(57)【要約】  本発明は屋内環境における幼虫状態を含む昆虫の存在を検出する方法であって、ａ／  屋内環境における揮発性有機化合物（ＶＯＣ）のサンプルを得るステップと、ｂ／  サンプルされたＶＯＣを分離するステップと、ｃ／  以前に定義されたターゲットＶＯＣの有無を検出するステップであって、ターゲットＶＯＣは、以下の３つのカテゴリーのＶＯＣのうちの少なくとも１つに属しており、  −  昆虫が発生する支持体とは無関係に放出され昆虫の侵入中の場合にのみ放出されるＶＯＣは「カテゴリー１のＶＯＣ」であり、  −  昆虫が発生する支持体とは無関係に放出されるが、昆虫以外の生物学的起源も有する可能性のあるＶＯＣは「カテゴリー２のＶＯＣ」であり、  −  昆虫が発生する支持体に応じて放出され、昆虫が昆虫の侵入中の場合にのみ放出されるＶＯＣは「カテゴリー３のＶＯＣ」である、ステップと、ｄ／  「３Ｉ」（または「３Ｉ指標」）と呼ばれる「昆虫侵入指標」の値および「ＶＬ」と呼ばれる「限界値」をいずれも計算し、いずれも以前に定義されたターゲットＶＯＣの有無に依存している、ステップと、ｅ／  「３Ｉ」と「ＶＬ」の値を比較するステップとを含むような方法に関する。「３Ｉ」の値が「ＶＬ」の値より厳密に大きい場合は環境が侵入されており、「３Ｉ」の値が「ＶＬ」の値以下の場合は環境が侵入されていない。【特許請求の範囲】
【請求項１】
屋内環境における昆虫の存在を検出する方法であって、
ａ／  屋内環境の揮発性有機化合物（ＶＯＣ）のサンプルをサンプリングするステップと、
ｂ／  サンプリングしたＶＯＣを分離するステップと、
ｃ／  所定のターゲットＶＯＣの有無を検出するステップであり、これらの所定のターゲットＶＯＣは、以下の３つのカテゴリーのＶＯＣ：
−  昆虫が生育する基質とは無関係に放出され、昆虫の侵入中のみ放出されるＶＯＣ（「カテゴリー１のＶＯＣ」と呼ばれる）と、
−  昆虫が生育する基質とは無関係に放出されるが、昆虫以外の生物学的起源も有する可能性のあるＶＯＣ（「カテゴリー２のＶＯＣ」と呼ばれる）と、
−  昆虫が生育する基質の作用として放出され、昆虫の侵入中のみ放出されるＶＯＣ（「カテゴリー３のＶＯＣ」と呼ばれる）と、
のうちの少なくとも１つに属している、ステップと、
ｄ／  「３Ｉ」（または「３Ｉ指標」）と呼ばれる値「昆虫侵入指標」および「ＶＬ」と呼ばれる値「上限値」をそれぞれ計算するステップであり、その各々は所定のターゲットＶＯＣの有無に依存している、ステップと、
ｅ／  値「３Ｉ」および値「ＶＬ」を比較するステップであり、値「３Ｉ」が値「ＶＬ」より厳密に大きい場合、環境は侵入されており、値「３Ｉ」が値「ＶＬ」以下である場合、環境は侵入されていない、ステップと、
を含むことを特徴とする、方法。
【請求項２】
ステップｄは、以下の３つのサブステップｄ−１、ｄ−２、ｄ−３：
ｄ−１／  インクリメント値「ｉ」を決定するステップであって、インクリメント値は、所定のターゲットＶＯＣの各々に、その有無に応じて−１、０または１の番号を割り当てることによって得られ、その番号は以下：
−  カテゴリー（１）のＶＯＣの存在は数字１によって特徴付けられ、その不在は−１によって特徴付けられ、
−  カテゴリー（２）のＶＯＣの存在は数字０によって特徴付けられ、その不在は−１によって特徴付けられ、
−  カテゴリー（３）のＶＯＣの存在は数字１によって特徴付けられ、その不在は０によって特徴付けられる、
ように割り当てられる、ステップと、
ｄ−２／  以下の式
【数１】
2021508248.tif 000014
に対応する重み付け値「Ｐ」（「重み係数」とも呼ばれる）を決定するステップであって、
−  「重み付けされたＶＯＣ」は、活発な侵入がない基質上に見出されるＶＯＣであるが、昆虫の存在下でより大きな相対量で、すなわち少なくとも２倍高い量で、放出されるＶＯＣに対応し、
−  係数１は、侵入が知られている環境のパネルを用いた反復によって確立された経験的な実数である、ステップと、
ｄ−３／  値３ＩとＶＬを決定するステップであって、
値（３Ｉ）は以下の式に対応し、
【数２】
2021508248.tif 000015
ここで：
ｎはターゲットＶＯＣの数を表し、
ｊは整数、
ｉはステップｄ−１／で定義されたインクリメント値を表し、
