(57)【要約】  本発明は、水性眼科用医薬組成物であって、ａ）少なくとも０．４ｗ／ｖ％の下記式のビラスチン【化１】2021511317.tif 000012またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であって、該ビラスチンまたはその塩もしくは溶媒和物が上記医薬組成物中に完全に溶解しているもの；ｂ）少なくとも１種のβ−シクロデキストリン；およびｃ）少なくとも１種の薬学的に許容される水溶性ゲル化剤を含有し、ｐＨが４〜９の範囲である、水性眼科用医薬組成物、ならびに、Ｈ１ヒスタミン受容体によって媒介される状態（例えば、アレルギー性障害または疾患）の治療および／または予防におけるその使用に関する。本発明は、アレルギー性結膜炎の治療および／または予防に関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
水性眼科用医薬組成物であって、
ａ）少なくとも０．４ｗ／ｖ％のビラスチン、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であって、該ビラスチンまたはその塩もしくは溶媒和物が前記水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解しているもの；
ｂ）アルキル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシアルキルβ−シクロデキストリン、カルボキシアルキル−β−シクロデキストリン、カルボニル−β−シクロデキストリン、スルホアルキルエーテルβ−シクロデキストリンおよびそれらの混合物からなる群から選択される、少なくとも１種のβ−シクロデキストリン；および
ｃ）ヒアルロン酸、ジェランガム、グアーガム、ローカストビーンガム、アルギン酸、ポビドン、κ−カラギーナン、アルギン酸ガム、デキストラン、デキストラン硫酸塩、キトサンおよびそれらの混合物からなる群から選択される、少なくとも１種の薬学的に許容される水溶性ゲル化剤またはその許容される塩；
を含有し、前記組成物のｐＨ値が４〜９の範囲（該範囲の下限値と上限値の両方が含まれる）である、水性眼科用医薬組成物。
【請求項２】
少なくとも０．６ｗ／ｖ％のビラスチンまたはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含有し、該ビラスチンまたはその塩もしくは溶媒和物が前記水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解している、請求項１に記載の眼科用医薬組成物。
【請求項３】
前記少なくとも１種の薬学的に許容される水溶性ゲル化剤が、ヒアルロン酸、ジェランガム、またはそれらの許容される塩である、請求項１または２のいずれか一項に記載の眼科用医薬組成物。
【請求項４】
請求項１から３のいずれか一項に記載の眼科用医薬組成物であって、
ａ）少なくとも０．６ｗ／ｖ％以上１．０ｗ／ｖ％以下のビラスチンまたはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であって、該ビラスチンまたは該その塩もしくは溶媒和物が前記水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解しているもの；
ｂ）アルキル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシアルキルβ−シクロデキストリン、カルボキシアルキル−β−シクロデキストリン、カルボニル−β−シクロデキストリン、スルホアルキルエーテルβ−シクロデキストリンおよびそれらの混合物からなる群から選択される、少なくとも１種のβ−シクロデキストリンであって、該β−シクロデキストリンの濃度が少なくとも５ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下であるもの；および
ｃ）ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩であって、該ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩の濃度が少なくとも０．０５ｗ／ｖ％以上１ｗ／ｖ％以下であるもの；
を含有する、眼科用医薬組成物。
【請求項５】
前記β−シクロデキストリンがヒドロキシアルキルβ−シクロデキストリンである、請求項１から４のいずれか一項に記載の眼科用医薬組成物。
【請求項６】
前記ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩が６０００００Ｄａ以下の分子量を有する、請求項１から５のいずれか一項に記載の眼科用医薬組成物。
【請求項７】
前記ｐＨが５〜８の範囲（該範囲の下限値と上限値の両方が含まれる）である、請求項１から６のいずれか一項に記載の眼科用医薬組成物。
【請求項８】
前記組成物が約２５０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約６００ｍＯｓｍ／ｋｇの範囲の浸透圧を有する、請求項１から７のいずれか一項に記載の眼科用医薬組成物。
【請求項９】
グリセリン、ソルビトール、マンニトール、エリスリトール、アラビトール、キシリトール、リビトール、ガラクチトール、マルチトール、マクロゴール、ラクチトール、およびそれらの混合物からなる群から選択される等張化剤をさらに含有する、請求項１から８のいずれか一項に記載の眼科用医薬組成物。
【請求項１０】
請求項１から９のいずれか一項に記載の眼科用医薬組成物であって、
ａ）少なくとも０．６ｗ／ｖ％以上１．０ｗ／ｖ％以下のビラスチンまたはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であって、該ビラスチンまたは該その塩もしくは溶媒和物が前記水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解しているもの；
ｂ）少なくとも１種のヒドロキシアルキルβ−シクロデキストリンであって、該β−シクロデキストリンの濃度が少なくとも５ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下であるもの；
ｃ）ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩であって、該ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩の濃度が少なくとも０．０５ｗ／ｖ％以上１ｗ／ｖ％以下であるもの；
ｄ）セルロースのエーテル誘導体、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、およびそれらの混合物からなる群から選択される、０．００１ｗ／ｖ％〜１５ｗ／ｖ％の少なくとも１種の薬学的に許容される水溶性ポリマー；および
ｅ）グリセリン、ソルビトール、マンニトール、エリスリオール、アラビトール、キシリトール、リビトール、ガラクチトール、マルチトール、マクロゴール、ラクチトール、およびそれらの混合物からなる群から選択される、０．０５ｗ／ｖ％〜５ｗ／ｖ％の少なくとも１種の等張化剤
を含有する、眼科用医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１から１０のいずれか一項に記載の眼科用医薬組成物であって、
ａ）少なくとも０．６ｗ／ｖ％以上１．０ｗ／ｖ％以下のビラスチンまたはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であって、該ビラスチンまたは該その塩もしくは溶媒和物が前記水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解しているもの；
ｂ）少なくとも１種のヒドロキシアルキルβ−シクロデキストリンであって、該β−シクロデキストリンの濃度が少なくとも５ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下であるもの；
ｃ）ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩であって、該ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩の濃度が少なくとも０．０５ｗ／ｖ％以上１ｗ／ｖ％以下であるもの；
ｄ）０．００１ｗ／ｖ％〜１５ｗ／ｖ％のセルロースのエーテル誘導体；および
ｅ）０．０５ｗ／ｖ％〜５ｗ／ｖ％のグリセリン
を含有する、眼科用医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１から１１のいずれか一項に記載の眼科用医薬組成物であって、
ａ）少なくとも０．６ｗ／ｖ％以上１．０ｗ／ｖ％以下のビラスチンまたはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であって、該ビラスチンまたは該その塩もしくは溶媒和物が前記水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解しているもの；
ｂ）少なくとも１種のヒドロキシアルキルβ−シクロデキストリンであって、該β−シクロデキストリンの濃度が少なくとも５ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下であるもの；
ｃ）ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩であって、該ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩の濃度が少なくとも０．０５ｗ／ｖ％以上１ｗ／ｖ％以下であるもの；
ｄ）０．００５ｗ／ｖ％〜０．１ｗ／ｖ％のメチルセルロース；および
ｅ）０．５ｗ／ｖ％〜２ｗ／ｖ％のグリセリン
を含有する、眼科用医薬組成物。
【請求項１３】
１日１回の眼科用医薬組成物であることを特徴とする、請求項１から１２のいずれか一項に記載の眼科用医薬組成物。
【請求項１４】
医薬として使用するための、請求項１から１３のいずれか一項に記載の水性眼科用医薬組成物。
【請求項１５】
Ｈ１ヒスタミン受容体の拮抗作用によって改善しやすい障害または疾患の治療および／または予防に使用するための、請求項１から１３のいずれか一項に記載の水性眼科用医薬組成物。
【請求項１６】
前記Ｈ１ヒスタミン受容体の拮抗作用によって改善しやすい障害または疾患が、眼のアレルギー性障害、アレルギー性疾患またはアレルギー症状である、請求項１５に記載の使用のための水性眼科用医薬組成物。
【請求項１７】
前記Ｈ１ヒスタミン受容体の拮抗作用によって改善しやすい障害または疾患が、鼻炎、鼻結膜炎、アレルギー性結膜炎、春季角結膜炎、アトピー性角結膜炎、巨大乳頭結膜炎、眼刺激、掻痒感、発赤、流涙、結膜浮腫、乾性角膜炎、乾性角結膜炎または機能不全涙症候群である、請求項１５または１６のいずれか一項に記載の使用のための水性眼科用医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、１日１回の投与に適した高濃度のビラスチンを含有する水性医薬組成物、ならびに抗ヒスタミン薬および抗アレルギー性眼科用医薬組成物としてのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒスタミンが、アレルギー型疾患、例えばアレルギー性鼻炎、結膜炎、鼻結膜炎、皮膚炎、蕁麻疹および喘息において非常に重要な役割を果たしていることは以前から知られている。Ｈ１受容体ヒスタミンレベルで作用する抗ヒスタミン化合物は、そのような状態を治療するのに有用である。
