(57)【要約】本発明は、以下の工程：  ａ）油相及び水相を提供する工程、  ｂ）前記油相及び前記水相を予備混合してＯ／Ｗプレエマルジョンを形成する工程、及び  ｃ）少なくとも１つのカウンタジェット分散機により前記Ｏ／Ｗプレエマルジョンを均質化してＯ／Ｗエマルジョンを形成する工程、を含む、Ｏ／Ｗエマルジョンの製造方法に関する。本発明は、さらに、Ｏ／Ｗエマルジョン、及びＯ／Ｗエマルジョンを製造するためのシステムに関する。【選択図】図２
2021520993.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）油相及び水相を提供する工程、
ｂ）前記油相及び前記水相を予備混合してＯ／Ｗプレエマルジョンを形成する工程、及び
ｃ）少なくとも１つのカウンタジェット分散機により前記Ｏ／Ｗプレエマルジョンを均質化してＯ／Ｗエマルジョンを形成する工程、
を含む、Ｏ／Ｗエマルジョン、特に非経口投与用のＯ／Ｗエマルジョンの製造方法。
【請求項２】
工程ｂ）が、少なくとも１つのローターステーター分散機により実施されることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記油相及び前記水相が、互いに空間的に分離された前記少なくとも１つのローターステーター分散機に供給されることを特徴とする、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記油相及び前記水相が、チューブインチューブ配置によって、前記少なくとも１つのローターステーター分散機に供給されることを特徴とする、請求項２又は３に記載の方法。
【請求項５】
前記油相及び前記水相を、前記少なくとも１つのローターステーター分散機の液滴粉砕ゾーン、特に剪断ゾーンに通過させることを特徴とする、請求項２〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
工程ｃ）が、１０００バール〜１９００バール、特に１０００バール〜１５００バール、好ましくは１２００バール〜１５００バールのポンプ圧力により実施されることを特徴とする、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
工程ｃ）が、３０℃〜８０℃、特に４０℃〜７７．５℃、好ましくは４０℃〜７５℃、特に好ましくは４０℃〜６５℃のＯ／Ｗプレエマルジョンの温度で実施されることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
工程ｃ）が実施されるときに、前記Ｏ／Ｗプレエマルジョンを前記少なくとも１つのカウンタジェット分散機に繰り返し通過させることを特徴とする、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
工程ｃ）が、複数のカウンタジェット分散機により実施されることを特徴とする、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
工程ｃ）が、直列に接続された２つのカウンタジェット分散機により実施されることを特徴とする、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
第１のカウンタジェット分散機が、第２のカウンタジェット分散機よりも高いポンプ圧力で運転されることを特徴とする、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記第１のカウンタジェット分散機は、最大で１５００バール、特に８００バール〜１４００バール、好ましくは１０００バール〜１２００バールのポンプ圧力で運転され、第２のカウンタジェット分散機は、１０００バール未満、特に５００バール〜８００バール、好ましくは５００バールのポンプ圧力で運転されることを特徴とする、請求項１０又は１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記少なくとも１つのカウンタジェット分散機の下流に減圧器が接続されていることを特徴とする、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法に従って製造される又は製造できる、及び／又は、＜０．０４％、特に＜０．０３％、好ましくは＜０．０２％、特に好ましくは≦０．０１％のＰＦＡＴ５値を有するＯ／Ｗエマルジョン。
【請求項１５】
Ｏ／Ｗエマルジョンの製造のための、及び／又は、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法を実施するためのシステムであって、前記システムは、油相と水相を予備混合してＯ／Ｗプレエマルジョンを形成するための少なくとも１つの分散機、及び、前記Ｏ／ＷプレエマルジョンをＯ／Ｗエマルジョンに均質化するための少なくとも１つの下流のカウンタジェット分散機とを有することを特徴とする、前記システム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｏ／Ｗエマルジョンの製造方法、Ｏ／Ｗエマルジョン、及びＯ／Ｗエマルジョンを製造するためのシステムに関する。
【背景技術】
【０００２】
エマルジョンは、目に見える分離のない２つの通常は非混和性の液体の細かく分割された混合物を意味すると理解されている。一方の液体（相）は、他方の液体中に分配された小さな液滴を形成する。液滴を形成する相は内部相又は分散相と呼ばれている。液滴が中に浮いている相は、外相又は連続相と呼ばれている。水と油のエマルジョンは、油中水型エマルジョン（Ｗ／Ｏエマルジョン）と水中油型エマルジョン（Ｏ／Ｗエマルジョン）に区別される。
【０００３】
エマルジョンの別の重要な構成要素は、液滴の形成を促進し、分離（相分離）を妨げる乳化剤である。
【０００４】
典型的には、エマルジョンを製造するために使用される成分は、最初に予備混合されて、粗く分散されたプレエマルジョンを形成し、これは、粗製又はプレエマルジョン又はプレミックスとも呼ばれることがある。これに続いて均質化が行われ、分散相が液滴に分割される（微細乳化）。粗製又はプレエマルジョンの液滴サイズスペクトルは、より小さな液滴に向かって大幅にシフトする。
【０００５】
非経口用途のためのＯ／Ｗエマルジョンは、通常、最初に油相と水相をローターステータースターラーを使用して、続いてピストンギャップホモジナイザーを使用して均質化することによって製造される。ピストンギャップホモジナイザーは、いわゆる高圧ホモジナイザーであり、高圧ポンプと均質化ノズルをベースにしている。高圧ポンプはエネルギーを蓄積し、均質化バルブにおける圧力を解放することにより液滴サイズを減少させるために使用できる。ピストンギャップホモジナイザーでは、１００〜数百バールの圧力を達成できる。ピストンギャップホモジナイザーでは、プレエマルジョンは一般に中央の供給ボアを通してポンプで送られ、次にプレエマルジョンはバルブシートとバルブピストンの間のラジアルギャップを通過する。
【０００６】
高圧ホモジナイザーでは、剪断力及び膨張力、衝撃流や、通常の場合、キャビテーション力も決定的な程度まで有効である。キャビテーションとは、圧力変動による液体中の空洞の生成と溶解である。キャビテーションは、物体が液体中で非常に速く移動することによって（例えば、プロペラやスターラーによって）、又は液体が例えばノズルを通って急速に移動することによって、及び超音波への暴露によって引き起こされる。
【０００７】
非経口投与を目的とするＯ／Ｗエマルジョンは、特定の仕様を満たさなければならない。例えば、かかるエマルジョンは、最低限の医療基準に適合するために、５００ｎｍ、好ましくは３５０ｎｍの平均液滴直径を超えてはならない。
