(57)【要約】  本発明は、ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ；４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）および４’，６，７−トリメトキシイソフラボンを含む創傷治療または皮膚活性用薬学的組成物に関する。【選択図】図８
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）を含む創傷治療用薬学的組成物。
【請求項２】
前記ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）の重量比は、３２０．５：１．４３：１〜１６０２：１．４３：１である、請求項１に記載の創傷治療用薬学的組成物。
【請求項３】
前記ベータグルカンは、０．１重量％〜５．０重量％である、請求項１に記載の創傷治療用薬学的組成物。
【請求項４】
前記グリシチンは、０．００２２３重量％〜０．０２２３重量％である、請求項１に記載の創傷治療用薬学的組成物。
【請求項５】
前記ＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）は、０．００１５３重量％〜０．０１５６重量％である、請求項１に記載の創傷治療用薬学的組成物。
【請求項６】
ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）を含む創傷治療用皮膚外用剤組成物。
【請求項７】
前記皮膚外用剤組成物は、軟膏、チューブ、パッチ、ゲルおよび噴霧剤よりなる群から選ばれるいずれか一つに剤形化される、請求項６に記載の創傷治療用皮膚外用剤組成物。
【請求項８】
前記薬学的組成物にＣＭＣ（Ｃａｒｂｏｘｙ  Ｍｅｔｈｙｌ  Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）をさらに含む、請求項１〜５のいずれかに記載の創傷治療用薬学的組成物。
【請求項９】
前記薬学的組成物にポリビニルアルコール（Ｐｏｌｙ  ｖｉｎｙｌ  ａｌｃｏｈｏｌ）をさらに含む、請求項１〜５のいずれかに記載の創傷治療用薬学的組成物。
【請求項１０】
前記創傷は、火傷、潰瘍、外傷、外科的手術（ｐｏｓｔ−ｓｕｒｇｉｃａｌ）、出産、慢性的な傷（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｗｏｕｎｄ）または皮膚炎（ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ）による損傷である、請求項９に記載の創傷治療用薬学的組成物。
【請求項１１】
ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ；４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）を含む創傷改善用化粧料組成物。
【請求項１２】
前記化粧料組成物は、柔軟化粧水、収れん化粧水、栄養化粧水、栄養クリーム、マッサージクリーム、エッセンス、アイクリーム、アイエッセンス、クレンジングクリーム、クレンジングフォーム、クレンジングウォーター、パック、パウダー、ボディローション、ボディクリーム、ボディオイル、ボディエッセンス、メイクアップベース、ファンデーション、染毛剤、シャンプー、リンス、ボディ洗浄剤、歯磨き粉および口腔清浄液よりなる群から選ばれるいずれか一つに剤形化される、請求項１１に記載の創傷改善用化粧料組成物。
【請求項１３】
ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ；４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）をこれを必要とする個体に薬学的に有効な量で投与する段階を含む創傷治療方法。
【請求項１４】
ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ；４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）を創傷治療用組成物に使用するための用途。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１８年０６月２２日に出願された韓国特許出願第１０−２０１８−００７２３０６号を優先権として主張し、前記明細書の全体は、本出願の参考文献である。
【０００２】
本発明は、ベータグルカン、グリシチンおよび４’，６，７−トリメトキシイソフラボンを含む創傷治療または皮膚活性用薬学的組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
