(57)【要約】本発明は、式（Ｉ）［式中、Ａｒは、式（II）又は（III）で示され；そしてＲは、ＣＨ３又はＯＣＨ３である］で示される化合物、あるいはその薬学的に許容し得る酸付加塩又は対応するエナンチオマーに関する。本化合物は、γ−セクレターゼ（Ａβ４２）のモジュレーターであり、そしてアルツハイマー病、脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症又はダウン症候群の処置に有用であろう。
2021511306.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化２７】
2021511306.tif 000034
［式中、
Ａｒは、下記式：
【化２８】
2021511306.tif 000035
で示され；そして
Ｒは、ＣＨ３又はＯＣＨ３である］で示される化合物、あるいはその薬学的に許容し得る酸付加塩又は対応するエナンチオマー。
【請求項２】
請求項１記載の式（IA-1）又は（IA-2）：
【化２９】
2021511306.tif 000036
で示される化合物又は薬学的に許容し得るその酸付加塩であって、以下の化合物：
（９Ｒ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリミジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン；又は
（９Ｓ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリミジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン
又は薬学的に許容し得るその酸付加塩。
【請求項３】
請求項１記載の式（IB-1）、（IB-2）、（IB-3）若しくは（IB-4）：
【化３０】
2021511306.tif 000037
で示される化合物又は薬学的に許容し得るその酸付加塩であって、以下の化合物：
（９Ｒ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メトキシピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン；
（９Ｓ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メトキシピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン；
（９Ｒ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン；若しくは
（９Ｓ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン
又は薬学的に許容し得るその酸付加塩。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか一項記載の式（Ｉ）の化合物の製造方法であって、
１）式（２）：
【化３１】
2021511306.tif 000038
で示される化合物を式（３）：
【化３２】
2021511306.tif 000039
で示される化合物と反応させて、式（Ｉ）：
【化３３】
2021511306.tif 000040
［式中、Ａｒは、請求項１に記載の意味を有する］で示される化合物を形成すること、及び
必要に応じて、得られた化合物を薬学的に許容し得る酸付加塩に変換すること、並びに
２）場合により式（Ｉ）のラセミ化合物をキラルＨＰＬＣ分離によって、式（IA-1）、（IA-2）、（IB-1）、（IB-2）、（IB-3）及び（IB-4）の化合物に分離すること
を含む製造方法。
【請求項５】
請求項４記載の製造方法により製造される、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６】
１種以上の請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物及び１種以上の薬学的に許容し得る賦形剤を含有する医薬品。
【請求項７】
アルツハイマー病、脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症又はダウン症候群の処置のための、請求項６記載の医薬品。
【請求項８】
アルツハイマー病、脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症又はダウン症候群の処置用医薬品の製造のための、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物の使用。
【請求項９】
治療活性物質として使用するための、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１０】
アルツハイマー病、脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症又はダウン症候群の処置のための、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物の使用。
【請求項１１】
アルツハイマー病、脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症又はダウン症候群の処置に使用するための、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１２】
アルツハイマー病、脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症又はダウン症候群の処置方法であって、有効量の請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物を投与することを含む方法。
【請求項１３】
本明細書に前記の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、γ−セクレターゼモジュレーターとして有用なピリミジン誘導体、それらの製造、前記化合物を含む医薬組成物、並びにアルツハイマー病、脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症及びダウン症候群のような、脳におけるβ−アミロイドの沈着に関連する疾患の処置用医薬品としてのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
アルツハイマー病（ＡＤ）は、高齢期の認知症の最多原因である。病理学的には、ＡＤは、脳における細胞外プラークへのアミロイドの沈着及び細胞内神経原線維変化を特徴とする。アミロイドプラークは主に、一連のタンパク質分解的切断ステップによる、β−アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）を起源とするアミロイドペプチド（Ａβペプチド）で構成される。ＡＰＰの幾つかの形態が同定されており、そのうち最も豊富なものは６９５、７５１及び７７０アミノ酸長のタンパク質である。これらは全て、異なるスプライシングによって単一の遺伝子から生じる。Ａβペプチドは、ＡＰＰの同じドメインに由来する。
