(57)【要約】  本発明は、２４時間中の最低１２時間、対象における脂肪酸アセチル化サリチル酸塩の閾値血漿濃度、例えば少なくとも約２０ｎｇ／ｍｌの閾値血漿濃度を達成するのに有効である、脂肪酸アセチル化サリチル酸塩、例えばエダサロネキセントを用いて、対象における筋ジストロフィー、例えばデュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）を治療するための方法及び組成物を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
必要とする対象における筋ジストロフィーを治療する方法であって、２４時間中の最低１２時間、少なくとも約２０ｎｇ／ｍｌの前記対象における化合物の閾値血漿濃度を達成するのに有効である、式Ｉ
【化１】
2021502328.tif 000012
の構造を有する前記化合物又はその薬学的に許容できる塩の投与計画を前記対象に施すことを含む、方法。
【請求項２】
前記閾値血漿濃度が、約２０ｎｇ／ｍｌ〜約２００ｎｇ／ｍｌである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記化合物が、２４時間中の少なくとも約１３時間、約１４時間、約１５時間、約１６時間、約１７時間、約１８時間、約１９時間、約２０時間、約２１時間、約２２時間、約２３時間、又は約２４時間、閾値濃度であるか、あるいはそれを超える、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記投与計画が、前記化合物の１日あたり１、２又は３回用量を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
各用量が、前記化合物の約２５ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇを含む、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記全一日量が、約１００ｍｇ／ｋｇ〜約２００ｍｇ／ｋｇ、又は約１００ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記全一日量が、約１３３ｍｇ／ｋｇを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記全一日量が、約１００ｍｇ／ｋｇを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記全一日量が、約９０ｍｇ／ｋｇ〜約１１０ｍｇ／ｋｇを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
前記全一日量が、１００ｍｇ／ｋｇ±５％、１００ｍｇ／ｋｇ±１０％、１００ｍｇ／ｋｇ±１５％、又は１００ｍｇ／ｋｇ±２０％を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
前記投与計画が、１日あたり３回用量を含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記３回用量が、前記化合物の等量を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
各用量が、前記化合物の約２５ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇを含む、請求項１１又は１２に記載の方法。
【請求項１４】
各用量が、約２０ｍｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇを含む、請求項１１又は１２に記載の方法。
【請求項１５】
各用量が、前記化合物の約３３ｍｇ／ｋｇを含む、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記第１用量及び前記第２用量が、前記化合物の、前記第３用量よりも少ない量を含む、請求項１１、１３又は１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記３回用量が等しく、且つ２５０ｍｇ又は１００ｍｇの式Ｉの化合物を含有する剤形で投与される、請求項１１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記３回用量が、１００ｍｇ／ｋｇ±５％、１００ｍｇ／ｋｇ±１０％、１００ｍｇ／ｋｇ±１５％、又は１００ｍｇ／ｋｇ±２０％の全一日量に等しい、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記全一日量が、６，０００ｍｇを超えない、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記第１用量が、午前中に投与され、前記第２用量が正午に投与され、且つ前記第３用量が夜間に投与される、請求項１１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
各用量が、食物とともに投与される、請求項４〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
各用量が、食事時に投与される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記第１用量が朝食時に投与され、前記第２用量が昼食時に投与され、且つ前記第３用量が夕食時に投与される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
２回用量が、朝食及び夕食とともに投与され、且つ昼食とともに投与される用量よりも高い、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記用量が、少なくとも８ｇの脂肪を含有する食物とともに摂取される、請求項４〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記化合物が、医薬組成物中で投与される、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記組成物が、グリセリルモノオレエート（タイプ４０）、ポリソルベート８０、ポリエチレングリコール４００、又はＤＬ−α−トコフェロールの１つ以上をさらに含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記組成物が、５０〜７０重量％の前記化合物を含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記組成物が、カプセル剤として製剤化される、請求項２６〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記化合物が、経口的に投与される、請求項１〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
四頭筋における炎症を少なくとも２０％低減する、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
四頭筋における線維症を少なくとも２０％低減する、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記筋ジストロフィーがデュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）である、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記対象がヒトである、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
式Ｉ
【化２】
2021502328.tif 000013
の構造を有する５０〜７０重量％の化合物又はその薬学的に許容できる塩、及び任意選択的には溶媒又は希釈剤；界面活性剤；共溶媒；及び抗酸化剤の１、２、３、又は４つを含む医薬組成物。
【請求項３６】
前記溶媒又は希釈剤が、グリセリルモノオレエート（タイプ４０）である、請求項３５に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
前記界面活性剤が、非イオン性界面活性剤である、請求項３５又は３６に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
前記非イオン性界面活性剤が、ポリソルベート８０である、請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
前記共溶媒が、ポリエチレングリコール４００である、請求項３５〜３８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
前記抗酸化剤が、ＤＬ−α−トコフェロールである、請求項３５〜３９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
[0001]  本願は、２０１７年１１月６日に出願される米国仮特許出願第６２／５８１，９８１号の優先権及び利点を主張し、その内容はその全体が参照により本明細書中に援用される。
【０００２】
発明の分野
[0002]  本発明は、筋ジストロフィーの分野、特にデュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）を治療するための方法、特にエダサロネキセント、脂肪酸サリチル酸コンジュゲートを用いてＤＭＤを治療するための投与計画に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
[0003]  デュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）は、劣性Ｘ連鎖遺伝を伴う、希少な、重篤な生命を脅かす変性神経筋疾患である。ＤＭＤは、ジストロフィン遺伝子における突然変異に起因して、幼児からの骨格筋機能の進行性増悪をもたらす、機能的ジストロフィンタンパク質の不在、又はほぼ不在によって特徴づけられる。標準治療における改善、例えばグルココルチコイドの使用にもかかわらず、ＤＭＤは、最終的に致死性の疾患のままであり、患者は通常、３０歳までに呼吸不全又は心不全で死亡する。
【０００４】
[0004]  ＤＭＤにおける機能的ジストロフィンの不在は、機械的ストレス、筋肉損傷、筋細胞の炎症、及び筋肉組織を再生させるための能力低下になりやすい筋線維をもたらす。ＮＦ−κＢは、ＤＭＤにおいて活性化される転写因子のファミリーである。転写因子のＮＦ−κＢファミリーは、ｐ５０（ＮＦ−κＢ１）、ｐ５２（ＮＦ−κＢ２）、ｐ６５（ＲｅｌＡ）、ｃ−Ｒｅｌ及びＲｅｌＢを含む。これらの核内因子は、ＮＦ−κＢ阻害因子ＩκＢ、例えば、ＩκＢα、ＩκＢβ、及びＩκＢによる複合体として、細胞質において不活性状態で維持される。不活性ＮＦ−κＢ複合体は、ＩＫＫβなどのキナーゼを介したＩκＢタンパク質のリン酸化により、細胞質から放出される。ＮＦ−κＢ活性を調節するキナーゼは、免疫応答又は細胞ストレスにより活性化される。したがって、ＩｋＢ／ｐ６５／ｐ５０などの細胞質ＮＦ−κＢ複合体において、ＩｋＢは、ＩＫＫβなどのキナーゼを介してリン酸化されるようになり、ＮＦ−κＢとｐ６５／ｐ５０などの核との二量体対を放出する。核において、ＮＦ−κＢは、アラキドン酸をプロスタグランジンＨ２（ＰＧＨ２）に変換する酵素の１つであるシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）などの酵素に加えて、ＴＮＦα、ＩＬ−６、及びＩＬ−１βのようなサイトカインなどの炎症誘発性因子の遺伝子発現を制御する。これらの因子は、様々な組織における炎症を誘導する。さらに、放出される細胞内容物及びＮＦ−κＢ核内因子に応じて、ＮＦ−κＢは、抗炎症性遺伝子の発現を引き起こし得る。これらの経路は生物の生存及び適応に必須であるが、ＮＦ−κＢ系の慢性活性化は、制御されない炎症性病理をもたらす。そのことは、ＮＦ−κＢの慢性活性化がジストロフィーマウス及びＤＭＤ患者の筋肉において生じる場合のジストロフィン欠損筋肉にも該当する。
【０００５】
[0005]  ＤＭＤ患者において、ＮＦ−κＢの活性化は、典型的には、他の臨床症状の発症前に筋肉組織内に認められる。さらに、ＤＭＤ患者の免疫細胞及び変性する筋線維は、活性化ＮＦ−κＢのレベル上昇を示す。証拠はまた、機械的ストレスが筋肉におけるＮＦ−κＢを活性化し、且つＮＦ−κＢ媒介炎症を駆動することを示唆する。機械的ストレス及び炎症の増加とともに、筋肉、例えば四頭筋及び大腿屈筋において、筋肉のより迅速な変質が認められる。
【０００６】
[0006]  エダサロネキセントは、専ら細胞内の脂肪酸ヒドロラーゼによる加水分解を受けやすいリンカーにより一緒にコンジュゲートされた、ＮＦ−κＢの活性化を個別に阻害する、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）及びサリチル酸を含む、経口的に生体利用可能なＮＦ−κＢ阻害剤である。これらの化合物は、インビトロでＮＦ−κＢ活性化を阻害することが示されており、さらに長期治療により、ＤＭＤのｍｄｘマウス及びゴールデンレトリーバー筋ジストロフィー（ＧＲＭＤ）イヌモデルの双方の表現型が改善される(Hammers et al. (2016) JCI INSIGHT 1(21):e90341)。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
[0007]  現在までの進歩にもかかわらず、患者における筋ジストロフィー、例えばＤＭＤを治療するための改善された方法、例えばＮＦ−ｋＢ阻害剤によりＤＭＤを治療するための方法が依然として求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
概要
[0008]  本発明は、筋ジストロフィー、例えばデュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）を治療するための方法及び組成物を提供する。本発明は、部分的には、脂肪酸アセチル化サリチル酸塩、例えばエダサロネキセントを用いて対象におけるＤＭＤを治療するとき、脂肪酸アセチル化サリチル酸塩が、血漿中の脂肪酸アセチル化サリチル酸塩の最大濃度であるか、又は脂肪酸アセチル化サリチル酸塩への総曝露でなく、対象における閾値血漿濃度であるか、又はそれを超えるような期間にかけて有効性が駆動されるという発見に基づく。
