバート、キトサングリコラート、アピゲニン、チリロシド、α−アルブチン、アルブチン、バイカリン、クエルセチン、クエルセチンカプリラート、イソクエルセチン＝イソクエルシトリン、イソクエルシトリン、ジエチルヘキシルシリンジリデンマロナート、ジヒドロキシメチルクロモン、ジメトキシジ−ｐ−クレゾール、ジメチルメトキシクロマノール、エチルビスイミノメチルグアイアコールマンガンクロリド、ヘスペリジンメチルカルコン、コウジ酸、コウジ酸ジパルミタート、マデカッソシド、アシアチコシド、マグノロール（５，５’−ジアリル−２，２’−ジヒドロキシビフェニル）、ノルジヒドログアイアレチン酸、フェニルエチルレゾルシノール、レスベラトロール、トロキセルチン（３’，４’，７−トリス（ヒドロキシエチル）ルチン）、グルコシルルチン、ルチン（４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン）、二ナトリウムルチニルジス���ファート、テトラヒドロビスデメトキシジフェルロイルメタン、テトラヒドロデメトキシジフェルロイルメタン、テトラヒドロジフェルロイルメタン、トコシステアミド、トタロール、ヒドロキシデシルユビキノン、ユビキノン＝補酵素Ｑ１０、カロテノイド、リコペン、没食子酸、及びカフェー酸、又はこれらの誘導体を含む群から選択することができる。
【００６９】
特定の実施において、コロイドＣｏｌ−２は、ＺｎＯコロイド又はＴｉＯ２コロイドであり、ＡｎｔｉＯｘ−１は、該コロイドＣｏｌ−２の表面との共有結合を提供するスペーサーアームの利用可能な官能基と反応することができるアルデヒド基（−ＣＨＯ）又は酸基を有する。特定の実施において、酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１は、フェノールアルデヒド又はフェノール酸である。
【００７０】
例として、酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘは、この状況では、２−ヒドロキシベンズアルデヒド、３−ヒドロキシベンズアルデヒド、４−ヒドロキシベンズアルデヒド、３，４ジヒドロキシベンズアルデヒド、２，４ジヒドロキシベンズアルデヒド、４，５ジヒドロキシベンズアルデヒド、及び有利には３−ヒドロキシベンズアルデヒド又は３，４ジヒドロキシベンズアルデヒド（プロトカテクアルデヒド）である。
【００７１】
有利には、またこの実施において、スペーサーアームは、１〜８個の範囲の炭素、好ましくは２〜４個の範囲の炭素を含み、コロイドＣｏｌ−２に対してそれ自体を共有結合させることができるアルコキシシラン官能基及び酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１に対してそれ自体を結合させることができるヒドロキシル型、ホスファート型、又はアミン型の官能基を有する。
【００７２】
有利には、スペーサーアームは、シリカの誘導体であり、有利にはアルコキシシランであり、さらにより有利には、該スペーサーアームは３−（アミノプロピル）トリエトキシシランである。
【００７３】
有利には、スペーサーアームを形成するために使用されるコロイドとシリカ誘導体との比は、１：１〜１０：１の範囲にあり、好ましくは２：１〜３：１の範囲にある。
【００７４】
有利には、酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１は、少なくとも１個の電子の移動によって、又は多電子移動によって、すべてのＲＯＳを中和させることにあるスーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）の効果を模倣する。
【００７５】
第２のグラフト化した半導体コロイドＣｏｌ−２は、電磁放射、好ましくは紫外線の作用下で、次の機序によって自己再生する。
−第２のコロイドＣｏｌ−２から該第１の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１に向けての電子の移動による、第１の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１の抗ラジカル活性の再生、ならびに
−特にＵＶ−Ａ及びＵＶ−Ｂの範囲における２８０ｎｍ〜４００ｎｍの範囲における紫外線への曝露による第２のコロイドＣｏｌ−２の再生。
【００７６】
このことは、リザーバが電子を酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１に無期限に与える能力を有していることを意味する。
【００７７】
要約すると、コロイドＣｏｌ−２は、電子のリザーバを構成することによって、酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１の抗ラジカル活性を再生することができ、該酸化防止剤はその後、該コロイドにおいて利用可能な電子の数と同じ数のフリーラジカルと反応することができる、及び／又はラジカル化合物すべてを酸化させることができ、したがって中和させることができる。この効果は、Ｃｏｌ−２とＡｎｔｉＯｘ−１との間の近接性に関連している。実際、グラフト結合の非存在下で、酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１は、コロイドＣｏｌ−２が反応媒体中に存在するときでさえ、再生しない。
【００７８】
有利には、グラフト化した酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１はより安定している。言い換えれば、酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘの半減期が延長する。
【００７９】
複合体Ｃｏｌ−２／ＡｎｔｉＯｘ−１の存在によって、反応に対して二次的なラジカル種、特に一重項酸素及び／又は過酸化水素の形成を回避することができる。逆に、先行技術の組成物は、二次ラジカル化合物の形成を遮断せず、このことは、酸化促進剤と酸化防止剤との間の不均衡の形成によって並進し、「二次的な」酸化ストレス及び細胞損傷を生じる。
