(57)【要約】  本発明は、ＩＬ−１７Ａのその受容体ＩＬ−１７ＲＡとの相互作用の阻害剤である、ＩＬ−１７Ａ結合ペプチド、それのバイオコンジュゲート、二量体、薬学的組成物、および医学的使用に関する。
2021531309.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下のいずれかのアミノ酸配列を有する、ＩＬ−１７ＡのＩＬ−ＲＡとの結合を阻害することができるペプチド：
式（Ｉ）：
（Ｉ）  Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４−Ｘ１５
（式中、互いに独立に：
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ｄ、Ｋ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｈ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｖ、Ｈ、もしくはＹであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｆ、Ｑ、もしくはＤであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｆ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり、またはそれが存在せず；
ただし、前記配列がＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮＫ（配列番号１）でもＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮでもＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩでもＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷでもないことを条件とする）；
または式（ＩＩ）：
（ＩＩ）  ａｎ−ＤＬＳＡＶＣＷＡＦＰＷＤＰＥＣＨ−ｂｎ’
（式中、互いに独立に：
ａ、ｂが、Ａ、Ｒ、Ｎ、Ｄ、Ｃ、Ｅ、Ｑ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｋ、Ｍ、Ｆ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、Ｙ、またはＶから選択され；
ｎ＝０〜３の整数であり；
ｎ’＝０〜３の整数である）。
【請求項２】
前記式（Ｉ）において：
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、またはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、またはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、またはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、またはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、またはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、またはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、またはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、またはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、またはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり、またはそれが存在せず；
ただし、前記配列がＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮＫ（配列番号１）でもＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮでもＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩでもＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷでもないことを条件とする、
請求項１に記載のペプチド。
【請求項３】
１５アミノ酸の配列を有する、請求項１または２に記載のペプチド。
【請求項４】
前記式（Ｉ）において：
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、もしくはＬであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｒ、Ｋ、もしくはＥであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、もしくはＩであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｙ、もしくはＮであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、もしくはＶであり；
Ｘ６が、Ｐであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、もしくはＬであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、もしくはＱであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｗ、Ｆ、Ｖ、もしくはＩであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、もしくはＦであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、もしくはＦであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、もしくはＬであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｑ、もしくはＥであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｈ、もしくはＥであり；
ただし、前記配列が、ＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮＫ（配列番号１）ではないことを条件とし；
または
Ｘ１が、Ｉ、もしくはＶであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、もしくはＲであり；
Ｘ３が、Ｖ、もしくはＦであり；
Ｘ４が、Ｔ、もしくはＱであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、もしくはＶであり；
Ｘ６が、Ｐ、もしくはＧであり；
Ｘ７が、Ａ、もしくはＱであり；
Ｘ８が、Ｄ、もしくはＥであり；
Ｘ９が、Ｌであり；
Ｘ１０が、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ１１が、Ｄ、もしくはＥであり；
Ｘ１２が、Ｗであり；
Ｘ１３が、Ｉ、もしくはＶであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、もしくはＥであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、もしくはＥであり；
ただし、前記配列が、ＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮＫ（配列番号１）ではないことを条件とし；
または
Ｘ１が、Ｉ、もしくはＶであり；
Ｘ２が、Ｈ、もしくはＭ，
Ｘ３が、Ｖであり；
Ｘ４が、Ｔであり；
Ｘ５が、Ｉであり；
Ｘ６が、Ｐであり；
Ｘ７が、Ａであり；
Ｘ８が、Ｄであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｗ、Ｆ、Ｖ、もしくはＩであり；
Ｘ１０が、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ１１が、Ｄ、もしくはＥであり；
Ｘ１２が、Ｗであり；
Ｘ１３が、Ｉ、もしくはＶであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、もしくはＥであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、もしくはＥであり；
ただし、前記配列が、ＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮＫ（配列番号１）ではないことを条件とし；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｍ、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｍ、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤである、
請求項１〜３のいずれか一項に記載のペプチド。
【請求項５】
式（Ｉ）において、Ｘ１がＶである、請求項１〜４のいずれか一項に記載のペプチド。
【請求項６】
配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号４２、配列番号１１１、配列番号１１２、配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号１１７、配列番号１１８、配列番号１１９、配列番号１２０、配列番号１２１、配列番号１２２、配列番号１２３、配列番号１２４、配列番号１２５、配列番号１２６、配列番号１２７、配列番号１２８、配列番号１２９、配列番号１３０、配列番号１３１、配列番号１３２、配列番号１３３、配列番号１３４、配列番号１３５、配列番号１３６、配列番号１３７、配列番号１３８、配列番号１３９、配列番号１４０、配列番号１４１、配列番号１４２、配列番号１４３、配列番号１４４、配列番号１４５、配列番号１４６、配列番号１４７、配列番号１４８、配列番号１４９、配列番号１５０、配列番号１５１、配列番号１５２、配列番号１５３、配列番号１５４、配列番号１５５、配列番号１５８、配列番号１５９、配列番号１６０、配列番号１６１、配列番号１６２、配列番号１６３、配列番号１６４、配列番号１６５、配列番号１６６、配列番号１６７、配列番号１６８、配列番号１６９、配列番号１７０、配列番号１７１、配列番号１７２、配列番号１７３、配列番号１７４、配列番号１７５、配列番号１７６、配列番号１７７、配列番号１７８、配列番号１７９、配列番号１８０、配列番号１８１、配列番号１８２、配列番号１８３、配列番号１８４、配列番号１８５、配列番号１８６、配列番号１８７、配列番号１８８、配列番号１８９、配列番号１９０、配列番号１９１、配列番号１９２、配列番号１９３、配列番号１９４、配列番号１９５、配列番号１９６、配列番号１９７、配列番号１９８、配列番号２００、配列番号２０１、配列番号２０２、配列番号２０３、配列番号２０４、配列番号２０５、配列番号２０６、配列番号２０７、配列番号２０８、配列番号２０９、配列番号２１０、配列番号２１１、配列番号２１２、配列番号２１３、配列番号２１４、配列番号２１５、配列番号２１６、配列番号２１７、配列番号２１８、配列番号２１９、配列番号２２０、配列番号２２１、配列番号２２２、配列番号２２３、配列番号２２４、配列番号２２５、配列番号２２６、配列番号２２７、配列番号２２８、配列番号２２９、配列番号２３０、配列番号２３１、配列番号２３２、配列番号２３３、配列番号２３４、配列番号２３５、配列番号２３６、配列番号２３７、配列番号２３８、配列番号２３９、配列番号２４０、配列番号２４１、配列番号２４２、配列番号２４３、配列番号２４４、配列番号２４５、配列番号２４６、配列番号２４７、配列番号２４８、配列番号２４９、配列番号２５０、配列番号２５１、配列番号２５２、配列番号２５３、配列番号２５４、配列番号２５５、配列番号２５６、および配列番号２５７から選択されるアミノ酸配列を有する、請求項１または２に記載の式（Ｉ）のペプチド。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載のペプチドの配列、ならびに前記配列のＣ末端および／またはＮ末端における、以下の式（ＩＩＩ）のアミノ酸配列を有する配列Ａという配列からなるアミノ酸配列を有するペプチド：
（ＩＩＩ）  Ｙ１−Ｙ２−Ｙ３−Ｙ４−Ｙ５−Ｙ６−Ｙ７−Ｙ８−Ｙ９−Ｙ１０−Ｙ１１−Ｙ１２−Ｙ１３−Ｙ１４−Ｙ１５−Ｙ１６
（式中：
Ｙ１が、Ａ、Ｔ、Ｖ、Ｋ、Ｒ、Ｉ、Ｌ、Ｘ、またはＧであり；
Ｙ２が、Ｒ、Ｗ、Ｐ、Ｅ、Ｑ、またはＡであり；
Ｙ３が、Ｋ、Ｗ、Ｇ、Ｔ、Ｉ、Ｒ、またはＰであり；
Ｙ４が、Ｋ、Ｔ、Ｅ、Ｗ、Ａ、Ｒ、Ｄ、Ｇ、Ｘ、またはＦであり；
Ｙ５が、Ａ、Ｅ、Ｔ、Ｇ、Ｗ、Ｉ、Ｒ、Ｐ、またはＶであり；
Ｙ６が、Ａ、Ｗ、Ｅ、Ｒ、Ｇ、Ｐ、または不在であり；
Ｙ７が、Ｋ、Ｓ、Ｗ、Ｔ、Ｆ、Ｒ、Ｖ、Ｇ、または不在であり；
Ｙ８が、Ａ、Ｑ、Ｗ、Ｒ、Ｇ、または不在であり；
Ｙ９が、Ｎ、Ｇ、または不在であり；
Ｙ１０が、Ｒ、または不在であり；
Ｙ１１が、Ｒ、または不在であり；
Ｙ１２が、Ｍ、または不在であり；
Ｙ１３が、Ｋ、または不在であり；
Ｙ１４が、Ｗ、または不在であり；
Ｙ１５が、Ｋ、または不在であり；
Ｙ１６が、Ｋ、または不在である）。
【請求項８】
配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、または配列番号４０の配列を有する、請求項７に記載のペプチド。
【請求項９】
請求項１〜６のいずれか一項に記載のペプチドの配列、ならびに前記配列のＣ末端および／またはＮ末端における、配列（Ａ）ｍ（式中、Ａが、Ｒ、Ｋ、Ｇ、Ｅ、Ｑ、またはＡ、好ましくはＲ、Ｋ、Ｇ、Ｅ、またはＡから選択されるアミノ酸であり、ｍが１〜１０の間の整数である）からなるアミノ酸配列を有するペプチド。
【請求項１０】
配列番号１９、配列番号２０、配列番号２９、配列番号３０、配列番号４３の配列を有する、請求項９に記載のペプチド。
【請求項１１】
前記ペプチドがＣ末端および／またはＮ末端において保護的キャップ基と結合しており、好ましくは、Ｃ末端と結合した前記保護的キャップ基が、アミド、アルデヒド、エステル、ｐ−ニトロアニリド、７−アミノ−４−メチルクマリンから選択され、Ｎ末端と結合した前記保護的キャップ基が、アセチル、ホルミル、ピログルタミル、脂肪酸、尿素、カルバメート、スルホンアミド、アルキルアミンから選択される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のペプチド。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の２つのペプチドにより形成された二量体。
【請求項１３】
前記ペプチドがポリエチレンスペーサーによって連結されている、請求項１２に記載の二量体。
【請求項１４】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のペプチドおよび生体分子を含むバイオコンジュゲートであって、好ましくは、前記分子が前記ペプチドのＮ末端および／またはＣ末端と結合している、バイオコンジュゲート。
【請求項１５】
前記生体分子が、好ましくは、カプリン酸、カプロン酸、アスコルビン酸、ＮＡＧ−ＮＡＭ、ＮＡＧ、ＮＡＭ、ヒアルロン酸、アルギン酸、キチン、（ＧａｌＮＡｃ）２、Ｇａｌ−α１，３−ＧａｌＮＡｃ、およびトリガラクツロン酸から選択される、請求項１４に記載のバイオコンジュゲート。
【請求項１６】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載のペプチド、請求項１２または１３に記載の二量体、あるいは請求項１４または１５に記載のバイオコンジュゲート、および少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を含む、薬学的組成物。
【請求項１７】
関節リウマチ、多発性硬化症、クローン病、全身性エリテマトーデス、喘息、ベーチェット病、高ＩｇＥ症候群、強直性脊椎炎、乾癬、乾癬性関節炎、関節リウマチ、乾性角結膜炎、春季角結膜炎、間質性ヘルペス性角膜炎、角膜同色移植片拒絶、角膜感染症、ヘルペスウイルスまたはシュードモナス・エルジーノサ（Pseudomonas aeruginosa）角膜炎、およびドライアイ疾患から選択される疾患、好ましくは乾癬またはドライアイ疾患の処置および／または予防における使用のための、請求項１〜１１のいずれか一項に記載のペプチド、請求項１２もしくは１３に記載の二量体、または請求項１４もしくは１５に記載のバイオコンジュゲート。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＩＬ−１７ＡのそのＩＬ−１７ＲＡ受容体との結合の阻害剤であり、かつそれにより、複合体ＩＬ−１７Ａ／ＩＬ−１７ＲＡ／ＩＬ−１７ＲＣの形成の阻害剤である、ＩＬ−１７Ａ結合ペプチドに関する。本発明の目的はまた、上記のペプチドを含むバイオコンジュゲートおよび二量体、上記のペプチド、バイオコンジュゲート、および二量体の薬学的組成物、ならびに医学的使用である。