【０００８】
さらに、かかるＯ／Ｗエマルジョンは、＜０．０５％のいわゆるＰＦＡＴ５値を有するべきである。この値は、Ｏ／Ｗエマルジョンの油相内の、直径、特に平均直径が５μｍ〜５０μｍである液滴の百分率を定義する。これは、患者の脂肪塞栓症を回避するための安全パラメーターである。
【０００９】
Ｏ／Ｗエマルジョンを製造するための従来のプロセスの欠点は、長いプロセス時間、特に、製造されるＯ／Ｗエマルジョンの品質に関して、特に、プロセス制御オプションが限られている又は不十分であることが多い点である。例えば、プロセスパラメーターからのわずかな逸脱でも、不良なバッチが発生し、その結果、かなりの規模でのバッチ廃棄をもたらすおそれがある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明の目的は、従来技術から知られているＯ／Ｗエマルジョンの製造方法に関連して生じる不利益を回避し、特により短いプロセス時間及びより良いプロセス制御によって特徴付けられる、Ｏ／Ｗエマルジョンを製造するための方法を提供することである。本発明の目的はまた、関連するＯ／Ｗエマルジョン及びＯ／Ｗエマルジョンを製造するための関連するシステムを提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
これらの目的は、本発明によれば、それぞれの主請求項に記載の、Ｏ／Ｗエマルジョンの製造方法、Ｏ／Ｗエマルジョンによって、及びシステムによっても達成される。好ましい構成は、特にそれぞれの従属請求項に見出すことができる。特許請求の範囲の内容は、参照により本詳細な説明の内容に明示的に組み込まれる。
【００１２】
第１の態様によれば、本発明は、特に非経口投与用の、水中油型エマルジョン（以下、Ｏ／Ｗエマルジョンと略記）を製造するための方法に関する。この方法は、以下の工程：
ａ）油相及び水相を提供する工程、
ｂ）油相及び水相を予備混合、すなわち予備均質化又は予備乳化して、水中油型プレエマルジョン、すなわち水中油型前駆体エマルジョン（以下、Ｏ／Ｗプレエマルジョンと略す。）を形成する工程、及び
ｃ）少なくとも１つのカウンタジェット分散機によりＯ／Ｗプレエマルジョンを均質化してＯ／Ｗエマルジョンを形成する工程、
を含む。
【００１３】
本発明の文脈において、「水相」という用語は、完成したＯ／Ｗエマルジョン、すなわち、本発明による方法によって製造されたＯ／Ｗエマルジョンでは、外相又は連続相を形成する水又は含水液体、特に、水溶液を意味すると理解されるべきである。
【００１４】
本発明の文脈において、「油相」という用語は、完成したＯ／Ｗエマルジョン、すなわち本発明による方法によって製造されたＯ／Ｗエマルジョンでは、液滴の形態にあり、内相又は分散相を形成する油及び／又は脂質、及び／又は、油及び／又は脂質含有液体、特に油及び／又は脂質含有溶液を意味すると理解されるべきである。
【００１５】
本発明の文脈において、「液滴」という用語は、Ｏ／Ｗプレエマルジョン及び／又はＯ／Ｗエマルジョンの内部相又は分散相を形成する、油滴及び／又は脂肪滴、すなわち、少なくとも１種の油及び／又は少なくとも１種の脂質、及び／又は、油及び／又は脂質含有液滴からなる液滴、油滴を意味すると理解される。典型的には、この場合、Ｏ／Ｗプレエマルジョンは、Ｏ／Ｗエマルジョンより広い液滴直径分布によって、及び／又はＯ／Ｗエマルジョンよりも大きな直径、特により大きな平均直径の液滴によって特徴付けられる。
【００１６】
本発明の文脈において、「カウンタジェット分散機」という表現は、少なくとも２つ、好ましくは２つの対向するボア又はチャネルからのプレエマルジョン（プレエマルジョン又は粗エマルジョン）の２つ以上のジェットが液滴粉砕ゾーンで互いに出会う高圧ホモジナイザーを意味すると理解されるべきである。プレエマルジョンジェットが出会うと、プレエマルジョン中に存在する液滴は、特に剪断力の作用下で粉砕される。したがって、前述の液滴粉砕ゾーンは剪断ゾーンと呼ばれることもある。液滴が粉砕される程度は、特に、Ｏ／Ｗプレエマルジョン又はＯ／Ｗプレエマルジョンジェットがカウンタジェット分散機内で搬送される搬送速度に依存する。Ｏ／Ｗプレエマルジョン又はＯ／Ｗプレエマルジョンジェットの搬送速度は、カウンタジェット分散機のポンプ、特に高圧ポンプによって生じる圧力を介して制御することができる。
【００１７】
「少なくとも１つのカウンタジェット分散機」という表現は、以下でより詳細に説明するように、カウンタジェット分散機、又は、好ましくは、複数のカウンタジェット分散機、すなわち２つ又は３つ以上のカウンタジェット分散機を意味することもある。
【００１８】
工程ｃ）を実施するために提供される少なくとも１つのカウンタジェット分散機は、好ましくは、少なくとも２つ、特に２つ、好ましくは２つの対向するチャネル又はそれ以上のチャネルを有する。チャネルは、例えばマイクロメートル範囲の内径を有する。結果として、Ｏ／Ｗプレエマルジョン中に存在する液滴の特に強力な剪断、及びその結果として、狭い又は制限された液滴直径分布を有するＯ／Ｗエマルジョンの製造を達成することができる。
【００１９】
少なくとも１つのカウンタジェット分散機のチャネルは、さらに、特に、Ｙ字型の構成又は配置を有することができる。
【００２０】
本発明は、とりわけ、以下の驚くべき発見及び利点に基づく。
−  油相と水相を予備乳化し、その後、少なくとも１つのカウンタジェット分散機を使用して高圧均質化することにより、一方ではＯ／Ｗエマルジョンの製造時間が大幅に短縮され、他方では製造されるＯ／Ｗエマルジョンの品質をよりよく制御することができ、特に、この製造は、質的に高品質のＯ／Ｗエマルジョンを達成することができる。
−  例えば、本発明による方法により、処理時間を最大７５％短縮することが可能である。その結果、製造コストを大幅に節約でき、単位時間あたりに製造できるエマルジョンバッチの数を大幅に増やすことができる。全体として、これは生産性の大幅な向上をもたらす。
−  生産性の観点から、カウンタジェット分散機が、一般的に、静的、すなわち一定のチャンバー寸法を有することも有利である。これにより、スケールアッププロセスの実施が容易になる。例えば、複数のカウンタジェット分散機を使用する場合、チャンバーの数を体積に比例してスケールアップすることができる。
−  品質の観点から、少なくとも１つのカウンタジェット分散機の使用によって、製造される最終的なＯ／Ｗエマルジョンの液滴直径分布を目標としたやり方で特定及び制御できることが特に有利である。例えば、本発明による方法は、特に、１８０ｎｍ〜３４０ｎｍ、特に２００ｎｍ〜３２０ｎｍ、好ましくは２００ｎｍ〜３００ｎｍ、特に好ましくは２４０ｎｍ〜２８０ｎｍの液滴直径、特に平均液滴直径（光子相関分光法、ＰＣＳによって決定される）を有するＯ／Ｗエマルジョンの製造を可能にする。
−  さらに、以下でより詳細に説明するように、本発明による方法の助けを借りて、製造されるＯ／ＷエマルジョンのＰＦＡＴ５値をより良好に制御でき、特に大幅に低減できることが有利である。結果として、本発明によって製造されたＯ／Ｗエマルジョンの非経口投与の場合の脂肪塞栓症のリスクを大幅に低減することができる。
【００２１】
本発明に従って提供される水相は、乳化剤を使用して、すなわち、水又は含水液体に乳化剤を添加することによって提供することができる。特に、水相は、乳化剤を水又は含水液に溶解させることによって提供することができる。この目的のために、水相を４０℃〜８０℃、特に５０℃〜７０℃の温度に加熱することができる。使用される乳化剤は、リン脂質、動物由来のリン脂質、植物由来のリン脂質、例えば卵レシチンなどのレシチン、オキアミリン脂質、及び上記の乳化剤のうちの少なくとも２種の混合物からなる群から選択される化合物であることができる。
