(57)【要約】  本発明は、（ｉ）結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド又は薬学的に許容されるその塩と；（ｉｉ）２５℃での水への溶解度が＞５％であることによって特性決定される水溶性コポリマーを含む界面活性剤との水性懸濁液を含む、医薬組成物に関する。組成物は、Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドの持続放出を提供し、関節炎、関節傷害又は軟骨組織傷害を患っている患者の関節への関節内注射に適している。
2021502337.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド又は薬学的に許容されるその塩と；（ｉｉ）２５℃での水への溶解度が＞５％であることによって特性決定される水溶性コポリマーを含む界面活性剤との水性懸濁液を含む、医薬組成物。
【請求項２】
前記界面活性剤が、親水性親油性バランス（ＨＬＢ）が少なくとも１８である水溶性コポリマーである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記界面活性剤が、７５００〜１５０００ダルトン、又は８０００〜１３０００ダルトンの平均分子量を有する水溶性コポリマーである、請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記界面活性剤が、２５℃での水への溶解度が＞１０％であることによって特性決定される水溶性コポリマーである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記界面活性剤が、下式の水溶性ブロックコポリマーであり、
【化１】
2021502337.tif 000018
式中、
ａは、７５〜１０１であり、
ｂは、２５〜６０である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記水溶性ブロックコポリマーが、ポロキサマー１８８としてさらに定義される、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記水溶性ブロックコポリマーが、ポロキサマー４０７としてさらに定義される、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記水溶性ブロックコポリマーの濃度が、少なくとも０．０２５％ｗ／ｖ、任意選択で、０．０５〜１％ｗ／ｖである、請求項５〜７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記界面活性剤が、ラウリル硫酸ナトリウムをさらに含み、任意選択で、前記ラウリル硫酸ナトリウムの濃度が、少なくとも０．０５％ｗ／ｖ、任意選択で、０．０５〜０．５％ｗ／ｖである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
懸濁安定剤をさらに含み、任意選択で、前記懸濁安定剤の濃度が、０．１〜１０％ｗ／ｖである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記懸濁安定剤が、（ｉ）１〜１０ｋＤａ、任意選択で、２〜５ｋＤａの平均分子量を有するポリビニルピロリドン；（ｉｉ）２５〜２５００ｋＤａ、任意選択で、７５〜１２５ｋＤａの平均分子量を有するカルボキシメチルセルロース；及び（ｉｉｉ）これらの組合せから選択される、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記ポリビニルピロリドンの濃度が、１〜５％ｗ／ｖ、任意選択で、約２〜４％ｗ／ｖであり、前記カルボキシメチルセルロースの濃度が、０．５〜２％（ｗ／ｖ）、任意選択で、０．７５〜１．５％ｗ／ｖである、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記ポリビニルピロリドンが、ＰＶＰ−１２としてさらに定義される、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記水性懸濁液が、（ｉ）１ｍＬの前記水性懸濁液当たり、１〜４００ｍｇの結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド；（ｉｉ）０．０５〜１％ｗ／ｖの水溶性ブロックコポリマーであって、任意選択で、ポロキサマー１８８又はポロキサマー４０７である、水溶性ブロックコポリマー；及び任意選択で、（ｉｉｉ）１〜５％ｗ／ｖのポリビニルピロリドンであって、任意選択で、ＰＶＰ−Ｋ１２である、ポリビニルピロリドンを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
（ｉ）１ｍＬの前記水性懸濁液当たり、１０〜３０ｍｇ又は約２５ｍｇの結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド；（ｉｉ）０．０５〜０．１５％ｗ／ｖ又は約０．１％ｗ／ｖのポロキサマー４０７；及び任意選択で、（ｉｉｉ）１．５〜２．５％ｗ／ｖ又は約２％ｗ／ｖのＰＶＰ−Ｋ１２を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
（ｉ）１ｍＬの前記水性懸濁液当たり、４０〜６０ｍｇ又は約５０ｍｇ、又は８０〜１２０ｍｇ又は約１００ｍｇの結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド；（ｉｉ）０．１〜０．３％ｗ／ｖ又は約０．２％ｗ／ｖのポロキサマー４０７；及び任意選択で、（ｉｉｉ）１〜５％ｗ／ｖ又は約２〜４％ｗ／ｖのＰＶＰ−Ｋ１２を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
（ｉ）１ｍＬの前記水性懸濁液当たり、１５０〜２５０ｍｇ又は約２００ｍｇの結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド；（ｉｉ）０．１〜０．５％ｗ／ｖ又は約０．２〜０．４％ｗ／ｖのポロキサマー４０７；及び任意選択で、（ｉｉｉ）１〜５％ｗ／ｖ又は約２〜４％ｗ／ｖのＰＶＰ−Ｋ１２を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
（ｉ）１ｍＬの前記水性懸濁液当たり、３５０〜４５０ｍｇ又は約４００ｍｇの結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド；（ｉｉ）０．６〜１％ｗ／ｖ、０．７〜０．９％ｗ／ｖ、又は約０．８％ｗ／ｖのポロキサマー４０７；及び任意選択で、（ｉｉｉ）１〜５％ｗ／ｖ又は約２〜４％ｗ／ｖのＰＶＰ−Ｋ１２を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドが、微結晶性又は微粒子化されている、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドが、（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドとしてさらに定義される、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記懸濁液のｐＨを６〜８に維持することができる緩衝液をさらに含む、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
関節内注射に適している、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
それを必要とする対象において急性関節損傷又は傷害を処置するか、回復させるか、又は予防する方法であって、任意選択で、第２の治療剤と組み合わせて、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の医薬組成物を、それを必要とする対象に投与し；それによって、前記対象において急性関節損傷又は傷害を処置するか、回復させるか、又は予防することを含む、方法。
【請求項２４】