Ｐはステップｄ−２／で定義された重み付け値を表し、
ｉｊはｊ番目のターゲットＶＯＣのインクリメントを表し、
Ｐｊはｊ番目のターゲットＶＯＣの重み付けを表し、
値（ＶＬ）は以下の式に対応し、
【数３】
2021508248.tif 000016
ここで、「重み付けされていないＶＯＣ」は、昆虫の存在下でのみ放出されるＶＯＣに対応し、
係数２は、「係数１」を決定するために使用されたものと同じ環境パネルを用いた反復によって確立された経験的実数である、ステップと、
で実行されることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
所定のターゲットＶＯＣは、２，２’−ｂｉ−１，３−ジオキソラン、酢酸ｎ−ブチル、１，３，５，７−シクロオクタテトラエン、アルファ−ピネン、１−プロパノール、メタンカルボチオール酸、３，３−ジメチル−１−ヘキセン、２−ブタノン、酢酸エチル、４−ヒドロキシ−２−ブタノン、１−ブタノール、２，５−ジメチル−フラン、２−エテニル−２−ブテナール、蟻酸ブチル、ピラジン、ピロール、１−ペンタノール、１−（３，４−ジメチルチエノ［２，３−ｂ］チオフェン−２−イル）−エタノン−オキシム、１，４−オクタジエン、１，３−オクタジエン、２−メチル−ピリミジン、１−ヘキサノール、２−ヘプタノン、２，５−ジメチル−ピラジン、カンフェン、２−オクタノン、１−メチル−４−（１−メチルエテニル）−シクロヘキセン、２−メチルデカン、アセトフェノン、２−ノネン−１−オール、１，１０−ジクロロデカン、ドデカナール、２−ペンチル−チオフェン、２−デセン−１−オール、ナフタレン、フタル酸ジエチルおよびこれらの混合物を含む群から選択されることを特徴とする、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
所定のターゲットカテゴリー１のＶＯＣは、２，２’−ｂｉ−１，３−ジオキソランおよび酢酸ｎ−ブチルを含む群から選択され、
所定のターゲットカテゴリー２のＶＯＣは、１，３，５，７−シクロオクタテトラエンおよびα−ピネンを含む群から選択され、
所定のターゲットカテゴリー３のＶＯＣは、１−プロパノール、メタンカルボチオール酸、３，３−ジメチル−１−ヘキセン、２−ブタノン、酢酸エチル、４−ヒドロキシ−２−ブタノン、１−ブタノール、２，５−ジメチル−フラン、２−エテニル−２−ブテナール、蟻酸ブチル、ピラジン、ピロール、１−ペンタノール、１−（３，４−ジメチルチエノ［２，３−ｂ］チオフェン−２−イル）−エタノン−オキシム、１，４−オクタジエン、１，３−オクタジエン、２−メチル−ピリミジン、１−ヘキサノール、２−ヘプタノン、２，５−ジメチル−ピラジン、カンフェン、２−オクタノン、１−メチル−４−（１−メチルエテニル）−シクロヘキセン、２−メチルデカン、アセトフェノン、２−ノネン−１−オール、１，１０−ジクロロデカン、ドデカナール、２−ペンチル−チオフェン、２−デセン−１−オール、ナフタレン、およびフタル酸ジエチルを含む群から選択されることを特徴とする、請求項１ないし３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
昆虫が幼虫状態であることを特徴とする、請求項１ないし４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
昆虫はＴｉｎｅｏｌａ  ｂｉｓｓｅｌｌｉｅｌｌａであり、
係数１は１〜３の値を有し、好ましくは２に等しく、
係数２は３〜５の値を有し、好ましくは４に等しいことを特徴とする、請求項１ないし５のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
〔発明の分野〕
本発明は、屋内環境における幼虫状態を含む、昆虫の侵入を検出する方法に関する。
【０００２】
「屋内環境（室内環境）」とは、（開放可能な窓等を介して）断続的にまたは強制換気によって連続的に換気される建物内部の密閉されたまたは閉じ込められた空間を意味する。屋内環境の例は、住居、博物館、教会、地下室、歴史的記念物、オフィスビル、学校および病院に見られる。
【０００３】
昆虫は多くの囲まれた空間で恐れられている害虫である。それらは、特に、フレーム、家具、木製パネル、不織布、食品等を攻撃し、建築部品の機械的強度の損失、遺産の破壊、または貯蔵穀類の損失につながる不可逆的劣化を引き起こす。