【０００３】
Ａβペプチドは、β−及びγ−セクレターゼと呼ばれる２つのタンパク質分解酵素の連続作用によりＡＰＰから生成される。β−セクレターゼは、最初にＡＰＰの細胞外ドメインにおいて膜貫通ドメイン（ＴＭ）の直ぐ外側を切断して、ＴＭ及び細胞質ドメインを含有するＡＰＰのＣ末端フラグメント（ＣＴＦβ）を生成させる。ＣＴＦβは、ＴＭ内の幾つかの隣接する位置で切断してＡβペプチドと細胞質断片を生成させるγ−セクレターゼの基質である。γ−セクレターゼが介在する種々のタンパク質分解的切断により、異なる鎖長のＡβペプチド、例えば、Ａβ３８、Ａβ４０及びＡβ４２が得られる。後者は、神経毒性凝集体を形成するその強い傾向のため、病原性の高いアミロイドペプチドであると考えられている。
【０００４】
β−セクレターゼは典型的なアスパラギン酸プロテアーゼである。γ−セクレターゼは、４つの必須サブユニット：プレセニリン（ＰＳ、ＰＳ１及びＰＳ２を含む）、ニカストリン、咽頭前部欠損１（anterior pharynx defective 1）（ＡＰＨ−１）、及びプレセニリンエンハンサー２（ＰＥＮ−２）からなる高分子量複合体である。解像度３．４Åのヒトγ−セクレターゼの原子構造が公表されている（X. Bai, C. Yan, G. Yang, P. Lu, D. Ma, L. Sun, R. Zhou, S. H. W.  Scheres, Y. Shi, Nature 2015, 525, pages 212 - 217）。プレセニリンは、触媒部位を有しており、そしてＴＭ内でその基質を切断し、それ自体がポリトピック膜タンパク質である、一群の非定型アスパラギン酸プロテアーゼを代表する。γ−セクレターゼの他の必須成分であるニカストリン、並びにａｐｈ１及びｐｅｎ−２遺伝子の産物は、基質の認識と動員に関与すると考えられている。γ−セクレターゼの証明された基質はＡＰＰ及びＮｏｔｃｈ受容体ファミリーのタンパク質であるが、γ−セクレターゼは、基質特異性は緩く、ＡＰＰ及びＮｏｔｃｈとは無関係のその他の多くの膜タンパク質が、インビトロでγ−セクレターゼにより切断されることが報告されている。
【０００５】
γ−セクレターゼ活性は、Ａβペプチドの産生に絶対に必要である。これは、遺伝的手段、即ち、プレセニリン遺伝子の破壊と、低分子量阻害化合物との両方によって示されている。ＡＤのアミロイドカスケード仮説によれば、Ａβの産生と沈着が疾患の最大要因である。したがって、γ−セクレターゼの選択的かつ強力な阻害は、ＡＤの予防と処置に役立つ可能性があると考えられた。
【０００６】
代替の処置様式は、Ａβ４２産生の選択的減少をもたらすγ−セクレターゼ活性の調節である。これは、凝集及びプラーク形成の能力がないか又は減少した、そして神経毒性がないか又は少ない、Ａβ３８、Ａβ３７他のような、より短いＡβアイソフォームの増加に導く。γ−セクレターゼ活性の調節に対してこの効果を示す化合物は、特定の非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）及び関連類似体を含む（Weggen et al., Nature, 414 (2001) 212-16）。
【０００７】
よって、本発明の化合物は、脳におけるβ−アミロイドの沈着に関連する疾患、特にアルツハイマー病、並びに脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症及びダウン症候群のような他の疾患の処置又は予防に有用であろう。
【０００８】
多くの文献にγ−セクレターゼ調節に関する現在の知識が記載されているが、例えば、次の刊行物に記載されている：
【０００９】
【表１】
2021511306.tif 000003
【００１０】
したがって、γ−セクレターゼ活性を調節することは、アルツハイマー病、脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症及びダウン症候群のような、脳におけるβ−アミロイドの沈着に関連する疾患の処置又は予防のための有望な治療戦略である。
【００１１】
脳におけるβ−アミロイドの沈着に関連する疾患及び障害を処置するための新しい化合物、製剤、処置法及び治療法が必要とされている。したがって、本発明の目的は、治療特性が改善されたこのような疾患及び障害の処置又は予防に有用な化合物を提供することである。
【発明の概要】
【００１２】
１つの態様において、本発明は、式（Ｉ）：
【００１３】
【化１】
2021511306.tif 000004
［式中、
Ａｒは、下記式：
【００１４】
【化２】
2021511306.tif 000005
で示され；そして
Ｒは、ＣＨ３又はＯＣＨ３である］で示される化合物、あるいはその薬学的に許容し得る酸付加塩又は対応するエナンチオマーに関する。
【００１５】
更なる態様において、本発明は、本明細書に定義される式（Ｉ）の化合物の製造方法であって、
ａ）式（２）：
【００１６】
【化３】
2021511306.tif 000006
で示される化合物を式（３）：
【００１７】
【化４】
2021511306.tif 000007
で示される化合物と反応させて、式（Ｉ）：
【００１８】
【化５】
2021511306.tif 000008
［式中、Ａｒは、本明細書に定義される意味を有する］で示される化合物にすること、及び必要に応じて、得られた化合物を薬学的に許容し得る酸付加塩に変換すること、並びに
ｂ）場合により式（Ｉ）のラセミ化合物をキラルＨＰＬＣ分離によって、式（IA-1）、（IA-2）、（IB-1）、（IB-2）、（IB-3）及び（IB-4）の化合物に分離すること
を含む製造方法を提供する。
【００１９】
更なる態様において、本発明は、上記の製造方法により製造される、本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物を提供する。
【００２０】
更なる態様において、本発明は、１種以上の上記の式（Ｉ）の化合物及び薬学的に許容し得る賦形剤を含有する医薬品を提供する。
【００２１】
更なる態様において、本発明は、アルツハイマー病、脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症又はダウン症候群の処置用医薬品の製造のための、本明細書に記載の化合物の使用を提供する。
【００２２】
更なる態様において、本発明は、治療活性物質として使用するための、本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物を提供する。
【００２３】
