(57)【要約】本開示は、外傷性視神経症（ＴＯＮ）を処置又は予防する新規の方法、ＴＯＮを有する対象の視覚機能を改善する方法、網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の生存又は神経突起伸長を促進する方法、及び外傷性損傷を経験した対象がＴＯＮを有する又は発症するリスクを低減する方法を提供する。前記方法は、有効量の芳香族カチオン性ペプチドを対象に投与することを含む。【選択図】図１Ａ
2021531272.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
必要とする対象の外傷性視神経症（ＴＯＮ）を処置又は予防する方法であって、前記対象に治療的有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩を投与することを含む方法。
【請求項２】
前記対象がＴＯＮを有すると診断されている、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＴＯＮが前記対象の直接損傷又は間接損傷に起因する、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記直接又は間接損傷が、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び前記対象の視神経の損傷からなる群から選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記ペプチドが損傷前に投与される、請求項３又は４に記載の方法。
【請求項６】
前記ペプチドが損傷直後に投与される、請求項３又は４に記載の方法。
【請求項７】
前記ペプチドが、前記損傷後約２時間以内、約６時間以内、約１２時間以内、又は約２４時間以内に投与される、請求項３又は４に記載の方法。
【請求項８】
前記ペプチドが２週間以上にわたって毎日投与される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記ペプチドが１２週間以上にわたって毎日投与される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記処置又は予防が、視力喪失、霧視、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症のうち１つ又は複数を含む、ＴＯＮの１つ又は複数の徴候又は症状の処置又は予防を含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記対象が哺乳動物である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記哺乳動物の対象がヒトである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ペプチドが、経口、局所、鼻腔内、全身、静脈内、皮下、腹腔内、皮内、眼内、点眼、イオン導入、経粘膜、硝子体内、又は筋肉内により投与される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記対象に追加処置を別々に、連続的に、又は同時に投与することを更に含む、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記追加処置が、治療薬の投与を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記治療薬が、ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１からなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＴＮＦα阻害剤がエタネルセプトである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記追加処置が、前記対象の深部体温を低下させることを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
前記対象の深部体温を約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記対象において低体温を誘発する、請求項１８又は１９に記載の方法。
【請求項２１】
ペプチドと追加の治療的処置の組み合わせが、ＴＯＮの予防又は処置において相乗効果を有する、請求項１４〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記薬学的に許容される塩が、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸（「モノＨＣｌ」）塩、ビス塩酸（「ビスＨＣｌ」）塩、トリ塩酸（「トリＨＣｌ」）塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記対象に投与するために配合される前記ペプチドの前記薬学的に許容される塩が、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
外傷性視神経症（ＴＯＮ）を有する対象の視覚機能を改善する方法であって、前記対象に、治療的有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩を投与することを含む方法。
【請求項２５】
前記対象が直接損傷又は間接損傷を経験している、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記直接又は間接損傷が、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び前記対象の視神経の損傷からなる群から選択される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記ペプチドが損傷直後に投与される、請求項２５又は２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記ペプチドが、前記損傷後約２時間以内、約６時間以内、約１２時間以内、又は約２４時間以内に投与される、請求項２５又は２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記ペプチドが２週間以上にわたって毎日投与される、請求項２４〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記ペプチドが１２週間以上にわたって毎日投与される、請求項２４〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
前記視覚機能が、パターン網膜電図（ＰＥＲＧ）、最高矯正視力（ＢＶＣＡ）の測定、網膜電図（ＥＲＧ）、及び光干渉断層撮影（ＯＣＴ）のうち１つ又は複数によって評価される、請求項２４〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
前記視覚機能の改善が、未処置の対照と比較しての、視力、ＢＶＣＡ、ＯＣＴで測定される網膜の厚さ、ＰＥＲＧ振幅、ＥＲＧ振幅、ＥＲＧ潜時、視力喪失、霧視、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症のうち任意の１つ又は複数の改善を含む、請求項２４〜３１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
前記対象が哺乳動物である、請求項２４〜３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
前記哺乳動物の対象がヒトである、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記ペプチドが、経口、局所、鼻腔内、全身、静脈内、皮下、腹腔内、皮内、眼内、点眼、イオン導入、経粘膜、硝子体内、又は筋肉内により投与される、請求項２４〜３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
前記対象に追加処置を別々に、連続的に、又は同時に投与することを更に含む、請求項２４〜３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
前記追加処置が、治療薬の投与を含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記治療薬が、ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１からなる群から選択される、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記ＴＮＦα阻害剤がエタネルセプトである、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記追加処置が、前記対象の深部体温を低下させることを含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項４１】
前記対象の深部体温を約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記対象において低体温を誘発する、請求項４１又は４２に記載の方法。
【請求項４３】
ペプチドと追加の治療的処置の組み合わせが、視覚機能の改善において相乗効果を有する、請求項３６〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
前記薬学的に許容される塩が、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸（「モノＨＣｌ」）塩、ビス塩酸（「ビスＨＣｌ」）塩、トリ塩酸（「トリＨＣｌ」）塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む、請求項２４〜４３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４５】
前記対象に投与するために配合される前記ペプチドの前記薬学的に許容される塩が、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である、請求項２４〜４３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４６】
網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の生存又は神経突起伸長を促進する方法であって、ＲＧＣに有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩を接触させることを含む方法。
【請求項４７】
前記ＲＧＣがｉｎ  ｖｉｔｒｏに存在する、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記ＲＧＣが、ＴＯＮを有する対象に存在する、請求項４６に記載の方法。
【請求項４９】
前記対象が哺乳動物である、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
哺乳動物の対象がヒトである、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記対象に追加処置を別々に、連続的に、又は同時に投与することを更に含む、請求項４６〜５０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５２】
前記追加処置が、治療薬の投与を含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記治療薬が、ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１からなる群から選択される、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記ＴＮＦα阻害剤がエタネルセプトである、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記追加処置が、前記対象の深部体温を低下させることを含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記対象の深部体温を約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記対象において低体温を誘発する、請求項５４又は５５に記載の方法。
【請求項５８】
ペプチドと追加の治療的処置の組み合わせが、ＲＧＣの生存又は神経突起伸長の促進において相乗効果を有する、請求項５１〜５７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５９】
前記薬学的に許容される塩が、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸（「モノＨＣｌ」）塩、ビス塩酸（「ビスＨＣｌ」）塩、トリ塩酸（「トリＨＣｌ」）塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む、請求項４６〜５８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６０】
前記対象に投与するために配合される前記ペプチドの前記薬学的に許容される塩が、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である、請求項４６〜５８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６１】
必要とする対象の外傷性視神経症（ＴＯＮ）を処置又は予防する薬剤の調製における組成物の使用であって、前記組成物が、治療的有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩を含む使用。
【請求項６２】
前記対象がＴＯＮを有すると診断されている、請求項６１に記載の使用。
【請求項６３】
前記ＴＯＮが前記対象の直接損傷又は間接損傷に起因する、請求項６１又は６２に記載の使用。
【請求項６４】
前記直接又は間接損傷が、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び前記対象の視神経の損傷からなる群から選択される、請求項６３に記載の使用。
【請求項６５】
前記ペプチドが損傷前に投与されることが意図される、請求項６３又は６４に記載の使用。
【請求項６６】
前記ペプチドが損傷直後に投与されることが意図される、請求項６３又は６４に記載の使用。
【請求項６７】
前記ペプチドが、前記損傷後約２時間以内、約６時間以内、約１２時間以内、又は約２４時間以内に投与されることが意図される、請求項６３又は６４に記載の使用。
【請求項６８】
前記ペプチドが２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される、請求項６１〜６７のいずれか１項に記載の使用。
【請求項６９】
前記ペプチドが１２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される、請求項６１〜６７のいずれか１項に記載の使用。
【請求項７０】
前記処置又は予防が、視力喪失、霧視、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症のうち１つ又は複数を含む、ＴＯＮの１つ又は複数の徴候又は症状の処置又は予防を含む、請求項６１〜６９のいずれか１項に記載の使用。
【請求項７１】
前記対象が哺乳動物である、請求項６１〜７０のいずれか１項に記載の使用。
【請求項７２】
前記哺乳動物の対象がヒトである、請求項７１に記載の使用。
【請求項７３】
前記ペプチドが、経口、局所、鼻腔内、全身、静脈内、皮下、腹腔内、皮内、眼内、点眼、イオン導入、経粘膜、硝子体内、又は筋肉内投与のために配合される、請求項６１〜７２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項７４】
前記ペプチドが追加処置と別々に、連続的に、又は同時に使用されることが意図される、請求項６１〜７３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項７５】
前記追加処置が、治療薬の使用を含む、請求項７４に記載の使用。
【請求項７６】
前記治療薬が、ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１からなる群から選択される、請求項７５に記載の使用。
【請求項７７】
前記ＴＮＦα阻害剤がエタネルセプトである、請求項７６に記載の使用。
【請求項７８】
前記追加処置が、前記対象の深部体温を低下させることを含む、請求項７４に記載の使用。
【請求項７９】
前記対象の深部体温を約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる、請求項７８に記載の使用。
【請求項８０】
前記対象において低体温を誘発する、請求項７８又は７９に記載の使用。
【請求項８１】
ペプチドと追加の治療的処置の組み合わせが、ＴＯＮの予防又は処置において相乗効果を有する、請求項７４〜８０のいずれか１項に記載の使用。
【請求項８２】
前記薬学的に許容される塩が、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸（「モノＨＣｌ」）塩、ビス塩酸（「ビスＨＣｌ」）塩、トリ塩酸（「トリＨＣｌ」）塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む、請求項６１〜８１のいずれか１項に記載の使用。
【請求項８３】
前記対象に投与するために配合される前記ペプチドの前記薬学的に許容される塩が、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である、請求項６１〜８１のいずれか１項に記載の使用。
【請求項８４】
外傷性視神経症（ＴＯＮ）を有する対象の視覚機能を改善する薬剤の調製における組成物の使用であって、前記組成物が、治療的有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩を含む使用。
【請求項８５】
前記対象が直接損傷又は間接損傷を経験している、請求項８４に記載の使用。
【請求項８６】
前記直接又は間接損傷が、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び前記対象の視神経の損傷からなる群から選択される、請求項８５に記載の使用。
【請求項８７】
前記ペプチドが損傷直後に投与されることが意図される、請求項８５又は８６に記載の使用。
【請求項８８】
前記ペプチドが、前記損傷後約２時間以内、約６時間以内、約１２時間以内、又は約２４時間以内に投与されることが意図される、請求項８５又は８６に記載の使用。
【請求項８９】
前記ペプチドが２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される、請求項８４〜８８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項９０】
前記ペプチドが１２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される、請求項８４〜８８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項９１】
前記視覚機能が、パターン網膜電図（ＰＥＲＧ）、最高矯正視力（ＢＶＣＡ）の測定、網膜電図（ＥＲＧ）、及び光干渉断層撮影（ＯＣＴ）のうち１つ又は複数によって評価される、請求項８４〜９０のいずれか１項に記載の使用。
【請求項９２】
前記視覚機能の改善が、未処置の対照と比較しての、視力、ＢＶＣＡ、ＯＣＴで測定される網膜の厚さ、ＰＥＲＧ振幅、ＥＲＧ振幅、ＥＲＧ潜時、視力喪失、霧視、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症のうち任意の１つ又は複数の改善を含む、請求項８４〜９１のいずれか１項に記載の使用。
【請求項９３】
前記対象が哺乳動物である、請求項８４〜９２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項９４】
前記哺乳動物の対象がヒトである、請求項９３に記載の使用。
【請求項９５】
前記ペプチドが、経口、局所、鼻腔内、全身、静脈内、皮下、腹腔内、皮内、眼内、点眼、イオン導入、経粘膜、硝子体内、又は筋肉内により投与されることが意図される、請求項８４〜９４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項９６】
前記ペプチドが追加処置と別々に、連続的に、又は同時に使用されることが意図される、請求項８４〜９５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項９７】
前記追加処置が、治療薬の使用を含む、請求項９６に記載の使用。
【請求項９８】
前記治療薬が、ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１からなる群から選択される、請求項９７に記載の使用。
【請求項９９】
前記ＴＮＦα阻害剤がエタネルセプトである、請求項９８に記載の使用。
【請求項１００】
前記追加処置が、前記対象の深部体温を低下させることを含む、請求項９６に記載の使用。
【請求項１０１】
前記対象の深部体温を約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる、請求項１００に記載の使用。
【請求項１０２】
前記対象において低体温を誘発する、請求項１００又は１０１に記載の使用。
【請求項１０３】
ペプチドと追加の治療的処置の組み合わせが、視覚機能の改善において相乗効果を有する、請求項９６〜１０２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１０４】
前記薬学的に許容される塩が、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸（「モノＨＣｌ」）塩、ビス塩酸（「ビスＨＣｌ」）塩、トリ塩酸（「トリＨＣｌ」）塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む、請求項８４〜１０３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１０５】
前記対象に投与するために配合される前記ペプチドの前記薬学的に許容される塩が、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である、請求項８４〜１０３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１０６】
網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の生存又は神経突起伸長を促進する薬剤の調製における組成物の使用であって、前記組成物が、有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩を含む使用。
【請求項１０７】
前記ＲＧＣがｉｎ  ｖｉｔｒｏに存在する、請求項１０６に記載の使用。
【請求項１０８】
前記ＲＧＣが、ＴＯＮを有する対象に存在する、請求項１０６に記載の使用。
【請求項１０９】
前記対象が哺乳動物である、請求項１０８に記載の使用。
【請求項１１０】
前記哺乳動物の対象がヒトである、請求項１０９に記載の使用。
【請求項１１１】
前記ペプチドが追加処置と別々に、連続的に、又は同時に使用されることが意図される、請求項１０６〜１１０のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１１２】
前記追加処置が、治療薬の使用を含む、請求項１１１に記載の使用。
【請求項１１３】
前記治療薬が、ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１からなる群から選択される、請求項１１２に記載の使用。
【請求項１１４】
前記ＴＮＦα阻害剤がエタネルセプトである、請求項１１３に記載の使用。
【請求項１１５】
前記追加処置が、深部体温を低下させることを含む、請求項１１４に記載の使用。
【請求項１１６】
前記深部体温を約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる、請求項１１５に記載の使用。
【請求項１１７】
低体温を誘発する、請求項１１４又は１１５に記載の使用。
【請求項１１８】
ペプチドと追加の治療的処置の組み合わせが、ＲＧＣの生存又は神経突起伸長の促進において相乗効果を有する、請求項１１１〜１１７のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１１９】
前記薬学的に許容される塩が、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸（「モノＨＣｌ」）塩、ビス塩酸（「ビスＨＣｌ」）塩、トリ塩酸（「トリＨＣｌ」）塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む、請求項１０６〜１１８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１２０】
前記対象に投与するために配合される前記ペプチドの前記薬学的に許容される塩が、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である、請求項１０６〜１１８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１２１】
必要とする対象の外傷性視神経症（ＴＯＮ）の処置又は予防に使用するための、ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩。
【請求項１２２】
前記対象がＴＯＮを有すると診断されている場合に使用するための、請求項１２１に記載のペプチド。
【請求項１２３】
前記ＴＯＮが、前記対象の直接損傷又は間接損傷に起因する場合に使用するための、請求項１２１又は１２２に記載のペプチド。
【請求項１２４】
前記直接又は間接損傷が、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び前記対象の視神経の損傷からなる群から選択される場合に使用するための、請求項１２３に記載のペプチド。
【請求項１２５】
前記ペプチドが損傷前に投与されることが意図される場合に使用するための、請求項１２３又は１２４に記載のペプチド。
【請求項１２６】
前記ペプチドが損傷直後に投与されることが意図される場合に使用するための、請求項１２３又は１２４に記載のペプチド。
【請求項１２７】
前記ペプチドが、前記損傷後約２時間以内、約６時間以内、約１２時間以内、又は約２４時間以内に投与されることが意図される場合に使用するための、請求項１２３又は１２４に記載のペプチド。
【請求項１２８】
前記ペプチドが２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される場合に使用するための、請求項１２１〜１２７のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１２９】
前記ペプチドが１２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される場合に使用するための、請求項１２１〜１２７のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１３０】
前記処置又は予防が、視力喪失、霧視、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症のうち１つ又は複数を含む、ＴＯＮの１つ又は複数の徴候又は症状の処置又は予防を含む場合に使用するための、請求項１２１〜１２９のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１３１】
前記対象が哺乳動物である場合に使用するための、請求項１２１〜１３０のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１３２】
前記哺乳動物の対象がヒトである場合に使用するための、請求項１３１に記載のペプチド。
【請求項１３３】
前記ペプチドが、経口、局所、鼻腔内、全身、静脈内、皮下、腹腔内、皮内、眼内、点眼、イオン導入、経粘膜、硝子体内、又は筋肉内投与のために配合される場合に使用するための、請求項１２１〜１３２のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１３４】
前記ペプチドが追加処置と別々に、連続的に、又は同時に使用されることが意図される場合に使用するための、請求項１２１〜１３３のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１３５】
前記追加処置が、治療薬の使用を含む場合に使用するための、請求項１３４に記載のペプチド。
【請求項１３６】
前記治療薬が、ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１からなる群から選択される場合に使用するための、請求項１３５に記載のペプチド。
【請求項１３７】
前記ＴＮＦα阻害剤がエタネルセプトである場合に使用するための、請求項に１３６記載のペプチド。
【請求項１３８】
前記追加処置が、前記対象の深部体温を低下させることを含む場合に使用するための、請求項１３４に記載のペプチド。
【請求項１３９】
前記対象の深部体温を約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる場合に使用するための、請求項１３８に記載のペプチド。
【請求項１４０】
前記対象において低体温を誘発する場合に使用するための、請求項１３８又は１３９に記載のペプチド。
【請求項１４１】
ペプチドと追加の治療的処置の組み合わせが、ＴＯＮの予防又は処置において相乗効果を有する場合に使用するための、請求項１３４〜１４０のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１４２】
前記薬学的に許容される塩が、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸（「モノＨＣｌ」）塩、ビス塩酸（「ビスＨＣｌ」）塩、トリ塩酸（「トリＨＣｌ」）塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む場合に使用するための、請求項１２１〜１４１のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１４３】
前記対象に投与するために配合される前記ペプチドの前記薬学的に許容される塩が、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である場合に使用するための、請求項１２１〜１４１のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１４４】
外傷性視神経症（ＴＯＮ）を有する対象の視覚機能の改善に使用するための、ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩。
【請求項１４５】
前記対象が直接損傷又は間接損傷を経験している場合に使用するための、請求項１４４に記載のペプチド。
【請求項１４６】
前記直接又は間接損傷が、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び前記対象の視神経の損傷からなる群から選択される場合に使用するための、請求項１４５に記載のペプチド。
【請求項１４７】
前記ペプチドが損傷直後に投与されることが意図される場合に使用するための、請求項１４５又は１４６に記載のペプチド。
【請求項１４８】
前記ペプチドが、前記損傷後約２時間以内、約６時間以内、約１２時間以内、又は約２４時間以内に投与されることが意図される場合に使用するための、請求項１４５又は１４６に記載のペプチド。
【請求項１４９】
前記ペプチドが２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される場合に使用するための、請求項１４４〜１４８のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１５０】
前記ペプチドが１２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される場合に使用するための、請求項１４４〜１４８のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１５１】
前記視覚機能が、パターン網膜電図（ＰＥＲＧ）、最高矯正視力（ＢＶＣＡ）の測定、網膜電図（ＥＲＧ）、及び光干渉断層撮影（ＯＣＴ）のうち１つ又は複数によって評価される場合に使用するための、請求項１４４〜１５０のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１５２】
前記視覚機能の改善が、未処置の対照と比較しての、視力、ＢＶＣＡ、ＯＣＴで測定される網膜の厚さ、ＰＥＲＧ振幅、ＥＲＧ振幅、ＥＲＧ潜時、視力喪失、霧視、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症のうち任意の１つ又は複数の改善を含む場合に使用するための、請求項１４４〜１５１のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１５３】
前記対象が哺乳動物である場合に使用するための、請求項１４４〜１５２のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１５４】
前記哺乳動物の対象がヒトである、請求項１５３に記載のペプチド。
【請求項１５５】
前記ペプチドが、経口、局所、鼻腔内、全身、静脈内、皮下、腹腔内、皮内、眼内、点眼、イオン導入、経粘膜、硝子体内、又は筋肉内により投与されることが意図される場合に使用するための、請求項１４４〜１５４のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１５６】
前記ペプチドが追加処置と別々に、連続的に、又は同時に使用されることが意図される場合に使用するための、請求項１４４〜１５５のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１５７】
前記追加処置が、治療薬の使用を含む場合に使用するための、請求項１５６に記載のペプチド。
【請求項１５８】
前記治療薬が、ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１からなる群から選択される場合に使用するための、請求項１５７に記載のペプチド。
【請求項１５９】
前記ＴＮＦα阻害剤がエタネルセプトである場合に使用するための、請求項１５８に記載のペプチド。
【請求項１６０】
前記追加処置が、前記対象の深部体温を低下させることを含む場合に使用するための、請求項１５６に記載のペプチド。
【請求項１６１】
前記対象の深部体温を約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる場合に使用するための、請求項１６０に記載のペプチド。
【請求項１６２】
前記対象において低体温を誘発する場合に使用するための、請求項１６０又は１６１に記載のペプチド。
【請求項１６３】
ペプチドと追加の治療的処置の組み合わせが、視覚機能の改善において相乗効果を有する場合に使用するための、請求項１５６〜１６２のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１６４】
前記薬学的に許容される塩が、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸（「モノＨＣｌ」）塩、ビス塩酸（「ビスＨＣｌ」）塩、トリ塩酸（「トリＨＣｌ」）塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む場合に使用するための、請求項１４４〜１６３のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１６５】
前記対象に投与するために配合される前記ペプチドの前記薬学的に許容される塩が、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である場合に使用するための、請求項１４４〜１６３のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１６６】
網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の生存又は神経突起伸長の促進に使用するための、ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩。
【請求項１６７】
前記ＲＧＣがｉｎ  ｖｉｔｒｏに存在する場合に使用するための、請求項１６６に記載のペプチド。
【請求項１６８】
前記ＲＧＣが、ＴＯＮを有する対象に存在する場合に使用するための、請求項１６６に記載のペプチド。
【請求項１６９】
前記対象が哺乳動物である場合に使用するための、請求項１６８に記載のペプチド。
【請求項１７０】
前記哺乳動物の対象がヒトである場合に使用するための、請求項１６９に記載のペプチド。
