(57)【要約】  本発明は、新規な抗ＨＢＶのテトラヒドロイソキサゾロ［４，３−ｃ］ピリジン類化合物を開示し、具体的には、次の式（Ｉ）で表される化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体を開示した。【化１】2021503466.tif 000119
2021503466.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式（Ｉ）：
【化１】
2021503466.tif 000092
［式中、環Ａは６〜１２員のアリールまたは５〜６員のヘテロアリールであり、
各Ｒは、独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＲａＲｂ、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲａＲｂ、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒｃ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲｄ、Ｃ１−６アルコキシ、または独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＮＨ２および−ＣＮからなる群より選ばれる１、２または３個の置換基で任意に置換されているＣ１−６アルキルであり、
ｎは０、１、２または３であり、
ＴはＮまたはＣＲ３であり、
Ｒ１およびＲ５は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＲａＲｂ、Ｃ１−３アルコキシ、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＮ、および−ＮＯ２からなる群より独立して選ばれる１、２または３個の置換基で任意に置換されているＣ１−３アルキルであり、
Ｒ２およびＲ４は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＲａＲｂ、Ｃ１−６アルコキシ、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＮ、および−ＮＯ２からなる群より独立して選ばれる１、２または３個の置換基で任意に置換されているＣ１−６アルキルであり、
Ｒ３はＦ、ＢｒまたはＣＮであり、
Ｒａ、Ｒｂ、ＲｃおよびＲｄは、それぞれ独立してＨまたはＣ１−６アルキルであり、
前記５〜６員のヘテロアリールは、−Ｏ−、−Ｓ−、Ｎおよび−ＮＨ−からなる群より独立して選ばれる１、２または３個のヘテロ原子またはヘテロ原子団を含む。］で表される
化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項２】
前記環Ａは、フェニルまたは５〜６員のヘテロアリールである、請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項３】
前記環Ａは、フェニル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、ピロリル、ピラジニル、ピリミジニルまたはピリジニルである、請求項２に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項４】
前記Ｒａ、Ｒｂ、ＲｃおよびＲｄは、それぞれ独立してＨ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３または−ＣＨ２（ＣＨ３）２である、請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項５】
前記各Ｒは、独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＮＨ２、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２ＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、ＣＦ３または−ＣＨ２ＯＨである、請求項１または４に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項６】
前記Ｒ１およびＲ５は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＮＨ２、−ＣＨ３、−ＣＨＦ、−ＣＨＦ２または−ＣＦ３である、請求項１または４に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項７】
前記Ｒ２およびＲ４は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＮＨ２、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨＦ、−ＣＨＦ２または−ＣＦ３である、請求項１または４に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項８】
前記構成単位
【化２】
2021503466.tif 000093
は、
【化３】
2021503466.tif 000094
である、請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項９】
前記構成単位
【化４】
2021503466.tif 000095
は、
【化５】
2021503466.tif 000096
である、請求項８に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項１０】
前記構成単位
【化６】
2021503466.tif 000097
は、
【化７】
2021503466.tif 000098
である、請求項９に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項１１】
前記構成単位
【化８】
2021503466.tif 000099
は、
【化９】
2021503466.tif 000100
である、請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項１２】
前記構成単位
【化１０】
2021503466.tif 000101
は、
【化１１】
2021503466.tif 000102
である、請求項１または１１に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項１３】
前記構成単位
【化１２】
2021503466.tif 000103
は、
【化１３】
2021503466.tif 000104
である、請求項１２に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項１４】
次の式（ＩＩ−ａ）または式（ＩＩＩ−ａ）：
【化１４】
2021503466.tif 000105
［式中、環Ａは請求項１〜３または８〜１０に定義の通りであり、
Ｒ２およびＲ４は請求項１または７に定義の通りであり、
Ｒは請求項１または５に定義の通りであり、
ｎは請求項１に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項１〜４および６〜１０のいずれか一項に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項１５】
次の式（ＩＩ−ａ−１）または式（ＩＩＩ−ａ−１）：
【化１５】
2021503466.tif 000106
［式中、環Ａは請求項１〜３または８〜１０に定義の通りであり、
Ｒ２およびＲ４は請求項１または７に定義の通りであり、
Ｒは請求項１または５に定義の通りであり、
ｎは請求項１に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項１４に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項１６】
次の式（ＩＩ−ｂ）、（ＩＩ−ｃ）、（ＩＩＩ−ｂ）または（ＩＩＩ−ｃ）：
【化１６】
2021503466.tif 000107
［式中、Ｔ１およびＴ２は、それぞれ独立してＮまたはＣＨであり、
Ｒ２およびＲ４は請求項１または７に定義の通りであり、
Ｒは請求項１または５に定義の通りであり、
ｎは請求項１に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項１、５または７に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体
【請求項１７】
次の式（ＩＩ−ｂ−１）、（ＩＩ−ｃ−１）、（ＩＩＩ−ｂ−１）または（ＩＩＩ−ｃ−１）：
【化１７】
2021503466.tif 000108
［式中、Ｔ１およびＴ２は、それぞれ独立してＮまたはＣＨであり、
Ｒ２およびＲ４は請求項１または７に定義の通りであり、
Ｒは請求項１または５に定義の通りであり、
ｎは請求項１に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項１６に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項１８】
次の式（ＩＩ−ｄ）、（ＩＩ−ｅ）、（ＩＩ−ｆ）、（ＩＩ−ｋ）、（ＩＩＩ−ｄ）、（ＩＩＩ−ｅ）、（ＩＩＩ−ｆ）または（ＩＩＩ−ｋ）：
【化１８】
2021503466.tif 000109
［式中、Ｒ２およびＲ４は請求項１または７に定義の通りであり、
Ｒは請求項１または５に定義の通りであり、
ｎは請求項１に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項１６に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項１９】
次の式（ＩＩ−ｄ−１）、（ＩＩ−ｅ−１）、（ＩＩ−ｆ−１）、（ＩＩ−ｋ−１）、（ＩＩＩ−ｄ−１）、（ＩＩＩ−ｅ−１）、（ＩＩＩ−ｆ−１）または（ＩＩＩ−ｋ−１）：
【化１９】
2021503466.tif 000110
［式中、Ｒ２およびＲ４は請求項１または７に定義の通りであり、
Ｒは請求項１または５に定義の通りであり、
ｎは請求項１に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項１８に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項２０】
次の式（ＩＩ−ｍ）または（ＩＩＩ−ｍ）：
【化２０】
2021503466.tif 000111
［式中、Ｒ２およびＲ４は請求項１または７に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項１８に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項２１】
次の式（ＩＩ−ｍ−１）または（ＩＩＩ−ｍ−１）：
【化２１】
2021503466.tif 000112
［式中、Ｒ２およびＲ４は請求項１または７に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項２０に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項２２】
次の式（ＩＩ−ｇ）〜（ＩＩ−ｉ）または式（ＩＩＩ−ｇ）〜（ＩＩＩ−ｉ）：
【化２２】
2021503466.tif 000113
［式中、Ｒ２およびＲ４は請求項１または７に定義の通りであり、
Ｒは請求項１または５に定義の通りであり、
ｎは請求項１に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項１４に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項２３】
次の式（ＩＩ−ｇ−１）〜（ＩＩ−ｉ−１）または式（ＩＩＩ−ｇ−１）〜（ＩＩＩ−ｉ−１）：
【化２３】
2021503466.tif 000114
［式中、Ｒ２およびＲ４は請求項１または７に定義の通りであり、
Ｒは請求項１または５に定義の通りであり、
ｎは請求項１に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項２２に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項２４】
次の式：
【化２４】
2021503466.tif 000115
2021503466.tif 000116
で示される
化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項２５】
次の式：
【化２５】
2021503466.tif 000117
2021503466.tif 000118
で示される
化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。
【請求項２６】
活性成分としての治療有効量の請求項１〜２５のいずれか一項に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体、および薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項２７】
抗Ｂ型肝炎薬の製造における、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体または請求項２６に記載の医薬組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、中国特許出願ＣＮ２０１７１１１３８９２２．９（出願日２０１７年１１月１６日）、および中国特許出願ＣＮ２０１８１０３３９７２３．２（出願日２０１８年０４月１６日）に基づき優先権を主張し、それらの出願の内容を全て本出願に援用する。
【０００２】
本発明は、医薬品の分野に関し、具体的には、新規な抗ＨＢＶのテトラヒドロイソキサゾロ［４，３−ｃ］ピリジン類化合物、その製造方法およびそのＢ型肝炎の治療薬の製造における使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
ＷＨＯの統計によると、現在、世界中では約２．４億の人がＨＢＶ（Ｂ型肝炎ウィルス）に感染しており、それで直接にまたは間接的に起因して毎年約６８万人が死亡している。中国は７千万以上のＢ型肝炎の感染人口を抱えている大きな国となっている。ＨＢＶの長期間感染は、肝不全、肝硬変および肝癌等悪性疾患を引き起こす可能性がある。（Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ，  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｂ：  Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｆａｃｔ  Ｓｈｅｅｔ  （２０１６）．を参照する。）
現在、慢性Ｂ型肝炎の治療に承認されている従来の薬物は、ヌクレオシド（酸）化合物とインターフェロンのみである。ラミブジン、エンテカビル、テノホビル（エステル）などのヌクレオシド（酸）薬は、ＨＢＶ  ＤＮＡ複製を阻害できるが、これらの薬はｃｃｃＤＮＡを排除できず、薬物使用中止後にしばしばリバウンドすることがある。患者は長期投薬を必要とし、一部の患者は薬剤耐性を示しやすくなっている。インターフェロン薬は、患者の免疫系を部分的に活性化し、身体の自己免疫作用を通じてＢ型肝炎ウイルスを阻害できるが、これらの薬には大きな副作用があり、患者の忍容性は十分ではない。より深刻なことに、インターフェロン治療に対する異なる集団の応答率には有意差はあるが、全体としての応答率は低かった（通常３０％未満）（Ｎａｔ．  Ｒｅｖ．  Ｇａｓｔｒｏ．  Ｈｅｐａｔ．  ８（２０１１），２７５−２８４）。
【０００４】
