(57)【要約】本発明は、ヒトＣＤ１３７に結合し、アゴニスト活性を示し、固形腫瘍および血液腫瘍を、単独で、ならびに抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体、化学療法、および電離放射線と組み合わせて治療するのに有用であり得る、抗体に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と組み合わせて投与することを含む、癌の治療方法であって、前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む、方法。
【請求項２】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号２３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２４のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号２５のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記癌が、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記癌が、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、または腎明細胞癌である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記癌が、膀胱癌、頭頸部扁平上皮癌、または腎細胞癌である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体および前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つが、電離放射線と組み合わせて投与される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体および前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つが、１つ以上の化学療法剤と組み合わせて投与される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体であって、前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む、抗ヒトＣＤ１３７抗体。
【請求項１５】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１４に記載の使用のための抗ヒトＣＤ１３７抗体。
【請求項１６】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１４に記載の使用のための抗ヒトＣＤ１３７抗体。
【請求項１７】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１４に記載の使用のための抗ヒトＣＤ１３７抗体。
【請求項１８】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１４に記載の使用のための抗ヒトＣＤ１３７抗体。
【請求項１９】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである、請求項１４〜１８のいずれか一項に記載の使用のための抗ヒトＣＤ１３７抗体。
【請求項２０】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号２３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１４〜１８のいずれか一項に記載の使用のための抗ヒトＣＤ１３７抗体。
【請求項２１】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２４のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号２５のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１４〜１８のいずれか一項に記載の使用のための抗ヒトＣＤ１３７抗体。
【請求項２２】
前記癌が、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、請求項１４〜２１のいずれか一項に記載の使用のための抗ヒトＣＤ１３７抗体。
【請求項２３】
前記癌が、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、または腎明細胞癌である、請求項１４〜２１のいずれか一項に記載の使用のための抗ヒトＣＤ１３７抗体。
【請求項２４】
前記癌が、膀胱癌、頭頸部扁平上皮癌、または腎細胞癌である、請求項１４〜２１のいずれか一項に記載の使用のための抗ヒトＣＤ１３７抗体。
【請求項２５】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体および前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つが、電離放射線と組み合わせて投与される、請求項１４〜２４のいずれか一項に記載の使用のための抗ヒトＣＤ１３７抗体。
【請求項２６】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体および前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つが、１つ以上の化学療法剤と組み合わせて投与される、請求項１４〜２５のいずれか一項に記載の使用のための抗ヒトＣＤ１３７抗体。
【請求項２７】
癌治療用の医薬品を製造するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用であって、前記医薬品が、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む、使用。
【請求項２８】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項２７に記載の使用。
【請求項２９】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項２７に記載の使用。
【請求項３０】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項２７に記載の使用。
【請求項３１】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項２７に記載の使用。
【請求項３２】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである、請求項２７〜３２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３３】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号２３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項２７〜３２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３４】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２４のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号２５のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項２７〜３２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３５】
前記癌が、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、請求項２７〜３４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３６】
前記癌が、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、または腎明細胞癌である、請求項２７〜３４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３７】
前記癌が、膀胱癌、頭頸部扁平上皮癌、または腎細胞癌である、請求項２７〜３４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３８】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体および前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つが、電離放射線と組み合わせて投与される、請求項２７〜３７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３９】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体および前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つが、１つ以上の化学療法剤と組み合わせて投与される、請求項２７〜３８のいずれか一項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬の分野に属する。特に、本発明は、ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）に対する抗体と組み合わせることができるヒトＣＤ１３７（配列番号１）に対するアゴニスト抗体、そのようなアゴニスト抗ヒトＣＤ１３７抗体または抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体を含む組成物の組み合わせ、ならびに単独で、または化学療法および他の癌治療薬と組み合わせて、固形腫瘍および血液腫瘍の治療のために抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせてそのようなアゴニスト抗ヒトＣＤ１３７抗体を使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
腫瘍細胞は、そのいくつかが免疫チェックポイント経路の操作を含む、複数の作用機序によって免疫系による検出および排除を回避する。免疫チェックポイント経路は自己寛容の維持およびＴ細胞活性化の調節において使用されるが、癌細胞はこれらの経路を操作して腫瘍の生存を延長し得る。プログラム細胞死１（ＰＤ−１）／ヒトプログラム細胞死１リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）経路は、１つのこのような免疫チェックポイントである。ヒトＰＤ−１はＴ細胞上で発現され、ＰＤ−１へのＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２の結合はＴ細胞増殖およびサイトカイン産生を阻害することが示されている。さらに、一部の腫瘍はＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２を発現することが既知であり、そのような発現は腫瘍内免疫応答を阻害するのに寄与し得る。一部の患者は抗ＰＤ−Ｌ１治療に対する適応耐性を示すが、一部は全く応答しないことも示されている。
【０００３】
現在、抗腫瘍免疫応答を高めることが癌治療の効果的な手段となり得ることが知られている。これに関して、４−１ＢＢとしても知られるＣＤ１３７は、ＴＮＦ受容体ファミリーに属し、Ｔ細胞の増殖およびエフェクター機能の駆動、活性化誘導細胞死の阻害、免疫記憶の促進などによる、Ｔ細胞免疫応答の活性化に寄与する。ＣＤ１３７を標的とするアゴニスト抗体は、マウスの腫瘍モデルで単独療法として期待されている（Ｍｅｌｅｒｏ．Ｉ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．（１９９７）３（６）：６８２−６８５）が、ヒトＣＤ１３７を標的とするアゴニスト抗体は、ヒト患者における単独療法または組み合わせ療法として十分な反応をいまだ実証していない。この点で、ウトミルマブ（ヒトＣＤ１３７アゴニストＩｇＧ２  ｍＡｂ）（Ｆｉｓｈｅｒ，Ｔ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．（２０１２）６１：１７２１−１７３３）も、ウレルマブ（ヒト化ＣＤ１３７アゴニストＩｇＧ４  ｍＡｂ）（Ｓｅｇａｌ，Ｎ．Ｈ．Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．（２０１７）２３（８）：１９２９−１９３６）も、単独療法または抗ＰＤ−Ｌ１抗体との組み合わせ療法としての使用について規制当局の承認を受けていない。実際に、ヒトＣＤ１３７を標的とするアゴニスト抗体はいずれも、ヒトでの治療用途について承認されていない。
【０００４】
規制当局の承認がないにもかかわらず、進行性悪性腫瘍を有する患者を対象に、ウトミルマブとアベルマブとの組み合わせが調査されている（ＮＣＴ０３２１７７４７）。しかしながら、ヒトＣＤ１３７受容体を刺激して強力な抗癌免疫応答を促進し、許容可能な毒性プロファイルを示し、かつ抗ＰＤ−Ｌ１抗体療法と組み合わせることができる、改善されたヒト抗体が依存として必要とされている。
【発明の概要】
【０００５】
加えて、これまでに開示されているＣＤ１３７を標的とするアゴニスト抗体を癌の単独療法および／または組み合わせ剤として使用することは、該抗体の作動強度、および／または有効性を持たせるために必要である可能性があるより高い用量でそれらを使用することから生じる免疫関連有害事象などの要因によって妨げられ得る。特に、これまでに開示されている抗体は、強力すぎるために有害事象を引き起こしたり、準最適な効力を示したりすることにより、それらの抗ＰＤ−Ｌ１抗体療法との組み合わせ可能性を制限する。ヒトＣＤ１３７受容体を刺激し、有利な薬理学的属性の改善された組み合わせを有する新規ヒト抗体が本明細書に記載される。具体的には、本明細書に記載の抗ヒトＣＤ１３７アゴニスト抗体は、ヒトＣＤ１３７およびカニクイザルＣＤ１３７に結合し、インビトロでＴ細胞活性化を刺激し、ヒトＣＤ１３７細胞表面発現を促進し、ＮＦ−カッパＢ活性を増強し、単独療法として非小細胞肺癌のマウス腫瘍モデルにおける腫瘍増殖を阻害し、インビトロでのＴ調節細胞媒介抑制を阻害し、望ましい免疫遺伝子シグネチャーを活性化し、腫瘍内ＣＤ３＋Ｔ細胞の頻度を増加させ、ヒトＣＤ１３７への結合についてヒトＣＤ１３７−リガンドと競合し、かつヒトＣＤ１３７の特有のアミノ酸残基に結合する、操作されたヒトＦｃγ受容体媒介エフェクターヌル抗体である。これに関して、本明細書に開示されるＣＤ１３７を標的とするアゴニスト抗体は、マウス腫瘍モデルにおいて抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせると利益を提供する。