皮膚とは、人体を外部刺激から保護し、水分の損失を防ぎ、体温調節、細菌侵入防止など重要な生命保護機能を行う臓器の一つであって、皮膚が火傷や各種外傷により欠損が生じると、その保護作用が喪失して機能の障害を招くことになり、水分損失などによる様々な副作用と外部からの細菌感染などを起こして、患部の治療を難しくしたり、二次的な機能障害または損傷などのようなさらなる副作用を招くことになって、ひどい場合には、生命延長にも影響を与えることになる。したがって、傷の治療を迅速に行い、二次的な各種副作用を最小化するためには、適切なドレッシングを用いた傷の治療が必須である。
【０００４】
創傷は、外部の圧力により組織の連続性が破壊されたり、一部の領域に欠損が生じる状態である。単純外傷などの軽度の創傷は、自己修復機能による再生が可能であるが、重症火傷や複合創傷、床擦れ、外科的手術による創傷などの難治性創傷は、完全な修復が困難である。難治性創傷や広範囲な創傷は、組織本来の機能実行に欠陥を残すことができるので、創傷の部位を迅速に治療し、二次的な各種副作用を最小化するための治療が必須である。創傷は、乾燥した状態より湿潤状態を維持する場合、治癒速度が２倍程度速いことが知られている。従来、湿潤状態を維持するために、生理学的溶液や消毒剤を含有する溶液で濡らしたガーゼでドレッシングする方法が用いられた。しかしながら、これは、ドレッシングの交換周期が短くなければならないので、管理が煩雑であり、創傷部位だけでなく、周辺部も、生理学的溶液や消毒剤によりぬれた状態が維持されて、皮膚のただれを誘発する問題があった。近年、ハイドロゲルやハイドロコロイドのような創傷被覆材を使用して患部を保護すると共に、体内からの水分漏出を防止し、滲出液を吸収して湿潤環境を維持するようにする方法が多く用いられている。
【０００５】
ベータグルカンは、グルコースからなる高分子物質であって、多様な由来から得られ、特に酵母の細胞壁から得られる酵母由来のベータグルカンは、皮膚に作用して新陳代謝および生体リズムを調節すると共に、免疫体系に活性をあたえる皮膚保護機能を持っている生体活性物質の一つとして広く知られており、創傷の治療に広く用いられている（韓国特許特許第１０−１１０９１４６号）。グリシチン（Ｇｌｙｃｉｔｉｎ；４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）は、線維芽細胞でコラーゲンの合成を増加させ、エラスチナーゼ（ｅｌａｓｔｉｎａｓｅ）の活性を阻害し、過酸化水素から誘導される細胞の老化を顕著に阻害させる効果がある。また、植物から抽出した天然単一物質であるＴＭＦ（４’，６，７−ｔｒｉｍｅｔｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）とグリシチン（４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）は、皮膚真皮層の増殖とコラーゲン合成を促進させて、シワの改善に効果が卓越である。しかしながら、前記三つの物質を特定の割合で混合して、創傷の治療において、相乗効果があるかについては、まだ研究されたことがない。
【０００６】
これより、研究者らは、ベータグルカン、グリシチンおよびＴＭＦ（４’，６，７−ｔｒｉｍｅｔｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）を特定の割合で混合して処理する場合、前記三つの物質を単独処理する場合より、創傷治療の効果がさらに大きいという事実を確認し、本発明を完成した。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明において解決しようとする課題は、ベータグルカン、グリシチンおよびＴＭＦ（４’，６，７−ｔｒｉｍｅｔｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）を含む創傷治療または皮膚活性用薬学的組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ；４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）を含む創傷治療用薬学的組成物を提供する。
【０００９】
本発明は、ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ；４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）を含む創傷治療用皮膚外用剤組成物を提供する。
【００１０】