【０００３】
アレルギー症状が主に眼性である場合、全身治療よりも局所治療が好ましいようである。局所薬は、全身薬よりも作用の発現が早く（数分以内）、優れているため、アレルギー応答を直ちに妨害することができる。結膜抗原チャレンジモデルを用いて直接比較したいくつかの研究では、アレルギー性結膜炎の治療において、局所薬が全身性抗ヒスタミン薬よりも優れていることが実証されている。経口抗ヒスタミン薬は、眼だけでなく他のアレルギー症状も緩和することができるが、局所眼薬と比較して作用の発現が遅れる。また、局所抗ヒスタミン薬は、結膜に浸透するのに必要な用量が少なく、局所使用による血清レベルが無視できるため、全身性抗ヒスタミン薬に比べて副作用が少ない。
【０００４】
アレルギー性結膜炎を治療するための現在入手可能な局所製品の有効性にもかかわらず、不完全な症状緩和を感じている患者には、１日１回の投薬という利便性で１日中症状の緩和をもたらす製品を使用することが有益である可能性が高い。１日１回の投薬は費用対効果が高く、患者の服薬遵守を向上させ、さらに重要なことには、患者の生活の質の向上をもたらすので、より頻繁な投薬を避けることは患者にとってより利便性が高い。
【０００５】
文献ＥＰ０８１８４５４Ａ１およびＥＰ０５８０５４１Ａ１は、選択的Ｈ１抗ヒスタミン活性を有しかつ催不整脈作用の無いベンズイミダゾール化合物を開示している。また、特許出願ＥＰ３０４０３３４Ａ１は、中枢神経系および心血管系に対する活性が無い、強力な選択的Ｈ１抗ヒスタミン活性を有するベンズイミダゾール化合物を開示している。
【０００６】
上記の性質を有する特定の化合物は、２−［４−（２−｛４−［１−（２−エトキシエチル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル］−１−ピペリジニル｝エチル）フェニル］−２−メチルプロパン酸（別名ビラスチン）であり、下記式：
【化１】
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を有し、スペインのＦａｅｓ  Ｆａｒｍａ社によって創製された。ビラスチンは、鎮静副作用、心毒性作用、および肝代謝を伴わないＨ１アンタゴニストベンズイミダゾール化合物である。さらにビラスチンは、アレルギー性鼻結膜炎および蕁麻疹の対症療法にも有効であることが証明されている。
【０００７】
ビラスチンは１９９９年１月に初めて開示され、それ以来、抗ヒスタミン薬を含有する多くの点眼液が開示され市販されており、例えば、ＥＰ２７０９６１０Ｂ１は高濃度のオロパタジンを含有する局所点眼液を開示しており、食品医薬品局（ＦＤＡ）は最近、０．７７％オロパタジン塩酸塩点眼液の新製剤を承認した。しかしながら、１日１回の投与に適した高濃度のビラスチンを含有する眼科用医薬組成物を提供することが可能な開示は、先行技術において一つも存在しない。
【０００８】
特許出願ＷＯ９４１３２９９Ａ１は、１−（２−エトキシエチル）−２−（４−メチル−１−ホモピペラジニル）−ベンズイミダゾール（別名エメダスチン）の点眼液を開示している。ビラスチンと構造的に類似しているにもかかわらず（エメダスチンは、イミダゾール環の窒素原子にエトキシエチル鎖を結合して含む、ベンズイミダゾール誘導体である）、エメダスチンの水溶解度はビラスチンの水溶解度よりもはるかに高いため、エメダスチン（濃度約８ｍｇ／ｍＬ）を、例えばＥＤＴＡ、ＮａＣｌ、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）などの当業者に公知の一般的な賦形剤や、ｐＨ調整剤であるＮａＯＨ／ＨＣｌおよびトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンと共に含有する点眼液の提供が可能になる。
【０００９】
ビラスチン投与による眼のアレルギー症状の治療を扱う当該技術分野における唯一の開示は、すべて経口投与のビラスチンに言及しており、この分子の点眼液を提供することの難しさを強調している。例えば、Ｈｏｒａｋ  Ｆら、Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１０年，（５９）３９１〜３９８またはＪ  Ｂａｒｔｒａら、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ａｌｌｅｒｇｏｌ．Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２０１１年，第２１巻，補遺３：２４〜３３は、ビラスチン錠の開示のみである。
【００１０】
ＵＳ２００７２６５２４７は、ビラスチンを含有する局所製剤を開示している。
【００１１】
ＷＯ０３０８９４２５Ａ１は、ビラスチンが点眼剤に使用可能であることを開示しているが、上記溶液を成功裏に調製する方法に関する技術的な詳細を何ら提供していない。ＷＯ２００７０４７２５３Ａ２は、ヒドロキシブテニルシクロデキストリンを用いて抗真菌アゾールの水溶解度を高める方法を開示している。ＷＯ２００９００３１９９Ａ１は、鼻および眼の組織に対するコルチコステロイド、抗ヒスタミン薬およびスルホアルキルエーテルシクロデキストリン誘導体を含有する水溶液製剤を開示している。
【００１２】
高濃度ビラスチンの眼科用医薬組成物を提供することが可能な先行技術開示が１つも存在しないだけでなく、アレルギーの徴候および症状の日常的な軽減のためのオロパタジン対ビラスチンの使用を先行技術が明確に指向していることも考慮すると、この問題は明らかである。Ｂｅａｕｒｅｇａｒｄ  Ｃ．ら（ＡＲＶＯ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  Ａｂｓｔｒａｃｔ、２００８年５月）はさらに、ビラスチンが、生体内においてオロパタジンの抗ヒスタミン作用の効力または持続時間に匹敵しないことを教示している。
【００１３】
したがって、上記ベンズイミダゾール化合物を高濃度に含有する１日１回の投与に適した点眼液を提供することが、当該技術分野で必要とされている。
【発明の概要】
【００１４】
本発明の発明者らは、驚くべきことに、ビラスチンを含有する本発明の眼科用製剤により、上記化合物の眼に対する有効性の持続時間が予想外に増大することを見出した。ビラスチンならびにその比較抗ヒスタミン化合物であるオロパタジンおよびアゼラスチンに関する前臨床的研究では、このような有効性の増大が認められなかったことを考慮すると、これらの知見は特に驚くべきものである。したがって本発明は、ビラスチンを含有する１日１回の眼科用製剤を初めて提供するものである。
【００１５】
したがって、第一の態様において、本発明は眼科用医薬組成物であって、
ａ）少なくとも０．４ｗ／ｖ％のビラスチン、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であって、該ビラスチンまたはその塩もしくは溶媒和物が上記水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解しているもの；
ｂ）アルキル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシアルキルβ−シクロデキストリン、カルボキシアルキル−β−シクロデキストリン、カルボニル−β−シクロデキストリン、スルホアルキルエーテルβ−シクロデキストリンおよびそれらの混合物からなる群から選択される、少なくとも１種のβ−シクロデキストリン；および
ｃ）ヒアルロン酸、ジェランガム、グアーガム、ローカストビーンガム、アルギン酸、ポビドン、κ−カラギーナン、アルギン酸ガム、デキストラン、デキストラン硫酸塩、キトサンおよびそれらの混合物からなる群から選択される、少なくとも１種の薬学的に許容される水溶性ゲル化剤またはその許容される塩；
を含有し、上記組成物のｐＨ値が４〜９の範囲（該範囲の下限値と上限値の両方が含まれる）である、眼科用医薬組成物を提供する。
【００１６】
第二の態様において、本発明は、医薬として使用するための上記の水性眼科用医薬組成物に関する。
【００１７】
第三の態様において、本発明は、Ｈ１ヒスタミン受容体の拮抗作用によって改善しやすい障害または疾患の治療および／または予防に使用するための、上記の水性眼科用医薬組成物に関する。
【００１８】
本発明の別の態様は、上記の水性眼科用医薬組成物、さらに薬学的に許容される担体、アジュバントまたはビヒクルに関する。
【００１９】
本発明の別の態様は、Ｈ１ヒスタミン受容体の拮抗作用によって改善しやすい障害または疾患の治療および／または予防のための医薬の製造における上記の水性眼科用医薬組成物の使用に関する。
【００２０】
本発明の別の態様は、Ｈ１ヒスタミン受容体の拮抗作用によって改善しやすい障害または疾患の治療および／または予防のための方法に関し、該方法は、このような治療および／または予防を必要とする被験体に、上記で定義された水性眼科用医薬組成物中の治療有効量のビラスチンを投与することを包含する。
【００２１】
これらの態様およびその好ましい実施形態はまた、本明細書中以下にさらに記載され、特許請求の範囲に定義されている。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】ｔ０での種々のｐＨの媒体中における９ｗ／ｖ％の５種のβ−シクロデキストリン存在下での６．５ｍｇ／ｍＬを超える濃度のビラスチン溶液の安定性を示す図である。
【図２】ｔ１での種々のｐＨの媒体中における９ｗ／ｖ％の５種のβ−シクロデキストリン存在下での６．５ｍｇ／ｍＬを超える濃度のビラスチン溶液の安定性を示す図である。
【図３】ビラスチン０．４ｗ／ｖ％およびＨＰＢ９ｗ／ｖ％を含有する本発明の組成物についての眼での平均保持時間（ＡＲＴ）を示す図である。ＡＨはヒアルロン酸ナトリウム、ＧＧはジェランガム、ＭＣはメチルセルロースである。
【図４】モルモットのヒスタミン誘発結膜炎に対する本発明の眼科用製剤の作用を示す図である。
【図５】３種のビラスチン濃度（ビラスチン０．２ｗ／ｖ％、ビラスチン０．４ｗ／ｖ％およびビラスチン０．６ｗ／ｖ％）について、ベースライン、１６時間、８時間および１５分での結膜アレルゲンチャレンジ（ＣＡＣ（登録商標））後の種々の時間（分）に測定された、最小二乗平均値（ＬＳＭｅａｎｓ）を用いて活性とビヒクルの差（Ａｃｔｉｖｅ−Ｖｅｈｉｃｌｅ）として算出した平均眼掻痒感スコアで表された治療差を示す図である。
【図６】ベースライン、１６時間、８時間および１５分でのＣＡＣ（登録商標）後の種々の時間（分）に測定された平均眼掻痒感スコア（０〜４の尺度）を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
発明の詳細な説明
本発明者らは驚くべきことに、ビラスチンと、少なくとも１種のβ−シクロデキストリンおよび少なくとも１種の薬学的に許容される水溶性ゲル化剤またはその許容される塩との組み合わせが、眼において優れた持続性作用を示すので、ビラスチンを含有する１日１回の眼科用製剤の提供を可能にし、眼科用途に最適であることを見出した。驚くべきことに、これらの結果は、前臨床研究および臨床研究に関する実施例に示されるように、前臨床治験では観察できなかった。
【００２４】
したがって、第一の態様において、本発明は眼科用医薬組成物であって、
ａ）少なくとも０．４ｗ／ｖ％のビラスチン、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であって、該ビラスチンまたはその塩もしくは溶媒和物が上記水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解しているもの；
