(57)【要約】本発明は、（ａ）薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）および高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）の中から分析液体クロマトグラフィ法を選択するステップと、（ｂ）被精製物について、ステップ（ａ）で選択された方法により得られる分析液体クロマトグラフィデータを入力するステップと、（ｃ）前記分取液体クロマトグラフィを実行するためにユーザが利用可能な分離ツールの表にアクセスするステップと、（ｄ）前記分析液体クロマトグラフィデータおよび利用可能な分離ツールの表に基づき、前記表から最適な分離ツールを選択し、前記選択された分離ツールに対する分取液体クロマトグラフィ操作条件を算出するステップと、を含み、ステップ（ａ）〜（ｄ）のうちの少なくとも一部は、プロセッサおよび該プロセッサに接続された表示画面を含むコンピュータによって実行される、分取液体クロマトグラフィを制御する方法に関する。【選択図】    図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
分取液体クロマトグラフィを制御する方法であって、
（ａ）薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）および高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）の中から分析液体クロマトグラフィ法を選択するステップと、
（ｂ）被精製物について、ステップ（ａ）で選択された方法により得られる分析液体クロマトグラフィデータを入力するステップと、
（ｃ）前記分取液体クロマトグラフィを実行するためにユーザが利用可能な分離ツールの表にアクセスするステップと、
（ｄ）前記分析液体クロマトグラフィデータおよび利用可能な分離ツールの表に基づき、前記表から最適な分離ツールを選択し、前記選択された分離ツールに対する分取液体クロマトグラフィ操作条件を算出するステップと、
を含み、
ステップ（ａ）〜（ｄ）のうちの少なくとも一部は、プロセッサおよび該プロセッサに接続された表示画面を含むコンピュータによって実行される、方法。
【請求項２】
前記被精製物の量を入力するステップをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記選択された分離ツールへの前記被精製物の注入モードを選択するステップをさらに含み、前記注入モードは、溶液注入または固体投入から選択される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
ユーザにより前記算出を確認するステップと、前記確認後に、前記選択された分離ツールで前記分取液体クロマトグラフィを開始するステップと、を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
ユーザによる前記分取液体クロマトグラフィの加速の実行を含み、ステップ（ｄ）は、前記選択された分離ツールが実装される分取液体クロマトグラフィシステムの最大流量および限界圧力を考慮しながら、最適化された操作条件を算出することを含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
ステップ（ａ）で選択された方法は、薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）であり、ステップ（ｂ）は、ＴＬＣ板で得られた分析データを入力することを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
ステップ（ｄ）で実行される選択および算出では、前記ＴＬＣ板の保持係数（Ｒｆ）の値、
０．０１＜Ｒｆ＜０．０７、
０．０８＜Ｒｆ＜０．４、
０．４＜Ｒｆ＜０．９、
０．９＜Ｒｆ＜１．０、
に応じた異なる４つのケースが考慮される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
同一の体積差係数（ΔＣＶ）が、前記４つのケースの領域それぞれで異なる保持係数の差（ΔＲｆ）に対応するという事実を考慮して、溶出勾配の形状を体積差係数（ΔＣＶ）の各値に適合させることを含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ステップ（ｄ）で実行される選択および算出では、前記ＴＬＣ板全体に広がる１つ以上またはすべての対象化合物が考慮される、請求項６〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
ステップ（ｄ）では、前記分取液体クロマトグラフィで使用される溶媒の溶出力の差（Δε°）と、溶媒の混合物の組成に応じた該混合物の溶出力の非線形変化とが考慮される、請求項６〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＴＬＣ板の画像を取得し、前記画像からユーザの携帯機器により分離された化合物を自動検出することを含み、ステップ（ｂ）における分析データの入力は、前記携帯機器からデータをインポートすることを含む、請求項６〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
ステップ（ａ）で選択された方法は、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）であり、前記選択は、
順相液体クロマトグラフィ（ＮＰＬＣ）、
逆相液体クロマトグラフィ（ＲＰＬＣ）、
親水性相互作用クロマトグラフィ（ＨＩＬＩＣ）、
疎水性相互作用クロマトグラフィ（ＨＩＣ）、
の中からクロマトグラフィ法を選択することをさらに含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
