(57)【要約】  本発明は、その任意の立体化学的異性体の形態を含む式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容される塩に関する。【化１】2021503009.tif 000023式中、Ｒ１は−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アルキル、炭酸エステル、または−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、エステル、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ−アルキル、カルバメートエステルであり、Ｒ２は−ＣＨ３または−ＣＤ３である。アルキルエステルは、飽和または不飽和Ｃ１２〜Ｃ２６のアルキル炭素を含むことができる。アルキル炭素鎖は、直鎖、分岐鎖、非環状、環状、非置換または置換構造のいずれかを有することができる。【選択図】図１
2021503009.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（＋）−α−ＤＨＴＢＺおよび（＋）−β−ＤＨＴＢＺ異性体の形態を含む式（Ｉ）の化合物
【化１】
2021503009.tif 000020
またはその薬学的に許容される塩であって、式中、Ｒ１は、直鎖、分岐鎖、非環状、環状または非置換もしくは置換構造を有する、１２〜２６個の炭素原子を含む飽和または不飽和アルキル誘導体であり、Ｒ２は−ＣＨ３または−ＣＤ３である、化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
治療有効量の請求項１に記載の化合物および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項３】
式（Ｉａ）を有するか、
【化２】
2021503009.tif 000021
またはその薬学的に許容される塩であり、式中、Ｒは、直鎖、分岐鎖、非環状、環状または非置換もしくは置換構造を有する、１１〜２５個の炭素原子を含む飽和または不飽和アルキル基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
式（Ｉｂ）を有するか、
【化３】
2021503009.tif 000022
またはその薬学的に許容される塩であり、式中、Ｒは、直鎖、分岐鎖、非環状、環状または非置換もしくは置換構造を有する、１１〜２５個の炭素原子を含む飽和または不飽和アルキル基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１がパルミテートである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１がステアレートである、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１がベヘネートである、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１がオレエートである、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
前記化合物のＶＭＡＴ２阻害ＩＣ５０が、放射性リガンド結合アッセイを使用して決定されるとき、非結合親化合物のものより２００倍超大きい、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
前記化合物のＶＭＡＴ２阻害ＩＣ５０が、放射性リガンド結合アッセイを使用して決定されるとき、非結合親化合物のものより５００倍超大きい、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
前記化合物のＶＭＡＴ２阻害ＩＣ５０が、放射性リガンド結合アッセイを使用して決定されるとき、非結合親化合物のものより１０００倍超大きい、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
ジメチルアセトアミド（ＤＭＡｃ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、またはトリアセチン（ＴＡ）を含む有機溶媒に溶解したときに溶液の変色を防止または最小限に抑えるが、非結合親化合物が同じ条件下で深刻な変色を示す、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
非結合（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺと比較して低い水溶液中の溶解度をもたらす、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
前記薬学的に許容される担体が、ＤＭＳＯ、ＮＭＰ、ＤＭＡｃ、ベンジルアルコール（ＢＡ）、安息香酸ベンジル（ＢＢ）、エタノール、グリコフロール、トリアセチンおよびグリセロールからなる群から選択される、請求項２に記載の組成物。
【請求項１５】
前記薬学的に許容される担体が、ゴマ油、植物油、トウモロコシ油、大豆油、ヒマシ油、綿実油、ピーナッツ油、およびオリーブ油からなる群から選択される薬学的な油からなる群から選択される、請求項２に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式（Ｉ）の化合物、これらの化合物を含む医薬組成物、これらの化合物を調製するための化学プロセス、ならびにかかる化合物を、それを必要とする温血動物へ投与することによる遅発性ジスキネジアなどの多動性疾患および障害の治療におけるそれらの使用に関する。
【０００２】
同義語：ジヒドロテトラベナジン、ＤＴＢＺ、ＤＨＴＢＺ
同義語：ｄ６−ジヒドロテトラベナジン、ｄ６−ＤＴＢＺ、ｄ６−ＤＨＴＢＺ
【背景技術】
【０００３】
不随意運動と反復的な身体運動は、精神病治療薬などのドーパミンアミン遮断薬による長期投薬への曝露によって引き起こされる多動性運動障害の典型的な症状である。多動性運動障害の実際のメカニズムはまだ明らかではない。以前のデータは、Ｄ２のようなドーパミン受容体の上方調節と過敏性が、ドーパミン作動性神経伝達の慢性的な低下をきたし、多動性運動障害を引き起こすという仮説を支持する。
【０００４】
多動性の運動は、噛むことから始まり、正常な発話、呼吸、運動障害およびバランスに影響を与える可能性がある。いくつかの重症例では、これにより、自傷、裂傷が起こり、正常な生活ができなくなる。遅発性ジスキネジア（ＴＤ）は、多動性運動障害の分類の１つであり、一般に、口腔顔面領域の不随意の多動性運動と、四肢および体幹の舞踏病アテトーシス状の障害を特徴とする。一般に、ＴＤは精神病治療薬の長期暴露によって発症する可能性があり、治療を中止した後でも持続することがよくある。
【０００５】
小胞性モノアミントランスポータ２（ＶＭＡＴ２）は、ドーパミン、セロトニン、ヒスタミン、ノルエピネフリンなどのモノアミンをシナプス前からシナプス小胞に輸送する膜タンパク質である。３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−Ａ］イソキノリン−２−オンは、また、テトラベナジン（ＴＢＺ、ＸＥＮＡＺＩＮＥ（登録商標））として知られ、強力な（ＩＣ５０は３．２ｎＭ、Ｓｃｈｅｒｍａｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１９８３、８０、５８４−５８８）および可逆性ＶＭＡＴ２阻害剤であり、多動性運動障害、例えば、ハンチントン病とＴＤに関連する舞踏病、の治療薬として使用されている。しかしながら、うつ病、鎮静、眠気、めまい、不眠症、アカシジア、パーキンソン症候群など、ＴＢＺの標的外の関連する副作用がいくつか観察され、報告されている。したがって、ＸＥＮＡＺＩＮＥ（登録商標）の厳格なリスク評価と軽減戦略（ＲＥＭＳ）が発行され、各人に適した投与量、投与量滴定および副作用に関連する薬物療法の管理が要求されている。