【００８０】
言い換えれば、本発明の複合体Ｃｏｌ−２／ＡｎｔｉＯｘ−１は、一次的な及び／又は二次的な酸化促進活性を中和させる。
【００８１】
概して、「半導体コロイド」という用語は、１個の電子があるものからその他のものへと移動するのに十分小さなエネルギー差を価電子帯と伝導帯との間に有する化合物を意味する。
【００８２】
概して、コロイドは、半導体特性を構成する分子、例えば、ＺｎＯの規則正しい積み重ねから生じる半導体特性を有する結晶質（ｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ）粒子（結晶質（ｎｏｎ−ａｍｏｒｐｈｏｕｓ）形態）である。このようなコロイドは、「量子ドット」又は「ナノ結晶」と呼ばれることもできる。該コロイドはまた、水性媒体中のコロイドの分散液又は懸濁液、及び有利には懸濁液の形態でもあることができる。
【００８３】
生体適合性ポリマーＢＰ２及び酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１のグラフト結合は、コロイドＣｏｌ−１とポリマーＢＰ２との間に、及び／又はコロイドＣｏｌ−２と酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１との間に共有化学結合を形成することによってグラフト結合する。
【００８４】
コロイドのグラフト結合又は官能化の概念は、当業者の一般的な知識の一部である。グラフト結合又は官能化は、例えば、ポリマーＢＰ２とコロイドＣｏｌ−１との間に、又は酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１とコロイドＣｏｌ−２の表面との間に共有結合を形成することに相当する。グラフト結合は、直接的に（例えば、ＰＶＰ（ＢＰ２）によるＣｏｌ−１の官能化）、又はスペーサーアームを介して間接的に（例えば、アルコキシシランによるＣｏｌ−２の官能化及びフェノールアルデヒドとの反応）実施することができる。
【００８５】
コロイドＣｏｌ−１及び／又はコロイドＣｏｌ−２は、先行技術を使用して、例えば、成長する前駆体の「ボトムアップ」アプローチによって合成してもよい。ナノ材料の分野において一般的に使用されているこの種類の合成は、核生成のステップと孤立した原子からの成長のステップとを実施する。このことによって、コロイドの大きさは制御することができる。
【００８６】
半導体コロイドＣｏｌ−１及び／又はＣｏｌ−２は、Ｃ、Ｓｉ、Ｇｅ、Ｓｎ、Ｓ、Ｓｅ、Ｔｅ、Ｂ、Ｎ、Ｐ、Ａｓ、Ａｌ、Ｓｂ、Ｇａ、Ｉｎ、Ｃｄ、Ｚｎ、Ｏ、Ｃｕ、Ｃｌ、Ｐｂ、Ｔｌ、Ｂｉ、Ｔｉ、Ｕ、Ｂａ、Ｓｒ、Ｌｉ、Ｎｂ、Ｌａ、Ｉ、Ｍｏ、Ｍｎ、Ｃａ、Ｆｅ、Ｎｉ、Ｅｕ、Ｃｒ、Ｂｒ、Ａｇ、Ｐｔ、Ｈｇ及びこれらの組み合わせを含む群から選択される少なくとも１つの元素によって有利には構成される。
【００８７】
有利な様式で、本発明の半導体コロイドＣｏｌ−１及び／又はＣｏｌ−２は、これらの元素のうちの２つ又は３つを含む。
【００８８】
特定の実施では、半導体コロイドＣｏｌ−１及び／又はＣｏｌ−２は、酸化亜鉛（ＺｎＯ）のコロイドである。
【００８９】
別の特定の実施では、半導体コロイドＣｏｌ−１及び／又はＣｏｌ−２は、酸化チタン（ＴｉＯ２）のコロイドである。
【００９０】
別の特定の実施では、半導体コロイドＣｏｌ−１及び／又はＣｏｌ−２は、酸化ビスマス（Ｂｉ２Ｏ３）のコロイドである。
【００９１】
概して、コロイドＣｏｌ−１／ＢＰ２及び／又はＣｏｌ−２／ＡｎｔｉＯｘ−１の平均の大きさは、数ナノメートル〜数十ナノメートルの範囲である。
【００９２】
したがって、コロイドＣｏｌ−１／ＢＰ２及び／又はＣｏｌ−２／ＡｎｔｉＯｘ−１の大きさは、有利には０．５ｎｍ〜１０００ｎｍの範囲にあり、より有利には１０ｎｍ〜１００ｎｍの範囲にあり、さらにより有利には約３０ｎｍであり、該大きさは、ＸＲＤによって測定される。
【００９３】
ＸＲＤ（Ｘ線回折）技術は、固体状態の結晶の大きさを測定するために従来から使用されている技術である。
【００９４】
「大きさ」という用語は、コロイドの最大寸法、例えば、コロイドが球状の時の直径を意味する。該大きさとは、グラフト化したコロイドの平均の大きさである。しかしながら、グラフト化していないコロイドＣｏｌ−１及びＣｏｌ−２の大きさはまた概して、先に示された値の範囲内にある。必要に応じて、当業者は、グラフト化していないコロイドＣｏｌ−１及びＣｏｌ−２の大きさを当てはめることができる。
【００９５】
コロイドＣｏｌ−１及び／もしくはＣｏｌ−２ならびに／又はコロイドＣｏｌ−１／ＢＰ２及び／もしくはＣｏｌ−２／ＡｎｔｉＯｘ−１は有利には球状である。
【００９６】
当然のことながら、グラフト結合は、単一のポリマー鎖のグラフト結合又は単一の抗酸化分子のグラフト結合に限定されない。各ナノ結晶に対して、少なくとも１種類のポリマー又は少なくとも１種類の酸化防止剤の多数の分子がグラフト結合している。
【００９７】
コロイドはドープ処理されていない。場合により、該コロイドは、コロイドの合成中に導入される遷移金属を含んでもよい。
【００９８】
「ドープ処理」という用語は、すでに形成されている材料に元素を組み込むことを意味する。材料が合成されている間に、すなわち材料の形成の上流に元素を組み込むことは、ドープ処理されているとは見なされない。
【００９９】
本発明の方法では、第２の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−２は、汚染物質によって又はその分解産物によってもたらされる反応種を中和させる点で実施され及び関与することができ、酸化防止剤とグラフト結合したコロイドの形態ではない。
【０１００】
有利には、第２の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−２は、フェノール、すなわち、少なくとも１個のヒドロキシル基（−ＯＨ）を有するフェニル、又はその誘導体の少なくとも１個、又はこれらの複合体である。
【０１０１】
