(57)【要約】  本発明は、式(I)：2021503465.tif 000052の単一エナンチオマーのイソチアゾリン化合物、及び上記化合物を合成する方法に関する。本化合物は、無脊椎有害生物、特に節足動物有害生物及び線虫類を駆除又は防除するために有用である。また本発明は、これらの化合物を用いることにより無脊椎有害生物を防除するための方法、及び前記化合物を含む獣医学用組成物にも関する。【選択図】図２
2021503465.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)：
【化１】
2021503465.tif 000041
(式中、
各R1A、R1B、及びR1Cは、個別に、水素、アルキル、ハロゲン、又はハロアルキルであり、
R2は、ハロアルキルであり、
Xは、結合、C(O)、SO2、又はC(O)NHであり、
R3は、水素、場合により置換されたアルキル、場合により置換されたハロアルキル、場合により置換されたシクロアルキル、場合により置換されたヘテロシクリル、場合により置換されたアリール、及び場合により置換されたヘテロアリールである)
の単一(S)エナンチオマー化合物、又はその殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩。
【請求項２】
各R1A、R1B、及びR1Cが、個別に、ハロゲン、ハロアルキル、又はアルキルであり、
R2が、ハロアルキルであり、
Xが、結合、C(O)、SO2、又はC(O)NHであり、
R3が、アルキル、ハロアルキル、又はアリールである、
請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
各R1A、R1B、及びR1Cが、個別に、ハロゲンであり、
R2が、ペルフルオロアルキルであり、
Xが、-C(O)-、-SO2-、又は-C(O)NH-であり、
R3が、ハロアルキルである、
請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
各R1A及びR1Cが、ハロゲンであり、R1Bが、異なるハロゲンであり、
R2が、ハロアルキル、好ましくは-CF3であり、
Xが、-C(O)-であり、
R3が、ハロアルキル、好ましくは-CH2CF3である、
請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
各R1A及びR1Cが、-Clであり、R1Bが、-Fであり、
R2が、-CF3であり、
Xが、-C(O)-であり、
R3が、ハロアルキル、好ましくは、-CH2CF3である、
請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項６】
各R1A及びR1Cが、-Clであり、R1Bが、-Fであり、
R2が、-CF3であり、
Xが、結合、C(O)、SO2、又はC(O)NHであり、
R3が、水素、場合により置換されたアルキル、場合により置換されたハロアルキル、場合により置換されたシクロアルキル、場合により置換されたヘテロシクリル、場合により置換されたアリール、及び場合により置換されたヘテロアリールである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
R3が、アルキル；1つ以上のアルコキシ、アルキルスルホニル、シアノ、若しくはアリールで置換されたアルキル；ハロアルキル；シクロアルキル；1つ以上のアルキル、アルケニル、ハロアルキル、ハロアルケニル、アルコキシ、若しくはカルボニルで置換されたシクロアルキル；ヘテロシクリル；アリール；1つ以上のハロゲンで置換されたアリール；又はヘテロアリールである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
単一(S)エナンチオマー化合物であって、該化合物が、以下：
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オン；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-N-(2,2,2-トリフルオロエチル)スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-カルボキサミド；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-1'-(4-フルオロフェニル)スルホニル-スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]；
(S)-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-フェニル-メタノン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-2-メチルスルホニル-エタノン；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3-ジメチル-ブタン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]ブタン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-2-フェニル-エタノン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-4,4,4-トリフルオロ-ブタン-1-オン；
(S)-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-(1-ナフチル)メタノン；
(S)-[(3Z,4Z)-4-アリリデン-3-エチリデン-シクロヘキサ-1,5-ジエン-1-イル]-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]メタノン；
(S)-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-(4-モルホリノフェニル)メタノン；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-1'-プロピルスルホニル-スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-1'-(3,3,3-トリフルオロプロピルスルホニル)スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-N-エチル-スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-カルボキサミド；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-N-フェニル-スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-カルボキサミド；
(S)-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-[3-(2,2-ジクロロビニル)-2,2-ジメチル-シクロプロピル]メタノン；
(S)-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-テトラヒドロピラン-4-イル-メタノン；
(S)-1'-ブチル-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-1'-(3,3-ジメチルブチル)スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-2-メトキシ-エタノン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-2-イソプロポキシ-エタノン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-2-エトキシ-エタノン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-2-メチル-プロパン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]プロパン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]エタノン；
(S)-3-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-4-エトキシ-シクロブタ-3-エン-1,2-ジオン；
(S)-3-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3-オキソ-プロパンニトリル；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-2,2,3,3,3-ペンタフルオロ-プロパン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-2,2-ジフルオロ-プロパン-1-オン；
(S)-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-[1-(トリフルオロメチル)シクロプロピル]メタノン；
(S)-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-[1-(トリフルオロメチル)シクロブチル]メタノン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-2,2-ジメチル-プロパン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]ペンタン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]ヘキサン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]ヘプタン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]オクタン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]ノナン-1-オン；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-1'-ピリミジン-2-イル-スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]；及び
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-N-メチル-スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-カルボキサミド
から選択され、立体化学的に純粋である、単一(S)エナンチオマー化合物、又はそれらの殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩。
【請求項９】
単一(S)-エナンチオマー化合物であって、該化合物が、以下の構造：
【化２】
2021503465.tif 000042
による(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オンである、前記単一(S)-エナンチオマー化合物。
【請求項１０】
(S)エナンチオマーが、(R)エナンチオマーを約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、99.5%、99.8%、99.9%、又は100%含まない、請求項１〜９のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか1項に記載の化合物と、殺有害生物剤として許容される担体とを含む組成物。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれか1項に記載の化合物と、1種以上の他の殺有害生物剤として活性な物質とを含む組み合わせ剤。
【請求項１３】
医薬品において使用するための、請求項１〜１０のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項１４】
単一(S)-エナンチオマー化合物の(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オン又はその殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩と、1種以上の殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される担体とを含む組成物であって、該化合物が立体化学的に純粋であり、且つ該組成物が化合物(R)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オンを実質的に含まない、前記組成物。
【請求項１５】
ある場所において寄生生物を防除するための方法であって、その場所に、有効量の請求項１〜１０のいずれか1項に記載の化合物を適用することを含む、前記方法。
【請求項１６】
対象における寄生生物の感染又は外寄生を処置又は予防する方法であって、対象に、有効量の請求項１〜１０のいずれか1項に記載の化合物を投与することを含む、前記方法。
【請求項１７】
寄生生物がノミ、ダニ、又は蚊である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
寄生生物が、ネコノミ(Ctenocephalides felis)、クリイロコイタマダニ(R. sanguineus)、アメリカイヌカクマダニ(D. variablis)、アムブリオンマ・アメリカヌム(A. americanum)、又はシカダニ(I. scapularis)である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１９】
寄生生物が蠕虫である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】
寄生生物がディロフィラリア・イミティス(Dirofilaria immitis)である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２１】
寄生生物の感染又は外寄生の処置又は予防における使用のための、請求項１〜１０のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項２２】
化合物が、以下の構造：
【化３】
2021503465.tif 000043
による(Z)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタ-2-エン-1-オンである、前記化合物。
【請求項２３】
化合物が、以下の構造：
【化４】
2021503465.tif 000044
による(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-((4-メトキシベンジル)チオ)-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オンである、単一(S)-エナンチオマー化合物。
【請求項２４】
化合物が、以下の構造：
【化５】
2021503465.tif 000045
による(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-メルカプト-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オンである、単一(S)-エナンチオマー化合物。
【請求項２５】
(S)-エナンチオマーが、(R)-エナンチオマーを約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、99.5%、99.8%、99.9%、又は100%含まない、請求項２３又は２４に記載の化合物。
【請求項２６】
請求項２２の化合物を製造する方法であって、1-(5'-アセチル-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-1-イル)-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オンと1-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-2,2,2-トリフルオロエタン-1-オンとを含む混合物を調製し、該混合物を反応させて前記化合物を形成することを含む、前記方法。
【請求項２７】
混合物が、有機溶媒及び塩基をさらに含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
混合物が、約40℃〜約80℃の温度に加熱される、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
請求項２３に記載の化合物を製造する方法であって、化合物(Z)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタ-2-エン-1-オン、3-((3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル)アミノ)-4-(((R)-(6-メトキシキノリン-4-イル)((1S,2R,4S,5R)-5-ビニルキヌクリジン-2-イル)メチル)アミノ)シクロブタ-3-エン-1,2-ジオンから選択されるエナンチオ選択的触媒、及びp-メトキシベンジルメルカプタンを含む混合物を調製し、該混合物を反応させて前記化合物を形成することを含む、前記方法。
【請求項３０】
混合物が、リン酸二カリウム及び有機溶媒をさらに含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
p-メトキシベンジルメルカプタンを有機溶媒に溶解し、約1時間〜約96時間の時間をかけて混合物に添加する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
p-メトキシベンジルメルカプタンを有機溶媒に溶解し、約20時間〜約60時間の時間をかけて混合物に添加する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
請求項２４に記載の化合物を製造する方法であって、(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-((4-メトキシベンジル)チオ)-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オンを含む混合物を調製し、酸を添加し、該混合物を反応させて前記化合物を形成することを含む、前記方法。
【請求項３４】
酸が1未満のpKaを有する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
酸が、塩酸、トリフルオロ酢酸及びトリフリン酸から選択される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
請求項９に記載の化合物を製造するための方法であって、該方法が、以下：
(a).  1-(5'-アセチル-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-1-イル)-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オンと、1-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-2,2,2-トリフルオロエタン-1-オンとを含む混合物を調製し、該混合物を反応させて、以下の構造：
【化６】
2021503465.tif 000046
による化合物(Z)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタ-2-エン-1-オンを得ることを含む反応を実施すること；
(b).  (a)の化合物、エナンチオ選択的触媒、及びチオール供与体を含む混合物を調製し、該混合物を反応させて、式(Ia)：
【化７】
2021503465.tif 000047
(式中、R4は、水素、場合により置換されたC1-C10アルキル、場合により置換されたフェニル、及び場合により置換されたベンジルから選択される)
のチオールエーテル化合物を形成することを含む反応を実施すること；
(c)  (b)のチオールエーテルを切断し、以下の構造：
【化８】
2021503465.tif 000048
による化合物(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-メルカプト-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オンを形成すること；及び
(d)  (c)の化合物とヒドロキシルアミン-O-スルホン酸とを含む混合物を調製し、該混合物を反応させて、以下の構造：
【化９】
2021503465.tif 000049
による化合物(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オンを形成することを含む反応を実施すること
を含む、前記方法。
【請求項３７】