前記医薬組成物が、２５ｍｇまで、７５ｍｇまで、１００ｍｇまで、２００ｍｇまで又は４００ｍｇまでの結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドの用量範囲で前記対象に投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
請求項１〜２２のいずれか一項に記載の医薬組成物、及び第２の治療剤を含む組合せ。
【請求項２６】
請求項１〜２２のいずれか一項に記載の医薬組成物、及び少なくとも使用説明書又はニードルを含む、キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、それらのそれぞれが参照により本明細書中にその全体が組み込まれている、２０１７年１１月１０日に出願された米国仮特許出願第６２／５８４，５８９号明細書及び２０１８年１０月１０日に出願された米国仮特許出願第６２／７４３，８６４号明細書の利益を主張するものである。
【０００２】
本発明は、関節炎、関節傷害又は軟骨組織傷害からもたらされる関節損傷を処置又は予防するための持続放出製剤に関する。
【背景技術】
【０００３】
関節炎は１つ若しくは複数の関節の炎症であり、世界中で概ね３億５千万人に影響を与えている。骨関節炎（ＯＡ）は関節炎の最も一般な形態であり、関節軟骨、及び関節軟骨の下にある軟骨下骨の両方を含めた関節のゆっくりした退行性の故障によって特性決定される。関節損傷（例えば、急性関節傷害、例えば、半月板若しくは靭帯の断裂、又は関節内骨折）はまた、関節炎、例えば、外傷後関節炎をもたらし得る。関節軟骨は修復する能力が限られているため、小さな検出不可能な損傷でさえも、時間と共に悪化し、ＯＡがもたらされることが多いことがある。
【０００４】
参照により本明細書中にその全体が組み込まれているＰＣＴ／ＵＳ第１５／３０３０３号明細書は、Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド（化合物Ａ）、及び関節炎及び／又は関節傷害の予防、回復又は処置において有用である他の化合物について記載している。
【化１】
2021502337.tif 000003
化合物Ａは、５．２のｐＫａを伴って弱塩基性であり、中性ｐＨ及び塩基性ｐＨの水溶液中で難溶性であるが、強いｐＨ依存性溶解度を示す。溶解度は、ｐＨの減少と共に増加する。化合物Ａは、関節内注射のための即時放出製剤として製剤化することができる。しかし、滑液及び血流の間の高い液体交換によって、即時放出製剤は短い滑液の滞留半減期（synovial residence half-life）を有し、頻繁な注射を必要とする。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
このように、慢性適応症を処置するための、滑液空間においてできるだけ長く効果的なレベルの薬物物質を維持する製剤が依然として必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド又は薬学的に許容されるその塩を含む持続放出製剤を提供する。
【０００７】
一態様において、本発明は、（ｉ）結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド又は薬学的に許容されるその塩と；（ｉｉ）２５℃での水への溶解度が＞５％であることによって特性決定される水溶性コポリマーを含む界面活性剤との水性懸濁液を含む、医薬組成物を提供する。
【０００８】
本発明の様々な列挙された実施形態は、本明細書に記載されている。各実施形態において特定したフィーチャは、他の特定のフィーチャと合わせて、本発明のさらなる実施形態を提供し得る。本明細書において使用する場合、組成物中の成分の濃度％は、他に記述しない限り、ｗ／ｖ％である。
【０００９】
実施形態１。上記のような医薬組成物。一実施形態では、組成物は、注射可能な持続放出製剤である。
【００１０】
実施形態２。前記界面活性剤が、親水性親油性バランス（ＨＬＢ）が少なくとも１８である水溶性コポリマーである、実施形態１に記載の医薬組成物。
【００１１】
実施形態３。前記界面活性剤が、７５００〜１５０００ダルトンの平均分子量を有する水溶性コポリマーである、実施形態１又は２に記載の医薬組成物。
【００１２】
実施形態４。前記界面活性剤が、８０００〜１３０００ダルトンの平均分子量を有する水溶性コポリマーである、実施形態１又は２に記載の医薬組成物。
【００１３】
実施形態５。前記界面活性剤が、２５℃、１ａｔｍでの水への溶解度が＞５％であることによって特性決定される水溶性コポリマーである、実施形態１〜４のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【００１４】
実施形態６。前記界面活性剤が、２５℃、１ａｔｍでの水への溶解度が＞１０％であることによって特性決定される水溶性コポリマーである、実施形態１〜４のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【００１５】
実施形態７。前記界面活性剤が、水溶性ブロックコポリマー、任意選択で、水溶性トリブロックコポリマーである、実施形態１〜６のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【００１６】
実施形態８。前記界面活性剤が、下式の水溶性ブロックコポリマーであり、
【化２】
2021502337.tif 000004
式中、
ａは、７５〜１０１であり、
ｂは、２５〜６０である、実施形態１〜７のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【００１７】
実施形態９。前記水溶性ブロックコポリマーが、ポロキサマー１８８である、実施形態８に記載の医薬組成物。
【００１８】
実施形態１０。前記水溶性ブロックコポリマーが、ポロキサマー４０７である、実施形態８に記載の医薬組成物。
【００１９】
実施形態１１。前記水溶性ブロックコポリマーの濃度が、少なくとも０．０２５％ｗ／ｖ；例えば、０．０２５〜２％ｗ／ｖ、０．０２５〜１％ｗ／ｖ、又は好ましくは、０．０５〜１％ｗ／ｖである、実施形態８〜１０のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【００２０】
実施形態１２。前記界面活性剤が、ラウリル硫酸ナトリウムをさらに含む、実施形態１に記載の医薬組成物。一実施形態では、前記ラウリル硫酸ナトリウムの濃度は、少なくとも０．０５％ｗ／ｖ；より特定すると、０．０５〜０．５％ｗ／ｖである。
【００２１】
実施形態１３。懸濁安定剤をさらに含む、実施形態１〜１２のいずれかに記載の医薬組成物。一実施形態では、前記懸濁安定剤の濃度は、０．１〜１０％ｗ／ｖである。
【００２２】
実施形態１４。前記懸濁安定剤が、（ｉ）１〜１０ｋＤａ、任意選択で、２〜５ｋＤａの平均分子量を有するポリビニルピロリドン；（ｉｉ）２５〜２５００ｋＤａ、任意選択で、７５〜１２５ｋＤａの平均分子量を有するカルボキシメチルセルロース；及び（ｉｉｉ）これらの組合せから選択される、実施形態１３に記載の医薬組成物。
【００２３】
実施形態１５。前記ポリビニルピロリドンの濃度が、１〜５％ｗ／ｖ、任意選択で、約２〜４％ｗ／ｖであり；前記カルボキシメチルセルロースの濃度が、０．５〜２％（ｗ／ｖ）、任意選択で、０．７５〜１．５％ｗ／ｖである、実施形態１４に記載の医薬組成物。
【００２４】
実施形態１６。前記ポリビニルピロリドンが、ＰＶＰ−１２である、実施形態１５に記載の医薬組成物。
【００２５】
実施形態１７。前記水性懸濁液が、（ｉ）１ｍＬの前記水性懸濁液当たり、１〜４００ｍｇの結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド；（ｉｉ）０．０５〜１％ｗ／ｖの水溶性ブロックコポリマーであって、任意選択で、ポロキサマー１８８又はポロキサマー４０７である、水溶性ブロックコポリマー；及び（ｉｉｉ）１〜５％ｗ／ｖのポリビニルピロリドンであって、任意選択で、ＰＶＰ−Ｋ１２である、ポリビニルピロリドンを含む、実施形態１に記載の医薬組成物。
【００２６】