【背景技術】
【０００２】
インターロイキン１７（ＩＬ−１７）とも名づけられた、ヒト細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原８（ＣＴＬＡ８）は、１９９３年に初めてクローニングされた。ヒトＩＬ−１７について記載された最初の生物活性は、関節リウマチ滑膜細胞からのインターロイキン６（ＩＬ−６）およびインターロイキン８（ＩＬ−８）の産生の誘導であった。この所見は、ＩＬ−６を通しての炎症およびＩＬ−８を通しての好中球動員におけるＩＬ−１７の役割を示唆した（Xu S et al, Cell Mol Immunol. 2010, 164-74; Murcia RY et al, PLOS ONE 2016, 11(5): e0154755doi:10.1371/journal.pone.0154755）。後にＩＬ−１７Ａと名づけられたこの分子が、５つの追加のメンバー、つまり、ＩＬ−１７Ｂ〜Ｆを含むより大きいファミリーの一部であることが後で見出された。ＩＬ−１７Ｆは、最初に発見されたＩＬ−１７、ＩＬ−１７Ａと最も高い相同性（約５６％）を共有し、一方、ＩＬ−１７Ｅは、最も低い配列保存（約１６％）を示す。ＩＬ−１７ファミリーのメンバーは、ヘテロ二量体としても作用し得るＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆを例外として、ホモ二量体の形をとってそれらの受容体と結合して、それらの機能を発揮する（Goepfert A et al, Sci Rep. 2017, 7 (1), 8906）。このファミリーの最も広く調べられたサイトカインである、ＩＬ−１７Ａは、微生物感染に対する宿主防御において必須の役割を果たし、それは、いくつかの炎症性および自己免疫性状態の主要な駆動因子と考えられている。ＩＬ−１７Ａの病的産生は、過剰な炎症および明らかな組織損傷をもたらす。
【０００３】
特に、サイトカイン、ケモカイン、急性期タンパク質、抗菌ペプチド、ムチン、およびマトリックスメタロプロテイナーゼを含む様々な分子の誘導を通して、ＩＬ−１７Ａは、好中球動員、炎症、および宿主防御をもたらす事象のカスケードを増幅することができる。ＩＬ−１７Ａは、ヘルパーＴ細胞１７（T helper 17）（Ｔｈ１７）細胞によって産生されるシグネチャーサイトカインであるが、他のＩＬ−１７ファミリーサイトカインのように、ＩＬ−１７Ａは、免疫細胞から非免疫細胞に渡る複数の供給源を有する。
【０００４】
ＩＬ−１７Ｂ、ＩＬ−１７Ｃ、およびＩＬ−１７Ｄもまた、炎症促進性サイトカインと考えられているが、それらの役割は、完全には知られていない。ＩＬ−２５としても知られているＩＬ−１７Ｅは、最も低い相同性を有し、寄生虫およびアレルギーに対するＴｈ２細胞応答に関与している。ＣＣＬ２０は、Ｔｈ１７および樹状細胞の炎症部位への動員を駆動する。次に、Ｔｈ１７細胞は活性化され、よって、炎症性メディエーターを産生して、慢性炎症を引き起こす。
【０００５】
ＩＬ−１７ファミリーに属するサイトカインは、それらの関連した受容体を介してシグナルを伝達し、ＮＦκＢ、ＭＡＰＫ、およびＣ／ＥＢＰを含む下流経路を活性化して、抗菌ペプチド、サイトカイン、およびケモカインの発現を誘導する。近位アダプターＡｃｔ１は、全てのＩＬ−１７サイトカインのシグナル伝達中の共通のメディエーターであり、それは、ＩＬ−１７媒介性宿主防御およびＩＬ−１７駆動性自己免疫性状態に関与する。
【０００６】
ＩＬ−１７受容体ファミリーは、５つのメンバー、ＩＬ−１７ＲＡ、ＲＢ、ＲＣ、ＲＤ、およびＲＥからなり、それらの全ては、それらのリガンドのように、配列相同性を共有する。
【０００７】
ＩＬ−１７ＲＡは、幅広い組織および細胞型に遍在性に発現し、ＩＬ−１７−Ａ、Ｃ、Ｅ、およびＦと結合する。受容体シグナル伝達は、共通のＩＬ−１７ＲＡサブユニット、およびリガンドに依存し、かつシグナル伝達特異性を制御する第２のサブユニットで形成されたヘテロ二量体受容体を通して起こる。リガンドでの刺激により、ＩＬ−１７ＲＡは、ＩＬ−１７ＲＢ（ＩＬ−１７Ｅについて）、ＩＬ−１７ＲＣ（ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆについて）、またはＩＬ−１７ＲＥ（ＩＬ−１７Ｃについて）とのヘテロ二量体受容体複合体を形成する。リガンドの第１のＩＬ−１７ＲＡ受容体サブユニットとの結合が、第２の結合事象を促進し、よって、ヘテロ二量体受容体複合体の形成を誘導すると提案されている。特に、ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆのシグナルは、ＩＬ−１７ＲＡとＩＬ−１７ＲＣの複合体により媒介される。ＩＬ−１７Ｆは、ＩＬ−１７ＲＡと、ＩＬ−１７Ａの約１／１００〜１／１０００の親和性で結合するが、ＩＬ−１７ＲＣに対する結合親和性は、その２つのサイトカインの間で同等である（Onishi RM et al, Immunology 2010, 129(3), 311-321；Gu C et al, Cytokine 2013, 64(2), 477-485）。
【０００８】
ヒトにおけるＩＬ−１７Ａは、関節リウマチ、多発性硬化症、乾癬、クローン病、全身性エリテマトーデス、喘息、ベーチェット病、および高ＩｇＥ症候群などの様々な自己免疫性および炎症性状態において中心的役割を果たす（Fujino S et al Gut, 2003, 52, 65-70；Shabgah AG et al, Postepy Dermatol Allergol 2014, 31 (4), 256-261）。さらに、ＩＬ−１７Ａ遮断は、強直性脊椎炎および関節リウマチにおいて前臨床的および臨床的効力を示している（Liu S et al, Nature-Scientific Reports 2016, doi:10.1038/srep26071；Lubberts E et al, Arthritis Rheum 2004, 50, 650-659）。
【０００９】
また、ＩＬ−１７Ａは、眼疾患、特に、ドライアイ疾患（ＤＥＤ）、ウイルス性および細菌性角膜炎などの眼表面および角膜疾患の発生に関与することが示されている。ＩＬ−１７Ａを中和するために開発された抗体は、これらの疾患の重症度を低下させることにおいて有望な結果を示している（Garbutcheon-Singh KB et al, Curr Eye Res, 2018, DOI:10.1080/02713683.2018.1519834）。
【００１０】
ＤＥＤは、不快感、視覚障害、および涙液層機能障害を生じる涙システムおよび眼表面の炎症性および自己免疫性眼科的疾患である。ＤＥＤは、成人集団における後天性視力障害の最も多い原因の一つである（Stern ME et al, Mucosal Immunol 2010, 3(5), 425-442；Stevenson W et al, Arch Ophthalmol 2012, 130(1), 90-100；Parul Singh , Parul Singh 2012；Hah, Chung et al. 2017）。その疾患は、眼表面に影響する免疫過程および炎症過程を含み、重篤な場合、失明に至る場合がある。ＤＥＤの現在の処置は、主に、対症的であり、眼潤滑剤、ならびにコルチコステロイド、サイクロスポリンＡ、およびタクロリムスなどの非特異的抗炎症剤に存する。
【００１１】
ＩＬ−１７Ａは、角膜上皮バリア機能への損傷に関連しており、その損傷は、ＤＥＤの視力への脅威度が最も高い合併症である。眼表面におけるＩＬ−６、ＴＧＦ−β、ＩＬ−２３、およびＩＬ−１７Ａ濃度の増加を誘導するＴｈ１７細胞の増加が、ＤＥＤ患者眼組織において報告されており、加えて、実験ＤＥＤモデルの、涙中のＩＬ−１７の濃度の増加および眼表面におけるＴｈ１７細胞の数の増加が報告されている。加えて、ＩＬ−１７Ａのインビボでの中和が、疾患の著しく減弱した誘発および重症度を生じることもまた実証されている（De Paiva CS et al, Mucosal Immunol. 2009; 2(3): 243-253；Chauhan et al, Mucosal Immunol , 2009, 2(3), 243-253；Chauhan SK et al, Mucosal Immunol 2009, 2(4), 375-376；Chauhan, El Annan et al. 2009；De Paiva, Chotikavanich et al. 2009；de Paiva, Huang et al. 2014；Subbarayal, Chauhan et al. 2016）。
【００１２】
ＩＬ−１７Ａはまた、乾癬に結びつけられている。乾癬は、慢性炎症性疾患である。それは、銀色の鱗屑で覆われた乾燥し、隆起した赤色の皮膚病変（斑）として現れる。多数の臨床表現型（すなわち、斑、滴状、嚢胞性、逆性）が存在し、疾患重症度は数個の散在する斑から広範な体表面関与まで様々である。乾癬を有する個体は、乾癬性関節炎、メタボリックシンドローム、心血管疾患、およびうつ病などの他の慢性および重篤な疾患を発症するリスクが増加する。乾癬の病態生理におけるＩＬ−１７Ａの中心的役割が実証されている（Zeichner JA et al J Clin Aesthet Dermatol 2016, 9 (6 Suppl 1), S3-S6）。乾癬において、ＩＬ−１７  ｍＲＮＡの発現は、非病変皮膚と比較して、病変皮膚においてより高い。追加として、ＩＬ−１７Ａレベルは、疾患重症度と有意に相関する（Arican Oet al. Mediators Inflamm 2005, 2005, 273-279；Takahashi K et al. Clin Exp Dermatol 2010, 35, 645-649）。ＩＬ−１７Ａの遮断は、ケラチノサイト過剰増殖、真皮へのＴ細胞浸潤、および主要な疾患伝播性遺伝子のｍＲＮＡ発現を低下させることが示されている（Krueger JG et al, J Allergy Clin Immunol 2012, 130, 145-154）。
【００１３】
抗ＩＬ−１７Ａ抗体、セクキヌマブ（ＡＩＮ４５７、Ｃｏｎｓｅｎｔｙｘ（商標））（完全ヒトＩｇＧ１ｋ抗ＩＬ−１７Ａ  ｍＡｂ）およびイキセキズマブ（ＬＹ２４３９８２１）（ヒト化ＩｇＧ４抗体）が、乾癬における臨床試験で試験され、中等度〜重度の乾癬の処置用に認可された。臨床試験中、どちらの抗体も、その疾患の重症度を、患者集団の８０％において少なくとも７５％（ＰＡＳＩ７５）、低下させることができた。さらに、現在の先端的臨床試験は、強直性脊椎炎および乾癬性関節炎の処置についても有望な結果を示している。他の抗体は、今、同じ適応症について臨床試験中である。
【００１４】
上記の証拠は、上記の病態の処置のための、ＩＬ−１７Ａをターゲットして、それのシグナル伝達を阻害することができる分子の開発を強く支持している。最近まで、ＩＬ−１７Ａおよびそれの受容体のターゲティングは、依然として、抗体のドメインのままである。抗体を好む理由は、ＩＬ−１７Ａのようなサイトカインが、今までのところ新薬の開発に繋がらないと考えられている、ターゲットすることが困難なタンパク質間相互作用（ＰＰＩ）標的を構成することである。実際、ＰＰＩ界面は、一般的に平らであり、低分子量（ＳＭＷ）分子に結合するのに通常、必要である深いサブポケットおよび溝を欠く。これにも関わらず、最近、新しい研究が、ＩＬ−１７Ａに結合して、それのＩＬ−１７ＲＡ受容体との相互作用を阻止し、よって、ＩＬ−１７Ａ経路活性化を阻害することができる数個のＳＭＷ  ＩＬ−１７Ａアンタゴニストを同定した（Espada A et al. J Med Chem 2016, 59(5), 2255-2260；Ting JP et al PLoS One 2018, 13(1), e0190850；Liu S et al, Scientific reports, 6:26071, doi: 10.1038/srep26071）。これらの中でも、高親和性ペプチド（ＨＡＰ）と名づけられた、配列ＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮＫのペプチドが記載されている（Liu S et al, Scientific reports, 6:26071, doi: 10.1038/srep26071）。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
しかしながら、ＩＬ−１７Ａ／ＩＬ−１７ＲＡ軸を含む障害の処置のための新しい治療選択肢の開発のために、ＩＬ−１７Ａと高親和性で結合して、ＩＬ−１７Ａ経路活性化を阻止することができる新しい分子を同定し、かつ特徴づける必要性がまだなお存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明者らは、驚くべきことに、ＩＬ−１７ＡのＮ末端部分の特定の部位と結合することができ、それにより、ＩＬ−１７ＲＡとの相互作用およびＩＬ−１７Ａ／ＩＬ−１７ＲＡ／ＩＬ−１７ＲＣ複合体の形成を阻害することができるペプチドを見出した。
【００１７】
前記相互作用の阻害は、ＩＬ−１７Ａシグナル伝達経路を遮断する。したがって、本発明によるペプチドは、Ｔｈ１７細胞およびＩＬ−１７Ａが中心的役割を発揮する炎症性および自己免疫性疾患において観察される、Ｔｈ１７関連炎症およびその後の損傷を低下させることができる。
【００１８】
実験セクションに示されているように、本発明のペプチドは、それらを眼科的および皮膚科的疾患の局所的処置に特に適したものにする物理化学的性質を有する。
【００１９】
前記ペプチドは、ＩＬ−１７Ａの過剰産生または活性に依存した疾患の革新的かつ特異的な局所的処置を設計するのに有用である。
【００２０】
本発明の目的は、ＩＬ−１７ＡのＩＬ−１７ＲＡとの結合を阻害することができるペプチド、二量体、およびバイオコンジュゲート、前記ペプチド、二量体、またはバイオコンジュゲートを含む薬学的組成物、ならびにＩＬ−１７Ａに依存した自己免疫性および炎症性疾患の予防および／または処置における上記の使用である。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】本発明による代表的なＩＬ−１７Ａ結合ペプチドを用いて、実施例５に記載されたＩＬ１７ＲＡ−ＩＬ１７ＲＣ二量体化アッセイにおいて得られたいくつかの用量反応曲線を示す図である。異なるペプチドでの処理により得られた、ＩＬ−１７Ａにより誘導されるＩＬ１７ＲＡ−ＩＬ１７ＲＣ二量体化の阻害のパーセンテージが報告されている。
【図２】実施例６に記載されているように測定された、ヒト分化および活性化Ｔｈ１７細胞によるＩＬ−６、ＩＬ−１７Ａ、およびＩＬ−２３の分泌への配列番号１８のＩＬ−１７Ａ結合ペプチドの活性を示す図である。配列番号１８のペプチドありまたはなし（対照）でのＴｈ１７細胞の上清における異なるサイトカインの濃度が報告されている。
【図３】実施例６に記載されているように測定された、ヒト分化および活性化Ｔｈ１７細胞によるメタロプロテイナーゼ３の分泌への配列番号１８のＩＬ−１７Ａ結合ペプチドの活性を示す図である。配列番号１８のペプチドありまたはなし（対照）でのＴｈ１７細胞の上清におけるメタロプロテイナーゼ３の濃度が報告されている。
【図４】実施例６に記載されているように、配列番号１８のペプチドの存在下および非存在下（対照）における２４時間後のヒトＴｈ１７細胞の生存率を示す。
【図５】本発明によるＩＬ−１７Ａ結合ペプチドの、ＩＬ−１７Ａにおける結合部位を示す図である。
【図６】配列番号２（上方パネル）または配列番号１（下方パネル）のペプチドを用いて、実施例９の実験で得られたセンサーグラムを示す図である。
【図７】実施例９の実験で得られた、配列番号２（上方パネル）または配列番号１（下方パネル）のペプチドの異なる濃度における親和定数の値を示す図である。
【図８】処理されていない（溶媒）、または配列番号２のペプチド（パネルＡ）で、もしくはペプチドＨＡＰ（配列番号１）（パネルＢ）で処理されたＨＣＥＣ細胞における、実施例１０に記載されているように、リアルタイムＰＣＲにより測定されたＩＬ−８の発現のレベルを示す図である。エラーバーは標準偏差を表す。統計解析としてｔ検定を実施した。ｐ値  ＊＜０．０５、＊＊＜０．００５、＊＊＊＜０．０００５。
【図９】処理されていない（溶媒）、または配列番号２のペプチド（パネルＡ）で、もしくはペプチドＨＡＰ（配列番号１）（パネルＢ）で処理されたＨＣＥＣ細胞における、実施例１０に記載されているように、リアルタイムＰＣＲにより測定されたＩＬ−６の量を示す図である。エラーバーは標準偏差を表す。統計解析としてｔ検定を実施した。ｐ値  ＊＜０．０５、＊＊＜０．００５、＊＊＊＜０．０００５。