ステップ（ｂ）で入力される前記分析液体クロマトグラフィデータは、参照分離ツールで得られた分析液体クロマトグラフィデータである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記利用可能な分離ツールの表は、前記参照分離ツールと同一の分離ツールを含み、ステップ（ｃ）は、該分離ツールを選択し、該分離ツールに対する分取液体クロマトグラフィ操作条件を算出することを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記利用可能な分離ツールの表は、前記参照分離ツールと同一の分離ツールを含まず、ステップ（ｄ）は、前記参照分離ツールの固定相と前記利用可能な分離ツールの固定相の類似度を比較して、前記参照分離ツールと異なる固定相を有する分離ツールを選択、または、前記参照分離ツールと同じ固定相を有する分離ツールを選択し、注入回数を最小限に抑えつつ、複数回注入モードにおける分取液体クロマトグラフィ操作条件を算出することを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
他の分析条件を決定するために、イソクラティック溶出での高速液体クロマトグラフィまたは薄層クロマトグラフィによる分離を算出するステップを含む、請求項６〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
ステップ（ｄ）における選択および算出では、強溶媒毎に固有の溶出力が考慮される、請求項６〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
複数の分離ツールで分離試験を行い、前記複数の分離ツールの中から最適な分離能力を有する分離ツールを選択することを含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記利用可能な分離ツールの表は、前記最適な分離能力を有する分離ツールと同一の分離ツールを含み、ステップ（ｄ）は、該分離ツールを選択し、該分離ツールに対する分取液体クロマトグラフィ操作条件を算出することを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記利用可能な分離ツールの表は、前記最適な分離能力を有する分離ツールと同一の分離ツールを含まず、ステップ（ｄ）は、前記最適な分離能力を有する分離ツールと同じ固定相を有する分離ツールを選択し、注入回数を最小限に抑えつつ、複数回注入モードにおける分取液体クロマトグラフィ操作条件を算出することを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
２つの異なる分析液体クロマトグラフィ法および／またはモードを用いて、一連のステップ（ａ）〜（ｄ）を少なくとも２回連続実行することを含む、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記連続実行は、１回目のステップ（ａ）〜（ｄ）で分取液体クロマトグラフィのソリューションを同定できなかった場合に自動で行われる、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法の各ステップを実行するように構成されたプロセッサ、ユーザインタフェース、および表示画面を含むコンピュータと、
移動相タンク、ポンプ、注入器、分離ツール、検出器、データレコーダ、およびフラクションコレクタを含み、前記コンピュータにより制御される分取液体クロマトグラフィシステムと、を備える、分取液体クロマトグラフィシステム。
【請求項２４】
コンピュータによって読み取り可能なサポートに記録されたプログラムコード命令を含むコンピュータプログラム製品であって、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法を実施するための命令を含む、コンピュータプログラム製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、低圧から高圧の分取液体クロマトグラフィの制御方法および制御システムに関する。
【背景技術】
【０００２】
分取液体クロマトグラフィは、化合物の混合物を分離、精製、または濃縮する方法であり、最適化には、使用する分離ツール（内径、長さ、固定相、粒子径など）や操作条件（移動相、溶出の種類、流量、温度、注入モード、注入量など）に関する特定の数のパラメータを選択する必要がある。これらのパラメータの選択は、多くの場合、所望の純度、所望の精製物の量、コスト、および精製時間の間で生産性の妥協に帰着する。
【０００３】
この選択を行うため、分析クロマトグラフィシステムを用い、同じ性質の試料について得られた分離結果を使用し、分取液体クロマトグラフィに移行することが知られている。「スケールアップ」では、分析液体クロマトグラフィで処理される試料の量と分取液体クロマトグラフィで処理される試料の量との間の乗数係数を定義する。
【０００４】
しかしながら、分析液体クロマトグラフィのシステムは、固定相や操作条件の点で分取液体クロマトグラフィのシステムとは大きく異なり、この移行は比較的複雑である。そのため、この移行を容易にするように計算ツールが設計されてきた。
【０００５】
米国特許第７６８６９５９号明細書には、薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）データを使用して分取クロマトグラフィの操作条件を計算するためのコンピュータによって実施される方法が記載されている。より具体的には、この文献には、薄層クロマトグラフィから、精製される試料の２つの化合物の移動率Ｒｆ１、Ｒｆ２を計算すること、それぞれの移動率から、化合物のそれぞれのカラム体積ＣＶ１、ＣＶ２を計算すること（カラム体積は、それぞれの移動率の逆数に等しい）、また、カラム体積ＣＶ１、ＣＶ２の差として定義されるカラム係数ΔＣＶを計算することが教示されている。ただし、この係数ΔＣＶはカラム毎に固有であり、最適なカラムを決定するには多数の計算が必要である。さらに、この方法では、ユーザの介入（データ入力）が多数必要であり、ユーザがクロマトグラフィについて十分な知識を持っていることを前提としている。
【０００６】
しかしながら、分取液体クロマトグラフィ精製の実施を担当する操作者が必ずしもクロマトグラフィの専門家であるとは限らないため、より自動化された、操作者による最小限の介入しか必要としない制御方法およびシステムを提供することが有用である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】米国特許第７６８６９５９号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、期待される結果に応じて最適かつ十分な分離ツールおよび精製条件を決定するために手動で入力するデータの量を最小限に抑えながら、クロマトグラフィの初心者であるユーザによって実施され得る分取液体クロマトグラフィを制御する方法を設計することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