実施形態１８。１ｍＬの前記水性懸濁液当たり、１０〜３０ｍｇ又は約２５ｍｇの結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドを含む、実施形態１７に記載の医薬組成物。
【００２７】
実施形態１９。０．０５〜０．１５％ｗ／ｖ、０．０８〜０．１２％ｗ／ｖ、又は約０．１％ｗ／ｖのポロキサマー４０７を含む、実施形態１８に記載の医薬組成物。
【００２８】
実施形態２０。１ｍＬの前記水性懸濁液当たり、７５ｍｇまで、任意選択で、４０〜６０ｍｇ又は約５０ｍｇの結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドを含む、実施形態１７に記載の医薬組成物。
【００２９】
実施形態２１。１ｍＬの前記水性懸濁液当たり、８０〜１２０ｍｇ又は約１００ｍｇの結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドを含む、実施形態１７に記載の医薬組成物。
【００３０】
実施形態２２。０．１〜０．３％ｗ／ｖ又は約０．２％ｗ／ｖのポロキサマー４０７を含む、実施形態２０〜２１のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【００３１】
実施形態２３。１ｍＬの前記水性懸濁液当たり、１５０〜２５０ｍｇ又は約２００ｍｇの結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドを含む、実施形態１７に記載の医薬組成物。
【００３２】
実施形態２４。０．１〜０．５％ｗ／ｖ又は約０．２〜０．４％ｗ／ｖのポロキサマー４０７を含む、実施形態２３に記載の医薬組成物。
【００３３】
実施形態２５。１ｍＬの前記水性懸濁液当たり、３５０〜４５０ｍｇ又は約４００ｍｇの結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドを含む、実施形態１７に記載の医薬組成物。
【００３４】
実施形態２６。０．６〜１％ｗ／ｖ、０．７〜０．９％ｗ／ｖ、又は約０．８％ｗ／ｖのポロキサマー４０７を含む、実施形態２５に記載の医薬組成物。
【００３５】
実施形態２７。１．５〜２．５％ｗ／ｖ、又は約２％ｗ／ｖのＰＶＰ−Ｋ１２を含む、実施形態１８又は１９に記載の医薬組成物。
【００３６】
実施形態２８。１〜５％ｗ／ｖ、又は約２〜４％ｗ／ｖのＰＶＰ−Ｋ１２を含む、実施形態２０〜２６のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【００３７】
実施形態２９。前記水性懸濁液が、（ｉ）１ｍＬの前記水性懸濁液当たり、１〜１００ｍｇの結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド；（ｉｉ）１ｍＬの前記水性懸濁液当たり、０．５〜１．５ｍｇ又は約１ｍｇのポロキサマー４０７；及び（ｉｉｉ）１ｍＬの前記水性懸濁液当たり、１５〜２５ｍｇ又は約２０ｍｇのＰＶＰ−Ｋ１２を含む、実施形態１に記載の医薬組成物。
【００３８】
実施形態３０。１ｍＬの前記水性懸濁液当たり、２０〜３０ｍｇ又は約２５ｍｇの結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドを含む、実施形態２９に記載の医薬組成物。
【００３９】
実施形態３１。前記結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドが、微結晶性又は微粒子化されている、実施形態１〜３０のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【００４０】
実施形態３２。前記結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドが、６１０〜６５０ｎｍ、より特定すると、約６３０〜６３５ｎｍの波長での懸濁液中のレーザー光線回折によって５０ミクロン以下の粒径分布Ｄ９０を有する、実施形態１〜３０のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【００４１】
実施形態３３。前記結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドが、６１０〜６５０ｎｍ、より特定すると、約６３０〜６３５ｎｍの波長での懸濁液中のレーザー光線回折によって２５ミクロン以下の粒径分布Ｄ９０を有する、実施形態１〜３０のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【００４２】
実施形態３４。前記Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドが、（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドとしてさらに定義される、実施形態１〜３３の１つに記載の医薬組成物。
【００４３】
実施形態３５。懸濁液のｐＨを６〜８に維持することができる緩衝液をさらに含む、実施形態１〜３４のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【００４４】
実施形態３６。前記組成物が、関節内注射に適している、実施形態１〜３５のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【００４５】
実施形態３７。前記組成物が、関節炎、関節傷害又は軟骨組織傷害を患っている患者において、特に、膝関節の滑液腔への関節内注射に適している、実施形態３６に記載の医薬組成物。一実施形態では、組成物は、骨関節炎を患っている患者の滑液腔への関節内注射に適している。別の実施形態では、組成物は、外傷性関節炎を患っている患者の滑液腔への関節内注射に適している。別の実施形態では、組成物は、自己免疫性関節炎を患っている患者の滑液腔への関節内注射に適している。
【００４６】
実施形態３８。前記組成物が、１時間超、２４時間、７日、１４日又は３０日の間、滑液腔へのＮ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドの持続放出を提供する、実施形態３７に記載の医薬組成物。
【００４７】
実施形態３９。前記組成物が、２２〜３１ゲージのニードル、２９〜３１ゲージのニードル、又は好ましくは、３０ゲージのニードルによる投与に適している、実施形態１〜３５のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【００４８】
実施形態４０。実施形態１〜３５のいずれか１つに記載の医薬組成物、及び第２の治療剤を含む、組合せ。
【００４９】
実施形態４１。実施形態１〜３５のいずれか１つに記載の医薬組成物、及び少なくとも使用説明書又はニードルを含む、キット。
【００５０】
実施形態４２。関節損傷又は傷害、例えば、関節炎（骨関節炎、外傷性関節炎、又は自己免疫性関節炎、例えば、全身性関節リウマチ）；変性円板疾患；急性関節傷害又は軟骨組織傷害を処置するか、回復させるか、又は予防するための、任意選択で、第２の治療剤と組み合わせた、実施形態１〜３５のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【００５１】
実施形態４３。硝子軟骨組織の生成を誘発するための、又は軟骨細胞の分化を誘発するための、任意選択で、第２の治療剤と組み合わせた、実施形態１〜３５のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【００５２】
実施形態４４。関節損傷又は傷害、例えば、関節炎（骨関節炎、外傷性関節炎、又は自己免疫性関節炎、例えば、全身性関節リウマチ）；変性円板疾患；急性関節傷害又は軟骨組織傷害の処置のための医薬の製造のための、任意選択で、第２の治療剤と組み合わせた、実施形態１〜３５のいずれか１つに記載の医薬組成物の使用。
【００５３】
実施形態４５。硝子軟骨組織の生成を誘発するための、又は軟骨細胞の分化を誘発するための医薬の製造のための、任意選択で、第２の治療剤と組み合わせた、実施形態１〜３５のいずれか１つに記載の医薬組成物の使用。