(a)の反応が、塩基を混合物に添加することをさらに含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
塩基が、約-2〜約9のpKbを有する、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
塩基が、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カルシウム、ヒューニッヒ塩基、DBU、N-メチルモルホリン、ピリジン、2,6-ジ-tert-ブチルピリジン、2,6-ルチジン、TMEDA、DABCO、2,2,6,6-テトラメチルピペリジン、トリメチルアミン、及び炭酸セシウムから選択される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
エナンチオ選択的触媒が、第二級アミン、チオ尿素、及びスクアラミドエナンチオ選択的触媒から選択される、請求項３６に記載の方法。
【請求項４１】
スクアラミドエナンチオ選択的触媒が、以下の構造：
【化１０】
2021503465.tif 000050
による3-((3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル)アミノ)-4-(((R)-(6-メトキシキノリン-4-イル)((1S,2R,4S,5R)-5-ビニルキヌクリジン-2-イル)メチル)アミノ)シクロブタ-3-エン-1,2-ジオンである、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
チオール供与体が、ベンジルメルカプタン及び4-メトキシベンジルメルカプタンから選択される、請求項３６に記載の方法。
【請求項４３】
式(Ia)のチオールエーテル化合物が、以下の構造：
【化１１】
2021503465.tif 000051
による(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-((4-メトキシベンジル)チオ)-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オンである、
請求項３６に記載の方法。
【請求項４４】
切断(c)が、(b)のチオールエーテルを含む混合物を調製すること、及び酸を添加することを含む酸ベースの切断である、請求項３６に記載の方法。
【請求項４５】
酸が1未満のpKaを有する、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
酸が、塩酸、トリフルオロ酢酸及びトリフリン酸から選択される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
(d)の反応が、塩基を添加すること、及び反応を酸でクエンチすることをさらに含む、請求項３６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、2017年11月16日に出願された米国仮出願第62/587,132号の優先権を主張し、その全内容は本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、殺寄生生物活性を有するスピロ環式誘導体を含む。特に、本明細書中には、単一エナンチオマーのスピロ環式誘導体が記載されている。本発明は、好ましくは、イソチアゾリン部分を有するスピロ環式アゼチデニル(azetidenyl)-イソベンゾフラン誘導体を含む。本発明はまた、単一エナンチオマーのスピロ環式誘導体を製造する方法、そのスピロ環式誘導体を含む組成物、及びそれを使用する方法も含む。
【背景技術】
【０００３】
改善された抗寄生生物剤が必要とされており、具体的には、特に動物の健康管理に使用するための改善された殺虫剤及び殺ダニ剤が必要とされている。さらに、投与に便利な改善された局所用製品及び経口用製品が必要とされている。なおさらに、寄生生物に対して効果的に処置するために使用することができる、1種以上の活性な抗寄生生物剤を含有する改善された組成物が必要とされている。このような改善は、鳥(例えば、ニワトリ及び七面鳥)、魚、愛玩動物(例えば、ネコ、イヌ、ラマ、及びウマ)、並びに家畜(例えば、畜牛、バイソン、ブタ、ヒツジ、シカ、エルク、及びヤギ)を含む、動物の処置に特に有用である。
【０００４】
現在入手可能な動物用の殺虫処置剤及び殺ダニ処置剤は、必ずしも良好な活性、良好な作用速度、又は作用の長期持続を示すわけではない。ほとんどの処置剤は、誤って摂取すると神経毒性及び致死性などの深刻な結果をもたらし得る、有害な化学物質を含有している。これらの薬剤の適用を行う人は、通常、曝露を制限するように指導される。幾つかの問題を克服するためにペット用首輪及びにペット用タグが利用されているが、これらは、噛み砕かれ、飲み込まれ易く、その結果として動物に対し毒性作用を及ぼし易い。したがって、現在の処置剤により達成される成功の度合いは様々であり、これは、部分的に、毒性、投与方法、及び効力によって決まる。さらに、一部の現在入手可能な薬剤は、寄生生物の耐性に起因して、効果がなくなってきている。
【０００５】
有効な広域スペクトルの抗寄生生物剤が入手可能であるとはいえ、常に存在する耐性発生の恐れを克服する、より安全かつ便利で、効力があり、環境にやさしい製品が依然として必要とされている。本発明は、そのような特性を示すイソチアゾリンスピロアゼチジニル-イソベンゾフラン誘導体の新規なエナンチオマーを含む。
【発明の概要】
【０００６】
本発明は、その殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩を含む、式(I)
【０００７】
【化１】
2021503465.tif 000003
(式中、
各R1A、R1B、及びR1Cは、個別に、水素、アルキル、ハロゲン、又はハロアルキルであり、
R2は、ハロアルキルであり、
Xは、結合、C(O)、SO2、又はC(O)NHであり、
R3は、水素、場合により置換されたアルキル、場合により置換されたハロアルキル、場合により置換されたシクロアルキル、場合により置換されたヘテロシクリル、場合により置換されたアリール、及び場合により置換されたヘテロアリールである)
による単一(S)エナンチオマー化合物、又はその殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩であって、上記化合物が立体化学的に純粋である、上記単一(S)エナンチオマー化合物、又はその殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩を含む。
【０００８】
一実施形態において、本発明は、式(I)(式中、
各R1A、R1B、及びR1Cは、個別に、ハロゲン、ハロアルキル、又はアルキルであり、
R2は、ハロアルキルであり、
Xは、結合、C(O)、SO2、又はC(O)NHであり、
R3は、アルキル、ハロアルキル、又はアリールである)
の化合物を含む。
【０００９】
一実施形態において、本発明は、式(I)(式中、
各R1A、R1B、及びR1Cは、個別に、ハロゲンであり、
R2は、ペルフルオロアルキルであり、
Xは、-C(O)-、-SO2-、又は-C(O)NH-であり、
R3は、ハロアルキルである)
の化合物を含む。
【００１０】
一実施形態において、本発明は、式(I)(式中、
各R1A及びR1Cはハロゲンであり、R1Bは、異なるハロゲンであり、
R2は、ハロアルキル、好ましくは、-CF3であり、
Xは、-C(O)-であり、
R3は、ハロアルキル、好ましくは、-CH2CF3である)
の化合物を含む。
【００１１】
一実施形態において、本発明は、式(I)(式中、
各R1A及びR1Cは、-Clであり、R1Bは、-Fであり、
R2は、-CF3であり、
Xは、-C(O)-であり、
R3は、ハロアルキル、好ましくは、-CH2CF3である)
の化合物を含む。
【００１２】
一実施形態において、本発明は、式(I)(式中、
各R1A及びR1Cは、-Clであり、R1Bは、-Fであり、
R2は、-CF3であり、
Xは、結合、C(O)、SO2、又はC(O)NHであり、
R3は、水素、場合により置換されたアルキル、場合により置換されたハロアルキル、場合により置換されたシクロアルキル、場合により置換されたヘテロシクリル、場合により置換されたアリール、及び場合により置換されたヘテロアリールである)
の化合物を含む。
【００１３】
1つ以上の実施形態において、R3は、アルキル；1つ以上のアルコキシ、アルキルスルホニル、シアノ、若しくはアリールで置換されたアルキル；ハロアルキル；シクロアルキル；1つ以上のアルキル、アルケニル、ハロアルキル、ハロアルケニル、アルコキシ、若しくはカルボニルで置換されたシクロアルキル；ヘテロシクリル；アリール；1つ以上のハロゲンで置換されたアリール；又はヘテロアリールである。
【００１４】
本発明の一実施形態は、式(I)の化合物を、殺有害生物剤として許容される担体と共に含む組成物を含む。本発明の組成物はまた、例えば、限定するものではないが、経口製剤、注射用製剤、及び局所用、経皮用、若しくは皮下用製剤などの様々な形態であってもよい。これらの製剤は、例えば、限定するものではないが、哺乳動物、鳥、及び魚などの動物に投与されることが意図される。哺乳動物の例としては、例えば、限定するものではないが、ヒト、畜牛、ヒツジ、ヤギ、ラマ、アルパカ、ブタ、ウマ、ロバ、イヌ、ネコ、及び他の家畜若しくは家畜用哺乳動物などが挙げられる。鳥の例としては、七面鳥、ニワトリ、ダチョウ、及び他の家畜若しくは家畜用鳥が挙げられる。
【００１５】
本発明は、植物若しくは動物(例えば、哺乳動物)などの、寄生生物に感染している可能性のある場所の処置に好適な、又はある場所への寄生生物の感染若しくは外寄生(infestation)の予防に好適な、式(I)の化合物を含む組成物を含む。
【００１６】
本発明の別の実施形態は、組み合わせ療法を含み、ここで、1つ以上の式(I)の化合物は、そのまま用いられてもよく、又は、例えば殺虫剤、誘引剤、滅菌剤、殺線虫剤、殺ダニ剤、殺真菌剤、除草剤などの1種以上の他の殺有害生物剤として活性な物質との、さらに薬害軽減剤、肥料、若しくは成長調節剤との組み合わせ剤としての、それらの調製物若しくは製剤の形態で用いられてもよい。これらの組み合わせ剤は、同一製剤の一部であってもよく、又は上記の場所に別々に若しくは連続的に投与されてもよい。
【００１７】
本発明の別の実施形態は、寄生生物の感染又は外寄生の処置又は予防に使用するための、式(I)の化合物、又は式(I)の化合物を含む組成物を含む。
【００１８】
本発明の別の実施形態は、寄生生物の感染又は外寄生の処置又は予防に使用するための医薬品の製造のための、式(I)の化合物の使用を含む。
【００１９】
本発明の別の実施形態は、寄生生物の感染を処置又は予防する方法であって、有効量の式(I)の化合物又は式(I)の化合物を含む組成物をある場所に投与することを含む、上記方法を含む。
【００２０】
本発明の一実施形態は、
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オン；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-N-(2,2,2-トリフルオロエチル)スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-カルボキサミド；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-1'-(4-フルオロフェニル)スルホニル-スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]；
(S)-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-フェニル-メタノン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-2-メチルスルホニル-エタノン；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3-ジメチル-ブタン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]ブタン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-2-フェニル-エタノン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-4,4,4-トリフルオロ-ブタン-1-オン；
(S)-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-(1-ナフチル)メタノン；
(S)-[(3Z,4Z)-4-アリリデン-3-エチリデン-シクロヘキサ-1,5-ジエン-1-イル]-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]メタノン；
(S)-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-(4-モルホリノフェニル)メタノン；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-1'-プロピルスルホニル-スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-1'-(3,3,3-トリフルオロプロピルスルホニル)スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-N-エチル-スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-カルボキサミド；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-N-フェニル-スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-カルボキサミド；
(S)-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-[3-(2,2-ジクロロビニル)-2,2-ジメチル-シクロプロピル]メタノン；
(S)-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-テトラヒドロピラン-4-イル-メタノン；
(S)-1'-ブチル-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-1'-(3,3-ジメチルブチル)スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-2-メトキシ-エタノン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-2-イソプロポキシ-エタノン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-2-エトキシ-エタノン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-2-メチル-プロパン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]プロパン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]エタノン；
(S)-3-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-4-エトキシ-シクロブタ-3-エン-1,2-ジオン；
(S)-3-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3-オキソ-プロパンニトリル；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-2,2,3,3,3-ペンタフルオロ-プロパン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-2,2-ジフルオロ-プロパン-1-オン；
(S)-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-[1-(トリフルオロメチル)シクロプロピル]メタノン；
(S)-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-[1-(トリフルオロメチル)シクロブチル]メタノン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-2,2-ジメチル-プロパン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]ペンタン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]ヘキサン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]ヘプタン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]オクタン-1-オン；
(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]ノナン-1-オン；
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-1'-ピリミジン-2-イル-スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]；及び
(S)-6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]-N-メチル-スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-カルボキサミド、
から選択される本発明の化合物、又はその殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩であって、上記化合物が立体化学的に純粋である、上記化合物、又はその殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩である。
【００２１】
本発明の一実施形態は、本発明の化合物と殺有害生物剤として許容される担体とを含む、組成物である。本発明の別の実施形態は、本発明の化合物と1種以上の他の殺有害生物剤として活性な物質とを含む、組み合わせ剤である。本発明の別の実施形態は、ある場所において寄生生物を防除するための方法であって、その場所に、有効量の本発明の化合物を適用することを含む、上記方法である。本発明の別の実施形態は、対象における寄生生物の感染又は外寄生を処置又は予防する方法であって、対象に、有効量の本発明の化合物を投与することを含む、上記方法である。一態様において、寄生生物は、ノミ又はダニである。一態様において、寄生生物は、ネコノミ(Ctenocephalides felis)、クリイロコイタマダニ(R. sanguineus)、アメリカイヌカクマダニ(D. variablis)、アムブリオンマ・アメリカヌム(A. americanum)、又はシカダニ(I. scapularis)である。一態様において、寄生生物は蠕虫である。一態様において、寄生生物は、ディロフィラリア・イミティス(Dirofilaria immitis)である。本発明の別の実施形態は、寄生生物の感染又は外寄生の処置又は予防において使用するための本発明の化合物である。別の実施形態は、医薬品において使用するための本発明の化合物である。
【００２２】
本発明の一実施形態は、以下の構造：
【００２３】
【化２】
2021503465.tif 000004
による化合物(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オンである。
【００２４】
本明細書中に記載される一部の実施形態において、上記の(S)エナンチオマー化合物は、その殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩である。一部の実施形態において、本明細書中に記載される(S)エナンチオマー化合物は、立体化学的に純粋である。
【００２５】
別の実施形態は、単一(S)エナンチオマー化合物の(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オン、又はその殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩と、1種以上の殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される担体とを含む組成物であって、上記化合物が立体化学的に純粋であり、且つ上記組成物が化合物(R)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オンを実質的に含まない、上記組成物である。
【００２６】