ｂ）アルキル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシアルキルβ−シクロデキストリン、カルボキシアルキル−β−シクロデキストリン、カルボニル−β−シクロデキストリン、スルホアルキルエーテルβ−シクロデキストリンおよびそれらの混合物からなる群から選択される、少なくとも１種のβ−シクロデキストリン；および
ｃ）ヒアルロン酸、ジェランガム、グアーガム、ローカストビーンガム、アルギン酸、ポビドン、κ−カラギーナン、アルギン酸ガム、デキストラン、デキストラン硫酸塩、キトサンおよびそれらの混合物からなる群から選択される、少なくとも１種の薬学的に許容される水溶性ゲル化剤またはその許容される塩；
を含有し、上記組成物のｐＨ値が４〜９の範囲（該範囲の下限値と上限値の両方が含まれる）である、眼科用医薬組成物を提供する。
【００２５】
ビラスチン
本発明の水性眼科用医薬組成物は、下記式のビラスチン
【化２】
2021511317.tif 000004
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含有する。本化合物は、２−［４−（２−｛４−［１−（２−エトキシエチル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル］−１−ピペリジニル｝エチル）フェニル］−２−メチルプロパン酸（別名ビラスチン）である。ビラスチンの合成は、文献ＥＰ０８１８４５４Ａ１、ＥＰ０５８０５４１Ａ１およびＥＰ３０４０３３４Ａ１に記載されている。
【００２６】
ビラスチンは、塩または溶媒和物の形態であってもよく、好ましくは薬学的に許容される塩または溶媒和物の形態であってもよい。
【００２７】
本発明はまた、本明細書に記載された化合物の「塩」を提供する。例示として、上記塩は酸付加塩、塩基付加塩または金属塩であってもよく、当業者に公知の従来の化学的方法によって、塩基部分または酸部分を含有する親化合物から合成され得る。例えば、このような塩は一般に、上記化合物の遊離酸または遊離塩基の形態を、水中もしくは有機溶媒中またはこれら２つの混合物中で、化学量論量の適切な塩基または酸と反応させることによって調製される。一般に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、アセトン、イソプロパノールまたはアセトニトリルなどの非水系媒体が好ましい。酸付加塩の実例としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩などの無機酸付加塩や、例えば、酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩などの有機酸付加塩が挙げられる。塩基付加塩の実例としては、例えば、アンモニウム塩などの無機塩基塩や、例えば、エチレンジアミン、エタノールアミン、Ｎ，Ｎ−ジアルキレンエタノールアミン、トリエタノールアミン、グルタミン、アミノ酸塩基性塩などの有機塩基塩が挙げられる。金属塩の実例としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、アルミニウム塩およびリチウム塩が挙げられる。
【００２８】
本発明による用語「溶媒和物」は、非共有結合を介して別の分子（ほとんどの場合、極性溶媒）に結合されている、本発明による活性化合物の任意の形態を意味するものと理解されるべきである。溶媒和物の例としては、水和物およびアルコラートが挙げられる。溶媒和の方法は、先行技術において一般に公知である。
【００２９】
本発明の化合物はまた、１つ以上の同位体濃縮原子の存在のみが異なる化合物を包含することが意図される。例えば、重水素もしくは三重水素による水素の置換、または１３Ｃ−もしくは１４Ｃ−濃縮炭素による炭素の置換、または１５Ｎ−濃縮窒素による窒素の置換を除く本構造を有する化合物は、本発明の範囲内である。
【００３０】
少なくとも０．４ｗ／ｖ％の濃度とは、ちょうど１ｍＬの水に４ｍｇより多いビラスチンが完全に溶解して、すなわち沈殿の兆候をほとんど示さずに、存在することを意味する。本発明において、特に明記しない限り、パーセンテージはすべてｗ／ｖ単位である。別の実施形態において、ビラスチンは少なくとも０．６ｗ／ｖ％、好ましくは少なくとも０．７ｗ／ｖ％の濃度で本発明の医薬組成物中に完全に溶解している。別の実施形態において、ビラスチンは少なくとも０．６ｗ／ｖ％以上１．０ｗ／ｖ％以下の濃度で本発明の医薬組成物中に完全に溶解している。特定の実施形態において、医薬組成物は、少なくとも０．４ｗ／ｖ％、少なくとも０．６ｗ／ｖ％、少なくとも０．７ｗ／ｖ％、少なくとも０．８ｗ／ｖ％、少なくとも０．９ｗ／ｖ％、または少なくとも０．６ｗ／ｖ％以上１．０ｗ／ｖ％以下のビラスチンを、ビラスチンが完全に溶解した状態で含有している。別の特定の実施形態において、医薬組成物は、少なくとも０．４ｗ／ｖ％、少なくとも０．６ｗ／ｖ％、少なくとも０．７ｗ／ｖ％、少なくとも０．８ｗ／ｖ％、少なくとも０．９ｗ／ｖ％、または少なくとも０．６ｗ／ｖ％以上１．０ｗ／ｖ％以下のビラスチンを、ビラスチンが完全に溶解した状態で含有している。好ましい実施形態において、ビラスチンは少なくとも０．６ｗ／ｖ％以上１．０ｗ／ｖ％以下の濃度で本発明の医薬組成物中に完全に溶解している。
【００３１】
シクロデキストリン
本発明との関連において、シクロデキストリン（ＣＤ）とは、１、４位で連結された５個以上のβ−Ｄ−グルコピラノース単位からなる環状構造であり、典型的には、１個のシクロデキストリン分子中に６個（α−シクロデキストリン）、７個（β−シクロデキストリン）、８個（γ−シクロデキストリン）または９個（δ−シクロデキストリン）の糖単位を有する。
【００３２】
ＭＳ値（平均モル置換度）は、グルコピラノース１モルあたりの置換基の平均モル数である。例えば、β−シクロデキストリンの場合、β−シクロデキストリン１コアあたりの平均置換基数は、ＭＳ値に７を乗じて算出され得る（β−シクロデキストリンはシクロデキストリン１分子あたり７個の糖単位を含有する）。この値の明確な表記法はＤＳ（置換度）である。
【００３３】
非晶質および結晶質シクロデキストリンはいずれも本願の範囲内である。本明細書中で使用される場合、用語「シクロデキストリン」は、シクロデキストリンまたはシクロデキストリン誘導体を指す場合がある。シクロデキストリンは市販されているか、または当該技術分野で周知の方法により合成され得る。シクロデキストリンの例としては、修飾または未修飾のα−、β−、γ−およびδ−シクロデキストリンが挙げられるが、これらに限定されない。本発明のシクロデキストリンは、β−シクロデキストリンである。本発明のシクロデキストリン誘導体、特にβ−シクロデキストリン誘導体としては、ＯＨ基の一部または全部がＯＲ基に変換されているものが挙げられる。上記誘導体としては、例えばメチル化、エチル化、プロピル化およびブチル化シクロデキストリンなどのＣ１〜６アルキル基を有し、Ｒがメチル基、エチル基、プロピル基またはブチル基である誘導体；例えばヒドロキシプロピルシクロデキストリンまたはヒドロキシエチルシクロデキストリンなどのヒドロキシアルキル置換基を有し、Ｒが−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３基またはＣＨ２ＣＨ２ＯＨ基である誘導体；例えばマルトース結合シクロデキストリンなどの分岐シクロデキストリン；カチオン性シクロデキストリン；四級アンモニウム；例えばアルボキシメチルシクロデキストリン、シクロデキストリン硫酸塩およびシクロデキストリンコハク酸塩などのアニオン性シクロデキストリン；例えばカルボキシメチル／第４級アンモニウムシクロデキストリンなどの両性シクロデキストリンが挙げられる。他の特定の修飾としては、１つ以上のヒドロキシアルキルエーテル（例えば、ＲはＣ１〜６アルキレンヒドロキシ）部分；１つ以上のスルホアルキルエーテル（例えば、ＲはＣ２〜６アルキレンＳＯ３−）部分；カルボキシアルキル（例えば、ＲはＣ（Ｏ）Ｃ１〜６アルキル）部分；置換フェノキシ部分；トリプトファン部分；またはそれらの混合が挙げられる。シクロデキストリン１分子あたりのＯＲ基の総数は、置換／修飾度として定義される。
【００３４】
本発明において、眼科用医薬組成物のシクロデキストリンはβ−シクロデキストリンである。好ましい実施形態において、β−シクロデキストリンは、アルキル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシアルキルβ−シクロデキストリン、カルボキシアルキル−β−シクロデキストリン、カルボニル−β−シクロデキストリン、スルホアルキルエーテルβ−シクロデキストリンおよびそれらの混合物からなる群から選択される。
【００３５】
１つの実施形態において、β−シクロデキストリンはアルキル−β−シクロデキストリンである。好ましいアルキル−β−シクロデキストリンとしては、メチル−β−シクロデキストリン；ジメチル−β−シクロデキストリン；トリメチル−β−シクロデキストリン；エチル−β−シクロデキストリン；ジエチル−β−シクロデキストリン；プロピル−β−シクロデキストリン；およびブチル−β−シクロデキストリンが挙げられる。より好ましい実施形態において、β−シクロデキストリンは、メチル−β−シクロデキストリンまたはジメチル−β−シクロデキストリンからなる群から選択される。本発明との関連において、「アルキル−β−シクロデキストリン」という用語が使用される場合、アルキル部分が任意に置換されているβ−シクロデキストリンを包含することを意味するが、ヒドロキシアルキル−β−シクロデキストリンを除く。
【００３６】
アルキルβ−シクロデキストリン誘導体は、好ましくは約１〜約１８、約３〜約１６、約４〜約１４、約４〜約１２．６、より好ましくは約４〜６の置換／修飾度を有する。
【００３７】
特定の実施形態において、β−シクロデキストリンはアルケニル−β−シクロデキストリンではなく、特にβ−シクロデキストリンはヒドロキシブテニル−β−シクロデキストリンではない。
【００３８】
別の実施形態において、シクロデキストリンはヒドロキシアルキル−β−シクロデキストリンである。好ましいヒドロキシアルキル−β−シクロデキストリンとしては、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（これは２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンと等価である）および２−ヒドロキシブチル−β−シクロデキストリンが挙げられる。より好ましい実施形態において、シクロデキストリンは、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰＢＣＤまたはＨＰ−β−ＣＤ）である。
【００３９】
ヒドロキシアルキルシクロデキストリン誘導体、特にヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンは、好ましくは約１〜約１４、より好ましくは約４〜約８の置換／修飾度を有する。
【００４０】
さらなる実施形態において、シクロデキストリンは、カルボキシアルキル−β−シクロデキストリンである。本明細書で用いられる好ましいカルボキシアルキル−β−シクロデキストリンとしては、カルボキシメチル−β−シクロデキストリンおよび（２−カルボキシエチル）−β−シクロデキストリンが挙げられる。
【００４１】