【０００４】
それらを検出するための現在の技術は本質的に、幼虫状態ではなく、劣化後に、成体を検出することに基づいているが、幼虫のほうが損傷の原因である。したがって、従来の技術は、環境を処理すること、または少なくとも、能動的な劣化を確立することを可能にするような、予防戦略を実施することができない。
【０００５】
これに関連して、これらの昆虫害虫の早期検出は、住居、遺産または食品の劣化を防止するための主要な目的を構成し、したがって、治療処置の使用および関連する修理、修復、予防などの高コストを制限する。
【０００６】
したがって、本発明の目的の１つは、幼虫状態であっても、昆虫害虫の存在を早期に検出することである。「早期検出」は、目に見える徴候が現れる以前の昆虫害虫の存在を検出することを意味する。早期検出は歴史的記念物、教会、または博物館などの遺産現場において非常に重要であり、そこでは、侵入（汚染、蔓延、はびこり、出没、群がり）の最初の目に見える徴候が現れたときに、一般に、回復不能な損傷が既に引き起こされている。
【０００７】
「真菌汚染を検出する方法」という名称の出願ＦＲ  ２  ９１３  ５０１において、出願人は、「ＩＣＦ」と呼ばれる「真菌汚染の化学指標」を決定し、これにより、屋内環境における真菌汚染を検出することが可能になる。
【０００８】
しかしながら、前記文献ＦＲ  ２  ９１３  ５０１に記載されたＩＣＦを計算する方法は、昆虫の検出に関して十分に特異的であることを可能にしない。したがって、そのままでは転用できず、改良が必要である。
【０００９】
したがって、出願人は、基質の代謝および／または劣化から生じる揮発性有機化合物（ＶＯＣ）（ｖｏｌａｔｉｌｅ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ）から幼虫を検出することに基づく研究を継続した。これらのターゲット（標的、目標）ＶＯＣは、環境中に分散され、基質によって保持されない。より詳細には、出願人は、特定のＶＯＣが、幼虫状態を含む昆虫の存在下でのみ周囲空気中に存在することを見出した。したがって、これらのＶＯＣは、幼虫状態を含む昆虫の代謝に特異的に起因する。特定の他のＶＯＣが、昆虫の存在下だけでなく、特定の物質または他の生物学的汚染の存在下でも、周囲空気中に存在することも見出された。
【００１０】
この発見に基づき、出願人は、昆虫に特定なこれらのＶＯＣを２つのグループに分けることができることを実証することができた：
−  昆虫が生育（成長）する基質とは無関係に放出されるＶＯＣ、および、
−  昆虫が生育する基質の作用として放出されるＶＯＣ。
【００１１】
基質とは無関係（独立）に放出されるＶＯＣの中で、昆虫によってのみ放出されるＶＯＣと、昆虫以外の生物学的起源を有する（生物由来）可能性のあるＶＯＣとが区別される。
【００１２】
したがって、ＶＯＣの３つの別々のカテゴリーが決定された。本発明は、昆虫に特定なこれらのＶＯＣ（所定のターゲットＶＯＣとも呼ばれる）の決定（測定、判定）および検出に基づく。
【００１３】
実際、これらの所定のターゲットＶＯＣの検出は、一方では侵入の早期検出を可能にし、他方では、裸眼では見えない侵入の検出を可能にする。
【００１４】
本出願人は、より詳細には、「３Ｉ」（３Ｉ指標（指数、インデックス）とも呼ばれる）によって表される「昆虫侵入指標」値、および「ＶＬ」によって表される「上限値」と呼ばれる値を開発し、そのそれぞれは、所定のターゲットＶＯＣの有無に依存する。これらの値を決定し、比較することにより、幼虫状態であっても昆虫の存在を早期に検出することが可能となる。
【００１５】
そこで、出願人は、広範かつ長期的な研究を行った結果、侵入の目に見える徴候がなくても屋内環境で幼虫状態を含めた昆虫の侵入を検出する方法を考案することができた。
【００１６】
本発明は、より詳細には、以下を含む屋内環境における昆虫の存在を検出する方法に関する：
ａ／  屋内環境の揮発性有機化合物（ＶＯＣ）のサンプルをサンプリングするステップと、
ｂ／  サンプリングしたＶＯＣを分離するステップと、
ｃ／  所定のターゲットＶＯＣの有無を検出するステップであり、これらの所定のターゲットＶＯＣは、以下の３つのカテゴリーのＶＯＣ：