この目的を達成するため、本発明は、分取液体クロマトグラフィを制御する方法であって、
（ａ）薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）および高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）の中から分析液体クロマトグラフィ法を選択するステップと、
（ｂ）被精製物について、ステップ（ａ）で選択された方法により得られる分析液体クロマトグラフィデータを入力するステップと、
（ｃ）分取液体クロマトグラフィを実行するためにユーザが利用可能な分離ツールの表にアクセスするステップと、
（ｄ）分析液体クロマトグラフィデータおよび利用可能な分離ツールの表に基づき、上記表から最適な分離ツールを選択し、選択された分離ツールに対する分取液体クロマトグラフィ操作条件を算出するステップと、を含み、
ステップ（ａ）〜（ｄ）のうちの少なくとも一部は、プロセッサおよび該プロセッサに接続された表示画面を含むコンピュータによって実行される方法を提供する。このステップには、特に適切な勾配プロファイルの決定が含まれる。
【００１０】
「分離ツール」は、固定相を含むカラム、カートリッジ、またはその他のクロマトグラフィ装置を意味すると解釈される。
【００１１】
本方法は、精製物の量を受け取るステップをさらに含む。
【００１２】
一実施形態によると、本方法は、選択された分離ツールへの被精製物の注入モードを選択するステップをさらに含み、注入モードは、溶液注入または固体投入から選択される。
【００１３】
有利な方法では、本方法は、ユーザにより上記の算出を確認するステップと、確認後に、選択された分離ツールで分取液体クロマトグラフィを開始するステップと、を含む。
【００１４】
一実施形態によると、本方法は、ユーザによる分取液体クロマトグラフィの加速の誘起を含む。ステップ（ｄ）は、選択された分離ツールが実装される分取液体クロマトグラフィシステムの最大流量および限界圧力を考慮しながら、最適化された操作条件を算出することを含む。
【００１５】
一実施形態によると、ステップ（ａ）で選択された方法は、薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）であり、ステップ（ｂ）は、ＴＬＣ板で得られた分析データを入力することを含む。
【００１６】
好ましくは、ステップ（ｄ）で実行される選択および算出では、ＴＬＣ板の保持係数Ｒｆ値、
０．０１＜Ｒｆ＜０．０７、
０．０８＜Ｒｆ＜０．４、
０．４＜Ｒｆ＜０．９、
０．９＜Ｒｆ＜１．０、
に応じた異なる４つのケースが考慮される。
【００１７】
特に有利な方法では、本方法は、同一の体積差係数ΔＣＶが、上記の４つの領域それぞれで異なる保持係数の差ΔＲｆに対応するという事実を考慮して、溶出勾配の形状を体積差係数ΔＣＶの各値に適合させることを含む。
【００１８】
好ましくは、ステップ（ｄ）で実行される選択および算出では、ＴＬＣ板全体に広がる１つ以上またはすべての対象化合物が考慮される。
【００１９】
有利な方法では、ステップ（ｄ）では、分取液体クロマトグラフィで使用される溶媒の溶出力の差と、溶媒の混合物の組成に応じた該混合物の溶出力の非線形変化とが考慮される。
【００２０】
一実施形態によると、本方法は、ＴＬＣ板の画像を取得し、画像からユーザの携帯機器により分離された化合物を自動検出することを含み、ステップ（ｂ）における分析データの入力は、携帯機器からデータをインポートすることを含む。
【００２１】
一実施形態によると、ステップ（ａ）で選択された方法は、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）であり、上記選択は、
順相液体クロマトグラフィ（ＮＰＬＣ）、
逆相液体クロマトグラフィ（ＲＰＬＣ）、
親水性相互作用クロマトグラフィ（ＨＩＬＩＣ）、
疎水性相互作用クロマトグラフィ（ＨＩＣ）、
の中からクロマトグラフィ法を選択することをさらに含む。
【００２２】
この場合、ステップ（ｂ）で入力される分析液体クロマトグラフィデータは、参照分離ツールで得られた分析液体クロマトグラフィデータであり得る。
【００２３】
一実施形態によると、利用可能な分離ツールの表は、参照分離ツールと同一の分離ツールを含み、ステップ（ｄ）は、該分離ツールを選択し、該分離ツールに対する分取液体クロマトグラフィ操作条件を算出することを含む。
【００２４】
別の方法では、利用可能な分離ツールの表は、参照分離ツールと同一の分離ツールを含まず、ステップ（ｃ）は、参照分離ツールの固定相と利用可能な分離ツールの固定相の類似度を比較して、参照分離ツールと異なる固定相を有する分離ツールを選択、または、参照分離ツールと同じ固定相を有する分離ツールを選択し、注入回数を最小限に抑えつつ、複数回注入（またはマルチラン）モードにおける分取液体クロマトグラフィ操作条件を算出することを含む。
【００２５】
一実施形態によると、本方法は、他の分析条件を決定するために、イソクラティック溶出での高速液体クロマトグラフィまたは薄層クロマトグラフィによる分離を算出するステップを含む。
【００２６】
有利な方法では、ステップ（ｄ）における選択および算出では、強溶媒毎に固有の溶出力が考慮される。
【００２７】
一実施形態によると、本方法は、複数の分離ツールでスクリーニング分離試験を行い、複数の分離ツールの中から最適な分離能力を有する分離ツールを選択することを含む。この試験は、薄層クロマトグラフィまたは高速液体クロマトグラフィのいずれにおいても、ステップ（ｂ）で入力し得る分析データが存在しない場合に実施される。
【００２８】
一実施形態によると、利用可能な分離ツールの表は、上記の最適な分離能力を有する分離ツールと同一の分離ツールを含み、ステップ（ｄ）は、該分離ツールを選択し、該分離ツールに対する分取液体クロマトグラフィ操作条件を算出することを含む。
【００２９】