ＨＢＶ感染患者では、ＨＢＶの連続複製の鋳型とする、安定した共有結合閉環状ＤＮＡ、すなわちｃｃｃＤＮＡが宿主の肝細胞核内に形成されている。全てのサブゲノムＲＮＡ（ｓｇＲＮＡ）およびプレゲノムＲＮＡ（ｐｇＲＮＡ）は、それぞれｃｃｃＤＮＡの転写によって形成される。細胞核から出た後、ｓｇＲＮＡはプロテインＸと他の３つのエンベロープタンパク質に翻訳され、ｐｇＲＮＡはコアタンパク質とウイルスポリメラーゼに翻訳される。ＰｇＲＮＡは、ポリメラーゼの作用下でコアタンパク質と自己集合して、ヌクレオカプシドに取り囲まれたＲＮＡを形成する。ヌクレオカプシドでは、ｐｇＲＮＡがＤＮＡのマイナス鎖に逆転写され、それによってＤＮＡのプラス鎖がさらに合成されてｒｃＤＮＡが形成される。一方では、ヌクレオカプシドに取り囲まれたｒｃＤＮＡは再び殻を取り除いて細胞核に入り、ｃｃｃＤＮＡをさらに増幅させ、他方では、エンベロープタンパク質と再結合し、小胞体を通して細胞を放出して新しいＨＢＶを形成した。ＨＢＶの複製サイクルでは、ヌクレオカプシド合成がＨＢＶゲノム複製プロセスの重要なステップであり、ウイルスＤＮＡの合成は、ヌクレオカプシド内でのみ特異的に発生する。ヌクレオカプシドのアセンブリは、ＨＢＶの多様性を制限する進化的制限プロセスであり、微妙な分子障害にも非常に敏感である。異なるＨＢＶウィルス遺伝子型と薬剤耐性菌に対する新しい治療法の開発のために、ヌクレオカプシドの合成と分解プロセスに作用する標的は極めて有望である。いくつかのヌクレオカプシド関連抗ＨＢＶ化合物が報告されている。ＮＶＲ  ３−７７８  （ＷＯ  ２０１５１０９１３０Ａ１）、ＪＮＪ−５６１３６３７９、ＧＬＳ−４  ＪＨＳなどのいくつかの関連化合物のそれぞれは臨床研究段階にある。
【発明の概要】
【０００５】
一態様によれば、本発明は、次の式（Ｉ）：
【化１】
2021503466.tif 000003
［式中、環Ａは６〜１２員のアリールまたは５〜６員のヘテロアリールであり、
各Ｒは、独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＲａＲｂ、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲａＲｂ、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒｃ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲｄ、Ｃ１−６アルコキシ、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＮＨ２および−ＣＮからなる群より独立して選ばれる１、２または３個の置換基で任意に置換されているＣ１−６アルキルであり、
ｎは０、１、２または３であり、
ＴはＮまたはＣＲ３であり、
Ｒ１およびＲ５は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＲａＲｂ、Ｃ１−３アルコキシ、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＮ、および−ＮＯ２からなる群より独立して選ばれる１、２または３個の置換基で任意に置換されているＣ１−３アルキルであり、
Ｒ２およびＲ４は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＲａＲｂ、Ｃ１−６アルコキシ、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＮ、および−ＮＯ２からなる群より独立して選ばれる１、２または３個の置換基で任意に置換されているＣ１−６アルキルであり、
Ｒ３はＦ、ＢｒまたはＣＮであり、
Ｒａ、Ｒｂ、ＲｃおよびＲｄは、それぞれ独立してＨまたはＣ１−６アルキルであり、
前記５〜６員のヘテロアリールは、−Ｏ−、−Ｓ−、Ｎおよび−ＮＨ−からなる群より独立して選ばれる１、２または３個のヘテロ原子またはヘテロ原子団を含む。］
で表される化合物（式Ｉの化合物）、その薬学的に許容される塩またはその異性体を提供する。
【０００６】
本発明に係るいくつかの実施形態において、各Ｒは、独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＲａＲｂ、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲａＲｂ、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒｃ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲｄ、Ｃ１−６アルコキシ、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＯＨ、−ＮＨ２および−ＣＮからなる群より独立して選ばれる１、２または３個の置換基で任意に置換されているＣ１−６アルキルであり、他の変数は本発明で定義される通りである。
【０００７】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記環Ａは、フェニルまたは５〜６員のヘテロアリールであり、他の変数は本発明で定義される通りである。
【０００８】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記環Ａは、フェニル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、ピロリル、ピラジニル、ピリミジニルまたはピリジニルであり、他の変数は本発明で定義される通りである。
【０００９】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記Ｒａ、Ｒｂ、ＲｃおよびＲｄは、それぞれ独立してＨ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３または−ＣＨ２（ＣＨ３）２であり、他の変数は本発明で定義される通りである。
【００１０】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記各Ｒは、独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＮＨ２、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２ＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、ＣＦ３または−ＣＨ２ＯＨであり、他の変数は本発明で定義される通りである。
【００１１】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記各Ｒは、独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、Ｃ１−３アルコキシまたはＣ１−３アルキルであり、他の変数は本発明で定義される通りである。
【００１２】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記各Ｒは、独立してＦ、Ｃｌ、ＣＮまたはメトキシであり、他の変数は本発明で定義される通りである。
【００１３】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記ｎは０、１または２であり、他の変数は本発明で定義される通りである。
【００１４】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記Ｒ１およびＲ５は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＮＨ２、−ＣＨ３、−ＣＨＦ、−ＣＨＦ２または−ＣＦ３であり、他の変数は本発明で定義される通りである。
【００１５】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記Ｒ１およびＲ５は、それぞれ独立してＨであり、他の変数は本発明で定義される通りである。
【００１６】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記Ｒ２およびＲ４は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、Ｃ１−３アルコキシ、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉからなる群より独立して選ばれる１、２または３個の置換基で任意に置換されているＣ１−３アルキルであり、他の変数は本発明で定義される通りである。
【００１７】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記Ｒ２およびＲ４は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、または２個のＦ（Ｆ原子）で任意に置換されているメチルであり、他の変数は本発明で定義される通りである。
【００１８】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記Ｒ２およびＲ４は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＮＨ２、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨＦ、−ＣＨＦ２または−ＣＦ３であり、他の変数は本発明で定義される通りである。
【００１９】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記構成単位
【化２】
2021503466.tif 000004
は、
【化３】
2021503466.tif 000005
であり、Ｒ、ｎおよびその他の変数は本発明で定義される通りであり、本発明に係るいくつかの実施形態において、上記構成単位
【化４】
2021503466.tif 000006
は、
【化５】
2021503466.tif 000007
であり、Ｒ、ｎおよびその他の変数は本発明で定義される通りである。
【００２０】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記構成単位
【化６】
2021503466.tif 000008
は、
【化７】
2021503466.tif 000009
であり、Ｒおよびその他の変数は本発明で定義される通りである。
【００２１】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記構成単位
【化８】
2021503466.tif 000010
は、
【化９】
2021503466.tif 000011
であり、他の変数は本発明で定義される通りである。
【００２２】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記構成単位
【化１０】
2021503466.tif 000012
は、
【化１１】
2021503466.tif 000013
であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびその他の変数は本発明で定義される通りである。
【００２３】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記構成単位
【化１２】
2021503466.tif 000014
は、
【化１３】
2021503466.tif 000015
であり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびその他の変数は本発明で定義される通りである。
【００２４】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記構成単位
【化１４】
2021503466.tif 000016
は、
【化１５】
2021503466.tif 000017
であり、Ｒ２、Ｒ４、およびその他の変数は本発明で定義される通りである。
【００２５】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記構成単位
【化１６】
2021503466.tif 000018
は、
【化１７】
2021503466.tif 000019
であり、他の変数は本発明で定義される通りである。
【００２６】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（Ｉ−１）で示される構造を備える。
【化１８】
2021503466.tif 000020
［式中、環Ａ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ、ｎ、Ｔ、または構成単位
【化１９】
2021503466.tif 000021
は、本発明で定義される通りである。］
【００２７】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ−ａ）または式（ＩＩＩ−ａ）で示される構造を備える。
【化２０】
2021503466.tif 000022
［式中、環Ａ、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ、ｎ、または構成単位
【化２１】
2021503466.tif 000023
は、本発明で定義される通りである。］
【００２８】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ−ａ−１）または式（ＩＩＩ−ａ−１）で示される構造を備える。
【化２２】
2021503466.tif 000024
［式中、環Ａ、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ、ｎ、または構成単位
【化２３】
2021503466.tif 000025
は、本発明で定義される通りである。］
【００２９】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ−ｂ）、（ＩＩ−ｃ）、（ＩＩＩ−ｂ）または（ＩＩＩ−ｃ）で示される構造を備える。
【化２４】
2021503466.tif 000026
［式中、Ｔ１およびＴ２は、それぞれ独立してＮまたはＣＨであり、Ｒ２、Ｒ４、Ｒおよびｎは、本発明で定義される通りである。］
【００３０】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ−ｂ−１）、（ＩＩ−ｃ−１）、（ＩＩＩ−ｂ−１）または（ＩＩＩ−ｃ−１）で示される構造を備える。
【化２５】
2021503466.tif 000027
［式中、Ｔ１およびＴ２は、それぞれ独立してＮまたはＣＨであり、Ｒ２、Ｒ４、Ｒおよびｎは、本発明で定義される通りである。］
【００３１】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ−ｄ）、（ＩＩ−ｅ）、（ＩＩ−ｆ）、（ＩＩ−ｋ）、（ＩＩＩ−ｄ）、（ＩＩＩ−ｅ）、（ＩＩＩ−ｆ）または（ＩＩＩ−ｋ）で示される構造を備える。
【化２６】
2021503466.tif 000028
［式中、Ｒ２、Ｒ４、Ｒおよびｎは、本発明で定義される通りである。］
【００３２】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ−ｄ−１）、（ＩＩ−ｅ−１）、（ＩＩ−ｆ−１）、（ＩＩ−ｋ−１）、（ＩＩＩ−ｄ−１）、（ＩＩＩ−ｅ−１）、（ＩＩＩ−ｆ−１）または（ＩＩＩ−ｋ−１）で示される構造を備える。
【化２７】
2021503466.tif 000029
［式中、Ｒ２、Ｒ４、Ｒおよびｎは、本発明で定義される通りである。］
【００３３】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ−ｍ）または（ＩＩＩ−ｍ）で示される構造を備える。
【化２８】
2021503466.tif 000030
［式中、Ｒ２およびＲ４は、本発明で定義される通りである。］
【００３４】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ−ｍ−１）または（ＩＩＩ−ｍ−１）で示される構造を備える。
【化２９】
2021503466.tif 000031
［式中、Ｒ２およびＲ４は、本発明で定義される通りである。］
