(57)【要約】  本明細書で提供されるのは、多官能性キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）ベース組成物および標的細胞に対する免疫反応の誘導におけるそれらの使用である。組成物は、癌などの過剰増殖障害の治療を含む用途を有する。提供される方法は通常、アダプターと組み合わせたＣＡＲ細胞の使用を含む。アダプターは、インビトロおよびインビボでのＣＡＲ細胞性免疫反応を調節、変更、および／または再指示する能力を付与する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、標的化抗原決定基の発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）およびアダプターを発現している細胞を含む、治療での使用に好適する組成物であって、
（ａ）前記ＣＡＲが、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合するＤドメイン、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプター、を含み、前記第１のＡＤが、ＡＦＰ  ｐ２６、ＡＦＰ、ＣＤ１２３、ＢＣＭＡ、またはＣＳ１であり、前記第２のＡＤが、ＣＳ１、ＢＣＭＡ、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ４５、ＣＤ１２３、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、またはＰＤＬ１であり、
（ｂ）前記ＣＡＲが、（ｉ）標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含み、
（ｃ）前記ＣＡＲが、（ｉ）標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含み、
（ｄ）前記ＣＡＲが、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）である抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含み、
（ｅ）前記ＣＡＲが、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤを含むＡＤＢＤを含み、
（ｆ）前記ＣＡＲが、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＤドメインを含み、
（ｇ）前記ＣＡＲが、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合するＤドメイン、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含み、
（ｈ）前記ＣＡＲが、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する第１のＤドメイン、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合する第２のＤドメインを含む、組成物。
【請求項２】
前記ＣＡＲが、下記の１つまたは複数を特徴とする、請求項１に記載の組成物。
（ａ）前記ＣＡＲが、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）ＡＤＢＤを含む；
（ｂ）前記ＣＡＲが、代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）ＡＤＢＤを含む；
（ｃ）前記ＣＡＲがＤドメインを含み、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号１７〜２６、および２７または配列番号４４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む；
（ｄ）前記ＣＡＲが２つのＡＤＢＤを含む；
（ｅ）前記ＣＡＲがＡＳＢＤおよびｓｃＦｖを含む；
（ｆ）前記ＣＡＲがＤドメインおよびｓｃＦｖを含む；
（ｇ）前記ＣＡＲが２つのＡＳＢＤを含む；
（ｈ）前記ＣＡＲが２つのＤドメインを含む；
（ｉ）前記ＣＡＲの細胞内ドメインがシグナル伝達ドメインである；
（ｊ）前記ＣＡＲの細胞内ドメインが、プライマリシグナル伝達ドメインを含む；
（ｋ）前記ＣＡＲの細胞内ドメインが、ＣＤ３ζプライマリシグナル伝達ドメインを含む；
（ｌ）前記ＣＡＲの細胞内ドメインが、共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む；
（ｍ）前記ＣＡＲの細胞内ドメインが、ＣＤ２８、４１ＢＢ、ＣＤ２７、およびＣＤ１３４から選択される共刺激シグナル伝達ドメインを含む；
（ｎ）前記ＣＡＲの細胞内ドメインが、４１ＢＢ共刺激シグナル伝達ドメインを含む；
（ｏ）前記ＣＡＲが、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＢＣＭＡ、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択される抗原に結合する；
（ｐ）前記ＣＡＲがＢＣＭＡに結合し、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号４４〜３３８、および３３９から選択される配列を含む；
（ｑ）前記ＣＡＲがＣＤ１２３に結合し、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号３４０〜７７および７７３から選択される配列を含む；
（ｒ）前記ＣＡＲがＣＤ１９に結合し、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号１０３０〜１０５８および１０５９から選択される配列を含む；
（ｓ）前記ＣＡＲがＣＤ２２に結合し、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号１０６０〜１０６８および１０６９から選択される配列を含む；
（ｔ）前記ＣＡＲがＣＳ１に結合し、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号７８０〜７９４および７９５から選択される配列を含む；
（ｕ）前記ＣＡＲがＨＥＲ２に結合し、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号８００〜８３９および８４０から選択される配列を含む；
（ｖ）前記ＣＡＲがＴＡＣＩまたはＢＡＦＦＲに結合する；
（ｗ）前記ＣＡＲがＰＤＬ１に結合し、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号１０１０〜１０１６、１０７４〜１０７８および１０７９から選択される配列を含む；
（ｘ）前記ＣＡＲがＡＦＰ  ｐ２６に結合し、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号８４１〜９８３および９８４から選択される配列を含む；
（ｙ）前記ＣＡＲが、別々の標的に結合する２つのＡＤＢＤを含む；
（ｚ）前記ＣＡＲは、ＣＤ１９およびＣＤ１２３に結合する；
（ａａ）前記ＣＡＲはＢＣＭＡおよびＣＳ１に結合する；
（ｂｂ）前記ＣＡＲはＣＤ２２およびＣＤ１２３に結合する；
（ｃｃ）前記ＣＡＲはＰＤＬ１およびＣＤ１２３に結合する；
（ｄｄ）前記ＣＡＲがＣＤ１９に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む；
（ｅｅ）前記ＣＡＲがＣＤ１９に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む；
（ｆｆ）前記ＣＡＲがＣＤ１９に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む；
（ｇｇ）前記ＣＡＲがＢＣＭＡに結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＳ１に結合する第２のＡＳＢＤを含む；
（ｈｈ）前記ＣＡＲがＢＣＭＡに結合する第１のＤドメインおよびＣＳ１に結合する第２のＤドメインを含む；
（ｉｉ）前記ＣＡＲがＣＳ１に結合するＤドメインおよびＢＣＭＡに結合するｓｃＦｖを含む；
（ｊｊ）前記ＣＡＲがＢＣＭＡに結合するＤドメインおよびＣＳ１に結合するｓｃＦｖを含む；
（ｋｋ）前記ＣＡＲがＣＤ２２に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む；
（ｌｌ）前記ＣＡＲがＣＤ２２に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む；
（ｍｍ）前記ＣＡＲがＣＤ２２に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む；
（ｎｎ）前記ＣＡＲがＰＤＬ１に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む；
（ｏｏ）前記ＣＡＲがＰＤＬ１に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む；
（ｐｐ）前記ＣＡＲがＰＤＬ１に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む；および
（ｑｑ）前記ＣＡＲがＣＤ１９に結合するＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む。
【請求項３】
前記アダプターが、下記の１つまたは複数を特徴とする、請求項１または請求項２に記載の組成物。
（ａ）前記アダプターがＡＦＰ  ｐ２６またはＡＦＰのエピトープであるＡＤを含み、任意選択で、配列番号１６または１１１７〜１１２３のアミノ酸残基を含む；
（ｂ）アダプターが腫瘍抗原のＡＤを含み、任意選択で、前記腫瘍抗原が、群：ＢＣＭＡ、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択される；
（ｃ）前記アダプターがｓｃＦｖであるＡＤＢＤを含む；
（ｄ）前記アダプターがＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む；
（ｅ）前記アダプターがＤドメインを含み、任意選択で、前記アダプターが、群：配列番号１７〜２６、および２７、または配列番号４４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む；
（ｆ）前記アダプターが２つのＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記ＡＤＢＤが、（ｉ）同じである、（ｉｉ）同じ抗原決定基に結合する、（ｉｉｉ）同じ抗原の異なるＡＤに結合する、（ｉｖ）同じ細胞上の異なる抗原に結合する、または（ｖ）異なる細胞上の異なる抗原に結合する；
（ｇ）前記アダプターが２つのＡＳＢＤを含む；
（ｈ）前記アダプターが二つのＤドメインを含み、任意選択で、前記アダプターが、群：配列番号４４〜１０７９から選択されるアミノ酸配列を含む；
（ｉ）前記アダプターがｓｃＦｖであるＡＤＢＤおよびＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む；
（ｊ）前記アダプターがｓｃＦｖであるＡＤＢＤおよびＤドメインであるＡＤＢＤを含む；
（ｋ）前記アダプターが、ＢＣＭＡ、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択されるメンバーに結合するＡＤＢＤを含む；
（ｌ）前記アダプターがＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記ＡＤＢＤが、群：配列番号４４〜３３８、および３３９から選択される配列を含む；
（ｍ）前記アダプターがＣＳ１に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記ＡＤＢＤが、配列番号７８０〜７９４、および７９５から選択される配列を含む；
（ｎ）前記アダプターがＨＥＲ２に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記ＡＤＢＤが、配列番号８００〜８３９、および８４０から選択される配列を含む；
（ｏ）前記アダプターがＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記ＡＤＢＤが、配列番号３４０〜７７２、および７７３から選択される配列を含む；
（ｐ）前記アダプターがＣＤ１９に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記ＡＤＢＤが、配列番号１０３０〜１０５８、および１０５９から選択される配列を含む；
（ｑ）前記アダプターがＣＤ２２に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記ＡＤＢＤが、配列番号１０６０〜１０６８、および１０６９から選択される配列を含む；
（ｒ）前記アダプターがＴＡＣＩに結合するＡＤＢＤを含む；
（ｓ）前記アダプターがＢＡＦＦＲに結合するＡＤＢＤを含む；
（ｔ）前記アダプターがＰＤＬ１に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記ＡＤＢＤが、配列番号１０１０〜１０１６、１０７４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む；
（ｕ）前記アダプターが二重特異性である；
（ｖ）前記アダプターがＣＤ１９に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む；
（ｗ）前記アダプターがＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤおよびＣＳ１に結合するＡＤＢＤを含む；
（ｘ）前記アダプターがＣＤ２２に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む；および
（ｙ）前記アダプターがＰＤＬ１に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれかに記載の組成物であって、
（ａ）前記標的細胞が腫瘍細胞であり、
（ｂ）前記標的細胞が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される腫瘍細胞であり、
（ｃ）前記標的細胞が多発性骨髄腫であり、
（ｄ）少なくとも１つの標的細胞が腫瘍細胞であり、任意選択で、前記腫瘍細胞が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択され、
（ｅ）第１と第２の標的細胞が腫瘍細胞であり、任意選択で、前記腫瘍細胞が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択され；
（ｆ）前記第１と第２の標的細胞が同じ型の腫瘍細胞であり、任意選択で、前記腫瘍細胞が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択され；
（ｇ）前記第１と第２の標的細胞が異なる型の腫瘍細胞であり、任意選択で、前記腫瘍細胞が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択され；
（ｈ）前記標的細胞が、乳癌、前立腺癌、卵巣癌、膵臓癌、結腸癌、および肺癌から選択される癌細胞であり、および／または
（ｉ）前記標的細胞が、乳癌または卵巣癌である、組成物。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれかに記載の組成物であって、
（ａ）前記ＣＡＲ発現細胞が免疫エフェクター細胞であり、
（ｂ）前記ＣＡＲ発現細胞がＴ細胞であり、または
（ｃ）前記ＣＡＲ発現細胞がＮＫ細胞である、組成物。
【請求項６】
前記標的細胞を請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法。
【請求項７】
標的細胞を死滅させる方法、標的細胞に免疫反応を伝達する方法、増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法、または血液癌を治療する方法であって、
（ａ）標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させるステップであって、
（１）前記標的細胞を含む組成物が、ＣＡＲを発現している細胞をさらに含み、前記ＣＡＲが、（ｉ）前記標的細胞上の第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、
（２）前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むステップ、
（ｂ）第１の標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させるステップであって、
（１）前記標的細胞を含む組成物がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞をさらに含み、前記ＣＡＲが、（ｉ）前記第１の標的細胞上の第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および
（２）前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むステップ、
（ｃ）標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させるステップであって、
（１）前記標的細胞を含む組成物がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞をさらに含み、前記ＣＡＲが、（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むステップ、および
（２）前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むステップ、
（ｄ）標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させるステップであって、
（１）前記標的細胞を含む組成物がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞をさらに含み、前記ＣＡＲが、（ｉ）第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および
（２）前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含むステップ、
（ｅ）標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させるステップであって、
（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）が前記標的細胞上に存在し、
（２）前記第１の標的細胞を含む組成物が、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターをさらに含み、および
（３）前記ＣＡＲが、（ｉ）前記標的細胞または前記アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むステップ、
（ｆ）標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させるステップであって、
（１）第１のＡＤが第１の標的細胞上に存在し、
（２）前記第１の標的細胞を含む組成物が、第２の標的細胞および（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターをさらに含み、および
（３）前記ＣＡＲが、（ｉ）前記第１の標的細胞または前記アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むステップ、
（ｇ）標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させるステップであって、
（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）が前記標的細胞上に存在し、
（２）前記標的細胞を含む組成物が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターをさらに含み、および
（３）前記ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むステップ、
（ｈ）標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させるステップであって、
（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）が前記標的細胞上に存在し、
（２）前記標的細胞を含む組成物が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターをさらに含み、および
（３）前記ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むステップを含む、方法。
【請求項８】
標的細胞を死滅させる方法、患者の標的細胞死滅を再指示する方法、患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法、患者の標的細胞に免疫反応を誘導する方法、患者の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法、患者の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶の治療を再指示する方法、患者の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶の治療を誘導する方法、患者の血液癌を治療する方法、患者の血液癌の治療を再指示する方法、または患者の血液癌の治療を誘導する方法であって、
（ａ）前記患者にアダプターを投与するステップであって、
（１）前記患者がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、前記ＣＡＲが、（ｉ）前記標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および
（２）前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むステップ、
（ｂ）前記患者にアダプターを投与するステップであって、
（１）前記患者がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、前記ＣＡＲが、（ｉ）第１の標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および
（２）前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むステップ、
（ｃ）前記患者にアダプターを投与するステップであって、
（１）前記患者がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、前記ＣＡＲが、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および
（２）前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むステップ、
（ｄ）前記患者にアダプターを投与するステップであって、
（１）前記患者がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、前記ＣＡＲが、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および
（２）前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含むステップ、
（ｅ）前記患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与するステップであって、
（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）および第２のＡＤが前記標的細胞上に存在し、
（２）前記患者が、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の前記第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターで治療されており、および
（３）前記ＣＡＲが、（ｉ）前記標的細胞または前記アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むステップ、
（ｆ）前記患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与するステップであって、
（１）前記患者が、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）および（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターで治療されており、および
（２）前記ＣＡＲが、（ｉ）前記アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むステップ、
（ｇ）前記患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与するステップであって、
（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）が前記標的細胞上に存在し、
（２）前記患者が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており、および
（３）前記ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むステップ、
（ｈ）前記患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与するステップであって、
（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）が前記標的細胞上に存在し、
（２）前記患者が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており、および
（３）前記ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むステップ、
（ｉ）前記患者にアダプターを投与するステップであって、
（１）前記患者がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、前記ＣＡＲが、（ｉ）前記標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および
（２）前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むステップ、
（ｊ）前記患者にアダプターを投与するステップであって、
（１）前記患者がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、前記ＣＡＲが、（ｉ）第１の標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および
（２）前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むステップ、
（ｋ）前記患者にアダプターを投与するステップであって、
（１）前記患者がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、前記ＣＡＲが、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および
（２）前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むステップ、
（ｌ）前記患者にアダプターを投与するステップであって、
（１）前記患者がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、前記ＣＡＲが、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、および
（２）前記アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含むステップ、
（ｍ）前記患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与するステップであって、
（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）および第２のＡＤが前記標的細胞上に存在し、
（２）前記患者が、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の前記第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターで治療されており、および
（３）前記ＣＡＲが、（ｉ）前記標的細胞または前記アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むステップ、
（ｎ）前記患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与するステップであって、
（１）前記患者が、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）および（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターで治療されており、および
（２）前記ＣＡＲが、（ｉ）前記アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むステップ、
（ｏ）前記患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含むステップであって、
（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）が前記標的細胞上に存在し、
（２）前記患者が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており、および
（３）前記ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むステップ、
（ｐ）前記患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与するステップであって、
（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）が前記標的細胞上に存在し、
（２）前記患者が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており、および
（３）前記ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むステップを含む、方法。
【請求項９】
前記増殖性障害、癌または血液癌が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、脊髄形成異常症、乳癌、前立腺癌、卵巣癌、膵臓癌、結腸癌、および肺癌から選択される、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＣＡＲが、下記の１つまたは複数を特徴とする、請求項７〜９のいずれか１項に記載の方法。
（ａ）前記ＣＡＲが、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）ＡＤＢＤを含む；
（ｂ）前記ＣＡＲが、代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）ＡＤＢＤを含む；
（ｃ）前記ＣＡＲがＤドメインを含み、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号１７〜２６、および２７または配列番号４４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む；
（ｄ）前記ＣＡＲが２つのＡＤＢＤを含む；
（ｅ）前記ＣＡＲがＡＳＢＤおよびｓｃＦｖを含む；
（ｆ）前記ＣＡＲがＤドメインおよびｓｃＦｖを含む；
（ｇ）前記ＣＡＲが２つのＡＳＢＤを含む；
（ｈ）前記ＣＡＲが２つのＤドメインを含む；
（ｉ）前記ＣＡＲの細胞内ドメインがシグナル伝達ドメインである；
（ｊ）前記ＣＡＲの細胞内ドメインが、プライマリシグナル伝達ドメインを含む；
（ｋ）前記ＣＡＲの細胞内ドメインが、ＣＤ３ζプライマリシグナル伝達ドメインを含む；
（ｌ）前記ＣＡＲの細胞内ドメインが、共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む；
（ｍ）前記ＣＡＲの細胞内ドメインが、ＣＤ２８、４１ＢＢ、ＣＤ２７、およびＣＤ１３４から選択される共刺激シグナル伝達ドメインを含む；
（ｎ）前記ＣＡＲの細胞内ドメインが、４１ＢＢ共刺激シグナル伝達ドメインを含む；
（ｏ）前記ＣＡＲが、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＢＣＭＡ、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択される抗原に結合する；
（ｐ）前記ＣＡＲがＢＣＭＡに結合し、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号４４〜３３８、および３３９から選択される配列を含む；
（ｑ）前記ＣＡＲがＣＤ１２３に結合し、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号３４０〜７７および７７３から選択される配列を含む；
（ｒ）前記ＣＡＲがＣＤ１９に結合し、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号１０３０〜１０５８および１０５９から選択される配列を含む；
（ｓ）前記ＣＡＲがＣＤ２２に結合し、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号１０６０〜１０６８および１０６９から選択される配列を含む；
（ｔ）前記ＣＡＲがＣＳ１に結合し、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号７８０〜７９４および７９５から選択される配列を含む；
（ｕ）前記ＣＡＲがＨＥＲ２に結合し、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号８００〜８３９および８４０から選択される配列を含む；
（ｖ）前記ＣＡＲがＴＡＣＩまたはＢＡＦＦＲに結合する；
（ｗ）前記ＣＡＲがＰＤＬ１に結合し、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号１０１０〜１０１６、１０７４〜１０７８および１０７９から選択される配列を含む；
（ｘ）前記ＣＡＲがＡＦＰ  ｐ２６に結合し、任意選択で、前記ＣＡＲが、群：配列番号８４１〜９８３および９８４から選択される配列を含む；
（ｙ）前記ＣＡＲが、別々の標的に結合する２つのＡＤＢＤを含む；
（ｚ）前記ＣＡＲは、ＣＤ１９およびＣＤ１２３に結合する；
（ａａ）前記ＣＡＲはＢＣＭＡおよびＣＳ１に結合する；
（ｂｂ）前記ＣＡＲはＣＤ２２およびＣＤ１２３に結合する；
（ｃｃ）前記ＣＡＲはＰＤＬ１およびＣＤ１２３に結合する；
（ｄｄ）前記ＣＡＲがＣＤ１９に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む；
（ｅｅ）前記ＣＡＲがＣＤ１９に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む；
（ｆｆ）前記ＣＡＲがＣＤ１９に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む；
（ｇｇ）前記ＣＡＲがＢＣＭＡに結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＳ１に結合する第２のＡＳＢＤを含む；
（ｈｈ）前記ＣＡＲがＢＣＭＡに結合する第１のＤドメインおよびＣＳ１に結合する第２のＤドメインを含む；
（ｉｉ）前記ＣＡＲがＣＳ１に結合するＤドメインおよびＢＣＭＡに結合するｓｃＦｖを含む；
（ｊｊ）前記ＣＡＲがＢＣＭＡに結合するＤドメインおよびＣＳ１に結合するｓｃＦｖを含む；
（ｋｋ）前記ＣＡＲがＣＤ２２に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む；
（ｌｌ）前記ＣＡＲがＣＤ２２に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む；
（ｍｍ）前記ＣＡＲがＣＤ２２に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む；
（ｎｎ）前記ＣＡＲがＰＤＬ１に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む；
（ｏｏ）前記ＣＡＲがＰＤＬ１に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む；
（ｐｐ）前記ＣＡＲがＰＤＬ１に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む；および
（ｑｑ）前記ＣＡＲがＣＤ１９に結合するＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む。
【請求項１１】
前記アダプターが、下記の１つまたは複数を特徴とする、請求項７〜１０のいずれか１項に記載の方法。
（ａ）前記アダプターがＡＦＰ  ｐ２６またはＡＦＰのエピトープであるＡＤを含み、任意選択で、配列番号１６または１１１７〜１１２３のアミノ酸残基を含む；
（ｂ）アダプターが腫瘍抗原のＡＤを含み、任意選択で、前記腫瘍抗原が、群：ＢＣＭＡ、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択される；
（ｃ）前記アダプターがｓｃＦｖであるＡＤＢＤを含む；
（ｄ）前記アダプターがＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む；
（ｅ）前記アダプターがＤドメインを含み、任意選択で、前記アダプターが、群：配列番号１７〜２６、および２７、または配列番号４４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む；
（ｆ）前記アダプターが２つのＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記ＡＤＢＤが、（ｉ）同じである、（ｉｉ）同じ抗原決定基に結合する、（ｉｉｉ）同じ抗原の異なるＡＤに結合する、（ｉｖ）同じ細胞上の異なる抗原に結合する、または（ｖ）異なる細胞上の異なる抗原に結合する；
（ｇ）前記アダプターが２つのＡＳＢＤを含む；
（ｈ）前記アダプターが二つのＤドメインを含み、任意選択で、前記アダプターが、群：配列番号４４〜１０７９から選択されるアミノ酸配列を含む；
（ｉ）前記アダプターがｓｃＦｖであるＡＤＢＤおよびＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む；
（ｊ）前記アダプターがｓｃＦｖであるＡＤＢＤおよびＤドメインであるＡＤＢＤを含む；
（ｋ）前記アダプターが、ＢＣＭＡ、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＳ１、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択されるメンバーに結合するＡＤＢＤを含む； 
（ｌ）前記アダプターがＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記ＡＤＢＤが、群：配列番号４４〜３３８、および３３９から選択される配列を含む；
（ｍ）前記アダプターがＣＳ１に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記ＡＤＢＤが、配列番号７８０〜７９４、および７９５から選択される配列を含む；
（ｎ）前記アダプターがＨＥＲ２に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記ＡＤＢＤが、配列番号８００〜８３９、および８４０から選択される配列を含む； 
（ｏ）前記アダプターがＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記ＡＤＢＤが、配列番号３４０〜７７２、および７７３から選択される配列を含む；
（ｐ）前記アダプターがＣＤ１９に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記ＡＤＢＤが、配列番号１０３０〜１０５８、および１０５９から選択される配列を含む；
（ｑ）前記アダプターがＣＤ２２に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記ＡＤＢＤが、配列番号１０６０〜１０６８、および１０６９から選択される配列を含む；
（ｒ）前記アダプターがＴＡＣＩに結合するＡＤＢＤを含む；
（ｓ）前記アダプターがＢＡＦＦＲに結合するＡＤＢＤを含む；
（ｔ）前記アダプターがＰＤＬ１に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記ＡＤＢＤが、配列番号１０１０〜１０１６、１０７４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む；
（ｕ）前記アダプターが二重特異性である；
（ｖ）前記アダプターがＣＤ１９に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む；
（ｗ）前記アダプターがＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤおよびＣＳ１に結合するＡＤＢＤを含む；
（ｘ）前記アダプターがＣＤ２２に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む；および
（ｙ）前記アダプターがＰＤＬ１に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む。
【請求項１２】
請求項７〜１１のいずれか１項に記載の方法であって、
（ａ）前記標的細胞が腫瘍細胞であり、
（ｂ）前記標的細胞が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される腫瘍細胞であり、
（ｃ）前記標的細胞が多発性骨髄腫であり、
（ｄ）少なくとも１つの標的細胞が腫瘍細胞であり、任意選択で、前記腫瘍細胞が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択され、
（ｅ）第１と第２の標的細胞が腫瘍細胞であり、任意選択で、前記腫瘍細胞が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択され；
（ｆ）前記第１と第２の標的細胞が同じ型の腫瘍細胞であり、任意選択で、前記腫瘍細胞が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択され；
（ｇ）前記第１と第２の標的細胞が異なる型の腫瘍細胞であり、任意選択で、前記腫瘍細胞が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択され；
（ｊ）前記標的細胞が、乳癌、前立腺癌、卵巣癌、膵臓癌、結腸癌、および肺癌から選択される癌細胞であり、および／または
（ｈ）前記標的細胞が、乳癌または卵巣癌である、方法。
【請求項１３】
請求項７〜１２のいずれか１項に記載の方法であって、
（ａ）前記ＣＡＲ発現細胞が免疫エフェクター細胞であり、
（ｂ）前記ＣＡＲ発現細胞がＴ細胞であり、または
（ｃ）前記ＣＡＲ発現細胞がＮＫ細胞である、方法。
【請求項１４】
遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞であって、
ａ．（１）ヒトＣＤ４５抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および
ｂ．前記遺伝子改変細胞上のヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、
前記遺伝子改変細胞が、インビトロアッセイでＣＤ４５  ＡＤ発現細胞に対する免疫反応を誘導でき、遺伝子改変細胞が前記ＣＤ４５  ＡＤを発現しない、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞。
【請求項１５】
標的細胞を死滅させる方法または標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、請求項１４に記載の遺伝子改変細胞を前記標的細胞と接触させることを含み、前記標的細胞がヒトＣＤ４５を発現している、方法。
【請求項１６】
標的細胞に免疫反応を誘導する方法、対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法、対象のリンパ球を枯渇させる方法、対象のメモリーＴ細胞を枯渇させる方法、対象の自己免疫疾患または障害を治療する方法、または対象の血液癌を治療する方法、または移植のために対象を前処置する方法であって、有効量の請求項１４に記載の遺伝子改変細胞を、それを必要としている前記対象に投与することを含む方法。
【請求項１７】
遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞であって、
ａ．（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および
ｂ．前記遺伝子改変細胞上の少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、
前記第１のＡＤが少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤではなく、インビトロアッセイでアダプターと組み合わせて使用される前記遺伝子改変細胞がＣＤ４５  ＡＤ発現細胞に対する免疫反応を誘導でき、前記アダプターが前記第１のＡＤおよび少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、前記遺伝子改変細胞が少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤを発現しない、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞。
【請求項１８】
請求項１７に記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび前記標的細胞に接触させることを含む標的細胞を死滅させるまたは標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、前記標的細胞がＣＤ４５を発現し、前記アダプターが前記第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、任意選択で、前記標的細胞が血液癌細胞である方法。
【請求項１９】
標的細胞に免疫反応を誘導する方法、対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法、対象のリンパ球を枯渇させる方法、対象のメモリーＴ細胞を枯渇させる方法、対象の自己免疫疾患または障害を治療する方法、または対象の血液癌を治療する方法、または移植のために対象を前処置する方法であって、
ａ．請求項１７に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量および前記第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている前記対象に投与するステップ、
ｂ．請求項２３４に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている前記対象に投与するステップであって、前記対象が、前記第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されているステップ、または
ｃ．前記第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与するステップであって、前記対象が請求項１７に記載の遺伝子改変細胞を投与されているステップを含む方法。
【請求項２０】
遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞であって、
ａ．（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む２つ以上のＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および
ｂ．前記遺伝子改変細胞上の前記第１のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、
前記遺伝子改変細胞が前記第１のＡＤを発現しない、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞。
【請求項２１】
標的細胞を死滅させるまたは標的に免疫反応を伝達する方法であって、
ａ．請求項２０に記載の遺伝子改変細胞を前記標的細胞と接触させるステップ、
ｂ．請求項２０に記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび前記標的細胞と接触させるステップであって、前記アダプターが、前記ＣＡＲおよび第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むステップ、
ｃ．請求項２０に記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび前記標的細胞と接触させるステップであって、前記アダプターが前記ＣＡＲおよび前記標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むステップ、または
ｄ．請求項２０に記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび癌細胞と接触させるステップであって、前記アダプターが、前記ＣＡＲおよび前記癌細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むステップ、を含む方法。
【請求項２２】
標的細胞に免疫反応を誘導する方法、対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法、対象のリンパ球を枯渇させる方法、対象のメモリーＴ細胞を枯渇させる方法、対象の自己免疫疾患または障害を治療する方法、または対象の血液癌を治療する方法、または移植のために対象を前処置する方法であって、
ａ．請求項２０に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている前記対象に投与するステップ、
ｂ．請求項２０に記載の前記遺伝子改変細胞の治療有効量ならびに前記ＣＡＲおよび前記標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている前記対象に投与するステップ、
ｃ．請求項２０に記載の前記遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている前記対象に投与するステップであって、前記対象が前記ＣＡＲおよび前記標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むステップ、
ｄ．前記ＣＡＲおよび前記標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与するステップであって、前記対象が請求項２０に記載の遺伝子改変細胞を投与されているステップを含む方法。
【請求項２３】
遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞であって、
ａ．（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および
ｂ．前記遺伝子改変細胞上の第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、
アダプターと組み合わせて使用される前記遺伝子改変細胞が、インビトロアッセイで前記第２のＡＤ発現細胞に対する免疫反応を誘導でき、前記アダプターが前記第１のＡＤおよび前記第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、前記遺伝子改変細胞が前記第２のＡＤを発現しない、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞。
【請求項２４】
遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞であって、
ａ．（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む２つ以上のＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および
ｂ．前記遺伝子改変細胞上の第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、
アダプターと組み合わせて使用される前記遺伝子改変細胞が、インビトロアッセイで前記第２のＡＤ発現細胞に対する免疫反応を誘導でき、前記アダプターが前記第１のＡＤおよび前記第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、前記遺伝子改変細胞が前記第２のＡＤを発現しない、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞。
【請求項２５】
請求項２３または請求項２４に記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび前記標的細胞に接触させることを含む標的細胞を死滅させるまたは標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、前記アダプターが前記第１のＡＤおよび前記第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、前記第２のＡＤが前記標的細胞上で発現され、任意選択で、前記標的細胞が血液癌細胞である方法。
【請求項２６】
標的細胞に免疫反応を誘導する方法、対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法、対象のリンパ球を枯渇させる方法、対象のメモリーＴ細胞を枯渇させる方法、対象の自己免疫疾患または障害を治療する方法、または対象の血液癌を治療する方法、または移植のために対象を前処置する方法であって、
ａ．請求項２３または請求項２４に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている前記対象に投与するステップ、
ｂ．請求項２３または請求項２４に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量および前記第１のＡＤおよび前記第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている前記対象に投与するステップであって、前記第２のＡＤが前記標的細胞上で発現されているステップ、
ｃ．請求項２３または請求項２４に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている前記対象に投与するステップであって、前記対象が前記第１のＡＤおよび前記第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されており、前記第２のＡＤが前記標的細胞上で発現されているステップ、または
ｄ．前記第１のＡＤおよび前記第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与するステップであって、前記対象が請求項２３または請求項２４に記載の前記遺伝子改変を投与されており、前記第２のＡＤが前記標的細胞上で発現されているステップ、を含む方法。
【請求項２７】
（１）抗原決定基（ＡＤ）および（ｂ）１つまたは複数の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む単離アダプターポリペプチドであって、少なくとも１つのＡＤＢＤがヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合し、請求項１７に記載の遺伝子改変細胞の存在下で、アダプターとＣＤ４５  ＡＤ発現標的細胞とを接触させることにより、インビトロアッセイにおいて前記標的細胞に対して前記遺伝子改変細胞による免疫反応を誘導できる、単離アダプターポリペプチド。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
遺伝子改変Ｔ細胞の養子移入は、急速に進化している癌の革新的治療である。キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）遺伝子改変Ｔ細胞は、持続的機能免疫を提供する能力を有する再生可能な薬物である。臨床的有効性は、一連の血液癌においてＣＤ１９  ＣＡＲ  Ｔで実証され、さらに固形腫瘍における他の遺伝子改変ＣＡＲ  Ｔに関する有望な早期臨床データが報告されている。しかし、ＣＡＲ技術のその実質的な能力をより完全に実現可能にするには、その前に、重大な課題を解決する必要がある。
【０００２】
現在のＣＡＲ  Ｔ細胞を用いた臨床試験では、ＣＡＲ  Ｔ細胞が抗原逃避および癌または腫瘍表現型の固有の不均一性に対処できないために、１年またはそれ未満の間での高い比率の再発が認められている。さらに、現在のＣＡＲ技術は、癌または腫瘍表現型の変化に対応できない。例えば、固形腫瘍では、現在のＣＡＲ技術は、腫瘍標的の不均一性であること、および経時的に発現した抗原性標的拡張セットを認識するようにＣＡＲ  Ｔ細胞を再プログラムできないことにより、限られた効力しか示さない。臨床的反応の耐久性および持続可能性の改善に加えて、現在のＣＡＲ細胞ベース技術の使用に対する他の重要な障害には、白血病以外の癌における使用のための、ＣＡＲ  Ｔ細胞の生成に必要な時間、ＣＡＲ細胞の準最適特異性、効力、および安全性が含まれる。従って、同時および／または逐次標的多重特異性およびインビボＣＡＲ細胞性免疫反応を調節、変更、または再指示する能力を提供するＣＡＲ細胞ベース技術が必要とされている。
【０００３】
骨髄移植（ＢＭＴ）および造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）は、どのような血液または免疫疾患も矯正する可能性を秘めている。Ｃｚｅｃｈｏｗｉｃｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １２８（２２）：４９３（２０１６）。それらの大きな潜在能力にも関わらず、ＢＭＴおよびＨＳＣＴの臨床使用は、移植およびその後のドナーＨＳＣ生着に向けて患者の準備を行う現在の高用量化学療法／照射移植前処置に関連する強い安全性および毒性リスクがあるために、かなり制限されている。患者が経験する最もよくある毒性には、好中球減少症、感染症、貧血、粘膜炎、不妊症、臓器損傷、特に骨髄コンパートメントおよび二次性悪性腫瘍が挙げられる。これらの毒性移植前処置の完全な排除は、ＢＭＴおよびＨＳＣＴの安全性特性を劇的に改善し、多くのより非悪性の血液学的障害、多種多様の自己免疫障害を含む潜在的用途を拡大し、ならびに実質臓器移植を容易にするはずである。従って、現在の高用量化学療法／照射に関連する毒性を制限または排除し、同時に、根底にある病状も効果的に治療する改善された移植前処置の開発が必要とされている。
【発明の概要】
【０００４】
本明細書で提供されるのは、多官能性キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）ベース組成物および標的細胞に対する免疫反応の誘導におけるそれらの使用である。組成物は、癌などの過剰増殖障害の治療を含む用途を有する。提供される方法は通常、アダプターと組み合わせたＣＡＲ細胞の使用を含む。アダプターは、インビトロおよびインビボでのＣＡＲ細胞性免疫反応を調節、変更、および／または再指示する能力を付与する。
【０００５】
本開示は、（ａ）抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞、および（ｂ）（ｉ）抗原決定基（ＡＤ）および（ｉｉ）ＡＤＢＤを含む、可溶性タンパク質（「アダプター」）を含む組成物に関する。本開示はまた、本明細書で提供される組成物を用いて、本明細書で提供される組成物の治療適用を含む標的細胞を死滅させる方法も提供する。
【０００６】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むＣＡＲを発現している細胞；および（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプター、を含む組成物を提供する。
【０００７】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むＣＡＲを発現している細胞；および（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプター、を含む組成物を提供する。
【０００８】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）第１のＡＤに結合する代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）であるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むＣＡＲを発現している細胞；および（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプター、を含む組成物を提供する。
【０００９】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むＣＡＲを発現している細胞；および（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤを含むＡＤＢＤを含むアダプター、を含む組成物を提供する。
【００１０】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むＣＡＲを発現している細胞；および（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＤドメインを含むアダプター、を含む組成物を提供する。
【００１１】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）第１のＡＤに結合するＤドメイン、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むＣＡＲを発現している細胞；および（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプター、を含む組成物を提供する。
【００１２】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）第１のＡＤに結合する第１のＤドメイン、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むＣＡＲを発現している細胞；および（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合する第２のＤドメインを含むアダプター、を含む組成物を提供する。
【００１３】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法を提供し、（ａ）標的細胞を含む組成物は、ＣＡＲを発現している細胞をさらに含み、ＣＡＲは、（ｉ）前記標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００１４】
いくつかの実施形態では、本開示は、第１の標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含む１個または複数の標的細胞を死滅させる方法を提供し、（ａ）標的細胞を含む組成物は、ＣＡＲを発現している細胞をさらに含み、ＣＡＲは、（ｉ）前記第１の標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００１５】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法を提供し、（ａ）標的細胞を含む組成物は、ＣＡＲを発現している細胞をさらに含み、ＣＡＲは、（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００１６】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法を提供し、（ａ）標的細胞を含む組成物は、ＣＡＲを発現している細胞をさらに含み、ＣＡＲは、（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。
【００１７】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を含む組成物を、ＣＡＲを発現している細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）第１の標的細胞を含む組成物は、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００１８】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を含む組成物を、ＣＡＲを発現している細胞と接触させることを含む１個または複数の標的細胞を死滅させる方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、第１の標的細胞上に存在し；（ｂ）第１の標的細胞を含む組成物は、第２の標的細胞および（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）第１の標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００１９】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を含む組成物を、ＣＡＲを発現している細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）標的細胞を含む組成物は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００２０】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を含む組成物を、ＣＡＲを発現している細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）標的細胞を含む組成物は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００２１】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法を提供し、（ａ）標的細胞を含む組成物は、ＣＡＲを発現している細胞をさらに含み、ＣＡＲは、（ｉ）前記標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００２２】
いくつかの実施形態では、本開示は、第１の標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含む１個または複数の標的細胞に免疫反応を伝達する方法を提供し、（ａ）標的細胞を含む組成物は、ＣＡＲを発現している細胞をさらに含み、ＣＡＲは、（ｉ）前記第１の標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００２３】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法を提供し、（ａ）標的細胞を含む組成物は、ＣＡＲを発現している細胞をさらに含み、ＣＡＲは、（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００２４】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法を提供し、（ａ）標的細胞を含む組成物は、ＣＡＲを発現している細胞をさらに含み、ＣＡＲは、（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。
【００２５】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を含む組成物をＣＡＲと接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）第１の標的細胞を含む組成物は、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００２６】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を含む組成物を、ＣＡＲを発現している細胞と接触させることを含む１個または複数の標的細胞に免疫反応を伝達する方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、第１の標的細胞上に存在し；（ｂ）第１の標的細胞を含む組成物は、第２の標的細胞および（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）第１の標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００２７】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を含む組成物をＣＡＲと接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）標的細胞を含む組成物は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００２８】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を含む組成物をＣＡＲと接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法を提供し、（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）は、標的細胞上に存在し；（ｂ）標的細胞を含む組成物は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００２９】
いくつかの実施形態では、本開示は、アダプターを患者に投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法を提供し、（ａ）患者は、ＣＡＲを発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）前記標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００３０】
いくつかの実施形態では、本開示は、アダプターを患者に投与することを含む患者の標的細胞の死滅を再指示する方法を提供し、（ａ）患者は、ＣＡＲを発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１の標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００３１】
いくつかの実施形態では、本開示は、アダプターを患者に投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法を提供し、（ａ）患者は、ＣＡＲを発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００３２】
いくつかの実施形態では、本開示は、アダプターを患者に投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法を提供し、（ａ）患者は、ＣＡＲを発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。
【００３３】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法を提供し、（ａ）第１のＡＤおよび第２のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）患者は、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターで治療されており；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００３４】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む患者の標的細胞の死滅を誘導する方法を提供し、（ａ）患者は、（ｉ）第１のＡＤ および （ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターで治療されており；および（ｂ）ＣＡＲは、（ｉ）アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００３５】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）患者は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤおよび（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００３６】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）患者は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤおよび（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００３７】
いくつかの実施形態では、本開示は、アダプターを患者に投与することを含む患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法を提供し、（ａ）患者は、ＣＡＲを発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）前記標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００３８】
いくつかの実施形態では、本開示は、アダプターを患者に投与することを含む患者の標的細胞に免疫反応を再指示する方法を提供し、（ａ）患者は、ＣＡＲを発現している細胞治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１の標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００３９】
いくつかの実施形態では、本開示は、アダプターを患者に投与することを含む患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法を提供し、（ａ）患者は、ＣＡＲを発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００４０】
いくつかの実施形態では、本開示は、アダプターを患者に投与することを含む患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法を提供し、（ａ）患者は、ＣＡＲを発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。
【００４１】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法を提供し、（ａ）第１のＡＤおよび第２のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）患者は、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターで治療されており；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００４２】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む患者の標的細胞に免疫反応を誘導する方法を提供し、（ａ）患者は、（ｉ）第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターで治療されており；および（ｂ）ＣＡＲは、（ｉ）アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００４３】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）患者は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤおよび（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００４４】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）患者は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤおよび（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００４５】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を含む組成物を、ＣＡＲを発現している細胞と接触させることを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）標的細胞を含む組成物は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００４６】
いくつかの実施形態では、本開示は、患者にアダプターを投与することを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法を提供し、（ａ）患者は、ＣＡＲを発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）前記標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００４７】
いくつかの実施形態では、本開示は、患者にアダプターを投与することを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶の治療を再指示する方法を提供し、（ａ）患者は、ＣＡＲを発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１の標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００４８】
いくつかの実施形態では、本開示は、患者にアダプターを投与することを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法を提供し、（ａ）患者は、ＣＡＲを発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００４９】
いくつかの実施形態では、本開示は、患者にアダプターを投与することを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法を提供し、（ａ）患者は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。
【００５０】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法を提供し、（ａ）第１のＡＤおよび第２のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）患者は、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターで治療されており；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００５１】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶の治療を誘導する方法を提供し、（ａ）患者は、（ｉ）第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターで治療されており；および（ｂ）ＣＡＲは、（ｉ）アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００５２】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）患者は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤおよび（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００５３】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）患者は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤおよび（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００５４】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を含む組成物を、ＣＡＲを発現している細胞と接触させることを含む血液癌を治療する方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）標的細胞を含む組成物は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００５５】
いくつかの実施形態では、本開示は、アダプターを患者に投与することを含む血液癌を治療する方法を提供し、（ａ）患者は、ＣＡＲを発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）前記標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００５６】
いくつかの実施形態では、本開示は、患者にアダプターを投与することを含む血液癌の治療を再指示する方法を提供し、（ａ）患者は、ＣＡＲを発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１の標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００５７】
いくつかの実施形態では、本開示は、アダプターを患者に投与することを含む血液癌を治療する方法を提供し、（ａ）患者は、ＣＡＲを発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【００５８】
いくつかの実施形態では、本開示は、アダプターを患者に投与することを含む血液癌を治療する方法を提供し、（ａ）患者は、ＣＡＲを発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。
【００５９】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む血液癌を治療する方法を提供し、（ａ）第１のＡＤおよび第２のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）患者は、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターで治療されており；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００６０】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む血液癌の治療を誘導する方法を提供し、（ａ）患者は、（ｉ）第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターで治療されており；および（ｂ）ＣＡＲは、（ｉ）アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００６１】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む血液癌を治療する方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）患者は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤおよび（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００６２】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む血液癌を治療する方法を提供し、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）患者は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤおよび（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【００６３】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（１）ヒトＣＤ４５抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；（ｂ）遺伝子改変細胞上のヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞を提供し、遺伝子改変細胞は、インビトロアッセイでＣＤ４５  ＡＤ発現細胞に対する免疫反応を誘導でき、遺伝子改変細胞はＣＤ４５  ＡＤを発現しない。
【００６４】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞と接触させることを含むヒトＣＤ４５発現標的細胞を死滅させる方法を提供し、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞は、（ａ）（１）ヒトＣＤ４５抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；（ｂ）遺伝子改変細胞上のヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む。
【００６５】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞と接触させることを含むヒトＣＤ４５発現標的細胞に免疫反応を伝達する方法を提供し、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞は、（ａ）（１）ヒトＣＤ４５抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；（ｂ）遺伝子改変細胞上のヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む。
【００６６】
いくつかの実施形態では、本開示は、治療有効量の遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法を提供し、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞は、（ａ）（１）ヒトＣＤ４５抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；（ｂ）遺伝子改変細胞上のヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む。
【００６７】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；（ｂ）遺伝子改変細胞上の少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞を提供し、第１のＡＤは少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤではなく、インビトロアッセイでアダプターと組み合わせて使用される遺伝子改変細胞はＣＤ４５発現細胞に対する免疫反応を誘導でき、アダプターは第１のＡＤおよび少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、遺伝子改変細胞は少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤを発現しない。
【００６８】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞およびアダプターと接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法を提供し、標的細胞はＣＤ４５を発現し、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞は、（ａ）（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｂ）遺伝子改変細胞上の少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、アダプターは第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含む。
【００６９】
いくつかの実施形態では、本開示は、標的細胞を遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞およびアダプターと接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法を提供し、標的細胞はＣＤ４５を発現し、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞は、（ａ）（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｂ）遺伝子改変細胞上の少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、アダプターは第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含む。
【００７０】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｉｉ）遺伝子改変細胞上の少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む、治療有効量の遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞を、それを必要としている対象に投与すること；および（ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含む治療有効量のアダプターを対象に投与することを含む対象のＣＤ４５発現標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法を提供する。
【００７１】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ｉ）（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｉｉ）遺伝子改変細胞上の少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む、治療有効量の遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞を、それを必要としている対象に投与することを含む対象のＣＤ４５発現標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法を提供し、対象は、第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されている。
【００７２】
いくつかの実施形態では、本開示は、第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含む治療有効量のアダプターを、それを必要としている対象に投与することを含む対象のＣＤ４５発現標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法を提供し、対象は、（ｉ）（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｉｉ）遺伝子改変細胞上の少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞を投与されている。
【００７３】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｉｉ）遺伝子改変細胞上の少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む、治療有効量の遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞を、それを必要としている対象に投与すること；および（ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含む治療有効量のアダプターを対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法を提供する。
【００７４】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ｉ）（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｉｉ）遺伝子改変細胞上の少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む、治療有効量の遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法を提供し、対象は、第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されている。
【００７５】
いくつかの実施形態では、本開示は、治療有効量の第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法を提供し、対象は、（ｉ）（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｉｉ）遺伝子改変細胞上の少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞を投与されている。
【００７６】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む２つ以上のＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｂ）遺伝子改変細胞上の第１のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞を提供し、遺伝子改変細胞は第１のＡＤを発現しない。
【００７７】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む２つ以上のＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｂ）遺伝子改変細胞上の第１のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む遺伝子改変細胞の遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞を標的細胞に接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法を提供する。
【００７８】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む２つ以上のＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｂ）遺伝子改変細胞上の第１のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む遺伝子改変細胞の遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の標的細胞に対し免疫反応を誘導する方法を提供する。
【００７９】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む２つ以上のＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｂ）遺伝子改変細胞上の第１のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法を提供する。
【００８０】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む２つ以上のＡＤＢＤ、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｉｉ）遺伝子改変細胞上の第１のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および（ｂ）ＣＡＲにより認識されるＡＤおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む対象の標的細胞に対し免疫反応を誘導する方法を提供する。
【００８１】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｂ）遺伝子改変細胞上の第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞を提供し、アダプターと組み合わせて使用される遺伝子改変細胞は、インビトロアッセイで第２のＡＤを発現している細胞に対する免疫反応を誘導でき、アダプターは、第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、遺伝子改変細胞は第２のＡＤを発現しない。
【００８２】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｉｉ）遺伝子改変細胞上の第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および（ｂ）ＣＡＲにより認識される第１のＡＤおよび標的細胞上で発現されている第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む対象の標的細胞に対し免疫反応を誘導する方法を提供する。
【００８３】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む２つ以上のＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｂ）遺伝子改変細胞上の第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞を提供し、アダプターと組み合わせて使用される遺伝子改変細胞は、インビトロアッセイで第２のＡＤを発現している細胞に対する免疫反応を誘導でき、アダプターは、第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、遺伝子改変細胞は第２のＡＤを発現しない。
【００８４】
いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）（ｉ）（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む２つ以上のＡＤＢＤ、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および（ｉｉ）遺伝子改変細胞上の第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および（ｂ）ＣＡＲにより認識される第１のＡＤおよび標的細胞上で発現されている第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む対象の標的細胞に対し免疫反応を誘導する方法を提供する。
【００８５】
いくつかの実施形態では、本開示は、下記を提供する。
［１］．下記を含む組成物：
（ａ）（ｉ）標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞；および
（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプター。
［２］．下記を含む組成物：
（ａ）（ｉ）標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞；および
（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプター。
［３］．下記を含む組成物：
（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）である抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞；および
（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプター。
［４］．下記を含む組成物：
（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞；および
（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤを含むＡＤＢＤを含むアダプター。
［５］．下記を含む組成物：
（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞；および
（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＤドメインを含むアダプター。
［６］．下記を含む組成物：
（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合するＤドメイン、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞；および
（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプター。
［７］下記を含む組成物：
（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する第１のＤドメイン、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞；および
（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合する第２のＤドメインを含むアダプター。
［８］．ＣＡＲが単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）ＡＤＢＤを含む、［１］〜［７］のいずれかに記載の組成物。
［９］．ＣＡＲが代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）であるＡＤＢＤを含む、［１］〜［７］のいずれかに記載の組成物。
［１０］．ＣＡＲがＤドメインを含み、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号１７〜２６、および２７または配列番号４４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む、［９］に記載の組成物。
［１１］．ＣＡＲが２つのＡＤＢＤを含む、［１］〜［１０］のいずれか１つに記載の組成物。
［１２］．ＣＡＲがＡＳＢＤおよびｓｃＦｖを含む、［１１］に記載の組成物。
［１３］．ＣＡＲがＤドメインおよびｓｃＦｖを含む、［１１］に記載の組成物。
［１４］．ＣＡＲが２つのＡＳＢＤを含む、［１１］に記載の組成物。
［１５］．ＣＡＲが２Ｄドメインを含む、［１１］に記載の組成物。
［１６］．ＣＡＲの細胞内ドメインがシグナル伝達ドメインである、［１］〜［１５］のいずれかに記載の組成物。
［１７］．ＣＡＲの細胞内ドメインが、プライマリシグナル伝達ドメインを含む、［１６］に記載の組成物。
［１８］．ＣＡＲの細胞内ドメインが、ＣＤ３ζプライマリシグナル伝達ドメインを含む、［１６］に記載の組成物。
［１９］．ＣＡＲの細胞内ドメインが、共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む、［１７］または［１８］に記載の組成物。
［２０］．ＣＡＲの細胞内ドメインが、ＣＤ２８、４１ＢＢ、ＣＤ２７、およびＣＤ１３４から選択される共刺激シグナル伝達ドメインを含む、［１９］に記載の組成物。
［２１］．ＣＡＲの細胞内ドメインが、４１ＢＢ共刺激シグナル伝達ドメインを含む、［２０］に記載の組成物。
［２２］．ＣＡＲが、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＢＣＭＡ、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択される抗原に結合する、［１］〜［２１］のいずれかに記載の組成物。
［２３］．ＣＡＲがＢＣＭＡに結合し、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号４４〜３３８、および３３９から選択される配列を含む、［２２］に記載の組成物。
［２４］．ＣＡＲがＣＤ１２３に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号３４０〜７７および７７３から選択される配列を含む、［２２］に記載の組成物。
［２５］．ＣＡＲがＣＤ１９に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号１０３０〜１０５８および１０５９から選択される配列を含む、［２２］に記載の組成物。
［２６］．ＣＡＲがＣＤ２２に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号１０６０〜１０６８、および１０６９から選択される配列を含む、［２２］に記載の組成物。
［２７］．ＣＡＲがＣＳ１に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号７８０〜７９４および７９５から選択される配列を含む、［２２］に記載の組成物。
［２８］．ＣＡＲがＨＥＲ２に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号８００〜８３９および８４０から選択される配列を含む、［２２］に記載の組成物。
［２９］．ＣＡＲがＰＤＬ１に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号１０１０〜１０１６、１０７４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む、［２２］に記載の組成物。
［３０］．ＣＡＲがＡＦＰ  ｐ２６に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号８４１〜９８３、および９８４から選択される配列を含む、［１］〜［２１］のいずれかに記載の組成物。
［３１］．ＣＡＲが、別々の標的に結合する２つのＡＤＢＤを含む、［１］〜［３０］のいずれかに記載の組成物。
［３２］．ＣＡＲがＣＤ１９およびＣＤ１２３に結合する、［３１］に記載の組成物。
［３３］．ＣＡＲがＢＣＭＡおよびＣＳ１に結合する、［３１］に記載の組成物。
［３４］．ＣＡＲがＣＤ２２およびＣＤ１２３に結合する、［３１］に記載の組成物。
［３５］．ＣＡＲがＰＤＬ１およびＣＤ１２３に結合する、［３１］に記載の組成物。
［３６］．ＣＡＲが、ＣＤ１９に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む、［３２］に記載の組成物。
［３７］．ＣＡＲが、ＣＤ１９に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む、［３６］に記載の組成物。
［３８］．ＣＡＲが、ＣＤ１９に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む、［３２］に記載の組成物。
［３９］．ＣＡＲが、ＢＣＭＡに結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＳ１に結合する第２のＡＳＢＤを含む、［３３］に記載の組成物。
［４０］．ＣＡＲが、ＢＣＭＡに結合する第１のＤドメインおよびＣＳ１に結合する第２のＤドメインを含む、［３９］に記載の組成物。
［４１］．ＣＡＲが、ＣＳ１に結合するＤドメインおよびＢＣＭＡに結合するｓｃＦｖを含む、［３３］に記載の組成物。
［４２］．ＣＡＲが、ＢＣＭＡに結合するＤドメインおよびＣＳ１に結合するｓｃＦｖを含む、［３９］に記載の組成物。
［４３］．ＣＡＲが、ＣＤ２２に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む、［３４］に記載の組成物。