【０００９】
[0009]  したがって、一態様では、本発明は、それを必要とする対象における筋ジストロフィー、例えばデュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）を治療する方法を提供する。該方法は、２４時間中の最低１２時間、少なくとも約２０ｎｇ／ｍｌの、対象における化合物の閾値血漿濃度を達成するのに有効である、式Ｉ
【化１】
2021502328.tif 000002
の構造を有する化合物又はその薬学的に許容できる塩の投与計画を対象に施すことを含む。特定の実施形態では、閾値血漿濃度は、約２０ｎｇ／ｍｌ〜約２００ｎｇ／ｍｌである。特定の実施形態では、該化合物は、２４時間中の、少なくとも約１３時間、約１４時間、約１５時間、約１６時間、約１７時間、約１８時間、約１９時間、約２０時間、約２１時間、約２２時間、約２３時間、又は約２４時間、閾値濃度である又はそれを超える。
【００１０】
[0010]  特定の実施形態では、投与計画は、１日あたり１回、２回又は３回用量の化合物を含む。特定の実施形態では、各用量が、該化合物の約２５ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇを含む。特定の実施形態では、各用量が、該化合物の約２５ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇを含む。特定の実施形態では、各用量が、該化合物の約２０ｍｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇを含む。特定の実施形態では、全一日量は、約１００ｍｇ／ｋｇ〜約２００ｍｇ／ｋｇ、又は約１００ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、例えば１００ｍｇ／ｋｇ又は１３３ｍｇ／ｋｇを含む。特定の実施形態では、全一日量は、約１００ｍｇ／ｋｇを含む。特定の実施形態では、全一日量は、約９０ｍｇ／ｋｇ〜約１１０ｍｇ／ｋｇを含む。特定の実施形態では、全一日量は、該化合物の１００ｍｇ／ｋｇ±５％、１００ｍｇ／ｋｇ±１０％、１００ｍｇ／ｋｇ±１５％、又は１００ｍｇ／ｋｇ±２０％を含む。
【００１１】
[0011]  特定の実施形態では、投与計画は、１日あたり３回用量を含む。特定の実施形態では、３回用量は、該化合物の等量を含む、例えば、各用量が、該化合物の約２５ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇを含む、又は例えば、各用量が、該化合物の約３３ｍｇ／ｋｇを含む。
【００１２】
[0012]  特定の実施形態では、第１用量及び第２用量は、該化合物の第３用量よりも少量を含む、例えば、第１用量及び第２用量は、該化合物の第３用量の約半量を含む。例えば、特定の実施形態では、第１用量及び第２用量は、該化合物の約２５ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇを含み、且つ第３用量は、該化合物の約５０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇを含む、例えば、第１用量及び第２用量は、該化合物の約３３ｍｇ／ｋｇを含み、且つ第３用量は、該化合物の約６７ｍｇ／ｋｇを含む。
【００１３】
[0013]  特定の実施形態では、３回用量の少なくとも１回の用量が他の２回用量と異なる量である、例えば、各用量が、該化合物の約２５ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇを含む、又は例えば、各用量が、該化合物の約２０ｍｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇを含む。一実施形態では、２回用量が等しく、且つ１回用量が異なる。一実施形態では、すべての３回用量が異なる。
【００１４】
[0014]  特定の実施形態では、３回用量は等しく、式Ｉの化合物の２５０ｍｇ又は１００ｍｇを含有する剤形で投与される。特定の他の実施形態では、３回用量は等しくなく、式Ｉの化合物の２５０ｍｇ又は１００ｍｇを含有する剤形で投与される、例えば、２回用量が等しく、且つ１回用量が異なる、又は例えば、各用量が異なる。特定の実施形態では、３回用量は、該化合物の１００ｍｇ／ｋｇ±５％、１００ｍｇ／ｋｇ±１０％、１００ｍｇ／ｋｇ±１５％、又は１００ｍｇ／ｋｇ±２０％の全一日量に等しい。特定の実施形態では、２回用量が７５０ｍｇであり、且つ１回用量が５００ｍｇである。特定の実施形態では、全一日量は、６，０００ｍｇを超えない。
【００１５】
[0015]  特定の実施形態では、第１用量は午前中に投与され、第２用量は正午に投与され、且つ第３用量は夜間に投与される。特定の実施形態では、各用量は食物とともに、例えば食事時に投与される。例えば、特定の実施形態では、第１用量は、朝食時に投与され、第２用量は昼食時に投与され、且つ第３用量は夕食時に投与される。特定の実施形態では、２回用量が、朝食及び夕食とともに投与され、それらは昼食とともに投与される用量よりも多い。特定の実施形態では、該用量は、少なくとも８ｇの脂肪を含有する食物又は食事とともに投与される。
【００１６】
[0016]  特定の実施形態では、該化合物は、医薬組成物、例えば５０〜７０重量％の化合物を含む組成物で投与される。該組成物は、例えば、グリセリルモノオレエート（タイプ４０）、ポリソルベート８０、ポリエチレングリコール４００、又はＤＬ−α−トコフェロールの１つ以上をさらに含んでもよい。特定の実施形態では、該組成物は、カプセル剤として製剤化される。特定の実施形態では、該化合物は、経口的に投与される。
【００１７】
[0017]  特定の実施形態では、該方法は、四頭筋における炎症を少なくとも２０％低減し、且つ／又は四頭筋における線維症を少なくとも２０％低減する。
【００１８】
[0018]  別の態様では、本発明は、５０〜７０重量％の式Ｉ
【化２】
2021502328.tif 000003
の構造を有する化合物又はその薬学的に許容できる塩、並びに任意選択的には、溶媒又は希釈剤（例えば、グリセリルモノオレエート（タイプ４０））；界面活性剤（例えば非イオン性界面活性剤、例えばポリソルベート８０）；共溶媒（例えばポリエチレングリコール４００）；及び抗酸化剤（例えば、ＤＬ−α−トコフェロール）の１、２、３、又は４を含む医薬組成物を提供する。特定の実施形態では、溶媒又は希釈剤は、グリセリルモノオレエート（タイプ４０）である。特定の実施形態では、界面活性剤は、非イオン性界面活性剤、例えばポリソルベート８０である。特定の実施形態では、共溶媒は、ポリエチレングリコールである。特定の実施形態では、抗酸化剤は、ＤＬ−α−トコフェロールである。
【００１９】
[0019]  本発明の様々な態様及び実施形態は、以下により詳細に説明される。本明細書に記載される場合に類似又は相当する方法及び材料は、本発明の実施又は試験にて用いることができるが、例示的な方法及び材料がここで説明される。本発明の他の特徴、対象、及び利点は、説明及び特許請求の範囲から明らかになるであろう。本明細書及び添付の特許請求の範囲では、単数形は、文脈が特に明示しない限り、複数も含む。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
図面の簡単な説明
【図１】[0020]食餌中の１．５％エダサロネキセントの用量の投与を受けたＣ５７ＢＬ／６マウスの血漿及び骨格筋におけるエダサロネキセントの濃度レベルの折れ線グラフを示す。
【図２】[0021]１回の経口一日量として４５０ｍｇ／ｋｇのエダサロネキセント、３回の経口一日量の１５０ｍｇ／ｋｇのエダサロネキセント（４５０ｍｇ／ｋｇの全一日量に対応）、又は２回の経口一日量の１５０ｍｇ／ｋｇのエダサロネキセント及び１回の経口一日量の３００ｍｇ／ｋｇのエダサロネキセント（６００ｍｇ／ｋｇの全一日量に対応）の投与を受けたＣ５７ＢＬ／６マウスにおけるエダサロネキセントの血漿濃度レベルを示す折れ線グラフである。
【図３】[0022]食餌中の１％エダサロネキセントの用量の投与を受けたｍｄｘマウスにおける四頭筋の筋炎（左）及び線維症（右）を表す棒グラフを示す。
【図４】[0023]１回の経口一日量の４５０ｍｇ／ｋｇのエダサロネキセント及び／又は食餌中の１％エダサロネキセントの用量の投与を受けたｍｄｘマウスにおける四頭筋の筋炎（左）及び線維症（右）を表す棒グラフを示す。
【図５】[0024]１回の経口一日量の４５０ｍｇ／ｋｇのエダサロネキセント、３回の経口一日量の１５０ｍｇ／ｋｇのエダサロネキセント（４５０ｍｇ／ｋｇの全一日量に対応）、又は２回の経口一日量の１５０ｍｇ／ｋｇのエダサロネキセント及び１回の経口一日量の３００ｍｇ／ｋｇのエダサロネキセント（６００ｍｇ／ｋｇの全一日量に対応）の投与を受けたｍｄｘマウスにおける四頭筋の筋炎（左）及び線維症（右）を表す棒グラフを示す。
【図６】[0025]１日２回の３３ｍｇ／ｋｇ用量（６７ｍｇ／ｋｇ／日の全一日量に対応）の投与を受けた、MoveDMD（登録商標）第２相試験からの対象におけるエダサロネキセント血漿濃度を示す。
【図７】[0026]１日３回の３３ｍｇ／ｋｇ用量（１００ｍｇ／ｋｇ／日の全一日量に対応）の投与を受けた、MoveDMD（登録商標）第２相試験からの対象におけるエダサロネキセント血漿濃度を示す。
【図８】[0027]エダサロネキセントの第１相及び第２相臨床試験からのデータを用いて開発された集団ＰＫモデルに基づく、１日３回の３３ｍｇ／ｋｇ用量（１００ｍｇ／ｋｇ／日の全一日量に対応）、又は１日あたり２回の３３ｍｇ／ｋｇ用量及び１回の６７ｍｇ／ｋｇ用量（１３３ｍｇ／ｋｇ／日の全一日量に対応）を含む投与計画に対してモデル化されたエダサロネキセント血漿濃度レベルを示す。
【図９】[0028]エダサロネキセントの第１相及び第２相臨床試験からのデータを用いて開発された集団ＰＫモデルに基づく、１日３回の３３ｍｇ／ｋｇ用量（１００ｍｇ／ｋｇ／日の全一日量に対応）、又は２回の３３ｍｇ／ｋｇ用量（６７ｍｇ／ｋｇ／日の全一日量に対応）を含む投与計画に対してモデル化されたエダサロネキセント血漿濃度レベルを示す。
【図１０】[0029]MoveDMD第１相及び第２相臨床試験設計の模式図である。
【図１１】[0030]３３ｍｇ／ｋｇ、６７ｍｇ／ｋｇ、又は１００ｍｇ／ｋｇの用量に曝露されるときの、ｎｇ／ｍＬ＊時間でのエダサロネキセントへの対象の一日曝露量を示す棒グラフである。
【図１２】[0031]対象が３３ｍｇ／ｋｇ、６７ｍｇ／ｋｇ、又は１００ｍｇ／ｋｇの用量に曝露されたとき、２４の異なるＮＦ−κＢ調節及び炎症調節遺伝子転写物における（エダサロネキセント治療前の）１日目〜（エダサロネキセント治療の）７日目の間での発現レベルにおける変化を示す棒グラフである。各カラムは、個別の遺伝子転写物におけるデータを表す。
【図１３】[0032]２４の異なるＮＦ−κＢ調節及び炎症調節遺伝子転写物における（エダサロネキセント治療前の）１日目〜（エダサロネキセント治療の）７日目の間での発現レベルにおける平均変化を、３回用量群（３３ｍｇ／ｋｇ／日、６７ｍｇ／ｋｇ／日、及び１００ｍｇ／ｋｇ／日）における平均Ｃトラフ（ｎｇ／ｍＬ）に対して示すグラフである。
【図１４】[0033]３６週対照期間とその後の６０週治療期間にわたる１００ｍｇ／ｋｇ／日のエダサロネキセント投与群内の試験対象におけるノーススター歩行能力評価(North Star Ambulatory Assessment)スコアの平均変化率を示す折れ線グラフである。
【図１５】[0034]３６週対照期間とその後の６０週治療期間にわたる１００ｍｇ／ｋｇ／日のエダサロネキセント投与群内の試験対象における１０メートル歩行／走行時間における平均変化率を示す折れ線グラフである。
【図１６】[0035]３６週対照期間とその後の６０週治療期間にわたる１００ｍｇ／ｋｇ／日のエダサロネキセント投与群内の試験対象における４階段昇降時間における平均変化率を示す折れ線グラフである。
【図１７】[0036]３６週対照期間とその後の６０週治療期間にわたる１００ｍｇ／ｋｇ／日のエダサロネキセント投与群内の試験対象における立ち上がり時間での時間における平均変化率を示す折れ線グラフである。
【図１８】[0037]３６週対照期間とその後の４８週治療期間にわたる１００ｍｇ／ｋｇ／日のエダサロネキセント投与群内の試験対象におけるＭＲＩ−Ｔ２値における年換算変化率を示す棒グラフである。
【図１９】[0038]３６週対照期間とその後の４８週治療期間にわたる１００ｍｇ／ｋｇ／日のエダサロネキセント投与群内の試験対象における脂肪画分値における変化を示す表である。
【図２０Ａ】[0039]６０週試験期間にわたる試験対象における拍動／分におけるベースラインからの心拍数変化を示す折れ線グラフである。
【図２０Ｂ】[0039]６０週試験期間にわたる試験対象における身長パーセンタイルの変化を示す折れ線グラフである。
【図２０Ｃ】[0039]６０週試験期間にわたる試験対象における肥満度指数（ＢＭＩ）パーセンタイルの変化を示す折れ線グラフである。
【図２０Ｄ】[0039]６０週試験期間にわたる試験対象における体重パーセンタイルの変化を示す折れ線グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
詳細な説明
[0040]  本発明は、筋ジストロフィー、例えばデュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）を治療するための方法及び組成物を提供する。本発明は、部分的には、脂肪酸アセチル化サリチル酸塩、例えばエダサロネキセントを用いて対象におけるＤＭＤを治療するとき、脂肪酸アセチル化サリチル酸塩が、血漿中の脂肪酸アセチル化サリチル酸塩の最大濃度又は脂肪酸アセチル化サリチル酸塩への総曝露でなく、対象における閾値血漿濃度である又はそれを超えるような期間にかけて有効性が駆動されるという発見に基づく。したがって、一態様では、本発明は、それを必要とする対象における筋ジストロフィー、例えばデュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）を治療する方法を提供する。該方法は、２４時間中の最低１２時間、少なくとも約２０ｎｇ／ｍｌの、対象における化合物の閾値血漿濃度を達成するのに有効である式Ｉ