【００３５】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ−ｇ）〜（ＩＩ−ｉ）または式（ＩＩＩ−ｇ）〜（ＩＩＩ−ｉ）で示される構造を備える。
【化３０】
2021503466.tif 000032
［式中、Ｒ２、Ｒ４、Ｒおよびｎは、本発明で定義される通りである。］
【００３６】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ−ｊ）〜（ＩＩ−ｎ）または式（ＩＩＩ−ｊ）〜（ＩＩＩ−ｎ）で示される構造を備える。
【化３１】
2021503466.tif 000033
［式中、Ｒ２、Ｒ４、Ｒおよびｎは、本発明で定義される通りである。］
【００３７】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ−ｇ−１）〜（ＩＩ−ｉ−１）または式（ＩＩＩ−ｇ−１）〜（ＩＩＩ−ｉ−１）で示される構造を備える。
【化３２】
2021503466.tif 000034
［式中、Ｒ２、Ｒ４、Ｒおよびｎは、本発明で定義される通りである。］
【００３８】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ−ｊ−１）〜（ＩＩ−ｎ−１）または式（ＩＩＩ−ｊ−１）〜（ＩＩＩ−ｎ−１）で示される構造を備える。
【化３３】
2021503466.tif 000035
［式中、Ｒ２、Ｒ４、Ｒおよびｎは、本発明で定義される通りである。］
【００３９】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、
【化３４】
2021503466.tif 000036
2021503466.tif 000037
から選ばれる。
【００４０】
本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、
【化３５】
2021503466.tif 000038
2021503466.tif 000039
から選ばれる。
【００４１】
また、本発明のいくつかの実施形態は、上記変数の任意の組合せからなるものがある。
【００４２】
別の様態によれば、さらに、本発明は、活性成分としての治療有効量の上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体、および薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物を提供する。
【００４３】
別の様態によれば、さらに、本発明は、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体、およびその上記医薬組成物の、抗Ｂ型肝炎薬の製造における使用を提供する。
【００４４】
別の様態によれば、さらに、本発明は、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体、およびその上記医薬組成物の、Ｂ型肝炎の予防または治療における使用を提供する。
【００４５】
別の様態によれば、さらに、本発明は、治療有効量の上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体、およびその上記医薬組成物を、それを必要とする（該治療または予防の）哺乳動物（好ましくは、ヒト）に投与することを含む、Ｂ型肝炎の治療または予防方法を提供する。
【００４６】
別の様態によれば、さらに、本発明は、Ｂ型肝炎の治療または予防に使用するための上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体、およびその上記医薬組成物を提供する。
【００４７】
本発明は、新規なＨＢＶ阻害剤に関し、その親コア構造は先行技術と区別される。本発明に係る化合物は、ＨＢＶ  ＤＮＡ複製活性の阻害を示す。
定義および説明
【００４８】
特に断らない限り、本発明における下記の用語およびフレーズは、次の意味を有する。ある１つの特定の用語やフレーズは、特に定義されない場合、不確定または不明確とが認定されておらず、一般的な意味とが理解されるべきである。本明細書に商品名が現れた場合、その対応の商品またはその活性成分を示すことである。
【００４９】
ここで採用されている用語「薬学的に許容される」とは、それらの化合物、材料、組成物および／または剤形に対し、信頼性を有する医学的判断の範囲においてヒトおよび動物の組織とを接触して使用することに適用するが、過剰な毒性、刺激性、アレルギー性の反応、または他の問題や合併症がなく、合理的な利益／リスクの比率とをバランスすることを意味する。
【００５０】
用語「薬学的に許容される塩」とは、本発明の化合物の塩を意味し、本発明に発見された、特定の置換基を有する化合物と相対的に無毒の酸またはアルカリとによって調製されるものである。本発明における化合物に、比較的酸性官能基を含む場合、純粋な溶媒または適当な不活性溶媒に、十分な塩基量でこれらの化合物とを接触する方式で塩基付加塩を取得する。比較的塩基性官能基を含む場合、純粋な溶媒または適当な不活性溶媒に十分な酸量でこれらの化合物とを接触する方式で酸付加塩を取得する。本発明における幾つか特定の化合物は、塩基性の官能基と酸性の官能基を含むため、任意の塩基付加塩または酸付加塩に変換されることができる。
【００５１】
本発明に係る薬学的に許容される塩は、酸基または塩基含有親化合物から通常の化学方法により合成される可能性がある。一般的には、このような塩の調製方法は、水や有機溶媒または両者の混合物に、遊離酸または遊離塩基の形態のこれらの化合物と適当の化学量論の塩基または酸とを反応させて調製することである。
【００５２】
本発明の化合物は、特定の幾何異性体または立体異性体の形態で存在する可能である。本発明に想定された全ての化合物は、シスおよびトランス異性体、（−）−および（＋）−鏡像異性体、（Ｒ）−および（Ｓ）−鏡像異性体、ジアステレオマー、（Ｄ）−異性体、（Ｌ）−異性体と、それらのラセミ体混合物および他の混合物とを含み、例えば、鏡像異性体またはジアステレオマーに富む混合物である。これらの混合物は、いずれも本発明の範囲に含まれる。アルキルなどの置換基に他の不斉炭素原子が存在してもよい。これらの異性体の全ておよびそれらの混合物は、いずれも本発明の範囲に含まれる。
【００５３】
特に断らない限り、用語「鏡像異性体」または「光学異性体」とは、互いに鏡像関係にある立体異性体を意味する。
【００５４】
特に断らない限り、用語「ジアステレオマー」とは、分子が２つ以上のキラル中心を備え、分子が互いに鏡像関係ではない立体異性体を意味する。
【００５５】
特に断らない限り、「（＋）」は右旋を表し、「（−）」は左旋を表し、「（±）」はラセミを表す。
【００５６】
【化３６】
2021503466.tif 000040
【００５７】
特に断らない限り、用語「１種の異性体に富む」、「異性体に富む」、「１種の鏡像異性体に富む」または「鏡像異性体に富む」とは、そのうちの１種の異性体または鏡像異性体の含有量が１００％未満であり、且つ、当該異性体または鏡像異性体の含有量が６０％以上であり、または７０％以上、または８０％以上、または９０％以上、または９５％以上、または９６％以上、または９７％以上、または９８％以上、または９９％以上、または９９．５％以上、または９９．６％以上、または９９．７％以上、または以上９９．８％以上、または９９．９％以上であることを意味する。
特に断らない限り、用語「異性体過剰」または「鏡像異性体過剰」とは、２種の異性体または２種の鏡像異性体の相対百分率間の差を意味する。例えば、一方の異性体または鏡像異性体の含有量が９０％、他方の異性体または鏡像異性体の含有量が１０％である場合、異性体または鏡像異性体過剰（ｅｅ値）は８０％である。
【００５８】
キラル合成またはキラル試薬、あるいは他の通常の技術により、光学活性の（Ｒ）−および（Ｓ）−異性体、並びにＤおよびＬ異性体を調製することができる。本発明のある化合物の１種の鏡像異性体を取得しようとする場合、不斉合成、またはキラル補助剤を有する誘導作用により調製することができ、取得されたジアステレオマー混合物を分離し、補助基を切断させて所望の純粋な鏡像異性体を提供する。あるいは、分子に塩基性官能基（例えば、アミノ基）または酸性官能基（例えば、カルボキシル基）を含む場合、適当な光学活性の酸または塩基によりジアステレオマー塩を形成し、次に本分野に周知の通常法によりジアステレオマーを分割し、その後、回収して純粋な鏡像異性体を得る。なお、鏡像異性体とジアステレオマーとの分離は、通常、クロマトグラフィーにより完成され、前記クロマトグラフィーは、キラル固定相を採用し、且つ必要に応じて化学誘導体化法と組み合わせる（例えば、アミンによりカルバミン酸塩を生成する。）。
【００５９】
本発明の化合物は、当該化合物を構成する１つ以上の原子の上に、不自然な割合の原子同位体を含むことができる。例えば、放射性同位体で化合物を標識することができ、例えば三重水素（３Ｈ）、ヨウ素−１２５（１２５Ｉ）またはＣ−１４（１４Ｃ）が挙げられる。さらに、例えば、水素を重水素で置き換えて重水素化薬物を形成できる。重水素と炭素から形成される結合は、一般的な水素と炭素から形成される結合よりも強力である。非重水素化薬物に比べると、重水素化薬物は、毒性や副作用を低減し、薬物安定性を高め、薬物有効性を高め、薬物生物学的半減期を延長させるという利点がある。本発明に係る化合物の全ての同位体構成の変更は、放射性であるか否かを問わず、いずれも本発明の範囲に含まれる。
【００６０】
用語「薬学的に許容される担体（キャリア）」は、本発明の有効量の活性物質を配送でき、活性物質の生物活性を干渉せず、且つ宿主（ホスト）または患者に対する毒性・副作用を持たない任意の製剤または担体媒体を意味する。典型的な担体は、水、油、野菜、および鉱物質、クリームベース、洗剤ベース、軟膏ベース等を含む。これらのベースは、懸濁剤、粘着付与剤、経皮吸収促進剤等を含む。これらの製剤は、化粧品の分野または一部の医薬品分野の当業者にとって周知である。
【００６１】
用語「賦形剤」は、有効な薬物組成物の調製に必要な担体（キャリア）、希釈剤、および／または媒体を意味する。
【００６２】
用語「含む／含有する（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、およびそれらの英語の変形（例えば「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ」や「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」など）は、いずれも開放（オープンエンド）式の、包含式の意味、すなわち「…を含むが、これらに限定されない」として解釈されるべきである。
【００６３】
用語「治療」とは、本発明に記載の化合物または製剤を投与して疾患又は前記疾患関連の１つ以上の症状を予防、緩和したり、解消したりすることを意味し、且つ
（ｉ）  哺乳類において疾患または疾患状態の発生を予防し、特に、当該哺乳類が前記疾患状態に罹りやすいが、そのような疾患状態にすでに罹患していることがまだ診断されていない場合、予防することと、
（ｉｉ）  疾患または疾患状態を阻害し、すなわちその発生・進行を阻害することと、
（ｉｉｉ）  疾患または疾患状態を緩和し、すなわち疾患または疾患状態を減退させることとを含む。
【００６４】
薬物または薬理活性剤について、用語「有効量」または「治療有効量」は、無毒なのに望ましい効果を達成可能な薬物・薬剤の十分な投与量を意味する。本発明に係る経口剤形について、組成物における１種の活性物質の「有効量」とは、当該組成物におけるその他の活性物質と併用する際に望ましい効果を達成するために必要な投与量を意味する。有効量の決定は、個人差があり、受験者の年齢および一般的な状況に依存し、具体的な活性物質にも依存して変化し、個別のケースに適合な有効量は、当業者により通常の実験に基づいて決定される。
【００６５】
用語「活性成分」、「治療剤」、「活性物質」または「活性剤」は、標的の不調（障害）、病気または病症を効果的に治療可能な化学実体（ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｅｎｔｉｔｙ）を意味する。
【００６６】
「任意の（ｏｐｔｉｏｎａｌ）」または「任意に／必要に応じて（ｏｐｔｉｏｎａｌｌｙ）（してもよい）」とは、その後に記載の状況が出現する可能性があり、必ず出現することではなく、かつ当該説明の内容には、前記事項または状況が発生する場合と発生しない場合とを含むことを意味する。
【００６７】
用語「〜で置換されている／置換された」とは、特定原子の電子価状態が正常であり且つ置換されている化合物が安定的なものであれば、特定原子における任意の１つ以上の、重水素および水素の変異体を含んでもよい水素原子が置換基に置換されていることを意味する。置換基がオキソまたはケト（すなわち、＝Ｏ）である場合、２つの水素原子が置換されていることを意味する。オキソ置換は、芳香族基に発生しない。用語「任意に置換されている／必要に応じて置換された」とは、置換されたとしてもよく、置換されていなくてもよく、特に断らない限り、化学的に達成できるという前提の下で、置換基の種類や数が任意であってもよいことを意味する。
【００６８】
本明細書に記載のＣｍ−ｎとは、この部分が所定範囲内の整数の炭素原子を有することを意味する。例えば、「Ｃ１−６」とは、当該基が１個の炭素原子、２個の炭素原子、３個の炭素原子、４個の炭素原子、５個の炭素原子、または６個の炭素原子を有し得ることを意味する。例えば、「Ｃ１−３」とは、当該基が１個の炭素原子、２個の炭素原子、３個の炭素原子を有し得ることを意味する。
【００６９】
任意の変数（例えば、Ｒ）は、化合物の組成や構造に１回以上現れる場合、その各状況における定義がそれぞれ独立している。そのため、例えば、１個の基は０〜２個のＲで置換される場合、前記基は、必要に応じて多くとも２個のＲで置換されてもよく、且つ各状況におけるＲは、いずれも独立して選択肢を持っている。また、置換基および／またはその変異体の組み合わせは、このような組合せが安定な化合物をもたらす場合のみ許可される。
【００７０】
ある置換基が存在しない場合、例えば、Ａ−ＸのＸが存在しない場合は、その置換基が存在しなく、前記例の構造が実際にＡであることを意味する。
【００７１】
例示された置換基についてどの原子を介して、置換された基に接続されているかを指定していない場合、このような置換基がその任意の原子を介して結合してもよい。例えば、置換基としてのピリジルは、ピリジン環上の任意の炭素原子を介して、置換された基に結合してもよい。列挙された連結基が連結方向を指定していない場合、連結方向は任意の方向であり、例えば、
【化３７】
2021503466.tif 000041
における連結基Ｌが−Ｍ−Ｗ−である場合、−Ｍ−Ｗ−は環Ａと環Ｂを、左から右への読み取り順序と同じ方向に連結して
【化３８】
2021503466.tif 000042
に形成してもよく、左から右への読み取り順序とは逆の方向に連結して
【化３９】
2021503466.tif 000043
に形成してもよい。前記連結基、置換基および／またはその変異体の組み合わせは、このような組合せが安定な化合物をもたらす場合のみ許可される。
【００７２】
特に断らない限り、用語「ヘテロ」は、ヘテロ原子、またはヘテロ原子団（即ち、ヘテロ原子含有原子団である）を示し、炭素（Ｃ）および水素（Ｈ）以外の原子並びにそれらのヘテロ原子含有原子団、例えば、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）、硫黄（Ｓ）、珪素（Ｓｉ）、ゲルマニウム（Ｇｅ）、アルミニウム（Ａｌ）、ホウ素（Ｂ）、−Ｏ−、−Ｓ−、＝Ｏ、＝Ｓ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｓ（＝Ｏ）、−Ｓ（＝Ｏ）２−、および必要に応じて置換された−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｈ）−、−Ｎ（Ｈ）−、−Ｃ（＝ＮＨ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｈ）−または−Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（Ｈ）−を含む。