［４４］．ＣＡＲが、ＣＤ２２に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む、［４３］に記載の組成物。
［４５］．ＣＡＲが、ＣＤ２２に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む、［３４］に記載の組成物。
［４６］．ＣＡＲが、ＰＤＬ１に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む、［３５］に記載の組成物。
［４７］．ＣＡＲが、ＰＤＬ１に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む、［４６］に記載の組成物。
［４８］．ＣＡＲが、ＰＤＬ１に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む、［３５］に記載の組成物。
［４９］．ＣＡＲが、ＣＤ１９に結合するＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む、［３２］に記載の組成物。
［５０］．アダプターが腫瘍抗原のＡＤを含み、任意選択で、腫瘍抗原が、群：ＢＣＭＡ、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択される、［１］〜［４９］のいずれかに記載の組成物。 
［５１］．アダプターがＡＦＰ  ｐ２６またはＡＦＰのエピトープであるＡＤを含み、任意選択で、配列番号１６または１１１７〜１１２３のアミノ酸残基を含む、［１］〜［５０］のいずれかに記載の組成物。
［５２］．アダプターがｓｃＦｖであるＡＤＢＤを含む、［１］〜［５１］のいずれかに記載の組成物。
［５３］．アダプターがＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む、［１］〜［５１］のいずれかに記載の組成物。
［５４］．アダプターがＤドメインを含み、任意選択で、アダプターが、群：配列番号１７〜２６、および２７、または配列番号４４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む、［５３］に記載の組成物。
［５５］．アダプターが２つのＡＤＢＤを含む、［１］〜［５４］のいずれか１つに記載の組成物。
［５６］２つのＡＤＢＤが、（ａ）同じである、（ｂ）同じ抗原決定基に結合する、（ｃ）同じ抗原の異なるＡＤに結合する、または（ｄ）同じ細胞上の異なる抗原に結合する、もしくは（ｅ）異なる細胞上の異なる抗原に結合する、［５５］に記載の組成物。
［５７］．アダプターが２つのＡＳＢＤを含む、［５５］または［５６］に記載の組成物。
［５８］．アダプターが２つのＤドメインを含み、任意選択で、アダプターが、群：配列番号４４〜１０７９から選択されるアミノ酸配列を含む、［５５］〜［５７］のいずれか１つに記載の組成物。
［５９］．アダプターがｓｃＦｖであるＡＤＢＤおよびＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む、［５５］または［５６］のいずれか１つに記載の組成物。
［６０］．アダプターがｓｃＦｖであるＡＤＢＤおよびＤドメインであるＡＤＢＤを含む、［５９］に記載の組成物。
［６１］．アダプターが、ＢＣＭＡ、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択されるメンバーに結合するＡＤＢＤを含む、［１］〜［６０］のいずれかに記載の組成物。
［６２］．アダプターがＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、ＡＤＢＤが、群：配列番号４４〜３３８、および３３９から選択される配列を含む、［６１］に記載の組成物。
［６３］．アダプターがＣＳ１に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、ＡＤＢＤが、群：配列番号７８０〜７９４、および７９５から選択される配列を含む、［６１］に記載の組成物。
［６４］．アダプターがＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、ＡＤＢＤが、群：配列番号３４０〜７７２、および７７３から選択される配列を含む、［６１］に記載の組成物。
［６５］．アダプターがＣＤ１９に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、ＡＤＢＤが、群：配列番号１０３０〜１０５８、および１０５９から選択される配列を含む、［６１］に記載の組成物。
［６６］．アダプターがＣＤ２２に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、ＡＤＢＤが、群：配列番号１０６０〜１０６８、および１０６９から選択される配列を含む、［６１］に記載の組成物。
［６７］．アダプターがＨＥＲ２に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、ＡＤＢＤが、群：配列番号８００〜８３９、および８４０から選択される配列を含む、［６１］に記載の組成物。
［６８］．アダプターがＴＡＣＩまたはＢＡＦＦＲに結合するＡＤＢＤを含む、［６１］に記載の組成物。
［６９］．アダプターがＰＤＬ１に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、ＡＤＢＤが、群：配列番号１０１０〜１０１６、１０７４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む、［６１］に記載の組成物。
［７０］．アダプターが二重特異性である、［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物。
［７１］．アダプターがＣＤ１９に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む、［７０］に記載の組成物。
［７２］．アダプターがＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤおよびＣＳ１に結合するＡＤＢＤを含む、［７０］に記載の組成物。
［７３］．アダプターがＣＤ２２に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む、［７０］に記載の組成物。
［７４］．アダプターがＰＤＬ１に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む、［７０］に記載の組成物。
［７５］．標的細胞が腫瘍細胞である、［１］〜［７４］のいずれかに記載の組成物。
［７６］．腫瘍細胞が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、脊髄形成異常症、乳癌、および卵巣癌から選択される、［７５］に記載の組成物。
［７７］．腫瘍細胞が多発性骨髄腫である、［７５］に記載の組成物。
［７８］．少なくとも１個の標的細胞が腫瘍細胞である、［７５］に記載の組成物。
［７９］．第１と第２の標的細胞が、腫瘍細胞である、［７５］に記載の組成物。
［８０］．第１と第２の標的細胞が同じタイプである、［７９］に記載の組成物。
［８１］．第１と第２の標的細胞が異なるタイプである、［７９］に記載の組成物。
［８２］．腫瘍細胞が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、脊髄形成異常症、乳癌、および卵巣癌から選択される、［８０］または［８１］に記載の組成物。
［８３］．腫瘍細胞が多発性骨髄腫である、［８２］に記載の組成物。
［８４］．ＣＡＲ発現細胞が免疫エフェクター細胞である、［１］〜［８３］のいずれかに記載の組成物。
［８５］．免疫エフェクター細胞がＴ細胞である、［８４］に記載の組成物。
［８６］．免疫エフェクター細胞がＮＫ細胞である、［８４］に記載の組成物。
［８７］．ＣＡＲ発現細胞が標的細胞を死滅させる、［１］〜［８６］のいずれかに記載の組成物。
［８８］．抗原決定基に対するアダプターの結合が、ＡＤを含む抗原の活性を遮断する、［１］〜［８７］のいずれかに記載の組成物。
［８９］．標的細胞を［１］〜［８８］のいずれか１つの組成物と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法。
［９０］．標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法であって、
（ａ）標的細胞を含む組成物が、（ｉ）前記標的細胞上の第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むＣＡＲを発現している細胞をさらに含み；および
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［９１］．第１の標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含む１個または複数の標的細胞を死滅させる方法であって、
（ａ）標的細胞を含む組成物が、（ｉ）前記第１の標的細胞上の第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞をさらに含み；および
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［９２］．標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法であって、
（ａ）標的細胞を含む組成物が、（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞をさらに含み；および
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［９３］．標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法であって、
（ａ）標的細胞を含む組成物が、（ｉ）第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞をさらに含み；および
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む、方法。
［９４］．標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）が標的細胞上に存在し；
（ｂ）第１の標的細胞を含む組成物が、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターをさらに含み、および
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［９５］．標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させることを含む１個または複数の標的細胞を死滅させる方法であって、
（ａ）第１のＡＤが第１の標的細胞上に存在し；
（ｂ）第１の標的細胞を含む組成物が、第２の標的細胞および（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターをさらに含み、および
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）第１の標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［９６］．標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）が標的細胞上に存在し；
（ｂ）標的細胞を含む組成物が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターをさらに含み、および
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［９７］．標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）が標的細胞上に存在し；
（ｂ）標的細胞を含む組成物が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターをさらに含み、および
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［９８］．標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、
（ａ）標的細胞を含む組成物が、（ｉ）前記標的細胞上の第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むＣＡＲを発現している細胞をさらに含み；および
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［９９］．第１の標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含む１個または複数の標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、
（ａ）標的細胞を含む組成物が、（ｉ）前記第１の標的細胞上の第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞をさらに含み；および
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［１００］．標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、
（ａ）標的細胞を含む組成物が、（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞をさらに含み；および
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［１０１］．標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、
（ａ）標的細胞を含む組成物が、（ｉ）第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞をさらに含み；および
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む、方法。
［１０２］．標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）が標的細胞上に存在し；
（ｂ）第１の標的細胞を含む組成物が、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターをさらに含み、および
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１０３］．標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させることを含む１個または複数の標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、
（ａ）第１のＡＤが第１の標的細胞上に存在し；
（ｂ）第１の標的細胞を含む組成物が、第２の標的細胞および（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターをさらに含み、および
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）第１の標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１０４］．標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）が標的細胞上に存在し；
（ｂ）標的細胞を含む組成物が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターをさらに含み、および
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１０５］．標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）が標的細胞上に存在し；
（ｂ）標的細胞を含む組成物が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターをさらに含み、および
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１０６］．患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法であって、
（ａ）患者は、（ｉ）前記標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており；
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［１０７］．患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞死滅を再指示する方法であって、
（ａ）患者は、（ｉ）第１の標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており；
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［１０８］．患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法であって、
（ａ）患者は、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており；
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［１０９］．患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法であって、
（ａ）患者は、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており；
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む、方法。
［１１０］．患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）および第２のＡＤが標的細胞上に存在し；
（ｂ）患者が、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の前記第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターで治療されており、
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１１１］．患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含む患者の標的細胞死滅を誘導する方法であって、
（ａ）患者が、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）および（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターで治療されており、
（ｂ）ＣＡＲが、（ｉ）アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１１２］．患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）が標的細胞上に存在し；
（ｂ）患者が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており、
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１１３］．患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）が標的細胞上に存在し；
（ｂ）患者が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており、
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１１４］．患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、
（ａ）患者は、（ｉ）前記標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており；
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［１１５］．患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞に対する免疫反応を再指示する方法であって、
（ａ）患者は、（ｉ）第１の標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており；
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［１１６］．患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、
（ａ）患者は、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており；
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［１１７］．患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、
（ａ）患者は、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており；
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む、方法。
［１１８］．患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含む患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）および第２のＡＤが標的細胞上に存在し；
（ｂ）患者が、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の前記第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターで治療されており、
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１１９］．患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含む患者の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、
（ａ）患者が、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）および（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターで治療されており、
（ｂ）ＣＡＲが、（ｉ）アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１２０］．患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含む患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）が標的細胞上に存在し；
（ｂ）患者が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており、
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１２１］．患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含む患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）が標的細胞上に存在し；
（ｂ）患者が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており、
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１２２］．標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させることを含む、増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）が標的細胞上に存在し；
（ｂ）標的細胞を含む組成物が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターをさらに含み、および
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１２３］．患者にアダプターを投与することを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、
（ａ）患者は、（ｉ）前記標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており；
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［１２４］．患者にアダプターを投与することを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶の治療を再指示する方法であって、
（ａ）患者は、（ｉ）第１の標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており；
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［１２５］．患者にアダプターを投与することを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、
（ａ）患者は、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており；
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［１２６］．患者にアダプターを投与することを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、
（ａ）患者は、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており；
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む、方法。
［１２７］．患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）および第２のＡＤが標的細胞上に存在し；
（ｂ）患者が、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の前記第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターで治療されており、
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１２８］．患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶の治療を誘導する方法であって、
（ａ）患者が、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）および（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターで治療されており、
（ｂ）ＣＡＲが、（ｉ）アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１２９］．患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）が標的細胞上に存在し；
（ｂ）患者が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており、
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１３０］．患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含む増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）が標的細胞上に存在し；
（ｂ）患者が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており、
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１３１］．増殖性障害または癌が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、脊髄形成異常症、乳癌、および卵巣癌から選択される、［１２２］〜［１３０］のいずれか１つに記載の方法。
［１３２］．増殖性障害または癌が、多発性骨髄腫である、［１２２］〜［１３０］のいずれか１つに記載の方法。
［１３３］．標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させることを含む血液癌を治療する方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）が標的細胞上に存在し；
（ｂ）標的細胞を含む組成物が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターをさらに含み、および
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１３４］．患者にアダプターを投与することを含む血液癌を治療する方法であって、
（ａ）患者は、（ｉ）前記標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており；
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［１３５］．患者にアダプターを投与することを含む血液癌の治療を再指示する方法であって、
（ａ）患者は、（ｉ）第１の標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており；
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［１３６］．患者にアダプターを投与することを含む血液癌を治療する方法であって、
（ａ）患者は、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており；
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む、方法。
［１３７］．患者にアダプターを投与することを含む血液癌を治療する方法であって、
（ａ）患者は、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており；
（ｂ）アダプターが、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む、方法。
［１３８］．患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含む血液癌を治療する方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）および第２のＡＤが標的細胞上に存在し；
（ｂ）患者が、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の前記第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターで治療されており、
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１３９］．患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含む血液癌の治療を誘導する方法であって、
（ａ）患者が、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）および（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターで治療されており、
（ｂ）ＣＡＲが、（ｉ）アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１４０］．患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含む血液癌を治療する方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）が標的細胞上に存在し；
（ｂ）患者が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており、
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１４１］．患者にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を投与することを含む血液癌を治療する方法であって、
（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）が標的細胞上に存在し；
（ｂ）患者が、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており、
（ｃ）ＣＡＲが、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む、方法。
［１４２］．血液癌が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される、［１３３］〜［１４１］のいずれか１つに記載の方法。
［１４３］．血液癌が、多発性骨髄腫である、［１３３］〜［１４１］のいずれか１つに記載の方法。
［１４４］．ＣＡＲが単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）ＡＤＢＤを含む、［９０］〜［１３１］のいずれかに記載の方法。
［１４５］．ＣＡＲが代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）であるＡＤＢＤを含む、［９０］〜［１４３］のいずれかに記載の方法。
［１４６］．ＣＡＲがＤドメインを含み、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号１７〜２６、および２７または配列番号４４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む、［１４５］に記載の方法。
［１４７］．ＣＡＲが２つのＡＤＢＤを含む、［９０］〜［１４６］のいずれか１つに記載の方法。
［１４８］．ＣＡＲがＡＳＢＤおよびｓｃＦｖを含む、［１４７］に記載の方法。
［１４９］．ＣＡＲがＤドメインおよびｓｃＦｖを含む、［１４７］に記載の方法。
［１５０］．ＣＡＲが２つのＡＳＢＤを含む、［１４７］に記載の方法。
［１５１］．ＣＡＲが２つのＤドメインを含む、［１４７］に記載の方法。
［１５２］．ＣＡＲの細胞内ドメインがシグナル伝達ドメインである、［９０］〜［１５１］のいずれか１つに記載の方法。
［１５３］．ＣＡＲの細胞内ドメインが、プライマリシグナル伝達ドメインを含む、［１５２］に記載の方法。
［１５４］．ＣＡＲの細胞内ドメインが、ＣＤ３ζプライマリシグナル伝達ドメインを含む、［１５２］に記載の方法。
［１５５］．ＣＡＲの細胞内ドメインが、共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む、［１５３］または［１５４］に記載の方法。
［１５６］．ＣＡＲの細胞内ドメインが、ＣＤ２８、４１ＢＢ、ＣＤ２７、およびＣＤ１３４から選択される共刺激シグナル伝達ドメインを含む、［１５５］に記載の方法。
［１５７］．ＣＡＲの細胞内ドメインが、４１ＢＢ共刺激シグナル伝達ドメインを含む、［１５６］に記載の方法。
［１５８］．ＣＡＲが、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＢＣＭＡ、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択される抗原に結合する、［９０］〜［１５７］のいずれか１つに記載の方法。
［１５９］．ＣＡＲがＢＣＭＡに結合し、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号４４〜３３８、および３３９から選択される配列を含む、［１５８］に記載の方法。
［１６０］．ＣＡＲがＣＳ１に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号７８０〜７９４、および７９５から選択される配列を含む、［１５８］に記載の方法。
［１６１］．ＣＡＲがＣＤ１２３に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号３４０〜７７２、および７７３から選択される配列を含む、［１５８］に記載の方法。
［１６２］．ＣＡＲがＣＤ１９に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号１０３０〜１０５８、および１０５９から選択される配列を含む、［１５８］に記載の方法。
［１６３］．ＣＡＲがＣＤ２２に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号１０６０〜１０６８、および１０６９から選択される配列を含む、［１５８］に記載の方法。
［１６４］．ＣＡＲがＨＥＲ２に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号８００〜８３９、および８４０から選択される配列を含む、［１５８］に記載の方法。
［１６５］．ＣＡＲがＰＤＬ１に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号１０１０〜１０１６、１０７４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む、［１５８］に記載の方法。
［１６６］．ＣＡＲがＡＦＰ  ｐ２６に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、群：配列番号８４１〜９８３、および９８４から選択される配列を含む、［９０］〜［１５７］のいずれか１つに記載の方法。
［１６７］．ＣＡＲが別々の標的に結合する２つのＡＤＢＤを含む、［９０］〜［１６６］のいずれか１つに記載の方法。
［１６８］．ＣＡＲがＣＤ１９およびＣＤ１２３に結合する、［１６７］に記載の方法。
［１６９］．ＣＡＲがＣＤ２２およびＣＤ１２３に結合する、［１６７］に記載の方法。
［１７０］．ＣＡＲがＰＤＬ１およびＣＤ１２３に結合する、［１６７］に記載の方法。
［１７１］．ＣＡＲがＣＳ１およびＢＣＭＡに結合する、［１６７］に記載の方法。
［１７２］．ＣＡＲが、ＣＤ１９に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む、［１６８］に記載の方法。
［１７３］．ＣＡＲが、ＣＤ１９に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む、［１７２］に記載の方法。
［１７４］．ＣＡＲが、ＣＤ１９に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む、［１６８］に記載の方法。
［１７５］．ＣＡＲが、ＣＤ２２に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む、［１６９］に記載の方法。
［１７６］．ＣＡＲが、ＣＤ２２に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む、［１７５］に記載の方法。
［１７７］．ＣＡＲが、ＣＤ２２に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む、［１６９］に記載の方法。
［１７８］．ＣＡＲが、ＰＤＬ１に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む、［１７０］に記載の方法。
［１７９］．ＣＡＲが、ＰＤＬ１に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む、［１７８］に記載の方法。
［１８０］．ＣＡＲが、ＰＤＬ１に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む、［１７０］に記載の方法。
［１８１］．ＣＡＲが、ＣＤ１９に結合するＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む、［１６８］に記載の方法。
［１８２］．ＣＡＲが、ＢＣＭＡに結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＳ１に結合する第２のＡＳＢＤを含む、［１７１］に記載の方法。
［１８３］．ＣＡＲが、ＢＣＭＡに結合する第１のＤドメインおよびＣＳ１に結合する第２のＤドメインを含む、［１８２］に記載の方法。
［１８４］．ＣＡＲが、ＢＣＭＡに結合するＤドメインおよびＣＳ１に結合するｓｃＦｖを含む、［１７１］に記載の方法。
［１８５］．ＣＡＲが、ＣＳ１に結合するＤドメインおよびＢＣＭＡに結合するｓｃＦｖを含む、［１７１］に記載の方法。
［１８６］．アダプターが腫瘍抗原のＡＤを含み、任意選択で、腫瘍抗原が、群：ＢＣＭＡ、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択される、［９０］〜［１８５］のいずれか１つに記載の方法。
［１８７］．アダプターがＡＦＰ  ｐ２６またはＡＦＰのエピトープであるＡＤを含み、任意選択で、配列番号１６または１１１７〜１１２３のアミノ酸残基を含む、［９０］〜［１８６］に記載の方法。
［１８８］．アダプターがｓｃＦｖであるＡＤＢＤを含む、［９０］〜［１８７］のいずれか１つに記載の方法。
［１８９］．アダプターがＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む、［９０］〜［１８７］のいずれか１つに記載の方法。
［１９０］．アダプターがＤドメインを含み、任意選択で、アダプターが、群：配列番号１７〜２６、および２７、または配列番号４４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む、［１８９］に記載の方法。
［１９１］．アダプターが２つのＡＤＢＤを含む、［９０］〜［１９０］のいずれか１つに記載の方法。
［１９２］２つのＡＤＢＤが、（ａ）同じである、（ｂ）同じ抗原決定基に結合する、（ｃ）同じ抗原の異なるＡＤに結合する、または（ｄ）同じ細胞上の異なる抗原に結合する、もしくは（ｅ）異なる細胞上の異なる抗原に結合する、［１９１］に記載の方法。
［１９３］．アダプターが２つのＡＳＢＤを含む、［１９１］または［１９２］に記載の方法。
［１９４］．アダプターが２つのＤドメインを含み、任意選択で、アダプターが、群：配列番号４４〜１０７９から選択されるアミノ酸配列を含む、［１９１］、［１９２］、または［１９３］のいずれか１つに記載の方法。
［１９５］．アダプターがｓｃＦｖであるＡＤＢＤおよびＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む、［１９１］または［１９２］に記載の方法。
［１９６］．アダプターがｓｃＦｖであるＡＤＢＤおよびＤドメインであるＡＤＢＤを含む、［１９５］に記載の方法。
［１９７］．アダプターが、ＢＣＭＡ、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択されるメンバーに結合するＡＤＢＤを含む、［９０］〜［１９６］のいずれか１つに記載の方法。
［１９８］．アダプターがＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、ＡＤＢＤが、群：配列番号４４〜３３８、および３３９から選択される配列を含む、［１９７］に記載の方法。
［１９９］．アダプターがＣＳ１に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、ＡＤＢＤが、群：配列番号７８０〜７９４、および７９５から選択される配列を含む、［１９７］に記載の方法。
［２００］．アダプターが、ＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、ＡＤＢＤが、群：配列番号３４０〜７７２、および７７３から選択される配列を含む、［１９７］に記載の方法。
［２０１］．アダプターが、ＣＤ１９に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、ＡＤＢＤが、群：配列番号１０３０〜１０５８、および１０５９から選択される配列を含む、［１９７］に記載の方法。
［２０２］．アダプターが、ＣＤ２２に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、ＡＤＢＤが、群：配列番号１０６０〜１０６８、および１０６９から選択される配列を含む、［１９７］に記載の方法。
［２０３］．アダプターが、ＨＥＲ２に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、ＡＤＢＤが、群：配列番号８００〜８３９、および８４０から選択される配列を含む、［１９７］に記載の方法。
［２０４］．アダプターがＴＡＣＩまたはＢＡＦＦＲに結合するＡＤＢＤを含む、［１９７］に記載の方法。
［２０５］．アダプターが、ＰＤＬ１に結合するＡＤＢＤを含み、任意選択で、ＡＤＢＤが、群：配列番号１０１０〜１０１６、１０７４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む、［１９７］に記載の方法。
［２０６］．アダプターが二重特異性である、［９０］〜［２０５］のいずれか１つに記載の方法。
［２０７］．アダプターがＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤおよびＣＳ１に結合するＡＤＢＤを含む、［２０６］に記載の方法。
［２０８］．アダプターがＣＤ１９に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む、［２０６］に記載の方法。
［２０９］．アダプターがＣＤ２２に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む、［２０６］に記載の方法。
［２１０］．アダプターがＰＤＬ１に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む、［２０６］に記載の方法。
［２１１］．標的細胞が腫瘍細胞である、［９０］〜［２１０］のいずれか１つに記載の方法。
［２１２］．腫瘍細胞が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、脊髄形成異常症、乳癌、および卵巣癌から選択される、［２１１］に記載の方法。
［２１３］．腫瘍細胞が多発性骨髄腫である、［２１１］に記載の方法。
［２１４］．少なくとも１個の標的細胞が腫瘍細胞である、［２１１］に記載の方法。
［２１５］．第１と第２の標的細胞が、腫瘍細胞である、［２１１］に記載の方法。
［２１６］．第１と第２の腫瘍細胞が、同じタイプである、［２１５］に記載の方法。
［２１７］．第１と第２の腫瘍細胞が、異なるタイプである、［２１５］に記載の方法。
［２１８］．腫瘍細胞が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、脊髄形成異常症、乳癌、および卵巣癌から選択される、［２１４］または［２１５］に記載の方法。
［２１９］．腫瘍細胞が多発性骨髄腫である、［２１４］または［２１５］に記載の方法。
［２２０］．ＣＡＲ発現細胞が免疫エフェクター細胞である、［９０］〜［２１９］のいずれか１つに記載の方法。
［２２１］．免疫エフェクター細胞がＴ細胞である、［２２０］に記載の方法。
［２２２］．免疫エフェクター細胞がＮＫ細胞である、［２２０］に記載の方法。
［２２３］．ＣＡＲ発現細胞が標的細胞を死滅させる、［９０］〜［２２２］のいずれか１つに記載の方法。
［２２４］．遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞であって、
（ａ）（１）ヒトＣＤ４５抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および
（ｂ）遺伝子改変細胞上のヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、
遺伝子改変細胞は、インビトロアッセイでＣＤ４５  ＡＤ発現細胞に対する免疫反応を誘導でき、遺伝子改変細胞はＣＤ４５  ＡＤを発現しない、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞。
［２２５］．［２２４］に記載の遺伝子改変細胞を標的細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法であって、標的細胞がヒトＣＤ４５を発現している、方法。
［２２６］．［２２４］に記載の遺伝子改変細胞を標的細胞と接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、標的細胞がヒトＣＤ４５を発現している、方法。
［２２７］．［２２４］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法。
［２２８］．［２２４］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法。
［２２９］．［２２４］に記載の遺伝子改変細胞の有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むリンパ球を枯渇させる方法。
［２３０］．［２２４］に記載の遺伝子改変細胞の有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むメモリーＴ細胞を枯渇させる方法。
［２３１］．［２２４］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む自己免疫疾患または障害を治療する方法。
［２３２］．［２２４］に記載の遺伝子改変細胞の有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法。
［２３３］．［２２４］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法。
［２３４］．遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞であって、
（ａ）（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および
（ｂ）前記遺伝子改変細胞上の少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、
第１のＡＤは少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤではなく、インビトロアッセイでアダプターと組み合わせて使用される遺伝子改変細胞はＣＤ４５  ＡＤ発現細胞に対する免疫反応を誘導でき、アダプターは第１のＡＤおよび少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、遺伝子改変細胞は少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤを発現しない、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞。
［２３５］．［２３４］に記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび標的細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法であって、標的細胞がＣＤ４５を発現し、アダプターが第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含む、方法。
［２３６］．［２３４］に記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび標的細胞と接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、標的細胞がＣＤ４５を発現し、アダプターが第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含む、方法。
［２３７］．［２３４］に記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび癌細胞と接触させることを含む血液癌を治療する方法であって、癌細胞がＣＤ４５を発現し、アダプターが第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含む、方法。
［２３８］．対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、
（ａ）［２３４］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２３９］．［２３４］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、対象が、第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［２４０］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、対象が［２３４］に記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２４１］．対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、
（ａ）［２３４］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２４２］．［２３４］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、対象が、第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［２４３］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、対象が、［２３４］に記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２４４］．リンパ球を枯渇させる方法であって、
（ａ）［２３４］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２４５］．［２３４］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むリンパ球を枯渇させる方法であって、対象が、第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［２４６］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むリンパ球を枯渇させる方法であって、対象が［２３４］に記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２４７］．メモリーＴ細胞を枯渇させる方法であって、
（ａ）［２３４］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２４８］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むメモリーＴ細胞を枯渇させる方法であって、対象が［２３４］に記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２４９］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むメモリーＴ細胞を枯渇させる方法であって、対象が［２３４］に記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２５０］．自己免疫疾患または障害を治療する方法であって、
（ａ）［２３４］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２５１］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む自己免疫疾患または障害を治療する方法であって、対象が［２３４］に記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２５２］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む自己免疫疾患または障害を治療する方法であって、対象が［２３４］に記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２５３］．移植のために対象を前処置する方法であって、
（ａ）［２３４］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２５４］．［２３４］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法であって、対象が、第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［２５５］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法であって、対象が［２３４］に記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２５６］血液癌の治療方法であって、
（ａ）［２３４］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２５７］．［２３４］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法であって、対象が、第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［２５８］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法であって、対象が［２３４］に記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２５９］．遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞であって、
（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む２つ以上のＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および
（ｂ）遺伝子改変細胞上の第１のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、
遺伝子改変細胞が第１のＡＤを発現しない、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞。
［２６０］．［２５９］に記載の遺伝子改変細胞を標的細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法。
［２６１］．［２５９］に記載の遺伝子改変細胞を標的細胞と接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法。
［２６２］．［２５９］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法。
［２６３］．［２５９］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法。
［２６４］．［２５９］に記載の遺伝子改変細胞の有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むリンパ球を枯渇させる方法。
［２６５］．［２５９］に記載の遺伝子改変細胞の有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法。
［２６６］．［２５９］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法。
［２６７］．［２５９］に記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび標的細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法であって、アダプターがＣＡＲおよび第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含む、方法。
［２６８］．［２５９］に記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび標的細胞と接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、アダプターがＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含む、方法。
［２６９］．［２５９］に記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび癌細胞と接触させることを含む血液癌を治療する方法であって、アダプターがＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含む、方法。
［２７０］．対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、
（ａ）［２５９］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２７１］．［２５９］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、対象が、ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［２７２］．ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、対象が、［２５９］に記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２７３］．対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、
（ａ）［２５９］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２７４］．［２５９］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、対象が、ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［２７５］．ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、対象が［２５９］に記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２７６］．リンパ球を枯渇させる方法であって、
（ａ）［２５９］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２７７］．［２５９］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むリンパ球を枯渇させる方法であって、対象が、ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［２７８］．ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むリンパ球を枯渇させる方法であって、対象が［２５９］に記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２７９］．移植のために対象を前処置する方法であって、
（ａ）［２５９］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２８０］．［２５９］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法であって、対象が、ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［２８１］．ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法であって、対象が［２５９］に記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２８２］血液癌の治療方法であって、
（ａ）［２５９］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２８３］．［２５９］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法であって、対象が、ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［２８４］．ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法であって、対象が、［２５９］に記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２８５］．遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞であって、
（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および
（ｂ）遺伝子改変細胞上の第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、
アダプターと組み合わせて使用される遺伝子改変細胞は、インビトロアッセイで第２のＡＤ発現細胞に対する免疫反応を誘導でき、アダプターは第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、遺伝子改変細胞は第２のＡＤを発現しない、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞。
［２８６］．遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞であって、
（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む２つ以上のＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および
（ｂ）遺伝子改変細胞上の第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、
アダプターと組み合わせて使用される遺伝子改変細胞は、インビトロアッセイで第２のＡＤ発現細胞に対する免疫反応を誘導でき、アダプターは第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、遺伝子改変細胞は第２のＡＤを発現しない、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞。
［２８７］．［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法。
［２８８］．［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法。
［２８９］．［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞の有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むリンパ球を枯渇させる方法。
［２９０］．［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞の有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法。
［２９１］．［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法。
［２９２］．［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび標的細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法であって、アダプターが第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、第２のＡＤが標的細胞上で発現している、方法。
［２９３］．［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび標的細胞と接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、アダプターが第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、第２のＡＤが標的細胞上で発現している、方法。
［２９４］．［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび癌細胞と接触させることを含む血液癌を治療する方法であって、アダプターが第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、第２のＡＤが癌細胞上で発現している、方法。
［２９５］．対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、
（ａ）［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含み、第２のＡＤが標的細胞上で発現している、方法。
［２９６］．［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、対象が、第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されており、第２のＡＤが標的細胞上で発現している、方法。
［２９７］．第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、対象が、［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞を投与されており、第２のＡＤが標的細胞上で発現している、方法。
［２９８］．対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、
（ａ）［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与することを含み、第２のＡＤが、増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［２９９］．［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、対象が、第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されており、第２のＡＤが増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３００］．第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、対象が、［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞を投与されており、第２のＡＤが増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３０１］．リンパ球を枯渇させる方法であって、
（ａ）［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含み、第２のＡＤがリンパ球標的細胞上で発現している、方法。
［３０２］．［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むリンパ球を枯渇させる方法であって、対象が、第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されており、第２のＡＤがリンパ球標的細胞上で発現している、方法。
［３０３］．第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むリンパ球を枯渇させる方法であって、対象が、［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞を投与されており、第２のＡＤがリンパ球標的細胞上で発現している、方法。
［３０４］．移植のために対象を前処置する方法であって、
（ａ）［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含み、第２のＡＤが移植に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３０５］．［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法であって、対象が、第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されており、第２のＡＤが移植に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３０６］．第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法であって、対象が［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞を投与されており、第２のＡＤが移植に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３０７］血液癌の治療方法であって、
（ａ）［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
（ｂ）第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含み、第２のＡＤが血液癌に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３０８］．［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法であって、対象が、第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されており、第２のＡＤが血液癌に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３０９］．第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法であって、対象が［２８５］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞を投与されており、第２のＡＤが血液癌に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３１０］．（１）抗原決定基（ＡＤ）および（ｂ）１つまたは複数の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む単離アダプターポリペプチドであって、
少なくとも１つのＡＤＢＤがヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合し、［２３４］に記載の遺伝子改変細胞の存在下で、アダプターとＣＤ４５  ＡＤ発現標的細胞とを接触させることにより、インビトロアッセイにおいて標的細胞に対して遺伝子改変細胞による免疫反応を誘導できる、単離アダプターポリペプチド。
【図面の簡単な説明】
【００８６】
【図１Ａ】１：４〜１：６４の範囲のエフェクター細胞：標的細胞の比率を用いて、一連の腫瘍について、ＣＤ１２３特異的（ｃｇ０６）およびＢＣＭＡ特異的（ｂｃ−４０）ＣＡＲの細胞溶解活性を、既知の標的特異性のないＣＡＲ（α３Ｄ）と比較した。手短に説明すると、ｂｃ４０、ｃｇ０６、またはα３Ｄを発現している２０，０００個のＣＡＲ  Ｔ細胞を漸増数のＣＤ１２３＋／ＢＣＭＡ−腫瘍標的（ＭＯＬＭ１３）（図１Ａ）；ＣＤ１２３−／ＢＣＭＡ＋腫瘍標的（Ｈ９２９）（図１Ｂ）；ＣＤ１２３−腫瘍標的（ＲＡＪＩ）（図１Ｃ）；またはＣＤ１２３＋／ＢＣＭＡ−腫瘍標的（ＭＯＬＭ１３）（図１Ｄ）と共にインキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。
【図１Ｂ】１：４〜１：６４の範囲のエフェクター細胞：標的細胞の比率を用いて、一連の腫瘍について、ＣＤ１２３特異的（ｃｇ０６）およびＢＣＭＡ特異的（ｂｃ−４０）ＣＡＲの細胞溶解活性を、既知の標的特異性のないＣＡＲ（α３Ｄ）と比較した。手短に説明すると、ｂｃ４０、ｃｇ０６、またはα３Ｄを発現している２０，０００個のＣＡＲ  Ｔ細胞を漸増数のＣＤ１２３＋／ＢＣＭＡ−腫瘍標的（ＭＯＬＭ１３）（図１Ａ）；ＣＤ１２３−／ＢＣＭＡ＋腫瘍標的（Ｈ９２９）（図１Ｂ）；ＣＤ１２３−腫瘍標的（ＲＡＪＩ）（図１Ｃ）；またはＣＤ１２３＋／ＢＣＭＡ−腫瘍標的（ＭＯＬＭ１３）（図１Ｄ）と共にインキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。
【図１Ｃ】１：４〜１：６４の範囲のエフェクター細胞：標的細胞の比率を用いて、一連の腫瘍について、ＣＤ１２３特異的（ｃｇ０６）およびＢＣＭＡ特異的（ｂｃ−４０）ＣＡＲの細胞溶解活性を、既知の標的特異性のないＣＡＲ（α３Ｄ）と比較した。手短に説明すると、ｂｃ４０、ｃｇ０６、またはα３Ｄを発現している２０，０００個のＣＡＲ  Ｔ細胞を漸増数のＣＤ１２３＋／ＢＣＭＡ−腫瘍標的（ＭＯＬＭ１３）（図１Ａ）；ＣＤ１２３−／ＢＣＭＡ＋腫瘍標的（Ｈ９２９）（図１Ｂ）；ＣＤ１２３−腫瘍標的（ＲＡＪＩ）（図１Ｃ）；またはＣＤ１２３＋／ＢＣＭＡ−腫瘍標的（ＭＯＬＭ１３）（図１Ｄ）と共にインキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。
【図１Ｄ】１：４〜１：６４の範囲のエフェクター細胞：標的細胞の比率を用いて、一連の腫瘍について、ＣＤ１２３特異的（ｃｇ０６）およびＢＣＭＡ特異的（ｂｃ−４０）ＣＡＲの細胞溶解活性を、既知の標的特異性のないＣＡＲ（α３Ｄ）と比較した。手短に説明すると、ｂｃ４０、ｃｇ０６、またはα３Ｄを発現している２０，０００個のＣＡＲ  Ｔ細胞を漸増数のＣＤ１２３＋／ＢＣＭＡ−腫瘍標的（ＭＯＬＭ１３）（図１Ａ）；ＣＤ１２３−／ＢＣＭＡ＋腫瘍標的（Ｈ９２９）（図１Ｂ）；ＣＤ１２３−腫瘍標的（ＲＡＪＩ）（図１Ｃ）；またはＣＤ１２３＋／ＢＣＭＡ−腫瘍標的（ＭＯＬＭ１３）（図１Ｄ）と共にインキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。
【図２Ａ】アダプター結合は、アダプターおよびＣＡＲの結合特異性を関連付ける。ジャーカットＮＦＡＴルシフェラーゼレポーター細胞に、陰性対照ＣＡＲ（α３Ｄ）、ＡＦＰ（ｐ２６）結合ＣＡＲ（ａｆ０３）、またはＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（ｂｃ４０）を形質導入した。図２Ａでは、ＣＡＲを形質導入したジャーカット細胞を０．５μｇのアダプタータンパク質と共にインキュベートし（４℃で２０分間）、洗浄後、抗ヒスＰＥ（クローンＪ０９５Ｇ４６、４℃で２０分間）で染色した。図２Ｂは、モック形質導入ジャーカット細胞と比較した、ＦＬＡＧ染色（クローンＬ５）によるＣＡＲ発現を示す。
【図２Ｂ】アダプター結合は、アダプターおよびＣＡＲの結合特異性を関連付ける。ジャーカットＮＦＡＴルシフェラーゼレポーター細胞に、陰性対照ＣＡＲ（α３Ｄ）、ＡＦＰ（ｐ２６）結合ＣＡＲ（ａｆ０３）、またはＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（ｂｃ４０）を形質導入した。図２Ａでは、ＣＡＲを形質導入したジャーカット細胞を０．５μｇのアダプタータンパク質と共にインキュベートし（４℃で２０分間）、洗浄後、抗ヒスＰＥ（クローンＪ０９５Ｇ４６、４℃で２０分間）で染色した。図２Ｂは、モック形質導入ジャーカット細胞と比較した、ＦＬＡＧ染色（クローンＬ５）によるＣＡＲ発現を示す。
【図３Ａ】特異性の適合したＣＡＲ：アダプターおよび標的：アダプターのアダプター結合は、標的細胞の溶解を促進することを示す。図３Ａでは、ＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（ｂｃ４０）を形質導入した２０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：２、ドナーＤ１４−０５３０１７、７日目）の存在下または非存在下で、４０，０００個のＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞を、種々のアダプターと共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。同じ比率で培養した対照のＣＤ１２３特異的ＣＡＲ  Ｔ細胞（ｃｇ０６）を、溶解のための陽性対照として使用した。図３Ｂでは、ＡＦＰ結合ＣＡＲ（Ａｆ０３またはＡｆ０５）を形質導入した２０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：２、ドナーＤ１６−０６１３１７、７日目）の存在下または非存在下で、４０，０００個のＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞を、ＣＤ１２３（ｃｇ０６）−ＡＦＰ（ｐ２６）アダプターと共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。同じ比率で培養した対照のＣＤ１２３特異的ＣＡＲ  Ｔ細胞（ｃｇ０６）を、溶解のための陽性対照として使用した。図３Ｃでは、モック形質導入した、またはＡＦＰ結合ＣＡＲ（Ａｆ０３またはＡｆ０５）を形質導入した１０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：４、ドナーＤ１５−０６２０１７、８日目）の存在下または非存在下で、４０，０００個のＢＣＭＡ＋ＮＣＩ  Ｈ９２９−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞を、ｂｃ４０−ＡＦＰ（ｐ２６）アダプターと共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＮＣＩ−Ｈ９２９−ＧＦＰ／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。
【図３Ｂ】特異性の適合したＣＡＲ：アダプターおよび標的：アダプターのアダプター結合は、標的細胞の溶解を促進することを示す。図３Ａでは、ＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（ｂｃ４０）を形質導入した２０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：２、ドナーＤ１４−０５３０１７、７日目）の存在下または非存在下で、４０，０００個のＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞を、種々のアダプターと共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。同じ比率で培養した対照のＣＤ１２３特異的ＣＡＲ  Ｔ細胞（ｃｇ０６）を、溶解のための陽性対照として使用した。図３Ｂでは、ＡＦＰ結合ＣＡＲ（Ａｆ０３またはＡｆ０５）を形質導入した２０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：２、ドナーＤ１６−０６１３１７、７日目）の存在下または非存在下で、４０，０００個のＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞を、ＣＤ１２３（ｃｇ０６）−ＡＦＰ（ｐ２６）アダプターと共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。同じ比率で培養した対照のＣＤ１２３特異的ＣＡＲ  Ｔ細胞（ｃｇ０６）を、溶解のための陽性対照として使用した。図３Ｃでは、モック形質導入した、またはＡＦＰ結合ＣＡＲ（Ａｆ０３またはＡｆ０５）を形質導入した１０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：４、ドナーＤ１５−０６２０１７、８日目）の存在下または非存在下で、４０，０００個のＢＣＭＡ＋ＮＣＩ  Ｈ９２９−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞を、ｂｃ４０−ＡＦＰ（ｐ２６）アダプターと共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＮＣＩ−Ｈ９２９−ＧＦＰ／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。
【図３Ｃ】特異性の適合したＣＡＲ：アダプターおよび標的：アダプターのアダプター結合は、標的細胞の溶解を促進することを示す。図３Ａでは、ＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（ｂｃ４０）を形質導入した２０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：２、ドナーＤ１４−０５３０１７、７日目）の存在下または非存在下で、４０，０００個のＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞を、種々のアダプターと共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。同じ比率で培養した対照のＣＤ１２３特異的ＣＡＲ  Ｔ細胞（ｃｇ０６）を、溶解のための陽性対照として使用した。図３Ｂでは、ＡＦＰ結合ＣＡＲ（Ａｆ０３またはＡｆ０５）を形質導入した２０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：２、ドナーＤ１６−０６１３１７、７日目）の存在下または非存在下で、４０，０００個のＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞を、ＣＤ１２３（ｃｇ０６）−ＡＦＰ（ｐ２６）アダプターと共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。同じ比率で培養した対照のＣＤ１２３特異的ＣＡＲ  Ｔ細胞（ｃｇ０６）を、溶解のための陽性対照として使用した。図３Ｃでは、モック形質導入した、またはＡＦＰ結合ＣＡＲ（Ａｆ０３またはＡｆ０５）を形質導入した１０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：４、ドナーＤ１５−０６２０１７、８日目）の存在下または非存在下で、４０，０００個のＢＣＭＡ＋ＮＣＩ  Ｈ９２９−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞を、ｂｃ４０−ＡＦＰ（ｐ２６）アダプターと共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＮＣＩ−Ｈ９２９−ＧＦＰ／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。
【図４Ａ】特異性の適合したＣＡＲ：アダプターおよび標的：アダプターのアダプター結合は、ＣＡＲ  Ｔ細胞によるサイトカイン産生を促進することを示す。図４Ａおよび４Ｂでは、ＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（ｂｃ４０）を形質導入したドナーＤ１４−０５３０１７Ｔ細胞を、ＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３細胞（２５，０００個のＴ細胞および標的細胞）の存在下または非存在下、種々のアダプターと共に一晩培養した。培養上清を集め、ＩＬ−２（図４Ａ）およびＩＦＮ−γ（図４Ｂ）の産生について評価した。図４Ｃおよび４Ｄでは、ＡＦＰ結合ＣＡＲ（Ａｆ０３およびＡｆ０５）を形質導入したドナーＤ１５−０６２０１７  Ｔ細胞を、ＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３細胞（２５，０００個のＴ細胞および標的細胞）の存在下または非存在下、ｃｇ０６−ＡＦＰ（ｐ２６）アダプターと共に一晩培養した。培養上清を集め、ＩＬ−２（図４Ｃ）およびＩＦＮ−γ（図４Ｄ）の産生について評価した。
【図４Ｂ】特異性の適合したＣＡＲ：アダプターおよび標的：アダプターのアダプター結合は、ＣＡＲ  Ｔ細胞によるサイトカイン産生を促進することを示す。図４Ａおよび４Ｂでは、ＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（ｂｃ４０）を形質導入したドナーＤ１４−０５３０１７Ｔ細胞を、ＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３細胞（２５，０００個のＴ細胞および標的細胞）の存在下または非存在下、種々のアダプターと共に一晩培養した。培養上清を集め、ＩＬ−２（図４Ａ）およびＩＦＮ−γ（図４Ｂ）の産生について評価した。図４Ｃおよび４Ｄでは、ＡＦＰ結合ＣＡＲ（Ａｆ０３およびＡｆ０５）を形質導入したドナーＤ１５−０６２０１７  Ｔ細胞を、ＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３細胞（２５，０００個のＴ細胞および標的細胞）の存在下または非存在下、ｃｇ０６−ＡＦＰ（ｐ２６）アダプターと共に一晩培養した。培養上清を集め、ＩＬ−２（図４Ｃ）およびＩＦＮ−γ（図４Ｄ）の産生について評価した。
【図４Ｃ】特異性の適合したＣＡＲ：アダプターおよび標的：アダプターのアダプター結合は、ＣＡＲ  Ｔ細胞によるサイトカイン産生を促進することを示す。図４Ａおよび４Ｂでは、ＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（ｂｃ４０）を形質導入したドナーＤ１４−０５３０１７Ｔ細胞を、ＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３細胞（２５，０００個のＴ細胞および標的細胞）の存在下または非存在下、種々のアダプターと共に一晩培養した。培養上清を集め、ＩＬ−２（図４Ａ）およびＩＦＮ−γ（図４Ｂ）の産生について評価した。図４Ｃおよび４Ｄでは、ＡＦＰ結合ＣＡＲ（Ａｆ０３およびＡｆ０５）を形質導入したドナーＤ１５−０６２０１７  Ｔ細胞を、ＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３細胞（２５，０００個のＴ細胞および標的細胞）の存在下または非存在下、ｃｇ０６−ＡＦＰ（ｐ２６）アダプターと共に一晩培養した。培養上清を集め、ＩＬ−２（図４Ｃ）およびＩＦＮ−γ（図４Ｄ）の産生について評価した。
【図４Ｄ】特異性の適合したＣＡＲ：アダプターおよび標的：アダプターのアダプター結合は、ＣＡＲ  Ｔ細胞によるサイトカイン産生を促進することを示す。図４Ａおよび４Ｂでは、ＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（ｂｃ４０）を形質導入したドナーＤ１４−０５３０１７Ｔ細胞を、ＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３細胞（２５，０００個のＴ細胞および標的細胞）の存在下または非存在下、種々のアダプターと共に一晩培養した。培養上清を集め、ＩＬ−２（図４Ａ）およびＩＦＮ−γ（図４Ｂ）の産生について評価した。図４Ｃおよび４Ｄでは、ＡＦＰ結合ＣＡＲ（Ａｆ０３およびＡｆ０５）を形質導入したドナーＤ１５−０６２０１７  Ｔ細胞を、ＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３細胞（２５，０００個のＴ細胞および標的細胞）の存在下または非存在下、ｃｇ０６−ＡＦＰ（ｐ２６）アダプターと共に一晩培養した。培養上清を集め、ＩＬ−２（図４Ｃ）およびＩＦＮ−γ（図４Ｄ）の産生について評価した。
【図５】特異性の適合したＣＡＲ：アダプターおよび標的：アダプターのアダプター結合は、ＣＡＲ  Ｔ細胞の増殖を促進する。ＡＦＰ結合ＣＡＲ（Ａｆ０３）を形質導入したドナーＤ１６−０６２７１７細胞をＣＦＳＥ標識（０．５μＭで１０分）した後、マイトマイシンＣ処理ＣＤ１２３−ＢＣＭＡ＋ＮＣＩ−Ｈ９２９細胞（２５，０００個）の存在下または非存在下、ＣＤ１２３特異的アダプターまたはＢＣＭＡ特異的アダプターの存在下（２５，０００個）で７２時間培養した。７２時間で、細胞をＣＤ３染色し、その後、ＣＤ３＋細胞の絶対数をフローサイトメトリーで分析した。
【図６Ａ】適合したＣＡＲ：アダプターおよび標的：アダプターのアダプター結合は、ＣＡＲ発現ジャーカットＮＦＡＴ−ルシフェラーゼレポーター細胞によるシグナル伝達を促進することを示す。図６Ａでは、前もってＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（ｂｃ４０）を形質導入した５０，０００個のレポーター細胞を、５０，０００個のＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１４細胞の存在下または非存在下、種々のアダプタータンパク質の存在下で５時間培養した後、ルシフェラーゼ活性を評価した。図６Ｂでは、前もってＡＦＰ（ｐ２６）結合ＣＡＲ（ａｆ０３）を形質導入した５０，０００個のレポーター細胞を、５０，０００個のＢＣＭＡ＋ＮＣＩ−Ｈ９２９細胞の存在下または非存在下、非特異的α３Ｄ−アダプターまたはＢＣＭＡ特異的Ｂｃ４０−アダプタータンパク質の存在下で５時間培養した後、ルシフェラーゼ活性を評価した。
【図６Ｂ】適合したＣＡＲ：アダプターおよび標的：アダプターのアダプター結合は、ＣＡＲ発現ジャーカットＮＦＡＴ−ルシフェラーゼレポーター細胞によるシグナル伝達を促進することを示す。図６Ａでは、前もってＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（ｂｃ４０）を形質導入した５０，０００個のレポーター細胞を、５０，０００個のＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１４細胞の存在下または非存在下、種々のアダプタータンパク質の存在下で５時間培養した後、ルシフェラーゼ活性を評価した。図６Ｂでは、前もってＡＦＰ（ｐ２６）結合ＣＡＲ（ａｆ０３）を形質導入した５０，０００個のレポーター細胞を、５０，０００個のＢＣＭＡ＋ＮＣＩ−Ｈ９２９細胞の存在下または非存在下、非特異的α３Ｄ−アダプターまたはＢＣＭＡ特異的Ｂｃ４０−アダプタータンパク質の存在下で５時間培養した後、ルシフェラーゼ活性を評価した。
【図７Ａ】ＢＣＭＡ抗原決定基を有するＣＤ１２３特異的アダプターは、ＢＣＭＡ特異的ＤドメインＣＡＲ（ｂｃ４０）またはＢＣＭＡ特異的ｓｃＦｖ  ＣＡＲ（ｃ１１Ｄ５−３）と一緒に機能を果たすことができることを示す。図７Ａでは、４０，０００個のＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞に、非特異的ＣＡＲ（α３Ｄ）、ＢＣＭＡ結合ＤドメインＣＡＲ（ｂｃ４０）、またはＢＣＭＡ結合ｓｃＦｖ  ＣＡＲ（ｃ１１Ｄ５−３）を形質導入した２０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：２、ドナーＤ１４−０６２７１７、９日目）の存在下または非存在下で、Ｃｇ０６−ＢＣＭＡアダプターと共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。実線は、計算した３パラメーター非線形曲線を示し、点線は、ｃ１１Ｄ５−３に対するものであり、例示の目的のみのために提示している。図７Ｂでは、ＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞を、図７Ａと同じ実験で、アダプタータンパク質の非存在下、形質導入Ｔ細胞を用いて培養した。
【図７Ｂ】ＢＣＭＡ抗原決定基を有するＣＤ１２３特異的アダプターは、ＢＣＭＡ特異的ＤドメインＣＡＲ（ｂｃ４０）またはＢＣＭＡ特異的ｓｃＦｖ  ＣＡＲ（ｃ１１Ｄ５−３）と一緒に機能を果たすことができることを示す。図７Ａでは、４０，０００個のＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞に、非特異的ＣＡＲ（α３Ｄ）、ＢＣＭＡ結合ＤドメインＣＡＲ（ｂｃ４０）、またはＢＣＭＡ結合ｓｃＦｖ  ＣＡＲ（ｃ１１Ｄ５−３）を形質導入した２０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：２、ドナーＤ１４−０６２７１７、９日目）の存在下または非存在下で、Ｃｇ０６−ＢＣＭＡアダプターと共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。実線は、計算した３パラメーター非線形曲線を示し、点線は、ｃ１１Ｄ５−３に対するものであり、例示の目的のみのために提示している。図７Ｂでは、ＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞を、図７Ａと同じ実験で、アダプタータンパク質の非存在下、形質導入Ｔ細胞を用いて培養した。
【図８Ａ】ＡＦＰ特異的ＣＡＲは、複数のアダプタータンパク質とのインキュベーションを介してＣＤ１２３およびＢＣＭＡ結合能力を同時に有することができることを示す。ＡＦＰ（ｐ２６）結合ＣＡＲ（ａｆ０３）を形質導入した１０５個のジャーカットＮＦＡＴルシフェラーゼを、ＣＤ１２３特異的アダプターに対するＢＣＭＡ特異的アダプターの種々の比率の合計０．５μｇのアダプタータンパク質と共にインキュベートし（４℃で２０分間）、洗浄後、ＣＤ１２３−Ｆｃおよびビオチン化ＢＣＭＡ（それぞれ０．５μｇ）と共にインキュベートし（４℃で２０分間）、洗浄後、抗Ｆｃ  Ａ４８８およびストレプトアビジン−ＰＥで結合を検出した。図８Ａは、それらのそれぞれの標的タンパク質に対するＣＤ１２３結合およびＢＣＭＡ結合のフローサイトメトリー分析を示し、図８Ｂは、図８Ａで提示したＡ４８８  ＭＦＩ（ＣＤ１２３結合、左軸）およびＰＥ  ＭＦＩ（ＢＣＭＡ結合、右軸）フローサイトメトリーデータの平均蛍光強度（ＭＦＩ）の比較を示す。
【図８Ｂ】ＡＦＰ特異的ＣＡＲは、複数のアダプタータンパク質とのインキュベーションを介してＣＤ１２３およびＢＣＭＡ結合能力を同時に有することができることを示す。ＡＦＰ（ｐ２６）結合ＣＡＲ（ａｆ０３）を形質導入した１０５個のジャーカットＮＦＡＴルシフェラーゼを、ＣＤ１２３特異的アダプターに対するＢＣＭＡ特異的アダプターの種々の比率の合計０．５μｇのアダプタータンパク質と共にインキュベートし（４℃で２０分間）、洗浄後、ＣＤ１２３−Ｆｃおよびビオチン化ＢＣＭＡ（それぞれ０．５μｇ）と共にインキュベートし（４℃で２０分間）、洗浄後、抗Ｆｃ  Ａ４８８およびストレプトアビジン−ＰＥで結合を検出した。図８Ａは、それらのそれぞれの標的タンパク質に対するＣＤ１２３結合およびＢＣＭＡ結合のフローサイトメトリー分析を示し、図８Ｂは、図８Ａで提示したＡ４８８  ＭＦＩ（ＣＤ１２３結合、左軸）およびＰＥ  ＭＦＩ（ＢＣＭＡ結合、右軸）フローサイトメトリーデータの平均蛍光強度（ＭＦＩ）の比較を示す。
【図９Ａ】単一結合ドメインアダプター蛋白質に比べて、二重結合ドメインアダプター蛋白質は、ＣＡＲ発現ジャーカットＮＦＡＴルシフェラーゼレポーター細胞により高められたシグナル伝達を促進する。図９Ａでは、ＡＦＰ（ｐ２６ドメイン）結合ＣＡＲ（ａｆ０３）を前もって形質導入した５０，０００個のレポーター細胞を、５０，０００個のＣＤ１２３＋ＭＯＬＭ１３またはＣＤ１２３欠損ＭＯＬＭ１３細胞の存在下、ＣＤ１２３特異的Ｃｇ０６−アダプター（Ｃｇ０６−ｐ２６）またはＣｇ０６−二重アダプター蛋白質（Ｃｇ０６−ｐ２６−Ｃｇ０６）の存在下で、５時間培養した後、ルシフェラーゼ活性を評価した。ＣＤ１２３欠乏細胞は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９遺伝子工学技術を用いて生成した。図９Ｂでは、ＡＦＰ（ｐ２６ドメイン）結合ＣＡＲ（ａｆ０３）を前もって形質導入した５０，０００個のレポーター細胞を、５０，０００個のＢＣＭＡ＋Ｕ２６６細胞の存在または非存在下、ＢＣＭＡ特異的Ｂｃ４０−アダプター（Ｂｃ４０−ｐ２６）またはＢｃ４０−二重アダプター蛋白質（Ｂｃ４０−ｐ２６−Ｂｃ４０）の存在下で５時間培養した後、ルシフェラーゼ活性を評価した。
【図９Ｂ】単一結合ドメインアダプター蛋白質に比べて、二重結合ドメインアダプター蛋白質は、ＣＡＲ発現ジャーカットＮＦＡＴルシフェラーゼレポーター細胞により高められたシグナル伝達を促進する。図９Ａでは、ＡＦＰ（ｐ２６ドメイン）結合ＣＡＲ（ａｆ０３）を前もって形質導入した５０，０００個のレポーター細胞を、５０，０００個のＣＤ１２３＋ＭＯＬＭ１３またはＣＤ１２３欠損ＭＯＬＭ１３細胞の存在下、ＣＤ１２３特異的Ｃｇ０６−アダプター（Ｃｇ０６−ｐ２６）またはＣｇ０６−二重アダプター蛋白質（Ｃｇ０６−ｐ２６−Ｃｇ０６）の存在下で、５時間培養した後、ルシフェラーゼ活性を評価した。ＣＤ１２３欠乏細胞は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９遺伝子工学技術を用いて生成した。図９Ｂでは、ＡＦＰ（ｐ２６ドメイン）結合ＣＡＲ（ａｆ０３）を前もって形質導入した５０，０００個のレポーター細胞を、５０，０００個のＢＣＭＡ＋Ｕ２６６細胞の存在または非存在下、ＢＣＭＡ特異的Ｂｃ４０−アダプター（Ｂｃ４０−ｐ２６）またはＢｃ４０−二重アダプター蛋白質（Ｂｃ４０−ｐ２６−Ｂｃ４０）の存在下で５時間培養した後、ルシフェラーゼ活性を評価した。
【図１０】短縮および完全長ｐ２６のヒトＦｃＲｎへの結合はｐＨ依存性であることを示す。
【図１１Ａ】ＣＳ１（ＳＬＡＭＦ７、ＣＲＡＣＣ、ＣＤ３１９）特異的ＡＤＢＤを含むアダプターは、細胞内シグナル伝達およびＣＳ１陽性腫瘍の死滅を調節することを示す。図１１Ａでは、ｃｃ０２およびｃｃ０８  ＡＤＢＤは、ａｆ５９−ＣＡＲ発現ＪＮＬ１０細胞の存在下およびＣＳ１陽性腫瘍細胞株、ＭＭ．１Ｓの存在下で培養した場合（図１１Ａ）、最も強力なＮＦＡＴシグナル伝達を示す。図１１Ｂは、ＣＳ１およびＢＣＭＡの両方に結合できる二重特異的ｂｃ９８−ｐ２６−ｃｃ０２アダプターは、シグナル伝達するその能力が、単一特異性ＢＣＭＡ結合ｂｃ９８−ｐ２６−α３ＤＱ１９Ｅアダプターおよび単一特異性ＣＳ１結合α３ＤＱ１９Ｅ−ｐ２６−ｃｃ０２アダプターよりも強力であったことを示す。図１１Ｃおよび１１Ｄは、ＨＴ９２９（ＢＣＭＡおよびＣＳ１両方の高発現、図１１Ｃ）およびＭＭ．１Ｓ（ＢＣＭＡの高発現、ＣＳ１の低発現；図１１Ｄ）の死滅の観点から、二重特異的ｂｃ９８−ｐ２６−ｃｃ０２が効果的アダプターであることを示す。
【図１１Ｂ】ＣＳ１（ＳＬＡＭＦ７、ＣＲＡＣＣ、ＣＤ３１９）特異的ＡＤＢＤを含むアダプターは、細胞内シグナル伝達およびＣＳ１陽性腫瘍の死滅を調節することを示す。図１１Ａでは、ｃｃ０２およびｃｃ０８  ＡＤＢＤは、ａｆ５９−ＣＡＲ発現ＪＮＬ１０細胞の存在下およびＣＳ１陽性腫瘍細胞株、ＭＭ．１Ｓの存在下で培養した場合（図１１Ａ）、最も強力なＮＦＡＴシグナル伝達を示す。図１１Ｂは、ＣＳ１およびＢＣＭＡの両方に結合できる二重特異的ｂｃ９８−ｐ２６−ｃｃ０２アダプターは、シグナル伝達するその能力が、単一特異性ＢＣＭＡ結合ｂｃ９８−ｐ２６−α３ＤＱ１９Ｅアダプターおよび単一特異性ＣＳ１結合α３ＤＱ１９Ｅ−ｐ２６−ｃｃ０２アダプターよりも強力であったことを示す。図１１Ｃおよび１１Ｄは、ＨＴ９２９（ＢＣＭＡおよびＣＳ１両方の高発現、図１１Ｃ）およびＭＭ．１Ｓ（ＢＣＭＡの高発現、ＣＳ１の低発現；図１１Ｄ）の死滅の観点から、二重特異的ｂｃ９８−ｐ２６−ｃｃ０２が効果的アダプターであることを示す。
【図１１Ｃ】ＣＳ１（ＳＬＡＭＦ７、ＣＲＡＣＣ、ＣＤ３１９）特異的ＡＤＢＤを含むアダプターは、細胞内シグナル伝達およびＣＳ１陽性腫瘍の死滅を調節することを示す。図１１Ａでは、ｃｃ０２およびｃｃ０８  ＡＤＢＤは、ａｆ５９−ＣＡＲ発現ＪＮＬ１０細胞の存在下およびＣＳ１陽性腫瘍細胞株、ＭＭ．１Ｓの存在下で培養した場合（図１１Ａ）、最も強力なＮＦＡＴシグナル伝達を示す。図１１Ｂは、ＣＳ１およびＢＣＭＡの両方に結合できる二重特異的ｂｃ９８−ｐ２６−ｃｃ０２アダプターは、シグナル伝達するその能力が、単一特異性ＢＣＭＡ結合ｂｃ９８−ｐ２６−α３ＤＱ１９Ｅアダプターおよび単一特異性ＣＳ１結合α３ＤＱ１９Ｅ−ｐ２６−ｃｃ０２アダプターよりも強力であったことを示す。図１１Ｃおよび１１Ｄは、ＨＴ９２９（ＢＣＭＡおよびＣＳ１両方の高発現、図１１Ｃ）およびＭＭ．１Ｓ（ＢＣＭＡの高発現、ＣＳ１の低発現；図１１Ｄ）の死滅の観点から、二重特異的ｂｃ９８−ｐ２６−ｃｃ０２が効果的アダプターであることを示す。
【図１１Ｄ】ＣＳ１（ＳＬＡＭＦ７、ＣＲＡＣＣ、ＣＤ３１９）特異的ＡＤＢＤを含むアダプターは、細胞内シグナル伝達およびＣＳ１陽性腫瘍の死滅を調節することを示す。図１１Ａでは、ｃｃ０２およびｃｃ０８  ＡＤＢＤは、ａｆ５９−ＣＡＲ発現ＪＮＬ１０細胞の存在下およびＣＳ１陽性腫瘍細胞株、ＭＭ．１Ｓの存在下で培養した場合（図１１Ａ）、最も強力なＮＦＡＴシグナル伝達を示す。図１１Ｂは、ＣＳ１およびＢＣＭＡの両方に結合できる二重特異的ｂｃ９８−ｐ２６−ｃｃ０２アダプターは、シグナル伝達するその能力が、単一特異性ＢＣＭＡ結合ｂｃ９８−ｐ２６−α３ＤＱ１９Ｅアダプターおよび単一特異性ＣＳ１結合α３ＤＱ１９Ｅ−ｐ２６−ｃｃ０２アダプターよりも強力であったことを示す。図１１Ｃおよび１１Ｄは、ＨＴ９２９（ＢＣＭＡおよびＣＳ１両方の高発現、図１１Ｃ）およびＭＭ．１Ｓ（ＢＣＭＡの高発現、ＣＳ１の低発現；図１１Ｄ）の死滅の観点から、二重特異的ｂｃ９８−ｐ２６−ｃｃ０２が効果的アダプターであることを示す。
【図１２Ａ】ＨＥＲ２結合ＡＤＢＤを含むアダプターは、ＨＥＲ２陽性ＳＫＢＲ３腫瘍と共に培養したＡｆ５９−ＣＡＲ発現ＪＮＬ１０−細胞におけるシグナル伝達を誘導する。図１２Ａは、ｅｂ０８  ＨＥＲ２結合ＡＤＢＤがこのアッセイで最も強力な刺激剤であったことを示す。図１２Ｂは、ｅｂ０８を含むアダプターにより媒介されるＪＮＬ１０細胞のＮＦＡＴシグナル伝達が、ｚＨＥＲ：４を含むアダプターにより媒介されるものよりも大きく、９．２９を含むアダプターにより媒介されるものと同等であり、Ｇ３およびｚＨＥＲ２：３４２のそれより小さいことを示す。図１２Ｃは、ＨＥＲ２結合ｅｂ０８またはｅｂ０４を含むアダプターは、用量依存性的に腫瘍溶解を調節することを示す。
【図１２Ｂ】ＨＥＲ２結合ＡＤＢＤを含むアダプターは、ＨＥＲ２陽性ＳＫＢＲ３腫瘍と共に培養したＡｆ５９−ＣＡＲ発現ＪＮＬ１０−細胞におけるシグナル伝達を誘導する。図１２Ａは、ｅｂ０８  ＨＥＲ２結合ＡＤＢＤがこのアッセイで最も強力な刺激剤であったことを示す。図１２Ｂは、ｅｂ０８を含むアダプターにより媒介されるＪＮＬ１０細胞のＮＦＡＴシグナル伝達が、ｚＨＥＲ：４を含むアダプターにより媒介されるものよりも大きく、９．２９を含むアダプターにより媒介されるものと同等であり、Ｇ３およびｚＨＥＲ２：３４２のそれより小さいことを示す。図１２Ｃは、ＨＥＲ２結合ｅｂ０８またはｅｂ０４を含むアダプターは、用量依存性的に腫瘍溶解を調節することを示す。
【図１２Ｃ】ＨＥＲ２結合ＡＤＢＤを含むアダプターは、ＨＥＲ２陽性ＳＫＢＲ３腫瘍と共に培養したＡｆ５９−ＣＡＲ発現ＪＮＬ１０−細胞におけるシグナル伝達を誘導する。図１２Ａは、ｅｂ０８  ＨＥＲ２結合ＡＤＢＤがこのアッセイで最も強力な刺激剤であったことを示す。図１２Ｂは、ｅｂ０８を含むアダプターにより媒介されるＪＮＬ１０細胞のＮＦＡＴシグナル伝達が、ｚＨＥＲ：４を含むアダプターにより媒介されるものよりも大きく、９．２９を含むアダプターにより媒介されるものと同等であり、Ｇ３およびｚＨＥＲ２：３４２のそれより小さいことを示す。図１２Ｃは、ＨＥＲ２結合ｅｂ０８またはｅｂ０４を含むアダプターは、用量依存性的に腫瘍溶解を調節することを示す。
【発明を実施するための形態】
【００８７】
Ｉ．定義
特段の記載がない限り、本明細書で用いられる全ての技術および科学用語は、本開示が属する当業者により一般的に解釈されるのと同じ意味を有する。
【００８８】
実施形態が用語の「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」と共に本明細書で記載される場合は常に、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」および／または「から基本的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」の用語で記載される別の類似の実施形態も同様に提供される。しかし、特許請求の範囲で移行句として使用される場合は、それぞれが別々におよび適切な法的文脈および事実の文脈で解釈されるべきである（例えば、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、より開放型の語句であると見なされ、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」はより排他的であると見なされ、「から基本的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」はこれらの中間的であると見なされる）。
【００８９】