【化３】
2021502328.tif 000004
の構造を有する化合物又はその薬学的に許容できる塩の投与計画を対象に施すことを含む。
【００２２】
[0041]  特定の実施形態では、閾値血漿濃度は、約２０ｎｇ／ｍｌ〜約２００ｎｇ／ｍｌである。例えば、特定の実施形態では、閾値血漿濃度は、約２０ｎｇ／ｍｌ〜約２００ｎｇ／ｍｌ、約２０ｎｇ／ｍｌ〜約１７５ｎｇ／ｍｌ、約２０ｎｇ／ｍｌ〜約１５０ｎｇ／ｍｌ、約２０ｎｇ／ｍｌ〜約１２５ｎｇ／ｍｌ、約２０ｎｇ／ｍｌ〜約１００ｎｇ／ｍｌ、約２０ｎｇ／ｍｌ〜約７５ｎｇ／ｍｌ、約２０ｎｇ／ｍｌ〜約５０ｎｇ／ｍｌ、約２０ｎｇ／ｍｌ〜約２５ｎｇ／ｍｌ、約２５ｎｇ／ｍｌ〜約２００ｎｇ／ｍｌ、約２５ｎｇ／ｍｌ〜約１７５ｎｇ／ｍｌ、約２５ｎｇ／ｍｌ〜約１５０ｎｇ／ｍｌ、約２５ｎｇ／ｍｌ〜約１２５ｎｇ／ｍｌ、約２５ｎｇ／ｍｌ〜約１００ｎｇ／ｍｌ、約２５ｎｇ／ｍｌ〜約７５ｎｇ／ｍｌ、約２５ｎｇ／ｍｌ〜約５０ｎｇ／ｍｌ、約５０ｎｇ／ｍｌ〜約２００ｎｇ／ｍｌ、約５０ｎｇ／ｍｌ〜約１７５ｎｇ／ｍｌ、約５０ｎｇ／ｍｌ〜約１５０ｎｇ／ｍｌ、約５０ｎｇ／ｍｌ〜約１２５ｎｇ／ｍｌ、約５０ｎｇ／ｍｌ〜約１００ｎｇ／ｍｌ、約５０ｎｇ／ｍｌ〜約７５ｎｇ／ｍｌ、約７５ｎｇ／ｍｌ〜約２００ｎｇ／ｍｌ、約７５ｎｇ／ｍｌ〜約１７５ｎｇ／ｍｌ、約７５ｎｇ／ｍｌ〜約１５０ｎｇ／ｍｌ、約７５ｎｇ／ｍｌ〜約１２５ｎｇ／ｍｌ、約７５ｎｇ／ｍｌ〜約１００ｎｇ／ｍｌ、約１００ｎｇ／ｍｌ〜約２００ｎｇ／ｍｌ、約１００ｎｇ／ｍｌ〜約１７５ｎｇ／ｍｌ、約１００ｎｇ／ｍｌ〜約１５０ｎｇ／ｍｌ、約１００ｎｇ／ｍｌ〜約１２５ｎｇ／ｍｌ、約１２５ｎｇ／ｍｌ〜約２００ｎｇ／ｍｌ、約１２５ｎｇ／ｍｌ〜約１７５ｎｇ／ｍｌ、約１２５ｎｇ／ｍｌ〜約１５０ｎｇ／ｍｌ、約１５０ｎｇ／ｍｌ〜約２００ｎｇ／ｍｌ、約１５０ｎｇ／ｍｌ〜約１７５ｎｇ／ｍｌ、又は約１７５ｎｇ／ｍｌ〜約２００ｎｇ／ｍｌである。特定の実施形態では、閾値血漿濃度は、約２００ｎｇ／ｍｌ、約１７５ｎｇ／ｍｌ、約１５０ｎｇ／ｍｌ、約１２５ｎｇ／ｍｌ、約１００ｎｇ／ｍｌ、約７５ｎｇ／ｍｌ、約５０ｎｇ／ｍｌ、約２５ｎｇ／ｍｌ、又は約２０ｎｇ／ｍｌである。本明細書に記載の活性薬剤、例えばエダサロネキセントの血漿濃度は、当該技術分野で公知の方法により、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ（液体クロマトグラフィー／質量分析／質量分析）により測定されてもよい。
【００２３】
[0042]  特定の実施形態では、該化合物は、２４時間中の、少なくとも約１２時間〜約２４時間、約１４時間〜約２４時間、約１６時間〜約２４時間、約１８時間〜約２４時間、約２０時間〜約２４時間、約２２時間〜約２４時間、約１２時間〜約２２時間、約１４時間〜約２２時間、約１６時間〜約２２時間、約１８時間〜約２２時間、約２０時間〜約２２時間、約１２時間〜約２０時間、約１４時間〜約２０時間、約１６時間〜約２０時間、約１８時間〜約２０時間、約１２時間〜約１８時間、約１４時間〜約１８時間、約１６時間〜約１８時間、約１２時間〜約１６時間、約１４時間〜約１６時間、又は約１２時間〜約１４時間、閾値濃度である又はそれを超える。
【００２４】
[0043]  特定の実施形態では、該化合物は、２４時間中の、少なくとも約１３時間、約１４時間、約１５時間、約１６時間、約１７時間、約１８時間、約１９時間、約２０時間、約２１時間、約２２時間、約２３時間、又は約２４時間、閾値濃度である又はそれを超える。
【００２５】
[0044]  本発明の様々な特徴及び態様は、以下により詳細に考察される。
【００２６】
Ｉ．定義
[0045]  本発明の理解を容易にするため、いくつかの用語及び語句が以下に定義される。
【００２７】
[0046]  本明細書で用いられるとき、用語「対象」及び「患者」は、互換可能に用いられ、本発明の方法及び組成物による治療対象である生物を指す。かかる生物は、好ましくは哺乳動物（例えば、ヒト、マウス、ラット、モルモット、イヌ、ネコ、ウマ、雌ウシ、ブタ、又は非ヒト霊長類、例えば、サル、チンパンジー、ヒヒ、及びアカゲザル）、より好ましくはヒトである。
【００２８】
[0047]  本明細書で用いられるとき、語句「有効量」及び「治療有効量」は、有利な又は所望される結果をもたらすのに十分な化合物（例えば本明細書に記載の化合物）の量を指す。有効量は、１回以上の投与、適用又は用量で施すことができ、特定の配合又は投与経路に限定されることは意図されない。
【００２９】
[0048]  本明細書で用いられるとき、用語「医薬組成物」は、活性薬剤と、組成物を特にインビボ又は生体外で診断又は治療用途に適合させる、不活性又は活性の担体との組み合わせを指す。
【００３０】
[0049]  本明細書で用いられるとき、用語「薬学的に許容できる担体」は、標準の薬学的担体、例えば、リン酸緩衝食塩水溶液、水、エマルジョン（例えば、油／水又は水／油エマルジョンなど）、及び様々なタイプの浸潤剤のいずれかを指す。該組成物はまた、安定剤及び保存剤を含みうる。担体、安定剤及びアジュバントの例として、Martin, Remington’s Pharmaceutical Sciences, 15th Ed., Mack Publ. Co., Easton, PA (1975)を参照されたい。
【００３１】
[0050]  本明細書で用いられるとき、用語「薬学的に許容できる塩」は、開示化合物中に存在してもよい酸性基又は塩基性基の任意の塩を指し、ここで塩は薬学的投与に適合する。当業者に公知である通り、開示化合物の「塩」は、無機又は有機の酸及び塩基に由来してもよい。酸の例として、限定はされないが、塩化水素酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、過塩素酸、フマル酸、マレイン酸、リン酸、グリコール酸、乳酸、サリチル酸、琥珀酸、トルエン−ｐ−スルホン酸、酒石酸、酢酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ギ酸、安息香酸、マロン酸、ナフタレン−２−スルホン酸及びベンゼンスルホン酸が挙げられる。他の酸、例えばシュウ酸は、それ自体で薬学的に許容できないが、本明細書に記載の化合物及びそれらの薬学的に許容できる酸付加塩を得る際の中間体として有用な塩の調製において用いられてもよい。
【００３２】
[0051]  塩基の例として、限定はされないが、アルカリ金属（例えばナトリウム）水酸化物、アルカリ土類金属（例えばマグネシウム）水酸化物、アンモニア、及び式ＮＷ４＋（式中、ＷはＣ１〜４アルキルである）の化合物などが挙げられる。
【００３３】
[0052]  塩の例として、限定はされないが、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、フルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、パルモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩、ウンデカン酸塩などが挙げられる。塩の他の例として、Ｎａ＋、ＮＨ４＋、及びＮＷ４＋（式中、ＷはＣ１〜４アルキル基でありうる）などの好適なカチオンと配合された本発明の化合物のアニオンなどが挙げられる。治療用途においては、本明細書に開示される化合物の塩が、薬学的に許容できるものとして検討される。
【００３４】
[0053]  用語「担体」は、賦形剤及び希釈剤を指し、医薬品を１つの臓器又は身体の一部から別の臓器又は身体の一部へ保有又は輸送することに関与する材料、組成物又は媒体、例えば、液体若しくは固体充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒又はカプセル封入材料を意味する。
【００３５】
[0054]  本明細書で用いられるとき、用語「治療すること」は、状態、疾患、障害などの改善をもたらす任意の効果、例えば、緩和、低減、調節、寛解若しくは排除すること、又はそれらの症状を寛解することを含む。治療は、障害を治癒すること、改善すること、又は少なくとも部分的に寛解することでありうる。特定の実施形態では、治療は、疾患を治癒することである。
【００３６】
[0055]  用語「障害」は、別段の指示がない限り、用語「疾患」、「状態」又は「疾病」を指し、互換可能に用いられる。
【００３７】
[0056]  本明細書に記載の方法及び組成物は、単独で又は他の治療薬及び／若しくは様式と組み合わせて用いることができる。「組み合わせ」投与されるという用語は、本明細書で用いられるとき、障害を有する対象が苦悩する期間、２つの（又はそれ以上の）異なる治療薬が対象に送達されることで、患者に対する治療の効果がある時点で重複することを意味すると理解される。特定の実施形態では、第１治療薬の送達が、第２治療薬の送達の開始時に依然として行われていることから、投与の観点で重複がある。これは時として、本明細書中で「同時」又は「併用送達」と称される。他の実施形態では、一方の治療薬の送達が、他方の治療薬の送達が開始する前に終了する。いずれかの場合の特定の実施形態では、その治療薬は、併用投与のため、より有効である。例えば、第２治療薬はより有効である、例えば第２治療薬の低減に伴い、同等の効果が見られる、又は第２治療薬が、第２治療薬が第１治療薬の不在下で投与された場合に見られる場合よりも症状を大幅に低減する、又は第１治療薬の存在下で同様の状況が見られる。特定の実施形態では、送達は、症状における低減、又は障害に関する他のパラメータが、一方の治療薬が他方の治療薬の不在下で送達される場合に認められる場合よりも大きい程度である。２つの治療薬の効果は、部分的に相加的でありうる、全体的に相加的でありうる、又は相加的を上回る可能性がある。送達は、送達される第１治療薬の効果が、第２治療薬が送達されるときに依然として検出可能である程度でありうる。
【００３８】
[0057]  「慢性投与」は、本明細書で用いられるとき、継続的、規則的、長期的な投与、即ち実質的中断を伴わない定期的投与を指す。例えば、患者における筋ジストロフィーを治療することを意図しての、少なくとも数週又は数か月又は数年の一時期にわたっての毎日が挙げられる。例えば、患者における筋ジストロフィーを治療することを意図しての、少なくとも数か月又は数年の一時期にわたっての毎週（例えば、少なくとも６週にわたって毎週、少なくとも１２週にわたって毎週、少なくとも２４週にわたって毎週、少なくとも４８週にわたって毎週、少なくとも７２週にわたって毎週、少なくとも９６週にわたって毎週、少なくとも１２０週にわたって毎週、少なくとも１４４週にわたって毎週、少なくとも１６８週にわたって毎週、少なくとも１８０週にわたって毎週、少なくとも１９２週にわたって毎週、少なくとも２１６週にわたって毎週、又は少なくとも２４０週にわたって毎週）が挙げられる。
【００３９】
[0058]  「定期的投与」は、本明細書で用いられるとき、投与間にある間隔を伴うような投与を指す。例えば、定期的投与は、反復してもよい固定間隔（例えば、毎週、毎月）での投与を含む。
【００４０】
[0059]  特に定義されない限り、本明細書で用いられるすべての科学技術用語は、本発明が属する当業者によって周知される場合と同じ意味を有する。
【００４１】
[0060]  説明全体を通じて、組成物及びキットが特定成分を有する、含む(including)、若しくは含む(comprising)ものとして説明される場合、又はプロセス及び方法が特定ステップを有する、含む(including)、若しくは含む(comprising)ものとして説明される場合、さらに、本質的に列挙される成分からなる、又は列挙される成分からなる本発明の組成物及びキットが存在し、且つ本質的に列挙される処理ステップからなる、又は列挙される処理ステップからなる本発明に従うプロセス及び方法が存在すると考えられる。
【００４２】
[0061]  本願中で、要素若しくは成分が、列挙される要素若しくは成分のリストの中に含まれ、且つ／又はリストから選択される場合、要素若しくは成分が、列挙される要素若しくは成分のいずれか１つでありうる、又は要素若しくは成分が、列挙される要素若しくは成分の２つ以上からなる群から選択されうることは理解されるべきである。
【００４３】
[0062]  さらに、本明細書に記載の組成物又は方法の要素及び／又は特徴が、本明細書で明示的又は暗示的にかかわらず、本発明の精神及び範囲から逸脱することなく種々の方法で組み合わせ可能であることは理解されるべきである。例えば、特定化合物に対する参照がなされる場合、その化合物は、特に文脈から理解されない限り、本発明の組成物の様々な実施形態及び／又は本発明の方法において用いることができる。換言すれば、本願中で、実施形態は、文書化及び図面化されるべき明確且つ簡潔な適用を可能にするように説明及び描写されているが、実施形態が、本教示内容及び本発明から逸脱することなく、様々に組み合わされても又は分割されてもよいことは意図されており、理解されるであろう。例えば、本明細書に説明及び描写されるあらゆる特徴が、本明細書に説明及び描写される本発明のあらゆる態様に適用可能であることは理解されるであろう。
【００４４】
[0063]  冠詞「a」及び「an」は、文脈的に不適切でない限り、本開示中で１又は２以上（即ち少なくとも１）のその冠詞の文法的対象を指すように用いられる。例として、「an element」は、１つの要素又は２つ以上の要素を意味する。
【００４５】
[0064]  用語「及び／又は」は、特に指示されない限り、本開示中で、「及び」又は「又は」のいずれかを意味するように用いられる。
【００４６】
[0065]  表現「〜の少なくとも１つ」が、特に文脈及び使用から明白でない限り、個別に該表現に後続する列挙対象の各々及び列挙対象の２つ以上の様々な組み合わせを含むことは理解されるべきである。３つ以上の列挙対象と組み合わせた表現「及び／又は」は、特に文脈から明白でない限り、同じ意味を有するように理解されるべきである。
【００４７】
[0066]  用語「含む(include)」、「含む(includes)」、「含む(including)」、「有する(have)」、「有する(has)」、「有する(having)」、「含有する(contain)」、「含有する(contains)」、又は「含有する(containing)」やその文法的均等物などの使用は、特に文脈から具体的に記述又は理解されない限り、一般にオープンエンドで非限定的であり、例えばさらなる列挙されない要素又はステップを排除しないものとして理解されるべきである。