【０００６】
ＴＢＺはラセミ混合物であり、２つのキラル中心を提示する。ＴＢＺは急速かつ高度に代謝され、その還元型、ジヒドロテトラベナジン（ＤＨＴＢＺ）として知られている、３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−２−オールになる。ラセミ混合物の性質により、ＤＨＴＢＺは（±）−α−ＤＨＴＢＺおよび（±）−β−ＤＨＴＢＺの４つの異性体として表すことができ、どの異性体に変わる程度は患者間で非常に変わり得る（Ｍｅｈｖａｒら、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．ａｎｄ  Ｄｉｓｐｏｓ．，１９８７，１５，２５０−２５５）。これらの異性体の中で、（＋）−α−ＤＨＴＢＺまたは２Ｒ、３Ｒ、１１ｂＲ−ＤＨＴＢＺは主要な活性代謝物と見なされ、優れたＶＭＡＴ２結合と標的外選択性を示す。一方、他の立体異性体は、弱い程度から中程度のＶＭＡＴ２結合や一部の標的外受容体への高い親和性など、さまざまな薬理効果を示す（Ｇｒｉｇｏｒｉａｄｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２０１７，３６１，４５４−４６１）。ＴＢＺは多動性障害治療薬として承認されている、しかしながら、高度の初回通過効果によるＴＢＺ代謝の複雑さによる、一定でない生物学的利用能と標的外の現象は、患者間で、一定でない治療結果をもたらす可能性がある。また、短い半減期、低い生物学的利用能はより多くの投与頻度、１日３回の投与を招く可能性がある。
【０００７】
複雑なラセミ代謝物によって引き起こされるＴＢＺの標的外効果は、自殺傾向、うつ病、鎮静状態、眠気、めまい、不眠症、アカシジア、パーキンソン症候群など、いくつかの深刻な副作用を引き起こす可能性がある。個人の遺伝子型判定は、各代謝産物の一定でない濃度レベルを生成するＴＢＺの異なる程度の代謝を示す可能性がある。また、遺伝子判定の結果により、ＴＢＺの投与量滴定が必要である。
【０００８】
ＴＢＺに関連する深刻な副作用は代謝の複雑さに関連するので、その場合生成された異性体代謝産物は患者ごとに大きく変動する可能性がある。一部の代謝産物の標的外選択性が低いことが、これらの深刻な副作用の原因であることが示されている。したがって、立体化学的代謝産物に関連する問題は、単一の立体異性体の形態で代謝産物またはその誘導体を投与することによっておそらく回避することができる。
【０００９】
米国特許第８０３９６２７号に記載の（Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−酪酸（２Ｒ、３Ｒ、１１ｂＲ）−３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−２−イル（Ｖａｌｂｅｎａｚｉｎｅ、ＶＢＺ、ＩＮＧＲＥＺＺＡ（登録商標））は単一の立体異性体（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺにバリン置換を有するプロドラッグである。プロドラッグは、不活性（または著しく活性が低い）形態で投与される薬理学的物質（薬物）である。投与されると、プロドラッグはインビボ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）で代謝されてその活性な親薬物になる。単一の立体異性体のプロドラッグの投与は、ジヒドロテトラベナジン（ＤＨＴＢＺ）のすべての立体異性体代謝産物への曝露を回避することができるため、価値がある。米国特許第８０３９６２７号に開示されているように、ＶＢＺ［アミノ酸、バリンと結合した（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺ］は１８７ｎＭのＶＡＭＴ２結合親和性、Ｋｉを示した。ＶＢＺは（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺより活性は低いが、なお、ＶＭＡＴ２に対する強力な阻害剤である。
【００１０】
優れた安定性、ＶＭＡＴ２結合が最小限または皆無、および活性薬物を遊離するための好適な加水分解速度は、ＤＨＴＢＺ誘導体の長時間作用型デポ剤の開発における重要なパラメーターである。いくつかの先行技術では、ヒドロキシルを含むＤＨＴＢＺの化学修飾を示しているが、エステル化された化合物に関連する結果として生じる特性は、大幅かつ予測不能に変動した。例えば、Ｈａｒｒｉｏｔｔ  ｅｔ  ａｌ、Ｐｒｏｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２０１８、５７、８７−１１１、Ａｒａｎｄａ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｕｒｏ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９９０，２５，３６９−３７４およびＫｉｌｂｏｕｒｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｈｉｒａｌｉｔｙ、１９９７、９、５９−６２は、ＤＨＴＢＺのヒドロキシル基を利用して、ＤＨＴＢＺのさまざまなエステル修飾を形成し得ることを示した。ＡｒａｎｄａはＤＨＴＢＺのカプロン酸エステル（Ａｒａｎｄａの３７０ページ、化合物Ｎｏ．６を参照）を開示し、ＫｉｌｂｏｕｒｎはＤＨＴＢＺの酢酸エステル（Ｋｉｌｂｏｕｒｎの６０ページ、右側の列を参照）を開示した。しかしながら、これらのタイプの化合物は、ＤＨＴＢＺのプロドラッグとしての使用に好適ではない。特許出願第１１／９３７，４４５号に対する審査官の拒絶に対する２０１１年４月１日の応答で開示されているように、ヒトの肝臓アッセイで試験した場合、これらの化合物の（＋）−α−ＤＨＴＢＺへの変換は観察されなかった。バリン修飾ＤＨＴＢＺであるＶＢＺのみが、活性（＋）−α−ＤＨＴＢＺを遊離することができる。短鎖（Ｃ２およびＣ６）脂肪族カルボン酸での修飾は、活性な親薬物の遊離を非効率的にするように見える。このように、これらの先行技術の化合物の投与は活性代謝物を生成できないので、これらの化合物はいずれも、（＋）−α−ＤＨＴＢＺの代替として機能しない（ｈｔｔｐｓ：／／ｐｏｒｔａｌ．ｕｓｐｔｏ．ｇｏｖ／ｐａｉｒ／ｖｉｅｗ／ＢｒｏｗｓｅＰｄｆＳｅｒｖｌｅｔ？ｏｂｊｅｃｔＩｄ＝ＧＬＺＨＲ２０８ＰＰＯＰＰＹ２＆ｌａｎｇ＝ＤＩＮＯおよびｈｔｔｐｓ：／／ｐｏｒｔａｌ．ｕｓｐｔｏ．ｇｏｖ／ｐａｉｒ／ｖｉｅｗ／ＢｒｏｗｓｅＰｄｆＳｅｒｖｌｅｔ？ｏｂｊｅｃｔＩｄ＝ＧＬＺＨＲ２０ＮＰＰＯＰＰＹ２＆ｌａｎｇ＝ＤＩＮＯ、宣言書を参照）。
【００１１】
Ａｒａｎｄａは、カプロン酸エステルのＶＭＡＴ２結合親和性（ＥＣ５０）を、（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺの６．７±１．１ｎＭと比較して、８．１±３．３ｎＭと報告する（３７０ページの表１を参照）。これは、（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺの４．７ｎＭのＫｉと比較して、カプロン酸エステルについて、５．７ｎＭのＫｉに相当する（宣言書１６を参照）。Ｋｉｌｂｏｕｒｎの酢酸エステルは、（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺの５．３ｎＭと比較して、１６ｎＭのＫｉを持つことが見出された（宣言の１７を参照）。Ｋｉｌｂｏｕｒｎの酢酸エステル（Ｃ２）は、Ａｒａｎｄａのカプロン酸エステル（Ｃ６）よりも低い親和性、つまり１６ｎＭ対５．７ｎＭを示した。エステルの炭素鎖が長いほど、ＶＡＭＴ２の阻害剤は強くなるようである。カプロン酸エステルと酢酸エステルの両方が（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺと同等の効力（Ｋｉ）を持つ強力なＶＡＭＴ２阻害剤である。したがって、Ｋｉｌｂｏｕｒｎ（Ｃ２）およびＡｒａｎｄａ（Ｃ６）に開示されているこれらのエステルは、プロドラッグとしての使用には好適ではない。また、（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺエステルの炭素鎖長をＣ２〜Ｃ６に増やしても、ＶＭＡＴ２に関する効力が低下しないようである。