ＡｎｔｉＯｘ−２は、特に、先に列挙したＩＮＣＩ名で指定された化合物又はその誘導体を含む群から選択してもよい。
【０１０２】
グラフト結合は、第１の生体適合性ポリマーＢＰ１のヒドロキシル基（−ＯＨ）と、該第２の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−２の酸官能基（Ｒ−ＣＯ−ＯＨ）との間のエステル化によって実施されてもよい。例として、酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−２は没食子酸であってもよい。
【０１０３】
別の実施では、酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−２は、カフェー酸、３−ヒドロキシベンズアルデヒドもしくは２−ヒドロキシベンズアルデヒド、又は４−ヒドロキシベンズアルデヒドもしくは３，４ジヒドロキシベンズアルデヒド、又は２，３ジヒドロキシベンズアルデヒド、又は４，５ジヒドロキシベンズアルデヒドであってもよい。
【０１０４】
有利には、酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１及びＡｎｔｉＯｘ−２は同一である。
【０１０５】
該第１の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１、及び場合により該第２の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−２は、電子を捕捉すること（ｔｒａｐｐｉｎｇ）又は「捕捉すること（ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ）」によって、汚染物質の分解又は紫外線への曝露から生じるフリーラジカルと直接反応する。これらのフリーラジカルは中和しており、いかなる酸化ストレスも発生させない。
【０１０６】
また、酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−２によって、生体適合性ポリマーＢＰ１を、Ｃｏｌ−１／ＢＰ２の光触媒活性によって生成されるラジカルの遊離に起因する可能性がある何らかの分解から保護することもできる。
【０１０７】
好ましい実施では、第２の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−２は、第１の生体適合性ポリマーＢＰ１にグラフト結合する。
【０１０８】
このグラフト結合により、抗酸化作用によって皮膚にもたらされる保護に加えて、製剤を保護することができる。したがって、製剤、より正確には第１の生体適合性ポリマーＢＰ１は、上述のように、第２の生体適合性ポリマーＢＰ２とグラフト結合した第１のコロイド、すなわち、Ｃｏｌ−１／ＢＰ２によって生じる光触媒効果による潜在的な分解から保護される。
【０１０９】
本発明はまた、先に定義したように方法を実施するのに適した、以下を含む局所化粧組成物も提供する。
−第１の生体適合性ポリマーＢＰ１、
−第２の生体適合性ポリマーＢＰ２と共有結合でグラフト結合した第１の半導体コロイドＣｏｌ−１、
−第２の半導体コロイドＣｏｌ−２が第１の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１と共有結合でグラフト結合した形態の、該第１の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１、及び
−酸化防止剤とグラフト結合したコロイドの形態ではない第２の酸化防止剤（ＡｎｔｉＯｘ−２）。
【０１１０】
したがって、第２の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−２は、コロイドにグラフト結合した酸化防止剤の形態にはない。
【０１１１】
有利には、第２の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−２は、第１の生体適合性ポリマーＢＰ１にグラフト結合する（ＢＰ１／ＡｎｔｉＯｘ−２）。
【０１１２】
一実施では、半導体コロイドＣｏｌ−１及び／又はＣｏｌ−２は、Ｃ、Ｓｉ、Ｇｅ、Ｓｎ、Ｓ、Ｓｅ、Ｔｅ、Ｂ、Ｎ、Ｐ、Ａｓ、Ａｌ、Ｓｂ、Ｇａ、Ｉｎ、Ｃｄ、Ｚｎ、Ｏ、Ｃｕ、Ｃｌ、Ｐｂ、Ｔｌ、Ｂｉ、Ｔｉ、Ｕ、Ｂａ、Ｓｒ、Ｌｉ、Ｎｂ、Ｌａ、Ｉ、Ｍｏ、Ｍｎ、Ｃａ、Ｆｅ、Ｎｉ、Ｅｕ、Ｃｒ、Ｂｒ、Ａｇ、Ｐｔ、Ｈｇ及びこれらの組み合わせを含む群から選択される少なくとも１つの元素によって、有利には構成される。
【０１１３】
有利には、局所用組成物の半導体コロイドＣｏｌ−１及び／又はＣｏｌ−２は、酸化亜鉛（ＺｎＯ）のコロイドである。
【０１１４】
有利には、局所用組成物の半導体コロイドＣｏｌ−１及び／又はＣｏｌ−２は、酸化チタン（ＴｉＯ２）のコロイドである。
【０１１５】
有利には、局所用組成物の半導体コロイドＣｏｌ−１及び／又はＣｏｌ−２は、酸化ビスマス（Ｂｉ２Ｏ３）のコロイドである。
【０１１６】
好ましい実施では、該組成物は以下を含む。
−多糖である第１の生体適合性ポリマーＢＰ１、
−酸化亜鉛（ＺｎＯ）、又は二酸化チタン（ＴｉＯ２）、又は酸化ビスマス（Ｂｉ２Ｏ３）のコロイドである第１及び第２のコロイド、
−ポリビニルピロリドン、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール、ポリ塩化ビニル、スチレン系、ポリアミド、アクリラート、及びこれらの混合物を含む群から選択される第２の生体適合性ポリマーＢＰ２、ならびに
−フェノール又はその誘導体、有利にはフェノールアルデヒドもしくはフェノール酸又はこれらの複合体に対応する第１及び第２の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１及びＡｎｔｉＯｘ−２であって、該第１の酸化防止剤は有利には該第２の酸化防止剤とは異なっている。
【０１１７】
有利には、多糖はプルランである。
【０１１８】