【００２２】
さらに、水相は、添加剤を使用して、すなわち、水又は含水液体に添加剤を添加することによって提供することができる。特に、水相は、添加剤を水又は含水液体に溶解させることによって提供することができる。使用される添加剤は、乳化助剤、安定化剤、等張化剤、及び上記の添加剤のうちの少なくとも２種の混合物からなる群から選択される化合物であることができる。使用される乳化助剤は、例えば、長鎖脂肪酸のアルカリ金属塩、例えば、１６〜１８個の炭素原子を有する脂肪酸のアルカリ金属塩であることができる。使用される安定化剤又は等張化剤は、例えば、特にグリセロール、グルコース、キシリトール、及び上記の安定化剤又は等張化剤のうちの少なくとも２種の混合物からなる群から選択される多価アルコールであり得る。
【００２３】
油相は、植物由来の油、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、動物由来の油、海洋由来の油、及び上記の油又は脂質のうちの少なくとも２種の混合物からなる群から好ましくは選択される油及び／又は脂質を使用して提供することができる。使用することができる植物由来の油は、例えば、ベニバナ油及び／又は大豆油である。これらの油は、ω−６シリーズの多価不飽和脂肪酸（主にリノール酸、１８：２  ω−６）の割合が高い一方で、ω−３脂肪酸（ほとんどがα−リノレン酸として、１８：３  ω−３）の含有量が低いという特徴がある。中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）は、炭素原子数６〜１４、特に好ましくは炭素原子数８〜１０の炭素鎖長を有する。使用することができる海洋由来の油は、例えば、魚油及び／又はオキアミ油である。オキアミから得られるオキアミ油のように、冷水魚から得られる魚油は、多価不飽和脂肪酸（主にエイコサペンタエン酸、ＥＰＡ、２０：５  ω−３及びドコサヘキサエン酸、ＤＨＡ、２０：６  ω−３）の比率が高い一方で、ω−６脂肪酸の含有量は低いという特徴がある。例えば、好適な魚油は、技術的にかなりの程度の冷水魚から得られたものである。魚油は一般的に、炭素原子数１２〜２２の脂肪酸のトリグリセリドを含む。使用することができる魚油は、例えば、イワシ油、サーモン油、ニシン油、サバ油、及び上記の魚油のうちの少なくとも２種の混合物からなる群から選択される油である。代替的又は追加的に、対応する魚油濃縮物及び／又はオキアミ油を使用してもよい。
【００２４】
油相は、乳化剤を使用して、すなわち、乳化剤を、油又は油混合物に、油含有液体に、脂質又は脂質混合物に、あるいは脂質含有液体に加えること、特に、乳化剤を油又は油混合物に、油含有液体に、脂質又は脂質混合物に、あるいは脂質含有液体に溶解させることによって提供することもできる。この場合、使用される乳化剤は、リン脂質及び少なくとも２種のリン脂質の混合物からなる群から好ましくは選択される化合物であることができる。
【００２５】
油相は、添加剤を使用して、すなわち、添加剤を、油又は油混合物に、油含有液体に、脂質又は脂質混合物に、あるいは脂質含有液体に加えること、特に、乳化剤を油又は油混合物、油含有液体、脂質又は脂質混合物、あるいは脂質含有液体に溶解させることによって提供することもできる。使用される添加剤は、例えば、抗酸化剤、例えば、トコフェロール及び／又は生理学的に無害なトコフェロールエステル、例えばα−トコフェロールアセテートなどのであることができる。
【００２６】
さらに、乳化剤を含む水相及び乳化剤を含まない油相を提供することができる。Ｏ／Ｗエマルジョンを製造するための、英国法（English method）と呼ばれるこの変法は、少量の乳化剤がしばしば必要とされる下記の大陸法（continental method）よりも優れている。
【００２７】
あるいは、乳化剤を含まない水相及び乳化剤を含む油相を提供することができる。Ｏ／Ｗエマルジョンを製造するための大陸法と呼ばれるこの変法には、リン脂質の良好な分散性のため、処理時間の短縮をもたらすという利点がある。
【００２８】
本発明による方法は、英国法又は大陸法のいずれかに基づいて、特にプロセスシーケンスを変更することなく、及び／又はプロセスプラントを変換することなく、格別の利点を伴って実施することができる。
【００２９】
原則として、油相及び水相を、工程ｂ）を実施する前にすでに一つにまとめられてもよい。特に、工程ｂ）が実施される前に、油相がすでに水相に加えられてもよい。
【００３０】
あるいは、油相及び水相は、工程ｂ）を実施するときにのみ一つにすることができる。
【００３１】
本発明の１つの構成では、工程ｂ）は、少なくとも１つのローターステーター分散機、特にローターステータースターラーを使用して実施される。
【００３２】
本発明の文脈における「ローターステーター分散機」という用語は、ローターステーターの原理に基づいて作動する、すなわちローター及びステーター（いわゆるローターステーターシステム）を含む分散機、特に撹拌機又はプレホモジナイザーを意味するものとする。
【００３３】
少なくとも１つのローターステーター分散機のローター及び／又はステーターの構成、例えば剪断スロットの幅及び／又は数及び／又は相互間隔、及び／又はローターの速度、及び／又は油相及び水相が少なくとも１つのローターステーター分散機を通過する流量によって、液滴粉砕、特に液滴剪断のための比エネルギー入力に特に有利に影響を及ぼすことができる。
【００３４】
本発明のさらなる構成において、油相及び水相は、互いに空間的に分離された少なくとも１つのローターステーター分散機に供給される。
【００３５】
本発明のさらなる構成において、油相及び水相は、同軸管、すなわちチューブインチューブ配置によって、又は同軸ホース、すなわちホースインホース配置によって、少なくとも１つのローターステーター分散機に供給される。このようにして、少なくとも１つのローターステーター分散機内の各液滴が十分な乳化剤濃度に曝されることを特に有利に確保することができる。本発明による方法が、例えば、英国法を使用して実施される場合、油相が中央管又は中央ホースを通過し、水相が中央管を取り囲む（同軸）外管又は中央ホースを囲む（同軸）外側ホースを通過することが好ましい。対照的に、大陸法を使用する場合、水相が中央管又は中央ホースを通過し、油相が中央管を取り囲む（同軸）外管又は中央のホースを取り囲む（同軸）外側ホースを通過することが好ましい。これらの方法の混合形式の場合は、英国法の構成を使用することができる。
【００３６】
本発明の文脈において、「少なくとも１つのローターステーター分散機」という表現は、１つのローターステーター分散機又は複数のローターステーター分散機、すなわち２つ又は３つ以上のローターステーター分散機、例えば２、３、４又は５つのローターステーター分散機を意味することがある。
【００３７】
したがって、工程ｂ）は、原則として、たった１つのローターステーター分散機を使用して実施することができる。
【００３８】
あるいは、工程ｂ）は、複数のローターステーター分散機を使用して、特に並列に接続された複数のローターステーター分散機を使用して、及び／又は直列に接続された複数のローターステーター分散機を使用して実施することができる。特に、工程ｂ）は、並列に接続されたローターステーター分散機のみを使用して実施できる。あるいは、工程ｂ）は、直列に接続されたローターステーター分散機のみを使用して実施できる。特に有利なことに、ローターステーター分散機を並列及び／又は直列に接続することにより、プロセス時間に影響を及ぼさずにプロセス生産性及びプロセス品質の両方を向上させることができる。少なくとも１つのローターステーター分散機に関して前の段落で説明した特徴及び利点は、多数のローターステーター分散機の使用と同様に適用される。