−  昆虫が生育する基質とは無関係に放出され、昆虫の侵入中のみ放出されるＶＯＣ（「カテゴリー１のＶＯＣ」と呼ばれる）と、
−  昆虫が生育する基質とは無関係に放出されるが、昆虫以外の生物学的起源も有する可能性のあるＶＯＣ（「カテゴリー２のＶＯＣ」と呼ばれる）と、
−  昆虫が生育する基質の作用として放出され、昆虫の侵入中のみ放出されるＶＯＣ（「カテゴリー３のＶＯＣ」と呼ばれる）と、
のうちの少なくとも１つに属している、ステップと、
ｄ／  「３Ｉ」（または「３Ｉ指標」）と呼ばれる値「昆虫侵入指標」および「ＶＬ」と呼ばれる値「上限値」をそれぞれ計算するステップであり、その各々は所定のターゲットＶＯＣの有無に依存している、ステップと、
ｅ／  値「３Ｉ」および値「ＶＬ」を比較するステップであり、値「３Ｉ」が値「ＶＬ」より厳密に大きい場合、環境は侵入されており、値「３Ｉ」が値「ＶＬ」以下である場合、環境は侵入されていない、ステップ。
【００１７】
本発明の方法によれば、好ましくは、ＶＯＣのサンプルをサンプリング（採取）するステップ（工程）ａ／は、好ましくは、活性炭、シリカゲル、ゼオライト、および商標Ｔｅｎａｘ（登録商標）、Ｃａｒｂｏｇｒａｐｈ（登録商標）またはＣｈｒｏｍｏｓｏｒｂ（登録商標）の下で市販されているものなどの多孔質合成樹脂から選択される固体吸着剤上での活性または拡散サンプリングによって実施される。
【００１８】
この場合、本発明の方法はまた、吸着されたＶＯＣの脱着ステップを含む。脱着は、当業者によく知られている状態で熱脱着によって実施される。
【００１９】
本発明の方法はまた、サンプリングされたＶＯＣの分離を含む（ステップｂ／）。特に、サンプリングされたＶＯＣは、クロマトグラフィーマイクロカラム上での溶出によって分離される。カラム温度または移動相の流速などの最適な分離パラメータは、カラムの幾何学的形状、および固定相およびキャリアガスの性質の相関的要素として、当業者によく知られた技術によって決定される。
【００２０】
検出ステップｃ／は、幼虫状態を含む昆虫の代謝から生じる所定のターゲットＶＯＣの有無を検出することを可能にする。これらの所定のターゲットＶＯＣは、幼虫状態を含む昆虫の活動と共に、カテゴリー１、２または３のうちの１つの少なくとも１つのＶＯＣを含む。
【００２１】
上述の３つのカテゴリーのＶＯＣのそれぞれの少なくとも１つの所定のターゲットＶＯＣの有無を検出することは、これらのカテゴリーのうちの１つのみからのＶＯＣの有無の検出と比較して、本発明による検出方法の確実性を高める。
【００２２】
好ましくは、前述の３つのカテゴリーの各々のいくつかのターゲットＶＯＣが検出される。
【００２３】
所定のターゲットＶＯＣは例えば、ガスクロマトグラフィー、続いて質量分析（ＧＣ／ＭＳ）によって検出される。
【００２４】
次に、本発明の方法の次のステップｄ／は、値「昆虫侵入指標」（「３Ｉ」または３Ｉ指標）および値「上限値」（「ＶＬ」）を計算することからなる。
【００２５】
より詳細には、本発明によれば、ステップｄ／は、３つのサブステップで実行される：
ｄ−１／  インクリメント値「ｉ」を決定するステップであって、インクリメント値は所定のターゲットＶＯＣの各々に、その有無に応じて−１、０または１の番号を割り当てることによって得られ、その番号は以下：
−  カテゴリー（１）のＶＯＣの存在は数字１によって特徴付けられ、その不在は−１によって特徴付けられ、
−  カテゴリー（２）のＶＯＣの存在は数字０によって特徴付けられ、その不在は−１によって特徴付けられ、
−  カテゴリー（３）のＶＯＣの存在は数字１によって特徴付けられ、その不在は０によって特徴付けられる、
ように割り当てられる、ステップと、
ｄ−２／  以下の式
【００２６】
【数１】
2021508248.tif 000002
【００２７】
に対応する重み付け値「Ｐ」（「重み係数」とも呼ばれる）を決定するステップであって、
−  「重み付けされたＶＯＣ」は、活発な侵入がない基質上に見出されるＶＯＣであるが、昆虫の存在下でより大きな相対量で、すなわち少なくとも２倍高い量で、放出されるＶＯＣに対応し、
−  係数１は、侵入が知られている環境のパネルを用いた反復によって確立された経験的な実数である、ステップと、
