(57)【要約】  本発明は、一般式(S)-Iの4-置換1-アミノインダンのエナンチオ選択的生体触媒調製のためのプロセス、および、好ましくはR = -CNおよびY = Hの上記一般式の(S)-4-置換1-アミノインダンを調製するエナンチオ選択的生体触媒プロセスを含むオザニモドの調製のためのプロセスに関する:2021520807.tif 000059【選択図】図１
2021520807.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式(S)-Iの4-置換1-アミノインダンのエナンチオ選択的生体触媒調製のためのプロセスであって:
【化１】
2021520807.tif 000055
式中
Rは、ハロゲン; -CN; -C(=O)H; -C(=N-OH)H; -C(=O)NH2; -C(=O)OH; -C(=NH)NH-OH; -C(=N-OH)NH2; および-COOR1からなる群より選ばれ、ここで、R1は、H; C1〜C8-アルキル; アリールアルキル、ここでアルキルはC1〜C8-アルキルである; -CH2-Hal、ここでHalはF、ClまたはBrである; -CH2-O-アルキル、ここでアルキルはC1〜C8-アルキルである; 置換されていてもよいアリール; および置換されていてもよいヘテロアリールからなる群より選ばれる;
Yは、H; -C(=O)R1y; および-C(=O)OR1yからなる群より選ばれ、ここでR1yは、H; C1〜C8-アルキル; アリールアルキル、ここでアルキルはC1〜C8-アルキルである; -CH2-Hal、ここでHalはF、ClまたはBrである; -CH2-O-アルキル、ここでアルキルはC1〜C8-アルキルである; 置換されていてもよいアリール; および置換されていてもよいヘテロアリールからなる群より選ばれる;
Ａ  生体触媒の存在下、エナンチオ選択的アシル化を介する一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミまたはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物の分割
【化２】
2021520807.tif 000056
式中、Rは上記で定義した通りである;
Ｂ  生体触媒の存在下、エナンチオ選択的加水分解を介する一般式(S)-IIIおよび(R)-IIIのN-アシル化4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミまたはエナンチオマー的に豊富なアミド混合物の分割
【化３】
2021520807.tif 000057
式中、RおよびR1yは上記で定義した通りであり、そしてnは0または1である;
Ｃ  アミン供与体の存在下、アミノ基転移酵素を用いた4-置換1-インダノンの不斉還元的アミノ化、ここで4位の置換基は上記で定義した通りのRである;または
Ｄ  窒素成分の存在下、アミンデヒドロゲナーゼを用いた4-置換1-インダノンの不斉還元的アミノ化、ここで4位の置換基は上記で定義した通りのRである
からなる群より選ばれるルートを介する、プロセス。
【請求項２】
ルートがルートＡまたはルートＢであることを特徴とする、請求項１に記載のプロセス。
【請求項３】
生体触媒がヒドロラーゼの群から選ばれる、請求項２に記載のプロセス。
【請求項４】
ヒドロラーゼがリパーゼ、エステラーゼおよびプロテアーゼからなる群より選ばれる、請求項３に記載のプロセス。
【請求項５】
ルートＡにおいて、一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミアミン混合物またはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物がアシル供与体とともに生体触媒に添加されることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項６】
生体触媒がリパーゼである、請求項５に記載のプロセス。
【請求項７】
ルートＡにおいて、以下の反応スキームに従って、一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミアミン混合物またはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物がアシル供与体とともに生体触媒に添加され、ここで生体触媒がリパーゼであることを特徴とする、請求項５に記載のプロセス
【化４】
2021520807.tif 000058
式中
Rは請求項１で定義した通りであり、好ましくはRは-CN、-COOMe、または-Brであり;
R2はC1〜C20-アルキル基; C1〜C20-アルコキシ基; 置換されていてもよいC6〜C20-アリール基; 置換されていてもよい5-または6-員ヘテロアリール基; ハロゲンおよび式-COOR4のアシル基からなる群より選ばれ、ここでR4はH、およびC1〜C8-アルキルから選ばれ、好ましくは-CH3または-C2H5である; 好ましくはR2はメトキシまたは-COOC2H5または-Clであり;
R3は、C1〜C8-またはC1〜C6-アルキル基、好ましくはR3はC1〜C4-アルキル基であり、より好ましくはR3はメチル、エチルまたはイソプロピルである; -CH2-Hal、ここでHalは-F、-Clまたは-Brを表す; -CH2-O-アルキル、ここでアルキルはC1〜C8-アルキルを表す; 置換されていてもよいアリール基; および置換されていてもよい5-または6-員ヘテロアリール基から選ばれ;
ここで、反応は、有機溶媒の存在下または無溶媒条件下、有機媒体中で行われる。
【請求項８】
Rが-Br、-CNおよび-COOCH3からなる群より選ばれることを特徴とする、請求項１〜７のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項９】
Rが-CNであるか、またはRが-CNでありかつYがHであることを特徴とする、請求項１〜８のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項１０】
任意の追加の溶媒の不在下で行われることを特徴とする、請求項２〜９のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項１１】
追加の有機溶媒の存在下で行われることを特徴とする、請求項１〜９のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項１２】
有機溶媒がn-ヘプタン、2-メトキシ-2-メチルプロパン、メチル-tert.-ブチルエーテル、2-メチル-テトラヒドロフラン、メチルシクロヘキサン、トルエンおよびそれらの任意の組み合わせからなる群より選ばれる少なくとも１種であり、好ましくは有機溶媒がn-ヘプタンおよび／またはメチル-tert.-ブチルエーテルであることを特徴とする、請求項１１に記載のプロセス。
【請求項１３】
リパーゼがCandida antarcticaからのリパーゼB(CAL-B)、Candida rugosaからのリパーゼ(CRリパーゼ)、Burkholderia cepaciaからのリパーゼ(BCリパーゼ)およびBurkholderia cepaciaからのリパーゼPSからなる群より選ばれることを特徴とする、請求項２〜１２のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項１４】
アシル供与体がメトキシ酢酸エチル、マロン酸ジエチル、およびメトキシ酢酸イソプロピルからなる群より選ばれることを特徴とする、請求項２〜１３のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項１５】
反応が以下の条件a)、b)またはc)のうちの１つの条件下で行われるか、または反応が条件a)およびb); a)およびc); b)およびc); ならびにa)、b)およびc)から選ばれる条件下で行われることを特徴とする、請求項２〜１４のいずれか１項に記載のプロセス:
a)  所望の4-置換1-アミノインダンの99 % eeに達するのに十分な時間、好ましくは30分〜48時間、より好ましくは少なくとも5 h;
b)  10〜90℃の温度範囲、好ましくは40〜60℃;
c)  1 mmolの基質あたり1〜50 mg、好ましくは5 mgのCAL-Bの基質:酵素比。
【請求項１６】
反応が、溶媒としてn-ヘプタンの存在下、溶液中で行われる、請求項１５に記載のプロセス。
【請求項１７】
一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミ混合物またはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物が、4-位の置換基Rが請求項１で定義した通りである対応する4-置換1-インダノンから得られるかまたは得られ得ることを特徴とする、請求項１〜１６のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項１８】
一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミ混合物またはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物が、対応する4-置換1-インダノンから
i)  特に4-置換1-インダノンのヒドロキシルアミンとの縮合によるケトオキシムの形成、続く
ii)  ケトオキシムのラセミアミン混合物への還元によって得られるかまたは得られ得ることを特徴とする、請求項１７に記載のプロセス。
【請求項１９】
ケトオキシムのラセミアミン混合物への還元が亜鉛の存在下で行われることを特徴とする、請求項１８に記載のプロセス。
【請求項２０】
酵素的アシル化から生じる所望でないエナンチオマーが回収および再循環／再使用されることを特徴とする、請求項２〜１９のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項２１】
Rが-CNでありかつYが水素である一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミまたはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物が、溶媒としてのn-ヘプタンおよび／またはメチル-tert.-ブチルエーテル中、CAL-Bの存在下、メトキシ酢酸イソプロピルでアシル化されることを特徴とする、請求項２〜２０のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項２２】
最初の4-置換インダン-1-オン化合物がナフタレンから得られ得るかまたは得られることを特徴とする、請求項１および１７〜２１のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項２３】
オザニモドの調製のためのプロセスであって、
I  ナフタレンを提供する、
II  ナフタレンを1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)および／または1,4-ジヒドロナフタレン(OZA-1)へと還元する、
IIa  必要に応じて1,4-ジヒドロナフタレン(OZA-1)を1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)へと再配置する、
III  1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)中のエチレン性C=C-二重結合を開裂してジカルボン酸(OZA-3)を提供する、
IV  工程IIIの生成物(OZA-3)の4-カルボキシ-1-インダノン(OZA-4)への環化、
V  4-カルボキシ-1-インダノン(OZA-4)の4-シアノ-1-インダノン(OZA-5)への誘導体化、
VI  4-シアノ-1-インダノン(OZA-5)をS-配置の4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)へと直接またはラセミ体を介して変換する、
VII  (S)-4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)のアミノ基を保護基で保護する、
VIII  シアノ基をアミドキシム基へと変換する、
IX  アミドキシム基を3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸または3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸誘導体との縮合を介して1,4-オキサジアゾール複素環基へと変換する、
X  アミノ基上の保護基をヒドロキシエチル基で置換してオザニモドを生成する
工程を所定の順序で含むかまたはこれら工程からなり、
ここで、工程VIにおける4-シアノ-1-インダノン(OZA-5)のS-配置の4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)への変換が、請求項１で定義したルートＣおよびＤに従って不斉還元的アミノ化を介して、請求項１で定義したルートＡに従って生体触媒の存在下、エナンチオ選択的アシル化を介するラセミまたはエナンチオマー的に豊富な4-シアノインダン-1-アミン化合物の分割によって、または請求項１で定義したルートＢに従って生体触媒の存在下、エナンチオ選択的アシル化を介するラセミまたはエナンチオマー的に豊富なN-アシル化4-シアノインダン-1-アミン化合物の分割によって行われる、プロセス。
【請求項２４】
VI  好ましくは請求項１または２〜２２のいずれか１項に記載のプロセスによって得られるS-配置の4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)を提供する、
VII  4-シアノ-1-アミノインダン(S)-2のアミノ基を保護基で保護する、
VIII  シアノ基をアミドキシム基へと変換する、
IX  アミドキシム基を3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸または3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸誘導体との縮合を介して1,4-オキサジアゾール複素環基へと変換する、
X  アミノ基上の保護基をヒドロキシエチル基で置換してオザニモドを生成する
工程を所定の順序で含むかまたはこれら工程からなる、オザニモドの調製のためのプロセス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願に対する相互参照
本発明は、２０１８年４月１２日に出願された欧州特許出願No. 18167058.9からの優先権の利益を請求し、これはその全体が本明細書中に参考として援用される。
【０００２】
技術分野
本発明は、(S)-4-置換1-アミノインダンの調製のためのエナンチオ選択的生体触媒プロセスならびに、好ましくは、本発明の(S)-4-置換1-アミノインダンのエナンチオ選択的生体触媒プロセスを含むオザニモドの調製のためのプロセスに関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
オザニモドは、以下の構造：
【０００４】
【化１】
2021520807.tif 000003
【０００５】
を有する、再発性多発性硬化症(RMS)および潰瘍性結腸炎(UC)の治療における使用のための免疫調節薬剤である。
【０００６】
WO 2015/066515に開示されるオザニモドの合成において、キラル１級アミン、特に(S)-4-シアノ置換1-アミノインダン((S)-2)は鍵となる中間体として役立つ。以下の構造
【０００７】
【化２】
2021520807.tif 000004
【０００８】
のこのキラルシアノ置換アミン(S)-2は、アミンおよびシアノ部分の官能基化を通じてオザニモドへのアクセスを可能にする。キラルアミン(S)-2は、続いて必要とされるN-アルキル化ならびにシアノ基の修飾が周知で確立された反応経路を通じて達成され得るので、有利な中間体を表す。
【０００９】
【化３】
2021520807.tif 000005
【００１０】
先行技術によれば、アミン(S)-2(塩酸塩として得られる)の合成は、4-ブロモインダノン(4)から開始することによって行われる。試薬としてシアン化亜鉛を用いる最初のパラジウム触媒シアノ化反応は、4-シアノ-1-インダノン(OZA-5)を与える。このケトンのキラルスルホンアミド(S)-6との縮合は、イミンを生じ、そして続くジアステレオ選択的還元、続いてキラルスルホニル基の開裂は所望のアミン(S)-2の形成に至る。先行技術に開示されたこの合成経路は、以下のスキーム(図2も見よ)に示す:
【００１１】
【化４】
2021520807.tif 000006
【００１２】
このプロセスは所望の標的化合物(S)-2へのアクセスを提供するが、この多工程合成経路に固有のいくつかの欠点が同定されている。4-ブロモインダノン(4)の合成における最初のブロモ化工程は、比較的高価であり、そして位置選択性の懸念ならびに予想され得る可能な副生成物の分離の必要性のために精製の問題を生じる。続くシアノ化工程は、非常に高価な重金属触媒(パラジウム塩)と組み合わせて試薬として非常に有毒なシアニドの使用を必要とする。所望の絶対配置を有する立体中心の形成について、化学量論量の高価なキラル補助剤、特にEllman試薬が必要とされる。還元工程において、水素化ホウ素ナトリウムが使用され、これは比較的高価なヒドリド源を表し、加えてまた、大規模プロセスにおいてあまり望まれない。最後に、キラルスルホニル基は、標的アミン(S)-2の形成を生じるために開裂されなければならない。
【００１３】
従って、WO 2015/066515による先行技術合成は、経済的合成およびいくつかの重要な特定のコスト因子に関する欠点を含む。最初に、出発物質4-ブロモインダノン(4)は、比較的高価なビルディングブロックである。4-ブロモインダノン(4)は市販で入手可能であるが、その製造は複雑であり、そして極めて高価な原材料を必要とする。続くシアノ化工程はまた、試薬について高いコストに関連し、そして例えば、非常に有毒なシアニドの使用による安全の懸念を生じる。さらなる欠点は、アミン(S)-2の立体中心のジアステレオ選択的形成において使用される高価な化学量論量のキラルEllman補助剤の必要である。 
【００１４】
"Biocatalytic Routes to Optically Active Amines", ChemCatChem, vol. 1, no. 1, 24 August 2009, pages 42-51においてM. Hohneらは、加水分解酵素を用いたエナンチオ選択的アシル化およびアミノ基転移酵素またはアミンデヒドロゲナーゼを用いた不斉還元などの光学活性アミンの調製のための生体触媒ルートについての概説を開示する。
【００１５】
"Omega-Transaminases for the synthesis of non-racemic alpha-chiral primary amines", Trends in Biotechnology, vol. 28, no. 6, 6 June 2010, pages 324-332においてD. KoszelewskiらおよびF.-F. Chenら、"Asymmetric Amination of Secondary Alcohols by using a Redox-Neutral Two-Enzyme Cascade", ChemCatChem vol. 7, no. 23, 22 October 2015, pages 3838-3841は、アミノ基転移酵素またはアミンデヒドロゲナーゼを用いた不斉還元的アミノ化を開示する。