【００４８】
[0067]  用語「約」の使用が定量値の前である場合、本発明はまた、特に具体的に記述されない限り、具体的な定量値自体を含む。本明細書で用いられるとき、用語「約」は、特に指示又は推定されない限り、名目値からの±１０％の差異を指す。
【００４９】
[0068]  例えばポリマーについて、分子量が示され、絶対値でない場合、分子量は、特に文脈から記述又は理解されない限り、平均分子量であると理解されるべきである。
【００５０】
[0069]  本発明が作用可能性を維持する限り、ステップの順序又は特定の作用を実施するための順序が重要でないことは理解されるべきである。さらに、２つ以上のステップ又は作用は、同時に実施されてもよい。
【００５１】
[0070]  本明細書中でのありとあらゆる例、又は例示的用語、例えば「〜など」又は「〜を含む」の使用は、特許請求されない限り、あくまで本発明をより十分に例示することが意図され、本発明の範囲に制限を設けない。本明細書中の用語は、任意の特許請求されない要素を本発明の実施に不可欠なものとして示すように解釈されるべきではない。
【００５２】
[0071]  一般的事項として、百分率を特定する組成物は、特に指定されない限り、重量を基準とする。さらに、変数に定義を伴わない場合、変数の先行的な定義が制御する。
【００５３】
ＩＩ．エダサロネキセント及び他のＮＦ−κＢ阻害剤
[0072]  ＮＦ−κＢ活性を阻害し、炎症を低減しうる脂肪酸アセチル化サリチル酸塩の例が、ＣＡＴ−１００４とも称されるエダサロネキセントである(Milne et al. (2014) NEUROMUSCULAR DISORDERS 24(9):825)。エダサロネキセントの［Ｎ−（２−［（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−ドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサンアミド(hexaenamido)］エチル）−２−ヒドロキシベンズアミド］は、サリチル酸とドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）とがエチレンジアミンリンカーを介して共有結合的にコンジュゲートされ、これらの化合物双方がＮＦ−κＢを阻害する能力に相乗的に作用するように設計された小分子である。エダサロネキセントは、ＣＡＳ登録番号１２０４３１７−８６−１が割り当てられ、式Ｉ：
【化４】
2021502328.tif 000005
の構造を有する。
【００５４】
[0073]  エダサロネキセントは、ｍｄｘマウスにおいて筋肉再生を増強し、筋肉変性及び炎症を低減し、且つ筋肉機能を維持することが示されている(上記のMilne, J. et al., (2014))。ｍｄｘマウスに関する長期試験では、エダサロネキセント治療が、横隔膜機能の改善及び累積走行距離の増加をもたらす(上記のMilne, J. et al., (2014))。ＤＭＤのイヌモデルでは、ｐ６５サブユニットのＤＮＡへの結合低下及び炎症性メディエーターＴＮＦ−αの分泌低下からも明らかなように、エダサロネキセントがＮＦ−κＢ活性を低下させる。ヒトでは、エダサロネキセントの投与が、全血中での炎症のバイオマーカーの減少をもたらす。健常成人では、エダサロネキセント治療により、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットのレベルが、プラセボ又は分離分子としてのサリチル酸塩及びω−３ＤＨＡによる治療と比べて低下する。
【００５５】
[0074]  エダサロネキセントが、エダサロネキセントと構造的に類似するが、ＤＨＡがエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）で置換された、ＣＡＴ−１０４１として公知の構造的相同体で置換されてもよいと考えられる。ｍｄｘマウスに関する長期試験では、ＣＡＴ−１０４１治療は、筋肉機能を維持し、骨格筋重量を増加させ、且つ筋肉線維症を低減する。ＣＡＴ−１０４１はまた、ｍｄｘマウスにおける心筋症を低減することがある。
【００５６】
[0075]  エダサロネキセントの例示的合成は、国際特許公開番号の国際公開第２０１０／００６０８５Ａ１号に記載されており、次のように表される。
【化５】
2021502328.tif 000006
【００５７】
[0076]  つまり、エチレンジアミンは、指標としてのブロモアレサールグリーン(bromoaresal green)を含有する水に溶解される。青色から淡黄色への移色が丁度なされるまで、メタンスルホン酸が水に添加される。溶液は、エタノールで希釈され、勢いよく撹拌される。混合物に、ジメトキシエタン中Ｃｂｚ−ＣIの溶液及び５０％ｗ／ｖの水性ＡｃＯＫが２０℃で添加されると同時に、指標としての淡黄色−緑色が維持される。添加完了後、混合物は、撹拌され、低温・真空下で濃縮され、揮発物が除去される。残渣が水とともに振盪され、濾過される。次に、濾液がトルエンで洗浄され、余分な４０％水性ＮａＯＨで塩基性化され、トルエンで抽出される。有機層が鹹水で洗浄され、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥され、蒸発され、２−アミノエチルカルバミン酸ベンジルが油として得られる。
【００５８】
[0077]  酢酸エチル中、２−アミノエチルカルバミン酸ベンジル、イミダゾール、サリチル酸の混合物に、酢酸エチル中ＤＣＣの溶液が添加される。混合物は、撹拌及び濾過される。溶液は低圧下で濃縮され、粗生成物がシリカクロマトグラフィーにより精製され、２−（２−ヒドロキシベンズアミド）エチルカルバミン酸ベンジルが白色固体として得られる。
【００５９】
[0078]  ＭｅＯＨ中、２−（２−ヒドロキシベンズアミド）エチルカルバミン酸ベンジルとＰｄ／Ｃとの混合物が、Ｈ２雰囲気下で撹拌される。混合物は、濾過され、低圧下で濃縮される。粗生成物がシリカクロマトグラフィーにより精製され、Ｎ−２−（アミノエチル）２−ヒドロキシベンズアミドが白色粉末として得られる。
【００６０】
[0079]  ＣＨ３ＣＮ中、Ｎ−２−（アミノエチル）２−ヒドロキシベンズアミド、ＤＨＡ及びＥｔ３Ｎの混合物にＨＡＴＵが添加される。混合物は、撹拌され、低圧下で濃縮される。残渣が鹹水で処理され、ＥｔＯＡｃで抽出される。組み合わせられた有機層が、１Ｍ  ＨＣｌ、鹹水、５％ＮａＨＣＯ３及び鹹水で洗浄される。有機溶液は、ＭｇＳＯ４上で乾燥され、低圧下で濃縮される。粗生成物がシリカクロマトグラフィーにより精製され、Ｎ−（２−ドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサンアミドエチル）−２−ヒドロキシベンズアミドが淡黄色油として得られる。ＣＡＴ−１０４１は、ＤＨＡがＥＰＡで置換される以外は類似の手法により生成されてもよい。
【００６１】
ＩＩＩ．  医薬組成物
[0080]  エダサロネキセント、及び／又はＣＡＴ−１０４１は、送達、例えば経口送達又は皮下送達を容易にするため、１つ以上の薬学的に許容できる担体と配合されてもよい。
【００６２】
[0081]  エダサロネキセント及び／又はＣＡＴ−１０４１の医薬組成物は、固体又は液体形態での投与、例えば、（１）経口投与、例えば、カプセル剤（水溶液若しくは非水溶液又は懸濁液）、錠剤、ボーラス、散剤、顆粒剤、及びペースト剤；（２）例えば無菌溶液若しくは懸濁液としての、例えば、皮下、筋肉内、静脈内若しくは硬膜外注射、又は徐放性製剤による非経口投与；（３）例えば、皮膚に適用される、クリーム、軟膏剤、又は徐放性パッチ若しくはスプレーとしての局所適用；（４）舌下；（５）経皮；又は（６）経鼻、に適応する場合を意図して製剤化されうる。
【００６３】
[0082]  組成物は、便宜的に単位剤形で存在可能であり、薬学分野で周知の任意の方法により調製されうる。単一剤形を作製するための、担体材料と組み合わせ可能な活性成分の量は、治療されている宿主、及び特定の投与様式に応じて変動することになる。組成物は、通常の混合、顆粒化又はコーティング方法に従って調製されうる。
【００６４】
[0083]  活性成分、例えばエダサロネキセントのカプセル剤、錠剤、又は他の固体剤形は、コーティング剤及び／又はシェル、例えば腸溶コーティング剤及び医薬製剤化分野で周知の他のコーティング剤を用いて調製されうる。それらはまた、例えば所望される放出特性をもたらすための様々な比率でのヒドロキシプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、リポソーム及び／又は微粒子を用いて、それらの中の活性成分の緩徐な又は制御された放出をもたらすように製剤化されうる。それらは、例えば細菌保持フィルターによる濾過により、又は使用直前に、滅菌剤を、滅菌水、若しくはいくつかの他の無菌注射用培地に溶解可能な滅菌固体組成物の形態で組み込むことにより、滅菌されうる。これらの組成物はまた、任意選択的には、乳白剤を含有することができ、専ら又は優先的に活性成分を、任意選択的には遅延性に、胃腸管の特定部分に放出する組成物でありうる。活性成分、例えばエダサロネキセントの経口投与用の液体剤形は、薬学的に許容できるエマルジョン、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップ及びエリキシル剤を含みうる。
【００６５】
[0084]  例示的な医薬組成物は、カプセル剤、例えばゼラチンカプセル剤、又は錠剤、例えばエダサロネキセント（本明細書に記載）、及び薬学的に許容できる担体、例えば、ａ）溶媒又は希釈剤；ｂ）界面活性剤；ｃ）共溶媒；又はｄ）抗酸化剤である。例示的な溶媒又は希釈剤は、精製水、トリグリセリド油、例えば水素化若しくは部分硬化植物油、又はそれらの混合物、トウモロコシ油、オリーブ油、ヒマワリ油、ベニバナ油、ＥＰＡ若しくはＤＨＡなどの魚油、それらのエステル若しくはトリグリセリド若しくはそれらの混合物、又はグリセリルモノオレエート（タイプ４０）を含む。例示的な界面活性剤は、ラウリル硫酸ナトリウム、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０、臭化セチルトリエチルアンモニウム、ポリエチエレン（ｐｏｌｙｅｔｈｙｅｌｅｎｅ）オキシド−ポリプロピレンオキシド共重合体、クレモフォールＥＬ、スパン８０、スパン２０、ツイーン２０、ツイーン４０、ツイーン６０、ツイーン８０、Brij L23、Brij 35、Labrasol、Plurol isostearique、ジオクチルソジウムスルホサクシネート、ＰＥＧ−３５ヒマシ油（リシノール酸マクロゴールグリセロール）、ＰＥＧ−４０水素化ヒマシ油（ヒドロキシステアリン酸マクロゴールグリセロール）、ジエチレングリコール、モノエチルエーテル、１，２−オクタンジオール、Epikuron、１，２−プロパンジオール、ベンジルアルコール、エアロゾルＯＴ、ドデシルグルコシド、コカミドプロピルベタイン、ホスファチジルコリン、２−エチル−１，３−ヘキサンジオール、カプリル酸／カプリン酸モノ／ジグリセリド、ポリソルベート、Brij、Tagat、イソプロピルアルコール、プロパノール、糖脂質、類脂質、ソジウムモノヘキシルホスフェート(sodium monohexylphosphate)、プロピレングリコール、ｎ−ブタノール、グリセリルオレエート、ポリオキシル４０脂肪酸誘導体、テトラグリコール、Ｏ−アルキルグリセロール、ドデシルグリセロール、テトラデシルグリセロール、タウロデオキシコール酸、スクロースモノラウレート、スクロースジラウレート、イソオクタノール、Epikuron、Oramix、１，２−ヘキサンジオール、ビス−２−（エチルヘキシル）スルホサクシネート、ｎ−プロパノール、１，２−プロピレングリコール、グリセロールモノオレート、ヘキサノール、スクロースラウレート、Plurololeat、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、又はデカノールを含む。例示的な共溶媒は、ポリエチレングリコール４００、ポリエチレングリコール３３５０、ポリエチレングリコール３００、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、プロピレングリコール、ブタンジオール、ペンタンジオール、ヘキサンジオール、トリエチレングリコール、テトラエチレングリコール、ジプロピレングリコール、ジブチレングリコール、グリセリン、ジメチルイソソルビド、テトラヒドロフルフリルアルコールポリエチレングリコールエーテル、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、１−メチル−２−ピロリジノン、ジメチルスルホキシド、ジメチルアセトアミド、乳酸、グリコール酸、塩化メチレン、メチル−エチル−ケトン、酢酸エチル、又はメチレンジメチルエーテルを含む。例示的な抗酸化剤は、ＤＬ−α−トコフェロール、没食子酸��ロピル、三次ブチルヒドロキノン（ｔＢＨＱ）、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）又はブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、亜硫酸ナトリウム、Ｎ−アセチルシステイン、アスコルビン酸、エデト酸、エデト酸ナトリウム、Ｌ−システイン、メタ重亜硫酸ナトリウム、グルタチオン、システイン、カプトプリル、Ｎ−アセチルシステイン、グルタチオン、Ｎａ−アスコルベート、Ｌ−システイン、Ｎａ２−ＥＤＴＡ、Ｎａ２−ＥＤＴＡ−Ｃａ、メチマゾール、ケルセチン、アルブチン、アロエシン、Ｎ−アセチルグルコサミン(acetylglucoseamine)、α−トコフェリルフェルラ酸、ＭＡＰ（Ｍｇアスコルビルリン酸）、安息香酸ナトリウム、Ｌ−フェニルアラニン、ＤＭＳＡ（サクシマー）、ＤＰＡ（Ｄ−ペニシラミン）、トリエンチン−ＨＣｌ、ジメルカプロール、クリオキノール、チオ硫酸ナトリウム、ＴＥＴＡ、ＴＥＰＡ、クルクミン、ネオクプロイン、タンニン、クプリゾン、亜硫酸水素ナトリウム、リポ酸、ＣＢ４、ＣＢ３、ＡＤ４、ＡＤ６、ＡＤ７、ビタミンＥ、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルメチルフェノール、ｔｅｒｔ−ブチル−メトキシフェノール、ポリフェノール、トコフェロール、ユビキノン、又はコーヒー酸を含む。