本明細書で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、特に明記しない限り複数の参照物を含む。
【００９０】
「Ａおよび／またはＢ」などの表現で使用される用語の「および／または」は本明細書では、ＡとＢの両方；ＡまたはＢ；Ａ（単独）；およびＢ（単独）を含むことが意図されている。同様に、「Ａ、Ｂおよび／またはＣ」などの表現で使用される用語の「および／または」はそれぞれ次の実施形態を包含する：Ａ、Ｂ、およびＣ；Ａ、Ｂ、またはＣ；ＡまたはＣ；ＡまたはＢ；ＢまたはＣ；ＡおよびＣ；ＡおよびＢ；ＢおよびＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；およびＣ（単独）。
【００９１】
本明細書で使われる場合の用語の「約（ａｂｏｕｔ）」は、量、時間的な期間、およびその他の当該技術分野において既知の測定可能な値などの測定可能な値を意味する場合、指定値から±２０％の変動、またはいくつかの実施形態では、±１０％の変動、またはいくつかの実施形態では、±５％の変動、またはいくつかの実施形態では、±１％の変動、またはいくつかの実施形態では、±０．１％の変動を包含することが意図されている。理由は、このような変動は、開示方法を実施するために適切であるためである。
【００９２】
用語の「タンパク質」および「ポリペプチド」は、本明細書では同義に用いられ、ペプチド結合を介して結合されたアミノ酸由来の単位を含む生物学的ポリマーを意味し、タンパク質は、２つ以上のポリペプチド鎖から構成され得る。
【００９３】
「細胞表面受容体」は、シグナルを受信および細胞の細胞膜を横切ってこのようなシグナルを伝達できる分子および分子の複合体を意味する。本明細書で提供される細胞表面受容体の例は、活性化インテグリン受容体、例えば、転移性細胞上の活性化αｖβ３インテグリン受容体である。本明細書で使用される場合、「細胞表面受容体」は、着目標的の抗原決定基と結合できるＣＡＲを含む細胞表面上に発現した分子も包含する。用語の「受容体」は、分子（例えば、リガンド）と結合する、あるいは、それと相互作用し、細胞上のリガンドの作用を媒介する細胞結合型タンパク質を意味する。いくつかの実施形態では、受容体と相互作用する分子は生理活性分子である。膜結合型細胞表面受容体は、マルチドメイン構造を特徴とし、この構造には、リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン、および通常シグナル伝達に関与する細胞内エフェクタードメインが含まれる。
【００９４】
本明細書で使用される場合、用語の「キメラ抗原受容体」または「ＣＡＲ」または「ＣＡＲ（複数）」は、抗原または標的特異性を免疫細胞（例えば、ナイーブＴ細胞、セントラルメモリーＴ細胞、エフェクターメモリーＴ細胞、ＮＫ細胞、ＮＫＴまたはそれらの複数もしくはそれらの組み合わせなどのＴ細胞）などの細胞に移植する遺伝子改変キメラポリペプチドを意味する。ＣＡＲはまた、本明細書においては、人工Ｔ細胞受容体、キメラＴ細胞受容体またはキメラ免疫受容体と呼ぶこともある。ＣＡＲは、構造的または機能的特性を細胞免疫機能受容体またはアダプター分子と共有する。同族抗原への結合時には、ＣＡＲは、自身が内部に配置される細胞傷害性細胞を活性化または不活性化できる、または細胞の抗腫瘍作用を調節できる、または別の方法で細胞免疫反応を調節できる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＴ細胞受容体（ＴＣＲ、例えば、Ｔ細胞受容体複合体に結合したゼータ鎖）由来、またはナチュラルキラー細胞受容体（ＮＫＲ）由来の１つまたは複数の要素（例えば、ドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、（１）抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、２つ以上の抗原決定基結合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、同じ抗原の異なる抗原決定基、異なる抗原上の異なる抗原決定基、または異なる標的細胞により発現された抗原決定基に結合する２つ以上の抗原決定基結合ドメインを含む。
【００９５】
本明細書で使用される場合、用語の「免疫細胞」は、抗原提示細胞、Ｂ細胞、好塩基球、細胞傷害性Ｔ細胞、樹状細胞、好酸球、顆粒球、ヘルパーＴ細胞、白血球、リンパ球、マクロファージ、マスト細胞、メモリー細胞、単球、ナチュラルキラー細胞、好中球、貪食細胞、プラズマ細胞、およびＴ細胞が含まれるが、これらに限定されない、哺乳動物免疫系の細胞を意味する。
【００９６】
用語の「Ｔ細胞」および「Ｔリンパ球」は、相互交換可能であり、本明細書では同義に使用される。例としては、ナイーブＴ細胞、セントラルメモリーＴ細胞、エフェクターメモリーＴ細胞、またはこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【００９７】
「自己」は、用語として本明細書で使用される場合、後で再投与される個体と同じ個体に由来する任意の物質を意味する。
【００９８】
「同種」は、用語として本明細書で使用される場合、導入される個体と同じ種の異なる動物に由来する任意の物質を意味する。２つ以上の個体は、遺伝子が１つまたは複数の座位で同一ではない場合に、相互に同種であると呼ばれる。いくつかの態様では、同じ種の個体由来の同種物質は、抗原性に相互作用するのに十分に遺伝的に異なり得る。
【００９９】
用語の「エフェクター細胞」は、１つまたは複数のＦｃＲを発現し、エフェクター機能を実行する白血球である。この細胞は少なくともＦｃＲＩＩＩを発現し、ＡＤＣＣエフェクター機能を実行するのが好ましい。ＡＤＣＣを媒介するヒト白血球の例には、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球、細胞傷害性Ｔ細胞および好中球が挙げられ、特定の実施形態では、ＰＢＭＣおよびＮＫ細胞が好ましい。エフェクター細胞は、その天然由来源、例えば、本明細書に記載の、あるいは当該技術分野において既知の、血液またはＰＢＭＣから単離できる。特定の実施形態では、エフェクター細胞はヒトエフェクター細胞である。
【０１００】
用語の「エフェクター機能」は、分化した細胞の特殊化された機能を意味する。Ｔ細胞のエフェクター機能は、例えば、細胞溶解活性またはサイトカインの分泌を含むヘルパー活性であり得る。
【０１０１】
本明細書で使用される場合、用語の「免疫応答」は、先天免疫、体液性免疫、細胞性免疫、免疫、炎症反応、後天（獲得）免疫、自己免疫、および／または過活動免疫が含まれるが、これらに限定されない、免疫を意味する。免疫反応の指標には、免疫細胞によるサイトカインの分泌、免疫細胞集団の増殖、抗体の産生、細胞傷害性細胞の脱顆粒、および標的細胞死滅が挙げられ得る。このような指標は、容易に利用可能なアッセイ、例えば、当該技術分野において既知のＥＬＩＳＡまたはエリスポットを用いて通常の方法で測定され得る。
【０１０２】
本明細書で使用される場合、用語の「アダプター」は、抗原決定基（ＡＤ）および第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むマルチドメイン可溶性タンパク質を意味する。このＡＤおよびＡＤＢＤに加えて、アダプターは、追加のＡＤ、追加のＡＤＢＤ、および／またはその他の追加のドメインを含み得る。
【０１０３】
本明細書で同じ意味で用いられる用語の「抗体」または「免疫グロブリン」は、全抗体を含む。全抗体は、ジスルフィド結合により相互に連接された少なくとも２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖を含む。各重鎖は、重鎖可変領域（ＶＨと略称）および重鎖定常領域からなる。重鎖定常領域は、３つのドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３からなる。各軽鎖は、軽鎖可変領域（ＶＬと略称）および軽鎖定常領域からなる。軽鎖定常領域は、１つのドメイン、Ｃｌからなる。ＶＨおよびＶＬ領域は、より保存されたフレームワーク領域（ＦＷ）と呼ばれる領域が散在する相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性領域にさらに細分できる。各ＶＨおよびＶＬは、３つのＣＤＲおよび４つのＦＷからなり、アミノ末端からカルボキシ末端へ次の順で配列される：ＦＷ１、ＣＤＲ１、ＦＷ２、ＣＤＲ２、ＦＷ３、ＣＤＲ３、ＦＷ４。重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含む。抗体の定常領域は、免疫系の種々の細胞（例えば、エフェクター細胞）および古典的補体系の第１の構成成分（Ｃ１ｑ）を含む宿主組織または因子への免疫グロブリンの結合を媒介し得る。
【０１０４】
本明細書で使用される場合、用語の「抗体フラグメント」などは、抗体の任意の機能的ドメイン、例えば、抗原結合断片またはその単鎖、エフェクタードメイン、サルベージ受容体結合エピトープ、またはその一部などの機能的ドメインを含む。本明細書で記載の抗体フラグメントは、種々の形態で存在し得る。抗体フラグメントの例には、限定されないが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖフラグメント、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄフラグメント、ｓｃＦｖ、ミニボディ、ＢｉＴＥ、Ｔａｎｄａｂ、ダイアボディ（（ＶＬ−ＶＨ）２または（ＶＨ−ＶＬ）２）、単一ドメイン抗体（例えば、ナノボディなどのｓｄＡｂ（ＶＬまたはＶＨ）、およびラクダ類ＶＨＨドメイン）および抗体フラグメントから形成された多重特異的抗体が含まれる。いくつかの実施形態では、「抗体フラグメント」は、抗体の抗原結合部位またはエピトープ結合部位に対応する。他の実施形態では、「抗体フラグメント」は、抗体の他の機能的領域、例えば、エフェクタードメインもしくはその一部、またはサルベージ受容体結合エピトープもしくはその一部に相当する。
【０１０５】
本明細書で使用される場合、用語の「単鎖可変フラグメント」、または「ｓｃＦｖ」抗体は、リンカーペプチドで結合された重鎖および軽鎖のみの可変領域を含む、抗体の形態（例えば、抗体フラグメント）を意味する。ｓｃＦｖは、ＶＬ−リンカー−ＶＨまたはＶＨ−リンカー−ＶＬを含み得る。ｓｃＦｖ抗体は通常、２２０〜２５０アミノ酸長さであり、１０〜２５アミノ酸長さのリンカーを含む。
【０１０６】
本明細書で使用される場合、用語の「Ｆｃ領域」または単に「Ｆｃ」は、免疫グロブリン鎖定常領域、好ましくは免疫グロブリン重鎖定常領域、またはその一部分のカルボキシル末端部を意味すると理解される。例えば、免疫グロブリンＦｃ領域は、（１）ＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン、（２）ＣＨ１ドメインおよびＣＨ２ドメイン、（３）ＣＨ１ドメインおよびＣＨ３ドメイン、（４）ＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメイン、または（５）２つ以上のドメインおよび免疫グロブリンヒンジ部の組み合わせを含み得る。好ましい実施形態では、免疫グロブリンＦｃ領域は、少なくとも免疫グロブリンヒンジ部、ＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインを含み、好ましくはＣＨ１ドメインを欠く。一実施形態では、重鎖定常領域が由来する免疫グロブリンのクラスは、ＩｇＧ（Ｉｇγ）（γサブクラス１、２、３、または４）である。免疫グロブリンの他のクラス、ＩｇＡ（Ｉｇα）、ＩｇＤ（Ｉｇδ）、ＩｇＥ（Ｉｇε）およびＩｇＭ（Ｉｇμ）を使用してもよい。適切な免疫グロブリン重鎖定常領域の選択は、米国特許第５，５４１，０８７号、および同５，７２６，０４４号に詳細に考察されている。これらの特許のそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。特定の結果を得るための特定の免疫グロブリンクラスおよびサブクラスからの特定の免疫グロブリン重鎖定常領域配列の選択は、当該技術分野における技能レベルの範囲内にあると見なされる。免疫グロブリンＦｃ領域をコードするＤＮＡ構築物の一部は、好ましくは、少なくとも一部のヒンジドメインを含み、および好ましくは少なくとも一部のＦｃガンマのＣＨ３ドメインまたはＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、またはＩｇＭのいずれかの相同ドメインを含む。さらに、免疫グロブリン重鎖定常領域内のアミノ酸の置換または欠失は、本明細書で開示の方法および組成物の実施に有用であり得る。１例は、上流ＣＨ２領域にアミノ酸置換を導入し、Ｆｃ受容体に対する親和性の低減したＦｃ変異体を生成することであろう（Ｃｏｌｅ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５９：３６１３（１９９７））。
【０１０７】
「抗体依存性細胞傷害」または「ＡＤＣＣ」は、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好中球、およびマクロファージ）を発現している非特異的細胞傷害性細胞が標的細胞上の結合抗体を認識し、その後、標的細胞を溶解させる（またはその他の細胞傷害性効果を引き起こす）細胞媒介反応を意味する。目的の分子のＡＤＣＣ活性を評価するために、米国特許第５，５００，３６２号または同５，８２１，３３７号に記載のものなどの当該技術分野において既知のいずれかのインビトロＡＤＣＣアッセイを用いることができる。このようなアッセイに有用なエフェクター細胞には、限定されないが、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）およびナチュラルキラー細胞（ＮＫ）細胞が含まれる。あるいは、または加えて、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、例えば、Ｃｌｙｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ９５：６５２−６５６（１９９８）に開示されたものなどの動物モデルを用いて、インビボで評価することができる。
【０１０８】
用語の「抗原決定基結合ドメイン」または「ＡＤＢＤ」が用語として本明細書で使用され、標的抗原決定基（ＡＤ）に対する認識および特異的結合を付与するのに十分なポリペプチドの配列（例えば、アダプターまたはＣＡＲ）を意味する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは抗原結合抗体フラグメント、ｓｃＦｖ、または抗体または抗体フラグメント配列をベースにしない抗原結合ペプチド（例えば、Ｄドメインまたはアフィボディ）である。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、非抗体ベース結合骨格（例えば、Ｄドメイン、アフィボディ、フィブロネクチンドメイン、ナノボディ、リポカリンドメイン、アンキリンドメイン、マキシボディ、プロテインＡドメイン、またはアフィリンドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは抗体ベース結合配列である。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはｓｃＦｖまたはドメイン抗体（ｄＡｂ）である。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、細胞の表面上の標的抗原に結合する能力を有する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、免疫エフェクター細胞の表面上の標的抗原に結合する能力を有する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、成長因子受容体またはホルモン受容体に結合する能力を有する。
【０１０９】
特定の実施形態では、ＡＤＢＤは、標的抗原決定基に対する認識および特異的結合を付与するのに十分な非抗体骨格ベースポリペプチド配列である。いくつかの実施形態では、非抗体ベースＡＤＢＤは、細胞の表面上の標的抗原に結合する能力を有するポリペプチドである。いくつかの実施形態では、非抗体ベースＡＤＢＤは、成長因子受容体またはホルモン受容体に結合する能力を有する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはＤドメインベースポリペプチドである。特定の実施形態では、ＡＤＢＤは、標的抗原決定基に対する認識および特異的結合を付与するのに十分なＤドメインベースポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、細胞の表面上の標的抗原に結合する能力を有するＤドメインベースポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、成長因子受容体またはホルモン受容体に結合する能力を有するＤドメインベースポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、血清タンパク質上の標的抗原に結合する能力を有するＤドメインベースポリペプチドである。
【０１１０】
用語の「特異的に結合する」または「に対し選択的親和性を有する」は、アダプターまたはＣＡＲなどの結合物質が、無関係のタンパク質を含む他の物質に対する場合より、標的エピトープに対して高頻度に、より急速に、より長期間、より大きな親和性で、またはこれらのいくつかの組み合わせで、エピトープ、タンパク質、または標的分子に対して反応するまたは結合することを意味する。異なる種中の相同タンパク質間の配列同一性のために、特定の結合は、いくつかの実施形態では、２つ以上の種中のタンパク質または標的を認識する結合物質を含む。同様に、異なるタンパク質の特定のポリペプチドの配列領域内の相同性のために、特異的結合は、２つ以上のタンパク質または標的を認識する結合物質を含み得る。特定の実施形態では、第１の標的に特異的に結合する結合物質は、第２の標的に特異的に結合しても、またはしなくてもよい。従って、「特異的結合」は、排他的な結合、例えば、単一標的に対する結合を必要とする（含むことはできるが）とは限らない。従って、結合物質は、特定の実施形態では、２つ以上の標的に特異的に結合し得る。特定の実施形態では、複数標的が、結合物質上の同じ抗原結合部位により結合され得る。
【０１１１】
用語の「リンカー」、「スペーサー」、および「ヒンジ」は、本明細書では同じ意味で用いられ、アダプターまたはＣＡＲのそれ以外は独立した２つ以上の機能的ドメイン間のペプチドまたはその他の化学的連結を意味する。例えば、リンカーは、アダプターの抗原決定基ドメインと抗原決定基結合ドメインとの間に配置され得る。同様に、リンカーは、ＣＡＲの２つの抗原決定基結合ドメインの間、または抗原結合ドメインと膜貫通ドメインとの間に配置され得る。アダプターの２つ以上のドメインを結合するための適切なリンカーは、本明細書で記載されている、および／または別の理由で当業者には明らかであろう。
【０１１２】
本明細書で使用される場合、用語の「作動可能に連結された」は、それぞれが、各分子が単独で有した少なくともあるレベルの機能活性を保持するように、２つの分子が結合することを示す。１つの分子が機能活性を有さないいくつかの実施形態では、その他の分子が少なくともあるレベルのその機能活性を有する場合、それは、別の分子と作動可能に連結される。作動可能に連結されるは、２つの非機能的分子の連結を意味することもできる。２つの分子は、それらが直接的であっても、または間接的（例えば、リンカー経由で）であっても、「作動可能に連結される」ことができる。
【０１１３】
「標的」は、アダプターまたはＣＡＲ、またはアダプターまたはＣＡＲの要素、例えば、抗原決定基結合ドメインにより結合され得る任意の分子または分子の組み合わせを意味する。
【０１１４】
本明細書で使用される場合、用語の「標的細胞」は、疾患に関与し、本明細書で提供されるＣＡＲ、アダプター、および／またはＣＡＲ／アダプター組成物により標的とされ得る細胞を意味する。標的細胞は、ＣＡＲ、アダプター、および／またはＣＡＲ／アダプター組成物により標的とされ得る対象（例えば、ヒトまたは動物）中の任意の細胞を含む。標的細胞は、ＣＡＲ、アダプター、および／またはＣＡＲ／アダプター組成物により特異的に結合された標的を発現または過剰発現している細胞であり得る。
【０１１５】
当該技術分野において既知の「標的に対する結合親和性」、「標的に対する結合」のような表現、および類似の表現は、親和定数、例えば、所与の抗原濃度で結合するおよび解離するアダプターの量を決定することにより直接測定され得るポリペプチドの特性を意味する。限定されないが、競合分析、平衡分析およびマイクロ熱量分析、および表面プラズモン共鳴相互作用に基づくリアルタイム相互作用分析（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）装置を用いて）などの別の方法を使用して分子間相互作用を特徴付けることができる。これらの方法は、当業者によく知られており、は、例えばＮｅｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｉｂｔｅｃｈ  １４：４６５−４７０（１９９６），およびＪａｎｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：８１８９−８１９７（１９９７）に記載されている。
【０１１６】
用語の「抗原決定基」および「エピトープ」は本明細書では同義に使用され、特定の結合物質（例えば、アダプターまたはＣＡＲ）により認識され、特異的に結合され得る任意の分子（例えば、着目標的、またはアダプター）の一部を意味する。認識される分子がポリペプチドの場合は、エピトープが、タンパク質の３次フォールディングにより併置された、連続アミノ酸および不連続アミノ酸および／またはその他の分子の化学的に活性な表面基（炭水化物など）から形成される。連続アミノ酸から形成されるエピトープは通常、タンパク質変性時に保持されるが、３次フォールディングにより形成されるエピトープは通常、タンパク質変時に失われる。エピトープは通常、特有の空間高次構造中に、少なくとも３個のアミノ酸、より一般的には少なくとも５個または８〜１０個のアミノ酸を含む。
【０１１７】
本明細書で使用される場合、「に由来する」という用語は、第１のおよび第２の分子の間の関係を示す。それは通常、第１の分子と第２の分子との間の構造的類似性を意味し、第２の分子に由来する第１の分子に対するプロセスまたは由来源の限定を暗示することも、これを含むこともない。例えば、ＣＤ３ζ分子由来の細胞内シグナル伝達ドメインの場合、細胞内シグナル伝達ドメインは、必要な機能、すなわち、適切な条件下でシグナルを生成する能力を有するような適切なＣＤ３ζ構造を保持する。それは、細胞内シグナル伝達ドメインを生成する特定のプロセスに対する限定を暗示も含むこともせず、例えば、それは、細胞内シグナル伝達ドメインを得るために、ＣＤ３ζ配列から始め、望ましくない配列を削除、または変異を行わせて、細胞内シグナル伝達ドメインに到達することを意味しない。
【０１１８】
核酸分子、ポリペプチド、抗原決定基、および宿主細胞などの生体物質に関連して用いられる場合、用語の「天然の」は、天然で見出され、ヒトにより改変されていないものを意味する。逆に、生体物質に関連して用いられる場合、用語の「非天然の」または「合成の」は、天然で見出されず、ヒトにより改変されているものを意味する。
【０１１９】
本明細書で使用される場合、基準配列に対する「改変」には、参照配列の対応するアミノ酸位置と比較して、配列の置換、欠失、挿入、および／または付加が含まれる。
【０１２０】
基準配列に対する「置換」は、参照配列の対応するアミノ酸位置での、特定のアミノ酸残基の異なるアミノ酸残基による置換を意味する。
【０１２１】
「保存的」アミノ酸置換は、１つのアミノ酸残基が、類似の側鎖を有する別のアミノ酸残基と置き換えられる置換である。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当該技術分野において明らかにされており、これらの側鎖には、塩基性側鎖（例えば、リシン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）、ヒスチジン（Ｈ））、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ））、非荷電極性側鎖（例えば、グリシン（Ｇ）、アスパラギン（Ｎ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）、スレオニン（Ｔ）、チロシン（Ｙ）、システイン（Ｃ））、非極性側鎖（例えば、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）、イソロイシン（Ｉ）、プロリン（Ｐ）、フェニルアラニン（Ｆ）、メチオニン（Ｍ）、トリプトファン（Ｗ））、β分岐側鎖（例えば、スレオニン（Ｔ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ））、および芳香族側鎖（例えば、チロシン（Ｙ）、フェニルアラニン（Ｆ）、トリプトファン（Ｗ）、ヒスチジン（Ｈ））が含まれる。例えば、チロシンのフェニルアラニンへの置換は、保存的置換である。一実施形態では、アダプターまたはＣＡＲの配列の保存的置換は、結合する着目標的に対する置換を含むアダプターまたはＣＡＲの特異的結合を保持する。選択的結合親和性を付与、変更または維持するヌクレオチドおよびアミノ酸保存的置換および非保存的置換非保存的置換を特定する方法は、当技術分野において既知である（例えば、Ｂｒｕｍｍｅｌｌ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．３２：１１８０−１１８７（１９９３）；Ｋｏｂａｙａｓｈｉ，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．１２（１０）：８７９−８８４（１９９９）；および  Ｂｕｒｋｓ，ＰＮＡＳ  ９４：４１２−４１７（１９９７）を参照されたい）。
【０１２２】
「非保存的」アミノ酸置換は、１つのアミノ酸残基が、異種の側鎖を有する別のアミノ酸残基と置き換えられる置換である。一実施形態では、アダプターまたはＣＡＲの配列の非保存的置換は、結合する着目標的に対する置換を含むアダプターまたはＣＡＲの特異的結合を保持する。
【０１２３】
「非天然アミノ酸」、「アミノ酸類似体」および「非標準アミノ酸残基」は、本明細書では同義に用いられる。本明細書で提供されるアダプターにおいて、置換できる非天然アミノ酸は当技術分野において既知である。一実施形態では、非天然アミノ酸は、プロリンを置換できる４−ヒドロキシプロリン、リシンを置換できる５−ヒドロキシリシン、ヒスチジンを置換できる３−メチルヒスチジン、セリンを置換できるホモセリン、およびリシンを置換できるオルニチンである。アダプターにおいて置換できる非天然アミノ酸の追加の例には、限定されないが、共通アミノ酸のＤ−異性体、２，４−ジアミノ酪酸、α−アミノイソ酪酸、Ａ−アミノ酪酸、Ａｂｕ、２−アミノ酪酸、γ−Ａｂｕ、ε−Ａｈｘ、６−アミノヘキサン酸、Ａｉｂ、２−アミノイソ酪酸、３−アミノプロピオン酸、オルニチン、ノルロイシン、ノルバリン、ヒドロキシプロリン、サルコシン、シトルリン、ホモシトルリン、システイン酸、ｔ−ブチルグリシン、ｔ−ブチルアラニン、フェニルグリシン、シクロヘキシルアラニン、β−アラニン、ランチオニン、デヒドロアラニン、γ−アミノ酪酸、セレノシステインおよびピロールリジンフルオロアミノ酸、βメチルアミノ酸などのデザイナーアミノ酸、Ｃα−メチルアミノ酸、およびＮα−メチルアミノ酸、または非天然アミノ酸の組み合わせなどの分子が挙げられる。さらに追加の非天然アミノ酸には、４−アミノ酪酸、４−アミノ−３−ヒドロキシ−５−フェニルペンタン酸、４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルヘプタン酸、２−チエニルアラニン、および／またはアミノ酸のＤ−異性体を挙げることができる。本明細書で考察のように、いくつかの実施形態では、非天然アミノ酸またはアミノ酸類似体は、配列からの１つまたは複数のアミノ酸の欠失を含むことができる。
【０１２４】
本明細書で同じ意味で用いられる用語「ポリヌクレオチド」および「核酸」は、任意の長さの高分子型のヌクレオチド、リボンヌクレオチドまたはデオキシヌクレオチド、を意味する。これらの用語には、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ｃＤＮＡ（相補ＤＮＡ）、ｍＲＮＡ（メッセンジャーＲＮＡ）、ｒＲＮＡ（リボソームＲＮＡ）、ｓｈＲＮＡ（小ヘアピンＲＮＡ）、ｓｎＲＮＡ（核内低分子ＲＮＡ）、ｓｎｏＲＮＡ（核小体低分子ＲＮＡ）、ｍｉＲＮＡ（マイクロＲＮＡ）、ゲノムＤＮＡ、合成ＤＮＡ、合成ＲＮＡ、および／またはｔＲＮＡが含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、単離ポリヌクレオチドは、非天然ヌクレオシドまたはヌクレオチドを含む修飾ｍＲＮＡである。いくつかの実施形態では、修飾ｍＲＮＡは、２−チオウリジン、プソイドウリジン、または１−メチルプソイドウリジンを含む。
【０１２５】
本明細書で使用される場合、用語の「ネイキッドＤＮＡ」は、発現に適切な配向で好適な発現ベクター（例えば、プラスミド）内にクローン化されたアダプターまたはＣＡＲなどのタンパク質をコードするＤＮＡ（例えば、ヒストン遊離ＤＮＡ）を意味する。使用され得るウイルスベクターには、ＳＩＮレンチウイルスベクター、レトロウイルスベクター、泡沫状ウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター、ハイブリッドベクター、および／またはプラスミドトランスポゾン（例えば、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポゾンシステム）、またはインテグラーゼ系のベクターシステムが含まれるが、これらに限定されない。アダプターおよびＣＡＲの作製および使用に関連して使用できるその他のベクターは、本明細書で記載されるか、あるいは当該技術分野において既知である。
【０１２６】
本明細書で使用される場合、用語の「ベクター」、「クローニングベクター」、および「発現ベクター」は、ビークルであって、これにより、宿主を形質転換し、導入配列の発現（例えば、転写および翻訳）を促進するように、核酸配列（例えば、アダプターまたはＣＡＲコード配列）が宿主細胞（例えば、クローニングベクター）中で維持または増幅でき、または宿主細胞に導入できる、ビークルを意味する。ベクターには、プラスミド、ファージ、ウイルスなどが含まれる。
【０１２７】
「宿主細胞」には、アダプターまたはＣＡＲをコードする核酸のレシピエントであり得る、またはレシピエントであった個別の細胞または細胞培養物を含む。宿主細胞には、限定されないが、ウイルス粒子、ファージミド、細菌、酵母、植物、動物、および哺乳動物細胞が含まれる。宿主細胞には、単一宿主細胞の子孫が含まれ、その子孫は、天然の、偶発的、または計画的な突然変異および／または変化に起因して、元の親細胞に完全に同じ（形態または全ＤＮＡ相補体において）である必要はない。宿主細胞は、インビボ、インビトロ、またはエクスビボでのアダプターまたはＣＡＲをコードする核酸の遺伝子導入または感染細胞を含む。いくつかの例では、宿主細胞はアダプターを発現できる。いくつかの例では、宿主細胞はアダプターを発現および分泌できる。いくつかの例では、宿主細胞はＣＡＲを発現できる。いくつかの例では、宿主細胞はその表面上にＣＡＲを発現および提示できる。「発現」には、転写および／または翻訳が含まれる。
【０１２８】
本明細書で使用される場合、用語の「薬学的に許容可能な」または「生理学的に許容可能な」およびその文法的変形は、それらが組成物、担体、希釈剤および試薬を意味する場合、同じ意味で用いられ、悪心、眩暈、急性胃蠕動および当該技術分野において既知のその他の治療的に禁止された望ましくない生理学的効果などの治療的に禁止された望ましくない生理学的効果の生成なしに、その物質がヒトに投与できることを示す。
【０１２９】
免疫原性組成物の「非経口的」投与には、例えば、皮下（ｓ．ｃ．）、静脈内（ｉ．ｖ．）、筋肉内（ｉ．ｍ．）、または胸骨内注射、または注入技術が含まれる。
【０１３０】
用語の「刺激する」または「刺激」は、刺激性分子のその同族リガンドと結合し、それにより、限定されないが、例えば、Ｔ受容体またはＮＫ受容体などの適切な受容体を介したシグナル伝達などのシグナル伝達イベントにより誘導される１次応答を意味する。
【０１３１】
「調節する」または「調節」は、大きさ、頻度、程度、または活性の調節または制御を意味する。別の関連する態様では、このような調節は、よい方向に調節され得る（例えば、頻度、程度、または活性の増大）または悪い方向に調節され得る（例えば、頻度、程度、または活性の低減）。いくつかの実施形態では、正または負の方向への調節は、治療薬の投与前の細胞、組織、または臓器の機能と比較して行われる。さらなる実施形態では、正または負の方向への調節は、健常で健康な細胞、組織、または臓器の機能と比較して行われる。
【０１３２】
本明細書で提供される「有効量」のＣＡＲ細胞、アダプター、および／またはＣＡＲ細胞／アダプター組成物は、ＣＡＲ細胞および／またはアダプターが結合する標的に関連する１種または複数の生物活性における観察可能な変化をもたらすなどの具体的に示される目的を成し遂げるのに十分な量である。特定の実施形態では、変化は標的活性のレベルを増大させる。他の実施形態では、変化は標的活性のレベルを低減させる。「有効量」は、示した目的に関連して実験的に、定型業務により決定できる。用語の「治療的有効量」は、対象（哺乳動物）の疾病または疾患を「治療」（例えば、疾患または障害の症状を低減）するのに効果的なＣＡＲ細胞および／またはアダプターまたは他の治療薬の量を意味する。「予防有効量」は、必要な服用量で、所望の予防結果を達成するのに必要な用量および時間で効果的な量を意味する。
【０１３３】
「患者」、「対象」、「動物」および「哺乳動物」は、同義に使用され、ヒト患者および非ヒト霊長類などの哺乳動物、ならびにウサギ、ラット、マウスなどの実験動物およびその他の動物を意味する。動物には、全ての脊椎動物、例えば、ニワトリ、両生類、および爬虫類などの哺乳動物および非哺乳動物が含まれる。本明細書で使用される場合、「哺乳動物」は、限定されないが、ヒトおよび非ヒト霊長動物、例えば、チンパンジーおよび他の類人猿ならびにサル種；ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、およびウマなどの家畜動物；イヌおよびネコなどの飼育哺乳動物；マウス、ラット、モルモットなどの齧歯動物などの実験動物、および当該技術分野において既知のその他の哺乳綱のメンバーを含む、哺乳綱のいずれかのメンバーを意味する。特定の実施形態では、患者はヒトである。この用語は特定の年齢または性別を表すものではない。このため、成体および新生児／仔の対象、ならびに胎児／仔は、雄性または雌性にかかわらず、本用語の範囲内に含まれることが意図される。
【０１３４】
本明細書で使用される場合、用語の「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」および「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」は、治療処置および予防または予防処置の両方を意味し、この場合の目的は、疾患、状態、または障害の症状、合併症、または生化学的徴候を防ぐかもしくは遅らせる（減らすまたは遅らせる）、疾患、状態、または障害を緩和もしくはそれらのさらなる進展を阻止もしくは抑制することである。「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、病態を標的とする、疾患、状態、または障害の発現後の症状の予防的（疾患の発生を防ぐまたは遅らせる、または臨床的またはその無症候性症状の発現を防止すること）または治療的抑制または緩和、病態の防止、有益な結果を追究するかもしくはそれを得る、または治療が最終的に成功しない場合であっても、個々の状態の進展の確率を減らすことであり得る。治療を必要としている対象には、既にその状態にある対象、ならびに、状態になる傾向のある対象、または状態が予防されるべき対象が含まれる。治療には、ＣＡＲ細胞、アダプター、および／またはＣＡＲ細胞／アダプター組成物を、単独でまたは追加の治療薬と組み合わせて用いることができる。いくつかの実施形態では、本明細書で使われる用語の「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」および「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」は、治療処置および予防または防止処置の両方を意味し、この場合の目的は、増殖性障害の症状、合併症、または生化学的徴候を防ぐかもしくは遅らせる（減らすまたは遅らせる）、または増殖性障害の１つまたは複数の症状（好ましくは、１つまたは複数の識別可能症状）の改善である。特定の実施形態では、用語の「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」および「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」は、患者により識別可能とは限らない、腫瘍の成長などの増殖性障害の少なくとも１つの測定可能な物理的パラメーターの改善を意味する。他の実施形態では、用語の「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」および「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」は、例えば、識別可能症状の安定化により物理的に、または、例えば、物理的パラメーターの安定化により生理学的に、または両方により、増殖性障害の進展を抑制することを意味する。他の実施形態では、用語の「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」および「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」は、腫瘍、腫瘍細胞増殖または生存、または癌細胞数の減少または安定化を意味する。
【０１３５】
「癌」、「腫瘍」、または「悪性腫瘍」は、同義の用語として使用され、細胞の無制御な、異常増殖、感染細胞の局所的または血流およびリンパ系を介した身体のその他の部分への拡散（転移）ならびに多数の特徴的構造および／または分子的特色を特徴とする多くの疾患のいずれかを意味する。本明細書で使用される場合、「腫瘍」は、悪性または良性に関係なく、全ての新生細胞成長および増殖、ならびに全ての前癌および癌細胞および組織を意味する。「癌性腫瘍」、または「悪性細胞」は、特異的構造特性を有し、分化を欠き、浸潤および転移できる細胞と理解される。本明細書で提供されるＣＡＲ細胞、アダプター、および／またはＣＡＲ細胞／アダプター組成物を用いて治療できる癌には、限定されないが、乳癌、肺癌、脳癌、頸部癌、皮膚癌、骨癌、肝臓癌、骨癌、膵癌、結腸直腸癌、腎癌、頭頸部癌、卵巣癌、造血性癌（例えば、白血病）、および前立腺癌、ならびにリンパ腫が挙げられる。ＣＡＲ細胞、アダプター、および／またはＣＡＲ細胞／アダプター組成物を用いて治療され得る他の型の癌および腫瘍は、本明細書で記載されているか、あるいは、当該技術分野において既知である。特定の「タイプ」は、特定の疾患を特徴とする癌、腫瘍、または腫瘍細胞を意味すると理解される。例えば、いくつかの実施形態では、同じタイプの第１と第２の癌は、混合細胞型ホジキンリンパ腫およびリンパ球リッチホジキンリンパ腫である。他の実施形態では、同じタイプの第１と第２の癌は、前駆物質Ｂ細胞急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）および成熟Ｂ細胞ＡＬＬである。異なるタイプの第１と第２の癌の例には、例えば、ホジキンリンパ腫およびＡＬＬが挙げられる。
【０１３６】
用語の「腫瘍抗原」は、癌などの特定の過剰増殖障害に共通の抗原である。用語の「腫瘍抗原」または「癌抗原」は、本明細書では同じ意味で用いられる。特定の態様では、抗原は、限定されないが、原発性または転移性黒色腫、胸腺腫、リンパ腫、肉腫、肺癌（例えば、ＮＳＣＬＣまたはＳＣＬＣ）、肝臓癌、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、白血病、多発性骨髄腫、神経膠芽腫、神経芽腫、子宮癌、子宮頸癌、腎臓癌、甲状腺癌、膀胱癌、腎臓癌、中皮腫、および乳癌、前立腺癌、卵巣癌、膵臓癌、結腸癌などの腺癌およびその他の当該技術分野において既知の癌を含む癌に由来する。いくつかの実施形態では、癌は、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（「ＢＡＬＬ」）、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（「ＴＡＬＬ」）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）；限定されないが、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）などの１種または複数の慢性白血病；限定されないが、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、毛様細胞性白血病、小細胞または大細胞濾胞性リンパ腫、悪性リンパ増殖性状態、ＭＡＬＴリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁層リンパ腫、多発性骨髄腫、脊髄形成異常症および骨髄異形成症候群、非ホジキンリンパ腫、形質芽球性リンパ腫、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍、ワルデンストレーム高ガンマグロブリン血症を含む追加の血液癌または血液学的状態である。
【０１３７】
腫瘍および癌抗原は、「腫瘍特異的抗原（ＴＳＡ）」、「癌特異的抗原（ＣＳＡ）」、「腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）」、または「癌関連抗原（ＣＡＡ）」として、さらに定義し得る。ＴＳＡは、腫瘍細胞に特有であり、身体中の他の細胞では発生しない抗原である。ＴＡＡは、腫瘍およびいくつかの正常細胞の両方で認められる抗原である。ＴＡＡは、抗原に対する免疫寛容の状態を誘導できない条件下で正常細胞上に発現する場合がある。腫瘍上でのＴＡＡの発現は、免疫系が抗原に応答可能とする条件下で起こり得る。ＴＡＡは、免疫系が未成熟で、応答できない、または通常、正常細胞上で極めて低いレベルで存在し得るが、腫瘍細胞上では遙かに高いレベルで発現される場合に、胎児発生中に正常細胞上で発現される。腫瘍の動的性質のために、いくつかの事例では、腫瘍細胞は、特定のステージで特有の抗原を発現し得、およびその他の場合でも、非腫瘍細胞上でも発現される抗原を発現する。従って、ＴＡＡのような特定のマーカーの包含は、それがＴＳＡと見なされることを排除しない。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＣＡＲ細胞、アダプター、および／またはＣＡＲ細胞／アダプター組成物により特異的に結合される抗原決定基を含むＴＡＡおよび／またはＴＳＡは、次記から選択される：ＢＣＭＡ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３／ｌＬ３Ｒａ、ＣＤ７０、ＣＤ１２３、ＣＤ１７１（Ｌ１−ＣＡＭ）、ＣＳ１、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＧＤ２、Ｌｅｗｉｓγ、ＲＯＲ  １、メソテリン、ＩＬ１３Ｒａ２、ｃＭｅｔ、ＰＳＭＡ、葉酸受容体α（ＦＲ−α）、ＣＥＡ、ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ−２／ｎｅｕ）；ＥＧＦＲ（ＨＥＲ）、ＰＳＣＡ、ＰＳＡ、ＭＵＣ１、ＭＵＣ１６、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ４４ｖ６／７、ＣＤ４４ｖ７／８、ＣＤ５５、ＩＬ１１Ｒａ、ＥｐｈＡ２、ＥＧＰ４０、ＴＡＧ７２、ＣＡＩＸ、ＨＭＷ−ＭＡＡ（ＣＳＰＧ４）、ＭＡＧＥＡ４、ＮＫＧ２Ｄリガンド、β−ＨＣＧ、Ｇｌｙｃｏｌｉｐｉｄ  Ｆ７７、ＨＬＡ−Ａ２（ＮＹ−ＥＳＯ−１）、ＨＭＷ−ＭＡＡ、ＧＤ３、ＴＣＲ、ＭＡＧＥ  Ａ３、ＭＡＲＴＩ、ＷＴ１、チログロブリン、ｇｐ１００（Ｐｍｅｌ  １７）、チロシナーゼ、ＴＲＰ１、ＴＲＰ２、ＨＬＡ−Ａ１、ＭＡＧＥ１、ＭＡＧＥ３、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ１、ＧＡＧＥ２、ｐｉ５、ｐ５３、Ｒａｓ、ＢＣＲ−ＡＢＬ、Ｅ２Ａ−ＰＲＬ、Ｈ４−ＲＥＴ、ＩＧＨ−ＩＧＫ、ＭＹＬ−ＲＡＲ；ＶＥＧＦＲ２、ＦＡＰ、ＦＡＲ、ＥＢＶＡ、ＨＰＶ抗原Ｅ６、ＨＰＶ抗原Ｅ７、ＴＳＰ−１８０、ＭＡＧＥ４、ＭＡＧＥ５、ＭＡＧＥ６、ＲＡＧＥ、ｐｌ８５ｅｒｂＢ２、ｐｌ８０ｅｒｂＢ３、ｎｍ−２３Ｈｌ、ＣＡ１９−９、ＣＡ７２−４、ＣＡＭ  １７．１、ＮｕＭａ、Ｋ−ｒａｓ、β−カテニン、ＣＤＫ４、Ｍｕｍ−１、ｐ１５、ｐ１６、４３−９Ｆ、α−フェトプロテイン、ＢＣＡ２２５、ＢＴＡＡ、ＣＡ１２５、ＣＡ  １５−３、ＣＡ  ２７．２９（ＢＣＡＡ）、ＣＡ１９５、ＣＡ２４２、ＣＡ５０、ＣＡＭ４３、ＣＤ６８、ＣＯ−０２９、ＦＧＦ５、Ｇ２５０、ＨＴｇｐ−１７５、Ｍ３４４、ＭＡ５０、ＭＧ７−Ａｇ、ＮＢ／７０Ｋ、ＮＹ−ＣＯ−１、ＲＣＡＳ１、ＳＤＣＣＡＧ１６、Ｍ２ＢＰ、ＴＡＡＬ６、ＴＬＰ、およびＴＰＳ。
【０１３８】
本明細書で使用される場合、用語の「ＣＳ１」は、免疫機能を調節するＮＫ細胞受容体で、これはＢ細胞、Ｔ細胞、樹状細胞、ＮＫ−Ｔ細胞、および単球上でも同様に発現する。ＣＳ１は、多発性骨髄腫中で過剰発現され、多発性骨髄腫の免疫療法のための標的化に成功している（Ｍａｌａｅｒ  ＆  Ｍａｔｈｅｗ，Ａｍ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．７（８）：１６３７−１６４１（２０１７））。ＣＳ１はまた、ＳＬＡＭ７、タンパク質１９Ａ、ＣＲＡＣＣ、およびＣＤ３１９としても知られる。用語の「ＣＳ１」は、変異体、アイソフォーム、同族体、オルソログおよびパラログを含む。ＣＳ１は、膜貫通タンパク質で、種々の異なったスプライシングによるアイソフォームがある。いくつかの実施形態では、２２個のアミノ酸残基Ｎ末端シグナル配列（ＭＡＧＳＰＴＣＬＴＬＩＹＩＬＷＱＬＴＧＳＡＡ、配列番号１１１９）および２２６個のＮ末端残基（配列番号１１２０）を含む細胞外ドメインを含むヒトＣＳ１のアミノ酸配列は、ジェンバンク受入番号ＮＰ＿０６７００４（配列番号１１２１）を有する。いくつかの実施形態では、ヒトＣＳ１のアミノ酸配列は、ジェンバンク受入番号ＮＰ＿００１２６９５１７、ＮＰ＿００１２６９５１８、ＮＰ＿００１２６９５１９、ＮＰ＿００１２６９５２０、ＮＰ＿００１２６９５２１、ＮＰ＿００１２６９５２２、ＮＰ＿００１２６９５２３、ＮＰ＿００１２６９５２４、またはＮＰ＿００１２６９５２５を有する。
【０１３９】
本明細書で使用される場合、用語の「自己免疫疾患」は、自己免疫反応から生じる障害として定義される。自己免疫疾患は、自己抗原に対する不適切で、過剰な反応の結果である。自己免疫疾患の例には、限定されないが、アジソン病、円形脱毛症、強直性脊椎炎、自己免疫性肝炎、自己免疫性耳下腺炎、クローン病、糖尿病（Ｉ型）、栄養障害型表皮水疱症、精巣上体炎、糸球体腎炎、グレーブス病、ギラン・バレー症候群、橋本病、溶血性貧血、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、重症筋無力症、尋常性天疱瘡、乾癬、リウマチ熱、関節リウマチ、サルコイドーシス、強皮症、シェーグレン症候群、脊椎関節症、甲状腺炎、血管炎、白斑症、粘液水腫、悪性貧血、潰瘍性大腸炎が特に挙げられる。
【０１４０】
本明細書で使用される場合、用語の「形質導入」は、ウイルスベクターを用いた、外来性核酸の細胞中への導入を意味する。本明細書で使用される場合、用語の「遺伝子導入」は、組換えＤＮＡ技術を用いた、外来性核酸の細胞中への導入を意味する。用語の「形質転換」は、「外来性」（例えば、外因性の、細胞外の、または別の理由で非内在性の）核酸（ＤＮＡまたはＲＮＡ）配列を宿主細胞へ導入し、宿主細胞が導入した核酸を発現して所望の導入コード配列によりコードされたタンパク質または酵素などの物質を産生することを意味する。導入核酸配列はまた、「クローン化」または「外来性」遺伝子または配列とも呼ぶことができ、開始、停止、プロモーター、シグナル、分泌、または細胞の遺伝機構により使用される他の配列などの調節または制御配列を含み得る。核酸配列には、既知の機能を有さない非機能性配列を含み得る。導入した核酸（例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡ）を受け取り、発現する宿主細胞は、「形質転換」されており、「形質転換体」または「クローン」である。宿主細胞に導入されたＤＮＡまたはＲＮＡは、宿主細胞と同じ属または種の細胞、または異なる属または種の細胞を含むいずれの供給源由来でもあり得、または非天然でもあり得る。
【０１４１】
用語の「Ｄドメイン」は、次記の参照骨格配列の特定の配列および特定の構造的特徴を共有する標的結合ポリペプチドを意味する：ＭＧＳＷＡＥＦＫＱＲＬＡＡＩＫ  ＴＲＬＱＡＬＧＧＳＥＡＥＬＡＡＦＥＫＥＩＡＡＦＥＳＥＬＱＡＹＫＧＫＧＮＰＥＶＥＡＬＲＫ  ＥＡＡＡＩＲＤＥＬＱＡＹＲＨＮ（配列番号１）（国際公開第２０１６／１６４３０５号および同第２０１６／１６４３０８号を参照、これらの特許は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。参照骨格は、元々はタンパク質フォールディングの練習のために改変された、非天然の、無標的逆平行の３つのヘリカルバンドル基準ポリペプチド変異体である（Ｗａｌｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ９６：５４８６−５４９１（１９９９）を参照。この文献は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。配列番号１のアミノ酸配列を有する無標的参照骨格の改変を含むポリペプチドは、着目標的に特異的に結合できることが発見された。従って、ＤドメインまたはＤドメインを含む分子は、標的分子に特異的に（作為的に）結合できる。理論に束縛されるものではないが、Ｄドメインの設計において、表面露出残基（改変され得る）の構造的制約が、表面露出残基の着目標的に特異的に結合する能力を付与すると考えられている。
【０１４２】
本明細書で使用される場合、「同時発現する」は、同じ細胞または細胞集団による２種以上のタンパク質コード配列の発現を意味する。コード配列は、例えば、それぞれ、単一タンパク質または単一ポリペプチド鎖としてキメラタンパク質をコードする核酸であってよい。
【０１４３】
本明細書で使用される場合、「抗原消失回避変異体（Ａｎｔｉｇｅｎ  ｌｏｓｓ  ｅｓｃａｐｅ  ｖａｒｉａｎｔ）」は、標的抗原の発現の低減または消失を示す細胞を意味し、この標的抗原の抗原決定基がアダプターまたはＣＡＲにより標的とされる。
【０１４４】
ＩＩ．抗原決定基（ＡＤ）
抗原決定基（ＡＤ）は、抗原決定基結合領域（ＡＤＢＤ）（例えば、抗体または代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）の抗原結合フラグメント（例えば、Ｄドメイン））により認識され、特異的に結合され得るエピトープである。本明細書で提供されるアダプター中および標的細胞上のＡＤは、以下で考察されるＣＡＲにより結合され得る。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、天然のタンパク質またはその他の分子中に存在するＡＤである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ヒトに対し内在性であるＡＤである。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤは、標的細胞上に存在するＡＤである。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、膜貫通タンパク質中に存在するＡＤ、例えば、膜貫通タンパク質の細胞外部分中に存在するＡＤである。いくつかの実施形態では、ＡＤは腫瘍抗原である。いくつかの実施形態では、ＡＤは腫瘍関連抗原である。いくつかの実施形態では、ＡＤは腫瘍特異的抗原である。
【０１４８】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、癌抗原である。いくつかの実施形態では、ＡＤは癌関連抗原である。いくつかの実施形態では、ＡＤは癌特異的抗原である。
【０１４９】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、ＢＣＭＡのエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号５の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０１５０】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＣＤ１９のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号３の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＣＤ２０のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号６〜９、または１０の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０１５２】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＣＤ２２のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号４１の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０１５３】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＣＤ１２３のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０１５４】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＣＤ３７のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１２または１３の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０１５５】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＣＳ１のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１３９の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤはエロツズマブにより結合されるＣＳ１のエピトープである。
【０１５６】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＨＥＲ２のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号４２の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０１５７】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＡＦＰのエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１５の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０１５８】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＡＦＰ  ｐ２６のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１６の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１７の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１６、１１１７、１１１８、１１１９、１１２０、１１２１、１１２２、または１１２３のアミノ酸残基を含む。
【０１５９】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、免疫エフェクター細胞の表面上で発現される。
【０１６０】
いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１０６の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基２９〜７６６の全てのアミノ酸残基を含む。
【０１６１】
いくつかの実施形態では、ＡＤは、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体により結合されるヒトＣＤ４５のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体により結合されるヒトＣＤ４５のエピトープである。
【０１６２】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＣＤ２６のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１３の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基２９〜７６６の全てのアミノ酸残基を含む。
【０１６３】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＣＤ３０のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１４の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基１９〜３７９の全てのアミノ酸残基を含む。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＣＤ３３のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１５の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基１８〜２５９の全てのアミノ酸残基を含む。
【０１６５】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＣＤ３８のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１６の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基４３〜３００の全てのアミノ酸残基を含む。
【０１６６】
いくつかの実施形態では、ＡＤはヒト細胞内タンパク質のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、群：サイトカイン受容体、ケモカイン受容体、Ｔ細胞受容体、Ｂ細胞受容体、ＮＫ細胞受容体、骨髄性細胞受容体、内皮細胞受容体、および上皮細胞受容体から選択される膜結合受容体タンパク質の細胞内部分のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ＣＤ３、ＣＤ１３７、ＣＤ２７９、ＣＤ２２３、ＣＤ１５２、ＣＤ２８、およびＶＥＧＦＲ−２の細胞内部分のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒト核タンパク質のエピトープである。
【０１６７】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、悪性腫瘍に関連する腫瘍抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは黒色腫由来の組織特異的抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ＭＡＲＴ−１、チロシナーゼ、およびＧＰ１００から選択される組織特異的黒色腫抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは前立腺癌由来の組織特異的抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、組織特異的前立腺癌抗原は、前立腺酸ホスファターゼ（ＰＡＰ）および前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）から選択される。いくつかの実施形態では、ＡＤは形質転換関連分子のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤはＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２）のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは癌胎児性抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは癌胎児抗原（ＣＥＡ）のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはＢ細胞リンパ腫特異的イディオタイプ免疫グロブリンのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはＢ細胞分化抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ＣＤ１９、ＣＤ２０、およびＣＤ３７から選択されるＢ細胞分化抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは骨髄性細胞上の抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ＴＳＬＰＲおよびＩＬ−７Ｒから選択される骨髄性細胞抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは癌精巣（ＣＴ）抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ＮＹ−ＥＳＯ−１およびＬＡＧＥ−１ａから選択される癌精巣（ＣＴ）抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ＣＳ１、ＣＤ３８、ＣＤ１３８、ＭＵＣ１、ＨＭ１．２４、ＣＹＰ１Ｂ１、ＳＰ１７、ＰＲＡＭＥ、ウイルムス腫瘍１（ＷＴ１）、および多発性骨髄腫細胞上のヒートショックプロテインｇｐ９６から選択される抗原のエピトープである。
【０１６８】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、ＴＳＡまたはＴＡＡのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは腫瘍分化抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ＭＡＲＴ１／ＭｅｌａｎＡ、ｇｐ１００（Ｐｍｅｌ  １７）、チロシナーゼ、ＴＲＰ１、およびＴＲＰ２から選択される腫瘍分化抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは腫瘍特異的多系列抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ＭＡＧＥ１、ＭＡＧＥ３、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ１、ＧＡＧＥ２、およびｐ１５から選択される腫瘍特異的多系列抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは過剰発現胎児性抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはＣＥＡのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは過剰発現癌遺伝子または変異導入腫瘍抑制因子遺伝子産物のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ｐ５３、Ｒａｓ、およびＨＥＲ２／ｎｅｕから選択される過剰発現癌遺伝子または変異導入腫瘍抑制因子遺伝子産物のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは染色体転座から生じた特有の腫瘍抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ＢＣＲ−ＡＢＬ、Ｅ２Ａ−ＰＲＬ、Ｈ４−ＲＥＴ、ＩＧＨ−ＩＧＫ、およびＭＹＬ−ＲＡＲから選択される染色体転座から生じた特有の腫瘍抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはウイルス抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはエプスタイン・バーウイルス抗原ＥＢＶＡのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）抗原Ｅ６またはＥ７のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは大きなタンパク質ベース抗原のエピトープである。
【０１６９】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、血液学的腫瘍抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ＢＣＭＡ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ１３８、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ１２３、ＣＳ１、ＲＯＲ１、ＬｅｗｉｓＹ、Ｉｇカッパ軽鎖、ＴＣＲ、ＢＣＭＡ、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ（ＣＤ２６８）、およびＮＫＧ２ＤＬリガンドから選択される抗原のエピトープである。
【０１７０】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、固形腫瘍抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ジシアロガングリオシド（ＧＤ２）、ｏ−アセチルＧＤ２、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）、ＶＥＧＦＲ２、ＦＡＰ、メソテリン、ＩＬ１３Ｒａ２（神経膠腫）、ｃＭＥＴ、ＰＳＭＡ、葉酸受容体α、Ｌ１ＣＡＭ、癌胎児抗原（ＣＥＡ）、およびＥＧＦＲから選択される抗原のエピトープである。
【０１７１】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、下記群から選択される抗原のエピトープである。ＣＤ１３７、ＰＤＬ１、ＣＴＬＡ４、ＣＤ４７、ＫＩＲ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ（ＤＲ５）、ＴＩＭ３、ＰＤ１、ｃＭｅｔ、糖脂質Ｆ７７、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＨＬＡＡ２（ＮＹ−ＥＳＯ−１）、ＬＡＧ３、ＣＤ１３４（ＯＸ４０）、ＨＶＥＭ、ＢＴＬＡ、ＴＮＦＲＳＦ２５（ＤＲ３）、ＣＤ１３３、ＭＡＧＥ  Ａ３、ＰＳＣＡ、ＭＵＣ１、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ４４ｖ６／７、ＣＤ４４ｖ７／８、ＩＬ１１Ｒａ、ｅｐｈＡ２、ＣＡＩＸ、ＭＮＣＡＩＸ、ＣＳＰＧ４、ＭＵＣ１６、ＥＰＣＡＭ（ＥＧＰ２）、ＴＡＧ７２、ＥＧＰ４０、ＥｒｂＢ受容体ファミリー、ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２）、ＥｒｂＢ３／４、ＲＡＧＥ１、ＧＤ３、ＦＡＲ、ＬｅｗｉｓＹ、ＮＣＡＭ、ＨＬＡＡ１／ＭＡＧＥ１、ＭＡＧＥＡ１、ＭＡＧＥＡ３、ＭＡＧＥ−Ａ４、Ｂ７Ｈ３、ＷＴ１、ＭｅｌａｎＡ（ＭＡＲＴ１）、ＨＰＶ  Ｅ６、ＨＰＶ  Ｅ７、チログロブリン、チロシナーゼ、ＰＳＡ、ＣＬＬ１ＧＤ３、Ｔｎ  Ａｇ、ＦＬＴ３、ＫＩＴ、ＰＲＳＳ２１、ＣＤ２４、ＰＤＧＦＲ−β、ＳＳＥＡ４、プロスターゼ、ＰＡＰ、ＥＬＦ２Ｍ、ｅｐｈＢ２、ＩＧＦ１、ＩＧＦＩＩ、ＩＧＦＩ受容体、ＬＭＰ２、ｇｐ１００、ｂｃｒ−ａｂ１、フコシルＧＭ１、ｓＬｅ、ＧＭ３、ＴＧＳ５、葉酸受容体β、ＴＥＭ１（ＣＤ２４８）、ＴＥＭ７Ｒ、ＣＬＤＮ６、ＴＳＨＲ、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＣＸＯＲＦ６１、ＣＤ９７、ＣＤ７ａ、ＨＬＥ、ＣＤ１７９ａ、ＡＬＫ、プリシアル酸、ＰＬＡＣ１、ＧｌｏｂｏＨ、ＮＹ−ＢＲ−１、ＵＰＫ２、ＨＡＶＣＲ１、ＡＤＲＢ３、ＰＡＮＸ３、ＧＰＲ２０、ＬＹ６Ｋ、ＯＲ５１Ｅ２、ＴＡＲＰ、ＬＡＧＥ１ａ、レグマイン、Ｅ７、ＥＴＶ６−ＡＭＬ、精子タンパク質１７、ＸＡＧＥ１、Ｔｉｅ  ２、ＭＡＤ−ＣＴ１、ＭＡＤ−ＣＴ２、Ｆｏｓ−関連する抗原１、ｐ５３、ｐ５３変異体、プロステイン、サバイビン、テロメラーゼ、ＰＣＴＡ１（ガレクチン８）、Ｒａｓ変異体、ｈＴＥＲＴ、肉腫転座切断点、ＭＬ−ＩＡＰ、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２  ＥＴＳ融合遺伝子）、ＮＡ１７、ＰＡＸ３、アンドロゲン受容体、サイクリンＢ１、ＭＹＣＮ、ＲｈｏＣ、ＴＲＰ２、ＣＹＰ１Ｂ１、ＢＯＲＩＳ、ＳＡＲＴ３、ＰＡＸ５、ＯＹ−ＴＥＳ１、ＬＣＫ、ＡＫＡＰ４、ＳＳＸ２、逆転写酵素、ＲＵ１、ＲＵ２、腸内カルボキシルエステラーゼ、好中球エラスターゼ、ｍｕｔ  ｈｓｐ７０−２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ７２、ＬＡＩＲ１、ＦＣＡＲ、ＬＩＬＲＡ２、ＣＤ３００ＬＦ、ＣＬＥＣ１２Ａ、ＢＳＴ２、ＥＭＲ２、ＬＹ７５、ＧＰＣ３、ＦＣＲＬＳ、ＩＧＬＬ１、ＴＳＰ−１８０、ＭＡＧＥ４、ＭＡＧＥ５、ＭＡＧＥ６、ＶＥＧＦＲ１、ＩＧＦ１Ｒ、肝細胞成長因子受容体、ｐ１８５ＥｒｂＢ２、ｐ１８０ＥｒｂＢ−３、ｎｍ−２３Ｈ１、ＣＡ  １９−９、ＣＡ  ７２−４、ＣＡＭ  １７．１、ＮｕＭａ、Ｋ−ｒａｓ、βカテニン、ＣＤＫ４、Ｍｕｍ１、ｐ１５、ｐ１６、４３−９Ｆ、５Ｔ４、７９１Ｔｇｐ７２、β−ヒト絨毛性ゴナドトロピン、ＢＣＡ２２５、ＢＴＡＡ、ＣＡ１２５、ＣＡ１５−３、ＣＡ  ２７．２９（ＢＣＡＡ）、ＣＡ１９５、ＣＡ２４２、ＣＡ−５０、ＣＡＭ４３、ＣＤ６８、ＣＯ−０２９、ＦＧＦ５、Ｇ２５０、ＨＴｇｐ−１７５、Ｍ３４４、ＭＡ５０、ＭＧ７−Ａｇ、ＭＯＶ１８、ＮＢ／７０Ｋ、ＮＹ−ＣＯ１、ＲＣＡＳ１、ＳＤＣＣＡＧ１６、Ｍ２ＢＰ、ＴＡＡＬ６、ＴＬＰ、および  ＴＰＳ、神経膠腫関連抗原、α−フェトプロテイン（ＡＦＰ）、ＡＦＰのｐ２６フラグメント、またはその変異体、レクチン反応性ＡＦＰ、およびＴＬＲ４。
【０１７２】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、ＴＳＡまたはＴＡＡのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ＰＴＧＥＲ４、ＩＴＧＡ４、ＣＤ３７、ＣＤ５２、ＣＤ６２Ｌ（Ｌ−セレクチン）、ＣＸＣＲ４、ＣＤ６９、ＥＶＩ２Ｂ（ＣＤ３６１）、ＳＬＣ３９Ａ８、ＭＩＣＢ、ＬＲＲＣ７０、ＣＬＥＬＣ２Ｂ、ＨＭＨＡ１、ＬＳＴ１、およびＣＭＴＭ６（ＣＫＬＦＳＦ６）から選択される抗原のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはＢＣＭＡのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはＣＳ１のエピトープである。
【０１７３】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、下記から選択される抗原のエピトープである。ＰＤＧＦＲＡ、ＶＥＧＦＲ１、ＶＥＧＦＲ３、ニューロピリン１（ＮＲＰ１）、ニューロピリン２（ＮＲＰ２）、ベータセルリン、ＰＬＧＦ、ＲＥＴ（遺伝子導入中に再配列）、ＴＩＥ１、ＴＩＥ２（ＴＥＫ）、ＣＡ１２５、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２５  ＣＤ３２、ＣＤ３２ｂ、ＣＤ４４（例えば、ＣＤ４４ｖ６）、ＣＤ４７、ＣＤ４９ｅ（インテグリンα５）、ＣＤ５４（ＩＣＡＭ）、ＣＤ５５、ＣＤ６４、ＣＤ７４、ＣＤ８０、ＣＤ９０、ＣＤ２００、ＣＤ１４７、ＣＤ１６６、ＣＤ２００、ＥＳＡ、ＳＨＨ、ＤＨＨ、ＩＨＨ、パッチト１（ＰＴＣＨ１）、スムーズンド（ＳＭＯ）、ＷＮＴ１、ＷＮＴ２Ｂ、ＷＮＴ３Ａ、ＷＮＴ４、ＷＮＴ４Ａ、ＷＮＴ５Ａ、ＷＮＴ５Ｂ、ＷＮＴ７Ｂ、ＷＮＴ８Ａ、ＷＮＴ１０Ａ、ＷＮＴ１０Ｂ、ＷＮＴ１６Ｂ、ＬＫＰ５、ＬＲＰ５、ＬＲＰ６、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ノッチ、ノッチ１、ノッチ３、ノッチ４、ＤＬＬ４、ジャギド、ジャギド１、ジャギド２、ジャギド３、ＴＮＦＲＳＦ１Ａ（ＴＮＦＲ１、ｐ５５、ｐ６０）、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ（ＴＮＦＲ２）、ＴＮＦＲＳＦ６（Ｆａｓ、ＣＤ９５）、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ（ＤｃＲ３）、ＴＮＦＲＳＦ７（ＣＤ２７）、ＴＮＦＳＦ９（４１ＢＢリガンド）、ＴＮＦＲＳＦ８（ＣＤ３０）、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ（ＴＲＡＩＬＲｌ、ＤＲ４）、ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ（ＲＡＮＫ）、ＴＮＦＲＳＦ１２（ＴＷＥＡＫＲ）、ＴＮＦＲＳＦ１９Ｌ（ＫＥＬＴ）、ＴＮＦＲＳＦ１９（ＴＲＯＹ）、ＴＮＦＲＳＦ２１（ＤＲ６）、ＩＬＩＲＩ、１Ｌ１Ｒ２、ＩＬ２Ｒ、ＩＬ５Ｒ、ＩＬ６Ｒ、１Ｌ８Ｒ、ＩＬ１０Ｒ、ＩＬ１２Ｒ、ＩＬ１３Ｒ、ＩＬ１５Ｒ、ＩＬ１８Ｒ、ＩＬ１９Ｒ、ＩＬ２１Ｒ、ＩＬ２３Ｒ、ＸＡＧ１、ＸＡＧ３、ＲＥＧＩＶ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＡＬＫ、ＡＬＫ１、ＡＬＫ７、ＡＬＣＡＭ、Ａｘｌ、ＴＧＦｂ、ＴＧＦｂ２、ＴＧＦｂ３、ＴＧＦＢＲ１、ＩＧＦＩＩＲ、ＢＭＰＲＩ、Ｎ−カドヘリン、Ｅ−カドヘリン、ＶＥ−カドヘリン、ガングリオシドＧＭ２、ガングリオシドＧＤ３、ＰＳＧＲ、ＤＣＣ、ＣＤＣＰ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ７、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ７、ＣＣＲ１０、クローディン１、クローディン２、クローディン３、クローディン４、ＴＭＥＦＦ２、ニューレグリン、ＭＣＳＦ、ＣＳＦ、ＣＳＦＲ（ｆｍｓ）、ＧＣＳＦ、ＧＣＳＦＲ、ＢＣＡＭ、ＢＲＣＡ１、ＢＲＣＡ２、ＨＬＡ−ＤＲ、ＡＢＣＣ３、ＡＢＣＢ５、ＨＭ  １．２４、ＬＦＡ１、ＬＹＮＸ、Ｓ１００Ａ８、Ｓ１００Ａ９、ＳＣＦ、フォンウィルブランド因子、ルイスＹ６受容体、ＣＡ  Ｇ２５０（ＣＡ９）、ＣＲＹＰＴＯ、ＶＬＡ５、ＨＬＡＤＲ、ＭＵＣｌ８、ムチンＣａｎＡｇ、ＥＧＦＬ７、インテグリンａｖｂ３、インテグリンα５βアクチビンＢｌα、ロイコトリエンＢ４受容体（ＬＴＢ４Ｒ）、ニューロテンシンＮＴ受容体（ＮＴＲ）、５Ｔ４癌胎児性抗原、テネイシンＣ、ＭＭＰ、ＭＭＰ２、ＭＭＰ７、ＭＭＰ９、ＭＭＰ１２、ＭＭＰ１４、ＭＭＰ２６、カテプシンＧ、ＳＵＬＦ１、ＳＵＬＦ���、ＭＥＴ、ＣＡ９、ＴＭ４ＳＦ１、シンデカン（ＳＤＣｌ）、エフリンＢ４、ＴＥＭ１、ＴＧＦβ１、およびＴＧＦＢＲＩＩ。
【０１７４】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、自己免疫障害に関連する、免疫系の炎症性またはその他の障害に関連する、または免疫反応の調節に関連する抗原のエピトープである。
【０１７５】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、免疫抑制標的のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ＩＬ１Ｒａ、ＩＬ６Ｒ、ＣＤ２６Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ８０、ＦｃＧａｍｍａ  ＲＩＩＢから選択される免疫抑制標的のエピトープである。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤは、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ４、ＰＤ１、Ｂ７Ｈ１（ＰＤＬ１）、Ｂ７Ｈ４  ＴＧＦｂｅｔａ、ＴＮＦＲＳＦ４（ＯＸ４０）、ＴＮＦＲＳＦ５（ＣＤ４０）、ＴＮＦＲＳＦ９（４１ＢＢ、ＣＤ１３７）、ＴＮＦＲＳＦ１４（ＨＶＥＭ）、ＴＮＦＲＳＦ２５（ＤＲ３）、およびＴＮＦＲＳＦ１８（ＧＩＴＲ）から選択される免疫抑制標的のエピトープである。
【０１７６】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、次記から選択される標的のエピトープである。ＩＬ１Ｒｂ、Ｃ３ＡＲ、Ｃ５ＡＲ、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＣＲ１、ＣＣＲ３、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０、ＣｈｅｍＲ２３、ＭＰＬ、ＧＰ１３０、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＲＥＭ１、ＴＲＥＭ２、ＣＤ４９ａ（インテグリンα１）、インテグリンａ５ｂ３、α４インテグリンサブユニット、Ａ４Ｂ７インテグリン、カテプシンＧ、ＴＮＦＲＳＦ３（ＬＴＢＲ）、ＴＮＦＲＳＦ６（Ｆａｓ、ＣＤ９５）、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ（ＤｃＲ３）、ＴＮＦＲＳＦ８（ＣＤ３０）、ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ（ＲＡＮＫ）、ＴＮＦＲＳＦ１６（ＮＧＦＲ）、ＴＮＦＲＳＦ１９Ｌ（ＲＥＬＴ）、ＴＮＦＲＳＦ１９（ＴＲＯＹ）、ＴＮＦＲＳＦ２１（ＤＲ６）、ＣＤ１４、ＣＤ２３、ＣＤ３６、ＣＤ３６Ｌ、ＣＤ３９、ＣＤ９１、ＣＤ１５３、ＣＤ１６４、ＣＤ２００、ＣＤ２００Ｒ、Ｂ７１（ＣＤ８０）、Ｂ７２（ＣＤ８６）、Ｂ７ｈ、Ｂ７ＤＣ（ＰＤＬ２）、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳＬ、ＭＨＣ、ＣＤ、Ｂ７Ｈ２、Ｂ７Ｈ３、Ｂ７ｘ、ＳＬＡＭ、ＫＩＭ１、ＳＬＡＭＦ２、ＳＬＡＭＦ３、ＳＬＡＭＦ４、ＳＬＡＭＦ５、ＳＬＡＭＦ６、ＳＬＡＭＦ７、ＴＮＦＲＳＦ１Ａ（ＴＮＦＲ１、ｐ５５、ｐ６０）、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ（ＴＮＦＲ２）、ＴＮＦＲＳＦ７（ＣＤ２７）、ＴＮＦＲＳＦ１２（ＴＷＥＡＫＲ）、ＴＮＦＲＳＦ５（ＣＤ４０）、ＩＬ１Ｒ、ＩＬ２Ｒ、ＩＬ４Ｒａ、ＩＬ５Ｒ、ＩＬ６ＲＩＬ１５Ｒ、ＩＬ１７Ｒ、ＩＬ１７Ｒｂ、ＩＬ１７ＲＣ、ＩＬ２２ＲＡ、ＩＬ２３Ｒ、ＴＳＬＰＲ、Ｂ７ＲＰ１、ｃＫｉｔ、ＧＭＣＳＦ、ＧＭＣＳＦＲ、ＣＤ２、ＣＤ４、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ８６、ＣＸＣＲ３、ＣＣＲ２、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ８、ＲｈＤ、ＩｇＥ、およびＲｈ。
【０１７７】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、神経障害に関連する抗原のエピトープである。
【０１７８】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、アミロイドβ（Ａｂｅｔａ）、βアミロイド、ＰＬＰ、ＲＯＢＯ４、ＲＯＢＯ、ＬＩＮＧＯ、ｇｐＩＩＢ、ｇｐＩＩＩａ、インテグリンａ２ｂＢ３、ＡＯＣ３、ＴＮＦＲＳＦ１９Ｌ（ＲＥＬＴ）、ＴＮＦＲＳＦ１９（ＴＲＯＹ）、およびスクレロスチンから選択される抗原のエピトープである。
【０１７９】
上記標的および別のところで本明細書で記載のものは、限定でなく、例示を意図しているものである。
【０１８０】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）により結合される。いくつかの実施形態では、ＡＤは、キメラ抗原受容体を発現している細胞により結合される。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ｓｃＦｖにより結合される。いくつかの実施形態では、ＡＤは、代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）により結合される。いくつかの実施形態では、ＡＤは、Ｄドメインにより結合される。いくつかの実施形態では、ＡＤは、抗体またはその抗原結合フラグメントにより結合される。
【０１８１】
ＩＩＩ．抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）
抗原決定基（ＡＤ）（例えば、セクションＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）に結合するタンパク質ドメインは、本明細書では、「抗原性決定基結合ドメイン」または「ＡＤＢＤ」とよばれる。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、着目標的に対する認識および特異的結合を付与するのに十分である。本明細書で記載のＡＤＢＤは、アダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）中におよび／またはキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）（例えば、セクションＶＩおよびセクションＸＩに記載されているような）中に存在できる。
【０１８２】
ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）により特異的に結合される着目標的は、アダプターおよび／またはＣＡＲが、例えば、本明細書で記載のＡＤ（例えば、セクションＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）のいずれかに結合するのが望ましい任意の分子であり得る。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤにより特異的に結合される標的は、精製、製造、処方、治療、診断または予後関連性または予後判定のいずれかの標的であり得る。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤの標的は、天然または合成であり得る。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤの標的は、細胞外成分、細胞内成分、可溶性因子（例えば、酵素、ホルモン、サイトカイン、成長因子、毒素、毒液、混入物、など）、または膜貫通タンパク質（例えば、細胞表面受容体）であり得る。
【０１８３】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、標的細胞の表面上の着目標的に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、細胞表面受容体に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ホスファターゼ受容体、成長因子受容体、チロシンキナーゼ受容体、ＴＮＦファミリー受容体、Ｇタンパク質共役型受容体、およびケモカイン受容体から選択されるファミリーのメンバーである着目標的に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、同じファミリーの複数メンバーに（例えば、ＴＮＦ受容体ＴＲＡＩＬＲ１およびＴＲＡＩＬＲ２に）結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、異なるファミリー由来のメンバーに結合する。従って、例えば、いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、成長因子受容体およびＴＮＦ受容体、またはＧタンパク質共役型受容体およびケモカイン受容体に結合できる。
【０１８４】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、腫瘍抗原に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは腫瘍関連抗原に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは腫瘍特異的抗原に結合する。
【０１８５】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、癌抗原に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは癌関連抗原に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは癌特異的抗原に結合する。
【０１８６】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、免疫エフェクター細胞の表面上に発現している抗原に結合する。
【０１８７】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）により結合された着目標的は、ヒトタンパク質である。一実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトタンパク質着目標的およびそのサル（例えば、カニクイザル）、マウス、ウサギ、ハムスターおよび／またはウサギオルソログに結合する。
【０１８８】
別の実施形態では、ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、着目標的上に存在するペプチドタグに結合する。このようなペプチドタグは、アダプターに対する１つまたは複数の追加部分を検出、監視、および／または取り付けるための有用な手段を提供する。一実施形態では、ＡＤＢＤは、ヘキサヒスチジル（Ｈｉｓ６）タグ、ミックタグおよびＦＬＡＧタグから選択されるペプチドタグに結合する。その他のペプチドタグは、本明細書で記載されている、あるいは、当該技術分野において既知である。
【０１８９】
所与のＡＤＢＤ結合イベントに対する親和性要求は、種々の要因に依存し、これには、限定されないが、結合マトリックスの組成および複雑さ、ＡＤＢＤおよび標的分子の両方の結合価および密度、ならびにＡＤＢＤの機能的適用が含まれる。一実施形態では、ＡＤＢＤは、着目標的に対し、５ｘ１０−３Ｍ、１０−３Ｍ、５ｘ１０−４Ｍ、１０−４Ｍ、５ｘ１０−５Ｍ、または１０−５Ｍ以下の解離定数（ＫＤ）で結合する。追加の実施形態では、ＡＤＢＤは、着目標的に対し、５ｘ１０−６Ｍ、１０−６Ｍ、５ｘ１０−７Ｍ、１０−７Ｍ、５ｘ１０−８Ｍ、または１０−８Ｍ以下のＫＤで結合する。追加の実施形態では、ＡＤＢＤは、着目標的に対し、５ｘ１０−９Ｍ、１０−９Ｍ、５ｘ１０−１０Ｍ、１０−１０Ｍ、５ｘ１０−１１Ｍ、１０−１１Ｍ、５ｘ１０−１２Ｍ、１０−１２Ｍ、５ｘ１０−１３Ｍ、１０−１３Ｍ、５ｘ１０−１４Ｍ、１０−１４Ｍ、５ｘ１０−１５Ｍ、または１０−１５Ｍ以下のＫＤで結合する。いくつかの実施形態では、本明細書で開示の方法で生成されたＡＤＢＤは、１０−４Ｍと１０−５Ｍとの間、１０−５Ｍと１０−６Ｍとの間、１０−６Ｍと１０−７Ｍとの間、１０−７Ｍと１０−８Ｍとの間、１０−８Ｍと１０−９Ｍとの間、１０−９Ｍと１０−１０Ｍとの間、１０−１０Ｍと１０−１１Ｍとの間、１０−１１Ｍと１０−１２Ｍとの間の群から選択される解離定数を有する。
【０１９０】
一実施形態では、ＡＤＢＤは、活性型の着目標的に結合する。一実施形態では、ＡＤＢＤは、活性型の着目標的に可逆的に結合し、また、活性型の結合標的を放出する。一実施形態では、ＡＤＢＤは、天然型の着目標的に結合する。特定の実施形態では、ＡＤＢＤは、１０−１０秒−１、５ｘ１０−９秒−１、１０−９秒−１、５ｘ１０−８秒−１、１０−８秒−１、５ｘ１０−７秒−１、１０−７秒−１、５ｘ１０−６秒−１、１０−６秒−１、５ｘ１０−５秒−１、１０−５秒−１、５ｘ１０−４秒−１、１０−４秒−１、５ｘ１０−３秒−１、１０−３秒−１、５ｘ１０−２秒−１、１０−２秒−１、５ｘ１０−１秒−１、または１０−１秒−１以上の解離速度定数またはＫｏｆｆで着目標的に結合する。
【０１９１】
ＫＤおよび解離速度定数を決定するための結合実験は、限定されないが、［ｐＨ６．０、０．０１％ツイーン２０］、［ｐＨ６．０、０．１％ゼラチン］、［ｐＨ５．０、０．０１％ツイーン２０］、［ｐＨ９．０、０．１％ツイーン２０］、［ｐＨ６．０、１５％エチレングリコール、０．０１％ツイーン２０］、［ｐＨ５．０、１５％エチレングリコール、０．０１％ツイーン２０］、および［ｐＨ９．０、１５％エチレングリコール、０．０１％ツイーン２０］を含む多くの条件で実施できる。これらの溶液を作製する緩衝液は、当業者により容易に決定でき、最終溶液の所望のｐＨに大きく依存する。例えば、クエン酸緩衝液中のグリシン−ＨＣｌ緩衝液中、またはコハク酸緩衝液中で、低ｐＨ溶液（＜ｐＨ５．５）を作製できる。高ｐＨ溶液は、例えば、トリス塩酸、リン酸緩衝液中、または重炭酸ナトリウム緩衝液中で作製できる。例えば、最適ｐＨおよび／または塩濃度を決定する目的のために、多くの条件を用いてＫＤおよび解離速度定数を測定し得る。
【０１９２】
一実施形態では、ＡＤＢＤは、０．１〜１０−７秒−１、１０−２〜１０−７秒−１、または０．５ｘ１０−２〜１０−７秒−１の範囲のＫｏｆｆで着目標的に特異的に結合する。特定の実施形態では、ＡＤＢＤは、５ｘ１０−２秒−１、１０−２秒−１、５ｘ１０−３秒−１、または１０−３秒−１未満の解離速度定数（Ｋｏｆｆ）で着目標的に結合する。追加の実施形態では、ＡＤＢＤは、５ｘ１０−４秒−１、１０−４秒−１、５ｘ１０−５秒−１、または１０−５秒−１、５ｘ１０−６秒−１、１０−６秒−１、５ｘ１０−７秒−１、または１０−７秒−１未満の解離速度定数（Ｋｏｆｆ）で着目標的に結合する。
【０１９３】
一実施形態では、ＡＤＢＤは、１０３〜１０７Ｍ−１秒−１、１０３〜１０６Ｍ−１秒−１、または１０３〜１０５Ｍ−１秒−１の範囲のＫＯｎで着目標的に特異的に結合する。他の特定の実施形態では、ＡＤＢＤは、１０３Ｍ−１秒−１、５ｘ１０３Ｍ−１秒−１、１０４Ｍ−１秒−１、または５ｘ１０４Ｍ−１秒−１を超える速度（ＫＯｎ）で着目標的に結合する。追加の実施形態では、ＡＤＢＤは、１０５Ｍ−１秒−１、５ｘ１０５Ｍ−１秒−１、１０６Ｍ−１秒−１、もしくは５ｘ１０６Ｍ−１秒−１、または１０７Ｍ−１秒−１超えるＫＯｎで着目標的に結合する。
【０１９４】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、抗体またはその抗原結合フラグメントである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは代替骨格結合ドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはＤドメインである。
【０１９５】
ＩＩＩａ．抗体由来抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）
いくつかの実施形態では、１つまたは複数のＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、抗体分子、例えば、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、組換え抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、単一ドメイン抗体、例えば、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）および、例えば、ヒトまたはラクダ類起源由来の可変ドメイン（ＶＨＨ）の１つまたは複数由来であり得る。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、アダプターまたはＣＡＲが、最終的に、例えば、ヒト用途に使用される同じ種由来である。アダプターおよび／またはＣＡＲがヒトまたはヒト化ＡＤＢＤを含むことは有益である。このようなＡＤＢＤを通常の方法で生成するための組成物および技術は当技術分野において既知である。
【０１９６】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、標的抗原に対する認識および特異的結合を付与するのに十分である抗体フラグメントを含む。抗体フラグメントの例には、限定されないが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖフラグメント、ｓｃＦｖ抗体フラグメント、直鎖抗体、ｓｄＡｂ（ＶＬまたはＶＨ）などの単一ドメイン抗体、ラクダ類ＶＨＨドメイン、および抗体フラグメントから形成された多重特異的抗体が挙げられる。
【０１９７】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、「ｓｃＦｖ」であり、これは、抗体のＶＬ鎖およびＶＨ鎖を含む融合タンパク質を含むことができ、ＶＨおよびＶＬは、例えば、可撓性ポリペプチドリンカー、例えば、本明細書で記載のリンカーを介して連結される。ｓｃＦｖは、当該技術分野において通常の方法にしたがって作製できる（例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６（１９８８）および  Ｈｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３（１９８８）を参照）。
【０１９８】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、単一ドメイン抗原結合（ＳＤＡＢ）分子である。ＳＤＡＢ分子は、単一ドメインポリペプチドの一部である相補性決定領域を含む分子を含む。例としては、限定されないが、重鎖可変ドメイン、天然で軽鎖を欠く結合分子、従来の４鎖抗体由来の単一ドメイン、抗体由来のもの以外の遺伝子改変ドメインおよび単一ドメイン骨格が挙げられる。ＳＤＡＢ分子は、限定されないが、マウス、ヒト、ラクダ、ラマ、魚、サメ、ヤギ、ウサギ、およびウシを含む任意の種由来であり得る。この用語はまた、ラクダ科およびサメ以外の種由来の天然の単一ドメイン抗体分子も含む。
【０１９９】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、ヒト抗体またはそのフラグメントを含む。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、ヒト化抗体またはそのフラグメントを含む。
【０２００】
抗体のヒト化は、当該技術分野においてよく知られており、基本的に、Ｗｉｎｔｅｒ  ａｎｄ  ｃｏ−ｗｏｒｋｅｒｓ（Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２７（１９８８）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４−１５３６（１９８８））の方法に従って、ヒト抗体の対応する配列を、げっ歯類ＣＤＲまたはＣＤＲ配列で置換することにより、すなわちＣＤＲグラフト化（欧州特許第２３９，４００号；国際公開第９１／０９９６７号；および米国特許第４，８１６，５６７同；同第６，３３１，４１５号；同第５，２２５，５３９号；同第５，５３０，１０１号；同第５，５８５，０８９号；および同第６，５４８，６４０号；これらの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）により、実施できる。抗体のヒト化はまた、ベニアリングまたはリサーフェイシング（欧州特許第５９２，１０６号；同第５１９，５９６号；Ｐａｄｌａｎ，１９９１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２８（４／５）：４８９−４９８；Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ７（６）：８０５−８１４（１９９４）；およびＲｏｇｕｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ９１：９６９−９７３（１９９４））またはチェーンシャッフリング（米国特許第５，５６５，３３２号）により達成できる。これら文献の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２０１】
ＩＩＩｂ．代替骨格結合ドメイン
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は代替骨格結合ドメインである。本明細書で使用される場合、「代替骨格結合ドメイン」または「ＡＳＢＤ」は、非抗体ベース結合骨格由来、またはそれに対応する抗原決定基結合ドメインである。
【０２０２】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含むＣＡＲを提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、ＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含むＣＡＲを含む細胞を提供する。さらなる実施形態では、ＡＳＢＤを含むＣＡＲを含む免疫エフェクター細胞が提供される。いくつかの実施形態では、本開示は、ＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含むアダプターを提供する。
【０２０３】
さらなる実施形態では、本開示は、ＡＳＢＤをそれぞれ含むアダプターおよびＣＡＲを含む組成物を提供する。
【０２０４】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）の標的ＡＤに対する結合は、アルファヘリックスまたはベータシートなどの結合骨格の二次構造により媒介される。いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、３つのヘリックスバンドルベースの結合ドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、Ｄドメインベース結合ドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、Ｚドメイン（アフィボディ）ベース結合ドメインである。
【０２０５】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）はＤドメイン（新規結合ドメイン）ベースＡＤ結合ドメインである。Ｄドメイン骨格ベース結合ドメインは通常、７０〜７５個のアミノ酸残基からなり、その内の、非天然逆平行の３つのヘリカルバンドル参照骨格（配列番号１）中の拘束された表面露出残基に対応する最大２０位置の置換が、目的の標的（ＡＤ）に対する標的認識および結合特異性を付与する。Ｄドメイン骨格ベース結合ドメインは、国際公開第２０１６１６４３０８号にさらに開示されている。この内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。一実施形態では、Ｄドメインは、配列番号１の配列を有する参照骨格のものとは最大２０置換まで異なる（例えば、アミノ酸改変により）アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｄドメインは、群：配列番号１７、１８、および１９から選択される配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｄドメインは、群：配列番号２０〜２６、および２７から選択される配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｄドメインは、群：配列番号４４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む。
【０２０６】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）はＺドメイン骨格（アフィボディ）ベースＡＤ結合ドメインである。Ｚドメイン骨格ベース結合ドメインは通常、５８個のアミノ酸残基からなり、その内の、３つのαヘリックスの内の第１と第２に位置する最大１３位置の置換が、目的の標的（ＡＤ）に対する標的（ＡＤ）認識および結合特異性を付与する。さらなる実施形態では、ＺドメインＡＳＢＤは、配列番号２８および２９から選択される配列を含む。Ｚドメイン（アフィボディ）骨格ベース結合ドメインは、米国特許第５，８３１，０１２号にさらに記載されている。その全内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２０７】
二次構造媒介標的結合を示すＡＳＢＤの追加の例には、ＤＡＲＰｉｎ、アフィリン、およびアルマジロリピートベース結合骨格が挙げられる。
【０２０８】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、ＤＡＲＰｉｎベースＡＤ結合ドメインである。ＤＡＲＰｉｎベース結合ドメインは通常、ＮおよびＣ末端キャッピングリピートの間の配列番号３０の配列の２〜３リピート（例えば、それぞれ、配列ＭＲＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＤＬＧＫＫＬＬＥＡＡＲＡＧＱＤＤＥＶＲＩＬＭＡＮＧＡ  ＤＶＮＡＸ３３（配列番号３１）および配列ＱＤＫＦＧＫＴＡＦＤＩＳＩＤＮＧＮＥＤＬＡＥＩＬＱ（配列番号３２）、第１のＧｌｎは、先行リピートのコンセンサスリピート位置Ｘ３３に対応する）を含む。それぞれの内部リピートは２７個のフレームワーク残基および最大６個の置換非フレームワーク残基からなり、βターンに続いて２つの逆平行ヘリックスおよび次のリピートのβターンに連結するループを形成する。ＤＡＲＰｉｎの一括置換および構造により、標的（ＡＤ）認識および結合特異性が付与される。
【表１】
2021503006.tif 000002
【０２０９】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）の標的ＡＤに対する結合特異性は、ＡＳＢＤ上の露出ループ中のアミノ酸により媒介される。これらの結合特性を有する骨格の例には、アドネクチン、リポカリン、アビマー、ノッチン、フィノマー、アトリマー、クニッツドメインベース結合剤、およびＣＴＬＡ４ベース結合骨格が挙げられる。
【０２１０】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、アドネクチンベースＡＤ結合ドメインである。アドネクチンベース結合ドメインは、フィブロネクチンＩＩＩ型（１０Ｆｎ３）の１０番目のドメイン由来である。このＡＤＢＤは通常、６つのループにより連結される７つの鎖を含むベータサンドイッチフォールディングを採用する９４個のアミノ酸結合ドメインである。アドネクチンドメインの片側の３つの表面露出ループでの置換は、標的（ＡＤ）特異的結合部分を生ずる。
【０２１１】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、リポカリンベース、アフィリンベース、またはアンチカリンベースＡＤ結合ドメインである。アンチカリン骨格は、８つの逆平行β鎖から構成される保存されたβ−バレル構造を示し、通常、１６０〜１８０アミノ酸からなる。アンチカリンベース結合骨格のリガンド結合ポケットは、それぞれ、最大２４個の置換を含む４つのループから構成され、全体として標的（ＡＤ）認識および結合特異性を付与する。
【０２１２】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、アビマー骨格ベースＡＤ結合ドメインである。アビマー骨格ベース結合ドメインは、細胞表面受容体のＡドメイン由来であり、通常、３５アミノ酸長さである。アビマーベース結合ドメインの構造は、１２個の保存されたアミノ酸により維持される。結合ドメインの残りの２３個の残基の全ての置換により、標的（ＡＤ）認識および結合特異性が付与される。いくつかの実施形態では、アビマー骨格ベース結合ドメインは、配列ＥＦＸ３ＣＸ５ＮＧＸ８ＣＩＰＸ１２Ｘ１３ＷＸ１５ＣＤＧＸ１９ＤＤＣＧＤＸ２５ＳＤＥを含み、Ｘは、任意のアミノ酸である（配列番号３３）。アビマー骨格ベース結合ドメインは、米国特許出願公開第２００４０１７５７５６号、同第２００５００５３９７３号、同第２００５００４８５１２号、および同第２００６０００８８４４号にさらに記載されている。これらのそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２１３】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、フィノマー骨格ベースＡＤ結合ドメインである。フィノマー結合ドメインは通常、６０〜７５アミノ酸長さであり、２つの可撓性ループにより連結された１対の逆平行ベータシートで構成される。ループ中の置換／挿入は、ＡＤ標的認識および結合特異性を付与する。いくつかの実施形態では、フィノマーベースＡＤ結合ドメインは、配列ＧＶＴＬＦＶ  ＡＬＹＤＹＸ１２Ｘ１３Ｘ１４Ｘ１５Ｘ１６Ｘ１７Ｘ１８Ｘ１９Ｘ２０Ｘ２１Ｘ２２ＬＳＦＨＫＧＥＫＦＱＩＬＳＴＨＥＹＥＸ４１Ｘ４２Ｘ４３Ｘ４４Ｘ４５Ｘ４６Ｘ４７Ｘ４８ＷＥＡＲＳＬＴＴＧＥＴＧＸ６１ＩＰＳＮＹＶＡＰＶＤＳＩＱを含み、Ｘは、任意のアミノ酸であり、Ｘ１３〜Ｘ２１およびＸ４２〜Ｘ４６は、任意選択で、存在しなくてもよい（配列番号３４）。いくつかの実施形態では、フィノマーベースＡＤ結合ドメインは、配列ＧＶＴＬＦＶＡＬＹＤＹＸ１２Ｘ１３Ｘ１４Ｘ１５Ｘ１６Ｘ１７Ｘ１８Ｘ１９Ｘ２０Ｘ２１Ｘ２２ＬＳＦＨＫＧＥＫＦＱＩＬＳＴＨＥＹＥＤＷＷＥＡＲＳＬＴＴＧＥＴＧＹＩＰＳＮＹＶＡＰＶＤＳＩＱを含み、Ｘは、任意のアミノ酸であり、Ｘ１６〜Ｘ２１は、任意選択で、存在しなくてもよい（配列番号３５）。
【０２１４】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、ノッチン骨格ベースＡＤ結合ドメインである。ノッチン骨格ベース結合ドメインは、可変長さおよび複数のジスルフィド結合のループにより連結された３つの逆平行β鎖から構成される３０アミノ酸タンパク質フォールディングに対応する。
【０２１５】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、クニッツドメインベースＡＤ結合ドメインである。クニッツドメインベース結合ドメインは、クニッツ型プロテアーゼ阻害剤の活性モチーフ由来であり、通常、約６０アミノ酸長さである。このＡＤＢＤの疎水性コアは、３つのジスルフィド結合対により安定化された撚り合わせた二本鎖逆平行βシートおよび２つのαヘリックスから構成される。３つのループ中の置換および挿入が、ＡＤ標的認識および結合特異性を付与する。いくつかの実施形態では、クニッツドメインドメインベースＡＤ結合ドメインは、配列ＭＨＳＦＣＡＦＫＡＤＸ１１ＧＸ１３ＣＸ１５Ｘ１６Ｘ１７Ｘ１８Ｘ１９ＲＦＦＦＮＩＦＴＲＱＣＥＥＦＸ３４ＹＧＧＣＸ３９Ｘ４０ＮＱＮＲＦＥＳＬＥＥＣＫＫＭＣＴＲＤＧＡ（配列番号３６）を含み、この配列に、Ｘ以外の位置で少なくとも８５％同一であり；Ｘ１１は：Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ、Ｙの１つであり；Ｘ１３は：Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ、Ｙの１つであり；Ｘ１５は：Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ、Ｙの１つであり；Ｘ１６は：Ａ、Ｇ、Ｅ、Ｄ、Ｈ、Ｔの１つであり；Ｘ１７は：Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ、Ｙの１つであり；Ｘ１８は：Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ、Ｙの１つであり；Ｘ１９は：Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ、Ｙの１つであり；Ｘ３４は：Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ、Ｙの１つであり；Ｘ３９は：Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ、Ｙの１つであり；およびＸ４０は：Ｇ、およびＡの１つである。クニッツ骨格ベース結合ドメインは、国際公開第２００４０６３３３７号にさらに記載されている。この特許は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２１６】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、ＷＷドメインベースＡＤ結合ドメインである。ＷＷドメインベース結合骨格は通常、３０〜３５アミノ酸長さである。いくつかの実施形態では、ＷＷドメインベースＡＤ結合ドメインは、配列ＫＬＰＰＧＷＸ７ＫＸ９ＷＳＸ１２Ｘ１３Ｘ１４ＧＲＶＸ１８ＹＸ２０ＮＸ２２ＩＴＸ２５ＡＸ２７ＱＷＥＲＰ（配列番号３７）を含み、Ｘ７、Ｘ９、Ｘ１２、Ｘ１３、Ｘ１４、Ｘ１８、Ｘ２０、Ｘ２２、Ｘ２５、およびＸ２７は任意のアミノ酸であり、Ｘ１４は、任意選択で、存在しなくてもよい。
【０２１７】
いくつかの実施形態では、ＷＷドメインベースＡＤ結合骨格は、配列ＫＬＰＰＧＷＸ７ＫＸ９ＷＳＸ１２Ｘ１３ＧＲＶＸ１７ＹＸ１９ＮＸ２１ＩＴＸ２４ＡＸ２６ＱＷＥＲＰ（配列番号３８）を含み、Ｘ７、Ｘ９、Ｘ１２、Ｘ１３、Ｘ１７、Ｘ１９、Ｘ２１、Ｘ２４、およびＸ２６は任意のアミノ酸であり、Ｘ１４は、任意選択で、存在しなくてもよい。