【００１６】
"Bacterial lipases for biotechnological applications", Journal of Molecular Catalysis. B: Enzymatic, vol. 3, no 1-4, June 1997, pages 3-12においてK.-E. Jaegerらは、リパーゼを用いたエナンチオ選択的アシル化を開示する。1-アミノインダンの光学分割が述べられている。
【００１７】
US 2007/037868は、Candida Antarcticaから単離したリパーゼB(CAL-B)を用いたベンズオキシカルボニルN-保護cis-およびtrans-3-アミノインダン-1-オールの生体触媒分割を開示する。
【００１８】
CN-B-105017035は、アシル供与体としてCandidaリパーゼおよびL-(+)-O-アセチル-アルファ-ヒドロキシフェニル酢酸を用いた動的速度論的分割を通じた(S)-6-ヒドロキシ-1-アミノインダンの調製を開示する。
【００１９】
特に、WO 2015/066515に開示されたルートに含まれる欠点を考慮して、本発明の基礎となる目的は、一般的にキラル(S)4-置換1-アミノインダン、および特に(S)-4-シアノ-1-アミノインダン、すなわち鍵となる中間体(S)-2のより経済的でかつ生態学的に魅力的であり、ならびに技術的に実行可能なエナンチオ選択的合成を提供することである。
【００２０】
本発明のさらなる目的は、先行技術の他の欠点の少なくともいくつかを回避しつつ、経済的に魅力的な化合物から出発するオザニモドの全合成のための代替的ルートを提供することである。
【００２１】
これらおよび他の目的に対する解決法は、添付の特許請求の範囲において説明するように、本明細書から当業者に明らかとなる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００２２】
発明の要旨
従って、本発明は:
1.  一般式(S)-Iの4-置換1-アミノインダンのエナンチオ選択的生体触媒調製のためのプロセスであって:
【００２３】
【化５】
2021520807.tif 000007
【００２４】
式中
Rは、ハロゲン; -CN; -C(=O)H; -C(=N-OH)H; -C(=O)NH2; -C(=O)OH; -C(=NH)NH-OH; -C(=N-OH)NH2; および-COOR1からなる群より選ばれ、ここで、R1は、H; C1〜C8-アルキル; アリールアルキル、ここでアルキルはC1〜C8-アルキルである; -CH2-Hal、ここでHalはF、ClまたはBrである; -CH2-O-アルキル、ここでアルキルはC1〜C8-アルキルである; 置換されていてもよいアリール; および置換されていてもよいヘテロアリールからなる群より選ばれる;
Yは、H; -C(=O)R1y; および-C(=O)OR1yからなる群より選ばれ、ここでR1yは、H; C1〜C8-アルキル; アリールアルキル、ここでアルキルはC1〜C8-アルキルである; -CH2-Hal、ここでHalはF、ClまたはBrである; -CH2-O-アルキル、ここでアルキルはC1〜C8-アルキルである; 置換されていてもよいアリール; および置換されていてもよいヘテロアリールからなる群より選ばれる;
Ａ  生体触媒の存在下、エナンチオ選択的アシル化を介する一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミまたはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物の分割
【００２５】
【化６】
2021520807.tif 000008
【００２６】
式中、Rは上記で定義した通りである;
Ｂ  生体触媒の存在下、エナンチオ選択的加水分解を介する一般式(S)-IIIおよび(R)-IIIのN-アシル化4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミまたはエナンチオマー的に豊富なアミド混合物の分割
【００２７】
【化７】
2021520807.tif 000009
【００２８】
式中、RおよびR1yは上記で定義した通りであり、そしてnは0または1である;
Ｃ  アミン供与体の存在下、アミノ基転移酵素を用いた4-置換1-インダノンの不斉還元的アミノ化、ここで4位の置換基は上記で定義した通りのRである;または
Ｄ  窒素成分の存在下、アミンデヒドロゲナーゼを用いた4-置換1-インダノンの不斉還元的アミノ化、ここで4位の置換基は上記で定義した通りのRである
からなる群より選ばれるルートを介する、プロセス。
【００２９】
2.  ルートがルートＡまたはルートＢであり、好ましくはルートＡであることを特徴とする、項１に記載のプロセス。
【００３０】
3.  生体触媒がヒドロラーゼの群から選ばれ、好ましくはヒドロラーゼがリパーゼ、エステラーゼおよびプロテアーゼからなる群より選ばれ、最も好ましくはヒドロラーゼがリパーゼである、項２に記載のプロセス。
【００３１】
4.  ルートＡにおいて、一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミアミン混合物またはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物がアシル供与体とともに生体触媒に添加され、好ましくは生体触媒がリパーゼであることを特徴とする、項２または３に記載のプロセス。
【００３２】
5.  ルートＡにおいて、以下の反応スキームに従って、一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミアミン混合物またはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物がアシル供与体とともに生体触媒に添加され、ここで生体触媒がリパーゼであることを特徴とする、項４に記載のプロセス
【００３３】
【化８】
2021520807.tif 000010
【００３４】
式中
Rは項１で定義した通りであり、好ましくはRは-CN、-COOMe、または-Brであり;
R2はC1〜C20-アルキル基; C1〜C20-アルコキシ基; 置換されていてもよいC6〜C20-アリール基; 置換されていてもよい5-または6-員ヘテロアリール基; ハロゲンおよび式-COOR4のアシル基からなる群より選ばれ、ここでR4はH、およびC1〜C8-アルキルから選ばれ、好ましくは-CH3または-C2H5である; 好ましくはR2はメトキシまたは-COOC2H5または-Clであり;
R3は、C1〜C8-またはC1〜C6-アルキル基、好ましくはR3はC1〜C4-アルキル基であり、より好ましくはR3はメチル、エチルまたはイソプロピルである; -CH2-Hal、ここでHalは-F、-Clまたは-Brを表す; -CH2-O-アルキル、ここでアルキルはC1〜C8-アルキルを表す; 置換されていてもよいアリール基; および置換されていてもよい5-または6-員ヘテロアリール基から選ばれ;
ここで、反応は、有機溶媒の存在下または無溶媒条件下、有機媒体中で行われる。
【００３５】
6.  Rが-Br、-CNおよび-COOCH3からなる群より選ばれ、好ましくはRが-CNまたは-Brであり、最も好ましくはRが-CNであることを特徴とする、項１〜５のいずれか１項に記載のプロセス。
【００３６】
7.  任意の追加の溶媒の不在下または追加の有機溶媒の存在下で行われ、好ましくは有機溶媒がn-ヘプタン、2-メトキシ-2-メチルプロパン、メチル-tert.-ブチルエーテル、2-メチル-テトラヒドロフラン、メチルシクロヘキサン、トルエンおよびそれらの任意の組み合わせからなる群より選ばれる少なくとも１種であり、好ましくは有機溶媒がn-ヘプタンおよび／またはメチル-tert.-ブチルエーテルであることを特徴とする、項２〜６のいずれか１項に記載のプロセス。
【００３７】
8.  リパーゼがCandida antarcticaからのリパーゼB(CAL-B)、Candida rugosaからのリパーゼ(CRリパーゼ)、Burkholderia cepaciaからのリパーゼ(BCリパーゼ)およびBurkholderia cepaciaからのリパーゼPSからなる群より選ばれ、好ましくはリパーゼがCAL-Bであることを特徴とする、項２〜７のいずれか１項に記載のプロセス。
【００３８】
9.  アシル供与体がメトキシ酢酸エチル、マロン酸ジエチル、およびメトキシ酢酸イソプロピルからなる群より選ばれ、好ましくはアシル供与体がメトキシ酢酸イソプロピルであることを特徴とする、項２〜８のいずれか１項に記載のプロセス。
【００３９】
10.  反応が、好ましくは溶媒としてのn-ヘプタンの存在下で溶液中、以下の条件a)、b)またはc)のうちの１つの条件下で行われるか、または反応が条件a)およびb); a)およびc); b)およびc); ならびにa)、b)およびc)から選ばれる条件下で行われることを特徴とする、項２〜９のいずれか１項に記載のプロセス:
a)  所望の4-置換1-アミノインダンの99 % eeに達するのに十分な時間、好ましくは30分〜48時間、より好ましくは少なくとも5 h;
b)  10〜90℃の温度範囲、好ましくは40〜60℃;
c)  1 mmolの基質あたり1〜50 mg、好ましくは5 mgのCAL-Bの基質:酵素比。
【００４０】
11.  一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミ混合物またはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物が、4-位の置換基Rが項１で定義した通りである対応する4-置換1-インダノンから、好ましくは
i)  特に4-置換1-インダノンのヒドロキシルアミンとの縮合によるケトオキシムの形成、続く
ii)  好ましくは亜鉛の存在下、ケトオキシムのラセミアミン混合物への還元
によって得られるかまたは得られ得ることを特徴とする、項２〜１０のいずれか１項に記載のプロセス。
【００４１】
12.  酵素的アシル化から生じる所望でないエナンチオマーが回収および再循環／再使用されることを特徴とする、項２〜１１のいずれか１項に記載のプロセス。
【００４２】
13.  Rが-CNでありかつYが水素である一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミまたはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物が、溶媒としてのn-ヘプタンおよび／またはメチル-tert.-ブチルエーテル中、CAL-Bの存在下、メトキシ酢酸イソプロピルでアシル化されることを特徴とする、項２〜１２のいずれか１項に記載のプロセス。
【００４３】
14.  最初の4-置換インダン-1-オン化合物がナフタレンから得られ得るかまたは得られることを特徴とする、項１〜１３のいずれか１項に記載のプロセス。
【００４４】
15.  オザニモドの調製のためのプロセスであって、
I  ナフタレンを提供する、
II  ナフタレンを1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)および／または1,4-ジヒドロナフタレン(OZA-1)へと還元する、
IIa  必要に応じて1,4-ジヒドロナフタレン(OZA-1)を1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)へと再配置する、
III  1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)中のエチレン性C=C-二重結合を開裂してジカルボン酸(OZA-3)を提供する、
IV  工程IIIの生成物(OZA-3)の4-カルボキシ-1-インダノン(OZA-4)への環化、
V  4-カルボキシ-1-インダノン(OZA-4)の4-シアノ-1-インダノン(OZA-5)への誘導体化、
VI  4-シアノ-1-インダノン(OZA-5)をS-配置の4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)へと直接またはラセミ体を介して変換する、
VII  (S)-4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)のアミノ基を保護基(PG)で保護してN-保護(S)-4-シアノ-1-アミノインダン(OZA-7)を形成する、
VIII  OZA-7のシアノ基をアミドキシム基へと変換する、
IX  アミドキシム基を3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸または3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸誘導体との縮合を介して1,4-オキサジアゾール複素環基へと変換する、
X  アミノ基上の保護基をヒドロキシエチル基で置換してオザニモドを生成する
工程を所定の順序で含むかまたはこれら工程からなり、
好ましくは、ここで、工程VIにおける4-シアノ-1-インダノンのS-配置の4-シアノ-1-アミノインダンへの変換が、項１または２〜１４のいずれか１項に記載のプロセスによって行われる、プロセス。
【００４５】
16.  VI  好ましくは項１または２〜１４のいずれか１項に記載のプロセスによって得られるS-配置の4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)を提供する、
VII  (S)-4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)のアミノ基を保護基(PG)で保護してN-保護(S)-4-シアノ-1-アミノインダン(OZA-7)を形成する、
VIII  OZA-7のシアノ基をアミドキシム基へと変換する、
IX  アミドキシム基を3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸または3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸誘導体との縮合を介して1,4-オキサジアゾール複素環基へと変換する、
X  アミノ基上の保護基をヒドロキシエチル基で置換してオザニモドを生成する
工程を所定の順序で含むかまたはこれら工程からなる、オザニモドの調製のためのプロセス。
【図面の簡単な説明】
【００４６】
【図１】図１は、本発明によるオザニモドの調製のためのプロセスを説明する。
【図２】図２は、先行技術の不利益のいくつかを説明する。
【図３】図３は、本発明に関する化合物(PG = 保護基; Boc = tert.-ブチルオキシカルボニル基)の包括的でない概説である。
【図４】図４は、例示の説明として、Candida antarcticaからのリパーゼB(CAL-B)を用いた0.5 M基質濃度で行った減少した生体触媒負荷での1-アミノインダンの分割を示す。
【図５】図５は、リパーゼCAL-Bを用いたインダン-1-アミンの分割について60℃でのアシル供与体および溶媒スクリーニングを示す。
【図６】図６は、リパーゼCAL-Bの低い生体触媒負荷での4-シアノ-1-アミノインダン(OZA-6)の分割を示し、そして>95 % eeの高い鏡像体過剰率が約55％の変換で達成されることを示す。
【図７】図７は、ラセミ4-置換インダン-1-アミンの調製の基礎となる原理を示す(例示目的のみ、本発明に従わない)。
【発明を実施するための形態】
【００４７】
用語および定義
本発明を記載する文脈において、与えられた量は、特に明記しない場合、重量による量である。
【００４８】
本発明の文脈において、温度は、セ氏温度(℃)で与えられる。反応、および測定は、特に明記しない場合、室温(23℃)で行われる。
【００４９】
本発明の文脈において、プロセス工程は、特に明記しない場合、約1013 mbarに相当する大気圧／標準圧で行われる。
【００５０】
本発明の文脈において、語句「および／または」は、それぞれのリストに列挙された要素のうちのいずれか１つならびに全ての組み合わせの両方を含むよう意味する。
【００５１】
本記載の全体を通して、用語「ラセミ分割」は、キラル分割、すなわち立体化学においてラセミ化合物のそれらのエナンチオマーへの単離のためのプロセスを意味する。
【００５２】
鏡像体過剰率(ee)は、キラル物質のために使用される純度の測定である。それは、サンプルが一方のエナンチオマーを他方よりも多い量で含む程度を反映する。定義により、「エナンチオマー的に純粋」は、100 %のeeを意味する;本発明によれば、標的のエナンチオマー化合物の95 %以上、または96 %以上、または97 %以上、または98 %以上、あるいは99 %以上のeeを達成することが望ましい。
【００５３】
本発明の記載において、アルキル基は直鎖を有し得、または分岐であり得、あるいは環状であり得る。分岐鎖および環状アルキル基の場合、アルキル基は少なくとも３個の炭素原子を含む。
【００５４】
本発明の記載において、アルコキシ基は直鎖を有し得、または分岐であり得、あるいは環状であり得る。分岐鎖および環状アルキル基の場合、アルコキシ基のアルキル基は少なくとも３個の炭素原子を含む。
【００５５】
本明細書中以下で特に明記しない場合、ハロゲン原子(例えば、Hal)はフッ素(F)、塩素(Cl)、臭素(Br)およびヨウ素(I)から選ばれ、好ましくはF、ClまたはBrである。
【００５６】
優先権が主張されている任意の先行出願を含む本明細書中で参照される各文献は、本明細書中で具体的に列挙されているかどうかに関わりなく、本明細書中で参考として援用される。任意の文献の言及は、このような文献が任意の権威において先行技術としての資格があるまたは当業者の一般的知識を構成すると認めることではない。
【００５７】
実施例以外、または明確に指示しない場合、物質の量、反応条件、分子量、炭素原子の数などを特定する本記載における全ての数量は、単語「約」によって修飾されると理解されるべきである。本明細書中で示す上限量および下限量、範囲、および比の限定は、独立して組み合わされ得ることが理解されるべきである。同様に、本発明の各要素についての範囲および量は、他の要素についての範囲または量とともに用いられ得る。
【００５８】
本明細書中で使用される「含む(including)」、「含む(containing)」、または「によって特徴付けられる(characterized by)」と同義である暫定的用語「含む(comprising)」は、包括的または制約がなく、そして追加の記載されていない要素または方法工程を排除しない。しかし、本明細書中「含む(comprising)」の各記述において、用語はまた代替的態様として表現「実質的に〜からなる(consisting essentially of)」および「〜からなる(consisting of)」を含むことが意図され、ここで、「〜からなる(consisting of)」は特定されていない任意の要素または工程を排除し、そして「実質的に〜からなる(consisting essentially of)」は、検討中の組成物または方法の必須または基本的および新規の特徴に実質的に影響を与えない追加の記載されていない要素または工程の包含を許可する。
【００５９】
