(57)【要約】  本開示内容は、必要とする対象において網膜病症（例えば、糖尿病性網膜病症）及び／又は黄斑病症（例えば、加齢黄斑変性）を治療するためのＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する拮抗剤（例えば、抗体又はその抗原結合部分）の薬剤学的用途に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列類似性１９を持つファミリー、メンバーＡ５（“ＦＡＭ１９Ａ５”）タンパク質に対する拮抗剤（“ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤”）であって、必要とする対象の網膜において基準（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤投与前の対象又はＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤を非投与した対象の該当値）に比べて網膜電位を改善させるためのＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２】
前記網膜電位の改善がＡ波、Ｂ波、律動様小波又はこれらの任意の組合せの増加を含む用途の請求項１に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３】
前記対象が網膜で網膜電位減少と関連した疾患又は症状を有する用途の請求項１又は２に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４】
前記疾患又は症状が糖尿病性網膜病症である用途の請求項３に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項５】
前記疾患又は症状が網膜の加齢黄斑変性である用途の請求項３に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項６】
必要とする対象において網膜病症及び／又は黄斑症を治療するための配列類似性１９を持つファミリー、メンバーＡ５（“ＦＡＭ１９Ａ５”）タンパク質に対する拮抗剤（“ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤”）。
【請求項７】
前記網膜病症が糖尿病性網膜病症である用途の請求項６に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項８】
前記糖尿病性網膜病症が非増殖性糖尿病性網膜病症（ＮＰＤＲ）である用途の請求項７に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項９】
前記糖尿病性網膜病症が増殖性糖尿病性網膜病症である用途の請求項７に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１０】
前記糖尿病性網膜病症が対象の網膜内で網膜電位減少、血管周囲細胞損失、無細胞性毛細血管形成、血管鬱血又はこれらの任意の組合せと関連する用途の請求項４及び請求項７〜９のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１１】
前記黄斑病症が糖尿病性黄斑浮腫である用途の請求項６に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１２】
前記糖尿病性黄斑浮腫が対象の網膜内で網膜電位減少、血管周囲細胞損失、無細胞性毛細血管形成、血管鬱血又はこれらの任意の組合せと関連がある用途の請求項１１に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１３】
前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が基準（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤投与前の対象又はＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤を非投与した対象の該当値）に比べて対象の網膜電位を改善させる用途の請求項６〜１２のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１４】
前記網膜電位の改善がＡ波、Ｂ波、律動様小波又はこれらの任意の組合せの増加を含む用途の請求項１３に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１５】
前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が対象の網膜内血管周囲細胞の損失を減少させる用途の請求項１１〜１４のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１６】
前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が対象の網膜内無細胞性毛細血管形成を減少及び／又は阻害する用途の請求項１１〜１５のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１７】
前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が対象の網膜神経線維層内で血管鬱血を減少及び／又は阻害する用途の請求項１１〜１６のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１８】
必要とする対象において黄斑変性を治療するための配列類似性１９を持つファミリー、メンバーＡ５（“ＦＡＭ１９Ａ５”）タンパク質に対する拮抗剤（“ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤”）。
【請求項１９】
前記黄斑変性が加齢黄斑変性である用途の請求項１８に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２０】
前記加齢黄斑変性が乾性（萎縮性）黄斑変性である用途の請求項１９に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２１】
前記加齢黄斑変性が湿性（新生血管又は滲出性）黄斑変性である用途の請求項１９に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２２】
前記加齢黄斑変性が（ｉ）初期ＡＭＤ、（ｉｉ）中間ＡＭＤ、又は（ｉｉｉ）後期又は進行性ＡＭＤ（地図状萎縮）である用途の請求項１９〜２１のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２３】
前記加齢黄斑変性が対象の網膜内ドルーゼンの蓄積又は凝集、血管新生、網膜電位減少、星状細胞形成又はこれらの任意の組合せと関連がある用途の請求項１９〜２２のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２４】
前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が、ＣＤ３１減少及び／又はＶＥＧＦ発現によって立証されたように、対象の網膜内で血管新生を減少及び／又は阻害する用途の請求項２３に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２５】
前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が、ＣＤ３１減少及び／又はＶＥＧＦ発現によって立証されたように、レーザー誘導脈絡膜血管新生があるマウスの網膜内で血管新生を減少及び／又は阻害可能な用途の請求項２４に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２６】
前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が基準（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤投与前の対象又はＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤を非投与した対象の該当値）に比べて対象の網膜神経線維層及び神経節細胞層内で血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）の発現を減少させる用途の請求項２３〜２５のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２７】
前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が基準（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤投与前の対象又はＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤を非投与した対象の該当値）に比べて対象の網膜電位を改善させる用途の請求項２３〜２６のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２８】
前記網膜電位の改善がＢ波の増加を含む用途の請求項２７に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２９】
前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が対象の網膜内ドルーゼンの蓄積又は凝集を減少及び／又は阻害可能な用途の請求項２３〜２８のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３０】
前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤がアンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ標的化ＦＡＭ１９Ａ５、アプタマー、ＰＮＡ又はこれを含むベクターである用途の請求項１〜２９のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３１】
前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤がＦＡＭ１９Ａ５タンパク質（“抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体”）に特異的に結合する抗体又はその抗原結合部分である用途の請求項１〜３０のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３２】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が：
（ａ）酵素結合免疫吸着分析法（ＥＬＩＳＡ）によって測定した時にＫＤが１０ｎＭ以下である可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合する特性；
（ｂ）ＥＬＩＳＡによって測定した時にＫＤが１０ｎＭ以下である膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合する特性；及び
（ｃ）（ａ）及び（ｂ）両方、のいずれか一特性を示す用途の請求項３１に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３３】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がヒトＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合するために、表２〜表５の抗体からなる群から選ばれる基準抗体と交差競合する用途の請求項３１又は３２に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３４】
前記基準抗体が重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３並びに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、
（ｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１４に示したアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１５に示したアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１６に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号２６に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号２７に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号２８に示したアミノ酸配列を含み；又は、
（ｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１７に示したアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１８に示したアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１９に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号２９に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号３０に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号３１に示したアミノ酸配列を含む用途の請求項３３に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３５】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が表２〜表５の抗体からなる群から選ばれる基準抗体と同じＦＡＭ１９Ａ５エピトープに特異的に結合する用途の請求項３１〜３４のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３６】
前記基準抗体が重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３並びに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、
（ｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１４に示したアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１５に示したアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１６に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号２６に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号２７に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号２８に示したアミノ酸配列を含み；又は、
（ｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１７に示したアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１８に示したアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１９に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号２９に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号３０に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号３１に示したアミノ酸配列を含む用途の請求項３５に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３７】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が配列番号６又は配列番号９である少なくとも一つのＦＡＭ１９Ａ５エピトープに特異的に結合する用途の請求項３１〜３６のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３８】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３並びに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、
（ｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、表２に示したＣＤＲ１からなる群から選ばれるＣＤＲ１を含み；
（ｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ２は、表２に示したＣＤＲ２からなる群から選ばれるＣＤＲ２を含み；
（ｉｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ３は、表２に示したＣＤＲ３からなる群から選ばれるＣＤＲ３を含み；
（ｉｖ）前記軽鎖ＣＤＲ１は、表３に示したＣＤＲ１からなる群から選ばれるＣＤＲ１を含み；
（ｖ）前記軽鎖ＣＤＲ２は、表３に示したＣＤＲ２からなる群から選ばれるＣＤＲ２を含み；及び／又は
（ｖｉ）前記軽鎖ＣＤＲ３は、表３に示したＣＤＲ３からなる群から選ばれるＣＤＲ３を含む用途の請求項３１〜３７のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３９】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３並びに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、
（ｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１４又は配列番号１７に示したアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１５又は配列番号１８に示したアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１６又は配列番号１９に示したアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号２６又は配列番号２９に示したアミノ酸配列を含み；
（ｖ）前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号２７又は配列番号３０に示したアミノ酸配列を含み；及び／又は
（ｖｉ）前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号２８又は配列番号３１に示したアミノ酸配列を含む用途の請求項３１〜３７のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４０】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３並びに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、配列番号１４、１５及び１６に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、配列番号２６、２７及び２８に示したアミノ酸配列を含む用途の請求項３１〜３９のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４１】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３並びに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、配列番号１７、１８及び１９に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３は、配列番号２９、３０及び３１に示したアミノ酸配列を含む用途の請求項３１〜３９のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４２】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、
（ｉ）前記ＶＨは、配列番号３６又は配列番号３７に示したアミノ酸配列を含み；又は、
（ｉｉ）前記ＶＬは、配列番号４０又は配列番号４１に示したアミノ酸配列を含む用途の請求項３１〜３９のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４３】
前記ＶＨが配列番号３６のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号４０に示したアミノ酸配列を含む用途の請求項４２に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４４】
前記ＶＨが配列番号３７のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号４１に示したアミノ酸配列を含む用途の請求項４２に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４５】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記ＶＨは、配列番号３６又は配列番号３７に示したアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含む用途の請求項３１〜４４のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４６】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記ＶＬは、配列番号４０又は配列番号４１に示したアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含む用途の請求項３１〜４５のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４７】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、（ｉ）前記ＶＨは、配列番号３６又は配列番号３７に示したアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）前記ＶＬは、配列番号４０又は配列番号４１に示したアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含む用途の請求項３１〜４５のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４８】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）を含む用途の請求項３１〜４７のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４９】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４及びこれらの変異体からなる群から選ばれる用途の請求項３１〜４８のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項５０】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がＩｇＧ２、ＩｇＧ４又はこれらの組合せである用途の請求項４９に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項５１】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がＩｇＧ２／ＩｇＧ４アイソ型抗体を含む用途の請求項５０に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項５２】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がＦｃ機能がない定常領域を含む用途の請求項３１〜５１のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項５３】
前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がキメラ抗体、ヒト抗体又はヒト化抗体である用途の請求項３１〜５１のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項５４】
前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が第２結合部分を持つ分子に連結されて二重特異的分子を形成する用途の請求項１〜５３のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項５５】
前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が作用剤に連結されて免疫接合体を形成する用途の請求項１〜５４のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項５６】
治療剤を投与することをさらに含む用途の請求項１〜５５のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項５７】
前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が薬剤学的に許容される担体と共に剤形化される用途の請求項１〜５６のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項５８】
前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が眼内投与で投与される用途の請求項１〜５７のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項５９】
前記眼内投与が硝子体内投与を含む用途の請求項５８に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項６０】
前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が静脈内投与される用途の請求項１〜５７のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項６１】
記載の前記対象がヒトである用途の請求項１〜６０のいずれかにＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［技術分野］
関連出願に対する相互参照事項
本ＰＣＴ出願は、２０１８年１０月１６日付に出願された米国臨時出願第６２／７４６，１９４号の優先権を主張し、その全文が本明細書に援用によって組み込まれる。
【０００２】
電子提出された配列目録に対する参照事項
本出願と共にＡＳＣＩＩテキストファイル（名：３７６３．０１２ＰＣ０１＿ＳｅｑＬｉｓｔｉｎｇ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ；サイス：２６１，６０９バイト；及び生成日：２０１９年１０月１３日）で電子提出された配列目録の内容は、その全体が本明細書に援用によって組み込まれる。
【０００３】
本開示内容は、配列類似性１９を持つファミリー、メンバーＡ５（ＦＡＭ１９Ａ５）タンパク質に対する拮抗剤を用いて対象（例えば、ヒト）において網膜病症（例えば、糖尿病性網膜病症）及び／又は黄斑変性（例えば、加齢黄斑変性）を治療するための方法及び当該拮抗剤を含む組成物に関する。
［背景技術］
糖尿病性網膜病症（ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ＤＲ）（糖尿病性眼疾患とも知られている。）のような網膜病症は、網膜の小さな血管と神経細胞の損傷に起因する。ＤＲは全世界的に労働年齢層（例えば、２０〜７４歳）で最も多い視力損失の原因である。Ｌｅｅ  Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｙｅ  Ｖｉｓ（Ｌｏｎｄ）２：１７（２０１５）。糖尿病患者の期待寿命が伸びるにつれてＤＲの発病率が数年にわたって急増してきた。概ね、糖尿病患者は糖尿病発症１０年後に約５０％、２０年後に７０％、３０年後に９０％においてＤＲが進行する。２０３０年には全世界における２０〜７９歳年齢群の糖尿病患者の数が略２倍になると予想され、これは、ＤＲと診断される個人の数がさらに増加することを示唆する。Ｎｅｎｔｗｉｃｈ  Ｍ．Ｍ．ａｎｄ  Ｕｌｂｉｇ  Ｍ．Ｗ．，Ｗｏｒｌｄ  Ｊ  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ６（３）：４８９−４９９（２０１５）。
【０００４】
いくつかの治療オプションが利用可能であり、ＤＲ関連症状を管理するのに役立ち得るが、前記疾患を治療するものではなく、不所望の副作用もあり得る。例えば、レーザー療法は、治療中の著しい不便さ、永久的な網膜瘢痕の形成、周辺視、色覚及び夜間視力（ｎｉｇｈｔ  ｖｉｓｉｏｎ）の低下を引き起こすことがある。ｗｏｒｌｄｗｅｂ．ａａｏ．ｏｒｇ／ｍｕｎｎｅｒｌｙｎ−ｌａｓｅｒ−ｓｕｒｇｅｒｙ−ｃｅｎｔｅｒ／ｌａｓｅｒ−ｔｒｅａｔｍｅｎｔ−ｏｆ−ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ−ｎｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ−を参考されたい。このため、現在、糖尿病性網膜病症に対する代替治療オプションが望まれている。
【０００５】
加齢黄斑変性（ＡＭＤ）は、眼、より具体的には眼の中央部（すなわち、黄斑）に影響を及ぼす別の網膜病症である。ＡＭＤは、網膜に栄養を供給する動脈が硬化し、網膜組織から酸素を奪い、中心視（ｃｅｎｔｒａｌ  ｖｉｓｉｏｎ）の低下につながると考えられる。Ｇｈｅｏｒｇｈｅ  Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｒｏｍ  Ｊ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  ５９（２）：７４−７７（２０１５）。ＡＭＤは、米国だけで約１１００万人の個人が苦しむ最も多いタイプの黄斑変性で、全世界では１億７千万人が有病率を持っている。ＡＭＤは、産業化された国における視覚障害の主な原因であり、世界的には３番目の主原因である。Ｐｅｎｎｉｎｇｔｏｎ  Ｋ．  Ｌ．ａｎｄ  Ｄｅ  Ａｎｇｅｌｉｓ  Ｍ．，Ｅｙｅ  Ｖｉｓ（Ｌｏｎｄ）３：３４（２０１６）。加齢が最大の危険因子であり、米国でＡＭＤの有病率は２０５０年までに２２００万人に増加すると予想される一方、世界の有病率は２０４０年まで２億８，８００万人に増加すると予想されている。Ｗｏｎｇ  Ｗ．Ｌ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ  Ｇｌｏｂ  Ｈｅａｌｔｈ  ２：ｅｌ０６−ｅｌｌ６（２０１４）。
【０００６】
ＡＭＤは、早期診断時には、ビタミン補充剤（例えば、抗酸化剤）、食餌変化（例えば低脂肪献立）、抗血管新生薬物（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）、レーザー療法、手術（例えば、黄斑下手術）及び網膜位置変更を含む種々の治療オプションで管理できる。Ｈｏｌｚ  Ｆ．Ｇ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ  １２４（４）：１４３０−１４３８（２０１４）。しかし、ＡＭＤについて知られている治療法はなく、治療オプションのほとんどが全てのＡＭＤ患者に対して実行可能なものでもない。例えば、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）（すなわち、湿性ＡＭＤ）の発症した患者の多数は、ＣＮＶをレーザー治療するにはそのサイズが大きすぎたり位置が正確に決定できないため、レーザー療法に適格ではない。しかも、治療を受けても多くのＡＭＤ患者が漸進的な中心視の喪失を経る。Ｖｉｒｇｉｌｉ  Ｇ．  ａｎｄ  Ｂｉｎｉ  Ａ．，Ｃｏｃｈｒａｎｅ  Ｄａｔａｂａｓｅ  Ｓｙｓｔ  Ｒｅｖ  ３：ＣＤ００４７６３  （２００７）．
［発明の概要］
［発明が解決しようとする課題］
したがって、現在、ＡＭＤに対するより効果的で包括的な治療オプションが望まれている。
［課題を解決するための手段］
本明細書は、必要とする対象に、配列類似性１９を持つファミリー、メンバーＡ５（“ＦＡＭ１９Ａ５”）タンパク質に対する拮抗剤（“ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤”）を投与することを含み、前記対象の網膜において基準（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤投与前の対象又はＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤を非投与した対象の該当値）に比べて網膜電位（ｒｅｔｉｎａｌ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ）を改善させる方法を提供する。一部の態様において、前記網膜電位の改善は、Ａ波、Ｂ波、律動様小波（ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｙ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ）又はこれらの任意の組合せの増加を含む。
【０００７】
一部の態様において、前記対象は、網膜において網膜電位減少に関連した疾患又は症状を有する。特定の態様において、前記疾患又は症状は、糖尿病性網膜病症である。他の態様において、前記疾患又は症状は、網膜の加齢黄斑変性である。
【０００８】
本明細書はまた、必要とする対象において網膜病症及び／又は黄斑病症を治療するための方法であって、前記対象にＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤を投与することを含む方法を提供する。
【０００９】
一部の態様において、前記網膜病症は、糖尿病性網膜病症である。一部の態様において、前記糖尿病性網膜病症は、非増殖性糖尿病性網膜病症（ＮＰＤＲ）である。他の態様において、前記糖尿病性網膜病症は、増殖性糖尿病性網膜病症である。特定の態様において、前記糖尿病性網膜病症は、対象の網膜内で網膜電位減少、血管周囲細胞（ｐｅｒｉｃｙｔｅ）損失、無細胞性毛細血管形成、血管鬱血又はそれらの任意の組合せと関連がある。
【００１０】
一部の態様において、前記黄斑病症は、糖尿病性黄斑浮腫である。特定の態様において、前記糖尿病性黄斑浮腫は、対象の網膜内で網膜電位減少、血管周囲細胞損失、無細胞性毛細血管形成、血管鬱血又はそれらの任意の組合せと関連がある。
【００１１】
一部の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、基準（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤投与前の対象又はＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤を非投与した対象の該当値）対比対象の網膜電位を改善させる。特定の態様において、前記網膜電位の改善は、Ａ波、Ｂ波、律動様小波又はそれらの任意の組合せの増加を含む。一部の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、対象の網膜内血管周囲細胞の損失を減少させる。一部の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、対象の網膜内無細胞性毛細血管形成を減少及び／又は阻害する。他の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、対象の網膜神経線維層内で血管鬱血を減少及び／又は阻害する。
【００１２】
本開示内容はまた、必要とする対象において黄斑変性を治療するための方法であって、前記対象にＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対する拮抗剤を投与することを含む方法を提供する。
【００１３】
一部の態様において、前記黄斑変性は、加齢黄斑変性である。特定の態様において、前記加齢黄斑変性は、乾性（萎縮性）黄斑変性である。他の態様において、前記加齢黄斑変性は、湿性（新生血管又は滲出性）黄斑変性である。特定の態様において、前記加齢黄斑変性は、（ｉ）初期ＡＭＤ、（ｉｉ）中期ＡＭＤ、又は（ｉｉｉ）後期又は進行性ＡＭＤ（地図状萎縮（ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃ  ａｔｒｏｐｈｙ））である。他の態様において、前記加齢黄斑変性は、対象の網膜内ドルーゼン（ｄｒｕｓｅｎ）の蓄積又は凝集、血管新生、網膜電位減少、星状細胞形成又はそれらの任意の組合せと関連がある。
【００１４】
一部の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、ＣＤ３１減少及び／又はＶＥＧＦ発現によって立証されたように、対象の網膜内で血管新生を減少及び／又は阻害する。特定の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、ＣＤ３１減少及び／又はＶＥＧＦ発現によって立証されたように、レーザー誘導脈絡膜血管新生があるマウスの網膜内で血管新生を減少及び／又は阻害できる。他の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、基準（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤投与前の対象又はＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤を非投与した対象の該当値）対比対象の網膜神経線維層と神経節細胞層内で血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）の発現を減少させる。他の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、基準（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤投与前の対象又はＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤を非投与した対象の該当値）対比対象の網膜電位を改善させる。一部の態様において、前記網膜電位の改善は、Ｂ波の増加を含む。特定の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、対象の網膜内ドルーゼンの蓄積又は凝集を減少及び／又は阻害できる。
【００１５】
一部の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ標的化ＦＡＭ１９Ａ５、アプタマー、ＰＮＡ又はこれを含むベクターである。
【００１６】
一部の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質（“抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体”）に特異的に結合する抗体又はその抗原結合部分である。特定の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は：（ａ）酵素結合免疫吸着分析法（ＥＬＩＳＡ）によって測定した時にＫＤが１０ｎＭ以下である可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合する特性；（ｂ）ＥＬＩＳＡによって測定した時にＫＤが１０ｎＭ以下である膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合する特性；又は（ｃ）（ａ）及び（ｂ）両方のいずれか一特性を示す。
【００１７】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、ヒトＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合するために、表２〜表５の抗体らからなる群から選ばれる基準抗体（ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ａｎｔｉｂｏｄｙ）と交差競合する。特定の態様において、前記基準抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３並びに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、（ｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１４に示したアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１５に示したアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１６に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号２６に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号２７に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号２８に示したアミノ酸配列を含み；又は（ｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１７に示したアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１８に示したアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１９に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号２９に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号３０に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号３１に示したアミノ酸配列を含む。