【００３９】
工程ｂ）は、例えば、インラインＵＬＴＲＡ−ＴＵＲＲＡＸ（登録商標）の名称で市販されている１つ又は複数のローターステーター分散機を使用して実施することができる。
【００４０】
本発明のさらなる構成において、油相及び水相は、好ましくは排他的に、少なくとも１つのローターステーター分散機の液滴粉砕ゾーン、特に剪断ゾーンを通過する。この文脈において、「液滴粉砕ゾーン」という表現は、ローター及び／又はステーターの作用により、特に剪断力の影響下で、液滴粉砕が起こるゾーン、すなわち、少なくとも１つのローターステーター分散機の領域又はセクションを意味するものとする。この段落に記載されている手順は、少なくとも１つのローターステーター分散機の液滴粉砕ゾーン、特に剪断ゾーンを通る油相及び水相の強制通過と呼ばれることもある。結果として、（すでに）工程ｂ）の間に、直径、特に平均直径が１μｍを超える液滴の大幅な減少を達成することが特に有利である。
【００４１】
原則として、Ｏ／Ｗエマルジョンを形成するために、Ｏ／Ｗプレエマルジョンを、直接、すなわち、さらなる中間工程なしで均質化することができる。結果として、製造時間のさらなる短縮、及びその結果としてのプロセス生産性のさらなる増加を有利な方法で達成することができる。
【００４２】
あるいは、Ｏ／Ｗプレエマルジョンは、工程ｃ）を実施する前に、中間貯蔵装置又は容器を通過させることができる。中間貯蔵装置又は容器は、特に有利であり、プロセスフローを維持するのに役立ち、したがって、少なくとも１つのローターステーター分散機と少なくとも１つのカウンタジェット分散機との間の調整を容易にする。
【００４３】
本発明のさらなる構成において、工程ｃ）は、５００バール（bar）〜２０００バール、特に８００バール〜１９００バール、好ましくは１０００バール〜１５００バールのポンプ圧力を使用して実施される。この段落に開示されているポンプ圧力は、液滴の粉砕、特に液滴の剪断、及び好ましくは狭い又は制限された液滴の直径分布を達成するために特に有利であることが見出された。
【００４４】
本発明の文脈において、「ポンプ圧力」という表現は、少なくとも１つのカウンタジェット分散機のポンプ、特に高圧ポンプによって生成される圧力を意味すると理解されることを意図している。これは、とりわけ、少なくとも１つのカウンタジェット分散機内でのＯ／Ｗプレエマルジョン、特にＯ／Ｗプレエマルジョンジェットの搬送速度に対して責任を負う。したがって、少なくとも１つのカウンタジェット分散機の液滴粉砕ゾーン、特に剪断ゾーン内のＯ／Ｗプレエマルジョンジェットの衝撃の速度、ひいては液滴粉砕、及びＯ／Ｗエマルジョンを形成するＯ／Ｗプレエマルジョンの均質化を、ポンプ圧力を介して制御することができる。この範囲で、ポンプ圧力は、本発明の文脈において均質化圧力と呼ばれることもある。
【００４５】
本発明のさらなる構成において、工程ｃ）は、３０℃〜８０℃、特に４０℃〜７７．５℃、好ましくは４０℃〜７５℃、特に好ましくは４０℃〜６５℃のＯ／Ｗプレエマルジョンの温度で実施される。言い換えれば、少なくとも１つのカウンタジェット分散機が、３０℃〜８０℃、特に４０℃〜７７．５℃、好ましくは４０℃〜７５℃、特に好ましくは４０℃〜６５℃の温度で運転されることが好ましく、言い換えれば、工程ｃ）を実施するときのＯ／Ｗプレエマルジョンの温度が３０℃〜８０℃、特に４０℃〜７７．５℃、好ましくは４０℃〜７５℃、特に好ましくは４０℃〜６５℃であることが好ましい。したがって、この段落に開示されている温度は、本発明の文脈では均質化温度と呼ばれることもある。この段落に開示されている温度は、液滴粉砕、特に液滴剪断、及び好ましくは狭い又は制限された液滴直径分布を達成するために特に有利であることが（も）見出された。
【００４６】
例えば、工程ｃ）を実施するための少なくとも１つのカウンタジェット分散機は、１９００バールのポンプ圧力及び４０℃のＯ／Ｗプレエマルジョンの温度で運転することができる。
【００４７】
工程ｃ）を実施するための少なくとも１つのカウンタジェット分散機は、例えば、１５００バールのポンプ圧力及び５０℃のＯ／Ｗプレエマルジョンの温度で運転することもできる。
【００４８】
工程ｃ）を実施するための少なくとも１つのカウンタジェット分散機は、例えば、１０００バールのポンプ圧力及び６０℃のＯ／Ｗプレエマルジョンの温度で運転することもできる。
【００４９】
本発明のさらなる構成において、Ｏ／Ｗプレエマルジョンは、工程ｃ）を実施するときに、少なくとも１つのカウンタジェット分散機を２回以上、特に２回、３回、４回又は５回通過させる。Ｏ／Ｗプレエマルジョンを少なくとも１つのカウンタジェット分散機に数回通過させることにより、特に平均液滴直径及び／又はＰＦＡＴ５値に関して、プロセス品質の向上を特に有利に達成することができる。
【００５０】
本発明のさらなる構成において、工程ｃ）は、複数のカウンタジェット分散機によって、特に２、３、４又は５つのカウンタジェット分散機によって実施される。工程ｃ）は、好ましくは、並列に接続された複数のカウンタジェット分散機によって、及び／又は直列に接続された複数のカウンタジェット分散機によって実施される。複数のカウンタジェット分散機を使用することにより、特にカウンタジェット分散機を並列及び／又は直列に接続することにより、特に平均液滴直径及び／又はＰＦＡＴ５値に関して、プロセス品質の大幅な改善も達成することができる。さらに、この手法により、プロセス生産性を向上させることができる。カウンタジェット分散機を直列に接続しても、プロセス時間は変わらない。並列接続の場合、プロセス時間は比例して短縮される。したがって、全体として、大幅な時間の節約があり、それによって、単位時間あたりに製造できるＯ／Ｗエマルジョンバッチの数が大幅に増加し、その結果、プロセス生産性の大幅な向上を達成することができる。
【００５１】
特に、工程ｃ）は、並列に接続されたカウンタジェット分散機のみを使用して実施することができる。
【００５２】
あるいは、工程ｃ）は、直列に接続されたカウンタジェット分散機のみを使用して実施することができる。
【００５３】
本発明のさらなる構成において、工程ｃ）は、直列に接続された少なくとも２つのカウンタジェット分散機を使用して、特に直列に接続された２つのカウンタジェット分散機のみを使用して実施される。第１のカウンタジェット分散機は、好ましくは、第２の、すなわち下流のカウンタジェット分散機よりも高いポンプ圧力で運転される。第１のカウンタジェット分散機は、特に好ましくは、最大１９００バール、好ましくは最大１５００バールのポンプ圧力で、特に８００バール〜１４００バール、好ましくは１０００バール〜１２００バールのポンプ圧力で運転され、第２のすなわち、下流のカウンタジェット分散機は、１０００バール未満のポンプ圧力、特に５００バール〜８００バール、好ましくは５００バールのポンプ圧力で運転される。
【００５４】
本発明はさらに、１μｍ〜５０μｍの直径、特に平均直径を有する液滴が、１０００バール未満、特に５００バール〜８００バール、できれば５００バールのポンプ圧力で優先的に粉砕され得るという驚くべき発見に基づく。その結果、特に有利な点として、ＰＦＡＴ５値を制御できる。これは、非経口投与されるＯ／Ｗエマルジョンにとって重要である。
【００５５】