【００１２】
ＶＢＺは成功した経口剤形であるが、それは毎日長期間服用する必要がある。それはまだＶＭＡＴ２受容体に比較的強い効力があり、プロドラッグとしての使用には理想的ではない。したがって、投与頻度を大幅に低減し、コンプライアンスを改善することができる、より長時間作用する剤形が依然として必要とされている。ＶＢＺよりもＶＭＡＴ２に対する効力が低い修飾医薬も必要である。
【発明の概要】
【００１３】
本発明は、その任意の立体化学的異性体の形態を含む式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容される塩に関する。
【化１】
2021503009.tif 000003
【００１４】
式（Ｉ）において、Ｒ１は−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アルキル、炭酸エステル、または−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、エステル、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ−アルキル、カルバメートエステルであり、Ｒ２は−ＣＨ３または−ＣＤ３である。アルキルエステルは、飽和または不飽和Ｃ１２〜Ｃ２６のアルキル炭素を含むことができる。アルキル炭素鎖は、直鎖、分岐鎖、非環状、環状または置換された構造のいずれかを有することができる。
【００１５】
具体的には、本発明は、（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）−３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−２−オール（（＋）−α−ＤＨＴＢＺ）および（２Ｓ、３Ｒ、１１ｂＲ）−３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−２−オール（（＋）−β−ＤＨＴＢＺ））の結合体、ならびにこれらの化合物の修飾方法、使用、およびこれらを含む医薬組成物を提供する。
【００１６】
本発明の式（Ｉ）の化合物は、良好な化学的かつ物理的な安定性を有し、ＶＭＡＴ２結合性が最小限であるかまたは皆無であり、許容可能なエステル加水分解速度を有する。
【００１７】
本発明の式（Ｉ）の化合物は、幅広い治療用途を達成でき、小胞性モノアミントランスポータ２（ＶＭＡＴ２）受容体と、多動性運動障害疾患に分類される疾患などその関連疾患との、阻害剤として使用することができる。
【００１８】
本発明の式（Ｉ）の化合物は、変動の少ない血漿濃度および薬物動態（ＰＫ）プロファイル、による制御された方法で活性ＤＨＴＢＺを送達するように意図され、それにより標的外効果を制限して患者に改善された安全プロファイルを提供することができる。さらに、式（Ｉ）は（＋）−ＤＨＴＢＺ（（＋）−α−ＤＨＴＢＺ）と（＋）−β−ＤＨＴＢＺ））のアルキルエステル体であり、アルキルエステル体は式Ｃ１２〜Ｃ２６のアルキルエステルを含む。本発明は、（＋）−ＤＨＴＢＺのヒドロキシル基を脂肪酸部分のカルボキシル基と反応させることにより、（＋）−ＤＨＴＢＺを脂肪酸と結合させる方法を提供する。本発明の式（Ｉ）の化合物は、低い水溶解度（例えば、１００ｍｃｇ／ｍＬ未満）、好適なＶＭＡＴ２阻害（Ｋｉが１００ｎＭを超える）を提供する。本発明の式（Ｉ）の化合物は、必要とする対象に投与することができ、活性ＤＨＴＢＺは、組織環境内での結合体の加水分解後に遊離される。加水分解は、酵素的経路または化学的経路を介して、または両方の経路を組み合わせて行われ得る。
【００１９】
本発明は、少なくとも１つの薬学的に許容される担体および治療有効量の式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】３７℃での有機溶液中の（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺおよび（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺパルミテートの色の変化。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明は、その任意の立体化学的異性体の形態を含む式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容される塩に関する。
【化２】
2021503009.tif 000004
【００２２】
式（Ｉ）において、Ｒ１は−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アルキル、炭酸エステル、または−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、エステル、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ−アルキル、カルバメートエステルであり、Ｒ２は−ＣＨ３または−ＣＤ３である。
【００２３】
本明細書で使用される場合、「アルキル」は、１２〜２６個の炭素原子を含む、直鎖または分岐鎖、非環状または環状、置換、不飽和または飽和脂肪族炭化水素を意味する。
【００２４】
本明細書で使用する場合、「アルキル誘導体」には、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アルキル、炭酸エステル、または−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、エステル、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ−アルキル、カルバメートエステルが含まれる。
【００２５】
本明細書で使用される「立体化学的異性体の形態」という用語は、式（Ｉ）の化合物が有し得るすべての可能な異性体の形態を含む。他に言及または示されていない限り、化合物の化学表示は、すべての可能な立体化学的異性体の形態の混合物を示し、前記混合物は、基本的な分子構造のすべてのジアステレオマーおよびエナンチオマーを含む。より具体的には、立体中心は、Ｒ配置またはＳ配置を有し得る。明らかに、式（Ｉ）の化合物の立体化学的異性体の形態は、本発明の範囲内に包含されることが意図されている。
【００２６】
式（Ｉ）の化合物およびそれらの合成に使用される中間体の絶対立体化学配置は、例えば、Ｘ線回折などの周知の方法を使用しながら、当業者により容易に決定され得る。
【００２７】
以下の略語が本明細書で定義されている。ＴＢＺ−テトラベナジン。ＤＨＴＢＺ−ジヒドロテトラベナジン；ＶＢＺ−バルベナジン
【００２８】
テトラベナジン（ＴＢＺ）は、（＋）−ＴＢＺ（Ｒ，Ｒ−ＴＢＺ）と（−）−ＴＢＺ（Ｓ，Ｓ−ＴＢＺ）のラセミ混合物で、次の構造を持つ。
【００２９】
（＋）−ＴＢＺ（３Ｒ，１１ｂＲ−ＴＢＺ）（３Ｒ、１１ｂＲ）−３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−２−オン
【化３】
2021503009.tif 000005
【００３０】
（−）−ＴＢＺ（３Ｓ，１１ｂＳ−ＴＢＺ）（３Ｓ、１１ｂＳ）−３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−２−オン
【化４】
2021503009.tif 000006
【００３１】
ジヒドロテトラベナジン（ＤＨＴＢＺ）には、次の構造を持つ４つの鏡像異性体がある。
【００３２】