【請求項１７１】
前記ペプチドが追加処置と別々に、連続的に、又は同時に使用されることが意図される場合に使用するための、請求項１６６〜１７０のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１７２】
前記追加処置が、治療薬の使用を含む場合に使用するための、請求項１７１に記載のペプチド。
【請求項１７３】
前記治療薬が、ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１からなる群から選択される場合に使用するための、請求項１７２に記載のペプチド。
【請求項１７４】
前記ＴＮＦα阻害剤がエタネルセプトである場合に使用するための、請求項１７３に記載のペプチド。
【請求項１７５】
前記追加処置が、深部体温を低下させることを含む場合に使用するための、請求項１７４に記載のペプチド。
【請求項１７６】
前記深部体温を約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる、請求項１７５に記載のペプチド。
【請求項１７７】
低体温を誘発する場合に使用するための、請求項１７５又は１７６に記載のペプチド。
【請求項１７８】
ペプチドと追加の治療的処置の組み合わせが、ＲＧＣの生存又は神経突起伸長の促進において相乗効果を有する場合に使用するための、請求項１７１〜１７７のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１７９】
前記薬学的に許容される塩が、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸（「モノＨＣｌ」）塩、ビス塩酸（「ビスＨＣｌ」）塩、トリ塩酸（「トリＨＣｌ」）塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む場合に使用するための、請求項１６６〜１７８のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１８０】
前記対象に投与するために配合される前記ペプチドの前記薬学的に許容される塩が、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である場合に使用するための、請求項１６６〜１７８のいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項１８１】
外傷性損傷を経験した対象においてＴＯＮのリスクを低減する方法であって、治療的有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む方法。
【請求項１８２】
前記外傷性損傷が直接損傷又は間接損傷である、請求項１８１に記載の方法。
【請求項１８３】
前記直接又は間接損傷が、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び前記対象の視神経の損傷からなる群から選択される、請求項１８２に記載の方法。
【請求項１８４】
前記ペプチドが前記外傷性損傷直後に投与される、請求項１８１〜１８３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８５】
前記ペプチドが、前記外傷性損傷後約２時間以内、約６時間以内、約１２時間以内、又は約２４時間以内に投与される、請求項１８１〜１８３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８６】
前記ペプチドが２週間以上にわたって毎日投与される、請求項１８１〜１８５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８７】
前記ペプチドが１２週間以上にわたって毎日投与される、請求項１８１〜１８５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８８】
前記対象が哺乳動物である、請求項１８１〜１８７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８９】
前記哺乳動物の対象がヒトである、請求項１８８に記載の方法。
【請求項１９０】
前記ペプチドが、経口、局所、鼻腔内、全身、静脈内、皮下、腹腔内、皮内、眼内、点眼、イオン導入、経粘膜、硝子体内、又は筋肉内により投与される、請求項１８１〜１８９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９１】
前記対象に追加処置を別々に、連続的に、又は同時に投与することを更に含む、請求項１８１〜１９０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９２】
前記追加処置が、治療薬の投与を含む、請求項１９１に記載の方法。
【請求項１９３】
前記治療薬が、ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１からなる群から選択される、請求項１９２に記載の方法。
【請求項１９４】
前記ＴＮＦα阻害剤がエタネルセプトである、請求項１９３に記載の方法。
【請求項１９５】
前記追加処置が、前記対象の深部体温を低下させることを含む、請求項１９１に記載の方法。
【請求項１９６】
前記対象の深部体温を約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる、請求項１９５に記載の方法。
【請求項１９７】
前記対象において低体温を誘発する、請求項１９５又は１９６に記載の方法。
【請求項１９８】
ペプチドと追加の治療的処置の組み合わせが、ＴＯＮの予防又は処置において相乗効果を有する、請求項１９１〜１９７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９９】
前記薬学的に許容される塩が、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸（「モノＨＣｌ」）塩、ビス塩酸（「ビスＨＣｌ」）塩、トリ塩酸（「トリＨＣｌ」）塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む、請求項１８１〜１９８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２００】
前記対象に投与するために配合される前記ペプチドの前記薬学的に許容される塩が、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である、請求項１８１〜１９８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０１】
前記カリウムチャネル遮断薬が４−アミノピリジン（４−ＡＰ）である、請求項１６、３８、５３、若しくは１９３のいずれか１項に記載の方法、又は請求項７６、９８、若しくは１１３のいずれか１項に記載の使用、又は請求項１３６、１５８、若しくは１７３のいずれか１項に記載のペプチド。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［関連出願の相互参照］
本出願は、２０１８年７月１６日に出願された米国特許出願第６２／６９８，７４２号明細書に対する優先権の利益を主張し、その全体が本明細書に援用される。
【０００２】
本技術は、概して、外傷性視神経症（ＴＯＮ）を改善又は処置する組成物及び方法に関する。更に本技術は、有効量の芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、又はＰｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、又はＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を、ＴＯＮを患う、又はＴＯＮのリスクがある対象に投与することに関する。
【背景技術】
【０００３】
以下の説明は読者の理解を助けるために提供している。提供する情報又は引用する参考文献のいずれも、本明細書に開示する組成物及び方法に対する先行技術であると認められていない。
【０００４】
外傷性視神経症（ＴＯＮ）は外傷性損傷による視神経の損傷に伴うまれな視神経症で、視力喪失に関わる。ＴＯＮは重度の中心視野喪失に至ることも多く、最終的な視覚予後は患者の基本的な視力に大きく左右される。その他の予後不良の要因には、意識消失、４８時間後の視力改善なし、視覚誘発反応の欠如、及び神経画像における視神経管骨折の痕跡などがある。ＴＯＮは多系統外傷や重度の脳損傷を伴う意識消失がある場合に最も多く生じる。ＴＯＮに至りやすい損傷に、自動車や自転車の事故による転倒や減速損傷などがある。
ＴＯＮは外傷性損傷の部位又は機序によって分類される。ＴＯＮに至る損傷の例として、視神経の外傷、頭部外傷、眼窩内損傷、管内損傷、及び／又は頭蓋内損傷などがある。最も一般的な損傷部位は視神経管内部である。ＴＯＮにおける外傷性損傷の種類には直接と間接の両方がある。直接ＴＯＮでは、視神経損傷は、正常な組織平面を横断する頭部又は眼窩の外傷によって引き起こされ、視神経の解剖学的構造及び機能が破壊される。このような直接的損傷は、例えば、弾丸や鉗子が視神経を物理的に損傷することによって生じることがある。直接的損傷に対し、間接的損傷では、組織平面を越えずに視神経に力が伝わる。このような力により、衝撃時に視神経が余分なエネルギーを吸収する。間接損傷の一例に、自動車事故時の前頭部への鈍的外傷がある。
【０００５】
ＴＯＮを効果的に処置するエビデンスのある治療は現時点で存在しない。一般的なＴＯＮ治療選択肢には、全身性ステロイド剤、視神経管の外科的減圧、ステロイド剤と外科手術の組み合わせ、及び観察のみがある。ステロイド剤又は外科手術の選択肢を用いたＴＯＮの管理については、こうした治療の有効性がまだ明らかになっておらず、またこれらの使用に重篤な合併症や有害事象のリスクがあるため意見が分かれている。例えば、ＴＯＮのステロイド治療で報告される有害事象に、急性精神病、急性膵炎、消化管出血、創傷感染、重症肺炎の他、死亡又は重度障害のリスク増加がある。外科的治療で報告される有害事象に、髄膜炎及び偶発的な髄膜露出などがある。従って当技術分野では、効果改善及び／又は副作用のリスク低減を呈する、ＴＯＮを含む視神経症の治療選択肢の開発が必要とされている。本技術の開示は、この必要性を満たし、関連の利点を提供するものである。
【発明の概要】
【０００６】
一態様において、本開示は、必要とする対象の外傷性視神経症（ＴＯＮ）を処置又は予防する方法であって、治療的有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、対象はＴＯＮを有すると診断されている。いくつかの実施形態では、ＴＯＮは対象の直接損傷又は間接損傷に起因する。いくつかの実施形態では、直接又は間接損傷は、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び対象の視神経の損傷からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ペプチドは損傷前に投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは損傷直後に投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、損傷後約２時間以内、約６時間以内、約１２時間以内、又は約２４時間以内に投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは２週間以上にわたって毎日投与される。
いくつかの実施形態では、ペプチドは１２週間以上にわたって毎日投与される。いくつかの実施形態では、処置及び予防は、視力喪失、霧視、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症のうち１つ又は複数を含むＴＯＮの１つ又は複数の徴候又は症状の処置又は予防を含む。
いくつかの実施形態では、対象は哺乳動物である。いくつかの実施形態では、哺乳動物の対象はヒトである。
【０００７】
いくつかの実施形態では、ペプチドは、経口、局所、鼻腔内、全身、静脈内、皮下、腹腔内、皮内、眼内、点眼、イオン導入、経粘膜、硝子体内、又は筋肉内により投与される。
いくつかの実施形態では、方法は更に、対象に対し別々に、連続的に、又は同時に追加処置を施すことを含む。いくつかの実施形態では、追加処置は治療薬の投与を含む。いくつかの実施形態では、治療薬は以下からなる群から選択される：ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１。いくつかの実施形態では、ＴＮＦα阻害剤はエタネルセプトである。いくつかの実施形態では、カリウムチャネル遮断薬は４−アミノピリジン（４−ＡＰ）である。いくつかの実施形態では、追加処置は対象の深部体温を低下させることを含む。いくつかの実施形態では、対象の深部体温を、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる。いくつかの実施形態では、対象に低体温を誘発する。いくつかの実施形態では、ペプチドと追加の治療的処置の組み合わせは、ＴＯＮの予防又は処置において相乗効果を有する。
いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、モノ酢酸塩（即ち、１つの酢酸部位を含む塩）、ビス酢酸塩（即ち、２つの酢酸部位を含む塩）、トリ酢酸塩（即ち、３つの酢酸部位）、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩（即ち、１つのトリフルオロ酢酸部位を含む塩）、ビストリフルオロ酢酸塩（即ち、２つのトリフルオロ酢酸部位を含む塩）、トリトリフルオロ酢酸塩（即ち、３つのトリフルオロ酢酸部位を含む塩）、モノ塩酸塩（即ち、ＨＣｌの含有に起因する、又は起因すると見なされるような１つの塩化物アニオンを含む塩；「モノＨＣｌ塩」）、ビス塩酸塩（即ち、２つのＨＣｌの含有に起因する、又は起因すると見なされるような２つの塩化物アニオンを含む塩；「ビスＨＣｌ塩」）、トリ塩酸塩（即ち、３つのＨＣｌの含有に起因する、又は起因すると見なされるような３つの塩化物アニオンを含む塩；「トリＨＣｌ塩」）、モノトシレート塩（即ち１つのトシレート部位を含む塩）、ビストシレート塩（即ち２つのトシレート部位を含む塩）、又はトリトシレート塩（即ち、３つのトシレート部位を含む塩）を含む。いくつかの実施形態では、対象に投与するために配合されるペプチドは、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である。
【０００８】
一態様において、本開示は、外傷性視神経症（ＴＯＮ）を有する対象の視覚機能を改善する方法を提供し、方法は、治療的有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む。
いくつかの実施形態では、対象は直接損傷又は間接損傷を経験している。いくつかの実施形態では、直接又は間接損傷は、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び対象の視神経の損傷からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ペプチドは損傷直後に投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、損傷後約２時間以内、約６時間以内、約１２時間以内、又は約２４時間以内に投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは２週間以上にわたって毎日投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは１２週間以上にわたって毎日投与される。
いくつかの実施形態では、視覚機能は、パターン網膜電図（ＰＥＲＧ）、最高矯正視力（ＢＶＣＡ）の測定、網膜電図（ＥＲＧ）、及び光干渉断層撮影（ＯＣＴ）のうち１つ又は複数によって評価する。いくつかの実施形態では、視覚機能の改善は、未処置の対照と比較しての、視力、ＢＶＣＡ、ＯＣＴで測定される網膜厚、ＰＥＲＧ振幅、ＥＲＧ振幅、ＥＲＧ潜時、視力喪失、霧視、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症のうち任意の１つ又は複数の改善を含む。
いくつかの実施形態では、対象は哺乳動物である。いくつかの実施形態では、哺乳動物の対象はヒトである。
【０００９】
いくつかの実施形態では、ペプチドは、経口、局所、鼻腔内、全身、静脈内、皮下、腹腔内、皮内、眼内、点眼、イオン導入、経粘膜、硝子体内、又は筋肉内により投与される。
いくつかの実施形態では、方法は更に、対象に対し別々に、連続的に、又は同時に追加処置を施すことを含む。いくつかの実施形態では、追加処置は治療薬の投与を含む。いくつかの実施形態では、治療薬は以下からなる群から選択される：ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１。いくつかの実施形態では、ＴＮＦα阻害剤はエタネルセプトである。いくつかの実施形態では、カリウムチャネル遮断薬は４−アミノピリジン（４−ＡＰ）である。いくつかの実施形態では、追加処置は対象の深部体温を低下させることを含む。いくつかの実施形態では、対象の深部体温を、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる。いくつかの実施形態では、対象に低体温を誘発する。いくつかの実施形態では、ペプチドと追加処置の組み合わせは、視覚機能の改善において相乗効果を有する。
いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸塩、ビス塩酸塩、トリ塩酸塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む。いくつかの実施形態では、対象に投与するために配合されるペプチドは、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である。
【００１０】
一態様において、本開示は、網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の生存又は神経突起伸長を促進する方法であって、ＲＧＣを有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩と接触させることを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、ＲＧＣはｉｎ  ｖｉｔｒｏに存在する。いくつかの実施形態では、ＲＧＣはＴＯＮを有する対象に存在する。
いくつかの実施形態では、対象は哺乳動物である。いくつかの実施形態では、哺乳動物の対象はヒトである。
【００１１】
いくつかの実施形態では、方法は更に、対象に対し別々に、連続的に、又は同時に追加処置を施すことを含む。いくつかの実施形態では、追加処置は治療薬の投与を含む。いくつかの実施形態では、治療薬は以下からなる群から選択される：ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１。いくつかの実施形態では、ＴＮＦα阻害剤はエタネルセプトである。いくつかの実施形態では、カリウムチャネル遮断薬は４−アミノピリジン（４−ＡＰ）である。いくつかの実施形態では、追加処置は対象の深部体温を低下させることを含む。いくつかの実施形態では、対象の深部体温を、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる。いくつかの実施形態では、対象に低体温を誘発する。いくつかの実施形態では、ペプチドと追加処置の組み合わせは、ＲＧＣの生存又は神経突起伸長の促進において相乗効果を有する。
いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸塩、ビス塩酸塩、トリ塩酸塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む。いくつかの実施形態では、対象に投与するために配合されるペプチドは、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である。
【００１２】
一態様において、本開示は、必要とする対象の外傷性視神経症（ＴＯＮ）を処置又は予防する薬剤の調製における組成物の使用に供し、組成物は、治療的有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩を含む。
いくつかの実施形態では、対象はＴＯＮを有すると診断されている。いくつかの実施形態では、ＴＯＮは対象の直接損傷又は間接損傷に起因する。いくつかの実施形態では、直接又は間接損傷は、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び対象の視神経の損傷からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ペプチドは損傷前に投与されることが意図される。
いくつかの実施形態では、ペプチドは損傷直後に投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、損傷後約２時間以内、約６時間以内、約１２時間以内、又は約２４時間以内に投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは１２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、処置及び予防は、視力喪失、霧視、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症のうち１つ又は複数を含むＴＯＮの１つ又は複数の徴候又は症状の処置又は予防を含む。
いくつかの実施形態では、対象は哺乳動物である。いくつかの実施形態では、哺乳動物の対象はヒトである。
【００１３】
いくつかの実施形態では、ペプチドは、経口、局所、鼻腔内、全身、静脈内、皮下、腹腔内、皮内、眼内、点眼、イオン導入、経粘膜、硝子体内、又は筋肉内投与のために配合される。
いくつかの実施形態では、ペプチドは追加処置と別々に、連続的に、又は同時に使用されることが意図される。いくつかの実施形態では、追加処置は治療薬の使用を含む。いくつかの実施形態では、治療薬は以下からなる群から選択される：ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１。いくつかの実施形態では、ＴＮＦα阻害剤はエタネルセプトである。いくつかの実施形態では、カリウムチャネル遮断薬は４−アミノピリジン（４−ＡＰ）である。いくつかの実施形態では、追加処置は対象の深部体温を低下させることを含む。いくつかの実施形態では、対象の深部体温を、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる。いくつかの実施形態では、対象に低体温を誘発する。いくつかの実施形態では、ペプチドと追加処置の組み合わせは、ＴＯＮの予防又は処置において相乗効果を有する。
いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸塩、ビス塩酸塩、トリ塩酸塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む。いくつかの実施形態では、対象に投与するために配合されるペプチドは、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である。
【００１４】
一態様において、本開示は、外傷性視神経症（ＴＯＮ）を有する対象の視覚機能を改善する薬剤の調製における組成物の使用に供し、組成物は、治療的有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩を含む。
いくつかの実施形態では、対象は直接損傷又は間接損傷を経験している。いくつかの実施形態では、直接又は間接損傷は、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び対象の視神経の損傷からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ペプチドは損傷直後に投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、損傷後約２時間以内、約６時間以内、約１２時間以内、又は約２４時間以内に投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは１２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される。
いくつかの実施形態では、視覚機能は、パターン網膜電図（ＰＥＲＧ）、最高矯正視力（ＢＶＣＡ）の測定、網膜電図（ＥＲＧ）、及び光干渉断層撮影（ＯＣＴ）のうち１つ又は複数によって評価する。いくつかの実施形態では、視覚機能の改善は、未処置の対照と比較しての、視力、ＢＶＣＡ、ＯＣＴで測定される網膜厚、ＰＥＲＧ振幅、ＥＲＧ振幅、ＥＲＧ潜時、視力喪失、霧視、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症のうち任意の１つ又は複数の改善を含む。
いくつかの実施形態では、対象は哺乳動物である。いくつかの実施形態では、哺乳動物の対象はヒトである。
【００１５】
いくつかの実施形態では、ペプチドは、経口、局所、鼻腔内、全身、静脈内、皮下、腹腔内、皮内、眼内、点眼、イオン導入、経粘膜、硝子体内、又は筋肉内により投与されることが意図される。
いくつかの実施形態では、ペプチドは追加処置と別々に、連続的に、又は同時に使用されることが意図される。いくつかの実施形態では、追加処置は治療薬の使用を含む。いくつかの実施形態では、治療薬は以下からなる群から選択される：ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１。いくつかの実施形態では、ＴＮＦα阻害剤はエタネルセプトである。いくつかの実施形態では、カリウムチャネル遮断薬は４−アミノピリジン（４−ＡＰ）である。いくつかの実施形態では、追加処置は対象の深部体温を低下させることを含む。いくつかの実施形態では、対象の深部体温を、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる。いくつかの実施形態では、対象に低体温を誘発する。いくつかの実施形態では、ペプチドと追加処置の組み合わせは、視覚機能の改善において相乗効果を有する。
いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸塩、ビス塩酸塩、トリ塩酸塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む。いくつかの実施形態では、対象に投与するために配合されるペプチドは、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である。
【００１６】
一態様において、本開示は、網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の生存又は神経突起伸長を促進する薬剤の調製における組成物の使用に供し、組成物は、有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩を含む。いくつかの実施形態では、ＲＧＣはｉｎ  ｖｉｔｒｏに存在する。いくつかの実施形態では、ＲＧＣはＴＯＮを有する対象に存在する。
いくつかの実施形態では、対象は哺乳動物である。いくつかの実施形態では、哺乳動物の対象はヒトである。
【００１７】
いくつかの実施形態では、ペプチドは追加処置と別々に、連続的に、又は同時に使用されることが意図される。いくつかの実施形態では、追加処置は治療薬の使用を含む。いくつかの実施形態では、治療薬は以下からなる群から選択される：ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１。いくつかの実施形態では、ＴＮＦα阻害剤はエタネルセプトである。いくつかの実施形態では、カリウムチャネル遮断薬は４−アミノピリジン（４−ＡＰ）である。いくつかの実施形態では、追加処置は深部体温を低下させることを含む。いくつかの実施形態では、深部体温を、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる。いくつかの実施形態では、低体温を誘発する。いくつかの実施形態では、ペプチドと追加処置の組み合わせは、ＲＧＣの生存又は神経突起伸長の促進において相乗効果を有する。
いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸塩、ビス塩酸塩、トリ塩酸塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む。いくつかの実施形態では、対象に投与するために配合されるペプチドは、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である。
【００１８】
一態様において、本開示は、必要とする対象の外傷性視神経症（ＴＯＮ）の処置又は予防に使用するための、ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩を提供する。
いくつかの実施形態では、対象はＴＯＮを有すると診断されている。いくつかの実施形態では、ＴＯＮは対象の直接損傷又は間接損傷に起因する。いくつかの実施形態では、直接又は間接損傷は、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び対象の視神経の損傷からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ペプチドは損傷前に投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは損傷直後に投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、損傷後約２時間以内、約６時間以内、約１２時間以内、又は約２４時間以内に投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは１２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される。
いくつかの実施形態では、処置及び予防は、視力喪失、霧視、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症のうち１つ又は複数を含むＴＯＮの１つ又は複数の徴候又は症状の処置又は予防を含む。
いくつかの実施形態では、対象は哺乳動物である。いくつかの実施形態では、哺乳動物の対象はヒトである。
【００１９】
いくつかの実施形態では、使用するためのペプチドは、経口、局所、鼻腔内、全身、静脈内、皮下、腹腔内、皮内、眼内、点眼、イオン導入、経粘膜、硝子体内、又は筋肉内投与のために配合される。いくつかの実施形態では、使用するためのペプチドは追加処置と別々に、連続的に、又は同時に使用されることが意図される。いくつかの実施形態では、追加処置は治療薬の使用を含む。いくつかの実施形態では、治療薬は以下からなる群から選択される：ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１。いくつかの実施形態では、ＴＮＦα阻害剤はエタネルセプトである。いくつかの実施形態では、カリウムチャネル遮断薬は４−アミノピリジン（４−ＡＰ）である。いくつかの実施形態では、追加処置は対象の深部体温を低下させることを含む。いくつかの実施形態では、対象の深部体温を、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる。いくつかの実施形態では、対象に低体温を誘発する。いくつかの実施形態では、ペプチドと追加処置の組み合わせは、ＴＯＮの予防又は処置において相乗効果を有する。
いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸塩、ビス塩酸塩、トリ塩酸塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む。いくつかの実施形態では、対象に投与するために配合されるペプチドは、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である。
【００２０】
一態様において、本開示は、外傷性視神経症（ＴＯＮ）を有する対象の視覚機能の改善に使用するための、ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩を提供する。
いくつかの実施形態では、対象は直接損傷又は間接損傷を経験している。いくつかの実施形態では、直接又は間接損傷は、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び対象の視神経の損傷からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ペプチドは損傷直後に投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、損傷後約２時間以内、約６時間以内、約１２時間以内、又は約２４時間以内に投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは１２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される。
いくつかの実施形態では、視覚機能は、パターン網膜電図（ＰＥＲＧ）、最高矯正視力（ＢＶＣＡ）の測定、網膜電図（ＥＲＧ）、及び光干渉断層撮影（ＯＣＴ）のうち１つ又は複数によって評価する。いくつかの実施形態では、視覚機能の改善は、未処置の対照と比較しての、視力、ＢＶＣＡ、ＯＣＴで測定される網膜厚、ＰＥＲＧ振幅、ＥＲＧ振幅、ＥＲＧ潜時、視力喪失、霧視、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症のうち任意の１つ又は複数の改善を含む。
いくつかの実施形態では、対象は哺乳動物である。いくつかの実施形態では、哺乳動物の対象はヒトである。
【００２１】
いくつかの実施形態では、ペプチドは、経口、局所、鼻腔内、全身、静脈内、皮下、腹腔内、皮内、眼内、点眼、イオン導入、経粘膜、硝子体内、又は筋肉内により投与されることが意図される。
いくつかの実施形態では、ペプチドは追加処置と別々に、連続的に、又は同時に使用されることが意図される。いくつかの実施形態では、追加処置は治療薬の使用を含む。いくつかの実施形態では、治療薬は以下からなる群から選択される：ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１。いくつかの実施形態では、ＴＮＦα阻害剤はエタネルセプトである。いくつかの実施形態では、カリウムチャネル遮断薬は４−アミノピリジン（４−ＡＰ）である。いくつかの実施形態では、追加処置は対象の深部体温を低下させることを含む。いくつかの実施形態では、対象の深部体温を、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる。いくつかの実施形態では、対象に低体温を誘発する。
いくつかの実施形態では、ペプチドと追加処置の組み合わせは、視覚機能の改善において相乗効果を有する。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸塩、ビス塩酸塩、トリ塩酸塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む。いくつかの実施形態では、対象に投与するために配合されるペプチドは、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である。
【００２２】
一態様において、本開示は、網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の生存又は神経突起伸長の促進に使用するための、ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩を提供する。いくつかの実施形態では、ＲＧＣはｉｎ  ｖｉｔｒｏに存在する。いくつかの実施形態では、ＲＧＣはＴＯＮを有する対象に存在する。
いくつかの実施形態では、対象は哺乳動物である。いくつかの実施形態では、哺乳動物の対象はヒトである。
【００２３】
いくつかの実施形態では、ペプチドは追加処置と別々に、連続的に、又は同時に使用されることが意図される。いくつかの実施形態では、追加処置は治療薬の使用を含む。いくつかの実施形態では、治療薬は以下からなる群から選択される：ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１。いくつかの実施形態では、ＴＮＦα阻害剤はエタネルセプトである。いくつかの実施形態では、カリウムチャネル遮断薬は４−アミノピリジン（４−ＡＰ）である。いくつかの実施形態では、追加処置は深部体温を低下させることを含む。いくつかの実施形態では、深部体温を、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる。いくつかの実施形態では、低体温を誘発する。いくつかの実施形態では、ペプチドと追加処置の組み合わせは、ＲＧＣの生存又は神経突起伸長の促進において相乗効果を有する。
いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸塩、ビス塩酸塩、トリ塩酸塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む。いくつかの実施形態では、対象に投与するために配合されるペプチドは、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である。
【００２４】
一態様において、本開示は、外傷性損傷を経験した対象のＴＯＮのリスクを低減する方法を提供し、方法は、治療的有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む。
いくつかの実施形態では、外傷性損傷は直接損傷又は間接損傷である。いくつかの実施形態では、直接又は間接損傷は、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び対象の視神経の損傷からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ペプチドは外傷性損傷直後に投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、外傷性損傷後約２時間以内、約６時間以内、約１２時間以内に、又は約２４時間以内に投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは２週間以上にわたって毎日投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは１２週間以上にわたって毎日投与される。
いくつかの実施形態では、対象は哺乳動物である。いくつかの実施形態では、哺乳動物の対象はヒトである。
【００２５】
いくつかの実施形態では、ペプチドは、経口、局所、鼻腔内、全身、静脈内、皮下、腹腔内、皮内、眼内、点眼、イオン導入、経粘膜、硝子体内、又は筋肉内により投与される。
いくつかの実施形態では、方法は更に、対象に対し別々に、連続的に、又は同時に追加処置を施すことを含む。いくつかの実施形態では、追加処置は治療薬の投与を含む。いくつかの実施形態では、治療薬は以下からなる群から選択される：ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１。いくつかの実施形態では、ＴＮＦα阻害剤はエタネルセプトである。いくつかの実施形態では、カリウムチャネル遮断薬は４−アミノピリジン（４−ＡＰ）である。いくつかの実施形態では、追加処置は対象の深部体温を低下させることを含む。いくつかの実施形態では、対象の深部体温を、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる。いくつかの実施形態では、対象に低体温を誘発する。いくつかの実施形態では、ペプチドと追加処置の組み合わせは、ＴＯＮの予防又は処置において相乗効果を有する。
いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸塩、ビス塩酸塩、トリ塩酸塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む。いくつかの実施形態では、対象に投与するために配合されるペプチドは、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である。
【００２６】
本技術は概して、視神経症を処置又は予防する新規の方法、視神経症を有する対象の視覚機能を改善する方法、網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の生存又は神経突起伸長を促進する方法、外傷性損傷を経験した対象が外傷性視神経症（ＴＯＮ）を有する又は発症するリスクを低減する方法、必要とする対象の視神経症を処置又は予防する薬剤の調製における組成物の使用、視神経症を有する対象の視覚機能を改善する薬剤の調製における組成物の使用、網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の生存又は神経突起伸長を促進する薬剤の調製における組成物の使用、必要とする対象の視神経症を処置又は予防するのに使用する芳香族カチオン性ペプチド、視神経症を有する対象の視覚機能を改善するのに使用する芳香族カチオン性ペプチド、網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の生存又は神経突起伸長を促進するのに使用する芳香族カチオン性ペプチドに関する。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１Ａ】損傷２週間後の網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の生存率。（１）ＰＢＳ、（２）エタネルセプト、又は（３）Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置した超音波処理誘発性外傷性視神経症（ＳＩ−ＴＯＮ）モデルにおけるＲＧＣの生存率を表す。第１群＝７６．６６±２．３２％；第２群＝９７．０８±２．２１％（ｐ＝０．０００２１６）；第３群＝９３．７０±１．５８％（ｐ＝０．０００３０４）。
【図１Ｂ】損傷２週間後の網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の生存率。（１）ＰＢＳ、（２）エタネルセプト、又は（３）Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置した視神経挫滅による外傷性視神経症（ＯＮＣ−ＴＯＮ）モデルにおけるＲＧＣの生存率を表す。第１群＝２４．７１±１．２１％；第２群＝４８．９４±１．９４％（ｐ＝１．９７×１０-5）；第３群＝５１．１３±１．４７％（ｐ＝１．６１×１０-5）。
【図２】損傷１週間後及び２週間後の超音波誘発性視神経のＰＥＲＧ反応。棒は、（１）ＯＤ対照（ＴＯＮ  ＯＳ−１週）；（２）ＯＤ対照（ＴＯＮ  ＯＳ−１週）＋Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2；（３）ＯＤ対照（ＴＯＮ  ＯＳ−２週）；（４）ＯＤ対照（ＴＯＮ  ＯＳ−２週）＋Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2；（５）ＯＳ（ＴＯＮ  ＯＳ−１週）；（６）ＯＳ（ＴＯＮ  ＯＳ−１週）＋Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2；（７）ＯＳ（ＴＯＮ  ＯＳ−２週）；及び（８）ＯＳ（ＴＯＮ  ＯＳ−２週）＋Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2のＰＥＲＧ振幅（ｕＶ）を表す。
【図３】損傷１週間後の挫滅誘発性視神経外傷のＰＥＲＧ反応。棒は、（１）ＯＤ対照（挫滅ＯＳ−１週）；（２）ＯＤ対照（挫滅ＯＳ−１週）＋Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2；（３）ＯＳ（挫滅ＯＳ−１週）；及び（４）ＯＳ（挫滅ＯＳ−１週）＋Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2のＰＥＲＧ振幅（ｕＶ）を表す。
【図４】Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2（ＭＴＰ−１３１）と、エタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ（登録商標））、４−アミノピリジン（４−ＡＰ）、又はＰＢＳの連続投与試験の概略図。投与の順番は次のように分類した。第１群、エタネルセプト、Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、及び４−ＡＰ；第２群、エタネルセプト、Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、及びＰＢＳ；第３群、Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、エタネルセプト、及び４−ＡＰ；第４群、Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、エタネルセプト、及びＰＢＳ；第５群、ＰＢＳ、ＰＢＳ、及び４−ＡＰ；第６群、ＰＢＳのみ。
【図５Ａ】ＵＳ−ＴＯＮ（ＳＩ−ＴＯＮ）後の視覚機能喪失に対するＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2とエタネルセプトの連続投与の効果。ＵＳ−ＴＯＮ誘発、及びＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2とエタネルセプトの連続投与後にＰＥＲＧ振幅で評価した視覚機能を時系列で示す散布図を表す。
【図５Ｂ】ＵＳ−ＴＯＮ（ＳＩ−ＴＯＮ）後の視覚機能喪失に対するＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2とエタネルセプトの連続投与の効果。処置２週間後の、視覚機能喪失の予防におけるエタネルセプトとそれに続くＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の連続投与の有効性を定量化した棒グラフを表す。
【図５Ｃ】ＵＳ−ＴＯＮ（ＳＩ−ＴＯＮ）後の視覚機能喪失に対するＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2とエタネルセプトの連続投与の効果。処置４週間後の、視覚機能喪失の予防におけるエタネルセプトとそれに続くＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の連続投与の有効性を定量化した棒グラフを表す。
【図５Ｄ】ＵＳ−ＴＯＮ（ＳＩ−ＴＯＮ）後の視覚機能喪失に対するＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2とエタネルセプトの連続投与の効果。処置４週間後の網膜神経線維層（ＲＮＦＬ）及び内網状層（ＩＰＬ）の厚さを定量化した棒グラフを表す。
【図６Ａ】マウスにおけるＳＩ−ＴＯＮ誘発性損傷４週間後の網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の生存率。（１）ＰＢＳ；（２）損傷１５分後にＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の硝子体内投与に続いて、３日間エタネルセプト皮下注射、及び更に３日間Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2皮下注射の連続投与；（３）３日間エタネルセプト皮下注射、及び更に損傷後３日間Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2皮下注射；（４）エタネルセプトのみを注射；並びに（５）Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2皮下注射のみの処置後のＲＧＣの生存率を表す。第２群：ｐ＝５．７×１０-7（対第１群）；ｐ＝０．００５２（対第３群）；第３群：ｐ＝０．０２７２；第４群：ｐ＝０．０００２１６；第５群：ｐ＝０．０００３０４。
【図６Ｂ】マウスにおけるＳＩ−ＴＯＮ誘発性損傷４週間後の網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の生存率。神経細胞マーカーβＩＩＩ−チューブリン（ＴＵＢＢ３）の免疫組織化学染色を表す。ＴＵＢＢ３は神経細胞のチューブリンを染色する。様々な処置コホートにおける網膜神経線維層（ＲＮＦＬ）のＲＧＣ染色及び軸索投射を表す。
【図７Ａ】Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の急性硝子体内投与は安全で効果的である。左眼へのＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2急性硝子体内投与の効果を、損傷前後の視覚機能について示したグラフ。グラフは（１）ＯＳ＿対照＿未損傷（ベースライン）；（２）ＯＳ＿Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2＿未損傷（ベースライン）；（３）ＯＳ＿対照＿ＴＯＮ；（４）ＯＳ＿Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2＿ＴＯＮのＲＧＣの電気活動を定量化したもの。図７Ａの第１、２、３、及び４群は、それぞれ図７Ｂの第１、３、４、及び６群と同じである（ｐ＝０．００４２）。
【図７Ｂ】Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の急性硝子体内投与は安全で効果的である。左眼へのＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2急性硝子体内投与の有効性を、損傷後の視覚機能改善について、皮下注射と比較して示したグラフ。グラフは（１）ＯＳ＿対照＿未損傷；（２）ＯＳ＿Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2皮下注射＿未損傷；（３）ＯＳ＿Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2硝子体内注射＿未損傷；（４）ＯＳ＿対照＿ＴＯＮ；（５）ＯＳ＿Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2皮下注射＿ＴＯＮ；並びに（６）ＯＳ＿Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2硝子体内注射＿ＴＯＮのＲＧＣの電気活動を定量化したもの。図７Ａの第１、２、３、及び４群は、それぞれ図７Ｂの第１、３、４、及び６群と同じである（ｐ＝０．００４２）。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本技術を実質的に理解してもらうために、本技術の特定の態様、様式、実施形態、変形例、及び特徴について以下に詳細を様々に説明していく。本明細書で使用する特定の用語の定義を以下に示す。別段の定義がない限り、本明細書に使用するすべての技術用語及び科学用語は、概して、本技術分野の当業者が一般に理解するのと同じ意味を有する。
本技術の実施において、分子生物学、タンパク質生化学、細胞生物学、免疫学、微生物学、及び組換えＤＮＡにおける多くの従来技術が用いられる。これらの技術は既知であり、例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌｓ．Ｉ−ＩＩＩ，Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｅｄ．（１９９７）；Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄ．（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ニューヨーク，１９８９）；ＤＮＡ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｖｏｌｓ．Ｉ及びＩＩ，Ｇｌｏｖｅｒ，Ｅｄ．（１９８５）；Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｇａｉｔ，Ｅｄ．（１９８４）；Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，Ｈａｍｅｓ＆Ｈｉｇｇｉｎｓ，Ｅｄｓ．（１９８５）；Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ，Ｈａｍｅｓ＆Ｈｉｇｇｉｎｓ，Ｅｄｓ．（１９８４）；Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ，Ｆｒｅｓｈｎｅｙ，Ｅｄ．（１９８６）；Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ  Ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  Ｅｎｚｙｍｅｓ（ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，１９８６）；Ｐｅｒｂａｌ，Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ；ｔｈｅ  ｓｅｒｉｅｓ，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．，（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，１９８４）；Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  Ｖｅｃｔｏｒｓ  ｆｏｒ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｃｅｌｌｓ，Ｍｉｌｌｅｒ＆Ｃａｌｏｓ，Ｅｄｓ．（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，ニューヨーク，１９８７）；並びにＭｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．，Ｖｏｌｓ．１５４及び１５５，Ｗｕ＆Ｇｒｏｓｓｍａｎ，ａｎｄ  Ｗｕ，Ｅｄｓ．でそれぞれ説明されている。
【００２９】
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用する単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、内容に明確に別段の定めがない限り、複数の指示対象を含む。例えば、「ａ  ｃｅｌｌ（細胞）」の言及は、２個以上の細胞の組み合わせなどを含む。
本明細書で使用する、対象への薬剤、薬、又はペプチドの「投与」は、意図する機能を果たす化合物を対象に導入又は送達する任意の経路を含む。投与は、経口、鼻腔内、眼内、点眼、非経口（静脈内、筋肉内、腹腔内、若しくは皮下）、硝子体内、又は局所を含む任意の好適な経路で実施できる。投与には、自己投与及び他者による投与などがある。
【００３０】
本明細書で使用する用語「アミノ酸」は、天然アミノ酸及び合成アミノ酸の他、天然アミノ酸と同じように機能するアミノ酸類似体及びアミノ酸模倣体を含む。天然アミノ酸には、遺伝暗号でコードされるものに加え、後で修飾されたアミノ酸、例えば、ヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタミン酸、及びＯ−ホスホセリンがある。アミノ酸類似体は、天然アミノ酸と同じ基本化学構造を有する化合物、即ち、水素、カルボキシル基、アミノ基、及びＲ基、例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウムと結合しているα炭素を指す。そのような類似体は、修飾Ｒ基（例えばノルロイシン）又は修飾ペプチド骨格を有するが、天然アミノ酸と同じ基本化学構造を保持している。アミノ酸模倣体は、アミノ酸の一般的な化学構造とは異なる構造を有するが、天然アミノ酸と同じように機能する化合物を指す。アミノ酸は、本明細書では、公知の３文字略号、又はＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ生生化学命名委員会が推奨する１文字略号のいずれかで表される。
【００３１】
本明細書で使用する用語「有効量」は、所望の治療及び／又は予防効果を達成するのに十分な量、例えば、ＴＯＮの１つ又は複数の症状の部分的又は完全な改善をもたらす量を指す。治療的又は予防的適用におけるいくつかの実施形態では、対象に投与される組成物の量は、疾患の種類、程度、及び重症度、並びに全体的な健康、年齢、性別、体重、及び薬物に対する耐性などの個人の特徴によって異なる。当業者は、こうした要素に応じて適切な用量を決定することができよう。組成物は１つ又は複数の追加の治療化合物と組み合わせて投与することもできる。本明細書に記載する方法において、芳香族カチオン性ペプチド、例えば、２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩、例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトシレート塩は、外傷性損傷、視力喪失、霧視、ＲＧＣ損傷、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症を含むがこれらに限定されない、ＴＯＮの１つ又は複数の徴候、症状、又はリスク因子を有する対象に投与し得る。
【００３２】
本明細書で使用する「単離された」又は「精製された」ポリペプチド又はペプチドは、薬剤が由来する細胞源又は組織源の細胞材料やその他の汚染ポリペプチドを実質的に含まない、又は、化学的に合成された場合、化学前駆体やその他の化学物質を実質的に含まないポリペプチド又はペプチドを指す。例えば、単離された芳香族カチオン性ペプチドは、薬剤の診断用途又は治療用途を妨げそうな材料を含まないだろう。そのような干渉材料には、酵素、ホルモン、及びその他のタンパク質性溶質、及び非タンパク質性溶質などがあり得る。
本明細書で使用する用語「ポリペプチド」、「ポリアミノ酸」、「ペプチド」、及び「タンパク質」は、本明細書において同じ意味で使用され、ペプチド結合又は修飾ペプチド結合によって互いに結合した２個以上のアミノ酸、即ちペプチドイソスターを含むポリマーを意味する。ポリペプチドは、一般に、ペプチド、グリコペプチド、又はオリゴマーと呼ばれる短鎖、及び一般にタンパク質と呼ばれる長鎖の両方を指す。ポリペプチドは、２０個の遺伝子でコードされたアミノ酸以外のアミノ酸を含み得る。ポリペプチドは、当技術分野で周知の翻訳後プロセシングなどの自然過程又は化学修飾技法によって修飾されたアミノ酸配列を含む。
【００３３】
本明細書で使用する、障害又は状態の「予防」又はこれらを「予防すること」は、統計標本において、未処置の対照標本と比べて、処置された標本で障害又は状態の発生を低下させる、又は未処置の対照標本と比べて、障害又は状態の１つ又は複数の症状の発現を遅延させる化合物を指す。本明細書で使用する「ＴＯＮを予防すること」は、ＴＯＮの症状が起こるのを予防すること、又は遅延させることを含む。本明細書で使用する「ＴＯＮの予防」は、ＴＯＮの１つ又は複数の徴候又は症状の再発を予防することも含む。
本明細書で使用する用語「対象」及び「患者」は、同じ意味で使用される。
治療上の使用又は投与の文脈において、用語「別々の」又は「別々に」は、少なくとも２つの活性成分を、異なる経路、製剤、及び／又は医薬組成物で投与することを指す。
用語「同時の」治療上の使用は、少なくとも２つの活性成分を、同時に、又は実質的に同時に投与することを指す。いくつかの実施形態では、同時投与は、少なくとも２つの活性成分を含む単一の組成物又は製剤の投与、同一の経路による、少なくとも２つの異なる活性成分の併用投与、並びに異なる経路による、少なくとも２つの異なる活性成分の併用投与を含むがこれらに限定されない。
本明細書で使用する用語「連続的な」治療上の使用は、異なる時間に、同一又は異なる投与経路で少なくとも２つの活性成分を投与することを指す。より詳細には、連続的な使用は、活性成分のうち１つを完全に投与した後に、他の１つ又は複数の活性成分を投与することを指す。従って、活性成分のうち１つを数分間、数時間、又は数日にわたって投与した後に、他の１つ又は複数の活性成分を投与することが可能である。この場合、同時処置とはならない。
本明細書で使用する「相乗的治療効果」は、少なくとも２つの薬剤の組み合わせによってもたらされる、その薬剤の個別投与から得られるであろう相加治療効果を超える治療効果を指す。例えば、低用量の１つ又は複数の薬剤をＴＯＮなどの視神経症の処置に用いることが、治療有効性の増大と副作用の低減をもたらし得る。
【００３４】
本明細書で使用する「外傷性損傷」は、損傷を経験した対象において、深刻な組織損傷、能力障害、長期の能力障害、及び／又は死亡を引き起こす可能性がある任意の損傷である。外傷性損傷には、鈍的損傷、穿通損傷、転倒、自動車衝突、刺し傷、及び銃創などがあるがこれらに限定されない。視神経において、外傷性損傷は直接的損傷と間接的損傷に分類できる。そのような視神経損傷の非限定的な例に、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び視神経乳頭の損傷などがある。
本明細書で使用する「外傷性視神経症」又は「ＴＯＮ」は、外傷性損傷に起因する視神経症を指す。損傷は直接的な場合と間接的な場合がある。ＴＯＮの例示的特徴には、片眼又は両眼の障害、対称的な両側ＴＯＮの場合を除く相対的求心性乳頭欠損、正常から光覚なしまでの視力の可変喪失、色覚障害、視野の可変欠損、視神経乳頭の異常外観、及び／又は視神経萎縮の発症（通常は損傷後６週間以内）などがあるがこれらに限定されない。ＴＯＮ症状の非限定的な例に、視力喪失、霧視、ＲＧＣ損傷、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症などがある。
【００３５】
本明細書で使用する用語「処置する」又は「処置」又は「緩和」は治療的処置を指し、目的は、標的となる病的状態又は障害の進行若しくは進展を軽減、緩和する、若しくは遅らせる、及び／又は進行を逆転させることである。対象が、本明細書に記載する方法に従って、治療量の芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩、例えば酢酸塩、酒石酸塩、トリフルオロ酢酸塩、塩化物塩、３つの塩酸塩の塩（「トリＨＣｌ塩」）、２つの塩酸塩の塩（「ビスＨＣｌ塩」）、１つの塩酸塩の塩（「モノＨＣｌ塩」）、又はトシラート塩の投与を受けた後に、視神経症の１つ又は複数の徴候及び症状の観測可能な、及び／若しくは測定可能な軽減、又は不在を示した場合、対象の視神経症の「処置」が成功となる。例えばＴＯＮにおいて、そのような徴候及び症状には、視力喪失、霧視、ＲＧＣ損傷、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症などがあるがこれらに限定されない。
本明細書に記載の病状の処置又は予防の様々な様式は、「実質的」を意味することを意図し、これには、処置又は予防の全体も全体に満たないものも含み、また多少の生物学的又は医学的に重要な結果が達成される場合を含むことも理解されたい。
【００３６】
外傷性視神経症及び網膜神経節細胞
外傷性損傷（即ち、ＴＯＮ）に起因する視神経症は、頭部又は顔の外傷歴が裏付けとなる臨床診断である。損傷は直接的な場合と間接的な場合がある。ＴＯＮの例示的特徴には、片眼又は両眼の障害、対称的な両側ＴＯＮの場合を除く相対的求心性乳頭欠損、正常から光覚なしまでの視力の可変喪失、色覚障害、視野の可変欠損、視神経乳頭の異常外観、及び／又は視神経萎縮の発症（通常は損傷後６週間以内）などがあるがこれらに限定されない。ＴＯＮ患者のおよそ４０〜６０％が重篤な光覚消失を示す。直接ＴＯＮは重篤で即時の視力喪失を引き起こすことが多く、回復の見込みはほとんどない。間接ＴＯＮは、視神経鞘の血腫に続発して後から視力喪失に至ることがある。
限定を目的としない例として、いくつかの実施形態では、ＴＯＮ症状に、視力喪失、霧視、網膜神経節細胞損傷、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症などがあるがこれらに限定されない。
【００３７】
視神経の神経細胞軸索は、網膜から出て視神経乳頭で眼を離れて視覚皮質に入り、そこで眼からの情報が処理されて視覚となる。視神経線維は網膜内層の網膜神経節細胞に由来する。ＴＯＮは、網膜神経節細胞の損傷（例えば、ＲＧＣ死及び／又はＲＧＣ軸索損傷）を含むがこれに限定されない視神経の損傷を伴うことがある。網膜神経節細胞（ＲＧＣ）は、眼の網膜の内面（神経節細胞層）近くに位置するニューロンの一種である。発生中、分泌された誘導分子は、細胞外マトリックス及び血管系からの信号と併せて、例えば中心窩の周りのＲＧＣの配置及び軸索伸長を誘導する。ＲＧＣは、２種類の介在ニューロン、即ち双極細胞及び網膜アマクリン細胞を介して光受容体から視覚情報を受け取る。網膜アマクリン細胞、特に狭域細胞は、神経節細胞層内に機能的サブユニットを作成し、神経節細胞が短い距離を移動する小さな点を観察できるようにするために重要である。網膜神経節細胞は、画像形成及び非画像形成の視覚情報を、活動電位の形で網膜から視床、視床下部、及び中脳のいくつかの領域に集合的に伝達する。
ＲＧＣは、ミジット、パラソル、及び小型二層性神経節細胞の主に３種類のサブタイプに分類され、それぞれ小細胞、大細胞、及び顆粒細胞の経路に寄与すると考えられている。これらの異なるＲＧＣ集団とこれらに関連する経路は、標準的な心理物理学的測定を変更することで試験できる。一般に、高空間周波数情報の処理は小細胞経路と関連し、高時間周波数情報は大細胞経路によって統合されていると考えられている。赤／緑処理と青／黄処理は、それぞれ小細胞経路と顆粒細胞経路に関連している。
【００３８】
芳香族カチオン性ペプチド
いくつかの実施形態では、本技術の芳香族カチオン性ペプチドは水溶性、高極性であり、細胞膜を容易に透過することができる。
本技術の芳香族カチオン性ペプチドに存在するアミノ酸の最大数は、ペプチド結合で共有結合したアミノ酸約２０個である。いくつかの実施形態では、アミノ酸の総数は約１２個である。いくつかの実施形態では、アミノ酸の総数は約９個である。いくつかの実施形態では、アミノ酸の総数は約６個である。いくつかの実施形態では、アミノ酸の総数は４個である。いくつかの実施形態では、アミノ酸の総数は３個である。
いくつかの態様において、本技術は、芳香族カチオン性ペプチド、又はこれらの薬学的に許容される塩、例えばモノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩を提供する。いくつかの実施形態では、ペプチドは、少なくとも１つの正味正電荷；最小３個のアミノ酸；最高約２０個のアミノ酸；正味正電荷の最小数（ｐm）とアミノ酸残基の総数（ｒ）の間の、３ｐmがｒ＋１以下の最大数であるという関係；並びに芳香族基の最小数（ａ）と正味正電荷の総数（ｐt）の間の、ａが１であるときにｐtも１であり得る場合を除いて、２ａがｐt＋１以下の最大数であるという関係を有する。
【００３９】
いくつかの実施形態では、ペプチドは式Ｉで定義される。
【化１】
2021531272.tif 000003
上式で、Ａ及びＪの１つは
【化２】
2021531272.tif 000004
であり、かつＡ及びＪのもう１つは
【化３】
2021531272.tif 000005
であり；Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、及びＧはそれぞれ
【化４】
2021531272.tif 000006
又は、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、及びＧはそれぞれ
【化５】
2021531272.tif 000007
であり；ただし、ｆが０であり、かつＪが末端基でないとき、末端基はＧ、Ｅ、Ｄ、又はＣの１つであり、そのため、Ａ及び末端基の１つは
【化６】
2021531272.tif 000008
であり、かつＡ及び末端基のもう１つは
【化７】
2021531272.tif 000009
であり；Ｒ101は
【化８】
2021531272.tif 000010
であり；Ｒ102は
【化９】
2021531272.tif 000011
又は水素であり；Ｒ103は
【化１０】
2021531272.tif 000012
であり；Ｒ104は
【化１１】
2021531272.tif 000013
であり；Ｒ105は
【化１２】
2021531272.tif 000014
又は水素であり；Ｒ106は
【化１３】
2021531272.tif 000015
又は水素であり；
ただし、Ｒ102、Ｒ104、及びＲ106が同一のとき、Ｒ101、Ｒ103、及びＲ105は同一でなく；
このとき
＊１、＊３、及び＊４は、それぞれ独立して不斉炭素中心を示し、それぞれの絶対配置が各存在において独立してＲ又はＳであり；
Ｒ102が水素でないとき、＊２はＲ又はＳの絶対配置を持つ不斉炭素中心を示し；
Ｒ105が水素でないとき、＊５はＲ又はＳの絶対配置を持つ不斉炭素中心を示し；
Ｒ106が水素でないとき、＊６はＲ又はＳの絶対配置を持つ不斉炭素中心を示し；
Ｒ1及びＲ2は、それぞれ独立して水素、又は置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、飽和若しくは不飽和のシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アラルキル、５若しくは６員環の飽和若しくは不飽和のヘテロシクリル（ｈｅｔｅｒｏｃｙｌｙｌ）、ヘテロアリール、若しくはアミノ保護基であり；又はＲ1及びＲ2は一緒になって３、４、５、６、７、若しくは８員環の置換若しくは非置換のヘテロシクリル（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｙｌ）環を形成し；
Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5は、それぞれ独立して水素、又は置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、飽和若しくは不飽和のシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アラルキル、５若しくは６員環の飽和若しくは不飽和のヘテロシクリル（ｈｅｔｅｒｏｃｙｌｙｌ）、若しくはヘテロアリールであり；又はＲ3及びＲ4は一緒に３、４、５、６、７、若しくは８員環の置換若しくは非置換のヘテロシクリル（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｙｌ）環を形成し；
各存在におけるＲ6及びＲ7は、独立して水素、又は置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ6アルキル基であり；
Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ18、Ｒ19、Ｒ20、Ｒ21、Ｒ22、Ｒ24、Ｒ25、Ｒ26、Ｒ27、Ｒ28、Ｒ29、Ｒ30、Ｒ31、Ｒ32、Ｒ33、Ｒ34、Ｒ35、Ｒ36、Ｒ37、Ｒ39、Ｒ40、Ｒ41、Ｒ42、Ｒ43、Ｒ44、Ｒ45、Ｒ46、Ｒ47、Ｒ48、Ｒ49、Ｒ50、Ｒ51、Ｒ52、Ｒ54、Ｒ55、Ｒ56、Ｒ57、Ｒ58、Ｒ60、Ｒ61、Ｒ62、Ｒ63、Ｒ64、Ｒ65、Ｒ67、Ｒ69、Ｒ71、及びＲ72は、それぞれ独立して水素、アミノ、アミド、−ＮＯ2、−ＣＮ、ＯＲa、ＳＲa、−ＮＲaＲa、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、又は置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、−Ｃ（Ｏ）−アルキル、−Ｃ（Ｏ）−アリール、−Ｃ（Ｏ）−アラルキル、−Ｃ（Ｏ）2Ｒa、Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ、Ｃ1−Ｃ4ジアルキルアミノ、又はペルハロアルキル基であり；
Ｒ66、Ｒ68、Ｒ70、及びＲ73は、それぞれ独立して水素、又は置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ6アルキル基であり；
Ｒ17、Ｒ23、Ｒ38、Ｒ53、及びＲ59は、それぞれ独立して水素、−ＯＲa、−ＳＲa、−ＮＲaＲa、−ＮＲaＲb、−ＣＯ2Ｒa、−（ＣＯ）ＮＲaＲa、−ＮＲa（ＣＯ）Ｒa、−ＮＲaＣ（ＮＨ）ＮＨ2、−ＮＲa−ダンシル、又は置換若しくは非置換アルキル、アリール、若しくはアラルキル基であり；
ＡＡ、ＢＢ、ＣＣ、ＤＤ、ＥＥ、ＦＦ、ＧＧ、及びＨＨは、それぞれ独立して不在、−ＮＨ（ＣＯ）−、−ＣＨ2−、又は−ＣＨ2ＣＨ2−であり；
各存在におけるＲaは、独立して水素、又は置換若しくは非置換Ｃ1−Ｃ6アルキル基であり；
各存在におけるＲbは、独立してＣ1−Ｃ6アルキレン−ＮＲa−ダンシル又はＣ1−Ｃ6アルキレン−ＮＲa−アントラニロイル基であり；
ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆは、それぞれ独立して０又は１であり、
ただし、ａ＋ｂ＋ｃ＋ｄ＋ｅ＋ｆ≧２であり；
ｇ、ｈ、ｋ、ｍ、及びｎは、それぞれ独立して１、２、３、４、又は５であり；並びに
ｉ、ｊ、及びｌは、それぞれ独立して１、２、３、４、又は５であり；
ただし任意で、
ｉが４であり、かつＲ23が−ＳＲaである、又はｊが４であり、かつＲ38が−ＳＲaである、又はｌが４であり、かつＲ53が−ＳＲaであるとき、−ＳＲaのＲaは置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ6アルキル基であり；
Ｊが−ＮＨ2であり、ｂ及びｄが０であり、ａ、ｃ、ｅ、ｆが１であるとき、Ｒ103は
【化１４】
2021531272.tif 000016
である。
【００４０】
式Ｉのペプチドいくつかの実施形態では、
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5は、それぞれ独立して水素、又は置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ6アルキル基であり；
各存在におけるＲ6及びＲ7は、独立して水素又はメチル基であり；
Ｒ8、Ｒ12、Ｒ18、Ｒ22、Ｒ24、Ｒ28、Ｒ33、Ｒ37、Ｒ39、Ｒ43、Ｒ48、Ｒ52、Ｒ54、Ｒ58、Ｒ60、及びＲ64は、それぞれ独立して水素又はメチル基であり；