【００７３】
特に断らない限り、環における原子の数は、通常、環の員数として定義され、例えば、「５〜７員環」とは、５〜７個の原子を環状に配列してなる「環」を意味する。
【００７４】
特に断らない限り、「環（シクロ）」は、置換もしくは無置換のシクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、シクロアルケニル基、ヘテロシクロアルケニル基、シクロアルキニル基、ヘテロシクロアルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基を示す。いわゆる環は、単環、連結環（ｌｉｎｋｅｄ  ｒｉｎｇ（環と環が直接つながっているもの））、スピロ環、縮合環、または架橋環を含む。特に断らない限り、当該環は、必要に応じて１〜３個のヘテロ原子を含む。そのため、「５〜７員環」には、例えばフェニル、ピリジニルおよびピぺリジニルを含む。一方、用語「５〜７員ヘテロシクロアルキル環」には、ピリジニルおよびピぺリジニルを含むが、フェニルを含まない。用語「環」にも、少なくとも１つの環を有する環系を含み、その中の「環」のいずれも独立して上記定義に合致する。
【００７５】
特に断らない限り、用語「ヒドロカルビル（炭化水素基）」とは、炭素と水素の２種類の原子のみを含む官能基を意味し、用語「ヒドロカルビル」またはその下位概念（例えば、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールなど）自体、あるいは他の置換基の一部として表される直鎖状、分岐鎖状または環状の炭化水素原子団またはその組み合わせは、完全飽和のもの（例えばアルキル）であっても、一価または多価不飽和のもの（例えばアルケニル、アルキニル、アリール）であってもよく、一置換または多置換のものであってもよく、１価（例えばメチル）、二価（例えばメチレン）または多価（例えばメチレン）であってもよく、二価または多価の原子団を含んでもよく、指定数の炭素原子を持っている（例えば、Ｃ１−Ｃ１２は１〜１２個の炭素を表し、Ｃ１−１２はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１およびＣ１２から選ばれ、Ｃ３−１２はＣ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１およびＣ１２から選ばれる）。「炭素水素基（ヒドロカルビル）」は、脂肪族炭化水素基および芳香族炭化水素基を含むが、これらに限定されるものではない。前記脂肪族炭化水素基は、鎖状および環状を含み、具体的には、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基を含むが、これらに限定されるものではない。前記芳香族炭化水素基は、６〜１２員の芳香族炭化水素基、例えばベンゼン、ナフタレン等を含むが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施形態において、用語「炭素水素基（ヒドロカルビル）」は、直鎖や分岐鎖の原子団、またはそれらの組み合わせを示し、完全飽和のものであっても、一価または多価不飽和のものでもよく、二価および多価の原子団を含んでもよい。飽和炭化水素の原子団の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｉ−ブチル、シクロヘキシル、（シクロヘキシル）メチル、シクロプロピルメチル、およびｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル等の原子団の同族体や異性体を含むが、これらに限定されるものではない。不飽和アルキルは、１つ以上の二重結合または三重結合を有し、その例として、ビニル、２−プロペニル、ブテニル、クロチル、２−イソペンテニル、２−ブタジエニル、２，４−ペンタジエニル、３−（１，４−ペンタジエニル）、エチニル、１−プロピニルおよび３−プロピニル、３−ブチニル、並びに、より高次の同族体および異性体を含むが、これらに限定されるものではない。
【００７６】
特に断りのない限り、用語「アルキル」とは、直鎖または分岐鎖の飽和炭化水素基を示すために用いられ、一置換（例えば、−ＣＨ２Ｆ）または多置換（例えば、−ＣＦ３）のものであってもよく、そして一価（例えば、メチル）、二価（例えば、メチレン）または多価（例えば、メチン）のものであってもよい。アルキルの例には、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル（例えば、ｎ−プロピルおよびｉ−プロピル）、ブチル（例えば、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル）、ペンチル（例えば、ｎ−ペンチル、ｉ−ペンチル、ネオペンチル）などを含む。
【００７７】
特に断らない限り、用語「ハロ」（「ハロゲン化」）や「ハロゲン」とは、それらの自体またはその他の１つの置換基の一部として、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素原子を意味する。また、用語「ハロアルキル基」とは、モノハロアルキル基およびポリハロアルキル基を含むことを意味する。例えば、用語「ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基」とは、トリフルオロメチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基、４−クロロブチル、および３−ブロモプロピル等を含むが、これらに限定されるものではないことを意味する。特に断りのない限り、ハロアルキルの例としては、トリフルオロメチル、トリクロロメチル、ペンタフルオロエチル、およびペンタクロロエチルを含むが、これらに限定されるものではない。
【００７８】
用語「アルコキシ」は、酸素橋を介して結合した特定の数の炭素原子を有する上記アルキルを指し、特に断りのない限り、Ｃ１−６アルコキシはＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、およびＣ６アルコキシを含む。アルコキシの例としては、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｉ−プロポキシ、ｎ−ブチルオキシ、ｎ−ブトキシ、ｓ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシとＳ−ペントキシを含むが、これらに限定されるものではない。
【００７９】
特に断りのない限り、用語「アリール」は、多価不飽和芳香族炭化水素置換基を表し、一置換または多置換のものであってもよく、そして一価、二価または多価のものであってもよく、単環式または多環式（好ましくは、１〜３個の環であって、少なくとも１個の環は芳香族である）であってもよく、それらは一緒に縮合されたり共有結合されたりしている。例えば、用語「ヘテロアリール」は、１、２、３、または４個のヘテロ原子、または１、２、３、または４個からなる任意数値範囲のヘテロ原子を含むアリール（または環）を意味する。一実施形態において、ヘテロ原子はＢ、Ｎ、ＯおよびＳから選ばれ、その中で、必要に応じて、窒素原子および硫黄原子は酸化され、窒素原子は４級化される。ヘテロアリール基は、ヘテロ原子を介して分子の残り部分に接続されてもよい。アリールまたはヘテロアリールの非制限的な実施例は、フェニル、ナフチル、ビフェニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピラジニル、オキサゾリル、フェニル−オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、フラニル、チエニル、ピリジル、ピリミジニル、ベンゾチアゾリル、プリニル、ベンズイミダゾリル、インドリル、インドリル、イソキノリニル、キノキサリニル、キノリニル、１−ナフチル、２−ナフチル、４−ビフェニル、１−ピロリル、２−ピロリル、３−ピロリル、３−ピラゾリル、２−ピラゾリル、４−ピラゾリル、ピラジニル、２−オキサゾリル、４−オキサゾリル、２−フェニル−４−オキサゾリル、５−オキサゾリル、３−イソオキサゾリル、４−イソオキサゾリル、５−イソオキサゾリル、２−チアゾリル、４−チアゾリル、５−チアゾリル、２−フラニル、３−フラニル、２−チエニル、３−チエニル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−ピリミジニル、４−ピリミジニル、５−ベンゾチアゾリル、プリニル、２−ベンゾチアゾリル、５−インドリル、１−イソキノリニル、５−イソキノリニル、２−キノキサリニル、５−キノキサリニル、３−キノリニル、および６−キノリニルを含む。上記のいずれの１つのアリールおよびヘテロアリールの環系の置換基は、後述の許容される置換基から選ばれる。
【００８０】
用語「脱離基」は、置換反応（例えば、求核置換反応）によって他の種類の官能基または原子に置換され得る官能基または原子を意味する。例えば、典型的な脱離基は、トリフルオロメタンスルホン酸エステルと、塩素、臭素、ヨウ素と、メタンスルホン酸エステル、トルエンスルホン酸エステル、ｐ−ブロモベンゼンスルホン酸エステル、ｐ−トルエンスルホン酸エステル等のようなスルホン酸エステル基と、アセトキシ、トリフルオロアセトキシ等のようなアシルオキシ基などの基を含む。
【００８１】
用語「保護基」は、「アミノ保護基」、「ヒドロキシル保護基（水酸基保護基）」、「チオール保護基（メルカプト保護基）」を含むが、これらに限定されるものではない。用語「アミノ基保護基」は、アミノ基の窒素位置での副反応の発生を阻止することに好適に用いられる保護基を意味する。典型的なアミノ保護基は、ホルミル基と、アルカノイル基（例えば、アセチル基、トリクロロアセチル基、またはトリフルオロアセチル基）のようなアシル基と、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）のようなアルコキシカルボニル基と、ベンジルオキシカルボニル基（Ｃｂｚ）および９−フルオレニルメトキシカルボニル基（Ｆｍｏｃ）のようなアリールメトキシカルボニル基と、ベンジル基（Ｂｎ）、トリチル基（Ｔｒ）、１，１−ジ−（４’−メトキシフェニル）メチル基のようなアリールメチル基と、トリメチルシリル基（ＴＭＳ）およびｔ−ブチルジメチルシリル基（ＴＢＳ）のようなシリル等とを含むが、これらに限定されるものではない。用語「ヒドロキシル保護基」は、ヒドロキシル基の副反応の発生を阻止することに好適に用いられる保護基を意味する。用語「ヒドロキシル保護基」は、ヒドロキシルの副反応の発生を阻止することに好適に用いられる保護基を意味する。典型的なヒドロキシル保護基は、メチル、エチルおよびｔ−ブチルのようなアルキルと、アルカノイル（例えば、アセチル）のようなアシルと、ベンジル（Ｂｎ）、ｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）、９−フルオレニルメチル（Ｆｍ）およびジフェニルメチル（ｄｉｐｈｅｎｙｌｍｅｔｈｙｌ：ＤＰＭ）のようなアリールメチルと、トリメチルシリル（ＴＭＳ）およびｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）のようなシリル等とを含むが、これらに限定されるものではない。
【００８２】
本発明に係る化合物は、下記に記載の具体的な実施形態およびその他の化学合成方法との組合せてなった実施形態、並びに当業者にとってよく知られた均等な形態を含む、当業者にとってよく知られている多種類の合成方法により調製することができる。好ましい実施形態には本発明の実施例を含むが、これらに限定されるものではない。
本発明で使用される溶媒は、市販により入手することができる。
【００８３】
本発明は、下記の略語（頭字語）が使用されており、ＤＭＦはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを表し、Ｎａ２ＣＯ３は炭酸ナトリウムを表し、Ｋ２ＣＯ３は炭酸カリウムを表し、Ｃｓ２ＣＯ３は炭酸セシウムを表し、ＣｕＩはヨウ化第一銅を表し、ＭｅＩはヨードメタンを表し、ＥｔＯＡｃは酢酸エチルを表し、ＥＡは酢酸エチルを表し、ＴＨＦはテトラヒドロフランを表し、ＬｉＨＭＤＳはリチウムヘキサメチルジシラジドを表し、ＭｅＯＨはメタノールを表し、ＤＣＭはジクロロメタンを表し、ＤＭＳＯはジメチルスルホキシドを表し、ＰＥは石油エーテルを表し、ＥｔＯＨはエタノールを表し、ＩＰＡはイソプロパノールを表し、ＣＨ３ＣＮはアセトニトリルを表し、ＭＴＢＥはメチル（ｔｅｒｔ−ブチル）エーテルを表し、ＴＦＡはトリフルオロ酢酸を表し、ＮＨ３・Ｈ２Ｏはアンモニア水を表し、ＴＥＡはトリエチルアミンを表し、ＤＩＰＥＡはＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを表し、Ｂｏｃ２Ｏは二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを表し、Ｂｏｃはｔ−ブトキシカルボニル（アミノ保護基の１つ）を表し、ＮＨ２ＯＨ・ＨＣｌはヒドロキシルアミンの塩酸塩を表し、Ｐｄ（ＰＰｈ２）Ｃｌ２はビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリドを表し、ＤＭＰはデス−マーチン（試薬Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬）を表し、ＰＩＦＡはビス（トリフルオロアセトキシ）ヨードベンゼンを表し、ＥＤＴＡはエチレンジアミン四酢酸二ナトリウムを表し、ＬＣＭＳは液体質量分析クロマトグラフィーを表し、ＨＰＬＣは液体クロマトグラフィーを表し、ＳＦＣ超臨界流体クロマトグラフィーを表し、ＰＯは経口投与（例えば、経口強制投与）を表し、ＩＶは静脈内投与を表し、ＱＤは１日１回投与を表し、ＢＩＤは１日２回投与を表し、ＭＰＫはｍｇ／ｋｇを表し、Ｔ１／２は半減期を表し、Ｖｄｓｓは定常状態における見かけの分布容積を表し、ＣＬはクリアランス率を表し、ＡＵＣ０−２４ｈは投与後０〜２４時間の血中濃度−時間曲線下面積を表し、Ｃｍａｘは最高血中濃度を表し、Ｔｍａｘは最高血中濃度到達時間を表す。
【図面の簡単な説明】
【００８４】
【図１】実施例６の化合物をマウスに投与してから１〜７日間各試験群のマウスの単位体積あたりの血漿におけるＬｏｇ（ＨＢＶ  ＤＮＡコピー数）の変化を示すグラフである。
【図２】実施例６の化合物をマウスに投与してから７日目の各試験群のマウスの単位重量あたりの肝臓組織におけるＬｏｇ（ＨＢＶ  ＤＮＡコピー数）のレベルを示すグラフである。
【図３】実施例２３の化合物をマウスに投与してから１〜７日間各試験群のマウスの単位体積あたりの血漿におけるＬｏｇ（ＨＢＶ  ＤＮＡコピー数）の変化を示すグラフである。
【図４】実施例２３の化合物をマウスに投与してから７日目の各試験群のマウスの単位重量あたりの肝臓組織におけるＬｏｇ（ＨＢＶ  ＤＮＡコピー数）のレベルを示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００８５】
以下、実施例により本発明を詳細に説明し、本発明に対していかなる限定を意味するものではない。本明細書で本発明を詳細に説明し、具体な実施形態をも開示したが、当業者にとって本発明の精神および範囲から逸脱することなく本発明の具体的な実施形態に対する様々な変更や修正は、明らかであろう。
【００８６】
中間体の製造
中間体Ａ−１
【化４０】
2021503466.tif 000044
中間体Ａ−１は次の方法で製造される。
【化４１】
2021503466.tif 000045
０℃でクロロギ酸フェニル（５８．５４ｇ、４６．８３ｍＬ）を、３，４，５−トリフルオロアニリン（５０．００ｇ）およびピリジン（２９．５８ｇ、３０．１８ｍＬ）を溶解させたジクロロメタン（３００ｍＬ）溶液に徐々に滴下した。反応混合物を２５℃で３時間撹拌し後、水２５０ｍＬを加えてクエンチすると、白色の沈殿物を析出した。当該沈殿物を濾過した後、減圧乾燥して、中間体Ａ−１を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．４６−７．３９（ｍ，２Ｈ），７．３２−７．２７（ｍ，１Ｈ），７．２１−７．１１（ｍ，４Ｈ），４．８２（ｂｒ．  ｓ．，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２６８  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【００８７】