【００５４】
実施形態４６。それを必要とする対象において急性関節損傷又は傷害を処置するか、回復させるか、又は予防する方法であって、任意選択で、第２の治療剤と組み合わせて、実施形態１〜３５のいずれか１つに記載の医薬組成物をそれを必要とする対象に投与し；それによって前記対象において急性関節損傷又は傷害を処置するか、回復させるか、又は予防することを含む、方法。
【００５５】
実施形態４７。前記医薬組成物を、結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミドの２５ｍｇまで、７５ｍｇまで、１００ｍｇまで、２００ｍｇまで又は４００ｍｇまでの用量範囲で前記対象に投与する、実施形態４６に記載の方法。
【００５６】
実施形態４８。医薬組成物を骨関節炎を有する個体の滑液腔中に注射することを含む、実施形態４６又は実施形態４７に記載の方法。
【００５７】
実施形態４９。硝子軟骨組織の生成又は軟骨細胞の分化を誘発する方法であって、軟骨形成前駆細胞と、任意選択で、第２の治療剤と組み合わせて、治療的有効量の実施形態１〜３５のいずれか１つに記載の医薬組成物とを接触させ；それによって硝子軟骨組織の細胞外マトリックスの生成を誘発することを含む、方法。
【００５８】
実施形態５０。前記接触ステップが、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏで哺乳動物において行われ；ｉｎ  ｖｉｖｏであるとき、幹細胞が、哺乳動物において存在する、実施形態４９に記載の方法。
【００５９】
実施形態５１。前記接触ステップが、マトリックス又は生体適合性スキャフォールドにおいて起こる、実施形態４９又は５０に記載の方法。
【００６０】
実施形態５２。前記第２の治療剤が、アンジオポエチン様３タンパク質（ＡＮＧＰＴＬ３）、インスリン成長因子（ＩＧＦ１）、ＳＭ０４６９０、ヤヌスキナーゼ阻害剤、経口サケカルシトニン、ＳＤ−６０１０、ビタミンＤ３、コラーゲン加水分解産物、骨形成タンパク質７（ＢＭＰ７）、酢酸ルサラチド(rusalatide acetate)、アボカドダイズ不けん化物（ＡＳＵ）、ステロイド、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、ヒアルロン酸、カルトゲニン、及びＴＰＸ−１００から選択される、実施形態４２若しくは４３に記載の医薬組成物、実施形態４４若しくは４５に記載の使用、又は実施形態４６〜５１のいずれか１つに記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【００６１】
【図１】４０℃にて３カ月後の化合物Ａの電子顕微鏡像である。
【図２】化合物Ａの３つの持続放出製剤：微小結晶懸濁液、ＰＬＧＡ微粒子懸濁液、及びＭＬＶリポソーム懸濁液の関節内投与の後の化合物Ａのラット血漿濃度を比較する。
【図３】即時放出溶液製剤（９１ｎｇ）による化合物Ａ（２５０μｇ）の微小結晶持続放出懸濁液のｉｎ  ｖｉｖｏでのプロファイルを比較する。
【発明を実施するための形態】
【００６２】
本発明は、Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド又は薬学的に許容されるその塩の微小結晶懸濁液と、水溶性コポリマーを含む界面活性剤とを含む、持続放出製剤を提供する。
【００６３】
本発明は、薬物懸濁液を安定化させる添加剤の同定を含めた、化合物Ａの微小結晶懸濁液を調製するための複数の課題を克服し、これらに限定されないが、下記を含めた、高度に濃縮された結晶懸濁液（１００ｍｇ／ｍＬまで）の製造（配合／充填）及び投与（投薬の正確性、注射針通過性(syringeability)）の間の許容されるフィーチャを提供する。
・配合ための態様：
○薬物物質（ＤＳ）の急速な懸濁性（ＤＳの良好な湿潤性）
○適正製造基準（ＧＭＰ）製造の間の投薬の正確性を保証するための、最初の懸濁液のゆっくりした沈降（ＤＳ微小結晶の凝集の防止）
・オートクレーブ又は貯蔵の後の態様：
○薬物物質の化学的安定性；
○微小結晶の急速な再懸濁性
○膝への無痛の注射を可能とする３０ゲージのニードルを通す注射針通過性
○投薬の正確性を可能とするゆっくりした沈降
○大きな結晶（オストワルト成長）又は凝集物が存在しないこと。
【００６４】
定義
本明細書において使用する場合、「持続放出」は、即時放出剤形について観察されたものと比較した、薬物物質の放出速度を引き延ばすように意図的に修正されている剤形を指す。持続放出投与量における放出パターンは、即時放出を模倣するバースト効果で始まってもよく、それに、剤形中の残りの薬物物質のよりゆっくりした放出が続く。
【００６５】
本明細書において使用する場合、用語「約」は、統計的に意味のある範囲の値以内、典型的には、１０％以内を意味する。このような範囲は、所与の値又は範囲の測定及び／又は決定のために使用される標準的な方法には典型的である実験誤差内にあってもよい。一実施形態では、範囲は、表示値の５％以内である。別の実施形態では、範囲は、表示値の１％以内である。さらに別の実施形態では、範囲は、表示値の０．５％以内である。
【００６６】
本明細書において使用する場合、用語「対象」は、霊長類（例えば、ヒト、男性又は女性）、イヌ、ウサギ、モルモット、ブタ、ラット、マウス及びウマを指す。ある特定の実施形態では、対象は、霊長類である。また他の実施形態では、対象は、ヒトである。
【００６７】
本明細書において使用する場合、任意の疾患若しくは障害の、用語「処置する」、「処置すること」又は「処置」は、疾患若しくは障害を軽減させるか、若しくは回復させること（すなわち、疾患若しくはその臨床症状の少なくとも１つの発生を遅延させるか、若しくは抑止すること）；又は患者にとって識別可能でなくてもよいものを含めた、疾患若しくは障害と関連する少なくとも１つの身体的パラメーター若しくはバイオマーカーを軽減させるか、若しくは回復させることを指す。
【００６８】
本明細書において使用する場合、任意の疾患若しくは障害の、用語「予防する」、「予防すること」又は「予防」は、疾患若しくは障害の予防的処置；又は疾患若しくは障害の開始若しくは進行を遅らせることを指す。
【００６９】
本明細書において使用する場合、対象は、このような対象が生物学的に、医学的に又は生活の質においてこのような処置から利益を受ける場合、処置を「必要としている」。
【００７０】
本明細書において使用する場合、医薬組成物の、用語「治療的有効量」は、対象の生物学的若しくは医学的応答、例えば、酵素若しくはタンパク質活性の低減若しくは阻害を引き出すか、又は症状を回復させるか、状態を軽減させるか、疾患の進行を遅延若しくは遅らせるか、又は疾患を予防するなどの組成物の量を指す。１つの非限定的な実施形態では、用語「治療的有効量」は、対象に投与されたとき、（１）関節傷害及び関節炎からもたらされる関節損傷を少なくとも部分的に軽減させ、阻害し、予防し、且つ／又は回復させるのに有効な化合物Ａの持続放出製剤の量を指す。別の非限定的な実施形態では、用語「治療的有効量」は、細胞、又は組織、又は非細胞の生体材料、又は媒体に投与されたとき、軟骨形成を促進するのに有効な化合物Ａの持続放出製剤の量を指す。
【００７１】
本明細書において使用する場合、用語「処置する」、「処置すること」、「処置」並びに「回復させる」及び「回復させること」は、任意の客観的又は主観的パラメーターを含めた、傷害、病態、状態、若しくは症状（例えば、疼痛）の処置若しくは回復における成功の徴候、例えば、緩和；寛解；症状の減少、又は症状、傷害、病態若しくは状態を患者にとってより許容できるものとすること；症状若しくは状態の頻度若しくは期間を減少させること；或いは一部の状況において、症状若しくは状態の開始を予防することを指す。症状の処置又は回復は、例えば、身体検査の結果を含めた、任意の客観的又は主観的パラメーターに基づくことができる。
【００７２】
本明細書において使用する場合、「投与すること」は、特定の関節への投与を指す。
【００７３】
本明細書において使用する場合、用語「医薬組成物」は、少なくとも１種の薬学的に許容される担体と一緒の、経口又は非経口投与に適した形態の、化合物又は薬学的に許容されるその塩を指す。