Ｒ10、Ｒ20、Ｒ26、Ｒ35、Ｒ41、Ｒ50、Ｒ56、及びＲ62は、それぞれ独立して水素又は−ＯＲaであり；
Ｒ9、Ｒ11、Ｒ19、Ｒ21、Ｒ25、Ｒ27、Ｒ34、Ｒ36、Ｒ40、Ｒ42、Ｒ49、Ｒ51、Ｒ55、Ｒ57、Ｒ61、Ｒ63、Ｒ65、Ｒ66、Ｒ67、Ｒ68、Ｒ69、Ｒ70、Ｒ71、Ｒ72、及びＲ73は水素であり；
Ｒ17、Ｒ23、Ｒ38、Ｒ53、及びＲ59は、それぞれ独立して水素、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＳＣＨ3、−ＮＨ2、−ＮＨＲb、−ＣＯ2Ｈ、−（ＣＯ）ＮＨ2、−ＮＨ（ＣＯ）Ｈ、−ＮＲaＣ（ＮＨ）ＮＨ2、又は−ＮＨ−ダンシル基であり；
ＡＡ、ＢＢ、ＣＣ、ＤＤ、ＥＥ、ＦＦ、ＧＧ、及びＨＨは、それぞれ独立して不在又は−ＣＨ2−であり；
各存在におけるＲaは、独立して水素、又は置換若しくは非置換Ｃ1−Ｃ4アルキル基であり；
各存在におけるＲbは、独立してエチレン−ＮＨ−ダンシル又はエチレン−ＮＨ−アントラニロイル基である。
【００４１】
式Ｉのいくつかの実施形態では、
Ａは
【化１５】
2021531272.tif 000017
であり；Ｊは
【化１６】
2021531272.tif 000018
であり；Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、及びＧは、それぞれ独立して
【化１７】
2021531272.tif 000019
又は不在であり；ただし、ｆが０のとき、Ｇは
【化１８】
2021531272.tif 000020
であり；ｅ及びｆが０のとき、Ｅは
【化１９】
2021531272.tif 000021
であり；ｄ、ｅ、及びｆが０のとき、Ｄは
【化２０】
2021531272.tif 000022
であり；並びにｃ、ｄ、ｅ、及びｆが０のとき、Ｃは
【化２１】
2021531272.tif 000023
である。
【００４２】
式Ｉの別の実施形態では、
Ａは
【化２２】
2021531272.tif 000024
であり；Ｊは
【化２３】
2021531272.tif 000025
であり；Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、及びＧは、それぞれ独立して
【化２４】
2021531272.tif 000026
又は不在であり；ただし、ｆが０のとき、Ｇは
【化２５】
2021531272.tif 000027
であり；ｅ及びｆが０のとき、Ｅは
【化２６】
2021531272.tif 000028
であり；ｄ、ｅ、及びｆが０のとき、Ｄは
【化２７】
2021531272.tif 000029
であり；並びにｃ、ｄ、ｅ、及びｆが０のとき、Ｃは
【化２８】
2021531272.tif 000030
である。
【００４３】
式Ｉのいくつかの実施形態では、Ｒ101、Ｒ102、Ｒ104、Ｒ105、及びＲ106のうち少なくとも１つは、上記に定義した塩基性基であり、かつＲ101、Ｒ103、Ｒ104、Ｒ105、及びＲ106のうち少なくとも１つは、上記に定義した中性基である。いくつかのそのような実施形態では、中性基は、上記に定義した芳香族基、複素環基又はシクロアルキル基である。式Ｉのいくつかの実施形態では、ペプチドは、少なくとも１つのアルギニン、例えばＤ−アルギニン（ただしこれに限定されない）、及び２’６’−ジメチルチロシン、チロシン、又はフェニルアラニンの少なくとも１つを含む。式Ｉのいくつかの実施形態では、Ｒ101はアルキルグアニジニウム基である。
【００４４】
いくつかの実施形態では、本技術のペプチドは、表Ａ又はＢに示すペプチドから選択される。
【００４５】
【表１】
2021531272.tif 000031
2021531272.tif 000032
2021531272.tif 000033
2021531272.tif 000034
2021531272.tif 000035
2021531272.tif 000036
2021531272.tif 000037
2021531272.tif 000038
【表２】
2021531272.tif 000039
2021531272.tif 000040
2021531272.tif 000041
2021531272.tif 000042
【００４６】
別の実施形態では、ペプチドは以下の式ＩＩで定義される。
【化２９】
2021531272.tif 000043
式ＩＩ
上式で、Ｋ及びＺの１つは
【化３０】
2021531272.tif 000044
であり、かつＫ及びＺのもう１つは
【化３１】
2021531272.tif 000045
であり；Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、及びＹはそれぞれ
【化３２】
2021531272.tif 000046
又はＬ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、及びＹはそれぞれ
【化３３】
2021531272.tif 000047
であり；ただし、ａａが０であり、かつＺが末端基でないとき、末端基はＬ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、又はＹのうちの１つであり、そのため、Ｋ及び末端基の１つは
【化３４】
2021531272.tif 000048
であり、かつＫ及び末端基のもう１つは
【化３５】
2021531272.tif 000049
から選択され；Ｒ201は
【化３６】
2021531272.tif 000050
であり；Ｒ202は
【化３７】
2021531272.tif 000051
であり；Ｒ203は
【化３８】
2021531272.tif 000052
又は水素であり；Ｒ204は
【化３９】
2021531272.tif 000053
であり；Ｒ205は
【化４０】
2021531272.tif 000054
であり；Ｒ206は
【化４１】
2021531272.tif 000055
であり；Ｒ207は
【化４２】
2021531272.tif 000056
又は水素であり；Ｒ208は
【化４３】
2021531272.tif 000057
であり；Ｒ209は
【化４４】
2021531272.tif 000058
であり；Ｒ210は
【化４５】
2021531272.tif 000059
又は水素であり；Ｒ211は
【化４６】
2021531272.tif 000060
であり；Ｒ212は
【化４７】
2021531272.tif 000061
であり；Ｒ213は
【化４８】
2021531272.tif 000062
であり；
このとき
＊１１、＊１２、＊１４、＊１５、＊１６、＊１８、＊１９、＊２１、＊２２、及び＊２３は、それぞれ独立して不斉炭素中心を示し、それぞれの絶対配置が各存在において独立してＲ又はＳであり；
Ｒ203が水素でないとき、＊１３はＲ又はＳの絶対配置を持つ不斉炭素中心を示し；
Ｒ207が水素でないとき、＊１７はＲ又はＳの絶対配置を持つ不斉炭素中心を示し；
Ｒ210が水素でないとき、＊２０はＲ又はＳの絶対配置を持つ不斉炭素中心を示し；
Ｒ214、Ｒ215、Ｒ216、Ｒ217、及びＲ218は、それぞれ独立して水素、又は置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、飽和若しくは不飽和のシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アラルキル、５若しくは６員環の飽和若しくは不飽和のヘテロシクリル（ｈｅｔｅｒｏｃｙｌｙｌ）、ヘテロアリール、若しくはアミノ保護基であり；又はＲ214及びＲ215は一緒になって３、４、５、６、７、若しくは８員環の置換若しくは非置換ヘテロシクリル（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｙｌ）環を形成し；
Ｒ219及びＲ220は、各存在において、独立して水素、又は置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ6アルキル基であり；
Ｒ222、Ｒ223、Ｒ224、Ｒ225、Ｒ226、Ｒ227、Ｒ228、Ｒ229、Ｒ230、Ｒ232、Ｒ234、Ｒ236、Ｒ237、Ｒ238、Ｒ239、Ｒ241、Ｒ242、Ｒ243、Ｒ244、Ｒ245、Ｒ246、Ｒ248、Ｒ249、Ｒ250、Ｒ251、Ｒ252、Ｒ254、Ｒ256、Ｒ258、Ｒ259、Ｒ260、Ｒ261、Ｒ262、Ｒ263、Ｒ264、Ｒ266、Ｒ267、Ｒ268、Ｒ269、Ｒ272、Ｒ274、Ｒ275、Ｒ277、Ｒ278、Ｒ279、Ｒ280、Ｒ282、Ｒ283、Ｒ284、Ｒ285、Ｒ286、Ｒ288、Ｒ289、Ｒ290、Ｒ291、Ｒ292、Ｒ293、Ｒ294、Ｒ295、Ｒ296、Ｒ297、Ｒ299、Ｒ301、Ｒ302、Ｒ303、Ｒ304、Ｒ305、Ｒ307、Ｒ308、Ｒ309、Ｒ310、Ｒ311、Ｒ312、Ｒ313、及びＲ315は、それぞれ独立して水素、アミノ、アミド、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＯＲc、−ＳＲc、−ＮＲcＲc、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、又は置換若しくは非置換Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、−Ｃ（Ｏ）−アルキル、−Ｃ（Ｏ）−アリール、−Ｃ（Ｏ）−アラルキル、−Ｃ（Ｏ）2Ｒc、Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ、Ｃ1−Ｃ4ジアルキルアミノ、若しくはペルハロアルキル基であり；
Ｒ221、Ｒ235、Ｒ247、Ｒ253、Ｒ257、Ｒ265、Ｒ273、Ｒ276、Ｒ300、Ｒ306、及びＲ314は、それぞれ独立して水素、又は置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ6アルキル基であり；
Ｒ231、Ｒ240、Ｒ255、Ｒ270、Ｒ271、Ｒ281、Ｒ287、Ｒ298、Ｒ316、及びＲ317は、それぞれ独立して水素、−ＯＲc、−ＳＲc、−ＮＲcＲc、−ＮＲcＲd、−ＣＯ2Ｒc、−（ＣＯ）ＮＲcＲc、−ＮＲc（ＣＯ）Ｒc、−ＮＲcＣ（ＮＨ）ＮＨ2、−ＮＲc−ダンシル、又は置換若しくは非置換アルキル、アリール、若しくはアラルキル基であり；
ＪＪ、ＫＫ、ＬＬ、ＭＭ、ＮＮ、ＱＱ、及びＲＲは、それぞれ独立して不在、−ＮＨ（ＣＯ）−、又は−ＣＨ2−であり；
各存在におけるＲcは、独立して水素、又は置換若しくは非置換Ｃ1−Ｃ6アルキル基であり；
各存在におけるＲdは、独立してＣ1−Ｃ6アルキレン−ＮＲc−ダンシル又はＣ1−Ｃ6アルキレン−ＮＲc−アントラニロイル基であり；
ｏ、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖ、ｗ、ｘ、ｙ、ｚ、及びａａは、それぞれ独立して０又は１であり、
ただし、ｏ＋ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ＋ｔ＋ｕ＋ｖ＋ｗ＋ｘ＋ｙ＋ｚ＋ａａは６、７、８、９、１０、又は１１に等しく；
ｃｃは０、１、２、３、４、又は５であり；並びに
ｂｂ、ｃｃ、ｅｅ、ｆｆ、ｇｇ、ｈｈ、ｉｉ、ｊｊ、ｋｋ、ｌｌ、ｍｍ、ｎｎ、ｏｏ、ｐｐ、及びｑｑは、それぞれ独立して１、２、３、４、又は５である。
【００４７】
式ＩＩのペプチドのいくつかの実施形態では、
Ｒ214、Ｒ215、Ｒ216、Ｒ217、及びＲ218は、それぞれ独立して水素、又は置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ6アルキル基であり；
Ｒ219及びＲ220は、各存在において、独立して水素又はメチル基であり；
Ｒ222、Ｒ223、Ｒ224、Ｒ225、Ｒ226、Ｒ227、Ｒ228、Ｒ229、Ｒ230、Ｒ232、Ｒ234、Ｒ236、Ｒ237、Ｒ238、Ｒ239、Ｒ241、Ｒ242、Ｒ243、Ｒ244、Ｒ245、Ｒ246、Ｒ248、Ｒ249、Ｒ250、Ｒ251、Ｒ252、Ｒ254、Ｒ256、Ｒ258、Ｒ259、Ｒ260、Ｒ261、Ｒ262、Ｒ263、Ｒ264、Ｒ266、Ｒ267、Ｒ268、Ｒ269、Ｒ272、Ｒ274、Ｒ275、Ｒ277、Ｒ278、Ｒ279、Ｒ280、Ｒ282、Ｒ283、Ｒ284、Ｒ285、Ｒ286、Ｒ288、Ｒ289、Ｒ290、Ｒ291、Ｒ292、Ｒ293、Ｒ294、Ｒ295、Ｒ296、Ｒ297、Ｒ299、Ｒ301、Ｒ302、Ｒ303、Ｒ304、Ｒ305、Ｒ307、Ｒ308、Ｒ309、Ｒ310、Ｒ311、Ｒ312、Ｒ313、及びＲ315は、それぞれ独立して水素、メチル、又は−ＯＲc基であり；
Ｒ221、Ｒ235、Ｒ247、Ｒ253、Ｒ257、Ｒ265、Ｒ273、Ｒ276、Ｒ300、Ｒ306、及びＲ314は、それぞれ独立して水素、又は置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ6アルキル基であり；
Ｒ231は、−（ＣＯ）ＮＲcＲc、−ＯＲc、又はＣ1−Ｃ6アルキル基であり、任意でヒドロキシル又はメチル基で置換されており；
Ｒ240及びＲ255は、それぞれ独立して−ＣＯ2Ｒc又は−ＮＲcＲcであり；
Ｒ270及びＲ271は、それぞれ独立して−ＣＯ2Ｒcであり；
Ｒ281は、−ＳＲc又は−ＮＲcＲcであり；
Ｒ287は、−（ＣＯ）ＮＲcＲc又は−ＯＲcであり；
Ｒ298は、−ＮＲcＲc、−ＣＯ2Ｒc、又はＳＲcであり；
Ｒ316は、−ＮＲcＲcであり；
Ｒ317は、水素又は−ＮＲcＲcであり；
ＪＪ、ＫＫ、ＬＬ、ＭＭ、ＮＮ、ＱＱ、及びＲＲは、それぞれ独立して不在又は−ＣＨ2−であり；
各存在におけるＲcは、独立して水素、又は置換若しくは非置換Ｃ1−Ｃ6アルキル基であり；
各存在におけるＲdは、独立してＣ1−Ｃ6アルキレン−ＮＲc−ダンシル又はＣ1−Ｃ6アルキレン−ＮＲc−アントラニロイル基であり；
ｏ、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖ、ｗ、ｘ、ｙ、ｚ、及びａａは、それぞれ独立して０又は１であり、
ただし、ｏ＋ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ＋ｔ＋ｕ＋ｖ＋ｗ＋ｘ＋ｙ＋ｚ＋ａａは６、７、８、９、１０、又は１１に等しく；
ｃｃは０、１、２、３、４、又は５であり；並びに
ｂｂ、ｃｃ、ｅｅ、ｆｆ、ｇｇ、ｈｈ、ｉｉ、ｊｊ、ｋｋ、ｌｌ、ｍｍ、ｎｎ、ｏｏ、ｐｐ、及びｑｑは、それぞれ独立して１、２、３、４、又は５である。
【００４８】
式ＩＩのペプチドのいくつかの実施形態では、
Ｒ221、Ｒ222、Ｒ223、Ｒ224、Ｒ225、Ｒ226、Ｒ227、Ｒ228、Ｒ229、Ｒ230、Ｒ232、Ｒ234、Ｒ235、Ｒ236、Ｒ237、Ｒ238、Ｒ239、Ｒ242、Ｒ244、Ｒ246、Ｒ247、Ｒ248、Ｒ249、Ｒ250、Ｒ251、Ｒ252、Ｒ253、Ｒ254、Ｒ256、Ｒ257、Ｒ258、Ｒ259、Ｒ260、Ｒ262、Ｒ263、Ｒ264、Ｒ265、Ｒ266、Ｒ267、Ｒ268、Ｒ269、Ｒ272、Ｒ273、Ｒ274、Ｒ275、Ｒ276、Ｒ277、Ｒ278、Ｒ279、Ｒ280、Ｒ282、Ｒ283、Ｒ285、Ｒ286、Ｒ288、Ｒ289、Ｒ291、Ｒ292、Ｒ293、Ｒ294、Ｒ296、Ｒ297、Ｒ299、Ｒ300、Ｒ301、Ｒ302、Ｒ303、Ｒ304、Ｒ305、Ｒ306、Ｒ307、Ｒ308、Ｒ309、Ｒ311、Ｒ312、Ｒ313、Ｒ314、及びＲ315は水素であり；
Ｒ241及びＲ245は、それぞれ独立して水素又はメチル基であり；
Ｒ243、Ｒ261、Ｒ284、Ｒ290、Ｒ295、Ｒ310は、それぞれ独立して水素又はＯＨであり；
Ｒ231は、−（ＣＯ）ＮＨ2、ヒドロキシル基で置換されたエチル基、又はイソプロピル基であり；
Ｒ240及びＲ255は、それぞれ独立して−ＣＯ2Ｈ又は−ＮＨ2であり；
Ｒ270及びＲ271は、それぞれ独立して−ＣＯ2Ｈであり；
Ｒ281は、−ＳＨ又は−ＮＨ2であり；
Ｒ287は、−（ＣＯ）ＮＨ2又は−ＯＨであり；
Ｒ298は、−ＮＨ2、−ＣＯ2Ｈ、又は−ＳＨであり；
Ｒ316は、−ＮＨ2であり；
Ｒ317は、水素又は−ＮＨ2であり；
ＪＪ、ＫＫ、ＬＬ、ＭＭ、ＮＮ、ＱＱ、及びＲＲは、それぞれ独立して−ＣＨ2−であり；
ｏ、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖ、ｗ、ｘ、ｙ、ｚ、及びａａは、それぞれ独立して０又は１であり、
ただし、ｏ＋ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ＋ｔ＋ｕ＋ｖ＋ｗ＋ｘ＋ｙ＋ｚ＋ａａは６、７、８、９、１０、又は１１に等しく；
ｃｃは０、１、２、３、４、又は５であり；並びに
ｂｂ、ｃｃ、ｅｅ、ｆｆ、ｇｇ、ｈｈ、ｉｉ、ｊｊ、ｋｋ、ｌｌ、ｍｍ、ｎｎ、ｏｏ、ｐｐ、及びｑｑは、それぞれ独立して１、２、３、４、又は５である。
【００４９】
式ＩＩの特定の実施形態では、  
Ｋは
【化４９】
2021531272.tif 000063
であり、Ｚは
【化５０】
2021531272.tif 000064
であり；Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、及びＹは、それぞれ独立して
【化５１】
2021531272.tif 000065
であり；ただし、ａａが０であり、かつＺが末端基でないとき、末端基はＬ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、又はＹのうちの１つであり、そのため、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、又はＹのうちの１つは
【化５２】
2021531272.tif 000066
である。
【００５０】
式ＩＩの別の実施形態では、
Ｋは
【化５３】
2021531272.tif 000067
であり、Ｚは
【化５４】
2021531272.tif 000068
であり；Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、及びＹは、それぞれ独立して
【化５５】
2021531272.tif 000069
であり；ただし、ａａが０であり、かつＺが末端基でないとき、末端基はＬ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、又はＹのうちの１つであり、そのため、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、又はＹのうちの１つは
【化５６】
2021531272.tif 000070
である。
【００５１】
いくつかの実施形態では、式ＩＩのペプチドは、表Ｃに示すペプチドから選択される。
【００５２】
【表３】
2021531272.tif 000071
【００５３】
別の実施形態では、ペプチドは式ＩＩＩで定義される。
【化５７】
2021531272.tif 000072
上式で、ＳＳ及びＸＸの１つは
【化５８】
2021531272.tif 000073
であり、かつもう１つは
【化５９】
2021531272.tif 000074
であり；ＴＴ、ＵＵ、ＶＶ、及びＷＷはそれぞれ
【化６０】
2021531272.tif 000075
又はＴＴ、ＵＵ、ＶＶ、及びＷＷはそれぞれ
【化６１】
2021531272.tif 000076
であり；ただし、ｖｖが０であり、かつｕｕが１のとき、ＳＳ及びＷＷの１つは
【化６２】
2021531272.tif 000077
であり、かつＳＳ及びＷＷのもう１つは
【化６３】
2021531272.tif 000078
であり；Ｒ401は
【化６４】
2021531272.tif 000079
であり；Ｒ402は
【化６５】
2021531272.tif 000080
であり；Ｒ403は
【化６６】
2021531272.tif 000081
であり：Ｒ404は
【化６７】
2021531272.tif 000082
であり；Ｒ405は
【化６８】
2021531272.tif 000083
であり；
このとき
＊α、＊β、＊δ、＊λ、及び＊εは、それぞれ独立して不斉炭素中心を示し、それぞれの絶対配置が各存在において独立してＲ又はＳであり；
Ｒ406、Ｒ407、Ｒ408、Ｒ409、及びＲ410は、それぞれ独立して水素、又は置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、飽和若しくは不飽和のシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アラルキル、５若しくは６員環の飽和若しくは不飽和のヘテロシクリル（ｈｅｔｅｒｏｃｙｌｙｌ）、ヘテロビシクリル（ｈｅｔｅｒｏｂｉｃｙｃｙｌ）、ヘテロアリール、若しくはアミノ保護基であり；又はＲ406及びＲ407は一緒になって３、４、５、６、７、若しくは８員環の置換若しくは非置換ヘテロシクリル（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｙｌ）環を形成し；
Ｒ455及びＲ460は、各存在において、独立して水素、−Ｃ（Ｏ）Ｒe、又は非置換Ｃ1−Ｃ6アルキル基であり；
Ｒ456及びＲ457は、それぞれ独立して水素、又は置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ6アルキル基であり；又はＲ456及びＲ457は共にＣ＝Ｏであり；
Ｒ458及びＲ459は、それぞれ独立して水素、又は置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ6アルキル基であり；又はＲ458及びＲ459は共にＣ＝Ｏであり；
Ｒ411、Ｒ412、Ｒ413、Ｒ414、Ｒ415、Ｒ418、Ｒ419、Ｒ420、Ｒ421、Ｒ422、Ｒ423、Ｒ424、Ｒ425、Ｒ426、Ｒ427、Ｒ428、Ｒ429、Ｒ430、Ｒ431、Ｒ432、Ｒ433、Ｒ434、Ｒ435、Ｒ436、Ｒ437、Ｒ438、Ｒ439、Ｒ440、Ｒ441、Ｒ443、Ｒ444、Ｒ445、Ｒ446、Ｒ447、Ｒ448、Ｒ449、Ｒ450、Ｒ451、Ｒ452、Ｒ453、及びＲ454は、それぞれ独立して水素、重水素、アミノ、アミド、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＯＲe、−ＳＲe、−ＮＲeＲe、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、又は置換若しくは非置換Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、−Ｃ（Ｏ）−アルキル、−Ｃ（Ｏ）−アリール、−Ｃ（Ｏ）−アラルキル、−Ｃ（Ｏ）2Ｒe、Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ、Ｃ1−Ｃ4ジアルキルアミノ、若しくはペルハロアルキル基であり；
Ｒ416及びＲ417は、それぞれ独立して水素、−Ｃ（Ｏ）Ｒe、又は置換若しくは非置換Ｃ1−Ｃ6アルキルであり；
Ｒ442は、水素、−ＯＲe、−ＳＲe、−ＮＲeＲe、−ＮＲeＲf、−ＣＯ2Ｒe、−Ｃ（Ｏ）ＮＲeＲe、−ＮＲeＣ（Ｏ）Ｒe、−ＮＲeＣ（ＮＨ）ＮＨ2、−ＮＲe−ダンシル、又は置換若しくは非置換アルキル、アリール、若しくはアラルキル基であり；
ＹＹ、ＺＺ、及びＡＥは、それぞれ独立して不在、−ＮＨ（ＣＯ）−、又はＣＨ2−であり；
ＡＢ、ＡＣ、ＡＤ、及びＡＦは、それぞれ独立して不在又はＣ1−Ｃ6アルキレン基であり；
各存在におけるＲeは、独立して水素、又は置換若しくは非置換Ｃ1−Ｃ6アルキル基であり；
各存在におけるＲfは、独立してＣ1−Ｃ6アルキレン−ＮＲe−ダンシル又はＣ1−Ｃ6アルキレン−ＮＲe−アントラニロイル基であり；
ｒｒ、ｓｓ、及びｖｖは、それぞれ独立して０又は１であり；ｔｔ及びｕｕはそれぞれ１であり、
ただし、ｒｒ＋ｓｓ＋ｔｔ＋ｕｕ＋ｖｖは４又は５に等しく；並びに
ｗｗ及びｘｘは、それぞれ独立して１、２、３、４、又は５である。
【００５４】
式ＩＩＩのペプチドのいくつかの実施形態では、
Ｒ406は、水素、置換若しくは非置換Ｃ1−Ｃ6アルキル基、
【化６９】
2021531272.tif 000084
であり；
このとき、Ｒ461は、−Ｃ1−Ｃ10アルキレン−ＣＯ2−又は−ＣＯ2−Ｃ1−Ｃ10アルキレン−ＣＯ2−であり；並びに
Ｒ462は、Ｃ1−Ｃ10アルキレン又はＣ1−Ｃ10アルキレン−ＣＯ2−であり；
Ｒ407、Ｒ408、Ｒ409、及びＲ410は、それぞれ独立して水素、又は置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ6アルキル基であり；
Ｒ455及びＲ460は、それぞれ独立して水素、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1−Ｃ6アルキル、又はメチル基であり；
Ｒ456及びＲ457はそれぞれ水素、又はＲ456及びＲ457は共にＣ＝Ｏであり；
Ｒ458及びＲ459はそれぞれ水素、又はＲ458及びＲ459は共にＣ＝Ｏであり；
Ｒ416及びＲ417は、それぞれ独立して水素又は−Ｃ（Ｏ）Ｒeであり；
Ｒ411、Ｒ412、Ｒ413、Ｒ414、Ｒ415、Ｒ418、Ｒ419、Ｒ420、Ｒ421、Ｒ422、Ｒ443、Ｒ444、Ｒ445、Ｒ446、及びＲ447は、それぞれ独立して水素、重水素、メチル、又は−ＯＲe基であり；
Ｒ423、Ｒ424、Ｒ425、Ｒ426、Ｒ427、Ｒ428、Ｒ429、Ｒ430、Ｒ431、Ｒ432、Ｒ433、Ｒ434、Ｒ435、Ｒ436、Ｒ437、Ｒ438、Ｒ439、Ｒ440、Ｒ441、Ｒ448、Ｒ449、Ｒ450、Ｒ451、Ｒ452、Ｒ453、及びＲ454は、それぞれ独立して水素、ＮＲeＲe、又は置換若しくは非置換Ｃ1−Ｃ6アルキル基であり；
Ｒ442は−ＮＲeＲeであり；
ＹＹ、ＺＺ、及びＡＥは、それぞれ独立して不在又は−ＣＨ2−であり；
ＡＢ、ＡＣ、ＡＤ、及びＡＦは、それぞれ独立して不在又はＣ1−Ｃ4アルキレン基であり；
各存在におけるＲeは、独立して水素、又は置換若しくは非置換Ｃ1−Ｃ6アルキル基であり；
ｒｒ、ｓｓ、及びｖｖはそれぞれ独立して０又は１であり；ｔｔ及びｕｕはそれぞれ１であり、
ただし、ｒｒ＋ｓｓ＋ｔｔ＋ｕｕ＋ｖｖは４又は５に等しく；並びに
ｗｗ及びｘｘは、それぞれ独立して１、２、３、４、又は５である。
【００５５】
式ＩＩＩのペプチドのいくつかの実施形態では、
Ｒ406は
【化７０】
2021531272.tif 000085
水素、又はメチルであり、
このとき、Ｒ461は、−（ＣＨ2）3−ＣＯ2−、−（ＣＨ2）9−ＣＯ2−、又は−ＣＯ2−（ＣＨ2）2−ＣＯ2−であり、及びＲ462は−（ＣＨ2）4−ＣＯ2−であり；
Ｒ407、Ｒ408、Ｒ409、及びＲ410はそれぞれ水素又はメチル基であり；
Ｒ455及びＲ460は、それぞれ独立して水素、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ3、又はメチル基であり；
Ｒ456及びＲ457はそれぞれ水素、又はＲ456及びＲ457は共にＣ＝Ｏであり；
Ｒ458及びＲ459はそれぞれ水素、又はＲ458及びＲ459は共にＣ＝Ｏであり；
Ｒ416及びＲ417は、それぞれ独立して水素又は−Ｃ（Ｏ）ＣＨ3であり；
Ｒ426、Ｒ438、及びＲ451はそれぞれ−Ｎ（ＣＨ3）2であり；
Ｒ434及びＲ442はそれぞれ−ＮＨ2であり；
Ｒ423、Ｒ424、Ｒ425、Ｒ427、Ｒ428、Ｒ429、Ｒ430、Ｒ431、Ｒ432、Ｒ433、Ｒ435、Ｒ436、Ｒ437、Ｒ439、Ｒ440、Ｒ441、Ｒ443、Ｒ444、Ｒ445、Ｒ446、Ｒ447、Ｒ448、Ｒ449、Ｒ450、Ｒ452、Ｒ453、及びＲ454はそれぞれ水素であり；
Ｒ412、Ｒ414、Ｒ419、及びＲ421は、それぞれ独立して水素又は重水素であり；
Ｒ411、Ｒ415、Ｒ418、及びＲ422は、それぞれ独立して水素、重水素、又はメチルであり；
Ｒ413及びＲ420は、それぞれ独立して水素、重水素、又はＯＲeであり；
ＹＹ、ＺＺ、及びＡＥは、それぞれ独立して−ＣＨ2−であり；
ＡＢ、ＡＣ、ＡＤ、及びＡＦはそれぞれ−ＣＨ2−又はブチレン基であり；
各存在におけるＲeは、独立して水素、又は置換若しくは非置換Ｃ1−Ｃ6アルキル基であり；
ｒｒ、ｓｓ、及びｖｖはそれぞれ独立して０又は１であり；ｔｔ及びｕｕはそれぞれ１であり、
ただし、ｒｒ＋ｓｓ＋ｔｔ＋ｕｕ＋ｖｖは４又は５に等しく；並びに
ｗｗ及びｘｘは、それぞれ独立して３又は４である。
【００５６】
式ＩＩＩの特定の実施形態では、
ＳＳは
【化７１】
2021531272.tif 000086
であり；ＸＸは
【化７２】
2021531272.tif 000087
であり；ＴＴ、ＵＵ、ＶＶ、及びＷＷは、それぞれ独立して
【化７３】
2021531272.tif 000088
であり；ただし、ｖｖが０であり、かつｕｕが１のとき、ＷＷは
【化７４】
2021531272.tif 000089
である。
【００５７】
いくつかの実施形態では、式ＩＩＩのペプチドは表Ｄに示すペプチドから選択される。
【００５８】
【表４】
2021531272.tif 000090
【００５９】
いくつかの実施形態では、ペプチドは表Ｅに示すペプチドから選択される。
【００６０】
【表５】
2021531272.tif 000091
【００６１】
一実施形態では、本技術の芳香族カチオン性ペプチドは、芳香族アミノ酸とカチオン性アミノ酸とが交互になったコア構造モチーフを有する。例えば、このペプチドは、次の式Ａ〜Ｆうちのいずれかで定義されるテトラペプチドであり得る。
芳香族−カチオン性−芳香族−カチオン性（式Ａ）
カチオン性−芳香族−カチオン性−芳香族（式Ｂ）
芳香族−芳香族−カチオン性−カチオン性（式Ｃ）
カチオン性−カチオン性−芳香族−芳香族（式Ｄ）
芳香族−カチオン性−カチオン性−芳香族（式Ｅ）
カチオン性−芳香族−芳香族−カチオン性（式Ｆ）
このとき、芳香族アミノ酸は、Ｐｈｅ（Ｆ）、Ｔｙｒ（Ｙ）、及びＴｒｐ（Ｗ）からなる群から選択される残基である。いくつかの実施形態では、芳香族残基は、芳香族残基、例えばシクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）の飽和類似体で置換され得る。いくつかの実施形態では、カチオン性アミノ酸は、Ａｒｇ（Ｒ）、Ｌｙｓ（Ｋ）、及びＨｉｓ（Ｈ）からなる群から選択される残基である。
【００６２】
本技術の芳香族カチオン性ペプチドのアミノ酸は任意のアミノ酸であってよい。本明細書で使用する用語「アミノ酸」は、少なくとも１つのアミノ基及び少なくとも１つのカルボキシル基を含有する任意の有機分子を指すのに使用される。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのアミノ基は、カルボキシル基に対してα位に位置する。
アミノ酸は天然であり得る。天然アミノ酸には、例えば、哺乳動物のタンパク質中に通常見られる２０種類の最も一般的な左旋性（Ｌ）アミノ酸、即ち、アラニン（Ａｌａ）、アルギニン（Ａｒｇ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、システイン（Ｃｙｓ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、リジン（Ｌｙｓ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、プロリン（Ｐｒｏ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、及びバリン（Ｖａｌ）などがある。
他の天然アミノ酸には、例えば、タンパク質合成に関係していない代謝過程で合成されるアミノ酸などがある。例えば、アミノ酸オルニチン及びシトルリンは、尿素生成中の哺乳動物の代謝で合成される。
本技術において有用なペプチドは、１つ又は複数の非天然アミノ酸を含有できる。非天然アミノ酸は、左旋性（Ｌ−）、右旋性（Ｄ−）、又はこれらの混合物であり得る。いくつかの実施形態では、ペプチドは天然のアミノ酸を含まない。
【００６３】
非天然アミノ酸は、生物の正常な代謝過程では通常合成されず、またタンパク質中に自然に生じないアミノ酸である。特定の実施形態では、本技術において有用な非天然アミノ酸は、一般的なプロテアーゼによって認識されることもない。
非天然アミノ酸はペプチドの任意の位置に存在できる。例えば、非天然アミノ酸はＮ末端、Ｃ末端、又はＮ末端とＣ末端の間の任意の位置に存在できる。非天然アミノ酸は、例えば、アルキル基、アリール基、又はアルキルアリール基を含み得る。アルキルアミノ酸のいくつかの例として、α−アミノ酪酸、β−アミノ酪酸、γ−アミノ酪酸、δ−アミノ吉草酸、及びε−アミノカプロン酸がある。アリールアミノ酸のいくつかの例として、オルト、メタ、及びパラアミノ安息香酸がある。アルキルアリールアミノ酸のいくつかの例として、オルト、メタ、及びパラアミノフェニル酢酸、並びにγ−フェニル−β−アミノ酪酸がある。
非天然アミノ酸には、天然アミノ酸の誘導体も含まれる。天然アミノ酸の誘導体には、例えば、天然アミノ酸に１つ又は複数の化学基を付加したものが含まれ得る。
例えば、１つ又は複数の化学基を、フェニルアラニン若しくはチロシン残基の芳香環の２’、３’、４’、５’、若しくは６’位、又はトリプトファン残基のベンゾ環の４’、５’、６’、若しくは７’位のうち１つ又は複数に付加できる。この基は、芳香環に付加できる任意の化学基であってよい。そのような基のいくつかの例として、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、又はｔ−ブチルなどの分岐又は非分岐のＣ1−Ｃ4アルキル、Ｃ1−Ｃ4アルキルオキシ（即ち、アルコキシ）、アミノ、Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ、及びＣ1−Ｃ4ジアルキルアミノ（例えば、メチルアミノ、ジメチルアミノ）、ニトロ、ヒドロキシル、ハロ（即ち、フルオロ、クロロ、ブロモ、又はヨード）がある。天然アミノ酸の非天然誘導体のいくつかの具体例として、ノルバリン（Ｎｖａ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、及びヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）がある。
【００６４】
本方法において有用なペプチド中のアミノ酸の修飾の別の例に、ペプチドのアスパラギン酸又はグルタミン酸残基のカルボキシル基の誘導体化がある。誘導体化の一例は、アンモニアによる、又は第一級若しくは第二級アミン、例えばメチルアミン、エチルアミン、ジメチルアミン、若しくはジエチルアミンによるアミド化である。誘導体化の別の例に、例えば、メチルアルコール又はエチルアルコールによるエステル化がある。
別のそのような修飾に、リジン、アルギニン、又はヒスチジン残基のアミノ基の誘導体化がある。例えば、そのようなアミノ基をアルキル化又はアシル化できる。いくつかの好適なアクリル基に、例えば、アセチル基又はプロピオニル基など上述のＣ1−Ｃ4アルキル基のいずれかを含むベンゾイル基又はアルカノイル基がある。
いくつかの実施形態では、非天然アミノ酸は一般的なプロテアーゼに対して耐性を示し、またいくつかの実施形態では感受性がない。プロテアーゼに耐性がある、又は非感受性である非天然アミノ酸の例に、上述の天然Ｌ−アミノ酸のいずれかの右旋性（Ｄ−）形態に加え、Ｌ−及び／又はＤ−非天然アミノ酸がある。Ｄ−アミノ酸は通常、タンパク質中に生じないが、細胞の正常なリボソームタンパク質合成機構以外の方法によって合成される特定のペプチド抗生物質中に見られ、本明細書で使用するＤ−アミノ酸は非天然アミノ酸と考えられる。
プロテアーゼ感受性を最小限に抑えるため、本技術の方法において有用なペプチドは、アミノ酸が天然か非天然かに関わらず、一般的なプロテアーゼによって認識される、５個未満、４個未満、３個未満、又は２個未満の隣接するＬ−アミノ酸を有するものとする。いくつかの実施形態では、ペプチドはＤ−アミノ酸のみを含み、Ｌ−アミノ酸を含まない。
ペプチドがアミノ酸のプロテアーゼ感受性配列を含有する場合、アミノ酸の少なくとも１つは非天然Ｄ−アミノ酸であり、それによりプロテアーゼ耐性をもたらす。プロテアーゼ感受性配列の一例に、エンドペプチターゼ及びトリプシンなどの一般的なプロテアーゼによって容易に切断される２つ以上の隣接塩基性アミノ酸がある。塩基性アミノ酸の例として、アルギニン、リジン、及びヒスチジンがある。いくつかの実施形態では、ペプチド骨格中の少なくとも１つのアミドはアルキル化されており、それによりプロテアーゼ耐性をもたらす。
【００６５】
芳香族カチオン性ペプチドが、ペプチド中のアミノ酸残基の総数と比較して、生理学的ｐＨで最小数の正味正電荷を有することが重要である。生理学的ｐＨでの正味正電荷の最小数を以下（ｐm）と呼ぶ。ペプチド中のアミノ酸残基の総数を以下（ｒ）と呼ぶ。
以下に述べる正味正電荷の最小数はすべて生理学的ｐＨにおける値である。本明細書で使用する用語「生理学的ｐＨ」は哺乳動物の体の組織及び器官の細胞中の正常ｐＨを指す。例えば、ヒトの生理学的ｐＨは通常約７．４であるが、哺乳動物の正常な生理学的ｐＨは約７．０〜約７．８の任意のｐＨであり得る。
通常、ペプチドは正に荷電したＮ末端アミノ基と負に荷電したＣ末端カルボキシル基を有する。電荷は生理学的ｐＨで互いに打ち消し合う。正味電荷の計算の例として、ペプチドＴｙｒ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ａｒｇは、１個の負に荷電したアミノ酸（即ち、Ｇｌｕ）及び４個の正に荷電したアミノ酸（即ち、２個のＡｒｇ残基、１個のＬｙｓ、及び１個のＨｉｓ）を有する。そのため、上記ペプチドは３個の正味正電荷を有する。