【表２】
2021503006.tif 000003
【０２１８】
ＩＶ．リンカー
リンカーは、リンカーによる連結がなければ、アダプターまたはＣＡＲの独立した２つ以上の機能的ドメインであるドメイン間を連結するペプチドまたはその他の化学的連結材を意味する。
【０２１９】
単鎖アミノ酸配列においてアダプターの２つ以上の機能的ドメインを作動可能に連結する適切なリンカーには、限定されないが、グリシンリンカー、セリンリンカー、混合グリシン／セリンリンカー、グリシンおよびセリンリッチリンカーまたはほぼ極性のポリペプチドフラグメントから構成されるリンカーなどのポリペプチドリンカーが挙げられる。
【０２２０】
一実施形態では、リンカーは、ほとんどがグリシン、アラニン、プロリン、アスパラギン、グルタミン、およびリシンから選択されるアミノ酸から構成される。一実施形態では、アダプターまたはＣＡＲの１つまたは複数のリンカーは、ほとんどがグリシン、アラニン、プロリン、アスパラギン、アスパラギン酸、トレオニン、グルタミン、およびリシンから選択されるアミノ酸から構成される。一実施形態では、アダプターまたはＣＡＲの１つまたは複数のリンカーは、グリシン、アラニン、プロリン、アスパラギン、アスパラギン酸、トレオニン、グルタミン、およびリシンから選択される１つまたは複数のアミノ酸から構成される。別の実施形態では、アダプターまたはＣＡＲの１つまたは複数のリンカーは、ほとんどが立体障害のないアミノ酸から構成される。別の実施形態では、リンカーは、その中のアミノ酸は、ほとんどがグリシン、セリン、および／またはアラニンである。いくつかの実施形態では、アダプターまたはＣＡＲリンカーの１つまたは複数のリンカーは、ポリグリシン（例えば、（Ｇｌｙ）５（配列番号１０９９））、および（Ｇｌｙ）８（配列番号１１００）、ポリ（Ｇｌｙ−Ａｌａ）、およびポリアラニンを含む。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーは配列Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ（配列番号３９）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターまたはＣＡＲの１つまたは複数のリンカーは、配列Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ（配列番号４０）を含む。
【０２２１】
一実施形態では、アダプターまたはＣＡＲは、それぞれ、アダプターまたはＣＡＲの別の成分に直接結合（すなわち、リンカーなしで）したＡＤＢＤを含む。一実施形態では、アダプターまたはＣＡＲは、それぞれ、アダプターまたはＣＡＲの別の成分に直接結合した、少なくとも２つの、少なくとも３つの、少なくとも４つの、または少なくとも５つのＡＤＢＤを含む。
【０２２２】
別の実施形態では、ＡＤＢＤは、リンカーを介して、アダプターまたはＣＡＲの別の成分に動作可能に連結できる。アダプターまたはＣＡＲは、単一リンカー、複数リンカー、または無リンカーを含むことができる。一実施形態では、アダプターまたはＣＡＲは、それぞれ、リンカーペプチドを介して、アダプターまたはＣＡＲの別の成分に動作可能に連結されたＡＤＢＤを含む。一実施形態では、アダプターまたはＣＡＲは、それぞれ、同じまたは異なるリンカーを介して、アダプターまたはＣＡＲの別のドメインに動作可能に連結された、少なくとも２つの、少なくとも３つの、少なくとも４つの、または少なくとも５つのＡＤＢＤを含む。
【０２２３】
リンカーは、機能的ドメインを機能させる（例えば、結合ドメインを着目標的に結合する能力を機能させる）ように、アダプターまたはＣＡＲの機能的ドメインを動作可能に連結できる限りにおいて、任意のサイズまたは組成とすることができる。いくつかの実施形態では、リンカーは、約１〜約１００アミノ酸、約１〜約５０アミノ酸、約１〜約２０アミノ酸、約１〜約１５アミノ酸、約１〜約１０アミノ酸、約１〜約５アミノ酸、約２〜約２０アミノ酸、約２〜約１５アミノ酸、約２〜約１０アミノ酸、または約２〜約５アミノ酸である。リンカーの長さ、可撓性の程度および／またはその他の特性は、限定されないが、着目標的に対するまたは１種もしくは複数の他の着目する標的タンパク質に対する親和性、特異性または結合力を含む本発明の最終ポリペプチドの特性に何らかの影響を与え得ることを明確にしなければならない。アダプターまたはＣＡＲで２つ以上のリンカーが用いられる場合、これらのリンカーは、同じまたは異なっていてもよい。本明細書で提供される状況および開示では、当業者なら、アダプターまたはＣＡＲの機能的ドメインを作動可能に連結するための最適リンカー組成および長さを通常の方法で決定できるであろう。
【０２２４】
リンカーはまた、アルキルリンカー、またはＰＥＧリンカーなどの非ペプチドリンカーであり得る。例えば、−ＮＨ−（ＣＨ２）ｓ−Ｃ（０）−（ｓ＝２〜２０）などのアルキルリンカーを使用できる。これらのアルキルリンカーはさらに、低級アルキル（例えば、Ｃ１−Ｃ６）、低級アシル、ハロゲン（例えば、ＣI、Ｂｒ）、ＣＮ、ＮＨ２、フェニルなどのような非立体障害性基で置換され得る。代表的非ペプチドリンカーは、ＰＥＧリンカーである。特定の実施形態では、ＰＥＧリンカーは、約１００〜５０００ｋＤａ、または約１００〜５００ｋＤａの分子量を有する。
【０２２５】
化学的架橋によりアダプターまたはＣＡＲ機能的ドメインを結合するための適切なリンカーには、限定されないが、グルタルアルデヒドなどのホモ二官能性化学的架橋化合物、アジプイミド酸ジメチル（ＤＭＡ）、スベルイミノ酸ジメチル（ＤＭＳ）およびピメルイミド酸ジメチル（ＤＭＰ）などのイミドエステルまたはジチオビス（スクシンイミジルプロピオネート）（ＤＳＰ）およびジチオビス（スルホスクシンイミジルプロピオネート）（ＤＴＳＳＰ）などのＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）エステルが挙げられる。アダプターまたはＣＡＲ機能的ドメインを結合するための適切なリンカーの例には、限定されないが、１つのアミン反応性末端および他端にスルフヒドリル反応性部分を有する架橋剤、または１端にＮＨＳエステルおよびＳＨ−反応性基（例えば、マレイミドまたはピリジル）を有する架橋剤が挙げられる。
【０２２６】
さらなる実施形態では、アダプターまたはＣＡＲの１つまたは複数のリンカーは切断可能である。切断可能リンカーの例には、限定されないが、プロテアーゼにより（インビトロまたはインビボで）認識される種々のタイプのペプチド配列、例えば、Ｔｅｖ、トロンビン、第Ｘａ因子、プラスミン（血液プロテアーゼ）、メタロプロテアーゼ、カテプシン（例えば、ＧＦＬＧ、など）、および他の身体区画中で見つかるプロテアーゼが挙げられる。
【０２２７】
いくつかの実施形態では、リンカーは、細胞中の、または細胞表面のアダプターの機能的ドメインまたは細胞傷害剤の放出を容易にする「切断可能リンカー」である。例えば、酸不安定性リンカー（例えば、ヒドラゾン）、プロテアーゼ感受性（例えば、ペプチダーゼ感受性）リンカー、感光性リンカー、ジメチルリンカーまたはジスルフィド含有リンカー（例えば、Ｃｈａｒｉ，Ｃａｎ．Ｒｅｓ．５２：１２７−１３１（１９９２）；米国特許第５，２０８，０２０号；および米国特許出願公開第２００９０１１０７５３号を参照されたい；これらの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）が使用でき、組成物が細胞中に内部移行すると、アダプターと細胞傷害剤との間の共有結合が細胞内で切断されるのが望ましい。用語の「細胞内で切断される」および「細胞内切断」は、アダプター薬物複合体に対する代謝プロセスまたは細胞内の反応を意味し、それによって、共有結合、すなわち、アダプターと細胞傷害剤との間のリンカーを介した結合が破壊され、細胞内で分離された遊離アダプターおよび／または細胞傷害剤が生ずる。
【０２２８】
さらなる実施形態では、ＣＡＲ中の１つまたは複数のリンカーは切断可能である。切断可能リンカーの例には、限定されないが、プロテアーゼにより（インビトロまたはインビボで）認識される種々のタイプのペプチド配列、例えば、Ｔｅｖ、トロンビン、第Ｘａ因子、プラスミン（血液プロテアーゼ）、メタロプロテアーゼ、カテプシン（例えば、ＧＦＬＧ、など）、および他の身体区画中で見つかるプロテアーゼが挙げられる。
【０２２９】
いくつかの実施形態では、約１〜１００アミノ酸長さの短いオリゴまたはポリペプチドリンカーを用いてＣＡＲのいずれかのドメインが一緒に連結される。リンカーは、隣接するタンパク質ドメインが互いに自由に動くように、グリシンおよびセリン（またはいずれか他のアミノ酸）のような可撓性残基で構成できる。リンカーのアミノ酸配列組成物は、ＣＡＲの免疫原性の可能性を最小化するように選択され得る。２つの隣接するドメインが互いに立体的に干渉しないことを確実にすることが望ましい場合、より長いリンカーが使用できる。
【０２３０】
いくつかの実施形態では、２〜１０アミノ酸長さで、膜貫通ドメインとCARの細胞質シグナル伝達ドメインとの間で結合を形成するのが好ましい。さらなる実施形態では、リンカーは、１０〜１５アミノ酸長さ、または１５〜２０アミノ酸長さ、または２０〜３０アミノ酸長さ、または３０〜６０アミノ酸長さ、または６０〜１００アミノ酸長さ（または記載の長さの中間の任意の範囲）である。さらなる実施形態では、リンカーはグリシン−セリンのダブレット配列である。いくつかの実施形態では、ＥＳＤは、ヒト細胞表面糖タンパク質ＣＤ８アルファ鎖ＥＳＤ領域（例えば、アミノ酸残基１３８〜１８２  ＣＤ８アルファ鎖：スイスプロット受入番号Ｐ０１７３２）に対応する。いくつかの実施形態では、ＥＳＤは、アミノ酸置換により、発現機能または免疫原性を改善するためにさらに改変されているＣＤ８  ＥＳＤ領域に対応する。さらなる実施形態では、ＥＳＤは、ＣＤ２８  ＥＳＤまたは改善された発現機能または免疫原性を付与するためにＣＤ２８  ＥＳＤの改変を含む配列に対応する。
【０２３１】
リンカー最適化は、本明細書で記載の技術を用いて、および／またはその他の当該技術分野において既知の技術を用いて評価できる。いくつかの実施形態では、リンカーは、アダプターまたはＣＡＲの標的抗原決定基に結合する能力、および／または別のアダプターまたはＣＡＲの機能的ドメインの適切に機能する能力（例えば、アダプターのエフェクター機能ドメインのエフェクター機能を誘発する能力、またはアダプターのＦｃＲｎ結合ドメインのＦｃＲｎに結合する能力）を妨害しない。
【０２３２】
Ｖ．アダプター−可溶性タンパク質
本明細書で提供されるのは、マルチドメイン可溶性アダプタータンパク質である。アダプターは、抗原決定基（ＡＤ）（例えば、セクションＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）および抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）（例えば、セクションＩＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）を含む。アダプターは、追加のＡＤ、追加のＡＤＢＤ、および／またはその他の追加のドメインをさらに含むことができる。
【０２３３】
本明細書で提供されるアダプターでは、ＡＤはＡＤＢＤに対しＮ末端であり得る。あるいは、ＡＤＢＤは、ＡＤに対しＮ末端であり得る。いくつかの実施形態では、ＡＤおよびＡＤＢＤは直接に融合される。いくつかの実施形態では、ＡＤおよびＡＤＢＤはリンカーを介して（タンパク質リンカーまたは化学的リンカー）または別のタンパク質ドメイン（例えば、機能的ドメイン）を介して融合される。
【０２３４】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＡＤＢＤとアダプターの別の機能的ドメインとの間に位置するリンカーを含む。いくつかの実施形態では、リンカーはアダプターの２つのＡＤＢＤの間に位置する。いくつかの実施形態では、リンカーはアダプターのＡＤとＡＤＢＤとの間に位置する。アダプターの２つ以上の機能的ドメインを結合するための適切なリンカーは、当業者には明らかであると思われ、通常、ペプチド、タンパク質またはその他の有機分子を結合するために当該技術分野において使われる任意のリンカーであってよい。代表的リンカーは、セクションＩＶで提供される。特定の実施形態では、リンカーは、医薬用途として意図されるタンパク質またはポリペプチドを構築するのに好適する。
【０２３５】
ＡＤ（または複数ＡＤ）およびＡＤＢＤ（または複数ＡＤＢＤ）に加えて、本明細書で提供されるアダプターは、追加ドメインまたは追加の複数ドメイン、例えば、延長された半減期を与えるドメインをさらに含むことができる。
【０２３６】
いくつかの実施形態では、アダプター、またはアダプター中のＡＤＢＤは、脱免疫化されている。
【０２３７】
本明細書で提供されるアダプターは、限定されないが、診断、分析、および治療用途を含む用途を有する。特定の実施形態では、例えば、標的細胞を死滅させるために、アダプターは、細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）の表面上に発現したキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）（例えば、セクションＶＩおよびセクションＸＩに記載されているような）と組み合わせて使用される。
【０２３８】
Ｖａ．抗原決定基（ＡＤ）
本明細書で提供されるアダプターは、少なくとも１つの抗原決定基（ＡＤ）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは単一ＡＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは２つ以上のＡＤを含む。アダプターが２つ以上のＡＤを含む場合、ＡＤは同じまたは異なり得る。
【０２３９】
本明細書で提供されるアダプターでは、ＡＤは任意のＡＤまたは複数ＡＤ（例えば、セクションＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）の組み合わせであり得る。
【０２４０】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＢＣＭＡの細胞外ドメイン（例えば、配列番号５の配列を含むポリペプチド）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、配列番号５の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０２４１】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＤ１２３の細胞外ドメイン（例えば、配列番号１１の配列を含むポリペプチド）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、配列番号１１の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０２４２】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＤ１９の細胞外ドメイン（例えば、配列番号２または３の配列を含むポリペプチド）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、配列番号２または３の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０２４３】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＤ２０の細胞外ドメインを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、配列番号６〜９、または１０の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０２４４】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＤ２２の細胞外ドメイン（例えば、配列番号４１の配列を含むポリペプチド）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、配列番号４１の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０２４５】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＤ３７の細胞外ドメイン（例えば、配列番号１２または１３の配列を含むポリペプチド）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、配列番号１２または１３の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０２４６】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＳ１の細胞外ドメイン（例えば、配列番号１１３８の配列を含むポリペプチド）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、配列番号１１３８の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０２４７】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＨＥＲ２の細胞外ドメイン（例えば、配列番号４２の配列を含むポリペプチド）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、配列番号４２の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０２４８】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＤ４５の細胞外ドメイン（例えば、配列番号１１０６の残基２９〜７６６の配列を含むポリペプチド）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、配列番号１１０６の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基２９〜７６６の全てのアミノ酸残基を含む。
【０２４９】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８の細胞外ドメインを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８の細胞外ドメインの５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０２５０】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＡＦＰのエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１５の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０２５１】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＡＦＰ  ｐ２６のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１６の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１７の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１６、１１１７、１１１８、１１１９、１１２０、１１２１、１１２２、または１１２３のアミノ酸残基を含む。
【０２５２】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ｐ２６タンパク質（例えば、配列番号１６、１１１７、１１１８、１１１９、１１２０、１１２１、１１２２、または１１２３の配列を含むポリペプチド）を含む。このようなｐ２６配列を含む融合タンパク質は、驚くべきことに、本明細書で、長い血清中半減期を有することが発見された。いくつかの実施形態では、アダプターは、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも４時間、少なくとも８時間、少なくとも１６時間、少なくとも３２時間、少なくとも６４時間、またはそれ２を超えるインビボ血漿中半減期を有する。いくつかの実施形態では、アダプターは、マウスで、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも４時間、少なくとも８時間、少なくとも１６時間、少なくとも３２時間、少なくとも６４時間、または６５時間より長い時間、１〜１０時間、２〜１０時間、４〜１０時間、６〜１０時間、または６〜９時間のインビボ血漿中半減期を有する。いくつかの実施形態では、アダプターは、ヒトで、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも４時間、少なくとも８時間、少なくとも１６時間、少なくとも３２時間、少なくとも６４時間、または６５時間より長い時間、１〜１０時間、２〜１０時間、４〜１０時間、６〜１０時間、または６〜９時間のインビボ血漿中半減期を有する。
【０２５３】
いくつかの実施形態では、本開示は、ｐ２６タンパク質（例えば、配列番号１６、１１１７、１１１８、１１１９、１１２０、１１２１、１１２２、または１１２３の配列を有する）を含むアダプターのインビボ半減期（例えば、マウスまたはヒトの）を向上させる方法を提供する。いくつかの実施形態では、アダプターは１つまたは複数の標的結合ＤＤｐｐを含む。いくつかの実施形態では、アダプターの半減期は、通常ヒトｐ２６タンパク質中で認められる１つまたは複数のアミノ酸残基を置換または欠失させることにより、または通常ヒトｐ２６タンパク質中では認められない１つまたは複数のアミノ酸残基を挿入することにより、延長または短縮される。別の実施形態では、アダプターのｐ２６配列は、アダプターのインビボ半減期を延長または短縮するように、１、２、３、５、５、１０、または１〜２０、１〜１０、３〜１０、または３〜５個のアミノ酸置換（保存的および／または非保存的置換）、欠失、および／または挿入を行うことにより改変される。特定の実施形態では、ｐ２６（配列番号１６）の位置２１７のグルタミン（Ｇｌｎ、Ｑ）に対応するアミノ酸残基が別のアミノ酸残基により置換される。さらなる実施形態では、置換は、Ｇｌｎ２１７Ｐｒｏである。別の実施形態では、アダプターのｐ２６配列は、アダプターのインビボ半減期を延長または短縮するように、１〜１５０、１〜１００、１〜５０、１〜２５、または１〜１０個のアミノ酸残基を欠失させることにより改変される。さらなる実施形態では、アダプターのｐ２６配列は、ＦｃＲｎを有するアダプターの相互作用が増大または減少をするように、１、２、３、５、５、１０、または１〜２０、１〜１０、３〜１０、または３〜５個のアミノ酸置換（保存的および／または非保存的置換）、欠失、および／または挿入することにより改変される。
【０２５４】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、天然のタンパク質またはその他の分子中に存在するＡＤである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ヒトに対し内在性であるＡＤである。
【０２５５】
いくつかの実施形態では、ＡＤはヒト細胞内タンパク質のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、エラスチンＴｙｋ２、Ｊａｋ１、Ｊａｋ２、Ｊａｋ３、ＬＣＫ、ＺＡＰ−７０、およびＧＲＢ２から選択されるヒト細胞内タンパク質のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、細胞内タンパク質の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０２５６】
いくつかの実施形態では、アダプターのＡＤＢＤにより特異的に結合される着目標的は、それ自体、異なる配列を有する別のアダプターのＡＤである。
【０２５７】
Ｖｂ．抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）
本明細書で提供されるアダプターは、少なくとも１つの抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは１つのＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、少なくとも２、３、４、または５つ、または５つを超えるＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、１〜３、１〜４、１〜５、または５つを超える異なるＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、少なくとも２、３、４、または５つ、または５つを超える異なるＡＤＢＤを含む。従って、アダプターは、単量体ＡＤＢＤ（すなわち、１つの抗原決定基結合ドメインを含む）または多量体ＡＤＢＤ（すなわち、２つ以上の抗原決定基結合ドメインを、直列に、任意選択でリンカーにより動作可能に連結された）を含み得る。いくつかの実施形態では、多量体アダプターの使用は、高められた（例えば、相乗的）標的結合をもたらす。さらなる実施形態では、多量体アダプターの使用は、単一アダプター構築物（例えば、二重、三重特異的、など）を用いて２つ以上の標的の標的化を可能とする。
【０２５８】
多量体アダプターは、ホモ多量体（すなわち、任意にリンカーにより結合されてもよい２つ以上の同じＡＤＢＤを含む）アダプター（例えば、ホモダイマー、ホモトリマー、ホモテトラマー、など）またはヘテロ多量体（すなわち、少なくとも２つの異なる抗原決定基結合ドメインが存在する２つ以上の抗原決定基結合ドメインを含む）アダプターである。いずれか特定のアダプターに含まれるＡＤＢＤの数は、実施形態に応じて変わってもよく、また、少なくとも部分的には、アダプターが産生される発現系により規定される。しかし、いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、約５〜約１０のＡＤＢＤ、約１０〜約１５のＡＤＢＤ、約１５〜約２０のＡＤＢＤ、約２０〜約２５のＡＤＢＤ、または約２５〜約３０のＡＤＢＤ（記載の数の中間の数ならびに端点を含む）の多量体を含み得る。さらに、アダプターのマルチドメインは、同じまたは異なるＡＤＢＤを含むことができる。いくつかの実施形態では、２、３、４、５つ、または５つを超えるドメインが直列に存在する。
【０２５９】
一実施形態では、アダプターは作動可能に連結された２つ以上のＡＤＢＤを含む。一実施形態では、アダプターは、標的抗原上の同じまたは異なるＡＤに結合する２つのＡＤＢＤを含む。同じ標的抗原に結合する２つ以上の同じＡＤＢＤの結合は、標的抗原に対し１つのＡＤＢＤのみを含む組成物に比べて、明確な利点（例えば、結合力、標的クラスタリングおよび受容体活性化を高める）をもたらす多価性の分子を生ずる。別の実施形態では、アダプターは、異なる抗原に結合する２つのＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、同じ細胞上の異なる抗原に結合する２つのＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、異なる細胞上の異なる抗原に結合する２つのＡＤＢＤを含む。２つ以上ＡＤＢＤの結合は、２つ以上の標的抗原に、別々にまたは同時に結合する可能性を有する多価性および多重特異的アダプターを生ずる。いくつかの実施形態では、多価性アダプターは、同じ標的抗原に同時に結合できる。いくつかの実施形態では、多価性アダプターは、異なる標的抗原に同時に結合できる。いくつかの実施形態では、アダプターは、抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、抗原決定基は、少なくとも５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、または５００アミノ酸長さである。いくつかの実施形態では、抗原決定基は、５〜５００、５〜４００、１０〜３００、５〜２００、５０〜１００、５〜５０、１０〜５００、１０〜４００、１０〜３００、１０〜２００、１０〜１００、１０〜５０、５０〜５００、５０〜４００、５０〜３００、５０〜２００、５０〜１００  ５０〜７５、１００〜５００、１００〜４００、１００〜３００、１００〜２００、または１００〜１５０アミノ酸長さである。さらなる実施形態では、アダプターは、ＢＣＭＡ抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＡＦＰ  ｐ２６抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＣＤ４５抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。
【０２６０】
本明細書で提供されるアダプター中のＡＤＢＤは、任意のＡＤ（例えば、セクションＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）に結合できる。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＢＣＭＡ（例えば、配列番号５の配列を含むポリペプチド）に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＣＤ１２３（例えば、配列番号１１の配列を含むポリペプチド）に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＣＤ２２（例えば、配列番号４１の配列を含むポリペプチド）に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＣＤ１９（例えば、配列番号３の配列を含むポリペプチド）に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＣＤ２０（例えば、配列番号６〜９または１０の配列を含むポリペプチド）に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＣＤ３７（例えば、配列番号１２または１３の配列を含むポリペプチド）に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＣＳ１（例えば、配列番号１１３８の配列を含むポリペプチド）に結合する。 いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＨＥＲ２（例えば、配列番号４２の配列を含むポリペプチド）に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはＣＤ４５に結合する。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるアダプター中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに結合する。アダプターは、「単一特異性」または「多重特異性」であり得る。「多重特異性」（例えば、二重特異性、三重特異性、またはさらに多い多重特異性）のアダプターは、１つまたは複数の異なる分子上に存在する２つ以上の異なるエピトープを認識し、それに結合する。
【０２６１】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＢＣＭＡのドメイン（例えば、細胞外ドメイン）（例えば、配列番号４の配列を含むポリペプチド）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＤ１２３のドメイン（例えば、細胞外ドメイン）（例えば、配列番号１１の配列を含むポリペプチド）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＤ２２のドメイン（例えば、細胞外ドメイン）（例えば、配列番号２４の配列を含むポリペプチド）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＤ１９のドメイン（例えば、細胞外ドメイン）（例えば、配列番号３の配列を含むポリペプチド）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＳ１のドメイン（例えば、細胞外ドメイン）（例えば、配列番号１１３８の配列を含むポリペプチド）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、ＨＥＲ２のドメイン（例えば、細胞外ドメイン）（例えば、配列番号４２の配列を含むポリペプチド）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＤ４５のドメイン（例えば、細胞外ドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のドメイン（例えば、細胞外ドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターはドメインのフラグメントを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、群：配列番号４または５、配列番号１１、配列番号２４、および配列番号３から選択されるアミノ酸配列を有するドメインのフラグメントを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、少なくとも５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、または５００アミノ酸長さであるドメインのフラグメントを含む。いくつかの実施形態では、抗原決定基は、５〜５００、５〜４００、１０〜３００、５〜２００、５０〜１００、５〜５０、１０〜５００、１０〜４００、１０〜３００、１０〜２００、１０〜１００、１０〜５０、５０〜５００、５０〜４００、５０〜３００、５０〜２００、５０〜１００、５０〜７５、１００〜５００、１００〜４００、１００〜３００、１００〜２００、または１００〜１５０アミノ酸長さである。
【０２６２】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＡＤＢＤにより結合された１つまたは複数の標的抗原および／または標的抗原を含む複合体に結合およびこれを架橋する少なくとも２つのＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、架橋抗原は、同じ細胞上にある。いくつかの実施形態では、架橋抗原は、異なる細胞上にある。いくつかの実施形態では、アダプターは、抗原決定基（例えば、上記ドメイン）により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、抗原決定基は、少なくとも５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、または５００アミノ酸長さである。いくつかの実施形態では、抗原決定基は、５〜５００、５〜４００、１０〜３００、５〜２００、５０〜１００、５〜５０、１０〜５００、１０〜４００、１０〜３００、１０〜２００、１０〜１００、１０〜５０、５０〜５００、５０〜４００、５０〜３００、５０〜２００、５０〜１００  ５０〜７５、１００〜５００、１００〜４００、１００〜３００、１００〜２００、または１００〜１５０アミノ酸長さである。さらなる実施形態では、アダプターは、ＢＣＭＡ抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＣＤ４５抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＡＦＰ  ｐ２６抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。
【０２６３】
いくつかの実施形態では、アダプターは少なくとも２つの同じＡＤＢＤを含む（すなわち、多価性）。いくつかの実施形態では、多価性アダプターは、２つ以上同じ標的抗原に同時に結合できる。いくつかの実施形態では、多価性アダプターは多価性であり、同じ標的抗原に同時に結合できる。いくつかの実施形態では、多価性アダプターは、抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、抗原決定基は、少なくとも５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、または５００アミノ酸長さである。いくつかの実施形態では、抗原決定基は、５〜５００、５〜４００、１０〜３００、５〜２００、５０〜１００、５〜５０、１０〜５００、１０〜４００、１０〜３００、１０〜２００、１０〜１００、１０〜５０、５０〜５００、５０〜４００、５０〜３００、５０〜２００、５０〜１００  ５０〜７５、１００〜５００、１００〜４００、１００〜３００、１００〜２００、または１００〜１５０アミノ酸長さである。さらなる実施形態では、多価性アダプターは、ＢＣＭＡ抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、多価性アダプターは、ＣＤ４５抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、多価性アダプターは、ＡＦＰ  ｐ２６抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。
【０２６４】
いくつかの実施形態では、アダプターは、異なる抗原に結合する（すなわち、多重特異的な）少なくとも２つのＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、多重特異的アダプターは、異なる標的抗原に同時に結合できる。いくつかの実施形態では、アダプターはまた多価性であり、同じ標的抗原に同時に結合できる。いくつかの実施形態では、多重特異的アダプターは、抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、抗原決定基は、少なくとも５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、または５００アミノ酸長さである。いくつかの実施形態では、抗原決定基は、５〜５００、５〜４００、１０〜３００、５〜２００、５０〜１００、５〜５０、１０〜５００、１０〜４００、１０〜３００、１０〜２００、１０〜１００、１０〜５０、５０〜５００、５０〜４００、５０〜３００、５０〜２００、５０〜１００  ５０〜７５、１００〜５００、１００〜４００、１００〜３００、１００〜２００、または１００〜１５０アミノ酸長さである。さらなる実施形態では、アダプターは、ＢＣＭＡ抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＣＤ４５抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＡＦＰ  ｐ２６抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。
【０２６５】
一実施形態では、多重特異的アダプターは、単一の着目標的上の少なくとも２つの異なるエピトープに結合する少なくとも２つのＡＤＢＤを含む（すなわち、同じ標的抗原に対し多重エピトープ性）。さらなる実施形態では、多重特異的アダプターは、着目標的上の１つのエピトープに特異的に結合する少なくとも１つのＡＤＢＤ、および同じ標的抗原上の異なるエピトープに特異的に結合する少なくとも１つのその他のＡＤＢＤを含む。一実施形態では、多重特異的アダプターは、第１の標的上のエピトープに特異的に結合する少なくとも１つのＡＤＢＤ、および第２の抗原上のエピトープに特異的に結合する少なくとも１つのＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、細胞上の第１の標的抗原上のエピトープに特異的に結合する少なくとも１つのＡＤＢＤ、および同じ細胞上の第２の抗原上のエピトープに特異的に結合する少なくとも１つのＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、細胞上の第１の標的抗原上のエピトープに特異的に結合する少なくとも１つのＡＤＢＤ、および異なる細胞上の第２の抗原上のエピトープに特異的に結合する少なくとも１つのＡＤＢＤを含む。
【０２６６】
さらなる実施形態では、アダプターは、その他の異種のタンパク質（またはそれらのサブドメイン）と作動可能に連結された２つ以上のＡＤＢＤを含み、そうすることにより、融合パートナーの多価性、多重特異性、および／または機能特性（例えば、半減期の延長などの薬物動態）をアダプター融合タンパク質に付与する。アダプターの融合パートナーの例には、限定されないが、抗体、抗体サブドメイン（例えば、ｓｃＦｖまたはＦｃドメイン）、血清アルブミン、血清アルブミンサブドメイン、細胞表面受容体、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、細胞表面受容体サブドメイン、ペプチド、ペプチドタグ（例えば、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）が挙げられる。ＡＤＢＤの数と位置およびそれらそれぞれのアダプター内の位置は変わり得る。例えば、ＡＤＢＤは、融合パートナーの１つまたは全ての末端に配置でき、および／またはアダプター融合パートナー内の異種サブユニット内に散在させ得る。いくつかの実施形態では、アダプターは、異種タンパク質（例えば、抗原決定基）により分離されている２つ以上のＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、異種タンパク質は、少なくとも５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、または５００アミノ酸長さである。いくつかの実施形態では、異種タンパク質は、５〜５００、５〜４００、１０〜３００、５〜２００、５０〜１００、５〜５０、１０〜５００、１０〜４００、１０〜３００、１０〜２００、１０〜１００、１０〜５０、５０〜５００、５０〜４００、５０〜３００、５０〜２００、５０〜１００、５０〜７５、１００〜５００、１００〜４００、１００〜３００、１００〜２００、または１００〜１５０アミノ酸長さである。
【０２６７】
一実施形態では、アダプターは二重特異性であり、２つの異なる標的抗原に特異的に結合するＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、二重特異的アダプターは、２つの異なる細胞型の表面上に発現した２つの異なる標的抗原に特異的に結合する。さらなる実施形態では、二重特異的アダプターは、腫瘍細胞の表面上に発現した２つの異なる標的抗原に特異的に結合する。さらなる実施形態では、二重特異的アダプターは、多発性骨髄腫細胞（例えば、ＢＣＭＡおよびＣＳ１）の表面上に発現した２つの異なる標的抗原に特異的に結合する。一実施形態では、二重特異的アダプターは、異なる細胞上に発現した標的抗原に結合する。さらなる実施形態では、二重特異的アダプターは、異なる腫瘍細胞上に発現した標的抗原に結合する。別の実施形態では、二重特異的アダプターは、腫瘍脈管構造または腫瘍微小環境内の異なる細胞上に発現した標的抗原に結合する。一実施形態では、二重特異的アダプターは、癌細胞標的および免疫エフェクター細胞標的に特異的に結合する。一実施形態では、二重特異的アダプターは、癌細胞（例えば、ＣＤ１９）上に発現した標的、およびＴリンパ球（例えば、ＣＤ３またはＣＤ４５）の表面上に発現した標的に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、二重特異的アダプターは、異なる標的抗原に同時に結合できる。いくつかの実施形態では、二重特異的アダプターは、抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、抗原決定基は、少なくとも５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、または５００アミノ酸長さである。いくつかの実施形態では、抗原決定基は、５〜５００、５〜４００、１０〜３００、５〜２００、５０〜１００、５〜５０、１０〜５００、１０〜４００、１０〜３００、１０〜２００、１０〜１００、１０〜５０、５０〜５００、５０〜４００、５０〜３００、５０〜２００、５０〜１００  ５０〜７５、１００〜５００、１００〜４００、１００〜３００、１００〜２００、または１００〜１５０アミノ酸長さである。さらなる実施形態では、アダプターは、ＢＣＭＡ抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＣＤ４５抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＡＦＰ  ｐ２６抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。
【０２６８】
アダプターが２つ以上のＡＤＢＤを含むいくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、本明細書で考察したＡＤＢＤのいずれかのタイプであり得る（例えば、上記セクションＩＩＩおよびセクションＸＩ中で記載のいずれかのＡＤＢＤ）。例えば、ＡＤＢＤは、抗体、その抗原結合フラグメント、ｓｃＦｖ、代替骨格結合ドメイン、Ｄドメイン、Ｔ細胞受容体、またはその抗原結合フラグメントであり得る。
【０２６９】
アダプターが２つ以上のＡＤＢＤを含むいくつかの実施形態では、これらのＡＤＢＤは、同じ種類の、または異なる種類の抗原結合分子であり得る。例えば、アダプターは、Ｄドメインである２つのＡＤＢＤを含み得る。Ｄドメインである２つのＡＤＢＤは、同じまたは異なり得る。アダプターは、ＤドメインであるＡＤＢＤおよびｓｃＦｖであるＡＤＢＤを含む。アダプターはまた、Ｔ細胞受容体またはその抗原結合フラグメントであるＡＤＢＤまたはｓｃＦｖであるＡＤＢＤを含み得る。いくつかの実施形態では、アダプターは、抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、抗原決定基は、少なくとも５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、または５００アミノ酸長さである。いくつかの実施形態では、抗原決定基は、５〜５００、５〜４００、１０〜３００、５〜２００、５０〜１００、５〜５０、１０〜５００、１０〜４００、１０〜３００、１０〜２００、１０〜１００、１０〜５０、５０〜５００、５０〜４００、５０〜３００、５０〜２００、５０〜１００  ５０〜７５、１００〜５００、１００〜４００、１００〜３００、１００〜２００、または１００〜１５０アミノ酸長さである。さらなる実施形態では、アダプターは、ＢＣＭＡ抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＣＤ４５抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＡＦＰ  ｐ２６抗原決定基により分離されている２つ以上の作動可能に連結されたＡＤＢＤを含む。
【０２７０】
いくつかの実施形態では、アダプターのＡＤＢＤは、脱免疫化されている。
【０２７１】
いくつかの実施形態では、アダプターは、目的のＡＤを含む抗原標的に結合するＡＤＢＤを含み、標的の機能に対する識別可能な影響を与えない。あるいは、いくつかの実施形態では、アダプターは、目的のＡＤを含む抗原標的に結合し、標的の生物活性に対し、完全にまたは部分的に、抑制する、拮抗する、刺激する、阻止する、増大させる、刺激する、または妨害するＡＤＢＤを含む。結合は、刺激的または拮抗的として特定され、アッセイ、バイオアッセイ、および／またはこのような活性を評価するための当該技術分野において既知の動物モデルを用いて、またはこれらを通常の方法で修正して決定できる。
【０２７２】
アダプター作動物質は、何らかの方法でアダプター標的の生物活性を増大させるまたは高めるまたはアダプター標的の既知の作動物質と同等の生物活性を有するアダプターを意味する。別の実施形態では、アダプターは、それが結合する標的の拮抗物質である。アダプター拮抗物質は、アダプター標的の生物活性を完全にまたは部分的に遮断する、または何らかの方法でアダプター標的の生物活性を妨害するまたはアダプター標的の既知の拮抗物質と同等の生物活性を有するアダプターを意味する。
【０２７３】
一実施形態では、アダプターは、血清タンパク質である着目標的に特異的に結合する。一実施形態では、アダプターは、血清アルブミン（例えば、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ））、チロキシン結合タンパク質、トランスフェリン、フィブリノーゲン、および免疫グロブリン（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥおよびＩｇＭ）から選択される血清タンパク質に特異的に結合する。理論に束縛されるものではないが、アダプターの担体タンパク質への結合は、アダプターに対し改善された薬力学的特性を付与すると考えられており、この特性には、限定されないが、タンパク質結合配列がないアダプターに比較して、向上した腫瘍標的化、腫瘍侵入、腫瘍内拡散、および高められた治療作用が挙げられる（例えば、国際公開第０１／４５７４６号を参照されたい。この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。
【０２７４】
一実施形態では、アダプターにより特異的に結合される着目標的は、疾患関連抗原である。抗原は、癌、および／または特定の細胞型（例えば、過剰増殖細胞）、および／または病原体（例えば、細菌細胞（例えば、結核、天然痘、および炭疽病）、ウイルス（例えば、ＨＩＶおよびＨ）、寄生生物（例えば、マラリアおよびリーシュマニア症）、真菌感染、カビ、マイコプラズマ、プリオン抗原、または免疫系の障害に関連する抗原に特徴的な抗原であり得る。
【０２７５】
追加の実施形態では、アダプターにより結合された着目標的は、細菌性抗原、ウイルス抗原、真菌抗原、マイコプラズマ抗原、プリオン抗原、または寄生生物抗原（例えば、哺乳動物に感染するもの）である。一実施形態では、アダプターの標的は、ヒトパピローマウイルス、Ｂ型肝炎、狂犬病、ニパウイルス、ウエストナイルウイルス、髄膜炎ウイルス、またはＣＭＶである。追加の実施形態では、アダプターは病原体に特異的に結合する。
【０２７６】
Ｖｃ．アダプター機能的ドメイン
いくつかの実施形態では、アダプターは、第１の抗原決定基（ＡＤ）、第２の抗原決定基に結合するドメイン（ＡＤＢＤ）を含み、および１つまたは複数の追加の望ましい特性（例えば、改善された製造特性）および／または薬物動態学的特性（例えば、改善された半減期）を付与する機能的ドメインをさらに含む。アダプターの機能的ドメインは、ＡＤとＡＤＢＤとの間に配置できる。アダプターはまた、ＡＤおよびＡＤＢＤの両方に対してＮ末端に、またはＡＤおよびＡＤＢＤの両方に対してＣ末端に配置できる。アダプターが２つ以上のＡＤを含むいくつかの実施形態では、アダプターの機能的ドメインは、２つ以上のＡＤの間、２つ以上ＡＤに対しＮ末端、または２つ以上ＡＤに対しＣ末端に配置できる。アダプターが２つ以上のＡＤＢＤを含むいくつかの実施形態では、アダプターの機能的ドメインは、２つ以上のＡＤＢＤの間、２つ以上ＡＤＢＤに対しＮ末端、または２つ以上のＡＤＢＤに対しＣ末端に配置できる。
【０２７７】
いくつかの実施形態では、アダプターは、Ｆｃまたは変異体Ｆｃ（例えば、ヒトＦｃまたは変異体Ｆｃドメイン）またはそのフラグメント、血清タンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン）またはそのフラグメント；ＦｃＲｎ結合ドメイン；血清タンパク質結合ドメイン；サイトカイン、成長因子、ホルモン、または酵素；造影剤；標識剤；およびペプチドタグから選択される機能的ドメインを含む。
【０２７８】
アダプターの機能的ドメインは、天然由来または組換え工学（例えば、ファージディスプレイ、ゼノマウス、または合成技術）の結果であり得る。特定の実施形態では、アダプターの機能的ドメインは、半減期を延長し、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）活性を強化または低減、および／または補体依存性細胞障害（ＣＤＣ）活性を強化または低減する。
【０２７９】
いくつかの実施形態では、アダプターは、Ｆｃまたは変異体Ｆｃ（例えば、ヒトＦｃまたは変異体ヒトＦｃドメイン）またはそのフラグメントまたは誘導体、血清タンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン）またはそのフラグメントまたは誘導体（例えば、血清タンパク質結合ドメイン）；ＦｃＲｎ結合ドメイン；および血清タンパク質結合ドメインから選択される機能的ドメインを含む。
【０２８０】
一実施形態では、アダプターは、１つまたは複数のＦｃ受容体に結合する能力などの１つまたは複数のエフェクター機能をアダプターに付与する抗体エフェクタードメインまたは抗体エフェクタードメインの誘導体を含む機能的ドメインを含む。いくつかの実施形態では、機能的ドメインは、ＣＨ２およびＣＨ３ドメインにより提供されるエフェクター機能を有する１つまたは複数の抗体のＣＨ２および／またはＣＨ３ドメインを含む。いくつかの実施形態では、機能的ドメインは、ＣＨ２およびＣＨ３ドメインにより提供されるエフェクター機能を有する１つまたは複数の抗体のＣＨ２および／またはＣＨ３ドメインの誘導体を含む。エフェクター機能を提供するためにアダプターに含めることができる、および本発明により包含される他の配列は、当業者には明らかと思われ、通常の方法で選択し、所望のエフェクター機能を基準にして本明細書で包含されるアダプターに設計できる。
【０２８１】
一実施形態では、アダプターは、アダプターにより付与される抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を高める機能的ドメインを含む（例えば、Ｂｒｕｈｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １１３：３７１６−３７２５（２００９）；Ｓｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１−６６０４（２００１）；Ｌａｚａｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  １０３：４００５−４０１０（２００６）；Ｓｔａｖｅｎｈａｇｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６７：８８８２−８８９０（２００７）；Ｈｏｒｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６８：８０４９−８０５７（２００８）；Ｚａｌｅｖｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １１３：３７３５−３７４３（２００９）；Ｂｒｕｃｋｈｅｉｍｅｒ，Ｎｅｏｐｌａｓｉａ  １１：５０９−５１７（２００９）；国際公開第２００６／０２０１１４号；Ｓｔｒｏｈｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２０：６８５−６９１（２００９）；および国際公開第２００４／０７４４５５号を参照されたい。これらの文献のそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。ＡＤＣＣを高めるアダプターの機能的ドメイン中に含まれるＦｃ部分に付与するエフェクター機能のフラグメント工学改変の例には、ＩｇＧ１−Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、Ｋ３３４Ａ；ＩｇＧ１−Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ；ＩｇＧ１−Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ；ＩｇＧ１−Ｐ２４７Ｉ、Ａ３３９Ｄ  またはＱ；ＩｇＧ１−Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０ＳおよびＳ２９８ＤもしくはＶを一緒に、またはＫ２９０Ｓ単独；ＩｇＧ１−Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ；ＩｇＧ１−Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｐ３９６Ｌ；およびＩｇＧ１−Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、Ｐ３９６Ｌ（Ｆｃ領域の残基のナンバリングは、ＫａｂａｔらのＥＵインデックスのものである（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，１９９１  第５版））に対応する１つまたは複数の改変が含まれる。
【０２８２】
従って、いくつかの実施形態では、アダプターは、アダプターに対して免疫グロブリンの生物学的または生化学的特性を付与する抗体フラグメントを含む機能的ドメインを含む。いくつかの実施形態では、抗体フラグメントは、抗体フラグメントのないアダプターに比べて、非共有結合により二量体化する能力、腫瘍部位に局在化する能力、および血清半減期の延長から選択される特性を付与する。特定の実施形態では、アダプターは、少なくとも、アダプターのない場合の対応する抗体フラグメントと同等の安定性である。特定の実施形態では、アダプターは、少なくとも、アダプターのない場合の対応する抗体フラグメントよりも高い安定性がある。アダプタータンパク質の安定性は、例えば、ＥＬＩＳＡ技術などの確立された方法を用いて測定できる。いくつかの実施形態では、アダプターは、３７℃の全血中で（インビボまたはエクスビボで）少なくとも約１０時間、少なくとも約１５時間、少なくとも約２０時間、少なくとも約２４時間、少なくとも約２５時間、少なくとも約３０時間、少なくとも約３５時間、少なくとも約４０時間、少なくとも約４５時間、少なくとも約４８時間、少なくとも約５０時間、少なくとも約５５時間、少なくとも約６０時間、少なくとも約６５時間、少なくとも約７０時間、少なくとも約７２時間、少なくとも約７５時間、少なくとも約８０時間、少なくとも約８５時間、少なくとも約９０時間、少なくとも約９５時間、または少なくとも約１００時間（これらの記載の間のいずれかの時間を含む）安定である。一実施形態では、アダプターは、１つまたは複数の定常領域ドメインの少なくとも一部が、対応する非改変免疫グロブリン配列を有する免疫グロブリンフラグメントと比較して、エフェクター機能の低減または増大、非共有結合により二量体化する能力、腫瘍の部位に局在化するように高められた能力、血清半減期の短縮、または血清半減期の延長などの所望の特性を与えるように改変されている免疫グロブリンドメインまたはフラグメントに対応する免疫グロブリンエフェクタードメインまたは半減期に影響を与えるドメインを含む。これらの定常領域ドメインの改変は、アミノ酸置換、挿入、または欠失であり得る。
【０２８３】
一実施形態では、アダプターは、アダプターに対して抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を付与する免疫グロブリンエフェクタードメインまたは免疫グロブリンエフェクタードメインの誘導体のアミノ酸配列を含む機能的ドメインを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＡＤＣＣを高めるように改変されている免疫グロブリンエフェクタードメインの配列を含む（例えば、Ｂｒｕｈｎｓ，Ｂｌｏｏｄ  １１３：３７１６−３７２５（２００９）；Ｓｈｉｅｌｄｓ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１−６６０４（２００１）；Ｌａｚａｒ，ＰＮＡＳ  １０３：４００５−４０１０（２００６）；Ｓｔａｖｅｎｈａｇｅｎ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６７：８８８２−８８９０（２００７）；Ｈｏｒｔｏｎ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６８：８０４９−８０５７（２００８）；Ｚａｌｅｖｓｋｙ，Ｂｌｏｏｄ  １１３：３７３５−３７４３（２００９）；Ｂｒｕｃｋｈｅｉｍｅｒ，Ｎｅｏｐｌａｓｉａ  １１：５０９−５１７（２００９）；国際公開第０６／０２０１１４号；Ｓｔｒｏｈｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２０：６８５−６９１（２００９）；および国際公開第０４／０７４４５５号を参照されたい。これらの文献のそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。ＡＤＣＣを高めるアダプター中のアミノ酸配列に含まれる免疫グロブリンフラグメント工学改変の例には、ＩｇＧ１−Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、Ｋ３３４Ａ；ＩｇＧ１−Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ；ＩｇＧ１−Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ；ＩｇＧ１−Ｐ２４７Ｉ、Ａ３３９ＤまたはＱ；ＩｇＧ１−Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０ＳおよびＳ２９８ＤまたはＶを一緒に、またはＫ２９０Ｓ単独；ＩｇＧ１−Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ；ＩｇＧ１−Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｐ３９６Ｌ；およびＩｇＧ１−Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、Ｐ３９６Ｌ（Ｆｃ領域の残基のナンバリングは、ＫａｂａｔらのＥＵインデックスのものである（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，１９９１  第５版）参照により本明細書に組み込まれる）に対応する１つまたは複数の改変を有する免疫グロブリンエフェクタードメイン配列が含まれる。
【０２８４】
さらなる実施形態では、アダプターは、アダプターに対して抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を付与する免疫グロブリンエフェクタードメインまたは免疫グロブリンエフェクタードメインの誘導体のアミノ酸配列を含む機能的ドメインを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を高めるように改変されている免疫グロブリンエフェクタードメインの配列を含む（例えば、Ｓｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１−６６０４（２００１）；Ｌａｚａｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  １０３：４００５−４０１０（２００６）；Ｓｔａｖｅｎｈａｇｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６７：８８８２−８８９０（２００７）；Ｒｉｃｈａｒｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．７：２５１７−２５２７（２００８）；Ｈｏｒｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６８：８０４９−８０５７（２００８）；Ｚａｌｅｖｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １１３：３７３５−３７４３（２００９）；Ｂｒｕｃｋｈｅｉｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｏｐｌａｓｉａ  １１：５０９−５１７（２００９）；国際公開第０６／０２０１１４号；Ｓｔｒｏｈｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２０：６８５−６９１（２００９）；および国際公開第０４／０７４４５５号を参照されたい。これらの文献のそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。ＡＤＣＰを高めるアダプター中のアミノ酸配列荷に含まれる免疫グロブリンフラグメント工学改変の例には、ＩｇＧ１−Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、Ｋ３３４Ａ；ＩｇＧ１−Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ；ＩｇＧ１−Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ；ＩｇＧ１−Ｐ２４７Ｉ、Ａ３３９ＤまたはＱ；ＩｇＧ１−Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０ＳおよびＳ２９８ＤまたはＶを一緒に、；ＩｇＧ１−Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ；ＩｇＧ１−Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｐ３９６Ｌ；ＩｇＧ１−Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、Ｐ３９６Ｌ；およびＩｇＧ１−Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ（残基のナンバリングは、ＫａｂａｔらのＥＵインデックスのものである（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，１９９１  第５版）参照により本明細書に組み込まれる）に対応する１つまたは複数の改変を有する免疫グロブリンエフェクタードメイン配列が含まれる。
【０２８５】
さらなる実施形態では、アダプターは、アダプターに対して補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を付与する免疫グロブリンエフェクタードメインまたは免疫グロブリンエフェクタードメインの誘導体のアミノ酸配列を含む機能的ドメインを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を高めるように改変されている免疫グロブリンエフェクタードメインの配列を含む（例えば、Ｉｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６６：２５７１−２５７５（２００１）；Ｓｔｒｏｈｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２０：６８５−６９１（２００９）；および  Ｎａｔｓｕｍｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６８：３８６３−３８７２（２００８）を参照されたい。これらの文献のそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。例えば、アダプターは、ＣＤＣを高める１つまたは複数の次の改変：ＩｇＧ１−Ｋ３２６Ａ、Ｅ３３３Ａ；ＩｇＧ１−Ｋ３２６Ｗ、Ｅ３３３Ｓ、ＩｇＧ２−Ｅ３３３Ｓ（残基のナンバリングは、ＫａｂａｔらのＥＵインデックスのものである（Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，１９９１  第５版）参照により本明細書に組み込まれる）を含む抗体フラグメントまたはドメインを含むことができる。
【０２８６】
さらなる実施形態では、アダプターは、ＦｃγＲＩＩｂ受容体結合する能力をアダプターに付与する免疫グロブリンエフェクタードメインまたは免疫グロブリンエフェクタードメインの誘導体のアミノ酸配列を含む機能的ドメインを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＦｃγＲＩＩｂ受容体に対する阻害結合を高めるように改変されている免疫グロブリンエフェクタードメインの配列を含む（例えば、Ｃｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４５：３９２６−３９３３（２００８）を参照されたい）。阻害的にＦｃγＲＩＩｂ受容体に対する結合を高める免疫グロブリンフラグメント工学改変の例は、ＩｇＧ１−Ｓ２６７Ｅ、Ｌ３２８Ｆである。
【０２８７】
ＩｇＧの半減期は、その新生児受容体ＦｃＲｎへのｐＨ依存性結合により媒介される。特定の実施形態では、アダプターは、アダプターに対する新生児の受容体ＦｃＲｎに結合する能力を付与する免疫グロブリンエフェクタードメインまたは免疫グロブリンエフェクタードメインの誘導体のアミノ酸配列を含む機能的ドメインを含む。特定の実施形態では、アダプターは、ＦｃＲｎに対する結合を高めるように改変されている免疫グロブリンＦｃＲｎ結合ドメインの配列を含む機能的ドメインを含む（例えば、Ｐｅｔｋｏｖａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８：１７５９−１７６９（２００６）；Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９：５１７１−５１８０（２００２）；Ｏｇａｎｅｓｙａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４６：１７５０−１７５５（２００９）；Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８１：２３５１４−２３５２４（２００６），Ｈｉｎｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７６：３４６−３５６（２００６）；Ｄａｔｔａ−Ｍａｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．３５：８６−９４（２００７）；Ｄａｔｔａ−Ｍａｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８２：１７０９−１７１７（２００７）；国際公開第０６／１３０８３４号；Ｓｔｒｏｈｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２０：６８５−６９１（２００９）；およびＹｅｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８２：７６６３−７６７１（２００９）を参照されたい。これらの文献のそれぞれの内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。
【０２８８】
さらなる実施形態では、アダプターは、ｐＨ６．０でＦｃＲｎに対する選択的親和性を有するが、ｐＨ７．４では親和性を有さないように改変されている免疫グロブリンエフェクタードメインの配列を含む機能的ドメインを含む。例えば、アダプター機能的ドメインは、半減期を高める１つまたは複数の次の改変：ＩｇＧ１−Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ；ＩｇＧ１−Ｔ２５０Ｑ、Ｍ４２８Ｌ；ＩｇＧ１−Ｈ４３３Ｋ、Ｎ４３４Ｙ；ＩｇＧ１−Ｎ４３４Ａ；およびＩｇＧ１−Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、Ｎ４３４Ａ（残基のナンバリングは、ＫａｂａｔらのＥＵインデックスのものである（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，１９９１  第５版）参照により本明細書に組み込まれる）を含む抗体フラグメントまたはドメインを含むことができる。
【０２８９】
別の実施形態では、アダプターは、２３８、２３９、２４６、２４８、２４９、２５２、２５４、２５５、２５６、２５８、２６５、２６７、２６８、２６９、２７０、２７２、２７６、２７８、２８０、２８３、２８５、２８６、２８９、２９０、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９８、３０１、３０３、３０５、３０７、３０９、３１２、３１５、３２０、３２２、３２４、３２６、３２７、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３７、３３８、３４０、３６０、３７３、３７６、３７８、３８２、３８８、３８９、３９８、４１４、４１６、４１９、４３０、４３４、４３５、４３７、４３８、および４３９から選択されるＦｃ領域（例えば、Ｆｃガンマ）の位置に対応するその配列中に少なくとも１つの置換を含むように改変されている免疫グロブリンエフェクタードメインに対応するアミノ酸配列を含む機能的ドメインを含む（Ｆｃ領域中の残基のナンバリングは、ＫａｂａｔらのＥＵナンバリングシステム（Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，１９９１  第５版；参照により本明細書に組み込まれる）に従う。特定の実施形態では、アダプターは、位置４３４に対応する少なくとも１つの残基がＡ、Ｗ、Ｙ、ＦおよびＨから選択される残基である免疫グロブリンエフェクタードメイン誘導体の配列を含む機能的ドメインを含む。別の実施形態では、アダプターは、次のそれぞれの置換Ｓ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ／Ｋ３３４Ａを有する免疫グロブリンエフェクターフラグメント誘導体の配列を含む。追加の実施形態では、アダプターは、Ｋ３２２Ａに対応する置換を有する免疫グロブリンエフェクタードメイン誘導体を含む。別の実施形態では、アダプターは、次の置換Ｋ２４６Ｈ、Ｈ２６８Ｄ、Ｅ２８３Ｌ、Ｓ３２４Ｇ、Ｓ２３９Ｄ  およびＩ３３２Ｅの内の１つまたはいずれかの組み合わせを有する免疫グロブリンエフェクターフラグメント誘導体の配列を含む。さらに別の実施形態では、アダプターは、Ｄ２６５Ａ／Ｎ２９７Ａに対応する置換を有する免疫グロブリンエフェクタードメイン誘導体の配列を含む。
【０２９０】
特定の実施形態では、アダプターは、当該技術分野において既知の技術を使用してエフェクター機能を高めるように糖鎖操作または変異導入されている免疫グロブリンエフェクタードメインの配列を含む機能的ドメインを含む。例えば、アダプターに含まれる定常領域ドメイン配列の不活性化（点変異またはその他の手段による）は、循環アダプターのＦｃ受容体結合を低減し、それにより、腫瘍局在化を高め得る。他の事例では、本発明の特定の実施形態と一致する定常領域改変は、補体結合を減速し、従って、血清半減期を短縮し、複合化細胞毒素の非特異的結合を減らす可能性がある。定常領域のさらに他の改変を用いて、抗原特異性または抗体柔軟性を増大させることにより、高められた局在化を可能とするジスルフィド結合またはオリゴ糖部分を改変し得る。腫瘍局在化、体内分布および血清半減期などの得られた生理学的プロファイル、およびその他の生化学的改変効果は、過度な実験をすることなく公知の免疫学的な技術を用いて容易に測定および定量化できる。
【０２９１】
化学的複合体としてのアダプター
着目標的に対する特異的結合を促進するアダプターは、蛍光染料、放射性同位元素、クロマトグラフィー組成物（例えば、ビーズ、樹脂、ゲル、など）および化学療法剤などの種々の化合物と化学的に複合化できる。アダプター複合体は、限定されないが、精製、診断、分析、製造および治療用途を含む用途を有する。
【０２９２】
アダプター配列中の固有のシステインの欠如は、部位特異的結合を目的とした特有のシステインの導入のための機会を提供する。
【０２９３】
いくつかの実施形態では、アダプターは少なくとも１個の反応性残基を含む。反応性残基は、例えば、化学療法剤などの複合体の結合のための部位として有用である。反応性残基は、例えば、システイン、リシン、または別の反応性残基であり得る。従って、システインは、アダプターのＮまたはＣ末端に、またはアダプター配列内に加えることができる。システインは、アダプターの配列中の別のアミノ酸を置換できる。加えて、リシンは、アダプターのどちらかの末端またはアダプター配列内に加えることができ、および／またはリシンは、アダプターの配列中の別のアミノ酸を置換できる。一実施形態では、反応性残基（例えば、システイン、リシン、など）は、ＡＤＢＤのループ配列中に位置する（例えば、配列番号２２〜２５、または２６のＺ１およびＺ２）。一実施形態では、反応性残基は、アダプターの成分間、例えば、アダプター融合タンパク質のＡＤＢＤとその他の成分との間に位置するリンカー中に配置される。反応性残基（例えば、システイン、リシン、など）はまた、アダプターの配列内に配置できる。一実施形態では、アダプターは、少なくとも１個、少なくとも２個、少なくとも３個の反応性残基を含む。一実施形態では、アダプターは、少なくとも１個、少なくとも２個、少なくとも３個のシステイン残基を含む。
【０２９４】
Ｖｄ．アダプターの作製
提供された方法の実施に有用なアダプターの作製は、当該技術分野において既知の化学合成、半合成方法、および組換えＤＮＡ方法のための種々の標準的な技術を用いて実施し得る。アダプターの作製方法もまた、個別に、またはマルチドメイン融合タンパク質の一部として、可溶性物質としておよび細胞結合タンパク質として提供される。
【０２９５】
いくつかの実施形態では、アダプターの全体作製スキームは、参照タンパク質骨格を得ることおよび改変のために骨格内の複数の残基を特定すること、を含む。実施形態に応じて、参照骨格は、１つまたは複数のアルファヘリックス領域、またはその他の三次構造を有するタンパク質構造を含み得る。特定されると、複数の残基を、例えば、アミノ酸の置換により改変できる。いくつかの実施形態では、置換は保存的であるが、他の実施形態では、非保存的置換がなされる。いくつかの実施形態では、天然のアミノ酸（例えば、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンまたはバリンの内の１個）が、改変のために参照骨格中の標的化位置で置換される。特定の実施形態では、改変は、システインまたはプロリンの置換は含まない。特定の実施形態で改変が所望の特定された全位置で行われた後で、得られた改変ポリペプチド（例えば、候補アダプター）は、例えば、プラスミド、細菌、ファージ、またはその他のベクター中で（例えば、改変ポリペプチドのそれぞれの数を増やすために）組換え発現できる。改変ポリペプチドはその後、精製およびスクリーニングして、特定の着目標的に特異的結合するこれらの改変ポリペプチドを区別できる。いくつかの実施形態では、特定の改変ポリペプチドは、いくつかの実施形態では、所与の着目標的にほとんどまたは全く結合を示さない場合がある参照骨格と比べて、着目標的に対する高められた結合特異性を示す。さらなる実施形態では、着目標的に応じて、参照骨格は、着目標的とある程度の相互作用（例えば、非特異的相互作用）を示し得るが、特定の改変ポリペプチドは、少なくとも約２倍、少なくとも約５倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約２０倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約１００倍（またはそれを超えて）増大した着目標的に対する結合特異性を示す。任意選択で、参照配列および／または改変ポリペプチド（例えば、アダプター）は、脱免疫化できる。例えば、免疫原性の可能性のある残基またはモチーフは、アダプターに対する免疫反応の可能性を低減または無くするために、特定および改変できる。アダプターの作製、選別、および単離の種々の実施形態に関する追加の詳細は、以下でさらに詳細に提供される。
【０２９６】
Ｖｅ．アダプターの組換え発現
いくつかの実施形態では、アダプターは、「組換えで作製」される（すなわち、組換えＤＮＡ技術を使って作製される）。アダプター融合タンパク質の合成に利用できる代表的組換え方法には、限定されないが、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）ベース合成、鎖状体化、シームレスクローニング、および再帰的指向性ライゲーション法（ＲＤＬ）が挙げられる（例えば、Ｍｅｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ３：３５７−３６７（２００２），Ｋｕｒｉｈａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｌｅｔｔ．２７：６６５−６７０（２００５），Ｈａｉｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．２：１３９−１５０（２００５）；およびＭｃＭｉｌｌａｎ  ｅｔ  ａｌ．，３２：３６４３−３６４６（１９９９）を参照されたい。それぞれの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【０２９７】
アダプターをコードするポリヌクレオチド配列を含む核酸も提供される。このようなポリヌクレオチドは、任意選択で、１つまたは複数の発現制御配列をさらに含んでもよい。例えば、ポリヌクレオチドは、発現制御配列として、１つまたは複数のプロモーターまたは転写エンハンサー、リボソーム結合部位、転写終結シグナル、およびポリアデニル化シグナルを含むことができる。ポリヌクレオチドは任意の好適なベクター内に挿入することができ、これは、任意の好適な発現用宿主細胞中に含めることができる。
【０２９８】
アダプターをコードする核酸の発現は通常、発現ベクター中でアダプターをコードする核酸をプロモーターに作動可能に連結することにより達成される。典型的な発現ベクターは、目的の核酸配列の発現の調節に有用な、転写および翻訳ターミネーター、開始配列、およびプロモーターを含む。当該技術分野において既知の方法を用いて、適切な転写／翻訳制御シグナルと共にアダプターをコードする核酸配列を含む発現ベクターを通常の方法で構築できる。これらの方法は、限定されないが、インビトロ組換えＤＮＡ技術、合成技術、およびインビボ組換え／遺伝子組換えを含む。ポリヌクレオチドの発現は、限定されないが、細菌細胞、酵母細胞、昆虫細胞、植物細胞、または哺乳動物細胞を含む当該技術分野において既知の任意の好適な発現宿主中で実施できる。一実施形態では、アダプターをコードする核酸配列は、核酸配列が宿主中でアダプターに転写および／または翻訳されるように、適切なプロモーター配列に動作可能に連結される。大腸菌中での発現に有用なプロモーターには、Ｔ７プロモーターが挙げられるが、これに限定されない。
【０２９９】
一実施形態では、アダプターコード核酸を含むベクターは、アダプターの発現のために、宿主細胞（例えば、ファージミド）中に導入される。ベクターは、治療薬をコードする挿入物が転写され得る限り、ベクターはエピソームのままで残るか、または染色体に統合され得る。ベクターは標準的組換えＤＮＡ技術により構築することができる。ベクターは、プラスミド、ファージ、コスミド、ファージミド、ウイルス、または原核または真核細胞中で複製および発現に使用することができる当該技術分野において既知のいずれか他のタイプであり得る。当業者なら、多種多様の転写シグナル、例えば、プロモーターおよびＲＮＡポリメラーゼのプロモーターへの結合を調節するその他の配列を含む当該技術分野において既知の多種多様の要素（例えば、発現制御配列）をこのようなベクター中に含めることができることを理解するであろう。ベクターが発現される細胞中で効果的であることが分かっているまたは実証されているいずれのプロモーターもアダプターの発現を開始するために使用することができるであろう。適切なプロモーターは、誘導可能（例えば、制御される）、または構成的であり得る。適切なプロモーターの非限定的例には、ＳＶ４０初期プロモーター領域、ラウス肉腫ウイルスの３’長末端反復配列中に含まれるプロモーター、ＨＳＶ−１（単純ヘルペスウイルス−１）チミジンキナーゼプロモーター、メタロチオネイン遺伝子の調節配列、など、ならびに次の動物転写制御領域、これは組織特異性を示し、遺伝子導入動物で利用されている：膵腺房細胞で活性なエラスターゼＩ遺伝子制御領域；膵臓のベータ細胞中で活性なインスリン遺伝子制御領域、精巣、乳房、リンパ系およびマスト細胞中で活性なマウス乳房腫瘍ウイルス制御領域、肝臓中で活性なアルブミン遺伝子制御領域、肝臓中で活性なアルファフェトプロテイン遺伝子制御領域、肝臓中で活性なアルファ１−抗トリプシン遺伝子制御領域、赤血球の細胞中で活性なベータグロビン遺伝子制御領域、脳のオリゴデンドロサイト細胞中で活性なミエリン塩基性タンパク質制御領域、骨格筋中で活性なミオシン軽鎖−２遺伝子制御領域、および視床下部で活性なゴナドトロピン放出ホルモン遺伝子制御領域、が挙げられる。特定の実施形態では、プロモーターは、リンパ系細胞で活性な免疫グロブリン遺伝子制御領域である。
【０３００】
一実施形態では、アダプターをコードする１つまたはいくつかの核酸は、構成的プロモーター、あるいは調節発現系の制御下で発現される。適切な調節発現系には、限定されないが、テトラサイクリン調節発現系、エクジソン誘導性発現系、ラックスイッチ発現系、グルココルチコイド誘導性発現系、温度誘導性プロモーター系、およびメタロチオネイン金属誘導性発現系が挙げられる。アダプターをコードするいくつかの異なる核酸が宿主細胞系内に含まれる場合には、いくつかの核酸は構成的プロモーターの制御下で発現され得るが、その他の核酸は調節プロモーターの制御下で発現され得る。発現レベルは、ウェスタンブロット分析およびノーザンブロット分析を含む当業者に既知の方法によって決定され得る。
【０３０１】
種々の宿主発現ベクター系を利用して、アダプターをコードする核酸を発現させることができる。アダプターまたはその一部もしくはそのフラグメントをコードする核酸を含むベクターには、プラスミドベクター、単鎖および二本鎖ファージベクター、ならびに単鎖および二本鎖ＲＮＡまたはＤＮＡウイルスベクターが挙げられる。ファージおよびウイルスベクターはまた、感染および形質導入のための既知の技術を用いてパッケージ化またはカプセル化ウイルスの形で宿主細胞に導入され得る。さらに、ウイルスベクターは、複製可能あるいは複製欠損であり得る。あるいは、無細胞翻訳系を用いて、ＤＮＡ発現構築物由来のＲＮＡを使って、同様にタンパク質を作製し得る（例えば、国際公開第８６／０５８０７号および同第８９／０１０３６号；および米国特許第５，１２２，４６４号を参照されたい。これらのそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。
【０３０２】
一般に、任意のタイプの細胞型または培養細胞株を用いて、本明細書で提供されるアダプターを発現させるのに使用できる。いくつかの実施形態では、遺伝子改変宿主細胞を生成するのに使用されるバックグラウンド細胞株は、ファージ、細菌細胞、酵母細胞または哺乳動物細胞である。種々の宿主発現ベクター系を使用して、アダプターのコード配列を発現させ得る。哺乳動物細胞は、着目標的のコード配列およびアダプターのコード配列を含む組換えプラスミドＤＮＡまたはコスミドＤＮＡ発現ベクターで遺伝子導入される宿主細胞系として使用できる。
【０３０３】
細胞は、生物（ヒト含む）からの初代分離株、培養物、または形質転換または遺伝子導入による細胞株であり得る。いくつかの実施形態では、宿主細胞はヒト細胞である。いくつかの実施形態では、宿主細胞はヒトＴ細胞である。いくつかの実施形態では、宿主細胞はヒト患者由来である。
【０３０４】
有用な宿主細胞には、限定されないが、アダプターコード配列を含む組換えバクテリオファージＤＮＡ、プラスミドＤＮＡまたはコスミドＤＮＡ発現ベクターで形質転換した細菌などの微生物（例えば、大腸菌および枯草菌）；アダプターコード配列を含む組換え酵母発現ベクターで形質転換した酵母（例えば、サッカロマイセス、ピキア）；アダプターコード配列を含む組換えウイルス発現ベクター発現ベクター（例えば、バキュロウイルス）で感染させた昆虫細胞系；アダプターコード配列を含む組換えウイルス発現ベクター（例えば、カリフラワーモザイクウイルス、ＣａＭＶ；タバコモザイクウイルス、ＴＭＶ）で感染させたまたは組換えプラスミド発現ベクター（例えば、Ｔｉプラスミド）で形質転換した植物細胞系が挙げられる。特定の実施形態では、哺乳動物細胞を使って、アダプターが作製される。哺乳動物細胞系は通常、哺乳動物細胞のゲノム由来のプロモーター（例えば、メタロチオネインプロモーター）、または哺乳動物ウイルス由来のプロモーター（例えば、アデノウイルス後期プロモーター；ワクシニアウイルス７．５Ｋプロモーター）を含む組換え発現構築物を利用する。
【０３０５】
アダプターの作製に宿主細胞として有用な原核生物には、グラム陰性またはグラム陽性生物、例えば、大腸菌、枯草菌が挙げられる。原核宿主細胞で使うための発現ベクターは通常、１種または複数種の表現型選択可能マーカー遺伝子（例えば、抗生物質耐性を付与するタンパク質または独立栄養要求性を満たすタンパク質をコードする遺伝子）を含む。有用な原核生物宿主発現ベクターの例には、ｐＫＫ２２３−３（Ｐｈａｒｍａｃｉａ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）、ｐＧＥＭｌ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｗｉｓ．，ＵＳＡ）、ｐＥＴ（Ｎｏｖａｇｅｎ，Ｗｉｓ．，ＵＳＡ）およびｐＲＳＥＴ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｌｉｆ．，ＵＳＡ）シリーズのベクターが挙げられる（例えば、Ｓｔｕｄｉｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１９：３７（１９９１）およびＳｃｈｏｅｐｆｅｒ，Ｇｅｎｅ  １２４：８３（１９９３）を参照されたい）。原核宿主細胞発現ベクターによく使われる代表的プロモーター配列には、Ｔ７、（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  ５６：１２５-１３５（１９８７））；β−ラクタマーゼ（ペニシリナーゼ）、ラクトースプロモーター系（Ｃｈａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ２７５：６１５（１９７８）；およびＧｏｅｄｄｅｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ２８１：５４４（１９７９））、トリプトファン（ｔｒｐ）プロモーター系（Ｇｏｅｄｄｅｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ  ８：４０５７（１９８０））、およびｔａｃプロモーター（Ｓａｍｂｒｏｏｋ，ｅｔ  ａｌ．，１９９０，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，２ｎｄ  ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．）が挙げられる。
【０３０６】
一実施形態では、米国特許出願公開第６０／３４４，１６９号および国際公開第０３／０５６９１４号（非ヒト真核宿主細胞中でのヒト様糖タンパク質の製造方法）（これらの特許の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）で教示されている発現系などのアダプターのコード配列を含む組換え酵母発現ベクターで形質転換した酵母細胞を含む真核宿主細胞系が使用される。ＤＢＤなどの本発明の組成物を作製するのに使用できる代表的酵母には、属サッカロマイセス、ピキア属、放線菌類およびクリベロマイセス由来の酵母が含まれる。酵母ベクターは通常、２ｍｕ酵母プラスミド由来の複製起点配列、自己複製配列（ＡＲＳ）、プロモーター領域、ポリアデニル化配列、転写終止配列、および選択可能マーカー遺伝子を含む。酵母発現構築物中のプロモーター配列の例には、メタロチオネイン、３−ホスホグリセリン酸キナーゼ（Ｈｉｔｚｅｍａｎ，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２５５：２０７３（１９８０））およびその他の糖分解酵素、例えば、エノラーゼ、グリセルアルデヒド−３−リン酸脱水素酵素、ヘキソキナーゼ、ピルビン酸脱炭酸酵素、ホスホフルクトキナーゼ、グルコース−６−リン酸イソメラーゼ、３−ホスホグリセリン酸ムターゼ、ピルビン酸キナーゼ、トリオースリン酸イソメラーゼ、ホスホグルコースイソメラーゼ、およびグルコキナーゼ由来のプロモーターが挙げられる。酵母発現ならびに酵母形質転換プロトコルに使用するための追加の好適なベクターおよびプロモーターは、当技術分野において既知である。例えば、Ｆｌｅｅｒ，Ｇｅｎｅ  １０７：２８５−１９５（１９９１）およびＨｉｎｎｅｎ，ＰＮＡＳ  ７５：１９２９（１９７８）を参照されたい。
【０３０７】
昆虫および植物宿主細胞培養システムはまた、本発明の組成物を作製するのに有用である。このような宿主細胞系には、限定されないが、米国特許第６，８１５，１８４号；米国特許出願公開第６０／３６５，７６９号、および同６０／３６８，０４７号；および国際公開第２００４／０５７００２号、同第２００４／０２４９２７号、および同第２００３／０７８６１４号で教示の発現系を含む、例えば、ＤＢＤのコード配列を含む組換えウイルス発現ベクター（例えば、バキュロウイルス）で感染させた昆虫細胞系；ＤＢＤのコード配列を含む組換えウイルス発現ベクター（例えば、カリフラワーモザイクウイルス、ＣａＭＶ；タバコモザイクウイルス、ＴＭＶ）で感染させたまたは組換えプラスミド発現ベクター（例えば、Ｔｉプラスミド）で形質転換した植物細胞系が挙げられる。
【０３０８】
追加の実施形態では、二重微小染色体中で安定に増幅された（ＣＨＯ／ｄｈｆｒ）または不安定に増幅された、アダプターをコードする複数コピーのＤＮＡを含むように遺伝子改変された細胞株（例えば、マウス細胞株）を含む、組換えウイルス発現ベクター（例えば、アデノウイルス、レトロウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス、レンチウイルス）で感染させた動物細胞系を含む宿主細胞系が使用され得る。一実施形態では、アダプターをコードするポリヌクレオチドを含むベクターは、ポリシストロニックである。これらの組成物の作製に有用な代表的哺乳動物細胞には、２９３細胞（例えば、２９３Ｔおよび２９３Ｆ）、ＣＨＯ細胞、ＢＨＫ細胞、ＮＳ０細胞、ＳＰ２／０細胞、ＹＯ骨髄腫細胞、Ｐ３Ｘ６３マウス骨髄腫細胞、ＰＥＲ細胞、ＰＥＲ．Ｃ６（Ｃｒｕｃｅｌｌ，Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）細胞  ＶＥＲＹ、Ｈｅｌａ細胞、ＣＯＳ細胞、ＭＤＣＫ細胞、３Ｔ３細胞、Ｗ１３８細胞、ＢＴ４８３細胞、Ｈｓ５７８Ｔ細胞、ＨＴＢ２細胞、ＢＴ２０細胞、Ｔ４７Ｄ細胞、ＣＲＬ７Ｏ３０細胞、ＨｓＳ７８Ｂｓｔ細胞、ハイブリドーマ細胞、およびその他の哺乳動物細胞が挙げられる。本発明の実施に有用な追加の代表的哺乳動物宿主細胞には、限定されないが、Ｔ細胞が挙げられる。発現系および選択方法のいくつかの例は、次の文献およびその文献中の引用文献に記載されている：Ｂｏｒｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎ．７１（４）：２６６−７３（２０００），ｉｎ  Ｗｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌｆｏｒｓｃｈｕｎｇ／Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓ．４８（８）：８７０−８０（１９９８），Ａｎｄｅｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１３：１１７−１２３（２００２），Ｃｈａｄｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１２：１８８−１９４（２００１），およびＧｉｄｄｉｎｇｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１２：４５０−４５４（２００１）。発現系および選択方法の追加の例は、Ｌｏｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ８１：３５５−３５９（１９８４），Ｂｉｒｔｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．１５３：５１−５４４（１９８７））に記載されている。哺乳動物宿主細胞発現ベクターのための転写および翻訳制御配列は、ウイルスゲノムから誘導される場合が多い。哺乳動物発現ベクター中でよく使われるプロモーター配列およびエンハンサー配列には、ポリオーマウイルス、アデノウイルス２、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）、およびヒトサイトメガロウィルス（ＣＭＶ）由来の配列が含まれる。哺乳動物宿主細胞で使用される代表的市販発現ベクターには、ｐＣＥＰ４（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）およびｐｃＤＮＡ３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）が挙げられる。
【０３０９】
宿主細胞（例えば、哺乳動物宿主細胞）中に核酸を導入する物理的方法には、リン酸カルシウム沈殿、リポフェクション、微粒子銃、微量注入、電気穿孔、および当該技術分野において既知のその他の方法が挙げられる。ベクターおよび／または外来性の核酸を含む細胞を作製する方法は、当該技術分野において周知である。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．（２００１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）を参照されたい。  
【０３１０】
目的のポリヌクレオチドを宿主細胞に導入する生物学的方法には、ＤＮＡおよびＲＮＡベクターの使用が挙げられる。ウイルスベクター、および特にレトロウイルスベクターは、遺伝子を哺乳動物（例えば、ヒト）細胞に挿入するための最も広範に使用される方法になってきている。その他のウイルスベクターは、レンチウイルス、ポックスウイルス、単純ヘルペスウイルスＩ、アデノウイルスおよびアデノ随伴ウイルス、ならびに当該技術分野において既知のその他のウイルスベクターから誘導できる。例えば、米国特許第５，３５０，６７４号および同第５，５８５，３６２号を参照されたい。これらそれぞれの内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０３１１】
目的のＤＮＡおよびＲＮＡを宿主細胞導入する方法には、細胞の電気穿孔法が挙げられ、この方法では、細胞膜の透過性を高めるために細胞に電界が印加され、化学薬品、薬物、またはポリヌクレオチドを細胞中に導入可能になる。ＤＮＡまたはＲＮＡ構築物をコードするアダプターは、電気穿孔法を用いて哺乳動物または原核細胞に導入され得る。
【０３１２】
好ましい実施形態では、細胞の電気穿孔法により、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞の表面上のＣＡＲの発現がもたらされる。このような発現は、一時的であるか、または細胞の寿命期間にわたり安定であり得る。電気穿孔法は、Ｍａｘｃｙｔｅ  ＧＴ（登録商標）およびＳＴＸ（登録商標）遺伝子導入系（ＭａｘＣｙｔｅ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ，ＵＳＡ）を含む、当該技術分野において既知の方法により実現可能である。
【０３１３】
ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための化学的手段には、高分子複合体、ナノカプセル、マイクロスフェア、ビーズ、および水中油型乳剤、ミセル、混合ミセル、およびリポソームを含む脂質系システムなどのコロイド状分散系が挙げられる。インビトロおよびインビボでの送達担体として使用するための代表的コロイド系は、リポソーム（例えば、人工膜小胞）である。非ウイルス送達系が利用される場合では、代表的送達担体はリポソームである。核酸の宿主細胞への導入（インビトロ、エクスビボまたはインビボ）に対しては、脂質配合物の使用が考えられる。別の態様では、核酸は脂質と組み合わされ得る。脂質と組み合わされた核酸は、リポソームの水性の内部への封入、リポソームの脂質二重層内に分散、リポソームおよびオリゴヌクレオチドの両方に結合した連結分子を介してリポソームに結合、リポソーム中の捕捉、リポソームと複合化、脂質含有溶液中に分散、脂質と混合、脂質と組み合わせ、脂質中に懸濁液として含有、ミセルとともに含有または複合化、または別の方法で脂質と一体化され得る。脂質、脂質／ＤＮＡまたは脂質／発現ベクター関連組成物は、溶液中のいずれか特定の構造に限定されない。例えば、それらは二重層構造体中に、ミセルとして、または「収縮した」構造で存在し得る。それらはまた、単純に溶液に分散され、おそらく、寸法または形状が均一ではない凝集体を形成している。脂質は、天然または合成脂質であり得る脂肪性物質である。例えば、脂質は、細胞質中で天然に発生する脂肪滴ならびに長鎖脂肪族炭化水素ならびにこれらの誘導体、例えば、脂肪酸、アルコール、アミン、アミノ、アルコール、およびアルデヒドを含む化合物クラスを含む。
【０３１４】
使用に好適する脂質は、市販品入手源から得ることができる。例えば、ジミリストイルホスファチジルコリン（「ＤＭＰＣ」）はＳｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯから入手でき；ジセチルホスフェート（「ＤＣＰ」）はＫ＆Ｋ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｐｌａｉｎｖｉｅｗ，ＮＹ）から入手でき；コレステロール（「Ｃｈｏｉ」）はＣａｌｂｉｏｃｈｅｍ−Ｂｅｈｒｉｎｇから入手でき；ジミリストイルホスファチジルグリセロール（「ＤＭＰＧ」）およびその他の脂質はＡｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ，Ｉｎｃ．（Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，ＡＬ）から入手できる。クロロホルムまたはクロロホルム／メタノール中の脂質のストック溶液は、−２０℃で保存できる。クロロホルムは、唯一の溶媒として使用し得る。理由は、それがメタノールより容易に蒸発させることができるためである。「リポソーム」は、封入脂質二重層または凝集体の生成により形成される種々の単一および多層状脂質ビークルを包含する汎用用語である。リポソームは、リン脂質二重層膜および内側の水性媒体を有する小胞構造を有するとして特徴付けることができる。多層状リポソームは、水性媒体により分離された複数の脂質層を有する。リン脂質が過剰な水溶液中に懸濁される場合に、それらは自然に形成される。脂質成分は、密閉構造体の形成の前に自己再構成を起こし、水および溶解した溶質を脂質二重層の間に封入する（Ｇｈｏｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ  ５：５０５−５１０（１９９１））。しかし、溶液中で通常の小胞構造とは異なる構造を有する組成物もまた包含される。例えば、脂質は、ミセル構造をとるか、またはただ単に不均一な脂質分子凝集体として存在し得る。リポフェクタミン−核酸複合体もまた意図されている。
【０３１５】
外来性の核酸を宿主細胞に導入するために使用される方法に関係なく、宿主細胞中の組換え核酸配列の存在は、当該技術分野において既知の種々のアッセイを用いて定常作業により確証できる。このようなアッセイには、例えば、サザンおよびノーザンブロッティング、ＲＴ−ＰＣＲおよびＰＣＲなどの当該技術分野において既知の「分子生物学的」アッセイ；例えば、本発明の範囲内にある薬剤を特定するための免疫学的な手段（ＥＬＩＳＡおよびウェスタンブロット）による、または本明細書で記載のアッセイによる、特定のペプチドの存在または非存在の検出などの「生化学的」アッセイが挙げられる。
【０３１６】
遺伝子導入の可能性のある細胞を特定するために、および調節配列の機能を評価するために、レポーター遺伝子が用いられる。一般に、レポーター遺伝子は、レシピエント生物、組織、または細胞中に存在しない、またはそれらにより発現されない、およびその発現がいくつかの容易に検出可能な性質、例えば、酵素活性により顕在化されるポリペプチドをコードする遺伝子である。レポーター遺伝子の発現は、ＤＮＡがレシピエント細胞に導入された後の好適な時間にアッセイされる。好適なレポーター遺伝子の非限定的リストには、ルシフェラーゼ、ベータガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、分泌アルカリフォスファターゼ、または緑色蛍光タンパク質遺伝子をコードする遺伝子が挙げられる（例えば、Ｕｉ−Ｔｅｉ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．４７９：７９−８２（２０００））。好適な発現系は当技術分野において既知であり、既知の技術を使用して作製できる、または市販品として得ることができる。一般に、レポーター遺伝子の最高レベルの発現を示す最小限の５’隣接領域を有する構築物は、プロモーターとして特定される。このようなプロモーター領域は、通常の方法でレポーター遺伝子に結合でき、薬剤のプロモーター駆動性転写を調節する能力を評価するために使用できる。
【０３１７】
多くの選択システムを哺乳動物宿主ベクター発現系で使用することができ、これらには、限定されないが、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ、ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ、およびアデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（Ｌｏｗｙ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  ２２：８１７（１９８０））遺伝子が含まれ、それぞれｔｋ−、ｈｇｐｒｔ−またはａｐｒｔ−細胞で用いることができる。さらに、代謝拮抗薬耐性を、例えば、ｄｈｆｒ、ｇｐｔ、ｎｅｏ、ｈｙｇｒｏ、ｔｒｐＢ、ｈｉｓＤ、ＯＤＣ（オルニチン脱炭酸酵素）、およびグルタミンシンターゼ系の選択のための基準として使用できる。
【０３１８】
Ｖｆ．アダプター精製
アダプターが組換え発現により作製されると、アダプターは、当該技術分野において組換えタンパク質の精製のために既知のいずれかの方法により、例えば、クロマトグラフィー（例えば、イオン交換、アフィニティ、およびサイジングカラムクロマトグラフィー）、遠心分離、溶解度差、またはタンパク質の精製のための任意の他の標準的技術により、精製できる。さらなる実施形態では、アダプターを、任意選択で、本明細書で記載の、または別の当該技術分野において既知の、異種ポリペプチド配列に融合して、精製を促進してもよい。より具体的には、アフィニティ精製用のアダプターアフィニティカラムのためのリガンド（例えば、抗体およびその他のアフィニティマトリックス）および任意選択で、これらのリガンドにより結合されるアダプター融合組成物のアダプターまたはその他の成分が、アダプターの最終作製の前に、当該技術分野において既知の技術を使用して組成物から除去されることが想定される。
【０３１９】
Ｖｇ．アダプターの化学合成
組換え法に加えて、アダプター作製はまた、種々の液相および固相化学プロセスを使用した所望のポリペプチドの有機化学合成を用いても実施し得る。種々の自動化合成装置が商業的に入手でき、既知プロトコルに従って使用できる。例えば、Ｔａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１０５：６４４２（１９８３）；Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３２：３４１−３４７（１９８６）；Ｂａｒａｎｙ  ａｎｄ  Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，Ｔｈｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，Ｇｒｏｓｓ  ａｎｄ  Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ，ｅｄｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１−２８４；Ｂａｒａｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐ．Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．３０：７０５−７３９（１９８７）；Ｋｅｌｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．ｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，Ｓｅｔｌｏｗ，Ｊ．Ｋ．，ｅｄ．Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ．１９９０，ｖｏｌ．１２，ｐｐ．１−１９；Ｓｔｅｗａｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  Ｃｏ．，Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，１９８９、を参照されたい。これらの方法の１つの利点は、それらが、天然アミノ酸残基のアダプター配列中への組み込みを可能とすることである。
【０３２０】