さらに、本発明は、圧力カスケードによって、特に、直列に接続された少なくとも２つのカウンタジェット分散機によって、最後から２番目の段落に記載されているように、第１のカウンタージェット分散機を、第２の（下流）カウンタジェット分散機よりも高いポンプ圧力で運転し、特に第１のカウンタジェット分散機のポンプ圧力によって、直径、特に平均直径が＜５００ｎｍ、特に＜４００ｎｍ、好ましくは＜３５０ｎｍ、特に、２００ｎｍ〜３２０ｎｍ、好ましくは２００ｎｍ〜３００ｎｍ、特に好ましくは２４０ｎｍ〜２８０ｎｍの液滴を生成させることができ、さらに、特に第２のカウンタジェット分散機のポンプ圧力によって、特に、１μｍ以上、特に１μｍ〜５０μｍまでの直径、特に平均直径を有する液滴の割合を大幅に、特に再現性よく減少させることができるという驚くべき発見に基づく。
【００５６】
例えば、第１のカウンタジェット分散機は、１９００バールのポンプ圧力で運転することができ、第２のカウンタジェット分散機は、５００バールのポンプ圧力で運転することができる。
【００５７】
また、例として、第１のカウンタジェット分散機は、１５００バールのポンプ圧力で運転することができ、第２のカウンタジェット分散機は、５００バールのポンプ圧力で運転することができる。
【００５８】
また、例として、第１のカウンタジェット分散機は、１２００バールのポンプ圧力で運転することができ、第２のカウンタジェット分散機は、５００バールのポンプ圧力で運転することができる。
【００５９】
さらに、第１のカウンタジェット分散機及び第２のカウンタジェット分散機はそれぞれ、同じ温度のＯ／Ｗプレエマルジョンで運転することができる。この点に関して、Ｏ／Ｗプレエマルジョンに関連してこれまでの説明ですでに開示された均質化温度が参照される。例えば、第１のカウンタジェット分散機及び第２のカウンタジェット分散機の両方は、５０℃のＯ／Ｗプレエマルジョンの温度で運転することができる。
【００６０】
カウンタジェット分散機として、ナノジェット（Nanojet）又はマイクロフルイダイザー（Microfluidizer）（登録商標）の名称で市販されている１つ又は複数のカウンタジェット分散機を使用することが可能である。
【００６１】
さらなる構成において、減圧器は、少なくとも１つのカウンタジェット分散機の下流に接続される。減圧器は、好ましくは、少なくとも１つのカウンタジェット分散機によって生じる圧力、特にポンプ圧力に対して逆圧（counter pressure）を生じるように構成される。例えば、減圧器は、１０バール〜１００バール、特に３０バール〜７０バールの逆圧を生じるように構成することができる。減圧器を使用することにより、プロセス安定性を特に有利に達成することができる。特に、ガス放出現象は減圧器によって回避することができる。複数のカウンタジェット分散機の場合、各カウンタジェット分散機の下流に減圧器を接続することができる。
【００６２】
本発明による方法は、好ましくは、液滴直径、特に１８０ｎｍ〜３４０ｎｍ、特に２００ｎｍ〜３２０ｎｍ、好ましくは２４０ｎｍ〜２８０ｎｍの平均液滴直径（光子相関分光法、ＰＣＳによって決定される）を有するＯ／Ｗエマルジョンを製造するために使用される。
【００６３】
さらに、本発明による方法は、＜０．０５％、特に＜０．０４％、好ましくは＜０．０３％、より好ましくは＜０．０２％、特に好ましくは≦０．０１％、特に＜０．０１％のＰＦＡＴ５値を有するＯ／Ｗエマルジョンを製造するために使用される。本発明による方法によって、例えば、０．００１％〜０．０１％のＰＦＡＴ５値を有するＯ／Ｗエマルジョンを製造することができる。
【００６４】
本発明のさらなる構成において、非経口的に投与されるＯ／Ｗエマルジョンは、本発明による方法によって製造される。
【００６５】
第２の態様によれば、本発明は、本発明の第１の態様による方法によって製造される、又は製造することができる水中油型エマルジョン（以下、Ｏ／Ｗエマルジョンと略される）に関する。
【００６６】
あるいは、又は組み合わせて、第２の態様によれば、本発明は、＜０．０４％、特に＜０．０３％、好ましくは＜０．０２％、特に好ましくは≦０．０１％、特に＜０．０１％のＰＦＡＴ５値を有する水中油型エマルジョン（以下、Ｏ／Ｗエマルジョンと略す。）に関する。例えば、Ｏ／Ｗエマルジョンは０．００１％〜０．０１％のＰＦＡＴ５値を有することができる。
【００６７】
Ｏ／Ｗエマルジョンが、１８０ｎｍ〜３４０ｎｍ、特に２００ｎｍ〜３２０ｎｍ、好ましくは２００ｎｍ〜３００ｎｍ、特に好ましくは２４０ｎｍ〜２８０ｎｍ平均液滴直径（光子相関分光法、ＰＣＳによって決定される）を有する場合も好ましい。
【００６８】
Ｏ／Ｗエマルジョンのさらなる特徴及び利点に関して、本発明の第１の態様の文脈でなされた記述を完全に参照する。本発明による方法に関連してそこに記載されている特徴及び利点はまた、本発明の第２の態様によるＯ／Ｗエマルジョンにも同様に適用される。
【００６９】
第３の態様によれば、本発明は、水中油型エマルジョン（以下、Ｏ／Ｗエマルジョンと略す。）を製造するためのシステム、及び／又は本発明の第１の態様による方法を実施するためのシステムに関する。
【００７０】
このシステムは、油相及び水相を、予備混合、すなわち、予均質化又は予備乳化して、水中油型プレエマルジョン（水中油型前駆体エマルジョン）（以下、Ｏ／Ｗプレエマルジョンと略す。）を形成するための少なくとも１つの分散機、及び、Ｏ／Ｗプレエマルジョンを水中油型エマルジョン（以下、Ｏ／Ｗエマルジョンと略す。）に均質化するための少なくとも１つの好ましくは下流のカウンタジェット分散機とを有する。
【００７１】
少なくとも１つの分散機（Ｏ／Ｗプレエマルジョンを予備混合するためのもの）は、好ましくは、ローターステーター分散機、特にローターステーターとして設計される。
【００７２】
このシステムは、１つのローターステーター分散機又は複数のローターステーター分散機、すなわち、２つ、３つ、４つ又は５つのローターステーター分散機などの２つ又は３つ以上のローターステーター分散機を有することができる。
【００７３】
特に、このシステムは、並列に接続された複数のローターステーター分散機、及び／又は直列に接続された複数のローターステーター分散機を有することができる。
【００７４】
さらに、このステムは、１つのカウンタジェット分散機又は複数のカウンタジェット分散機、すなわち、２つ又は３つ以上のカウンタジェット分散機、例えば２つ、３つ、４つ又は５つのカウンタジェット分散機などを有することができる。
【００７５】
特に、このシステムは、並列に接続された複数のカウンタジェット分散機、及び／又は直列に接続された複数のカウンタジェット分散機を有することができる。
【００７６】
このシステムは、好ましくは、直列に接続された少なくとも２つのカウンタジェット分散機を有する。
【００７７】
さらに、中間容器は、少なくとも１つの分散機（Ｏ／Ｗプレエマルジョンを予備混合するため）と少なくとも１つのカウンタジェット分散機との間に接続されてもよい。中間容器は、プロセスフローを緩衝することによって特に有利な、少なくとも１つのローターステーター分散機と少なくとも１つのカウンタジェット分散機との間の調整を容易にする。
【００７８】
さらに、減圧器は、少なくとも１つのカウンタジェット分散機の下流に接続されてもよい。本発明のさらなる特徴及び利点は、図の説明及び関連する図、並びに例の形での好ましい実施形態についての以下の説明から生じる。この場合、単一の機能をそれぞれ個別に又は互いに組み合わせて実装できる。以下に記載される実施形態は、本発明を限定せずに、例として本発明を単に反映するものである。
以下は、図に概略的に示されている。