本発明の別の実施形態は、単一(S)エナンチオマー化合物の(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オン、又はその殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩と、1種以上の他の殺有害生物剤として活性な物質とを含む組み合わせ剤であって、上記化合物が立体化学的に純粋であり、且つ化合物(R)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オンを実質的に含まない、上記組み合わせ剤である。
【００２７】
本発明の別の実施形態は、ある場所における寄生生物を防除するための方法であって、その場所に有効量の単一(S)エナンチオマー化合物の(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オン、又はその殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩を適用することを含み、ここで上記化合物は立体化学的に純粋であり、且つ化合物(R)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オンを実質的に含まない、上記方法である。
【００２８】
本発明の別の実施形態は、対象における寄生生物の感染又は外寄生を処置又は予防する方法であって、対象に、有効量の単一(S)エナンチオマー化合物の(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オン、又はその殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩を投与することを含み、ここで上記化合物は立体化学的に純粋であり、且つ化合物(R)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オンを実質的に含まない、上記方法である。一態様において、寄生生物は、ノミ又はダニである。一態様において、寄生生物は、ネコノミ、クリイロコイタマダニ、アメリカイヌカクマダニ、アムブリオンマ・アメリカヌム、又はシカダニである。一態様において、寄生生物は、蠕虫である。一態様において、寄生生物は、ディロフィラリア・イミティスである。本発明の別の実施形態は、寄生生物の感染又は外寄生の処置又は予防において使用するための(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オン、又はその殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩であって、上記化合物が立体化学的に純粋である、上記化合物、又はその殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩である。別の実施形態は、医薬品において使用するための(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オン、又はその殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩であって、上記
化合物が立体化学的に純粋である、上記化合物、又はその殺有害生物剤として、獣医学的に、若しくは医薬的に許容される塩である。
【００２９】
別の実施形態は、化合物が、以下の構造：
【００３０】
【化３】
2021503465.tif 000005
による(Z)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタ-2-エン-1-オンである、上記化合物である。
【００３１】
別の実施形態は、(Z)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタ-2-エン-1-オン化合物を製造する方法であって、1-(5'-アセチル-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-1-イル)-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オンと1-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-2,2,2-トリフルオロエタン-1-オンとを含む混合物を調製し、この混合物を反応させて上記化合物を形成することを含む、上記方法である。一態様において、上記混合物は、有機溶媒及び塩基をさらに含む。別の態様において、上記混合物は、約40℃〜約80℃の温度に加熱される。
【００３２】
別の実施形態は、単一(S)-エナンチオマー化合物であって、化合物が、以下の構造：
【００３３】
【化４】
2021503465.tif 000006
による(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-((4-メトキシベンジル)チオ)-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オンである、上記化合物である。
【００３４】
別の実施形態は、(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-((4-メトキシベンジル)チオ)-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オン化合物を製造する方法であって、化合物(Z)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタ-2-エン-1-オン、3-((3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル)アミノ)-4-(((R)-(6-メトキシキノリン-4-イル)((1S,2R,4S,5R)-5-ビニルキヌクリジン-2-イル)メチル)アミノ)シクロブタ-3-エン-1,2-ジオンから選択されるエナンチオ選択的触媒、及びp-メトキシベンジルメルカプタンを含む混合物を調製し、この混合物を反応させて上記化合物を形成することを含む、上記方法である。一態様において、上記混合物は、リン酸二カリウム及び有機溶媒をさらに含む。別の態様においては、p-メトキシベンジルメルカプタンを有機溶媒に溶解し、約1時間〜約96時間の時間をかけて混合物に添加する。別の態様においては、p-メトキシベンジルメルカプタンを有機溶媒に溶解し、約20時間〜約60時間の時間をかけて混合物に添加する。
【００３５】
別の実施形態は、単一(S)-エナンチオマー化合物であって、化合物が、以下の構造：
【００３６】
【化５】
2021503465.tif 000007
による(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-メルカプト-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オンである、上記化合物である。
【００３７】
別の実施形態は、(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-メルカプト-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オン化合物を製造する方法であって、(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-((4-メトキシベンジル)チオ)-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オンを含む混合物を調製し、酸を添加し、この混合物を反応させて上記化合物を形成することを含む、上記方法である。一態様において、酸は1未満のpKaを有する。別の態様において、酸は、塩酸、トリフルオロ酢酸及びトリフリン酸から選択される。
【００３８】
本明細書中に記載される一部の実施形態において、本明細書中に記載される(S)エナンチオマー化合物は、任意の(R)-エナンチオマーを約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、99.5%、99.8%、99.9%、又は100%含まない。
【００３９】
別の実施形態は、(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オン化合物を製造するための方法であって、(a). 1-(5'-アセチル-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-1-イル)-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オンと1-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-2,2,2-トリフルオロエタン-1-オンとを含む混合物を調製し、上記混合物を反応させて、化合物(Z)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタ-2-エン-1-オンを得ることを含む反応を実施すること；(b). (a)の化合物、エナンチオ選択的触媒、及びチオール供与体を含む混合物を調製し、この混合物を反応させて、式(Ia)：
【化６】
2021503465.tif 000008
(式中、R4は、水素、場合により置換されたC1-C10アルキル、場合により置換されたフェニル、及び場合により置換されたベンジルから選択される)のチオールエーテル化合物を形成することを含む反応を実施すること；(c). (b)のチオールエーテルを切断し、化合物(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-メルカプト-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オンを形成すること；及び(d). (c)の化合物とヒドロキシルアミン-O-スルホン酸とを含む混合物を調製し、上記混合物を反応させて、化合物(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オンを形成することを含む反応を実施することを含む、上記方法である。(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オンを合成するための幾つかのさらなる態様が、本明細書中で想定される。一態様において、(a)の反応を作成するための方法は、塩基を混合物に添加することをさらに含む。別の態様において、塩基は、約-2〜約9のpKbを有する。さらなる態様において、塩基は、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カルシウム、ヒューニッヒ塩基、DBU、N-メチルモルホリン、ピリジン、2,6-ジ-tert-ブチルピリジン、2,6-ルチジン、TMEDA、DABCO、2,2,6,6-テトラメチルピペリジン、トリメチルアミン、及び炭酸セシウムから選択される。別の態様において、エナンチオ選択的触媒は、第二級アミン、チオ尿素、及びスクアラミドエナンチオ選択的触媒から選択される。別の態様において、スクアラミドエナンチオ選択的触媒は、以下の構造：
【００４０】
【化７】
2021503465.tif 000009
による3-((3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル)アミノ)-4-(((R)-(6-メトキシキノリン-4-イル)((1S,2R,4S,5R)-5-ビニルキヌクリジン-2-イル)メチル)アミノ)シクロブタ-3-エン-1,2-ジオンである。
【００４１】
別の態様において、チオール供与体は、ベンジルメルカプタン及び4-メトキシベンジルメルカプタンから選択される。別の態様において、式(Ia)のチオールエーテル化合物は、以下の構造：
【００４２】
【化８】
2021503465.tif 000010
による(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-((4-メトキシベンジル)チオ)-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オンである。
【００４３】
別の態様において、切断(c)は、(b)のチオールエーテルを含む混合物を調製すること、及び酸を添加することを含む、酸ベースの切断である。別の態様において、酸は、1未満のpKaを有する。別の態様において、酸は、塩酸、トリフルオロ酢酸及びトリフリン酸から選択される。別の態様において、(d)の反応は、塩基を添加すること、及び反応を酸でクエンチすることをさらに含む。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】キラルHPLCによる、C1(R)エナンチオマー及びC1(S)エナンチオマーの代表的なクロマトグラム。
【図２】C1(S)エナンチオマーの熱楕円体プロット(50%確率)(明瞭さのため水素原子は省略する)。
【図３】イヌ薬物動態(PK)研究(血漿対全血)における、C1(S)エナンチオマーの平均血漿PKプロファイル及び全血PKプロファイル。明瞭さのためデータポイント間に線が描かれているが、これらの線は任意のデータ適合の結果ではない。
【図４】イヌPK研究(血漿対全血)における、C1(S)エナンチオマーの平均血漿PKプロファイル及び全血PKプロファイルの片対数プロット。
【図５】キラルHPLCによる、C1(R)エナンチオマー及びC1(S)エナンチオマーの代表的なクロマトグラム。同一濃度のイヌ-1のイヌ血漿サンプルと標準のイヌ血漿サンプルとを120時間比較することによると、in vivoにおけるC1(R)エナンチオマー含有量の想定される増加はない。
【図６】キラルHPLCによる、C1(S)エナンチオマーの代表的なクロマトグラム。同一濃度のイヌ-2及びイヌ-3のイヌ血漿サンプルと標準のイヌ血漿サンプルを120時間比較することによると、in vivoにおけるC1(R)エナンチオマー含有量の想定される増加はない。
【図７】接触アッセイにおける、クリイロコイタマダニに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#1)。2時間、6時間、12時間、24時間及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(百万分率(ppm))において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図８】接触アッセイにおける、クリイロコイタマダニに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#2)。2時間、6時間、12時間、24時間及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(百万分率(ppm))において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図９】接触アッセイでの殺傷速度における、クリイロコイタマダニに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#1)。12時間、24時間、及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(百万分率(ppm))において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図１０】接触アッセイでの殺傷速度における、クリイロコイタマダニに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#2)。12時間、24時間、及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(百万分率(ppm))において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図１１】接触アッセイにおける、アメリカイヌカクマダニに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#1)。2時間、6時間、12時間、24時間及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(μM)において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図１２】接触アッセイにおける、アメリカイヌカクマダニに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#2)。2時間、6時間、12時間、24時間及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(μM)において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図１３】接触アッセイでの殺傷速度における、アメリカイヌカクマダニに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#1)。12時間、24時間、及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(百万分率(ppm))において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図１４】接触アッセイでの殺傷速度における、アメリカイヌカクマダニに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#2)。12時間、24時間、及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(百万分率(ppm))において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図１５】接触アッセイにおける、アムブリオンマ・アメリカヌムに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#1)。2時間、6時間、12時間、24時間及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(μM)において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図１６】接触アッセイにおける、アムブリオンマ・アメリカヌムに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#2)。2時間、6時間、12時間、24時間及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(μM)において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図１７】接触アッセイでの殺傷速度における、アムブリオンマ・アメリカヌムに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#1)。12時間、24時間、及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(百万分率(ppm))において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図１８】接触アッセイでの殺傷速度における、アムブリオンマ・アメリカヌムに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#2)。12時間、24時間、及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(百万分率(ppm))において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図１９】摂取アッセイにおける、ネコクラミジア(C. felis)に対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#1)。2時間、6時間、12時間、24時間及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(百万分率(ppm))において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図２０】摂取アッセイにおける、ネコクラミジアに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#2)。2時間、6時間、12時間、24時間及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(百万分率(ppm))において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図２１】摂取アッセイでの殺傷速度における、ネコクラミジアに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#2)。2時間、6時間及び12時間目に、指示濃度のC1化合物(百万分率(ppm))において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図２２】摂取アッセイでの殺傷速度における、ネコクラミジアに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#2)。24時間及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(百万分率(ppm))において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図２３】接触アッセイにおける、ネコクラミジアに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#1)。2時間、6時間、12時間、24時間及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(μM)において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【図２４】接触アッセイにおける、ネコクラミジアに対するC1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体の活性(試験#2)。2時間、6時間、12時間、24時間及び48時間目に、指示濃度のC1化合物(μM)において、死亡率を評価するアッセイポイントをとった。