また、本発明は、前記薬学的組成物にＣＭＣ（Ｃａｒｂｏｘｙ  Ｍｅｔｈｙｌ  Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）をさらに含む創傷治療用薬学的組成物を提供する。
【００１１】
本発明は、前記薬学的組成物にポリビニルアルコール（Ｐｏｌｙ  ｖｉｎｙｌ  ａｌｃｏｈｏｌ）をさらに含む創傷治療用薬学的組成物を提供する。
【００１２】
本発明は、ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ；４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）を含む創傷改善用化粧料組成物を提供する。
【００１３】
本発明の他の目的は、ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ；４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）をこれを必要とする個体に薬学的に有効な量で投与する段階を含む創傷治療方法を提供することにある。
【００１４】
本発明の他の目的は、ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ；４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）を創傷治療用組成物に使用するための用途を提供することにある。
【発明の効果】
【００１５】
本発明の皮膚外用剤は、ベータグルカン、グリシチンおよびＴＭＦを特定の濃度で混合して製造したものであって、前記皮膚外用剤を創傷部位に処理した結果、傷治癒効果が、それぞれの組成物を個別で処理したものよりも優れた効果がある。これを通じて、手術後に回復患者や創傷患者の傷治癒速度を促進し、傷の保護および湿潤環境を提供することができる。ひいては、ＣＭＣまたはポリビニルアルコールをさらに含む皮膚外用剤を開発して、創傷由来の滲出物を吸収する機能を行うハイドロゲルチューブ型皮膚外用剤とハイドロコロイドパッチ型皮膚外用剤を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１は、ベータグルカンの濃度によるヒト角質細胞と線維芽細胞の分化および移動を示す結果である。
【図２】図２は、０．５％ベータグルカンの処理による上皮細胞と線維芽細胞の因子発現効果をウェスタンブロッティング（ｗｅｓｔｅｒｎ  ｂｌｏｔｔｉｎｇ）を通じて確認した結果である。
【図３】図３は、グリシチンとＴＭＦの濃度および混合による上皮細胞と線維芽細胞の分化、移動および成長因子の発現をウェスタンブロッティングを通じて確認した結果である。
【図４】図４は、グリシチンとＴＭＦの配合比による角質細胞の分化と移動を確認した結果である。
【図５】図５は、上皮細胞および線維芽細胞の単独培養および上皮細胞および線維芽細胞の共培養（ｃｏ−ｃｕｌｔｕｒｅ）においてグリシチンおよびＴＭＦの混合液で成長因子の発現をウェスタンブロッティングを通じて確認した結果である。
【図６】図６は、ベータグルカン、ＣＭＣ、ＴＭＦ（４’，６，７−ｔｒｉｍｅｔｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）およびグリシチン（４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）を含む創傷治癒ハイドロゲルの創傷治癒効果を確認した結果である。
【図７】図７は、ベータグルカン、ポリビニルアルコール、ＴＭＦ（４’，６，７−ｔｒｉｍｅｔｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）およびグリシチン（４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）を含むハイドロコロイドパッチにおいて、ポリビニルアルコールの重量によるパッチの膨潤度を確認した結果である。
【図８】図８は、ベータグルカン、ポリビニルアルコール、グリシチン（４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）、ＴＭＦ（４’，６，７−ｔｒｉｍｅｔｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）を含むハイドロコロイドパッチの創傷治癒効果を確認した結果である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
ベータグルカン、グリシチンおよびＴＭＦ（４’，６，７−ｔｒｉｍｅｔｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）を特定の割合で混合して処理する場合、前記三つの物質を単独処理する場合より、創傷治療の効果がさらに大きいという事実を確認し、本発明を完成した。
