(57)【要約】  本発明の一実施形態は、癌である患者へと吸入投与するためのエアロゾルにて分散するのに好適な乾燥粉末薬学的組成物を提供し、組成物は、その塩、溶媒和物、水和物、およびエステルを含む、シチジン類似体、および癌である患者へと吸入によって投与するためのエアロゾルにて分散するのに好適な乾燥粉末薬学的組成物を共に形成する薬学的に許容される賦形剤を含む。別の実施形態は、組成物を作製するための方法を提供し、さらに組成物を用いてその必要がある患者を治療するための方法を提供する。
2021511368.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌である特許へと吸入投与するためのエアロゾルにて分散するのに好適な乾燥粉末薬学的組成物であって、
前記組成物が、その塩、溶媒和物、水和物、およびエステルを含む、シチジン類似体、および
癌である前記患者へと吸入によって投与するための前記エアロゾルにて分散するのに好適な前記乾燥粉末薬学的組成物を共に形成する薬学的に許容される賦形剤を含み、前記組成物がＤＭＳＯ溶液にて前記シチジン類似体を霧化することにより形成される、乾燥粉末薬学的組成物。
【請求項２】
前記賦形剤が、ロイシン、トリロイシン、イソロイシンまたはそれらの任意の組合せからなる群から選択されたアミノ酸である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記賦形剤が、糖またはアルコールである、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記糖またはアルコールは、トレハロース、ラクトース、マンニトール、ソルビトール、ラフィノース、イノシトールおよびエリスリトールからなる群から選択される、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記賦形剤が、トレハロースおよび／またはロイシンを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記シチジン類似体が、５−アザシチジン、ゼブラリン、５−アザ−２´−デオキシシチジン、ＳＧ−１１０およびその塩、溶媒和物、水和物、およびエステルからなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記薬学的賦形剤が、前記乾燥粉末の約９９〜１重量％であり、その塩、溶媒和物、水和物、およびエステルを含む前記シチジン類似体が、約０〜２０％の残留ＤＭＳＯを有する、前記乾燥粉末の約１〜９９重量％である、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記残留ＤＭＳＯが、約５〜１５％のＤＭＳＯである、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
約０〜９９ｗ／ｗ％の範囲のトレハロース、
約０〜９９ｗ／ｗ％の範囲のロイシン、
その塩、溶媒和物、水和物、およびエステルを含む、約０．１〜５０％の範囲のシチジン類似体、および
約０．１〜２０％の残留ＤＭＳＯである、ＤＭＳＯの残留物を含む、
請求項５に記載の組成物。
【請求項１０】
前記乾燥粉末が、約１〜５μｍのＭＭＤＡを有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
その塩、溶媒和物、水和物およびエステルを含むシチジン類似体を含む乾燥粉末組成物を形成する方法であって、
ＤＭＳＯ中に前記シチジン類似体を溶解させ、シチジン類似体ＤＭＳＯ溶液を形成する工程、
溶媒中に薬学的賦形剤を溶解させる工程、
混合により、前記シチジン類似体ＤＭＳＯ溶液と前記溶解された賦形剤とを組み合わせる工程、
霧化することにより液滴を形成する工程、ならびに
前記液滴を蒸発させて乾燥させ、約１〜５μｍのＭＭＡＤを有するシチジン類似体を含む粒子を形成する工程を含む、方法。
【請求項１２】
前記薬学的賦形剤が、アミノ酸、糖またはそれらの組合せを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記アミノ酸が、ロイシン、トリロイシンおよびイソロイシンからなる群から選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記糖が、六価アルコール、およびトレハロース、ラクトース、マンニトール、ソルビトール、ラフィノース、イノシトールおよびエリスリトールを含むがこれに限定されない、糖アルコールからなる群から選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記薬学的賦形剤が、トレハロースおよび／またはロイシンを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
前記乾燥粉末が残留ＤＭＳＯを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１７】
混合はインライン混合である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１８】
前記シチジン類似体が、５−アザシチジン、ゼブラリン、５−アザ−２´−デオキシシチジン、ＳＧ−１１０およびその塩、溶媒和物、水和物、およびエステルからなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項１９】
前記薬学的賦形剤が、前記乾燥粉末の約９９〜１重量％であり、その塩、溶媒和物、水和物、およびエステルを含む前記シチジン類似体が、約０〜２０％の残留ＤＭＳＯを有する、前記乾燥粉末の約１〜９９重量％である、請求項１１に記載の方法。
【請求項２０】
前記残留ＤＭＳＯが、約５〜１５％のＤＭＳＯである、請求項１１に記載の方法。
【請求項２１】
前記乾燥粉末組成物が、
約０〜９９ｗ／ｗ％の範囲のトレハロース、
約０〜９９ｗ／ｗ％の範囲のロイシン、
その塩、溶媒和物、水和物、およびエステルを含む、約０．１〜５０％の範囲のシチジン類似体、ならびに
約０．１〜２０％の残留ＤＭＳＯである、ＤＭＳＯの残留物を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項２２】
前記組成物が、ＤＭＳＯ溶液中で前記シチジン類似体を霧化することにより形成される、請求項１１に記載の方法。
【請求項２３】
前記乾燥粉末組成物が、約１〜５μｍのＭＭＤＡを有する、請求項１１に記載の方法。
【請求項２４】
対象における癌を治療する方法であって、
必要がある対象へ、生理的有効量の分散可能な薬学に基づく請求項１に記載の乾燥粉末組成物を経肺投与することを含む、方法。
【請求項２５】
前記癌が肺癌である、請求項２４に記載の対象の癌を治療するための方法。
【請求項２６】
前記癌が肺の外側に位置している、請求項２４に記載の対象の癌を治療するための方法。
【請求項２７】
約０．２〜約１０ｍｇ／ｋｇの肺投与量濃度で前記シチジン類似体化合物を含む、乾燥粉末製剤のエアロゾル化により形成された分散物を吸入することにより、治療有効投与量の、その塩、溶媒和物、水和物およびエステルを含むシチジン類似体化合物を、前記対象の肺へと送達することをさらに含み、
吸入シチジン類似体化合物またはその誘導体の毎日の総投与量は１０００ｍｇ／ｋｇを超えず、前記治療有効投与量は前記対象内の癌を治療する、請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
前記乾燥粉末シチジン類似体化合物のエアロゾル化が、（ｉ）約０．５μｍ〜約５μｍである、エアロゾライザーを用いて放出された前記乾燥粉末の粒子サイズの空気動力学的中央粒子径（ＭＭＡＤ）を提供し、（ｉｉ）約１．０μｍ〜約３．４μｍの前記乾燥粉末の放出された粒子サイズ分布の幾何標準偏差（ＧＳＤ）を提供し、（ｉｉｉ）少なくとも約３０％である前記乾燥粉末から放出された粒子の微粒子割合（５ミクロン以下のエアロゾル粒子のＦＰＦ＝％）を提供し、さらに（ｉｖ）少なくとも約５０％のデバイスおよびカプセルからの放出された割合を提供する、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記対象へと、エアロゾル化された前記乾燥粉末の単回吸入投与後に得られた、前記シチジン類似体化合物の血漿Ｃｍａｘおよび／またはＡＵＣが、前記吸入乾燥粉末シチジン類似体化合物により投与された用量と同等の用量にて、前記対象へと、噴霧された前記シチジン類似体化合物の単回吸入水性投与後に得られた、その前記シチジン類似体化合物の血漿Ｃｍａｘおよび／またはＡＵＣよりも大きい、請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
前記対象へと、エアロゾル化された前記乾燥粉末の単回吸入投与後に得られた、前記シチジン類似体化合物の脳Ｃｍａｘおよび／またはＡＵＣが、前記吸入乾燥粉末シチジン類似体化合物により投与された用量と同等の用量にて、前記対象へと、噴霧された前記シチジン類似体化合物の単回吸入水性投与後に得られた、前記シチジン類似体化合物の脳Ｃｍａｘおよび／またはＡＵＣよりも大きい、請求項２７に記載の方法。
【請求項３１】
前記対象へと、エアロゾル化された前記乾燥粉末の単回吸入投与後に得られた、前記シチジン類似体化合物の肝臓Ｃｍａｘおよび／またはＡＵＣが、前記吸入乾燥粉末シチジン類似体化合物により投与された用量と同等の用量にて、前記対象へと、噴霧された水性シチジン類似体化合物の単回吸入投与後に得られた、前記シチジン類似体化合物の肝臓Ｃｍａｘおよび／またはＡＵＣよりも大きい、請求項２７に記載の方法。
【請求項３２】
エアロゾル化された前記乾燥粉末の前記対象への単回吸入投与後に得られた、前記シチジン類似体化合物の肺Ｃｍａｘおよび／またはＡＵＣは、吸入乾燥粉末シチジン類似体化合物により投与された用量より３倍高い用量にて、噴霧された水性シチジン類似体化合物の前記対象への単回全身投与後に得られた、シチジン類似体化合物の肺Ｃｍａｘおよび／またはＡＵＣよりも大きい、請求項２７に記載の方法。
【請求項３３】
前記製剤が賦形剤をさらに含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項３４】