【発明を実施するための形態】
【００４５】
具体的に記載されていなくとも、1つ以上の態様及び実施形態が、異なる実施形態に組み込まれ得る。すなわち、すべての態様及び実施形態は、任意の手段又は組み合わせで、組み合わせることができる。
【００４６】
定義
本明細書中に開示される化合物について言及する場合、以下の用語は、別段に示されない限り以下の意味を有する。以下の定義は、定義される用語を明確にすることを意図するものであり、限定することを意図するものではない。本明細書中で使用される特定の用語が具体的に定義されていない場合、かかる用語は曖昧であるとみなされるべきではない。むしろ、用語はそれらの許容される意味の範囲内で用いられる。
【００４７】
本明細書中で使用される用語「アルコキシ」は-OR基を指し、ここでRはアルキルである。例示的なアルコキシ基としては、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、イソプロポキシ、n-ブトキシ、tert-ブトキシ、sec-ブトキシ、n-ペントキシ、n-ヘキソキシ、及び1,2-ジメチルブトキシが挙げられる。
【００４８】
本明細書中で使用される「アルキル」は、1〜20個の炭素原子、好ましくは1〜8個の炭素原子、好ましくは1〜6個の炭素原子を有する一価飽和脂肪族ヒドロカルビル基を指す。炭化水素鎖は、直鎖又は分岐鎖のいずれかであり得る。例示的なアルキル基としては、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソ-ブチル、及びtert-ブチルが挙げられる。同様に、「アルケニル」基は、鎖中に1つ以上の二重結合が存在するアルキル基を指す。
【００４９】
本明細書中で使用される「シクロアルキル」は、3〜6個の環原子を含有する不飽和又は部分飽和の炭化水素環を指す。例示的なシクロアルキル基としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、並びにそれらの部分飽和型のもの、例えば、シクロヘキセニル及びシクロヘキサジエニルが挙げられる。
【００５０】
本明細書中で使用される「ハロゲン」又は「ハロ」は、ハロゲンを指す。一部の実施形態において、ハロゲンは、好ましくはBr、Cl、又はFである。
【００５１】
本明細書中で使用される「ハロアルキル」は、少なくとも1個の水素原子がハロゲンで置換されている、1〜20個の炭素原子、好ましくは1〜8個の炭素原子、好ましくは1〜6個の炭素原子を有する一価飽和脂肪族ヒドロカルビル基を指し、例えば、限定するものではないが、全ての水素原子がハロゲン原子で置換されているペルハロ基などが挙げられる。ハロアルキル鎖は、直鎖又は分岐鎖のいずれかであり得る。例示的なアルキル基としては、トリフルオロメチル、トリフルオロエチル、トリフルオロプロピル、トリフルオロブチル、及びペンタフルオロエチルが挙げられる。同様に、「ハロアルケニル」基とは、鎖中に1つ以上の二重結合が存在するハロアルキル基を指す。
【００５２】
本明細書中で使用される「ヘテロシクリル」又は「複素環」は、3〜6個の環原子、並びに窒素、酸素、及び硫黄から選択される同一であっても異なっていてもよい1〜4個のヘテロ原子を含有する不飽和又は部分飽和の環を指す。例示的なヘテロシクリル基としては、オキシラン、テトラヒドロフラニル、モルホリノ、ピロリジニル、テトラヒドロチオフェン、ジオキサン、及びピペリジニルが挙げられる。
【００５３】
本明細書中で使用される「アリール」は、5〜10個の環原子を含有する芳香環系を指す。例示的なアリール基としては、フェニル及びナフチルが挙げられる。
【００５４】
本明細書中で使用される「ヘテロアリール」は、5〜10個の環原子、並びに窒素、酸素、及び硫黄から選択される、同一であっても異なっていてもよい1〜4個のヘテロ原子を含有する複素芳香族環系を指す。例示的なヘテロアリール基としては、ピリジル(ピリジニル)、フラン、チオフェン、ピラゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、及びピリミジニルが挙げられる。
【００５５】
本明細書中で使用される「場合により置換された」は、置換されなかったとしたらその置換基に存在するであろう水素原子の置換を指す。環系について説明する場合、場合による置換とは、典型的には、通常は存在する水素を置換する、1、2、又は3個の置換基による置換である。しかしながら、直鎖部分及び分岐鎖部分に言及する場合、置換の数はさらに多くてもよく、水素が通常存在している場所であればどこでも生じ得る。置換は同一であっても異なっていてもよい。例示的な置換としては、ニトロ、-NR'R''、シアノ、-NR'COR'''、アルキル、アルケニル、-C(O)、-SO2R'''、-NR'SO2R'''、-SO2NR'R''、-CONR'R''、-CONHC6H5、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルスルホニル、ハロアルキル、ハロアルケニル、ハロアルコキシ、メルカプト(-SH)、チオアルキル、ハロゲン、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、又はヘテロアリール(ここでR'とR''は同一であるか若しくは異なり、且つそれぞれ水素若しくはアルキルを表し；又はR'及びR''は、それぞれ窒素原子に結合して、これらは4〜6個の環原子を含有する飽和若しくは不飽和の複素環式環を形成してもよく、R'''は、アルキル又はハロアルキルである)が挙げられる。
【００５６】
本明細書中で使用される表現「殺有害生物用若しくは殺有害生物剤として、獣医学用若しくは獣医学的に、又は医薬用若しくは医薬的に許容される塩」は、本明細書中に開示される化合物の任意の塩であって、その生物学的特性を保持しており、且つ毒性ではないか、あるいは殺有害生物用、獣医学用、若しくは医薬用の用途に望ましくないものではないものを指す。このような塩は、当技術分野で公知の様々な有機対イオン及び無機対イオンから誘導することができる。そのような塩としては、(1) 塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、スルファミン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、トリクロロ酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンチルプロピオン酸、グリコール酸、グルタル酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、ソルビン酸、アスコルビン酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、3-(4-ビドロキシベンゾイル)安息香酸、ピクリン酸、ケイ皮酸、マンデル酸、フタル酸、ラウリン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、1,2-エタン-ジスルホン酸、2-ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、4-クロロベンゼンスルホン酸、2-ナフタレンスルホン酸、4-トルエンスルホン酸、カンファー酸、カンファースルホン酸、4-メチルビシクロ[2.2.2]-オクタ-2-エン-1-カルボン酸、グルコヘプトン酸、3-フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、tert-ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、安息香酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、シクロヘキシルスルファミン酸、キナ酸、ムコン酸などの有機酸又は無機酸を用いて形成された酸付加塩が挙げられる。
【００５７】
塩としてはさらに、単なる例として、非毒性の有機酸又は無機酸の塩、例えば塩化物及び臭化物などのハロゲン化物、硫酸塩、リン酸塩、スルファミン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、トリクロロ酢酸塩、プロピオン酸塩、ヘキサン酸塩、シクロペンチルプロピオン酸塩、グリコール酸塩、グルタル酸塩、ピルビン酸塩、乳酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、ソルビン酸塩、アスコルビン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、3-(4-ビドロキシベンゾイル)安息香酸塩、ピクリン酸塩、ケイ皮酸塩、マンデル酸塩、フタル酸塩、ラウリル酸塩、メタンスルホン酸塩(メシル酸塩)、エタンスルホン酸塩、1,2-エタン-ジスルホン酸塩、2-ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩(ベシル酸塩)、4-クロロベンゼンスルホン酸塩、2-ナフタレンスルホン酸塩、4-トルエンスルホン酸塩、カンファー酸塩、カンファースルホン酸塩、4-メチルビシクロ[2.2.2]-オクタ-2-エン-1-カルボン酸塩、グルコヘプタン酸塩、3-フェニルプロピオン酸塩、トリメチル酢酸塩、tert-ブチル酢酸塩、ラウリル硫酸塩、グルコン酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、シクロヘキシルスルファミン酸塩、キナ酸塩、ムコン酸塩などが挙げられる。
【００５８】
本明細書中には、式(I)による単一の立体異性体化合物が記載されている。特定の例において、示される置換基は、光学異性及び/又は立体異性に寄与し得る。同じ分子式を有するが、それらの原子の結合の性質若しくは順序、又はそれらの原子の空間における配置が異なる化合物は「異性体」と呼ばれる。原子の空間における配置が異なる異性体は「立体異性体」と呼ばれる。互いに鏡像ではない立体異性体は「ジアステレオマー」と呼ばれ、互いに重ね合わせることができない鏡像であるものは、「エナンチオマー」と称される。化合物が不斉中心を有する場合、例えば、その不斉中心が4つの異なる基に結合している場合、1対のエナンチオマーが可能である。エナンチオマーは、その不斉中心の絶対配置によって特徴付けることが可能であり、Cahn及びPrelogの規則(Cahnら1966, Angew. Chem. 78: 413〜447ページ、Angew. Chem., Int. Ed. Engl. 5: 385〜414ページ(正誤表: Angew. Chem., Int. Ed. Engl. 5:511ページ)、Prelog及びHelmchen, 1982, Angew. Chem. 94: 614〜631ページ、Angew. Chem. Internat. Ed. Eng. 21: 567〜583ページ、Mata及びLobo, 1993, Tetrahedron: Asymmetry 4: 657〜668ページ)に従って(R)又は(S)と呼ばれるか、あるいは、分子が偏光面を回転させる様式によって特徴付けることが可能であり、右旋性又は左旋性と(すなわち、それぞれ、(+)-異性体又は(-)-異性体として)呼ばれる。キラル化合物は、個々のエナンチオマーとして、又はそれらの混合物として存在し得る。同じ比率のエナンチオマーを含有する混合物は「ラセミ混合物」と呼ばれる。
【００５９】
本明細書中に開示される化合物は、1つ以上の不斉中心を有する。本明細書中に記載される化合物は、個別の(R)-エナンチオマー若しくは(S)-エナンチオマー、又は混合物若しくはラセミ体として生成することができる。一部の実施形態において、本明細書中に記載される化合物は単一の不斉中心を有し、(S)-エナンチオマーとして生成される。例えば式の任意の位置における立体化学の指定により別段に示されない限り、本明細書及び特許請求の範囲における特定の化合物の説明又は命名は、個々のエナンチオマー及びそれらの混合物、ラセミ体、若しくはそれ以外のものの両方を含むことが意図される。立体化学を決定するための方法及び立体異性体を分離するための方法は、当技術分野で周知である。一部の実施形態において、本明細書中で提供される化合物の立体異性体は、塩基で処理してから示される。
【００６０】
特定の実施形態において、本明細書中に開示される化合物は、「立体化学的に純粋」である。立体化学的に純粋な化合物は、当業者により「純粋」であると認識されるであろう立体化学的純度のレベルを有する。当然ながら、この純度レベルは、100%未満であってもよい。特定の実施形態において、「立体化学的に純粋」は、別の異性体を実質的に含まない(すなわち、少なくとも約85%又はそれ以上含まない)化合物を指す。特定の実施形態において、本化合物は、他の異性体を、少なくとも約85%、約90%、約91%、約92%、約93%、約94%、約95%、約96%、約97%、約98%、約99%、約99.5%、又は約99.9%含まない。
【００６１】
本明細書中で使用される用語「対象」及び「患者」は、本明細書中で互換的に使用される。用語「対象(1つ又は複数)」は、霊長類、例えば、カニクイザルなどのサル、チンパンジー、及びヒト、又は非霊長類の動物を指す。一実施形態において、対象はヒトである。別の実施形態において、対象は、イヌ又はネコなどの愛玩動物である。さらなる実施形態において、対象は、農業に重要な動物、例えば、ヒツジ、ウシ、ウマ、ヤギ、魚、ブタ、又は家禽(例えば、ニワトリ、七面鳥、カモ、若しくはガチョウ)である。
【００６２】
さらに、式(I)により表される化合物の医薬的に許容されるプロドラッグもまた、本発明に含まれる。「医薬的に許容されるプロドラッグ」は、加溶媒分解により、又は生理学的条件下でアミノ基、ヒドロキシル基、カルボキシル基などに変換され得る基を有する化合物を指す。プロドラッグを形成する基の例としては、Prog. Med., 5, 2157〜2161ページ(1985)又は「Pharmaceutical Research and Development」(Hirokawa Publishing Company, 1990), vol. 7, Drug Design, 163〜198ページに記載されているものが挙げられる。用語「プロドラッグ」は、患者に投与されると活性化合物を与える、任意の医薬的に許容される形態の化合物を表すために、本明細書全体を通して使用される。「医薬的に許容されるプロドラッグ」は、宿主において代謝(例えば、加水分解又は酸化)されて本発明の化合物を形成する化合物を指す。プロドラッグの典型的な例としては、活性化合物の官能部分に生物学的に不安定な保護基を有する化合物が挙げられる。「プロドラッグ」は、酸化され、還元され、アミノ化され、脱アミノ化され、ヒドロキシル化され、脱ヒドロキシル化され、加水分され、脱水分解(dehydrolyzed)され、アルキル化され、脱アルキル化され、アシル化され、脱アシル化され、リン酸化され、脱リン酸化されて活性化合物を生じ得る化合物を包含する。
【００６３】
本発明は、1つ以上の原子が、同じ原子番号を有するが、原子質量又は質量数が自然において通常見られる原子質量又は質量数とは異なる原子により置換されている、全ての医薬的に許容される同位体標識した本発明の化合物を包含する。本発明の化合物に含めるのに好適な同位体の例としては、水素の同位体(例えば、2H及び3H)、炭素の同位体(例えば、11C、13C、及び14C)、塩素の同位体(例えば36Cl)、フッ素の同位体(例えば18F)、ヨウ素の同位体(例えば、123I及び125I)、窒素の同位体(例えば、13N及び15N)、酸素の同位体(例えば、15O、17O、及び18O)、リンの同位体(例えば32P)、並びに硫黄の同位体(例えば35S)が挙げられる。特定の同位体標識した本発明の化合物(例えば、放射性同位体を組み込んでいる本発明の化合物)は、薬物又は基質の組織分布研究において有用であり得る。放射性同位体であるトリチウム(すなわち3H)、及び炭素-14(すなわち14C)が、組み込みの容易さ及び迅速な検出手段の観点から、この目的に特に有用である。重水素(すなわち2H)などのより重い同位体との置換は、より高い代謝安定性から得られる特定の治療的利点(例えば、in vivo半減期の増加又は投薬要件の低減)を与える可能性があり、したがって、一部の状況においては好ましい場合がある。ポジトロン放出同位体(例えば、11C、18F、15O、及び13N)との置換は、基質受容体占有率を試験するためのポジトロン放出断層撮影法(PET)研究において有用であり得る。同位体標識した本発明の化合物は、一般的に、当業者に公知の従来技術により、又は以前に利用されていた非標識試薬の代わりに適切な同位体標識試薬を用いて、添付の実施例及び調製法に記載されている方法に類似の方法により、調製することができる。
【００６４】
化合物
イソオキサゾリン誘導体は、殺虫及び殺ダニ活性を有するものとして当技術分野において開示されている。例えば、国際公開第2007/105814号、同第2008/122375号、及び同第2009/035004号は、特定のアルキレン結合アミドを含む。国際公開第2010/032437号は、ベンジルアミドをイソオキサゾリンに対してオルト位に移動させ得ることについて開示している。さらに、国際公開第2007/075459号は、5〜6員の複素環で置換されているフェニルイソオキサゾリンを開示しており、国際公開第2010/084067号及び同第2010/025998号は、10〜11員の縮合アリール及びヘテロアリールで置換されているフェニルイソオキサゾリンについて開示している。イソオキサゾリンを製造するためのキラル法は、国際公開第2011/104089号及び同第2009/063910号及び同第2017/176948号に報告されている。イソオキサゾリンアゼチジン誘導体は、国際公開第WO2012/017359号において公開された。糖尿病及び高脂血症の治療のための幾つかのスピロ-アゼチジンイソベンゾフラン誘導体は、国際公開第2008/096746号に記載されている。さらに、最近、スピロ環式イソオキサゾリンが国際公開第2012/120399号において公開された。国際公開第2014/039489号は、例えばアゼチジニル-イソベンゾフランなどの、抗寄生生物剤としてのスピロ環式誘導体を開示しているが、この引用文献は、複素環式部分としてのイソチアゾリンを教示又は示唆するものではない。国際公開第2014/079935号は、殺虫剤としての[4-(イソチアゾール-3-イル)アリールチオ]アセトアミド誘導体の調製について開示しており、国際公開第2014/001121号及び同第2014/001120号は、それぞれ、殺虫用化合物としてのイソチアゾール誘導体の調製について開示しているが、いずれもアゼチジニル-イソベンゾフランを含有するものではない。国際公開第2014/206911号は、イソチアゾリン化合物を開示しているが、しかしながら、その教示には、アゼチデニル-イソベンゾフラン部分が全く含まれていない。国際公開第2014/079941号は、N-(アリールスルファニルメチル)カルボキサミド誘導体に基づく殺虫用化合物につ
いて開示している。米国第2014378415号は、イソチアゾリン化合物について開示しているが、しかしながら、その教示には、アゼチデニル-イソベンゾフラン部分が全く含まれていない。国際公開第2009/112275号は、殺有害生物用縮合環アリール化合物に関するが、しかしながら、その教示には、アゼチデニル-イソベンゾフラン部分が全く含まれていない。イソチアゾリン部分を有する殺寄生生物用スピロ環式アゼチジニル-イソベンゾフラン誘導体は、国際公開第2016/115315号に開示されている。
【００６５】
前述の参考文献はいずれも、単一エナンチオマーの非イソオキサゾリンスピロ環式分子、又はそのような化合物を製造する方法も教示又は示唆するものではない。特に、前述の参考文献はいずれも、式Iによる化合物について教示するものではない。前述の引用文献はまた、そのような化合物の単一のエナンチオマーが、愛玩動物、家畜、鳥、又は魚に関連する寄生生物種のスペクトルに対して、並びに特に寄生生物の形態学的生活環段階の範囲に対して有用であり得ることを示すものでもない。
【００６６】
合成
一般的に、本発明の化合物は、当業者には明らかな任意の方法によって調製、単離、又は取得することができる。例示的な調製方法は、以下のスキームによって示される。
【００６７】
【化９】
2021503465.tif 000011
【００６８】