一実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、生理学的ｐＨでの正味正電荷の最小数（ｐm）とアミノ酸残基の総数（ｒ）の間の、３ｐmがｒ＋１以下の最大数であるという関係を有する。本実施形態では、正味正電荷の最小数（ｐm）とアミノ酸残基の総数（ｒ）の関係は以下の通りである。
【表６】
2021531272.tif 000092
別の実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、正味正電荷の最小数（ｐm）とアミノ酸残基の総数（ｒ）の間の、２ｐmがｒ＋１以下の最大数であるという関係を有する。本実施形態では、正味正電荷の最小数（ｐm）とアミノ酸残基の総数（ｒ）の関係は以下の通りである。
【表７】
2021531272.tif 000093
一実施形態では、正味正電荷の最小数（ｐm）とアミノ酸残基の総数（ｒ）は等しい。別の実施形態では、ペプチドは３個又は４個のアミノ酸残基、及び最小１個の正味正電荷、又は最小２個の正味正電荷、又は最小３個の正味正電荷を有する。
また芳香族カチオン性ペプチドが、正味正電荷の総数（ｐt）と比較して、最小数の芳香族基を有することも重要である。芳香族基の最小数を以下（ａ）と呼ぶ。芳香族基を有する天然アミノ酸には、アミノ酸ヒスチジン、トリプトファン、チロシン、及びフェニルアラニンなどがある。例えば、ヘキサペプチドＬｙｓ−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐは２個（リジン及びアルギニン残基による寄与）と３個（チロシン、フェニルアラニン、及びトリプトファン残基による寄与）の芳香族基の正味正電荷を有する。
また芳香族カチオン性ペプチドは、芳香族基の最小数（ａ）と生理学的ｐＨでの正味正電荷の総数（ｐt）の間の、ａが１であるときにｐtも１であり得る場合を除いて、３ａがｐt＋１以下の最大数であるという関係も有するものとする。本実施形態では、芳香族基の最小数（ａ）と正味正電荷の総数（ｐt）との関係は以下の通りである。
【表８】
2021531272.tif 000094
別の実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、芳香族基の最小数（ａ）と正味正電荷の総数（ｐt）の間の、２ａがｐt＋１以下の最大数であるという関係を有する。本実施形態では、芳香族アミノ酸残基の最小数（ａ）と正味正電荷の総数（ｐt）の関係は以下の通りである。
【００６６】
【表９】
2021531272.tif 000095
【００６７】
別の実施形態では、芳香族基の数（ａ）と正味正電荷の最小数（ｐt）は等しい。
いくつかの実施形態では、カルボキシル基、特にＣ末端アミノ酸の末端カルボキシル基は、例えばＣ末端アミドを形成するアンモニアでアミド化される。或いは、Ｃ末端アミノ酸の末端カルボキシル基は任意の第一級又は第二級アミンでアミド化し得る。第一級又は第二級アミンは、例えばアルキル、特に分岐又は非分岐のＣ1−Ｃ4アルキル又はアリールアミンであり得る。従って、ペプチドのＣ末端のアミノ酸は、アミド、Ｎ−メチルアミド、Ｎ−エチルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミド、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミド、Ｎ−メチル−Ｎ−エチルアミド、Ｎ−フェニルアミド、又はＮ−フェニル−Ｎ−エチルアミド基に変換し得る。
本技術の芳香族カチオン性ペプチドのＣ末端で生じないアスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、及びグルタミン酸残基の遊離カルボン酸塩基も、ペプチド内のどこで生じてもアミド化され得る。これらの内部位置でのアミド化は、本明細書に述べるアンモニア、又は第一級若しくは第二級アミンのいずれかによるものであり得る。
一実施形態では、本技術の方法において有用な芳香族カチオン性ペプチドは、２個の正味正電荷及び少なくとも１個の芳香族アミノ酸を有するトリペプチドである。特定の実施形態では、本技術の方法において有用な芳香族カチオン性ペプチドは、２個の正味正電荷及び２個の芳香族アミノ酸を有するトリペプチドである。
【００６８】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは以下を有するペプチドである。
少なくとも１個の正味正電荷；
最小４個のアミノ酸；
最大約２０個のアミノ酸；
正味正電荷の最小数（ｐm）とアミノ酸残基の総数（ｒ）の間の、３ｐmがｒ＋１以下の最大数であるという関係；及び芳香族基の最小数（ａ）と正味正電荷の総数（ｐt）の間の、ａが１であるときにｐtも１であり得る場合を除いて、２ａがｐt＋１以下の最大数であるという関係。
一実施形態では、２ｐmはｒ＋１以下の最大数であり、かつｐtと等しくてもよい。芳香族カチオン性ペプチドは、最小２個又は最小３個の正電荷を有する水溶性ペプチドであり得る。
一実施形態では、ペプチドは１つ又は複数の非天然アミノ酸、例えば１つ又は複数のＤ−アミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、Ｃ末端のアミノ酸のＣ末端カルボキシル基はアミド化されている。特定の実施形態では、ペプチドは最小４個のアミノ酸を有する。ペプチドは、合計約６個、合計約９個、又は合計約１２個のアミノ酸を有し得る。
一実施形態では、ペプチドはＮ末端（即ち、アミノ酸位置１）にチロシン残基又はチロシン誘導体を有する。チロシンの好適な誘導体には、２’−メチルチロシン（Ｍｍｔ）；２’，６’−ジメチルチロシン（２’６’−Ｄｍｔ）；３’，５’−ジメチルチロシン（３’５’Ｄｍｔ）；Ｎ，２’，６’−トリメチルチロシン（Ｔｍｔ）；及び２’−ヒドロキシ−６’−メチルチロシン（Ｈｍｔ）などがある。
一実施形態では、ペプチドは式Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2を有する。Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2は、アミノ酸のチロシン、アルギニン、及びリジンが寄与する３個の正味正電荷、並びにアミノ酸のフェニルアラニン及びチロシンが寄与する２個の芳香族基を有する。Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2のチロシンは、式２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2を有する化合物を生成する２’６’−ジメチルチロシンにおけるものなど、チロシンの修飾誘導体であってよい。２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2は６４０の分子量を有し、生理学的ｐＨで正味３個の正電荷を帯びている。２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2は、エネルギー依存様式で、いくつかの哺乳動物細胞型の形質膜に容易に浸透する（Ｚｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ．，３０４：４２５−４３２，２００３）。
【００６９】
或いは、いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、Ｎ末端（即ち、アミノ酸位置１）にチロシン残基又はチロシンの誘導体を有していない。Ｎ末端のアミノ酸は、チロシン以外の任意の天然又は非天然アミノ酸であってよい。一実施形態では、Ｎ末端のアミノ酸はフェニルアラニン又はその誘導体である。フェニルアラニンの例示的な誘導体には、２’−メチルフェニルアラニン（Ｍｍｐ）、２’，６’−ジメチルフェニルアラニン（２’，６’−Ｄｍｐ）、Ｎ，２’，６’−トリメチルフェニルアラニン（Ｔｍｐ）、及び２’−ヒドロキシ−６’−メチルフェニルアラニン（Ｈｍｐ）などがある。
Ｎ末端にチロシン残基又はチロシンの誘導体を有していない芳香族カチオン性ペプチドの一例が、式Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2を有するペプチドである。或いは、Ｎ末端フェニルアラニンは、２’６’−ジメチルフェニルアラニン（２’６’−Ｄｍｐ）などのフェニルアラニンの誘導体であってよい。一実施形態では、２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2のアミノ酸配列は、ＤｍｔがＮ末端にならないように再配置される。そのような芳香族カチオン性ペプチドの一例が、式Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の式を有するペプチドである。
【００７０】
本明細書に列挙するペプチドの好適な置換変異体には保存的アミノ酸置換体が含まれる。アミノ酸は、その物理化学的特性に従って以下のように分類され得る。
（ａ）非極性アミノ酸：Ａｌａ（Ａ）Ｓｅｒ（Ｓ）Ｔｈｒ（Ｔ）Ｐｒｏ（Ｐ）Ｇｌｙ（Ｇ）Ｃｙｓ（Ｃ）；
（ｂ）酸性アミノ酸：Ａｓｎ（Ｎ）Ａｓｐ（Ｄ）Ｇｌｕ（Ｅ）Ｇｌｎ（Ｑ）；
（ｃ）塩基性アミノ酸：Ｈｉｓ（Ｈ）Ａｒｇ（Ｒ）Ｌｙｓ（Ｋ）；
（ｄ）疎水性アミノ酸：Ｍｅｔ（Ｍ）Ｌｅｕ（Ｌ）Ｉｌｅ（Ｉ）Ｖａｌ（Ｖ）；及び
（ｅ）芳香族アミノ酸：Ｐｈｅ（Ｆ）Ｔｙｒ（Ｙ）Ｔｒｐ（Ｗ）。
同じ分類内の別のアミノ酸によるペプチド中のアミノ酸の置換は保存的置換と呼ばれ、元のペプチドの物理化学的特性が維持され得る。これに対し、異なる分類内の別のアミノ酸によるペプチド中のアミノ酸の置換は、元のペプチドの特性が変わる可能性が一般に高い。
本明細書に開示するペプチドのアミノ酸は、Ｌ−又はＤ−のいずれの構成でもあり得る。
【００７１】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示する芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）は、必要とする対象のＴＯＮの処置又は予防に使用される。いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩である。いくつかの実施形態では、対象はＴＯＮを有すると診断されている。
他の実施形態では、本明細書に開示する芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）は、ＴＯＮを有する対象の視覚機能の改善に使用される。いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩である。
いくつかの実施形態では、本明細書に開示する芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）は、網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の生存又は神経突起伸長の促進に使用される。いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩である。
【００７２】
本技術のペプチドのいくつかの実施形態では、ＴＯＮは対象の直接損傷又は間接損傷に起因する。いくつかの実施形態では、直接又は間接損傷は、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び対象の視神経の損傷からなる群から選択される。
本技術のペプチドのいくつかの実施形態では、ペプチドは損傷前に投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは損傷直後に投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、損傷後約１０分以内、２０分以内、約３０分以内、約４０分以内、約５０分以内、約１時間以内、約１．５時間以内、約２時間以内、約３時間以内、約４時間以内、約５時間以内、約６時間以内、約７時間以内、約８時間以内、約９時間以内、約１０時間以内、約１１時間以内、約１２時間以内、約１６時間以内、約２０時間以内、約２４時間以内、約３６時間以内、約４８時間以内、約７２時間以内、約９６時間以内、約５日以内、約６日以内、又は約１週間以内に投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約７週間、約８週間、約９週間、約１０週間、約１１週間、又は約１２週間以上にわたって毎日投与されることが意図される。いくつかの実施形態では、ペプチドは１６週間以上にわたって毎日投与されることが意図される。
【００７３】
本技術のペプチドのいくつかの実施形態では、処置及び予防は、視力喪失、霧視、ＲＧＣ損傷、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症のうち１つ又は複数を含むＴＯＮの１つ又は複数の徴候又は症状の処置又は予防を含む。
本技術のペプチドのいくつかの実施形態では、ペプチドは、対象又はＲＧＣに対し、追加治療薬又は追加の治療的処置と別々に、連続的に、又は同時に投与されることが意図される、又は投与されるよう配合される。いくつかの実施形態では、追加治療薬は以下からなる群から選択される：ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、及びネクロスタチン−１。いくつかの実施形態では、ＴＮＦα阻害剤はエタネルセプトである。いくつかの実施形態では、カリウムチャネル遮断薬は４−アミノピリジン（４−ＡＰ）である。いくつかの実施形態では、追加の治療的処置は対象の体温を下げる治療的冷却処置である。いくつかの実施形態では、追加の治療的処置は対象の低体温を誘発する。いくつかの実施形態では、ペプチドは、ペプチドと追加治療薬又は処置の組み合わせがＴＯＮの予防又は処置において相乗効果を有するように使用される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、ペプチドと追加治療薬の組み合わせがＲＧＣの生存又は神経突起伸長の促進において相乗効果を有するように使用される。
【００７４】
芳香族カチオン性ペプチドの合成
本明細書に開示する芳香族カチオン性ペプチド（例えば、２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、又はＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）は当技術分野で既知の任意の方法で合成し得る。ペプチドを化学的に合成する例示的で非限定的な方法は、Ｓｔｕａｒｔ  ａｎｄ  Ｙｏｕｎｇ，“Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ（１９８４）、“Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．２８９，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，ニューヨーク（１９９７），及びＮ．Ｌｅｏ  Ｂｅｎｏｉｔ，“Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，ボカラトン（２００６）に説明されている。本明細書に開示するペプチド、例えばＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2及びその代表的な塩形態を調製する別の方法は、次の公開された特許出願で確認し得る：国際公開第２００４／０７００５４号、国際公開第２０１７／１５６４０３号、国際公開第２０１８／０３４９０１号、及び国際公開第２０１８／１８７４００号。
遺伝子組換えペプチドは、例えばそれぞれ以下に記載されているように、分子生物学、タンパク質生化学、細胞生物学、及び微生物学の従来技術を用いて生成し得る：Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌｓ．Ｉ−ＩＩＩ，Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｅｄ．（１９９７）；Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄ．（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ニューヨーク，１９８９）；ＤＮＡ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｖｏｌｓ．Ｉ及びＩＩ，Ｇｌｏｖｅｒ，Ｅｄ．（１９８５）；Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｇａｉｔ，Ｅｄ．（１９８４）；Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，Ｈａｍｅｓ＆Ｈｉｇｇｉｎｓ，Ｅｄｓ．（１９８５）；Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ，Ｈａｍｅｓ＆Ｈｉｇｇｉｎｓ，Ｅｄｓ．（１９８４）；Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ，Ｆｒｅｓｈｎｅｙ，Ｅｄ．（１９８６）；Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ  Ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  Ｅｎｚｙｍｅｓ（ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，１９８６）；Ｐｅｒｂａｌ，Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ；ｔｈｅ  ｓｅｒｉｅｓ，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．，（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，１９８４）；Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  Ｖｅｃｔｏｒｓ  ｆｏｒ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｃｅｌｌｓ，Ｍｉｌｌｅｒ＆Ｃａｌｏｓ，Ｅｄｓ．（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，ニューヨーク，１９８７）；並びにＭｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．，Ｖｏｌｓ．１５４及び１５５，Ｗｕ＆Ｇｒｏｓｓｍａｎ，及びＷｕ，Ｅｄｓ．。
【００７５】
芳香族カチオン性ペプチド前駆体は、当技術分野で既知の（例えば、溶液相及び固相化学ペプチド合成を用いた）化学合成又は組換え合成のいずれかによって作成し得る。例えば、アミド化された本技術の芳香族カチオン性ペプチドの前駆体も同様に作成し得る。いくつかの実施形態では、組換え生成は費用対効果が著しく高いと考えられている。いくつかの実施形態では、同じく当技術分野で既知のアミド化反応によってペプチドを活性化するために前駆体を変換する。例えば、酵素的アミド化については、米国特許第４，７０８，９３４号明細書、欧州特許出願公開第０３０８０６７号明細書、及び欧州特許出願公開第０３８２４０３号明細書に記載されている。
組換え生成は、前駆体と、芳香族カチオン性ペプチドの所望の活性型への前駆体の変換を触媒する酵素の両方に用いることができる。そのような組換え生成については、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１１（１９９３）ｐｐ．６４−７０で考察されており、更にアミド化生成物への前駆体の変換についても説明されている。アミド化の際、α−ケト酸などのケト酸、又はこれらの塩若しくはエステル（このとき、α−ケト酸は分子構造ＲＣ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）ＯＨを有し、Ｒはアリール、Ｃ1−Ｃ4炭化水素部位、ハロゲン化若しくはヒドロキシル化Ｃ1−Ｃ4炭化水素部位、及びＣ1−Ｃ4カルボン酸からなる群から選択される）を、カタラーゼ補因子の代わりに使用し得る。こうしたケト酸の例として、ピルビン酸エチル、ピルビン酸及びこれらの塩、ピルビン酸メチル、ベンゾイルギ酸及びこれらの塩、２−ケト酪酸及びこれらの塩、３−メチル−２−オキソブタン酸及びこれらの塩、並びに２−ケトグルタル酸及びこれらの塩があるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、組換え芳香族カチオン性ペプチドの生成は、例えば、グルタチオンＳ−トランスフェラーゼを有する可溶性融合タンパク質としてグリシン伸長前駆体を大腸菌内で生成することによって進行し得る。α−アミド化酵素は、前駆体の活性芳香族カチオン性ペプチドへの変換を触媒する。この酵素は、例えば、上記に引用したＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙに記載されているチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞内で組換え生成する。他のアミド化ペプチドの前駆体も同様に生成し得る。アミド化又は他の追加の機能性を必要としないペプチドも同様に生成し得る。他のペプチド活性剤は、市販されているか、又は当技術分野で既知の技術により生し得る。
【００７６】
治療法
以下の考察は例示のみを目的として提示しており、限定することを意図したものではない。
本技術の一態様は、ＴＯＮを有する、有することが疑われる、又は有するリスクがあると診断された対象のＴＯＮを処置する方法を含む。治療適用において、芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）を含む組成物又は薬剤は、視神経症が疑われる、又はすでに視神経症に罹患した対象に、その合併症、及び疾患進行時の中間的な病理学的表現型を含む疾患の症状を治療する、又は少なくとも部分的に阻止するのに十分な量が投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩である。
本技術の別の態様は、ＴＯＮを有する、有することが疑われる、又は有するリスクがあると診断された対象の視覚機能を改善する方法を含む。治療適用において、芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）を含む組成物又は薬剤は、視神経症が疑われる、又はすでに視神経症に罹患した対象に、対象の視覚機能を改善するのに十分な量が投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩である。
本技術の一態様は、網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の生存又は神経突起伸長を促進する方法を含む。いくつかの実施形態では、ＲＧＣはＴＯＮを有する、有することが疑われる、又は有するリスクがある対象に存在する。治療適用において、芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）を含む組成物又は薬剤は、ＴＯＮが疑われる、又はすでにＴＯＮに罹患した対象に、対象の視覚機能を改善するのに十分な量が投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩である。
【００７７】
本技術の他の態様は、必要とする対象のＴＯＮを処置又は予防する薬剤の調製における組成物の使用、ＴＯＮを有する、又は有することが疑われる対象の視覚機能を改善する薬剤の調製における組成物の使用、及びＲＧＣの生存又は神経突起伸長を促進する薬剤の調製における組成物の使用を含む。芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）を含む組成物又は薬剤は、ＴＯＮが疑われる、又はすでにＴＯＮに罹患した対象に、対象の視覚機能を改善するのに十分な量を投与するのに好適である。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩である。
ＴＯＮなどの視神経症に罹患した対象は、当技術分野で既知の診断又は予後分析のいずれか、又は組み合わせで同定できる。例えば、ＴＯＮの典型的な症状に、視力喪失、霧視、ＲＧＣ損傷、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症などがあるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、ＴＯＮに罹患した対象は直接又は間接損傷を有する。いくつかの実施形態では、損傷は眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び対象の視神経の損傷からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＴＯＮに罹患した対象は、本明細書に記載するように、ＢＶＣＡ、ＰＥＲＧ、ＥＲＧ、ＳＴＲ、ＰｈＮＲ、ＯＣＴ、ＶＥＰ、及び／又はｐｒＶＥＰで検出される対象のＲＧＣの損傷によって同定される。
【００７８】
治療適用では、芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）を含む組成物が対象に投与される。いくつかの実施形態では、ペプチド組成物は１日に１、２、３、４、又は５回投与される。いくつかの実施形態では、ペプチド組成物は１日に６回以上投与される。追加的に、又は別法として、いくつかの実施形態では、ペプチド組成物は、毎日、隔日、３日毎、４日毎、５日毎、又は６日毎に投与される。いくつかの実施形態では、ペプチド組成物は、毎週、隔週、３週間毎に、又は毎月投与される。いくつかの実施形態では、ペプチド組成物は１、２、３、４、又は５週間にわたって投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、６週間以上にわたって投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは１２週間以上にわたって投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは１年未満にわたって投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、１年より長い期間にわたって、又は対象の視力が完全に若しくは部分的に回復するまで投与される。
本治療法に従って処置される対象は、例えば、ヒツジ、ブタ、ウシ、及びウマなどの家畜；イヌ及びネコなどのペット動物；ラット、マウス、及びウサギなどの実験動物を含む任意の哺乳動物であってよい。いくつかの実施形態では、この哺乳動物はヒトである。
【００７９】
いくつかの実施形態では、ＴＯＮと診断された、又はＴＯＮを有することが疑われる対象を１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドで処置することにより、以下のうち１つ又は複数のＴＯＮの症状が改善又は解消される：ＲＧＣ損傷、視力喪失、霧視、ＲＧＣ損傷、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症。いくつかの実施形態では、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドを用いての処置成功は、対象のＲＧＣにおいて、以下のうち１つ又は複数に対する改善を確認することによって判断する：（１）処置開始前若しくは開始時に測定した損傷のベースライン測定値若しくはレベル；（２）ＴＯＮの１つ若しくは複数の症状を示さない、未損傷（反対側）の眼の測定値若しくはレベル；（３）対照対象若しくは対照対象集団の損傷の測定値若しくはレベルであって、対照対象が視神経症の１つ若しくは複数の症状を示し、かつ（ｉ）芳香族カチオン性ペプチドの投与を受けていない、若しくは（ｉｉ）対照ペプチドの投与を受けている；又は（４）標準。いくつかの実施形態では、対象のＲＧＣにおける改善は、本明細書に記載するように、ＢＶＣＡ、ＰＥＲＧ、ＥＲＧ、ＳＴＲ、ＰｈＮＲ、ＯＣＴ、ＶＥＰ、及び／又はｐｒＶＥＰのうち１つ又は複数によって検出される。
【００８０】
予防法
一態様において、本技術は、ＴＯＮを有する、又は発症するリスクがある対象において、ＴＯＮの発症又はＴＯＮの１つ又は複数の症状を予防する、又は遅延させる方法を提供する。予防適用では、芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）の医薬組成物又は薬剤は、ＴＯＮを発症しやすい、又はそれ以外でＴＯＮのリスクがある対象に、疾患の生化学的、組織学的、及び／若しくは行動的症状、その合併症、並びに疾患進行時の中間的な病理学的表現型提示を含む疾患のリスクを排除する、若しくは低下させる、又は発症を遅延させるのに十分な量が投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩である。
予防的な芳香族カチオン性ペプチドの投与は、疾患又は障害に特徴的な症状が発現する前に投与することにより、疾患又は障害を予防すること、或いはその進行を遅延させることができる。
視神経症のリスクがある対象は、当技術分野で既知の診断又は予後分析のいずれか、又は組み合わせで同定できる。いくつかの実施形態では、ＴＯＮのリスクがある対象は、外傷性損傷を経験している対象である。いくつかの実施形態では、外傷性損傷は直接損傷又は間接損傷である。いくつかの実施形態では、直接又は間接損傷は、眼窩内損傷、管内損傷、頭蓋内損傷、及び対象の視神経の損傷からなる群から選択される。
【００８１】
予防適用では、芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）を含む組成物が対象に投与される。いくつかの実施形態では、ペプチド組成物は１日に１、２、３、４、又は５回投与される。いくつかの実施形態では、ペプチド組成物は１日に６回以上投与される。追加的に、又は別法として、いくつかの実施形態では、ペプチド組成物は、毎日、隔日、３日毎、４日毎、５日毎、又は６日毎に投与される。いくつかの実施形態では、ペプチド組成物は、毎週、隔週、３週間毎に、又は毎月投与される。いくつかの実施形態では、ペプチド組成物は１、２、３、４、又は５週間にわたって投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、６週間以上にわたって投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは１２週間以上にわたって投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは１年未満にわたって投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは１年より長い期間にわたって投与される。
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドを用いた処置により、以下のうち１つ又は複数の症状の発症が予防される、又は遅延する：視力喪失、霧視、ＲＧＣ損傷、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症。
本予防法に従って処置される哺乳動物は、例えば、ヒツジ、ブタ、ウシ、及びウマなどの家畜；イヌ及びネコなどのペット動物；ラット、マウス、及びウサギなどの実験動物を含む任意の哺乳動物である可能性がある。いくつかの実施形態では、この哺乳動物はヒトである。
【００８２】
芳香族カチオン性ペプチドベースの治療法の生物学的効果の判定
様々な実施形態において、好適なｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏアッセイを実施し、特定の芳香族カチオン性ペプチドベースの治療法の効果、及びその投与が処置に適用されるかを判定する。様々な実施形態において、代表的な動物モデルを用いてｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを実施し、所定の芳香族カチオン性ペプチドベースの治療法が、ＴＯＮの徴候及び／若しくは症状の軽減又は解消に所望の効果を発揮するかを判定できる。
【００８３】
動物モデル
治療に用いる化合物は、ヒト対象で試験する前に、ラット、マウス、トリ、ウシ、サル、ウサギなどを含むがこれらに限定されない好適な動物モデル系で試験できる。同様に、ｉｎ  ｖｉｖｏ検査でも、ヒト対象に投与する前に、当技術分野で既知の動物モデル系のいずれかを用いることができる。いくつかの実施形態では、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏ検査は、２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）の生物学的機能を対象とする。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩である。
【００８４】
視神経症の動物モデルは、当技術分野で既知の技術を用いて作成し得る。ＴＯＮの動物モデルには以下があるがこれらに限定されない：（ｉ）間接ＴＯＮの臨床症状を厳密に再現した超音波誘発性ＴＯＮ（ＳＩ−ＴＯＮ）；（ｉｉ）神経線維の軸索切断や神経血管系の破裂に至りやすい重症型のＴＯＮである視神経挫滅誘発性ＴＯＮ（ＯＮＣ−ＴＯＮ）；及び（ｉｉｉ）眼爆風損傷モデル。このようなモデルを使用して、ＴＯＮなどの視神経症の予防及び処置における本技術の芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、又はＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の生物学的効果を実証し、かつ特定の状況におけるペプチドの治療的有効量を含むものを決定し得る。
ＳＩ−ＴＯＮは、Ｔａｏ，Ｗ．ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｒｅｐｏｒｔｓ（２０１７）７：１１７７９（参照により本明細書に援用される）に記載されているように、視神経の骨管への入口の真上にある眼窩上隆起にマイクロチッププローブソニファイアーを配置して誘発する。次いで、超音波パルスを視神経に送達する。損傷後、ＰＥＲＧで測定される網膜のＲＧＣの数と視覚機能は、２週間にわたって徐々に低下する。視神経では、損傷後６時間以内に炎症性マーカーがアップレギュレートされる。免疫組織化学的には、ミクログリアの活性化、視神経へのＣＤ４５陽性白血球の浸潤、及びグリオーシス反応の開始が示される。
ＳＩ−ＴＯＮモデルは、視神経に非接触の振盪性損傷を与え、マウスにＴＯＮを誘発することができる。ＯＮＣ−ＴＯＮは、Ｓｏｌｏｍｏｎ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｍｅｔｈｏｄｓ（１９９６）７０：２１−２５（参照により本明細書に援用される）に記載されているように、成体ラットの視神経を露出させ、神経の髄膜に小さな開口部を設けることによって誘発する。開口部は眼球の約２〜３ｍｍ後方に設ける。ガラス製の解剖器具を開口部から導入し、これで神経の全幅にわたって軸索をすべて切断する。髄膜の連続性を保ち、神経への血管供給を損傷しないようにして、視神経軸索を完全に形質転換する。切断は、神経軸索の連続性に完全な隙間があることを透過照明で観察し、また形態学的及び電気生理学的基準の両方に照らすことで確認できる。「髄膜管」に形成した開口部を用いて、損傷した軸索の回復、救出及び／又は再生に有益であり得る物質を注入できる。このモデルは、神経再生のｉｎ  ｖｉｖｏ試験に、また特に想定される治療薬のスクリーニングにとりわけ好適である。
ＴＯＮの眼爆風損傷モデルは、Ｈｉｎｅｓ−Ｂｅａｒｄ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓ．（２０１２）９９：６３−７０（参照により本明細書に援用される）に記載されているように、特殊な圧力チャンバーを用いて誘発する。簡潔に説明すると、特殊な圧力チャンバーは、圧縮空気タンクが取り付けられた機械加工バレル付き調整ペイントボールガン；眼球を露出させたマウスを直接的な損傷や反動から保護するチャンバー；及びバレルに対してチャンバーの動きを微調整できる安全なプラットフォームを備える。マウスは、３段階の爆風圧の１つに曝露する（２３．６、２６．４、又は３０．４ｐｓｉ）。肉眼的所見、眼圧、光干渉断層撮影、及び視力は、曝露の０、３、７、１４、及び２８日後に評価できる。反対側の眼及び爆風に曝露していないマウスを対照として用いることができる。このモデルにおけるＴＯＮの肉眼的所見には、角膜浮腫、角膜擦過傷、及び視神経剥離などがあるがこれらに限定されない。
【００８５】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏモデル
上述の動物モデルに加え、ＴＯＮなどの視神経症のｉｎ  ｖｉｔｒｏモデルは、網膜神経節細胞のｉｎ  ｖｉｔｒｏ培養を含むことができる。ＲＧＣを抽出及び／又は培養する方法は当技術分野で既知であり、例えば、Ｘｕ，Ｚ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｈｕａｚｈｏｎｇ  Ｕｎｉｖ  Ｓｃｉ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇ  Ｍｅｄ  Ｓｃｉ．（２０１１）３１：４００−３；Ｈｕ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｇｌａｕｃｏｍａ（１９９７）６：３７−４３；Ｔａｎａｋａ，Ｔ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｒｅｐｏｒｔｓ（２０１５）５：８３４４（それぞれ参照により本明細書に援用される）に記載されている。