【図１０】処理されていない（溶媒）、または配列番号２のペプチド（パネルＡ）で、もしくはペプチドＨＡＰ（配列番号１）（パネルＢ）で処理されたＨＣＥＣ細胞における、実施例１０に記載されているように、リアルタイムＰＣＲにより測定されたＴＮＦ−αの量を示す図である。エラーバーは標準偏差を表す。統計解析としてｔ検定を実施した。ｐ値  ＊＜０．０５、＊＊＜０．００５、＊＊＊＜０．０００５。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
定義
他に規定がない限り、本明細書で用いられる全ての技術用語、表記法、および他の科学的用語法は、本開示に関する当業者により一般的に理解されている意味をもつことを意図される。場合によっては、一般的に理解された意味をもつ用語が、明瞭さのためにおよび／または参照しやすくするために本明細書で定義される；したがって、本明細書におけるそのような定義の包含は、当技術分野において一般的に理解されているものに対する実質的な違いを表すと解釈されるべきではない。
【００２３】
用語「薬学的に許容される賦形剤」は、安全性について適切に評価されており、かつ薬物送達システムに意図的に含まれる、活性薬学的成分（ＡＰＩ）以外の物質を指す。薬学的に許容される賦形剤は、先行技術においてよく知られており、例えば、参照により本明細書に含まれる、Handbook of Pharmaceutical Excipients, seventh edition 2013（Rowe, Sheskey et al. 2012）に開示されている。
【００２４】
賦形剤は、通常、それらが最終薬学的組成物において有する機能に従って分類される。好ましくは、本発明による適切な賦形剤は、例えば、希釈剤、吸着剤、流動促進剤、結合剤、潤滑剤、界面活性剤、崩壊剤、保存剤、抗酸化剤、またはそれらの混合物である。
【００２５】
本明細書における用語「およそ」および「約」は、測定において生じる可能性がある、実験誤差の範囲を指す。
【００２６】
用語「含むこと（comprising）」、「有すること（having）」、「含むこと（including）」、および「含有すること（containing）」は、オープンエンドの用語（すなわち、「含むが、それらに限定されない」ことを意味する）と解釈されるべきであり、「から本質的になる（consist essentially of）」、「から本質的になること（consisting essentially of）」、「からなる（consist of）」、または「からなること（consisting of）」のような用語へもサポートすると考えられるべきである。
【００２７】
用語「から本質的になる（consist essentially of）」、「から本質的になること（consisting essentially of）」は、半分閉じた用語と解釈されるべきであり、本発明の基本的かつ新規な特徴に実質的に影響する他の成分が含まれない（したがって、任意の賦形剤は含まれてもよい）ことを意味する。
【００２８】
用語「からなる（consist of）」、「からなること（consisting of）」は、閉じた用語として解釈されるべきである。
【００２９】
本明細書で用いられる場合、用語「バイオコンジュゲート」は、少なくとも１つが生体分子である異なる分子、好ましくは２つの分子の間の、任意でスペーサーを用いて連結された、安定な共有結合性連結によって形成されたコンジュゲートを指す。
【００３０】
本明細書で用いられる場合、用語「生体分子」は、生物学的起源の分子を指す。その用語は、糖質、脂質、およびタンパク質などの高分子、または小さい天然産物を含む。本発明のために、「生体分子」は、好ましくは、アスコルビン酸、カプリン酸、カプロン酸、Ｎ−アセチル−グルコサミン（ＮＡＧとも呼ばれる）、Ｎ−アセチルムラミン酸（ＮＡＭとも呼ばれる）、ヒアルロン酸、アルギン酸、キチン、（ＧａｌＮＡｃ）２、Ｇａｌ−α１，３−ＧａｌＮＡｃ、またはトリガラクツロン酸から選択される。
【００３１】
本明細書における「保存的置換」の定義は、保存的置き換え（保存的変異または保存的置換とも呼ばれる）は、所定のアミノ酸を、類似した生化学的性質をもつ異なるアミノ酸へ変化させるアミノ酸置き換えであることを指す（Simon French 1983）。
【００３２】
発明の説明
本発明者らは、ＩＬ−１７Ａと高親和性で結合して、それのＩＬ−ＲＡ受容体との相互作用を阻害することができるいくつかのペプチドを同定した。これらの化合物は、ＩＬ−１７Ａシグナル伝達の阻害剤として作用する。
【００３３】
したがって、本発明の第１の目的は、以下のいずれかのアミノ酸配列を有する、ＩＬ−１７ＡのＩＬ−ＲＡとの結合を阻害することができるペプチドである：
式（Ｉ）：
（Ｉ）  Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４−Ｘ１５
（式中、互いに独立に：
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ｄ、Ｋ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｈ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｖ、Ｈ、もしくはＹであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｆ、Ｑ、もしくはＤであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｆ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり、またはそれが存在せず；
ただし、前記配列がＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮＫ（配列番号１）でも、それの１２〜１４アミノ酸長のＣ末端切り詰め型配列ＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮでも、ＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩでもＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷでもないことを条件とする）；
または式（ＩＩ）：
（ＩＩ）  ａｎ−ＤＬＳＡＶＣＷＡＦＰＷＤＰＥＣＨ−ｂｎ’
（式中、互いに独立に：
ａ、ｂが、Ａ、Ｒ、Ｎ、Ｄ、Ｃ、Ｅ、Ｑ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｋ、Ｍ、Ｆ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、Ｙ、またはＶから選択され；
ｎ＝０〜３の整数であり；
ｎ’＝０〜３の整数である）。
【００３４】
好ましくは、式（ＩＩ）において、ａともｂとも異なるアミノ酸のそれぞれを、保存的置換で置き換えることができる。
【００３５】
式（ＩＩ）の好ましいペプチドは、ＤＬＳＡＶＣＷＡＦＰＷＤＰＥＣＨ（配列番号４１）である。
【００３６】
特に好ましいのは、式（Ｉ）のペプチドである。
【００３７】
好ましい実施形態によれば、前記式（Ｉ）のペプチドにおいて：
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ｄ、Ｋ、またはＷであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、またはＮであり；
Ｘ３が、Ｖ、またはＦであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｈ、Ｖ、またはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、またはＦであり；
Ｘ６が、Ｐ、またはＧであり；
Ｘ７が、Ａ、またはＱであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、またはＮであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、またはＷであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、もしくはＦであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、Ｎであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｖであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｆであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｆ、Ｖ、もしくはＷであり、またはそれが存在せず；
ただし、前記配列がＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮＫ（配列番号１）でも、それの１２〜１４アミノ酸長のＣ末端切り詰め型配列ＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮでも、ＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩでもＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷでもないことを条件とする。
【００３８】
代替の好ましい実施形態によれば、前記式（Ｉ）のペプチドにおいて：
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、またはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、またはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、またはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、またはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、またはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、またはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、またはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、またはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、またはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり、またはそれが存在せず；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤ、またはそれが存在せず；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤ、またはそれが存在せず；
ただし、前記配列がＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮＫ（配列番号１）でも、それの１２〜１４アミノ酸長のＣ末端切り詰め型配列ＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮでも、ＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩでもＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷでもないことを条件とする。
【００３９】
好ましくは、上記の式（Ｉ）のペプチドにおいて、全てのアミノ酸Ｘ１〜Ｘ１５が存在し、上記の式（Ｉ）のペプチドが、１５アミノ酸の配列を有する。好ましくは、１５アミノ酸未満の配列を有する式（Ｉ）のペプチドにおいて、１アミノ酸が存在しない場合、前記アミノ酸のＮ末端側の全てのアミノ酸もまた存在しない。例えば、アミノ酸Ｘ１０が存在しないならば、アミノ酸Ｘ１１〜Ｘ１５もまた存在しない。
【００４０】
式（Ｉ）の特に好ましいペプチドは、Ｘ１がＶであるペプチドである。
【００４１】
Ｘ１をＶとして有する特に好ましいペプチドは、配列番号２のペプチドである。
【００４２】
実験セクションで実証されているように、本発明者らは、配列番号１のペプチドＨＡＰにおける最初のアミノ酸イソロイシンが、バリンによって置き換えられている、配列番号２のペプチドが、驚くべきことに、ＨＡＰと比較して、著しく異なる機能的および化学物理学的性質、加えて耐容性の向上を示すことを見出した。
【００４３】
特に、実施例で実証されているように、そのペプチドは、対応する配列番号１のペプチドと比較して、局所的および眼科的使用に特に有利である化学物理学的性質の向上、より高い透過性、ならびにＩＬ−１７Ａに対する親和性の増加を示す。また、本発明者らは、ペプチドＨＡＰが、それのＩＬ−１７Ａシグナル伝達への活性とは独立に、炎症性サイトカインの発現を誘導することにより角膜細胞への直接的毒性効果を発揮することを見出した。驚くべきことに、配列番号２のペプチドは、この効果を示さず、それゆえに、ＨＡＰと比較した、耐容性の向上によって特徴づけられる。
【００４４】
好ましくは、上記の式（Ｉ）のペプチドにおいて：
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、もしくはＬであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｒ、Ｋ、もしくはＥであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、もしくはＩであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｙ、もしくはＮであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、もしくはＶであり；
Ｘ６が、Ｐであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、もしくはＬであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、もしくはＱであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｗ、Ｆ、Ｖ、もしくはＩであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、もしくはＦであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、もしくはＦであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、もしくはＬであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｑ、もしくはＥであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｈ、もしくはＥであり；
ただし、前記配列が、ＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮＫ（配列番号１）ではないことを条件とし；
または
Ｘ１が、Ｉ、もしくはＶであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、もしくはＲであり；
Ｘ３が、Ｖ、もしくはＦであり；
Ｘ４が、Ｔ、もしくはＱであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、もしくはＶであり；
Ｘ６が、Ｐ、もしくはＧであり；
Ｘ７が、Ａ、もしくはＱであり；
Ｘ８が、Ｄ、もしくはＥであり；
Ｘ９が、Ｌであり；
Ｘ１０が、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ１１が、Ｄ、もしくはＥであり；
Ｘ１２が、Ｗであり；
Ｘ１３が、Ｉ、もしくはＶであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、もしくはＥであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、もしくはＥであり；
ただし、前記配列が、ＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮＫ（配列番号１）ではないことを条件とし；
または
Ｘ１が、Ｉ、もしくはＶであり；
Ｘ２が、Ｈ、もしくはＭ，
Ｘ３が、Ｖであり；
Ｘ４が、Ｔであり；
Ｘ５が、Ｉであり；
Ｘ６が、Ｐであり；
Ｘ７が、Ａであり；
Ｘ８が、Ｄであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｗ、Ｆ、Ｖ、もしくはＩであり；
Ｘ１０が、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ１１が、Ｄ、もしくはＥであり；
Ｘ１２が、Ｗであり；