【発明を実施するための形態】
【０００６】
本発明の組み合わせで使用するための既知の抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体の非限定的な例には、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９、および抗体Ｂ（以前に国際公開第ＷＯ２０１７／０３４９１６号に記載されている）が含まれる。いくつかの例では、抗体Ｂは、配列番号２２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号２３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの例では、抗体Ｂは、配列番号２４のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号２５のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【０００７】
本明細書に記載の組み合わせで使用するための有用な化学療法剤の非限定的な例には、５−フルオロウラシル、ヒドロキシウレア、ゲムシタビン、メトトレキサート、ドキソルビシン、エトポシド、カルボプラチン、シスプラチン、シクロホスファミド、メルファラン、ダカルバジン、タキソール、カンプトテシン、ＦＯＬＦＩＲＩ、ＦＯＬＦＯＸ、ドセタキセル、ダウノルビシン、パクリタキセル、オキサリプラチン、およびそれらの組み合わせが含まれる。
【０００８】
本明細書で使用されるとき、「抗体」という用語は、重鎖と軽鎖とがジスルフィド結合によって相互接続されるように、２つの重鎖（ＨＣ）と２つの軽鎖（ＬＣ）とを有するポリペプチド複合体を指し、ここで、抗体はＩｇＧサブクラス抗体である。
【０００９】
本発明における使用のためのＣＤ１３７アゴニスト抗体は、操作された、天然に存在しないポリペプチド複合体である。本発明のＤＮＡ分子は、本発明の抗体中のポリペプチドのうちの少なくとも１つのアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする天然に存在しないポリヌクレオチド配列を含む、ＤＮＡ分子である。
【００１０】
本発明の抗ヒトＣＤ１３７抗体はＩｇＧ型抗体であり、鎖内および鎖間ジスルフィド結合を介して架橋されている「重」鎖および「軽」鎖を有する。各重鎖は、Ｎ末端ＨＣＶＲおよび重鎖定常領域（「ＨＣＣＲ」）からなる。各軽鎖は、ＬＣＶＲおよび軽鎖定常領域（「ＬＣＣＲ」）からなる。ある特定の生物系で発現されるとき、天然のヒトＦｃ配列を有する抗体はＦｃ領域においてグリコシル化される。典型的には、グリコシル化は、高度に保存されたＮ−グリコシル化部位の抗体のＦｃ領域に生じる。Ｎ−グリカンは、典型的には、アスパラギンに結合する。抗体は、他の位置でもグリコシル化され得る。
【００１１】
必要に応じて、本明細書に記載の抗ヒトＣＤ１３７抗体は、ヒトＩｇＧ１に由来するＦｃ部分を含む。ＩｇＧ１は、Ｆｃガンマ受容体ファミリー（ＦｃγＲ）のタンパク質、およびＣ１ｑに結合することが周知である。これらの受容体との相互作用は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）および補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘導し得る。したがって、必要に応じて、本明細書に記載の抗ヒトＣＤ１３７抗体は、Ｆｃエフェクター機能を欠失するヒトモノクローナル抗体（ＩｇＧ１、Ｆｃ−ヌル（Ｆｃ−ｎｕｌｌ））である。Ｆｃ−ヌルＩｇＧ１抗体を達成するために、残基の選択的突然変異誘発がそのＩｇＧ１  Ｆｃ領域のＣＨ２領域内で必要である。アミノ酸置換Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ｅ、およびＧ２３７ＡをＩｇＧ１  Ｆｃに導入してＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、およびＦｃγＲＩＩＩへの結合を減少させ、置換Ａ３３０ＳおよびＰ３３１Ｓを導入してＣ１ｑ媒介性補体固定を減少させる。ヒトに投与したときの免疫応答の潜在的な誘導を減少するために、ある特定のアミノ酸は、抗体生殖細胞系配列と適合させるために復帰突然変異を必要とし得る。
【００１２】
ＨＣＶＲ領域およびＬＣＶＲ領域は、フレームワーク領域（「ＦＲ」）と呼ばれるより保存されている領域とともに点在する、相補性決定領域（「ＣＤＲ」）と呼ばれる超可変領域にさらに細分することができる。各ＬＣＶＲおよびＨＣＶＲは、以下のＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順でアミノ末端からカルボキシ末端へと配置している３つのＣＤＲおよび４つのＦＲからなる。本明細書では、重鎖の３つのＣＤＲを「ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３」と称し、軽鎖の３つのＣＤＲを「ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３」と称する。ＣＤＲは、抗原との特異的相互作用を形成する残基の大部分を含有する。本発明の目的のために、ＮｏｒｔｈのＣＤＲ定義を使用する。ＮｏｒｔｈのＣＤＲの定義（Ｎｏｒｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａ  Ｎｅｗ  Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ  ｏｆ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ＣＤＲ  Ｌｏｏｐ  Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，４０６，２２８−２５６（２０１１））は、多数の結晶構造を有する親和性伝搬クラスタ化（ａｆｆｉｎｉｔｙ  ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ  ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ）に基づいている。
【００１３】
ＨＣＶＲ領域をコードする単離ＤＮＡは、ＨＣＶＲをコードするＤＮＡを、重鎖定常領域をコードする別のＤＮＡ分子に作動可能に連結することによって、完全長重鎖遺伝子に変換され得る。ヒトおよび他の哺乳動物の重鎖定常領域遺伝子の配列は、当該技術分野において既知である。これらの領域を包含するＤＮＡフラグメントは、例えば、標準的なＰＣＲ増幅によって取得され得る。
【００１４】
ＬＣＶＲ領域をコードする単離ＤＮＡは、ＬＣＶＲをコードするＤＮＡを、軽鎖定常領域をコードする別のＤＮＡ分子に作動可能に連結することによって、完全長軽鎖遺伝子に変換され得る。ヒトおよび他の哺乳動物の軽鎖定常領域遺伝子の配列は、当該技術分野において既知である。これらの領域を包含するＤＮＡフラグメントは、標準的なＰＣＲ増幅によって取得され得る。軽鎖定常領域は、カッパまたはラムダ定常領域であり得る。本発明の抗ヒトＣＤ１３７抗体については、軽鎖定常領域がヒトカッパ定常領域であることが好ましい。
【００１５】
本発明のポリヌクレオチドは、配列が発現制御配列に作動可能に連結された後に宿主細胞において発現される。発現ベクターは、典型的には、エピソーム、または宿主染色体ＤＮＡの一体化した部分のいずれかとして、宿主生物中で複製可能である。一般に、発現ベクターは、所望のＤＮＡ配列で形質転換されたそれらの細胞の検出を可能にするために、選択マーカー、例えば、テトラサイクリン、ネオマイシン、およびジヒドロ葉酸レダクターゼを含有する。
【００１６】
本明細書に記載される抗体は、哺乳動物細胞において容易に産生され得、その非限定的な例として、ＣＨＯ、ＮＳ０、ＨＥＫ２９３、およびＣＯＳ細胞が挙げられる。宿主は、当該技術分野で周知の技法を使用して培養され得る。対象となるポリヌクレオチド配列（例えば、抗体のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドおよび発現制御配列）を含むベクターは、細胞宿主の種類に応じて異なり得る周知の方法によって宿主細胞に導入され得る。
【００１７】
タンパク質精製のさまざまな方法が用いられ得、そのような方法は、当該技術分野において既知であり、例えば、Ｄｅｕｔｓｃｈｅｒ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  １８２：８３−８９（１９９０）、およびＳｃｏｐｅｓ，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，ＮＹ（１９９４）に記載される。
【００１８】
本発明の別の実施形態において、抗体または抗体をコードする核酸は単離形態で提供される。本明細書で使用する場合、「単離」という用語は、細胞環境に見出される任意の他の高分子種を含まないか、または実質的に含まない、タンパク質、ペプチド、または核酸を指す。「実質的に含まない」とは、本明細書中で使用する場合、目的のタンパク質、ペプチド、または核酸が（モル基準で）８０％超、好ましくは９０％超、より好ましくは９５％超の対象の高分子種を含むことを意味する。
【００１９】
本発明の抗体またはそれを含む薬学的組成物は、非限定的な例が静脈内投与である、非経口経路によって投与されてもよい。本発明の抗体は、単独で薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤と一緒に単回用量または複数回用量で患者に投与され得る。本発明の薬学的組成物は、当該技術分野で周知の方法によって調製することができ（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２ｎｄ  ｅｄ．（２０１２），Ａ．Ｌｏｙｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ）、本明細書に開示される抗体、および１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤を含む。
【００２０】
局所的もしくは全身性またはそれらの組み合わせで静脈内（ｉ．ｖ．）または非静脈内投与のための投与スケジュールは、典型的には、単一ボーラス投与もしくは連続注入から、１日当たり複数回の投与（例えば、４〜６時間おき）までの範囲であるか、または処置する医師および患者の状態によって示されるとおりである。投与量および投与頻度は、患者を治療する医師によって決定されてよい。
【００２１】
「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」（または「治療する（ｔｒｅａｔ）」または「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」）という用語は、既存の症状、障害、状態、または疾患の進行または重症度を遅延、妨害、抑制、緩和、停止、軽減、または反転させることを指す。
【００２２】
「有効量」とは、研究者、医師、または他の臨床医によって求められている組織、系、動物、哺乳動物、またはヒトの生物学的もしくは医学的応答またはそれに対する所望の治療効果を誘発するであろう本発明の抗体または本発明の抗体を含む薬学的組成物の量を意味する。抗体の有効量は、個体の病状、年齢、性別、および体重、ならびに個体における所望の応答を誘発する抗体の能力などの因子に応じて変動し得る。有効量はまた、抗体の任意の毒性効果または有害効果よりも治療的に有益な効果が上回る量である。
【００２３】
本開示は、癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と組み合わせて投与することを含む、癌の治療方法を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む。
【００２４】
本開示は、癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と組み合わせて投与することを含む、癌を治療する方法を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【００２５】
本開示は、癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と組み合わせて投与することを含む、癌を治療する方法を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【００２６】
本開示は、癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と組み合わせて投与することを含む、癌を治療する方法を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００２７】
本開示は、癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と組み合わせて投与することを含む、癌を治療する方法を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、かつ／または抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００２８】
本開示は、癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と組み合わせて投与することを含む、癌の治療方法を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである。
【００２９】
本開示は、癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と組み合わせて投与することを含む、癌を治療する方法を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号２３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【００３０】