【００１８】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、表２〜表５の抗体からなる群から選ばれる基準抗体と同じＦＡＭ１９Ａ５エピトープに特異的に結合する。特定の態様において、前記基準抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３並びに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、（ｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１４に示したアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１５に示したアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１６に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号２６に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号２７に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号２８に示したアミノ酸配列を含み；又は（ｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１７に示したアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１８に示したアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１９に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号２９に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号３０に示したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号３１に示したアミノ酸配列を含む。
【００１９】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、配列番号６又は配列番号９である少なくとも一つのＦＡＭ１９Ａ５エピトープに特異的に結合する。
【００２０】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３並びに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、（ｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、表２に示したＣＤＲ１からなる群から選ばれるＣＤＲ１を含み；（ｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ２は、表２に示したＣＤＲ２からなる群から選ばれるＣＤＲ２を含み；（ｉｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ３は、表２に示したＣＤＲ３からなる群から選ばれるＣＤＲ３を含み；（ｉｖ）前記軽鎖ＣＤＲ１は、表３に示したＣＤＲ１からなる群から選ばれるＣＤＲ１を含み；（ｖ）前記軽鎖ＣＤＲ２は、表３に示したＣＤＲ２からなる群から選ばれるＣＤＲ２を含み；及び／又は（ｖｉ）前記軽鎖ＣＤＲ３は、表３に示したＣＤＲ３からなる群から選ばれるＣＤＲ３を含む。
【００２１】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３並びに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、（ｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１４又は配列番号１７に示したアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１５又は配列番号１８に示したアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１６又は配列番号１９に示したアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号２６又は配列番号２９に示したアミノ酸配列を含み；（ｖ）前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号２７又は配列番号３０に示したアミノ酸配列を含み；及び／又は（ｖｉ）前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号２８又は配列番号３１に示したアミノ酸配列を含む。
【００２２】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３並びに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、配列番号１４、１５及び１６を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、配列番号２６、２７及び２８を含む。他の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３並びに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、配列番号１７、１８及び１９を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、配列番号２９、３０及び３１を含む。
【００２３】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、（ｉ）前記ＶＨは、配列番号３６又は配列番号３７に示したアミノ酸配列を含み；又は（ｉｉ）前記ＶＬは、配列番号４０又は配列番号４１に示したアミノ酸配列を含む。特定の態様において、前記ＶＨは、配列番号３６のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬは、配列番号４０に示したアミノ酸配列を含む。他の態様において、前記ＶＨは、配列番号３７のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬは、配列番号４１に示したアミノ酸配列を含む。
【００２４】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記ＶＨは、配列番号３６又は配列番号３７に示したアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含む。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記ＶＬは、配列番号４０又は配列番号４１に示したアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含む。
【００２５】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、（ｉ）前記ＶＨは、配列番号３６又は配列番号３７に示したアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）前記ＶＬは、配列番号４０又は配列番号４１に示したアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含む。
【００２６】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）を含む。特定の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４及びそれらの変異体からなる群から選ばれる。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、ＩｇＧ２、ＩｇＧ４又はそれらの組合せである。他の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、ＩｇＧ２／ＩｇＧ４アイソ型（ｉｓｏｔｙｐｅ）抗体を含む。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、Ｆｃ機能がない定常領域を含む。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、キメラ抗体、ヒト抗体又はヒト化抗体である。
【００２７】
一部の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、第２結合部分を持つ分子に連結されて二重特異的分子を形成する。一部の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、作用剤（ａｇｅｎｔ）に連結されて免疫接合体（ｉｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ）を形成する。
【００２８】
一部の態様において、本明細書に開示のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、薬剤学的に許容される担体と共に剤形化される。一部の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、眼内投与で投与される。特定の態様において、前記眼内投与は、硝子体内投与を含む。一部の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、静脈内投与で投与される。
【００２９】
一部の態様において、本明細書に開示の方法は、治療剤を投与することをさらに含む。一部の態様において、本開示内容で処理される対象は、ヒトである。
【００３０】
本開示内容はまた、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対する薬剤学的有効量の拮抗剤を含む網膜病症及び／又は黄斑病症予防又は治療用薬剤学的組成物を提供する。
［図面の簡単な説明］
図１Ａ、図１Ｂ及び図１Ｃは、２５週齢ｄｂ／ｄｂマウスにおいて網膜電位回復に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の効果を示している。前記マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“１−６５”又は“３−２”）で処理した。正常（すなわち、糖尿病がない）マウスを対照群として用いた。各群のマウスを３つの異なるフラッシュ強度（−１、０．２及び０．８ｌｏｇ  ｃｄｓ／ｍ２）の白色光に露出させた後、Ａ波（μＶ）（図１Ａ）、Ｂ波（μＶ）（図１Ｂ）及び律動様小波（μＶ）（図１Ｃ）を測定した。データは、平均±Ｓ．Ｄで表した。
【００３１】
図２Ａ及び図２Ｂは、２５週齢ｄｂ／ｄｂマウスにおいて抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の網膜微細血管保護効果を示している。前記マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“１−６５”又は“３−２”）で処理した。正常の（すなわち、糖尿病がない）健康なマウスを対照群として用いた。図２Ａは、異なる処理群：（ｉ）正常群（すなわち、非糖尿病）（左上パネル）、（ｉｉ）ヒトＩｇＧ対照群（右上パネル）及び（ｉｉｉ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン１−６５、左下パネル；クローン３−２、右下パネル）のそれぞれにおいて、マウスの代表的な網膜領域を過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色した後、顕微鏡写真（倍率１００×）を示している。黒色矢印は内皮細胞を、白色矢印は血管周囲細胞を、灰色矢印は無細胞性毛細血管を示す。図２Ｂは、前記異なる処理群のマウスの分析した全体網膜領域内で観察された血管周囲細胞に対する内皮細胞の比率（“Ｅ／Ｐ比”）の比較を示している。前記Ｅ／Ｐ比を決定するために、それぞれの撮影写真において内皮細胞と血管周囲細胞の数を計算した。データは、平均±Ｓ．Ｄで表した。棒上の“＊＊＊”は、ＩｇＧ処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．００１）を示す。
【００３２】
図２Ｃは、異なる処理群のマウスの分析された全体網膜領域内で観察された無細胞性毛細血管の数の比較を示している。データは、平均±Ｓ．Ｄで表した。棒上の“＊”は、ＩｇＧ処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．０５）を示す。
【００３３】
図２Ｄは、観察された無細胞性毛細血管の長さの比較を示している。データは、平均±Ｓ．Ｄで表した。棒上の“＊＊”及び“＊＊＊”は、ＩｇＧ処理群対比統計的に有意な差（それぞれ、ｐ＜０．０１及びｐ＜０．００１）を示す。
【００３４】
図３は、Ｈ＆Ｅ染色を用いて２５週齢ｄｂ／ｄｂマウスの網膜内血管鬱血に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体処理の効果を示している。前記マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”、右上パネル）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“１−６５”、左下パネル又はクローン“３−２”、右下パネル）で処理した。正常の（すなわち、糖尿病がない）健康なマウス（左上パネル）を対照群として用いた。矢じりは、血管鬱血の例を示す。表示された異なる網膜層には（ｉ）神経節細胞層（ＧＣＬ）、（ｉｉ）内網状層（ＩＰＬ）、（ｉｉｉ）内核層（ＩＮＬ）、（ｉｖ）外核層（ＯＮＬ）及び（ｖ）網膜色素上皮（ＰＥ）が含まれている。
【００３５】
図４は、ＴＵＮＥＬ分析を用いて２５週齢ｄｂ／ｄｂマウスにおいて抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体処理の網膜細胞保護効果を示している。前記マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“１−６５”又は“３−２”）で処理した。正常の（すなわち、糖尿病がない）健康なマウスを対照群として用いた。中間列（“ＴＵＮＥＬ”）において赤色矢じりは、細胞死が進行している網膜細胞を示す。ＴＵＮＥＬ染色の強度は、細胞死の程度と相関がある（例えば、強度減少は、一部の細胞死を示す）。表示された異なる網膜層には（ｉ）神経節細胞層（ＧＣＬ）、（ｉｉ）内核層（ＩＮＬ）、（ｉｉｉ）外核層（ＯＮＬ）及び（ｉｖ）網膜色素上皮（ＰＥ）が含まれている。
【００３６】
図５は、ＣＤ３１及びＶＥＧＦ発現に対して染色する免疫組織化学を用いて、２５週齢ｄｂ／ｄｂマウスの網膜内血管新生に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の阻害効果を示している。前記マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“１−６５”又は“３−２”）で処理した。正常の（すなわち、糖尿病がない）健康なマウスを対照群として用いた。矢じりは、陽性ＣＤ３１（上段行）又は陽性ＶＥＧＦ（下段行）染色を示す。
【００３７】
図６Ａは、実施例８で用いられたようなイメージ誘導レーザーシステムの写真を示している。図６Ｂは、図６Ａに示したイメージ誘導レーザーシステムからレーザーに露出された網膜の写真の一例を示している。
【００３８】
図７Ａ及び図７Ｂは、蛍光眼底血管造影術（ＦＦＡ）分析を用いて脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン３−２）の阻害効果を示している。ヒトＩｇＧ抗体が投与されたＣＮＶ誘導マウスを対照群として用いた。図７Ａは、ＣＮＶ誘導当日（“０日”）とＣＮＶ誘導後１３日目にヒトＩｇＧ抗体（上段行）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５（クローン３−２）（下段行）で処理したマウスにおいて４個の湿性ＡＭＤ様病変（左列写真で矢印で表示される）を示す代表的な網膜写真である。図７Ｂは、ＣＮＶ誘導後１３日目にヒトＩｇＧ抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“３−２”）で処理したＣＮＶ誘導マウスに対する補正された総蛍光（ＣＴＦ）値の比較を提供している。データを平均で且つ個別的に表した。“＊”は、ＩｇＧ処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．０５）を示す。
【００３９】
図８Ａ、図８Ｂ及び図８Ｃは、光干渉断層撮影（ＯＣＴ）分析を用いて、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン３−２）の阻害効果を示している。ヒトＩｇＧ抗体が投与されたＣＮＶ誘導マウスを対照群として用いた。図８Ａは、ＣＮＶ誘導後１３日目にヒトＩｇＧ抗体（上段行）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５（クローン３−２）（下段行）で処理したマウスにおいて４個の湿性ＡＭＤ様病変（番号１、２、３及び４と表記）を示す代表的な網膜写真を提供している。１、２、３及び４と標識された列は、最左側の写真に示した当該病変に対するＯＣＴ写真を提供している。図８Ｂは、前記病変の大きさを定量化するために用いたスケールバーを示している。図８Ｃは、ヒトＩｇＧ対照群抗体又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン３−２）で処理したマウスにおいてＣＮＶ誘導後１３日目に観察したＣＮＶ病変の大きさの比較を提供している。データを平均で且つ個別的に表した。“＊＊＊”は、ＩｇＧ処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．００１）を示す。
【００４０】
図９は、ＣＮＶ誘導マウスにおいてＢ波値の回復に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の効果を示している。前記ＣＮＶ誘導マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“３−２”）で処理した。正常（すなわち、糖尿病がない）マウスを対照群として用いた。データは、平均±Ｓ．Ｄで表した。“＊”は、ＩｇＧ処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．０５）を示す。
【００４１】
図１０Ａ及び図１０Ｂは、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン３−２）の阻害効果を示している。図１０Ａは、Ｈ＆Ｅ分析（左写真）又はＯＣＴ分析（右写真）を用いて異なる網膜層を識別している。これらの表示された層は、次を含む：（ｉ）網膜神経線維層／神経節細胞層（ＲＮＦＬ／ＧＣＬ）；（ｉｉ）内網状層；（ｉｉｉ）内核層；（ｉｖ）外網状層；（ｖ）外核層、（ｖｉ）光受容体内部セグメント／外部セグメント（ＩＳ／ＯＳ）及び（ｖｉｉ）網膜色素上皮（ＲＰＥ）。図１０Ｂは、異なる群である（ｉ）正常の健康な動物群、（ｉｉ）ヒトＩｇＧ抗体で処理したＣＮＶ誘導マウス群、及び（ｉｉｉ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体で処理したＣＮＶ誘導マウス群におけるマウスの網膜の関連細胞層の代表的なＨ＆Ｅ写真を示している。矢じりは、脈絡膜血管新生領域を示す。
【００４２】
図１１は、ＩＨＣ分析を用いて、網膜の神経線維層及び神経節細胞層内の両方においてＰＤＧＦ発現に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の阻害効果を示している。ＣＮＶ誘導マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“３−２”）で処理した。正常（すなわち、糖尿病がない）マウスを対照群として用いた。矢じりは、陽性ＰＤＧＦ染色を示す。
【００４３】
図１２は、免疫蛍光顕微鏡法を用いて、ＡＰＰ／ＰＳ−１／ｔａｕ遺伝子導入マウス（認知症モデル）においてオリゴマー性Ａβ及びドルーゼンの形成に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の阻害効果を示している。前記ＡＰＰ／ＰＳ−１／ｔａｕ遺伝子導入マウスを抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体で処理しない（中間行）か又は処理した（下段行）。未投与（ｎａｉｖｅ）野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスを陰性対照群（上段行）として用いた。“Ｈ３３３４２”（核酸染色）と標識された列は、網膜組織内細胞を示している。“ＱＤ５２５−ｏＡβ”と標識された列は、オリゴマーＡβを示している。“６４７  Ａｌｅｘａ  Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ”と標識された列は、ドルーゼン形成を示しているもので、ドルーゼンは矢印で例示されている。“ｍｅｒｇｅｄ”と標識された列は、それぞれの処理群に対する上の３列の合成写真を示している。
【００４４】
図１３Ａ〜図１３Ｃは、糖尿病性網膜病症マウスモデルにおいて硝子体内又は静脈内投与後、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン１−３０）の網膜微細血管保護効果の比較を示している。前記マウスに（ｉ）ヒトＩｇＧ対照群抗体（“ヒトＩｇＧ”）、（ｉｉ）アフリベルセプト、（ｉｉｉ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体のいずれか一方を、硝子体内（“ＩＶＴ”）投与したり、又は（ｉｖ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体を静脈内（“ＩＶ”）投与した。正常の（すなわち、糖尿病がない）健康なマウスを対照群として用いた。図１３Ａは、異なる処理群のそれぞれにおいてマウスの代表的な網膜領域を過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色した後、顕微鏡写真（倍率１００×）を提供している。黒色矢印は内皮細胞を、白色矢印は血管周囲細胞を、黒色矢印は無細胞性毛細血管を示す。図１３Ｂは、異なる処理群のマウスの分析した全体網膜領域内で観察された無細胞性毛細血管の数の比較を提供している。図１３Ｃは、異なる処理群のマウスの分析した全体網膜領域内で観察された血管周囲細胞に対する内皮細胞の比率（“Ｅ／Ｐ比”）の比較を提供している。前記Ｅ／Ｐ比を決定するために、それぞれの撮影写真において内皮細胞と血管周囲細胞の数を計算した。図１３Ｂ及び図１３Ｃにおいてデータは、平均±Ｓ．Ｄで表した。棒上の“＊”及び“＊＊＊”は、未投与マウス対比統計的に有意な差（それぞれｐ＜０．０５とｐ＜０．００１）を示す。棒上の“＃＃”及び“＃＃＃”は、ヒトＩｇＧ抗体処理群対比統計的に有意な差（それぞれ、ｐ＜０．０１及びｐ＜０．００１）を示す。棒上の“†††”は、アフリベルセプト処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．００１）を示す。棒上の“§”は、ＩＶＴ群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．０５）を示す。
【００４５】
図１４は、静脈内及び硝子体内投与後、糖尿病性網膜病症マウスの網膜内血管鬱血形成に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の阻害効果を示している。処理群は、図１３Ａ〜図１３Ｃに記載と同一である。矢じりは、血管鬱血の例を示す。
【００４６】
図１５は、硝子体内又は静脈内投与時に、ＴＵＮＥＬ分析を用いて測定した抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の網膜細胞保護効果を示している。処理群は、図１３Ａ〜図１３Ｃに記載と同一である。中間列（“ＴＵＮＥＬ”）において矢じりは、細胞死が進行している網膜細胞を示す。ＴＵＮＥＬ染色の強度は、細胞死の程度と相関関係がある（例えば、強度減少は、一部の細胞死を示す）。
【００４７】
図１６Ａ及び１６Ｂは、硝子体内及び静脈内投与後、糖尿病性網膜病症マウスの網膜内血管新生に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の阻害効果を示している。処理群は、図１３Ａ〜図１３Ｃに記載と同一である。血管新生は、ＶＥＧＦ（図１６Ａ）及びＣＤ３１（図１６Ｂ）発現を用いて測定した。矢じりは、陽性ＶＥＧＦ又はＣＤ３１染色を示す。
［発明を実施するための形態］
本明細書に提供される開示内容の理解を容易にするために、多数の用語及び語句を定義する。追加定義は、詳細な説明全般にわたって記載されている。
【００４８】
＜Ｉ．定義＞
本開示内容全般にわたって、用語“一つの”又は“ある”実体は、その実体の１つ以上をいうもので、例えば、“一つの抗体”は１つ以上の抗体を表すものと理解される。このように、用語“一つ”（又は“ある”）、“１つ以上の”及び“少なくとも１つの”は、本明細書で同じ意味で使われる。
【００４９】
また、本明細書で使う“及び／又は”は、２個の特定された特徴又は構成要素のそれぞれ一つを、もう一つの特徴又は構成要素と共に又は単独で具体的に開示するものと見なされるべきである。したがって、本明細書で“Ａ及び／又はＢ”のような語句において使われる用語“及び／又は”は、“Ａ及びＢ”、“Ａ又はＢ”、“Ａ”（単独）及び“Ｂ”（単独）を含むものとして意図される。同様に、“Ａ、Ｂ及び／又はＣ”のような語句において使われる用語“及び／又は”は、次のような態様のそれぞれを含むものとして意図される：Ａ、Ｂ及びＣ；Ａ、Ｂ又はＣ；Ａ又はＣ；Ａ又はＢ；Ｂ又はＣ；Ａ及びＣ；Ａ及びＢ；Ｂ及びＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；及びＣ（単独）。
【００５０】
本明細書において、態様を、用語“含む”で記載すれば、“なる”及び／又は“本質的になる”の観点で記載された他の類似の態様も提供されるものと理解される。
【００５１】
特に定義しない限り、本明細書で使われる全ての技術及び科学用語は、本開示内容と関連した技術分野における通常の技術者にとって通常理解されるのと同じ意味を有する。例えば、Ｃｏｎｃｉｓｅ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｕｏ，Ｐｅｉ−Ｓｈｏｗ，２ｎｄ  ｅｄ．，２００２，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ；Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，３ｒｄ  ｅｄ，１９９９，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；及びＯｘｆｏｒｄ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  Ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｒｅｖｉｓｅｄ，２０００，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓは、当業者に、本開示内容で使われている用語の多数を提供している。
【００５２】
単位、接頭辞及び記号は、これらのＳｙｓｔｅｍｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｄｅ  Ｕｎｉｔｅｓ（ＳＩ）で認めた形態で表示される。数値範囲は、当該範囲を限定する数字を含む。特に表示されない限り、アミノ酸配列は、アミノからカルボキシに向かって左側から右側に書かれる。本明細書で提供された表題は、開示内容の様々な態様の制限ではなく、それらは全体的に明細書を参照したものであり得る。したがって、次に定義された用語は、明細書全般を参照してより完全に定義される。
【００５３】
本明細書において用語“約”は、ほぼ、概略、程度又はその領域内を意味するものとして使われる。用語“約”が数値範囲と共に使われる場合、記載されている数値の上と下へ境界を拡張して当該範囲を変更する。一般に、用語“約”は、明示された値の上と下の数値を、例えば、上又は下の（より高かいかより低い）１０％の変化量だけ変更可能である。
【００５４】
本明細書で使われる用語“網膜病症”とは、網膜（すなわち、角膜と水晶体を通過する像を捕捉する眼球の裏側の内側表面を包んでいる組織）の疾患、炎症又は損傷を指す。
【００５５】
本明細書で使われる用語“糖尿病性網膜病症”（ＤＲ）は、糖尿病と関連した合併症によって誘発される網膜病症のことを指す。前記疾患の重症度によって、ＤＲは、無症状であるか、軽微な視力問題を招くか、又は失明につながることがある。ＤＲは、微細血管網膜変化の結果である。高血糖症誘導壁内（ｉｎｔｒａｍｕｒａｌ）血管周囲細胞の死と基底膜の肥厚は血管壁の不全につながることがある。それらの損傷は、血液−網膜障壁の形成を変化させ、網膜血管をより透過し易くする。血管周囲細胞の死は、高血糖症がタンパク質キナーゼＣ−δ（ＰｒｋｃｄによってコードされたＰＫＣ−δ）とｐ３８ミトゲン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）を持続的に活性化させ、従来に知られていないＰＫＣ−δ信号伝達の標的としてタンパク質チロシンホスファターゼであるＳｒｃ相同−２ドメイン含有ホスファターゼ−１（ＳＨＰ−１）の発現を増加させる時に誘発され得る。この信号伝達カスケードは、ＰＤＧＦ受容体脱リン酸化及びこの受容体からの下位信号伝達（ｄｏｗｎｓｔｒｅａｍ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）の減少につながり、“血管周囲細胞死”が起き得る。眼にある小さい血管のような小さな血管は、特に血糖に対する調節不良に脆弱であり得る。ブドウ糖及び／又は果糖の過剰蓄積は、網膜にある小さい血管を損傷させることがある。
【００５６】
ＤＲは、２個の別の段階に分類できる。Ｗｕ  Ｌ．，ｅｌ  ａｌ．，Ｗｏｒｌｄ  Ｊ  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ４（６）：２９０−２９４（２０１３）。非増殖性糖尿病性網膜病症（ＮＰＤＲ）という第１期は、早期糖尿病性網膜病症と関連がある。ＮＰＤＲは一般に、明らかな症状がないか、周辺組織に体液が抜け出る血管によって起きる軽微な視力歪（ｖｉｓｉｏｎ  ｄｉｓｔｏｒｔｉｏｎ）と関連がある。ＮＰＤＲを検査する唯一の方法は、微細動脈瘤（動脈壁に血液が溜まっている微細な隆起部）が観察できる眼底撮影による方法である。治療せずに放置すると、ＤＲ患者は、増殖性糖尿病性網膜病症（ＰＤＲ）というより深刻な第２期に進むことがある。ＰＤＲは、破裂と出血を起こして視野を曇らせる非正常の新しい血管形成（すなわち、血管新生）を特徴とする。ＰＤＲの他の症状には、視野に浮遊する斑点や濃い線（“飛蚊症（ｆｌｏａｔｅｒｓ）”）、視力変化、色覚損傷、視野の暗い又は空いた領域、疼痛、視力バラツキ及び完全な視力喪失などを含む。
【００５７】
用語“糖尿病性網膜病症”は、非増殖性糖尿病性網膜病症（ＮＰＤＲ）、増殖性糖尿病性網膜病症（ＰＤＲ）、糖尿病性黄斑病症及び糖尿病性黄斑浮腫を含むが、これに限定されないいかなる類型の糖尿病性網膜病症をも含む。
【００５８】
一部の態様において、ＰＤＲは、ＮＰＲＤの発病後に発生する（例えば、最初はＮＰＲＤと診断され、疾患がＰＤＲへと進む）。別の態様において、ＰＤＲはＮＰＲＤとは無関係に発生する。本明細書で使われる用語“糖尿病性網膜病症”はまた、原因に関係なく、全類型の糖尿病性網膜病症と糖尿病性網膜病症の任意及び全ての症状を含む。糖尿病性網膜病症に対する危険因子の非制限的に例は、糖尿病持続期間、遺伝、アルコール過剰摂取、喫煙、高血圧、肥満、異常脂質血症、高いコレステロール、腎臓疾患、妊娠及び腎臓損傷がある。
【００５９】
本明細書で使われる用語“黄斑病症”は、非常に敏感で正確な視力と関連がある網膜の中心領域である黄斑の任意の病理学的症状を意味する。一部の態様において、用語“黄斑病症”及び“網膜病症”は同じ意味で使用可能である（すなわち、黄斑の影響だけを受ける場合）。一部の態様において、前記黄斑病症は、糖尿病性黄斑病症である。
【００６０】
“糖尿病性黄斑病症”は、黄斑が糖尿病に起因した網膜変化による影響を受けるときに発生する。前記用語は、２つの区別される眼疾患である糖尿病性黄斑浮腫と糖尿病性虚血性黄斑病症を意味する。この２類型の黄斑病症はしばしば併発（ｃｏｍｏｒｂｉｄ）し、すなわち黄斑浮腫を持つ人はしばしば虚血性黄斑病症を持っている。虚血性黄斑病症は黄斑浮腫と共に発生し、黄斑浮腫が軽症である場合でも発生し得る。一部の態様において、糖尿病性黄斑病症と関連した網膜変化は、対象の網膜内で網膜電位の減少、血管周囲細胞の損失、無細胞性毛細血管形成、血管鬱血、血管機能障害、血管漏れ、血管閉塞、組織腫脹（浮腫）、組織虚血又はそれらの任意の組合せを含む。
【００６１】
本明細書で使われる用語“無細胞性毛細血管”は、長さに沿ってどこにも核を持たない毛細血管サイズの血管チューブ（ｖｅｓｓｅｌ  ｔｕｂｅ）を意味する。
【００６２】
本明細書で使われる用語“血管鬱血”は、血管損傷の一類型を指し、本明細書に開示の様々な眼球疾患（例えば、糖尿病性黄斑浮腫）の病因において重要な因子である。血管鬱血は、血管組織内体液（例えば、血管内血液）蓄積と関連がある。一部の態様において、血管鬱血は高血糖症（すなわち、高血糖）によって発生し得る。
【００６３】
本明細書で使われる用語“黄斑変性”とは、黄斑が変性したり機能的活性を失う任意の数の障害と症状のことを指す。前記変性又は機能的活性の損失は、例えば、細胞死、細胞増殖減少、正常の生物学的機能損失又はそれらの組合せの結果として発症し得る。黄斑変性は、細胞及び／又は黄斑の細胞外基質の構造的完全性変化、正常細胞及び／又は細胞外基質構成の変化及び／又は黄斑細胞の機能喪失につながることがあり及び／又はこれらとして発現し得る。前記細胞は、ＲＰＥ細胞、光受容体及び／又は毛細血管内皮細胞を含む黄斑内又は近傍に正常に存在する任意の細胞類型であり得る。加齢黄斑変性は、黄斑変性の最も多い類型であるが、用語“黄斑変性”は、老人以外の患者の黄斑変性を必ずしも排除しない。黄斑変性の非制限的に例は：加齢黄斑変性（湿性又は乾性）；Ｂｅｓｔ黄斑異栄養症、Ｓｏｒｓｂｙ眼底異栄養症、Ｍａｌｌａｔｉａ  Ｌｅｖｅｎｔｉｎｅｓｅ、Ｄｏｙｎｅハチの巣状網膜異栄養症、Ｓｔａｒｇａｒｄｔ病（Ｓｔａｒｇａｒｄｔ黄斑異栄養症、青少年黄斑変性又は黄色斑眼底（ｆｕｎｄｕｓ  ｆｌａｖｉｍａｃｕｌａｔｕｓ）ともいう。）及び色素上皮剥離関連黄斑変性を含む。
【００６４】
本明細書で使われる用語“加齢黄斑変性”（ＡＭＤ）は、一般に老人に影響を及ぼし、網膜の中央部（すなわち、黄斑）損傷による中心視喪失と関連した網膜病症を意味する。ＡＭＤは一般に、黄斑（主に網膜色素上皮（ＲＰＥ）とその下にある脈絡膜との間）内ドルーゼン（アミロイドベータのような細胞外タンパク質及び脂質の蓄積）という黄色を帯びる不溶性細胞外沈着物の漸進的な蓄積又は凝集を特徴とする。黄斑内におけるこれら沈着物の蓄積又は凝集は、黄斑を漸次悪化させ、中心視損傷を招くことがある。本明細書で使われる用語“黄斑”は、中央の高解像度色覚を担当する網膜の中心部を意味する。
【００６５】
酸化ストレス、ミトコンドリア機能障害及び炎症過程を含むいくつかの理論が提案されたが、加齢黄斑変性の病因はよく知られていない。損傷した細胞成分の生成と分解間の不均衡は、例えば細胞内リポフスチンと細胞外ドルーゼンのような有害産物の蓄積につながる。初期萎縮は、ＡＭＤの初期段階で地図状萎縮に先行する網膜色素上皮（ＲＰＥ）薄層化又は脱色の領域によって区分される。ＡＭＤの進行段階でＲＰＥの萎縮（地図状萎縮）及び／又は新しい血管の発達（血管新生）は、光受容体の死滅と中心視喪失を招く。乾性（非滲出性）ＡＭＤでは、ドルーゼンという細胞破片が網膜と脈絡膜との間に蓄積され、網膜に萎縮と瘢痕ができる。より重症である湿性（滲出性）ＡＭＤでは、血管が網膜裏の脈絡膜で成長（血管新生）して滲出物と体液が漏液し、出血を誘発することがある。。
【００６６】
存在するドルーゼンの程度によって、ＡＭＤは３つの主要段階に分類できる：（ｉ）初期、（ｉｉ）中期、及び（ｉｉｉ）進行期又は後期。初期ＡＭＤは、いくつかの小さい（例えば、直径が約６３ミクロン未満である）ドルーゼン又はいくつかの中間大きさの（例えば、直径が約６３〜１２４ミクロンである）ドルーゼンが存在することを特徴とする。初期段階では患者は視力喪失がなく、明らかな症状がない。中期は、多くの中間大きさのドルーゼン又は一つ以上の大きい（例えば、直径が約１２５ミクロンを超える）ドルーゼンが存在することを特徴とする。この段階中に一部の患者は視野中央に薄暗い斑点を経験し始めることがある。進行期又は後期ＡＭＤは、網膜組織の広い面積の損傷によって中央の死角地帯、結局には中心視喪失を起こすことを特徴とする。損傷類型（例えば、血管新生の有無）に基づいて、進行期又は後期ＡＭＤは、次のような２つの下位類型にさらに分類できる：（ｉ）地図状萎縮（萎縮性ＡＭＤともいう。）及び（ｉｉ）湿性ＡＭＤ（新生血管性又は滲出性ＡＭＤともいう。）。
【００６７】
ＡＭＤには、２つの主要形態である（ｉ）乾性ＡＭＤ、及び（ｉｉ）湿性ＡＭＤがある。特に断りのない限り、用語“加齢黄斑変性”は、乾性ＡＭＤ及び湿性ＡＭＤ両方を含む。本明細書で使われる用語“加齢黄斑変性”はまた、原因に関係なく、全ての類型の加齢黄斑変性と加齢黄斑変性の任意及び全ての症状を含む。黄斑変性（例えば、加齢黄斑変性）に関連した症状の非制限的に例は：中心視喪失、歪み、対比感度低下、霧視、低照度適応の困難、突然の発病、症状の急速悪化及び色覚減少を含む。一部の態様において、黄斑変性（例えば、加齢黄斑変性）は、黄斑浮腫（すなわち、黄斑上又は下に体液とタンパク質沈着物の捕集による黄斑腫脹）を起こし得る。
【００６８】
本明細書で使われる用語“乾性ＡＭＤ”（萎縮性加齢黄斑変性又は非滲出性ＡＭＤともいう。）は、湿性（血管新生性）ＡＭＤ以外の全形態のＡＭＤのことを指す。これは、初期及び中期形態のＡＭＤだけでなく、地図状萎縮と知られた進行期形態の乾性ＡＭＤも含む。乾性ＡＭＤ患者は、より早い初期において最小症状を持つ傾向があり；視覚機能喪失は、症状が地図状萎縮に進行する場合に、より頻繁に発生する。
【００６９】
本明細書で使われる用語“湿性ＡＭＤ”（血管新生性加齢黄斑変性又は滲出性ＡＭＤともいう。）は、網膜血管新生の存在を特徴とする網膜症状を意味し、最も進行された形態のＡＭＤである。湿性ＡＭＤにおいて血管は、ブルッフ膜（Ｂｒｕｃｈ’ｓ  ｍｅｍｂｒａｎｅ）の欠陥により、脈絡膜毛細血管及び一部の場合には下部の網膜色素上皮（脈絡膜新生血管形成又は血管新生）から成長する。これらの血管から抜け出る漿液性又は血性滲出物の組織化は、神経網膜の付随的変性、網膜色素上皮の剥離及び破裂、硝子体出血及び中心視の永久損傷と共に、黄斑部位の線維血管瘢痕の生成を起こすことがある。
【００７０】
本明細書で使われる用語“血管新生”は、出血を誘発し、視力喪失を起こし得る眼の異なる部分における新しい異常血管成長のことを指す。本明細書で使われる用語“脈絡膜血管新生”は、脈絡膜（すなわち、結合組織を含み、網膜と鞏膜との間にある眼の血管層）における新しい血管の異常成長のことを指す。湿性ＡＭＤにおいて新しい血管は、網膜色素上皮（ＲＰＥ）と脈絡膜を経て網膜に成長でき、血液及び脂質漏れによって視覚機能に損傷を与えることがある。本明細書で使われる用語“網膜血管新生”は、網膜上部又は内部、例えば、網膜表面における血管の異常発達、増殖及び／又は成長のことを指す。網膜血管新生は、網膜虚血及び／又は炎症疾患と関連した網膜病症（例えば、糖尿病性網膜病症、鎌状赤血球網膜病症、イールズ（Ｅａｌｅｓ）病、眼虚血症候群、頸動脈海綿静脈洞瘻（ｃａｒｏｔｉｄ  ｃａｖｅｒｎｏｕｓ  ｆｉｓｔｕｌａ）、家族性滲出性硝子体網膜病症、過粘稠度症候群、特発性閉塞性細動脈炎、放射線網膜病症、網膜静脈閉塞、網膜動脈閉塞、網膜塞栓症、バードショート網膜脈絡膜症（ｂｉｒｄｓｈｏｔ  ｒｅｔｉｎｏｃｈｏｒｏｉｄｏｐａｔｈｙ）、網膜血管炎、乳肉腫症、トキソプラズマ症及びブドウ膜炎、脈絡膜黒色腫、慢性網膜剥離、前部虚血性視神経病症（ＡＩＯＮ）、非動脈炎性前部虚血性視神経症（ＮＡＩＯＮ）及び色素失調症（ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｔｉａ  ｐｉｇｍｅｎｔｉ））のような多くの網膜病症において発生し得る。血管新生を検出する方法は、当業界に公知されており、組織でＣＤ３１（血小板内皮細胞付着分子、ＰＥＣＡＭ−１とも知られている。）及び血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）の発現を測定することを含むが、これに限定されない。例えば、Ｓｃｈｌｕｔｅｒ  Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，ＢＭＣ  Ｃａｎｃｅｒ  ｌ８（１）：２７２（２０１８）を参考されたい。
【００７１】
“網膜色素上皮”（ＲＰＥ）は、脈絡膜血液供給（脈絡膜毛細血管層）と神経網膜の間の脊椎動物の眼の裏側に位置している上皮細胞の単一の単層である。ＲＰＥは、血液−網膜障壁の構成要素の一つとして働き、ＲＰＥ細胞は、視覚サイクル維持、光受容体外部セグメント食作用及び遠位網膜と脈絡膜毛細血管層との間で栄養素、代謝廃棄物、イオン及び体液の輸送において重要な役割を担う。
【００７２】
用語“眼内”とは、眼組織の内部又は下部のことを指す。本明細書で使われる用語“眼内投与”は、組成物（例えば、本明細書に開示の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体）を眼のテノン嚢下（ｓｕｂ−Ｔｅｎｏｎ）、結膜下、脈絡膜上、硝子体内及び類似位置に伝達できる任意の投与のことを指す。一部の態様において、眼内投与は、硝子体内投与を含む。
【００７３】
用語“眼球疾患（ｏｃｕｌａｒ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）”は、網膜疾患のように眼又は眼の一部又は領域に影響を与えたり関連する疾患、疾病又は症状のことを指す。一部の態様において、本開示内容で治療できる眼症状は、糖尿病性網膜病症及び加齢黄斑変性を含む。本明細書に開示の組成物及び方法で治療できる他の眼球疾患は、糖尿病性黄斑浮腫、前部虚血性視神経病症（ＡＩＯＮ）、非動脈炎性前部虚血性視神経症（ＮＡＩＯＮ）、網膜静脈閉塞、網膜動脈閉塞又はそれらの組合せを含む。