【００１８】
本発明は、ベータグルカンの効果を示す濃度を実験した結果、０．５％のベータグルカンがヒト角質細胞の分化、移動および浸潤に効果があり、線維芽細胞においても分化に優れた効果を有することを確認した（図１）。前記上皮細胞および線維芽細胞の成長誘導因子の発現も、０．５％のベータグルカンで効果的に増加することを確認した（図２）。本発明者らは、グリシチンとＴＭＦのシナジー効果を確認するために、グリシチンおよびＴＭＦを単独濃度別およびグリシチンおよびＴＭＦを１．４３：１で混合処理した。その結果、上皮細胞と線維芽細胞の成長因子の発現が増加することを確認した（図３）。ひいては、前記グリシチンおよびＴＭＦを１．４３：１、２．８６：１および１．４３：２で割合を異ならしめて混合して上皮細胞に処理した結果、グリシチンとＴＭＦを１．４３：１で混合した場合、上皮細胞の分化と移動が増加したことを確認することができた（図４）。上皮細胞および線維芽細胞を共培養（ｃｏ−ｃｕｌｔｕｒｅ）してグリシチンおよびＴＭＦを１．４３：１で混合液を処理した結果、上皮細胞と線維芽細胞の成長因子の発現を増加させることを確認した。
【００１９】
本発明は、ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ；４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）を含む創傷治療用薬学的組成物を提供する。
【００２０】
前記ベータグルカン（β−ｇｌｕｃａｎ）は、下記化学式１と同じである。
【００２１】
【化１】
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または、
【化２】
2021531244.tif 000004
【００２２】
前記グリシチン（４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）は、下記化学式２と同じである。
【００２３】
【化３】
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【００２４】
前記ＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）は、下記化学式３と同じである。
【００２５】
【化４】
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【００２６】
本発明者らは、ベータグルカン、グリシチンおよびＴＭＦの割合による上皮細胞と線維芽細胞の分化および移動において効果を確認した結果、ベータグルカン０．２５ｗ／ｖ％、グリシチン０．００４４６ｗ／ｖ％およびＴＭＦ０．００３１２ｗ／ｖ％を混合した混合液が、最も効果が優れたことを確認した（表１）。
【００２７】
前記ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）の重量比は、３２０．５：１．４３：１〜１６０２：１．４３：１でありうる。
【００２８】
前記薬学的組成物は、ベータグルカンを０．１ｗ／ｖ％〜５．０ｗ／ｖ％で含むことができ、好ましくは０．１ｗ／ｖ％〜０．５ｗ／ｖ％であり得、最も好ましくは０．２５重量％でありうる。
【００２９】
前記薬学的組成物は、グリシチンを０．００２２３ｗ／ｖ％〜０．０２２３ｗ／ｖ％の濃度で含むことができ、好ましくは０．００２２３ｗ／ｖ％〜０．００４４６ｗ／ｖ％であり得、最も好ましくは０．００４４６ｗ／ｖ％でありうる。
【００３０】
前記薬学的組成物は、ＴＭＦを０．００１５６ｗ／ｖ％〜０．０１５６ｗ／ｖ％の濃度で含むことができ、好ましくは０．００１５６ｗ／ｖ％〜０．００３１２ｗ／ｖ％であり得、最も好ましくは０．００３１２ｗ／ｖ％でありうる。
【００３１】
前記グリシチンおよびＴＭＦは、１．４３：２〜２．８６：１であり得、好ましくは１．４３：１でありうる。
【００３２】
ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）を含む創傷治療用皮膚外用剤組成物を提供する。
【００３３】
本発明による皮膚外用剤組成物は、化粧品学または皮膚科学的に許容可能な媒質または基剤を含有して剤形化され得る。これは、局所適用に適合したすべての剤形であって、例えば、前記皮膚外用剤組成物は、柔軟化粧水、収れん化粧水、栄養化粧水、栄養クリーム、マッサージクリーム、エッセンス、アイクリーム、アイエッセンス、クレンジングクリーム、クレンジングフォーム、クレンジングウォーター、パック、パウダー、ボディローション、ボディクリーム、ボディオイルおよびボディエッセンス、メイクアップベース、ファンデーション、染毛剤、シャンプー、リンス、ボディ洗浄剤、歯磨き粉、口腔清浄液、軟膏、チューブ、パッチおよび噴霧剤よりなる群から選ばれるいずれか一つに剤形化され得る。これらの組成物は、当該分野における通常の方法により製造され得る。