別の方法では、利用可能な分離ツールの表は、上記の最適な分離能力を有する分離ツールと同一の分離ツールを含まず、ステップ（ｄ）は、最適な分離能力を有する分離ツールと同じ固定相を有する分離ツールを選択し、注入回数を最小限に抑えつつ、複数回注入モードにおける分取液体クロマトグラフィ操作条件を算出することを含む。
【００３０】
本発明の一実施形態によると、本方法は、２つの異なる分析液体クロマトグラフィ法および／またはモードを用いて、一連のステップ（ａ）〜（ｄ）を少なくとも２回連続実行することを含む。
【００３１】
特に有利な方法では、上記連続実行は、１回目のステップ（ａ）〜（ｄ）で分取液体クロマトグラフィのソリューションを同定できなかった場合に自動で行われる。
【００３２】
本発明の別の目的は、上述した方法を実行するためのシステムである。
【００３３】
本システムは、上述した方法の各ステップを実行するように構成されたプロセッサ、ユーザインタフェース、および表示画面を含むコンピュータと、
移動相タンク、ポンプ、注入器、分離ツール、検出器、データレコーダ、およびフラクションコレクタを含み、上記コンピュータにより制御される分取液体クロマトグラフィシステムと、を備える。
【００３４】
好ましくは、上述の制御方法は、コンピュータプログラムが実行される処理ユニットとメモリを備えるＰＣ型コンピュータなど、制御方法のステップを実行する手段を含む処理装置によって実施される。
【００３５】
このコンピュータプログラムは、特に、上述の方法のステップを実行することを可能にする１つまたは複数のアルゴリズムを含む。
【００３６】
本発明の他の特徴および利点は、以下の添付の図面を参照して、以下の詳細な説明から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００３７】
【図１】本発明によるシステムの動作を示す論理図である。
【図２】ＴＬＣ板で得られた分離を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００３８】
本発明により、特に薄層またはＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィまたは高圧液体クロマトグラフィ）カラムでの順相、逆相または他の分析クロマトグラフィ分析から、分取液体クロマトグラフィによる可能な限り最良の精製が可能となる。
【００３９】
この分取液体クロマトグラフィは、低圧から高圧まで実施することができ、特に、フラッシュクロマトグラフィ、ＭＰＬＣ（中圧液体クロマトグラフィ）およびＨＰＬＣが含まれる。実行圧力は、使用するクロマトグラフィシステム、特に分離ツールが耐えることができる圧力によってのみ制限される。「低圧」とは、一般に、数バールから数十バールのオーダーの圧力を意味すると解釈される。「高圧」とは、一般に、数十バールから数百バール、またはそれ以上の圧力を意味すると解釈される。
【００４０】
上記の目的のため、本発明は、ユーザを分析データの提供から分取液体クロマトグラフィを実施可能とする条件の定義までガイドするコンピュータによって実施される方法を提供する。すべてのステップは、ユーザにデータの入力や選択を求めることなく、自動で実行することができる。
【００４１】
したがって、本方法は、クロマトグラフィの初心者であるユーザにとって特に興味深いものである。
【００４２】
しかしながら、ユーザがクロマトグラフィにある程度の専門知識を持っている場合でも、操作条件の決定に要する時間を短縮することができる点で、この方法は依然として有利である。さらに、本方法は、ユーザによって直接実行されるステップを含んでもよく、これにより、ユーザは、使用されるアルゴリズムと対話することができる（エキスパートモード）。
【００４３】
本方法は、ユーザが利用可能な分離ツールの表にアクセスすることを含む。この表は、例えば、ユーザのストックにあるすべてのツールをリスト化したデータベースの形式であり、ツールの主な特性（ツールの種類（カラム、カートリッジ等）、ツールの構成材料（プラスチック、ステンレス鋼等）、寸法（内径、幅等）、固定相の性質、固定相の粒径、固定相の製造元または供給元など）に対応するフィールドを含む。以下、説明の簡潔化のため「カラム」という用語を使用するが、使用する分離ツールの種類に関して制限はない。特に有利な方法では、上述の調製ツールにより、異なるクロマトグラフィ技術、特に順相および／または逆相で異なる圧力（低圧から高圧まで）で実施される技術を実行することができる。
【００４４】
本方法は、有利には、出願人によって販売されているクロマトグラフィシステム（商品名ｐｕｒｉＦｌａｓｈＴＭ）に適用することができるが、他のシステムに適用してもよい。これらのシステムは、通常、移動相タンク、ポンプ、注入器、分離ツール、検出器、データレコーダ、およびフラクションコレクタを備える。このようなシステムは当業者にとって周知であり、本文では詳細には説明しない。
【００４５】
本方法は、ユーザが利用可能なクロマトグラフィシステム（または装置）の表へのアクセスを含み得る。本方法では、最適なクロマトグラフィシステムを提供するため、例えば達成する純度の観点から、生成物の発展段階に応じて、ユーザが表明したニーズが考慮される。システムの定義では、装置のドウェルボリュームと必要なポンプ出力が考慮される。したがって、本方法により、精製物および所望の純度に応じて、最も適切なクロマトグラフィツールおよびシステムを選択することができる。
【００４６】
制御ユニットは、以下に説明する特定の数のアルゴリズムを実装するように、またはこのアルゴリズムを実装するリモートコンピュータと通信するように構成されたプロセッサを備える。固体試料の場合、システムは、固体注入サポート（一般にドライロードと呼ばれる）を任意に含む。このサポートは、カラムの上流の移動相流路に配置される。
【００４７】
図１の論理図は、本方法の一般的なアーキテクチャを示す。
【００４８】
以下、異なるモダリティについて順次説明する。
【００４９】
すべてのモダリティは連続しており、これらは、ユーザが最も一般的に利用可能なＴＬＣ分析データから開始し、ＴＬＣ分析データが利用できないかあるいは不十分である場合は、他のタイプの分析データに移行して、すべて任意に実行することができる。すなわち、あるタイプの分析データではユーザに分取液体クロマトグラフィのソリューションを提案できない場合、ユーザは、分離液体クロマトグラフィのソリューションの提供につながり得る別のタイプの分析データに自動的に誘導される。したがって、ユーザがクロマトグラフィの初心者であっても、分析データの提供から分取液体クロマトグラフィのソリューションの取得まで完全にユーザをガイドすることができる。