本開示は、癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と組み合わせて投与することを含む、癌を治療する方法を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２４のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号２５のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００３１】
本開示は、癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と組み合わせて投与することを含む、癌を治療する方法を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である。
【００３２】
本開示は、癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と組み合わせて投与することを含む、癌を治療する方法を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、または腎明細胞癌である。
【００３３】
本開示は、癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と組み合わせて投与することを含む、癌を治療する方法を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、膀胱癌、頭頸部扁平上皮癌、または腎細胞癌である。
【００３４】
本開示は、癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と組み合わせて投与することを含む、癌を治療する方法を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つは、電離放射線と組み合わせて投与される。
【００３５】
本開示は、癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と組み合わせて投与することを含む、癌を治療する方法を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つは、１つ以上の化学療法剤と組み合わせて投与される。
【００３６】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む。
【００３７】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【００３８】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【００３９】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００４０】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００４１】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである。
【００４２】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号２３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【００４３】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２４のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号２５のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００４４】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である。
【００４５】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、または腎明細胞癌である。
【００４６】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、膀胱癌、頭頸部扁平上皮癌、または腎細胞癌である。
【００４７】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つは、電離放射線と組み合わせて投与される。
【００４８】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つは、１つ以上の化学療法剤と組み合わせて投与される。
【００４９】
本開示は、癌治療用の医薬品を製造するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用を提供し、医薬品は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む。
【００５０】
本開示は、癌治療用の医薬品を製造するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用を提供し、医薬品は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与されるものであり、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【００５１】
本開示は、癌治療用の医薬品を製造するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用を提供し、医薬品は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与されるものであり、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【００５２】
本開示は、癌治療用の医薬品を製造するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用を提供し、医薬品は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与されるものであり、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００５３】
本開示は、癌治療用の医薬品を製造するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用を提供し、医薬品は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与されるものであり、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００５４】
本開示は、癌治療用の医薬品を製造するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用を提供し、医薬品は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒＰＤ−Ｌ１ト抗体は、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである。
【００５５】
本開示は、癌治療用の医薬品を製造するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用を提供し、医薬品は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与されるものであり、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号２３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【００５６】
本開示は、癌治療用の医薬品を製造するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用を提供し、医薬品は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与されるものであり、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２４のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号２５のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００５７】
本開示は、癌治療用の医薬品を製造するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用を提供し、医薬品は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与されるものであり、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である。
【００５８】
本開示は、癌治療用の医薬品を製造するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用を提供し、医薬品は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与されるものであり、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、または腎明細胞癌である。
【００５９】
本開示は、癌治療用の医薬品を製造するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用を提供し、医薬品は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与されるものであり、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、膀胱癌、頭頸部扁平上皮癌、または腎細胞癌である。
【００６０】
本開示は、癌治療用の医薬品を製造するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用を提供し、医薬品は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与されるものであり、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体および抗ＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つは、電離放射線と組み合わせて投与される。
【００６１】
本開示は、癌治療用の医薬品を製造するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用を提供し、医薬品は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与されるものであり、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＣＤ１３７抗体および抗ＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つは、１つ以上の化学療法剤と組み合わせて投与される。
【００６２】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、膀胱癌である。
【００６３】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、胆道癌である。
【００６４】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、結腸癌である。
【００６５】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、子宮内膜癌である。
【００６６】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、食道癌である。
【００６７】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、胃癌である。
【００６８】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、頭頸部癌である。
【００６９】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、非小細胞肺癌である。
【００７０】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、前立腺癌である。
【００７１】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、直腸癌である。
【００７２】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、甲状腺癌である。
【００７３】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、胆管細胞癌である。
【００７４】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、扁平上皮癌である。
【００７５】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、肺腺癌である。
【００７６】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、肺扁平上皮癌である。
【００７７】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、腎明細胞癌である。
【００７８】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、膀胱癌である。
【００７９】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、頭頸部扁平上皮癌である。
【００８０】