中間体Ａ−２
【化４２】
2021503466.tif 000046
中間体Ａ−２は、中間体Ａ−１の製造方法を参照して３，４，５−トリフルオロアニリンの代わりに３−シアノ−４−フルオロアニリンを使用して製造できる。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．８５−７．７４（ｍ，１Ｈ），７．６７（ｄｄ，Ｊ  ＝  ３．８，８．３  Ｈｚ，１Ｈ），７．４６−７．４１（ｍ，２Ｈ），７．３１−７．１８（ｍ，５Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２５７  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【００８８】
中間体Ａ−３
【化４３】
2021503466.tif 000047
中間体Ａ−３は、中間体Ａ−１の製造方法を参照して３，４，５−トリフルオロアニリンの代わりに３−クロロ−４−フルオロアニリンを使用して製造できる。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．６４（ｄ，Ｊ  ＝  ４．３  Ｈｚ，１Ｈ），７．５１−７．３８（ｍ，３Ｈ），７．３２−７．２９（ｍ，１Ｈ），７．２２−７．１０（ｍ，３Ｈ），６．９５（ｂｒ．  ｓ．，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２６６  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【００８９】
中間体Ａ−４
【化４４】
2021503466.tif 000048
中間体Ａ−４は、中間体Ａ−１の製造方法を参照して３，４，５−トリフルオロアニリンの代わりに３−メチル−４−フルオロアニリンを使用して製造できる。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．４９−７．３３（ｍ，３Ｈ），７．２８−７．１５（ｍ，４Ｈ），７．０３−６．９３（ｍ，１Ｈ），６．９６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．２９（ｓ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２４６  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【００９０】
中間体Ａ−５
【化４５】
2021503466.tif 000049
中間体Ａ−５は、中間体Ａ−１の製造方法を参照して３，４，５−トリフルオロアニリンの代わりに２−クロロ−４−アミノピリジンを使用して製造できる。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：８．１９（ｄ，Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ，１Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ  ＝  １．６  Ｈｚ，２Ｈ），７．３８−７．３１（ｍ，２Ｈ），７．２５−７．２０（ｍ，２Ｈ），７．１０（ｄ，Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２４９  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【００９１】
中間体Ａ−６
【化４６】
2021503466.tif 000050
中間体Ａ−６は、中間体Ａ−１の製造方法を参照して３，４，５−トリフルオロアニリンの代わりに３，４−ジフルオロアニリンを使用して製造できる。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．５５−７．４７（ｍ，１Ｈ），７．４５−７．４０（ｍ，２Ｈ），７．３２−７．２６（ｍ，２Ｈ），７．２１−７．２０（ｍ，１Ｈ），７．１７−７．０１（ｍ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２５０  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【００９２】
実施例１
【化４７】
2021503466.tif 000051
実施例１の製造：
【化４８】
2021503466.tif 000052
【００９３】
ステップＡ：化合物１−２の合成
０℃で、化合物１−１（３．００ｇ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）溶液に塩化オキサリル（５．４０ｇ、４２．５２ｍｏｌ）を加え、続いて１〜２滴のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを加えた。当該反応混合物を室温まで自然的に昇温し、１４時間撹拌して続けた後、減圧濃縮して化合物１−２の粗生成物を得た。
【００９４】
ステップＢ：化合物１−３の合成
−７０℃で、窒素保護下でＮ−Ｂｏｃ−（Ｓ）−２−メチル−４−ピペリドン（０．５０ｇ）をエーテル（８ｍＬ）に溶解し、続いてリチウムヘキサメチルジシラジド（２．３４ｍＬ、１ｍｏｌ／Ｌ）を加えた。反応混合物を−７０℃で０．５時間撹拌した後、化合物１−２（３７４．０４ｍｇ）のエーテル（２ｍＬ）溶液を系に滴下した。反応液を室温まで自然的に昇温し、３時間撹拌して続けた。反応液を１ｍｏｌ／Ｌの塩酸（４０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２５ｍＬ×２）で抽出した。有機相を合わせて飽和食塩水（４０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後、濾液を減圧濃縮して化合物１−３の粗生成物を得た。
【００９５】
ステップＣ：化合物１−４の合成
撹拌しながら、エタノール２．５ｍＬに、化合物１−３（３００．００ｍｇ、粗生成物）、塩酸ヒドロキシルアミン（３３４．６９ｍｇ）およびピリジン（２．５ｍＬ）を順次加えた。反応混合物を１００℃まで徐々に昇温し、該温度で１時間撹拌した。自然冷却後、減圧蒸留し、残渣を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、そして１ｍｏｌ／Ｌ塩酸（２０ｍＬ）および飽和食塩水（２０ｍＬ）で順次洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後、濾液を減圧濃縮した。残渣を分取クロマトグラフィー（展開液：石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）により分離して化合物１−４を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：８．６３−８．４８（ｍ，１Ｈ），７．９２（ｄｄ，Ｊ  ＝  ４．２，８．６  Ｈｚ，１Ｈ），７．６０−７．４５（ｍ，１Ｈ），５．９６−４．７９（ｍ，１Ｈ），４．５８−４．２１（ｍ，１Ｈ），３．２９−３．０５（ｍ，１Ｈ），３．０２−２．７２（ｍ，２Ｈ），１．５９−１．３５（ｍ，１２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）  ｍ／ｚ：３３４  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【００９６】
ステップＤ：化合物１−５の合成
室温で、化合物１−４（９３．００ｍｇ）を、塩酸／１，４−ジオキサン溶液（４ｍｏｌ／Ｌ、５ｍＬ）に加えた。当該反応混合物を室温で０．５時間撹拌した後、減圧蒸留して粗生成物である化合物１−５（塩酸塩）を得、次のステップの反応に直接使用した。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２３４  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【００９７】
ステップＥ：実施例１の合成
室温で、化合物１−５（塩酸塩、７５．００ｍｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２ｍＬに溶解し、続いてＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１０７．８２ｍｇ）および中間体Ａ−１（７４．３１ｍｇ）を順次加えた。反応混合物を７０℃で１時間撹拌し後、３０ｍＬ水に徐々に注ぎ、その後酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。有機相を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後、濾液を減圧濃縮した。残渣を分取高速液体クロマトグラフィー（分離カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｃ１８、１５０×３０ｍｍ×４μｍ、移動相：［水（０．２２５％トリフルオロ酢酸）−アセトニトリル］、Ｂ％：５０％〜８０％、１０．５ｍｉｎ）により精製して実施例１のものを得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：８．６３（ｄ，Ｊ  ＝  ２．８  Ｈｚ，１Ｈ），８．００−７．９６（ｍ，１Ｈ），７．７８−７．７５（ｍ，１Ｈ），７．３４−７．１４（ｍ，２Ｈ），５．２９（ｄ，Ｊ  ＝  １７．５  Ｈｚ，１Ｈ），４．９５（ｑｕｉｎ，Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，１Ｈ），４．５０（ｄ，Ｊ  ＝  １７．４  Ｈｚ，１Ｈ），３．０６（ｄｄ，Ｊ  ＝  ５．７，１６．４  Ｈｚ，１Ｈ），２．８７（ｄｄ，Ｊ  ＝  １．２，１６．３  Ｈｚ，１Ｈ），１．２２（ｄ，Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４０７  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【００９８】
実施例２
【化４９】
2021503466.tif 000053
実施例２の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりに安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＳ−Ｈ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：５μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＥｔＯＨ］、Ｂ％：３０％〜３０％、７．８ｍｉｎ）により分離して実施例２のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：７．８６−７．７７（ｍ，２Ｈ），７．６９−７．４８（ｍ，３Ｈ），７．３６−７．２１（ｍ，２Ｈ），５．２１（ｄ，Ｊ  ＝  １５．９４  Ｈｚ，１Ｈ），４．６５−４．４７（ｍ，２Ｈ），３．１７−３．０２（ｍ，１Ｈ），２．９０（ｄｄ，Ｊ  ＝  １．４４，１６．３８  Ｈｚ，１Ｈ），１．２７（ｄ，Ｊ  ＝  ６．９０  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８８  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【００９９】
実施例３
【化５０】
2021503466.tif 000054
実施例３の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりに２−フルオロ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：１０μｍ）、移動相：［０．１％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：２０％〜２０％、４．０ｍｉｎ）により分離して実施例３のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：７．８１（ｄｔ，Ｊ  ＝  １．６３，７．５３  Ｈｚ，１Ｈ），７．６７−７．５４（ｍ，１Ｈ），７．４３−７．２０（ｍ，４Ｈ），５．１０（ｄ，Ｊ  ＝  １６．６９  Ｈｚ，１Ｈ），４．９２−４．７８（ｍ，１Ｈ），４．３８（ｄ，Ｊ  ＝  １６．８１  Ｈｚ，１Ｈ），３．１０（ｄｄ，Ｊ  ＝  ５．９０，１６．５６  Ｈｚ，１Ｈ），２．９１（ｄ，Ｊ  ＝  １６．３１  Ｈｚ，１Ｈ），１．２９（ｄ，Ｊ  ＝  ６．９０  Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４０６  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１００】
実施例４
【化５１】
2021503466.tif 000055
実施例４の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりに３−フルオロ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＳ（仕様：２５０ｍｍ×５０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＩＰＡ］、Ｂ％：５０％〜５０％、１．９ｍｉｎ）により分離して実施例４のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：７．６２−７．５６（ｍ，２Ｈ），７．５２（ｄｄ，Ｊ  ＝  １．３，８．７  Ｈｚ，１Ｈ），７．３１−７．２１（ｍ，３Ｈ），５．１６（ｄ，Ｊ  ＝  １６．１  Ｈｚ，１Ｈ），４．９９（ｑｕｉｎ，Ｊ  ＝  ６．３  Ｈｚ，１Ｈ），４．４９（ｄ，Ｊ  ＝  １６．１  Ｈｚ，１Ｈ），３．０９−３．００（ｍ，１Ｈ），２．９２−２．８３（ｍ，１Ｈ），１．２３（ｄ，Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４０６  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１０１】
実施例５
【化５２】
2021503466.tif 000056
実施例５の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりに４−フルオロ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＳ−Ｈ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：５μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＥｔＯＨ］、Ｂ％：３０％〜３０％、４．２ｍｉｎ）により分離して実施例５のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：７．９０−７．８０（ｍ，２Ｈ），７．４２−７．２３（ｍ，４Ｈ），５．２４−５．１４（ｍ，１Ｈ），５．０１（ｑｕｉｎ，Ｊ  ＝  ６．３  Ｈｚ，１Ｈ），４．５０（ｄ，Ｊ  ＝  １６．１  Ｈｚ，１Ｈ），３．０８（ｄｄ，Ｊ  ＝  ５．８，１６．３  Ｈｚ，１Ｈ），２．８９（ｄｄ，Ｊ  ＝  １．２，１６．４  Ｈｚ，１Ｈ），１．２６（ｄ，Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４０６  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１０２】