Ｘ１３が、Ｉ、もしくはＶであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、もしくはＥであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、もしくはＥであり；
ただし、前記配列が、ＩＨＶＴＩＰＡＤＬＷＤＷＩＮＫ（配列番号１）ではないことを条件とし；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｍ、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｍ、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｎ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｈ、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤであり；
または
Ｘ１が、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、Ｌ、もしくはＰであり；
Ｘ２が、Ｍ、Ｋ、Ｒ、Ｅ、Ｑ、Ｗ、もしくはＹであり；
Ｘ３が、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｙ、もしくはＷであり；
Ｘ４が、Ｔ、Ｑ、Ｓ、Ｎ、もしくはＹであり；
Ｘ５が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、もしくはＹであり；
Ｘ６が、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、もしくはＮであり；
Ｘ７が、Ａ、Ｑ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、Ｖ、Ｉ、Ｎ、もしくはＥであり；
Ｘ８が、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、もしくはＹであり；
Ｘ９が、Ｌ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｉ、もしくはＨであり；
Ｘ１０が、Ｗ、Ｙ、Ｆ、もしくはＱであり；
Ｘ１１が、Ｄ、Ｅ、もしくはＮであり；
Ｘ１２が、Ｗ、Ｆ、Ｈ、もしくはＹであり；
Ｘ１３が、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、もしくはＹであり；
Ｘ１４が、Ｒ、Ｅ、Ｑ、もしくはＤであり；
Ｘ１５が、Ｒ、Ｅ、Ｖ、Ｗ、Ｈ、もしくはＤである。
【００４５】
上記のものの中で式（Ｉ）の特に好ましいペプチドは、Ｘ１がＶであるものである。
【００４６】
実験セクションで実証されているように、式（Ｉ）のペプチドにおける最初のアミノ酸がバリンである場合、そのペプチドは、驚くべきことに、局所的および眼科的使用に特に有利な化学物理学的性質、ならびにＩＬ−１７Ａに対する親和性の増加を示す。
【００４７】
好ましくは、上記の式（Ｉ）のペプチドにおいて、全てのアミノ酸Ｘ１〜Ｘ１５が存在する。
【００４８】
本発明による式（Ｉ）の好ましい個々のペプチドは、下記の表１に列挙されている。
【００４９】
【表１−１】
2021531309.tif 000003
【００５０】
【表１−２】
2021531309.tif 000004
【００５１】
【表１−３】
2021531309.tif 000005
【００５２】
【表１−４】
2021531309.tif 000006
【００５３】
【表１−５】
2021531309.tif 000007
【００５４】
【表１−６】
2021531309.tif 000008
【００５５】
【表１−７】
2021531309.tif 000009
【００５６】
本発明によるＩＬ−１７Ａの他のペプチド阻害剤は表１Ａのペプチドである。
【００５７】
【表２】
2021531309.tif 000010
【００５８】
本発明の第１の目的により、そのペプチドのＮ末端またはＣ末端にさらなるアミノ酸配列が付加され得る。
【００５９】
好ましい実施形態によれば、上記の式（Ｉ）または（ＩＩ）のペプチドは、それらのＮ末端および／またはＣ末端で、以下の式（ＩＩＩ）のアミノ酸配列を有するさらなるアミノ酸配列、配列Ａと結合している：
（ＩＩＩ）  Ｙ１−Ｙ２−Ｙ３−Ｙ４−Ｙ５−Ｙ６−Ｙ７−Ｙ８−Ｙ９−Ｙ１０−Ｙ１１−Ｙ１２−Ｙ１３−Ｙ１４−Ｙ１５−Ｙ１６
（式中：
Ｙ１が、Ａ、Ｔ、Ｖ、Ｋ、Ｒ、Ｉ、Ｌ、Ｘ、またはＧであり；
Ｙ２が、Ｒ、Ｗ、Ｐ、Ｅ、Ｑ、またはＡであり；
Ｙ３が、Ｋ、Ｗ、Ｇ、Ｔ、Ｉ、Ｒ、またはＰであり；
Ｙ４が、Ｋ、Ｔ、Ｅ、Ｗ、Ａ、Ｒ、Ｄ、Ｇ、Ｘ、またはＦであり；
Ｙ５が、Ａ、Ｅ、Ｔ、Ｇ、Ｗ、Ｉ、Ｒ、Ｐ、またはＶであり；
Ｙ６が、Ａ、Ｗ、Ｅ、Ｒ、Ｇ、Ｐ、または不在であり；
Ｙ７が、Ｋ、Ｓ、Ｗ、Ｔ、Ｆ、Ｒ、Ｖ、Ｇ、または不在であり；
Ｙ８が、Ａ、Ｑ、Ｗ、Ｒ、Ｇ、または不在であり；
Ｙ９が、Ｎ、Ｇ、または不在であり；
Ｙ１０が、Ｒ、または不在であり；
Ｙ１１が、Ｒ、または不在であり；
Ｙ１２が、Ｍ、または不在であり；
Ｙ１３が、Ｋ、または不在であり；
Ｙ１４が、Ｗ、または不在であり；
Ｙ１５が、Ｋ、または不在であり；
Ｙ１６が、Ｋ、または不在である）。
【００６０】
好ましくは、式（ＩＩＩ）の配列において、１個のアミノ酸が存在しない場合、前記アミノ酸のＮ末端側のアミノ酸もまた存在しない。例えば、アミノ酸Ｙ６が存在しないならば、アミノ酸Ｙ７〜Ｙ１６もまた存在しない。
【００６１】
本発明による式（ＩＩＩ）の好ましい配列は、下記の表２に列挙されている。
【００６２】
【表３】
2021531309.tif 000011
【００６３】
したがって、本発明の第２の目的は、本発明の第１の目的による式（Ｉ）または（ＩＩ）のペプチドの配列、ならびに前記配列のＣ末端および／またはＮ末端における上記のような配列Ａを含み、好ましくはそれらからなるアミノ酸配列を有するペプチドである。
【００６４】
アミノ酸配列の配列Ａは、式（Ｉ）または（ＩＩ）のペプチドのＮ末端とＣ末端の両方と結合し得る。そのような場合、前記ペプチドのＮ末端およびＣ末端と結合したその２つのアミノ酸配列、配列Ａは、同じまたは異なり得る。
【００６５】
あるいは、アミノ酸配列、配列Ａは、ペプチドのＮ末端かまたはＣ末端かのいずれかと結合し得る。
【００６６】
本発明のこの目的による好ましい個々のペプチドは、下記の表３に列挙されている。
【００６７】
【表４】
2021531309.tif 000012
【００６８】
上記の代替となる実施形態において、本発明の第１の目的による前記式（Ｉ）または（ＩＩ）のペプチドは、それらのＮ末端および／またはＣ末端で、アミノ酸配列（Ａ）ｍ（式中、Ａが、Ｒ、Ｋ、Ｇ、Ｅ、Ｑ、またはＡ、好ましくはＲ、Ｋ、Ｇ、Ｅ、またはＡから選択されるアミノ酸であり、ｍが１〜１０の間の整数である）と結合し得る。
【００６９】
アミノ酸配列（Ａ）ｍは、式（Ｉ）または（ＩＩ）のペプチドのＮ末端とＣ末端の両方と結合し得る。そのような場合、前記ペプチドのＮ末端およびＣ末端に付着したその２つのアミノ酸配列（Ａ）ｍは、同じまたは異なり得る。
【００７０】
あるいは、アミノ酸配列（Ａ）ｍは、前記ペプチドのＮ末端かまたはＣ末端のいずれかに付着し得る。
【００７１】
したがって、本発明の第３の目的は、本発明の第１の目的によるペプチドの配列、ならびに前記配列のＣ末端および／またはＮ末端における上記で定義されているような配列（Ａ）ｍを含み、好ましくはそれらからなるアミノ酸配列を有するペプチドである。
【００７２】
本発明のこの実施形態による好ましい個々のペプチドは、下記の表４に列挙されている。
【００７３】
【表５】
2021531309.tif 000013
【００７４】
特定の実施形態において、前記式（Ｉ）または（ＩＩ）のペプチドは、配列Ａという配列および配列（Ａ）ｍの両方と結合している。この場合、前記ペプチドは、それらのＮ末端および／またはＣ末端において、上記で定義されているようなアミノ酸配列（Ａ）ｍと結合し、前記アミノ酸配列（Ａ）ｍが、それのＮ末端および／またはＣ末端において、上記のようなアミノ酸配列、配列Ａと結合している。
【００７５】
したがって、本発明の第４の目的は、本発明の第１の目的によるペプチドの配列、前記配列のＣ末端および／またはＮ末端における上記のような配列（Ａ）ｍ、ならびに前記配列（Ａ）ｍのＣ末端および／またはＮ末端における上記のような配列Ａを含み、好ましくはそれらからなるアミノ酸配列を有するペプチドである。
【００７６】
本発明の上記の目的のいずれかによるペプチドの好ましい実施形態によれば、前記ペプチドは、Ｃ末端および／またはＮ末端で、分解を防ぐことができる保護的キャップ基と結合している。
【００７７】
当技術分野において通常の任意の保護的キャップ基が用いられ得る。
【００７８】
好ましくは、Ｃ末端に結合した保護的キャップ基は、アミド、好ましくはＮ−アルキルアミド、アルデヒド、エステル、好ましくはメチルエステルおよびエチルエステル、ｐ−ニトロアニリド、７−アミノ−４−メチルクマリンから選択される。
【００７９】
好ましくは、Ｎ末端と結合した保護的キャップ基は、アセチル、ホルミル、ピログルタミル、脂肪酸、尿素、カルバメート、スルホンアミド、アルキルアミンから選択される。
【００８０】
好ましくは、上記ペプチドは、Ｎ末端においてのみ、保護的キャップ基と結合している。より好ましくは、前記ペプチドは、Ｎ末端においてのみ保護的キャップ基と結合し、かつその保護的キャップ基はアセチルである。
【００８１】
結合親和性および阻害活性を増加させるために、本発明の異なる目的のいずれかによる上記のペプチドの、好ましくは本発明の第１の目的による式（Ｉ）または（ＩＩ）のペプチドの、二量体を調製することは特に有利である。
【００８２】
上記に従って、好ましくは、上記の本発明の異なる目的による上記のペプチド、好ましくは本発明の第１の目的による式（Ｉ）または（ＩＩ）のペプチド、より好ましくは本発明の第１の目的による式（Ｉ）のペプチドが、二量体の形をとって存在する。
【００８３】
したがって、本発明の第５の目的は、本発明の上記の目的のいずれかによる２つのペプチドにより形成される二量体である。好ましくは、前記ペプチドは、本発明の第１の目的による式（Ｉ）または（ＩＩ）のペプチドであり、より好ましくは、それらは、本発明の第１の目的による式（Ｉ）のペプチドである。
【００８４】
好ましくは、前記二量体は、前記二量体を形成する２つのペプチドが同一の配列を有する、ホモ二量体である。好ましくは、前記二量体において、そのペプチドは、スペーサー分子、好ましくはポリエチレングリコールスペーサーによって連結されている。
【００８５】
好ましくは、この実施形態によれば、ポリエチレングリコールは、本発明によるペプチドのＮ末端と、または式（Ｉ）の２つのペプチドのアミノ酸Ｘ４、Ｘ７、もしくはＸ１４と連結している。
【００８６】
さらなる実施形態によれば、保護的キャップ基の非存在下において、本発明の異なる目的によるペプチドが、好ましくはそれらのＣ末端および／またはＮ末端で、生体分子と結合して、バイオコンジュゲートを形成している。好ましくは、前記生体分子は、カプリン酸、カプロン酸、アスコルビン酸、ＮＡＧ−ＮＡＭ、ＮＡＧ、ＮＡＭ、ヒアルロン酸、アルギン酸、キチン、（ＧａｌＮＡｃ）２、Ｇａｌ−α１，３−ＧａｌＮＡｃ、およびトリガラクツロン酸から選択される。
【００８７】
生体分子は、ペプチドに特定の機能を加えるためか、またはペプチドの物理化学的性質を調節するためかのいずれかで、ペプチドと結合している。例えば、アスコルビン酸は、ペプチドへ抗酸化活性を与え、カプロン酸は、ペプチドの細胞膜へのアンカリングを助ける。
【００８８】
したがって、本発明の第６の目的は、本発明の異なる目的によるペプチド、好ましくは本発明の第１の目的による式（Ｉ）または（ＩＩ）のペプチド、より好ましくは本発明の第１の目的による式（Ｉ）のペプチド、および上記のような少なくとも１つの生体分子を含む、好ましくはそれらからなるバイオコンジュゲートである。
【００８９】
好ましくは、前記バイオコンジュゲートにおいて、前記生体分子は、前記ペプチドのＮ末端および／またはＣ末端と結合している。
【００９０】
この実施形態による好ましいバイオコンジュゲートは、下記の表５に列挙されている。
【００９１】
【表６】
2021531309.tif 000014
【００９２】
一実施形態によれば、上記バイオコンジュゲートにおいて、上記生体分子または保護的キャップ基は、ペプチドのＮ末端および／またはＣ末端と直接的に結合している。
【００９３】
一実施形態によれば、前記生体分子は、ペプチドのＮ末端およびＣ末端の両方と結合している。そのような場合、前記ペプチドのＮ末端およびＣ末端と結合した２つの生体分子は、同じまたは異なり得る。
【００９４】
代替の実施形態によれば、前記生体分子は、ペプチドのＮ末端かＣ末端のいずれかと結合している。
【００９５】
代替の実施形態によれば、上記の生体分子または保護的キャップ基は、ペプチドのＮ末端および／またはＣ末端と、リンカーによって連結されている。好ましくは、前記リンカーは、４−アミノ酪酸、β−アラニン、２−アミノエトキシ−酢酸、５−アミノ吉草酸、６−アミノカプロン酸、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸、１２−アミノ−４，７，１０−トリオキサドデカン酸、１５−アミノ−４，７，１０，１３−テトラオキサペンタ−デカン酸、およびトリオキサトリデカン−スクシナミン酸から選択される。好ましくは、リンカーが１個のアミノ酸リジンに付着している場合、前記リンカーは、ＮＨＳ−エステル、イソシアネート、フッ化ベンゾイル、またはカルバメートから選択される。
【００９６】
上記の異なる実施形態によれば、本発明は、上記の式（Ｉ）または（ＩＩ）のＩＬ−１７Ａ結合ペプチドを含み、またはそれからなり、かつ以下の式（ＩＶ）を有する化合物に関し：
（ＩＶ）  ［生体分子またはキャップ］ａ−［リンカー］ｂ−（配列Ａ）ｎ−Ａｍ−［ペプチド］−Ａ’ｍ’−（配列Ａ）ｎ’−［リンカー］ｂ’−［生体分子またはキャップ］ａ’
（式中、互いに独立に：
ａ＝０または１；
ｂ＝０または１；
ａ’＝０または１；
ｂ’＝０または１；
ｍ＝０〜１０；
ｍ’＝０〜１０；
ｎ＝０または５；
ｎ’＝０または５である）、
ならびに
ペプチドが、式（Ｉ）または式（ＩＩ）によるポリペプチドであり；
ＡまたはＡ’が、ｍ回またはｍ’回繰り返される、Ｒ、Ｋ、Ｇ、Ｅ、またはＡから選択される１個のアミノ酸であり；
および配列Ａが、上記の式（ＩＩＩ）の配列を含み；
生体分子が、互いに独立に、カプロン酸、アスコルビン酸、ＮＡＧ−ＮＡＭ、ＮＡＧ、ＮＡＭ、ヒアルロン酸、アルギン酸、キチン、（ＧａｌＮＡｃ）２、Ｇａｌ−α１，３−ＧａｌＮＡｃ、またはトリガラクツロン酸であり；
キャップが、互いに独立に、アミド、アルデヒド、エステル、ｐ−ニトロアニリド、７−アミノ−４−メチルクマリン、アセチル、ホルミル、ピログルタミル、または脂肪酸であり；
リンカーが、互いに独立に、４−アミノ酪酸、β−アラニン、２−アミノエトキシ−酢酸、５−アミノ吉草酸、６−アミノカプロン酸、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸、１２−アミノ−４，７，１０−トリオキサドデカン酸、１５−アミノ−４，７，１０，１３−テトラオキサペンタ−デカン酸、またはトリオキサトリデカン−スクシナミン酸である。
【００９７】
好ましい実施形態によれば、前記配列Ａは、式（Ｉ）または（ＩＩ）のペプチドのＮ末端またはＣ末端に付着している。
【００９８】
本発明による可能な化合物のいくつかの例は、本明細書の下記で報告されているが、式（ＩＶ）に含まれる全ての他の可能な組合せが存在し得る：
［生体分子またはキャップ］−［リンカー］−（配列Ａ）−Ａ−［ペプチド］−；
［生体分子またはキャップ］−（配列Ａ）−Ａ−［ペプチド］−；
［生体分子またはキャップ］−−Ａ−［ペプチド］−；
［生体分子またはキャップ］−［ペプチド］−；
−［ペプチド］−Ａｍ’−（配列Ａ）ｎ’−［生体分子またはキャップ］ａ’；
−［ペプチド］−Ａｍ’−［生体分子またはキャップ］ａ’；
−［ペプチド］−［生体分子またはキャップ］ａ’
【００９９】
好ましい実施形態によれば、本発明の式（ＩＶ）における生体分子は、アスコルビン酸、カプロン酸、ＮＡＧ、またはＮＡＭから選択される。
【０１００】
さらなる好ましい実施形態によれば、本発明によるキャップは、アミド、好ましくはＮ−アルキルアミド、アルデヒド、エステル、好ましくはメチルエステルおよびエチルエステル、ｐ−ニトロアニリド、７−アミノ−４−メチルクマリンから選択されるＣ末端修飾、またはアセチル、ホルミル、ピログルタミル、脂肪酸、好ましくはカプロン酸、尿素、カルバメート、スルホンアミド、もしくはアルキルアミンから選択されるＮ末端修飾であり、好ましくは、前記キャップは、アミド、カプロン酸などの脂肪酸、およびアセチルから選択される。
【０１０１】
本発明によれば、式（ＩＶ）における前記リンカー、生体分子、またはキャップは、同じ、または互いに異なり得る。
【０１０２】
本発明のさらなる好ましい実施形態において、式（ＩＶ）のリンカーは、４−アミノ酪酸、β−アラニン、２−アミノエトキシ−酢酸、５−アミノ吉草酸、またはトリオキサトリデカン−スクシナミン酸から選択される。