【００７４】
本明細書で使われる用語“眼”は、眼球及び眼球を構成する組織と体液（例えば、鞏膜、角膜、前眼房（ａｎｔｅｒｉｏｒ  ｃｈａｍｂｅｒ）及び後眼房（ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ  ｃｈａｍｂｅｒ）、虹彩／瞳孔、水晶体、硝子体液、網膜、中心窩（ｆｏｖｅａ）、黄斑及び脈絡膜）、眼周囲筋肉（例えば、傾筋及び直筋）及び眼球内部又は隣接している視神経の一部を含む。
【００７５】
用語“視神経損傷”とは、視神経の正常の構造又は機能の変化のことを指す。視神経の正常の構造又は機能の変化は、緑内障を含む任意の疾患、障害又は損傷の結果であり得る。視神経の正常の機能の変化は、網膜から脳への視覚情報伝達能力のような視神経の適切な機能能力の任意の変化を含む。機能変化は、例えば、視野喪失、中心視損傷、異常色覚などであり、自体発現し得る。構造変化の例には、網膜神経線維損失、視神経の異常カピング（ｃｕｐｐｉｎｇ）及び／又は網膜の網膜神経節細胞層からの細胞損失が含まれる。本明細書で使われる“視神経損傷”とは、対象の一方又は両方の視神経の視神経損傷を含むことができる。
【００７６】
本明細書で使う用語“治療する（ｔｒｅａｔ）”、“治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）”及び“治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）”は、疾患関連症候群、合併症、症状又は生化学的徴候の進行、発達、重症度又は再発を反転、緩和、改善、阻害又は遅延又は予防しようとする目的で対象に行われた任意類型の介入又は過程、又は対象に活性剤を投与することを指す。治療は、疾患のある対象又は疾患のない対象（例えば、予防用）に対して行われ得る。
【００７７】
本明細書で使う“投与”は、当業者に公知の様々な方法と伝達系のうち任意のものを用いて対象に治療剤又は治療剤を含む組成物を物理的に導入することを指す。本明細書に記載の抗体に対する好ましい投与経路は、静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、脊髄、硝子体内、又は例えば注射又は注入による他の非経口投与経路を含む。本明細書で使う用語“非経口投与”は一般に、注射による腸内及び局所投与以外の投与方式を意味し、これに制限されないが、静脈内、腹腔内、筋肉内、動脈内、髄腔内、リンパ内、病変内、被膜内、眼窩内、心臓内、血内、経気管、皮下、表皮下、硝子体内、関節内、皮膜下、蜘蛛膜下、脊髄内、硬膜外及び胸骨内注射及び注入だけでなく、生体内電気穿孔を含む。これと違い、本明細書に記載の抗体は、非経口経路、例えば、局所、表皮又は粘膜投与経路、例えば、鼻腔内、経口、膣内、直腸、舌下又は局所投与され得る。投与はまた、例えば１回、複数回及び／又は１回以上の延長された期間にわたって行われ得る。
【００７８】
本明細書で使う用語“治療有効量”は、対象の疾患又は障害を“治療”したり、疾患又は障害（例えば、緑内障）の危険、潜在性、可能性又は発生を減少させるのに効果的な薬物単独又は他の治療剤と組み合わせた薬物の量を指す。“治療有効量”は、疾患又は障害（例えば、本明細書に開示の緑内障）を有するか、有する危険のある対象に、一部の改善又は実益を提供する薬物又は治療剤の量を含む。これによって、“治療有効量”は、疾患又は障害の危険、潜在性、可能性又は発生を減少させたり、又は一部緩和、軽減を提供し／又は少なくとも１つの指標（例えば、炎症増加）を減少させ／又は疾患又は障害の少なくとも１つの臨床症状を減少させる量である。
【００７９】
本明細書で使う用語“対象”は、任意のヒト又は非ヒト動物を含む。用語“非ヒト動物”は、全ての脊椎動物、例えば哺乳類及び非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ウシ、ニワトリ、両棲類、爬虫類などのような非哺乳類を含む。
【００８０】
用語“配列類似性１９を持つファミリー、メンバーＡ５”又は“ＦＡＭ１９Ａ５”は、５個の相同性が高いタンパク質のＴＡＦＡファミリー（ＦＡＭ１９ファミリーとも知られている。）に属するタンパク質のことを指す。Ｔａｎｇ  Ｔ．Ｙ．ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ８３（４）：７２７−３４（２００４）を参考されたい。それらのタンパク質は、所定位置に保存されたシステイン残基を含有し、ＣＣ−ケモカインファミリーに属する一種である大食細胞炎症タンパク質１−アルファ（ＭＩＰ−１−アルファ）とかすかに関連している。前記ＴＡＦＡタンパク質は、脳と脊髄の特定領域で発現する。それらのタンパク質は、神経発生過程で成体神経幹細胞によって生成及び分泌されると見なされる。ＦＡＭ１９Ａ５は、ＴＡＦＡ５又はケモカイン様タンパク質ＴＡＦＡ−５とも知られている。
【００８１】
ＦＡＭ１９Ａ５は、完全な中枢神経系の発生、分化及び形成に重要なものとされている。ＦＡＭ１９Ａ５はまた、多くの中枢神経系損傷及び／又は退行性脳疾患（例えば、ハンチントン病、パーキンソン病、アルツハイマー病、脳脊髓損傷、脳卒中及び脳腫瘍）の発病に重要な役割を果たす。中枢神経系損傷時に、神経幹細胞は正常星状細胞を反応性星状細胞に分化させるＦＡＭ１９Ａ５を生産する。これらの反応性星状細胞（小膠細胞と共に）は、様々なＥＣＭ（例えば、プロテオグリカン）を発現させ、網のように中枢神経系の損傷領域を囲んで神経細胞の再生を防止する神経膠瘢痕（ｇｌｉａｌ  ｓｃａｒ）の形成を誘導できる。ＦＡＭ１９Ａ５に対する拮抗剤（例えば、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体）は、中枢神経系損傷及び／又は疾患の予防及び／又は治療に用いることができる。米国特許番号９，５７９，３９８を参考されたい。
【００８２】
しかし、特定疾患、特に、血管異常と関連した疾患について、最近の研究では、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が実行可能な治療オプションでない可能性を提案した。Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  １３８（１）：４８−６３（２０１８）。Ｗａｎｇ等は、正常の健康な個体の脂肪組織は、スフィンゴシン−１−ホスフェート受容体２（Ｓ１ＰＲ２）を通じて血管平滑筋細胞（ＶＳＭＣ）の増殖及び移動を抑制し、損傷後新生内膜形成を弱化させる信号を伝達するＦＡＭ１９Ａ５を生成することを提示した。しかし、肥満個体では、脂肪組織においてＦＡＭ１９Ａ５発現（ｍＲＮＡとタンパク質の両方とも）が顕著に減少する。Ｗａｎｇ等は、このようなＦＡＭ１９Ａ５活性減少のため、多数の肥満個体で観察される心血管疾患の進行が加速化すると結論付けた。
【００８３】
ヒトにおいてＦＡＭ１９Ａ５をコードする遺伝子は、染色体２２に位置している。選択的スプライシングによって生産されるとされる次のような３つのヒトＦＡＭ１９Ａ５（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７）アイソ型（ｉｓｏｆｏｒｍ）がある：１３２個のアミノ酸からなるアイソ型１（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−１）、１２５個のアミノ酸からなるアイソ型２（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−２）及び５３個のアミノ酸からなるアイソ型３（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−３）。ヒトＦＡＭ１９Ａ５タンパク質は、膜結合及び可溶性（分泌）の形態で存在するとされる。アイソ型１は、一つの膜貫通領域を有する膜であるとされる。Ｔａｎｇ  Ｔ．Ｙ．ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ８３（４）：７２７−３４（２００４）に、分泌されたタンパク質（可溶性）として報告されたアイソ型２は、アミノ酸位置１−２５番に信号ペプチドを含有している。アイソ型３は、ＥＳＴデータに基づいて予測される。次は、３つの公知されたヒトＦＡＭ１９Ａ５アイソ型のアミノ酸配列である。
【００８４】
（Ｉ）アイソ型１（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−１、膜貫通タンパク質）：このアイソ型を標準配列として選定した。
【００８５】
ＭＡＰＳＰＲＴＧＳＲ  ＱＤＡＴＡＬＰＳＭＳ  ＳＴＦＷＡＦＭＩＬＡ  ＳＬＬＩＡＹＣＳＱＬ  ＡＡＧＴＣＥＩＶＴＬ  ＤＲＤＳＳＱＰＲＲＴ  ＩＡＲＱＴＡＲＣＡＣ  ＲＫＧＱＩＡＧＴＴＲ  ＡＲＰＡＣＶＤＡＲＩ  ＩＫＴＫＱＷＣＤＭＬ  ＰＣＬＥＧＥＧＣＤＬ  ＬＩＮＲＳＧＷＴＣＴ  ＱＰＧＧＲＩＫＴＴＴ  ＶＳ（配列番号１）
（ＩＩ）アイソ型２（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−２、可溶性タンパク質）：
ＭＱＬＬＫＡＬＷＡＬ  ＡＧＡＡＬＣＣＦＬＶ  ＬＶＩＨＡＱＦＬＫＥ  ＧＱＬＡＡＧＴＣＥＩ  ＶＴＬＤＲＤＳＳＱＰ  ＲＲＴＩＡＲＱＴＡＲ  ＣＡＣＲＫＧＱＩＡＧ  ＴＴＲＡＲＰＡＣＶＤ  ＡＲＩＩＫＴＫＱＷＣ  ＤＭＬＰＣＬＥＧＥＧ  ＣＤＬＬＩＮＲＳＧＷ  ＴＣＴＱＰＧＧＲＩＫ  ＴＴＴＶＳ（配列番号２）
（ＩＩＩ）アイソ型３（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−３）：
ＭＹＨＨＲＥＷＰＡＲ  ＩＩＫＴＫＱＷＣＤＭ  ＬＰＣＬＥＧＥＧＣＤ  ＬＬＩＮＲＳＧＷＴＣ  ＴＱＰＧＧＲＩＫＴＴ  ＴＶＳ（配列番号３）
用語“ＦＡＭ１９Ａ５”は、細胞によって自然的に発現するＦＡＭ１９Ａ５の任意の変異体又はアイソ型を含む。したがって、本明細書に記載された抗体は、同一種内の異なるアイソ型（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５の異なるアイソ型）と交差反応したり、或いはヒト以外の種のＦＡＭ１９Ａ５（例えば、マウスＦＡＭ１９Ａ５）と交差反応し得る。これと違い、前記抗体は、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的であり得、異なる種とはいかなる交差反応も示さないことがある。ＦＡＭ１９Ａ５又はその任意の変異体及びアイソ型は、これらを自然的に発現させる細胞又は組織から分離されたり、或いは組換えによって生産され得る。ヒトＦＡＭ１９Ａ５をコードするポリヌクレオチドは、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＢＣ０３９３９６、及び次のような配列を有する：
【００８６】
【表１】
2021532733.tif 000002
【００８７】
用語“ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対する拮抗剤”は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の発現及び／又は活性を抑制及び／又は中和する全ての拮抗剤のことを指す。このような拮抗剤は、ペプチド、核酸又は化合物であり得る。より具体的に、前記拮抗剤は、ＦＡＭ１９Ａ５を標的にするアンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、アプタマー、ＰＮＡ（ペプチド核酸）又はこれを含むベクターであり得る。一部の態様において、前記拮抗剤は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合する抗体又はその抗原結合部分であり得る。
【００８８】
用語“抗体（ａｎｔｉｂｏｄｙ）”及び“抗体（ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）”は、当業界の用語であり、本明細書で互換して使用可能であり、抗原に特異的に結合する抗原結合部位を持つ分子を指す。本明細書で使う用語は、全抗体及びこれらの任意の抗原結合断片（すなわち、“抗原結合部分”）又は単鎖を含む。一態様において、“抗体”は、二硫化結合によって互いに連結された少なくとも２個の重（Ｈ）鎖及び２個の軽（Ｌ）鎖を含む糖タンパク質又はその抗原結合部分を指す。さらに他の態様において、“抗体”は、単一可変ドメイン、例えばＶＨＨドメインを含む単鎖抗体を指す。それぞれの重鎖は、重鎖可変領域（本明細書ではＶＨと略す。）及び重鎖定常領域からなっている。特定の自然発生抗体において、前記重鎖定常領域は３個のドメインＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３からなっている。特定の自然発生抗体においてそれぞれの軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書ではＶＬと略す。）及び軽鎖定常領域からなっている。前記軽鎖定常領域は、一つのドメインＣＬからなっている。
【００８９】
前記ＶＨ及びＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と称する、より保存された領域が散在している、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称する超可変性領域にさらに細分化できる。ＶＨ及びＶＬのそれぞれは、アミノ末端からカルボキシ末端まで次のような順序で配置されている３個のＣＤＲ及び４個のＦＲからなっている：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３及びＦＲ４。前記重鎖及び軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含有する。前記抗体の定常領域は、免疫系の様々な細胞（例えば、効果器細胞）及び古典的補体系の第１成分（Ｃｌｑ）をはじめとする宿主組織又は因子に免疫グロブリンが結合することを媒介できる。
【００９０】
用語“Ｋａｂａｔ番号表記（Ｋａｂａｔ  ｎｕｍｂｅｒｉｎｇ）”及び類似の用語は、当業界で認定されており、抗体又はその抗原結合部分の重鎖及び軽鎖可変領域においてアミノ酸残基の番号を表記する体系のことを指す。特定の態様において、抗体のＣＤＲはＫａｂａｔ番号表記体系にしたがって決定され得る（例えば、Ｋａｂａｔ  ＥＡ  ＆  Ｗｕ  ＴＴ（１９７１）Ａｎｎ  ＮＹ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  １９０：３８２−３９１  ａｎｄ  Ｋａｂａｔ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ，（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．９１−３２４２参照）。Ｋａｂａｔ番号表記体系を用いると、抗体重鎖分子内ＣＤＲは、典型的に、アミノ酸位置３１〜３５番（ＣＤＲ１）（場合によって３５番以降に１個又は２個の追加アミノ酸を含んでもよい（Ｋａｂａｔ番号表記方式では３５Ａ及び３５Ｂと称する。）、アミノ酸位置５０〜６５番（ＣＤＲ２）及びアミノ酸位置９５〜１０２番（ＣＤＲ３）に存在する。Ｋａｂａｔ番号表記体系用いると、抗体軽鎖分子内ＣＤＲは、典型的に、アミノ酸位置２４〜３４番（ＣＤＲ１）、アミノ酸位置５０〜５６番（ＣＤＲ２）及びアミノ酸位置８９〜９７番（ＣＤＲ３）に存在する。特定の態様において、本明細書に記載の抗体のＣＤＲは、Ｋａｂａｔ番号表記方式によって決定している。
【００９１】
語句“Ｋａｂａｔにおけると同じアミノ酸位置番号表記”、“Ｋａｂａｔ位置”及びこれらの文法的変形は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）において抗体コンピレーションの重鎖可変ドメイン又は軽鎖可変ドメインに対して使われる番号表記体系のことを指す。この番号表記体系を用いると、実際の線形アミノ酸配列は、可変ドメインのＦＷ又はＣＤＲの短縮又はこれに挿入することに該当するものに該当する追加アミノ酸を含有することができる。例えば、重鎖可変ドメインは、Ｈ２の残基５２番以降に挿入された単一アミノ酸（Ｋａｂａｔによれば、残基５２ａ番）及び重鎖ＦＷ残基８２番以降に挿入された残基（例えば、Ｋａｂａｔによれば、残基８２ａ番、８２ｂ番及び８２ｃ番など）を含むことができる。表１Ｂを参照されたい。
【００９２】
【表２】
2021532733.tif 000003
【００９３】
所定の抗体に対する残基のＫａｂａｔ番号表記は、“標準”Ｋａｂａｔ番号表記された配列と前記抗体の配列の相同性の領域において整列によって決定され得る。代わりに、Ｃｈｏｔｈｉａは、構造ループの位置のことを指す（Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７））。Ｋａｂａｔ番号表記慣例を用いて番号表記した時、Ｃｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲ−Ｈ１ループの末端は、ループの長さによってＨ３２〜Ｈ３４の間で変わる（これは、Ｋａｂａｔ番号表記方式がＨ３５ＡとＨ３５Ｂで挿入（ｉｎｓｅｒｔｉｏｎｓ）を置くためである；３５Ａも３５Ｂもないと、ループは３２で終わる；３５Ａだけあると、ループは３３で終わる；３５Ａと３５Ｂの両方があると、ループは３４で終わる）。ＡｂＭ超可変領域は、Ｋａｂａｔ  ＣＤＲとＣｈｏｔｈｉａ構造ループ間の折衝を代弁するもので、Ｏｘｆｏｒｄ  ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアによって用いられる。
【００９４】
ＩＭＧＴ（ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ）も、ＣＤＲを含む免疫グロブリン可変領域に対する番号表記体系を提供する。例えば、本明細書に参考として含まれるＬｅｆｒａｎｃ，Ｍ．Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２７：５５−７７（２００３）を参照されたい。ＩＭＧＴ番号表記体系は、５，０００個を超える配列の整列、構造データ及び超可変ループの特性分析に基づくものであり、全ての種に対して可変及びＣＤＲ領域の比較を容易にする。ＩＭＧＴ番号表記体系によれば、ＶＨ−ＣＤＲ１は２６番〜３５番位置にあり、ＶＨ−ＣＤＲ２は位置５１番〜５７番位置にあり、ＶＨ−ＣＤＲ３は９３番〜１０２番位置にあり、ＶＬ−ＣＤＲ１は２７番〜３２番位置にあり、ＶＬ−ＣＤＲ２は５０番〜５２番位置にあり、ＶＬ−ＣＤＲ３は８９番〜９７番位置にある。
【００９５】
本開示内容で論議される全ての重鎖定常領域アミノ酸位置に対して、番号表記は、配列化された最初のヒトＩｇＧ１である骨髄腫タンパク質ＥＵのアミノ酸配列を記載したＥｄｅｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９６９，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ６３（１）：７８−８５）に最初に記載されたＥＵインデックスに従う。Ｅｄｅｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．のＥＵインデックスはまた、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．，Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａに提示されている。これによって、語句“Ｋａｂａｔに提示されたＥＵインデックス”又は“ＫａｂａｔのＥＵインデックス”及び“Ｋａｂａｔに提示されたＥＵインデックスに従う位置．．．”及びこれらの文法的変形は、Ｋａｂａｔ  １９９１に提示されたＥｄｅｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．のヒトＩｇＧ１ＥＵ抗体に基づく残基番号表記体系のことを指す。
【００９６】
可変ドメイン（重鎖及び軽鎖両方）及び軽鎖定常領域アミノ酸配列に用いられた番号表記体系は、Ｋａｂａｔ  １９９１に提示されているものである。
【００９７】
抗体は、免疫グロブリン分子の任意の類型（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ又はＩｇＹ）、任意の類型（例えば、ＩｇＤ、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１又はＩｇＡ２）、又は任意の亜型（例えば、ヒトにおいてＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４；及びマウスにおいてＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ３）を有することができる。免疫グロブリン、例えば、ＩｇＧ１は、最大限でいくつかのアミノ酸において互いに異なる様々な同種異因子型（ａｌｌｏｔｙｐｅ）で存在する。本明細書に開示の抗体は、通常知られたアイソ型、類型、亜型又は同種異因子型のいずれかからなり得る。特定の態様において、本明細書に開示の抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４亜型又はこれらの任意の混成型である。特定の態様において、前記抗体は、ヒトＩｇＧ１亜型又はヒトＩｇＧ２又はヒトＩｇＧ４亜型を有する。
【００９８】
“抗体”は、例えば、自然発生及び非自然発生抗体；単クローン性及び多クローン性抗体；キメラ及びヒト化抗体；ヒト及び非ヒト抗体、全合成抗体；単鎖抗体；単一特異的抗体；多重特異的抗体（二重特異的抗体を含む）；２個の重鎖と２個の軽鎖分子を含むテトラマー抗体；抗体軽鎖モノマー；抗体重鎖モノマー；抗体軽鎖ダイマー；抗体重鎖ダイマー；抗体軽鎖−抗体重鎖対；細胞内抗体（ｉｎｔｒａｂｏｄｙ）；ヘテロコンジュゲート（ｈｅｔｅｒｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ）抗体；１価抗体；単鎖抗体；ラクダ化（ｃａｍｅｌｉｚｅｄ）抗体；アフィボディ（ａｆｆｙｂｏｄｙ）；抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体（例えば、抗抗Ｉｄ抗体を含む）、及び完全に抗原結合可能な単一モノマー可変抗体ドメイン（例えば、ＶＨドメイン又はＶＬドメイン）からなる結合分子を含む単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）を含む（Ｈａｒｍｅｎ  Ｍ．Ｍ．ａｎｄ  Ｈａａｒｄ  Ｈ．Ｊ．Ａｐｐｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．７７（１）：１３−２２（２００７））。
【００９９】
本明細書で使う用語、抗体の“抗原結合部分”は、抗原（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する能力を保有した抗体の１つ以上の断片を指す。このような“断片”は、例えば、約８〜約１５００個のアミノ酸長であり、好適には、約８〜約７４５個アミノ酸長、好適には約８〜約３００個、例えば、約８〜約２００個アミノ酸又は約１０個〜約５０個又は１００個アミノ酸長である。抗体の抗原結合機能は全長抗体の断片によって行われ得るということが明らかにされた。抗体、例えば、本明細書に開示の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の“抗原結合部分”という用語に含まれる結合断片の例は、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１ドメインからなる１価断片であるＦａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域で二硫化連結部によって連結された２個のＦａｂ断片を含む２価断片であるＦ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一腕のＶＬ及びＶＨドメイン及び二硫化連結されたＦｖｓ（ｓｄＦｖ）からなるＦｖ断片；（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６）；及び（ｖｉ）分離された相補性決定領域（ＣＤＲ）又は（ｖｉｉ）場合によって合成リンカーによって接合され得る２個以上の分離されたＣＤＲの組合せを含む。また、Ｆｖ断片の２個のドメインであるＶＬとＶＨは、別個の遺伝子によってコードされるが、これらは、組換え方法を用いてこれらをＶＬとＶＨ領域が対をなして１価分子を形成する単一タンパク質鎖（単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られている）として作り得る合成リンカーによって接合され得る；例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；及びＨｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３参照。このような単鎖抗体はまた、抗体の“抗原結合部分”という用語内に含まれる。これらの抗体断片は、当業者に公知の従来技術を用いて得られ、前記断片は、無損傷抗体と同じ方式で有用性に対してスクリーニングされる。抗原結合部分は、組換えＤＮＡ技術によって又は無損傷免疫グロブリンの酵素的又は化学的切断によって生成され得る。
【０１００】
本明細書で使われる用語“可変領域”と“可変ドメイン”は同じ意味で使われ、当業界では普遍的である。前記可変領域とは、典型的に抗体の一部、一般に軽鎖又は重鎖の一部を指すものであり、典型的に、前記成熟した重鎖内には約アミノ末端１１０〜１２０個のアミノ酸があり、前記成熟した軽鎖内には約９０〜１１５個のアミノ酸があり、これらは、抗体間において配列が広範囲に異なり、特定抗体の特定抗原に対する結合と特異性において使用される。前記配列可変性は、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる領域に集中するが、前記可変ドメインにおいてより高度に保存された領域はフレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。
【０１０１】
特定機転又は理論に限定されるわけではないが、前記軽鎖及び重鎖のＣＤＲは、抗原と抗体の相互作用及び特異性を主に担当するものとみられる。特定の態様において、前記可変領域は、ヒト可変領域である。特定の態様において、前記可変領域は、齧歯類又はネズミ科のＣＤＲとヒトフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。特定の態様において、前記可変領域は、霊長類（例えば、非ヒト霊長類）可変領域である。特定の態様において、前記可変領域は、齧歯類又はネズミ科のＣＤＲと霊長類（例えば、非ヒト霊長類）フレームワーク領域（ＦＲ）を含む。
【０１０２】
本明細書で使う用語“重鎖（ＨＣ）”は、抗体と関連して用いたとき、定常ドメインのアミノ酸配列に基づいてＩｇＧの亜型、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４を含み、それぞれ抗体のＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭ類型を発生させる任意の別個のタイプ、例えば、アルファ（α）、デルタ（δ）、エプシロン（ε）、ガンマ（γ）及びミュー（μ）を指すことができる。
【０１０３】
本明細書で使う用語“軽鎖（ＬＣ）”は、抗体と関連して用いたとき、定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて任意の別個のタイプ、例えば、カッパ（κ）及びラムダ（λ）のことを指すことができる。軽鎖アミノ酸配列は、当業界によく公知されている。特定の態様において、前記軽鎖は、ヒト軽鎖である。
【０１０４】
用語“ＶＬ”及び“ＶＬドメイン”は、抗体の軽鎖可変領域のことを指すために互換的に使われる。
【０１０５】
用語“ＶＨ”及び“ＶＨドメイン”は、抗体の重鎖可変領域のことを指すために互換的に使われる。
【０１０６】
本明細書で使う用語“定常領域”又は“定常ドメイン”は互換的であり、当業界における通常の意味を有する。前記定常ドメインは、抗体部分、例えば、抗原に対する抗体の結合に直接関与することはないが、Ｆｃ受容体との相互作用のような様々な効果器機能を示し得る軽鎖及び／又は重鎖のカルボキシ末端部分である。免疫グロブリン分子の定常領域は一般に、免疫グロブリン可変ドメインに比べてより保存されたアミノ酸配列を有する。
【０１０７】
“Ｆｃ領域”（断片結晶化可能な領域）又は“Ｆｃドメイン”又は“Ｆｃ”は、免疫系の様々な細胞（例えば、効果器細胞）上に位置しているＦｃ受容体又は古典的補体系の第１成分（Ｃ１ｑ）に対する結合を含み、宿主組織又は因子に免疫グロブリンが結合することを媒介する抗体の重鎖のＣ末端領域のことを指す。これによって、Ｆｃ領域は、第１定常領域免疫グロブリンドメイン（例えば、ＣＨ１又はＣＬ）を除く抗体の定常領域を含む。ＩｇＧ、ＩｇＡ及びＩｇＤ抗体アイソ型において、Ｆｃ領域は、抗体の２個の重鎖の第２（ＣＨ２）及び第３（ＣＨ３）定常ドメインから由来した２個の同じタンパク質断片を含み；ＩｇＭ及びＩｇＥ  Ｆｃ領域は、それぞれのポリペプチド鎖にある３個の重鎖定常ドメイン（ＣＨドメイン２〜４）を含む。ＩｇＧの場合、Ｆｃ領域は免疫グロブリンドメインＣγ２とＣγ３との間及びＣγ１とＣγ２との間のヒンジを含む。免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は変わり得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は一般に、Ｃ２２６番又はＰ２３０番の位置にあるアミノ酸残基（又は、これら２個のアミノ酸の間のアミノ酸）から重鎖のカルボキシ末端まで伸長されるものに限定されるが、番号表記は、Ｋａｂａｔにおけると同様にＥＵインデックスに従う。ヒトＩｇＧ  Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインは、約アミノ酸２３１番から約アミノ酸３４０番に延長されており、ＣＨ３ドメインは、Ｆｃ領域においてＣｍドメインのＣ末端側に位置しているところ、すなわち、ＩｇＧの約アミノ酸３４１番から約アミノ酸４４７番に延長されている。本明細書で使うＦｃ領域は、任意の同種異因子型変異体を含む天然配列Ｆｃ、又は変異体Ｆｃ（例えば、非自然発生Ｆｃ）であり得る。Ｆｃはまた、この領域が分離状態にあるか、又は“Ｆｃ融合タンパク質”（例えば、抗体又は免疫癒着（ｉｍｍｕｎｏａｄｈｅｓｉｏｎ））とも呼ばれる“Ｆｃ領域を含む結合タンパク質”のようなＦｃ含有タンパク質ポリペプチドと関連して意味するものであり得る。
【０１０８】
“天然配列Ｆｃ領域”又は“天然配列Ｆｃ”は、自然から発見されたＦｃ領域のアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を含む。天然配列ヒトＦｃ領域は、天然配列ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域；天然配列ヒトＩｇＧ２  Ｆｃ領域；天然配列ヒトＩｇＧ３  Ｆｃ領域；及び天然配列ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域だけでなく、これらの自然発生変異体も含む。天然配列Ｆｃは、Ｆｃの様々な同種異因子型を含む（例えば、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）ｍＡｂｓ  １：１；Ｖｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ．ｅｔ  ａｌ．Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開）参照）。
【０１０９】
“Ｆｃ受容体”又は“ＦｃＲ”は、免疫グロブリンのＦｃ領域に結合する受容体である。ＩｇＧ抗体に結合するＦｃＲは、Ｆｃγファミリーの受容体とこれら受容体の対立遺伝子変異体及び他の方式でスプライシングされた形態を含む。前記Ｆｃγファミリーは、３個の活性化受容体（マウスのＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＩ及びＦｃγＲＩＶ；ヒトのＦｃγＲＩＡ、ＦｃγＲＩＩＡ及びＦｃγＲＩＩＩＡ）と一つの阻害受容体（ＦｃγＲＩＩＢ）からなっている。ヒトＩｇＧ１は、大部分のヒトＦｃ受容体と結合し、最も強いＦｃ効果器機能を導き出す。ヒトＩｇＧ１は、それが結合する活性化Ｆｃ受容体の類型と関連してネズミのＩｇＧ２ａと同等なものと見なすことができる。逆に、ヒトＩｇＧ４は、最小のＦｃ効果器機能を導き出す（Ｖｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ．ｅｔ  ａｌ．Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開）参照）。
【０１１０】
前記定常領域は、１つ以上の効果器機能を除去するために、例えば組換え技術によって操作され得る。“効果器機能”は、抗体Ｆｃ領域とＦｃ受容体又はリガンドの相互作用又はそれから生じる生化学的反応を指す。例示的な“効果器機能”は、Ｃ１ｑ結合、補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）、Ｆｃ受容体結合、ＡＤＣＣ及び抗体依存性細胞媒介食作用（ＡＤＣＰ）のようなＦｃγＲ媒介効果器機能及び細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体；ＢＣＲ）の下向き調節を含む。このような効果器機能は一般に、Ｆｃ領域が結合ドメイン（例えば、抗体可変ドメイン）と組み合わせられることを必要とする。したがって、用語“Ｆｃ機能のない定常領域”は、Ｆｃ領域によって媒介された１つ以上の効果器機能が減少したり又は存在しない定常領域を含む。
【０１１１】
抗体の効果器機能は、互いに異なる接近法によって減少又は回避され得る。抗体の効果器機能は、Ｆｃ領域が欠如している抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）又はモノマーＶＨ又はＶＬドメインからなるｓｄＡｂのような）を使用することによって減少又は回避され得る。これと違い、Ｆｃ領域の他の価値ある特性（例えば、長い半減期及びヘテロダイマー化）は保有しながらＦｃ領域において特定残基に連結されている糖を除去して抗体の効果器機能を減少させることによって、いわゆる無糖化（ａｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ）抗体が生成され得る。無糖化抗体は、例えば、糖が付着している残基を欠失又は変更することによって、糖を酵素的に除去することによって、グリコシル化阻害剤の存在の下に培養された細胞に抗体を生産することによって、又はタンパク質をグリコシル化できない細胞（例えば、バクテリア宿主細胞）において抗体を発現させることによって生成され得る。例えば、米国特許公開番号２０１２０１００１４０を参照する。他の接近法は、効果器機能が減少したＩｇＧ亜型のＦｃ領域を利用することであり、例えば、ＩｇＧ２及びＩｇＧ４抗体は、ＩｇＧ１及びＩｇＧ３に比べてより低いレベルのＦｃ効果器機能を有することを特徴とする。Ｆｃ部分のＣＨ２ドメインにおいてヒンジ領域の最も近くにある残基が抗体の効果器機能を担当するが、先天免疫系の効果器細胞上でＣ１ｑ（補体）及びＩｇＧ−Ｆｃ受容体（ＦｃγＲ）に対して大きく重なった結合部位を含有しているわけである（Ｖｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ．ｅｔ  ａｌ．Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開））。したがって、Ｆｃ効果器機能が減少したり或いは存在しない抗体は、例えば、ＩｇＧ４アイソ型のＩｇＧ抗体のＣＨ２ドメインとＩｇＧ１アイソ型のＩｇＧ抗体のＣＨ３ドメインを含むキメラＦｃ領域、又はＩｇＧ２のヒンジ領域とＩｇＧ４のＣＨ２領域を含むキメラＦｃ領域（例えば、Ｌａｕ  Ｃ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９１：４７６９−４７７７（２０１３）参照）、又はＦｃ効果器機能を変更、例えばＦｃ機能を減少させたり或いはなくす突然変異を持つＦｃ領域を生成させることによって製造され得る。突然変異があるこのようなＦｃ領域は、当業界に公知されている。例えば、開示内容が全体的に本明細書に参考として含まれる米国特許公開番号２０１２０１００１４０とそこに引用されている米国出願とＰＣＴ出願及びＡｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｍＡｂｓ  １：６，５７２−５７９（２００９）を参照する。
【０１１２】
“ヒンジ”、“ヒンジドメイン”又は“ヒンジ領域”又は“抗体ヒンジ領域”は、ＣＨ１ドメインをＣＨ２ドメインと接合させてヒンジの上、中及び下部を含む重鎖定常領域のドメインのことを指す（Ｒｏｕｘ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９８  １６１：４０８３）。前記ヒンジは抗体の結合及び効果器領域間の可撓性のレベル変化を提供し、また２個の重鎖定常領域間の分子間二硫化結合のための部位を提供する。本明細書に開示されているように、ヒンジは、全てのＩｇＧアイソ型に対してＧｌｕ２１６から始まってＧｌｙ２３７で終わる（Ｒｏｕｘ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６１：４０８３）。野生型ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４ヒンジの配列が当業界に知られている。例えば、Ｋａｂａｔ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．９１−３２４２；Ｖｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ．ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開）を参照する。
【０１１３】
用語“ＣＨ１ドメイン”は、重鎖定常ドメインにおいてヒンジに可変ドメインを連結する重鎖定常領域のことを指す。本明細書で使うＣＨ１ドメインは、Ａ１１８から始まってＶ２１５で終わる。用語“ＣＨ１ドメイン”は、野生型ＣＨ１ドメインだけでなく、その自然に存在する変異体（例えば、同種異因子型）を含む。ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４（野生型及び同種異因子型を含む）のＣＨ１ドメイン配列は、当業界に公知されている（例えば、上のＫａｂａｔ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）及びＶｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ．ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開参照）。例示的なＣＨ１ドメインは、例えば、米国特許公開第２０１２０１００１４０号及びそこに引用されている米国特許、公開公報及びＰＣＴ公報に記載されている抗体の生物学的活性、例えば、半減期を変更する突然変異を持つＣＨ１ドメインを含む。
【０１１４】
用語“ＣＨ２ドメイン”は、重鎖定常ドメインでＣＨ３ドメインにヒンジを連結する重鎖定常領域のことを指す。本明細書で使うＣＨ２ドメインは、Ｐ２３８から始まってＫ３４０で終わる。用語“ＣＨ２ドメイン”は、野生型ＣＨ２ドメインだけでなく、その自然に存在する変異体（例えば、同種異因子型）を含む。ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４（野生型及び同種異因子型を含む）のＣＨ２ドメイン配列は、当業界に公知されている（例えば、上のＫａｂａｔ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）及びＶｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ．ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開参照）。例示的なＣＨ２ドメインは、例えば、米国特許公開第２０１２０１００１４０号及びそこに引用されている米国特許、公開公報及びＰＣＴ公報に記載されている抗体の生物学的活性、例えば、半減期及び／又は減少したＦｃ効果器機能を変更する突然変異を持つＣＨ２ドメインを含む。
【０１１５】
用語“ＣＨ３ドメイン”は、重鎖定常ドメインにおいてＣＨ２ドメインに対してＣ末端である重鎖定常領域のことを指す。本明細書で使うＣＨ３ドメインは、Ｇ３４１から始まってＫ４４７で終わる。用語“ＣＨ３ドメイン”は、野生型ＣＨ３ドメインだけでなく、その自然に存在する変異体（例えば、同種異因子型）を含む。ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４（野生型及び同種異因子型を含む）のＣＨ３ドメイン配列は、当業界に公知されている（例えば、上のＫａｂａｔ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）及びＶｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ．ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開参照）。例示的なＣＨ３ドメインは、例えば、米国特許公開第２０１２０１００１４０号及びそこに引用されてい米国特許、公開公報及びＰＣＴ公報に記載されている抗体の生物学的活性、例えば半減期を変更する突然変異を持つＣＨ３ドメインを含む。
【０１１６】
本明細書で使う“アイソ型”は、重鎖定常領域遺伝子によってコードされる抗体類型（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、及びＩｇＥ抗体）のことを指す。
【０１１７】
“同種異因子型”は、いくつのアミノ酸を異にする特定アイソ型グループ内自然発生変異体のことを指す（例えば、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，（２００９）ｍＡｂｓ  １：１参照）。本明細書に記載されている抗体は、任意の同種異因子型を有することができる。ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４の同種異因子型は、当業界に公知されている。例えば、上のＫａｂａｔ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）；Ｖｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ．ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開）；及びＬｅｆｒａｎｃ  ＭＰ，ｍＡｂｓ  １：４，１−７（２００９）を参照する。