さらなる実施形態において、シクロデキストリンは、スルホアルキルエーテルβ−シクロデキストリンである。本明細書で用いられる好ましいスルホアルキルエーテル−β−シクロデキストリンは、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンである。
【００４２】
スルホアルキルエーテル−β−シクロデキストリン誘導体は、好ましくは約１〜約１４、好ましくは約１〜約７の置換／修飾度を有する。
【００４３】
好ましい実施形態において、シクロデキストリンは、アルキル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシアルキルβ−シクロデキストリン、カルボキシアルキル−β−シクロデキストリン、スルホアルキルエーテルβ−シクロデキストリンおよびそれらの混合物からなる群から選択されるβ−シクロデキストリンである。
【００４４】
別の好ましい実施形態において、シクロデキストリンは、ヒドロキシアルキルβ−シクロデキストリン、カルボキシアルキル−β−シクロデキストリン、スルホアルキルエーテルβ−シクロデキストリンおよびそれらの混合物からなる群から選択されるβ−シクロデキストリンである。
【００４５】
最も好ましい実施形態において、シクロデキストリンは、ヒドロキシアルキル−β−シクロデキストリン、スルホアルキルエーテルβ−シクロデキストリンおよびそれらの混合物からなる群から選択されるβ−シクロデキストリンである。
【００４６】
本発明の実施例において、以下のβ−シクロデキストリンが用いられる：
−β−ＣＤ：β−シクロデキストリン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｒｅｆ．：Ｃ４７６７−２５Ｇ）
−ＨＰ−β−ＣＤ：置換度５．６の２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｒｅｆ．：３３２６０７−５Ｇ）
−ＨＰＢ：置換度４．５の２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（Ｋｌｅｐｔｏｓｅ（商標）Ｒｏｑｕｅｔｔｅ  Ｐｈａｒｍａ）
−ＣＭ−β−ＣＤ：置換度３のカルボキシメチル−β−シクロデキストリンナトリウム塩（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｒｅｆ．：２１９０６−５Ｇ）
−ＤＭ−β−ＣＤ：ヘプタキス（２，６−ジ−Ｏ−メチル）−β−シクロデキストリン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｒｅｆ．：Ｈ０５１３−５Ｇ）
−ＳＢＥ−β−ＣＤ：置換度６．２〜６．９のβ−シクロデキストリンスルホブチルエーテルナトリウム塩−ＵＳＰ（Ｃａｒｂｏｓｙｎｔｈ  Ｒｅｆ．：ＳＢＥＣＤ）。
【００４７】
好ましい実施形態において、シクロデキストリンは、薬学的に許容されるシクロデキストリンである。
【００４８】
特定の実施形態において、シクロデキストリンは、約０．１％〜約５０ｗ／ｖ％の量で組成物中に存在する。ここで、ｗ／ｖとは重量／体積％濃度（ｇ／１００ｍＬ）を意味し、例えば、シクロデキストリンが約０．１％〜約５０％の量で組成物中に存在する場合、約１ｍｇ／ｍＬ〜約５００ｍｇ／ｍＬの量で存在することを意味する。本発明において、特に明記しない限り、パーセンテージはすべてｗ／ｖ単位である。特定の実施形態において、シクロデキストリンは、約０．２５％〜約３０％、約０．５％〜約２５％、約１％〜約２０％、約２％〜約１５％、または約３％〜約１０ｗ／ｖ％の量で存在する。好ましい実施形態において、本発明の医薬組成物のシクロデキストリンは、少なくとも５ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下の濃度、すなわち約５０〜１５０ｍｇ／ｍＬの濃度である。より好ましくは、シクロデキストリンは、少なくとも８％以上１０ｗ／ｖ％以下の量で存在する。別の好ましい実施形態において、本発明の組成物は、９ｗ／ｖ％のシクロデキストリンを含有する。
【００４９】
ゲル化剤
水溶性ゲル化剤とは、他の特性を実質的に変化させることなく、本発明の眼科用医薬組成物のような水溶液の粘度を増加させることができるが、弱凝集性内部構造を形成するコロイド混合物として液相中に溶解してゲルを形成する物質をいう。好ましい実施形態において、少なくとも１種のゲル化剤は、眼科用途のための薬学的に許容されるゲル化剤である。
【００５０】
好ましい実施形態において、本発明の眼科用医薬組成物の少なくとも１種のゲル化剤またはその許容される塩は、ヒアルロン酸、ジェランガム、グアーガム、ローカストビーンガム、アルギン酸、ポビドン、κ−カラギーナン、アルギン酸ガム、デキストラン、デキストラン硫酸塩、キトサンおよびそれらの混合物からなる群から選択される。
【００５１】
好ましい実施形態において、少なくとも１種の薬学的に許容される水溶性ゲル化剤またはその許容される塩は、ヒアルロン酸、ジェランガム、およびそれらの混合物から選択される。
【００５２】
したがって、好ましい実施形態において、少なくとも１種の薬学的に許容される水溶性ゲル化剤は、ヒアルロン酸またはその許容される塩である。
【００５３】
特定の実施形態において、ゲル化剤またはその許容される塩は、約０．００１ｗ／ｖ％〜約２ｗ／ｖ％、好ましくは約０．００３ｗ／ｖ％〜約１ｗ／ｖ％の量で本発明の水性組成物中に存在する。特定の実施形態において、ゲル化剤は、約０．０５％、約０．１％、約０．２５％、約０．５０％、約０．７５％、約１％、約１．５％、または約２％の量で本発明の水性組成物中に存在する。特に明記しない限り、パーセンテージはすべてｗ／ｖ単位である。好ましい実施形態において、ゲル化剤は、少なくとも０．０５ｗ／ｖ％以上１ｗ／ｖ％以下の量で、最も好ましくは０．１ｗ／ｖ％で本発明の水性組成物中に存在する。
【００５４】
好ましい実施形態において、本発明の眼科用医薬組成物は、以下を含有する：
ａ）少なくとも０．６ｗ／ｖ％以上１．０ｗ／ｖ％以下のビラスチン、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であって、該ビラスチンまたは該その塩もしくは溶媒和物が上記水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解しているもの；
ｂ）アルキル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシアルキルβ−シクロデキストリン、カルボキシアルキル−β−シクロデキストリン、カルボニル−β−シクロデキストリン、スルホアルキルエーテルβ−シクロデキストリンおよびそれらの混合物からなる群から選択される少なくとも１種のβ−シクロデキストリンであって、該β−シクロデキストリンの濃度が少なくとも５ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下であるもの；および
ｃ）ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩であって、該ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩の濃度が少なくとも０．０５ｗ／ｖ％以上１ｗ／ｖ％以下であるもの。
【００５５】
特定の実施形態において、ゲル化剤は、ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩であり、６０００００Ｄａ以下の分子量を有する。ゲル化剤の分子量は、当該技術分野で公知の技術によって測定され得る。好ましくは、限定されるものではないが、ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩の平均分子量は、多角度光散乱検出器と連結したサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ−ＭＡＬＬＳ）を用いて決定されてもよい。あるいは、ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩の平均分子量はまた、固有粘度およびＭａｒｋ−Ｈｏｕｗｉｎｋの関係式を用いて決定されてもよい。
【００５６】
さらなる実施形態
特定の実施形態において、本発明の眼科用医薬組成物はさらに、セルロースのエーテル誘導体、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、およびそれらの混合物からなる群から選択される、少なくとも１種の薬学的に許容される水溶性ポリマーを粘性剤として含有する。
【００５７】
水溶性ポリマーとは、少なくとも部分的に水に可溶な親水性ポリマーをいう。好ましい実施形態において、少なくとも１種の水溶性ポリマーは、薬学的に許容される水溶性ポリマーである。
【００５８】
好ましい実施形態において、少なくとも１種の水溶性ポリマーは、セルロースのエーテル誘導体であり、最も好ましくはメチルセルロースである。別の実施形態において、少なくとも１種の水溶性ポリマーは、ポリエチレングリコールである。
【００５９】
特定の実施形態において、水溶性ポリマーは、本発明の水性組成物中に約０．００１ｗ／ｖ％〜約１５ｗ／ｖ％、好ましくは約０．０１ｗ／ｖ％〜約１５ｗ／ｖ％の量で存在する。特定の実施形態において、水溶性ポリマーは、本発明の水性組成物中に約０．０１％、約０．０５％、約０．１％、約０．２５％、約０．５０％、約０．７５％、約１％、約３％、約５％、約７％、約１０％、約１３％または約１５％の量で存在する。特に明記しない限り、パーセンテージはすべてｗ／ｖ単位である。
【００６０】
−  セルロースエーテル誘導体
１つの実施形態において、水溶性ポリマーは、セルロースのエーテル誘導体である。セルロースエーテル誘導体とは、セルロースのヒドロキシル基が部分的または完全に置換されてセルロースエーテル（−ＯＲ）を提供するセルロースをいう。１つの実施形態において、セルロースのエーテル誘導体は、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、カルボキシアルキルセルロースおよびそれらの混合物からなる群から選択される。
【００６１】
好ましい実施形態において、セルロースのエーテル誘導体は、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、メチルセルロース、カルボキシアルキルセルロースおよびそれらの混合物からなる群から選択される。
【００６２】
１つの実施形態において、セルロースエーテル誘導体はアルキルセルロースである。本明細書での使用に好ましいアルキルセルロースとしては、メチルセルロース（ＭＣ）、エチルセルロース、エチルメチルセルロースおよびそれらの混合物が挙げられる。
【００６３】
１つの実施形態において、セルロースエーテル誘導体はヒドロキシアルキルセルロースである。本明細書での使用に好ましいヒドロキシアルキルセルロースとしては、ヒドロキシメチルセルロース（ＨＭＣ）、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）およびエチルヒドロキシエチルセルロースが挙げられる。
【００６４】
１つの実施形態において、セルロースエーテル誘導体はカルボキシアルキルセルロースである。本明細書での使用に好ましいカルボキシアルキルセルロースとしては、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）が挙げられる。ＣＭＣおよびカルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣＮａ）は等価である。