【００７４】
本明細書において使用する場合、用語「薬学的に許容される担体」は、医薬組成物の調製又は使用において有用な物質を指し、例えば、当業者には公知のような、適切な賦形剤、溶媒、分散媒、界面活性剤、抗酸化剤、保存剤、等張剤、緩衝剤、乳化剤、吸収遅延剤、塩、薬物安定剤、結合剤、添加剤、崩壊剤、滑沢剤、湿潤剤、甘味剤、香味剤、色素、及びこれらの組合せを含む（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２ｎｄ  Ｅｄ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，２０１３，ｐｐ．１０４９−１０７０を参照されたい）。
【００７５】
本明細書において使用する場合、用語「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、「その（ｔｈｅ）」、「前記」及び本発明の文脈において（特に、特許請求の範囲の文脈において）使用される同様の用語は、本明細書において他に示さない限り、又は文脈によって明らかに矛盾しない限り、単数及び複数の両方をカバーすると解釈される。
【００７６】
本発明は、Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド又は薬学的に許容されるその塩を含む持続放出製剤、特に、関節炎、関節傷害又は軟骨組織傷害を患っている患者の関節への関節内注射に適した注射可能な持続放出製剤を提供する。
【００７７】
一態様において、本発明は、（ｉ）結晶性Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−３−（ピリジン−４−イル）−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド又は薬学的に許容されるその塩と；（ｉｉ）２５℃での水への溶解度が＞５％であることによって特性決定される水溶性コポリマーを含む界面活性剤との水性懸濁液を含む、医薬組成物を提供する。
【００７８】
一実施形態では、医薬組成物は、親水性親油性バランス（ＨＬＢ）が少なくとも１８である水溶性ブロックコポリマーである界面活性剤を含む。界面活性剤の親水性親油性バランス（ＨＬＢ）は、それに対して界面活性剤が親水性又は親油性である程度の尺度であり、当業者に公知の方法を使用して分子の異なる領域についての値を計算することによって決定される（例えば、ＢＡＳＦ（登録商標）ＰＬＵＲＡＣＡＲＥ（登録商標）Ｌ／Ｆグレードポロキサマー、Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ、０４＿０７０８０１ｅ−０１、２００９年７月；ＢＡＳＦ（登録商標）Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ（登録商標）Ｐグレード、Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ、０３＿１１１１３６ｅ−０３）。
【００７９】
本明細書において開示されている医薬組成物と共に使用するのに適していてもよい水溶性ブロックコポリマーの例には、これらに限定されないが、ポロキサマー１８８（ＬＵＴＲＯＬ（登録商標）Ｆ−６８）、ポロキサマー２３７（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ−８７）、ポロキサマー３３８（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ−１０８）及びポロキサマー４０７（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ−１２７若しくはＬＵＴＲＯＬ（登録商標）Ｆ−１２７）、又はこれらの混合物が含まれる。ポロキサマーの濃度は一般に、約≧０．０２５％；例えば、０．０２５〜２％ｗ／ｖである。
【００８０】
別の実施形態では、医薬組成物は、懸濁安定剤、例えば、ポリビニルピロリジン（ＰＶＰ）、カルボキシメチルセルロース又はこれらの組合せをさらに含み得る。特定の実施形態では、さらなる懸濁安定剤は、単独で又はカルボキシメチルセルロースと組み合わせた、ＰＶＰ−Ｋ１２である。
【００８１】
さらに別の実施形態では、医薬組成物は、水性懸濁液のｐＨを６〜８又は約７．２〜７．４の生理学的に許容されるｐＨで維持することができる適切な緩衝液をさらに含む。一実施形態では、医薬組成物は、リン酸緩衝液を含む。これらに限定されないが、有機酸塩、ＴＲＩＳ又は塩酸トロメタミンが含まれる他の公知の緩衝剤は、本明細書において開示されている医薬組成物と共に使用することについて考慮し得る。別の実施形態では、医薬組成物は、注射用ＮａＣｌを含む。
【００８２】
本発明の医薬組成物は、１種若しくは複数の他の治療剤と同時に、前に、又は後に投与し得る。本発明の医薬組成物は、別々に又は１種若しくは複数の治療剤と一緒に、同じ又は異なる投与経路によって投与し得る。治療剤は、化合物Ａ若しくはその医薬塩の持続放出製剤と組み合わせて患者に投与されたとき、治療的に活性であるか、又は治療活性を増進させる、例えば、化合物、ペプチド、抗体、抗体フラグメント又は核酸である。
【００８３】
一実施形態では、本発明は、治療における同時、別々又は逐次使用のための合わせた調製品として、化合物Ａ若しくは薬学的に許容されるその塩の持続放出製剤、及び少なくとも１種の他の治療剤を含む生成物を提供する。一実施形態では、治療は、関節傷害又は関節炎からもたらされる関節損傷の処置である。合わせた調製品として提供される生成物は、同じ医薬組成物中で一緒の、化合物Ａ若しくは薬学的に許容されるその塩の持続放出製剤、及び他の治療剤；又は別々の形態での、例えば、キットの形態での、化合物Ａ若しくは薬学的に許容されるその塩の持続放出製剤、及び他の治療剤を含む組成物を含む。
【００８４】
一実施形態では、本発明は、第２の治療剤と組み合わせた、化合物Ａ若しくは薬学的に許容されるその塩の持続放出製剤を提供する。第２の薬剤は、１種若しくは複数のさらなる軟骨細胞分化剤であり得る。軟骨細胞分化剤の例には、これらに限定されないが、アンジオポエチン様３タンパク質（ＡＮＧＰＴＬ３）、インスリン成長因子（ＩＧＦ１）、ＳＭ０４６９０（Ｗｎｔ阻害剤）、ヤヌスキナーゼ阻害剤（例えば、ルクソリチニブ、トファシチニブ、バリシチニブ）、経口サケカルシトニン、ＳＤ−６０１０（ｉＮＯＳ阻害剤）、ビタミンＤ３（コレカルシフェロール）、コラーゲン加水分解産物、骨形成タンパク質７（ＢＭＰ７）、酢酸ルサラチド、アボカドダイズ不けん化物（ＡＳＵ）、ステロイド、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、ヒアルロン酸、カルトゲニン及びＴＰＸ−１００が含まれる。
【００８５】
本発明の医薬組成物又は組合せは、約５０〜７０ｋｇの対象について、０．５〜１０００ｍｇの活性成分の単位投与量；例えば、０．５〜５００ｍｇ、０．５〜２５０ｍｇ、０．５〜１５０ｍｇ、０．５〜１００ｍｇ、又は０．５〜５０ｍｇの活性成分の単位投与量範囲でよい。化合物、医薬組成物、又はこれらの組合せの治療的に有効な投与量は、対象の種、体重、年齢、及び個々の状態、障害若しくは疾患、又は処置されるその重症度によって決まる。通常の技術の医師、臨床医又は獣医師は、障害又は疾患の進行を予防し、処置し、又は阻害するのに必要な活性成分のそれぞれの有効量を容易に決定することができる。
【００８６】
上記の投与量特性は、有利には、哺乳動物、例えば、マウス、ラット、イヌ、サル又は単離した器官、組織及びその調製物を使用して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏでの試験において示すことが可能である。本発明の組成物は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで、溶液、例えば、水溶液の形態で、及びｉｎ  ｖｉｖｏで、経腸的、非経口的、有利には、静脈内、例えば、懸濁液として又は水溶液中で適用することができる。ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの投与量は、約１０−３モル濃度〜１０−９モル濃度の範囲であり得る。