ｄ−３／  値３ＩとＶＬを決定するステップであって、
値（３Ｉ）は以下の式に対応し、
【００２８】
【数２】
2021508248.tif 000003
【００２９】
ここで：
ｎはターゲットＶＯＣの数を表し、
ｊは整数、
ｉはステップｄ−１／で定義されたインクリメント値を表し、
Ｐはステップｄ−２／で定義された重み付け値を表し、
ｉｊはｊ番目のターゲットＶＯＣのインクリメントを表し、
Ｐｊはｊ番目のターゲットＶＯＣの重み付けを表し、
値（ＶＬ）は以下の式に対応し、
【００３０】
【数３】
2021508248.tif 000004
【００３１】
ここで、「重み付けされていないＶＯＣ」は、昆虫の存在下でのみ放出されるＶＯＣに対応し、
係数２は、「係数１」を決定するために使用されたものと同じ環境パネルを用いた反復によって確立された経験的実数である、ステップ。
【００３２】
したがって、係数１は、パネルの２つのグループ（侵入された／侵入されていない（非侵入））の識別を可能にするために固定される。この係数は、検出される昆虫種の関数である。
【００３３】
同様に、係数２は、パネルの２つのグループ（侵入された／侵入されていない（非侵入））の識別を可能にするために固定される。この係数は、検出される昆虫種の関数である。
【００３４】
第１に（ステップｄ−１／）、各所定のターゲットＶＯＣの有無の関数であるインクリメント（増加、増分、インクリメンテーション）値「ｉ」を決定することである。
【００３５】
より詳細には研究中に、本出願人は以下の知見を得た。
【００３６】
昆虫が生育する基質とは無関係に放出され、昆虫の侵入中にのみ放出される、幼虫状態を含む昆虫の代謝から特異的に生じるＶＯＣ（カテゴリー１のＶＯＣ）の存在は、昆虫の侵入を示し、一方、このようなＶＯＣが存在しないこと（非存在、不在）は、昆虫の侵入が存在しないこと（非存在、不在）を示す。
【００３７】
対照的に、昆虫が生育する基質とは無関係に放出されるが、昆虫以外の生物学的起源も有する可能性のある、幼虫状態を含む昆虫の代謝から特異的に生じるＶＯＣ（「カテゴリー２のＶＯＣ」）の存在は、昆虫の侵入の結論を可能にしない。しかしながら、このようなＶＯＣが存在しないことは、昆虫の侵入が存在しないことを示す。
【００３８】
幼虫状態を含む昆虫の代謝に特異的に起因するＶＯＣで、昆虫が生育する基質の作用として放出され、昆虫の侵入中にのみ放出されるもの（カテゴリー３のＶＯＣ）に関しては、その存在は、昆虫の侵入を示しているが、それが存在しないことは、昆虫の侵入が存在しないという結論を下すものではない。
【００３９】
これらの知見に基づいて、本発明者らは、以下のインクリメント（増加、増分、インクリメンテーション）に基づく計算方法を考案した。
【００４０】
ＶＯＣの存在が昆虫の侵入を示す場合にはＶＯＣの存在は値「１」だけインクリメント（増加）され、ＶＯＣの存在が昆虫の侵入の存在の結論を可能にしない場合には値「０」だけインクリメントされる。ＶＯＣの不在が昆虫の侵入の不在を示す場合にはＶＯＣの不在は値「−１」だけインクリメントされ、ＶＯＣの不在が昆虫の侵入の不在の結論を可能にしない場合には値「０」だけインクリメントされる。
【００４１】
以下の表１は、インクリメントの原理を要約する。
【００４２】
表１：インクリメント「ｉ」
【００４３】
【表１】
2021508248.tif 000005
【００４４】
しかしながら、この第１のステップｄ−１／は、それ自体では、侵入された環境を「健康である」環境から区別することを可能にしない。
【００４５】
したがって、この識別を可能にするために、重み付け（加重、重み）からなる第２のステップｄ−２／は、この第１のステップを完了することを可能にする。
【００４６】
参考（活発な侵入のない基質）の文脈で、実験室で見出されるが、昆虫の存在下で、より大きな相対量（少なくとも２倍高い量）で放出されるＶＯＣが、ここで考慮され、以下のように定義される「Ｐ」と呼ばれる因子によって重み付けされる：
【００４７】
【数４】
2021508248.tif 000006
【００４８】
これらのＶＯＣは「重み付けされたＶＯＣ」と呼ばれる。この重み付けは、実験室で昆虫のみが放出する化合物（「重み付けされていないＶＯＣ」）に対して、これらの化合物（「重み付けされたＶＯＣ」）の影響を低減することを目的としている。
