(57)【要約】  トリアシルグリセリド油の精製方法であって、（ａ）トリアシルグリセリド油を補助捕捉剤と混合する工程であって、トリアシルグリセリド油及び補助捕捉剤の融解温度が実質的に異なり、補助捕捉剤がトリアシルグリセリド油に可溶であり、補助捕捉剤がトリアシルグリセリド油よりも高極性である、工程と、（ｂ）（ｉ）工程（ａ）の混合物を、補助捕捉剤の融解温度未満に冷却することによって、補助捕捉剤を結晶化する工程であって、補助捕捉剤が、トリアシルグリセリド油よりも高い融解温度を有する、工程、又は（ｉｉ）工程（ａ）の混合物を、トリアシルグリセリド油の融解温度未満に冷却することによって、トリアシルグリセリド油を結晶化する工程であって、トリアシルグリセリド油が、補助捕捉剤よりも高い融解温度を有する、工程と、（ｃ）工程（ｂ）の生成物の固相及び液相を分離する工程と、を含む、精製方法。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
トリアシルグリセリド油の精製方法であって、
（ａ）前記トリアシルグリセリド油を補助捕捉剤と混合する工程であって、前記トリアシルグリセリド油及び前記補助捕捉剤の融解温度が実質的に異なり、前記補助捕捉剤が前記トリアシルグリセリド油に可溶であり、前記補助捕捉剤が前記トリアシルグリセリド油よりも高極性である、工程と、
（ｂ）（ｉ）工程（ａ）の混合物を、前記補助捕捉剤の融解温度未満に冷却することによって、前記補助捕捉剤を結晶化する工程であって、前記補助捕捉剤が、前記トリアシルグリセリド油よりも高い融解温度を有する、工程、
又は（ｉｉ）工程（ａ）の混合物を、前記トリアシルグリセリド油の融解温度未満に冷却することによって、前記トリアシルグリセリド油を結晶化する工程であって、前記トリアシルグリセリド油が、前記補助捕捉剤よりも高い融解温度を有する、工程と、
（ｃ）工程（ｂ）の生成物の固相及び液相を分離する工程と、を含む、精製方法。
【請求項２】
モノクロロプロパンジオールエステル（ＭＣＰＤＥ）の塩素化前駆体の量が、前記出発トリアシルグリセリド油と比較して、前記精製されたトリアシルグリセリド油中で低減される、請求項１に記載の精製方法。
【請求項３】
前記補助捕捉剤の融解温度が、前記トリアシルグリセリド油の融解温度より少なくとも１０℃高く、好ましくは前記トリアシルグリセリド油の融解温度より少なくとも２０℃高い、請求項１又は２に記載の精製方法。
【請求項４】
前記補助捕捉剤と前記トリアシルグリセリド油との間のｌｏｇＰｏｃｔ／ｗａｔの差が、少なくとも１、好ましくは少なくとも２である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の精製方法。
【請求項５】
前記補助捕捉剤がグリセリドを含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の精製方法。
【請求項６】
前記補助捕捉剤が、モノアシルグリセリド、ジアシルグリセリド及び遊離脂肪酸からなる群から選択される少なくとも１つの化合物を含み、好ましくは、前記補助捕捉剤が、モノステアリン、モノパルミチン、ジステアリン、ジパルミチン、ステアリン酸及びパルミチン酸からなる群から選択される少なくとも１つの化合物を含み、好ましくは、前記補助捕捉剤が、モノステアリンを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の精製方法。
【請求項７】
前記トリアシルグリセリド油が、植物油、動物油、魚油又は藻類油、好ましくは植物油であり、好ましくは前記植物油が、ヒマワリ油、コーン油、キャノーラ油、大豆油、ココナッツ油、パーム油、パーム核油、及びカカオバターからなる群から選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の精製方法。
【請求項８】
工程（ａ）の前記混合が、前記トリアシルグリセリド油及び補助捕捉剤の融解温度よりも高い温度まで加熱する工程、及び／又は混合物を均質化する工程を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の精製方法。
【請求項９】
工程（ｃ）の前記分離が、遠心分離、デカンテーション及び／又は濾過を含み、好ましくは遠心分離を含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載の精製方法。
【請求項１０】
前記トリアシルグリセリド油のｐＨが、工程（ｂ）の前に調整されて、ＭＣＰＤＥの塩素化前駆体の極性を増加させる、請求項１〜９のいずれか一項に記載の精製方法。
【請求項１１】
工程（ｃ）の後に以下の工程を更に含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の精製方法：
（ｄ）物理的精製又は化学的精製、脱ガム、中和、及び脱色からなる群から選択される１つ以上のプロセス、
（ｅ）所望により、工程（ｄ）の生成物を脱臭する工程であって、好ましくは、前記脱臭が真空蒸気脱臭である、工程、及び
（ｆ）所望により、工程（ｄ）又は（ｅ）の生成物を分画する工程。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の精製方法によって得られるトリアシルグリセリド油。
【請求項１３】
トリアシルグリセリド油の精製のための補助捕捉剤の使用であって、
前記トリアシルグリセリド油及び前記補助捕捉剤の融解温度は実質的に異なり、前記補助捕捉剤が、前記トリアシルグリセリド油に可溶であり、前記補助捕捉剤が前記トリアシルグリセリド油よりも高極性であり、前記精製が、前記補助捕捉剤又は前記トリアシルグリセリド油を結晶化することを含む、補助捕捉剤の使用。
【請求項１４】
前記精製により、前記出発トリアシルグリセリド油と比較して、前記精製されたトリアシルグリセリド油中のモノクロロプロパンジオールエステル（ＭＣＰＤＥ）の塩素化前駆体の量が低減する、請求項１３に記載の補助捕捉剤の使用。
【請求項１５】
前記補助捕捉剤が、前記トリアシルグリセリド油よりも高い融解温度を有し、前記補助捕捉剤が結晶化されている、請求項１３又は１４に記載の補助捕捉剤の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、油の精製に関する。具体的に、本発明は、モノクロロプロパンジオールエステル（ＭＣＰＤＥ）の不純物塩素化前駆体及び／又はＭＣＰＤＥ自体からのトリアシルグリセリド油の精製に関する。
【背景技術】
【０００２】
３−ハロゲン−１，２−プロパンジオール、特に３−モノクロロ−１，２−プロパンジオール（３−ＭＣＰＤ）は、食品中の既知の不純物である（Ｆｏｏｄ  Ａｄｄｉｔ．Ｃｏｎｔａｍ．（２００６）２３：１２９０−１２９８）。例えば、種々の調査報告は、３−ＭＣＰＤは、これが高用量で投与された場合にラットにとって発癌性であり得ることを示している（Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｅｒｔａｉｎ  Ｆｏｏｄ  Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｔｓ，Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｓａｔｉｏｎ，Ｇｅｎｅｖａ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ（１９９３）２６７−２８５；ｌｎｔ．Ｊ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．（１９９８）１７：４７）。
【０００３】
３−ＭＣＰＤは、当初、酸加水分解植物性タンパク質で発見されたものである（ａｃｉｄ−ＨＶＰ；Ｚ．Ｌｅｂｅｎｓｍ．−Ｕｎｔｅｒｓ．Ｆｏｒｓｃｈ．（１９７８）１６７：２４１−２４４）。近年、精製食用油は、３−ＭＣＰＤをその脂肪酸エステル形態で含有し得る一方で、非常に少量の遊離３−ＭＣＰＤのみを含有し得ることも見出された（Ｆｏｏｄ  Ａｄｄｉｔ  Ｃｏｎｔａｍ．（２００６）２３：１２９０−１２９８）。欧州食品安全機関（ＥＦＳＡ）は、毒性の観点から、３−ＭＣＰＤエステルを遊離３−ＭＣＰＤと同等に扱うことを推奨している（欧州食品安全機関（２００８））。
【０００４】
アシルグリセリドの塩素化は、非常に高温で、例えば、油が真空（３〜７ｍｂａｒ）下で最大２６０〜２７０℃まで加熱され得る油精製プロセスの最終工程中、すなわち脱臭中に、起こり得ることが報告されている。これは、ＭＣＰＤの脂肪酸エステルの形成をもたらし得る。
【０００５】
ＭＣＰＤエステルの効率的な低減の手段は限定的であり、植物油精製産業に課題が提起されている。現在、精油中の３−ＭＣＰＤの存在を慎重にモニターし、ＥＦＳＡの勧告への完全準拠を確実なものとするために、３−ＭＣＰＤ含量が所定の閾値を上回る油は廃棄されている。これらの不純物の効率的な低減を妨げる１つの重大な要因は、塩素保有の前駆体が脱臭工程の前に除去されず、したがって脱臭工程中に塩素源／塩素供与体として作用し得ることである。
【０００６】
３−ＭＣＰＤは、商業的に重要な多くの精製油中、例えば、植物油中などで生じ得るため、油精製中に生じるそのような不純物を除去及び／又は回避する改良された方法が、特に必要とされている。
【０００７】
［発明の概要］
本発明者らは、油精製のプロセス中のＭＣＰＤエステル生成を実質的に低減又は抑制することができる方法を開発した。
【０００８】
本発明者らは、トリアシルグリセリド油を補助剤で処理して、極性塩素化物質、例えば油精製中に塩素の活性源であり得る極性塩素化物質を捕捉する方法を開発した。次いで、捕捉された塩素化物質は、補助剤を油から結晶化し、又はその逆のいずれかで物理的に分離され得る。結晶化は、例えば、融解温度及び／又は極性に基づいて選択することができるある範囲の補助剤群から用いることによって補助され得る。
【０００９】
潜在的な塩素供与体は一度除去されると、油精製の加熱工程中におけるＭＣＰＤエステル及びＭＣＰＤジエステルなどの塩素化化合物の生成にはもはや用いられない。これにより、塩素化物質が低濃度である生成物油が得られ、かつ精製油を、ＭＣＰＤＥが低濃度であるか、又はＭＣＰＤＥを含まない精製油を生成するために、熱処理及び脱臭などの様々な精製方法に供することが可能となる。
【００１０】
補助捕捉剤の利用により、本発明は、特定の種類のトリアシルグリセリド油に限定されるものではないが、様々な油脂及び油、例えば、ヒマワリ油、コーン油、キャノーラ油、大豆油、ココナッツ油、パーム油、及びパーム核油などの様々な油脂及び油に広く適用可能である。油の組成及び物理化学的特性に応じて、ＭＣＰＤＥ前駆体の可溶化と、これに同時的な物理的分離（例えば、バルクから結晶化すること又は冷却して液体上清を残すことのいずれかなどの）プロセスとの両方を促進するより極性の高い補助脂質捕捉剤を使用することによって、塩素化前駆体の除去は、補助される。補助捕捉剤は、モノアシルグリセリド、ジアシルグリセリド、及び元の主要な油よりも極性が高い他の脂質可溶性物質などの単一成分又はそれらの成分のブレンドから選択してもよい。
【００１１】
本発明の方法の更なる利点は、油の脱臭で使用する温度をより低温とし得ることであり、これにより、トランス脂肪酸の形成が低減される（高温でのトランス脂肪形成は、Ｂａｌｅｙ’ｓ  ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  ｏｉｌ  ａｎｄ  ｆａｔ  ｐｒｏｄｕｃｔｓ；Ｓｉｘｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ；Ｖｏｌｕｍｅ  ５  Ｅｄｉｂｌｅ  Ｏｉｌ  ａｎｄ  Ｆａｔ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ：Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ；Ｃｈａｐｔｅｒ  ８  Ｄｅｏｄｏｒｉｚａｔｉｏｎ；ｓｅｃｔｉｏｎ  ３．Ｒｅｆｉｎｅｄ  ｏｉｌ  ｑｕａｌｉｔｙ，ｓｕｂｓｅｃｔｉｏｎ  ３．２Ｆａｔ  ｉｓｏｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ  ｐｒｏｄｕｃｔｓにて報告されている）。
【００１２】
したがって、一態様では、本発明は、トリアシルグリセリド油の精製方法であって、
（ａ）トリアシルグリセリド油を補助捕捉剤と混合する工程であって、トリアシルグリセリド油及び補助捕捉剤の融解温度が実質的に異なり、補助捕捉剤がトリアシルグリセリド油に可溶であり、補助捕捉剤がトリアシルグリセリド油よりも高極性である、工程と、
（ｂ）（ｉ）工程（ａ）の混合物を、補助捕捉剤の融解温度未満に冷却することによって、補助捕捉剤を結晶化する工程であって、補助捕捉剤が、トリアシルグリセリド油よりも高い融解温度を有する、工程、又は