【００６５】
−  ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）
ＰＥＧは、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）またはポリオキシエチレン（ＰＯＥ）の別名でも知られる。１つの好ましい実施形態において、ＰＥＧは低分子量ＰＥＧであり、これは３００〜１００００ｇ／モルの分子量を有するＰＥＧを意味する。ＰＥＧの分子量は、より好ましくは３００〜５００ｇ／モルである。好ましい実施形態において、分子量は４００ｇ／モル、すなわちＰＥＧ４００である。
【００６６】
特定の実施形態において、組成物は、約２００ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約６４０ｍＯｓｍ／ｋｇ、好ましくは約２５０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約６００ｍＯｓｍ／ｋｇの範囲の浸透圧を有する。好ましい実施形態において、浸透圧は、約２４０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約３４０ｍＯｓｍ／ｋｇである。本発明の眼科用医薬溶液の浸透圧は、当該技術分野で周知の標準的な方法を用いて測定されてもよい。好ましくは、限定されるものではないが、本発明の眼科用医薬溶液の浸透圧は、浸透圧計を用いて溶液の凝固点降下を測定することによって決定されてもよい。
【００６７】
特定の実施形態において、本発明の組成物はさらに、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、エリスリオール、アラビトール、キシリトール、リビトール、ガラクチトール、マルチトール、マクロゴール、ラクチトール、およびそれらの混合物から選択される浸透圧剤または等張化剤を含有し得る。上記浸透圧剤または等張化剤は、存在する場合、約０．０５％、約０．１％、約０．２５％、約０．５０％、約０．７５％、約１％、約１．５％、約１．６％、約２％、約３％、約５％、約７％、約１０％、約１３％または約１５％の量で本発明の水性組成物中に存在する。前者に適合する実施形態において、上記浸透圧剤または等張化剤は、１５％未満、１３％、１０％、７％、５％、３％または２％の量で本発明の水性組成物中に存在する。特に明記しない限り、パーセンテージはすべてｗ／ｖ単位である。
【００６８】
好ましい実施形態において、浸透圧剤または等張化剤は、存在する場合、０．０５％〜５ｗ／ｖ％の量で本発明の水性組成物中に存在する。
【００６９】
特定の実施形態において、本発明者らは驚くべきことに、本発明の組成物が安定であり、かつ有利には、ドライアイおよび眼刺激症状を引き起こすことが知られている防腐剤、例えば塩化ベンザルコニウム、イミダゾリジニル尿素、メチルパラベン、プロピルパラベン、フェノキシエタノール、ＥＤＴＡ二ナトリウム、チメロサール、クロロブタノールおよびソルビン酸などの添加を必要としないことを見出した。したがって、特定の実施形態において、本発明の眼科用医薬組成物は防腐剤を含有しない。
【００７０】
特定の実施形態において、本発明の組成物はグリセリンを含有する。グリセリン（ｇｌｙｃｅｒｉｎ）は、グリセロールまたはグリセリン（ｇｌｙｃｅｒｉｎｅ）と同義である。好ましくは、グリセリンは、０．０５％〜５ｗ／ｖ％、より好ましくは０．０５％〜３ｗ／ｖ％の量で本発明の水性組成物中に存在する。好ましい実施形態において、グリセリンは、２．５％以下の濃度で等張化剤として存在する。好ましい実施形態において、本発明の組成物は、約１．６％、好ましくは１．６１％の量のグリセリンを含有する。特に明記しない限り、パーセンテージはすべてｗ／ｖ単位である。
【００７１】
ｐＨ
本発明の水性医薬組成物は、好ましくは、眼科用途および／または投与のために開発されたものであり、すなわち、水性眼科用医薬組成物は、これらの目的に適合している。眼、特にヒトの眼の生理的ｐＨは、約６．５〜８．０であることが知られている。
【００７２】
好ましい実施形態において、医薬組成物は、４〜９の範囲のｐＨ値（下限値と上限値の両方が含まれる）を有する。いくつかの実施形態において、本発明の水性眼科用医薬組成物のｐＨは、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、８．０、８．１、８．２、８．３、８．４、８．５、８．６、８．７、８．８、８．９、９．０、９．１、９．２、９．３または９．４である
【００７３】
ｐＨ値との関連において、ｐＨ値４はまた、ｐＨ３．６〜４．４の範囲に対応するものとして特定され得ることを容易に理解しなければならない。同様に、ｐＨ値９もまた、ｐＨ８．６〜９．４の範囲に対応するものとして特定され得る。別の好ましい実施形態において、医薬組成物のｐＨ値は、４．０、５．５、７．４、８．０または９．０である。
【００７４】
１つの実施形態において、塩酸、ホウ酸、酢酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、またはそれらの組み合わせからなる群から選択されるｐＨ調整剤が存在する。
【００７５】
１つの実施形態において、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される緩衝剤が存在する。
【００７６】
別の実施形態において、組成物は、ビラスチンの化学的、物理的、および／または生理学的安定性を維持する範囲であり、かつ、眼に十分許容される範囲のｐＨを有する。
【００７７】
用途
ビラスチンは、ヒスタミンＨ１受容体の拮抗薬であることが見出されており、したがって、ヒスタミンＨ１受容体の拮抗薬によって改善しやすいことが知られている疾患の治療および／または予防において有用であろう。
【００７８】
したがって、本発明の１つの態様は、医薬として使用するための上記で定義された水性眼科用医薬組成物に関する。
【００７９】
本発明の別の態様は、Ｈ１ヒスタミン受容体の拮抗作用によって改善しやすい障害または疾患の治療および／または予防に使用するための、上記で定義された水性眼科用医薬組成物に関する。そのような疾患は、例えば、アレルギー性疾患もしくは障害、またはアレルギー由来の症状である。
【００８０】
好ましい実施形態において、本発明は、眼のアレルギー性障害、アレルギー性疾患もしくはアレルギー症状の治療および／または予防に使用するための、上記で定義された水性眼科用医薬組成物に関する。好ましくは、アレルギー性疾患、障害または症状は、鼻炎、鼻結膜炎、アレルギー性結膜炎、春季角結膜炎、アトピー性角結膜炎、巨大乳頭結膜炎、眼刺激、掻痒感、発赤、流涙、結膜浮腫、乾性角膜炎、乾性角結膜炎または機能不全涙症候群から選択される。好ましい実施形態において、アレルギー性疾患または障害は、鼻炎、鼻結膜炎、アレルギー性結膜炎、春季角結膜炎、アトピー性角結膜炎、巨大乳頭結膜炎、および結膜浮腫から選択される。別の好ましい実施形態において、アレルギー症状は、眼の刺激、掻痒感、発赤、流涙、乾性角膜炎、乾性角結膜炎または機能不全涙症候群から選択される。本発明との関連において、ドライアイ症候群は、乾性角膜炎、乾性角結膜炎または機能不全涙症候群を包含する。
【００８１】
好ましくは、本発明は、アレルギー性結膜炎の治療および／または予防に使用するための、上記で定義された水性眼科用医薬組成物に関する。別の好ましい実施形態において、本発明は、ドライアイ症候群の治療および／または予防に使用するための、上記で定義された水性眼科用医薬組成物に関する。より好ましい実施形態において、本発明は、アレルギー性結膜炎およびドライアイ症候群の同時治療および／または予防に使用するための、上記で定義された水性眼科用医薬組成物に関する。
【００８２】
本明細書との関連における用語「治療」または「治療する」は、疾患または該疾患に伴う１つ以上の症状を改善または排除するために、本発明による化合物または製剤を投与することを意味する。「治療」はまた、疾患の生理学的後遺症を改善または排除することを包含する。
【００８３】
本発明との関連における用語「改善する」は、治療される患者の状況の任意の改善を意味するものと理解される。
【００８４】
本明細書との関連における用語「予防」または「予防する」は、疾患または該疾患に伴う１つ以上の症状の罹患または発症のリスクを軽減するために、本発明による化合物または製剤を投与することを意味する。
【００８５】
医薬組成物
「水性眼科用医薬組成物」という表現は、眼での使用に適した水を含有する液体医薬組成物をいう。
【００８６】
１つの実施形態において、ビラスチンは、少なくとも０．４ｗ／ｖ％の濃度で本発明の水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解している。別の実施形態において、ビラスチンは、少なくとも０．６ｗ／ｖ％、好ましくは少なくとも０．７％の濃度で本発明の水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解している。別の実施形態において、ビラスチンは、０．６〜１．０ｗ／ｖ％の範囲の濃度で、好ましくは０．６〜０．９ｗ／ｖ％の範囲の濃度で、より好ましくは０．６〜０．８％の範囲の濃度で本発明の水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解している。好ましくは、ビラスチンは、０．６ｗ／ｖ％の濃度で本発明の水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解している。ここで、ｗ／ｖ％は重量／体積パーセント濃度（ｇ／１００ｍＬ）を意味し、例えば、ビラスチンが約０．６％〜約１．０％の量で組成物中に存在する場合、ビラスチンが約６ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬの量で存在することを意味する。本発明において、特に明記しない限り、パーセンテージはすべてｗ／ｖ単位である。
【００８７】
１つの実施形態において、本発明の医薬組成物中のビラスチンの量は、好ましくは４５００μｇ／ｍＬを超え、好ましくは６０００μｇ／ｍＬを超え、好ましくは６５００μｇ／ｍＬを超え、好ましくは７０００μｇ／ｍＬを超え、好ましくは７５００μｇ／ｍＬを超え、好ましくは８０００μｇ／ｍＬを超え、好ましくは８５００μｇ／ｍＬを超え、好ましくは９０００μｇ／ｍＬを超え、より好ましくは９５００μｇ／ｍＬを超える。好ましい実施形態において、本発明の医薬組成物中のビラスチンの量は、１０５００μｇ／ｍＬ未満である。
【００８８】
特定の実施形態において、水性眼科用医薬組成物は、ビラスチン、β−シクロデキストリンおよびヒアルロン酸またはその許容される塩を含有し、該ビラスチンは該水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解している。別の特定の実施形態において、水性眼科用医薬組成物は、ビラスチン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンおよびヒアルロン酸またはその許容される塩を含有し、該ビラスチンは該水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解している。
【００８９】
「治療有効量」という表現は、投与された場合に、その中に含有される１種以上の薬学的に活性な薬剤の量を供給して、疾患または病態の治療または管理において治療効果を提供する、薬の量を意味する。
【００９０】
好ましい実施形態において、本発明の医薬組成物は、治療有効量のビラスチンを含有する。