あるいは、イソチアゾリンは、以下のスキームに従って形成することができる。
【００６９】
【化１０】
2021503465.tif 000012
【００７０】
特に本明細書中に記載されるのは、式(1)による単一(S)化合物のエナンチオ選択的合成のための合成法である。本明細書中に記載されるこの化合物は、化合物C1(S)エナンチオマーと呼ばれ、これは、以下の構造：
【００７１】
【化１１】
2021503465.tif 000013
による(S)-1-(5'-(5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4,5-ジヒドロイソチアゾール-3-イル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-1-イル)-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オンである。
【００７２】
C1(S)エナンチオマーを合成するための方法は、スキーム2A〜2D：
【００７３】
【化１２】
2021503465.tif 000014
2021503465.tif 000015
により表される。
【００７４】
一態様において、上記化合物の合成は、スキーム2において表される、化合物(10)、式1aによる化合物(F1a)、及び化合物(12)として示される3つの中間体化合物を含む3つのステップを含む。従って、スキーム2Aとして示される方法の第1の態様は、1-(5'-アセチル-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-1-イル)-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オンと、1-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-2,2,2-トリフルオロエタン-1-オンとを含む混合物を調製し、上記混合物を反応させて、化合物(Z)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタ-2-エン-1-オンを得ることを含む。
【００７５】
化合物C1(S)エナンチオマーを製造するための第2の合成態様はスキーム2Bとして示され、(a)の化合物、エナンチオ選択的触媒；及びチオール供与体を含む混合物を調製し、この混合物を反応させて、式(Ia)：
【００７６】
【化１３】
2021503465.tif 000016
(式中、R4は、水素、場合により置換されたC1-C10アルキル、場合により置換されたフェニル、及び場合により置換されたベンジルから選択される)のチオールエーテル化合物を形成することを含む反応を実施することを含む。一態様において、R4は1つ以上のR4aで置換されており、ここでR4aは、第一級アミン、第二級アミン、第三級アミン、エーテル、フェノール、アミド、エステル、アルキル基、フェニル、及びビニル基から選択される電子供与基である。別の態様において、R4Aは、水素、C1-C10アルキル、及びC1-C10アルコキシから選択される。チオール供与体化合物としては、式S-R4の化合物が挙げられ、ここでR4は上記に定義されるとおりである。一つの特定の態様において、R4はベンジルであり、R4Aは水素又はメトキシであり；このような化合物としては、例えば、チオール供与体であるベンジルメルカプタン及び4-メトキシベンジルメルカプタンなどが挙げられる。一つの特定の態様において、チオール供与体は、4-メトキシベンジルメルカプタン(PMBSHとしても知られている)である。
【００７７】
合成中の化合物のエナンチオマー的特異性は、エナンチオ選択的触媒を利用することにより達成される。このような触媒は、当技術分野において一般的に知られている(Malerich, J.P., et al., J. Am. Chem. Soc., 130 (44), pp. 14416-14417 (2008)及びGuant, M.J., et al., Drug Disc. Today 12(1/2), pp. 8-27, (2006)を参照)。好適な例となる非限定的なエナンチオ選択的触媒としては、第二級アミン含有触媒、チオ尿素含有触媒、及びスクアラミド含有触媒が挙げられる。一態様において、エナンチオ選択的触媒はスクアラミド含有触媒である。別の特定の態様において、スクアラミド含有触媒は、以下の構造：
【００７８】
【化１４】
2021503465.tif 000017
による3-((3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル)アミノ)-4-(((R)-(6-メトキシキノリン-4-イル)((1S,2R,4S,5R)-5-ビニルキヌクリジン-2-イル)メチル)アミノ)シクロブタ-3-エン-1,2-ジオンである。
【００７９】
化合物C1(S)エナンチオマーを製造するための第3の合成態様は、スキーム2Cとして示され、スキーム2Bにおいて形成されたチオールエーテルを切断し、化合物(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-メルカプト-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オンを形成することを含む。一態様において、上記の切断は、酸ベースの切断である。第4の合成態様は、スキーム2Dとして示され、(c)の化合物とヒドロキシルアミン-O-スルホン酸とを含む混合物を調製し、この混合物を反応させてC1(S)エナンチオマーの化合物を形成することを含む。さらに想定される、C1(S)エナンチオマー化合物を合成するための方法は、合成中間体のそれぞれについて記載される。
【００８０】
本明細書中に記載される一実施形態は、以下の構造：
【００８１】
【化１５】
2021503465.tif 000018
による化合物(Z)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタ-2-エン-1-オンである。
【００８２】
この化合物は、スキーム2Aに従って製造され、このスキームは、(a) 1-(5'-アセチル-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-1-イル)-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オンと、(b) 1-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-2,2,2-トリフルオロエタン-1-オンとを含む混合物を調製し、この混合物を反応させることを含む。一態様において、(a)及び(b)は、有機溶媒に溶解される。別の態様において、反応混合物は、例えば、トリエチルアミン、ピリジン、メチルアミン、ベンジルアミン、n-ブチルアミンなどの、約8〜約12のpKbを有するアミン含有塩基を含む。別の態様において、上記混合物は、約40℃〜約90℃、約40℃〜約80℃、又は約50℃〜約60℃を含む特定の温度(上記特定範囲内の各整数を含む)に加熱される。別の態様において、上記混合物は、約30分間〜約6時間、約1時間〜約4時間、又は約1時間〜約2時間を含む時間範囲(上記特定範囲内の各整数時間を含む)にわたり、特定の温度に加熱される。別の態様において、上記混合物は、約1時間〜約8時間、1時間〜約6時間、又は1時間〜約4時間を含む時間(上記特定範囲内の各整数時間を含む)、特定の温度に保持される。当技術分野で公知のとおり、さらなる洗浄ステップ及び精製ステップを含めることができる。
【００８３】
別の実施形態は、以下の構造：
【００８４】
【化１６】
2021503465.tif 000019
による(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-((4-メトキシベンジル)チオ)-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オンである、C1(S)エナンチオマー化合物の合成中間体である。
【００８５】
上記合物はスキーム2Bに従って製造され、このスキームは、化合物(Z)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタ-2-エン-1-オン、エナンチオ選択的触媒、及びp-メトキシベンジルメルカプタンを含む混合物を調製することを含む。一態様において、上記混合物は、リン酸二カリウムなどの緩衝剤及び有機溶媒をさらに含む。別の態様において、上記混合物は、約20℃〜約-40℃、約4℃〜約-30℃、又は約-5℃〜約-25℃の温度(上記特定範囲内の各整数を含む)に冷却される。別の態様において、エナンチオ選択的触媒は、約1時間〜約96時間、約10時間〜約80時間、約20時間〜約60時間、又は約40時間〜約50時間を含む期間(上記特定範囲内の各整数時間を含む)にわたり上記混合物に添加される。当技術分野で公知のとおり、さらなる洗浄及び精製ステップを含めることができる。
【００８６】
別の実施形態は、以下の構造：
【００８７】
【化１７】
2021503465.tif 000020
による(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-メルカプト-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オンである、C1(S)エナンチオマー化合物の合成中間体である。
【００８８】
上記化合物はスキーム2Cに従って製造され、このスキームは、(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-((4-メトキシベンジル)チオ)-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オン、有機溶媒を含む混合物を調製し、酸を添加して、上記混合物を反応させることを含む。一態様において、上記の酸は、約-14〜約5、約-14〜約1、又は約-14〜約-5を含むpKa、又は1未満のpKa(上記特定範囲内の各整数を含む)を有する。このような合成化学法に適した酸は公知であり、例えば、塩酸、トリフルオロ酢酸、トリフリン酸などが挙げられる。別の態様において、上記混合物の温度は、約20℃未満、約15℃未満、若しくは約10℃未満、又は約-20℃〜約30℃、又は約0℃〜約10℃の温度(上記特定範囲内の各整数を含む)に維持される。別の態様において、上記の酸は、約5分間〜約60分間、約5分間〜約30分間、又は約20分間を含む期間(上記特定範囲の時間内の各整数を含む)にわたり、上記混合物に添加される。当技術分野で公知のとおり、さらなる洗浄ステップ及び精製ステップを含めることができる。
【００８９】
化合物C1(S)エナンチオマーは、スキーム2Dに従って第3の中間体から製造され、このスキームは、化合物(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-メルカプト-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オン、有機溶媒、及びヒドロキシルアミン-O-スルホン酸を含む混合物を調製し、上記混合物を反応させることを含む。一態様において、上記混合物は、20℃〜約-40℃、約4℃〜約-30℃、又は約-5℃〜約-25℃の温度(上記特定範囲内の各整数を含む)に冷却される。一態様においては、その後、上記混合物に塩基が添加され、この結果として得られた混合物を反応させる。別の態様において、上記の塩基は、約10分間〜約6時間、約10分間〜約4時間、又は約1時間〜約3時間の期間(上記特定範囲内の各整数を含む)にわたり添加される。別の態様において、上記の反応は、この反応への酸の添加によりクエンチされる。好適な酸として、約-14〜約5のpKaを有するもの、例えば塩酸などが挙げられる。別の態様において、酸を添加している間の上記混合物の温度は、約20℃未満、約15℃未満、若しくは約10℃未満、又は約-20℃〜約30℃、又は約0℃〜約10℃の温度(上記特定範囲内の各整数を含む)に維持される。好適な塩基としては、約-2〜約9のpKbを有するもの、例えば、限定するものではないが、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カルシウム、ヒューニッヒ塩基、DBU、N-メチルモルホリン、ピリジン、2,6-ジ-tert-ブチルピリジン、2,6-ルチジン、TMEDA、DABCO、及び2,2,6,6-テトラメチルピペリジンなどが挙げられる。
【００９０】
本明細書中に記載される化合物の合成的調製は、通常、当技術分野で一般的に公知の有機溶媒中で実施される。例となる非限定的な溶媒として、水混和性溶媒と水非混和性溶媒、極性溶媒と非極性溶媒、の両方が挙げられる。例となる非限定的な溶媒としては、ペンタン、シクロペンタン、ヘキサン、シクロヘキサン、ベンゼン、トルエン、1,4-ジオキサン、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルtert-ブチルエーテル、ジメチルスルホキシドなどが挙げられる。
【００９１】
組成物及び投与方法
本明細書中で開示される方法において使用される式(I)の化合物は、特定の実施形態において、単独で用いられるか、あるいは1種以上の適合性があり且つ獣医学的に、医薬的に、若しくは殺有害生物剤として許容される担体(例えば希釈剤若しくはアジュバント)との、又は別の薬剤との組み合わせの形で用いられる、(適切であれば塩の形態の)少なくとも1つの式(I)の化合物を含む獣医学用、医薬用、又は殺有害生物用組成物を用いて投与することができる。式(I)のイソチアゾリン誘導体又はその塩と、許容される賦形剤、担体、又は希釈剤とを含む組成物が提供される。本組成物はまた、例えば、限定するものではないが、経口製剤、注射用製剤、及び局所用、経皮用、若しくは皮下用製剤などの様々な形態であってもよい。
【００９２】
本組成物は、経口用途に適した形態、例えば、栄養補助食品、トローチ、ロゼンジ、チュアブル剤、錠剤、硬カプセル剤若しくは軟カプセル剤、エマルション、水性若しくは油性懸濁液、水性若しくは油性溶液、分散性粉末若しくは顆粒、シロップ、又はエリキシルであり得る。経口用途が意図される組成物は、獣医学用、医薬用、又は殺有害生物用の組成物の製造のための当技術分野で公知の任意の方法に従って調製することが可能であり、このような組成物は、上品な口当たりの良い調製物を提供するために、甘味剤、苦味剤、香味剤、着色剤、及び保存剤からなる群から選択される1種以上の薬剤を含有し得る。
【００９３】
錠剤は、錠剤の製造に好適な非毒性の医薬的に許容される賦形剤と混合して活性成分を含有し得る。これらの賦形剤は、例えば、不活性希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム、又はリン酸ナトリウム；造粒剤及び崩壊剤、例えば、トウモロコシデンプン、又はアルギン酸；結合剤、例えば、デンプン、ゼラチン、又はアカシア、並びに滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、又はタルクであり得る。錠剤は、コーティングされていなくてもよく、又はそれらは、胃腸管での分解及び吸収を遅延させ、これにより長期間にわたる持続作用を提供するように、公知の技術によりコーティングされてもよい。
【００９４】
経口用途用の製剤は、硬ゼラチンカプセルであってもよく、ここで活性成分は、不活性固体希釈剤(例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、又はカオリン)と混合されている。またカプセルは、軟ゼラチンカプセルであってもよく、ここで活性成分は、水若しくは混和性溶媒(例えば、プロピレングリコール、PEG、及びエタノール)、又は油性媒体(例えば、ピーナツ油、液体パラフィン、若しくはオリーブ油)と混合されている。
【００９５】
本組成物はまた、水中油型又は油中水型エマルションの形態であってもよい。油相は、植物性油(例えば、オリーブ油若しくはラッカセイ油)、又は鉱油(例えば、液体パラフィン)、あるいはこれらの混合物であり得る。好適な乳化剤は、天然リン脂質、例えば、大豆、レシチン、並びに脂肪酸及びヘキシトール無水物から誘導されるエステル若しくは部分エステル(例えば、モノオレイン酸ソルビタン)、さらに前記部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物(例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン)であり得る。エマルションはまた、甘味剤、苦味剤、香味剤、及び保存剤も含有し得る。
【００９６】
本製剤の一実施形態において、本組成物は、マイクロエマルションの形態である。マイクロエマルションは、液体担体ビヒクルとして十分に適している。マイクロエマルションは、水相、油相、界面活性剤、及び補助界面活性剤を含む4成分系である。これらは半透明かつ等方性の液体である。マイクロエマルションは、油相における水相の微小液滴の安定分散液、又は逆に水相における油相の微小液滴の安定分散液で構成される。これらの微小液滴のサイズは、200nm未満である(エマルションについては1000〜100,000nm)。界面薄膜は、界面活性(SA)分子と補助界面活性(Co-SA)分子が交互に配列したものから構成され、これは、界面張力を低下させることにより、マイクロエマルションが自発的に形成されることを可能とする。油相の一実施形態において、油相は、鉱油若しくは植物性油から、不飽和ポリグリコシル化グリセリド若しくはトリグリセリドから、あるいはこのような化合物の混合物から形成することができる。油相の一実施形態において、油相はトリグリセリドを含み、油相の別の実施形態において、トリグリセリドは、中鎖トリグリセリド、例えば、C8-C10カプリル酸/カプリン酸トリグリセリドである。別の実施形態において、油相は、マイクロエマルションの約2〜約15%、約7〜約10%、及び約8〜約9%(体積/体積)からなる群から選択される%(体積/体積)範囲を占める。水相としては、例えば、水、又はグリコール誘導体(例えば、プロピレングリコール、グリコールエーテル、ポリエチレングリコール、若しくはグリセロール)が挙げられる。グリコール誘導体の一実施形態において、グリコールは、プロピレングリコール、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジプロピレングリコールモノエチルエーテル、及びそれらの混合物からなる群から選択される。一般的に、水相は、マイクロエマルション中約1%〜約4%(体積/体積)の割合を占めるであろう。マイクロエマルションの界面活性剤としては、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジプロピレングリコールモノメチルエーテル、ポリグリコール化C8-C10グリセリド、又はポリグリセリル-6ジオレエートが挙げられる。これらの界面活性剤に加えて、補助界面活性剤として、短鎖アルコール、例えば、エタノール及びプロパノールが挙げられる。いくつかの化合物は、上述の3つの成分、例えば、水相、界面活性剤、及び補助界面活性剤に共通している。しかしながら、同一製剤の各成分に異なる化合物を用いることは、十分に当業者の技能の範囲内である。界面活性剤/補助界面活性剤の量に関する一実施形態において、補助界面活性剤と界面活性剤の比は、約1/7〜約1/2となるであろう。
【００９７】
補助界面活性剤の量に関する別の実施形態において、約25〜約75%(体積/体積)の界面活性剤、及び約10〜約55%(体積/体積)の補助界面活性剤が、マイクロエマルション中に存在するであろう。
【００９８】
油性懸濁液は、活性成分を、植物性油(例えば、ラッカセイ油(atachis oil)、オリーブ油、ゴマ油、若しくはココナツ油)、又は鉱油(例えば液体パラフィン)に懸濁させることによって製剤化することができる。油性懸濁液は、増粘剤、例えば、蜜蝋、硬パラフィン、又はセチルアルコールを含有し得る。口当たりのよい経口調製物を得るために、甘味剤(例えば、スクロース、サッカリン、又はアスパルテーム)、苦味剤、及び香味剤を添加してもよい。これらの組成物は、抗酸化剤(例えば、アスコルビン酸)、又は他の公知の保存剤の添加により保存することができる。
【００９９】
水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に適した賦形剤と混合して活性材料を含有し得る。このような賦形剤は、懸濁化剤(例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴム、及びアカシアゴム)であり、分散剤又は湿潤剤は、天然リン脂質(例えばレシチン)、又はアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物(例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレン)、又はエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物(例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール)、又はエチレンオキシドと脂肪酸及びヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生成物(例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール)、又はエチレンオキシドと、脂肪酸及びヘキシトール無水物から誘導される部分エステルとの縮合生成物、(例えば、モノオレイン酸ポリエチレンソルビタン)であり得る。水性懸濁液はまた、1種以上の保存剤、例えば、エチル、又はn-プロピル、p-ヒドロキシベンゾエート、1種以上の着色剤、1種以上の香味剤、並びに1種以上の甘味剤及び/又は苦味剤、例えば上記に示されるものなども含有し得る。
