(57)【要約】本明細書において開示される可変重鎖ドメイン(VH)、可変軽鎖ドメイン(VL)、および相補性決定領域を有するMICA/Bに特異的に結合する抗体、ならびにその方法および使用が本明細書において提供される。2021511387.tif 000004
2021511387.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項２】
SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも90%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項３】
SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも95%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項４】
SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも99%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項５】
SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項６】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項1〜5のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項７】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも90%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項1〜5のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項８】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも95%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項1〜5のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項９】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも99%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項1〜5のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項１０】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項1〜5のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項１１】
前記軽鎖が、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む、請求項1〜10のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項１２】
前記重鎖が、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む、請求項1〜11のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項１３】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する、請求項1〜12のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項１４】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する、請求項1〜13のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項１５】
MICAタンパク質が、膜結合MICAタンパク質、可溶性MICAタンパク質、またはその両方である、請求項13または請求項14記載のモノクローナル抗体。
【請求項１６】
MICBタンパク質が、膜結合MICBタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方である、請求項13または請求項14記載のモノクローナル抗体。
【請求項１７】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される、請求項1〜16のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項１８】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、IgGまたはIgMである、請求項1〜17のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項１９】
前記モノクローナル抗体またはその断片が、ヒト化されているか、またはキメラである、請求項1〜18のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項２０】
SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項２１】
SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも90%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項２２】
SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも95%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項２３】
SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも99%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項２４】
SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項２５】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項20〜24のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項２６】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも90%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項20〜24のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項２７】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも95%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項20〜24のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項２８】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも99%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項20〜24のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項２９】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項20〜24のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項３０】
前記重鎖が、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む、請求項20〜29のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項３１】
前記軽鎖が、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む、請求項20〜30のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項３２】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する、請求項20〜31のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項３３】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する、請求項20〜32のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項３４】
MICAタンパク質が、膜結合MICAタンパク質、可溶性MICAタンパク質、またはその両方である、請求項36または請求項33記載のモノクローナル抗体。
【請求項３５】
MICBタンパク質が、膜結合MICBタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方である、請求項36または請求項33記載のモノクローナル抗体。
【請求項３６】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される、請求項20〜35のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項３７】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、IgGまたはIgMである、請求項20〜36のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項３８】
前記モノクローナル抗体またはその断片が、ヒト化されているか、またはキメラである、請求項20〜37のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項３９】
SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項４０】
SEQ ID NO: 1と少なくとも90%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも90%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも90%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項４１】
SEQ ID NO: 1と少なくとも95%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも95%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも95%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項４２】
SEQ ID NO: 1と少なくとも99%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも99%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも99%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項４３】
SEQ ID NO: 1と少なくとも100%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも100%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも100%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項４４】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、請求項39〜43のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項４５】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 4と少なくとも90%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも90%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも90%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、請求項39〜43のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項４６】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 4と少なくとも95%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも95%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも95%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、請求項39〜43のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項４７】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 4と少なくとも99%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも99%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも99%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、請求項39〜43のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項４８】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 4と100%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と100%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と100%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、請求項39〜43のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項４９】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項39〜48のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項５０】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項49記載のモノクローナル抗体。
【請求項５１】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項39〜48のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項５２】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項51記載のモノクローナル抗体。
【請求項５３】
前記軽鎖が、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む、請求項39〜52のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項５４】
前記重鎖が、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む、請求項39〜53のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項５５】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する、請求項39〜54のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項５６】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する、請求項39〜55のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項５７】
MICAタンパク質が、膜結合MICAタンパク質、可溶性MICAタンパク質、またはその両方である、請求項55または請求項56記載のモノクローナル抗体。
【請求項５８】
MICBタンパク質が、膜結合MICBタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方である、請求項55または請求項56記載のモノクローナル抗体。
【請求項５９】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される、請求項39〜58のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項６０】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、IgGまたはIgMである、請求項39〜59のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項６１】