請求項１の吸入可能である粉末組成物と、乾燥粉末吸入器と、を含む、吸入可能である粉末組成物を含む薬学的キット。
【請求項３５】
請求項１に記載の吸入可能である粉末組成物を含む、容器。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、「Ｉｎｈａｌａｂｌｅ  ｄｒｙ  ｐｏｗｄｅｒ５−ａｚａｃｙｔｉｄｉｎｅ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ（肺癌の治療および予防のための吸入可能な乾燥粉末５−アザシチジン）」と題し、２０１８年２月７日に出願された、米国仮特許出願第６２／６２７，４２８号に対する優先権およびその提出の恩典を主張するものであり、その明細書および特許請求の範囲は参照により本明細書に組み入れられる。
【０００２】
連邦政府による資金提供を受けた研究の記載
本発明は、国立衛生研究所／国立癌研究所によって授与された、助成金番号第Ｒ０１  ＣＡ１９６５９０号による政府の支援によって実施された。政府は、本発明において一定の権利を有する。
【０００３】
共同研究契約のある当事者
適用されない。
【０００４】
コンパクトディスクなどによる提出材料の参照による援用
適用されない。
【０００５】
発明者らによる先行開示の記載
適用されない。
【０００６】
著作権のある資料
適用されない。
【背景技術】
【０００７】
米国にて毎年診断されている、２２０，０００件の新規症例を有する肺癌は、未だに癌関連死の主因である（非特許文献１及び２）。肺癌（ＬＣ）に対する新規標的治療及び化学治療は、進行性ＬＣに関して現在およそ６．５ヶ月である生存期間中央値について適度の改善を達成している。しかしこうした治療は、致死性疾患というよりも慢性的な疾患とすることが可能な治療に対する明確な方針を何ら提供していない。ＬＣにおける近年の主要な進歩は、治療パラダイムへの免疫チェックポイント阻害薬の統合である。ただし、わずか約２０％のＮＳＣＬＣ患者だけは、この治療に由来する永続的な恩恵を得ている（非特許文献３〜５）。治癒を目指す手術が行われるのは肺癌の１５％であることを考慮しても、症例の４０％は５年以内に再発し、こうした集団に対する有効なアジュバント療法が存在しない。したがって、全身性の毒性が低く局所的および転移性肺癌を治療することができる、新規の高い有効性のある治療に対する明確な要求が存在している。加えて、無増悪生存期間を通して疾患状態を維持し、かつ癌の再発を防止するための長期にわたって延長され得る治療は、総合的な生存期間を劇的に増やすことによるこの致死性疾患の管理という点ではパラダイムシフトとなり得る。
【０００８】
エピジェネティクスは、遺伝子発現における長期変化の研究を指す。この変化は遺伝性であってもなくてもよく、かつＤＮＡ配列に対する変化により引き起こされる（非特許文献６）。エピジェネティック機構は、ＤＮＡメチル化及びヒストン修飾を含む。ＤＮＡメチル化において、グアニン残基（ＣｐＧ）の前にあるシトシン残基は、酵素のＤＮＡメチルトランスフェラーゼ（ＤＮＡ  ＭＴａｓｅ）ファミリーがＤＮＡへのメチル基の転移を触媒し、次いでそのクロマチンの区分に影響を与えかつ疾患遺伝子の発現を阻止するといったプロセスによって、メチル化された状態となる（非特許文献７）。第２のカテゴリは、ヒストン修飾である。ヒストンは、クロマチンの折りたたみ構造及びコンパクション中に含まれるタンパク質であり、ヒストンの脱アセチル化およびヒストンテール上のリジン部分のメチル化により疾患遺伝子の転写を阻止する、クロマチン立体構造における変化もまたもたらす。遺伝子突然変異とは異なり、エピジェネティクスは薬物学的な阻害薬を用いることで元に戻すことができる。５−アザシチジン（［５ＡＺＡ］、例えばＶｉｄａｚａ（登録商標））及び５−アザ−２’−デオキシアザシチジン（［ＤＡＣ］、例えばＤｅｃｉｔａｂｉｎｅ（登録商標））は自然に発生するヌクレオシドシチジンの誘導体／類似体である（図１）。シチジンは、ＤＮＡ及びＲＮＡ中に存在し、ＤＮＡ  ＭＴａｓｅが阻害される場合には、ＤＮＡの低メチル化及び遺伝子の再発現が生じ得る（非特許文献６）。治療法として評価された追加のシトシンの化学類似体には、ゼブラリン及びＳＧ−１１０（例えばＧｕａｄｅｃｉｔａｂｉｎｅ（登録商標））が挙げられる（非特許文献８及び９）。
【０００９】
こうした遺伝子を活性化する能力を用いるエピジェネティック治療は、永続的かつ持続的な腫瘍縮小を最終的に生じ得る戦略を提供する。シトシンメチル化は、転写阻止において最も有力であるように思われる。但し、ヒストン脱アセチル化の阻害薬（ＨＤＡＣｉ）は、プロモータの過剰なメチル化により発現抑制された遺伝子の再発現を引き起こす上ではさほど有効ではない反面、こうした阻害薬が脱メチル化剤と協同して転写阻止を軽減することがあり得る（非特許文献１０）。滅菌水中で再構成することにより液状製剤にて送達された５ＡＺＡ及び／又はＤＡＣは、６０％超の全奏効率（ＯＲＲ）を有する脊髄形成異常症向けの効果の高い治療として判明しており、こうした疾患の治療に対するＦＤＡ認可につながっている（非特許文献１１及び１２）。
【００１０】
Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ａｔｌａｓ（ＴＣＧＡ）は、ｌｌｌｕｍｉｎａ  Ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ  ４５０  Ｂｅａｄｃｈｉｐ（ＨＭ４５０Ｋ）を用いて８００件以上のＮＳＣＬＣを調べ、実際には全ての腫瘍が、減少した転写と関連する高濃度のシトシンメチル化プロモータ領域を有する数百の遺伝子を含有することを明らかにした（非特許文献１３及び１４）。したがって、エピジェネティック治療は、肺腫瘍の成長を阻止するアプローチを提供することができる。第Ｉ／ＩＩ相治験において、３つの化学療法（応答率は通常約１０％であるような設定）の治療を以前に受けた、複数の治療歴を有するＬＣ患者は、５ＡＺＡ及びＨＤＡＣｉエンチノスタットを用いて治療された。この治療は良好に許容され、３４人の評価可能な患者のうち１０人は、５．８％のＯＲＲに対し、同一の部分奏功及び同一の完全奏功を有する安定状態（２９％）であった（非特許文献１５）。
【００１１】
明らかになっているエピジェネティック治療の追加的な効用はその後の治療向けの腫瘍の「プライミング」であり、最も目立つものは、プログラム死１タンパク質［ＰＤ−Ｌ１］を標的とする免疫チェックポイント遮断薬である。インビトロで投与された５ＡＺＡは、ＬＣ細胞株におけるＰＤ−Ｌ１の発現を増加させる。これは、免疫活性化と阻害との均衡、すなわちエピジェネティックプライミング（全身投薬）に続いて抗−ＰＤ−Ｌ１抗体であるニボルマブを用いた治験で試験されている仮説を変化させ得る（非特許文献１６）。
【００１２】
エピジェネティック治療及びＯＲＲの向上を、第ＩＩＩ相治験又はアジュバント療法へと拡大することは、必要な連続した日々の皮下投薬スケジュール、並びに肺及び転移性疾患が多く発生する組織（脳及び肝臓）への分散に関する、５ＡＺＡの不十分な薬物動態（ＰＫ）プロファイルにより制約される。５ＡＺＡ及びＤＡＣは、室温では水性溶液中で比較的不安定であり、その発現が肝臓内では最も高いシチジンデアミナーゼによる加水分解及び異化作用を受け、それにより、肺到達前に皮下投与又は静脈内投与後の薬物の濃度が減少する（非特許文献１７）。５ＡＺＡの経口製剤はまた、シチジンデアミナーゼ（ＣＤＡ）によるシチジンの脱アミノ化用の物質であり、ＧＩ管における毒性は、肺到達前に、他の経口送達される薬物に見られる多大な薬物希釈効果と関連して、送達用量を制限する（非特許文献１８及び１９）。２１日間、１日につき３００ｍｇである、５ＡＺＡの最大限許容された経口投与量に対する累積曝露は、２８日サイクルにつき７日間、注入可能な５ＡＺＡ（７５ｍｇ／ｍ２）に見られる、わずか５７％の曝露を提供する（非特許文献１９）。但し、経口的に投与される、５ＡＺＡの３００ｍｇの日々の投与量を用いると、注入可能な５ＡＺＡを受ける２５％の患者と比較して８４％の患者は、胃腸毒性を有した（非特許文献１９）。こうした障壁は、高い局所組織濃度を得る吸入送達により緩和可能であり、全身性の毒性を最小にしながら最大の臨床効果を獲得する。これにより、例えばヘテロクロマチンを標的にするようなものである追加薬物（例えば抗癌剤）の有無にかかわらない５ＡＺＡの吸入送達が、これらの癌に対して非常に有効であり得る場合、細気管支肺胞上皮癌（ＢＡＣ［約２５，０００症例／年］）およびステージＩＩＩの腺癌（ＡｄＣ）又は扁平上皮癌（ＳＣＣ［〜５０，０００症例／年］）を含む、局在した切除不可能な疾患を有する患者に大いに恩典を与えなければならない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Nat Rev Cancer 2014;14:535-56.
【非特許文献２】CA Cancer J Clin 2017; 67:7-30.
【非特許文献３】Cancer Lett 2017; 405:29-37.
【非特許文献４】Lancet Oncol 2011; 12:175-180.
【非特許文献５】N Eng J Med 2017; 376:2415-2426.
【非特許文献６】Nat Rev Genet 2002;3:415-428.
【非特許文献７】N Engl J Med 2003;349:2042-2054.
【非特許文献８】PLOS One 2015; 10:e0120545.
【非特許文献９】Lancet Oncol. 2017; 18:1317-1326.
【非特許文献１０】Nat Genet 1999;21:103-107.
【非特許文献１１】Cancer Res 2006;66:5495-5503.
【非特許文献１２】J Clin Oncol 2002;20:2429-40.
【非特許文献１３】Nature 2012;489:519-525.
【非特許文献１４】Nature 2014:511:543-50.
【非特許文献１５】Cancer Discovery 2011;1:598-607.
【非特許文献１６】Oncotarget 2013;4:2067-79.
【非特許文献１７】Clin Pharmacol Ther 1971; 12:944-54.
【非特許文献１８】J Clin Oncol 2011; 29:2521-2527.
