(57)【要約】ＡＡＶおよびバッファーを含むＡＡＶ組成物。これらのＡＡＶ組成物は、脳室内（ＩＣＶ）および実質内（ＩＰＡ）投与、ならびに他の投与経路での使用に適しており、凍結、液体、または潜在的にフリーズドライ（凍結乾燥）状態で提供できる。
2021532071.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ウイルスベクターと、以下を含むバッファー製剤：
（ｉ）約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭの安定剤；
（ｉｉ）約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩；
（ｉｉｉ）約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；
（ｉｖ）約０．１ｍＭ〜約２０ｍＭの糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせ；および
（ｖ）水；
とを含む水性組成物。
【請求項２】
約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で約７．０または約７．４のｐＨを有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記安定剤がＬ−ヒスチジンである、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
約１ｍＭ〜約２０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１５ｍＭ、または約５ｍＭ〜約１５ｍＭのＬ−ヒスチジンを含む、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記薬学的に許容される塩が、ナトリウム塩、アンモニウム塩、またはカリウム塩である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約１５０ｍＭ〜約２００ｍＭ、約１２５ｍＭ〜約１７５ｍＭ、または約１５０ｍＭ〜約１６０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記非イオン性界面活性剤が、ポリソルベート８０、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８、またはそれらの組み合わせである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
約０．０００５％〜約０．００６％（ｗ／ｗ）、約０．００１％〜約０．００５％（ｗ／ｗ）、または約０．００２％〜約０．００４％（ｗ／ｗ）のＰＳ８０を含む、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
ＰＳ８０がＳｕｐｅｒ  Ｒｅｆｉｎｅｄ（商標）ＰＳ８０である、請求項７または８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記糖が、スクロース、グルコース、またはそれらの組み合わせである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
約０．５ｍＭ〜約１５ｍＭ、約１ｍＭ〜約１０ｍＭ、または約４ｍＭ〜約６ｍＭのスクロース、グルコース、またはそれらの組み合わせを含む、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
グリシン、グルコース、またはグリシンとグルコースの両方を含まない、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
ウイルスベクターと、以下を含むバッファー製剤：
（ｉ）約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン；
（ｉｉ）約１５４ｍＭの塩化ナトリウム；
（ｉｉｉ）約０．００３％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）；
（ｉｖ）約５ｍＭのスクロース；および
（ｖ）水
とを含む水性組成物。
【請求項１４】
ウイルスベクターと、以下を含むバッファー製剤：
（ｉ）約１ｍＭ〜約１００ｍＭの安定剤；
（ｉｉ）約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩；
（ｉｉｉ）約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；および
（ｉｖ）水
とを含む水性組成物。
【請求項１５】
約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で約７．０または約７．４のｐＨを有する、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記安定剤がＬ−ヒスチジンである、請求項１４または請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
約３０ｍＭ〜約７５ｍＭ、約２５ｍＭ〜約７５ｍＭ、または約４０ｍＭ〜約６０ｍＭのＬ−ヒスチジンを含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
前記薬学的に許容される塩が、ナトリウム塩、アンモニウム塩、またはカリウム塩である、請求項１４〜１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約１５０ｍＭ〜約２００ｍＭ、約１２５ｍＭ〜約１７５ｍＭ、または約１５０ｍＭ〜約１６０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記非イオン性界面活性剤がＰＳ８０である、請求項１４〜１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２１】
約０．０００５％〜約０．００６％（ｗ／ｗ）、約０．００１％〜約０．００５％（ｗ／ｗ）、または約０．００２％〜約０．００４％（ｗ／ｗ）のＰＳ８０を含む、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
ＰＳ８０がＳｕｐｅｒ  Ｒｅｆｉｎｅｄ（商標）ＰＳ８０である、請求項２０または２１に記載の組成物。
【請求項２３】
糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせを含まない、請求項１４〜２２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２４】
グリシンを含まない、請求項１４〜２３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２５】
ウイルスベクターと、以下を含むバッファー製剤：
（ｉ）約５０ｍＭのＬ−ヒスチジン；
（ｉｉ）約１５４ｍＭの塩化ナトリウム；
（ｉｉｉ）約０．００３％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）；および
（ｉｖ）水
とを含む水性組成物。
【請求項２６】
ウイルスベクターと、以下を含むバッファー製剤：
（ｉ）約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭの安定剤；
（ｉｉ）約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩；
（ｉｉｉ）任意選択で約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；および
（ｉｖ）水
とを含む水性組成物。
【請求項２７】
約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で約７．０または約７．４のｐＨを有する、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２８】
前記安定剤がクエン酸ナトリウムである、請求項２６または２７に記載の組成物。
【請求項２９】
約１ｍＭ〜約２０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１５ｍＭ、または約５ｍＭ〜約１５ｍＭのクエン酸ナトリウムを含む、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
前記安定剤が重炭酸ナトリウムである、請求項２６または２７に記載の組成物。
【請求項３１】
前記薬学的に許容される塩が、ナトリウム塩、アンモニウム塩またはカリウム塩である、請求項２６〜３０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３２】
約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約１５０ｍＭ〜約２００ｍＭ、約１２５ｍＭ〜約１７５ｍＭ、または約１４０ｍＭ〜約１６０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項３１に記載の組成物。
【請求項３３】
前記非イオン性界面活性剤がＰＳ８０である、請求項２６〜３２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３４】
約０．０００５％〜約０．００６％（ｗ／ｗ）、約０．００１％〜約０．００５％（ｗ／ｗ）、または約０．００２％〜約０．００４％（ｗ／ｗ）のＰＳ８０を含む、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３５】
ＰＳ８０がＳｕｐｅｒ  Ｒｅｆｉｎｅｄ（商標）ＰＳ８０である、請求項３３または３４に記載の組成物。
【請求項３６】
糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせを含まない、請求項２６〜３５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３７】
グリシンを含まない、請求項２６〜３６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３８】
ウイルスベクターと、以下を含むバッファー製剤：
（ｉ）約１０ｍＭのクエン酸ナトリウム；
（ｉｉ）約１５０ｍＭの塩化ナトリウム；
（ｉｉｉ）約０．００３％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）；および
（ｉｖ）水
とを含む水性組成物。
【請求項３９】
ウイルスベクターと、以下を含むバッファー製剤：
（ｉ）約１ｍＭ〜約４０ｍＭの安定剤；
（ｉｉ）約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩；
（ｉｉｉ）任意選択で約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；および
（ｉｖ）水
とを含む水性組成物。
【請求項４０】
約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で約７．０または約７．４のｐＨを有する、請求項３９に記載の組成物。
【請求項４１】
前記安定剤が重炭酸ナトリウムである、請求項３９または４０に記載の組成物。
【請求項４２】
約５ｍＭ〜約３５ｍＭ、約１０ｍＭ〜約３０ｍＭ、または約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの重炭酸ナトリウムを含む、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４３】
前記薬学的に許容される塩が、ナトリウム塩、アンモニウム塩またはカリウム塩である、請求項３９〜４２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４４】
約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約１００ｍＭ〜約１５０ｍＭ、約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭ、または約１１０ｍＭ〜約１３０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項４３に記載の組成物。
【請求項４５】
前記非イオン性界面活性剤がＰＳ８０である、請求項３９〜４４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４６】
約０．０００５％〜約０．００６％（ｗ／ｗ）、約０．００１％〜約０．００５％（ｗ／ｗ）、または約０．００２％〜約０．００４％（ｗ／ｗ）のＰＳ８０を含む、請求項４５に記載の組成物。
【請求項４７】
ＰＳ８０がＳｕｐｅｒ  Ｒｅｆｉｎｅｄ（商標）ＰＳ８０である、請求項４５または４６に記載の組成物。
【請求項４８】
糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせを含まない、請求項３９〜４７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４９】
グリシンを含まない、請求項３９〜４８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５０】
ウイルスベクターと、以下を含むバッファー製剤：
（ｉ）約２０ｍＭの重炭酸ナトリウム、
（ｉｉ）約１２０ｍＭの塩化ナトリウム、
（ｉｉｉ）約０．００３％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）；および
（ｉｖ）水
とを含む水性組成物。
【請求項５１】
前記ウイルスベクターがＡＡＶである、請求項１〜５０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５２】
前記ウイルスベクターが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、またはＡＡＶ１０である、請求項１〜５１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５３】
前記ウイルスベクターがＡＡＶ８である、請求項１〜５２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５４】
前記ウイルスベクターがＡＡＶ９である、請求項１〜５２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５５】
前記ウイルスベクターがＡＡＶ６である、請求項１〜５２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５６】
ＡＡＶベクターが遺伝的および／または化学的に改変されている、請求項５１〜５５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５７】
液体である、請求項１〜５６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５８】
凍結乾燥されている、請求項１〜５６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５９】
単位用量容器内に存在する、請求項１〜５８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６０】
単位用量容器がバイアルである、請求項５９に記載の組成物。
【請求項６１】
バイアルが密封されたガラスバイアルである、請求項６０に記載の組成物。
【請求項６２】
凍結乾燥された保存安定組成物であって、実質的に脱水されており、該凍結乾燥された保存安定組成物を希釈剤で再構成することにより、請求項１〜６１のいずれか一項に記載の組成物を形成することができる、凍結乾燥された保存安定組成物。
【請求項６３】
再構成が、凍結乾燥された保存安定組成物を注射用水（ＷＦＩ）と配合することを含む、請求項６２に記載の凍結乾燥された保存安定組成物。
【請求項６４】
対象における出血性障害を処置する方法であって、障害または疾患を処置するのに有効な量で請求項１〜６３のいずれか一項に記載の組成物を対象に投与することを含む、方法。
【請求項６５】
前記障害または疾患が出血性障害である、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
前記出血性障害が、血友病Ａ、血友病Ｂ、血友病Ｃ、フォン・ヴィレブランド病（ＶＷＤ）、第Ｉ因子欠乏症、第ＩＩ因子欠乏症、第Ｖ因子欠乏症、第ＶＩＩ因子欠乏症、第ＶＩＩＩ因子欠乏症、第ＩＸ因子欠乏症、第Ｘ因子欠乏症、第ＸＩ因子欠乏症、第ＸＩＩ因子欠乏症、または第ＸＩＩＩ因子欠乏症である、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
対象における神経学的障害を処置する方法であって、障害または疾患を処置するのに有効な量で請求項１〜６３のいずれか一項に記載の組成物を対象に投与することを含む、方法。
【請求項６８】
前記障害または疾患が神経変性障害である、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
前記神経変性障害が、多発性硬化症（「ＭＳ」）、ＡＩＤＳ関連神経変性およびアルツハイマー病、感染性髄膜炎、脳脊髄炎、パーキンソン病、ハンチントン病、ハンター病、筋萎縮性側索硬化症、または脳炎である、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を含む水性組成物を調製する方法であって、
ａ）Ｌ−ヒスチジン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、スクロース、水、および任意選択で塩化ナトリウムを、約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、および約０．１ｍＭ〜約２０ｍＭのスクロースの濃度になるように配合する、および
ｂ）ＡＡＶ粒子を添加し、それによってＡＡＶを含む組成物を得る
ことを含む、方法。
【請求項７１】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を含む水性組成物を調製する方法であって、
ａ）Ｌ−ヒスチジン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、水、および任意選択で塩化ナトリウムを、約１ｍＭ〜約１００ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの塩化ナトリウム、および約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）の濃度になるように配合する、および
ｂ）ＡＡＶを添加し、それによってＡＡＶを含む組成物を得る
ことを含む、方法。
【請求項７２】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を含む水性組成物を調製する方法であって、
ａ）クエン酸ナトリウム、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、水、および任意選択で塩化ナトリウムを、約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭのクエン酸ナトリウム、約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）の濃度になるように配合する、および
ｂ）ＡＡＶを添加し、それによってＡＡＶを含む組成物を得る
ことを含む、方法
【請求項７３】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を含む水性組成物を調製する方法であって、
ａ）重炭酸ナトリウム、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、水、および任意選択で塩化ナトリウムを、約１ｍＭ〜約４０ｍＭの重炭酸ナトリウム、０ｍＭ〜約２５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）の濃度になるように配合する、および
ｂ）ＡＡＶを添加し、それによってＡＡＶを含む組成物を得る
ことを含む、方法。
【請求項７４】
ウイルスベクターを含む組成物を安定に保存する方法であって、請求項１〜６３のいずれか一項に記載の医薬組成物の安定剤、薬学的に許容される塩、非イオン性界面活性剤、および任意選択で糖、糖アルコールまたはそれらの組み合わせを配合することを含む、方法。
【請求項７５】
凍結乾燥された保存安定ＡＡＶ組成物を生成するのに十分な方法で、請求項１〜６３のいずれか一項に記載の凍結乾燥されたＡＡＶ組成物を作成する方法。
【請求項７６】
水性濃縮組成物を単位用量容器に導入し、単位用量容器内で水性濃縮組成物を凍結乾燥することを含む、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
前記単位用量容器がバイアルである、請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】
凍結乾燥された組成物を前記単位用量容器内に密封することをさらに含む、請求項７６または７７に記載の方法。
【請求項７９】
前記ウイルスベクターが、約−８０℃〜約４０℃の温度範囲で少なくとも６か月間保存されたときに安定である力価を有する、請求項１〜６３のいずれか一項に記載の組成物または請求項７０〜７８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８０】
前記ウイルスベクターが、約−８０℃〜約２５℃の温度範囲で少なくとも６か月間保存されたときに安定である力価を有する、請求項１〜６３のいずれか一項に記載の組成物または請求項７０〜７８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８１】
前記ウイルスベクターが、約−２０℃〜約１８℃の温度範囲で少なくとも６か月間保存されたときに安定である力価を有する、請求項１〜６３のいずれか一項に記載の組成物または請求項７０〜７８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８２】
前記ウイルスベクターが、約−２０℃〜約４℃の温度範囲で少なくとも６か月間保存されたときに安定である力価を有する、請求項１〜６３のいずれか一項に記載の組成物または請求項７０〜７８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８３】
前記ウイルスベクターが、約４℃〜約４０℃の温度範囲で少なくとも６か月間保存されたときに安定である力価を有する、請求項１〜６３のいずれか一項に記載の組成物または請求項７０〜７８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８４】
前記ウイルスベクターが、約４℃〜約２５℃の温度範囲で少なくとも６か月間保存されたときに安定である力価を有する、請求項１〜６３のいずれか一項に記載の組成物または請求項７０〜７８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８５】
前記ウイルスベクターが、約４℃〜約１８℃の温度範囲で少なくとも６か月間保存されたときに安定である力価を有する、請求項１〜６３のいずれか一項に記載の組成物または請求項７０〜７８のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）は、線状一本鎖ＤＮＡゲノムをパッケージングする小型の非エンベロープウイルスである。ＡＡＶによる増殖感染は、例えばアデノウイルスまたはヘルペスウイルスなどのヘルパーウイルスの存在下でのみ生じるため、ＡＡＶはパルボウイルス科、ディペンドウイルス属に属する。ヘルパーウイルスの不在下ですら、ＡＡＶ（血清型２）は宿主ヒトゲノムの染色体１９ｑ１３．４中に組み込まれることにより潜伏を達成することができる。それは、部位特異的組込みができることが知られている唯一の哺乳動物ＤＮＡウイルスである（非特許文献１）。
【０００２】
ＡＡＶを臨床で安全に使用するために、ＡＡＶはそのゲノム内のいくつかの位置で遺伝的に改変されている。例えば、ウイルス複製に必要なＲｅｐ遺伝子、および部位特異的組込みに必要な因子が、多くのウイルスベクターにおいてＡＡＶゲノムから除去されている。この組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）は、染色体外状態で存在し、ゲノムＤＮＡへの組込み効率が非常に低い。従って、ｒＡＡＶが宿主細胞においてランダム変異導入を生じさせる可能性は、完全には排除されないとしても、低減される。これらの特性や病原性の欠如のため、ｒＡＡＶは前臨床および臨床適用の多様な態様で遺伝子治療ベクターとして大きな見込みを示している。新たな血清型および自己相補的ベクターが臨床で試験されている。これら進行中のベクター開発と並行して、高い純度および効力を有する高力価のｒＡＡＶベクターを効率的に作成できるスケーラブルな製造プロセスに対する継続的な取組みに焦点が当てられてきた。