前記モノクローナル抗体またはその断片が、ヒト化されているか、またはキメラである、請求項39〜60のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項６２】
SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項６３】
SEQ ID NO: 4と少なくとも90%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも90%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも90%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項６４】
SEQ ID NO: 4と少なくとも95%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも95%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも95%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項６５】
SEQ ID NO: 4と少なくとも99%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも99%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも99%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項６６】
SEQ ID NO: 4と100%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と100%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と100%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項６７】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、請求項62〜66のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項６８】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 1と少なくとも90%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも90%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも90%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、請求項62〜66のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項６９】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 1と少なくとも95%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも95%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも95%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、請求項62〜66のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項７０】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 1と少なくとも99%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも99%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも99%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、請求項62〜66のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項７１】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 1と100%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と100%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と100%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、請求項62〜66のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項７２】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項62〜71のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項７３】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項72記載のモノクローナル抗体。
【請求項７４】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項62〜71のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項７５】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項74記載のモノクローナル抗体。
【請求項７６】
前記重鎖が、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む、請求項62〜75のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項７７】
前記軽鎖が、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む、請求項62〜76のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項７８】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する、請求項62〜77のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項７９】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する、請求項62〜78のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項８０】
MICAタンパク質が、膜結合MICAタンパク質、可溶性MICAタンパク質、またはその両方である、請求項78または請求項79記載のモノクローナル抗体。
【請求項８１】
MICBタンパク質が、膜結合MICBタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方である、請求項78または請求項79記載のモノクローナル抗体。
【請求項８２】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される、請求項62〜81のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項８３】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、IgGまたはIgMである、請求項62〜82のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項８４】
前記モノクローナル抗体またはその断片が、ヒト化されているか、またはキメラである、請求項62〜83のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項８５】
請求項1〜84のいずれか一項記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片と、薬学的に許容される担体または賦形剤とを含む、薬学的組成物。
【請求項８６】
SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片の有効量を個体に投与する段階を含む、がんの処置を必要とする個体においてがんを処置する方法。
【請求項８７】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、請求項86記載の方法。
【請求項８８】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項86または87のいずれか一項記載の方法。
【請求項８９】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項88記載の方法。
【請求項９０】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項86または87のいずれか一項記載の方法。
【請求項９１】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項90記載の方法。
【請求項９２】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する、請求項86〜91のいずれか一項記載の方法。
【請求項９３】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する、請求項86〜92のいずれか一項記載の方法。
【請求項９４】
MICAタンパク質が、膜結合MICAタンパク質、可溶性MICAタンパク質、またはその両方である、請求項92または請求項93記載の方法。
【請求項９５】
MICBタンパク質が、膜結合MICBタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方である、請求項92または請求項93記載の方法。
【請求項９６】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される、請求項86〜95のいずれか一項記載の方法。
【請求項９７】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、IgGまたはIgMである、請求項86〜96のいずれか一項記載の方法。
【請求項９８】
前記モノクローナル抗体またはその断片が、ヒト化されているか、またはキメラである、請求項86〜97のいずれか一項記載の方法。
【請求項９９】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する、請求項86〜98のいずれか一項記載の方法。
【請求項１００】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを低減する、請求項86〜98のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０１】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを阻害する、請求項86〜98のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０２】
がんが肝細胞癌である、請求項86〜101のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０３】
SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片の有効量を個体に投与する段階を含む、がんの処置を必要とする個体においてがんを処置する方法。
【請求項１０４】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、請求項103記載の方法。
【請求項１０５】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項103または104のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０６】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項105記載の方法。
【請求項１０７】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項103または104のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０８】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項107記載の方法。
【請求項１０９】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する、請求項103〜108のいずれか一項記載の方法。
【請求項１１０】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する、請求項103〜109のいずれか一項記載の方法。
【請求項１１１】
MICAタンパク質が、膜結合MICAタンパク質、可溶性MICAタンパク質、またはその両方である、請求項109または請求項110記載の方法。
【請求項１１２】
MICBタンパク質が、膜結合MICBタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方である、請求項109または請求項110記載の方法。
【請求項１１３】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される、請求項103〜112のいずれか一項記載の方法。
【請求項１１４】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、IgGまたはIgMである、請求項103〜113のいずれか一項記載の方法。
【請求項１１５】
前記モノクローナル抗体またはその断片が、ヒト化されているか、またはキメラである、請求項103〜114のいずれか一項記載の方法。
【請求項１１６】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する、請求項103〜115のいずれか一項記載の方法。
【請求項１１７】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを低減する、請求項103〜115のいずれか一項記載の方法。
【請求項１１８】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを阻害する、請求項103〜115のいずれか一項記載の方法。
【請求項１１９】
がんが肝細胞癌である、請求項103〜118のいずれか一項記載の方法。
【請求項１２０】
SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片の有効量を個体に投与する段階を含む、肝細胞癌の処置を必要とする個体において肝細胞癌を処置する方法。
【請求項１２１】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、請求項120記載の方法。
【請求項１２２】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項120または121のいずれか一項記載の方法。
【請求項１２３】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項122記載の方法。
【請求項１２４】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項120または121のいずれか一項記載の方法。
【請求項１２５】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項124記載の方法。
【請求項１２６】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する、請求項120〜125のいずれか一項記載の方法。
【請求項１２７】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する、請求項120〜126のいずれか一項記載の方法。
【請求項１２８】
MICAタンパク質が、膜結合MICAタンパク質、可溶性MICAタンパク質、またはその両方である、請求項126または請求項127記載の方法。
【請求項１２９】
MICBタンパク質が、膜結合MICBタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方である、請求項126または請求項127記載の方法。
【請求項１３０】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される、請求項120〜129のいずれか一項記載の方法。
【請求項１３１】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、IgGまたはIgMである、請求項120〜130のいずれか一項記載の方法。
【請求項１３２】
前記モノクローナル抗体またはその断片が、ヒト化されているか、またはキメラである、請求項120〜131のいずれか一項記載の方法。