【０１１８】
語句“抗原を認識する抗体”及び“抗原に特異的な抗体”は、用語“抗原に特異的に結合する抗体”と本明細書で互換して使われる。
【０１１９】
本明細書で使う“分離された抗体”は、互いに異なる抗原特異性を持つ他の抗体が実質的にない抗体を意味する（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する分離された抗体は、ＦＡＭ１９Ａ５以外の抗原に特異的に結合する抗体が実質的にない）。しかし、ＦＡＭ１９Ａ５のエピトープに特異的に結合する分離された抗体は、互いに異なる種の他のＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に交差反応性を有することができる。
【０１２０】
“結合親和性”は、一般に、分子（例えば、抗体）の単一結合部位とその結合パートナー（例えば、抗原）間の非共有相互作用の総和の強度を意味する。別段の提示がない限り、本明細書で使う“結合親和性”は、結合対のメンバー（例えば、抗体及び抗原）間１：１相互作用を反映した固有結合親和性を意味する。パートナーＹに対する分子Ｘの親和性は、一般に、解離定数（ＫＤ）によって表現され得る。親和性は、平衡解離定数（ＫＤ）及び平衡結合定数（ＫＡ）を含むが、これに限定されない当業界に公知の多数の方法で測定及び／又は表示され得る。前記ＫＤは、ｋｏｆｆ／ｋｏｎの商から計算され、モル濃度（Ｍ）で表示され、ＫＡはｋｏｎ／ｋｏｆｆの商から計算される。ｋｏｎは、例えば、抗原に対する抗体の結合速度定数を意味し、ｋｏｆｆは、例えば、抗原に対する抗体の解離を意味する。ｋｏｎ及びｋｏｆｆは、免疫分析（例えば、酵素結合免疫吸着分析（ＥＬＩＳＡ））、ＢＩＡＣＯＲＥＴＭ又は力学的排除分析（ＫｉｎＥｘＡ（登録商標））のように当業者に公知の技術によって決定され得る。
【０１２１】
本明細書で使う用語“特異的に結合”、“特異的に認識”、“特異的結合”、“選択的結合”及び“選択的に結合”は、抗体と関連して類似の用語であり、抗原（例えば、エピトープ又は免疫複合体）に結合する分子（例えば、抗体）のことを指し、結合は、当業者によって理解されるものである。例えば、抗原に特異的に結合する分子は、例えば免疫分析、ＢＩＡＣＯＲＥＴＭ、ＫｉｎＥｘＡ（登録商標）  ３０００機器（Ｓａｐｉｄｙｎｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｂｏｉｓｅ，ＩＤ）又は当業界に公知されている他の分析法によって決定したとき、通常、より低い親和度を持つ他のペプチド又はポリペプチドに結合し得る。特定の態様において、抗原に特異的に結合する分子は、この分子が他の抗原に結合するとき、ＫＡに比べて、少なくとも２ｌｏｇｓ、２．５ｌｏｇｓ、３ｌｏｇｓ、４ｌｏｇｓ以上さらに大きいＫＡで前記抗原に結合する。
【０１２２】
抗体は典型的に、１０−５〜１０−１１Ｍ以下の解離定数（ＫＤ）によって反映される高い親和度でこれらの同族抗原（ｃｏｇｎａｔｅ  ａｎｔｉｇｅｎ）に特異的に結合する。約１０−４Ｍを超える任意のＫＤは一般に、非特異的結合を意味すると見なされる。本明細書で使う抗原に“特異的に結合する”抗体は、高い親和度で抗原及び実質的に同じ抗原に結合する抗体のことを指し、これは、例えば、前記所定の抗原を使用するＢＩＡＣＯＲＥＴＭ２０００機器で免疫分析（例えば、ＥＬＩＳＡ）又は表面プラズマ共鳴（ＳＰＲ）技術によって決定したとき、１０−７Ｍ以下、好ましくは１０−８Ｍ以下、より好ましくは１０−９Ｍ以下、最も好ましくは１０−８Ｍ〜１０−１０Ｍ以下のＫＤを有することを意味するが、この抗体は、関連のない抗原には高い親和度で結合しない。
【０１２３】
本明細書で使う“抗原”は、タンパク質、ペプチド又はハプテン（ｈａｐｔｅｎ）のような任意の天然又は合成免疫原性物質のことを指す。抗原は、ＦＡＭ１９Ａ５又はその断片であり得る。
【０１２４】
本明細書で使う“エピトープ”は、当業界の用語で、抗体が特異的に結合できる抗原の局在化された領域を指す。エピトープは、例えばポリペプチドの隣接アミノ酸（線形又は隣接エピトープ）であるか、又はエピトープは、例えばポリペプチド又はポリペプチドの２個以上の隣接しない領域が集合したもの（立体形態、非線形、不連続又は非隣接エピトープ）であり得る。隣接アミノ酸から形成されたエピトープは、いつもではないが、典型的に変性（ｄｅｎａｔｕｒｉｎｇ）溶媒に露出時に維持されるのに対し、３次フォルディングによって形成されたエピトープは、典型的に変性溶媒で処理時に喪失される。エピトープは典型的に、特有の空間的立体形態内に少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５又は２０個のアミノ酸を含む。所定の抗体によってどのエピトープが結合するかを決定するための方法（すなわち、エピトープマッピング）は、当業界によく公知されており、例えば（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５の）重複又は隣接ペプチドを所定の抗体（例えば、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体）との反応性に対して試験する免疫ブロットと免疫沈殿分析を含む。エピトープの空間的立体形態を決定する方法は、当業界における技術及び本明細書に記載の技術、例えばｘ線結晶学、２次元核磁気共鳴及びＨＤＸ−ＭＳを含む（例えば、Ｅｐｉｔｏｐｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．６６，Ｇ．Ｅ．Ｍｏｒｒｉｓ，Ｅｄ．（１９９６）参照）。
【０１２５】
特定の態様において、前記抗体が結合するエピトープは、例えば、ＮＭＲ分光法、Ｘ線回折結晶学研究、ＥＬＩＳＡ分析、質量分光分析と結合した水素／重水素交換（例えば、液体クロマトグラフィー電子噴霧質量分光分析）、アレイベースのオリゴペプチドスキャニング分析及び／又は突然変異誘発マッピング（例えば、部位指向突然変異誘発マッピング）によって決定され得る。Ｘ線結晶学の場合、決定化は当業界に公知の方法のいずれかを用いて達成され得る（例えば、Ｇｉｅｇｅ  Ｒ  ｅｔ  ａｌ，（１９９４）Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  Ｄ  Ｂｉｏｌ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  ５０（Ｐｔ４）：３３９−３５０；ＭｃＰｈｅｒｓｏｎ  Ａ（１９９０）Ｅｕｒ  Ｊ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  １８９：１−２３；Ｃｈａｙｅｎ  ＮＥ（１９９７）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ５：１２６９−１２７４；ＭｃＰｈｅｒｓｏｎ  Ａ（１９７６）Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２５１：６３００−６３０３参照）。抗体：抗原結晶は、周知のＸ線回折技術を用いて研究でき、Ｘ−ＰＬＯＲ（Ｙａｌｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，１９９２，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎｓ，Ｉｎｃ．によって配布；例えば、Ｍｅｔｈ  Ｅｎｚｙｍｏｌ（１９８５）ｖｏｌｕｍｅｓ  １１４  ＆  １１５，ｅｄｓ  Ｗｙｃｋｏｆｆ  Ｈ．Ｗ．ｅｔ  ａｌ．，；Ｕ．Ｓ．２００４／００１４１９４参考）及びＢＵＳＴＥＲ（Ｂｒｉｃｏｇｎｅ  Ｇ．（１９９３）Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  Ｄ  Ｂｉｏｌ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  ４９（Ｐｔ１）：３７−６０；Ｂｒｉｃｏｇｎｅ  Ｇ．（１９９７）Ｍｅｔｈ  Ｅｎｚｙｍｏｌ  ２７６Ａ：３６１−４２３，ｅｄ  Ｃａｒｔｅｒ  ＣＷ；Ｒｏｖｅｒｓｉ  Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，（２０００）Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  Ｄ  Ｂｉｏｌ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  ５６（Ｐｔ  １０）：１３１６−１３２３）のようなコンピュータソフトウェアを用いて精製（ｒｅｆｉｎｅ）され得る。突然変異誘発マッピング研究は、当業者に公知された任意の方法を用いて行うことができる。アラニンスキャニング突然変異誘発技術を含む突然変異誘発技術の記載については、例えば、Ｃｈａｍｐｅ  Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，（１９９５）Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７０：１３８８−１３９４及びＣｕｎｎｉｎｇｈａｍ  Ｂ．Ｃ．  ＆  Ｗｅｌｌｓ  Ｊ．Ａ．（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４４：１０８１−１０８５を参考する。
【０１２６】
用語“エピトープマッピング”は、抗体抗原認識に対する分子決定要因の同定過程を指す。
【０１２７】
２個以上の抗体と関連して用語“同一エピトープに結合”は、所定の方法によって決定するとき、抗体がアミノ酸残基の同一セグメントに結合するということを意味する。抗体が本明細書に記載の抗体と“ＦＡＭ１９Ａ５上の同一エピトープ”に結合するか否かを決定するための技術は、エピトープマッピング方法、例えばエピトープの原子分解能を提供する抗原：抗体複合体の結晶のｘ線分析及び水素／重水素交換質量分光分析（ＨＤＸ−ＭＳ）を含む。他の方法は、抗原断片又は抗原の突然変異した変異体に対する抗体の結合をモニタリングすることであり、ここで、前記抗原配列内のアミノ酸残基の変形による結合損失は、だいてい、エピトープ成分の表示として見なされる。また、エピトープマッピングのための電算組合せ法も利用可能である。これらの方法は、組合せファージディスプレイペプチドライブラリーから特定の短いペプチドを親和性分離する関心抗体の能力に依存する。同じＶＨ及びＶＬ又は同じＣＤＲ１、２及び３配列を有する抗体は、同じエピトープに結合すると予想される。
【０１２８】
“標的との結合に対して他の抗体と競合”する抗体は、前記他の抗体の標的結合を（部分的に又は完全に）阻害する抗体を指す。２個の抗体が標的との結合に対して互いに競合するか否か、すなわち一つの抗体が他の抗体の標的結合を阻害するか否か、及び阻害する程度は、公知の競合実験を用いて決定することができる。特定の態様において、一つの抗体は他の抗体の標的結合において競合し、この結合を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％まで阻害する。阻害又は競合レベルは、抗体が“遮断抗体”（すなわち、標的とまず培養される低温抗体）であるかどうかによって異なり得る。競合分析は、例えば、Ｅ．ｄ．Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｄａｖｉｄ  Ｌａｎｅ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂ  Ｐｒｏｔｏｃ；２００６；ｄｏｉ：１０．１１０１／ｐｄｂ．ｐｒｏｔ  ４２７７又はＥ．ｄ．Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｄａｖｉｄ  Ｌａｎｅ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ，ＵＳＡ  １９９９による“Ｕｓｉｎｇ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ”の第１１章に記載されたとおりに実施できる。競合抗体は、同一エピトープ、重複エピトープ又は隣接エピトープ（例えば、立体障害で立証される）に結合する。
【０１２９】
他の競合結合分析としては、固相直接又は間接放射性免疫分析（ＲＩＡ）、固相直接又は間接酵素免疫分析（ＥＩＡ）、サンドウィッチ競合分析（Ｓｔａｈｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  ９：２４２（１９８３）参照）；固相直接ビオチン−アビジンＥＩＡ（Ｋｉｒｋｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３７：３６１４（１９８６）参照）；固相直接標識化分析、固相直接標識化サンドウィッチ分析（Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ（１９８８）参照）；１−１２５標識を使用する固相直接標識ＲＩＡ（Ｍｏｒｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２５（１）：７（１９８８）参照）；固相直接ビオチン−アビジンＥＩＡ（Ｃｈｅｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  １７６：５４６（１９９０）参照）；及び直接標識化ＲＩＡ（Ｍｏｌｄｅｎｈａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３２：７７（１９９０）参照）を含む。
【０１３０】
“二重特異的”又は“二重機能性抗体”は、２個の異なる重鎖／軽鎖対が２個の異なる結合部位を持つ人工混成抗体である。二重特異的抗体は、ハイブリドーマの融合又はＦａｂ’断片の連結を含む様々な方法によって生産され得る。例えば、Ｓｏｎｇｓｉｖｉｌａｉ  ＆  Ｌａｃｈｍａｎｎ，Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７９：３１５−３２１（１９９０）；Ｋｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８，１５４７−１５５３（１９９２）を参照する。
【０１３１】
本明細書で使う“単クローン性抗体”は、特定エピトープに対して単一結合特異性と親和性を示す抗体であるか、又は全ての抗体が特定エピトープに対して単一結合特異性と親和性を示す抗体組成のことを指す。したがって、用語“ヒト単クローン性抗体”は、単一結合特異性を示し、ヒト生殖系（ｇｅｒｍｌｉｎｅ）免疫グロブリン配列から由来した可変及び選択的定常領域を有する抗体又は抗体組成のことを指す。一部の態様において、ヒト単クローン性抗体は、例えば、不滅化細胞に融合されたヒト重鎖転移遺伝子と軽鎖転移遺伝子を含むゲノムを持つ遺伝子導入（ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ）非ヒト動物、例えば遺伝子導入マウスから得たＢ細胞を含むハイブリドーマによって生産される。
【０１３２】
本明細書で使う用語“組換えヒト抗体”は、（ａ）ヒト免疫グロブリン遺伝子に対して遺伝子導入又は染色体導入（ｔｒａｎｓｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌ）動物（例えば、マウス）から分離された抗体又はそれから製造されたハイブリドーマ、（ｂ）抗体を発現させるために形質転換された宿主細胞から、例えばトランスフェクトーマ（ｔｒａｎｓｆｅｃｔｏｍａ）から分離された抗体、（ｃ）組換え組合せヒト抗体ライブラリーから分離された抗体、及び（ｄ）他のＤＮＡ配列にヒト免疫グロブリン遺伝子配列をスプライシングすることを伴う任意の他の手段によって製造、発現、生成又は分離された抗体、のような組換え手段によって製造、発現、生成又は分離された全てのヒト抗体を含む。このような組換えヒト抗体は、生殖系遺伝子によってコードされる特定のヒト生殖系免疫グロブリン配列を用いるが、例えば、抗体成熟化中に起こる後続再配列と突然変異を含む可変及び定常領域を含む。当業界に公知された通り（例えば、Ｌｏｎｂｅｒｇ（２００５）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３（９）：１１１７−１１２５参照）、前記可変領域は、外来抗原に対して特異的な抗体を形成するように再配列される様々な遺伝子によってコードされる抗原結合ドメインを含有する。再配列の他にも、前記可変領域は、外来抗原に対する抗体の親和性を増加させるために多数の単一アミノ酸変化（体細胞突然変異又は超突然変異という）によってさらに変形され得る。前記定常領域は、抗原に対する追加反応にしたがって変わるだろう（すなわち、アイソ型変化）。したがって、抗原に反応して軽鎖及び重鎖免疫グロブリンポリペプチドをコードする、再配列され体細胞突然変異した核酸分子は、本来の核酸分子と配列同一性を有することはできないが、その代わりに、実質的に同一又は類似するであろう（すなわち、少なくとも８０％同一性を有する）。
【０１３３】
“ヒト抗体（ＨｕＭＡｂ）”は、フレームワークとＣＤＲ領域が両方ともヒト生殖系免疫グロブリン配列から由来した可変領域を有する抗体のことを指す。また、前記抗体が定常領域を含有すると、前記定常領域もヒト生殖系免疫グロブリン配列から由来する。本明細書に記載の抗体は、ヒト生殖系免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、試験管内無作為又は部位特異的突然変異誘発によって又は生体内体細胞突然変異によって導入された突然変異）を含むことができる。しかし、本明細書で用いる用語“ヒト抗体”は、マウスのような他の哺乳類種の生殖系から由来したＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列に移植された抗体を含まない。用語“ヒト”抗体と“完全なヒト”抗体は同じ意味で使われる。
【０１３４】
“ヒト化”抗体は、非ヒト抗体のＣＤＲドメイン外部のアミノ酸の一部、大部分又は全部が、ヒト免疫グロブリンから由来した相応するアミノ酸に置換された抗体のことを指す。抗体のヒト化された形態の一部の態様において、ＣＤＲドメイン外部のアミノ酸の一部、大部分又は全部がヒト免疫グロブリンのアミノ酸に置換されており、１つ以上のＣＤＲ領域内部のアミノ酸の一部、大部分又は全部は変わらずに残っている。アミノ酸の小さい添加、欠失、挿入、置換又は変形は、これらが特定抗原に結合する抗体の能力をなくさない限り、許容可能である。“ヒト化”抗体は、原始抗体の抗原特異性に類似する抗原特異性を維持する。
【０１３５】
“キメラ抗体”は、マウス抗体から可変領域が由来し、ヒト抗体から定常領域が由来した抗体のように、一つの種から可変領域が由来し、他の種から定常領域が由来した抗体のことを指す。
【０１３６】
本明細書で使う用語“交差反応”は、異なる種のＦＡＭ１９Ａ５に結合する本明細書に開示の抗体の能力を指す。例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合する本明細書に開示の抗体は、他の種のＦＡＭ１９Ａ５（例えば、マウスＦＡＭ１９Ａ５）にも結合できる。本明細書で使う交差反応性は、結合分析（例えば、ＳＰＲ、ＥＬＩＳＡ）で精製された抗原との特異的反応性を検出することによって又はＦＡＭ１９Ａ５を生理学的に発現する細胞に結合したり又はそれとも前記細胞と機能的に相互作用することによって測定され得る。交差反応性を決定するための方法は、本明細書に記載されている標準結合分析、例えば、ＢＩＡＣＯＲＥＴＭ２０００  ＳＰＲ機器（Ｂｉａｃｏｒｅ  ＡＢ，Ｕｐｐｓａｌａ、スウェーデン）を用いたＢＩＡＣＯＲＥＴＭ表面プラズマ共鳴（ＳＰＲ）分析、又は流細胞計数技術を含む。
【０１３７】
本明細書に開示の用語“自然発生”を対象体に適用時に、対象体が自然から発見され得るという事実を意味する。例えば、自然のソースから分離可能であり、実験室で人によって意図的に変形されない有機体（ウイルスを含む）内に存在するポリペプチド又はポリヌクレオチド配列は自然発生である。
【０１３８】
“ポリペプチド”は、少なくとも２個の連続連結されたアミノ酸残基を含む鎖のことを指し、前記鎖の長さに上限はない。タンパク質内の１つ以上のアミノ酸残基は、グリコシル化、ホスホリル化又は二硫化結合形成のような変形を含有できるが、これに限定されるものではない。“タンパク質”は、１つ以上のポリペプチドを含むことができる。
【０１３９】
本発明で使用する用語“核酸分子”は、ＤＮＡ分子及びＲＮＡ分子を含む。核酸分子は、単鎖又は二重鎖であり得、ｃＤＮＡであり得る。
【０１４０】
本明細書で使われる用語“ベクター”は、連結されたさらに他の核酸を輸送できる核酸分子を意味する。ベクターの一類型は、追加ＤＮＡ片が結紮され得る円形の二重鎖ＤＮＡループを意味する“プラスミド”である。ベクターのさらに他の類型は、追加ＤＮＡ片がウイルスゲノムに連結され得るウイルスベクターである。特定ベクターは、これらが導入される宿主細胞で自己複製できる（例えば、バクテリア性複製起源を持つバクテリアベクター及びエピソーマル（ｅｐｉｓｏｍａｌ）哺乳類動物）。他のベクター（例えば、非エピソーマル哺乳類ベクター）は、宿主細胞に導入時に宿主細胞のゲノムに統合でき、これによって宿主ゲノムに沿って複製される。さらに、特定ベクターは、これらが作動的に連結された遺伝子の発現を指示できる。このようなベクターを本明細書では“組換え発現ベクター”（又は、単に“発現ベクター”）という。一般に、組換えＤＮＡ技術において活用性のある発現ベクターは、しばしばプラスミドの形態である。本明細書において、“プラスミド”と“ベクター”は、最も一般的に用いられるベクターの形態がプラスミドであることから、互換して使用されてもよい。しかし、等価の機能を担う他の形態の発現ベクター、例えば、ウイルスベクター（例えば、複製欠陥レトロウイルス、アデノウイルス及びアデノ関連ウイルス）も含まれる。
【０１４１】
本発明で使用する用語“組換え宿主細胞”（又は、簡単に“宿主細胞”）は、細胞内自然的に存在しない核酸を含む細胞のことを指し、組換え発現ベクターが導入された細胞であり得る。このような用語は、特定の対象細胞だけでなく、このような細胞の子孫のことも指すものとして理解すべきである。突然変異や環境的な影響によって次の世代には特定の変形が起き得る点から、このような子孫は実際に親細胞と同一であるとはいえないが、本明細書で使う用語“宿主細胞”の範囲内に依然として含まれる。
【０１４２】
本発明で使用する用語“連結された”は、２個以上の分子の会合を指す。前記連結は、共有連結又は非共有連結であり得る。前記連結はまた、遺伝子連結（すなわち、組換えによる融合）であり得る。このような連結は、化学的コンジュゲーション及び組換えタンパク質生産のような、当業界で認める様々な技術を用いて達成され得る。
【０１４３】
本明細書で使われる用語“治療有効量”は、対象の疾患又は障害を“治療”したり、或いは疾患又は障害（例えば、糖尿病性網膜病症又は加齢黄斑変性）の危険、潜在性、可能性又は発生を減少させるのに効果的な薬物単独又は他の治療剤と組み合わせた薬物の量を意味する。“治療有効量”は、疾患又は障害（例えば、糖尿病性網膜病症又は加齢黄斑変性）を持っているか或いは持つ危険がある対象に一部改善又は実益を提供する薬物又は治療剤（例えば、本明細書に開示の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体）の量を含む。これによって、“治療有効量”は、疾患又は障害の危険、潜在性、可能性又は発生を減少させたり、又は一部緩和、軽減を提供し／又は少なくとも一つの指標を減少させ／又は疾患又は障害（例えば、糖尿病性網膜病症又は加齢黄斑変性）の少なくとも一つの臨床症状を減少させる量である。
【０１４４】
＜ＩＩ．網膜病症及び／又は黄斑変性を治療する方法＞
本明細書は、必要とする対象において眼球疾患を治療する方法を開示する。より具体的に、本明細書に開示の方法は、網膜病症、特に糖尿病性網膜病症を治療するために用いることができる。本明細書に開示の方法はまた、黄斑変性、特に加齢黄斑変性を治療するために用いることができる。次に記載するように、糖尿病性網膜病症及び加齢黄斑変性のような眼障害は、網膜電位減少と関連がある。したがって、本明細書はまた、必要とする対象（例えば、糖尿病性網膜病症又は加齢黄斑変性を持つ対象）において網膜電位を改善する方法を提供する。
【０１４５】
一部の態様において、本明細書に開示の方法は、前記対象にＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対する拮抗剤（“ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤”）を投与することを含む。一部の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ標的化ＦＡＭ１９Ａ５、アプタマー、ＰＮＡ又はこれを含むベクターである。他の態様において、前記ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、前記ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質（“抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体”）に特異的に結合する抗体又はその抗原結合部分、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体をコードするポリヌクレオチド又はそのポリヌクレオチドを含むベクターである。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に結合してＦＡＭ１９Ａ５活性を減少させる。
【０１４６】
網膜病症（例えば、糖尿病性網膜病症）及び／又は黄斑変性（例えば、加齢黄斑変性）を持つ対象は、網膜内に次のような特徴の一つ以上を示すことがある：（ｉ）網膜電位減少、（ｉｉ）血管周囲細胞損失、（ｉｉｉ）無細胞性毛細血管形成増加、（ｉｖ）血管鬱血増加（例えば、網膜の神経線維層内で）、（ｖ）細胞死性細胞増加（例えば、網膜の神経線維層及び／又は内核層内で）、（ｖｉ）網膜及び／又は脈絡膜血管新生増加、及び（ｖｉｉ）星状細胞形成増加（例えば、網膜の神経線維層及び／又は神経節細胞層内ＰＤＧＦ染色増加によって立証されている。）。実施例６〜１０を参照されたい。
【０１４７】
したがって、任意の単一理論に拘わらず、本明細書に開示のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤（例えば、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体）は、上述した特徴の一つ以上を減少、緩和及び／又は反転させることによって、網膜病症及び／又は黄斑変性を治療することができる。一部の態様において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を中和させることができる、例えば、ＦＡＭ１９Ａ５中和剤である。他の態様において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体である。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、中和抗体である。
【０１４８】
一部の態様において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、対象（例えば、糖尿病性網膜病症又は加齢黄斑変性を持つ対象）において網膜電位を改善させることができる。特定の態様において、網膜電位の改善は、基準（例えば、本明細書に開示のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤で非治療したＤＲ又はＡＭＤ対象の該当値）に比べて、Ａ波、Ｂ波及び／又は律動様小波に対する値の増加を含む。一部の態様において、前記Ａ波、Ｂ波及び／又は律動様小波に対する値は、基準に比べて少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％以上である。
【０１４９】
一部の態様において、本明細書に開示のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤（例えば、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体）は、対象（例えば、糖尿病性網膜病症又は加齢黄斑変性を持つ対象）の網膜内血管周囲細胞の損失を減少又は防止させることができる。特定の態様において、前記網膜内血管周囲細胞の損失は、基準（例えば、本明細書に開示のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤で非治療したＤＲ又はＡＭＤ対象の該当値）に比べて少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％減少する。
【０１５０】
一部の態様において、本開示内容のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、対象（例えば、糖尿病性網膜病症又は加齢黄斑変性を持つ対象）の網膜内無細胞性毛細血管形成を減少及び／又は阻害させることができる。特定の態様において、前記無細胞性毛細血管の形成は、基準（例えば、本明細書に開示のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤で非治療したＤＲ又はＡＭＤ対象の該当値）に比べて少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％減少及び／又は阻害する。
【０１５１】
一部の態様において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤（例えば、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体）は、対象（例えば、糖尿病性網膜病症又は加齢黄斑変性を持つ対象）の網膜内血管鬱血を減少及び／又は阻害させることができる。特定の態様において、前記網膜内血管鬱血は、基準（例えば、本明細書に開示のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤で非治療したＤＲ又はＡＭＤ対象の該当値）に比べて少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％減少及び／又は阻害する。
【０１５２】
一部の態様において、本明細書に開示のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、対象（例えば、糖尿病性網膜病症又は加齢黄斑変性を持つ対象）の網膜細胞の細胞死を減少及び／又は阻害させることができる。特定の態様において、前記細胞死が進行する網膜細胞の個数は、基準（例えば、本明細書に開示のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤で非治療したＤＲ又はＡＭＤ対象の該当値）に比べて少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％減少する。
【０１５３】
一部の態様において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、対象（例えば、糖尿病性網膜病症又は加齢黄斑変性を持つ対象）の網膜内血管新生（例えば、網膜及び／又は脈絡膜血管新生）を減少及び／又は阻害させることができる。特定の態様において、網膜内血管新生（例えば、網膜及び／又は脈絡膜血管新生）は、基準（例えば、本明細書に開示のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤で非治療したＤＲ又はＡＭＤ対象の該当値）に比べて少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％減少及び／又は阻害する。
【０１５４】
一部の態様において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、対象（例えば、糖尿病性網膜病症又は加齢黄斑変性を持つ対象）の網膜内ＰＤＧＦを減少及び／又は阻害させる。特定の態様において、網膜内ＰＤＧＦの発現は、基準（例えば、本明細書に開示のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤で非治療したＤＲ又はＡＭＤ対象の該当値）に比べて少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％減少及び／又は阻害する。一部の態様において、前記ＰＤＧＦ発現の減少及び／又は阻害は、前記対象の網膜内星状細胞形成減少と関連がある。
【０１５５】
一部の態様において、本明細書で使われる用語“基準”は、本明細書に開示の組成物（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤、例えば抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体）を投与しなかった該当の対象（例えば、糖尿病性網膜病症又は加齢黄斑変性を持つ対象）のことを指す。用語“基準”はまた、本明細書に開示の組成物を投与する前の同じ対象（例えば、糖尿病性網膜病症又は加齢黄斑変性を持つ対象）のことを指してもよい。特定の態様において、用語“基準”は、対象（例えば、糖尿病性網膜病症又は加齢黄斑変性を持つ対象）の集団の平均を指す。
【０１５６】
一部の態様において、本開示内容で治療できる網膜病症は、糖尿病性網膜病症を含む。特定の態様において、糖尿病性網膜病症は、非増殖性糖尿病性網膜病症（ＮＰＤＲ）である。他の態様において、糖尿病性網膜病症は、増殖性糖尿病性網膜病症（ＰＤＲ）である。一部の態様において、糖尿病性網膜病症は、糖尿病性黄斑病症である。他の態様において、糖尿病性網膜病症は、糖尿病性黄斑浮腫である。一部の態様において、糖尿病性網膜病症は、網膜内虚血性損傷と関連した任意の網膜病症である。
【０１５７】
一部の態様において、本開示内容で治療できる黄斑変性は、加齢黄斑変性（ＡＭＤ）を含む。一部の態様において、加齢黄斑変性は、初期ＡＭＤである。他の態様において、加齢黄斑変性は、中期ＡＭＤである。他の態様において、加齢黄斑変性は、後期又は進行性ＡＭＤ（すなわち、地図状萎縮）である。一部の態様において、加齢黄斑変性は、乾性（非滲出性）ＡＭＤである。他の態様において、加齢黄斑変性は、湿性（血管新生性又は滲出性）ＡＭＤである。
【０１５８】
一部の態様において、本方法で治療できる対象は、ラット又はマウスのような非ヒト動物である。他の態様において、本明細書に開示の方法で治療できる対象は、ヒトである。
【０１５９】
一部の態様において、本明細書に開示のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤（例えば、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体）、二重特異的分子又は免疫接合体又はその組成物は、眼内投与、又は本明細書に開示の組成物（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤）をテノン嚢下、結膜下、脈絡膜上、硝子体内及び眼中の類似位置に伝達できる任意の別の投与によって対象に伝達される。一部の態様において、眼内投与は、硝子体内投与を含む。
【０１６０】
本明細書に開示のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤又はその組成物（例えば、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体）の投与のための投与量は、約０．０００１〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲に属する。
【０１６１】
一部の態様において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤又はその組成物は、網膜病症（例えば、糖尿病性網膜病症）及び／又は黄斑変性（例えば、加齢黄斑変性）を治療するための一つ以上の追加製剤（例えば、治療剤）、例えば標準治療法、例えば（ｉ）コルティコステロイド、（ｉｉ）抗血管形成阻害剤（例えば、抗ＶＥＧＦ阻害剤）、（ｉｉｉ）レーザー治療（例えば、レーザー光凝固術）、（ｉｖ）抗酸化剤との組合せで投与できる。ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤又はその組成物と組み合わせて使用できる現在利用可能な他の治療オプションには、手術（例えば、硝子体切除述）及び矯正可能な危険因子調節（例えば、グルコース及びコレステロール数値低下、喫煙中断）が含まれるが、これに限定されない。
【０１６２】
＜ＩＩＩ．ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤＞
一部の態様において、本開示内容に有用なＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、ＦＡＭ１９Ａ５を特異的に標的にするアンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、アプタマー、ＰＮＡ（ペプチド核酸）又はこれを含むベクターである。他の態様において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質（“抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体”）、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体をコードするポリヌクレオチド又はそのポリヌクレオチドを含むベクターに特異的に結合する抗体又はその抗原結合部分である。
【０１６３】
本明細書に開示の方法に有用な抗体は、特定機能的特徴又は特性を特徴とする単クローン抗体を含む。例えば、前記抗体は、可溶性ＦＡＭ１９Ａ５及び膜結合ＦＡＭ１９Ａ５を含むヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する。可溶性及び／又は膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的結合の他にも、本明細書に記載の抗体はまた、（ａ）ＫＤが１０ｎＭ以下である可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合し；（ｂ）ＫＤが１０ｎＭ以下である膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合し；又は（ａ）及び（ｂ）の両方である。
【０１６４】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、高い親和度、例えば、ＫＤが１０−７Ｍ以下、１０−８Ｍ以下、１０−９Ｍ（１ｎＭ）以下、１０−１０Ｍ（１０ｎＭ）以下、１０−１１Ｍ以下又は１０−１２Ｍ以下、例えば１０−１２Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１１Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１０Ｍ〜１０−７Ｍ又は１０−９Ｍ〜１０−７Ｍ、例えば１０−１２Ｍ、５×１０−１２Ｍ、１０−１１Ｍ、５×１０−１１Ｍ、１０−１０Ｍ、５×１０−１０Ｍ、１０−９Ｍ、５×１０−９Ｍ、１０−８Ｍ、５×１０−８Ｍ、１０−７Ｍ又は５×１０−７Ｍである、可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５又は膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する。様々な種のヒトＦＡＭ１９Ａ５に対する抗体の結合能を評価するための標準分析法は、例えば、ＥＬＩＳＡ、ウェスタンブロット及びＲＩＡを含め、当業界に公知されている。好適な分析法は、実施例の部分に詳細に記載されている。前記抗体の結合動力学（例えば、結合親和度）は、ＥＬＩＳＡ、ＢＩＡＣＯＲＥＴＭ分析又はＫＩＮＥＸＡ（登録商標）のような当業界に周知の標準分析法によって評価されてもよい。
【０１６５】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、例えばＥＬＩＳＡによって決定した時、ＫＤが１０−７Ｍ以下、１０−８Ｍ（１０ｎＭ）以下、１０−９Ｍ（１ｎＭ）以下、１０−１０Ｍ以下、１０−１２Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１１Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１０Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−９Ｍ〜１０−７Ｍ、又は１０−８Ｍ〜１０−７Ｍである、可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合する。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＫＤが１０ｎＭ以下、例えば０．１〜１０ｎＭ、０．１〜５ｎＭ、０．１〜１ｎＭ、０．５〜１０ｎＭ、０．５〜５ｎＭ、０．５〜１ｎＭ、１〜１０ｎＭ、１〜５ｎＭ又は５〜１０ｎＭである、可溶性ＦＡＭ１９Ａ５に結合する。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＬＩＳＡによって決定した時、ＫＤが約１ｐＭ、２ｐＭ、３ｐＭ、４ｐＭ、５ｐＭ、６ｐＭ、７ｐＭ、８ｐＭ、９ｐＭ、１０ｐＭ、２０ｐＭ、３０ｐＭ、４０ｐＭ、５０ｐＭ、６０ｐＭ、７０ｐＭ、８０ｐＭ、９０ｐＭ、１００ｐＭ、２００ｐＭ、３００ｐＭ、４００ｐＭ、５００ｐＭ、６００ｐＭ、７００ｐＭ、８００ｐＭ又は９００ｐＭ、又は約１ｎＭ、２ｎＭ、３ｎＭ、４ｎＭ、５ｎＭ、６ｎＭ、７ｎＭ、８ｎＭ又は９ｎＭ、又は約１０ｎＭ、２０ｎＭ、３０ｎＭ、４０ｎＭ、５０ｎＭ、６０ｎＭ、７０ｎＭ、８０ｎＭ又は９０ｎＭである、可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する。
