(57)【要約】  加齢関連の病変及び疾患を含む多くの病変及び疾患に関連する老化細胞を選択的に死滅させるための老化細胞除去剤が、本明細書において提供される。本明細書に開示されるように、老化細胞に関連する疾患及び障害は、少なくとも１つの老化細胞除去剤又はその医薬組成物を投与することによって治療又は予防され得る。本明細書に記載される方法によって治療又は予防される老化細胞に関連する疾患又は障害としては、限定はされないが、心血管疾患又は障害、アテローム性動脈硬化症などの動脈硬化に関連する心血管疾患及び障害、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、変形性関節症、炎症性疾患又は障害、自己免疫疾患又は障害、肺疾患又は障害、神経疾患又は障害、皮膚疾患又は障害、化学療法の副作用、放射線療法の副作用、転移及び代謝性疾患が挙げられる。
2021531249.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（ＩＶ）又は（Ｖ）：
【化１】
2021531249.tif 000110
（式中、Ｒが、ヒドロキサム酸誘導体ヒストンデアセチラーゼ阻害剤の残基であり、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが、独立して、水素、Ｃ（Ｏ）−Ｒ１、式（ＶＩ）の部分又は式（ＶＩＩ）の部分：
【化２】
2021531249.tif 000111
であり、各Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ４３、Ｒ４４及びＲ４５が、独立して、水素又は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ２であり；各Ｒ１が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５又はＲ１６の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の残りは、水素又はＣ（Ｏ）−Ｒ１であり；各Ｒ２が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の残りは、水素又は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり；ただし、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが水素である場合、Ｒは、７−ヘプタノイルフェニルアミドでない）
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物若しくは溶媒和物。
【請求項２】
前記ピラノース環のアノマー炭素（標識される＊）が、Ｓ配置のものであり、前記化合物はそれぞれ、ヒドロキサム酸誘導体ヒストンデアセチラーゼ阻害剤のβ−Ｄ−ガラクトシド及びα−Ｌ−フコシドコンジュゲートである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記ヒドロキサム酸誘導体ヒストンデアセチラーゼ阻害剤が、パノビノスタット、キシノスタット、ボリノスタット、ダシノスタット、ギビノスタット、ＣＵＤＣ−９０７、ＣＵＤＣ−１０１、アベキシノスタット、ベリノスタット、プラシノスタット、レスミノスタット、リコリノスタット、ピロキサミド、ＡＰＨＡ、トリコスタチンＡ、オキサムフラチン及びＡＲ−４２からなる群から選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
構造：
【化３−１】
2021531249.tif 000112
【化３−２】
2021531249.tif 000113
【化３−３】
2021531249.tif 000114
【化３−４】
2021531249.tif 000115
のいずれかを有する、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
構造：
【化４−１】
2021531249.tif 000116
【化４−２】
2021531249.tif 000117
【化４−３】
2021531249.tif 000118
【化４−４】
2021531249.tif 000119
のいずれかを有する、請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
構造：
【化５−１】
2021531249.tif 000120
【化５−２】
2021531249.tif 000121
【化５−３】
2021531249.tif 000122
【化５−４】
2021531249.tif 000123
【化５−５】
2021531249.tif 000124
のいずれかを有する、請求項３に記載の化合物。
【請求項７】
式（ＸＩ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）又は（ＸＩＶ）：
【化６】
2021531249.tif 000125
（式中、Ｙが、カルボニルであるか又は存在せず；Ａが、少なくとも１つの窒素原子を含有する置換又はベンゾ縮合５員ヘテロアリール又は複素環式基であり；Ｂが、エチル、イソプロピル又はクロロからなる群から選択され；Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが、独立して、水素、Ｃ（Ｏ）−Ｒ１、式（ＶＩ）の部分又は式（ＶＩＩ）の部分：
【化７】
2021531249.tif 000126
であり、各Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ４３、Ｒ４４及びＲ４５が、独立して、水素又は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ２であり；各Ｒ１が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５又はＲ１６の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の残りは、水素又はＣ（Ｏ）−Ｒ１であり；各Ｒ２が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の残りは、水素又は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１である）
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物若しくは溶媒和物。
【請求項８】
前記ピラノース環のアノマー炭素（標識される＊）が、Ｓ配置のものであり、前記化合物はそれぞれ、Ｈｓｐ９０阻害剤のβ−Ｄ−ガラクトシド及びα−Ｌ−フコシドコンジュゲートである、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
部分Ａ−Ｙ−Ｃ６Ｈ２（ＯＨ）２−Ｂが、ルミネスピブ（ＮＶＰ−ＡＵＹ９２２）、ガネテスピブ、ＶＥＲ−５０５８９、ＡＴ１３３８７及びＫＷ−２４７８からなる群から選択されるＨｓｐ９０阻害剤である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
構造：
【化８−１】
2021531249.tif 000127
【化８−２】
2021531249.tif 000128
【化８−３】
2021531249.tif 000129
【化８−４】
2021531249.tif 000130
【化８−５】
2021531249.tif 000131
【化８−６】
2021531249.tif 000132
のいずれかを有する、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
式（ＸＶＩ）、（ＸＶＩＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）、（ＸＸ）、（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）、（ＸＸＩＶ）又は（ＸＸＶ）：
【化９−１】
2021531249.tif 000133
【化９−２】
2021531249.tif 000134
【化９−３】
2021531249.tif 000135
【化９−４】
2021531249.tif 000136
【化９−５】
2021531249.tif 000137
（式中、Ｒ８が、４−モルホリニル又は１−イミダゾリルであり；各Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５が、独立して、水素、Ｃ（Ｏ）−Ｒ１、式（ＶＩ）の部分又は式（ＶＩＩ）の部分：
【化１０】
2021531249.tif 000138
であり、各Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ４３、Ｒ４４及びＲ４５が、独立して、水素又は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ２であり；各Ｒ１が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５又はＲ１６の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の残りは、水素又はＣ（Ｏ）−Ｒ１であり；各Ｒ２が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の残りは、水素又は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１である）
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物若しくは溶媒和物。
【請求項１２】
前記ピラノース環のアノマー炭素（標識される＊）が、Ｓ配置のものであり、前記化合物はそれぞれ、ＴＯＰ１阻害剤のβ−Ｄ−ガラクトシド及びα−Ｌ−フコシドコンジュゲートである、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
構造：
【化１１−１】
2021531249.tif 000139
【化１１−２】
2021531249.tif 000140
【化１１−３】
2021531249.tif 000141
【化１１−４】
2021531249.tif 000142
のいずれかを有する、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
構造：
【化１２−１】
2021531249.tif 000143
【化１２−２】
2021531249.tif 000144
【化１２−３】
2021531249.tif 000145
【化１２−４】
2021531249.tif 000146
のいずれかを有する、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１５】
式（ＸＸＶＩＩＩ）又は（ＸＸＩＸ）：
【化１３】
2021531249.tif 000147
（式中、Ｒ９が、水素、Ｃ１〜４アルキル、ＣＦ３、ＣＮ又はＮＯ２であり；Ｒ１０が、水素、Ｃ１〜４アルキル又はアリールアルキルであり；Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが、独立して、水素、Ｃ（Ｏ）−Ｒ１、式（ＶＩ）の部分又は式（ＶＩＩ）の部分：
【化１４】
2021531249.tif 000148
であり、各Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ４３、Ｒ４４及びＲ４５が、独立して、水素又はＣ（Ｏ）−Ｒ２であり、各Ｒ１が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、又はＲ１６の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の残りは、水素又はＣ（Ｏ）−Ｒ１であり；各Ｒ２が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の残りは、水素又はＣ（Ｏ）−Ｒ１であり；ただし、式（ＸＸＶＩＩＩ）の化合物において、Ｒ９がＮＯ２であり、Ｒ１０がベンジルである場合、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６のそれぞれが、同時に水素又はアセチルであることはない）
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物若しくは溶媒和物。
【請求項１６】
前記ピラノース環のアノマー炭素（標識される＊）が、Ｓ配置のものであり、前記化合物はそれぞれ、ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン類似体のβ−Ｄ−ガラクトシド及びα−Ｌ−フコシドコンジュゲートである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
老化関連の疾患又は障害を治療するための方法であって、それを必要としている対象に、治療有効量の、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬組成物を投与する工程を含む方法。
【請求項１８】
老化関連の疾患又は障害を治療するための方法であって、それを必要としている対象に、式：
【化１５】
2021531249.tif 000149
（式中、Ｒ４６が、水素、アセチル又はプロピオニルのいずれかである）
の化合物又はその薬学的に許容される塩、医薬組成物、水和物若しくは溶媒和物を治療有効量で投与することを含む方法。
【請求項１９】
前記老化関連の疾患又は障害が、腎疾患、腎不全、フレイル、認知障害、聴力低下、筋肉疲労、皮膚疾患、皮膚創傷治癒、肝線維症、膵臓線維症、口腔粘膜下線維症、及びサルコペニアからなる群から選択される加齢関連の疾患である、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記老化関連の疾患又は障害が、肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、嚢胞性線維症、気腫、気管支拡張症、及び加齢関連の肺機能の低下からなる群から選択される肺疾患である、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記老化関連の疾患又は障害が、転移である、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記老化関連の疾患又は障害が、化学療法の副作用又は放射線療法の副作用である、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項２３】
前記化学療法の副作用又は放射線療法の副作用が、胃腸毒性、末梢神経障害、疲労、倦怠感、低身体活動、フレイル、血液毒性、肝毒性、脱毛症（脱毛）、疼痛、感染症、粘膜炎、体液鬱滞、皮膚毒性、口腔、歯肉又は咽喉の問題、心筋症、鬱血性心疾患、炎症、早発閉経、骨粗鬆症、不妊症、認知機能の障害、続発性癌、白内障及び他の視覚障害、聴力低下、肺活量の減少及び肺疾患である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記老化関連の疾患又は障害が、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、認知症、軽度認知障害、及び運動ニューロンの機能不全からなる群から選択される神経変性疾患である、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項２５】
前記老化関連の疾患又は障害が、黄斑変性症、緑内障、白内障、老眼、及び視力低下からなる群から選択される眼疾患又は障害である、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項２６】
前記老化関連の疾患又は障害が、糖尿病、糖尿病性潰瘍、メタボリック症候群及び肥満からなる群から選択される代謝性疾患である、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項２７】
前記老化関連の疾患又は障害が、腎機能障害である、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項２８】
前記老化関連の疾患又は障害が、湿疹、乾癬、色素過剰症、母斑、発疹、アトピー性皮膚炎、じんましん、光感受性又は光老化に関連する疾患及び障害、しわ；掻痒症；感覚異常；湿疹性発疹；好酸球性皮膚疾患；反応性の好中球性皮膚症；天疱瘡；類天疱瘡；免疫水疱性皮膚疾患；皮膚の線維性組織球増殖；皮膚リンパ腫；及び皮膚ループスからなる群から選択される皮膚疾患又は障害である、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項２９】
前記老化関連の疾患又は障害が、変形性関節症、骨粗鬆症、口腔粘膜炎、炎症性腸疾患、後彎症、及び椎間板ヘルニアから選択される炎症性又は自己免疫疾患又は障害である、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項３０】
前記老化関連の疾患又は障害が、アテローム性動脈硬化症、狭心症、不整脈、心筋症、鬱血性心不全、冠動脈疾患、頸動脈疾患、心内膜炎、冠動脈血栓症、心筋梗塞、高血圧症、大動脈瘤、心臓の拡張機能障害、高コレステロール血、高脂血、僧帽弁逸脱、末梢血管疾患、心臓のストレス耐性、心筋繊維化、脳動脈瘤、及び脳卒中から選択される心血管疾患である、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項３１】
前記老化関連の疾患又は障害に関連する老化細胞が、老化前脂肪細胞、老化内皮細胞、老化線維芽細胞、老化ニューロン、老化上皮細胞、老化間葉細胞、老化平滑筋細胞、老化マクロファージ、又は老化軟骨細胞である、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項３２】
前記化合物が、前記老化関連の疾患又は障害に関連する老化細胞を含む器官又は組織において、老化細胞の少なくとも２０％を死滅させ、非老化細胞の５％以下を死滅させる、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項３３】
前記化合物が、１つ以上の他の治療剤と組み合わせて投与される、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項３４】
前記化合物が、化学療法剤と組み合わせて投与される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
請求項１〜１６のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容されるビヒクルとを含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１８年７月１１日に出願される米国仮特許出願第６２／６９６，４８６号の優先権及び利益を主張するものであり、この仮特許出願の開示内容は、あらゆる目的のために全体が参照により本明細書に援用される。
【０００２】
加齢関連の病変及び疾患を含む多くの病変及び疾患に関連する老化細胞を選択的に死滅させるための老化細胞除去剤が、本明細書において提供される。本明細書に開示されるように、老化細胞に関連する疾患及び障害は、少なくとも１つの老化細胞除去剤又はその医薬組成物を投与することによって治療又は予防され得る。本明細書に記載される方法によって治療又は予防される老化細胞に関連する疾患又は障害としては、限定はされないが、心血管疾患又は障害、アテローム性動脈硬化症などの動脈硬化に関連する心血管疾患及び障害、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、変形性関節症、炎症性疾患又は障害、自己免疫疾患又は障害、肺疾患又は障害、神経疾患又は障害、皮膚疾患又は障害、化学療法の副作用、放射線療法の副作用、転移及び代謝性疾患が挙げられる。
【背景技術】
【０００３】
老化は、ほとんどの慢性疾患、障害及び体調不良の危険因子である。複製を停止した細胞である老化細胞は、加齢とともに個体に蓄積し、老化及び加齢関連の疾患の根底にある細胞及び組織の劣化に部分的に又は大きく寄与し得る（例えば、Ｃｈｉｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．１６（２０１７）７１８−７３５を参照）。細胞はまた、環境的、化学的、生物学的な損傷への曝露後に又は疾患の結果として老化することもある（例えば、Ｄｅｍａｒｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ７（２０１７）１６５−１７６；及びＳｃｈａｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｃｏｍｍｕｎ．８（２０１７）ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｃｏｍｍｓ１４５３２を参照）。
【０００４】
多様な薬理学的機構を有する老化細胞除去剤が、当該技術分野において公知である。老化細胞除去剤は、１つ以上のＢｃｌ−２抗アポトーシスタンパク質ファミリーメンバーの特異的阻害剤であり得、この阻害剤は、少なくともＢｃｌ−ｘＬを阻害する（例えば、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ／Ｂｃｌ−ｗ阻害剤；選択的Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤；Ｂｃｌ−ｘＬ／Ｂｃｌ−ｗ阻害剤、（例えば、Ｎａｖｉｔｏｃｌａｘ、ＡＢＴ−７３７、Ａ１３３１８５２、Ａ１１５５４６３）；（例えば、Ｃｈｉｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．、上記；Ｚｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｇｉｎｇ  ９（２０１７）９５５−９６５；Ｙｏｓｅｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｏｍｍｕｎ．（２０１６）ｄｏｉ：１０．１０３８を参照）；Ａｋｔキナーゼ特異的阻害剤（例えば、ＭＫ−２２０６）；受容体チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、ダサチニブ、例えば、Ｚｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｇｉｎｇ  Ｃｅｌｌ  １４（２０１５）６５４−６５８を参照）；ＣＤＫ４／６阻害剤（例えば、パルボサイクリブ、（例えば、Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．１７３（２０１７）８３−１０５を参照））；ｍＴＯＲ阻害剤（例えば、ラパマイシン、（例えば、Ｌａｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１７（２０１５）１０４９−１０６１を参照））；ＭＤＭ２阻害剤（例えば、Ｎｕｔｌｉｎ−３；及びＲＧ−７１１２、例えば、米国特許出願公開第２０１６／０３３９０１９号明細書を参照））；Ｈｓｐ９０阻害剤（例えば、１７−ＤＭＡＧ；及びガネテスピブ、例えば、Ｆｕｈｒｍａｎｎ−Ｓｔｒｏｉｓｓｎｉｇｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｃｏｍｍｕｎ．８（２０１７）ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓ４１４６７−０１７−００３１４−ｚを参照））；フラボン（例えば、ケルセチン；及びフィセチン、（例えば、Ｚｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｇｉｎｇ  Ｃｅｌｌ  １４（２０１５）６５４−６５８；Ｚｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｇｉｎｇ  ９（２０１７）９５５−９６５を参照））；又はヒストンデアセチラーゼ阻害剤（例えば、パノビノスタット、（例えば、Ｓａｍａｒａｗｅｅｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉ．Ｒｅｐ．７（２０１７）１９００．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓ４１５９８−０１７−０１９６４−１を参照））。
【０００５】
重要な課題は、非老化細胞を残しながら老化細胞を選択的に死滅させる老化細胞除去剤の同定であった。さらに、多くの公知の老化細胞除去剤が、最初は、細胞傷害性抗癌剤として開発され、その後、老化細胞集団の「選択的な」除去のために別の目的で使用された。増殖細胞は、多くの場合、抗癌剤の細胞傷害又は細胞静止作用により感受性であるため、造血細胞における用量制限毒性が、抗老化治療の臨床的有用性を制限するよく見られる副作用である（例えば、好中球減少症は、抗アポトーシスＢｃｌ−２ファミリータンパク質阻害剤の使用に関連するよく特徴付けられた毒性であり、Ｌｅｖｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．（２０１５）７：２７９ｒａ４０．ｄｏｉ：１０．１１２６／ｓｃｉｔｒａｎｓｌｍｅｄ．ａａａ４６４２を参照されたい）。このような老化細胞除去剤のパルス投与が、これらの分子への非老化細胞の曝露を最小限に抑え、潜在的にオフターゲット効果を制限する機構として提案されている。したがって、非老化細胞に対する最小の毒性を有し、老化細胞を死滅させるのに改善した選択性を有する老化細胞除去剤が必要とされている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
これらの及び他のニーズを満たす、老化細胞内に優先的に蓄積するヒドロラーゼ酵素によって活性化される老化細胞除去剤の非毒性プロドラッグが、本明細書に開示される。一態様において、ヒドロラーゼ酵素は、グリコシダーゼであり、老化に関連して増加される細胞内グリコシダーゼ活性が、アポトーシス促進剤の非毒性プロドラッグ誘導体（Ｉ）を、毒性のアポトーシス促進親化合物（ＩＩ）に変換するのに利用されて、老化細胞の特異的死滅をもたらす。
【化１】
2021531249.tif 000003
【０００７】
ある実施形態において、化合物（ＩＩ）は、非増殖細胞内のアポトーシスを促進することが可能である。
【０００８】
別の態様において、老化細胞内で活性老化細胞除去剤に切断されると、老化細胞死を特異的にもたらす、毒性の老化細胞除去剤の非毒性プロドラッグが提供される。ある実施形態において、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤のプロドラッグが、提供される。他の実施形態において、Ｈｓｐ９０阻害剤のプロドラッグが、提供される。さらに他の実施形態において、トポイソメラーゼ１阻害剤のプロドラッグが、提供される。さらに他の実施形態において、ＤＮＡアルキル化剤のプロドラッグが、提供される。さらに他の実施形態において、Ａｋｔｌ阻害剤のプロドラッグが、提供される。さらに他の実施形態において、プロテアソーム阻害剤のプロドラッグが、提供される。本明細書に記載されるプロドラッグの塩、溶媒和物、水和物、代謝産物を含む誘導体も提供される。本明細書において提供されるプロドラッグ及びビヒクルを含む組成物がさらに提供される。
【０００９】
別の態様において、対象における、例えば、心血管疾患又は障害、アテローム性動脈硬化症などの動脈硬化に関連する心血管疾患及び障害、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、変形性関節症、炎症性疾患又は障害、自己免疫疾患又は障害、肺疾患又は障害、神経疾患又は障害、皮膚疾患又は障害、化学療法の副作用、放射線療法の副作用、転移及び代謝性疾患などの医学的障害の症状を治療、予防、又は改善する方法も、本明細書において提供される。この方法を実施する際、治療有効量の老化細胞除去剤又はその医薬組成物が対象に投与される。
【００１０】
さらに別の態様において、加齢関連の疾患又は病態を治療する方法が提供される。本方法は、治療有効量の老化細胞除去剤又はその医薬組成物を対象に投与することを含む。さらに別の態様において、対象における老化の少なくとも１つの特徴を遅らせるための方法が提供される。本方法は、治療有効量の老化細胞除去剤又はその医薬組成物を対象に投与することを含む。
【００１１】
さらに別の態様において、治療誘導性の老化細胞を死滅させる方法が提供される。本方法は、治療有効量の老化細胞除去剤又はその医薬組成物を、ＤＮＡを損傷する治療を受けた対象に投与することを含む。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１Ａ】様々な薬剤濃度の５−フルオロウリジン（ＦＵＲ）（１０２）又は５−フルオロウリジン−５’−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（ＦＵＲＧａｌ）（１０１）で処理された増殖性マウス胚性線維芽細胞（ＭＥＦ）の生存率を示す。
【図１Ｂ】様々な薬剤濃度の５−フルオロウリジン（ＦＵＲ）（１０２）又は５−フルオロウリジン−５’−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（ＦＵＲＧａｌ）（１０１）で処理された老化マウス胚性線維芽細胞（ＭＥＦ）の生存率を示す。
【図２Ａ】処理の６日後の、ＦＵＲ（１０２）（１００ｍｇ／ｋｇ）又はＦＵＲＧａｌ（１０１）（１６０ｍｇ／ｋｇ）を単回腹腔内注入によって投与された野生型（ｗ．ｔ．）Ｃ５７ＢＬ／６マウス（Ｎ＝３マウス／群）からの血球数の定量を示す。
【図２Ｂ】処理の６日後の、ＦＵＲ（１０２）（１００ｍｇ／ｋｇ）又はＦＵＲＧａｌ（１０１）（１６０ｍｇ／ｋｇ）を単回腹腔内注入によって投与された野生型（ｗ．ｔ．）Ｃ５７ＢＬ／６マウス（Ｎ＝３マウス／群）からの大腿骨からの骨髄細胞の数の定量を示す。
【図２Ｃ】処理の６日後の、ＦＵＲ（１０２）（１００ｍｇ／ｋｇ）又はＦＵＲＧａｌ（１０１）（１６０ｍｇ／ｋｇ）を単回腹腔内注入によって投与された野生型（ｗ．ｔ．）Ｃ５７ＢＬ／６マウス（Ｎ＝３マウス／群）からの総脾臓重量の定量を示す。
【図３Ａ】ドキソルビシン（２５ｍｇ／ｋｇ）を注入されたＣ５７ＢＬ／６マウスの肝切片の代表的な画像を示す。
【図３Ｂ】ドキソルビシン（２５ｍｇ／ｋｇ）及びＦＵＲＧａｌ（１４０ｍｇ／ｋｇ）を注入されたＣ５７ＢＬ／６マウスの肝切片の代表的な画像を示す。
【図３Ｃ】対照とともに、図３Ａ及び図３Ｂの肝切片の定量を示す。
【図３Ｄ】分析当日のＣ５７ＢＬ／６マウスの平均体重を示す。
【図４Ａ】Ｃ５７ＢＬ／６マウスの肝細胞における老化の誘導及び化合物（１１３）によるその後の処理のプロトコルを示す。
【図４Ｂ】ドキソルビシン（２０ｍｇ／ｋｇ）、続いてビヒクル又は化合物（１１３）を注入されたＣ５７ＢＬ／６マウスの肝切片の代表的な画像を比較する。
【図４Ｃ】対照とともに、図４Ｂからの肝切片におけるＳＡ−β−Ｇａｌの定量を示す。
【図４Ｄ】ドキソルビシン（２０ｍｇ／ｋｇ）、続いてビヒクル又は化合物（１１３）を注入されたＣ５７ＢＬ／６マウスの肝臓におけるＣｄｋｎ２ａ発現の定量を示す。
【図４Ｅ】ドキソルビシン（２０ｍｇ／ｋｇ）、続いてビヒクル又は化合物（１１３）を注入されたＣ５７ＢＬ／６マウスの肝臓におけるＩＬ−６発現の定量を示す。
【図５Ａ】Ｃ５７ＢＬ／６マウスの肺組織における化合物（１１９）の老化細胞除去効果の観察のプロトコルを示す。
【図５Ｂ】ドキソルビシン（１５ｍｇ／ｋｇ）、続いて２０ｍｇ／ｋｇのビヒクル又は化合物（１１９）を注入されたＣ５７ＢＬ／６マウスの肺切片の代表的な画像を比較する。
【図５Ｃ】対照とともに、１０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ又は４０ｍｇ／ｋｇで化合物（１１９）を静脈内（ｉ．ｖ．）投与した後の、肺切片におけるＳＡ−β−Ｇａｌの定量を示す。
【図５Ｄ】ドキソルビシン（１５ｍｇ／ｋｇ）、続いて１０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ又は４０ｍｇ／ｋｇのビヒクル又は化合物（１１９）を注入されたＣ５７ＢＬ／６マウスの肺におけるＣｄｋｎ２ａ発現の定量を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
定義
本明細書において使用される際の「老化の特徴」としては、限定はされないが、免疫系の全身的な衰え、筋萎縮及び筋力の低下、皮膚弾力性の低下、創傷治癒遅延、網膜萎縮、水晶体透明度の低下、聴力の低下、骨粗鬆症、サルコペニア、毛髪の白髪化、顔のしわ、視力低下、フレイル、及び認知障害が挙げられる。
【００１４】
「アシル」は、Ｈ−ＣＯ−、アルキル−ＣＯ−、アルケニル−ＣＯ−又はシクロアルキル−ＣＯ−基を意味し、ここで、アルキル、アルケニル又はシクロアルキル基は、本明細書に記載されるとおりである。
【００１５】
「アシルアミノ」は、アシル−ＮＨ−基であり、ここで、アシルは、本明細書に定義されるとおりである。
【００１６】
本明細書において使用される際の「加齢関連の疾患又は病態」としては、限定はされないが、変性疾患又は機能低下障害、例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、白内障、黄斑変性症、緑内障、フレイル、筋力低下、認知障害、アテローム性動脈硬化症、急性冠症候群、心筋梗塞、脳卒中、高血圧症、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、変形性関節症、２型糖尿病、肥満、脂肪機能障害、冠動脈疾患、脳血管疾患、歯周病、癌治療に関連する障害、例えば、様々な組織における萎縮及び線維症、脳及び心臓傷害、及び治療関連骨髄異形成症候群、並びに老化の促進に関連する疾患及び／又はＤＮＡ損傷修復及びテロメア維持の欠陥、例えば、早老症（すなわち、ハッチンソン・ギルフォード早老症候群、ウェルナー症候群、ブルーム症候群、ロスムンド・トムソン症候群、コケイン症候群、色素性乾皮症、硫黄欠乏性毛髪発育異常症、色素性乾皮症−コケイン症候群複合型、拘束性皮膚障害）、毛細血管拡張性運動失調、ファンコニ貧血、フリードライヒ運動失調症、先天性角化不全症、再生不良性貧血、及びその他が挙げられる。
【００１７】
「アルケニル」は、炭素−炭素二重結合を含有し、鎖中に２〜２０個の炭素原子を有する、直鎖状又は分枝鎖状であり得る脂肪族炭化水素基を意味する。ある実施形態において、アルケニル基は、鎖中に２〜１２個の炭素原子を有する。他の実施形態において、アルケニル基は、鎖中に約２〜６個の炭素原子を有する。さらに他の実施形態において、アルケニル基は、鎖中に２〜４個の炭素原子を有する。本明細書中で本文全体を通して使用される際の「分枝鎖状」は、メチル、エチル又はプロピルなどの１つ以上の低級アルキル基が、直鎖；ここでは直鎖状アルケニル鎖に結合されていることを意味する。「低級アルケニル」は、直鎖状又は分枝鎖状であり得る、鎖中の約２〜約４個の炭素原子を意味する。例示的なアルケニル基としては、限定はされないが、エテニル、プロペニル、ｎ−ブテニル、ｉ−ブテニル、３−メチルブタ−２−エニル、ｎ−ペンテニル、ヘプテニル、オクテニル、シクロヘキシルブテニル及びデセニルが挙げられる。
【００１８】
「アルケニレン」は、直鎖状又は分枝鎖状アルケニル基から誘導される脂肪族二価ラジカルを意味し、ここで、アルケニル基は、本明細書に記載されるとおりである。例示的なアルケニレンラジカルとしては、限定はされないが、ビニレン及びプロピレンが挙げられる。
【００１９】
「アルコキシ」は、アルキル−Ｏ−基を意味し、ここで、アルキル基は、本明細書に記載されるとおりである。例示的なアルコキシ基としては、限定はされないが、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｉ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ及びヘプトキシが挙げられる。
【００２０】
「アルコキシカルボニル」は、アルキル−Ｏ−ＣＯ−基を意味し、ここで、アルキル基は、本明細書に記載されるとおりである。例示的なアルコキシカルボニル基としては、限定はされないが、メトキシ及びエトキシカルボニルが挙げられる。
【００２１】
「アルキル」は、特に規定されない限り、鎖中に１〜２０個の炭素原子を有する直鎖状又は分枝鎖状であり得る脂肪族炭化水素基を意味する。ある実施形態において、アルキル基は、１〜６個の炭素原子を有する。低級アルコキシ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルフィニル若しくは低級アルキルスルホニル基の基又はその一部としての「低級アルキル」は、特に規定されない限り、鎖中に１〜４個の炭素原子を有する直鎖状又は分枝鎖状であり得る脂肪族炭化水素基を意味する。例示的なアルキル基としては、限定はされないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、３−ペンチル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル及びドデシルが挙げられる。
【００２２】
「アルキレン」は、直鎖状又は分枝鎖状アルキル基から誘導される脂肪族二価ラジカルを意味し、ここで、アルキル基は、本明細書に記載されるとおりである。例示的なアルキレンラジカルとしては、限定はされないが、メチレン、エチレン及びトリメチレンが挙げられる。
【００２３】
「アルキレンジオキシ」は、−Ｏ−アルキレン−Ｏ−基を意味し、ここで、アルキレンは、上に定義されるとおりである。例示的なアルキレンジオキシ基としては、限定はされないが、メチレンジオキシ及びエチレンジオキシが挙げられる。
【００２４】
「アルキルスルフィニル」は、アルキル−ＳＯ−基を意味し、ここで、アルキル基は、上述されるとおりである。例示的なアルキルスルフィニル基としては、限定はされないが、アルキル基がＣ１〜４アルキルであるものが挙げられる。
【００２５】
「アルキルスルホニル」は、アルキル−ＳＯ２−基を意味し、ここで、アルキル基は、上述されるとおりである。ある実施形態において、アルキルスルホニル基は、アルキル基がＣ１〜４アルキルであるものである。
【００２６】
「アルキルチオ」は、アルキル−Ｓ−基を意味し、ここで、アルキル基は、上述されるとおりである。例示的なアルキルチオ基としては、限定はされないが、メチルチオ、エチルチオ、イソプロピルチオ及びヘプチルチオが挙げられる。
【００２７】
「アルキニル」は、炭素−炭素三重結合を含有し、鎖中に約２〜約２０個の炭素原子を有する、直鎖状又は分枝鎖状であり得る脂肪族炭化水素基を意味する。ある実施形態において、アルキニル基は、鎖中に２〜１２個の炭素原子を有する。他の実施形態において、アルキニル基は、鎖中に２〜６個の炭素原子を有する。さらに他の実施形態において、アルキニル基は、鎖中に２〜４個の炭素原子を有する。例示的なアルキニル基としては、限定はされないが、エチニル、プロピニル、ｎ−ブチニル、ｉ−ブチニル、３−メチルブタ−２−イニル、及びｎ−ペンチニルが挙げられる。
【００２８】
「アルキニレン」は、直鎖状又は分枝鎖状アルキニル基から誘導される脂肪族二価ラジカルを意味し、ここで、アルキニル基は、本明細書に記載されるとおりである。例示的なアルキニレンラジカルとしては、限定はされないが、エチニレン及びプロピニレンが挙げられる。
【００２９】
「アミノ酸側鎖」は、α−アミノ酸中のアミノ基とカルボキシ基との間の炭素上に見られる置換基を意味する。アミノ酸側鎖の「対応する保護誘導体」の例については、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ  ｉｎ  “Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，１９９１を参照されたい。
【００３０】
「アロイル」は、アリール−ＣＯ−基を意味し、ここで、アリール基は、本明細書に記載されるとおりである。例示的なアロイル基としては、ベンゾイル及び１−及び２−ナフトイルが挙げられる。
【００３１】
基又は基の一部としての「アリール」は、（ｉ）約６〜約１４個の炭素原子の任意に置換される単環式又は多環式芳香族炭素環部分、例えば、フェニル若しくはナフチル；又は（ｉｉ）アリール及びシクロアルキル又はシクロアルケニル基が一緒に縮合されて環状構造を形成する、任意に置換される部分的に飽和した多環式芳香族炭素環部分、例えば、テトラヒドロナフチル、インデニル若しくはインダニル環を示す。
【００３２】
「アリールアルキル」は、アリール−アルキル−基を意味し、ここで、アリール及びアルキル部分は、上述されるとおりである。例示的なアリールアルキル基としては、限定はされないが、ベンジル、２−フェネチル及びナフタレンメチルが挙げられる。
【００３３】
「アリールジイル」は、アリール基から誘導される任意に置換される二価ラジカルを意味する。例示的なアリールジイル基としては、限定はされないが、任意に置換されるフェニレン、ナフチレン及びインダニレン（ｉｎｄａｎｙｌｅｎｅ）が挙げられる。好適な置換基としては、上に定義される１つ以上の「アリール基置換基」、特に、ハロゲン、メチル又はメトキシが挙げられる。
【００３４】
「アリールオキシ」は、アリール−Ｏ−基を意味し、ここで、アリール基は、上述されるとおりである。例示的なアリールオキシ基としては、限定はされないが、任意に置換されるフェノキシ及びナフトキシが挙げられる。
【００３５】
「アリールオキシカルボニル」は、アリール−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−基を意味し、ここで、アリール基は、上述されるとおりである。例示的なアリールオキシカルボニル基としては、限定はされないが、フェノキシカルボニル及びナフトキシカルボニルが挙げられる。
【００３６】
「アリールスルフィニル」は、アリール−ＳＯ−基を意味し、ここで、アリール基は、上述されるとおりである。
【００３７】
「アリールスルホニル」は、アリール−ＳＯ２−基を意味し、ここで、アリール基は、上述されるとおりである。
【００３８】
「アリールチオ」は、アリール−Ｓ−基を意味し、ここで、アリール基は、上述されるとおりである。例示的なアリールチオ基としては、フェニルチオ及びナフチルチオが挙げられる。
【００３９】
「アザヘテロアリール」は、約５〜約１０個の環員の芳香族炭素環部分を意味し、ここで、環員の１つが窒素であり、他の環員が、炭素、酸素、硫黄、又は窒素から選択される。アザヘテロアリール基の例としては、ピリジル、ピリミジニル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、イミダゾリル、及びベンズイミダゾリルが挙げられる。
【００４０】
「化合物」は、本明細書に開示される構造式に包含される化合物を指し、構造が本明細書に開示されるこれらの式中の任意の特定の化合物を含む。化合物は、それらの化学構造及び／又は化学名のいずれかによって同定され得る。化学構造及び化学名が矛盾する場合、化学構造が、化合物の属性を決定する。本明細書に記載される化合物は、１つ以上のキラル中心及び／又は二重結合を含有し得、したがって、二重結合異性体（すなわち、幾何異性体）、鏡像異性体又はジアステレオマーなどの立体異性体として存在し得る。したがって、本明細書に示される化学構造は、構造中に示される立体異性的に純粋な形態（例えば、幾何異性的に純粋、鏡像異性的に純粋又はジアステレオマー的に純粋）を包含する。本明細書に示される化学構造は、明らかに特定されない限り、示される化合物の鏡像異性体及び立体異性体誘導体も包含する。鏡像異性体及び立体異性体混合物は、当業者に周知の分離技術又はキラル合成技術を用いて、それらの構成要素の鏡像異性体又は立体異性体に分割され得る。化合物はまた、エノール型、ケト型及びそれらの混合物を含むいくつかの互変異性体において存在してもよい。したがって、本明細書に示される化学構造は、示される化合物の全ての可能な互変異性体を包含する。記載される化合物は、１つ以上の原子が自然界に通常見られる原子質量と異なる原子質量を有する、同位体で標識された化合物も含む。本明細書に開示される化合物に組み込まれ得る同位体の例としては、限定はされないが、２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ、１７Ｏなどが挙げられる。化合物は、非溶媒和形態並びに水和形態を含む溶媒和形態において存在し得る。一般に、化合物は、水和又は溶媒和され得る。特定の化合物は、多結晶又は非晶質形態において存在してもよい。一般に、全ての物理的形態が本明細書において想定される使用に関して同等であり、本開示の範囲内であることが意図される。さらに、化合物の部分的構造が示される場合、括弧が、部分的構造の、分子の残りの部分への結合点を示すことが理解されるべきである。
【００４１】
「環状アミン」は、環炭素原子の１つが窒素で置換され、Ｏ、Ｓ、ＳＯ２、又はＮＹ（ここで、Ｙは、水素、アルキル、アリール、アリールアルキル、アシル、アシルオキシアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル又はスルホニルである）から選択されるヘテロ原子もさらに含有し得る３〜８員単環式シクロアルキル環系を意味する。例示的な環状アミンとしては、限定はされないが、ピロリジニル、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニル、インドリニル、ピリドリニル、テトラヒドロキノリニルが挙げられる。
【００４２】
「シクロアルケニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含有し、３〜１０個の炭素原子を有する非芳香族単環式又は多環式環系を意味する。例示的な単環式シクロアルケニル環としては、限定はされないが、シクロペンテニル、シクロヘキセニル又はシクロヘプテニルが挙げられる。
【００４３】
「シクロアルキル」は、オキソで任意に置換される３〜１０個の炭素原子の飽和単環式又は二環式環系を意味する。例示的な単環式シクロアルキル環としては、限定はされないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル及びシクロヘプチルが挙げられる。
【００４４】
「シクロアルキレン」は、シクロアルキル基から誘導される二価ラジカルを意味する。例示的なシクロアルケニレンラジカルとしては、限定はされないが、シクロペンチレン及びシクロへキシレンが挙げられる。
【００４５】
本明細書において使用される際の「ＤＮＡ損傷治療」としては、限定はされないが、γ線照射、アルキル化剤、例えば、ナイトロジェンマスタード（例えば、クロラムブシル、シクロホスファミド、イホスファミド、メルファラン）、ニトロソウレア（ストレプトゾシン、カルムスチン、ロムスチン）、アルキルスルホネート（例えば、ブスルファン）、トリアジン（ダカルバジン、テモゾロミド）及びエチレンイミン（例えば、チオテパ、アルトレタミン）、白金製剤、例えば、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、代謝拮抗剤、例えば、５−フルオロウラシル、６−メルカプトプリン、カペシタビン、クラドリビン、クロファラビン、シタラビン、フロクスウリジン、フルダラビン、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、メトトレキサート、ペメトレキセド、ペントスタチン、チオグアニン、アントラサイクリン、例えば、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、抗腫瘍抗生物質、例えば、アクチノマイシン−Ｄ、ブレオマイシン、マイトマイシン−Ｃ、ミトキサントロン、トポイソメラーゼ阻害剤、例えば、トポイソメラーゼＩ阻害剤（例えば、トポテカン、イリノテカン）及びトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えば、エトポシド、テニポシド、ミトキサントロン）、有糸分裂阻害剤、例えば、タキサン（例えば、パクリタキセル、ドセタキセル）、エポチロン（例えば、イクサベピロン）、ビンカアルカロイド（例えば、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン）及びエストラムスチンが挙げられる。