【非特許文献１９】Am J Hematol. 2018; 93:1199-1206.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明の一実施形態によれば、癌である特許へと吸入投与するためのエアロゾルにて分散するのに好適な乾燥粉末薬学的組成物が提供されている。組成物は、その塩、溶媒和物、水和物、及びエステルを含むシチジン類似体、及び癌である特許へと吸入によって投与するためのエアロゾルにて分散するのに好適な乾燥粉末薬学的組成物を共に形成する薬学的に許容される賦形剤を含む。一例では、賦形剤は、ロイシン、トリロイシン、イソロイシン又はそれらの任意の組合せからなる群から選択されるがこれに限定されない、アミノ酸である。別の例では、賦形剤は糖またはアルコールである。例えば、糖又はアルコールは、トレハロース、ラクトース、マンニトール、ソルビトール、ラフィノース、イノシトール及びエリスリトールからなる群から選択される。更なる例では、賦形剤はトレハロース及び／又はロイシンを含む。シチジン類似体は、５−アザシチジン、ゼブラリン、５−アザ−２’−デオキシシチジン、ＳＧ−１１０及びその塩、溶媒和物、水和物、及びエステルからなる群から選択され得る。一実施形態では、薬学的賦形剤は、乾燥粉末の約９９〜１重量％であり、その塩、溶媒和物、水和物、及びエステルを含むシチジン類似体は、約０〜２０％の残留ＤＭＳＯを有する乾燥粉末の約１〜９９重量％である。更に、残留ＤＭＳＯは、約５〜１５％のＤＭＳＯであり得る。例えば、組成物は、約０〜９９ｗ／ｗ％の範囲のトレハロース、約０〜９９ｗ／ｗ％の範囲のロイシン、その塩、溶媒和物、水和物、及びエステルを含む、約０．１〜５０％の範囲のシチジン類似体、０．１〜２０％の残留ＤＭＳＯである、ＤＭＳＯの残留物を含み得る。一実施形態では、組成物は、ＤＭＳＯ溶液中でシチジン類似体を霧化することにより形成されている。別の実施形態では、乾燥粉末は約１〜５μｍのＭＭＤＡを有する。
【００１６】
本発明の別の実施形態は、その塩、溶媒和物、水和物およびエステルを含むシチジン類似体を含む乾燥粉末組成物を形成する方法であって、ＤＭＳＯ中にシチジン類似体を溶解させ、シチジン類似体ＤＭＳＯ溶液を形成することを含む方法を提供する。薬学的に許容される賦形剤は、溶媒中に溶解されている。混合により、シチジン類似体は、ＤＭＳＯ溶液および溶解された賦形剤と組み合わせられる。液滴は霧化することによって形成される。液滴は蒸発して乾燥され、約１〜５μｍのＭＭＡＤを有するシチジン類似体を含む粒子を形成する。例えば、賦形剤はアミノ酸および／または糖を含んでよい。アミノ酸は、ロイシン、トリロイシンおよびイソロイシンからなる群から選択され得るが、これに限定されない。糖は、六価アルコール、およびトレハロース、ラクトース、マンニトール、ソルビトール、ラフィノース、イノシトールおよびエリスリトールを含むがこれに限定されない、糖アルコールからなる群から選択されることができる。一実施形態では、賦形剤はトレハロースおよび／またはロイシンを含む。別の実施形態では、乾燥粉末は残留ＤＭＳＯを含む。混合はインライン混合によるものであってよい。シチジン類似体は、５−アザシチジン、ゼブラリン、５−アザ−２’−デオキシシチジン、ＳＧ−１１０およびその塩、溶媒和物、水和物、およびエステルからなる群から選択され得る。一実施形態では、賦形剤は、乾燥粉末の約９９〜１重量％であり、その塩、溶媒和物、水和物、およびエステルを含むシチジン類似体は、約０〜２０％の残留ＤＭＳＯを有する乾燥粉末の約１〜９９重量％である。残留ＤＭＳＯは、約５〜１５％のＤＭＳＯである。方法の一実施形態では、乾燥粉末組成物は、約０〜９９ｗ／ｗ％の範囲のトレハロース、０〜９９ｗ／ｗ％の範囲のロイシン、その塩、溶媒和物、水和物、およびエステルを含む、約０．１〜５０％の範囲のシチジン類似体、０．１〜２０％の残留ＤＭＳＯである、ＤＭＳＯの残留物を含む。例えば、組成物は、ＤＭＳＯ溶液中でシチジン類似体を霧化することにより形成される。一実施形態では、乾燥粉末組成物が、約１〜５μｍのＭＭＤＡを有する。
【００１７】
本発明の別の実施形態は、対象の癌を治療する方法を提供する。方法は、本明細書において記載されるように、その必要がある対象へ、生理的有効量の分散可能な薬学に基づく乾燥粉末組成物を経肺投与することを含む。癌は、肺の中に位置し得、または肺の外側に位置し得る。方法は、約０．２〜約１０ｍｇ／ｋｇの肺投与量濃度でシチジン類似体化合物を含む、乾燥粉末製剤のエアロゾル化により形成された分散物を吸入することにより、治療有効投与量の、その塩、溶媒和物、水和物、およびエステルを含むシチジン類似体化合物を、対象の肺へと送達することをさらに含み、吸入シチジン類似体化合物またはその誘導体の１日の総投与量は、１０００ｍｇ／ｋｇを超えず、治療有効投与量は、対象内の癌を治療することを含んでよい。一実施形態では、乾燥粉末シチジン類似体化合物のエアロゾル化が、（ｉ）約０．５μｍ〜約５μｍである、エアロゾライザーを用いて放出された乾燥粉末の粒子サイズの空気動力学的中央粒子径（ＭＭＡＤ）を提供し、（ｉｉ）約１．０μｍ〜約３．４μｍの乾燥粉末の放出された粒子サイズの分布の幾何標準偏差（ＧＳＤ）を提供し、（ｉｉｉ）少なくとも約３０％である乾燥粉末から放出された粒子の微粒子割合（５ミクロン以下のエアロゾル粒子のＦＰＦ＝％）を提供し、さらに（ｉｖ）約５０％または６０％または７０％または８０％または９０％のデバイスおよび少なくともカプセルから放出された割合を提供する。治療方法の別の実施形態では、エアロゾル化された乾燥粉末の対象への単回吸入投与後に得られた、シチジン類似体化合物の血漿Ｃｍａｘおよび／またはＡＵＣは、吸入乾燥粉末シチジン類似体化合物により投与された用量と同等の用量にて、噴霧されたシチジン類似体化合物の対象への単回吸入水性投与後に得られた、そのシチジン類似体化合物の血漿Ｃｍａｘおよび／またはＡＵＣよりも大きい。治療のさらなる別の方法では、エアロゾル化された乾燥粉末の対象への単回吸入投与後に得られた、シチジン類似体化合物の脳Ｃｍａｘおよび／またはＡＵＣは、吸入乾燥粉末シチジン類似体化合物により投与された用量と同等の用量にて、噴霧されたシチジン類似体化合物の対象への単回吸入水性投与後に得られた、シチジン類似体化合物の脳Ｃｍａｘおよび／またはＡＵＣよりも大きい。治療の方法のさらなる実施形態では、エアロゾル化された乾燥粉末の対象への単回吸入投与後に得られた、シチジン類似体化合物の肝臓Ｃｍａｘおよび／またはＡＵＣが、吸入乾燥粉末シチジン類似体化合物により投与された用量と同等の用量にて、噴霧された水性シチジン類似体化合物の対象への単回吸入投与後に得られた、シチジン類似体化合物の肝臓Ｃｍａｘおよび／またはＡＵＣよりも大きい。治療の方法のさらなる実施形態では、エアロゾル化された乾燥粉末の対象への単回吸入投与後、得られたシチジン類似体化合物の肺Ｃｍａｘおよび／またはＡＵＣが、吸入乾燥粉末シチジン類似体化合物により投与された用量より３倍高い用量にて、噴霧された水性シチジン類似体化合物の対象への単回全身投与後に得られた、シチジン類似体化合物の肺Ｃｍａｘおよび／またはＡＵＣよりも大きい。対象へと送達された肺用組成物は、賦形剤を含んでよい。
【００１８】
本発明の別の実施形態は、その塩、溶媒和物、水和物、およびエステルならびに薬学的に許容される賦形剤を含むシチジン類似体を含む吸入可能である粉末組成物を含む、吸入可能である粉末組成物および乾燥粉末吸入器を含む、薬学的キットを提供する。
【００１９】
本発明の別の実施形態は、本明細書において記載されるように吸入可能である粉末組成物を含む、容器を提供する。
【００２０】
本発明の一態様は、活性物質を含む吸入可能な乾燥粒子を吸入することにより、例えば非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）といった癌の治療において活性物質として使用するための、シチジンのピリミジン環類似体といった（５ＡＺＡなどの）シチジン誘導体または類似体の安定した乾燥粉末製剤を作製および使用する立案および方法に関する。吸入可能な粒子に関して、「安定した」または「安定性」は、例えば、投与前、Ｎ−ホルミルリボシルグアニル尿素および／またはリボシル−グアニル尿素に対する、５ＡＺＡなどのシチジン類似体といった活性物質の化学分解がないこと、ならびに吸入送達を成立させ続けるその性能に関する、活性物質および／または製剤の物理的安定性を指す（２０）。一実施形態では、乾燥粉末は、例えばシチジン類似体活性物質、および乾燥粉末である吸入剤を用いて対象へ送達を成立させる薬学的に許容される賦形剤といったような、シチジン類似体組成物の製剤を指す。
【００２１】
本発明の一実施形態は、その必要がある対象によって吸入するためのシチジン類似体乾燥粉末組成物を提供する。
【００２２】
本発明の別の実施形態は、約［２５〜５００μｇ／ｍＬ］の組織濃度を達成し、全身性の毒性を最小限としながら臨床効果を得られる、５ＡＺＡなどのシチジン類似体の肺組織への標的送達を提供する。
【００２３】
本発明の一実施形態における別の態様は、肺気管支気道および肺胞および肺循環を通じて直接堆積させることによる、５ＡＺＡ化合物／組成物などのシチジン類似体の吸入送達を提供する。
【００２４】
本発明の別の実施形態は、巨大な腫瘍での５ＡＺＡ化合物／組成物濃度といった、水性シチジン類似体の注入化学療法剤に相当するまたはこれを超える巨大な腫瘍での濃度を有する、巨大な腫瘍への送達用５ＡＺＡ化合物などのシチジン類似体を提供する。
【００２５】
本発明の別の実施形態は、治療の必要がある対象内の肺外転移性癌を治療するための方法を提供する。この方法は、治療の必要がある患者によって吸入される、５ＡＺＡ乾燥粉末化合物といった有効量の乾燥粉末シチジン類似体の投与を含む。肺外転移性癌は肺癌の診断時〜４０％の患者に存在していると推定されており、化学療法薬物の形態である従来の治療は、１０％未満の５年生存率を基にすると、肺外転移性疾患に対する有効性は最小である。
【００２６】
本発明の別の実施形態は、５ＡＺＡ化合物といった吸入可能な乾燥粉末シチジン類似体を提供する。これは、肺脈管構造中に、エアロゾル化された乾燥粉末シチジン類似体を吸収させることで、肝臓による初回通過を避け、シチジンデアミナーゼ活性における個別差による回避を防止するものである。それにより薬物を全身的に送達させ、ＬＣを含む転移を治療する。
【００２７】
本発明の一態様は、シチジン類似体化合物を安定化させるため、希釈剤としてのＤＭＳＯの添加を提供する。
【００２８】
本発明の別の実施形態は、向上した安定性ならびに／またはスプレー乾燥プロセス中、および／もしくは真空乾燥中の分解の少なさを呈し、長期保存を可能とする、ＤＭＳＯ希釈剤を有するシチジン類似体化合物を提供する。
【００２９】
本発明の別の実施形態は、担体賦形剤を有するシチジン類似体である、活性乾燥粉末製剤を提供する。
【００３０】
シチジン類似体粉末製剤の一態様は、製剤がヒトの肺および非臨床種中へと効率的に送達することができるものである。
【００３１】