（ｉｉ）工程（ａ）の混合物を、トリアシルグリセリド油の融解温度未満に冷却することによって、トリアシルグリセリド油を結晶化する工程であって、トリアシルグリセリド油が、補助捕捉剤よりも高い融解温度を有する、工程と、
（ｃ）工程（ｂ）の生成物の固相及び液相を分離する工程と、を含む、精製方法を提供する。
【００１３】
別の態様では、本発明は、トリアシルグリセリド油の精製方法であって、
（ａ）トリアシルグリセリド油を補助捕捉剤と混合する工程であって、補助捕捉剤がトリアシルグリセリド油よりも高い融解温度を有し、補助捕捉剤がトリアシルグリセリド油に可溶であり、補助捕捉剤がトリアシルグリセリド油よりも高極性である、工程と、
（ｂ）工程（ａ）の混合物を補助捕捉剤の融解温度未満に冷却することにより、補助捕捉剤を結晶化する工程と、
（ｃ）工程（ｂ）の生成物の固相及び液相を分離する工程と、を含む、精製方法を提供する。
【００１４】
一実施形態では、補助捕捉剤の融解温度は、トリアシルグリセリド油の融解温度よりも少なくとも１０℃高い。好ましい実施形態では、補助捕捉剤の融解温度は、トリアシルグリセリド油の融解温度よりも少なくとも２０℃高い。
【００１５】
別の態様では、本発明は、トリアシルグリセリド油の精製方法であって、
（ａ）トリアシルグリセリド油を補助捕捉剤と混合する工程であって、トリアシルグリセリド油が補助捕捉剤よりも高い融解温度を有し、補助捕捉剤がトリアシルグリセリド油に可溶であり、補助捕捉剤がトリアシルグリセリド油よりも高極性である、工程と、
（ｂ）工程（ａ）の混合物をトリアシルグリセリド油の融解温度未満に冷却することにより、トリアシルグリセリド油を結晶化する工程と、
（ｃ）工程（ｂ）の生成物の固相及び液相を分離する工程と、を含む、精製方法を提供する。
【００１６】
一実施形態では、トリアシルグリセリド油の融解温度は、補助捕捉剤の融解温度よりも少なくとも１０℃高い。好ましい実施形態では、トリアシルグリセリド油の融解温度は、補助捕捉剤の融解温度よりも少なくとも２０℃高い。
【００１７】
一実施形態では、モノクロロプロパンジオールエステル（ＭＣＰＤＥ）の塩素化前駆体の量は、出発トリアシルグリセリド油と比較して、精製されたトリアシルグリセリド油中では低減される。
【００１８】
一実施形態では、出発トリアシルグリセリド油は、粗トリアシルグリセリド油である。
【００１９】
一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、工程（ａ）の前に精製されていない。一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、工程（ａ）の前に脱ガムされていない。一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、工程（ａ）の前に脱色されていない。一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、工程（ａ）の前に分画されていない。
【００２０】
好ましい実施形態では、トリアシルグリセリド油は、工程（ａ）の前に脱臭されていない。
【００２１】
一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、工程（ａ）の前に予備洗浄に供される。一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、工程（ａ）の前に予備精製に供される。一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、工程（ａ）の前に分画される。一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、工程（ａ）の前に水素化される。一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、工程（ａ）の前にエステル交換される。
【００２２】
一実施形態では、補助捕捉剤とトリアシルグリセリド油との間におけるｌｏｇＰｏｃｔ／ｗａｔの差は、少なくとも１である。好ましい実施形態では、補助捕捉剤とトリアシルグリセリド油との間におけるｌｏｇＰｏｃｔ／ｗａｔの差は、少なくとも２である。
【００２３】
一実施形態では、補助捕捉剤はグリセリドを含む。したがって、補助捕捉剤はグリセリドを含有してもよく、他の化合物を含有してもよいが、補助捕捉剤は好ましくは主にグリセリドからなる。別の実施形態では、補助捕捉剤はグリセリドである。
【００２４】
一実施形態では、補助捕捉剤は、モノアシルグリセリド、ジアシルグリセリド及び遊離脂肪酸からなる群から選択される少なくとも１つの化合物を含む。別の実施形態では、補助捕捉剤は、モノアシルグリセリド、ジアシルグリセリド及び遊離脂肪酸からなる群から選択される１つ以上の化合物からなる。
【００２５】
一実施形態では、補助捕捉剤は、モノアシルグリセリド及び／又はジアシルグリセリドを含む。別の実施形態では、補助捕捉剤は、モノアシルグリセリド及び／又はジアシルグリセリドからなる。
【００２６】
一実施形態では、補助捕捉剤は、少なくとも６０重量％、７０重量％、８０重量％、９０重量％、９５重量％、９６重量％、９７重量％、９８重量％、９９重量％、又は１００重量％でモノアシルグリセリド及び／又はジアシルグリセリドを含む。
【００２７】
一実施形態では、補助捕捉剤は、２重量％未満でトリアシルグリセリドを含む。
【００２８】
好ましい実施形態では、補助捕捉剤は、トリアシルグリセリドを全く含まない。
【００２９】
一実施形態では、補助捕捉剤の脂肪酸鎖は、飽和又は一価不飽和である。好ましい実施形態では、補助捕捉剤の脂肪酸鎖は、全て飽和である。
【００３０】
一実施形態では、補助捕捉剤の脂肪酸鎖は、少なくとも１２の鎖長を有する。別の実施形態では、補助捕捉剤の脂肪酸鎖は、少なくとも１４の鎖長を有する。別の実施形態では、補助捕捉剤の脂肪酸鎖は、少なくとも１６の鎖長を有する。別の実施形態では、補助捕捉剤の脂肪酸鎖は、少なくとも１８の鎖長を有する。
【００３１】
一実施形態では、補助捕捉剤の脂肪酸鎖は、１２の鎖長を有する。別の実施形態では、補助捕捉剤の脂肪酸鎖は、１４の鎖長を有する。好ましい実施形態では、補助捕捉剤の脂肪酸鎖は、１６の鎖長を有する。別の好ましい実施形態では、補助捕捉剤の脂肪酸鎖は、１８の鎖長を有する。
【００３２】
一実施形態では、補助捕捉剤は、モノステアリン、モノパルミチン、ジステアリン、ジパルミチン、ステアリン酸及びパルミチン酸からなる群から選択される少なくとも１つの化合物を含む。別の実施形態では、補助捕捉剤は、モノステアリン、モノパルミチン、ジステアリン、ジパルミチン、ステアリン酸及びパルミチン酸からなる群から選択される１つ以上の化合物からなる。
【００３３】
一実施形態では、補助捕捉剤はモノステアリンを含む。別の実施形態では、補助捕捉剤はモノステアリンである。
【００３４】
一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、植物油、動物油、魚油又は藻類油である。
【００３５】
好ましい実施形態では、トリアシルグリセリド油は植物油であり、好ましくは植物油は、ヒマワリ油、コーン油、キャノーラ油、大豆油、ココナッツ油、パーム油、パーム核油、及びカカオバターからなる群から選択される。
【００３６】
一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、粗パーム油であり、捕捉剤はモノステアリンである。一実施形態では、トリアシルグリセリド油は粗キャノーラ種子油であり、捕捉剤はモノステアリンである。一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、水脱ガムした工業生成粗パーム油であり、捕捉剤はモノステアリンである。一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、水脱ガム及び酸脱ガムした工業生成粗パーム油であり、捕捉剤はモノステアリンである。一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、酸脱ガムした溶媒抽出粗パーム油であり、捕捉剤はモノステアリンである。一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、酸脱ガムした工業生成粗パーム油であり、捕捉剤はモノステアリンである。一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、工業生成粗パーム油由来の中和された油であり、捕捉剤はモノステアリンである。一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、溶媒抽出粗パーム油から作製された中和された油であり、捕捉剤はモノステアリンである。中和された油は、アルカリ精製／化学的に精製されたものと同様にアルカリ処理されている。
【００３７】
一実施形態では、工程（ａ）の混合は、トリアシルグリセリド油及び補助捕捉剤の融解温度よりも高い温度まで加熱する工程、及び／又は混合物を均質化する工程を含む。
【００３８】
一実施形態では、工程（ａ）の混合は、トリアシルグリセリド油及び補助捕捉剤を、トリアシルグリセリド油及び補助捕捉剤の融解温度超の温度で温置する工程、及び／又は混合物を均質化する工程を含む。
【００３９】
一実施形態では、工程（ｃ）の分離は、遠心分離、デカンテーション、及び／又は濾過を含む。好ましい実施形態では、工程（ｃ）の分離は、遠心分離を含む。
【００４０】
一実施形態では、トリアシルグリセリド油と混合される補助捕捉剤の量は、トリアシルグリセリド油の少なくとも２重量％、３重量％、４重量％、５重量％、６重量％、７重量％、８重量％、９重量％、又は１０重量％である。
【００４１】
一実施形態では、トリアシルグリセリド油のｐＨは、工程（ｂ）の前に調整される。工程（ｂ）の前にｐＨを調整して、ＭＣＰＤＥの塩素化前駆体の極性を増加させることができる。一実施形態では、トリアシルグリセリド油のｐＨは、約０．５〜２．０低下し、例えば約０．５、１．０、１．５又は２．０低下する。一実施形態では、トリアシルグリセリド油のｐＨは、約０．５〜２．０増加し、例えば約０．５、１．０、１．５又は２．０増加する。
【００４２】
一実施形態では、トリアシルグリセリド油のｐＨは、クエン酸又はリン酸の添加によって調整される。別の実施形態では、トリアシルグリセリド油のｐＨは、重炭酸ナトリウム又は水酸化ナトリウムなどの重炭酸塩又は水酸化物塩を添加することによって調整される。
【００４３】
一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、工程（ｂ）の前に前処理され、例えば、トリアシルグリセリド油は、工程（ｂ）の前に酸性化された水と混合される。同様のｐＨ処理工程は、一般的に、物理的精製によって実施される（例えば、”Ｄｅｇｕｍｍｉｎｇ  ｏｆ  ｏｉｌｓ  ａｎｄ  ｆａｔｓ”  ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｌｉｐｉｄ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ，Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｆｒａｎｋ  Ｄ．Ｇｕｎｓｔｏｎｅ，Ｊｏｈｎ  Ｌ．Ｈａｒｗｏｏｄ，Ａｌｂｅｒｔ  Ｊ．Ｄｉｊｋｓｔｒａ；Ｂａｌｅｙ’ｓ  ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  ｏｉｌ  ａｎｄ  ｆａｔ  ｐｒｏｄｕｃｔｓ；Ｓｉｘｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ；Ｖｏｌｕｍｅ  ５  Ｅｄｉｂｌｅ  Ｏｉｌ  ａｎｄ  Ｆａｔ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ：Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ；Ｃｈａｐｔｅｒ  １  Ａ  Ｐｒｉｍｅｒ  ｏｎ  Ｏｉｌｓ  Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；ｓｅｃｔｉｏｎ  ６．Ｄｅｇｕｍｍｉｎｇ，Ｌｅｃｉｔｈｉｎ  Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ，ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｆｉｎｉｎｇ  Ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔを参照されたい）。可溶化された酸の含有量を、工程（ｂ）の前に増加させ、例えば、ＭＣＰＤＥの塩素化前駆体のプロトン化形態を増加させ、かつ／又は極性を増加させることができる。一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、クエン酸又はリン酸の添加によって酸性化された水と混合される。例えば、７０％〜８５％のリン酸を含有する０．１重量％〜１重量％の酸性溶液を使用することができる。