【００５０】
当然、試料の性質（極性か否か）や利用可能な分析データの性質に応じて、ステップの一部のみを実行してもよく、ユーザは、上記のモダリティのいずれからも本方法の実行を自由に開始することができる。しかしながら、本システムは、以下に詳述するすべてのタイプの分析データを処理できるように構成される。
【００５１】
第１のステップでは、ユーザは、使用する分析データを取得するために実行される分析液体クロマトグラフィ法を、インターフェースを用いて選択するように促される。この選択は、インターフェースによってユーザに提案される以下の方法の中から行われる。
・薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）
・高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）
【００５２】
この選択には、必要に応じて、ＨＰＬＣカラムでデータを取得するために使用されるクロマトグラフィ法の選択も含まれる。クロマトグラフィ法は、通常、以下から選択される。
・順相液体クロマトグラフィ（ＮＰＬＣ）
・逆相液体クロマトグラフィ（ＲＰＬＣ）
・親水性相互作用クロマトグラフィ（ＨＩＬＩＣ）：この技術は、低極性分子を分離するのに特に有利である。
疎水性相互作用クロマトグラフィ（ＨＩＣ）：この技術は、疎水性アミノ酸、ペプチドおよびタンパク質を分離するのに特に有利である。
【００５３】
第２のステップでは、上記で選択した方法で取得された分析データが、インターフェースを介して入力データとしてプロセッサに提供される。以下で詳細に説明するように、これらのデータは、ユーザが表に手動で入力してもよく、あるいは、データが格納されているスマートフォンまたはタブレットなどの携帯機器からインポートされてもよい。
【００５４】
第１の一連のシチュエーション（Ｐ）は、極性試料に関するものである。
【００５５】
第１の可能性（ボックス１）では、ユーザは、検討対象の試料について、ＴＬＣ板の分析データを有する。
【００５６】
ＴＬＣ分析データの処理は、本発明者らによる独自の開発の目的である。
【００５７】
まず、使用される量の定義を示す。
保持係数Ｒｆは、薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）板上の化合物の溶出を特徴付ける相対量である。これは、移動相の移動距離に対する溶質の移動距離の比である。したがって、完全に溶出された溶質の保持係数は１であり、移動相に運ばれない溶質の保持係数は０である。
ｋは、カラム内の溶質の保持を特徴付ける熱力学的量であり、（ｔｒ−ｔ０）／ｔ０または（Ｖｒ−Ｖ０）／Ｖ０に等しい。
ここで、ｔｒは溶質の保持時間、ｔ０は移動相がカラムを通過するのにかかる時間、Ｖｒはカラムから溶質を取り出すのに必要な移動相の体積、Ｖ０はカラムの細孔容積である。
【００５８】
同じクロマトグラフィシステムの場合、保持係数Ｒｆとｋは基本的に以下の関係を有する。
ｋ＝（１−Ｒｆ）／Ｒｆ
Δｋは、カラムの形状に依存しない相対量であり、所与の温度で所与の移動相によって所与の固定相に溶出される所与の溶質の特性である。
分取液体クロマトグラフィでは、溶質を回収するために必要な移動相の体積は、非常に有用な量である。この体積Ｖｓは、ＣＶとも呼ばれ、さまざまなカラム形状を考慮して、カラムのドウェルボリュームの単位で以下のように表される。
Ｖｓ＝ＣＶ＝Ｖｒ／Ｖ０＝１＋ｋ
【００５９】
図２は、化合物ａ、ｂにそれぞれ対応する２つの染色を有するＴＬＣ板を概略的に示している。化合物のうち一方は対象化合物であり、他方はこれに最も近い化合物である。ｄｓは、試料の投入ライン（文字Ｄで示される）と溶媒フロント（文字Ｆで示される）の間の距離である。ｄａは、試料投入ラインと化合物ａに対応する染色の中心との間の距離であり、ｄｂは、試料投入ラインと化合物ｂに対応する染色の中心との間の距離である。
Ｒｆａ＝ｄａ／ｄｓ
Ｒｆｂ＝ｄｂ／ｄｓ
Ｖｓａ＝ＣＶａ＝１／Ｒｆａ＝１＋ｋａ
Ｖｓｂ＝ＣＶｂ＝１／Ｒｆｂ＝１＋ｋｂ
したがって、
ΔＣＶ＝ＣＶｂ−ＣＶａ
ｋ＝Ｋｔｒ×（１／Ｒｆ−１）、Ｋｔｒ＝定数＝１
Δｋ＝Ｋｔｒ×［（１／Ｒｆｂ−１）−（１／Ｒｆａ−１）］
したがって、
ΔＣＶ＝Δｋ
【００６０】
本発明は、対象化合物の保持係数Ｒｆが０．０１〜１．０の間であり、対象化合物とそれに最も近い隣接物（または最も近い隣接物２つ）との間の保持差Δｋが０．２０以上（ΔＲｆ≧０．０２）のＴＬＣ板を用いて実施することができる。
【００６１】
ＴＬＣ板上に存在し、ＴＬＣ板全体に分布し得る、１つ以上またはすべての化合物を考慮することができる。したがって、薄層クロマトグラフィから分取液体クロマトグラフィへの移行は、常に実施可能であり、これにより、ユーザが追加の操作を行うことなく、ユーザに精製ソリューションを提供することができる。
【００６２】
処理の独自性は、純溶媒の混合物の組成に応じた、混合物の溶出力の非線形変化、および振幅Δε°（別々の２つの溶媒の溶出力の差）を考慮に入れることにある（ε°は溶媒の溶出力）。
【００６３】
算出では、ソフトウェアに入力された溶媒の溶出力をカバーする振幅をすべて表す５つの動作振幅が定義される。
【００６４】
さらに、本発明者らは、ＴＬＣ板上の化合物の絶対および相対位置に応じて、対象化合物の４つの保持領域を定義した。
【００６５】
例えば、Δε°＝０．３８のシクロヘキサン／酢酸エチルのペアについて、以下の領域が定められる。
（０．０１＜Ｒｆ≦０．０７）−（０．０８≦Ｒｆ≦０．４０）−（０．４０＜Ｒｆ≦０．９）−（０．９＜Ｒｆ＜１．０）
さらに、これらの領域それぞれについて、以下の６つの強溶媒条件が、溶出力の曲率を一部ずつ模倣するように定められる（強溶媒は移動相の溶出性が最も高い溶媒である）。
（０＜％強溶媒≦４）−（５≦％強溶媒≦８）−（９≦％強溶媒≦１３）−（１４≦％強溶媒≦２０）−（２１≦％強溶媒≦５３）−（５４≦％強溶媒＜１００）
％強溶媒は、移動相中の強溶媒の体積パーセントを表す。
【００６６】