【請求項１３３】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する、請求項120〜132のいずれか一項記載の方法。
【請求項１３４】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを低減する、請求項120〜132のいずれか一項記載の方法。
【請求項１３５】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを阻害する、請求項120〜132のいずれか一項記載の方法。
【請求項１３６】
SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片の有効量を個体に投与する段階を含む、肝細胞癌の処置を必要とする個体において肝細胞癌を処置する方法。
【請求項１３７】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、請求項136記載の方法。
【請求項１３８】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項136または137のいずれか一項記載の方法。
【請求項１３９】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項138記載の方法。
【請求項１４０】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項136または137のいずれか一項記載の方法。
【請求項１４１】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項140記載の方法。
【請求項１４２】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する、請求項136〜141のいずれか一項記載の方法。
【請求項１４３】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する、請求項136〜142のいずれか一項記載の方法。
【請求項１４４】
MICAタンパク質が、膜結合MICAタンパク質、可溶性MICAタンパク質、またはその両方である、請求項142または請求項143記載の方法。
【請求項１４５】
MICBタンパク質が、膜結合MICBタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方である、請求項142または請求項143記載の方法。
【請求項１４６】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される、請求項136〜145のいずれか一項記載の方法。
【請求項１４７】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、IgGまたはIgMである、請求項136〜146のいずれか一項記載の方法。
【請求項１４８】
前記モノクローナル抗体またはその断片が、ヒト化されているか、またはキメラである、請求項136〜147のいずれか一項記載の方法。
【請求項１４９】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する、請求項136〜148のいずれか一項記載の方法。
【請求項１５０】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを低減する、請求項136〜148のいずれか一項記載の方法。
【請求項１５１】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを阻害する、請求項136〜148のいずれか一項記載の方法。
【請求項１５２】
SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片の有効量を個体に投与する段階を含む、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルの低減を必要とする個体において可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する方法。
【請求項１５３】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、請求項152記載の方法。
【請求項１５４】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項152または153のいずれか一項記載の方法。
【請求項１５５】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項154記載の方法。
【請求項１５６】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項152または153のいずれか一項記載の方法。
【請求項１５７】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項156記載の方法。
【請求項１５８】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する、請求項152〜157のいずれか一項記載の方法。
【請求項１５９】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する、請求項152〜158のいずれか一項記載の方法。
【請求項１６０】
MICAタンパク質が、可溶性MICAタンパク質である、請求項158または請求項159記載の方法。
【請求項１６１】
MICBタンパク質が、可溶性MICBタンパク質である、請求項158または請求項159記載の方法。
【請求項１６２】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される、請求項152〜161のいずれか一項記載の方法。
【請求項１６３】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、IgGまたはIgMである、請求項152〜162のいずれか一項記載の方法。
【請求項１６４】
前記モノクローナル抗体またはその断片が、ヒト化されているか、またはキメラである、請求項152〜163のいずれか一項記載の方法。
【請求項１６５】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを低減または阻害し、それにより、個体における可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する、請求項152〜164のいずれか一項記載の方法。
【請求項１６６】
前記個体が、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルの上昇によって特徴付けられるがんを有する、請求項152〜165のいずれか一項記載の方法。
【請求項１６７】
前記がんが肝細胞癌である、請求項166記載の方法。
【請求項１６８】
SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片の有効量を個体に投与する段階を含む、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルの低減を必要とする個体において可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する方法。
【請求項１６９】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、請求項168記載の方法。
【請求項１７０】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項168または169のいずれか一項記載の方法。
【請求項１７１】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項170記載の方法。
【請求項１７２】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項168または169のいずれか一項記載の方法。
【請求項１７３】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、請求項172記載の方法。
【請求項１７４】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する、請求項168〜173のいずれか一項記載の方法。
【請求項１７５】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する、請求項168〜174のいずれか一項記載の方法。
【請求項１７６】
MICAタンパク質が、可溶性MICAタンパク質である、請求項174または請求項175記載の方法。
【請求項１７７】
MICBタンパク質が、可溶性MICBタンパク質である、請求項174または請求項175記載の方法。
【請求項１７８】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される、請求項168〜177のいずれか一項記載の方法。
【請求項１７９】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、IgGまたはIgMである、請求項168〜178のいずれか一項記載の方法。
【請求項１８０】
前記モノクローナル抗体またはその断片が、ヒト化されているか、またはキメラである、請求項168〜179のいずれか一項記載の方法。
【請求項１８１】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを低減または阻害し、それにより、個体における可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する、請求項168〜180のいずれか一項記載の方法。
【請求項１８２】
前記個体が、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルの上昇によって特徴付けられるがんを有する、請求項168〜181のいずれか一項記載の方法。
【請求項１８３】
前記がんが肝細胞癌である、請求項182記載の方法。
【請求項１８４】
がんの処置を必要とする個体においてがんの処置で用いるための、請求項1〜84のいずれか一項記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項１８５】
がんの処置を必要とする個体においてがんを処置するための医薬の調製で用いるための、請求項1〜84のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項１８６】
がんが肝細胞癌である、請求項184または請求項185記載の使用のための、モノクローナル抗体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
相互参照
本出願は、2018年1月25日付で出願された米国特許仮出願第62/621,892号の恩典を主張するものであり、この出願は参照により本明細書に組み入れられる。
【発明の概要】
【０００２】
概要
MICA/Bに特異的に結合し、それにより疾患細胞に対する免疫応答を調節するモノクローナル抗体が本明細書において開示される。
【０００３】
ある特定の態様において、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも90%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも95%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも99%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも90%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも95%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも99%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を���しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも90%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも95%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも99%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、軽鎖は、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、重鎖は、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する。いくつかの態様において、MICAタンパク質は、膜結合MICAタンパク質、可溶性MICAタンパク質、またはその両方である。いくつかの態様において、MICBタンパク質は、膜結合MICBタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方である。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、IgGまたはIgMである。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその断片は、ヒト化されているか、またはキメラである。
【０００４】
ある特定の態様において、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも90%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも95%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも99%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも90%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも95%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも99%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を���しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも90%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも95%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも99%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、重鎖は、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、軽鎖は、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する。いくつかの態様において、MICAタンパク質は、膜結合MICAタンパク質、可溶性MICAタンパク質、またはその両方である。いくつかの態様において、MICBタンパク質は、膜結合MICBタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方である。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、IgGまたはIgMである。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその断片は、ヒト化されているか、またはキメラである。
【０００５】