【０００３】
ＡＡＶの研究は、ヒト投与を目的としたＡＡＶ組成物にも焦点を当てている。このようなＡＡＶ組成物は、安全で無菌であり、適正製造基準（ＧＭＰ）グレードであるだけでなく、ＡＡＶの長期安定性を示しかつ促進し、製造、充填および保存プロセス中におけるＡＡＶ効力の損失を最小限に抑える必要があることが理解される。組成物はさらに、ＡＡＶがその中に充填されて保存される容器の表面および製造中に使用される機械の表面への吸着を防止する必要がある。そのようなＡＡＶ組成物を設計するための努力は多大であるが、特に脳室内（ＩＣＶ）および実質内（ＩＰＡ）投与のための、改善されたＡＡＶ組成物の必要性が依然として残っている。記載の組成物は、髄腔内（ＩＴ）ならびに静脈内（ＩＶ）、皮下（ＳＣ）、筋肉内（ＩＭ）および硝子体内（ＩＶＴ）投与の可能性もある。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Daya and Berns, Clinical Microbiology Reviews, pages 583-593 (2008)
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本開示は、上記の満たされていないニーズに対処する、ヒトへの投与（例えば、脳室内（ＩＣＶ）および実質内（intraparenchymal）（ＩＰＡ）、髄腔内（ＩＴ）、ならびに静脈内（ＩＶ）、皮下（ＳＣ）、筋肉内（ＩＭ）および硝子体内（ＩＶＴ）投与）に適合した組成物（例えば、保存組成物および／または医薬組成物）を提供する。有利なことに、いくつかの実施形態では、組成物は、ＡＡＶの長期保存に適しており、ＡＡＶ効力の損失を最小限に抑え、有利には目に見える粒子形成を防ぎ、さらにＡＡＶがその中に充填されて保存される容器の表面および製造時に使用される機械の表面への吸着を防ぐ。
【０００６】
遺伝子治療によって処置可能な障害について対象を処置する方法が本開示によって提供される。例示的な態様では、この方法は、疾患または障害を処置するのに有効な量で本明細書に記載の医薬組成物を対象に投与することを含む。
【０００７】
ある態様において、本発明は、ウイルスベクターと、約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭの安定剤；約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩；約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；および約０．１ｍＭ〜約２０ｍＭの糖、糖アルコールまたはそれらの組み合わせを含むバッファー製剤（buffer formulation）とを含む、水性組成物を提供する。
【０００８】
他の態様において、本発明は、ウイルスベクターと、約１ｍＭ〜約１００ｍＭの安定剤；約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩；約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤を含むバッファー製剤とを含む、水性組成物を提供する。
【０００９】
他の態様において、本発明は、ウイルスベクターと、約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭの安定剤；約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩；および任意選択で約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤を含むバッファー製剤とを含む、水性組成物を提供する。
【００１０】
追加の態様では、本発明は、ウイルスベクターと、約１ｍＭ〜約４０ｍＭの安定剤；約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩；および任意選択で約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤を含むバッファー製剤とを含む、水性組成物を提供する。
【００１１】
ある実施形態において、本発明のバッファー製剤は、Ｌ−ヒスチジンを含む。ある実施形態において、バッファー製剤は、１ｍＭ〜約２０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１５ｍＭ、約５ｍＭ〜約１５ｍＭ、約３０ｍＭ〜約７５ｍＭ、約２５ｍＭ〜約７５ｍＭ、または約４０ｍＭ〜約６０ｍＭのＬ−ヒスチジンを含む。
【００１２】
ある実施形態において、本発明のバッファー製剤は、クエン酸ナトリウムを含む。ある実施形態では、バッファー製剤は、約１ｍＭ〜約２０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１５ｍＭ、または約５ｍＭ〜約１５ｍＭのクエン酸ナトリウムを含む。
【００１３】
ある実施形態において、本発明のバッファー製剤は、重炭酸ナトリウムを含む。ある実施形態では、バッファー製剤は、約５ｍＭ〜約３５ｍＭ、約１０ｍＭ〜約３０ｍＭ、または約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの重炭酸ナトリウムを含む。
【００１４】
ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、ナトリウム塩、アンモニウム塩、またはカリウム塩である。ある実施形態では、塩は塩化ナトリウムである。
【００１５】
ある実施形態において、本発明のバッファー製剤は、約０〜約１００ｍＭ、約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ、約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭ、約１１０ｍＭ〜約１３０ｍＭ、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約１５０ｍＭ〜約２００ｍＭ、約１２５ｍＭ〜約１７５ｍＭ、約１４０ｍＭ〜約１６０ｍＭ、または約１５０ｍＭ〜約１６０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は塩化ナトリウムである。
【００１６】
ある実施形態において、本発明のバッファー製剤は、約０．０００５％〜約０．００６％（ｗ／ｗ）、約０．００１％〜約０．００５％（ｗ／ｗ）、または約０．００２％〜約０．００４％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤を含む。ある実施形態では、非イオン性界面活性剤は、ポリソルベート（Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ）８０、プルロニック（登録商標）（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）Ｆ−６８、またはそれらの組み合わせである。ある実施形態では、非イオン性界面活性剤はポリソルベート８０である。ある実施形態では、ポリソルベート８０は、Ｓｕｐｅｒ  Ｒｅｆｉｎｅｄ（商標）ＰＳ８０である。
【００１７】
ある実施形態において、本発明のバッファー製剤は、約０．５ｍＭ〜約１５ｍＭ、約１ｍＭ〜約１０ｍＭ、または約４ｍＭ〜約６ｍＭの糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせを含む。ある実施形態では、糖は、スクロース、グルコース、またはそれらの組み合わせである。
【００１８】
ある実施形態では、本発明の組成物は水を含む。
【００１９】
ある態様では、本発明は、ウイルスベクターと、約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン；約１５４ｍＭの塩化ナトリウム；約０．００３％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）；約５ｍＭのスクロース；および水を含むバッファー製剤とを含む、水性組成物を提供する。
【００２０】
ある態様では、本発明は、ウイルスベクターと、約５０ｍＭのＬ−ヒスチジン；約１５４ｍＭの塩化ナトリウム；および約０．００３％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）；および水を含むバッファー製剤とを含む、水性組成物を提供する。
【００２１】
ある態様において、本発明は、ウイルスベクターと、約１０ｍＭのクエン酸ナトリウム；約１５０ｍＭの塩化ナトリウム；約０．００３％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）；および水を含むバッファー製剤とを含む、水性組成物を提供する。
【００２２】
ある態様において、本発明は、ウイルスベクターと、約２０ｍＭの重炭酸ナトリウム；約１２０ｍＭの塩化ナトリウム；約０．００３％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）；および水を含むバッファー製剤とを含む、水性組成物を提供する。
【００２３】
ある実施形態において、本発明の組成物は約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で、約７．０または約７．４のｐＨを有する。
【００２４】
ある実施形態では、本発明の組成物は、グリシン、グルコース、またはグリシンとグルコースの両方を含まない。
【００２５】
概して、本明細書で提供されるＡＡＶ組成物は医薬投与に適している。ある実施形態では、ＡＡＶは、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、またはＡＡＶ１０であり得る。ある実施形態では、ＡＡＶは、ＡＡＶ２、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ８、またはＡＡＶ９であり得る。ある実施形態では、ＡＡＶはＡＡＶ６であり得る。ある実施形態では、ＡＡＶはＡＡＶ８であり得る。ある実施形態では、ＡＡＶはＡＡＶ９であり得る。ある実施形態において、ＡＡＶベクターは、遺伝的および／または化学的に改変されている。
【００２６】
ある実施形態では、組成物は液体である。ある実施形態では、組成物は凍結乾燥される。ある実施形態では、組成物は単位用量容器内に存在する。ある実施形態では、単位用量容器はバイアルである。ある実施形態では、バイアルは密封ガラスバイアルである。
【００２７】
ある態様において、本発明は、凍結乾燥された保存安定組成物を提供し、凍結乾燥された保存安定組成物は実質的に脱水され、凍結乾燥された保存安定組成物を希釈剤で再構成することにより、本明細書に記載の水性組成物のいずれかを形成することができる。ある実施形態において、再構成は、凍結乾燥された保存安定組成物を注射用水（ＷＦＩ）と配合することを含む。
【００２８】
ある態様において、本発明は、対象における神経学的障害を処置する方法を提供し、障害または疾患を処置するのに有効な量で本明細書に記載の組成物のいずれかを対象に投与することを含む。ある実施形態では、障害または疾患は神経変性障害である。ある実施形態において、神経変性障害は、多発性硬化症（「ＭＳ」）、ＡＩＤＳ関連神経変性およびアルツハイマー病、感染性髄膜炎、脳脊髄炎、パーキンソン病、ハンチントン病、ハンター病、筋萎縮性側索硬化症、または脳炎である。
【００２９】
ある態様において、本発明は、対象における出血性障害を処置する方法を提供し、障害または疾患を処置するのに有効な量で本明細書に記載の組成物のいずれかを対象に投与することを含む。ある実施形態では、障害または疾患は出血性障害である。ある実施形態において、出血性障害は、血友病Ａ、血友病Ｂ、血友病Ｃ、フォン・ヴィレブランド病（von Willebrand disease）（ＶＷＤ）、第Ｉ因子欠乏症、第ＩＩ因子欠乏症、第Ｖ因子欠乏症、第ＶＩＩ因子欠乏症、第ＶＩＩＩ因子欠乏症、第ＩＸ因子欠乏症、第Ｘ因子欠乏症、第ＸＩ因子欠乏症、第ＸＩＩ因子欠乏症、または第ＸＩＩＩ因子欠乏症である。
【００３０】
ある態様において、本発明は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を含む水性組成物を調製する方法を提供し、その方法は、ａ）Ｌ−ヒスチジン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、スクロース、水、および任意選択で塩化ナトリウムを、約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、および約０．１ｍＭ〜約２０ｍＭのスクロースの濃度になるように配合する；およびｂ）ＡＡＶ粒子を添加し、それによりＡＡＶを含む組成物を得る；ことを含む。
【００３１】
ある態様において、本発明は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を含む水性組成物を調製する方法を提供し、その方法は、ａ）Ｌ−ヒスチジン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、水、および任意選択で塩化ナトリウムを、約１ｍＭ〜約１００ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの塩化ナトリウム、および約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）の濃度になるように配合する；およびｂ）ＡＡＶを添加し、それによりＡＡＶを含む組成物を得る；ことを含む。
【００３２】
ある態様において、本発明は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を含む水性組成物を調製する方法を提供し、その方法は、ａ）クエン酸ナトリウム、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、水、および任意選択で塩化ナトリウムを、０．５ｍＭ〜約３０ｍＭのクエン酸ナトリウム、約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）の濃度になるように配合する；およびｂ）ＡＡＶを添加し、それによりＡＡＶを含む組成物を得る；ことを含む。
【００３３】
ある態様において、本発明は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を含む水性組成物を調製する方法を提供し、その方法は、ａ）重炭酸ナトリウム、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、水、および任意選択で塩化ナトリウムを、約１ｍＭ〜約４０ｍＭの重炭酸ナトリウム、約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）の濃度になるように配合する；およびｂ）ＡＡＶを添加し、それにより組成物を得る；ことを含む。
【００３４】
ある態様において、本発明は、ウイルスベクターを含む組成物を安定に保存する方法を提供し、その方法は、本明細書に記載の組成物のいずれかの医薬組成物の安定剤、非イオン性界面活性剤、および任意選択で薬学的に許容される塩および／または糖、糖アルコールもしくはそれらの組み合わせを配合することを含む。
【００３５】
ある態様では、本発明は、凍結乾燥された保存安定ＡＡＶ組成物を作成するのに十分な方法（manner）で、本明細書に記載の組成物のいずれか１つの凍結乾燥されたＡＡＶ組成物を作成する方法を提供する。
【００３６】
ある実施形態では、この方法は、水性濃縮組成物を単位用量容器に入れ、水性濃縮組成物を単位用量容器内で凍結乾燥することを含む。ある実施形態では、単位用量容器はバイアルである。ある実施形態では、この方法は、凍結乾燥された組成物を単位用量容器内に密封することをさらに含む。
【００３７】
ある実施形態において、ウイルスベクターは、約−８０℃〜約４０℃の温度範囲で少なくとも６か月間保存されたときに安定である力価を有する。ある実施形態において、ウイルスベクターは、約−８０℃〜約２５℃の温度範囲で少なくとも６か月間保存されたときに安定である力価を有する。ある実施形態において、ウイルスベクターは、約−２０℃〜約１８℃の温度範囲で少なくとも６か月間保存されたときに安定である力価を有する。ある実施形態において、ウイルスベクターは、約−２０℃〜約４℃の温度範囲で少なくとも６か月間保存されたときに安定である力価を有する。ある実施形態において、ウイルスベクターは、約４℃〜約４０℃の温度範囲で少なくとも少なくとも６か月間保存されたときに安定である力価を有する。ある実施形態において、ウイルスベクターは、約４℃〜約２５℃の温度範囲で少なくとも６か月間保存されたときに安定である力価を有する。ある実施形態において、ウイルスベクターは、約４℃〜約１８℃の温度範囲で少なくとも６か月間保存されたときに安定である力価を有する。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】＋５±３℃で最大４か月間および≦−６０℃で最大６か月間保存した後、ＥＬＩＳＡによって測定した総ＡＡＶ８粒子力価（titer）の回収率（％）のグラフである。
【図２】＋５±３℃で４か月までおよび≦−６０℃で６か月まで保存したＡＡＶ８粒子のｉｎ  ｖｉｖｏ生物効力（biopotency）（ＩＵ／ｍｌ）を示すグラフである。
【図３】＋５±３℃で最大４か月間および≦−６０℃で最大６か月間保存した後、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物効力によって測定した総ＡＡＶ８粒子の回収率（％）のグラフである。
【図４】＋５±３℃で最大４か月間、≦−６０℃で最大６か月間保存した後、ＩＴＲ−ｑＰＣＲで測定した総ＡＡＶ８粒子の回収率（％）のグラフである。
【図５】０か月の時点でのＡＡＶ８粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥ銀染色およびウエスタンブロットである。
【図６】＋５±３℃または≦−６０℃で保存１か月後の時点でのＡＡＶ８粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥ銀染色である。
【図７】＋５±３℃または≦−６０℃で保存１か月後の時点でのＡＡＶ８粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥウエスタンブロットである。
【図８】＋５±３℃で保存２か月後の時点でのＡＡＶ８粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥ銀染色およびウエスタンブロットである。
【図９】＋５±３℃または≦−６０℃で保存２か月後の時点でのＡＡＶ８粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥ銀染色である。
【図１０】＋５±３℃または≦−６０℃で保存２か月後の時点でのＡＡＶ８粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥウエスタンブロットである。
【図１１】≦−６０℃で保存３か月後の時点でのＡＡＶ８粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥ銀染色およびウエスタンブロットである。
【図１２】＋５±３℃で保存４か月後の時点でのＡＡＶ８粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥ銀染色である。
【図１３】≦−６０℃で保存６か月後の時点でのＡＡＶ８粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥウエスタンブロットである。
【図１４】バッファー製剤１（０、４、および６か月）のＡＡＶ８粒子のｎｓＴＥＭである。
【図１５】バッファー製剤２（０、４、および６か月）のＡＡＶ８粒子のｎｓＴＥＭである。
【図１６】バッファー製剤３（０、４、および６か月）のＡＡＶ８粒子のｎｓＴＥＭである。
【図１７】参照バッファー（０、４、および６か月）のＡＡＶ８粒子のｎｓＴＥＭである。
【図１８】＋５±３℃または≦−６０℃で最大６か月間保存した後にＥＬＩＳＡで測定した総ＡＡＶ９粒子力価の回収率（％）のグラフである。
【図１９】＋５±３℃または≦−６０℃で最大６か月間保存した後にＨＴ２−ｑＰＣＲで測定した総ＡＡＶ９粒子の回収率（％）のグラフである。
【図２０】＋５±３℃または≦−６０℃で最大６か月間の保存期間中のＡＡＶ９粒子のｉｎ  ｖｉｖｏ生物効力（相対的ｍＨＴＴ発現）を示すグラフである。各製剤をそれぞれ３つに群分けする：左から順に、バッファー製剤１、バッファー製剤２、バッファー製剤３、および参照バッファーである。
【図２１】０か月（出発物質）の時点でのＡＡＶ９粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥ銀染色およびウエスタンブロットである。
【図２２】＋５±３℃（左）および≦−６０℃（中央）で保存４週間後の時点でのＡＡＶ９粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥ銀染色ブロットである。
【図２３】＋５±３℃（左）および≦−６０℃（中央）で保存４週間後の時点でのＡＡＶ９粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥウエスタンブロット（抗キャプシド）である。
【図２４】＋５±３℃（左）および≦−６０℃（右）で保存８週間後の時点でのＡＡＶ９粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥ銀染色である。
【図２５】＋５±３℃（左）および≦−６０℃（右）で保存８週間後の時点でのＡＡＶ９粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥウエスタンブロット（抗キャプシド）である。
【図２６】＋５±３℃（左）および≦−６０℃（右）で保存３か月後の時点でのＡＡＶ９粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥ銀染色である。
【図２７】＋５±３℃（左）および≦−６０℃（右）で保存３か月後の時点でのＡＡＶ９粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥウエスタンブロット（抗キャプシド）である。
【図２８】＋５±３℃（左）および≦−６０℃（右）で保存６か月後の時点でのＡＡＶ９粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥ銀染色である。
【図２９】＋５±３℃（左）および≦−６０℃（右）で保存６か月後の時点でのＡＡＶ９粒子のＳＤＳ−ＰＡＧＥウエスタンブロット（抗キャプシド）である。
【図３０】バッファー製剤１（０か月、９０日、および６か月）のＡＡＶ９粒子のｎｓＴＥＭである。
【図３１】バッファー製剤２（０か月、９０日、および６か月）のＡＡＶ９粒子のｎｓＴＥＭである。
【図３２】バッファー製剤３（０か月、９０日、および６か月）のＡＡＶ９粒子のｎｓＴＥＭである。
【図３３】０か月の時点での参照バッファー中のＡＡＶ９のｎｓＴＥＭである。
【図３４】ＡＡＶ６粒子（０、１、および２か月）のＳＤＳ−ＰＡＧＥ銀染色である。
【図３５】ＡＡＶ６粒子（０、１、および２か月）のＳＤＳ−ＰＡＧＥウエスタンブロット（抗キャプシド）である。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
本開示は、ＡＡＶの長期保存およびＡＡＶ効力の喪失を最小限に抑えるのに適した、ヒトへの投与または獣医投与に適合性のある組成物、例えば医薬組成物を提供する。本明細書で提供される組成物は、その組成物が目に見える粒子の形成を防ぎ、またＡＡＶがその中に充填されて保存される容器の表面への吸着を防ぎ、製造中に使用される機械への吸着を防ぐため有利である。ある実施形態では、本明細書で提供される組成物は、長期間保存された場合に有意なＡＡＶ活性を保持する。ある実施形態では、本明細書で提供される組成物は、分解および／または凝集を低減または遅延させる。
【００４０】
定義
本明細書で使用される場合、「ウイルスベクター」という用語は、核酸を細胞に移入することができるウイルスまたはウイルス粒子、あるいは移入された核酸自体のいずれかを指すことができる。ウイルスベクターおよびトランスファープラスミドは、主にウイルスに由来する構造的および／または機能的な遺伝子要素を含む。
【００４１】