【００３４】
また、本発明による組成物は、脂肪物質、有機溶媒、溶解剤、濃縮剤、ゲル化剤、軟化剤、抗酸化剤、懸濁化剤、安定化剤、発泡剤（ｆｏａｍｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、芳香剤、界面活性剤、水、イオン型または非イオン型乳化剤、充填剤、金属イオン封鎖剤、キレート化剤、保存剤、ビタミン、遮断剤、湿潤化剤、必須オイル、染料、顔料、親水性または親油性活性剤、脂質小胞または化粧品に通常用いられる任意の他の成分のような化粧品学または皮膚科学分野において通常用いられる補助剤を含有することができる。前記補助剤は、化粧品学または皮膚科学分野において一般的に用いられる量で導入される。
【００３５】
本発明は、前述した皮膚外用剤組成物にカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ；Ｃａｒｂｏｘｙ  Ｍｅｔｈｙｌ  Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）をさらに含む皮膚外用剤組成物を提供する。
【００３６】
本発明者らは、傷の保護および湿潤環境を提供して、創傷由来の滲出物を吸収する機能を行うハイドロゲルチューブ型皮膚外用剤を研究した。前述した皮膚外用剤組成物にポリビニルアルコール（Ｐｏｌｙ  ｖｉｎｙｌ  ａｌｃｏｈｏｌ）をさらに含む皮膚外用剤組成物を提供する。０．２５％ベータグルカン溶液にＣＭＣ（Ｓｏｄｉｕｍ  ｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ，Ｍｗ．〜２５０，０００）４重量％を入れ、６０℃で撹拌して混合させた後、ＴＭＦ（４’，６，７−ｔｒｉｍｅｔｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）とグリシチン（４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）をそれぞれ０．００３１２ｗ／ｖ％と０．００４４６ｗ／ｖ％の濃度で添加して、前記混合水溶液を型枠に入れて、創傷治癒ハイドロゲルを製造した。前記ハイドロゲルを製造するにあたって、ＣＭＣの重量％に応じて粘度を測定した結果、４重量％ＣＭＣを含むハイドロゲルの粘度が適当であると判断した。前記製造されたハイドロゲルチューブ型にて創傷治癒効果を確認した。実験群当たり５匹のＩＣＲマウスを分配し、背中に５ｍｍの生検パンチ（ｂｉｏｐｓｙ  ｐｕｎｃｈ）で傷つけた後、創傷被覆材２種と非処理群（ｃｏｎｔｒｏｌ）、生理食塩水処理群に区分して、１４日間傷の変化を確認した結果、傷の回復速度と組織検査を通じて効能を評価し、ベータグルカン、グリシチンおよびＴＭＦを有効成分として含有するＣＭＣ組成物が最も優れた効果を示した。
【００３７】
前記ＣＭＣは、全体組成物の重量部に対して０ｗ／ｖ％〜８ｗ／ｖ％であり得、好ましくは２ｗ／ｖ％〜６ｗ／ｖ％であり得、より好ましくは４ｗ／ｖ％でありうる。
【００３８】
前記組成物は、柔軟化粧水、収れん化粧水、栄養化粧水、栄養クリーム、マッサージクリーム、エッセンス、アイクリーム、アイエッセンス、クレンジングクリーム、クレンジングフォーム、クレンジングウォーター、パック、パウダー、ボディローション、ボディクリーム、ボディオイルおよびボディエッセンス、メイクアップベース、ファンデーション、染毛剤、シャンプー、リンス、ボディ洗浄剤、歯磨き粉、口腔清浄液、軟膏、チューブ、パッチ、ゲルおよび噴霧剤よりなる群から選ばれるいずれか一つに剤形化され得、最も好ましくはゲル型に剤形化され得る。
【００３９】
本発明の発明者らは、傷の保護および湿潤環境を提供して、創傷由来の滲出物を吸収する機能を行うハイドロゲルチューブ型皮膚外用剤を開発した。ひいては、前記皮膚外用剤組成物にポリビニルアルコールを含むパッチ型皮膚外用剤組成物を研究した。精製水にポリビニルアルコール（ＰＶＡ，Ｍｗ．８５，０００〜１２４，０００）５、７、１０重量％を入れ、８０℃で撹拌して混合させた。前記混合液を直径１２０ｍｍのポリスチレン皿に成形した後、−８０℃で凍結し、常温で解凍させた。この過程を２回繰り返してポリビニルアルコールの物理的架橋をさせて物性を評価し、ハイドロコロイド型パッチを製造した。以後、ハイドロコロイド表面に０．２５％のベータグルカン溶液にＴＭＦとグリシチンをそれぞれ０．