好ましくは、第２の生体適合性ポリマーＢＰ２はポリビニルピロリドンであり、第１の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１は３−ヒドロキシベンズアルデヒド又は３，４ジヒドロキシベンズアルデヒドである。
【０１１９】
特定の実施において、第１の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１と共有結合でグラフト結合した第２の半導体コロイドＣｏｌ−２は、以下から形成される。
−酸化亜鉛（ＺｎＯ）又は酸化チタン（ＴｉＯ２）のコロイドである第２のコロイドＣｏｌ−２、
−フェノールアルデヒド又はフェノール酸である第１の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１、及び
−Ｃｏｌ−２とＡｎｔｉＯｘ−１との間に配置されたスペーサーアームの形態の共有結合グラフト結合であって、該スペーサーアームは、１〜８個の範囲の炭素、好ましくは２〜４の範囲の炭素を含み、かつそれ自体をコロイドＣｏｌ−２へ共有結合することができるアルコキシシラン官能基と、それ自体を酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１へ結合することができるヒドロキシル型、ホスファート型、又はアミン型の官能基とを有する。
【０１２０】
有利には、
−第１の酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１は、２−ヒドロキシベンズアルデヒド、３−ヒドロキシベンズアルデヒド、又は４−ヒドロキシベンズアルデヒド、３，４ジヒドロキシベンズアルデヒド、２，４ジヒドロキシベンズアルデヒド、４，５ジヒドロキシベンズアルデヒドを含む群から選択され、かつ
−スペーサーアームは有利には３−（アミノプロピル）トリエトキシシランである。
【０１２１】
別の実施では、第２の生体適合性ポリマーはポリビニルピロリドンであり、及び／又は第１の酸化防止剤はフェノールもしくはフェノールの誘導体、又はこれらの複合体、好ましくは２−ヒドロキシベンズアルデヒド、３−ヒドロキシベンズアルデヒドもしくは４−ヒドロキシベンズアルデヒド又は３，４、ジヒドロキシベンズアルデヒド、又は２，３ジヒドロキシベンズアルデヒド、又は４，５ジヒドロキシベンズアルデヒドである。
【０１２２】
有利には、ＡｎｔｉＯｘ−２は没食子酸である。
【０１２３】
好ましい実施では、該組成物は以下を含む。
−プルランであり、有利には没食子酸とグラフト結合し、かつ該組成物に対して０．１質量％〜２０質量％、有利には０．５質量％〜１０質量％、好ましくは０．８質量％〜５質量％の範囲である第１の生体適合性ポリマーＢＰ１、
−酸化亜鉛コロイドであり、ＰＶＰとグラフト結合し（ＺｎＯ／ＢＰ２）、該組成物の質量に対して０．１質量％〜３０質量％の範囲で、有利には１質量％〜２０％の範囲で、好ましくは５質量％〜９質量％の範囲である第１の半導体コロイド、及び
−フェノールアルデヒドもしくはフェノール酸又はそれらの複合体とグラフト結合した酸化亜鉛のコロイドであり、該組成物の質量に対して０．１質量％〜１０質量％の範囲で、有利には０．５質量％〜５質量％の範囲で、好ましくは０．６質量％〜２質量％の範囲である第２の半導体コロイド。
【０１２４】
さらに、該組成物は、保湿剤、粘度制御剤、及び水を含む群から選択される少なくとも１種類の添加物をさらに含んでもよい。
【０１２５】
有利には、保湿剤は、グリセロール、尿素、乳酸、及びこれらの混合物を含む群から選択される。
【０１２６】
該組成物は、有利には、保湿剤、好ましくはグリセロールを該組成物の質量に対して、０．１％〜２０％の範囲で、有利には１％〜１０％の範囲で、好ましくは２％〜６％の範囲で含む。
【０１２７】
保湿剤によって、皮膚に塗布した後に該組成物が早急に乾き切るのを防ぐことができる。保湿剤はまた、肌を保湿することにも寄与する。保湿剤はまた、該組成物の粘度を制御することにも寄与することができ、かつこの目的のために、皮膚上での該組成物の延展を最適化することにも寄与することができる。
【０１２８】
有利には、安定剤は、グアーガム、キサンタンガム、又はこれらの混合物を含む群から選択することができる。
【０１２９】
該組成物は、有利には、安定剤、好ましくはグアーガムを該組成物の質量に対して、０．１質量％〜２０質量％の範囲で、有利には０．２質量％〜１０質量％の範囲で、好ましくは０．５質量％〜５質量％の範囲で含む。
【０１３０】
安定剤によって、該組成物の粘度を制御することができる。
【０１３１】
有利には、該組成物はさらに水を含む。該組成物は、有利には、該組成物の質量に対して水を３０質量％〜９９質量％の範囲で、有利には５０質量％〜９０質量％の範囲で、好ましくは７０質量％〜８５質量％の範囲で含む。
【０１３２】
好ましい実施では、本発明の組成物は、以下からなる。
−没食子酸と有利にはグラフト結合した第１の生体適合性ポリマーＢＰ１として、好ましくは該組成物の質量に対して０．８質量％〜５質量％の範囲にあるプルラン、
−該組成物の質量に対して好ましくは５質量％〜９質量％の範囲にある、第１のコロイドとしてＰＶＰとグラフト結合した酸化亜鉛コロイド（ＺｎＯ／ＢＰ２又はＴｉＯ２／ＢＰ２又はＢｉ２Ｏ３／ＢＰ２）、
−該組成物の質量に対して好ましくは０．６質量％〜２質量％の範囲にある、第２のコロイドとしてフェノールアルデヒド又はフェノール酸とグラフト結合した酸化亜鉛又は酸化チタン又はＢｉ２Ｏ３コロイド（ＺｎＯ／ＡｎｔｉＯｘ−１又はＴｉＯ２／ＡｎｔｉＯｘ−１）、
−該組成物の質量に対して好ましくは２質量％〜６質量％の範囲にある、保湿剤としてのグリセロール、
−該組成物の質量に対して好ましくは０．５質量％〜５質量％の範囲にある、安定剤としてのグアーガム、及び
−該組成物の質量に対して、好ましくは７０質量％〜８５質量％の範囲の水。
【０１３３】
有利には、本発明の組成物は、ずり減粘、速乾性、及び安定性の特性を有し、かつ有利にはパラベン及び／又は有機溶媒非含有である、水性製剤である。
【０１３４】