【００８６】
視神経の機能及び処置の有効性の評価方法
本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象の視覚機能及び／又は処置の有効性は以下のうち１つ又は複数を用いて評価する：最高矯正視力（ＢＶＣＡ）、パターン網膜電図（ＰＥＲＧ）、網膜電図（ＥＲＧ）、暗所視限界反応（ＳＴＲ）、光干渉断層撮影（ＯＣＴ）、視覚誘発電位（ＶＥＰ）、パターン反転ＶＥＰ、及び明所視陰性反応（ＰｈＮＲ）。例えば国際臨床視覚電気生理学会（ＩＳＣＥＶ）が定めるこれらの技術の標準については、Ｍａｒｍｏｒ，Ｍ．Ｆ．ｅｔ  ａｌ．，Ｄｏｃ．Ｏｐｔｈａｍｏｌ．（１９９５）８９：１９９−２１０；Ｈｏｌｄｅｒ，Ｇ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ．，Ｄｏｃ．Ｏｐｔｈａｍｏｌ．（２００７）１１４：１１１−１１６；Ｍａｒｍｏｒ，Ｍ．Ｆ．ｅｔ  ａｌ．，Ｄｏｃ．Ｏｐｔｈａｍｏｌ．（２００８）１１８：６９−７７；Ｏｄｏｍ，Ｊ．Ｖ．ｅｔ  ａｌ．，Ｄｏｃ．Ｏｐｔｈａｍｏｌ．（２００９）１２０：１１１−１９；及びＨｏｏｄ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．，Ｄｏｃ．Ｏｐｔｈａｍｏｌ．（２０１２）１２４：１−１３に記載されている。
視力と最高矯正視力（ＢＣＶＡ）は同じ意味で使用され、視覚処理系の眼の空間分解能の関数として眼の最大分解能を指す。ＢＣＶＡは、検査表上の図案化された文字、ランドルト環、記号、標準化されたキリル文字などのパターンを所定の距離から検査対象に判別させて検査する。視力検査表はコントラストを最大にする（例えば、白い背景に対して黒い記号）。検査対象の眼と検査表の距離は、水晶体が焦点を合わせようとする方法（遠距離視力）、又は既定の読み取り距離（近距離視力）で「光学的無限大」に近似するよう設定される。いくつかの実施形態では、測定は視力検査表（例えば、フェルディナンド・モノイエの視力検査表）、光学機器、及び／又はＦｒＡＣＴのようなコンピューターによる検査を用いて実施できる。
【００８７】
ＰＥＲＧは網膜中心機能を客観的に評価する確立された技術である。いくつかの実施形態では、ＰＥＲＧは、反転チェッカーボードを用いて、主に網膜内部から生じる小さな電位を誘発する。国際臨床視覚電気生理学会（ＩＳＣＥＶ）が推奨する技術を用いた通常のＰＥＲＧは、眼の光学系に干渉しない角膜電極を用いて記録する。いくつかの実施形態では、ＰＥＲＧは、約５０ｍｓでの顕著な陽性成分と、約９５ｍｓでのより大きな陰性成分からなる。これらの成分は、従来の神経生理学的慣行によりＰ５０及びＮ９５として知られており、これにより成分はその極性とおおよその潜時によって識別される。いくつかの実施形態では、Ｎ９５は網膜神経節細胞機能と関連して発生する。Ｐ５０の一部は、より遠位に発生したが、いくつかの実施形態では、Ｐ５０の最大７０％が、スパイク細胞（ｓｐｉｋｉｎｇ  ｃｅｌｌ）機能に関連した起源を有する。いくつかの実施形態では、Ｐ５０成分は黄斑光受容体によって「駆動」され、従って、黄斑機能の指標として用いることができる。急速な頻度（＞３．５Ｈｚ）の刺激を用いると、「定常状態」波形が得られるものの、これでは個々の成分を測定することができない。いくつかの実施形態では、ＰＥＲＧは、例えば、Ｈｏｌｄｅｒ，Ｇ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ．，Ｄｏｃ．Ｏｐｔｈａｍｏｌ．（２００７）１１４：１１１−１１６；及びＨｏｌｄｅｒ，Ｇ．Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｒｅｔｉｎａｌ  ａｎｄ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（２００１）２０：５３１−５６１（それぞれ参照により本明細書に援用される）に記載されているように実施する。
いくつかの実施形態では、外傷性損傷に起因する視神経障害は、電気生理学的異常を伴って生じる。いくつかの実施形態では、ＴＯＮなどの視神経症を有する、又は有することが疑われる対象は、罹患した眼でＰＥＲＧ振幅が徐々に連続的に減少する、及び／又はピーク潜時が徐々に増加する。従っていくつかの実施形態では、ＴＯＮの処置成功、及び／又は対象の視覚機能の改善は、損傷後の潜時及び振幅などの１つ又は複数のＰＥＲＧ測定値の改善を確認することによって判定できる。いくつかの実施形態では、改善はＰＥＲＧ振幅の増加、及び／又は潜時遅延の減少が改善となる。
【００８８】
ＥＲＧは、通常はＧａｎｚｆｅｌｄボウルを用いて照射した短時間の拡散閃光に対する網膜の反応の総和（ｍａｓｓ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ）である。これは角膜電極を使用して記録する。ＥＲＧの主成分は、負方向のａ波と正方向のｂ波である。暗順応した眼において明るい閃光に反応したａ波は、主に光受容体機能を反映しているが、特に刺激輝度が低い場合、受容体の後ろの構造が関与し得る。平時のａ波よりも振幅が大きいｂ波は、光情報伝達後の活動を反映している。これは主にＯＮ（脱分極）型双極細胞機能に関連して生成される。ＩＳＣＥＶ標準ＥＲＧ（Ｍａｒｍｏｒ，Ｍ．Ｆ．ｅｔ  ａｌ．，Ｄｏｃ．Ｏｐｔｈａｍｏｌ．（１９９５）８９：１９９−２１０）は、暗所視条件下での薄暗い光に対する桿体特有の反応と、標準的な、暗順応下での明るい白色閃光に対する桿体と錐体の混合反応を取り入れている。後者の反応は桿体の機能が優位となる。いくつかの実施形態では、ＥＲＧは反応の総和であり、従って、機能障害が狭い網膜領域に限られている場合には、正常な測定値を引き出し得る。いくつかの実施形態では、明所視ＥＲＧは、単一閃光（適切な明所視順応を行い、桿体抑制背景を使用）と３０Ｈｚのフリッカー刺激の両方に対して記録され、桿体は時間分解能が低いため、３０Ｈｚの刺激には反応しない。いくつかの実施形態では、明所視陰性反応（ＰｈＮＲ）評価を実施し、短い閃光への反応、錐体反応のｂ波に続く負方向の波を測定する。いくつかの実施形態では、暗所視限界反応（ＳＴＲ）評価を実施し、薄暗い光で、完全に暗順応したヒトの眼のＥＲＧで小さな角膜陰性波を誘発する。いくつかの実施形態では、ＥＲＧは、例えば、ｉｎ  Ｍａｒｍｏｒ，Ｍ．Ｆ．ｅｔ  ａｌ．，Ｄｏｃ．Ｏｐｔｈａｍｏｌ．（１９９５）８９：１９９−２１０；Ｍａｒｍｏｒ，Ｍ．Ｆ．ｅｔ  ａｌ．，Ｄｏｃ．Ｏｐｔｈａｍｏｌ．（２００９）１１８：６９−７７；Ｈｅｃｋｅｎｌｉｖｅｌｙ，Ｊ．Ｒ．ａｎｄ  Ａｒｄｅｎ，Ｇ．Ｂ．（ｅｄｓ）（１９９１）Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｖｉｓｉｏｎ．Ｍｏｓｂｙ  Ｙｅａｒ  Ｂｏｏｋ，セントルイス；Ｆｉｓｈｍａｎ，Ｇ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．Ｏｐｔｈａｍｏｌｏｇｙ  Ｍｏｎｏｇｒａｐｈ  ２，２nd  Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００１）；Ｔｈｅ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ，サンフランシスコ（それぞれ参照により本明細書に援用される）に記載されるように実施する。
【００８９】
視覚誘発電位（ＶＥＰ）は、視神経疾患疑い症例を調べる際に重要な電気生理学的検査である。診断用のＶＥＰの刺激は、通常、反転する白黒チェッカーボード又はグレーティング（ＰＶＥＰ）であるが、出現刺激（開始／停止）も使用できる。拡散閃光刺激は有効ではあるが、フラッシュＶＥＰ（ＦＶＥＰ）はパターンＶＥＰよりも疾患の影響に対する感度が低く、集団内では変動が大きい。しかしながら、正常な対象では眼間又は半球間の非対称性が小さいため、ＦＶＥＰは個々の患者における眼間又は半球間の非対称性を検出し得る。いくつかの実施形態では、パターン反転刺激によって誘発されるＶＥＰは、約１００ｍｓ（Ｐ１００）における顕著な陽性成分に先行及び後続する陰性成分（Ｎ７５及びＮ１３５）からなる。いくつかの実施形態では、（ピークまでの）潜時及びＰ１００成分の振幅を重点的に解析する。前部視覚路の機能障害の検出に加え、視交叉及び視交叉後方の機能障害が、頭皮後部にわたるＶＥＰの分布を調べることによって評価できる。いくつかの実施形態では、ＶＥＰは、例えば、Ｏｄｏｍ，Ｊ．Ｖ．ｅｔ  ａｌ．，Ｄｏｃ．Ｏｐｔｈａｍｏｌ．（２００９）１２０：１１１−１９；及びＨｅｃｋｅｎｌｉｖｅｌｙ，Ｊ．Ｒ．ａｎｄ  Ａｒｄｅｎ，Ｇ．Ｂ．（ｅｄｓ）（１９９１）Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｖｉｓｉｏｎ．Ｍｏｓｂｙ  Ｙｅａｒ  Ｂｏｏｋ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ（それぞれ参照により本明細書に援用される）に記載されるように実施する。
【００９０】
パターン反転ＶＥＰ（ｐｒＶＥＰ）は、約１００ｍｓ（Ｐ１００）における顕著な陽性成分に先行及び後続する陰性成分（Ｎ７５及びＮ１３５）からなる。陰的時間（通常は潜時と呼ばれる）及びＰ１００の振幅を重点的に解析する。視神経の機能障害の検出に加え、視交叉及び視交叉後方の機能障害が、頭皮後部にわたるＶＥＰの分布を調べることによって評価できる。視神経疾患に伴ってＰ１００成分の遅延が生じることが多いが、遅延は黄斑部の機能障害でもよく生じるため、ＶＥＰの遅延は視神経疾患の特徴とみなすべきではない。パターン網膜電図（ＰＥＲＧ）や多局所ＥＲＧ（ｍｆＥＲＧ）などの黄斑機能に関わる検査では、異常ｐｒＶＥＰの判定性が向上する。いくつかの実施形態では、ｐｒＶＥＰは、Ｋｏｔｈａｒｉ、Ｒ．ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｔ  Ｊ．Ｏｐｔｈａｍｏｌ．（２０１４）７：３２６−２９（参照により本明細書に援用される）に記載されるように実施する。
【００９１】
多局所ＥＲＧ（ｍｆＥＲＧ）技術は、網膜の電気生理学的活動を局所的に測定するために開発された。多局所網膜電図（ｍｆＥＲＧ）は、疑似バイナリシーケンス刺激技術を用いて網膜局所を同時に評価する技術である。いくつかの実施形態では、刺激は約５０度をカバーする黒白の六角形で構成されている。いくつかの実施形態では、ＥＲＧ反応（通常６１又は１０３）は、明順応条件下で錐体駆動型網膜から記録される。従ってｍｆＥＲＧでは、空間情報を、またいくつかの実施形態では網膜内の層局在化を追加することによって、ＰＥＲＧから得られるデータを拡張する中心網膜機能の指標が得られる。いくつかの実施形態では、ＥＲＧは、例えば、ｉｎ  Ｈｏｏｄ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．，Ｄｏｃ．Ｏｐｔｈａｍｏｌ．（２０１２）１２４：１−１３（参照により本明細書に援用される）に記載されるように実施する。
【００９２】
光干渉断層撮影（ＯＣＴ）は、コヒーレント光を用いて、光散乱媒体（例えば、生体組織）内からマイクロメートルの解像度の２次元及び３次元画像をキャプチャするイメージング技術である。光干渉断層撮影は、通常は近赤外光を使用する低コヒーレンス干渉法に基づいている。比較的長い波長を用いることで、光散乱媒体に透過させることが可能となる。ＯＣＴで、眼の細胞構成、光受容体の完全性、網膜微小血管、網膜層厚、陥凹乳頭径比、及び軸索の太さを評価できる。陥凹乳頭径比は、視神経乳頭の「陥凹」部分と視神経乳頭の最大径比である。視神経乳頭の病理的学的陥凹は眼圧によって生じることがある。
【００９３】
いくつかの実施形態では、対象（即ち、ｉｎ  ｖｉｖｏ）のＲＧＣは、最高矯正視力（ＢＣＶＡ）、パターン網膜電図（ＰＥＲＧ）、網膜電図（ＥＲＧ）、暗所視限界反応（ＳＴＲ）、光干渉断層撮影（ＯＣＴ）、視覚誘発電位（ＶＥＰ）、パターン反転ＶＥＰ（ｐｒＶＥＰ）、及び明所視陰性反応（ＰｈＮＲ）のうち１つ又は複数によって評価できる。このような方法を用いて、ＲＧＣの生存、及び／又は神経突起伸長の促進を検出できる。
いくつかの実施形態では、ＲＧＣは、当技術分野で既知の、ＲＧＣ損傷、ＲＧＣ生存、又は神経突起伸長を評価する任意の好適な方法によって評価できる。神経突起伸長とは、細胞体から伸びるニューロンの突起（例えば、軸索又は樹状突起）における形態学的変化である。いくつかの実施形態では、神経突起伸長の検出は、神経突起の数又は発生数の増加、及び神経突起の長さ又は大きさの増大の検出を含む。ＲＧＣを評価する好適な方法の非限定的な例に以下があるがこれらに限定されない：ｉｎ  ｖｉｔｒｏ神経突起伸長アッセイ（例えば、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｓｉｇｍａ、カタログ番号ＮＳ２２０から入手可能）の使用、細胞生存率アッセイ、例えばテトラゾリウム減少アッセイ、レサズリン減少アッセイ、色素排除アッセイ、例えばトリパンブルーアッセイ、細胞増殖アッセイ、例えば細胞定量化、アポトーシスアッセイ、例えばアネキシンＶを用いたアッセイ又はＴＵＮＥＬアッセイ、プロテアーゼ生存率マーカーアッセイ、及びＡＴＰアッセイの使用。
いくつかの実施形態では、ＲＧＣにおける視神経症の病態生理は、視神経をいくつかのマーカーで染色する免疫組織化学法（ＩＨＣ）によって確認できる。こうしたマーカーには以下があるがこれらに限定されない：活性化ミクログリアマーカーＣＤ１１ｂ（例えば、Ａｂｃａｍ（カタログ番号ａｂ１３３３５７）から入手可能）、白血球共通抗原ＣＤ４５（例えば、Ａｂｃａｍ（カタログ番号ａｂ１０５５８）から入手可能）、血小板内皮細胞接着分子（ＣＤ３１）（例えば、Ａｂｃａｍ（カタログ番号ａｂ２８３６４）から入手可能）、腫瘍壊死因子α（Ｔｎｆ）（例えば、Ａｂｃａｍ（カタログ番号ａｂ６６７１）から入手可能）、及び星状細胞マーカーＧＦＡＰ（例えば、Ａｂｃａｍ（カタログ番号ａｂ７２６０）から入手可能）。いくつかの実施形態では、損傷した視神経は以下のうち１つ又は複数を示す：ミクログリアの活性化（ＣＤ１１ｂ陽性細胞）、視神経へのＣＤ４５陽性白血球の浸潤、可溶性Ｔｎｆタンパク質の蓄積、及び視神経の横断面及び／又は縦断面の両方における星状細胞マーカーＧＦＡＰのポジティブ染色。
いくつかの実施形態では、ＲＧＣ喪失に至る早期病態生理学的機序、及び視覚機能は、選択したマーカーの遺伝子発現解析によって確認できる。遺伝子発現解析の非限定的な例として、選択したマーカーでの定量ＲＴ−ＰＣＲ（ｑＲＴ−ＰＣＲ）、ＲＮＡ−ｓｅｑ、ノーザンブロット、蛍光ｉｎ−ｓｉｔｕハイブリダイゼーション、遺伝子発現連鎖解析（ＳＡＧＥ）、ウエスタンブロット、及びマイクロアレイ解析がある。いくつかの実施形態では、損傷したＲＧＣは、損傷した神経において、インターロイキン１β（Ｉｌ１ｂ、ＲｅｆＳｅｑ：ＮＭ＿０００５７６）、ケモカイン（Ｃ−Ｃモチーフ）リガンド２（Ｃｃｌ２、ＲｅｆＳｅｑ：ＮＭ＿００２９８２）、腫瘍壊死因子α（Ｔｎｆ、ＲｅｆＳｅｑ：ＮＭ＿０００５９４）、及びＣ−Ｘ−Ｃモチーフ型ケモカイン１０（Ｃｘｃｌ１０、ＲｅｆＳｅｑ：ＮＭ＿００１５６５）を含むがこれらに限定されない、１つ又は複数の炎症性成分の発現のアップレギュレーションを示す。従って、ＲＧＣの処置成功は、ＴＯＮを有する未処置の対照に対して、これらの遺伝子のうち１つ又は複数の発現の減少を検出することによって確認できる。
【００９４】
投与方法及び有効投与量
本技術の芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）を細胞、器官、又は組織に接触させるのに、当業者に既知の任意の方法を使用し得る。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩である。好適な方法には、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｅｘ  ｖｉｖｏ、又はｉｎ  ｖｉｖｏ法がある。ｉｎ  ｖｉｖｏ法には、通常、上述のような芳香族カチオン性ペプチドの、哺乳動物、好適にはヒトへの投与がある。ｉｎ  ｖｉｖｏで治療に用いるとき、芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）は、対象に有効量（即ち、所望の治療効果を有する量）が投与される。用量及び投与計画は、対象の罹患程度、使用する特定の芳香族カチオン性ペプチドの特徴、例えばその治療指数、対象、及び対象の既往歴によって決まる。
有効量は、医師及び臨床医が精通する方法によって、前臨床試験及び臨床試験で決定し得る。方法で有用なペプチドの有効量を、医薬化合物を投与する既知の方法のいずれかによって、必要とする哺乳動物に投与し得る。ペプチドは全身又は局所に投与し得る。
【００９５】
ペプチドは薬学的に許容される塩として配合し得る。用語「薬学的に許容される塩」は、哺乳動物などの患者への投与に許容される塩基又は酸から調製される塩を意味する（例えば、所定の投与計画について哺乳動物で許容される安全性を有する塩）。しかしながら、患者への投与が意図されていない中間化合物の塩などの塩は、薬学的に許容される塩である必要がないことを理解されたい。薬学的に許容される塩は、薬学的に許容される無機塩基又は有機塩基、及び薬学的に許容される無機酸又は有機酸に由来してよい。更に、ペプチドが、アミン、ピリジン、又はイミダゾールなどの塩基性部位と、カルボン酸又はテトラゾールなどの酸性部位の両方を含む場合、双性イオンが形成され、かつ本明細書で使用する用語「塩」に含まれ得る。薬学的に許容される無機塩基に由来する塩に、アンモニウム塩、カルシウム塩、銅塩、第二鉄塩、第一鉄塩、リチウム塩、マグネシウム塩、マンガン塩、第一マンガン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、及び亜鉛塩などがある。薬学的に許容される有機塩基に由来する塩に、置換アミン、環状アミン、天然アミンなどを含む第一級、第二級、及び第三級アミン、例えばアルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルフォリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルフォリン、ピペラジン（ｐｉｐｅｒａｚｉｎｅ）、ピペラジン（ｐｉｐｅｒａｄｉｎｅ）、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリメチルアミン（ＮＥｔ3）、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどの塩があり、例えばこの塩は有機塩基（例えば、［ＨＮＥｔ3］+）のプロトン化形態を含む。薬学的に許容される無機酸に由来する塩に、ホウ酸、炭酸、ハロゲン化水素酸（臭化水素酸、塩酸、フッ化水素酸、又はヨウ化水素酸）、硝酸、リン酸、スルファミン酸、及び硫酸の塩などがある。薬学的に許容される有機酸に由来する塩に、脂肪族ヒドロキシル酸（例えば、クエン酸、グルコン酸、グリコール酸、乳酸、ラクトビオン酸、リンゴ酸、及び酒石酸）、脂肪族モノカルボン酸（例えば、酢酸、酪酸、ギ酸、プロピオン酸、及びトリフルオロ酢酸）、アミノ酸（例えば、アスパラギン酸及びグルタミン酸）、芳香族カルボン酸（例えば、安息香酸、ｐ−クロロ安息香酸、ジフェニル酢酸、ゲンチシン酸、馬尿酸、及びリフェニル酢酸）、芳香族ヒドロキシル酸（例えば、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、１−ヒドロキシナフタレン−２−カルボン酸、及び３−ヒドロキシナフタレン−２−カルボン酸）、アスコルビン酸、ジカルボン酸（例えば、フマル酸、マレイン酸、シュウ酸、及びコハク酸）、グルクロン酸、マンデル酸、ムチン酸、ニコチン酸、オロチン酸、パモン酸、パントテン酸、スルホン酸（例えば、ベンゼンスルホン酸、カンファースルホン酸、エジシル酸（ｅｄｉｓｙｌｉｃ  ａｃｉｄ）、エタンスルホン酸、イセチオン酸、メタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸���ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２，６−ジスルホン酸、及びｐ−トルエンスルホン酸）、キシナホ酸（ｘｉｎａｆｏｉｃ  ａｃｉｄ）などの塩がある。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される対イオンは、酢酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、臭化物、カンファースルホン酸塩、塩化物、クロルテオフィリネート、クエン酸塩、エタンジスルホン酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、馬尿酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフトエ酸塩、ナプシル酸（ｓａｐｓｙｌａｔｅ）、硝酸塩、オクタデカン酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、スルホサリチル酸塩、酒石酸塩、トシラート、及びトリフルオロ酢酸塩からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、モノ酢酸塩、ビス酢酸塩、トリ酢酸塩、酒石酸塩、モノトリフルオロ酢酸塩、ビストリフルオロ酢酸塩、トリトリフルオロ酢酸塩、モノ塩酸塩、ビス塩酸塩、トリ塩酸塩、モノトシレート塩、ビストシレート塩、又はトリトシレート塩を含む。いくつかの実施形態では、対象に投与するために配合されるペプチドは、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、又はモノＨＣｌ塩である。
【００９６】
本明細書に記載する芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）は、本明細書に記載する障害を処置又は予防するために単独又は組み合わせで対象に投与する医薬組成物に混合することができる。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩である。そのような組成物は、通常、活性剤及び薬学的に許容されるキャリアを含む。本明細書で使用する用語「薬学的に許容されるキャリア」には、薬剤投与に適合する生理食塩水、溶剤、分散媒、コーティング、抗菌剤及び抗真菌剤、等張剤、並びに吸収遅延剤などがある。補助的な活性化合物も組成物に混合することができる。
【００９７】
医薬組成物は、通常、意図する投与経路に適合するよう配合される。投与経路の例として、非経口（例えば、静脈内、皮内、腹腔内、又は皮下）、経口、硝子体内、吸入、経皮（局所）、眼内、点眼、イオン導入、及び経粘膜投与がある。非経口、皮内、又は皮下適用に用いる溶液又は懸濁液には以下の成分があってよい：注射用水、生理食塩水、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、又はその他の合成溶剤などの滅菌希釈液；ベンジルアルコール又はメチルパラベンなどの抗菌剤；アスコルビン酸又は亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化剤；エチレンジアミン四酢酸などのキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩、又はリン酸塩などの緩衝剤；及び塩化ナトリウム又はデキストロースなどの張性調整剤。ｐＨは、酸又は塩基、例えば塩酸又は水酸化ナトリウムを用いて調整できる。非経口製剤は、ガラス製又はプラスチック製のアンプル、ディスポーザブルシリンジ、又は複数回投与用バイアルに封入できる。患者又は処置する医師の便宜のために、投与製剤は、治療クール（例えば、７日間治療）に必要な器具（例えば、薬剤のバイアル、希釈液のバイアル、シリンジ、及び針）がすべて含まれたキットで提供できる。
注射用途に好適な医薬組成物は、滅菌水溶液（水溶性の場合）、又は滅菌注射液の即時調製若しくは分散用の分散液及び滅菌粉末を含むことができる。静脈内投与の好適なキャリアに、生理食塩水、静菌水、ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ  ＥＬ（登録商標）（ＢＡＳＦ、ニュージャージー州パーシッパニー）、又はリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）などがある。いずれにおいても、非経口投与用の組成物は、滅菌でなければならず、また容易に注射できる程度に流動性があるものとする。製造及び保管の条件下で安定しているものとし、細菌及び真菌などの微生物の汚染作用から保護されている必要がある。
【００９８】
芳香族カチオン性ペプチド組成物はキャリアを含むことができ、これは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコールなど）、並びに好適なこれらの混合物を含有する溶剤又は分散媒であってよい。適当な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用、分散液の場合は必要な粒径の維持、及び界面活性剤の使用により維持できる。微生物の活動は、様々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなどにより抑制できる。酸化を防止するために、グルタチオン及びその他の抗酸化剤を含むことができる。多くの場合、組成物に等張化剤、例えば糖類、マンニトール、ソルビトールなどの多価アルコール、又は塩化ナトリウムを含むと有利であろう。吸収を遅らせる薬剤、例えばモノステアリン酸アルミニウム又はゼラチンを組成物に含めるなどにより、注射可能な組成物の持続的吸収をもたらすことができる。
滅菌注射液は、必要量の活性化合物を、必要に応じて、上記に列挙した成分を１つ又は組み合わせて適切な溶剤に混合し、その後にろ過滅菌することによって調製できる。概して、分散液は、基本的な分散媒、及び上記に列挙した必要な他の成分を含有する滅菌溶媒に活性化合物を混合することによって調製する。滅菌粉末を用いて滅菌注射液を調製する場合、典型的な調製方法に真空乾燥及び凍結乾燥があり、これにより、活性成分の粉末に加え、更に事前に滅菌ろ過したこれらの溶液から任意の所望の成分を得ることができる。  経口組成物は、一般に不活性希釈液又は食用キャリアを含む。経口治療的投与を目的として、活性化合物に賦形剤を混合し、これを錠剤、トローチ、又はカプセル、例えばゼラチンカプセルの形態で使用することができる。また経口組成物は、流動キャリアを用いて調製し、口内洗浄剤として使用することもできる。薬学的に適合する結合剤及び／又は補助材料を組成物の一部として含めることができる。錠剤、丸剤、カプセル、トローチなどは、以下のいずれかの成分又は同様の性質を有する化合物を含有できる：微結晶性セルロース、トラガカントゴム、若しくはゼラチンなどの結合剤；デンプン若しくはラクトースなどの賦形剤；アルギン酸、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ、若しくはトウモロコシデンプンなどの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウム若しくはＳｔｅｒｏｔｅｘなどの潤滑剤；コロイド状二酸化ケイ素などの流動促進剤；スクロース若しくはサッカリンなどの甘味剤；又はペパーミント、サリチル酸メチル、若しくはオレンジ香料などの香味料。
【００９９】
吸入による投与では、化合物は、好適な噴射剤、例えば二酸化炭素などのガスを含有する加圧容器若しくはディスペンサー、又はネブライザーを用いたエアゾール噴霧という形で送達できる。このような方法には、米国特許第６，４６８，７９８号明細書に記載されているものも含まれる。
点眼又は眼内製剤では、本明細書に記載する芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、これらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）、又はこれらの医薬組成物を眼又は眼周辺領域に送達する任意の好適な方式を使用できる。点眼製剤については、全般的に、Ｍｉｔｒａ（ｅｄ．），Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ニューヨーク（１９９３）、及びＨａｖｅｎｅｒ，Ｗ．Ｈ．，Ｏｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｃ．Ｖ．Ｍｏｓｂｙ  Ｃｏ．，セントルイス（１９８３）も参照のこと。眼又は眼周辺への投与に好適な製剤の非限定的な例として、眼内挿入物、小型錠剤、及び局所製剤、例えば点眼剤、軟膏、及びｉｎ  ｓｉｔｕゲルがあるがこれらに限定されない。一実施形態では、本明細書に記載する芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）でコンタクトレンズを被覆する。いくつかの実施形態では、１回用量に、眼に投与される芳香族カチオン性ペプチドが０．１ｎｇ〜５０００μｇ、１ｎｇ〜５００μｇ、又は１０ｎｇ〜１００μｇ含まれる。
【０１００】
点眼剤は、眼に直接投与できる滅菌液剤を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載する１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）を含む点眼剤は、更に１つ又は複数の防腐剤を含む。いくつかの実施形態では、点眼剤に最適なｐＨは涙液に等しく、約７．４である。
ｉｎ  ｓｉｔｕゲルは粘稠液であり、適切なｐＨ、温度、及び電解質の存在となどの外的要因の影響を受けると、ゾルからゲルへの転移を起こす能力を示す。この特性により、眼球面からの薬剤排出が遅くなり、活性成分のバイオアベイラビリティが向上する。ｉｎ  ｓｉｔｕゲル製剤に一般に用いられるポリマーに、ジェランガム、ポロキサマー、及び酢酸フタル酸セルロースなどがあるがこれらに限定されない。
軟膏は、眼への局所使用など外用の半固形剤形である。いくつかの実施形態では、軟膏は、ヒトの深部体温に近い融点又は軟化点を有する固形又は半固形炭化水素系を含む。いくつかの実施形態では、眼に塗布される軟膏は、小さな液滴に分解し、これが結膜嚢に長時間留まることから、バイオアベイラビリティが向上する。
【０１０１】
眼内挿入物は、典型的な点眼剤形態の短所がない固形又は半固形剤形である。これらは鼻涙管からの流出といった防御機構の影響を受けにくく、結膜嚢に長時間留まる能力を示し、従来の剤形よりも安定している。またこれらには、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドを正確に投与でき、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドを一定速度で持続放出し、かつ１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドの体内吸収を制限するなどの利点もある。いくつかの実施形態では、眼内挿入物は、本明細書に記載する１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）、及び１つ又は複数のポリマー材料を含む。ポリマー材料には、メチルセルロース及びその誘導体（例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ））、エチルセルロース、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ  Ｋ−９０）、ポリビニルアルコール、キトサン、カルボキシメチルキトサン、ゼラチン、並びに前述のポリマーの様々な混合物などがあるがこれらに限定されない。
【０１０２】
小型錠剤は生分解性の固形剤形態であり、結膜嚢への塗布後にゲルに転移することにより活性成分と眼球面の接触時間が延長するため、活性成分のバイオアベイラビリティが向上する。小型錠剤の利点に、結膜嚢への塗布しやすさ、流涙又は鼻涙管からの留出などの防御機構に対する耐性、粘膜付着性ポリマーの存在による角膜との接触延長、及びキャリア外層の膨潤による製剤から塗布部分への活性成分の漸進的な放出などがある。小型錠剤は、本明細書に記載する１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）、及び１つ又は複数のポリマーを含む。小型錠剤製剤で用いるのに好適なポリマーの非限定的な例として、セルロース誘導体、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、アクリル酸塩（例えば、ポリアクリル酸及びその架橋形態）、Ｃａｒｂｏｐｏｌ又はＣａｒｂｏｍｅｒ、キトサン、並びにデンプン（例えば、ドラム乾燥ワクシートウモロコシデンプン）がある。いくつかの実施形態では、小型錠剤は更に、１つ又は複数の賦形剤を含む。賦形剤の非限定的な例に、マンニトール及びステアリン酸マグネシウムがある。
【０１０３】
点眼又は眼内調剤は、使用上無害である抗菌成分などの無毒性補助物質、例えば、チメロサール、塩化ベンザルコニウム、メチル及びプロピルパラベン、臭化ベンジルドデシニウム、ベンジルアルコール、又はフェニルエタノール；塩化ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、又はグルコン酸塩緩衝剤などの緩衝成分；並びにソルビタンラウリン酸モノエステル、トリエタノールアミン、ポリオキシエレンソルビタンモノパルミチレート、エチレンジアミン四酢酸などの従来成分などを含有し得る。  いくつかの実施形態では、本明細書に記載する１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）を含む点眼製剤の粘度を高めて、角膜との接触及び眼内バイオアベイラビリティを向上させる。粘度の向上は、生体膜を通して拡散せずに水中で３次元網目構造を形成する高分子量の親水性ポリマーを添加することによって可能である。このようなポリマーの非限定的な例として、ポリビニルアルコール、ポロキサマー、ヒアルロン酸、カルボマー、及び多糖類、セルロース誘導体、ジェランガム、及びキサンタンガムがある。
本明細書に記載する治療用化合物は、経粘膜又は経皮で全身投与することもできる。経粘膜又は経皮投与では、透過させるバリアに適した浸透剤を製剤に使用する。このような浸透剤は、一般に当技術分野で既知であり、例えば経粘膜投与では、洗浄剤、胆汁酸塩、及びフシジン酸誘導体などがある。経粘膜投与は、鼻腔スプレーの使用により実現できる。経皮投与では、活性化合物は、当技術分野で一般に知られるように、軟膏、膏薬、ゲル、又はクリームに製剤化される。一実施形態では、経皮投与はイオン導入で実施し得る。
【０１０４】
治療タンパク質又はペプチドはキャリア系で製剤化できる。キャリアはコロイド系であってよい。コロイド系は、リポソーム、リン脂質二重層溶媒であってよい。一実施形態では、治療ペプチドは、ペプチドの完全性を維持したままリポソームに封入される。当業者は、リポソームを調製する様々な方法が存在することを理解しよう（Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ａｎａｌ．，３３：３３７−４６２（１９８８）；Ａｎｓｅｌｅｍ，ｅｔ  ａｌ．，Ｌｉｐｏｓｏｍｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ（１９９３）参照）。リポソーム製剤は、クリアランスを遅らせ、かつ細胞取り込みを促進することができる（Ｒｅｄｄｙ，Ａｎｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．，３４（７−８）：９１５−９２３（２０００）参照）。また、可溶性、不溶性、透過性、不透過性、生分解性、若しくは胃内滞留性ポリマー又はリポソームを含むがこれらに限定されない、薬学的に許容される成分から調製される粒子に活性剤を添加することもできる。このような粒子に、ナノ粒子、生分解性ナノ粒子、ミクロ微粒子、生分解性ミクロ粒子、ナノスフェア、生分解性ナノスフェア、ミクロスフェア、生分解性ミクロスフェア、カプセル、エマルジョン、リポソーム、ミセル、及びウイルスベクター系などがあるがこれらに限定されない。
【０１０５】
キャリアは、ポリマー、例えば、生分解性・生体適合性ポリマーマトリックスであってもよい。一実施形態では、治療ペプチドは、タンパク質の完全性を維持したまま、ポリマーマトリックスに埋め込むことができる。ポリマーは、ポリペプチド、タンパク質、若しくは多糖類などの天然型、又はポリα−ヒドロキシ酸などの合成型であり得る。例として、例えば、コラーゲン、フィブロネクチン、エラスチン、酢酸セルロース、硝酸セルロース、多糖類、フィブリン、ゼラチン、及びこれらの組み合わせから作成されるキャリアがある。一実施形態では、ポリマーは、ポリ乳酸（ＰＬＡ）又は乳酸グリコール酸共重合体（ＰＧＬＡ）である。ポリマーマトリックスは、ミクロスフェア及びナノスフェアを含む、様々な形態及びサイズで調製及び単離できる。ポリマー製剤は、長期間の治療効果をもたらすことができる（Ｒｅｄｄｙ，Ａｎｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．，３４（７−８）：９１５−９２３（２０００）参照）。ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）のためのポリマー製剤は臨床試験で使用されている（Ｋｏｚａｒｉｃｈ及びＲｉｃｈ，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，２：５４８−５５２（１９９８）参照）。