本発明において使用される場合、文言「または任意のそれらの任意の組み合わせ」は、当該文言の前のリストのメンバーの全ての可能な組み合わせが当該リストに直接的かつ明確に開示されていることを意味すると理解されるべきである。この論述は、特許法の下で要求されるのと可能な限り正確な方法で対応する文章（記載またはクレーム）を説明する単なる手段を表し、一方、当該文言はそれらから生じる可能な組み合わせのそれぞれおよび全てを直接的かつ明確に開示すると読みかつ理解されるべきであることがはっきりと明確になる。従って、特定の必須の要素「〜からなる(consisting of)」ポリマーは、該少量／痕跡成分の少量を潜在的にさらに含むと理解されなければならない。
【００６０】
ある代表的な実施態様および詳細は本発明の説明目的のために示されているが、種々の変化および改変が本発明の範囲から逸脱することなくなされ得ることが当業者には明らかであろう。この点に関し、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるべきである。
【００６１】
数値範囲が本明細書中で開示される場合、このような範囲は、連続的であり、該範囲の最小値および最大値の両方ならびにこのような最小値と最大値との間の全ての値を含む。よりさらに、範囲が整数に言及する場合、このような範囲の最小値と最大値との間の全ての整数が含まれる。さらに、特徴または特性を記載するために複数の範囲が提供される場合、このような範囲は組み合わされ得る。すなわち、別段の指示がない限り、本明細書中に開示された全ての範囲は、そこに含まれる任意のおよび全ての部分的範囲を含むと理解されるべきである。例えば、「1〜10」の述べられた範囲は、最小値1および最大値10の間の任意のおよび全ての部分的範囲を含むと考えられるべきである。範囲1〜10の例示的な部分的範囲は、1〜6.1、3.5〜7.8、および5.5〜10を含むが、これらに限定されない。本明細書中に示される上限量および下限量、範囲、および比の限定は、独立して組み合わされ得ることが理解されるべきである。同様に、本発明の各要素についての範囲および量は、任意の他の要素についての範囲または量とともに使用され得る。
【００６２】
本明細書および添付の特許請求の範囲において使用される物質の量、成分、反応条件、分子量、炭素原子の数などを特定する全ての数、値および／または表現は、このような値を得ることにおいて遭遇する測定の種々の不確実性に供されるので、別段の指示がない限り、全ては、全ての場合において用語「約」によって修飾されると理解されるべきである。数値とともに使用される本明細書中で使用される用語「約」は、本開示の文脈内で、およびより特定すると認識できる機能または特性が述べられた値で正確に示された同じ機能または特性と異なるように影響されない述べられた値の範囲内で値を測定するために当業者によって一般的に使用される機器の誤差の程度内で、意味すると理解されるべきである。数値とともに使用される用語「約」は、値±20%を意味し得る。数値とともに使用される用語「約」は、値±10%を意味し得る。数値とともに使用される用語「約」は、値±5%を意味し得る。数値とともに使用される用語「約」は、値±1%を意味し得る。数値とともに使用される用語「約」は、値±0.5%を意味し得る。
【００６３】
従って、以下の詳細な記載がよりよく理解され得るように、および当該分野に対する本発明の寄与がよりよく評価されるように、本発明のより重要な特徴がむしろより広く概説される。本明細書中以下に記載され、そして添付の特許請求の範囲の主題を形成する本発明の明らかに追加の特徴がある。この点に関し、本発明のいくつかの実施態様を詳細に説明する前に、本発明はその用途において以下の記載に説明されるかまたは図面に例示される詳細および構成ならびに構成成分の配置に限定されないことが理解されるべきである。本発明は、他の実施態様が可能であり、そして種々の方法で実施および実行され得る。
【００６４】
また、本明細書中の用語および専門用語は、記載の目的のためであることが理解されるべきであり、そしていかようにも限定しないと見なされるべきである。当業者は、本開示が基礎とし、そしてこの開発のいくつかの目的を実施するための他の構造、方法およびシステムを指定する他の基礎として容易に利用され得る概念を理解する。特許請求の範囲は、本発明の精神および範囲から逸脱しない限り、このような等価な構成を含むと見なされることが重要である。
【００６５】
詳細な説明
本発明は、一般式(S)-Iの4-置換1-アミノインダンのエナンチオ選択的生体触媒調製のためのプロセスに関する:
【００６６】
【化９】
2021520807.tif 000011
【００６７】
式中
Rは、ハロゲン、-CN、-C(=O)H、-C(=N-OH)H、-C(=O)NH2、-C(=O)OH、-C(=NH)NH-OH、-C(=N-OH)NH2、および-COOR1からなる群より選ばれ、ここで、R1は、H; C1またはC2〜C8-アルキル、好ましくはC1またはC2〜C6-アルキル、より好ましくはC1またはC2〜C4-アルキル;アリールアルキル、ここでアルキルはC1またはC2〜C8-アルキル、好ましくはC1またはC2〜C6-アルキル、より好ましくはC1またはC2〜C4-アルキルを表し、およびここでアリールは好ましくはフェニルおよびナフチルから選ばれ、好ましくはフェニルである;-CH2-Hal、ここでHalはF、ClまたはBrである;-CH2-O-アルキル、ここでアルキルはC1またはC2〜C8-アルキル、好ましくはC1またはC2〜C6-アルキル、より好ましくはC1またはC2〜C4-アルキルである;アリール;およびヘテロアリールからなる群より選ばれ;
Yは、H; -C(=O)R1y;および-C(=O)OR1yからなる群より選ばれ、ここでR1yは、H;C1またはC2〜C8-アルキル、好ましくはC1またはC2〜C6-アルキル、より好ましくはC1またはC2〜C4-アルキル;アリールアルキル、ここでアルキルはC1またはC2〜C8-アルキル、好ましくはC1またはC2〜C6-アルキル、より好ましくはC1またはC2〜C4-アルキルを表し、およびここでアリールは好ましくはフェニルおよびナフチルから選ばれ、好ましくはフェニルである;-CH2-Hal、ここでHalはF、ClまたはBrである;-CH2-O-アルキル、ここでアルキルはC1またはC2〜C8-アルキル、好ましくはC1またはC2〜C6-アルキル、より好ましくはC1またはC2〜C4-アルキルである;アリール;およびヘテロアリールからなる群より選ばれる。
【００６８】
R1およびR1yの定義において、アリール基は好ましくはフェニル、トリル、キシリルおよびナフチルからなる群より選ばれ、好ましくはフェニルであり、このアリール基は無置換であり得るか、またはH;C1またはC2〜C8-アルキル、好ましくはC1またはC2〜C6-アルキル、より好ましくはC1またはC2〜C4-アルキル;アリールアルキル、ここでアルキルはC1またはC2〜C8-アルキル、好ましくはC1またはC2〜C6-アルキル、より好ましくはC1またはC2〜C4-アルキルを表し、およびここでアリールは好ましくはフェニルおよびナフチルから選ばれ、好ましくはフェニルである;-CH2-Hal、ここでHalはF、ClまたはBrである;-CH2-O-アルキル、ここでアルキルはC1またはC2〜C8-アルキル、好ましくはC1またはC2〜C6-アルキル、より好ましくはC1またはC2〜C4-アルキルである、からなる群より選ばれる少なくとも１つの置換基で置換され得、好ましくは置換基はC1〜C6-アルキル、C1〜C4-アルキルおよびハロゲンから選ばれる。
【００６９】
R1およびR1yの定義において、ヘテロアリール基は好ましくは窒素、酸素および硫黄からなる群より選ばれる少なくとも１個のヘテロ原子を含む5-または6-員複素環基、好ましくはピリジル、ピリミジル、フリル、チエニル、およびイミダゾリルからなる群より選ばれる種であり;このヘテロアリール基は無置換であり得るか、またはピリジル、ピリミジル、フリル、チエニル、およびイミダゾリルから選ばれる置換ヘテロアリール基を表し、ここで置換基はC1〜C6-アルキル、C1〜C4-アルキルおよびハロゲンから選ばれる。
【００７０】
好ましくは、R1yはC1〜C4-アルキル(より好ましくはメチル、エチル、n-またはiso-プロピル、およびtert.-ブチルから選ばれ、最も好ましくはtert.-ブチルである)またはアリールアルキル（ここでアルキル基はC1またはC2-アルキルであり、そして好ましくはここでアリールアリール-基はフェニルである）である。
【００７１】
１つの実施態様において、Rはハロゲン、好ましくは-Br;-CNおよび-COOCH3などの-COOR1から選ばれ、最も好ましくは-CNである;およびYはHまたは-C(=O)R1yであり、好ましくはここでR1yはC1〜C4-アルキル基であり、より好ましくはメチル、エチル基およびtert.-ブチル基から選ばれ、最も好ましくはここでR1yはtert.-ブチル基である。
【００７２】
本発明の１つの実施態様において、Rは-Br、-CNまたは-COOCH3から選ばれ、好ましくはここでRは-CNであり、およびYはHまたは-C(=O)R1yであり、ここでR1yはtert.-ブチル基である。
【００７３】
１つの実施態様において、Rは-CNであり、およびYはHであり、最も好ましいS-配置の標的アミンエナンチオマー、すなわち4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)に相当する。
【００７４】
本発明の標的アミンエナンチオマー(S)-2などの一般式Iの(S)-4-置換1-アミノインダンのエナンチオ選択的調製の目的のため、４つの別の経路／ルートが特に本発明によって含まれる:
−  上記の4-置換1-インダノンを対応するラセミアミンに変換する場合、リパーゼ-触媒分割がルートＡとして生体触媒オプションとして使用される−本発明による好ましいルートを表す。
−  ルートＢは、エナンチオ選択的加水分解を介する適切なアミドのラセミ混合物またはエナンチオマー的に豊富な混合物の分割に関する。
−  ルートＣおよびＤとして、触媒としてアミノ基転移酵素(ルートＣ)またはアミンデヒドロゲナーゼ(ルートＤ)のいずれかを含む上記の4-置換1-インダノンの直接不斉還元的アミノ化が提供される。
【００７５】
ルートＡは、鍵となる工程として、生体触媒の存在下、好ましくはヒドロラーゼ、好ましくはリパーゼ、エステラーゼまたはプロテアーゼから選ばれるヒドロラーゼの存在下、N-アシル化を介するラセミアミンの分割に関する。最も好ましくは、リパーゼが生体触媒として使用される。WO 2015/066515によるオザニモドの全合成の初期段階におけるエナンチオマー的に純粋な4-シアノ置換1-アミノインダン(すなわち、化合物(S)-2))の形成は、エナンチオマー的に純粋な(S)-4-シアノ置換1-アミノインダン((S)-2)の生成のための分割プロセスの使用を特に魅力的にする。従って、本発明の１つの局面は、鍵となる工程として生体触媒の存在下、好ましくはリパーゼの存在下、それらのアシル化を介した上記の一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミンのラセミアミン混合物の分割に関する。ラセミ混合物の代わりに、適切なアミンのエナンチオマー的に豊富な混合物が同様にこのプロセスのための基質として使用され得る。
【００７６】
ルートＢは、鍵となる工程として、生体触媒の存在下、好ましくはヒドロラーゼ、好ましくはリパーゼ、エステラーゼまたはプロテアーゼから選ばれるヒドロラーゼの存在下での加水分解を介したラセミアミドの分割に関する。最も好ましくは、リパーゼが生体触媒として使用される。本発明の１つの局面は、鍵となる工程として、生体触媒を用いたエナンチオ選択的加水分解を介した上記の一般式(S)-IIIおよび(R)-IIIの4-置換インダン-1-アミドのラセミアミド混合物の分割に関する。また、ラセミ混合物の代わりに、適切なアミドのエナンチオマー的に豊富な混合物が同様にこのプロセスのための基質として使用され得る。
【００７７】
4-置換1-アミノインダン標的化合物(4-シアノ-1-アミノインダン(S)-2または関連する4-位に他の置換基を有するインダン-1-アミンなど)に関するルートＣは、対応するインダノン基質の直接不斉還元的アミノ化からなる。このような還元的アミノ化は、該変換において酸化されて副生成物を形成するアミン供与体と組み合わせてアミノ基転移酵素を用いて行われ得る。
【００７８】
このルートにおいて、エナンチオ選択的アミノ基転移酵素、例えば、Vibrio fluvialisからのアミノ基転移酵素(VF-TA)またはArthrobacter sp.からのアミノ基転移酵素(ArS-TA)は、特に、補因子、例えば、ピリドキサールリン酸、および適切なアミン供与体と組み合わせて生体触媒として使用される。このようなアミン供与体として特にL-アラニンまたはイソプロピルアミンのいずれかが使用され得、酸化生成物であるピルベートまたはアセトンを生じる。この反応は、水性または有機媒体のいずれか中で行われ得る。
【００７９】
特に、このルートは、VF-TAを用いて行われ得る。例示的なプロセスは、L-アラニンを用い、水性媒体、メタノール20 % v/v、Pi-緩衝剤(0.1 M、pH 8.0)中、30℃で24時間行われる。
【００８０】
ルートＤにおいて、ケトンの不斉還元的アミノ化は、生体触媒としてアミノ基転移酵素の代わりに補因子としてNAD(P)Hを用いたアミンデヒドロゲナーゼ(AmDH)を利用して行われる。このルートにおいて、必要とされる窒素成分(窒素源)は、アンモニア、C1〜C4アルキルアミン、またはアンモニウム塩であり得、アンモニアが好ましい。還元剤が必要とされ、これは、例えばD-グルコースまたはホルメートであり得る。さらに、インサイチュ-補因子-再生のための第２の酵素が必要とされ、これは、グルコースデヒドロゲナーゼ(補基質としてD-グルコースの場合)またはギ酸デヒドロゲナーゼ(補基質としてホルメートの場合)であり得る。
【００８１】
使用可能なアミンデヒドロゲナーゼの１つの例は、F.-F. Chenら(ChemCatChem 2015, 7, 3838-3841)によって報告された人工アミンデヒドロゲナーゼであり、彼らはExigobacterium sibiricumから２つの位置(K77S/N270L)でロイシンデヒドロゲナーゼ(EsLeuDH-DM)を変異させた。
【００８２】
１つの実施態様において、所望の4-置換1-アミノインダン(化合物(S)-2および関連する他の4-置換基を有するアナログなど)の調製のための最も好ましい別のルートは、リパーゼの存在下、エナンチオ選択的アシル化によるアミンを基礎とするラセミの酵素的分割によって表され、ルートＡおよびＢであり、最も好ましい実施態様はルートＡである。
【００８３】
ルートＡおよびＢの実施態様において、本発明は、
(i)ヒドロラーゼの存在下、好ましくはここでヒドロラーゼはリパーゼ、エステラーゼおよびプロテアーゼからなる群より選ばれ、最も好ましくはリパーゼの存在下、エナンチオ選択的アシル化(本明細書中に記載のアシル化剤を用いる)を介する、ルートＡの一般式(S)-IIおよび(R)-II:
【００８４】
【化１０】
2021520807.tif 000012
【００８５】
式中、Rは上記で定義した通りであり、好ましくはハロゲン(-Clまたは-Br)、-COOCH3、または-CNであり、最も好ましくは-CNである;
の(キラル)4-置換インダン-1-アミンエナンチオマーのラセミ混合物の分割を介した、または
(ii)生体触媒の存在下、好ましくはヒドロラーゼの存在下、最も好ましくはヒドロラーゼはリパーゼ、エステラーゼおよびプロテアーゼからなる群より選ばれ、最も好ましくはリパーゼの存在下、エナンチオ選択的加水分解を介する、ルートＢの一般式(S)-Iおよび(R)-I
【００８６】
【化１１】
2021520807.tif 000013
【００８７】
式中、Rは上記で定義した通りであり、好ましくはハロゲン(-Clまたは-Br)、-COOCH3、または-CNであり、最も好ましくは-CNである;およびYは上記で定義した通りであり、好ましくはここでYは-C(=O)R1yまたは-C(=O)OR1yであり、ここでR1yは上記で定義した通りであり、最も好ましくはここでR1yはC1〜C4-アルキル(１つの好ましい実施態様において、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピルおよびtert.-ブチルから選ばれ、最も好ましくはtert.-ブチルである)またはアリールアルキルであり、ここでアルキルはC1またはC2-アルキルであり、そしてアリールはフェニルを表す；
の(キラル)4-置換インダン-1-アミドエナンチオマーのラセミアミド混合物の分割を介した、
上記で定義した一般式Iの4-置換1-アミノインダンの調製のためのエナンチオ選択的生体触媒プロセスに関する。
【００８８】
本発明の好ましい実施態様であるルートＢは、生体触媒の存在下、エナンチオ選択的加水分解を介する、一般式(S)-IIIおよび(R)-IIIのN-アシル化4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミまたはエナンチオマー的に豊富な(アミド)混合物の分割に関する
【００８９】
【化１２】
2021520807.tif 000014
【００９０】
式中、RおよびR1y上記で定義した通りであり、そしてnは0または1であり、好ましくはここでnは0である。
【００９１】
好ましいさらなる実施態様において、R1yはC1〜C4-アルキル(メチル、エチル、プロピル、イソプロピルまたはtert.-ブチルなど)またはアルキルがC1またはC2-アルキルを表し、そしてアリールがフェニルを表すアリールアルキルである。なおさらなる実施態様において、Rは-CNである。
【００９２】
なおさらなる好ましい実施態様において、Rは-CNを表し、nは0であり、そしてR1yはC1〜C4-アルキルであり、より好ましくはR1yはメチル、エチルおよびtert.-ブチル基からなる群より選ばれ、最も好ましくはR1yはtert.-ブチル基である。
【００９３】
本発明の１つの実施態様において、プロセスは、ルートＡにおいて、以下の一般例示反応スキーム(生体触媒 = リパーゼ; 反応媒体 = 有機溶媒を例示する)に従って、一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミアミン混合物またはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物は、アシル供与体(すなわち、アシル化剤)とともに生体触媒、好ましくはリパーゼに添加されることを特徴とする:
【００９４】
【化１３】
2021520807.tif 000015
【００９５】
式中
Rは上記で定義した通りであり、好ましくはハロゲン(-Clまたは-Br)、-COOCH3、または-CN、最も好ましくは-CNである;
R2はC1〜C20-アルキル、C1またはC2〜C18-アルキル、またはC1またはC2〜C16-アルキル、またはC1またはC2〜C12-アルキル、またはC1またはC2〜C8-アルキル、またはC1またはC2〜C6-アルキル、またはC1またはC2〜C4-アルキル;C1〜C20-アルコキシ、C1またはC2〜C18-アルコキシ、またはC1またはC2〜C16-アルコキシ、またはC1またはC2〜C12-アルコキシ、またはC1またはC2〜C8-アルコキシ、またはC1またはC2〜C6-アルコキシ、またはC1またはC2〜C4-アルコキシ;置換されていてもよい6〜20個の炭素原子を有するアリール基、好ましくはここでアリール基はR1/R1yの定義に関連して上記で定義した通りである;R1/R1yの定義に関連して上記で定義した置換されていてもよい5-または6-員ヘテロアリール基、または式-COOR4のアシル基、ここでR4はC1またはC2〜C8-アルキル、好ましくはC1またはC2〜C6-アルキル、より好ましくはC1またはC2〜C4-アルキル、特にCH3またはC2H5;ハロゲン原子;であり、好ましくはここでR2はメトキシ、-COOC2H5および塩素からなる群より選ばれる;