本開示は、癌の治療において抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供し、抗ヒトＣＤ１３７抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、癌は、腎細胞癌である。
【実施例】
【００８１】
抗体の特性評価、生成、発現、および精製
配列番号１４に示される重鎖ポリヌクレオチド配列および配列番号１７に示される軽鎖ポリヌクレオチド配列を使用した哺乳動物細胞における抗体産生は、２つの抗体産物関連種、（ａ）配列番号１０に示される重鎖アミノ酸配列および配列番号１１の軽鎖アミノ酸配列を有する完全長抗体（以下「抗体Ａ１」と呼ぶ）、ならびに（ｂ）軽鎖のｎ末端アラニンのクリッピングから生じる抗体の単一アミノ酸短縮型（以下「抗体Ａ２」と呼ぶ）の産生をもたらし、抗体Ａ２は、配列番号１０に示される重鎖アミノ酸配列、および配列番号１３に示される軽鎖アミノ酸配列を有する。本明細書で使用されるとき、「抗体Ａ１／２」は、配列番号１７に示される軽鎖ポリヌクレオチド配列の使用から生じる抗体産物を指し、抗体Ａ１（約６％）と抗体Ａ２（約９４％）とを含む。配列番号１４に示される重鎖ポリヌクレオチド配列および配列番号１５に示される軽鎖ポリヌクレオチド配列を使用して、顕著な量の抗体Ａ２を伴わずに抗体Ａ１を合成することができる。配列番号１４に示される重鎖ポリヌクレオチド配列および配列番号１６に示される軽鎖ポリヌクレオチド配列を使用して、顕著な量の抗体Ａ１を伴わずに抗体Ａ２を合成することができる。
【００８２】
本発明の抗体は、ファージディスプレイを含むがこれに限定されない、既知の方法を使用して産生してもよい。さらに、上述するものに由来する抗体は、本明細書に記載のアッセイを用いてさらにスクリーニングすることができる。
【００８３】
抗体Ａ１、Ａ２、およびＢの重鎖および軽鎖の可変領域のポリペプチド、ならびに完全長の重鎖および軽鎖のアミノ酸配列、ならびにそれらをコードするヌクレオチド配列は、「アミノ酸およびヌクレオチド配列」と題するセクションに列挙されている。さらに、抗体Ａ１、Ａ２、Ａ１／２、およびＢの軽鎖、重鎖、軽鎖可変領域、および重鎖可変領域の配列番号は、表１および２に示される。
【表１】
2021516249.tif 000002
【表２】
2021516249.tif 000003
【００８４】
抗体Ａ１、Ａ２、Ａ１／２、およびＢを含むがこれらに限定されない本発明の抗体は、本質的に以下のようにして作製および精製することができる。ＨＥＫ２９３またはＣＨＯなどの適切な宿主細胞は、最適な所定のＨＣ：ＬＣベクター比を用いて抗体を分泌するための発現系、またはＨＣとＬＣの両方をコードする単一のベクター系で、一過性にまたは安定的にトランスフェクトすることができる。抗体が分泌された既知組成培地は、多くの一般的に使用される技術のうちのいずれかを使用して精製されてもよい。例えば、培地は、リン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ７．４）のような適合緩衝液で平衡化された、ＭａｂＳｅｌｅｃｔカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）、またはＫａｐｐａＳｅｌｅｃｔカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に簡便に適用され得る。カラムは、非特異的結合構成成分を除去するために洗浄され得る。結合抗体は、例えば、ｐＨ勾配（１０ｍＭクエン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ３．０に対して２０ｍＭのＴｒｉｓ緩衝液ｐＨ７、または１００ｍＭグリシン緩衝液ｐＨ３．０に対してリン酸緩衝生理食塩水ｐＨ７．４など）によって溶出され得る。抗体画分は、紫外線吸光度またはＳＤＳ−ＰＡＧＥなどによって検出され得、次いで、プールされ得る。意図する使用に応じて、さらなる精製は任意選択的である。抗体は、一般的な技術を使用して濃縮および／または滅菌ろ過され得る。可溶性凝集体および多量体は、サイズ排除、疎水性相互作用、イオン交換、マルチモーダル、またはヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーを含む一般的な技法によって効果的に除去され得る。生成物は、−７０℃ですぐに冷凍されてもよく、または凍結乾燥されてもよい。
【００８５】
本明細書で使用されるとき、ＢＭＳ２０Ｈ４．９は、配列番号１８に示される重鎖と、配列番号１９に示される軽鎖と、を有する抗体を指し、これまでにＵＳ７２８８６３８に記載されている。本明細書で使用されるとき、ＰＦ８３は、配列番号２０に示される重鎖と、配列番号２１に示される軽鎖と、を有する抗体を指し、これまでにＵＳ８３３７８５０に記載されている。
【００８６】
抗体Ａ１／２はヒトＣＤ１３７に結合する
本明細書に開示される抗体がヒトＣＤ１３７に結合する能力は、ＥＬＩＳＡにより測定することができる。ヒトＣＤ１３７への結合を測定するために、９６ウェルプレート（Ｎｕｎｃ）を４℃で一晩、ヒトＣＤ１３７−Ｆｃ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）でコーティングする。ウェルをブロッキング緩衝液（０．２％ウシ血清アルブミンと０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０とを含有するＰＢＳ）で２時間ブロッキングする。ウェルを、０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳで３回洗浄する。次に、抗体Ａ１／２または対照ＩｇＧ（１００マイクロリットル）を異なる濃度で添加し、室温で１時間インキュベートする。洗浄後、プレートを１００マイクロリットルのヤギ抗ヒトＩｇＧ  Ｆ（ａｂ’）２−ＨＲＰコンジュゲート（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）とともに室温で４５分間インキュベートする。プレートを洗浄し、次いで１００マイクロリットルの３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジンとともにインキュベートする。６５０ｎｍにおける吸光度をＳｐｅｃｔｒａＭａｘ（登録商標）マイクロプレートリーダーで読み取る。半数効果濃度（ＥＣ５０）をＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ７ソフトウェアを用いて計算する。
【００８７】
本質的に上述のように実施された実験では、抗体Ａ１／２は０．０２７ｎＭのＥＣ５０でヒトＣＤ１３７に結合する。
【００８８】
抗体Ａ１／２はカニクイザルＣＤ１３７に結合する
本明細書に開示される抗体が細胞表面カニクイザルＣＤ１３７に結合する能力は、フローサイトメトリーアッセイを使用して測定することができる。カニクイザルＣＤ１３７を発現する安定細胞を、製造元のプロトコールに従ってＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ（商標）２０００試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（商標））を使用してＣｙｎｏ−ＣＤ１３７受容体プラスミドＤＮＡをヒト２９３細胞（ＡＴＣＣ）にトランスフェクトすることにより生成する。安定細胞を、１０％ウシ胎仔血清と１％ＧｌｕｔａＭＡＸ（商標）を含むダルベッコ改変イーグル培地において、０．５マイクログラム／ｍＬピューロマイシンを使用して選択する。フローサイトメトリーでは、Ｇｉｂｃｏ（登録商標）Ｃｅｌｌ  Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｂｕｆｆｅｒ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用してコンフルエントな接着細胞を剥離し、ＦＡＣＳ緩衝液（３％ウシ胎仔血清を含むリン酸緩衝生理食塩水）中、４℃で１時間ブロッキングし、１×１０５細胞／ウェルの密度で、９６ウェル丸底プレートに移す。抗体Ａ１／２、ＢＭＳ２０Ｈ４．９、ＰＦ８３、または対照ヒトＩｇＧ１（０．５マイクログラム／ｍＬで開始するＦＡＣＳ緩衝液に１：４で希釈）を添加し（１００マイクロリットル）、細胞を４℃で１時間染色する。
【００８９】
ＦＡＣＳ緩衝液で洗浄した後、二次抗体Ｒ−フィコエリトリンコンジュゲートヤギ抗ヒトＩｇＧ、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント特異的抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を１：２００希釈で添加し、細胞を４℃で３０分間インキュベートする。細胞を洗浄し、ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ（登録商標）Ｆｉｘａｂｌｅ  Ｆａｒ  Ｒｅｄ  Ｄｅａｄ  Ｃｅｌｌ  Ｓｔａｉｎキット（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して、製造元のプロトコールに従って生細胞／死細胞の染色を行う。細胞をＦＡＣＳ緩衝液で洗浄し、ＩｎｔｅｌｌｉＣｙｔ  ＨＴＦＣ（登録商標）スクリーニングシステムで処理する。フローサイトメトリーデータを、ＦｌｏｗＪｏ（登録商標）ソフトウェアを使用して分析する。平均蛍光強度（ＭＦＩ）比を、（実験抗体のＭＦＩ）／（対照ＩｇＧのＭＦＩ）として計算する。
【００９０】
本質的に上述のように実施された実験では、０．５マイクログラム／ｍＬの濃度の抗体Ａ１／２は、ＢＭＳ２０Ｈ４．９（０．９４のＭＦＩ比）およびＰＦ８３（３７のＭＦＩ比）と比較して高い、１５３のＭＦＩ比を示す。
【００９１】
ヒト細胞に結合する抗体Ａ１／２はＣＤ１３７発現を増加させる
本明細書に開示される抗体のヒトＣＤ１３７細胞表面レベルを調節する能力は、以下のように決定することができる。ヒトＣＤ１３７を発現する安定細胞を、製造元のプロトコールに従ってＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ（商標）２０００試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（商標））を使用してヒトＣＤ１３７プラスミドＤＮＡをヒト２９３細胞（ＡＴＣＣ）にトランスフェクトすることにより生成する。安定細胞を、１０％ウシ胎仔血清と１％ＧｌｕｔａＭＡＸ（商標）を含むダルベッコ改変イーグル培地において、０．５マイクログラム／ｍＬのピューロマイシンを使用して選択する。培地中の３００ナノモル濃度で開始するＣＤ１３７抗体を３７℃で２４時間細胞とともにインキュベートする。細胞をＰＢＳで洗浄し、Ｇｉｂｃｏ（登録商標）Ｃｅｌｌ  Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｂｕｆｆｅｒを使用して剥離し、冷緩衝液（１×ＰＢＳ、１％ＢＳＡ、０．０９％アジ化ナトリウム）中の同一のＣＤ１３７抗体で２時間染色する。洗浄後、細胞をＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７コンジュゲートヤギ抗ヒトＩｇＧ検出抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）で３０分間染色する。細胞を洗浄し、製造元のプロトコールに従ってＺｏｍｂｉｅ  Ｇｒｅｅｎ  Ｌｉｖｅ／Ｄｅａｄ（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）で差異的に標識する。全ての細胞をＦｏｒｔｅｓｓａ  Ｘ−２０で処理する。ＦｌｏｗＪｏ（登録商標）ソフトウェアを使用して分析を実施し、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７の中央蛍光強度（ＭＦＩ）を生成し、同等の可溶性蛍光色素（ＭＥＳＦ）標準曲線（Ｂａｎｇｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）のＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７分子に対して較正する。ＭＥＳＦ値を、未処理の染色対照（１００％）および未処理のアイソタイプ染色対照（０％）に対して標準化する。
【００９２】
本質的に上述のように実施された実験では、３００ナノモル濃度の抗体Ａ１／２はＰＦ８３（１２％）と比較してＣＤ１３７レベルの増加（２１％）を誘導するが、ＢＭＳ２０Ｈ４．９は細胞表面のＣＤ１３７を５６％減少させる。
抗体Ａ１／２のＮＦ−カッパＢルシフェラーゼレポーターアッセイ活性
【００９３】
本明細書に開示される抗体がＮＦ−カッパＢを活性化する能力は、以下のように測定することができる。二重安定ＮＦ−カッパＢルシフェラーゼレポーター／ヒトＣＤ１３７−２９３細胞を、製造元のプロトコールに従って、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ（商標）２０００試薬（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅ）を使用してｐＧＬ４．３２［ｌｕｃ２Ｐ／ＮＦ−ｋａｐｐａＢ−ＲＥ／Ｈｙｇｒｏ］プラスミドＤＮＡ（Ｐｒｏｍｅｇａ）をヒトＣＤ１３７発現２９３細胞にトランスフェクトすることにより生成する。安定細胞を、１０％ウシ胎仔血清と１％ＧｌｕｔａＭＡＸ（商標）を含むダルベッコ改変イーグル培地において、１００マイクログラム／ｍＬハイグロマイシンおよび０．５マイクログラム／ｍＬピューロマイシンを使用して選択する。Ｔｈｅｒｍｏ  ＭｕｌｔｉＤｒｏｐ  Ｃｏｍｂｉ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｄｉｓｐｅｎｓｅｒ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して、細胞を３８４ウェルプレートに５×１０３細胞／ウェルの密度で播種し、３７℃で一晩培養する。抗体Ａ１／２、ＢＭＳ２０Ｈ４．９、ＰＦ８３、または対照ヒトＩｇＧ１を、９マイクロモル濃度または１．３３マイクロモル濃度で開始するプレート内の１０点の２倍希釈で、Ｈａｍｉｌｔｏｎ  ＳＴＡＲ（商標）（Ｈａｍｉｌｔｏｎ  Ｃｏｍｐａｎｙ）を使用してリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で希釈し、細胞に移す。次いで、細胞を抗体とともに５％ＣＯ２において３７℃で５．５時間インキュベートし、次いで、ＯＮＥ−Ｇｌｏ（商標）ルシフェラーゼアッセイシステム（Ｐｒｏｍｅｇａ（商標））およびＴｈｅｒｍｏ（商標）Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉ  ＭｕｌｔｉＤｒｏｐ（商標）Ｃｏｍｂｉ試薬ディスペンサーを使用して処理する。発光を、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ（登録商標）マイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用して測定し、データ分析を、Ｇｅｎｅｄａｔａ  Ｓｃｒｅｅｎｅｒ（登録商標）（Ｇｅｎｅｄａｔａ）を使用して実施する。次のようにデータを正規化する：活性％＝［（最小対照のウェルの中央値）／（最小対照の最大の対照−中央値の中央値）］×１００％。