【０１６６】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、例えばＥＬＩＳＡによって決定した時、ＫＤが１０−７Ｍ以下、１０−８Ｍ（１０ｎＭ）以下、１０−９Ｍ（１ｎＭ）以下、１０−１０Ｍ以下、１０−１２Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１１Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１０Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−９Ｍ〜１０−７Ｍ又は１０−８Ｍ〜１０−７Ｍである、膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合する。特定の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＬＩＳＡによって決定した時、ＫＤが１０ｎＭ以下、例えば０．１〜１０ｎＭ、０．１〜５ｎＭ、０．１〜１ｎＭ、０．５〜１０ｎＭ、０．５〜５ｎＭ、０．５〜１ｎＭ、１〜１０ｎＭ、１〜５ｎＭ又は５〜１０ｎＭである、膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＬＩＳＡによって決定した時、ＫＤが約１ｐＭ、２ｐＭ、３ｐＭ、４ｐＭ、５ｐＭ、６ｐＭ、７ｐＭ、８ｐＭ、９ｐＭ、１０ｐＭ、２０ｐＭ、３０ｐＭ、４０ｐＭ、５０ｐＭ、６０ｐＭ、７０ｐＭ、８０ｐＭ、９０ｐＭ、１００ｐＭ、２００ｐＭ、３００ｐＭ、４００ｐＭ、５００ｐＭ、６００ｐＭ、７００ｐＭ、８００ｐＭ又は９００ｐＭ、又は約１ｎＭ、２ｎＭ、３ｎＭ、４ｎＭ、５ｎＭ、６ｎＭ、７ｎＭ、８ｎＭ又は９ｎＭ、又は約１０ｎＭ、２０ｎＭ、３０ｎＭ、４０ｎＭ、５０ｎＭ、６０ｎＭ、７０ｎＭ、８０ｎＭ又は９０ｎＭである、膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合する。
【０１６７】
一部の態様において、本明細書に開示の方法に有用な抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ヒトＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合するために（又は、結合を阻害するために）、本明細書に開示のＣＤＲ又は可変領域を含む抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体と交差競合する。
【０１６８】
一部の態様において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分が、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、並びに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む基準抗体の結合を阻害し、（ｉ）前記基準抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、配列番号１１、配列番号１２及び配列番号１３のアミノ酸配列を含み、前記基準抗体の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、配列番号２３、配列番号２４及び配列番号２５のアミノ酸配列を含んだり；（ｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１４のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１５のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１６のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号２６のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号２７のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号２８のアミノ酸配列を含んだり；（ｉｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１８のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号２９のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号３０のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号３１のアミノ酸配列を含んだり；（ｉｖ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号２０のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号２１のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号２２のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号３２のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号３３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号３４のアミノ酸配列を含んだり；（ｖ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号８９のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号９０のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号９１のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号９２のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号９３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号９４のアミノ酸配列を含んだり；（ｖｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号９５のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号９６のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号９７のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号９８のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号９９のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１００のアミノ酸配列を含んだり；（ｖｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１０１のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１０２のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１０４のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１０５のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１０６のアミノ酸配列を含んだり；（ｖｉｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１０７のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１０８のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１０９のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１１０のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１１１のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１１２のアミノ酸配列を含んだり；（ｉｘ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１１３のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１１４のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１１５のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１１６のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１１７のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１１８のアミノ酸配列を含んだり；（ｘ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１２０のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１２１のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１２２のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１２３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１２４のアミノ酸配列を含んだり；（ｘｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１２５のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１２６のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１２７のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１２８のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１２９のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１３０のアミノ酸配列を含んだり；（ｘｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１３１のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１３２のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１３３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１３４のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１３５のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１３６のアミノ酸配列を含んだり；（ｘｉｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１３７のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１３８のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１３９のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１４０のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１４１のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１４２のアミノ酸配列を含んだり；（ｘｉｖ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１４３のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１４４のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１４５のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１４６のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１４７のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１４８のアミノ酸配列を含んだり；又は（ｘｖ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１４９のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１５０のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１５１のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１５２のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１５３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１５４のアミノ酸配列を含む。
【０１６９】
一部の態様において、前記基準抗体は、（ａ）それぞれ配列番号３５及び３９を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｂ）それぞれ配列番号３６及び４０を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｃ）それぞれ配列番号３７及び４１を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｄ）それぞれ配列番号３８及び４２を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｅ）それぞれ配列番号１５５及び１６６を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｆ）それぞれ配列番号１５６及び１６７を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｇ）それぞれ配列番号１５７及び１６８を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｈ）それぞれ配列番号１５８及び１６９を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｉ）それぞれ配列番号１５９及び１７０を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｊ）それぞれ配列番号１６０及び１７１を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｋ）それぞれ配列番号１６１及び１７２を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｌ）それぞれ配列番号１６２及び１７３を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｍ）それぞれ配列番号１６３及び１７４を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｎ）それぞれ配列番号１６４及び１７５を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；又は（ｏ）それぞれ配列番号１６５及び１７６を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列を含む。
【０１７０】
特定の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に対するこのような基準抗体の結合を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％阻害する。競合抗体は、同一のエピトープ、重複エピトープ又は隣接エピトープに結合する（例えば、立体障害によって立証される）。標的に結合するために２個の抗体がお互い競合するか否かは、ＲＩＡ及びＥＩＡのような当業界に公知の競合実験を用いて決定できる。
【０１７１】
特定の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分が、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、並びに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む本明細書に開示の基準抗体と同じＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合し、（ｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１１のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１２のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号２３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号２４のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号２５のアミノ酸配列を含んだり；（ｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１４のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１５のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１６のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号２６のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号２７のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号２８のアミノ酸配列を含んだり；（ｉｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１８のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号２９のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号３０のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号３１のアミノ酸配列を含んだり；（ｉｖ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号２０のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号２１のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号２２のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号３２のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号３３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号３４のアミノ酸配列を含んだり；（ｖ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号８９のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号９０のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号９１のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号９２のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号９３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号９４のアミノ酸配列を含んだり；（ｖｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号９５のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号９６のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号９７のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号９８のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号９９のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１００のアミノ酸配列を含んだり；（ｖｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１０１のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１０２のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１０４のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１０５のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１０６のアミノ酸配列を含んだり；（ｖｉｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１０７のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１０８のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１０９のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１１０のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１１１のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１１２のアミノ酸配列を含んだり；（ｉｘ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１１３のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１１４のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１１５のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１１６のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１１７のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１１８のアミノ酸配列を含んだり；（ｘ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１２０のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１２１のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１２２のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１２３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１２４のアミノ酸配列を含んだり；（ｘｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１２５のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１２６のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１２７のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１２８のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１２９のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１３０のアミノ酸配列を含んだり；（ｘｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１３１のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１３２のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１３３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１３４のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１３５のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１３６のアミノ酸配列を含んだり；（ｘｉｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１３７のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１３８のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１３９のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１４０のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１４１のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１４２のアミノ酸配列を含んだり；（ｘｉｖ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１４３のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１４４のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１４５のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１４６のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１４７のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１４８のアミノ酸配列を含んだり；又は（ｘｖ）前記重鎖ＣＤＲ１は、配列番号１４９のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ２は、配列番号１５０のアミノ酸配列を含み、前記重鎖ＣＤＲ３は、配列番号１５１のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は、配列番号１５２のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ２は、配列番号１５３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ＣＤＲ３は、配列番号１５４のアミノ酸配列を含む。
【０１７２】
一部の態様において、前記基準抗体は、（ａ）それぞれ配列番号３５及び３９を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｂ）それぞれ配列番号３６及び４０を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｃ）それぞれ配列番号３７及び４１を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｄ）それぞれ配列番号３８及び４２を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｅ）それぞれ配列番号１５５及び１６６を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｆ）それぞれ配列番号１５６及び１６７を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｇ）それぞれ配列番号１５７及び１６８を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｈ）それぞれ配列番号１５８及び１６９を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｉ）それぞれ配列番号１５９及び１７０を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｊ）それぞれ配列番号１６０及び１７１を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｋ）それぞれ配列番号１６１及び１７２を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｌ）それぞれ配列番号１６２及び１７３を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｍ）それぞれ配列番号１６３及び１７４を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｎ）それぞれ配列番号１６４及び１７５を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；又は（ｏ）それぞれ配列番号１６５及び１７６を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列を含む。
【０１７３】
２個の抗体が同一のエピトープに結合するか否かを決定するための技術は、例えば、エピトープの原子分解能を提供する抗原：抗体複合体の結晶のｘ線分析及び水素／重水素交換質量分光分析（ＨＤＸ−ＭＳ）のようなエピトープマッピング方法、抗原配列内アミノ酸残基の変形による結合損失をたいていエピトープ成分の表示として見なす抗原断片又は抗原の突然変異した変異体に対する抗体の結合をモニタリングする方法、エピトープマッピングのための電算組合せ方法（ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  ｍｅｔｈｏｄ）を含む。
【０１７４】
本明細書に開示の方法に有用な抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、例えばヒトＦＡＭ１９Ａ５の断片に対する抗体の結合によって決定された通り、成熟したヒトＦＡＭ１９Ａ５の少なくとも１つのエピトープに結合できる。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＴＬＤＲＤＳＳＱＰＲＲＴＩＡＲＱＴＡＲＣ（配列番号６又は配列番号２のアミノ酸残基４２〜６１）のアミノ酸配列内に位置した断片、例えば、配列番号６の少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸を持つエピトープに結合する。一部の態様において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、アミノ酸残基４６〜５１（すなわち、ＤＳＳＱＰＲ）、例えばアミノ酸残基４６、５０及び５２（すなわち、Ｄ−−−Ｐ−Ｒ）、例えば配列番号２のアミノ酸残基４６、４７、４８及び５０（すなわち、ＤＳＳ−Ｐ）に該当する１つ以上のアミノ酸で配列番号６に結合する。一部の態様において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＣＤＭＬＰＣＬＥＧＥＧＣＤＬＬＩＮＲＳＧのアミノ酸配列内に位置した断片（配列番号９又は配列番号２のアミノ酸９０〜１０９）、例えば、配列番号９の少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個アミノ酸を持つエピトープに結合する。特定の態様において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、１つ以上のアミノ酸残基９９〜１０７（すなわち、ＥＧＣＤＬＬＩＮＲ）、例えばアミノ酸残基１０２、１０３、１０５及び１０７（すなわち、ＤＬ−Ｉ−Ｒ）、例えばアミノ酸残基９９、１００、１０２、１０３、１０５及び１０７（すなわち、ＥＧ−ＤＬ−Ｉ−Ｒ）、例えば配列番号４のアミノ酸残基９９、１００及び１０７（すなわち、ＥＧ−−−−−−Ｒ）で配列番号９に結合する。
【０１７５】
一部の態様において、前記少なくとも１つのエピトープは、配列番号６と少なくとも９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を有する。一部の態様において、前記少なくとも１つのエピトープは、配列番号９と少なくとも９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を有する。
【０１７６】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、配列番号５、６、７、８、９又は１０であるヒトＦＡＭ１９Ａ５エピトープ又は配列番号５、６、７、８、９又は１０のアミノ酸配列内に位置した断片、例えば、配列番号５、６、７、８、９又は１０の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸を有するエピトープにのみ結合する。
【０１７７】
一部の態様において、本開示内容の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、配列番号６又は天然立体形態（すなわち、未変性）のその断片に結合する。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、配列番号９又は天然立体形態（すなわち、未変性）のその断片に結合する。他の態様において、前記少なくとも一つのエピトープは、配列番号５と少なくとも９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を有する。前記エピトープは、配列番号１０と少なくとも９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を有する。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、グリコシル化及び非グリコシル化ヒトＦＡＭ１９Ａ５の両方に結合する。
【０１７８】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、１つ以上の追加ＦＡＭ１９Ａ５エピトープにさらに結合する。したがって、特定抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、配列番号６のエピトープ及び追加エピトープ、又は配列番号９のエピトープ及び追加エピトープに結合する。他の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、配列番号５、配列番号９のエピトープ及び追加エピトープに結合できる。一部の態様において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、配列番号６のエピトープ、配列番号１０のエピトープ及び追加エピトープに結合する。
【０１７９】
一部の態様において、前記１つ以上の追加ＦＡＭ１９Ａ５エピトープは、ＱＬＡＡＧＴＣＥＩＶＴＬＤＲ（配列番号５、エピトープＦ１）、ＴＬＤＲＤＳＳＱＰＲＲＴＩＡＲＱＴＡＲＣ（配列番号６、エピトープＦ２）、ＴＡＲＣＡＣＲＫＧＱＩＡＧＴＴＲＡＲＰＡ（配列番号７、エピトープＦ３）、ＡＲＰＡＣＶＤＡＲＩＩＫＴＫＱＷＣＤＭＬ（配列番号８、エピトープＦ４）、ＣＤＭＬＰＣＬＥＧＥＧＣＤＬＬＩＮＲＳＧ（配列番号９、エピトープＦ５）又はＮＲＳＧＷＴＣＴＱＰＧＧＲＩＫＴＴＴＶＳ（配列番号１０、エピトープＦ６）又は配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９又は配列番号１０のアミノ酸配列内に位置した断片又はこれらの任意の組合せから選択される。配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９又は配列番号１０のアミノ酸配列内に位置した断片は、配列番号５、配列番号６及び配列番号７、配列番号８、配列番号９又は配列番号１０の任意の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸を持つ断片を含む。一部の態様において、前記１つ以上の追加ＦＡＭ１９Ａ５エピトープは、配列番号５、６、７、８、９又は１０、又は配列番号５、６、７、８、９又は１０のアミノ酸配列内に位置した断片、例えば、配列番号５、６、７、８、９又は１０の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸を持つ断片、又はこれらの任意の組合せから選択される。一部の態様において、本開示内容の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、天然立体形態（すなわち、未変性）の前記１つ以上の追加エピトープのいずれかのエピトープに結合する。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、前記グリコシル化及び非グリコシル化の１つ以上のＦＡＭ１９Ａ５エピトープの両方に結合する。
【０１８０】
一部の態様において、本開示内容の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＰ２、ＥＰ４及び／又はＥＰ８として同定された少なくとも１つのＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合し、ＥＰ２は、アミノ酸ＤＳＳＱＰ（配列番号６６）を含んだり、前記アミノ酸から本質的になったり、又は前記アミノ酸からなり、ＥＰ４は、アミノ酸ＡＲＣＡＣＲＫ（配列番号６８）を含んだり、前記アミノ酸から本質的になったり、又は前記アミノ酸からなり、ＥＰ８は、アミノ酸ＴＣＴＱＰＧＧＲ（配列番号７２）を含んだり、前記アミノ酸から本質的になったり、又は前記アミノ酸からなる。一部の態様において、前記少なくとも１つのエピトープは、ＥＰ２、ＥＰ４又はＥＰ８と少なくとも９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を有する。一部の態様において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分のみがＥＰ２に結合する。一部の態様において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＰ４及びＥＰ８に結合する。
【０１８１】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＰ６、ＥＰ７又はＥＰ８として同定された少なくとも１つのＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合し、ＥＰ６は、アミノ酸ＫＴＫＱＷＣＤＭＬ（配列番号７０）を含み、ＥＰ７は、アミノ酸ＧＣＤＬＬＩＮＲ（配列番号７１）を含み、ＥＰ８は、アミノ酸ＴＣＴＱＰＧＧＲ（配列番号７２）を含む。一部の態様において、前記少なくとも１つのエピトープは、ＥＰ６、ＥＰ７又はＥＰ８と少なくとも９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を有する。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＰ６、ＥＰ７又はＥＰ８にのみ結合する。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＰ６、ＥＰ７及びＥＰ８に結合する。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＰ７及びＥＰ８に結合する。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＥＰ７に結合する。
【０１８２】
一部の態様において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２及びこれらの任意の組合せからなる群から選ばれる１つ以上のＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合する。
【０１８３】
一部の態様において、本明細書は、例えば免疫分析（例えば、ＥＬＩＳＡ）、表面プラズマ共鳴又は力学的排除分析によって測定した時、ＦＡＭ１９Ａファミリーにおける他のタンパク質に比べて２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又はより高い親和度でＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に結合する抗体又はその抗原結合部分を提供する。特定の具現例において、本明細書は、例えば免疫分析によって測定した時、ＦＡＭ１９Ａファミリーにおけるさらに他のタンパク質との交差反応性無しでＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に結合する抗体又はその抗原結合部分を提供する。
【０１８４】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、天然抗体でないか、或いは自然発生抗体ではない。例えば、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、例えば、より多い又はより少ないか、又は互いに異なる類型の翻訳後変形を有することによって、自然発生抗体と異なる翻訳後変形を有する。
【０１８５】
＜ＩＶ．例示的な抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体＞