（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺ（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ−ＤＨＴＢＺ）（（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）−３−イソブチル−９、１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−２−オール）
【化５】
2021503009.tif 000007
【００３３】
（＋）−（β）−ＤＨＴＢＺ（２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＲ−ＤＨＴＢＺ）（（２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＲ）−３−イソブチル−９、１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−２−オール）
【化６】
2021503009.tif 000008
【００３４】
（−）−（α）−ＤＨＴＢＺ（２Ｓ，３Ｓ，１１ｂＳ−ＤＨＴＢＺ）（（２Ｓ，３Ｓ，１１ｂＳ）−３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−２−オール）
【化７】
2021503009.tif 000009
【００３５】
（−）−（β）−ＤＨＴＢＺ（２Ｒ，３Ｓ，１１ｂＳ−ＤＨＴＢＺ）（（２Ｒ，３Ｓ，１１ｂＳ）−３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−２−オール）
【化８】
2021503009.tif 000010
【００３６】
バルベナジン（ＶＢＺ）またはＲ，Ｒ，Ｒ−ＤＨＴＢＺ−Ｖａｌまたは［（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺ）］−Ｖａｌ（ＶＢＺ）の構造は次のとおりである。
【化９】
2021503009.tif 000011
【００３７】
（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺならびに（＋）−（β）−ＤＨＴＢＺ、ならびにそれらの重水素化誘導体ｄ６−（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺおよびｄ６−（＋）−（β）−ＤＨＴＢＺは、本発明において、式（Ｉ）の結合体を合成するために好ましく使用される。
【００３８】
本明細書で上述した薬学的に許容される塩は、式（Ｉ）の化合物が形成することができる治療的に活性な無毒の酸付加塩を含むことを意味する。これらの薬学的に許容される酸付加塩は、塩基体をそのような適切な酸で処理することにより簡便に得ることができる。適切な酸は、例えば、ハロゲン化水素酸、例えば塩酸または臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、または、例えば、酢酸、プロパン酸、ヒドロキシ酢酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸（すなわち、エタン二酸）、マロン酸、コハク酸（すなわち、ブタン二酸）、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サイクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、パモ酸などの有機酸を含む。
【００３９】
逆に、前記塩形態は、適切な塩基での処理により遊離塩基形態に変換することができる。
【００４０】
一実施形態では、本発明は、Ｒ１がＣ１２〜２６アルキルのエステルまたはカルバメートエステルまたは炭酸エステルであり、Ｒ２が−ＣＨ３である式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４１】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ１がＣ１２〜２６アルキルのエステルまたはカルバメートエステルまたは炭酸エステルであり、Ｒ２が−ＣＤ３である式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４２】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ１がラウリン酸、トリデシル酸、ミリスチン酸、ペンタデシル酸、パルミチン酸、マルガリン酸、ステアリン酸、ノナデシル酸、アラキジン酸、ヘンイコシル酸、ベヘン酸、トリコシル酸、リグノセリン酸、ペンタコシル酸、およびセロチン酸の群のうちの１つに由来する、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４３】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ１がＣ１６アルキルのエステルまたはパルミテートである式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４４】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ１がＣ１８アルキルのエステルまたはステアレートである式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４５】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ１がＣ２２アルキルのエステルまたはベヘネートである式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４６】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ１が不飽和Ｃ１８アルキルのエステルまたはオレエートである式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４７】
別の実施形態では、Ｒ１がＣ１２〜２６アルキルのエステルを表し、Ｒ２が−ＣＨ３を表す式（Ｉ）の化合物として定義される式（Ｉａ）の化合物は、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）を、それぞれカップリング試薬および触媒として存在させて、（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺ（ＩＶ）を式（ＩＸ）の脂肪酸と反応させる既知のエステル化方法により合成することができる。式（ＩＸ）の脂肪酸におけるＲ置換基は、Ｃ１１〜２５アルキルとして定義される。
【化１０】
2021503009.tif 000012
【００４８】
別の実施形態では、Ｒ１がＣ１２〜２６アルキルのエステルを表し、Ｒ２が−ＣＤ３，を表す式（Ｉ）の化合物として定義される式（Ｉｂ）の化合物は、ＥＤＣおよびＤＭＡＰをそれぞれカップリング試薬および触媒として存在させてｄ６−（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺ（Ｘ）と式（ＩＸ）の脂肪酸を反応させる既知のエステル化方法により合成することができる。式（ＩＸ）の脂肪酸におけるＲ置換基は、Ｃ１１〜２５アルキルとして定義される。
【化１１】
2021503009.tif 000013
【００４９】
あるいは、化合物（Ｉａ）および（Ｉｂ）は、（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺ（ＩＶ）およびｄ６−（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺ（Ｘ）を、反応中に遊離した酸を中和するための塩基の存在下、で式（ＸＩ）の塩化アシルと反応させることにより合成することができる。式（ＸＩ）の塩化アシルのＲ置換基は、Ｃ１１〜２５アルキルとして定義される。
【化１２】
2021503009.tif 000014
【００５０】
一般に、本発明の結合体の合成は、典型的には以下のステップからなる。