R3はC1またはC2〜C8-アルキル、好ましくはC1またはC2〜C6-アルキル、より好ましくはC1またはC2〜C4-アルキルからなる群より選ばれ、好ましくはR3はメチル、エチルおよびイソプロピルからなる群より選ばれ、最も好ましくはここでR3はエチルである;-CH2-Hal、Halは-F、-Clまたは-Brを表す;-CH2-O-アルキル、アルキルはC1〜C8-アルキルを表す;R1/R1yの定義に関連して上記で定義した置換されていてもよいアリール基;またはR1/R1yの定義に関連して上記で定義した置換されていてもよい5-または6-員ヘテロアリール基;
ここで反応は、追加の有機溶媒とともにまたはニート条件下(すなわち、無溶媒)のいずれかで有機媒体中で行われる。
【００９６】
１つの実施態様において、アシル化剤は、R3がC1〜C4-アルキル基(メチル、エチル、プロピル、イソプロピル基、n-およびtert.-ブチル基など、好ましくはエチルおよびイソプロピル基)から選ばれ、そしてR2がメトキシ、-COOC2H5および塩素からなる群より選ばれ、好ましくはメトキシであることによって特徴付けられる。
【００９７】
反応原理は、以下の反応スキームにおいて、選択したラセミアミンについて本明細書中以下に示される(例えば、ここでR = -CNおよびR2= メトキシ):
【００９８】
【化１４】
2021520807.tif 000016
【００９９】
オザニモド-関連ラセミアミンの酵素的分割に関し、および50 %の最高収率を考慮して、このような分割方法は、特に多工程合成の比較的初期段階でそれを適用する場合、魅力的である。分割におけるこのような比較的初期段階で、4-置換インダン-1-アミンOZA-6(または他の4-置換アナログ)は、基質と考えられ得る。高いプロセス効率に加えて、所望でないエナンチオマーの回収およびラセミ化は異なる目的のためにも同様に望ましい。
【０１００】
本発明の１つの実施態様において、有機溶媒はn-ヘプタン、2-メトキシ-2-メチルプロパン、メチル-tert.-ブチルエーテル(MTBE)、2-メチルテトラヒドロフラン(2-MTHF)、メチルシクロヘキサン(MCH)、トルエンおよびそれらの混合物からなる群より選ばれ、好ましくはここで溶媒はn-ヘプタン、MTBEおよびトルエン、またはそれらの混合物から選ばれる。
【０１０１】
本発明の１つの実施態様において、リパーゼはCandida antarcticaからのリパーゼB(CAL-B)、Candida rugosaからのリパーゼ(CRリパーゼ)、およびBurkholderia cepaciaからのリパーゼ(BCリパーゼ)からなる群より選ばれ、好ましくはCAL-Bである。Candida antarcticaからのリパーゼB(CAL-B)は、該有機体から産生される２つの異なるリパーゼ(リパーゼAおよびリパーゼB)のうちの１つである。
【０１０２】
CAL-Bは組み換え固定化酵素(例えば、Novozyme 435)として市販で入手可能である。Candida rugosaからのリパーゼは真菌から単離され、そしてBurkholderia cepaciaからのリパーゼは細菌から単離される。上述のリパーゼは市販で入手可能である。本発明の実施態様に従って、Candida antarcticaからのリパーゼB(CAL-B)の使用が好ましい。
【０１０３】
リパーゼ触媒を用いる分割は、典型的には、好ましくは生体触媒が固定化形態で存在する有機媒体中で行われる。これは、酵素成分からの生成物混合物の分離を可能にする。適切なアシル化剤を含むこの種の酵素的分割は、広範な利点を提供する。
【０１０４】
一般に、本発明に従って、任意のタイプのアシル供与体、すなわちアシル化剤が使用され得る。本発明の１つの実施態様において、アシル供与体はエステル、特にスキームIにおいて上記で示すような構造を有するエステルである。代表的なエステルは、2-ブタン酸アルキル、オクタン酸アルキル、シュウ酸ジアルキル、マロン酸ジアルキル、2-クロロ酢酸アルキルからなる群より選ばれ、ここでアルキル基はC1〜C6、好ましくはC1〜C4-アルキル基から選ばれ、ここでメチル、エチルまたはイソプロピルなどのアルキル基が好ましい。
【０１０５】
本発明の１つの実施態様において、アシル供与体はメトキシ酢酸エチル、マロン酸ジエチル、およびメトキシ酢酸イソプロピルからなる群より選ばれ、好ましくはここでアシル供与体はメトキシ酢酸イソプロピルである。
【０１０６】
本発明の実施態様において、反応は以下のうちの１つの条件下、以下のうちの２つの条件下(すなわち、(a)およびb)、a)およびc)、b)およびc))または以下の３つの全ての条件下で行われる:
好ましくは上記で特定したものから選ばれる有機溶媒の存在下、より好ましくはn-ヘプタンの存在下、
a)  99 % ee以上の所望の4-置換1-アミノインダン(残る基質として)に達するのに十分な時間、99 % ee以上の所望の4-置換1-アミノインダンに達するために好ましくは30分〜48時間、より好ましくは少なくとも5 h;
b)  10〜90℃、好ましくは40〜60℃の温度範囲;
c)  1 mmolの基質あたり1〜50 mgのCAL-Bの基質:酵素比。
【０１０７】
条件a)において少なくとも99 % eeの所望の4-置換1-アミノインダンに達するのに十分な時間は、条件b)およびc)について選ばれるパラメーターに依存し、そして選ばれたそれぞれの反応条件に従って容易に制御され得ることは明らかである。
【０１０８】
本発明の１つの実施態様において、光学分割の前に、続くエナンチオ選択的生体触媒分割方法(ルートＡ)において使用されるラセミ混合物、すなわち、基質は、4-位の置換基Rが上記で定義した通りである対応する4-置換1-インダノンから調製される。１つの実施態様において、これは、以下によって達成され得る
i)  特に4-置換1-インダノンのヒドロキシルアミンとの縮合によるケトオキシムの形成、続く
ii)  特に亜鉛の存在下、ケトオキシムの還元、ラセミアミン混合物を生じる。
【０１０９】
本発明の１つの好ましい実施態様において、酵素的アシル化から生じる望ましくないエナンチオマーは回収され、そして再循環/再使用される。
【０１１０】
本発明の１つの好ましい実施態様において、式(S)-Iのエナンチオマーを製造するためのプロセスは、Rが-CNでありかつYが水素である一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミまたはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物をn-ヘプタンおよび／またはMTBE中、好ましくは溶媒としてn-ヘプタンの存在下、CAL-Bの存在下、メトキシ酢酸イソプロピルでアシル化することを特徴とする。
【０１１１】
本発明の１つのさらなる実施態様において、最初の出発化合物（これから4-置換インダン-1-オンが調製される）はナフタレンである。
【０１１２】
なおさらなる実施態様において、本発明は、以下の工程を所定の順序で含むかまたはこれら工程からなるオザニモドの調製のためのプロセスに関する
I  ナフタレンを提供する、
II  ナフタレンを1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)および／または1,4-ジヒドロナフタレン(OZA-1)へと還元する、
IIa  必要に応じて1,4-ジヒドロナフタレン(OZA-1)を1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)へと再配置する、
III  1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)中のエチレン性C=C-二重結合を開裂してジカルボン酸(OZA-3)を提供する、
IV  工程IIIの生成物(OZA-3)の4-カルボキシ-1-インダノン(OZA-4)への環化、
V  4-カルボキシ-1-インダノン(OZA-4)の4-シアノ-1-インダノン(OZA-5)への誘導体化、
VI  4-シアノ-1-インダノン(OZA-5)をS-配置の4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)へと直接またはラセミ体を介して変換する、
VII  (S)-4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)のアミノ基を保護基(PG)で保護してN-保護(S)-4-シアノ-1-アミノインダン(OZA-7)を形成する、
VIII  OZA-7のシアノ基をアミドキシム基へと変換する、
IX  アミドキシム基を3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸または3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸誘導体との縮合を介して1,4-オキサジアゾール複素環基へと変換する、
X  アミノ基上の保護基をヒドロキシエチル基で置換してオザニモドを生成する。
【０１１３】
本発明の１つの実施態様において、上記工程VIにおける4-シアノ-1-インダノンの(S)-配置の4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)への変換は、さらに上記で概説した本発明による任意の１つの実施態様によるプロセス、好ましくはルートＡ(ラセミ体を含む)を介して達成される。従って、１つの実施態様において、本発明はまた、ルートＡまたはルートＢ(所望のS-エナンチオマーの分離および脱アシル化の後)の方法に従って(S)-配置の4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)を提供する工程を含むオザニモドの調製のための方法に関する。好ましくは、オザニモドの合成はルートＡの方法を含む。
【０１１４】
なおより特定の実施態様における本発明は、さらに、以下の工程を所定の順序で含むかまたはこれら工程からなるオザニモドの調製のためのプロセスに関する
VI  上記でさらに概説した任意の１つの実施態様によるプロセスにより、より好ましくはルートＡまたはルートＢ(所望のS-エナンチオマーの分離および脱アシル化の後)に従って得られるかまたは得られ得る(S)-配置の4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)を提供する、
VII  (S)-4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)のアミノ基を保護基(PG)で保護してN-保護(S)-4-シアノ-1-アミノインダン(OZA-7)を形成する、
VIII  OZA-7のシアノ基をアミドキシム基へと変換する、
IX  アミドキシム基を3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸または3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸誘導体との縮合を介して1,4-オキサジアゾール複素環基へと変換する、および
X  アミノ基上の保護基をヒドロキシエチル基で置換してオザニモドを生成する。
【０１１５】
本発明の１つの実施態様において、工程IIにおいて、ナフタレンの1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)への還元は、電気化学的またはBirch反応のいずれかを介して行われる。１つの特定の実施態様において、Birch反応はジエチルエーテル中ナトリウムおよびtert.-ブタノールの存在下で行われる[参照: 1 電気化学的合成についてa) T. Asahara, M. Seno, H. Kaneko, Bulletin of the Chemical Society of Japan 1968, 41, 2985; b) A. Misono, T. Osa, T. Yamagishi, Bulletin of the Chemical Society of Japan 1967, 40, 427; c) J. Mortensen, J. Heinze, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1984, 23, 84; d) H. W. Sternberg, R. Markby, I. Wender, Journal of The Electrochemical Society 1963, 110, 425; 2 Birch-型反応についてa) O. S. Kukovinets, M. I. Kislitsyn, R. A. Zainullin, A. A. Mukhamedzyanova, F. Z. Galin, M. I. Abdullin, Russian Journal of Organic Chemistry2008, 44, 362; b) A. Menzek, A. Altundas, D. Gultekin, Journal of Chemical Research2003, 2003, 752]。
【０１１６】
本発明の１つの実施態様において、追加の工程IIa、すなわち、1,4-ジヒドロナフタレン(OZA-1)の1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)への再配置は、工程IIから生じる1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)に対する1,4-ジヒドロナフタレン(OZA-1)の比が好ましくない場合、行われ得る。１つの特定の実施態様における工程IIaは、強酸の存在下または強塩基、特にtert.-ブタノール中のナトリウムtert.-ブトキシドなどの存在下のいずれかで、より特定すると約60℃の温度で約12時間行われる[参照:ジヒドロナフタレン再配置についてa) S. Suzuki, M. Kato, S. Nakajima, Can. J. Chem. 1994, 72, 357; b) W. Wu, J. G. Verkade, ARKIVOC 2004, 88; c) D. R. Vutukuri, P. Bharathi, Z. Yu, K. Rajasekaran, M.-H. Tran, S. Thayumanavan, J. Org. Chem. 2003, 68, 1146; d) M. Guney, A. Coskun, F. Topal, A. Dastan, I. Gulcin, C. T. Supuran, Bioorganic & Medicinal Chemistry 2014, 22, 3537]。
【０１１７】
本発明の１つの実施態様において、工程IIIは、酸化的に、特にオゾン分解を介して、または触媒量の過酸化水素およびタングステン酸ナトリウムを用いることによって、より特定するとテトラヒドロフラン中過マンガン酸カリウム／水酸化ナトリウムまたは水および少量の塩化メチレン中過マンガン酸カリウム／水酸化ナトリウムによって行われる[参照: 1 オゾン分解についてB. M. Cochran, Synlett 2016, 27, 245; 2 過マンガン酸開裂についてJianwen Tan, Zhongyu Zhou, Jian Yan, Mei Zhang, Jing Wang, CN 102432494 (A), 2012]。
【０１１８】
本発明の１つの実施態様において、工程IIIにおいて、過マンガン酸カリウムを添加する場合温度プロファイルはない。この実施態様において、反応混合物は0℃まで冷却され得るが、これは必須ではない。生成物は、例えば、結晶化および抽出を介して単離され得る;工程IIIのいくつかの実施態様において、より高い純度を達成するために結晶化が好ましい[参照:Friedel-Crafts型反応についてJianwen Tan, Zhongyu Zhou, Jian Yan, Mei Zhang, Jing Wang, CN102432494 (A), 2012]。
【０１１９】
本発明の１つの実施態様において、工程IVにおいて、生成物の4-カルボキシ-1-インダノン(OZA-4)への環化は、分子内Friedel-Crafts-型アシル化反応を介して行われる。この反応は、三塩化アルミニウムの存在下、より好ましくは、溶媒および触媒として硫酸の存在下、行われ得る。工程IVの１つの特定の実施態様において、高収率および高純度を達成するために連続液-液抽出器が使用される[参照:Friedel-Crafts型反応についてJianwen Tan, Zhongyu Zhou, Jian Yan, Mei Zhang, Jing Wang, CN102432494 (A), 2012]。
【０１２０】
本発明の１つの実施態様において、工程Vにおいて、4-カルボキシ-1-インダノン(OZA-4)の4-シアノ-1-インダノン(OZA-5)への誘導体化は、4-カルボキシ-1-インダノン(OZA-4)をクロロギ酸エチルと反応させ、次いで混合酸種を求核剤としてのアンモニアと反応させて4-アミド-1-インダノンを生成し、そして続いて溶媒中、従来の脱水剤でのアミドの脱水によって混合無水物を形成することによって行われる。好ましい実施態様において、脱水試薬はPOCl3、PCl5、塩化チオニル、塩化シアヌル、五酸化リン、無水トリフルオロ酢酸およびそれらの混合物からなる群より選ばれる。好ましい脱水試薬は無水トリフルオロ酢酸である。適切な溶媒の特定の例は、トルエンおよび／またはジメチルホルムアミド(DMF)および／またはアセトニトリルである[参照: 1 アミド合成についてa) S. Zhou, K. Junge, D. Addis, S. Das, M. Beller, Org. Lett. 2009, 11, 2461; b) F.-L. Yang, X. Zhu, D.-K. Rao, X.-N. Cao, K. Li, Y. Xu, X.-Q. Hao, M.-P. Song, RSC Adv 2016, 6, 37093; c) G. R. Hodges, WO 2012/123328; d) M. Mineno, Y. Sawai, K. Kanno, N. Sawada, H. Mizufune, The Journal of organic chemistry 2013, 78, 5843; 2 脱水についてa) N. K. Bhattacharyya, Satadru Jha, Sangeeta Jha, Tshering Yangden Bhutia and Gita Adhikary, International Journal of Chemistry and Applications 2012, 4, 295; b) A. K. Yadav, V. P. Srivastava, L. D. S. Yadav, RSC Adv 2014, 4, 4181; c) Carr Albert A, Farr Robert, DE3031892 (A1), 1981]。
【０１２１】
本発明の１つの実施態様において、工程VIにおいて、4-シアノ-1-インダノン(OZA-5)のS-配置の4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)への変換は、ラセミ体を介して行われる[参照: K. J. Gillen, J. Gillespie, C. Jamieson, J. K. F. Maclean, E. M. Moir, Z. Rankovic, WO 2010/115952]。
【０１２２】