本発明の方法で使用されるアダプターは、合成または翻訳中にもしくはその後に、例えば、グリコシル化、アセチル化、ベンジル化、リン酸化、アミド化、ペグ化、ホルミル化、既知の保護／ブロック基による誘導体化、タンパク質切断、抗体分子への結合、ヒドロキシル化、ヨード化、メチル化、ミリストイル化、酸化、ペグ化、タンパク分解性プロセッシング、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレン化、硫酸化、ユビキチン化、などにより修飾され得る（例えば、Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，２ｄ  Ｅｄ．（Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏ．，Ｎ．Ｙ．，１９９２）；Ｐｏｓｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｖａｌｅｎｔ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｊｏｈｎｓｏｎ，ｅｄ．（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８３），ｐｐ．１−１２；Ｓｅｉｆｔｅｒ，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．１８２：６２６−６４６（１９９０）；Ｒａｔｔａｎ，Ａｎｎ．ＮＹ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．６６３：４８−６２（１９９２）を参照されたい）。特定の実施形態では、ペプチドはＮ末端でアセチル化されるおよび／またはＣ末端でアミド化される。
【０３２１】
多くの化学修飾のいずれかを既知の技術、例えば、限定されないが、アセチル化、ホルミル化、などを使って行うことができる。さらに、誘導体は１つまたは複数の非古典的アミノ酸を含み得る。
【０３２２】
ＶＩ．キメラ抗原受容体
本明細書で提供される場合、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）は、ＡＤＢＤ、膜貫通ドメイン、および細胞内シグナル伝達ドメインを含む細胞外ドメインを含むマルチドメインタンパク質である。このようなＣＡＲは、例えば、標的細胞を死滅させるために、細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）の表面上に発現され、アダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）と組み合わせて使用され得る。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、少なくとも部分的に、本明細書で開示の標的結合ポリペプチドから構成される。いくつかの実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、群：ヒトＣＤ３ゼータドメイン、４１ＢＢドメイン、ＣＤ２８ドメインおよびこれらの任意の組み合わせから選択される。実施形態に応じて、共刺激シグナル伝達領域は、群：ＣＤ２７、ＣＤ２８、４ｌＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ１、リンパ球機能関連抗原１（ＬＦＡ１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７Ｈ３、ＣＤ８３に特異的に結合するリガンド、およびこれらの任意の組み合わせから選択される共刺激分子の細胞内ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、追加標的結合ポリペプチドを含む融合タンパク質を含む。標的化領域の一部（または全部）として標的結合ポリペプチドを含むＣＡＲをコードする単離核酸配列も提供される。
【０３２３】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲのＡＤＢＤは、膜結合ＣＡＲに結合特異性を付与するように設計された少なくとも１つの代替骨格結合ドメイン（例えば、Ｄドメインまたはアフィボディ）を含む。代替骨格結合ドメインを含む受容体は任意の細胞型により発現され得る。
【０３２４】
一実施形態では、ＣＡＲは、次の要素：細胞外ドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインから構成され、細胞質ドメインはシグナル伝達ドメインを含む。別の実施形態では、ＣＡＲは細胞外ドメインおよび膜貫通ドメインから構成される。さらなる実施形態では、ＣＡＲは、同じまたは異なる特異性を有する１つまたは複数のＡＤＢＤから構成される細胞外ドメインから構成される。一実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメイン（例えば、細胞質ドメイン）は、ＣＤ３ゼータ鎖の細胞内ドメインを含む。別の実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ゼータ鎖の細胞内ドメインの一部から構成される。さらなる実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、ＣＤ３ゼータ鎖の細胞内ドメインおよび共刺激シグナル伝達領域を含む。共刺激シグナル伝達領域は、共刺激分子の細胞内ドメインの全部または一部を含むＣＡＲの一部を指す。共刺激分子および共刺激特性をＣＡＲに付与できるこれらの分子の一部は、当技術分野において既知であり、ＣＡＲ中に通常の方法で組み込むことができる。加えて、これらの細胞内シグナル伝達および共刺激ドメインに対する短縮化または変異が取り込まれて、受容体シグナル伝達をさらに高めるまたは低減し得る。好ましい実施形態では、Ｔ細胞は、安定にＣＡＲを発現するように遺伝子改変される。このような実施形態では、ＣＡＲの細胞質ドメインは、ＣＤ２８および／または４１ＢＢシグナル伝達ドメインを単独で含むことができ、または本発明との関係において有用な任意の他の所望の細胞質ドメインと組み合わせることができる。一実施形態では、ＣＡＲの細胞質ドメインは、ＣＤ３ゼータ鎖のシグナル伝達ドメインをさらに含むように設計できる。一実施形態では、ＣＡＲは細胞外ドメイン、細胞膜を通過する膜貫通ドメインを有する細胞外タンパク質リンカー（Ｔ細胞またはＮＫ細胞中で認められるような）、および細胞質ドメインを含み、任意選択で、複数のシグナル伝達モジュールを含んでもよい。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはまた、エピトープタグを含み得る。いくつかの実施形態では、ＣＡＲの細胞質ドメインは、限定されないが、ＣＤ３ゼータ、４１ＢＢおよびＣＤ２８シグナル伝達モジュールおよびこれらの組み合わせを含み得る。
【０３２５】
ＶＩａ．ＣＡＲ細胞外抗原決定基結合ドメイン
本明細書で提供されるＣＡＲは、１つまたは複数の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む。ＣＡＲのＡＤＢＤは、本明細書で記載のいずれかのＡＤＢＤであり得る（例えば、セクションＩＩＩおよびセクションＸＩ中で記載のような）。代表的ＡＤＢＤは、ポリペプチド、例えば、抗体分子（これには、抗体、その抗原結合フラグメント、例えば、免疫グロブリン、単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）、およびｓｃＦｖが含まれる）、または非抗体骨格（例えば、Ｄドメイン、またはアフィボディ）を含む。
【０３２６】
標的化される所望の抗原に応じて、ＣＡＲの細胞外ドメインは、所望の抗原標的に特異的に結合する１つまたは複数の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むように遺伝子改変できる。例えば、一実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９を標的とするように遺伝子改変され、ＣＤ１９結合ＡＤＢＤがＣＡＲの細胞外ドメイン中に組み込まれる。あるいは、ＣＡＲの細胞外ドメインは、２つ以上のＡＤＢＤを含むことにより、ＣＡＲに対し多重特異性または多価性を付与し得る。
【０３２７】
ＣＡＲの細胞外ドメイン中のＡＤＢＤの選択は、標的化される細胞の素性に依存する。例えば、ＣＡＲの細胞外ドメインは、同じ細胞または別の細胞上の受容体などの細胞表面タンパク質に特異的に結合するように遺伝子改変され得る。他の実施形態では、ＣＡＲの細胞外ドメインは、免疫グロブリンなどの可溶性分子に特異的に結合するように遺伝子改変される。他の実施形態では、ＣＡＲにより結合される着目標的は、ウイルス、細菌性および寄生虫感染、免疫系の疾患および障害（例えば、自己免疫疾患）に関連する標的を含む。
【０３２８】
他の実施形態では、ＣＡＲの細胞外ドメインは、癌に関連する標的細胞上の細胞表面マーカーとして機能するリガンドに結合する１つまたは複数のＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、腫瘍または癌抗原（例えば、ＴＡＡ、ＴＳＡ、ＣＡＡ、ＣＳＡまたは本明細書で記載の、または当該技術分野において既知のその他の腫瘍抗原）を標的とし、それに結合する。従って、本明細書で提供されるのは、ＣＡＲを作製する方法、ヒトＴ細胞およびナチュラルキラー細胞などのキメラ細胞の作製におけるそれらの使用、およびこれらのキメラＴ細胞およびＮＫ細胞の養子免疫療法における使用である。
【０３２９】
ＡＤＢＤの選択は、標的細胞の表面を特徴付けるリガンドまたは受容体のタイプと数に依存し得る。例えば、ＡＤＢＤは、特定の病状に関連する標的細胞上の細胞表面マーカーとして機能するリガンドまたは受容体を認識するように選択され得る。リガンドまたは受容体として機能し得る細胞表面マーカーの例には、特定の病状に関連する細胞表面マーカー、例えば、ウイルス性疾患、細菌性疾患、寄生虫感染、自己免疫疾患および望ましくない細胞増殖に関連する障害、例えば、本明細書で記載の癌などの癌の細胞表面マーカーが含まれる。
【０３３０】
ＣＡＲのＡＤＢＤにより特異的に結合される着目標的は、ＣＡＲまたはアダプターが結合するのが望ましいいずれかの分子、例えば、セクションＩＩａおよびセクションＸＩに記載のいずれかのＡＤであり得る。
【０３３１】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは表４に記載の標的に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤＢＤは、表３に記載の１、２、３、４、５、１〜５、１〜１０個、または１０個を超えるＤドメイン配列を含む（例えば、配列番号４４〜１０７８、または１０７９）。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、表３に記載の１、２、３、４、５、１〜５、１〜１０個、または１０個を超える異なるＤドメイン配列を含む。
【０３３２】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＢＣＭＡ（例えば、配列番号５の配列を含むポリペプチド）に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、群：配列番号４４〜３３８、および３３９から選択されるＤＤ配列を含む。
【０３３３】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＣＳ１（例えば、配列番号１１３８の配列を含むポリペプチド）に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、群：配列番号７８０〜７９４、および７９５から選択されるＤＤ配列を含む。
【０３３４】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＨＥＲ２（例えば、配列番号４２の配列を含むポリペプチド）に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、群：配列番号８００〜８３９、および８４０から選択されるＤＤ配列を含む。
【０３３５】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＣＤ１２３（例えば、配列番号１１の配列を含むポリペプチド）に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、群：配列番号３４０〜７７２、および７７３から選択されるＤＤ配列を含む。
【０３３６】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＡＦＰ（例えば、配列番号１４または１５の配列を含むポリペプチド）に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＡＦＰ  ｐ２６（例えば、配列番号１６、１１１７、１１１８、１１１９、１１２０、１１２１、１１２２、または１１２３の配列を含むポリペプチド）に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、群：配列番号８４１〜９８３、および９８４から選択されるＤＤ配列を含む。
【０３３７】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＣＤ１３７（例えば、配列番号１０８１の配列を含むポリペプチド）に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤＢＤは、群：配列番号９８５〜９９０、および９９１から選択されるＤＤ配列を含む。
【０３３８】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはＣＤ４７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤＢＤは、群：配列番号９９２〜９９５、および９９６から選択されるＤＤ配列を含む。
【０３３９】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはＣＴＬＡ４に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号９９７のＤＤ配列を含む。
【０３４０】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはＤＲ５に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤＢＤは、群：配列番号９９８〜１００６、１０７０〜１０７２、および１０７３から選択されるＤＤ配列を含む。
【０３４１】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはＫＩＲに結合する。さらなる実施形態では、ＡＤＢＤは、群：配列番号１００７、１００８、および１００９から選択されるＤＤ配列を含む。
【０３４２】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはＰＤＬ１に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤＢＤは、群：配列番号１０１０〜１０１６、１０７４〜１０７８、および１０７９から選択されるＤＤ配列を含む。
【０３４３】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはＴＩＭ３に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１０１７のＤＤ配列を含む。
【０３４４】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはＰＤ１に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤＢＤは、群：配列番号１０１８、１０１９、および１０２０から選択されるＤＤ配列を含む。
【０３４５】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはＣＤ１３７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤＢＤは、群：配列番号９８５〜９９０、および９９１から選択されるＤＤ配列を含む。
【０３４６】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＣＤ１９（例えば、配列番号３の配列を含むポリペプチド）に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＣＤ２０（例えば、配列番号６〜９または１０の配列を含むポリペプチド）に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤＢＤは、群：配列番号１０３０〜１０５８、および１０５９から選択されるＤＤ配列を含む。
【０３４７】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＣＤ２２（例えば、配列番号４１の配列を含むポリペプチド）に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤＢＤは、群：配列番号１０６０〜１０６８、および１０６９から選択されるＤＤ配列を含む。
【０３４８】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは細胞内タンパク質に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤＢＤは、群：Ｔｙｋ２、Ｊａｋ１、Ｊａｋ２、Ｊａｋ３、ＬＣＫ、ＺＡＰ−７０、およびＧＲＢ２から選択される細胞内タンパク質に結合するＤＤ配列を含む。
【０３４９】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）（例えば、配列番号１１０６の残基２９〜７６６）に結合する。
【０３５０】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＣＤ２６（例えば、配列番号１１１３の残基２９〜７６６）に結合する。
【０３５１】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＣＤ３０（例えば、配列番号１１１４の残基１９〜３７９）に結合する。
【０３５２】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＣＤ３３（例えば、配列番号１１１５の残基１８〜２５９）に結合する。
【０３５３】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＣＤ３８（例えば、配列番号１１１６の残基４３〜３００）に結合する。
【０３５４】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、哺乳動物の癌または腫瘍に由来する腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）により免疫学的に認識される１つまたは複数の抗原性癌エピトープを含む腫瘍抗原または癌抗原に結合する。
【０３５５】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、免疫エフェクター細胞の表面上に発現しているＡＤに結合する。
【０３５６】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、天然のタンパク質またはその他の分子中に存在するＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ヒトに対し内在性であるＡＤに結合する。
【０３５７】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＣＡＲは、ＭＨＣ提示ペプチドに結合するＡＤＢＤ（例えば、抗体フラグメントまたはＡＳＢＤ）を含む。通常、内在性タンパク質由来のペプチドは、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）クラスＩ分子のポケットに入り、ＣＤ８＋Ｔリンパ球上のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）に認識される。ＭＨＣクラスＩ複合体は、全ての有核細胞により構成的に発現されている。癌では、ウイルス特異的および／または腫瘍特異的ペプチド／ＭＨＣ複合体が免疫療法のためのユニークな種類の細胞表面標的を提示する。ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）−Ａ１またはＨＬＡ−Ａ２との関連で、ウイルス性または腫瘍抗原決定基由来のペプチドを標的とするＴＣＲ様抗体が記載されている（例えば、Ｓａｓｔｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．８５（５）：１９３５−１９４２（２０１１）；Ｓｅｒｇｅｅｖａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １１７（１６）：４２６２−４２７２（２０１１）；Ｖｅｒｍａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８４（４）：２１５６−２１６５（２０１０）；Ｗｉｌｌｅｍｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．８（２１）：１６０１−１６０８（２００１）；Ｄａｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．５（１７６）：１７６ｒａ３３（２０１３）；Ｔａｓｓｅｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．１９（２）：８４−１００（２０１２）を参照されたい）。例えば、ＴＣＲ様抗体は、ライブラリー、例えば、ヒトｓｃＦｖファージディスプレイライブラリーの選別により特定できる。従って、いくつかの実施形態では、本開示は、細胞内で発現されるいずれかの上記腫瘍抗原、例えば、ｐ５３、ＢＣＲ−Ａｂ１、Ｒａｓ、Ｋ−Ｒａｓ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、およびｃ−ｍｅｔから選択されるＭＨＣ提示ペプチド分子に結合するＡＤＢＤを含むＣＡＲを提供する。
【０３５８】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、抗体またはその抗原結合フラグメントであるＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ｓｃＦｖであるＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、代替骨格結合ドメインであるＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＤドメインであるＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、Ｔ細胞受容体、またはその抗原結合フラグメントを含む。
【０３５９】
本明細書では、複数のＡＤＢＤを含むＣＡＲもまた提供される。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、複数の同じＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、複数の異なるＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、同じ抗原決定基に結合する複数のＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、結合ドメインが異なるＡＤに結合する複数のＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、結合ドメインが同じ細胞上の異なるＡＤに結合する複数のＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、結合ドメインが異なる細胞上の異なるＡＤに結合する複数のＡＤＢＤを含む。
【０３６０】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、複数の、例えば、２、３、４、５つの、または５つを超えるＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン、アフィボディ、またはｓｃＦｖ）を含み、各ＡＤＢＤは標的抗原に結合できる。一実施形態では、２つ以上のＣＡＲのＡＤＢＤが、異なるＡＤに結合できる。追加の実施形態では、２つ以上のＣＡＲのＡＤＢＤが、同じ抗原、例えば、同じ抗原上の同じまたは異なるエピトープに結合できる。一実施形態では、複数のＣＡＲのＡＤＢＤが相互に結合され、例えば、第１のＡＤＢＤのＣ末端が第２のＡＤＢＤのＮ末端に結合される。一実施形態では、第１のＡＤＢＤのＣ末端が、共有結合により、例えば、ペプチド結合により、第２のＡＤＢＤのＮ末端に結合される。
【０３６１】
いくつかの実施形態では、リンカーまたはヒンジ部は、１個または複数のＡＤＢＤの間に含まれ、例えば、リンカーまたはヒンジ部は第１のＡＤＢＤのＣ末端と、第２のＡＤＢＤのＮ末端との間に配置される。例えば、２つのＡＤＢＤ（例えば、ＡＤＢＤ１およびＡＤＢＤ２）を含む抗原結合メンバーは、次の構成で配置できる：［ＡＤＢＤ１］−［リンカー／ヒンジ］−［ＡＤＢＤ２］。ＡＤＢＤのＣ末端と次のＡＤＢＤのＮ末端との間に配置されるリンカーまたはヒンジ部を任意に用いて、追加のＡＤＢＤを類似の方法で付加できる。複数の抗原結合メンバーの連結に好適するリンカーまたはヒンジ部は、可撓性で、切断可能でなく、その他のＡＤＢＤとは無関係に各ＡＤＢＤのほぼ自由な運動を可能として、複数の標的ＡＤとの結合を容易にする。当該技術分野において既知の任意の可撓性リンカーまたはヒンジ部を使用できる。リンカーの例には、グリシンおよびセリン残基を含むペプチドリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）ｎが挙げられ、式中ｎは、１以上の正の整数、例えば、ｎ＝１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０である（配列番号４３）。
【０３６２】
ＶＩｂ．細胞外スペーサードメイン
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは細胞外スペーサードメインを含む。本明細書で使用される場合、用語の「細胞外スペーサードメイン」または「ＥＳＤ」は、ＡＤＢＤと膜貫通ドメインとの間に配置されたＣＡＲのポリペプチド配列を意味する。ある実施形態では、細胞外スペーサードメインは、細胞の外表面およびＡＤＢＤから十分な距離、ならびに細胞とＡＤＢＤとの間の立体障害を最小化する可撓性を可能とする。
【０３６３】
特定の実施形態では、細胞外スペーサードメインは、充分に短くまたは可撓性があり、ＣＡＲを含む細胞のＡＤ保有細胞、例えば、標的細胞との結合を妨害しない。ある実施形態では、細胞外スペーサードメインは、２〜２０、５〜１５、７〜１２、または８〜１０アミノ酸長さである。いくつかの実施形態では、ＥＳＤドメインは、少なくとも５０、２０、または１０個の残基を含む。いくつかの実施形態では、ＥＳＤは、１０〜３００、１０〜２５０、または１０〜２００残基長さである。
【０３６４】
いくつかの実施形態では、ＥＳＤが細胞から伸びる距離は、充分に短く、ヒンジはＣＡＲのＡＤＢＤと標的細胞の表面との結合を妨害しない。いくつかの実施形態では、ＥＳＤドメインは、細胞傷害性細胞の表面から、２０、１５、または１０ナノメートル未満伸びる。従って、ＥＳＤの適合性は、ＥＳＤの直線長さ、アミノ酸残基の数および可撓性により影響され得る。例えば、ＩｇＧ４  ＥＳＤは、２００アミノ酸の長さであり得るが、細胞傷害性細胞から伸びる距離は、Ｉｇドメインフォールディングのために、より小さい。ＣＤ８  αＥＳＤは、約８ｎｍ長さで約４３アミノ酸である。対照的に、ＩｇＧ４  Ｃ２＆Ｃ３  ＥＳＤは、約２００アミノ酸長さであるが、ＣＤ８  αＥＳＤと同等の細胞傷害性細胞表面からの距離を有する。理論に束縛されるものではないが、延長の類似性は、可撓性により影響を受ける。
【０３６５】
いくつかの実施形態では、細胞外スペーサードメインには、限定されないが、抗体またはそのフラグメントもしくは誘導体のＦｃフラグメント、抗体またはそのフラグメントもしくは誘導体のヒンジ部、抗体のＣＨ２領域、抗体のＣＨ３領域、人工スペーサー配列、またはそれらの組み合わせが挙げられる。細胞外スペーサードメインの追加の例には、限定されないが、ＣＤ８ａヒンジ、およびＧｌｙ３程度に小さくてもよいポリペプチドから作られる人工スペーサー、またはＩｇＧ（ヒトＩｇＧ４など）のＣＨ１およびＣＨ３ドメインが挙げられる。いくつかの実施形態では、細胞外スペーサードメインは、（ｉ）ＩｇＧ４のヒンジ部、ＣＨ２およびＣＨ３領域、（ｉｉ）ＩｇＧ４のヒンジ部、（ｉｉｉ）ＩｇＧ４のヒンジ部およびＣＨ２、（ｉｖ）ＣＤ８ａのヒンジ部、（ｖ）ＩｇＧ１のヒンジ部、ＣＨ２、およびＣＨ３領域、（ｖｉ）ＩｇＧ１のヒンジ部、または（ｖｉ）ＩｇＧ１のヒンジ部およびＣＨ２、の内のいずれか１つまたは複数である。その他の細胞外スペーサードメインは、当業者に明らかであり、本明細書で提供される代替実施形態に関連して使用され得る。
【０３６６】
いくつかの実施形態では、ＥＳＤは、天然の配列である。いくつかの実施形態では、ＣＡＲのＥＳＤは、ヒトタンパク質、そのフラグメント、またはショートオリゴまたはポリペプチドリンカー由来のＥＳＤに対応する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ  ＥＳＤは、ヒトＩｇ（免疫グロブリン）ＥＳＤ（ヒンジ）、またはそのフラグメントに対応する。一実施形態では、ＥＳＤは、ＩｇＧ４  ＥＳＤのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一実施形態では、例えば、ヒンジは、ＩｇＤヒンジのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。いくつかの実施形態では、ヒンジは、ヒトＣＤ８ヒンジ、またはそのフラグメントであり得る。一実施形態では、例えば、ヒンジは、ＣＤ８ヒンジのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。
【０３６７】
いくつかの実施形態では、ＥＳＤは、人工の配列である。一実施形態では、ＥＳＤは、グリシン−セリンダブレットを含むショートオリゴリンカーである。
【０３６８】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは細胞外スペーサードメインを含まない。
【０３６９】
ＶＩｃ．膜貫通ドメイン
本明細書で使用される場合、用語の「膜貫通ドメイン」（ＴＭＤ）は、ＣＡＲなどの、細胞膜を貫通する細胞表面発現タンパク質の領域を意味する。いくつかの実施形態では、ＴＭＤは、細胞外配列、例えば、細胞外のＡＤＢＤと、細胞内配列、例えば、細胞内シグナル伝達ドメインを繋ぐ。いくつかの実施形態では、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、膜貫通タンパク質（例えば、Ｉ型膜貫通タンパク質）、人工疎水性配列、またはそれらの組み合わせの膜貫通領域である。その他の膜貫通ドメインが当業者に明白であり、本発明の代替の実施形態に関連して使用され得る。
【０３７０】
ＣＡＲは、受容体の細胞外ドメインに融合される膜貫通ドメインを含むように設計できる。上述のように、細胞外ドメインおよび膜貫通ドメインの融合は、リンカーを用いて、またはリンカーなしで達成できる。一実施形態では、天然でＣＡＲ中のドメインの１つと結合している膜貫通ドメインが使用される。特定の実施形態では、ＣＡＲ中の膜貫通ドメインは、ＣＤ８膜貫通ドメインである。いくつかの事例では、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、ＣＤ８ヒンジドメインを含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは、他の表面膜タンパク質と結合を促進または抑制するように、アミノ酸置換により選択または改変される。
【０３７１】
膜貫通ドメインは、天然または合成供給源から誘導できる。供給源が天然である場合、ドメインは任意の膜結合型または膜貫通型タンパク質から誘導できる。本明細書の目的のための特定の用途の膜貫通領域は、群：Ｔ細胞受容体のα、βまたはζ鎖；ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７およびＣＤ１５４から選択されるメンバーから誘導し得る（すなわち、少なくとも膜貫通領域を含む）。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは、ＮＫＲの膜貫通領域由来である。さらなる実施形態では、膜貫通ドメインは、ＫＩＲＤＳ２、ＯＸ４０、ＴＮＦＲ２、ＬＦＡ１（ＣＤ１１ａ、ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ、４１ＢＢ、ＧＩＴＲ、ＬＴＢＲ、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＩＬ２Ｒβ、ＩＬ２Ｒγ、ＩＬ７Ｒα、ＩＴＧＡ１、ＩＴＧＡ４、ＩＴＧＡ６、ＩＴＧＡＤ、ＩＴＧＡＥ、ＩＴＧＡＬ、ＩＴＧＡＭ、ＩＴＧＢ７、ＶＬＡ１、ＶＬＡ６、ＩＡ４、ＩＴＧＡＸ、ＣＤ１１ｃ、ＩＴＧＢ１  ＣＤ２７、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＣＤ２、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｄ、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ４０、ＣＤ４９ａ、ＣＤ４９ｄ、ＣＤ４９ｆ、ＣＤ８４、ＣＤ９６、ＣＤ１００、ＣＤ１０３、ＣＤ１６０、ＣＤ１６２、ＣＤ２２６、ＣＤ２２９、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、ＰＳＧＬ１、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１）、ＳＬＡＭＦ４、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ−Ａ、Ｌｙ１０８）、ＳＬＡＭＦ７、ＳＬＡＭＦ８、ＳＥＬＰＬＧ、およびＰＡＧ／Ｃｂｐからなる群より選択される分子の膜貫通領域に由来する。あるいは、膜貫通ドメインは、合成でき、主に、ロイシンおよびバリンなどの疎水性残基を含むのが好ましい。さらなる実施形態では、膜貫通ドメインは、膜貫通ドメインの核末端に三つ組のＦＷＶ（フェニルアラニン、トリプトファンおよびバリン）を含む。
【０３７２】
代表的ＮＫＲドメイン、例えば、膜貫通、ヒンジまたはステム、または細胞内（例えば、細胞質ドメイン）ドメイン（そのドメインが誘導されるＮＫＲにより特定される）キラー免疫グロブリンＫＩＲ２ＤＬ１受容体（ＫＩＲ）には、ＫＩＲ２ＤＬ２／Ｌ３、ＫＩＲ２ＤＬ４、ＫＩＲ２ＤＬ５Ａ、ＫＩＲ２ＤＬ５Ｂ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＩＲ２ＤＳ２、ＫＩＲ２ＤＳ３、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＫＩＲ２ＤＳ５、ＫＩＲ３ＤＬ１／Ｓ１、ＫＩＲ３ＤＬ２、ＫＩＲ３ＤＬ３、ＫＩＲ２ＤＰ１、ＫＩＲ２ＤＰ１、ＮＣＲｓ：ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６、ＳＬＡＭ；受容体ＳＬＡＭ、ＣＤ４８、ＣＤ２２９、２Ｂ４、ＣＤ８４、ＮＴＢ−Ａ、ＣＲＡＣＣ、ＢＬＡＭＥ、ＣＤ２Ｆ−１０、ＳＬＡＭＦ６、ＳＬＡＭＦ７；Ｆｃ結合受容体ＣＤ１６、ＦｃｇＲＩＩＩ、ＣＤ６４、Ｌｙ４９；受容体Ｌｙ４９、レクチン関連ＮＫ  Ｌｙ４９Ａ細胞受容体、Ｌｙ４９Ｃ；その他のＮＫ受容体ＮＫＧ２Ｄ、ＣＤ１６０（ＴＭ含有スプライスバリアント）ＤＮＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、ＣＤ２７、ＰＳＧＬ１、ＣＤ９６、ＣＤ１００、ＮＫｐ８０、ＣＥＡＣＡＭ１、およびＣＤ２４４が挙げられる。
【０３７３】
ＶＩｄ．細胞内シグナル伝達ドメイン
本明細書で記載されるのは、本発明によるキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）に使用できる細胞内シグナル伝達ドメインである。
【０３７４】
本明細書で使用される場合、「細胞内シグナル伝達ドメイン」（ＩＳＤ）または「細胞質ドメイン」は、エフェクター機能シグナルを伝達し、細胞にその特殊化された機能（例えば、細胞溶解活性およびサイトカイン分泌を含むヘルパー活性）を実施するように指示するＣＡＲの一部を意味する。
【０３７５】
ＣＡＲの細胞質ドメイン（すなわち、細胞内シグナル伝達ドメイン）は、ＣＡＲを発現するように遺伝子改変された免疫細胞の少なくとも１つの通常のエフェクター機能の活性化に関与する。用語の「エフェクター機能」は、細胞の特殊化された機能を意味する。Ｔ細胞のエフェクター機能は、例えば、細胞溶解活性およびサイトカインの分泌を含むヘルパー活性を含む。従って、用語の「細胞内シグナル伝達ドメイン」は、エフェクター機能シグナルを伝達し、細胞にその特殊化された機能を実施するように指示する、ＣＡＲタンパク質の一部を意味する。通常、天然の受容体に対応する全細胞内シグナル伝達ドメインを用いることができるが、多くの事例では、全部の系統を使用することが必須ではない。細胞内シグナル伝達ドメインの短縮部分が使用できる程度に応じて、それがエフェクター機能シグナルを伝達する限り、このような短縮部分を無傷の系統の代わりに使用できる。用語の細胞内シグナル伝達ドメインは、従って、エフェクター機能シグナルを伝達するのに十分な細胞内シグナル伝達ドメインのいずれかの短縮部分を含むことが意図されている。一実施形態では、ＣＡＲ中の細胞内シグナル伝達ドメインは、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）の細胞質配列および抗原受容体結合後に呼応してシグナル伝達を開始するように機能する共受容体の配列、または機能的能力を有するこれらの配列の任意の誘導体または変異体も含む。エフェクター機能シグナルを伝達するドメインの例としては、限定されないが、Ｔ細胞受容体複合体のζ鎖またはそのホモログのいずれか（例えば、η鎖、ＦｃｓＲ１ｙおよびβ鎖、ＭＢ１（Ｉｇａ）鎖、Ｂ２９（Ｉｇ）鎖など）、ヒトＣＤ３ゼータ鎖、ＣＤ３ポリペプチド（Δ、δ、およびε）、ｓｙｋファミリーチロシンキナーゼ（Ｓｙｋ、ＺＡＰ７０など）、ｓｒｃファミリーチロシンキナーゼ（Ｌｃｋ、Ｆｙｎ、Ｌｙｎなど）、ならびにＣＤ２、ＣＤ５、およびＣＤ２８などのＴ細胞形質導入に関与する他の分子が挙げられる。
【０３７６】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、融合される細胞外ドメイン（例えば、ＡＤＢＤ）が同族ＡＤに結合する場合、細胞内シグナルを生成する。ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、プライマリ細胞内シグナル伝達ドメインおよび共刺激シグナル伝達ドメインを含み得る。一実施形態では、ＣＡＲは、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞またはＮＫ細胞）中で発現するために構築され、発現したＣＡＲは、プライマリ細胞内シグナル伝達ドメインおよび／または共刺激シグナル伝達ドメインなどのドメインを含み、これは通常、免疫細胞に関連するポリペプチドから誘導される。例えば、いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、Ｔ細胞中での発現のためであり、４１ＢＢドメインおよびＣＤ３ゼータドメインを含む。別の実施形態では、ＣＡＲ分子は、免疫細胞中で発現するために構築され、発現したＣＡＲは通常、免疫細胞に関連しないポリペプチドから誘導されるドメインを含む。例えば、いくつかの実施形態では、Ｔ細胞中での発現のためのＣＡＲは、ＮＫ細胞から誘導されるＫＩＲドメインを含む。代替的実施形態では、ＮＫ細胞中での発現のためのＣＡＲは、Ｔ細胞から誘導される４１ＢＢドメインおよびＣＤ３ゼータドメインを含む（例えば、国際公開第２０１３／０３３６２６号を参照されたい。この特許は参照により本明細書に組み込まれる）。
【０３７７】
ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、例えば、融合されるＡＤＢＤが同族ＡＤに結合する場合、細胞内シグナルを生成するのに十分な一次刺激分子配列を含む。特定の実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナルは、群：増殖、サイトカイン分泌、死滅、活性化、および分化から選択されるＴ細胞応答を媒介する。
【０３７８】
一実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達は、免疫受容体チロシン活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含むドメインを含む。さらなる実施形態では、ＣＡＲ細胞内シグナル伝達領域は、ＴＣＲζ（ＣＤ３ζ）、ＦｃＲγ（ＦＣＥＲ１Ｇ）、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃＲβ（ＦＣＥＲ１Ｂ）、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ５、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＣＤ３２（ＦｃγＲＩＩａ）、ＣＤ７９ａ、およびＣＤ７９ｂから選択される分子由来のＩＴＡＭ含有ドメインを含む。特定の実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインを含む。別の特定の実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、ＤＡＰ１２シグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、シグナル伝達ドメインを含むＩＴＡＭは、天然ＩＴＡＭ含有ドメインの対応する残基に対し、少なくとも７０、７５、８０、８５、９０、９５、９８、または９９％の配列同一性を有するか、または３０、２５、２０、１５、１０、５、４、３、２、または１アミノ酸残基以下だけ異なる。
【０３７９】
本発明における特定の用途に使われる一次細胞質のシグナル伝達配列を含むＩＴＡＭの例には、ＴＣＲζ、ＦｃＲγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、およびＣＤ６６ｄから誘導されるものが挙げられる。ＣＡＲ中の細胞質シグナル伝達分子は、ＣＤ３ゼータ由来の細胞質のシグナル伝達配列を含むことが特に好ましい。
【０３８０】
好ましい実施形態では、ＣＡＲの細胞質ドメインは、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン単独またはＣＡＲとの関連で有用ないずれか他の望ましい細胞質ドメインと組み合わせて含む。例えば、ＣＡＲの細胞質ドメインは、ＣＤ３ゼータ鎖部分および共刺激シグナル伝達領域を含み得る。共刺激シグナル伝達領域は、共刺激分子の細胞内ドメインを含むＣＡＲの一部を指す。共刺激分子は、リンパ球の抗原に対する効率的反応に必要な抗原受容体またはそれらのリガンド以外の細胞表面分子である。このような分子の例には、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４１ＢＢ（ＣＤ  １３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原１（ＬＦＡ１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７Ｈ３、ＴＩＭ１、およびＬＡＧ３が挙げられる。
【０３８１】
本明細書で使用される場合、「共刺激ドメイン」（ＣＳＤ）は、メモリー細胞の増殖、生存、および／または発生を高めるＣＡＲの一部を指す。ＣＡＲは、１つまたは複数の共刺激ドメインを含み得る。それぞれの共刺激ドメインは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ１３７（４１ＢＢ）、ＣＤ１３４（ＯＸ４０）、Ｄａｐ１０、ＣＤ２７、ＣＤ２、ＣＤ５、ＩＣＡＭ１、ＬＦＡ１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、Ｌｃｋ、ＴＮＦＲＩ、ＴＮＦＲＩＩ、Ｆａｓ、ＣＤ３０、およびＣＤ４０、またはこれらの組み合わせから選択されるＴＮＦＲスーパーファミリーのメンバーの内のいずれか１つまたは複数の共刺激ドメインを含む。他の共刺激ドメイン（例えば、他のタンパク質由来の）は、当業者に明らかであり、本発明の代替の実施形態に関連して使用され得る。
【０３８２】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、融合される細胞外のＡＤＢＤが同族リガンドに結合する場合にＩＴＡＭ含有ドメインおよび細胞内シグナルを生成するのに十分な共刺激分子の機能性断片または類似体を含む共刺激シグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１３７（４１ＢＢ）、ＯＸ４０、ＬＩＧＨＴ、ＴＮＦＲ２、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＧＩＴＲ、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ、Ｂ７Ｈ３、ＣＤＳ、ＩＬ２Ｒβ、ＩＬ２Ｒγ、ＩＬ７Ｒα、ＩＴＧＡ４、ＩＴＧＡ６、ＩＴＧＡＤ、ＩＴＧＡＥ、ＩＴＧＡＬ、ＩＴＧＡＭ、ＩＴＧＡＸ、ＩＴＧＢ１、ＩＴＧＢ２、ＩＴＧＢ７、ＶＬＡ１、ＶＬＡ６、Ｃ４９ｆ、ＩＡ４、ＬＦＡ１、ＣＤ２、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ８α、ＣＤ８β、ＣＤ１ｌＡ、ＣＤ１１Ｂ、ＣＤ１１Ｃ、ＣＤ１１Ｄ、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ２９、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ４９Ａ、ＣＤ４９Ｄ、ＣＤ６９、ＣＤ８４、ＣＤ９６、ＣＤ１００、ＣＤ１０３、ＣＤ１５０、ＣＤ１６０、ＣＤ１６２、ＣＤ２２６、ＣＤ２２９、ＣＤ２７８、ＩＣＡＭ１、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、ＰＳＧＬ１、ＳＬＡＭＦ１、ＳＬＡＭＦ４、ＳＬＡＭＦ６、ＳＬＡＭＦ７、ＳＬＡＭＦ８、ＬＴＢＲ、ＬＡＴ、ＧＡＤＳ、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＳＬＰ７６、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６およびＮＫｐ８０から選択される分子で見出されるものに対応する共刺激シグナル伝達ドメインを含む。
【０３８３】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、４１ＢＢ、ＣＤ２８、ＣＤ２７、ＩＣＯＳ、およびＯＸ４０からなる群から選択される分子で見出されるものに対応する共刺激ドメインを含む。
【０３８４】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、複数の共刺激ドメインを含む。特定の実施形態では、ＣＡＲは、次の共刺激シグナル伝達ドメイン（細胞外から細胞内の方向に）：４１ＢＢ−ＣＤ２７、ＣＤ２７−４１ＢＢ、４１ＢＢ−ＣＤ２８、ＣＤ２８−４１ＢＢ、ＯＸ４０−ＣＤ２８、ＣＤ２８−ＯＸ４０、ＣＤ２８−４１ＢＢ；または４１ＢＢ−ＣＤ２８を含む。
【０３８５】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲの共刺激シグナル伝達ドメインは、天然共刺激ドメインの対応する残基に対し、少なくとも７０、７５、８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、または９９％の配列同一性を有するか、または３０、２５、２０、１５、１０、５、４、３、２、または１アミノ酸残基以下だけ異なる。
【０３８６】
ポリペプチドリンカーは、ＣＡＲの隣接要素の間に配置され得る。例えば、リンカーは、隣接するＡＤＢＤ間またはＡＤＢＤと膜貫通ドメインとの間、または膜貫通ドメインと細胞質ドメインとの間または隣接細胞質ドメイン間に配置され得る。ＣＡＲの細胞質シグナル伝達部分内の細胞質シグナル伝達配列は、相互にランダムにまたは指定の順に結合され得る。任意選択で、ショートリンカー、好ましくは、２〜１０アミノ酸長さのリンカーが結合を形成し得る。グリシン−セリンダブレットは、特に好適なリンカーを与える。
【０３８７】
ＶＩｅ．ＣＡＲの発現
ＣＡＲは意図的に細胞結合し、それらが細胞中で発現されている状態で使用される。１つの特定の実施形態は、ＣＡＲを発現するように形質導入されているＴ細胞の養子細胞移入戦略に関する。好ましくは、細胞は、その表面上に安定にＣＡＲを発現するように遺伝子改変でき、ＭＨＣから独立した新規標的特異性を付与する。
【０３８８】
ウイルスが遺伝子導入に用いられ、哺乳動物細胞ゲノムに統合される各種用途で、種々のウイルス由来ベクターを使用できる。ベクターとして有用なウイルスには、限定されないが、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス、およびレンチウイルスが挙げられる。レンチウイルスベクターは、長期遺伝子導入（例えば、養子Ｔ細胞免疫療法）を達成するのに特に好適である。理由は、それらが、長期の、安定な導入遺伝子の組み込みおよび娘細胞へのその伝播を可能とするためである。レンチウイルスベクターは、肝細胞などの非増殖細胞を形質導入できるという点で、マウス白血病ウイルスなどのオンコレトロウイルス由来のベクターに比べて、さらなる利点を有する。それらはまた、低免疫原性というさらなる利点も有する。一般に、好適なベクターは、少なくとも１つの生物で機能的な複製起点、プロモーター配列、簡便な制限エンドヌクレアーゼ部位、および１つまたは複数の選択可能マーカーを含む（例えば、国際公開第０１／９６５８４号および同第０１／２９０５８号；および米国特許第６，３２６，１９３号）。数個のベクタープロモーター配列は、導入遺伝子の発現に利用できる。好適なプロモーターの一例は、最初期のサイトメガロウィルス（ＣＭＶ）プロモーター配列である。このプロモーター配列は、それに動作可能に連結された任意のポリヌクレオチド配列の高レベルの発現を推進できる強力な構成的プロモーター配列である。好適なプロモーターの別の例は、ＥＦ−１ａである。しかし、その他の構成的プロモーター配列も使用でき、これらには、限定されないが、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）初期プロモーター、マウス乳房腫瘍ウイルス（ＭＭＴＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）長末端反復配列（ＬＴＲ）プロモーター、ＭｏＭｕＬＶプロモーター、トリ白血病ウイルスプロモーター、エプスタイン・バールウイルス最初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモーター、ならびに限定されないが、アクチンプロモーター、ミオシンプロモーター、ヘモグロビンプロモーター、およびクレアチンキナーゼプロモーターなどのヒト遺伝子プロモーターが挙げられる。誘導性プロモーターには、限定されないが、メタロチオネインプロモーター、グルココルチコイドプロモーター、プロゲステロンプロモーター、およびテトラサイクリンプロモーターが挙げられる。
【０３８９】
ＣＡＲポリペプチドまたはその一部の発現を評価するために、細胞中に導入された発現ベクターはまた、選択可能マーカー遺伝子またはレポーター遺伝子のいずれかまたは両方を含み、ウイルスベクターによる遺伝子導入または感染を試みている細胞集団からの発現細胞の特定および選択を容易に可能とする。他の態様では、選択可能マーカーは、別のＤＮＡ部分に対し実施し、同時遺伝子導入手順で使用し得る。両方の選択可能マーカーおよびレポーター遺伝子は、適切な調節配列に隣接し、宿主細胞中で発現を可能にし得る。有用な選択可能マーカーには、例えば、ネオなどの抗生物質耐性遺伝子が含まれ、その他のものは、当該技術分野において既知である。
【０３９０】
本発明のＴ細胞の増殖および遺伝子改変の前に、Ｔ細胞源が対象から取得される。Ｔ細胞は、末梢血単核球、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位由来組織、腹水、胸水、脾臓組織、および腫瘍を含む多くの供給源から得ることができる。本明細書で提供される特定の実施形態では、当該技術分野において利用できる任意の数の細胞株を用い得る。
【０３９１】
Ｔ細胞単離、培養、活性化および増殖の完全な考察は、国際公開第２０１２／０７９０００号で見つけ得る。この内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０３９２】
さらに、本明細書で記載のＣＡＲをコードする核酸を含む宿主細胞が提供される。ＣＡＲをコードする核酸配列を含む組成物がさらに提供される。
【０３９３】
ＶＩＩ．キメラ抗原受容体細胞
本開示は、１つまたは複数の異なるＣＡＲを発現するように改変された細胞の特異性および活性を調節する組成物および方法を提供する。
【０３９４】
いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書で記載の１個または複数のＣＡＲを発現するように遺伝子改変される。このようなＣＡＲ含有細胞は、「ＣＡＲ細胞」と呼ばれ、単剤療法および、例えば、標的細胞を死滅させるために、本明細書で記載のアダプターなどのその他の治療薬を含む併用療法で使用する。
【０３９５】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ＣＡＲをコードする核酸配列を含み、ＣＡＲは、少なくとも部分的に、着目標的に結合するＡＤＢＤから構成される細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、およびシグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、コードされたＣＡＲポリペプチドは、腫瘍抗原に特異的に結合する（従って、ＣＡＲ発現細胞を腫瘍に送達するように機能する）。いくつかの実施形態では、ＣＡＲにより結合された腫瘍抗原は、血液系腫瘍に関連する。さらなる実施形態では、ＣＡＲにより結合された腫瘍抗原は、固形腫瘍に関連する。さらなる実施形態では、ＣＡＲは、固形腫瘍および血液腫瘍の両方に結合するように遺伝子改変される。実施形態に応じて、ＣＡＲ発現細胞は、免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー（ＮＫ）細胞）または別の細胞型であり得る。いくつかの実施形態では、細胞（Ｔ細胞、ＮＫ細胞または他の細胞型のいずれでも）は、ＣＡＲの抗原結合ドメインがその標的抗原に結合すると、抗腫瘍免疫性を示す。
【０３９６】
いくつかの実施形態では、増幅および遺伝子改変またはその他の改変の前に、細胞源（例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）は、当該技術分野において既知の技術を使用して通常の方法で対象から得ることができる。用語の「対象」は、免疫反応が誘発される任意の生物体（例えば、哺乳動物）を含むことが意図されている。Ｔ細胞は、限定されないが、末梢血単核球、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位由来組織、腹水、胸水、脾臓組織、および腫瘍を含む供給源から得ることができる。
【０３９７】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、例えば、ＣＡＲのＡＤＢＤが、標的細胞の表面上および／またはアダプター中に存在し得るＡＤと相互作用する場合、標的細胞を死滅させることができる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、例えば、ＣＡＲのＡＤＢＤが、標的細胞の表面上および／またはアダプター中に存在し得るＡＤと相互作用する場合、脱顆粒することができる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、例えば、ＣＡＲのＡＤＢＤが、標的細胞の表面上および／またはアダプター中に存在し得るＡＤと相互作用する場合、サイトカインを分泌できる。
【０３９８】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ含有細胞は免疫細胞である。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ含有細胞は免疫エフェクター細胞である。さらなる実施形態では、ＣＡＲ含有免疫細胞は、細胞傷害性細胞である。さらなる実施形態では、細胞傷害性細胞は、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、または培養ＮＫ細胞（例えば、ＮＫ９２細胞）から選択される。
【０３９９】
特定の実施形態では、免疫エフェクター細胞は、免疫グロブリンまたはその他のペプチド結合分子のための細胞表面受容体、例えば、免疫グロブリン定常領域のための受容体、および一般に「Ｆｃ受容体」（「ＦｃＲ」）と呼ばれる受容体クラスを含む受容体を含む。制限されたサブセットの免疫グロブリン重鎖アイソタイプと相互作用する特定の能力を有するＦｃＲ、または種々の親和性でＦｃドメインと相互作用するＦｃＲ、および／または特定の条件下で制限されたサブセットの免疫エフェクター細胞上で発現し得るＦｃＲを含む、多数のＦｃＲが構造上および／または機能的に特徴付けられてきており、当技術分野において既知である（例えば、Ｋｉｊｉｍｏｔｏ−Ｏｃｈｉｃｈａｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｌｉｆｅ．Ｓｃｉ．５９：６４８（２００２）；Ｄａｖｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２６６：８５（２００２）；Ｐａｗａｎｋａｒ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ａｌｌｅｒｇ．Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：３（２００１）；Ｒａｄａｅｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３８：１０７３（２００２）；Ｗｕｒｚｂｕｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３８：１０６３（２００２）；Ｓｕｌｉｃａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：３７１（２００１）；Ｕｎｄｅｒｈｉｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：８２５（２００２）；Ｃｏｇｇｅｓｈａｌｌ，Ｃｕｒｒ．Ｄｉｒ．Ａｕｔｏｉｍｍ．５：１（２００２）；Ｍｉｍｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．４９５：４９（２００１）；Ｂａｕｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．４９５：２１９（２００１）；Ｓａｎｔｏｓｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｔａｌ．Ｈｅａｒｔ  Ｊ．２：８１１（２００１）；Ｎｏｖａｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：７２１（２００１）；Ｆｏｓｓａｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．３１：８２１（２００１））、これらのそれぞれの文献の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０４００】
ＡＤＣＣを媒介できる細胞は、免疫エフェクター細胞の例である。その他の免疫エフェクター細胞には、ナチュラルキラー細胞、腫瘍浸潤性Ｔリンパ球（ＴＩＬ）、細胞傷害性Ｔリンパ球、およびアレルギー反応機構を含む細胞などの顆粒球細胞が挙げられる。従って、免疫エフェクター細胞には、限定されないが、骨髄およびリンパ系内の種々の分化段階の細胞を含む造血起源の細胞ならびにＴリンパ球、Ｂリンパ球、ＮＫ細胞、単球、マクロファージ、樹状細胞、好中球、好塩基球、好酸球、マスト細胞、血小板、赤血球、および前駆物質、前駆細胞（例えば、造血幹細胞）、ならびにこれら細胞の休止、活性化、および成熟型などの１つまたは複数のタイプの機能細胞表面ＦｃＲを発現し得る（発現しなくてもよい）細胞が挙げられる。その他の免疫エフェクター細胞には、免疫機能を媒介できる非造血起源の細胞、例えば、内皮細胞、ケラチノサイト、線維芽細胞、破骨細胞、上皮細胞、およびその他の細胞が挙げられ得る。免疫エフェクター細胞にはまた、細胞傷害性または細胞分裂停止イベント、またはエンドサイトーシス、食作用性、または飲作用イベントを媒介する細胞、またはアポトーシスの誘導をもたらす細胞、または微生物の免疫性または微生物感染の中和をもたらす細胞、またはアレルギー性、炎症性、過敏症および／または自己免疫反応を媒介する細胞が挙げることができる。
【０４０１】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ含有細胞はＴ細胞である。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ含有細胞はＮＫ細胞である。さらなる実施形態では、ＣＡＲ含有細胞はＢ細胞である。その他の免疫細胞、および／または異なる免疫細胞型の組み合わせを、任意選択で使用できる。いくつかの実施形態では、細胞型の組み合わせ（例えば、ＮＫ細胞とＴ細胞）は有利である。理由は、それらが相乗的に作用して、疾患または状態（例えば、癌などの過剰増殖疾患）を治療するためである。組み合わせが使用される場合、種々の細胞型は、同じ、異なる、または重複した腫瘍抗原決定基を標的にできる。
【０４０２】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ含有免疫細胞はＴ細胞であり、ＣＡＲのＡＤＢＤの同族リガンド（すなわち、着目標的）への結合は、Ｔ細胞を刺激して細胞内シグナル伝達を開始させる。さらなる実施形態では、ＣＡＲのＡＤＢＤの同族のリガンドへの結合は、Ｔ細胞を刺激して、サイトカインを生成させ、脱顆粒させて、その表面上に着目標的（例えば、癌細胞）を発現している細胞に対する細胞傷害性効果をもたらす。さらなる実施形態では、ＣＡＲ含有Ｔ細胞は、着目標的への結合に反応して増殖する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ含有Ｔ細胞の活性は、Ｔ細胞枯渇に関連する表現型を示すＴ細胞をもたらさない。ＣＡＲ細胞がＴ細胞であるいくつかの実施形態では、ＣＡＲの膜貫通ドメインは４１ＢＢまたはＣＤ２８を含み、細胞質ドメインはＴ細胞受容体アルファ、ベータ、またはゼータ鎖を含む。
【０４０３】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ含有細胞は、ＮＫ細胞であり、膜貫通ドメインはＣＤ２８を含み、細胞質ドメインはＴ細胞受容体のゼータ鎖を含む。
【０４０４】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ含有免疫細胞は、癌細胞により発現された着目標的に結合するように遺伝子改変されている。さらなる実施形態では、ＣＡＲ含有細胞は、群：ＣＤ１３７、ＰＤＬ１、ＣＤ１２３、ＣＴＬＡ４、ＣＤ４７、ＫＩＲ、ＤＲ５、ＴＩＭ３、ＰＤ１、ＥＧＦＲ、ＴＣＲ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＲＯＲ１、メソテリン、ＣＤ３３、ＩＬ３Ｒａ、ｃＭｅｔ、ＰＳＭＡ、糖脂質Ｆ７７、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＧＤ２、ＮＹ−ＥＳＯ−１、およびＭＡＧＥ  Ａ３から選択される腫瘍抗原に結合する。さらなる実施形態では、ＣＡＲ含有細胞は、２、３、４、５個またはそれを超える上記腫瘍抗原に結合する。
【０４０５】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞のＣＡＲは、２つ以上の着目標的に結合する。さらなる実施形態では、ＣＡＲは、配列番号１７〜２６、または２７のアミノ酸を含む第２のポリペプチドをさらに含み、該ポリペプチドは、癌細胞により発現された第２の着目標的に特異的に結合でき、第２のポリペプチドの第２の着目標的への特異的結合は、配列番号１によるポリペプチドの第２の着目標的に対する結合よりも強力である。
【０４０６】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、本明細書で開示のアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）を発現するように遺伝子改変される。
【０４０７】
さらなる実施形態では、ＣＡＲ細胞は、第２のＣＡＲを発現するように遺伝子改変される。いくつかの実施形態では、第２のＣＡＲは、ＡＤＢＤ、膜貫通ドメイン、および細胞内シグナル伝達ドメインを含む細胞外ドメインを含む。さらなる実施形態では、第２のＣＡＲは、同じまたは異なる特異性を有する１つまたは複数のＡＤＢＤ（例えば、本明細書のセクションＶＩおよびセクションＸＩに記載のように）から構成される細胞外ドメインからなる。いくつかの実施形態では、第２のＣＡＲは、着目標的に結合時に、エフェクター機能シグナルを伝達できる。さらなる実施形態では、第２のＣＡＲは、ＡＤＢＤ、および膜貫通ドメイン、または他の細胞表面結合ドメインを含む細胞外ドメインを含むが、着目標的に対し結合時にシグナル伝達できない。
【０４０８】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ＣＡＲコード配列が対応する宿主細胞中の高度発現遺伝子の座位に特異的に導入される部位となるように、遺伝子改変される。いくつかの実施形態では、ＣＡＲコード配列は、Ｔ細胞受容体座位に導入される。さらなる実施形態では、ＣＡＲコード配列は、細胞のＴ細胞受容体αサブユニット定常遺伝子（ＴＲＡＣ）に導入される。機能的ＴＣＲおよび／またはＨＬＡの発現を欠く改変細胞は、例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ＣＲＩＳＰＲ、ＴＡＬＥＮ、および／またはＺＦＮを含む、当該技術分野において既知の任意の好適な手段を使用して定常作業により得ることができる。
【０４０９】
いくつかの実施形態では、免疫エフェクター細胞は、同種免疫エフェクター細胞、例えば、Ｔ細胞またはＮＫ細胞であり得る。
【０４１０】
ＶＩＩａ．ＣＡＲ細胞の遺伝子改変
本明細書で開示のＣＡＲ細胞がそれら自身に対する免疫反応（例えば、死滅）を標的とする可能性を回避するまたは低減させるために、ＣＡＲ細胞は、ＣＡＲ細胞により、本明細書で提供されるＣＡＲにより直接的にまたは本明細書で提供されるアダプターを介して間接的に標的とされる１つまたは複数のＡＤの発現を低減または無くするように遺伝子改変できる。例えば、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するＡＤＢＤを有する本明細書で提供されるＣＡＲ細胞、またはヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するＡＤＢＤを含むアダプターと組み合わせた使用に好適する本明細書で提供されるＣＡＲ細胞は、ＡＤＢＤにより認識されるヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を低減または無くするように遺伝子改変できる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞はヒト免疫エフェクター細胞である。
【０４１１】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、本明細書で提供されるＣＡＲまたはアダプターにより結合される１つのＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、本明細書で提供されるＣＡＲまたはアダプターにより結合される２つ以上のＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、本明細書で提供されるＣＡＲまたはアダプターにより結合される２つ以上のＡＤの発現を低減または無くする２つ以上の遺伝子改変を含む。いくつかの実施形態では、２つ以上のＡＤは、単一抗原からなる。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５  ＡＤである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８  ＡＤである。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞はヒト免疫エフェクター細胞である。
【０４１２】
いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、遺伝子改変のない参照細胞に比べて、ＡＤの発現を、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９５％低減させる。いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ＡＤの発現を無くする。
【０４１３】
いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、遺伝子改変のない参照細胞に比べて、ＡＤ含有ポリペプチドの発現を、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９５％低減させる。いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ＡＤ含有ポリペプチドの発現を無くする。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５  ＡＤである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８  ＡＤである。
【０４１４】
いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ＡＤをコードする遺伝子またはそのフラグメント中の、欠失、挿入、または置換である。いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ＡＤをコードする遺伝子またはそのフラグメント中の、ＡＤの発現を無くする欠失、挿入、または置換である。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５  ＡＤである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８  ＡＤである。
【０４１５】
いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ＡＤを含むポリペプチドをコードする遺伝子またはそのフラグメントの、ＡＤを含むポリペプチドのホモログ、変異体、または誘導体をコードするヌクレオチド配列による置換であり、コードされたホモログ、変異体、または誘導体はＡＤを含まない。いくつかの実施形態では、ホモログは非ヒト霊長類ホモログである。いくつかの実施形態では、ホモログはアカゲザル由来である。いくつかの実施形態では、ホモログはカニクイザル由来である。いくつかの実施形態では、変異体は、天然の変異体である。いくつかの実施形態では、変異体は、スプライスバリアントである。いくつかの実施形態では、変異体は、改変グリコシル化パターンを有する。いくつかの実施形態では、変異体または誘導体は、シグナル伝達できる。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５  ＡＤである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８  ＡＤである。
【０４１６】
遺伝子改変は、ＣＡＲまたはアダプターが結合するのが望ましいいずれかのＡＤ、例えば、セクションＩＩａおよびセクションＸＩに記載のいずれかのＡＤの発現を低減または無くすることができる。
【０４１７】
提供された方法の実施に有用な遺伝子改変を含むＣＡＲ細胞の作製は、当該技術分野において既知の組換えＤＮＡ法、遺伝子操作、およびゲノム編集のための種々の標準的技術を用いて実施され得る。ＡＤの発現を欠く本明細書で記載の遺伝子改変ＣＡＲ細胞は、例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ＣＲＩＳＰＲ、ＴＡＬＥＮ、および／またはＺＦＮを含む、当該技術分野において既知の任意の好適な手段を使用して定常作業により得ることができる。ＣＡＲ細胞の遺伝子操作方法は、例えば、米国特許出願公開第２０１７０２０４３７２号に記載されている。この特許は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０４１８】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、機能的Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）および／またはヒト白血球抗原（ＨＬＡ）、例えば、ＨＬＡクラスＩおよび／またはＨＬＡクラスＩＩの発現を無くするまたは低減するように遺伝子改変される。機能的ＴＣＲおよび／またはＨＬＡの発現を欠く改変細胞は、例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ＣＲＩＳＰＲ、ＴＡＬＥＮ、および／またはＺＦＮを含む、当該技術分野において既知の任意の好適な手段を使用して定常作業により得ることができる。
【０４１９】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ＣＡＲ細胞の免疫エフェクター応答を開始する能力を低減し得る分子の発現を無くするまたは低減するように遺伝子改変される。さらなる実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ＰＤ１、ＰＤＬ１、ＣＴＬＡ４、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４およびＴＧＦＲβから選択される分子の発現を無くするまたは低減するように遺伝子改変される。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、２、３、４、５個またはそれを超える上記分子の発現を無くするまたは低減するように遺伝子改変されている。１個または複数の上記分子の発現を欠く改変細胞は、例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ＣＲＩＳＰＲ、ＴＡＬＥＮ、および／またはＺＦＮを含む、当該技術分野において既知の任意の好適な手段を使用して定常作業により得ることができる。
【０４２０】
さらなる実施形態では、ＣＡＲ細胞は、１個または複数の（ａ）機能的ＴＣＲおよびＨＬＡ；および（ｂ）ＰＤ１、ＰＤＬ１、ＣＴＬＡ４、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４およびＴＧＦＲβから選択される分子の発現を無くするまたは低減するように遺伝子改変される。さらなる実施形態では、ＣＡＲ細胞は、２、３、４、５、６個またはそれを超える上記分子の発現を無くするまたは低減するように遺伝子改変されている。
【０４２１】
ＶＩＩＩ．組成物
ＣＡＲ細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）およびアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）を含む組成物が本明細書で記載される。
【０４２２】
例えば、一実施形態では、組成物は、（ａ）（ｉ）標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞、および（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプター、を含む。ＣＡＲ細胞は、本明細書で記載のいずれのＣＡＲ（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）であってもよく、および／またはアダプターは本明細書で記載のいずれのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）でもよい。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、第１または第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む。
【０４２３】
一実施形態では、組成物は、（ａ）（ｉ）標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞、および（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプター、を含む。ＣＡＲ細胞は、本明細書で記載のいずれのＣＡＲ（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）であってもよく、および／またはアダプターは本明細書で記載のいずれのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）でもよい。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、第１または第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む。
【０４２４】
一実施形態では、組成物は、（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞、および（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプター、を含む。ＣＡＲ細胞は、本明細書で記載のいずれのＣＡＲ（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）であってもよく、および／またはアダプターは本明細書で記載のいずれのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）でもよい。いくつかの実施形態では、アダプターの結合は、標的細胞上の第２のＡＤまたは第２のＡＤを含む複合体を架橋する。いくつかの実施形態では、アダプターは、非天然骨格由来のＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、標的細胞により発現されるＡＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、分泌タンパク質上のＡＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、α−フェトプロテインＡＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターのＡＤは、核タンパク質ではない。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、第１または第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む。
【０４２５】
一実施形態では、組成物は、（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）である抗原決定基（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞、および（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプター、を含む。ＣＡＲ細胞は、本明細書で記載のいずれのＣＡＲ（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）であってもよく、および／またはアダプターは本明細書で記載のいずれのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）でもよい。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、第１または第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む。
【０４２６】
一実施形態では、組成物は、（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞、および（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤを含むＡＤＢＤを含むアダプター、を含む。ＣＡＲ細胞は、本明細書で記載のいずれのＣＡＲ（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）であってもよく、および／またはアダプターは本明細書で記載のいずれのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）でもよい。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、第１または第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む。
【０４２７】
一実施形態では、組成物は、（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞；（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＤドメインを含むアダプター、を含む。ＣＡＲ細胞は、本明細書で記載のいずれのＣＡＲ（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）であってもよく、および／またはアダプターは本明細書で記載のいずれのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）でもよい。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、第１または第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む。
【０４２８】
一実施形態では、組成物は、（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合するＤドメイン、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞、および（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプター、を含む。ＣＡＲ細胞は、本明細書で記載のいずれのＣＡＲ（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）であってもよく、および／またはアダプターはセクションＶおよびセクションＸＩに記載のいずれのアダプターでもよい。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、第１または第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む。
【０４２９】
一実施形態では、組成物は、（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する第１のＤドメイン、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞、および（ｂ）（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合する第２のＤドメイン、を含む。ＣＡＲ細胞は、本明細書で記載のいずれのＣＡＲ（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）であってもよく、および／またはアダプターは本明細書で記載のいずれのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）でもよい。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、第１または第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む。
【０４３０】
特定の実施形態では、ＣＡＲは単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）ＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）ＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、ＣＡＲは、Ｄドメインを含む。
【０４３１】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、２つのＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、ＣＡＲはＡＳＢＤおよびｓｃＦｖを含む。さらなる実施形態では、ＣＡＲは、ＤドメインおよびｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、２つのＡＳＢＤを含む。さらなる実施形態では、ＣＡＲは、２つのＤドメインを含む。
【０４３２】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインはシグナル伝達ドメインである。さらなる実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、プライマリシグナル伝達ドメインを含む。特定の実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、ＣＤ３ζプライマリシグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。さらなる実施形態では、共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２８、４１ＢＢ、ＣＤ２７、およびＣＤ１３４から選択される。特定の実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、４１ＢＢ共刺激シグナル伝達ドメインを含む。
【０４３３】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ４５、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、およびＣＤ３８から選択される抗原に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＤ２６に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＤ３０に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＤ３３に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＤ３８に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＤ４５に結合する。
【０４３４】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＢＣＭＡ、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択される抗原に結合する。さらなる実施形態では、ＣＡＲはＢＣＭＡに結合する。さらなる実施形態では、ＣＡＲはＣＳ１に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ１２３に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ１９に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ２２に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＴＡＣＩに結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＢＡＦＦＲに結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＰＤＬ１に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＨＥＲ２に結合する。
【０４３５】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、別々の標的に結合する２つのＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、ＣＡＲはＢＣＭＡおよびＣＳ１に結合する。さらなる実施形態では、ＣＡＲはＣＤ１９およびＣＤ１２３に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ２２およびＣＤ１２３に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＰＤＬ１およびＣＤ１２３に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＤ４５および第２の標的に結合する。特定の実施形態では、ＣＡＲは、ＢＣＭＡに結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＳ１に結合する第２のＡＳＢＤを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＢＣＭＡに結合する第１のＤドメインおよびＣＳ１に結合する第２のＤドメインを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＢＣＭＡに結合するＤドメインおよびＣＳ１に結合するｓｃＦｖを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＳ１に結合するＤドメインおよびＢＣＭＡに結合するｓｃＦｖを含む。特定の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ４５ ＡＤに結合する第１のＤドメインおよび第２のＡＤに結合する第２のＤドメインを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ２２に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ２２に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ２２に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＰＤＬ１に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＰＤＬ１に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＰＤＬ１に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９に結合するＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む。
【０４３６】
いくつかの実施形態では、アダプターは腫瘍抗原のＡＤを含む。さらなる実施形態では、腫瘍抗原は、群：ＢＣＭＡ、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＳ１、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択される。さらなる実施形態では、腫瘍抗原はＨＥＲ２である。
【０４３７】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ｓｃＦｖであるＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターはＤドメインを含む。
【０４３８】
いくつかの実施形態では、アダプターは２つのＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、（ａ）同じである、（ｂ）同じ抗原決定基に結合する、（ｃ）同じ抗原の異なるＡＤに結合する、または（ｄ）同じ細胞上の異なる抗原に結合する、もしくは（ｄ）異なる細胞上の異なる抗原に結合する、２つのＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは２つのＡＳＢＤを含む。特定の実施形態では、アダプターは２つのＤドメインを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、ｓｃＦｖであるＡＤＢＤおよびＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターは、ｓｃＦｖであるＡＤＢＤおよびＤドメインであるＡＤＢＤを含む。
【０４３９】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＤ４５、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、およびＣＤ３８から選択されるメンバーに結合するＡＤＢＤを含む。特定の実施形態では、アダプターはＣＤ４５に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ２６に結合するＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターはＣＤ３０に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ３３に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ３８に結合するＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターはＣＤ４５に結合するＡＤＢＤを含む。
【０４４０】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＢＣＭＡ、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択されるメンバーに結合するＡＤＢＤを含む。特定の実施形態では、アダプターはＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターはＣＤ１９に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ２２に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＳ１に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＨＥＲ２に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＴＡＣＩに結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＢＡＦＦＲに結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＰＤＬ１に結合するＡＤＢＤを含む。
【０４４１】
いくつかの実施形態では、アダプターは二重特異性である。さらなる実施形態では、アダプターはＣＤ１９に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤおよびＣＳ１に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ２２に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＰＤＬ１に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターはヒトＣＤ４５  ＡＤおよび第２のＡＤに結合する。
【０４４２】
いくつかの実施形態では、標的細胞は腫瘍細胞である。さらなる実施形態では、腫瘍細胞は、群：急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される。さらなる実施形態では、腫瘍細胞は、群：急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、および多発性骨髄腫（ＭＭ）から選択される。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞はＡＭＬ腫瘍細胞である。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞はＣＬＬ腫瘍細胞である。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞はＭＭ腫瘍細胞である。
【０４４３】
いくつかの実施形態では、標的細胞は癌細胞である。さらなる実施形態では、癌細胞は、群：乳癌、前立腺癌、卵巣癌、膵臓癌、結腸癌、および肺癌から選択される。さらなる実施形態では、癌細胞は、乳癌である。いくつかの実施形態では、癌細胞は卵巣癌である。
【０４４４】
いくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも２個の標的細胞を含む。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の標的細胞は腫瘍細胞である。さらなる実施形態では、第１と第２の標的細胞は、腫瘍細胞である。特定の実施形態では、第１と第２の腫瘍細胞は、同じ腫瘍型である。他の実施形態では、第１と第２の腫瘍細胞は、異なる腫瘍型である。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、および多発性骨髄腫（ＭＭ）から選択される。
【０４４５】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ発現細胞は免疫エフェクター細胞である。さらなる実施形態では、免疫エフェクター細胞はＴ細胞である。他の実施形態では、免疫エフェクター細胞はＮＫ細胞である。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ発現細胞は標的細胞を死滅させる。いくつかの実施形態では、アダプターのＡＤへの結合は、ＡＤを含む抗原の活性を遮断する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ発現細胞は、本明細書で記載のＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ発現細胞は、ヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。
【０４４６】
一実施形態では、組成物は患者、例えば、ヒト患者内に存在する。
【０４４７】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、標的細胞およびアダプターの両方上に存在するＡＤに結合する。他の実施形態では、ＣＡＲ細胞は、アダプター上に存在するが、標的細胞上には存在しないＡＤに結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤは天然タンパク質／分子である。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトタンパク質／分子である。
【０４４８】
ＩＸ．標的細胞と接触させることを含む方法
標的細胞をＣＡＲ細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩで上記されているような）およびアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩで上記されているような）または組成物（例えば、セクションＶＩＩＩおよびセクションＸＩで上記されているような）と接触させることを含む使用方法が本明細書で記載される。
【０４４９】
例えば、一実施形態では、標的細胞に免疫反応を伝達する方法は、標的細胞を本明細書で記載のいずれかの組成物（例えば、セクションＶＩＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）と接触させることを含む。別の実施形態では、標的細胞を死滅させる方法は、標的細胞を本明細書で記載のいずれかの組成物（例えば、セクションＶＩＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）と接触させることを含む。本明細書で使用される場合、「接触させること」は、標的細胞をインビトロで（例えば、細胞培養で）接触させること、または標的細胞インビボで（例えば、患者中で）接触させることを意味し得る。
【０４５０】
一実施形態では、標的細胞に免疫反応を伝達する方法は、標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含み、（ａ）標的細胞を含む組成物は、ＣＡＲを発現している細胞をさらに含み、ＣＡＲは、（ｉ）前記標的細胞上の第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【０４５１】
一実施形態では、１個または複数の標的細胞に免疫反応を伝達する方法は、第１の標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含み、（ａ）標的細胞を含む組成物は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞をさらに含み、ＣＡＲは、（ｉ）前記第１の標的細胞上の第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【０４５２】
一実施形態では、標的細胞に免疫反応を伝達する方法は、標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含み、（ａ）標的細胞を含む組成物は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞をさらに含み、ＣＡＲは、（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【０４５３】
一実施形態では、標的細胞に免疫反応を伝達する方法は、標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含み、（ａ）標的細胞を含む組成物は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞をさらに含み、ＣＡＲは、（ｉ）第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。
【０４５４】
一実施形態では、標的細胞に免疫反応を伝達する方法は、標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させることを含み、（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）は、標的細胞上に存在し；（ｂ）第１の標的細胞を含む組成物は、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【０４５５】
一実施形態では、１個または複数の標的細胞に免疫反応を伝達する方法は、標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させることを含み、（ａ）第１のＡＤは、第１の標的細胞上に存在し；（ｂ）第１の標的細胞を含む組成物は、第２の標的細胞および（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）第１の標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【０４５６】
一実施形態では、標的細胞に免疫反応を伝達する方法は、標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させることを含み、（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）は、標的細胞上に存在し；（ｂ）標的細胞を含む組成物は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【０４５７】
一実施形態では、標的細胞に免疫反応を伝達する方法は、標的細胞を含む組成物を、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞と接触させることを含み、（ａ）第１の抗原決定基（ＡＤ）は、標的細胞上に存在し；（ｂ）標的細胞を含む組成物は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【０４５８】
一実施形態では、標的細胞を死滅させる方法は、標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含み、（ａ）標的細胞を含む組成物は、ＣＡＲを発現している細胞をさらに含み、ＣＡＲは、（ｉ）前記標的細胞上の第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【０４５９】
一実施形態では、１個または複数の標的細胞を死滅させる方法は、第１の標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含み、（ａ）標的細胞を含む組成物は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞をさらに含み、ＣＡＲは、（ｉ）前記第１の標的細胞上の第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【０４６０】
一実施形態では、標的細胞を死滅させる方法は、標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含み、（ａ）標的細胞を含む組成物は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞をさらに含み、ＣＡＲは、（ｉ）第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【０４６１】
一実施形態では、標的細胞を死滅させる方法は、標的細胞を含む組成物をアダプターと接触させることを含み、（ａ）標的細胞を含む組成物は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞をさらに含み、ＣＡＲは、（ｉ）第１のＡＤに結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み；および（ｂ）アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤ（例えば、Ｄドメイン）であるＡＤＢＤを含む。
【０４６２】
一実施形態では、標的細胞を死滅させる方法は、標的細胞を含む組成物を、ＣＡＲを発現している細胞と接触させることを含み、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）標的細胞を含む組成物は、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【０４６３】
一実施形態では、１個または複数の標的細胞を死滅させる方法は、標的細胞を含む組成物を、ＣＡＲを発現している細胞と接触させることを含み、（ａ）第１のＡＤは、第１の標的細胞上に存在し、（ｂ）第１の標的細胞を含む組成物は、第２の標的細胞および（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）第１の標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【０４６４】
一実施形態では、標的細胞を死滅させる方法は、標的細胞を含む組成物を、ＣＡＲを発現している細胞と接触させることを含み、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）標的細胞を含む組成物は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【０４６５】
一実施形態では、標的細胞を死滅させる方法は、標的細胞を含む組成物を、ＣＡＲを発現している細胞と接触させることを含み、（ａ）第１のＡＤは、標的細胞上に存在し；（ｂ）標的細胞を含む組成物は、（ｉ）前記標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターをさらに含み；および（ｃ）ＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。
【０４６６】
接触させることは、インビトロ、エクスビボ、またはインビボであり得る。一実施形態では、接触させることは、患者、例えば、ヒト患者中で、例えば、既にＣＡＲを発現している細胞を受けている患者へのアダプターの投与後、または既にアダプターを受けている患者へのＣＡＲを発現している細胞の投与後に起こる。
【０４６７】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、本明細書で記載のＣＡＲにより、または本明細書で記載のアダプターにより認識されるＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５  ＡＤである。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ＣＡＲにより、またはＣＡＲにより結合されたアダプターにより認識されるＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含む。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５  ＡＤである。