ある特定の態様において、SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 1と少なくとも90%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも90%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも90%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 1と少なくとも95%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも95%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも95%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 1と少なくとも99%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも99%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも99%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 1と少なくとも100%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも100%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも100%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 1と少なくとも90%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも90%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも90%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 1と少なくとも95%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも95%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも95%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有し��い軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 1と少なくとも99%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも99%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも99%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 1と少なくとも100%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも100%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも100%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 4と少なくとも90%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも90%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも90%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 4と少なくとも95%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも95%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも95%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 4と少なくとも99%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも99%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも99%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 4と100%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と100%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と100%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)��含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、軽鎖は、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、重鎖は、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する。いくつかの態様において、MICAタンパク質は、膜結合MICAタンパク質、可溶性MICAタンパク質、またはその両方である。いくつかの態様において、MICBタンパク質は、膜結合MICBタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方である。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、IgGまたはIgMである。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその断片は、ヒト化されているか、またはキメラである。
【０００６】
ある特定の態様において、SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 4と少なくとも90%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも90%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも90%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 4と少なくとも95%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも95%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも95%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 4と少なくとも99%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも99%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも99%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 4と100%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と100%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と100%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が、本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 4と少なくとも90%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも90%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも90%同一の鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 4と少なくとも95%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも95%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも95%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9���して記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 4と少なくとも99%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも99%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも99%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、SEQ ID NO: 4と100%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と100%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と100%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片であって、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含むか、またはSEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む、該モノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 1と少なくとも90%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも90%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも90%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 1と少なくとも95%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも95%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも95%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 1と少なくとも99%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも99%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも99%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 1と100%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と100%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と100%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗��結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、重鎖は、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、軽鎖は、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する。いくつかの態様において、MICAタンパク質は、膜結合MICAタンパク質、可溶性MICAタンパク質、またはその両方である。いくつかの態様において、MICBタンパク質は、膜結合MICBタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方である。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、IgGまたはIgMである。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその断片は、ヒト化されているか、またはキメラである。
【０００７】
ある特定の態様において、本明細書における開示のいずれかによるモノクローナル抗体またはその抗原結合断片と薬学的に許容される担体または賦形剤とを含む薬学的組成物が、本明細書において開示される。
【０００８】
ある特定の態様において、SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片の有効量を個体に投与する段階を含む、がんの処置を必要とする個体においてがんを処置する方法が本明細書において開示される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する。いくつかの態様において、MICAタンパク質は、膜結合MICAタンパク質、可溶性MICAタンパク質、またはその両方である。いくつかの態様において、MICBタンパク質は、膜結合MICBタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方である。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、IgGまたはIgMである。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその断片は、ヒト化されているか、またはキメラである。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを低減する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを阻害する。いくつかの態様において、がんは肝細胞癌である。
【０００９】
ある特定の態様において、SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片の有効量を個体に投与する段階を含む、がんの処置を必要とする個体においてがんを処置する方法が本明細書において開示される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する。いくつかの態様において、MICAタンパク質は、膜結合MICAタンパク質、可溶性MICAタンパク質、またはその両方である。いくつかの態様において、MICBタンパク質は、膜結合MICBタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方である。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、IgGまたはIgMである。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその断片は、ヒト化されているか、またはキメラである。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを低減する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを阻害する。いくつかの態様において、がんは肝細胞癌である。
【００１０】
ある特定の態様において、SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片の有効量を個体に投与する段階を含む、肝細胞癌の処置を必要とする個体において肝細胞癌を処置する方法が本明細書において開示される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する。いくつかの態様において、MICAタンパク質は、膜結合MICAタンパク質、可溶性MICAタンパク質、またはその両方である。いくつかの態様において、MICBタンパク質は、膜結合MICBタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方である。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、IgGまたはIgMである。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその断片は、ヒト化されているか、またはキメラである。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを低減する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを阻害する。
【００１１】
ある特定の態様において、SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片の有効量を個体に投与する段階を含む、肝細胞癌の処置を必要とする個体において肝細胞癌を処置する方法が本明細書において開示される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する。いくつかの態様において、MICAタンパク質は、膜結合MICAタンパク質、可溶性MICAタンパク質、またはその両方である。いくつかの態様において、MICBタンパク質は、膜結合MICBタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方である。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、IgGまたはIgMである。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその断片は、ヒト化されているか、またはキメラである。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを低減する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを阻害する。
【００１２】
ある特定の態様において、SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片の有効量を個体に投与する段階を含む、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルの低減を必要とする個体において可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する方法が本明細書において開示される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する。いくつかの態様において、MICAタンパク質は、可溶性MICAタンパク質である。いくつかの態様において、MICBタンパク質は、可溶性MICBタンパク質である。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、IgGまたはIgMである。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその断片は、ヒト化されているか、またはキメラである。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを低減または阻害し、それにより、個体における可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する。いくつかの態様において、個体は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルの上昇によって特徴付けられるがんを有する。いくつかの態様において、がんは肝細胞癌である。