【００４４】
別の実施形態では、トリアシルグリセリド油は、塩基（苛性ソーダ、ＮａＯＨなど）又はその水溶液と混合される。同様のｐＨ処理工程は、一般に、油の化学精製／中和により実施される（例えば、”Ａｌｋａｌｉ  ｒｅｆｉｎｉｎｇ  ｏｆ  ｏｉｌｓ  ａｎｄ  ｆａｔｓ”  ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｌｉｐｉｄ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ，Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｆｒａｎｋ  Ｄ．Ｇｕｎｓｔｏｎｅ，Ｊｏｈｎ  Ｌ．Ｈａｒｗｏｏｄ，Ａｌｂｅｒｔ  Ｊ．Ｄｉｊｋｓｔｒａ；Ｂａｌｅｙ’ｓ  ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  ｏｉｌ  ａｎｄ  ｆａｔ  ｐｒｏｄｕｃｔｓ；Ｓｉｘｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ；Ｖｏｌｕｍｅ  ５  Ｅｄｉｂｌｅ  Ｏｉｌ  ａｎｄ  Ｆａｔ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ：Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ；Ｃｈａｐｔｅｒ  １  Ａ  Ｐｒｉｍｅｒ  ｏｎ  Ｏｉｌｓ  Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；ｓｅｃｔｉｏｎ  ７．Ｃａｕｓｔｉｃ  Ｒｅｆｉｎｉｎｇを参照されたい）。可溶化された塩基含有量を、工程（ｂ）の前に増加させ、例えば、ＭＣＰＤＥの塩素化前駆体の、解離形態を増加させ、かつ／又は極性を増加させることができる。一実施形態では、トリアシルグリセリド油は、例えば重炭酸ナトリウム又は水酸化ナトリウムなどの重炭酸塩又は水酸化物塩含有する水と混合される。
【００４５】
別の実施形態では、トリアシルグリセリド油は、工程（ｂ）の前に、酸性水処理及び塩基性水処理（例えば、前述の酸性水処理及び塩基性水処理）の両方の組み合わせで前処理される。
【００４６】
一実施形態では、トリアシルグリセリド油の酸／塩基含有量は、高剪断混合下で調整される。
【００４７】
一実施形態では、本方法は、工程（ｃ）の後に以下の工程のうちの１つ以上を更に含む：
（ｄ）物理的又は化学的精製、脱ガム、中和、及び脱色からなる群から選択される１つ以上の工程、
（ｅ）所望により、工程（ｄ）の生成物を脱臭する工程であって、好ましくは、脱臭が真空蒸気脱臭である、工程、
（ｆ）所望により、工程（ｄ）又は（ｅ）の生成物を分画する工程。
【００４８】
別の態様では、本発明は、本発明の方法によって得られるトリアシルグリセリド油を提供する。
【００４９】
別の態様では、本発明は、トリアシルグリセリド油の精製のための補助捕捉剤の使用を提供する。ここで、トリアシルグリセリド油及び補助捕捉剤の融解温度は実質的に異なり、補助捕捉剤が、トリアシルグリセリド油に可溶であり、補助捕捉剤がトリアシルグリセリド油よりも高極性であり、精製が、補助捕捉剤又はトリアシルグリセリド油を結晶化することを含む。
【００５０】
別の態様では、本発明は、トリアシルグリセリド油の精製のための補助捕捉剤の使用を提供する。ここで、補助捕捉剤が、トリアシルグリセリド油よりも高い融解温度を有し、補助捕捉剤が、トリアシルグリセリド油に可溶であり、補助捕捉剤がトリアシルグリセリド油よりも高極性であり、精製が、補助捕捉剤又はトリアシルグリセリド油を結晶化することを含む。
【００５１】
別の態様では、本発明は、トリアシルグリセリド油の精製のための補助捕捉剤の使用を提供する。ここで、トリアシルグリセリド油が、補助捕捉剤よりも高い融解温度を有し、補助捕捉剤が、トリアシルグリセリド油に可溶であり、補助捕捉剤がトリアシルグリセリド油よりも高極性であり、かつ精製が、トリアシルグリセリド油を結晶化することを含む。
【００５２】
一実施形態では、精製により、出発トリアシルグリセリド油と比較して、精製されたトリアシルグリセリド油中のモノクロロプロパンジオールエステル（ＭＣＰＤＥ）の塩素化前駆体の量が低減する。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１】図１は、熱処理された粗ヒマワリ油の実施例のクロマトグラムである。
【図２】図２は、粗ヒマワリ油からの塩素化前駆体ｍ／ｚ  ７１８の除去（Ｆｏｏｄ  Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｔｓ  ｉｎ  Ｖｏｌ．２８，Ｎｏ．１１，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  ２０１１，１４９２−１５００で確認されたい）及び加熱油中で観察されたモノクロロプロパンジオールエステル（ＭＣＰＤＥ）濃度について除去の効果を示す。
【図３】図３は、粗パーム油からの塩素化前駆体ｍ／ｚ７０２．６１８０７；７１６．５９７２３；７１８．６１３５７；７３４．６０８０９；７７６．５８１２７１及び８０４．５７８１３の除去（Ｆｏｏｄ  Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｔｓ  ｉｎ  Ｖｏｌ．２８，Ｎｏ．１１，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  ２０１１，１４９２−１５００）を示す。
【図４】図４は、粗パーム油オレインからの塩素化前駆体ｍ／ｚ  ７１８の除去、及び加熱油中で観察されたモノクロロプロパンジオールエステル（ＭＣＰＤＥ）濃度について、除去の効果を示す。
【図５】図５は、モデル系添加ヒマワリ油からの塩素化前駆体（ｎは６）ｍ／ｚ ７１８の捕捉再現性を示す。
【図６】図６は、ガラスアンプル（ｎは１０）中の粗ヒマワリ油の加熱の再現性を示す。エラーバーは標準偏差を示す。
【図７】図７は、ｍ／ｚ  ７１８．６１１２４を有する塩素化前駆体が最も豊富である例示的な陰イオンモードＥＳＩ−ＭＳ質量スペクトルを示す。
【図８】図８は、モデルヒマワリ油で実施された捕捉実験について、液相中における４つの主要な塩素化前駆体を相対的存在量で示す。
【図９】図９は、添加ヒマワリ油のモデル系で実施された捕捉実験について、４つの主要な塩素化前駆体を液相及び固相間のバランスで示す。
【図１０】図１０は、前駆体を富化したモデルヒマワリ油中の、有機塩素捕捉の動態を示す。液相中に残存する有機塩素の存在量は、捕捉時間に応じてプロットされている。ピーク領域は、ｔ０（５％モノステアリンを既に含有しているが、遠心分離されておらず、むしろ分析のため即時に希釈された試料のもの）で観察されたピーク領域に対して正規化されている。
【図１１】図１１は、捕捉の概念も追加して、粗ヒマワリ油からの塩素化前駆体の除去を示す。（ｎは３）
【図１２】図１２は、加熱された粗ヒマワリ油中で観察されたＭＣＰＤＥを、有機塩素の除去前及び除去後について、示す。（ｎは３）
【図１３】図１３は、捕捉の概念も追加して、粗大豆油からの塩素化前駆体の除去を示す。（ｎは３）
【図１４】図１４は、加熱された粗大豆油中で観察されたＭＣＰＤＥを、有機塩素の除去前及び除去後について、示す。（ｎは３）
【図１５】図１５は、捕捉の概念も追加して、粗コーン油からの塩素化前駆体の除去を示す。（ｎは３）
【図１６】図１６は、加熱された粗トウモロコシ油中で観察されたＭＣＰＤＥを、有機塩素の除去前及び除去後について、示す。（ｎは３）
【図１７】図１７は、捕捉の概念も追加して、工業生成粗パーム油からの塩素化前駆体の除去を示す。
【図１８】図１８は、加熱された粗工業生成パーム油中で観察されたＭＣＰＤＥを、有機塩素の除去前及び除去後について、示す。
【図１９】図１９は、捕捉の概念も追加して、「冷圧プレスされた粗キャノーラ種子油」からの塩素化前駆体の除去を示す。
【図２０】図２０は、捕捉の概念も追加して、「水脱ガムした工業生成粗パーム油」からの塩素化前駆体の除去を示す。
【図２１】図２１は、加熱された「水脱ガムした工業生成粗パーム油」中で観察されたＭＣＰＤＥを、有機塩素を除去する前及び除去した後について、示す。
【図２２】図２２は、捕捉の概念も追加して、「水脱ガム及び酸脱ガムした工業生成粗パーム油」からの塩素化前駆体の除去を示す。
【図２３】図２３は、加熱された「水脱ガム及び酸脱ガムした工業生成粗パーム油」中で観察されたＭＣＰＤＥを、有機塩素の除去前及び除去後について、示す。
【図２４】図２４は、捕捉の概念も追加して、「酸脱ガムした溶媒抽出粗パーム油」からの塩素化前駆体の除去を示す。
【図２５】図２５は、加熱された「酸脱ガムした溶媒抽出粗パーム油」中で観察されたＭＣＰＤＥを、有機塩素の除去前及び除去後について、示す。
【図２６】図２６は、捕捉の概念も追加して、「酸脱ガムした工業生成粗パーム油」からの塩素化前駆体の除去を示す。
【図２７】図２７は、加熱された「酸脱ガムした工業生成粗パーム油」中で観察されたＭＣＰＤＥを、有機塩素の除去前及び除去後について、示す。
【図２８】図２８は、捕捉の概念も追加して、「中和された（アルカリ処理された）、工業生成粗パーム油」からの塩素化前駆体の除去を示す。
【図２９】図２９は、捕捉の概念も追加して、「中和された（アルカリ処理された）、溶媒抽出粗パーム油」からの塩素化前駆体の除去を示す。
【発明を実施するための形態】
【００５４】
本明細書で使用する場合、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、及び「から構成される（ｃｏｍｐｒｉｓｅｄ  ｏｆ）」は、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」又は「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」又は「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」又は「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｓ）」と同義であり、包括的、すなわちオープンエンドであり、かつ追加の、列挙されていない構成、要素、又は工程を除外しない。用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、及び「から構成される（ｃｏｍｐｒｉｓｅｄ  ｏｆ）」はまた、用語「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」を含む。
【００５５】
精製
一態様では、本発明は、トリアシルグリセリド油の精製方法であって、（ａ）トリアシルグリセリド油を補助捕捉剤と混合する工程であって、トリアシルグリセリド油及び補助捕捉剤の融解温度が実質的に異なり、補助捕捉剤がトリアシルグリセリド油に可溶であり、補助捕捉剤が当該トリアシルグリセリド油よりも高極性である、工程と、（ｂ）（ｉ）工程（ａ）の混合物を、補助捕捉剤の融解温度未満に冷却することによって、補助捕捉剤を結晶化する工程であって、補助捕捉剤が、トリアシルグリセリド油よりも高い融解温度を有する、工程、又は（ｉｉ）工程（ａ）の混合物を、トリアシルグリセリド油の融解温度未満に冷却することによって、トリアシルグリセリド油を結晶化する工程であって、トリアシルグリセリド油が、補助捕捉剤よりも高い融解温度を有する、工程と、（ｃ）工程（ｂ）の生成物の固相及び液相を分離する工程と、を含む、精製方法を提供する。
【００５６】
出発トリアシルグリセリド油（すなわち、本発明の方法の工程（ａ）に供される直前のトリアシルグリセリド油）からの、モノクロロプロパンジオールエステル（ＭＣＰＤＥ）の塩素化前駆体及び／又はＭＣＰＤＥ自体（例えば、３−モノクロロプロパン−１，２−ジオールエステル（３−ＭＣＰＤＥ）及び／又は３−ＭＣＰＤＥ自体）などの不純物を除去するのに、当該精製は、特に好適である。
【００５７】