【００６６】
[0085]  エダサロネキセントはまた、リポソーム送達系、例えば、小型単層リポソーム、大型単層リポソーム及び多重膜小胞の形態で投与可能である。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミン又はホスファチジルコリンを含有する種々のリン脂質から形成されうる。いくつかの実施形態では、脂質成分のフィルムは、米国特許第５，２６２，５６４号に記載の通り、本明細書に記載の類似体の水溶液で水和され、類似体を被包する脂質層が形成される。
【００６７】
[0086]  一般に非経口的注射投与が、皮下、筋肉内又は静脈内の注射及び注入のため、用いられる。注射剤は、通常の形態で、注射前の液体への溶解に適した溶液又は懸濁液又は固体形態のいずれかとして調製されうる。
【００６８】
[0087]  本医薬組成物は、重量又は体積を基準として約０．１％〜約８０％、約５％〜約６０％、又は約１％〜約２０％の活性成分、例えばエダサロネキセントを含有しうる。特定の実施形態では、本発明の医薬組成物は、約５０％〜約７０重量％の活性成分を含有する。例えば、医薬組成物は、重量を基準として約５０％〜約６５％、約５０％〜約６０％、約５０％〜約５５％、約５５％〜約７０％、約５５％〜約６５％、約５５％〜約６０％、約６０％〜約７０％、約６０％〜約６５％、又は約６５％〜約７０％の活性成分、例えばエダサロネキセントを含有してもよい。
【００６９】
[0088]  特定の実施形態では、本発明の医薬組成物は、溶媒又は希釈剤（例えば、グリセリルモノオレエート（タイプ４０））；界面活性剤（例えば非イオン性界面活性剤、例えばポリソルベート８０）；共溶媒（例えば、ポリエチレングリコール４００）；及び抗酸化剤（例えば、ＤＬ−α−トコフェロール）の１、２、３つ又はそれ以上を含んでもよい。
【００７０】
[0089]  特定の例示的な剤形では、該組成物は、１ｋｇあたり、５００〜７００ｇの活性成分、１５０〜２５０ｇのグリセリルモノオレエート（タイプ４０）、１００〜２００ｇのポリソルベート８０、１０〜７０ｇのポリエチレングリコール４００、及び０．５〜５ｇのＤＬ−α−トコフェロールを含む。
【００７１】
[0090]  特定の例示的な剤形では、該組成物は、１ｋｇあたり、５５０〜６５０ｇの活性成分、１７５〜２３０ｇのグリセリルモノオレエート（タイプ４０）、１３０〜１８０ｇのポリソルベート８０、２０〜６０ｇのポリエチレングリコール４００、及び１〜４ｇのＤＬ−α−トコフェロールを含む。
【００７２】
[0091]  特定の例示的な剤形では、該組成物は、１ｋｇあたり、５５０〜６２５ｇの活性成分、１７０〜２２０ｇのグリセリルモノオレエート（タイプ４０）、１３０〜１７０ｇのポリソルベート８０、２０〜６０ｇのポリエチレングリコール４００、及び１〜４ｇのＤＬ−α−トコフェロールを含む。
【００７３】
[0092]  特定の例示的な剤形では、該組成物は、１ｋｇあたり、５８５〜６１５ｇの活性成分、１８０〜２２０ｇのグリセリルモノオレエート（タイプ４０）、１４０〜１８０ｇのポリソルベート８０、２０〜６０ｇのポリエチレングリコール４００、及び１〜４ｇのＤＬ−α−トコフェロールを含む。
【００７４】
[0093]  特定の例示的な剤形では、該組成物は、１ｋｇあたり、５９０〜６１０ｇの活性成分、１８０〜２２０ｇのグリセリルモノオレエート（タイプ４０）、１４０〜１８０ｇのポリソルベート８０、２０〜６０ｇのポリエチレングリコール４００、及び１〜４ｇのＤＬ−α−トコフェロールを含む。
【００７５】
[0094]  特定の例示的な剤形では、該組成物は、１ｋｇあたり、５８５〜６５０ｇの活性成分、１８０〜２５０ｇのグリセリルモノオレエート（タイプ４０）、１４０〜２００ｇのポリソルベート８０、２０〜６０ｇのポリエチレングリコール４００、及び１〜４ｇのＤＬ−α−トコフェロールを含む。
【００７６】
ＩＩＩ．  治療用途
[0095]  本発明は、それを必要とする対象における筋ジストロフィー、例えばデュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）を治療するための方法及び組成物を提供する。
【００７７】
[0096]  特定の実施形態では、治療は、疾患進行を遅らせ、歩行運動の低下を緩徐化又は低減し、筋炎を低減し、筋肉損傷を低減し、筋肉機能を改善し、肺機能の低下を低減し、且つ／若しくは筋肉再生を増強するか、又はそれらのいずれかの組み合わせを施す。特定の実施形態では、治療は、疾患進行を維持する、遅くする、又は緩徐化する。特定の実施形態では、治療は、歩行運動を維持する、又は歩行運動の低下を低減する。特定の実施形態では、治療は、肺機能を維持する、又は肺機能の低下を低減する。特定の実施形態では、治療は、例えば６分歩行テスト（６ＭＷＴ）により測定されるとき、患者における安定歩行距離を維持する又は増加させる。特定の実施形態では、治療は、１０メートル歩行／走行時間（即ち、１０メートル歩行／走行テスト）を維持又は低減する。特定の実施形態では、治療は、仰臥位からの立ち上がり時間（即ち、立ち上がり時間テスト）を維持又は低減する。特定の実施形態では、治療は、標準の４階段昇降時間（即ち、４階段昇降テスト）を維持又は低減する。特定の実施形態では、治療は、例えばＭＲＩ（例えば脚筋のＭＲＩ）により測定されるとき、患者における筋炎を維持又は低減する。特定の実施形態では、ＭＲＩは、筋肉変性を同定するため、Ｔ２及び／又は脂肪画分を測定する。ＭＲＩは、炎症、水腫、筋肉損傷及び脂肪浸潤によって引き起こされる筋肉構造及び組成における変化を同定可能である。特定の実施形態では、筋力は、ノーススター歩行能力評価により測定される。
【００７８】
[0097]  特定の実施形態では、治療は、筋炎を低減し、筋肉損傷を低減し、筋肉機能を改善し、且つ／又は筋肉再生を増強する。例えば、治療は、対象における炎症を安定化、維持、改善、又は低減することがある。治療はまた、例えば、対象における筋肉損傷を安定化、維持、改善、又は低減することがある。治療は、例えば、対象における筋肉機能を安定化、維持、又は改善することがある。さらに、例えば、治療は、対象における筋肉再生を安定化、維持、改善、又は増強することがある。特定の実施形態では、治療は、例えば磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）（例えば脚筋のＭＲＩ）により測定されるとき、患者における筋炎を維持又は低減する。
【００７９】
[0098]  特定の実施形態では、治療は、６分歩行テスト（６ＭＷＴ）によって測定される。特定の実施形態では、治療は、１０メートル歩行／走行テストによって測定される。特定の実施形態では、治療は、患者における筋炎における低減又は減少もたらす。特定の実施形態では、患者における筋炎は、ＭＲＩイメージングにより測定される。特定の実施形態では、治療は、４階段昇降テストにより測定される。特定の実施形態では、治療は、立ち上がり時間テストにより測定される。特定の実施形態では、治療は、ノーススター歩行能力評価により測定される。
【００８０】
[0099]  特定の実施形態では、患者は、仰臥位から独りで立ち上がる能力を失っている。特定の実施形態では、患者は、本発明の方法又は組成物による治療の少なくとも１年前に、仰臥位から独りで立ち上がる能力を失っている。特定の実施形態では、患者は、本発明の方法又は組成物による治療開始の１年内に、仰臥位から独りで立ち上がる能力を失っている。特定の実施形態では、患者は、本発明の方法又は組成物による治療開始の２年内に、仰臥位から独りで立ち上がる能力を失っている。
【００８１】
[00100]  特定の実施形態では、患者は、治療開始から少なくとも２４週間、歩行運動を維持する。特定の実施形態では、患者は、治療開始直後少なくとも２４週間、プラセボ対照と比べて、歩行運動の低下における低減を有する。
【００８２】
[00101]  特定の実施形態では、治療は、炎症のバイオマーカーに対して患者の血清をアッセイすることにより測定される。特定の実施形態では、治療は、炎症のバイオマーカーの１つ以上、又は組み合わせのレベルにおける低下をもたらす。例えば、特定の実施形態では、炎症のバイオマーカーは、サイトカイン（ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ−αなど）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、レプチン、アディポネクチン、及びクレアチンキナーゼ（ＣＫ）の１つ以上又は組み合わせである。特定の実施形態では、治療は、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットのレベルを、プラセボによる治療と比べて低下させる。炎症のバイオマーカーは、当該技術分野で公知の方法により、例えば、Cruz-Guzman et al. (2015) BIOMED RESEARCH INTERNATIONAL 891972に記載の通りにアッセイされてもよい。
【００８３】
[00102]  特定の実施形態では、治療は、例えば６分歩行テスト（６ＭＷＴ）（例えば、McDonald et al. (2010) MUSCLE NERVE 42:966-74に記載）により測定されるとき、患者における安定歩行距離を維持する又は増加させる。６分歩行距離（６ＭＷＤ）における変化は、絶対値、百分率変化又は％予測値における変化として表されてもよい。特定の実施形態では、治療は、対象における６ＭＷＴにおける安定歩行距離を、健常なピアと比べて、２０％の低下から維持又は改善する。６ＭＷＴにおけるＤＭＤ患者の健常なピアの典型的性能と比べた性能は、％予測値を計算することにより判定可能である。例えば、６ＭＷＤの％予測値は、男性における式：１９６．７２＋（３９．８１×年齢）−（１．３６×年齢２）＋（１３２．２８×メートル単位の身長）を用いて計算されてもよい。女性においては、６ＭＷＤの％予測値は、式：１８８．６１＋（５１．５０×年齢）−（１．８６×年齢２）＋（８６．１０×メートル単位の身長）を用いて計算されてもよい(Henricson et al. (2013) PLOS CURR 5)。特定の実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドによる治療は、患者における安定歩行距離を、ベースラインから３超、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０又は５０メートル（それらの間のすべての整数を含む）に増加させる。
【００８４】
[00103]  ＤＭＤを有する患者における筋肉機能の低下は、正常な小児の成長及び発達というバックグラウンドに対して生じることがある。確かに、ＤＭＤを有する若年児は、進行性筋肉障害にもかかわらず、約１年の期間にわたり、６ＭＷＴ中の歩行距離における増加を示すことがある。特定の実施形態では、ＤＭＤを有する患者からの６ＭＷＤは、典型的に発達している対照被験者並びに年齢及び性別適合対象からの既存の規範的データと比較される。特定の実施形態では、正常な成長及び発達は、規範的データにフィッティングされた年齢及び身長に基づく式を用いて説明することができる。ＤＭＤを有する対象において、かかる式を用いて、６ＭＷＤをパーセント予測（％予測）値に変換することができる。特定の実施形態では、％予測６ＭＷＤデータの分析は、正常な成長及び発達を説明するための方法を表し、早期年齢（例えば７歳以下）時の機能における利得が、ＤＭＤを有する患者における能力の改善よりむしろ安定性を表すことを示してもよい(Henricson et al. (2013) 上記)。
【００８５】
[00104]  さらなる例示的な筋ジストロフィーは、ベッカー型筋ジストロフィー（ＢＭＤ）、先天性筋ジストロフィー、遠位筋ジストロフィー、エメリ・ドレフュス型筋ジストロフィー、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー、肢帯型筋ジストロフィー、筋緊張性ジストロフィー及び眼咽頭型筋ジストロフィーを含む。
【００８６】
[00105]  特定の実施形態では、該方法は、四頭筋における炎症を少なくとも２０％低減し、且つ／又は四頭筋における線維症を少なくとも２０％低減する。
【００８７】
[00106]  本発明の方法及び組成物はまた、対象における炎症性疾患を治療するため、用いられてもよい。炎症は、炎症性疾患又は炎症が疾患の原因となる場合の疾患に関連しうる。身体組織の炎症が認められる場合、炎症性疾患が発生しうる。これらは、局所的炎症性応答及び全身性炎症を含む。かかる疾患の例として、限定はされないが、臓器移植片拒絶；限定はされないが、心臓、肺、肝臓及び腎臓といった臓器の移植を含む臓器移植に起因する再酸素負荷損傷(Grupp et al. (1999) J. MOL. CELL. CARDIOL. 31: 297-303)；関節炎、関節リウマチ、変形性関節症及び骨再吸収の増加に関連した骨疾患を含む、関節の慢性炎症性疾患；回腸炎、潰瘍性大腸炎、バレット症候群、及びクローン病などの炎症性腸疾患；喘息、成人呼吸促迫症候群、慢性閉塞性気道疾患、及び嚢胞性線維症などの炎症性肺疾患；角膜異栄養症、トラコーマ、オンコセルカ症、ぶどう膜炎、交感神経性眼球炎及び眼内炎を含む眼の炎症性疾患；歯肉炎及び歯周炎を含む、歯肉の慢性炎症性疾患；尿毒症合併症、糸球体腎炎及びネフローゼを含む、腎臓の炎症性疾患；硬化性皮膚炎、乾癬及び湿疹を含む、皮膚の炎症性疾患；神経系の慢性脱髄性疾患、多発性硬化症、ＡＩＤＳ関連神経変性及びアルツハイマー病、感染性髄膜炎、脳脊髄炎、パーキンソン病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、及びウイルス性又は自己免疫性脳炎を含む、中枢神経系の炎症性疾患が挙げられる。代謝疾患、例えばＩＩ型糖尿病；Ｉ型糖尿病の予防；脂質異常症(dyslipedemia)；高トリグリセリド血症；糖尿病合併症、例えば限定はされないが、緑内障、網膜症、黄斑浮腫(macula edema)、腎症、例えば微量アルブミン尿及び進行性糖尿病性腎症、多発ニューロパチー、糖尿病性神経障害、アテローム硬化性冠動脈疾患、末梢動脈疾患、糖尿病性高血糖性高浸透圧性昏睡(nonketotic hyperglycemichyperosmolar coma)、単ニューロパチー、自律神経ニューロパチー、関節障害、及び皮膚又は粘膜合併症、例えば、感染、脛斑点、カンジダ感染又は糖尿病性リポイド類壊死症など；免疫複合体脈管炎、全身性エリテマトーデス；心筋症、虚血性心疾患、高コレステロール血症、及びアテローム性動脈硬化症などの心臓の炎症性疾患；並びに、子癇前症を含む有意な炎症性成分を有しうる様々な他の疾患；慢性肝不全、脳及び脊髄外傷、及びがん。炎症性疾患はまた、グラム陽性又はグラム陰性ショック、出血性若しくはアナフィラキシーショック、又は炎症促進性サイトカインに応答してがん化学療法によって誘発されるショック、例えば炎症促進性サイトカインに関連するショックによって例示される、身体の全身性炎症でありうる。かかるショックは、例えばがんに対する治療として施される化学療法剤により誘発されうる。他の障害として、抑うつ、肥満、アレルギー性疾患、急性心血管イベント、不整脈、突然死の予防、炎症性筋疾患、例えば、皮膚筋炎(dermatomositis)、封入体筋炎、及び多発性筋炎、がん悪液質、並びに手術及び外傷に起因する炎症が挙げられる。