【００４９】
したがって、ｎ個の「重み付けされたＶＯＣ」（ｎ＝「重み付けされたＶＯＣ」の数＝「係数１」／Ｐ）の検出は、１個の「重み付けされていないＶＯＣ」に等しい。
【００５０】
「係数１」とは、現場での（ｉｎ  ｓｉｔｕ）測定により実験的に決定された経験的な実数である。この係数は、その侵入が知られている（侵入された／侵入されていない）環境のパネルを用いた反復によって確立された。
【００５１】
この重み付けＰは、昆虫の存在下でのみ放出されるＶＯＣ「重み付けされていないＶＯＣ」の場合、１に等しい（Ｐ＝１）。このユニット重み付けは、各「重み付けされていないＶＯＣ」に同じ重要性を与えることを可能にする。
【００５２】
最後に、第３のステップｄ−３／は、値「３Ｉ」（３Ｉ指標）および「ＶＬ」をそれぞれ決定することを可能にする。
【００５３】
３Ｉ指標は次のようにインクリメントされる：
【００５４】
【数５】
2021508248.tif 000007
【００５５】
ｎ、ｊ、ｉ、Ｐ、ｉｊ、Ｐｊは上記のように定義される、すなわち：  ｎはターゲットＶＯＣの数を表し、
ｊは整数を表し、
ｉはステップｅ１／で定義されたインクリメント値を表し、
Ｐはステップｅ２／で定義された重み付け値を表し、
ｉｊはｊ番目のターゲットＶＯＣのインクリメントを表し、
Ｐｊはｊ番目のターゲットＶＯＣの重み付けを表す。
【００５６】
値（ＶＬ）は、すでに記述された公式に対応する、すなわち：
【００５７】
【数６】
2021508248.tif 000008
【００５８】
「係数２」とは、現場での測定により実験的に決定された経験的な実数である。「係数１」について前に述べたのと同様に、「係数１」の決定に用いられたのと同じ環境パネルによる反復によって「係数２」が確立された。
【００５９】
これらの係数「１」および「２」は、経験的アプローチによって、２つの別個のグループ（侵入されたおよび侵入されていない）を、その侵入の状態が知られている環境のパネルから識別することを可能にする。
【００６０】
指標（３Ｉ）がＶＬより厳密（完全、精密、精確、絶対、厳格）に（ｓｔｒｉｃｔｌｙ）大きい（３Ｉ＞ＶＬ）場合、環境は侵入されているが、逆に指標（３Ｉ）がＶＬ以下である（３Ｉ≦ＶＬ）場合、環境は侵入されていない。
【００６１】
本発明によれば、所定のターゲットＶＯＣは、好ましくは、２，２’−ｂｉ−１，３−ジオキソラン、酢酸ｎ−ブチル、１，３，５，７−シクロオクタテトラエン、アルファ−ピネン、１−プロパノール、メタンカルボチオール酸、３，３−ジメチル−１−ヘキセン、２−ブタノン、酢酸エチル、４−ヒドロキシ−２−ブタノン、１−ブタノール、２，５−ジメチル−フラン、２−エテニル−２−ブテナール、蟻酸ブチル、ピラジン、ピロール、１−ペンタノール、１−（３，４−ジメチルチエノ［２，３−ｂ］チオフェン−２−イル）−エタノン−オキシム、１，４−オクタジエン、１，３−オクタジエン、２−メチル−ピリミジン、１−ヘキサノール、２−ヘプタノン、２，５−ジメチル−ピラジン、カンフェン、２−オクタノン、１−メチル−４−（１−メチルエテニル）−シクロヘキセン、２−メチルデカン、アセトフェノン、２−ノネン−１−オール、１，１０−ジクロロデカン、ドデカナール、２−ペンチル−チオフェン、２−デセン−１−オール、ナフタレン、フタル酸ジエチルおよびこれらの混合物を含む群から選択される。
【００６２】
より詳細には、本発明の有利な実施形態によれば：
所定のターゲットカテゴリー１のＶＯＣは、２，２’−ｂｉ−１，３−ジオキソランおよび酢酸ｎ−ブチルを含む群から選択され、
所定のターゲットカテゴリー２のＶＯＣは、１，３，５，７−シクロオクタテトラエンおよびα−ピネンを含む群から選択され、
所定のターゲットカテゴリー３のＶＯＣは、１−プロパノール、メタンカルボチオール酸、３，３−ジメチル−１−ヘキセン、２−ブタノン、酢酸エチル、４−ヒドロキシ−２−ブタノン、１−ブタノール、２，５−ジメチル−フラン、２−エテニル−２−ブテナール、蟻酸ブチル、ピラジン、ピロール、１−ペンタノール、１−（３，４−ジメチルチエノ［２，３−ｂ］チオフェン−２−イル）−エタノン−オキシム、１，４−オクタジエン、１，３−オクタジエン、２−メチル−ピリミジン、１−ヘキサノール、２−ヘプタノン、２，５−ジメチル−ピラジン、カンフェン、２−オクタノン、１−メチル−４−（１−メチルエテニル）−シクロヘキセン、２−メチルデカン、アセトフェノン、２−ノネン−１−オール、１，１０−ジクロロデカン、ドデカナール、２−ペンチル−チオフェン、２−デセン−１−オール、ナフタレン、およびフタル酸ジエチルを含む群から選択される。