本明細書で使用される場合、「ＡＡＶ」という用語は、天然起源の形態と組換え形態（ｒＡＡＶ）の両方のアデノ随伴ウイルスベクターを指し、ＡＡＶの変異形態を包含する。ＡＡＶという用語にはさらに、ＡＡＶ１型、ＡＡＶ２型、ＡＡＶ３型、ＡＡＶ４型、ＡＡＶ５型、ＡＡＶ６型、ＡＡＶ７型、ＡＡＶ８型、ＡＡＶ９型、ＡＡＶ１０型、トリＡＡＶ、ウシＡＡＶ、イヌＡＡＶ、ウマＡＡＶ、ヒツジＡＡＶ、霊長類ＡＡＶ、および非霊長類ＡＡＶが含まれるが、これらに限定されない。ある実施形態では、ＡＡＶはＡＡＶ６であり得る。ある実施形態では、ＡＡＶはＡＡＶ８であり得る。ある実施形態では、ＡＡＶはＡＡＶ９であり得る。ある実施形態では、ＡＡＶは遺伝的に改変され得る。ある実施形態では、ＡＡＶは化学的に改変される。
【００４２】
本明細書に記載の組成物に関連して用いられる場合、語句「薬学的に許容される」は、生理学的に許容できかつ対象に投与されたときに通常は有害反応を生じさせないそのような組成物の分子実体および他の成分を意味する。好ましくは、用語「薬学的に許容される」は、連邦政府または州政府の規制当局により認可されている、あるいは米国薬局方、または他の哺乳動物および特にヒトでの使用に関して一般的に認められている薬局方に掲載されていることを意味する。「薬学的に許容される塩」は、医薬用途の化合物またはコンジュゲートに配合されうる塩であり、例えば、薬物組成物において対象（例えばヒト）に投与するのに安全である、金属塩（ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウムなど）およびアンモニアもしくは有機アミンの塩が含まれる（例えば、Berge, et al. “Pharmaceutical Salts” J. Pharm. Sci. 1977; 66:1（その全てがおよび全ての目的のために参照により本明細書に組み込まれる）を参照のこと）。適切な「薬学的に許容される塩」には、ナトリウム、カリウムおよびセシウム塩などの金属塩；カルシウムおよびマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩；トリエチルアミン、グアニジンおよびＮ−置換グアニジン塩、アセトアミジンおよびＮ−置換アセトアミジン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、およびＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩などの有機アミン塩が含まれるが、これらに限定されない。（塩基性窒素中心の）「薬学的に許容される塩」には、塩酸塩、臭化水素塩、硫酸塩、リン酸塩などの無機酸塩；トリフルオロ酢酸塩およびマレイン酸塩などの有機酸塩；メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩およびナフタレンスルホン酸塩などのスルホン酸塩；アルギニン酸塩、アラニン酸塩、アスパラギン酸塩およびグルタミン酸塩などのアミノ酸塩；ならびにグルクロン酸塩およびガラクツロン酸塩などの炭化水素塩が含まれるが、これらに限定されない。薬学的に許容される塩の選択および使用は当業界でよく知られており、例えば、Stahl and Wermuth, Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, 2nd Revised edition, Wiley, Hoboken, N.J.,（その全てがおよび全ての目的のために参照により本明細書に組み込まれる）を参照のこと。薬学的に許容される塩の非限定的な例には、ナトリウム塩、アンモニウム塩、カリウム塩（例えば、塩化ナトリウム、塩化アンモニウム、および塩化カリウム；酢酸ナトリウム、酢酸アンモニウム、および酢酸カリウム；クエン酸ナトリウム、クエン酸アンモニウム、およびクエン酸カリウム；リン酸ナトリウム、リン酸アンモニウム、およびリン酸カリウム；フッ化ナトリウム、フッ化アンモニウム、およびフッ化カリウム；臭化ナトリウム、臭化アンモニウム、および臭化カリウム；ならびにヨウ化ナトリウム、ヨウ化アンモニウム、およびヨウ化カリウム）が含まれるが、これらに限定されない。
【００４３】
本明細書で使用される場合、状況、障害または状態を「処置する（treat）」または「処置（treatment）」という用語には、（１）状況、障害または状態に罹患しているかまたはその素因を有する可能性があるが、その状況、障害または状態の臨床症状または無症候性症状をまだ経験していないまたは表していない対象において進行している状況、障害または状態の少なくとも１つの臨床症状または無症候性症状の発生および／または出現の可能性を防止、遅延または低減すること；（２）状況、障害または状態を抑制すること、すなわち、疾患もしくはその再発またはそれらの少なくとも１つの臨床症状または無症候性症状の発症／進行を阻止、低減または遅延させること；および（３）疾患を緩和すること、すなわち、状況、障害または状態、あるいは少なくとも１つのその臨床症状または無症候性症状の退行を引き起こすこと；が含まれる。これら用語を用いる場合、必ずしも１００％または完全な治療を意味するわけではない。むしろ、当業者が潜在的利益または治療効果を有すると認識する治療の程度はさまざまである。処置される対象への利益は、統計学的に有意であるか、あるいは少なくとも対象または臨床医に感じられるかのいずれかである。これに関して、本開示の障害（例えば出血性または神経学的疾患または障害）を処置する方法は、任意の量または任意のレベルの処置を提供することができる。さらには、本開示の方法により提供される処置には、処置されている障害の１つまたは複数の状態または症状または兆候を処置することが含まれ得る。
【００４４】
本明細書で使用される場合、「治療有効量または用量」あるいは「十分な量または用量」は、それが投与されて効果を生じさせる用量を意味する。正確な用量は、処置の目的に依存し、公知の技術を用いて当業者が突き止めることができる（例えば、Lieberman, Pharmaceutical Dosage Forms (vols. 1-3, 1992); Lloyd, The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding (1999); Pickar, Dosage Calculations (1999); and Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, 2003, Gennaro, Ed., Lippincott, Williams & Wilkinsを参照のこと）。
【００４５】
「患者」および「対象」という用語は交換可能に使用され、本開示の組成物の投与によって予防または処置することができる状態を患っているかまたは生じやすい生物を指すためにその通常の意味で用いられ、ヒトおよび非ヒト動物の両方を含む。対象の例には、ヒト、チンパンジー、ならびに他の類人猿およびサル種；ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギおよびウマなどの家畜；イヌおよびネコなどの飼育哺乳動物；マウス、ラットおよびモルモットなどの齧歯動物を含む実験動物；ニワトリ、シチメンチョウおよび他のキジ目鳥、カモ、ガチョウなどの家禽、野鳥および狩猟鳥を含む鳥類が含まれるが、これらに限定されない。この用語は、特定の年齢を意味するものではない。従って、成人、若年者、および新生児の個体も対象となる。
【００４６】
本明細書で使用される場合、「保存（storage）」は、組成物が調製されるとすぐに対象に投与されるのではなく、使用前に特定条件下（例えば、特定温度など）で一定期間保持されることを意味する。例えば、液体または凍結乾燥組成物は、対象に投与する前に、数日、数週間、数か月、１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１年、２年、３年、４年、５年、６年、７年、または８年間、冷蔵（０℃〜＋１０℃）もしくは（０℃〜＋１８℃）、冷凍（０℃〜−１９０℃）、または室温（例えば、＋２０℃〜＋３２℃までの温度）などの様々な温度で保持することができる。ある実施形態では、組成物は、約＋４℃〜約＋１８℃で少なくとも６か月間安定である。
【００４７】
本明細書で使用される場合、「約」という用語は、指定された値からプラスマイナス（±）１０％のおおよその範囲を意味する。例えば、「約２０％」という語は、１８〜２２％の範囲を包含する。本明細書で使用される場合、約には正確な量も含まれる。したがって、「約２０％」は「約２０％」および「２０％」を意味する。
【００４８】
本明細書で使用される場合、「および／または」という用語は、関連する列挙項目の１つまたは複数のありとあらゆる可能な組み合わせ、ならびに代替（「または」）で解釈される場合の組み合わせの欠如を意味し、それらを包含する。
【００４９】
本明細書で使用される場合、「または」という用語は、特定のリストの任意の１つのメンバーを指し、またそのリストのメンバーの任意の組み合わせも含む。
【００５０】
本明細書で使用される場合、本開示を説明する文脈における（特に以下の特許請求の範囲の文脈において）「ａ」および「ａｎ」および「ｔｈｅ」という用語および同様の指示対象は、本明細書に別段の記載がない限り、または文脈によって明確に矛盾しない限り、単数形および複数形の両方をカバーすると解釈されるべきである。「含む」、「有する」、「包含する」、および「含有する」という用語は、特に断りのない限り、制限のない（open-ended）用語（すなわち、「含むが、これらに限定されない」ことを意味する）として解釈されるべきである。
【００５１】
本明細書における値の範囲の列挙は、本明細書に別段の記載がない限り、範囲および各エンドポイントに含まれる各個別の値を個別に言及する簡略法としての役割を果たすことを意図しており、各個別の値およびエンドポイントは、本明細書に個別に記載されているかのように明細書に組み込まれる。
【００５２】
ウイルス組成物
一態様では、本発明は、ウイルスベクター（例えば、ＡＡＶ）の保存および／または投与のための安定化された水性組成物を提供する。ある実施形態において、組成物は、少なくとも約６か月間安定である。ある実施形態では、組成物は、少なくとも約４０℃までの温度で少なくとも約６か月間保存された場合に安定である。他の実施形態では、本明細書で提供される組成物は、長期間保存された場合に、有意なウイルス（例えば、ＡＡＶ）ベクター生物効力（biopotency）（例えば、遺伝子送達、感染力、目的タンパク質の発現など）を保持する。さらに他の実施形態では、本発明の組成物は、ウイルス（例えば、ＡＡＶ）粒子の分解および／または凝集を低減または遅延させる。他の実施形態では、本明細書で提供される組成物は、ウイルス（例えば、ＡＡＶ）キャプシドの完全性（integrity）を保持する。
【００５３】
一実施形態では、本発明は、治療有効量または用量のウイルス（例えば、ＡＡＶ）粒子、生理学的濃度未満（sub-physiological）から生理学的濃度までの薬学的に許容される塩、安定化濃度の１つまたは複数の糖、糖アルコールおよび／またはアミノ酸、非イオン性界面活性剤、ならびに任意選択で緩衝剤を含む、ウイルスキャプシド（例えば、ＡＡＶ）の組成物を提供する。一般に、本明細書で提供される安定化されたウイルス（例えば、ＡＡＶ）組成物は医薬投与に適している。ある実施形態では、ウイルスはＡＡＶである。ある実施形態では、ＡＡＶは、ＡＡＶ２、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ８、またはＡＡＶ９である。
【００５４】
ある実施形態では、ウイルス（例えば、ＡＡＶ）組成物は液体組成物である。他の実施形態では、ウイルス（例えば、ＡＡＶ）組成物は、本明細書で提供される液体組成物から凍結乾燥された凍結乾燥組成物である。
【００５５】
特定の例において、組成物は無菌組成物であってよい。「無菌」とは、病原菌（microbe）または他の生きている微生物（例えば、真菌、細菌、追加のウイルス、胞子形態など）が実質的に存在しないことを意味する。
【００５６】
例示的な態様では、本開示のバッファー製剤は、約０．５ｍＭ〜約７５ｍＭ、約０．５ｍＭ〜約５０ｍＭ、約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭ、約０．５ｍＭ〜約２０ｍＭ、約０．５ｍＭ〜約１５ｍＭ、約０．５ｍＭ〜約１０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１００ｍＭ、約１ｍＭ〜約７５ｍＭ、約１ｍＭ〜約５０ｍＭ、約１ｍＭ〜約４０ｍＭ、約１ｍＭ〜約３０ｍＭ、約１ｍＭ〜約２０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１５ｍＭ、約１ｍＭ〜約１０ｍＭ、約５ｍＭ〜約７５ｍＭ、約５ｍＭ〜約５０ｍＭ、約５ｍＭ〜約３０ｍＭ、約５ｍＭ〜約３５ｍＭ、約５ｍＭ〜約２０ｍＭ、約５ｍＭ〜約１５ｍＭ、約５ｍＭ〜約１０ｍＭ、約１０ｍＭ〜約７５ｍＭ、約１０ｍＭ〜約５０ｍＭ、約１０ｍＭ〜約３０ｍＭ、約１０ｍＭ〜約２０ｍＭ、約１０ｍＭ〜約１５ｍＭ、約１５ｍＭ〜約２５ｍＭ、約２０ｍＭ〜約７５ｍＭ、約２０ｍＭ〜約５０ｍＭ、約２０ｍＭ〜約３０ｍＭ、約２５ｍＭ〜約７５ｍＭ、約３０ｍＭ〜約７５ｍＭ、約３０ｍＭ〜約５０ｍＭ、約４０ｍＭ〜約７５ｍＭ、約４０ｍＭ〜約６０ｍＭ、約４０ｍＭ〜約５０ｍＭ、または約５０ｍＭ〜約７５ｍＭの安定剤を含む。例示的な態様では、バッファー製剤は、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１１ｍＭ、約１２ｍＭ、約１３ｍＭ、約１４ｍＭ、約１５ｍＭ、約１６ｍＭ、約１７ｍＭ、約１８ｍＭ、約１９ｍＭ、約２０ｍＭ、約２１ｍＭ、約２２ｍＭ、約２３ｍＭ、約２４ｍＭ、約２５ｍＭ、約２６ｍＭ、約２７ｍＭ、約２８ｍＭ、約２９ｍＭ、約３０ｍＭ、約３５ｍＭ、約４０ｍＭ、約４５ｍＭ、約５０ｍＭ、約５５ｍＭ、約６０ｍＭ、約６５ｍＭ、約７０ｍＭ、または約７５ｍＭの安定剤を含む。ある実施形態では、安定剤は約１０ｍＭであり得る。ある実施形態では、安定剤は約２０ｍＭであり得る。ある実施形態では、安定剤は約５０ｍＭであり得る。
【００５７】
薬学的に許容される安定剤は当技術分野で周知であり、リン酸緩衝液、ヒスチジン、クエン酸ナトリウム、ＨＥＰＥＳ、トリス（Ｔｒｉｓ）、ビシン、グリシン、Ｎ−グリシルグリシン、酢酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム（ＮａＨＣＯ３）、グリシルグリシン、リジン、アルギニン、リン酸ナトリウム、およびそれらの混合物が含まれるが、これらに限定されない。ある実施形態において、安定剤はヒスチジン（例えば、Ｌ−ヒスチジン）であり得る。ある実施形態において、安定剤はクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は重炭酸ナトリウムであり得る。ある実施形態では、安定剤は重炭酸ナトリウムではない。ある実施形態では、安定剤はグリシンではない。
【００５８】
例示的な態様では、本開示のバッファー製剤は、約０．５ｍＭ〜約７５ｍＭ、約０．５ｍＭ〜約５０ｍＭ、約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭ、約０．５ｍＭ〜約２０ｍＭ、約０．５ｍＭ〜約１５ｍＭ、約０．５ｍＭ〜約１０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１００ｍＭ、約１ｍＭ〜約７５ｍＭ、約１ｍＭ〜約５０ｍＭ、約１ｍＭ〜約４０ｍＭ、約１ｍＭ〜約３０ｍＭ、約１ｍＭ〜約２０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１５ｍＭ、約１ｍＭ〜約１０ｍＭ、約５ｍＭ〜約７５ｍＭ、約５ｍＭ〜約５０ｍＭ、約５ｍＭ〜約３５ｍＭ、約５ｍＭ〜約３０ｍＭ、約５ｍＭ〜約２０ｍＭ、約５ｍＭ〜約１５ｍＭ、約５ｍＭ〜約１０ｍＭ、約１０ｍＭ〜約７５ｍＭ、約１０ｍＭ〜約５０ｍＭ、約１０ｍＭ〜約３０ｍＭ、約１０ｍＭ〜約２０ｍＭ、約１０ｍＭ〜約１５ｍＭ、約１５ｍＭ〜約２５ｍＭ、約２０ｍＭ〜約７５ｍＭ、約２０ｍＭ〜約５０ｍＭ、約２０ｍＭ〜約３０ｍＭ、約２５ｍＭ〜約７５ｍＭ、約３０ｍＭ〜約７５ｍＭ、約３０ｍＭ〜約５０ｍＭ、約４０ｍＭ〜約７５ｍＭ、約４０ｍＭ〜約６０ｍＭ、約４０ｍＭ〜約５０ｍＭ、または約５０ｍＭ〜約７５ｍＭのＬ−ヒスチジンを含む。例示的な態様では、本開示のバッファー製剤は、約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１００ｍＭ、約１ｍＭ〜約７５ｍＭ、約１ｍＭ〜約２０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１５ｍＭ、約５ｍＭ〜約５０ｍＭ、約５ｍＭ〜約３５ｍＭ、約５ｍＭ〜約２５ｍＭ、約５ｍＭ〜約１５ｍＭ、約１０ｍＭ〜約３０ｍＭ、約１０ｍＭ〜約２０ｍＭ、約１５ｍＭ〜約２５ｍＭ、約２５ｍＭ〜約７５ｍＭ、または約４０ｍＭ〜約６０ｍＭのＬ−ヒスチジンを含む。例示的な態様では、本開示のバッファー製剤は、約１ｍＭ〜約７５ｍＭ、約５ｍＭ〜約７５ｍＭ、約１０ｍＭ〜約７５ｍＭ、約５ｍＭ〜約６０ｍＭ、約１０ｍＭ〜約６０ｍＭ、約２０ｍＭ〜約６０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約６０ｍＭ、または約４０ｍＭ〜約６０ｍＭのＬ−ヒスチジンを含む。例示的な態様では、バッファー製剤は、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１１ｍＭ、約１２ｍＭ、約１３ｍＭ、約１４ｍＭ、約１５ｍＭ、約１６ｍＭ、約１７ｍＭ、約１８ｍＭ、約１９ｍＭ、約２０ｍＭ、約２１ｍＭ、約２２ｍＭ、約２３ｍＭ、約２４ｍＭ、約２５ｍＭ、約２６ｍＭ、約２７ｍＭ、約２８ｍＭ、約２９ｍＭ、約３０ｍＭ、約３５ｍＭ、約４０ｍＭ、約４５ｍＭ、約５０ｍＭ、約５５ｍＭ、約６０ｍＭ、約６５ｍＭ、約７０ｍＭ、または約７５ｍＭのＬ−ヒスチジンを含む。ある実施形態では、バッファー製剤は、約１０ｍＭのＬ−ヒスチジンを含む。ある実施形態では、バッファー製剤は、約５０ｍＭのＬ−ヒスチジンを含む。
【００５９】
ある実施形態において、Ｌ−ヒスチジンバッファー製剤は、＋８℃未満の温度範囲で沈殿しない。
【００６０】
例示的な態様では、本開示のバッファー製剤は、約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭ、約０．５ｍＭ〜約１５ｍＭ、約１ｍＭ〜約１００ｍＭ、約１ｍＭ〜約４０ｍＭ、約１ｍＭ〜約３０ｍＭ、約１ｍＭ〜約２０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１５ｍＭ、約１ｍＭ〜約１０ｍＭ、約５ｍＭ〜約３５ｍＭ、約５ｍＭ〜約１５ｍＭ、約５ｍＭ〜約１０ｍＭ、約５ｍＭ〜約１５ｍＭ、約１０ｍＭ〜約３０ｍＭ、約１０ｍＭ〜約２０ｍＭ、または約１５ｍＭ〜約２５ｍＭのクエン酸ナトリウムまたは重炭酸ナトリウムを含む。例示的な態様では、バッファー製剤は、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１１ｍＭ、約１２ｍＭ、約１３ｍＭ、約１４ｍＭ、約１５ｍＭ、約１６ｍＭ、約１７ｍＭ、約１８ｍＭ、約１９ｍＭ、約２０ｍＭ、約２１ｍＭ、約２２ｍＭ、約２３ｍＭ、約２４ｍＭ、約２５ｍＭのクエン酸ナトリウムまたは重炭酸ナトリウムを含む。ある実施形態では、バッファー製剤は、約１０ｍＭのクエン酸ナトリウムを含む。ある実施形態では、バッファー製剤は、約２０ｍＭの重炭酸ナトリウムを含む。
【００６１】
例示的な態様では、本開示のバッファー製剤は、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約１００ｍＭ〜約２００ｍＭ、約１２０ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約１５０ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約１５４ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約１００ｍＭ〜約２００ｍＭ、約１２０ｍＭ〜約２００ｍＭ、約１５０ｍＭ〜約２００ｍＭ、約１５４ｍＭ〜約２００ｍＭ、約１００ｍＭ〜約１７５ｍＭ、約１２０ｍＭ〜約１７５ｍＭ、約１２５ｍＭ〜約１７５ｍＭ、約１５０ｍＭ〜約１７５ｍＭ、約１５４ｍＭ〜約１７５ｍＭ、約１４０ｍＭ〜約１６０ｍＭ、または約１５０ｍＭ〜約１６０ｍＭの薬学的に許容される塩（上記で定義）を含む。例示的な態様では、本開示のバッファー製剤は、約１００ｍＭ、約１０５ｍＭ、約１１０ｍＭ、約１１５ｍＭ、約１２０ｍＭ、約１２５ｍＭ、約１３０ｍＭ、約１３５ｍＭ、約１４０ｍＭ、約１４５ｍＭ、約１５０ｍＭ、約１５４ｍＭ、約１５５ｍＭ、約１６０ｍＭ、約１７０ｍＭ、約１７５ｍＭ、約１８０ｍＭ、約１９０ｍＭ、約２００ｍＭ、約２１０ｍＭ、約２２０ｍＭ、約２２５ｍＭ、約２３０ｍＭ、約２４０ｍＭ、または約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、ナトリウム塩（例えば、塩化ナトリウム）であり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩の濃度は、約１２０ｍＭの塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩の濃度は、約１５０ｍＭの塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩の濃度は、約１５４ｍＭの塩化ナトリウムであり得る。
【００６２】
理論に縛られることなく、生理学的濃度未満（sub-physiological concentration）の薬学的に許容される塩は、より低い水分含有量を有するコンパクトな凍結乾燥ケーキ（lyocake）を形成することができ、改良された凍結乾燥ケーキの形成を助ける。ある実施形態において、生理学的濃度未満の薬学的に許容される塩は、白いコンパクトで均質な凍結乾燥ケーキをもたらす。したがって、ある実施形態では、本開示は、生理学的濃度未満の薬学的に許容される塩、例えば約１００ｍＭ未満の薬学的に許容される塩を含む低塩組成物を提供する。一実施形態では、本明細書で提供される低塩組成物は、約１００ｍＭ未満の薬学的塩を含む。ある実施形態では、本明細書で提供される低塩組成物は、約８０ｍＭ未満の薬学的塩を含む。ある実施形態では、本明細書で提供される低塩組成物は、約７０ｍＭ未満の薬学的塩を含む。別の一実施形態では、本明細書で提供される低塩組成物は、約６０ｍＭ未満の薬学的塩を含む。別の実施形態では、本明細書で提供される低塩組成物は、約５０ｍＭ未満の薬学的塩を含む。別の実施形態では、本明細書で提供される低塩組成物は、約４０ｍＭ未満の薬学的塩を含む。別の実施形態では、本明細書で提供される低塩組成物は、約３０ｍＭ未満の薬学的塩を含む。別の実施形態では、本明細書で提供される低塩組成物は、約２０ｍＭ未満の薬学的塩を含む。別の実施形態では、本明細書で提供される低塩組成物は、約１０ｍＭ未満の薬学的塩を含む。ある実施形態では、薬学的塩は存在しない。別の実施形態では、低塩組成物は、約３０ｍＭ〜約６０ｍＭの間の薬学的に許容される塩を含む。さらに他の実施形態では、低塩組成物は、約０ｍＭ、約５ｍＭ、約１０ｍＭ、約１５ｍＭ、約２０ｍＭ、約２５ｍＭ、約３０ｍＭ、約３５ｍＭ、約４０ｍＭ、約４５ｍＭ、約５０ｍＭ、約５５ｍＭ、約６０ｍＭ、約６５ｍＭ、約７０ｍＭ、約７５ｍＭ、約８０ｍＭ、約８５ｍＭ、約９０ｍＭ、約９５ｍＭ、または約１００ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の組成物は、約０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の組成物は、約３０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の組成物は、約４０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の組成物は、約５０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の組成物は、約６０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の組成物は、約７０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の組成物は、約８０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。好ましい実施形態では、低塩組成物は凍結乾燥組成物である。好ましい実施形態では、塩はナトリウム塩（例えば、塩化ナトリウム）である。
【００６３】