【００９１】
本発明の水性眼科用医薬組成物は、薬学的に許容される賦形剤をさらに含有してもよい。
【００９２】
「薬学的に許容される賦形剤」という表現は、活性成分と共に投与されるビヒクル、希釈剤、またはアジュバントをいう。そのような医薬賦形剤は、水および油などの滅菌液であってよく、これらとしては、石油、動物、植物、または合成起源のもの、例えば落花生油、大豆油、鉱油、ゴマ油などが挙げられる。水または生理食塩水ならびにブドウ糖水溶液およびグリセリン水溶液は、特に注射用溶液のために、ビヒクルとして好ましく使用される。適切な医薬ビヒクルは、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎによる「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」、第２１版、２００５に記載されている。
【００９３】
本発明の医薬組成物の所望の医薬投与形態を製造するために必要な賦形剤および補助物質は、とりわけ、選択された投与医薬形態に依存する。医薬組成物の上記医薬投与形態は、当業者に公知の従来の方法に従って製造される。種々の活性成分投与方法、使用される賦形剤およびそれらを製造するためのプロセスの概説は、「Ｔｒａｔａｄｏ  ｄｅ  Ｆａｒｍａｃｉａ  Ｇａｌｅｎｉｃａ」，Ｃ．Ｆａｕｌｉ  ｉ  Ｔｒｉｌｌｏ，Ｌｕｚａｎ  ５，Ｓ．Ａ．ｄｅ  Ｅｄｉｃｉｏｎｅｓ，１９９３に見出され得る。
【００９４】
「薬学的に許容される」という表現は、生理学的に許容可能であり、ヒトまたは動物に投与した場合に、アレルギー反応や類似の好ましくない反応、例えば胃疾患、めまいなどを典型的には生じない組成物および分子実体をいう。好ましくは、用語「薬学的に許容される」とは、動物に、より具体的にはヒトに使用するために、州または連邦政府の規制当局によって承認されているか、または米国薬局方または他の一般的に認められた薬局方に記載されていることを意味する。
【００９５】
本明細書に開示される製剤はまた、１種以上の眼科用賦形剤を必要に応じてさらに含有する。眼科用賦形剤としては、非限定的な例として、粘膜接着剤、防腐剤、ｐＨ調整剤、浸透圧調整剤、緩衝剤、酸化防止剤、キレート剤、抗菌性防腐剤、化学防腐剤、粘性剤またはそれらの組み合わせから選択される少なくとも１種の薬剤が挙げられる。特定の実施形態において、眼科用組成物は、上記で定義されたように水溶性ポリマーをさらに含有する。
【００９６】
特定の実施形態において、本発明の組成物は、コルチコステロイドを含有しない。
【００９７】
好ましい実施形態において、眼科用医薬組成物は、以下を含有する：
ａ）少なくとも０．６ｗ／ｖ％以上１．０ｗ／ｖ％以下のビラスチン、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であって、該ビラスチンまたは該その塩もしくは溶媒和物が上記水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解しているもの；
ｂ）少なくとも１種のヒドロキシアルキルβ−シクロデキストリンであって、該β−シクロデキストリンの濃度が少なくとも５ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下であるもの；
ｃ）ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩であって、該ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩の濃度が少なくとも０．０５ｗ／ｖ％以上１ｗ／ｖ％以下であるもの；
ｄ）セルロースのエーテル誘導体、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、およびそれらの混合物からなる群から選択される、０．００１ｗ／ｖ％〜１５ｗ／ｖ％の少なくとも１種の薬学的に許容される水溶性ポリマー；および
ｅ）グリセリン、ソルビトール、マンニトール、エリスリオール、アラビトール、キシリトール、リビトール、ガラクチトール、マルチトール、マクロゴール、ラクチトール、およびそれらの混合物からなる群から選択される、０．０５ｗ／ｖ％〜５ｗ／ｖ％の少なくとも１種の等張化剤。
【００９８】
別の好ましい実施形態において、眼科用医薬組成物は、以下を含有する：
ａ）少なくとも０．６ｗ／ｖ％以上１．０ｗ／ｖ％以下のビラスチンまたはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であって、該ビラスチンまたは該その塩もしくは溶媒和物が上記水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解しているもの；
ｂ）少なくとも１種のヒドロキシアルキルβ−シクロデキストリンであって、該β−シクロデキストリンの濃度が少なくとも５ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下であるもの；
ｃ）ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩であって、該ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩の濃度が少なくとも０．０５ｗ／ｖ％以上１ｗ／ｖ％以下であるもの；
ｄ）０．００１ｗ／ｖ％〜１５ｗ／ｖ％のセルロースのエーテル誘導体；および
ｅ）０．０５ｗ／ｖ％〜５ｗ／ｖ％のグリセリン。
【００９９】
より好ましい実施形態において、眼科用医薬組成物は、以下を含有する：
ａ）少なくとも０．６ｗ／ｖ％以上１．０ｗ／ｖ％以下のビラスチンまたはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であって、該ビラスチンまたは該その塩もしくは溶媒和物が上記水性眼科用医薬組成物中に完全に溶解しているもの；
ｂ）少なくとも１種のヒドロキシアルキルβ−シクロデキストリンであって、該β−シクロデキストリンの濃度が少なくとも５ｗ／ｖ％以上１５ｗ／ｖ％以下であるもの；
ｃ）ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩であって、該ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩の濃度が少なくとも０．０５ｗ／ｖ％以上１ｗ／ｖ％以下であるもの；
ｄ）０．００５ｗ／ｖ％〜０．１ｗ／ｖ％のメチルセルロース；および
ｅ）０．５ｗ／ｖ％〜２ｗ／ｖ％のグリセリン。
【０１００】
以下の表１は、本発明の眼科用組成物の例示的な好ましい製剤に適した例示的な成分およびこれらの成分の所望の重量／体積パーセントの一覧表を提供する。以下の表１は例示的なものであって、特に明記しない限り、製剤が本発明の範囲内であり得る限り、特定の成分を表に追加または表から削除してもよく、また特定の成分の濃度を変更してもよいことが理解されるものとする。
【０１０１】
【表１】
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【０１０２】
医薬形態
医薬組成物の例としては、眼への局所投与のための任意の液体組成物が挙げられる。液体形態は、溶液、懸濁液または乳濁液である。
【０１０３】
眼への局所投与に適した調製物の例としては、点眼薬（すなわち、点眼剤または人工涙液）、点眼乳濁液、および眼軟膏が挙げられる。特定の実施形態において、本発明の組成物は、点眼薬としての眼科用調製物の形態である。眼科用調製物は、適切な抗菌剤を含有し得る。好ましい実施形態において、眼科用調製物は防腐剤を含有しない。より好ましい実施形態において、眼科用調製物は、塩化ベンザルコニウム、イミダゾリジニル尿素、メチルパラベン、プロピルパラベン、フェノキシエタノール、ＥＤＴＡ二ナトリウム、チメロサール、クロロブタノールおよびソルビン酸から選択される防腐剤を含有しない。
【０１０４】
本発明は、上記で定義された眼科用医薬組成物を提供する。好ましい実施形態において、上記眼科用医薬組成物は、１日１回の医薬組成物である。
【０１０５】
以下の実施例は、本発明の特定の実施形態の単なる例示であり、いかなる方法でも本発明を限定するものとみなすことはできない。
【実施例】
【０１０６】
材料および方法
以下の材料が使用されている：ビラスチン（Ｓａｉ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ提供、バッチ番号５００００１１３２５）；β−ＣＤ、ＨＰ−β−ＣＤ、ＨＰＢ、ＣＭ−β−ＣＤ、ＤＭ−β−ＣＤおよびＳＢＥ−β−ＣＤとして上述したシクロデキストリン；メチルセルロース１５００（ＭＣ１５００）（Ａｃｏｆａｒｍａ）；ジェランガム（ＧＧ）（Ｋｅｌｃｏｇｅｌ  ＣＧ−ＬＡ，ＣＰＫｅｌｃｏ）、ヒアルロン酸ナトリウム（Ｃａｒｅｆ）およびグリセリン（Ｍｅｒｃｋ−Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）。以下の実施例で使用された水は、Ｍｅｒｃｋ−ＭｉｌｌｉｐｏｒｅのＥｌｉｘ（登録商標）精製水システムを用いて得られた精製水であった。
【０１０７】
実施例１：種々のｐＨ値の水溶液中における９％の種々のβ‐シクロデキストリンの存在下での、２５℃での６．５ｍｇ／ｍＬを超えるビラスチンの安定性
本実施例は、種々のｐＨ値の水溶液中における９．０ｗ／ｖ％の５種のシクロデキストリンβ−ＣＤ、ＨＰ−β−ＣＤ、ＣＭ−β−ＣＤ、ＤＭ−β−ＣＤおよびＳＢＥ−β−ＣＤの存在下での６．５ｍｇ／ｍＬ（０．６５ｗ／ｖ％）を超える濃度のビラスチン溶液の安定性を示す。各ｐＨ値は、以下のように塩基性溶液からの調整によって得た。
【０１０８】
非緩衝液中のビラスチン（ｐＨ調整）
ａ．塩基性媒体中７ｍｇ／ｍＬのビラスチン溶液：７０ｍｇのビラスチンを１０ｍＬメスフラスコに添加した。約５ｍＬの脱イオン水を添加し、次いで、全てのビラスチンが溶解するまで混合物を振盪しながら１ＭのＮａＯＨを滴下して添加した。次いで、９００ｍｇの対応するシクロデキストリンを加え、シクロデキストリンが完全に可溶化するまで混合物を振盪した（β−ＣＤが完全な可溶化に至らなかった特定の場合を除いて）。次いで、体積を１０ｍＬに調整した。
【０１０９】
ｂ．工程ａで調製した５種のビラスチン＋シクロデキストリン溶液９００μＬをそれぞれ別個のエッペンドルフチューブに移した。
【０１１０】
ｃ．各エッペンドルフにおいて、必要に応じて５０％ＡｃＯＨ、１ＭのＨＣｌまたは１ＭのＮａＯＨを慎重に添加することによって、ｐＨを所望の値に調整した。
【０１１１】
ｔ０＝０日
溶液を３０℃で１時間攪拌した後、ビラスチン濃度を測定した。
【０１１２】
ｔ１＝７日
ｔ０での分析後、溶液を２２±２℃の恒温室内で撹拌せずに７日間保持し、再分析した。
【０１１３】
各エッペンドルフを一定の撹拌下（１００ｒｐｍ）でインキュベーター（ＶＷＲ（登録商標）Ｉｎｃｕｂａｔｉｎｇ  Ｍｉｎｉ  Ｓｈａｋｅｒ）に入れ、３０℃で１時間インキュベートした。次いで、各エッペンドルフの試料１．５ｍＬを、１２，５００ｒｐｍで０．５時間遠心分離（ＳＩＧＭＡ２−１６Ｐ恒温遠心機）して、ビラスチンの固体粒子を除去した。上清の試料を適切に希釈（１：１００）して、ビラスチンの濃度を決定した。ビラスチンの濃度は、ダイオードアレイ分光光度計Ｈｅｗｌｅｔｔ  Ｐａｃｋａｒｄ８４５２Ａを用いて測定した。アッセイは三連で実施した。結果を以下に示す。
【０１１４】
【表２】
2021511317.tif 000006
【０１１５】
ビラスチンの濃度値における７ｍｇ／ｍＬからの偏差は、ｐＨ調整工程後の希釈の影響によるものである。