３−ハロゲン−１，２−プロパンジオール、特に３−モノクロロ−１，２−プロパンジオール（３−ＭＣＰＤ）は、食品中の既知の不純物である（Ｆｏｏｄ  Ａｄｄｉｔ．Ｃｏｎｔａｍ．（２００６）２３：１２９０−１２９８）。例えば、種々の研究は、３−ＭＣＰＤは、これが高用量で投与された場合にラットにとって発癌性であり得ることを、示している（Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｅｒｔａｉｎ  Ｆｏｏｄ  Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｔｓ，Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｓａｔｉｏｎ，Ｇｅｎｅｖａ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ（１９９３）２６７−２８５；ｌｎｔ．Ｊ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．（１９９８）１７：４７）。しかしながら、精製された食用油は、３−ＭＣＰＤをその脂肪酸エステル形態で含有し得る一方で、非常に少量の遊離３−ＭＣＰＤのみを含有し得ることも発見された（Ｆｏｏｄ  Ａｄｄｉｔ．Ｃｏｎｔａｍ．（２００６）２３：１２９０−１２９８）。欧州食品安全機関（ＥＦＳＡ）は、毒性の観点から、３−ＭＣＰＤエステルを遊離３−ＭＣＰＤと同等に扱うことを推奨している（欧州食品安全機関（２００８））。
【００５８】
本発明の方法は、出発油（例えば粗油）から、例えば油精製中の塩素の活性源であり得る、極性塩素化物質を捕捉するために、補助剤で処理する出発トリアシルグリセリド油を対象とする。次いで、捕捉された塩素化物質は、補助剤を油から結晶化し、又はその逆のいずれかで物理的に分離され得る。結晶化は、例えば、融解温度及び／又は極性に基づいて選択することができるある範囲の補助剤群によって補助され得る。
【００５９】
脱ハロゲン化反応は、熱プロセス中に生じ得ることが周知である。例えば、高温（例えば、２７０℃まで）での植物性油の脱臭中に豊富である十分な活性化エネルギーが投入された際に、塩素は、塩化水素（ガス）として化学成分で残存することが示されている。本発明者らは、塩化水素は、トリアシルグリセリド油精製プロセスの出発物質、例えば植物材料中に元来存在する塩素含有化合物由来で、油精製中に発生し得ると考えている。
【００６０】
実際に、ＭＣＰＤ生成反応は指数関数的に増加し（１５０℃超）、短時間で完了することが示唆されている。
【００６１】
理論に束縛されるものではないが、機構的には、ＭＣＰＤジエステルは、ほとんどの植物性油中の全グリセリドの約８８％〜９５％で存在するトリアシルグリセリド（ＴＡＧ）の末端エステル基のプロトン化、すなわち、油精製中に発生した塩化水素との相互作用によるプロトン化を介して、油精製中に形成され得ることが示唆される。次いで、形成されたオキソニウムカチオンは、分子内再配置、続く塩化物イオンの求核置換を受け、遊離脂肪酸及びＭＣＰＤジエステルが放出され得る。
【００６２】
潜在的な塩素供与体は、本発明の方法の使用によって除去されると、油精製の加熱工程中に、ＭＣＰＤエステルなどの塩素化化合物の生成にはもはや用いられない。それにより、塩素化物質が低濃度である生成油が得られ、かつこの浄化された油は、ＭＣＰＤＥが低濃度であるか又はＭＣＰＤＥを含まない精製油を生成するために、熱処理及び脱臭などの様々な精製方法に供され得る。
【００６３】
したがって、一実施形態では、モノクロロプロパンジオールエステル（ＭＣＰＤＥ）の塩素化前駆体の量は、出発トリアシルグリセリド油のものと比較して精製されたトリアシルグリセリド油中で低減される。
【００６４】
別の実施形態では、モノクロロプロパンジオールエステル（ＭＣＰＤＥ）の塩素化前駆体の量は、出発トリアシルグリセリド油のものと比較して、精製されたトリアシルグリセリド油中で少なくとも４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％低減される。
【００６５】
本発明の方法を使用して製造される精製油は、例えば、１ｐｐｍ未満、０．５ｐｐｍ未満、又は好ましくは０．３ｐｐｍ未満のＭＣＰＤＥを含有し得る。
【００６６】
ＭＣＰＤＥ及びそれらの塩素化前駆体の量は、当該技術分野において周知のプロトコルを用いて容易に分析することができる。例えば、液体クロマトグラフィー／質量分析（ＬＣ／ＭＳ）に基づく手法は、本実施例に示されるように、ＭＣＰＤＥ及びそれらの塩素化前駆体の濃度を分析するのに好適である。ＭＣＰＤＥの塩素化前駆体の例としては、ｍ／ｚ７０２．６１８０７；７１６．５９７２３；７１８．６１３５７；７３４．６０８０９；７７６．５８１２７１及び８０４．５７８１３を有する既知の塩素化前駆体が挙げられる（Ｆｏｏｄ  Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｔｓ  ｉｎ  Ｖｏｌ．２８，Ｎｏ．１１，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  ２０１１，１４９２−１５００）。
【００６７】
一実施形態では、本発明の方法の工程（ａ）に投入されるトリアシルグリセリド油は、粗トリアシルグリセリド油である。
【００６８】
本明細書で使用するとき、用語「粗油」は、未精製油を指し得る。例えば、いくつかの実施形態では、本発明の方法の工程（ａ）に投入されるトリアシルグリセリド油は、精製、脱ガム、脱色及び／又は分画されていない。好ましい実施形態では、トリアシルグリセリド油は、工程（ａ）の前に脱臭されていない。
【００６９】
いくつかの実施形態では、トリアシルグリセリド油は、工程（ａ）の前に予備洗浄などの予備加工に供される。しかしながら、工程（ａ）の前にトリアシルグリセリド油に実施される任意のプロセスは、好ましくはトリアシルグリセリド油を、例えば１５０℃、２００℃又は２５０℃を超える温度まで加熱することを含まない。いくつかの実施形態では、トリアシルグリセリド油は、工程（ａ）の前に予備精製、分画、水素化、及び／又はエステル交換に供される。
【００７０】
トリアシルグリセリド油
本発明の方法を使用して精製され得る油は、トリアシルグリセリドを含み、当該油としては、植物油、動物油、魚油、藻類油、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【００７１】
好ましい実施形態では、トリアシルグリセリド油は植物油である。
【００７２】
例えば、植物油としては、ヒマワリ油、コーン油、キャノーラ油、大豆油、ココナッツ油、パーム油、パーム核油、及びカカオバターが挙げられる。
【００７３】
補助捕捉剤
モノクロロプロパンジオールエステル（ＭＣＰＤＥ）の塩素化前駆体及び／又はＭＣＰＤＥそれ自体の除去は、塩素化前駆体及び／又はＭＣＰＤＥの可溶化と、これと同時の物理的分離プロセス（例えば、バルクから晶出させること又は冷却して液体上清を残すことのいずれかによるもの）の両方を促進する、より極性の高い補助脂質捕捉剤を使用することによって補助される。
【００７４】
補助捕捉剤は、トリアシルグリセリド油の融解温度と実質的に異なる融解温度を有するように選択される。融解温度の差により、２つの混合物が、補助捕捉剤及びトリアシルグリセリド油の両方の最高融解温度超の温度（すなわち、補助捕捉剤及びトリアシルグリセリド油の両方が液体である温度）から冷却されるときに、補助捕捉剤又はトリアシルグリセリド油のいずれかの選択的な結晶化が促進される。
【００７５】
本明細書で使用するとき、用語「融解温度」は、固体が、固体から液体に１００ｋＰａの圧力で状態が変化する温度を指し得る。例えば、融解温度は、固体が、２℃／分で加熱したときに固体から液体に１００ｋＰａの圧力で状態が変化する温度であり得る。
【００７６】
当業者は、補助捕捉剤及びトリアシルグリセリド油の融解温度の決定及び比較のための好適な方法を容易に選択可能である。
【００７７】
例えば、溶融温度の分析のための装置は、加熱ブロック、又は透明窓（例えば、Ｔｈｉｅｌｅ管）及び拡大鏡を有する油浴からなり得る。固体の試料を薄いガラス管に入れ、これを加熱ブロック内に配置して、又は油浴中に浸漬して、その後徐々に加熱してもよい。固体の融解を観察し、関連する融解温度を記録することができる。
【００７８】
好ましくは、補助捕捉剤及びトリアシルグリセリド油の融解温度の決定には、同じ方法を用いる。
【００７９】
トリアシルグリセリド油及び／又は補助捕捉剤が２つ以上の成分からなるとき、
（ａ）当該方法は、工程（ｂ）における補助捕捉剤の結晶化を含む場合、補助捕捉剤は、補助捕捉剤の最低融解温度がトリアシルグリセリド油の最高融解温度よりも高いように選択されてもよく、
（ｂ）当該方法は、工程（ｂ）におけるトリアシルグリセリド油の結晶化を含む場合、補助捕捉剤は、補助捕捉剤の最高融解温度がトリアシルグリセリド油の最低融解温度より低いように選択され得る。
【００８０】
補助捕捉剤は、トリアシルグリセリド油に可溶であるように選択される（例えば、両方の成分のものがそれらの融解温度を上回っている際には、２つの混合によって実質的に単一の液相が生じる）。加えて、補助捕捉剤は、トリアシルグリセリド油よりも極性が高いように選択される。補助捕捉剤の極性が高いほど、塩素化物質（例えば、ＭＣＰＤＥの塩素化前駆体、及び／又はＭＣＰＤＥ）の捕捉を促進することができ、これにより、補助捕捉剤は、塩素化物質をより極性の低いトリアシルグリセリド油から分ける。
【００８１】
補助捕捉剤は、２つの不混和性相（例えば、オクタノール及び水）における薬剤の溶解度の尺度を提供する、その分配係数（Ｐ）に基づいて選択されてもよい。分配係数は、平衡時の２つの不混和相の混合物中の薬剤の濃度の比であり、例えば、以下のようである。
【００８２】
【数１】
2021516712.tif 000002
【００８３】
当業者は、経験に即して、又は当該技術分野において既知の理論的アプローチに基づいてのいずれかで、薬剤のｌｏｇＰ値を容易に決定することができる。
【００８４】
一実施形態では、補助捕捉剤とトリアシルグリセリド油との間のｌｏｇＰｏｃｔ／ｗａｔの差は、少なくとも１である。好ましい実施形態では、補助捕捉剤とトリアシルグリセリド油との間のｌｏｇＰｏｃｔ／ｗａｔの差は、少なくとも２である。
【００８５】
一実施形態では、補助捕捉剤は、−０．５を超えるｌｏｇＰｏｃｔ／ｗａｔを有する。別の実施形態では、補助捕捉剤は、１、２、３、４又は５を超えるｌｏｇＰｏｃｔ／ｗａｔを有する。好ましい実施形態では、補助捕捉剤は、５を超えるｌｏｇＰｏｃｔ／ｗａｔを有する。
【００８６】
好ましくは、補助捕捉剤は、食品等級の薬剤である。薬剤は、それがヒト又は動物の摂取用として承認されている場合には、食品等級と見なされ得る。
【００８７】
補助捕捉剤は、モノアシルグリセリド、ジアシルグリセリド、及び／又は元の主要な油よりも極性が高い他の脂質可溶性物質などの単一成分又はそれらの成分のブレンドであってもよい。
【００８８】
好ましくは、補助捕捉剤は、ヒドロキシル基及びアミド基から選択される少なくとも１つの官能基を含む。
【００８９】
例示的な補助捕捉剤としては、モノアシルグリセリド及びジアシルグリセリドなどのグリセリド、並びに遊離脂肪酸が挙げられる。例えば、補助捕捉剤は、モノステアリン、モノパルミチン、ジステアリン、ジパルミチン、ステアリン酸及びパルミチン酸からなる群から選択される少なくとも１つの化合物を含んでもよい。
【００９０】
補助捕捉剤がグリセリドを含む実施形態では、補助捕捉剤と本発明の方法によって分離される不純物化合物との混合物は、これがトリアシルグリセリド油から分離されると、加水分解され得る。加水分解により、補助捕捉剤のグリセリドから脂肪酸を遊離させることができ、次いで、脂肪酸は、更なる使用のために、放出されたグリセロール及び不純物化合物から分離され得る。
【００９１】
結晶化
本明細書で使用するとき、用語「結晶化」は、例えば、液体状態にある温度から冷却されるときの、補助捕捉剤又はトリアシルグリセリド油の固化を指し得る。
【００９２】
本発明の方法は、補助捕捉剤又はトリアシルグリセリド油が、２つの混合物から結晶化される選択的結晶化を利用する。補助捕捉剤又はトリアシルグリセリド油のうちの一方は、液体から固体へと状態が変化するが、他方の成分は液体状態で実質的に残存し、２つは、それらの異なる相に基づいて容易に分離され得る。例えば、固相及び液相は、遠心分離、デカンテーション及び／又は濾過を使用して分離され得る。補助捕捉剤の融解温度とトリアシルグリセリド油の融解温度との間の温度（すなわち、１つの成分が実質的に液体のままであり、他方の成分が実質的に固体のままである温度）で実施される場合に、分離は、最も効果的であり得る。周知の共結晶化及び／又は共晶効果は、主要なトリグリセリドがトリアシルグリセロールの複雑な混合物である場合、又は結晶化温度が十分に選択されない場合（例えば、冷えすぎる場合）に観察され得る。このような共結晶化効果は、開示される方法の有効性を低減し得るが、例えば、分画プロセスを介した、又は結晶化のための他の温度を使用した、トリグリセリド油の前処理によって抑制され得る。