有利には、非イオン性界面活性剤を含めることにより、表面でのウイルス（例えば、ＡＡＶ）の損失が実質的に減少し、組成物の目に見える粒子の形成が防止されることも見出された。したがって、ある実施形態では、安定化濃度の非イオン性界面活性剤を含む組成物が提供される。本明細書に開示される組成物で使用され得る薬学的に許容される非イオン性界面活性剤は、薬学分野で知られており、ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０；ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０；ＰＳ２０）、およびプルロニック（登録商標）（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）Ｆ−６８やＢＲＩＪ  ３５を含む様々なポロキサマーもしくはプルロニック（登録商標）、あるいはそれらの混合物が含まれるが、それらに限定されない。ある実施形態では、バッファー製剤で使用される非イオン性界面活性剤は、ポリソルベート８０であり得る。例示的な態様において、本開示のバッファー製剤は、Ｃｒｏｄａ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｃａｒｅ（Ｓｎａｉｔｈ，ＵＫ）から市販されているＳｕｐｅｒ  Ｒｅｆｉｎｅｄ（商標）ＰＳ８０を含む。ある実施形態において、バッファー製剤において使用される非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態では、バッファー製剤で使用される非イオン性界面活性剤は、ポリソルベート８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００６４】
ある実施形態において、本開示のバッファー製剤は、約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）、約０．０００５％（ｗ／ｗ）〜約０．００６％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００６％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００５％（ｗ／ｗ）、約０．００２５％（ｗ／ｗ）〜約０．００７５％（ｗ／ｗ）、約０．００５％（ｗ／ｗ）〜約０．００６％（ｗ／ｗ）、または約０．００２％（ｗ／ｗ）〜約０．００４％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤を含む。例示的な態様では、バッファー製剤は、約０．００１％（ｗ／ｗ）、約０．００１５％（ｗ／ｗ）、約０．００２％（ｗ／ｗ）、約０．００２５％（ｗ／ｗ）、約０．００３％（ｗ／ｗ）、約０．００３５％（ｗ／ｗ）、約０．００４％（ｗ／ｗ）、約０．００４５％（ｗ／ｗ）、約０．００５％（ｗ／ｗ）、約０．００５５％（ｗ／ｗ）、約０．００６％（ｗ／ｗ）、約０．００６５％（ｗ／ｗ）、約０．００７％（ｗ／ｗ）、約０．００７５％（ｗ／ｗ）、約０．００８％（ｗ／ｗ）、約０．００８５％（ｗ／ｗ）、約０．００９％（ｗ／ｗ）、約０．００９５％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）、約０．００２％（ｗ／ｗ）、約０．００３％（ｗ／ｗ）、約０．００４％（ｗ／ｗ）、または約０．００５％の非イオン性界面活性剤を含む。ある実施形態では、本開示のバッファー組成物は、約０．００３％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤を含む。ある実施形態では、本開示のバッファー製剤は、約０．００５％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤を含む。ある実施形態では、本開示のバッファー製剤は、約０．００６％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤を含む。
【００６５】
例示的な態様では、本開示のバッファー製剤は、約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）、約０．０００５％（ｗ／ｗ）〜約０．００６％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００６％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００５％（ｗ／ｗ）、約０．００２５％（ｗ／ｗ）〜約０．００７５％（ｗ／ｗ）、約０．００５％（ｗ／ｗ）〜約０．００６％（ｗ／ｗ）、または約０．００２％（ｗ／ｗ）〜約０．００４％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（例えば、Ｓｕｐｅｒ  Ｒｅｆｉｎｅｄ（商標）ＰＳ８０）および／またはプルロニック（登録商標）Ｆ−６８を含む。例示的な態様では、バッファー製剤は、約０．００１％（ｗ／ｗ）、約０．００１５％（ｗ／ｗ）、約０．００２％（ｗ／ｗ）、約０．００２５％（ｗ／ｗ）、約０．００３％（ｗ／ｗ）、約０．００３５％（ｗ／ｗ）、約０．００４％（ｗ／ｗ）、約０．００４５％（ｗ／ｗ）、約０．００５％（ｗ／ｗ）、約０．００５５％（ｗ／ｗ）、約０．００６％（ｗ／ｗ）、約０．００６５％（ｗ／ｗ）、約０．００７％（ｗ／ｗ）、約０．００７５％（ｗ／ｗ）、約０．００８％（ｗ／ｗ）、約０．００８５％（ｗ／ｗ）、約０．００９％（ｗ／ｗ）、約０．００９５％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）、約０．００２％（ｗ／ｗ）、約０．００３％（ｗ／ｗ）、約０．００４％（ｗ／ｗ）、または約０．００５％のＰＳ８０および／またはプルロニック（登録商標）Ｆ−６８を含む。ある実施形態では、本開示のバッファー製剤は、約０．００３％（ｗ／ｗ）のＰＳ８０を含む。ある実施形態において、本開示のバッファー製剤は、約０．００５％（ｗ／ｗ）のＰＳ８０および／またはプルロニック（登録商標）Ｆ−６８を含む。ある実施形態において、本開示のバッファー製剤は、約０．００３％（ｗ／ｗ）のプルロニック（登録商標）Ｆ−６８を含む。ある実施形態において、本開示のバッファー製剤は、約０．００５％（ｗ／ｗ）のプルロニック（登録商標）Ｆ−６８を含む。ある実施形態において、本開示のバッファー製剤は、約０．００３％（ｗ／ｗ）のＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８を含む。ある実施形態において、本開示のバッファー製剤は、約０．００５％〜約０．００６％（ｗ／ｗ）のＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８を含む。
【００６６】
ある実施形態において、本開示のバッファー製剤は、約０．１ｍＭ〜約２０ｍＭの１つまたは複数の糖および／または糖アルコールを含む。単糖類、二糖類、もしくは多糖類、または水溶性グルカンなどの任意の糖を使用することができ、例えば、フルクトース、グルコース、マンノース、ソルボース、キシロース、マルトース、ラクトース、スクロース、デキストラン、トレハロース、プルラン、デキストリン、シクロデキストリン、可溶性デンプン、ヒドロキシエチルデンプン、およびカルボキシメチルセルロースが含まれる。ある実施形態では、糖は、スクロース、グルコース、トレハロース、またはそれらの組み合わせであり得る。ある実施形態において、トレハロースはトレハロース二水和物であり得る。糖アルコールは、約４〜約８個の炭素原子とヒドロキシル基とを有する炭化水素として定義される。本明細書で提供されるバッファー製剤で使用され得る糖アルコールの非限定的な例には、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、ガラクチトール、ズルシトール、キシリトール、およびアラビトールが含まれる。ある実施形態において、マンニトールは、糖アルコール添加剤として使用することができる。ある実施形態では、バッファー製剤は、糖および糖アルコール添加剤の両方を含む。ある実施形態では、糖はスクロースであり得る。ある実施形態では、糖はグルコースである。ある実施形態では、糖はグルコースではない。
【００６７】
理論に縛られることなく、スクロースは神経膜を通過することができ、ＡＡＶベクターを細胞内に輸送するのを助けることができるので、スクロースがバッファー製剤に添加される。
【００６８】
糖および糖アルコールは、個別にまたは組み合わせて使用することができる。いくつかの実施形態において、糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせは、約０．１ｍＭ〜約２０ｍＭ、０．１ｍＭ〜約１５ｍＭ、０．１ｍＭ〜約１０ｍＭ、０．５ｍＭ〜約１５ｍＭ、約１ｍＭ〜約２０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１５ｍＭ、約１ｍＭ〜約１０ｍＭ、約１ｍＭ〜約５ｍＭ、約２ｍＭ〜約２０ｍＭ、２ｍＭ〜約１５ｍＭ、２ｍＭ〜約１０ｍＭ、約２ｍＭ〜約５ｍＭ、約３ｍＭ〜約２０ｍＭ、３ｍＭ〜約１５ｍＭ、３ｍＭ〜約１０ｍＭ、約３ｍＭ〜約５ｍＭ、約４ｍＭ〜約２０ｍＭ、４ｍＭ〜約１５ｍＭ、４ｍＭ〜約１０ｍＭ、約４ｍＭ〜約６ｍＭ、約４ｍＭ〜約５ｍＭ、約５ｍＭ〜約２０ｍＭ、５ｍＭ〜約１５ｍＭ、５ｍＭ〜約１０ｍＭ、または約１０ｍＭ〜約２０ｍＭの濃度で組成物中に存在するであろう。例示的な態様では、本開示のバッファー製剤は、約０．１ｍＭ、約０．５ｍＭ、約１ｍＭ、２ｍＭ、約３ｍＭ、約４ｍＭ、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１１ｍＭ、約１２ｍＭ、約１３ｍＭ、約１４ｍＭ、約１５ｍＭ、約１６ｍＭ、約１７ｍＭ、約１８ｍＭ、約１９ｍＭ、約２０ｍＭ、約２５ｍＭ、または約３０ｍＭの糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせを含む。ある実施形態において、糖は、スクロース、グルコース、またはそれらの組み合わせであり得る。ある実施形態では、糖はスクロースであり得る。ある実施形態では、糖は５ｍＭのスクロースであり得る。ある実施形態では、糖はグルコースである。ある実施形態では、糖は５ｍＭのグルコースであり得る。ある実施形態では、糖はグルコースではない。
【００６９】
例示的な態様において、本開示のバッファー製剤はグリシンを含まない。
【００７０】
例示的な態様において、本開示の組成物はマンニトールを含まない。例示的な態様において、本開示の組成物はトレハロースを含まない。
【００７１】
例示的な態様において、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約１ｍＭ〜約１５ｍＭの安定剤、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００５％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤、および約０．１ｍＭ〜約２０ｍＭの糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせを含むバッファー製剤とを含む。
【００７２】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約３０ｍＭ〜約７５ｍＭの安定剤、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩、および約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００５％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤を含むバッファー製剤とを含む。
【００７３】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約１ｍＭ〜約３０ｍＭの安定剤、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩、および任意選択で約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤を含むバッファー製剤とを含む。
【００７４】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭ、約１ｍＭ〜約２０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１５ｍＭ、または約５ｍＭ〜約１５ｍＭの安定剤；約０ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１００ｍＭ、約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約１５０ｍＭ〜約２００ｍＭ、約１２５ｍＭ〜約１７５ｍＭ、約１４０ｍＭ〜約１６０ｍＭ、または約１５０ｍＭ〜約１６０ｍＭの薬学的に許容される塩；約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）、約０．０００５％（ｗ／ｗ）〜約０．００６％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００５％（ｗ／ｗ）、または約０．００２％（ｗ／ｗ）〜約０．００４％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；および約０．１ｍＭ〜約２０ｍＭ、約０．５ｍＭ〜約１５ｍＭ、約１ｍＭ〜約１０ｍＭ、または約４ｍＭ〜約６ｍＭの糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせ；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジンであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、糖は、スクロースおよび／またはグルコースであり得る。
【００７５】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭの安定剤；約３０ｍＭ〜約１００ｍＭの薬学的に許容される塩；約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；および約０．１ｍＭ〜約２０ｍＭの糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせ；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジンであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、糖は、スクロースおよび／またはグルコースであり得る。
【００７６】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭの安定剤；約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩；約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；および約０．１ｍＭ〜約２０ｍＭの糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせ；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジンであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、糖は、スクロースおよび／またはグルコースであり得る。
【００７７】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約１ｍＭ〜約２０ｍＭの安定剤；約１００ｍＭ〜約２００ｍＭの薬学的に許容される塩；約０．０００５％（ｗ／ｗ）〜約０．００６％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；および約０．５ｍＭ〜約１５ｍＭの糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせ；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジンであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、糖は、スクロースおよび／またはグルコースであり得る。
【００７８】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約１ｍＭ〜約１５ｍＭの安定剤；約１２５ｍＭ〜約１７５ｍＭの薬学的に許容される塩；約０．００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００５％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；および約１ｍＭ〜約１０ｍＭの糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせ；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジンであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、糖は、スクロースおよび／またはグルコースであり得る。
【００７９】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約５ｍＭ〜約１５ｍＭの安定剤；約１５０ｍＭ〜約１６０ｍＭの薬学的に許容される塩；約０．００２％（ｗ／ｗ）〜約０．００４％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；および約４ｍＭ〜約６ｍＭの糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせ；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジンまたはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジンであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、糖は、スクロースおよび／またはグルコースであり得る。
【００８０】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約１０ｍＭの安定剤；約１５４ｍＭの薬学的に許容される塩；約０．００３％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；および約５ｍＭの糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせ；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジンであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、糖は、スクロースおよび／またはグルコースであり得る。
【００８１】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約１ｍＭ〜約１００ｍＭ、約３０ｍＭ〜約７５ｍＭ、約２５ｍＭ〜約７５ｍＭ、または約４０ｍＭ〜約６０ｍＭの安定剤；約０ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１００ｍＭ、約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約１００ｍＭ〜約２００ｍＭ、約１２５ｍＭ〜約１７５ｍＭ、または約１４０ｍＭ〜約１６０ｍＭ、または１５０ｍＭ〜約１６０ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００５％（ｗ／ｗ）、約０．０００５％（ｗ／ｗ）〜約０．００６％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００５％（ｗ／ｗ）、または約０．００２％（ｗ／ｗ）〜約０．００４％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジンであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００８２】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約１ｍＭ〜約１００ｍＭの安定剤；約３０ｍＭ〜約１００ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．０００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジンであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００８３】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）はアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約１ｍＭ〜約１００ｍＭの安定剤；約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．０００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジンであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００８４】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約３０ｍＭ〜約７５ｍＭの安定剤；約１００ｍＭ〜約２００ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．０００５％（ｗ／ｖ）〜約０．００６％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジンであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００８５】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約２５ｍＭ〜約７５ｍＭの安定剤；約１２５ｍＭ〜約１７５ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００５％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジンであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００８６】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約４０ｍＭ〜約６０ｍＭの安定剤；約１５０ｍＭ〜約１６０ｍＭの薬学的に許容される塩；および／または約０．００２％（ｗ／ｗ）〜約０．００４％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジンであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００８７】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約５０ｍＭの安定剤；約１５４ｍＭの薬学的に許容される塩；および／または約０．００３％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジンであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００８８】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭ、約１ｍＭ〜約２０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１５ｍＭ、または約５ｍＭ〜約１５ｍＭの安定剤；約０ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１００ｍＭ、約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約１００ｍＭ〜約２００ｍＭ、または約１４０ｍＭ〜約１６０ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）、約０．０００５％（ｗ／ｗ）〜約０．００６％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００５％（ｗ／ｗ）、または約０．００２％（ｗ／ｗ）〜約０．００４％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、クエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００８９】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭの安定剤；約３０ｍＭ〜約１００ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、クエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００９０】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭの安定剤；約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、クエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００９１】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約１ｍＭ〜約２０ｍＭの安定剤；約１００ｍＭ〜約２００ｍＭの薬学的に許容される塩；約０．