【００８７】
一実施形態では、本発明の医薬組成物は、２５ｍｇまでの活性成分（例えば、化合物Ａ）；例えば、約０．５ｍｇ、２．５ｍｇ、７．５ｍｇ、１５ｍｇ又は２５ｍｇの活性成分の用量範囲で関節内に投与される。別の実施形態では、本発明の医薬組成物は、７５ｍｇまでの活性成分；例えば、約４０ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ又は７５ｍｇの活性成分の用量範囲で関節内に投与される。さらに別の実施形態では、本発明の医薬組成物は、１００ｍｇまでの活性成分；例えば、５０〜１００ｍｇの活性成分の用量範囲で関節内に投与される。さらに別の実施形態では、本発明の医薬組成物は、２００ｍｇまで又は４００ｍｇまでの活性成分の用量範囲で関節内に投与される。
【００８８】
別の態様において、本発明は、２種若しくはそれより多い別々の医薬組成物を含むキットを提供し、それらの少なくとも１つは、化合物Ａ若しくは薬学的に許容されるその塩の持続放出製剤を含有する。一実施形態では、キットは、前記組成物を別々に保持するための手段、例えば、容器、分離したボトル、又は分離したホイルパケットを含む。このようなキットの一例は、典型的には、錠剤、カプセル剤などのパッケージ化のために使用されるようなブリスターパックである。
【００８９】
本発明のキットは、異なる剤形、例えば、経口及び非経口を投与するために、別々の組成物を異なる投与間隔で投与するために、又は別々の組成物を互いに滴定するために使用し得る。服薬遵守を助けるために、本発明のキットは典型的には、投与のための指示を含む。
【００９０】
本発明の併用療法において、本発明の組成物及び他の治療剤は、同じ又は異なる製造者によって製造及び／又は製剤化し得る。さらに、本発明の化合物及び他の治療は、（ｉ）（例えば、本発明の化合物及び他の治療剤を含むキットの場合）医師への組合せ生成物の放出の前；（ｉｉ）投与の直前に医師自身によって（又は医師の指導の元で）；（ｉｉｉ）例えば、本発明の化合物及び他の治療剤の逐次投与の間に患者自身において、併用療法へと一緒にし得る。
【実施例】
【００９１】
下記の実施例は、本発明を例示し、本発明を限定しない。本発明の医薬組成物におけるｗ／ｖ％は、統計的に意味のある範囲以内、及び許容される実験誤差以内、例えば、表示値の１０％以内、より好ましくは、表示値の５％以内、１％以内又は０．５％以内の許容されるバリエーションをさらに含むことを当業者は理解する。
【００９２】
略語
下記の略語を使用する。
ＰＶＰ−Ｋ１２  ポリビニルピロリドン（ポビドンＫ１２）；Ｍ．Ｗ．３５００（ＣＡＳ  ９００３−３９−８）
ＣＭＣ  カルボキシメチルセルロースナトリウム塩
Ｆ６８  ＬＵＴＲＯＬ（登録商標）Ｆ−６８（ＢＡＳＦ）
Ｆ１２７  ＬＵＴＲＯＬ（登録商標）Ｆ−１２７（ＢＡＳＦ）
ＳＤＳ  ドデシル硫酸ナトリウム（ラウリル硫酸ナトリウム）
卵ＰＣ  Ｌ−α−ホスファチジルコリン（天然脂質）；ＭＷ  ７７０．１２３（平均）；（ＣＡＳ  ９２８１−４４−２；Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ）
リン酸緩衝液  ５０ｎＭ、ｐＨ７．０（１Ｌ中２．８８ｇのＫＨ２ＰＯ４及び４．０９９ｇのＮａ２ＨＰＯ４）
ＷＦＩ  注射用水。
【００９３】
アッセイ
いくつかのアッセイは、製剤が関節内投与のための判断基準に合致するかどうかを試験するように設計された。
【００９４】
懸濁性。このアッセイは、化合物Ａの微小結晶を湿らせ、且つ粒子を懸濁状態で維持する、製剤の能力を測定する。化合物Ａの微小結晶懸濁液を、５分間、１５分間、３０分間、及び６０分間連続的に撹拌した。撹拌期間の終わりに、各溶液を下記の判断基準によって評価した。（ｉ）均一な懸濁液が達成されたかどうか；（ｉｉ）薬物粒子がバイアルのガラス表面に接着したかどうか；（ｉｉｉ）残留するケークが底に接着しているが、均一な懸濁液が達成されたかどうか；又は（ｉｖ）薬物物質が大きな集塊物を形成したかどうか。
【００９５】
沈降。このアッセイは、最初の懸濁液の沈降速度を測定する。ゆっくりした沈降は、薬物粒子のより少ない凝集を示し、より良好な投薬の正確性を確実にする。上記の撹拌ステップの後、試料製剤を、５分間、１５分間、３０分間及び６０分間沈下させた。各期間の終わりに、懸濁性のための同じ判断基準に従って各試料を評価した。
【００９６】
注射針通過性。このアッセイは、患者に疼痛をもたらすことなく、製剤を関節へと急速に送達することができるかを測定する。均一な懸濁液を３０ゲージのシリンジを使用して引き上げ、同じバイアルへと再注入した。注射針通過性は、ニードルから懸濁液を押し出す容易さに基づいて主観的に決定した。
【００９７】
実施例１．化合物Ａの微小結晶の調製
化合物Ａの生成バッチを電子顕微鏡下で観察した（図１）。粒子は不規則で円柱状であり、長さが約１００ｎｍ〜１４０μｍまでの範囲であったが、粒子の大部分は５０μｍより小さい。これらの粒子は、集塊する傾向を有する。
【００９８】
化合物Ａは、当業者に公知の任意の方法を使用して微粒子化することができる。粉砕していない化合物Ａをサイズ低減プロセスに供し、粒径が得られる。化合物Ａのサイズ低減は、任意の公知の方法を使用して、例えば、ジェット粉砕技術によって、より特定すると、スパイラルジェット粉砕技術、流動床対向ジェット粉砕技術又はループジェット粉砕技術によって行うことができる。
【００９９】
一実施形態では、化合物Ａは、Ｄ９０≦５０μｍの粒径分布を有する。別の実施形態では、化合物Ａは、Ｄ９０≦３０μｍ、≦２５μｍ、≦２０μｍ又は≦１５μｍの粒径分布を有する。
【０１００】
また他の実施形態では、化合物Ａを微粒子化して、表１において特性決定する最大粒子直径を伴って微小結晶を形成させた。
【０１０１】
【表１】
2021502337.tif 000005
【０１０２】
実施例２．ＰＶＰ−Ｋ１２又はＣＭＣによる製剤スクリーニング
実施例１において調製した化合物Ａの微小結晶懸濁液は、ＰＶＰ−Ｋ１２又はカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）ナトリウム塩を含有する溶液と共に調製した。遠心分離及び振盪による再懸濁を繰り返すことによって製剤の再懸濁性を試験した。ＣＭＣ含有製剤は、遠心分離の後で再懸濁しなかった。ＰＶＰ−Ｋ１２含有製剤を、さらに調査した。
【０１０３】
実施例３．製剤Ｐ１〜Ｐ８（Ｆ６８、Ｆ１２７、ＳＤＳ、又は卵ＰＣを伴うＰＶＰ−Ｋ１２）
プラセボ溶液Ｐ１〜Ｐ８は、表２において一覧表示する組成（ｗ／ｖ％）によって調製した。
【０１０４】
【表２】
2021502337.tif 000006
【０１０５】
製剤は、約５ｍｇの化合物Ａの微小結晶と共にＲ２バイアル中で調製し、プラセボ溶液Ｐ１〜Ｐ８を充填し、５ｍｇ／ｍＬの薬物物質濃度に達しさせた。製剤を、表３の第１欄において一覧表示した逐次のステップによって再懸濁性及び沈降速度について試験した。各ステップの後、試料の濁り度を観察し、写真によって記録し、表３において要約した。
【０１０６】
【表３】
2021502337.tif 000007
【０１０７】
注射針通過性試験は、製剤が関節中に滑らかに注入することができるかどうかについての目安を提供する。各バイアルについて、懸濁液を３０ゲージのニードルを通してシリンジ中に引き込み、同じバイアルへと再注入した。内容物を排出する容易さ又は困難は、「ＯＫ」又は困難として分類した。
【０１０８】
加熱滅菌を１２２．５℃にて２０分間行った。加熱滅菌前試料及び加熱滅菌後試料の懸濁性及び沈降は同じであると観察された。このように、加熱滅菌は、微小結晶の分解及び集塊に対して効果を有するようではなかった。光学顕微鏡写真をそれぞれの再懸濁した製剤について取り、平均粒径≧５０μｍを有する粒子についてスクリーニングした。平均粒径≧５０μｍを有する粒子は全ての製剤中で見出されなかった。微粒子化された結晶の分布は、全ての場合において均一であった（顕微鏡写真は示さず）。
【０１０９】