本明細書に開示の方法で使用できる特定抗体は、本明細書に開示のＣＤＲ及び／又は可変領域配列を有する抗体、例えば、単クローン抗体だけでなく、これらの可変領域又はＣＤＲ配列に少なくとも８０％同一性（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は９９％の同一性）を有する抗体である。前記異なる抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体に対するＶＨ及びＶＬ  ＣＤＲに対するアミノ酸配列がそれぞれ、表２及び表３に提供されている。次のような抗体に対するＣＤＲは、Ｋａｂａｔ番号表記体系（上記を参照）を用いて同定した：１−６５、３−２、２−１３、１−２８、Ｐ２−Ｃ１２、１３Ｂ４、１３Ｆ７、１５Ａ９、Ｐｌ−Ａ０３、Ｐ１−Ａ０８、Ｐ１−Ｆ０２、Ｐ２−Ａ０１、Ｐ２−Ａ０３、Ｐ２−Ｆ０７、Ｐ２−Ｆ１１、ＳＳ０１−１３、ＳＳ０ｌ−１３−ｓ５及びＳ５−２．ＧＫＮＧ。次のような抗体に対するＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号表記体系（上記を参照）を用いて同定した：１−７Ａ−ＩＴ、Ｌｏｗ−ＰＩ、１−３０、１−１７、１−３２、４−１１、６−１０、２−１３Ｄ、２−１３Ｄ−３７、２−１３Ｄ−３７−１．５Ｗ−４１及び２−１３Ｄ−３７−３Ｗ−１６。本開示内容の個別の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列がそれぞれ表４及び５に提供されている。
【０１８６】
【表３】
2021532733.tif 000004
【０１８７】
2021532733.tif 000005
【０１８８】
2021532733.tif 000006
【０１８９】
【表４】
2021532733.tif 000007
【０１９０】
2021532733.tif 000008
【０１９１】
2021532733.tif 000009
【０１９２】
【表５】
2021532733.tif 000010
【０１９３】
2021532733.tif 000011
【０１９４】
2021532733.tif 000012
【０１９５】
【表６】
2021532733.tif 000013
【０１９６】
2021532733.tif 000014
【０１９７】
2021532733.tif 000015
【０１９８】
したがって、本明細書は、重鎖及び軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域は、配列番号：３５−３８、１５５−１６５又は２３２−２４０のアミノ酸配列を含む、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分を提供する（表４参照）。他の態様において、前記分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、配列番号３５−３８、１５５−１６５又は２３２−２４０からなる群から選ばれる重鎖可変領域のＣＤＲを含む（表４参照）。
【０１９９】
本明細書はまた、重鎖及び軽鎖可変領域を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号３９−４２、１６６−１７６又は２４１−２５０のアミノ酸配列を含む抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分を提供する（表５参照）。他の態様において、前記分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、配列番号：３９−４２、１６６−１７６又は２４１−２５０からなる群から選ばれる軽鎖可変領域のＣＤＲを含む（表５参照）。
【０２００】
特定の態様において、前記分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、配列番号：３５−３８、１５５−１６５又は２３２−２４０からなる群から選ばれる重鎖可変領域のＣＤＲ及び配列番号３９−４２、１６６−１７６又は２４１−２５０からなる群から選ばれる軽鎖可変領域のＣＤＲを含む。
【０２０１】
本明細書はまた、重鎖及び軽鎖可変領域を含み、（ｉ）前記重鎖可変領域は、配列番号３７のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号３９のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）前記重鎖可変領域は、配列番号３６のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号４０のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）前記重鎖可変領域は、配列番号３７のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号４１のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）前記重鎖可変領域は、配列番号３８のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号４２のアミノ酸配列を含み；（ｖ）前記重鎖可変領域は、配列番号１５５のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１６６のアミノ酸配列を含み；（ｖｉ）前記重鎖可変領域は、配列番号１５６のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１６７のアミノ酸配列を含み；（ｖｉｉ）前記重鎖可変領域は、配列番号１５７のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１６８のアミノ酸配列を含み；（ｖｉｉｉ）前記重鎖可変領域は、配列番号１５８のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１６９のアミノ酸配列を含み；（ｉｘ）前記重鎖可変領域は、配列番号１５９のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１７０のアミノ酸配列を含み；（ｘ）前記重鎖可変領域は、配列番号１６０のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１７１のアミノ酸配列を含み；（ｘｉ）前記重鎖可変領域は、配列番号１６１のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１７２のアミノ酸配列を含み；（ｘｉｉ）前記重鎖可変領域は、配列番号１６２のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１７３のアミノ酸配列を含み；（ｘｉｉｉ）前記重鎖可変領域は、配列番号１６３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１７４のアミノ酸配列を含み；（ｘｉｖ）前記重鎖可変領域は、配列番号１６４のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１７５のアミノ酸配列を含み；及び（ｘｖ）前記重鎖可変領域は、配列番号１６５のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１７６のアミノ酸配列を含む、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分を提供する。一部の態様において、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記ＶＨは、表４に示すＶＨ配列を含み、前記ＶＬは、表５に示すＶＬ配列を含む。
【０２０２】
本明細書は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域は、配列番号３５−３８、１５５−１６５又は２３２−２４０に示すアミノ酸配列（表４参照）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含む、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分を提供する。
【０２０３】
本明細書はまた、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号３９−４２、１６６−１７６又は２４１−２５０に示すアミノ酸配列（表５参照）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含む、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分を提供する。
【０２０４】
本明細書はまた、重鎖及び軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域は、配列番号３５−３８、１５５−１６５又は２３２−２４０に示すアミノ酸配列（表４参照）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号３９−４２、１６６−１７６又は２４１−２５０に示すアミノ酸配列（表５参照）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含む、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分を提供する。
【０２０５】
一部の態様において、本開示内容は：
（ａ）それぞれ配列番号３５及び３９を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｂ）それぞれ配列番号３６及び４０を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｃ）それぞれ配列番号３７及び４１を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｄ）それぞれ配列番号３８及び４２を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｅ）それぞれ配列番号１５５及び１６６を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｆ）それぞれ配列番号１５６及び１６７を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｇ）それぞれ配列番号１５７及び１６８を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｈ）それぞれ配列番号１５８及び１６９を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｉ）それぞれ配列番号１５９及び１７０を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｊ）それぞれ配列番号１６０及び１７１を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｋ）それぞれ配列番号１６１及び１７２を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｌ）それぞれ配列番号１６２及び１７３を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｍ）それぞれ配列番号１６３及び１７４を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｎ）それぞれ配列番号１６４及び１７５を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｏ）それぞれ配列番号１６５及び１７６を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｐ）それぞれ配列番号２３２及び２４１を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｑ）それぞれ配列番号２３３及び２４２を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｒ）それぞれ配列番号２３４及び２４２を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｓ）それぞれ配列番号２３５及び２４３を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｔ）それぞれ配列番号２３６及び２４４を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｕ）それぞれ配列番号２３６及び２４５を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｖ）それぞれ配列番号２３６及び２４６を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｗ）それぞれ配列番号２３６及び２４７を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｘ）それぞれ配列番号２３６及び２４８を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｙ）それぞれ配列番号２３６及び２４９を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｚ）それぞれ配列番号２３７及び２５０を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ａａ）それぞれ配列番号２３８及び２５０を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｂｂ）それぞれ配列番号２３９及び２５０を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；又は
（ｃｃ）それぞれ配列番号２４０及び２５０を含む重鎖及び軽鎖可変領域配列を含む、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分を提供する。
【０２０６】
特定の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、（ｉ）２−１３の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は２−１３の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ；（ｉｉ）３−２の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は３−２の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｉｉｉ）１−６５の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は１−６５の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｉｖ）１−２８の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は１−２８の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｖ）Ｐ２−Ｃ１２の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又はＰ２−Ｃ１２の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｖｉ）１３Ｂ４の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は１３Ｂ４の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｖｉｉ）１３Ｆ７の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は１３Ｆ７の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｖｉｉｉ）１５Ａ９の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は１５Ａ９の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｉｘ）Ｐ１−Ａ０３の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又はＰ１−Ａ０３の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘ）Ｐ１−Ａ０８の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又はＰ１−Ａ０８の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉ）Ｐ１−Ｆ０２の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又はＰ１−Ｆ０２の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉｉ）Ｐ２−Ａ０１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又はＰ２−Ａ０１の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉｉｉ）Ｐ２−Ａ０３の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又はＰ２−Ａ０３の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉｖ）Ｐ２−Ｆ０７の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又はＰ２−Ｆ０７の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｖ）Ｐ２−Ｆ１１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又はＦ２−Ｆ１１の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｖｉ）ＳＳ０１−１３の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又はＳＳ０１−１３の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｖｉｉ）ＳＳ０１−１３−ｓ５の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又はＳＳ０１−ｌ３−ｓ５の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｖｉｉｉ）Ｓ５−２．ＧＫＮＧの重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又はＳ５−２．ＧＫＮＧの軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉｘ）１−７Ａ−ＩＴの重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は１−７Ａ−ＩＴの軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｘ）Ｌｏｗ−ＰＩの重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又はＬｏｗ−ＰＩの軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｘｉ）１−３０の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は１−３０の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｘｉｉ）１−１７の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は１−１７の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｘｉｉｉ）１−３２の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は１−３２の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｘｉｖ）４−１１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は４−１１の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｘｖ）６−１０の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は６−１０の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｘｖｉ）２−１３Ｄの重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は２−１３Ｄの軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｘｖｉｉ）２−１３Ｄ−３７の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は２−１３Ｄ−３７の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの任意の組合せ；（ｘｘｖｉｉｉ）２−１３Ｄ−３７−１．５Ｗ−４１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は２−１３Ｄ−３７−１．５Ｗ−４１の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３−４１又はこれらの任意の組合せ；又は（ｘｘｉｖ）２−１３Ｄ−３７−３Ｗ−１６の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せ及び／又は２−１３Ｄ−３Ｗ−１６の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３又はこれらの組合せを含む。本明細書に開示の異なる抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体に対するＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列は、表２に提供されている。本明細書に開示の異なる抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体に対するＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列は、表３に提供されている。
【０２０７】
一部の態様において、本開示内容の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；及び／又は
（ｂ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３を含む。
【０２０８】
特定の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、前記ＶＨ  ＣＤＲの１個、２個又は３個のいずれをも含む。
【０２０９】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；及び／又は
（ｂ）配列番号２４のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３を含む。
【０２１０】
特定の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、前記ＶＬ  ＣＤＲの１個、２個又は３個のいずれをも含む。
【０２１１】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；
（ｃ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３；
（ｄ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｅ）配列番号２４のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｆ）配列番号２５のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３を含む。
【０２１２】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３を含む。
【０２１３】
特定の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、前記ＶＬ  ＣＤＲの１個、２個又は３個のいずれをも含む。
【０２１４】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合し：
（ａ）配列番号２６のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号２７のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）配列番号２８のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３を含む。
【０２１５】
特定の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、前記ＶＬ  ＣＤＲの１個、２個又は３個のいずれをも含む。
【０２１６】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合し：
（ａ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；
（ｃ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３；
（ｄ）配列番号２６のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｅ）配列番号２７のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｆ）配列番号２８のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３を含む。
【０２１７】
一部の態様において、本開示内容の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合し：
（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３を含む。
【０２１８】
特定の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、前記ＶＨ  ＣＤＲの１個、２個又は３個のいずれをも含む。
【０２１９】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合し：
（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３を含む。
【０２２０】
特定の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、前記ＶＬ  ＣＤＲの１個、２個又は３個のいずれをも含む。
【０２２１】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合し：
（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；
（ｃ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３；
（ｄ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｅ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｆ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３を含む。
【０２２２】
一部の態様において、本開示内容の前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合し：
（ａ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３を含む。
【０２２３】
特定の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、前記ＶＨ  ＣＤＲの１個、２個又は３個のいずれをも含む。
【０２２４】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合し：
（ａ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３を含む。
【０２２５】
特定の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、前記ＶＬ  ＣＤＲの１個、２個又は３個のいずれをも含む。
【０２２６】
一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合し：
（ａ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；
（ｃ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３；
（ｄ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｅ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｆ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３を含む。
【０２２７】
特定の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、前記ＣＤＲの１個、２個、３個、４個、５個又は６個を含む。
【０２２８】
本明細書に記載のＶＨドメイン又はその１つ以上のＣＤＲは、重鎖、例えば全長（ｆｕｌｌ  ｌｅｎｇｔｈ）重鎖を形成するための定常ドメインに連結され得る。類似に、本明細書に記載のＶＬドメイン又はその１つ以上のＣＤＲは、軽鎖、例えば全長軽鎖を形成するための定常ドメインに連結され得る。全長重鎖及び全長軽鎖は組み合わせて全長抗体を生成する。
【０２２９】
したがって、特定の態様において、本明細書は、抗体軽鎖及び重鎖、例えば、別個の軽鎖及び重鎖を含む抗体を提供する。前記軽鎖と関連して、特定の態様において、本明細書に記載の抗体の軽鎖は、カッパ（ｋａｐｐａ）軽鎖である。他の特定の態様において、本明細書に記載の抗体の軽鎖は、ラムダ（ｌａｍｂｄａ）軽鎖である。さらに他の特定の態様において、本明細書に記載の抗体の軽鎖は、ヒトカッパ軽鎖又はヒトラムダ軽鎖である。特定の態様において、ＦＡＭ１９Ａ５ポリペプチド（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する本明細書に記載の抗体は、本明細書に記載された任意のＶＬ又はＶＬ  ＣＤＲアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、前記軽鎖の定常領域は、ヒトカッパ軽鎖定常領域のアミノ酸配列を含む。特定の態様において、ＦＡＭ１９Ａ５ポリペプチド（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する本明細書に記載の抗体は、本明細書に記載されたＶＬ又はＶＬ  ＣＤＲアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、前記軽鎖の定常領域は、ヒトラムダ軽鎖定常領域のアミノ酸配列を含む。ヒト定常領域配列の非制限的な例は、当業界に記載されている。例えば、米国特許番号５，６９３，７８０及び上のＫａｂａｔ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ，（１９９１）を参照されたい。
【０２３０】
前記重鎖と関連して一部の態様において、本明細書に記載の抗体の重鎖は、アルファ（α）、デルタ（δ）、エプシロン（ε）、ガンマ（γ）又はミュー（μ）重鎖であり得る。他の特定の態様において、記載された抗体の重鎖は、ヒトアルファ（α）、デルタ（δ）、エプシロン（ε）、ガンマ（γ）又はミュー（μ）重鎖を含むことができる。一態様において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する本明細書に記載の抗体は、本明細書に開示のＶＨ又はＶＨ  ＣＤＲアミノ酸配列を含む重鎖を含み、前記重鎖の定常領域は、重鎖はヒトガンマ（γ）重鎖定常領域のアミノ酸配列を含む。他の態様において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する本明細書に記載の抗体は、本明細書に開示のＶＨ又はＶＨ  ＣＤＲアミノ酸配列を含む重鎖を含み、前記重鎖の定常領域は、本明細書に記載又は当業界に公知のヒト重鎖のアミノ酸を含む。ヒト定常領域配列の非制限的な例は、当業界に記載されている。例えば、米国特許番号５，６９３，７８０及び上のＫａｂａｔ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）を参照されたい。
【０２３１】
一部の態様において、本明細書に記載の抗体は、本明細書に記載されたＶＨ又はＶＨ  ＣＤＲとＶＬ及びＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬドメイン及びＶＨドメインを含み、前記定常領域は、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ又はＩｇＹ免疫グロブリン分子又はヒトＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ又はＩｇＹ免疫グロブリン分子の定常領域のアミノ酸配列を含む。他の特定の態様において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する本明細書に記載の抗体は、本明細書に記載された任意のアミノ酸配列を含むＶＬドメイン及びＶＨドメインを含み、前記定常領域は、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ又はＩｇＹ免疫グロブリン分子及び任意の亜型の免疫グロブリン分子（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡｌ及びＩｇＡ２）の定常領域のアミノ酸配列を含む。一部の態様において、前記定常領域は、亜型（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４）及び同種異因子型（例えば、Ｇｌｍ、Ｇ２ｍ、Ｇ３ｍ及びｎＧ４ｍ）及びこれらの変種を含む天然ヒトＩｇＧの定常領域のアミノ酸配列を含む。例えば、Ｖｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ．ｅｔ  ａｌ．Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開）及びＪｅｆｆｅｒｉｓ  Ｒ．ａｎｄ  Ｌｅｆｒａｎｃ  ＭＰ，ｍＡｂｓ  １：４，１−７（２００９）を参照されたい。一部の態様において、前記定常領域は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４又はこれらの変種の定常領域のアミノ酸配列を含む。
【０２３２】
特定の態様において、本明細書に開示の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、Ｆｃ効果器機能、例えば、補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）及び／又は抗体依存性細胞性食菌作用（ＡＤＣＰ）を持たない。効果器機能は、Ｆｃ領域によって媒介され、前記Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインにおいてヒンジ領域に最も近接した残基は、先天性免疫系の効果器細胞上でＣｌｑ（補体）及びＩｇＧ−Ｆｃ受容体（ＦｃγＲ）に対して大きく重なる結合部位を含むので、抗体の効果器機能を担当する。また、ＩｇＧ２及びＩｇＧ４抗体は、ＩｇＧ１及びＩｇＧ３抗体よりも低いレベルのＦｃ効果器機能を有する。抗体の効果器機能は、（１）Ｆｃ領域が欠如している抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）又はモノマーＶＨ又はＶＬドメインからなるｓｄＡｂのような）を用い；（２）例えば、糖が付着している残基を欠失又は変更することによって、糖を酵素的に除去することによって、グリコシル化阻害剤の存在の下に培養された細胞において抗体を生成することによって、又はタンパク質をグリコシル化できない細胞（例えば、バクテリア宿主細胞、例えば米国特許公開第２０１２０１００１４０号参照）において抗体を発現させることによって、無糖化抗体を生成し；（３）効果器機能が減少したＩｇＧ亜型のＦｃ領域を用い（例えば、ＩｇＧ２及びＩｇＧ４抗体の領域又はＩｇＧ２及びＩｇＧ４抗体のＣＨ２ドメインを含むキメラＦｃ領域、例えば米国特許公開第２０１２０１００１４０号及びＬａｕ  Ｃ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９１：４７６９−４７７７（２０１３）参照）；及び（４）Ｆｃ機能を減少させたり或いはなくす突然変異を持つＦｃ領域を生成させることを含めて当業界に公知の異なる接近法によって減少又は回避され得る。例えば、米国特許公開第２０１２０１００１４０号及びそこに引用されている米国及びＰＣＴ出願及びＡｎ  ｅｔ  ａｌ，ｍＡｂｓ  １：６，５７２−５７９（２００９）を参照されたい。
【０２３３】
これによって、一部の態様において、本明細書に開示の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）又は単量体ＶＨ又はＶＬドメインからなるｓｄＡｂである。このような抗体断片は当業界によく知られており、上に記載されている。
【０２３４】
一部の態様において、本明細書に開示の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、Ｆｃ効果器機能が減少したり或いは存在しないＦｃ領域を含む。一部の態様において、前記定常領域は、ヒトＩｇＧ２又はＩｇＧ４のＦｃ領域のアミノ酸配列を含み、一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、ＩｇＧ２／ＩｇＧ４アイソ型を有する。一部の態様において、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、ＩｇＧ４アイソ型のＩｇＧ抗体のＣＨ２ドメイン及びＩｇＧ１アイソ型のＩｇＧ抗体のＣＨ３ドメインを含むキメラＦｃ領域、又はＩｇＧ２のヒンジ領域とＩｇＧ４のＣＨ２領域を含むキメラＦｃ領域、又はＦｃ効果器機能が減少したり或いは存在しない突然変異を持つＦｃ領域を含む。Ｆｃ効果器機能が減少したり或いは存在しないＦｃ領域は、当業界に公知されたものを含む。例えば、Ｌａｕ  Ｃ．ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９１：４７６９−４７７７（２０１３）；Ａｎ  ｅｔ  ａｌ，ｍＡｂｓ  １：６，５７２−５７９（２００９）；及び米国特許公開番号２０１２０１００１４０及びそこに引用されている米国特許及び公開公報及びＰＣＴ公開公報を参照されたい。また、Ｆｃ効果器機能が減少したり或いは存在しないＦｃ領域は、当業者であれば容易に作ることができる。
【０２３５】
＜Ｖ．核酸分子＞
本明細書に記載されたさらに他の態様は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合部分のいずれか一つをコードする一つ以上の核酸分子に関する。前記核酸は、全細胞（ｗｈｏｌｅ  ｃｅｌｌ）、細胞溶解物、又は一部精製されたり実質的に純粋な形態で存在できる。核酸は、他の細胞成分又は他の汚染物質、例えば他の細胞核酸（例えば、他の染色体ＤＮＡ、例えば、自然から分離されたＤＮＡに連結された染色体ＤＮＡ）又はタンパク質からアルカリ／ＳＤＳ処理、ＣｓＣｌバンディング（ｂａｎｄｉｎｇ）、カラムクロマトグラフィー、制限酵素、アガロースゲル電気泳動及び当業界に公知のその他の技術を含む標準技術によって精製されるときに“分離”されたり“実質的に純粋”になる。Ｆ．Ａｕｓｕｂｅｌ，ｅｌａｌ．，ｅｄ．（１９８７）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを参照されたい。本明細書に記載の核酸は、例えば、ＤＮＡ又はＲＮＡであり得、イントロン配列を含有しても含有しなくてもよい。特定の態様において、前記核酸はｃＤＮＡ分子である。
【０２３６】
本明細書に記載の核酸は、標準分子生物学技術を用いて得ることができる。ハイブリドーマによって発現した抗体（例えば、下にさらに説明されているように、ヒト免疫グロブリン遺伝子を運搬する遺伝子導入マウスから製造されたハイブリドーマ）の場合、ハイブリドーマによって作られた抗体の軽鎖及び重鎖をコードするｃＤＮＡは、標準ＰＣＲ増幅又はｃＤＮＡクローニング技術によって得ることができる。免疫グロブリン遺伝子ライブラリーから（例えば、ファージディスプレイ技術を用いて）得た抗体の場合、前記抗体をコードする核酸をライブラリーから回収できる。
【０２３７】
特定核酸分子は、本開示内容の様々な抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体のＶＨ及びＶＬ配列をコードするものである。このような抗体のＶＨ配列をコードする例示的なＤＮＡ配列は、配列番号４３−４６及び１７７に示されている。このような抗体のＶＬ配列をコードする例示的なＤＮＡ配列は、配列番号４７−５０及び１７８に示されている。
【０２３８】
【表７】
2021532733.tif 000016
【０２３９】
2021532733.tif 000017
【０２４０】
2021532733.tif 000018
【０２４１】
【表８】
2021532733.tif 000019
【０２４２】
2021532733.tif 000020
【０２４３】