本発明の一実施形態の別の態様は、５ＡＺＡといったシチジン類似体と同じ濃度またはそれより低い濃度で提供される場合、皮下、静脈内（ＩＶ：Ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ）または他の非吸入経路を通じた全身用量の送達と比較した際に、少なくとも３、５、１０または２０倍である、５ＡＺＡといったシチジン類似体の肺組織曝露における増加を提供する。シチジン類似体の乾燥粉末製剤の吸入送達は、５ＡＺＡといったシチジン類似体の３倍高い全身用量と比較した際に、５ＡＺＡといったシチジン類似体に対する肺組織曝露を約４７倍増加させ得る。
【００３２】
本発明の一実施形態の一態様は、患者の肺にてＮＳＣＬＣを治療する際に有効でなければならないシチジン類似体乾燥粉末製剤を含む、薬学的組成物を提供する。
【００３３】
本発明の適用性のさらなる範囲は、添付の図面と共に採用され、解釈される詳細な説明において部分的に規定されている。さらに、以下の試験を行う際には部分的には当業者にとって明らかであり、またはこれは本発明の実施により学ぶことができる。本発明の目的および利点は、添付の特許請求の範囲にて特に指摘される手段および組合せと用いることにより、理解および達成することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
明細書に組み込まれ、かつ明細書の一部を形成する添付の図面は、１つまたは複数の本発明の実施形態を示し、説明と共に作用し、本発明の原理を説明するよう機能する。図面は、本発明の１つまたは複数の実施形態を示す目的のみのものであり、本発明を制限するものとして解釈されるべきではない。図面において：
【００３５】
【図１】シチジンおよびヌクレオシドシチジンの誘導体／類似体（１Ａ）、シチジンおよびヌクレオシドシチジンの誘導体／類似体（１Ｂ）、シチジンおよびヌクレオシドシチジンの誘導体／類似体（１Ｃ）、シチジンおよびヌクレオシドシチジンの誘導体／類似体（１Ｄ）、シチジンおよびヌクレオシドシチジンの誘導体／類似体（１Ｅ）を示す。
【図２Ａ】スプラーグドーリーラットにおいて、吸入水性５ＡＺＡ化合物および腹腔内に送達される５ＡＺＡ化合物の全身送達を比較した際の、本発明の一実施形態による吸入５ＡＺＡ乾燥粉末化合物の薬物動態プロファイルを示す。
【図２Ｂ】スプラーグドーリーラットにおいて、吸入水性５ＡＺＡ化合物および腹腔内に送達される５ＡＺＡ化合物の全身送達を比較した際の、本発明の一実施形態による吸入５ＡＺＡ乾燥粉末化合物の薬物動態プロファイルを示す。
【図２Ｃ】スプラーグドーリーラットにおいて、吸入水性５ＡＺＡ化合物および腹腔内に送達される５ＡＺＡ化合物の全身送達を比較した際の、本発明の一実施形態による吸入５ＡＺＡ乾燥粉末化合物の薬物動態プロファイルを示す。
【図２Ｄ】スプラーグドーリーラットにおいて、吸入水性５ＡＺＡ化合物および腹腔内に送達される５ＡＺＡ化合物の全身送達を比較した際の、本発明の一実施形態による吸入５ＡＺＡ乾燥粉末化合物の薬物動態プロファイルを示す。ラットは、単回投与量のｉ）吸入乾燥粉末［０．６ｍｇ／ｋｇ肺投与量］、ｉｉ）吸入水性［０．６ｍｇ／ｋｇ肺投与量］、またはｉｉｉ）全身（２ｍｇ／ｋｇ、腹腔内投与）といったように５ＡＺＡ化合物粉末に曝され、複数の時点で経時的に屠殺され、血液、肝臓、肺および脳を回収した。第２セットの動物は、５ＡＺＡへの曝露１時間前に、テトラヒドロウリジン（［ＴＨＵ］、８０ｍｇ／ｋｇ、経口投与量）を受けた。
【図３Ａ】本発明の一実施形態による、ビヒクル、５ＡＺＡ吸入水性製剤および５ＡＺＡ吸入乾燥粉末製剤を用いて処置したＣａｌｕ６肺腫瘍およびＣａｌｕ３肺腫瘍を有するラットの生存期間を示す。
【図３Ｂ】本発明の一実施形態による、ビヒクル、５ＡＺＡ吸入水性製剤および５ＡＺＡ吸入乾燥粉末製剤を用いて処置したＣａｌｕ６肺腫瘍およびＣａｌｕ３肺腫瘍を有するラットの生存期間を示す。
【図４】本発明の一実施形態による、吸入用乾燥粉末５ＡＺＡ製剤を調製する方法を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
本明細書において使用する場合、「ａ」、「ａｎ」または「ｔｈｅ」は、特段指示されない限り、１つまたは複数を指す。
【００３７】
本明細書において提供されている化合物が、１つまたは複数の酸性部分または塩基性部分を含有する場合、化合物は塩として存在してよい。
【００３８】
本明細書において提供されている化合物が、１つまたは複数の酸性部分または塩基性部分を含有する場合、これはまた、薬学的に許容される塩として提供されてもよい（２１）。本明細書において使用する場合、さらに特段明記されない限り、用語「薬学的に許容される塩」は、無機酸および有機酸を含む薬学的に許容される非毒性の酸、または無機塩基および有機塩基を含む薬学的に許容される非毒性の塩基から調製される塩を指す。
【００３９】
一実施形態では、塩酸塩、硫酸塩、臭化水素酸塩、およびメタンスルホン酸塩を含むがこれに限定されない、５ＡＺＡといったシチジン類似体の薬学的に許容される塩が本明細書において提供されている。
【００４０】
一実施形態では、例えば金属ベースの不純物といった、１つまたは複数の不純物を実質的に含まない、５ＡＺＡといったシチジン類似体の塩が、本明細書において提供されている。一実施形態では、例えば金属ベースの不純物といった、１つまたは複数の不純物を実質的に含まない、５ＡＺＡといったシチジン類似体の薬学的に許容される塩が本明細書において提供されている。
【００４１】
本明細書において使用する場合、さらに特段明記されない限り、用語「溶媒和物」は、本明細書において提供されている化合物またはその塩を指し、これは、非共有分子間力によって結合された化学量論的または非化学量論的量の溶媒をさらに含む。溶媒が水の場合、溶媒和物は水和物である（例えば、一水和物、二水和物、三水和物、四水和物など）。
【００４２】
本明細書において使用する場合、特段指示されない限り、用語「多形」は、本明細書において提供されている化合物の固体結晶形態またはその塩もしくは複合体を指す。同様の化合物の異なる多形は、特に異なる物理的、化学的、生物学的、および／または分光学的特性を呈することができる。
【００４３】
本明細書において使用する場合、さらに特段明記されない限り、用語「立体異性体」は、本明細書において提供されている、全ての鏡像異性的／ステレオメリックに純粋かつ鏡像異性的／ステレオメリックに濃縮した化合物全てを包含する。
【００４４】
本明細書において使用する場合、さらに特段明記されない限り、用語「ステレオメリックに純粋な」は、化合物の１つの立体異性体を含み、かつその化合物の他の立体異性体を実質的に含まない組成物を意味する。例えば、１つのキラル中心を有する化合物のステレオメリックに純粋な組成物は、化合物の対向するエナンチオマーを実質的に含まない。２つのキラル中心を有する化合物のステレオメリックに純粋な組成物は、化合物の他のジアステレオマーを実質的に含まない。典型的なステレオメリックに純粋な化合物は、約８０重量％超の化合物の一方の立体異性体と、約２０重量％未満の化合物の他方の立体異性体と、約９０重量％超の化合物の一方の立体異性体と、約１０重量％未満の化合物の他方の立体異性体と、約９５重量％超の化合物の一方の立体異性体と、約５重量％未満の化合物の他方の立体異性体と、約９７重量％超の化合物の一方の立体異性体と、約３重量％未満の化合物の他方の立体異性体と、または約９９重量％超の化合物の一方の立体異性体と、約１重量％未満の化合物の他方の立体異性体と、を含む。
【００４５】
本明細書において使用する場合、さらに特段指示されない限り、用語「ステレオメリックに濃縮した」は、約５５重量％超の化合物の一方の立体異性体と、約６０重量％超の化合物の一方の立体異性体と、約７０重量％超の化合物の一方の立体異性体と、または約８０重量％超の化合物の一方の立体異性体と、を含む組成物を意味する。
【００４６】
本明細書において使用する場合、さらに特段指示されない限り、用語「鏡像異性的に純粋な」は、１つのキラル中心を有する化合物の、ステレオメリックに純粋な組成物を意味する。同様に、用語「鏡像異性的に濃縮した」は、１つのキラル中心を有する化合物の、ステレオメリックに濃縮した組成物を意味する。
【００４７】
特定の実施形態では、本明細書において使用する場合、さらに特段明記されない限り、「光学的に活性」および「鏡像異性的に活性」は、約５０％以上、約７０％以上、約８０％以上、約９０％以上、約９１％以上、約９２％以上、約９３％以上、約９４％以上、約９５％以上、約９６％以上、約９７％以上、約９８％以上、約９９％以上、約９９．５％以上、または約９９．８％以上の鏡像体過剰率を有する、分子の収集物を指す。特定の実施形態では、化合物は、問題になっているラセミ体の総重量に基づき、約９５％以上の所望のエナンチオマーおよび約５％以下の好ましくないエナンチオマーを含む。
【００４８】
本明細書において使用する場合、特段明記されない限り、用語「ラセミ体の」または「ラセミ体」は、分子中の全キラル中心に対する、約５０％の一方のエナンチオマーと、約５０％の対応するエナンチオマーを指す。
【００４９】
光学的に活性な化合物を記載する場合、接頭辞ＲおよびＳはキラル中心（複数可）周辺の分子の絶対配置を表すのに使用されている。（＋）および（−）は、化合物の旋光度、すなわち偏波光面が光学的に活性な化合物によって旋回される方向を表すのに使用されている。（−）接頭辞は、化合物が左旋回、すなわち化合物が偏波光面を左に旋回または反時計回りに旋回することを示している。（＋）接頭辞は、化合物が右旋回、すなわち化合物が偏波光面を右に旋回または時計回りに旋回することを示している。ただし、旋光度の記号である（＋）および（−）は、分子の絶対配置であるＲおよびＳとは関連しない。
【００５０】
特段明記されない限り、本明細書において提供されている化合物は、例えば単一のエナンチオマーもしくは単一のジアステレオマーといったように鏡像異性的に純粋であってよく、または例えば２つのエナンチオマーのラセミ体混合物など、エナンチオマーの混合物といった立体異性体的な混合物、もしくは２つ以上のジアステレオマーの混合物であってよい。個別のエナンチオマーの調製／単離のための従来の技術には、好適な光学的に純粋な前駆体による合成、または光学不活性な出発物質による不斉合成、例えばキラルクロマトグラフィー、再結晶、分割、ジアステレオマーの塩形成といった鏡像異性的混合物の分割、またはジアステレオマー的付加体への誘導体化とその後の分離が挙げられる。
【００５１】
構造的異性体は相互転換できるものであり、本明細書において提供されている化合物は、単一の互変異性体または互変異性体の混合物として存在することができることに留意する必要がある。これは例えば、アミノ、ケト、もしくはオキシム基を含有する化合物内のプロトン互変異性、または芳香族部分を含有する化合物中の、いわゆる原子価異性の形態をとることができる。単一の化合物は、１種類超の異性を呈することができることに従っている。
【００５２】
本明細書において使用する場合、さらに特段指示されない限り、用語「約」または「およそ」は、当業者によって決定されるような特定の値に対して許容される誤差を意味しており、これはどのように値を測定または決定されるかによって部分的に変化する。特定の態様では、用語「約」または「およそ」は、１、２、３、または４の標準的な偏差内にあることを意味する。特定の態様では、用語「約」または「および」は、５０％、２０％、１５％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％、もしくは０．０５％の所与の値または範囲内にあることを意味する。