実施例６
【化５３】
2021503466.tif 000057
実施例６の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−ジフルオロ安息香酸の代わりに２，４−ジフルオロ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＳ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：１０μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＩＰＡ］、Ｂ％：３０％〜３０％、９ｍｉｎ）により分離して実施例６のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：７．８６−７．７５（ｍ，１Ｈ），７．２６−７．１４（ｍ，４Ｈ），５．０５（ｄ，Ｊ  ＝  １６．４  Ｈｚ，１Ｈ），４．９３（ｑｕｉｎ，Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，１Ｈ），４．３８−４．２７（ｍ，１Ｈ），３．０６（ｄｄ，Ｊ  ＝  ５．９，１６．４  Ｈｚ，１Ｈ），２．９１−２．８２（ｍ，１Ｈ），１．２５（ｄ，Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２４  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１０３】
実施例７
【化５４】
2021503466.tif 000058
実施例７の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりに２−メトキシ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：３０％〜３０％、２．５ｍｉｎ）により分離して実施例７のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：７．６０（ｄｄ，Ｊ  ＝  １．６，７．６  Ｈｚ，１Ｈ），７．５３−７．４５（ｍ，１Ｈ），７．２５−７．１２（ｍ，３Ｈ），７．０７（ｔ，Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，１Ｈ），４．９９（ｄ，Ｊ  ＝  １６．６  Ｈｚ，１Ｈ），４．９４−４．８８（ｍ，１Ｈ），４．２４（ｄ，Ｊ  ＝  １６．６  Ｈｚ，１Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），３．０４（ｄｄ，Ｊ  ＝  ５．９，１６．４  Ｈｚ，１Ｈ），２．８３（ｄｄ，Ｊ  ＝  １．０，１６．３  Ｈｚ，１Ｈ），１．２６（ｄ，Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１８  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１０４】
実施例８
【化５５】
2021503466.tif 000059
実施例８の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりに３−メトキシ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＥｔＯＨ］、Ｂ％：３０％〜３０％、３．０ｍｉｎ）により分離して実施例８のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ  ７．５１−７．４３（ｍ，１Ｈ），７．３４−７．２３（ｍ，４Ｈ），７．０７（ｄｄ，Ｊ  ＝  ２．１，８．２  Ｈｚ，１Ｈ），５．１５（ｄ，Ｊ  ＝  １６．１  Ｈｚ，１Ｈ），４．９７（ｑｕｉｎ，Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，１Ｈ），４．４７（ｄ，Ｊ  ＝  １６．０  Ｈｚ，１Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），３．０５（ｄｄ，Ｊ  ＝  ５．７，１６．３  Ｈｚ，１Ｈ），２．８６（ｄｄ，Ｊ  ＝  １．１，１６．３  Ｈｚ，１Ｈ），１．２４（ｄ，Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１８  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１０５】
実施例９
【化５６】
2021503466.tif 000060
実施例９の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりに４−メトキシ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ  ＯＤ（仕様：２５０ｍｍ×５０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＩＰＡ］、Ｂ％：３０％〜３０％、４．２ｍｉｎ）により分離して実施例９のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：７．７５（ｄ，Ｊ  ＝  ８．９  Ｈｚ，２Ｈ），７．３３−７．２５（ｍ，２Ｈ），７．１４（ｄ，Ｊ  ＝  ９．０  Ｈｚ，２Ｈ），５．１６（ｄ，Ｊ  ＝  １５．８  Ｈｚ，１Ｈ），５．０５−４．９７（ｍ，１Ｈ），４．４８（ｄ，Ｊ  ＝  １５．９  Ｈｚ，１Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），３．０６（ｄｄ，Ｊ  ＝  ５．６，１６．４  Ｈｚ，１Ｈ），２．８７（ｄ，Ｊ  ＝  １６．３  Ｈｚ，１Ｈ），１．２６（ｄ，Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１８  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１０６】
実施例１０
【化５７】
2021503466.tif 000061
実施例１０の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりに３−シアノ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：１０μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＩＰＡ］、Ｂ％：３０％〜３０％、３．１ｍｉｎ）により分離して実施例１０のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：８．１７−８．０６（ｍ，２Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，１Ｈ），７．８１−７．７２（ｍ，１Ｈ），７．３３−７．２２（ｍ，２Ｈ），５．２３（ｄ，Ｊ  ＝  １６．３  Ｈｚ，１Ｈ），５．０８−４．９６（ｍ，１Ｈ），４．６２−４．５８（ｍ，１Ｈ），３．０９（ｄｄ，Ｊ  ＝  ５．７，１６．４  Ｈｚ，１Ｈ），２．９１（ｄｄ，Ｊ  ＝  １．３，１６．３  Ｈｚ，１Ｈ），１．２６（ｄ，Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１３  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１０７】
実施例１１
【化５８】
2021503466.tif 000062
実施例１１の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりに３−クロロ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＳ−Ｈ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：５μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：３５％〜３５％、５ｍｉｎ）により分離して実施例１１のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：７．７１−７．５５（ｍ，２Ｈ），７．５１−７．３８（ｍ，２Ｈ），７．１６（ｄｄ，Ｊ  ＝  ６．３，１０．３  Ｈｚ，２Ｈ），５．０８（ｄ，Ｊ  ＝  １６．０  Ｈｚ，１Ｈ），４．９４−４．８２（ｍ，１Ｈ），４．５０−４．３７（ｍ，１Ｈ），３．０４−２．９１（ｍ，１Ｈ），２．７８（ｂｒ．  ｄ，Ｊ  ＝  １６．４  Ｈｚ，１Ｈ），１．１４（ｄ，Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２２  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１０８】
実施例１２
【化５９】
2021503466.tif 000063
実施例１２の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりに４−クロロ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＳ−Ｈ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：５μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＥｔＯＨ］、Ｂ％：３０％〜３０％、８．３ｍｉｎ）により分離して実施例１２のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：７．７３−７．６３（ｍ，２Ｈ），７．５２−７．４５（ｍ，２Ｈ），７．１７（ｄｄ，Ｊ  ＝  ６．３６，１０．２７  Ｈｚ，２Ｈ），５．０８（ｄ，Ｊ  ＝  １６．１４  Ｈｚ，１Ｈ），４．９４−４．８４（ｍ，１Ｈ），４．３９（ｄ，Ｊ  ＝  １６．０２  Ｈｚ，１Ｈ），２．９６（ｄｄ，Ｊ  ＝  ５．７５，１６．３８  Ｈｚ，１Ｈ），２．７８（ｄｄ，Ｊ  ＝  １．２８，１６．３２  Ｈｚ，１Ｈ），１．１４（ｄ，Ｊ  ＝  ６．９７  Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２２  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１０９】
実施例１３
【化６０】
2021503466.tif 000064
実施例１３の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン−２−カルボン酸の代わりにピラジン−２−カルボン酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＳ−Ｈ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：５μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：６０％〜６０％、４．５ｍｉｎ）により分離して実施例１３のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：９．１７（ｄ，Ｊ  ＝  １．５  Ｈｚ，１Ｈ），８．８１（ｄｄ，Ｊ  ＝  １．６，２．４  Ｈｚ，１Ｈ），８．６７（ｄ，Ｊ  ＝  ２．５  Ｈｚ，１Ｈ），７．３２−７．２２（ｍ，２Ｈ），５．３７（ｄ，Ｊ  ＝  １７．６  Ｈｚ，１Ｈ），５．０３−４．９６（ｍ，１Ｈ），４．５７（ｄ，Ｊ  ＝  １７．７  Ｈｚ，１Ｈ），３．１２（ｄｄ，Ｊ  ＝  ５．８，１６．４  Ｈｚ，１Ｈ），２．９４（ｄｄ，Ｊ  ＝  １．４，１６．４  Ｈｚ，１Ｈ），１．２６（ｄ，Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９０  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１１０】
実施例１４
【化６１】
2021503466.tif 000065
実施例１４の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりにチアゾール−５−カルボン酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ  ＯＤ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：３０％〜３０％、２．３ｍｉｎ）により分離して実施例１４のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：９．１２（ｓ，１Ｈ），８．２６（ｓ，１Ｈ），７．２４−７．１１（ｍ，２Ｈ），５．０３（ｄ，Ｊ＝  １６．３８  Ｈｚ，１Ｈ），４．９０（ｔ，Ｊ  ＝  ６．７２  Ｈｚ，１Ｈ），４．３３（ｄ，Ｊ  ＝  １６．３８  Ｈｚ，１Ｈ），３．０２−２．９２（ｍ，１Ｈ），２．７９（ｄｄ，Ｊ  ＝  １．４１，１６．４４  Ｈｚ，１Ｈ），１．１４（ｄ，Ｊ  ＝  ６．８５  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９５  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１１１】
実施例１５
【化６２】
2021503466.tif 000066
実施例１５の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりにチアゾール−４−カルボン酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：１０μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＩＰＡ］、Ｂ％：３０％〜３０％、３．０ｍｉｎ）により分離して実施例１５のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：９．２０（ｄ，Ｊ  ＝  ２．０  Ｈｚ，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ  ＝  １．９  Ｈｚ，１Ｈ），７．３７−７．２１（ｍ，２Ｈ），５．３０（ｄ，Ｊ  ＝  １６．８  Ｈｚ，１Ｈ），５．０５−４．９５（ｍ，１Ｈ），４．５２（ｄ，Ｊ  ＝  １６．８  Ｈｚ，１Ｈ），３．０９（ｄｄ，Ｊ  ＝  ５．７，１６．４  Ｈｚ，１Ｈ），２．９０（ｄ，Ｊ  ＝  １６．３  Ｈｚ，１Ｈ），１．２６（ｄ，Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９５  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１１２】
実施例１６
【化６３】
2021503466.tif 000067
実施例１６の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりにチアゾール−２−カルボン酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＳ−Ｈ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：５μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：３５％〜３５％、６．３ｍｉｎ）により分離して実施例１６のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：９．０１（ｓ，１Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ  ＝  ４．８  Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｄｄ，Ｊ  ＝  ６．４，１０．３  Ｈｚ，２Ｈ），５．２１（ｄ，Ｊ  ＝  １７．２  Ｈｚ，１Ｈ），４．９３−４．８４（ｍ，１Ｈ），４．５０−４．４１（ｍ，１Ｈ），３．０５−２．９５（ｍ，１Ｈ），２．８０（ｄ，Ｊ  ＝  １６．５  Ｈｚ，１Ｈ），１．１４（ｄ，Ｊ＝  ６．８  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９５  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１１３】