これらの保持領域のそれぞれについて、クリティカルなペアまたはトリオ（すなわち、ピークの分解能が最良なペアまたはトリオ）のΔｋを算出することで、カラムの細孔容積Ｖ０が既知な状態で、カラムの粒子サイズに応じて、特定の数のグラジエント条件やイソクラティック条件を提案することができる（ボックス４）。
【００６７】
これにより、合計で１２１５件のケースが導き出される（これらのうち１１５件については、分離不可能）。
【００６８】
したがって、溶出勾配の形状は、同じ係数ΔＣＶが前述の４つの保持領域のそれぞれで異なる保持係数の差ΔＲｆに対応するという事実を考慮して、ΔＣＶの各値に適合される。
【００６９】
これらの要素から、４つの領域に対するすべての条件をシーケンスし、独自の分取液体クロマトグラフィのソリューションを実現するコンピュータアルゴリズムが構築される。このアルゴリズムには、精製する試料の量に応じた、使用するカラムの寸法に基づく、直接的なスケールアップ係数の算出が組み込まれる。この係数は、分析クロマトグラフィの試料量と分取液体クロマトグラフィの試料量の間のスケールアップ係数である。
【００７０】
ユーザは、補足入力データとして、精製する試料の質量を示す。
【００７１】
ユーザは、溶液投入または固体投入（ドライロード）の中から、精製物の注入モードを選択することができる。
【００７２】
アルゴリズムは、負荷方程式に基づいて、クロマトグラフィカラムの形状と性質との間の最良の関連性を計算し、分取液体クロマトグラフィのコスト／生産性比を改善する。
【００７３】
初期条件と勾配形状は、ＴＬＣの溶質のＲｆとΔＲｆから計算される。提案されるさまざまな勾配形状は、順相極性（順相モード）のＨＰＬＣにおける溶媒の２成分混合物の溶出曲線の形状に基づく。
【００７４】
分離の困難さΔｋとΔＲｆに応じて、６つのカラムの分類が示される（ボックス６）。この分類はカラムの表に基づいて行われ、提案にはユーザのストックにある少なくとも３つのカラムが含まれる。この分類では、カラムの種類、固定相の種類、および対象化合物の分子量が考慮される。
【００７５】
したがって、使用可能なすべてのカラムの中から提案されたカラムの表示は、対象のアプリケーションと入力データに応じて調節される。
【００７６】
有利には、ユーザは、選択したカラムを確認するように促される（ボックス７）。
【００７７】
分析データを入力するためのさまざまな手段が存在する。
【００７８】
一実施形態によれば、ユーザは、分析データを表に手動で入力して完了する（ボックス２）。データ入力には通常、以下のものが含まれる。
・ＴＬＣの場合：Ｒｆ、対象化合物、溶媒、および精製する質量。
・ＨＰＬＣの場合：化合物の保持時間、カラム上流のドウェルボリュームの合計、カラムの内径と長さ、固定相の粒子径、分析カラムのドウェルボリューム、流量、および注入量。
【００７９】
特に有利な実施形態によれば、ユーザは、分取液体クロマトグラフィのソリューションの作成のため、ＴＬＣ分析データの取得およびプロセッサへのデータ転送専用のアプリケーションを備えた、スマートフォンまたはタブレットなどの携帯機器を自由に使用できる（ボックス３）。このようなアプリケーションにより、薄層クロマトグラフィの工程とその処理をより迅速かつ簡単に行うことができる。
【００８０】
このようなアプリケーションは、以下の機能を有する。
【００８１】
（１）ＴＬＣ板上の化合物の自動検出
ユーザが直接撮影した、または、ユーザのスマートフォンにある画像ライブラリからダウンロードしたＴＬＣ板の画像から、アルゴリズムが（コントラストにより可能であれば）形状の輪郭を識別し、化合物の存在を表す点をその中心に配置する。化合物がアルゴリズムによって自動認識されない場合は、ユーザは手動で化合物を識別、修正することができる。また、ユーザは、試料の投入ラインと溶媒フロントを表す２本のラインを配置する必要がある。
【００８２】
（２）対象化合物の同定、保持係数（Ｒｆ）およびΔＣＶ（＝Δｋ）の算出
すべての化合物が特定された後、ユーザはそれらをクリックして対象の化合物を指す。保持係数Ｒｆは、対象化合物ごとに表示される。必要に応じて、ユーザは、専用のボタンを押すことで、その化合物が良好な動作領域にあるかどうかを確認することができる。この領域は、典型的には、０．１〜０．４の間である。
【００８３】
ユーザは、この目的専用のボタンをクリックすることで、ΔＣＶ（＝Δｋ）を表示することもできる。これらは、上下の化合物の配置から計算される。
【００８４】
アプリケーションは、最小のΔＣＶ（＝Δｋ）を「ＭｉｎΔＣＶ」の形式で通信する。このデータから、分離の難易度をユーザに示すアラートメッセージが表示される。例えば、手動モードは以下の３つのレベルの難易度で構成される。
・簡単：「ＭｉｎΔＣＶ」が４より大きい
・標準：「ＭｉｎΔＣＶ」が１．５〜４
・難しい：「ＭｉｎΔＣＶ」が１．５未満
【００８５】
（３）溶媒および精製する試料の量の入力
ユーザは、精製する試料の量を入力し、使用した溶媒（最大２つ）とその割合を％で選択するように求められる。ユーザは、溶媒ごとに添加剤があるかどうかを示し、それらについてのコメントを追加するか、必要に応じて、次の画面でより一般的な方法でコメントを追加することができる。
【００８６】
次に、ユーザのデータを要約した画面が表示される。
【００８７】
（４）クロマトグラフィシステムへの情報の直接かつ安全な送信
上記のデータは、例えば、ユーザの個人データベースに保存され、電子メールでユーザに送信され、あるいは、Ｂｌｕｅｔｏｏｔｈ（登録商標）またはＷｉ−Ｆｉによって分取液体クロマトグラフィシステムに送信される。
【００８８】
（５）アプリケーションと分取液体クロマトグラフィシステムのペアリング
アプリケーションは、分析データのドシエがファイルされ読み取られるファイル転送プロトコル（ＦＴＰ）を使用して、Ｗｉ−Ｆｉ経由でクロマトグラフィシステムとアプリケーションとのペアリングを可能にするパラメータ化モジュールを備える。このパラメータ化モジュールを使用することで、ユーザは自分の電子メールアドレスを入力してファイルを受信することもできる。
【００８９】
（６）同じデータのアーカイブ化およびリピート送信
アプリケーションは、有利には、ユーザが必要に応じて自分のデータをアーカイブすることができるアーカイブモジュールを備える。この場合、データはユーザのスマートフォンからのみ参照可能である。必要に応じて、ユーザは、ＴＬＣ板の分析データをクロマトグラフィシステムに何度でも送信することができる。
【００９０】