【００９４】
本質的に上述のように実施された実験では、抗体Ａ１／２はＰＦ８３（最大活性１２％）よりも高く、ＢＭＳ２０Ｈ４．９（最大活性１１５％）よりも低い、最大活性７８％を示す。
【００９５】
抗体Ａ１／２はＴ細胞由来のインターフェロンガンマ産生を促進する
本明細書に開示される抗体のＴ細胞由来インターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−ガンマ）産生を促進する能力は、以下のように測定することができる。ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、Ｆｉｃｏｌｌ密度勾配遠心分離（Ｆｉｃｏｌｌ（登録商標）Ｐａｑｕｅ  ＰＬＵＳ；ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）により全血または白血球から分離させ、１０％ウシ胎仔血清（ＨｙＣｌｏｎｅ）を含むロズウェルパーク記念研究所培地（ＲＰＭＩ）（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中で増殖させる。ＰＢＳ中の抗ヒトＣＤ３抗体クローンＨＩＴ３ａ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を９６ウェルプレートにコーティングし（一般的な範囲：２〜１５ナノグラム／ウェル）、４℃で一晩インキュベートする。吸引後、ウェルをＰＢＳですすぎ、ヒトＰＢＭＣを９６ウェルプレートに１．５×１０５細胞／ウェルの密度で移す。抗体Ａ１／２、ＢＭＳ２０Ｈ４．９、ＰＦ８３、または対照ヒトＩｇＧ１は、８０マイクログラム／ｍＬの開始濃度で１０％ウシ胎仔血清を含むＲＰＭＩで１：４に希釈して調製する。抗ヒトＣＤ２８抗体クローンＣＤ２８．２（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）をプレートに添加し（０．２〜２マイクログラム／ｍＬの一般的な範囲）、試験抗体を添加し、加湿した５％ＣＯ２インキュベーターで、３７℃で９６時間インキュベートする。上清を収集し、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（登録商標）ヒトＩＦＮ−ガンマＤｕｏＳｅｔ  ＥＬＩＳＡキットを使用してヒトＩＦＮ−ガンマレベルを測定する。簡潔に述べると、ＩＦＮ−ガンマ捕捉抗体を室温で一晩プレートにコーティングする（４マイクログラム／ｍＬ）。吸引および洗浄後、プレートを室温で１時間ブロッキングする。サンプルの上清とＩＦＮ−ガンマ標準を添加し、室温で２時間インキュベートする。洗浄後、１００マイクロリットルのＩＦＮ−ガンマ検出抗体を添加し、室温で２時間インキュベートし、洗浄する。ストレプトアビジン−ＨＲＰ（１：４０希釈の１００マイクロリットル）を室温で２０分間添加する。洗浄後、１００マイクロリットルの基質溶液を添加することによって２０分間プレートを発色させ、５０マイクロリットルの停止液を添加し、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ（登録商標）マイクロプレートリーダーによって４５０ｎｍでシグナルを測定する。データ分析を、ＳｏｆｔＭａｘ  ＰｒｏソフトウェアとＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用して実施する。誘導倍率を、試料平均ＩＦＮ−ガンマ（ｐｇ／ｍＬ）／対照ｈＩｇＧ１平均ＩＦＮ−ガンマ（ｐｇ／ｍＬ）として計算する。
【００９６】
本質的に上述のように実施された実験では、抗体Ａ１／２は、ＩＦＮ−ガンマサイトカイン産生によって測定されるＣＤ３／ＣＤ２８共刺激によるヒトＰＢＭＣの準最適な活性化を促進する。この点で、５マイクログラム／ｍｌの抗体Ａ１／２で処理すると、ＰＦ８３よりも高く（１．６倍の増加）、ＢＭＳ２０Ｈ４．９よりも低い（９．４倍の増加）、３．８倍の増加でＩＦＮ−ガンマの産生がもたらされる。
【００９７】
抗体Ａ１／２固相結合アッセイ
抗体Ａ１／２のヒトＣ１ｑへの結合は、ＥＬＩＳＡアッセイを使用して測定できる。抗体Ａ１／２および対照抗体（陰性対照ＩｇＧ１）をＰＢＳで連続希釈し、４℃で一晩ＥＬＩＳＡプレートにコーティングする。カゼイン緩衝液中のヒトＣ１ｑを１０ミリグラム／ｍＬの濃度で添加し、２時間インキュベートする。プレートを抗ヒトＣ１ｑ−ＨＲＰ（ＡｂＤ  Ｓｅｒｏｔｅｃ  Ｉｎｃ．、１：２００希釈）とともに１時間インキュベートすることでヒトＣ１ｑを検出し、ＴＭＢ（ＫＰＬ，Ｉｎｃ．）を使用してプレートを発色させる。Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｎｅｏ２ハイブリッドマルチモードリーダー（ＢｉｏＴｅｋ（登録商標））を使用して、４５０ｎｍで吸光度を測定する。
【００９８】
抗体Ａ１／２のＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ（Ｈ）、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩＩａ（Ｆ）、およびＦｃγＲＩＩＩａ（Ｖ）への結合は、ＭＳＤアッセイ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を使用して決定する。簡潔に述べると、Ｆｃγ受容体をＭｅｓｏ  Ｓｃａｌｅプレートに一晩コーティングし、連続希釈した試験抗体をプレートに添加して２時間インキュベートする。抗体Ａ１／２は、抗ヒト二次抗体（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ｄ２０ＴＦ−６）を使用して検出され、プレートはＲｅａｄ  Ｂｕｆｆｅｒ  Ｔ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ｒ９２ＴＣ−１）で発色させる。発光をＳＥＣＴＯＲ  Ｉｍａｇｅｒ  ２４００（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）で測定し、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ７．０ソフトウェアを使用してデータを分析する。
【表３】
2021516249.tif 000004
【００９９】
本質的に上述したように実施した実験では、抗体Ａ１／２は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩＩａ、またはＣ１ｑと結合しなかった（上述の表３に示すように）。他の実験では、細胞ベースの抗体依存性細胞傷害性および補体依存性細胞傷害性アッセイにおいて、抗体Ａ１／２は検出可能なエフェクター機能を示さなかった。
【０１００】
確立された腫瘍モデルにおける抗体Ａ１／２の抗腫瘍効果
ＨＣＣ８２７ヒト非小細胞肺癌（ＡＴＣＣ）腫瘍細胞株は、それぞれの培地で維持され、移植のために採取される。腫瘍細胞（マウス当たり１×１０７個の細胞）を、７週齢のメスＮＯＤ／ＳＣＩＤガンマ（ＮＳＧ）マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）の右側腹部に皮下注射する。腫瘍の大きさが約３５０ｍｍ３〜４５０ｍｍ３に達するとき、マウスは５〜８の群に無作為化される。ナイーブヒトＰＢＭＣをＤｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）Ｈｕｍａｎ  Ｔ−ｅｘｐａｎｄｅｒ  ＣＤ３／ＣＤ２８ビーズ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で９〜１０日間刺激して、ヒト増殖Ｔ細胞を生成し、保管する。ヒトＰＢＭＣ（ＮＹ  Ｂｌｏｏｄ  Ｃｅｎｔｅｒ）は、ＳｅｐＭａｔｅチューブ（ＳＴＥＭＣＥＬＬ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）のＦｉｃｏｌｌ（登録商標）Ｐａｑｕｅ  ＰＬＵＳで遠心分離して調製し、保管する。増殖したＴ細胞を解凍し、１×１０６個の細胞をマウスに注射する。対照として、一部のマウスでは腫瘍細胞のみを、Ｔ細胞もＰＢＭＣも伴わずに移植する。処理は０日目または１日目から開始する。処理群には、対照ＩｇＧ、ＢＭＳ２０Ｈ４．９、ＰＦ８３、および抗体Ａ１／２が含まれる。動物に腹腔内注射で１０ｍｇ／ｋｇの抗体を週に１回、４週間投与する。体重（ＢＷ）を週２回記録し、ＢＷの変化率を、次の式、（観測日のＢＷ−初日のＢＷ）／初日のＢＷ×１００％を使用して計算する。腫瘍体積を、電子キャリパーを使用して週に２回測定する。腫瘍体積は、式、腫瘍体積（ｍｍ３）＝π／６＊長さ＊幅２を用いて計算する。Ｔ／Ｃ％は、幾何平均値がΔＴ＞０の場合、式１００×ΔＴ／ΔＣを使用して計算する。ΔＴ＝研究の観測日の薬物処理群の平均腫瘍体積−投与の初日の薬物処理群の平均腫瘍体積、ΔＣ＝研究の観測日の対照群の平均腫瘍体積−投与の初日の対照群の平均腫瘍体積である。ＳＡＳソフトウェア（バージョン９．２）のＭＩＸＥＤ手順を使用して、時間および処理による繰り返しのある二元配置反復測定分散分析を用いて、腫瘍体積データの統計分析を実施する。
【０１０１】
本質的に上述のように実施した実験では、阻害を示さなかった、ＰＦ８３（Ｔ／Ｃ％＝８１．２）およびＢＭＳ２０Ｈ４．９（Ｔ／Ｃ％＝９６．９）で処理されたマウスとは対照的に、抗体Ａ１／２で処理されたマウスは有意な腫瘍増殖阻害を示した（Ｔ／Ｃ％＝３０．６、Ｐ＜０．００１）。
【０１０２】
抗体Ａ１、抗体Ａ２、および抗体Ａ１／２の動力学／親和性の結果
Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００機器を使用して、抗体Ａ１、抗体Ａ２、および抗体Ａ１／２に結合する固定化ヒトＣＤ１３７−Ｆｃの動力学を測定できる。組換えヒト細胞外ＣＤ１３７−Ｆｃタンパク質（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）は、アミンカップリング（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を介してＣＭ５センサーチップに共有結合で固定化されている。ＣＤ１３７抗体試験は、ＨＢＳ−ＥＰ＋緩衝液で３０マイクロリットル／分の流速で実施する。試料をさまざまな濃度で注入し、２５℃で測定する。３０ミリリットル／分の流速で１０ミリモル濃度のグリシン−ＨＣｌ  ｐＨ２．０とともに２４秒間、各試料を注入した後、表面を再生し、その後緩衝液で１０秒間安定化させる。０．１２３ナノモル濃度〜３０ナノモル濃度の範囲の濃度のセンサーグラムを、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００ソフトウェアを使用して評価する。結合（Ｋａ）および解離（Ｋｄ）の速度定数の計算は、１：１ラングミュア結合モデルの近似に基づいている。動力学速度定数Ｋｄ／Ｋａの比から、平衡解離定数（ＫＤ）または結合親和定数を計算する。
【０１０３】
本質的に上述のように実施した実験において、抗体Ａ１は、抗体Ａ２、および抗体Ａ１／２は、表４に示される動力学および親和定数でヒトＣＤ１３７に結合する。
【表４】
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【０１０４】
抗体Ａ１、抗体Ａ２、および抗体Ａ１／２を比較するＮＦ−カッパＢルシフェラーゼレポーターアッセイ
本明細書に開示される抗体のＮＦ−カッパＢを活性化する能力は、抗体希釈液をＰＢＳで調製し、９マイクロモル濃度で開始して、プレート内で１０点の２倍希釈を行うという変更を加えて、本明細書に上述したように測定できる。
【０１０５】
本質的に上述のように実施された実験では、抗体Ａ１／２（最大活性７０．５％）は、抗体Ａ１（最大活性６３．４％）および抗体Ａ２（最大活性７２．３％）と比較して同様の最大活性を示した。
【０１０６】
抗体Ａ１および抗体Ａ２はＴ細胞由来のインターフェロンガンマ産生を促進する
本明細書に開示される抗体のＴ細胞由来インターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−ガンマ）産生を促進する能力は、本明細書に上述したように測定することができる。本質的に本明細書に記載されるように実施された実験において、抗体Ａ１、抗体Ａ２、および抗体Ａ１／２は、ＩＦＮ−ガンマサイトカイン産生により測定されるＣＤ３／ＣＤ２８共刺激によるヒトＰＢＭＣの準最適な活性化を増強する。この点で、５マイクログラム／ｍｌの抗体Ａ１／２で処理すると、抗体Ａ１（３．５倍の増加）および抗体Ａ２（３．５倍の増加）に匹敵した、ＩＦＮ−ガンマの産生の３．１倍の増加がもたらされる。
【０１０７】
確立された腫瘍モデルにおける抗体Ａ１および抗体Ａ２の抗腫瘍効果
本明細書に開示される抗体のマウスの腫瘍増殖を阻害する能力は、本明細書に上述したように測定することができる。
【０１０８】
本質的に上述のように実施された実験では、抗体Ａ１、抗体Ａ２、および抗体Ａ１／２は、ＨＣＣ８２７で確立された腫瘍モデルの腫瘍増殖を阻害する。抗体Ａ１／２による処理（Ｔ／Ｃ％＝４７．１％、Ｐ＜０．００１）では、抗体Ａ１（Ｔ／Ｃ％＝５６．０％、Ｐ＜０．００１）および抗体Ａ２（Ｔ／Ｃ％＝４８．７％、Ｐ＜０．００１）と同様の腫瘍増殖の低減を示す。
【０１０９】
Ｘ線結晶構造によって決定された抗体Ａ１のエピトープ