実施例１７
【化６４】
2021503466.tif 000068
実施例１７の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりにイソチアゾール−４−カルボン酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：１０μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＩＰＡ］、Ｂ％：３０％〜３０％、３０ｍｉｎ）により分離して実施例１７のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：９．４０（ｓ，１Ｈ），９．００（ｓ，１Ｈ），７．３３−７．２７（ｍ，２Ｈ），５．１８（ｄ，Ｊ  ＝  １６．０  Ｈｚ，１Ｈ），５．０８−５．００（ｍ，１Ｈ），４．５０（ｄ，Ｊ  ＝  １６．０  Ｈｚ，１Ｈ），３．０８（ｄｄ，Ｊ  ＝  ５．７，１６．４  Ｈｚ，１Ｈ），２．９４−２．８８（ｍ，１Ｈ），１．２５（ｄ，Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９５  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１１４】
実施例１８
【化６５】
2021503466.tif 000069
実施例１８の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりにイソチアゾール−３−カルボン酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：５μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：３５％〜３５％、２．１ｍｉｎ）により分離して実施例１８のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：８．００（ｄ，Ｊ  ＝  ３．２  Ｈｚ，１Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ  ＝  ３．２  Ｈｚ，１Ｈ），７．２０−７．１３（ｍ，２Ｈ），５．１８（ｄ，Ｊ  ＝  １７．２  Ｈｚ，１Ｈ），４．９２−４．８５（ｍ，１Ｈ），４．５１−４．３７（ｍ，１Ｈ），３．０４−２．９６（ｍ，１Ｈ），２．８５−２．７８（ｍ，１Ｈ），１．１４（ｄ，Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９５  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１１５】
実施例１９
【化６６】
2021503466.tif 000070
実施例１９の製造方法は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりに２，４−ジフルオロ安息香酸を使用し、中間体Ａ−１の代わりに中間体Ａ−２を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ  ＯＪ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＥｔＯＨ］、Ｂ％：２５％〜２５％、２．４ｍｉｎ）により分離して実施例１９のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：７．８９−７．７６（ｍ，２Ｈ），７．７２−７．６４（ｍ，１Ｈ），７．２９−７．１６（ｍ，３Ｈ），５．０８（ｄ，Ｊ  ＝  １６．４  Ｈｚ，１Ｈ），４．９６（ｑｕｉｎ，Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，１Ｈ），４．３６（ｄ，Ｊ  ＝  １６．６  Ｈｚ，１Ｈ），３．０８（ｄｄ，Ｊ＝５．８，１６．４  Ｈｚ，１Ｈ），２．９３−２．８５（ｍ，１Ｈ），１．２７（ｄ，Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１３  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１１６】
実施例２０
【化６７】
2021503466.tif 000071
実施例２０の製造方法は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりに２，４−ジフルオロ安息香酸を使用し、中間体Ａ−１の代わりに中間体Ａ−３を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＳ（仕様：２５０ｍｍ×５０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：４０％〜４０％、１．９ｍｉｎ）により分離して実施例２０のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：７．８５−７．７９（ｍ，１Ｈ），７．５９（ｄｄ，Ｊ  ＝  ２．６，６．８  Ｈｚ，１Ｈ），７．３６−７．０８（ｍ，４Ｈ），５．０９（ｄｄ，Ｊ  ＝  １．１，１６．６  Ｈｚ，１Ｈ），４．９７−４．９４（ｍ，１Ｈ），４．３６（ｄｄ，Ｊ  ＝  １．５，１６．６  Ｈｚ，１Ｈ），３．１０（ｄｄ，Ｊ  ＝  ５．９，１６．４  Ｈｚ，１Ｈ），２．９０（ｄｄ，Ｊ  ＝  １．３，１６．４  Ｈｚ，１Ｈ），１．２８（ｄ，Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２２  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１１７】
実施例２１
【化６８】
2021503466.tif 000072
実施例２１の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりに２，４−ジフルオロ安息香酸を使用し、中間体Ａ−１の代わりに中間体Ａ−４を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＥｔＯＨ］、Ｂ％：２０％〜２０％、５．５ｍｉｎ）により分離して実施例２１のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：７．８７−７．８３（ｍ，１Ｈ），７．３０−７．１０（ｍ，４Ｈ），６．９６−６．９４（ｍ，  １Ｈ），５．０９（ｄ，Ｊ  ＝  １６．６  Ｈｚ，１Ｈ），５．０２−４．９４（ｍ，１Ｈ），４．３５（ｄ，Ｊ  ＝  １６．４  Ｈｚ，１Ｈ），３．１６−３．０６（ｍ，１Ｈ），２．８９（ｄ，Ｊ  ＝  １６．４  Ｈｚ，１Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ），１．２８（ｄ，Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４０２  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１１８】
実施例２２
【化６９】
2021503466.tif 000073
実施例２２の製造は、実施例１における５−フルオロピリジン２−カルボン酸の代わりに２，４−ジフルオロ安息香酸を使用し、中間体Ａ−１の代わりに中間体Ａ−５を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：  分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ（仕様：２５０ｍｍ×５０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：３０％〜３０％、１．８ｍｉｎ）により分離して実施例２２のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：８．００（ｄ，Ｊ  ＝  ５．９  Ｈｚ，１Ｈ），７．７７−７．６９（ｍ，１Ｈ），７．５３（ｄ，Ｊ  ＝  １．７  Ｈｚ，１Ｈ），７．３１（ｄｄ，Ｊ  ＝  １．８，５．７  Ｈｚ，１Ｈ），７．１６−７．０６（ｍ，２Ｈ），４．９９（ｄ，Ｊ  ＝  １６．５  Ｈｚ，１Ｈ），４．９０−４．８３（ｍ，１Ｈ），４．２７（ｄ，Ｊ  ＝  １６．６  Ｈｚ，１Ｈ），２．９９（ｄｄ，Ｊ  ＝  ５．９，１６．５  Ｈｚ，１Ｈ），２．７９（ｄ，Ｊ  ＝  １６．５  Ｈｚ，１Ｈ），１．１７（ｄ，Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４０５  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１１９】
実施例２３
【化７０】
2021503466.tif 000074
実施例２３の製造：
【化７１】
2021503466.tif 000075
【０１２０】
ステップＡ：  化合物２３−２の合成
０℃で、化合物２３−１（５０．０ｇ）および炭酸カリウム（７７．５３ｇ）のアセトニトリル（５００ｍＬ）溶液に３−ブロモプロピン（６６．７３ｇ）を滴下した。当該反応混合物を室温まで自然的に昇温し、１２時間撹拌して続けた後、減圧濃縮して残渣を得た。当該残渣を水で希釈し、そして酢酸エチルで抽出し、有機相を合わせて飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後、濾液を減圧濃縮して化合物２３−２の粗生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１２８  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１２１】
ステップＢ：化合物２３−３の合成
室温で、化合物２３−２（５２．０ｇ）のテトラヒドロフラン（５００ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（２６．５６ｇ）およびＢｏｃ２Ｏ（４１．９４ｇ）を加えた。当該反応液を１８℃で１２時間撹拌した後、固形物を濾過して除去し、濾液を収集して減圧濃縮した。得られた残渣を酢酸エチル（８００ｍＬ）に溶解し、当該有機相を水、飽和クエン酸溶液および飽和炭酸水素ナトリウム溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後、濾液を減圧濃縮して化合物２３−３の粗生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２２８  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１２２】
ステップＣ：化合物２３−４の合成
０℃で、化合物２３−３（４０．０ｇ）のジクロロメタン（４００ｍＬ）溶液に、デスマーチン試薬（８２．１０ｇ）をバッチで加えた。当該反応液混合物を室温まで自然に昇温し、２時間撹拌し後、体積比１：１の飽和炭酸水素ナトリウム溶液および飽和チオ硫酸ナトリウム溶液で２回洗浄し、さらに飽和炭酸水素ナトリウム溶液および飽和食塩水で有機相を順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後、濾液を減圧濃縮して化合物２３−４の粗生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２２６  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１２３】
ステップＤ：化合物２３−５の合成
室温で、化合物２３−４（４２．０ｇ）のエタノール（４００ｍＬ）および水（４０ｍＬ）の混合溶液に酢酸ナトリウム（２２．９４ｇ）および塩酸ヒドロキシルアミン（１６．８４ｇ）を加えた。当該反応混合物を室温で１２時間撹拌した後、減圧濃縮してエタノールを除去して残渣を得た。当該残渣を酢酸エチルで溶解した後、水および飽和食塩水で順次洗浄し、さらに無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後、濾液を減圧濃縮して化合物２３−５の粗生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２４１  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１２４】
ステップＥ：化合物２３−６の合成
室温で、化合物２３−５（３００ｍｇ）および２−ヨードピリミジン（２５７．１６ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８ｍＬ）溶液に、ヨウ化第一銅（１１．８９ｍｇ）、トリエチルアミン（２５２．６６ｍｇ）およびビストリフェニルホスフィンパラジウムジクロリド（４３．８１ｍｇ）を加えた。窒素保護下で当該反応混合物を１２℃で１２時間撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈した後濾過し、濾液を減圧濃縮し、残渣を分取クロマトグラフィーにより分離して化合物２３−６を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３１９  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１２５】
ステップＦ：化合物２３−７の合成
室温で、化合物２３−６（１８０ｍｇ）のメタノール（４ｍＬ）および水（０．８ｍＬ）の混合溶液に、ビス（トリフルオロアセトキシ）ヨードベンゼン（２９１．７６ｍｇ）をバッチで加えた。当該反応混合物を１０〜２０℃で０．５時間撹拌した後、水２０ｍＬで希釈し、そして酢酸エチルで抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ，濾過し、濾液を減圧濃縮し、残渣を分取クロマトグラフィーにより分離して化合物２３−７を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３１７  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１２６】
ステップＧ：化合物２３−８の合成
化合物２３−７（９０ｍｇ）を、塩酸のジオキサン溶液（４ｍｏｌ／Ｌ、４ｍＬ）に溶解し、当該反応混合物を２０℃で０．５時間撹拌した後、減圧濃縮して化合物２３−８の粗生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２１７  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１２７】
ステップＨ：実施例２３の合成