【図面の簡単な説明】
【００７９】
【図１】図１は、本発明に従って使用することができるカウンタジェット分散機のマイクロチャネル構造である。
【図２】図２は、本発明による方法のフロー図である。
【図３】図３は、本発明による方法のさらなるフロー図である。
【図４】図４は、本発明による方法のさらなるフロー図である。
【発明を実施するための形態】
【００８０】
図１は、本発明に従って使用することができるカウンタジェット分散機のチャネル構造１を示す。示したチャネル構造１は、Ｙ字型の配置を有し、例えば、マイクロメートル範囲の内径ｄを有することができる。Ｏ／Ｗプレエマルジョンを、カウンタジェット分散機のポンプ（高圧ポンプ）によって生じた圧力によって、入口２及び３を介してチャネル構造１に通過させることができる。チャネル４と６が対向して配置されているため、Ｏ／Ｗプレエマルジョンのジェットは液滴粉砕ゾーン５で互いに遭遇する。特に剪断力の影響下で、Ｏ／Ｗプレエマルジョン中に存在する液滴の粉砕が起こる。得られたＯ／Ｗエマルジョンは、出口７を介してチャネル構造１を出ることができる。
【００８１】
図２は、英国法による本発明による方法のフロー図を概略的に示す。
【００８２】
水相を提供するために、ローターステーターシステム１１を備えた予備分散機１０が使用される。これにより、例えば卵レシチンなどの乳化剤を水、特に注射用水（ＷＦＩ）中に分散させることができる。乳化剤に加えて、水を、例えばグリセロールなどの安定化剤又は等張化剤、及び例えばオレイン酸ナトリウムなどの乳化剤と混合することもできる。その後、混合物を、例えば、６０分間にわたって、５５℃〜７５℃の温度に、加熱又は温度制御することができる。
【００８３】
油相を、撹拌要素２１を備えた予備温度制御容器として構成することができる容器２０内に提供することができる。油相を提供するために、例えば、大豆油及び中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）並びにα−トコフェロールを使用することができる。容器２０で生成された混合物も、例えば５５℃〜７５℃の温度に加熱又は温度制御することができる。
【００８４】
次に、このようにして提供された油相及び水相を、ローターステーター分散機３０に供給する。この場合、油相及び水相を、好ましくは、互いに空間的に分離されたローターステーター分散機３０に供給する。これは、例えば、同軸管又は同軸ホースによって達成することができる。これにより、油滴が十分な乳化剤濃度にさらされることが確保される。
【００８５】
油相及び水相は、好ましくは、ローターステーター分散機３０の剪断ゾーン３２を通過する。その結果、直径、特に平均直径が１μｍ以上の油滴の効果的な粉砕がこのプロセス段階ですでに達成される、以下のことができる。ローターステーター分散機３０では、油相と水相が予備混合され、Ｏ／Ｗプレエマルジョンを形成する。
【００８６】
ローターステーター分散機の出口３４を介して、Ｏ／Ｗプレエマルジョンを、中間貯蔵容器４０を介して少なくとも１つのカウンタジェット分散機５０に供給することができる。中間貯蔵装置又は容器は、特に有利なことに、プロセスフローを維持するのに役立ち、したがって、ローターステーター分散機３０と少なくとも１つのカウンタジェット分散機５０との間の調整を容易にする。
【００８７】
カウンタジェット分散機５０は、高圧ポンプ、特に、５００バール〜１９００バールの範囲内の圧力を生じることができる高圧ポンプによって運転される。カウンタジェット分散機５０内で生成されたポンプ圧力によって、Ｏ／Ｗプレエマルジョンは、好ましくは対向するチャネルを備えたマイクロチャネル構造を通してポンプで送られる。この場合、Ｏ／Ｗプレエマルジョンのジェットは液滴粉砕ゾーンで互いに接触し、その結果、特に剪断力の影響下で、Ｏ／Ｗプレエマルジョン中に存在する液滴が粉砕される。この場合、特に有利なことに、直径、特に平均直径（光子相関分光法、ＰＣＳによって決定される）が１８０ｎｍ〜３４０ｎｍ、特に２００ｎｍ〜３２０ｎｍ、好ましくは２４０ｎｍ〜２８０ｎｍである液滴を生成させることができる。
【００８８】
次に、カウンタジェット分散機５０で生成されたＯ／Ｗエマルジョンは、さらに、適切な包装サイズで充填するために、充填容器７０に移すことができる。
【００８９】
図３は、英国法に従って実施される本発明による方法のさらなるフロー図を概略的に示す。
【００９０】
示した方法は、直列に接続された２つのカウンタジェット分散機５０及び６０で実施されるという点で、図１に示される方法とは異なる。
【００９１】
この場合、１８０ｎｍ〜３４０ｎｍ、特に２００ｎｍ〜３２０ｎｍ、好ましくは２００ｎｍ〜３００ｎｍ、特に好ましくは２４０ｎｍ〜２８０ｎｍの直径、特に平均直径（光子相関分光法、ＰＣＳによって決定される）を有する液滴が、好ましくは、第１のカウンタジェット分散機５０で生成され、一方、第２の、すなわち下流のカウンタジェット分散機６０では、好ましくは、１μｍ以上の直径、特に平均直径を有する液滴の割合が減少し、ＰＦＡＴ５値が減少する。この目的のために、第１のカウンタジェット分散機５０を、例えば、１５００バールのポンプ圧力で運転することができ、カウンタジェット分散機５０内のＯ／Ｗプレエマルジョンは、好ましくは５０℃の温度を有する。第２のカウンタジェット分散機６０は、好ましくは５００バールのポンプ圧力で運転され、カウンタジェット分散機６０内のＯ／Ｗエマルジョンは、好ましくは５０℃の温度を有する。
【００９２】
他の点では、プロセスシーケンス及び参照番号は、図２に示されるプロセスシーケンス及び図２に示される参照番号に対応する。
【００９３】
図４は、本発明による方法のさらなるフロー図を概略的に示す。ただし、この場合、手順は大陸法に基づく。
【００９４】
この目的のために、水相は、予備温度制御容器として構成することができる容器１５によって提供され、油相は、ローターステーターシステム２３を備えた予備分散機２５によって提供される。
【００９５】
水相を提供するために、水、特に注射用水（ＷＦＩ）を、例えば、水酸化ナトリウム水溶液及びグリセロールと混合することができ、こうして得られた混合物を、例えば、撹拌要素１３を用いて撹拌しながら５５℃〜７５℃の温度に加熱又は温度制御することができる。油相を提供するために、例えば、オレイン酸、大豆油及び中鎖トリグリセリドを、乳化剤、例えば卵レシチンや、抗酸化剤、例えばα−トコフェロールなどと混合し、することができ、このようにして得られた混合物を撹拌しながら５５℃〜７５℃の温度に加熱又は温度制御することもできる。
【００９６】
他の点では、プロセスシーケンス及び参照番号は、図２に示されるプロセスシーケンス及び図２に示される参照番号に対応する。
【実施例】
【００９７】
１．非経口脂肪エマルジョンの調製（リポフンジンＭＣＴ／ＬＣＴ  ２０％）
調製プロセスは、以下の３つのプロセス工程に分割した。
最初の工程で、油相と水相を準備した。水相は、乳化剤を粉砕し、溶解させるために、撹拌槽型反応器で調製した。油相は、マグネチックスターラー上で単純に油相の温度を制御することによって生成させた。
【００９８】
第２の工程において、Ｏ／Ｗプレエマルジョンを、インラインＵＬＴＲＡ−ＴＵＲＲＡＸ（登録商標）（Ｙｔｒｏｎ−Ｚ）の名称で市販されているローターステーター分散機によって調製した。従来のプロセスとは対照的に、油相と水相を、強制通過によってローターステーター分散機の剪断ゾーンを通過させた。これにより、油相の全部分が均質化ゾーンを通過することも確保された。古典的な撹拌槽型反応器では、ローターステータースターラーへの油相の導入は統計的に考慮されることができるのみで、経験は、それが限られた範囲でしか制御できない望ましくない広い粒子分布につながることを示している。