【００４６】
「ハロ」又は「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、又はヨードを意味する。
【００４７】
「ヘテロアロイル」は、ヘテロアリール−Ｃ（＝Ｏ）−基を意味し、ここで、ヘテロアリール基は、本明細書に記載されるとおりである。例示的な基は、ピリジルカルボニルである。
【００４８】
基又は基の一部としての「ヘテロアリール」は、（ｉ）環員の１つ以上が炭素、例えば窒素、酸素又は硫黄以外の元素である、約５〜約１０個の環員の芳香族単環式又は多環式有機部分（このような基の例としては、上に定義される１つ以上のアリール基置換基で任意に置換される、ベンズイミダゾリル、ベンズチアゾリル、フリル、イミダゾリル、インドリル、インドリジニル、イソオキサゾリル、イソキノリニル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、１，３，４−チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル及びトリアゾリル基が挙げられる）；（ｉｉ）ヘテロアリール及びシクロアルキル又はシクロアルケニル基が一緒に縮合されて環状構造を形成する、任意に置換される部分的に飽和した多環式ヘテロ炭素環部分（このような基の例としては、ピリンダニル（ｐｙｒｉｎｄａｎｙｌ）基が挙げられる）を示す。
【００４９】
「ヘテロアリールジイル」は、ヘテロアリール基から誘導される二価ラジカルを意味する。
【００５０】
「ヘテロアリールオキシ」は、ヘテロアリール−Ｏ−基を意味し、ここで、ヘテロアリール基は、上述されるとおりである。例示的なヘテロアリールオキシ基は、任意に置換されるピリジルオキシである。
【００５１】
「複素環」は、環員の１つ以上が炭素以外の元素、例えば窒素、酸素又は硫黄である、５又は６環員の任意に置換される飽和、部分的に飽和した又は完全に不飽和の単環式有機部分を示す。例示的な５又は６員複素環としては、フリル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、オキサジニル、ピペリジニル、ピラジニル、ピリダジニル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリル、ピロリジニル、ピロリニル、１，３，４−チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル及びトリアゾリル基が挙げられる。
【００５２】
「ヘテロシクロアルキル」は、（ｉ）Ｏ、Ｓ又はＮから選択される１つ以上のヘテロ原子を含有し、オキソで任意に置換される、約３〜７個の環員のシクロアルキル基；（ｉｉ）アリール（又はヘテロアリール環）、及びヘテロシクロアルキル基が一緒に縮合されて環状構造を形成する、部分的に飽和した多環式ヘテロ炭素環部分（このような基の例としては、クロマニル、ジヒドロベンゾフラニル、インドリニル及びピリンドリニル（ｐｙｒｉｎｄｏｌｉｎｙｌ）基が挙げられる）を意味する。
【００５３】
本明細書において使用される際の「ヒストンデアセチラーゼ阻害剤」又は「ＨＤＡＣ阻害剤」は、インビボ、インビトロ又はその両方でヒストンの脱アセチル化を阻害することが可能な化合物である（例えば、Ｍｏｔｔａｍａｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ２０（２０１５）３８９８−３９４１；Ｒｏｃｈｅ  ａｎｄ  Ｂｅｒｔｒａｎｄ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１２１（２０１６）４５１−４８３を参照）。したがって、ＨＤＡＣ阻害剤は、少なくとも１つのヒストンデアセチラーゼの活性を阻害する。少なくとも１つのヒストンの脱アセチル化を阻害する結果として、アセチル化ヒストンの増加が起こり、アセチル化ヒストンの蓄積は、ＨＤＡＣ阻害剤の活性を評価するための好適な生物学的マーカーである。したがって、アセチル化ヒストンの蓄積をアッセイし得る手順が、対象とする化合物のＨＤＡＣ阻害活性を決定するのに使用され得る。ヒストンデアセチラーゼ活性を阻害し得る化合物が、他の基質にも結合し得、したがって、酵素などの他の生物学的に活性な分子を阻害し得ることが理解される。
【００５４】
「水和物」は、化学量論的割合で、本明細書に記載される化合物の結晶格子に水を組み込んで、付加物を形成したものを指す。水和物を作製する方法としては、限定はされないが、水蒸気を含む雰囲気中での貯蔵、水を含む剤形、又は例えば、結晶化（すなわち、水若しくは混合水性溶媒からの）、凍結乾燥、湿式造粒法、水性フィルムコーティング、若しくは噴霧乾燥などの日常的な製剤工程が挙げられる。水和物はまた、特定の状況下で、水蒸気への曝露時、又は水中での無水材料の懸濁時に、結晶性溶媒和物から形成され得る。水和物はまた、２つ以上の形態で結晶化して、水和物多形をもたらすこともある。例えば、（Ｇｕｉｌｌｏｒｙ，Ｋ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  ５，ｐｐ．２０２２０５  ｉｎ  Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｏｌｉｄｓ，（Ｂｒｉｔｔａｉｎ，Ｈ．ｅｄ．），Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ，１９９９）を参照されたい。水和物を調製するための上記の方法は、十分に当業者の能力の範囲内であり、完全に従来のものであり、当該技術分野において典型的なものを超える実験を必要としない。水和物は、例えば、単結晶Ｘ線回折、Ｘ線粉末回折、偏光光学顕微鏡法、熱顕微鏡法、熱重量分析、示差熱分析、示差走査熱量測定、赤外分光法、ラマン分光法及び核磁気共鳴分光法などの、当業者に周知の方法によって特徴付け及び／又は分析され得る。（Ｂｒｉｔｔａｉｎ，Ｈ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  ６，ｐｐ．２０５２０８  ｉｎ  Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｏｌｉｄｓ，（Ｂｒｉｔｔａｉｎ，Ｈ．ｅｄ．），Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｉｎｃ．Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９）。さらに、多くの営利会社の日常的な業務が、例えば、ＨＯＬＯＤＩＡＧ、Ｐｈａｒｍａｐａｒｃ  ＩＩ、Ｖｏｉｅ  ｄｅ  ｌ’Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ、２７  １００  Ｖａｌ  ｄｅ  Ｒｅｕｉｌ、Ｆｒａｎｃｅ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｈｏｌｏｄｉａｇ．ｃｏｍ）などの、水和物の調製及び／又は特徴付けを含むサービスを提供している。
【００５５】
本明細書において使用される際の「ヒドロキサム酸誘導体ヒストンデアセチラーゼ阻害剤」は、ヒドロキサム酸誘導体であるヒストンデアセチラーゼ阻害剤のクラスを指す。
【００５６】
本明細書において使用される際の「ヒドロキサム酸誘導体ヒストンデアセチラーゼ阻害剤の残基」は、ヒドロキサム酸部分を除く、ヒドロキサム酸誘導体ヒストンデアセチラーゼ阻害剤の全体部分を指す。
【００５７】
本明細書において使用される際の「医薬組成物」は、少なくとも１つの化合物、及び化合物とともに患者に投与される薬学的に許容されるビヒクルを指す。
【００５８】
本明細書において使用される際の「薬学的に許容される塩」は、親化合物の所望の薬理学的活性を有する、化合物の塩を指す。このような塩は、（１）塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸とともに形成されるか；若しくは酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、３−（４−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタン−ジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、４−トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、４−メチルビシクロ［２．２．２］−オクタ−２−エン−１−カルボン酸、グルコヘプトン酸、３−フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、第三級ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸などの有機酸とともに形成される酸付加塩；又は（２）親化合物中に存在する酸性プロトンが、金属イオン、例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオン、若しくはアルミニウムイオンで置換されるときに形成される塩；又はエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、Ｎ−メチルグルカミンなどの有機塩基との配位体（ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅ）を含む。
【００５９】
本明細書において使用される際の「薬学的に許容されるビヒクル」は、化合物とともに投与される希釈剤、補助剤、賦形剤又は担体を指す。
【００６０】
「患者」は、ヒトを含む。「ヒト」及び「患者」という用語は、同義的に使用される。
【００６１】
本明細書において使用される際の「予防する」又は「予防」は、疾患又は障害に罹患するリスクの低減（すなわち、疾患の臨床症状の少なくとも１つが、疾患に曝されるか又はその素因があり得るが、疾患の症状をまだ経験又は呈していない患者において発生しないようにすること）を指す。
【００６２】
本明細書において使用される際の「プロドラッグ」は、活性薬剤を放出するのに身体内での変換を必要とする、薬剤分子の誘導体を指す。プロドラッグは、必ずしもではないが、親薬剤に変換されるまで薬理学的に不活性であることが多い。
【００６３】
本明細書において使用される際の「プロ部分（ｐｒｏｍｏｉｅｔｙ）」は、薬剤分子内の官能基をマスクするのに使用されるとき、薬剤をプロドラッグに変換する保護基の形態を指す。典型的に、プロ部分は、インビボで酵素的又は非酵素的手段によって切断される結合を介して薬剤に結合される。
【００６４】
本明細書において使用される際の「保護基」は、分子マスク中の反応性官能基に結合されるとき、官能基の反応性を低減又は防止する原子群を指す。保護基の例が、Ｇｒｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，（Ｗｉｌｅｙ，２ｎｄｅｄ．１９９１）及びＨａｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｍｅｔｈｏｄｓ”，Ｖｏｌｓ．１−８（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，１９７１−１９９６）に見出され得る。代表的なアミノ保護基としては、限定はされないが、ホルミル、アセチル、トリフルオロアセチル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル（「Ｃｂｚ」）、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（「Ｂｏｃ」）、トリメチルシリル（「ＴＭＳ」）、２−トリメチルシリル−エタンスルホニル（「ＳＥＳ」）、トリチル及び置換トリチル基、アリルオキシカルボニル、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（「Ｆｍｏｃ」）、ニトロ−ベラトリルオキシカルボニル（「Ｎｖｏｃ」）などが挙げられる。代表的なヒドロキシ保護基としては、限定はされないが、ヒドロキシ基がアシル化又はアルキル化されているもの、例えば、ベンジル、及びトリチルエーテル並びにアルキルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、トリアルキルシリルエーテル及びアリルエーテルが挙げられる。
【００６５】
本明細書において使用される際の「老化」又は「老化細胞」は、細胞がある細胞ストレスに応答して老化の１つ以上のマーカーを取得した状態を指す。このようなマーカーとしては、典型的に、細胞周期からの永続的な離脱、炎症性因子の生物活性セクレトームの発現、変化したメチル化、細胞老化関連ヘテロクロマチン形成（ＳＡＨＦ）、酸化的ストレスの発現マーカー、ＤＮＡ損傷のマーカーの発現、タンパク質及び脂質修飾、老化の形態学的特徴、変化したリソソーム／液胞及び老化に関連するβ−ガラクトシダーゼの発現が挙げられる（Ｌｏｒｅｎｚｏ  Ｇａｌｌｕｚｚｉ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），Ｃｅｌｌ  Ｓｅｎｅｓｃｅｎｅ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．９６５，ＤＯＩ  １０．１００７／９７８−１−６２７０３−２３９−１＿４，（著作権）Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ＋Ｂｕｓｉｎｅｓｓ  Ｍｅｄｉａ，ＬＬＣ  ２０１３を参照）。
【００６６】
本明細書において使用される際の「老化細胞除去剤」は、老化細胞を「選択的に」（優先的に又はより高い程度に）破壊する、死滅させる、除去する、又は老化細胞の選択的破壊を促進する薬剤を指す。言い換えると、老化細胞除去剤は、非老化細胞を破壊するか又は死滅させるその能力と比較して、生物学的に、臨床的に、及び／又は統計的に有意に、老化細胞を破壊するか又は死滅させる。老化細胞除去剤は、確立された老化細胞を選択的に死滅させるのに十分な量で及び十分な時間にわたって使用されるが、臨床的に有意に又は生物学的に有意に非老化細胞を死滅させるのに不十分である。特定の実施形態において、本明細書に記載される老化細胞除去剤は、老化細胞の死亡を誘導し（すなわち、開始させる、刺激する、引き起こす、活性化する、促進する）、老化細胞の死亡をもたらすように少なくとも１つのシグナル伝達経路を変化させる。
【００６７】
「水和物」は、化学量論的割合で本明細書に記載される化合物の結晶格子に水を組み込んで、付加物を形成したものを指す。水和物を作製する方法としては、限定はされないが、水蒸気を含む雰囲気中での貯蔵、水を含む剤形、又は例えば、結晶化（すなわち、水若しくは混合水性溶媒からの）、凍結乾燥、湿式造粒法、水性フィルムコーティング、若しくは噴霧乾燥などの日常的な製剤工程が挙げられる。水和物はまた、特定の状況下で、水蒸気気への曝露時、又は水中での無水材料の懸濁時に、結晶性溶媒和物から形成され得る。水和物はまた、２つ以上の形態で結晶化して、水和物多形をもたらすこともある。例えば、（Ｇｕｉｌｌｏｒｙ，Ｋ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  ５，ｐｐ．２０２２０５  ｉｎ  Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｏｌｉｄｓ，（Ｂｒｉｔｔａｉｎ，Ｈ．ｅｄ．），Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ，１９９９）を参照されたい。水和物を調製するための上記の方法は、十分に当業者の能力の範囲内であり、完全に従来のものであり、当該技術分野において典型的なものを超える実験を必要としない。水和物は、例えば、単結晶Ｘ線回折、Ｘ線粉末回折、偏光光学顕微鏡法、熱顕微鏡法、熱重量分析、示差熱分析、示差走査熱量測定、赤外分光法、ラマン分光法及び核磁気共鳴分光法などの、当業者に周知の方法によって特徴付け及び／又は分析され得る。（Ｂｒｉｔｔａｉｎ，Ｈ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  ６，ｐｐ．２０５２０８  ｉｎ  Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｏｌｉｄｓ，（Ｂｒｉｔｔａｉｎ，Ｈ．ｅｄ．），Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９）。さらに、多くの営利会社の日常的な業務が、例えば、ＨＯＬＯＤＩＡＧ、Ｐｈａｒｍａｐａｒｃ  ＩＩ、Ｖｏｉｅ  ｄｅ  ｌ’ｌｎｎｏｖａｔｉｏｎ、２７  １００  Ｖａｌ  ｄｅ  Ｒｅｕｉｌ、Ｆｒａｎｃｅ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｖｖ．ｈｏｌｏｄｉａｇ．ｃｏｍ）などの、水和物の調製及び／又は特徴付けを含むサービスを提供している。
【００６８】
本明細書において使用される際の「置換」は、特定の基又はラジカルを修飾するのに使用されるとき、特定の基又はラジカルの１つ以上の水素原子がそれぞれ、互いに独立して、同じか又は異なる置換基で置換されることを意味する。
【００６９】
特定の基又はラジカル中の飽和炭素原子を置換するのに有用な置換基としては、限定はされないが、−Ｒａ、ハロ、−Ｏ−、＝Ｏ、−ＯＲｂ、−ＳＲｂ、−Ｓ−，＝Ｓ、−ＮＲｃＲｃ、＝ＮＲｂ、＝Ｎ−ＯＲｂ、トリハロメチル、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、−Ｎ−ＯＲｂ、−Ｎ−ＮＲｃＲｃ、−ＮＲｂＳ（Ｏ）２Ｒｂ、＝Ｎ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲｂＲｂ、−Ｓ（Ｏ）２Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲｂ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒｂ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｏ−、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲｂ、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲｃＮＲｃ、＼−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（Ｏ−）、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（ＯＲｂ）、−Ｃ（Ｏ）Ｒｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂ−ＯＲｂ−Ｃ（Ｓ）Ｒｂ、−Ｃ（ＮＲｂ）Ｒｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＲｂ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ、−ＯＣ（Ｓ）Ｒｂ、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（ＮＣＮ）ＮＲｃＲｃ−ＯＣ（Ｓ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｒｂ、−ＮＲｂＣ（Ｓ）Ｒｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲｂＣ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＣ（ＮＣＮ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＳ（Ｏ）２ＮＲｃＲｃ、−ＮＲｂＣ（Ｓ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−ＮＲｂＣ（Ｓ）ＮＲｃＲｃ、−ＮＲｂＣ（Ｓ）ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｒａ、−ＮＲｂＳ（Ｏ）２ＯＲｂ、−ＮＲｂＳ（Ｏ）２Ｒｂ、−ＮＲｂＣ（ＮＣＮ）ＮＲｃＲｃ、−ＮＲｂＣ（ＮＲｂ）Ｒｂ及び−ＮＲｂＣ（ＮＲｂ）ＮＲｃＲｃが挙げられ、ここで、Ｒａが、独立して、アルキル、ヘテロアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルであり；各Ｒｂが、独立して、水素、Ｒａ、置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換アリール、置換アリールアルキル、置換ヘテロアリール及び置換ヘテロアリールアルキルであり；各Ｒｃが、独立して、Ｒｂであるか、或いは、２つのＲｃが、それらが結合される窒素原子と一緒になって、４員、５員、６員若しくは７員シクロヘテロアルキル、置換シクロヘテロアルキル、又はＯ、Ｎ及びＳからなる群から選択される同じか又は異なるさらなるヘテロ原子の１〜４つを任意に含み得るアリール基と縮合されるシクロヘテロアルキルを形成する。具体例として、−ＮＲｃＲｃは、−ＮＨ２、−ＮＨ−アルキル、Ｎ−ピロリジニル及びＮ−モルホリニルを含むことを意味する。同様に、特定の基又はラジカル中の不飽和炭素原子を置換するのに有用な置換基としては、限定はされないが、−Ｒａ、ハロ、−Ｏ−、−ＯＲｂ、−ＳＲｂ、−Ｓ−、−ＮＲｃＲｃ、トリハロメチル、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ、−Ｓ（Ｏ）２Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲｂ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒｂ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｏ−、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲｂ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（Ｏ−）、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（ＯＲｂ）、−Ｃ（Ｏ）Ｒｂ、−Ｃ（Ｓ）Ｒｂ、−Ｃ（ＮＲｂ）Ｒｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＲｂ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ、−ＯＣ（Ｓ）Ｒｂ、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲｂ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＳＯ（Ｏ）２ＮＲｃＮＲｃ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｒｂ、−ＮＲｂＣ（Ｓ）Ｒｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲｂＣ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＳ（Ｏ）２ＯＲａ、−ＮＲｂＳ（Ｏ）２Ｒａ、−ＮＲｂＣ（Ｓ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−ＮＲｂＣ（ＮＲｂ）Ｒｂ及び−ＮＲｂＣ（ＮＲｂ）ＮＲｃＲｃが挙げられ、ここで、Ｒａ、Ｒｂ及びＲｃが、上述されるとおりである。ヘテロアルキル及びシクロヘテロアルキル基中の窒素原子を置換するのに有用な置換基としては、限定はされないが、−Ｒａ、−Ｏ−、−ＯＲｂ、−ＳＲｂ、−Ｓ−、−ＮＲｃＲｃ、トリハロメチル、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ、−Ｓ（Ｏ）２Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲｂ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒｂ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｏ−、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲｂ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（Ｏ−）、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（ＯＲｂ）、−Ｃ（Ｏ）Ｒｂ、−Ｃ（Ｓ）Ｒｂ、−Ｃ（ＮＲｂ）Ｒｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＲｂ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ、−ＯＣ（Ｓ）Ｒｂ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｒｂ、−ＮＲｂＣ（Ｓ）Ｒｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｓ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−ＮＲｂＣ（ＮＲｂ）Ｒｂ及び−ＮＲｂＣ（ＮＲｂ）ＮＲｃＲｃが挙げられ、ここで、Ｒａ、Ｒｂ及びＲｃが、上述されるとおりである。他の特定の基又は原子を置換するのに有用な上記のリストからの置換基は、当業者に明らかであろう。ある実施形態において、特定の基を置換するのに使用される置換基は、典型的に、上に規定される様々な基から選択される同じか又は異なる基の１つ以上でさらに置換され得る。
【００７０】
本明細書において使用される際の任意の疾患又は障害を「治療する」又は「治療」は、ある実施形態において、疾患又は障害を改善する（すなわち、疾患又はその臨床症状の少なくとも１つの発症を停止させるか又は軽減する）ことを指す。他の実施形態において、「治療する」又は「治療」は、患者に認識されないこともある少なくとも１つの物理的パラメータを改善することを指す。さらに他の実施形態において、「治療する」又は「治療」は、疾患又は障害を、身体的に、（例えば、認識可能な症状の安定化）、生理学的に、（例えば、物理的パラメータの安定化）、又はその両方で阻害することを指す。さらに他の実施形態において、「治療する」又は「治療」は、疾患又は障害の発症を遅らせることを指す。
【００７１】
本明細書において使用される際の「治療有効量」は、疾患を治療するために患者に投与されるとき、疾患のこのような治療を行うのに十分である化合物の量を指す。「治療有効量」は、化合物、疾患及びその重症度及び治療される患者の年齢、体重などに応じて変化する。
【００７２】
ここで、化合物及び方法特定の実施形態に詳細に言及する。開示される実施形態は、特許請求の範囲を限定することは意図されていない。それとは逆に、特許請求の範囲は、全ての代替例、変更及び均等物を包含することが意図されている。
【００７３】
老化細胞除去剤
血液癌（Ｔ細胞リンパ腫、白血病及び多発性骨髄腫など）の臨床治療のために承認されているヒドロキサム酸誘導体ＨＤＡＣ阻害剤としては、ボリノスタット（スベロイルアニリドヒドロキサム酸又はＳＡＨＡ（１））、ベリノスタット（２）及びパノビノスタット（３）が挙げられる。いくつかの他のヒドロキサム酸誘導体ＨＤＡＣ阻害剤（例えば、化合物（４）〜（１３））が、単一の薬剤として、又は他の腫瘍溶解剤化合物との併用療法において、血液系及び固形腫瘍の両方の治療のために臨床研究中である。ＨＤＡＣクラスＩ、ＩＩ及びＩＶ内の酵素を様々に阻害することに加えてヒドロキサム酸誘導体は、他の治療標的、例えば、ＣＵＤＣ−１０１（１２）（ＥＧＦＲ及びＨＥＲ−２キナーゼを強く阻害する）及びＣＵＤＣ−９０７（１３）（様々なＰＩ３Ｋアイソフォームをさらに阻害する）を同時に阻害するように設計されている。ストレプトマイセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）から分離される天然産物トリコスタチンＡ（１４）及び多くの合成的に誘導された化合物を含む多くの他のヒドロキサム酸誘導体ＨＤＡＣ阻害剤が開示されており、その例としては、化合物（１５）〜（２１）並びにＲｏｃｈｅ  ａｎｄ  Ｂｅｒｔｒａｎｄ（上記）に開示される他のもの；又は米国特許第５，３６９，１０８号明細書、同第５，９３２，６１６号明細書、同第６，０８７，３６７号明細書及び同第６，５１１，９９０号明細書に開示されるヒドロキサム酸のいずれかが挙げられる。
【化２−１】
2021531249.tif 000004
【化２−２】
2021531249.tif 000005
【化２−３】
2021531249.tif 000006
【化２−４】
2021531249.tif 000007
【化２−５】
2021531249.tif 000008
【化２−６】
2021531249.tif 000009
【００７４】
老化細胞除去活性は、汎ＨＤＡＣ阻害剤パノビノスタット（３）について以前に報告されており（Ｓａｍａｒａｗｅｅｒａ  ｅｔ  ａｌ．、上記）、老化が、減少したグローバルなヒストンアセチル化に関連していることが示されている（Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  １３（２０１３）２５８５−２５９６）。いくつかの報告が、Ｂｃｌ−ｘＬ発現のＨＤＡＣ阻害剤媒介性の低下を実証している（例えば、Ｃａｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２５（２００１）５６２−５６８；Ｒａｄａ−Ｉｇｌｅｓｉａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．１７（２００７）７０８−７１９；及びＦｒｙｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｈａｅｍａｔｏｌ．１６９（２０１５）５０６−５１９を参照）。理論に拘束されるのを望むものではないが、ＨＤＡＣ阻害剤の老化細胞除去活性の１つの薬理学的基礎が、抗アポトーシスＢｃｌ−ｘＬタンパク質レベルの低下によって媒介されることが可能である。
【００７５】
ある実施形態において、老化細胞除去剤として有効な化合物は、式（ＩＶ）又は（Ｖ）：
【化３】
2021531249.tif 000010
の化合物であり、式中：Ｒが、ヒドロキサム酸誘導体ヒストンデアセチラーゼ阻害剤の残基であり；各Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５が、独立して、水素、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１、式（ＶＩ）の部分又は式（ＶＩＩ）の部分：
【化４】
2021531249.tif 000011
であり、各Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ４３、Ｒ４４及びＲ４５が、独立して、水素又は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ２であり；各Ｒ１が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５又はＲ１６の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の残りは、水素又はＣ（Ｏ）−Ｒ１であり；各Ｒ２が、独立して、水素、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の残りは、水素又は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり；ただし、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが水素である場合、Ｒは、７−ヘプタノイルフェニルアミドでない。
【００７６】
式（ＩＶ）又は（Ｖ）の化合物のある実施形態において、ピラノース環（標識される＊）の芳香族炭素は、Ｓ配置のものであり、化合物はそれぞれ、ヒドロキサム酸誘導体ヒストンデアセチラーゼ阻害剤のβ−Ｄ−ガラクトシド及びα−Ｌ−フコシドコンジュゲートである。
【００７７】
式（ＩＶ）又は（Ｖ）の化合物のある実施形態において、Ｒが、ヒドロキサム酸誘導体ヒストンデアセチラーゼ阻害剤の残基であり、ここで、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤は、パノビノスタット、キシノスタット、ボリノスタット、ダシノスタット、ギビノスタット、ＣＵＤＣ−９０７、ＣＵＤＣ−１０１、アベキシノスタット、ベリノスタット、プラシノスタット、レスミノスタット、リコリノスタット、ピロキサミド、ＡＰＨＡ、トリコスタチンＡ、オキサムフラチン及びＡＲ−４２からなる群から選択される。
【００７８】
式（ＩＶ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが水素である。式（Ｖ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが水素である。
【００７９】
式（ＩＶ）の化合物の他の実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。式（Ｖ）の化合物の他の実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。
【００８０】
式（ＩＶ）の化合物のさらに他の実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。式（Ｖ）の化合物のさらに他の実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。
【００８１】
式（ＩＶ）の化合物のさらに他の実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。式（Ｖ）の化合物のさらに他の実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。
【００８２】
さらなる実施形態において、式（ＩＶ）の化合物は、構造：
【化５−１】
2021531249.tif 000012
【化５−２】
2021531249.tif 000013
のいずれかを有する化合物である。
【００８３】
さらなる実施形態において、式（Ｖ）の化合物は、構造：
【化６−１】
2021531249.tif 000014
【化６−２】
2021531249.tif 000015
のいずれかを有する化合物である。
【００８４】
さらに他の実施形態において、式（ＩＶ）の化合物は、構造：
【化７−１】
2021531249.tif 000016
【化７−２】
2021531249.tif 000017
のいずれかを有する化合物である。
【００８５】
さらに他の実施形態において、式（Ｖ）の化合物は、構造：
【化８−１】
2021531249.tif 000018
【化８−２】
2021531249.tif 000019
のいずれかを有する化合物である。
【００８６】
さらに他の実施形態において、式（ＩＶ）の化合物は、構造：
【化９−１】
2021531249.tif 000020
【化９−２】
2021531249.tif 000021
【化９−３】
2021531249.tif 000022
のいずれかを有する化合物である。
【００８７】
さらに他の実施形態において、式（Ｖ）の化合物は、構造：
【化１０−１】
2021531249.tif 000023
【化１０−２】
2021531249.tif 000024
【化１０−３】
2021531249.tif 000025
のいずれかを有する化合物である。
【００８８】
式（ＩＶ）又は（Ｖ）の化合物は、以下に示されるように、カルボジイミド（例えば、ＥＤＣ）などのアシルカップリング試薬、或いは、活性化の後、塩化アシル又は混合無水物アシル化剤の存在下で、ヒドロキサム酸ＨＤＡＣ阻害剤のカルボン酸前駆体ＲＣＯ２Ｈ（ＶＩＩＩ）を、糖オキサム化合物（ＩＸ）及び（Ｘ）のそれぞれとカップリングすることによって合成され得る。
【化１１】
2021531249.tif 000026
【００８９】
具体的には、ＳＡＨＡのＯ−β−ガラクトシド誘導体、化合物（２２）は、公知のブロモガラクトシド（２３）：
【化１２−１】
2021531249.tif 000027
【化１２−２】
2021531249.tif 000028
から、Ｔｈｏｍａｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１７（２００７）９８３−９８６の方法にしたがって調製され得る。
【００９０】
β−ガラクトシダーゼを伴う、化合物（２２）のインキュベーションは、（１）への定量的変換を示した。ヒドロキサム酸誘導体化合物のＨＤＡＣ阻害活性が、遊離ヒドロキサム酸部分の亜鉛キレート活性に極めて依存することは周知である（例えば、Ｒｏｃｈｅ  ａｎｄ  Ｂｅｒｔｒａｎｄ、上記を参照）。したがって、式（ＩＶ）又は（Ｖ）の化合物中のグリコシド誘導体としてヒドロキサム酸官能基をマスクすることにより、これらのプロドラッグがＨＤＡＣ阻害剤として不活性であるが、老化細胞のリソソーム中での加水分解により活性化されることを確実にする。
【００９１】
同様に、パノビノスタットのＯ−β−ガラクトシド誘導体、化合物（２６）が、２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチルアミン（２８）（国際出願番号国際公開第０２／２２５７７号パンフレットに記載される）及び例えばフルオレニルメチルオキシカルバメート（Ｆｍｏｃ）誘導体（２９）としての得られる保護されたアミノ酸の塩基性窒素による、４−ホルミルケイ皮酸（２７）の還元的アミノ化によって合成され得る。上述される化合物（２４）とのカップリング、続いて連続的な脱保護により、パノビノスタットプロドラッグ（２６）が得られる。
【化１３−１】
2021531249.tif 000029
【化１３−２】
2021531249.tif 000030
【００９２】
化合物（２６）への代替的な経路において、化合物（２４）は、まず、（例えば、ＥＤＣ、ＨＯＢｔを用いて）（２７）とカップリングされ、得られたアルデヒドが、還元的アミノ化反応においてトリプタミン誘導体（２８）で処理され、アセチル保護基のナトリウムメトキシド媒介性除去により、プロドラッグ（２６）が得られる。
【００９３】
ヒドロキサム酸誘導体ヒストンデアセチラーゼ阻害剤の特定のα−Ｌ−フコシドコンジュゲートが、Ｈｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍａｔｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｆｒｏｎｔ．１（２０１７）６６０−６６７又は米国特許出願公開第２０１５／０１６８３７４号明細書に記載されるように調製される適切に保護及び活性化されたフコース誘導体から出発して、同様の方法で調製され得る。例えば、１−フルオロ−２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−フコース（３０）が、Ｎ−ヒドロキシフタルイミドで処理されて、α及びβ−Ｌ−フコシルオキシム誘導体の混合物が得られ、ここで、所望のαアノマー（３１）は、極性の低い生成物である。次に、ヒドラジンによる脱保護により、α−Ｌ−フコシルオキシム（３２）が得られ、それが、ＳＡＨＡ及びパノビノスタットのα−Ｌ−フコシドプロドラッグ、それぞれ化合物（３３）及び（３５）：
【化１４−１】
2021531249.tif 000031
【化１４−２】
2021531249.tif 000032
へとさらに合成され得る。
【００９４】
Ｈｓｐ９０阻害剤は、レゾルシノール化合物ＡＴ１３３８７（オナレスピブ、（３６）、ＮＹＰ−ＡＵＹ９２２（ルミネスピブ、（３７））、ガネテスピブ（３８）、ＶＥＲ−５０５８９（３９）、ＶＥＲ−４９００９（４０）、ＣＣＴ０１８１５９（４１）及びＫＷ−２４７８（４２）によって例示され、２−（４−アミノシクロヘキサノール）−ベンズアミド誘導体は、ＳＮＸ−２１１２（４３）及び（ＳＮＸ−７０８１）（４４）によって例示される。ある実施形態において、Ｈｓｐ９０阻害剤のＯ−ガラクトシド又はＯ−フコシドコンジュゲートは、老化細胞除去化合物である。他の実施形態において、Ｈｓｐ９０阻害剤のＯ−β−Ｄ−ガラクトシド又はＯ−α−Ｌ−フコシドコンジュゲートは、老化細胞除去化合物である。
【化１５−１】
2021531249.tif 000033
【化１５−２】
2021531249.tif 000034
【化１５−３】
2021531249.tif 000035
【００９５】
ある実施形態において、式（ＸＩ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）又は（ＸＩＶ）の化合物は、老化細胞除去剤：
【化１６】
2021531249.tif 000036
であり、式中、Ｙが、カルボニルであるか又は存在せず；Ａが、少なくとも１つの窒素原子を含有する置換又はベンゾ縮合５員ヘテロアリール又は複素環式基であり；Ｂが、エチル、イソプロピル又はクロロからなる群から選択され；各Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５が、独立して、水素、Ｃ（Ｏ）−Ｒ１、式（ＶＩ）の部分又は式（ＶＩＩ）の部分；
【化１７】
2021531249.tif 000037
であり、各Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ４３、Ｒ４４及びＲ４５が、独立して、水素又は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ２であり；各Ｒ１が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５又はＲ１６の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の残りは、水素又はＣ（Ｏ）−Ｒ１であり；各Ｒ２が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の残りは、水素又は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１である。
【００９６】
式（ＸＩ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）又は（ＸＩＶ）の化合物のある実施形態において、ピラノース環のアノマー炭素（標識される＊）が、Ｓ配置のものであり、この化合物はそれぞれ、レゾルシノールＨｓｐ９０阻害剤のβ−Ｄ−ガラクトシド及びα−Ｌ−フコシドコンジュゲートである。
【００９７】
式（ＸＩ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）又は（ＸＩＶ）の化合物のある実施形態において、部分Ａ−Ｙ−Ｃ６Ｈ２（ＯＨ）２−Ｂは、ルミネスピブ（ＮＶＰ−ＡＵＹ９２２）、ガネテスピブ、ＶＥＲ−５０５８９、ＡＴ１３３８７及びＫＷ−２４７８からなる群から選択されるＨｓｐ９０阻害剤である。
【００９８】
式（ＸＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが水素である。式（ＸＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが水素である。式（ＸＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが水素である。式（ＸＩＶ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが水素である。
【００９９】
式（ＸＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。式（ＸＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。式（ＸＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。式（ＸＩＶ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。
【０１００】
式（ＸＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。式（ＸＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。式（ＸＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。式（ＸＩＶ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。
【０１０１】
式（ＸＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。式（ＸＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。式（ＸＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。式（ＸＩＶ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。
【０１０２】
さらなる実施形態において、式（ＸＩ）の化合物は、構造：
【化１８−１】
2021531249.tif 000038
【化１８−２】
2021531249.tif 000039
のいずれかを有する化合物である。
【０１０３】
さらなる実施形態において、式（ＸＩＩ）の化合物は、構造：
【化１９−１】
2021531249.tif 000040
【化１９−２】
2021531249.tif 000041
のいずれかを有する化合物である。
【０１０４】
さらなる実施形態において、式（ＸＩＩＩ）の化合物は、構造：
【化２０−１】
2021531249.tif 000042
【化２０−２】
2021531249.tif 000043
のいずれかを有する化合物である。
【０１０５】
さらなる実施形態において、式（ＸＩＶ）の化合物は、構造：
【化２１−１】
2021531249.tif 000044
【化２１−２】
2021531249.tif 000045
のいずれかを有する化合物である。
【０１０６】
式（ＸＩ）及び（ＸＩＩＩ）の化合物は、古典的なＢＦ３媒介性グリコシル化又はケーニッヒ・クノールカップリング条件下で、式（ＸＶ）の化合物と保護されたＤ−ガラクトシル供与体部分との反応によって調製され得、ここで、得られた位置異性体は、クロマトグラフィー手段によって分離される。或いは、レゾルシノール化合物（ＸＶ）のフェノール性ヒドロキシル基が、まず、位置選択的グリコシル化を可能にするように選択的に保護され得る。
【化２２】
2021531249.tif 000046
【０１０７】
具体的には、ＡＴ１３３８７（３６）（米国特許第８，７７９，１３２号明細書に記載されるようの調製される）のＯ−β−ガラクトシドコンジュゲート、すなわち、化合物（４６）及び（４７）は、Ｓｈｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｒｅｓ．３４１（２００６）４４３−４５６の方法にしたがって、（３６）と（２３）との反応によって調製され得る。
【化２３】
2021531249.tif 000047
【０１０８】
同様に、ＮＶＰ−ＡＵＹ９２２（３７）（Ｂｒｏｕｇｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５１（２００８）１９６−２１８に記載されるようの調製される）のＯ−β−ガラクトシドコンジュゲート、すなわち、化合物（４８）及び（４９）は、（３７）と（２３）との反応によって調製され得る。
【化２４】
2021531249.tif 000048
【０１０９】
Ｈｓｐ９０阻害剤（３６）及び（３７）の特定のα−Ｌ−フコシドコンジュゲートである化合物（５０）〜（５３）は、保護されたフコース誘導体（４５）から出発して、類似の方法で調製され得る。
【化２５−１】
2021531249.tif 000049
【化２５−２】
2021531249.tif 000050
【０１１０】