【００５１】
すでに活性化されているのではない場合、カルボキシル基の活性化。
【００５２】
塩基の存在下での活性化脂肪酸のＤＨＴＢＺへの添加またはその逆。
【００５３】
例えば、無水ＴＨＦまたはジクロロメタン（ＤＣＭ）中の（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺ遊離塩基の溶液に、トリエチルアミン（ＴＥＡ）を加えた。溶液を撹拌し、脂肪酸クロリドを室温で滴下した。脂肪酸誘導体に応じて２〜６時間後、溶媒を蒸発乾固させ、残留物を酢酸エチル（ＥＡ）に溶解した。有機相をＮａＨＣＯ３水溶液および食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固させて、脂肪酸−（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺ結合体を得た。
【００５４】
室温で、結合体をジオキサン中の４Ｎ  ＨＣｌとともに１５分間撹拌し、溶媒を蒸発乾固させることにより、その塩酸塩に変換した。残留物をイソプロパノール（ＩＰＡ）で粉砕し、沈殿物を濾過し、乾燥して、脂肪酸−（＋）−（α）−ＤＨＴＢＺ結合体の塩酸塩を得た。同様にして、本出願の他の結合体は、この結合合成手順を改変して、または改変せずに合成することができる。
【００５５】
別の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、非結合化合物よりも水溶液中での溶解度が低い。これは、（＋）−α−ＤＨＴＢＺとバリンの結合体であるバルベナジン（ＶＢＺ）とは対照的である。アミノ酸は通常、薬物の水溶解度を高めるために使用されてきた（Ｊｏｒｎａｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ２０１６，２１，４２を参照）。式（Ｉ）の化合物のこの低い溶解度は、投与頻度を低減するための徐放製剤を開発するために有利に使用され得る。
【００５６】
別の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、有機溶液中で改善された安定性を示す。薬学的に許容される有機溶媒に溶解すると、非結合ＤＨＴＢＺは時間とともに色が変化する。意外にも、結合ＤＨＴＢＺを同じ溶媒に溶解すると、色の変化を最小限に抑える、または防止し得ることが見出された。この色安定化は、高品質の製品を開発するのに役立つ。本明細書に開示される溶媒には、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡｃ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、トリアセチン（ＴＡ）、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリエチレングリコールなどが含まれる。
【００５７】
別の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、ＶＭＡＴ２受容体の阻害を示さないか、または最小限に抑える。比較すると、放射性リガンド結合アッセイを使用して決定されるとき、式（Ｉ）の化合物のＶＭＡＴ２阻害ＩＣ５０は、非結合親化合物のものより２００倍超大きい。好ましくは、放射性リガンド結合アッセイを使用して決定されるとき、式（Ｉ）の化合物のＶＭＡＴ２阻害ＩＣ５０は、非結合親化合物のものより５００倍超大きい。より好ましくは、放射性リガンド結合アッセイを使用して決定されるとき、式（Ｉ）の化合物のＶＭＡＴ２阻害ＩＣ５０は、非結合親化合物のものより１０００倍超大きい。
【００５８】
本発明の化合物は、それを必要とする温血動物にその化合物を投与することによる遅発性ジスキネジアなどの多動性疾患および障害の治療に使用するための、小胞性モノアミントランスポータ２（ＶＭＡＴ２）によるカテコールアミン取り込みの長時間作用型可逆的阻害剤であるという利点を示す。本発明の式（Ｉ）の化合物は、安定したＰＫプロファイルにより、治療濃度範囲内で遊離ＶＭＡＴ２阻害剤を、長期間にわたって、好ましくは２週間にわたって、より好ましくは１ヶ月にわたって、安定かつ継続的に遊離することができる。これは、例えば、動物への投与後に血漿レベルを測定することによって証明することができる。
【００５９】
本発明は、少なくとも１つの薬学的に許容される担体および治療有効量の式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物を提供する。
【００６０】
本発明の医薬組成物を調製するために、遊離塩基または酸付加塩形態の有効量の特定の化合物が、活性成分として、少なくとも１つの薬学的に許容される担体と緊密な混合物に組み合わされ、これは投与に望ましい調製物の形態に応じて広く様々な形態をとり得る。これらの医薬組成物は、好ましくは、経口投与、直腸投与、経皮投与または非経口注射に好適な、望ましくは単一剤形である。
【００６１】
例えば、経口剤形で組成物を調製する場合、懸濁液、シロップ、エリキシル、溶液などの経口液体製剤の場合、水、グリコール、油、アルコールなどの通常の液体医薬担体のいずれかが、粉末剤、丸剤、カプセル剤および錠剤の場合、デンプン、糖、カオリン、滑沢剤、結合剤、崩壊剤などの固体医薬担体が、用いられ得る。それらの容易な投与のために、錠剤およびカプセルは、最も有利な経口単位剤形を代表し、その場合、固体医薬担体が明らかに用いられる。非経口注射組成物の場合、医薬担体は主に滅菌水を含むが、活性成分の特性を改善するために他の成分を含めることができる。注射可能な溶液は、例えば、生理食塩水、グルコース溶液または両方の混合物、を含む医薬担体を使用することによって調製され得る。注射可能な懸濁液はまた、適切な液体担体、懸濁剤などを使用することによって調製されてもよい。経皮投与に好適な組成物では、医薬担体は、皮膚に有意な有害作用を引き起こさない、任意に、小さい割合の好適な添加剤と組み合わされ得る、浸透促進剤および／または適切な湿潤剤を任意で含み得る。前記添加剤は、皮膚への活性成分の投与を容易にするために、および／または所望の組成物を調製するのに役立つように選択することができる。これらの局所用組成物は、例えば、経皮パッチ、スポットオンまたは軟膏として、様々な方法で投与することができる。
【００６２】
投与の容易さおよび投薬量の均一性のために、本発明の医薬組成物を単位剤形で製剤化することは、特に有利である。本明細書で使用される「単位剤形」は、まとまった投与量として好適な物理的に分離した単位を指し、各単位は、必要な医薬担体と結合して所望の治療効果を生じるように計算された所定量の活性成分を含む。そのような単位剤形の例は、錠剤（分割錠またコーティング錠を含む）、カプセル、丸薬、粉末パケット、ウエハース、注射可能な溶液または懸濁液、小さじ１杯、大さじ１杯など、およびそれらの分割された複数である。
【００６３】
式（Ｉ）の化合物は、注射による非経口投与のために製剤化され得る。注射用製剤は、防腐剤を加えた単位剤形、例えばアンプルまたは複数回投与用容器で提供することができる。それらは、油性または水性ビヒクル中の懸濁液、溶液または乳濁液などの形態をとることができ、等張化剤、懸濁剤、安定剤および／または分散剤などの配合剤を含むことができる。あるいは、活性成分は、使用前に、好適なビヒクル、例えば、発熱物質を含まない無菌水、と混合するための粉末形態で存在し得る。
【００６４】
式（Ｉ）の化合物は、例えば、カカオバターおよび／または他のグリセリドなどの従来の坐剤基剤を含む、坐剤または停留浣腸などの直腸組成物に製剤化することもできる。
【００６５】
したがって、本発明は、ハンチントン病に関連する遅発性ジスキネジアおよび舞踏病などの、ＶＭＡＴ２受容体に関連する運動障害の治療方法を提供する。この方法は、経口または非経口投与を行うための、本発明の式（Ｉ）の化合物、ＶＭＡＴ２阻害剤、および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物を含む。