【０４６８】
特定の実施形態では、ＣＡＲは単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）ＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）ＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、ＣＡＲは、Ｄドメインを含む。
【０４６９】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、２つのＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、ＣＡＲはＡＳＢＤおよびｓｃＦｖを含む。さらなる実施形態では、ＣＡＲは、ＤドメインおよびｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、２つのＡＳＢＤを含む。さらなる実施形態では、ＣＡＲは、２つのＤドメインを含む。
【０４７０】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインはシグナル伝達ドメインである。さらなる実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、プライマリシグナル伝達ドメインを含む。特定の実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、ＣＤ３ζプライマリシグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。さらなる実施形態では、共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２８、４１ＢＢ、ＣＤ２７、およびＣＤ１３４から選択される。特定の実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、４１ＢＢ共刺激シグナル伝達ドメインを含む。
【０４７１】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ４５、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、およびＣＤ３８から選択される抗原に結合する。さらなる実施形態では、ＣＡＲはＣＤ２６に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ３０に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ３３に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ３８に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＤ４５に結合する。
【０４７２】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＢＣＭＡ、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択される抗原に結合する。さらなる実施形態では、ＣＡＲはＢＣＭＡに結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＳ１に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ１２３に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ１９に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ２２に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＴＡＣＩに結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＢＡＦＦＲに結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＰＤＬ１に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＨＥＲ２に結合する。
【０４７３】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、別々の標的に結合する２つのＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、ＣＡＲはＣＤ１９およびＣＤ１２３に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＢＣＭＡおよびＣＳ１に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ２２およびＣＤ１２３に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＰＤＬ１およびＣＤ１２３に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＤ４５および第２の標的に結合する。特定の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む。特定の実施形態では、ＣＡＲは、ＢＣＭＡに結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＳ１に結合する第２のＡＳＢＤを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＢＣＭＡに結合する第１のＤドメインおよびＣＳ１に結合する第２のＤドメインを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＳ１に結合するＤドメインおよびＢＣＭＡに結合するｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ４５ ＡＤに結合する第１のＤドメインおよび第２のＡＤに結合する第２のＤドメインを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ２２に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ２２に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ２２に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＰＤＬ１に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＰＤＬ１に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＰＤＬ１に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９に結合するＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む。
【０４７４】
いくつかの実施形態では、アダプターは腫瘍抗原のＡＤを含む。さらなる実施形態では、腫瘍抗原は、群：ＣＤ４５、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、およびＣＤ３８から選択される。
【０４７５】
いくつかの実施形態では、アダプターは腫瘍抗原のＡＤを含む。さらなる実施形態では、腫瘍抗原は、群：ＢＣＭＡ、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択される。
【０４７６】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ｓｃＦｖであるＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターはＤドメインを含む。
【０４７７】
いくつかの実施形態では、アダプターは２つのＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、（ａ）同じである、（ｂ）同じ抗原決定基に結合する、（ｃ）同じ抗原の異なるＡＤに結合する、（ｄ）同じ細胞上の異なる抗原に結合する、または（ｅ）異なる細胞上の異なる抗原に結合する、２つのＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは２つのＡＳＢＤを含む。特定の実施形態では、アダプターは２つのＤドメインを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、ｓｃＦｖであるＡＤＢＤおよびＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターは、ｓｃＦｖであるＡＤＢＤおよびＤドメインであるＡＤＢＤを含む。
【０４７８】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＤ４５、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、およびＣＤ３８から選択されるメンバーに結合するＡＤＢＤを含む。特定の実施形態では、アダプターはＣＤ２６に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ３０に結合するＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターはＣＤ３８に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ４５に結合するＡＤＢＤを含む。
【０４７９】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＢＣＭＡ、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択されるメンバーに結合するＡＤＢＤを含む。特定の実施形態では、アダプターはＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターはＣＤ１９に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ２２に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＳ１に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＨＥＲ２に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＴＡＣＩに結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＢＡＦＦＲに結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＰＤＬ１に結合するＡＤＢＤを含む。
【０４８０】
いくつかの実施形態では、アダプターは二重特異性である。さらなる実施形態では、アダプターはＣＤ１９に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤおよびＣＳ１に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ２２に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＰＤＬ１に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターはヒトＣＤ４５  ＡＤおよび第２のＡＤに結合する。
【０４８１】
いくつかの実施形態では、標的細胞は腫瘍細胞である。さらなる実施形態では、腫瘍細胞は、群：急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される。さらなる実施形態では、腫瘍細胞は、群：急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、および多発性骨髄腫（ＭＭ）から選択される。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞はＡＭＬ腫瘍細胞である。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞はＣＬＬ腫瘍細胞である。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞はＭＭ腫瘍細胞である。
【０４８２】
いくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも２個の標的細胞を含む。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の標的細胞は腫瘍細胞である。さらなる実施形態では、第１と第２の標的細胞は、腫瘍細胞である。特定の実施形態では、第１と第２の腫瘍細胞は、同じ腫瘍型である。他の実施形態では、第１と第２の腫瘍細胞は、異なる腫瘍型である。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、および多発性骨髄腫（ＭＭ）から選択される。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は、多発性骨髄腫（ＭＭ）である。本明細書で提供される標的細胞を死滅させる方法では、標的細胞は癌細胞であり得る。本明細書で提供される方法により標的化可能な代表的癌細胞は、セクションＸおよびセクションＸＩで考察される。
【０４８３】
いくつかの実施形態では、標的細胞は腫瘍細胞である。さらなる実施形態では、腫瘍細胞は、群：急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、および多発性骨髄腫（ＭＭ）から選択される。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は、多発性骨髄腫（ＭＭ）である。
【０４８４】
いくつかの実施形態では、標的細胞は癌細胞である。さらなる実施形態では、癌細胞は、群：乳癌、前立腺癌、卵巣癌、膵臓癌、結腸癌、および肺癌から選択される。いくつかの実施形態では、癌細胞は乳癌である。いくつかの実施形態では、癌細胞は卵巣癌である。
【０４８５】
いくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも２個の標的細胞を含む。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の標的細胞は腫瘍細胞である。さらなる実施形態では、第１と第２の標的細胞は、腫瘍細胞である。特定の実施形態では、第１と第２の腫瘍細胞は、同じ腫瘍型である。他の実施形態では、第１と第２の腫瘍細胞は、異なる腫瘍型である。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、および多発性骨髄腫（ＭＭ）から選択される。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は、多発性骨髄腫（ＭＭ）である。
【０４８６】
本明細書で提供される標的細胞を死滅させる方法では、標的細胞は免疫系の細胞であり得る。いくつかの実施形態では、標的細胞はＢ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はナイーブＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はメモリーＴ細胞である。
【０４８７】
本明細書で提供される標的細胞を死滅させる方法では、標的細胞は、細菌細胞（例えば、結核、天然痘、および炭疽病）、寄生生物の細胞（例えば、マラリアまたはリーシュマニア症）、真菌細胞、カビ、マイコプラズマ、またはウイルス（例えば、ＨＩＶ、Ｂ型肝炎、狂犬病、ニパウイルス、ウエストナイルウイルス、髄膜炎ウイルス、またはＣＭＶ）に感染した細胞であり得る。
【０４８８】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ発現細胞は免疫エフェクター細胞である。免疫エフェクター細胞は、例えば、免疫エフェクター反応の促進において免疫反応に関与する細胞である。免疫エフェクター細胞の例には、Ｔ細胞（例えば、α／βＴ細胞およびγ／δＴ細胞）、Ｂ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ細胞）、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、マスト細胞、および骨髄由来貪食細胞が挙げられる。免疫エフェクター機能または免疫エフェクター反応は、例えば、標的細胞の免疫攻撃を高めるまたは促進する免疫エフェクター細胞の機能または反応である。いくつかの実施形態では、免疫エフェクター機能または反応は、標的細胞の殺作用、または成長または増殖の抑制を促進するＴまたはＮＫ細胞の性質を意味する。例えば、一次刺激および共刺激は、Ｔ細胞の免疫エフェクター機能または反応の例である。特定の実施形態では、免疫エフェクター機能または反応は、本開示のＣＡＲ、アダプター、および／またはＣＡＲおよびアダプター組成物の作用により促進される。このような機能または反応は、例えば、増殖、サイトカイン産生、細胞傷害性またはＣＤ２５、ＣＤ６９、およびＣＤ１０７ａなどの細胞表面マーカーの発現上昇により効果的なＣＡＲ細胞をもたらす。
【０４８９】
いくつかの実施形態では、免疫エフェクター細胞はＴ細胞である。他の実施形態では、免疫エフェクター細胞はＮＫ細胞である。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ発現細胞は標的細胞を死滅させる。いくつかの実施形態では、アダプターのＡＤへの結合は、ＡＤを含む抗原の活性を遮断する。
【０４９０】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、標的細胞に直接結合時に標的細胞を死滅させる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、アダプターに結合時に標的細胞を死滅させ、アダプターは標的細胞に結合されている（例えば、図３Ａ〜３Ｃに示すように、）。
【０４９１】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲの標的細胞および／またはアダプターへの結合は、ＣＡＲ発現細胞中で、細胞内シグナル伝達を生ずる。
【０４９２】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲの標的細胞および／またはアダプターへの結合は、脱顆粒を生ずる。脱顆粒は、細胞型に応じて、免疫細胞中の分泌顆粒から、抗菌性、細胞傷害性またはその他の分子を放出できる。パーフォリン（細孔形成細胞毒素）またはグランザイム（標的細胞のアポトーシスを誘導するセリンプロテアーゼ）などの分子は、腫瘍細胞（または他の細胞型）を死滅させる際に、Ｔ細胞およびＮＫ細胞を支援する。
【０４９３】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲの標的細胞および／またはアダプターへの結合は、ＣＡＲ発現細胞によるサイトカイン分泌を生ずる。サイトカインは、例えば、インターフェロンガンマ（ＩＦＮγ）で有り得る。
【０４９４】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲの標的細胞および／またはアダプターへの結合は、ＣＡＲ発現細胞の増殖を生ずる。
【０４９５】
Ｘ．治療上の使用
患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法および／または患者の標的細胞を死滅させる方法が本明細書で記載され、該方法は、本明細書に記載のアダプター（セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）、および／または本明細書で記載のＣＡＲ細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）を患者に投与することを含む。増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶の治療方法もまた本明細書で記載され、該方法は、本明細書で記載のアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）、および／または本明細書で記載のＣＡＲ細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）を患者に投与することを含む。特定の実施形態では、血液癌または自己免疫疾患の治療方法が本明細書で記載され、該方法は、本明細書で記載のアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）、および／または本明細書で記載のＣＡＲ細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）を患者に投与することを含む。
【０４９６】
一実施形態では、患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の標的細胞を死滅させる方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者のリンパ球を枯渇させる方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。特定の実施形態では、血液癌を治療する方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。特定の実施形態では、自己免疫疾患または障害を治療する方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。一実施形態では、第１のＡＤは標的細胞上に存在し、ＣＡＲは、（ｉ）標的細胞上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、第１のＡＤは標的細胞上に存在し、ＣＡＲは、（ｉ）前記第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。ＣＡＲを発現している細胞を投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法では、ＣＡＲを発現している細胞は、本明細書で記載のＣＡＲを発現しているいずれかの細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）で有り得る。ＣＡＲを発現している細胞を投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法では、ＣＡＲを発現している細胞は、薬学的に許容可能な組成物中に含めることができる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ＣＡＲにより結合されるＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。
【０４９７】
一実施形態では、患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法は、患者にアダプターを投与することを含む。別の実施形態では、患者の標的細胞を死滅させる方法は、アダプターを患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者のリンパ球を枯渇させる方法は、アダプターを患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法は、アダプターを患者に投与することを含む。特定の実施形態では、血液癌を治療する方法は、アダプターを患者に投与することを含む。特定の実施形態では、自己免疫疾患または障害を治療する方法は、アダプターを患者に投与することを含む。一実施形態では、患者はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）前記標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。一実施形態では、患者はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。一実施形態では、患者はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法では、アダプターは、本明細書で記載のいずれかのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）であってよくおよび／または患者は本明細書で記載のＣＡＲＳを発現しているいずれかの細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）で既に治療されていてよい。患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法のいくつかの実施形態では、患者はアダプターで前もって治療されている（ＣＡＲを発現している細胞に加えて）。いくつかの実施形態では、患者に投与されるアダプターおよび前もって患者に投与されているアダプターは、異なるＡＤ（例えば、同じまたは異なる標的細胞上の）に結合する。患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法では、アダプターは、薬学的に許容可能な組成物中に含めることができる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ＣＡＲまたはアダプターにより結合されるＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。
【０４９８】
一実施形態では、患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法は、患者にアダプターを投与することを含む。別の実施形態では、患者の標的細胞を死滅させる方法は、アダプターを患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者のリンパ球を枯渇させる方法は、アダプターを患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法は、アダプターを患者に投与することを含む。特定の実施形態では、血液癌を治療する方法は、アダプターを患者に投与することを含む。特定の実施形態では、自己免疫疾患または障害を治療する方法は、アダプターを患者に投与することを含む。一実施形態では、患者はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を含み、ＣＡＲは、（ｉ）前記標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。一実施形態では、患者はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を含み、ＣＡＲは、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。一実施形態では、患者はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を含み、ＣＡＲは、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法では、アダプターは、本明細書で記載のいずれかのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）であってよく、および／または患者は本明細書で記載のＣＡＲＳを発現しているいずれかの細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）を含んでよい。患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法のいくつかの実施形態では、患者はアダプターを含む（ＣＡＲを発現している細胞に加えて）。いくつかの実施形態では、患者に投与されるアダプターおよび患者により含まれるアダプターは、異なるＡＤに結合する（例えば、同じまたは異なる標的細胞上の）。患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法では、アダプターは、薬学的に許容可能な組成物中に含めることができる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ＣＡＲまたはアダプターにより結合されるＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。
【０４９９】
一実施形態では、患者の標的細胞に免疫反応を再指示する方法は、患者にアダプターを投与することを含む。別の実施形態では、患者の標的細胞死滅を再指示する方法は、アダプターを患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者のリンパ球枯渇を再指示する方法は、アダプターを患者に投与することを含む。別の実施形態では、増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶の治療を再指示する方法は、患者にアダプターを投与することを含む。特定の実施形態では、血液癌の治療を再指示する方法は、アダプターを患者に投与することを含む。特定の実施形態では、自己免疫疾患または障害の治療を再指示する方法は、アダプターを患者に投与することを含む。一実施形態では、患者はＣＡＲを発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１の標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞死滅を再指示する方法では、アダプターは、本明細書で記載のいずれかのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）であってよく、および／または患者は本明細書で記載のＣＡＲを発現しているいずれかの細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）で既に治療されていてよい。一実施形態では、患者はＣＡＲを発現している細胞を含み、ＣＡＲは、（ｉ）第１の標的細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）第２の標的細胞上の第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞死滅を再指示する方法では、アダプターは、本明細書で記載のいずれかのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）であってよく、および／または患者は本明細書で記載のＣＡＲＳを発現しているいずれかの細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）を含んでよい。患者にアダプターを投与することを含む患者の標的細胞死滅を再指示する方法では、アダプターは、薬学的に許容可能な組成物中に含めることができる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ＣＡＲまたはアダプターにより結合されるＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。
【０５００】
一実施形態では、患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の標的細胞を死滅させる方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者のリンパ球を枯渇させる方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。特定の実施形態では、血液癌を治療する方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。特定の実施形態では、自己免疫疾患または障害を治療する方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。一実施形態では、第１のＡＤおよび第２のＡＤは標的細胞上に存在し、患者は、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターで治療されており；およびＣＡＲは、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、患者は、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターで治療されており；およびＣＡＲは、（ｉ）アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、第１のＡＤは標的細胞上に存在し、患者は、（ｉ）前記標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており；およびＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、第１のＡＤは標的細胞上に存在し、患者は、（ｉ）標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＳＢＤを含むＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターで治療されており；およびＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。患者にＣＡＲを発現している細胞を投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法では、ＣＡＲを発現している細胞は、本明細書で記載のＣＡＲを発現しているいずれかの細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）であってよく、および／または患者は本明細書で記載のいずれかのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）で既に治療されていてよい。ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法では、ＣＡＲを発現している細胞は、薬学的に許容可能な組成物中に含めることができる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ＣＡＲまたはアダプターにより結合されるＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。
【０５０１】
一実施形態では、患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の標的細胞を死滅させる方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者のリンパ球を枯渇させる方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。特定の実施形態では、血液癌を治療する方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。特定の実施形態では、自己免疫疾患または障害を治療する方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。一実施形態では、第１のＡＤおよび第２のＡＤは標的細胞上に存在し、患者は、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターを含み；およびＣＡＲは、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、患者は、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターを含み；およびＣＡＲは、（ｉ）アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、第１のＡＤは標的細胞上に存在し、患者は、（ｉ）前記標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターを含み；およびＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、第１のＡＤは標的細胞上に存在し、患者は、（ｉ）標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＳＢＤを含むＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤを含むアダプターを含み；およびＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。患者にＣＡＲを発現している細胞を投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法では、ＣＡＲを発現している細胞は、本明細書で記載のＣＡＲを発現しているいずれかの細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）であってよく、および／または患者は本明細書で記載のいずれかのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）を含んでよい。ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法では、ＣＡＲを発現している細胞は、薬学的に許容可能な組成物中に含めることができる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ＣＡＲまたはアダプターにより結合されるＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。
【０５０２】
一実施形態では、患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法は、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の標的細胞を死滅させる方法は、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者のリンパ球を枯渇させる方法は、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法は、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞を患者に投与することを含む。特定の実施形態では、血液癌を治療する方法は、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞を患者に投与することを含む。特定の実施形態では、自己免疫疾患または障害を治療する方法は、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞を患者に投与することを含む。一実施形態では、第１のＡＤおよび第２のＡＤは標的細胞上に存在し、アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記標的細胞上の前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含み；およびＣＡＲは、（ｉ）標的細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）標的細胞上の前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含み；およびＣＡＲは、（ｉ）アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、第１のＡＤは標的細胞上に存在し、アダプターは、（ｉ）前記標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤを含み；およびＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、第１のＡＤは標的細胞上に存在し、アダプターは、（ｉ）標的細胞上の第１のＡＤに結合するＡＳＢＤを含むＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤを含み；およびＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。患者にＣＡＲを発現している細胞を投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法では、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞は、本明細書で記載のＣＡＲを発現しているいずれかの細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）であってよく、およびアダプターは本明細書で記載のいずれかのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）であってよい。ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞を患者に投与することを含む患者の標的細胞を死滅させる方法では、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞は、薬学的に許容可能な組成物中に含めることができる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞は、単一の薬学的に許容可能な組成物中に含められる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞は、別々の薬学的に許容可能な組成物中に含められる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ＣＡＲまたはアダプターにより結合されるＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。
【０５０３】
特定の実施形態では、ＣＡＲは単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）ＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）ＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、ＣＡＲは、Ｄドメインを含む。
【０５０４】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、２つのＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、ＣＡＲはＡＳＢＤおよびｓｃＦｖを含む。さらなる実施形態では、ＣＡＲは、ＤドメインおよびｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、２つのＡＳＢＤを含む。さらなる実施形態では、ＣＡＲは、２つのＤドメインを含む。
【０５０５】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインはシグナル伝達ドメインである。さらなる実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、プライマリシグナル伝達ドメインを含む。特定の実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、ＣＤ３ζプライマリシグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。さらなる実施形態では、共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２８、４１ＢＢ、ＣＤ２７、およびＣＤ１３４から選択される。特定の実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、４１ＢＢ共刺激シグナル伝達ドメインを含む。
【０５０６】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ４５、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、およびＣＤ３８から選択される抗原に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＤ４５に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ２６に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ３０に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ３３に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ３８に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＤ４５  ＡＤに結合する。
【０５０７】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＢＣＭＡ、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択される抗原に結合する。さらなる実施形態では、ＣＡＲはＢＣＭＡに結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＳ１に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ１２３に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ１９に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ２２に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＴＡＣＩに結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＢＡＦＦＲに結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＰＤＬ１に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＨＥＲ２に結合する。
【０５０８】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、別々の標的に結合する２つのＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、ＣＡＲはＣＤ１９およびＣＤ１２３に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＢＣＭＡおよびＣＳ１に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＣＤ２２およびＣＤ１２３に結合する。他の実施形態では、ＣＡＲはＰＤＬ１およびＣＤ１２３に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＤ４５および第２の標的に結合する。特定の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む。特定の実施形態では、ＣＡＲは、ＢＣＭＡに結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＳ１に結合する第２のＡＳＢＤを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＢＣＭＡに結合する第１のＤドメインおよびＣＳ１に結合する第２のＤドメインを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＳ１に結合するＤドメインおよびＢＣＭＡに結合するｓｃＦｖを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ２２に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ２２に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ４５ＡＤに結合する第１のＤドメインおよび第２のＡＤに結合する第２のＤドメインを含む。他の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ２２に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＰＤＬ１に結合する第１のＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合する第２のＡＳＢＤを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＰＤＬ１に結合する第１のＤドメインおよびＣＤ１２３に結合する第２のＤドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＰＤＬ１に結合するＤドメインおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９に結合するＡＳＢＤおよびＣＤ１２３に結合するｓｃＦｖを含む。
【０５０９】
いくつかの実施形態では、アダプターは腫瘍抗原のＡＤを含む。さらなる実施形態では、腫瘍抗原は、群：ＣＤ４５、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、およびＣＤ３８から選択される。
【０５１０】
いくつかの実施形態では、アダプターは腫瘍抗原のＡＤを含む。さらなる実施形態では、腫瘍抗原は、群：ＢＣＭＡ、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択される。
【０５１１】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ｓｃＦｖであるＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、ＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターはＤドメインを含む。
【０５１２】
いくつかの実施形態では、アダプターは２つのＡＤＢＤを含む。さらなる実施形態では、アダプターは、（ａ）同じである、（ｂ）同じ抗原決定基に結合する、（ｃ）同じ抗原の異なるＡＤに結合する、（ｄ）同じ細胞上の異なる抗原に結合する、または（ｅ）異なる細胞上の異なる抗原に結合する、２つのＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは２つのＡＳＢＤを含む。特定の実施形態では、アダプターは２つのＤドメインを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、ｓｃＦｖであるＡＤＢＤおよびＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターは、ｓｃＦｖであるＡＤＢＤおよびＤドメインであるＡＤＢＤを含む。
【０５１３】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＣＤ４５、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、およびＣＤ３８から選択されるメンバーに結合するＡＤＢＤを含む。特定の実施形態では、アダプターはＣＤ２６に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ３０に結合するＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターはＣＤ３３に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ３８に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ４５に結合するＡＤＢＤを含む。
【０５１４】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ＢＣＭＡ、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択されるメンバーに結合するＡＤＢＤを含む。特定の実施形態では、アダプターはＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターはＣＤ１９に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ２２に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＳ１に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＴＡＣＩに結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＢＡＦＦＲに結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＰＤＬ１に結合するＡＤＢＤを含む。
【０５１５】
いくつかの実施形態では、アダプターは二重特異性である。さらなる実施形態では、アダプターはＣＤ１９に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤおよびＣＳ１に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＣＤ２２に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む。他の実施形態では、アダプターはＰＤＬ１に結合するＡＤＢＤおよびＣＤ１２３に結合するＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターはＣＤ４５  ＡＤに結合するＡＤＢＤおよび第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【０５１６】
いくつかの実施形態では、標的細胞は腫瘍細胞である。さらなる実施形態では、腫瘍細胞は、群：急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される。さらなる実施形態では、腫瘍細胞は、群：急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、および多発性骨髄腫（ＭＭ）から選択される。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞はＡＭＬ腫瘍細胞である。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞はＣＬＬ腫瘍細胞である。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞はＭＭ腫瘍細胞である。
【０５１７】
いくつかの実施形態では、標的細胞は癌細胞である。さらなる実施形態では、癌細胞は、群：乳癌、前立腺癌、卵巣癌、膵臓癌、結腸癌、および肺癌から選択される。さらなる実施形態では、癌細胞は、乳癌である。いくつかの実施形態では、癌細胞は卵巣癌である。
【０５１８】
いくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも２個の標的細胞を含む。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の標的細胞は腫瘍細胞である。さらなる実施形態では、第１と第２の標的細胞は、腫瘍細胞である。特定の実施形態では、第１と第２の腫瘍細胞は、同じ腫瘍型である。他の実施形態では、第１と第２の腫瘍細胞は、異なる腫瘍型である。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、および多発性骨髄腫（ＭＭ）から選択される。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は、多発性骨髄腫（ＭＭ）である。
【０５１９】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ発現細胞は免疫エフェクター細胞である。さらなる実施形態では、免疫エフェクター細胞はＴ細胞である。他の実施形態では、免疫エフェクター細胞はＮＫ細胞である。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ発現細胞は標的細胞を死滅させる。いくつかの実施形態では、アダプターのＡＤへの結合は、ＡＤを含む抗原の活性を遮断する。
【０５２０】
いくつかの実施形態では、患者の標的細胞を死滅させる方法は、アダプターおよびＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。アダプターおよびＣＡＲ発現細胞は、同じ医薬組成物に含めて、または別の医薬組成物として投与できる。アダプターおよびＣＡＲ発現細胞は、異なる医薬組成物に含めて投与できる。アダプターおよびＣＡＲ発現細胞は、同時にまたは続けて投与できる。
【０５２１】
患者の標的細胞を死滅させる方法または患者の標的細胞死滅を再指示する方法の一実施形態では、患者は、癌と診断され、標的細胞は癌細胞である。一実施形態では、癌細胞は前立腺癌細胞、乳癌細胞、結腸直腸癌細胞、肺癌細胞、骨肉腫、または神経膠芽腫である。従って、いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法は、癌を治療する。
【０５２２】
治療できる癌には、血管形成しない、またはまだ実質的に血管形成していない腫瘍、ならびに血管形成した腫瘍を含めることができる。癌は、非固形腫瘍（血液学的腫瘍、例えば、白血病およびリンパ腫など）または固形腫瘍を含むことができる。治療される癌のタイプには、限定されないが、癌腫、芽細胞腫、および肉腫、および特定の白血病またはリンパ系悪性腫瘍、良性および悪性腫瘍、および悪性腫瘍、例えば、肉腫、癌腫および黒色腫が挙げられる。成体腫瘍／癌および小児科腫瘍／癌も包含される。
【０５２３】
肉腫および癌腫などの固形腫瘍の例には、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、およびその他の肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、リンパ系悪性腫瘍、膵臓癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、前立腺癌、肝細胞癌、扁平上皮細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、甲状腺髄様癌、甲状腺乳頭癌、褐色芽細胞種、脂腺癌、乳頭癌、乳頭状腺癌、乳頭腺癌、髄様癌、気管支原性肺癌、腎細胞癌、肝細胞腫、胆管癌、絨毛癌、ウイルムス腫瘍、子宮頸癌、精巣腫瘍、精上皮腫、膀胱癌、黒色腫、およびＣＮＳ腫瘍（例えば、神経膠腫（脳幹神経膠腫および混合神経膠腫など）、神経膠芽腫（多形神経膠芽腫としても知られる）星状細胞腫、ＣＮＳリンパ腫、胚細胞腫、髄芽腫、シュワン腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫瘍、乏突起細胞腫、髄膜腫、神経芽腫、網膜芽細胞腫および脳転移）が挙げられる。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は乳癌である。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は卵巣癌である。
【０５２４】
別の実施形態では、本明細書記載の方法は、血液癌の患者の治療に有用である。血液学的（または血行性）癌の例には、急性白血病（急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、急性骨髄性白血病および骨髄芽球、前骨髄球性、骨髄単球性、単球性および赤白血病など）、慢性白血病（慢性骨髄性（顆粒球性）白血病、慢性骨髄性白血病、および慢性リンパ性白血病など）、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（無痛性および高悪性度型）、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症が挙げられる。血液学的（または血行性）癌のさらなる例には、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、および多発性骨髄腫（ＭＭ）が挙げられる。いくつかの実施形態では、血液学的（または血行性）癌はＡＭＬである。いくつかの実施形態では、血液学的（または血行性）癌はＣＬＬである。いくつかの実施形態では、血液学的（または血行性）癌はＭＭである。
【０５２５】
いくつかの実施形態では、癌は難治性癌の再発癌である。いくつかの実施形態では、癌は再発癌である。いくつかの実施形態では、癌は化学療法後に再発した。いくつかの実施形態では、癌は化生物学的製剤で治療後に再発した。いくつかの実施形態では、生物学的製剤は、治療抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、癌は難治性癌である。いくつかの実施形態では、癌は化学療法剤に対し難治性である。いくつかの実施形態では、癌は生物学的製剤での治療に対し難治性である。いくつかの実施形態では、生物学的製剤は、治療抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞である。
【０５２６】
いくつかの実施形態では、癌は難治性血液癌の再発癌である。いくつかの実施形態では、癌は再発血液癌である。いくつかの実施形態では、癌は化学療法後に再発した血液癌である。いくつかの実施形態では、癌は生物学的製剤で治療後に再発した血液癌である。いくつかの実施形態では、生物学的製剤は、治療抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、癌は自己骨髄移植後に再発した血液癌である。いくつかの実施形態では、癌は同種骨髄移植後に再発した血液癌である。いくつかの実施形態では、癌は造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）後に再発した血液癌である。いくつかの実施形態では、ＨＳＣＴは、自己ＨＳＣＴである。いくつかの実施形態では、癌は難治性血液癌である。いくつかの実施形態では、癌は化学療法剤に対し難治性である血液癌である。いくつかの実施形態では、癌は生物学的製剤での治療に対し難治性である血液癌である。いくつかの実施形態では、生物学的製剤は、治療抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、血液癌は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、および多発性骨髄腫（ＭＭ）である。いくつかの実施形態では、血液癌はＡＭＬである。いくつかの実施形態では、血液癌はＣＬＬである。いくつかの実施形態では、血液癌はＭＭである。いくつかの実施形態では、標的細胞はＢ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はナイーブＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はメモリーＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞は骨髄腫細胞である。
【０５２７】
一実施形態では、患者の多発性骨髄腫細胞に対する免疫反応を伝達する方法は、患者にアダプターを投与することを含む。別の実施形態では、患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法は、アダプターを患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の多発性骨髄腫細胞を枯渇させる方法は、アダプターを患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の多発性骨髄腫を治療する方法は、アダプターを患者に投与することを含む。一実施形態では、患者はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）（例えば、ＣＳ１またはＢＣＭＡ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の第２のＡＤ（例えば、ＣＳ１またはＢＣＭＡ）に結合するＡＤＢＤを含む。一実施形態では、患者はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）（例えば、ＡＦＰ  ｐ２６またはその変異体）に結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の第２のＡＤ（例えば、ＣＳ１またはＢＣＭＡ）に結合するＡＤＢＤを含む。一実施形態では、患者はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）（例えば、ＡＦＰ  ｐ２６またはその変異体）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の第２のＡＤ（例えば、ＣＳ１またはＢＣＭＡ）に結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。患者にアダプターを投与することを含む患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法では、アダプターは、本明細書で記載のいずれかのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）であってよくおよび／または患者は本明細書で記載のＣＡＲＳを発現しているいずれかの細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）で既に治療されていてよい。いくつかの実施形態では、アダプターはＣＳ１、ＢＣＭＡ、またはＣＳ１およびＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＳ１、ＢＣＭＡ、またはＣＳ１およびＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＡＦＰ  ｐ２６またはその変異体に結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。患者にアダプターを投与することを含む患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法のいくつかの実施形態では、患者はアダプターで前もって治療されている（ＣＡＲを発現している細胞に加えて）。いくつかの実施形態では、患者に投与されるアダプターおよび前もって患者に投与されているアダプターは、異なるＡＤ（例えば、同じまたは異なる多発性骨髄腫細胞上の）に結合する。いくつかの実施形態では、患者に投与されるアダプターはＣＳ１に結合し、および前もって患者に投与されているアダプターは、ＢＣＭＡに結合する。いくつかの実施形態では、患者に投与されるアダプターはＢＣＭＡに結合し、および前もって患者に投与されているアダプターは、ＣＳ１に結合する。患者にアダプターを投与することを含む患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法では、アダプターは、薬学的に許容可能な組成物中に含めることができる。いくつかの実施形態では、患者は再発した多発性骨髄腫を有する。いくつかの実施形態では、癌は生物学的製剤、例えば、抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞で治療後に再発した多発性骨髄腫を有する。いくつかの実施形態では、患者は、ＣＳ１またはＢＣＭＡを標的とした抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞で治療後に再発した多発性骨髄腫を有する。
【０５２８】
一実施形態では、患者の多発性骨髄腫細胞に対する免疫反応を伝達する方法は、患者にアダプターを投与することを含む。別の実施形態では、患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法は、アダプターを患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の多発性骨髄腫細胞を枯渇させる方法は、アダプターを患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の多発性骨髄腫を治療する方法は、アダプターを患者に投与することを含む。一実施形態では、患者はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を含み、ＣＡＲは、（ｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）（例えば、ＣＳ１またはＢＣＭＡ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の第２のＡＤ（例えば、ＣＳ１またはＢＣＭＡ）に結合するＡＤＢＤを含む。一実施形態では、患者はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を含み、ＣＡＲは、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）（例えば、ＡＦＰ  ｐ２６またはその変異体）に結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の第２のＡＤ（例えば、ＣＳ１またはＢＣＭＡ）に結合するＡＤＢＤを含む。一実施形態では、患者はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞を含み、ＣＡＲは、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）（例えば、ＡＦＰ  ｐ２６またはその変異体）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の第２のＡＤ（例えば、ＣＳ１またはＢＣＭＡ）に結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。患者にアダプターを投与することを含む患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法では、アダプターは、本明細書で記載のいずれかのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）であってよく、および／または患者は本明細書で記載のＣＡＲＳを発現しているいずれかの細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）を含んでよい。いくつかの実施形態では、アダプターはＣＳ１、ＢＣＭＡ、またはＣＳ１およびＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＳ１、ＢＣＭＡ、またはＣＳ１およびＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＡＦＰ  ｐ２６またはその変異体に結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。患者にアダプターを投与することを含む患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法のいくつかの実施形態では、患者はアダプターを含む（ＣＡＲを発現している細胞に加えて）。いくつかの実施形態では、患者に投与されるアダプターおよび患者により含まれるアダプターは、異なるＡＤに結合する（例えば、同じまたは異なる多発性骨髄腫細胞上の）。いくつかの実施形態では、患者に投与されるアダプターはＣＳ１に結合し、および患者に含まれるアダプターは、ＢＣＭＡに結合する。いくつかの実施形態では、患者に投与されるアダプターはＢＣＭＡに結合し、および患者に含まれるアダプターは、ＣＳ１に結合する。患者にアダプターを投与することを含む患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法では、アダプターは、薬学的に許容可能な組成物中に含めることができる。いくつかの実施形態では、患者は再発した多発性骨髄腫を有する。いくつかの実施形態では、癌は生物学的製剤、例えば、抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞で治療後に再発した多発性骨髄腫を有する。いくつかの実施形態では、患者は、ＣＳ１またはＢＣＭＡを標的とした抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞で治療後に再発した多発性骨髄腫を有する。
【０５２９】
一実施形態では、患者の多発性骨髄腫細胞に対する免疫反応を再指示する方法は、患者にアダプターを投与することを含む。別の実施形態では、患者の多発性骨髄腫細胞死滅を再指示する方法は、アダプターを患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者のリンパ球枯渇を再指示する方法は、アダプターを患者に投与することを含む。別の実施形態では、多発性骨髄腫の治療を再指示する方法は、アダプターを患者に投与することを含む。特定の実施形態では、自己免疫疾患または障害の治療を再指示する方法は、アダプターを患者に投与することを含む。一実施形態では、患者はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の第１の抗原決定基（ＡＤ）（例えば、ＣＳ１またはＢＣＭＡ）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の第２のＡＤ（例えば、ＣＳ１またはＢＣＭＡ）に結合するＡＤＢＤを含む。一実施形態では、患者はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）（例えば、ＡＦＰ  ｐ２６またはその変異体）に結合するＡＳＢＤである抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の第２のＡＤ（例えば、ＣＳ１またはＢＣＭＡ）に結合するＡＤＢＤを含む。一実施形態では、患者はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している細胞で治療されており、ＣＡＲは、（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）（例えば、ＡＦＰ  ｐ２６またはその変異体）に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含み、およびアダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の第２のＡＤ（例えば、ＣＳ１またはＢＣＭＡ）に結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤを含む。患者にアダプターを投与することを含む患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法では、アダプターは、本明細書で記載のいずれかのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）であってよくおよび／または患者は本明細書で記載のＣＡＲＳを発現しているいずれかの細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）で既に治療されていてよい。いくつかの実施形態では、アダプターはＣＳ１、ＢＣＭＡ、またはＣＳ１およびＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＳ１、ＢＣＭＡ、またはＣＳ１およびＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＡＦＰ  ｐ２６またはその変異体に結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。患者にアダプターを投与することを含む患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法のいくつかの実施形態では、患者はアダプターで前もって治療されている（ＣＡＲを発現している細胞に加えて）。いくつかの実施形態では、患者に投与されるアダプターおよび前もって患者に投与されているアダプターは、異なるＡＤ（例えば、同じまたは異なる多発性骨髄腫細胞上の）に結合する。いくつかの実施形態では、患者に投与されるアダプターはＣＳ１に結合し、および前もって患者に投与されているアダプターは、ＢＣＭＡに結合する。いくつかの実施形態では、患者に投与されるアダプターはＢＣＭＡに結合し、および前もって患者に投与されているアダプターは、ＣＳ１に結合する。患者にアダプターを投与することを含む患者の多発性骨髄腫細胞死滅を再指示する方法では、アダプターは、薬学的に許容可能な組成物中に含めることができる。いくつかの実施形態では、患者は再発した多発性骨髄腫を有する。いくつかの実施形態では、癌は生物学的製剤、例えば、抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞で治療後に再発した多発性骨髄腫を有する。いくつかの実施形態では、患者は、ＣＳ１またはＢＣＭＡを標的とした抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞で治療後に再発した多発性骨髄腫を有する。
【０５３０】
一実施形態では、患者の多発性骨髄腫細胞に免疫反応を伝達する方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の多発性骨髄腫細胞を枯渇させる方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の多発性骨髄腫を治療する方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。一実施形態では、第１のＡＤ（例えば、ＢＣＭＡ）および第２のＡＤ（例えば、ＣＳ１）は多発性骨髄腫細胞上に存在し、患者は、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターで治療されており；およびＣＡＲは、（ｉ）多発性骨髄腫細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、患者は、（ｉ）前記第１のＡＤ（例えば、ＢＣＭＡ）および（ｉｉ）多発性骨髄腫細胞上の前記第２のＡＤ（例えば、ＣＳ１）に結合するＡＤＢＤを含むアダプターで治療されており；およびＣＡＲは、（ｉ）アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、第１のＡＤ（例えば、ＣＳ１）は多発性骨髄腫細胞上に存在し、患者は、（ｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤ（例えば、ＢＣＭＡ）を含むアダプターで治療されており；およびＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、第１のＡＤ（例えば、ＣＳ１）は多発性骨髄腫細胞上に存在し、患者は、（ｉ）多発性骨髄腫細胞上の第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤ（例えば、ＢＣＭＡ）を含むアダプターで治療されており；およびＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。患者にＣＡＲを発現している細胞を投与することを含む患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法では、ＣＡＲを発現している細胞は、本明細書で記載のＣＡＲを発現しているいずれかの細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）であってよく、および／または患者は本明細書で記載のいずれかのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）で既に治療されていてよい。いくつかの実施形態では、アダプターはＣＳ１、ＢＣＭＡ、またはＣＳ１およびＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＳ１、ＢＣＭＡ、またはＣＳ１およびＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＡＦＰ  ｐ２６またはその変異体に結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法では、ＣＡＲを発現���ている細胞は、薬学的に許容可能な組成物中に含めることができる。いくつかの実施形態では、患者は再発した多発性骨髄腫を有する。いくつかの実施形態では、癌は生物学的製剤、例えば、抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞で治療後に再発した多発性骨髄腫を有する。いくつかの実施形態では、患者は、ＣＳ１またはＢＣＭＡを標的とした抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞で治療後に再発した多発性骨髄腫を有する。
【０５３１】
一実施形態では、患者の多発性骨髄腫細胞に免疫反応を伝達する方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の多発性骨髄腫を治療する方法は、ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む。一実施形態では、第１のＡＤ（例えば、ＢＣＭＡ）および第２のＡＤ（例えば、ＣＳ１）は多発性骨髄腫細胞上に存在し、患者は、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含むアダプターを含み；およびＣＡＲは、（ｉ）多発性骨髄腫細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、患者は、（ｉ）第１のＡＤ（例えば、ＢＣＭＡ）および（ｉｉ）多発性骨髄腫細胞上の第２のＡＤ（例えば、ＣＳ１）に結合するＡＤＢＤを含むアダプターを含み；およびＣＡＲは、（ｉ）アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、第１のＡＤ（例えば、ＣＳ１）は多発性骨髄腫細胞上に存在し、患者は、（ｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤ（例えば、ＢＣＭＡ）を含むアダプターを含み；およびＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、第１のＡＤ（例えば、ＣＳ１）は多発性骨髄腫細胞上に存在し、患者は、（ｉ）多発性骨髄腫細胞上の第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤ（例えば、ＢＣＭＡまたはＡＦＰ  ｐ２６またはその変異体）を含むアダプターを含み；およびＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。患者にＣＡＲを発現している細胞を投与することを含む患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法では、ＣＡＲを発現している細胞は、本明細書で記載のＣＡＲを発現しているいずれかの細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）であってよく、および／または患者は本明細書で記載のいずれかのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）を含んでよい。いくつかの実施形態では、アダプターはＣＳ１、ＢＣＭＡ、またはＣＳ１およびＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＳ１、ＢＣＭＡ、またはＣＳ１およびＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＡＦＰ  ｐ２６またはその変異体に結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。ＣＡＲを発現している細胞を患者に投与することを含む患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法では、ＣＡＲを発現している細胞は、薬学的に許容可能な組成物中に含めることができる。いくつかの実施形態では、患者は再発した多発性骨髄腫を有する。いくつかの実��形態では、癌は生物学的製剤、例えば、抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞で治療後に再発した多発性骨髄腫を有する。いくつかの実施形態では、患者は、ＣＳ１またはＢＣＭＡを標的とした抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞で治療後に再発した多発性骨髄腫を有する。
【０５３２】
一実施形態では、患者の多発性骨髄腫細胞に免疫反応を伝達する方法は、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法は、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の多発性骨髄腫細胞を枯渇させる方法は、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞を患者に投与することを含む。別の実施形態では、患者の多発性骨髄腫を治療する方法は、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞を患者に投与することを含む。一実施形態では、第１のＡＤ（例えば、ＢＣＭＡ）および第２のＡＤ（例えば、ＣＳ１）は多発性骨髄腫細胞上に存在し、アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤおよび（ｉｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含み；およびＣＡＲは、（ｉ）多発性骨髄腫細胞またはアダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、アダプターは、（ｉ）前記第１のＡＤ（例えば、ＢＣＭＡ）および（ｉｉ）多発性骨髄腫細胞上の前記第２のＡＤ（例えば、ＣＳ１）に結合するＡＤＢＤを含み；およびＣＡＲは、（ｉ）アダプター上の前記第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、第１のＡＤ（例えば、ＣＳ１）は多発性骨髄腫細胞上に存在し、アダプターは、（ｉ）前記多発性骨髄腫細胞上の第１のＡＤに結合するＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤ（例えば、ＢＣＭＡ）を含み；およびＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。一実施形態では、第１のＡＤ（例えば、ＣＳ１）は多発性骨髄腫細胞上に存在し、アダプターは、（ｉ）多発性骨髄腫細胞上の第１のＡＤに結合するＡＳＢＤであるＡＤＢＤ、および（ｉｉ）第２のＡＤ（例えば、ＢＣＭＡまたはＡＦＰ  ｐ２６またはその変異体）を含み；およびＣＡＲは、（ｉ）前記第２のＡＤに結合するＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含む。患者にＣＡＲを発現している細胞を投与することを含む患者の多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法では、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞は、本明細書で記載のＣＡＲを発現しているいずれかの細胞（例えば、セクションＶＩＩおよびセクションＸＩに記載されているような）であってよく、およびアダプターは本明細書で記載のいずれかのアダプター（例えば、セクションＶおよびセクションＸＩに記載されているような）であってよい。いくつかの実施形態では、アダプターはＣＳ１、ＢＣＭＡ、またはＣＳ１およびＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＣＳ１、ＢＣＭＡ、またはＣＳ１およびＢＣＭＡに結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＡＦＰ  ｐ２６またはその変異体に結合するＡＤＢＤ（例えば、Ｄドメイン）を含む。ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞を患者に投与することを含む患者の多発性骨髄腫��胞を死滅させる方法では、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞は、薬学的に許容可能な組成物中に含めることができる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞は、単一の薬学的に許容可能な組成物中に含められる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲおよびアダプターを発現している細胞は、別々の薬学的に許容可能な組成物中に含められる。いくつかの実施形態では、患者は再発した多発性骨髄腫を有する。いくつかの実施形態では、癌は生物学的製剤、例えば、抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞で治療後に再発した多発性骨髄腫を有する。いくつかの実施形態では、患者は、ＣＳ１またはＢＣＭＡを標的とした抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞で治療後に再発した多発性骨髄腫を有する。
【０５３３】
一実施形態では、本明細書記載の方法は、腫瘍増殖の抑制、新生血管形成の低減、血管新生の低減、分化の誘導、腫瘍体積の縮小、および／または腫瘍の腫瘍形成能の低下に有用である。
【０５３４】
患者の標的細胞を死滅させる方法または患者の標的細胞死滅を再指示する方法の一実施形態では、患者は免疫系の疾患または障害と診断され、標的細胞は免疫系の細胞である。従って、いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法は、免疫系の疾患または障害を治療する。
【０５３５】
いくつかの実施形態では、免疫系の疾患または障害は、自己免疫疾患または障害である。いくつかの実施形態では、自己免疫疾患または障害は、Ｉ型糖尿病、全身性硬化症、多発性硬化症、関節リウマチ、若年性特発性関節炎、乾癬、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、潰瘍性大腸炎、または円形脱毛症である。いくつかの実施形態では、自己免疫疾患または障害は、Ｉ型糖尿病である。いくつかの実施形態では、自己免疫疾患または障害は、全身性硬化症である。いくつかの実施形態では、自己免疫疾患または障害は、多発性硬化症である。いくつかの実施形態では、自己免疫疾患または障害は、関節リウマチである。いくつかの実施形態では、自己免疫疾患または障害は、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）である。いくつかの実施形態では、自己免疫疾患または障害は、クローン病である。いくつかの実施形態では、自己免疫疾患または障害は、潰瘍性大腸炎である。
【０５３６】
患者の標的細胞を死滅させる方法または患者の標的細胞死滅を再指示する方法の一実施形態では、標的細胞は免疫系の細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はＢ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はナイーブＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はメモリーＴ細胞である。
【０５３７】
患者の標的細胞を死滅させる方法または患者の標的細胞死滅を再指示する方法の一実施形態では、患者は免疫系の疾患または障害と診断され、標的細胞はＣＤ４５  ＡＤを発現している免疫系の細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はＢ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はメモリーＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５を発現している。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５ＲＯを発現している。
【０５３８】
患者標的細胞を死滅させる方法、または患者の標的細胞死滅を再指示する方法の一実施形態では、患者は感染を有し、標的細胞は、細菌細胞（例えば、結核、天然痘、および炭疽病）、寄生生物の細胞（例えば、マラリアまたはリーシュマニア症）、真菌細胞、カビ、マイコプラズマ、またはウイルス（例えば、ＨＩＶ、Ｂ型肝炎、狂犬病、ニパウイルス、ウエストナイルウイルス、髄膜炎ウイルス、またはＣＭＶ）に感染した細胞である。従って、いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法は、感染症を治療する。
【０５３９】
一実施形態では、本明細書記載の方法は、骨髄移植（ＢＭＴ）または造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）のために患者の準備または前処置をするために有用である。従って、いくつかの実施形態では、本明細書で提供される患者の標的細胞を死滅させる方法または患者の標的細胞死滅を再指示する方法は、対象をＢＭＴまたはＨＳＣＴのために前処置する。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法は、ＨＳＣＴのために患者を前処置する。いくつかの実施形態では、ＨＳＣＴは、自己ＨＳＣＴである。いくつかの実施形態では、本明細書で開示の患者を前処置する方法は、高用量化学療法剤または全身照射（ＴＢＩ）を含まない。いくつかの実施形態では、本明細書で開示の前処置する方法は、低減された強度の化学療法を含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示の前処置する方法は、全身照射を含む。いくつかの実施形態では、患者は６５歳を超える年齢である。いくつかの実施形態では、患者は癌を有する。いくつかの実施形態では、患者は血液癌である。いくつかの実施形態では、患者は再発した血液癌を有する。いくつかの実施形態では、血液癌は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、および多発性骨髄腫（ＭＭ）である。いくつかの実施形態では、患者は自己免疫疾患または障害を有する。いくつかの実施形態では、自己免疫疾患または障害は、Ｉ型糖尿病、多発性硬化症、関節リウマチ、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、または潰瘍である。
【０５４０】
いくつかの実施形態では、アダプターおよび／またはキメラ抗原受容体細胞の投与は、静脈内であるが、動脈内、筋肉内、局所的、またはその他の許容可能な経路を所与の治療シナリオに対し用い得る。
【０５４１】
本明細書で記載の治療方法を実施するのに有用な治療用組成物も提供される。一実施形態では、本明細書で提供される治療用組成物は、生理学的に許容可能な担体を、有効成分としてその中に溶解または分散された少なくとも１種の本明細書に記載のアダプターと共に、含む。別の実施形態では、本明細書で提供される治療用組成物は、生理学的に許容可能な担体を、有効成分としてその中に溶解または分散された少なくとも１種の本明細書に記載のＣＡＲ細胞と共に、含む。好ましい実施形態では、治療目的でヒト患者に投与される場合、治療用組成物は、免疫原性を有さない。
【０５４２】
有効成分をその中に溶解または分散させて含む医薬組成物の作製は、当該技術分野においてよく理解されている。通常、このような組成物は、水性のまたは非水性の溶液または懸濁剤として無菌注射剤として作製される。しかし、使用前に液体中で溶液または懸濁液とするために好適する固体形態も、作製できる。製剤はまた、乳化することもできる。従って、アダプター含有組成物は、溶液、懸濁液、錠剤、カプセル、持続放出製剤もしくは粉末、またはその他の組成物形態の形態とすることができる。いくつかの実施形態では、アダプター組成物は、インビボでの分布を確保するまたは最適化するように配合され、例えば、血液脳関門（ＢＢＢ）は多くの高度に親水性の化合物を排除するので、それが望ましい場合には、例えば、リポソーム中での配合により、組成物はＢＢＢを横切る移動を増大させるように作製される。リポソームを製造する方法については、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号、同第５，３７４，５４８号および同第５，３９９，３３１号を参照されたい。リポソームは、特定細胞または臓器中に選択的に輸送される１つまたは複数の部分を含むことができ、従って、標的化薬物送達を強化できる（例えば、Ｒａｎａｄｅ，Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２９：６８５（１９８９）を参照されたい）。
【０５４３】
アダプター（および／またはＣＡＲ細胞）は、他の有効成分および／または薬学的に許容可能で、有効成分と適合性がある賦形剤と本明細書で記載の治療方法での使用に好適する量で混合できる。適切な賦形剤は、例えば、水、生理食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノールなどおよびこれらの組み合わせである。加えて、必要に応じ、組成物は、湿潤または乳化剤、緩衝剤および他の当該技術分野において既知の補助的な物質などの有効成分の有効性を高める少量の補助的な物質を含むことができる。
【０５４４】
治療的アダプター配合物は、その中の成分の薬学的に許容可能な塩も含み得る。薬学的に許容可能な塩には、例えば、塩酸またはリン酸などの無機酸、または酢酸、酒石酸、マンデル酸などの有機酸と形成される酸付加塩（ポリペプチドの遊離アミノ基と形成される）および当該技術分野において既知の他の薬学的に許容可能な塩が挙げられる。遊離カルボキシル基と形成される塩はまた、無機塩基、例えば、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウムまたは水酸化第二鉄酸化物などの無機塩基、およびイソプロピルアミン、トリメチルアニリン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどの有機塩基から誘導でき、および他の塩は、当該技術分野において既知の無機塩基から誘導できる。
【０５４５】
生理学的に許容可能な担体は、当技術分野において既知である。代表的液体担体は、有効成分および水の他に何らの物質も含まない、または生理学的ｐＨ値のリン酸ナトリウム、生理食塩水または両方、リン酸塩緩衝生理食塩水などの緩衝液を含む無菌水溶液である。さらに、水性担体は、２種以上の緩衝塩、ならびに塩化ナトリウムおよび塩化カリウム、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、およびその他の溶質などの塩を含むことができる。
【０５４６】
液体組成物はまた、水に追加する、および水以外の、液相も含み得る。このような追加液相の代表例は、グリセロール、綿実油などの植物油、オレイン酸エチルなどの有機エステル、および水油エマルションである。
【０５４７】
一実施形態では、治療用組成物は、アダプター、典型的には、治療用組成物の総重量当たり、少なくとも０．１重量％のアダプターを含む。重量パーセントは、総組成物当たりのアダプターの重量比である。従って、例えば、０．１重量パーセントは、１００ｇの総組成物当たり０．１ｇのアダプターである。
【０５４８】
アダプター含有治療用組成物は通常、約１０マイクログラム（μｇ）／ミリリットル（ｍｌ）〜１００ミリグラム（ｍｇ）／ｍｌの組成物の体積当たりの有効成分としてのアダプターを含み、より好ましくは、約１ｍｇ／ｍｌ〜約１０ｍｇ／ｍｌ（すなわち、約０．１〜１重量％）の組成物の体積当たりの有効成分としてのアダプターを含む。
【０５４９】
アダプターの投与のための投与量の範囲は、標的分子により媒介される病徴の改善に向けた所望の効果をもたらすのに十分大きい量である。投与量は、過粘稠度症候群、肺水腫、うっ血性心不全、およびその他の当該技術分野において既知の有害副作用などの有害な副作用を引き起こすほど多量であってはならない。一般に、投与量は、患者の年齢、病状、性別、および疾患の程度で変化し、当業者によって決定可能である。万一何らかの合併症が生じる場合には、投与量は個々の医師によって調節できる。
【０５５０】
アダプターは、注射または一定の時間にわたるゆるやかな注入により、非経口的に投与できる。標的分子は通常、全身投与により身体に適用でき、従って、ほとんどの場合、治療用組成物の静脈内投与により治療されるが、標的組織が標的分子を含む可能性がある場合には、他の組織および送達手段が考えられる。従って、アダプターは、静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、空洞内投与でき、さらに蠕動手段により送達可能である。アダプターはまた、エアロゾルにより気道および肺に送達できる。
【０５５１】
アダプター含有治療用組成物は、例えば、単位用量の注射などの従来法で静脈内に投与できる。本明細書で提供される治療用組成物に関連して使用される用語の「単位用量」は、対象に対する単一投与量として適する物理的に別々の単位を意味し、各単位は、例えば、担体、またはビークルなどの必要とされる希釈剤と組み合わせて、所望の治療効果が得られるように計算された所定量の活性物質を含む。特定の実施形態では、アダプターを含む治療用組成物は、皮下に投与される。
【０５５２】
いくつかの実施形態では、アダプターは、剤形と適合性がある方式により治療有効量で投与される。投与される量は、治療される対象、対象の組織の有効成分を利用する能力、および所望の治療効果の程度に依存する。投与に必要な有効成分の厳密な量は、開業医の判断に依存し、それぞれの個体に特有である。しかし、全身投与のための好適な投与量範囲は本明細書で開示され、これは、投与経路に依存する。好適な投与計画も変更可能であるが、初期投与とこれに続く、注射または他の投与法による１時間または複数時間の間隔での反復投与が典型例である。あるいは、インビボでの指定された範囲での、血液中の濃度を維持するのに十分な連続的静脈内注入も意図される。
【０５５３】
アダプター組成物は、処方され、用量が決定され、良質の医療のための原則に従って投与される。これに関して考慮すべき因子には、処置される特定の障害、処置される特定の哺乳動物、個別患者の臨床状態、障害の原因、薬剤送達部位、投与方法、投与スケジュール、およびその他の開業医に既知の因子が挙げられる。アダプターの投与のための投与量の範囲は、標的分子により媒介される病徴の改善に向けた所望の効果をもたらすのに十分大きい量である。投与量は、過粘稠度症候群、肺水腫、うっ血性心不全、およびその他の当該技術分野において既知の有害副作用などの有害な副作用を引き起こすほど多量であってはならない。一般に、投与量は、患者の年齢、病状、性別、および疾患の程度で変化し、当業者によって決定可能である。万一何らかの合併症が生じる場合には、投与量は個々の医師によって調節できる。
【０５５４】
治療および予防用途に効果的な投薬スケジュールおよび量、すなわち「投薬計画」は、疾患または障害の原因、ステージおよび重症度、治療される哺乳動物の身体的状態、年齢、およびアダプターの送達部位および経路を含む種々の要因に依存するであろう。複合体および組成物の治療効力および毒性は、細胞培養物または実験動物を用いて、標準的医薬薬理学的、および毒性学的方法により測定できる。これらの方法により得られたデータは同様に、ヒトにおける使用のための投与量範囲の処方に使用することができる。さらに、治療指数（すなわち、集団の５０％で治療的に有効な投与量を集団の５０％の致死投与量で割った値（ＥＤ５０／ＬＤ５０））は、既知の手順を用いて容易に決定できる。投与量は、毒性がほとんどまたは全くなしに、ＥＤ５０を含む濃度の範囲内であるのが好ましく、採用される剤形、患者の感受性、および投与経路に応じて、この範囲内で変わってもよい。
【０５５５】
投与計画では、薬物吸収速度、バイオアベイラビリティ、代謝およびクリアランスなどの、当該技術分野において既知の薬物動態学パラメーターも考慮される（例えば、Ｈｉｄａｌｇｏ−Ａｒａｇｏｎｅｓ，Ｊ．Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．５８：６１１−６１７（１９９６）；Ｇｒｏｎｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｚｉｅ  ５１：３３７−３４１（１９９６）；Ｆｏｔｈｅｒｂｙ，Ｃｏｎｔｒａｃｅｐｔｉｏｎ  ５４：５９−６９（１９９６）；およびＪｏｈｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．８４：１１４４−１１４６（１９９５）を参照されたい）。治療されるそれぞれの対象に対し、臨床医が投与計画を決定することは、十分に現状技術の範囲内にある。さらに、アダプター組成物の単一または複数投与は、対象に必要で、耐容される投与量と頻度に応じて投与できる。予防および治療処置の期間は、治療される特定の疾患または状態に依存するであろう。いくつかの疾患は、急性期治療に適用できるが、他のものは、長い期間にわたる長期治療が必要である。アダプターは、追加の治療薬を用いて順次に、または同時に投与できる。
【０５５６】
いくつかの実施形態では、アダプターは、約１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇで投与される。
【０５５７】
別の実施形態では、アダプターは、１種または複数の追加の治療薬と組み合わせて投与される。
【０５５８】
アダプター融合タンパク質などのアダプターの治療有効量は、生理学的に許容可能な組成物中に入れて投与される場合、約０．１マイクログラム（μｇ）／ミリリットル（ｍｌ）〜約１００μｇ／ｍｌ、好ましくは、約１μｇ／ｍｌ〜５μｇ／ｍｌ、および通常約５μｇ／ｍｌの血漿中濃度を達成するのに十分であるような量であり得る。言い方を変えれば、用量は、１日または数日間にわたり毎日１回または複数回の投与で、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約３００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは、約０．２ｍｇ／ｋｇ〜約２００ｍｇ／ｋｇ、最も好ましくは、約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇの間で変わり得る。
【０５５９】
一実施形態では、疾患または障害は、免疫系の疾患または障害、例えば、炎症または自己免疫疾患である。
【０５６０】
本明細書で提供されるＣＡＲを発現している細胞は、単独で、または医薬組成物として、希釈剤および／または化学療法剤、抗体、サイトカインまたは細胞集団などの他の成分と共に、投与できる。本明細書で提供される組成物は、好ましくは、１回または複数回投与できる静脈内投与用として処方される。
【０５６１】
ＣＡＲ改変Ｔ細胞はまた、哺乳動物におけるエクスビボ免疫化および／またはインビボ療法のための１種のワクチンとして機能し得る。好ましくは、哺乳動物はヒトである。
【０５６２】
アダプターまたはＣＡＲ細胞で治療できる癌には、血管形成しない、またはまだ実質的に血管形成していない腫瘍、ならびに血管形成した腫瘍を含めることができる。癌は、非固形腫瘍（血液学的腫瘍、例えば、白血病およびリンパ腫など）または固形腫瘍を含むことができる。アダプターで治療される癌のタイプには、限定されないが、癌腫、芽細胞腫、および肉腫、および特定の白血病またはリンパ系悪性腫瘍、良性および悪性腫瘍、および悪性腫瘍、例えば、肉腫、癌腫および黒色腫が挙げられる。成体腫瘍／癌および小児科腫瘍／癌も包含される。
【０５６３】
肉腫および癌腫などの固形腫瘍の例には、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、およびその他の肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、リンパ系悪性腫瘍、膵臓癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、前立腺癌、肝細胞癌、扁平上皮細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、甲状腺髄様癌、甲状腺乳頭癌、褐色芽細胞種、脂腺癌、乳頭癌、乳頭状腺癌、乳頭腺癌、髄様癌、気管支原性肺癌、腎細胞癌、肝細胞腫、胆管癌、絨毛癌、ウイルムス腫瘍、子宮頸癌、精巣腫瘍、精上皮腫、膀胱癌、黒色腫、およびＣＮＳ腫瘍（例えば、神経膠腫（脳幹神経膠腫および混合神経膠腫など）、神経膠芽腫（多形神経膠芽腫としても知られる）星状細胞腫、ＣＮＳリンパ腫、胚細胞腫、髄芽腫、シュワン腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫瘍、乏突起細胞腫、髄膜腫、神経芽腫、網膜芽細胞腫および脳転移）が挙げられる。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は乳癌である。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は卵巣癌である。