ＫＷ−２４７８（４２）のＯ−β−ガラクトシドコンジュゲート（すなわち、化合物（５４）及び（５５））、ＳＮＸ−２１１２（４３）、（すなわち、化合物（５６））及びＳＮＸ−７０８１（４４）（すなわち、化合物（５７））並びにＫＷ−２４７８（４２）のＯ−α−フコシドコンジュゲート（すなわち、化合物（５８）及び（５９））、ＳＮＸ−２１１２（４３）、（すなわち、化合物（６０））及びＳＮＸ−７０８１（４４）（すなわち、化合物（６１））が、類似の方法で調製され得る。
【化２６−１】
2021531249.tif 000051
【化２６−２】
2021531249.tif 000052
【化２６−３】
2021531249.tif 000053
【０１１１】
さらに他の実施形態は、老化細胞除去化合物としてのトポイソメラーゼＩ（ＴＯＰ１）阻害性化合物のＯ−Ｄ−ガラクトシル及びＯ−Ｌ−フコシルコンジュゲートに関する。細胞傷害性五環式キノリンアルカロイド天然産物であるカンプトテシン（６２）が、原型ＴＯＰＩ阻害剤であり、多くの合成類似体（ＳＮ−３８（６３）及びトポテカン（６４）を含む）が、抗癌剤として臨床的に又は前臨床的に研究されている（例えば、Ｊａｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  １８（２０１７）７５−９２；及びＬｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｒｅｖ．３５（２０１５）７５３−７８９を参照）。ＴＯＰ１阻害剤の他の重要な構造的クラスとしては、インデノイソキノリン（化合物（６５）〜（７０）によって例示される（例えば、Ｃｉｎｅｌｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５５（２０１２）１０８４４−１０８６２；及びＬｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５９（２０１６）４８９０−４８９９を参照））及びジベンゾナフチリドン（ｄｉｂｅｎｚｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｏｎｅ）（化合物（７１）〜（７３）によって例示される（例えば、Ｓｏｏｒｙａｋｕｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．．Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．１０（２０１１）１４９０−１４９９を参照））が挙げられる。
【化２７】
2021531249.tif 000054
【０１１２】
ＳＮ−３８のＯ−β−Ｄ−ガラクトシドコンジュゲート（７４）（中国特許番号ＣＮ１５３４０４６号明細書、２００４）及びＳＮ−３８のＯ−β−Ｌ−フコシドコンジュゲート（７５）（日本特許番号ＪＰ６３２８０９８号公報、１９８８）が、抗癌剤として以前に開示されている。
【化２８】
2021531249.tif 000055
【０１１３】
ある実施形態において、式（ＸＶＩ）、（ＸＶＩＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）、（ＸＸ）、（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）、（ＸＸＩＶ）又は（ＸＸＶ）の化合物は、老化細胞除去剤：
【化２９−１】
2021531249.tif 000056
【化２９−２】
2021531249.tif 000057
【化２９−３】
2021531249.tif 000058
【化２９−４】
2021531249.tif 000059
【化２９−５】
2021531249.tif 000060
であり、式中、Ｒ８が、少なくとも１つの窒素原子を含有するヘテロアリール又は複素環式基であり；各Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５が、独立して、水素、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１、式（ＶＩ）の部分又は式（ＶＩＩ）の部分：
【化３０】
2021531249.tif 000061
であり、各Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ４３、Ｒ４４及びＲ４５が、独立して、水素又は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ２であり；各Ｒ１が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５又はＲ１６の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の残りは、水素又はＣ（Ｏ）−Ｒ１であり；各Ｒ２が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の残りは、水素又は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１である。
【０１１４】
式（ＸＶＩ）、（ＸＶＩＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）、（ＸＸ）、（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）、（ＸＸＩＶ）又は（ＸＸＶ）の化合物のある実施形態において、ピラノース環のアノマー炭素（標識される＊）が、Ｓ配置のものであり、この化合物はそれぞれ、ＴＯＰ１阻害剤のβ−Ｄ−ガラクトシド及びα−Ｌ−フコシドコンジュゲートである。式（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）、（ＸＸ）又は（ＸＸＩ）の化合物の他の実施形態において、Ｒ８が、４−モルホリニル又は１−イミダゾリルである。
【０１１５】
式（ＸＶＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが水素である。式（ＸＶＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが水素である。式（ＸＶＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが水素である。式（ＸＩＸ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが水素である。式（ＸＸ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが水素である。式（ＸＸＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが水素である。式（ＸＸＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが水素である。式（ＸＸＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが水素である。式（ＸＸＩＶ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが水素である。式（ＸＸＶ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが水素である。
【０１１６】
式（ＸＶＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。式（ＸＶＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。式（ＸＶＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。式（ＸＩＸ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。式（ＸＸ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。式（ＸＸＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。式（ＸＸＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。式（ＸＸＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。式（ＸＸＩＶ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。式（ＸＸＶ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。
【０１１７】
式（ＸＶＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。式（ＸＶＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。式（ＸＶＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。式（ＸＩＸ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。式（ＸＸ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。式（ＸＸＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。式（ＸＸＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。式（ＸＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。式（ＸＸＩＶ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。式（ＸＸＶ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。
【０１１８】
式（ＸＶＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。式（ＸＶＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。式（ＸＶＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。式（ＸＩＸ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。式（ＸＸ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。式（ＸＸＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。式（ＸＸＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。式（ＸＸＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。式（ＸＸＩＶ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。式（ＸＸＶ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。
【０１１９】
さらに他の実施形態において、細胞傷害性デュオカルマイシンファミリー抗生物質をベースとするＤＮＡアルキル化剤のＯ−Ｄ−ガラクトシル及びＯ−Ｌ−フコシルコンジュゲートが、老化細胞除去剤である。ストレプトマイセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）ＤＯ−１１３から分離されたデュオカルマイシンＳＡ（７６）は、反応性の高いスピロシクロプロピルシクロヘキサジエノン部分を含有し、ガラクトシル化合物（７７）などの単糖及び二糖誘導体の設計のための刺激（ｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ）として使用されている（例えば、Ｔｉｅｔｚｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．４５（２００６）６５７４−６５７７；Ｔｉｅｔｚｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５２（２００９）５３７−５４３を参照）。化合物（７７）は、その加水分解された二次生成物（ｓｅｃｏ  ｐｒｏｄｕｃｔ）（７８）より４０００倍超細胞傷害性が低く、それは、インサイチュでのいわゆるＷｉｎｓｔｅｉｎ環化を経て、ＤＮＡ反応性スピロシクロプロピルシクロヘキサジエノン（７９）を生じる。
【化３１】
2021531249.tif 000062
【０１２０】
ある実施形態において、式（ＸＸＶＩ）又は（ＸＸＶＩＩ）の化合物は、老化細胞除去剤：
【化３２】
2021531249.tif 000063
であり、式中、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが、独立して、水素、Ｃ（Ｏ）−Ｒ１、式（ＶＩ）の部分又は式（ＶＩＩ）の部分：
【化３３】
2021531249.tif 000064
であり、各Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ４３、Ｒ４４及びＲ４５が、独立して、水素又は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ２であり；各Ｒ１が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５又はＲ１６の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の残りは、水素又はＣ（Ｏ）−Ｒ１であり；各Ｒ２が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の残りは、水素又は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり；ただし、式（ＸＸＶＩ）の化合物において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６のそれぞれが、同時に水素又はアセチルであることはない。
【０１２１】
式（ＸＸＶＩ）又は（ＸＸＶＩＩ）の化合物のある実施形態において、ピラノース環のアノマー炭素（標識される＊）が、Ｓ配置のものであり、この化合物はそれぞれ、デュオカルマイシン類似体のβ−Ｄ−ガラクトシド及びα−Ｌ−フコシドコンジュゲートである。
【０１２２】
式（ＸＸＶＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが水素である。式（ＸＸＶＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが水素である。
【０１２３】
式（ＸＸＶＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。式（ＸＸＶＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。
【０１２４】
式（ＸＸＶＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。式（ＸＸＶＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。
【０１２５】
式（ＸＸＶＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。式（ＸＸＶＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。
【０１２６】
式（ＸＸＶＩＩ）の化合物のある実施形態において、化合物（８０）は、化合物（８１）（Ｔｉｅｔｚｅ  ｅｔ  ａｌ．、同前の方法にしたがって調製される）：
【化３４】
2021531249.tif 000065
から合成される。
【０１２７】
さらに他の実施形態は、老化細胞除去剤としての細胞傷害性ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）のＯ−Ｄ−ガラクトシル及びＯ−Ｌ−フコシルコンジュゲートに関する。ＰＢＤは、天然産物アントラマイシン（８５）を含む抗腫瘍抗生物質のファミリーである。これらの化合物は、それらのＮ１０−Ｃ１１イミン官能基を介してＤＮＡの副溝中のグアニン残基の環外ＮＨ２基に共有結合することによってそれらの細胞傷害効果を発揮する（例えば、Ａｎｔｏｎｏｗ  ａｎｄ  Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１１１（２０１１）２８１５−２８６４；及びＭａｎｔａｊ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．５６（２０１７）４６２−４８８を参照）。ＰＢＤモノマーは、顕著な細胞毒性を示し、リンカーを介して２つのＰＢＤモノマーを結合することにより、鎖間ＤＮＡ架橋が可能なＰＢＤ二量体が生成される。ＳＪＧ−１３６（８６）は、臨床的有用性を有する抗体−薬物コンジュゲートを構築するのに使用されている、高い細胞傷害性効力を有する１つのこのような二量体である。
【化３５】
2021531249.tif 000066
【０１２８】
Ｋａｍａｌ及び共同研究者は、抗癌剤としてＰＢＤモノマー及び二量体の両方のβ−ガラクトシド類似体を記載している（例えば、化合物（８７）及び（８８）（Ｋａｍａｌ  ｅｔ  ａｌ．，ＣｈｅｍＭｅｄＣｈｅｍ  ３（２００８）７９４−８０２）を参照）。
【化３６−１】
2021531249.tif 000067
【化３６−２】
2021531249.tif 000068
【０１２９】
ある実施形態において、式（ＸＸＶＩＩＩ）又は（ＸＸＩＸ）の化合物は、老化細胞除去剤：
【化３７】
2021531249.tif 000069
であり、式中、Ｒ９が、水素、Ｃ１〜４アルキル、ＣＦ３、ＣＮ又はＮＯ２であり；Ｒ１０が、水素、Ｃ１〜４アルキル又はアリールアルキルであり；Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが、独立して、水素、Ｃ（Ｏ）−Ｒ１、式（ＶＩ）の部分又は式（ＶＩＩ）の部分：
【化３８】
2021531249.tif 000070
であり、各Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ４３、Ｒ４４及びＲ４５が、独立して、水素又はＣ（Ｏ）−Ｒ２であり、各Ｒ１が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、又はＲ１６の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の残りは、水素又はＣ（Ｏ）−Ｒ１であり；各Ｒ２が、独立して、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルであり、ただし、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の１つが、式（ＶＩ）又は式（ＶＩＩ）の部分である場合、Ｒ２３、Ｒ２４又はＲ２５の残りは、水素又はＣ（Ｏ）−Ｒ１であり；ただし、式（ＸＸＶＩＩＩ）の化合物において、Ｒ９がＮＯ２であり、Ｒ１０がベンジルである場合、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６のそれぞれが、同時に水素又はアセチルであることはない。
【０１３０】
式（ＸＸＶＩＩＩ）又は（ＸＸＩＸ）の化合物のある実施形態において、ピラノース環のアノマー炭素（標識される＊）が、Ｓ配置のものであり、この化合物はそれぞれ、ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン類似体のβ−Ｄ−ガラクトシド及びα−Ｌ−フコシドコンジュゲートである。
【０１３１】
式（ＸＸＶＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが水素である。式（ＸＸＩＸ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが水素である。
【０１３２】
式（ＸＸＶＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。式（ＸＸＩＸ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが、独立して、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル又はフェニルである。
【０１３３】
式（ＸＸＶＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。式（ＸＸＩＸ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がメチルである。
【０１３４】
式（ＸＸＶＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。式（ＸＸＩＸ）の化合物のある実施形態において、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５のそれぞれが−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ここで、Ｒ１がエチルである。
【０１３５】
式（ＸＸＶＩＩＩ）の化合物のある実施形態において、化合物（８９）は、化合物（９０）（Ｋａｍａｌ  ｅｔ  ａｌ．、同前の方法にしたがって調製される）：
【化３９−１】
2021531249.tif 000071
【化３９−２】
2021531249.tif 000072
から合成される。
【０１３６】
具体的には、式（ＸＸＩＸ）の化合物の一実施形態として、化合物（９１）は、同等の合成手法を用いて、化合物（９０）から調製される。
【化４０】
2021531249.tif 000073
【０１３７】
さらに他の実施形態において、Ａｋｔ阻害剤のＯ−ガラクトシド又はＯ−フコシドコンジュゲートが、老化細胞除去剤である。このようなコンジュゲートの調製に有用なＡｋｔ阻害剤は、イパタセルチブ（又はＧＤＣ−００６８）（９２）、ＡＺＤ５３６３（９３）及びトリシリビン（９４）などの化合物によって例示される。ある実施形態において、Ａｋｔ阻害剤のＯ−β−Ｄ−ガラクトシド又はＯ−α−Ｌ−フコシドコンジュゲートが、老化細胞除去剤である。
【化４１−１】
2021531249.tif 000074
【化４１−２】
2021531249.tif 000075
【０１３８】
特定の化合物は、本明細書において前に開示される方法にしたがって調製される、化合物（９５）〜（１００）（式中、各Ｒ４６が、水素、アセチル又はプロピオニルのいずれかである）：
【化４２−１】
2021531249.tif 000076
【化４２−２】
2021531249.tif 000077
【化４２−３】
2021531249.tif 000078
によって例示される。
【０１３９】
ある実施形態において、５−フルオロウリジン−５’−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（ＦＵＲＧａｌ）（１０１）によって例示される式（Ｉ）の化合物は、老化細胞において豊富な細胞内β−ガラクトシダーゼ（すなわち、ＳＡ−β−Ｇａｌ）の作用によって、式（ＩＩ）のアポトーシス促進化合物、特に、細胞毒素５−フルオロウリジン（ＦＵＲ）（１０２）に変換される。
【化４３】
2021531249.tif 000079
【０１４０】
別の実施形態において、５−フルオロウリジン−５’−Ｏ−α−Ｌ−フコピラノシド（ＦＵＲＦｕｃ）（１０６）によって例示される式（Ｉ）の化合物は、老化細胞において豊富な細胞内α−フコシダーゼの作用によって、式（ＩＩ）のアポトーシス促進化合物、特に、細胞毒素５−フルオロウリジン（ＦＵＲ）（１０２）に変換される。
【化４４】
2021531249.tif 000080
【０１４１】
さらに他の実施形態において、プロテアソーム阻害剤のＯ−ガラクトシド又はＯ−フコシドコンジュゲートが、老化細胞除去剤である。このようなコンジュゲートの調製に有用なプロテアソーム阻害剤は、デランゾミブ（１０３）などの化合物によって例示される。ある実施形態において、Ｏ−β−Ｄ−ガラクトシド又はＯ−α−Ｌ−フコシドコンジュゲート（１０４）及び（１０５）が、老化細胞除去剤である。
【化４５−１】
2021531249.tif 000081
【化４５−２】
2021531249.tif 000082
【０１４２】
老化細胞除去剤を特徴付け及び同定するための方法
老化細胞除去剤を特徴付けることは、本明細書又は当該技術分野で記載され、当業者が周知であろう１つ以上の細胞ベースのアッセイ及び１つ以上の動物モデルを用いて決定され得る。老化細胞除去剤は、老化細胞（例えば、老化前脂肪細胞、老化内皮細胞、老化線維芽細胞、老化ニューロン、老化上皮細胞、老化間葉細胞、老化平滑筋細胞、老化マクロファージ、又は老化軟骨細胞）の１つ以上のタイプを選択的に死滅させ得る。特定の実施形態において、老化細胞除去剤は、少なくとも老化線維芽細胞を選択的に死滅させることができる。
【０１４３】
化合物を老化細胞除去剤として特徴付けることは、本明細書又は当該技術分野で記載される１つ以上の細胞ベースのアッセイ及び１つ以上の動物モデルを用いて行われ得る。当業者は、化合物を老化細胞除去剤として特徴付けること及び化合物によって死滅させるレベルを決定することが、検査薬の活性を、適切な陰性対照（例えば、ビヒクル若しくは希釈剤のみ及び／又は老化細胞を死滅させないことが当該技術分野において知られている組成物若しくは化合物）及び適切な陽性対照と比較することによって行われ得ることを容易に理解するであろう。老化細胞除去剤を特徴付けるためのインビトロの細胞ベースのアッセイは、非老化細胞（例えば、静止細胞又は増殖細胞）に対する薬剤の効果を決定するための対照も含む。老化細胞除去剤は、１つ以上の陰性対照と比較して、複数の老化細胞の生存率パーセントを低下させる（すなわち、減少させる）（すなわち、ある方法において、動物において又は細胞ベースのアッセイにおいて生存可能な老化細胞の量を減少させる）。特定のインビトロのアッセイのための条件は、温度、緩衝液（塩、カチオン、培地を含む）、及びアッセイに使用される検査薬及び試薬の完全性を維持する、当業者に周知である及び／又は日常的な実験によって容易に決定され得る他の要素を含む。
【０１４４】
アッセイに使用するための老化細胞の供給源は、初代細胞培養、又は染色体に組み込まれた若しくはエピゾームの組み換えの核酸配列を含み得る遺伝子組み換え細胞株、不死化した若しくは不死化可能な細胞株、体細胞雑種細胞株、分化した若しくは分化可能な細胞株、形質転換された細胞株などを含むがこれらに限定されない、培養に適応した細胞株であり得る。ある実施形態において、老化細胞は、疾患又は障害に関連する老化細胞を有する宿主又は対象から得られる生体サンプルから分離される。他の実施形態において、非老化細胞は、放射線照射又は化学療法剤（例えば、ドキソルビシン）への曝露などによって、本明細書及び当該技術分野で記載される方法によって、使用され（例えば、対象から得られる初代細胞又は培養物中で成長させるのに適応された細胞株）、老化が誘発される。生体サンプルは、例えば、血液サンプル、生検材料、体液（例えば、肺洗浄、腹水、粘膜洗浄液、滑液など）、骨髄、リンパ節、組織外植片、器官培養、又は対象から得られる任意の他の組織若しくは細胞調製物であり得る。生体サンプルは、形態学的完全性又は身体状態が、例えば、解剖、解離、可溶化、分画、均質化、生化学的若しくは化学的な抽出、粉末化、凍結乾燥、超音波処理、又は対象若しくは生物学的供給源に由来するサンプルを処理するための任意の他の手段によって破壊されている、組織又は細胞調製物であり得る。対象は、ヒト又は非ヒト動物であり得る。例として、培養培地中のヒト線維芽細胞に対する本発明の特定の化合物の老化細胞除去効果は、本明細書の実施例２３において特徴付けられ、マウス胚性線維芽細胞に対する効果は本明細書の実施例２４において特徴付けられる。実施例２６及び２７は、本発明の老化細胞除去化合物のインビボ投与が、マウスにおける老化肝細胞の減少をもたらすことを実証している。実施例２８は、本発明の老化細胞除去化合物のインビボ投与が、マウスにおける老化肺細胞の減少をもたらすことを実証している。
【０１４５】
本明細書又は当該技術分野で記載されるトランスジェニック動物モデルは、老化細胞の死滅又は除去を決定するのに使用され得る（例えば、Ｂａｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．、上記；Ｎａｔｕｒｅ，４７９（２０１１）２３２−２３６；国際出願番号国際公開第２０１２／１７７９２７号パンフレット；国際出願番号国際公開第２０１３／０９０６４５号パンフレットを参照）。例示的なトランスジェニック動物モデルは、陽性対照としての老化細胞（例えば、ｐｌ６ＩＮＫ４ａ陽性老化細胞）の制御されたクリアランスを可能にする核酸を含む導入遺伝子を含有する。トランスジェニック動物中の老化細胞の存在及びレベルは、動物の老化細胞において発現される検出可能な標識のレベルを測定することによって決定され得る。導入遺伝子のヌクレオチド配列は、老化細胞のクリアランスを検出するために、検出可能な標識、例えば、赤色蛍光タンパク質；緑色蛍光タンパク質；及び１つ以上のルシフェラーゼのうちの１つ以上を含む。
【０１４６】
本明細書又は当該技術分野で記載される動物モデルは、アテローム性動脈硬化症モデル、変形性関節症モデル、ＣＯＰＤモデル、ＩＰＦモデルなどの特定の老化関連の疾患又は障害を治療又は予防する（すなわち、その発症の可能性を低下させる）ための老化細胞除去剤の有効性を決定するための当該技術分野で承認されたモデルを含む。本明細書に記載されるように、ブレオマイシン肺線維症モデルなどの肺疾患マウスモデル、及び慢性の喫煙モデルは、ＣＯＰＤなどの疾患に適用可能であり、当業者によって日常的に実施され得る。化学療法及び放射線療法の副作用モデルを治療及び／又は予防する（すなわち、その発症の可能性を低下させる）、又は転移を治療又は予防する（すなわち、その発症の可能性を低下させる）ための老化細胞除去剤の有効性を決定するための動物モデルは、国際出願番号国際公開第２０１３／０９０６４５号パンフレット及び国際公開第２０１４／２０５２４４号パンフレットに記載されている。眼疾患、特に、加齢性黄斑変性症を治療するための薬剤の有効性を決定するための動物モデルはまた、当該技術分野で日常的に使用される（例えば、Ｐｅｎｎｅｓｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ａｓｐｅｃｔｓ  Ｍｅｄ．３３（２０１２）４８７−５０９；Ｚｅｉｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｖｅｔ．Ｐａｔｈｏｌ．４７（２０１０）３９６−４１３；及びＣｈａｖａｌａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１２３（２０１３）４１７０−４１８１を参照）。
【０１４７】
限定しない例として及び本明細書に記載されるように、変形性関節症動物モデルが、開発されている。変形性関節症は、例えば、前十字靱帯の不完全又は完全な外科的切断によって、例えば、膝において関節への損傷を引き起こすことによって、動物において誘発され得る。変形性関節症動物モデルは、変形性関節症を治療又は予防する（すなわち、その発症の可能性を低下させる）、プロテオグリカン侵食の減少を引き起こす、コラーゲン（ＩＩ型コラーゲンなど）産生を引き起こす（すなわち、刺激、増強する）、及びＡＣＬ手術を受ける動物の疼痛を軽減するための老化細胞除去剤の有効性を評価するために使用され得る。免疫組織学が、関節中の組織及び細胞の完全性及び組成を調べるために行われ得る。当業者によって日常的に実施され得る本明細書に記載される方法及び技術を用いて、炎症分子（例えば、ＩＬ−６）のレベルを決定するためのアッセイ及び上述されるような老化マーカーのレベルを決定するためのアッセイなどの免疫化学及び／又は分子生物学の技術も行われ得る。
【０１４８】
別の限定しない例として及び本明細書に記載されるように、アテローム性動脈硬化症動物モデルが、開発されている。アテローム性動脈硬化症は、動物、例えば、動物に高脂肪食を与えることによって又はアテローム性動脈硬化症を高度に発症しやすいトランスジェニック動物を使用することによって誘発され得る。動物モデルは、アテローム性動脈硬化の動脈においてプラークの量を減少させる又はプラークの形成を阻害する、アテローム性動脈硬化プラークの脂質含有量を減少させる（すなわち、プラーク中の脂質の量を減少させる、低減する）、及びプラークの線維性被膜厚さを増大させるか又は増強するための老化細胞除去剤の有効性を決定するために使用され得る。アテローム性動脈硬化血管における脂質のレベルを検出するために、ズダン染色が使用され得る。免疫組織学及び免疫化学及び分子生物学アッセイ（例えば、炎症分子（例えば、ＩＬ−６）のレベルを決定するための、及び上述されるような老化マーカーのレベルを決定するための）は全て、当該技術分野で日常的に実施される本明細書に記載される方法にしたがって行われ得る。
【０１４９】
さらに別の限定しない例として、及び本明細書に記載されるように、動物がブレオマイシンで処置されるマウスモデルが、ＩＰＦを処置するための薬剤の有効性を決定するために記載されている（例えば、Ｐｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ  ８（４）（２０１３）ｅ５９３４８．ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００５９３４８；Ｍｏｕｒａｔｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｕｌｍ．Ｍｅｄ．１７（２０１１）３５５−３６１を参照）。肺疾患動物モデル（例えば、ブレオマイシン動物モデル、喫煙曝露の動物モデルなど）において、エラスタンス、コンプライアンス（ｃｏｍｐｌｉａｎｃｅ）、静的コンプライアンス、及び末梢毛細血管の酸素飽和度（ＳｐＯ２）を決定するために、呼吸の測定が行われ得る。免疫組織学及び免疫化学及び分子生物学アッセイ（例えば、炎症分子（例えば、ＩＬ−６）のレベルを決定するための、及び上述されるような老化マーカーのレベルを決定するための）は全て、当該技術分野で日常的に実施される本明細書に記載される方法にしたがって行われ得る。
【０１５０】
動物モデルにおいて本明細書に記載されるような老化細胞を選択的に死滅させるための老化細胞除去剤の有効性を決定することは、当業者が周知であろう１つ以上の統計分析を用いて行われ得る。例として、二元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）などの統計分析が、薬剤で処理された動物群と薬剤で処理されていない動物群（すなわち、ビヒクルのみ及び／又は非老化細胞除去剤を含み得る陰性対照群）との間の差異の統計的有意性を決定するために使用され得る。ＳＰＳＳ、ＭＩＮＩＴＡＢ、ＳＡＳ、Ｓｔａｔｉｓｔｉｋａ、Ｇｒａｐｈｐａｄ、ＧＬＩＭ、Ｇｅｎｓｔａｔ、及びＢＭＤＰなどの統計パッケージは、容易に入手可能であり、動物モデルの技術分野の当業者によって日常的に使用される。
【０１５１】
当業者は、老化細胞除去剤を特徴付けること及び老化細胞除去剤による死滅のレベルを決定することが、検査薬の活性を、適切な陰性対照（例えば、ビヒクルのみ及び／又は老化細胞を死滅させないことが当該技術分野において知られている組成物、薬剤、又は化合物）及び適切な陽性対照と比較することによって行われ得ることを容易に理解するであろう。薬剤を特徴付けるためのインビトロの細胞ベースのアッセイは、非老化細胞（例えば、静止細胞又は増殖細胞）に対する薬剤の効果を決定するための対照も含む。有用な老化細胞除去剤は、１つ以上の陰性対照と比較して老化細胞の生存率パーセントを低下させる（すなわち、減少させる）（すなわち、ある方法において、動物において又は細胞ベースのアッセイにおいて生存可能な老化細胞の量を減少させる）。したがって、老化細胞除去剤は、非老化細胞の死滅と比較して老化細胞を選択的に死滅させる（これは、本明細書において、非老化細胞より老化細胞を選択的に死滅させると示され得る）。
【０１５２】
特定の実施形態において（インビトロアッセイ又はインビボのいずれかで（ヒト又は非ヒト動物において））、少なくとも１つの老化細胞除去剤は、老化細胞の少なくとも２０％を死滅させ、非老化細胞の５％以下を死滅させる。他の実施形態において（インビトロアッセイ又はインビボのいずれかで（ヒト又は非ヒト動物において））、少なくとも１つの老化細胞除去剤は、老化細胞の少なくとも約２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、又は６５％を死滅させ、非老化細胞の約５％又は１０％以下を死滅させる。さらに他の実施形態において（インビトロアッセイ又はインビボのいずれかで（ヒト又は非ヒト動物において））、少なくとも１つの老化細胞除去剤は、老化細胞の少なくとも約３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、又は６５％を死滅させ、非老化細胞の約５％、１０％、又は１５％以下を死滅させる。さらに他の実施形態において（インビトロアッセイ又はインビボのいずれかで（ヒト又は非ヒト動物において））、少なくとも１つの老化細胞除去剤は、老化細胞の少なくとも約４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、又は６５％を死滅させ、非老化細胞の約５％、１０％、１５％、２０％、又は２５％以下を死滅させる。さらに他の実施形態において（インビトロアッセイ又はインビボのいずれかで（ヒト又は非ヒト動物において））、少なくとも１つの老化細胞除去剤は、老化細胞の少なくとも約５０％、５５％、６０％、又は６５％を死滅させ、非老化細胞の約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、又は３０％以下を死滅させる。言い換えると、老化細胞除去剤は、非老化細胞より老化細胞の死滅に対する少なくとも５〜２５、１０〜５０、１０〜１００又は１００〜１０００倍高い選択性を有する。
【０１５３】
老化関連の疾患又は障害を治療するための本明細書に記載される方法の特定の実施形態に関して、死滅された老化細胞パーセントは、疾患又は障害の発症、進行、及び／又は悪化に寄与する老化細胞を含む組織又は器官において死滅された老化細胞パーセントを指し得る。限定しない例として、脳の組織、眼の組織及び部分、肺組織、心臓組織、動脈、関節、皮膚、及び筋肉は、本明細書に記載される老化細胞除去剤によって上述されるようなパーセントで減少され、それによって治療効果をもたらし得る、老化細胞を含み得る。さらに、罹患した組織又は器官から老化細胞の少なくとも２０％又は少なくとも２５％を選択的に除去することは、臨床的に有意な治療効果を有し得る。
【０１５４】
老化細胞除去剤を投与することによって、例えば、アテローム性動脈硬化症などの、動脈硬化に関連する心血管疾患又は障害を治療するための本明細書に記載される方法の特定の実施形態に関して（すなわち、上記のインビボの方法に関して）、死滅される老化細胞パーセントは、動脈プラークにおいて死滅された非老化細胞に対する、プラークを含有する罹患した動脈において死滅された老化細胞パーセントを指し得る。特定の実施形態において、本明細書で記載されるような、アテローム性動脈硬化症などの心血管疾患を治療するための方法において、少なくとも１つの老化細胞除去剤は、老化細胞の少なくとも２０％を死滅させ、動脈において非老化細胞の５％以下を死滅させる。他の実施形態において、老化細胞除去剤は、動脈硬化の動脈において老化細胞の少なくとも２５％を選択的に死滅させる。
【０１５５】
ある実施形態において、老化細胞除去剤を投与することによって、変形性関節症を治療するための本明細書に記載される方法に関して、死滅される老化細胞パーセントは、骨関節炎の関節において死滅された非老化細胞に対する、骨関節炎の関節において死滅された老化細胞パーセントを指し得る。特定の実施形態において、本明細書に記載されるような変形性関節症を治療するための方法において、少なくとも１つの老化細胞除去剤は、骨関節炎の関節において老化細胞の少なくとも２０％を死滅させ、非老化細胞の５％以下を死滅させる。他の実施形態において、老化細胞除去剤は、骨関節炎の関節において老化細胞の少なくとも２５％を選択的に死滅させる。
【０１５６】
ある実施形態において、少なくとも１つの老化細胞除去剤を投与することによって、老化関連の肺疾患又は障害（例えば、ＣＯＰＤ、ＩＰＦ）を治療するための本明細書に記載される方法に関して、死滅される老化細胞パーセントは、肺の罹患した肺組織において死滅された非老化細胞に対する、罹患した肺組織において死滅された老化細胞のパーセントを指し得る。特定の実施形態において、本明細書に記載されるような老化関連の肺疾患及び障害を治療するための方法において、老化細胞除去剤は、罹患した肺組織において老化細胞の少なくとも２０％を死滅させ、非老化細胞の５％以下を死滅させる。他の実施形態において、老化細胞除去剤は、罹患した肺組織において老化細胞の少なくとも２５％を選択的に死滅させる。
【０１５７】
特定の実施形態において、老化関連の疾患又は障害を治療又は予防する（すなわち、その発症の可能性を低下させる）ための有用な老化細胞除去剤である薬剤を同定する（すなわち、スクリーニングする）ための方法が提供される。ある実施形態において、このような疾患及び障害を治療するための老化細胞除去剤を同定するための方法は、確立された老化細胞を提供するために細胞に老化を誘発する工程を含む。細胞の老化に誘発するための方法は、本明細書及び当該技術分野で記載され、例えば、放射線（例えば、１０Ｇｙが典型的に十分である）又は化学療法剤（例えば、ドキソルビシン若しくは他のアントラサイクリン）への曝露を含む。薬剤への曝露後、細胞は、適切な時間にわたって及び適切な条件（例えば、所与の細胞型又は細胞株に適切な培地、温度、ＣＯ２／Ｏ２レベル）下で培養されて、老化を確立させる。本明細書に説明されるように、細胞の老化は、形態の変化（例えば、顕微鏡によって見られる）；例えば、老化に関連するβ−ガラクトシダーゼ（ＳＡ−β−ｇａｌ）、ｐ１６ＩＮＫ４ａ、ｐ２１、又はいずれか１つ以上のＳＡＳＰ因子（例えば、ＩＬ−６、ＭＭＰ３）の産生などの任意の数の特性を決定することによって決定され得る。次に、老化細胞のサンプルが、候補薬剤と接触される（すなわち、混合される、組み合わされる、又は何らかの形で細胞及び薬剤が相互作用するのを可能にする）。当業者は、アッセイが、過去か又は現在に行われるかのいずれかで、適切な陰性対照及び陽性対照を含むことを認識するであろう。例えば、老化細胞と同様に培養されたが、老化誘発剤に曝されなかった対照非老化細胞のサンプルが、候補薬剤と接触される。老化細胞の生存のレベルが決定され、非老化細胞の生存のレベルと比較される。老化細胞除去剤は、老化細胞の生存のレベルが、非老化細胞の生存のレベル未満であるときに同定される。
【０１５８】
ある実施形態において、老化細胞除去剤を同定するための上述される方法は、老化細胞除去剤が変形性関節症を治療するのに有用であるかどうかを同定するための工程をさらに含み得る。本方法は、同定された老化細胞除去剤を、コラーゲンを産生することが可能な細胞と接触させる工程と；細胞によって産生されたコラーゲンのレベルを決定する工程とをさらに含み得る。実施形態、細胞は、軟骨細胞であり、コラーゲンは、ＩＩ型コラーゲンである。本方法は、候補老化細胞除去剤を、関節に関節炎病変を有する非ヒト動物に投与する工程と、（ａ）関節における老化細胞のレベル；（ｂ）動物の身体機能；（ｃ）炎症の１つ以上のマーカーのレベル；（ｄ）関節の組織構造；及び（ｅ）産生されるＩＩ型コラーゲンのレベルのうちの１つ以上を決定し、それによって、老化細胞除去剤の治療効果を決定する工程とをさらに含み得、ここで、以下の１つ以上が、老化細胞除去剤で処理されていない動物と比較して、処理された動物において観察される：（ｉ）処理された動物の関節における老化細胞のレベルの低下；（ｉｉ）処理された動物の身体機能の改善；（ｉｉｉ）処理された動物における炎症の１つ以上のマーカーのレベルの低下；（ｉｖ）処理された動物の関節における組織学的正常性の増大；及び（ｖ）処理された動物において産生されたＩＩ型コラーゲンのレベルの増加。本明細書及び当該技術分野で記載されるように、動物の身体機能は、例えば、罹患した肢への重量に耐える動物の耐性又は熱又は冷たさなどの不快な刺激から逃れる動物の能力によって、誘発された又は天然の骨関節炎の疾患に対する脚の感受性を決定する技術によって決定され得る。動物モデルにおいて本明細書に記載されるような老化細胞を死滅させる薬剤の有効性を決定することは、当業者が周知であろう１つ以上の統計分析を用いて行われ得る。本明細書に記載され、当該技術分野で日常的に実施される統計分析が、データを分析するのに適用され得る。
【０１５９】
他の実施形態において、老化細胞除去剤を同定するための上述される方法は、老化細胞除去剤が動脈硬化によって引き起こされるか又はそれに関連する心血管疾患を治療するのに有用であるかどうかを同定するための工程をさらに含み得る。したがって、本方法は、プラークの量を減少させる、アテローム性動脈硬化の動脈におけるプラークの形成を阻害する、アテローム性動脈硬化プラークの脂質含有量を減少させる（すなわち、プラークにおける脂質の量を減少させる、低減する）、及び／又はプラークの線維性被膜厚さを増大させるか又は増強するための薬剤の有効性を決定するために、非ヒト動物又は動物モデルに候補老化細胞除去薬剤を投与する工程をさらに含み得る。アテローム性動脈硬化血管における脂質のレベルを検出するために、ズダン染色が使用され得る。免疫組織学、炎症分子（例えば、ＩＬ−６）のレベルを決定するためのアッセイ、及び／又は上述されるような老化マーカーのレベルを決定するためのアッセイである、免疫組織学的検査は全て、本明細書に記載され、当該技術分野で日常的に実施される方法にしたがって行われ得る。
【０１６０】
特定の実施形態において、老化細胞除去剤を同定するための本明細書に記載される方法は、アテローム性動脈硬化プラークを有する非ヒト動物に候補老化細胞除去剤を投与する工程と、（ａ）動脈における老化細胞のレベル；（ｂ）動物の身体機能（ｃ）炎症の１つ以上のマーカーのレベル；（ｄ）罹患した血管（例えば、動脈）の組織構造のうちの１つ以上を決定し；それによって、老化細胞除去剤の治療効果を決定する工程とをさらに含み得、ここで、以下の１つ以上が、老化細胞除去剤で処理されていない動物と比較して、処理された動物において観察される：（ｉ）処理された動物の動脈における老化細胞のレベルの低下；（ｉｉ）処理された動物の身体機能の改善；（ｉｉｉ）処理された動物における炎症の１つ以上のマーカーのレベルの低下；（ｉｖ）処理された動物の動脈における組織学的正常性の増大。本明細書及び当該技術分野で記載されるように、動物の身体機能は、身体活動を測定することによって決定され得る。本明細書に記載され、当該技術分野で日常的に実施される統計分析が、データを分析するのに適用され得る。
【０１６１】
ある実施形態において、老化細胞除去剤を同定するための本明細書に記載される方法は、ブレオマイシンモデル又は喫煙曝露の動物モデルなどの非ヒト動物肺疾患モデルに候補老化細胞除去剤を投与する工程と、（ａ）肺における老化細胞のレベル；（ｂ）動物の肺機能；（ｃ）炎症の１つ以上のマーカーのレベル；（ｄ）肺組織の組織構造のうちの１つ以上を決定し、それによって、老化細胞除去剤の治療効果を決定する工程とをさらに含み得、ここで、以下の１つ以上が、老化細胞除去剤で処理されていない動物と比較して、処理された動物において観察される：（ｉ）処理された動物の肺及び肺組織における老化細胞のレベルの低下；（ｉｉ）処理された動物の肺機能の改善；（ｉｉｉ）処理された動物における炎症の１つ以上のマーカーのレベルの低下；及び（ｉｖ）処理された動物の肺組織における組織学的正常性の増大。エラスタンス、コンプライアンス、静的コンプライアンス、及び末梢毛細血管の酸素飽和度（ＳｐＯ２）を決定するために、呼吸の測定が行われ得る。肺機能は、予備呼気量（ＥＲＶ）、努力肺活量（ＦＶＣ）、努力呼気肺活量（ＦＥＶ）（例えば、１秒でのＦＥＶ、ＦＥＶ１）、ＦＥＶ１／ＦＥＶ比率、努力呼気流量２５％〜７５％、及び最大換気量（ＭＶＶピーク呼気流量（ＰＥＦ）、遅い肺活量（ＳＶＣ）などの多くの測定のいずれかを決定することによって評価され得る。全肺気量は、全肺活量（ＴＬＣ）、肺活量（ＶＣ））、残気量（ＲＶ）、及び機能的残気量（ＦＲＣ）を含む。肺胞毛細血管膜にわたるガス交換は、一酸化炭素拡散能（ＤＬＣＯ）を用いて測定され得る。末梢毛細血管の酸素飽和度（ＳｐＯ２）も測定され得る。本明細書に記載され、当該技術分野で日常的に実施される統計分析が、データを分析するのに適用され得る。