抗体Ａ１−Ｆａｂを、１２ｍＬのＣａｐｔｕｒｅＳｅｌｅｃｔ  ＩｇＧ−ＣＨ１  Ａｆｆｉｎｉｔｙ  Ｍａｔｒｉｘを使用して２９３ＨＥＫ細胞上清から精製する。ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび分析サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）を利用して、精製された抗体Ａ１−Ｆａｂの純度および品質に対処する。このマトリックスの溶離物質は、１×Ｔｒｉｓ緩衝生理食塩水（ＴＢＳ）と交換された緩衝液である。ｈＣＤ１３７＊（＊（ヒトＣＤ１３７アミノ酸２２−１６１、ΔＣ１２１Ｓ）−ＡＡＡ−６Ｈｉｓ）を、Ｎｉ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標）Ｅｘｃｅｌカラム、Ｎｉ−ＮＴＡカラム、およびＳＥＣカラムを利用する３つのステップで２９３ＨＥＫ上清から精製する。簡潔に述べると、２リットルの上清を、緩衝液交換をすることなく、Ｎｉ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  Ｅｘｃｅｌカラムに直接ロードする。このステップの溶離液を、ＰＢＳで緩衝液交換し、Ｎｉ−ＮＴＡ重力流カラムを使用してさらに精製する。このステップの溶離液をさらに精製し、分取ＳＥＣカラムを使用して１×ＴＢＳと緩衝液交換する。最初のＮｉ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  Ｅｘｃｅｌステップからのフロースルーには、大量のｈＣＤ１３７＊が含まれている。次いで、Ｎｉ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  Ｅｘｃｅｌカラムに再びロードし、その後Ｎｉ−ＮＴＡおよび分取ＳＥＣカラムに再びロードする。ＳＤＳ−ＰＡＧＥを使用して、純度に基づいてｈＣＤ１３７＊画分をプールする。ｈＣＤ１３７＊の濃度は１４．５ミリグラム／ｍＬで、抗体Ａ１−Ｆａｂの濃度は７．５ミリグラム／ｍＬである。
【０１１０】
抗体Ａ１−Ｆａｂ：ＣＤ１３７＊複合体を１：１のモル比で組み合わせ、次いで、２０ミリモル濃度のＴｒｉｓ  ｐＨ８．０、１００ミリモル濃度の塩化ナトリウムで事前に平衡化したゲルろ過カラムにかける。得られた複合体を１２．５ミリグラム／ｍＬに濃縮する。ろ過後、抗体Ａ１−Ｆａｂ：ＣＤ１３７複合体は、２１℃と８℃との両方で、Ｐｈｏｅｎｉｘ液体ハンドラーを使用して、シッティングドロッププレートでスパースマトリックス結晶スクリーニング条件で１：１の比率に設定する。大きな角柱のような結晶は、２１℃で１モル濃度のクエン酸三ナトリウムｐＨ６．５で４日以内に単一の条件で成長する。結晶を採取し、２０％グリセロールおよびリザーバー条件で凍結保護し、液体窒素にマウントしてフラッシュ凍結し、Ａｒｇｏｎｎｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  ＬａｂｏｒａｔｏｒｙのＡｄｖａｎｃｅｄ  Ｐｈｏｔｏ  Ｓｏｕｒｃｅを使用して、試料をＸ線スクリーニングし、データを収集する。抗体Ａ１−Ｆａｂ／ｈＣＤ１３７＊データは、ＣＣＰ４プログラムのパッケージ（Ｗｉｎｎ，Ｍ．Ｄ．ｅｔ  ａｌ．Ａｃｔａ．Ｃｒｙｓｔ．２０１１：Ｄ６７，２３５−２４２）を使用して２．４Ａへと加工する。結晶は、空間パラメーターＰ３１２１に属し、セルパラメーターはａ＝ｂ＝１２４．９Ａ、ｂ＝１１２．７Ａ、α＝β＝９０°、γ＝１２０°である。構造は、検索モデルとして内部Ｆａｂ構造を使用して、プログラムＰｈａｓｅｒ（ＭｃＣｏｙ，Ａ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｃｒｙｓｔ．２００７  ４０：６５８−６７４）による、分子置換によって決定する。Ｆａｂの分子置換ソリューションは、Ｒｅｆｍａｃ（Ｗｉｎｎ，Ｍ．Ｄ．ｅｔ  ａｌ．Ａｃｔａ．Ｃｒｙｓｔ．２０１１：Ｄ６７，２３５−２４２、Ｍｕｒｓｈｕｄｏｖ，Ｇ．Ｎ．Ａｃｔ．Ｃｒｙｓｔ．２０１１：Ｄ６７，３５５−３６７）およびＢｕｓｔｅｒ（Ｂｒｉｃｏｇｎｅ，Ｇ．ｅｔ  ａｌ．２０１６、Ｂｕｓｔｅｒ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．１１．６．Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｕｎｉｔｅｄ  Ｋｉｎｇｄｏｍ：Ｇｌｏｂａｌ  Ｐｈａｓｉｎｇ  Ｌｅｔ．）を使用して精密化する。精密化されたマップを使用して、プログラムＣＯＯＴ（Ｅｍｓｌｅｙ，Ｐ．Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔ．２０１０：Ｄ６６，４８６−５０１）を使用してＣＤ１３７についてのモデルを手動で構築する。精密化されたＲファクターはＲ＝１７．８％、Ｒｆｒｅｅ＝２０．５％である。
【０１１１】
このアッセイに本質的に記載されるように実施した実験において、抗体Ａ１−Ｆａｂ：ｈＣＤ１３７＊複合体の解像を行い、エピトープ／パラトープが以下の表５に示されている。表５に、ｈＣＤ１３７＊の列挙されている残基の６Ａ以内にある抗体Ａ１−Ｆａｂの残基を示す。抗体Ａ１−Ｆａｂの重鎖にはｈＣＤ１３７＊との５７の接触（カットオフ６Ａ）があり、軽鎖には１８の接触（カットオフ６Ａ）がある。
【表５】
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【０１１２】
抗体Ａ１／２はＣＤ１３７／ＣＤ１３７−リガンド相互作用を完全にブロックする
本明細書に開示される抗体のヒトＣＤ１３７とＣＤ１３７−リガンド（以下、ＣＤ１３７Ｌ）の相互作用を遮断する能力は、ＥＬＩＳＡアッセイで測定することができる。まず、ＥＬＩＳＡアッセイを使用して、ｈＣＤ１３７＊＊（ヒトＣＤ１３７アミノ酸２２−１６４、ΔＣ１２１Ｓ）−ＡＡＡ−ＦＬＡＧのｈＣＤ１３７Ｌ＊ならびに抗体Ａ１／２、ＢＭＳ２０Ｈ４．９、およびＰＦ８３への結合ＥＣ５０を定量化する。９６ウェルＩｍｍｕｌｏｎ（登録商標）４ＨＢＸ  ＥＬＩＳＡプレートのウェルを、１００ナノリットルのＰＢＳ、ｐＨ７．２中の５０ナノグラムのｈＣＤ１３７＊＊で、４℃で穏やかに攪拌しながら一晩コーティングする。ＰＢＳＴ中の５％ＢＳＡでブロッキングし、洗浄した後、５倍希釈系列（３９２ナノモル濃度−０．００５ナノモル濃度）のＨｉｓタグ付き組換えヒトＣＤ１３７Ｌ（以下ｈＣＤ１３７Ｌ＊と呼ぶ）（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）、（５３−０．０００６８ナノモル濃度）のＢＭＳ２０Ｈ４．９、（１０７−０．００１４ナノモル濃度）のＰＦ８３、または（５３−０．０００６８ナノモル濃度）の抗体Ａ１／２を、各希釈液について二重で添加し、室温で１時間穏やかに撹拌しながらインキュベートする。次いで、抗ＣＤ１３７抗体で処理したウェルを洗浄し、ＨＲＰコンジュゲートヤギ抗Ｆａｂ抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）の１：１００００希釈液を添加し、標準プロトコールに従って室温でインキュベートする。次いで、ｈＣＤ１３７Ｌ＊で処理したウェルを洗浄し、ＨＲＰコンジュゲートマウス抗Ｈｉｓ抗体（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（登録商標））の１：５０００希釈液を添加し、標準プロトコールに従ってプレートを室温でインキュベートする。ＴＭＢペルオキシダーゼ発色基質と停止液は、シグナルの視覚化と検出に関する製造元の取扱説明書に従って使用する。吸光度の読み取り値を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアバージョン６にプロットする。ＥＣ５０値を、ソフトウェアのＯｎｅ  Ｓｉｔｅ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｂｉｎｄｉｎｇ関数の非線形回帰曲線適合分析によって計算する。上述のように実施された実験では、ｈＣＤ１３７＊＊に対する結合親和性（ＥＣ５０）は、ｈＣＤ１３７Ｌで０．６ナノモル濃度、抗体１／２で１．４ナノモル濃度、ＢＭＳ２０Ｈ４．９で０．４３ナノモル濃度、ＰＦ８３で１０ナノモル濃度以上と決定される。
【０１１３】
ｈＣＤ１３７Ｌ＊のｈＣＤ１３７＊＊への結合についてＢＭＳ２０Ｈ４．９、ＰＦ８３、および抗体Ａ１／２と競合する能力は、以下のように決定できる。９６ウェルＩｍｍｕｌｏｎ  ４ＨＢＸ  ＥＬＩＳＡプレートを、１００ナノリットルのＰＢＳ、ｐＨ７．２中の５０ナノグラムのｈＣＤ１３７＊＊で４℃で穏やかに攪拌しながら一晩コーティングする。ブロッキング（ＰＢＳＴ中５％ＢＳＡによる）および洗浄後、ｈＣＤ１３７Ｌ＊の５倍希釈（１９６から０．００２５ナノモル濃度）を飽和量の指定抗体、抗体Ａ１／２（２００ナノグラム／ウェル）、ＢＭＳ２０Ｈ４．９（３ナノグラム／ウェル）、またはＰＦ８３（１０００ナノグラム／ウェル）と混合する。次に、混合物を二重でウェルに添加し、室温で１時間穏やかに撹拌しながらインキュベートする。洗浄後、プレートをＨＲＰコンジュゲートヤギ抗Ｆａｂ抗体（１：１０００希釈、Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）とともに標準プロトコールに従って室温でインキュベートする。ＴＭＢペルオキシダーゼ発色基質と停止液は、シグナルの視覚化と検出に関する製造元の取扱説明書に従って使用する。
【０１１４】
ＣＤ１３７に結合したままのｍＡｂのパーセンテージをプロットし、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用した非線形回帰曲線適合分析によりＩＣ５０値を計算する。
本質的に上述のように実施された実験では、ｈＣＤ１３７Ｌ＊は０．４０１ナノモル濃度のＩＣ５０で抗体Ａ１／２のｈＣＤ１３７＊＊への結合を完全に遮断する。また、ｈＣＤ１３７Ｌ＊は、１．０３７ナノモル濃度のＩＣ５０でＰＦ８３のｈＣＤ１３７＊＊への結合を遮断する（３０％の結合シグナルが表面に残る）。ＢＭＳ２０Ｈ４．９のｈＣＤ１３７＊＊への結合に対するｈＣＤ１３７Ｌ＊の測定可能な効果はない。
【０１１５】
抗体Ａ１／２は、ＢＭＳ２０Ｈ４．９およびＰＦ８３とは異なる特定のアミノ酸残基でヒトＣＤ１３７に結合する
抗体Ａ１／２、ＢＭＳ２０Ｈ４．９、およびＰＦ８３がヒトＣＤ１３７に結合するアミノ酸残基を決定するために、ヒトＣＤ１３７点変異を導入する。ＣＤ１３７−Ｆｃ変異体を、市販の部位特異的変異導入キット（Ｑｕｉｃｋｃｈａｎｇｅ  ＩＩキット、Ｑｉａｇｅｎ）の標準プロトコールを使用して生成する。野生型および変異型ＣＤ１３７−Ｆｃタンパク質を発現させ、精製する。ここで報告された全ての変異体は、野生型ＣＤ１３７−Ｆｃと同様のサイズ排除プロファイルを有する（すなわち、導入された変異はタンパク質の構造的完全性を損なわない）。抗体の結合に対する変異の影響を決定するために、ＣＤ１３７−Ｆｃ野生型および変異体に対するポイントＥＬＩＳＡアッセイを利用する。９６ウェルＩｍｍｕｌｏｎ  ４ＨＢＸ  ＥＬＩＳＡプレートのウェルを、１００ナノリットルのＰＢＳ、ｐＨ７．２中の５０ナノグラムのヒトＣＤ１３７−ＥＣＤ−Ｃ１２１Ｓ−Ｆｃまたはその変異体で４℃で穏やかに攪拌しながら一晩コーティングする。ブロッキング（ＰＢＳＴ中５％ＢＳＡによる）および洗浄後、指定抗体の８点の５倍希釈系列（１００−０．００１２８ナノモル濃度）を添加し、室温で１時間穏やかに攪拌しながらインキュベートする。ウェルを洗浄し、ＨＲＰコンジュゲート二次抗体（ＨＲＰコンジュゲートヤギ抗Ｆａｂ抗体の１：１００００希釈液（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を添加し、標準プロトコールに従って室温でインキュベートする。ＴＭＢペルオキシダーゼ発色基質と停止液は、シグナルの視覚化と検出に関する製造元の取扱説明書に従って使用する。各濃度点の吸光度の読み取り値を、野生型相互作用の吸光度によって標準化する。各変異体について、８つの濃度の標準化された比率の平均を決定する。
【０１１６】
変異は、Ｐ２７、Ｎ４２、Ｄ６３、Ｑ６７、Ａ９７、Ｇ９８、Ｓ１００、Ｍ１０１、Ｑ１０４、Ｋ１１４、Ｋ１１５、Ｒ１３０、Ｉ１３２、Ｒ１３４の位置でヒトＣＤ１３７（配列番号１）に個別に導入した。表６は、示されているヒトＣＤ１３７の変異体に対するＢＭＳ２０Ｈ４．９と抗体Ａ１／２の結合プロファイルを示している。表７は、示されているヒトＣＤ１３７の変異体に対するＰＦ８３と抗体Ａ１／２の結合プロファイルを示している。まとめると、表６および７は、ＢＭＳ２０Ｈ４．９およびＰＦ−８３と比較して、抗体Ａ１／２がヒトＣＤ１３７の異なるアミノ酸残基に結合することを示している。
【表６】
2021516249.tif 000007
【表７】
2021516249.tif 000008
【０１１７】
ヒト腫瘍におけるＣＤ１３７遺伝子発現
ヒト腫瘍免疫浸潤物におけるＣＤ１３７遺伝子発現プロファイルは、Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ａｔｌａｓ（ＴＣＧＡ）データベースと計算方法論を使用して分析できる。簡潔に述べると、ＣＤ１３７／ＣＤ３ｅの発現比を、ＯｍｉｃｓｏｆｔがキュレートしたＴＣＧＡ  ＲＮＡＳｅｑの結果から生成する。腫瘍試料と同一組織の隣接する正常部におけるＣＤ１３７／ＣＤ３ｅの発現比を比較するために、ｔ検定を実施し、各腫瘍タイプについてＣｏｈｅｎのｄを計算する。腫瘍対正常部の発現比のｔ検定でＰ値＜０．０５を有し、Ｃｏｈｅｎのｄ＞０．８の大きな効果サイズを有する腫瘍タイプは、統計的に有意である。腫瘍対正常組織におけるＣＤ１３７／ＣＤ３ｅの発現比の差を、ｌｏｇ倍率変化（ｌｏｇＦＣ）として計算する。
【０１１８】
上述のように実施された実験では、乳癌、結腸癌、子宮内膜癌、膀胱癌、および頭頸部癌を含むがこれらに限定されないさまざまな癌の種類にわたって腫瘍ＣＤ１３７／ＣＤ３比の増加が観察される（表８）。ＣＤ１３７＋リンパ球が豊富な腫瘍は、抗体Ａ１、抗体Ａ２、または抗体Ａ１／２を使用したＣＤ１３７抗体療法の候補である。
【表８】
2021516249.tif 000009
【０１１９】
抗体Ａ１／２はインビボでＣＤ３＋Ｔ細胞腫瘍浸潤を増加させる
本明細書に開示される抗体がヒト化マウスモデルにおけるＴ細胞腫瘍浸潤を変化させる能力は、免疫組織化学（ＩＨＣ）により決定することができる。簡潔に述べると、Ｌ５５ヒト非小細胞肺癌細胞（Ｌ５５−ＣＢＧ−２Ａ−ＧＦＰ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ）をＮＳＧマウスに移植する。腫瘍のサイズが２５０〜３００ｍｍ３に達するとき、ヒトＰＢＭＣ（８×１０６細胞）を注射し、抗体を１０ミリグラム／ｋｇで週１回４週間投与する。研究の終わりに、腫瘍をホルマリンに収集し、パラフィンに処理し、切片にし、抗ＣＤ３抗体（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）で染色する。画像を、Ａｐｅｒｉｏ  ＸＴ  ＳｃａｎＳｃｏｐｅ（登録商標）を使用して２００倍の倍率で取得し、半定量的に分析する。総腫瘍細胞に対するＣＤ３陽性細胞のパーセンテージを、Ａｐｅｒｉｏ  ＩｍａｇｅＳｃｏｐｅソフトウェアを使用して計算する。結果を、一元配置分散分析で比較し、続いて多重比較のためにＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ法（Ｓｉｇｍａ  Ｐｌｏｔ  １２．５、Ｓｙｓｔａｔ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）で比較する。