【０５６４】
別の実施形態では、本明細書記載のアダプターおよび／またはＣＡＲ細胞は、血液癌の患者の治療に有用である。血液学的（または血行性）癌の例には、急性白血病（急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、急性骨髄性白血病および骨髄芽球、前骨髄球性、骨髄単球性、単球性および赤白血病など）、慢性白血病（慢性骨髄性（顆粒球性）白血病、慢性骨髄性白血病、および慢性リンパ性白血病など）、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（無痛性および高悪性度型）、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症が挙げられる。血液学的（または血行性）癌のさらなる例には、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、および多発性骨髄腫（ＭＭ）が挙げられる。いくつかの実施形態では、血液学的（または血行性）癌はＡＭＬである。いくつかの実施形態では、血液学的（または血行性）癌はＣＬＬである。いくつかの実施形態では、血液学的（または血行性）癌はＭＭである。
【０５６５】
一実施形態では、アダプターおよび／またはＣＡＲの抗原決定基結合ドメイン部分は、特定の癌を治療するように設計されている。治療できる癌には、血管形成しない、またはまだ実質的に血管形成していない腫瘍、ならびに血管形成した腫瘍を含めることができる。癌は、非固形腫瘍（血液学的腫瘍、例えば、白血病およびリンパ腫など）または固形腫瘍を含むことができる。ＣＡＲで治療される癌のタイプには、限定されないが、癌腫、芽細胞腫、および肉腫、および特定の白血病またはリンパ系悪性腫瘍、良性および悪性腫瘍、および悪性腫瘍、例えば、肉腫、癌腫および黒色腫が挙げられる。成体腫瘍／癌および小児科腫瘍／癌も包含される。
【０５６６】
血液学的（または血行性）癌の例には、急性白血病（急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、急性骨髄性白血病および骨髄芽球、前骨髄球性、骨髄単球性、単球性および赤白血病など）、慢性白血病（慢性骨髄性（顆粒球性）白血病、慢性骨髄性白血病、および慢性リンパ性白血病など）、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（無痛性および高悪性度型）、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症が挙げられる。血液学的（または血行性）癌のさらなる例には、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、および多発性骨髄腫（ＭＭ）が挙げられる。いくつかの実施形態では、血液学的（または血行性）癌はＡＭＬである。いくつかの実施形態では、血液学的（または血行性）癌はＣＬＬである。いくつかの実施形態では、血液学的（または血行性）癌はＭＭである。
【０５６７】
肉腫および癌腫などの固形腫瘍の例には、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、およびその他の肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、リンパ系悪性腫瘍、膵臓癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、前立腺癌、肝細胞癌、扁平上皮細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、甲状腺髄様癌、甲状腺乳頭癌、褐色芽細胞種、脂腺癌、乳頭癌、乳頭状腺癌、乳頭腺癌、髄様癌、気管支原性肺癌、腎細胞癌、肝細胞腫、胆管癌、絨毛癌、ウイルムス腫瘍、子宮頸癌、精巣腫瘍、精上皮腫、膀胱癌、黒色腫、およびＣＮＳ腫瘍（例えば、神経膠腫（脳幹神経膠腫および混合神経膠腫など）、神経膠芽腫（多形神経膠芽腫としても知られる）星状細胞腫、ＣＮＳリンパ腫、胚細胞腫、髄芽腫、シュワン腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫瘍、乏突起細胞腫、髄膜腫、神経芽腫、網膜芽細胞腫および脳転移）が挙げられる。
【０５６８】
一実施形態では、癌および障害は、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、およびＲＯＲ１を標的とするアダプターまたはＣＡＲ細胞を用いて治療できる。特定の一実施形態では、ＣＡＲ、アダプターおよび／またはＣＡＲ／アダプターの組み合わせは、ＣＤ２２を標的とし、Ｂ細胞リンパ腫を治療するために使用される。別の実施形態では、ＣＡＲ、アダプターおよび／またはＣＡＲ／アダプターの組み合わせは、ＣＤ１９を標的とし、限定されないが、前駆ＢＡＬＬリンパ芽球性白血病リンパ腫（小児適応症）、成人ＡＬＬ、マントル細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、および同種間骨髄移植後のサルベージ療法を含む癌および障害を治療するために使用される。別の実施形態では、ＣＡＲ、アダプターおよび／またはＣＡＲ／アダプターの組み合わせは、ＣＳ１を標的とし、多発性骨髄腫を治療するために使用される。別の実施形態では、ＣＡＲ、アダプターおよび／またはＣＡＲ／アダプターの組み合わせは、ＢＣＭＡを標的とし、多発性骨髄腫を治療するために使用される。別の実施形態では、ＣＡＲ、アダプターおよび／またはＣＡＲ／アダプターの組み合わせは、ＣＳ１およびＢＣＭＡを標的とし、多発性骨髄腫を治療するために使用される。
【０５６９】
本明細書で使用される場合、「Ｂ細胞関連疾患」は、Ｂ細胞免疫不全、自己免疫疾患および／またはＢ細胞関連過剰／無制御細胞増殖（リンパ腫および／または白血病を含む）を含む。本明細書で提供されるＣＡＲ、アダプターおよび／またはＣＡＲ／アダプターの組み合わせが治療手法のために使用されるこのような疾患の例には、限定されないが、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、糖尿病、関節リウマチ（ＲＡ）、反応性関節炎、多発性硬化症（ＭＳ）、尋常性天疱瘡、セリアック病、クローン病、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、自己免疫性甲状腺疾患、Ｘ連鎖無ガンマグロブリン血症、前Ｂ急性リンパ芽球性白血病、全身性エリテマトーデス、分類不能型免疫不全、慢性リンパ性白血病、選択的ＩｇＡ欠損および／またはＩｇＧサブクラス欠損に関連する疾患、Ｂ系統リンパ腫（ホジキンリンパ腫および／または非ホジキンリンパ腫）、胸腺腫を有する免疫不全、一時的な低ガンマグロブリン血症および／または高ＩｇＭ症候群、ならびにＥＢＶ媒介リンパ増殖性疾患などのウイルス媒介Ｂ細胞疾患、および病態生理学においてＢ細胞が関与する慢性感染症が挙げられる。
【０５７０】
一実施形態では、ＣＡＲ、アダプターおよび／またはＣＡＲ／アダプターの組み合わせは、中皮腫、膵臓癌、卵巣癌、および当該技術分野において既知のその他のメソテリン発現癌を治療するために、メソテリンを標的とするように設計される。一実施形態では、ＣＡＲ、アダプターおよび／またはＣＡＲ／アダプターの組み合わせは、急性骨髄性白血病および当該技術分野において既知のその他のＣＤ３３／ＩＬ３Ｒａ発現癌を治療するために、ＣＤ３３／ＩＬ３Ｒａを標的とするように設計される。一実施形態では、ＣＡＲ、アダプターおよび／またはＣＡＲ／アダプターの組み合わせは、トリプルネガティブ乳癌、非小細胞肺癌、および当該技術分野において既知のその他のｃ−Ｍｅｔ発現癌を治療するために、ｃ−Ｍｅｔを標的とするように設計される。一実施形態では、ＣＡＲ、アダプターおよび／またはＣＡＲ／アダプターの組み合わせは、前立腺癌および当該技術分野において既知のその他のＰＳＭＡ発現癌を治療するために、ＰＳＭＡを標的とするように設計される。一実施形態では、ＣＡＲ、アダプターおよび／またはＣＡＲ／アダプターの組み合わせは、前立腺癌および当該技術分野において既知のその他の糖脂質Ｆ７７発現癌を治療するために、糖脂質Ｆ７７を標的とするように設計される。一実施形態では、ＣＡＲ、アダプターおよび／またはＣＡＲ／アダプターの組み合わせは、神経膠芽腫および当該技術分野において既知のその他のＥＧＦＲｖＩＩＩ発現癌を治療するために、ＥＧＦＲｖＩＩＩを標的とするように設計される。一実施形態では、ＣＡＲ、アダプターおよび／またはＣＡＲ／アダプターの組み合わせは、神経芽腫、黒色腫、および当該技術分野において既知のその他のＧＤ２発現癌を治療するために、ＧＤ２を標的とするように設計される。一実施形態では、ＣＡＲ、アダプターおよび／またはＣＡＲ／アダプターの組み合わせは、骨髄腫、肉腫、黒色腫、および当該技術分野において既知のその他のＮＹ−ＥＳＯ−１発現癌を治療するために、ＮＹ−ＥＳＯ−１を標的とするように設計される。一実施形態では、ＣＡＲ、アダプターおよび／またはＣＡＲ／アダプターの組み合わせは、骨髄腫、肉腫、黒色腫、および当該技術分野において既知のその他のＭＡＧＥＡ３発現癌を治療するために、ＭＡＧＥＡ３を標的とするように設計できる。しかし、本発明は、本明細書で開示の抗原標的および疾患のみに限定されると解釈されるべきではない。むしろ、本発明は、ＣＡＲ、アダプターおよび／またはＣＡＲ／アダプターの組み合わせを治療に使用できる疾患に関連する任意の抗原性標的を含むと解釈されるべきである。
【０５７１】
好ましい実施形態では、ＣＡＲは、Ｔ細胞中で発現され、癌を治療または予防する方法を提供し、該方法は、ＣＡＲを発現している宿主細胞の癌患者への投与を含み、患者中で癌細胞は、その表面上に腫瘍抗原を発現し、アダプターは標的抗原に特異的に結合する。アダプターおよびＣＡＲが結合する代表的標的抗原決定基には、限定されないが、ＢＣＭＡ、ＣＳ１、ＣＤ１９、ＣＤ１２３、ＴＳＬＰＲ、およびＣＤ２６７が挙げられる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、Ｔ細胞中で発現され、多発性骨髄腫を治療する方法を提供し、該方法は、ＣＡＲを発現している宿主細胞の多発性骨髄腫患者への投与を含み、患者中で腫瘍細胞は、その表面上にＢＣＭＡおよび／またはＣＳ１を発現し、アダプターはＢＣＭＡ、ＣＳ１、またはＢＣＭＡおよびＣＳ１に特異的に結合する。
【０５７２】
アダプター、ＣＡＲ細胞、および／またはＣＡＲ細胞／アダプター組成物を含むキットを含む製品が本明細書で提供される。製品は、容器および容器上のまたは容器に添付されたラベルまたは添付文書を含み得る。好適な容器には、例えば、瓶、バイアル、シリンジが挙げられる。容器は、ガラス又はプラスチックなどの種々の材料から形成され得る。容器は、１種または複数のアダプター、ＣＡＲ細胞、アダプターをコードする核酸、および／または本開示のベクターまたは宿主細胞を保持する。ラベルまたは添付文書は、アダプター、ＣＡＲ細胞、および／またはＣＡＲ細胞／アダプター組成物を患者に投与するための使用法を含み得る。このようなキットは、限定されないが、アダプター、ＣＡＲ細胞、および／またはＣＡＲ／アダプター組成物の治療適用を含む用途を有する。
【０５７３】
ＸＩ．さらなる組成物およびその使用方法
いくつかの実施形態では、本開示は、下記を提供する。
［１］．遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞であって、
ａ）（１）ヒトＣＤ４５抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および
ｂ）遺伝子改変細胞上のヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、
遺伝子改変細胞は、インビトロアッセイでＣＤ４５  ＡＤ発現細胞に対する免疫反応を誘導でき、遺伝子改変細胞はＣＤ４５  ＡＤを発現しない、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞。
［２］．免疫反応がＣＤ４５  ＡＤ発現細胞を死滅させる、［１］に記載の遺伝子改変細胞。
［３］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５Ｒ０アイソフォーム中に存在するが、ヒトＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＡＢ、またはＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォーム中に存在しない、［１］または［２］に記載の遺伝子改変細胞。
［４］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５ＲＡアイソフォーム中に存在するが、ヒトＣＤ４５Ｒ０アイソフォーム中に存在しない、［１］または［２］に記載の遺伝子改変細胞。
［５］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５Ｒ０およびＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォーム中に存在する、［１］または［２］に記載の遺伝子改変細胞。
［６］．インビトロ結合アッセイで、ＡＤＢＤが、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体とＣＤ４５  ＡＤに対する結合に関し競合する、［１］〜［５］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［７］．インビトロ結合アッセイで、ＡＤＢＤが、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体とＣＤ４５  ＡＤに対する結合に関し競合する、［１］〜［５］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［８］．遺伝子改変が、ヒトＣＤ４５  ＡＤをコードする遺伝子またはそのフラグメント中の、欠失、挿入、または置換である、［１］〜［７］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［９］．遺伝子改変が、ヒトＣＤ４５の発現を無くする欠失、挿入、または置換である、［８］に記載の遺伝子改変細胞。
［１０］．遺伝子改変が、ＣＤ４５  ＡＤをコードする遺伝子またはそのフラグメントの、ヒトＣＤ４５のホモログ、変異体、または誘導体をコードするヌクレオチド配列による置換であり、コードされたホモログ、変異体、または誘導体は、ヒトＣＤ４５  ＡＤを含まない、［１］〜［９］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１１］．ホモログが、非ヒト霊長類ＣＤ４５である、［１０］に記載の遺伝子改変細胞。
［１２］．変異体が、天然起源である、［１０］に記載の遺伝子改変細胞。
［１３］．変異体または誘導体が、シグナル伝達できる、［１０］または［１２］に記載の遺伝子改変細胞。
［１４］．ＡＤＢＤが、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）を含む、［１］〜［１３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１５］．ＡＤＢＤが、代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）を含む、［１］〜［１３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１６］．ＡＤＢＤが、Ｄドメインを含む、［１］〜［１３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１７］．ＣＡＲが、２つ以上のＡＤＢＤを含む、［１］〜［１６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１８］．ＣＡＲが、２つのＡＤＢＤを含む、［１］〜［１６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１９］．ＣＡＲがＡＳＢＤおよびｓｃＦｖを含む、［１８］に記載の遺伝子改変細胞。
［２０］．ＣＡＲがＤドメインおよびｓｃＦｖを含む、［１８］に記載の遺伝子改変細胞。
［２１］．ＣＡＲが２つのＡＳＢＤを含む、［１８］に記載の遺伝子改変細胞。
［２２］．ＣＡＲが２つのＤドメインを含む、［１８］に記載の遺伝子改変細胞。
［２３］．ＣＡＲが、２つのｓｃＦｖを含む、［１］〜［１６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２４］．ＣＡＲが、２つのＡＳＢＤを含む、［１］〜［１６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２５］．ＣＡＲが、３、４、または５つのＡＳＢＤを含む、［１］〜［１６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２６］．ＣＡＲが、２つのＤドメインを含む、［１］〜［１６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２７］．ＣＡＲが、３、４、または５つのＤドメインを含む、［１］〜［１６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２８］．少なくとも１つのＡＤＢＤが、ＡＦＰ、ＢＣＭＡ、ＣＳ１、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、またはＣＤ１３７の抗原決定基に特異的に結合する、［１７］〜［２７］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２９］．少なくとも１つのＡＤＢＤが、ＡＦＰ  ｐ２６またはその変異体（例えば、配列番号１６、１１１７、１１１８、１１１９、１１２０、１１２１、１１２２、または１１２３のアミノ酸配列を含むポリペプチド）に特異的に結合する、［１７］〜［２７］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３０］．少なくとも１つのＡＤＢＤが、配列番号８４１〜９８４から選択される配列を含む、［１７］〜［２７］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３１］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、シグナル伝達ドメインである、［１］〜［３０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３２］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、プライマリシグナル伝達ドメインを含む、［１］〜［３１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３３］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、ＣＤ３ζプライマリシグナル伝達ドメインを含む、［１］〜［３２］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３４］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む、［１］〜［３３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３５］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、ＣＤ２８、４１ＢＢ、ＣＤ２７、およびＣＤ１３４から選択される共刺激シグナル伝達ドメインを含む、［１］〜［３４］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３６］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、４１ＢＢ共刺激シグナル伝達ドメインを含む、［１］〜［３４］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３７］．免疫エフェクター細胞がＴ細胞である、［１］〜［３６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３８］．免疫エフェクター細胞がＮＫ細胞である、［１］〜［３６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３９］．［１］〜［３８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を標的細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法であって、標的細胞がヒトＣＤ４５を発現している、方法。
［４０］．標的細胞がヒトＣＤ４５Ｒ０またはヒトＣＤ４５ＲＡアイソフォームを発現する、［３９］に記載の方法。
［４１］．［１］〜［３８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を標的細胞と接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、標的細胞がヒトＣＤ４５を発現する、方法。
［４２］．標的細胞がヒトＣＤ４５Ｒ０またはヒトＣＤ４５ＲＡアイソフォームを発現する、［４１］に記載の方法。
［４３］．接触させることが、インビトロで行われる、［３９］〜［４２］のいずれか１つに記載の方法。
［４４］．接触させることが、インビボで行われる、［３９］〜［４２］のいずれか１つに記載の方法。
［４５］．接触させることが、エクスビボで行われる、［３９］〜［４２］のいずれか１つに記載の方法。
［４６］．［１］〜［３８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む、対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法。
［４７］．［１］〜［３８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法。
［４８］．［１］〜［３８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む、リンパ球を枯渇させる方法。
［４９］．［１］〜［３８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む、メモリーＴ細胞を枯渇させる方法。
［５０］．ＣＤ４５  ＡＤがＣＤ４５ＲＯ特異的ＡＤである、［４９］に記載の方法。
［５１］．［１］〜［３８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む自己免疫疾患または障害を治療する方法。
［５２］．ＣＤ４５  ＡＤがＣＤ４５ＲＯ特異的ＡＤである、［５１］に記載の方法。
［５３］．自己免疫疾患または障害が、Ｉ型糖尿病、全身性硬化症、多発性硬化症、関節リウマチ、若年性特発性関節炎、乾癬、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、潰瘍性大腸炎、または円形脱毛症である、［５１］または［５２］に記載の方法。
［５４］．［１］〜［３８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法。
［５５］．移植が骨髄移植（ＢＭＴ）である、［５４］に記載の方法。
［５６］．移植が造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）である、［５４］に記載の方法。
［５７］．移植が自己移植である、［５４］〜［５６］のいずれか１つに記載の方法。
［５８］．移植が同種移植である、［５４］〜［５６］のいずれか１つに記載の方法。
［５９］．対象が血液癌を有する、［５４］〜［５８］のいずれか１つに記載の方法。
［６０］．対象が再発血液癌を有する、［５４］〜［５９］のいずれか１つに記載の方法。
［６１］．［１］〜［３８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法。
［６２］．血液癌が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される、［５９］〜［６１］のいずれか１つに記載の方法。
［６３］．血液癌がＡＭＬ、ＣＬＬ、または多発性骨髄腫である、［５９］〜［６１］のいずれか１つに記載の方法。
［６４］．遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞であって、
ａ）（１）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および
ｂ）前記遺伝子改変細胞上の少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、
第１のＡＤは少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤではなく、インビトロアッセイでアダプターと組み合わせて使用される遺伝子改変細胞はＣＤ４５  ＡＤ発現細胞に対する免疫反応を誘導でき、アダプターは第１のＡＤおよび少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、遺伝子改変細胞は少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤを発現しない、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞。
［６５］．免疫反応がＣＤ４５  ＡＤ発現細胞を死滅させる、［６４］に記載の遺伝子改変細胞。
［６６］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５Ｒ０アイソフォーム中に存在するが、ヒトＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＡＢ、またはＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォーム中に存在しない、［６４］または［６５］に記載の遺伝子改変細胞。
［６７］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５ＲＡアイソフォーム中に存在するが、ヒトＣＤ４５Ｒ０アイソフォーム中に存在しない、［６４］または［６５］に記載の遺伝子改変細胞。
［６８］．少なくとも１つのＣＤ４５  ＡＤが、ヒトＣＤ４５Ｒ０およびＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォーム中に存在する、［６４］または［６５］に記載の遺伝子改変細胞。
［６９］．第２のＡＤＢＤが、インビトロ結合アッセイで、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体とＣＤ４５  ＡＤに対する結合に関し競合する、［６４］〜［６８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［７０］．第２のＡＤＢＤが、インビトロ結合アッセイで、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体とＣＤ４５  ＡＤに対する結合に関し競合する、［６４］〜［６８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［７１］．遺伝子改変が、ヒトＣＤ４５  ＡＤをコードする遺伝子またはそのフラグメント中の、欠失、挿入、または置換である、［６４］〜［７０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［７２］．遺伝子改変が、ヒトＣＤ４５の発現を無くする欠失、挿入、または置換である、［７１］に記載の遺伝子改変細胞。
［７３］．遺伝子改変が、ＣＤ４５  ＡＤをコードする遺伝子またはそのフラグメントの、ヒトＣＤ４５のホモログ、変異体、または誘導体をコードするヌクレオチド配列での置換であり、コードされたホモログ、変異体、または誘導体は、ヒトＣＤ４５  ＡＤを含まない、［６４］〜［７２］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［７４］．ホモログが、非ヒト霊長類ＣＤ４５である、［７３］に記載の遺伝子改変細胞。
［７５］．変異体が、天然起源である、［７３］に記載の遺伝子改変細胞。
［７６］．変異体または誘導体が、シグナル伝達できる、［７３］または［７５］に記載の遺伝子改変細胞。
［７７］．ＡＤＢＤが、単鎖可変フラグメント（ｓｖＦｖ）を含む、［６４］〜［７６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［７８］．ＡＤＢＤが、代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）を含む、［６４］〜［７６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［７９］．ＡＤＢＤが、Ｄドメインを含む、［６４］〜［７６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［８０］．第１のＡＤＢＤが、ＡＦＰ、ＢＣＭＡ、ＣＳ１、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、またはＣＤ１３７の抗原決定基に特異的に結合する、［６４］〜［７９］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［８１］．第１のＡＤＢＤが、ＡＦＰ  ｐ２６またはその変異体（例えば、配列番号１６、１１１７、１１１８、１１１９、１１２０、１１２１、１１２２、または１１２３のアミノ酸配列を含むポリペプチド）に特異的に結合する、［６４］〜［７９］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［８２］．第１のＡＤＢＤが、配列番号８４１〜９８４から選択される配列を含む、［６４］〜［７９］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［８３］．ＣＡＲが、２つ以上のＡＤＢＤを含む、［６４］〜［８２］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［８４］．ＣＡＲが、２つのＡＤＢＤを含む、［６４］〜［８２］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［８５］．ＣＡＲがＡＳＢＤおよびｓｃＦｖを含む、［８４］に記載の遺伝子改変細胞。
［８６］．ＣＡＲがＤドメインおよびｓｃＦｖを含む、［８４］に記載の遺伝子改変細胞。
［８７］．ＣＡＲが２つのＡＳＢＤを含む、［８４］に記載の遺伝子改変細胞。
［８８］．ＣＡＲが２つのＤドメインを含む、［８４］に記載の遺伝子改変細胞。
［８９］．ＣＡＲが、２つのｓｃＦｖを含む、［６４］〜［８２］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［９０］．ＣＡＲが、２つのＡＳＢＤを含む、［６４］〜［８２］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［９１］．ＣＡＲが、３、４、または５つのＡＳＢＤを含む、［６４］〜［８２］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［９２］．ＣＡＲが、２つのＤドメインを含む、［６４］〜［８２］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［９３］．ＣＡＲが、３、４、または５つのＤドメインを含む、［６４］〜［８２］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［９４］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、シグナル伝達ドメインである、［６４］〜［９３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［９５］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、プライマリシグナル伝達ドメインを含む、［６４］〜［９４］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［９６］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、ＣＤ３ζプライマリシグナル伝達ドメインを含む、［６４］〜［９５］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［９７］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む、［６４］〜［９６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［９８］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、ＣＤ２８、４１ＢＢ、ＣＤ２７、およびＣＤ１３４から選択される共刺激シグナル伝達ドメインを含む、［６４］〜［９７］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［９９］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、４１ＢＢ共刺激シグナル伝達ドメインを含む、［６４］〜［９７］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１００］．免疫エフェクター細胞がＴ細胞である、［６４］〜［９９］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１０１］．免疫エフェクター細胞がＮＫ細胞である、［６４］〜［９９］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１０２］．［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび標的細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法であって、標的細胞がＣＤ４５を発現し、アダプターが第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含む、方法。
［１０３］．［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび標的細胞と接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、標的細胞がＣＤ４５を発現し、アダプターが第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含む、方法。
［１０４］．標的細胞がヒトＣＤ４５Ｒ０またはヒトＣＤ４５ＲＡアイソフォームを発現する、［１０２］または［１０３］に記載の方法。
［１０５］．［６４］〜［１０１］にいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび癌細胞と接触させることを含む血液癌を治療する方法であって、癌細胞がＣＤ４５を発現し、アダプターが第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含む、方法。
［１０６］．接触させることが、インビトロで行われる、［１０２］〜［１０６］のいずれか１つに記載の方法。
［１０７］．接触させることが、インビボで行われる、［１０２］〜［１０６］のいずれか１つに記載の方法。
［１０８］．接触させることが、エクスビボで行われる、［１０２］〜［１０６］のいずれか１つに記載の方法。
［１０９］．対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、
ａ）［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［１１０］．［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、対象が、第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［１１１］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、対象が［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［１１２］．対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、
ａ）［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［１１３］．［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、対象が、第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［１１４］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、対象が、［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［１１５］．リンパ球を枯渇させる方法であって、
ａ）［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［１１６］．［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むリンパ球を枯渇させる方法であって、対象が、第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［１１７］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むリンパ球を枯渇させる方法であって、対象が［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［１１８］．メモリーＴ細胞を枯渇させる方法であって、
ａ）［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［１１９］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むメモリーＴ細胞を枯渇させる方法であって、対象が［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［１２０］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むメモリーＴ細胞を枯渇させる方法であって、対象が［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［１２１］．ヒトＣＤ４５  ＡＤがＣＤ４５ＲＯ特異的ＡＤである、［１１８］〜［１２０］のいずれか１つに記載の方法。
［１２２］．自己免疫疾患または障害を治療する方法であって、
ａ）［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［１２３］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む自己免疫疾患または障害を治療する方法であって、対象が［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［１２４］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む自己免疫疾患または障害を治療する方法であって、対象が［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［１２５］．ヒトＣＤ４５  ＡＤがＣＤ４５ＲＯ特異的ＡＤである、［１２２］〜［１２４］のいずれか１つに記載の方法。
［１２６］．自己免疫疾患または障害が、Ｉ型糖尿病、全身性硬化症、多発性硬化症、関節リウマチ、若年性特発性関節炎、乾癬、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、潰瘍性大腸炎、または円形脱毛症である、［１２４］または［１２５］に記載の方法。
［１２７］．移植のために対象を前処置する方法であって、
ａ）［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［１２８］．［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法であって、対象が、第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［１２９］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法であって、対象が［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［１３０］．移植が骨髄移植（ＢＭＴ）である、［１２７］〜［１２９］のいずれか１つに記載の方法。
［１３１］．移植が造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）である、［１２７］〜［１２９］のいずれか１つに記載の方法。
［１３２］．移植が自己移植である、［１２７］〜［１３１］のいずれか１つに記載の方法。
［１３３］．移植が同種移植である、［１２７］〜［１３１］のいずれか１つに記載の方法。
［１３４］．対象が血液癌を有する、［１２７］〜［１３３］のいずれか１つに記載の方法。
［１３５］．対象が再発血液癌を有する、［１２７］〜［１３３］のいずれか１つに記載の方法。
［１３６］血液癌の治療方法であって、
ａ）［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［１３７］．［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法であって、対象が、第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［１３８］．第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法であって、対象が［６４］〜［１０１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［１３９］．血液癌が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される、［１２７］〜［１３９］のいずれか１つに記載の方法。
［１４０］．血液癌がＡＭＬ、ＣＬＬ、または多発性骨髄腫である、［１２７］〜［１３９］のいずれか１つに記載の方法。
［１４１］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５Ｒ０アイソフォーム中に存在するが、ヒトＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＡＢ、またはＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォーム中に存在しない、［６４］〜［１４０］のいずれか１つに記載の方法。
［１４２］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５ＲＡアイソフォーム中に存在するが、ヒトＣＤ４５Ｒ０アイソフォーム中に存在しない、［６４］〜［１４０］のいずれか１つに記載の方法。
［１４３］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５Ｒ０およびＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォーム中に存在する、［６４］〜［１４０］のいずれか１つに記載の方法。
［１４４］．第２のＡＤＢＤが、インビトロ結合アッセイで、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体とＣＤ４５  ＡＤに対する結合に関し競合する、［６４］〜［１４３］のいずれか１つに記載の方法。
［１４５］．第２のＡＤＢＤが、インビトロ結合アッセイで、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体とＣＤ４５  ＡＤに対する結合に関し競合する、［６４］〜［１４３］のいずれか１つに記載の方法。
［１４６］．遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞であって、
ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む２つ以上のＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および
ｂ）遺伝子改変細胞上の第１のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、
遺伝子改変細胞が第１のＡＤを発現しない、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞。
［１４７］．第１のＡＤがヒトＣＤ４５  ＡＤである、［１４６］に記載の遺伝子改変細胞。
［１４８］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５Ｒ０アイソフォーム中に存在するが、ヒトＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＡＢ、またはＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォーム中に存在しない、［１４６］または［１４７］に記載の遺伝子改変細胞。
［１４９］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５ＲＡアイソフォーム中に存在するが、ヒトＣＤ４５Ｒ０アイソフォーム中に存在しない、［１４６］または［１４７］に記載の遺伝子改変細胞。
［１５０］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５Ｒ０およびＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォーム中に存在する、［１４６］または［１４７］に記載の遺伝子改変細胞。
［１５１］第１のＡＤが、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８  ＡＤである、［１４６］に記載の遺伝子改変細胞。
［１５２］．２つ以上のＡＤＢＤが、同じ標的細胞上で発現したＡＤに結合する、［１４６］〜［１５１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１５３］．２つ以上のＡＤＢＤが、異なる標的細胞上で発現したＡＤに結合する、［１４６］〜［１５１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１５４］．遺伝子改変が、第１のＡＤを含むポリペプチドをコードする遺伝子またはそのフラグメント中の、欠失、挿入、または置換である、［１４６］〜［１５３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１５５］遺伝子改変が、第１のＡＤを含むポリペプチドをコードする遺伝子またはそのフラグメントの、第１のＡＤを含むポリペプチドのホモログ、変異体、または誘導体をコードするヌクレオチド配列による置換であり、コードされたホモログ、変異体、または誘導体は、第１のＡＤを含まない、［１４６］〜［１５４］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１５６］．ホモログが、非ヒト霊長類ホモログである、［１５５］に記載の遺伝子改変細胞。
［１５７］．変異体が、天然起源である、［１５５］に記載の遺伝子改変細胞。
［１５８］．変異体または誘導体が、シグナル伝達できる、［１５５］または［１５７］に記載の遺伝子改変細胞。
［１５９］．ＣＡＲが、異なる標的に結合する２つのＡＤＢＤを含む、［１４６］〜［１５８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１６０］．ＣＡＲが、（ａ）同じである、（ｂ）同じＡＤに結合する、（ｃ）同じ抗原の異なるＡＤに結合する、（ｄ）同じ細胞上の異なるＡＤに結合する、または（ｅ）異なる細胞上の異なるＡＤに結合する、２つのＡＤＢＤを含む、［１４６］〜［１５９］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１６１］．第１のＡＤＢＤが、ＡＦＰ、ＢＣＭＡ、ＣＳ１、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、またはＣＤ１３７の抗原決定基に特異的に結合する、［１４６］〜［１６０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１６２］．第１のＡＤＢＤが、ＡＦＰ  ｐ２６、またはその変異体（例えば、配列番号１６、１１１７、１１１８、１１１９、１１２０、１１２１、１１２２、または１１２３のアミノ酸配列を含むポリペプチド）に特異的に結合する、［１４６］〜［１６０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１６３］．第１のＡＤＢＤが、配列番号８４１〜９８４から選択される配列を含む、［１４６］〜［１６０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１６４］．ＣＡＲが、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＣＳ１、ＨＥＲ２、ＢＣＭＡ、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択される抗原に特異的に結合する、［１４６］〜［１６３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１６５］．ＣＡＲがＢＣＭＡに特異的に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、配列番号４４〜３３８、および３３９から選択される配列を含む、［１４６］〜［１６３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１６６］．ＣＡＲがＣＤ１２３に特異的に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、配列番号３４０〜７７２、および７７３から選択される配列を含む、［１４６］〜［１６３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１６７］．ＣＡＲがＣＤ１９に特異的に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、配列番号１０３０〜１０５８、および１０５９から選択される配列を含む、［１４６］〜［１６３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１６８］．ＣＡＲがＣＤ２２に特異的に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、配列番号１０６０〜１０６８、および１０６９から選択される配列を含む、［１４６］〜［１６３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１６９］．ＣＡＲがＣＳ１に特異的に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、配列番号７８０〜７９４、および７９６から選択される配列を含む、［１４６］〜［１６３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１７０］．ＣＡＲがＰＤＬ１に特異的に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、配列番号１０１０〜１０１６、１０７４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む、［１４６］〜［１６３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１７１］．ＣＡＲが、２つのＡＤＢＤを含む、［１４６］〜［１７０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１７２］．ＣＡＲがＡＳＢＤおよびｓｃＦｖを含む、［１７１］に記載の遺伝子改変細胞。
［１７３］．ＣＡＲがＤドメインおよびｓｃＦｖを含む、［１７１］に記載の遺伝子改変細胞。
［１７４］．ＣＡＲが２つのＡＳＢＤを含む、［１７１］に記載の遺伝子改変細胞。
［１７５］．ＣＡＲが２つのＤドメインを含む、［１７１］に記載の遺伝子改変細胞。
［１７６］．ＣＡＲが、２つのｓｃＦｖを含む、［１４６］〜［１７０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１７７］．ＣＡＲが、２つのＡＳＢＤを含む、［１４６］〜［１７０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１７８］．ＣＡＲが、３、４、または５つのＡＳＢＤを含む、［１４６］〜［１７０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１７９］．ＣＡＲが、２つのＤドメインを含む、［１４６］〜［１７０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１８０］．ＣＡＲが、３、４、または５つのＤドメインを含む、［１４６］〜［１７０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１８１］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、シグナル伝達ドメインである、［１４６］〜［１８０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１８２］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、プライマリシグナル伝達ドメインを含む、［１４６］〜［１８１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１８３］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、ＣＤ３ζプライマリシグナル伝達ドメインを含む、［１４６］〜［１８２］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１８４］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む、［１４６］〜［１８３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１８５］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、ＣＤ２８、４１ＢＢ、ＣＤ２７、およびＣＤ１３４から選択される共刺激シグナル伝達ドメインを含む、［１４６］〜［１８４］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１８６］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、４１ＢＢ共刺激シグナル伝達ドメインを含む、［１４６］〜［１８４］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１８７］．免疫エフェクター細胞がＴ細胞である、［１４６］〜［１８６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１８８］．免疫エフェクター細胞がＮＫ細胞である、［１４６］〜［１８６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［１８９］．［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を標的細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法。
［１９０］．標的細胞がヒトＣＤ４５を発現する、［１８９］に記載の方法。
［１９１］．標的細胞がヒトＣＤ４５Ｒ０またはヒトＣＤ４５ＲＡアイソフォームを発現する、［１８９］に記載の方法。
［１９２］．［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を標的細胞と接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法。
［１９３］．標的細胞がヒトＣＤ４５を発現する、［１９２］に記載の方法。
［１９４］．標的細胞がヒトＣＤ４５Ｒ０またはヒトＣＤ４５ＲＡアイソフォームを発現する、［１９２］に記載の方法。
［１９５］．接触させることが、インビトロで行われる、［１８９］〜［１９４］のいずれか１つに記載の方法。
［１９６］．接触させることが、インビボで行われる、［１８９］〜［１９４］のいずれか１つに記載の方法。
［１９７］．接触させることが、エクスビボで行われる、［１８９］〜［１９４］のいずれか１つに記載の方法。
［１９８］．［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む、対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法。
［１９９］．［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法。
［２００］．［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む、リンパ球を枯渇させる方法。
［２０１］．［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法。
［２０２］．移植が骨髄移植（ＢＭＴ）である、［２０１］に記載の方法。
［２０３］．移植が造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）である、［２０１］に記載の方法。
［２０４］．移植が自己移植である、［２０１］〜［２０３］のいずれか１つに記載の方法。
［２０５］．移植が同種移植である、［２０１］〜［２０３］のいずれか１つに記載の方法。
［２０６］．対象が血液癌を有する、［２０１］〜［２０５］のいずれか１つに記載の方法。
［２０７］．対象が再発血液癌を有する、［２０１］〜［２０５］のいずれか１つに記載の方法。
［２０８］．［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法。
［２０９］．血液癌が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される、［２０６］〜［２０８］のいずれか１つに記載の方法。
［２１０］．血液癌がＡＭＬ、ＣＬＬ、または多発性骨髄腫である、［２０６］〜［２０８］のいずれか１つに記載の方法。
［２１１］．［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび標的細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法であって、アダプターがＣＡＲおよび第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含む、方法。
［２１２］．［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび標的細胞と接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、アダプターがＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含む、方法。
［２１３］．［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび癌細胞と接触させることを含む血液癌を治療する方法であって、アダプターがＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含む、方法。
［２１４］．接触させることが、インビトロで行われる、［２１１］〜［２１３］のいずれか１つに記載の方法。
［２１５］．接触させることが、インビボで行われる、［２１１］〜［２１３］のいずれか１つに記載の方法。
［２１６］．接触させることが、エクスビボで行われる、［２１１］〜［２１３］のいずれか１つに記載の方法。
［２１７］．対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、
ａ）［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２１８］．［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、対象が、ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［２１９］．ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、対象が、［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２２０］．対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、
ａ）［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２２１］．［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、対象が、ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［２２２］．ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、対象が［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２２３］．リンパ球を枯渇させる方法であって、
ａ）［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２２４］．［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むリンパ球を枯渇させる方法であって、対象が、ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［２２５］．ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むリンパ球を枯渇させる方法であって、対象が［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２２６］．移植のために対象を前処置する方法であって、
ａ）［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２２７］．［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法であって、対象が、ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［２２８］．ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法であって、対象が［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２２９］．移植が骨髄移植（ＢＭＴ）である、［２２６］〜［２２８］のいずれか１つに記載の方法。
［２３０］．移植が造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）である、［２２６］〜［２２８］のいずれか１つに記載の方法。
［２３１］．移植が自己移植である、［２２６］〜［２３０］のいずれか１つに記載の方法。
［２３２］．移植が同種移植である、［２２６］〜［２３０］のいずれか１つに記載の方法。
［２３３］．対象が血液癌を有する、［２２６］〜［２３２］のいずれか１つに記載の方法。
［２３４］．対象が再発血液癌を有する、［２２６］〜［２３２］のいずれか１つに記載の方法。
［２３５］血液癌の治療方法であって、
ａ）［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含む方法。
［２３６］．［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法であって、対象が、ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターを投与されている、方法。
［２３７］．ＣＡＲおよび標的細胞上の第２のＡＤに結合できる第２のＡＤＢＤにより認識されるＡＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法であって、対象が、［１４６］〜［１８８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されている、方法。
［２３８］．血液癌が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される、［２３３］〜［２３７］のいずれか１つに記載の方法。
［２３９］．血液癌がＡＭＬ、ＣＬＬ、または多発性骨髄腫である、［２３３］〜［２３７］のいずれか１つに記載の方法。
［２４０］．遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞であって、
ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および
ｂ）遺伝子改変細胞上の第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、
アダプターと組み合わせて使用される遺伝子改変細胞は、インビトロアッセイで第２のＡＤ発現細胞に対する免疫反応を誘導でき、アダプターは第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、遺伝子改変細胞は第２のＡＤを発現しない、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞。
［２４１］．免疫反応が第２のＡＤ発現細胞を死滅させる、［２４０］に記載の遺伝子改変細胞。
［２４２］．第２のＡＤがヒトＣＤ４５  ＡＤである、［２４０］または［２４１］に記載の遺伝子改変細胞。
［２４３］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５Ｒ０アイソフォーム中に存在するが、ヒトＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＡＢ、またはＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォーム中に存在しない、［２４２］に記載の遺伝子改変細胞。
［２４４］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５ＲＡアイソフォーム中に存在するが、ヒトＣＤ４５Ｒ０アイソフォーム中に存在しない、［２４２］に記載の遺伝子改変細胞。
［２４５］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５Ｒ０およびＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォーム中に存在する、［２４２］に記載の遺伝子改変細胞。
［２４６］．第２のＡＤがヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８  ＡＤである、［２４０］または［２４１］に記載の遺伝子改変細胞。
［２４７］．第１のＡＤが標的細胞上で発現しておらず、第２のＡＤが標的細胞上で発現している、［２４０］〜［２４６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２４８］．第１のＡＤが標的細胞上で発現している、［２４０］〜［２４６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２４９］．第１のＡＤおよび第２のＡＤが同じ標的細胞上で発現している、［２４０］〜［２４６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２５０］．第１のＡＤおよび第２のＡＤが異なる標的細胞上で発現している、［２４０］〜［２４６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２５１］．遺伝子改変が、第２のＡＤを含むポリペプチドをコードする遺伝子またはそのフラグメント中の、欠失、挿入、または置換である、［２４０］〜［２５０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２５２］遺伝子改変が、第２のＡＤを含むポリペプチドをコードする遺伝子またはそのフラグメントの、第２のＡＤを含むポリペプチドのホモログ、変異体、または誘導体をコードするヌクレオチド配列による置換であり、コードされたホモログ、変異体、または誘導体は、第２のＡＤを含まない、［２４０］〜［２５０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２５３］．ホモログが、非ヒト霊長類ホモログである、［２５２］に記載の遺伝子改変細胞。
［２５４］．変異体が、天然起源である、［２５２］に記載の遺伝子改変細胞。
［２５５］．変異体または誘導体が、シグナル伝達できる、［２５２］または［２５４］に記載の遺伝子改変細胞。
［２５６］．第１のＡＤＢＤが、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）を含む、［２４０］〜［２５５］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２５７］．第１のＡＤＢＤが、代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）を含む、［２４０］〜［２５５］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２５８］．第１のＡＤＢＤが、Ｄドメインを含む、［２４０］〜［２５５］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２５９］．第１のＡＤＢＤが、ＡＦＰ、ＢＣＭＡ、ＣＳ１、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、またはＣＤ１３７の抗原決定基に特異的に結合する、［２４０］〜［２５８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２６０］．第１のＡＤＢＤが、ＡＦＰ  ｐ２６、またはその変異体（例えば、配列番号１６、１１１７、１１１８、１１１９、１１２０、１１２１、１１２２、または１１２３のアミノ酸配列を含むポリペプチド）に特異的に結合する、［２４０］〜［２５８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２６１］．第１のＡＤＢＤが、配列番号８４１〜９８４から選択される配列を含む、［２４０］〜［２５８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２６２］．ＣＡＲが、２つ以上のＡＤＢＤを含む、［２４０］〜［２６１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２６３］．ＣＡＲが、２つのＡＤＢＤを含む、［２４０］〜［２６１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２６４］．ＣＡＲがＡＳＢＤおよびｓｃＦｖを含む、［２６３］に記載の遺伝子改変細胞。
［２６５］．ＣＡＲがＤドメインおよびｓｃＦｖを含む、［２６３］に記載の遺伝子改変細胞。
［２６６］．ＣＡＲが２つのＡＳＢＤを含む、［２６３］に記載の遺伝子改変細胞。
［２６７］．ＣＡＲが２つのＤドメインを含む、［２６３］に記載の遺伝子改変細胞。
［２６８］．ＣＡＲが、２つのｓｃＦｖを含む、［２４０］〜［２６１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２６９］．ＣＡＲが、２つのＡＳＢＤを含む、［２４０］〜［２６１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２７０］．ＣＡＲが、３、４、または５つのＡＳＢＤを含む、［２４０］〜［２６１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２７１］．ＣＡＲが、２つのＤドメインを含む、［２４０］〜［２６１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２７２］．ＣＡＲが、３、４、または５つのＤドメインを含む、［２４０］〜［２６１］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２７３］．遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞であって、
ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む２つ以上のＡＤＢＤ、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）；および
ｂ）遺伝子改変細胞上の第２のＡＤの発現を無くする遺伝子改変を含み、
アダプターと組み合わせて使用される遺伝子改変細胞は、インビトロアッセイで第２のＡＤ発現細胞に対する免疫反応を誘導でき、アダプターは第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、遺伝子改変細胞は第２のＡＤを発現しない、遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞。
［２７４］．免疫反応が第２のＡＤ発現細胞を死滅させる、［２７３］に記載の遺伝子改変細胞。
［２７５］．第２のＡＤがヒトＣＤ４５  ＡＤである、［２７３］または［２７４］に記載の遺伝子改変細胞。
［２７６］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５ＲＯアイソフォーム中に存在するが、ヒトＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＡＢ、またはＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォーム中に存在しない、［２７５］に記載の遺伝子改変細胞。
［２７７］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５ＲＡアイソフォーム中に存在するが、ヒトＣＤ４５ＲＯアイソフォーム中に存在しない、［２７５］に記載の遺伝子改変細胞。
［２７８］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５ＲＯおよびＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォーム中に存在する、［２７５］に記載の遺伝子改変細胞。
［２７９］．第２のＡＤがヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８  ＡＤである、［２７３］または［２７４］に記載の遺伝子改変細胞。
［２８０］．第１のＡＤが標的細胞上で発現している、［２７３］〜［２７９］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２８１］．第１のＡＤおよび第２のＡＤが同じ標的細胞上で発現している、［２７３］〜［２７９］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２８２］．第１のＡＤおよび第２のＡＤが異なる標的細胞上で発現している、［２７３］〜［２７９］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２８３］．遺伝子改変が、第２のＡＤを含むポリペプチドをコードする遺伝子またはそのフラグメント中の、欠失、挿入、または置換である、［２７３］〜［２８２］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２８４］遺伝子改変が、第２のＡＤを含むポリペプチドをコードする遺伝子またはそのフラグメントの、第２のＡＤを含むポリペプチドのホモログ、変異体、または誘導体をコードするヌクレオチド配列による置換であり、コードされたホモログ、変異体、または誘導体は、第２のＡＤを含まない、［２７３］〜［２８２］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２８５］．ホモログが、非ヒト霊長類ホモログである、［２８４］に記載の遺伝子改変細胞。
［２８６］．変異体が、天然起源である、［２８４］に記載の遺伝子改変細胞。
［２８７］．変異体または誘導体が、シグナル伝達できる、［２８４］または［２８６］に記載の遺伝子改変細胞。
［２８８］．第１のＡＤＢＤが、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）を含む、［２７３］〜［２８７］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２８９］．第１のＡＤＢＤが、代替骨格結合ドメイン（ＡＳＢＤ）を含む、［２７３］〜［２８７］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２９０］．第１のＡＤＢＤが、Ｄドメインを含む、［２７３］〜［２８７］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２９１］．ＣＡＲが、２つのＡＤＢＤを含む、［２７３］〜［２８７］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２９２］．ＣＡＲがＡＳＢＤおよびｓｃＦｖを含む、［２９１］に記載の遺伝子改変細胞。
［２９３］．ＣＡＲがＤドメインおよびｓｃＦｖを含む、［２９１］に記載の遺伝子改変細胞。
［２９４］．ＣＡＲが２つのＡＳＢＤを含む、［２９１］に記載の遺伝子改変細胞。
［２９５］．ＣＡＲが２つのＤドメインを含む、［２９１］に記載の遺伝子改変細胞。
［２９６］．ＣＡＲが、２つのｓｃＦｖを含む、［２７３］〜［２８７］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２９７］．ＣＡＲが、２つのＡＳＢＤを含む、［２７３］〜［２８７］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２９８］．ＣＡＲが、３、４、または５つのＡＳＢＤを含む、［２７３］〜［２８７］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［２９９］．ＣＡＲが、２つのＤドメインを含む、［２７３］〜［２８７］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３００］．ＣＡＲが、３、４、または５つのＤドメインを含む、［２７３］〜［２８７］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３０１］．第１のＡＤＢＤが、ＡＦＰ、ＢＣＭＡ、ＣＳ１、ＣＤ１２３、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、またはＣＤ１３７の抗原決定基に特異的に結合する、［２７３］〜［３００］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３０２］．第１のＡＤＢＤが、ＡＦＰ  ｐ２６、またはその変異体（例えば、配列番号１６、１１１７、１１１８、１１１９、１１２０、１１２１、１１２２、または１１２３のアミノ酸配列を含むポリペプチド）に特異的に結合する、［２７３］〜［３００］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３０３］．第１のＡＤＢＤが、配列番号８４１〜９８４から選択される配列を含む、［２７３］〜［３００］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３０４］．ＣＡＲが、異なる標的に結合する２つのＡＤＢＤを含む、［２７３］〜［３０３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３０５］．ＣＡＲが、（ａ）同じである、（ｂ）同じＡＤに結合する、（ｃ）同じ抗原の異なるＡＤに結合する、（ｄ）同じ細胞上の異なるＡＤに結合する、または（ｅ）異なる細胞上の異なるＡＤに結合する、２つのＡＤＢＤを含む、［２７３］〜［３０３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３０６］．ＣＡＲが、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＢＣＭＡ、ＣＳ１、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、およびＰＤＬ１から選択される抗原に特異的に結合する、［２７３］〜［３０５］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３０７］．ＣＡＲがＢＣＭＡに特異的に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、配列番号４４〜３３８、および３３９から選択される配列を含む、［２７３］〜［３０５］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞、またはＣＡＲがＣＳ１に特異的に結合する、［２７３］〜［３０５］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３０８］．ＣＡＲがＣＤ１２３に特異的に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、配列番号３４０〜７７２、および７７３から選択される配列を含む、［２７３］〜［３０５］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３０９］．ＣＡＲがＣＤ１９に特異的に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、配列番号１０３０〜１０５８、および１０５９から選択される配列を含む、［２７３］〜［３０５］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３１０］．ＣＡＲがＣＤ２２に特異的に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、配列番号１０６０〜１０６８、および１０６９から選択される配列を含む、［２７３］〜［３０５］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３１１］．ＣＡＲがＣＳ１に特異的に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、配列番号７８０〜７９４、および７９５から選択される配列を含む、［２７３］〜［３０５］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３１２］．ＣＡＲがＰＤＬ１に特異的に結合し、任意選択で、ＣＡＲが、配列番号１０１０〜１０１６、１０７４〜１０７８、および１０７９から選択される配列を含む、［２７３］〜［３０５］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３１３］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、シグナル伝達ドメインである、［２４０］〜［３１２］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３１４］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、プライマリシグナル伝達ドメインを含む、［２４０］〜［３１３］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３１５］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、ＣＤ３ζプライマリシグナル伝達ドメインを含む、［２４０］〜［３１４］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３１６］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む、［２４０］〜［３１５］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３１７］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、ＣＤ２８、４１ＢＢ、ＣＤ２７、およびＣＤ１３４から選択される共刺激シグナル伝達ドメインを含む、［２４０］〜［３１６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３１８］．ＣＡＲ細胞内ドメインが、４１ＢＢ共刺激シグナル伝達ドメインを含む、［２４０］〜［３１６］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３１９］．免疫エフェクター細胞がＴ細胞である、［２４０］〜［３１８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３２０］．免疫エフェクター細胞がＮＫ細胞である、［２４０］〜［３１８］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞。
［３２１］．［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を標的細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法。
［３２２］．標的細胞がヒトＣＤ４５を発現する、［３２１］に記載の方法。
［３２３］．標的細胞がヒトＣＤ４５Ｒ０またはヒトＣＤ４５ＲＡアイソフォームを発現する、［３２１］に記載の方法。
［３２４］．［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を標的細胞と接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法。
［３２５］．標的細胞がヒトＣＤ４５を発現する、［３２４］に記載の方法。
［３２６］．標的細胞がヒトＣＤ４５Ｒ０またはヒトＣＤ４５ＲＡアイソフォームを発現する、［３２４］に記載の方法。
［３２７］．接触させることが、インビトロで行われる、［３２１］〜［３２６］のいずれか１つに記載の方法。
［３２８］．接触させることが、インビボで行われる、［３２１］〜［３２６］のいずれか１つに記載の方法。
［３２９］．接触させることが、エクスビボで行われる、［３２１］〜［３２６］のいずれか１つに記載の方法。
［３３０］．［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む、対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法。
［３３１］．［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法。
［３３２］．［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む、リンパ球を枯渇させる方法。
［３３３］．［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法。
［３３４］．移植が骨髄移植（ＢＭＴ）である、［３３３］に記載の方法。
［３３５］．移植が造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）である、［３３３］に記載の方法。
［３３６］．移植が自己移植である、［３３３］〜［３３５］のいずれか１つに記載の方法。
［３３７］．移植が同種移植である、［３３３］〜［３３５］のいずれか１つに記載の方法。
［３３８］．対象が血液癌を有する、［３３３］〜［３３７］のいずれか１つに記載の方法。
［３３９］．対象が再発血液癌を有する、［３３３］〜［３３７］のいずれか１つに記載の方法。
［３４０］．［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法。
［３４１］．血液癌が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される、［３３８］〜［３４０］のいずれか１つに記載の方法。
［３４２］．血液癌がＡＭＬ、ＣＬＬ、または多発性骨髄腫である、［３３８］〜［３４０］のいずれか１つに記載の方法。
［３４３］．［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび標的細胞と接触させることを含む標的細胞を死滅させる方法であって、アダプターが第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、第２のＡＤが標的細胞上で発現している、方法。
［３４４］．［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび標的細胞と接触させることを含む標的細胞に免疫反応を伝達する方法であって、アダプターが第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、第２のＡＤが標的細胞上で発現している、方法。
［３４５］．［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞をアダプターおよび癌細胞と接触させることを含む血液癌を治療する方法であって、アダプターが第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含み、第２のＡＤが癌細胞上で発現している、方法。
［３４６］．接触させることが、インビトロで行われる、［３４３］〜［３４５］のいずれか１つに記載の方法。
［３４７］．接触させることが、インビボで行われる、［３４３］〜［３４５］のいずれか１つに記載の方法。
［３４８］．接触させることが、エクスビボで行われる、［３４３］〜［３４５］のいずれか１つに記載の方法。
［３４９］．対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、
ａ）［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含み、第２のＡＤが標的細胞上で発現している、方法。
［３５０］．［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、対象が、第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されており、第２のＡＤが標的細胞上で発現している、方法。
［３５１］．第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の標的細胞に対する免疫反応を誘導する方法であって、対象が、［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されており、第２のＡＤが標的細胞上で発現している、方法。
［３５２］．対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、
ａ）［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与することを含み、第２のＡＤが、増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３５３］．［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、対象が、第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されており、第２のＡＤが増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３５４］．第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む対象の増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶を治療する方法であって、対象が、［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されており、第２のＡＤが増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３５５］．リンパ球を枯渇させる方法であって、
ａ）［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含み、第２のＡＤがリンパ球標的細胞上で発現している、方法。
［３５６］．［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むリンパ球を枯渇させる方法であって、対象が、第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されており、第２のＡＤがリンパ球標的細胞上で発現している、方法。
［３５７］．第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含むリンパ球を枯渇させる方法であって、対象が、［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されており、第２のＡＤがリンパ球標的細胞上で発現している、方法。
［３５８］．移植のために対象を前処置する方法であって、
ａ）［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含み、第２のＡＤが移植に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３５９］．［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法であって、対象が、第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されており、第２のＡＤが移植に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３６０］．第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む移植のために対象を前処置する方法であって、対象が［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されており、第２のＡＤが移植に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３６１］．移植が骨髄移植（ＢＭＴ）である、［３５８］〜［３６０］のいずれか１つに記載の方法。
［３６２］．移植が造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）である、［３５８］〜［３６０］のいずれか１つに記載の方法。
［３６３］．移植が自己移植である、［３５８］〜［３６２］のいずれか１つに記載の方法。
［３６４］．移植が同種移植である、［３５８］〜［３６２］のいずれか１つに記載の方法。
［３６５］．対象が血液癌を有する、［３５８］〜［３６４］のいずれか１つに記載の方法。
［３６６］．対象が再発血液癌を有する、［３５８］〜［３６４］のいずれか１つに記載の方法。
［３６７］血液癌の治療方法であって、
ａ）［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、
それを必要としている対象に投与すること；および
ｂ）第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を対象に投与すること、を含み、第２のＡＤが血液癌に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３６８］．［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法であって、対象が、第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与されており、第２のＡＤが血液癌に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３６９］．第１のＡＤおよび第２のＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターの治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む血液癌を治療する方法であって、対象が［２４０］〜［３２０］のいずれか１つに記載の遺伝子改変細胞を投与されており、第２のＡＤが血液癌に付随する標的細胞上で発現している、方法。
［３７０］．血液癌が、急性白血病、慢性白血病、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、毛様細胞性白血病、および脊髄形成異常症から選択される、［３５８］〜［３６９］のいずれか１つに記載の方法。
［３７１］．血液癌がＡＭＬ、ＣＬＬ、または多発性骨髄腫である、［３５８］〜［３６９］のいずれか１つに記載の方法。
［３７２］．（ａ）抗原決定基（ＡＤ）および（ｂ）１つまたは複数の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む単離アダプターポリペプチドであって、少なくとも１つのＡＤＢＤがヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合し、［６４］に記載の遺伝子改変細胞の存在下で、アダプターとＣＤ４５  ＡＤ発現標的細胞とを接触させることにより、インビトロアッセイにおいて標的細胞に対して遺伝子改変細胞による免疫反応を誘導できる、単離アダプターポリペプチド。
［３７３］．免疫反応がＣＤ４５  ＡＤ発現細胞を死滅させる、［３７２］に記載のアダプターポリペプチド。
［３７４］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５Ｒ０アイソフォーム中に存在するが、ヒトＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＡＢ、またはＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォーム中に存在しない、［３７２］または［３７３］に記載のアダプターポリペプチド。
［３７５］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５ＲＡアイソフォーム中に存在するが、ヒトＣＤ４５Ｒ０アイソフォーム中に存在しない、［３７２］または［３７３］に記載のアダプターポリペプチド。
［３７６］．ＣＤ４５  ＡＤがヒトＣＤ４５Ｒ０およびＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォーム中に存在する、［３７２］または［３７３］に記載のアダプターポリペプチド。
［３７７］．インビトロ結合アッセイで、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体とＣＤ４５  ＡＤに対する結合に関し競合する、［３７２］または［３７３］に記載のアダプターポリペプチド。
［３７８］．インビトロ結合アッセイで、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体とＣＤ４５  ＡＤに対する結合に関し競合する、［３７２］または［３７３］に記載のアダプターポリペプチド。
【０５７４】
本明細書で使用される場合、用語の「ＣＤ４５」は、タンパク質チロシンホスファターゼ、受容体Ｃ型（ＰＴＰＲＣ）を意味し、白血球共通抗原（ＬＣＡ）、ＬＹ５、Ｂ２２０、Ｌ−ＣＡ、Ｔ２００、ＣＤ４５Ｒ、ＧＰ１８０としても知られる。用語の「ＣＤ４５」は、変異体、アイソフォーム、同族体、オルソログおよびパラログを含む。ＣＤ４５は、グリコシル化Ｉ型膜貫通タンパク質であり、その種々のアイソフォームは、赤血球およびプラズマ細胞を除く、全ての造血細胞の表面上に発現する。ＣＤ４５はまた、リンパ腫、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病、毛様細胞性白血病、および急性非リンパ性白血病でも発現している。ＣＤ４５は、可変ＣＤ４５エクソンの選択的スプライシングの結果として、複数のアイソフォームで発現される。ＣＤ４５遺伝子は、３４エクソンを含み、その内、ペプチドＡをコードするエクソン４、ペプチドＢをコードするエクソン５、およびペプチドＣをコードするエクソン６は、選択的にスプライシングされ、各種アイソフォームを生成する。ペプチドＡ、Ｂ、およびＣを含むＣＤ４５Ｒアイソフォームは最長である。ペプチドＡ、Ｂ、およびＣを欠くＣＤ４５ＲＯアイソフォームは最短である。アイソフォームＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＢ、ＣＤ４５ＲＣ、ＣＤ４５ＲＡＢ、ＣＤ４５ＲＡＣ、およびＣＤ４５ＲＢＣは、ペプチドＡ、Ｂ、およびＣの対応する組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、２５個のアミノ酸残基Ｎ末端シグナル配列（ＭＴＭＹＬＷＬＫＬＬＡＦＧＦＡＦＬＤＴＥＶＦＶＴＧ、配列番号１１０１）を含むヒトＣＤ４５ＲＡＢＣのアミノ酸配列は、ジェンバンク受入番号ＮＰ＿００２８２９．３（配列番号１１０２）を有する。ペプチドＡ、Ｂ、およびＣは、それぞれ、配列番号１１０２の残基３４〜９９、１００〜１４６、および１４７〜１９４に対応する。いくつかの実施形態では、配列番号１１０１の２５個のアミノ酸残基Ｎ末端シグナル配列を含むヒトＣＤ４５ＲＯのアミノ酸配列は、ジェンバンク受入番号ＮＰ＿５６３５７８．２（配列番号１１０３）を有する。
【０５７５】
ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ４５ＲＢ、ＣＤ４５ＲＡＢ、ＣＤ４５ＲＢＣおよびＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォームのみが従来からヒトで特定されている。ＣＤ４５ＲＡは、ナイーブＴ細胞上で発現される。ＣＤ４５ＲＯアイソフォームは、活性化およびメモリーＴ細胞、一部のＢ細胞サブセット、活性化単球／マクロファージ、および顆粒球上で発現される。ＣＤ４５ＲＢは、末梢Ｂ細胞、ナイーブＴ細胞、胸腺細胞上で、わずかにマクロファージ上で、および樹状細胞上で発現される２２０ｋＤの糖タンパク質である。Ｔ細胞は、活性化され、ナイーブからメモリー細胞に進行するので、ＣＤ４５ＲＢ発現は下方制御される。さらに、機能的に別のＣＤ４＋Ｔ細胞サブセットは異なるサイトカインプロファイルを分泌し、ＣＤ４５ＲＢ強度により分離できる。
【０５７６】
異なるＣＤ４５アイソフォームの細胞外ドメインは、重なり合う一連の抗原決定基を含む。ＣＤ４５反応性モノクローナル抗体は、異なるアイソフォームに対するそれらの特異性に基づいて分類された。本明細書で使用される場合、抗ＣＤ４５抗体は、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ４５ＲＢ、ＣＤ４５ＲＡＢ、ＣＤ４５ＲＢＣおよびＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォームに特異的に結合する抗体を意味する。本明細書で使用される場合、抗ＣＤ４５ＲＡ抗体は、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＡＢ、またはＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォームに特異的に結合するが、ＣＤ４５ＲＢまたはＣＤ４５ＲＯには結合しない抗体を意味する。抗ＣＤ４５ＲＡ抗体には、限定されないが、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、ＭＴ２が挙げられる。本明細書で使用される場合、抗ＣＤ４５ＲＢ抗体は、ＣＤ４５ＲＢ、ＣＤ４５ＲＡＢ、ＣＤ４５ＲＢＣまたはＣＤ４５ＲＡＢＣアイソフォームに特異的に結合するが、ＣＤ４５ＲＡまたはＣＤ４５ＲＯには結合しない抗体を意味する。本明細書で使用される場合、抗ＣＤ４５ＲＯ抗体は、ＣＤ４５ＲＯに特異的に結合するが、他のアイソフォームには結合しない抗体を意味する。ＣＤ４５ＲＯ特異的抗体には、限定されないが、ＵＣＨＬ１、Ａ６、ＯＰＤ４が挙げられる。いくつかの実施形態では、本明細書で開示のＣＤ４５特異的抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）は、ＣＤ４５ＲＯに特異的に結合するが、その他のＣＤ４５アイソフォームには結合しない。いくつかの実施形態では、本明細書で開示のＣＤ４５特異的ＡＤＢＤは、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＡＢ、およびＣＤ４５ＲＡＢＣに特異的に結合するが、その他のＣＤ４５アイソフォームには結合しない。いくつかの実施形態では、本明細書で開示のＣＤ４５特異的ＡＤＢＤは、ＣＤ４５アイソフォームに特異的に結合する。ＣＤ４５の細胞型特異的グリコシル化は、ヒトＣＤ４５抗原決定基の形成に寄与する。例えば、ＣＤ４５ＲＢＭＥＭ５５抗体により結合される抗原決定基の発現差異は、Ｂ細胞発生中に細胞型特異的Ｏ結合型グリコシル化により調節される。Ｋｏｅｔｈｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，９０（１）：５−１９。ＵＣＨＬ１およびＡ６抗体により結合される抗原決定基の発現はまた、ＣＤ４５ＲＯアイソフォームのグリコシル化に依存する。いくつかの実施形態では、本明細書で開示のＣＤ４５特異的ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５のグリコシル化依存性抗原決定基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、本明細書で開示のＣＤ４５特異的ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＢのグリコシル化依存性抗原決定基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、本明細書で開示のＣＤ４５特異的ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＯのグリコシル化依存性抗原決定基に特異的に結合する。
【０５７７】
本明細書で使用される場合、用語の「非ヒト霊長類ＣＤ４５」は、ヒトＣＤ４５の霊長類オルソログを意味する。いくつかの実施形態では、非ヒト霊長類ＣＤ４５は、アカゲザルＣＤ４５である。いくつかの実施形態では、Ｎ末端シグナル配列を含むアカゲザル（ｒｈｅｓｕｓ）（アカゲザル（Ｍａｃａｃａ  ｍｕｌａｔｔａ））ＣＤ４５ＲＡＢＣのアミノ酸配列は、ジェンバンク受入番号ＸＰ＿０１４９７６２０９（配列番号１１０４）を有する。いくつかの実施形態では、非ヒト霊長類ＣＤ４５は、カニクイザルＣＤ４５である。いくつかの実施形態では、Ｎ末端シグナル配列を含むカニクイザル（ｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓ）（カニクイザル（Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）ＣＤ４５ＲＡＢＣのアミノ酸配列は、ジェンバンク受入番号ＸＰ＿００５５４０３８６（配列番号１１０５）を有する。それらの一次アミノ酸配列の差異に起因して、ヒトＣＤ４５および非ヒト霊長類ＣＤ４５は、異なる抗原決定基セットを含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示のＣＤ４５特異的ＡＤＢＤは、非ヒト霊長類ＣＤ４５中にも存在する抗原決定基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、本明細書で開示のＣＤ４５特異的ＡＤＢＤは、非ヒト霊長類ＣＤ４５中に存在しない抗原決定基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、本明細書で開示のＣＤ４５特異的ＡＤＢＤは、アカゲザルＣＤ４５中に存在しない抗原決定基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、本明細書で開示のＣＤ４５特異的ＡＤＢＤは、カニクイザルＣＤ４５中に存在しない抗原決定基に特異的に結合する。
【０５７８】