ポリマーミクロスフェア徐放製剤の例は、ＰＣＴ国際公開第９９／１５１５４号（Ｔｒａｃｙ，ｅｔ  ａｌ．）、米国特許第５，６７４，５３４号及び同第５，７１６，６４４号明細書（共にＺａｌｅ，ｅｔ  ａｌ．）、ＰＣＴ国際公開第９６／４００７３号（Ｚａｌｅ，ｅｔ  ａｌ．）、及びＰＣＴ国際公開第００／３８６５１号（Ｓｈａｈ，ｅｔ  ａｌ．）に記載されている。米国特許第５，６７４，５３４号明細書、米国特許第５，７１６，６４４号明細書、及びＰＣＴ国際公開第９６／４００７３号は、塩を用いることで凝集に対して安定化されるエリスロポエチンの粒子を含有するポリマーマトリックスを説明している。
いくつかの実施形態では、治療用化合物は、埋め込み及びマイクロカプセル化送達システムを含む放出制御製剤など、治療用化合物を身体からの急速な排除に対して保護するキャリアを用いて調製する。エチレン酢酸ビニル、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、及びポリ乳酸などの生分解性・生体適合性ポリマーが使用できる。このような製剤は、既知の技術を用いて調製できる。材料は、例えば、Ａｌｚａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｎｏｖａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．から市販されている。リポソーム懸濁液（細胞特異的抗原に対するモノクローナル抗体を有する特定の細胞を標的化したリポソームを含む）も、薬学的に許容されるキャリアとして使用できる。これらは、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号明細書に記載されているように、当業者に既知の方法に従って調製できる。
治療用化合物を製剤化して、細胞内送達を強化することができる。例えば、リポソーム送達システムは当技術分野で既知であり、例えば、Ｃｈｏｎｎ  ａｎｄ  Ｃｕｌｌｉｓ，“Ｒｅｃｅｎｔ  Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｌｉｐｏｓｏｍｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，”  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ６：６９８−７０８（１９９５）；Ｗｅｉｎｅｒ，“Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ  ｆｏｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ：Ｓｅｌｅｃｔｉｎｇ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ，”  Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ，４（３）：２０１−９（１９９４）；ａｎｄ  Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ，“Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ：Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｂｌｅｍｓ，”  Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１３（１２）：５２７−３７（１９９５）を参照のこと。Ｍｉｚｇｕｃｈｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔ．，１００：６３−６９（１９９６）は、タンパク質をｉｎ  ｖｉｖｏとｉｎ  ｖｉｔｒｏの両方で細胞に送達するための融合性リポソームの使用を説明している。
【０１０６】
任意の治療薬の用量、毒性、及び治療有効性は、例えば、ＬＤ50（集団の５０％が死に至る用量）及びＥＤ50（集団の５０％で治療的に有効な用量）を決定するための、細胞培養又は実験動物における標準的な製薬手順によって決定できる。毒性効果と治療効果の用量比は治療指数とされ、ＬＤ50／ＥＤ50の比として表すことができる。高い治療指数を示す化合物が有利である。毒性副作用を呈する化合物も使用し得るが、罹患組織部位を当該化合物の標的とするよう送達システムの設計に注意し、非罹患細胞に損傷を与える可能性を最小限に抑えて副作用を低減させる必要がある。
ヒトに使用するための用量範囲で製剤化するのに、細胞培養アッセイ及び動物研究から得られたデータを用いることができる。このような化合物の用量は、毒性がほとんど又は全くないＥＤ50を含む血中濃度の範囲内に収まり得る。用量は、用いる剤形と投与経路に応じてこの範囲内で変化し得る。本方法で用いる任意の化合物についても、治療有効用量は、最初に細胞培養アッセイから推定できる。投与量は、細胞培養で決定されるＩＣ50（即ち、症状の最大値の半数を阻害する試験化合物の濃度）を含む血中血漿濃度範囲を達成するように、動物モデルで製剤化できる。このような情報を用いて、ヒトにおいて有用な投与量を正確に決定することができる。血漿中濃度は、例えば、高速液体クロマトグラフィーによって測定し得る。
【０１０７】
通常、治療効果又は予防効果をもたらすのに十分な有効量の芳香族カチオン性ペプチドは、約０．０００００１〜約１０，０００ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲である。好適には、用量は約０．０００１〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲である。例えば、用量は、毎日、隔日、若しくは３日毎に１ｍｇ／ｋｇ体重若しくは１０ｍｇ／ｋｇ体重、又は毎週、隔週、若しくは３週間毎に１〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲内であってよい。一実施形態では、ペプチドの１回用量は、０．００１〜１０，０００μｇ／ｋｇ体重の範囲である。一実施形態では、キャリアにおける芳香族カチオン性ペプチド濃度は、送達される１ミリリットル当たり０．２〜２０００μｇの範囲である。例示的な処置計画には、１日１回又は１週間に１回の投与が含まれる。治療適用において、疾患の進行が緩和若しくは停止するまで、又は対象が疾患の症状の部分的若しくは完全な改善を示すまで、比較的短い間隔で比較的高用量の投与が必要となることがある。その後、患者に予防投与計画で投与することができる。
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの治療的有効量は、標的組織におけるペプチド濃度が１０-12〜１０-6モル、例えば、約１０-7モルと定義し得る。この濃度は、０．００１〜１００ｍｇ／ｋｇの全身投与量、又は体表面積当たりの等価用量によってもたらし得る。投与スケジュールは、連続投与（例えば、非経口注入又は経皮適用）も含め、１日１回又は週１回投与などにより、標的組織で治療濃度を維持するよう最適化する。
【０１０８】
いくつかの実施形態では、治療的有効量の芳香族カチオン性ペプチドは損傷前に投与される。いくつかの実施形態では、治療的有効量の芳香族カチオン性ペプチドは損傷直後に投与される。いくつかの実施形態では、治療的有効量の芳香族カチオン性ペプチドは、損傷後約１時間以内、約２時間以内、約３時間以内、約４時間以内、約５時間以内、約６時間以内、約７時間以内、約８時間以内、約９時間以内、約１０時間以内、約１１時間以内、約１２時間以内、約１４時間以内、約１６時間以内、約１８時間以内、約２０時間以内、約２２時間以内、又は約２４時間以内に投与される。いくつかの実施形態では、治療的有効量の芳香族カチオン性ペプチドは、損傷の約１分〜約６時間後、約１〜約１２時間後、約４〜約２４時間後、約１２〜約３６時間後、約６〜約４８時間後、又は約２４〜約７６時間後に投与される。いくつかの実施形態では、治療的有効量の芳香族カチオン性ペプチドは、約１週以上、約２週間以上、約３週間以上、約４週間以上、約５週間以上、約６週間以上、約７週間以上、約８週間以上、約１０週間以上、又は約１２週間以上にわたって毎日投与される。いくつかの実施形態では、治療的有効量の芳香族カチオン性ペプチドは、約１〜約１２週間にわたって毎日投与される。
当業者は、対象の効果的な処置に必要な用量及びタイミングに影響を及ぼし得る特定の要因を理解するだろう。こうした要因には、疾患又は障害の重症度、前処置、対象の全身の健康及び／又は年齢、並びに存在する他の疾患などがあるがこれらに限定されない。更に、本明細書に記載する治療的有効量の治療組成物を用いた対象の処置は、単回処置又は連続的な処置を含むことができる。
【０１０９】
併用療法
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）は、ＴＯＮの予防又は処置のための１つ又は複数の追加治療と組み合わせ得る。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2又はこれらの薬学的に許容される塩である。いくつかの実施形態では、追加の治療に、ステロイドの投与；視神経管の外科的減圧；ステロイドと外科手術の組み合わせ；ＴＮＦα阻害剤の投与、コルチコステロイドの投与、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬の投与、レスベラトロールの投与、カリウムチャネル遮断薬の投与、ネクロスタチン−１の投与、処置された対象の深部体温の低下がなどあるがこれらに限定されない。
【０１１０】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数のＴＮＦα阻害剤が、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドと別々に、同時に、又は連続的に投与される。いくつかの実施形態では、ＴＮＦα阻害剤は、エタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ（登録商標））、インフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ（登録商標））、アダリムマブ（Ｈｕｍｉｒａ（登録商標））、セルトリズマブ（Ｃｉｍｚｉａ（登録商標））、及びゴリムマブ（Ｓｙｍｐｏｎｉ（登録商標））からなる群から選択される。特定の実施形態では、ＴＮＦα阻害剤はエタネルセプトである。いくつかの実施形態では、ＴＮＦα阻害剤の投与量は、約０．５〜約２ｍｇ／ｋｇ、約５〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約１０〜約７５ｍｇ／ｋｇ、又は約２５〜約５０ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＴＮＦα阻害剤の投与量は、０．８ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ、約７５ｍｇ／ｋｇ、約８０ｍｇ／ｋｇ、約９０ｍｇ／ｋｇ、約１００ｍｇ／ｋｇ、約１１０ｍｇ／ｋｇ、約１２０ｍｇ／ｋｇ、約１２５ｍｇ／ｋｇ、約１３０ｍｇ／ｋｇ、約１４０ｍｇ／ｋｇ、約１５０ｍｇ／ｋｇ、約１６０ｍｇ／ｋｇ、約１７５ｍｇ／ｋｇ、約１８０ｍｇ／ｋｇ、約１９０ｍｇ／ｋｇ、約２００ｍｇ／ｋｇ以上である。いくつかの実施形態では、ＴＮＦα阻害剤は、１日２回、毎日、４８時間毎、７２時間毎、１週間に２回、１週間に１回、２週間に１回、１ヵ月に２回、２ヵ月に１回、３ヵ月に１回、又は６ヵ月に１回投与される。いくつかの実施形態では、ＴＮＦα阻害剤の投与量は、対象の体重及び／又は年齢によって決まる。
【０１１１】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数のＩＬ−１Ｒ拮抗薬が、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドと別々に、同時に、又は連続的に投与される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬はＩＬ１ＲＮ遺伝子（Ｅｎｔｒｅｚ  ｇｅｎｅ  ３５５７，ＵｎｉＰｒｏｔ  Ｐ１８５１０）によってコード化される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬は、ＩＬ１ＲＮ遺伝子によってコードされたタンパク質、又はＩＬ１ＲＮ遺伝子によってコードされたタンパク質と少なくとも８０％の配列類似性を有するタンパク質の断片を有する。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬はアナキンラ（Ｋｉｎｅｒｅｔ（登録商標））である。アナキンラは、アミノ末端に余分に１個のメチオニン残基を有している点が天然のヒトＩＬ−１Ｒａと異なる。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬は組換え体である。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬の投与量は、約０．５〜約２ｍｇ／ｋｇ、約１〜約２ｍｇ／ｋｇ、約０．５〜約５ｍｇ／ｋｇ、約５〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約１０〜約７５ｍｇ／ｋｇ、又は約２５〜約５０ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬の投与量は、０．８ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ、約７５ｍｇ／ｋｇ、約８０ｍｇ／ｋｇ、約９０ｍｇ／ｋｇ、約１００ｍｇ／ｋｇ、約１１０ｍｇ／ｋｇ、約１２０ｍｇ／ｋｇ、約１２５ｍｇ／ｋｇ、約１３０ｍｇ／ｋｇ、約１４０ｍｇ／ｋｇ、約１５０ｍｇ／ｋｇ、約１６０ｍｇ／ｋｇ、約１７５ｍｇ／ｋｇ、約１８０ｍｇ／ｋｇ、約１９０ｍｇ／ｋｇ、約２００ｍｇ／ｋｇ以上である。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬は、１日２回、毎日、４８時間毎、７２時間毎、１週間に２回、１週間に１回、２週間に１回、１ヵ月に２回、２ヵ月に１回、３ヵ月に１回、又は６ヵ月に１回投与される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬の投与量は、対象の体重及び／又は年齢によって決まる。
【０１１２】
いくつかの実施形態では、レスベラトロールが、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドと別々に、同時に、又は連続的に投与される。レスベラトロール（３，５，４’−トリヒドロキシ−ｔｒａｎｓ−スチルベン）はスチルベノイド（天然フェノールの一種）であり、また、損傷に反応して、又はバクテリアや菌類などの病原体の攻撃を受けたときにいくつかの植物で生合成されるファイトアレキシンである。レスベラトロールが含まれる食品には、ブドウの皮、ブルーベリー、ラズベリー、クワの実などがあるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、レスベラトロールは、ジヒドロ−レスベラトロール、ε−ビニフェリン、パリドール、クアドラングラリンＡ、ｔｒａｎｓ−ジプトインドネシンＢ、ホペアフェノール、オキシレスベラトロール、ピセタノール、ピセイド、プテロスチルベン、及び４’メトキシ−（Ｅ）−レスベラトロール３−Ｏ−ルチノシドからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、レスベラトロールの投与量は、約０．５〜約２ｍｇ／ｋｇ、約１〜約２ｍｇ／ｋｇ、約０．５〜約５ｍｇ／ｋｇ、約５〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約１０〜約７５ｍｇ／ｋｇ、又は約２５〜約５０ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、レスベラトロールの投与量は、０．８ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ、約７５ｍｇ／ｋｇ、約８０ｍｇ／ｋｇ、約９０ｍｇ／ｋｇ、約１００ｍｇ／ｋｇ、約１１０ｍｇ／ｋｇ、約１２０ｍｇ／ｋｇ、約１２５ｍｇ／ｋｇ、約１３０ｍｇ／ｋｇ、約１４０ｍｇ／ｋｇ、約１５０ｍｇ／ｋｇ、約１６０ｍｇ／ｋｇ、約１７５ｍｇ／ｋｇ、約１８０ｍｇ／ｋｇ、約１９０ｍｇ／ｋｇ、約２００ｍｇ／ｋｇ以上である。いくつかの実施形態では、レスベラトロールは、１日２回、毎日、４８時間毎、７２時間毎、１週間に２回、１週間に１回、２週間に１回、１ヵ月に２回、２ヵ月に１回、３ヵ月に１回、又は６ヵ月に１回投与される。いくつかの実施形態では、レスベラトロールの投与量は、対象の体重及び／又は年齢によって決まる。
【０１１３】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数のネクロスタチン−１剤が、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドと別々に、同時に、又は連続的に投与される。いくつかの実施形態では、ネクロスタチン−１は、式５−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−３−メチル−２−チオキソイミダゾリジン−４−オンの化合物である。いくつかの実施形態では、ネクロスタチン−１剤は、式（５−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−２−チオキソイミダゾリジン−４−オン）を有する不活性型Ｎｅｃ−１（Ｎｅｃ−１ｉ）、式７−Ｃｌ−Ｏ−Ｎｅｃ−１（５−（（７−クロロ−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−３−メチルイミダゾリジン−２，４−ジオン）を有する安定型Ｎｅｃ−１（Ｎｅｃ−１ｓ）、又は免疫調節酵素インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）阻害剤のメチル−チオヒダントイン−トリプトファンを含むがこれらに限定されないネクロスタチン−１の類似体である。いくつかの実施形態では、ネクロスタチン−１剤の投与量は、約０．５〜約２ｍｇ／ｋｇ、約１〜約２ｍｇ／ｋｇ、約０．５〜約５ｍｇ／ｋｇ、約５〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約１０〜約７５ｍｇ／ｋｇ、又は約２５〜約５０ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ネクロスタチン−１の投与量は、０．８ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ、約７５ｍｇ／ｋｇ、約８０ｍｇ／ｋｇ、約９０ｍｇ／ｋｇ、約１００ｍｇ／ｋｇ、約１１０ｍｇ／ｋｇ、約１２０ｍｇ／ｋｇ、約１２５ｍｇ／ｋｇ、約１３０ｍｇ／ｋｇ、約１４０ｍｇ／ｋｇ、約１５０ｍｇ／ｋｇ、約１６０ｍｇ／ｋｇ、約１７５ｍｇ／ｋｇ、約１８０ｍｇ／ｋｇ、約１９０ｍｇ／ｋｇ、約２００ｍｇ／ｋｇ以上である。いくつかの実施形態では、ネクロスタチン−１剤は、１日２回、毎日、４８時間毎、７２時間毎、１週間に２回、１週間に１回、２週間に１回、１ヵ月に２回、２ヵ月に１回、３ヵ月に１回、又は６ヵ月に１回投与される。いくつかの実施形態では、ネクロスタチン−１の投与量は、対象の体重及び／又は年齢によって決まる。
【０１１４】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数のカリウムチャネル遮断薬が、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドと別々に、同時に、又は連続的に投与される。いくつかの実施形態では、カリウムチャネル遮断薬は４−アミノピリジン（４−ＡＰ）である。いくつかの実施形態では、カリウムチャネル遮断薬の投与量は、約０．５〜約２ｍｇ／ｋｇ、約１〜約２ｍｇ／ｋｇ、約０．５〜約５ｍｇ／ｋｇ、約５〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約１０〜約７５ｍｇ／ｋｇ、又は約２５〜約５０ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、カリウムチャネル遮断薬の投与量は、０．８ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ、約７５ｍｇ／ｋｇ、約８０ｍｇ／ｋｇ、約９０ｍｇ／ｋｇ、約１００ｍｇ／ｋｇ、約１１０ｍｇ／ｋｇ、約１２０ｍｇ／ｋｇ、約１２５ｍｇ／ｋｇ、約１３０ｍｇ／ｋｇ、約１４０ｍｇ／ｋｇ、約１５０ｍｇ／ｋｇ、約１６０ｍｇ／ｋｇ、約１７５ｍｇ／ｋｇ、約１８０ｍｇ／ｋｇ、約１９０ｍｇ／ｋｇ、約２００ｍｇ／ｋｇ以上である。いくつかの実施形態では、カリウムチャネル遮断薬は、１日２回、毎日、４８時間毎、７２時間毎、１週間に２回、１週間に１回、２週間に１回、１ヵ月に２回、２ヵ月に１回、３ヵ月に１回、又は６ヵ月に１回である。いくつかの実施形態では、カリウムチャネル遮断薬の投与量は、対象の体重及び／又は年齢によって決まる。
【０１１５】
いくつかの実施形態では、対象の体温を低下させることを含む治療的冷却処置は、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドの投与と別々に、同時に、又は連続的に投与又は実施される。いくつかの実施形態では、対象の体温を、体温低下を実施する前の対象の体温に対して約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、又は約５０％低下させる。特定の実施形態では、対象の体温を、約２〜約６％、又は約３〜約１０％低下させる。非限定的な例では、対象の体温を、約３７℃から約３２〜約３４℃に低下させる。いくつかの実施形態では、体温とは対象の深部体温である。いくつかの実施形態では、以下のうち１つ又は複数を用いて対象の体温を低下させる：冷却ブランケット、氷、アイスパック、冷却パッド、氷水、及び冷却した液体のＩＶ（静脈内）ラインを介した血流内への投与。いくつかの実施形態では、低下させた体温は、約２時間、約４時間、約６時間、約８時間、約１０時間、約１２時間、約１４時間、約１６時間、約１８時間、約２０時間、約２２時間、約２４時間、約３０時間、約３６時間、約４２時間、約４８時間、又は約７２時間維持される。特定の実施形態では、対象の体温を約２４時間にわたって低下させる。いくつかの実施形態では、治療的冷却処置は、損傷後４〜６時間以内に開始される。いくつかの実施形態では、対象が震え及び／又は運動を起こさないよう、鎮痛剤及び／又は麻痺剤が治療的冷却処置と併用される。いくつかの実施形態では、鎮痛剤及び／又は麻痺剤は、フェンタニル、プロポフォール、ミダゾラム、及びベクロニウムのうち１つ又は複数である。いくつかの実施形態では、対象の低体温を誘発する。いくつかの実施形態では、低体温は、深部体温が３５℃未満の対象を指す。治療的冷却処置の例示的な方法は、例えば、Ｓａｍａｎｉｅｇｏ，Ｅ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ．（２０１１）Ａｕｇ；１５（１）：１１３−１１９に記載されており、参照により本明細書に援用される。
【０１１６】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数のステロイドが、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドと別々に、同時に、又は連続的に投与される。いくつかの実施形態では、１つ又は複数のステロイドはコルチコステロイドを含む。好適なコルチコステロイドの非限定的な例に、メチルプレドニゾロン、プレドニゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、及びプレドニゾロンがある。いくつかの実施形態では、ステロイドの投与量は、約０．５〜約２ｍｇ／ｋｇ、約１〜約２ｍｇ／ｋｇ、約０．５〜約５ｍｇ／ｋｇ、約５〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約１０〜約７５ｍｇ／ｋｇ、又は約２５〜約５０ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ステロイドの投与量は、０．８ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ、約７５ｍｇ／ｋｇ、約８０ｍｇ／ｋｇ、約９０ｍｇ／ｋｇ、約１００ｍｇ／ｋｇ、約１１０ｍｇ／ｋｇ、約１２０ｍｇ／ｋｇ、約１２５ｍｇ／ｋｇ、約１３０ｍｇ／ｋｇ、約１４０ｍｇ／ｋｇ、約１５０ｍｇ／ｋｇ、約１６０ｍｇ／ｋｇ、約１７５ｍｇ／ｋｇ、約１８０ｍｇ／ｋｇ、約１９０ｍｇ／ｋｇ、約２００ｍｇ／ｋｇ以上である。いくつかの実施形態では、ステロイドは、１日２回、毎日、４８時間毎、７２時間毎、１週間に２回、１週間に１回、２週間に１回、１ヵ月に２回、２ヵ月に１回、３ヵ月に１回、又は６ヵ月に１回投与される。特定の実施形態では、約１００ｍｇ未満の低用量、約１００〜約４９９ｍｇの中用量、約５００〜約１９９９ｍｇの高用量、約２０００〜約５３９９ｍｇの非常に高い用量、又は約５４００ｍｇ以上の超高用量のステロイドが対象に投与される。
【０１１７】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数の抗酸化剤が、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドと別々に、同時に、又は連続的に投与される。抗酸化剤の使用は、眼部に障害のある患者に有益であることが示されている。例えば、Ａｒｃｈ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．，１１９：１４１７−３６（２００１）；Ｓｐａｒｒｏｗ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７８：１８２０７−１３（２００３）を参照のこと。少なくとも１つの芳香族カチオン性ペプチドと組み合わせて使用できる好適な抗酸化剤の例として、ビタミンＣ、ビタミンＥ、βカロテンなどのカロテノイド，コエンザイムＱ、４−ヒドロキシ−２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−Ｎ−オキシル（テンポルとしても知られる）、ルテイン、ブチルヒドロキシトルエン、レスベラトロール、トロロクス類似体（ＰＮＵ−８３８３６−Ｅ）、及びビルベリー抽出物がある。
【０１１８】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数の鉱物が、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドと別々に、同時に、又は連続的に投与される。特定の鉱物の使用も、眼部に障害のある患者に有益であることが示されている。例えば、Ａｒｃｈ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．，１１９：１４１７−３６（２００１）を参照のこと。少なくとも１つの芳香族カチオン性ペプチドと組み合わせて使用できる好適な鉱物の例として、酸化第二銅などの含銅鉱物；酸化亜鉛などの含亜鉛鉱物；及び含セレン化合物がある。
【０１１９】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数の負に帯電したリン脂質が、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドと別々に、同時に、又は連続的に投与される。特定の負に帯電したリン脂質の使用も、眼部に障害のある患者に有益であることが示されている。例えば、Ｓｈａｂａｎ＆Ｒｉｃｈｔｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，３８３：５３７−４５（２００２）；Ｓｈａｂａｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐ．Ｅｙｅ  Ｒｅｓ．，７５：９９−１０８（２００２）を参照のこと。少なくとも１つの芳香族カチオン性ペプチドと組み合わせて使用できる好適な負に帯電したリン脂質の例として、カルジオリピン及びホスファチジルグリセロールがある。正に帯電した、及び／又は中性リン脂質も、芳香族カチオン性ペプチドと組み合わせて使用すると、眼部に障害のある患者に有益であり得る。
【０１２０】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数のカロテノイドが、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドと別々に、同時に、又は連続的に投与される。特定のカロテノイドの使用は、光受容細胞に必要な光防護の維持に関連している。カロテノイドは、植物、藻類、細菌、並びに鳥類及び甲殻類などの特定の動物に見られるテルペノイド群の黄色から赤色の天然色素である。カロテノイドは大きなクラスの分子で、６００種以上の天然カロテノイドが同定されている。カロテノイドには、炭化水素（カロテン）及びそれらの酸化アルコール誘導体（キサントフィル）などがある。これらには、アクチニオエリスロール、アスタキサンチン、カンタキサンチン、カプサンチン、カプソルビン、β−８’−アポカロテナール（アポカロテナール）、β−１２’−アポカロテナール、αカロテン、βカロテン、「カロテン」（α及びβカロテンの混合物）、γカロテン、βクリプトキサンチン、ルテイン、リコピン、ビオレリトリン、ゼアキサンチン、及びこれらのヒドロキシル又はカルボキシルを含有するもののエステル類などがある。カロテノイドの多くは、シス及びトランス異性体の形で天然に存在するが、合成物はしばしばラセミ混合物である。
ヒトでは、網膜に、ゼアキサンチン及びルテインの主に２種類のカロテノイドが選択的に蓄積する。この２種類のカロテノイドは強力な抗酸化剤であり、また青色光を吸収するため、網膜の保護に役立つと考えられている。ウズラを用いた研究では、カロテノイド欠乏食で飼育した群は、アポトーシス光受容細胞の数が非常に多いことから明らかなように、網膜のゼアキサンチン濃度が低く、深刻な光損傷を受けたのに対し、ゼアキサンチン濃度が高い群は損傷が最小限であったことが証明されている。少なくとも１つの芳香族カチオン性ペプチドと組み合わせるのに好適なカロテノイドの例として、ルテイン及びゼアキサンチン、並びに前述のカロテノイドのいずれかがある。
【０１２１】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数の一酸化窒素（ＮＯ）誘導物質が、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドと別々に、同時に、又は連続的に投与される。好適な一酸化窒素誘導物質には、内因性ＮＯを刺激する、又はｉｎ  ｖｉｖｏで内皮由来血管弛緩因子（ＥＤＲＦ）のレベルを上昇させる、又は一酸化窒素シンターゼの基質である化合物がある。このような化合物には、例えば、Ｌ−アルギニン、Ｌ−ホモアルギニン、及びＮ−ヒドロキシ−Ｌ−アルギニン（これらのニトロソ化類似体及びニトロシル化類似体（例えば、ニトロソ化Ｌ−アルギニン、ニトロシル化Ｌ−アルギニン、ニトロソ化Ｎ−ヒドロキシ−Ｌ−アルギニン、ニトロシル化Ｎ−ヒドロキシ−Ｌ−アルギニン、ニトロソ化Ｌ−ホモアルギニン、及びニトロシル化Ｌ−ホモアルギニン）を含む）、Ｌ−アルギニンの前駆体及び／又はこれらの生理学的に許容可能な塩（例えば、シトルリン、オルニチン、グルタミン、リジン、これらのアミノ酸の少なくも１種を含有するポリペプチドを含む）、酵素アルギナーゼの阻害剤（例えば、Ｎ−ヒドロキシ−Ｌ−アルギニン及び２（Ｓ）−アミノ−６−ボロノへキサン酸）、並びに一酸化窒素シンターゼの基質、サイトカイン、アデノシン、ブラジキニン、カルレティキュリン、ビサコジル、並びにフェノールフタレインなどがある。ＥＤＲＦは、内皮によって分泌される血管弛緩因子であり、一酸化窒素又はこれらの密接に関連する誘導体として同定されている（Ｐａｌｍｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２７：５２４−５２６（１９８７）；Ｉｇｎａｒｒｏ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８４：９２６５−９２６９（１９８７））。
【０１２２】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数のスタチンが、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドと別々に、同時に、又は連続的に投与される。スタチンは、脂質低下剤及び／又は好適な一酸化窒素誘導物質として機能する。更に、スタチンの使用と特定の眼部障害の発症又は進行遅延の間に関係が示されている。Ｇ．ＭｃＧｗｉｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ，８７：１１２１−２５（２００３）を参照のこと。好適なスタチンに、単なる例として、ロスバスタチン、ピチバスタチン（ｐｉｔｉｖａｓｔａｔｉｎ）、シンバスタチン、プラバスタチン、セリバスタチン、メバスタチン、ベロスタチン、フルバスタチン、コンパクチン、ロバスタチン、ダルバスタチン、フルインドスタチン、アトルバスタチン、アトルバスタチンカルシウム（アトルバスタチンのヘミカルシウム塩）、及びジヒドロコンパクチンなどがある。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数の抗炎症薬が、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドと別々に、同時に、又は連続的に投与される。芳香族カチオン性ペプチドと併用され得る好適な抗炎症薬に、単なる例として、アスピリンや他のサリチル酸塩、クロモリン、ネドクロミル、テオフィリン、ジロートン、ザフィルルカスト、モンテルカスト、プランルカスト、インドメタシン、及びリポキシゲナーゼ阻害剤；非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）（例えば、イブプロフェン及びナプロキセン）；プレドニゾン、デキサメタゾン、シクロオキシゲナーゼ阻害剤（即ち、Ｎａｐｒｏｘｅｎ（登録商標）又はＣｅｌｅｂｒｅｘ（登録商標）などのＣＯＸ−１及び／又はＣＯＸ−２阻害剤）；スタチン（単なる例として、ロスバスタチン、ピチバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、セリバスタチン、メバスタチン、ベロスタチン、フルバスタチン、コンパクチン、ロバスタチン、ダルバスタチン、フルインドスタチン、アトルバスタチン、アトルバスタチンカルシウム（アトルバスタチンのヘミカルシウム塩）、及びジヒドロコンパクチン）；並びに解離性ステロイドなどがある。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数の抗血管新生薬又は抗ＶＥＧＦ剤が、１つ又は複数の芳香族カチオン性ペプチドと別々に、同時に、又は連続的に投与される。抗血管新生薬又は抗ＶＥＧＦ剤の使用も、眼部に障害のある患者に有益であることが示されている。少なくとも１つの芳香族カチオン性ペプチドと組み合わせて使用できる好適な抗血管新生薬又は抗ＶＥＧＦ剤の例として、ｒｈｕＦａｂ  Ｖ２（Ｌｕｃｅｎｔｉｓ（登録商標））、トリプトファニルｔＲＮＡシンテターゼ（ＴｒｐＲＳ）、Ｅｙｅ００１（抗ＶＥＧＦペグ化アプタマー）、スクアラミン、Ｒｅｔａａｎｅ（登録商標）１５ｍｇ（デポ懸濁液用酢酸アネコルタブ；Ａｌｃｏｎ，Ｉｎｃ．）、コンブレタスタチンＡ４プロドラッグ（ＣＡ４Ｐ）、Ｍａｃｕｇｅｎ（登録商標）、Ｍｉｆｅｐｒｅｘ（登録商標）（ミフェプリストン−ｒｕ４８６）、テノン嚢下トリアムシノロンアセトニド、硝子体内結晶性トリアムシノロンアセトニド、Ｐｒｉｎｏｍａｓｔａｔ（ＡＧ３３４０−合成マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤、Ｐｆｉｚｅｒ）、フルオシノロンアセトニド（フルオシノロン眼内レンズなど、Ｂａｕｓｃｈ＆Ｌｏｍｂ／Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）、ＶＥＧＦＲ阻害剤（Ｓｕｇｅｎ）、及びＶＥＧＦ−Ｔｒａｐ（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ／Ａｖｅｎｔｉｓ）などがある。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、視力障害を軽減するために用いられている他の薬物療法を、少なくとも１つの芳香族カチオン性ペプチドと組み合わせて使用できる。このような処置に、非熱レーザーの使用を伴うＶｉｓｕｄｙｎｅ（登録商標）などの薬剤、ＰＫＣ  ４１２，Ｅｎｄｏｖｉｏｎ（ＮｅｕｒｏＳｅａｒｃｈ  Ａ／Ｓ）、神経栄養因子（例として、グリア由来神経栄養因子及び毛様体神経栄養因子を含む）、ジアタゼム（ｄｉａｔａｚｅｍ）、ドルゾラミド、Ｐｈｏｔｏｔｒｏｐ、９−シス−レチナール、ヨウ化ホスホリン又はエコチオフェート又は炭酸脱水素酵素阻害剤を含む眼の薬物療法（エコー治療を含む）、ＡＥ−９４１（ＡＥｔｅｒｎａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）、Ｓｉｒｎａ−０２７（Ｓｉｒｎａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ．）、ペガプタニブ（ＮｅＸｓｔａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ／Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ニューロトロフィン（単なる例として、ＮＴ−４／５、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈなど）、Ｃａｎｄ５（Ａｃｕｉｔｙ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ラニビツマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、ＩＮＳ−３７２１７（Ｉｎｓｐｉｒｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、インテグリン拮抗薬（Ｊｅｒｉｎｉ  ＡＧ及びＡｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓの製品など）、ＥＧ−３３０６（Ａｒｋ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  Ｌｔｄ．）、ＢＤＭ−Ｅ（ＢｉｏＤｉｅｍ  Ｌｔｄ．）、サリドマイド（例えば、ＥｎｔｒｅＭｅｄ，Ｉｎｃ．によって使用されている）、カルジオトロフィン−１（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、２−メトキシエストラジオール（Ａｌｌｅｒｇａｎ／Ｏｃｕｌｅｘ）、ＤＬ−８２３４（東レ株式会社）、ＮＴＣ−２００（Ｎｅｕｒｏｔｅｃｈ）、テトラチオモリブデート（ミシガン大学）、ＬＹＮ−００２（Ｌｙｎｋｅｕｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ）、微細藻類化合物（Ａｑｕａｓｅａｒｃｈ／Ａｌｂａｎｙ，Ｍｅｒａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、Ｄ−９１２０（Ｃｅｌｌｔｅｃｈ  Ｇｒｏｕｐ  ｐ１ｃ）、ＡＴＸ−Ｓ１０（浜松ホトニクス株式会社）、ＴＧＦ−β２（Ｇｅｎｚｙｍｅ／Ｃｅｌｔｒｉｘ）、チロシンキナーゼ阻害剤（Ａｌｌｅｒｇａｎ，ＳＵＧＥＮ，Ｐｆｉｚｅｒ）、ＮＸ−２７８−Ｌ（ＮｅＸｓｔａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ／Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、Ｏｐｔ−２４（ＯＰＴＩＳ  Ｆｒａｎｃｅ  ＳＡ）、網膜細胞神経節神経保護薬（Ｃｏｇｅｎｔ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、Ｎ−ニトロピラゾール誘導体（Ｔｅｘａｓ  Ａ＆Ｍ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｙｓｔｅｍ）、ＫＰ−１０２（Ｋｒｅｎｉｔｓｋｙ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、及びシクロスポリンＡなどがあるがこれらに限定されない。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、付加的効果又は相乗効果をもたらし得る手段と組み合わせても使用し得る。視力障害を軽減することが知られている、提案されている、又は考えられている手段に、「限定網膜移動術」、光線力学的治療（ＰＤＴ）（単なる例として、受容体標的化ＰＤＴ、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ，Ｃｏ．；注射用ポリフィマーナトリウムを用いたＰＤＴ；ベルテポルフィン、ＱＬＴ  Ｉｎｃ．；ロスタポルフィンを用いたＰＤＴ、Ｍｉｒａｖｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ；タラポルフィンナトリウムを用いたＰＤＴ、Ｎｉｐｐｏｎ  Ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ；モテキサフィンルテチウム、Ｐｈａｒｍａｃｙｃｌｉｃｓ，Ｉｎｃ．を含む）、アンチセンスオリゴヌクレオチド（例として、Ｎｏｖａｇａｌｉ  Ｐｈａｒｍａ  ＳＡによって試験された製品及びＩＳＩＳ−１３６５０，Ｉｓｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓを含む）、レーザー光凝固術、ドルーゼンレーザー療法、黄斑円孔手術、黄斑移動術、移植式超小型テレスコープ、ファイモーション（Ｐｈｉ−Ｍｏｔｉｏｎ）血管造影法（マイクロレーザー療法及び栄養血管凝固療法としても既知）、陽子ビーム療法、微小刺激療法、網膜剥離及び硝子体手術、強膜バックル、黄斑下手術、経瞳孔温熱療法、光化学系Ｉ療法、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）の使用、体外レオフェレーシス（膜分別ろ過及びレオセラピー（Ｒｈｅｏｔｈｅｒａｐｙ）としても既知）、マイクロチップ移植、幹細胞療法、遺伝子置換療法、リボザイム遺伝子療法（低酸素応答要素の遺伝子療法、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａ；Ｌｅｎｔｉｐａｋ，Ｇｅｎｅｔｉｘ；ＰＤＥＦ遺伝子療法、ＧｅｎＶｅｃを含む）、光受容体／網膜細胞移植（移植可能な網膜上皮細胞、Ｄｉａｃｒｉｎ，Ｉｎｃ．；網膜細胞移植、Ｃｅｌｌ  Ｇｅｎｅｓｙｓ，Ｉｎｃ．を含む）、及び鍼治療などがあるがこれらに限定されない。