【０１００】
水の添加による水性懸濁液の調製に適した分散性粉末及び顆粒は、分散剤若しくは湿潤剤、懸濁化剤、及び1種以上の保存剤と混合して活性成分を提供する。好適な分散剤若しくは湿潤剤及び懸濁化剤は、前述のものによって例示される。さらなる賦形剤、例えば、甘味剤、苦味剤、香味剤、及び着色剤もまた存在し得る。
【０１０１】
シロップ及びエリキシルは、甘味剤、例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール、又はスクロースと共に製剤化することができる。このような製剤はまた、粘滑剤、保存剤、香味剤(1種又は複数種)、及び着色剤(1種又は複数種)も含有し得る。
【０１０２】
本組成物は、滅菌注射用の水性又は油性(oleagenous)の懸濁液の形態であり得る。この懸濁液は、上述の好適な分散剤若しくは湿潤剤及び懸濁化剤を使用して、公知の技術に従って製剤化することができる。滅菌注射用調製物はまた、非毒性の非経口的に許容される希釈剤又は溶媒中の滅菌注射溶液又は懸濁液、例えば、1,3-ブタンジオール中溶液であってもよい。許容されるビヒクル及び溶媒の中でも、利用することができるのは、水、リンガー溶液、及び等張塩化ナトリウム溶液である。共溶媒、例えばエタノール、プロピレングリコール、又はポリエチレングリコールなども使用し得る。保存剤、例えばフェノール又はベンジルアルコールを使用することができる。
【０１０３】
さらに、滅菌の固定油が、溶媒又は懸濁媒体として通常用いられる。この目的のため、合成のモノグリセリド又はジグリセリドなどの任意の無菌の固定油を利用し得る。さらに、オレイン酸などの脂肪酸は、注射用調製物として利用される。
【０１０４】
局所用、経皮用、及び皮下用製剤としては、エマルション剤、クリーム剤、軟膏剤、ゲル剤、又はペースト剤などが挙げられる
【０１０５】
本発明において使用し得る有機溶媒としては、限定するものではないが、クエン酸アセチルトリブチル、脂肪酸エステル(例えば、ジメチルエステル)、アジピン酸ジイソブチル、アセトン、アセトニトリル、ベンジルアルコール、ブチルジグリコール、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミド、ジプロピレングリコールn-ブチルエーテル、エタノール、イソプロパノール、メタノール、エチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコールモノメチルエーテル、モノメチルアセトアミド、ジプロピレングリコールモノメチルエーテル、液体ポリオキシエチレングリコール、プロピレングリコール、2-ピロリドン(例えば、N-メチルピロリドン)、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコール、及びフタル酸ジエチル、又はこれらの溶媒のうち少なくとも2種の混合物などが挙げられる。
【０１０６】
ビヒクル又は希釈剤として、本発明の組成物は、植物性油(例えば、限定するものではないが、大豆油、ラッカセイ油、ヒマシ油、トウモロコシ油、綿実油、オリーブ油、グレープシード油、ヒマワリ油など)、鉱油、例えば、限定されないが、ワセリン、パラフィン、シリコーンなど、脂肪族若しくは環式炭化水素、又は代替的に、例えば、中鎖(例えば、C8-C12)トリグリセリドを含み得る。
【０１０７】
剤形は、約0.5mg〜約5gの活性成分を含有し得る。
【０１０８】
本発明の一実施形態において、活性成分は、約0.05〜10%(重量/体積)の濃度で製剤中に存在する。
【０１０９】
式(I)の化合物は、そのまま利用することも可能であるし、又は他の殺有害生物剤として活性な物質(例えば、殺虫剤、誘引剤、滅菌剤、殺線虫剤、殺ダニ剤、殺真菌剤、除草剤など)との、さらに薬害軽減剤、肥料、及び/若しくは成長調節剤との組み合わせ剤としての、それらの調製物若しくは製剤の形態で利用することもできる。
【０１１０】
本発明による式(I)の化合物は、例えば活性を増加させるために同じ活性領域(sphere of activity)を有する1種以上の薬剤と、又は例えば活性の範囲を広げるために別の活性領域を有する物質と組み合わせてもよい。本発明の化合物はまた、いわゆる忌避剤と組み合わせることもできる。式Iの化合物を他の好適な殺寄生生物剤と組み合わせることにより、殺寄生生物活性を高めることができるだけでなく、大きな経済的損失を与える寄生生物の大部分が対象範囲に包含されるであろう。さらに、この作用は、耐性の形成を回避することに実質的に寄与するであろう。組み合わせパートナーの好ましい群、及び特に好ましい組み合わせパートナーを以下に挙げるが、ここで、組み合わせ剤は、式Iの化合物に加えて、これらのパートナーのうちの1種以上を含有し得る。好適なパートナーはまた、アフォキソラネル(afoxolaner)、サロラネル(sarolaner)、フルララネル(fluralaner)、又はこれらの組み合わせであってもよい。個別に列挙した薬剤のいずれも、任意の他の1種以上の独立して列挙された薬剤と共に、式(I)の化合物と組み合わせて使用することができる。
【０１１１】
混合物における好適なパートナーは、殺生物剤、すなわち、様々な活性機序を有する殺虫剤及び殺ダニ剤、例えば、キチン合成阻害剤、成長調節剤、幼若ホルモンとして作用する活性成分、殺成虫剤として作用する活性成分、広域殺虫剤、広域殺ダニ剤、及び殺線虫剤、並びにさらには駆虫剤、並びに防虫及び防ダニ物質、忌避剤又は脱離剤(detacher)であり得る。好適な殺虫剤及び殺ダニ剤の非限定的な例は、以下の通りである。
【表Ａ】
2021503465.tif 000021
2021503465.tif 000022
【０１１２】
好適な駆虫剤の非限定的な例として、殺虫活性及び殺ダニ活性に加えて駆虫活性を有する幾つかの代表的な駆虫剤としては、次のものが挙げられる。
【表Ｂ】
2021503465.tif 000023
【０１１３】
好適な忌避剤及び脱離剤の非限定的な例としては、以下のものが挙げられる：
(R1) DEET (N,N-ジエチル-m-トルアミド)
(R2) KBR 3023、ピカリジン、N-ブチル-2-オキシカルボニル-(2-ヒドロキシ)-ピペリジン
(R3) シミアゾール、N,-2,3-ジヒドロ-3-メチル-1,3-チアゾール-2-イリデン-2,4-キシリデン
【０１１４】
上記に特定される組み合わせパートナーは、当技術分野における専門家に最もよく知られている。その大部分は、Pesticide Manual, The British Crop Protection Council, Londonの様々な版、Compendium of Veterinary Products, North American Compendiums, Inc.の様々な版、Compendium of Pesticide Common Namesの様々な版、並びにMerck Veterinary Manual 及びThe Merck Index, Merck & Co., Inc., Rahway, New Jersey, USAの様々な版に記載されている。
【０１１５】
ヒト又は他の哺乳動物への送達のためのイソチアゾリン誘導体を含む医薬調製物は、好ましくは単位剤形であり、ここで、調製物は、適切な量の活性成分を含む単位用量にさらに分割される。単位剤形は、個別量の調製物を含むパッケージ調製物、例えば、パッケージ錠剤、カプセル、及びバイアル若しくはアンプルに入った粉末であり得る。また、単位剤形は、カプセル、錠剤、若しくはロゼンジ自体であってもよく、又は適切な数のパッケージ形態におけるこれらのいずれかであってもよい。
【０１１６】
単位用量調製物中の活性成分の量は、活性成分の特定の用途及び効力に応じて、約0.1mg〜約1000mgで変動又は調整され得る。本組成物は、所望の場合、他の適合性のある治療剤もまた含有し得る。
【０１１７】
ヒト又は他の動物における寄生生物感染の処置又は予防のための治療用途において、処置方法において用いられる化合物は、1間隔当たり約0.1mg/kg〜約100mg/kgの初期投与量で投与される。好ましい間隔は、1日1回、週に1回、年に4回、半年毎に1回、又は年に1回であり得る。投与量は、患者の要件(例えば、処置されているヒト又は哺乳動物のサイズ、処置されている症状の重症度、投与経路、及び使用されている化合物(1種又は複数種)の効力)に応じて変動し得る。特定の状況のための適切な投与量及び投与経路の決定は、当業者の技能の範囲内である。一般的に、処置は、化合物の最適用量未満のより少ない投与量で開始され、これを、特定の感染状況下で最適な効果が達成されるまで、少しずつ増加させることができる。便宜上、総一日投与量を、所望の場合はその日の間に少量ずつ分割して投与することができる。
【０１１８】
本発明の化合物、並びに治療有効量の式(I)の化合物及びその獣医学的に許容される塩と、獣医学的に許容される賦形剤、希釈剤、又は担体とを含む組成物は、動物における前記外部寄生生物により示される感染又は外寄生の防除及び処置のための殺外部寄生生物剤(ectoparasiticide)として有用である。本発明の化合物は、殺外部寄生生物剤、特に、殺ダニ剤及び殺虫剤としての有用性を有することが、本明細書中に示されている。それらは、特に、獣医学用医薬品、家畜飼育、及び公衆衛生の維持の分野において；脊椎動物、特に、愛玩動物、家畜、及び家禽などの温血脊椎動物、並びに魚などの冷血脊椎動物に寄生する、ダニ、昆虫、及びカイアシ類に対して使用され得る。外部寄生生物の非限定的な例としては、ダニ類(例えば、マダニ属種(Ixodes spp.)(例えば、マダニ(I. ricinus)、イクソデス・ヘキサゴナス(I. hexagonus))、コイタマダニ属種(Rhipicephalus spp.)(例えば、クリイロコイタマダニ)、ウシマダニ属種(Boophilus spp.)、キララマダニ属種(Amblyomma spp.)(例えば、アムブリオンマ・アメリカヌム(A. americanum)、アムブリオンマ・マクラツム(A. maculatum)、アムブリオンマ・トリエステ(A.triste)、アムブリオンマ・パルバム(A. parvum)、アムブリオンマ・カジェネンセ(A. cajennense)、アムブリオンマ・オバレ(A. ovale)、アムブリオンマ・オブロンゴグッタツム(A. oblongoguttatum)、アムブリオンマ・オーレオラツム(A. aureolatum)、アムブリオンマ・カジェネンセ(A. cajennense))、イボマダニ属種、チマダニ属種、カクマダニ属種(例えば、アメリカイヌカクマダニ(D. variabilis)、デルマセンター・アンダーソニ(D. andersoni)、デルマセンター・マルギナタス(D. marginatus))、オルニトドラス属種(Ornithodorus spp.)など)；ダニ類(例えば、デルマニッスス属種、ヒゼンダニ属種(例えば、ヒゼンダニ(S. scabiei))、キュウセンヒゼンダニ属種(例えば、ソロプテス・ボビス(P. bovis))、ミミヒゼンダニ属種、ショクヒゼンダニ属種、ニキビダニ属種(例えば、ニキビダニ(D. folliculorum)、イヌニキビダニ(D. canis)、及びコニキビダニ(D. brevis)など)；ハジラミ及び吸血シラミ類(chewing and sucking lice)(例えば、ダマリニア属種(Damalinia spp.)、ケモノホソジラミ属種(Linognathus spp.)、ツメダニ属種(Cheyletiella spp.)、ブタジラミ属種(Haematopinus spp.)、ソレノプテス属種(Solenoptes spp.)、トリコデクテス属種(Trichodectes spp.)、フェリコラ属種(Felicola spp.)など)；ノミ類(例えば、ノミ目種(Siphonaptera spp.)、テノセファリデス種(Ctenocephalides spp.)など)；サシバエ類、小昆虫類、及び、蚊(例えば、アブ科種(Tabanidae spp.)、ヘマトビア属種(Haematobia spp.)、イヌバエ属種(Musca spp.)、サシバエ属種(Stomoxys spp.)、ヒフバエ属種(Dematobia spp.)、コクリオミヤ属種(Cochliomyia spp.)、ブユ科種(Simuliidae spp.)、ヌカカ科種(Certopogonidae spp.)、チョウバエ科種(Psychodidae spp.)、ヤブカ属種(Aedes spp.)、イエカ属種(Culex spp.)、ハマダラカ属種(Anopheles spp.)、キンバエ属種(Lucilia spp.)、サンチョウバエ属種(Phlebotomus spp.)、ルツォミヤ属種(Lutzomyia spp.)、など)；トコジラミ類(例えば、トコジラミ属(Cimex)及びトコジラミ科(Cimicidae)内の昆虫、及び、地虫類(例えば、ウシバエ(Hypoderma bovis)、キスジウシバエ(H. lineatum))；並びに、カイアシ類(例えば、ウオジラミ(Siphonostomatoida)目内のウオジラミ(sea lice)、例えば、レペオフテイルス属(Lepeophtheirus)及びカリガス属(Caligus)など)が挙げられる。
【０１１９】
本発明の化合物はまた、内部寄生生物、例えば、蠕虫類(例えば、吸虫類、条虫類、及び線虫類)、例えば、イヌ糸状虫(heartworm)、回虫、鉤虫、鞭虫、吸虫、及びサナダムシの処置に使用することもできる。胃腸管の回虫としては、例えば、オステルタギア・オステルタギ(Ostertagia ostertagi)、(抑制幼虫(inhibited larvae)を含む)、オステルタギア・リラータ(O. Lyrata)、ヘモンクス・プラセイ(Haemonchus placei)、ヘモンクス・シミリス(H. similis)、ヘモンクス・コントルツス(H. contortus)、イヌ回虫(Toxocara canis)、イヌ小回虫(T. leonina)、ネコ回虫(T. cati)、トリコストロンギルス・アクセイ(Trichostrongylus axei)、トリコストロンギルス・コルブリフォルミス(T. colubriformis)、トリコストロンギルス・ロンギスピクラリス(T. longispicularis)、クーペリア・オンコホラ(Cooperia oncophora)、クーペリア・ペクチナタ(C. pectinata)、クーペリア・パンクタタ(C. punctata)、クーペリア・スルナバダ(C. surnabada)、(同義語、マクマステリ(mcmasteri))、クーペリア・スパチュラ(C. spatula)、ブタ回虫(Ascaris suum)、紅色毛様線虫(Hyostrongylus rubidus)、ウシ鉤虫(Bunostomum phlebotomum)、ウシ毛頭虫(Capillaria bovis)、ブノストム・トリゴノセファラム(B. trigonocephalum)、乳頭糞線虫(Strongyloides papillosus)、糞線虫(S. ransomi)、ウシ腸結節虫(Oesophagostomum radiatum)、ブタ腸結節虫(O. dentatum)、コロンビア腸結節虫(O. columbianum)、エソファゴストム・クアドリスピヌラタム(O. quadrispinulatum)、トリチュリス属(Trichuris spp.)などが挙げられる。他の寄生生物としては、鉤虫(例えば、イヌ鉤虫(Ancylostoma caninum)、ネコ鉤虫(A. tubaeforme)、ブラジル鉤虫(A. braziliense)、ウンシナリア・ステノセファラ(Uncinaria stenocephala))；肺虫類(例えば、ウシ肺虫(Dictyocaulus viviparous)、及びブタ肺虫属種(Metastrongylus spp))；眼虫類(例えば、テラジア属種(Thelazia spp.))；寄生段階の幼虫類(parasitic stage grubs)、(例えば、ウシバエ、キスジウシバエ、ヒトヒフバエ(Dermatobia hominis))；腎虫(Kidneyworm)、(例えば、ブタ腎虫(Stephanurus dentatus))；ラセン虫(screw worm)、(例えば、ラセンウジバエ(Cochliomyia hominivorax)(幼虫)；フィラリア上科(super-family Filarioidea)及びオンコセルカ科(Onchocercidae Family)のフィラリア線虫(filarial nematode)が挙げられる。オンコセルカ科内のフィラリア線虫の非限定的な例としては、ブルギア属種(すなわち、マレー糸状虫(B.malayi)、パハン糸状虫(B. pahangi)、チモール糸状虫(B. timori)など)、ウシェレリア属種(Wuchereria spp.)(すなわち、バンクロフト糸状虫(W. bancrofti)など)、ディロフィラリア属種(Dirofilaria spp.)(ディロフィラリア・イミティス(D. immitis)、ディロフィラリア・レペンス(D. repens)、ディロフィラリア・ウルシ(D. ursi)、ディロフィラリア・テヌイス(D. tenuis)、ディロフィラリア・スペクタンス(D. spectans)、ディロフィラリア・ルトラエ(D. lutrae)など)、ジペタロネマ属種(Dipetalonema spp.)(すなわち、ジペタロネマ・レコンジツム(D. reconditum)、ジペタロネマ・レペンス(D. repens)など)、オンコセルカ属種(Onchocerca spp.)(すなわち、ギブソン糸状虫(O. gibsoni)、咽頭糸状虫(O. gutturosa)、回旋糸状虫(O. volvulus)など)、エラエオホラ属種(Elaeophora spp.)(エラエオホラ・ボミ(E. bohmi)、エラエオホラ・エラフィ(E. elaphi)、エラエオホラ・ポエリ(E. poeli)、エラエオホラ・サギッタ(E. sagitta)、エラエオホラ・スクネイデリ(E. schneideri)など)、マンソネラ属種(Mansonella spp.)(すなわち、マンソネラ・オザルディ(M. ozzardi)、マンソネラ・ペルスタンス(M. perstans)など)、及びロア属種(Loa spp.)(すなわち、ロア糸状虫(L. loa))が挙げられる。
【０１２０】
好ましくは、本発明の化合物は、寄生生物の感染又は外寄生を処置するために使用され、好ましくは、寄生生物は、ノミ又はダニである。特に好ましい実施形態において、寄生生物は、ネコノミ、クリイロコイタマダニ、アムブリオンマ・アメリカヌム、シカダニ、アムブリオンマ・マクラテ(A. maculate)、アメリカイヌカクマダニ、又はマダニである。
【０１２１】
本発明の別の態様において、本発明の化合物は、ディロフィラリア属内の蠕虫/フィラリア線虫(すなわち、ディロフィラリア・イミティス、ディロフィラリア・レペンス、ディロフィラリア・ウルシ、ディロフィラリア・テヌイスなど)による内部寄生感染の処置に有用である。
【０１２２】
本発明の化合物、その立体異性体、及びその獣医学的に又は医薬的に許容される塩、並びに本発明の化合物を少なくとも1種の他の獣医学用薬剤とともに含む組成物は、愛玩動物、家畜、鳥、及び魚に有害であるか、又はそれらにおいて疾患を蔓延させるか若しくは疾患の媒介物として作用する外部寄生生物、内部寄生生物、及び昆虫の防除に特に有用である。
【０１２３】
本発明の化合物のいずれか、又は本発明の化合物と場合により少なくとも1種のさらなる獣医学用薬剤との好適な組み合わせ剤は、動物に直接的に、及び/又は動物が居住している局所環境(例えば、寝床(bedding)、囲い(enclosure)など)に適用することにより間接的に、投与することができる。直接投与としては、対象動物の皮膚、毛皮、若しくは羽毛を化合物(1つ又は複数)と接触させること、又は化合物を動物に摂取させるか若しくは注射することによるものなどが挙げられる。
【０１２４】
本明細書に記載される、式(I)の化合物、及びその獣医学的に許容される塩、並びに少なくとも1種のさらなる獣医学用薬剤との組み合わせ剤は、昆虫及び寄生生物の様々な生活環段階(例えば卵、若虫、幼虫、及び成虫の段階など)の処置及び防除に有用であると考えられる。
【０１２５】
本発明はまた、本発明の化合物を、単独で、又は少なくとも1種のさらなる獣医学用薬剤、及び場合により獣医学的に許容される賦形剤、希釈剤、若しくは担体と組み合わせて、良好な健康状態の動物に投与する方法であって、動物により運ばれる寄生生物によるヒトの寄生生物感染又は外寄生の可能性を低減又は排除するため、及び動物が居住する環境を改善するために、前記動物に適用することを含む、上記方法にも関する。
【０１２６】
本発明は、表1に示される化合物を明示的に包含する。これらの化合物のうちのいずれかを治療上許容される量で含む組成物もまた、本発明の範囲内である。本組成物は、獣医学的に許容される賦形剤、希釈剤、担体、又はこれらの混合物をさらに含み得る。このような組成物は、寄生生物の感染又は外寄生を処置及び/又は予防するために、それを必要とする動物に投与することができる。本組成物は、本明細書に記載されるさらなる獣医学用薬剤をさらに含み得る。