【実施例】
【００６６】
サンプルを分析するためのＨＰＬＣ法
分析ＨＰＬＣ法１
プラットフォーム：Ｓｈｉｍａｄｚｕ  Ｎｅｘｅｒａ  Ｘ２シリーズ：オートサンプラー、ＵＶ検出器（２１４ｎｍおよび２５４ｎｍ）を搭載
カラム：ＧＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ  ＩｎｅｒｔＳｕｓｔａｉｎ  Ｐｈｅｎｙｌ
勾配：
移動相Ａ−８．５ｍＭ酢酸アンモニウム溶液（ｐＨ６．８）
移動相Ｂ−ＡＣＮ＋３．５％ＴＨＦ
０〜３分３０％Ｂ、
３〜１０分３０％−５０％Ｂ、
１０〜４０．５分５０〜９０％Ｂ、
４０．５〜５０分９０％Ｂ、
５０〜５０．５分９０〜３０％Ｂ、
５０．５〜６０分３０％Ｂ
流量：１ｍＬ／分
オーブン温度：５０℃
分析ＨＰＬＣ法２
プラットフォーム：Ｓｈｉｍａｄｚｕ  Ｎｅｘｅｒａ  Ｘ２シリーズ：オートサンプラー、ＵＶ検出器（２１４ｎｍおよび２５４ｎｍ）を搭載
カラム：ＧＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ  ＩｎｅｒｔＳｕｓｔａｉｎ  Ｐｈｅｎｙｌ
勾配：
移動相Ａ−８．５ｍＭ酢酸アンモニウム溶液（ｐＨ６．８）
移動相Ｂ−ＡＣＮ＋３．５％ＴＨＦ
０〜３分５０％〜７５％Ｂ、
３〜３．５分７５％Ｂ、
３．５〜３．６分７５−５０％Ｂ、
３．６〜６分５０％Ｂ、
流量：２ｍＬ／分
オーブン温度：５０℃
分析ＨＰＬＣ法３
プラットフォーム：Ｓｈｉｍａｄｚｕ  Ｎｅｘｅｒａ  Ｘ２シリーズ：オートサンプラー、ＵＶ検出器（２１４ｎｍおよび２５４ｎｍ）を搭載
カラム：ＧＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ  ＩｎｅｒｔＳｕｓｔａｉｎ  Ｐｈｅｎｙｌ
勾配：
移動相Ａ−８．５ｍＭ酢酸アンモニウム溶液（ｐＨ６．８）
移動相Ｂ−ＡＣＮ＋３．５％ＴＨＦ
０〜２分８０％〜９５％Ｂ、
２〜４分９５％Ｂ、
４〜４．１分９５〜８０％Ｂ、
４．１〜７分８０％Ｂ、
流量：２ｍＬ／分
オーブン温度：５０℃
分析ＨＰＬＣ法４
プラットフォーム：Ｓｈｉｍａｄｚｕ  Ｎｅｘｅｒａ  Ｘ２シリーズ：オートサンプラー、ＵＶ検出器（２１４ｎｍおよび２５４ｎｍ）を搭載
カラム：ＧＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ  ＩｎｅｒｔＳｕｓｔａｉｎ  Ｐｈｅｎｙｌ
勾配：
移動相Ａ−８．５ｍＭ酢酸アンモニウム溶液（ｐＨ６．８）
移動相Ｂ−ＡＣＮ＋３．５％ＴＨＦ
０〜２分８０％〜９５％Ｂ、
２−５分９５％Ｂ、
５〜５．１分９５〜８０％Ｂ、
５．１〜８分８０％Ｂ、
流量：２．５ｍＬ／分
オーブン温度：５０℃
【００６７】
実施例１．（２Ｒ、３Ｒ、１１ｂＲ）−３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−２−イル  パルミテート（化合物１−１）
パルミチン酸（１２０．４ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）と４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（１５．３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を無水ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）に溶解し、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）（１１０．８ｕＬ、０．６２ｍｍｏｌ）を不活性環境下で、前の溶液に加えた。混合物を室温で５〜１０分間撹拌した。無水ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）に溶解した（２Ｒ、３Ｒ、１１ｂＲ）−３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−２−オール（１００ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）をその後、不活性環境下で前の混合物に加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、次に濃縮した。得られた化合物の精製は、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／Ｈｅ＝１／５でＲｆ＝０．１５）を介して行われ、６１％の収率で１０５．９ｍｇの化合物１−１を得た。ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：０．８３−０．８９（ｍ、９Ｈ）、０．９７−１．０４（ｍ、１Ｈ）、１．２２−１．４１（ｍ、２４Ｈ）、１．４４−１．４９（ｄｄ、１Ｈ）、１．５９−１．６７（ｍ、４Ｈ）、１．９３−２．０７（ｍ、２Ｈ）、２．３０−２．３４（ｍ、２Ｈ）、２．４３−２．６３（ｍ、３Ｈ）、２．９５−３．１６（ｍ、２Ｈ）、３．１８（ｄ、１Ｈ）、３．８２（ｓ、６Ｈ）、４．６２−４．６６（ｍ、１Ｈ）、６．５５（ｓ、１Ｈ）、６．６０（ｓ、１Ｈ）。ＥＳＩ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］計算：５５８．４；実測：５５８．５。
【００６８】
実施例２．（２Ｒ、３Ｒ、１１ｂＲ）−３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１ａ］イソキノリン−２−イル  ベヘネート（化合物１−２）
ベヘン酸（２４０．１ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）と４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（２２．９ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を無水ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）とＴＨＦ（２ｍＬ）の混合物に溶解し、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）（１６６．４ｕＬ，０．９４ｍｍｏｌ）を不活性環境下で前の溶液に加えた。混合物を室温で５〜１０分間撹拌した。無水ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）に溶解した（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）−３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−２−オール（１５０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）をその後、不活性環境下で前の混合物に加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、次に濃縮した。得られた化合物の精製は、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／Ｈｅｘ＝１／５でＲｆ＝０．１５）を介して行われ、３９％の収率で１１６ｍｇの化合物１−２を与えた。ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：０．８４−０．９０（ｍ、９Ｈ）、０．９８−１．０４（ｍ、１Ｈ）、１．２３−１．４１（ｍ、３６Ｈ）、１．４４−１．４９（ｄｄ、１Ｈ）、１．６０−１．６６（ｍ、４Ｈ）、１．９３−２．０８（ｍ、２Ｈ）、２．３０−２．３４（ｍ、２Ｈ）、２．４４−２．６３（ｍ、３Ｈ）、２．９５−３．１６（ｍ、２Ｈ）、３．１９（ｄ、１Ｈ）、３．８２（ｓ、６Ｈ）、４．６１−４．６６（ｍ、１Ｈ）、６．５５（ｓ、１Ｈ）、６．６０（ｓ、１Ｈ）。ＥＳＩ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］計算：６４２．５；実測［Ｍ＋Ｈ］：６４２．５。