０００５％（ｗ／ｗ）〜約０．００６％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、クエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００９２】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約１ｍＭ〜約１５ｍＭの安定剤；約１２５ｍＭ〜約１７５ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００５％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、クエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００９３】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約５ｍＭ〜約１５ｍＭの安定剤；約１４０ｍＭ〜約１６０ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．００２％（ｗ／ｗ）〜約０．００４％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、クエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００９４】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約１０ｍＭの安定剤；約１５０ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．００３％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、クエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００９５】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約１ｍＭ〜約４０ｍＭ、約５ｍＭ〜約３５ｍＭ、約１０ｍＭ〜約３０ｍＭ、または約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの安定剤；約０ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約１ｍＭ〜約１００ｍＭ、約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭ、約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭ、約１００ｍＭ〜約１５０ｍＭ、または約１１０ｍＭ〜約１３０ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）、約０．０００５％（ｗ／ｗ）〜約０．００６％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００５％（ｗ／ｗ）、または約０．００２％（ｗ／ｗ）〜約０．００４％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、重炭酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００９６】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約１ｍＭ〜約４０ｍＭの安定剤；約３０ｍＭ〜約１００ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、重炭酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００９７】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約１ｍＭ〜約４０ｍＭの安定剤；約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、重炭酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００９８】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約５ｍＭ〜約３５ｍＭの安定剤；約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．０００５％（ｗ／ｗ）〜約０．００６％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、重炭酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【００９９】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約１０ｍＭ〜約３０ｍＭの安定剤；約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００５％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、重炭酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【０１００】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの安定剤；約１１０ｍＭ〜約１３０ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．００２％（ｗ／ｗ）〜約０．００４％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、重炭酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、重炭酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【０１０１】
例示的な態様では、本開示の水性組成物（例えば、保存および／または薬学的に許容される組成物）は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）と、約２０ｍＭの安定剤；約１２０ｍＭの薬学的に許容される塩；および約０．００３％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤；を含むバッファー製剤とを含む。ある実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジンまたはクエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、安定剤は、クエン酸ナトリウムであり得る。ある実施形態において、薬学的に許容される塩は、塩化ナトリウムであり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。ある実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ＰＳ８０およびプルロニック（登録商標）Ｆ−６８であり得る。
【０１０２】
追加成分
例示的実施形態では、本開示の組成物は、追加の薬学的に許容される成分を含む。例示的態様では、組成物は以下のいずれか１つまたはそれらの組み合わせを含む：酸性化剤、添加剤、吸着剤、エアロゾル噴射剤、空気置換剤、アルカリ化剤、固化防止剤、抗凝固剤、抗菌防腐剤、抗酸化剤、抗腐食剤、基剤、結合剤、緩衝剤、キレート剤、コーティング剤、着色剤、乾燥剤、洗浄剤、希釈剤、殺菌消毒剤、崩壊剤、分散剤、溶解促進剤、色素、軟化剤、乳化剤、乳化安定剤、充填剤、成膜剤、風味増強剤、香味剤、流動促進剤、ゲル化剤、造粒剤、保湿剤、潤滑剤、粘着付与剤、軟膏基剤、軟膏、油性ビヒクル、有機塩基、トローチ基剤、顔料、可塑剤、研磨剤、防腐剤、金属イオン封鎖剤、皮膚浸透剤、可溶化剤、溶媒、安定化剤、坐剤の基剤、表面活性剤、界面活性剤、懸濁剤、甘味剤、治療剤、粘度付与剤、等張化剤、毒性剤、増粘剤、吸水剤、水混和性共溶媒、軟水化剤または湿潤剤。一部の実施形態では、本開示の組成物は以下の成分のいずれか１つまたはそれらの組み合わせを含む：アカシア、アセスルファムカリウム、アセチルクエン酸トリブチル、アセチルクエン酸トリエチル、寒天、アルブミン、アルコール、脱水アルコール、変性アルコール、希アルコール、アロイリット酸、アルギン酸、脂肪族ポリエステル、アルミナ、水酸化アルミニウム、ステアリン酸アルミニウム、アミロペクチン、α−アミロース、アスコルビン酸、アスコルビルパルミタート、アスパルテーム、注射用静菌水、ベントナイト、マグマベントナイト、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、安息香酸、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、ブロノポール、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、ブチルパラベン、ブチルパラベンナトリウム、アルギン酸カルシウム、アスコルビン酸カルシウム、炭酸カルシウム、シクラミン酸カルシウム、無水リン酸水素カルシウム、脱水リン酸水素カルシウム、リン酸三カルシウム、プロピオン酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、ソルビン酸カルシウム、ステアリン酸カルシウム、硫酸カルシウム、硫酸カルシウム半水和物、キャノーラ油、カルボマー、二酸化炭素、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、β−カロテン、カラギーナン、ひまし油、硬化ひまし油、カチオン性乳化ワックス、酢酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、エチルセルロース、微結晶セルロース、粉末セルロース、ケイ化微結晶セルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、セトステアリルアルコール、セトリミド、セチルアルコール、クロルヘキシジン、クロロブタノール、クロロクレゾール、コレステロール、酢酸クロルヘキシジン、グルコン酸クロルヘキシジン、塩酸クロルヘキシジン、クロロジフルオロエタン（ＨＣＦＣ）、クロロジフルオロメタン、クロロフロオロカーボン（ＣＦＣ）クロロフェノキシエタノール、クロロキシレノール、コーンシロップ固体、無水クエン酸、クエン酸一水和物、カカオバター、着色剤、コーン油、綿実油、クレゾール、ｍ−クレゾール、ｏ−クレゾール、ｐ−クレゾール、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、シクラミン酸、シクロデキストリン、デキストレート、デ��ストリン、ブドウ糖、ブドウ糖（無水）、ジアゾリジニル尿素、フタル酸ジブチル、セバシン酸ジブチル、ジエタノールアミン、フタル酸ジエチル、ジフルオロエタン（ＨＦＣ）、ジメチル−β−シクロデキストリン、Ｃａｐｔｉｓｏｌ（登録商標）などのシクロデキストリンタイプの化合物、ジメチルエーテル、フタル酸ジメチル、エデト酸二カリウム、エデト酸二ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、ドクサートカルシウム、ドクサートカリウム、ドクサートナトリウム、没食子酸ドデシル、ドデシルトリメチルアンモニウムブロミド、エデト酸カルシウム二ナトリウム、エデト酸、エグルミン、エチルアルコール、エチルセルロース、没食子酸エチル、ラウリン酸エチル、エチルマルトール、オレイン酸エチル、エチルパラベン、エチルパラベンカリウム、エチルパラベンナトリウム、エチルバニリン、フルクトース、フルクトース液、粉砕フルクトース、フルクトース（パイロジェンフリー）、粉末フルクトース、フマル酸、ゼラチン、グルコース、液体グルコース、飽和植物脂肪酸のグリセリド混合物、グリセリン、ベヘン酸グリセリル、モノオレイン酸グリセリル、モノステアリン酸グリセリル、自己乳化型モノステアリン酸グリセリル、パルミトステアリン酸グリセリル、グリシン、グリコール、グリコフロール、グアーガム、ヘプタフルオロプロパン（ＨＦＣ）、ヘキサデシルトリメチルアンモニウムブロミド、高フルクトースシロップ、ヒト血清アルブミン、炭化水素（ＨＣ）、希塩酸、硬化植物油タイプＩＩ、ヒドロキシエチルセルロース、２−ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、イミド尿素、インジゴカルミン、イオン交換体、酸化鉄、イソプロピルアルコール、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、等張食塩水、カオリン、乳酸、ラクチトール、ラクトース、ラノリン、ラノリンアルコール、無水ラノリン、レシチン、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、炭酸マグネシウム、正炭酸マグネシウム、炭酸マグネシウム（無水）、炭酸水酸化マグネシウム、水酸化マグネシウム、ラウリル硫酸マグネシウム、酸化マグネシウム、ケイ酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、三ケイ酸マグネシウム、三ケイ酸マグネシウム（無水）、リンゴ酸、麦芽、マルチトール、マルチトール溶液、マルトデキストリン、マルトール、マルトース、マンニトール、中鎖トリグリセリド、メグルミン、メントール、メチルセルロース、メチルメタクリラート、オレイン酸メチル、メチルパラベン、メチルパラベンカリウム、メチルパラベンナトリウム、微結晶セルロースおよびカルボキシメチルセルロースナトリウム、鉱物油、軽鉱物油、鉱物油およびラノリンアルコール、油、オリーブ油、モノエタノールアミン、モンモリロナイト、没食子酸オクチル、オレイン酸、パルミチン酸、パラフィン、ピーナッツ油、ワセリン、ワセリンおよびラノリンアルコール、医薬用グレーズ、フェノール、液状フェノール、フェノキシエタノール、フェノキシプロパノール、フェニ��エチルアルコール、酢酸フェニル水銀、ホウ酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、ポラクリリン、ポラクリリンカリウム、ポロキサマー、ポリデキストロース、ポリエチレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリアクリラート、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリメタクリラート、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンひまし油誘導体、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステル、ステアリン酸ポリオキシエチレン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、アルギン酸カリウム、安息香酸カリウム、炭酸水素カリウム、亜硫酸水素カリウム、塩化カリウム、クエン酸カリウム、クエン酸カリウム（無水）、リン酸水素カリウム、ピロ亜硫酸カリウム、リン酸二水素カリウム、プロピオン酸カリウム、ソルビン酸カリウム、ポビドン、プロパノール、プロピオン酸、炭酸プロピレン、プロピレングリコール、アルギン酸プロピレングリコール、没食子酸プロピル、プロピルパラベン、プロピルパラベンカリウム、プロピルパラベンナトリウム、硫酸プロタミン、ナタネ油、リンゲル液、サッカリン、サッカリンアンモニウム、サッカリンカルシウム、サッカリンナトリウム、ベニバナ油、サポナイト、血清タンパク質、ゴマ油、コロイドシリカ、コロイド状二酸化ケイ素、アルギン酸ナトリウム、アスコルビン酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム（無水）、クエン酸ナトリウム（脱水）、塩化ナトリウム、シクラミン酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、ドデシル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム（無水）、プロピオン酸ナトリウム、ソルビン酸ナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、フマル酸ステアリルナトリウム、亜硫酸ナトリウム、ソルビン酸、ソルビタンエステル（ソルビタン脂肪酸エステル）、ソルビトール、ソルビトール液７０％、ダイズ油、鯨蝋、デンプン、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、アルファ化デンプン、滅菌可能なトウモロコシデンプン、ステアリン酸、精製ステアリン酸、ステアリルアルコール、スクロース（ショ糖）、糖、圧縮用砂糖、粉砂糖、製菓用砂糖、白糖球状顆粒、転化糖、Ｓｕｇａｒｔａｂ、サンセットイエローＦＣＦ、合成パラフィン、タルク、酒石酸、タートラジン、テトラフルオロエタン（ＨＦＣ）、カカオ油、チメロサール、二酸化チタン、アルファトコフェロール、酢酸トコフェロール、α−トコフェロールコハク酸エステル、β−トコフェロール、δ−トコフェロール、γ−トコフェロール、トラガカント、トリアセチン、クエン酸トリブチル、トリエタノールアミン、クエン酸トリエチル、トリメチル−β−シクロデキストリン、臭化トリメチルテトラデシルアンモニウム、トリスバッファー、エデト酸三ナトリウム、バニリン、タイプＩの硬化植物油、水、軟水、硬水、二酸化炭素を含まない水、発熱性物質除去水、注射用水、吸入用滅菌水、注射用滅菌水、灌水用滅菌水、ワックス、アニオン性乳剤ワックス、カルナバロウ、カチオン性乳化ワックス、セチルエス���ルワックス、マイクロクリスタリンワックス、非イオン性乳剤ワックス、坐剤用蝋、白蝋、黄蝋、白色ワセリン、羊毛蝋、キサンタンガム、キシリトール、ゼイン、プロピオン酸亜鉛、亜鉛塩、ステアリン酸亜鉛、あるいは、Remington’s Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980) Handbook of Pharmaceutical Excipients, Third Edition, A. H. Kibbe (Pharmaceutical Press, London, UK, 2000)（参照によりその全体が組み込まれる）に記載の任意の賦形剤。Remington’s Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980)（あらゆる意図される目的のために参照によりその全てが本明細書に組み込まれる）は、薬学的に許容される組成物を調製するのに用いられる様々な成分、ならびにそれを調製するための公知技術を開示する。あらゆる従来の薬剤について、それが本医薬組成物と不適合である場合を除いて、医薬組成物におけるその使用が企図されている。例示的実施形態では、本開示の組成物は、上記の成分の１つまたは組み合わせを含まない。例示的実施形態では、本開示の組成物は、これら成分のいずれも含まない。例示的態様では、本開示の医薬組成物はデキストランを含まない。例示的態様では、本開示の医薬組成物は塩化カルシウムを含まない。
【０１０３】
ｐＨ
例示的な実施形態では、本開示の組成物は、生理学的に適合性のあるｐＨを有する。したがって、ある実施形態では、中性ｐＨに組成物を維持するのに適した賦形剤を含むウイルス（例えばＡＡＶ）組成物が提供される。
【０１０４】
例示的な態様では、組成物のｐＨは、約６．５〜約９．０、約６．５〜約８．０、約６．９〜約７．７、または約７．０〜約７．５であり得る。ある実施形態では、組成物のｐＨは、約６．５、または約６．６、約６．７、約６．８、約６．９、約７．０、約７．１、約７．２、約７．３、約７．４、約７．５、約７．６、約７．７、約７．８、約７．９、約８．０、約８．１、約８．２、約８．３、約８．４、約８．５、約８．６、約８．７、約８．８、約８．９、または約９．０であり得る。例示的な態様では、組成物のｐＨは、約７．０または約７．４であり得る。ある実施形態では、組成物のｐＨは約７．０であり得る。ある実施形態では、組成物のｐＨは約７．４であり得る。
【０１０５】
オスモル濃度（Osmolality）
例示的な実施形態では、本開示の組成物は、約２００〜約４００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、約２５０〜約４００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、または約２９０〜約３９０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇのオスモル濃度を有する。ある実施形態では、本明細書で提供されるウイルス（例えば、ＡＡＶ）組成物は、例えば、約２００ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２１０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２２０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２３０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２４０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２５０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２６０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２７０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２８０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２９０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３００ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３１０
ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３２０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３３０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３４０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３５０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３６０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３７０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３８０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３９０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、または約４００ｍＯｓｍｏｌ／Ｌのオスモル濃度を有する。例示的な態様では、本開示の組成物は、約２５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約３５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇのオスモル濃度を有する。例示的な態様では、本開示の組成物は、約２５９ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、約３０５ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、約３２０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、または約３４７ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇのオスモル濃度を有する。
【０１０６】