【００６３】
本発明による昆虫の侵入を検出する方法は、このような侵入を早期に、すなわち目に見える徴候が現れる前に検出するのに特に有用である。
【００６４】
本発明はまた、上記のように定義された昆虫の存在を検出する方法に関し、昆虫が幼虫状態にあることを特徴とする。
【００６５】
以下の実施例は、本発明の範囲を限定するものではなく、本発明を例示するものである。
【００６６】
〔実施例〕
以下に示す作業の目的は、第１の実験室段階において、幼虫段階での昆虫による基質の侵入中に放出されるターゲットＶＯＣのリストを決定することである。実際には、ＶＯＣのサンプルを採取（サンプリング）する前に、侵入された基質および侵入されていない基質が放出チャンバー内に配置される。
【００６７】
第２段階では、これらの昆虫が侵入している屋内環境または侵入していない屋内環境から採取した試料中に、ターゲットＶＯＣを探す。
【００６８】
〔材料および方法〕
〔生物学的材料〕
使用した昆虫種は、ケラトファゴー微小鱗翅目、衣類ガ（蛾）、Ｔｉｎｅｏｌａ  ｂｉｓｓｅｌｌｉｅｌｌａである。実験室段階では、繁殖局から得られたこの種の２〜３匹の幼虫が、「侵入されたチャンバー」と呼ばれるチャンバーに置かれた。
【００６９】
本発明の検出方法の一実施形態によれば、昆虫がＴｉｎｅｏｌａ  ｂｉｓｓｅｌｌｉｅｌｌａである場合、次のようになる：
−  係数１は１〜３の値を有し、好ましくは２に等しく、
−  係数２は３〜５の値を有し、好ましくは４に等しい。
【００７０】
〔生育基質〕
実験室段階では、ガに弱い２種類の基質が使用される：
−  ウール（羊毛）の織物、
−  ウサギの皮。
【００７１】
〔放出チャンバー〕
実験室段階では、ＣＳＴＢが開発した３００ｃｍ３の放出チャンバーを使用する。それらはガラス製であり、ＶＯＣサンプルを採取するためのＰＴＦＥバルブを備えている。
【００７２】
各一連の分析のために、ガを含まず、栄養基質、すなわちウールまたはウサギの皮のみを含有する参考（参照）チャンバーを使用した。次いで、放出チャンバーを、光から遠ざけ、２５℃の温度で、インキュベーター中でインキュベートする。インキュベーション時間は、実施した実験に応じて変化し、３〜６ヶ月である。
【００７３】
〔現場環境〕
３タイプの環境を調べた。視覚的診断と、フェロモントラップの使用と連動した診断とを行い、調べた場所の違いによる衣類ガの有無を決定した。これらは、イルデフランス領域にある宮殿（２室）、２つの住居、および、（侵入された馬車と小屋における）博物館である。
【００７４】
表２は、調査された環境およびそれらの侵入状況を記載する。
【００７５】
表２：調査環境と侵入状況
【００７６】
【表２】
2021508248.tif 000009
【００７７】
〔サンプリング〕
ＶＯＣは、吸着剤、ＴＥＮＡＸ（登録商標）ＴＡ（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）を入れたチューブに集められる。これは、２，６−ジフェニル−ｐ−フェニレンオキシドの吸着性ポリマーからなる無極性相である。このポリマーは、炭素数がＣ４ないしＣ２０の分子を保持することができる。サンプリングはアクティブで、ポンプを使用して実行される。サンプリング流量は１００ｃｍ３／分に固定され、サンプリング時間は、チャンバー容積を少なくとも１０回更新するのに充分である。
【００７８】
密閉空間で環境サンプリングを行う場合、流量は１５０ｃｍ／分で、サンプリング時間は１時間である。
【００７９】
〔分析〕
ＴＥＮＡＸ（登録商標）ＴＡのチューブの脱着は、ＡＴＤ  ４００、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ上で行われる。ＶＯＣは、ＶＦ−５ｍｓタイプ（Ａｇｉｌｅｎｔ）のカラムに同時に注入され、次いで、分離され、ＧＣ−ＭＳシステム（ＧＣ  ３８００−ＭＳ  Ｓａｔｕｒｎ  ２０００、Ｖａｒｉａｎ）で分析される。分析対象物は、それらの保持から、および、それらの質量スペクトルをＮＩＳＴ  ２００８ライブラリーと比較することによって、同定される。化合物の同定は、利用可能性に依存して、標準物質の通過によって確認される。