【００９３】
更なる精製
本発明の方法によって塩素前駆体を激減させることにより、任意の後続の精製プロセス中の加熱では、ＭＣＰＤＥなどの望ましくない塩素化化合物の著しい生成が生じない。
【００９４】
一実施形態では、本方法は、工程（ｃ）の後に、物理的又は化学的精製、脱ガム、中和、及び脱色からなる群から選択される１つ以上のプロセスを更に含む。
【００９５】
一実施形態では、方法は、工程（ｃ）の後に脱臭を更に含み、好ましくは、脱臭は真空蒸気脱臭である。
【００９６】
一実施形態では、方法は、工程（ｃ）の後に分画を更に含む。
【００９７】
精製、脱ガム、脱色、脱臭及び分画を行うためのプロセスは、当該技術分野において周知である。
【００９８】
例として、植物性油などの植物油の精製は、典型的には、物理的精製又は化学的精製からなる。
【００９９】
持続可能性の向上を目的とした試みでは、油精製所において、植物油処理ラインが、エネルギー消費の最小化（エコノミザー）及び廃棄物の低減のために、過去数十年にわたって改修されている。しかしながら、これら２つの精製プロセスの工程は、本質的に変化していない。
【０１００】
物理的精製は、本質的に、化学的精製の短縮された形態であり、１９７３年にパーム油精製の好ましい方法として導入された。これは、入ってくる油を酸で前処理（脱ガム）し、吸着性脱色粘土を通過させて洗浄し、次いで水蒸気蒸留を行う３工程連続操作であり得る。このプロセスにより、後続の脱酸、脱臭、及びパーム油に固有のカロテノイド（すなわち、粗油は、他の植物性油とは異なり、色が濃い赤色である）の分解を可能にする。物理的精製における中和工程の欠如を考慮すると、物理的精製所から製造された精製脱色（ＲＢ）油は、粗油中に見出されるものとほぼ同じ遊離脂肪酸（ＦＦＡ）濃度を有する。
【０１０１】
化学精製所からの中和脱色（ＮＢ）油及びＲＢパーム油は、全ての他の態様における、予備脱臭されたものと同等である。
【０１０２】
熱脱色ユニットの操作は、油精製プロセスにおける損失の主な原因であり、濾過後の油量が２０〜４０％減少する。プロセスは、典型的には約３０〜４５分間持続し、典型的には、９５〜１１０℃の温度で２７〜３３ｍｂａｒの真空下で行われる。
【０１０３】
次いで、熱脱色された油は、脱臭塔に送られる前に、溶解ガス及び水分の除去を補助する脱気装置への配管に、経路を変更してもよい。
【０１０４】
脱色工程は、油を加熱すること、及び吸着性脱色粘土を通過させることによって油を洗浄することを含んでもよい。
【０１０５】
脱臭工程は、水蒸気蒸留を含んでもよい。
【０１０６】
当業者は、開示される本発明の範囲から逸脱することなく、本明細書に開示される本発明の全ての特徴を組み合わせることができることを理解されたい。
【０１０７】
本発明の好ましい特徴及び実施形態を、非限定的な例によってこれより記述する。
【０１０８】
本発明の実施は、特に指示がない限り、当業者の能力の範囲内である、化学、生化学、分子生物学、微生物学、及び免疫学の従来技術を使用する。かかる技術は文献で説明されている。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｊ．，Ｆｒｉｔｓｃｈ，Ｅ．Ｆ．ａｎｄ  Ｍａｎｉａｔｉｓ，Ｔ．（１９８９）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．（１９９５  ａｎｄ  ｐｅｒｉｏｄｉｃ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｃｈ．９，１３  ａｎｄ  １６，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ；Ｒｏｅ，Ｂ．，Ｃｒａｂｔｒｅｅ，Ｊ．ａｎｄ  Ｋａｈｎ，Ａ．（１９９６）ＤＮＡ  Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ：Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ；Ｐｏｌａｋ，Ｊ．Ｍ．ａｎｄ  ＭｃＧｅｅ，Ｊ．Ｏ’Ｄ．（１９９０）Ｉｎ  Ｓｉｔｕ  Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ；Ｇａｉｔ，Ｍ．Ｊ．（１９８４）Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ、並びに、Ｌｉｌｌｅｙ，Ｄ．Ｍ．ａｎｄ  Ｄａｈｌｂｅｒｇ，Ｊ．Ｅ．（１９９２）Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ：ＤＮＡ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  Ｐａｒｔ  Ａ：Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ＤＮＡ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓを参照されたい。これらの一般的なテキストの各々は、本明細書に参照により組み込まれる。
【実施例】
【０１０９】
実施例１
材料及び方法
粗パーム油の製造
凍結した１．８ｋｇの完全な無傷のパーム果物を室温で解凍した。小刀を使用して、種子を手作業で果実から取り出した。２Ｌの２−プロパノール及び２Ｌのｎ−ヘキサンを混合することにより、４Ｌの抽出溶液を調製した。果肉及び果皮を含む１．４ｋｇのパームパルプを混合して裏ごしし、市販の浸漬ブレンダーミキサー（Ｂａｍｉｘ  Ｇａｓｔｒｏ  ２００）を使用して２Ｌの抽出溶液と均質化した。得られたスラリーを混合し、ポリトロン（Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ  Ｐｏｌｙｔｒｏｎ  ＰＴ  １０  ３５  ＧＴ）を使用して、残りの２Ｌの抽出溶液で更に均質化した。得られたスラリー溶液を１Ｌポリプロピレン管（Ｓｏｒｖａｌｌ  １０００ｍＬ）に等分し、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｈｅｒａｅｕｓ  Ｃｒｙｏｆｕｇｅ  ８５００ｉ遠心分離器中で３０℃で４０００ｇで１５分間遠心分離した。有機相を濾紙（Ｗｈａｔｍａｎ  ５９５  １／２）を通して濾過し、混ぜ合わせた。次いで、有機溶媒を、６０℃でＢｕｃｈｉ  Ｒｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−３００システム（Ｂ−３００加熱浴、Ｉ−３００真空コントローラ、Ｖ−３００ポンプ、及び４℃で稼働するＰ−３１４再循環冷却機）を使用して、油から蒸発させた。試料の沸騰を避けるために１０ｍｂａｒに達するまで真空を段階的に調整した。
【０１１０】
粗パームオレインの製造
粗パーム油を室温で８時間放置した。次いで、固体相及び液相を、２３℃で１００００ｇで６０分間遠心分離によって分離した。得られた液相を粗パームオレインとして標識した。
【０１１１】
粗ヒマワリ種子油の製造
１．２ｋｇのヒマワリ種子を粉砕し、市販の浸漬ブレンダーミキサー（Ｂａｍｉｘ  Ｇａｓｔｒｏ  ２００）を使用して１．５Ｌの抽出溶液（２−プロパノール：ｎ−ヘキサン、１：１ｖ／ｖ）と均質化した。均質物を１．５Ｌの抽出溶液と更に混合し、ポリトロン（Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ  Ｐｏｌｙｔｒｏｎ  ＰＴ  １０  ３５  ＧＴ）を使用して更に均質化した。得られたスラリーを１Ｌポリプロピレン管（Ｓｏｒｖａｌｌ  １０００ｍＬ）に等分し、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｈｅｒａｅｕｓ  Ｃｒｙｏｆｕｇｅ  ８５００ｉ遠心分離器中で２２℃で４０００ｇで１５分間遠心分離した。有機相を濾紙（Ｗｈａｔｍａｎ  ５９５  １／２）を通して濾過し、混ぜ合わせた。次いで、有機溶媒を、６０℃でＢｕｃｈｉ  Ｒｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−３００システム（Ｂ−３００加熱浴、Ｉ−３００真空コントローラ、Ｖ−３００ポンプ、及び４℃で稼働するＰ−３１４再循環冷却機）を用いて、油から蒸発させた。試料の沸騰を避けるために１０ｍｂａｒに達するまで真空を段階的に調整した。
【０１１２】
補助捕捉剤
モノアシルグリセロールのモノステアリンベースの混合物
モノアシルグリセロールのモノステアリンベースの混合物は、Ｄｉｍｏｄａｎ（登録商標）ＨＳ  Ｋ−Ａから得た。これは、食用の完全水素添加大豆油から作製された蒸留モノグリセリドから構成される。
【０１１３】
モノアシルグリセロールのモノパルミチン／モノオレインベースの混合物
モノアシルグリセロールのモノパルミチン／モノオレインベースの混合物は、Ｄｉｍｏｄａｎ（登録商標）ＰＴ  Ｋ−Ａから入手した。これは、食用の精製パーム油から作製された蒸留モノグリセリドからなる。
【０１１４】
低減試験
補助捕捉剤としてのモノアシルグリセロールのモノステアリンベースの混合物による粗パーム油の処理
５重量％の市販のモノステアリン（Ｄａｎｉｓｃｏ製のＤｉｍｏｄａｎ  ＨＳ  Ｋ−Ａ）を粗油に添加した。混合物を８０℃に加熱して、完全に融解させた。次いで、試料を４０℃で７時間温置した。結晶化した固相及び液相を、４０℃で１００００ｇで２０分間遠心分離することによって分離し、約８５％の液相を得た。
【０１１５】
補助捕捉剤としてのモノアシルグリセロールのモノステアリンベースの混合物による粗パームオレインの処理
５重量％の市販のモノステアリンベースの混合物モノアシルグリセロール（Ｄａｎｉｓｃｏ製のＤｉｍｏｄａｎ  ＨＳ  Ｋ−Ａ）を粗油に添加した。混合物を８０℃に加熱して、完全に融解させた。次いで、試料を室温で７時間温置した。結晶化した固相及び液相を、室温で１００００ｇで２０分間遠心分離することによって分離し、約４０％の液相を得た。
【０１１６】
補助捕捉剤としてのモノアシルグリセロールのモノステアリンベースの混合物による粗ヒマワリ油の処理
５重量％の市販のモノアシルグリセロールのモノステアリンベースの混合物（Ｄａｎｉｓｃｏ製のＤｉｍｏｄａｎ  ＨＳ  Ｋ−Ａ）を粗油に添加した。混合物を８０℃に加熱して、完全に融解させた。次いで、試料を室温で７時間温置した。結晶化した固相及び液相を、室温で１００００ｇで２０分間遠心分離することによって分離し、約５０％の液相を得た。
【０１１７】
補助捕捉剤としてのモノアシルグリセロールのモノパルミチン／モノオレインベースの混合物による粗ヒマワリ油の処理
５重量％の市販のモノパルミチン／モノオレイン（Ｄａｎｉｓｃｏ製のＤｉｍｏｄａｎ  Ｐ−Ｔ  Ｋ−Ａ）を粗油に添加した。混合物を８０℃に加熱して、完全に融解させた。次いで、試料を室温で７時間温置した。結晶化した固相及び液相を、室温で１００００ｇで２０分間遠心分離することによって分離し、約５０％の液相を得た。
【０１１８】
試料のアンプル中での加熱処理
この粗油試料の熱処理を、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｈｅｒａｅｕｓオーブン（シリーズ６１００）において、２３０℃で２時間、窒素下で密閉したガラスアンプル中で実施した。窒素でフラッシングし、ブンゼンガスバーナーを使用してそれらを密封することにより、ガラス製のパスツール・ピペットからガラスアンプルを製造した。これらの条件は、食用油の脱臭中に使用される熱条件を再現するために選択された。
【０１１９】
液体クロマトグラフィー−質量分析
試料の準備
油及び国産の粗油を、注射前に段階的に希釈した。まず、各試料５０μＬをバイアル瓶に移し、９５０μＬのｎ−ヘキサン：アセトン（１：１ｖ／ｖ）の混合物を添加した。試料を５〜１０秒間ボルテックスした。第２の工程では、１００μＬの分割分量を９００μＬのアセトンと混合することによって、この溶液を更に希釈した。得られた溶液を５〜１０秒間ボルテックスした。最終希釈工程は、以下を混合することからなる：
第２希釈工程後に得られた１０μＬの溶液；
５μＬの０．２ｎｇ／μＬ内部標準溶液（１−オレイル２−リノレオイル３−クロロプロパンジオール２Ｈ５）；及び
８５μＬのアセトン：メタノール（１：１ｖ／ｖ）の混合物。
【０１２０】
ＬＣ条件
超高性能液体クロマトグラフィーを、シリカ系オクタデシル相（Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＨＳＳ  Ｃ１８、１．７μｍ；
２．１×１５０ｍｍ）を備えるＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ａｃｃｅｌａシステムを使用して実施した。適用された溶媒勾配を表１に要約する。
【０１２１】
【表１】
2021516712.tif 000003