【００９９】
第３の工程において、最終的な微細エマルジョンを、カウンタジェット分散機として構成されたＰＳＩ−４０タイプの高圧ホモジナイザーを使用して生成させた。動的バルブを使用して液滴を分解する従来のプロセスで使用されるピストンギャップホモジナイザーとは対照的に、カウンタジェット分散機は、液滴を分解するための静的マイクロチャネル構造を有する。
【０１００】
１．１．  ローターステーター分散機（インラインローターステーター、Ｙｔｒｏｎ−Ｚ）
使用したローターステーター分散機（Ｙｔｒｏｎ−Ｚ）は、１１個の主要な構成要素から構成されていた。原材料（油相と水相）は、ディスクバルブを介してそれぞれ開閉できる２つの供給漏斗を介してのシステムへの計量添加のために供給することができる。そこから、原材料は２つのダイヤフラムモーター駆動計量ポンプ（ＰｒｏＭｉｎｅｎｔ（登録商標）Ｓｉｇｍａ／１  コントロールタイプＳ１Ｃｂ）の入口に直接流れ込んだ。これらの２つのポンプは、電気モーターによって駆動される振動変位ポンプの原理に基づいて動作した。これにより、ストローク運動がプッシュロッドによって計量ダイヤフラムに伝達された。予め決定した計量プロファイルに従ってストロークを実施でき、原材料の特性（粘度及び／又はガス放出特性）に応じて調整できるように、ディスプレーサのストローク運動を継続的に記録及び調整した。各油滴が直接乳化剤濃度に曝されるように、計量添加は、チューブインチューブ構造を有する計量ヘッドを介して行った。油相は内管の中心を介して供給し、水相は周囲の外管に供給した。原材料を、２つの計量ポンプによって反応器ヘッドに直接ポンプ輸送し、強制通路を通って回転ローター／ステーターセットに直接流れ込んだ。これは、三相モーター（ＡＴＢ  Ｍｏｔｏｒｅｎｗｅｒｋｅ  ＧｍｂＨ、ＩＭ  Ｂ３；１．５ｋＷ）によって駆動した。
【０１０１】
生成物は、ローター／ステーターを通過し、圧縮空気駆動ピンチバルブ（ＫＶＴ  ＧｍｂＨ）によって狭められた生成物出口を介して反応器ヘッドを出た。
【０１０２】
ピンチバルブは、一方では、２つのダイヤフラム計量ポンプの正確な機能のための技術的に義務的な逆圧バルブとして機能し、他方では、反応器ヘッドがその動作体積に達し、プロセス中に空で運転しないことを保証するために、生成物出口用のリダクションユニットとして機能した。システムは、プログラム可能なロジックコントローラー（ＰＬＣ、ＳＩＭＡＴＩＣ、Ｓｉｅｍｅｎｓ  ＡＧ）を使用してスイッチキャビネットを介して制御した。２つの計量ポンプの比率とローターステーター分散機の速度は、スイッチキャビネットドアに取り付けられたタッチパネルを介して同時に入力及び開始できる。ローターステーター分散機のシャフトは、生成物潤滑メカニカルリングシールによってシールした。
【０１０３】
ローターディスクを、フェザーキーによって三相モーターの回転シャフトにクランプし、Ｏリングシールを備えたローターねじによって回転シャフトにしっかりと固定した。ステーターを反応器カバーにしっかりとねじで取り付け、ステーターは、リアクターヘッドを閉じたときにローターディスクに接触することなく動いた。反応器ヘッドは、Ｏリングシールとクランプ接続を用いて閉じた。
【０１０４】
１．２．  モデルエマルジョンの処方（リポフンジン（Lipofundin）ＭＣＴ／ＬＣＴ  ２０％；非経口脂肪エマルジョン）
Ｏ／Ｗエマルジョンの一例を調製するために、以下の表１に示す処方を使用した。
【０１０５】
【表１】
2021520993.tif 000003
【０１０６】
１．３．  手順：
ダブルジャケットを介して温度制御ユニットによって６５℃のプロセス温度に加熱された１０リットルの撹拌タンク内で水相を生成させた。このプロセス工程は、本質的に、水相で乳化剤を粉砕及び水和するのに役目を果たした。このプロセス工程では、卵レシチン（乳化剤）、グリセロール、オレイン酸ナトリウムを撹拌タンクに入れ、注射用の温度制御された（６５℃の）水（ＷｆＩ）で１０リットルの容積にした。
【０１０７】
分散のために、ＩＫＡ  Ｔ  ５０ＵＬＴＲＡ−ＴＵＲＲＡＸ（登録商標）の名称で入手可能なローターステータースターラーを最大速度（１０，０００回転／分）で使用した。撹拌タンクのジャケット温度制御によって６５℃で同時に温度制御しながら、ローターステータースターラーの撹拌タンク内で分散を１時間行った。
【０１０８】
続いて、水相を、インラインＵＬＴＲＡ−ＴＵＲＲＡＸ（登録商標）での使用に備えて、マグネチックスターラー上で７５℃のプロセス温度でさらに温度制御し、インラインローターステータリアクターの第１の貯蔵容器に移した。この貯蔵容器は、乳化中に水相をプロセス温度にするジャケット温度制御も備えていた。この工程で水相の準備が完了した。
【０１０９】
油相を生成させるために、大豆油、ＭＣＴ及びα−トコフェロールをガラスビーカーに入れ、次にマグネチックスターラー上で７５℃のプロセス温度で温度制御し、インラインＵＬＴＲＡ  ＴＵＲＲＡＸ（登録商標）での使用の準備をし、インラインローターステーターリアクターの第２の貯蔵容器に移した。この貯蔵容器は、乳化中に油相をプロセス温度にするジャケット温度制御も備えていた。この工程で油相の準備が完了した。
【０１１０】
スロット幅１ｍｍ、最内歯リングについてスターラー円周３３ｍｍ、中央歯リングについてスターラー円周４４ｍｍ、及び外歯リングについてスターラー円周５５ｍｍのローターを使用した。
【０１１１】
ステーターの歯間隔は０．５ｍｍであった。３つの歯付きリングの円周は、内歯リングで３８ｍｍ、中歯リングで４９ｍｍ、外歯リングで６０ｍｍであった。
【０１１２】
乳化の開始前に、計量添加及びローターステーター速度のプロセスパラメーターを、以下の表２に従って、インラインローターステーターの制御ユニットのＰＬＣに設定した。
【０１１３】
【表２】
2021520993.tif 000004
【０１１４】
システムを始動した後、生成物出口の圧力を２バールの逆圧に設定した。Ｏ／Ｗプレエマルジョンをガラスビーカーの生成物出口で収集し、撹拌下に継続的に保った。
【０１１５】
次に、Ｏ／Ｗエマルジョンを、カウンタジェット分散機として構成されたＰＳＩ−４０タイプの高圧ホモジナイザーに３回通過させることによって微細に乳化させた。従来の動的バルブの代わりに、この高圧ホモジナイザーは、静的なマイクロメートルサイズのチャネル構造を使用し、そこで液滴の崩壊が起こった。チャネルの寸法がはるかに狭く不変であるため、剪断力がより集約的になり、流れの分布がより小さくかつ再現性があり、より狭い液滴分布をもたらした。さらに、それらの静的なチャンバージオメトリのため、かかる高圧ホモジナイザーはより容易にスケーリングできる。液滴の崩壊は、３１６Ｌステンレス鋼ケーシングに沈められたダイヤモンドコアからなる相互作用チャンバー（剪断チャンバー）で起った。このダイヤモンドコアは上記の微細構造チャネルを備え、そこで液滴を加速させ、高いプロセス圧力で破壊させた。乳化にはいわゆるＹチャンバーを使用した。かかるチャンバー内のマイクロチャネルはＹ字型に形成された。この場合、５００バール〜２０００バールのプロセス圧力が可能であった。
【０１１６】
高いプロセス圧力でのキャビテーションによって引き起こされる損傷から相互作用チャンバーを保護するために、ＡＰＭ（補助処理モジュール）を相互作用チャンバー（二次チャンバー）の下流に接続した。この二次チャンバーは減圧器として機能し、一次チャンバーの出口側（出口）に低い逆圧を発生させた。したがって、誘導キャビテーションを伴う直接大気圧に対する相互作用チャンバーの減圧が防止された。実際には、ＡＰＭモジュールは、ステンレス鋼ケーシングに特別な寸法の穴が設けられたステンレス鋼コアであった。