本明細書に開示の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体を製造するための方法は、前記抗体の関連重鎖及び軽鎖、例えば、それぞれ配列番号４３及び４７、配列番号４４及び４８、配列番号４５及び４９、配列番号４６及び５０、配列番号１７７及び１７８を信号ペプチドと共に、前記重鎖及び軽鎖をコードするヌクレオチド配列を含む細胞株で発現することを含むことができる。これらのヌクレオチド配列を含む宿主細胞は、本明細書に含まれる。
【０２４４】
ＶＨ及びＶＬセグメントをコードするＤＮＡ断片が得られると、これらのＤＮＡ断片は、標準組換えＤＮＡ技術によってさらに操作し、例えば、可変領域遺伝子を全長抗体鎖遺伝子、Ｆａｂ断片遺伝子又はｓｃＦｖ遺伝子に変換できる。これらの操作においてＶＬ又はＶＨ−コーディングＤＮＡ断片は、抗体定常領域又は可撓性リンカーのようなさらに他のタンパク質をコードするさらに他のＤＮＡ断片に作動的に連結される。これと関連して使われた用語“作動的に連結”は、２個のＤＮＡ断片が接合して前記２個のＤＮＡ断片によってコードされたアミノ酸配列がフレーム内残っていることを意味するよう意図される。
【０２４５】
ＶＨ領域をコードする分離されたＤＮＡは、ＶＨ−コーディングＤＮＡを重鎖定常領域（ヒンジ、ＣＨ１、ＣＨ２及び／又はＣＨ３）をコードするさらに他のＤＮＡ分子に作動的に連結することによって、全長重鎖遺伝子に転換可能である。ヒト重鎖定常領域遺伝子の配列は、当業界に公知であり（例えば、Ｋａｂａｔ，ＥＡ，ｅｌ  ａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＵＳ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．９１−３２４２参考）、これらの領域を含むＤＮＡ断片は、標準ＰＣＲ増幅によって得ることができる。重鎖定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭ又はＩｇＤ定常領域、例えばＩｇＧ２及び／又はＩｇＧ４定常領域であり得る。Ｆａｂ断片重鎖遺伝子の場合、ＶＨ−コーディングＤＮＡは、重鎖ＣＨ１定常領域だけをコードするさらに他のＤＮＡ分子に作動的に連結され得る。
【０２４６】
ＶＬ領域をコードする分離されたＤＮＡは、ＶＬ−コーディングＤＮＡを軽鎖定常領域（ＣＬ）をコードするさらに他のＤＮＡ分子に作動的に連結することによって、全長軽鎖遺伝子（のみならず、Ｆａｂ軽鎖遺伝子）に転換可能である。ヒト軽鎖定常領域遺伝子の配列は当業界に公知であり（例えば、Ｋａｂａｔ，ＥＡ，ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＵＳ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．９１−３２４２）、これらの領域を含むＤＮＡ断片は、標準ＰＣＲ増幅によって得ることができる。軽鎖定常領域は、カッパ又はラムダ定常領域であり得る。
【０２４７】
ｓｃＦｖ抗体を生成するために、前記ＶＨ−及びＶＬ−コーディングＤＮＡ断片は、可撓性リンカー、例えばアミノ酸配列（Ｇｌｙ４−Ｓｅｒ）３をコードするさらに他の断片に作動的に連結され、前記ＶＨ及びＶＬ配列が、ＶＬ及びＶＨ領域が可撓性リンカーによって接合された隣接単鎖タンパク質として発現し得る（例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ、（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；Ｈｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４参照）。
【０２４８】
一部の態様において、本開示内容は、抗体又はその抗原結合部分をコードするヌクレオチド配列を含む分離された核酸分子を含むベクターを提供する。他の態様において、前記ベクターは、遺伝子治療のために用いることができる。
【０２４９】
本開示内容に適するベクターは、発現ベクター、ウイルスベクター及びプラスミドベクターを含む。一態様において、前記ベクターは、ウイルスベクターである。
【０２５０】
本明細書で用いる発現ベクターとは、挿入されたコーディング配列の転写及び翻訳に必要な要素を含む任意の核酸構造体のことを指すか、或いはＲＮＡウイルスベクターでは、適切な宿主細胞への導入時、複製と翻訳に必要な要素のことを指す。発現ベクターは、プラスミド、ファージミド、ウイルス及びこれらの誘導体を含むことができる。
【０２５１】
本開示内容の発現ベクターは、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合部分をコードするポリヌクレオチドを含むことができる。一態様において、前記抗体又はその抗原結合部分に対するコーディング配列は、発現調節配列に作動可能に連結される。本明細書で用いる２個の核酸配列は、各成分核酸配列がその機能を維持するように許容する方式で共有結合される時に作動可能に連結される。コーディング配列及び遺伝子発現調節配列は、コーディング配列の発現又は転写及び／又は翻訳を遺伝子発現調節配列の影響又は制御の下にあるように共有結合される時に作動可能に連結されているとする。５’遺伝子発現配列においてプロモーターの誘導がコーディング配列の転写を起こし、２個のＤＮＡ配列間の結合特性が、（１）フレーム−移動（ｆｒａｍｅ−ｓｈｉｆｔ）突然変異の導入を起こさいか、（２）コーディング配列の転写を指示するプロモーター領域の能力を妨害しないか、又は（３）タンパク質に翻訳される相応するＲＮＡ転写体の能力を妨害しない場合に、２個のＤＮＡ配列が作動可能に連結されているとする。これによって、遺伝子発現配列がコーディング核酸配列の転写に影響を及ぼし得る場合、前記遺伝子発現配列は、コーディング核酸配列に作動可能に連結されて生成された転写体が所望の抗体又はその抗原結合部分に翻訳される。
【０２５２】
ウイルスベクターは、次のようなウイルスの核酸配列を含むが、これに限定されるものではない：レトロウイルス、例えば、モロニー（Ｍｏｌｏｎｅｙ）マウス白血病ウイルス、ハーベイ（Ｈａｒｖｅｙ）マウス肉腫ウイルス、マウス乳癌ウイルス及びラウス（Ｒｏｕｓ）肉腫ウイルス；レンチウイルス；アデノウイルス；アデノ関連ウイルス；ＳＶ４０型ウイルス；ポリオーマウイルス；エプスタインバール（Ｅｐｓｔｅｉｎ−Ｂａｒｒ）ウイルス；乳頭腫ウイルス；ヘルペスウイルス；ワクシニアウイルス；小児痲痺ウイルス；及びレトロウイルスのようなＲＮＡウイルス。当業界に公知の他のベクターを容易に用いることができる。特定ウイルスベクターは、非必須遺伝子が関心遺伝子に代替された非細胞病性真核ウイルスに基づく。非細胞病性ウイルスには、ライフサイクルがゲノムウイルスＲＮＡをＤＮＡに逆転写した後、続いて宿主細胞ＤＮＡにプロウイルス統合することを伴うレトロウイルスが含まれる。レトロウイルスは、ヒト遺伝子治療試験のために承認された。最も有用なのは、複製欠陥のあるレトロウイルスである（すなわち、所望のタンパク質の合成を指示できるが、感染性粒子は生成できない。）。このような遺伝的に変形されたレトロウイルス発現ベクターは、生体内で遺伝子の高効率形質導入において一般的に有用である。複製欠陥のあるレトロウイルスの生産のための標準プロトコル（外因性遺伝物質をプラスミドに混入する段階、プラスミドを用いてパッケージ細胞株を形質注入させる段階、パッケージ細胞株によって組換えレトロウイルスを生産する段階、組織培養培地からウイルス粒子を回収する段階、及びウイルス粒子に標的細胞を感染させる段階を含む。）は、Ｋｒｉｅｇｌｅｒ，Ｍ．，Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  ａｎｄ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｗ．Ｈ  Ｆｒｅｅｍａｎ  Ｃｏ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９０）ａｎｄ  Ｍｕｒｒｙ，Ｅ．Ｔ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．７，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，Ｃｌｉｆｆｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．（１９９１）に提供されている。
【０２５３】
一態様において、前記ウイルスは、二重鎖ＤＮＡウイルスであるアデノ関連ウイルスである。アデノ関連ウイルスは、複製欠陥があるように操作されてよく、広範囲な細胞類型及び種を感染させることができる。また、熱及び脂質溶媒安定性；造血細胞を含む様々な系統の細胞で高い形質導入頻度；重複感染阻害が欠如し、様々な一連の形質導入が可能であるという長所がある。報告によれば、アデノ関連ウイルスは、部位特異的方式でヒト細胞ＤＮＡに統合され得るので、挿入突然変異の誘発可能性とレトロウイルス感染の挿入された遺伝子発現特性の可変性を最小化できる。また、野生型アデノ関連ウイルス感染は、選択的圧力がない状態で１００回も超える継代中に組織培養で追跡され、これは、アデノ関連ウイルスゲノム統合が比較的安定した反応であることを意味する。アデノ関連ウイルスは、染色体外方式で作用してもよい。
【０２５４】
他の態様において、前記ベクターは、レンチウイルスから由来する。特定の態様において、前記ベクターは、非分裂細胞を感染させ得る組換えレンチウイルスのベクターである。
【０２５５】
レンチウイルスゲノムとプロウイルスＤＮＡは一般に、レトロウイルスから発見する２個の長い末端反復（ＬＴＲ）配列が両側にある３個の遺伝子であるｇａｇ、ｐｏｌ及びｅｎｖを有する。ｇａｇ遺伝子は、内部構造（マトリックス、カプシド及びヌクレオカプシド）タンパク質をコードし；ｐｏｌ遺伝子は、ＲＮＡ−指向ＤＮＡ重合酵素（逆転写酵素）、プロテアーゼ及びインテグラーゼをコードし；ｅｎｖ遺伝子は、ウイルス外皮糖タンパク質をコードする。５’及び３’ＬＴＲは、ビリオンＲＮＡの転写及びポリアデニル化を促進する役割を担う。ＬＴＲは、ウイルス複製に必要な他の全てのシス−作用（ｃｉｓ−ａｃｔｉｎｇ）配列を含む。レンチウイルスは、ｖｉｆ、ｖｐｒ、ｔａｔ、ｒｅｖ、ｖｐｕ、ｎｅｆ及びｖｐｘ（ＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２及び／又はＳＩＶにおいて）を含む追加遺伝子を持っている。
【０２５６】
前記ゲノム（ｔＲＮＡプライマー結合部位）の逆転写及びウイルスＲＮＡを粒子（Ｐｓｉ部位）に効率的に封入するために必要な配列が５’ＬＴＲに隣接している。封入（又は、レトロウイルスＲＮＡを感染性ビリオンにパッケージング）に必要な配列がウイルスゲノムから欠落している場合、シス欠陥（ｃｉｓ  ｄｅｆｅｃｔ）はゲノムＲＮＡの封入を防ぐ。
【０２５７】
しかし、その結果、得られた突然変異体は、全てのビリオンタンパク質の合成を指示できる状態で残っている。本開示内容は、パッケージング機能を保有している２個以上のベクター、すなわち、ｇａｇ、ｐｏｌ及びｅｎｖだけでなく、ｒｅｖ及びｔａｔを用いて好適な宿主細胞を形質注入させることを含む、非分裂細胞を感染させ得る組換えレンチウイルスを生産する方法を提供する。下に開示されるように、機能性ｔａｔ遺伝子が欠如したベクターは、特定用途に好適である。これによって、例えば、第１ベクターは、ウイルスｇａｇ及びウイルスｐｏｌをコードする核酸を提供でき、さらに他のベクターは、パッケージング細胞を生産するためにウイルスｅｎｖをコードする核酸を提供できる。本明細書において、伝達ベクターとして同定された異種遺伝子を提供するベクターをパッケージング細胞に導入すれば、関心外来遺伝子を運搬する感染性ウイルス粒子を放出するプロデューサー細胞（ｐｒｏｄｕｃｅｒ  ｃｅｌｌ）が得られる。
【０２５８】
上に述べたベクター及び外来遺伝子の構成によれば、第２ベクターは、ウイルス外皮（ｅｎｖ）遺伝子をコードする核酸を提供することができる。前記ｅｎｖ遺伝子は、レトロウイルスを含む略全ての好適なウイルスから由来し得る。一部の態様において、前記ｅｎｖタンパク質は、ヒト及び他の種の細胞の形質導入を可能にする両種性外皮タンパク質である。
【０２５９】
レトロウイルス由来のｅｎｖ遺伝子の例は、次を含むが、これに限定されない：モロニーマウス白血病ウイルス（ＭｏＭｕＬＶ又はＭＭＬＶ）、ハーベイマウス肉腫ウイルス（ＨａＭｕＳＶ又はＨＳＶ）、マウス乳癌ウイルス（ＭｕＭＴＶ又はＭＭＴＶ）、テナガザル白血病ウイルス（Ｇｉｂｂｏｎ  Ａｐｅ  Ｌｅｕｋｅｍｉａ  Ｖｉｒｕｓ）、ヒト免疫欠乏ウイルス（ＨＩＶ）、及びラウス肉腫ウイルス。水疱性口内炎（Ｖｅｓｉｃｕｌａｒ  ｓｔｏｍａｔｉｔｉｓ）ウイルス（ＶＳＶ）タンパク質Ｇ（ＶＳＶ  Ｇ）のような他のｅｎｖ遺伝子、肝炎ウイルス及びインフルエンザーの遺伝子も用いられ得る。
【０２６０】
ウイルスｅｎｖ核酸配列を提供するベクターは、本明細書の他の箇所に記載されている調節配列と作動可能に関連される。
【０２６１】
特定の態様において、前記ベクターは、ベクターが非分裂細胞を形質導入させる能力を損傷させずにＨＩＶ毒性遺伝子ｅｎｖ、ｖｉｆ、ｖｐｒ、ｖｐｕ及びｎｅｆが欠失されたレンチウイルスベクターを含む。
【０２６２】
一部の態様において、前記ベクターは、３’ＬＴＲのＵ３領域の欠失を含むレンチウイルスベクターを含む。Ｕ３領域の欠失は、全体欠失又は部分欠失であり得る。
【０２６３】
一部の態様において、本明細書に記載のＦＶＩＩＩヌクレオチド配列を含む本開示内容のレンチウイルスベクターは、（ａ）ｇａｇ、ｐｏｌ又はｇａｇ及びｐｏｌ遺伝子を含む第１ヌクレオチド配列、及び（ｂ）異種ｅｎｖ遺伝子を含む第２ヌクレオチド配列を用いて形質注入されてよく；このとき、前記レンチウイルスベクターは、機能性ｔａｔ遺伝子が欠如している。他の態様において、前記細胞は、ｒｅｖ遺伝子を含む第４ヌクレオチド配列を用いてさらに形質注入される。特定の態様において、前記レンチウイルスベクターは、ｖｉｆ、ｖｐｒ、ｖｐｕ、ｖｐｘ及びｎｅｆ又はこれらの組合せから選択される機能性遺伝子が欠如している。
【０２６４】
特定の態様において、レンチウイルスベクターは、ｇａｇタンパク質、Ｒｅｖ反応要素、中心ポリプリントラック（ｃＰＰＴ）、又はこれらの任意の組合せをコードする１つ以上のヌクレオチド配列を含む。
【０２６５】
レンチウイルスベクターの例は、Ｗ０９９３１２５１、Ｗ０９７１２６２２、Ｗ０９８１７８１５、Ｗ０９８１７８１６及びＷ０９８１８９３４に開示されており、これらはその全文が本明細書に参考として含まれる。
【０２６６】
他のベクターは、プラスミドベクターを含む。プラスミドベクターは、当業界に広範囲に記述されており、本技術分野の当業者には周知である。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｌ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，１９８９参照。ここ数年間、プラスミドベクターは宿主ゲノム内で複製して宿主ゲノムに統合できないことから、生体内で細胞に遺伝子を伝達するのに特に有利なものとして明らかになった。しかし、宿主細胞と相溶性であるプロモーターを有するこれらのプラスミドは、プラスミド内に作動可能にコードされた遺伝子からペプチドを発現することができる。商業用供給社から入手でき、一般的に用いられる一部のプラスミドは、ｐＢＲ３２２、ｐＵＣｌ８、ｐＵＣｌ９、様々なｐｃＤＮＡプラスミド、ｐＲＣ／ＣＭＶ、様々なｐＣＭＶプラスミド、ｐＳＶ４０及びｐＢｌｕｅＳｃｒｉｐｔを含む。特定プラスミドの追加例は、ｐｃＤＮＡ３．１、カタログ番号Ｖ７９０２０；ｐｃＤＮＡ３．１／ｈｙｇｒｏ、カタログ番号Ｖ８７０２０；ｐｃＤＮＡ４／ｍｙｃ−Ｈｉｓ、カタログ番号Ｖ８６３２０；及びｐＢｕｄＣＥ４．ｌ、カタログ番号Ｖ５３２２０（いずれも、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）社製）である。他のプラスミドは当業者によく知られている。さらに、プラスミドはＤＮＡの特定断片を除去及び／又は追加するために標準分子生物学技術を用いてカスタマイズ設計され得る。
【０２６７】
＜ＶＩ．抗体生産＞
ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に免疫特異的に結合する抗体又はその断片は、抗体の合成のために当業界に公知の任意の方法、例えば化学的合成又は組換え発現技術によって生成され得る。本明細書に開示された方法は、特に言及がない限り、分子生物学、微生物学、遺伝子分析、組換えＤＮＡ、有機化学、生化学、ＰＣＲ、オリゴヌクレオチド合成及び変形、核酸混成化、及び当業界の関連技術分野における従来の技術を利用する。これらの技術は、例えば、本明細書で援用された参考文献に完全に説明されている。例えば、Ｍａｎｉａｔｉｓ  Ｔ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８２）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ；Ｓａｍｂｒｏｏｋ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８９）、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ；Ｓａｍｂｒｏｏｋ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．，（２００１）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ；Ａｕｓｕｂｅｌ  ＦＭ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ（１９８７  ａｎｄ  ａｎｎｕａｌ  ｕｐｄａｔｅｓ）；Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ（１９８７  ａｎｄ  ａｎｎｕａｌ  ｕｐｄａｔｅｓ）Ｇａｉｔ（ｅｄ．）（１９８４）Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ；Ｅｃｋｓｔｅｉｎ（ｅｄ．）（１９９１）Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ；Ｂｉｒｒｅｎ  Ｂ  ｅｔ  ａｌ．，（ｅｄｓ．）（１９９９）Ｇｅｎｏｍｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓを参考されたい。
【０２６８】
特定の態様において、本明細書に記載の抗体は、例えば、合成、ＤＮＡ配列の遺伝子操作を用いた生成を伴う任意の手段によって製造、発現、生成又は分離した抗体（例えば、組換え抗体）である。特定の実施形態において、このような抗体は、生体内動物又は哺乳類（例えば、ヒト）の抗体ジャームライン（ｇｅｒｍｌｉｎｅ）レパートリー内に自然的に存在しない配列（例えば、ＤＮＡ配列又はアミノ酸配列）を含む。
【０２６９】
＜ＶＩＩ．薬剤学的組成物＞
本明細書は、生理学的に許容される担体、賦形剤又は安定化剤（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９９０）Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ）において所望の程度の純度を持つ、本明細書に記載された抗体又はその抗原結合部分を含む組成物を提供する。許容される担体、賦形剤又は安定化剤は、使用された投与量及び濃度において、受容者に非毒性であり、ホスフェート、シトレート及びその他の有機酸のような緩衝剤；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；保存剤（オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；ヘキサメトニウムクロリド；ベンザルコニウムクロリド；フェノール、ブチル又はベンジルアルコール；メチル又はプロピルパラベンのようなアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；及びｍ−クレゾールのような）；低分子量（約１０個未満の残基）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン又は免疫グロブリンのようなタンパク質；ポリビニルピロリドンのような親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン又はリジン（ｌｙｓｉｎｅ）のようなアミノ酸；単糖類、二糖類及びグルコース、マンノース又はデキストリンを含む他の炭水化物；ＥＤＴＡのようなキレート化剤；スクロース、マンニトール、トレハロース又はソルビトールのような糖；ナトリウムのような塩形成対イオン；金属複合体（例えば、Ｚｎ−タンパク質複合体）；及び／又はＴＷＥＥＮＴＭＴＭ、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳＴＭ又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のような非イオン性界面活性剤を含む。
【０２７０】
一部の態様において、薬剤学的組成物は、薬剤学的に許容される担体に、本明細書に記載された抗体又はその抗原結合部分、二重特異的分子又は免疫複合体を含む。一部の態様において、薬剤学的組成物は、薬剤学的に許容される担体に、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合部分の有効量及び場合によって１つ以上の追加予防剤又は治療剤を含む。一部の態様において、前記抗体は、前記薬剤学的組成物に含まれた唯一の活性成分である。本明細書に記載の薬剤学的組成物は、ＦＡＭ１９Ａ５活性を減少させ、緑内障のような眼球疾患、障害、又は症状を治療するのに有用であり得る。
【０２７１】
非経口製剤において用いられる薬剤学的に許容される担体は、水性ビークル、非水性ビークル、抗微生物剤、等張化剤、緩衝剤、抗酸化剤、局所痲酔剤、懸濁及び分散剤、乳化剤、金属イオン封鎖剤又はキレート化剤及びその他の薬剤学的に許容される物質を含む。水性ビークルの例は、塩化ナトリウム注射液、点滴注射液、等張デキストロース注射液、滅菌水注射液、デキストロース及びラクテート点滴注射液を含む。非水性非経口ビークルは、植物起源の固定油、綿実油、トウモロコシ油、ゴマ油及びピーナッツ油を含む。静菌又は静真菌濃度の抗微細物剤がフェノール又はクレゾール、水銀含有物質、ベンジルアルコール、クロロブタノール、メチル及びプロピルｐ−ヒドロキシベンゾ酸エステル、チメロサール、ベンザルコニウムクロリド及びベンゼトニウムクロリドを含む多回容量容器にパッケージされた非経口製剤に添加され得る。等張化剤は、塩化ナトリウム及びデキストロースを含む。緩衝剤は、ホスフェート及びシトレートを含む。抗酸化剤は、硫酸水素ナトリウムを含む。局所痲酔剤は、プロカイン塩酸塩を含む。懸濁及び分散剤は、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース及びポリビニルピロリドンを含む。乳化剤は、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ  ８０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）  ８０）を含む。金属イオンの封鎖剤又はキレート化剤は、ＥＤＴＡを含む。薬剤学的担体はまた、水混和性ビークル用エチルアルコール、ポリエチレングリコール及びプロピレングリコール；及びｐＨ調整のための水酸化ナトリウム、塩酸、クエン酸又は乳酸を含む。
【０２７２】
本開示内容の薬剤学的組成物は、対象に対する任意の投与経路のために剤形化できる。一部の態様において、本明細書に開示の薬剤学的組成物は、眼のテノン嚢下、結膜下、脈絡膜上、硝子体内及び類似位置に、前記組成物を伝達できる任意の経路で投与できる。特定の態様において、本明細書に開示の薬剤学的組成物は、対象に眼球投与で伝達される。一部の態様において、眼球投与は、硝子体内投与を含む。本明細書では、皮下、筋肉内、腹腔内又は静脈内注射を特徴とする非経口投与も考慮される。注射剤は、従来の形態であり、液体溶液や懸濁液、注射前に液体中溶液又は懸濁液に適した固体形態で製造されたり又は乳化液として製造され得る。注射剤、溶液及び乳化液はまた、１つ以上の賦形剤を含有する。適切な賦形剤は、例えば、水、食塩水、デキストロース、グリセロール又はエタノールである。また、必要な場合、投与する薬剤学的組成物はまた、少量の湿潤又は乳化剤、ｐＨ緩衝剤、安定化剤、溶解度増進剤のような非毒性補助物質及び例えば酢酸ナトリウム、ソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミンオレート及びシクロデキストリンのような製剤を含有できる。
【０２７３】
抗体の非経口投与用製剤は、注射用即席滅菌液、皮下注射用錠剤を含めて使用直前に溶媒と即席で調合できる凍結乾燥粉末のような滅菌乾燥可溶性製品、注射用即席滅菌懸濁液、使用直前にビークルと即席調合できる滅菌乾燥不溶性製品及び滅菌乳化液を含む。前記溶液は、水性又は非水性であり得る。
【０２７４】
静脈内投与の場合、適切な担体は、生理食塩水又はリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）及びグルコース、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール及びこれらの混合物のような増粘剤と可溶化剤を含有する溶液を含む。
【０２７５】
抗体を含む局所用混合物は、局所及び全身投与に対して記載の通りに製造される。その結果として得た混合物は、溶液、懸濁液、乳化液などであり得、クリーム、ゲル、軟膏、乳化液、溶液、エリキシル、ローション、懸濁液、チンキ、ペースト、フォーム、エアゾール、灌注液（ｉｒｒｉｇａｔｉｏｎ）、スプレー、坐薬、包帯、皮膚パッチ又は局所投与に適した任意の他の剤形として剤形化できる。
【０２７６】
本明細書に記載の抗体又はその抗原結合部分は、例えば、吸入による局所用エアゾールとして剤形化できる（例えば、炎症性疾患、特に、喘息治療に有用なステロイド伝達用エアゾールを記載している米国特許第４，０４４，１２６，４，４１４，２０９号及び第４，３６４，９２３号を参照）。気道投与用のこれらの剤形は、噴霧器用エアゾール又は溶液形態であるか、吸入剤用微細粉末であり、単独又はラクトースのような非活性担体と組み合わせることができる。このような場合、剤形の粒子は、一態様において、５０ミクロン未満の直径、一態様では１０ミクロン未満の直径を有する。
【０２７７】
本明細書に記載の抗体又はその抗原結合部分は、目におけるような皮膚と粘膜への局所塗布のように局所用又は局部用に、ゲル、クリーム及びローションの形態で、及び目に適用又は槽内（ｉｎｔｒａｃｉｓｔｅｒｎａｌ）又は脊髄内適用のために製剤化できる。局所投与は、経皮伝達用にそして目や粘膜投与用又は吸入療法用にも考慮される。前記抗体の点鼻液（ｎａｓａｌ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）は、単独で、或いは他の薬剤学的に許容される賦形剤との組合せで投与できる。
【０２７８】
イオン泳動及び電気泳動デバイスを含む経皮パッチは、当業者には周知であり、抗体を投与するために用いることができる。例えば、このようなパッチは、米国特許番号第６，２６７，９８３号、第６，２６１，５９５号、第６，２５６，５３３号、第６，１６７，３０１号、第６，０２４，９７５号、第６，０１０，７１５号、第５，９８５，３１７号、第５，９８３，１３４号、第５，９４８，４３３号及び第５，８６０，９５７号に開示されている。
【０２７９】
一部の態様において、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合部分を含む薬剤学的組成物は、溶液、乳化液及びその他の混合物として投与用に再構成できる凍結乾燥粉末である。前記凍結乾燥粉末はまた、固体又はゲルとして再構成及び剤形化できる。前記凍結乾燥粉末は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合部分、又はその薬剤学的に許容される誘導体を適切な溶媒に溶解させてなる。一部の態様において、前記凍結乾燥粉末は、滅菌性である。前記溶媒は、前記粉末又は前記粉末から製造された再構成溶液の安定性又はその他の薬理学的成分を改善する賦形剤を含有できる。使用可能な賦形剤は、デキストロース、ソルビトール、フルクトース、トウモロコシシロップ、キシリトール、グリセリン、グルコース、スクロース又はその他の適切な製剤を含むが、これに限定されるものではない。前記溶媒はまた、シトレート、リン酸ナトリウム又はリン酸カリウムのような緩衝剤、又は一態様において略中性ｐＨの他のこのような緩衝剤を含有できる。次いで、前記溶液を滅菌濾過した後、当業者に公知された標準条件で凍結乾燥させ、所望の剤形を提供する。一態様において、前記得られた溶液は、凍結乾燥用バイアルに配分され得る。それぞれのバイアルは、前記化合物の単一投与量又は多回の投与量を含有できる。前記凍結乾燥した粉末は、約４℃〜室温のような適切な条件で保管され得る。
【０２８０】
このような凍結乾燥した粉末を注射用水によって再構成し、非経口投与用に使用するための剤形を提供する。再構成のために、前記凍結乾燥した粉末を、滅菌水又は他の適切な担体に添加する。その正確な量は、選択した化合物によって異なる。このような量は、経験的に決定できる。
【０２８１】
本明細書に記載の抗体又はその抗原結合部分、二重特異的分子又は免疫複合体、及び本明細書に提供された他の組成物はまた、治療する対象の特定組織、受容体又は他の身体領域を標的にするよう剤形化されてもよい。このような標的化方法の多数が当業者によく知られている。本明細書において、このような標的化方法はいずれも、本組成物に使用することが考慮される。標的化方法の非制限的な例については、例えば、米国特許第６，３１６，６５２号、第６，２７４，５５２号、第６，２７１，３５９号、第６，２５３，８７２号、第６，１３９，８６５号、第６，１３１，５７０号、第６，１２０，７５１号、第６，０７１，４９５号、第６，０６０，０８２号、第６，０４８，７３６号、第６，０３９，９７５号、第６，００４，５３４号、第５，９８５，３０７号、第５，９７２，３６６号、第５，９００，２５２号、第５，８４０，６７４号、第５，７５９，５４２号及び第５，７０９，８７４号を参照する。特定の態様において、本明細書に記載のベクター又はその抗原結合部分は、緑内障を治療し及び／又は緑内障関連炎症を減少、改善又は阻害するために用いることができる。
【０２８２】
生体内投与のために用いられる組成物は、滅菌性であり得る。これは、例えば滅菌濾過膜を用いた濾過によって容易に行われる。
【０２８３】
＜ＶＩＩＩ．キット＞
本明細書は、本明細書に記載の一つ以上の抗体又はその抗原結合部分を含むキットを提供する。特定の態様において、本明細書は、本明細書に提供された一つ以上の抗体又はその抗原結合部分のような、本明細書に記載の薬剤学的組成物の成分の一つ以上が満たされれた一つ以上の容器、及び場合によって使用説明書を含む、薬剤学的パック又はキットを提供する。一部の態様において、前記キットは、本明細書に記載の薬剤学的組成物及び本明細書に記載されたような任意の予防剤又は治療剤を含有する。
【０２８４】
＜実施例＞
（実施例１）
糖尿病性網膜病症のマウスモデルにおいて抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の生体内投与後の網膜電位差の評価
糖尿病性網膜病症に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体治療効果の評価を始めるために、２型糖尿病性ｄｂ／ｄｂマウス（Ｂ６．ＢＫＳ（Ｄ）−Ｌｅｐｒｄｂ／ｊ）（２５週齢）を使用した。簡単に、マウスを１週間安定化させた後、ヒトＩｇＧ対照群抗体又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（１−６５又は３−２クローン）を、マウスにマイクロポンプシステムを用いて硝子体内投与した（２週ごとに４μｇ／眼の投与量で総７回投与）。正常（すなわち、糖尿病のない野生型）マウスを対照群として用いた。次に、網膜電位検査（ＥＲＧ）を用いて網膜電位を評価した。
【０２８５】
ＥＲＧは、光受容体（竿状体及び錐状体）、内部網膜細胞（両極性及び無軸索細胞）及び神経節細胞を含む網膜の様々な細胞によって発生する電気的活性（すなわち、網膜電位）を測定する診断検査である。一般に、明るい刺激閃光時に、健康な眼のＥＲＧは、初期負偏向（“Ａ波”）と以降“律動様小波”（ＯＰ）と知られた高周波数振動とが重なった勾配が次第に大きくなり、より速いピークを持つＢ波で構成された複雑な波形を示すだろう。前記Ａ波は、竿状体の集団反応によって左右され、前記暗順応（ｓｃｏｔｏｐｉｃ）Ｂ波は、竿状体両極性神経細胞の反応によって左右される。前記ＯＰは、両極性、無軸索及び神経節細胞が相互作用する内網状層内で発生する。Ｗｉｌｓｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  ２７（２）：１１８−１２４（２０１６）を参照する。これらの値を評価することによって、網膜内で発見される様々な細胞の健康状態が評価できる。
【０２８６】
ＥＲＧを用いて網膜電位を評価するために、２．５％フェニレフリン塩酸塩の局所処理によって、異なる処理群の動物の眼の瞳孔を拡張させた。次に、動物を除毛し麻酔（ケタミン（８０ｍｇ／ｋｇ）及びキシラジン（１６ｍｇ／ｋｇ）投与後、０．５％パラカイン使用）し、皮膚、尾及び角膜に電極を取り付けた。白色光の単一閃光（０．９ｌｏｇ  ｃｄ  ｓｅｃ／ｍ２）で網膜を刺激した。異なる動物の眼内部の電気的活性（すなわち、“網膜電位差”）を評価するために、Ａ波（Ａ波の谷（ｔｒｏｕｇｈ）から基準線まで）、Ｂ波（Ａ波の谷からＢ波のピークまで）、律動様小波（ＯＰ）（Ｂ波の上行脚（ａｓｃｅｎｄｉｎｇ  ｌｉｍｂ）から観察される小さな振動の振幅と時間）振幅値を測定した。
【０２８７】
図１Ａ〜図１Ｃに示すように、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン１−６５又は３−２）が投与されたマウスは、対照群ＩｇＧ抗体が投与されたマウスに比べて、改善されたＡ波、Ｂ波及び律動様小波を有した。このことから、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体投与の動物が正常の網膜機能を回復したことが分かった。
【０２８８】
（実施例２）
糖尿病性網膜病症のマウスモデルにおいて抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体処理後の形態学的変化の評価
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体処理が網膜の形態学的変化をもたらしたか否かを評価するために、実施例１の２型糖尿病ｄｂ／ｄｂマウスを犠牲させ、動物から両眼を摘出した。
【０２８９】
摘出後、各動物の一方の眼を一日間１０％中性ホルマリンに固定した。その後、角膜、水晶体と鞏膜を除去して残った眼球組織を振蕩しながら１時間蒸留水で５回洗浄した。最後の洗浄後に蒸留水を除去し、眼球組織を、３７℃の０．１Ｍ  Ｔｒｉｓ緩衝液に溶かした３％トリプシンで２時間培養した。その後、網膜血管を残りの網膜組織から分離し、過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）で染色するためにスライドに付着させ、初期糖尿病性網膜病症の特徴的な標識子（例えば、血管周囲細胞損失及び無細胞性毛細血管形成）に対する網膜微細血管を評価した。
【０２９０】
各動物の他方の眼を４％グルタルアルデヒドにあらかじめ固定させた後、１０％ホルマリンに３日間固定させた。その後、眼を使い捨てカセットに入れ、パラフィンブロックに包埋した。その後、凍結した組織を薄片化し、追加分析のためにスライドに載せた。血管鬱血、血管標識子（ＣＤ３１及びＶＥＧＦ）、網膜細胞保護効果を分析するために、Ｈ＆Ｅ、ＴＵＮＥＬ分析及びＩＨＣ分析を行った。
【０２９１】
図２Ａは、異なる処理群に属する動物の代表的な網膜領域の顕微鏡写真（１００×倍率）を提供している。抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン１−６５又は３−２）が投与されたマウスから検出された内皮細胞対比血管周囲細胞の比（Ｅ／Ｐ比率）と無細胞性毛細血管の個数及び長さはいずれも、正常の健康な動物のそれと類似であった。図２Ｂ〜図２Ｄを参照されたい。対照的に、ヒトＩｇＧ対照群抗体で処理したマウスは、遥かに高いＥ／Ｐ比率を有し、これは、血管周囲細胞の損失を示唆する。図２Ｂを参照されたい。ヒトＩｇＧ対照群マウスはまた、より多い数の無細胞性毛細血管形成を有し（図２Ｃ）、無細胞性毛細血管は遥かに長かった（図２Ｄ）。この結果は、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が糖尿病性網膜病症モデルにおいて細胞周囲細胞損失を防止し、網膜微細血管を無細胞性毛細血管形成から保護できることを示唆する。
【０２９２】
また、図３に示すように、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体で処理したマウス（下段２枚のパネル）はまた、ヒトＩｇＧ対照群抗体が投与されたマウス（右上パネル）に比べて、網膜の神経線維層において血管鬱血が遥かに減少した。ＴＵＮＥＬ分析は、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体で処理したマウスの網膜の神経線維層及び内核層ともに、ヒトＩｇＧ対照群抗体で処理したマウスの網膜の相応する層に比べて、細胞死の進行した細胞が少ないということを立証した。図４を参照されたい。これは、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が、糖尿病に起因した損傷から網膜細胞を保護できることを示唆する。
【０２９３】
最後に、図５に示すように、ヒトＩｇＧ対照群抗体で処理したマウスの神経線維層は、広範囲なＣＤ３１及びＶＥＧＦ染色を示したが、これは、糖尿病性網膜病症のさらに進展した段階の特徴である血管新生を意味する。対照的に、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン１−６５又は３−２）で処理したマウスは、ＣＤ３１及びＶＥＧＦ染色が遥かに減少した。この結果は、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が、糖尿病性網膜病症モデルから血管新生を効果的に遮断できることを示唆する。
【０２９４】
要するに、前記データは、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が糖尿病性網膜病症のような網膜病症に関連した基底病態のほとんどを改善し、前記疾患が治療できることを立証した。
【０２９５】
（実施例３）
加齢黄斑変性マウスモデルにおいて脈絡膜血管新生に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体効果の評価
加齢黄斑変性に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体治療の効果を評価するために、マウス誘導脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）モデルを使用した。より具体的に、ＣＮＶモデルは、ヒトの湿性加齢黄斑変性の動物モデルである。簡単に、Ｃ５７ＢＬ／６マウスを１週間安定化させた後、動物の眼の瞳孔を拡張させた（２．５％フェニレフリン塩酸塩の局所処理によって）。次いで、動物を２％フルオレセイン（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ）（Ｓｉｇｍａ）で腹腔内処理して血管を染色した。フルオレセイン注射して約３〜５分後にマウスを麻酔させ、レーザー（２４０ｍＷ、７０ｍｓ持続時間）によるＰｈｏｅｎｉｘ緑色レーザー光凝固術を用いて視神経の４つの領域に湿性ＡＭＤ様病変を誘導した。図６を参照されたい。その後、ＣＮＶ誘導当日（すなわち、０日）及びＣＮＶ誘導後３日及び７日目に、ヒトＩｇＧ対照群抗体や抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体をマウス（４μｇ／眼）に硝子体内投与した。ＣＮＶ誘導後１３日目に、蛍光眼底血管造影術（ＦＦＡ）及びイメージＪプログラムを用いて脈絡膜血管新生の程度を測定し、補正された総蛍光（ＣＴＦ＝積分密度−（選択した病変の面積×背景判読の平均蛍光）値を計算した。また、イメージ誘導光学干渉断層撮影（ＯＣＴ）装備を用いて網膜断層撮影を行い、新生血管病変の程度を測定した。イメージＪプログラムを用いて新生血管病変を定量化した。
【０２９６】
図７Ａに示すように、ＣＮＶ誘導直後及び抗体処理前（０日、左列）に、レーザーに露出された４つの領域（矢印で表示）で観察された蛍光強度は、２個の処理群において類似であった。しかし、ＣＮＶ誘導後１３日目に抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体で処理したマウスは、ヒトＩｇＧ対照群抗体で処理したマウスに比べて、統計的に低いＣＴＦ値を有していた。図７Ｂを参照されたい。この効果は、イメージ誘導光干渉断層撮影（ＯＣＴ）（図８Ａ〜図８Ｃ参照）及びＨ＆Ｅ染色（図１０Ｂ参照）の両方で確認された。これらの結果は、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がレーザーによる脈絡膜血管新生を阻害及び／又は減少させることができることを立証した。
【０２９７】
（実施例４）
加齢黄斑変性のマウスモデルにおいて抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の生体内投与後網膜電位差の評価
加齢黄斑変性に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体治療の効果をさらに評価するために、網膜電位造影術（ＥＲＧ）を用いて実施例３のマウスから網膜電位を評価した。簡単に、２．５％フェニレフリン塩酸塩の局所処理によって、異なる処理群の動物の眼の瞳孔を拡張させた。次いで、動物を麻酔させ、皮膚、尾及び角膜に電極を付着させた。白色光の単一閃光（０．９ｌｏｇ  ｃｄ  ｓｅｃ／ｍ２）で網膜を刺激した。異なる動物の眼内部の電気的活性（すなわち、“網膜電位差”）を評価するために、Ｂ波値を、実施例１で記載した通りにして測定した。
【０２９８】
図９に示すように、前記抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体で処理したＣＮＶ誘導マウスは、ヒトＩｇＧ抗体群のマウスに比べて改善されたＢ波網膜電位を有していた。この結果は、ＣＮＶ誘導マウスへの抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体投与は、正常の網膜機能を回復させたことを示唆する。
【０２９９】
（実施例５）