【００５３】
本明細書において使用する場合、かつ特段明記されない限り、化合物を「実質的に含まない」組成物は、化合物の約２０重量％未満、約１０重量％未満、約５重量％未満、約３重量％未満、約１重量％未満、約０．１重量％未満、約０．０１重量％未満、約０．００１重量％未満、または約０．０００１重量％未満を含有することを意味する。
【００５４】
本明細書において使用する場合、かつ特段明記されない限り、「実質的に純粋である」組成物は、組成物が約８０重量％超、約９０重量％超、約９５重量％超、約９７重量％超、約９９重量％超、約９９．５重量％超、約９９．９重量％超、約９９．９５重量％超、約９９．９９重量％超、約９９．９９５重量％超、約９９．９９９重量％超、約９９．９９９５重量％超、または約９９．９９９９重量％超の純度レベルを有することを意味する。
【００５５】
本明細書において使用する場合、かつ特段明記されない限り、用語「薬学的に許容される担体」、「薬学的に許容される賦形剤」、「生理学的に許容される担体」、または「生理学的に許容される賦形剤」は、液体または固体充填剤、希釈剤、溶媒、またはカプセルに包んでいる物質といった、薬学的に許容される物質、組成物、またはビヒクルを指す。一実施形態では、各成分は薬学的な製剤の他の成分と適合しているという意味で「薬学的に許容され」、かつ各成分は、過大な毒性、刺激、アレルギー応答、免疫原性、または適度な恩典／リスク比に相応する、他の問題もしくは合併症がない、ヒトおよび動物の組織または器官と接触する際に使用するのに好適である（２２〜２６）。
【００５６】
本明細書において使用する場合、かつ特段明記されない限り、用語「活性成分」、「活性物質」または「活性薬学的成分」は化合物または物質を指し、これは状態、障害、または疾患の１つもしくは複数の症状を治療、防止、および／または改善するため、単独または他の薬学的活性化合物（複数可）および／もしくは１つもしくは複数の薬学的に許容される賦形剤と組み合わせられて、対象に投与される。本明細書において使用する場合、「活性成分」、「活性物質」および「活性薬学的成分」は、薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、エステル、多形または本明細書において記載された化合物の光学的に活性な異性体であってよい。
【００５７】
癌は２つの方法で分類される。すなわち、癌が発生した組織の種類（組織学的な種類）によって、および原発部位（癌が最初に成長した身体中の場所）によってである。組織学的な観点により、数百の異なる癌が存在する。これは６つの主要なカテゴリにグループ化される。すなわち、２０１６年５月５日に最後に訪問された、ワールドワイドウェブリサーチソサイエティのウェブサイトである、ｃｒｓ−ｓｒｃ．ｃａから識別されるように、細胞癌、肉腫、骨髄腫、白血病、リンパ腫、混合種、中枢神経系および中皮腫である。
【００５８】
用語「癌」は、明細書を通して使用され、１つまたは複数の以下の異常な成長特徴を持つ細胞（複数可）を指す。すなわち、制御不可能な増殖、不死、転移可能性、急速な成長速度および増殖速度、撹乱された発癌性シグナル伝達、および特定の形態学的な特有の特徴である。また、これは上皮細胞組織（細胞癌）、血液細胞、骨髄、および免疫細胞（白血病、リンパ腫、骨髄腫）、結合組織、骨、軟骨、脂肪、筋肉、血管（肉腫）、中央神経系組織、グリア細胞または支持細胞（グリオーマ、芽腫、ＣＮＳリンパ腫）、中皮裏層（肺、心臓、腹腔の中皮腫）、メラノーマ（中胚葉を起点とする）から発生することができる。本明細書において使用する場合、用語癌は、本発明による診断および治療に適用可能である全ての癌性疾患状態を記載するために用いられ、かつ細胞癌、肉腫、骨髄腫、白血病、リンパ腫、混合種を含む、事実上、全ての癌の種類に関連する病理学的プロセスを採用または包含する。好ましい実施形態では、癌は固形腫瘍である。
【００５９】
用語「肺癌」は、肺で発生した癌か、または例えば肺に転移した乳癌といったように、別の組織で発生して肺に転移した癌かにかかわらず、肺で発見された癌を含む。
【００６０】
本明細書において使用する場合、かつ特段指示されない限り、用語「治療する」「治療している（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」および「治療」は、疾患または障害、または疾患もしくは障害に関連する１つもしくは複数の症状の、根絶または改善を指す。特定の実施形態では、該用語は、前述の疾患または障害を伴う対象へ、１つまたは複数の予防薬または治療薬を投与することで生じる、疾患または障害の伝播または悪化を最小にすることを指す。いくつかの実施形態では、該用語は、特定の疾患の症状が発生した後、追加の活性物質の有無にかかわらず、本明細書において提供されている化合物の投与を指す。
【００６１】
本明細書において使用する場合、かつ特段指示されない限り、用語「防止する」「防止している（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」および「防止」は、疾患または障害、またはその１つもしくは複数の症状の、発症、再発または伝播の予防を指す。特定の実施形態では、該用語は、本明細書で提供されている疾患または障害のリスクがある患者に対し、症状発症前に、他の追加の活性化合物の有無にかかわらず、本明細書において提供されている化合物を用いた治療またはその投与を指す。該用語は、特定の疾患の症状の阻害または低減を包含する。疾患の家族歴を有するか、または特に疾患診断前の患者は、特定の実施形態における防止的投与計画の候補である。加えて、症状の再発歴を有する患者はまた、防止のための潜在的な候補である。この点については、用語「防止」は、用語「予防的治療」と互換的に用いられてよい。
【００６２】
本明細書において使用する場合、かつ特段明記されない限り、用語「管理する」「管理している（ｍａｎａｇｉｎｇ）」および「管理」は、疾患または障害、またはその１つもしくは複数の症状の悪化、伝播または悪化を防止することまたは遅らせることを指す。多くの場合、対象が予防薬および／または治療薬から引き出す恩典的な効果は、疾患または障害の治癒の原因となることがない。この点については、用語「管理している」は、疾患の再発を防止または最小にしようとする点で、特定の疾患に苦しんでいた患者を治療することを含有する。
【００６３】
本明細書において使用する場合、かつ特段明記されない限り、用語「対象」は、霊長類（例えばヒト）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウスなどを含むがこれに限定されない、哺乳動物といった動物を含むと本明細書において定義されている。具体的な実施形態では、対象はヒトである。
【００６４】
特段明記されない限り、本明細書において提供されている化合物はプロドラッグとして提供されてよく、これは化合物の機能的誘導体である。例えば、ＳＧ−１１０はインビボで親化合物である５−アザ−２’−デオキシシチジンへと容易に転換可能である（９）。多くの場合、プロドラッグは有用である。これは場合によっては親化合物よりも投与が簡単となる可能性があるためである。例えば、親化合物は生体利用可能でない一方で、プロドラッグは吸入投与により生体利用可能であり得る。プロドラッグはまた、親化合物以上に薬学的組成物における溶解性を増強することができる。プロドラッグは、酵素プロセスおよび代謝加水分解を含む種々の機構により、親薬物へと転換可能である。
【００６５】
本明細書において使用する場合、かつ特段指示されない限り、用語「プロセス」は、本明細書において提供されている化合物を調製するのに有用である、本明細書において開示されている方法を指す。当業者に周知である、本明細書において開示されている方法に対する変更（例えば、出発物質、試薬、保護基、溶媒、温度、反応時間、精製）はまた、本開示により包含されている、
【００６６】
本明細書の目的は、その必要がある患者へ、長期の経肺投与に好適な薬学的組成物を提供することである。
【００６７】
本発明の別の目的は、ＣＦＣ、ＨＦＣもしくは二酸化炭素といった液状噴霧剤を含有する方法で吸入することにより投与される、薬学的に含有している、分散可能な乾燥粉末化された組成物を提供することである。または、別の実施形態では、乾燥粉末化された組成物は、ＣＦＣ、ＨＦＣもしくは二酸化炭素といった液状噴霧剤を含まない方法で吸入することにより投与される。
【００６８】
本発明の別の目的は、高い比率の薬学活性を維持する方法により容易に製造され得る、薬学的に含有している、分散可能な乾燥粉末化された組成物を提供することである。
【００６９】
本発明の別の目的は、十分な純度の薬学的組成物の製造のための製造方法を提供することである。
【００７０】
本発明のさらなる別の目的は、高レベルの安定性を呈する、薬学的に含有している分散可能な乾燥粉末化組成物を提供することである。
【００７１】
用語「分散能」または「分散可能」は、約１５重量％（ｗ％）未満の水であって、通常約５ｗ％未満、好ましくは約３ｗ％未満の水分、約１．０〜１０．０μｍの容積測定粒子サイズおよび１．０〜８．０の空気動力学的中央粒子径（ＭＭＡＤ）であって、通常１．０〜５．０μｍのＭＭＡＤ、好ましくは１．０〜４．０μｍのＭＭＡＤである空気動力学的粒子サイズ、約３０％超、通常４０％超、好ましくは５０％超、および最も好ましくは６０％超である送達用量、ならびに約１．０〜５．０μｍの空気動力学的粒子サイズ（ＭＭＡＤ）であって、通常１．５〜４．５μｍのＭＭＡＤ、好ましくは１．５〜４．０μｍのＭＭＡＤである、エアロゾル粒子サイズ分布を有する、乾燥粉末を意味する。
【００７２】
用語「粉末」は、粒子が肺に到達して肺胞中への浸透を可能とするように、自由に流動し、吸入デバイス中に容易に分散されてその後対象によって吸入可能である、細かく分散された固形粒子からなる組成物を意味する。したがって、粉末は「呼吸用」であると言われている。好ましくは、粉末の平均ＭＭＡＤは、比較的均一な球体形状分布に関して、径にして約１０ミクロン（μｍ）未満である。より好ましくは、径は約７．５μｍ未満であり、最も好ましくは約５．０μｍ未満である。通常、粒子サイズ分布は径にして約０．１μｍ〜約５μｍであり、特に約０．３μｍ〜約５μｍである。
【００７３】
用語「乾燥」は、エアロゾルを形成するため吸入デバイス内にて粒子が容易に分散可能であるように、組成物が水分を有することを意味する。この水分は一般に、約１０重量％（ｗ％）未満、通常は約５ｗ％未満、好ましくは約３ｗ％未満の水である。
【００７４】
用語「吸入可能」または「吸入」は、経肺投与に好適な粒子を指す。こうした粒子は、１０μｍ未満、より好ましくは５μｍ未満、最も好ましくは３．５μｍ未満の平均空気動力学的粒子サイズを意味する。
【００７５】