【０１１７】
高圧ホモジナイザーのために、以下のプロセスパラメーター及びチャンバー構成を確立した：
【０１１８】
【表３】
2021520993.tif 000005
【０１１９】
Ｅ１０１Ｄチャンバーは、単一スロットのＹチャンバーであり、最大２０Ｌ／ｈの流量を提供した。
【０１２０】
ＡＰＭモジュールは、一次チャンバーＥ１０１Ｄについて約５０バールの逆圧を提供した。
【０１２１】
チャンバー構成をさらに最適化することによって、ＰＳＩ−４０高圧ホモジナイザーを用いてさらに改善されたエマルジョン品質を達成することができた。この構成は、以下のプロセスパラメーターで設定された。
【０１２２】
【表４】
2021520993.tif 000006
【０１２３】
Ｅ１０１Ｄチャンバーは、単一スロットのＹチャンバーであり、最大２０Ｌ／ｈの流量を提供した。
【０１２４】
ＡＰＭモジュール（低減された逆圧）は、一次チャンバＥ１０１Ｄに逆圧を提供したが、５０バールに近い減少した逆圧であった。
【０１２５】
生じた逆圧に関する情報は、製造業者のデータに基づく。
【０１２６】
以下の粒子分析を使用して、製造されたＯ／Ｗエマルジョンを特徴付けた。
【０１２７】
ａ）光子相関分光法（ＰＣＳ）：
この方法を使用して、ブラウン運動は、分散粒子の散乱光信号の自己相関関数の助けを借りて定量化される。測定では、規定波長の光線がレーザーによってサンプルを通過し、それによってレーザー光が散乱される。散乱光の強度は、粒子を取り巻く分子の非指向性拡散により、時間に依存する揺らぎの影響を受ける。これらの時間依存干渉現象は、散乱粒子のサイズに依存する。ナノメートル［ｎｍ］単位の平均粒子径又は液滴直径が出力パラメーターとして使用される。
【０１２８】
ｂ）顕微鏡画像の記録（顕微鏡写真）：
顕微鏡画像記録のために、各場合に１つの液滴（約１０ｌのサンプル）を、１００倍のイマージョンオイルレンズを備えた光学顕微鏡下でスライド上に観察した。スライド上の５点（左上、左下、右下、右上、中央）でこのサンプルからサンプル画像を取得し、ソフトウェアを使用して２μｍのサイズの液滴をカウントして評価した。
【０１２９】
単位［液滴］による顕微鏡写真を出力パラメーターとして使用した。顕微鏡写真は、１つの観察されたサンプルボリュームの５つのサンプル画像からの液滴の数に対応した。
【０１３０】
２．異なる均質化温度と圧力でのＯ／Ｗエマルジョンの調製
１．に従って調製された脂肪エマルジョンを、異なる均質化温度及び圧力を使用して調製した。タイプＰＳＩ−４０カウンタジェット分散機を使用した。Microfluidicsによる説明（チャンバーユーザーガイド、１２／３０／１４）から、均質化中にプロセス温度が圧力によってどのように変化するかが知られている（１００バール当たり２．５℃）。この温度は、Ｏ／Ｗプレエマルジョンのそれぞれの試験温度ＴＨ、すなわち、少なくとも１つのカウンタジェット分散機に入る前のＯ／Ｗプレエマルジョンの温度に加え、本発明の文脈における均質化温度を与えた。例えば、少なくとも１つのカウンタジェット分散機に入る前に２０℃の温度を有するＯ／Ｗプレエマルジョンの場合、４５℃のカウンタジェット分散機内のＯ／Ｗプレエマルジョンの温度は、１０００バールの均質化圧力（ポンプ圧力）で動作するカウンタジェット分散機の場合で計算される。
【０１３１】
測定したのは、５マイクロメートルより大きいエマルジョン液滴の百分率（ＰＦＡＴ５）、光子相関分光法（ＰＣＳ）を使用して測定された平均粒子径又は液滴直径（ＭＤＳ＝平均液滴サイズ）、顕微鏡カウントを使用した液滴の数、及びｐＨ値であった。
【０１３２】
２．１．    ２０℃での調査
【表５】
2021520993.tif 000007
【０１３３】
２．２．  ３０℃での調査
【表６】
2021520993.tif 000008
【０１３４】
２．３．  ４０℃での調査
【表７】
2021520993.tif 000009
【０１３５】
２．４．  ５０℃での調査
【表８】
2021520993.tif 000010
【０１３６】
２．５．  ６０℃での調査
【表９】
2021520993.tif 000011
【０１３７】
２．６．  ７０℃での調査
【表１０】
2021520993.tif 000012
【０１３８】
表５〜１０に示される試験結果は、Ｏ／Ｗエマルジョンの平均液滴直径が５００ｎｍの値を超えてはならないというＯ／Ｗエマルジョンの非経口投与に必要な最低限の医療基準が、製造されたすべてのＯ／Ｗエマルジョンにより満たされることを示している。さらに、表５〜１０に表形式で示される結果は、平均液滴直径が、圧力の増加及び／又は均質化サイクルの数の増加とともに減少し得ることを示している。
【０１３９】
さらに、得られた試験結果は、１μｍを超え、特に１μｍ〜５μｍの間の直径、特に平均直径を有する液滴が、好ましくは１０００バール未満の均質化圧力で、特に５００バールの均質化圧力で、粉砕されることを示している。これにより、特に、直列に接続された２つのカウンタジェット分散機の場合、最初のカウンタジェット分散機を介して生成されるＯ／Ｗエマルジョンの平均液滴径と、第２の、すなわち下流のカウンタジェット分散機によって生成されるＯ／ＷエマルジョンのＰＦＡＴ５値とを制御できる。このようにして、平均液滴直径に関する既存の最低限の基準とＰＦＡＴ５値に関して必要とされる最低限の基準の両方を、目標とする方法で満たすことができ、したがって、プロセス品質を大幅に向上させることができる。
【０１４０】
３．様々な圧力レベルでの均質化によるＯ／Ｗエマルジョンの調製
１．に従って調製された脂肪エマルジョンを、直列に接続された２つのカウンタジェット分散機（それぞれのＰＳＩ−４０タイプ）を使用して製造された。ここで得られた結果を以下の表１１〜１３に示す。
【０１４１】
２．７．  第１圧力段階  １９００バール
【表１１】
2021520993.tif 000013
【０１４２】
２．８．  第１圧力段階  １５００バール
【表１２】
2021520993.tif 000014
【０１４３】
２．９．  第１圧力段階  １０００バール
【表１３】
2021520993.tif 000015
【０１４４】
表形式で示た結果は、平均液滴直径に関して非経口的に投与されるＯ／Ｗエマルジョンに必要な医学的な最低限の基準が、製造された全てのＯ／Ｗエマルジョンによって満たされたことを示している。これらの結果は、直列に接続された第２のカウンタジェット分散機を使用することにより、平均液滴直径をさらに減少させることができることも示している。第２のカウンタジェット分散機が、均質化圧力（ポンプ圧力）＜１０００バール、特に５００バールの均質化圧力で運転される場合、非経口的に投与されるＯ／Ｗエマルジョンに適用可能なＰＦＡＴ５値を著しく低下させることができる。したがって、全体として、特に製造されるＯ／Ｗエマルジョンの平均液滴径とＰＦＡＴ５値に関して、プロセス品質の大幅な向上を達成できる。
【図１】
2021520993.tif 000016
【図２】
2021520993.tif 000017
【図３】
2021520993.tif 000018
【図４】
2021520993.tif 000019
【国際調査報告】
2021520993.tif 000020
2021520993.tif 000021
2021520993.tif 000022
2021520993.tif 000023
2021520993.tif 000024