【０１６２】
老化関連の疾患及び障害の治療及び予防方法
必要としている対象において、加齢関連の疾患及び障害を含む、細胞老化に関係する、関連する、又はそれによって引き起こされる病態、疾患、又は障害を治療するための方法が、本明細書において提供される。老化関連の疾患又は障害は、本明細書において、老化細胞に関連する疾患又は障害とも呼ばれ得る。老化関連の疾患及び障害としては、例えば、老化によって引き起こされる、加齢関連の疾患及び障害；肺疾患及び障害；神経疾患及び障害（例えば、神経変性疾患及び障害）；眼疾患及び障害；代謝性疾患及び障害；心血管疾患及び障害；炎症性疾患及び障害；自己免疫疾患及び障害；皮膚疾患及び障害；皮膚疾患；加齢関連の疾患；並びに移植に関連する疾患及び障害が挙げられる。老化の顕著な特徴は、漸進的な機能低下、又は分子、細胞、組織、及び有機体レベルで生じる変性である。加齢関連の変性は、よく認識された病変、例えば、サルコペニア、アテローム性動脈硬化症及び心不全、骨粗鬆症、肺機能不全、腎不全、神経変性（黄斑変性症、アルツハイマー病、及びパーキンソン病を含む）、並びに多くのその他の病変を引き起こす。異なる哺乳動物種は、特定の加齢関連の病変に対するそれらの感受性が異なるが、集合的に、加齢関連の病変は、一般に、種特異的な寿命のおよその中間点（例えば、ヒトでは５０〜６０歳）から開始するおよその指数関数的な動態（ｅｘｐｏｎｅｎｔｉａｌ  ｋｉｎｅｔｉｃ）とともに増加する（例えば、Ｃａｍｐｉｓｉ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．７５（２０１３）６８５−７０５；Ｎａｙｌｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．９３（２０１３）１０５−１１６を参照）。
【０１６３】
本明細書に記載される方法にしたがって本明細書に記載される老化細胞除去剤を投与することによって治療され得る、老化関連の病態、疾患、又は障害の例としては、老化関連の疾患及び障害（例えば、後彎症、腎機能障害、フレイル、脱毛、聴力低下、筋肉疲労、皮膚疾患、サルコペニア、及び椎間板ヘルニア）並びに老化によって引き起こされる他の加齢関連の疾患（例えば、放射線照射、化学療法、喫煙、高脂肪／高糖質食の摂取、及び環境要因に起因する疾患／障害）；肺疾患（例えば、特発性肺線維症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、気腫、閉塞性細気管支炎、喘息）；癌及び転移を含む増殖性疾患；化学療法又は放射線療法に関連する副作用；線維症及び線維性障害（例えば、嚢胞性線維症、腎線維症、肝線維症、肺線維症、口腔粘膜下線維症、心筋繊維化、及び膵臓線維症）；認知疾患（例えば、軽度認知障害（ＭＣＩ）、アルツハイマー病及び他の認知症；ハンチントン病）；運動機能疾患及び障害（例えば、パーキンソン病、運動ニューロンの機能不全（ＭＮＤ）；ハンチントン病）；脳血管疾患；気腫；変形性関節症；前立腺肥大症；眼疾患又は障害（例えば、加齢性黄斑変性症、白内障、緑内障、視力低下、老眼）；代謝性疾患及び障害（例えば、肥満、糖尿病、メタボリック症候群）；心血管疾患（例えば、アテローム性動脈硬化症、心臓の拡張機能障害、大動脈瘤、狭心症、不整脈、心筋症、鬱血性心不全、冠動脈疾患、心筋梗塞、心内膜炎、高血圧症、頸動脈疾患、末梢血管疾患、心臓のストレス耐性、心筋繊維化）；炎症性／自己免疫疾患及び障害（例えば、変形性関節症、湿疹、乾癬、骨粗鬆症、粘膜炎、移植に関連する疾患及び障害）；皮膚疾患、例えば、糖尿病性潰瘍、創傷治癒及び皮膚母斑が挙げられる。特定の実施形態において、上記又は本明細書に記載される疾患又は障害のいずれか１つ以上は、除外されてもよい。
【０１６４】
ある実施形態において、老化細胞除去剤を投与することによって、疾患又は障害を有する対象における疾患又は障害に関連する老化細胞（すなわち、確立された老化細胞）を死滅させることによって、老化関連の疾患又は障害を治療するための方法が提供され、ここで、疾患又は障害は、老化に伴う疾患（例えばフレイル、筋力低下、認知障害）；特発性肺線維症；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；腎線維症若しくは肝線維症；転移若しくは他の増殖性疾患；変形性関節症；又はアテローム性動脈硬化症である。
【０１６５】
加齢関連の疾患及び障害
本明細書に記載される老化細胞除去剤は、老化細胞を選択的に死滅させる。このように、老化の過程において老化細胞を標的とすることは、予防的手法であり得る。したがって、対象への本明細書に記載される老化細胞除去剤の投与は、併存疾患を予防し、高齢対象の死亡を遅らせ得る。さらに、老化細胞を選択的に死滅させることにより、免疫系の機能を高め、健康寿命を延ばし、対象のクオリティ・オブ・ライフを改善し得る。
【０１６６】
老化細胞除去剤はまた、自然な老化の過程の一環として生じるか又は対象が老化誘発剤又は因子（例えば、放射線照射、化学療法、喫煙、高脂肪／高糖質食、他の環境要因）に曝されるときに生じる加齢関連の疾患又は障害を治療又は予防する（すなわち、その発症の可能性を低下させる）のに有用であり得る。加齢関連の障害若しくは疾患又は加齢に敏感な特性は、老化誘発性の刺激に関連し得る。本明細書に記載される治療の方法の有効性は、老化誘発性の刺激に関連する加齢関連の障害又は加齢に敏感な特性の症状の数を減少させることによって、１つ以上の症状の重症度を低下させることによって、又は老化誘発性の刺激に関連する加齢関連の障害又は加齢に敏感な特性の進行を遅らせることによって、明らかになり得る。他の実施形態において、老化誘発性の刺激に関連する加齢関連の障害又は加齢に敏感な特性を予防することは、老化誘発性の刺激に関連する加齢関連の障害又は加齢に敏感な特性の発症、或いは老化誘発性の刺激に関連する１つ以上の加齢関連の障害又は加齢に敏感な特性の再発を予防する（すなわち、その発症の可能性を低下させる）又は遅らせることを指す。加齢関連の疾患又は病態としては、例えば、腎機能障害、後彎症、椎間板ヘルニア、フレイル、認知障害、脱毛、聴力低下、視力低下（失明又は視覚障害）、筋肉疲労、皮膚疾患、皮膚母斑、糖尿病、メタボリック症候群、及びサルコペニアが挙げられる。視力低下は、対象が前に有していた視力の欠如を指す。視力に基づいて視覚の程度及び視力低下を表すために、様々な尺度が開発されてきた。加齢関連の疾患及び病態は、皮膚疾患、例えば、限定はされないが、以下の病態の１つ以上の治療も含む：表在性の小じわを含むしわ；色素過剰症；瘢痕；ケロイド；皮膚炎；乾癬；湿疹（脂漏性湿疹を含む）；酒さ；白斑；尋常性魚鱗癬；皮膚筋炎；及び光線角化症。フレイルは、毎日又は急性のストレス要因に対処する対象の能力を損なう複数の生理系にわたって予備力（ｒｅｓｅｒｖｅ）及び機能の老化に関連する低下に起因する、増加した脆弱性の臨床的に認識可能な状態として定義される。フレイルは、低握力、低エネルギー、歩行速度の低下、低身体活動、及び／又は意図しない体重減少などの、損なわれたエネルギー特性によって特徴付けられ得る。研究は、上記の特徴の５つのうち３つが観察されるときに、患者がフレイルであると診断され得ることを示唆している（例えば、Ｆｒｉｅｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｇｅｒｏｎｔｏｌ．Ａ  Ｂｉｏｌ．Ｓｃｉ．Ｍｅｄ，Ｓｃｉ．５６（３）（２００１）Ｍ１４６−Ｍ１５６；Ｘｕｅ，Ｃｌｉｎ．Ｇｅｒｉａｔｒ．Ｍｅｄ．２７（１）（２００１）１−１５を参照）。特定の実施形態において、老化並びに老化関連の疾患及び障害は、老化細胞除去剤を投与することによって治療又は予防され得る（すなわち、発症の可能性が低下される）。老化細胞除去剤は、成体幹細胞の老化を阻害するか又は老化した成体幹細胞の蓄積を阻害するか、それを死滅させるか、若しくはその除去を促進し得る。組織の再生能を維持するために幹細胞における老化を予防する重要性が、例えば、Ｐａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１３（２００４）１７５−１７９；及びＳｏｕｓ��−Ｖｉｃｔｏｒ，Ｎａｔｕｒｅ  ５０６（２０１４）３１６−３２１に記載されている。
【０１６７】
老化を測定する方法が、当該技術分野において公知である。例えば、老化は、非脊椎骨折の発生、股関節骨折の発生、全骨折の発生、脊椎骨折の発生、反復骨折の発生、骨折後の機能回復、腰椎及び股関節における骨ミネラル濃度の低下、膝屈曲の速度、ＮＳＡＩＤ使用、疼痛を伴う関節の数、及び変形性関節症によって、骨において測定され得る。老化はまた、機能低下、転倒率（ｒａｔｅ  ｏｆ  ｆａｌｌ）、反応時間及び握力、上肢及び下肢における筋肉量の減少、及び二重課題１０メートル歩行速度によって、筋肉において測定され得る。さらに、老化は、収縮期及び拡張期血圧変化、高血圧症の発生、心筋梗塞などの主要な心血管イベント、脳卒中、鬱血性心疾患、及び心血管死亡率によって、心血管系において測定され得る。さらに、老化は、認知低下、鬱病の発生、及び認知症の発生によって、脳において測定され得る。また、老化は、感染率、上気道感染の率、インフルエンザに似た病気の率、入院につながる重症感染症の発生、癌の発生、移植感染症の率、及び消化管感染症の率によって、免疫系において測定され得る。老化の他の適応症としては、限定はされないが、口腔衛生の低下、歯の喪失、消化管（ＧＩ）症状の率、空腹時血糖及び／又はインスリンレベル、身体組成の変化、腎機能の低下、クオリティ・オブ・ライフ、日常生活動作に関する身体障害の発生、及び介護施設への入所の発生が挙げられる。皮膚老化を測定する方法は、当該技術分野において公知であり、経表皮水分蒸散量（ＴＥＷＬ）、皮膚の水和、皮膚弾力性、目尻のしわの面積比の分析、敏感さ、輝き、粗さ、染み、たるみ、肌の色合いの均一性、柔らかさ、及び起伏（深さのばらつき）を含み得る。
【０１６８】
本明細書に記載される老化細胞除去剤の投与は、対象が処置を受けていなかった場合に予想される生存と比較したとき、延長する生存を延長することができる。治療を必要としている対象は、疾患又は障害を既に有する対象並びに疾患又は障害を有する傾向のある又はそれを発症するリスクのある対象、及び疾患、病態、又は障害が予防的に処置される対象を含む。対象は、老化細胞のクリアランスから利益を受け得る疾患又は障害を発症する遺伝性素因を有し得るか、又は老化細胞除去剤の摂取が、加齢関連の疾患又は障害を含む疾患の発症を遅らせるか若しくはその重症度を低下させる臨床効果を提供し得る特定の年齢であり得る。
【０１６９】
他の実施形態において、本明細書に記載される老化細胞除去剤による治療（すなわち、表現型検査；個々に応じた治療）から利益を受け得る対象を同定する工程をさらに含む、老化関連の疾患又は障害を治療するための方法が提供される。この方法は、対象の特定の器官又は組織中などで、対象における老化細胞のレベルを最初に検出する工程を含む。生体サンプル、例えば、血液サンプル、血清若しくは血漿サンプル、生検材料、体液（例えば、肺洗浄、腹水、粘膜洗浄液、滑液、硝子体液、髄液）、骨髄、リンパ節、組織外植片、器官培養、又は対象からの任意の他の組織若しくは細胞調製物が、対象から得られる。老化細胞のレベルは、本明細書に記載されるインビトロのアッセイ又は技術のいずれかにしたがって決定され得る。例えば、老化細胞は、形態（例えば、顕微鏡によって見られる）；老化に関連するβ−ガラクトシダーゼ（ＳＡ−β−ｇａｌ）、ｐ１６ＩＮＫ４ａ、ｐ２１、ＰＡＩ−１、又はいずれか１つ以上のＳＡＳＰ因子（例えば、ＩＬ−６、ＭＭＰ３）などの老化に関連するマーカーの産生によって検出され得る。生体サンプルの老化細胞及び非老化細胞はまた、インビトロの細胞アッセイにおいて使用され得、ここで、細胞は、非老化細胞に対する望ましくない毒性なしで、対象の老化細胞を死滅させる老化細胞除去剤の能力を決定するために、本明細書に記載される老化細胞除去剤のいずれか１つに曝される。さらに、これらの方法は、老化細胞除去剤による処理の前、その間、及びその後に、対象における老化細胞のレベルをモニタリングするのに使用され得る。特定の実施形態において、老化細胞の存在は、（例えば、ｍＲＮＡの老化細胞マーカー発現のレベルを決定することなどによって）検出され得、処理過程及び／又は非処理間隔が、それに応じて調節され得る。
【０１７０】
肺疾患及び障害
ある実施形態において、本明細書に記載される老化細胞除去剤を投与することによって、疾患又は障害を有する対象における疾患又は障害に関連する老化細胞（すなわち、確立された老化細胞）を死滅させることによって、肺疾患又は障害である老化関連の疾患又は障害を治療又は予防する（すなわち、その発症の可能性を低下させる）ための方法が提供される。老化関連の肺疾患及び障害としては、例えば、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息、嚢胞性線維症、気管支拡張症、及び気腫が挙げられる。
【０１７１】
ＣＯＰＤは、肺組織の破壊（気腫）及び小気道の機能不全（閉塞性細気管支炎）に起因する持続的に不十分な気流によって定義される肺疾患である。ＣＯＰＤの一次症状としては、息切れ、喘鳴、胸部圧迫感、慢性咳、及び過剰な痰生成が挙げられる。巻たばこ煙で活性化される好中球及びマクロファージからのエラスターゼは、胞状構造の細胞外基質を分解し、気腔の拡大及び呼吸容量の損失をもたらす（例えば、Ｓｈａｐｉｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３２（２００５）３６７−３７２を参照）。ＣＯＰＤは、たばこ煙（巻たばこ煙、葉巻煙、副流煙、パイプ煙を含む）、職業上の曝露（例えば、粉塵、煙又は煙霧への曝露）、及び汚染によって最も一般に引き起こされ、これは、数十年間にわたって生じ、それによって、ＣＯＰＤを発症させる危険因子として老化に関与している。
【０１７２】
肺損傷を引き起こすことに関与するプロセスは、例えば、たばこ煙中の高濃度のフリーラジカルによって生じる酸化的ストレス；気道における刺激物への炎症反応によるサイトカイン放出；及びたばこ煙及びフリーラジカルによる抗プロテアーゼ酵素の障害（それにより、プロテアーゼに肺を損傷させる）を含む。遺伝的感受性も、この疾患に寄与し得る。ＣＯＰＤに罹患している人の約１％において、この疾患は、肝臓中のα−１−アンチトリプシンの低レベルの産生を引き起こす遺伝性疾患に起因する。酵素は、通常、肺を保護するのを助けるために血流へと分泌される。
【０１７３】
肺線維症は、肺の硬化及び瘢痕化によって特徴付けられる慢性及び進行性の肺疾患であり、これは、呼吸不全、肺癌、及び心不全につながり得る。線維症は、上皮の修復に関連している。線維芽細胞が活性化され、細胞外基質タンパク質の産生が増加され、収縮性筋線維芽細胞への分化転換が創面収縮に寄与する。暫定的な基質は、損傷した上皮を塞ぎ、上皮間葉移行（ＥＭＴ）を含む上皮細胞移動のための足場を提供する。上皮損傷に関連する失血は、血小板活性化、成長因子の産生、及び急性炎症反応を誘発する。通常、上皮性関門は治癒し、炎症反応が解消される。しかしながら、線維症において、線維芽細胞応答は継続し、解決されない創傷治癒をもたらす。線維芽細胞巣の形成は、この疾患の特徴であり、これは、進行中の線維形成の位置を反映している。名称が暗示するように、ＩＰＦの病因は不明である。ＩＰＦにおける細胞老化の関与は、発病率が加齢とともに増加すること及びＩＰＦ患者中の肺組織がＳＡ−β−Ｇａｌ陽性細胞に富み、増加したレベルの老化マーカーｐ２１を含有していることの観察によって示唆されている（例えば、Ｍｉｎａｇａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．３００（２０１１）Ｌ３９１−Ｌ４０１を参照；また、例えば、Ｎａｙｌｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，上記も参照）。短いテロメアは、ＩＰＦ及び細胞老化の両方に共通する危険因子である（例えば、Ａｌｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０５（２００８）１３０５１−１３０５６を参照）。理論に拘束されるのを望むものではないが、ＩＰＦへの細胞老化の寄与は、ＩＬ−６、ＩＬ−８、及びＩＬ−１βなどの老化細胞のＳＡＳＰ成分が、線維芽細胞から筋線維芽細胞への分化及び上皮間葉移行を促進し、肺胞腔及び間質腔の細胞外基質の広範囲なリモデリングにつながるという報告によって示唆されている（例えば、Ｍｉｎａｇａｗａ  ｅｔ  ａｌ．、上記を参照）。
【０１７４】
肺線維症を発症させるリスクのある対象としては、石綿症及び珪肺症などに罹患している、環境又は職業上の汚染物質に曝される対象；喫煙者；関節リウマチ、ＳＬＥ及び強皮症などのいくつかの典型的な結合組織疾患に罹患している対象；サルコイドーシス及びウェゲナー肉芽腫症などの、結合組織に関連する他の疾患に罹患している対象；感染症に罹患している対象；特定の薬剤（例えば、アミオダロン、ブレオマイシン、ブスルファン、メトトレキサート、及びニトロフラントイン）を摂取している対象；胸部への放射線治療を受けている対象；及び家族が肺線維症に罹患している対象が挙げられる。
【０１７５】
ＣＯＰＤの症状は、特に身体活動中の息切れ；喘鳴；胸部圧迫感；肺における過剰粘液が原因の朝一での咳払い；透明、白色、黄色又は緑色がかった唾液をもたらす慢性咳；唇又は爪の基部の青色化（チアノーゼ）；頻繁な呼吸器感染症；エネルギーの不足；（疾患の後期段階で観察される）意図しない体重減少のいずれか１つを含み得る。ＣＯＰＤに罹患している対象は、増悪を起こすこともあり、その間に、症状は悪化し、何日も持続する。肺線維症の症状は、当該技術分野において公知であり、特に運動中の息切れ；乾性の空咳；速く浅い呼吸；漸進的な意図しない体重減少；疲労；関節痛及び筋肉痛；並びにばち指（指又はつま先の先端の広がり及び丸まり）を含む。
【０１７６】
ＣＯＰＤ又は肺線維症に罹患している対象は、当該技術分野で日常的に実施される標準的な診断方法を用いて同定され得る。肺疾患を罹患しているか又はそれを発症するリスクのある対象に投与される１つ以上の老化細胞除去剤の効果のモニタリングは、診断に典型的に使用される方法を用いて行われ得る。一般に、以下の検査又は試験の１つ以上が行われ得る：健康診断、患者の病歴、患者の家族の病歴、胸部Ｘ線、肺機能検査（肺活量測定など）、血液検査（例えば、動脈血ガス分析）、気管支肺胞洗浄、肺生検、ＣＴスキャン、及び運動試験。
【０１７７】
老化細胞除去剤を使用することによって治療され得る他の肺疾患又は障害としては、例えば、気腫、喘息、気管支拡張症、及び嚢胞性線維症（例えば、Ｆｉｓｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．３０４（６）（２０１３）Ｌ３９４−４００を参照）が挙げられる。これらの疾患はまた、細胞の老化を誘発し、それによって炎症に寄与する、たばこ煙（巻たばこ煙、葉巻煙、副流煙、パイプ煙を含む）、職業上の曝露（例えば、粉塵、煙又は煙霧への曝露）、感染症、及び／又は汚染物質によって悪化され得る。気腫は、場合により、ＣＯＰＤのサブグループと見なされる。
【０１７８】
気管支拡張症は、気道を広がらせ、たるませ、瘢痕化する、気道に対する損傷に起因する。気管支拡張症は、通常、気道壁を損傷するか又は気道が粘液を取り除くことを阻害する病状によって引き起こされる。このような病態の例としては、嚢胞性線維症及び原発性線毛機能不全（ＰＣＤ）が挙げられる。肺の一部のみが罹患する場合、この障害は、病状ではなく閉塞によって引き起こされ得る。
【０１７９】
老化関連の肺疾患又は障害を治療又は予防する（すなわち、その発症の可能性を低下させる）ための本明細書に記載される方法はまた、老化している、及び肺機能の低下（又は変性）（すなわち、より若い対象と比較した肺機能の低下又は障害）及び／又は肺組織の変性を有する対象を治療するのに治療され得る。呼吸器系は、加齢とともに様々な解剖学的、生理学的及び免疫学的な変化を生じる。構造変化は、全呼吸器系コンプライアンスを損ない得る胸壁及び胸椎の変形を含み、これは、呼吸する努力を増加させる。呼吸器系は、加齢とともに構造的、生理学的、及び免疫学的な変化を生じる。好中球の割合の増加及びマクロファージの低いパーセンテージが、より若い成人と比較して高齢者の気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）において見られる。下気道における持続する軽度の炎症は、肺マトリックスに対するタンパク分解性及びオキシダント媒介性の損傷を引き起こして、老化とともに見られる肺胞単位の損失及び肺胞膜にわたるガス交換の障害をもたらし得る。下気道の持続した炎症により、高齢者が、毒性の環境曝露に対する感受性の増大及び肺機能の低下の促進を生じやすくなり得る。（例えば、Ｓｈａｒｍａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ａｇｉｎｇ  １（２００６）２５３−２６０を参照）。酸化的ストレスは、老化中に炎症を悪化させる（例えば、Ｂｒｏｄ，Ｉｎｆｌａｍｍ．Ｒｅｓ．４９（２０００）５６１−５７０；Ｈｅｎｄｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  ａｎｄ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  １７（２０１０）５９６−６０６を参照）。老化中の酸化還元バランスの変化及び酸化的ストレスの増加は、サイトカイン、ケモカイン、及び接着分子、及び酵素の発現を促進する（例えば、Ｃｈｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｇｅｉｎｇ  Ｒｅｓ．Ｒｅｖ．８（２００９）１８−３０を参照）。マクロファージ、Ｔ細胞、及び肥満細胞の構成的活性化及び動員は、プロテアーゼの放出を促進し、これは、細胞外基質分解、細胞死、リモデリンング、並びに慢性炎症の間に組織及び臓器障害を引き起こし得る他の事象をもたらす（例えば、Ｄｅｍｅｄｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｒｅｓｐｉｒ．Ｒｅｓ．７（２００６）５３−６３を参照）。老化細胞除去剤を老化している対象（無症候の中年の成人を含む）に投与することによって、肺機能の低下は、気道から老化細胞を死滅させ、除去することによって減速又は阻害され得る。
【０１８０】
老化細胞除去剤の有効性は、医療及び臨床の技術分野の当業者によって容易に判定され得る。本明細書に記載される身体検査、臨床症状の評価及びモニタリング、並びに分析試験及び方法の実施を含む、診断方法の１つ又は任意の組合せが、対象の健康状態をモニタリングするのに使用され得る。老化細胞除去剤又はこの薬剤を含む医薬組成物の治療の効果は、治療を受けた、肺疾患に罹患しているか又はそのリスクのある患者の症状を、このような治療を受けなかったか又はプラセボ治療を受けた患者の症状と比較することなどの、当該技術分野において公知の技術を用いて分析され得る。さらに、肺の機械的機能を評価する方法及び技術、例えば、肺の容量、弾性、及び気道過敏性を測定する技術が実施され得る。処置全体を通して、肺機能を決定し、肺機能をモニタリングするために、予備呼気量（ＥＲＶ）、努力肺活量（ＦＶＣ）、努力呼気肺活量（ＦＥＶ）（例えば、１秒でのＦＥＶ、ＦＥＶ１）、ＦＥＶ１／ＦＥＶ比率、努力呼気流量２５％〜７５％、及び最大換気量（ＭＶＶ）、ピーク呼気流量（ＰＥＦ）、遅い肺活量（ＳＶＣ）といった多くの測定のいずれかが取得される。全肺気量は、全肺活量（ＴＬＣ）、肺活量（ＶＣ）、残気量（ＲＶ）、及び機能的残気量（ＦＲＣ）を含む。肺胞毛細血管膜にわたるガス交換は、一酸化炭素拡散能（ＤＬＣＯ）を用いて測定され得る。末梢毛細血管の酸素飽和度（ＳｐＯ２）も測定され得；正常な酸素レベルは、典型的に、９５％〜１００％である。９０％未満のＳｐＯ２レベルは、対象が低酸素血症に罹患していることを示唆している。８０％未満の値は、重篤であると考えられ、脳及び心臓の機能を維持し、心臓又は呼吸の停止を回避するための介入を必要とする。
【０１８１】
転移
ある実施形態において、転移である、老化細胞に関連する疾患（又は障害若しくは病態）を治療又は予防する（すなわち、その発症又は発生の可能性を低下させる）ための方法が提供される。本明細書に記載される老化細胞除去剤はまた、身体におけるある器官又は組織から別の器官又は組織への転移（すなわち、癌又は腫瘍細胞の広がり及び播種）を治療又は予防する（すなわち、その発症の可能性を低下させる）ための本明細書に記載される方法にしたがって使用され得る。
【０１８２】
老化細胞に関連する疾患又は障害は、転移を含み、癌に罹患している対象は、転移を阻害するための本明細書に記載される老化細胞除去剤の投与から利益を受け得る。本明細書に記載される方法にしたがって、癌に罹患している対象に投与されるとき、このような老化細胞除去剤は、腫瘍増殖を阻害し得る。癌の転移は、癌細胞（すなわち、腫瘍細胞）が、発生及び最初のコロニー形成の解剖学的部位を越えて対象の身体の全体にわたって他の部位に広がるときに生じる。腫瘍増殖は、腫瘍サイズによって決定され得、これは、例えば、ＰＥＴスキャン、ＭＲＩ、ＣＡＴスキャン、生検などによって、当業者に周知の様々な方法で測定され得る。腫瘍増殖に対する治療剤の効果も、腫瘍細胞の分化を調べることによって評価され得る。
【０１８３】
本明細書及び当該技術分野で使用される際、癌又は腫瘍という用語は、典型的に異常な細胞増殖を示す細胞によって特徴付けられる疾患を包含する臨床的に記述的な用語である。癌という用語は、一般に、悪性腫瘍又は悪性腫瘍から生じる疾患状態を表すのに使用される。或いは、異常な成長は、当該技術分野において新生物と呼ばれ得る。組織などに関して、腫瘍という用語は、一般に、過度及び異常な細胞増殖によって少なくとも部分的に特徴付けられる異常な組織成長を指す。腫瘍は、転移性であり得、発生及び最初のコロニー形成のその解剖学的部位を越えて対象の身体の全体にわたって他の部位に広がることが可能であり得る。癌は、固形腫瘍を含み得るか、又は「液体」腫瘍（例えば、白血病及び他の血液癌）を含み得る。
【０１８４】
細胞は、放射線及び特定の化学療法剤などの癌治療によって老化を引き起こされる。老化細胞の存在は、炎症分子の分泌を増加させ、腫瘍進行を促進し、これは、腫瘍成長を促進し、腫瘍サイズを増大させ、転移を促進し、分化を変化させることを含み得る。老化細胞が破壊されると、腫瘍進行は、著しく阻害され、腫瘍サイズは小さくなり、転移成長はほとんど又は全く観察されない（例えば、国際公開第２０１３／０９０６４５号パンフレットを参照）。
【０１８５】
ある実施形態において、本明細書に記載される老化細胞除去剤を投与することによって、癌に罹患している対象における転移を予防する（すなわち、その発症の可能性を低下させる）、阻害する、又は遅らせるための方法が提供される。他の実施形態において、老化細胞除去剤は、７日又は１４日以下の治療期間（すなわち、治療過程）内で１日以上投与される。さらに他の実施形態において、治療過程は、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０日以下、又は２１日以下である。さらに他の実施形態において、治療過程は、１日である。さらに他の実施形態において、老化細胞除去剤は、７日又は１４日以下の治療期間内に２日以上投与される。
【０１８６】
細胞が、放射線及び特定の化学療法剤（例えば、ドキソルビシン；パクリタキセル；ゲムシタビン；ポマリドミド；レナリドミド）などの癌治療によって老化を引き起こされ得るため、本明細書に記載される老化細胞除去剤は、これらの老化細胞を死滅させる（又はその死滅を促進する）ために化学療法又は放射線療法後に投与され得る。本明細書に説明され、当該技術分野において理解されるように、細胞老化関連分泌現象（ＳＡＳＰ）の存在などによって示される老化の確立が、数日間にわたって生じ；したがって、老化細胞を死滅させ、それによって、転移の発生の可能性を低下させるか又はその範囲を縮小するための老化細胞除去剤の投与が、老化が確立されたときに開始される。本明細書に説明されるように、老化細胞除去剤の投与のための以下の治療過程が、化学療法又は放射線療法の副作用を治療又は予防する（すなわち、発症の可能性を低下させるか、又は重症度を低下させる）ために本明細書に記載される方法において使用され得る。
【０１８７】
特定の実施形態において、化学療法又は放射線療法が、少なくとも１日のオン治療（ｏｎ−ｔｈｅｒａｐｙ）（すなわち、化学療法又は放射線療法））、その後、少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４日（又は約２週間）、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１日（又は約３週間）、又は約４週間（約１か月）のオフ治療（ｏｆｆ−ｔｈｅｒａｐｙ）（すなわち、化学療法又は放射線療法を受けていない）の治療サイクルで施されるとき、老化細胞除去剤は、オフ治療の時間間隔の２日目に又はその後に始まり、オフ治療の時間間隔の最終日に又はその前に終了する、オフ治療の時間間隔（時間周期）の間に１日以上投与される。例示として、ｎがオフ治療の日数である場合、老化細胞除去剤は、オフ治療の時間間隔の少なくとも１日及びｎ−１日以下投与される。ある実施形態において、化学療法又は放射線療法が、少なくとも１日のオン治療（すなわち、化学療法又は放射線療法）の治療サイクルで施されるとき、その後、少なくとも１週間のオフ治療、老化細胞除去剤は、オフ治療の時間間隔の２日目に又はその後に始まり、オフ治療の時間間隔の最終日に又はその前に終了する、オフ治療の時間間隔の間に１日以上投与される。
【０１８８】
化学療法は、化学療法、化学療法薬、又は化学療法剤と呼ばれ得る。多くの化学療法薬は、小有機分子と呼ばれる化合物である。化学療法は、特定の癌を治療するために投与される化学療法剤の組合せを表すのにも使用される用語である。当業者によって理解されるように、化学療法はまた、協調的に投与され、併用化学療法と呼ばれ得る、２つ以上の化学療法分子の組合せを指し得る。多くの化学療法剤が、腫瘍学の技術分野で使用され、限定はされないが、アルキル化剤；代謝拮抗剤；アントラサイクリン、植物アルカロイド；及びトポイソメラーゼ阻害剤を含む。
【０１８９】
転移し得る癌は、固形腫瘍であり得るか、又は液体腫瘍（例えば、血液癌、例えば、白血病）であり得る。液体腫瘍である癌は、血液、骨髄、及びリンパ節に生じるものとして当該技術分野において分類され、一般に、白血病（骨髄性及びリンパ球性）、リンパ腫（例えば、ホジキンリンパ腫）、及び黒色腫（多発性骨髄腫を含む）を含む。白血病としては、例えば、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、及び有毛細胞白血病が挙げられる。固形腫瘍であり、ヒトにおいてかなりの頻度で生じる癌としては、例えば、前立腺癌、精巣癌、乳癌、脳腫瘍、膵臓癌、結腸癌、甲状腺癌、胃癌、肺癌、卵巣癌、カポジ肉腫、皮膚癌（扁平上皮細胞皮膚癌を含む）、腎臓癌、頭頸部癌、喉頭癌、鼻、口、咽喉などの湿った粘膜内層に生じる扁平上皮癌）、膀胱癌、骨肉腫（骨癌）、子宮頸癌、子宮内膜癌、食道癌、肝臓癌、及び腎臓癌が挙げられる。いくつかの特定の実施形態において、本明細書に記載される方法によって治療又は予防される（すなわち、発症又は発生の可能性が低下される）老化細胞に関連する疾患又は障害は、黒色腫細胞、前立腺癌細胞、精巣癌細胞、乳癌細胞、脳腫瘍細胞、膵臓癌細胞、結腸癌細胞、甲状腺癌細胞、胃癌細胞、肺癌細胞、卵巣癌細胞、カポジ肉腫細胞、皮膚癌細胞、腎臓癌細胞、頭頸部癌細胞、喉頭癌細胞、扁平上皮癌細胞、膀胱癌細胞、骨肉腫細胞、子宮頸癌細胞、子宮内膜癌細胞、食道癌細胞、肝臓癌細胞、又は腎臓癌細胞の転移である。
【０１９０】
本明細書に記載される方法はまた、医療技術分野で記載される腫瘍のタイプのいずれか１つの転移癌の進行を阻害する、遅らせる、又は遅くするのに有用である。癌（腫瘍）のタイプとしては、以下のものが挙げられる：副腎皮質癌、小児副腎皮質癌、ＡＩＤＳ関連の癌、肛門癌、虫垂癌、基底細胞癌、小児基底細胞癌、膀胱癌、小児膀胱癌、骨肉腫、脳腫瘍、小児星状細胞腫、小児脳幹グリオーマ、小児中枢神経系非定型奇形腫様／横紋筋様腫瘍、小児中枢神経系胚芽腫、小児中枢神経系胚細胞腫瘍、小児頭蓋咽頭腫脳腫瘍、小児上衣腫脳腫瘍、乳癌、小児気管支腫瘍、カルチノイド腫瘍、小児カルチノイド腫瘍、消化管カルチノイド腫瘍、原発不明癌、小児原発不明癌、小児心（心臓）腫瘍、子宮頸癌、小児子宮頸癌、小児脊索腫、慢性骨髄増殖性疾患、結腸癌、結腸直腸癌、小児結腸直腸癌、肝外胆管癌、非浸潤性乳管癌（ＤＣＩＳ）、子宮内膜癌、食道癌、小児食道癌、小児鼻腔神経芽細胞腫、眼癌、骨の悪性線維性組織球腫、胆嚢癌、胃（ｇａｓｔｒｉｃ（ｓｔｏｍａｃｈ））癌、小児胃（ｇａｓｔｒｉｃ（ｓｔｏｍａｃｈ））癌、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、小児消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、小児頭蓋外胚細胞腫瘍、性腺外胚細胞腫瘍、妊娠性絨毛腫瘍、神経膠腫、頭頸部癌、小児頭頸部癌、肝細胞（肝臓）癌、下咽頭癌、腎臓癌、腎細胞の腎臓癌、ウィルムス腫瘍、小児腎臓腫瘍、ランゲルハンス細胞組織球増加症、喉頭癌、小児喉頭癌、白血病、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、有毛細胞白血病、口唇癌、肝臓癌（原発性）、小児肝臓癌（原発性）、非浸潤性小葉癌（ＬＣＩＳ）、肺癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、リンパ腫、ＡＩＤＳ関連のリンパ腫、バーキットリンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫（ＣＮＳ）、黒色腫、小児黒色腫、眼内（眼）黒色腫、メルケル細胞癌、悪性中皮腫、小児悪性中皮腫、原発不明の転移性扁平上皮頚部癌、ＮＵＴ遺伝子に関与する正中線管癌（ｍｉｄｌｉｎｅ  ｔｒａｃｔ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、口腔癌、小児多発性内分泌腫瘍症候群、菌状息肉腫、骨髄異形成症候群、骨髄異形成腫瘍、骨髄増殖性腫瘍、多発性骨髄腫、鼻腔癌、鼻咽腔癌、小児鼻咽腔癌、神経芽細胞腫、口腔癌、小児口腔癌、口腔咽頭癌、卵巣癌、小児卵巣癌、上皮卵巣癌、低悪性度腫瘍卵巣癌、膵臓癌、小児膵臓癌、膵神経内分泌腫瘍（島細胞腫）、小児乳頭腫症、傍神経節腫、副鼻腔癌、副甲状腺癌、陰茎癌、咽頭癌、褐色細胞腫、下垂体部腫瘍、形質細胞腫、小児胸膜肺芽腫、前立腺癌、直腸癌、腎盂移行上皮癌、網膜芽細胞腫、唾液腺癌、小児唾液腺癌、腫瘍のユーイング肉腫ファミリー、カポジ肉腫、骨肉腫、横紋筋肉腫、小児横紋筋肉腫、軟部組織肉腫、子宮肉腫、セザリー症候群、小児皮膚癌、非黒色腫皮膚癌、小腸癌、扁平上皮細胞癌、小児扁平上皮細胞癌、精巣癌、小児精巣癌、喉頭癌、胸腺腫及び胸腺癌、小児胸腺腫及びび胸腺癌、甲状腺癌、小児甲状腺癌、尿管移行上皮癌、尿道癌、子宮内膜の子宮癌、膣癌、外陰癌、及びワルデンシュトレームマクログロブリン血症。
【０１９１】
化学療法及び放射線療法の副作用
他の実施形態において、老化細胞に関連する障害又は病態は、化学療法の副作用又は放射線療法の副作用である。非癌細胞の老化を誘発する化学療法剤の例としては、アントラサイクリン（ドキソルビシン、ダウノルビシンなど）；タキソール（例えば、パクリタキセル）；ゲムシタビン；ポマリドミド；及びレナリドミドが挙げられる。本明細書に記載されるように投与される老化細胞除去剤の１つ以上は、化学療法の副作用又は放射線療法の副作用を治療及び／又は予防する（すなわち、その発症の可能性を低下させる）ために使用され得る。老化細胞の除去又は破壊は、化学療法又は放射線療法の、エネルギー不均衡を含む急性毒性を含む、急性毒性を改善し得る。急性毒性副作用としては、限定はされないが、胃腸毒性（例えば、吐き気、嘔吐、便秘、食欲不振、下痢）、末梢神経障害、疲労、倦怠感、低身体活動、血液毒性（例えば、貧血）、肝毒性、脱毛症（脱毛）、疼痛、感染症、粘膜炎、体液鬱滞、皮膚毒性（例えば、発疹、皮膚炎、色素過剰症、じんましん、光過敏症、爪の変化）、口腔の問題（例えば、口腔粘膜炎）、歯肉又は咽喉の問題、或いは化学療法又は放射線療法によって引き起こされる任意の毒性副作用が挙げられる。例えば、放射線療法又は化学療法によって引き起こされる毒性副作用は、本明細書に記載される方法によって改善され得る。したがって、特定の実施形態において、治療を受ける対象における化学療法又は放射線療法或いはその両方の急性毒性を改善する（発症を減少させる、阻害する、又は予防する（すなわち、発症の可能性を低下させる））或いはその毒性副作用（すなわち、有害副作用）の重症度を低下させるための方法が、本明細書において提供され、ここで、本方法は、老化細胞を選択的に死滅させる、除去する、又は破壊する或いはその選択的な破壊を促進する薬剤を対象に投与する工程を含む。化学療法又は放射線療法の副作用を治療する又はその発症の可能性を低下させる、或いはその重症度を低下させるための本明細書に記載される老化細胞除去剤の投与が、転移の治療／予防について上述されるのと同じ治療過程によって行われ得る。転移を治療又は予防する（すなわち、その発症の可能性を低下させる）ことについて記載されるように、老化細胞除去剤は、化学療法のない又は放射線療法のない時間間隔中或いは化学療法又は放射線療法の治療計画が完了した後に投与される。
【０１９２】
より特定の実施形態において、急性毒性は、エネルギー不均衡を含む急性毒性であり、体重減少、内分泌変化（例えば、ホルモン不均衡、ホルモンシグナル伝達の変化）、及び身体組成の変化の１つ以上を含み得る。特定の実施形態において、エネルギー不均衡を含む急性毒性は、医学療法を受けなかった対象において観察されるより減少した又は縮小されたエネルギーの消費によって示されるように、対象が身体的に活発になる能力の減少又は縮小に関連している。限定しない例として、エネルギー不均衡を含むこのような急性毒性作用は、低身体活動を含む。他の実施形態において、エネルギー不均衡は、疲労又は倦怠感を含む。
【０１９３】
ある実施形態において、本明細書に記載される老化細胞除去剤によって治療又は予防される（すなわち、発症の可能性が低下される）化学療法副作用は、心臓毒性である。アントラサイクリン（ドキソルビシン、ダウノルビシンなど）で治療されている癌に罹患した対象は、アントラサイクリンの心臓毒性を軽減し、改善し、又は減少させる１つ以上の本明細書に記載される老化細胞除去剤で治療され得る。医療技術分野でよく理解されるように、アントラサイクリンに関連する心臓毒性のため、対象が受けることができる最大の生涯投与量は、癌が薬剤に反応したとしても制限される。老化細胞除去剤の１つ以上の投与により、心臓毒性は軽減され得、さらなる量のアントラサイクリンを対象に投与することができるようになり、癌疾患に関連する予後の改善がもたらされる。ある実施形態において、心臓毒性は、ドキソルビシンなどのアントラサイクリンの投与に起因する。ドキソルビシンは、白金に基づく治療の失敗後に卵巣癌；術前化学療法の失敗若しくは治療に対する不耐性後のカポジ肉腫；又は以前にボルテゾミブを受けなかった又は少なくとも１回の以前の治療を受けた患者においてボルテゾミブと組み合わせた多発性骨髄腫に罹患した患者を治療するために承認されているアントラサイクリントポイソメラーゼ阻害剤である。ドキソルビシンは、患者への合計の生涯投与量が５５０ｍｇ／ｍ２を超える場合、鬱血性心不全につながり得る心筋障害を引き起こし得る。心臓毒性は、患者がさらに縦隔放射線照射又は別の心臓毒性薬剤を受ける場合、さらに低用量でも生じ得る。
【０１９４】
他の実施形態において、本明細書に記載される老化細胞除去剤は、慢性又は長期の副作用を改善するために本明細書において提供される方法に使用され得る。慢性の毒性副作用は、典型的に、長期間にわたる化学療法又は放射線療法への複数回の曝露又は投与に起因する。特定の毒性作用は、治療のかなり後に現われ（遅発性毒性作用とも呼ばれる）、治療による器官又は系への損傷に起因する。臓器機能不全（例えば、神経、肺、心血管、及び内分泌の機能不全）が、小児期に癌の治療を受けた患者において観察されている（例えば、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＪＡＭＡ  ３０９  ９２０１３）２３７１−２３８１を参照）。何らかの特定の理論に拘束されるのを望むものではないが、老化細胞、化学療法又は放射線療法によって老化を誘発された特定の正常細胞を破壊することによって、慢性の副作用の発生の可能性が低下され得るか、又は慢性の副作用の重症度が軽減若しくは低下され得るか、又は慢性の副作用の発現の時間が遅延され得る。化学療法又は放射線治療を受けた対象において生じる慢性及び／又は遅発性の毒性副作用としては、限定しない例として、心筋症、鬱血性心疾患、炎症、早発閉経、骨粗鬆症、不妊症、認知機能の障害、末梢神経障害、続発性癌、白内障及び他の視覚障害、聴力低下、慢性疲労、肺活量の減少、及び肺疾患が挙げられる。
【０１９５】
さらに、老化細胞除去剤を投与することによって、癌に罹患した対象における老化細胞を死滅させるか又は除去することによって、化学療法又は放射線療法に対する感受性は、老化細胞除去剤が投与されなかった場合より、臨床的又は統計的に有意に高められ得る。言い換えると、化学療法又は放射線療法への耐性の発生は、老化細胞除去剤が、それぞれの化学療法又は放射線療法で治療された対象に投与されるときに阻害され得る。
【０１９６】
神経疾患及び障害
本明細書に記載される老化細胞除去剤を投与することによって治療可能な老化関連の疾患又は障害としては、神経疾患又は障害が挙げられる。このような老化関連の疾患及び障害としては、パーキンソン病、アルツハイマー病（及び他の認知症）、運動ニューロンの機能不全（ＭＮＤ）、軽度認知障害（ＭＣＩ）、ハンチントン病、及び加齢性黄斑変性症などの眼の疾患及び障害が挙げられる。加齢関連の眼の他の疾患は、緑内障、視力低下、老眼、及び白内障である。
【０１９７】
パーキンソン病（ＰＤ）は、２番目に一般的な神経変性疾患である。それは、動作緩慢（運動緩徐）、振盪、硬直及び後期段階での平衡感覚障害によって特徴付けられる脳の身障状態である。これらの症状の多くは、脳における特定の神経の喪失に起因し、これは、ドーパミンの不足をもたらす。この疾患は、黒質緻密部中のドーパミン作動性ニューロンの約５０％〜７０％の喪失、線条体中のドーパミンの重度の喪失及び／又は主にα−シヌクレイン及びユビキチンから構成される細胞質内封入体（レヴィー小体）の存在などの神経変性によって特徴付けられる。パーキンソン病はまた、振戦、硬直、運動緩徐及び／又は姿勢の不安定などの自発運動の障害を特徴とする。パーキンソン病を発症するリスクのある対象としては、パーキンソン病の家族歴を有する対象及び殺虫剤（例えば、ロテノン又はパラコート）、除草剤（例えば、エージェントオレンジ）、又は重金属に曝された対象が挙げられる。ドーパミンを産生するニューロンの老化は、活性酸素種の産生によってＰＤにおいて観察された細胞死に寄与すると考えられるため（例えば、Ｃｏｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒａｌ  Ｔｒａｎｓｍ．Ｓｕｐｐｌ．１９（１９８３）８９−１０３を参照）；本明細書に記載される方法及び老化細胞除去剤は、パーキンソン病の治療及び予防に有用である。
【０１９８】
組織学的研究、生化学試験、及び行動評価などの、パーキンソン病に関連する神経変性欠陥及び／又は自発運動の障害を検出、モニタリング又は定量するための方法は、当該技術分野において公知である（例えば、米国特許出願公開第２０１２／０００５７６５号明細書を参照）。パーキンソン病の症状は、当該技術分野において公知であり、限定はされないが、随意運動を開始若しくは終了することの困難さ、ぎくしゃくした硬い動き、筋萎縮、震え（振戦）、及び心拍数の変化、正常反射、運動緩徐、及び姿勢の不安定を含む。パーキンソン病と診察された人が、その身体的症状に加えて、軽度認知障害を含む認知障害を有し得るという認識が高まっている。
【０１９９】
アルツハイマー病（ＡＤ）は、深刻な認知症につながる、記憶障害、失見当識、及び錯乱を伴う緩徐進行性の精神機能低下を示す神経変性疾患である。加齢は、高齢者の認知症の主要な原因であるＡＤを発症する単一の最も大きな素因となる危険因子である（例えば、Ｈｅｂｅｒｔ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒａｌ．６０（２００３）１１１９−１１２２を参照）。初期の臨床症状は、軽度認知障害との著しい類似性を示す（以下を参照）。この疾患が進行するにつれて、判断力低下、錯乱、行動変化、失見当識、及び歩行困難及び嚥下困難が生じる。
【０２００】
アルツハイマー病は、組織学的試料中の神経原線維変化及びアミロイド（老人）プラークの存在によって特徴付けられる。この疾患は、主に、脳の辺縁及び皮質の領域に関与している。アミロイド前駆タンパク質（ＡＰＰ）のアミロイド生成性Ａβ断片を含有する好銀性のプラークは、大脳皮質及び海馬全体にわたって散在している。神経原線維変化は、新皮質、海馬、及びマイネルト基底核に主に位置する錐体ニューロンにおいて見られる。海馬の錐体細胞中の顆粒空胞変性などの他の変化、並びに皮質及び海馬におけるニューロン喪失及び神経膠症が観察される。アルツハイマー病を発症するリスクのある対象としては、高齢の対象、アルツハイマー病の家族歴を有する対象、遺伝的リスク遺伝子（例えば、ＡｐｏＥ４）又は決定的な遺伝子突然変異（例えば、ＡＰＰ、ＰＳ１、若しくはＰＳ２）を有する対象、並びに頭部外傷又は心臓／血管の病態（例えば、高血圧、心臓病、脳卒中、糖尿病、高コレステロール症など）の病歴を有する対象が挙げられる。
【０２０１】
アルツハイマー病の表現型を評価するため、治療剤を特徴付けるため、及び治療を評価するための多くの行動的及び病理組織学的なアッセイが、当該技術分野において公知である。組織学的分析は、典型的に死後に行われる。Ａβレベルの組織学的分析は、チオフラビン−Ｓ、コンゴーレッド、又は切断された脳組織上のＡβ沈着を視覚化するための抗Ａβ染色（例えば、４Ｇ８、１０Ｄ５、若しくは６Ｅ１０抗体）を用いて行われ得る（例えば、Ｈｏｌｃｏｍｂ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．４（１９９８）９７−１００；Ｂｏｒｃｈｅｌｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｎ  １９（１９９７）９３９−９４５；Ｄｉｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈ．１３２（１９９８）８６−１０１を参照）。トランスジェニックマウスにおけるＡβ沈着を視覚化するインビボでの方法も記載されている。ＢＳＢ（（トランス，トランス）−１−ブロモ−２，５−ビス−（３−ヒドロキシカルボニル−４−ヒドロキシ）スチリルベンゼン）及びＰＥＴトレーサー１１Ｃ標識化Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ化合物−Ｂ（ＰＩＢ）は、ＡＰプラークに結合する（例えば、Ｓｋｏｖｒｏｎｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９７（２０００）７６０９−７６１４；Ｋｌｕｎｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．５５（２００４）３０６−３１９を参照）。１９Ｆ含有アミロイド親和性（ａｍｙｌｏｉｄｏｐｈｉｌｉｃ）コンゴーレッド型化合物ＦＳＢ（（Ｅ，Ｅ）−１−フルオロ−２，５−ｂｉｓ−（３−ヒドロキシカルボニル−４−ヒドロキシ）スチリルベンゼン）は、ＭＲＩによってＡβプラークの可視化を可能にする（例えば、Ｈｉｇｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．８（２００５）５２７−５３３を参照）。放射性標識された、プトレシン修飾アミロイド−βペプチドは、アルツハイマー病のマウスモデルにおいてインビボでアミロイド沈着物を標識する（例えば、Ｗｅｎｇｅｎａｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１８（２０００）８６８−８７２を参照）。