００３１２ｗ／ｖ％と０．００４４６ｗ／ｖ％の濃度で添加した溶液を塗布して、創傷治癒ハイドロコロイドを製造した。ポリビニルアルコールオールの重量％による膨潤度を測定した結果、７％重量のハイドロコロイドが創傷皮膚の滲出物の吸収にさらに容易なものと判断された。前記製造したハイドロコロイドパッチ型創傷被覆材の創傷治癒効能を比較実験した。各実験群当たり５匹のＩＣＲマウスを分配し、背中に５ｍｍの生検パンチで傷つけた後、製造した創傷被覆材パッチと非処理群（ｃｏｎｔｒｏｌ）、生理食塩水ガーゼ処理群、一般バンド処理群に区分して、１４日間傷の変化を確認した。傷の回復速度を通じて効能を評価し、ベータグルカン、グリシチンおよびＴＭＦを有効成分として含有するＰＶＡパッチ（ｐａｔｃｈ）組成物が最も優れた効果を示すことを確認した。
【００４０】
前記ポリビニルアルコールは、全体組成物の重量部に対して５ｗ／ｖ％〜１０ｗ／ｖ％であり得、好ましくは６ｗ／ｖ％〜８ｗ／ｖ％であり得、より好ましくは７ｗ／ｖ％でありうる。
【００４１】
前記組成物は、柔軟化粧水、収れん化粧水、栄養化粧水、栄養クリーム、マッサージクリーム、エッセンス、アイクリーム、アイエッセンス、クレンジングクリーム、クレンジングフォーム、クレンジングウォーター、パック、パウダー、ボディローション、ボディクリーム、ボディオイルおよびボディエッセンス、メイクアップベース、ファンデーション、染毛剤、シャンプー、リンス、ボディ洗浄剤、歯磨き粉、口腔清浄液、軟膏、チューブ、パッチ、ゲルおよび噴霧剤よりなる群から選ばれるいずれか一つに剤形化され得、最も好ましくはパッチ型に剤形化され得る。
【００４２】
前記創傷は、火傷、潰瘍、外傷、外科的手術（ｐｏｓｔ−ｓｕｒｇｉｃａｌ）、出産、慢性的な傷（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｗｏｕｎｄ）または皮膚炎（ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ）による損傷であり得、最も好ましくは創傷でありうる。
【００４３】
ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ；４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）を含む創傷改善用化粧料組成物を提供する。
【００４４】
本発明の他の目的は、ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ；４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）をこれを必要とする個体に薬学的に有効な量で投与する段階を含む創傷治療方法を提供することにある。
【００４５】
本発明において「個体」とは、疾患の治療を必要とする対象を意味し、より具体的には、ヒトを含む猿、牛、馬、羊、豚、鶏、七面鳥、ウズラ、猫、犬、マウス、ラット、ウサギまたはギニアピッグを含むすべての動物を意味し、本発明の薬学的組成物を個体に投与することによって、前記疾患を効果的に予防または治療することができる。本発明の薬学的組成物は、従来の治療剤と並行して投与され得る。
【００４６】
本発明の他の目的は、ベータグルカン、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ；４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ−７−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）およびＴＭＦ（４’，６，７−Ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ）を創傷治療用組成物に使用するための用途を提供することにある。
【００４７】
前記化粧料組成物は、柔軟化粧水、収れん化粧水、栄養化粧水、栄養クリーム、マッサージクリーム、エッセンス、アイクリーム、アイエッセンス、クレンジングクリーム、クレンジングフォーム、クレンジングウォーター、パック、パウダー、ボディローション、ボディクリーム、ボディオイル、ボディエッセンス、メイクアップベース、ファンデーション、染毛剤、シャンプー、リンス、ボディ洗浄剤、歯磨き粉および口腔清浄液よりなる群から選ばれるいずれか一つに剤形化され得る。
【００４８】
以下、本発明の理解を助けるために好適な実施例を提示する。しかしながら、下記の実施例は、本発明をより容易に理解するために適用されるものに過ぎず、実施例により本発明の内容が限定されるものではない。
【００４９】