室温で、化合物２３−８（６１．５２ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）溶液にＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１１０．３１ｍｇ）および中間体Ａ−２（７２．９０ｍｇ）を加えた。該反応混合物を７０℃で１時間撹拌した。反応液を水２０ｍＬで希釈した後、酢酸エチルで抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧濃縮した後、残渣を分取高速液体クロマトグラフィー（分離カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｃ１８、１５０×３０ｍｍ×４μｍ、移動相：［水（０．２２５％トリフルオロ酢酸）−アセトニトリル］、Ｂ％：３５％〜６５％、１０ｍｉｎ）により精製して実施例２３のものを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：８．９７（ｄ，Ｊ  ＝  ５．０  Ｈｚ，２Ｈ），７．８３（ｄｄ，Ｊ  ＝  ２．８，５．６  Ｈｚ，  １Ｈ），７．７５−７．７１  （ｍ，１Ｈ），７．５２（ｔ，Ｊ  ＝  ５．０  Ｈｚ，１Ｈ），７．３０（ｔ，Ｊ  ＝  ９．０  Ｈｚ，１Ｈ），５．４２（ｄ，Ｊ  ＝  １７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），５．０１（ｑｕｉｎ，Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，１Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ  ＝  １７．７  Ｈｚ，１Ｈ），３．１４（ｄｄ，Ｊ  ＝  ５．７，１６．４  Ｈｚ，１Ｈ），２．９５  （ｄｄ，Ｊ  ＝  １．２，１６．４  Ｈｚ，１Ｈ），１．２７（ｄ，Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３７９  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１２８】
実施例２４
【化７２】
2021503466.tif 000076
実施例２４の製造は、実施例２３における中間体Ａ−２の代わりに中間体Ａ−３を使用した以外、実施例２３の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：９．０４（ｄ，Ｊ  ＝  ４．９  Ｈｚ，２Ｈ），９．０１（ｓ，１Ｈ），７．７４（ｄｄ，Ｊ  ＝  ２．４，６．８  Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ  ＝  ４．９  Ｈｚ，１Ｈ），７．４４−７．４０（ｍ，１Ｈ），７．３５−７．２７（ｍ，１Ｈ），５．３６（ｄ，Ｊ  ＝  １８．０  Ｈｚ，１Ｈ），４．９８−４．８３（ｍ，１Ｈ），４．３６（ｄ，Ｊ  ＝  １８．０  Ｈｚ，１Ｈ），３．１２−２．９９（ｍ，１Ｈ），２．９４−２．８３（ｍ，１Ｈ），１．１６（ｄ，Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８８  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１２９】
実施例２５
【化７３】
2021503466.tif 000077
実施例２５の製造は、実施例２３における中間体Ａ−２の代わりに中間体Ａ−１を使用した以外、実施例２３の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：８．８６（ｄ，Ｊ  ＝  ４．８９  Ｈｚ，２Ｈ），７．２９（ｔ，Ｊ  ＝  ４．８９  Ｈｚ，１Ｈ），７．０８（ｄｄ，Ｊ  ＝  ６．０５，９．４８  Ｈｚ，２Ｈ），６．４５（ｓ，１Ｈ），５．０７（ｄ，Ｊ  ＝  １６．７５  Ｈｚ，１Ｈ），５．０５−４．９４（ｍ，１Ｈ），４．５５（ｄ，Ｊ  ＝  １６．８７  Ｈｚ，１Ｈ），３．１０−３．００（ｍ，１Ｈ），２．９４−２．８５（ｍ，１Ｈ），１．１７（ｄ，Ｊ  ＝  ６．９７  Ｈｚ，  ３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９０  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１３０】
実施例２６
【化７４】
2021503466.tif 000078
実施例２６の製造は、実施例２３における中間体Ａ−２の代わりに中間体Ａ−６を使用した以外、実施例２３の製造プロセスＡ〜Ｅを参照して行うことができる。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：９．０３（ｓ，３Ｈ），７．６０（ｓ，２Ｈ），７．４３−７．０９（ｍ，２Ｈ），５．３６（ｄ，Ｊ  ＝  １７．９  Ｈｚ，１Ｈ），４．９０（ｓ，１Ｈ），４．３６（ｄ，Ｊ  ＝  １８．１  Ｈｚ，１Ｈ），３．０６（ｄ，Ｊ  ＝  １２．１  Ｈｚ，１Ｈ），２．８９（ｄ，Ｊ  ＝  １６．４  Ｈｚ，１Ｈ），１．１５（ｄ，Ｊ  ＝  ５．４  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３７２  ［Ｍ＋Ｈ＋］。
【０１３１】
活性測定
１．  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ抗ＨＢＶ活性測定
１）  ＨｅｐＧ２．２．１５細胞１００μＬを、９６ウェル細胞培養プレートに、１．２×１０５細胞／ウェルで播種し、細胞を３７℃、５％二酸化炭素（ＣＯ２）のインキュベーターで一晩培養した。２日目に、ＤＭＳＯで３倍の勾配で被検化合物を稀釈し、合計８つの濃度に希釈した後、さらに培地で化合物を１００倍に希釈し、希釈した化合物１００μＬを取って細胞含有培養プレートに加え、最終体積２００μＬになり、ＤＭＳＯの最終濃度０．５％になり、２つの重複ウエルを使用した。細胞を３７℃、５％  ＣＯ２のインキュベーターで３日間培養した。５日目に、同じ濃度の化合物を含む新鮮な培地を細胞培養プレートの培養液と交換した。培養が８日目に達した時に、細胞培養プレートの上清を収集し、ＨＢＶ  ＤＮＡを抽出するために用いる。
【０１３２】
２）  リアルタイム定量ＰＣＲによるＨＢＶ  ＤＮＡの検出：  ＱＩＡａｍｐ  ９６  ＤＮＡ  Ｂｌｏｏｄ  Ｋｉｔセットで上清における全ＤＮＡを抽出し、ＨＢＶ特異性プライマーおよびプローブを用いた定量ＰＣＲによりＨＢＶ  ＤＮＡ含有量を検出した。２０μＬのＰＣＲプレミックス溶液と、５μＬのＨＢＶ  ＤＮＡサンプルまたはＨＢＶプラスミド標準試料を定量ＰＣＲプレートに加えて反応させた。ＨＢＶプラスミド標準試料を１０倍の勾配で１０７〜１０コピー数／μＬの７つの濃度に希釈した。定量ＰＣＲ反応手順は次の通りであり、予備変性を９５℃で１０分間行い、変性を９５℃で１５秒間行い、６０℃で１分間反応させ、このようなサイクルを４０回繰り返した。次の式により各ウェルのＨＢＶ  ＤＮＡの阻害率を計算し、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して化合物の阻害率データに対して非線形性フィッティング分析を行い、化合物のＥＣ５０値を得た。
【０１３３】
ＨＢＶ  ＤＮＡ阻害率％＝（１−サンプルＨＢＶ  ＤＮＡコピー数／ＤＭＳＯ対照ＨＢＶ  ＤＮＡコピー数）×１００％
試験結果を次の表１に示す。
【０１３４】
【表１】
2021503466.tif 000079
２．マウスの薬物動態学的研究
本実験は、マウスへの単回静脈内投与または強制経口投与後に化合物の薬物動態学的挙動を評価することを目的としている。静脈内投与では、化合物が０．５ｍｇ／ｍＬの清澄溶液として調製され、溶媒が５％  ＤＭＳＯ／５％  １２−ヒドロキシステアレート（ｓｏｌｕｔｏｌ）／９０％水である。強制経口投与では、化合物が２ｍｇ／ｍＬの懸濁液として調製され、溶媒が０．５％カルボキシメチルセルロースナトリウム／０．２％  Ｔｗｅｅｎ  ８０／９９．３％水である。
【０１３５】
血漿中の化合物の濃度は高速液体クロマトグラフィー−タンデム質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）により測定された。化合物および内部標準（ジクロフェナク）の保持時間、クロマトグラムの収集およびクロマトグラムの統合は、ソフトウェアＡｎａｌｙｓｔ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて処理され、データ統計は、ソフトウェアＷａｔｓｏｎ  ＬＩＭＳ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）またはＡｎａｌｙｓｔ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて処理された。サンプル中の分析物の濃度単位はｎｇ／ｍＬであり、有効数字３桁が保持され、パーセンテージで表された全ての値（例えば、％偏差および％変化係数など）は、いずれも小数点以下１桁まで保持されている。各校正曲線（検量線）には、少なくとも６つの濃度レベルが含まれている。校正標準試料の調製は品質管理（ＱＣ）サンプルと異なるソースからの原液（ストック液）を使用する必要がある。校正標準試料の計算濃度と表示値との偏差が±１５．０％を超える（定量下限が±２０．０％を超える）場合、このような標準試料は回帰分析から除外する必要がある。除外された校正標準試料は２５％未満である必要があり、各校正曲線には少なくとも許容標準を満たす６つの校正標準試料が含まれている。定量下限および定量上限の校正標準試料を除外する必要がある場合、当該分析物バッチの定量上限および下限は、それに応じて増減されている。
【０１３６】
ＷｉｎＮｏｎｌｉｎＴＭ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ６．３（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ，  Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，  ＣＡ）薬動学的ソフトウェアの非コンパートメントモデルを用いて血漿濃度を処理し、線形対数台形法を用いて薬物動態パラメータを計算した。計算される薬物動態パラメータは、（データが許可されている）静脈注射群のＴ１／２、Ｖｄｓｓ、ＣＬ、ＡＵＣ０−２４ｈ、強制経口投与群のＣｍａｘ、Ｔｍａｘ、ＡＵＣ０−２４ｈ、生物学的利用率（Ｆ％）が含まれるがこれらに限定されていない。
本発明の実施例のマウスにおける関連する薬物動態パラメータは、次の表２に示す。
【０１３７】
【表２】
2021503466.tif 000080
【０１３８】
３．  マウス尾静脈は高圧水注射によるＨＢＶ  ＤＮＡプラスミドモデルｉｎ  ｖｉｖｏの活性測定
この研究は、高圧尾静脈注射によるマウスモデルを通じて、マウスｉｎ  ｖｉｖｏにおけるＨＢＶに対する化合物（実施例６）の阻害効果を測定することを目的としている。本実験には、６〜７週齢であった雌のＢＡＢＬ／ｃマウスが使用された。ＨＢＶプラスミドＤＮＡは、ｐＡＡＶ２−ＨＢＶ１．３  ｍｅｒを使用してＱｉａｇｅｎ  ＥｎｄｏＦｒｅｅ  Ｐｌａｓｍｉｄ  Ｇｉｇａキットにより濃度１０００ｎｇ／μＬで抽出した。使用する前に、通常の生理食塩水で希釈して使用するまで４℃で保存した。
【０１３９】
３．１  動物の群分け（グループ化）
実験動物の群分けは次の表３に示す。
【表３】
2021503466.tif 000081
【０１４０】
３．２  薬物の調製
薬物の調製は、次の表４に示す。
【表４】
2021503466.tif 000082
３．３  投与スケジュール
【表５】
2021503466.tif 000083
【０１４１】
３．４  非エンドポイント採血の血液サンプルの収集と移送
１日目、３日目、５日目に、当日の１回目の投与後約４時間で各マウスから全血１００μＬを採取し、ヘパリンナトリウムを入れたチューブに全血を収集し、４℃で遠心分離し、７０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、上清を採取し、即ち血漿を得た。血漿を−８０℃の冷凍庫に保存し、ドライアイスの凍結条件下で分析実験室へ輸送して検出する。
【０１４２】
３．５  マウス血漿におけるＨＢＶ  ＤＮＡ含有量の定量ＰＣＲによる検出
１）  血漿におけるＤＮＡを抽出し、ＱＩＡａｍｐ  ９６  ＤＮＡ  Ｂｌｏｏｄ  Ｋｉｔの説明書を参考して実験手順を行った。
【０１４３】
２）  マウス血漿におけるＨＢＶ  ＤＮＡ含有量の定量ＰＣＲによる検出
ｑＰＣＲ反応混合物を調製した（表６を参照）。ｑＰＣＲ反応混合物、サンプルおよび標準試料を９６ウェル反応プレートに加えた。その中で、標準試料はＤ型ＨＢＶ全長配列を含むプラスミドＤＮＡであり、標準試料を１０７コピー数／μＬから、１０倍の勾配で希釈し、順次１０６〜１０１コピー数／μＬのＤＮＡ標準試料を得た。ＰＣＲ反応：９５℃で１０分間、９５℃で１５秒間、６０℃で１分間、４０サイクル。
【０１４４】
【表６】
2021503466.tif 000084
【０１４５】
３．６  マウス肝臓におけるＨＢＶ  ＤＮＡ含有量の定量ＰＣＲによる検出
１）  全肝臓ＤＮＡの抽出
肝臓組織を取り、組織グラインダーで均質化した。遠心分離後上清を取って新規な遠心分離管に移し、プロテイナーゼＫ消化液を加えて３時間消化した。得られた混合物を冷却した後、ＲＮＡ酵素Ａ（ＲＮＡｓｅ  Ａ）を加えて３０分間インキュベートした。ＲＮＡ酵素Ａで処理された混合液を等体積のフェノールクロロホルムイソアミルアルコールで２回抽出して残留タンパク質を除去した。上清を新しい遠心分離管に移し、イソプロパノールを加えてＤＮＡを沈殿させた。ＤＮＡ沈殿物を７０％エタノールで２回洗浄した。沈殿物を風乾し、ＴＥ（１０  ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．０、１ｍＭ  ＥＤＴＡ）を加えてＤＮＡを溶解した。
２）  マウス肝臓におけるＨＢＶ  ＤＮＡ含有量の定量ＰＣＲによる検出
ＮａｎｏｄｒｏｐでＤＮＡ濃度を測定し、全てのサンプルのＤＮＡ濃度を１０ｎｇ／μＬに調整した。サンプル５μＬを定量ＰＣＲ反応系に加えて定量ＰＣＲを行った。
ＨＢＶ  ＤＮＡ含有量＝ＨＢＶプライマーにより検出されたＤＮＡ含有量−ｐＡＡＶ２プライマーにより検出されたＤＮＡ含有量。
【０１４６】
３．７  実験結果
１）  各試験群のマウスに対してそれぞれ投与後１日目、３日目、５日目、７日目に血液サンプルを収集し、そのＨＢＶ  ＤＮＡ濃度の検出値（Ｌｏｇ  ＨＢＶ  ＤＮＡ）を次の表７に示す。
【表７】
2021503466.tif 000085
この結果を図１に示す。
【０１４７】
２）  投与７日間後、各試験群の動物の肝組織におけるＨＢＶ  ＤＮＡ濃度の検出値（Ｌｏｇ  ＨＢＶ  ＤＮＡ）を次の表８に示す。
【表８】
2021503466.tif 000086
この結果を図２に示す。
【０１４８】
４．  マウス尾静脈は高圧水注射によるＨＢＶ  ＤＮＡプラスミドモデルｉｎ  ｖｉｖｏの活性測定
この研究は、高圧尾静脈注射によるマウスモデルを通じて、マウスｉｎ  ｖｉｖｏにおけるＨＢＶに対する化合物（実施例２３）の阻害効果を測定することを目的としている。本実験には、６〜７週齢であった雌のＢＡＢＬ／ｃマウスが使用された。ＨＢＶプラスミドＤＮＡは、ｐＡＡＶ２−ＨＢＶ１．３  ｍｅｒを使用してＱｉａｇｅｎ  ＥｎｄｏＦｒｅｅ  Ｐｌａｓｍｉｄ  Ｇｉｇａキットにより濃度１０００ｎｇ／μＬで抽出した。使用する前に、正常生理食塩水で希釈して使用するまで４℃で保存した。
【０１４９】
４．１  動物の群分け
実験動物の群分けは次の表９に示す。
【表９】
2021503466.tif 000087
【０１５０】
４．２  薬物の調製
薬物の調製は、次の表１０に示す。
【表１０】
2021503466.tif 000088
【０１５１】
４．３  投与スケジュール
【表１１】
2021503466.tif 000089
【０１５２】
４．４  実験結果
１）  各試験群のマウスに対してそれぞれ投与後１日目、３日目、５日目、７日目に血液サンプルを収集し、そのＨＢＶ  ＤＮＡ濃度の検出値（Ｌｏｇ  ＨＢＶ  ＤＮＡ）を次の表１２に示す。
【表１２】
2021503466.tif 000090
この結果を図３に示す。
【０１５３】
２）  投与７日間後、各試験群の動物の肝組織におけるＨＢＶ  ＤＮＡ濃度の検出値（Ｌｏｇ  ＨＢＶ  ＤＮＡ）を次の表１３に示す。
【表１３】
2021503466.tif 000091
この結果を図４に示す。
【図１】
2021503466.tif 000120
【図２】
2021503466.tif 000121
【図３】
2021503466.tif 000122
【図４】
2021503466.tif 000123
【国際調査報告】
2021503466.tif 000124
2021503466.tif 000125
2021503466.tif 000126
2021503466.tif 000127