【０１０３】
好ましくは、リンカーが１個のアミノ酸リジンに付着している場合、前記リンカーは、ＮＨＳ−エステル、イソシアネート、フッ化ベンゾイル、またはカルバメートから選択される。
【０１０４】
本発明の第７の目的は、上記のような、本発明の目的による前記ペプチド、二量体、またはバイオコンジュゲート、および少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を含む薬学的組成物である。
【０１０５】
本発明の薬学的組成物は、局所的または眼科的投与に適している形で製剤化され得る。
【０１０６】
好ましくは、本発明の薬学的組成物の投与が局所的経路によって実施される場合、剤形は、クリーム、軟膏（ointment）、ゲル、軟膏（salve）、溶液、洗浄液、懸濁液、点滴剤、バッファー（バッファー溶液）、懸濁液、点眼剤、点滴剤、スプレー、ワイプ、または粉末から選択され、好ましくは、それは、クリーム、ゲル、スプレー、または軟膏（ointment）から選択される。
【０１０７】
眼科的投与の間では、剤形は、好ましくは、点眼剤、眼科用ゲル、軟膏（ointment）、洗浄液、ワイプ、スプレー、またはクリームから選択される。
【０１０８】
特定の実施形態によれば、本発明のペプチドまたはバイオコンジュゲートは、マイクロ粒子またはナノ粒子を用いることにより局所投与される。
【０１０９】
本発明によれば、本発明の薬学的組成物は、成人としておよび「小児科集団」として定義された動物およびヒトに投与することができ、その用語「小児科集団」は、０歳から１８歳までの集団の一部を示す。
【０１１０】
本発明の第８の目的は、炎症性および自己免疫性疾患の処置および／または予防における使用のための本発明による上記のペプチド、二量体、またはバイオコンジュゲートである。
【０１１１】
本発明の第９の目的は、炎症性および自己免疫性疾患の処置および／または予防のための方法であって、それを必要としている患者へ本発明による上記のペプチド、二量体、またはバイオコンジュゲートの治療的有効量を投与するステップを含む方法である。
【０１１２】
好ましくは、前記炎症性および自己免疫性疾患は、関節リウマチ、多発性硬化症、クローン病、全身性エリテマトーデス、喘息、ベーチェット病、高ＩｇＥ症候群、強直性脊椎炎、乾癬、乾癬性関節炎、関節リウマチ、乾性角結膜炎、春季角結膜炎、間質性ヘルペス性角膜炎、角膜同色移植片拒絶、角膜感染症、好ましくは、ヘルペスウイルスおよびシュードモナス・エルジーノサ（Pseudomonas aeruginosa）角膜炎、ならびにドライアイ疾患から選択される。より好ましくは、前記疾患は、自己免疫性眼科的または皮膚科的疾患であり、さらにより好ましくは、それはドライアイ疾患または乾癬である。
【０１１３】
上記の特定の疾患および医学的状態の全ては、それらの起源および／または症状がＩＬ−１７Ａおよび／またはＴｈ−１７関連であるという共通点をもつ。
【０１１４】
後者のドライアイ疾患（ＤＥＤ）についてより具体的には、広範囲の眼表面障害、眼粘膜炎を含む高度に蔓延している状態が、炎症誘発性角膜潰瘍および瘢痕による、制御できない場合には視力喪失をもたらす可能性がある特異な特性である。ＤＥＤの進行において、病原性免疫細胞、主にＴｈ１７細胞は、眼粘膜表面へ持続的に遊走し、ＩＬ−１７を含む炎症促進性メディエーターを分泌し、眼表面炎症および上皮症を引き起こす。
【０１１５】
本発明のペプチド、二量体、またはバイオコンジュゲートは、便利にかつ好ましくは、点眼剤または眼科的ゲルおよび軟膏（ointment）として局所的に投与される。
【０１１６】
さらなる実施形態において、本発明による使用のためのペプチド、二量体、またはバイオコンジュゲートは、唯一の活性成分として、またはさらなる活性成分と組み合わせて、および／もしくは非限定的にＤＥＤを含む眼科的状態の対症療法のための医療デバイス、例えば、眼潤滑剤または「人工涙液」、局所的再上皮化剤、治療用コンタクトレンズ、および涙点プラグと組み合わせて、投与される。
【０１１７】
好ましくは、前記さらなる活性成分は、アジュバント、免疫抑制剤、免疫調節剤、または抗炎症剤である。
【０１１８】
例えば、本発明のＩＬ−１７Ａ結合ペプチドは、ＤＭＳＯと組み合わせて用いられ得る。
【０１１９】
好ましい実施形態によれば、本発明のＩＬ−１７Ａ結合ペプチドは、免疫抑制性モノクローナル抗体、例えば、ＭＨＣ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ５８、ＣＤ８０、ＣＤ８６から選択される白血球受容体もしくはそれらのリガンドに対する親和性を有するモノクローナル抗体；他の免疫調節性化合物、好ましくは、ＣＴＬＡ４の細胞外ドメインまたはその変異体の少なくとも一部分を有する組換え結合分子、非ＣＴＬＡ４タンパク質配列と連結された、ＣＴＬＡ４の少なくとも細胞外部分またはその変異体、例えば、ＡＴＣＣ  ６８６２９と名づけられたＣＴＬＡ４ｌｇまたはその変異体、例えば、ＬＥＡ２９Ｙ；接着分子阻害剤、ＬＦＡ−Ｉアンタゴニスト、ＩＣＡＭ−Ｉまたは−３アンタゴニスト、ＶＣＡＭ−４アンタゴニストまたはＶＬＡ−４アンタゴニストと組み合わせて用いられ得る。
【０１２０】
さらなる好ましい実施形態において、本発明のＩＬ−１７Ａ結合ペプチドは、ＤＭＡＲＤ（疾患修飾性抗リウマチ薬）、好ましくは、金塩、スルファサラジン、抗マラリア薬、メトトレキサート、Ｄ−ペニシラミン、アザチオプリン、ミコフェノール酸、サイクロスポリンＡ、タクロリムス、シロリムス、ミノサイクリン、レフルノミド、グルココルチコイド；カルシニューリン阻害剤、好ましくは、サイクロスポリンＡまたはＦＫ  ５０６；リンパ球再循環のモジュレーター、好ましくは、ＦＴＹ７２０およびＦＴＹ７２０アナログ；ｍＴＯＲ阻害剤、好ましくは、ラパマイシン、４０−Ｏ−（２−ヒドロキシエチル）−ラパマイシン、ＣＣＩ７７９、ＡＢＴ５７８、ＡＰ２３５７３、またはＴＡＦＡ−９３；免疫抑制性を有するアスコマイシン、好ましくは、ＡＢＴ−２８１、ＡＳＭ９８１；コルチコステロイド；シクロホスファミド；アザチオプレン（azathioprene）；メトトレキサート；レフルノミド；ミゾリビン；ミコフェノール酸；ミコフェノール酸モフェチル；１５−デオキシスパガリンまたはそれの免疫抑制性ホモログ、アナログ、もしくは誘導体；または化学療法剤、好ましくは、パクリタキセル、ゲムシタビン、シスプラチナム、ドキソルビシンまたは５−フルオロウラシル；抗ＴＮＦ剤、好ましくは、ＴＮＦに対するモノクローナル抗体、好ましくは、インフリキシマブ、アダリムマブ、ＣＤＰ８７０、またはＴＮＦ−ＲＩもしくはＴＮＦ−ＲＩＩに対する受容体構築物、好ましくは、エタネルセプト、ＰＥＧ−ＴＮＦ−ＲＩ；炎症促進性サイトカインの遮断薬、ＩＬ−１遮断薬、好ましくは、アナキンラまたはＩＬ−１トラップ、ＡＡＬ１６０、ＡＣＺ８８５、ＩＬ−６遮断薬；プロテアーゼ、好ましくはメタロプロテアーゼの阻害剤または活性剤、抗ＩＬ−１５抗体、抗ＩＬ−６抗体、抗ＩＬ−２３抗体、抗ＩＬ−２２抗体、抗ＩＬ−２１抗体、抗ＩＬ−１２抗体、抗ＩＦＮ−γ抗体、抗ＩＦＮ−α抗体、抗ＣＤ２０抗体、抗炎症剤、好ましくはアスピリン、または抗感染剤と組み合わせて用いられる。
【０１２１】
当然ながら、同時投与のための作用物質のこのリストは、限定的でも完全でもない。
【０１２２】
本発明のさらなる目的は、上記の炎症性および自己免疫性疾患の処置および／または予防における使用のための表６に列挙されたペプチドのうちの１つである。
【０１２３】
【表７−１】
2021531309.tif 000015
【０１２４】
【表７−２】
2021531309.tif 000016
【０１２５】
本発明によるペプチドの投与の量およびモードは、本発明の特定のペプチド阻害剤、個々の患者群または患者、さらなる医学的活性化合物の存在、ならびに処置されることになっている状態の性質および重症度によって変わる。
【０１２６】
好ましい実施形態によれば、予防的および／または治療的使用量は、約５〜５０μｇ／ｍｌ、好ましくは約１０〜２５μｇ／ｍｌである。
【０１２７】
好ましくは、予防的および／または治療的使用のための投与の頻度は、１日約１回〜２回の適用の範囲にあり、好ましくは１回である。
【０１２８】
本発明は、以下の実施例における実例としてさらに記載され、それらのいずれも、添付された特許請求の範囲に概要を示されているような本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。
【実施例】
【０１２９】
[実施例１]
ペプチド合成および精製：
本発明者らは、入手可能な結晶学的データ（ＰＤＢ  ５ｈ１３、ＰＤＢ  ５ｖｂ９、およびＰＤＢ  ４ｈｓａ）（Liu et al. Nat Commun 2013, 4, 1888、Liu et al. Sci Rep 2016, 6: 30859、Liu et al. Sci Rep 2016, 6, 26071、Ting, Tung et al. Plos One 2018, 13(1): e01908502018）の使用によりＩＬ−１７Ａの相同性モデルを開発した。本発明者らのモデルにおいて、本発明者らはまた、Ｓｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒ  Ｍａｅｓｔｒｏマクロモデルパッケージソフトに実装されているようなＤｅｓｍｏｎｄソフトウェアで実施される分子動力学シミュレーションを通して、その結晶において解像されていないループおよび最適化モデルを再創造した。全ての分子シミュレーションは、システム安定性を保証するために１マイクロ秒間で実行された。
【０１３０】
ＩＬ−１７Ａ  α−ポケットの構造および性質に基づいて、ｉ）ＩＬ−１７Ａに、最適化タンパク質結合部位を占有して結合する安定な二次および三次立体構造、ならびにｉｉ）眼科的および皮膚科的病態における局所的使用に適した物理化学的性質を得るように、異なるペプチド配列が設計されている（Liu et al. Nat Commun 2013, 4, 1888、Espada et al J Med Chem 2016, 59(5), 2255-2260）。
【０１３１】
追加として、本発明者らは、水素結合の導入および疎水性相互作用の最適化によりリガンド−ＩＬ−１７Ａの相互作用を最適化した。
【０１３２】
ａ．Ｆｍｏｃに基づいた固相ペプチド合成
全ての化学物質を購入し、さらなる精製なしに使用した。
【０１３３】
表１の配列番号１〜４３および１１１〜２５７のペプチドを、下記のように、固体担体としてＲｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ−ＭＢＨＡ樹脂において、手動または自動固相ペプチド合成により調製し、Ｎ末端アミンをアセチル基でキャップした。
【０１３４】
Ｎα保護のために用いられたＦｍｏｃ（９−フルオレニルメトキシカルボニル）基を、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中２０％ピペリジンでの８分間の処理、続いて、同じ試薬での１０分間のさらなる処理により切断した。Ｆｍｏｃ切断後、ペプチド−樹脂複合体を、ＤＭＦで洗浄した（×６）。その後、次の残基を、１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）／Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ）カップリングプロトコール［Ｆｍｏｃ−アミノ酸（３当量）、ＨＡＴＵ（３当量）、およびＤＩＰＥＡ（６当量）］の使用により取り込んだ。穏やかな撹拌（１時間）およびＤＭＦでの洗浄（×６）後、ペプチド−樹脂の一部を、Ｋａｉｓｅｒ試験によって分析した。アセンブリの完了後、ペプチド−樹脂を、ＤＭＦ（×３）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）（×４）で洗浄し、その後、真空中で乾燥させた。
【０１３５】
切断および脱保護
前記ペプチドを、樹脂から切断し、必要な場合、トリフルオロ酢酸／１，２−エタンジチオール／チオアニソール／フェノール／Ｈ２Ｏ／トリイソプロピルシランの６８．５／１０／１０／５／３．５／１  ｖ／ｖの比での混合物を切断溶液として用いることにより脱保護した。１００ｍｇの樹脂あたり３ｍｌの切断溶液を用いた。完全な脱保護は、３０℃で４時間の撹拌下で達成された。切断反応後、混合物におけるペプチドを、冷たいジエチルエーテル中に沈殿させ、５０℃、真空中で乾燥させた。
【０１３６】
ｂ．ペプチド４１におけるジスルフィド結合形成
表１の配列番号４１のペプチドにおけるジスルフィド結合形成は、そのペプチドの混合物ＤＭＳＯ／Ｈ２Ｏ（２０／８０、ｖ／ｖ）におけるインキュベーションにより得られ、それは、ＲＰ−ＨＰＬＣ、ＭＳ、および遊離スルフヒドリル検出（ＤＴＮＢ方法）によりモニターされた。
【０１３７】
ｃ．調製用ＲＰ−ＨＰＬＣによる精製および分析用ＨＰＬＣによる精製評価
粗ペプチド試料を、Ｃ１８カラム（１０μｍ、１００Å、５０×２５０ｍｍ）を用いた調製用ＲＰ−ＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ）により精製した。２５ｍＬ／分の流速における溶媒Ａ（水中０．１％ＴＦＡ、２％ＣＨ３ＣＮ）および溶媒Ｂ（９０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）からなる溶媒系を溶出のために用い、吸光度を２２０ｎｍで検出した。溶媒を凍結乾燥により除去した。最終産物を、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳにより特徴づけ、その材料の純度を分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｃ１８  −  ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ  Ｉ．Ｄ．、１ｍＬ／分の流速）により評価し、吸光度を２２０ｎｍで検出した。
【０１３８】
[実施例２]
ＮＡＭおよび／またはＮＡＧバイオコンジュゲート化ペプチドＢＩＯ−１、ＢＩＯ−２、およびＢＩＯ−３の調製
バイオコンジュゲート化ペプチドＢＩＯ−１、ＢＩＯ−２、およびＢＩＯ−３を、以下の手順に従って、ペプチド４２または４３のコンジュゲーション反応により調製した。
【０１３９】
１．供与体および受容体の調製
全ての反応を、Ｎ２雰囲気下で実施した。ＮＭＲスペクトルを、Ｂｒｕｃｋｅｒ  ４００  ＭＨｚ機器において実行した。ＨＰＬＣ−ＵＶ分析は、Ｇ１３１１Ｂ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １２６０クォータナリポンプ、Ｇ１３２９Ｂ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １２６０オートサンプラー、Ｇ１３１５Ｃ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １２６０ダイオードアレイ検出器、およびＧ１３１６Ａ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １２６０カラムサーモスタットモジュールを備えたＡｇｉｌｅｎｔ  １２６０  Ｉｎｆｉｎｉｔｙシステムにおいて得られた。Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ＧＥＭＩＮＩ  Ｃ１８  １５０×４．６ｍｍ２（５μｍ）カラムを用いた。移動相Ａは、１．０ｍＬ／分での流速での、０．０５％ＴＦＡを含むＭｉｌｌｉＱ水であり、Ｂは、０．０５％ＴＦＡを含むＨＰＬＣグレードのアセトニトリルであった。ＨＰＬＣシステムは、ポジティブイオンモードで操作されるＡｇｉｌｅｎｔ四重極６１２０  ＬＣ／ＭＳ質量分析計と連結された。イオンは、エレクトロスプレーイオン化イオン源を用いて生成された。取得データは、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｃｈｅｍｓｔａｔｉｏｎソフトウェアで処理された。
【０１４０】
ａ．１−（２，２，２−トリクロロアセチミン（Trichloroacetimine））２−デオキシ−３−Ｏ−アセチル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−（２，２，２−トリ−クロロエトキシカルボニルアミノ）−ａ−Ｄ−グルコピラノシド（供与体）の合成
塩化トリクロロエトキシカルボニル（２．１ｍＬ、１５．３ｍｍｏｌ）を、水（３０ｍＬ）中塩酸Ｄ−グルコサミン（３ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（３．５ｇ、４１．７ｍｍｏｌ）の激しく撹拌された溶液へ室温で滴下した。その混合物を２時間、撹拌し、その後、１Ｍ  ＨＣｌで中和し、濃縮し、真空中で乾燥させた。２−デオキシ−２−（２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ）−ａ−Ｄ−グルコピラノシド（中間体Ａ）を得た。
【０１４１】
得られた粗生成物を、さらなる精製なしで次の反応段階に直接、用いた。
【０１４２】