一実施では、本発明の組成物は、局所使用のためのものであり、例えば、非治療上の使用のための化粧組成物である。この組成物は、有利には、親水性エマルション、ミセルエマルション又はピッカリングエマルション（すなわち、ミセル組成物の逆形態）である。
【０１３５】
本発明の組成物はまた、メイクアップ基剤としても実施してもよい。
【０１３６】
本発明を実施することができる様式及び結果として生じる利点は、実施に関する以下の例からより明確に現れ、該例は、非限定的な表示として、添付の図面の裏付けとともに付与される。
【図面の簡単な説明】
【０１３７】
【図１】本発明の組成物の作用機序を示す図である。
【図２】酸化防止剤で官能化した後のＺｎＯコロイドのＸ線回折パターンを示す図である。スペクトル線は、六角形のＺｎＯ構造に対応する平面で指標付けされている。
【図３】酸化防止剤で官能化されたコロイド（Ｃｏｌ−２／ＡｎｔｉＯｘ−１）と酸化防止剤のみとについてのＤＰＰＨ反応速度を示す図である。
【図４】紫外線へ曝露されたとき、又は暗所に保管されたときに、本発明のコロイドによって分解されたＡＢＴＳ基質の百分率を示す図である。
【図５】波長の関数として正規化された強度での紫外線への曝露によって誘発される有害作用を示す図である。
【図６】本発明の組成物の保護力を示す図であり、誤差棒は、９７％の信頼水準での信頼区間に相当する。
【図７】本発明の酸化防止剤で官能化したコロイド（Ｃｏｌ−２／ＡｎｔｉＯｘ−１）の何らかの一次的及び／又は二次的な酸化促進活性の抑制を、他の酸化防止剤と比較して示す図である。
【図８Ａ−８Ｂ】酸化防止剤ＡｎｔｉＯｘ−１のＳＯＤ効果を模倣する活性を、スーパーオキシドアニオン及び過酸化水素と比較して示す図である。
【図９】カーボンブラック試験を使用して、本発明の組成物の付着防止効果及び反発効果を市販の組成物と比較して示す図である。
【図１０】本発明の組成物の反発力を示す図である。
【実施例】
【０１３８】
図１は、本発明の組成物の作用機序を示している。
【０１３９】
１／コロイドＣｏｌ−１及びＣｏｌ−２の合成
百分率は、組成物の重量によって与えられる
１．１／Ｃｏｌ−１及びＣｏｌ−２＝ＺｎＯ含有
無水酢酸亜鉛（２％）及び水酸化ナトリウム（１．５％）などの酸化亜鉛前駆体を、溶媒又はエタノール（８５％）とジエチレングリコール（８％）とを含む溶媒の混合物と混合し、オートクレーブ内で密封した。溶媒はまた、ベンジルアルコール、フェノール、オレイルアルコール、ブタノール、プロパノール、イソプロパノール、水、テトラヒドロフラン、エタノール、メタノール、アセトニトリル、トルエン、ＰＧＭＥＡ、ＰＧＰＥ、ＰＧＭＥ、２−メチル−１−プロパノール、又はトリエチレングリコールモノメチルエーテルであってもよい。
【０１４０】
塩が溶解するまで、反応媒体を６０℃で約３０分間機械的撹拌下に置いた。次に水（２％）を添加した。粒子の形成の開始を示す曇りが観察された。この反応を６５℃で１時間半維持した。
【０１４１】
球状で直径７ｎｍの酸化亜鉛ナノ結晶を収集した。
【０１４２】
１．２．Ｃｏｌ−１及びＣｏｌ−２＝ＴｉＯ２含有
前の例と同じ条件下で、同じ酸化防止剤をルチル型二酸化チタンへとグラフト結合させた。５ｇのルチル型二酸化チタンを９５０ｍＬのエタノールと５０ｍＬのジエチレングリコールとの混合物中に分散させ、オートクレーブ内で密封した。
【０１４３】
塩が溶解するまで、反応媒体を６０℃で約３０分間機械的撹拌下に置いた。次に水（２％）を添加した。粒子の形成の開始を示す曇りが観察された。この反応を６５℃で１時間半維持した。
【０１４４】
球状で直径７ｎｍの二酸化チタンナノ結晶を収集した。
【０１４５】
２／コロイドＣｏｌ−２／ＡｎｔｉＯｘ−１の調製
２．１／ＺｎＯ／３−ヒドロキシベンズアルデヒド
本発明のコロイドを、先に得られた酸化亜鉛（ＺｎＯ）コロイドと酸化防止剤３−ヒドロキシベンズアルデヒドの前駆体又はスペーサーアームとを使用して調製した。このようにして、ＺｎＯ／３−ヒドロキシベンズアルデヒドの粒子を得た。実際には、先に形成されたナノ結晶を、（３−アミノプロピル）トリエトキシシラン（０．５％）でその場で官能化した。加えて、溶液はわずかに透明になった。この官能化をさらに３時間実行した。最後に、酸化防止剤３−ヒドロキシベンズアルデヒド（１．５％）を添加した。反応を９時間維持した。
【０１４６】
次に、反応器を周囲温度に冷却した。粒子を収集し、３０００回転／分（ｒｐｍ）で１５分間遠心分離した。次に、この粒子をエタノール中で洗浄し、次に再度遠心分離した。最後に、粒子を水中で所望の濃度（１０％〜１５％の範囲の質量濃度）に分散させた。ＺｎＯ粒子の大きさが小さいことにより、網羅する領域をより大きくすることができ、したがってより多数の抗酸化分子を各粒子の表面にグラフト結合させることができた。
【０１４７】
ＺｎＯコロイドの直径は、Ｘ線回折計（ＸＲＤ）によって測定した。回折計によって生じた波長は、１．５４Åに等しいＣｕ−Ｋα線に対応していた。使用した他のパラメータは、４０ｋＶの加速電圧、４０ｍＡの電流、及びＢｒａｇｇ−Ｂｒｅｎｔａｎｏ幾何学的配置に対応していた。
【０１４８】
Ｘ線回折パターンは、透過下にあるＣｕ−Ｋα源のＸＲＤを用いて粉末で測定した。酸化防止剤を用いた官能化（グラフト結合）の前のコロイドのＸ線回折パターンを図２に示す。
【０１４９】
２．２．／ＴｉＯ２／３ヒドロキシベンズアルデヒド
実際には、先に形成したナノ結晶を、（３−アミノプロピル）トリエトキシシランでその場で官能化した。実際には、５ｍＬの水を添加し、次に８ｍＬの（３−アミノプロピル）トリエトキシシランを添加した。混合物を２時間撹拌した後、５ｇの３−ヒドロキシベンズアルデヒドを添加し、混合物を撹拌したままにしておき、６５℃で９時間加熱した。次に、混合物を周囲温度に冷却した。粒子を収集し、３０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。次に、この粒子をエタノール中で洗浄し、次に再度遠心分離した。最後に、粒子を水中で所望の濃度に分散させた。
【０１５０】
２．２．／ＴｉＯ２／３，４ヒドロキシベンズアルデヒド