【００６９】
実施例３．（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）−３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１ａ］イソキノリン−２−イル  ステアレート（化合物１−３）
ステアリン酸（１３３．４ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）と４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（７．７ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を無水ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）に溶解し、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）（１１０．８ｕＬ、０．６２ｍｍｏｌ）を不活性環境下で前の溶液に加えた。混合物を室温で５〜１０分間撹拌した。無水ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）に溶解した（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）−３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−２−オール（１００ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）をその後、不活性環境下で前の混合物に加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、次に濃縮した。得られた化合物の精製は、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／Ｈｅｘ＝１／５でＲｆ＝０．１５）を介して行われ、５５％の収率で１００．３ｍｇの化合物１−３を与えた。ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：０．８３−０．９０（ｍ、９Ｈ）、０．９６−１．０４（ｍ、１Ｈ）、１．２０−１．４０（ｍ、２８Ｈ）、１．４３−１．４８（ｄｄ、１Ｈ）、１．５８−１．７０（ｍ、４Ｈ）、１．９２−２．１０（ｍ、２Ｈ）、２．３２−２．３６（ｍ、２Ｈ）、２．４９−２．６３（ｍ、３Ｈ）、２．９４−３．１２（ｍ、２Ｈ）、３．１７（ｄ、１Ｈ）、３．８２（ｓ、６Ｈ）、４．６１−４．６７（ｍ、１Ｈ）、６．５５（ｓ、１Ｈ）、６．６０（ｓ、１Ｈ）。ＥＳＩ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］計算：５８６．５；実測［Ｍ＋Ｈ］：５８６．５。
【００７０】
実測例４．（２Ｒ、３Ｒ、１１ｂＲ）−３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−２−イル  ラウレート（化合物１−４）
ラウリン酸（１４１．２．４ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）と４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（２２．９ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を無水ＣＨ２Ｃｌ２（６ｍＬ）に溶解し、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）（１６６．４ｕＬ，０．９４ｍｍｏｌ）を不活性環境下で前の溶液に加えた。混合物を室温で５〜１０分間撹拌した。無水ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）に溶解した（２Ｒ、３Ｒ、１１ｂＲ）−３−イソブチル−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−２−オール（１５０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）をその後、不活性環境下で前の混合物に加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、次に濃縮した。得られた化合物の精製は、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／Ｈｅｘ＝１／５でＲｆ＝０．１５）を介して行われ、収率４８％で１１３．７ｍｇの化合物１−４を得た。ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：０．８３−０．９０（ｍ、９Ｈ）、０．９８−１．０４（ｍ、１Ｈ）、１．２１−１．４１（ｍ、１６Ｈ）、１．４１−１．４９（ｄｄ、１Ｈ）、１．５９−１．６６（ｍ、４Ｈ）、１．９３−２．０８（ｍ、２Ｈ）、２．３２−２．３８（ｍ、２Ｈ）、２．４３−２．６３（ｍ、３Ｈ）、２．９５−３．１２（ｍ、２Ｈ）、３．１７（ｄ、１Ｈ）、３．８１（ｓ、６Ｈ）、４．６２−４．６５（ｍ、１Ｈ）、６．５５（ｓ、１Ｈ）、６．６０（ｓ、１Ｈ）。ＥＳＩ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］計算：５０２．４；実測［Ｍ＋Ｈ］：５０２．４。
【００７１】
実施例５．各種化合物の水溶解度
１０ｍＭ  ｐＨ４．０クエン酸生理食塩水緩衝液、１０ｍＭ  ｐＨ５．０クエン酸生理食塩水緩衝液、１０ｍＭ  ｐＨ５．８  ＰＢＳ、１０ｍＭ  ｐＨ７．４  ＰＢＳ、１０ｍＭ  ｐＨ８．５ホウ酸塩−生理食塩水緩衝液、純水および血清を含む、様々な水溶液中の化合物懸濁液（２ｍｇ／ｍＬ）を、２〜３日間３７℃で撹拌した。毎日、０．５〜１ｍＬの液の一部を採取し、温度制御なしで１４，０００ｒｐｍで２分間遠心分離した。上清をＨＰＬＣで分析して、溶解した化合物の量を決定した。表１は、様々な水溶液における化合物１−１、１−２および化合物ＩＶの溶解度を示す。化合物１−１および１−２は、すべての試験条件で、化合物ＩＶよりも著しく低い水溶解度を示す。
【表１】
2021503009.tif 000015
【００７２】
化合物ＩＶの水溶解度はｐＨの増加とともに減少し、化合物１−１および１−２の水溶解度はｐＨの増加とともに増加することに注目すると興味深い。ＶＢＺはアミノ酸修飾結合体であるため、その水溶解度の傾向に対するｐＨの影響は、化合物ＩＶのｐＨの影響と同様であると予想される。
【００７３】
実施例６．薬学的に許容される有機溶媒への化合物の溶解度
以前は、有機溶媒などの非水性溶媒は、注射用医薬品において水不溶性薬物を溶解するために長い間利用されてきた。ここで、様々な有機溶媒における本出願の化合物の溶解度を試験した。ジメチルアセトアミド（ＤＭＡｃ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、トリアセチン（ＴＡ）を含む様々な薬学上許容される有機溶媒中の化合物懸濁液が３７℃で計画された時間間隔で撹拌された。計画された時点で、０．５ｍＬの液の一部を採取し、温度制御なしで１４，０００ｒｐｍで２分間遠心分離した。上清をＡＣＮで希釈し、ＨＰＬＣで分析して溶解した化合物の量を測定した。表２は、化合物１−１、化合物１−２、および化合物ＩＶの、インキュベーション後のさまざまな薬学的に許容される有機溶媒での溶解度を示す。化合物１−１、化合物はすべての試験した溶媒中で良好な溶解度を示す。しかし化合物１−２は、ＤＭＳＯで０．１５ｍｇ／ｍＬ、ＤＭＡｃで８．８１ｍｇ／ｍＬのずっと低い溶解度を示す。驚くべきことに、結合化合物１−１および１−２は７日間、３７℃でのインキュベーション後に、全く色の変化を示さずまたは最小限の色の変化をしか示さなかったが、非結合化合物ＩＶは、経時的に有意な色の変化を示した（図１）。式（Ｉ）の化合物で定義される結合は、有機溶媒中での非結合化合物の色の安定性を著しく改善する。