加齢黄斑変性のマウスモデルにおいて抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体処理後の形態学的変化の評価
次に、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体投与が網膜内形態学的変化をもたらしたか否かを評価するために、実施例３及び４のＣＮＶ誘導マウスを犠牲させ、動物から両眼を摘出した。次いで、眼を４８時間１０％中性ホルマリンに固定した。その後、固定させた眼をパラフィンブロックに包埋し、Ｈ＆Ｅ及びＩＨＣ分析を行った。Ｈ＆Ｅを用いて、実施例３で示した脈絡膜血管新生に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の阻害効果を確認した。血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）の発現に対して、ＩＨＣを用いて染色した。ＰＤＧＦは網膜神経細胞から分泌されるものと知られており、星状細胞の形成と脈絡膜血管新生に重要な役割を担う。
【０３００】
図１０Ａ及び図１０Ｂに示すように、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体で処理したＣＮＶ誘導マウスでは、ヒトＩｇＧ処理群に比べて、脈絡膜血管新生がＣＮＶ誘導後１３日まで大きさが有意に減少した。この結果から、初期データ（実施例３参照）が脈絡膜血管新生に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５の阻害効果を立証するものであることを確認した。そして、図１１に示すように、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体で処理したＣＮＶ誘導マウスは、ＩｇＧ処理群に比べて網膜の神経線維層及び神経節細胞層の両方においてＰＤＧＦ染色が顕著に少なかった。
【０３０１】
（実施例６）
ドルーゼン生成に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の阻害効果の評価
上述したように、ドルーゼンは、眼のブルック膜と網膜色素上皮（ＲＰＥ）との間に積もった細胞外物質（主に、タンパク質及び脂質）の小さな黄色又は白色蓄積物である。抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の投与がドルーゼン形成を阻害できるどうかを評価するために、雄性ＡＰＰ／ＰＳ−１／ｔａｕ遺伝子導入痴呆マウス（Ｃ５７ＢＬ／６；４月齢）を使用した。簡単に、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体をマウスに総８週間、１週に２回０．７ｍｇ／ｋｇの投与量で静脈内投与した。年齢が一致する未処理未投与野生型Ｃ５７ＢＬ／６及びＡＰＰ／ＰＳ−１／ｔａｕ遺伝子導入マウスを対照群として用いた。初期抗体投与後８週目に動物を犠牲させ、動物から眼を摘出した。収穫後、眼を４℃で２４時間４％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ）に固定させた。その後、眼をＯＣＴコンパウンド（Ｌｏｔ  ｎｏ．６８６７９４，Ｓｉｇｍａ，ＵＳＡ）と共にプラスチックモールドに入れて凍結させた。次いで、凍結した眼組織を−２０℃のマイクロトーム（Ｃｒｙｏｓｔａｔｓ  ＣＭ１８６０，Ｌｅｉｃａ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて薄片化（２５μｍ厚）した。薄片化された組織切片をスライド上に載せ、オリゴマー性Ａβ及びＡｌｅｘａ  ６４７ファロイジンで染色し、ドルーゼン形成を観察した。
【０３０２】
図１２に示すように、未処理ＡＰＰ／ＰＳ−１／ｔａｕ遺伝子導入マウスにおいてオリゴマー性Ａβは視覚色素細胞の周辺内で強く発現するが、ドルーゼン（陽性ファロイジン染色によって立証される）は、網膜組織、錘状細胞及び神経節細胞層の周辺内で強く発現した。これに対し、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体で処理したＡＰＰ／ＰＳ−１／ｔａｕ遺伝子導入マウスでは、未投与野生型Ｃ５７ＢＬ／６対照群マウスと類似に、無視できるようなオリゴマー性Ａβ及びドルーゼン染色があった。
【０３０３】
この結果から、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が、周辺組織を含めて網膜内でオリゴマー性Ａβ及びドルーゼン形成を阻害できることを確認した。
【０３０４】
要するに、上のデータは、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が加齢黄斑変性のような黄斑変性に関連した基底病態の殆どを改善し、前記疾患を治療できることを立証した。
【０３０５】
（実施例７）
静脈投与後糖尿病性網膜病症に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の阻害効果の評価
静脈内投与後の糖尿病性網膜病症に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の治療効果を評価するために、２型糖尿病ｄｂ／ｄｂマウス（例えば、実施例１で記載したマウス）を使用した。簡単に、動物を安定化させた後、次のいずれか一つで処理した：（ｉ）ヒトＩｇＧ抗体、（ｉｉ）アフリベルセプト（ＥＹＬＥＡ，Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、又は（ｉｉｉ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン１−３０）。ヒトＩｇＧ抗体とアフリベルセプトをそれぞれ陰性及び陽性対照群として用いた。未投与群（すなわち、糖尿病性網膜病症がない動物）を追加対照群として用いた。異なる治療処方を、マイクロポンプシステムを用いてマウスの硝子体腔に硝子体内投与したり（２週ごとに２μＬ／眼の投与量で総７回）又は尾静脈注射で静脈内投与した（２週ごとに１００μＬの投与量で総７回）。処理群を下表８に記載する。
【０３０６】
【表９】
2021532733.tif 000021
【０３０７】
例えば、血清内血糖濃度及び／又は体重を測定することによって、動物の健康状態全般を周期的にモニタリングした。最後の投与後、マウスを安楽死させ、動物から両眼を摘出した。摘出後、眼をＯＣＴブロック上に用意した後、実施例２に記載されており、下でより詳細に説明するように、トリプシン分解分析、ヘマトキシリン−エオシン染色（Ｈ＆Ｅ染色）、ＴＵＮＥＬ分析及び免疫蛍光染色のために固定させた。トリプシン分解分析を行って、微細血管を、血管周囲細胞損失及び無細胞性毛細血管形成（すなわち、初期糖尿病性網膜病症の標識子）に対して評価した。Ｈ＆Ｅ染色、ＴＵＮＥＬ分析、免疫蛍光染色を行って、血管鬱血、血管標識子（ＣＤ３１及びＶＥＧＦ）、網膜細胞保護効果を分析した。
【０３０８】
Ｈ＆Ｅ分析
凍結組織を薄片化し、スライドに載せた後（実施例２参照）、スライドを室温で約１時間乾燥させた。次いで、スライドをヘマトキシリンで３〜５分間染色し、Ｈｃｌ溶液で３０秒間洗浄した。次いで、スライドをエオシン溶液に１分間漬した後、再びＨｃｌ溶液で洗浄した。次いで、スライドを８０％〜１００％エタノールで３分間洗浄し、カルボキシレン及びキシレンとそれぞれ５分間反応させた。染色されたスライドは、顕微鏡（ＮａｎｏＺｏｏｍｅｒ  ２．０  ＲＳ，Ｈａｍａｍａｔｓｕ）を用いて観察した。
【０３０９】
ＴＵＮＥＬ分析
凍結組織切片が装着されたスライド（実施例２参照）を、室温で約１時間乾燥させた。一旦乾燥すると、スライドを１％パラホルムアルデヒドに１０分間漬した後にＰＢＳで５分間２回洗浄した。次いで、スライドを平衡緩衝液に１０分間浸漬した。その後、加湿チャンバーで組織サンプルをＴｄＴ酵素で３７℃で２時間処理した。次いで、スライドをＰＢＳで２分間４回洗浄した。染色したスライドを室温で完全に乾燥させた。乾燥すると、組織サンプルをＤＡＰＩで染色し、蛍光顕微鏡（ＬＥＩＣＡ  ＤＭ  ２５００）で観察した。
【０３１０】
免疫蛍光分析
凍結組織切片が装着されたスライド（実施例２参照）を、室温で約１時間乾燥させた。一旦乾燥すると、組織サンプルを、ＰＢＳに溶かした５％（ｖ／ｖ）トリトンＸ−１００溶液で処理し、ＰＢＳで５分間３回洗浄した。次いで、組織を正常ロバ血清と３％（ｖ／ｖ）ＢＳＡ、０．５％トリトンＸ−１００溶液で１時間ブロッキングした。その後、組織を、４℃で一晩、抗ＶＥＧＦ及び／又は抗ＣＤ３１一次抗体（ＰＢＳで３％（ｖ／ｖ）ＢＳＡ及び０．５％トリトンＸ−１００溶液で１：３００希釈）で染色した。翌日、サンプルをＰＢＳで５分間３回洗浄した。次いで、組織サンプルを二次抗体（Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５５５ロバ抗ウサギＩｇＧ、ＰＢＳで３％（ｖ／ｖ）ＢＳＡ及び０．５％トリトンＸ−１００溶液で１：５００希釈）と共に室温で１時間反応させた。次いで、サンプルをＰＢＳで５分間３回洗浄後にＤＡＰＩで染色し、蛍光顕微鏡（ＬＥＩＣＡ  ＤＭ２５００）で観察した。
【０３１１】
結果
表９（下）、図１３Ａ及び図１３Ｃに示すように（実施例２に提供されたデータと一致）、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体で処理した動物（静脈内及び硝子体内投与群の両方とも）のＥ／Ｐ比（すなわち、内皮細胞に対する血管周囲細胞の比）は、抗ヒトＩｇＧ単独で処理した動物（“陰性対照群”）に比べて低い。抗ＦＡＭ１９Ａ５投与は、陽性対照群（すなわち、アフリベルセプトで処理した動物）に比較した時にも、Ｅ／Ｐ比により大きい影響を有することが見られ、未投与（すなわち、健康な）動物で観察された比に類似していた。硝子体内投与で最大の効果が観察されたが、静脈投与でも注目すべき治療効果が観察された。動物の眼で無細胞性毛細血管の数を測定した時、類似の結果が観察された（表９及び図１３Ｂ参照）。
【０３１２】
【表１０】
2021532733.tif 000022
【０３１３】
投与経路は、血管鬱血を減少させ、糖尿病による損傷から網膜細胞を保護する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の能力にあまり影響を与えないと見なされる（図１４参照）。そして、図１５に示すように、ＴＵＮＥＬ分析は、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体を静脈内処理したマウスの網膜神経線維層及び内核層の両方において、ヒトＩｇＧ対照群抗体で処理したマウスの網膜における当該層に比べて、細胞死の進行した細胞が少ないことがみられた。前記効果は、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体を硝子体内処理した動物と類似であった（図１４及び図１５参照、ＩＶＴ対比ＩＶ群）。ＣＤ３１及びＶＥＧＦ（新生血管形成に対する標識子）の発現を評価した時も類似の結果が観察された。抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体を硝子体内又は静脈内処理した２動物ともに、対照群動物（すなわち、ヒトＩｇＧ対照群抗体単独で処理した動物）に比べてＣＤ３１及びＶＥＧＦ発現が著しく減少した（図１６Ａ及び図１６Ｂ参照）。
【０３１４】
要するに、上のデータは、実施例２の結果（すなわち、硝子体内投与による）を確認し、また、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が静脈内及び硝子体内投与後、糖尿病性網膜病症に対する治療効果を有することを立証した。
【０３１５】
概要及び要約部分以外の詳細な説明部分は、特許請求の範囲を解釈するために用いられると理解されるべきである。概要及び要約部分は、発明者によって考慮される本開示内容の例示的な態様の一つ以上を示すが、全ての例示的な態様を示すものではないので、本開示内容と添付する特許請求の範囲をいかなる方式でも制限しようとするものではない。
【０３１６】
本開示内容は、特定機能及びそれらの関係の具現を説明する機能的構成要素を用いて上に説明した。それらの機能的構成要素の境界は、説明の便宜のために、本明細書では任意に定義した。前記特定機能とそれらの関係が適切に行われる限り、代替境界が定義されてもよい。
【０３１７】
特定態様に関する上の説明は、他人が当業界技術における知識を応用することによって、本開示内容の一般的な概念を超えない範囲で過度な実験なしで様々な応用のためにこのような特定態様を容易に変形及び／又は調整することができるように、本開示内容の一般的な属性を完全に表すものであろう。したがって、このような調整及び変形は、本明細書に提示された教示及び指針に立って開示された態様の均等物の意味及び範囲内にあるものと意図される。本明細書の語句又は用語は、本明細書の用語又は語句が本発明の教示及び指針に照らして当業者によって解釈され得るように、制限ではなく説明しようとする目的であることが理解できよう。
【０３１８】
本開示内容の幅と範囲は、上述した例示的な態様のいずれによっても制限されてはならず、後述する特許請求の範囲及びその等価物によってのみ定義されるべきである。
【０３１９】
本明細書に引用された全ての刊行物、特許、特許出願、インターネットサイト及び受託番号／データベース配列（ポリヌクレオチド及びポリペプチド配列の両方とも）は、あたかもそれぞれの個別刊行物、特許、特許出願、インターネットサイト又は受託番号／データベース配列が具体的にそして個別的に参考として含まれると表示されたのと同じ程度に、全ての目的のためにその全体が本明細書に参考として組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【０３２０】
【図１Ａ】図１Ａは、２５週齢ｄｂ／ｄｂマウスにおいて網膜電位回復に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の効果を示している。前記マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“１−６５”又は“３−２”）で処理した。正常（すなわち、糖尿病がない）マウスを対照群として用いた。各群のマウスを３つの異なるフラッシュ強度（−１、０．２及び０．８ｌｏｇ  ｃｄｓ／ｍ２）の白色光に露出させた後、Ａ波（μＶ）（図１Ａ）、Ｂ波（μＶ）（図１Ｂ）及び律動様小波（μＶ）（図１Ｃ）を測定した。データは、平均±Ｓ．Ｄで表した。
【図１Ｂ】図１Ｂは、２５週齢ｄｂ／ｄｂマウスにおいて網膜電位回復に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の効果を示している。前記マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“１−６５”又は“３−２”）で処理した。正常（すなわち、糖尿病がない）マウスを対照群として用いた。各群のマウスを３つの異なるフラッシュ強度（−１、０．２及び０．８ｌｏｇ  ｃｄｓ／ｍ２）の白色光に露出させた後、Ａ波（μＶ）（図１Ａ）、Ｂ波（μＶ）（図１Ｂ）及び律動様小波（μＶ）（図１Ｃ）を測定した。データは、平均±Ｓ．Ｄで表した。
【図１Ｃ】図１Ｃは、２５週齢ｄｂ／ｄｂマウスにおいて網膜電位回復に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の効果を示している。前記マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“１−６５”又は“３−２”）で処理した。正常（すなわち、糖尿病がない）マウスを対照群として用いた。各群のマウスを３つの異なるフラッシュ強度（−１、０．２及び０．８ｌｏｇ  ｃｄｓ／ｍ２）の白色光に露出させた後、Ａ波（μＶ）（図１Ａ）、Ｂ波（μＶ）（図１Ｂ）及び律動様小波（μＶ）（図１Ｃ）を測定した。データは、平均±Ｓ．Ｄで表した。
【図２Ａ】図２Ａは、２５週齢ｄｂ／ｄｂマウスにおいて抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の網膜微細血管保護効果を示している。前記マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“１−６５”又は“３−２”）で処理した。正常の（すなわち、糖尿病がない）健康なマウスを対照群として用いた。図２Ａは、異なる処理群：（ｉ）正常群（すなわち、非糖尿病）（左上パネル）、（ｉｉ）ヒトＩｇＧ対照群（右上パネル）及び（ｉｉｉ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン１−６５、左下パネル；クローン３−２、右下パネル）のそれぞれにおいて、マウスの代表的な網膜領域を過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色した後、顕微鏡写真（倍率１００×）を示している。黒色矢印は内皮細胞を、白色矢印は血管周囲細胞を、灰色矢印は無細胞性毛細血管を示す。図２Ｂは、前記異なる処理群のマウスの分析した全体網膜領域内で観察された血管周囲細胞に対する内皮細胞の比率（“Ｅ／Ｐ比”）の比較を示している。前記Ｅ／Ｐ比を決定するために、それぞれの撮影写真において内皮細胞と血管周囲細胞の数を計算した。データは、平均±Ｓ．Ｄで表した。棒上の“＊＊＊”は、ＩｇＧ処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．００１）を示す。
【図２Ｂ】図２Ｂは、２５週齢ｄｂ／ｄｂマウスにおいて抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の網膜微細血管保護効果を示している。前記マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“１−６５”又は“３−２”）で処理した。正常の（すなわち、糖尿病がない）健康なマウスを対照群として用いた。図２Ａは、異なる処理群：（ｉ）正常群（すなわち、非糖尿病）（左上パネル）、（ｉｉ）ヒトＩｇＧ対照群（右上パネル）及び（ｉｉｉ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン１−６５、左下パネル；クローン３−２、右下パネル）のそれぞれにおいて、マウスの代表的な網膜領域を過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色した後、顕微鏡写真（倍率１００×）を示している。黒色矢印は内皮細胞を、白色矢印は血管周囲細胞を、灰色矢印は無細胞性毛細血管を示す。図２Ｂは、前記異なる処理群のマウスの分析した全体網膜領域内で観察された血管周囲細胞に対する内皮細胞の比率（“Ｅ／Ｐ比”）の比較を示している。前記Ｅ／Ｐ比を決定するために、それぞれの撮影写真において内皮細胞と血管周囲細胞の数を計算した。データは、平均±Ｓ．Ｄで表した。棒上の“＊＊＊”は、ＩｇＧ処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．００１）を示す。
【図２Ｃ】図２Ｃは、異なる処理群のマウスの分析された全体網膜領域内で観察された無細胞性毛細血管の数の比較を示している。データは、平均±Ｓ．Ｄで表した。棒上の“＊”は、ＩｇＧ処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．０５）を示す。
【図２Ｄ】図２Ｄは、観察された無細胞性毛細血管の長さの比較を示している。データは、平均±Ｓ．Ｄで表した。棒上の“＊＊”及び“＊＊＊”は、ＩｇＧ処理群対比統計的に有意な差（それぞれ、ｐ＜０．０１及びｐ＜０．００１）を示す。
【図３】図３は、Ｈ＆Ｅ染色を用いて２５週齢ｄｂ／ｄｂマウスの網膜内血管鬱血に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体処理の効果を示している。前記マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”、右上パネル）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“１−６５”、左下パネル又はクローン“３−２”、右下パネル）で処理した。正常の（すなわち、糖尿病がない）健康なマウス（左上パネル）を対照群として用いた。矢じりは、血管鬱血の例を示す。表示された異なる網膜層には（ｉ）神経節細胞層（ＧＣＬ）、（ｉｉ）内網状層（ＩＰＬ）、（ｉｉｉ）内核層（ＩＮＬ）、（ｉｖ）外核層（ＯＮＬ）及び（ｖ）網膜色素上皮（ＰＥ）が含まれている。
【図４】図４は、ＴＵＮＥＬ分析を用いて２５週齢ｄｂ／ｄｂマウスにおいて抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体処理の網膜細胞保護効果を示している。前記マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“１−６５”又は“３−２”）で処理した。正常の（すなわち、糖尿病がない）健康なマウスを対照群として用いた。中間列（“ＴＵＮＥＬ”）において赤色矢じりは、細胞死が進行している網膜細胞を示す。ＴＵＮＥＬ染色の強度は、細胞死の程度と相関がある（例えば、強度減少は、一部の細胞死を示す）。表示された異なる網膜層には（ｉ）神経節細胞層（ＧＣＬ）、（ｉｉ）内核層（ＩＮＬ）、（ｉｉｉ）外核層（ＯＮＬ）及び（ｉｖ）網膜色素上皮（ＰＥ）が含まれている。
【図５】図５は、ＣＤ３１及びＶＥＧＦ発現に対して染色する免疫組織化学を用いて、２５週齢ｄｂ／ｄｂマウスの網膜内血管新生に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の阻害効果を示している。前記マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“１−６５”又は“３−２”）で処理した。正常の（すなわち、糖尿病がない）健康なマウスを対照群として用いた。矢じりは、陽性ＣＤ３１（上段行）又は陽性ＶＥＧＦ（下段行）染色を示す。
【図６Ａ】図６Ａは、実施例８で用いられたようなイメージ誘導レーザーシステムの写真を示している。
【図６Ｂ】図６Ｂは、図６Ａに示したイメージ誘導レーザーシステムからレーザーに露出された網膜の写真の一例を示している。
【図７Ａ】図７Ａは、蛍光眼底血管造影術（ＦＦＡ）分析を用いて脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン３−２）の阻害効果を示している。ヒトＩｇＧ抗体が投与されたＣＮＶ誘導マウスを対照群として用いた。図７Ａは、ＣＮＶ誘導当日（“０日”）とＣＮＶ誘導後１３日目にヒトＩｇＧ抗体（上段行）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５（クローン３−２）（下段行）で処理したマウスにおいて４個の湿性ＡＭＤ様病変（左列写真で矢印で表示される）を示す代表的な網膜写真である。図７Ｂは、ＣＮＶ誘導後１３日目にヒトＩｇＧ抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“３−２”）で処理したＣＮＶ誘導マウスに対する補正された総蛍光（ＣＴＦ）値の比較を提供している。データを平均で且つ個別的に表した。“＊”は、ＩｇＧ処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．０５）を示す。
【図７Ｂ】図７Ｂは、蛍光眼底血管造影術（ＦＦＡ）分析を用いて脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン３−２）の阻害効果を示している。ヒトＩｇＧ抗体が投与されたＣＮＶ誘導マウスを対照群として用いた。図７Ａは、ＣＮＶ誘導当日（“０日”）とＣＮＶ誘導後１３日目にヒトＩｇＧ抗体（上段行）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５（クローン３−２）（下段行）で処理したマウスにおいて４個の湿性ＡＭＤ様病変（左列写真で矢印で表示される）を示す代表的な網膜写真である。図７Ｂは、ＣＮＶ誘導後１３日目にヒトＩｇＧ抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“３−２”）で処理したＣＮＶ誘導マウスに対する補正された総蛍光（ＣＴＦ）値の比較を提供している。データを平均で且つ個別的に表した。“＊”は、ＩｇＧ処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．０５）を示す。
【図８Ａ】図８Ａは、光干渉断層撮影（ＯＣＴ）分析を用いて、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン３−２）の阻害効果を示している。ヒトＩｇＧ抗体が投与されたＣＮＶ誘導マウスを対照群として用いた。図８Ａは、ＣＮＶ誘導後１３日目にヒトＩｇＧ抗体（上段行）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５（クローン３−２）（下段行）で処理したマウスにおいて４個の湿性ＡＭＤ様病変（番号１、２、３及び４と表記）を示す代表的な網膜写真を提供している。１、２、３及び４と標識された列は、最左側の写真に示した当該病変に対するＯＣＴ写真を提供している。図８Ｂは、前記病変の大きさを定量化するために用いたスケールバーを示している。図８Ｃは、ヒトＩｇＧ対照群抗体又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン３−２）で処理したマウスにおいてＣＮＶ誘導後１３日目に観察したＣＮＶ病変の大きさの比較を提供している。データを平均で且つ個別的に表した。“＊＊＊”は、ＩｇＧ処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．００１）を示す。
【図８Ｂ】図８Ｂは、光干渉断層撮影（ＯＣＴ）分析を用いて、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン３−２）の阻害効果を示している。ヒトＩｇＧ抗体が投与されたＣＮＶ誘導マウスを対照群として用いた。図８Ａは、ＣＮＶ誘導後１３日目にヒトＩｇＧ抗体（上段行）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５（クローン３−２）（下段行）で処理したマウスにおいて４個の湿性ＡＭＤ様病変（番号１、２、３及び４と表記）を示す代表的な網膜写真を提供している。１、２、３及び４と標識された列は、最左側の写真に示した当該病変に対するＯＣＴ写真を提供している。図８Ｂは、前記病変の大きさを定量化するために用いたスケールバーを示している。図８Ｃは、ヒトＩｇＧ対照群抗体又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン３−２）で処理したマウスにおいてＣＮＶ誘導後１３日目に観察したＣＮＶ病変の大きさの比較を提供している。データを平均で且つ個別的に表した。“＊＊＊”は、ＩｇＧ処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．００１）を示す。
【図８Ｃ】図８Ｃは、光干渉断層撮影（ＯＣＴ）分析を用いて、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン３−２）の阻害効果を示している。ヒトＩｇＧ抗体が投与されたＣＮＶ誘導マウスを対照群として用いた。図８Ａは、ＣＮＶ誘導後１３日目にヒトＩｇＧ抗体（上段行）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５（クローン３−２）（下段行）で処理したマウスにおいて４個の湿性ＡＭＤ様病変（番号１、２、３及び４と表記）を示す代表的な網膜写真を提供している。１、２、３及び４と標識された列は、最左側の写真に示した当該病変に対するＯＣＴ写真を提供している。図８Ｂは、前記病変の大きさを定量化するために用いたスケールバーを示している。図８Ｃは、ヒトＩｇＧ対照群抗体又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン３−２）で処理したマウスにおいてＣＮＶ誘導後１３日目に観察したＣＮＶ病変の大きさの比較を提供している。データを平均で且つ個別的に表した。“＊＊＊”は、ＩｇＧ処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．００１）を示す。
【図９】図９は、ＣＮＶ誘導マウスにおいてＢ波値の回復に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の効果を示している。前記ＣＮＶ誘導マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“３−２”）で処理した。正常（すなわち、糖尿病がない）マウスを対照群として用いた。データは、平均±Ｓ．Ｄで表した。“＊”は、ＩｇＧ処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．０５）を示す。
【図１０Ａ】図１０Ａは、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン３−２）の阻害効果を示している。図１０Ａは、Ｈ＆Ｅ分析（左写真）又はＯＣＴ分析（右写真）を用いて異なる網膜層を識別している。これらの表示された層は、次を含む：（ｉ）網膜神経線維層／神経節細胞層（ＲＮＦＬ／ＧＣＬ）；（ｉｉ）内網状層；（ｉｉｉ）内核層；（ｉｖ）外網状層；（ｖ）外核層、（ｖｉ）光受容体内部セグメント／外部セグメント（ＩＳ／ＯＳ）及び（ｖｉｉ）網膜色素上皮（ＲＰＥ）。図１０Ｂは、異なる群である（ｉ）正常の健康な動物群、（ｉｉ）ヒトＩｇＧ抗体で処理したＣＮＶ誘導マウス群、及び（ｉｉｉ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体で処理したＣＮＶ誘導マウス群におけるマウスの網膜の関連細胞層の代表的なＨ＆Ｅ写真を示している。矢じりは、脈絡膜血管新生領域を示す。
【図１０Ｂ】図１０Ｂは、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン３−２）の阻害効果を示している。図１０Ａは、Ｈ＆Ｅ分析（左写真）又はＯＣＴ分析（右写真）を用いて異なる網膜層を識別している。これらの表示された層は、次を含む：（ｉ）網膜神経線維層／神経節細胞層（ＲＮＦＬ／ＧＣＬ）；（ｉｉ）内網状層；（ｉｉｉ）内核層；（ｉｖ）外網状層；（ｖ）外核層、（ｖｉ）光受容体内部セグメント／外部セグメント（ＩＳ／ＯＳ）及び（ｖｉｉ）網膜色素上皮（ＲＰＥ）。図１０Ｂは、異なる群である（ｉ）正常の健康な動物群、（ｉｉ）ヒトＩｇＧ抗体で処理したＣＮＶ誘導マウス群、及び（ｉｉｉ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体で処理したＣＮＶ誘導マウス群におけるマウスの網膜の関連細胞層の代表的なＨ＆Ｅ写真を示している。矢じりは、脈絡膜血管新生領域を示す。
【図１１】図１１は、ＩＨＣ分析を用いて、網膜の神経線維層及び神経節細胞層内の両方においてＰＤＧＦ発現に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の阻害効果を示している。ＣＮＶ誘導マウスをヒトＩｇＧ対照群抗体（“ＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン“３−２”）で処理した。正常（すなわち、糖尿病がない）マウスを対照群として用いた。矢じりは、陽性ＰＤＧＦ染色を示す。
【図１２】図１２は、免疫蛍光顕微鏡法を用いて、ＡＰＰ／ＰＳ−１／ｔａｕ遺伝子導入マウス（認知症モデル）においてオリゴマー性Ａβ及びドルーゼンの形成に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の阻害効果を示している。前記ＡＰＰ／ＰＳ−１／ｔａｕ遺伝子導入マウスを抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体で処理しない（中間行）か又は処理した（下段行）。未投与（ｎａｉｖｅ）野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスを陰性対照群（上段行）として用いた。“Ｈ３３３４２”（核酸染色）と標識された列は、網膜組織内細胞を示している。“ＱＤ５２５−ｏＡβ”と標識された列は、オリゴマーＡβを示している。“６４７  Ａｌｅｘａ  Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ”と標識された列は、ドルーゼン形成を示しているもので、ドルーゼンは矢印で例示されている。“ｍｅｒｇｅｄ”と標識された列は、それぞれの処理群に対する上の３列の合成写真を示している。
【図１３Ａ】図１３Ａは、糖尿病性網膜病症マウスモデルにおいて硝子体内又は静脈内投与後、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン１−３０）の網膜微細血管保護効果の比較を示している。前記マウスに（ｉ）ヒトＩｇＧ対照群抗体（“ヒトＩｇＧ”）、（ｉｉ）アフリベルセプト、（ｉｉｉ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体のいずれか一方を、硝子体内（“ＩＶＴ”）投与したり、又は（ｉｖ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体を静脈内（“ＩＶ”）投与した。正常の（すなわち、糖尿病がない）健康なマウスを対照群として用いた。図１３Ａは、異なる処理群のそれぞれにおいてマウスの代表的な網膜領域を過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色した後、顕微鏡写真（倍率１００×）を提供している。黒色矢印は内皮細胞を、白色矢印は血管周囲細胞を、黒色矢印は無細胞性毛細血管を示す。図１３Ｂは、異なる処理群のマウスの分析した全体網膜領域内で観察された無細胞性毛細血管の数の比較を提供している。図１３Ｃは、異なる処理群のマウスの分析した全体網膜領域内で観察された血管周囲細胞に対する内皮細胞の比率（“Ｅ／Ｐ比”）の比較を提供している。前記Ｅ／Ｐ比を決定するために、それぞれの撮影写真において内皮細胞と血管周囲細胞の数を計算した。図１３Ｂ及び図１３Ｃにおいてデータは、平均±Ｓ．Ｄで表した。棒上の“＊”及び“＊＊＊”は、未投与マウス対比統計的に有意な差（それぞれｐ＜０．０５とｐ＜０．００１）を示す。棒上の“＃＃”及び“＃＃＃”は、ヒトＩｇＧ抗体処理群対比統計的に有意な差（それぞれ、ｐ＜０．０１及びｐ＜０．００１）を示す。棒上の“†††”は、アフリベルセプト処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．００１）を示す。棒上の“§”は、ＩＶＴ群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．０５）を示す。
【図１３Ｂ】図１３Ｂは、糖尿病性網膜病症マウスモデルにおいて硝子体内又は静脈内投与後、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン１−３０）の網膜微細血管保護効果の比較を示している。前記マウスに（ｉ）ヒトＩｇＧ対照群抗体（“ヒトＩｇＧ”）、（ｉｉ）アフリベルセプト、（ｉｉｉ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体のいずれか一方を、硝子体内（“ＩＶＴ”）投与したり、又は（ｉｖ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体を静脈内（“ＩＶ”）投与した。正常の（すなわち、糖尿病がない）健康なマウスを対照群として用いた。図１３Ａは、異なる処理群のそれぞれにおいてマウスの代表的な網膜領域を過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色した後、顕微鏡写真（倍率１００×）を提供している。黒色矢印は内皮細胞を、白色矢印は血管周囲細胞を、黒色矢印は無細胞性毛細血管を示す。図１３Ｂは、異なる処理群のマウスの分析した全体網膜領域内で観察された無細胞性毛細血管の数の比較を提供している。図１３Ｃは、異なる処理群のマウスの分析した全体網膜領域内で観察された血管周囲細胞に対する内皮細胞の比率（“Ｅ／Ｐ比”）の比較を提供している。前記Ｅ／Ｐ比を決定するために、それぞれの撮影写真において内皮細胞と血管周囲細胞の数を計算した。図１３Ｂ及び図１３Ｃにおいてデータは、平均±Ｓ．Ｄで表した。棒上の“＊”及び“＊＊＊”は、未投与マウス対比統計的に有意な差（それぞれｐ＜０．０５とｐ＜０．００１）を示す。棒上の“＃＃”及び“＃＃＃”は、ヒトＩｇＧ抗体処理群対比統計的に有意な差（それぞれ、ｐ＜０．０１及びｐ＜０．００１）を示す。棒上の“†††”は、アフリベルセプト処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．００１）を示す。棒上の“§”は、ＩＶＴ群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．０５）を示す。
【図１３Ｃ】図１３Ｃは、糖尿病性網膜病症マウスモデルにおいて硝子体内又は静脈内投与後、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（クローン１−３０）の網膜微細血管保護効果の比較を示している。前記マウスに（ｉ）ヒトＩｇＧ対照群抗体（“ヒトＩｇＧ”）、（ｉｉ）アフリベルセプト、（ｉｉｉ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体のいずれか一方を、硝子体内（“ＩＶＴ”）投与したり、又は（ｉｖ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体を静脈内（“ＩＶ”）投与した。正常の（すなわち、糖尿病がない）健康なマウスを対照群として用いた。図１３Ａは、異なる処理群のそれぞれにおいてマウスの代表的な網膜領域を過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色した後、顕微鏡写真（倍率１００×）を提供している。黒色矢印は内皮細胞を、白色矢印は血管周囲細胞を、黒色矢印は無細胞性毛細血管を示す。図１３Ｂは、異なる処理群のマウスの分析した全体網膜領域内で観察された無細胞性毛細血管の数の比較を提供している。図１３Ｃは、異なる処理群のマウスの分析した全体網膜領域内で観察された血管周囲細胞に対する内皮細胞の比率（“Ｅ／Ｐ比”）の比較を提供している。前記Ｅ／Ｐ比を決定するために、それぞれの撮影写真において内皮細胞と血管周囲細胞の数を計算した。図１３Ｂ及び図１３Ｃにおいてデータは、平均±Ｓ．Ｄで表した。棒上の“＊”及び“＊＊＊”は、未投与マウス対比統計的に有意な差（それぞれｐ＜０．０５とｐ＜０．００１）を示す。棒上の“＃＃”及び“＃＃＃”は、ヒトＩｇＧ抗体処理群対比統計的に有意な差（それぞれ、ｐ＜０．０１及びｐ＜０．００１）を示す。棒上の“†††”は、アフリベルセプト処理群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．００１）を示す。棒上の“§”は、ＩＶＴ群対比統計的に有意な差（ｐ＜０．０５）を示す。
【図１４】図１４は、静脈内及び硝子体内投与後、糖尿病性網膜病症マウスの網膜内血管鬱血形成に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の阻害効果を示している。処理群は、図１３Ａ〜図１３Ｃに記載と同一である。矢じりは、血管鬱血の例を示す。
【図１５】図１５は、硝子体内又は静脈内投与時に、ＴＵＮＥＬ分析を用いて測定した抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の網膜細胞保護効果を示している。処理群は、図１３Ａ〜図１３Ｃに記載と同一である。中間列（“ＴＵＮＥＬ”）において矢じりは、細胞死が進行している網膜細胞を示す。ＴＵＮＥＬ染色の強度は、細胞死の程度と相関関係がある（例えば、強度減少は、一部の細胞死を示す）。
【図１６Ａ】図１６Ａは、硝子体内及び静脈内投与後、糖尿病性網膜病症マウスの網膜内血管新生に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の阻害効果を示している。処理群は、図１３Ａ〜図１３Ｃに記載と同一である。血管新生は、ＶＥＧＦ（図１６Ａ）及びＣＤ３１（図１６Ｂ）発現を用いて測定した。矢じりは、陽性ＶＥＧＦ又はＣＤ３１染色を示す。
【図１６Ｂ】１６Ｂは、硝子体内及び静脈内投与後、糖尿病性網膜病症マウスの網膜内血管新生に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の阻害効果を示している。処理群は、図１３Ａ〜図１３Ｃに記載と同一である。血管新生は、ＶＥＧＦ（図１６Ａ）及びＣＤ３１（図１６Ｂ）発現を用いて測定した。矢じりは、陽性ＶＥＧＦ又はＣＤ３１染色を示す。
【図１Ａ】
2021532733.tif 000023
【図１Ｂ】
2021532733.tif 000024
【図１Ｃ】
2021532733.tif 000025
【図２Ａ】
2021532733.tif 000026
【図２Ｂ】
2021532733.tif 000027
【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
2021532733.tif 000029
【図３】
2021532733.tif 000030
【図４】
2021532733.tif 000031
【図５】
2021532733.tif 000032
【図６Ａ】
2021532733.tif 000033
【図６Ｂ】
2021532733.tif 000034
【図７Ａ】
2021532733.tif 000035
【図７Ｂ】
2021532733.tif 000036
【図８Ａ】
2021532733.tif 000037
【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
2021532733.tif 000039
【図９】
2021532733.tif 000040
【図１０Ａ】
2021532733.tif 000041
【図１０Ｂ】
2021532733.tif 000042
【図１１】
2021532733.tif 000043
【図１２】
2021532733.tif 000044
【図１３Ａ】
2021532733.tif 000045
【図１３Ｂ】
2021532733.tif 000046
【図１３Ｃ】
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【図１４】
2021532733.tif 000048
【図１５】
2021532733.tif 000049
【図１６Ａ】
2021532733.tif 000050
【図１６Ｂ】
2021532733.tif 000051
【配列表】
2021532733000001.app
【国際調査報告】
2021532733.tif 000052
2021532733.tif 000053