【０１２７】
【表１】
2021503465.tif 000024
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【実施例】
【０１２８】
以下の実施例は、本発明の化合物を調製するためのプロセス条件のより詳細な説明を提供する。しかしながら、本明細書中に完全に記載され、特許請求の範囲に列挙されている本発明は、以下の調製スキーム又はモードの詳述により限定されることが意図されるものではないことを理解されたい。
【０１２９】
実施例１：(S)-1-(5'-(5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4,5-ジヒドロイソチアゾール-3-イル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-1-イル)-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オンの合成
中間体1：(Z)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタ-2-エン-1-オン(10)
【０１３０】
【化１８】
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【０１３１】
1-(5'-アセチル-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-1-イル)-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オン(2.16kg)及び1-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-2,2,2-トリフルオロエタン-1-オン(9)(3.22kg)を、12LのTHFに溶解した。トリエチルアミン(1.95L)を添加し、この混合物を2時間かけて60℃に温め、60℃で4時間保持し、その時点でHPLCにより反応を完了した。新たなTHFを添加して体積を一定に維持しながら、カールフィッシャー分析による水含量が<0.13%になるまで大気圧で水の共沸除去を行った。次いで、混合物を20℃に冷却し、トリエチルアミン(680mL)とDMAP(128g)を添加し、その後温度が25℃を超えないような速度で無水酢酸(1.33L)を添加した。7時間撹拌した後、HPLC分析により反応を完了し、塩化アンモニウム(水中20％溶液、6.6L)を添加し、その後MTBE(11L)を添加した。15分間撹拌した後、相を分割し、水性層を捨てた。有機層を4.4Lの0.1N NaOH溶液で洗浄し、その後4.4LのNaClの27重量％溶液で洗浄した。有機層を真空下で濃縮し、35Lの最終体積までIPAへの溶媒交換を行った。上記混合物を、全材料が溶解するまで67℃に加熱し、その後1.5時間かけて水(14.3L)を添加し、混合物を58℃に冷却し、種結晶(44g)を添加した。この混合物を55℃で90分間保持した後、混合物を40℃〜45℃に冷却し、15分間かけて水(3.3L)を添加し、その時点で温度を55℃に上昇させ、撹拌しながら16時間保持した。次いで、この結晶体を40℃に冷却し、15分間かけて水(3.3L)を添加し、その後、上記混合物を55℃に加熱して15分間保持し、その後3時間かけて20℃に冷却した。この混合物を20℃で2時間撹拌し、その後濾過して、この固体を5.5Lの6：5のIPA：水の溶液で洗浄し、固体を回収して真空下で乾燥し、2.75kgの生成物(Z)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタ-2-エン-1-オン(10)(収率70％)を得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 7.88 (dd, J=0.6, 8.0 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.53 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.41 (d, J=1.2 Hz, 1H), 7.24 (d, J=6.1 Hz, 2H), 5.18 (s, 2H), 4.61 (d, J=9.1 Hz, 1H), 4.48 - 4.39 (m, 2H), 4.35 - 4.30 (m, 1H), 3.14 - 3.02 (m, 2H)。
【０１３２】
中間体2：(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-((4-メトキシベンジル)チオ)-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オン(11)
【０１３３】
【化１９】
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【０１３４】
(Z)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタ-2-エン-1-オン(10)、触媒A (3-((3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル)アミノ)-4-(((R)-(6-メトキシキノリン-4-イル)((1S,2R,4S,5R)-5-ビニルキヌクリジン-2-イル)メチル)アミノ)シクロブタ-3-エン-1,2-ジオン)、及びK2HPO4を、16Lのトルエン中でスラリー化し、-20℃に冷却した。この混合物に、2.35Lのトルエン中のPMBSH(1.18kg)の溶液を、40時間かけて添加した。48時間後、HPLCにより反応を完了し(1%の10が残っていた)、その時点で水中327gのK2HPO4の溶液を添加し、その後4.6LのEtOAcを添加して、反応を20℃に温めた。水性層を除去し、水中硫酸の1M溶液を、反応温度を<25℃に維持するような速度で添加した。得られたスラリを濾過し、この固体を2LのEtOAcで洗浄し、捨てた。濾液の水性層を除去し、有機層を4.6Lの1M H2SO4で1回洗浄し、6Lの26%ブライン溶液で1回洗浄した。溶媒を除去し、残渣を3.5kgのシリカゲル上で懸濁させた。カラムクロマトグラフィー(4.6kgシリカ、ヘプタン/EtOAc)を実施して残りのPMBSHを除去した後、HPLCを実施し、生成物を含有する画分を合わせて溶媒を除去し、2.7kgの生成物(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-((4-メトキシベンジル)チオ)-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オン(11)(収率92％)を得た。1H NMR (400MHz, CHLOROFORM-d) δ = 7.84 (t, J=6.8 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.58 (d, J=6.0 Hz, 2H), 7.48 (dd, J=1.9, 8.0 Hz, 1H), 7.10 (d, J=8.7 Hz, 2H), 6.76 (d, J=8.6 Hz, 2H), 5.17 (s, 2H), 4.61 (d, J=8.9 Hz, 1H), 4.49 - 4.39 (m, 2H), 4.37 - 4.30 (m, 1H), 3.94 - 3.88 (m, 1H), 3.85 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.79 - 3.70 (m, 4H), 3.65 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.08 (dq, J=2.5, 10.3 Hz, 2H)。
【０１３５】
中間体3：ジャケット温度(TJ)を-2.5℃に設定した、N2フラッシュされた12L反応器に、1LのDCMを添加し、その後455.0g(0.6404mol)の中間体11を添加して、反応器を2.4LのDCMで200rpmにて撹拌しながらすすいだ。添加漏斗に85mL(0.963mol)のTfOHを入れ、反応器の頂部に置いた。反応温度(TR)が0℃に達したとき、TR<5℃に維持しながら、10分間かけてTfOHの添加を行った。最大TR=2.1℃、その後TJを0℃に設定した。1時間後、TJを18℃に設定し、反応をHPLCによりモニターした。さらに4時間後、HPLC分析は、約6.5%の残留出発物質における変化を示さなかった。この溶液に、570mLのリン酸カリウム緩衝液(445gのK2HPO4及び230gのKH2PO4をH2Oで4Lに希釈することにより製造される緩衝液)を添加した。TR=18.7℃から発熱が観察された(最大TR=21.3℃)。15分後に撹拌を停止し、5分以内に良好な相分離が形成された。3.5Lの有機相を回収し、水性相を捨てた。さらなる570mLのリン酸カリウム緩衝液を反応器に添加し、その後上記の有機層を添加して、この溶液を200rpmで15分間撹拌した。撹拌の終了から5分以内に良好な相分離が形成され、有機相を回収して、水性相を捨てた。225mLのH2Oを反応器に添加し、その後、有機層及び溶液を200rpmで15分間撹拌した。撹拌の終了から5分以内に良好な相分離が形成され、有機相を回収し、水性相を捨てた。有機層を5Lの丸底フラスコに移し、バスを30℃に設定したロータリーエバポレーターを用いてDCM蒸留した。溶液が約1Lの場合、1LのEtOHを添加し、蒸留を継続した。EtOHの添加により褐色/白色の泡状の沈殿物が形成され、攪拌を続けると、この泡が壊れて流動性の沈殿物となった。30分後、さらなる1.5LのEtOHを添加し、この溶液を、真空状態にすることなく、ウォーターバスのスイッチをオフにして撹拌した。NMRは、EtOHを基準として2mol%のDCMを示した。1時間撹拌した後、溶液を、卓上フィルター上の24cmのノンシェディング(non-shedding)濾紙を通して濾過し、固体を0.5LのEtOHですすいだ。14時間攪拌した後、研磨濾過(polish filtration)で残りの固体を除去し、ロータリーエバポレーターを用いてEtOHを蒸留した。溶液が約1Lの場合、500mLのTHFを添加し、溶液を濃縮乾固した。減圧下で周囲温度にて42時間乾燥した後、375.9gの(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-メルカプト-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オン(中間体12)を、褐色の泡状物として収率99％で回収した。
【０１３６】
化合物C1：磁気攪拌棒を有する1Lエルレンマイヤーフラスコに、160.6g(1.420mol)のヒドロキシルアミン-O-スルホン酸(HOSA)と500mLのMeOHを入れ、得られたスラリーを攪拌プレート上で撹拌した。N2フラッシュされた12L反応器に、140mLのTHFを添加し、その後300mLのTHF中280.1g(0.47448mol)の(S)-3-(3,5-ジクロロ-4-フルオロフェニル)-4,4,4-トリフルオロ-3-メルカプト-1-(1-(3,3,3-トリフルオロプロパノイル)-3'H-スピロ[アゼチジン-3,1'-イソベンゾフラン]-5'-イル)ブタン-1-オン(中間体12)を添加した。オーバーヘッド撹拌を60rpmに設定し、さらなる200mLのTHFx2(3回の合計体積のTHF)を用いて残りの中間体12を移し、反応器の壁をすすぎ落した。TJを13.6℃に設定した。MeOH中HOSAの溶液を中間体12の溶液に添加し、エルレンマイヤーフラスコをさらなる170mLのMeOHx2(3回の合計体積のMeOH)ですすぎ、これを反応器に添加した。攪拌を180rpmに設定した。TR=14.1℃で、TJを9℃に設定した。冷却溶液に、168mL(1.45mol)の2,6-ルチジンを、約20mLずつ6分間かけて添加した。この添加の後、TR(Max)は16.4℃であり、TJを13.7℃に設定した。反応をHPLCによりモニターして、12の消費により反応の終了を決定した。2Lメスシリンダーを使用して、155mLの濃縮HClを1.6LのDI水に添加し、DI水で1.8Lまで希釈することにより1.8Lの1M HCl(水性)を作成した。18時間後、HPLCは反応の終了を示し、1Lのtert-ブチルメチルエーテルを添加し、その後840mLの1M HCl(水性)を添加した。20分間撹拌した後、層を分離し、1.82LのpH1水性層を捨てた。さらなる840mLの1M HCl(水性)を添加し、10分間撹拌を続けた。層を分離した後、1.48Lの水性層を回収して捨てた。残りの約100mLの1M HCl(水性)を、DI水で1Lに希釈した。この0.1M HCl(水性)溶液を有機層に添加し、溶液を15分間撹拌した。10分後、1.5Lの水性層を回収して捨て、有機層を、30μm Meissnerフィルター(CS2MF30-442)を通して研磨濾過し、このフィルターを2部のMTBEで洗浄して1.6Lの有機体積を得た(移動及び洗浄に合計約500mLのMTBEを使用した)。有機層を2Lフラスコに移し、ロータリーエバポレーターを用いてMTBEを蒸留した。体積が約500mLのとき、560mLのEtOHを添加して蒸留を継続し、NMRを用いて溶媒レベルをモニターした。蒸留の終了時に、NMRはAPS-488に対して0.1mol%のMTBEを示した。この溶液を、オーバーヘッド撹拌、内部熱電対、及びN2吸気口を有する、36℃に設定した1Lジャケット付き3首反応器に移した。さらなる180mLのEtOHを60mL部で使用して溶液を移動させ、NMRにより1800mol%のEtOHを達成した。このTR=34.7℃の均一な黄色/橙色溶液に、10mLのEtOH中スラリーとしての2.34gの種を添加した。22時間撹拌した後、褐色のスラリーを63時間かけて0℃に冷却した。0℃で5時間攪拌した後、スラリーを、ノンシェディング濾紙を用いて90mmブフナー漏斗上で濾過し、ケーキを250mLの冷却EtOHで洗浄し、高さ2.4cmの93gの褐色の粉末を得た。褐色の粉末を結晶化皿に移し、50℃で21時間真空乾燥して、89.91gの(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ10フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オン(C1(S)エナンチオマー)を得、収率31％で単離した。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.77 (br d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.68 (br s, 1H), 7.47 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 5.17 (s, 2H), 4.59 (br d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.48 - 4.37 (m, 2H), 4.37 - 4.29 (m, 1H), 4.22 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 3.07 (dq, J = 2.3, 10.3 Hz, 2H)。
【０１３７】
キラルHPLCによる、(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オン(C1(S)エナンチオマー)、及びその(R)-エナンチオマーの(R)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オンの代表的なクロマトグラムは、図１に示される。
【０１３８】
表1に示される化合物2〜41は、WO 2016115315に記載されるとおりに調製することが可能であり、当業者により理解されるであろうとおり、キラル分離法を用いて精製することができる。
【０１３９】
実施例2：(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロ-プロパン-1-オン(C1(S)エナンチオマー)の結晶構造
化合物C1(S)エナンチオマーは、単斜晶系空間群P21で結晶化する。C1(S)エナンチオマーの熱楕円体プロット(50%確率)は、図2に示される。単位格子は2つの分子を含む。原子C1における立体化学はSである。この値の統計的決定は、完全な分析の一部としての化学的手段により確認することが可能であり、またそうすべきである。そのS1を含む環中の結合パターンは独特であると考えられ、ケンブリッジ構造データベース(Cambridge Structural Database)(5.38版、2017年5月更新)において明らかな類似の構造は存在しない。Mogul geometry checkは、上記データベースにおける環系の希少性と関連性を有する可能性のある、幾つかの統計的に稀な幾何的特徴(結合長、結合角度、ねじれ角等)を明らかにした。この化合物の分子単位間の水素結合相互作用についての証拠は存在しない。
【０１４０】
実験手順：
X線結晶解析のため、0.122mm x 0.174mm x 0.241mmの近似寸法を有するC1(S)エナンチオマーの無色の塊状試験片を使用した。Bruker-Nonius X8 APEX II回折計を用いて、X線強度データを測定した。
【０１４１】
総曝露時間は16.81時間であった。これらのフレームを、Bruker SAINTソフトウェアパッケージでナローフレームアルゴリズム(narrow-frame algorithm)を用いて積分した。単斜晶系単位格子を用いたデータの積分では、36.37°(0.60Å分解能)の最大θ角度に対して全部で41804の反射をもたらし、そのうち11540が独立しており(平均冗長度3.623、完全性=99.2%、Rint=3.06%、Rsig=3.40%)、そして10085(87.39%)が2σ(F2)より大きかった。最終格子定数のa = 9.918(4)Å、b = 10.241(4)Å、c = 12.055(4)Å、β = 101.891(8)°、体積 = 1198.2(7)Å3は、5.794°<2θ<63.48°の範囲で20σ(I)より大きい348反射のXYZ重心の精密化に基づいている。マルチスキャン法(SADABS, Bruker、マディソン、ウィスコンシン州(2016))を用いて、吸収効果についてデータを補正した。最小見かけ透過率対最大見かけ透過率の比は、0.932であった。計算最小透過係数及び計算最大透過係数(結晶サイズに基づく)は、0.9020及び0.9480である。構造解は、XS(Bruker、マディソン、ウィスコンシン州(2014))により行われる直接法を用いて達成された。
【０１４２】
334変数を有するF2についての最終異方性フルマトリックス最小二乗精密化は、観測データについてはR1=3.66%で収束し、全データについてはwR2=8.69%で収束した。適合度は1.033であった。最終差電子密度合成における最大ピークは0.461 e-/Å3であり、最大空孔は-0.274 e-/Å3、RMS偏差は0.067 e-/Å3であった。最終モデルに基づいて、計算された密度は1.628g/cm3及びF(000)、592 e-であった。絶対構造因子についての最終精密値(フラック(Flack))は、Parsons, Flack and Wagner (Act Cryst. B69 (2013) 249-259)の方法に従って4214指数[(I+)-(I-)]/[(I+)+(I-)]を用いて0.048(12)の値で決定され、描かれる構造が正確である(correct hand)と断言するには十分であった。
【０１４３】
実施例3：(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オン(C1(S)エナンチオマー)の薬物動態
【０１４４】
概要
この研究は、ビーグル犬における単一経口用量のC1(S)エナンチオマーのin vivo薬物動態(PK)挙動について評価した(Charles River研究#第20104466号)。C1(S)エナンチオマーの溶液を、強制経口投与(oral gavage)(10mg/kg)により一群のイヌ(n = 3)に投与した。投与前、及び投与1日目の投与後0.25時間、0.5時間、1時間、2時間、4時間、及び8時間目に、血液サンプルを採取した。血液サンプルは、投与1日目、2日目、3日目、5日目、7日目、10日目、14日目、17日目、21日目、25日目、28日目、32日目、35日目、39日目、43日目、及び45日目にも採取した。各全血サンプルの一部を処理して血漿にした。血漿及び全血中の被験物質濃度を、液体クロマトグラフィータンデム質量分析法(LC-MS/MS)を用いて決定した。
【０１４５】
C1(S)エナンチオマーの血漿及び血液中の平均最大観測濃度(Cmax)は、それぞれ2.26μg/mL及び3.65μg/mLであった。血漿及び血液について無限大に外挿された曲線下面積(AUC0-∞)は、それぞれ196時間*μg/mL及び148時間*μg/mLであった。血漿及び血液中のTmax(薬物が最大濃度で存在する時間の量)は、それぞれ2.0時間及び1.7時間であった。血漿及び血液中の排出半減期(t1/2)は、それぞれ205時間及び209時間であった。