本明細書で提供される組成物で使用できる等張化剤の例には、塩化ナトリウム、デキストロース、スクロース、キシリトール、フルクトース、グリセロール、ソルビトール、マンニトール、トレハロース、塩化カリウム、マンノース、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、他の無機塩、他の糖、他の糖アルコール、およびそれらの組み合わせ物が含まれるが、これらに限定されない。ある実施形態において、ウイルス（例えば、ＡＡＶ）組成物は、少なくとも１つの等張化剤、または少なくとも２つ、３つ、４つ、５つ、またはそれ以上の等張化剤を含み得る。
【０１０７】
ＡＡＶ
例示的な実施形態では、本開示の組成物はＡＡＶを含む。ＡＡＶは任意のＡＡＶ血清型であってよい。例示的な態様において、ＡＡＶは、ＡＡＶ１血清型、ＡＡＶ２血清型、ＡＡＶ３血清型、ＡＡＶ４血清型、ＡＡＶ５血清型、ＡＡＶ６血清型、ＡＡＶ７血清型、ＡＡＶ８血清型、ＡＡＶ９血清型、またはＡＡＶ１０血清型、あるいはそれらの組み合わせであり得る。例示的な態様では、ＡＡＶは、ＡＡＶ８血清型のものであり得る。例示的な態様では、ＡＡＶは、ＡＡＶ９血清型のものであり得る。例示的な態様では、ＡＡＶは、ＡＡＶ６血清型のものであり得る。
【０１０８】
ある実施形態において、ＡＡＶは、遺伝的および／または化学的に改変され得る。ある実施形態では、ＡＡＶは遺伝的に改変され得る。ある実施形態では、ＡＡＶは化学的に改変され得る。
【０１０９】
ある実施形態において、ＡＡＶは、遺伝子治療適用のために、受容体の使用、抗原性、形質導入効率および／または組織向性が変化したＡＡＶベクターを作成するために遺伝的に改変されている。ある実施形態において、ＡＡＶは、ペプチドリガンド、抗体、抗体フラグメント、ＭＨＣ、および／または受容体をウイルスキャプシドに挿入するように遺伝的に改変され得る。ある実施形態において、ＡＡＶは、ウイルスキャプシドの標識のためにペプチドを挿入するように遺伝的に改変され得る。可能な変更の非限定的な例は、Buning H., Bolyard C.M., Hallek M., Bartlett J.S. (2012) Modification and Labeling of AAV Vector Particles. In: Snyder R., Moullier P. (eds) Adeno-Associated Virus. Methods in Molecular Biology (Methods and Protocols), vol 807. Humana Pressに見ることができ、これは意図されたすべての目的のためにその全体が本書に組み込まれる。
【０１１０】
ある実施形態において、ＡＡＶは、ＡＡＶベクターの組織向性を変更するために化学的に改変されている。例えば、特定のアミノ酸側鎖を標的とすることができる化学選択的反応を利用して、ＡＡＶキャプシドの受容体結合ドメイン内の電荷、極性、疎水性、および水素結合の可能性を変化させることができる。ＡＡＶキャプシド表面上の特定受容体の性質を変化させるそのような能力は、組織向性が変化した合成ベクターの作製を可能にする。ある実施形態において、化学的に改変されたＡＡＶベクターは、化学的に改変されたＡＡＶベクターの変化した受容体使用、抗原性、形質導入効率および／または組織向性を示すことができる。可能な改変の非限定的な例は、Buning H., Bolyard C.M., Hallek M., Bartlett J.S. (2012) Modification and Labeling of AAV Vector Particles. In: Snyder R., Moullier P. (eds) Adeno-Associated Virus. Methods in Molecular Biology (Methods and Protocols), vol 807. Humana Pressに見ることができ、これは意図されたすべての目的のためにその全体が本書に組み込まれる。
【０１１１】
本明細書で提供される組成物のある実施形態では、ＡＡＶは、米国特許出願公開第２０１７／０２３３４５５号および仮出願第６２／５０９，６１６号に記載されているようなｒＡＡＶであってよく、これらは両方とも参照によりその全体およびすべての目的のために本明細書に組み込まれる。
【０１１２】
例示的な態様では、組成物は、高力価のＡＡＶ生成物を含む。例示的な態様では、組成物は、少なくとも約１０１０キャプシド粒子（ｃｐ）、または少なくとも約１０１１キャプシド粒子（ｃｐ）、または少なくとも約１０１２キャプシド粒子（ｃｐ）、または少なくとも約１０１３キャプシド粒子（ｃｐ）を含む。例示的な態様では、組成物は、少なくとも約１０１４キャプシド粒子（ｃｐ）または少なくとも約１０１５キャプシド粒子（ｃｐ）、例えば、少なくとも約２×１０１５キャプシド粒子（ｃｐ）、少なくとも約５×１０１５キャプシド粒子（ｃｐ）を含む。ある実施形態では、キャプシド粒子（ｃｐ）という用語は、ベクター粒子という用語と交換可能に使用することができる。ある実施形態では、ｃｐは、ＥＬＩＳＡ分析と関連して使用される。ある実施形態において、ｖｇは、ｑＰＣＲ分析と関連して使用される。組成物はまた、約１０１０ベクターゲノム（ｖｇ）、または少なくとも約１０１１ベクターゲノム（ｖｇ）、または少なくとも約１０１２ベクターゲノム（ｖｇ）、または少なくとも約１０１３ベクターゲノム（ｖｇ）を含む。例示的な態様において、組成物は、少なくとも約１０１４ベクターゲノム（ｖｇ）または少なくとも約１０１５ベクターゲノム（ｖｇ）、例えば、少なくとも約２ｘ１０１５ベクターゲノム（ｖｇ）、少なくとも約５ｘ１０１５ベクターゲノム（ｖｇ）を含む。
【０１１３】
この出願は特にＡＡＶベクターを例示しているが、これらの同じ組成物を他のウイルスベクターでも使用できる。本明細書に記載のウイルス粒子が由来し得るウイルスの非限定的な例には、例えば、レトロウイルス（例えば、ラウス肉腫ウイルス、ヒトおよびウシＴ細胞白血病ウイルス（ＨＴＬＶおよびＢＬＶ））、レンチウイルス（例えば、ヒトおよびサル免疫不全ウイルス（ＨＩＶおよびＳＩＶ）、メイソン・ファイザーサルウイルス）、フォーミーウイルス（例えば、ヒトフォーミーウイルス（ＨＦＶ））、ヘルペスウイルス（単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、水痘・帯状疱疹ウイルス、ＶＺＶＥＢＶ、ＨＣＭＶ、ＨＨＶ）、ハンタウイルス、ポックスウイルス（例えば、脊椎動物および鳥類のポックスウイルス、ワクシニアウイルス）、オルソミクソウイルス（例えば、Ａ型インフルエンザ、Ｂ型インフルエンザ、Ｃ型インフルエンザウイルス）、パラミクソウイルス（例えば、パラインフルエンザウイルス、呼吸器多核体（ＲＳ）ウイルス、センダイウイルス、ムンプスウイルス、麻疹および麻疹様ウイルス）、ラブドウイルス（例えば、小胞性口内炎ウイルス、風疹ウイルス、狂犬病ウイルス）、コロナウイルス（例、ＳＡＲＳ、ＭＥＲＳ）、フラビウイルス（例えば、マールブルグウイルス、レストンウイルス、エボラウイルス）、アルファウイルス（例えば、シンドビスウイルス）、ブニヤウイルス、アレナウイルス（例えば、ＬＣＭＶ、ＧＴＯＶ、ＪＵＮＶ、ＬＡＳＶ、ＬＵＪＶ、ＭＡＣＶ、ＳＡＢＶ、ＷＷＡＶなど）、イリドウイルス、およびヘパドナウイルスが含まれる。
【０１１４】
製造方法および使用
ウイルス（例えば、ＡＡＶ）を含む組成物を調製する方法が本明細書でさらに提供される。ある実施形態では、組成物は水性である。ある実施形態では、組成物は凍結乾燥される。以下の例はＡＡＶに関するものであるが、他のウイルスベクターも使用できる。
【０１１５】
例示的な態様では、この方法は、ａ）安定剤、非イオン性界面活性剤、糖、糖アルコールまたはそれらの組み合わせ、溶媒、および任意選択で薬学的に許容される塩を、最終濃度が約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭの安定剤、約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤、約０．１ｍＭ〜約２０ｍＭの糖、糖アルコールまたはそれらの組み合わせ（追加の範囲は上記でさらに詳細に開示されている）となるように配合する、およびｂ）ＡＡＶ粒子を添加し、それによってＡＡＶを含む組成物を得ることを含む。ある実施形態では、ＡＡＶ粒子は精製される。ある実施形態では、ＡＡＶ含有溶液は、最終組成物に透析される。ある実施形態において、組成物は、約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で約７．０または約７．４のｐＨを有する。
【０１１６】
例示的な態様では、この方法は、ａ）Ｌ−ヒスチジン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、スクロースおよび／またはグルコース、水、および任意選択で塩化ナトリウムを、最終濃度が約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、および約０．１ｍＭ〜約２０ｍＭのスクロースおよび／またはグルコース（追加の範囲は上記でさらに詳細に開示）となるように配合する、およびｂ）ＡＡＶ粒子を添加し、それによりＡＡＶを含む組成物を得ることを含む。ある実施形態では、ＡＡＶ粒子は精製される。ある実施形態では、ＡＡＶ含有溶液は、最終組成物に透析される。ある実施形態において、組成物は、約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で約７．０または約７．４のｐＨを有する。
【０１１７】
例示的な態様では、この方法は、ａ）Ｌ−ヒスチジン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、スクロースおよび／またはグルコース、塩化ナトリウム、および水を、最終濃度が約１ｍＭ〜約１５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００５％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約０．１ｍＭ〜約２０ｍＭのスクロースおよび／またはグルコース（追加の範囲は上記でさらに詳細に開示されている）となるように配合する、およびｂ）ＡＡＶ粒子を添加し、それによりＡＡＶを含む組成物を得ることを含む。ある実施形態では、ＡＡＶ粒子は精製される。ある実施形態において、ＡＡＶ含有溶液は、最終組成物に透析される。ある実施形態において、組成物は、約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で約７．０または約７．４のｐＨを有する。
【０１１８】
例示的な態様では、この方法は、ａ）安定剤、非イオン性界面活性剤、溶媒、および任意選択で薬学的に許容される塩を、最終濃度が約１ｍＭ〜約１００ｍＭの安定剤、約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩、および約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤（追加の範囲は上記でさらに詳細に開示されている）となるように配合する、およびｂ）ＡＡＶ粒子を添加し、それによってＡＡＶを含む組成物を得ることを含む。ある実施形態では、ＡＡＶ粒子は精製される。ある実施形態において、ＡＡＶ含有溶液は、最終組成物に透析される。ある実施形態では、組成物は、約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で、約７．０または約７．４のｐＨを有する。
【０１１９】
例示的な態様では、この方法は、ａ）Ｌ−ヒスチジン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、水、および任意選択で塩化ナトリウムを、最終濃度が約１ｍＭ〜約１００ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの塩化ナトリウム、および約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）（追加の範囲は上記でさらに詳細に開示されている）となるように配合する、およびｂ）ＡＡＶ粒子を添加し、それによってＡＡＶを含む組成物を得ることを含む。ある実施形態では、ＡＡＶ粒子は精製される。ある実施形態では、溶液を含むＡＡＶ粒子は、最終組成物に透析される。ある実施形態では、組成物は、約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で、約７．０または約７．４のｐＨを有する。
【０１２０】
例示的な態様では、この方法は、ａ）Ｌ−ヒスチジン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、水、および任意選択で塩化ナトリウムを、最終濃度が約３０ｍＭ〜約７５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．００５％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）（追加の範囲は上記でさらに詳細に開示されている）となるように配合する、およびｂ）ＡＡＶを添加し、それによりＡＡＶを含む組成物を得ることを含む。ある実施形態では、ＡＡＶ粒子は精製される。ある実施形態において、ＡＡＶ含有溶液は、最終組成物に透析される。ある実施形態では、組成物は、約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で、約７．０または約７．４のｐＨを有する。
【０１２１】
例示的な態様では、この方法は、ａ）安定剤、非イオン性界面活性剤、溶媒、および任意選択で薬学的に許容される塩を、最終濃度が約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭの安定剤、約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩、および約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤（追加の範囲は上記でさらに詳細に開示されている）となるように配合する、およびｂ）ＡＡＶ粒子を添加し、それによってＡＡＶを含む組成物を得ることを含む。ある実施形態では、ＡＡＶ粒子は精製される。ある実施形態において、ＡＡＶ含有溶液は、最終組成物に透析される。ある実施形態では、組成物は、約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で、約７．０または約７．４のｐＨを有する。
【０１２２】
例示的な態様では、この方法は、ａ）クエン酸ナトリウム、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、水、および任意選択で塩化ナトリウムを、最終濃度が約０．５ｍＭ〜約３０ｍＭのクエン酸ナトリウム、約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの塩化ナトリウム、および約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）（追加の範囲は上記でさらに詳細に開示されている）となるように配合する、およびｂ）ＡＡＶ粒子を添加し、それによりＡＡＶを含む組成物を得ることを含む。ある実施形態では、ＡＡＶ粒子は精製される。ある実施形態では、溶液を含むＡＡＶ粒子は、最終組成物に透析される。ある実施形態では、組成物は、約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で、約７．０または約７．４のｐＨを有する。
【０１２３】
例示的な態様では、この方法は、ａ）クエン酸ナトリウム、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、水、および塩化ナトリウムを、最終濃度が約１ｍＭ〜約３０ｍＭのクエン酸ナトリウム、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）（追加の範囲は上記でさらに詳細に開示されている）となるように配合する、およびｂ）ＡＡＶを添加し、それによりＡＡＶを含む組成物を得ることを含む。ある実施形態では、ＡＡＶ粒子は精製される。ある実施形態では、ＡＡＶ含有溶液は、最終的組成物に透析される。ある実施形態では、組成物は、約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で、約７．０または約７．４のｐＨを有する。
【０１２４】
例示的な態様では、この方法は、ａ）安定剤、非イオン性界面活性剤、溶媒、および任意選択で薬学的に許容される塩を、最終濃度が約１ｍＭ〜約４０ｍＭの安定剤、約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの薬学的に許容される塩、および約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤（追加の範囲は上記でさらに詳細に開示されている）となるように配合する、およびｂ）ＡＡＶ粒子を添加し、それによってＡＡＶを含む組成物を得ることを含む。ある実施形態では、ＡＡＶ粒子は精製される。ある実施形態では、ＡＡＶ含有溶液は、最終組成物に透析される。ある実施形態では、組成物は、約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で、約７．０または約７．４のｐＨを有する。
【０１２５】
例示的な態様では、この方法は、ａ）重炭酸ナトリウム、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、水、および任意選択で塩化ナトリウムを、最終濃度が約１ｍＭ〜約４０ｍＭの重炭酸ナトリウム、約０ｍＭ〜約２５０ｍＭの塩化ナトリウム、および約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）（追加の範囲は上記でさらに詳細に開示されている）となるように配合する、およびｂ）ＡＡＶ粒子を添加し、それによりＡＡＶを含む組成物を得ることを含む。ある実施形態では、ＡＡＶ粒子は精製される。ある実施形態では、ＡＡＶ含有溶液は、最終組成物に透析される。ある実施形態では、組成物は、約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で約７．０または約７．４のｐＨを有する。
【０１２６】
例示的な態様では、この方法は、ａ）重炭酸ナトリウム、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、水、および塩化ナトリウムを、最終濃度が約１ｍＭ〜約４０ｍＭの重炭酸ナトリウム、約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．０００１％（ｗ／ｗ）〜約０．０１％（ｗ／ｗ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）（追加の範囲は上記でさらに詳細に開示されている）となるように配合する、およびｂ）ＡＡＶを添加し、それによりＡＡＶを含む組成物を得ることを含む。ある実施形態では、ＡＡＶ粒子は精製される。ある実施形態では、ＡＡＶ含有溶液は、最終組成物に透析される。ある実施形態では、組成物は、約６．９〜約７．７のｐＨを有し、任意選択で、約７．０または約７．４のｐＨを有する。
【０１２７】
ＡＡＶを精製する非限定的な例は、例えば、国際公開第２０１８１２８６８８号およびＰＣＴ／ＵＳ２０１８／０６７６２７の公開広報に見ることができる。
【０１２８】
凍結乾燥されたＡＡＶ組成物を作成する方法の実施形態は、水性濃縮組成物を作成することも含んでいてよく、それをその後凍結乾燥することができる。
【０１２９】
いくつかの実施形態では、凍結乾燥はまた、組成物の周囲の圧力を低下させた状態で組成物の温度を上昇させることを含んでいてよい。例えば、組成物の温度は、上記の最低温度からその最低温度よりも高い温度まで上昇させることができる。場合によっては、低下した周囲圧力での組成物中の水の昇華を促進するために温度を上昇させる。
【０１３０】
容器内に組成物を提供することにより、無菌組成物として組成物を維持することを容易にすることができる。例えば、無菌環境で容器内に封入された組成物を維持するように容器を構成することができる。従って、容器は密封容器であってよく、例えば、容器は、水密および／または気密シールなどのシールを含んでいてよい。使用者が容器の内容物を利用できるように、シールを容器から取り外し可能にすることができる。一部の例では、シールは脆弱なシールであってよく、あるいは他の例では、シールを容器から取り外すことなく、針、カニューレまたはシリンジを容器の内部に挿入できるようにシールを構成してもよい。一部の例では、シールを容器から取り外すことなく容器の内部へのアクセスを可能にするように構成されたシールは、対象への組成物の投与の前に無菌環境において容器の内容物（例えば容器内の組成物）を維持することを容易にすることができる。シールに適した材料には、例えば、シリコーンゴム、天然ゴム、スチレンブタジエンゴム、エチレン−プロピレンコポリマー、ポリクロロプレン、ポリアクリラート、ポリブタジエン、ポリウレタン、スチレンブタジエン等、およびそれらの組み合わせなどのゴムまたはポリマーシールが含まれるが、これらに限定されない。例えば、ある実施形態では、シールは、針、シリンジ、またはカニューレにより貫通可能な隔膜であり得る。シールは、容器内のサンプルへの便利なアクセス、ならびに容器の開口部を覆う保護バリアも提供することができる。一部の例では、シールは、ねじ込み式ャップまたはスナップオンキャップ、あるいは容器の開口部に適用できる他の適切なシール要素などの、取り外し可能なシールであってよい。例えば、容器にサンプルを添加する前または後に、ねじ込み式キャップを開口部にねじ込むことができる。
【０１３１】
一部の例では、容器は単位用量容器(unit dosage container)であり得る。単位用量容器は、対象への投与のための１または複数の単位用量を含む容器を指す。一部の実施形態では、単位用量容器は、対象において所望の効果をもたらすのに十分な量で計算された所定量の対象組成物を含む。組成物のある実施形態は、正確な投薬量の個別投与に適した単位用量容器で提供され得る。対象に投与される活性組成物の量は、処置されている対象、苦痛の重症度、および投与方法に依存し得る。例えば、単位用量容器は、処置されている対象において所望の効果を達成するのに有効な量で本明細書に開示されるように投与される組成物の量を含み得る。ある例では、単位用量容器は、ＡＡＶ粒子を有する組成物を治療有効量で含む。ある実施形態では、単位用量容器はバイアルであり得る。一部の例では、バイアルは、（例えば密封容器に関して上述したような）密封されたバイアルである。
【０１３２】
容器は、ＡＡＶおよび組成物の他の成分と適合する任意の都合のよい材料から構成され得る。例えば、容器は、固体（例えば凍結乾燥組成物）を含むように構成された固体適合性容器であり得る。一部の例では、容器は、液体を含むように構成された液体適合性容器であり得る。容器は、固体および液体を含むように構成された固体および液体に適合性の容器であってもよい。一部の例では、容器中の液体は水性液体であってよく、その場合、容器は水性組成物に適合性のものであり得る。「適合性」とは、容器が液体および／または組成物あるいは容器と接触する他の成分と実質的に不活性である（例えば、有意には反応しない）ことを意味する。適切な容器材料の例には、ガラスおよびプラスチックが含まれるが、これらに限定されない。例えば、容器は、ケイ酸塩ガラス、ホウケイ酸塩ガラス、ホウケイ酸ナトリウムガラス（例えばＰＹＲＥＸ（商標））、溶融石英ガラス、溶融シリカガラスなどであるがこれらに限定されないガラスで構成され得る。容器に適切な容器材料の他の例には、ポリプロピレン、ポリメチルペンテン、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロエーテル（ＰＦＥ）、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリエチレンテレフタラート（ＰＥＴ）、ポリエチレン（ＰＥ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、ポリスチレンなどであるがこれらに限定されないプラスチックが含まれる。ある例では、上述したように、容器はバイアルであってよく、従ってガラスバイアルであってよい。上記のように、容器は密封容器であってよく、従って密封ガラスバイアルであってよい。
【０１３３】
例示的な態様では、ガラスまたはプラスチック容器に入れられたＡＡＶを含む組成物の体積は、約０．１ｍｌ〜約１０ｍｌ、約０．１ｍｌ〜約５ｍｌ、約０．２ｍｌ〜約６ｍｌ、約０．２ｍｌ〜約５ｍｌ、約０．２５ｍｌ〜約５ｍｌ、約２ｍｌ〜約５ｍｌ、約２．５ｍｌ〜約５ｍｌ、約３ｍｌ〜約５ｍｌ、約４ｍｌ〜約５ｍｌ、約５ｍｌ〜約１０ｍｌ、約６ｍｌ〜約９ｍｌ、または約７ｍｌ〜約８ｍｌであり得る。例示的態様では、その体積は、約０．１ｍｌ、約０．２ｍｌ、約０．２５ｍｌ、約０．３ｍｌ、約０．４、約０．５ｍｌ、約０．６ｍｌ、約０．７ｍｌ．約０．７５ｍｌ、約０．８ｍｌ、約０．９ｍｌ、約１ｍｌ、約２ｍｌ、約２．５ｍｌ、約３ｍｌ、約４ｍｌ、約５ｍｌ、約５．５ｍｌ、約５．６ｍｌ、約６ｍｌ、約７ｍｌ、約７．５ｍｌ、約８ｍｌ、約９ｍｌ、または約１０ｍｌであり得る。