【００１３】
ある特定の態様において、SEQ ID NO: 4と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 5と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 6と少なくとも80%同一の重鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片の有効量を個体に投与する段階を含む、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルの低減を必要とする個体において可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する方法が本明細書において開示される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 1と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域1 (CDR1)配列、SEQ ID NO: 2と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域2 (CDR2)配列、およびSEQ ID NO: 3と少なくとも80%同一の軽鎖相補性決定領域3 (CDR3)配列の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する。いくつかの態様において、MICAタンパク質は、可溶性MICAタンパク質である。いくつかの態様において、MICBタンパク質は、可溶性MICBタンパク質である。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、IgGまたはIgMである。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその断片は、ヒト化されているか、またはキメラである。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを低減または阻害し、それにより、個体における可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する。いくつかの態様において、個体は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルの上昇によって特徴付けられるがんを有する。いくつかの態様において、がんは肝細胞癌である。
【００１４】
ある特定の態様において、がんの処置を必要とする個体においてがんの処置で用いるための本明細書における開示のいずれかによるモノクローナル抗体またはその抗原結合断片が本明細書において開示される。ある特定の態様において、がんの処置を必要とする個体においてがんを処置するための医薬の調製で用いるための本明細書における開示のいずれかによるモノクローナル抗体またはその抗原結合断片も本明細書において開示される。いくつかの態様において、がんは肝細胞癌である。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
本発明の特徴および利点の理解は、本発明の原理が利用される例示的な態様を記載する以下の詳細な説明、およびその添付の図面を参照することによって得られるであろう。
【００１６】
【図１】BioLayer干渉法によるMICA抗原(MICA＊01およびMICA＊08)に対する抗体PDI-1の動態測定を例示している。
【図２】ELISAによる抗体PDI-1のMICA/B対立遺伝子への結合を例示している。
【図３】MICA＊04でトランスフェクトされたTRAMP C2細胞の細胞染色によって評価された、抗体PDI-1が細胞表面MICAに結合することを例示している。
【図４】抗体PDI-1がPLC/PRF/5細胞からのMICAシェディングを阻害することを例示している。
【図５】PDI-1がPLC/PRF/5細胞のNK-92細胞媒介性細胞毒性を増強することを例示している。
【図６】PDI-1抗体を用いたヒト肝がん異種移植モデルの血清中の可溶性MICAレベルの測定を例示している。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
詳細な説明
いくつかの態様において、MICA/Bに特異的に結合するモノクローナル抗体が本明細書において開示される。いくつかの態様において、本明細書におけるMICA/B抗体は、MICA/Bタンパク質またはその断片に結合して個体における免疫応答を調節し、それによりがん(例えば肝細胞癌)を処置する。
【００１８】
主要組織適合性複合体クラスI関連鎖AおよびB (MICA/B)は、ナチュラルキラー細胞(NK)受容体NKG2Dの2つのストレス誘導性リガンドであり、NKおよびT細胞の細胞毒性の媒介に重要な役割を果たす。病変細胞(例えば、がん細胞)によりシェディングされた可溶性MICA/Bは、NKG2D受容体の結合を通してNKおよびT細胞の感受性を低下させ、それによって免疫応答を抑制する。したがって、MICA/Bの調節は個体、例えば、がんを患っている個体における免疫応答を調節するのに有用である。MICA/Bに結合し、その活性を調節する抗体は、がんの処置のための新規の治療用物質の開発に望ましい。
【００１９】
いくつかの専門用語
本明細書において用いられる場合、「MICA/B」は、MICAタンパク質、MICBタンパク質、またはMICAおよびMICBタンパク質の両方をいい、それらの変種、アイソフォーム、およびヒトMICA/Bの種相同体を含む。
【００２０】
本明細書において用いられる場合、「抗体」は、特定の抗原に対する結合特異性を示す糖タンパク質をいう。抗体は、重鎖および軽鎖の各々に可変ドメインおよび定常ドメインを含むことが多い。したがって、ほとんどの抗体は、抗原に結合する抗体の部分を一緒に形成する重鎖可変ドメイン(VH)および軽鎖可変ドメイン(VL)を有する。各可変ドメイン内には、抗原の表面に接触する重鎖可変ドメイン(VH)および軽鎖可変ドメイン(VL)中でループを形成する3つの相補性決定領域(CDR)がある。本明細書における抗体は、抗原に結合することができる抗体の断片または「抗原結合部分」も含む。
【００２１】
本明細書において用いられる場合、「キメラ」抗体は、所望の生物学的活性を示す限り、特定の種に由来する、または特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一または相同の重鎖および/または軽鎖の一部分を有するが、鎖の残部分は、別の種に由来する、または別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体中の対応する配列、およびそのような抗体の断片と同一または相同の抗体である(例えば、Morrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:6851-6855 (1984)を参照のこと)。本明細書における「ヒト化抗体」は、抗体配列中に置換されたヒト配列を有するキメラ抗体をいう。
【００２２】
「レシピエント」、「個体」、「対象」、「宿主」および「患者」という用語は、本明細書において互換的に用いられ、場合によっては、診断、処置または治療が望まれる任意の哺乳類対象、特にヒトをいう。処置の目的での「哺乳類」とは、ヒト、飼育動物および農場動物、ならびに実験室動物、動物園動物、スポーツ動物、またはペット動物、例えばイヌ、ウマ、ネコ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、マウス、ラット、ウサギ、モルモット、サルなどを含む、哺乳類として分類される任意の動物をいう。いくつかの態様において、哺乳類はヒトである。
【００２３】
本明細書において用いられる場合、「処置」、「処置する」などの用語は、場合によっては、効果を得るという目的で、薬剤を投与すること、または手順を実行することをいう。効果は、疾患もしくはその症状を完全にもしくは部分的に予防することに関して予防的であってもよく、および/または疾患および/もしくは疾患の症状の部分的もしくは完全な治癒を達成することに関して治療的であってもよい。本明細書において用いられる「処置」は、哺乳類、特にヒトにおける疾患または障害(例えば、がん)の処置を含むことができ、以下を含む: (a) 疾患にかかりやすい素因を持ちうるが、それを持つとまだ診断されていない対象において疾患または疾患の症状(例えば、原発性疾患に関連しうる、または原発性疾患によって引き起こされうる疾患を含む)が起こるのを予防すること; (b) 疾患を阻止すること、すなわち、その発生を阻むこと; および(c) 疾患を緩和すること、すなわち、疾患の退縮を引き起こすこと。処置することは、軽減; 寛解; 症状の軽減もしくは疾患状態を患者にとっていっそう許容できるものにすること; 変性もしくは衰退の速度の緩徐化; または変性の最終点をいっそう衰弱させないようにすることのような、任意の客観的または主観的パラメータを含めて、がんの処置または改善または予防の成功の任意の兆候をいうことができる。症状の処置または改善は、医師による検査の結果を含めて、1つまたは複数の客観的または主観的パラメータに基づく。したがって、「処置する」という用語は、疾患(例えば、がん)に関連する症状または状態の発症を予防もしくは遅延するための、緩和するための、または阻止もしくは阻害するための本発明の化合物または薬剤の投与を含む。「治療効果」という用語は、対象における疾患、疾患の症状、または疾患の副作用の低減、排除、または予防をいう。
【００２４】
「治療的有効量」とは、場合によっては、疾患を処置するために対象に投与される場合に、その疾患の処置を達成するのに十分な量を意味する。
【００２５】
本明細書において用いられる場合、単数形「a」、「and」および「the」は、文脈上明らかに別の意味を示していない限り、複数の指示対象を含む。したがって、例えば、「抗体(an antibody)」への言及は複数の抗体を含み、いくつかの態様における「抗体(an antibody)」への言及は多数の抗体を含む、などである。
【００２６】
本明細書において用いられる場合、全ての数値または数値範囲は、文脈上明らかに別の意味を示していない限り、そのような範囲内のまたはそのような範囲を包含する整数全体および範囲内のまたは範囲を包含する整数または値の分数を含む。したがって、例えば、90〜100%の範囲への言及は、91%、92%、93%、94%、95%、95%、97%等、および、91.1%、91.2%、91.3%、91.4%、91.5%等、92.1%、92.2%、92.3%、92.4%、92.5%等などを含む。別の例において、1〜5,000倍の範囲への言及は、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20倍等、および、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5倍等、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5倍等などを含む。
【００２７】
本明細書において用いられる場合、数の「約」とは、その数を含み、その数の10%下からその数の10%上までの範囲をいう。範囲の「約」とは、その範囲の下限の10%下から、その範囲の上限の10%上に及ぶことをいう。
【００２８】
MICA/B
いくつかの態様において、MICA/Bに特異的に結合するモノクローナル抗体が本明細書において開示される。
【００２９】
主要組織適合性複合体(MHC)クラスI鎖関連遺伝子Aおよび遺伝子Bタンパク質(MICA/B)は、グリコシル化された多型かつ膜固定型の非古典的MHCクラスIタンパク質である。MICA/BはMHCクラスIに関連し、3つの細胞外Ig様ドメイン(アルファ-1、アルファ-2およびアルファ-3)、膜貫通ドメインならびにC末端細胞質尾部を含む同様のドメイン構造を有する。しかしながら、MICA/Bはβ2-ミクログロブリンとは結合せず、CD8結合部位を欠き、いずれの抗原も提示しない。MICA/Bは、NK、NKT、およびαβとγδ CD8+ T細胞の両方を含む、免疫エフェクタ細胞上のC型レクチン様活性化受容体ナチュラルキラーグループ2D (NKG2D)に対するリガンドである。MICA/BおよびNKG2Dの相互作用は、腫瘍監視および免疫応答に関与する。
【００３０】
MICA/Bタンパク質は正常細胞では通常低レベルで発現されるが、ストレスを受けた細胞または形質転換された細胞(例えば、がん細胞)ではいっそう高いレベルに誘導される。NKG2Dを担持する免疫エフェクタ細胞と、細胞表面にMICA/Bリガンドを発現するストレスを受けたまたは病変した細胞との相互作用により、ストレスを受けた/病変した細胞に対する細胞性免疫応答が生じ、MICA/B発現細胞の死に至る。がん細胞では、切断されたMICA/Bタンパク質(膜貫通ドメインおよび細胞質尾部を欠くが、アルファ-1、アルファ-2およびアルファ-3ドメインを含む3つの細胞外ドメインを保持するタンパク質)は、プロテアーゼの作用により血中に頻繁にシェディングされ、その結果、エフェクタ免疫細胞上で、その意図される受容体であるNKG2Dの下方制御(受容体内部移行)が起こる。いくつかの態様において、MICA/B糖タンパク質は細胞内で産生され、これらは常に細胞表面膜に結合されることになるわけではなく、代わりにエキソソーム内に組み込まれ、免疫細胞上のNKG2D受容体との相互作用が起こる細胞外に放出される。がん細胞の表面からシェディングされたこれらの切断型または可溶性MICA/Bリガンドは、デコイ分子のように機能し、NK、NKTおよびさまざまなCD8+ T細胞のような免疫エフェクタ細胞上のNKG2D受容体の下方制御をもたらす。いくつかの態様において、可溶性MICA/Bの形成は、その本来の役割が形質転換された細胞を探して破壊することである生来の防御システムのエフェクタが、これらのデコイリガンド分子の免疫抑制作用によってシャットダウンされるという異常な状況をもたらし、それにより、がん細胞が免疫系から隠れ、抑制されずに成長することを可能にする。
【００３１】
肝細胞癌(HCC)
いくつかの態様において、本明細書において開示されるMICA/B抗体は、MICA/Bタンパク質またはその断片に結合して個体における免疫応答を調節し、それによりがん(例えば肝細胞癌)を処置する。
【００３２】
肝細胞癌(HCC)は、肝臓の原発性悪性腫瘍であり、慢性肝疾患および肝硬変を基礎疾患に持つ個体において主に発生する。腫瘍は局所拡張、肝内の広がり、および遠隔転移とともに進行する。B型肝炎およびC型肝炎は、個人を慢性肝疾患の発症およびその後のHCC発症にかかりやすくさせる。肥満、糖尿病、およびアルコール乱用は、個体をその後のHCC発症にかかりやすくさせる他のいくつかの原因である。
【００３３】
MICA/B抗体
MICA/Bタンパク質に特異的に結合する抗体が本明細書において提供される。いくつかの態様において、MICA/B抗体は、重鎖可変ドメイン(VH)を含む少なくとも1つの重鎖および軽鎖可変ドメイン(VL)を含む少なくとも1つの軽鎖を含む。各VHおよびVLは、3つの相補性決定領域(CDR)を含む。VHおよびVLならびにCDRのアミノ酸配列は、抗体の抗原結合特異性および抗原結合強度を決定する。VHおよびVLならびにCDRのアミノ酸配列を表1に要約する。
【００３４】
（表１）抗MICA/Bモノクローナル抗体(PDI-1)配列
2021511387.tif 000003
【００３５】
いくつかの態様において、抗体はMICAタンパク質に特異的に結合する。いくつかの態様において、抗体はMICBタンパク質に特異的に結合する。いくつかの態様において、抗体はMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する。いくつかの態様において、抗体はMICAタンパク質のα-3ドメインに結合する。いくつかの態様において、抗体はMICBタンパク質のα-3ドメインに結合する。いくつかの態様において、抗体はMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する。いくつかの態様において、抗体は、膜結合MICAタンパク質であるMICAタンパク質に結合する。いくつかの態様において、抗体は、可溶性MICAタンパク質であるMICAタンパク質に結合する。いくつかの態様において、抗体は、膜結合MICAタンパク質および可溶性MICAタンパク質の両方であるMICAタンパク質に結合する。いくつかの態様において、抗体は、膜結合MICBタンパク質であるMICBタンパク質に結合する。いくつかの態様において、抗体は、可溶性MICBタンパク質であるMICBタンパク質に結合する。いくつかの態様において、抗体は、膜結合MICBタンパク質および可溶性MICBタンパク質の両方であるMICBタンパク質に結合する。
【００３６】
いくつかの態様において、MICA/Bに特異的に結合する抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの態様において、抗体は抗原結合断片である。いくつかの態様において、抗体は、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される。いくつかの態様において、抗体はIgGまたはIgMである。いくつかの態様において、抗体はヒト化されている。いくつかの態様において、抗体はキメラである。
【００３７】
MICA/B抗体可変ドメイン