実際には、先に形成したナノ結晶を、（３−アミノプロピル）トリエトキシシランでその場で官能化した。実際には、５ｍＬの水を添加し、次に８ｍＬの（３−アミノプロピル）トリエトキシシランを添加した。混合物を２時間撹拌したままにしておいた後、５ｇの３，４ジヒドロキシベンズアルデヒドを添加し、混合物を撹拌したままにしておき、６５℃で９時間加熱した。次に、混合物を周囲温度に冷却した。粒子を収集し、３０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。次に、この粒子をエタノール中で洗浄し、次に再度遠心分離した。最後に、粒子を水中で所望の濃度に分散させた。
【０１５１】
３／コロイドＣｏｌ−１／ＢＰ２（ＰＶＰ）の調製
３．１／コロイドＺｎＯ／ＢＰ２を調製する方法
コロイドを、従来通り、例えば、水と、官能化されるべきコロイド及び官能化ポリマー（ＢＰ２）を含有するエタノールとの溶液中でグラフト化させた。
【０１５２】
実際には、先に形成したナノ結晶を、エタノール（２０質量％の溶液）中に溶解したＰＶＰ（２重量％）によってその場で官能化した。反応を１２時間維持した。次に、反応器を周囲温度に冷却した。粒子を収集し、３０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。次に、この粒子をエタノール中で洗浄し、次に再度遠心分離した。最後に、粒子を水中に分散させ、２時間加熱還流した。
【０１５３】
ＺｎＯ粒子の大きさが小さいことにより、網羅する領域をより大きくすることができ、したがって、より多数の抗酸化分子を各粒子の表面にグラフト結合させることができた。
【０１５４】
Ｘ線回折パターンは、透過下にあるＣｕ−Ｋα源のＸＲＤを用いて粉末で測定した。
【０１５５】
３．２／コロイドＴｉＯ２／ＢＰ２を調製する方法
３．１にあるのと同じ方法を繰り返した。
３／複合体ＡｎｔｉＯｘ−２／ＢＰ１（没食子酸／プルラン）の調製
０．００１〜０．０１ｍｍｏｌのプルランを５０〜１００ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中に溶解した。混合物を不活性ガス流の下で４０〜８０℃で５〜３０分間加熱した。
【０１５６】
５〜２０ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中にあらかじめ溶解した５００〜５０００当量の没食子酸及び５００〜５０００当量のジシクロヘキシルカルボジイミドをこの溶液に添加した。反応を、７０℃で不活性ガス流の下で２４〜７２時間維持した。
【０１５７】
エタノール中に反応容積の２〜２０倍を添加することにより、生成物を沈殿させ、次に濾過により収集した。
【０１５８】
４／コロイドＺｎＯ／ＡｎｔｉＯｘ−１の抗酸化活性の測定
４．１．反応速度
コロイドＣｏｌ／ＡｎｔｉＯｘの作用速度は、２，２−ジフェニル−１−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）の分解速度を測定することによって推定した。
【０１５９】
ＤＰＰＨは、そのフリーラジカルの容量を安定して保つ分子である。このラジカル種は、５２０ｎｍでの光（溶液の紫色）を吸収し、酸化防止剤による中和の後、無色又は淡黄色になる。したがって、時間の関数としてラジカルＤＰＰＨの吸収の測定の強度を測定することによって中和反応を監視することが可能である。
【０１６０】
その目的のために、２つのエタノール溶液を次のように調製した。
−［ＤＰＰＨ］０濃度が０．１ｍｏｌ／ＬであるＤＰＰＨを含有する対照溶液、及び
−［ＤＰＰＨ］０濃度が０．１ｍｏｌ／ＬであるＤＰＰＨと、（ＣＩ５０測定結果に基づいて決定されるように）２時間後にＤＰＰＨの９０％が消費されるような濃度の酸化防止剤とを含有する試験溶液。
【０１６１】
吸光度は、ＵＶ／可視／ＮＩＲ分光計によって測定した。２．５ｍＬの溶液をポリスチレン容器内へと注入した（光路＝１ｃｍ）。３１０ｎｍ〜７００ｍｍのＵＶ／可視吸収スペクトルを３００秒間測定した。５２０ｎｍでの吸光度の値により、Ｂｅｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ式を使用して、所与の時間におけるラジカルＤＰＰＨの濃度を測定することができた：
Ａ５２０ｎｍ（τ）＝εＤＰＰＨ．ｌ．［ＤＰＰＨ］τ
【０１６２】
該式によると、Ａは、測定された吸光度に相当し、εＤＰＰＨは、ＤＰＰＨの質量係数に相当し、ｌ（ｃｍ）は、試料を通る光路に相当し、［ＤＰＰＨ］τ（ｇ／Ｌ）は、試料の質量濃度に相当する。
【０１６３】
得られた曲線は、反応速度又は「速度論的」定数κ及び反応の半減期定数τ１／２に戻らせることができる速度論モデルを使用して完成となった。
【０１６４】
酸化防止剤（ＺｎＯ／３−ヒドロキシベンズアルデヒド）で官能化されたコロイドの作用速度、及び遊離の、つまりグラフト化していない酸化防止剤（３−ヒドロキシベンズアルデヒド）の作用速度を示すグラフを図３に示している。
【０１６５】
本結果は、複合体ＺｎＯ／３−ヒドロキシベンズアルデヒドが遊離の３−ヒドロキシベンズアルデヒドよりもＤＰＰＨと迅速に反応したことを示している。
【０１６６】
５／コロイドＺｎＯ／ＡｎｔｉＯｘ−１の抗酸化活性の再生の評価
５．１／経時的評価
８ｍＭのＡＢＴＳ（２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）酸）のストック溶液を、メトミオグロビンと過酸化水素とを含む３ｍＭの溶液とともに等量でインキュベートして、ＡＢＴＳラジカルカチオンを生成した。得られた溶液を、１５０ｍＭのＮａＣｌを含有するリン酸緩衝液（０．２Ｍ、及びｐＨ７．４）で希釈して、７３４ｎｍで１．５の吸光度を得た。
【０１６７】
水中に２４０ｇ／Ｌで分散した３０μＬのＺｎＯ／３−ヒドロキシベンズアルデヒド（例２．）の試料を、水中の０．０７ｍＭ  ＡＢＴＳカチオン溶液２９７０μＬに添加した後、暗所で撹拌の下に置いた。
【０１６８】
３０分のインキュベーション後、ＡＢＴＳは完全に分解された。
【０１６９】