【００８８】
[00107]  特定の実施形態では、本発明の方法又は組成物は、コルチコステロイドと組み合わせて施される。コルチコステロイドは、脊椎動物の副腎皮質において天然に生成されるステロイドホルモン及び実験室内で合成されるこれらホルモンの類似体を含む化学物質のクラスである。コルチコステロイドは、ストレス応答、免疫応答、並びに炎症、炭水化物代謝、タンパク質異化、血液電解質レベル、及び挙動の制御を含む、広範な生理学的プロセスに関与する。例示的なコルチコステロイドとして、ベタメタゾン、ブデソニド、コルチソン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、プレドニゾン、又はデフラザコートが挙げられる。特定の実施形態では、コルチコステロイドは、本発明の方法又は組成物に先立ち、それと併せて、又はそれに続いて投与される。
【００８９】
[00108]  特定の実施形態では、本発明の方法又は組成物は、例えば、エクソンスキッピング剤、エクソン５１スキッピングに適合可能であるＤＭＤ遺伝子の確認された突然変異を有する患者におけるＤＭＤの治療用に米国食品医薬品局(United States Food and Drug Administration)によって認可されている、Exondys 51（登録商標）（エテプリルセン；米国特許第７，８０７，８１６号、米国特許第７，９６０，５４１号、米国特許第８，４８６，９０７号、米国特許第９，４１６，３６１号、及び米国特許第９，５０６，０５８号を参照）と組み合わせて施される。他のエクソンスキッピング剤、例えばエクソン４５スキッピング剤、例えばSRP-4045（米国特許第８，５２４，８８０号、米国特許第９，４４７，４１５号及び米国特許第９２２８，１８７号を参照）、他のエクソンスキッピング剤、例えばドリサペルセン、及びエクソン５３スキッピング剤、例えばSRP-4053（米国特許第８，４５５，６３６号、米国特許第９，０２４，００７号、及び米国特許第９，４１６，３６１号を参照）は、本明細書に記載の活性成分、例えばエダサロネキセントと組み合わせて投与されてもよいと考えられる。
【００９０】
[00109]  特定の実施形態では、対象はヒトである。特定の実施形態では、対象は、７歳又はそれ以上である。特定の実施形態では、対象は、約６か月〜約４歳の間である。特定の実施形態では、対象は、約４歳〜７歳の間である。
【００９１】
ＩＶ．  投与
[00110]  活性成分、例えばエダサロネキセントを用いる投与計画は、患者のタイプ、種、年齢、体重、性別及び医学的状態；治療されるべき状態の重症度；投与経路；患者の腎臓又は肝臓機能；及び使用される特定化合物を含む種々の要素に応じて選択される。
【００９２】
[00111]  特定の実施形態では、患者に投与される脂肪酸アセチル化サリチル酸塩、例えばエダサロネキセントの用量は、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇの間（例えば、約１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、又は５００ｍｇ／ｋｇ）を含む。特定の実施形態では、患者に投与される活性成分、例えばエダサロネキセントの用量は、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約７５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ〜約７５ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ〜約７５ｍｇ／ｋｇ、約７５ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、又は約９０ｍｇ／ｋｇ〜約１１０ｍｇ／ｋｇを含む。特定の実施形態では、患者に投与される活性成分、例えばエダサロネキセントの用量は、約２５ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの間、例えば約３３ｍｇ／ｋｇ、又は約５０ｍｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの間、例えば約６７ｍｇ／ｋｇを含む。或いは、用量は、絶対項、例えば、１０ｍｇ、２０ｍｇ、３０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７０ｍｇ、８０ｍｇ、９０ｍｇ、１００ｍｇ、１１０ｍｇ、１２０ｍｇ、１３０ｍｇ、１４０ｍｇ、１５０ｍｇ、１６０ｍｇ、１７０ｍｇ、１８０ｍｇ、１９０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、８００ｍｇ、８５０ｍｇ、９００ｍｇ、９５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１５００ｍｇ、２０００ｍｇ、２５００ｍｇ、３０００ｍｇ、３５００ｍｇ、４０００ｍｇ、４５００ｍｇ、５０００ｍｇ、５５００ｍｇ、６０００ｍｇ、６５００ｍｇ、７０００ｍｇ、７５００ｍｇ、８０００ｍｇ、８５００ｍｇ、９０００ｍｇ、９５００ｍｇ、又は１０，０００ｍｇで投与されてもよい。特定の実施形態では、該用量は、１００ｍｇ、２５０ｍｇ、５００ｍｇ又は１０００ｍｇの活性成分、例えばエダサロネキセントを含有する１以上の剤形として投与される。例えば、一実施形態では、該剤形は、１００ｍｇのエダサロネキセントを含有する。別の実施形態では、該剤形は、２５０ｍｇのエダサロネキセントを含有する。特定の実施形態では、全一日量は、約１５００ｍｇ〜約３０００ｍｇ又は約２０００ｍｇ〜約３０００ｍｇである。特定の実施形態では、全一日量は、約５００ｍｇ〜約１０００ｍｇ又は約６７０ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲の３分割用量で送達される。
【００９３】
[00112]  特定の実施形態では、活性成分、例えばエダサロネキセントの用量は、１日１回、患者に投与される。特定の実施形態では、活性成分、例えばエダサロネキセントの用量は、１日２回以上、患者に投与される。例えば、特定の実施形態では、活性成分、例えばエダサロネキセントの用量は、例えば、１日２回、１日３回、又は１日４回、患者に投与される。
【００９４】
[00113]  １日あたり２回用量以上の活性成分、例えばエダサロネキセントが患者に投与される特定の実施形態では、各用量は、脂肪酸アセチル化サリチル酸塩の等量を含む。他の実施形態では、１回以上の用量は、活性成分、例えばエダサロネキセントのもう１つの用量と比べて異なる量を含んでもよい。
【００９５】
[00114]  特定の実施形態では、投与計画は、１日あたり３回用量を含む。特定の実施形態では、３回用量は該化合物の等量を含む、例えば各用量は、該化合物の約２５ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇを含む、例えば各用量は、該化合物の約３３ｍｇ／ｋｇを含む。特定の実施形態では、第１用量及び第２用量は、活性成分、例えばエダサロネキセントの第３用量よりも少ない量を含む、例えば第１用量及び第２用量は、活性成分、例えばエダサロネキセントの第３用量の約半量を含む。例えば、特定の実施形態では、第１用量及び第２用量は、該活性成分、例えばエダサロネキセントの約２５ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇを含み、且つ第３用量は、活性成分、例えばエダサロネキセントの約５０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇを含む、例えば第１用量及び第２用量は、活性成分、例えばエダサロネキセントの約３３ｍｇ／ｋｇを含み、且つ第３用量は、活性成分、例えばエダサロネキセントの約６７ｍｇ／ｋｇを含む。特定の実施形態では、３回の一日量のうち、少なくとも１回の用量は、それ以外の１回用量と量が異なる。特定の実施形態では、３回の一日量のうち、２回は同じであり、且つ１回は異なる。例えば、特定の実施形態では、各用量は、約２０ｍｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇを含む。例えば、２回用量が約３７．５ｍｇ／ｋｇを含む一方で、残りの用量は約２５ｍｇ／ｋｇを含む。特定の実施形態では、３回すべての用量が異なる。例えば、特定の実施形態では、各用量は、約２０ｍｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇを含む。
【００９６】
[00115]  特定の実施形態では、第１用量は午前中に投与され、第２用量は正午に投与され、且つ第３用量は夜間に投与される。特定の実施形態では、各用量は食物とともに、例えば食事時に投与される。例えば、特定の実施形態では、第１用量は朝食時に投与され、第２用量は昼食時に投与され、且つ第３用量は夕食時に投与される。該用量が食物とともに摂取されるとき、食物含量は、活性化合物の吸収を容易にするように調整されてもよい。例えば、該用量は、高脂肪食とともに摂取されてもよい。例えば、一実施形態では、該用量は、少なくとも１ｇ、少なくとも２ｇ、少なくとも３ｇ、少なくとも４ｇ、少なくとも５ｇ、少なくとも６ｇ、少なくとも７ｇ、少なくとも８ｇ、少なくとも９ｇ、少なくとも１０ｇ、少なくとも１１ｇ、少なくとも１２ｇ、少なくとも１３ｇ、少なくとも１４ｇ、少なくとも１５ｇ、少なくとも１６ｇ、少なくとも１７ｇ、少なくとも１８ｇ、少なくとも１９ｇ、又は少なくとも２０ｇの脂肪を含有する食事とともに摂取される。１つの特定の実施形態では、該用量は、少なくとも８ｇの脂肪を含有する食事とともに摂取される。特定環境下で、同じ用量が朝食及び夕食とともに投与される一方で、より少ない用量が昼食とともに投与される。特定環境下で、３回の一日量が投与され、且つ該用量が等しくない場合、最小用量は昼食時に摂取される。特定の実施形態では、３回の一日量が投与され、且つ該用量が等しくない場合、最大用量は夕食時に摂取される。
【００９７】
[00116]  特定の実施形態では、患者に投与される活性成分、例えばエダサロネキセントの全一日量は、約２０ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇの間（例えば、約２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、又は１０００ｍｇ／ｋｇ）を含む。特定の実施形態では、患者に投与される活性成分、例えばエダサロネキセントの全一日量は、約１００ｍｇ／ｋｇ〜約２００ｍｇ／ｋｇ、約１００ｍｇ／ｋｇ〜約１７５ｍｇ／ｋｇ、約１００ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、約１００ｍｇ／ｋｇ〜約１２５ｍｇ／ｋｇ、約１２５ｍｇ／ｋｇ〜約２００ｍｇ／ｋｇ、約１２５ｍｇ／ｋｇ〜約１７５ｍｇ／ｋｇ、約１２５ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、約１５０ｍｇ／ｋｇ〜約２００ｍｇ／ｋｇ、約１５０ｍｇ／ｋｇ〜約１７５ｍｇ／ｋｇ、又は約１７５ｍｇ／ｋｇ〜約２００ｍｇ／ｋｇを含む。特定の実施形態では、活性成分、例えばエダサロネキセントの全一日量は、約１００ｍｇ／ｋｇ〜２００ｍｇ／ｋｇの間、例えば約１００ｍｇ／ｋｇ又は約１３３ｍｇ／ｋｇを含む。
【００９８】
[00117]  特定の実施形態では、患者に投与される活性成分、例えばエダサロネキセントの全一日量は、約９０ｍｇ／ｋｇ〜約１１０ｍｇ／ｋｇを含む。特定の実施形態では、患者に投与される活性成分、例えばエダサロネキセントの全一日量は、１００ｍｇ／ｋｇを含む。特定の実施形態では、患者に投与される活性成分、例えばエダサロネキセントの全一日量は、全一日量の１００ｍｇ／ｋｇ±５％を含む。特定の実施形態では、患者に投与される活性成分、例えばエダサロネキセントの全一日量は、全一日量の１００ｍｇ／ｋｇ±１０％を含む。特定の実施形態では、患者に投与される活性成分、例えばエダサロネキセントの全一日量は、全一日量の１００ｍｇ／ｋｇ±１５％を含む。特定の実施形態では、患者に投与される活性成分、例えばエダサロネキセントの全一日量は、全一日量の１００ｍｇ／ｋｇ±２０％を含む。
【００９９】