軽鎖可変ドメイン(VL)を含む軽鎖を有するMICA/Bに特異的に結合する抗体が本明細書において開示される。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、VLは、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、または99%同一のアミノ酸配列を有する。いくつかの態様において、VLは、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する。
【００３８】
重鎖可変ドメイン(VH)を含む重鎖を有するMICA/Bに特異的に結合する抗体が本明細書においてさらに開示される。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、VHは、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、または99%同一のアミノ酸配列を有する。いくつかの態様において、VHは、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する。
【００３９】
軽鎖可変ドメイン(VL)および重鎖可変ドメイン(VH)を含むMICA/Bに結合する抗体も本明細書において開示される。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン(VL)およびSEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、VLは、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有し、VHは、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する。いくつかの態様において、VLは、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有し、VHは、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列を有しない軽鎖を含む。いくつかの態様において、軽鎖は、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、軽鎖は、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、軽鎖は、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも2個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、軽鎖は、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも3個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、軽鎖は、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも4個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、軽鎖は、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも5個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、軽鎖は、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも6個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、軽鎖は、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも7個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、軽鎖は、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも8個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、軽鎖は、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも9個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、軽鎖は、SEQ ID NO: 9として記載されるアミノ酸配列の少なくとも10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片は、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列を有しない重鎖を含む。いくつかの態様において、重鎖は、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも1〜10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、重鎖は、SEQ ID NO: 10と��て記載されるアミノ酸配列の少なくとも1個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、重鎖は、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも2個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、重鎖は、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも3個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、重鎖は、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも4個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、重鎖は、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも5個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、重鎖は、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも6個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、重鎖は、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも7個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、重鎖は、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも8個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、重鎖は、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも9個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、重鎖は、SEQ ID NO: 10として記載されるアミノ酸配列の少なくとも10個のアミノ酸が改変されているアミノ酸配列を含む。
【００４０】
MICA/B抗体相補性決定領域
軽鎖相補性決定領域(CDR)を含む軽鎖を有するMICA/Bに特異的に結合する抗体が本明細書において開示される。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 1として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1、SEQ ID NO: 2として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2、およびSEQ ID NO: 3として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 1として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1、SEQ ID NO: 2として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2、およびSEQ ID NO: 3として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 1として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1、SEQ ID NO: 2として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2、およびSEQ ID NO: 3として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3の少なくとも1つを含む。
【００４１】
重鎖相補性決定領域(CDR)を含む重鎖を有するMICA/Bに特異的に結合する抗体が本明細書においてさらに開示される。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 4として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1、SEQ ID NO: 5として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2、SEQ ID NO: 6として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 4として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1、SEQ ID NO: 5として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2、SEQ ID NO: 6として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 4として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1、SEQ ID NO: 5として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2、SEQ ID NO: 6として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3の少なくとも1つを含む。
【００４２】
軽鎖相補性決定領域(CDR)および重鎖相補性決定領域(CDR)を含むMICA/Bに結合する抗体も本明細書において開示される。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 1として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1、SEQ ID NO: 2として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2、SEQ ID NO: 3として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3、SEQ ID NO: 4として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1、SEQ ID NO: 5として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2、およびSEQ ID NO: 6として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 1として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1、SEQ ID NO: 2として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2、SEQ ID NO: 3として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3、SEQ ID NO: 4として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1、SEQ ID NO: 5として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2、およびSEQ ID NO: 6として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 1として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1、SEQ ID NO: 2として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2、SEQ ID NO: 3として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3、SEQ ID NO: 4として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1、SEQ ID NO: 5として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2、およびSEQ ID NO: 6として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3の少なくとも1つを含む。
【００４３】
処置および使用の方法
本明細書において開示されるMICA/B抗体の投与を含む、がん(例えば肝細胞癌)の処置を必要とする個体においてがん(例えば肝細胞癌)を処置する方法が本明細書において提供される。
【００４４】
本明細書において開示されるMICA/B抗体の投与を含む、可溶性MICA/Bタンパク質のレベルの低減を必要とする個体において可溶性MICA/Bタンパク質のレベルを低減する方法が本明細書においてさらに提供される。
【００４５】
いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 1として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1、SEQ ID NO: 2として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2、およびSEQ ID NO: 3として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 1として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1、SEQ ID NO: 2として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2、およびSEQ ID NO: 3として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 1として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1、SEQ ID NO: 2として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2、およびSEQ ID NO: 3として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3の少なくとも1つを含む。
【００４６】
重鎖相補性決定領域(CDR)を含む重鎖を有するMICA/Bに特異的に結合する抗体が本明細書においてさらに開示される。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 4として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1、SEQ ID NO: 5として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2、SEQ ID NO: 6として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 4として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1、SEQ ID NO: 5として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2、SEQ ID NO: 6として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 4として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1、SEQ ID NO: 5として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2、SEQ ID NO: 6として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3の少なくとも1つを含む。
【００４７】