更なる態様において、本発明は、アルツハイマー病、脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症又はダウン症候群の処置のための、本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００２４】
更なる態様において、本発明は、アルツハイマー病、脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症又はダウン症候群の処置に使用するための、本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物を提供する。
【００２５】
更なる態様において、本発明は、アルツハイマー病、脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症又はダウン症候群の処置方法であって、有効量の本明細書に定義される式（Ｉ）の化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００２６】
今や式（Ｉ）の本発明の化合物は、γ−セクレターゼのモジュレーターであることが見い出され、これらは、脳におけるβ−アミロイドの沈着に関連する疾患、特にアルツハイマー病、並びに脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症及びダウン症候群のような他の疾患の処置又は予防に有用であろう。
【００２７】
発明の詳細な説明
「薬学的に許容し得る酸付加塩」という用語は、塩酸、硝酸、硫酸、リン酸、クエン酸、ギ酸、フマル酸、マレイン酸、酢酸、コハク酸、酒石酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸などのような、無機及び有機酸との塩を包含する。
【００２８】
発明の化合物
第１の態様において、本発明は、式（Ｉ）：
【００２９】
【化６】
2021511306.tif 000009
［式中、
Ａｒは、下記式：
【００３０】
【化７】
2021511306.tif 000010
で示され；そして
Ｒは、ＣＨ３又はＯＣＨ３である］で示される化合物、あるいはその薬学的に許容し得る酸付加塩又は対応するエナンチオマーに関する。
【００３１】
１つの実施態様において、式（IA-1）又は（IA-2）：
【００３２】
【化８】
2021511306.tif 000011
で示される化合物又は薬学的に許容し得るその酸付加塩であって、以下の化合物：
（９Ｒ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリミジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン；又は
（９Ｓ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリミジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン
又は薬学的に許容し得るその酸付加塩が提供される。
【００３３】
１つの実施態様において、式（IB-1）、（IB-2）、（IB-3）及び（IB-4）：
【００３４】
【化９】
2021511306.tif 000012
で示される化合物又は薬学的に許容し得るその酸付加塩であって、以下の化合物：
（９Ｒ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メトキシピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン；
（９Ｓ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メトキシピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン；
（９Ｒ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン；若しくは
（９Ｓ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン
又は薬学的に許容し得るその酸付加塩が提供される。
【００３５】
製造方法
本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物の製造方法もまた、本発明の目的である。
【００３６】
式（Ｉ）の本発明の化合物及びその薬学的に許容し得る塩は、当技術分野において公知の方法により、例えば、下記の方法であって、
ａ）式（２）：
【００３７】
【化１０】
2021511306.tif 000013
で示される化合物を式（３）：
【００３８】
【化１１】
2021511306.tif 000014
で示される化合物と反応させて、式（Ｉ）：
【００３９】
【化１２】
2021511306.tif 000015
［式中、Ａｒは、上記の意味を有する］で示される化合物にすること、及び
必要に応じて、得られた化合物を薬学的に許容し得る酸付加塩に変換すること、並びに
ｂ）場合により式（Ｉ）のラセミ化合物をキラルＨＰＬＣ分離によって、式（IA-1）、（IA-2）、（IB-1）、（IB-2）、（IB-3）及び（IB-4）のエナンチオマーに分離すること
を含む方法により調製され得る。
【００４０】
１つの実施態様において、式（Ｉ）の化合物及びその中間体は、スキーム１及び２により、並びに６つの特定の実施例の記載により調製され得る。
【００４１】
式（Ｉ）の誘導体の一般合成
【００４２】
【化１３】
2021511306.tif 000016
【００４３】
一般式（Ｉ）の誘導体の調製は、配位子（例えば、２−ジ−tert−ブチルホスフィノ−２’，４’，６’−トリイソプロピルビフェニル、CAS564483-19-8）の存在下のパラジウム触媒（例えば、ジブロモ−ビス−（トリ−tert−ブチル）−ホスフィン−パラジウム、CAS185812-86-6、又はトリ（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）、CAS51364-51-3）、及び塩基（例えば、ＮａＯｔＢｕ）の存在下での、式（２）の誘導体と一般式（３）のアミノ誘導体とのブッフバルト型クロスカップリングを介して行われ得る。
【００４４】
中間体（３）の一般合成
【００４５】
【化１４】
2021511306.tif 000017
【００４６】
スキーム１に使用される式（３）の化合物は、Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］カルバミン酸tert−ブチル（４）（CAS 847862-26-4）から出発して、スキーム２により調製され得る。（４）と一般式：Ａｒ−Ｘの複素環式ハロゲン化物とのカップリングは、エタノール又はＮＭＰのような溶媒中で温熱条件下でＥｔ３Ｎのような塩基の存在下で、又は触媒条件（例えば、パラジウム（０）又は銅（II）触媒作用）下での置換反応を用いて達成され得、式（５）の化合物を与える。酸（例えば、トリフルオロ酢酸）による脱保護後、式（３）の化合物が得られた。