詳細には、塩化亜鉛（１．９ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）を、ベンズアルデヒド（２４ｍｌ）中の中間体Ａ（４．９ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）の溶液およびモレキュラーシーブ４Å（４Å  ＭＳ、６００ｍｇ）に加えた。室温で一晩、撹拌後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（３０ｍＬ）およびジエチルエーテル（９０ｍＬ）を加え、その反応混合物を１５分間、撹拌した。形成された沈殿物を濾過し、水、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥させた。その残留物をピリジン（１３ｍＬ）中に溶解し、０℃へ冷却し、無水酢酸（６．４ｍＬ、６８ｍｍｏｌ）で処理し、室温で一晩、撹拌し、その後、その溶液をトルエンで濃縮し、０℃へ冷却し、ＤＣＭおよび飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で抽出し（３×）、その後、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄した。合わせた有機層を乾燥させ、濃縮し、その粗生成物を、Ｉｓｏｌｅｒａ（ＥｔＰｅｔ／ＥｔＯＡｃ）により精製して、白色固体として１，３−ジ−Ｏ−アセチル  ２−デオキシ−４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−（２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ）−ａ−Ｄ−グルコピラノシド（中間体Ｂ）（３．０５ｇ、４１．７％収率）を得た。
【０１４３】
その後、モルホリン（１．２ｍＬ、１３．９ｍｍｏｌ）を、乾燥酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）（１２．２ｍＬ）中の中間体Ｂ（３．０５ｇ、５．８ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。室温で一晩、撹拌後、その反応混合物を、３Ｎ  ＨＣｌ溶液（３．５ｍＬ）で急冷し、その後、２０分間、撹拌し、ＥｔＯＡｃで抽出し、水、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、および飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、乾燥させ、濃縮した。その粗生成物を、Ｉｓｏｌｅｒａ（ＥｔＰｅｔ／ＥｔＯＡｃ）により精製して、白色固体として２−デオキシ−３−Ｏ−アセチル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−（２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ）−ａ−Ｄ−グルコピラノシド（中間体Ｃ）を得た（２．２ｇ、７８．４％）。ｄｒｙ  ＤＣＭ（４４ｍｌ）中の中間体Ｃ（２．２ｇ、４．５４ｍｍｏｌ）の溶液へ、Ｃｓ２ＣＯ３（６８０ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）およびＣＣｌ３ＣＮ（４．４ｍＬ、４３．８ｍｍｏｌ）を加えた。その反応混合物を、室温で２時間、撹拌し、その後、セライトに通して濾過し、濃縮して、淡黄色固体として１−（２，２，２−トリクロロアセチミン）２−デオキシ−３−Ｏ−アセチル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−（２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ）−ａ−Ｄ−グルコピラノシド（供与体）を得た（２．２ｇ、７７％）。
【０１４４】
ｂ．１，６−ジ−Ｏ−ベンジル  ２−デオキシ−３−Ｏ−（（Ｒ）−１０−エトキシカルボニルエチル）−２−（２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ）−ａ−Ｄ−グルコピラノシド（受容体）の合成
クロロギ酸アリル（６．６ｍＬ、６２．２ｍｍｏｌ）を、水（６１ｍＬ）中塩酸Ｄ−グルコサミン（１２．２ｇ、５６．６ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（１４．３ｇ、１６９．７ｍｍｏｌ）の激しく撹拌された溶液に室温で滴下した。その混合物を、２時間、撹拌し、その後、１Ｍ  ＨＣｌで中和し、濃縮し、真空中で乾燥させた。粗２−デオキシ−２−（アリルオキシカルボニルアミノ）−ａ−Ｄ−グルコピラノシド（中間体Ｄ）が得られた。その生成物を、さらなる精製なしで次の反応段階に用いた。中間体Ｄ（１４．９ｇ、５６．６ｍｍｏｌ）を、ベンジルアルコール（８９ｍＬ）中に溶解し、塩化アセチル（１５．４ｍＬ、２１５．２ｍｍｏｌ）を、０℃で滴下した。８０℃で３時間の撹拌後、その反応混合物を、冷たい飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２０ｍｌ）で急冷し、さらに３０分間、撹拌した。冷たい水およびジエチルエーテルを加え、その反応混合物を、３０分間、撹拌した。その２つの相を分離させ、水相を濃縮し、真空中で乾燥させた。３０ｍｌの水および２００ｍｌのエチルエーテルを、沈殿物の形成まで加え、その沈殿物を、濾過し、冷たいジエチルエーテルで数回、洗浄した（ベンジルアルコールの痕跡が全く検出されなくなるまで）。ベンジル  ２−デオキシ−２−（アリルオキシカルボニルアミノ）−ａ−Ｄ−グルコピラノシド（中間体Ｅ）が白色固体として得られ（１１ｇ、５５％）、さらなる精製なしで次の反応段階に直接、用いた。塩化亜鉛（４．２ｇ、３１．１ｍｍｏｌ）を、ベンズアルデヒド（５５ｍＬ）中の中間体Ｅ（１１ｇ、３１．１ｍｍｏｌ）の溶液および４Å  ＭＳ（４．９ｇ）に加えた。２時間後、さらに塩化亜鉛（４．２ｇ、３１．１ｍｍｏｌ）を加えた。室温で一晩、撹拌後、その反応混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（７０ｍＬ）、石油エーテル（４２０ｍＬ）で処理し、１０分間、撹拌した。その沈殿物を濾過し、石油エーテルで洗浄し、ＤＣＭ中に溶解した。その有機溶液を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水、および飽和ＮａＣｌ溶液で抽出し、乾燥させ、濃縮した。その粗生成物をＩｓｏｌｅｒａ（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ）により精製して、白色固体としてベンジル  ２−デオキシ−４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−（アリルオキシカルボニルアミノ）−ａ−Ｄ−グルコピラノシド（中間体Ｆ）を得た（２．７５ｇ、２０％）。
【０１４５】
０℃に冷却されたｄｒｙ  ＤＣＭ（４０．６ｍＬ）中の中間体Ｆ（２．７５ｇ、６．２ｍｍｏｌ）の溶液へ、水素化ナトリウム（ＮａＨ、３４８．８ｍｇ、８．７ｍｍｏｌ、６０％油分散）を加え、その混合物を、室温で３０分間、撹拌した。その後、その混合物を、原液の（−）−エチル  （Ｓ）−２−トリフルオロメタンスルホニルプロピオネートの滴下で処理し、室温で２時間、撹拌した。その反応混合物を、氷の添加により急冷し、ＤＣＭで抽出した。有機溶液を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、乾燥させ、濃縮した。その残留物を、Ｉｓｏｌｅｒａ（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ）により精製して、白色固体としてベンジル  ２−デオキシ−３−Ｏ−（（Ｒ）−１０−エトキシカルボニルエチル）−４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−（アリルオキシ−カルボニルアミノ）−ａ−Ｄ−グルコピラノシド（中間体Ｇ）を得た（２．３５ｇ、６９．７％）。
【０１４６】
テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１．５ｇ、１．３ｍｍｏｌ）および酢酸（ＡｃＯＨ、０．３８５ｍＬ、６．７２５ｍｍｏｌ）を、ｄｒｙ  ＤＣＭ（４２．７ｍＬ）中の中間体Ｇ（２．３５ｇ、４．３４ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。その反応混合物を、室温で１５分間、撹拌し、その後、クロロギ酸２，２，２−トリクロロエチル（ＴｒｏｃＣｌ、１．２２４ｍＬ、８．８９５ｍｍｏｌ）を滴下し、生じた溶液を、室温で１時間、撹拌した。その反応混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で急冷し、ＤＣＭで抽出し、Ｈ２Ｏおよび飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄した。真空中での濃縮後、その残留物を、ジエチルエーテル（１００ｍｌ）中に溶解し、不溶性材料を濾過して取り除いた。有機層を乾燥させ、濃縮し、Ｉｓｏｌｅｒａ（シクロヘキサン／ＡｃＯＥｔ）により精製して、白色固体としてベンジル  ２−デオキシ−３−Ｏ−（（Ｒ）−１０−エトキシカルボニルエチル）−４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−（２，２，２−トリ−クロロエトキシカルボニルアミノ）−ａ−Ｄ−グルコピラノシド（中間体Ｈ）を得た（２．３ｇ、８３．７％）。
【０１４７】
０℃でのｄｒｙ  ＣＨ３ＣＮ（３８ｍＬ）中の中間体Ｈ（２．４ｇ、３．８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ３ＣＮ（２．２ｍＬ）中のＭｅ３Ｎ−ＢＨ３（３３２ｍｇ、４．５５ｍｍｏｌ）の溶液を加え、続いて、ＣＨ３ＣＮ（８ｍＬ）中のＢＦ３−ＯＥｔ２（２．８９ｍＬ、２３．４ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。０℃で３時間の撹拌後、その混合物を、冷たい飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３０ｍＬ）で急冷し、ＥｔＯＡｃ（３５０ｍｌ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍｌ）、５％クエン酸（４×５０ｍｌ）、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）、および飽和ＮａＣｌ溶液（４０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ、濃縮し、その粗生成物をＩｓｏｌｅｒａ（シクロヘキサン／ＡｃＯＥｔ）で精製して、無色の泡として、１，６−ジ−Ｏ−ベンジル  ２−デオキシ−３−Ｏ−（（Ｒ）−１０−エトキシカルボニルエチル）−２−（２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ）−ａ−Ｄ−グルコピラノシド（受容体）を得た（１．２ｇ、４９．８％）。
【０１４８】
２．ＮＡＧ−ＮＡＭコンジュゲート化ペプチドＢＩＯ−３の合成
４Åモレキュラーシーブ（２００ｍｇ）と共にｄｒｙ  ＤＣＭ（５５ｍＬ）中に懸濁した、供与体（１．６ｇ、２．６ｍｍｏｌ）および受容体（１．１ｇ、１．７３ｍｍｏｌ）を、−１５℃において、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（ＴＭＳＯＴｆ、１８８μＬ、１．０４ｍｍｏｌ）で処理した。２０分間の撹拌後、さらに０．７５当量の供与体および０．３当量のＴＭＳＯＴｆを加えた。２０分間の撹拌後、さらに０．７５当量の供与体および０．３当量のＴＭＳＯＴｆを加えた。その後、その混合物を、ＮａＨＣＯ３の冷たい飽和溶液（１５ｍＬ）で急冷し、ＤＣＭ（６０ｍＬ）で抽出した。有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液および飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、乾燥させ、濃縮した。その残留物を、Ｉｓｏｌｅｒａ逆相（Ｈ２Ｏ／ＡＣＮ中性相）により精製して、白色の泡として、ベンジル  ６−Ｏ−ベンジル−４−Ｏ−［２−デオキシ−３−Ｏ−アセチル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−（２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ）−ｂ−Ｄ−グルコピラノシル］−２−デオキシ−３−Ｏ−［（Ｒ）−１’−エトキシカルボニルエチル］−２−（２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ）−ａ−Ｄ−グルコピラノシド（中間体Ｌ）を得た（１．２ｇ、６２．９％）。
【０１４９】
混合物ＡｃＯＨ／Ａｃ２Ｏ／ＴＨＦ  １：１：１（１２ｍＬ）中の中間体Ｌ（１．２ｇ、１．０９ｍｍｏｌ）および亜鉛−銅カップル（３．１２ｇ、２４．２ｍｍｏｌ）の溶液を室温で４時間、撹拌した。その反応混合物をセライトに通して濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、濃縮した。その粗生成物を、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（シクロヘキサン／ＡｃＯＥｔ）により精製して、白色固体として、ベンジル  ６−Ｏ−ベンジル−４−Ｏ−［２−デオキシ−３−Ｏ−アセチル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−アセチルアミノ−ｂ−Ｄ−グルコピラノシル］−２−デオキシ−３−Ｏ−［（Ｒ）−１０−エトキシカルボニルエチル］−２−アセチルアミノ−ａ−Ｄ−グルコピラノシド（中間体Ｍ）を得た（５６０ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ、６１．６％）。ＨＰＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ：Ｃ４４Ｈ５４Ｎ２Ｏ１４＋Ｎａ：８５７．３４７２。実測値：８５７．６１２４。
【０１５０】
ＴＨＦ／１，４−ジオキサン／Ｈ２Ｏ  ４：２：１（２．８ｍＬ）中の中間体Ｍ（９１ｍｇ、０．１０９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（５６ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）を加えた。室温で２時間の撹拌後、その反応混合物を（１Ｎ  ＨＣｌで新鮮に活性化された）Ｄｏｗｅｘ  Ｈ＋に通して濾過した。その残留物を、水、ＭｅＯＨ、および水で予め洗浄されたｄｉａｉｏｎ  ＨＰ−２０カラムクロマトグラフィー（２×７ｃｍ）により精製した。カラムを、最初、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）で、その後、ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）で溶出した。アルコール画分を濃縮して、白色固体として、ベンジル  ６−Ｏ−ベンジル−４−Ｏ−［２−デオキシ−４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−アセチルアミノ−ｂ−Ｄ−グルコピラノシル］−２−デオキシ−３−Ｏ−［（Ｒ）−１０−エトキシカルボニルエチル］−２−アセチルアミノ−ａ−Ｄ−グルコピラノシド（中間体Ｎ）を得た（５７．４ｍｇ、６９％）。Ｍｐ  １０２〜１０５℃、１ＨＮＭＲ（６００  ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）  δＨ  ７．５１〜７．２７（ｍ，１５Ｈ，ＡｒＨ）、５．５９（ｓ，１Ｈ，ＣＨＰｈ）、５．３６（ｄ，Ｊ  ３．１Ｈｚ，Ｈ−１）、４．８５（ｍ）Ｈ２Ｏ、Ｈ−１０、１／２  ＣＨ２Ｐｈ）、４．６６〜４．５７（ｍ，３Ｈ，Ｊ  １２．１Ｈｚ，ＣＨＣＨ３，ＣＨ２−Ｐｈ）、４．４６（ｄ，１Ｈ，Ｊ  １２．２Ｈｚ，１／２ＣＨ２Ｐｈ）、４．２９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ  １０．３Ｈｚ，Ｊ  ５．０Ｈｚ，Ｈ−６０ｂ）、４．０７（ｔ，１Ｈ，Ｊ  ９．６Ｈｚ，Ｈ−３０）、３．９５（ｔ，１Ｈ，Ｊ  ９．１Ｈｚ，Ｈ−４）、３．８２〜３．７７（ｍ，２Ｈ，Ｈ−６ｂ，Ｈ−３）、３．７２〜３．６２（ｍ，３Ｈ，Ｈ−６０ａ，Ｈ−５，Ｈ−６ａ）、３．５５〜３．４０（ｍ，３Ｈ，Ｈ−２０，Ｈ−４０，Ｈ−２）、３．３０〜３．２７（ｍ，１Ｈ，Ｈ−５０）、１．９８（ｓ，３Ｈ，ＣＯＣＨ３）、１．９６（ｓ，３Ｈ，ＣＯＣＨ３）、１．３７（ｄ，Ｊ  ６．９Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨＣＨ３）。ＨＰＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ：Ｃ４０Ｈ４８Ｎ２Ｏ１３＋Ｎａ：７８７．３０５４  実測値：７８７．７８３０。