【０１１６】
【表３】
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【０１１７】
１週間後でも、これらの値はまだ６．５ｍｇ／ｍＬを超えている。ｔ０での結果と比較すると、ビラスチンの濃度にわずかではあるが全般的な増加があり、これは溶媒のわずかな蒸発によって引き起こされるものである。
【０１１８】
本実施例は、６．５ｍｇ／ｍＬを超えるビラスチン濃度が、ｐＨ４．０〜９．０の範囲について３０℃で１時間後および２２℃で７日後に非緩衝溶液中で安定であることを示している。これらの結果を図１（ｔ０）および図２（ｔ１）に示す。
【０１１９】
実施例２：様々な組成物中のビラスチン０．４ｗ／ｖ％およびのＨＰＢ９％の眼生体接着
動物（ラット）の眼におけるビラスチン０．４ｗ／ｖ％およびＨＰＢ９％の組成物の生体接着を、ポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）スキャンにより測定した。組成物は、粘性剤および等張化剤（メチルセルロースおよびグリセリン）およびゲル化剤（ヒアルロン酸ナトリウムおよび／またはジェランガム）の含有量が様々であった。ポジトロン放出トレーサー１８ＦＤＧの添加により、ラットの眼組織における各組成物の平均保持時間を測定することが可能になった。
【０１２０】
【表４】
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【０１２１】
表４は、メチルセルロース（ＭＣ）およびグリセリンの有無にかかわらず、ヒアルロン酸ナトリウム（ＨＡ）、ジェランガム（ＧＧ）またはＡＨおよびＧＧの混合物を、ビラスチンおよびＨＰＢシクロデキストリンと併用した場合に、最長の保持時間（すなわち眼生体接着）が達成されることを示している。したがって、これらの結果は、少なくともＧＧまたはＨＡが、ビラスチンおよびＨＰＢ、ならびに随意にＭＣおよびグリセリンを含有する組成物の眼保持時間を増加させるのに適していることを示している。結果を図３に示す。
【０１２２】
実施例３：眼科用製剤の前臨床生体内有効性
動物モデル
受領時（Ｈａｒｌａｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｉｎｃ．／Ｅｎｖｉｇｏ）に体重３００〜３４９ｇであり、標準的な飼育条件下（２匹／ケージ）で飼育された雄Ｄｕｎｋｉｎ−Ｈａｒｔｌｅｙモルモットを用いた。動物（１群あたり６〜１０匹）は、眼結膜の完全な回復が可能になるように、２回の連続使用の間に少なくとも４日の洗浄期間を経て再利用した。
【０１２３】
実験手順
２種のビラスチン水性眼科用製剤を、０．４％および０．６ｗ／ｖ％のビラスチン濃度で調製した。両製剤はまた、ＨＰＢ９０ｍｇ／ｍＬ、メチルセルロース０．１ｍｇ／ｍＬ、ヒアルロン酸ナトリウム１ｍｇ／ｍＬおよびグリセリン１６．１ｍｇ／ｍＬを含有した。
【０１２４】
眼科用製剤を右眼に点眼し（２５μＬ）、結膜嚢における生成物の永続性を確保するために、動物を２〜３分間固定したままにした。次に、左眼は同体積の対応するビヒクルまたは市販の点眼剤の場合にはＮａＣｌ０．９％を受けた。各動物は、それ自身の陽性対照であった。
【０１２５】
確立した時間が経過すれば（１０分〜２４時間であり得る）、ヒスタミン二塩酸塩溶液（０．９％ＮａＣｌ中５％、２５μＬ／眼）を各眼に投与し、２〜３分間動物を固定したままにして、急性結膜炎を誘発させた。ヒスタミンに対する応答を、適用後３０分で評価した。
【０１２６】
各眼について以下のパラメータをスコア化した：浮腫の程度（結膜浮腫）、結膜発赤および血管充血（結膜充血）ならびに涙液分泌（流涙）。重症度は、０〜４の主観的尺度（ガイドラインＯＥＣＤテストＮｏ４０５：０＝正常；１＝極小；２＝中程度；３＝激烈；４＝重度）に従って評価した。各眼における各パラメータの個別スコアを加算した結果（０から１２までの合計スコア）を、全体的な結膜炎度の平均とみなした。
【０１２７】
統計
統計学的有意に達しなかった製剤、または統計学的有意に達してはいるがヒスタミン拮抗作用のパーセンテージが３０％以下であった製剤は、不活性とみなされた。各治療について、対照眼（左）および抗ヒスタミン治療眼（右）の合計スコアの平均値を算出した。さらに、阻害のパーセンテージ（薬理効果の平均）を次式に従って算出した：
阻害（％）＝［（対照スコア−治療スコア）／対照スコア］×１００
【０１２８】
統計解析には、ノンパラメトリック検定である「ウィルコクソン符号順位検定」（対データ）および「マン・ホイットニーのＵ検定」（独立データ用）を用いて、各治療とその対応する対照を、および治療間の差を、それぞれ比較した。ｐ＜０．０５の場合に統計的有意差とみなした。
【０１２９】
市販製剤の作用
アゼラスチン０．５ｍｇ／ｍｌ（Ａｆｌｕｏｎ（登録商標））は、適用後９時間は活性を示したが（ヒスタミン誘発作用の３８．４％阻害）、１２時間後には活性を示さなかった（１９．２％阻害）。オロパタジン１ｍｇ／ｍＬ（Ｏｐａｔａｎｏｌ（登録商標））は、その阻害活性が投薬後２４時間に観察されたので（３８．０％阻害）、はるかに長い活性持続時間を提供した。このモデルにおけるアゼラスチンとオロパタジンの間に観察された差は（図４参照）、ヒスタミン誘発結膜血管透過性のモルモットモデルを用いて、季節性アレルギー性結膜炎の局所治療用市販薬の抗ヒスタミン活性の持続時間を比較した以前の証拠と一致している（Ｂｅａｕｒｅｇａｒｄ  Ｃ，Ｓｔｅｐｈｅｎｓ  Ｄ，Ｒｏｂｅｒｔｓ  Ｌ，Ｇａｍａｃｈｅ  ＤおよびＹａｎｎｉ  Ｊ．ヒスタミン誘発結膜血管透過性のモルモットモデルにおける局所抗アレルギー薬の作用持続時間。Ｊ  Ｏｃｕｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ．２００７，２３：３１５〜２０）。興味深いことに、このヒスタミン誘発血管漏出動物モデルにおけるオロパタジン０．２％溶液の長い作用持続時間が、ヒト臨床試験で確認された（Ｖｏｇｅｌｓｏｎ  ＣＴ，Ａｂｅｌｓｏｎ  ＭＢ，Ｐａｓｑｕｉｎｅ  Ｔ，Ｓｔｅｐｈｅｎｓ  ＤＭ，Ｇａｍａｃｈｅ  ＤＡ，Ｇｒｏｓｓ  ＲＤ，Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ  ＳＭ，Ｙａｎｎｉ  ＪＭ．オロパタジン０．２％溶液の局所眼投与２４時間後の前臨床的および臨床的抗アレルギー作用。Ａｌｌｅｒｇｙ  Ａｓｔｈｍａ  Ｐｒｏｃ．２００４，２５：６９〜７５）。
【０１３０】
ビラスチン濃度の影響
上記のビラスチン４ｍｇ／ｍＬ（０．４ｗ／ｖ％）の製剤を調製し、作用持続時間を決定した。アゼラスチン０．５ｍｇ／ｍＬと同様に、モルモットのヒスタミン誘発結膜炎に対する本製剤を用いて観察された活性は、適用後９時間までは有意であった（３６．４％阻害、図４）。
【０１３１】
上記のビラスチン６ｍｇ／ｍＬ（０．６ｗ／ｖ％）の製剤も調製し、その活性をビラスチン４ｍｇ／ｍＬの活性と比較した。得られた結果は、投薬９時間後（４０．５および３６．４％阻害）および１２時間後（２９．０および２０．４％阻害）の両方で、最も高いビラスチン濃度で阻害パーセンテージに関してわずかな改善を示している。いずれの時点でも統計差は認められなかった。同じ時間間隔で、オロパタジン１ｍｇ／ｍＬは強い活性を示した（投薬後９時間および１２時間で、それぞれ７５．９％および６３．９％の阻害）。ビラスチン濃度の増加は、作用の有効性および持続時間に関して顕著な改善を伴わないと結論付けた。
【０１３２】
メチルセルロースの影響
メチルセルロース０．１ｍｇ／ｍＬの有りおよび無しでの等価なビラスチン０．４ｗ／ｖ％製剤の有効性を比較した。両製剤とも、ＨＰＢ１００ｍｇ／ｍＬ、ヒアルロン酸ナトリウム１ｍｇ／ｍＬおよびジェランガム２ｍｇ／ｍＬを含有した。投薬後９時間では、両製剤とも明らかに活性であった（それぞれ４４．７％対４７．４％のヒスタミン誘発作用の拮抗）。これらの結果は、メチルセルロースがビラスチン０．４ｗ／ｖ％製剤の活性の持続時間に関しては寄与しないことを示す。
【０１３３】
グリセリンの影響
グリセリン１６．１ｍｇ／ｍＬの有りおよび無しでの等価なビラスチン０．４ｗ／ｖ％製剤の有効性を比較した。両製剤とも、ＨＰＢ１００ｍｇ／ｍＬ、メチルセルロース０．１ｍｇ／ｍＬ、ヒアルロン酸ナトリウム１ｍｇ／ｍＬおよびジェランガム２ｍｇ／ｍＬを含有した。投薬後９時間では、両製剤ともに活性を示した（グリセリン有りおよび無しの製剤について、それぞれ３３．５％対４５．８％の阻害）。投薬後１２時間では、両製剤ともに明らかに不活性であった（それぞれ２４．５％対２６．７％の拮抗）。いずれの時点でも統計差は認められなかった。これらの結果は、グリセリンがビラスチン０．４ｗ／ｖ％製剤の活性の持続時間に関しては寄与しないことを示す。
【０１３４】
実施例４：眼科用製剤の臨床生体内有効性
本実施例は、表５〜６および図５〜６とともに、結膜アレルゲンチャレンジ（ＯＲＡ−ＣＡＣ（登録商標））モデルにおけるアレルギー性結膜炎の治療について、ビヒクルと比較したビラスチン点眼液（０．２ｗ／ｖ％、０．４ｗ／ｖ％、および０．６ｗ／ｖ％）の有効性の、単一施設、二重盲検、ランダム化、ビヒクル対照、第ＩＩ相、用量範囲評価の結果を示す。
【０１３５】
ビラスチンの水性眼科用製剤を０．２ｗ／ｖ％、０．４％および０．６ｗ／ｖ％のビラスチン濃度で調製した。ビヒクル製剤はビラスチンを全く含有しなかった。賦形剤は上の表１に示した通りであり、すなわち、ＨＰＢ９０ｍｇ／ｍＬ、メチルセルロース０．１ｍｇ／ｍＬ、ヒアルロン酸ナトリウム１ｍｇ／ｍＬおよびグリセリン１６．１ｍｇ／ｍＬもまた含有した。
【０１３６】
ＣＡＣ（登録商標）は、眼アレルギーの調査的療法を研究するための標準化モデルである。ＣＡＣ（登録商標）は、結膜へのアレルゲンの直接投与によって、制御された方法で眼アレルギー（例えば、眼の発赤、腫脹、流涙、および眼の掻痒感）の徴候および症状を誘発する。
【０１３７】
割り当てられた被験物質の１回量（両眼に１滴ずつ）を、ＣＡＣ（登録商標）試験およびアレルギー性結膜炎の徴候および症状の評価の１５分前、８時間前、または１６時間前に投与した。この研究は、約６〜１０週間にわたる８回の来院から構成された。有効性は、ＯＲＡ，Ｉｎｃ．（Ａｎｄｏｖｅｒ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ，Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ，０１８１０）により実施されたＣＡＣ（登録商標）モデルを用いて評価した。ＣＡＣ（登録商標）モデルは、スクリーニング、治療および追跡期間を含む。
【０１３８】
スクリーニング期間中、来診１では、被験者はインフォームドコンセントに署名し、アレルギー性皮膚試験を行った。来診２では、各適格被験者は、皮膚試験で陽性反応を示したアレルゲンを用いて両眼ＣＡＣ（登録商標）滴定を受けた。ＣＡＣ（登録商標）後に陽性反応が誘発された被験者は、来診２で適格とされたのと同じアレルゲンを用いて来診３で確認ＣＡＣ（登録商標）を受けた。
【０１３９】
治療期間は、被験者をランダム化した後に来診４ａで開始した。この来診時、被験者は治療を受けるためにランダム化され、院内投薬による治療を受けた。治験薬の点眼から約１６時間後、被験者は来診４ｂでＣＡＣ（登録商標）を受けた。来診５ａで、被験者は同じ治験薬の院内投薬を受けた。治験薬の点眼から約８時間後、被験者は来診５ｂでＣＡＣ（登録商標）を受けた。被験者は来診６で治験薬の最終投薬を受け、その約１５分後にＣＡＣ（登録商標）を受けた。
【０１４０】
追跡期間では、全ての被験者に対し２９（±３）日目に電話追跡を行った。表５に来診スケジュールの概要を示す。