有利な方法では、送信は、ＴＬＣ板の画像、それに割り当てられた名前、標的化合物のＲｆ、ＴＬＣ板上のコメント、被精製物の量の表示、溶媒の名前および割合（％）、該当する場合は溶媒への添加剤に関する言及および潜在的コメントなどを含むＪＳＯＮファイルを介して行われる。これらのデータは、分取液体クロマトグラフィのソリューションを提供するため、以下に説明する処理アルゴリズムにより読み取られる。
【００９１】
しかしながら、例えば、目的のピークの位置、精製を行う溶媒の性質または量がユーザのストックより多い、あるいは、適切なカラムがストックにないことなどが原因で、ＴＬＣ分離が不十分である場合が存在する。
【００９２】
この場合、プロセッサは、分析条件、特に強溶媒または使用する溶媒のペアを変更することで、イソクラティック溶出で最初の分離とは異なる分離が可能なアルゴリズムを起動する（ボックス５）。これにより、最適な保持領域で最高の実験条件を決定し、効率的な精製を行うことが可能となる。このアルゴリズムは、この目的のため、“Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ”  Ｒ．Ｌ．Ｓｎｙｄｅｒ，  ｅｄ．Ｍ．Ｄｅｋｋｅｒ（１９６８）に記載される、普遍的な図に基づく。
【００９３】
アルゴリズムは、前述の５つの動作振幅それぞれに固有の強溶媒の割合の限界値を算出する。
【００９４】
次に、分取液体クロマトグラフィ条件が提案される（上記ボックス６）。
【００９５】
分析ＴＬＣデータはないが、分析クロマトグラムが利用できる場合（ボックス９）、以下に説明するように、別のモジュールが使用される。
【００９６】
ＨＰＬＣで得られたクロマトグラムの場合、２つのピーク間の分離能は以下の関係によって定義される。
Ｒｓ＝２×（ｔＲ２−ｔＲ１）／（ω２−ω１）
ここで、ｔＲはピークの保持時間、ωはそのベースでのピークの幅を表す。
【００９７】
Ｒｓが大きいほど、２つのピーク間の分離が良好になる。
【００９８】
第１のケース（ボックス１０）では、分析固定相は、カラム表のうち少なくとも１つのカラムの固定相と同じである。アルゴリズムは、入力された分析カラムに基づき、固定相の材料、商品名、およびグラフト化に関するフィールドが保持されたカラム表のうち１つ以上のカラムを識別する。また、精製する試料の量が入力される。
【００９９】
別のアルゴリズム（ボックス１１）では、固定相の性質、粒子径、溶媒の性質、およびカラムの材料を考慮しながら、圧力に関してシステムと適合性のあるカラムが選択される。
【０１００】
アルゴリズムは、カラムの内径と長さ、および使用される固定相粒子の細孔容積の割合からスケールアップ比を計算する。
【０１０１】
精製される生試料の質量を上記のスケールアップ比で割り、注入回数を計算する。
【０１０２】
最後に、アルゴリズムは、分析カラムのグラジエント法から分取液体クロマトグラフィカラムのグラジエント法への移行を行う。この移行は、カラムの寸法の直接比、グラジエントの勾配の再計算、その工程および時間、ならびに使用される粒子の細孔容積の割合に基づく。また、カラムのドウェルボリュームＶ０や装置のディレイボリュームも考慮される。したがって、圧力の変化と溶媒の消費量が予測できる。保持時間を計算するために表に入力された化合物の分析保持時間も同様に、分取液体クロマトグラフィカラムの予測保持時間に変換される。
【０１０３】
ユーザが分析評価と同じ固定相を持つカラムを有していない場合（ボックス２１）、アルゴリズムは、カラム表において、固定相の性質に関するフィールドが、（ａ）未処理シリカ、（ｂ）Ｃ１８以外のグラフト化シリカ、または（ｃ）Ｃ１８グラフト化シリカに相当するか識別する。
【０１０４】
ケース（ａ）および（ｂ）（シリカまたはＣ１８以外グラフト化シリカ）の場合、アルゴリズムは、カラム表の固定相やグラフト化の種類に関するフィールドを相関させることができるか識別し、可能であった場合は、直接移行を提案する。
【０１０５】
ケース（ｃ）（実施するグラフト化によって機能に大きな違いがあるＣ１８グラフト化シリカ）の場合は、「アトムテーブル」と呼ばれる、さまざまな製造元またはメーカーによる数百個のＣ１８グラフト化シリカ型のカラムの実験データをまとめた表が予め作成されている。アルゴリズムは、極値に応じて実験値の正規化を実行する。それぞれの分析カラムおよび認定基準について、他のすべてのカラムに対するユークリッド距離が計算される。正規化後、各基準のそれぞれの距離が合計され、そのカラムの他のすべてのカラムに対する参照値となる。基準の１つは、疎水性に関する統一されたパラメータを定義することで構成される。
【０１０６】
アルゴリズムは、アトムテーブルにおいて、入力された分析カラムと同じ固定相、メーカーおよびグラフトの種類のフィールドを検索する（ボックス１３）。
【０１０７】
これを認識すると、アルゴリズムは、アトムテーブルにあるすべての固定相の選択の類似度（ユークリッド距離）を計算する。レスポンスを昇順で分類し、類似値が０．１７未満の候補のみを保持する。
【０１０８】
アルゴリズムは、その結果をアトムテーブルと比較し、注入回数およびカラム表における有無（ユーザの物理的なストックにあるか）に基づいた基準に応じて、６つの候補を一意に保持する。
【０１０９】
その後のステップは、ボックス１１で説明した通りである。
【０１１０】
ユーザが適切なカラムを有していない場合（ボックス１４）、ユーザは適切なカラムを購入する必要があることを通知される。カラム購入後のステップはボックス１１で説明した通りである。
【０１１１】
直接順相のソリューションが見つからない場合（ボックス１５）、順相スクリーニングが実施される（ボックス１６）。このようなスクリーニングは、ＨＰＬＣカラムまたはフラッシュクロマトグラフィカラムを用いて、分析カラムにおける順相のさまざまな分離を調査することを含む。
【０１１２】
このスクリーニングにより、アルゴリズムは、最高の精製能力を有するカラムを選択する（ボックス１７）。アルゴリズムは、異なる分離が可能な溶出条件を提案してもよい。
【０１１３】
次に、アルゴリズムは、選択したカラムによる分離の分析クロマトグラムを使用する（ボックス１８）。
【０１１４】
第１のケース（ボックス１９）では、分析固定相は、カラム表のうちの少なくとも１つのカラムの固定相と同じである。アルゴリズムは、入力された分析カラムに基づき、固定相の材料、その製造元、およびグラフト化に関するフィールドが保持されたカラムの表のうち１つ以上のカラムを識別する。また、精製する試料の量が入力される。