【０１２７】
一実施形態では、追加治療薬は、相乗的治療効果をもたらすように、少なくとも１つの芳香族カチオン性ペプチドと組み合わせて対象に投与される。例えば、少なくとも１つの芳香族カチオン性ペプチドとＴＯＮの予防又は処置のための１つ又は複数の追加治療薬との併用投与は、疾患の予防又は処置における相加効果より大きな効果を有する。従って、ＴＯＮの処置又は予防に、１つ又は複数の任意の個々の治療薬を低用量使用することにより、治療有効性が向上し、また副作用が低減し得る。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの芳香族カチオン性ペプチドは、視神経症の予防又は処置において相乗効果が得られるように、ＴＮＦα阻害剤、コルチコステロイド、ＩＬ−１Ｒ拮抗薬、レスベラトロール、カリウムチャネル遮断薬、又はネクロスタチン−１のうち１つ又は複数と組み合わせて投与される。
いくつかの実施形態では、複数の治療薬が任意の順序で、又は同時に投与され得る。同時の場合、複数の治療薬は、単一の一体形態又は複数の形態で（単なる例として、個々の丸剤又は２つの個別の丸剤のいずれかとして）提供され得る。治療薬のうち１つを複数回投与しても、又は両方を複数回投与してもよい。同時でない場合、複数回投与間のタイミングは、０週間超から４週間未満まで変化し得る。更に、併用方法、組成物、及び製剤は２剤のみの使用に限定されない。
【実施例】
【０１２８】
以下の実施例により本技術を更に説明していくが、これらは決して限定するものと解釈してはならない。以下の実施例のいずれについても、本明細書に記載する任意の芳香族カチオン性ペプチドを使用することができる。限定的でない例として、以下の実施例で使用する芳香族カチオン性ペプチドは、２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又は表Ａ、６、７、及び／若しくは８に示す任意の１つ又は複数のペプチドであり得る。
【０１２９】
［実施例１］
ＴＯＮの処置における芳香族カチオン性ペプチドの使用
本実施例では、芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）の使用を実証する。
【０１３０】
方法
ＴＯＮを有することが疑われる、又は有すると診断された対象は、毎日１ｍｇ／ｋｇ体重の芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）の投与を単独で、又はＴＯＮの処置若しくは予防のための１つ又は複数の追加治療薬を組み合わせて受ける。ペプチド及び／又は追加治療薬は、当技術分野で既知の方法に従って、経口、局所、全身、静脈内、皮下、硝子体内、腹腔内、又は筋肉内により投与される。対象は、ＴＯＮに関連する徴候及び症状（例えば、視力喪失、霧視、ＲＧＣ損傷、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症などを含むがこれらに限定されない）の存在及び／又は重症度について毎週評価を受ける。ＴＯＮの１つ又は複数の徴候又は症状が改善又は解消するまで処置を続ける。
【０１３１】
結果
ＴＯＮを有することが疑われ、又は有すると診断され、治療的有効量の芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）の投与を受けた対象は、ＴＯＮに関連する１つ又は複数の症状の重症度の軽減又は解消を示すと予測される。１つ又は複数の追加治療薬と組み合わせて２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ２、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、又はＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を投与すると、芳香族カチオン性ペプチド又は追加治療薬を単独で投与された対象で観察されるのと比べて、この点で相乗効果が得られることが更に期待される。
こうした結果から、芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）がＴＯＮの処置において有用であることが示されるであろう。こうした結果から、芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、酢酸塩、酒石酸塩、トリフルオロ酢酸塩、塩化物塩、トリＨＣｌ塩、ビスＨＣｌ塩、モノＨＣｌ塩、又はトシレート塩）が、以下の症状のうち１つ又は複数を改善するのに有用であることが示されるであろう：視力喪失、霧視、ＲＧＣ損傷、暗点、色覚低下、ブドウ膜炎、視神経炎、眼痛、視神経剥離、視神経切断、視神経鞘出血、眼窩出血、脈絡膜破裂、及び網膜振盪症。従ってペプチドは、ＴＯＮの処置のためにこれらを必要とする対象を処置する方法において有用である。
【０１３２】
［実施例２］
動物モデルでのＴＯＮの処置における芳香族カチオン性ペプチドの使用
本実施例では、疾患の動物モデルでのＴＯＮの処置における芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）のｉｎ  ｖｉｖｏ有効性を実証する。
【０１３３】
方法
本実施例では以下の２つのＴＯＮモデルを利用した：間接ＴＯＮの臨床症状を厳密に再現した新規の超音波誘発性ＴＯＮ（ＳＩ−ＴＯＮ）、及び神経線維の軸索切断や神経血管系の破裂に至りやすい重症型のＴＯＮを示す視神経挫滅誘発性ＴＯＮ（ＯＮＣ−ＴＯＮ）。ＳＩ−ＴＯＮは、Ｔａｏ，Ｗ．ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｒｅｐｏｒｔｓ（２０１７）７：１１７７９に記載されているように、視神経の骨管への入口の真上にある眼窩上隆起にマイクロチッププローブソニファイアーを配置して誘発する。次いで、超音波パルスを視神経に送達する。ＯＮＣ−ＴＯＮは、Ｓｏｌｏｍｏｎ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｍｅｔｈｏｄｓ（１９９６）７０：２１−２５に記載されているように、成体ラットの視神経を露出させ、神経の髄膜に小さな開口部を設けることによって誘発する。
ＳＩ−ＴＯＮ又はＯＮＣ−ＴＯＮを誘発する前に、パターン網膜電図（ＰＥＲＧ）による視覚機能のベースライン記録と視神経乳頭の画像診断を実施した。ＴＯＮ誘発直後に、ラットの半数に対照の生理食塩水又はＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2のボーラス皮下注射を行い、次いで３日間にわたって毎日それぞれ特定の製剤を注射した。ラットのサブセットは、３日間にわたって神経障害状態を進行させた後、生理食塩水又はＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2のボーラス皮下注射を行い、次いで２日間連続で毎日それぞれの製剤を注射した。ＴＯＮ誘発後７日目に、ＰＥＲＧ及び視神経乳頭の網膜明視野画像診断でラットの視覚機能検査を実施した。何匹かは、ＴＯＮ誘発後７日目に機能検査及び画像診断の後で安楽死させた。安楽死させたラットはＲＧＣドロップアウトについてフラットマウントで評価した。視神経は、骨の視神経管を抜いた後部で解剖し、ＶＴ−１０００ｓビブラトームで切断してから、炎症マーカー及びグリオーシスマーカーの免疫組織化学解析のために処理した。
コンビナトリアル戦略によって視覚予後が改善するかを試験するために、ＴＮＦα阻害剤（例えば、エタネルセプト）などの治療薬、Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの医薬品の組み合わせを評価した。ラットでＴＯＮを誘発する前に、パターン網膜電図（ＰＥＲＧ）による視覚機能のベースライン記録と視神経乳頭の画像診断を実施した。ラットの半数には、すぐにエタネルセプト＋Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2のボーラス皮下注射を行い、次いで３日間にわたって毎日製剤を注射した。ラットのサブセットは、３日間にわたって神経障害状態を進行させた後、エタネルセプト＋Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2のボーラス皮下注射を行い、次いで２日間連続で毎日製剤を注射した。ＴＯＮ誘発後７日目に、ＰＥＲＧ及び視神経乳頭の網膜明視野画像診断でラットの視覚機能検査を実施した。安楽死させたラットはＲＧＣドロップアウトについてフラットマウントで評価した。視神経は、骨の視神経管を抜いた後部で解剖し、ＶＴ−１０００ｓビブラトームで切断してから、炎症マーカー及びグリオーシスマーカーの免疫組織化学解析のために処理した。
【０１３４】
結果
Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2はＴＯＮでＲＧＣの生存を促進する。ＴＯＮ誘発後早期にＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を使用すると、ＳＩ−ＴＯＮ及びＯＮＣ−ＴＯＮモデルの両方でＲＧＣの有意な生存がもたらされる（それぞれ９３．７７±１．５６％［ｐ＝０．０００１９］と５１．１３±１．４７％［ｐ＝１．９８ｅ−０５］）。Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の早期使用（７日間にわたる２ｍｇ／ｋｇ  ＳＱ）は、両方のＴＯＮモデルで、ＴＮＦα阻害剤エタネルセプトの使用に匹敵するＲＧＣ生存効果をもたらした（ＳＩ−ＴＯＮで９３．７７％対９７．０８％、ＯＮＣ−ＴＯＮで５１．１３％対４８．９４％）（図１Ａ及び１Ｂ）。
Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の早期使用はＳＩ−ＴＯＮで視覚予後を有意に改善する。視神経の外傷直後にＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置したことにより視覚予後が改善し、損傷１週間後及び２週間後のＰＥＲＧ記録で証明されるように、投薬中止後も対照より有意に高いままであった。機能回復は、無処置又は反対側（未損傷）の眼のレベルには至らなかったが、視覚機能は、１週目（ｐ＝０．０２７８）及び２週目（ｐ＝０．０３９１）において、損傷した眼を生理食塩水で処置した対照よりも有意に改善した（図２）。
Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の早期使用はＯＮＣ−ＴＯＮで視覚予後を有意に改善する。視神経の挫滅直後にＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置したことにより視覚予後が改善し、損傷１週間後のＰＥＲＧ記録で証明されるように、投薬中止後も対照より有意に高いままであった。この重症外傷モデルにおいて、機能回復は、無処置又は反対側（未損傷）の眼よりもなおも有意に低かったが、視覚機能は、挫滅後１週目（ｐ＝０．０３１５）において、損傷した眼を生理食塩水で処置した対照よりも有意に改善した（図３）。
本明細書で実証するように、視神経の外傷性損傷直後にＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を使用すると、生存率の有意な改善、及びＴＮＦα阻害剤エタネルセプトの使用に匹敵する視覚機能の保持がもたらされる。驚くことに、ＯＮＣ−ＴＯＮモデルでＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を使用すると、ＲＧＣの生存率が５１．１３％となり（図１Ｂ）、これは損傷前にも神経栄養剤を用いた大部分の報告よりもはるかに優れている。従って、これらの結果は、必要とする対象において、外傷性視神経症（ＴＯＮ）を処置又は予防する方法において有用である。
【０１３５】
［実施例３］
動物モデルでのＴＯＮの予防における芳香族カチオン性ペプチドの使用
本実施例では、マウスモデルでのＴＯＮの症状発現の予防（即ち遅延）における芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）のｉｎ  ｖｉｖｏ有効性を実証する。
【０１３６】
方法
２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、又はＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を水に配合し、８週齢から１日１回皮下ボーラス注射で１又は５ｍｇ／ｋｇを投与する。対照マウスは、未処置又は対照ペプチドで処置する。芳香族カチオン性ペプチドで処置したマウスは、エタネルセプトなど他の治療薬を用いた処置とも比較する。
マウスには、ペプチドの初回投与の４時間後、８時間後、１２時間後、１８時間後、２４時間後、４８時間後、３日後、４日後、５日後、６日後、１週間後、２週間後、３週間後、又は４週間後に、ＳＩ−ＴＯＮ又はＯＮＣ−ＴＯＮを誘発する方法を実施する。ＳＩ−ＴＯＮは、Ｔａｏ，Ｗ．ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｒｅｐｏｒｔｓ（２０１７）７：１１７７９に記載されているように、視神経の骨管への入口の真上にある眼窩上隆起にマイクロチッププローブソニファイアーを配置して実施する。次いで、超音波パルスを視神経に送達する。ＯＮＣ−ＴＯＮは、Ｓｏｌｏｍｏｎ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｍｅｔｈｏｄｓ（１９９６）７０：２１−２５に記載されているように、成体ラットの視神経を露出させ、神経の髄膜に小さな開口部を設けることによって実施する。
初回投与前、及びＴＯＮ誘発法実施前に再び、パターン網膜電図（ＰＥＲＧ）による視覚機能のベースライン記録と視神経乳頭の画像診断を実施する。これらの結果を、ＴＯＮ誘発法を実施した１日後、２日後、３日後、４日後、５日後、６日後、７日後、８日後、９日後、１０日後、１１日後、１２日後、１３日後、１４日後、３週間後、４週間後、５週間後、６週間後、７週間後、８週間後、１２週間後、及び１６週間後のＰＥＲＧ記録及び視神経乳頭画像と比較する。安楽死させたマウスはＲＧＣドロップアウトについてフラットマウントで評価する。視神経は、骨の視神経管を抜けた後部で解剖し、ＶＴ−１０００ｓビブラトームで切断してから、炎症マーカー及びグリオーシスマーカーの免疫組織化学解析のために処理する。
【０１３７】
結果
２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、又はＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で事前処置したマウスでは、未処置マウス及び対照ペプチドで処置したマウスと比べて、ＴＯＮの発現が遅延する、又が予防されると予想される。
２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、又はＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で事前処置したマウスは、未処置マウス及び対照ペプチドで処置したマウスと比べて、より健康的なＰＥＲＧ記録及び視神経乳頭の形態を示すと予想される。２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、又はＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で事前処置したマウスは、未処置マウス及び対照ペプチドで処置したマウスと比べて、より健康的なＲＧＣを示すとも予想される。
こうした結果から、芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）は、ＴＯＮの発現を遅延させる、又は予防するのに有用であることが示されるであろう。こうした結果から、芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）は、ＴＯＮの予防、及び／又は外傷性損傷後にＴＯＮを発症するリスクを低減するのに有用であることが示されるであろう。
【０１３８】
［実施例４］
動物モデルでのＴＯＮの処置における芳香族カチオン性ペプチドと追加治療薬の連続投与
本実施例では、疾患の動物モデルでのＴＯＮの処置における芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）と追加治療薬の連続投与のｉｎ  ｖｉｖｏ有効性を実証する。
【０１３９】
方法
図４に表すように連続投与試験を実施した。網膜神経節細胞（ＲＧＣ）のベースライン視覚機能は、パターン網膜電図（ＰＥＲＧ）を用いてＲＧＣの電気活動を記録し、光干渉断層撮影（ＯＣＴ）を用いて網膜神経線維層（ＲＮＦＬ）の厚さを測定し、ハイデルベルク網膜トモグラフィー（ＨＲＴ）を用いて外傷に起因する視神経のわずかな変化を評価して得た。０日目に、実施例２に説明するように、視神経の骨管への入口の真上にある眼窩上隆起にマイクロチッププローブソニファイアーを配置してＵＳ−ＴＯＮ（ＳＩ−ＴＯＮ）を誘発した。
１日目に、６群のマウスに、３ｍｇ／ｋｇ（３０ｇのマウスで１２０μｇ）のエタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ（登録商標）、第１及び２群）、１０ｍｇ／ｋｇ（３０ｇのマウスで３００μｇ）のＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2（ＭＴＰ−１３１、第３及び４群）、又はＰＢＳ（第５及び６群）のいずれかをボーラス皮下注射で投与した後、３日間にわたって毎日製剤を注射した。６日目に、第１及び２群に１０ｍｇ／ｋｇ（３０ｇのマウスで３００μｇ）のＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2をボーラス皮下注射で投与し；第３及び４群に３ｍｇ／ｋｇ（３０ｇのマウスで１２０μｇ）のエタネルセプトをボーラス皮下注射で投与し；更に第５及び６群にＰＢＳを投与した後、３日間にわたって毎日製剤を注射した。マウスのサブセットは、損傷後２週間、神経障害状態を進行させ、５ｍｇ／ｋｇ（３０ｇのマウスで１５０μｇ）の４−アミノピリジン（４−ＡＰ、第１、３、及び５群）又はＰＢＳ（第２、４、及び６群）のいずれかを投与した後、毎日製剤を注射した。ＰＥＲＧ及び視神経乳頭の網膜明視野画像診断（ＯＣＴ／ＨＲＴ）でマウスのサブセットの視覚機能検査を実施した。神経障害状態を進行させたマウスのサブセットは、損傷の４週間後に視覚機能検査を実施した。
【０１４０】
結果
エタネルセプトの後にＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を連続投与することにより、ＴＯＮの視覚予後が改善した。損傷２週間後及び４週間後に、最初にエタネルセプト、その後にＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の皮下注射を受けたマウスは、最初にＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、その後にエタネルセプトの投与を受けたマウスと比べて高いＰＥＲＧ振幅を示した（第１及び２群）（図５Ａ〜５Ｃ）。処置２週間後のＲＧＣの電気活動（ＰＥＲＧ振幅）は、処置４週間後に観察されたものと実質的に同様であった（図５Ａ〜５Ｃ）。しかしながら、ＯＣＴ結果の定量化から、第１〜４群間でＲＮＦＬ厚さに有意差がないことが示された（図５Ｄ）。ＲＮＦＬ及びＩＰＬ層は、生理食塩水で処置したマウス（第５及び６群）よりも、治療製剤を投与したマウス（第１〜４群）で厚かった（図５Ｄ）。
カリウムチャネル遮断薬４−アミノピリジン（４−ＡＰ）は、損傷後のＲＧＣの電気生理学的機能を有意に改善した。任意の製剤に加えて４−ＡＰをマウスに投与すると、ＰＥＲＧで測定したＲＧＣ電気活動が有意に改善した（図５Ｂ〜５Ｃ）。４−ＡＰの効果は、製剤の投与順序及び処置の期間と無関係であった。処置２週間後及び４週間後の第１、３、及び５群のＰＥＲＧ振幅は、第２、４、及び６群のＰＥＲＧ振幅よりも有意に高かった。４−ＡＰは、ＯＣＴ画像から示されるように、ＲＮＦＬ及びＩＰＬの厚さを有意に改善しなかった（図５Ｄ）。
本明細書で実証するように、Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2と追加治療薬の連続投与は、損傷後に視覚機能を保持するＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の機能的有益性を有意に改善した。特に、最初にＴＮＦα阻害剤エタネルセプト、その後にＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を投与すると、ＲＧＣの電気活動が有意に増加し、視覚機能が改善した。カリウムチャネル遮断薬４−アミノピリジン（４−ＡＰ）の追加により、全群で電気生理学的反応が有意に高まった（図５Ｂ〜５Ｃ）。従って、これらの結果は、本技術の組成物が、必要とする対象の外傷性視神経症（ＴＯＮ）を処置又は予防する方法において有用であることを実証している。
【０１４１】
［実施例５］
芳香族カチオン性ペプチドの急性硝子体内投与は安全であり、動物モデルにおいてＴＯＮ後のＲＧＣ生存を促進する。
本実施例では、疾患の動物モデルでのＴＯＮの処置において、芳香族カチオン性ペプチド、例えば２’６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、若しくはＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はこれらの薬学的に許容される塩（例えば、モノ、ビス、若しくはトリ酢酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、モノ、ビス、若しくはトリＨＣｌ塩、モノ、ビス、若しくはトリトシレート塩、又はモノ、ビス、若しくはトリトリフルオロ酢酸塩）と追加治療薬を連続で急性硝子体内投与したときのｉｎ  ｖｉｖｏ安全性及び有効性を実証する。
【０１４２】
方法
芳香族カチオン性ペプチドの急性硝子体内投与に、ｉｎ  ｖｉｖｏでの追加治療薬の連続投与を組み合わせた効果を判定するために、実施例２に説明するように、防音チャンバーでＢｒａｎｓｏｎ  Ｄｉｇｉｔａｌ  Ｓｏｎｉｆｉｅｒ  ４５０（Ｂｒａｎｓｏｎ）と３ｍｍマイクロチッププローブ（Ｂｒａｎｓｏｎ）を用いて３ヵ月齢のＣ５７ＢＬ／６ＪマウスでＳＩ−ＴＯＮを誘発した。ＴＯＮ誘発の１５分後に、マウス１０匹の左眼の硝子体内に１．３μＬの１００ｎＭ  Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2（ＭＴＰ−１３１）を投与した（ＯＳ、処置）。次いで、これらのマウスに１０ｍｇ／ｋｇのエタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ（登録商標））を３日間にわたって毎日皮下注射した後、５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を更に３日間にわたって毎日皮下注射した。第２群のマウス１０匹には、１０ｍｇ／ｋｇのエタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ（登録商標））を３日間にわたって毎日皮下注射した後、５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を更に３日間にわたって毎日皮下注射した。第３群には、１０ｍｇ／ｋｇのエタネルセプト、５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、又はＰＢＳのいずれかを６日間にわたって毎日投与した。マウスは処置の４週間後に安楽死させた。視神経は、骨の視神経管を抜けた後部で解剖し、ＶＴ−１０００ｓビブラトームで切断してから、炎症マーカー及びグリオーシスマーカーの免疫組織化学解析のために処理した。ＲＧＣの生存は、免疫組織化学染色を用いて神経細胞マーカーＴｕｂｕｌｉｎ  Ｂｅｔａ３Ｃｌａｓｓ  ＩＩＩ（ＴＵＢＢ３）をアッセイした後、盲検化した独立的な研究者２名が、単位面積当たりの残りのＲＧＣ数を手集計した。ＲＧＣの生存は、単位面積当たりのＲＧＣ数の、無損傷の野生型対照（未処置の対照）から得られた数に対する割合として報告される。
ｉｎ  ｖｉｖｏで芳香族カチオン性ペプチドの急性硝子体内投与の安全性を判定するために、実施例２に説明するように、防音チャンバーでＢｒａｎｓｏｎ  Ｄｉｇｉｔａｌ  Ｓｏｎｉｆｉｅｒ  ４５０（Ｂｒａｎｓｏｎ）と３ｍｍマイクロチッププローブ（Ｂｒａｎｓｏｎ）を用いて３ヵ月齢のＣ５７ＢＬ／６ＪマウスでＳＩ−ＴＯＮを誘発した。ＴＯＮ誘発の１５分後に、マウス１０匹の左眼の硝子体内に１．３μＬの１００ｎＭ  Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2（ＭＴＰ−１３１）を投与した（ＯＳ、処置）。マウスの別のサブセットには、損傷１５分後に、左眼の硝子体内に対照ＰＢＳ溶液を投与した後、５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を皮下注射した。マウスの視覚機能は、ＳＩ−ＴＯＮ誘発前にＰＥＲＧのＲＧＣ電気生理学的記録を用いてベースライン記録を取り、マウスの視覚の機能予後を、損傷４週間後に再び試験した。
【０１４３】
結果
Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の急性硝子体内投与は、ＴＯＮにおいてＲＧＣ生存を促進する。ＴＯＮ誘発直後にＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を硝子体内投与し、更にエタネルセプトとＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を連続的に皮下注射すると、ＲＧＣは細胞死から有意に保護された（図６Ａ）。損傷２週間後、ＳＩ−ＴＯＮにおけるＲＧＣの生存率が約８０％であったのに対し、Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2（ｐ＜０．０１、ｎ＝５）とエタネルセプト（ｐ＜０．０１、ｎ＝５）のみを皮下注射すると、ＲＧＣの生存率が約９０〜１００％となった（図６Ａ）。
Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の急性硝子体内注射は、ＳＩ−ＴＯＮにおいて神経線維束の形態を保護する。免疫組織化学的画像は、ＳＩ−ＴＯＮ損傷後にＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置したマウスの網膜全体で神経線維束の直径と形態が保護されていることを示している（図６Ｂ）。ＰＢＳ処置マウスでは、神経線維束の染色から、免疫蛍光強度及び線維直径の低下と、繊維束の形態及び分布の破壊で表されるＲＧＣ軸索突起の喪失が認められる。
Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の急性硝子体内注射は安全かつ有効である。ＲＧＣのベースライン電気生理学的記録は、対照とＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2処理マウスで実質的に同様であった（図７Ａ）。未処置マウスでは、ＳＩ−ＴＯＮ誘発によりＲＧＣ電気活動が約５０％低下した。損傷１５分後に１００ｎＭのＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を急性硝子体内注射したマウスでは、ＳＩ−ＴＯＮがＲＧＣに及ぼす外傷の影響は、無損傷マウスと比べると著しく低減した（図７Ａ）。
ＲＧＣのベースライン電気生理学的記録は、対照とＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2処置マウスで実質的に同様であった（図７Ｂ）。損傷後のＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の急性硝子体内投与は、皮下投与単独よりも、薬剤の視覚予後（ＰＥＲＧ）効果を増大させた（図７Ｂ）。
結果から、Ｄ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の硝子体内投与に、エタネルセプトとＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の連続皮下注射を組み合わせると、ＳＩ−ＴＯＮがＲＧＣの生存に及ぼす影響の予防において、皮下注射単独よりも効果的であったことが実証された。更に、眼へのＤ−Ａｒｇ−２’６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の直接適用は安全であり（毒性の証拠が示されなかった）、またＰＥＲＧ記録から示されるように、皮下注射単独よりも視覚予後が改善した。従って、これらの結果は、本技術の組成物が、必要とする対象の外傷性視神経症（ＴＯＮ）を処置又は予防する方法において有用であることを実証している。
【０１４４】
均等物
本技術は、本出願に記載する特定の実施形態に関して限定されるべきではなく、これらは、本技術の個々の態様の単一の例示として意図されている。当業者には明らかとなるように、本技術の多くの修正及び変形を、その精神及び範囲から逸脱することなく行うことができる。前述の説明から、当業者には、本明細書に列挙したものに加えて、本技術の範囲内の機能的に同等の方法及び装置が明らかとなろう。そのような修正及び変形は、添付の特許請求の範囲内に入ることが意図されている。本技術は、添付の特許請求の範囲の文言、及びそのような請求項が権利を与えられる均等物の全範囲によってのみ制限されるべきである。本技術は、特定の方法、試薬、化合物、組成物、又は生物系に限定されず、当然のことながら変化する可能性があることを理解されたい。また本明細書で使用する用語は、特定の実施形態を説明することのみを目的としており、限定することを意図するものではないことも理解されたい。
更に、本開示の特徴又は態様がマーカッシュ群の形式で説明される場合、当業者は、それにより開示が、マーカッシュ群の任意の個別要素又は要素のサブグループに関しても説明されていることを理解するだろう。
当業者が理解するように、あらゆる目的のために、特に明細書を提供する観点から、本明細書に開示するすべての範囲は、あらゆる可能な部分範囲及びこれらの部分範囲の組み合わせを包含する。列挙した範囲は、同じ範囲が少なくとも２等分、３分等分、４分等分、５等分、１０等分などに分割されることを十分に記述し、またこれを可能にするものと容易に認識できる。非限定的な例として、本明細書に説明する各範囲は、下部３分の１、中部３分の１、上部３分の１などに容易に分割できる。同様に当業者が理解するように、「まで」、「少なくとも」、「より大きい」、「より小さい」などのすべての言葉は、列挙する数字を含み、かつ前述のように後で部分範囲に分割できる範囲を指す。更に、当業者が理解するように、範囲は個々の要素を含む。従って、例えば、１〜３個の細胞を有する群は、１、２、又は３個の細胞を有する群を指す。同様に、１〜５個の細胞を有する群は、１、２、３、４、又は５個の細胞を有する群を指すなどとなる。
本明細書で参照又は引用するすべての特許、特許出願、仮出願、及び刊行物は、本明細書の明示的な教示と矛盾しない範囲で、すべての図面及び表を含め、参照によりその全体が援用される。
他の実施形態は、以下の特許請求の範囲内に記載する。
【図１Ａ】
2021531272.tif 000096
【図１Ｂ】
2021531272.tif 000097
【図２】
2021531272.tif 000098
【図３】
2021531272.tif 000099
【図４】
2021531272.tif 000100
【図５Ａ】
2021531272.tif 000101
【図５Ｂ】
2021531272.tif 000102
【図５Ｃ】
2021531272.tif 000103
【図５Ｄ】
2021531272.tif 000104
【図６Ａ】
2021531272.tif 000105
【図６Ｂ】
2021531272.tif 000106
【図７Ａ】
2021531272.tif 000107
【図７Ｂ】
2021531272.tif 000108
【国際調査報告】
2021531272.tif 000109
2021531272.tif 000110
2021531272.tif 000111