軽鎖相補性決定領域(CDR)および重鎖相補性決定領域(CDR)を含むMICA/Bに結合する抗体も本明細書において開示される。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 1として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1、SEQ ID NO: 2として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2、SEQ ID NO: 3として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3、SEQ ID NO: 4として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1、SEQ ID NO: 5として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2、およびSEQ ID NO: 6として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 1として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1、SEQ ID NO: 2として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2、SEQ ID NO: 3として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3、SEQ ID NO: 4として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1、SEQ ID NO: 5として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2、およびSEQ ID NO: 6として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3の少なくとも1つを含む。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 1として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1、SEQ ID NO: 2として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2、SEQ ID NO: 3として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3、SEQ ID NO: 4として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1、SEQ ID NO: 5として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2、およびSEQ ID NO: 6として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3の少なくとも1つを含む。
【００４８】
軽鎖可変ドメイン(VL)を含む軽鎖を有するMICA/Bに特異的に結合する抗体が本明細書において開示される。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。いくつかの態様において、VLは、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、または99%同一のアミノ酸配列を有する。いくつかの態様において、VLは、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する。
【００４９】
重鎖可変ドメイン(VH)を含む重鎖を有するMICA/Bに特異的に結合する抗体が本明細書においてさらに開示される。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、VHは、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、または99%同一のアミノ酸配列を有する。いくつかの態様において、VHは、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する。
【００５０】
軽鎖可変ドメイン(VL)および重鎖可変ドメイン(VH)を含むMICA/Bに結合する抗体も本明細書において開示される。いくつかの態様において、MICA/Bに結合する抗体は、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン(VL)およびSEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約70%同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン(VH)を含む。いくつかの態様において、VLは、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有し、VHは、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と少なくとも約75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%または99%同一のアミノ酸配列を有する。いくつかの態様において、VLは、SEQ ID NO: 7として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有し、VHは、SEQ ID NO: 8として記載されるアミノ酸配列と100%同一のアミノ酸配列を有する。
【００５１】
いくつかの態様において、抗体はMICAタンパク質に特異的に結合する。いくつかの態様において、抗体はMICBタンパク質に特異的に結合する。いくつかの態様において、抗体はMICAおよびMICBタンパク質の両方に特異的に結合する。いくつかの態様において、抗体はMICAタンパク質のα-3ドメインに結合する。いくつかの態様において、抗体はMICBタンパク質のα-3ドメインに結合する。いくつかの態様において、抗体はMICAおよびMICBタンパク質の両方のα-3ドメインに結合する。いくつかの態様において、抗体は、膜結合MICAタンパク質であるMICAタンパク質に結合する。いくつかの態様において、抗体は、可溶性MICAタンパク質であるMICAタンパク質に結合する。いくつかの態様において、抗体は、膜結合MICAタンパク質および可溶性MICAタンパク質の両方であるMICAタンパク質に結合する。いくつかの態様において、抗体は、膜結合MICBタンパク質であるMICBタンパク質に結合する。いくつかの態様において、抗体は、可溶性MICBタンパク質であるMICBタンパク質に結合する。いくつかの態様において、抗体は、膜結合MICBタンパク質および可溶性MICBタンパク質の両方であるMICBタンパク質に結合する。
【００５２】
いくつかの態様において、MICA/Bに特異的に結合する抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの態様において、抗体は抗原結合断片である。いくつかの態様において、抗体は、免疫グロブリン全体、scFv、Fab、F(ab')2またはジスルフィド結合Fvから選択される。いくつかの態様において、抗体はIgGまたはIgMである。いくつかの態様において、抗体はヒト化されている。いくつかの態様において、抗体はキメラである。
【００５３】
いくつかの態様において、本明細書において開示される抗体は、可溶性MICAタンパク質のレベルを低減する。いくつかの態様において、本明細書において開示される抗体は、可溶性MICBタンパク質のレベルを低減する。いくつかの態様において、本明細書において開示される抗体は、可溶性MICAタンパク質および可溶性MICBタンパク質の両方のレベルを低減する。いくつかの態様において、本明細書において開示される抗体は、可溶性MICAタンパク質のシェディングを低減する。いくつかの態様において、本明細書において開示される抗体は、可溶性MICBタンパク質のシェディングを低減する。いくつかの態様において、本明細書において開示される抗体は、可溶性MICAタンパク質および可溶性MICBタンパク質の両方のシェディングを低減する。いくつかの態様において、本明細書において開示される抗体は、可溶性MICAタンパク質のシェディングを阻害する。いくつかの態様において、本明細書において開示される抗体は、可溶性MICBタンパク質のシェディングを阻害する。いくつかの態様において、本明細書において開示される抗体は、可溶性MICAタンパク質および可溶性MICBタンパク質の両方のシェディングを阻害する。いくつかの態様において、本明細書において開示される抗体は、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のシェディングを低減または阻害し、それにより、可溶性MICAタンパク質、可溶性MICBタンパク質、またはその両方のレベルを低減する。
【００５４】
本明細書において開示される方法で用いるために任意の適当な投与経路が企図される。いくつかの態様において、抗体は静脈内投与によって投与される。いくつかの態様において、抗体は皮下投与によって投与される。いくつかの態様において、抗体は局所的に投与される。いくつかの態様において、抗体は全身に(例えば、静脈内に、筋肉内に、皮下に、皮内に、経口に、鼻腔内に、舌下に)投与される。いくつかの態様において、抗体は膏薬、ローションまたはエマルジョンとして製剤化される。いくつかの態様において、抗体は溶液として製剤化される。いくつかの態様において、抗体は局所、経口、口腔、または経鼻投与用に製剤化される。
【００５５】
いくつかの態様において、個体は、抗体の投与前にモニタリングされる。症状が特定され、その重症度が評価される。本明細書において記述される抗体は、本明細書において論じられるように、または当業者に公知であるように時間をかけて単発的にまたは複合的に、単独でまたは追加の処置との組み合わせで投与される。いくつかの態様において、処置計画の有効性が決定されるように個体がモニタリングされる。いくつかの態様において、処置計画は、症状の緩和、副作用の低減、または症状の緩和および副作用の低減の組み合わせの観点から望ましいレベルの対象応答を達成するよう処置用量もしくは頻度または用量および頻度が変更されるように、予備的な処置結果に応じて改変される。
【００５６】
治療的に有効な量または投与量は、約0.01 mg/kg〜約20 mg/kg、例えば、約0.01 mg/kg、約0.02 mg/kg、約0.03 mg/kg、約0.04 mg/kg、約0.05 mg/kg、約0.06 mg/kg、約0.07 mg/kg、約0.08 mg/kg、約0.09 mg/kg、約0.1 mg/kg、約0.2 mg/kg、約0.3 mg/kg、約0.4 mg/kg、約0.5 mg/kg、約0.6 mg/kg、約0.7 mg/kg、約0.8 mg/kg、約0.9 mg/kg、約1.0 mg/kg、約1.1 mg/kg、約1.2 mg/kg、約1.3 mg/kg、約1.4 mg/kg、約1.5 mg/kg、約1.6 mg/kg、約1.7 mg/kg、約1.8 mg/kg、約1.9 mg/kg、約2 mg/kg、約2.1 mg/kg、約2.2 mg/kg、約2.3 mg/kg、約2.4 mg/kg、約2.5 mg/kg、約2.6 mg/kg、約2.7 mg/kg、約2.8 mg/kg、約2.9 mg/kg、約3 mg/kg、約3.1 mg/kg、約3.2 mg/kg、約3.3 mg/kg、約3.4 mg/kg、約3.5 mg/kg、約3.6 mg/kg、約3.7 mg/kg、約3.8 mg/kg、約3.9 mg/kg、約4 mg/kg、約4.1 mg/kg、約4.2 mg/kg、約4.3 mg/kg、約4.4 mg/kg、約4.5 mg/kg、約4.6 mg/kg、約4.7 mg/kg、約4.8 mg/kg、約4.9 mg/kg、約5 mg/kg、約5.1 mg/kg、約5.2 mg/kg、約5.3 mg/kg、約5.4 mg/kg、約5.5 mg/kg、約5.6 mg/kg、約5.7 mg/kg、約5.8 mg/kg、約5.9 mg/kg、約6 mg/kg、約6.1 mg/kg、約6.2 mg/kg、約6.3 mg/kg、約6.4 mg/kg、約6.5 mg/kg、約6.6 mg/kg、約6.7 mg/kg、約6.8 mg/kg、約6.9 mg/kg、約7 mg/kg、約7.1 mg/kg、約7.2 mg/kg、約7.3 mg/kg、約7.4 mg/kg、約7.5 mg/kg、約7.6 mg/kg、約7.7 mg/kg、約7.8 mg/kg、約7.9 mg/kg、約8 mg/kg、約8.1 mg/kg、約8.2 mg/kg、約8.3 mg/kg、約8.4 mg/kg、約8.5 mg/kg、約8.6 mg/kg、約8.7 mg/kg、約8.8 mg/kg、約8.9 mg/kg、約9 mg/kg、約9.1 mg/kg、約9.2 mg/kg、約9.3 mg/kg、約9.4 mg/kg、約9.5 mg/kg、約9.6 mg/kg、約9.7 mg/kg、約9.8 mg/kg、約9.9 mg/kg、約10 mg/kg、約10.1 mg/kg、約10.2 mg/kg、約10.3 mg/kg、約10.4 mg/kg、約10.5 mg/kg、約10.6 mg/kg、約10.7 mg/kg、約10.8 mg/kg、約10.9 mg/kg、約11 mg/kg、約11.1 mg/kg、約11.2 mg/kg、約11.3 mg/kg、約11.4 mg/kg、約11.5 mg/kg、約11.6 mg/kg、約11.7 mg/kg、約11.8 mg/kg、約11.9 mg/kg、約12 mg/kg、約12.1 mg/kg、約12.2 mg/kg、約12.3 mg/kg、約12.4 mg/kg、約12.5 mg/kg、約12.6 mg/kg、約12.7 mg/kg、約12.8 mg/kg、約12.9 mg/kg、約13 mg/kg、約13.1 mg/kg、約13.2 mg/kg、約13.3 mg/kg、約13.4 mg/kg、約13.5 mg/kg、約13.6 mg/kg、約13.7 mg/kg、約13.8 mg/kg、約13.9 mg/kg、約14 mg/kg、約14.1 mg/kg、約14.2 mg/kg、約14.3 mg/kg、約14.4 mg/kg、約14.5 mg/kg、約14.6 mg/kg、約14.7 mg/kg、約14.8 mg/kg、約14.9 mg/kg、約15 mg/kg、約15.1 mg/kg、約15.2 mg/kg、約15.3 mg/kg、約15.4 mg/kg、約15.5 mg/kg、約15.6 mg/kg、約15.7 mg/kg、約15.8 mg/kg、約15.9 mg/kg、約16 mg/kg、約16.1 mg/kg、約16.2 mg/kg、約16.3 mg/kg、約16.4 mg/kg、約16.5 mg/kg、約16.6 mg/kg、約16.7 mg/kg、約16.8 mg/kg、約16.9 mg/kg、約17 mg/kg、約17.1 mg/kg、約17.2 mg/kg、約17.3 mg/kg、約17.4 mg/kg、約17.5 mg/kg、約17.6 mg/kg、約17.7 mg/kg、約17.8 mg/kg、約17.9 mg/kg、約18 mg/kg、約18.1 mg/kg、約18.2 mg/kg、約18.3 mg/kg、約18.4 mg/kg、約18.5 mg/kg、約18.6 mg/kg、約18.7 mg/kg、約18.8 mg/kg、約18.9 mg/kg、約19 mg/kg、約19.1 mg/kg、約19.2 mg/kg、約19.3 mg/kg、約19.4 mg/kg、約19.5 mg/kg、約19.6 mg/kg、約19.7 mg/kg、約19.8 mg/kg、約19.9 mg/kg、または約20 mg/kgの投与量を含むと企図される。治療的に有効な量または投与量は、場合によっては約0.1 mg/kg〜約2.0 mg/kgの投与量を含むと企図される。
【００５７】
本明細書における処置の方法は、本明細書において開示される用量でのMICA/B抗体の1回または複数回の投与を含む。いくつかの態様において、方法は、MICA/B抗体の1回の投与を含む。いくつかの態様において、方法は、MICA/B抗体の2回の投与を含む。いくつかの態様において、方法は、MICA/B抗体の3回の投与を含む。いくつかの態様において、方法は、MICA/B抗体の4回の投与を含む。いくつかの態様において、方法は、MICA/B抗体の5回の投与を含む。いくつかの態様において、方法は、MICA/B抗体の6回の投与を含む。いくつかの態様において、MICA/B抗体の1回または複数回の投与は、毎日投与される。いくつかの態様において、MICA/B抗体の1回または複数回の投与は、毎週投与される。いくつかの態様において、MICA/B抗体の1回または複数回の投与は、隔週で投与される。いくつかの態様において、MICA/B抗体の1回または複数回の投与は、毎月投与される。いくつかの態様において、MICA/B抗体の1回または複数回の投与は、3ヶ月ごとに投与される。いくつかの態様において、MICA/B抗体の1回または複数回の投与は、6ヶ月ごとに投与される。いくつかの態様において、MICA/B抗体の1回または複数回の投与は、毎年投与される。
【００５８】
薬学的組成物
本明細書において開示されるMICA/B抗体と薬学的に許容される担体または賦形剤とを含む薬学的組成物も本明細書において開示される。
【００５９】
いくつかの態様において、本明細書において開示される組成物で用いるための賦形剤は、マレイン酸、酒石酸、乳酸、クエン酸、酢酸、重炭酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、ヒスチジン、グリシン、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化亜鉛、水、デキストロース、N-メチルピロリドン、ジメチルスルホキシド、N,N-ジメチルアセトアミド、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、および界面活性剤ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートを含む。
【００６０】