【０１４６】
ラセミの1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オンは、イヌにおいて延長された排出半減期で十分に吸収される化合物であることが確認された。しかし、ビーグル犬において実施したS-エナンチオマー血漿PK曲線及び計算されたPKパラメーターは、雑種犬に投与されたラセミ体について行った経口効力の研究とは異なっていた。具体的には、C1(S)エナンチオマーの平均半減期は、ラセミ体の平均半減期より短かった。さらに、C1(S)エナンチオマーのCmax及びAUCは、同じ用量レベルのラセミ体のCmax及びAUCと比べて低かった。
【０１４７】
研究中に生物変換は観察されなかった。結果は、図3〜4に示される。
【０１４８】
材料及び方法
生物分析
ラセミの1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オンを、以下の名目濃度：5、10、20、50、100、200、500、1000、2000、5000及び10000ng/mLで複数アリコートのブランクのK2EDTAビーグル犬血漿又は全血(Bioreclamation、ウェストベリー、ニューヨーク州)に添加することにより、較正曲線を構築した。同じ方法で、品質制御サンプル(QCs)を以下の濃度：15、30、150、800、1600、4000、及び8000ng/mLで調製した。
【０１４９】
サンプル(二重ブランク、ブランク+IS、ブランク+薬物、標準、QCサンプル、及び研究サンプル)を、タンパク質沈殿法を用いて抽出した。50μLアリコートの血漿又は血液を、深ウェル96ウェルプレートに移した。このサンプルアリコートに、血漿には250μLの、又は血液には300μLの内部標準(IS)溶液を添加した。この内部標準溶液は、メタノール中50ng/mLのアフォキソラネル(Afoxolaner)を含有していた。二重ブランク及びブランク+薬物については、ISの代わりにニートなメタノールを添加した。この96ウェルプレートをキャップし、10分間振盪し、5000相対遠心力(RCF)で、15℃にて10分間遠心分離した。150〜200μLアリコートの結果として得られた各サンプルの上清を、清浄な96ウェルマイクロタイタープレートに移した。このマイクロタイタープレートをキャップし、LC-MS/MS分析に供した。
【０１５０】
LC-MS/MSシステムは、Leapオートサンプラー、Agilent 1100シリーズ液体クロマトグラフィーポンプ、及びトリプル四重極モードで操作されるSciexAPI4000質量分析計で構成した。室温のChiralPak IAカラム(4.6 x 150mm、5μm粒子、Supplier Daicel PN 80324)を、移動相Aとしての水及び移動相Bとしてのニートなアセトニトリルと共に使用した。LC勾配、MSパラメーター、及びガスパラメーターは、それぞれ表2〜4に示される。
【０１５１】
【表２】
2021503465.tif 000028
【０１５２】
質量分析計(MS)を、多重反応モニタリング(MRM)を伴うネガティブTurbo IonSpray(商標)モードで操作した。
【０１５３】
【表３】
2021503465.tif 000029
【０１５４】
【表４】
2021503465.tif 000030
【０１５５】
LC-MS/MS分析の後、ピーク面積比を計算した(分析物ピーク面積を内部標準ピーク面積で除した)。ピーク面積比対名目濃度の最小二乗適合プロットを作成することにより標準曲線を作出した。サンプル濃度は、最小二乗適合の結果から計算した。
【０１５６】
薬物動態分析
Cmax及びTmaxは、それぞれ、観察される最大薬物濃度、及び最大濃度が生じる時間である。線形台形法を用いて、曲線下面積(AUC)を計算した。半減期(t1/2)を計算するため、log濃度(C)対時間(t)プロット(片対数プロット)上で最小二乗回帰を実施し、傾きkを得た。t1/2は、0.693/kと等しい。t1/2は、排出相のデータポイントを用いて計算した。経口PKについて、Cl/F=投与量/AUC。
【０１５７】
結果
この報告において、PK計算を、測定された用量溶液濃度に対して正規化した。以下の全ての図及び表においては、名目用量が列挙される。
【０１５８】
表5及び図3〜4は、研究サンプルから得られた平均薬物濃度を示す。
【０１５９】
【表５】
2021503465.tif 000031
【０１６０】
考察
化合物C1(S)エナンチオマーのPK研究から得られた薬物動態の結果は、ラセミ体の効力研究とは異なっていた。表6において、本文書中に記載される化合物C1(S)エナンチオマーのPK研究から得られた平均血漿薬物動態パラメーターを、ラセミ体の経口効力研究から得られた平均血漿薬物動態パラメーターに対して比較する。
【０１６１】
【表６】
2021503465.tif 000032
【０１６２】
化合物C1(S)エナンチオマーの血漿Tmaxは、ラセミ体の研究におけるラセミ体の血漿Tmaxと類似していたが、C1(S)エナンチオマー又はC1ラセミ体のいずれかを10mg/kgで投与した場合、C1(S)エナンチオマーの血漿Cmaxは、ラセミ体のCmaxより低かった(2.26μg/ml対3.47〜3.78μg/ml)。さらに、C1(S)エナンチオマーはラセミ体より速く血漿から除去され、このことは、Cl/F(0.050L/kg/時間対0.030〜0.044L/kg/時間)及び半減期(205時間対357〜572時間)により示された。従って、C1(S)エナンチオマーの無限大に外挿された血漿曲線下面積(AUC0-∞)は、ラセミ体の無限大に外挿された血漿曲線下面積(AUC0-∞)より低いと予想された(10mg/kgで196時間*μg/mL対361〜395時間*μg/mL)。
【０１６３】
C1(S)エナンチオマーのPK研究から得られた血漿及び全血の薬物動態パラメーターは、表7において比較される。C1(S)エナンチオマーの血液濃度は、投与後最初の数時間の対応する血漿濃度より有意に高く、これが血液における、血漿より高いCmaxをもたらすことに留意すべきである。さらに、血中濃度は、血漿中濃度より早くCmaxに達した。これらの事実は、本化合物が、赤血球(RBC)に対してより高い初期親和性を有することを示していた。その後、血液：血漿濃度比は減少し続け、48時間目に、血液及び血漿中の濃度は同様となり、血漿及びRBCにおける類似の濃度を示唆していた。240時間後には、血漿中濃度は血中濃度の約2倍となり、化合物がほぼ全て血漿中に存在し、RBC中には存在しないことを示唆していた。
【０１６４】
【表７】
2021503465.tif 000033
【０１６５】
血液のAUCは血漿より低く、これは、初期の血中濃度は比較的高いにも関わらず、後の時点における血中濃度は比較的低いことに起因する。この低い血中濃度はまた、血液中で示される比較的速いクリアランス(Cl/F)をもたらした。他方、半減期は後の時点(240時間後)でのみ計算されるため、血液半減期は、血漿半減期と極めて類似している。
【０１６６】
全研究サンプルのクロマトグラムは、C1(S)エナンチオマーの単一のピークを示し、C1(R)エナンチオマーの(R)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オンについてはピークを示さなかった。C1(R)エナンチオマー及びC1(S)エナンチオマーについての代表的なクロマトグラムは、図5〜6に示される。生物変換は観察されなかった。
【０１６７】
実施例4：成虫段階のネコノミ(ノミ)、マダニ(Ixodidae)(ダニ)、及びネッタイシマカ(Aedes aegypti)(蚊)に対する、C1ラセミ体、C1(S)エナンチオマー、及びC1(R)エナンチオマーのバイオプロファイリング
【０１６８】
概要：
1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オン(本明細書中でC1ラセミ体と呼ばれる)は、2つの異性体：(R)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オン(本明細書中C1(R)エナンチオマーと呼ばれる)、及び(S)-1-[6-[5-(3,5-ジクロロ-4-フルオロ-フェニル)-5-(トリフルオロメチル)-4H-イソチアゾール-3-イル]スピロ[1H-イソベンゾフラン-3,3'-アゼチジン]-1'-イル]-3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オン(本明細書中C1(S)エナンチオマーと呼ばれる)からなるイソチアゾリン化合物である。ラセミ体化合物と2つのエナンチオマーを、成虫段階のネコノミ(ノミ)、マダニ(ダニ)、及びネッタイシマカ(蚊)に対して試験した。化合物を、DMSO又はアセトン/トリトン溶液に溶解し、個々の化合物について用量応答曲線を作成した。
【０１６９】
接触活性の評価のため、コーティングされた基質(ノミ)及びコーティングされたバイアル(ダニ及び蚊)のアッセイ手順を用いた。ノミ摂取活性の評価のため、人工給餌アッセイの手順を用いた。各アッセイについて、様々な時点で殺虫活性を評価した。3つの独立した試験事象(test occasion)(試験1〜試験3)について用量応答曲線を2通り(in duplicate)生成し、EC50値及びEC90値を計算した。C1ラセミ体の生物学的活性は、主にC1(S)エナンチオマーに関連することが見いだされた。C1ラセミ体及び、とりわけC1(S)エナンチオマーは、ダニ類に対して優れた効力を示した。
【０１７０】
材料及び一般的方法
試験物質：
C1ラセミ体、C1(R)エナンチオマー、及びC1(S)エナンチオマーを合成し、精製した。化合物をDMSOに溶解し、10mg/mlストック溶液を作成した。
【０１７１】
I. ダニ類
脱皮後2〜4週齢のリピセファルス・サングイネウス(Rhipicephalus sanguineus)、デルマセントル・ヴァリアビリス(Dermacentor variabilis)、アムブリオンマ・アメリカヌム(Amblyomma americanum)(Ecto Services, Inc.、ヘンダーソン、ノースカロライナ州)及びイクソデス・スカプラリス(Ixodes scapularis)(オクラホマ州立大学、スティルウォーター、オクラホマ州)を、24℃、湿度80%の環境チャンバー中、12時間明/暗周期で保持した。
【０１７２】
成虫のダニに対する接触活性のIn vitro評価
ダニアッセイのため、バイアルキャップに予めドリルで穿設して各キャップの中央に単一の穴を開け、空気交換を可能にした。濾紙(ワットマングレード540 2.1cm)を各バイアルの蓋の中に配置した。各化合物ストックから得た1アリコートをアセトン/トリトン溶液に添加し、研究のための所望の最高用量を得た。最高用量(すなわち100ppm)から連続希釈を行い、EC50及びEC90決定のための所望のタイトレーション範囲を得た。クリイロコイタマダニ、アメリカイヌカクマダニ、及びアムブリオンマ・アメリカヌムについて、各試験バイアル中の最終DMSO濃度は0.5％であった。シカダニについては、DMSOに対してシカダニが感受性であるため、化合物をアセトン/トリトン溶液に直接溶解した。459μLアリコートの各化合物製剤を、ワットマングレード540の2.1cm濾紙を含有するバイアルに移した。バイアルを、直ぐに非加熱のローラーユニット上に配置し、バイアル壁を均一にコーティングした。バイアルをコーティングした後、41μLの各化合物製剤を、各バイアルキャップ中に埋め込まれた濾紙に添加した。各キャップを乾燥させた。このバイアルをゆるくキャップし、化学ドラフト中、最小で4時間乾燥させた。
【０１７３】
ダニ接触及び摂取研究のための処置は、以下のものを含んでいた：
試験1及び試験2
試験した化合物は、C1ラセミ体、C1(R)エナンチオマー、及びC1(S)エナンチオマーであった。
溶媒のみ(陰性対照)
【０１７４】
試験3
試験した化合物は、C1ラセミ体、C1(R)エナンチオマー、及びC1(S)エナンチオマーであった。試験3については、C1(R)エナンチオマー及びC1(S)エナンチオマーをさらにキラル精製し、純度>99％を達成した。
溶媒のみ(陰性対照)
【０１７５】
10匹の成虫のダニを各バイアルに加えて、24℃、湿度80%にて、12時間明/暗周期で保持した。成虫のダニを、外寄生後2時間〜48時間の様々な時点で、パーセント死亡率について評価した。加熱したローラーユニット上でダニを刺激して、評価した。動きを示さないか、又は極めて遅く且つぎこちない動きを示すダニは、死亡していると認められた。
【０１７６】
試験1及び2のクリイロコイタマダニ接触アッセイの結果は図7〜10に示され、試験3の結果は表9に示される。アメリカイヌカクマダニ接触アッセイの結果は、図11〜14に示される。アムブリオンマ・アメリカヌム接触アッセイの結果は、図15〜18に示される。シカダニ接触アッセイの結果は、表8に示される。
【０１７７】
【表８】
2021503465.tif 000034
【０１７８】
【表９】
2021503465.tif 000035
【０１７９】
II. ノミ
孵化後1〜7日目のネコノミ(Avista Pharma, Inc.、RTP、ノースカロライナ州)を、24℃、湿度85％の環境チャンバー中で保持した。
【０１８０】
ノミ(ネコノミ)に対する接触活性のIn vitro評価
ノミ接触試験のため、バイアルキャップに予めドリルで穿設し、各キャップの中央に単一の穴を開けて空気交換を可能にした。濾紙(ワットマングレード540 2.1cm)を各バイアルの蓋の中に配置した。0.5インチに切断したパイプクリーナーを各試験バイアルに挿入した。各化合物ストックから1アリコートをとり、アセトン/トリトン溶液に添加して、研究のための所望の最高濃度を得た。最高用量(すなわち100ppm)から連続希釈を行い、EC50及びEC90決定のための所望の濃度を達成した。最終DMSO濃度は0.5%であった。75μLアリコートの各化合物製剤を、処置バイアル中に含まれる各0.5インチのパイプクリーナーに添加した。これらのバイアルをゆるくキャップし、化学ドラフト中、最小で4時間乾燥させた。
【０１８１】
ノミ(ネコノミ)に対する摂取活性のIn vitro評価
ノミ摂取試験のため、DMSOを用いた化合物ストックの連続希釈を実施し、EC50及びEC90決定のための所望の範囲を得た。1アリコートの各化合物希釈液を、最終DMSO濃度0.5%で有機ウシ血液に添加し、人工給餌容器に入れた。
【０１８２】
ノミ接触及び摂取研究のための処置は、以下のものを含んでいた：
試験1及び試験2
試験した化合物は、C1ラセミ体、C1(R)エナンチオマー、及びC1(S)エナンチオマーであった。
溶媒のみ(陰性対照)
【０１８３】
試験3
試験した化合物は、C1ラセミ体、C1(R)エナンチオマー、及びC1(S)エナンチオマーであった。試験3については、C1(R)エナンチオマー及びC1(S)エナンチオマーをさらにキラル精製し、純度>99％を達成した。
溶媒のみ(陰性対照)
【０１８４】
接触アッセイ及び摂取アッセイの両方のため、実験室コロニーから得た10匹の新たに発生した無給餌の成虫のノミ(0〜7日齢のネコノミ)を、各バイアル又はケージ内に吸引した。接触アッセイ用の試験バイアルは、24℃、湿度80％の環境チャンバー中、明/暗周期(各12時間)で保持した。ノミ摂取アッセイ用のケージは、温度制御された人工給餌装置中で保持し、所望の濃度の化合物を含む有機ウシ血液への連続的接近を可能とした。研究期間中、化合物添加したウシ血液の新たなアリコートを毎日与えた。
【０１８５】
ノミを、外寄生後2時間〜48時間の様々な時点で、パーセント死亡率について評価した。正常な運動及び/又はジャンプ能力を示すノミは生存しているとみなし、バイアルのタッピング後に動きを示さないノミは死亡しているとスコア化された。
【０１８６】
試験1及び2のネコクラミジア摂取アッセイの結果は、図19〜22に示され、試験3の結果は表10に示される。試験1及び2の接触アッセイの結果は図23〜24に示され、試験3の結果は表11に示される。
【０１８７】
【表１０】
2021503465.tif 000036
【０１８８】
【表１１】
2021503465.tif 000037
【０１８９】
III. 蚊
ネッタイシマカ(Louisiana Biologicals Inc.、ニューオーリンズ、ルイジアナ州)の卵を孵化させて閉じ込め、26℃、湿度80%の環境チャンバー中、明/暗周期で3〜5日間加齢させた。
【０１９０】
成虫の蚊(ネッタイシマカ)に対する接触活性のIn vitro評価
蚊アッセイのため、各化合物ストックから得た1アリコートをアセトン/トリトン溶液に添加し、研究のための所望の最高用量を得た。最高用量(すなわち50ppm)から連続希釈を行い、EC50及びEC90決定のための所望のタイトレーション範囲を得た。各試験バイアル中の最終DMSO濃度は0.5％であった。459μLアリコートの各化合物製剤をバイアルに移し、これらのバイアルを直ぐに非加熱のローラーユニット上に配置して、バイアル壁を均一に被覆した。これらのバイアルをゆるくキャップし、化学ドラフト中、最小で4時間乾燥させた。
【０１９１】
成虫の蚊(ネッタイシマカ)に対する摂取活性のIn vitro評価
蚊摂取試験のため、DMSOを用いて化合物ストックの連続希釈を実施し、EC50及びEC90決定のための所望の範囲を得た。1アリコートの各化合物希釈を、最終DMSO濃度0.5%で有機ウシ血液に添加し、温度制御された人工給餌容器中に置いた。
【０１９２】
蚊の接触研究及び摂取研究のための処置は、以下のものを含んでいた：
試験1及び試験2
試験した化合物は：C1ラセミ体、C1(R)エナンチオマー、及びC1(S)エナンチオマーであった。
溶媒のみ(陰性対照)
【０１９３】
試験3
試験した化合物は：C1ラセミ体、C1(R)エナンチオマー、及びC1(S)エナンチオマーであった。試験3については、C1(R)エナンチオマー及びC1(S)エナンチオマーをさらにキラル精製し、純度>99％を得た。
溶媒のみ(陰性対照)
【０１９４】
接触アッセイ及び摂取アッセイの両方について、5匹の雌のネッタイシマカ成虫を各バイアル又はケージに加えた。接触アッセイのための試験バイアルは、24℃、湿度80%の環境チャンバー中、明/暗周期(各12時間)で保持した。蚊摂取アッセイ用のケージは、温度制御された人工給餌装置中で保持し、所望の濃度の化合物を含む有機ウシ血液への連続的接近を可能とした。研究期間中、化合物添加したウシ血液の新たなアリコートを毎日与えた。
【０１９５】
外寄生後30分〜24時間の間の様々な時点で、死亡率/ノックダウンの評価を実施した。動きを示さない蚊又はノックダウンされた蚊は死亡していると認められた。試験1及び試験2の接触アッセイから得られた結果は、それぞれ表12及び13に示され、試験3の蚊摂取アッセイから得られた結果は表14に示される。
【０１９６】
【表１２】
2021503465.tif 000038
【０１９７】
【表１３】
2021503465.tif 000039
【０１９８】
【表１４】
2021503465.tif 000040
【０１９９】
結果
陰性対照(溶媒のみ処置のバイアル)において、有意な死亡率は観察されなかった。このため、アッセイにおいて死亡率の補正は行わなかった。
【０２００】
XLfitを用いて、EC50値及びEC90値の計算を実施した。EC50値及びEC90値はいずれも、各試験について2複製の平均を用いて計算した。
【０２０１】
試験1及び試験2の結果に基づいて、試験3において高純度エナンチオマーを試験するための時点の選択を変更した。
【０２０２】
蚊の接触アッセイ及び摂取アッセイについては、各複製は5匹の蚊を含んでいた。計算を簡単にするため、2複製を加算して合計10匹の蚊と等しくした。
【０２０３】
概要及び結論
C1(R)エナンチオマー、C1(S)エナンチオマー、及びC1ラセミ体は、ノミ、ダニ、及び蚊に対する接触及び摂取のin vitroスクリーニングアッセイにおいて首尾よく評価された。試験1及び試験2の結果は、試験3における純度>99%のエナンチオマーのデータと併せて、C1(S)エナンチオマーが、C1ラセミ体の活性エナンチオマーであることを示唆する。
【０２０４】
本明細書に引用される全ての刊行物、特許、及び特許出願は、そのような引用が用いられる教示に関する参照により本明細書に組み込まれる。
【０２０５】
本明細書に記載される実験のための試験化合物は、遊離形態又は塩の形態で用いられた。
【０２０６】
観察された特定の応答は、選択された特定の活性化合物、又は担体が存在するかどうか、並びに用いられる製剤の種類及び投与様式に従って、且つそれに応じて変動する可能性があり、本発明の実施により、このような予想される結果の変動又は差異が想定される。
【０２０７】
本発明の具体的実施形態は本明細書中に詳細に例示及び説明されるが、本発明はそれらに限定されるものではない。上記の詳細な説明は、本発明の例示として提供され、本発明の任意の限定を構成すると解されるべきではない。改変形は当業者には明らかであり、本発明の精神を逸脱しないすべての改変形は、添付の特許請求の範囲の範囲内に含まれることが意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【国際調査報告】
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