【００４７】
式：Ａｒ−Ｘの複素環ハロゲン化物は、市販されているか、又は文献公知であるため、これらを当技術分野において公知の方法により調製することができるかのいずれかである。
【００４８】
医薬品及び投与
本発明の別の目的は、本明細書に記載の１種以上の式（Ｉ）の化合物及び少なくとも１種の薬学的に許容し得る賦形剤を含む医薬品である。
【００４９】
式（Ｉ）の化合物及び薬学的に許容し得るその塩は、例えば、医薬製剤の形で医薬品として使用され得る。医薬製剤は、例えば、錠剤、コーティング錠、糖衣錠、硬及び軟ゼラチンカプセル剤、液剤、乳剤又は懸濁剤の剤形で経口投与され得る。しかし投与はまた、例えば、坐剤の剤形で直腸内投与でも、例えば、注射液の剤形で非経口投与でも達成され得る。投与はまた、例えば、経皮投与、又は点眼液若しくは点耳液の剤形で局所投与でも達成され得る。
【００５０】
式（Ｉ）の化合物は、医薬製剤の製造のために薬学的に不活性な無機又は有機担体と一緒に加工され得る。乳糖、トウモロコシデンプン又はその誘導体、タルク、ステアリン酸又はその塩などを、例えば、錠剤、コーティング錠、糖衣錠及び硬ゼラチンカプセル剤用のそのような担体として使用することができる。軟ゼラチンカプセル剤に適した担体は、例えば、植物油、ロウ、脂肪、半固体及び液体ポリオールなどである。しかしながら、活性物質の性質に応じて、軟ゼラチンカプセル剤の場合、担体は通常必要とされない。液剤及びシロップ剤の製造に適した担体は、例えば、水、ポリオール、グリセロール、植物油などである。坐剤に適した担体は、例えば、天然又は硬化油、ロウ、脂肪、半液体又は液体ポリオールなどである。
【００５１】
更には、医薬製剤は、保存料、可溶化剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、甘味料、着色料、香味料、浸透圧を変化させるための塩、緩衝剤、マスキング剤又は抗酸化剤を含有することができる。それらはまた、更に他の治療有用物質を含有し得る。
【００５２】
式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容し得るその塩及び治療上不活性な担体を含有する医薬品もまた、式（Ｉ）の１種以上の化合物及び／又は薬学的に許容し得る酸付加塩、並びに必要に応じて１種以上の他の治療有用物質を１種以上の治療上不活性な担体と一緒にガレヌス製剤の投与剤形にすることを含む、これらの製造方法と同様に、本発明の目的である。
【００５３】
本発明により、式（Ｉ）の化合物並びにその薬学的に許容し得る塩は、アルツハイマー病のような、Ａβ４２分泌の阻害に基づく病気の制御又は予防において有用である。
【００５４】
投与量は広い範囲内で変動する可能性があり、当然ながら、それぞれの特定の症例における個々の要件に合わせて調整する必要がある。経口投与の場合、成人の投与量は、一般式（Ｉ）の化合物１日当たり約０．０１mg〜約１０００mg又は薬学的に許容し得るその塩の対応する量で変動し得る。１日用量は、単回投与として又は分割投与で投与され得、更に、これが必要であることが判明した場合、上限は超えることもできる。
【００５５】
本発明の医薬組成物は、以下のとおり調製され得る。
【００５６】
本発明の化合物を含む医薬組成物の調製
【００５７】
【表２】
2021511306.tif 000018
【００５８】
製造手順
１．項目１、２、３及び４を混合して精製水で造粒する。
２．顆粒を５０℃で乾燥させる。
３．顆粒を適切な粉砕機器に通す。
４．項目５を加え、３分間混合する；適切な打錠機で打錠する。
【００５９】
【表３】
2021511306.tif 000019
【００６０】
製造手順
１．適切なミキサーで項目１、２及び３を３０分間混合する。
２．項目４及び５を加えて、３分間混合する。
３．適切なカプセルに充填する。
【００６１】
適応
また本発明の目的は、治療活性物質として使用するための本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物である。
【００６２】
１つの態様において、本発明は、アルツハイマー病、脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症又はダウン症候群の処置用医薬品の製造のための、本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
１つの実施態様において、本発明は、アルツハイマー病の処置用医薬品の製造のための、本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００６３】
更に別の態様において、本発明は、アルツハイマー病、脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症又はダウン症候群の処置における使用のための、本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物を提供する。
１つの実施態様において、本発明は、アルツハイマー病の処置における使用のための、本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物を提供する。
【００６４】
更に別の態様において、本発明は、アルツハイマー病、脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症又はダウン症候群の処置のための、本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
１つの実施態様において、本発明は、アルツハイマー病の処置のための、本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００６５】
更に別の態様において、本発明は、アルツハイマー病、脳アミロイド血管症、遺伝性アミロイド性脳出血−オランダ型（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、多発梗塞性認知症、ボクサー認知症又はダウン症候群の処置方法であって、有効量の本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物を投与することを含む方法を提供する。
１つの実施態様において、本発明は、アルツハイマー病の処置方法であって、有効量の本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物を投与することを含む方法を提供する。
【実施例】
【００６６】
以下の実施例は、本発明の例示のために提供される。これらは、本発明の範囲を限定するものと考えるべきではなく、単にその代表的なものと考えるべきである。