【０２０２】
星状細胞による増加したグリア線維酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）は、神経変性の間のアストログリアの活性化及び神経膠症のためのマーカーである。ＡＰプラークは、ＧＦＡＰ陽性の活性化星状細胞に関連しており、ＧＦＡＰ染色によって視覚化され得る（例えば、Ｎａｇｅｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ａｇｉｎｇ  ２５（２００４）６６３−６７４；Ｍａｎｄｙｂｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ４０（１９９０）６３５−６３９；Ｌｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８５（２０１０）２７７３７−２７７４４を参照）。神経原線維変化は、チオフラビン−Ｓ蛍光顕微鏡法及びＧａｌｌｙａｓ銀染色（例えば、Ｇｏｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６（２００１）５２９−５３４；米国特許第６，６６４，４４３号明細書を参照）を用いて、免疫組織化学的検査によって同定され得る。電子顕微鏡法及び軸索輸送研究を用いる軸索染色が、神経変性を視覚化するのに使用され得る（例えば、Ｉｓｈｉｈａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｎ  ２４（１９９９）７５１−７６２を参照）。
【０２０３】
アルツハイマー病に罹患している対象は、アルツハイマー病の技術分野において公知の標準の診断方法を用いて同定され得る。一般に、アルツハイマー病の診断は、患者の症状（例えば、記憶機能の進行性の低下、日常活動からの漸進的な退避及びそれによるフラストレーション、無関心、激越又は被刺激性、攻撃性、不安、睡眠障害、不快、異常な運動行動、脱抑制、引きこもり、食欲不振、幻覚、認知症）、病歴、神経心理学的検査、神経学的検査及び／又は身体検査に基づく。脳脊髄液もまた、タウ、アミロイドβペプチド、及びＡＤ７Ｃ−ＮＴＰを含む、アルツハイマー病理に関連している様々なタンパク質のために試験され得る。遺伝子検査もまた、常染色体性優性遺伝病である、早期発症型家族性アルツハイマー病（ｅＦＡＤ）に利用可能である。臨床遺伝子検査が、ＡＤ症状を有する個体又は早期発症型の疾患に罹患するリスクのある患者の家族に利用可能である。米国では、ＰＳ２、及びＡＰＰに対する突然変異は、臨床検査室改善法（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ  Ａｍｅｎｄｍｅｎｔｓ）の下で、臨床的に又は連邦政府によって承認された実験室において試験され得る。ＰＳ１突然変異に対する商用試験も利用可能である（Ｅｌａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）。
【０２０４】
Ｚｈａｎｇらは、ＡＤに罹患した患者の脳において及びＡＤマウスモデルにおいて、Ａβプラークに関連するＯｌｉｇ２−及びＮＧ２を発現するオリゴデンドロサイト前駆細胞（ＯＰＣ）が、ｐ２１／ＣＤＫＮ１Ａ、ｐ１６／ＩＮＫ４／ＣＤＫＮ２Ａタンパク質の上方制御によって特徴付けられる老化様の表現型、及び老化に関連するβ−ガラクトシダーゼ活性を示すが、星状細胞、ミクログリア、又はオリゴデンドロサイトは示さないことを報告した（Ｎａｔｕｒｅ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２２（２０１９）７１９−７２８を参照）。Ａβプラーク環境の分子的情報（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｉｎｔｅｒｒｏｇａｔｉｏｎ）は、ＯＰＣ機能、複製老化、及び炎症に関与するタンパク質をコードする転写産物の上昇したレベルを示した。凝集Ａβへの培養されたＯＰＣの直接の曝露は、細胞老化を引き起こした。ダサチニブ及びケルセチンを含む老化細胞除去剤混合物によるＡＤマウスの処理は、プラーク環境から老化細胞を選択的に除去し、神経炎症を軽減し、Ａβ負荷を減少させ、認知障害を改善した。これらの知見は、ＡＤの神経炎症及び認知障害におけるＡβ誘導性のＯＰＣ細胞老化の役割、及び老化細胞除去処理の潜在的な治療効果を示唆している。
【０２０５】
本明細書に記載される１つ以上の老化細胞除去剤の有効性及び１つ以上の老化細胞除去剤を受ける対象のモニタリングは、医療及び臨床の技術分野の当業者によって容易に判定され得る。本明細書に記載される、身体検査、臨床症状の評価及びモニタリング、並びに分析試験及び方法の実施を含む、診断方法の１つ又はその任意の組合せが、対象の健康状態をモニタリングするのに使用され得る。１つ以上の老化細胞除去剤を投与する効果は、治療を受けたアルツハイマー病に罹患しているか又はそのリスクのある患者の症状を、このような治療を受けなかった又はプラセボ治療を受けた患者の症状と比較することなどの、当該技術分野において公知の技術を用いて分析され得る。
【０２０６】
軽度認知障害（ＭＣＩ）は、個体の日常活動を妨げるほど有意なものではないが、個体の年齢及び教育に基づいて予測されるものを超える認知障害の発現及び進展を伴う脳機能症候群である。ＭＣＩは、正常な老化から認知症に転換し得るまでの移行状態であると考えられる認知的加齢の態様である（Ｐｅｐｅｕ，Ｄｉａｌｏｇｕｅｓ  ｉｎ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  ６（２００４）３６９−３７７を参照）。主に記憶に影響を及ぼすＭＣＩは、「健忘性ＭＣＩ」として知られている。健忘性ＭＣＩを有する人は、最近の出来事など以前には容易に思い出された重要な情報を忘れ始め得る。健忘性ＭＣＩは、アルツハイマー病の前駆期と見なされることが多い。記憶以外の思考力に影響を及ぼすＭＣＩは、「非健忘性ＭＣＩ」として知られている。このタイプのＭＣＩは、正しい判断を行う、複雑な作業を完了するために必要な工程の時間若しくは順序を判断するか、又は視覚的認識を行う能力などの思考力に影響を及ぼす。非健忘性ＭＣＩを有する個体は、他のタイプの認知症（例えば、レビー小体認知症）に転換する可能性がより高いと考えられている。
【０２０７】
医療技術分野の当業者は、パーキンソン病と診察された人が、身体的症状に加えてＭＣＩを有し得るという認識を高めている。最近の研究は、パーキンソン病に罹患した人の２０〜３０％がＭＣＩを有し、ＭＣＩが非健忘性となる傾向があることを示す。ＭＣＩを有するパーキンソン病患者は、場合により、完全に発達した認知症（認知症を伴うパーキンソン病）に進む。
【０２０８】
星状細胞の形態学的解析、アセチルコリンの放出、神経変性を評価するための銀染色、及びβアミロイド沈着物を検出するためのＰｉＢ  ＰＥＴイメージングを含む、ＭＣＩに関連する神経病理学的欠陥を検出、モニタリング、定量又は評価するための方法は、当該技術分野において公知である（例えば、米国特許出願公開第２０１２／００７１４６８号明細書；Ｐｅｐｅｕ、（２００４）、上記を参照）。八方向放射状迷路パラダイム、非見本合わせ課題、水迷路における他者中心性位置決定課題（ａｌｌｏｃｅｎｔｒｉｃ  ｐｌａｃｅ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｔａｓｋ  ｉｎ  ａ  ｗａｔｅｒ  ｍａｚｅ）、モリス迷路試験、視空間課題、遅延応答空間記憶課題、及び嗅覚新規検査を含む、ＭＣＩに関連する行動的欠陥を検出、モニタリング、定量又は評価するための方法も、当該技術分野において公知である。
【０２０９】
運動ニューロンの機能不全（ＭＮＤ）は、発話、歩行、呼吸及び嚥下などの不可欠な随意筋活動を制御する細胞である、運動ニューロンを破壊する進行性の神経障害の群である。それは、変性が上位運動ニューロン、下位運動ニューロン、又はその両方に影響を与えるかによって分類される。ＭＮＤの例としては、限定はされないが、ルー・ゲーリック病としても知られている筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、進行性球麻痺、偽球麻痺、原発性側索硬化症、進行性筋萎縮症、下位運動ニューロン疾患、及び脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）（例えば、ウェルドニッヒ・ホフマン病とも呼ばれるＳＭＡ１、クーゲルバーグ・ヴェランダー病、及びケネディ病とも呼ばれるＳＭＡ２、ＳＭＡ３）、ポリオ後症候群、及び遺伝性の痙性対麻痺が挙げられる。成人において、最も一般的なＭＮＤは、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）であり、これは、上位及び下位運動ニューロンの両方に影響を与える。それは、腕、脚、又は顔の筋肉に影響を及ぼし得る。原発性側索硬化症が、上位運動ニューロンンの疾患である一方、進行性筋萎縮症は、脊髄における下位運動ニューロンにのみ影響を及ぼす。進行性球麻痺では、脳幹の最も下位の運動ニューロンが最も影響を受け、不明瞭な発語並びに咀嚼及び嚥下困難を引き起こす。腕及び脚にほぼ常に軽度に異常な徴候がある。ＭＮＤを有する患者は、パーキンソン病の表現型を示す（例えば、振戦、硬直、運動緩徐、及び／又は姿勢の不安定を有する）。ＭＮＤなどの、パーキンソン病に関連する自発運動障害及び／又は他の欠陥を検出、モニタリング又は定量するための方法は、当該技術分野において公知である（例えば、米国特許出願公開第２０１２／０００５７６５号明細書を参照）。
【０２１０】
病理組織学的、生化学的、及び電気生理学的な検査及び運動活性分析を含む、ＭＮＤに関連する運動障害及び病理組織学的欠陥を検出、モニタリング、定量又は評価するための方法は、当該技術分野において公知である（例えば、Ｒｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｉｏｌ．８８（２００２）３２９３−３３０４；Ａｐｐｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８８（１９９１）６４７−６５１を参照）。病理組織学的に、ＭＮＤは、運動ニューロンの死、ＳＯＤ１及びユビキチンを含有する界面活性剤耐性凝集体の漸進的な蓄積及び変性運動ニューロンにおける異常な神経フィラメントの蓄積によって特徴付けられる。さらに、反応性アストログリア及びミクログリアは、病変組織において検出されることが多い。ＭＮＤを有する患者は、筋力低下及び消耗、制御できない単収縮、痙縮、緩慢で努力を要する動作、及び過活動腱反射を含む１つ以上の運動障害を示す。
【０２１１】
眼疾患及び障害
特定の実施形態において、老化関連の疾患又は障害は、眼の疾患、障害、又は病態、例えば、老眼、黄斑変性症、又は白内障である。他の特定の実施形態において、老化関連の疾患又は障害は、緑内障である。黄斑変性症は、黄斑と呼ばれる網膜の中央部位における光受容細胞の喪失を引き起こす神経変性疾患である。黄斑変性症は、一般に、２つのタイプ：乾性又は湿性に分類される。乾性形態は、湿性よりも一般的であり、加齢性黄斑変性症（ＡＲＭＤ又はＡＭＤ）患者の約９０％が、乾性形態と診断されている。この疾患の湿性形態は、通常、より深刻な視力低下につながる。加齢性黄斑変性症の正確な原因はまだ不明であるが、老化網膜色素上皮（ＲＰＥ）細胞の数は、加齢とともに増加する。加齢及び特定の遺伝的要因及び環境要因は、ＡＲＭＤを発症する危険因子である（例えば、Ｌｙｅｎｇａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．７４（２００４）２０−３９；Ｋｅｎｅａｌｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｖｉｓ．１０（２００４）５７−６１；Ｇｏｒｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｖｉｓ．５（１９９９）２９を参照）。環境素因としては、オメガ−３脂肪酸摂取（例えば、Ｃｈｒｉｓｔｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．１２９（２０１１）９２１−９２９を参照）；エストロゲン曝露（例えば、Ｆｅｓｈａｎｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．１２６（４）（２００８）５１９−５２４を参照）；及びビタミンＤの血中濃度の増加（例えば、Ｍｉｌｌｅｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．１２９（４）（２０１１）４８１−８９を参照）が挙げられる。遺伝素因となる危険因子としては、乾性ＡＭＤを有する患者の眼における減少したレベルのＤｉｃｅｒ  １（マイクロＲＮＡの成熟に関与する酵素）が挙げられ、マイクロＲＮＡの減少は、老化細胞プロファイルに寄与する。
【０２１２】
乾性ＡＲＭＤは、ＲＰＥ層の萎縮に関連し、これは、光受容細胞の喪失を引き起こす。乾性形態のＡＲＭＤは、黄斑組織の老化及び薄化並びに黄斑における色素の沈着に起因し得る。老化は、ＲＰＥの複製及び移動の両方を阻害するように見え、乾性ＡＭＤ患者の黄斑における恒久的なＲＰＥ不足をもたらす（例えば、Ｉｒｉｙａｍａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８３（２００８）１１９４７−１１９５３を参照）。湿性ＡＲＭＤでは、新しい血管は、網膜の下で成長し、血液及び体液が漏出する。この異常な漏出性の脈絡膜血管新生は、網膜細胞を死滅させ、中心視野に盲点を生じる。異なる形態の黄斑変性症も、より若い患者において起こり得る。加齢に関連しない病因は、遺伝、糖尿病、栄養不足、頭部外傷、感染症、又は他の因子に関連付けられ得る。
【０２１３】
定期眼科検診中に患者又は眼科医によって気付かれる視力の低下は、黄斑変性症の最初の指標であり得る。黄斑のブルック膜の下の滲出物、又は「ドルーゼン」の形成は、黄斑変性症が発症し得る最初の身体的徴候であることが多い。症状は、知覚される直線の歪みを含み、ある場合には、視野の中心が残りの光景よりも歪んで見え；暗くぼやけた領域若しくは「ホワイトアウト」が視野の中心に見え；及び／又は色の知覚が変化するか若しくは減退する。黄斑変性症に罹患した対象の診断及びモニタリングは、当該技術分野で承認された定期眼科検診の手順及び対象による症状の報告にしたがって、眼科の技術分野の当業者によって行われ得る。
【０２１４】
老眼は、正常な眼の調節の速度及び調節幅が加齢とともに低下するため、目が近くの物体に焦点を合わせる能力が徐々に減退する、加齢関連の状態である。水晶体の弾性の喪失及び毛様筋の収縮性の喪失が、その原因として仮定されている（例えば、Ｈｅｙｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｖｉｓ．１０（２００４）９５６−９６３；Ｐｅｔｒａｓｈ，Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．５４（２０１３）ＯＲＳＦ５４−ＯＲＳＦ５９を参照）。水晶体前嚢及び水晶体後嚢の機械的特性の加齢関連の変化は、水晶体後嚢の機械的強度が、加齢とともに著しく低下することを示唆している（例えば、Ｋｒａｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．４４（２００３）６９１−６９６；Ｋｒａｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．３８（１９９７）３５７−３６３を参照）。
【０２１５】
眼の嚢の積層構造も変化し、組織の組成の変化に少なくとも部分的に起因し得る（例えば、Ｋｒａｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７、上記、及びそこで引用される参考文献を参照）。水晶体嚢の主な構造成分は、三次元分子ネットワークへと組織化された基底膜ＩＶ型コラーゲンである（例えば、Ｃｕｍｍｉｎｇｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｎｎｅｃｔ．Ｔｉｓｓｕｅ  Ｒｅｓ．５５（２０１４）８−１２；Ｖｅｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｌｌ．Ｒｅｌａｔ．Ｒｅｓ．１（１９８１）２６９−２８６を参照）。ＩＶ型コラーゲンは、α  １１２、α  ３４５、又はα  ５５６の特定の鎖の組合せをそれぞれ含むヘテロ三量体コラーゲンＩＶプロトマーへと会合する６つの相同な鎖（α１〜６）から構成される（例えば、Ｋｈｏｓｈｎｏｏｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｉｃｒｏｓｃ．Ｒｅｓ．Ｔｅｃｈ．７１（２００８）３５７−３７０を参照）。プロトマーは、非コラーゲン性１（ＮＣ１）ドメインと呼ばれる球状のＣ末端領域で終端する、Ｇｌｙ−Ｘ−Ｙのトリプレットペプチド配列と三重螺旋コラーゲンドメインの構造的類似性を共有する（Ｔｉｍｐｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．９５（１９７９）２５５−２６３）。Ｎ末端は、７Ｓドメインと呼ばれる螺旋ドメインから構成され（例えば、Ｒｉｓｔｅｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１０８（１９８０）２３９−２５０を参照）、これは、プロトマー間の相互作用にも関与している。
【０２１６】
コラーゲンＩＶが、上皮層の下の基底膜の位置決めから推論される細胞機能に影響を与えることを、研究は示唆しており、データは、組織安定化におけるコラーゲンＩＶの役割を裏付けている（例えば、Ｃｕｍｍｉｎｇｓ  ｅｔ  ａｌ．、上記を参照）。後嚢混濁（ＰＣＯ）は、白内障手術後数年間に患者の約２０〜４０％において合併症として発症する（例えば、Ａｗａｓｔｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．１２７（２００９）５５５−５６２を参照）。ＰＣＯは、創傷治癒に類似した反応における後嚢に沿った残りの水晶体上皮細胞の増殖及び活性に起因する。線維芽細胞成長因子、形質転換成長因子−β、上皮成長因子、肝細胞増殖因子、インスリン様成長因子、及びインターロイキンＩＬ−１及びＩＬ−６などの成長因子はまた、上皮細胞移動を促進し得る（例えば、Ａｗａｓｔｈｉ  ｅｔ  ａｌ、上記；Ｒａｊ  ｅｔ  ａｌ．、上記を参照）。本明細書に説明されるように、老化細胞によるこれらの因子及びサイトカインの産生は、ＳＡＳＰに寄与する。対照的に、インビトロの研究は、コラーゲンＩＶが、水晶体上皮細胞の付着を促進することを示す（例えば、Ｏｌｉｖｅｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．３４（１９９３）２８２５−２８３４を参照）。眼内レンズへのコラーゲンＩＶ、フィブロネクチン、及びラミニンの付着は、細胞移動を阻害し、ＰＣＯのリスクを低下させ得る（例えば、Ｒａｊ  ｅｔ  ａｌ，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｓｃｉ．３（２００７）２３７−２５０を参照）。
【０２１７】
何らかの特定の理論に拘束されるのを望むものではないが、本明細書に記載される老化細胞除去剤によって老化細胞を選択的に死滅させることは、ＩＶ型コラーゲン網の分裂を遅くするか又は妨げ得る（遅延する、阻害する、遅らせる）。老化細胞の除去及びそれによるＳＡＳＰの炎症効果の除去は、上皮細胞移動を減少させるか又は阻害し得、さらに老眼の発症を遅らせる（抑制する）又は病態の進行性の重症度を低下させるか若しくは遅くし得る（軽度から中程度又は中程度から重度の進行を遅くするなど）。本明細書に記載される老化細胞除去剤はまた、ＰＣＯの発症の可能性を低下させるための白内障手術後に有用であり得る。
【０２１８】
白内障の発症との、細胞老化の関与の直接的な証拠は、臨床研究から得られていないが、ＢｕｂＲ１の低形質マウスは、生涯の早期に両側的に後嚢下白内障を発症し、これは、老化が役割を果たし得ることを示唆している（例えば、Ｂａｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１０（２００８）８２５−８３６を参照）。白内障は、眼の水晶体の混濁であり、かすみ目を引き起こし、治療せずに放置すると、失明につながり得る。白内障を取り除くために、手術が有効であり、日常的に実施されている。本明細書に記載される老化細胞除去剤の１つ以上の投与は、白内障の発症の可能性を低下させ得るか、又は白内障の進行を遅くするか若しくは阻害し得る。白内障の存在及び重症度は、眼科の技術分野の当業者によって日常的に実施される方法を用いて眼科検診によってモニタリングされ得る。
【０２１９】
特定の実施形態において、本明細書に記載される少なくとも１つの老化細胞除去剤は、老眼、白内障、又は黄斑変性症を発症するリスクのある対象に投与され得る。老化細胞除去剤による処置は、白内障、老眼、及び黄斑変性症の発症又は発生を遅らせるか又は阻害するために、ヒト対象が、少なくとも４０歳であるときに開始され得る。ほぼ全てのヒトが老眼を発症するため、特定の実施形態において、老化細胞除去剤は、老眼の発症又は発生を遅らせるか又は阻害するために、対象が４０歳に達した後に、ヒト対象に、本明細書に記載されるような方法で投与され得る。
【０２２０】
特定の実施形態において、老化関連の疾患又は障害は、緑内障である。緑内障は、多くの場合、他の現行の症状なしで、視野欠損を引き起こす疾患の群を表すのに使用される広義語である。症状の欠如は、多くの場合、疾患の末期までの緑内障の診断の遅れにつながる。緑内障に罹患した対象は、たとえ失明しなくても、視覚が重度に損なわれることが多い。通常、透明な液体が、前房として知られている眼の前部に流出入する。開放隅角／広角緑内障有する個体では、この流体の排出が遅すぎ、眼内の圧力の上昇を引き起こす。治療せずに放置すると、この高い圧力は、その後、視神経を損傷し、完全な失明を引き起こし得る。周辺視力の喪失は、網膜における神経節細胞の死によって引き起こされる。神経節細胞は、眼を脳に連結する特定のタイプの投射ニューロンである。流体の流出に必要とされる細胞網が、ＳＡ−β−Ｇａｌ染色に供されると、緑内障患者において老化の４倍増加が観察された（例えば、Ｌｉｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐ．Ｇｅｒｏｎｔｏｌ．４０（２００５）７４５−７４８を参照）。
【０２２１】
緑内障の進行の阻害に対する治療の効果をモニタリングするために、標準の自動視野計測（視野検査）が、最も広く使用されている技術である。さらに、進行検出のためのいくつかのアルゴリズムが開発された（例えば、Ｗｅｓｓｅｌｉｎｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．１２７（３）（２００９）２７０−２７４、及びその中の参考文献を参照）。さらなる方法は、隅角鏡検査（流体が眼から流出する小柱網及び角を検査する）；イメージング技術、例えば、走査型レーザートモグラフィー（例えば、ＨＲＴ３）、レーザー偏光測定（例えば、ＧＤＸ）、及び眼のコヒーレンストモグラフィー）；眼底検査；及び中心角膜の厚さを測定する厚度計測定を含む。
【０２２２】
代謝性疾患又は障害
老化細胞除去剤を投与することによって治療可能な老化関連の疾患又は障害としては、代謝性疾患又は障害が挙げられる。このような老化細胞に関連する疾患及び障害としては、糖尿病、メタボリック症候群、糖尿病性潰瘍、及び肥満が挙げられる。
【０２２３】
糖尿病は、インスリン産生、インスリン作用、又はその両方の欠陥に起因する高レベルの血糖によって特徴付けられる。成人における糖尿病の全ての診断された症例の大多数（９０〜９５％）は、膵臓によるインスリン産生の漸進的な喪失によって特徴付けられる２型糖尿病である。糖尿病は、米国における成人の間で、腎不全、非外傷性の下肢切断、及び失明の新しい症例の主要原因である。糖尿病は、心臓病及び脳卒中の主な原因であり、米国における主要な死亡原因の第７位である（例えば、Ｃｅｎｔｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ａｎｄ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  ｄｉａｂｅｔｅｓ  ｆａｃｔ  ｓｈｅｅｔ：ｎａｔｉｏｎａｌ  ｅｓｔｉｍａｔｅｓ  ａｎｄ  ｇｅｎｅｒａｌ  ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｏｎ  ｄｉａｂｅｔｅｓ  ａｎｄ  ｐｒｅ−ｄｉａｂｅｔｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ，２０１１（“Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ｆａｃｔ  ｓｈｅｅｔ”）を参照）。本明細書に記載される老化細胞除去剤は、２型糖尿病、特に、加齢、食事及び肥満に関連する２型糖尿病を治療するのに使用され得る。
【０２２４】
肥満及び２型糖尿病などの代謝性疾患への老化細胞の関与は、損傷又は代謝機能不全に対する反応として示唆されている（例えば、Ｔｃｈｋｏｎｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｇｉｎｇ  Ｃｅｌｌ  ９（２０１０）６６７−６８４を参照）。肥満マウスからの脂肪組織は、老化マーカーＳＡ−β−Ｇａｌ、ｐ５３、及びｐ２１の誘発を示した（例えば、Ｔｃｈｋｏｎｉａ  ｅｔ  ａｌ．、上記；Ｍｉｎａｍｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．１５（２００９）１０８２−１０８７を参照）。腫瘍壊死因子−α及びＣｃｌ２／ＭＣＰ１などの炎症性サイトカインの同時の上方制御が、同じ脂肪組織中で観察された（例えば、Ｍｉｎａｍｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．、上記を参照）。炎症性ＳＡＳＰ成分も２型糖尿病に寄与することが示唆されているため、肥満における老化細胞の誘発は、潜在的に臨床的意味を有する（例えば、Ｔｃｈｋｏｎｉａ  ｅｔ  ａｌ．、上記を参照）。老化マーカー及びＳＡＳＰ成分の上方制御の同様のパターンが、マウス及びヒトの両方において、糖尿病に関連している（例えば、Ｍｉｎａｍｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．、上記を参照）。したがって、老化細胞除去剤を投与する工程を含む本明細書に記載される方法は、２型糖尿病、並びに肥満及びメタボリック症候群の治療又は予防に有用であり得る。理論に拘束されるのを望むものではないが、老化前脂肪細胞が老化細胞除去剤と接触し、それによって、老化前脂肪細胞を死滅させることにより、糖尿病、肥満、又はメタボリック症候群のいずれか１つを有する人に臨床的及び健康的な利益を提供することができる。
【０２２５】
２型糖尿病に罹患している対象は、２型糖尿病の分野において公知の標準的な診断方法を用いて同定され得る。一般に、２型糖尿病の診断は、患者の症状（例えば、喉の渇きの増加及び頻尿、空腹感の増加、体重の減少、疲労、かすみ目、治癒が遅い痛み又は頻発する感染症、及び／又は黒ずんだ皮膚の領域）、病歴、及び／又は身体検査に基づく。２型糖尿病を発症するリスクのある対象としては、２型糖尿病の家族歴を有する対象並びに過剰な体重、脂肪分布、運動不足、人種、年齢、前糖尿病、及び／又は妊娠性糖尿病などの他の危険因子を有する対象が挙げられる。
【０２２６】
老化細胞除去剤の有効性は、医療及び臨床の技術分野の当業者によって容易に判定され得る。本明細書に記載されるものなどの、身体検査、臨床症状の評価及びモニタリング、並びに分析試験及び方法の実施を含む、診断方法の１つ又は任意の組合せが、対象の健康状態をモニタリングするのに使用され得る。糖尿病の治療又は予防のために本明細書に記載される１つ以上の老化細胞除去剤を受ける対象は、例えば、グルコース及びインスリンの耐性、エネルギー消費、身体組成、脂肪組織、骨格筋、及び肝臓の炎症、及び／又は脂肪毒性（インビボでのイメージングによる筋肉及び肝臓の脂質並びに組織構造による筋肉、肝臓、骨髄、及び膵臓のβ細胞脂質の蓄積及び炎症）をアッセイすることによってモニタリングされ得る。２型糖尿病の他の特性又は表現型が公知であり、本明細書に記載されるように、当該技術分野において公知であり、日常的に実施される他の方法及び技術を使用することによってアッセイされ得る。
【０２２７】
肥満及び肥満関連疾患は、身長及び体格に理想的なものよりも著しく体重が重い対象の状態を指すのに使用される。ボディ・マス・インデックス（ＢＭＩ）は、過剰な体重を判定するために使用される測定ツールであり、対象の身長及び体重から計算される。ヒトは、２５〜２９のＢＭＩを有する場合、太り過ぎであると考えられ；３０〜３９のＢＭＩを有する場合、肥満であると考えられ、＞４０のＢＭＩを有する場合、重度の肥満であると考えられる。したがって、肥満及び肥満関連という用語は、３０を超える、３５を超える、又は４０を超えるボディ・マス・インデックス値を有するヒト対象を指す。ＢＭＩによって捉えられない肥満のカテゴリーは、当該技術分野において「腹部肥満」と呼ばれ、これは、対象の胴周りに見られる余分な脂肪に関連し、ＢＭＩとは無関係でも健康に重要な因子である。腹部肥満の最も簡単で及び最もよく使用される尺度は、ウエストサイズである。一般に、女性の腹部肥満は、３５インチ以上のウエストサイズとして定義され、男性では４０インチ以上のウエストサイズとして定義される。肥満を判定するためのより複雑な方法は、磁気共鳴画像法又は二重エネルギーＸ線吸収測定法の機械などの特殊な装置を必要とする。
【０２２８】
糖尿病及び老化関連の病態又は障害は、糖尿病性潰瘍（すなわち、糖尿病の創傷）である。潰瘍は、皮膚の破壊であり、これは、皮下組織又は筋肉若しくは骨までを含むように広がり得る。これらの病変は、特に、下肢に生じる。糖尿病性静脈潰瘍を有する患者は、慢性創傷の部位で、細胞老化の存在の増加を示す（例えば、Ｓｔａｎｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｖａｓ．Ｓｕｒｇ．３３（２００１）１２０６−１２１１を参照）。糖尿病性潰瘍などの慢性炎症も、慢性創傷の部位で観察され（例えば、Ｇｏｒｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１６８（２００６）６５−７７を参照）、これは、老化細胞の炎症性サイトカインの表現型が、病理における役割を果たすことを示唆している。
【０２２９】
２型糖尿病に罹患しているか又は２型糖尿病を発症するリスクのある対象は、メタボリック症候群を有し得る。ヒトにおけるメタボリック症候群は、典型的に、肥満に関連し、心血管疾患、肝臓脂肪症、高脂血、糖尿病、及びインスリン抵抗性の１つ以上によって特徴付けられる。メタボリック症候群を有する対象は、例えば、高血圧症、２型糖尿病、高脂血、脂質異常症（例えば、高トリグリセリド血症、高コレステロール血）、インスリン抵抗性、肝臓脂肪症（脂肪性肝炎）、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、及び他の代謝障害の１つ以上を含み得る、代謝障害又は代謝異常の群を示し得る。
【０２３０】
腎機能障害
糸球体疾患などの腎臓の病態は、高齢者に起こり、本明細書に記載される老化細胞除去化合物の投与によって治療され得る。糸球体腎炎は、腎臓の炎症並びに２つのタンパク質、ＩＬ１α及びＩＬ１βの発現によって特徴付けられる（例えば、Ｎｉｅｍｉｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．５２（１９９７）３９３−４０３を参照）。ＩＬ１α及びＩＬ１βは、ＳＡＳＰの主要制御因子と考えられる（例えば、Ｃｏｐｐｅ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ．Ｂｉｏｌ．６（２００８）２８５３−２８６８を参照）。糸球体疾患は、特に線維性の腎臓における老化細胞の存在の増加に関連している（例えば、Ｓｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．７１（２００７）２１８−２２６を参照）。
【０２３１】
皮膚疾患又は障害
本明細書に記載される老化細胞除去剤を投与することによって治療可能な老化関連の疾患又は障害としては、皮膚疾患又は障害が挙げられる。このような老化細胞に関連する疾患及び障害としては、乾癬及び湿疹が挙げられ、これらも炎症性疾患であり、より詳細に上で説明されている。老化関連の他の皮膚疾患及び障害としては、しわ（老化によるしわ）；掻痒症（糖尿病及び老化に関連している）；感覚異常（糖尿病及び多発性硬化症に関連する化学療法副作用）；乾癬（示されるような）及び他の丘疹鱗屑性障害、例えば、紅皮症、扁平苔癬、及び苔癬様皮膚疾患；アトピー性皮膚炎（湿疹の形態であり、炎症に関連している）；湿疹性発疹（多くの場合、高齢患者に観察され、特定の薬剤の副作用に関連している）が挙げられる。老化関連の他の皮膚疾患及び障害としては、好酸球性皮膚疾患（特定の種類の血液癌に関連している）；反応性の好中球性皮膚症（炎症性腸症候群などの基礎疾患に関連している）；天疱瘡（自己抗体がデスモグレインに対して形成する自己免疫疾患）；類天疱瘡及び他の免疫水疱性皮膚疾患（皮膚の自己免疫性水疱形成）；老化関連の皮膚の線維性組織球増殖；及び高齢の個体群においてより一般的な皮膚リンパ腫が挙げられる。本明細書に記載される方法にしたがって治療可能な別の皮膚疾患としては、ループスエリテマトーデスの症状である皮膚ループスが挙げられる。遅発性のループスは、Ｔ細胞及びＢ細胞の減少した（すなわち、低下した）機能及び老化に関連するサイトカイン（免疫老化）に関連付けられ得る。
【０２３２】
炎症性及び自己免疫疾患及び障害
特定の実施形態において、老化関連の疾患又は障害は、限定しない例として、老化細胞除去剤の投与を含む本明細書に記載される方法にしたがって治療又は予防され得る（すなわち、発症の可能性が低下される）変形性関節症などの炎症性疾患又は障害である。本明細書に記載される阻害剤及びアンタゴニストなどの老化細胞除去剤を投与することによって治療され得る他の炎症性又は自己免疫疾患又は障害としては、骨粗鬆症、乾癬、口腔粘膜炎、関節リウマチ、炎症性腸疾患、湿疹、後彎症、椎間板ヘルニア、及び肺疾患、ＣＯＰＤ及び特発性肺線維症が挙げられる。
【０２３３】
骨関節炎の変形性関節疾患は、高い機械的ストレス、骨硬化症、並びに滑膜及び関節襄の厚化の部位における軟骨細線維化によって特徴付けられる。細線維化は、軟骨の表層の分割に伴う局所表面の崩壊である。初期の分割は、主要なコラーゲン束の軸に沿って軟骨と接する方向に起こる。軟骨内のコラーゲンは、崩壊し、プロテオグリカンが軟骨表面から失われる。関節中のプロテオグリカンの保護効果及び潤滑効果がないと、コラーゲン繊維は、分解しやすくなり、機械的破壊が続発する。変形性関節症を発症する素因となる危険因子としては、加齢、肥満、以前の関節損傷、関節の酷使、弱い大腿筋、及び遺伝的性質が挙げられる。変形性関節症の症状としては、不活発又は酷使後の、関節、特に股関節、膝、及び腰の痛み又は凝り；動作後にはなくなる静止後の凝り；及び活動後又は一日の終わりに向かって悪化する疼痛が挙げられる。変形性関節症は、頚部、小指関節、親指の付け根、足首、及び足の親指にも影響を及ぼし得る。慢性炎症は、変形性関節症に寄与する主な加齢関連の因子であると考えられる。老化と組み合わせて、関節の酷使及び肥満は、変形性関節症を促進するようである。
【０２３４】
老化細胞を選択的に死滅させることによって、老化細胞除去剤は、関節におけるプロテオグリカン層の損失又は侵食を予防する（すなわち、発症の可能性を低下させる）、減少させるか又は阻害し、患部の関節における炎症を軽減し、コラーゲン（例えば、ＩＩ型コラーゲン）の産生を促進する（すなわち、刺激する、増強する、誘発する）。老化細胞の除去は、関節において産生されるＩＬ−６などの炎症性サイトカインの量（すなわち、レベル）の減少を引き起こし、炎症が軽減される。少なくとも１つの老化細胞除去剤（少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤と組み合わされて、医薬組成物を形成し得る）を対象に投与することによって、変形性関節症を治療するため、対象の骨関節炎関節において老化細胞を選択的に死滅させ、及び／又は対象の関節においてコラーゲン（ＩＩ型コラーゲンなど）産生を誘発するための方法が、本明細書において提供される。老化細胞除去剤はまた、関節においてコラーゲンを分解するメタロプロテイナーゼ１３（ＭＭＰ−１３）の産生を減少させる（阻害する、軽減する）ため、及びプロテオグリカン層を回復するか又はプロテオグリカン層の喪失及び／又は分解を阻害するために使用されてもよい。老化細胞除去剤による処置はまた、それによって、骨の侵食を予防し（すなわち、その発症の可能性を低下させる）、阻害し、若しくは軽減し、又は骨の侵食を遅らせる（すなわち、速度を低下させる）。本明細書に詳細に記載されるように、特定の実施形態において、老化細胞除去剤は、（例えば、関節内、局所、経皮、皮内、又は皮下の送達によって）骨関節炎関節に直接投与される。老化細胞除去剤による処置はまた、関節の強度の劣化を回復、改善、又は阻害することができる。さらに、老化細胞除去剤を投与する工程を含む方法は、関節痛を軽減することができ、したがって、骨関節炎関節の疼痛処理に有用である。
【０２３５】
対象における変形性関節症の治療又は予防のための１つ以上の老化細胞除去剤の有効性及び１つ以上の老化細胞除去剤を受ける対象のモニタリングは、医療及び臨床の技術分野の当業者によって容易に判定され得る。身体検査（患部の関節の柔軟性、腫脹又は赤みの測定など）、臨床症状の評価及びモニタリング（疼痛、凝り、可動性など）、並びに本明細書に記載され、当該技術分野で実施される分析試験及び方法の実施（例えば、炎症性サイトカイン又はケモカインのレベルの測定；関節における骨間の空間の狭化によって示されるような軟骨の喪失を測定するためのＸ線画像；軟骨を含む、骨及び軟部組織の詳細な画像を提供する磁気共鳴画像法（ＭＲＩ））を含む、診断方法の１つ又は任意の組合せが、対象の健康状態をモニタリングするのに使用され得る。１つ以上の老化細胞除去剤の治療の効果は、治療を受けた、変形性関節症などの炎症性疾患又は障害に罹患しているか又はそのリスクのある患者の症状を、このような治療を受けなかったか又はプラセボ治療を受けた患者の症状と比較することによって分析され得る。
【０２３６】
特定の実施形態において、老化細胞除去剤は、関節リウマチ（ＲＡ）を治療及び／又は予防する（すなわち、その発症の可能性を減少又は低下させる）ために使用され得る。自然及び適応免疫応答の調節不全は、関節リウマチ（ＲＡ）の特徴であり、これは、発症率が加齢とともに増加する自己免疫疾患である。関節リウマチは、手及び足の小関節に典型的に影響を及ぼす慢性炎症性疾患である。変形性関節症が、少なくとも部分的に、関節の磨耗及び裂傷に起因し得る一方、関節リウマチは、関節の内面に影響を及ぼし、骨侵食及び関節変形を引き起こし得る疼痛性の腫脹をもたらす。ＲＡは、場合により、皮膚、眼、肺及び血管などの身体の他の器官にも影響を及ぼし得る。ＲＡは、あらゆる年齢の対象に生じ得るが；ＲＡは、通常、４０歳以降に発症する。この障害は、女性においてはるかに多く見られる。本明細書に記載される方法の特定の実施形態において、ＲＡは除外される。
【０２３７】
慢性炎症はまた、後彎症及び骨粗鬆症などの、他の加齢関連又は老化関連の疾患及び障害に寄与し得る。後彎症は、脊柱の重度の湾曲であり、正常老化及び早期老化でよく見られる（例えば、Ｋａｔｚｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｔｈｏｐ．Ｓｐｏｒｔｓ  Ｐｈｙｓ．Ｔｈｅｒ．４０（２０１０）３５２−３６０を参照）。加齢関連の後彎症は、骨粗鬆症が脊椎骨を亀裂及び圧迫が起きるまで減弱させた後に起こることが多い。いくつかのタイプの後彎症は、幼児又は十代の若者が対象になる。重度の後彎症は、肺、神経、並びに他の組織及び器官に影響を及ぼし得、疼痛及び他の問題を引き起こす。後彎症は、細胞老化に関連している。後彎症を治療するための老化細胞除去剤の能力の特性決定は、当該技術分野において使用される前臨床動物モデルにおいて決定され得る。例として、ＴＴＤマウスは、後彎症を発症し（例えば、ｄｅ  Ｂｏｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２９６（２００２）１２７６−１２７９を参照）；使用され得る他のマウスは、ＢｕｂＲ１Ｈ／Ｈマウスを含み、これも後彎症を発症することが知られている（例えば、Ｂａｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ４７９（２０１１）２３２−２３６を参照）。後彎症の形成は、経時的に視覚的に測定される。老化細胞除去剤による治療によって減少される老化細胞のレベルは、ＳＡ−β−Ｇａｌ染色などの１つ以上の老化細胞関連マーカーの存在を検出することによって決定され得る。
【０２３８】
骨粗鬆症は、本明細書に記載される老化細胞除去剤の投与によって治療又は予防され得る、骨折のリスクの増加につながり得る骨量及び骨密度の減少によって特徴付けられる進行性の骨疾患である。骨ミネラル濃度（ＢＭＤ）は低下され、骨微細構造は劣化し、骨におけるタンパク質の量及び種類は変更される。骨粗鬆症は、典型的に、骨ミネラル濃度試験によって診断され、モニタリングされる。閉経後の女性又はエストロゲンが減少した女性に最もリスクがある。７５歳を超える男性及び女性の両方にリスクがあるが、女性は男性の２倍骨粗鬆症を発症しやすい。老化細胞除去剤による治療によって減少される老化細胞のレベルは、ＳＡ−β−Ｇａｌ染色などの１つ以上の老化細胞関連マーカーの存在を検出することによって決定され得る。
【０２３９】
さらに他の実施形態において、本明細書に記載される老化細胞除去剤で治療又は予防され得る（すなわち、発症の可能性が低下される）炎症性／自己免疫疾患としては、潰瘍性大腸炎及びクローン病などの、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）及び炎症性腸疾患が挙げられる。炎症性腸疾患（ＩＢＤ）は、消化管の全て又は一部の慢性炎症を伴う。ＩＢＤから生じる命にかかわる合併症に加えて、この疾患は、痛みを伴い、衰弱させ得る。潰瘍性大腸炎は、消化管の一部に長期にわたる炎症を引き起こす炎症性腸疾患である。症状は、通常、急にではなくむしろ、時間をかけて進行する。潰瘍性大腸炎は、通常、大腸（結腸）及び直腸の最も内側のみに影響を及ぼす。クローン病は、消化管の膜に沿った部位のどこにでも炎症を引き起こし、多くの場合、患部の組織へと深く伸長する、炎症性腸疾患である。これは、腹痛、重度の下痢及び栄養失調につながり得る。クローン病によって引き起こされる炎症は、消化管の様々な領域を包含し得る。この疾患の診断及びモニタリングは、血液検査、結腸内視鏡検査、軟性Ｓ状結腸鏡検査、バリウムかん腸剤、ＣＴスキャン、ＭＲＩ、内視鏡検査、及び小腸画像診断を含む、当該技術分野で日常的に実施される方法及び診断試験にしたがって行われる。
【０２４０】
老化細胞除去剤を使用することによって治療又は予防され得る（すなわち、発症の可能性が低下される）他の炎症性又は自己免疫疾患としては、湿疹、乾癬、骨粗鬆症、及び肺疾患（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、喘息）、炎症性腸疾患、及び粘膜炎（ある場合には、放射線によって引き起こされる口腔粘膜炎を含む）が挙げられる。腎線維症、肝線維症、膵臓線維症、心筋繊維化、皮膚創傷治癒、及び口腔粘膜下線維症などの、器官の特定の線維症又は線維性疾患は、本明細書に記載される老化細胞除去剤で治療され得る。
【０２４１】
特定の実施形態において、老化細胞に関連する障害は、非限定的な例として、老化細胞除去剤の投与を含む本明細書に記載される方法にしたがって治療又は予防され得る（すなわち、発症の可能性が低下される）乾癬及び湿疹などの、皮膚の炎症性疾患である。乾癬は、皮膚の表皮層の異常に過剰な及び急速な成長によって特徴付けられる。乾癬の診断は、通常、皮膚の外観に基づいている。乾癬に典型的な皮膚の特徴は、疼痛及びかゆみを伴い得る、鱗状の赤色のプラーク、丘疹、皮膚の斑点である。乾癬では、ＳＡＳＰの主要な成分であるＩＬ−６などの様々な炎症性サイトカインの皮膚及び全身性の過剰発現が観察される。湿疹は、赤み、皮膚の腫れ、かゆみ及び乾燥、痂皮化、はがれ、水ぶくれ、ひび割れ、滲出、又は出血によって特徴付けられる皮膚の炎症である。乾癬及び湿疹の治療のための老化細胞除去剤の有効性及びこのような老化細胞除去剤を受ける対象のモニタリングは、医療又は臨床の技術分野の当業者によって容易に判定され得る。身体検査（皮膚の外観など）、臨床症状（かゆみ、腫れ、及び疼痛など）のモニタリングの評価、並びに本明細書に記載され、当該技術分野で実施される分析試験及び方法の実施（すなわち、炎症性サイトカインのレベルの決定）を含む、診断方法の１つ又は任意の組合せ。本明細書に記載される老化細胞除去剤で治療又は予防され得る（すなわち、発症の可能性が低下される）他の免疫障害又は疾患は、移植臓器の拒絶反応などの、臓器移植（例えば、腎臓、骨髄、肝臓、肺、又は心臓の移植）に対する宿主免疫応答に起因する病態を含む。本明細書に記載される老化細胞除去剤はまた、移植片対宿主病を治療するか又はその発症の可能性を低下させるために使用され得る。
【０２４２】
心血管疾患及び障害
他の実施形態において、本明細書に記載される方法によって治療される老化関連の疾患又は障害は、心血管疾患である。心血管疾患は、狭心症、不整脈、アテローム性動脈硬化症、心筋症、鬱血性心不全、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、頸動脈疾患、心内膜炎、心臓発作（冠動脈血栓症、心筋梗塞［ＭＩ］）、高血圧／高血圧症、大動脈瘤、脳動脈瘤、心筋繊維化、心臓の拡張機能障害、高コレステロール血／高脂血、僧帽弁逸脱、末梢血管疾患（例えば、末梢動脈疾患（ＰＡＤ））、心臓のストレス耐性及び脳卒中のいずれか１つ以上であり得る。
【０２４３】
特定の実施形態において、動脈硬化（すなわち、動脈の硬化）に関連するか又はそれによって引き起こされる老化関連の心血管疾患を治療するための方法が提供される。心血管疾患は、アテローム性動脈硬化症（例えば、冠動脈疾患（ＣＡＤ）及び頸動脈疾患）；狭心症、鬱血性心不全、及び末梢血管疾患（例えば、末梢動脈疾患（ＰＡＤ））のいずれか１つ以上であり得る。動脈硬化に関連するか又はそれによって引き起こされる心血管疾患を治療するための方法は、高血圧／高血圧症、狭心症、脳卒中、及び心臓発作（すなわち、冠動脈血栓症、心筋梗塞（ＭＩ））の発症の可能性を低下させ得る。特定の実施形態において、対象の血管（例えば、動脈）中のアテローム性動脈硬化プラークを安定させ、それによって、脳卒中又は心筋梗塞などの血栓事象の発症の可能性を低下させるか又はその発症を遅らせるための方法が提供される。特定の実施形態において、老化細胞除去剤の投与を含むこれらの方法は、対象の血管（例えば、動脈）中のアテローム性動脈硬化プラークの脂質含有量を減少させ（すなわち、その減少を引き起こす）、及び／又は線維性被膜厚さを増大させる（すなわち、線維性被膜の増大を引き起こす、その厚化を増強又は促進する）。
【０２４４】
アテローム性動脈硬化症は、中型及び大型の動脈の内腔を侵す斑状の内膜のプラーク（アテローム）によって特徴付けられ；プラークは、脂質、炎症細胞、平滑筋細胞、及び結合組織を含有する。アテローム性動脈硬化症は、冠状動脈、頚動脈、及び大脳動脈、大動脈及びその分枝、並びに肢の主な動脈を含む、中型及び大型の動脈に影響を及ぼし得る。ある実施形態において、老化細胞除去剤を投与することによって、アテローム性動脈硬化プラークの形成を阻害する（又はアテローム性動脈硬化プラークの形成を減少させる、低減する、減少を引き起こす）ための方法が提供される。他の実施形態において、プラークの量（すなわち、レベル）を減少させる（低下させる、低減する）ための方法が提供される。血管（例えば、動脈）中のプラークの量の減少は、例えば、プラークの表面積の減少によって、又は血管造影法又は心臓血管の分野で使用される他の可視化方法によって決定され得る、血管（例えば、動脈）の閉塞の範囲又は程度（例えば、パーセント）の減少によって、決定され得る。対象の１つ以上の血管（例えば、１つ以上の動脈）中に存在するアテローム性動脈硬化プラークの安定性を増加させる（又は安定性を改善する、促進する、増強する）ための方法も、本明細書において提供され、この方法は、本明細書に記載される老化細胞除去剤のいずれか１つを対象に投与する工程を含む。