【０１２２】
ＭＳ条件
モノクロロプロパンジオール（ＭＣＰＤ）エステル及びそれらの有機前駆体のモニタリングは、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｑ−Ｅｘａｃｔｉｖｅハイブリッド質量分析計を使用して実施した。このプラットフォームは、約７００００質量分解能で、作業質量精度が２ｐｐｍである分析を可能にした。ＭＣＰＤエステルの前駆体は、陰イオンモードのエレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ−）で検出され、一方、ＭＣＰＤエステルは、ＥＳＩ陽イオンモード（ＥＳＩ＋）でモニターされた。これらの条件下で、観察されたＭＣＰＤ前駆体イオンは［Ｍ−Ｈ］−であったが、モニターされたＭＣＰＤエステルイオンは［Ｍ＋ＮＨ４］＋付加体であった。データ解釈のために、ｍ／ｚシグナルを１０ｐｐｍのウインドウで抽出した。
【０１２３】
結果
粗ヒマワリ油
塩素化前駆体の除去による結晶化を、上述のように粗ヒマワリ油に適用した。補助捕捉剤は、モノステアリンであった。ｍ／ｚ  ７１８．６１３５７を有する既知の塩素化前駆体のシグナルを、上述のようにモニターした。全く処理なし（出発物質）で得られたピーク面積及び低減後で得られたピーク面積を図２に示す。
【０１２４】
粗パーム油
塩素化前駆体の除去による結晶化を、上述のように粗パーム油に適用した。補助捕捉剤は、モノステアリンであった。既知の塩素化前駆体のシグナルをｍ／ｚ７０２．６１８０７；７１６．５９７２３；７１８．６１３５７；７３４．６０８０９；７７６．５８１２７１及び８０４．５７８１３で上記のようにモニターした（Ｆｏｏｄ  Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｔｓ  ｉｎ  Ｖｏｌ．２８，Ｎｏ．１１，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  ２０１１，１４９２−１５００）。全く処理なし（出発物質）で得られたピーク面積及び低減後で得られたピーク面積を図３に示す。
【０１２５】
粗パーム油オレイン
塩素化前駆体の除去による結晶化を、上述のように粗パームオレインに適用した。補助捕捉剤は、モノステアリンであった。ｍ／ｚ  ７１８．６１３５７を有する既知の塩素化前駆体のシグナルを、上記のようにモニターした。全く処理なし（出発物質）で得られたピーク面積及び低減後で得られたピーク面積を図４に示す。
【０１２６】
考察
このデータは、粗ヒマワリ油、粗パーム油、及び粗パームオレインについての試験のそれぞれについての処理の非存在下で観察された濃度と比較して、低減後の塩素化前駆体及びモノクロロプロパンジオールエステル（ＭＣＰＤＥ）の両方の濃度の実質的な低減を示している。
【０１２７】
実施例２
化学物質
モノパルミチン（Ｍ−１５４−ＪＹ２０−Ｂ）は、Ｎｕ−Ｃｈｅｃｋ  Ｐｒｅｐ  Ｉｎｃ．，（Ｍｉｎｎｅｓｏｔａ，ＵＳＡ）から購入した。安定した同位体を、内部標準と標識し、ｒａｃ−１−オレオイル−２−リノレオイル−３−クロロプロパンジオール−ｄ５（ＣＡＳ番号ｎ．ａ．）をＣａｍｐｒｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（Ｂｅｒｌｉｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）から購入した。
【０１２８】
酢酸ナトリウム及びＬＣ−ＭＳの溶媒（水、メタノール、イソプロパノール、アセトン、ｎ−ヘキサン）は全て、ＬＣ−ＭＳグレードであり、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｂｕｃｈｓ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）から購入した。
【０１２９】
モノステアリンベースのＤｉｍｏｄａｎ（登録商標）ＨＳ  Ｋ−Ａを含む蒸留モノアシルグリセロール、モノパルミチン／オレイン／リノレインベースのＤｉｍｏｄａｎ（登録商標）Ｐ−Ｔ  Ｋ−Ａ及びモノオレインベースのＤｉｍｏｄａｎ（登録商標）ＭＯ９０／Ｄを含む蒸留モノアシルグリセロールは、Ｄａｎｉｓｃｏ  Ｃｕｌｔｏｒ（Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）ＡＧ（Ｋｒｅｕｚｌｉｎｇｅｎ）から入手した。
【０１３０】
使用される略語：Ｐ−パルミチン酸；Ｏ−オレイン酸；Ｌ−リノール酸。
【０１３１】
植物性油試料
粗パーム油の製造
凍結した１．８ｋｇの完全な無傷のパーム果物を室温で解凍した。小刀を使用して、種子を手作業で果実から取り出した。２Ｌの２−プロパノール及び２Ｌのｎ−ヘキサンを混合することにより、４Ｌの抽出溶液を調製した。果肉及び果皮を含む１．４ｋｇのパームパルプを混合して裏ごしし、市販の浸漬ブレンダーミキサー（Ｂａｍｉｘ  Ｇａｓｔｒｏ  ２００）を使用して２Ｌの抽出溶液と均質化した。得られたスラリーを混合し、ポリトロン（Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ  Ｐｏｌｙｔｒｏｎ  ＰＴ  １０  ３５  ＧＴ）を使用して、残りの２Ｌの抽出溶液で更に均質化した。得られたスラリー溶液を１Ｌポリプロピレン管（Ｓｏｒｖａｌｌ  １０００ｍＬ）に等分し、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｈｅｒａｅｕｓ  Ｃｒｙｏｆｕｇｅ  ８５００ｉ遠心分離器中で３０℃で４０００ｇで１５分間遠心分離した。有機相を濾紙（Ｗｈａｔｍａｎ  ５９５  １／２）を通して濾過し、混ぜ合わせた。次いで、有機溶媒を、６０℃でＢｕｃｈｉ  Ｒｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−３００システム（Ｂ−３００加熱浴、Ｉ−３００真空コントローラ、Ｖ−３００ポンプ、及び４℃で稼働するＰ−３１４再循環冷却機）を用いて、油から蒸発させた。試料の沸騰を避けるために１０ｍｂａｒに達するまで真空を段階的に調整した。
【０１３２】
粗ヒマワリ種子油の製造
１．２ｋｇのヒマワリ種子を粉砕し、市販の浸漬ブレンダーミキサー（Ｂａｍｉｘ  Ｇａｓｔｒｏ  ２００）を使用して１．５Ｌの抽出溶液（２−プロパノール：ｎ−ヘキサン、１：１ｖ／ｖ）と均質化した。均質物を１．５Ｌの抽出溶液と更に混合し、ポリトロン（Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ  Ｐｏｌｙｔｒｏｎ  ＰＴ  １０  ３５  ＧＴ）を使用して更に均質化した。得られたスラリーを１Ｌポリプロピレン管（Ｓｏｒｖａｌｌ  １０００ｍＬ）に等分し、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｈｅｒａｅｕｓ  Ｃｒｙｏｆｕｇｅ  ８５００ｉ遠心分離器中で２２℃で４０００ｇで１５分間遠心分離した。有機相を濾紙（Ｗｈａｔｍａｎ  ５９５  １／２）を通して濾過し、混ぜ合わせた。次いで、有機溶媒を、６０℃でＢｕｃｈｉ  Ｒｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−３００システム（Ｂ−３００加熱浴、Ｉ−３００真空コントローラ、Ｖ−３００ポンプ、及び４℃で稼働するＰ−３１４再循環冷却機）を用いて、油から蒸発させた。試料の沸騰を避けるために１０ｍｂａｒに達するまで真空を段階的に調整した。
【０１３３】
前駆体を富化したヒマワリモデル系
結晶化しない簡略化されたシステムにおける概念の研究を可能にするため、前駆体を富化した完全精製ヒマワリ油を使用した。この方法は、捕捉剤の効果に干渉しない。この目的のため、粗パーム油及び完全精製ヒマワリ油（スーパーマーケットで入手可能）を６０℃に加熱し、６：４ｖ／ｖの比で混合した。混合物を室温で２４時間結晶化させた。次いで、固体相及び液相を、２３℃で１５０００ｇで１５分間遠心分離によって分離した。得られた液相を「ヒマワリモデル系」と標識した。
【０１３４】
工業生成粗大豆油及び粗トウモロコシ油
工業的に生産された大豆粗油及びトウモロコシ粗油を、この研究の目的のために選択し、ＶＦＩ  ＧｍｂＨ（Ｗｅｌｓ，Ａｕｓｔｒｉａ）から購入した。大豆の方は「バイオ」変異体であり、トウモロコシの方は従来のトウモロコシ油であった。
【０１３５】
有機塩素を激減させるための低減試験
５重量％の捕捉剤を油に添加した。混合物を８０℃に加熱して、完全に融解させた。次いで、試料を激しく振盪し、室温で７時間温置した。この後者の期間中、高い融解温度の捕捉剤は結晶化され、固体相の形成を開始し、一方、大部分の油バルクは液体のままであった。これらの２つの相は、自然には分離しなかったが、ゲル状のバルクを形成した。結晶化した固体相及び液相を、１５０００ｇで１５分間遠心分離することによって分離した。
【０１３６】
モノステアリンを捕捉剤として使用することにより、添加ヒマワリ油のモデル系において実験の再現性を研究した。実験は、同じ出発物質を使用して、同時並行でに６回実施した。ｍ／ｚ７１８．６１３５７を有する塩素化前駆体のシグナルを、モノステアリンを含有する試料中でモニターしたが、相分離（捕捉前）無しのものと、結晶化した固体を遠心分離によって除去済の冷却試料におけるものとで、直ちに分析した。得られた絶対ピーク面積を図５に示す。
【０１３７】
試料の熱処理
この油試料の熱処理を、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｈｅｒａｅｕｓオーブン（シリーズ６１００）において、２３０℃で２時間、窒素下で密閉したガラスアンプル中で実施した。窒素でフラッシングし、ブンゼンガスバーナーを使用してそれらを密封することにより、ガラス製のパスツール・ピペットからガラスアンプルを製造した。これらの条件は、食用油の脱臭中に使用される熱条件を再現するために選択された。
【０１３８】
粗ヒマワリ油において、熱処理の再現性を研究した。実験は、同じ出発物質を使用して、同時並行に１０回実施した。ＯＯ（ジオレイル−）、ＯＬ（オレイル−リノレイル−）及びＬＬ（ジリノレニル−）ＭＣＰＤＥのシグナルを上述のようにモニターした。内部標準２Ｈ５−ＯＬ−ＭＣＰＤＥのシグナルに対して正規化された取得ピーク面積を図６に示す。
【０１３９】
ＬＣ−ＭＳ分析のための試料調製
試料を８０℃の水浴中で融解した後、１００μＬを９００μＬのアセトン／ｎ−ヘキサン１：１で希釈した。次いで、この溶液をアセトンで更に２０倍希釈し、次いで、５０ｎｇ／ｍＬで、内部標準（ｒａｃ−１−リノレオイル−２−ステアロイル−３−クロロプロパンジオール−ｄ５）を含有するメタノールで再度２倍に希釈した。この方法で、バイアル瓶中の最終試料濃度は２５０μｇ／ｍＬであった。
【０１４０】
ＬＣ条件
超高性能液体クロマトグラフィーを、シリカ系オクタデシル相（Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＨＳＳ  Ｃ１８、１．７μｍ；２．１×１５０ｍｍ）を備えるＤｉｏｎｅｘ  Ｕｌｔｉｍａ  ３０００システムを使用して実施した。適用された溶媒勾配を表２に要約する。
【０１４１】
【表２】
2021516712.tif 000004
【０１４２】
ＭＳ条件
ＭＣＰＤＥ及びそれらの有機前駆体のモニタリングは、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｌｕｍｏｓ及びＥｌｉｔｅハイブリッド質量分析計を使用して実施した。このプラットフォームは、約２４００００質量分解能で、作業質量精度が１ｐｐｍである分析を可能にした。ＭＣＰＤＥの前駆体は、陰イオンモードのエレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ−）で検出され、一方、ＭＣＰＤＥは、ＥＳＩ陽イオンモード（ＥＳＩ＋）でモニターされた。これらの条件下で、観察されたＭＣＰＤＥ前駆体イオンは［Ｍ−Ｈ］−であったが、モニターされたＭＣＰＤエステルイオンは［Ｍ＋Ｈ］＋，［Ｍ＋ＮＨ４］＋及び［Ｍ＋Ｎａ］＋付加体であった。データ解釈のために、ｍ／ｚシグナルを１０ｐｐｍのウインドウで抽出した。
【０１４３】
ｍ／ｚ７１８．６１１２４で観察された最も豊富な塩素化前駆体の質量スペクトルの例を、図７に示す。挿入図は、拡大された第２の同位体クラスタを示す。このクラスタでは、３７ＣＬ同位体を表す第１のピークは、塩素化物質の効率的なスクリーニングのためのマーカーとして、その負の質量欠損と共に使用することができる。
【０１４４】
結果及び説明
ヒマワリモデル系における概念実証