【００６７】
１）調製実施例
１．１）全般
分析方法：
ａ）ＨＰＬＣ（LCMS_fastgradient法）
−カラム：Agilent Zorbax Eclipse Plus C18、Rapid Resolution HT、２．１ｘ３０mm、１．８μm、Part.no. 959731-902
−溶媒Ａ：水 ０．０１％ギ酸；溶媒Ｂ：アセトニトリル（ＭｅＣＮ）
−勾配：
【００６８】
【表４】
2021511306.tif 000020
【００６９】
略語：
以下の略語が実験の部に使用された：
ｔＢｕＯＮａ＝ナトリウムtert−ブチルオキシド；
ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；
ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル；
ＥｔＯＨ＝エタノール；
Ｅｔ３Ｎ＝トリエチルアミン；
ＬＤＡ＝リチウムジイソプロピルアミド；
ＭｅＯＨ＝メタノール；
Ｍｅ２ＳＯ＝ジメチルスルホキシド；
ＲＴ＝室温、２０〜２５℃；
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸；
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン；
ＴＢＭＥ＝メチル−tert−ブチルエーテル；
ＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィー；
ＴＨＰ＝テトラヒドロピラン。
【００７０】
１．２）中間体の調製
中間体（２）の調製：
２−ブロモ−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン
【００７１】
【化１５】
2021511306.tif 000021
工程１：６−クロロ−２−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）ヘキサン酸メチル
【００７２】
【化１６】
2021511306.tif 000022
ＴＨＦ（３０mL）中のＬＤＡ（２４．６mmol）の冷却（−７８℃）溶液に、２−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）酢酸メチル（４．７５ｇ、２３．４mmol）のＴＨＦ（２０mL）溶液を３０分かけて滴下した。撹拌を更に１時間続けた後、１−クロロ−４−ヨードブタン（５．１２ｇ、２３．４mmol）のＴＨＦ（２０mL）溶液をなおも−７８℃で２０分かけて加えた。２時間後、温度をゆっくりと１時間かけてＲＴに上げ、撹拌を一晩続けた。ＮＨ４Ｃｌの飽和水溶液（１００mL）を加えて反応をクエンチして、生成物をＴＢＭＥで抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮した。カラムクロマトグラフィー（勾配：ヘプタン中のＴＢＭＥ）により、６−クロロ−２−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）ヘキサン酸メチル（４．７６ｇ、６９％）を淡黄色の油状物として与えた。
【００７３】
工程２：６−クロロ−２−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）ヘキサン酸
【００７４】
【化１７】
2021511306.tif 000023
ＴＨＦ（６０mL）中の６−クロロ−２−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）ヘキサン酸メチル（４．７５ｇ、１６．２mmol）の撹拌溶液にＲＴで、Ｈ２Ｏ（６０mL）及びＭｅＯＨ（６mL）中のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（２．０４ｇ、４８．６mmol）溶液を加えた。ＲＴで一晩撹拌を続けた。ＨＣｌの水溶液（２M、５０mL）を加えると、白色の沈殿が得られた。生成物をＥｔＯＡｃで抽出して、有機相を食塩水で洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。真空下での濃縮及び乾燥後、６−クロロ−２−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）ヘキサン酸（４．７ｇ、９９％）を白色の固体として得た。ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：２７７．３［（Ｍ−Ｈ）＋］。
【００７５】
工程３：５−［５−クロロ−１−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）ペンチル］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−アミン
【００７６】
【化１８】
2021511306.tif 000024
トルエン（２０mL）中の６−クロロ−２−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）ヘキサン酸（２．１ｇ、７．５mmol）の撹拌溶液に、塩化チオニル（２．０９mL、２８．８mmol）を加え、反応物を９０℃で３時間加熱し、次にＲＴで一晩置いた。反応物を真空下で濃縮乾固して、淡黄色の油状物を与えた。この残渣にヒドラジンカルボキシミドアミド塩酸塩（１．６６ｇ、１５mmol）を加えた。得られた濃い褐色のペーストを１４０℃で４５分間撹拌し、ＲＴに冷却した。Ｈ２Ｏ（３０mL）及びＫ２ＣＯ３（１．５０ｇ、１０．９mmol）を加え、加熱を１１０℃で２０分間続け、ＲＴに冷却してから、酢酸を加えてｐＨをｐＨ＝７に調整した。生成物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出して、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮して、５−［５−クロロ−１−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）ペンチル］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−アミン（１．９６ｇ、８２％）をベージュ色の固体として与えた。ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：３１７．２［（Ｍ＋Ｈ）＋］。
【００７７】
工程４：９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン
【００７８】
【化１９】
2021511306.tif 000025