【０２４５】
心血管疾患に罹患している対象は、心血管疾患の分野において公知の標準的な診断方法を用いて同定され得る。一般に、アテローム性動脈硬化症及び他の心血管疾患の診断は、患者の症状（例えば、胸痛又は胸部圧迫感（狭心症）、腕又は脚の麻痺又は脱力、発話困難又は不明瞭発語、顔の垂下筋肉、下肢痛、高血圧、腎不全及び／又は勃起障害）、病歴、及び／又は身体検査に基づく。診断は、血管造影法、超音波検査法、又は他の画像検査によって確認され得る。心血管疾患を発症するリスクのある対象としては、心血管疾患の家族歴などの素因のいずれか１つ以上を有する対象、並びに高血圧、脂質異常症、高コレステロール、糖尿病、肥満及び喫煙、座りがちな生活様式、及び高血圧症などの他の危険因子（すなわち、素因）を有する対象が挙げられる。特定の実施形態において、老化細胞に関連する疾患／障害である心血管疾患は、アテローム性動脈硬化症である。
【０２４６】
心血管疾患（例えば、アテローム性動脈硬化症）を治療又は予防する（すなわち、その発生又は発症の可能性を低下又は減少させる）ための１つ以上の老化細胞除去剤の有効性は、医療及び臨床の技術分野の当業者によって容易に判定され得る。身体検査、臨床症状の評価及びモニタリング、並びに本明細書に記載され、当該技術分野で実施される分析試験及び方法の実施（例えば、血管造影法、心電図検査法、ストレステスト、非ストレステスト）を含む、診断方法の１つ又は任意の組合せが、対象の健康状態をモニタリングするのに使用され得る。老化細胞除去剤又はそれを含む医薬組成物の治療の効果は、治療を受けた、心血管疾患に罹患しているか又はそのリスクのある患者の症状を、このような治療を受けなかったか又はプラセボ治療を受けた患者の症状と比較することなどの、当該技術分野において公知の技術を用いて分析され得る。
【０２４７】
併用療法
本明細書に開示される老化細胞除去剤及び組成物はまた、１つ以上の他の有効成分と組み合わせて使用され得る。特定の実施形態において、化合物は、別の治療剤と組み合わせて、又はそれと連続して投与され得る。このような他の治療剤としては、本明細書に記載される１つ以上の症状又は障害を治療、予防、又は改善することが知られているものが挙げられる。
【０２４８】
例えば、老化細胞除去剤は、化学療法剤の投与と組み合わせて、又はそれに続いて投与され得る。一実施形態において、腫瘍が、腫瘍細胞中の老化の状態を誘発する化学療法剤で治療され、共投与される老化細胞除去剤が、老化腫瘍細胞を死滅させる。老化細胞除去化合物と組み合わせた、腫瘍の治療に有用な化学療法薬の例としては、ドキソルビシンなどのトポイソメラーゼ阻害剤、パルボサイクリブなどのＣＤＫ４／６阻害剤及びオラパリブなどのＰＡＲＰ阻害剤が挙げられる（例えば、Ｆｌｅｕｒｙ  ｅｔ  ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１０（２０１９）２５５６を参照）。
【０２４９】
本明細書において提供される化合物及び医薬組成物と、上記の治療剤及び任意に１つ以上のさらなる薬理的活性物質の１つ以上との任意の好適な組合せが、本開示の範囲内であると考えられることが理解されるべきである。ある実施形態において、本明細書において提供される化合物及び医薬組成物は、１つ以上のさらなる有効成分の前又は後に投与される。
【０２５０】
医薬組成物及び投与方法
本明細書に記載される老化細胞除去剤と、薬学的に好適な賦形剤又は担体（すなわち、有効成分の活性を妨げない非毒性材料）とも呼ばれる少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物も、本明細書において提供される。医薬組成物は、滅菌した水性又は非水性の水溶液、懸濁液又はエマルジョン（例えば、マイクロエマルジョン）であり得る。本明細書に記載される賦形剤は、例であり、決して限定するものではない。有効量又は治療有効量は、所望の治療効果を生じるのに有効である、単回投与又は一連の投与の一部として、対象に投与される１つ以上の老化細胞除去剤の量を指す。
【０２５１】
２つ以上の老化細胞除去剤が、本明細書に記載される疾患又は障害の治療のために対象に投与される場合、老化細胞除去剤のそれぞれは、別個の医薬組成物へと製剤化されてもよい。別個の医薬組成物（便宜上、例えば、第１及び第２の老化細胞除去剤のそれぞれを含む第１の医薬組成物及び第２の医薬組成物と呼ばれ得る）のそれぞれを含む医薬製剤が調製され得る。調製における医薬組成物のそれぞれは、同時に（すなわち、並行して）及び同じ投与経路を介して投与され得るか、又は同じか又は異なる投与経路によって異なる時間に投与され得る。或いは、２つ以上の老化細胞除去剤は、単一の医薬組成物中で一緒に製剤化され得る。
【０２５２】
対象に投与される老化細胞除去剤（又はその１つ以上の代謝産物）の薬物動態が、生体液、例えば、血液、血液分画（例えば、血清）、及び／又は尿、及び／又は対象からの他の生体サンプル若しくは生体組織における老化細胞除去剤のレベルを決定することによってモニタリングされ得る。薬剤を検出するために当該技術分野で実施され、本明細書に記載される任意の方法が、治療過程の間、老化細胞除去剤のレベルを測定するのに使用され得る。
【０２５３】
老化細胞に関連する疾患又は障害を治療するための本明細書に記載される老化細胞除去剤の用量は、対象の状態、すなわち、疾患の病期、疾患によって引き起こされる症状の重症度、全体的な健康状態、並びに年齢、性別、及び体重、並びに医療技術分野の当業者に明白な他の因子に依存し得る。医薬組成物は、医療技術分野の当業者によって決定されるように、治療される疾患に適切な方法で投与され得る。本明細書に記載される、老化関連の疾患又は障害を治療するための老化細胞除去剤の使用に関連する因子に加えて、老化細胞除去剤の好適な期間及び投与の頻度はまた、患者の状態、患者の疾患のタイプ及び重症度、有効成分の特定の形態、及び投与の方法のような因子によって、決定又は調整され得る。薬剤の最適用量は、一般に、実験モデル及び／又は臨床試験を用いて決定され得る。最適用量は、対象の体格、体重、又は血液量に依存し得る。有効な治療を提供するのに十分な最小量の使用が通常好ましい。本明細書に記載される老化細胞除去剤（予防効果のために投与される場合を含む）のための前臨床及び臨床試験の設計及び実行は、関連技術の当業者の技術の十分範囲内にある。２つ以上の老化細胞除去剤が、老化関連の疾患又は障害を治療するために投与されるとき、各老化細胞除去剤の最適用量は、いずれかの薬剤が単回の薬剤治療として単独で投与されるときより少ないなど、異なり得る。特定の実施形態において、２つの老化細胞除去剤の併用は、相乗的又は相加的に作用し、いずれかの薬剤が、単独で投与される場合より少ない量で使用され得る。１日当たり投与され得る老化細胞除去剤の量は、例えば、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ（例えば、約０．１〜１ｍｇ／ｋｇ、約１〜１０ｍｇ／ｋｇ、約１０〜５０ｍｇ／ｋｇ、約５０〜１００ｍｇ／ｋｇ体重であり得る。他の実施形態において、１日当たり投与され得る老化細胞除去剤の量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１０００ｍｇ／ｋｇ、約１００〜５００ｍｇ／ｋｇ、又は約５００〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重である。最適用量（１日当たり又は治療の経過ごと）は、治療される老化関連の疾患又は障害によって異なり得、また、投与経路及び治療計画に応じて異なり得る。
【０２５４】
老化細胞除去剤を含む医薬組成物は、当該技術分野で日常的に実施される技術を使用することによって、送達方法に適切な方法で製剤化され得る。組成物は、固体（例えば、錠剤、カプセル）、半固体（例えば、ゲル）、液体、又は気体（エアロゾル）の形態であり得る。他のいくつかの特定の実施形態において、老化細胞除去剤（又はそれを含む医薬組成物）は、ボーラス注入として投与される。特定の実施形態において、老化細胞除去剤が注入によって送達されるとき、老化細胞除去剤は、医療技術分野の当業者によって日常的に実施される技術にしたがって、血管を介して、死滅される老化細胞を含む器官又は組織に送達される。
【０２５５】
薬学的に許容される賦形剤は、薬学の技術分野において周知であり、例えば、Ｒｏｗｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ：Ａ  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｕｓｅｓ，Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ａｎｄ  Ｓａｆｅｔｙ，５ｔｈＥｄ．，２００６、及びＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｇｅｎｎａｒｏ，２１ｓｔＥｄ．Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ．Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ．（２００５））に記載されている。例示的な薬学的に許容される賦形剤は、生理学的なｐＨで滅菌生理食塩水及びリン酸緩衝生理食塩水を含む。保存剤、安定剤、染料、緩衝液などが、医薬組成物中に提供され得る。さらに、酸化防止剤及び懸濁化剤も使用され得る。一般に、賦形剤のタイプは、投与の方法、並びに有効成分の化学組成に基づいて選択される。或いは、本明細書に記載される組成物は、凍結乾燥物として製剤化され得る。本明細書に記載される組成物は、凍結乾燥され得るか、或いは投与後に組成物の薬剤を可溶化及び／又は希釈するために１つ以上の適切な賦形剤溶液を用いて、凍結乾燥した生成物として製剤化され得る。他の実施形態において、薬剤は、当該技術分野において公知であり、実施される技術を用いて、リポソーム内に封入され得る。医薬組成物は、本明細書及び当該技術分野で記載される投与の任意の適切な方法のために製剤化され得る。
【０２５６】
医薬組成物は、当業者に公知のいくつかの経路のいずれか１つによって、それを必要としている対象に送達され得る。限定しない例として、組成物は、経口、静脈内、腹腔内、注入（例えば、ボーラス注入）、皮下、腸内、直腸、鼻腔内、吸入、口腔、舌下、筋肉内、経皮、皮内、局所、眼内、膣、直腸、若しくは頭蓋内の注入によって、又はそれらの任意の組合せで送達され得る。特定の実施形態において、上述されるような用量の投与は、静脈内、腹腔内を介するか、標的組織若しくは器官に直接であるか、又は皮下経路である。特定の実施形態において、送達方法は、老化細胞除去剤である薬物をコーティングした又は浸透させたステントを含む。このような送達方法に好適な製剤が、本明細書にさらに詳細に記載されている。
【０２５７】
特定の実施形態において、老化細胞除去剤（少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤と組み合わされて、医薬組成物を形成し得る）は、疾患又は障害の発現に寄与する老化細胞を含む標的組織又は器官に直接投与される。変形性関節症を治療するときの特定の実施形態において、少なくとも１つの老化細胞除去剤は、それを必要としている対象の骨関節炎の関節（すなわち、関節内）に直接投与される。他の特定の実施形態において、老化細胞除去剤は、局所、経皮、皮内、又は皮下経路を介して関節に投与され得る。他の特定の実施形態において、動脈に直接投与することによって、アテローム性動脈硬化症などの、動脈硬化に関連する心血管疾患又は障害を治療するための方法が、本明細書において提供される。他の実施形態において、老化関連の肺疾患又は障害を治療するための老化細胞除去剤（少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤と組み合わされて、医薬組成物を形成し得る）は、例えば、罹患した肺組織により直接的に老化細胞除去剤を提供するために、吸入、鼻腔内、挿管によって、又は気管内に投与され得る。別の限定しない例として、老化細胞除去剤（又は老化細胞除去剤を含む医薬組成物）は、注入（例えば、眼内若しくは硝子体内）又はクリーム、軟膏、ゲル、若しくは点眼剤の眼瞼の下の結膜への適用によって眼に直接送達され得る。より特定の実施形態において、老化細胞除去剤又は老化細胞除去剤を含む医薬組成物は、持続放出（徐放性、制御放出とも呼ばれる）組成物として製剤化され得るか、又はボーラス注入として投与され得る。
【０２５８】
医薬組成物（例えば、経口投与のための又は注射、注入、皮下送達、筋肉内送達、腹腔内送達若しくは他の方法のための）は、液体の形態であり得る。液体医薬組成物は、例えば、以下の１つ以上を含み得る：滅菌希釈剤、例えば、水、生理食塩溶液、好ましくは、生理食塩水、リンゲル液、等張塩化ナトリウム、溶媒若しくは懸濁媒として働き得る固定油、ポリエチレングリコール、グリセロール、プロピレングリコール若しくは他の溶媒；抗菌剤；酸化防止剤；キレート剤；塩化ナトリウム又はデキストロースなどの、張度を調節するための緩衝液及び薬剤。非経口組成物は、ガラス又はプラスチックで作製された、アンプル、使い捨て注射器又は複数回投与用バイアルに封入され得る。生理食塩水の使用が好ましく、注射用の医薬組成物は好ましくは滅菌されている。他の実施形態において、眼の疾病又は疾患の治療のために、液体医薬組成物は、点眼剤の形態で眼に適用され得る。液体医薬組成物は、経口で送達され得る。
【０２５９】
経口製剤の場合、本明細書に記載される老化細胞除去剤の少なくとも１つが、単独で又は錠剤、粉末剤、顆粒剤若しくはカプセル剤を作製するのに適切な添加剤と、必要に応じて、希釈剤、緩衝剤、湿潤剤、保存剤、着色剤、及び着香剤と組み合わせて使用され得る。化合物は、胃環境の低いｐＨからの化合物の保護及び／又は腸溶コーティングを提供するために、緩衝剤とともに製剤化され得る。医薬組成物に含まれる老化細胞除去剤は、例えば、液体、固体若しくは半固体の製剤において香味剤とともに及び／又は腸溶コーティングとともに、経口送達のために製剤化され得る。
【０２６０】
本明細書に記載される老化細胞除去剤のいずれか１つを含む医薬組成物は、徐放性又は遅効性（持続放出又は制御放出とも呼ばれる）のために製剤化され得る。このような組成物は、一般に、周知の技術を用いて調製され得、例えば、経口、直腸、皮内、若しくは皮下への移植によって、又は所望の標的部位における移植によって投与され得る。徐放性製剤は、担体マトリックス中に分散された及び／又は律速膜に囲まれたリザーバ内に含まれた化合物を含有し得る。このような製剤中で使用するための賦形剤は、生体適合性であり、生分解性でもあり得；好ましくは、製剤は、比較的一定のレベルの有効成分の放出を提供する。徐放性製剤内に含まれる活性薬剤の量は、移植の部位、放出の速度及び予測される期間、並びに治療又は予防される病態、疾患又は障害の性質に依存する。
【０２６１】
特定の実施形態において、老化細胞除去剤を含む医薬組成物は、経皮、皮内、又は局所投与のために製剤化される。組成物は、粉末／タルク又は他の固体、液体、スプレー、エアロゾル、軟膏、フォーム、クリーム、ゲル、ペーストとして、シリンジ、包帯、経皮貼布、インサート（ｉｎｓｅｒｔ）、又はシリンジ状の塗布用具を用いて投与され得る。これは、好ましくは、局所に投与された又は治療される領域に隣接する若しくは領域内の皮膚に直接注入された（皮内又は皮下に）制御放出製剤又は徐放性製剤の形態である。活性組成物はまた、イオン導入によって送達され得る。保存剤は、真菌及び他の微生物の増殖を防ぐために使用され得る。好適な保存剤としては、限定はされないが、安息香酸、ブチルパラベン、エチルパラベン、メチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ベンジルアルコール、塩化セチルピリジニウム、クロロブタノール、フェノール、フェニルエチルアルコール、チメロサール、及びそれらの組合せが挙げられる。
【０２６２】
老化細胞除去剤を含む医薬組成物は、局所適用のためのエマルジョンとして製剤化され得る。エマルジョンは、第２の液体の本体に分配された１つの液体を含有する。エマルジョンは、水中油型エマルジョン又は油中水型エマルジョンであり得る。油相及び水性相のいずれか又は両方は、１つ以上の界面活性剤、乳化剤、乳化安定剤、緩衝液、及び他の賦形剤を含有し得る。油相は、他の油性の薬学的に許容される賦形剤を含有し得る。好適な界面活性剤としては、限定はされないが、アニオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、及び両性界面活性剤が挙げられる。局所適用のための組成物は、少なくとも１つの好適な懸濁化剤、酸化防止剤、キレート剤、皮膚軟化剤、又は湿潤剤も含み得る。
【０２６３】
軟膏及びクリームは、例えば、好適な増粘剤及び／又はゲル化剤が添加された水性又は油性の基剤とともに製剤化され得る。ローションは、水性又は油性の基剤とともに製剤化され得、一般に、１つ以上の乳化剤、安定剤、分散剤、懸濁化剤、増粘剤、又は着色剤も含有する。液体スプレーは、例えば、特別に成形されたクロージャ（ｃｌｏｓｕｒｅ）を介して、加圧パックから送達され得る。水中油型エマルジョンはまた、組成物、貼付剤、包帯及び物品において使用され得る。これらのシステムは、半固体のエマルジョン、マイクロエマルジョン、又は泡状のエマルジョンのシステムである。
【０２６４】
制御放出又は徐放性の経皮又は局所製剤は、当該技術分野において利用可能である、高分子構造、マトリックスなどの持続放出の添加剤の添加によって実現され得る。例えば、組成物は、生体付着性ホットメルト押出フィルムなどのホットメルト押出物の使用によって投与され得る。製剤は、架橋されたポリカルボン酸ポリマー製剤を含み得る。架橋剤は、化合物の所望の放出を可能にする十分な時間にわたって、標的の上皮又は内皮細胞表面にシステムを付着したままにするのに十分な付着性を提供する量で存在し得る。
【０２６５】
インサート、経皮貼布、包帯又は物品は、長期間にわたって一定の速度で活性薬剤の放出を提供するポリマーの混合物又はコーティングを含み得る。ある実施形態において、物品、経皮貼布又はインサートは、インサートの耐久性を増加させるために及び有効成分の放出を延長するために水不溶性ポリマーと混合され得るポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの水溶性の気孔生成剤を含む。
【０２６６】
ポリマー製剤も、制御放出又は徐放を提供するために利用され得る。当該技術分野で記載される生体付着性ポリマーが使用され得る。例として、徐放性のゲル及び化合物は、疎水性ポリマーマトリックスなどのポリマーマトリックスに組み込まれ得る。ポリマーマトリックスの例としては、微小粒子が挙げられる。微粒子は、ミクロスフェアであり得、コアは、ポリマーシェルと異なる材料で構成され得る。或いは、ポリマーは、薄いスラブ若しくは膜、粉砕若しくは他の標準的な技術によって生成された粉末、又はヒドロゲルなどのゲルとして鋳造され得る。ポリマーはまた、コーティング又は包帯、ステント、カテーテル、人工血管、又は老化細胞除去剤の送達を促進する他のデバイスの一部の形態であり得る。マトリックスは、溶媒蒸発、噴霧乾燥、溶媒抽出及び当業者に公知の他の方法によって形成され得る。
【０２６７】
本明細書に記載される薬剤の１つ以上の単位用量を有するキットは、通常、経口又は注射可能な用量で、提供される。このようなキットは、単位用量を含む容器、老化細胞関連の疾患を治療する際の薬剤の使用及び付随する利点を説明する情報の添付文書、及び任意に組成物の送達用の器具又はデバイスを含み得る。
【０２６８】
全ての参考文献及び特許文献は、あらゆる目的のために、全体が本明細書に援用される。
【実施例】
【０２６９】
実施例１：（Ｅ）−３−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリル酸（２９）の調製
【化４６】
2021531249.tif 000083
２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エタン−１−アミン（２８）（４００ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ：ジクロロエタン：メタノール（５：５：０．５）の混合物に溶解させた。この溶液に、（Ｅ）−３−（４−ホルミルフェニル）アクリル酸（２７）（３６７ｍｇ、２．０９ｍｍｏｌ、０．９５当量）、トリアセトキシボロヒドリド（２３２０ｍｇ、１１ｍｍｏｌ、５．０当量）及び３滴の酢酸を加えた。混合物を一晩撹拌させ、揮発性物質を減圧下で除去した。ＬＣ／ＭＳは、所望の生成物の存在を示した。水を加えたところ、固体が溶液から析出した。希薄ＮａＨＣＯ３を用いてｐＨを７に調整した後、水溶液を酢酸エチルで洗浄した。白色の固体をろ過し、水、エーテル、及びヘキサンで洗浄して、（Ｅ）−３−（４−（（（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリル酸を淡黄色の固体として得た。（６２０ｍｇ、８１％の収率）。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．４１分；ｍ／ｚ＝３３５．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７０】
前の生成物（Ｅ）−３−（４−（（（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリル酸（２６０ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ、１．０当量）及び炭酸水素ナトリウム（２４５ｍｇ、２．９２ｍｍｏｌ、３．８当量）を、ジオキサン：水（３：１）（５．１ｍＬ、０．１５Ｍ）中で懸濁させた。Ｆｍｏｃ塩化物を０℃で少しずつ加えた（２３０ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ、１．１５当量）。反応混合物を室温に温めた。ＬＣ／ＭＳによる分析は、所望の生成物を示した。ｐＨ約２になるまで希薄ＨＣｌを加えた。水溶液を、酢酸エチルで２回抽出した。組み合わされた有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮して、オレンジ色の固体を得た。粗生成物を、ヘキサン中１０〜１００％の酢酸エチルで溶離する順相精製に供した。生成物画分を組み合わせて、濃縮乾固させて、（Ｅ）−３−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリル酸（２９）をオフホワイトの固体として得た。（２４０ｍｇ、５６％の収率）。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝３．９１分；ｍ／ｚ＝５５７．６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７１】
実施例２：２−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸（１１０）の調製
【化４７】
2021531249.tif 000084
ジオキサン（２８．０ｍＬ、０．２３Ｍ）中のｔｅｒｔ−ブチル（ピペリジン−４−イルメチル）カルバメート（１４００ｍｇ、６．５ｍｍｏｌ、１．０当量）及びメチル２−クロロピリミジン−５−カルボキシレート（１１８０ｍｇ．６．８ｍｍｏｌ、１．０５当量）を、炭酸セシウム（５．２７ｇ、１６．２ｍｍｏｌ、２．５当量）で処理し、Ｐｄ（ｄｂａ）２アセトン（４４０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、０．０７５当量）を加えた。溶液を窒素（３回）でパージした。次に、キサントホス（５５８ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ、０．１５当量）を一度に加えた。懸濁液が数分以内に濃い赤色から黄緑色に変化した。次に、それを７０℃で３０分間加熱し、その時点で、ＬＣ／ＭＳ分析は、所望の生成物の存在を示した。混合物を室温に冷まし、ジクロロメタン（２０ｍＬ、３回）で洗浄しながらＣｅｌｉｔｅのパッドに通してろ過した。溶媒を濃縮乾固させ、残渣を、ヘキサン：酢酸エチル（４０〜１００％）で溶離する順相精製に供した。生成物画分を収集し、組み合わせて、濃縮して、２−［４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−メチル）−ピペリジン−１−イル］−ピリミジン−カルボン酸メチルエステルをオフホワイトの固体として得た。（１６５０ｍｇ）。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝３．２３分；ｍ／ｚ＝３５１．６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７２】
２−［４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−メチル）−ピペリジン−１−イル］−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル（１．６５ｇ、４．７ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させた。４ＮのＨＣｌ／ジオキサン（９．４ｍＬ、３７．６ｍｍｏｌ、８．０当量）を加え、溶液を６０℃で２時間加熱し、その間に、固体が沈殿した。塩酸塩沈殿物をろ過し、エーテル／ヘキサン（３回）で洗浄し、乾燥させて、２−（４−アミノメチル−ピペリジン−１−イル）−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル塩酸塩を白色の固体（１．０８ｇ）として得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８８分；ｍ／ｚ＝２５１．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７３】
ＴＨＦ：ＤＣＥ（１：１）５％のメタノール１８ｍＬ）中の２−（４−アミノメチル−ピペリジン−１−イル）−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル（１０８０ｍｇ、３．７７ｍｍｏｌ、１．０当量）及びトリエチルアミン（１．５ｍＬ、１０．５ｍｍｏｌ、２．５当量）に、１−メチル−１Ｈ−インドール−３−カルバルデヒド（６００ｍｇ、３．７７ｍｍｏｌ、０．９５当量）を一度に加えた。ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（６３００ｍｇ、３０．６ｍｍｏｌ、８．０当量）及び４滴の酢酸を加えた。ＮＭＰ（１．８ｍＬ）を加え、混合物を室温で２日間撹拌した。ＬＣ／ＭＳ分析は、所望の生成物の形成を示した。水を加え、炭酸水素ナトリウムを用いてｐＨを７に調整し、白色の固体をろ過し、水及び酢酸エチルで洗浄した。生成物を高真空下で乾燥させて、メチル２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボキシレートを白色の固体（１３００ｍｇ）として得た。この材料をさらに精製せずに次の工程に使用した。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．６７分；ｍ／ｚ＝３９４．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７４】
粗メチル２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボキシレート（１３００ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ、１．０当量）及び水酸化ナトリウム（１０５８ｍｇ、２６．４ｍｍｏｌ、８．０当量）を、ジオキサン：水（３：１）（１０．０ｍＬ）中で懸濁させた。溶液を７０℃で２時間加熱した。ＬＣ／ＭＳ分析は、完全な反応を示した。溶媒を濃縮して、過剰なアルコールを除去し、混合物を、ｐＨ約５になるまで酸性化し、水、続いてヘキサンで洗浄した。灰色の固体を高真空下で乾燥させて、純粋な２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸（２２０ｍｇ）を得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．４１分；ｍ／ｚ＝３８０．６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７５】
２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸（２００ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ、１．０当量）及び炭酸水素ナトリウム（１６５ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ、３．８当量）を、ジオキサン：水（３：１）（１．４ｍＬ）中で懸濁させた。Ｆｍｏｃ塩化物（１３６ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ、１．０当量）を、溶液が透明になるまで少しずつ加えた。ＬＣ／ＭＳ分析は、所望の生成物を示した。溶液のｐＨを２に調整し、酢酸エチルを加えた。混合物を水（３回）で抽出し、塩水で洗浄した。組み合わされた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮乾固させて、白色の発泡体を得て、それを、ジクロロメタンメタノール−ヘキサン（１：５、３回）で研和した。十分な乾燥により、表題化合物２−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）−メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸（１１０）が白色の発泡体（２００ｍｇ）として得られた。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝３．９６分；ｍ／ｚ＝６０２．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７６】
実施例３：（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（アミノオキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（２４）の調製
【化４８】
2021531249.tif 000085
（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−２−（アセトキシメチル）−６−ブロモテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（２３）（６６００ｍｇ、１６．０５ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ジクロロメタン（８０ｍＬ）に溶解させた。この溶液に、２−ヒドロキシイソインドリン−１，３−ジオン（２６００ｍｇ、１６．０５ｍｍｏｌ、１．０当量）を加えた。１Ｍの炭酸ナトリウム（３２．０ｍＬ、３２ｍｍｏｌ、２．０当量）中の硫酸水素テトラブチルアンモニウム（１０９０ｍｇ、３．２１ｍｍｏｌ、０．２当量）を、氷浴温度でゆっくりと加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。ＴＬＣ分析は、ＰＭＡ染色により、出発材料と比較してより低いｒｆで新たなスポットを示した。水を加え、混合物をジクロロメタン（３回）で抽出した。組み合わされた有機層を水及び塩水で洗浄し、次に、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮して、赤色の固体を得た。粗生成物を、２０〜７０％の酢酸エチル：ヘキサンで溶離する順相精製に供した。生成物画分を収集し、組み合わせて、濃縮して、純粋な（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテートを白色の発泡体として得た。（２０００ｍｇ、５５％）。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．９６分；ｍ／ｚ＝４９４．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７７】
（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（２０００ｍｇ、４．０５ｍｍｏｌ、１．０当量）を、メタノール（３５ｍＬ、０．１Ｍ）に溶解させた。ヒドラジン水和物（０．２０ｍＬ、４．２５ｍｍｏｌ、１．０５当量）をゆっくりと加えた。５分後、ＬＣ／ＭＳ分析は、所望の生成物を示した。ジクロロメタン（１２５ｍＬ）を加え、溶液を飽和ＮａＨＣＯ３（３回）で洗浄した。組み合わされた有機層を水及び塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮して、固体（２０００ｍｇ）を得た。生成物を、３０〜９０％の酢酸エチル：ヘキサンで溶離する順相精製に供した。生成物画分を収集し、組み合わせて、濃縮して、表題化合物（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（アミノオキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（２４）を白色の発泡体として得た。（１１７０ｍｇ、７９％の収率）。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．９８分；ｍ／ｚ＝３６４．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７８】
実施例４：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アミノオキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（３２）の調製
【化４９】
2021531249.tif 000086
（３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−ヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（５０００ｍｇ、１７ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１００．０ｍＬ）に溶解させた。ＤＡＳＴ（１８．０ｍＬ、１３７ｍｍｏｌ、８．０当量）を、ドライアイス−メタノール浴で冷却しながら−３０℃で加えた。反応混合物を、室温に温め、１時間にわたってこの温度で撹拌した。別の分量のＤＡＳＴ（４ｍＬ）を−３０℃で加え、再度室温に温め、１時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳ分析は、反応が完了したことを示した。メタノールを−２０℃で加え、溶媒を蒸発させた。ＮａＨＣＯ３を加え、溶液をジクロロメタン（３回）で抽出した。組み合わされた有機層を水で洗浄した。希薄ＨＣｌを加えて、残留ＤＡＳＴを分解し、溶液を酢酸エチル（２回）で抽出した。組み合わされた有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮して、粗生成物を油（４０００ｍｇ）として得た。この褐色の油を、ヘキサン−酢酸エチル（０〜４０％）で溶離する順相精製に供した。生成物画分を収集し、組み合わせて、濃縮して、（３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−フルオロ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（３０）を白色の発泡体固体として得た。（２０００ｍｇ）。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．４５分；ｍ／ｚ＝３１０［Ｍ＋Ｈ２Ｏ］＋。
【０２７９】
（３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−フルオロ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（３０）（１８００ｍｇ、６．１６ｍｍｏｌ、１．０当量）を、アセトニトリル（３０ｍＬ）に溶解させた。Ｎ−ヒドロキシフタルイミド（１１００ｍｇ、６．７８ｍｍｏｌ、１．１当量）を加えた後、ＴＥＡ（１．１５ｍＬ、６．７８ｍｍｏｌ、１．０５当量）を加えた。ＢＦ３：Ｅｔ２Ｏ（１．１ｍＬ、６．７８ｍｍｏｌ、１．０５当量）を滴下して加え、反応物を１時間撹拌し、その時点で、ＬＣ／ＭＳ分析は、所望の生成物の存在を示した。混合物を１０％のＮａＨＣＯ３／ＥｔＯＡｃに注いだ。層を振とうし、分離させ、有機層を、炭酸水素ナトリウム（２回）、水、及び塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮して、暗色の油を得た。粗生成物を、ヘキサン：酢酸エチル（０〜５０％）で溶離する順相精製に供した。生成物画分を収集し、組み合わせた（より低い極性の生成物−画分５５〜６４、１．０ｇ；より極性の生成物−画分９１〜１０５、５００ｍｇ）。より低い極性の生成物は、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）オキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（３１）の所望のα−アノマーである。より極性の生成物は、望ましくないβ−アノマーである。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝３．０２分及び３．２８分；ｍ／ｚ＝４３６．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２８０】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）オキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（３１）（３５０ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ、１．０当量）を、メタノール（８．０ｍＬ）に溶解させた。ヒドラジン水和物（６５％、０．０６６ｍＬ、０．８ｍｍｏｌ、１．０当量）を氷浴温度でゆっくりと加えた。ＬＣ／ＭＳ分析は、数分以内に完全な反応を示した。白色の沈殿物をろ過して取り出した。反応物をジクロロメタンで希釈し、２度目のろ過を行った。ろ過された溶液をＮａＨＣＯ３（３回）で洗浄した。有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮して、所望の（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アミノオキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（３２）を白色の発泡体固体（５００ｍｇ）として得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．２分；ｍ／ｚ＝３０６．６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２８１】
実施例５：（Ｅ）−３−（４−（（（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）−Ｎ−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）アクリルアミド（２６）の調製
【化５０】
2021531249.tif 000087
１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ．ＨＣｌ）（１１４ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ、１．３３当量）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（９１ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ、１．３３当量）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（１．４ｍＬ）中の（Ｅ）−３−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリル酸（２９）（２５０ｍｇ、０．４４９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に加え、室温で３０分間撹拌した。次に、（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（アミノオキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（２４）（２４４ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ、１．５当量）及びＤＩＰＥＡ（０．０７８ｍＬ、０．４４９ｍｍｏｌ、１．４当量）を、氷浴温度で混合物に加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。ＬＣ／ＭＳ分析は、所望の生成物を示した。混合物を冷飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液でクエンチした。このように形成された白色の沈殿物をろ過し、水（２回）で洗浄した。白色の固体を酢酸エチルに再溶解させ、水、ＮａＨＣＯ３、及び塩水で洗浄した。組み合わされた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮して、純粋な（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−２−（（（Ｅ）−３−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１６）を淡黄色の泡状の固体として得た。（３２０ｍｇ、７９％の収率）。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝６．９５分；ｍ／ｚ＝９０２．７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２８２】
【化５１】
2021531249.tif 000088
（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−２−（（（Ｅ）−３−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１６）（１５０ｍｇ、０．１６６ｍｍｏｌ、１．０当量）を、メタノール（３．０ｍＬ）に溶解させ、メタノール（０．１ｍＬ、０．４９ｍｍｏｌ、３．０当量）中２５％のナトリウムメトキシドを氷浴温度でゆっくりと加えた。ＬＣ／ＭＳは、２０分後に所望の生成物を示した。反応物を、１０％の酢酸の添加によってクエンチした。水を除去し、メタノールで置き換えた。２回のろ過により、不溶性塩を除去し、溶媒除去後の粗生成物を、最終的な分析のためにＨＰＬＣ精製に供した。表題化合物（Ｅ）−３−（４−（（（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）−Ｎ−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）アクリルアミド（２６）を、白色の固体として単離した。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．２８分；ｍ／ｚ＝５１２．５［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ７．５９−７．４５（ｍ、３Ｈ）、７．４０（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．３１（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、２Ｈ）、７．２５（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．０２（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．９４（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．５０（Ｊ＝１５．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．５６（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．８５（ｍ、４Ｈ）、３．７８−３．６７（ｍ、２Ｈ）、３．６５−３．６０（ｍ、１Ｈ）、３．５７（ｄｄ、Ｊ＝９．６、３．４Ｈｚ、１Ｈ）、２．９７（ｄｄ、Ｊ＝７．９、５．８Ｈｚ、２Ｈ）、２．９０（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ）、２．３６（ｓ、３Ｈ）。
【０２８３】
実施例６：（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（（（Ｅ）−３−（４−（（（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１３）の調製
【化５２】
2021531249.tif 000089
（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−２−（（（Ｅ）−３−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１６）（７４５ｍｇ、０．８２５ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解させた。ピペリジン（ＤＣＭ中１０％）（７．０ｍＬ、８．２ｍｍｏｌ、１０．０当量）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳ分析は、反応が完了したことを示した。ＥｔＯＡｃを加え（２００ｍＬ）、溶液をＮａＨＣＯ３（２回）で洗浄した。有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮乾固させて、粗生成物を得た。表題化合物（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（（（Ｅ）−３−（４−（（（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１３）を、ＨＣｌ含有緩衝液を用いたＨＰＬＣ精製の後にその白色の塩酸塩として単離した（５５０ｍｇ、８０％の収率）。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝４．３８分；ｍ／ｚ＝６８０．７［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ７．６１−７．４８（ｍ、３Ｈ）、７．４０（ｄｔ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．３３（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、２Ｈ）、７．２５（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．０２（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．９５（ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．４８（ｄ、Ｊ＝１６．１Ｈｚ、１Ｈ）、５．４３（ｄ、Ｊ＝３．３Ｈｚ、１Ｈ）、５．３２−５．１９（ｍ、２Ｈ）、５．０２（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．２７−４．１３（ｍ、３Ｈ）、３．８９（ｓ、２Ｈ）、３．１１（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．０２−２．８７（ｍ、４Ｈ）、２．３７（ｓ、３Ｈ）、２．１５（ｓ、３Ｈ）、２．１３（ｓ、３Ｈ）、２．０３（ｓ、３Ｈ）、１．９８（ｓ、３Ｈ）。