いくつかの実施形態では、ＡＤ（例えば、アダプター中のおよび／または標的細胞上の）は、ヒトＣＤ４５のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５ＲＡのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５ＲＢのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５ＲＡＢのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５ＲＢＣのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５ＲＡＣのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５ＲＡＢＣのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５ＲＯのＥＣＤのエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１０６の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１０７の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１０８の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１０９の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１０の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１１の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１２の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０５７９】
いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５のグリコシル化依存性エピトープである。
【０５８０】
いくつかの実施形態では、ＡＤは、非ヒト霊長類ＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、アカゲザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、カニクイザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープである。
【０５８１】
いくつかの実施形態では、ＡＤは、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体により結合されるヒトＣＤ４５のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体により結合されるヒトＣＤ４５のエピトープである。
【０５８２】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＣＤ２６のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１３の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基２９〜７６６の全てのアミノ酸残基を含む。
【０５８３】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＣＤ３０のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１４の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基１９〜３７９の全てのアミノ酸残基を含む。
【０５８４】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＣＤ３３のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１５の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基１８〜２５９の全てのアミノ酸残基を含む。
【０５８５】
いくつかの実施形態では、ＡＤはＣＤ３８のエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１６の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基４３〜３００の全てのアミノ酸残基を含む。
【０５８６】
本明細書で開示の組成物のおよび方法のいくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、免疫エフェクター細胞の表面上に発現した抗原決定基に結合する能力を有する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５の抗原決定基に結合する能力を有する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５Ｒ、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＢ、またはＣＤ４５ＲＯの抗原決定基に結合する能力を有する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡの抗原決定基に結合する能力を有する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＢの抗原決定基に結合する能力を有する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＯの抗原決定基に結合する能力を有する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５の抗原決定基に結合する能力を有するが、ＣＤ４５の非ヒト霊長類ホモログに結合する能力を有さない。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５の抗原決定基に結合する能力を有するが、アカゲザルまたはカニクイザルＣＤ４５に結合する能力を有さない。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５Ｒ、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＢ、またはＣＤ４５ＲＯの抗原決定基に結合する能力を有するが、ＣＤ４５の非ヒト霊長類ホモログに結合する能力を有さない。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５Ｒ、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＢ、またはＣＤ４５ＲＯの抗原決定基に結合する能力を有するが、アカゲザルまたはカニクイザルＣＤ４５に結合する能力を有さない。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＯの抗原決定基に結合する能力を有するが、ＣＤ４５の非ヒト霊長類ホモログに結合する能力を有さない。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＯの抗原決定基に結合する能力を有するが、アカゲザルまたはカニクイザルＣＤ４５に結合する能力を有さない。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８の抗原決定基に結合する能力を有する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８の抗原決定基に結合する能力を有するが、それぞれ、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８の非ヒト霊長類ホモログに結合する能力を有さない。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８の抗原決定基に結合する能力を有するが、それぞれ、アカゲザルまたはカニクイザルＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８に結合する能力を有さない。
【０５８７】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５の抗原決定基に結合する能力を有するＤドメインベースポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５Ｒ、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＢ、またはＣＤ４５ＲＯの抗原決定基に結合する能力を有するＤドメインベースポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＯの抗原決定基に結合する能力を有するＤドメインベースポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡの抗原決定基に結合する能力を有するＤドメインベースポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＢの抗原決定基に結合する能力を有するＤドメインベースポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５の抗原決定基に結合する能力を有するが、ＣＤ４５の非ヒト霊長類ホモログに結合する能力を有さないＤドメインベースポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５の抗原決定基に結合する能力を有するが、アカゲザルまたはカニクイザルＣＤ４５に結合する能力を有さないＤドメインベースポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５Ｒ、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＢ、またはＣＤ４５ＲＯの抗原決定基に結合する能力を有するが、ＣＤ４５の非ヒト霊長類ホモログに結合する能力を有さないＤドメインベースポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５Ｒ、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＢ、またはＣＤ４５ＲＯの抗原決定基に結合する能力を有するが、アカゲザルまたはカニクイザルＣＤ４５に結合する能力を有さないＤドメインベースポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＯの抗原決定基に結合する能力を有するが、ＣＤ４５の非ヒト霊長類ホモログに結合する能力を有さないＤドメインベースポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＯの抗原決定基に結合する能力を有するが、アカゲザルまたはカニクイザルＣＤ４５に結合する能力を有さないＤドメインベースポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８の抗原決定基に結合する能力を有するＤドメインベースポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８の抗原決定基に結合する能力を有するが、それぞれ、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８の非ヒト霊長類ホモログに結合する能力を有さないＤドメインベースポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８の抗原決定基に結合する能力を有するが、それぞれ、アカゲザルまたはカニクイザルＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８に結合する能力を有さないＤドメインベースポリペプチドである。
【０５８８】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）のＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＢのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡＢのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＢＣのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡＣのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡＢＣのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＯのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１０６の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１０７の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１０８の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１０９の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１１０の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１１１の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１１２の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。
【０５８９】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはヒトＣＤ４５のグリコシル化依存性エピトープに特異的に結合する。
【０５９０】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、非ヒト霊長類ＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、アカゲザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、カニクイザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合する。
【０５９１】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体により結合されるヒトＣＤ４５の同じエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体により結合されるヒトＣＤ４５の同じエピトープに特異的に結合する。
【０５９２】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体により結合されるエピトープと重なり合うヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体により結合されるエピトープと重なり合うヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合する。
【０５９３】
いくつかの実施形態では、参照抗体がＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４である場合、インビトロ結合アッセイで、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５に対する結合に関し参照抗体と競合する。いくつかの実施形態では、参照抗体が４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２である場合、インビトロ結合アッセイで、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５に対する結合に関し参照抗体と競合する。
【０５９４】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６のＡＤに特異的に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１３の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基２９〜７６６の全てのアミノ酸残基を含む。
【０５９５】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ３０のＡＤに特異的に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１４の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基１９〜３７９の全てのアミノ酸残基を含む。
【０５９６】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ３３のＡＤに特異的に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１５の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基１８〜２５９の全てのアミノ酸残基を含む。
【０５９７】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ３８のＡＤに特異的に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１６の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基４３〜３００の全てのアミノ酸残基を含む。
【０５９８】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合する。
【０５９９】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに対する認識および特異的結合を付与するのに十分である抗体フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに対する認識および特異的結合を付与するのに十分である抗体フラグメントを含む。
【０６００】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）のＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡのＥＣＤのＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＢのＥＣＤのＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡＢのＥＣＤのＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＢＣのＥＣＤのＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡＣのＥＣＤのＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡＢＣのＥＣＤのＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＯのＥＣＤのＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１０６の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含むＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１０７の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含むＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１０８の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含むＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１０９の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含むＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１１０の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含むＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１１１の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含むＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１１２の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含むＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。
【０６０１】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはヒトＣＤ４５のグリコシル化依存性エピトープに特異的に結合するｓｃＦｖである。
【０６０２】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、非ヒト霊長類ＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、アカゲザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、カニクイザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合するｓｃＦｖである。
【０６０３】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体により結合されるヒトＣＤ４５の同じエピトープに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体により結合されるヒトＣＤ４５の同じエピトープに特異的に結合するｓｃＦｖである。
【０６０４】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体により結合されるエピトープと重なり合うヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体により結合されるエピトープと重なり合うヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合するｓｃＦｖである。
【０６０５】
いくつかの実施形態では、参照抗体がＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４である場合、インビトロ結合アッセイで、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５に対する結合に関し参照抗体と競合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、参照抗体が４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２である場合、インビトロ結合アッセイで、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５に対する結合に関し参照抗体と競合するｓｃＦｖである。
【０６０６】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合するｓｃＦｖである。
【０６０７】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するＳＤＡＢである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合するＳＤＡＢである。
【０６０８】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するヒト抗体またはそのフラグメントを含む。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合するヒト抗体またはそのフラグメントを含む。
【０６０９】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するヒト化抗体またはそのフラグメントを含む。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合するヒト化抗体またはそのフラグメントを含む。
【０６１０】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するＡＳＢＤである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合するＡＳＢＤである。
【０６１１】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合する。
【０６１２】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合する。
【０６１３】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤ（例えば、アダプターおよび／またはＣＡＲの）は、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）のＡＤに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡのＥＣＤのＡＤに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＢのＥＣＤのＡＤに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡＢのＥＣＤのＡＤに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＢＣのＥＣＤのＡＤに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡＣのＥＣＤのＡＤに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡＢＣのＥＣＤのＡＤに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＯのＥＣＤのＡＤに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１０６の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含むＡＤに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１０７の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含むＡＤに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１０８の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含むＡＤに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１０９の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含むＡＤに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１１０の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含むＡＤに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１１１の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含むＡＤに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、配列番号１１１２の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含むＡＤに特異的に結合するＤドメインである。
【０６１４】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤはヒトＣＤ４５のグリコシル化依存性エピトープに特異的に結合するＤドメインである。
【０６１５】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、非ヒト霊長類ＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、アカゲザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、カニクイザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合するＤドメインである。
【０６１６】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体により結合されるヒトＣＤ４５の同じエピトープに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体により結合されるヒトＣＤ４５の同じエピトープに特異的に結合するＤドメインである。
【０６１７】
いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体により結合されるエピトープと重なり合うヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＤＢＤは、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体により結合されるエピトープと重なり合うヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合するＤドメインである。
【０６１８】
いくつかの実施形態では、参照抗体がＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４である場合、インビトロ結合アッセイで、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５に対する結合に関し参照抗体と競合するＤドメインである。いくつかの実施形態では、参照抗体が４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２である場合、インビトロ結合アッセイで、ＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５に対する結合に関し参照抗体と競合するＤドメインである。
【０６１９】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合するＤドメインである。
【０６２０】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するＺドメイン骨格ベース結合ドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合するＺドメイン骨格ベース結合ドメインである。
【０６２１】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するＤＡＲＰｉｎベースＡＤ結合ドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合するＤＡＲＰｉｎベースＡＤ結合ドメインである。
【０６２２】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するアドネクチンベースＡＤ結合ドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合するアドネクチンベースＡＤ結合ドメインである。
【０６２３】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するリポカリン、アフィリン、またはアンチカリンベースＡＤ結合ドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合するリポカリン、アフィリン、またはアンチカリンベースＡＤ結合ドメインである。
【０６２４】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するアビマー骨格ベースＡＤ結合ドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合するアビマー骨格ベースＡＤ結合ドメインである。
【０６２５】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するフィノマー骨格ベースＡＤ結合ドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合するフィノマー骨格ベースＡＤ結合ドメインである。
【０６２６】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するノッチン骨格ベースＡＤ結合ドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合するフィノマー骨格ベースＡＤ結合ドメインである。
【０６２７】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するクニッツ骨格ベースＡＤ結合ドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合するクニッツ骨格ベースＡＤ結合ドメインである。
【０６２８】
いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するＷＷドメインベースＡＤ結合ドメインである。いくつかの実施形態では、ＡＳＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合するＷＷドメインベースＡＤ結合ドメインである。
【０６２９】
本明細書で提供されるのは、マルチドメイン可溶性アダプタータンパク質である。アダプターは、抗原決定基（ＡＤ）（例えば、セクションＩＩに記載されているような）および抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）（例えば、セクションＩＩＩに記載されているような）を含む。アダプターは、追加のＡＤ、追加のＡＤＢＤ、および／またはその他の追加のドメインをさらに含むことができる（例えば、セクションＶに記載のような）。いくつかの実施形態では、アダプターはヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する抗原決定基（ＡＤＢＤ）を含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含む。
【０６３０】
いくつかの実施形態では、アダプターは、ヒトＣＤ４５  ＡＤであるＡＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤであるＡＤを含む。
【０６３１】
いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤはヒトＣＤ４５のエピトープである。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤは、ヒトＣＤ４５の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）のエピトープである。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤはヒトＣＤ４５ＲＡのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤはヒトＣＤ４５ＲＢのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤはヒトＣＤ４５ＲＡＢのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤはヒトＣＤ４５ＲＢＣのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤはヒトＣＤ４５ＲＡＣのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤはヒトＣＤ４５ＲＡＢＣのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤはヒトＣＤ４５ＲＯのＥＣＤのエピトープである。さらなる実施形態では、アダプター中のＡＤは、配列番号１１０６の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、アダプター中のＡＤは、配列番号１１０７の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、アダプター中のＡＤは、配列番号１１０８の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、アダプター中のＡＤは、配列番号１１０９の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、アダプター中のＡＤは、配列番号１１１０の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、アダプター中のＡＤは、配列番号１１１１の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。 さらなる実施形態では、アダプター中のＡＤは、配列番号１１１２の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０６３２】
いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤはヒトＣＤ４５のグリコシル化依存性エピトープである。
【０６３３】
いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤは、非ヒト霊長類ＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープである。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤは、アカゲザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープである。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤは、カニクイザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープである。
【０６３４】
いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤは、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体により結合されるヒトＣＤ４５のエピトープである。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤは、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体により結合されるヒトＣＤ４５のエピトープである。
【０６３５】
いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のエピトープである。
【０６３６】
いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）のＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＢのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡＢのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＢＣのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡＣのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡＢＣのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＯのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、配列番号１１０６の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、配列番号１１０７の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、配列番号１１０８の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、配列番号１１０９の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、配列番号１１１０の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、配列番号１１１１の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、配列番号１１１２の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。
【０６３７】
いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤはヒトＣＤ４５のグリコシル化依存性エピトープに特異的に結合する。
【０６３８】
いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、非ヒト霊長類ＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、アカゲザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、カニクイザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合する。
【０６３９】
いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体により結合されるヒトＣＤ４５の同じエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体により結合されるヒトＣＤ４５の同じエピトープに特異的に結合する。
【０６４０】
いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体により結合されるエピトープと重なり合うヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体により結合されるエピトープと重なり合うヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合する。
【０６４１】
いくつかの実施形態では、参照抗体がＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４である場合、インビトロ結合アッセイで、アダプター中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５に対する結合に関し参照抗体と競合する。いくつかの実施形態では、参照抗体が４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２である場合、インビトロ結合アッセイで、アダプター中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５に対する結合に関し参照抗体と競合する。
【０６４２】
いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のエピトープに特異的に結合する。
【０６４３】
いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する、抗体、その抗原結合フラグメント、ｓｃＦｖ、代替骨格結合ドメイン、Ｄドメイン、Ｔ細胞受容体、またはその抗原結合フラグメントであり得る。いくつかの実施形態では、アダプター中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合する、抗体、その抗原結合フラグメント、ｓｃＦｖ、代替骨格結合ドメイン、Ｄドメイン、Ｔ細胞受容体、またはその抗原結合フラグメントであり得る。
【０６４４】
いくつかの実施形態では、アダプターは二重特異性である。いくつかの実施形態では、アダプターはＣＤ４５  ＡＤに結合するＡＤＢＤおよび第２のＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターは、第１のＣＤ４５  ＡＤに結合するＡＤＢＤおよび第２のＣＤ４５  ＡＤに結合するＡＤＢＤを含む。
【０６４５】
本明細書で提供される場合、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）は、ＡＤＢＤ、膜貫通ドメイン、および細胞内シグナル伝達ドメイン（例えば、セクションＶＩに記載のような）を含む細胞外ドメインを含むマルチドメインタンパク質である。
【０６４６】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）のＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＢのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡＢのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＢＣのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡＣのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＡＢＣのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５ＲＯのＥＣＤのＡＤに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、配列番号１１０６の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、配列番号１１０７の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、配列番号１１０８の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、配列番号１１０９の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、配列番号１１１０の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、配列番号１１１１の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、配列番号１１１２の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基に特異的に結合する。
【０６４７】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤはヒトＣＤ４５のグリコシル化依存性エピトープに特異的に結合する。
【０６４８】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、非ヒト霊長類ＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、アカゲザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、カニクイザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合する。
【０６４９】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体により結合されるヒトＣＤ４５の同じエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体により結合されるヒトＣＤ４５の同じエピトープに特異的に結合する。
【０６５０】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体により結合されるエピトープと重なり合うヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体により結合されるエピトープと重なり合うヒトＣＤ４５のエピトープに特異的に結合する。
【０６５１】
いくつかの実施形態では、参照抗体がＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４である場合、インビトロ結合アッセイで、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５に対する結合に関し参照抗体と競合する。いくつかの実施形態では、参照抗体が４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２である場合、インビトロ結合アッセイで、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ヒトＣＤ４５に対する結合に関し参照抗体と競合する。
【０６５２】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ＣＤ２６のＡＤに特異的に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１３の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基２９〜７６６の全てのアミノ酸残基を含む。
【０６５３】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ＣＤ３０のＡＤに特異的に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１４の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基１９〜３７９の全てのアミノ酸残基を含む。
【０６５４】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ＣＤ３３のＡＤに特異的に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１５の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基１８〜２５９の全てのアミノ酸残基を含む。
【０６５５】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ中のＡＤＢＤは、ＣＤ３８のＡＤに特異的に結合する。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１６の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または残基４３〜３００の全てのアミノ酸残基を含む。
【０６５６】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＣＡＲは、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するＡＢＤＢを含む。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＣＡＲは、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のＡＤに特異的に結合するＡＢＤＢを含む。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＣＡＲは、ＡＦＰ  ｐ２６、またはその変異体（例えば、配列番号１６、１１１７、１１１８、１１１９、１１２０、１１２１、１１２２、または１１２３のアミノ酸配列を含むポリペプチド）に特異的に結合するＡＢＤＢを含む。
【０６５７】
本明細書で開示のＣＡＲ細胞がそれら自身に対する免疫反応（例えば、死滅）を標的とする可能性を回避するまたは低減させるために、ＣＡＲ細胞は、ＣＡＲ細胞により、本明細書で記載されるＣＡＲにより直接的にまたは本明細書で記載されるアダプターを介して間接的に標的とされる１つまたは複数のＡＤの発現を低減または無くするように遺伝子改変できる。例えば、ヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するＡＤＢＤを有する本明細書で開示のＣＡＲ細胞、またはヒトＣＤ４５のＡＤに特異的に結合するＡＤＢＤを含むアダプターと組み合わせた使用に好適する本明細書で開示のＣＡＲ細胞は、ＡＤＢＤにより認識されるヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を低減または無くするように遺伝子改変できる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞はヒト免疫エフェクター細胞である。
【０６５８】
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、本明細書で開示のＣＡＲまたはアダプターにより結合される１つのＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、本明細書で開示のＣＡＲまたはアダプターにより結合される２つ以上のＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、本明細書で開示のＣＡＲまたはアダプターにより結合される２つ以上のＡＤの発現を低減または無くする２つ以上の遺伝子改変を含む。いくつかの実施形態では、２つ以上のＡＤは、単一抗原からなる。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５  ＡＤである。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞はヒト免疫エフェクター細胞である。
【０６５９】
いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、遺伝子改変のない参照細胞に比べて、ＡＤの発現を、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９５％低減させる。いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ＡＤの発現を無くする。
【０６６０】
いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、遺伝子改変のない参照細胞に比べて、ＡＤ含有ポリペプチドの発現を、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９５％低減させる。いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ＡＤ含有ポリペプチドの発現を無くする。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５  ＡＤである。
【０６６１】
いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ＡＤをコードする遺伝子またはそのフラグメント中の、欠失、挿入、または置換である。いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ＡＤをコードする遺伝子またはそのフラグメント中の、ＡＤの発現を無くする欠失、挿入、または置換である。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５  ＡＤである。
【０６６２】
いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ＡＤを含むポリペプチドをコードする遺伝子またはそのフラグメントの、ＡＤを含むポリペプチドのホモログ、変異体、または誘導体をコードするヌクレオチド配列による置換であり、コードされたホモログ、変異体、または誘導体はＡＤを含まない。いくつかの実施形態では、ホモログは非ヒト霊長類ホモログである。いくつかの実施形態では、ホモログはアカゲザル由来である。いくつかの実施形態では、ホモログはカニクイザル由来である。いくつかの実施形態では、変異体は、天然の変異体である。いくつかの実施形態では、変異体は、スプライスバリアントである。いくつかの実施形態では、変異体は、改変グリコシル化パターンを有する。いくつかの実施形態では、変異体または誘導体は、シグナル伝達できる。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５  ＡＤである。
【０６６３】
遺伝子改変は、ＣＡＲまたはアダプターが結合するのが望ましいいずれかのＡＤ、例えば、セクションＩＩａに記載のいずれかのＡＤの発現を低減または無くすることができる。
【０６６４】
いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を低減または無くする。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５ＲＡのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５ＲＢのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５ＲＡＢのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５ＲＢＣのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５ＲＡＣのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５ＲＡＢＣのＥＣＤのエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤはヒトＣＤ４５ＲＯのＥＣＤのエピトープである。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１０６の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１０７の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１０８の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１０９の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１０の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１１の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。さらなる実施形態では、ＡＤは、配列番号１１１２の５〜２５、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１２５、または５〜１５０個のアミノ酸残基、１５０個を超えるアミノ酸残基、または全てのアミノ酸残基を含む。
【０６６５】
いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ヒトＣＤ４５のグリコシル化依存性エピトープであるヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を低減または無くする。
【０６６６】
いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を低減または無くする。いくつかの実施形態では、ＡＤは、非ヒト霊長類ＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、アカゲザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、カニクイザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５のエピトープである。
【０６６７】
いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を低減または無くする。いくつかの実施形態では、ＡＤは、ＵＣＨＬ−１、Ａ６、またはＯＤＰ４抗体により結合されるヒトＣＤ４５のエピトープである。いくつかの実施形態では、ＡＤは、４ＫＢ５、ＭＢ１、ＫｉＢ３、２Ｈ４、またはＭＴ２抗体により結合されるヒトＣＤ４５のエピトープである。
【０６６８】
いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を低減または無くする。いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ヒトＣＤ４５をコードする遺伝子またはそのフラグメント中の、欠失、挿入、または置換である。いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ＣＤ４５  ＡＤの発現を無くするヒトＣＤ４５をコードする遺伝子またはそのフラグメント中の、欠失、挿入、または置換である。
【０６６９】
いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を低減または無くする。いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ヒトＣＤ４５をコードする遺伝子またはそのフラグメントの、ヒトＣＤ４５のホモログ、変異体、または誘導体をコードするヌクレオチド配列による置換であり、コードされたホモログ、変異体、または誘導体はＣＤ４５  ＡＤを含まない。いくつかの実施形態では、ホモログは非ヒト霊長類ホモログである。いくつかの実施形態では、ホモログはアカゲザルＣＤ４５である。いくつかの実施形態では、ホモログはカニクイザルＣＤ４５である。いくつかの実施形態では、変異体は、ヒトＣＤ４５の天然の変異体である。いくつかの実施形態では、ＣＤ４５変異体は、スプライスバリアントである。いくつかの実施形態では、ＣＤ４５変異体は、改変グリコシル化パターンを有する。いくつかの実施形態では、変異体または誘導体は、シグナル伝達できる。
【０６７０】
いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８  ＡＤの発現を低減または無くする。いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８の発現を低減または無くする。いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８の発現を無くする。いくつかの実施形態では、遺伝子改変は、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８をコードする遺伝子またはそのフラグメントの、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８のホモログ、変異体、または誘導体をコードするヌクレオチド配列による置換であり、コードされたホモログ、変異体、または誘導体は、本明細書で記載のＣＡＲまたはアダプターにより標的化されるＡＤを含まない。
【０６７１】
提供された方法の実施に有用な遺伝子改変を含むＣＡＲ細胞の作製は、当該技術分野において既知の組換えＤＮＡ法、遺伝子操作、およびゲノム編集のための種々の標準的技術を用いて実施され得る。ＡＤの発現を欠く本明細書で記載の遺伝子改変ＣＡＲ細胞は、例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ＣＲＩＳＰＲ、ＴＡＬＥＮ、および／またはＺＦＮを含む、当該技術分野において既知の任意の好適な手段を使用して定常作業により得ることができる。ＣＡＲ細胞の遺伝子操作方法は、例えば、米国特許出願公開第２０１７０２０４３７２号に記載されている。この特許は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０６７２】
標的細胞をＣＡＲ細胞（例えば、セクションＶＩＩで上記されているような）およびアダプター（例えば、セクションＶで上記されているような）または組成物（例えば、セクションＶＩＩＩで上記されているような）と接触させることを含む使用方法が本明細書で記載される。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５を発現している。いくつかの実施形態では、ＣＡＲまたはアダプターはＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合するＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、本明細書で記載のＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。
【０６７３】
例えば、一実施形態では、標的細胞に免疫反応を伝達する方法は、標的細胞を本明細書で記載のいずれかの組成物（例えば、セクションＶＩＩＩに記載されているような）と接触させることを含む。別の実施形態では、標的細胞を死滅させる方法は、標的細胞を本明細書で記載のいずれかの組成物（例えば、セクションＶＩＩＩに記載されているような）と接触させることを含む。本明細書で使用される場合、「接触させること」は、標的細胞をインビトロで（例えば、細胞培養で）接触させること、または標的細胞インビボで（例えば、患者中で）接触させることを意味し得る。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、本明細書で記載のＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５を発現している。
【０６７４】
本明細書で提供される標的細胞を死滅させる方法では、標的細胞は免疫系の細胞であり得る。いくつかの実施形態では、標的細胞はＢ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はナイーブＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はメモリーＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５ＲＯ発現メモリーＴ細胞である。
【０６７５】
いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５を発現している。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５ＲＯを発現する。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５ＲＡを発現している。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５ＲＡＢを発現している。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５ＲＡＣを発現している。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５ＲＢＣを発現している。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５ＲＡＢＣを発現している。いくつかの実施形態では、ＣＤ４５はヒトＣＤ４５である。
【０６７６】
本明細書で開示の組成物および方法のいくつかの実施形態では、標的は、ヒトＣＤ４５の抗原決定基である。いくつかの実施形態では、標的は、ヒトＣＤ４５Ｒ、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＢ、またはＣＤ４５ＲＯの抗原決定基である。いくつかの実施形態では、標的は、ＣＤ４５の非ヒト霊長類ホモログ中には存在しないヒトＣＤ４５の抗原決定基である。いくつかの実施形態では、標的は、ＣＤ４５の非ヒト霊長類ホモログ中には存在しないヒトＣＤ４５Ｒ、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＢ、またはＣＤ４５ＲＯの抗原決定基である。いくつかの実施形態では、標的は、アカゲザルまたはカニクイザルＣＤ４５中には存在しないヒトＣＤ４５の抗原決定基である。いくつかの実施形態では、標的は、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８の抗原決定基である。いくつかの実施形態では、標的は、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８の非ヒト霊長類ホモログ中には存在しない、それぞれ、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８の抗原決定基である。いくつかの実施形態では、標的は、アカゲザルまたはカニクイザルＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８中には存在しない、それぞれ、ヒトＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８の抗原決定基である。
【０６７７】
本明細書で開示の組成物および方法のいくつかの実施形態では、標的細胞は、ＣＤ４５を発現している細胞であり得る。いくつかの実施形態では、標的細胞は、ＣＤ４５Ｒ、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＢ、またはＣＤ４５ＲＯを発現している細胞であり得る。いくつかの実施形態では、標的細胞は、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、またはＣＤ３８を発現している細胞であり得る。
【０６７８】
患者の標的細胞に免疫反応を伝達する方法および／または患者の標的細胞を死滅させる方法が本明細書で記載され、該方法は、本明細書に記載のアダプター（上記セクションＶに記載されているような）、および／または本明細書で記載のＣＡＲ細胞（例えば、セクションＶＩＩに記載されているような）を患者に投与することを含む。増殖性障害、癌、自己免疫疾患、感染症、または同種移植片拒絶の治療方法もまた本明細書で記載され、該方法は、本明細書で記載のアダプター（例えば、セクションＶに記載されているような）、および／または本明細書で記載のＣＡＲ細胞（例えば、セクションＶＩＩに記載されているような）を患者に投与することを含む。特定の実施形態では、血液癌または自己免疫疾患の治療方法が本明細書で記載され、該方法は、本明細書で記載のアダプター（例えば、セクションＶに記載されているような）、および／または本明細書で記載のＣＡＲ細胞（例えば、セクションＶＩＩに記載されているような）を患者に投与することを含む。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５を発現している。いくつかの実施形態では、ＣＡＲまたはアダプターはＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合するＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、本明細書で記載のＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ＣＤ４５  ＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。
【０６７９】
患者の標的細胞を死滅させる方法または患者の標的細胞死滅を再指示する方法の一実施形態では、標的細胞は免疫系の細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はＢ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はナイーブＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はメモリーＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５ＲＯ発現メモリーＴ細胞である。
【０６８０】
いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５を発現している。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５ＲＯを発現する。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５ＲＡを発現している。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５ＲＡＢを発現している。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５ＲＡＣを発現している。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５ＲＢＣを発現している。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５ＲＡＢＣを発現している。いくつかの実施形態では、ＣＤ４５はヒトＣＤ４５である。
【０６８１】
患者の標的細胞を死滅させる方法または患者の標的細胞死滅を再指示する方法の一実施形態では、患者は免疫系の疾患または障害と診断され、標的細胞はＣＤ４５  ＡＤを発現している免疫系の細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はＢ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はメモリーＴ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５を発現している。いくつかの実施形態では、標的細胞はＣＤ４５ＲＯを発現する。
【０６８２】
一実施形態では、本明細書記載の方法は、骨髄移植（ＢＭＴ）または造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）のために患者の準備または前処置をするために有用である。従って、いくつかの実施形態では、本明細書で提供される患者の標的細胞を死滅させる方法または患者の標的細胞死滅を再指示する方法は、対象をＢＭＴまたはＨＳＣＴのために前処置する。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法は、ＨＳＣＴのために患者を前処置する。いくつかの実施形態では、ＨＳＣＴは、自己ＨＳＣＴである。いくつかの実施形態では、本明細書で開示の患者を前処置する方法は、高用量化学療法剤または全身照射（ＴＢＩ）を含まない。いくつかの実施形態では、本明細書で開示の前処置する方法は、低減された強度の化学療法を含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示の前処置する方法は、全身照射を含む。いくつかの実施形態では、患者は６５歳を超える年齢である。いくつかの実施形態では、患者は癌を有する。いくつかの実施形態では、患者は血液癌である。いくつかの実施形態では、患者は再発した血液癌を有する。いくつかの実施形態では、血液癌は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、および多発性骨髄腫（ＭＭ）である。いくつかの実施形態では、患者は自己免疫疾患または障害を有する。いくつかの実施形態では、自己免疫疾患または障害は、Ｉ型糖尿病、多発性硬化症、関節リウマチ、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、または潰瘍である。
【０６８３】
患者のＨＳＣＴのための前処置方法の一実施形態では、患者は、血液癌と診断されており、標的細胞は、ＣＤ４５  ＡＤを発現している。いくつかの実施形態では、患者は、（ｉ）（１）ヒトＣＤ４５抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、（２）膜貫通ドメイン、および（３）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）および（ｉｉ）遺伝子改変細胞上のヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変、を含む遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞を投与される。いくつかの実施形態では、患者は、（ｉ）ヒトＣＤ４５抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）、および（ｉｉ）細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）および（ｉｉ）遺伝子改変細胞上のヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変、を含む遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞を投与される。いくつかの実施形態では、患者は、（ａ）（ｉ）第１の抗原決定基（ＡＤ）に特異的に結合する第１の抗原決定基結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、および（ｉｉ）遺伝子改変細胞上の少なくとも１つのヒトＣＤ４５  ＡＤの発現を無くする遺伝子改変、を含む遺伝子改変ヒト免疫エフェクター細胞、および（ｂ）第１のＡＤおよびヒトＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合する第２のＡＤＢＤを含むアダプターを投与される。
【０６８４】
アダプター、ＣＡＲ細胞、および／またはＣＡＲ細胞／アダプター組成物を含むキットを含む製品が本明細書で提供される。製品は、容器および容器上のまたは容器に添付されたラベルまたは添付文書を含み得る。好適な容器には、例えば、瓶、バイアル、シリンジが挙げられる。容器は、ガラス又はプラスチックなどの種々の材料から形成され得る。容器は、１種または複数のアダプター、ＣＡＲ細胞、アダプターをコードする核酸、および／または本開示のベクターまたは宿主細胞を保持する。ラベルまたは添付文書は、アダプター、ＣＡＲ細胞、および／またはＣＡＲ細胞／アダプター組成物を患者に投与するための使用法を含み得る。このようなキットは、限定されないが、アダプター、ＣＡＲ細胞、および／またはＣＡＲ／アダプター組成物の治療適用を含む用途を有する。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合するＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、アダプターはＣＤ４５  ＡＤに特異的に結合するＡＤＢＤを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ＣＤ４５  ＡＤの発現を低減または無くする遺伝子改変を含む。
【０６８５】
本発明の種々の実施形態が以降で当該実験の記載により例示される。以下の実施例は、開示実施形態の実施を容易にするために提供されるものであり、残りの開示を限定するものと解釈されるべきではない。実施例では、添付図が参照される。
【０６８６】
実施例
実施例１．代表的ＤドメインおよびＡＤ
【表３】
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【表４】
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【表５】
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【表６】
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【０６８７】
実施例２．Ｄドメイン  ＣＡＲ  Ｔ細胞は、Ｄドメイン標的を発現している腫瘍細胞を死滅させる
１：４〜１：６４の範囲のエフェクター細胞：標的細胞の比率を用いて、一連の腫瘍について、ＡＤＢＤ  ＣＡＲ発現Ｔ細胞の細胞溶解活性を評価した。ＣＤ１２３結合ＣＡＲ（ｃｇ０６、配列番号１０９０）；ＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（ｂｃ４０、配列番号１０９１）の細胞溶解活性を、既知の標的特異性のないＣＡＲ（α３Ｄ−Ｑ１９Ｅ、配列番号１０８９）と比較した。
【０６８８】
示したＣＡＲを発現している１０，０００個のＴ細胞を漸増数のＣＤ１２３＋／ＢＣＭＡ−腫瘍標的（ＭＯＬＭ１３）（図１Ａ）；ＣＤ１２３−／ＢＣＭＡ＋腫瘍標的（Ｈ９２９）（図１Ｂ）；ＣＤ１２３−腫瘍標的（ＲＡＪＩ）（図１Ｃ）；またはＣＤ１２３＋／ＢＣＭＡ−腫瘍標的（ＭＯＬＭ１３）（図１Ｄ）と共にインキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。
【０６８９】
実施例３．アダプター結合は、アダプターとＣＡＲ結合特異性を関連付ける
ジャーカットＮＦＡＴルシフェラーゼレポーター細胞に、陰性対照ＣＡＲ（α３Ｄ−Ｑ１９Ｅ、配列番号１０８９）、ｐ２６結合ＣＡＲ（ａｆ０３、配列番号１０９２）、またはＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（ｂｃ４０、配列番号１０９１）を形質導入した。図２Ａでは、ＣＡＲ形質導入ジャーカット細胞を、０．５μｇのアダプタータンパク質（配列番号１０８２〜１０８５）と共に、４℃で２０分間インキュベートし、洗浄後、抗ヒスＰＥで染色した（クローンＪ０９５Ｇ４６、４℃で２０分間）。モック形質導入ジャーカット細胞に比較して、ＦＬＡＧ染色（クローンＬ５）ベースＣＡＲ発現も評価した（図２Ｂ）。
【０６９０】
実施例４．特異性の適合したＣＡＲ：アダプターおよび標的：アダプターのアダプター結合は、標的細胞の溶解を促進する
ＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（ｂｃ４０、配列番号１０９１）を形質導入した２０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：２、ドナーＤ１４−０５３０１７、７日目）の存在下または非存在下で、４０，０００個のＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞を、種々のアダプター（配列番号１０８２〜１０８４）と共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した（図３Ａ）。同じ比率で培養した対照のＣＤ１２３特異的ＣＡＲ  Ｔ細胞（ｃｇ０６、配列番号１０９０）を、溶解のための陽性対照として使用した。
【０６９１】
図３Ｂでは、ｐ−２６結合ＣＡＲ（Ａｆ０３、配列番号１０９２またはＡｆ０５、配列番号１０９３を形質導入した２０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：２、ドナーＤ１６−０６１３１７、７日目）の存在下または非存在下で、４０，０００個のＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞を、アダプター（ｃｇ０６−ｐ２６、配列番号１０８４）と共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。同じ比率で培養した対照のＣＤ１２３結合ＣＡＲ  Ｔ細胞（ｃｇ０６、配列番号１０９０）を、溶解のための陽性対照として使用した。
【０６９２】
図３Ｃでは、モック形質導入した、またはｐ２６結合ＣＡＲ（Ａｆ０３、配列番号１０９２またはＡｆ０５、配列番号１０９３）を形質導入した１０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：４、ドナーＤ１５−０６２０１７、８日目）の存在下または非存在下で、４０，０００個のＢＣＭＡ＋ＮＣＩ  Ｈ９２９−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞を、アダプター（ｂｃ４０−ｐ２６、配列番号１０８５）と共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＮＣＩ−Ｈ９２９−ＧＦＰ／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。
【０６９３】
実施例５．特異性の適合したＣＡＲ：アダプターおよび標的：アダプターのアダプター結合は、ＣＡＲ  Ｔ細胞によるサイトカイン産生を促進する
ＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（ｂｃ４０、配列番号１０９１）を形質導入したドナーＤ１４−０５３０１７Ｔ細胞を、ＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３細胞（２５，０００個のＴ細胞および標的細胞）の存在下または非存在下、種々のアダプター（ｃｇ０６−ＢＣＭＡ、配列番号１０８２；α３Ｄ−ＢＣＭＡ、配列番号１０８３；またはｃｇ０６−ｐ２６、配列番号１０８４）と共に一晩培養した。培養上清を集め、ＩＬ２（図４Ａ）およびＩＦＮγ（図４Ｂ）の産生について評価した。図４Ｃおよび４Ｄでは、ｐ２６結合ＣＡＲ（Ａｆ０３、配列番号１０９２またはＡｆ０５、配列番号１０９３）を形質導入したドナーＤ１５−０６２０１７  Ｔ細胞を、ＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３細胞（２５，０００個のＴ細胞および標的細胞）の存在下または非存在下、ＣＤ１２３結合アダプター（ｃｇ０６ｐ２６、配列番号１０８４）と共に一晩培養した。培養上清を集め、ＩＬ２（図４Ｃ）およびＩＦＮγ（図４Ｄ）の産生について評価した。
【０６９４】
実施例６．ＣＡＲ  Ｔ細胞は、ＣＡＲに結合され、アダプターにより認識されるＡＤ発現腫瘍に結合するアダプターに暴露後増殖する
図５では、ＡＦＰ結合ＣＡＲ（Ａｆ０３、配列番号１０９２）を形質導入したドナーＤ１６−０６２７１７細胞（２５，０００個）をＣＦＳＥ標識（０．５μＭで１０分）した後、マイトマイシンＣ処理ＣＤ１２３−ＢＣＭＡ＋ＮＣＩ−Ｈ９２９細胞（２５，０００個）の存在下または非存在下、ＣＤ１２３結合アダプター（ｃｇ９６−ｐ２６、配列番号１０８４）またはＢＣＭＡ結合アダプター（ｂｃ４０−ｐ２６、配列番号１０８５）の存在下で７２時間培養した。７２時間で、細胞をＣＤ３染色し、その後、ＣＤ３＋細胞の絶対数をフローサイトメトリーで分析した。
【０６９５】
実施例７．特異性の適合したＣＡＲ：アダプターおよび標的：アダプターのアダプター結合のＣＡＲ  Ｔ細胞によるシグナル伝達
前もってＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（ｂｃ４０、配列番号１０９１）を形質導入した５０，０００個のレポーター細胞を、５０，０００個のＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１４細胞の存在下または非存在下、種々のアダプター（ｃｇ０６−ＢＣＭＡ、配列番号１０８２；α３Ｄ−ＢＣＭＡ、配列番号１０８３；またはｃｇ０６−ｐ２６、配列番号１０８４）の存在下で５時間培養した後、ルシフェラーゼ活性を評価した（図６Ａ）。
【０６９６】
前もってｐ２６結合ＣＡＲ（ａｆ０３、配列番号１０９２）を形質導入した５０，０００個のレポーター細胞を、５０，０００個のＢＣＭＡ＋ＮＣＩ−Ｈ９２９細胞の存在下または非存在下、アダプター（α３ＤＱ１９Ｅ−ＢＣＭＡ、配列番号１０８６；ｂｃ４０−ｐ２６、配列番号１０８５）の存在下で５時間培養した後、ルシフェラーゼ活性を評価した（図６Ｂ）。
【０６９７】
図６Ａおよび６Ｂは、適合したＣＡＲ：アダプターおよび標的：アダプターのアダプター結合は、ＣＡＲ発現ジャーカットＮＦＡＴ−ルシフェラーゼレポーター細胞によるシグナル伝達を促進することを示す。
【０６９８】
実施例８．ＤドメインまたはｓｃＦｖ含有アダプターは、標的細胞のＣＡＲ細胞：アダプター媒介溶解を促進する
ＢＣＭＡ  ＡＤ（配列番号１０８２）を有するＣＤ１２３−結合アダプターの、対照ＣＡＲ（α３ＤＱ１９Ｅ、配列番号１０８９）、ＢＣＭＡ−結合ＣＡＲ（ｂｃ４０、配列番号１０９１）または国際公開第２０１０／１０４９４９Ａ２号から得たＢＣＭＡ特異的ｓｃＦｖ  ＣＡＲ（ｃ１１Ｄ５−３）と共に機能するその能力を評価した。
【０６９９】
対照ＣＡＲ（配列番号１０８９）、ＢＣＭＡ結合ＣＡＲ（配列番号１０９１）、またはＢＣＭＡ結合ｓｃＦｖ  ＣＡＲ（ｃ１１Ｄ５−３）を形質導入した２０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：２、ドナーＤ１４−０６２７１７、９日目）の存在下または非存在下で、４０，０００個のＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞を、Ｃｇ０６−ＢＣＭＡアダプター（配列番号１０８２）と共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。実線は、計算した３パラメーター非線形曲線を示し、点線は、ｃ１１Ｄ５−３に対するものであり、例示の目的のみのために提示している（図７Ａ）。ＣＤ１２３＋ＢＣＭＡ−ＭＯＬＭ１３−ＧＦＰ／ルシフェラーゼ細胞を、図７Ａと同じ実験で、アダプタータンパク質の非存在下、形質導入Ｔ細胞を用いて培養した（図７Ｂ）。
【０７００】
図７Ａおよび７Ｂは、ＢＣＭＡ抗原決定基を有するＣＤ１２３特異的アダプターは、ＢＣＭＡ特異的ＤドメインＣＡＲ（ｂｃ４０）またはＢＣＭＡ特異的ｓｃＦｖ  ＣＡＲ（ｃ１１Ｄ５−３）と共に機能を果たすことができることを示す。
【０７０１】
実施例９．複数アダプターの使用により、ＣＡＲ細胞を複数の抗原標的に向ける
ｐ２６結合ＣＡＲ（ａｆ０３、配列番号１０９２）を形質導入した１０５個のジャーカットＮＦＡＴルシフェラーゼを、示した比率の合計０．５μｇのアダプター（配列番号１０８４、配列番号１０８５）と共に４℃で２０分間インキュベートし、洗浄後、ＣＤ１２３−Ｆｃおよびビオチン化ＢＣＭＡ（それぞれ０．５μｇ／（４℃で２０分間））と共にインキュベートし、洗浄後、抗Ｆｃ  Ａ４８８およびストレプトアビジン−ＰＥで結合を検出した。図８Ａは、それらのそれぞれの標的タンパク質に対するＣＤ１２３結合およびＢＣＭＡ結合のフローサイトメトリー分析を示し、図８Ｂは、図８Ａで提示したＡ４８８  ＭＦＩ（ＣＤ１２３結合、左軸）およびＰＥ  ＭＦＩ（ＢＣＭＡ結合、右軸）フローサイトメトリーデータの平均蛍光強度（ＭＦＩ）の比較を示す。
【０７０２】
図８Ａおよび８Ｂは、ＡＦＰ特異的ＣＡＲは、複数のアダプタータンパク質とのインキュベーションを介してＣＤ１２３およびＢＣＭＡ結合能力を同時に有することができることを示す。
【０７０３】
実施例１０．二重結合ドメインアダプターの使用はＣＡＲシグナル伝達を高める
ＣＤ１２３結合アダプター（ｃｇ０６−ｐ２６、配列番号１０８４）または二価アダプター（ｃｇ０６−ｐ２６−ｃｇ０６、配列番号１０８７）の存在下で、５０，０００個のＣＤ１２３＋ＭＯＬＭ１３またはＣＤ１２３欠損ＭＯＬＭ１３細胞の存在下、前もってｐ２６結合ＣＡＲ（ａｆ０３、配列番号１０９２）を形質導入した５０，０００個のレポーター細胞を５時間培養した後、ルシフェラーゼ活性を評価した。ＣＤ１２３欠乏細胞は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９遺伝子工学技術を用いて生成した（図９Ａ）。前もってｐ２６結合ＣＡＲ（ａｆ０３、配列番号１０９２）を形質導入した５０，０００個のレポーター細胞を、５０，０００個のＢＣＭＡ＋Ｕ２６６細胞の存在下または非存在下、ＢＣＭＡ結合アダプター（ｂｃ４０−ｐ２６、配列番号１０８５）または二価アダプター（ｂｃ４０−ｐ２６−ｂｃ４０、配列番号１０８８）の存在下で５時間培養した後、ルシフェラーゼ活性を評価した（図９Ｂ）。
【０７０４】
図９Ａおよび９Ｂは、単一結合ドメインアダプター蛋白質に比べて、二重結合ドメインアダプター蛋白質は、ＣＡＲ発現ジャーカット細胞により高められたシグナル伝達を促進することを示す。
【０７０５】
実施例１１．ＣＤ４５特異的ＤドメインＣＡＲ  Ｔ細胞は、ＣＤ４５発現標的細胞を死滅させる
Ｔ細胞は、ＣＤ４５特異的Ｄドメインを含むＣＡＲを形質導入される。ヒトＣＤ４５特異的Ｄドメインを含むＣＡＲを発現しているＣＤ４５−ＣＡＲ  Ｔ細胞は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９遺伝子工学技術を用いて生成される。ＣＤ４５特異的ｇＲＮＡおよびｃｒＲＮＡおよびＣａｓ９は、市販品入手源から得られる。ＣＤ４５−ＣＡＲ  Ｔ細胞の自己溶解活性は、細胞増殖、生存率および／または細胞傷害性のためのアッセイ、例えば、７−ＡＡＤ染色およびクロム放出アッセイを用いて評価される。ＣＤ４５−ＣＡＲ  Ｔ細胞の自己溶解性は、ＣＤ４５特異的Ｄドメインを含む同じＣＡＲを発現しているＣＤ４５＋対照ＣＡＲ  Ｔ細胞と比較される。
【０７０６】
ヒトＣＤ４５特異的Ｄドメインを含むＣＡＲ発現ＣＤ４５−Ｔ細胞の細胞溶解活性が、１：４〜１：６４の範囲のエフェクター細胞：標的細胞の比率を用いて、一連のＣＤ４５＋標的細胞について評価される。ＣＤ４５−ＣＡＲ  Ｔ細胞の細胞溶解活性は、既知の標的特異性を有さないＣＡＲと比較される。
【０７０７】
実施例１２．ＣＤ４５特異的アダプターは、標的細胞の溶解を誘導する
ＣＤ４５−ＣＡＲ  Ｔ細胞は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９遺伝子工学技術を用いて生成される。ＣＤ４５特異的ｇＲＮＡおよびｃｒＲＮＡおよびＣａｓ９は、市販品入手源から得られる。ＣＤ４５−ＣＡＲ  Ｔ細胞の自己溶解活性は、細胞増殖、生存率および／または細胞傷害性のためのアッセイ、例えば、７−ＡＡＤ染色およびクロム放出アッセイを用いて評価される。ＣＤ４５−ＣＡＲ  Ｔ細胞の自己溶解性は、ＣＤ４５＋対照ＣＡＲ  Ｔ細胞と比較される。
【０７０８】
ヒトＣＤ４５特異的Ｄドメインを含むＣＡＲ発現ＣＤ４５−Ｔ細胞の細胞溶解活性が、１：４〜１：６４の範囲のエフェクター細胞：標的細胞の比率を用いて、一連のＣＤ４５＋標的細胞について評価される。ＣＤ４５−ＣＡＲ  Ｔ細胞の細胞溶解活性は、既知の標的特異性を有さないＣＡＲと比較される。
【０７０９】
ＣＤ４５＋標的細胞は、ｐ２６結合ＣＡＲで形質導入したＣＤ４５−Ｔ細胞の存在または非存在下、ＣＤ４５特異的Ｄドメインおよびｐ２６を含む種々のアダプターと共に１６時間インキュベートされる。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性が評価される。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養した標的細胞のウェルを基準にして、溶解％が評価される。同じ比率で培養したＣＤ４５特異的ＣＡＲ  Ｔ細胞の対照が、溶解の陽性対照として使用される。
【０７１０】
実施例１３．短縮ｐ２６を含むアダプターは、細胞傷害性アッセイで向上した生物活性を有する。
ｐ２６構造体の分析により、凝集および／またはタンパク質分解の可能性を高めることが予測される残基のＮ末端進展が明らかになった。このＮ末端配列はまた、予測されたジスルフィド結合対も含み、これは、システインが不対である場合、タンパク質を不安定化する、またはジスルフィド結合が形成されると、準最適なタンパク質構造を強める可能性がある。これらの潜在的発生の傾向を除くために、ｐ２６のＮ末端短縮変異体を作製した。ｐ２６（Ｇ１７〜Ｖ２２９）（配列番号１１１８）では、ｐ２６の最初の１６残基を取り除いてシステインのジスルフィド対（Ｃ４〜Ｃ１３）を無くした。ｐ２６（Ｋ２３〜Ｖ２２９）（配列番号１１２０）では、ｐ２６の最初の２２残基を取り除いて予測アルブミン３ドメインの先頭を除去した。ｐ２６（Ｑ２６〜Ｖ２２９）では、最初の２５残基を取り除いて、Ｋ２３短縮化の先の２つの疎水性残基（ＹＩ）を除去し、これにより、Ｎ末端をｐ２６の予測球状領域と端を揃えた。完全長および短縮ｐ２６のFeRnへの結合を、ＥＬＩＳＡを用いて評価した。完全長ｐ２６または短縮ｐ２６（Ｑ２６〜Ｖ２２９）変異体を含むアダプターは、ｐＨ依存的にＦｃＲｎに結合し、ｐＨ７．４の場合より高い結合親和性がｐＨ６．０で観察された。
【０７１１】
完全長ｐ２６または短縮ｐ２６（Ｇ１７〜Ｖ２２９）、ｐ２６（Ｋ２３〜Ｖ２２９）またはｐ２６（Ｑ２６〜Ｖ２２９）変異体を、種々のルシフェラーゼベース細胞傷害性アッセイで試験した。意外にも、短縮ｐ２６を含むアダプターが、完全長ｐ２６を含むアダプターより高い生物活性を有していた。
【０７１２】
ｐ２６結合ＣＡＲ（Ａｆ５９、配列番号１１３３）を形質導入した１０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：４）の存在下で、４０，０００個のＢＣＭＡ＋ＮＡＬＭ６／ルシフェラーゼ細胞を、アダプターＢＣＭＡ（ｂｃ９８）−ｐ２６  ＪＰＥ（配列番号１１２４）、ＢＣＭＡ（ｂｃ９８）−ｐ２６（配列番号１１２５）、ＢＣＭＡ（ｂｃ９８）−ｐ２６（Ｑ２６〜Ｖ２２９）（配列番号１１２６）、ＢＣＭＡ（ｂｃ９８）−ｐ２６（Ｋ２３〜Ｖ２２９）（配列番号１１２７）、またはＢＣＭＡ（ｂｃ９８）−ｐ２６（Ｇ１７〜Ｖ２２９）（配列番号１１２８）と共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＮＡＬＭ６／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。短縮ｐ２６変異体を含むアダプターが、完全長ｐ２６を含むアダプターより高い生物活性を有していた。測定したアダプターのＥＣ５０値は以下の通りである。
【表７】
2021503006.tif 000074
【０７１３】
ｐ２６結合ＣＡＲ（Ａｆ５９、配列番号１１３３）を形質導入した１０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：４）の存在下で、４０，０００個のＢＣＭＡ＋ＮＣＩ  Ｈ９２９／ルシフェラーゼ細胞を、アダプターＢＣＭＡ（ｂｃ９８）−ｐ２６  ＪＰＥ（配列番号１１２４）、ＢＣＭＡ（ｂｃ９８）−ｐ２６（配列番号１１２５）、ＢＣＭＡ（ｂｃ９８）−ｐ２６（Ｑ２６〜Ｖ２２９）（配列番号１１２６）、ＢＣＭＡ（ｂｃ９８）−ｐ２６（Ｋ２３〜Ｖ２２９）（配列番号１１２７）、またはＢＣＭＡ（ｂｃ９８）−ｐ２６（Ｇ１７〜Ｖ２２９）（配列番号１１２８）と共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＮＣＩ−Ｈ９２９／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。短縮ｐ２６変異体を含むアダプターが、完全長ｐ２６を含むアダプターより高い生物活性を有していた。測定したアダプターのＥＣ５０値は以下の通りである。
【表８】
2021503006.tif 000075
【０７１４】
短縮ｐ２６中のＱ１２７Ｐ置換の存在は、アダプターの生物活性を変化させなかった。ｐ２６結合ＣＡＲ（Ａｆ５９、配列番号１１３３）を形質導入した１０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：４）の存在下で、４０，０００個のＢＣＭＡ＋ＮＣＩ  Ｈ９２９／ルシフェラーゼ細胞を、アダプターＢＣＭＡ（ｂｃ９８）−ｐ２６（配列番号１１２４）、ＢＣＭＡ（ｂｃ９８）−ｐ２６（Ｑ２６〜Ｖ２２９）（配列番号１１２６）、またはＢＣＭＡ（ｂｃ９８）−ｐ２６（Ｑ２６〜Ｖ２２９）Ｑ２１７Ｐ（配列番号１１３１）と共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＮＣＩ−Ｈ９２９／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。短縮ｐ２６変異体を含むアダプターが、完全長ｐ２６を含むアダプターより高い生物活性を有していた。Ｑ２１７Ｐ置換含有または非含有の短縮ｐ２６変異体を含むアダプターは、実質的に同じ生物活性を有した。測定したＥＣ５０値は以下の通りである。
【表９】
2021503006.tif 000076
【０７１５】
短縮ｐ２６変異体を含む二価アダプターはまた、完全長ｐ２６を含む対応するアダプターより良好な性能であった。ｐ２６結合ＣＡＲ（Ａｆ５９、配列番号１１３３）を形質導入した１０，０００個のＴ細胞（Ｅ：Ｔ比＝１：４）の存在下で、４０，０００個のＢＣＭＡ＋ＮＣＩ  Ｈ９２９／ルシフェラーゼ細胞を、アダプターＢＣＭＡ（ｂｃ９８）−ｐ２６−ＢＣＭＡ（ｂｃ９８）（配列番号１１２９）、ＢＣＭＡ（ｂｃ９８）−ｐ２６（Ｑ２６〜Ｖ２２９）−ＢＣＭＡ（ｂｃ９８）（配列番号１１３２）、またはＢＣＭＡ（ｂｃ９８）−ｐ２６（Ｑ２６〜Ｖ２２９）Ｑ２１７Ｐ−ＢＣＭＡ（ｂｃ９８）（配列番号１１３０）と共に１６時間インキュベートした。１６時間後、細胞を洗浄し、ルシフェラーゼ活性を評価した。Ｔ細胞またはアダプタータンパク質の非存在下で培養したＮＣＩ−Ｈ９２９／ルシフェラーゼのウェルを基準にして、溶解％を評価した。短縮ｐ２６変異体を含むアダプターが、完全長ｐ２６を含むアダプターより高い生物活性を有していた。Ｑ２１７Ｐ置換含有または非含有の短縮ｐ２６変異体を含むアダプターは、実質的に同じ生物活性を有した。測定したアダプターのＥＣ５０値は以下の通りである。
【表１０】
2021503006.tif 000077
【０７１６】
実施例１４．短縮および完全長ｐ２６のヒトＦｃＲｎへの結合はｐＨ依存性である
完全長および短縮ｐ２６のＦｃＲｎへの結合は、９６ウェルプレートをアダプター（ｂｃ４０−ｐ２６（配列番号１０８５）、ｂｃ９８−ｐ２６（Ｑ２６〜Ｖ２２９）−ｂｃ９８（配列番号１１３２）、ＨＳＡ、ｂｃ４０（配列番号１９７、ＨＩＳタグ付）または非コート）でコートするＥＬＩＳＡフォーマットを用いて４℃で一晩評価した。その後、ウェルをＰＢＳ＋１％魚肉ゼラチンを用いて２２℃で１時間ブロッキングした。その後、パラレルウェルを、ＰＢＳ＋０．１％ツイーン、ｐＨ６．０または７．４で洗浄した。ＰＢＳ＋１％魚肉ゼラチン（ｐＨ６．０または７．４）中のビオチン化ヒトＦｃＲｎを系列希釈してウェルに加え、２２℃で１時間インキュベートした。ＰＢＳ＋０．１％ツイーン、ｐＨ６．０または７．４で洗浄後、ストレプトアビジン−ＨＲＰ（ＰＢＳ＋１％魚肉ゼラチン、ｐＨ６．０または７．４）を加えた。最終洗浄後、ＴＭＢ試薬を用いてシグナルを発生させ、Ａ４５０で吸光度を読み取ることにより定量化した。図１０に示すように、完全長ｐ２６または短縮ｐ２６（Ｑ２６〜Ｖ２２９）変異体を含むアダプターは、ｐＨ依存的にＦｃＲｎに結合し、ｐＨ７．４の場合より高い結合親和性がｐＨ６．０で観察された。
【０７１７】
実施例１５．ＣＳ１（ＳＬＡＭＦ７、ＣＲＡＣＣ、ＣＤ３１９）特異的ＡＤＢＤを含むアダプターは、細胞内シグナル伝達およびＣＳ１陽性腫瘍の死滅を調節する
ヒトＣＳ１タンパク質の細胞外ドメインのＡＤＢＤファージライブラリーをパニングすることにより、ＣＳ１結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を単離した。代表的ＣＳ１結合ＡＤＢＤを二重特異性フォーマットで、非結合α３ＤＱ１９Ｅ（配列番号１０２１）と共にｐ２６に融合し、ａｆ５９−ＣＡＲ（配列番号１１３３）発現ＪＮＬ１０細胞またはａｆ５９−ＣＡＲ発現ヒトＴ細胞と組み合わせた機能試験のためのアダプタータンパク質を生成した。
【表１１】
2021503006.tif 000078
【０７１８】
試験したアダプターの中では、ａｆ５９−ＣＡＲ発現ＪＮＬ１０細胞およびＣＳ１陽性腫瘍細胞株、ＭＭ．１Ｓの存在下で培養した場合、ｃｃ０２およびｃｃ０８  ＡＤＢＤが最も強力なＮＦＡＴシグナル伝達を示した（図１１Ａ）。
【０７１９】
ｃｃ０２  ＣＳ１  ＡＤＢＤ（配列番号７８１）をｐ２６および非結合α３ＤＱ１９Ｅ  ＤＤ（配列番号１０２１）またはＢＣＭＡ結合ｂｃ９８  ＤＤ（配列番号２０１）に融合した。ＢＣＭＡ陽性およびＣＳ１陽性細胞株、ＭＭ．１Ｓの存在下で、得られたアダプターの、ａｆ５９−ＣＡＲ発現ＪＮＬ１０細胞中のシグナル伝達を誘導する能力を評価した。図１１Ｂに示すように、ＣＳ１およびＢＣＭＡの両方に結合できる二重特異的ｂｃ９８−ｐ２６−ｃｃ０２アダプターは、シグナル伝達するその能力が、単一特異性ＢＣＭＡ結合ｂｃ９８−ｐ２６−α３ＤＱ１９Ｅアダプターおよび単一特異性ＣＳ１結合α３ＤＱ１９Ｅ−ｐ２６−ｃｃ０２アダプターよりも強力であった。
【０７２０】
ａｆ５９−ＣＡＲ（配列番号１１３３）を正常ヒトＴ細胞に形質導入し、示したアダプターを用いて、これらの細胞のＨ９２９（ＢＣＭＡ＋＋、ＣＳ１＋）およびＭＭ．１Ｓ（ＢＣＭＡ＋＋、ＣＳ１＋＋）腫瘍を死滅させる能力を評価した。図１１Ｃおよび１１Ｄに示すデータは、ＨＴ９２９（ＢＣＭＡおよびＣＳ１両方の高発現）およびＭＭ．１Ｓ（ＢＣＭＡの高発現、ＣＳ１の低発現）の死滅の観点から、二重特異的ｂｃ９８−ｐ２６−ｃｃ０２が効果的アダプターであることを示す。
【０７２１】
実施例１６．ＨＥＲ２結合ＡＤＢＤを含むアダプターは、ＨＥＲ２陽性ＳＫＢＲ３腫瘍細胞α３Ｄ（Ｑ１９Ｅ）−ｐ２６−Ｅｂ（０８）、またはアフィボディ／ＤＡＲＰｉｎベースアダプターと共に培養したＡｆ５９−ＣＡＲ発現ＪＮＬ１０−細胞におけるシグナル伝達を誘導する。
ヒトＨＥＲ２タンパク質の細胞外ドメインのＡＤＢＤファージライブラリーをパニングすることにより、ＨＥＲ２（ＥＲＢＢ２、ＣＤ３４０）結合ドメイン（ＡＤＢＤ）を単離した。代表的ＨＥＲ２結合ＡＤＢＤを二重特異性フォーマットで非結合α３ＤＱ１９Ｅ（配列番号１０２１）と共にｐ２６と融合し、ａｆ５９−ＣＡＲ（配列番号１１３３）発現ＪＮＬ１０細胞またはａｆ５９−ＣＡＲ発現ヒトＴ細胞と組み合わせた機能試験のためのアダプタータンパク質を生成した。
【表１２】
2021503006.tif 000079
【０７２２】
ａｆ５９−ＣＡＲ発現ＪＮＬ１０細胞およびＨＥＲ２陽性ＳＫＢＲ３腫瘍細胞の存在下で培養した場合、アダプターは、ＪＮＬ１０  ＮＦＡＴシグナル伝達を誘導するそれらの能力における一連の活性を示した。図１２Ａに示すように、ｅｂ０８を含むアダプターは、このアッセイで最も強力な刺激剤であった。
【０７２３】
次に、ｅｂ０８を含むアダプターを、アフィボディ（ｚＨＥＲ２（４）およびｚＨＥＲ２（３４２））またはＤＡＲＰｉｎ（９．２９およびＧ３）由来のＨＥＲ２結合ドメインを含むその他のアダプターと比較した。図１２Ｂに示すように、ｅｂ０８を含むアダプターにより媒介されるＪＮＬ１０細胞のＮＦＡＴシグナル伝達は、ｚＨＥＲ：４を含むアダプターにより媒介されるものよりも大きく、９．２９を含むアダプターにより媒介されるものと同等であり、Ｇ３およびｚＨＥＲ２：３４２のそれより小さい。
【０７２４】
ＨＥＲ２結合ｅｂ０８およびｅｂ０４を含むアダプターの、腫瘍（ＳＫＢＲ３）死滅を誘導する能力を、アフィボディ（ｚＨＥＲ２（４）およびｚＨＥＲ２（３４２））またはＤＡＲＰｉｎ（９．２９およびＧ３）由来の他のＨＥＲ２結合ドメイン含有アダプターと比較した。各アダプターを、各アダプター中で見出されるｐ２６に結合するａｆ５９−ＣＡＲを形質導入した正常ヒトＴ細胞と共にインキュベートした。１：５のエフェクター：標的比率でＳＫＢＲ３溶解を１６時間ルシフェラーゼベースアッセイによりで定量化した。図１２Ｃに示すアッセイ結果は、ｅｂ０８またはｅｂ０４を含むアダプターは、用量依存性的に腫瘍溶解を調節することを実証する。
【０７２５】
本出願の全体を通して、種々の刊行物が著者名および日付、または特許番号、特許公報番号により参照されている。これらの刊行物の開示は、本明細書で記載および請求される本発明の日付の時点での当業者により既知の現状技術をより完全に説明するために、参照によりその全体が本出願中に組み込まれる。しかし、本出願における文献の引用が、このような文献が本発明の先行技術であるということを承認するものと解釈されるべきではない。
【図１】
2021503006.tif 000080
【図２】
2021503006.tif 000081
【図３−１】
2021503006.tif 000082
【図３−２】
2021503006.tif 000083
【図４−１】
2021503006.tif 000084
【図４−２】
2021503006.tif 000085
【図５】
2021503006.tif 000086
【図６】
2021503006.tif 000087
【図７】
2021503006.tif 000088
【図８】
2021503006.tif 000089
【図９】
2021503006.tif 000090
【図１０】
2021503006.tif 000091
【図１１−１】
2021503006.tif 000092
【図１１−２】
2021503006.tif 000093
【図１２Ａ】
2021503006.tif 000094
【図１２Ｂ】
2021503006.tif 000095
【図１２Ｃ】
2021503006.tif 000096
【手続補正書】
【提出日】令和2年7月13日(2020.7.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2021503006000001.app
【国際調査報告】
2021503006.tif 000097
2021503006.tif 000098
2021503006.tif 000099
2021503006.tif 000100