ＤＭＦ（１５mL）中の５−［５−クロロ−１−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）ペンチル］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−アミン（１．９６ｇ、６．１８mmol）の溶液に、ｔＢｕＯＮａ（０．６５ｇ、６．８mmol）及びＬｉＣｌ（０．２９ｇ、６．８mmol）を加えた。次に反応混合物を８５℃で１時間加熱し、ＲＴに冷却し、Ｈ２Ｏ（２５mL）を加えてクエンチした。生成物をＥｔＯＡｃで数回抽出し、合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮した。カラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中のＮＨ３／ＭｅＯＨ）により、９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン（０．６２ｇ、３５％）を白色固体として与えた。ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：２８１．３［（Ｍ＋Ｈ）＋］。
【００７９】
工程５：２−ブロモ−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン
【００８０】
【化２０】
2021511306.tif 000026
ＣＨ３ＣＮ（１２mL）中の９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン（０．３６ｇ、１．２９mmol）にＣｕＢｒ２（０．４３ｇ、１．９３mmol）を加えると、暗緑色／褐色の溶液が得られた。次に硝酸tert−ブチル（０．２５mL、１．９３mmol）を、ＲＴで１５分かけて５回に分けて加えた。次に反応混合物を６５℃で３０分間加熱し、ＲＴに冷却し、Ｈ２Ｏ（８mL）を加えてクエンチした。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機相を順次Ｈ２Ｏ、ＮＨ４ＯＨ水溶液（２５％、１０mL）、次いで食塩水で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（勾配：ヘプタン中のＥｔＯＡｃ）により、２−ブロモ−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン（０．４２ｇ、９５％）を白色固体として与えた。ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：３４４．１；３４６．１［（Ｍ＋Ｈ）＋］。
【００８１】
（３）型の中間体の調製
中間体（3-1）：
（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリミジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−アミン
【００８２】
【化２１】
2021511306.tif 000027
工程１：
封管内で、Ｎ−［（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］カルバミン酸tert−ブチル（５００mg、２．２１mmol）をＥｔＯＨ（１０mL）に溶解し、４−クロロ−６−メチルピリミジン（８６９mg、６．６３mmol）を加え、続いてトリエチルアミン（８９４mg、１．２３mL、８．８４mmol）を加えた。反応混合物を１３０℃で一晩撹拌した。粗反応混合物を真空で濃縮した。残渣をＣＨ２Ｃｌ２２０mL及び水２０mLで希釈した。有機相をＣＨ２Ｃｌ２（３×２０mL）で抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥させて真空で濃縮した。粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン中の０％〜１００％ ＥｔＯＡｃ）により精製して、Ｎ−［（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリミジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］カルバミン酸tert−ブチルを黄色の固体として与えた（４９６mg、収率７１％）。ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：３１９．２［（Ｍ＋Ｈ）＋］
【００８３】
工程２：
ＣＨ２Ｃｌ２（８mL）中のＮ−［（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリミジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］カルバミン酸tert−ブチル（２６０mg、８１７μmol）の淡黄色の溶液にＴＦＡ（９３１mg、６２９μl、８．１７mmol）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌して、真空で濃縮した。粗物質をイオン交換カラム（Si-SCX-2、１０ｇ、ＭｅＯＨで洗浄してＭｅＯＨ（ＮＨ３ ２M）で遊離させた）により精製して、（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリミジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−アミン（3-1）（１９５mg、８０４μmol、収率９８．５％）を与え、これを更に精製することなく次の工程に使用した。ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：２１９．２［（Ｍ＋Ｈ）＋］
【００８４】
中間体（3-2）：
（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−メトキシピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−アミン
【００８５】
【化２２】
2021511306.tif 000028
工程１：
中間体（3-1）の調製（工程１）と同様に、封管内のＮ−［（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］カルバミン酸tert−ブチル（２．００ｇ、８．８４mmol）及び３，５−ジクロロピリダジン（２．０ｇ、１３．４mmol）から９０℃でＥｔＯＨを溶媒として使用し、Ｅｔ３Ｎ（３．６３ｇ、５．０mL、３５．９mmol）の存在下、Ｎ−［（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−クロロピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］カルバミン酸tert−ブチル（１．７１ｇ、５４％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：３３９．２［（Ｍ＋Ｈ）＋］。