[00118]  特定の実施形態では、活性成分、例えばエダサロネキセントの全一日量は、３分割用量で患者に投与され、ここで３回用量の各々は、２５０ｍｇの倍数（例えば、２５０ｍｇ、５００ｍｇ、７５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１２５０ｍｇ、１５００ｍｇ、１７５０ｍｇ、又は２０００ｍｇなど）又は１００ｍｇの倍数（例えば、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、８００ｍｇ、９００ｍｇ、１０００ｍｇ、１１００ｍｇ、１２００ｍｇ、１３００ｍｇ、１４００ｍｇ、１５００ｍｇ、１６００ｍｇ、１７００ｍｇ、１８００ｍｇ、１９００ｍｇ、又は２０００ｍｇなど）のいずれかである。特定の実施形態では、該用量は、１００ｍｇ又は２５０ｍｇの活性成分、例えばエダサロネキセントを含有する１つ以上の剤形として投与される。特定の実施形態では、３分割用量は、同じであり、２５０ｍｇ又は１００ｍｇの倍数である。特定の実施形態では、３分割用量のうち、２回用量は等しく且つ１回用量は異なり、該用量は２５０ｍｇ又は１００ｍｇの倍数である。特定の実施形態では、３分割用量は各々異なるが、該用量は２５０ｍｇ又は１００ｍｇの倍数である。特定の実施形態では、３分割用量は同じであり、２５０ｍｇ又は１００ｍｇの倍数であり、１００ｍｇ／ｋｇ±１０％の全一日量を提供する。特定の実施形態では、３分割用量のうち、２回用量は等しく且つ１回用量は異なり、該用量は２５０ｍｇ又は１００ｍｇの倍数であり、また１００ｍｇ／ｋｇ±１０％の全一日量を提供する。特定の実施形態では、３分割用量は各々異なるが、該用量は２５０ｍｇ又は１００ｍｇの倍数であり、また１００ｍｇ／ｋｇ±１０％の全一日量を提供する。特定の実施形態では、３分割用量は同じであり、２５０ｍｇ又は１００ｍｇの倍数であり、また１００ｍｇ／ｋｇ±１５％の全一日量を提供する。特定の実施形態では、３分割用量のうち、２回用量は等しく且つ１回用量は異なり、該用量は２５０ｍｇ又は１００ｍｇの倍数であり、また１００ｍｇ／ｋｇ±１５％の全一日量を提供する。特定の実施形態では、３分割用量は各々異なるが、該用量は２５０ｍｇ又は１００ｍｇの倍数であり、また１００ｍｇ／ｋｇ±１５％の全一日量を提供する。特定の実施形態では、３分割用量は同じであり、２５０ｍｇ又は１００ｍｇの倍数であり、また１００ｍｇ／ｋｇ±２０％の全一日量を提供する。特定の実施形態では、３分割用量のうち、２回用量は等しく且つ１回用量は異なり、該用量は２５０ｍｇ又は１００ｍｇの倍数であり、また１００ｍｇ／ｋｇ±２０％の全一日量を提供する。特定の実施形態では、３分割用量は各々異なるが、該用量は２５０ｍｇ又は１００ｍｇの倍数であり、また１００ｍｇ／ｋｇ±２０％の全一日量を提供する。特定の実施形態では、活性成分、例えばエダサロネキセントの全一日量は、６０００ｍｇを超えない。
【０１００】
[00119]  本明細書に記載の方法及び医薬組成物は、筋ジストロフィーの治療のため、患者に慢性的に施されてもよい。例えば、該方法又は医薬組成物は、少なくとも数週又は数か月又は数年（例えば、少なくとも２週、４週、６週、８週、１０週、１２週、２４週、３６週、４８週、７２週、９６週、１２０週、１４４週、１６８週、１８０週、１９２週、２１６週、又は少なくとも２４０週）の期間、施されてもよい。
【０１０１】
[00120]  上記の通り、本明細書に開示される配合物又は製剤が、経口投与、非経口投与、全身投与、局所投与、直腸投与又は筋肉内投与されてもよい。それらは、典型的には各投与経路に適した形態で投与される。例えば、それらは、錠剤又はカプセル形態で、注射、吸入、目薬、軟膏剤、坐剤などにより投与される（注射、注入又は吸入による投与）；ローション又は軟膏剤により局所投与される；また坐剤により直腸投与される。特定の実施形態では、活性成分、例えばエダサロネキセントは、好適な鼻腔内媒体の局所使用を介して、又は経皮経路を介して、当業者に周知の経皮皮膚パッチの形態を用いて、鼻腔内形態で投与されうる。特定の他の実施形態では、剤形は経口的に投与される。特定の実施形態では、剤形は、カプセル剤又は錠剤として経口的に投与される。
【０１０２】
[00121]  特定の実施形態では、且つ実施例４に示される通り、３回の等用量（約３３ｍｇ／ｋｇ）での１００ｍｇ／ｋｇ／日のエダサロネキセントを用いたデュシェンヌ型筋ジストロフィーを患う小児の治療は、例えば、１０メートル歩行／走行、４階段昇降、及び立ち時間の時間によって示される通り、疾患進行の臨床的に有意な緩徐化をもたらし、且つ無治療対照期間と比べて少なくとも６０週の治療期間にわたり、ノーススター歩行能力評価（ＮＳＡＡ）スコアを安定化させる。
【実施例】
【０１０３】
実施例
[00122]  本開示は、本明細書に記載の具体的手順に対する範囲又は精神において本開示を限定するものとして解釈されるべきでない、以下の実施例によりさらに例示される。実施例が、特定の実施形態を例示するために提供され、且つ本開示の範囲に対する限定がそれによって意図されるものでないことは理解されるべきである。
【０１０４】
実施例１：Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおけるエダサロネキセント投与計画の薬物動態の評価
[00123]  Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、それらの食餌中の且つ／又は経口経管栄養によるエダサロネキセントを投与した。薬物動態（ＰＫ）モデリングを用いて、エダサロネキセントヒト臨床試験にて試験している６７ｍｇ／ｋｇ／日及び１００ｍｇ／ｋｇ／日の用量に関して好適な投与量及びタイミングを同定した。具体的には、マウスに、それらの食餌中、１．５％エダサロネキセントを、１回の一日量として経口送達される４５０ｍｇ／ｋｇ／日、３回の等しい分割用量として経口送達される４５０ｍｇ／ｋｇ／日、又は２回の１５０ｍｇ／ｋｇ／用量と１回の３００ｍｇ／ｋｇ／用量として経口送達される６００ｍｇ／ｋｇ／日で投与した。３回の一日量を伴う投与計画においては、諸用量を７：００ａｍ、正午、及び５：００ｐｍに送達した。
【０１０５】
[00124]  各群における投与計画を表１に示す。各群は、マウス１２匹を含んだ。
【０１０６】
【表１】
2021502328.tif 000007
【０１０７】
[00125]  食餌中のエダサロネキセントを投与した動物においては、エダサロネキセント濃度は、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳにより、４時間ごとに２４時間測定した（投与７日目に開始）。エダサロネキセントを経口投与した動物においては、エダサロネキセント濃度は、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳにより、投与後０．２５、０．５、１、２、４、６及び２４時間目に測定した（投与３日目に開始）。
【０１０８】
[00126]  食餌中、１．５％エダサロネキセントの投与を受けた群１における指定の組織内でのエダサロネキセント濃度を図１に示し、且つこの群におけるＰＫパラメータを表２に示す。
【０１０９】
【表２】
2021502328.tif 000008
【０１１０】
[00127]  治療群２（１回の一日量として経口送達される４５０ｍｇ／ｋｇ／日を投与）、群３（３回の等しい分割用量として経口送達される４５０ｍｇ／ｋｇ／日を投与）、及び群４（２回の１５０ｍｇ／ｋｇ／用量と１回の３００ｍｇ／ｋｇ／用量として経口送達される６００ｍｇ／ｋｇ／日を投与）における血漿エダサロネキセント濃度を図２に示し、且つこれらの群におけるＰＫパラメータを表３に示す。群２は、エダサロネキセントに対する間欠的な高曝露、及び群１で認められる場合よりも約２．５倍高い、１３１６時間＊ｎｇ／ｍＬのＡＵＣを示した。
【０１１１】
【表３】
2021502328.tif 000009
【０１１２】
実施例２：ｍｄｘマウスにおけるエダサロネキセント投与計画の評価
[00128]  若いｍｄｘマウスを、エダサロネキセントの様々な投与計画を用いて４週間処置した。ｍｄｘマウスは、デュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）を試験するための有用な一般に認められた動物モデルである(Mann et al. (2001) PROC. NATL. ACAD. SCI. 98(1):42-7)。ｍｄｘマウスは、ジストロフィン遺伝子中の遺伝子突然変異に起因して、完全長ジストロフィンの発現が欠損している。
【０１１３】
[00129]  マウスに、それらの食餌中の且つ／又は経口経管栄養によるエダサロネキセントを投与した。具体的には、マウスに、それらの食餌中、１％エダサロネキセントを、１回の一日量として経口送達される４５０ｍｇ／ｋｇ／日、３回の等しい分割用量として経口送達される４５０ｍｇ／ｋｇ／日、及び／又は２回の１５０ｍｇ／ｋｇ／用量と１回の３００ｍｇ／ｋｇ／用量として経口送達される６００ｍｇ／ｋｇ／日で投与した。３回の一日量を伴う投与計画においては、諸用量を７：００ａｍ、正午、及び５：００ｐｍに送達した。
【０１１４】
[00130]  各処置群における投与計画を表４に示す。各処置群は、マウス１０〜１１匹を含んだ。
【０１１５】
【表４】
2021502328.tif 000010
【０１１６】
[00131]  動物は、４週間処置し、屠殺し、組織を組織学的分析用に収集した。炎症及び線維症の評価においては、ヘマトキシリン及びエオシン（Ｈ＆Ｅ）及びピクロシリウスレッド（コラーゲン）組織化学染色のため、四頭筋を処理した。各動物から、２〜４の完全な横断切片をImageJを用いてデジタル分析し、ヘマトキシリン染色した核の面積を炎症性浸潤の尺度度として判定し、そしてピクロシリウスレッド染色した面積を線維症の尺度度として判定した。
【０１１７】
[00132]  治療群２における炎症及び線維症を組織化学染色によって測定したものを図３に示す。より高齢のマウスにおける先行試験を拡張し、若年ｍｄｘマウスにおいて、食餌中の１％エダサロネキセントにより、炎症及び線維症が低減された。実施例１からのＰＫデータと組み合わせると、これらの結果は、食餌中のエダサロネキセントの投与により、定常的な低曝露がもたらされ、炎症及び線維症が低減されたことを示す。
【０１１８】
[00133]  治療群３、４、及び５における炎症及び線維症を図４に示す。結果は、治療群４が炎症又は線維症の有意な低減を引き起こさなかったことを示す。したがって、食餌中のエダサロネキセントの投与（群２；図３）が有効であった一方で、エダサロネキセントの１日１回の４５０ｍｇ／ｋｇ／用量での投与（群４；図４）は、実施例１におけるＣ５７ＢＬ／６マウスにて観察すると、１日１回の４５０ｍｇ／ｋｇ／用量におけるＡＵＣが約２．５倍より高いにもかかわらず、有効でなかった。これらの結果は、経口経管栄養によるエダサロネキセントへの間欠的な高曝露が有効でないことを示す。
【０１１９】
[00134]  治療群６及び７における炎症及び線維症を図５に示す。結果は、投与頻度が有効性を駆動し、且つ１日３回投与による時間的範囲の増大が治療成績を改善したことを示す。エダサロネキセントの１日１回の４５０ｍｇ／ｋｇ用量での投与（群４；図４）は有効でなかったが、同じ全一日量における１日３回の１５０ｍｇ／ｋｇ用量での投与（群６；図５）は有効であり、これは２回の治療がＣ５７ＢＬ／６マウスにおけるＰＫ試験において類似する最大（Ｃ最大）及び最小濃度、並びに総薬物暴露量（ＡＵＣ）をもたらすという事実に反した。最終一日量の倍加（群７）は、有効性をさらに駆動した。最終投与が長い一晩のトラフ期間中にさらなる曝露をもたらしたと考えられる。
【０１２０】
[00135]  まとめると、これらの結果は、Ｃ最大又は薬剤総曝露でなく、特定の薬物濃度閾値にわたる最大時間が、エダサロネキセントにおける有効性を主に駆動することを示唆する。
【０１２１】
実施例３：ヒトエダサロネキセント投与計画のモデリング
[00136]  エダサロネキセントは、安全で且つ十分に耐容性があることが示され、成人における３つのプラセボ対照試験を含む第１相臨床プログラムにおいて、活性化ＮＦ−κＢ経路を阻害した(Donovan et al. (2017) J. CLIN. PHARMACOL. 57(5): 627-639)。エダサロネキセントはまた、MoveDMD（登録商標）第２相試験（ＮＣＴ０２４３９２１６）及びその非盲検延長において、４〜７歳時に登録された、ＤＭＤに冒された男子における陽性治療効果を示している。
【０１２２】
[00137]  図６及び図７は、MoveDMD（登録商標）第２相試験からの対象におけるエダサロネキセント血漿濃度を示す。対象には、（６７ｍｇ／ｋｇ／日の全一日量に対する）１日２回の３３ｍｇ／ｋｇ用量又は（１００ｍｇ／ｋｇ／日の全一日量に対する）１日３回の３３ｍｇ／ｋｇ用量を投与した。濃度測定値は、各群につき、毎日初回の３３ｍｇ／ｋｇ用量後に取得した。
【０１２３】
[00138]  第１相及び第２相エダサロネキセント臨床試験からのデータを用いて、集団ＰＫモデルを開発した。血漿濃度及びＰＫパラメータは、３つの投与計画：（８７ｍｇ／ｋｇの全一日量に対する）１日２回の３３ｍｇ／ｋｇ用量、（１００ｍｇ／ｋｇ／日の全一日量に対する）１日３回の３３ｍｇ／ｋｇ用量、又は（１３３ｍｇ／ｋｇ／日の全一日量に対する）１日あたり２回の３３ｍｇ／ｋｇ用量及び１回の６７ｍｇ／ｋｇ用量についてモデル化した。結果を図８及び９並びに表５に示す。
【０１２４】
【表５】
2021502328.tif 000011
【０１２５】
[00139]  結果は、１００ｍｇ／ｋｇ／日の投与計画（３３ｍｇ／ｋｇ、ＴＩＤ）におけるＣ最小がｍｄｘマウスモデルにおける有効レベルの範囲内にあり、且つ１３３ｍｇ／ｋｇ／日の投与計画を得るための夜間用量が閾値までの時間を増加させることを示す。さらに、図９に示す通り、１００ｍｇ／ｋｇ（３３ｍｇ／ｋｇ  ＴＩＤ）用量は、６７ｍｇ／ｋｇ（３３ｍｇ／ｋｇ  ＢＩＤ）用量と比べて、閾値までの時間における実質的増加をもたらす。
【０１２６】
[00140]  これらの結果は、本明細書の実施例１及び２からの結果と組み合わせると、均等に分割された１００ｍｇ／ｋｇ／日の臨床用量（３回の３３ｍｇ／ｋｇ用量）並びに不均等に分割された１３３ｍｇ／ｋｇ／日の臨床用量（１日あたり２回の３３ｍｇ／ｋｇ用量及び１回の６７ｍｇ／ｋｇ用量）を評価するための前臨床的サポートをもたらす。というのは、該データは、これらの用量が、ヒトにおける筋ジストロフィー、例えばＤＭＤの治療における有効性を駆動する、閾値までの十分な時間をもたらすことがあることを示唆するためである。
【０１２７】
実施例４：ヒトＤＭＤ患者におけるエダサロネキセントの評価
[00141]  MoveDMD試験（図１０参照）は、エダサロネキセントの有効性、安全性／耐容性、薬物動態（ＰＫ）、薬力学（ＰＤ）、及び用量反応を評価するように設計した。MoveDMD試験の第１相部は、２分割用量で投与される３３及び６７ｍｇ／ｋｇ／日、及び３分割用量で投与される１００ｍｇ／ｋｇ／日での安全性、ＰＫ、及びＰＤを評価するための１週試験であった。
【０１２８】