【０２８４】
実施例７：（Ｅ）−３−（４−（（（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）−Ｎ−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）アクリルアミド（３５）の調製
【化５３】
2021531249.tif 000090
ＥＤＣ（４３０ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ、１．４当量）及びＨＯＢｔ（３４４ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ、１．４当量）を、ＤＭＦ（８．０ｍＬ）中の（２９）（９００ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ、１．０当量）に加えた。混合物を１０分間撹拌した。化合物（３２）（５００ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ、１．０５当量）、続いてＤＩＥＡ（４１８μＬ、１．５当量）を氷浴温度で加えた。反応物を室温で一晩撹拌した。ＬＣ／ＭＳ分析は、所望の生成物を示した。飽和塩化アンモニウム溶液を加えた（２０ｍＬ）ところ、白色の固体が沈殿した。固体をろ過し、水（２回）で洗浄し、乾燥させて、白色の固体（１．３０ｇ）を得た。固体を、ヘキサン−酢酸エチル（２０〜７５％）で溶離する順相クロマトグラフィーによって精製した。生成物画分を収集し、組み合わせて、溶媒を濃縮して、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（（Ｅ）−３−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１７）をオフホワイトの固体（６５０ｍｇ）として得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝３．８９分；ｍ／ｚ＝８４４．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２８５】
【化５４】
2021531249.tif 000091
メタノール（１．０ｍＬ）中の（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（（Ｅ）−３−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１７）（１５０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ、１．０当量）及びナトリウムメトキシド（２５％）（０．０８５ｍＬ、２．６当量）を、氷浴温度で混合した。混合物を室温で２時間撹拌した。１ＮのＨＣｌ（１．０当量）を加え、溶液を濃縮乾固させ、残渣をＨＰＬＣ精製に供し、表題化合物（Ｅ）−３−（４−（（（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）−Ｎ−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）アクリルアミド（３５）を、白色の固体（７０ｍｇ）として単離した。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．３５分；ｍ／ｚ＝４９６．５［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ７．６９（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、３Ｈ）、７．５３（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、２Ｈ）、７．４３（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．２８（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）７．０８−６．９７（ｍ、２Ｈ）、６．５９（ｄ、Ｊ＝１５．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．５７（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．２８（ｓ、２Ｈ）、３．７４（ｑ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．６８−３．６１（ｍ、２Ｈ）、３．５７（ｄｄ、Ｊ＝９．７、３．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．３０−３．２２（ｍ、２Ｈ）、３．１４（ｄｄ、Ｊ＝９．３、６．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．４２（ｓ、３Ｈ）、１．３３（ｄ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、３Ｈ）。
【０２８６】
実施例８：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−メチル−６−（（（Ｅ）−３−（４−（（（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１９）の調製
【化５５】
2021531249.tif 000092
ＤＣＭ：ＤＭＦ（１：１）（１０ｍＬ）中の化合物（１１７）（６４０ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ、１．０当量）に、５０％のトリエチルアミン／ＤＣＭ（１０．０ｍＬ）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。ＬＣ／ＭＳ分析は、所望の生成物及び出発材料の存在を示した。溶媒を濃縮した。残渣を、５０％のＴＥＡ／ＤＣＭ（５ｍＬ）及びＤＭＦ（２．０ｍＬ）に取り込み、混合物を４時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳは、この時点で、出発材料が消費されたことを示した。溶媒を減圧下で除去した。残渣をヘキサンで研和して、９−メチレン−９Ｈ−フルオレンの塊を除去した。飽和塩化アンモニウム溶液及び酢酸エチルを加え、有機層を、水（３回）、続いて塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を除去し、残渣を、ＨＣｌを含有する緩衝液を用いたＨＰＬＣによって精製し、表題化合物（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−メチル−６−（（（Ｅ）−３−（４−（（（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１９）を、白色の固体としてのその塩酸塩として単離した。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８９分；ｍ／ｚ＝６２２．４［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ７．７３−７．６１（ｍ、３Ｈ）、７．５４（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、２Ｈ）、７．４４（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．２８（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．０６（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．００（ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．５５（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、５．４８−５．３１（ｍ、３Ｈ）、５．１６（ｄｄ、Ｊ＝１１．３、３．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．６３（ｓ、１Ｈ）、４．２８（ｓ、２Ｈ）、３．２６（ｄｄ、Ｊ＝９．５、６．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．１４（ｄｄ、Ｊ＝９．３、６．５Ｈｚ、２Ｈ）、２．４２（ｓ、３Ｈ）、２．１８（ｓ、３Ｈ）、２．１６（ｓ、３Ｈ）、２．０１（ｓ、３Ｈ）、１．２０（ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、３Ｈ）。
【０２８７】
実施例９：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−２−（（２−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド）オキシ）−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１１）の調製
【化５６】
2021531249.tif 000093
ＥＤＣ（７６ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ、１．４当量）及びＨＯＢｔ（６１ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ、１．４当量）を、ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の２−（４−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニル）−（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−アミノ］−メチル｝−ピペリジン−１−イル）−ピリミジン−５−カルボン酸（１１０）（１７０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、１．０当量）に加えた。溶液を１０分間撹拌し、その後、化合物（２４）（１４８ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ、１．５当量）、続いてＤＩＥＡ（８０μＬ、１．５当量）を氷浴温度で加えた。溶液を室温で一晩撹拌した。ＬＣ／ＭＳ分析は、所望の生成物の形成を示した。飽和塩化アンモニウム溶液を加え（２．０ｍＬ）、白色の固体が沈殿した。沈殿物を水（２回）で洗浄した。固体をろ過し、乾燥させて、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−２−（（２−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド）オキシ）−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１１）を白色の固体（２６０ｍｇ）として得て、それをさらに精製せずに次の工程に使用した。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝７．０７分；ｍ／ｚ＝９４７．９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２８８】
実施例１０：２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）−Ｎ−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ピリミジン−５−カルボキサミド（１１２）の調製
【化５７】
2021531249.tif 000094
化合物（１１１）（１７０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を、メタノール（１．７９ｍＬ）に溶解させ、メタノール（０．０４０ｍＬ、１．０当量）中２５％のナトリウムメトキシドを氷浴温度でゆっくりと加えた。室温で２時間撹拌した後、Ｆｍｏｃ保護基は、完全には除去されていなかった。さらに０．２当量のナトリウムメトキシドを氷浴温度で加えたところ、反応は、２０分以内に完了した。ＨＣｌ／ジオキサン（１Ｎ、１．２当量）を加えて、ｐＨを５〜６に調整した。溶媒を濃縮乾固させ、残渣を、ＨＰＬＣ精製に供して、表題化合物２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）−Ｎ−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ピリミジン−５−カルボキサミド（１１２）（８０ｍｇ）を得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．３３分；ｍ／ｚ＝５５７．３［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ８．７２（ｓ、２Ｈ）、７．７５（ｍ、１Ｈ）、７．４７（ｍ、２Ｈ）、７．２９（ｍ、１Ｈ）、７．２０（ｍ、１Ｈ）、４．９５−４．９１（ｍ、２Ｈ）、４．６０（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．４５、（ｓ  ２Ｈ）、３．８８−３．８１（ｍ、５Ｈ）、３．７７（ｄｄ、Ｊ＝１１．３、４．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．７１（ｄｄ、Ｊ＝９．６、８．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．６４（ｍ、１Ｈ）、３．５７（ｍ、１Ｈ）、３．０５−２．９６（ｍ、４Ｈ）、２．１０（ｍ、１Ｈ）、２．０６（ｓ、２Ｈ）、１．９２−１．８５（ｍ、２Ｈ）、１．２６（ｍ、２Ｈ）。
【０２８９】
実施例１１：（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（（２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１４）の調製
【化５８】
2021531249.tif 000095
化合物（１１１）（８８ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（０．１ｍＬ）に溶解させた。ピペリジン（ＤＣＭ中２０％）（０．４７ｍｍｏｌ、１．１ｍｍｏｌ、１２．０当量）を加えた。混合物を室温で６時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳ分析は、反応が完了したことを示した。１ＮのＨＣｌ／ジオキサン（１．０当量）を加えた。溶液を濃縮乾固させ、粗残渣を、ＨＰＬＣ精製に供して、６０ｍｇの表題化合物（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（（２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−ｌ−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１４）を得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８９分；ｍ／ｚ＝７２５．３［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ８．６４（ｓ、２Ｈ）、７．６９（ｍ、１Ｈ）、７．４０（ｍ、１Ｈ）、７．３１（ｓ、１Ｈ）、７．２３（ｍ、１Ｈ）、７．１３（ｍ、１Ｈ）、５．４２（ｄ、Ｊ＝３．５Ｈｚ、１Ｈ）、５．３４（ｍ、１Ｈ）、５．２１（ｍ、１Ｈ）、５．０７（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．８１（ｄ、Ｊ＝１３．３Ｈｚ、２Ｈ）、４．２６−４．１３（ｍ、５Ｈ）、３．８２（ｓ、３Ｈ）、２．９４（ｔ、Ｊ＝１２．８Ｈｚ、２Ｈ）、２．７７（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、２Ｈ）、２．１３（ｓ、３Ｈ）、２．１１（ｓ、３Ｈ）、２．０２（ｓ、３Ｈ）、１．９７（ｓ、３Ｈ）、１．８５（ｄ、Ｊ＝１１．６Ｈｚ、２Ｈ）、１．１９（ｍ、２Ｈ）。
【０２９０】
実施例１２：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−メチル−６−（（２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１５）の調製
【化５９】
2021531249.tif 000096
ＥＤＣ（５４ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（４２ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、１．０５当量）を、ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の化合物（１１０）（９６ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ、１．４当量）の溶液に加えた。溶液を室温で１５分間撹拌し、その時点で、化合物（３２）（９６ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ、１．４当量）を一度に加えた。ＤＩＥＡ（１．５当量、０．０７３ｍＬ）を氷浴温度で加え、混合物を室温で１時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳ分析は、所望の生成物の存在を示した。飽和塩化アンモニウム溶液を反応物に加え、黄色の固体をろ過して取り出し、水で洗浄した。酢酸エチルを溶液に加え、それを塩水（２回）で洗浄した。組み合わされた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮して、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−メチル−６−（（２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１５）を泡状の固体（２００ｍｇ）として得て、それを精製せずにそのまま次の反応に使用した。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝６．８３分；ｍ／ｚ＝８８９．９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９１】
実施例１３：２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）−Ｎ−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ピリミジン−５−カルボキサミド（１２０）の調製
【化６０】
2021531249.tif 000097
化合物（１１５）（７０ｍｇ、０．０７９ｍｍｏｌ、１．０当量）及びナトリウムメトキシド（２５％）（２．０当量）を、氷浴温度でメタノール（０．８ｍＬ）に溶解させた。混合物を室温で２時間撹拌した。１ＮのＨＣｌ（１．０当量）を加え、溶液を濃縮乾固させ、残渣を、ＨＰＬＣ精製に供して、表題化合物（１２０）を得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝３．０５分；ｍ／ｚ＝５４１．３［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ８．７１（ｓ、２Ｈ）、７．７４（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．５１−７．４３（ｍ、２Ｈ）、７．３０（ｍ、１Ｈ）、７．２１（ｍ、１Ｈ）、４．９３（ｄ、Ｊ＝３．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．５９（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．４５（ｓ、２Ｈ）、３．８７（ｓ、３Ｈ）、３．７７−３．７１（ｍ、１Ｈ）、３．６８−３．６１（ｍ、２Ｈ）、３．５７（ｍ、１Ｈ）、３．０５−２．９５（ｍ、４Ｈ）、２．０９（ｍ、１Ｈ）、１．８８（ｄ、Ｊ＝１２．４Ｈｚ、２Ｈ）、１．３３（ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、３Ｈ）、１．２６（ｍ、２Ｈ）。
【０２９２】
実施例１４：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−メチル−６−（（（Ｅ）−３−（４−（（（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリプロピオネート（１２１）の調製
【化６１】
2021531249.tif 000098
Ｌ−フコース（３０００ｍｇ、１８．２ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ピリジン（９．０ｍＬ）及びプロピオン酸無水物（２７．０ｍＬ）の混合物中で撹拌した。溶液を８０℃で２日間加熱して、その時点でさらなるプロピオン酸無水物（５．０ｍＬ）を加え、さらに１日撹拌を続けた。混合物を濃縮乾固させ、酢酸エチル（８０ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）を加え、水性層をさらに２回抽出した。組み合わされた有機層を、１Ｎの希薄ＨＣｌ、続いて塩水で洗浄した。溶液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶液を濃縮乾固させて、（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２，３，４，５−テトライルテトラキス（プロピオネート）を褐色の油（１０ｇ）として得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝３．３分；ｍ／ｚ＝４６７．５［Ｍ＋７９］＋。
【０２９３】
酢酸（１．８ｍＬ、２８．８ｍｍｏｌ、１．４当量）を、ＴＨＦ（２００ｍＬ）中のエチレンジアミン（１．７８ｍＬ、２４．７ｍｍｏｌ、１．２当量）の溶液に加えた。固体が沈殿し、（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２，３，４，５−テトライルテトラキス（プロピオネート）（８ｇ、２０．６６ｍｍｏｌ、１．０当量）を一度に加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、その時点で、ＬＣ／ＭＳ分析は、主に未反応の出発材料を示した。反応物を後処理し、室温で一晩撹拌しながら、再度、同じ反応条件に供した。第２のロットを同じ規模で繰り返した。ＬＣ／ＭＳ分析は、反応が完了したことを示した。水を加え、２つの層を分離した。希薄ＨＣｌ（２％）及び酢酸エチルを加え、有機層を、水で２回、続いて塩水で洗浄した。溶液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を除去して、（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−ヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリプロピオネートを白色の粘着性の固体として得た。（５．８ｇ）。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．６分；ｍ／ｚ＝３５０．１［Ｍ＋１８］。
【０２９４】
（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−ヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリプロピオネート（３．０ｇ、９．０３ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＴＨＦ（１５０ｍＬ）に溶解させた。溶液を、５分間にわたって窒素でパージし、溶液を−５０℃に冷却した。ＤＡＳＴ（５．０ｍＬ）を、プラスチックピペットを介して滴下して加えた。溶液を０℃に温めた。ＴＬＣ分析は、ほとんど出発材料を示した。別の分量のＤＡＳＴ（２．０ｍＬ）を−５０℃（１．５当量）で加え、温度を０℃に温めた。ＴＬＣ分析は、より低い極性のスポット及び少量の出発材料を示した。さらなるＤＡＳＴを前述のとおり２回加え（それぞれ３．０ｍｌ、３．０ｍＬ）、出発材料が完全に消費されるまで（合計で約８時間）反応物を撹拌させた。溶液を−３０℃に冷却し、メタノール（１５ｍＬ）をゆっくりと加え、混合物を室温に温めた。冷ＮａＨＣＯ３溶液を加え、混合物をジクロロメタンで希釈した。有機層を分離させ、１ＮのＨＣｌ（２回）、続いて塩水で洗浄した。溶液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を除去して、黄色の油（４．１ｇ）を得た。ＴＬＣ分析は、生成物が非純粋であったことを示した。粗生成物を、６０分間にわたって１００％のヘキサンからヘキサン中１５％の酢酸エチルの勾配で溶離する順相精製に供した。生成物画分を収集し、溶媒を除去して、純粋な（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−フルオロ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリプロピオネートを無色油（２．４ｇ）として得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝３．２分；ｍ／ｚ＝４１３．１［Ｍ＋７９］＋。
【０２９５】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−フルオロ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリプロピオネート（１５００ｍｇ、４．４９ｍｍｏｌ、１．０当量）を、アセトニトリル（１５ｍＬ）に溶解させた。Ｎ−ヒドロキシフタルイミド（９１５ｍｇ、５．６１ｍｍｏｌ、１．２５当量）を加えた後、トリエチルアミン（０．８１ｍＬ、５．６１ｍｍｏｌ、１．２５当量）を加えた。溶液が濃い赤色に変化した。ＢＦ３−エーテラート（１．０３ｍＬ、８．０８ｍｍｏｌ、１．８当量）を加え、溶液が透明に変化した。それを室温で１時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳは、所望の生成物を示した。ＮａＨＣＯ３の冷溶液を加え、それを、酢酸エチルで２回抽出した。溶液が濃い赤色に変化した。組み合わされた有機層を、色が検出されなくなるまでＮａＨＣＯ３で２回洗浄した。有機溶媒を硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を濃縮して、黄色の油（２０００ｍｇ）を得た。粗混合物を、４０分間にわたって１００％のヘキサンからヘキサン中２５％の酢酸エチルの勾配で溶離する、２５ｇのシリカゲルカラムを用いた順相精製に供した。生成物画分を２つのピークとして収集した。ピーク＃１（順相、より低い極性）ＬＣ／ＭＳ（逆相）：ＲＴ＝３．５６分；ｍ／ｚ＝４７８．４［Ｍ＋Ｈ］＋。ピーク＃２（順相、より極性）ＬＣ／ＭＳ（逆相）：ＲＴ＝３．３１分；ｍ／ｚ＝４７８．４［Ｍ＋Ｈ］＋。ピーク＃１は、その１Ｈ  ＮＭＲスペクトルと、文献において特徴付けられたトリアセトキシ類似体（３１）との比較によって、所望のα異性体、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）オキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリプロピオネートであることが分かった。それを白色の固体（５００ｍｇ）として単離した。
【０２９６】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）オキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリプロピオネート（５００ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ、１．０当量）を、メタノール（１０ｍＬ）に溶解させた。ヒドラジン水和物（６５％、０．０９０ｍＬ、１．０４ｍｍｏｌ、１．０当量）を、氷浴温度で滴下して加えた。混合物を３０分間撹拌したところ、溶液が透明から濁った状態になった。ＬＣ／ＭＳは、反応が完了したことを示した。ジクロロメタン（１５ｍＬ）を加え、混合物を、冷飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で２回抽出した。組み合わされた有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を濃縮して、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アミノオキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリプロピオネートを白色の固体（２８０ｍｇ）として得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．３４分；ｍ／ｚ＝３４８．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９７】
（Ｅ）−３−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリル酸（２９）（２８１ｍｇ、０．５０３ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＤＭＦ（１．５ｍＬ）に溶解させた。ＥＤＣ（１２４ｍｇ、０．６５３ｍｍｏｌ、１．３当量）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１００ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ、１．３当量）を加え、混合物を１０分間撹拌した。（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アミノオキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリプロピオネート（２２６ｍｇ、０．５０３ｍｍｏｌ、１．０当量）を加えた後、ＤＩＰＥＡ（１．４当量）を加えた。室温で２時間撹拌した後、ＬＣ／ＭＳは、所望の生成物を示した。飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を加え、次に、酢酸エチルを加え、有機相を、ＮａＨＣＯ３で２回抽出した。組み合わされた有機層を塩水で洗浄し、溶媒を濃縮して、淡黄色の発泡体を得た。（４９０ｍｇ）。生成物を、４５分間にわたって１００％のヘキサンからヘキサン中５０％の酢酸エチルの勾配で溶離する４０ｇのシリカゲルカラム上での順相精製を用いて精製した。生成物画分を収集し、溶媒を濃縮して、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（（Ｅ）−３−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）−オキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリプロピオネートを白色の泡状の固体．（２００ｍｇ）として得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝７．４８分；ｍ／ｚ＝８８６．７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９８】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（（Ｅ）−３−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリプロピオネート（２００ｍｇ、０．２２５ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＤＣＭ／ＤＭＦ中５０％のＮＥｔ３に溶解させた。溶液を室温で３日間撹拌して、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。ＬＣ／ＭＳは、反応が完了したことを示した。溶媒を濃縮し、飽和ＭＬＣｌ溶液を加え、次に、混合物を、酢酸エチルで２回抽出した。組み合わされた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させた。粗混合物をヘキサンで２回研和した。最終生成物を濃縮して、白色の泡状の固体を得た。（１３８ｍｇ）。この固体を、ＨＣｌを含有する緩衝液を用いたＨＰＬＣによって精製し、表題化合物（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−メチル−６−（（（Ｅ）−３−（４−（（（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリプロピオネート（１２１）を、白色の固体としてのその塩酸塩として単離した。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝４．９８分；ｍ／ｚ＝６６４．７［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ７．７０−７．６８（ｍ、３Ｈ）、７．５３（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、２Ｈ）、７．４７−７．４０（ｍ、１Ｈ）、７．２８（ｄｔ、Ｊ＝８．０、１．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．０６（ｄｄｄ、Ｊ＝８．２、７．１、１．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．０３−６．９７（ｍ、１Ｈ）、６．５５（ｄ、Ｊ＝１５．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．４９−５．４３（ｍ、１Ｈ）、５．４３−５．３９（ｍ、１Ｈ）、５．３８−５．３１（ｍ、１Ｈ）、５．２４−５．１７（ｍ、１Ｈ）、４．６６（ｓ、１Ｈ）、４．２８（ｓ、２Ｈ）、３．２９−３．２３（ｍ、２Ｈ）、３．１７−３．１０（ｍ、２Ｈ）、２．５５−２．４６（ｍ、３Ｈ）、２．４２（ｓ、３Ｈ）、２．３４−２．２０（ｍ、２Ｈ）、１．２５−１．１４（ｍ、９Ｈ）、１．１０（ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、３Ｈ）。
【０２９９】
実施例１５：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−メチル−６−（（（Ｅ）−３−（４−（（（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリス（２−メチルプロパノエート）（１２２）の調製
【化６２】
2021531249.tif 000099
Ｌ−フコース（３ｇ、１８．４ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ピリジン（１３ｍＬ）及びクロロホルム（１９．５ｍＬ）に溶解させた。窒素雰囲気下で、塩化イソブチリル（１３．１４ｍＬ、１２３．８ｍｍｏｌ、６．７当量）を、氷浴温度でゆっくりとシリンジを介して加えた。反応混合物を、室温に昇温させ、次に、４８時間撹拌した。溶液を高真空下で濃縮乾固させ、次に、２ＭのＨＣｌ（１５ｍＬ）でクエンチした。酢酸エチル（２００ｍＬ）を加え、溶液を水で２回洗浄した。有機層を、さらに１回、２ＭのＨＣｌ（２０ｍＬ）、続いて飽和炭酸水素ナトリウム溶液（３０ｍＬ）及び次に水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム溶液上で乾燥させた。溶媒を除去して、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２，３，４，５−テトライルテトラキス（２−メチルプロパノエート）を淡黄色の油（９．８ｇ）として得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝３．９３分；ｍ／ｚ＝４６２．８［Ｍ＋１８］。
【０３００】
酢酸（１．５ｍＬ、２４ｍｍｏｌ、１．４当量）を、ＴＨＦ（２００ｍＬ）中のエチレンジアミン（１．６ｍＬ、２０．５ｍｍｏｌ、１．２当量）の溶液に加えた。沈殿した固体の懸濁液に、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２，３，４，５−テトライルテトラキス（２−メチルプロパノエート）（８ｇ、２０．６６ｍｍｏｌ、１．０当量）を一度に加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。翌日、ＬＣ／ＭＳ分析は、大部分が未反応の出発材料を示した。反応物を後処理し、再度、同じ反応条件に供し、このとき合計で５日間にわたって撹拌し、その時点で水を加えた。層を分離させ、希薄ＨＣｌ（２％）を加えた後、酢酸エチル（２００ｍＬ）を加えた。振とうした後、層を分離させ、有機層を水で２回洗浄した。有機層を塩水でさらに洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を除去して、（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−ヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリス（２−メチルプロパノエート）を黄色の油として得た。粗生成物を８０ｇのシリカゲルカラム上に乾式充填し、１時間にわたって１００％のヘキサンからヘキサン中３０％の酢酸エチルの勾配を用いて精製した。生成物画分を収集し、濃縮して、（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−ヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリス（２−メチルプロパノエート）を無色油として得た。（２．８９ｇ）。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝３．１９分；ｍ／ｚ＝３９２．５［Ｍ＋１８］。
【０３０１】
ジクロロメタン（６０ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−ヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリス（２−メチルプロパノエート）（２．４ｇ、６．４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＤＡＳＴ（３．６９ｍＬ、２７．５ｍｍｏｌ、４．３当量）を、０℃で３０分間にわたって３回に分けて滴下して加えた。混合物をこの温度でさらに３０分間撹拌した。ＴＬＣ分析は、出発材料の非存在を示した。反応混合物を−２０℃に冷却し、メタノール（５．０ｍＬ）をゆっくりと加えた。混合物をさらに１５分間撹拌し、その時点でジクロロメタンを加え、混合物を、炭酸水素ナトリウムの冷溶液に注いだ。分離した有機層を、２回、１ＮのＨＣｌ、続いて飽和炭酸水素ナトリウム溶液及び最後に塩水で洗浄した。硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、溶媒を除去して、黄色の油（２．５ｇ）を得た。粗生成物を、１００％のヘキサンからヘキサン中２５％の酢酸エチルの勾配で溶離する、２５ｇのシリカゲルカラムを用いた順相精製に供した。生成物画分を収集し、溶媒を除去して、（２ＲＳ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−フルオロ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリス（２−メチルプロパノエート）を白色の発泡体（２．０ｇ）として得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝３．６４、３．７８分；ｍ／ｚ＝３７７．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３０２】
アセトニトリル（４．０ｍＬ）中の（２ＲＳ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−フルオロ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリス（２−メチルプロパノエート）（２０００ｍｇ、５．３ｍｍｏｌ、１．０当量）及びＮ−ヒドロキシフタルイミド（１１００ｍｇ、６．８９ｍｍｏｌ、１．３当量）の溶液に、トリエチルアミン（０．９８ｍＬ、６．８ｍｍｏｌ、１．３当量）を加えた。ＢＦ３．Ｅｔ２Ｏ（２．１ｍＬ、１５．９ｍｍｏｌ、３．０当量）を、シリンジを介してゆっくりと加えた。溶液が、赤色から透明の淡黄色に変化した。３０分後、ＬＣ／ＭＳ分析は、反応が完了し、２つの異性体生成物が得られたことを示した。ジクロロメタンを加え、溶液を、炭酸水素ナトリウムの冷溶液に注いだ。有機層を分離させ、無色になるまで炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄した。次に、溶液を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶液を濃縮乾固させて、２５００ｍｇの粗（２ＲＳ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）オキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリス（２−メチルプロパノエート）を得た。生成物を、４０分間にわたって１００％のヘキサンからヘキサン中２５％の酢酸エチルの勾配を用いた（４０ｇのシリカゲルカラム上での）順相カラムクロマトグラフィーによって精製した。生成物画分を２つのピークとして収集した。ピーク＃１（順相、より低い極性）ＬＣ／ＭＳ（逆相）：ＲＴ＝４．０４分；ｍ／ｚ＝５２０．６［Ｍ＋Ｈ］＋。ピーク＃２（順相、より極性）ＬＣ／ＭＳ（逆相）：ＲＴ＝３．７４分；ｍ／ｚ＝５２０．６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３０３】
ピーク＃１は、その１Ｈ  ＮＭＲスペクトルと、文献において特徴付けられたトリアセトキシ類似体（３１）との比較によって、所望のα異性体、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）オキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリス（２−メチルプロパノエート）であることが分かった。それを、白色の固体（１４００ｍｇ）として単離した。ピーク＃２は、β異性体、（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）オキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリス（２−メチルプロパノエート）であることが分かった。それを、白色の固体（５００ｍｇ）として単離した。
【０３０４】
（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）オキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリス（２−メチルプロパノエート）（９００ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ、１．０当量）を、メタノール（２０ｍＬ）に溶解させた。ヒドラジン水和物（６５％、２．３ｍＬ、２．３ｍｍｏｌ、１．０当量）を、氷浴温度で滴下して加え、反応混合物を３０分間撹拌した。溶液は、透明から濁った状態に変化した。ＬＣ／ＭＳ分析は、反応が完了したことを示した。ジクロロメタン（２５ｍＬ）を加え、分離した有機層を、冷飽和ＮａＨＣＯ３溶液で２回洗浄した。有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を除去して、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アミノオキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリス（２−メチルプロパノエート）を白色の固体（７５０ｍｇ）として得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．８７分；ｍ／ｚ＝３９０．５［Ｍ＋Ｈ］＋。（Ｅ）−３−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリル酸（２９）（３００ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＤＭＦ（１．５ｍＬ）に溶解させた。ＥＤＣ（１２４ｍｇ、０．６５３ｍｍｏｌ、１．３当量）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１００ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ、１．３当量）を加えた。反応混合物を１０分間撹拌し、その後、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アミノオキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリス（２−メチルプロパノエート）（２４７ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ、１．０当量）、続いてＤＩＰＥＡ（１．４当量）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳ分析は、所望の生成物の形成を示した。酢酸エチルを加え、混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液で２回洗浄した。酢酸エチル層を、２回、ＮａＨＣＯ３水溶液、及び最後に塩水で洗浄した。溶媒を除去して、淡黄色の発泡体（５９０ｍｇ）を得た。生成物を、４５分間にわたって１００％のヘキサンからヘキサン中３０％の酢酸エチルの勾配で溶離する１０ｇのシリカゲルカラムを用いた順相精製を用いて精製した。生成物画分を収集し、溶媒を除去して、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（（Ｅ）−３−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリス（２−メチルプロパノエート）を白色の発泡体（２５０ｍｇ）として得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝８．１３分；ｍ／ｚ＝８２９．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３０５】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（（Ｅ）−３−（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリス（２−メチルプロパノエート）（２５０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＤＭＦ（１．０ｍＬ）に溶解させた。トリエチルアミン（１．０ｍＬ）を加え、それを室温で一晩撹拌して、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。ＬＣ／ＭＳは、所望の生成物を示した。混合物をヘキサンで研和し、酢酸エチルを加え、混合物を、飽和ＮＨ４Ｃｌで２回抽出した。組み合わされた有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を濃縮して、黄色の発泡体を得た。（３００ｍｇ）。この残渣を、ヘキサン／ＤＣＭ（１０％）で研和した。粗生成物を濃縮し、乾燥させて、オレンジ色の固体（１８０ｍｇ）を得た。この固体を、ＨＣｌを含有する緩衝液を用いたＨＰＬＣによって精製し、表題化合物（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−メチル−６−（（（Ｅ）−３−（４−（（（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリス（２−メチルプロパノエート）（１２２）を、白色の固体としてのその塩酸塩として単離した。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝５．６７分；ｍ／ｚ＝７０６．９［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ７．７２−７．６１（ｍ、３Ｈ）、７．５３（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、２Ｈ）、７．４３（ｍ、１Ｈ）、７．２８（ｄｔ、Ｊ＝８．０、１．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．０６（ｄｄｄ、Ｊ＝８．２、７．１、１．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．００（ｄｄｄ、Ｊ＝８．０、７．１、１．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．５５（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、５．４８（ｄｄ、Ｊ＝１１．１、３．３Ｈｚ、１Ｈ）、５．４０（ｄｄ、Ｊ＝３．４、１．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．３３（ｄ、Ｊ＝３．９Ｈｚ、１Ｈ）、５．２４（ｄ、７＝１０．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．７０（ｂｒ．ｓ、１Ｈ）、４．２８（ｓ、２Ｈ）、３．２６（ｍ、２Ｈ）、３．１７−３．１０（ｍ、２Ｈ）、２．７３（ｍ、１Ｈ）、２．６７（ｓ、２Ｈ）、２．４７（ｍ、１Ｈ）、２．４２（ｓ、３Ｈ）、１．３１−１．１５（ｍ、１５Ｈ）、１．１２（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、６Ｈ）。