【００８６】
工程２：
封管内のＭｅＯＨ（２２mL）中のＮ−［（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−クロロピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］カルバミン酸tert−ブチル（９６３mg、２．７０mmol）の溶液に、ＮａＯＭｅのメタノール溶液（２５％、１．９mL、８．３mmol）を加えた。反応混合物を８５℃で一晩加熱した。反応混合物をIsolute HM-Nに吸着させ、カラムクロマトグラフィーによりＮ−［（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−メトキシピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］カルバミン酸tert−ブチル（３６２mg、３８％）を白色固体として与えた。ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：３３５．２［（Ｍ＋Ｈ）＋］。
【００８７】
工程３：
中間体（3-1）の調製（工程２）と同様に、ＣＨ２Ｃｌ２中のＮ−［（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−メトキシピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］カルバミン酸tert−ブチル（０．９３ｇ、２．７２mmol）からＴＦＡ（１．１２ｇ、０．７６mL、９．８６mmol）の存在下、（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−メトキシピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−アミン（２２５mg、９６％）が白色固体として得られ、これを更に精製することなく次の工程に直接使用した。ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：２３５．２［（Ｍ＋Ｈ）＋］。
【００８８】
中間体（3-3）：
（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−アミン
【００８９】
【化２３】
2021511306.tif 000029
工程１：
ジオキサン（５０mL）中のＮ−［（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−クロロピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］カルバミン酸tert−ブチル（０．８４ｇ、２．４８mmol、本明細書に上記）の撹拌溶液に、メチルボロン酸（０．５９ｇ、９．９２mmol）、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン−パラジウム（II）ジクロリド・ＣＨ２Ｃｌ２錯体（０．２０ｇ、０．２５mmol）、炭酸セシウム（３．６３ｇ、１１．２mmol）及びＨ２Ｏ（５．０mL）を加えた。反応混合物を８５℃で４８時間加熱し、次に別の１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン−パラジウム（II）ジクロリド・ＣＨ２Ｃｌ２錯体（０．２０ｇ、０．２５mmol）を加え、２，４，６−トリメチル−１，３，５，２，４，６−トリオキサトリボリナン（０．９４ｇ、７．４４mmol）を加えた。撹拌を更に２０時間続け、ＲＴに冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、Celite（登録商標）（「珪藻土」）で濾過して真空下で濃縮した。カラムクロマトグラフィーにより、Ｎ−［（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］カルバミン酸tert−ブチル（０．１５ｇ、１８％）を淡灰色の固体として与えた。ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：３１９．３［（Ｍ＋Ｈ）＋］。
【００９０】
工程２：
中間体（3-1）の調製（工程２）と同様に、ＣＨ２Ｃｌ２中のＮ−［（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］カルバミン酸tert−ブチル（０．１４ｇ、０．４４mmol）から、ＴＦＡの存在下で、（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−アミン（９０mg、９５％）が白色の固体として得られ、これを更に精製することなく次の工程に直接使用した。ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：２１９．３［（Ｍ＋Ｈ）＋］。
【００９１】
１．３）一般手順１：ブッフバルトカップリング反応
１，４−ジオキサン中の誘導体（２）の溶液に、中間体（３）１．１当量を加えた。反応混合物を脱気して、２−ジ−tert−ブチルホスフィノ−２’，４’，６’−トリイソプロピルビフェニル（CAS564483-19-8）の存在下のパラジウム触媒［ジブロモ−ビス（トリ−tert−ブチル）ホスフィン−パラジウム（０．１当量、CAS185812-86-6）又はトリ（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（CAS51364-51-3）のいずれか］及びＮａＯｔＢｕ（２．１当量）を加えた。反応の終了まで（通常２〜８時間）反応混合物を１００℃で加熱して、真空で濃縮した。カラムクロマトグラフィー又は逆相分取ＨＰＬＣのいずれかにより精製を行って、所望の生成物を与えた。
【００９２】
［実施例１及び２］
（９Ｒ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリミジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン、及び
（９Ｓ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリミジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン
【００９３】
【化２４】
2021511306.tif 000030