本発明の１つの実施態様において、工程VIIにおいて、4-シアノ-1-アミノインダン(S)-2のアミノ基の保護は、保護剤を用いて達成される。一般に、任意のタイプの保護基が使用され得る。適切な保護試薬の概説は、有機化学の標準的な教科書に与えられ、そしてTheodora W. Greene "Protective Groups in Organic Synthesis"などから当業者に公知である。好ましい保護剤は、Boc(tert.-ブチル-オキシカルボニル)、Adoc(1-アダマンチル-O(CO)NR2)、Alloc/Aloc(アリルカルバメート)、Cbz(ベンジルオキシカルボニル)、シクロブチルオキシカルボニル、N-ヒドロキシピペリニジル(piperinidyl)オキシカルボニル、p-ニトロベンジルオキシカルボニル、3,4-ジメトキシ-6-ニトロベンジルオキシカルボニルおよび2,4-ジクロロベンジルオキシカルボニルからなる群より選ばれるものであり、Boc基が特に好ましい。
【０１２３】
本発明の１つの実施態様において、工程VIIIにおいて、シアノ基のアミドキシム基への変換は、塩基性(アルカリ性)条件下、ヒドロキシルアミンまたは対応する塩酸塩のシアノ基への付加によって行われる。好ましくは、塩基性条件は、カーボネートの存在によって、特に基質を溶解するための単鎖アルコールの存在下、達成され得る。１つのさらに特定の実施態様において、アルコールはメタノールおよび／またはエタノールであり、好ましくは還流下である[工程VIII-IXについての文献: a) R. Sheng, S. Li, G. Lin, S. Shangguan, Y. Gu, N. Qiu, J. Cao, Q. He, B. Yang, Y. Hu, RSC Adv 2015, 5, 81817; b) G. Schmidt, M. H. Bolli, C. Lescop, S. Abele, Org. Process Res. Dev. 2016, 20, 1637; c) M. R. Kuram, W. G. Kim, K. Myung, S. Y. Hong, Eur. J. Org. Chem. 2016, 2016, 438; d) K. S. Kadam, T. Gandhi, A. Gupte, A. K. Gangopadhyay, R. Sharma, Synthesis 2016, 48, 3996; e) X. Hou, J. Zhu, B.-C. Chen, S. H. Watterson, W. J. Pitts, A. J. Dyckman, P. H. Carter, A. Mathur, H. Zhang, Org. Process Res. Dev. 2016, 20, 989; f) D. Flesch, M. Gabler, A. Lill, R. C. Gomez, R. Steri, G. Schneider, H. Stark, M. Schubert-Zsilavecz, D. Merk, Bioorganic & Medicinal Chemistry 2015, 23, 3490; g) J. Cai, H. Wei, K. H. Hong, X. Wu, M. Cao, X. Zong, L. Li, C. Sun, J. Chen, M. Ji, European Journal of Medicinal Chemistry 2015, 96, 1; h) J. Bostrom, A. Hogner, A. Llinas, E. Wellner, A. T. Plowright, J. Med. Chem. 2012, 55, 1817]。
【０１２４】
本発明の１つの実施態様において、工程IXにおいて、アミドキシム基の1,4-オキサジアゾール複素環基への変換は、3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸または3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸誘導体、特に塩化3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸との縮合を介して達成される。この工程は、溶媒中、例えば極性非プロトン性溶媒、好ましくはジメチルホルムアミド(DMF)中、カップリング剤の存在下で行われ得る。適切なカップリング剤は、当該分野で公知であり、そしてヒドロキシベンゾトリアゾール、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)-カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)、およびエチレンジアミンカルボジイミド(EDC)などのカルボジイミド、ベンゾトリアゾリルオキシトリス(ジメチルアミノ)-ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(BOP)、カストロ試薬(ベンゾトリアゾール-1-イル-オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート、PyBOP)などのホスホニウム試薬、N-エトキシカルボニル-2-エトキシ-1,2-ヒドロキノリン(EEDQ)、4-(4,6-ジメトキシ-1,3,5-トリアジン-2-イル)-4-メチル-モルホリニウムクロリド(DMTMM)、カルボニルジイミダゾール(CDI)、1-ヒドロキシ-7-アザベンゾトリアゾール(HOAt)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシド ヘキサフルオロホスフェート(HATU)、2-(1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-1,1,3,3-テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロホスフェート(HBTU)、ヒドロキシ-3,4-ヒドロ-4-オキソ-1,2,3-ベンゾトリアジン(HOOBt)、およびそれらの混合物からなる群より選ばれ得る。
【０１２５】
本発明の１つの実施態様において、工程Xにおいて、保護アミンのエポキシドとのカップリングが行われる。ヒドロキシエチル基の付加後、保護基は酸性条件下で開裂される。あるいは、一般式X-CH2-CH2-OHまたは-OSiR'3の化合物でのN-アルキル化が行われ得、Xはハロゲンを表し、そしてR'はC1〜C4-アルキルから選ばれ、特にメチルまたはエチルである。
【０１２６】
本発明によるオザニモドの代替合成の基礎となる概念は、鍵となる中間体としてのアミン(S)-2に基づく。
【０１２７】
さらに、１つの実施態様において、ブロモ置換インダノン(4)は、特定の生体触媒方法論に先立つ4-置換1-アミノインダン(好ましくは4-シアノ-1-アミノインダン化合物(S)-2)のための基質として利用され得る。
【０１２８】
インダノンから所望のアミン(S)-2を得た後、オキサジアゾール複素環の形成は、本発明によるオザニモドの全合成に向かう次の工程の１つを表す。
【０１２９】
別の実施態様において、本発明は、分割のための基質として使用されるラセミアミンの調製に関する。
【０１３０】
本発明の文脈において、これらのラセミアミン基質を利用する生物学的変換が行われる。
【０１３１】
本発明のプロセスは、いくつかの局面において、とりわけ以下について変化し得る:
−  生体触媒(好ましくは市販で入手可能なリパーゼ)、
−  反応媒体(「溶媒工学」)、
−  アシル化剤(「アシル供与体」、好ましくは容易に利用可能なバルクケミカル)、
−  反応時間および反応温度、
−  高い基質負荷(高い時空収率を可能にする)、および
−  インダノン-1-アミン基質(異なる4-置換基を有する)。
【０１３２】
ラセミアミン出発物質の調製
酵素的分割工程のための出発物質として必要とされるラセミアミンは、種々の方法によって対応するケトンから合成され得る。
【０１３３】
ラセミ4-置換インダン-1-アミンの調製のための好ましい合成方法は、ケトオキシムの形成下、ケトンのヒドロキシルアミンとの最初の縮合および亜鉛でのさらなる還元からなる２工程プロトコルを適用することによる(以下のスキームに示す)。本明細書中に例示的に説明されるように、この合成手順によって、酵素的分割に必要な所望のラセミアミンは、特定の条件および置換基(R5 = Hは本発明に従わない)に依存して、40 %までまたはそれ以上の収率で得られ得る:
【０１３４】
【化１５】
2021520807.tif 000017
【０１３５】
(上記反応スキームで述べた例示条件下、収率: H 37 %収率; Br 28 %収率; CN 35 %収率; COOMe 30 %)
【０１３６】
原則として、任意の市販で入手可能なリパーゼが本発明による方法において使用され得る。上述のように、好ましいリパーゼは市販で入手可能なリパーゼ、特にCandida antarcticaからのリパーゼB(CAL-B)、Candida rugosaからのリパーゼ(CRリパーゼ)、Burkholderia plantariiからのリパーゼ(BPL)およびBurkholderia cepaciaからのリパーゼ(BCリパーゼ)からなる群より選ばれるものである。リパーゼCAL-Bは、本発明による最も好ましい生体触媒であり、他の２つのリパーゼと比較して顕著により高い変換(76 %まで)を生じる。
【０１３７】
さらに、種々の温度および異なる溶媒が使用され得る。本発明の１つの実施態様において、90℃までの高温、60℃の温度が好ましくは反応温度として使用される。反応温度は、40℃ほどの低さであり得、または10℃でさえあり得る。
【０１３８】
上述のように、反応媒体として使用される好ましい有機溶媒は、n-ヘプタン、メチル-tert.-ブチルエーテル(MTBE)、2-メチルテトラヒドロフラン(2-MTHF)、メチルシクロヘキサン トルエンおよびそれらの混合物からなる群より選ばれ、より好ましくは2-MTHFおよびn-ヘプタンであり、ここでn-ヘプタンが特に好ましい。
【０１３９】
反応媒体としての有機溶媒の選択に関し、一般的および生体触媒と無関係に、溶媒n-ヘプタンが最高の変換を生じ、従って最も好ましい溶媒を表すことが見出された。特に大規模用途に適切なさらに好ましい溶媒は、トルエン、MTBE、2-メチルテトラヒドロフラン、メチルシクロヘキサンおよびn-ヘプタンから選ばれる。
【０１４０】
さらに、アシル供与体も変化され得る。従って、リパーゼ-触媒分割、好ましくはCAL-B-触媒分割は、好ましくはマロン酸ジエチル(DEM)、メトキシ酢酸エチル(EMA)、メトキシ酢酸イソプロピル(IMA)およびそれらの混合物からなる群より選ばれるアシル供与体、最も好ましくはメトキシ酢酸イソプロピルを用いて行われた。
【０１４１】
本発明の１つの実施態様において、溶媒は2-MTHFであり、そしてアシル供与体はメトキシ酢酸イソプロピルである。
【０１４２】
さらなる基質として、特に4-シアノ-1-アミノインダン(OZA-6)、4-ブロモ-1-アミノインダンおよび4-メチルカルボキシレート-1-アミノインダンのラセミ体がリパーゼ、好ましくはCAL-Bを用いる本発明による分割プロセスにおいて使用され得る。
【０１４３】
良好なE-値が全ての基質について得られる。4-シアノ置換1-アミノインダン(すなわち、化合物(S)-2)について、31の最高E-値が得られ、これは、58 %の変換で99 % eeの優れた鏡像体過剰率とともにアミンの所望の残る(S)-エナンチオマー(すなわち、化合物(S)-2)の形成に至る。
【０１４４】
表1.リパーゼCAL-Bを利用するオザニモド前駆体としてのラセミ4-置換1-アミノインダンの酵素的分割についての変換、ee-値およびE-値(R6 = 基Rの選択した置換基)
【０１４５】
【表１】
2021520807.tif 000018
【０１４６】
オザニモドの調製のための魅力的な逆合成アプローチは安価な原料としてのナフタレンから開始する多工程ルートからの誘導体としてのラセミ4-シアノ-1-アミノインダン(OZA-6)に基づくので、この基質の分割が好ましい実施態様である。
【０１４７】
従って、本発明のプロセス(酵素的分割)は、所望の標的中間体(S)-4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)、ならびに異なる4-置換基を有するそのアナログの調製のための優れたルートを表し、市販で入手可能な生体触媒の存在下、良好な変換ならびに高いエナンチオ選択性の両方を生じる。
【０１４８】
１つの実施態様において、鍵となる中間体(S)-4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)の調製のためのプロセスは、エナンチオ選択的反応工程としてのリパーゼ-触媒分割を含む多工程合成であり得る。効率的な分割が所望の(S)-4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)の調製のために適していることに加えて、本発明はまた、ラセミ基質(OZA-6)に向かう適切なアプローチおよびそれと本発明による分割工程との組み合わせ、続くオザニモドに向かうさらなる誘導体化のための標的化合物および中間体としてこの(S)-アミンの単離下での適切な後処理を提供する。
【０１４９】
標的アミン(S)-4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)のこの多工程合成は、以下の特定のしかし限定されない例によって説明される:基質合成は、対応するインダノンならびにオキシム形成および還元に基づくラセミアミンへの２工程変換から開始し、ラセミアミンOZA-6を与える。続いて、発明ルートＡによるリパーゼ-触媒分割が行われ、続いてN-アシル化生成物からの分離が行われる。続く精製は酸性抽出および中和の工程を含み、次いで所望のキラル(S)-4-シアノ-1-アミノインダンエナンチオマー((S)-2)を与える。
【０１５０】
さらに、所望の(S)-4-シアノ-1-アミノインダンの合成における酵素的分割プロセスのエナンチオ選択性は、メトキシアセテートアシル供与体のメチルエステルの代わりにイソプロピルエステルが使用される場合、さらに高められ得、メトキシ酢酸イソプロピルを本発明による好ましいエステルにすることに言及する。従って、本発明の好ましい実施態様において、メトキシ酢酸イソプロピルが4-シアノ-1-アミノインダンキラル混合物(rac-2)を分割するための方法においてアシル供与体として使用される。
【０１５１】
固定化形態のリパーゼの好ましい使用および反応媒体としての有機溶媒の使用は、生体触媒は単純な濾過によって分離され得るので、反応媒体からの触媒の分離をより容易にする。従って、リパーゼの再循環はより容易である。
【０１５２】
従って、回収したリパーゼ、好ましくはCAL-Bの再循環もまた本発明の一部である。
【０１５３】
注目すべきは、５回目の反応サイクル後でさえ、変換が高いままであり、そしてほとんど変化せず、リパーゼの高い割合のリサイクル性を説明することである。
【０１５４】
1 mmolの基質あたりの酵素の量(mg)は、1 mg/mmol〜100 mg/mmol、1 mg/mmol〜75 mg/mmol、1 mg/mmol〜50 mg/mmol、5 mg/mmol〜40 mg/mmol、または10 mg/mmol〜20 mg/mmolに及び得る。例えば、1 mmolの基質あたり40 mgの固定化リパーゼ、例えば、CAL-Bの量は、生物学的変換に使用され得る。しかし、量はまた、1 mmolの基質あたりそれぞれ20 mg/mmol、10 mg/mmolおよび5 mg/mmolの酵素;または任意の他の所望の量に減少され得る。
【０１５５】
触媒の量に関係なく、反応は全ての場合において円滑に進む。予想されるように、反応速度は、リパーゼの量が減少すると低下する。1 mmolの基質あたり増加した量のリパーゼ、例えば、CAL-Bを用いる場合、しばらくした時間後、ほぼ同じee-値を達成し得る。これは、これらの生物学的変換の全てにおいて、反応が完了に近いことを意味する。1 mmolの基質あたり低い量のリパーゼを用いる場合、同じ時間後のee-値は、依然として低いが反応は依然として進行中であるか、またはほとんど同じであるかのいずれかである。長い反応時間で、反応はまた完了に達するであろう。
【０１５６】
従って、コストが要因である場合、低い触媒負荷が用いられ得る;結果は最終的に同じであり、それに達するまでの持続時間のみが異なる。
【０１５７】
通常、反応は0.5時間〜24時間の時間期間内で行われるが、実際の要求／要望に応じてより短いまたはより長い反応時間に適応され得る。
【０１５８】
本発明のプロセスの有効性およびリパーゼのリサイクル性により、１キログラムの生成物(S)-4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)あたりの魅力的な生体触媒コストが達成され得る。
【０１５９】
従って、提示した４つのルートＡ）、Ｂ）、Ｃ）およびＤ）のうち、リパーゼ-ベースのルートＡ）が本発明の好ましいルートを表す。
【０１６０】
別の局面において、本発明は、オザニモドの全合成に関する。キラルアミン中間体(S)-4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)の合成における鍵となる工程として種々の不斉生体触媒反応に基づき、および手持ちのこのアミンの効率的な合成を可能にする好ましいリパーゼ-触媒分割を用い、出発物質として容易に入手可能でかつ安価なバルクケミカルから開始するオザニモドの全合成もまた、本発明の実施態様を表す。
【０１６１】
従って、分割工程のための基質の合成の技術的可能性を有する単純な反応工程を同定することが本発明のさらなる目的である。
【０１６２】
本発明によるオザニモドに向かう全合成ルートの最適化のための特定の焦点は、上述の鍵となるビルディングブロックである(S)-4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)などの4-置換1-アミノインダンを提供するための代替アプローチに重点を置く。本発明の新規ルートの概念は、図１に示す。
【０１６３】
２つの主要な鍵となる問題が本発明によって対処された。一方では、立体中心は、魅力的な生体触媒アプローチによって導入される。
【０１６４】
第２の鍵となる問題は、4-シアノ-インダン-1-オン、他の関連する4-置換アナログならびにそれらの対応するラセミアミン(リパーゼ-触媒分割アプローチのため)（これらは次いで生体触媒工程のための基質として役立つ）の全合成に関する。本発明において、これらの化合物は、安価な出発原料から確立された化学反応によって合成された。
【０１６５】
オザニモドの全合成において、ナフタレンは、その低コストでの大規模利用可能性により、興味を引く原料である。第１の工程において、ナフタレンは1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)へと還元され得る。
【０１６６】
次に、C=C-二重結合は酸化的に開裂されてジカルボン酸(OZA-3)を生じ得、続いて、例えば、Friedel-Crafts-反応を介して環化により対応するインダノン(OZA-4)を形成し得る。続いて、インダノン中の残りのカルボン酸部分は、シアノ基(OZA-5)へと誘導体化される。対応するラセミアミンは、本発明のリパーゼ-ベースのプロセスを介して変換される。この工程からの望ましくないエナンチオマーは、好ましくはアシル化されそして続いてラセミ化され、そして従って再循環され得る。
【０１６７】
手持ちの鍵となる中間体(S)-4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)を用い、オザニモドに向かうさらなる合成工程は、オキサジアゾール複素環の形成およびN-置換基の最終導入からなるWO 2015/066515のルートと類似である。