ＡＢＴＳ基質全体の分解のこのステップの後に得られた溶液を分離し、溶液の一画分を暗所に置き、残りの画分をＵＶ照射下に置いた。３０分間の曝露（暗所又はＵＶ下）の後、３０μＬのＡＢＴＳの濃縮溶液（７ｍＭ）を添加した後、溶液をもう一度、５時間撹拌しながら暗所に置いた。次に、３０分ごとに吸光度を測定した。
【０１７０】
データを図４に示している。
【０１７１】
本結果は、ＺｎＯ／３−ヒドロキシベンズアルデヒドコロイドを含有し、紫外線に曝露された溶液が、暗所に残存しているＺｎＯ／３−ヒドロキシベンズアルデヒドコロイドを含有する溶液よりもかなり大きなＡＢＴＳ分解能を有していることを示している。暗所に残存しているＺｎＯ／３−ヒドロキシベンズアルデヒドコロイドの活性は、ＺｎＯ／３−ヒドロキシベンズアルデヒド複合体に固有の残余の抗ラジカル活性に相当する。したがって、１２０分後、ＡＢＴＳの６５％が、紫外線に曝露された溶液によって分解されたのに対し、暗所に残存している溶液では１８％が分解された。
【０１７２】
結論として、本発明のＺｎＯ／３−ヒドロキシベンズアルデヒドコロイドは、紫外線に曝露されると、該コロイドの抗酸化活性を再生する能力を有している。
【０１７３】
６／紫外線の効果に対する本発明の組成物の保護力の評価
５つの主な有害作用は、紫外線への曝露によって引き起こされる危害に関連しているものとして従来から認識されている。
−フリーラジカルの生成、
−炎症反応、
−メラニンの酸化、
−ＤＮＡの突然変異、及び
−免疫抑制。
【０１７４】
Ｈａｌｌｉｄａｙらによる研究（Ｈａｌｌｉｄａｙ，Ｇ．Ｍ．，Ｂｅｓｔａｋ，Ｒ．，Ｙｕｅｎ，Ｋ．Ｓ．，Ｃａｖａｎａｇｈ，Ｌ．Ｌ．，＆Ｂａｒｎｅｓｔｏｎ、Ｒ．Ｓ．Ｃ．（１９９８）．ＵＶＡ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｍｕｔａｔｉｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，４２２，１３９−１４５）にあるのと同様のアプローチを使用して、ガウスモデル又は双曲性ガウスモデル（試験するパラメータによる）を、紫外線によって誘発される有害作用によって引き起こされる現象を説明するために確立した。
【０１７５】
データは、当業者に公知であり、かつ日焼け止めを評価するためのＩＳＯ規格に準拠している従来の実験プロトコルに準拠して得た。データは、正規化された太陽放射照度によって正規化した。
【０１７６】
正規化されたデータを図５のグラフに示している。
【０１７７】
本データは、ＵＶＢ線（２８０ｎｍ〜３１５ｎｍ）が炎症反応、ＤＮＡの突然変異、及び皮膚組織の免疫抑制を引き起こしたことを示している。ＵＶＡ線（３１５ｎｍ〜４００ｎｍ）は、フリーラジカルの生成、メラニンの酸化、及び皮膚の細胞における免疫抑制を引き起こした。
【０１７８】
図６に示す結果は、本発明の組成により、紫外線と関係するある特定の効果を低減することができることを示している。
−フリーラジカルの生成の６９．２％の低下、
−炎症反応の８３．６％の低下、
−メラニンの酸化を介した皮膚の色素沈着の７４％の低下、
−ＤＮＡの突然変異の７５．６％の低下、及び
−免疫抑制の６０．３％の低下。
【０１７９】
本結果は、紫外線への曝露によって生成されたフリーラジカルの６９．２％が除去されたことを示している。それゆえ、フリーラジカルの３０．８％しか形成することができなかった。本明細書で計算された保護力は、紫外線によって誘発される有害作用にのみ相当する。
【０１８０】
７／一次フリーラジカル及び二次フリーラジカルの生成に対する本発明の組成物の保護力の評価
本試行は、捕捉分子としてＤＩＰＰＭＰＯ（５−（ジイソプロポキシホスホリル）−５−メチル−１−ピロリン−Ｎ−オキシド）を使用することによって、競合する捕捉実験を実施するために、電子常磁性共鳴（ＥＰＲ）と連関させた「スピントラッピング」法によって実行した。この化合物は、この技術を使用してスーパーオキシドラジカルを検出及び研究するために従来から使用されている。
【０１８１】
付加物ＤＩＰＰＭＰＯ−ＯＯＨのシグナルの強度の変化を、クリーム剤の存在下及び非存在下での時間の関数として監視した。本方法は、クリーム剤の存在下及び非存在下でのモデルラジカル（ＴＥＭＰＯＬ又は１−オキシル−２，２，６，６−テトラメチル−４−ヒドロキシピペリジン）の分解速度を試験することによって評価した。試行の持続時間、すなわち、２０分間にわたって、４つの実験（対照＋３つの試料）についてＴＥＭＰＯＬからのシグナルの喪失は観察されなかった。また、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）の存在下での対照分析を行った。
【表１】
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【０１８２】
表２：時間の関数としてのＤＩＰＰＭＰＯ−ＯＯＨシグナルの抑制の百分率。
【０１８３】
表に示されている値は、３回の同一の実験の平均である（変動は１０％未満である）。
【０１８４】
抑制速度を図７に示している。
【０１８５】
異なるスーパーオキシドラジカルトラッピング特性を各試料について観察した。
【０１８６】
組成物Ｃは、ＤＩＰＰＭＰＯ−ＯＯＨ付加物のシグナルにおいて３分で４８％（５分で５３％）の低減を示しており、酸化活性の半分の抑制を示唆した。
【０１８７】
組成物Ｄは、ＤＩＰＰＭＰＯ−ＯＯＨ付加物のシグナルにおいて３分で２０％（５分で４４％）低減したことを示しており、臨床試料の抑制よりも有効性の低い抑制を示唆した。
【０１８８】
本発明の複合体（ＺｎＯ／３−ヒドロキシベンズアルデヒドコロイド）については、ＤＩＰＰＭＰＯ−ＯＯＨ付加物に相当するシグナルは観察されなかった。したがって、生成されたスーパーオキシドラジカルをすべて捕捉した。
【０１８９】
これらの実験中に、追加のラジカルの形成が観察された（本発明の複合体を除く）。本出願者によると、新たなラジカルは、スーパーオキシドラジカル又は過酸化水素（スーパーオキシドラジカルの自発的不均化によって生成される）との反応に利用可能な遷移金属塩の存在を包含するＨａｂｅｒ  Ｗｅｉｓｓ反応又はＦｅｎｔｏｎ反応から生じたように見えた。したがって、ヒドロキシルラジカルが生成され、クリームの構成要素と反応して、ＤＩＰＰＭＰＯ上の付加物の形で観察される新たなラジカル又は「二次ラジカル」を生成するように見えるであろう。