中間体（3.1）：（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリミジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−アミンと化合物：２−ブロモ−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン（２）とのブッフバルトカップリングの一般手順を用いて、続いてエナンチオマーのキラルＨＰＬＣ分離により、（９Ｒ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリミジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン １３mgを白色の固体（ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：４８２．２［（Ｍ＋Ｈ）＋］）として、及び（９Ｓ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリミジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン １３mgを白色の固体（ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：４８２．２［（Ｍ＋Ｈ）＋］）として調製した。
【００９４】
［実施例３及び４］
（９Ｒ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メトキシピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン、及び
（９Ｓ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メトキシピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン
【００９５】
【化２５】
2021511306.tif 000031
中間体（3.2）：（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−メトキシピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−アミンと化合物：２−ブロモ−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン（２）とのブッフバルトカップリングの一般手順を用いて、続いてエナンチオマーのキラルＨＰＬＣ分離により、（９Ｒ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メトキシピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン ３３mgを白色の固体（ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：４９８．３［（Ｍ＋Ｈ）＋］）として、及び（９Ｓ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メトキシピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン ３２mgを白色の固体（ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：４９８．３［（Ｍ＋Ｈ）＋］）として調製した。
【００９６】
［実施例５及び６］
（９Ｒ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン、及び
（９Ｓ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン
【００９７】
【化２６】
2021511306.tif 000032
中間体（3.3）：（１Ｒ，５Ｓ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−アミンと化合物：２−ブロモ−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン（２）とのブッフバルトカップリングの一般手順を用いて、続いてエナンチオマーのキラルＨＰＬＣ分離により、（９Ｒ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン ２１mgを白色の固体（ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：４８２．３［（Ｍ＋Ｈ）＋］）として、及び（９Ｓ）−９−（３−クロロ−５−フルオロ−フェニル）−Ｎ−［（１Ｓ，５Ｒ，８Ｓ）−３−（６−メチルピリダジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］アゼピン−２−アミン ２１mgを白色の固体（ＭＳ（ＥＳ＋）m/z：４８２．３［（Ｍ＋Ｈ）＋］）として調製した。
【００９８】
２）生物学的実施例
２．１）アッセイ手順：細胞内γ−セクレターゼアッセイ
後述の試験により化合物を調査した。
スウェーデン型二重変異（Ｋ５９５Ｎ／Ｍ５９６Ｌ）を伴うヒトＡＰＰ６９５を過剰発現するヒト神経膠腫Ｈ４細胞を、１０％ ＦＣＳ、０．２mg/l ハイグロマイシンＢを含有するＩＭＤＭ培地で９６ウェルプレートに３０，０００細胞／ウェル／１００μlで蒔き、３７℃、５％ ＣＯ２でインキュベートした。
播種の３〜４時間後、化合物を培地に希釈し、１．５倍濃縮液として５０μｌを添加して、最終濃度を達成する。化合物のインキュベーションは２４時間実施される。最終用量は、典型的には半対数目盛りで４μlから０．００１３μlに下がる範囲であり、８点の用量作用曲線が得られる。
ビヒクルのみ及び基準化合物を使用する適切な対照をこのアッセイに適用した。Ｍｅ２ＳＯの最終濃度は０．４％とした。
３７℃、５％ ＣＯ２でのインキュベーション後、AlphaLisa（登録商標）アッセイキット（Human Amyloid beta 1-42、Perkin Elmer Inc.）を用いて、上清を分泌Ａβ４２の定量に付した。細胞培養上清２０μlをアッセイプレートに移した。次に、AlphaLisa結合捕捉抗体とビオチン化検出抗体との混合物１０μlを添加し、アッセイプレートを軽く振盪しながら室温で３時間インキュベートした。ドナー（Donor）ビーズ２０μlを更に添加後、アッセイプレートを室温で３０分間、直接光に曝さずに一定の振盪をしながらインキュベートした。次に６８０nmでの励起と５７０nmでの発光を伴う内蔵プログラムを使用して、Paradigm AlphaLisaリーダーでアッセイプレートを読み取った。
次に測定された信号を使用して、XLfit 5.3ソフトウェア（IDBS Ltd製）を使用した非線形回帰フィット分析により、Ａβ４２分泌の阻害のＩＣ５０値を算出した。
【００９９】
２．２）結果
以下の表は、Ａβ４２分泌の阻害に関する全ての化合物のデータを示す：
【０１００】
【表５】
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【国際調査報告】
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