【０１６８】
ナフタレンは還元されそして1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)へと再配置され得る。
【０１６９】
本発明の１つの代替において、ナフタレンの還元は好ましくは電気化学的に行われる。
【０１７０】
所望の1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)に向かう本発明の別の代替において、Birch反応が最初の工程として選ばれる。ナフタレンはナトリウムおよびtert.-BuOHの存在下反応して1,4-ジヒドロナフタレン(OZA-1)を形成し、これは高い収率、１つの好ましい実施態様において80 %以上の収率、なおさらに好ましくは85 %以上の収率で得られ得る。
【０１７１】
所望でない1,4-生成物は通常主要な位置異性体であるので、必要とされる1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)への続く再配置が行われ得る。この反応は、強塩基(脱プロトン化)または強酸(プロトン化)のいずれかによるイオンの形成に基づき得る。再配置反応のために塩基を使用することが好ましい。
【０１７２】
塩基触媒再配置は、塩基の濃度および溶媒の性質を変化させることによって行われ得る。一般に、全ての種類の塩基(および触媒)が本明細書中で使用され得る。
【０１７３】
塩基の量は、広範に変化され得、例えば、0.01 eq〜1 eqであり;そして温度もまた広範に変化され得、例えば、20℃と100℃との間である。
【０１７４】
好ましくは、本発明による再配置プロセスは、カリウムtert.-ブタノエートおよびtert.-BuOHの組み合わせを用い、所望の1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)について好ましくは97:3の２つの位置異性体の比を生じる。特に、この再配置は、40〜80℃の温度で0.2〜0.6 eq.の塩基を用いて、好ましくは55〜65℃で0.35〜0.45 eqの塩基を用いて行われる。
【０１７５】
C=C-二重結合は、選択的に1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)へと酸化的に開裂され得る。4-カルボキシ-置換インダン-1-オン(OZA-4)を得るため、1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)の対応するC=C-二重結合の選択的開裂が行われる。
【０１７６】
この開裂は、例えば、オゾン分解または触媒量の過酸化水素とタングステン酸ナトリウムとを用いる酸化によって行われ得る。過マンガン酸カリウムを用いることによる酸化は、これが改善された結果および高収率で非常に高い変換を生じるので、特に好ましい。１つの特定の実施態様において、この反応は水酸化ナトリウムの存在下で行われる。さらに、観察される副生成物の形成がないことおよび単純な生成物単離によって示される良好な選択性は、さらなる利点である。この方法を用いて、好ましくは2〜4時間の短い反応時間内で、所望の生成物が形成され、そして70 %以上、特に75 %以上の収率で得られる。
【０１７７】
収率は、生成物の沈殿に影響を与える存在する水の量によって制御され得る。あるいは、生成物は抽出によっても単離され得る。
【０１７８】
次の工程として、酸化的C=C-二重結合開裂によって得られるジカルボン酸は、4-カルボキシ-置換インダン-1-オン(OZA-4)へと変換される。好ましい実施態様において、変換は、分子内Friedel-Craftsアシル化によって行われる。塩化アルミニウムの添加により両方のカルボン酸官能基を対応する酸クロリドへと変換することによる「古典的」アプローチが使用され得るが、これはあまり好ましくない。非常に安価なブロンステッド酸触媒としての硫酸が溶媒および触媒の両方として使用されるアプローチが同様に実行可能である。反応温度は、100と180℃との間、好ましくは100〜160℃、特に125〜135℃であり得る。原料生成物は、特に３回抽出され得、または収率および純度を増加させるために硫酸溶液から直接沈殿され得る。
【０１７９】
合成において安価な硫酸を触媒として使用する代わりに、後処理を単純化する不均一ルイス酸またはブロンステッド酸触媒などの別の触媒系を本発明に従って使用することができる。
【０１８０】
インダン-1-オン誘導体(OZA-4)の4-カルボキシ基の4-シアノインダノン(OZA-5)への所望の変換について、最初にカルボン酸置換基の１級アミド基への変換が行われる。
【０１８１】
酸のクロロギ酸エチルとの反応から混合無水物が形成され、これは次いで活性化酸種として求核としてアンモニアと反応する。無水物への変換において、クロロギ酸エチルの当量は、少なくとも1.5、好ましくは4.0よりも高くあるべきである。完全な変換は、化学量論量をクロロギ酸エチルの5.0 eqまでさらに増加させた場合に達成され、80 %以上、特に85 %以上の収率で粗生成物として混合無水物を生じる。
【０１８２】
アミドの形成は、次いでアンモニア水溶液を室温で添加することによって行われる。反応温度を60℃に増加させると定量的な変換を生じ、そして所望のアミドが粗生成物の65 %以上、好ましくは70 %以上の収率で得られ得る。
【０１８３】
ニトリル(OZA-5)の形成下でのアミドの続く脱水において、POCl3、PCl5、P2O5などの種々のリン化合物、塩化チオニル、無水トリフルオロ酢酸ならびに塩化シアヌルなどのアミドの脱水反応に適切な種々の試薬が使用され得る。脱水は、原理上全ての試薬で機能する。しかし、収率は互いに異なる。同時に、注目すべきは、出発物質は全く検出され得ず、従って完全な変換を示すことである。
【０１８４】
五酸化リンおよび無水トリフルオロ酢酸は、性能および取り扱いの適性の観点から好ましい脱水試薬である。
【０１８５】
反応の開始で使用した質量の80 %の回収が達成され得る。
【０１８６】
無水物に対するアミドの比は、顕著に変化しないと思われる。無水物は塩基性抽出の間に加水分解され、そして水相に残る。従って、それは生成物混合物中により低い量で検出され得る。
【０１８７】
酵素的分割の前に、インダノン部分は対応するラセミインダン-1-アミンへと変換される。ケトンの１級アミンへの還元的アミノ化は、今もなお業界において挑戦である。理由は、中間体として形成される１級イミンの不安定性である。
【０１８８】
ケトンの１級アミンへの変換において、Leuckard-Wallach化学が使用され得、ここでギ酸アンモニウムが窒素源として使用され、そしてギ酸の気体として逃げる二酸化炭素への酸化がこの反応の駆動力を表す。
【０１８９】
別のアプローチは、容易に利用可能なケトオキシムの脱水であり、これはインダン-1-オンのヒドロキシルアミンとの縮合反応において形成される。
【０１９０】
ケトン成分として4-シアノインダノン(OZA-5)を利用して、得られるケトオキシムは定量的収率で単離され得る。所望のアミンへの続く還元的変換は、次いで酢酸の存在下、還元剤、好ましくは亜鉛によって起こる。
【０１９１】
ラセミインダン-1-アミン(無置換および4-置換)の酵素的(速度論的)分割は、鍵となる中間体として上記のような4-シアノ-インダン-1-アミンの(S)-エナンチオマー((S)-2)に向かう好ましいエナンチオ選択的ルートであることが分かった。
【０１９２】
一般に、定義につき、速度論的分割は所望のエナンチオマーについて50 %の最大理論収率に制限される。触媒のより低いエナンチオ選択性の場合、エナンチオマー的に非常に豊富な化合物(生成物または残りの基質のいずれかとして)の収率は著しく低くあり得る。
【０１９３】
分割工程から生じる、活性成分の合成に関係しない望まないエナンチオマーは、再循環され、そしてラセミ化後のプロセスにおいて再使用される。
【０１９４】
１級キラルアミンのラセミ化において、２つの別のルートが存在する。１つの可能性は、遷移金属触媒を用いる２級アルコールの酸化還元ラセミ化に類似する。しかし、この場合において、より多量の触媒負荷がしばしば要求され、そして例えばShvo(ルテニウム)触媒についての高価格はこのアプローチの経済的魅力を制限する。
【０１９５】
本発明において好ましい別の代替ルートは、以下のように進行する:最初に、対応するケトンとの縮合反応によってアミンからシッフ塩基が形成される。得られるイミンは、続いて別の強塩基で脱プロトン化される。
【０１９６】
完全に共役した系を介して、負電荷は分子全体にわたって分布し得、そして前者の立体中心は一時的にsp2へと混成する。他の物質からのキラル情報なしで、立体中心の絶対配座は破壊され、従って対応するラセミ体を形成する。
【０１９７】
塩基の変化およびケトンの当量はラセミ化の速度に対して影響を有するので、最適化した塩基の種類およびケトンの当量が使用される。好ましい実施態様において、受容体特性を有するカルボニル化合物、特にケトンおよびアルデヒド、特に3,5-ジニトロサリチルアルデヒドは、それらが反応速度の増加を生じるので、使用される。
【０１９８】
アミドキシム形成
オキサジアゾールは、オザニモドへの全合成において最後の分子構造の１つを形成する。それは、ヒドロキシルアミン(または塩化ヒドロキシルアンモニウム)のニトリルへの付加、続くアミドキシム種のカルボン酸誘導体との縮合を介するオキサジアゾール環形成によって調製されなければならない。
【０１９９】
アミドキシムは、塩基性条件下で形成され、そして通常カーボネートが使用される。好ましい溶媒は、メタノールまたはエタノールなどの短鎖アルコールであり、反応の間還流まで加熱される。
【０２００】
塩基およびヒドロキシルアミン当量を変化させることにより、副生成物形成は影響を受け得る。アミド形成はまた、温度により変化され得る。例えば、温度を25℃まで下げると、副生成物形成が少なくなる結果となる。
【０２０１】
塩基の量を増加させると、所望の生成物への変換が高くなり、ならびにより速い反応となる結果となる。
【０２０２】
アミド形成に対する強い影響を有する反応パラメーターは、反応の間のヒドロキシルアミンまたはその対応する塩酸塩の濃度である。
【０２０３】
従って、ヒドロキシルアミンの投与量の制御は、望ましくないアミド副生成物の形成を抑制するために好ましい戦略である。
【０２０４】
オキサジアゾール縮合において、アミドキシムは芳香族酸クロリドと縮合され得る。この反応は、定量的またはほぼ定量的に進行し、所望のオキサジアゾールを高収率で生じるように行われ得る。本発明の種々の実施態様は、特許請求の範囲および実施例において説明される実施態様に限定されると解釈されるべきではなく、任意の適切な様式で組み合わされ得る。
【０２０５】
本発明は、今、以下の非限定的な実施例によってさらに説明される。これらの実施例は、包括的でなく、そして本発明の範囲を限定することを意図しない。本発明は、特定の実施態様を参照して記載されているが、これらの実施態様は本発明の原理を単に説明するものであることが認識されるべきである。当業者は、本発明の組成物、機器および方法が他の方法および実施態様において構築されそして実行され得ることを理解する。従って、本明細書中の記載は、添付の特許請求の範囲によって定義されるように、他の実施態様もまた本発明の範囲内に含まれるので、本発明を限定すると読まれるべきではない。
【０２０６】
実施例
ルートＡ:鍵となる工程としてリパーゼを用いたアシル化を介するラセミアミンの分割に関する実験プロトコルおよびデータ
分析目的(HPLC)のためのアミンの誘導体化
【０２０７】
【化１６】
2021520807.tif 000019
【０２０８】
サンプルを塩化メチレン中、塩化アセチル(1.1 eq)およびトリエチルアミン(1.5 eq)で１時間アセチル化した。懸濁液を塩化水素(1:1, v/v)の溶液で洗浄した。溶媒を真空で除去した。鏡像体過剰率および変換をHPLCによって決定した。
【０２０９】
リパーゼ-触媒アシル化反応の変換の決定のため、最初に1H-NMR分光法を用いた。従って、酵素からの反応混合物の分離および真空での溶媒の除去後、粗生成物を1H-NMR分析に供し、そして得られた1H-NMRスペクトルにおいて、基質(トリプレット)および生成物(カルテット)のアミノ-およびN-アシルアミノ-官能基化炭素原子でのベンジルプロトンをそれぞれ用い、そして比較した(5.54 ppmでのカルテット: rac-1-インダニルアセトアミド、4.37 ppmでのトリプレット: rac-1-アミノインダン)。
【０２１０】
キラルHPLC分析による鏡像体過剰率の決定のため、抽出した粗生成物を単離し、そしてインサイチュでさらなる後処理なく誘導体化し得る。この誘導体化工程におけるアシル化成分は、分割において用いるものと異なり、従って２つの異なるタイプのアミドを生じる。この誘導体化工程は、非誘導体化アミンから直接ee-値を決定するにおいて可能性がある困難さのため、しばしば必要であり得る。
【０２１１】
全ての４つのアミドエナンチオマー(分割工程からのこれらの２つは生成物に関し、そして２つは基質に関する)のきれいな分離を示す、得られるキラルHPLC-クロマトグラムから、リパーゼ-触媒分割における残る基質および形成した生成物についてのee値は、直接計算され得る。さらに、変換およびE-値(エナンチオ選択性値)もまた、これらee-値から計算され得る。
【０２１２】
これらの知見を示す種々のリパーゼ、温度及び溶媒を用いた初期実験を行った:
【０２１３】
【化１７】
2021520807.tif 000020
【０２１４】
【表２】
2021520807.tif 000021
【０２１５】
また、市販で入手可能なリパーゼPSを1-アミノインダンのラセミ化のために別のリパーゼとして試験した。実験において、リパーゼPSおよびリパーゼPS-SD(SDはデキストリンで希釈したことを意味する)を試験した。1-アミノインダンでの低い変換が両方の酵素で示された。しかし、4-シアノ-1-アミノ-インダン(OZA-6)はリパーゼPSのための適切な基質として分からなかった。
【０２１６】
出発化合物としての4-シアノ-1-インダノンについて例示的に記載したラセミアミンの合成のための２工程還元的アミノ化
4-シアノ-1-インダノン(OZA-5, 1 eq.)およびヒドロキシルアミン塩酸塩(1.5 eq.)をエタノールおよび水(1:1, v/v)中に溶解した。その間、水に溶解した水酸化ナトリウム(1.75 eq)を懸濁液に加えた。混合物を還流まで90分間加熱した。粗生成物をセライト上で濾過し、そして水で洗浄した。溶媒を真空で除去した。オキシムを酢酸に溶解した。アルゴン雰囲気下、亜鉛-粉末(5 eq.)を加え、そして懸濁液を室温で48時間攪拌した。反応混合物をセライト上で濾過し、酢酸エチルで洗浄し、そして溶媒を真空で除去した。オイルを酢酸エチルおよび塩化水素(1:1, v/v)に溶解し、そして2 M塩化水素で２回抽出した。水相のpH値を10に調節し、そしてその後酢酸エチルで３回抽出した。有機相をブラインで洗浄し、そしてMgSO4で乾燥した。溶媒を真空で除去した。残りの溶媒をアルゴン雰囲気下、シュレンク管中で除去した。
【０２１７】
rac-4-シアノ-1-アミノインダン(OZA-6)についての実験データ
【０２１８】
【化１８】
2021520807.tif 000022
【０２１９】
収率: 28 mg (0.18 mmol, 35 %).
1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ[ppm] = 2.11-2.17 (m, 1H, CH2), 2.60-2.69 (m,1H, CH2), 3.05-3.10 (m, 1H, CH2), 3.28-3.33 (m, 1H, CH2), 4.65 (t, 3J= 7.5 Hz, 1H, NH2CH), 7.37 (t, 3J= 7.6 Hz, 1H, ArmH), 7.56 (d, 3J= 7.4 Hz, 1H, Aro/pH), 7.70 (d, 3J= 7.9 Hz, 1H, Aro/pH).
13C-NMR (500 MHz, CDCl3): δ[ppm] = 148.2 (CH-C-CH2), 141.7 (CH-C-CH2), 132.6 (Ar-C), 129.6 (Ar-C), 126.1 (Ar-C), 117.3 (C≡N) 109.5 (Ar-C), 55.8 (N-CH2), 31.3 (CH2), 30.0 (CH2).
MS (ESI): m/z = 159.0 [M+H]+.
【０２２０】
rac-1-アミノインダンについての実験データ
【０２２１】
【化１９】
2021520807.tif 000023
【０２２２】
収率: 0.18 g (1.38 mmol, 37%).
1H-NMR (500 MHz, CDCl3):δ[ppm] =1.70-1.76 (m, 1H, CH2), 2.51-2.56 (m, 1H, CH2), 2.83-2.87 (m, 1H, CH2), 2.95-3.02 (m, 1H, CH2), 4.37 (t, 3J= 7.5 Hz, 1H, NH2CH), 7.19-7.25 (m, 3H, ArH), 7.33-7.35 (m, 1H, ArH).
MS: m/z = 134.5 [M+H]+.
【０２２３】
rac-4-ブロモ-1-アミノインダンについての実験データ
【０２２４】
【化２０】
2021520807.tif 000024
【０２２５】
収率: 0.36 g (1.68 mmol, 28 %).
1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ[ppm] = 1.61-1.64 (m, 1H, CH2), 2.42-2.50 (m, 1H, CH2), 2.69-2.75 (m, 1H, CH2), 2.91-2.97 (m, 1H, CH2), 4.33 (t, 3J= 7.5 Hz, 1H,NH2CH), 7.00 (t, 3J= 7.6 Hz, H, ArmH), 7.17 (d, 3J= 7.4 Hz, 1H, Aro/pH), 7.27 (d, 3J = 7.9 Hz, 1H, Aro/pH).
13C-NMR (500 MHz, CDCl3): δ[ppm] = 144.2 (CH-C-CH2), 143.1 (CH-C-CH2), 131.9 (Ar-C), 129.0 (Ar-C), 123.5 (Ar-C), 120.4 (Ar-C), 56.8 (N-CH2), 31.8 (CH2),31.6 (CH2).
MS (ESI): m/z = 211.9 [M+H]+, 213.9 [M+H]+
【０２２６】
rac-4-メチルカルボキシラト-1-アミノインダンについての実験データ
【０２２７】
【化２１】
2021520807.tif 000025
【０２２８】
収率: 0.30 g (1.57 mmol, 30 %).
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ/ ppm: 1.69-1.76 (m, 1H, CH2), 2.55-2.61 (m, 1H, CH2), 3.10-3.17 (m, 1H, CH2), 3.37 (s, 3H, CH3), 3.45-3.53 (m, 1H, CH2), 4.39 (t, 3J= 7.5Hz, 1H, NH2CH), 7.32 (t, 3J= 7.6 Hz, 1H, ArmH), 7.54 (d, 3J= 7.4 Hz, 1H, Aro/p H), 7.91 (d, 3J= 7.9 Hz, 1H, Aro/p H).