ロイシン、トリロイシン、イソロイシンといった用語アミノ酸は、アミノ酸の塩形態またはカウンターイオン製剤、ならびに単離された立体異性体（例えば、Ｄ−ロイシンまたはＬ−ロイシン）および立体異性体の混合物を包含すると意図されている。ロイシン、トリロイシン、イソロイシンといったアミノ酸の誘導体および中間体もまた包含される。アミノ酸は、アスパラギン酸、グルタミン酸、ロイシン、イソロイシン、リジン、バリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン、アラニン、セリン、Ｎ−アセチル−システイン、フェニルアラニン、リジン、または薬学的に許容される誘導体、塩、溶媒和物、水和物およびその多形から選択されてよい。
【００７６】
ここで図１Ａ〜図１Ｅを参照すると、シチジンおよびその誘導体／類似体が示されている。シチジン類似体は、その塩、溶媒和物、水和物、およびエステルを含む（２７）。１つまたは複数のシチジン類似体は、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼの阻害薬およびウリジンキナーゼの阻害薬として作用すると考えられている。シチジン類似体の作用は、ヌクレオチドのようなＤＮＡ中への組込みによって生じ、すでに正常な細胞成長制御機構に応答することがない癌細胞を含む、分裂細胞の急速な死の原因となる。シチジン類似体はまた、ＲＮＡ中にも組み込む。シチジン類似体の細胞毒性作用は、ＤＮＡ、ＲＮＡおよびタンパク質合成の阻害、ＲＮＡおよびＤＮＡ中への組込み、およびＤＮＡ損傷経路の活性化を含む、複数の機構により生じることがある。シチジン類似体である、４−アミノ−１−β−Ｄ−リボフラノシル−１，３，５−トリアジン−２（１Ｈ）−オンの化学名を有する、５−アザシチジン（５ＡＺＡ）は、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼの阻害薬およびウリジンキナーゼの阻害薬として作用すると考えられている。ＤＮＡ中への組込みによる５ＡＺＡの作用は、すでに正常な細胞成長制御機構に応答することがない癌細胞を含む、分裂細胞の急速な死の原因となる。５ＡＺＡはまた、ＲＮＡ中にも組み込む。５ＡＺＡの細胞毒性作用は、ＤＮＡ、ＲＮＡおよびタンパク質合成の阻害、ＲＮＡおよびＤＮＡ中への組込み、およびＤＮＡ損傷経路の活性化を含む、複数の機構により生じることがある。現在の５ＡＺＡ治療は、皮下全身送達用に５ＡＺＡ粉末と滅菌水中に溶解されたマンニトール粉末とを組み合わせ、特定の種類の骨髄癌および血液細胞障害を治療する。５ＡＺＡが、その作用へと寄与する遺伝子の再発現につながる、有効なインビトロでのＤＮＡ脱メチル化剤である一方、その活性および半減期は、シチジン脱アミノ化による肝臓中での初回通過不活性化、つまりつまりＬＣに対する活性を制限する障壁によって、皮下送達ではインビボで制限されている。水性または乾燥粉末エアロゾルとして肺に直接的に送達される乾燥粉末製剤の開発により、薬物動態プロファイルを大きく向上させ、かつ腫瘍部位での５ＡＺＡ濃度を実質的に増加させるといった独自の機会を提供する。これにより、シトシン脱メチル化の増強、遺伝子の再発現および腫瘍縮小といった形態での臨床奏功を促進させる。
【００７７】
局所薬物送達ＰＫおよび腫瘍多様性に関する、ヒトにおけるＬＣを再現した検証用の同所性ＬＣモデルは、異なる５ＡＺＡ製剤のエアロゾル送達の有効性、ならびに腫瘍負荷量および遺伝子再発現に影響することを目的とした、クロマチン再構成を標的とする剤の協同的な潜在力を評価するのに有益である。
【００７８】
ヒトＬＣ由来細胞株の異種移植片がＲｏｗｅｔｔヌードラットの肺全体にわたって効率的に移植された、同所性ＬＣモデルを発育した（２８）。このラットモデルにおける一研究は、滅菌水中で再構成された５ＡＺＡ、ならびに難治性で進行性非小細胞肺癌を伴う患者へと投与される５ＡＺＡおよびＭＳ２７５を用いた、第ＩＩ相臨床試験と同様の用量およびスケジュールでラットに送達されたヒストン脱アセチル化ＨＤＡＣｉエンチノスタット（ＭＳ２７５）の腹腔内注射による全身送達を含む、併用療法を評価した。５ＡＺＡは３１％分腫瘍負荷量を減少させたが、ＭＳ２７５は５ＡＺＡと協同し、６０％腫瘍成長を阻止した。５ＡＺＡは、遺伝子の脱メチル化および再発現によって検出されるようなエピゲノムのリプログラミングを誘発した（２９）。さらに、５ＡＺＡの呼吸に高度に適した水性エアロゾル製剤（５ＡＺＡは滅菌水中で再構成した）は、吸入ネブライザー送達に使用された。約０．６ｍｇ／ｋｇの５ＡＺＡの吸入噴霧用量をラットに送達し、該用量は、滅菌水中で再構成された２ｍｇ／ｋｇの５ＡＺＡの全身腹腔内用量と比較された。比較は、有効な全身５ＡＺＡ用量の３分の１にて、水性５ＡＺＡの吸入送達、肺中の向上したＰＫプロファイル、腫瘍負荷量における等価の減少、および肺葉全体にわたって採取された腫瘍中の３００個の遺伝子を脱メチル化するための共通する性質の増強を得たことを示した（３０）。Ｑｉｕらは、同所性マウスモデルにおいて、我々の発見を再現した。このグループは、第Ｉ相用量の漸増安全性および噴霧された５ＡＺＡを用いて継続したヒトにおけるバイオマーカの試験を開始した（３１、３２）。
【００７９】
癌治療向けの薬物の噴霧は、送達用時間の延長、クリニックでの必要な投与、および送達期間にわたる５ＡＺＡの化学的安定性によって制約されている。したがって、こうした障壁を取り除くため、以下に記載された５ＡＺＡの新規スプレー乾燥製剤は、吸入水性５ＡＺＡと比較すると、判明しているように優れた物理的安定性および化学的安定性、ＰＫ特性、および肺癌の治療に対する有効性を有するように開発されている。
【００８０】
本発明の一態様は、臨床的および非臨床的送達に好適な特性を有する、化学的および物理的に安定した製剤を可能とすることで有利である５ＡＺＡの乾燥粉末製剤を生成することを提供している。
【００８１】
例えば５ＡＺＡといったシチジン類似体の乾燥粉末製剤の一成分は、薬物を安定化させ、製造プロセス中の安定性を維持し、かつ保存中の使用前の製品の安定性を保持する希釈剤である。酢酸アンモニウム緩衝液、緩衝されていない水、１：１のエタノール：水、およびＤＭＳＯを含んだ希釈剤のいくつかが評価された。ＤＭＳＯは、望ましい安定性および溶解性を提供した。ＤＭＳＯは任意の販売された／認可された吸入製品中に使用されておらず、これは試す上で明らかではなかった。ＤＭＳＯの毒性は吸入では評価されなかったが、１ヶ月間、２００ｍｇ／ｋｇ（我々の吸入５ＡＺＡ用量より２，０００倍大きい）でのラットにおける静脈内投薬では、毒性は何ら示さなかった（３３）。
【００８２】
一実施形態では、５ＡＺＡをＤＭＳＯ（１０％）と混合し、スプレー乾燥プロセス中の５ＡＺＡの分解を防止した。例えば、糖（例えばトレハロース）といった炭水化物および／またはアミノ酸（例えばロイシン）といった賦形剤を添加してスプレー乾燥プロセスを推進させる。流動可能かつ呼吸用である乾燥粉末の形成は、例えば水または生理食塩水中に、トレハロースおよびロイシンを含む賦形剤を溶解する工程ならびに霧化直前にＤＭＳＯ−５ＡＺＡを有する賦形剤をインライン混合する工程を含んだ。こうした賦形剤は、液滴中のその溶解性に基づいて相互作用すると考えられている。液滴を蒸発した際、各賦形剤はその溶解最大値に到達する。溶解度が最大飽和溶解度より高い場合、賦形剤は結晶化する。トレハロースは、高いガラス転移温度の充填剤として機能し、粒子製剤および用量の希釈に役立つ。ロイシンは最初に結晶化し、これは粒子の球体形状および粒子の多孔性性質を推進する。ロイシンは、エアロゾル性能および吸入用のスプレー乾燥粉末の安定性を促進させる上で使用されるアミノ酸の１つである。他は、限定するわけではないが、トリロイシンおよびイソロイシンを含む（３４）。トレハロースは、乾燥粉末製剤中の微細粒子として機能し、５ＡＺＡといったシチジン類似体を含む薬物の吸入効率を向上させる。他の好適な微細粉末は、糖、六価アルコール、およびラクトース、マンニトール、ソルビトール、ラフィノース、イノシトールおよびエリスリトールを含むがこれに限定されない、広範な一覧に由来したものである（３５）。
【００８３】
本発明の一実施形態では、シチジン類似体組成物は、約１１％のＤＭＳＯを伴う約７０／２０／１０ｗ／ｗの比で、残留ＤＭＳＯを伴うトレハロース／ロイシン／５ＡＺＡを含むが、他の比も考えられる。走査型電子顕微鏡は、製剤が、融合または凝集の兆候が見られない第１粒子から構成されることを明らかにした。ＨＰＬＣ分析は、スプレー乾燥またはその後の真空乾燥（安定した保存に使用されているアプローチ）後に検出された、分解のない約９８％以上の純度を明らかにした。本発明の一実施形態では、シチジン類似体は、粉末組成物の乾燥重量の約９９重量％以下、例えば約９０重量％以下、例えば約８０重量％もしくは７０重量％、または約６０重量％以下、または約５０重量％以下、または約４０重量％以下、または約３０重量％以下、または約２０重量％以下、または約１０重量％以下といった量で存在する。シチジン類似体は、粉末組成物の乾燥重量の約０．５重量％以上、約１重量％以上、約２重量％以上、約３重量％または約４重量％の量で存在してよい。例えば一実施形態では、シチジン類似体は、組成物の乾燥重量の約０．５重量％〜約５重量％、または約５重量％〜約１０重量％、または約１０重量％〜約２０重量％の量で存在する。例えば、一実施形態では、シチジン類似体は、組成物の乾燥重量の、約１％〜約２０％、または約５％〜約１５％の量で存在する。
【００８４】
本発明の一実施形態では、薬学的に許容される賦形剤は、粉末組成物の乾燥重量の約９９重量％以下、例えば約９０重量％以下、例えば約８０重量％以下もしく７０重量％、または約６０重量％以下、または約５０重量％以下、または約４０重量％以下、または約３０重量％以下、または約２０重量％以下、または約１０重量％以下といった量で存在している。代替的には、薬学的に許容される賦形剤は、粉末組成物の乾燥重量を含まない（０％）か、または粉末組成物の乾燥重量の約０．５重量％以上、約１重量％以上、約２重量％以上、約３重量％または約４重量％の量で存在してよい。例えば一実施形態では、薬学的に許容される賦形剤は、組成物の乾燥重量の約０．５重量％〜約０．５重量％、または約５重量％〜約１０重量％、または約１０重量％〜約２０重量％の量で存在する。例えば、一実施形態では、薬学的に許容される賦形剤は、組成物の乾燥重量の、約６０％〜約７０％、または約６５％〜約７５％の量で存在する。代替的には、薬学的に許容される賦形剤は、組成物の乾燥重量の約０．５重量％〜約０．５重量％、または約５重量％〜約１０重量％、または約１０重量％〜約２０重量％の量で存在する。例えば、一実施形態では、薬学的に許容される賦形剤は、組成物の乾燥重量の、約５０％〜約８０％、または約６５％〜約７５％の量で存在する。
【００８５】