【０１３４】
例示的態様では、ＡＡＶを含む組成物は、約−８０℃〜約−１０℃の温度で少なくとも１か月（例えば、少なくとも２か月、少なくとも３か月、少なくとも４か月、少なくとも５か月、少なくとも６か月）保存することができる。例示的態様では、ＡＡＶを含む組成物は、約−６０℃〜約−２０℃の温度で少なくとも１か月（例えば、少なくとも２か月、少なくとも３か月、少なくとも４か月、少なくとも５か月、少なくとも６か月）保存することができる。例示的態様では、ＡＡＶを含む組成物は、３、４、５、または６か月以上保存することができる。組成物を保存する方法は本明細書に記載されている（例えば実施例１〜３を参照のこと）。例示的態様では、ＡＡＶの初期量（例えば、保存前の組成物中のＡＡＶの量）の８０％超が、保存期間（例えば、約３か月、約４か月、約５か月、または約６か月以上の保存期間）後に効力を有することができる。例示的態様では、ＡＡＶの初期量の９０％超が、保存期間（例えば、約３か月、約４か月、約５か月、または約６か月以上の保存期間）後に効力を有することができる。例示的態様では、ＡＡＶの初期量の９５％超が、保存期間（例えば、約３か月、約４か月、約５か月、または約６か月以上の保存期間）後に効力を有することができる。例示的態様では、保存期間の終了時のＡＡＶの生物効力は、保存期間の開始時のＡＡＶの生物効力と実質的に同じであることができる。例示的態様では、保存期間の終了時のＡＡＶの生物効力は、保存期間の開始時のＡＡＶの生物効力よりも高められ得る。例示的態様では、保存期間の終了時の組成物の外観は、保存期間の開始時の組成物と実質的に同じであることができる。例示的態様では、保存期間の終了時の組成物の外観は、目に見える粒子がないことにより特徴づけることができる。例示的態様では、保存期間の終了時の組成物の粒子濃度は、保存期間の開始時の組成物の粒子濃度と実質的に同じであることができる。例示的態様では、保存期間の終了時の組成物の粒子濃度は、マイクロフローイメージング（ＭＦＩ）により決定することができる。
【０１３５】
遺伝子治療によって処置可能な障害について対象を処置する方法が本開示によって提供される。例示的な態様では、その方法は、疾患または障害を処置するのに有効な量で本明細書に記載の医薬組成物を対象に投与することを含み、方法は、疾患または障害を処置するのに有効な量で本開示の医薬組成物を対象に投与することを含む。
【０１３６】
例示的な態様では、疾患または障害は、神経学的障害または神経変性障害（例えば、多発性硬化症（「ＭＳ」）、ＡＩＤＳ関連神経変性およびアルツハイマー病、感染性髄膜炎、脳脊髄炎、パーキンソン病、ハンチントン病、ハンター病、フリードライヒ運動失調症、脊髄小脳失調症、筋萎縮性側索硬化症、脳炎、プリオン病、運動ニューロン病、または脊髄性筋萎縮症）であってよく、その方法は、神経変性障害を処置するのに有効な量で本開示の医薬組成物を対象に投与することを含む。ある実施形態では、神経学的障害または神経変性障害は、ニューロン（神経細胞）に影響を与える疾患または障害である。ある実施形態において、神経学的障害または神経変性障害は、ニューロンの進行性の変性および／または死をもたらす。ある実施形態では、神経学的障害または神経変性障害は、例えば、農薬、殺菌剤、殺虫剤、金属（例えば、ヒ素、鉛、マンガン）、工業製品または消費者製品で使用される化学物質（例えば、ポリ塩化ビフェニル（ＰＣＢ）、およびポリ臭化ジフェニルエーテル（ＰＢＤＥ））、大気汚染および／または水質汚染、生物学的要因（例えば、細菌によって生成されるエンドトキシン）、および／または食事およびライフスタイルの要因（例えば、カフェイン、タバコの煙、食物の抗酸化物質）によって引き起こされ得る。
【０１３７】
例示的な態様では、疾患または障害は眼疾患（例えば、網膜血管疾患、網膜変性または角膜変性）であってよく、この方法は、神経変性障害を処置するのに有効な量で本開示の医薬組成物を対象に投与することを含む。
【０１３８】
例示的な態様では、疾患または障害は、Ｃ１阻害剤欠損症、肺高血圧症、ポンペ病、ファブリー病、ゴーシェ病、またはα１−アンチトリプシン欠損症であってよく、この方法は、神経変性障害を処置するのに有効な量で本開示の医薬組成物を対象に投与することを含む。
【０１３９】
例示的な態様では、疾患または障害は、出血性障害（例えば、血友病Ａ、血友病Ｂ、または血友病Ｃ、フォン・ヴィレブランド病（ＶＷＤ）、第Ｉ、第ＩＩ、第Ｖ、第ＶＩＩ、第ＶＩＩＩ、第ＩＸ、第Ｘ、第ＸＩ、第ＸＩＩおよび第ＸＩＩＩなどの因子欠損症）であってよく、この方法は、出血性障害を処置するのに有効な量で本開示の医薬組成物を対象に投与することを含む。ある実施形態では、出血性障害は遺伝性であってよい。ある実施形態では、出血性障害は後天性であってよい。ある実施形態では、出血性障害は、貧血、肝硬変、ＨＩＶ、白血病、ビタミンＫ欠乏症であってよい。
【０１４０】
例示的態様では、その方法は、非経口投与により医薬組成物を投与することを含む。「非経口」という用語は、消化管を通さないで、いずれか他の経路によることを意味する。例えば、本明細書に開示される組成物は、例えば、静脈内投与（例えば、ボーラスとして、または長時間にわたる持続注入による）、筋肉内、腹腔内、脳室内、脳脊髄内、皮下、関節内、滑液嚢内、髄腔内、硝子体内、実質内、経口、局所または吸入経路によるなど、既知の方法を介した投与用に製剤化され得る。ある実施形態では、本明細書に提供されるＡＡＶ組成物は、全身的または局所的のいずれで投与してもよい。全身投与には、経口、真皮下、腹腔内、皮下、経鼻、舌下または直腸内の投与経路が含まれるが、これらに限定されない。局所投与には、局所、皮下、筋肉内、および腹腔内の投与経路が含まれるが、これらに限定されない。ある実施形態では、投与経路は脳室内注射を介したものでよい。ある実施形態では、投与経路は実質内注射を介したものでよい。
【０１４１】
対象の遺伝子治療のためにＡＡＶを投与する方法は当技術分野で知られている。例えば、Monahan, Gene therapy in an era of emerging treatment options for hemophilia B, J Thromb Haemost. 2015 Jun; 13(0 1): S151-S160を参照されたい。
【０１４２】
本開示の再構成された組成物は、例えば注射または静脈内投与により対象に投与することができる。これらの実施形態では、再構成された組成物を対象に投与する前に、例えば上記のような固体組成物を液体と配合して、例えば注射または静脈内投与による投与に適した液体組成物を提供することができる。一部の例では、組成物を対象に投与する前に、固体組成物を水（例えば注射用水、ＷＦＩ）またはバッファー／緩衝剤と配合して、例えば注射または静脈内投与による投与に適した水性組成物を提供することができる。例えば、水（例えば注射用水、ＷＦＩ）またはバッファー／緩衝剤で凍結乾燥組成物を再構成し、例えば注射または静脈内投与による対象への投与に適した再構成された投薬単位を作成することができる。
【０１４３】
ある実施形態では、再構成された投薬単位は生理的条件に適合するｐＨを有する。一部の例では、再構成された投薬単位のｐＨは６〜８の範囲である。一部の例では、再構成された投薬単位のｐＨは７〜８の範囲である。例えば、再構成された投薬単位のｐＨは７〜７．５の範囲であってよい。一部の例では、再構成された投薬単位のｐＨは７．０であってよい。一部の例では、再構成投薬単位のｐＨは７．１であってよい。一部の例では、再構成投薬単位のｐＨは７．２であってよい。一部の例では、再構成投薬単位のｐＨは７．３であってよい。一部の例では、再構成投薬単位のｐＨは７．４であってよい。
【０１４４】
再構成された投薬単位は、対象において所望の治療効果をもたらすのに十分な量で計算された本開示の組成物の所定量を含むことができる。対象に投与される再構成された投与単位中の組成物の量は、処置されている対象、苦痛の重症度、および投与方法に依存し得る。例えば、再構成された投薬単位は、治療有効量で本明細書に開示されるように投与される組成物の量を含み得る。
【０１４５】
対象に投与される場合、液体または再構成された投薬単位は、再構成された投薬単位が１Ｅ＋１０ｃｐ／ｍｌ〜５Ｅ＋１５ｃｐ／ｍｌまたは１Ｅ＋１０ｃｐ／ｍｌ〜５Ｅ＋１５ｃｐ／ｍｌを送達するように、治療有効量のＡＡＶを含み得る。
【０１４６】
ある実施形態では、その方法は、治療レジメンに従い対象に液体または再構成された投薬単位を投与することを含む。例えば、一部の例では、処置される対象は、医療提供者から治療レジメンを指示されていてよい。一部の例では、治療レジメンには、１日５回、１日４回、１日３回、１日２回、１日１回、１週間に３回、１週間に２回、１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回、１か月に１回、５週間に１回、６週間に１回、７週間に１回、隔月に１回、およびそれらの任意の組み合わせが含まれるが、必ずしもそれらに限定されない。
【０１４７】
いくつかの実施形態において、治療レジメンは、長期間にわたり１または複数回投与を与えることを含む。ある例では、単回投与（例えば、１投薬単位）を対象に与え、その最初の投与の後に、１または複数回投与を後の時間に対象に与えてよい。一部の例では、１回投与より多く（例えば、１投薬単位より多く）を対象に与え、その最初の投与の後に、１または複数回投与を後の時間に対象に与えてよい。例えば、単回投与（例えば１投薬単位）を対象に与え、その単回投与の後に、単回投与を後の時間に対象に与えてよい。追加の単回投与を後の時間に対象に与えてよい。他の例では、単回投与（例えば１投薬単位）を対象に与え、その単回投与の後に、２回投与を後の時間に対象に与えてよい。追加の単回または複数回投与を後の時間に与えてもよい。
【０１４８】
ある実施形態では、例えば併用療法において、関連するまたは関連しない状態を処置するための他の活性物質の前に、それと同時に、またはその後に、本開示の再構成された投薬単位を投与することができる。そのような追加の治療法の例には、放射線治療、外科的治療、および化学療法が含まれる。他の活性物質と同時に提供される場合、本開示の再構成された投薬単位を、同じ組成物で提供してもまたは異なる組成物で提供してもよい。例えば、同時治療は、特定の治療レジメンに従い、組み合わせて治療有効用量を提供する、再構成された投薬単位と、少なくとも１つの他の活性物質（例えば、化学療法剤など）を有する医薬組成物とを投与することにより達成することができる。別々の医薬組成物の投与は、これら物質の組み合せの治療有効効果が処置を受けている対象で生じる限りは、同時に行っても、または異なる時に（例えば、連続して、いずれかの順序で、同日に、または異なる日に）行ってもよい。
【０１４９】
従って、本開示の態様は、併用療法をさらに含む。ある実施形態では、その方法は、治療有効量の１つまたは複数の追加の活性物質を投与することを含む。併用療法とは、ＡＡＶ組成物（例えば本明細書に記載のような）を別の治療物質と組み合わせて使用して、単一の疾患または状態を処置することができることを意味する。ある実施形態では、本開示の化合物は、別の治療物質と同時に投与され、その別の治療物質は、本開示の化合物を含む組成物の構成成分として投与しても、あるいは異なる組成物の構成成分として投与してもよい。ある実施形態では、本開示の化合物を含む組成物は、別の治療物質の投与の前または後に投与される。
【０１５０】
以下の実施例は、単に本発明を説明するために与えられており、その範囲を限定するものではない。
【実施例】
【０１５１】
実施例１
この例は、ＡＡＶベクターの脳室内（ＩＣＶ）、硝子体内（ＩＶ）、および髄腔内（ＩＴ）投与用の組成物を直接脳検討へと開発するために実施した。様々なＡＡＶ血清型で最もよく機能するバッファー製剤を決定するために、７つの異なるバッファー製剤を製造した。参照組成物（ＰＢＳ＋０．００１％のプルロニック（登録商標）Ｆ−６８；製剤５）を比較のための対照として使用した。
【０１５２】
【表１】
2021532071.tif 000003
【０１５３】
【表２】
2021532071.tif 000004
【０１５４】
【表３】
2021532071.tif 000005
【０１５５】
【表４】
2021532071.tif 000006
【０１５６】
【表５】
2021532071.tif 000007
【０１５７】
【表６】
2021532071.tif 000008
【０１５８】
実施例２
＋５±３℃で最大４か月（０、１、２、および４か月）、および≦−６０℃（設定値−８０℃）で最大６か月（１、２、３、および６か月）、１０ｍｌのＳｉＯ２ガラスバイアル内で保存された実施例１の５つの異なるバッファー製剤中のＡＡＶ８遺伝子治療材料の安定性を調べた。各時点に関して、０か月、１か月（≦−６０℃）、４か月（＋５±３℃）、および６か月（≦−６０℃）について２．８ｍｌを別々の１０ｍｌのＳｉＯ２ガラスバイアルに入れ、また他のすべての時点について２．２ｍｌを使用した。この研究は、最終的に配合され、滅菌濾過されたＡＡＶ８遺伝子治療材料を使用して実施した。
【０１５９】
材料および方法
この研究では、以下の機器、装置、および試薬を使用した：
・ＡＡＶ８ウイルスベクター
・＋５±３℃で保存
・≦−６０℃で保存
・１０ｍｌ  Ｓｃｈｏｔｔ  Ｔｙｐｅ  ＩバイアルおよびＳｉＯ２層
・２０Ｒ  ＮｏｖａＰｕｒｅ血清ストッパー
・２ｍｌ  Ｓｃｈｏｔｔ  Ｔｙｐｅ  ＩバイアルおよびＳｉＯ２層
・１３Ｒ  ＮｏｖａＰｕｒｅ血清ストッパー
・温度測定、Ｔｅｓｔｏ  １１２
・Ｓｌｉｄｅ−Ａ−Ｌｙｚｅｒ（登録商標）１０Ｋ透析カセット（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）。
【０１６０】
精製されたＡＡＶ８ウイルスベクターを、調査する各バッファー製剤について２０．５ｍｌずつ分注し、製剤１〜６に対して透析した（上記の実施例１を参照）。透析は、１２〜３０ｍｌのＳｌｉｄｅ−Ａ−Ｌｙｚｅｒ（登録商標）１０Ｋ透析カセットにおいて１００倍容量で３回行った。
【０１６１】
バッファー交換後、材料を１０ｍｌのガラスバイアルに入れ、＋５±３℃または≦−６０℃のいずれかで保存した。０か月、１か月（≦−６０℃）、４か月（＋５±３℃）および６か月（≦−６０℃）については２．８ｍｌを入れた。他のすべての試験時点については、２．２ｍｌを使用した。１ｍｌの各溶液を１０ｍｌバイアルと同様に２ｍｌガラスバイアルに入れ、それらの外観を評価した。
【０１６２】
ＡＡＶ８材料を、以下の表１〜表５に示されるバッファー製剤に対して透析した。さらに、酸化による活性損失を調べるために、ＡＡＶ８をグルコースバッファー製剤（表６）でも保存した。
【０１６３】
【表７】
2021532071.tif 000009
【０１６４】
【表８】
2021532071.tif 000010
【０１６５】
結果
総粒子力価（ＥＬＩＳＡ）
この方法は、サンドイッチＥＬＩＳＡシステムで無傷（intact）のアデノ随伴ウイルス−血清型８（ＡＡＶ８）粒子を特定するために使用した。コーティング抗体をマイクロプレートに塗布した。その後、ＡＡＶ８粒子を含む溶液を加えた。ＡＡＶ８粒子が抗体によって捕捉された。次のステップでは、ＡＡＶ８粒子を検出する別の抗体を添加し、この抗体を標識した。最後のステップでは、力価を定量化するために基質を添加した。総粒子力価（ＥＬＩＳＡ）は国際公開第２０１８／１６０９７５号に記載されており、これは意図されたすべての目的のためにその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１６６】
一般に、ＡＡＶ８総粒子力価（ＥＬＩＳＡ）に関して得られたすべての結果は、正常な変動を示し、ＡＡＶ８粒子は各バッファー製剤および時点で安定なままであった。バッファー製剤４のみが＋５±３℃での保存で減少を示した（表９および図１）。
【表９】
2021532071.tif 000011
【０１６７】
ｉｎ  ｖｉｖｏ生物効力
ｉｎ  ｖｉｖｏ効力アッセイは血友病マウスで実施した。導入遺伝子の発現によって生じるｉｎ  ｖｉｖｏ生物効力を測定するために、用量群あたり６〜８匹の雄の６〜８週齢のＦＶＩＩＩノックアウト雄マウスに、ＡＡＶ８ベクターの側尾静脈注射により、ＡＡＶ８第ＶＩＩＩ因子（ＡＡＶ８−ＦＶＩＩＩ）最終製剤（１００μＬのバッファー製剤中４ｘ１０１２ｃｐ／ｋｇ）を与えた。
【０１６８】
投与２週間後、マウスに麻酔をかけ、後眼窩静脈叢から採血した。クエン酸血漿を調製し、発色アッセイにより第ＶＩＩＩ因子補因子活性をアッセイした。結果はミリリットルあたりの国際単位（ｌＵ／ｍＬ）で与えられた。ｉｎ  ｖｉｖｏ生物効力アッセイも、国際公開第２０１８／１６０９７５号に記載されており、これはすべての意図された目的のためにその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１６９】
バッファー製剤１〜３は正常な変動の結果を示したが、参照バッファーは効力を低下させる傾向を示した（表１０および図２）。
【表１０】
2021532071.tif 000012
【０１７０】
Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物効力
ＡＡＶ８−ＦＶＩＩＩ遺伝子治療ベクターのｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物効力アッセイは、ヒト肝細胞株ＨｅｐＧ２で実施した。ヒドロキシ尿素で処理した後、細胞をフォン・ヴィレブランド因子（ＶＷＦ）および５−Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピル−アミロライド（ＥＩＰＡ）の存在下でＡＡＶ８−ＦＶＩＩＩベクターに感染させ、９６±３時間インキュベートした。インキュベーション中に、ＦＶＩＩＩが発現され、細胞上清に放出され、ＦＶＩＩＩ活性が発色エンドポイント測定によって決定された。各アッセイの実施は、精製されたＡＡＶ８−ＦＶＩＩＩベクター材料のリファレンスカーブ（基準曲線）を含む。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物効力アッセイは、国際公開第２０１８／１６０９７５号にさらに詳細に記載されており、これはすべての意図された目的のために参照により本明細書に組み込まれる。
【０１７１】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物効力アッセイで得られたすべての結果は、正常な変動（±０．５  ｌｏｇ）を示し、ＡＡＶ８ベクターは各バッファー製剤および時点で安定なままであった。バッファー製剤４のみが＋５±３℃で保存したときに減少を示した（表１１および図３）。
【表１１】
2021532071.tif 000013
【０１７２】
ＩＴＲ−ｑＰＣＲ
ＦＶＩＩＩのＩＴＲ−ｑＰＣＲに関して、プライマーとベクターゲノムのＩＴＲ配列内の配列を検出する蛍光標識プローブとを使用するＴａｑＭａｎベースのｑＰＣＲを使用してミリリットル（ｍｌ）あたりのベクターゲノム力価（ｖｇ）を決定した。ＡＡＶ粒子のＩＴＲ特異的配列を検出するために、サンプルをＤＮＡｓｅ  Ｉで処理し、続くプロテイナーゼＫステップの後、ｓｃＡＡＶゲノムをキャプシドから放出させた。最後に、Ｓｍａｌによる制限酵素消化を行ってＡＡＶ  ＩＴＲのＴ字型構造を解明した。ＩＴＲ−ｑＰＣＲアッセイは、国際公開第２０１８／１６０９７５号に記載されており、これは意図されたすべての目的のためにその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１７３】
試験結果は、各バッファー製剤、ならびに＋５±３℃および≦−６０℃（設定値−８０℃）での保存中の各時点で、ＩＴＲ−ｑＰＣＲアッセイの±０．５  ｌｏｇの変動を示した（表１２および図４）。
【表１２】
2021532071.tif 000014
【０１７４】
凝集体
凝集体は、サイズ排除高速液体クロマトグラフィー（ＳＥ−ＨＰＬＣ）により分析した。サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥ−ＨＰＬＣ）を使用して、流体力学的直径に基づき分析対象物を分離した。大きな分子はカラム充填剤の細孔に浸透できないかまたは部分的にしか浸透できないが、小さな分子はほとんどまたはすべての細孔にアクセスできる。したがって、大きな粒子は最初に溶出し、より小さな粒子は後で溶出する。
【０１７５】
アデノ随伴ウイルスは集合して凝集することができる。記載の方法を使用して、凝集体をモノマーから分離して定量化することができる。合計１００％である凝集体およびモノマーの量は、内部蛍光（intrinsic fluorescence）によって検出され、総ピーク面積のパーセンテージとして計算された。
【０１７６】
異なるバッファー製剤および時点で凝集体の減少も増加も見られなかった。＋５±３℃で保存されたバッファー製剤４のみが４．２％から２．９％に減少し（表１３および図５）、これは、同じサンプルについて、ＥＬＩＳＡアッセイがＡＡＶ８総粒子力価の減少を示したことによって説明できる。
【表１３】
2021532071.tif 000015
【０１７７】
密度
密度は、製品の効力の規定値への正確な希釈、および最終容器への正確な値の充填のために必要である。
【表１４】
2021532071.tif 000016
【０１７８】
オスモル濃度
脳脊髄液のオスモル濃度は約２９５［ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ］である。脳脊髄液より高いまたはより低いオスモル濃度を有する物質を投与すると、注入された溶液と接触する細胞の圧力に悪影響を及ぼし、その結果、壊死細胞の生成をもたらす。表１５に示されるオスモル濃度値に基づいて、各製剤を、例えば、脳室内（ＩＣＶ）、硝子体内（ＩＶＴ）、髄腔内（ＩＴ）、ならびに静脈内（ＩＶ）、皮下（ＳＣ）、または筋肉内（ＩＭ）投与に使用することができる。
【表１５】
2021532071.tif 000017
【０１７９】
ｐＨ
＋５±３℃および≦−６０℃（設定値−８０℃）での４か月の保存期間中、ｐＨ値に有意な変化は見られなかった。製剤４のｐＨ値は安定しなかった。安定性の欠如の１つの説明は、二酸化炭素の蒸発により、透析中の攪拌などの操作中にｐＨ値が７．０２から８．６７または８．６９に変化したことである。
【表１６】
2021532071.tif 000018
【０１８０】
外観
＋５±３℃で１か月および２か月保存した後、製剤６の外観試験中に１つの粒子が見られただけである。各温度および各試験時点で他の各製剤については、外観試験は粒子のない澄明（clear）で無色の溶液を示した。参照も粒子を示さなかったが、これは、０．００３％のポリソルベート８０および０．００１％のプルロニック（登録商標）Ｆ−６８の存在による可能性がある。ポリソルベート８０はテキスト製剤から完全に分離できなかったため、約０．００２％〜０．００３％のポリソルベート８０および０．００１％のプルロニック（登録商標）Ｆ−６８を含む参照バッファーが作成され、これも粒子を示さなかった。
【表１７】
2021532071.tif 000019
【０１８１】
ポリソルベート８０
ポリソルベート８０の結果は、参照についてＰＳ８０を完全に分離できなかったことを示す。したがって、０．００３％〜０．００４％のポリソルベート８０が各製剤に見られる。
【表１８】
2021532071.tif 000020
【０１８２】
ＳＤＳ−ＰＡＧＥ
ＡＡＶ血清型は、それぞれベクター（導入遺伝子、ヘルパープラスミドなど）を含むＡＡＶウイルス粒子を表す。様々な製品のＡＡＶ粒子は、ウイルス構造タンパク質ＶＰ１、ＶＰ２、およびＶＰ３からなる。血清型の違いは、キャプシドの含有量である。現在の方法は、これらの構造タンパク質の可視化を目的とする。ＳＤＳ  ＰＡＧＥアッセイは、アデノ随伴ウイルスのキャプシドに適格であるため、ＡＡＶ６、ＡＡＶ８、およびＡＡＶ９血清型を含むすべてのＡＡＶ血清型に適用できる。
【０１８３】
サンプルをＳＤＳサンプルバッファーで１：２に希釈して、電気泳動を行う。ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）およびドデシル硫酸リチウム（ＬＤＳ）はそれぞれタンパク質を均一な負電荷で被覆するため、それらの分離は分子量（流体力学的直径）のみに基づく。
【０１８４】
銀染色ならびにウエスタンブロットは、各バッファー製剤、温度および試験時点について、いずれの分解および／または追加のバンドも示さなかった（図５〜１３）。＋５±３℃で２か月後にバッファー製剤６で見られるスミア（図９）は、再試験後のこのサンプルのきれいなバンド（図８）によってアーティファクトとして見られ、ウエスタンブロットでは見られなかった（図１０）。
【０１８５】
ｎｓＴＥＭ