【００８０】
〔結果〕
〔実験室段階〕
この段階は、昆虫の基質侵入中に放出されるターゲットＶＯＣの一覧を同定することを可能にする。次いで、各ターゲットＶＯＣを、本出願に記載される３つのカテゴリー「カテゴリー１、２または３」（それらの特異性に従って生成されるＶＯＣの分類）のうちの１つに割り当てた。
【００８１】
参考文脈におけるターゲットＶＯＣ（「カテゴリー１、２、または３」）の存在または不在は、インクリメント「ｉ」、次いで重み付けＰ、最後に３Ｉ指標を決定することを可能にした。
【００８２】
この場合、それぞれ以下の式が得られる：
−  「重み付けされていないＶＯＣ」については、１に等しい重み付けＰ、
−  「重み付けけされたＶＯＣ」については、０．０８に等しい重み付けＰ。
【００８３】
重み付けＰを１未満（Ｐ  ＝０．０８）とすることで、「重み付けされたＶＯＣ」の影響を抑えることができる。したがって、「重み付けされていないＶＯＣ」と同じ効果を持つ重み付けされたＶＯＣが複数必要となる。
【００８４】
得られた結果を表３に示す。
【００８５】
「有無」のカラムは、０がＶＯＣの不在を示し、１がＶＯＣの存在を示す。
【００８６】
カラム「インクリメント」に関して、数字１、０、および−１は、表１に記載されるとおりである。
【００８７】
表３：侵入されていない、以前に侵入された、および侵入された基質におけるＶＯＣの放出
【００８８】
【表３】
2021508248.tif 000010
【００８９】
既に述べたように、Ｔｉｎｅｏｌａ  ｂｉｓｓｅｌｌｉｅｌｌａ専用の値（３Ｉ）については、係数１および２がそれぞれ２および４に固定される。
【００９０】
〔現場段階〕
この段階は、一方では実験室段階で同定されたターゲットＶＯＣのリストを、実際の環境で遭遇するいくつかのバックグラウンドノイズと比較することを可能にする。他方、この段階は、侵入された環境および侵入されていない環境における放出量を比較することを可能にする。
【００９１】
表４に試験成績をまとめている。
【００９２】
表４：侵入されたおよび侵入されていない環境からのＶＯＣの放出
【００９３】
【表４】
2021508248.tif 000011
【００９４】
〔値（ＶＬ）の計算〕
上限値ＶＬは、上記ステップｄ−３／で与えられた式を用いて計算された：
【００９５】
【数７】
2021508248.tif 000012
【００９６】
表３および表４から、１３個の「重み付けされていないＶＯＣ」（これらは侵入の場合にのみ存在するため）および２３個の「重み付けされたＶＯＣ」が存在することが分かる。
【００９７】
この場合、値ＶＬは、３．７１＝［１３＋（０．０８×２３）］／４に等しい。
【００９８】
上記の表３および表４に示した指標（３Ｉ）の値を以下の表５にまとめる。
【００９９】
侵入されていない条件および環境は、それぞれ、区分「実験室条件」の最初の５行および区分「現場環境」の最初の３行に対応する。
【０１００】
表５：指標３Ｉの値
【０１０１】
【表５】
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【０１０２】
〔結論：〕
すべての侵入された条件および環境は、予想通り、上限値ＶＬ（この場合は３．７１）より厳密に大きい指標（３Ｉ）を有する。対照的に、侵入されていない条件および環境のすべては、この同じ上限値以下の指標を有する。
【０１０３】
さらに、以前に侵入された２つの状態は３．７１未満の指標を有し、これは、いったん侵入が終了し、制御されると、残留ＶＯＣが存在しないことを反映している。
【０１０４】
したがって、指標（３Ｉ）は、衣類ガ、すなわちＴｉｎｅｏｌａ  ｂｉｓｓｅｌｌｉｅｌｌａの活動とよく相関している。
【０１０５】
したがって、指標（３Ｉ）および値ＶＬを構築するための本発明の方法は、幼虫段階での昆虫の検出を有利に可能にする。
【国際調査報告】
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