【０１５１】
配列番号４２のペプチドを、アミノ酸カップリングに用いられる条件において、化合物Ｎとカップリングさせ、生じたバイオコンジュゲートを固体担体からトリフルオロ酢酸（ＤＣＭ中１％溶液）での処理により切断した。生じたバイオコンジュゲート（０．０２６ｍｍｏｌ）を酢酸（８ｍＬ）に溶解し、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（５８ｍｇ）を加えた。生じた混合物を、水素雰囲気下、室温で６時間、撹拌した。その混合物をセライトに通して濾過し、濃縮して、定量的収率でバイオコンジュゲートＢＩＯ−３を得た。
【０１５２】
切断溶液として６８．５／１０／１０／５／３．５／１、ｖ／ｖの比でのトリフルオロ酢酸／１，２−エタンジチオール／チオアニソール／フェノール／Ｈ２Ｏ／トリイソプロピルシランの混合物を用いることにより、そのバイオコンジュゲートを樹脂から切断し、最後の残基を脱保護した。樹脂の１００ｍｇあたり３ｍｌの切断溶液を用いた。完全な脱保護は、３０℃において４時間後、達成された。切断反応後、その粗ペプチドを、冷たいジエチルエーテルの添加により沈殿させ、５０℃、真空中で乾燥させた。
【０１５３】
その粗バイオコンジュゲートを、Ｃ１８カラム（１０μｍ、１００Å、５０×２５０ｍｍ）を用いた調製用ＲＰ−ＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ）により精製した。２５ｍＬ／分の流速での、溶媒Ａ（Ｈ２Ｏ中０．１％ＴＦＡ、２％ＣＨ３ＣＮ）および溶媒Ｂ（９０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）からなる溶媒混合物を溶出に用い、吸光度を２２０ｎｍで検出した。その溶媒を凍結乾燥により除去し、最終生成物をＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳにより特徴づけた。その精製された材料の純度を、分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｃ１８  −  ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ  Ｉ．Ｄ．、１ｍＬ／分の流速）により評価し、吸光度を、２２０ｎｍで検出した。
【０１５４】
３．ＮＡＧおよびＮＡＭバイオコンジュゲートＢＩＯ−１およびＢＩＯ−２の合成
Swaminathan et al., Proc Natl Acad Sci USA. 2006, 17;103 (3):684-9に記載された手順により、ＮＡＭ−ペプチドおよびペプチド−ＮＡＧの合成を、ペプチドアンカリング化樹脂から開始して実施し（実施例１）、そのペプチドは、それぞれ、配列番号４２のペプチド（ＢＩＯ−１について）または配列番号４３のペプチド（ＢＩＯ−２について）であり、供与体および受容体は上記の分子であった。
【０１５５】
[実施例３]
カプリン酸バイオコンジュゲートＢＩＯ−４の合成
カプリン酸でキャップされたペプチドを、カプリン酸でキャップされたＮ末端アミンを用いることにより実施例１に記載された手順に従って合成した。
【０１５６】
[実施例４]
アスコルビン酸バイオコンジュゲートＢＩＯ−５の合成
５，６−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−アスコルビン酸（ｉＡＳＡ）を、Ｊｕｎｇの方法（Jung, M. E.; Shaw, T. J. J. Am. Chem. Soc. 1980, 102, 6304）により合成した。活性化のために、ＣＤＩ（１０当量）を、ペプチドアンカリング化樹脂に２時間、加えた。樹脂からの切断後のペプチドのＮ末端アミンの活性化を、以下の条件を用いるＲＰ−ＨＰＬＣにより、確認した：ＡからＢへ（Ａ：Ｈ２Ｏ中０．１％ＴＦＡ、Ｂ：ＣＨ３ＣＮ中０．１％ＴＦＡ；３０分間に渡って０％から６０％へのＢ、１．０ｍＬ／分の流速）；検出、ＵＶ  ２３０ｎｍ。次に、ｉＡＳＡを、その活性化ペプチドアンカリング化樹脂に導入した。その生成物を５０％ＴＦＡ／ＤＣＭ（ｖ／ｖ）で１時間処理することにより樹脂から分離した。樹脂を濾過し、濾液を、高真空中で濃縮し、冷たいジエチルエーテルで沈殿させた。生じたバイオコンジュゲートＢＩＯ−５の構造を、溶出剤として０．１％ギ酸／メタノールを２５０μＬ／分の流速で３０分間に渡って用いるＬＣ／ＭＳにより確認し、２３０ｎｍにおいてモニターした。
【０１５７】
[実施例５]
ＩＬ−１７Ａに対する応答におけるＩＬ−１７ＲＡ／ＩＬ−１７ＲＣ二量体化アッセイ
表７のペプチドを、ＩＬ−１７Ａのそれの受容体への結合およびその後のＩＬ−１７ＲＡとＩＬ−１７ＲＣの相互作用を阻害する能力について試験した。
【０１５８】
インターロイキン受容体ＲＡとＲＣの二量体化アッセイ（ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ）を用いて、表７のペプチドの非存在下または存在下におけるＩＬ−１７Ａによる活性化での受容体鎖ＩＬ−１７ＲＡとＩＬ−１７ＲＣの相互作用を測定した。
【０１５９】
ＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ（登録商標）サイトカイン受容体アッセイにおいて、一方のサイトカイン受容体鎖が、小さいペプチドエピトープＰｒｏＬｉｎｋ（ＰＫ）でタグ付けされ、他方の鎖が酵素受容体（Enzyme Acceptor）（ＥＡ）でタグ付けされる。リガンド結合は、その２つの受容体の二量体化を誘導し、ＰＫ断片とＥＡ断片の相補を促進する。この相互作用は、活性ユニットのｂ−ガラクトシダーゼを生じ、そのｂ−ガラクトシダーゼが、化学発光基質を用いて検出される。ＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ細胞株を、フリーザーストックから標準手順に従って増殖させた。細胞を、白色壁面の３８４ウェルマイクロプレートへ総体積２０μＬで播種し、試験前に適切な時間の間、インキュベートした。アゴニスト活性阻害について、細胞を、試料とインキュベートして、応答を誘導した。アッセイバッファーにおける５×試料を作製するために、試料ストックの中間希釈を行った。５×試料の５μＬを細胞へ加え、３７℃または室温で６０分間、インキュベートした。溶媒濃度は１％であった。アッセイバッファー中の６×  ＥＣ８０アゴニスト（ＩＬ−１７Ａ）の５μＬを細胞へ加え、３７℃で、アッセイに依存して６〜１６時間、インキュベートした。アゴニスト（ＩＬ−１７Ａ）および（表７のペプチド）アッセイ、それぞれについてのＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ検出試薬カクテルの１２．５μＬまたは１５μＬ（５０％  ｖ／ｖ）の単一の添加、続いて、室温での１時間のインキュベーションによってアッセイシグナルを発生させた。いくつかのアッセイについては、活性を、アッセイ性能を向上させるために高感度検出試薬（ＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ  Ｆｌａｓｈキット）を用いて検出した。これらのアッセイにおいて、同体積の検出試薬（２５μＬまたは３０μＬ）をウェルに加え、続いて、室温で１時間、インキュベートした。マイクロプレートを、シグナル発生後、化学発光シグナル検出用のＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｅｎｖｉｓｉｏｎ（商標）機器を用いて読み取った。化合物活性を、ＣＢＩＳデータ分析パッケージソフト（ＣｈｅｍＩｎｎｏｖａｔｉｏｎ、ＣＡ）を用いて分析した。％阻害＝１００％×（１−（試験試料の平均ＲＬＵ−溶媒対照の平均ＲＬＵ）／（ＥＣ８０対照の平均ＲＬＵ−溶媒対照の平均ＲＬＵ））。
【０１６０】
下記の表７に報告されているように、全ての試験された分子は、中間のナノモル濃度範囲でのＩＣ５０値を示し、ＩＬ−１７ＲＡ／ＩＬ−１７ＲＣ二量体化を阻害し、よって、ＩＬ−１７Ａ経路活性化を阻害することにおいて活性があることが見出された。
【０１６１】
【表８−１】
2021531309.tif 000017
【０１６２】
【表８−２】
2021531309.tif 000018
【０１６３】
【表８−３】
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【０１６４】
【表８−４】
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【０１６５】
【表８−５】
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【０１６６】
【表８−６】
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【０１６７】
【表８−７】
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【０１６８】
【表８−８】
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【０１６９】
【表８−９】
2021531309.tif 000025
【０１７０】
図１において、例示的なペプチドについての用量反応プロファイルが報告されている。
【０１７１】
[実施例６]
ヒト分化型Ｔｈ１７細胞における表現型アッセイおよび生死判別アッセイ
本発明のペプチドの、眼科的または皮膚科的病態における炎症の原因である標的細胞への効果を評価するために、本発明者らは、配列番号１８のペプチドの、ヒトＴｈ１７細胞による炎症促進性サイトカインおよびメタロプロテイナーゼ分泌をインビトロで阻害する能力を試験した。
【０１７２】
ヒト初代ＣＤ４  Ｔ細胞を、インビトロで、その細胞をＴｈ１７分化培地中で１０日間、培養することにより、Ｔｈ１７細胞へ分化させた。詳細には、精製されたヒト末梢血ＣＤ４  Ｔ細胞を、Ｔｈ−１７分化培地（ＣｅｌｌＸＶｉｖｏヒトＴｈ１７、Ｔｏｃｒｉｓ）中で、製造会社の使用説明書の通り、培養した。簡単に述べれば：９６ウェル組織培養プレートを、抗ＣＤ３およびＣＤ２８アゴニスト抗体でコーティングした。細胞を、トリパンブルー排除によってカウントし、Ｔｈ１７分化培地中に１Ｅ５細胞／ｍｌの濃度で懸濁した。この懸濁液の０．２ｍＬを、９６ウェルプレートの個々のウェルへプレーティングした。細胞を、３７℃、５％ＣＯ２で１０日間、インキュベートし、必要に応じて培地を交換した。１０日間の細胞分化後、実施例１で合成されたペプチド、例えば、配列番号１８のペプチドを、ＣＧＭ（細胞成長培地、ＸＶｉｖｏ−１５、Ｌｏｎｚａ）中、適切な濃度に希釈した。細胞プレートを、３００ｘｇで５分間、遠心分離し、Ｔｈ１７分化培地を除去した。
【０１７３】
分化後、細胞を、様々な濃度の試験品目の存在下でホルボール１２−ミリステート１３−アセテートおよびイオノマイシンを含有する活性化カクテルで刺激した。
【０１７４】
刺激後２４時間目において、培養上清を、ＩＬ−１７、ＩＬ−６、ＩＬ−２３、ＭＭＰ３の発現について分析し、蛍光生死判別色素、アラマーブルーを用いて生死判別について調べた。ＣＤ４細胞は、活性化カクテルでの刺激に応答して高レベルのＩＬ−１７Ａを分泌し、Ｔｈ１７細胞への分化の成功を示した。追加として、刺激された細胞は、ＩＬ−６、ＩＬ２３、およびＭＭＰ３を分泌した。
【０１７５】
適切な群において、上清を除去し、２００μＬの希釈されたペプチドまたは溶媒（ＴＩ濃度と同様に希釈されたＣＧＭ＋ＤＭＳＯ）に置き換えた。細胞を、刺激前の１時間、ペプチド試験項目とインキュベートした。以下の刺激溶液を作製した：１０×  細胞活性化カクテル：ＣＧＭ中５００×から１０×までのワーキング溶液に希釈される。２２μＬの適切な刺激物質を、ＴＩ添加から１時間後、ウェルに加えた。最後に、刺激物質から２０時間後（２４時間目の血清収集の４時間前）、２５μＬのアラマーブルー試薬（１０×）を各ウェルに加えて、細胞生存率を決定した。刺激物質から２４時間後、アラマーブルー蛍光を、製造会社の使用説明書の通り、測定した。残りの上清を次の多重タンパク質分析のために収集した。２４時間目の刺激された培養上清中のＩＬ−６、ＩＬ−１７、およびＩＬ−２３、加えてＭＭＰ３の発現レベルを、ＭＡＧＰＩＸ機器におけるＬｕｍｉｎｅｘ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ  Ｐｌａｔｆｏｒｍを用いて評価した。
【０１７６】
図２および３は、配列番号１８のペプチドの効果を示す。図に見られるように、このペプチドは、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−６、およびＩＬ−２３の分泌、加えてＭＭＰ３の分泌を有意に低下させることができる。図４に示されているように、配列番号１８のペプチドでの１１日間の細胞処理は細胞生存能を損なわなかったため、サイトカインおよびメタロプロテイナーゼ分泌の阻害は、細胞生存能問題のせいではない。
【０１７７】
[実施例７]
ペプチドの物理化学的分析
先行技術のペプチドＨＡＰおよび本発明によるいくつかのペプチド（表８参照）の物理化学的性質は、下記のように試験されている。
【０１７８】
ｉ．方法
ａ．等電点ＩＰ、ｌｏｇＤ，およびｌｏｇＰ
下記の表８のペプチドの主要な物理化学的性質（等電点（ＩＰ）、ｌｏｇＤ（７．４）、およびｌｏｇＰ）を、Ａｇ／ＡｇＣｌダブルジャンクション参照ｐＨ電極、Ｓｉｒｉｕｓ  Ｄ−ＰＡＳ分光計、および濁度検知デバイスを備えたＳｉｒｉｕｓＴ３装置（Ｓｉｒｉｕｓ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｌｔｄ．、Ｅａｓｔ  Ｓｕｓｓｅｘ、ＵＫ）を用いることにより決定した。ｐＨ電極は、ｐＨ範囲１．８〜１２．２において滴定法で較正された。オーバーヘッドスターラーが用いられ、温度プローブ（ペルチェコントローラー）が、滴定の過程の間、温度をモニターした。滴定実験を、０．１５Ｍ  ＫＣｌイオン強度調整溶液（ＩＳＡ水）中、窒素雰囲気下、２５±１℃の温度で行った。全ての試験を、滴定試薬として標準化０．５Ｍ  ＫＯＨおよび０．５Ｍ  ＨＣｌを用いて実施し、分配係数試験について、ＩＳＡ水中飽和オクタノール（ＩＳＡ水の５％）を分配溶媒として用いた。ｐＫａｓを、ｐＨ計量滴定による電位差測定法により決定した。粉末（約０．５ｍｇ）を１．５ｍｌのＩＳＡ水に溶解し、滴定をｐＨ範囲２．０〜１２．０において３連で実施した。各ＬｏｇＰを、粉末（約１ｍｇ）を１ｍｌのＩＳＡ水に溶解し、続いて、３つの異なるパーセンテージのオクタノール（一般的に、５０％、６０％、７０％）におけるｐＨ計量滴定により、３連で実施した。
【０１７９】
ｂ．水溶性および安定性
ストック溶液の調製のための一般的な手順
各凍結乾燥したペプチドの重量を琥珀色バイアルにおいて測定した。１０ｍＭストック溶液を直接得るために、ｐＨ７．８におけるリン酸緩衝溶液の計算された体積を加えた。回収された懸濁液を、３７℃でオービタルシェーカーインキュベーターにより３０分間、撹拌した。溶解性がより低い化合物について希釈度のより高いストック溶液を得るために、その後の希釈を実施した。
【０１８０】
安定性および溶解性を評価するために、全てのストック溶液を２５℃で保存した。前記見出しを、３時点：Ｔ０、３日目、１週間目において、標準溶液と比較したＵＨＰＬＣ−ＭＳ分析により評価した。
【０１８１】
クロマトグラフィープロファイルを、定量アッセイのために評価し、ＭＳスペクトルを、安定性研究におけるサポートとして検出した。
【０１８２】
標準溶液調製のための一般的な手順
各ペプチドを重量測定し、ｐＨ７．８におけるリン酸バッファーで１００μＭに直接希釈した。その溶液を、ボルテックスにより５分間、撹拌し、３７℃で２０分間、加熱した。得られた標準溶液を、暗闇中、管理温度下、２５℃で保存した。
【０１８３】
試料調製のための一般的な手順
ストック溶液の一部分を琥珀色バイアルに収集し、ｐＨ７．８におけるリン酸バッファーにより１００μＭに希釈した（希釈係数、１：１００）。
【０１８４】
機器方法
逆相ＵＨＰＬＣを、０．３ｍｌ／分の流速で、Ｌｕｎａ  Ｏｍｅｇａ  Ｐｏｌａｒ  Ｃ１８カラム（ポアサイズ１．６μｍ、２．１×１００ｍｍ）を用いて実施した。溶媒Ａは水中０．５％ギ酸であり、溶媒Ｂはアセトニトリル中０．５％ギ酸であった。まず、試料をカラムに負荷し、１０％Ｂで均一濃度的に３分間、洗浄した。その後、１０〜９５％の勾配のＢを２２分間に渡って流し、９５％で２分間、保ち、その後、１分間に渡って１０％へ減少させ、圧力安定化のために、５分間、保った。ＵＶ吸収をＤＡＤ（２２０〜４００ｎｍ）によりモニターした。ＴＩＣのモニタリングのために、ＥＳＩ−ＭＳイオントラップを用いた。
【０１８５】
ｉｉ．結果
試験された全てのペプチドは、クロマトグラフィープロファイルにも質量スペクトルにも有意な変動が見出されなかったため、１週間目まで２５℃において安定性を示した。
【０１８６】
試験されたペプチドの物理化学的性質は、下記の表８に示されている。
【０１８７】
【表９−１】