ＳＤＳ及び卵ＰＣ（Ｐ５〜Ｐ８）を含む製剤は、４時間の遠心分離の後で乏しい再懸濁性を示した。他方、Ｆ６８及びＦ１２７（Ｐ１〜Ｐ４）を含む製剤はより良好な再懸濁性を示し、さらに調査した。
【０１１０】
実施例４．製剤Ｐ９〜Ｐ１６（Ｆ６８又はＦ１２７を有するＰＶＰ−Ｋ１２）
プラセボ溶液Ｐ９〜Ｐ１６は、表４において一覧表示した組成（ｗ／ｖ％）によって調製した。
【０１１１】
【表４】
2021502337.tif 000008
【０１１２】
製剤は、約５ｍｇの化合物Ａの微小結晶を加え、プラセボ溶液Ｐ９〜Ｐ１６で充填し、５ｍｇ／ｍＬの薬物物質濃度に達することによって、Ｒ２バイアル中で調製した。製剤を、表５の第１欄において一覧表示した逐次のステップによって再懸濁性及び沈降速度について試験した。各ステップの後、試料の濁り度を観察し、表５において要約した。
【０１１３】
【表５】
2021502337.tif 000009
【０１１４】
Ｆ６８及びＦ１２７を含有する全ての製剤が、４時間の遠心分離の後で良好な再懸濁性を示したことを表５は示す。しかし、Ｆ１２７（Ｐ１３〜Ｐ１６）を含有する製剤は、Ｆ６８を含有する製剤と比較したとき、微小結晶をより短い時間内で再懸濁させ、微小結晶を懸濁状態でより長く維持することができた。
【０１１５】
実施例５．製剤Ｐ１７〜Ｐ３６（ＰＶＰ−Ｋ１２及びＦ１２７）
Ｆ１２７と伴う又は伴わない製剤Ｐ１７〜Ｐ３６は、表６において記載するように設計したが、構成要素はｗ／ｖ％として一覧表示する。本明細書において使用する場合、「Ｃｐｄ  Ａ」は、化合物Ａを指す。
【０１１６】
【表６】
2021502337.tif 000010
【０１１７】
上記の製剤Ｐ１７〜Ｐ３６は、標的量の微小結晶を加えることによってそれらの個々のプラセボ溶液から調製した。プラセボ溶液（ビヒクル）を、各構成要素のストック溶液から調製した。製剤のそれぞれについて５０ｍＬのプラセボ溶液を調製するのに必要とされる構成要素溶液の構成要素（ｗ／ｖ％）及び容量（ｍＬ）、並びにプラセボ溶液のｐＨを、表７において一覧表示した。
【０１１８】
【表７】
2021502337.tif 000011
【０１１９】
表８は、各添加剤についてのストック溶液の調製を記載する。
【０１２０】
【表８】
2021502337.tif 000012
【０１２１】
５０ｍｌでの各プラセボ溶液のために、薬物物質を加え（５ｍｇ／ｍＬ）、対応するプラセボで容量によって満たした。各製剤の少なくとも１ｍＬの２つのバイアルを、それに続くアッセイのために調製した。第１の組のバイアルを、それらの懸濁性及び沈降特徴についてアッセイした。製剤を５分間、１５分間、３０分間、及び６０分間連続的に撹拌した。６０分の連続した撹拌の後、バイアル１７、１８、１８Ａ、１９、２２、２３Ａ、２７、２８は均一であった。撹拌サイクルの完了において測定されたｐＨ値を、最初のプラセボ溶液から取ったものと比較した。
【０１２２】
注射針通過性、沈降速度及び懸濁性を決定する様々なアッセイにおいて製剤を試験した。注射針通過性について、各試料製剤を３０ゲージのニードルを通してシリンジ中に引き込み、同じバイアルへと再注入した。試料の引込みはゆっくりであったが、全ての製剤は許容される注射針通過性を有した。それに続いて、試料製剤を、６０分間沈降させた。６０分後、バイアル１７、１８、１８Ａ、２２、２３、２３Ａ、２４、２７、２８Ａ、３２及び３３Ａは、まだ懸濁していた。バイアル１９、２０、２１、２５、２６及び２８は、沈下し始めた。バイアルの残りは、完全に沈降した。バイアルを密封し、１２２．５℃にて２０分間オートクレーブした。試料の全ては透明であったが、微小結晶が沈降したことを示す。バイアルを手で数回振盪した後、バイアルＰ１７、Ｐ１８、２３Ａ、Ｐ２７、及びＰ２８のみは、均一な懸濁液へと再懸濁した。第２の組のバイアルを、それぞれ２〜８℃及び５０℃にて約１２時間、５回のサーモサイクリングサイクルに供し、上記のように評価した。試料を手で振盪して粒子を再懸濁させ、バイアルＰ１７、１８、１９、２７及び２８のみが再懸濁した。しかし、（全てではないが）大部分の製剤は、より激しい振盪の後再懸濁した。注射針通過性は、Ｐ２０及びＰ２２を除いて、全てのバイアルについて許容された。
【０１２３】
別の沈降分析を行った。６０分後、バイアルＰ１７、Ｐ１８Ａ、Ｐ２２、Ｐ２３、Ｐ２３Ａ、Ｐ２４、Ｐ２７、Ｐ２８Ａ、Ｐ３２及びＰ３３Ａは、まだ懸濁していた。試料をエッペンドルフ管に移し、４０００ｒｐｍにて４時間遠心分離した。それに続いて、試料を振盪して、再懸濁した。多少激しい振盪（ボルテックス）の後に半分超は再懸濁したが、バイアルＰ１７、Ｐ２２、Ｐ２７、Ｐ３２及びＰ３３Ａのみは、６０分後及び遠心分離後に一貫して再懸濁した。
【０１２４】
実施例６．例示的な持続放出製剤
実施例６は、本発明を例示するが、限定しない、例示的な組成物を提供する。本発明の医薬組成物は、当業者には公知の許容されるバリエーションをさらに含む。
【０１２５】
【表９】
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【０１２６】
驚いたことに、選択した微小結晶懸濁液は、湿式加熱によって最後に滅菌することができ、滅菌の間及び貯蔵に亘り結晶成長（オストワルト成長）又は凝集の徴候を示さなかったが、細い針（３０ゲージ）を通した正確な投薬を可能とした。局所組織の刺激作用は観察されなかった。一実施形態では、組成物は、上記の緩衝ビヒクル中の均質な懸濁液として２５ｍｇ／ｍＬの化合物Ａの微小結晶を含む。
【０１２７】
実施例７．持続放出製剤の比較データ
持続放出特徴を有するいくつかの製剤を調製し、試験した。可能な最も高い薬物物質添加を各製剤において使用し、治療効果を最大化した。
【０１２８】
微小結晶懸濁液
化合物Ａ（２５０μｇ）を、実施例６からの２５μＬの緩衝ビヒクルに懸濁させた。
【０１２９】
ＰＬＧＡ微粒子懸濁液
ジクロロメタン中の化合物Ａ（２％ｗ／ｖ）及びＰＬＧＡ（１２ｋＤａ；１：１のＬ：Ｇ比）を、１％ｗ／ｖのポリビニルアルコール（ＰＶＡ）を含有する水溶液中で乳化し、最初のエマルジョンを安定化した。熱によるジクロロメタンの蒸発は、ＰＬＧＡ微粒子に分子的に分散させた化合物Ａをもたらしたが、これをそれに続いて水中で洗浄し、乾燥させた。Ｄ５０＝４０μｍ及びＤ９０＝５７μｍの粒径分布を有するＰＬＧＡ微粒子を得た。
【０１３０】
リポソーム懸濁液
リポソーム製剤を使用し、脂質二重層中で化合物Ａを可溶化し、可能な持続性放出を得た。さらに、リポソームは、注入した側において滑沢剤として役立つはずである。リポソーム処方を、下記の手順において記載したように調製した。
第１の手順
１．  ＤＭＰＣ（１００ｍｇ）及び微粒子化されていない化合物Ａ（３ｍｇ）を、１０ｍＬのＥｔＯＨ：ＤＣＭ、１：１に溶解した。
２．  ＥｔＯＨ及びＤＣＭを、４０℃及び２５０ミリバール（１４０ｒｐｍ）にてロータリーエバポレーター上で３０分間除去した。
３．  微量のＥｔＯＨ及びＤＣＭを、４０℃及び４０ミリバール（１４０ｒｐｍ）にて１０分間除去した。
４．  脂質／化合物Ａのフィルムを、１ｍＬのリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）又は水中の糖で再水和した。
５．  １ｕｍフィルターを通して試料を押し出し、均質なサイズを得た。
６．  試料を−２０℃にて凍結した。
７．  試料を一晩凍結乾燥した。
８．  試料を滅菌水で再懸濁した。
第２の手順
１．  化合物Ａ及びＤＭＰＣをｔｅｒｔ−ブタノールに溶解した。
２．  試料を−２０℃にて凍結した。
３．  試料を一晩凍結乾燥した。
４．  試料をＰＢＳで再懸濁した。
【０１３１】
当初の材料は、ＤＭＰＣ及び化合物Ａをｔｅｒｔ−ブタノールに可溶化することによって無菌濾過することができた。凍結乾燥の後、粉末を再構成して、多重膜小胞（ＭＬＶ）を製造することができた。その製造された形態（ＭＬＶ）での使用した脂質（ＤＭＰＣ）は、その大きなサイズ及び抗炎症性特性によって注射の側における潜在的により良好な保持の利点を有する。化合物Ａの漏出をマウスモデルにおいて試験したが、ここで、化合物Ａの速い放出が観察された。
【０１３２】
比較データ