【０２２９】
リパーゼによって触媒される1-アミノインダンの分割
【０２３０】
【化２２】
2021520807.tif 000026
【０２３１】
1-アミノインダン(1.0 eq.)およびアシル供与体(1.1 eq.)を有機溶媒に溶解した。リパーゼを加え、そして60℃まで加熱した。固定した時間で、サンプルを取った。このサンプルを塩化メチレン中、塩化アセチル(1.1 eq.)およびトリエチルアミン(1.5 eq.)で１時間アセチル化した。懸濁液を塩化水素(1:1, v/v)で洗浄した。溶媒を真空で除去した。鏡像体過剰率および変換をHPLCによって決定した。
【０２３２】
種々のリパーゼを用いた速度論的分割のための初期実験
【０２３３】
【化２３】
2021520807.tif 000027
【０２３４】
初期実験のために、1-アミノインダン(20 mg, 0.15 mmol)を、エッペンドルフ容器中、有機溶媒(256 μL)中のマロン酸ジエチル(24 mg, 0.20 mmol)とともに溶解した。リパーゼを反応溶液(6 mg)に加えた。反応溶液を適切な温度で16時間攪拌した。続いて、酵素を濾去し、そしてジクロロメタンで洗浄した。溶媒を真空で除去した。変換を1H NMR分光法によって決定した。
【０２３５】
CAL-B-触媒反応の溶媒-、アシル供与体-、温度スクリーニング
【０２３６】
【化２４】
2021520807.tif 000028
【０２３７】
最適溶媒の決定のため、1-アミノインダン(30 mg, 0.22 mmol)およびマロン酸ジエチル(40 mg, 0.25 mmol)またはメトキシ酢酸エチル(29 mg, 0.29 mmol)を溶媒(384 μl)中に溶解し、そしてCAL-B(9 mg)を加えた。反応を5 mLのねじ蓋ガラス中で行った。以下の溶媒を試験した、トルエン、MTBE、2-メチルテトラヒドロフラン(2-MTHF)、メチルシクロヘキサン(MCH)およびn-ヘプタン。メトキシ酢酸イソプロピル(25 mg, 0.19 mmol)を用いた反応を2-メチルテトラヒドロフラン(384 μl)中で行った。6、26および48時間後にサンプルを取った。酵素を濾過し、そしてジクロロメタンで洗浄した。サンプルをアシル化した。変換を1H-NMR分光法およびHPLCを用いて行った。鏡像体過剰率をキラルHPLCによって決定した。
【０２３８】
CAL-B-触媒反応の溶媒、アシル供与体、温度スクリーニングについての結果を以下の表3に示す:
【０２３９】
【表３】
2021520807.tif 000029
【０２４０】
a 1H-NMRによるconv.; b HPLCによるconv.; cHPLC-データによるcalc.; d HPLC-データによるcalc.; e eeデータによるcalc.; f マロン酸ジエチル、g メトキシ酢酸エチル; h メトキシ酢酸イソプロピル; i 2-メチル-THF; j メチルシクロヘキサン(MCH)
【０２４１】
リパーゼCAL-Bを用いたインダン-1-アミンの分割のための60℃でのアシル供与体および溶媒スクリーニング
【０２４２】
【化２５】
2021520807.tif 000030
【０２４３】
メトキシアセテートのイソプロピルエステルを利用した場合に達成された最高E-値はE=113であったが、メトキシ酢酸エチルならびにマロン酸ジエチルの利用もまた、それぞれ57および36までの良好で合成的に依然として魅力的なE-値を生じた。溶媒成分に関し、一般にMTBEは2-メチルヒドロフランおよびトルエンと比較していくらかより低いE-値を生じた。注目すべきは、溶媒としてn-ヘプタンを用い、高いE-値、E=57がアシル供与体としてメトキシ酢酸エチルを用いた場合に達成され、一方、マロン酸ジエチルの使用はこのアシル供与体について最低の観察されたE-値、E=11のみを生じたことである。この文脈において図5もまた参照。
【０２４４】
1M基質負荷を用いたCAL-B-触媒反応
【０２４５】
【化２６】
2021520807.tif 000031
【０２４６】
1 M基質負荷を用いたCAL-B-触媒反応の決定のため、1-アミノインダン(665 mg, 5.03 mmol)、メトキシ酢酸エチル(770mg, 7.09 mmol)およびCAL-B(0.20 g)を2-メチルテトラヒドロフラン(5 mL)に溶解した。反応物を60℃で攪拌した。6および26時間後にサンプルを取った。酵素を濾過し、そしてジクロロメタンで洗浄した。サンプルをアシル化した。変換を1H-NMR分光法およびHPLCを用いて行った。鏡像体過剰率をキラルHPLCによって決定した。
【０２４７】
1 M基質負荷を用いたCAL-B-触媒反応についての結果:
【０２４８】
【表４】
2021520807.tif 000032
【０２４９】
CAL-B-触媒速度論的分割がまた、阻害効果を生じることなく、高い基質濃度において可能かどうかの評価のため、1 M基質負荷を用いた反応を行った。従って、0.57 Mの濃度の分析スケールで行う反応のE-値を、1 Mの高い基質負荷で行う生物学的変換の１つと比較し、これは、同様のE-値が基質濃度に関係なく得られることを示す。
【０２５０】
1-アミノインダン誘導体を用いたCAL-B-触媒反応
【０２５１】
【化２７】
2021520807.tif 000033
【０２５２】
1-アミノインダン誘導体(1.0 eq.)のCAL-B-触媒反応のために適切な溶媒にアシル供与体(1.1 eq.)とともに溶解した。反応を5 mLの容積のねじ蓋ガラス中で行った。CAL-B(40 mg/mmolアミン)を反応溶液に加えた。26時間後、サンプルを取り、そして誘導体化した。続いて、酵素を濾過し、そしてジクロロメタンで洗浄した。変換および鏡像体過剰率をキラルHPLCによって決定した。
【０２５３】
【表５】
2021520807.tif 000034
【０２５４】
4-シアノ-1-アミノインダン(OZA-5)を用いたCAL-B-触媒反応
【０２５５】
【化２８】
2021520807.tif 000035
【０２５６】
4-シアノ-1-インダノン(OZA-5, 0.40 g, 2.55 mmol)およびヒドロキシルアミノ塩酸塩(0.27 g, 3.84 mmol)を10 mLのエタノールおよび水(1:1, v/v)に溶解した。その間、1 mLの水に溶解した水酸化ナトリウム(0.17 g, 4.51 mmol)を懸濁液に加えた。混合物を還流まで90分間加熱した。粗生成物セライト上で濾過し、そして水で洗浄した。溶媒を真空で除去した。オキシムを10 mLの酢酸に溶解した。アルゴン雰囲気下、亜鉛-粉末(0.83 g, 12.77 mmol)を加え、そして懸濁液を室温で86時間攪拌した。反応混合物セライト上で濾過し、酢酸エチルで洗浄し、そして溶媒を真空で除去した。オイルを10 mLの酢酸エチルおよび塩化水素(1:1, v/v)に溶解し、そして2 M塩化水素(2x10 mL)で抽出した。水相のpH値を10に調節し、そしてその後酢酸エチル(3x10 mL)で抽出した。有機相をブラインで洗浄し、そしてMgSO4で乾燥した。溶媒を真空で除去した。残りの溶媒をアルゴン雰囲気下、シュレンク管中で除去した。
【０２５７】
4-シアノ-1-アミノインダン(OZA-6, 0.14 g, 0.90 mmol)、メトキシ酢酸エチル(0.11 g, 0.99 mmol)およびCAL-B(60 mg)を2-メチルテトラヒドロフラン(5 mL)に溶解し、そして60℃で20 h攪拌した。サンプルを塩化メチレン中、塩化アセチル(1.1 eq)およびトリエチルアミン(1.5 eq)で１時間アセチル化した。懸濁液を塩化水素(1:1, v/v)および炭酸水素ナトリウムで洗浄した。溶媒を真空で除去した。鏡像体過剰率および変換をHPLCによって決定した。
【０２５８】
(S)-4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)
収率: 23 mg (0.15 mmol) 計算
1H-NMR (500 MHz,DMSO-d6) δ/ ppm: 1.74 (dq, 1H, 3J= 8.69, 12.62, CH2), 2.44 (ddt, 1H, 3J= 15.6, 7.8, 4J= 3.2, CH2), 2.88 (dt, 1H, 3J= 16.6, 8.4, CH2), 3.04 (ddd, 1H, 3J= 16.5, 8.7, 4J = 3.1, CH2), 4.31 (t, 1H, 3J= 7.6 Hz, NHCH), 7.40 (t, 1H, 3J= 7.6, ArmH), 7.64 (d, 1H, 3J= 7.6, Arp/oH), 7.72 (d, 1H, 3J= 7.6, Arp/oH).
13C-NMR (500 MHz, CDCl3) δ/ ppm: 148.8 (CH-C-CH2), 147.4 (CH-C-CH2), 130.9 (Ar-C), 128.2 (Ar-C), 127.5 (Ar-C), 117.9 (C≡N), 109.0 (Ar-C), 57.4 (N-CH), 37.1 (CH2), 30.0 (CH2).
MS (ESI): m/z = 159.0 [M+H]+, 298.1 [2M+H] +
【０２５９】
(R)-4-シアノ-1-インダニル-(2-メトキシアセトアミド)
収率: 47 mg (0.20 mmol)
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ/ ppm: 1.92 (dq, 1H, 3J= 8.60, 13.15, CH2), 2.69 (dtd, 1H, 3J= 13.1, 8.1, 4J= 3.6, CH2), 3.05 (dt, 1H, 3J= 16.9, 8.4, CH2), 3.22 (ddd, 1H, 3J= 16.9, 8.9, 4J = 3.5, CH2), 3.41 (s, 2H, CH3), 3.96 (d, 4J= 2.4, 2H), 5.58 (q, 1H, 3J= 8.1 Hz, NHCH), 6.73 (d, 1H, 3J= 7.8, NH), 7.31 (t, 1H, 3J= 7.7, ArmH), 7.52 (tt, 2H, 3J= 7.1, 4J= 0.9 Hz, Arp/oH).
13C-NMR (500 MHz, CDCl3) δ/ ppm: 169.5 (C=O), 147.4 (CH-C-CH2), 144.9 (CH-C-CH2), 131.7 (Ar-C), 128.9 (Ar-C), 127.8 (Ar-C), 117.6 (C≡N), 109.3 (Ar-C), 72.0 (CH2-O), 59.3 (CH3), 53.8 (N-CH), 33.4 (CH2), 29.9 (CH2).
MS (ESI): m/z = 253.1 [M+Na]+, 483.1 [2M+Na] +
IR (neat) / cm-1: 3216 (m, ν,-NH), 2920 (m, ν,-CH3), 2850 (w, ν,-O-CH3), 2222 (m, ν, -C≡N), 1654 (s, ν -C=O), 1541 (w, δ, HN-C=O-), 1447 (w, δ, -CH2), 795 (m, δ, -Ar).
EA: calculated for C13H14N2O2: C, 67.81; H, 6.13; N, 12.17. Found: C, 67.83; H, 6.21; N, 11.73.
NP-HPLC: Daicel Chiracel OB-H, CO2/イソプロパノール 95:5, 1.5 mL/min, 20℃, 210 nm, Rt1= 22.4 min
【０２６０】
CAL-Bを用いた再循環実験
【０２６１】
【化２９】
2021520807.tif 000036
【０２６２】
1-アミノインダン(67 mg, 0.50 mmol)、メトキシ酢酸イソプロピル(73 mg, 0.55 mmol)およびCAL-B(20 mg)を5 mLのトルエンに溶解し、そして60℃で攪拌した。7h後、200 μLのサンプルを取った。サンプルを塩化アセチル(9 mg, 0.11 mmol)およびトリエチルアミン(15 mg, 0.15 mmol)でアシル化した。サンプルを精製し、そして分析した。反応を数日繰り返した。
【０２６３】
【表６】
2021520807.tif 000037
【０２６４】
1-アミノインダンを用いたCAL-B量の減少
【０２６５】
【化３０】
2021520807.tif 000038
【０２６６】
1-アミノインダン(83 mg, 0.63 mmol)、メトキシ酢酸イソプロピル(91 mg, 0.69 mmol)およびCAL-B(25 mg, 13 mg, 6 mgおよび3 mg)を1.25 mLのトルエンに溶解し、そして60℃で攪拌した。0.5 h、1 hおよび3h後、100 μLのサンプルを取った。サンプルを塩化アセチル(4 mg, 0.04 mmol)およびトリエチルアミン(8 mg, 0.08 mmol)でアシル化した。サンプルを精製し、そして分析した。
【０２６７】
【表７】
2021520807.tif 000039
【０２６８】
4-シアノ-1-アミノインダン(OZA-6)を用いたCAL-B量の減少
【０２６９】
【化３１】
2021520807.tif 000040
【０２７０】
4-シアノ-1-アミノインダン(OZA-6, 37 mg, 0.23 mmol)、メトキシ酢酸エチル(30 mg, 0.25 mmol)およびCAL-B(1.18 mg)を470 μLのトルエンに溶解し、そして60℃で攪拌した。0.5 h、1 h、3 hおよび5 h後、50 μLのサンプルを取った。サンプルを塩化アセチル(1 eq)およびトリエチルアミン(1 eq)でアシル化した。サンプルを精製し、そして分析した。
【０２７１】
【表８】
2021520807.tif 000041
【０２７２】
標的アミン(S)-2の多工程合成
この特定の実施例における基質合成は、対応するインダノンから開始して行われ、そしてヒドロキシルアミンとのオキシム形成および亜鉛での還元に基づくラセミアミンへの２工程変換は、ラセミアミンOZA-を与える。続いて、アシル供与体としてメトキシ酢酸エチルを用いたリパーゼ-触媒分割を2-メチルテトラヒドロフラン中、60℃で行い、続いてN-アシル化生成物から分離を行った。酸性抽出および中和の工程を含む続く精製は、次いで所望の(S)-4-シアノ-1-アミノインダン(S)-2を５工程にわたって合計収率20%で与え、そして分割(最大理論収率50%を有する)を含んだ。得られた生成物(S)-2の鏡像体過剰率は99% eeで優れていたことが分かった。
【０２７３】
【化３２】
2021520807.tif 000042
【０２７４】
低い生体触媒負荷での生物学的変換
4-シアノ-1-アミノインダンOZA-6の5 mg/mmolの低い生体触媒負荷、および4-シアノ-1-アミノインダンOZA-6の5 mg/mmolの生体触媒負荷の存在下、アシル供与体としてのメトキシ酢酸エチルを用いた。この分割の反応経路を図6に示し、そして>98% eeの高い鏡像体過剰率が約57%の変換で達したことを示す。
【０２７５】
【化３３】
2021520807.tif 000043
【０２７６】
図6. リパーゼCAL-Bの低い生体触媒負荷での4-シアノ-1-アミノインダン(OZA-6)の分割
【０２７７】
オザニモドの新規全合成の開発に関連する実験プロトコルおよびデータ
【０２７８】
ナフタレンの還元および1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)に向かう再配置
【０２７９】
【化３４】
2021520807.tif 000044
【０２８０】
ナフタレン(10.00 g, 78 mmol, 1.00 eq)をEt2O(150 mL)に溶解する。ナトリウム(5.00 g, 217 mmol, 2.78 eq)の小片を溶液に与える。ナトリウム上の雰囲気を窒素フラッシュした。Tert.-BuOH(14.5 g, 196 mmol, 2.50 eq)をEt2O(50 mL)に溶解し、そしてナトリウム懸濁液に滴下する。室温で16 h攪拌後、反応混合物を水でクエンチし、そして酢酸エチルで抽出(3回)した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、そして真空中で溶媒から分離する。変換をNMRスペクトルによって計算する。収率: 86 %。
【０２８１】
【化３５】
2021520807.tif 000045
【０２８２】
1,4-ジヒドロナフタレン(OZA-1, 7.92 g, 60.1 mmol, 1 eq)をtert.-ブタノール(6 mL)に溶解する。カリウムtert.-ブチレート(2.5 g, 22.3 mmol, 0.4 eq)を溶液に与え、そして混合物をアルゴン雰囲気下、60℃で12 h攪拌する。反応混合物をDCM(10 mL)と混合し、そして水(15 mL)で３回洗浄する。溶媒を真空中で除去し、そして生成物をわずかに黄色がかった液体として回収した。反応制御をGCによって行い、そして生成物の純度を1H NMRによって決定し、12hの反応時間後に所望の1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)について好ましい97:3の２つの位置異性体の比を生じた。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =2.28 (m, 2 H, H-9), 2.75 (t, 2 H, H-10), 5.99 (m, 1 H, H-8), 6.42 (m, 1 H, H-7), 6.85-7.29 (m, 4 H, H-1, -2, -3, -6). 13C-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =23.2 (C-10), 27.5 (C-9), 125.9 (CH), 126.4 (CH) 126.8 (CH), 127.5 (CH), 127.8 (CH), 128.5 (CH), 134.2 (C), 135.4 (C).
【０２８３】
1,2-ジヒドロナフタレン中のC=C-二重結合の酸化的開裂
【０２８４】
【化３６】
2021520807.tif 000046
【０２８５】
1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2, 15.00 g, 115 mmol, 1.00 eq)を塩化メチレン(50 mL)に溶解し、次いで過マンガン酸カリウム溶液(2000 mL, 230 mmol, 230 mM, 4.00 eq)にゆっくりと滴下する。反応混合物を0 ℃で3 h攪拌した。水酸化ナトリウム(32 g, 800 mmol, 6.96 eq)を添加後、溶液を濾過して二酸化マンガンを分離した。ろ液を塩化メチレン(3回1000 mL)によって抽出する。水層を濃塩酸(70 mL, 840 mmol, 12 M, 7.30 eq)でpH 12に酸性化し、沈殿物を生じた。ろ過後、二酸OZA-3を70 %の収率(15.53 g, 80 mmol)で単離し得る。
m/z (M+Na): 217.0; m/z (M-H): 192.8.
1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =2.73 (t, 2 H, H-10), 3.42 (t, 2 H, H-11), 7.35 (m, 2 H, Har), 7.52 (m, 1 H, Har), 8.06 (d, 3JHH=7.7 Hz, 1 H, Har). 13C-NMR (500 MHz, DMSO): δ (ppm) =30.0 (C-10), 36.3 (C-11), 127.2 (CH), 131.2 (CH) 131.4 (CH), 131.7 (CH), 132.7 (CH), 142.8 (CH), 167.6 (C-7), 174.7 (C-12).
【０２８６】
インダン-1-オン形成下での分子内Friedel-Crafts-アシル化
【０２８７】
【化３７】
2021520807.tif 000047
【０２８８】
3-(2-カルボキシフェニル)プロピオン酸(OZA-3, 500 mg, 2.57 mmol, 1.00 eq)を硫酸(30 mL)に溶解した。反応混合物を130 ℃で2 h攪拌した。完全な反応混合物を氷(20 g)上に与えた。溶液を8℃で65 h保存し、沈殿物を生じた。ろ過後、55 %のきれいな生成物OZA-4(NMRによる分析)を単離することができた。生成物の色は無色であったべきであるが、単離した生成物は茶色であった。茶色物質はエタノールで溶解することができた。再結晶もまた可能であった。
m/z (M-H): 174.8.
1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =3.16-3.22 (m, 2 H, H-7), 3.54-3.58 (m, 2 H, H-8), 7.62 (m, 1 H, H-1), 8.03 (d, 3JHH=7.6 Hz, 1 H, H-2), 8.38 (d, 3JHH=8.0 Hz, 1 H, H-6). 13C-NMR (500 MHz, DMSO): δ (ppm) =27.4 (C-7), 36.2 (C-8), 127.6 (C-1), 128.2 (C-1) 129.5 (C-3), (C-6), 136.6 (C-2), 138.4 (C-5), 156.8 (C-4), 167.3 (C-11), 206.4 (C-9).
【０２８９】
インダノンの4-カルボキシ置換基の誘導体化
【０２９０】
【化３８】
2021520807.tif 000048
【０２９１】
4-カルボキシ-1-インダノン(OZA-4, 580 mg, 4.10 mmol, 1.00 eq)およびトリエチルアミン(600 μL, 4.30 mmol, 1.0 eq)をDMF(11 mL)に溶解し、そして0℃まで冷却した。クロロギ酸エチル(420 μL, 4.10 mmol, 1.00 eq)。反応混合物をrtで2 h攪拌した。水(3 mL)でクエンチした後、混合物をDCM(3x 7 mL)で抽出する。合わせた有機層を水(15 mL)で洗浄し、そしてMgSO4で乾燥する。溶媒を除去して茶色オイルを得た(60 %)。
m/z (M+Na): 271.1; m/z (精密質量): 271.0577.
1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =1.45 (t, 3 H, H-18), 2.77 (m, 2 H, H-7), 3.55 (m, 2 H, H-8), 4.45 (q, 2 H, H-17), 7.56 (m, 1 H, H-1), 8.05 (d, 3JHH=7.6 Hz, 1 H, H-2), 8.32 (d, 3JHH=8.0 Hz, 1 H, H-6). 13C-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =13.9 (C-18), 27.1 (C-7), 36.0 (C-8), 66.0 (C-17), 125.8 (C-1), 127.9 (C-3), 129.6 (C-6), 137.0 (C-2), 138.8 (C-5), 148.5 (C-4), 148.9 (C-11), 158.0 (C-14), 205.8 (C-9).