2021531309.tif 000026
【０１８８】
【表９−２】
2021531309.tif 000027
【０１８９】
【表９−３】
2021531309.tif 000028
【０１９０】
上記からわかるように、本発明によるペプチドの大部分は、最適な物理化学的性質を有し、溶解性と親油性の良いバランスを示している。本ペプチドのＬｏｇＤの平均は、−２．６４±２．０６であり、一方、本ペプチドの大部分について、水中で観察された溶解性は非常に良かった（＞１０ｍＭ）。その観察された性質は、それらを、眼科的および皮膚科的適用に特に適したものにし、皮膚および眼の表面に疎水性成分と親水性成分の両方が存在するからである。それらはまた、ペプチドにより観察された良い透過性（実施例８参照）を説明している。
【０１９１】
[実施例８]
透過性試験
試験されるペプチドは、配列番号１、配列番号２、配列番号７、配列番号１１、配列番号１４、配列番号３８、配列番号１１１、配列番号１１３、配列番号１１５、および配列番号１２１のペプチドであった。それらを、１０ｍＭストック溶液を用意するために、細胞培養グレード水（Ｃｏｍｉｎｇ、Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ、ＵＳＡ）に溶解した。
【０１９２】
ｉ．方法
インビトロモデル
Ｉ−ＨＣＥＣ、不死化ヒト角膜上皮細胞株（Immortalized Human Corneal Epithelial cell line）は、初代ヒト角膜上皮細胞に由来した（＞９９％純度）。これらの細胞は、健康および疾患におけるヒト角膜の研究に適している。その細胞を、プロトコールに従い、Ｉｎｎｏｐｒｏｔ、Ｂｉｚｋａｉａ、Ｓｐａｉｎにより提案される培地（ＩＭ−角膜上皮細胞培地  参照番号Ｐ６０１３１）を用いて培養した。
【０１９３】
免疫蛍光
薬物試験を進める前にまず、バリア完全性を確認し、かつ定量化するために、定性的および定量的技術を開発した。最初、本発明者らは、タイトジャンクションの特性を示すタンパク質（ＺＯ−１）についての免疫蛍光を実施した（Sugrue SP et al., (1997) Exp Eye Res. Jan;64 (1): 11-20）。その細胞を、コラーゲンＩ  ５０μｇ／ｍｌ（ストック溶液３ｍｇ／ｍｌ  Ｇｉｂｃｏ、ＮＹ、ＵＳＡ社製）でコーティングされたカバースリップにおいて１×１０４細胞／ｃｍ２の密度で播種し、１４日間（１４  ＤＩＶ）培養し、コンフルエンシー後、培地を毎日、リフレッシュした。細胞を、メタノール中、−２０℃で１０分間、固定し、リン酸緩衝液（ＰＢＳ）ですすぎ、４％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ；Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を含有するＰＢＳ中、室温（ＲＴ）で１０分間、インキュベートし、一次抗体および二次抗体と各６０分間、室温（ＲＴ）で連続的にインキュベートした。一次抗体はヤギ抗ヒトＺＯ−１（１：１００、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ）であり、それと４℃で一晩、インキュベートし、続いて、抗ヤギＡｌｅｘａｆｌｕｏｒ  ４８８（１：１００００）とインキュベートした。最後に、細胞をＤＡＰＩ（０．５ｍｇ／ｍｌ）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）で室温、５分間、対比染色し、Ｖｅｃｔａｓｈｉｅｌｄ封入剤（Mounting Medium）（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｉｎｃ、Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ、ＣＡ）と共にマウントし、共焦点レーザー走査顕微鏡（Ｌｅｉｃａ  ＴＣＳ  ＳＰ５、Ｗｅｔｚｌａｒ、Ｇｅｒｍａｎｙ）において観察した。
【０１９４】
ＭＴＳアッセイ
細胞生存率を、２４時間目に、細胞力価一溶液細胞増殖アッセイ（Cell Titer One Solution Cell Proliferation Assay）（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ  Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ、ＵＳＡ）、３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム（ＭＴＳ）に基づいた比色法を用いて決定した。生存率の関数として、形成されたホルマザンの量を、ＥＬＩＳＡプレートリーダー、Ｉｎｆｉｎｉｔｅ  Ｆ２００（Ｔｅｃａｎ、Ｍａｎｎｅｄｏｒｆ、Ｓｗｉｓｓ）を用いて４９２ｎｍにおいて測定した。そのアッセイは、５０μＭおよび１００μＭにおいて実施した（Ｎ＝９）。結果を４９２ｎｍにおける吸光度として表した。
【０１９５】
ＴＥＥＲアッセイ
角膜上皮培養物のバリア完全性を、ＴＥＥＲ（経上皮／経内皮電気抵抗（TransEpithelial/TransEndothelial Electrical Resistance））および傍細胞浸透性物質（例えば、マンニトール、６−カルボキシフルオレセイン）の透過性の測定を用いて検証した（Ronkko S et al., (2016) Drug Deliv Transl Res 6: 660-675）。ＴＥＥＲは、内皮および上皮の単層の細胞培養モデルにおけるタイトジャンクション動態の完全性を測定するための広く受け入れられている定量技術である。ＴＥＥＲ値は、細胞バリアが薬物または化学物質の輸送について評価される前の、細胞バリアの完全性の指標である。ＴＥＥＲ測定は、細胞損傷なしにリアルタイムで実施することができ、一般的に、広範囲の周波数に渡ってオーム抵抗を測定すること、またはインピーダンスを測定することに基づいている（Snirivasan et al., 2015  J Lab Autom. 20(2): 107-126）。このアッセイを実施するために、Ｍｉｌｌｉｃｅｌｌ  ＥＲＳ−２、ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ、ＭＡ、ＵＳＡ）による電気抵抗システムを、製造会社の使用説明書に従って用いた。アッセイを、５０μＭおよび１００μＭにおいて実施した（Ｎ＝９）。結果を抵抗（Ｑ／ｃｍ２）として表した。
【０１９６】
透過性試験
この研究の目的は、重層ヒト角膜上皮細胞に渡る本ペプチドの見かけの透過係数（Ｐａｐｐ）値を評価することであった。全てのペプチドを、５０μＭにおいて２連で試験した。
【０１９７】
特に、ヒト角膜上皮細胞（ｈＣＥＰＩＣ）を、Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ細胞培養インサート（Ｃｏｍｉｎｇ、ＮＹ、ＵＳＡ）上に重層化させた。透過実験を、５分間目、３０分間目、６０分間目の時点においてレシーバーチャンバーから、および同じ時点においてドナーチャンバーから試料を採取することにより実施した。収集された各アリコートを、４０℃にサーモスタット制御された、Ｃ１８  Ｖｅｒｔｅｘ  Ｐｌｕｓカラム（Ｋｎａｕｅｒ）を備えたＨＰＬＣ機器（Ｋｎａｕｅｒ）により分析した。研究化合物の速度（見かけの透過係数、Ｐａｐｐ）を計算し、低透過性および高透過性マーカー、それぞれ、６−カルボキシフルオレセインおよびローダミンＢのＰａｐｐ値と比較した。
【０１９８】
見かけの透過係数（Ｐａｐｐ）を、以下の方程式により計算した：
Ｐａｐｐ＝（ｌ／Ａ＊Ｃ０）（ｄＭ／ｄｔ）
式中、ｄＭ／ｄｔは、細胞層に渡る流束（１秒あたりのナノモル）であり；
Ａ（平方センチメートル）は、インサート膜の曝露された表面積であり；
Ｃ０は、ｔ＝０におけるドナーコンパートメント内の最初の薬物濃度（マイクロモル濃度）である（Xiang et al., Drug Metab Dispos. 2009 May;37(5):992-8）。
【０１９９】
統計
全ての群（研究された化合物およびローダミン）を、低透過性対照と比較した。全ての他の実験を、平均値±Ｓ．Ｅ．として表し、有意性を、対照細胞に対するスチューデントｔ検定により計算した。スチューデントｔ検定により決定された場合、差は、統計的に有意である（ｐ＜０．０５）とみなされた。
【０２００】
ｉｉ．結果
ＭＴＳおよびＴＥＥＲアッセイ
本発明者らの実験条件において、考慮されたペプチドは、５０μＭおよび１００μＭの試験濃度において、細胞生存率にもＴＥＥＲにも有意な影響を及ぼさなかった。
【０２０１】
透過性試験
各ペプチドについて得られた結果は下記の表９に示されている。
【０２０２】
【表１０】
2021531309.tif 000029
【０２０３】
ＨＣＥ細胞培養物が、本ペプチドをスクリーニングするのに有用であることを検証するために、親油性経細胞マーカー、ローダミンＢの透過性を決定した。予想通り、ローダミンＢは、ＨＣＥ細胞培養物の高い透過性を示した（５１．２６±５．４４  １０−６ｃｍ／秒）。その後、６−カルボキシフルオレセインの透過性がアッセイされ、文献と一致した（０．６１±０．３３  １０−６ｃｍ／秒）。このマーカーは非常に低い親油性を有し、それは、細胞間隙を通してのみ生体膜を透過する。
【０２０４】
試験されたペプチドは、高透過性標準、ローダミンＢと比較して、不死化ヒト角膜上皮への非常に良い透過性を示した。明らかに、ＨＣＥ透過性モデルは、角膜実質も内皮も含んでいないが、これらの層は、角膜の薬物吸収に必須のバリアではない。本発明者らは、良い透過性を有するペプチド（配列番号２）、およびローダミンＢと比較してより高い透過性を有するペプチド（配列番号１１５、配列番号１１３、および配列番号１１１）を見出した。
【０２０５】
[実施例９]
ペプチド−ＩＬ−１７Ａ親和性試験
先行技術ＨＡＰ（配列番号１）のペプチド、および配列番号２のペプチドを、下記のように、ｍＩＬ−１７Ａに対する親和性について試験した。
【０２０６】
ａ．ｍＩＬ−１７Ａの固定化
マウスＩＬ−１７Ａタンパク質の固定化のために、アミンカップリング化学作用を用いた。センサーチップ表面において、反応性スクシンイミドエステルを得るために、デキストランマトリックスを、最初、１−エチル−３−カルボジイミド（ＥＤＣ）とＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）の混合物で活性化した。１０μｇ／ｍｌのＩＬ−１７を、ｐＨ＝５．０における１０ｍＭ酢酸バッファー中に希釈し、その後、前記リガンドを表面の上を通過させて、前記エステルが非荷電アミノ基と自発的に反応するようにさせた。このようにして、前記リガンドは、デキストランと共有結合性に連結する。ｍＩＬ−１７の共有結合性固定化は、リガンドのその表面との３０００ＲＵの安定な付着を生じる。
【０２０７】
ｂ．ペプチド／ＩＬ−１７相互作用の特徴づけ
配列番号１（ＨＡＰ）および配列番号２のペプチドを、固定化ｍＩＬ−１７Ａに結合するそれらの能力について分析した。それらの分子を、ＨＢＳ−ＥＰバッファー中に異なる濃度（６２．５ｎＭから１０００ｎＭまで）で希釈し、センサーチップ上に４分間、注入し、５分間、解離させた。各実行後、センサーチップを、２Ｍ  ＮａＣｌ注入により再生した。センサーグラム（図１、パネルＡ）に基づいて、かつＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェアを用いて、平衡状態におけるＲＵ値のスキャッチャード分析により、溶液中の分析物濃度の関数として親和定数を決定することができた（図６、パネルＢ）。得られた結果は下記の表１０に示されている。
【０２０８】
【表１１】
2021531309.tif 000030
【０２０９】
表８に示されているように、配列番号２のペプチドは、ＩＬ−１７Ａと、１３０ｎＭに等しい親和性の値で結合し、一方、配列番号１のペプチドは、ＩＬ−１７Ａと、非常に低い親和性値（３７００ｎＭ）で結合する。
【０２１０】
実施例８および９で得られた結果を考慮すれば、配列番号２のペプチドにおいてのように、先行技術のＨＡＰペプチドにおける位置１におけるイソロイシンのバリンでの改変が、物理化学的性質、透過性、およびリガンドに対する親和性に関する著しい違いをもたらす。
【０２１１】
本発明者らは、その２つのペプチドの性質を本明細書の下記に要約している。
【０２１２】
【表１２】
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【０２１３】
表１１は、ペプチド配列番号１と配列番号２の間での比較データを示す。
【０２１４】
本発明者らは、ｌｏｇＰおよびｌｏｇＤに関して大きな差（それぞれ、６−ｌｏｇおよび３−ｌｏｇの差）を見出した：これは、配列番号１と比較して配列番号２に関して観察されたより高い透過性（１９．３に対して２８．８）を説明した。マウスＩＬ−１７Ａで実施された表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイにおいて測定されたＫｄ（ｎＭ）は、配列番号２が配列番号１より２８倍高い親和性を有することを示した。
【０２１５】
さらに、分子動力学シミュレーション研究もまた行い、それは、イソロイシン（ＨＡＰ）の代わりのバリン（配列番号２）が、折り畳み構造を大いに安定化させることを示している：配列番号２は安定性が８０％高いことが予測された。
【０２１６】
[実施例１０]
炎症性サイトカインの発現のインビトロでの評価
ペプチドＨＡＰ（配列番号１）および配列番号２のペプチドを、それらの角膜における炎症性サイトカインの発現への直接的影響の評価についてインビトロで試験した。
【０２１７】
試験を、不死化ヒト角膜上皮細胞株（Ｉ−ＨＣＥＣ）（Ｉｎｎｏｐｒｏｔ、Ｂｉｚｋａｉａ、Ｓｐａｉｎ、参照番号Ｐ１０８７１）において行った。これは、初代ヒト角膜上皮細胞に由来し（＞９９％純度）、健康および疾患におけるヒト角膜の研究に適している。その細胞を、プロトコールに従い、Ｉｎｎｏｐｒｏｔにより提案される培地（ＩＭ−角膜上皮細胞培地  参照番号Ｐ６０１３１）を用いて培養した。その細胞培地に、５％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を追加した。
【０２１８】
細胞を、３２００００細胞／６ウェルプレートのウェル、および１５０００細胞／９６ウェルプレートのウェルで播種した。８０％のコンフルエンスに達した細胞を、用量曲線（０．０１〜５００μＭ）における配列番号１および配列番号２の化合物で２４時間、処理した。
【０２１９】
全ＲＮＡを、６ウェルプレートからＱｕｉｃｋ−Ｓｔａｒｔ  ＲＮｅａｓｙミニキット（Ｑｉａｇｅｎ、カタログ番号７４１０４）を用いて製造会社の使用説明書に従って単離した。逆転写を、ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ  Ｖｉｌｏ（参照番号１１７５５０５０、Ｌｉｆｅ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、およびＣＦＸ９６リアルタイムシステムに適応したＴａｑＭａｎプロトコール（参照番号４４４４５５７、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍ）を用いるリアルタイムＰＣＲを用いて実施した。実験を、３回、各回２連で実施した。用いられたＴｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製のプローブは以下であった：ヒトＣＸＣＬ８（Ｈｓ００１７４１０３＿ｍ１）、ヒトＩＬ６（Ｈｓ００１７４１３１＿ｍ１）、ヒトＴＮＦα（Ｈｓ９９９９９０４３＿ｍ１）。ハウスキーピング遺伝子として、ＧＡＰＤＨ（プローブＨｓ０２７５８９９１＿ｇ１）を用いた。
【０２２０】
Ｉ−ＨＣＥＣにおけるＩＬ−８、ＩＬ−６、およびＴＮＦ−α発現を、配列番号１または配列番号２のペプチドの異なる濃度（０．０１μＭ、０．１μＭ、１μＭ、１０μＭ、１００μＭ、５００μＭ）での２４時間の処理後、評価した。未処理のＩ−ＨＣＥＣを陰性対照（溶媒）として用いた。
【０２２１】
結果は、化合物配列番号２が、測定された炎症性サイトカインのいずれの発現も変化させず（図８Ａ、９Ａ、および１０Ａ）、一方、化合物配列番号１の５００μＭでの処理が、２つの炎症性サイトカインＩＬ−６およびＴＮＦαの発現を有意に誘導する（図９Ｂおよび１０Ｂ）ことを示している。
【０２２２】
得られたデータは、配列番号１のペプチドが、直接的な炎症促進活性を有し、ＨＣＥＣによるＩＬ−６およびＴＮＦ−α炎症性サイトカインの発現を、それぞれ、１０倍および８倍の増加を以て、有意に誘導することを実証している。その反対に、配列番号２のペプチドは、サイトカインの発現への効果を少しも示していない。
【０２２３】
上記を考慮すれば、配列番号２のペプチドが、驚くべきことに、配列番号１のペプチドＨＡＰと比較して有意に、より良い耐容性および毒性の欠如を示していると結論づけることができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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