[00142]  MoveDMD試験の第２相及び非盲検延長（ＯＬＥ）部では、ＤＭＤを有する４〜７歳男子を登録した。第２相は、１日２回の３３ｍｇ／ｋｇ（ＢＩＤ；６７ｍｇ／ｋｇ／日；ｎ＝１０）又は１日３回の３３ｍｇ／ｋｇ（ＴＩＤ；１００ｍｇ／ｋｇ／日；ｎ＝１０）の投与、及びプラセボコホート（ｎ＝１０）といった２つのコホートを伴う１２週プラセボ対照試験であった。ＯＬＥにおける患者は、エダサロネキセントのいずれかの用法で継続した。
【０１２９】
[00143]  MoveDMD試験の第２相における投与計画は、（１）動物モデルにおいて認められる曝露／有効性の関係；（２）小児ＤＭＤ患者における第１相の安全性、耐容性、及びＰＤ；並びに（３）ヒトＰＫを含む非臨床及び臨床データに基づいて選択した。
【０１３０】
[00144]  １日３回（ＴＩＤ）の３３ｍｇ／ｋｇ（１００ｍｇ／ｋｇ／日）で投与したエダサロネキセントは、エダサロネキセント治療前の対照期間中の変化率と比べて、６０週を通じて筋肉機能の保存及びＤＭＤ疾患進行の緩徐化を示した。この１００ｍｇ／ｋｇ／日の投与計画が、１３３ｍｇ／ｋｇ／日（朝食時、３３ｍｇ／ｋｇ、昼食時、３３ｍｇ／ｋｇ、及び夕食時、６７ｍｇ／ｋｇ）を有する投与計画と同様に有効であり、副作用が低減されることもまた認められた。
【０１３１】
４．Ａ  ＤＭＤ患者における全身性曝露はＮＦ−κＢ阻害が成人において認められたレベルに達する
[00145]  成人試験では、ＮＦ−κＢに駆動される遺伝子の発現における変化が約１００ｍｇ／ｋｇ／日の用量で、全血中で認められた。MoveDMD試験では、３３ｍｇ／ｋｇ用量を１日２回（６７ｍｇ／ｋｇの総用量）又は１日３回（１００ｍｇ／ｋｇの総用量）投与したとき、全身性曝露がＮＦ−κＢが成人試験において認められるレベルに達した。図１１は、ＮＦ−κＢ阻害を示す成人における平均一日曝露量と比べての第ＩＩ相試験に登録された男子における一日曝露レベル（ｎｇ／ｍｌ＊時間）を示す。示されるように、６７ｍｇ／ｋｇ／日及び１００ｍｇ／ｋｇ／日の用量が、成人試験で示されたＮＦ−κＢの阻害に有効であるようなレベルと同等な一日曝露レベルをもたらす。
【０１３２】
４．Ｂ  ＤＭＤ患者における持続的なエダサロネキセント曝露はＮＦ−κＢ阻害に相関する
[00146]  ＮＦ−κＢ阻害に対する所与のエダサロネキセント投与計画の効果を判定するため、いくつかのＮＦ−κＢ調節及び炎症関連遺伝子転写物の発現レベルを、ＤＭＤ患者からの全血サンプル中で測定した。
【０１３３】
[00147]  ＮＦ−ｋＢ調節及び炎症関連遺伝子は、Broad InstituteのHALLMARK ＴＮＦ／ＮＦ−ｋＢ遺伝子セットから選択した(Liberzon, et. al., (2015), Cell Systems, 1(6):417-425)。エダサロネキセント治療の前と１週後、血液をＤＭＤ男子から採取し、PAXgene RNAチューブ(Qiagen)に収集した。ＲＮＡを抽出し、配列決定し、各患者における両時点における全血中での転写物の存在量を直接的に測定し、選択された転写物の各々における相対的変化を判定するため、治療１週後の転写物の存在量を治療前値と比較した。投与コホート内の全患者を通じての各遺伝子におけるこの比を平均化したものを、平均＋／−平均値の標準誤差としてのカラムにより図１２に示す。１未満の値は、エダサロネキセントによる１週治療後の転写物における減少を示す。
【０１３４】
[00148]  図１２に示す通り、１００ｍｇ／ｋｇ／日の用量を投与した群にて測定した２４の全転写物において統計学的に有意な減少が認められた一方で、６７ｍｇ／ｋｇ／日の用量での減少は大して明白でなかった。３３ｍｇ／ｋｇ／日の用量では、一般に減少が認められなかった。
【０１３５】
[00149]  患者の中の２４の全転写物の比についても平均化したものを、各個別患者からのこの平均を表す記号を用いて図１３に示す。この平均は、各投与コホート内で平均エダサロネキセントＣトラフ値に対してグラフ化した（ｘ軸上にｎｇ／ｍｌ単位で示す）。
【０１３６】
[00150]  図１３は、３３ｍｇ／ｋｇ／日、６７ｍｇ／ｋｇ／日、及び１００ｍｇ／ｋｇ／日のエダサロネキセント用量の各々における平均Ｃトラフレベル（ｎｇ／ｍＬ）に対する遺伝子転写物における平均倍数変化を示す。図１３に示す通り、より高い平均Ｃトラフレベルは、ＮＦ−κＢ及び炎症関連遺伝子転写における最大の減少に相関する。特に、１００ｍｇ／ｋｇ／日の用量は、３３ｍｇ／ｋｇ／日及び６７ｍｇ／ｋｇ／日の用量と比べて、最高のＣトラフレベル及び関連遺伝子転写物における最大の減少を有し、エダサロネキセント治療の１週後、転写物の存在量における平均Ｃトラフレベルとの逆相関を示した。したがって、結果は、これら３つの投与計画の内、１００ｍｇ／ｋｇ／日（３３ｍｇ／ｋｇで１日３回）が、ＤＭＤ患者におけるＮＦ−κＢ調節及び炎症関連遺伝子転写物を低減するのに最も有効であったことを示し、且つＣトラフがエダサロネキセントの有効性のドライバーであることを示唆する。
【０１３７】
４．Ｃ  エダサロネキセント治療はＤＭＤを有する男子におけるＮＳＡＡ及び他の機能的尺度を安定化する
[00151]  ノーススター歩行能力評価（ＮＳＡＡ）は、ＤＭＤを有する歩行する男子に特化して設計された検証された機能的尺度であり、若年男子における全体的機能を評価する。図１４に示す通り、試験対象における疾患進行は、１００ｍｇ／ｋｇ／日の治療期間（６０週）中、無治療対照期間（エダサロネキセント投与期間前の３６週）中でのＮＳＡＡスコアの変化率と比べて安定化するＮＳＡＡスコアによる評価として緩徐化した。
【０１３８】
[00152]  １０メートル歩行／走行、４階段昇降、及び立ち上がり時間は、ＤＭＤを有する男子における機能の尺度として用いられるすべての時間制限のあるテストである。これらのテストの各々において、図１５〜１７に示す通り、試験対象による、これらの身体的課題を完了する際の速度の平均変化率は、６０週の１００ｍｇ／ｋｇ／日でのエダサロネキセント治療期間中、無治療対照期間（治療期間前の３６週）中の変化率と比べると安定化した。治療期間中、すべての時間制限のある機能試験値が安定化した。
【０１３９】
[00153]  したがって、これらの結果は、ＤＭＤ患者の３回の３３ｍｇ／ｋｇ用量での１００ｍｇ／ｋｇ／日による治療が、６０週の治療期間中、無治療対照期間と比べて、疾患進行の臨床的に有意な緩徐化をもたらすことを示唆する。
【０１４０】
４．Ｄ  エダサロネキセントはＤＭＤ試験対象におけるＭＲＩ  Ｔ２レベルの変化率を有意に改善した
[00154]  ＭＲＩ（ＭＲＩ−Ｔ２；バルクＴ２とも称される）により評価したＭＲ横緩和時間定数は、ＤＭＤにおける疾患病理のいくつかの病態生理学的特徴、例えば、筋肉損傷、炎症、及び脂肪浸潤に対して感受性があり、広範な年齢範囲にわたり疾患病理を監視するための方法を提供する。さらに、ゴールドスタンダードなプロトンＭＲＳ（１Ｈ−ＭＲＳ）、又は３点Dixonイメージング技術を用いて測定した、筋肉における脂肪浸潤の割合（脂肪画分）は、疾患進行に関連し、機能試験についての性能に相関する。(Willcocks et al., (2016), ANN. NEUROL.,79(4):535-47; Barnard et al., (2018), PLOS ONE, 13(3):E0194283)。これらは、年齢とともに上昇・増加する、ＤＭＤにおける疾患進行の非侵襲的尺度であり；これら尺度における変化は、機能における変化と強力に相関し、機能的マイルストーンの将来的な欠如を予測する。
【０１４１】
[00155]  図１８に示す通り、試験対象における１００ｍｇ／ｋｇ／日のエダサロネキセント治療期間（６０週）中でのＭＲＩ−Ｔ２値の年換算変化率（ミリ秒／年）は、無治療期間（エダサロネキセント治療期間前の３６週）中、変化率にわたって有意に改善した。ＭＲＩ−Ｔ２値は、５つの下肢筋肉の複合であった。ＭＲＩ−Ｔ２値の安定化は、先に考察した機能的評価を通じて認められたＤＭＤの疾患進行に伴う緩徐化に合致する。
【０１４２】
[00156]  さらに、図１９に示す通り、１００ｍｇ／ｋｇ／日投与から４８週後にＭＲスペクトロスコピーによって評価した、試験対象における脂肪画分の変化は、ヒラメ筋（子牛筋肉）において０．８５％、外側広筋（四頭筋）において５．９％であった一方で、エダサロネキセント投与前の２６週の無治療対照期間中、脂肪画分の変化は、ヒラメ筋において２．６％、外側広筋において１０．４％であった。したがって、１００ｍｇ／ｋｇ／日でのエダサロネキセントは、無治療期間と比べて、これらの筋肉における脂肪画分における増加の速度を低減するのに有効であった。これは、（試験対象の７５％超が慢性ステロイド依存であるにもかかわらず）１年変化がヒラメ筋において３％、外側広筋において７％である場合のＤＭＤの自然経過試験のイメージングにおける、脂肪画分で認められた変化をも超える改善である。
【０１４３】
[00157]  したがって、これらのＭＲＩ尺度は、ＤＭＤを患う男子における１００ｍｇ／ｋｇ／日（３回用量の３３ｍｇ／ｋｇ／日）で４８週にわたる正のエダサロネキセント治療効果を支持する。
【０１４４】
４．Ｅ  エダサロネキセントは安全性シグナルを有さずに十分に耐容性があった
[00158]  試験対象における１００ｍｇ／ｋｇで投与されるエダサロネキセントの安全性に関して、有害な所見は認められなかった。該薬剤は、本質的に軽度であり、ほとんどが胃腸である有害事象の大部分に十分に耐容性があった。血液学、化学、腎臓又は副腎機能、又はカルシウム若しくはリン酸レベルにおける有害な傾向は認められなかった。図２０に示す通り、試験対象の心拍数は年齢の規範値の方へ減少し、同じくらいの年齢の男子におけるCDC Growth Chartあたりのパーセンタイルに基づく、治療期間にわたる身長、体重、及び肥満度指数（ＢＭＩ）における一定のパーセンタイルによって示される通り、身長及び体重における年齢に即した増加が認められた。
【０１４５】
４．Ｆ  結論
[00159]  これらのデータは、閾値にわたる持続的曝露及び時間が薬力学的シグナル及び有効性におけるドライバーであり、閾値レベルを超える持続的曝露が３回の３３ｍｇ／ｋｇ用量での１００ｍｇ／ｋｇ／日の場合に達成可能であり、且つこの投与が試験対象における無治療対照期間と比べて１年を超える疾患進行の臨床的に有意な緩徐化を示すことを実証する。
【０１４６】
実施例５：ＤＭＤを有する小児におけるエダサロネキセントの投与計画
[00160]  ＤＭＤを患っている体重が２０ｋｇの小児は、２，０００ｍｇの総用量をもたらす、一日量が１００ｍｇ／ｋｇのエダサロネキセントを処方してもよい。この総用量は、３回用量に分割する。第１用量は朝食とともに、第２用量は昼食とともに、且つ第３用量は夕食とともに経口摂取される。すべての用量は、吸収を助けるための少なくとも８ｇの脂肪を含有する食物とともに摂取される。用量を３回の等しい用量に分割することは望ましい一方で、エダサロネキセントが２５０ｍｇカプセル剤で入手可能であることから、これは不可能である。カプセル剤の数を最小化するため、２，０００ｍｇの用量を、朝食時の７５０ｍｇ（３×２５０ｍｇカプセル剤）、昼食時の５００ｍｇ（２×２５０ｍｇカプセル剤）、及び夕食時の７５０ｍｇ（３×２５０ｍｇカプセル剤）として投与することが望ましいことがある。３回用量が不均等である場合、好ましくは、朝食時又は夕食時に１用量以上のより高い用量を投与し、且つ昼食時により低い用量を投与してもよい。
【０１４７】
[00161]  ＤＭＤを患っている体重が２８ｋｇの小児は、２，８００ｍｇの総用量をもたらす、一日量が１００ｍｇ／ｋｇのエダサロネキセントを処方してもよい。この総用量は、３回用量に分割する。第１用量は朝食とともに、第２用量は昼食とともに、且つ第３用量は夕食とともに経口摂取される。すべての用量は、吸収を助けるための少なくとも８ｇの脂肪を含有する食物とともに経口摂取される。用量を３回の等しい用量に分割することは望ましい一方で、エダサロネキセントが２５０ｍｇカプセル剤で入手可能であることから、これは不可能である。したがって、２，８００ｍｇ用量を３０００ｍｇに増加させ、朝食時の１，０００ｍｇ（４×２５０ｍｇカプセル剤）、昼食時の１，０００ｍｇ（４×２５０ｍｇカプセル剤）、及び夕食時の１，０００ｍｇ（４×２５０ｍｇカプセル剤）として投与することが可能である。したがって、カプセル剤において提供されるエダサロネキセントの量が理由で、総用量は３，０００ｍｇである。しかし、総実用量（３，０００ｍｇ／日）は、推奨用量、即ち２８００ｍｇ／日の１０％超を超えることはない。この場合、実用量は、推奨用量よりも７．１％多い。代替的手法では、昼食時の４回目の２５０ｍｇカプセル剤を１００ｍｇカプセル剤と交換することで、小児に、朝食とともに１，０００ｍｇ、昼食とともに８５０ｍｇ、且つ夕食とともに１，０００ｍｇを投与し、２８５０ｍｇの全一日量（その場合、実用量は２８００ｍｇの推奨用量よりも１．８％高い）を投与してもよい。
【０１４８】
参照による援用
[00162]  本明細書で参照される特許及び科学文献の各々の全開示は、あらゆる目的で参照により援用される。
【０１４９】
均等物
[00163]  本発明は、その精神又は本質的特徴から逸脱しない条件で、他の特定の形式で具体化されてもよい。したがって、前述の実施形態は、本明細書に記載の発明を限定するよりも、あらゆる観点で例示的なものとして考慮されるべきである。それ故、本発明の範囲は、前記説明によるものでなく、添付の特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲の同等性の意味及び範囲の中でなされるあらゆる変更は、その中に包含されることが意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０Ａ】
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【図２０Ｂ】
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【図２０Ｃ】
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【図２０Ｄ】
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【国際調査報告】
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