【０２９２】
【化３９】
2021520807.tif 000049
【０２９３】
4-カルボキシ-1-インダノン(OZA-4, 200 mg, 1.14 mmol, 1.00 eq)およびトリエチルアミン(551 μL, 5.79 mmol, 5.0 eq)をTHF(5 mL)に溶解し、そして0℃まで冷却した。クロロギ酸エチル(540 μL, 5.67 mmol, 5.00 eq)。反応混合物をrtで2 h攪拌した。水(3 mL)でクエンチした後、混合物をDCM(3x 7 mL)で抽出する。合わせた有機層を水(15 mL)で洗浄し、そしてMgSO4で乾燥する。溶媒を除去して茶色オイルを得た(85 %)。
m/z (M+Na): 271.1; m/z (精密質量): 271.0577.
1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =1.45 (t, 3 H, H-18), 2.77 (m, 2 H, H-7), 3.55 (m, 2 H, H-8), 4.45 (q, 2 H, H-17), 7.56 (m, 1 H, H-1), 8.05 (d, 3JHH=7.6 Hz, 1 H, H-2), 8.32 (d, 3JHH=8.0 Hz, 1 H, H-6). 13C-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =13.9 (C-18), 27.1 (C-7), 36.0 (C-8), 66.0 (C-17), 125.8 (C-1), 127.9 (C-3), 129.6 (C-6), 137.0 (C-2), 138.8 (C-5), 148.5 (C-4), 148.9 (C-11), 158.0 (C-14), 205.8 (C-9).
【０２９４】
【化４０】
2021520807.tif 000050
【０２９５】
混合無水物(100 mg, 0.40 mmol, 1.00 eq)をアンモニア溶液(2.5 mL, 25 %, 14.7 eq)に与え、そして60℃まで加熱した。反応混合物 をrtで24 h攪拌した。混合物をDCM(3x 5 mL)で抽出した。合わせた有機層を水(15 mL)で洗浄し、そしてMgSO4で乾燥する。溶媒を除去して茶色オイルを得た(70 %)。
m/z (M-H): 173.8.
1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =1.45 (t, 3 H, H-18), 2.77 (m, 2 H, H-7), 3.55 (m, 2 H, H-8), 4.45 (q, 2 H, H-17), 7.56 (m, 1 H, H-1), 8.05 (d, 3JHH=7.6 Hz, 1 H, H-2), 8.38 (d, 3JHH=8.0 Hz, 1 H, H-6). 13C-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =26.3 (C-7), 36.2 (C-8), 126.8 (C-1), 127.7 (H-6), 132.0 (C-2), 132.8 (C-3), 138.5 (C-5), 154.7 (C-4), 168.7 (C-11), 206.4 (C-9).
【０２９６】
【化４１】
2021520807.tif 000051
【０２９７】
得られた１級アミド(150 mg, 0.85 mmol, 1.00 eq)およびトリエチルアミン(356 μL, 2.55 mmol, 3.00 eq)をトルエン(5 mL)に懸濁した。五酸化リン(48 mg, 0.34 mmol, 0.40 eq)を加え、そして混合物を80℃まで加熱した。反応混合物を5 h攪拌した。水(3 mL)でクエンチした後、混合物をDCM(3x 7 mL)で抽出する。合わせた有機層を水(15 mL)で洗浄し、そしてMgSO4で乾燥する。溶媒を除去して標的化合物(OZA-5)の茶色オイルを得た(29 %)。
m/z (M-Na): 179.0.
1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =2.82 (m, 2 H, H-7), 3.36 (m, 2 H, H-8), 7.54 (t, 1 H, H-1), 7.91 (d, 3JHH=7.6 Hz, 1 H, H-6), 7.99 (d, 3JHH=8.0 Hz, 1 H, H-2). 13C-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =25.3 (C-7), 35.8 (C-8), 111.5 (C-3), 116.1 (C-11), 128.1 (C-6), 128.3 (C-1), 137.7 (C-2), 138.2 (C-5), 157.7 (C-4), 204.5 (C-9).
【０２９８】
２工程プロセスにおける4-シアノインダノンの還元的アミノ化
【０２９９】
【化４２】
2021520807.tif 000052
【０３００】
ケトンOZA-5(500 mg, 3.18 mmol, 1.00 eq)をEtOH(10 mL)に溶解した。塩化ヒドロキシアンモニウム(3.32 g, 47.72 mmol, 1.50 eq)を加え、そして混合物を還流まで2 h加熱した。溶媒を減圧下エバポレートし、そして中間体を酢酸(10 mL)に溶解する。溶液にZn(10.40 g, 159.1 mmol, 5.0 eq)を加える。懸濁液をAr雰囲気下、48 h攪拌する。粗生成物を塩化メチレンおよび塩酸(1 M)で抽出した(3回)。水相のpHを14に変え、そして相を塩化メチレンで抽出した(3回)。溶媒の蒸発後、生成物(2.16 g, 1.38 mmol, 42 %)を単離した。所望のラセミ4-シアノ-1-アミノインダン(OZA-6)の合成は42%の収率を生じる。
m/z (M+H): 159.0.
1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =1.70 (m, 1 H, H-7), 2.53 (m, 1 H, H-7), 2.89 (m, 2 H, H-8), 3.10 (m, 2 H, H-8), 4.35 (t, 3JHH=7.6 Hz, 1 H, H-9), 7.24 (t, 3JHH=7.6 Hz, 1 H, H-1), 7.42 (d, 3JHH=7.7 Hz, 1 H, H-2), 7.49 (d, 3JHH=7.7 Hz, 1 H, H-2). 13C-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =29.7 (C-7), 37.1 (C-8), 57.3 (C-9), 108.9 (C-3), 117.8 (C-11), 127.4 (C-1), 128.1 (C-2), 130.8 (C-6), 147.3 (C-4), 148.8 (C-5).
【０３０１】
アミドキシム形成(モデル反応)
【０３０２】
【化４３】
2021520807.tif 000053
【０３０３】
塩化ヒドロキシルアンモニウム(1.399 g, 20 mmol, 2.00 eq)を真空中で乾燥し、そしてMeOH(10 mL)、NaHCO3(1815 mg, 2.16 mmol, 2.16 eq)およびortho-トルニトリル(1170 μL, 10 mmol, 1.00 eq)に与えた。80℃で7.3 h後、反応を水(5 mL)でクエンチし、そしてCHCl3(3x 10 mL)で抽出する。合わせた有機層を水(2x 15 mL)で洗浄し、そしてMgSO4で乾燥する。溶媒を除去して以下の生成物比(1H NMRによって分析した): 9%ニトリル、72%アミドキシム、19%アミドを得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =2.39 (s, 3 H, H-7), 5.45 (s, 1 H, H-10) 7.14-7.63 (m, 4 H, Har). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ (ppm) =2.39 (s, 3 H, H-7), 5.74 (s, 2 H, H-9, H-10) 7.19-7.32 (m, 4 H, Har), 9.38 (s, 1 H, H-11). 13C-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ (ppm) =19.8, 125.4, 128.6, 128.9, 130.2, 134.3, 136.4, 152.5.
【０３０４】
オキサジアゾール複素環の形成(モデル反応)
【０３０５】
【化４４】
2021520807.tif 000054
【０３０６】
アミドキシム(105 mg, 0.7 mmol, 1.00 eq)およびアミド(前の工程から生じる、95 mg, 72 mmol, 1.03 eq)の混合物をTHF(10 mL)およびピリジン(2 mL)に溶解した。塩化パラ-フルオロ安息香酸(100 μL, 0.83 mmol, 1.19 eq)を溶液に与える。還流で66 h後、反応を水(10 mL)でクエンチし、そしてCHCl3(3x 20 mL)で抽出する。合わせた有機層を水(2x 15 mL)で洗浄し、そしてMgSO4で乾燥する。溶媒を除去して淡黄色固体を得た(1H NMRによって分析した)。精製をカラムクロマトグラフィー(1. Snap Ultra 50 mg（登録商標）;溶出液: CyHex/EtOAc 90:10 - 30:70, 2. 長さ: 16 cm; φ: 4 cm; 溶出液 CyHex/EtOAc 35:65)によって行った。精製後、無色固体(119 mg, 0.42 mmol, 95 %)を単離した。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =2.68 (s, 3 H, H-23), 7.24 (m, 2 H, H-4 & H-6), 7.35 (m, 2 H, H-19 & H-21), 7.41 (m, 1 H, H-20), 8.07 (m, 1 H, H-22), 8.24 (m, 2 H, H-1 & H-3). 13C-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) =22.3, 116.62, 120.9, 126.2, 130.2, 130.7, 13.8, 131.5, 138.4, 165.6, 169.8, 173.9. 19F-NMR (500 MHz, CDCl3): δ (ppm) = -105.3
【図１】
2021520807.tif 000060
【図２】
2021520807.tif 000061
【図３】
2021520807.tif 000062
【図４】
2021520807.tif 000063
【図５】
2021520807.tif 000064
【図６】
2021520807.tif 000065
【図７】
2021520807.tif 000066
【手続補正書】
【提出日】令和2年2月7日(2020.2.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式(S)-Iの4-置換1-アミノインダンのエナンチオ選択的生体触媒調製のためのプロセスであって:
【化１】
2021520807.tif 000067
式中
Rは、ハロゲン; -CN; -C(=O)H; -C(=N-OH)H; -C(=O)NH2; -C(=O)OH; -C(=NH)NH-OH; -C(=N-OH)NH2; および-COOR1からなる群より選ばれ、ここで、R1は、H; C1〜C8-アルキル; アリールアルキル、ここでアルキルはC1〜C8-アルキルである; -CH2-Hal、ここでHalはF、ClまたはBrである; -CH2-O-アルキル、ここでアルキルはC1〜C8-アルキルである; 置換されていてもよいアリール; および置換されていてもよいヘテロアリールからなる群より選ばれる;
Yは、H; -C(=O)R1y; および-C(=O)OR1yからなる群より選ばれ、ここでR1yは、H; C1〜C8-アルキル; アリールアルキル、ここでアルキルはC1〜C8-アルキルである; -CH2-Hal、ここでHalはF、ClまたはBrである; -CH2-O-アルキル、ここでアルキルはC1〜C8-アルキルである; 置換されていてもよいアリール; および置換されていてもよいヘテロアリールからなる群より選ばれる;
リパーゼの存在下、エナンチオ選択的アシル化を介する一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミまたはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物の分割
【化２】
2021520807.tif 000068
式中、Rは上記で定義した通りである;
を介する、プロセス。
【請求項２】
一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミアミン混合物またはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物がアシル供与体とともにリパーゼに添加されることを特徴とする、請求項１に記載のプロセス。
【請求項３】
以下の反応スキームに従って、一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミアミン混合物またはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物がアシル供与体とともに生体触媒に添加され、ここで生体触媒がリパーゼであることを特徴とする、請求項１または２に記載のプロセス
【化４】
2021520807.tif 000069
式中
Rは請求項１で定義した通りであり、好ましくはRは-CN、-COOMe、または-Brであり;
R2はC1〜C20-アルキル基; C1〜C20-アルコキシ基; 置換されていてもよいC6〜C20-アリール基; 置換されていてもよい5-または6-員ヘテロアリール基; ハロゲンおよび式-COOR4のアシル基からなる群より選ばれ、ここでR4はH、およびC1〜C8-アルキルから選ばれ、好ましくは-CH3または-C2H5である; 好ましくはR2はメトキシまたは-COOC2H5または-Clであり;
R3は、C1〜C8-またはC1〜C6-アルキル基、好ましくはR3はC1〜C4-アルキル基であり、より好ましくはR3はメチル、エチルまたはイソプロピルである; -CH2-Hal、ここでHalは-F、-Clまたは-Brを表す; -CH2-O-アルキル、ここでアルキルはC1〜C8-アルキルを表す; 置換されていてもよいアリール基; および置換されていてもよい5-または6-員ヘテロアリール基から選ばれ;
ここで、反応は、有機溶媒の存在下または無溶媒条件下、有機媒体中で行われる。
【請求項４】
Rが-Br、-CNおよび-COOCH3からなる群より選ばれることを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項５】
Rが-CNであるか、またはRが-CNでありかつYがHであることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項６】
任意の追加の溶媒の不在下で行われることを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項７】
追加の有機溶媒の存在下で行われることを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項８】
有機溶媒がn-ヘプタン、2-メトキシ-2-メチルプロパン、メチル-tert.-ブチルエーテル、2-メチル-テトラヒドロフラン、メチルシクロヘキサン、トルエンおよびそれらの任意の組み合わせからなる群より選ばれる少なくとも１種であり、好ましくは有機溶媒がn-ヘプタンおよび／またはメチル-tert.-ブチルエーテルであることを特徴とする、請求項７に記載のプロセス。
【請求項９】
リパーゼがCandida antarcticaからのリパーゼB(CAL-B)、Candida rugosaからのリパーゼ(CRリパーゼ)、Burkholderia cepaciaからのリパーゼ(BCリパーゼ)およびBurkholderia cepaciaからのリパーゼPSからなる群より選ばれることを特徴とする、請求項１〜８のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項１０】
アシル供与体がメトキシ酢酸エチル、マロン酸ジエチル、およびメトキシ酢酸イソプロピルからなる群より選ばれることを特徴とする、請求項１〜９のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項１１】
反応が以下の条件a)、b)またはc)のうちの１つの条件下で行われるか、または反応が条件a)およびb); a)およびc); b)およびc); ならびにa)、b)およびc)から選ばれる条件下で行われることを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか１項に記載のプロセス:
a)  所望の4-置換1-アミノインダンの99 % eeに達するのに十分な時間、好ましくは30分〜48時間、より好ましくは少なくとも5 h;
b)  10〜90℃の温度範囲、好ましくは40〜60℃;
c)  1 mmolの基質あたり1〜50 mg、好ましくは5 mgのCAL-Bの基質:酵素比。
【請求項１２】
反応が、溶媒としてn-ヘプタンの存在下、溶液中で行われる、請求項１１に記載のプロセス。
【請求項１３】
一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミ混合物またはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物が、対応する4-置換1-インダノンから
i)  特に4-置換1-インダノンのヒドロキシルアミンとの縮合によるケトオキシムの形成、続く
ii)  ケトオキシムのラセミアミン混合物への還元によって得られるかまたは得られ得ることを特徴とする、請求項１〜１２のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項１４】
ケトオキシムのラセミアミン混合物への還元が亜鉛の存在下で行われることを特徴とする、請求項１３に記載のプロセス。
【請求項１５】
酵素的アシル化から生じる所望でないエナンチオマーが回収および再循環／再使用されることを特徴とする、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項１６】
Rが-CNでありかつYが水素である一般式(S)-IIおよび(R)-IIの4-置換インダン-1-アミン化合物のラセミまたはエナンチオマー的に豊富なアミン混合物が、溶媒としてのn-ヘプタンおよび／またはメチル-tert.-ブチルエーテル中、CAL-Bの存在下、メトキシ酢酸イソプロピルでアシル化されることを特徴とする、請求項１〜１５のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項１７】
オザニモドの調製のためのプロセスであって、
I  ナフタレンを提供する、
II  ナフタレンを1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)および／または1,4-ジヒドロナフタレン(OZA-1)へと還元する、
IIa  必要に応じて1,4-ジヒドロナフタレン(OZA-1)を1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)へと再配置する、
III  1,2-ジヒドロナフタレン(OZA-2)中のエチレン性C=C-二重結合を開裂してジカルボン酸(OZA-3)を提供する、
IV  工程IIIの生成物(OZA-3)の4-カルボキシ-1-インダノン(OZA-4)への環化、
V  4-カルボキシ-1-インダノン(OZA-4)の4-シアノ-1-インダノン(OZA-5)への誘導体化、
VI  4-シアノ-1-インダノン(OZA-5)をS-配置の4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)へと直接またはラセミ体を介して変換する、
VII  (S)-4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)のアミノ基を保護基で保護する、
VIII  シアノ基をアミドキシム基へと変換する、
IX  アミドキシム基を3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸または3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸誘導体との縮合を介して1,4-オキサジアゾール複素環基へと変換する、
X  アミノ基上の保護基をヒドロキシエチル基で置換してオザニモドを生成する
工程を所定の順序で含むかまたはこれら工程からなり、
ここで、工程VIにおける4-シアノ-1-インダノン(OZA-5)のS-配置の4-シアノ-1-アミノインダン((S)-2)への変換が、請求項１で定義した、リパーゼの存在下、エナンチオ選択的アシル化を介するラセミまたはエナンチオマー的に豊富な4-シアノインダン-1-アミン化合物の分割によって行われる、プロセス。
【請求項１８】
VI  請求項１に記載のプロセスに従ってラセミまたはエナンチオマー的に豊富な4-シアノ置換インダン-1-アミン化合物から(S)-4-シアノ-1-アミノインダンを調製する、
VII  4-シアノ-1-アミノインダン(S)-2のアミノ基を保護基で保護する、
VIII  シアノ基をアミドキシム基へと変換する、
IX  アミドキシム基を3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸または3-シアノ-4-イソプロポキシ安息香酸誘導体との縮合を介して1,4-オキサジアゾール複素環基へと変換する、
X  アミノ基上の保護基をヒドロキシエチル基で置換してオザニモドを生成する
工程を所定の順序で含むかまたはこれら工程からなる、オザニモドの調製のためのプロセス。
【国際調査報告】
2021520807.tif 000070
2021520807.tif 000071
2021520807.tif 000072
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