【０３０６】
実施例１６：（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（（２−（（（２−（６−メトキシピリジン−３−イル）−４−モルホリノチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−イル）メチル）（メチル）アミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１２３）の調製
【化６３】
2021531249.tif 000100
ジオキサン（６０ｍＬ）及び水（１５ｍＬ）中のメチル２−（Ｎ−（（２−（６−メトキシピリジン−３−イル）−４−モルホリノチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−イル）メチル）−Ｎ−メチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキシレート（国際公開第２０１８０８５３４２Ａ１号パンフレットに記載されるように調製される）（１．８ｇ、３．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＯＨ（３４０ｍｇ、１４．２ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を５０℃で１６時間撹拌した。反応混合物を室温に冷まし、水（１０ｍＬ）で希釈し、２ＭのＨＣｌ水溶液を用いて約ｐＨ５になるまで酸性化した。次に、反応混合物を減圧下で濃縮して、ジオキサンを除去した。沈殿した生成物をろ過し、水（１５ｍＬ）で洗浄し、高真空下で乾燥させて、２−（Ｎ−（（２−（６−メトキシピリジン−３−イル）−４−モルホリノチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−イル）メチル）−Ｎ−メチルアミノ）ピリミジン−５−カルボン酸をオフホワイトの固体（１．５ｇ、８５％）として得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．５２分；ｍ／ｚ＝４９４．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３０７】
ＤＭＦ（４．２ｍＬ）中の２−（Ｎ−（（２−（６−メトキシピリジン−３−イル）−４−モルホリノチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−イル）メチル）−Ｎ−メチルアミノ）ピリミジン−５−カルボン酸（７４０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＥＤＣ．ＨＣｌ（４０１ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）を加えた後、ＨＯＢｔ（３２１ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を室温で５分間撹拌した。化合物（２４）（７００ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）を一度に加えた。反応混合物を氷／水浴中で冷却し、Ｅｔ３Ｎ（０．３ｍＬ、２．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を徐々に室温に温め、１２時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（６ｍＬ）を加え、得られた沈殿物をろ過し、水（１０ｍＬ）で洗浄した。残渣をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）に溶解させ、塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、濃縮して、粗生成物（１ｇ、８０％の収率、９０％の純度）を白色の泡状の固体として得た。３５０ｍｇのこの粗材料を、逆相ＨＰＬＣ上で精製して、１４６ｍｇの表題化合物（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（（２−（（（２−（６−メトキシピリジン−３−イル）−４−モルホリノチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−イル）メチル）（メチル）アミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１２３）を得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．９２分；ｍ／ｚ＝８３９．４［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ９．０８（ｄ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、１Ｈ）、８．７９（ｓ、２Ｈ）、８．５１（ｄｄ、Ｊ＝８．８、２．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．５６（ｓ、１Ｈ）、７．０４（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．４５（ｄ、Ｊ＝３．３Ｈｚ、１Ｈ）、５．３３（ｓ、２Ｈ）、５．３０（ｄｄ、Ｊ＝１０．４、８．１Ｈｚ、１Ｈ）、５．２４（ｄｄ、Ｊ＝１０．４、３．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．０６（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．２９−４．１６（ｍ、７Ｈ）、４．０６（ｓ、３Ｈ）、３．９１（ｍ、４Ｈ）、３．３８（ｓ、３Ｈ）、２．１８（ｓ、３Ｈ）、２．１６（ｓ、３Ｈ）、２．０４（ｓ、３Ｈ）、１．９８（ｓ、３Ｈ）。
【０３０８】
実施例１７：２−（（（２−（６−メトキシピリジン−３−イル）−４−モルホリノチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−イル）メチル）（メチル）アミノ）−Ｎ−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ピリミジン−５−カルボキサミド（１２４）の調製
【化６４】
2021531249.tif 000101
ＭｅＯＨ（７．７ｍＬ）中の化合物（１２３）（６５０ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＯＨ（０．２１ｍＬ、１ｍｍｏｌ）中２５％のＮａＯＭｅ溶液を、氷／水浴中で滴下して加えた。次に、反応混合物を室温に温め、１時間撹拌した。反応混合物を、１ＮのＨＣｌ水溶液の添加によってクエンチして、ｐＨを７に調整した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を逆相ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物２−（（（２−（６−メトキシピリジン−３−イル）−４−モルホリノチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−イル）メチル）（メチル）アミノ）−Ｎ−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ピリミジン−５−カルボキサミド（１２４）（２６７ｍｇ）を白色の粉末として得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．３４分；ｍ／ｚ＝６７１．６［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ９．０８（ｄｄ、Ｊ＝２．７、０．７Ｈｚ、１Ｈ）、８．８５（ｓ、２Ｈ）、８．５１（ｄｄ、Ｊ＝８．９、２．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．５８（ｄ、Ｊ＝１．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．０５（ｄｄ、Ｊ＝８．９、０．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．３６−５．３４（ｍ、２Ｈ）、４．６３（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．２７（ｍ、４Ｈ）、４．０７（ｓ、３Ｈ）、３．９４−３．８２（ｍ、６Ｈ）、３．７８（ｄｄ、Ｊ＝１１．４、４．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．７１（ｄｄ、Ｊ＝９．７、７．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．６５（ｄｄｄ，Ｊ＝７．６、４．６、１．１Ｈｚ、１Ｈ）、３．５８（ｄｄ、Ｊ＝９．６、３．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．３８（ｓ、３Ｈ）。
【０３０９】
実施例１８：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（２−（（（２−（６−メトキシピリジン−３−イル）−４−モルホリノチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−イル）メチル）（メチル）アミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド）オキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１２５）の調製
【化６５】
2021531249.tif 000102
ＤＭＦ（４．６ｍＬ）中の２−（Ｎ−（（２−（６−メトキシピリジン−３−イル）−４−モルホリノチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−イル）メチル）−Ｎ−メチルアミノ）ピリミジン−５−カルボン酸（７００ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＥＤＣ．ＨＣｌ（３７７ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）、続いてＨＯＢｔ（２９０ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）を室温で一度に加えた。２０分後、反応混合物を氷／水浴中で冷却し、化合物（３２）（４９１ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．３４ｍＬ、１．４当量）を０℃で加えた。得られた混合物を室温にし、２時間撹拌した。ＮＨ４Ｃｌの冷飽和水溶液（１０ｍＬ）を加え、沈殿した生成物をろ過し、水（５ｍＬ）で洗浄した。残渣をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）に溶解させ、塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、濃縮して、粗生成物（１２５）（１．１ｇ、定量的、９０％の純度）を白色の泡状の固体として得た。３５０ｍｇのこの粗材料を逆相ＨＰＬＣ上で精製して、１５３ｍｇの表題化合物（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（２−（（（２−（６−メトキシピリジン−３−イル）−４−モルホリノチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−イル）メチル）（メチル）アミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド）オキシ）−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１２５）を得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．９６分；ｍ／ｚ＝７８１．５［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ９．０８（ｄｄ、Ｊ＝２．６、０．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．８０（ｓ、２Ｈ）、８．５２（ｄｄ、Ｊ＝８．８、２．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．５１（ｄ、Ｊ＝０．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．００（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．４６−５．３６（ｍ、３Ｈ）、５．３２（ｓ、２Ｈ）、５．１７（ｄｄ、Ｊ＝１１．１、４．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．７０（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、１Ｈ）、４．２０（ｍ、４Ｈ）、４．０５（ｓ、３Ｈ）、３．９０（ｍ、４Ｈ）、３．３７（ｓ、３Ｈ）、２．１９（ｓ、３Ｈ）、２．１７（ｓ、３Ｈ）、２．０１（ｓ、３Ｈ）、１．１９（ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、３Ｈ）。
【０３１０】
実施例１９：２−（（（２−（６−メトキシピリジン−３−イル）−４−モルホリノチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−イル）メチル）（メチル）アミノ）−Ｎ−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ピリミジン−５−カルボキサミド（１２６）の調製
【化６６】
2021531249.tif 000103
ＭｅＯＨ（９．６ｍＬ）中の化合物（１２５）（７５０ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＯＨ（０．２２ｍＬ、１．０６ｍｍｏｌ）中２５％のＮａＯＭｅ溶液を、氷／水浴中で滴下して加えた。次に、反応混合物を室温に温め、１時間撹拌した。反応混合物を、１ＮのＨＣｌ水溶液の添加によってクエンチして、ｐＨを７に調整した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を逆相ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物２−（（（２−（６−メトキシピリジン−３−イル）−４−モルホリノチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−イル）メチル）（メチル）アミノ）−Ｎ−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ピリミジン−５−カルボキサミド（１２６）（３５９ｍｇ）を白色の粉末として得た。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．４０分；ｍ／ｚ＝６５５．４［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ９．０８（ｄｄ、Ｊ＝２．７、０．７Ｈｚ、１Ｈ）、８．８１（ｓ、２Ｈ）、８．５１（ｄｄ、Ｊ＝８．８、２．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．５７（ｄ、Ｊ＝０．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．０５（ｄｄ、Ｊ＝８．８、０．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．３４（ｍ、２Ｈ）、５．１５（ｄ、Ｊ＝３．７Ｈｚ、１Ｈ）、４．４２（ｍ、１Ｈ）、４．２７（ｍ、４Ｈ）、４．０７（ｓ、３Ｈ）、３．９５−３．８４（ｍ、６Ｈ）、３．７６（ｄｄ、Ｊ＝３．０、１．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．３８（ｓ、３Ｈ）、１．２６（ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、３Ｈ）。
【０３１１】
実施例２０：（２−ヒドロキシ−５−イソプロピル−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）（５−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）イソインドリン−２−イル）メタノン（４６）及び（４−ヒドロキシ−５−イソプロピル−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）（５−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）イソインドリン−２−イル）メタノン（４７）の調製
【化６７】
2021531249.tif 000104
β−Ｄ−ガラクトシルコンジュゲート（４６）及び（４７）を、水性媒体中の迅速なＯ−フェノールグリコシル化のためのＷａｄｚｉｎｓｋｉら（Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．，１０（２０１８）６４４−６５２）の合成プロトコルへの適応によって合成した。市販の（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピルフェニル）（５−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）イソインドリン−２−イル）メタノン、ＡＴ１３３８７（３６）から出発して、Ｃａ（ＯＨ）２の存在下におけるα−Ｄ−ガラクトピラノシルフルオリドによる処理により、β−Ｄ−ガラクトシドの位置異性体混合物が得られ、それをＨＰＬＣによって分離した。
【０３１２】
α−Ｄ−ガラクトピラノシルフルオリドを以下のように調製した：氷／水浴中で冷却されたプラスチック瓶中のβ−Ｄ−ガラクトースペンタアセテート（１０ｇ、２５．７ｍｍｏｌ、１当量）に、７０％のＨＦ．ピリジンの冷溶液（１７ｍＬ、１．５Ｍ）を、シリンジを介してゆっくりと加えた。反応容器に蓋をし、徐々に室温に温め、１６時間撹拌した。反応混合物を、冷水（５０ｍＬ）の添加によってクエンチした。ＤＣＭ（５０ｍＬ）を加え、得られた混合物を３０分間撹拌した。次に、有機層を分離させ、水性層をＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出した。組み合わされた有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１５０ｍＬ）、塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮し、高真空下で乾燥させて、粗残渣を得た。
【０３１３】
上記の残渣に、無水ＭｅＯＨ（１３０ｍＬ）を加え、得られた混合物を１５分間撹拌した。次に、反応混合物を１０分間にわたって氷／水中で冷却し、ＮａＯＭｅ（１３９ｍｇ、２．５７ｍｍｏｌ）を加え、１０分後、氷／水浴を除去し、反応混合物を、３時間にわたって徐々に室温に温めた。反応混合物を、氷／水浴中で再度冷却し、シリカゲル（１１ｇ）を加えた。得られた懸濁液を、高粘度のペーストになるまで濃縮した。７：３のＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨの溶液（５０ｍＬ）を加え、５分間十分に撹拌し、ろ過した。残渣を７：３のＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ（６０ｍＬ）で洗浄し、組み合わされたろ液を、ロータリーエバポレータを用いて濃縮乾固させた。残渣を高真空下で一晩乾燥させて、所望の生成物α−Ｄ−ガラクトピラノシルフルオリド（４．２ｇ、９１％）を泡状の固体として得て、それをさらに精製せずに次の工程に使用した。
【０３１４】
水（７ｍＬ）及びＤＭＳＯ（７ｍＬ）中のＡＴ１３３８７（３６）（９０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）及びα−Ｄ−ガラクトピラノシルフルオリド（１．２ｇ、６．６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｃａ（ＯＨ）２（４８８ｍｇ、６．６ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を室温で８時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳは、所望の化合物（４６）及び（４７）への実質的な変換を示した。反応混合物を、１ＭのＨＣｌ水溶液の添加によってクエンチして、ｐＨ８に調整し、得られた混合物を減圧下で濃縮して、水を除去した。残渣のＤＭＳＯ溶液を、逆相ＨＰＬＣによって直接生成し、２つの位置異性体生成物を単離した。生成物の位置化学的なアイデンティティを、逆相ＬＣ／ＭＳにおける保持時間と、計算されたＬｏｇＰ値との相関によって推測した（親油性が低いと計算された異性体は、ＨＰＬＣにおける先に溶出するピークに割り当てられる）。
【０３１５】
先に溶出するピークは、３４ｍｇの（２−ヒドロキシ−５−イソプロピル−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）（５−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）イソインドリン−２−イル）メタノン（４６）を白色の固体（ｃＬｏｇＰ＝１．８）として生じた。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．１３分；ｍ／ｚ＝５７２．５［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ７．４１−７．３５（ｂｒ  ｓ、２Ｈ）、７．３３（ｓ、１Ｈ）、７．３０（ｓ、２Ｈ）、５．０１−４．９０（ｍ、６Ｈ）、４．１０−４．００（ｍ、２Ｈ）、３．８３−３．６３（ｍ、９Ｈ）、３．２９（ｍ、４Ｈ）、２．８８（ｓ、３Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、３Ｈ）１．２４（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、３Ｈ）。
【０３１６】
後に溶出するピークは、２２ｍｇの（４−ヒドロキシ−５−イソプロピル−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）（５−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）イソインドリン−２−イル）メタノン（４７）を白色の固体（ｃＬｏｇＰ＝２．０）として生じた。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．２０分；ｍ／ｚ＝５７２．５［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ７．４２−７．３５（ｍ、１Ｈ）、７．３５−７．２７（ｍ、１Ｈ）、７．２５−７．１８（ｍ、１Ｈ）、７．１２（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．７８（ｓ、１Ｈ）、４．９８−４．７８（ｍ、６Ｈ）、４．７１（ｍ、１Ｈ）、３．９２−３．８６（ｍ、１Ｈ）、３．８５−３．６２（ｍ、６Ｈ）、３．５５（ｍ、１Ｈ）、３．３０−３．２２（ｍ、７Ｈ）、２．８８（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、３Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、３Ｈ）、１．２２（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、３Ｈ）。
【０３１７】
実施例２１：Ｎ−エチル−５−（２−ヒドロキシ−５−イソプロピル−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）−４−（４−（モルホリノメチル）フェニル）イソオキサゾール−３−カルボキサミド（４８）及びＮ−エチル−５−（４−ヒドロキシ−５−イソプロピル−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）−４−（４−（モルホリノメチル）フェニル）イソオキサゾール−３−カルボキサミド（４９）の調製
【化６８−１】
2021531249.tif 000105
【化６８−２】
2021531249.tif 000106
β−Ｄ−ガラクトシルコンジュゲート（４８）及び（４９）を、水性媒体中での迅速なＯ−フェノールグリコシル化のためのＷａｄｚｉｎｓｋｉら（Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．，１０（２０１８）６４４−６５２）の合成プロトコルへの適応によって合成した。市販のレゾルシノール化合物ＮＶＰ−ＡＵＹ９２２（３７）から出発して、Ｃａ（ＯＨ）２の存在下におけるα−Ｄ−ガラクトピラノシルフルオリドによる処理により、β−Ｄ−ガラクトシドの位置異性体混合物が得られ、それをＨＰＬＣによって分離した。
【０３１８】
４ｍＬバイアル中で、水（０．４ｍＬ）中の５−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピルフェニル）−Ｎ−エチル−４−（４−（モルホリノメチル）フェニル）イソオキサゾール−３−カルボキサミド、ＮＶＰ−ＡＵＹ９２２（３７）、（１００ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）、α−Ｄ−ガラクトピラノシルフルオリド（３５２ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）及びＣａ（ＯＨ）２（４７ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）を懸濁した。反応バイアルに蓋をし、得られた混合物を室温で３時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳは、所望の化合物（４８）及び（４９）への実質的な変換を示した。反応混合物を、１ＭのＨＣｌ水溶液の添加によってクエンチして、ｐＨ８に調整し、得られた混合物を、逆相ＨＰＬＣによって直接精製して、２つの位置異性体生成物を得た。生成物の位置化学的なアイデンティティを、逆相ＬＣ／ＭＳにおける保持時間と、計算されたＬｏｇＰ値との相関によって推測した（親油性が低いと計算された異性体は、ＨＰＬＣにおける先に溶出するピークに割り当てられる）。
【０３１９】
先に溶出するピークは、７ｍｇのＮ−エチル−５−（２−ヒドロキシ−５−イソプロピル−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）−４−（４−（モルホリノメチル）フェニル）イソオキサゾール−３−カルボキサミド（４８）を白色の固体（ｃＬｏｇＰ＝０．８８）として生じた。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．２９分；ｍ／ｚ＝６２８．４［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ７．４４（ｍ、４Ｈ）、６．９８（ｓ、１Ｈ）、６．７３（ｓ、１Ｈ）、４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．３１（ｓ、１Ｈ）、３．９４（ｓ、１Ｈ）、３．８７−３．７６（ｍ、４Ｈ）、３．７１（ｍ、１Ｈ）、３．５９（ｍ、１Ｈ）、３．３９−３．１５（ｍ、１１Ｈ）、１．２３（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）、１．０６（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、３Ｈ）、１．０５（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、３Ｈ）。
【０３２０】
後に溶出するピークは、２２ｍｇのＮ−エチル−５−（４−ヒドロキシ−５−イソプロピル−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）−４−（４−（モルホリノメチル）フェニル）イソオキサゾール−３−カルボキサミド（４９）を白色の固体（ｃＬｏｇＰ＝１．０２）として生じた。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．４３分；ｍ／ｚ＝６２８．４［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ７．４５（ｓ、４Ｈ）、７．０５（ｓ、１Ｈ）、６．７２（ｓ、１Ｈ）、４．７１（ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、１Ｈ）、４．３５（ｑ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ）、４．０６（ｂｒ．ｓ、１Ｈ）、３．８６（ｍ、１Ｈ）、３．７７−３．７０（ｍ、３Ｈ）、３．６０（ｍ、１Ｈ）、３．４８−３．２０（ｍ、１０Ｈ）、３．１６（ｍ、１Ｈ）、１．２３（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）、１．１０（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、３Ｈ）、１．０９（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、３Ｈ）。
【０３２１】
実施例２２：５−（２−ヒドロキシ−５−イソプロピル−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−２，４−ジヒドロ−３Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−オン（１２７）及び５−（４−ヒドロキシ−５−イソプロピル−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−２，４−ジヒドロ−３Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−オン（１２８）の調製
【化６９−１】
2021531249.tif 000107
【化６９−２】
2021531249.tif 000108
無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の５−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピルフェニル）−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−２，４−ジヒドロ−３Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−オン、ガネテスピブ（３８）、（２００ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）及び２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシルブロミド（１．３５ｇ、３．３ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｃｓ２ＣＯ３（３．２ｇ、９．８ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を室温で１５時間撹拌した。水（１００ｍＬ）を加え、得られた混合物をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。組み合わされた有機層を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。残渣を高真空下で一晩乾燥させた。
【０３２２】
上記の残渣に、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）及びＮａＯＭｅ（ＭｅＯＨ中２５％の溶液、２５ｕＬ、０．１１ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を室温で１時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳは、所望の化合物（１２７）及び（１２８）への実質的な変換を示した。反応混合物を、ジオキサン溶液中４ＭのＨＣｌの添加によってクエンチして、ｐＨ８に調整した。次に、反応混合物を減圧下で濃縮し、逆相ＨＰＬＣによって精製して、２つの位置異性体生成物を得た。生成物の位置化学的なアイデンティティを、逆相ＬＣ／ＭＳにおける保持時間を、計算されたＬｏｇＰ値との相関によって推測した（親油性が低いと計算された異性体は、ＨＰＬＣにおける先に溶出するピークに割り当てられる）。
【０３２３】
先に溶出するピークは、２５ｍｇの５−（２−ヒドロキシ−５−イソプロピル−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−２，４−ジヒドロ−３Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−オン（１２７）を白色の固体（ｃＬｏｇＰ＝１．９６）として生じた。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．３０分；ｍ／ｚ＝５２７．２［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ７．５３−７．４６（ｍ、２Ｈ）、７．２９（ｄ、Ｊ＝３．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．０８（ｄｄ、Ｊ＝８．６、２．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．７１（ｓ、１Ｈ）、６．６７（ｓ、１Ｈ）、６．４９（ｄｄ、Ｊ＝３．１、０．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．８０（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．９０（ｄ、Ｊ＝２．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ）、３．８２−３．７１（ｍ、３Ｈ）、３．６７（ｍ、１Ｈ）、３．５５（ｄｄ、Ｊ＝９．７、３．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．１４（ｍ、１Ｈ）、０．７３（ｄｄ、Ｊ＝６．９、１．７Ｈｚ、６Ｈ）。後に溶出するピークは、３５ｍｇの５−（４−ヒドロキシ−５−イソプロピル−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−２，４−ジヒドロ−３Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−オン（１２８）を白色の固体（ｃＬｏｇＰ＝２．０９）として生じた。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．５４分；ｍ／ｚ＝５２７．２［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ  ７．５５−７．４９（ｍ、２Ｈ）、７．３０（ｄ、Ｊ＝３．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．０９（ｄｄ、Ｊ＝８．６、２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．５９（ｓ、１Ｈ）、６．５１（ｄ、Ｊ＝３．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．２９（ｓ、１Ｈ）、５．２７（ｄ、Ｊ＝９．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．４０（ｍ、１Ｈ）、３．９８（ｄ、Ｊ＝３．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．８７（ｓ、３Ｈ）、３．８５−３．７５（ｍ、３Ｈ）、３．７２（ｄｄ、Ｊ＝９．６、３．３Ｈｚ、１Ｈ）、２．９１（ｍ、１Ｈ）、０．６７（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、３Ｈ）、０．６５（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、３Ｈ）。
【０３２４】
実施例２３：正常増殖性、老化又は静止線維芽細胞に対する化合物の毒性
正常なヒト線維芽細胞（ＩＭＲ９０）及び患者由来のβ−ガラクトシダーゼ（ＧＬＢ１）又はα−フコシダーゼ（ＦＵＣＡ１）欠損細胞を用いて、化合物への曝露後の細胞生存率の変化を決定した。細胞を、５％の二酸化炭素及び５％の酸素の制御された雰囲気下で、ＤＭＥＭ及び１０％の熱で不活性化されたＦＢＳとともに培養した。老化を細胞接触阻害によって誘発し、老化に関連するβ−ガラクトシダーゼ（ＳＡ−β−Ｇａｌ）染色の非存在及び細胞周期に再び入る能力によって確認した。老化を、ドキソルビシンによる処理によって誘発し、ＳＡ−β−Ｇａｌ陽性染色及びＤＮＡ複製の欠如によって確認した。細胞を、３日間にわたって化合物で処理した。細胞生存率を、１０の濃度の試験される化合物でミトコンドリアデヒドロゲナーゼ活性（ＸＴＴアッセイ、Ｃａｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）によって決定した。用量反応曲線を生成するために、データを、４パラメータのヒル関数に当てはめ、ＩＣ５０を、Ｙ＝０．５生存率で決定した。各化合物についての老化細胞除去指数（Ｓ．Ｉ．）を、正常な増殖細胞に対するＩＣ５０を老化細胞に対するＩＣ５０で除算することによって決定した。老化細胞除去指数データが、表１に示され、化合物は、Ｓ．Ｉ．＜１（−）、Ｓ．Ｉ．＞１（＋）、Ｓ．Ｉ．＞５（＋＋）及びＳ．Ｉ．＞１０（＋＋＋）を有する。
【０３２５】
【表１】
2021531249.tif 000109
【０３２６】
実施例２４：マウス胚性線維芽細胞（ＭＥＦ）に対する５−フルオロウリジン−５’−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（ＦＵＲＧａｌ）（１０１）の老化細胞除去効果
マウス胚性線維芽細胞を、２４時間にわたって３００ｎＭのドキソルビシンをともにインキュベートして、老化を誘発した。細胞を洗浄し、７日間にわたる培地中でのインキュベーションの後、老化を、ＳＡ−β−Ｇａｌのための染色（Ｉｔａｈａｎａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３７１（２００７）２１−３１）及び５−エチニル−２’−デオキシウリジン（ＥｄＵ）の組み込みの欠如によって確認した（Ｙｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３５０（２００９）２９−３５を参照）。
【０３２７】
増殖又は老化ＭＥＦを、４日間にわたって増加する濃度のＦＵＲＧａｌ（１０１）又は５−フルオロウリジン（ＦＵＲ）（１０２）のいずれかで処理した。細胞を洗浄し、４’，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール（ＤＡＰＩ）及びヨウ化プロピジウム（ＰＩ）で染色し、生存細胞の分画を、ＰＩ陰性核に対するＰＩ陽性核の比率から評価した。図１Ａに示される結果は、活性薬剤（１０２）が、細胞生存率を著しく低下させる一方、プロドラッグ（１０１）が、４ｍＭ程度の濃度で増殖細胞に対して完全に非毒性であることを実証している。対照的に、両方の化合物（１０１）及び（１０２）は、図１Ｂに示されるように、老化ＭＥＦに対して等毒性であり、これは、プロドラッグ（１０１）が、老化細胞集団中のヒドロラーゼ酵素によって細胞傷害性ＦＵＲ（１０２）に効率的に変換されることを示している。
【０３２８】
実施例２５：Ｃ５７ＢＬ／６マウスに対する５−フルオロウリジン−５’−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（ＦＵＲＧａｌ）（１０１）及び５−フルオロウリジン（ＦＵＲ）（１０２）の毒性の比較
等モル用量の（１０１）（１６０ｍｇ／ｋｇ）及び（１０２）（１００ｍｇ／ｋｇ）を、マウスの２つの群（それぞれＮ＝３）への単回用量の腹腔内注入によって投与した。処理の６日後、血球数を、標準方法（図２Ａ）によって決定し、大腿骨からの骨髄細胞を計数し（図２Ｂ）、脾臓重量（図２Ｃ）を決定して、２つの薬剤の毒性を比較した。プロドラッグ（１０１）は、血小板、好中球、リンパ球及び骨髄細胞に対するわずかな毒性を示す一方、ＦＵＲ（１０２）は、全ての細胞集団の著しい減少を誘発する。プロドラッグ（１０１）はまた、ＦＵＲ（１０２）と比較して脾臓重量に対する最小の効果を示す。
【０３２９】
実施例２６：インビボ投与後の老化Ｃ５７ＢＬ／６マウス肝細胞に対する５−フルオロウリジン−５’−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（ＦＵＲＧａｌ）（１０１）の効果
Ｃ５７ＢＬ／６マウス（Ｎ＝５／群）の２つの群に、ドキソルビシン（２５ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内注入して、肝細胞老化を誘導した。４及び６日後、群に、ＰＢＳ又はＦＵＲＧａｌ（１４０ｍｇ／ｋｇ）（１０１）を注入した。５匹の動物の第３の群を対照として用いた。さらに４日後、肝臓を取り出し、薄片化した（３０μｍ）後、ＳＡ−β−Ｇａｌについて染色した（動物当たり６つの視野を評価した）（図３Ａ及び３Ｂ）。図３Ｃに示されるように、定量は、ＦＵＲＧａｌ処理後の老化肝細胞の減少についての数値的な傾向を示した。分析当日のマウスの平均体重が図３Ｄに示される。
【０３３０】
実施例２７：インビボ投与後の老化Ｃ５７ＢＬ／６マウス肝細胞に対する（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（（（Ｅ）−３−（４−（（（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１３）（ａｋａ  ＲＢＯ−０１３）の効果
Ｃ５７ＢＬ／６マウス（Ｎ＝９／群）の２つの群に、ドキソルビシン（２０ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内注入して、肝細胞老化を誘導した。４及び６日後、群に、ＰＢＳ又は化合物（１１３）（ａｋａ  ＲＢＯ−０１３）（２×２０ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内（ｉ．ｐ．）注入した。動物の第３の群を対照として用いた。さらに２日後、肝臓を取り出し、薄片化した（３０μｍ）後、上述されるようにＳＡ−β−Ｇａｌについて染色した（図４Ａ及び４Ｂ）。図４Ｃに示されるように、定量は、（１１３）による処理後に老化肝細胞（ＳＡ−β−Ｇａｌ染色によって可視化される）の減少を示した。この老化細胞除去効果はまた、Ｃｄｋｎ２ａ（ｐ１６ＩＮＫ４ａ）及びＩＬ−６のｍＲＮＡレベルを検出するために定量ＰＣＲを使用することによって裏付けられた（Ｎ．Ｂ．Ｃｄｋｎ２ａ発現が、ドキソルビシンを投与された動物のみに検出された）。発現レベルを、参照遺伝子としてのＡｃｔｂに対して報告した。図４Ｄ及び４Ｅはそれぞれ、Ｃｄｋｎ２ａ及びＩＬ−６遺伝子発現の有意な減少を示す。
【０３３１】
実施例２８：インビボ投与後のＣ５７ＢＬ／６マウスの老化肺細胞に対する（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−メチル−６−（（（Ｅ）−３−（４−（（（２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１９）（ａｋａ  ＲＢＯ−０１９）の老化細胞除去効果
Ｃ５７ＢＬ／６マウス（Ｎ＝９／群）の４つの群に、ドキソルビシン（１５ｍｇ／ｋｇ）を静脈内注入して、肺組織における老化を誘導した。５日後、群に、ビヒクル又は化合物（１１９）（ａｋａ  ＲＢＯ−０１９）（静脈内（ｉ．ｖ．）に１０、２０又は４０ｍｇ／ｋｇ）を注入した。さらに３日後、肺を取り出し、左葉を薄片化した後、上述されるようにＳＡ−β−Ｇａｌについて染色した（図５Ａ及び５Ｂ）。図５Ｃに示されるように、定量は、（１１９）による処理後にＳＡ−β−Ｇａｌ染色の用量依存的減少を示した。この老化細胞除去効果はまた、Ｃｄｋｎ２ａ（ｐ１６ＩＮＫ４ａ）のｍＲＮＡレベルを検出するために定量ＰＣＲを使用することによって裏付けられた。発現レベルを、参照遺伝子としてのＡｃｔｂに対して報告した。図５Ｄは、肺におけるＣｄｋｎ２ａ遺伝子発現の用量依存的減少を示す。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図４Ｄ】
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【図４Ｅ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図５Ｄ】
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【国際調査報告】
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