試験の第１段階では、塩素化前駆体捕捉の概念を単純なモデル系で試験した。ここで、市販の完全に精製されたヒマワリ油は、「前駆体を富化したヒマワリモデル系」の項に記載されているように、粗パーム油から生じるオルガノクロリンを添加したモデルマトリックスとして使用した。完全に精製されたヒマワリ油は、この油が利用しやすく、室温で液体であるため、出発モデルシステムとして選択した。前駆体の強い分析シグナルを確実にするために、パーム油に特に豊富であり、一般的に発生する有機塩素を、この油に添加することが決定された。これにより、概念の効果的な実証が可能になり、実際の工業油において更に最適化し得る効果の確認がより容易になる（以下の項を参照されたい）。
【０１４５】
捕捉は、１）ｍＰ、化学グレード、純モノパルミチン、２）ｍ−Ｐ／Ｏ／Ｌ：モノパルミチン／−オレイン／−リノレインに基づく工業グレード蒸留モノステアリン及び３）ｍＳｔ、工業グレード蒸留モノステアリンを用いて実施した。完全精製パームステアリン（ＲＢＤパームステアリン）を、陰性対照（モノアシルグリセロールを含まないが、高い融解温度）とした。ｍ／ｚ  ７００．６０２８０；７０２．６１８０７；、７１６．５９７２３及び７１８．６１３５７を有する、以前に報告された４つの主な塩素化前駆体のシグナルを上述のようにモニターした。出発物質試料（全く処理なし）中に得られたピーク面積及び捕捉実験の液相中に得られたピーク面積を図８に示す。
【０１４６】
結果は、固化したモノグリセロールが、４つの主な塩素化前駆体の約６０〜９５％を液相から除去することができることを示す。モノアシルグリセロールの完全な固化は、効率的な捕捉を達成するために必須であり、これは、除去プロセスで４０〜６０％低減のみを示す、より効率的でないモノパルミチン／オレイン／リノレイン混合物によって示される。モノオレインの融解温度は３５℃であり、モノノレインの融解温度は１２℃であるため、この後者は、非常に遅い及び／又は不完全な凝固プロセスによって説明される（Ｈｕｄｓｏｎ  １９９３）。ＲＢＤパームステアリンの例は、陰性対照として示される。後者の場合、捕捉剤は、モノグリセロールを実際に含まず、固相は主に固化したトリアシルグリセロールである。提示された捕捉の手法によると、ＲＢＤパームステアリンは、調査塩素化前駆体を効率的に除去しない（１０〜２０％）。
【０１４７】
相補的方法では、液相中の有機塩素の減少が同じ実験の固相に「回収され」得ることを確認するために、実験の固相も分析することが可能であった。捕捉は、１）化学グレード、純モノパルミチン、２）モノパルミチン／−オレイン／−リノレインに基づく工業グレード蒸留モノグリセロール混合物及び３）工業グレード蒸留モノステアリンを用いて実施した。精製されたパームステアリンは、陰性対照（モノアシルグリセロールを含まないが、高い融解温度）であった。対応する結果は、固体相と液相との間の有機塩素をバランスで示す図９に示される。これらの結果は、調査された有機塩素が、固化したモノグリセリド、例えば、モノステアリン及びモノパルミチン中で富化されているが、凝固したトリアシルグリセロールＲＢＤパームステアリン（陰性対照）中に全く濃縮されていないことを裏付けている。
【０１４８】
捕捉の時間経過実験
塩素化前駆体捕捉の動態を、捕捉剤の添加と液体油相からのその分離との間で経過した平衡時間を変化させることによって研究した。いずれの場合も、モノステアリンを８０℃で試料と均質化した後、室温で平衡化した。モノステアリンを捕捉剤として使用した。有機塩素の除去をＬＣ−ＭＳによりモニターした。出発物質試料（全く処理なし）中に得られたピーク面積及び捕捉実験の液相中に得られたピーク面積を図１０に示す。
【０１４９】
溶媒抽出粗ヒマワリ油の低減
塩素化前駆体捕捉の概念を、上述のように、粗ヒマワリ油に適用した。捕捉剤は、モノステアリンであった。実験は、同じ出発物質で３回実施した。ｍ／ｚ７０２．６１８０７；７１６．５９７２３；７１８．６１３６０及び７３４．６０８０９を有する塩素化前駆体のシグナルを上記のようにモニターした。全く処理なし（出発物質）に得られたピーク面積及び低減後に得られたピーク面積を図１１に示す。また、同じ試料を熱処理し、上述のようにＭＣＰＤＥ含有量について分析した。図１２に低減前後のＭＣＰＤＥの絶対ピーク面積を示すことによって、捕捉概念の有益な効果を示す。
【０１５０】
全４つの前駆体シグナルは、捕捉後に大幅に減少した。粗ヒマワリ油のｍ／ｚ  ７３４．６０８０９で最も高い低減効果が観察され、約９９％に達した。
【０１５１】
粗大豆油の低減
塩素化前駆体捕捉の概念を、上述のように、粗バイオグレード大豆油に適用した。捕捉剤は、モノステアリンであった。ｍ／ｚ７０２．６１８０７；７１６．５９７２３；７１８．６１３６０及び７３４．６０８０９を有する塩素化前駆体のシグナルを上記のようにモニターした。全く処理なし（出発参照物質）で得られたピーク面積及び低減後に得られたピーク面積を図１３に示す。
【０１５２】
また、同じ試料を熱処理し、上述のようにＭＣＰＤＥ含有量について分析した。図１４で低減前後のＭＣＰＤＥの絶対ピーク面積を描写することによって、捕捉概念の有益な効果を示す。
【０１５３】
粗トウモロコシ油の低減
塩素化前駆体捕捉の概念を、上述のように、粗トウモロコシ油に適用した。捕捉剤は、モノステアリンであった。ｍ／ｚ７０２．６１８０７；７１６．５９７２３；７１８．６１３６０及び７３４．６０８０９を有する塩素化前駆体のシグナルを上述のようにモニターした。全く処理なし（出発参照物質）で得られたピーク面積及び低減後に得られたピーク面積を図１５に示す。
【０１５４】
また、同じ試料を熱処理し、上記のようにＭＣＰＤＥ含有量について分析した。図１６に低減前後のＭＣＰＤＥの絶対ピーク面積を示すことによって、捕捉概念の有益な効果を示す。
【０１５５】
この実施例は、植物性油から特定の有機塩素を捕捉及び除去することを可能にする概念実証を示す。このプロセスでは、有機塩素は、捕捉剤中での溶解度がより良好であることにより、油バルクから分離される。この手法は、溶媒の使用を全く必要としない混合／分離プロセスに基づくため、規模の拡大化及び工業化の可能性を有する。この概念は、精製されたヒマワリ油の単純なモデル系上の様々な捕捉剤を用いて実証される。溶媒抽出粗ヒマワリ油、工業生成粗大豆及びトウモロコシ油について、適用の事例が示されている。
【０１５６】
これらの実験室規模の結果は、植物性油からの特定の有機塩素の早期の無溶媒除去が可能であり、これにより、最終的に形成された油のＭＣＰＤＥ含量に有益な効果がもたらされることを示唆している。実際の工業プロセスでは、ＭＣＰＤＥの形成は、油の種類、品質、及び生産履歴に応じて非常に多様な塩素源から生じ得るが、本明細書に記載される手法は、最終的に消費された完全精製植物性油におけるＭＣＰＤＥの形成を更に最小限にするための、方法への新たな追加の工程を提示することができる。
【０１５７】
実施例３
本実施例で提供される情報は、以下の実施例４〜１１に関連する。
【０１５８】
化学薬品
水はミリＱグレードであった。ＢｉｏＵｌｔｒａリン酸はＳｉｇｍａ  Ａｌｒｉｃｈ製（７９６１７−２５０ＭＬ）であった。水酸化ナトリウム（ペレット）はＭｅｒｃｋ製（１．０６４９８．１０００）であった。
【０１５９】
試料の分析
試料の準備
油試料を注入前に段階的に希釈した。
１）まず、各試料１００μＬをバイアル瓶に移し、９００μＬのｎ−ヘキサン：アセトン（１：１ｖ／ｖ）の混合物を添加した。試料を５〜１０秒間ボルテックスした。
２）第２の工程では、５０μＬのこの溶液を、９５０μＬのアセトンと混合することによって更に希釈した。得られた溶液を５〜１０秒間ボルテックスした。
３）この後者の溶液１００μＬを、９０μＬのメタノール及び１０μＬの内部標準混合溶液と混合した。（内部標準混合溶液は、２ｎｇ／μＬの濃度で、メタノールに溶解した以下の好適な同位体標識化合物を含んでいる：１−オレオイル２−リノレオイル３−クロロプロパンジオール−２Ｈ５（ＯＬ）、１−２−ジパルミトオイル３−クロロプロパンジオール−２Ｈ５（ＰＰ）、１−パルミトイル２−オレオイル３−クロロプロパンジオール−２Ｈ５（ＰＯ）、１−パルミトイル２−リノレオイル３−クロロプロパンジオール−２Ｈ５（ＰＬ）、１−２−ジリノレオイル３−クロロプロパンジオール−２Ｈ５（ＬＬ））、１−２−オレオイル３−クロロプロパンジオール−２Ｈ５（ＯＯ））。
【０１６０】
ＬＣ条件
超高性能液体クロマトグラフィーを、シリカ系オクタデシル相（Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＨＳＳ  Ｃ１８、１．７μｍ；２．１×１５０ｍｍ）を備えるＴｈｅｒｍｏ  ＵｌｔｉＭａｔｅ３０００システム又はＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  Ｈ−クラスシステムのいずれかを使用して実施した。適用された溶媒勾配を表３に要約する。
【０１６１】
【表３】
2021516712.tif 000005
【０１６２】
ＭＳ条件
モノクロロプロパンジオール（ＭＣＰＤ）エステル及びそれらの有機前駆体のモニタリングは、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ高分解質量分析計（Ｑ  Ｅｘａｃｔｉｖｅ  Ｈｙｂｒｉｄ  Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ−Ｏｒｂｉｔｒａｐ、Ｏｒｂｉｔｒａｐ  Ｆｕｓｉｏｎ（商標）Ｌｕｍｏｓ（商標）Ｔｒｉｂｒｉｄ（商標）及びＯｒｂｉｔｒａｐ  Ｅｌｉｔｅ  Ｈｙｂｒｉｄ）を使用して実施した。これらのプラットフォームは、約２ｐｐｍの作業質量精度での高選択質量分析を可能にした。ＭＣＰＤエステルの前駆体は、陰イオンモードのエレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ−）で検出され、一方、ＭＣＰＤエステルは、ＥＳＩ陽イオンモード（ＥＳＩ＋）でモニターされた。これらの条件下で、観察されたＭＣＰＤ前駆体イオンは［Ｍ−Ｈ］−であったが、モニターされたＭＣＰＤエステルイオンは［Ｍ＋ＮＨ４］＋及び［Ｍ＋Ｎａ］＋付加体であった。
【０１６３】
データの解説
前駆体の相対的定量化は、最初に、それぞれの物質のイオンクロマトグラムをそれぞれのｍ／ｚ値で１０ｐｐｍの質量ウィンドウで抽出し、次いで、得られたピーク面積を対応するクロマトグラフィー保持時間で積分することによって実施した。各前駆体分析のｍ／ｚ及びクロマトグラフィー保持時間値を表４に示す。
【０１６４】
実施例４〜１１の全ての実験について、対照試料で検出されたピーク領域を１００％とし、低減された試料中に見出された結果を、非低減対照試料と比較して相対％として表した。
【０１６５】
【表４】
2021516712.tif 000006
【０１６６】
ＭＣＰＤＥの相対的定量化は、最初に、［Ｍ＋ＮＨ４］＋及び［Ｍ＋Ｎａ］＋付加体のイオンクロマトグラムをそれぞれのｍ／ｚ値で１０ｐｐｍの質量ウィンドウで抽出し、次いで、得られたピーク面積を対応するクロマトグラフィー保持時間で積分することによって実施した。モニターされたＭＣＰＤＥの略語は以下の通りである：ＰＰ：ジパルミトイルＭＣＰＤエステル；ＰＯ：パルミトイル−オレイルＭＣＰＤエステル；ＯＯ：ジオレイルＭＣＰＤエステル；ＯＬ：オレイル−リノレイルＭＣＰＤエステル；ＬＬ：ジリノイルＭＣＰＤエステル；ＰＬ：パルミトイル−リノレイルＭＰＣＤエステル。
【０１６７】
実施例４〜１１の全ての実験について、対照試料で検出された最も豊富なＭＰＣＤＥのピーク領域を１００％とし、低減された試料中に見出された結果を、非低減対照試料と比較して相対％として表した。
【０１６８】
実施例４
工業生成粗パーム油
工業的に生成した粗パーム油をＮｕｔｒｉｓｗｉｓｓ（Ｌｙｓｓ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）から購入した。最初に粗油を８０℃で加熱し、次いで、４０℃で１５’０００ｇで１５分間遠心分離した。上位９０体積％の液相を沈殿物から直ちに分離し、更に、低減試験に使用した。
【０１６９】
１０重量％の市販のモノステアリン（Ｄａｎｉｓｃｏ製のＤｉｍｏｄａｎ  ＨＳ  Ｋ−Ａ）を油に添加することによって低減を実施した。混合物を８０℃に加熱して、完全に融解させた。次いで、試料を４０℃で１６時間温置した。結晶化した固体相及び液相を、４０℃で１０’０００ｇで２０分間遠心分離することによって分離した。得られた試料を、実施例３で上述したように、それらの前駆体含有量について、ＬＣ−ＭＳにより分析した。前駆体濃度に対する低減の効果を図１７に示す。
【０１７０】
また、ＭＣＰＤＥの形成をシミュレートするために、同じ試料をアンプル内で熱処理し、それに応じてＭＣＰＤＥ含有量についてＬＣ−ＭＳにより分析した。得られたＭＣＰＤＥ濃度に対する低減の効果を図１８に示す。
【０１７１】
実施例５
冷圧プレスされた粗キャノーラ種子油