ｎｓＴＥＭは、ネガティブ染色細胞を透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）で調べる方法である。古典的にＴＥＭは、固定、脱水、切片化、ならびに細胞および組織構造の選択的な「染色」を必要とする。「染色」は着色画像を入手する手段であり、電子顕微鏡と組み合わせて常に効果的に使用できるとは限らない。サンプルに重金属塩（例えば、鉛（plumb）、タングステン、およびウラン）を含浸させることにより、ＴＥＭのために構造を強化することが可能である。可能なｎｓＴＥＭ技術の説明は、Barreto-Vieira and Bath “Negative and Positive staining in Transmission Electron Microscopy for Virus Diagnosis” in Microbiology in Agriculture and Human Health, http://dx.doi.org/10.5772/60511でさらに詳しく説明されており、これはすべての意図された目的のために参照により本明細書に組み込まれる。この場合、コントラストは目的物ではなく、重金属塩を使用してその環境に加えられる。電子ビームは、周囲空間よりも容易に生体物質を通過できる。結果は、反転した従来のＴＥＭ画像に似ている。いくつかの実施形態において、標準的な染色溶液は、ｐＨ７．２の水性１％リンタングステン酸であり得る。固定されたまたは固定されていないウイルス懸濁液の液滴を、フォルムバール（ｆｏｒｍｖａｒ）またはコロジオン（ｃｏｌｌｏｄｉｕｍ）で覆われた電子顕微鏡グリッドに数秒間付け、液体を濾紙に吸収させ、次に染色液の液滴を付け、数秒後にそれも吸収させた。乾燥後、検体を電子ビームに導入した。
【０１８６】
この研究の結果は、＜１０％、５０％、および＞９０％として定量化される（図１４〜１７）。
【０１８７】
バッファー製剤２が最高の性能を示し、次にバッファー製剤１が続いた。
【０１８８】
ディスカッション
ＡＡＶ８総粒子力価（ＥＬＩＳＡ）について得られたすべての結果は、正常な変動の範囲で試験結果を示し、各バッファー製剤および時点で安定なままであった。バッファー製剤４のみが＋５±３℃で保存したときに減少を示した。
【０１８９】
ｉｎ  ｖｉｖｏでの生物効力の結果は、バッファー製剤１〜３で正常な変動を示したが、参照は減少する傾向を示した。
【０１９０】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物効力アッセイについて得られたすべての結果は、正常な変動を示し、各バッファー製剤は、試験された各時点で生物効力的に安定なままであった。バッファー製剤４のみが、＋５±３℃で保存中にｉｎ  ｖｉｔｒｏでの生物効力の減少を示した。
【０１９１】
ＩＴＲ−ｑＰＣＲアッセイは、＋５±３℃および≦−６０℃（設定点−８０℃）での保存中に試験された各組成物および時点で正常な変動を示した。
【０１９２】
凝集体は、試験された時点にわたり、異なるバッファー製剤において減少も増加もしなかった。＋５±３℃で保存されたバッファー製剤４のみが４．２％から２．９％に減少し、これは、前述したように、ＥＬＩＳＡアッセイが同じサンプルのＡＡＶ８総粒子力価の減少を示したという事実によって説明できる。
【０１９３】
＋５±３℃および≦−６０℃（設定値−８０℃）での４か月の保存期間中、ｐＨ値に有意な変化は見られなかった。バッファー製剤４のｐＨ値はそれほど安定しておらず、これは、二酸化炭素の蒸発の影響により、細胞培養操作（例えば、透析中の攪拌）中にｐＨ値が７．０２から８．６７または８．６９に変化したためと考えられる。
【０１９４】
バッファー製剤６は、＋５±３℃で１か月および２か月保存した後、１つの粒子だけ生じさせた。他の各バッファー製剤、温度、および試験時点では、粒子のない澄明で無色の溶液が見られた。参照も目に見える粒子を示さず、これは、０．００３％のポリソルベート８０および０．００１％のプルロニック（登録商標）Ｆ−６８の存在による可能性がある。透析中、ポリソルベート８０を完全に分離できず、それは観察された結果を説明できた。
【０１９５】
銀染色ならびにウエスタンブロットは、各バッファー製剤、温度および時点で、分解および／または追加のバンドを示さなかった。
【０１９６】
実施例３
＋５±３℃で最大６か月（０か月、２および６週間、３および６か月）および≦−６０℃（設定値−８０℃）で最大１２か月（２および６週間、３、６および１２か月）、１０ｍｌのＳｉＯ２密封ガラスバイアル内で保存された３つの異なるバッファー製剤中のＡＡＶ血清型９（ＡＡＶ９）の安定性を調べた。各時点について、２ｍＬを１０ｍＬのＳｉＯ２バイアルに入れた。この研究は、最終的に配合され、滅菌濾過されたＡＡＶ９遺伝子治療材料を使用して実施した。
【０１９７】
材料および方法
この研究では、以下の機器、装置、および試薬を使用した：
・ＡＡＶ９ウイルスベクター（５８．３ｘ１０１２ｖｇ／ｍｌの濃度を３．５ｘ１０１２ｖｇ／ｍｌに希釈（両方ＩＴＲ  ｑＰＣＲ）
・２０ｍｌテルモシリンジ（Therumo Syringe）
・５０ｍｌブラウンオムニフィックスシリンジ（Braun Omnifix Syringe）
・１０ｍｌエッペンドルフｂｉｏｐｕｒコンビチップ（Eppendorf biopur combitip）
・Ｍｉｎｉ  ＫｌｅｅｎｐａｋシリンジフィルターのＳｕｐｏｒ  ＥＫＶメンブレン
・＋５±３℃で保存
・≦−６０℃で保存
・１０ｍｌ  Ｓｃｈｏｔｔ  Ｔｙｐｅ  ＩバイアルおよびＳｉＯ２層
・２０ｍｍクロロブチルゴムストッパー
・Ｆｉｌｐ  ｏｆｆシール
・ＰＲＩＭＡ  Ｃｌｅａｒｐｅｅｌシースルーポーチ
・Ｓｔｅｒｉｃａｎ  １．１ｘ３０ｍｍ皮下注射針
・温度測定、Ｔｅｓｔｏ  １１２
・ｐＨ測定、ｔｅｓｔｏ  ２３０
・Ｓｌｉｄｅ−Ａ−Ｌｙｚｅｒ（登録商標）１０Ｋ透析カセット（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）
・２ｍｌ  Ｓｃｈｏｔｔ  Ｔｙｐｅ  ＩバイアルおよびＳｉＯ２層
・１３ｍｍクロロブチルゴムストッパー
【０１９８】
ＡＡＶ９材料を３．５ｘ１０１２ｖｇ／ｍＬ（ＩＴＲ  ｑＰＣＲ）の目標濃度に希釈し、各バッファー製剤用に２２ｍＬずつ分注し、バッファー製剤１〜３または参照に対して透析した（表１〜３を参照）。透析は、１２〜３０ｍＬのＳｌｉｄｅ−Ａ−Ｌｙｚｅｒ（登録商標）１０Ｋ透析カセットにおいて１００倍容量で３回行った。バッファー交換後、材料を１０ｍＬのガラスバイアルに入れた（２ｍＬ）。外観およびｐＨ検査用のサンプルは、同じ容量で別々に入れた。各試験時点で、サンプルを分取し、ドライアイスで保存した。ｉｎ  ｖｉｖｏ生物効力サンプルのみを、試験時点０で≦−６０℃で保存して４週間の結果を作成し、またその材料を次の４週間保存して８週間の結果を作成した。４週間後の＋５±３℃サンプルは、同じアッセイのために凍結保存した。
【０１９９】
結果
総粒子力価（ＥＬＩＳＡ）
サンドイッチＥＬＩＳＡシステムを使用して、無傷のＡＡＶ９粒子の数を決定した。コーティング抗体をマイクロプレートに塗布した。その後、ＡＡＶ９粒子を含む溶液を添加し、ＡＡＶ９粒子を抗体に捕捉させた。次のステップでは、ＡＡＶ９粒子を検出する別の抗体を添加し、この抗体を検出部分で標識した。最後のステップでは、総ＡＡＶ９力価レベルを定量化するために基質を添加し、反応を停止した。
【０２００】
ＡＡＶ９総粒子力価（ＥＬＩＳＡ）は、バッファー製剤１および２について、両方の温度で最大６か月間安定なままであったが、バッファー製剤３は、≦−６０℃では安定なままであったが、＋５±３℃で３か月後にわずかな減少を示した。参照バッファーは、＋５±３℃での保存で６５％の力価の減少、および≦−６０℃での保存で７３％の回収率を示した（表１９および図１８）。
【表１９】
2021532071.tif 000021
【０２０１】
ＨＴ２−ｑＰＣＲ
サンプルをＤＮａｓｅ  Ｉで処理し、リアルタイムｑＰＣＲシステムで分析した。蛍光標識プローブ（レポーター：ＦＡＭ、クエンチャー：ブラックホールクエンチャー（ＢＨＱ））と組み合わせて、シングルコピー遺伝子に特異的な従来のサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プライマーペア（すなわち、ＣＭＶプロモーターを検出するため）を使用した。ＰＣＲ産物の分析および定量は、増幅プロセス中のプローブの切断に由来する蛍光の検出と定量によって行った。
【０２０２】
ＨＴ２−ｑＰＣＲアッセイは、バッファー製剤１〜３について損失が見られなかったことを示す（表２０および図１９）。
【表２０】
2021532071.tif 000022
【０２０３】
ｉｎ  ｖｉｖｏ生物効力
急速凍結した線条体組織から全ＲＮＡを単離した（ＡｌｌＰｒｅｐキット，Ｑｉａｇｅｎ）。ＲＮＡ濃度を測定し（Ｎａｎｏｄｒｏｐ，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ）、すべてのサンプルを１００ｎｇ／μｌに希釈した。ファーストストランドｃＤＮＡは、１μｇのＲＮＡ入力で合成した（Ｈｉｇｈ  Ｃａｐａｃｉｔｙ  ＲＮＡ−ｔｏ−ｃＤＮＡ，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ）。カスタム設計されたヒトＨＴＴアッセイ（０．５μＭのフォワードプライマー：ＧＣＣＣＧＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡ、０．５μＭのリバースプライマー：ＴＴＣＡＣＡＣＧＧＴＣＴＴＴＣＴＴＧＧＴＧＧ、０．２５μＭのプローブ：ＴＧＣＡＣＣＧＡＣＣＡＡＡＧＡＡＧＧＡＡＣＴＣＴ）、および市販のマウスＡｃｔｂアッセイ（Ｍｍ．ＰＴ．３９ａ．２２２１４８４３．ｇ，ＩＤＴ）をＲＴ−ＰＣＲに使用した。標準サイクルを使用してＱｕａｎｔＳｔｕｄｉｏ  ７（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ）でＲＴ−ＰＣＲを実施し、ＰＭＩＤ  １１８４６６０９に従ってデルタＣｔ法でデータを分析した。簡単に説明すると、３つの技術的複製の平均を使用し、ＨＴＴ  Ｃｔ値をＡｃｔｂ  Ｃｔ値で正規化してｄＣｔを計算した。続いて、ｄＣｔ値をヌルベクター群の平均ｄＣｔに対して正規化して、ｄｄＣｔを計算し、ヌルベクター群の平均ｄｄＣｔが０になるようにした。倍率変化を２∧−ｄｄＣｔとして計算した（表２１および図２０）。
【表２１】
2021532071.tif 000023
【０２０４】
凝集体
凝集体は、実施例２に記載のように分析した。
【０２０５】
参照バッファーは最低量の凝集体（０．５％〜０．８％）を示したが、バッファー製剤１〜３は０．９％〜１．４％の範囲の凝集体を生成した。しかしながら、＋５±３℃および≦−６０℃で最大６か月間保存中に凝集体の増加は検出されなかった。
【表２２】
2021532071.tif 000024
【０２０６】
この研究の開始時に試験した完全キャプシドのパーセンテージは、５３％〜６２％の間の範囲を示した。
【０２０７】
ｐＨ
各バッファー製剤および両方の保存温度についてｐＨ値に変化はなかった。
【表２３】
2021532071.tif 000025
【０２０８】
外観
適合する（complies）とは、目に見える粒子のない、澄明で無色の溶液を意味する。
【０２０９】
様々なバッファー製剤および異なる温度で、粒子または色の変化は見られなかった。
【表２４】
2021532071.tif 000026
【０２１０】
ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、ウエスタンブロット、および銀染色
ＳＤＳ−ＰＡＧＥ研究は、実施例２に概説したように実施した。
【０２１１】
ＳＤＳ  ＰＡＧＥ、ウエスタンブロット抗キャプシド、および銀染色ゲルは、同じ時間枠で分解バンドを示さなかった（図２１〜２９）。＋５±３℃または≦−６０℃のいずれかで保存した様々なバッファー製剤中のすべてのＡＡＶ９血清型は、少なくとも６か月間安定であると見なすことができる。
【０２１２】
エンドトキシン
＋５±３℃で６か月間保存した後のエンドトキシンの管理は、この６か月の期間中に作られたすべての結果が実行され、同じ品質のサンプルを生じることを保証する。
【表２５】
2021532071.tif 000027
【０２１３】
ポリソルベート８０
目標濃度０．００３％（目標３０μｇ／ｍＬ）のポリソルベート８０は、＋５±３℃で６か月の保存期間中に損失を示さなかった。バッファー製剤１でのＡＡＶ９に関して、決定的ではない結果が得られた（予想される３０μｇ／ｍＬではなく約１００μｇ／ｍＬのポリソルベート８０）が、一致するバッファーは３６．７μｇ／ｍＬのポリソルベート８０の含有量を示した。≦−６０℃での保存の結果は、この研究の終わりに、１２か月後に得られるであろう。データは、保存中にポリソルベート８０の損失がないこと示す。
【表２６】
2021532071.tif 000028
【０２１４】
粘度、密度、およびオスモル濃度
脳脊髄液のオスモル濃度は約２９５である。より高いまたはより低いオスモル濃度の物質の流入は、溶液と接触する細胞内の圧力に悪影響を与える可能性がある。
【表２７】
2021532071.tif 000029
【０２１５】
ｎｓＴＥＭ（形態学）およびＣｒｙｏＴＥＭ（完全キャプシドの割合（％））
透過型電子顕微鏡法としても知られるクライオＴＥＭ（ＣｒｙｏＴＥＭ）は、極低温（例えば、液体窒素温度）でサンプルを調べる透過型電子顕微鏡法（ＴＥＭ）の一種である。サンプルは染色も固定もされないため、外部からのいずれの影響も受けずにネイティブ環境で表示される。この方法では、原子に近い分解能で高分子構造を決定することができる。
【表２８】
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【０２１６】
ｎｓＴＥＭは、実施例２に記載のように実施した。ｎｓＴＥＭは、ネガティブ染色された細胞を透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）で調べる方法である。同様の結果が各バッファー製剤で示された（図３０〜３３）。
【０２１７】
実施例４
バッファー製剤２におけるＡＡＶ６の安定性を試験した。２．６ｇのＡＡＶ６材料を２００ｍＭのＮａＣｌおよび１００ｍＭのグリシン中で保存した。１Ｍ  ＴＲＩＳ（ｐＨ８．５）でｐＨ値を７．５８に調整した。出荷前に０．００３％のポリソルベート８０を添加した。最後に、サンプルをバッファー製剤２に対して透析した。バッファー交換は、サンプルの１００倍容量で最低４時間を３回実施した。バッファー交換後、材料を１：１．９１５に希釈し、３つの部分に分割した。それらのうちの２つは≦−６０℃（設定値−８０℃）で最大２か月間凍結し、１つは直ぐ分析するためにサンプルサイズに分注し、それをその後１か月後と２か月後に繰り返した。
【表２９】
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【０２１８】
図３４および３５は、保存後のＡＡＶ粒子の銀染色およびウェスターブロットを示す。
【０２１９】
実施例５
この例は、製造のための追加のバッファー製剤を示す。これらのバッファー製剤は、凍結乾燥されたＡＡＶ組成物および／または液体ＡＡＶ組成物において有用であり得る。
【０２２０】
【表３０】
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【０２２１】
【表３１】
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【０２２２】
【表３２】
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【０２２３】
【表３３】
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【０２２４】
【表３４】
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【０２２５】
【表３５】
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【０２２６】
【表３６】
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【０２２７】
【表３７】
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【０２２８】
【表３８】
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【０２２９】
【表３９】
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【０２３０】
【表４０】
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【０２３１】
【表４１】
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【０２３２】
【表４２】
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【０２３３】
【表４３】
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【０２３４】
【表４４】
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【０２３５】
【表４５】
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【０２３６】
【表４６】
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【０２３７】
【表４７】
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【０２３８】
【表４８】
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【０２３９】
【表４９】
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【０２４０】
【表５０】
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【０２４１】
【表５１】
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【０２４２】
【表５２】
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【０２４３】
【表５３】
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【０２４４】
【表５４】
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【０２４５】
【表５５】
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【０２４６】
【表５６】
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【０２４７】
【表５７】
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【０２４８】
【表５８】
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【０２４９】
【表５９】
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【０２５０】
【表６０】
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【０２５１】
【表６１】
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【０２５２】
【表６２】
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【０２５３】
【表６３】
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【０２５４】
【表６４】
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【０２５５】
【表６５】
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【０２５６】
【表６６】
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【０２５７】
【表６７】
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【０２５８】
【表６８】
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【０２５９】
【表６９】
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【０２６０】
【表７０】
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【０２６１】
【表７１】
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【０２６２】
【表７２】
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【０２６３】
【表７３】
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【０２６４】
【表７４】
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【０２６５】
【表７５】
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【０２６６】
【表７６】
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【０２６７】
【表７７】
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【０２６８】
【表７８】
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【０２６９】
【表７９】
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【０２７０】
【表８０】
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【０２７１】
【表８１】
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【０２７２】
【表８２】
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【０２７３】
【表８３】
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【０２７４】
【表８４】
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【０２７５】
本明細書で引用される刊行物、特許出願、および特許を含むすべての参考文献は、各参考文献が参照により組み込まれることが個別にかつ具体的に示され、その全体が本明細書に記載される場合と同程度に、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２７６】
本明細書に記載されるすべての方法は、本明細書に別段の指示がない限り、または文脈によって明らかに矛盾しない限り、任意の適切な順序で実行することができる。本明細書で提供されるありとあらゆる例、または例示的な言語（例えば、「など」）の使用は、単に開示をよりよく明らかにすることを意図しており、別段の請求がない限り、開示の範囲に制限を課さない。明細書のいかなる文言も、クレームされていない要素を開示の実施に不可欠であるとして示すと解釈されるべきではない。
【０２７７】
本開示の好ましい実施形態は、本開示を実施するために発明者に知られている最良のモードを含めて、本明細書に記載されている。それらの好ましい実施形態の変形は、前述の説明を読むと当業者に明らかになる可能性がある。本発明者らは、当業者がそのような変形を適切に使用することを予測し、また本発明者らは、本開示が本明細書に具体的に記載されている以外の方法で実施されることを意図している。したがって、本開示は、適用法によって許可されるように、本明細書に添付された特許請求の範囲に記載された主題のすべての修正および同等物を含む。さらに、そのすべての可能な変形における上記の要素の任意の組み合わせは、本明細書に別段の指示がない限り、または文脈によって明らかに矛盾しない限り、本開示に含まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【国際調査報告】
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