【０１１５】
別のアルゴリズム（ボックス２０）では、固定相の性質、粒子径、溶媒の性質、およびカラムの材料を考慮しながら、圧力に関してシステムと適合性のあるカラムが選択される。
【０１１６】
アルゴリズムは、カラムの内径と長さ、および使用される固定相粒子の細孔容積の割合からスケールアップ比を計算する。
【０１１７】
精製される生試料の質量を上記のスケールアップ比で割り、注入回数を計算する。
【０１１８】
最後に、アルゴリズムは、分析カラムのグラジエント法から分取液体クロマトグラフィカラムのグラジエント法への移行を行う。この移行は、カラムの寸法の直接比、グラジエントの勾配の再計算、その工程および時間、ならびに使用される粒子の細孔容積の割合に基づく。また、カラムのドウェルボリュームＶ０も考慮される。したがって、圧力の変化や溶媒の消費量が予測できる。保持時間を計算するために表に入力された化合物の分析保持時間も同様に、分取液体クロマトグラフィカラムの予測保持時間に変換される。
【０１１９】
ユーザが分析評価と同じ固定相を持つカラムを有していない場合（ボックス２１）、アルゴリズムは、カラム表において、固定相の性質に関するフィールドが、（ａ）未処理シリカ、（ｂ）Ｃ１８以外のグラフト化シリカ、または（ｃ）Ｃ１８グラフト化シリカに相当するか識別する（ボックス２２）。
【０１２０】
ケース（ａ）および（ｂ）（シリカまたはＣ１８以外グラフト化シリカ）の場合、アルゴリズムは、カラム表の固定相やグラフト化の種類に関するフィールドを相関させることができるか識別し、可能であった場合は、直接移行を提案する（ボックス２０）。
【０１２１】
ケース（ｃ）（実施するグラフト化によって機能に大きな違いがあるＣ１８グラフト化シリカ）の場合は、「アトムテーブル」と呼ばれる、さまざまな製造元またはメーカーによる数百個のＣ１８グラフト化シリカ型のカラムの実験データをまとめた表が予め作成されている。アルゴリズムは、極値に応じて実験値の正規化を実行する。それぞれの分析カラムおよび認定基準について、他のすべてのカラムに対するユークリッド距離が計算される。正規化後、各基準のそれぞれの距離が合計され、そのカラムの他のすべてのカラムに対する参照値となる。基準の１つは、疎水性に関する統一されたパラメータを定義することで構成される。
【０１２２】
アルゴリズムは、アトムテーブルにおいて、入力された分析カラムと同じ固定相、メーカーおよびグラフトの種類のフィールドを検索する（ボックス１３）。
【０１２３】
これを認識すると、アルゴリズムは、アトムテーブルにあるすべての固定相の選択の類似度（ユークリッド距離）を計算する。レスポンスを昇順で分類し、類似値が０．１７未満の候補のみを保持する。
【０１２４】
アルゴリズムは、その結果をアトムテーブルと比較し、注入回数およびカラム表における有無に基づいた基準に応じて、６つの候補を一意に保持する（候補のうち少なくとも３つはユーザの物理的ストックにあるものとする）。
【０１２５】
その後のステップは、ボックス２０で説明した通りである。
【０１２６】
ユーザが適切なカラムを有していない場合（ボックス２３）、ユーザは適切なカラムを購入する必要があることを通知される。カラム購入後のステップはボックス２０で説明した通りである。
【０１２７】
順相でのスクリーニング後にソリューションが見つからないが、逆相のソリューションが存在する場合（ボックス２４）、非極性または中極性（ＮＰ／ＭＰ）試料に関する第２の一連のシチュエーションに移行する。
【０１２８】
第１の可能性では、分離の分析クロマトグラムが利用可能である（ボックス２５）。
【０１２９】
ボックス２６〜３０による方法の実施は、ボックス１０〜１４を参照して上述したものと同様であるため、説明を省略する。
【０１３０】
逆相のソリューションが利用できない場合（ボックス３１）、システムは、ＨＰＬＣまたはフラッシュクロマトグラフィシステムを用いて、逆相のさまざまな選択に関する分離の調査を提案する（ボックス３２）。
【０１３１】
アルゴリズムにより、２つのステップを通じて、熱力学的パラメータｐおよびｑが既知のカラムセットを用いて、最良の分離能を持つカラムを決定することができる（ボックス３３）。第１のステップでは、精製する混合物から溶出する最後の化合物の保持係数が１０のオーダーである移動相条件を決定し、他のカラムがこれと同じ目標を達成するようなイソクラティック溶出条件を再計算する。第２のステップでは、イソクラティック溶出で各カラムに試料を注入し、クロマトグラフィプロファイルを比較することで、最も関連性の高いカラムを選択する。
【０１３２】
第１の可能性では、分離の分析クロマトグラムが利用可能である（ボックス３４）。
【０１３３】
ボックス３５〜３９による方法の実施は、ボックス１０〜１４および２６〜３０を参照して上述したものと同様であるため、説明を省略する。
【０１３４】
いずれの場合も、選択したカラムがクロマトグラフィシステムに配置されると、算出された操作モードに従って、プロセッサによりクロマトグラフィの実行が開始される（ボックス８）。
【０１３５】
特に有利な方法では、分取液体クロマトグラフィ法は、以下に記載されるアルゴリズムによって加速することができる。
【０１３６】
この加速の可能性により、ユーザは、クリティカルペアの分解能が流量の増加によって大きな影響を受けないことを推定しながら、優先度の高い別のタスクを処理するために、および／または、分析時間を短縮するために、精製をより迅速に完了することができる。
【０１３７】
この目的のため、アルゴリズムは、ＴＬＣ分析データでは分離の困難さΔｋ、ＨＰＬＣ分析データではＲｓに応じて、進行中の精製の最大許容流量および圧力係数を（特にクロマトグラフィシステムの限界圧力、カラムの限界圧力、またドライロードの限界圧力を考慮して）評価する（ボックス４０）。アルゴリズムは、リアルタイムでグラジエント法を新しい条件に自動で調整する。ユーザは、精製の任意の時点で加速の実行を選択することができる。この操作は可逆的であり、精製物を損なわず、安全に実行することができる。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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