【表２】
2021503009.tif 000016
【００７４】
実施例７．薬学的に許容される油での化合物の溶解度。
従来、脂肪酸は、油への溶解度を高めるために薬物の親油性を高めるため、薬物との結合に使用されている。本出願の化合物の様々な油への溶解度を試験した。ヒマシ油、ゴマ油、綿実油、ピーナッツ油および大豆油を含む、様々な薬学的に許容される油中の化合物の懸濁液を、２〜３日間３７℃で撹拌した。計画した時点で、約２００〜３００μＬの液の一部を取り、温度制御なしで１４，０００ｒｐｍで２分間遠心分離した。上澄みを注意深く抜き取り、９倍のＡＣＮで抽出した。次に、混合物を３０秒間ボルテックスし、続いて温度制御なしで１４，０００ｒｐｍで２分間遠心分離した。上澄み（３００ｕＬ）を取り、１倍のイソプロパノール（ＩＰＡ）で希釈し、次にＨＰＬＣにより分析して溶解した化合物の量を測定した。同じ抽出／希釈ステップ後の化合物を含まない油を対照として使用した。表３に示すように、すべての化合物１−１、１−２、およびＩＶは、薬学的に許容される油への溶解度が中程度から良好である。結合により、様々な油への溶解度が大幅に向上する。より高い油溶性は、活性化合物を運ぶ長時間作用型または持続放出製剤を作製するために有利に使用され得る。
【表３】
2021503009.tif 000017
【００７５】
実施例８：水溶液中での化合物の加水分解
本方法はＷａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ，２０１６，１０５，７７３−７８５のものを改変した。要約すると、化合物の水性加水分解は、等張性のｐＨ７．４  ＰＢＳ、１０ｍＭ、ｐＨ４．０のクエン酸生理食塩水緩衝液および１０ｍＭ、ｐＨ８．５のホウ酸塩−生理食塩水緩衝液で、３７℃で行った。パルミテートおよびベヘネート誘導体は水溶解度が低いため、まず誘導体を０．１％ＴＦＡを含むＡＣＮに５ｍｇ／ｍＬで溶解し原液とした。次に、２０ｍＬスクリューキャップガラスバイアル中で、０．１〜０．２５ｍＬの各原液の一部を対応する水溶液で慎重に希釈して、化合物の最終濃度を０．０５ｍｇ／ｍＬ、２．５％ｖ／ｖにした。さらに、ＰＢＳ緩衝液中の０．１％ＴＦＡを含む様々な濃度のＡＣＮ（１％〜１５％）を使用して、０．１％ＴＦＡを含むＡＣＮの加水分解速度への影響を調べた。１０％ｖ／ｖ  ０．１％ＴＦＡ含有ＡＣＮ／水溶液を対照として調製した。バイアルを暗所に保ち、インキュベーター内で、マグネチックスターラーで撹拌した。３０分〜４８時間かけて、試験溶液の一部の２００〜３００μＬをエッペンドルフチューブに取り出し、ＨＰＬＣ分析まで−２０℃で保存した。ＨＰＬＣ分析前に、試験溶液を１４，０００ｒｐｍで２分間、室温で遠心分離した。各溶液の上澄みをＨＰＬＣ分析のために採取した。
【００７６】
実施例９：化合物１−１の酵素的加水分解
化合物溶液は、実施例８に記載されているように調製した。要約すると、各試験条件には、１．５ｍＬエッペンドルフチューブに０．４μｍｏｌｅの化合物が含まれていた。ブタ肝臓エステラーゼ（ＰＬＥ）をＰＢＳ（ｐＨ７．４、１０ｍＭ）に溶解し、反応容器内のエステラーゼと化合物の最終比率は２０〜１まで変動させた。ＡＣＮの最終％は１０％である。ＰＬＥ溶液を１．５ｍｌのエッペンドルフチューブ中の化合物１−１の溶液に添加する前に１時間、３７℃で平衡化した。３７℃で８０分間インキュベートした後、試験溶液の一部の１００μＬをエッペンドルフチューブに取り出し、温度制御なしで２分間１４，０００ｒｐｍで遠心分離した。上清をＨＰＬＣ分析のために注意深く抜き取った。表４に示すように、化合物１−１は、５以上のＰＬＥ／化合物比で加水分解されて、活性化合物（＋）−α−ＤＨＴＢＺを遊離することができる。
【表４】
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【００７７】
実施例１０．小胞性モノアミントランスポータアイソフォーム２（ＶＭＡＴ２）結合アッセイ
（＋）−α−ＤＨＴＢＺ、化合物１−１と１−２を、ＶＭＡＴ２結合親和性について試験した。この研究で用いられた方法は、信頼性と再現性を最大化するために科学文献から適応された（Ｎｉｃｋｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２０１１，３３６，７２４−７３３およびＴｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，１９９８，７１，２５８−２６５）。標準品は、得られた結果の有効性を保証するために、各アッセイの不可欠な部分として測定された。
【００７８】
ＩＣ５０値は、ＭａｔｈＩＱ（商標）（ＩＤ  Ｂｕｓｉｎｅｓｓ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ  Ｌｔｄ．、ＵＫ）を使用して非線形最小二乗回帰分析によって決定された。この際、試験化合物の観測されたＩＣ５０、アッセイで用いた放射性リガンドの濃度、およびこのリガンドのＫｄの過去の測定値（Ｅｕｒｏｆｉｎｓ  Ｐａｎｌａｂｓ  Ｉｎｃ．で実験的に取得）を使用して、ＣｈｅｎｇおよびＰｒｕｓｏｆｆの式（Ｃｈｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１９７３，２２，３０９９−３１０８を参照）を使用してＫｉ値を計算した。
【００７９】
ＶＭＡＴ２拮抗結合アッセイはＥｕｒｏｆｉｎｓ  Ｐａｎｌａｂｓ  Ｔａｉｗａｎ  Ｌｔｄで実施された。（アイテム２５２０２０）および条件は以下のとおりである。
材料源：全脳（小脳なし）膜
リガンド：［３Ｈ］ジヒドロテトラベナジン、１０ｎＭ。
インキュベーション条件：２５℃で３０分間。
インキュベーション緩衝液：２５ｍＭのＨＥＰＥＳ、１００ｍＭの酒石酸カリウム、５ｍＭのＭｇＳＯ４、０．１ｍＭ  ＥＤＴＡおよび０．０５ｍＭ、ＥＧＴＡ、ｐＨ７．４。
非特異的リガンド：Ｒｏ４−１２８４、１０μＭ。
対照阻害剤：テトラベナジン
Ｋｄ：１４ｎＭ
Ｂｍａｘ：１．６ｐｍｏｌｅ／ｍｇタンパク質。
定量法：シンチレーション計測。
【００８０】
表５で、化合物ＩＶは、文献で報告された結果と同様の強いＶＭＡＴ２受容体結合を示している。驚くべきことに、そして予期せぬことに、化合物１−１および化合物１−２の両方は、１０μＭを超えるＫｉを有するかなり弱いＶＭＡＴ２結合親和性を示した。これは、化合物１−１および化合物１−２が、ＶＭＡＴ２阻害剤として（＋）−α−ＤＨＴＢＺよりも少なくとも１０００倍効力が低いことを示している。この特性は、化合物１−１および化合物１−２をプロドラッグとして使用するために非常に望ましい。
【表５】
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【００８１】
上記の実験データから、式（Ｉ）の化合物のパルミチン酸エステルとベヘン酸エステルは、良好な化学的および物理的安定性、最小限のまたは皆無のＶＭＡＴ２結合性、許容可能なエステル加水分解速度という望ましいプロドラッグ特性を示すことを見出す。アルキルが１６（パルミチン酸エステルのように）および２２（ベヘン酸エステルのように）の範囲内の炭素原子を含む式（Ｉ）の化合物のアルキル誘導体エステルなど、アルキル誘導体エステルが、パルミチン酸エステルおよびベヘン酸エステルに類似している場合、このデータから式（Ｉ）の化合物の様々な他のエステルへ外挿することは理に適っている。さらに、化学構造の類似性に基づいて、アルキルが１２〜２６個の範囲の炭素原子を含む場合に、本発明の式（Ｉ）の化合物のアルキル誘導体エステルは、望ましいプロドラッグ特性を示し得ると考える。
【図１】
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【国際調査報告】
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