本発明の一実施形態では、ロイシンおよび／またはトリロイシン、および／またはイソロイシンは、粉末組成物の乾燥重量の約９９重量％以下、例えば約９０重量％以下、例えば約８０重量％以下もしくは７０重量％、または約６０重量％以下、または約５０重量％以下、または約４０重量％以下、または約３０重量％以下、または約２０重量％以下、または約１０重量％以下といった量で存在している。代替的には、ロイシンおよび／またはトリロイシン、および／またはイソロイシンは、粉末組成物の乾燥重量を含まない（０％）か、または粉末組成物の乾燥重量の約０．５重量％以上、約１重量％以上、約２重量％以上、約３重量％または約４重量％の量で存在してよい。例えば一実施形態では、ロイシンおよび／またはトリロイシン、および／またはイソロイシンは、組成物の乾燥重量の約０．５重量％〜約０．５重量％、または約５重量％〜約１０重量％、または約１０重量％〜約２０重量％の量で存在する。例えば、一実施形態では、ロイシンおよび／またはトリロイシン、および／またはイソロイシンは、組成物の乾燥重量の、約１０％〜約３０％、または約１５％〜約２５％の量で存在する。
【００８６】
本発明の一実施形態では、トレハロースは、粉末組成物の乾燥重量の約９９重量％以下、例えば約９０重量％以下、例えば約８０重量％以下もしくは７０重量％、または約６０重量％以下、または約５０重量％以下、または約４０重量％以下、または約３０重量％以下、または約２０重量％以下、または約１０重量％以下といった量で存在する。代替的には、トレハロースは、粉末組成物の乾燥重量を含まない（０％）か、または粉末組成物の乾燥重量の約０．５重量％以上、約１重量％以上、約２重量％以上、約３重量％または約４重量％の量で存在してよい。例えば一実施形態では、トレハロースは、組成物の乾燥重量の約０．５重量％〜約０．５重量％、または約５重量％〜約１０重量％、または約１０重量％〜約２０重量％の量で存在する。例えば、一実施形態では、トレハロースは、組成物の乾燥重量の、約５５％〜約９０％、または約６５％〜約７５％の量で存在する。
【００８７】
本発明の別の実施形態では、トレハロース類似体は、粉末組成物の乾燥重量の約９０重量％または８０重量％または７０重量％または６０重量％以下の量で存在し、ロイシンおよび／またはトリロイシン、および／またはイソロイシンは、粉末組成物の乾燥重量の約５重量％または約１０重量％〜約２５重量％の量で存在し、シチジン類似体は、粉末組成物の乾燥重量の約１〜２５重量％または約５重量％〜約１５重量％の量で存在する。
【００８８】
別の実施形態では、残留ＤＭＳＯは約０〜５％、５〜１０％、１０〜２０％または３０％未満である。
【００８９】
乾燥粉末製剤の粒子サイズ分布は、次世代インパクター（ＮＧＩ、ＭＳＰ  Ｃｏｒｐ）を有するカプセルベースの吸入器（Ｐｌａｓｔｉａｐｅ  ＲＳ０１）により特徴づけられ、粉末に対する空気動力学的中央粒子径（ＭＭＡＤ）、幾何標準偏差（ＧＳＤ）、デバイスおよびカプセルからの放出された割合（ＥＦ）、および粉末に対する微粒子割合（ＦＰＦ）を測定した（表１）。プログラムを臨床研究へと進める際に臨床的送達へと移ることができるため、Ｐｌａｓｔｉａｐｅデバイスが選択された。重複解析は全ての試験に実施され、結果は再現性のために比較された。経口的な吸入エアロゾルは全て１〜５μｍのＭＭＡＤを有さなければならないというＦＤＡ要件は、経口堆積を減少させ、肺堆積を増加させる。本発明の一実施形態では、本明細書において開示されるような吸入可能である５ＡＺＡ乾燥粉末製剤は、約３．５μｍ±０．３のＭＭＡＤを有するように特徴づけられている。
【００９０】
【表１】
2021511368.tif 000003
【００９１】
薬物動態試験は、単回投与量の５ＡＺＡへ曝露させた後のスプラーグドーリーラット中の血液、肺（表２）および肝臓および脳（表３）における、７５ｍｇ／ｍ２の５ＡＺＡのヒト注入可能用量と当量である、５ＡＺＡの全身（２ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射［ｉ．ｐ．］）用量、５ＡＺＡの吸入水性（０．６ｍｇ／ｋｇ肺投与量）製剤、および５ＡＺＡの吸入乾燥粉末（０．３、０．６、および０．９ｍｇ／ｋｇ肺投与量）製剤の特性を比較するために行われた。５ＡＺＡエアロゾルは、回転ブラシ発生器またはＰａｒｉネブライザーをそれぞれ用いて５ＡＺＡ乾燥粉末製剤および５ＡＺＡ水性製剤エアロゾルを生成する、鼻のみの吸入送達システムを用いてラットの肺へと送達された。システムは、エアロゾルの総濃度、５ＡＺＡエアロゾル濃度および粒子サイズ分布を観測する。加えて、薬物動態に関して、５ＡＺＡ投薬の１時間前に経口投与された、シチジンデアミナーゼ（ＣＤＡ）阻害薬であるテトラヒドロウリジン（ＴＨＵ、［８０ｍｇ／ｋｇ］）の作用を測定した。５ＡＺＡ投与の後、時点につき、治療グループごとに３頭の動物を、１２時間にわたって１０の時点で連続的に屠殺した。各時点にて、血漿へ分離することを目的として全身の血液をＫ３ＥＤＴＡ管へと収集し、肺、肝臓、および脳組織を液体窒素中で急速凍結した。血漿および肺組織サンプルを液体クロマトグラフィー質量分析アッセイによってアッセイし、平均濃度対時間プロファイルは非コンパートメント分析を用いてモデル化した。吸入乾燥粉末５ＡＺＡ製剤の薬物動態プロファイルを、吸入水性５ＡＺＡ製剤およびスプラーグドーリーラット中の全身５ＡＺＡ製剤（ｉ．ｐ．注射）と比較した（図２）。この比較は、単回投与量の吸入乾燥粉末５ＡＺＡ［０．６ｍｇ／ｋｇ肺投与量］、単回投与量の吸入水性５ＡＺＡ［０．６ｍｇ／ｋｇ肺投与量］、またはＴＨＵ（８０ｍｇ／ｋｇ経口投与量）の投与を伴うおよび伴わない、単回投与量の全身５ＡＺＡ（２ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）に曝露されたラットを用いた。
【００９２】
ＴＨＵの添加は、乾燥粉末の最大投与量（これは、ＴＨＵ投与量を飽和させ得る）および最大血漿濃度（Ｃｍａｘ［表２］）に対する、血漿における曲線下の領域（ＡＵＣ）を増加させた。吸入乾燥粉末５ＡＺＡ（０．６ｍｇ／ｋｇ）と、全身５ＡＺＡ（２ｍｇ／ｋｇ）および吸入水性５ＡＺＡ（０．６ｍｇ／ｋｇ）５ＡＺＡとをそれぞれ比較した場合、最も目立つものでＴＨＵとは無関係のものは、乾燥粉末に関してはＡＵＣでは〜１０倍の増加であり、Ｃｍａｘでは１．５〜５倍の増加であった（表２、図２）。
【００９３】
【表２】
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【００９４】
５ＡＺＡ乾燥粉末製剤の吸入送達は、水性５ＡＺＡ製剤の吸入送達または５ＡＺＡ製剤の全身送達に見られた値を大きく超える、血漿ＡＵＣおよびＣｍａｘを得る。したがって、乾燥粉末５ＡＺＡの吸入送達（例えば、本明細書において開示されているような製剤による）は、向上した全身送達を得るのに十分適しており、肺の外側組織の転移性癌を治療し、腫瘍負荷量を減少させ、かつ総合的な生存期間を向上させる。この結果は、５ＡＺＡの吸入水性形態を超える向上したＰＫを呈するような吸入５ＡＺＡ乾燥粉末を、当業者が特定できなかった場合には明らかではなかった。
【００９５】
ＴＨＵの添加は、肺ＰＫには影響しなかった（表２）。吸入乾燥粉末および水性５ＡＺＡ（０．６ｍｇ／ｋｇ投与量）は、Ｃｍａｘ（〜３０倍）およびＡＵＣ（〜４７倍）に対して、全身送達よりも優れた互角のＰＫプロファイルを示した。肝臓および脳についてのＰＫ解析は、ＡＵＣおよびＣｍａｘについて７〜２６倍の増加および２．５〜３．３倍の増加をそれぞれ有する吸入水性投薬および全身投薬と比較すると、乾燥粉末５ＡＺＡの優位性を示している（図２、表３）。ＴＨＵの添加は、脳内の乾燥粉末製剤に関するＰＫプロファイルを大きく向上させた。こうした発見は、乾燥粉末５ＡＺＡの吸入送達が全身５ＡＺＡまたは水性噴霧５ＡＺＡよりも大きく優れる全身用量を提供し、これが転移性疾患の治療時に有効であり得ることを立証した。
【００９６】
【表３】
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【００９７】
等量の用量（０．６ｍｇ／ｋｇ肺投与量）の水性５ＡＺＡ対乾燥粉末５ＡＺＡの吸入送達を比較する有効性試験は、同所性ＬＣモデル中で実施された。ＮＳＣＬＣ患者に由来する、２つの腺癌（ＡｄＣ）腫瘍株であるＣａｌｕ−６とＣａｌｕ−３、１つの細気管支肺胞（ＢＡＣ）腫瘍株であるＨ３５８、および１つの扁平上皮癌（ＳＣＣ）株であるＲＨ２を評価した。細胞株（１５×１０６細胞／Ｃａｌｕ−６とＣａｌｕ−３用のラット、７．５×１０６細胞／Ｈ３５８とＲＨ２用のラット）を、器官を介してヌードラット（細胞株あたり６０匹のラット）の肺へと滴下注入した。６匹のラットは癌であり、治療を受けない状態を継続させ、正常対照として機能させた。腫瘍株移植の３週間後（肺は１〜３ｍｍの多数の腫瘍を含有している［２０］）、ラット（ｎ＝２０／グループ）を週に４回４週間治療し、その後屠殺して腫瘍負荷量を評価した。５匹の動物／グループは維持し、Ｃａｌｕ６とＣａｌｕ３に対する治療後生存期間を評価した。全ての動物の肺を即時取り除いて計量し、腫瘍のない肺の平均重量から腫瘍を有する肺の重量を引くことで、腫瘍負荷量を測定した。加えて、腫瘍を有さないスプラーグドーリーラットを、同様の治療プロトコールの下で乾燥粉末５ＡＺＡに曝露させ、局所毒性および全身性の毒性を評価した。
【００９８】
Ｃａｌｕ６とＣａｌｕ３腫瘍に対する腫瘍負荷量においては５０％の低下であった吸入水性５ＡＺＡ製剤と比較すると、吸入乾燥粉末５ＡＺＡ製剤は７０〜８０％の減少を示し、著しく良好であった（表４）。吸入乾燥粉末５ＡＺＡ製剤はまた、Ｃａｌｕ６腫瘍に対する腫瘍負荷量の減少に関して、全身ｉ．ｐ．５ＡＺＡよりも優れていた（８０％対３１％［２９］）。吸入治療は両方とも、Ｃａｌｕ３腫瘍の生存期間を増加させたことに関連していたが、乾燥粉末５ＡＺＡ製剤はＣａｌｕ６腫瘍の生存期間を向上させた（図３）。乾燥粉末または水性５ＡＺＡ製剤のいずれかによる治療は、ゆっくりと成長するＨ３５８気管支肺胞（ｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｌｏａｒ）腫瘍を大幅に治癒するのに等しく有効であった（図４）。対照的に、吸入乾燥粉末５ＡＺＡ製剤は、水性５ＡＺＡ製剤については３３％の腫瘍負荷量の減少であったのと比較すると、７４％減少させたことで明らかであるように、高悪性度の扁平上皮癌であるＲＨ２の成長に影響を与えるという点で大きく優れていた。また、吸入５ＡＺＡ乾燥粉末製剤へ曝露した４週間後の局所毒性または全身性の毒性に関する病理組織学的な証拠は、存在しなかった。一緒に、こうした研究は、局所肺癌および転移性肺癌および他の癌の治療に対する、新規５ＡＺＡ乾燥粉末製剤の使用を強固に支援する。
【００９９】
【表４】
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【０１００】
乾燥粉末５ＡＺＡ製剤の吸入送達は、腺癌および扁平上皮癌の腫瘍負荷量を減少させるための水性５ＡＺＡ製剤と比較すると向上した有効性を示し、また細気管支肺胞上皮癌に対しては、同様の有効性を示した（表４を参照されたい）。こうした３つの腫瘍タイプには、非小細胞肺癌のより広範な肺癌の分類が含まれる。したがって、吸入送達用の５ＡＺＡ乾燥粉末製剤は、患者の肺にてＮＳＣＬＣを治療する際に有益である。
【０１０１】
例えば５ＡＺＡ乾燥粉末製剤といったシチジン類似体の吸入送達は、例えば同一経路にて送達された５ＡＺＡ製剤といった水性シチジン類似体と比較すると、いくつかの腫瘍に対し、対象の総合的な生存期間を向上させることができる。
【０１０２】