【０１４１】
【表５】
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【０１４２】
合計２２０人の被験者をスクリーニングし、１か所で約１２０人の被験者を登録した。第一の目的は、アレルギー性結膜炎の主症状として眼の掻痒感を測定することであった。
【０１４３】
ＣＡＣ（登録商標）モデルでは、各患者に薬物またはビヒクルを投与し、特定のチャレンジ時間にアレルゲンに曝露する。治験のチャレンジ時間は、投薬の１５分後、８時間後および１６時間後であった。その後、来診４ｂ（治験薬の点眼の１６時間後）、来診５ｂ（治験薬の点眼の８時間後）、および来診６（点眼の１５分後）で、チャレンジ時間の３、５および７分後の判定時間に掻痒感を判定した。患者は、掻痒感スコアを得るために０〜４の尺度（半単位の増分を許可）で眼の掻痒感を評価するように依頼され、各スコアにおいて０が最小で４が最大であった。したがって、患者は３回の薬物またはビヒクルの投与を受け、各投与の後にアレルゲンチャレンジが行われ、その後、前述のように被験者によって眼の掻痒感が評価された。
【０１４４】
治療成功は、ＣＡＣ（登録商標）後の全３時点について少なくとも０．５単位、かつ、ＣＡＣ（登録商標）後の大部分の時点について少なくとも１単位の差で、ビヒクルに対する臨床的優位性を示すビラスチン点眼液の少なくとも１つの濃度と定義した。これらの時点での判定結果を表６に提示し、そのデータを図５および６にグラフとして提示する。
【０１４５】
【表６】
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【０１４６】
ビラスチン０．６ｗ／ｖ％は、治験薬点眼の１５分後（来診６）、８時間後（来診５ｂ）および１６時間後（来診４ｂ）での眼の掻痒感の軽減において、臨床的に有意な治療差を示した。ビラスチン０．２ｗ／ｖ％および０．４ｗ／ｖ％は、治験薬点眼の１５分後（来診６）および８時間後（来診５ｂ）での眼の掻痒感の治療において、臨床的に有意な治療差を示した。ビラスチンの全ての濃度が、全ての来院での眼の掻痒感の治療において、ビヒクルとの統計学的有意差を示した。
【０１４７】
表６および図５〜６から分かるように、０．６ｗ／ｖ％の濃度のビラスチンは、眼の掻痒感の治療のためにＣＡＣ（登録商標）の１６時間前（来診４ｂ）に投与された場合、臨床的かつ統計的に有効であった唯一の試験濃度であった。このＣＡＣ（登録商標）研究の前には、ビラスチン濃度０．６ｗ／ｖ％の製剤が、点眼後１６時間での眼の掻痒感を軽減するのに極めて有効であるという徴候がなかったので、このデータは特に驚くべきものである。
【０１４８】
急性結膜炎のモルモットモデルにおいて４ｍｇ／ｍｌ（０．４ｗ／ｖ％）および６ｍｇ／ｍｌ（０．６ｗ／ｖ％）の濃度でのビラスチン眼科用製剤の生体内有効性を評価した以前の前臨床小論（例えば、前の実施例の前臨床小論など）では、ビラスチンの濃度を０．４％から０．６ｗ／ｖ％に増加させても、作用の有効性および持続期間に関して顕著な改善を伴わないと結論付けた。ビラスチン０．６ｗ／ｖ％は、適用９時間後には活性があるとみなされたが、１２時間後には活性がないとみなされた。また、オロパタジン１ｍｇ／ｍＬ（オパタノール（登録商標））は、投薬２４時間後にその阻害活性が認められたことから、はるかに長い活性持続時間を提供することも確認された。興味深いことに、このヒスタミン誘発血管漏出動物モデルにおけるオロパタジン０．２％溶液の長い作用持続時間が、先行技術によりヒト臨床試験で確認されている（Ｖｏｇｅｌｓｏｎ  ＣＴ，Ａｂｅｌｓｏｎ  ＭＢ，Ｐａｓｑｕｉｎｅ  Ｔ，Ｓｔｅｐｈｅｎｓ  ＤＭ，Ｇａｍａｃｈｅ  ＤＡ，Ｇｒｏｓｓ  ＲＤ，Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ  ＳＭ，Ｙａｎｎｉ  ＪＭ．オロパタジン０．２％溶液の局所眼投与２４時間後の前臨床的および臨床的抗アレルギー作用。Ａｌｌｅｒｇｙ  Ａｓｔｈｍａ  Ｐｒｏｃ．２００４，２５：６９〜７５）。別の臨床試験では、オロパタジン０．７７％製剤によってもたらされる眼の掻痒感の軽減が、２４時間にわたって維持されている（Ｔｏｒｋｉｌｄｓｅｎ  Ｇ．，Ｎａｒｖｅｋａｒ  Ａ．，Ｂｅｒｇｍａｎｎ  Ｍ．結膜アレルゲンチャレンジモデルを用いたアレルギー性結膜炎患者におけるオロパタジン塩酸塩０．７７％の有効性および安全性。Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ  ２０１５：９  １７０３〜１７１３）。
【０１４９】
別の研究では、ヒスタミン誘発結膜血管透過性のモルモットモデルにおいて、ビラスチンおよびオロパタジンの抗ヒスタミン作用を比較した。生体内における抗ヒスタミン活性を測定するために、モルモットを局所薬またはビヒクルで前処理し、エバンスブルー色素を静脈内投与した後、結膜下ヒスタミンチャレンジを与えた。ビラスチンをヒスタミンチャレンジの２〜８時間前に投与した場合、５０％有効性は達成されなかったが、オロパタジンは０．１％未満のＥＤ５０を維持した（２００８年５月，第４９巻，１３号，ＡＲＶＯ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  Ａｂｓｔｒａｃｔ，結膜肥満細胞の安定化およびヒスタミン誘発血管透過性に対するオロパタジン、ベポタスチン、およびビラスチンの作用比較、Ｃ．Ｂｅａｕｒｅｇａｒｄ；Ｄ．Ｊ．Ｓｔｅｐｈｅｎｓ；Ｓ．Ｔ．Ｍｉｌｌｅｒ；Ｌ．Ｒｏｂｅｒｔｓ；Ｄ．Ａ．Ｇａｍａｃｈｅ；Ｊ．Ｍ．Ｙａｎｎｉ）。したがって、これまでの先行技術では、ビラスチンが生体内におけるオロパタジンの抗ヒスタミン作用の効力または持続時間に匹敵することはできないことが明確に指摘されている。
【０１５０】
しかしながら、驚くべきことに、表６および図５〜６のデータは、ＣＡＣ（登録商標）モデルで評価されたように、ビラスチンが０．６ｗ／ｖ％の濃度で、ビヒクルと比較して１６時間での眼の掻痒感を統計学的に有意に緩和することを示しており、アレルギー性結膜炎に伴う眼の掻痒感の治療におけるビラスチン含有量が０．４ｗ／ｖ％を超える製剤の１日１回の投薬を支持するものである。
【０１５１】
現在利用可能な薬物療法の限界、例えば１日複数回投薬の必要性や眼への副作用などは、特に生活の質への悪影響がアレルギー性結膜炎自体によって負う悪影響を超える負担とみなされる場合には、治療アドヒアランスの低下または治療中断につながり得る。さらに、１日１回のレジメンは、投薬ミスのリスクを減らし、場合によっては治療成績および症状コントロールを改善することにより、患者の服薬遵守に大きく寄与することが示されている。
【０１５２】
したがって、抗アレルギー点眼薬の１回の投薬でアレルギー性結膜炎症状を管理することが困難であり、結果的に２回目の投薬を使用しなければならない患者は、ビラスチン含有量が少なくとも０．４ｗ／ｖ％の製剤の１日１回の投薬レジメンによる増大した利便性から恩恵を受け得る。
【０１５３】
実施例５：眼科用製剤の眼生体内分布
本実施例は、本発明の眼科用製剤中のビラスチンが、ウサギの眼への投与に際し、角膜、虹彩、網膜および水晶体組織と比較して、主に結膜中に見出されることを示すことにより、実施例４の結果を確認する。
【０１５４】
ビラスチンの水性眼科用製剤を、ビラスチン濃度０．６ｗ／ｖ％で調製した。賦形剤は上の表１に示した通りであり、すなわち、ＨＰＢ９０ｍｇ／ｍＬ、メチルセルロース０．１ｍｇ／ｍＬ、ヒアルロン酸ナトリウム１ｍｇ／ｍＬ、グリセリン１６．１ｍｇ／ｍＬもまた含有した。
【０１５５】
本実施例の結果は、以下の優良試験所基準に準拠して得られた：
・  Ｒｅａｌ  Ｄｅｃｒｅｔｏ（勅令）１３６９／２０００年７月１９日（スペイン）
・  経済協力開発機構（ＯＥＣＤ）優良試験所基準の原則（１９９７年改訂）、ＥＮＶ／ＭＣ／ＣＨＥＭ（９８）１７；
・  欧州諸共同体（ＥＣ）委員会指令２００４／１０／ＥＣ、２００４年２月１１日；
・  ２０００年３月１４日付省令（Ａｒｒｅｔｅ  ｄｕ  １４  Ｍａｒｓ  ２０００）（フランス）、２００４／１０／ＥＣ
・  経済協力開発機構（ＯＥＣＤ）ＥＮＶ／ＪＭ／ＭＯＮＯ（２００２）９、２００２年６月２５日
・  アメリカ食品医薬品局（ＦＤＡ）産業界向けガイダンス−生物分析法検証−２０１８年５月、および
・  欧州医薬品庁（ＥＭＡ）生物分析法検証に関するガイドラインＥＭＥＡ／ＣＨＭＰ／ＥＷＰ／１９２２１７／２００９総説１改訂第２版−２０１１年７月。
【０１５６】
４２匹の４〜５ヶ月齢のＤｕｔｃｈ  Ｂｅｌｔｅｄウサギを被験体として選択した。治療開始時の動物の体重は１．６〜２．１ｋｇであった。
【０１５７】
【表７】
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【０１５８】
動物には、各眼に３０μＬの眼科用製剤を単回投与した。眼科用製剤を、自動ピペットを用いて各動物の両眼に直接配置した。新しいピペットチップを各眼に用いた。
【０１５９】
被験動物の眼は点眼後洗浄しなかった。動物は投与前に体重を測定し、投与後に観察を行い、可能な限りのあらゆる臨床徴候を記録した。
【０１６０】
２〜３匹の動物を各時点（０．５、１、２、４、６、８、１２および２４時間）で屠殺し、両眼から以下の組織を採取した：房水、硝子体液、角膜、結膜、虹彩／毛様体、水晶体および網膜／脈絡膜。試料採取直後に、全ての固体マトリックスを秤量し（小数点以下４桁の精度）、採取した各組織の量を決定した。
【０１６１】
ビラスチン濃度は、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって決定した。
【０１６２】
ビラスチン分析は、以下の分析法：
−  ウサギ血漿についてはＰＫＨ／ＭＯＡ／１０２２、
−  ウサギ房水についてはＰＫＨ／ＭＯＡ／１０４２、
−  ウサギ硝子体液についてはＰＫＨ／ＭＯＡ／１０４３、
−  ウサギ角膜ホモジネートについてはＰＫＨ／ＭＯＡ／１０２８、
−  ウサギ虹彩／毛様体ホモジネートについてはＰＫＨ／ＭＯＡ／１０４１、
−  ウサギ結膜ホモジネートについてはＰＫＨ／ＭＯＡ／１０３６、
−  ウサギ水晶体ホモジネートについてはＰＫＨ／ＭＯＡ／１０３２、
−  ウサギ網膜／脈絡膜ホモジネートについてはＰＫＨ／ＭＯＡ／１０２９
に従って実施し、これらの分析法は、研究１８−０１４Ａ〜１８−０１４Ｈにおいて、産業界向けガイダンス−生物分析法検証−アメリカ食品医薬品局（ＦＤＡ）２０１８年５月および欧州医薬品庁（ＥＭＡ）ガイドライン−ＥＭＥＡ／ＣＨＭＰ／ＥＷＰ／１９２２１７／２００９−２０１１年７月２１日に従い、Ｅｕｒｏｆｉｎｓ｜ＡＤＭＥ ＢＩＯＡＮＡＬＹＳＥＳで以前に開発および検証されたものである。
【０１６３】
これらの分析法は、血漿についてはタンパク質沈殿を包含し、他のマトリックスについては希釈を包含し、続いて、内部標準としてＦ２１２０１ＲＲ（ビラスチン−ｄ６）を用いたＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を包含した。
【０１６４】
結果から、投与の２４時間後に、顕著に高い濃度のビラスチンが結膜に認められたが（平均値：３８８．４５ｎｇ／ｇ）、残りの眼組織ではビラスチン濃度がより低いことが示された：角膜（平均値：２８．６８ｎｇ／ｇ）、虹彩／毛様体（１２．４２ｎｇ／ｇ）、網膜／脈絡膜（１．９１ｎｇ／ｇ）および水晶体（０．１２ｎｇ／ｇ）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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