【０１２０】
上述のように実施された実験では、抗体Ａ１／２はＬ５５で確立された腫瘍にＣＤ３＋Ｔ細胞腫瘍の浸潤を誘発する。抗体Ａ１／２（６０％）に反応したＣＤ３＋Ｔ細胞のパーセンテージは、ＢＭＳ２０Ｈ４．９（１８％）またはヒトＩｇＧ（２７％）処理と比較して高くなっている。
【０１２１】
抗体Ａ１／２と抗体Ｂとの組み合わせ
抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体である抗体Ｂと組み合わせた抗体Ａ１／２は、ＮＣＩ−Ｈ２９２  Ｗｉｎｎモデル、ＨＣＣ８２７ヒトＮＳＣＬＣモデル、およびＬ５５ヒトＮＳＣＬＣモデルを使用して試験することができる。ＮＣＩ−Ｈ２９２  Ｗｉｎｎモデルは、次のように使用する。７週齢のメスＮＯＤ／ＳＣＩＤガンマ（ＮＳＧ）マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を使用する。それぞれの培地で培養したヒトＮＳＣＬＣ細胞株ＮＣＩ−Ｈ２９２（ＡＴＣＣ；ＣＲＬ−１８４８）を約８０％〜９０％のコンフルエンスで採取し、１０×１０６細胞／ｍＬでＨＢＳＳに懸濁させる。ヒトＰＢＭＣは、前述のように、ＮＹ  Ｂｌｏｏｄ  Ｃｅｎｔｅｒから入手した全血の単位から単離する。ＰＢＭＣを、ＮＣＩ−Ｈ２９２腫瘍細胞と、腫瘍細胞対ＰＢＭＣ比４：１で組み合わせる。混合物を遠心分離し、ペレットを、１ｍＬ当たり、１０×１０６のＮＣＩ−Ｈ２９２細胞および２．５×１０６のＰＢＭＣの濃度でＨＢＳＳに再懸濁させる。０日目に、０．２ｍＬの溶液を各マウスの右側腹部に皮下移植する。腫瘍細胞のみを受けた対照群を各研究に含める。マウスを５〜８匹のマウスの治療群に無作為に割り当て、０日目または１日目に治療を開始する。治療群には、典型的には、対照ＩｇＧ、抗体Ａ１／２、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体（抗体Ｂ）、および抗体Ａ１／２と抗体Ｂとの組み合わせが含まれる。動物に、週に１回、４週間、示されない限り１０ｍｇ／ｋｇで腹腔内投与する。抗体Ｂを、週に１回、４週間、Ｗｉｎｎモデルには０．２５ｍｇ／ｋｇで、ＨＣＣ８２７モデルには１ｍｇ／ｋｇで投与する。
【０１２２】
ＨＣＣ８２７ヒトＮＳＣＬＣ（ＡＴＣＣ、ＣＲＬ−２８６８）およびＬ５５ヒトＮＳＣＬＣ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ）腫瘍細胞株を、それぞれの培地で維持し、移植のために採取する。腫瘍細胞（マウス当たりの細胞数範囲は、ＨＣＣ８２７（ＨＢＳＳ）には１０×１０６、Ｌ５５には５×１０６（１：１のＨＢＳＳとＭａｔｒｉｇｅｌとの混合物））を、７週齢のメスＮＯＤ／ＳＣＩＤガンマ（ＮＳＧ）マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）の右側腹部に皮下注射する。腫瘍の大きさが約２５０ｍｍ３〜４００ｍｍ３に達したら、マウスを５〜８匹の群に無作為化する。ヒト増殖Ｔ細胞を、前述のように生成する。増殖Ｔ細胞（３×１０６から８×１０６）またはＰＢＭＣ（５×１０５から８×１０６）を解凍し、マウスに注射する。対照として、腫瘍細胞のみを、Ｔ細胞もＰＢＭＣも伴わずに移植する。治療は０日目または１日目に開始する。治療群には、典型的には、対照ＩｇＧ、抗体Ａ１／２、抗体Ｂ、抗体Ａ１／２と抗体Ｂとの組み合わせが含まれる。動物に、週に１回、４週間、１０ｍｇ／ｋｇ（別途示されない限り）で腹腔内投与する。
【０１２３】
全モデルについて、体重（ＢＷ）を週に２回記録し、ＢＷの変化％を基本的には上記のように計算する。腫瘍体積を、電子キャリパーを使用して週に２回測定し、上記のように計算する。加えて、Δ＜０の場合、退縮％は、式＝１００×ΔＴ／Ｔ初日を使用して計算する。測定可能な腫瘍を有していない動物を完全奏効（ＣＲ）とみなし、５０％超の退縮を有する腫瘍を部分奏効（ＰＲ）とみなす。ＳＡＳソフトウェア（バージョン９．２）のＭＩＸＥＤ手順を使用して、時間および処理による繰り返しのある二元配置反復測定分散分析を用いて、腫瘍体積データの統計分析を実施する。ブリス独立分析を行って、試験した２つの化合物との併用治療の効果が、いずれかの単一の薬剤と比較して、相加的であるか、相加超であるか、または相加未満であるかを決定する。応答率は、ベースラインを上回る腫瘍体積のデルタＴ／Ｃ％、およびベースラインを下回る腫瘍体積の回帰％である。（単剤治療）−（併用治療）の差を比較する。記載のように実行した実験では、表９に示すように、抗体Ａ１／２と抗体Ｂとの組み合わせにより、抗体Ａ１／２または抗体Ｂによる単独療法と比べて、相加的な腫瘍成長の阻害が提供される。
【表９】
2021516249.tif 000010
【０１２４】
アミノ酸およびヌクレオチド配列
配列番号１（ヒトＣＤ１３７）
MGNSCYNIVATLLLVLNFERTRSLQDPCSNCPAGTFCDNNRNQICSPCPPNSFSSAGGQRTCDICRQCKGVFRTRKECSSTSNAECDCTPGFHCLGAGCSMCEQDCKQGQELTKKGCKDCCFGTFNDQKRGICRPWTNCSLDGKSVLVNGTKERDVVCGPSPADLSPGASSVTPPAPAREPGHSPQIISFFLALTSTALLFLLFFLTLRFSVVKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL
【０１２５】
配列番号２（ＨＣＤＲ１）
KASGGTFSSYAIS
【０１２６】
配列番号３（ＨＣＤＲ２）
GIIPIFGTANYAQKFQG
【０１２７】
配列番号４（ＨＣＤＲ３）
ARDLMTTAPGTYFDL
【０１２８】
配列番号５（ＬＣＤＲ１）
QASQDIGNSLG
【０１２９】
配列番号６（ＬＣＤＲ２）
FDASDLET
【０１３０】
配列番号７（ＬＣＤＲ３）
QQGNSFPLT
【０１３１】
配列番号８（ＨＣＶＲ）
QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDLMTTAPGTYFDLWGRGTLVTV
【０１３２】
配列番号９（抗体Ａ１のＬＣＶＲ）
AIRMTQSPPSLSASVGDRVTITCQASQDIGNSLGWYQQKPGKAPKLVIFDASDLETGVPSRFSGSGSGTDFSLTISSLQPEDFATYYCQQGNSFPLTFGQGTRLEIK
【０１３３】
配列番号１０（ＨＣ）
QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDLMTTAPGTYFDLWGRGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAEGAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPＧＫ
【０１３４】
配列番号１１（抗体Ａ１のＬＣ）
AIRMTQSPPSLSASVGDRVTITCQASQDIGNSLGWYQQKPGKAPKLVIFDASDLETGVPSRFSGSGSGTDFSLTISSLQPEDFATYYCQQGNSFPLTFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
【０１３５】
配列番号１２（抗体Ａ２のＬＣＶＲ）
IRMTQSPPSLSASVGDRVTITCQASQDIGNSLGWYQQKPGKAPKLVIFDASDLETGVPSRFSGSGSGTDFSLTISSLQPEDFATYYCQQGNSFPLTFGQGTRLEIK
【０１３６】
配列番号１３（抗体Ａ２のＬＣ）
IRMTQSPPSLSASVGDRVTITCQASQDIGNSLGWYQQKPGKAPKLVIFDASDLETGVPSRFSGSGSGTDFSLTISSLQPEDFATYYCQQGNSFPLTFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
【０１３７】
配列番号１４（ＨＣのＤＮＡ）
CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGATCTGATGACTACGGCCCCTGGGACGTACTTCGATCTCTGGGGCCGTGGCACCCTGGTCACTGTCTCCTCAGCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCACTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAAGCCGAGGGGGCACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGTATGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAAGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCATCCTCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAAGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTATTCCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCCGGGCAAATGA
【０１３８】
配列番号１５（抗体Ａ１のＬＣのＤＮＡ）
ATGAGGCTGCTGCCTCTGCTGGCCCTCCTGGCCCTGTGGGGCCCAGACCCAGCCAGAGCCGCCATCCGGATGACCCAGTCTCCACCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCAGGCGAGTCAGGACATTGGCAACTCTTTAGGTTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAACTCGTGATCTTCGATGCATCAGATCTGGAAACAGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGCACAGATTTCAGTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAGGATTTTGCAACTTACTATTGTCAACAGGGTAACAGTTTCCCGCTCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAACGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGTTAG
【０１３９】
配列番号１６（抗体Ａ２のＬＣのＤＮＡ）
ATGGAGACAGACACACTCCTGCTATGGGTACTGCTGCTCTGGGTTCCAGGCTCCACCGGCATCCGGATGACCCAGTCTCCACCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCAGGCGAGTCAGGACATTGGCAACTCTTTAGGTTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAACTCGTGATCTTCGATGCATCAGATCTGGAAACAGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGCACAGATTTCAGTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAGGATTTTGCAACTTACTATTGTCAACAGGGTAACAGTTTCCCGCTCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAACGAACTGTGGCCGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGTTAG
【０１４０】
配列番号１７（抗体Ａ１／２のＬＣのＤＮＡ）
ATGGAGACAGACACACTCCTGCTATGGGTACTGCTGCTCTGGGTTCCAGGCTCCACCGGCGCCATCCGGATGACCCAGTCTCCACCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCAGGCGAGTCAGGACATTGGCAACTCTTTAGGTTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAACTCGTGATCTTCGATGCATCAGATCTGGAAACAGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGCACAGATTTCAGTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAGGATTTTGCAACTTACTATTGTCAACAGGGTAACAGTTTCCCGCTCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAACGAACTGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGTTAG
【０１４１】
配列番号１８（ＢＭＳ２０Ｈ４．９のＨＣ）
QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSGYYWSWIRQSPEKGLEWIGEINHGGYVTYNPSLESRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARDYGPGNYDWYFDLWGRGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
【０１４２】
配列番号１９（ＢＭＳ２０Ｈ４．９のＬＣ）
EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPPALTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