いくつかの態様において、組成物は追加の治療剤をさらに含む。いくつかの態様において、治療剤は化学療法剤である。化学療法剤は、とりわけ、細胞毒性剤、代謝拮抗剤(例えば、葉酸拮抗薬、プリン類似体、ピリミジン類似体など)、トポイソメラーゼ阻害剤(例えば、カンプトテシン誘導体、アントラセンジオン、アントラサイクリン、エピポドフィロトキシン、キノリンアルカロイドなど)、抗微小管剤(例えば、タキサン、ビンカアルカロイド)、タンパク質合成阻害剤(例えば、セファロタキシン、カンプトテシン誘導体、キノリンアルカロイド)、アルキル化剤(例えば、スルホン酸アルキル、エチレンイミン、ナイトロジェンマスタード、ニトロソウレア、白金誘導体、トリアゼンなど)、アルカロイド、テルペノイド、およびキナーゼ阻害剤を含むことができる。
【００６１】
いくつかの態様において、抗体および治療剤は同じ製剤中にある。いくつかの態様において、抗体および治療剤は異なる製剤中にある。いくつかの態様において、本明細書において記述される抗体は、他の治療剤の投与前に用いられる。いくつかの態様において、本明細書において記述される抗体は、他の治療剤の投与と同時に用いられる。いくつかの態様において、本明細書において記述される抗体は、他の治療剤の投与後に用いられる。
【００６２】
いくつかの態様において、薬学的製剤は、特定の局所、局部または全身の投与または送達経路に適合するように作製される。したがって、薬学的製剤は、特定の経路による投与に適した担体、希釈剤、または賦形剤を含む。本明細書における組成物の投与経路の特定の非限定的な例は、非経口、例えば、静脈内、動脈内、皮内、筋肉内、皮下、胸膜内、経皮(局所)、経粘膜、頭蓋内、脊髄内、眼内、直腸、経口(栄養)、粘膜投与、および処置方法または投与プロトコルに適した任意の他の製剤である。
【００６３】
いくつかの態様において、非経口適用に用いられる溶液または懸濁液は、以下を含む: 注射用水、生理食塩水溶液、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒のような無菌希釈剤; ベンジルアルコールまたはメチルパラベンのような抗菌剤; アスコルビン酸や重硫酸ナトリウムのような抗酸化物質; エチレンジアミン四酢酸のようなキレート剤; 酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩のような緩衝液; および塩化ナトリウムまたはデキストロースのような等張調整用の作用物質。いくつかの態様において、pHは、塩酸または水酸化ナトリウムのような、酸または塩基で調整される。
【００６４】
注射用の薬学的製剤は、無菌の水溶液(水溶性の場合)または分散液および無菌の注射可能な溶液または分散液の即時調製用の無菌粉末を含む。静脈内投与の場合、適当な担体は、生理食塩水、静菌水、Cremophor EL (商標) (BASF, Parsippany, N.J.)、またはリン酸緩衝生理食塩水(PBS)を含む。いくつかの態様において、担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール(例えば、グリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコールなど)、またはそれらの適当な混合物を含有する溶媒または分散媒である。流動性は、いくつかの態様において、例えば、レシチンのようなコーティングの使用により、分散液の場合には必要な粒子サイズの維持により、および界面活性剤の使用により維持される。抗菌剤および抗真菌剤は、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、およびチメロサールを含む。等張剤、例えば、糖; マンニトールもしくはソルビトールのような多価アルコール; または塩化ナトリウムは、いくつかの態様において、組成物に含まれる。場合によっては、吸収を遅延させる作用物質も含まれ、いくつかの態様において、例えば、モノステアリン酸アルミニウムまたはゼラチンは、注射可能な組成物の吸収を引き延ばす。
【００６５】
いくつかの態様において、無菌の注射可能な製剤は、上記の成分の1つまたは組み合わせとともに適切な溶媒中に必要量の活性組成物を組み込むことによって調製される。一般に、分散液は、活性組成物を、基本的な分散媒および任意の他の成分を含有する無菌ビヒクルに組み込むことによって調製される。無菌の注射可能な溶液の調製のための無菌粉末の場合、調製の方法は、例えば、その事前に調製された溶液から活性成分と任意の追加の所望の成分の粉末を生じる真空乾燥および凍結乾燥を含む。
【００６６】
経粘膜投与または経皮投与の場合、浸透すべき障壁に適した浸透剤が製剤に用いられる。そのような浸透剤は当技術分野において公知であり、例えば、経粘膜投与のために、界面活性剤、胆汁酸塩、およびフシジン酸誘導体を含む。いくつかの態様において、経粘膜投与は、鼻スプレイ、吸入装置(例えば、吸引器)または坐剤の使用を通じて達成される。経皮投与の場合、活性化合物は軟膏、膏薬、ゲル、クリームまたはパッチ中に製剤化される。
【００６７】
いくつかの態様において、薬学的製剤は、徐放性製剤またはモノステアリン酸グリセリルもしくはステアリン酸グリセリルなどの時間遅延物質のような、身体からの急速な排出を防ぐ担体とともに調製される。いくつかの態様において、製剤はまた、インプラントおよびマイクロカプセル化送達システムなどの製造品を用いて送達され、局所的、局部的もしくは全身的送達または制御放出もしくは持続放出を達成する。
【実施例】
【００６８】
以下の実施例は、本発明のさまざまな態様を例示する目的で与えられ、いかなる方法でも本発明を限定することを意味しない。本実施例は、本明細書において記述される方法とともに、現下、好ましい態様を代表し、例示的であって、本発明の範囲に対する限定と意図されるものではない。特許請求の範囲によって定義される本発明の趣旨のなかに包含されるその中の変更および他の使用が、当業者には想到されるであろう。
【００６９】
実施例1: MICA/Bモノクローナル抗体の産生およびスクリーニング
抗体は当技術分野、例えば、参照により本明細書に組み入れられるKohler and Milstein, 1975, Nature 256(5517):495-7; Coligan et al., 前記, sections 2.5.1-2.6.7; Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons, Inc. (1992); およびAntibodies: A Laboratory Manual, Harlow and Lane, eds., Cold Spring Harbor Press, New York (1988); Monoclonal Antibodies: Methods and Protocols in Methods Mol Biol., Vol. 378, Albitar M., ed., Humana Press (2007)において公知の従来の技法を用いて調製される。モノクローナル抗体は、免疫原の投与と、それに続いて抗体を作るB細胞の分離によりマウスにおいて産生される。B細胞を次に、同じB細胞種の別の、安定した細胞型との融合により不死化して、ハイブリドーマを作る。ハイブリドーマクローンを、抗原(MICA/B)に結合する能力についてELISAを用いスクリーニングする。個々のB細胞は、その一次アミノ酸配列およびその基礎となる遺伝子配列によって定義される1つの特異的抗体(すなわち、クローン的に単一特異性である)を作る。MICA/Bへの特異的結合を示すモノクローナル抗体は、プロテインAセファロースを用いた親和性クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、およびイオン交換クロマトグラフィーのような従来の方法論を用いて、ハイブリドーマ培養物から分離および精製される(例えば、Coligan, et al., 前記, sections 2.7.1-2.7.12およびsections 2.9.1-2.9.3; Barnes, et al., Purification of Immunoglobulin G (IgG), in Methods Mol. Biol., Vol. 10, pages 79-104, Humana Press (1992)を参照のこと)。
【００７０】
実施例2: PDI-1抗体結合反応速度測定
親和性の動態は、ForteBio Octet Red96分析機にて決定された。簡単に述べると、PDI-1 (30 μg/ml)は、PBS + 0.1% BSA + 0.02% Tween-20 (pH 7.2)のアッセイ緩衝液中で室温にてDip and Read(商標) Anti-mouse IgG Fc Capture (AMC) Biosensors (ForteBio)に捕捉された。センサーをアッセイ緩衝液中で洗浄し、その後、アッセイ緩衝液中5分間2倍希釈系列で、それぞれ、精製された6xHis-MICA＊08および6xHis-MICA＊01タンパク質(100 nM)とともにインキュベートして、抗体とタンパク質抗原との結合反応速度を決定した。センサーを次に、アッセイ緩衝液中で10分間インキュベートして、解離反応速度を決定した。結果として得られる反応速度パラメータは、ForteBio分析スイート8.0で1:1モデルを用い計算された。これらのアッセイ法の結果を図1に示す。
【００７１】
実施例3: MICA/B対立遺伝子へのPDI-1抗体の結合
組み換えMICA＊01、MICA＊02、MICA＊04、MICA＊08、MICA＊09、およびMICBタンパク質を50 mM炭酸ナトリウム緩衝液, pH 9.6中で1 μg/mlに希釈し、高結合性96ウェルマイクロプレート(Corning #9018)に、1ウェルあたり100 ul中100 ngでコーティングした。以下のmorningのコーティングされたELISAプレートをTBS-Tween-20, pH 7.4で3回洗浄し、その後、SuperBlock T20ブロッキング緩衝液(Blocking Buffer) (Pierce #37536)中でブロッキングした。ブロッキング後、ELISAプレートをTBS-Tで1回洗浄し、連続希釈したPDI-1抗体(0〜1 μg/ml)とともに室温でおよそ2時間インキュベートした。インキュベーション後、ELISAプレートをTBS-Tで3回洗浄し、その後、ヤギ抗マウスIgG (H+L)-HRPコンジュゲート(ThermoFisher Scientific #626520)とともに振とう(およそ400 rpm)しながら室温で45分間インキュベートした。インキュベーション後、ELISAプレートをTBS-Tで3回洗浄し、発色が十分になるまで、1ウェルあたり100 ulのSuper Sensitive Liquid Substrate TMB (Sigma #T4444)とともにインキュベートした。1ウェルあたり100 ulの1 N硫酸で反応を停止した。マイクロプレートリーダーを用い450 nmで光学密度(OD)値を測定した。このアッセイ法の結果を図2に示す。
【００７２】
実施例4: 細胞表面MICAへのPDI-1抗体の結合
マウス前立腺腺癌TRAMP-C2細胞(TC2) (ATCC, Manassas, VA)を用いて、MICA＊04対立遺伝子を発現する安定細胞株(TC2-MICA-04)を作製した。PDI-1のTC2-MICA-04への結合をフローサイトメトリーによって分析した。簡単に述べると、細胞を最初にLIVE/DEAD Near IR Stain (Thermo)で4℃にて30分間染色し、その後、FACS緩衝液(1×PBS中1 mM EDTA, 25 mM HEPES, 2% FBS)での遠心分離により1回洗浄した。約2〜3×105個のTC2-MICA-04細胞を、PDI-1抗体500 ngを含有するFACS緩衝液100 μlとともに4℃で30分間インキュベートした後に、2 μg/ml PE結合ヤギ抗マウスIgG (Biolegend, San Diego, CA)二次Ab 100 μlとの4℃で30分間のインキュベーションを行った。次に細胞を1回洗浄し、FACS分析用のFACS緩衝液で細胞ペレットを再懸濁し、生細胞をゲーティングした。親TC2細胞と比較してTC2-MICA-04細胞で有意に高いPE蛍光シグナルが観察され、表面に発現したMICAへのPDI-1の結合が示された。このアッセイ法の結果を図3に示す。
【００７３】
実施例5: PDI-1抗体はPLC/PRF/5細胞からのMICAシェディングを阻害する
4×104個のPLC/PRF/5細胞(肝細胞癌) (ATCC, Manassas, VA)を96ウェルプレートにプレーティングし、37℃で終夜インキュベートした。細胞を次に、それぞれ、PDI-1および陰性対照抗体を含有する完全培地(MEM + 10% FBS, Thermo, Grand Island, NY) 100 μlで処理し、37℃でさらに1日インキュベートした。シェディングしたMICAを含有する細胞上清を用いて、ELISAにより可溶性MICAのレベルを決定した。簡単に述べると、96ウェルプレートを、2 μg/mlの捕捉Abである抗ヒトMICA/MICB, クローン6D4 (Biolegend, San Diego, CA) 100 μlで4℃にて終夜コーティングした。プレートをブロッキングし、その後、細胞上清およびMICA標準物質とともに2時間インキュベートした。インキュベーション後、プレートを洗浄し、続いてビオチンと結合した500 ng/mlの検出Ab (抗ヒト-MICA mAb, クローン159227, R&D Systems, Minneapolis, MN) 100 μlとの1時間のインキュベーションを行った。次に、HRP結合ストレプトアビジン(HRP-SA) (R&D Systems, Minneapolis, MN) 100 μlをウェルに加え、30分間インキュベートした。TMBで4分間サンプルを発色させ、1 N硫酸で停止させ、450 nmの吸光度で検出した。可溶性MICAレベルを標準曲線から補間した。このアッセイ法の結果を図4に示す。
【００７４】
実施例6: PDI-1抗体は、PLC/PRF/5細胞に対するNK-92細胞媒介性細胞毒性を増強する
PLC/PRF/5 (標的)細胞を、10% FBSを有するRPMI-1640に懸濁し、96ウェル平底プレート(Costar)中に細胞6000個/ウェルでプレーティングした。次に、細胞をPDI-1抗体(10 μg/ml)とともに24時間インキュベートした後、カルセインAM (1 μM)で3時間、37℃, 5% CO2にて標識した。ウェルを洗浄し、10% FBSを有するRPMI-1640に懸濁したNK-92細胞(エフェクタ)を次に、示されるようにエフェクタ 対 標的(E:T)比でウェルに加え、標的細胞とともに4時間共培養した。培養の最後に、上清を除去し、PBSと交換し、VICTORマルチラベルプレートリーダー(Perkin Elmer)を用いてカルセインAMシグナルを測定した。アイソタイプが適合する非反応性免疫グロブリン(R&D)抗体を対照として用いた。このアッセイ法の結果を図5に示す。
【００７５】
実施例7: 可溶性MICAサンドイッチELISA
96ウェルの高結合性プレート(Costar #9018)を100 μlの容量にて炭酸ナトリウム緩衝液(50 mM pH 9.6)中200 ng/ウェルの抗MICA捕捉抗体により4℃で終夜コーティングし、その後、SuperBlock T20 (Pierce #37536)でブロッキングし、TBS-Tで洗浄した。次に、SuperBlock T20中で1:3に希釈されたヒト肝がん異種移植モデル由来血清サンプルまたは組み換えMICA＊08標準物質をプレートに加え、RTで2時間インキュベートした。2時間のインキュベーション後、プレートをTBS-Tで3回洗浄し、その後、SuperBlock T20中で1 μg/mlに希釈されたビオチン化PDI-1検出抗体とともにインキュベートした。1時間のインキュベーション後、プレートをTBS-Tで3回洗浄し、その後、1ウェルあたり100 μlの、SuperBlock T20中1/5000希釈のストレプトアビジン-HRPコンジュゲート(Invitrogen #SNN2004)とともに45分間インキュベートした。45分のインキュベーション後、プレートをTBS-Tで3回洗浄した。次に、1ウェルあたり100 μlの、ELISA用のSupersensitive Liquid Substrate TMB (Sigma T4444)を加え、発色させた。1ウェルあたり100 μlの1 N H2SO4を加えることにより反応を停止させた。アウトプットは、450 nmで決定されたO.D.により測定された。このアッセイ法の結果を図6に示す。
【００７６】
本発明の好ましい態様を本明細書において示し記述してきたが、そのような態様は例としてのみ提供されていることが当業者には明らかであろう。本発明から逸脱することなく、多数の変形、変更、および置換が、当業者には想到されるであろう。本明細書において記述される態様のさまざまな代替が採用されてもよいことが理解されるべきである。以下の特許請求の範囲が本発明の範囲を定義すること、ならびにこれらの特許請求の範囲内の方法かつ構造およびそれらの均等物がそれによって網羅されることが意図される。
【図１】
2021511387.tif 000005
【図２】
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【図３】
2021511387.tif 000007
【図４】
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【図５】
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【図６】
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【手続補正書】
【提出日】令和2年9月24日(2020.9.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2021511387000001.app
【国際調査報告】
2021511387.tif 000011
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