冷圧プレスされた粗キャノーラ油の製造：７．９ｋｇのキャノーラ種子を、家庭用電気油プレス（ＯＰ  ７００，Ｒｏｍｍｅｌｓｂａｃｈｅｒ（Ｇｅｒｍａｎｙ））を使用して圧搾し、約２．４ｋｇの圧搾した油及び約５．５ｋｇの乾物を得た。次いで、圧搾した油を、オーブン内で６０℃で濾紙（Ｗｈａｔｍａｎ  ５９５  １／２）を通して濾過した。
【０１７２】
５重量％又は１０重量％の市販のモノステアリン（Ｄａｎｉｓｃｏ製のＤｉｍｏｄａｎ  ＨＳ  Ｋ−Ａ）を粗キャノーラ油に添加することによって、捕捉剤としてモノステアリンで低減試験を実施した。混合物を８０℃に加熱して、完全に融解させた。次いで、試料を室温で１６時間温置した。結晶化した固体相及び液相を、２３℃で１０’０００ｇで２０分間遠心分離することによって分離した。得られた試料を、実施例３で上述したように、それらの前駆体含有量について、ＬＣ−ＭＳにより分析した。前駆体濃度に対する低減の効果を図１９に示す。
【０１７３】
実施例６
水脱ガムした工業生成粗パーム油
工業生成粗パーム油は、Ｎｕｔｒｉｓｗｉｓｓ（Ｌｙｓｓ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）から購入した。
【０１７４】
粗油を最初に８０℃で加熱し、次いで、粗油を７０℃に維持しながら高剪断ミキサー（Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ  Ｌ５Ｍ−Ａ）で１０００ｒｐｍで２５分間剪断し、３％の加熱したミリＱ水（ｖ／ｖ）を添加した。次いで、油を４０℃で１５’０００ｇで１５分間遠心分離した。上部の油相を取り出し、更なる低減試験に使用した。
【０１７５】
１０重量％の市販のモノステアリン（Ｄａｎｉｓｃｏ製のＤｉｍｏｄａｎ  ＨＳ  Ｋ−Ａ）を油に添加することによって低減を実施した。混合物を８０℃に加熱して、完全に融解させた。次いで、試料を４０℃で１６時間温置した。結晶化した固体相及び液相を、４０℃で１０’０００ｇで２０分間遠心分離することによって分離した。得られた試料を、実施例３で上述したように、それらの前駆体含有量について、ＬＣ−ＭＳにより分析した。前駆体濃度に対する低減の効果を図２０に示す。
【０１７６】
また、ＭＣＰＤＥの形成をシミュレートするために、同じ試料をアンプル内で熱処理し、それに応じてＭＣＰＤＥ含有量についてＬＣ−ＭＳにより分析した。得られたＭＣＰＤＥ濃度に対する低減の効果を図２１に示す。
【０１７７】
実施例７
水脱ガム及び酸脱ガムした工業生成粗パーム油
工業生成粗パーム油は、Ｎｕｔｒｉｓｗｉｓｓ（Ｌｙｓｓ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）から購入した。最初に粗油を８０℃で加熱し、次いで４０℃で１５’０００ｇで１５分間遠心分離した。上位９０体積％の液相を沈殿物から直ちに分離し、更に、脱ガムに使用した。
【０１７８】
粗油を最初に８０℃で加熱し、次いで、粗油を７０℃に維持しながら高剪断ミキサー（Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ  Ｌ５Ｍ−Ａ）で１０００ｒｐｍで２５分間剪断し、３％の加熱したミリＱ水（ｖ／ｖ）を添加した。次いで、油を４０℃で１５’０００ｇで１５分間遠心分離した。上部の油相を取り出し、その後の酸脱ガムに使用した。
【０１７９】
水脱ガムした油を８０℃に加熱した。次いで、０．０２％のリン酸８５％（ｖ／ｖ）を添加し、粗油を８５℃に維持しながら混合物を剪断ミキサー（Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ  Ｌ５Ｍ−Ａ）で１０００ｒｐｍで１０分間剪断した。次いで、混合物を３５℃まで冷却し、１％ミリＱ水（ｖ／ｖ）を添加した。最後に、粗油を３５℃に維持しながら、混合物を１０００ｒｐｍで１５分間剪断した。得られた脱ガムした油を、４０℃で１５’０００ｇで１５分間遠心分離した。上部の液相を、低減試験に使用した。
【０１８０】
１０重量％の市販のモノステアリン（Ｄａｎｉｓｃｏ製のＤｉｍｏｄａｎ  ＨＳ  Ｋ−Ａ）を油に添加することによって低減を実施した。混合物を８０℃に加熱して、完全に融解させた。次いで、試料を４０℃で１６時間温置した。結晶化した固体相及び液相を、４０℃で１０’０００ｇで２０分間遠心分離することによって分離した。得られた試料を、実施例３で上述したように、それらの前駆体含有量について、ＬＣ−ＭＳにより分析した。前駆体濃度に対する低減の効果を図２２に示す。
【０１８１】
また、ＭＣＰＤＥの形成をシミュレートするために、同じ試料をアンプル内で熱処理し、それに応じてＭＣＰＤＥ含有量についてＬＣ−ＭＳにより分析した。得られたＭＣＰＤＥ濃度に対する低減の効果を図２３に示す。
【０１８２】
実施例８
酸脱ガムした溶媒抽出粗パーム油
溶媒抽出粗パーム油の製造は、実施例３で上述したように実施した。最初に粗油を８０℃で加熱し、次いで４０℃で１５’０００ｇで１５分間遠心分離した。上部９０体積％の液相を沈殿物から直ちに分離し、更に、脱ガムに使用した。
【０１８３】
この油の脱ガムは、まずこの油を８０℃に加熱し、０．０２％のリン酸８５％（ｖ／ｖ）を添加することによって実施した。次いで、粗油を８５℃に維持しながら、剪断ミキサー（Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ  Ｌ５Ｍ−Ａ）を使用してこの混合物を１０００ｒｐｍで１０分間剪断した。次いで、混合物を３５℃まで冷却し、１％ミリＱ水（ｖ／ｖ）を添加した。最後に、粗油を３５℃に維持しながら、混合物を１０００ｒｐｍで１５分間剪断した。得られた脱ガムした油を、４０℃で１５’０００ｇで１５分間遠心分離した。上部の液相を、低減試験に使用した。
【０１８４】
１０重量％の市販のモノステアリン（Ｄａｎｉｓｃｏ製のＤｉｍｏｄａｎ  ＨＳ  Ｋ−Ａ）を油に添加することによって低減を実施した。混合物を８０℃に加熱して、完全に融解させた。次いで、試料を４０℃で１６時間温置した。結晶化した固体相及び液相を、４０℃で１０’０００ｇで２０分間遠心分離することによって分離した。得られた試料を、実施例３で上述したように、それらの前駆体含有量について、ＬＣ−ＭＳにより分析した。前駆体濃度に対する低減の効果を図２４に示す。
【０１８５】
また、ＭＣＰＤＥの形成をシミュレートするために、同じ試料をアンプル内で熱処理し、それに応じてＭＣＰＤＥ含有量についてＬＣ−ＭＳにより分析した。得られたＭＣＰＤＥ濃度に対する低減の効果を図２５に示す。
【０１８６】
実施例９
酸脱ガムした工業生成粗パーム油
工業生成粗パーム油は、Ｎｕｔｒｉｓｗｉｓｓ（Ｌｙｓｓ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）から購入した。最初に粗油を８０℃で加熱し、次いで４０℃で１５’０００ｇで１５分間遠心分離した。上部９０体積％の液相を沈殿物から直ちに分離し、更に、脱ガムに使用した。
【０１８７】
この油の脱ガムは、まずこの油を８０℃に加熱し、０．０２％のリン酸８５％（ｖ／ｖ）を添加することによって実施した。次いで、粗油を８５℃に維持しながら、剪断ミキサー（Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ  Ｌ５Ｍ−Ａ）を使用してこの混合物を１０００ｒｐｍで１０分間剪断した。次いで、混合物を３５℃まで冷却し、１％ミリＱ水（ｖ／ｖ）を添加した。最後に、粗油を３５℃に維持しながら、混合物を１０００ｒｐｍで１５分間剪断した。得られた脱ガムした油を、４０℃で１５’０００ｇで１５分間遠心分離した。上部の液相を、低減試験に使用した。
【０１８８】
１０重量％の市販のモノステアリン（Ｄａｎｉｓｃｏ製のＤｉｍｏｄａｎ  ＨＳ  Ｋ−Ａ）を油に添加することによって低減を実施した。混合物を８０℃に加熱して、完全に融解させた。次いで、試料を４０℃で１６時間温置した。結晶化した固体相及び液相を、４０℃で１０’０００ｇで２０分間遠心分離することによって分離した。得られた試料を、実施例３で上述したように、それらの前駆体含有量について、ＬＣ−ＭＳにより分析した。前駆体濃度に対する低減の効果を図２６に示す。
【０１８９】
また、ＭＣＰＤＥの形成をシミュレートするために、同じ試料をアンプル内で熱処理し、それに応じてＭＣＰＤＥ含有量についてＬＣ−ＭＳにより分析した。得られたＭＣＰＤＥ濃度に対する低減の効果を図２７に示す。
【０１９０】
実施例１０
工業生成粗パーム油から製造された中和（アルカリ精製／化学的精製におけるアルカリ処理）油
工業生成粗パーム油は、Ｎｕｔｒｉｓｗｉｓｓ（Ｌｙｓｓ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）から購入した。
【０１９１】
粗パーム油を最初に８０℃に加熱し、次いで４０℃で１５’０００ｇで１５分間遠心分離した。粗パーム油を、粗油を８５℃に維持しながら、高剪断ミキサー（Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ  Ｌ５Ｍ−Ａ）で１０００ｒｐｍで１０分間剪断混合した。次いで、０．０２％のリン酸８５％（ｖ／ｖ）を粗パーム油に添加し、８５℃で温度を維持しながら、得られた混合物を１０００ｒｐｍで１５分間剪断した。次いで、５％のＮａＯＨを２Ｍ（ｖ／ｖ）添加し、７５℃で温度を維持しながら、混合物を１０００ｒｐｍで１５秒間更に剪断した。次いで、混合物を４０℃で１５’０００ｇで１５分間遠心分離した。上部の相を取り出し、７５℃の予熱した１０％のミリＱ水（ｖ／ｖ）と混合し、７５℃の温度を維持しながら１０００ｒｐｍで２分間再び剪断混合した。得られた混合物を４０℃で１５’０００ｇで１５分間遠心分離し、上部の液相（中和油）を、低減試験に使用した。
【０１９２】
１０重量％の市販のモノステアリン（Ｄａｎｉｓｃｏ製のＤｉｍｏｄａｎ  ＨＳ  Ｋ−Ａ）を油に添加することによって低減を実施した。混合物を８０℃に加熱して、完全に融解させた。次いで、試料を４０℃で１６時間温置した。結晶化した固体相及び液相を、４０℃で１０’０００ｇで２０分間遠心分離することによって分離した。得られた試料を、実施例３で上述したように、それらの前駆体含有量について、ＬＣ−ＭＳにより分析した。前駆体濃度に対する低減の効果を図２８に示す。
【０１９３】
実施例１１
溶媒抽出粗パーム油から製造された中和（アルカリ精製／化学的精製におけるアルカリ処理）油
溶媒抽出粗パーム油の製造は、実施例３で上述したように実施した。
【０１９４】
粗パーム油を最初に８０℃に加熱し、次いで４０℃で１５’０００ｇで１５分間遠心分離した。粗パーム油を、粗油を８５℃に維持しながら、高剪断ミキサー（Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ  Ｌ５Ｍ−Ａ）で１０００ｒｐｍで１０分間剪断混合した。次いで、０．０２％のリン酸８５％（ｖ／ｖ）を粗パーム油に添加し、８５℃で温度を維持しながら、得られた混合物を１０００ｒｐｍで１５分間剪断した。次いで、５％のＮａＯＨを２Ｍ（ｖ／ｖ）添加し、７５℃で温度を維持しながら、混合物を１０００ｒｐｍで１５秒間更に剪断した。次いで、混合物を４０℃で１５’０００ｇで１５分間遠心分離した。上部の相を取り除き、７５℃の予熱した１０％のミリＱ水（ｖ／ｖ）と混合し、７５℃の温度を維持しながら１０００ｒｐｍで２分間再び剪断混合した。得られた混合物を４０℃で１５’０００ｇで１５分間遠心分離し、上部の液相（中和油）を、低減試験に使用した。
【０１９５】
１０重量％の市販のモノステアリン（Ｄａｎｉｓｃｏ製のＤｉｍｏｄａｎ  ＨＳ  Ｋ−Ａ）を油に添加することによって低減を実施した。混合物を８０℃に加熱して、完全に融解させた。次いで、試料を４０℃で１６時間温置した。結晶化した固体相及び液相を、４０℃で１０’０００ｇで２０分間遠心分離することによって分離した。得られた試料を、実施例３で上述したように、それらの前駆体含有量について、ＬＣ−ＭＳにより分析した。前駆体濃度に対する低減の効果を図２９に示す。
【０１９６】
参照文献
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【０１９７】
本明細書で言及される全ての刊行物は、参照により本明細書に組み込まれる。本発明に開示する方法、使用及び生成物の様々な修正及び変更は、本発明の範囲及び主旨から逸脱することなく、当業者には明白である。本発明は、特定の好ましい実施形態に関連して開示されているが、特許請求される本発明は、このような特定の実施形態に過度に限定されるべきではないことを理解されたい。実際、当業者には自明であり、本発明を実施するために開示された様式の種々の改変は以下の特許請求の範囲の範囲内であることを意図している。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【国際調査報告】
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