［実験例１．上皮細胞および線維芽細胞においてベータグルカンの効果］
ベータグルカンの単独処理による上皮細胞であるヒト角質細胞の分化、移動および浸潤効果を確認し、線維芽細胞では分化を確認した。ベータグルカンは、Ｑｕｅｇｅｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ社で自体生産して使用した。ヒト皮膚線維芽細胞およびヒト角質細胞は、韓国細胞株銀行から購入して使用した。ヒト皮膚線維芽細胞（Ｈｕｍａｎ  ｄｅｒｍａｌ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ，ＨＤＦ）とヒト角質細胞（Ｈｕｍａｎ  Ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ  ｃｅｌｌ，ＨａＣａＴ）をそれぞれ１０％ＦＢＳを含む１２ｍｌのＤＭＥＭ培地が入っている６ウェルプレートに１×１０４ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌ（ＨＤＦ）と５×１０４ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌ（ＨａＣａＴ）の濃度で接種し、３７℃、５％ＣＯ２条件下に培養した。培養時に、ベータグルカンの濃度を０〜１０％まで濃度依存的に上皮細胞（ＨａＣａＴ）と線維芽細胞（Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ）にそれぞれ２００μｌずつ処理した。濃度別に上皮細胞の分化、移動、浸潤を確認して、０．５％のベータグルカンで最上の結果を確認し、線維芽細胞分化の場合、有意的な変化が観察されなかった（図１）。また、０．５％ベータグルカン溶液を処理した上皮細胞と線維芽細胞において多様な成長因子およびタンパク質の発現をウェスタンブロットを通じて確認した結果、上皮細胞において有意的変化が確認された（図２）。
【００５０】
［実験例２．線維芽細胞においてグリシチンおよびＴＭＦの効果］
グリシチンとＴＭＦを用いて上皮細胞と線維芽細胞の分化誘導効果を確認した。グリシチン（１０μＭ（０．００４４６ｗ／ｖ％）および２０μＭ（０．００８９２ｗ／ｖ％））、ＴＭＦ（１０μＭ（０．００３１２ｗ／ｖ％）および２０μＭ（０．００６２４２ｗ／ｖ％））またはグリシチン（１０μＭ（０．００４４６ｗ／ｖ％））およびＴＭＦ（１０μＭ（０．００３１２ｗ／ｖ％））を１：１で混合したものを準備した。ヒト皮膚線維芽細胞（ＨＤＦ）とヒト角質細胞（ＨａＣａＴ）をそれぞれ１０％ＦＢＳを含む１２ｍｌのＤＭＥＭ培地が入っている６ウェルプレートに１×１０４ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌ（ＨＤＦ）と５×１０４ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌ（ＨａＣａＴ）の濃度で接種し、３７℃、５％ＣＯ２条件下に培養した。前記グリシチン、ＴＭＦ、およびグリシチンおよびＴＭＦ混合液を線維芽細胞と上皮細胞に処理した後、培養液での各細胞発現タンパク質の変化をウェスタンブロットを通じて観察した。グリシチンやＴＭＦを単独で使用した場合に比べて二つの物質を１：１で混合して使用する場合、上皮細胞と線維芽細胞の分化が有意的に増加することを確認し、各細胞の分化誘導因子の増加も確認した。傷の治癒効果を高めるために、二つの物質の混用使用が効果的であることを確認した（図３）。  
【００５１】
［実験例３．上皮細胞においてグリシチンとＴＭＦの混合比の効果］
また、グリシチンとＴＭＦの混合比を１．４３：１、２．８６：１、１．４３：２に変化して試料を製造し、ヒト角質細胞（ＨａＣａＴ）を１０％ＦＢＳを含む１２ｍｌのＤＭＥＭ培地が入っている６ウェルプレートに５×１０４ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌ（ＨａＣａＴ）の濃度で接種し、３７℃、５％ＣＯ２条件下に試料を処理した後、２４時間培養して、細胞分化と移動を調べた。グリシチンとＴＭＦを１．４３：１で混合した場合、上皮細胞の分化と移動に優れた効果を示すことを確認した（図４）。グリシチンおよびＴＭＦの混合比を変化して試料を製作し、これを用いてＨａＣａＴ  ５×１０４ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌを１０％ＦＢＳを含む１２ｍｌのＤＭＥＭ培地が入っているＴｒａｎｓｗｅｌｌ  ｉｎｖａｓｉｏｎ  ｋｉｔの上端で３７℃、５％ＣＯ２条件下に２４時間培養した実験群と、Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ  ｉｎｖａｓｉｏｎ  ｋｉｔの上端にＨａＣａＴ  ５×１０４ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌと下端にＨＤＦ  １×１０４ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌ（ＨＤＦ）を接種し、１０％ＦＢＳを含む２４ｍｌのＤＭＥＭ培地と試料を処理した後、３７℃、５％ＣＯ２条件下に２４時間培養して、成長因子の誘導を確認した。グリシチンおよびＴＭＦ混合物が上皮細胞と線維芽細胞の増殖を促進することを確認した（図５）。