シチジン類似体の一例としての吸入乾燥粉末５ＡＺＡ化合物に関する、腫瘍負荷量を減少させるための優れた薬物動態プロファイルおよび有効性は、化学療法剤および低分子阻害薬を含むことができる免疫療法または他の治療と組み合わせて同時投与する際、無増悪かつ総合的な生存期間を向上させるためのエピジェネティックプライミングにおける、吸入乾燥粉末シチジン類似体の使用を補助する。
【０１０３】
例えば５ＡＺＡ乾燥粉末化合物といった乾燥粉末化合物であるシチジン類似体の吸入送達は、正常な肺組織または他の全身の器官への毒性とは関連しなかった。したがって５ＡＺＡ乾燥粉末化合物の吸入送達は、化学療法に効果がないことを示した場合に、再発を防止し無増悪かつ総合的な生存期間を向上させるために、腫瘍切除に続いて肺癌患者に長期にわたって行われる、アジュバント療法に使用されることができる（３６）。
【０１０４】
肺に対して０．６ｍｇ／ｋｇ（低用量）にて送達された吸入乾燥粉末５ＡＺＡ化合物の一態様は、等量の５ＡＺＡの吸入水性用量よりも向上した有効性を提供する。吸入乾燥粉末５ＡＺＡ用量は増加させることができ、肺中の腫瘍成長をさらに低減させる。
【０１０５】
例えば低用量の吸入乾燥粉末といった５ＡＺＡシチジン類似体の一態様は、用量が肺の外側の腫瘍成長をさらに減少させるために増加され得るような、向上した有効性を得るための等量の５ＡＺＡの吸入水性用量が使用されるということである。
【０１０６】
例えば５ＡＺＡ化合物といったシチジン類似体吸入乾燥粉末および治療の一態様は、これが、肺中の腫瘍成長をさらにもたらすヒストン脱アセチル化の阻害薬と組み合わせることが可能であるということである。
【０１０７】
例えば５ＡＺＡ化合物といったシチジン類似体吸入乾燥粉末および治療の一態様は、これが、肺の外側の腫瘍成長をさらにもたらすヒストン脱アセチル化の阻害薬と組み合わせることが可能であるということである。
【０１０８】
例えば５ＡＺＡ化合物といったシチジン類似体吸入乾燥粉末および治療の一態様は、これが、肺中の腫瘍負荷量をさらにもたらすヒストンメチル化の阻害薬と組み合わせることが可能であるということである。
【０１０９】
例えば５ＡＺＡ化合物といった吸入乾燥粉末シチジン類似体および治療の一態様は、これが、肺の外側の腫瘍負荷量をさらにもたらすヒストンメチル化の阻害薬と組み合わせることが可能であるということである。
【０１１０】
本発明の一実施形態の別の態様は、ＴＨＵといったシチジンデアミナーゼ阻害薬の添加が吸入乾燥粉末シチジン類似体化合物に関する血漿ＣｍａｘおよびＡＵＣを増加させており、転移性肺癌の治療時にシチジン類似体とシチジンデアミナーゼの併用使用を補助しているということである。
【０１１１】
本発明の一実施形態の別の態様は、シチジンデアミナーゼ阻害薬であるＴＨＵの添加が吸入乾燥粉末シチジン類似体化合物に関する血漿ＣｍａｘおよびＡＵＣを増加させており、再発を防止し、無増悪かつ総合的な生存期間を向上させるため、例えば腫瘍切除後である肺癌患者といった癌患者に長期にわたって行われるアジュバント療法が目的である、５ＡＺＡといったシチジン類似体を用いた併用使用を補助しているということである。
【０１１２】
本発明の一実施形態の別の態様は、シチジンデアミナーゼ阻害薬であるＴＨＵの添加が吸入乾燥粉末シチジン類似体化合物に関する血漿ＣｍａｘおよびＡＵＣを増加させており、例えば、免疫療法または化学療法剤および低分子阻害薬を含むことができる他の治療と組み合わされた際、無増悪かつ総合的な生存期間を向上させるための、エピジェネティックプライミング時に、例えば５ＡＺＡといったシチジン類似体との併用使用を補助しているということである。
【０１１３】
本発明の一実施形態の別の態様は、吸入水性シチジン類似体化合物と比較すると、肺中で成長している癌治療用の、例えば５ＡＺＡ化合物といった吸入乾燥粉末シチジン類似体化合物の向上した有効性は、肺に転移しており、乳癌、大腸癌および前立腺癌を含むがこれに限定されない、他の原発腫瘍の治療時での使用を補助することである。
【０１１４】
本発明の一実施形態の別の態様は、吸入水性シチジン類似体化合物と比較すると、血液、肝臓、および脳への、例えば５ＡＺＡ化合物といった吸入乾燥粉末シチジン類似体化合物の向上した送達は、乳癌、大腸癌および前立腺癌を含むがこれに限定されない、他の原発腫瘍の治療時での使用を補助することである。
【０１１５】
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【図１】
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【図２Ａ】
2021511368.tif 000008
【図２Ｂ】
2021511368.tif 000009
【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【手続補正書】
【提出日】令和3年1月27日(2021.1.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌である患者へと吸入投与するためのエアロゾルにて分散するのに好適な乾燥粉末薬学的組成物であって、
前記組成物が、その塩、溶媒和物、水和物、およびエステルを含む、シチジン類似体、および
癌である前記患者へと吸入によって投与するための前記エアロゾルにて分散するのに好適な前記乾燥粉末薬学的組成物を共に形成する薬学的に許容される賦形剤を含み、前記組成物がＤＭＳＯ溶液にて前記シチジン類似体を霧化することにより形成される、乾燥粉末薬学的組成物。
【請求項２】
前記賦形剤が、ロイシン、トリロイシン、イソロイシンまたはそれらの任意の組合せからなる群から選択されたアミノ酸である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記賦形剤が、糖またはアルコールである、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記糖またはアルコールは、トレハロース、ラクトース、マンニトール、ソルビトール、ラフィノース、イノシトールおよびエリスリトールからなる群から選択される、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記賦形剤が、トレハロースおよび／またはロイシンを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記シチジン類似体が、５−アザシチジン、ゼブラリン、５−アザ−２´−デオキシシチジン、ＳＧ−１１０およびその塩、溶媒和物、水和物、およびエステルからなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記薬学的賦形剤が、前記乾燥粉末の約９９〜１重量％であり、その塩、溶媒和物、水和物、およびエステルを含む前記シチジン類似体が、約０〜２０％の残留ＤＭＳＯを有する、前記乾燥粉末の約１〜９９重量％である、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記残留ＤＭＳＯが、約５〜１５％のＤＭＳＯである、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
約０〜９９ｗ／ｗ％の範囲のトレハロース、
約０〜９９ｗ／ｗ％の範囲のロイシン、
その塩、溶媒和物、水和物、およびエステルを含む、約０．１〜５０％の範囲のシチジン類似体、および
約０．１〜２０％の残留ＤＭＳＯである、ＤＭＳＯの残留物を含む、
請求項５に記載の組成物。
【請求項１０】
前記乾燥粉末が、約１〜５μｍのＭＭＤＡを有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
その塩、溶媒和物、水和物およびエステルを含むシチジン類似体を含む乾燥粉末組成物を形成する方法であって、
ＤＭＳＯ中に前記シチジン類似体を溶解させ、シチジン類似体ＤＭＳＯ溶液を形成する工程、
溶媒中に薬学的賦形剤を溶解させる工程、
混合により、前記シチジン類似体ＤＭＳＯ溶液と前記溶解された賦形剤とを組み合わせる工程、
霧化することにより液滴を形成する工程、ならびに
前記液滴を蒸発させて乾燥させ、約１〜５μｍのＭＭＡＤを有するシチジン類似体を含む粒子を形成する工程を含む、方法。
【請求項１２】
前記薬学的賦形剤が、アミノ酸、糖またはそれらの組合せを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記アミノ酸が、ロイシン、トリロイシンおよびイソロイシンからなる群から選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記糖が、六価アルコール、およびトレハロース、ラクトース、マンニトール、ソルビトール、ラフィノース、イノシトールおよびエリスリトールを含むがこれに限定されない、糖アルコールからなる群から選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記薬学的賦形剤が、トレハロースおよび／またはロイシンを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
前記乾燥粉末が残留ＤＭＳＯを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１７】
混合はインライン混合である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１８】
前記シチジン類似体が、５−アザシチジン、ゼブラリン、５−アザ−２´−デオキシシチジン、ＳＧ−１１０およびその塩、溶媒和物、水和物、およびエステルからなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項１９】
前記薬学的賦形剤が、前記乾燥粉末の約９９〜１重量％であり、その塩、溶媒和物、水和物、およびエステルを含む前記シチジン類似体が、約０〜２０％の残留ＤＭＳＯを有する、前記乾燥粉末の約１〜９９重量％である、請求項１１に記載の方法。
【請求項２０】
前記残留ＤＭＳＯが、約５〜１５％のＤＭＳＯである、請求項１１に記載の方法。
【請求項２１】
前記乾燥粉末組成物が、
約０〜９９ｗ／ｗ％の範囲のトレハロース、
約０〜９９ｗ／ｗ％の範囲のロイシン、
その塩、溶媒和物、水和物、およびエステルを含む、約０．１〜５０％の範囲のシチジン類似体、ならびに
約０．１〜２０％の残留ＤＭＳＯである、ＤＭＳＯの残留物を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項２２】
前記組成物が、ＤＭＳＯ溶液中で前記シチジン類似体を霧化することにより形成される、請求項１１に記載の方法。
【請求項２３】
前記乾燥粉末組成物が、約１〜５μｍのＭＭＤＡを有する、請求項１１に記載の方法。
【請求項２４】
請求項１の吸入可能である粉末組成物と、乾燥粉末吸入器と、を含む、吸入可能である粉末組成物を含む薬学的キット。
【請求項２５】
請求項１に記載の吸入可能である粉末組成物を含む、容器。
【国際調査報告】
2021511368.tif 000015
2021511368.tif 000016
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