【０１４３】
配列番号２０（ＰＦ８３のＨＣ）
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYSFSTYWISWVRQMPGKGLEWMGKIYPGDSYTNYSPSFQGQVTISADKSISTAYLQWSSLKASDTAMYYCARGYGIFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPEMETDTLLLWVLLLWVPGSTGAIRMTQSPPSLSASVGDRVTITCQASQDIGNSLGWYQQKPGKAPKLVIFDASDLETGVPSRFSGSGSGTDFSLTISSLQPEDFATYYCQQGNSFPLTFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGECNNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
【０１４４】
配列番号２１（ＰＦ８３のＬＣ）
SYELTQPPSVSVSPGQTASITCSGDNIGDQYAHWYQQKPGQSPVLVIYQDKNRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAMDEADYYCATYTGFGSLAVFGGGTKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS
【０１４５】
配列番号２２（抗体ＢのＨＣＶＲ）
QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSPDYSPYYYYGMDVWGQGTTVTVSS
【０１４６】
配列番号２３（抗体ＢのＬＣＶＲ）
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNTVNWYQQLPGTAPKLLIYGNSNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCQSYDSSLSGSVFGGGIKLTVLG
【０１４７】
配列番号２４（抗体ＢのＨＣ）
QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSPDYSPYYYYGMDVWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAEGAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
【０１４８】
配列番号２５（抗体ＢのＬＣ）
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNTVNWYQQLPGTAPKLLIYGNSNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCQSYDSSLSGSVFGGGIKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPAECS
【０１４９】
配列番号２６（ヒトＰＤ−Ｌ１）
MRIFAVFIFMTYWHLLNAFTVTVPKDLYVVEYGSNMTIECKFPVEKQLDLAALIVYWEMEDKNIIQFVHGEEDLKVQHSSYRQRARLLKDQLSLGNAALQITDVKLQDAGVYRCMISYGGADYKRITVKVNAPYNKINQRILVVDPVTSEHELTCQAEGYPKAEVIWTSSDHQVLSGKTTTTNSKREEKLFNVTSTLRINTTTNEIFYCTFRRLDPEENHTAELVIPELPLAHPPNERTHLVILGAILLCLGVALTFIFRLRKGRMMDVKKCGIQDTNSKKQSDTHLEET
【配列表】
2021516249000001.app
【手続補正書】
【提出日】令和2年9月15日(2020.9.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体を含む癌の治療剤であって、癌の治療を必要としている患者に、有効量の前記抗ヒトＣＤ１３７抗体を、有効量の前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせて投与することを特徴とし、前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む、治療剤。
【請求項２】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の治療剤。
【請求項３】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の治療剤。
【請求項４】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１に記載の治療剤。
【請求項５】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１に記載の治療剤。
【請求項６】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の治療剤。
【請求項７】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号２３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の治療剤。
【請求項８】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２４のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号２５のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の治療剤。
【請求項９】
前記癌が、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の治療剤。
【請求項１０】
前記癌が、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、または腎明細胞癌である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の治療剤。
【請求項１１】
前記癌が、膀胱癌、頭頸部扁平上皮癌、または腎細胞癌である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の治療剤。
【請求項１２】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体および前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つが、電離放射線と組み合わせて投与される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の治療剤。
【請求項１３】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体および前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つが、１つ以上の化学療法剤と組み合わせて投与される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の治療剤。
【請求項１４】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を含む癌の治療剤であって、前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む、治療剤。
【請求項１５】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１４に記載の治療剤。
【請求項１６】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１４に記載の治療剤。
【請求項１７】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１４に記載の治療剤。
【請求項１８】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１４に記載の治療剤。
【請求項１９】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである、請求項１４〜１８のいずれか一項に記載の治療剤。
【請求項２０】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号２３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１４〜１８のいずれか一項に記載の治療剤。
【請求項２１】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２４のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号２５のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１４〜１８のいずれか一項に記載の治療剤。
【請求項２２】
前記癌が、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、請求項１４〜２１のいずれか一項に記載の治療剤。
【請求項２３】
前記癌が、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、または腎明細胞癌である、請求項１４〜２１のいずれか一項に記載の治療剤。
【請求項２４】
前記癌が、膀胱癌、頭頸部扁平上皮癌、または腎細胞癌である、請求項１４〜２１のいずれか一項に記載の治療剤。
【請求項２５】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体および前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つが、電離放射線と組み合わせて投与される、請求項１４〜２４のいずれか一項に記載の治療剤。
【請求項２６】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体および前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つが、１つ以上の化学療法剤と組み合わせて投与される、請求項１４〜２５のいずれか一項に記載の治療剤。
【請求項２７】
癌治療用の医薬品を製造するための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用であって、前記医薬品が、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号２６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む、使用。
【請求項２８】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項２７に記載の使用。
【請求項２９】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項２７に記載の使用。
【請求項３０】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項２７に記載の使用。
【請求項３１】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項２７に記載の使用。
【請求項３２】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである、請求項２７〜３２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３３】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号２３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項２７〜３２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３４】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２４のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号２５のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項２７〜３２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３５】
前記癌が、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、請求項２７〜３４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３６】
前記癌が、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、または腎明細胞癌である、請求項２７〜３４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３７】
前記癌が、膀胱癌、頭頸部扁平上皮癌、または腎細胞癌である、請求項２７〜３４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３８】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体および前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つが、電離放射線と組み合わせて投与される、請求項２７〜３７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３９】
前記抗ヒトＣＤ１３７抗体および前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つが、１つ以上の化学療法剤と組み合わせて投与される、請求項２７〜３８のいずれか一項に記載の使用。
【国際調査報告】
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