【０１９０】
結論として、本発明のコロイドは、スーパーオキシド型のフリーラジカルを捕捉するために試験された他の化合物よりも大きな能力を有する。また、本発明のコロイドを用いて二次ラジカル種の生成は観察されず、ＲＯＳを抑制し、したがって酸化ストレスを抑制することに対して全体的な有効性を示した。
【０１９１】
８／本発明の組成物のＳＯＤ活性を模倣した抗酸化活性の評価
試行は、インビトロで実施し、データは条件ごとに３つのウェルを使用した実験から得た（ｎ＝３）。
【０１９２】
８．１  スーパーオキシドアニオン（Ｏ２●−）
ＳＯＤは、スーパーオキシドアニオン（Ｏ２●−）の二酸素（Ｏ２）及び過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）への不均化を触媒する。
【０１９３】
ＳＯＤ試験は、特に、テトラゾリウム塩ＷＳＴ−１の変換、及び水溶性の色素であるホルマザンの生成によるスーパーオキシドアニオンの還元を監視することができるアッセイ法である。
【０１９４】
本結果を図８Ａに示している。
【０１９５】
これらの結果は、本発明の組成物が、本発明の組成物の１２．５％から０．２％までの範囲にある濃度に対して有意なかつ＋９３．７％から＋２０．１％まで用量依存的であるスーパーオキシドアニオンの不均化に対する活性を有していたことを示している。
【０１９６】
８．２  過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）
ＳＯＤ試験は、特に、テトラゾリウム塩ＷＳＴ−１の変換、及び水溶性の色素であるホルマザンの生成による過酸化水素の還元を監視することができるアッセイ法である。
【０１９７】
本結果を図８Ｂに示している。
【０１９８】
これらの結果は、本発明の組成物が２５％から３．１２％の範囲の濃度で、−２２％から−４％の範囲のＨ２Ｏ２ラジカルの有意なかつ用量依存的な抑制を誘導したことを示している。
【０１９９】
９／本組成物のバリア機能の評価
本試行は、１２．５ｃｍ２の３つの領域が前腕の前面で区切られている個体（左前腕に２つの領域、及び右前腕に１つの領域）でインビボで実施した。第１の領域は、試行の陰性対照を構成しており、処置しなかった。第２の領域は、試行の陽性対照を構成しており、２ｍｇ／ｃｍ２の市販の試料で処理した。該試料は、Ｃｏｌｌｉｓｔａｒ（登録商標）という製品に相当し、スモッグ、煙、微粉塵に対する具体的な汚染防止作用を備えた「バリア」及び保湿効果を主張するものであった。第３の領域は、２ｍｇ／ｃｍ２での本発明の組成物で処理し、その汚染防止能力を試験した。
【０２００】
製剤の適用の２０分後、４０ｍｇのカーボンブラック（平均の大きさが１μｍの粒子）を、区切られた各領域へと散布した。５分の接触時間の後、腕を振って、区切られた各領域上のカーボンブラックの残余量を視覚的に評価した。次に、各領域を５０ｍＬの蒸留水ですすいだ。カーボンブラックの微粒子の残余量をもう一度視覚的に評価した。
【０２０１】
本結果を図９に示している。
【０２０２】
ステップ１：前腕上の区切られた皮膚領域、製品の適用（２ｍｇ／ｃｍ２）、
ステップ２：４０ｍｇのカーボンブラックの散布：接触時間：５分、
ステップ３：付着試験：腕を振った後の残余のカーボンブラック、及び
ステップ４：バリア効果試験：皮膚をすすいだ後の残余のカーボンブラック。
【０２０３】
視覚的に、本発明の組成物は、陰性対照（対照）及び陽性対照（先行技術の組成物）よりも良好なカーボンブラック付着防止特性、及び良好な反発効果を有することが観察された。
【０２０４】
１０／汚染物質粒子及び分子を反発するための本発明の組成物の反発効果の評価及び定量
項目８にあるような実験プロトコルを繰り返した。
【０２０５】
前腕の前面を、２ｍｇ／ｃｍ２の本発明の組成物（試料Ｂ）、又は先行技術からの２つの「汚染防止」組成物（試料Ａ及び試料Ｃ）を適用することによって処理した。
【０２０６】
微粒子の量は、すすぎ前（Ｔ１）及びすすぎ後（Ｔ２）で定量した。
【０２０７】
バリア効果は、Ｙｏｕｎｇ−Ｄｕｐｒｅの式：
【数１】
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を使用して、微粒子の堆積後の剥離の％を測定することによって決定され、式中、ｃｏｓθは、決定された表面に対する粒子の付着を表す。このパラメータにより、該組成物が親水性か疎水性かを判定することができ、及び
γＳＶは、固体／蒸気界面の表面張力であり、γＳＬは、固体／液体界面の表面張力であり、γＬＶは、液体／蒸気界面の表面張力である。
【０２０８】
本結果を図１０に示している。
【０２０９】
定量データは、試料Ａを適用すると、「初回付着：堆積後の剥離」の比が、すすぎ前に８８．５％、すすぎ後に３．６％になったことを示している。試料Ｃを適用すると、「初回付着：堆積後の剥離」の比は、すすぎ前で６６．４％、すすぎ後で１１．４％になった。
【０２１０】
「初回付着：堆積後の剥離」比の低減は、先行技術が付着防止特性を有していたが、微粒子のいかなる反発も生じなかったことを示している。
【０２１１】
逆に、本発明の組成物を適用すると、すすぎ前で６８．７％、すすぎ後でー１９．９％の「初回付着：堆積後の剥離」の比になった。すすぎ後に得られた「初回付着；堆積後の剥離」比のこの負の値は、カーボンブラックの微粒子に対する付着防止効果によって補足される反発効果を明確に示している。
【０２１２】
したがって、これらの結果は、本発明の組成物が微粒子に対して「バリア」特性を有することを示している。言い換えれば、本発明の組成物は、大気汚染物質粒子に対する付着防止及び反発の補完的な保護効果を提案し、これを初めて達成する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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