化合物Ａを、異なる持続放出製剤によって雄性Ｌｅｗｉｓラットの関節内（ＩＡ）に投与した（製剤毎に３匹の動物）。ＰＬＧＡ微粒子及びＭＬＶリポソーム懸濁液を可能な最大用量近くで投与したが、これは薬物添加能力によって限定し得る。血漿試料をＩＡ注射後に４８０時間（２０日、時点当たりｎ＝３）まで連続的に集めた。
【０１３３】
化合物Ａの血漿濃度を、液体クロマトグラフィー／質量分析法（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）アッセイを使用して定量化した。アセトニトリル／メタノール（容量によって３／１）中の１ミリリットル当たり２００ピコグラム（ｐｇ／ｍＬ）のベラパミル塩酸塩（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｖ４６２９、ＣＡＳ  １５２−１１−４）を、内部標準及び血漿沈殿溶媒として使用した。２０μＬの各血漿試料に、１００μＬの内部標準溶液を加え、マトリックスタンパク質を沈殿させた。試料をボルテックスにかけ、次いで、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ  Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ５８１０Ｒ（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ、Ｈａｍｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）で４，０００ｒｐｍの設定で１０℃にて５分間遠心した。上清（８０μＬ）を清浄な９６ウェルプレートに移し、７５μＬのＭｉｌｌｉ−Ｑ水と混合した。混合した試料を、ＺＯＲＢＡＸ（登録商標）ＳＢ−Ｃ８分析カラム（２．１×３０ｍｍ、３．５μｍ、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．、Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）上に７００μＬ／分の流量での勾配法を使用して注入（５μＬ）した（下記の表を参照されたい）。水中の０．０５％ギ酸（溶媒Ａ）及びアセトニトリル中の０．０５％ギ酸（溶媒Ｂ）からなる移動相を使用した。化合物Ａ及び内部標準を、それぞれ、保持時間１．４０分及び１．４５分において溶出させた。
【０１３４】
【表１０】
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【０１３５】
Ａｇｉｌｅｎｔ  １２６０シリーズバイナリーポンプ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．）、Ａｇｉｌｅｎｔ  １２６０シリーズマイクロ真空デガッサー（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．）、ＣＴＣ  ＰＡＬ−ＨＴＣ−ｘｔ分析オートサンプラー（ＬＥＡＰ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｒｂｏｒｒｏ，ＮＣ，ＵＳＡ）からなるＨＰＬＣシステムを、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ＳＣＩＥＸトリプル四重極５５００質量分析計（ＡＢ  Ｓｃｉｅｘ  ＬＬＣ．、Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ，ＵＳＡ）へとインターフェース接続した。陽イオンモードでのエレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）を使用して質量スペクトル分析を行った。化合物Ａ（３６３．０３＞１５６．００）及び内部標準（４５５．４０＞１６５．１０）のピーク積分を、Ａｎａｌｙｓｔ（商標）１．５ソフトウェアを使用して行った。血漿中の定量化の下限（ＬＬＯＱ）は、５ｐｇ／ｍＬであった。既知の量の化合物Ａを血漿中に添加し、２０ｐｇ／ｍＬ、８０ｐｇ／ｍＬ、８００ｐｇ／ｍＬ、４０００ｐｇ／ｍＬ及び２００００ｐｇ／ｍＬの既知の濃度を有する品質管理試料を生じさせた。
【０１３６】
４８０時間までの時点において、ラット血漿試料を集め、薬物濃度についてアッセイした。表９は、関節内投与の後の血漿ｐＫパラメーターを示す。図２及び表９に示されているように、微小結晶懸濁液は、観察期間の終わりまでの最も高い薬物用量、最も高いＣｍａｘ及び経時の薬物曝露（ＡＵＣ）を可能とすることにおいて他の製剤より優れていた。ミクロ懸濁プロファイル（■）は、薬物添加が試験した系の中で最も高かったため、最も高いＣｍａｘに達する。化合物Ａの微小結晶懸濁液のより長い滞留時間によって、化合物Ａの微小結晶懸濁液をｉｎ  ｖｉｖｏでさらに特性決定した。
【０１３７】
【表１１】
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【０１３８】
実施例８．即時及び持続放出製剤の比較データ
ｉｎ  ｖｉｖｏでの研究は、４週間後の単一の関節内注射、及び１２週間後（すなわち、注射の８週間後）のテイクダウンに続いて、３６週齢の雄性Ｌｅｗｉｓにおけるラット半月板断裂（ＲＭＴ）モデルにおいてそれぞれの製剤タイプで達成可能である送達可能な投与量で即時放出（ＩＲ）及び持続放出（ＥＲ）製剤を比較した。図３は、化合物ＡのＥＲ製剤（２５０μｇ）及びＩＲ製剤（９１ｎｇ）のｉｎ  ｖｉｖｏでのプロファイルを比較する。図３に示すように、持続放出微小結晶懸濁液は、軟骨組織の修復において有効であったが、したがって、処置の有効性を損なうことなしに、投薬頻度の低減の利点（すなわち、より少ない注射）を提供する。
【０１３９】
実施例９．化合物Ａ（２５ｍｇ／ｍＬ）を含む持続放出製剤
化合物Ａ（２５ｍｇ／ｍＬ）を、ｐＨを生理学的ｐＨ７に設定するｐＨ調整剤として、無水リン酸二ナトリウム（５ｍＭ）、ＮａＯＨ（１Ｎ）、ＨＣｌ  ２５％（１Ｎ）、及び注射用水の存在下で、下記の添加剤を含有する水性緩衝ビヒクルに分散させた。
【０１４０】
【表１２】
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【０１４１】
薬物物質の濃度を増加させるために、５０ｍｇの化合物Ａの粉末を、上記のように２ｍＬのビヒクル溶液に加えた。溶液を５００ｒｐｍにて磁気撹拌で一晩撹拌し、目に見える凝集物又は集塊物を伴わない個々に分散された微小結晶の均一な懸濁液を得た。
【０１４２】
実施例１０．化合物Ａ（５０〜４００ｍｇ／ｍＬ）を含む持続放出製剤
変化する濃度のＰＶＰ  Ｋ１２及びポロキサマー４０７を伴う本質的に実施例１０におけるのと同じビヒクル組成物を含む組成物をスクリーニングして、約５０ｍｇ／ｍＬ〜約４００ｍｇ／ｍＬの濃度で化合物Ａを含む組成物の沈降及び再懸濁に対する添加剤濃度の影響を評価した。下記の組成物（１）〜（４）は、集塊しない懸濁液として得たが、これは沈降の後に（例えば、オートクレーブの間又は数日間の貯蔵によって）容易に再懸濁した。
【０１４３】
【表１３】
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【０１４４】
実施例１１．さらなる懸濁安定剤としてのカルボキシメチルセルロース
カルボキシメチルセルロースを、実施例６の緩衝ビヒクル中に化合物Ａの微小結晶（２５ｍｇ／ｍＬ）を含む懸濁液に加えた。驚いたことに、オートクレーブしない試料及びオートクレーブした試料の再懸濁は、ＣＭＣ（１％及び１．５％ｗ／ｖ）の存在下で改善した。
【０１４５】
本明細書に記載されている実施例及び実施形態は、例示のために過ぎないことが理解される。記載した実施例及び実施形態における様々な修正又は変化が当業者に対して示唆され、本出願、及び本明細書における特許請求の範囲の精神及び趣旨以内に含まれることがまた理解される。本明細書において引用した全ての公開資料、特許、及び特許出願は、全ての目的のために参照により本明細書に組み込まれている。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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