【００５２】
［実験例４．ベータグルカン、グリシチンおよびＴＭＦ複合剤形］
ベータグルカンをＡ液として、グリシチン／ＴＭＦ  １．４３：１の混合液をＢ液として、下記の表１のような濃度組成で単独または混合してそれぞれの試験液を製造した。Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ  ｉｎｖａｓｉｏｎ  ｋｉｔの上端にＨａＣａＴ  ５×１０４ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌと、下端にＨＤＦ  １×１０４ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌ（ＨＤＦ）を接種し、１０％ＦＢＳを含む２４ｍｌのＤＭＥＭ培地と実験液３種をそれぞれ処理した後、３７℃、５％ＣＯ２条件下に２４時間培養して、最適な濃度条件を確認した。
【００５３】
【表１】
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【００５４】
製薬複合物の場合、単一物のｏｐｔｉｍａｌ組成条件で配合する場合、傷組織の過大増殖などを防ぎ、恒常性を維持するための組織内メカニズム（ｍｅｃｈａｎｉｓｍ）が作動する。したがって、ｓｕｂ−ｏｐｔｉｍａｌ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎでの最適組成条件を確立しなければならないし、これにより、最適な組成を確認した。特に０．２５％のベータグルカンおよびＴＭＦ  ０．００３１２％（１０μＭ）、グリシチン０．００４４６％（１０μＭ）を混合した組成は、それぞれ個別で使用する場合よりさらに大きい増殖および移動の相乗効果を示した。
【００５５】
［実験例５．ベータグルカン、ＴＭＦおよびグリシチンが含有された創傷治癒ハイドロゲルの粘度の測定］
実験例４で製造したハイドロゲルを１００ｍｌビーカーに満たし、粘度計を用いて粘度を測定する。スピンドル（ｓｐｉｎｄｌｅ）は、６４番で測定し、１２ｒｐｍで進めて、トルク（ｔｏｒｑｕｅ）５３．５％で測定値を確認した。ＣＭＣ含量が０重量％である場合よりも４重量％である場合、ｃＰ値がさらに高く現れ、４重量％のｃＰ値が適当であると判断された（表２）。
【００５６】
【表２】
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【００５７】
［実験例６．ベータグルカン、ＴＭＦおよびグリシチンが含有された創傷治癒ハイドロゲルの創傷治療効果］
実験例４で製造したそれぞれのハイドロゲル創傷被覆材を用いて創傷治癒効能を比較した。各実験群当たり５匹のＩＣＲマウスを分配し、背中に５ｍｍの生検で傷つけた後、創傷被覆材２種と非処理群（ｃｏｎｔｒｏｌ）、生理食塩水処理群に区分して、１４日間傷の変化を確認した。傷の回復速度と組織検査を通じて効能を評価し、ベータグルカン、グリシチンおよびＴＭＦを有効成分として含有するＣＭＣ組成物が最も優れた効果を示すことを確認した（図６）。
【００５８】
［実施例７．ベータグルカン、ＴＭＦおよびグリシチンが含有された創傷治癒ハイドロコロイドパッチの製造］
精製水にポリビニルアルコール（ＰＶＡ，Ｍｗ．８５，０００〜１２４，０００）５、７、１０重量％を入れ、８０℃で撹拌して混合させた。前記混合液を直径１２０ｍｍのポリスチレン皿に成形した後、−８０℃で凍結し、常温で解凍させた。この過程を２回繰り返してポリビニルアルコールの物理的架橋をさせて物性を評価し、ハイドロコロイド型パッチを製造した。以後、ハイドロコロイド表面に０．２５％のベータグルカン溶液にＴＭＦとグリシチンをそれぞれ０．００３１２％（１０μＭ）と０．００４４６％（１０μＭ）の濃度で添加した溶液を塗布して、創傷治癒ハイドロコロイドを製造した。
【００５９】
［実験例８．前記ベータグルカン、ＴＭＦおよびグリシチンが含有された創傷治癒ハイドロコロイドパッチの膨潤度の測定］
前記実施例５で製造したハイドロコロイドを５×５ｃｍのサイズに切って、秤量皿（ｗｅｉｇｈｉｎｇ  ｄｉｓｈ）に載置し、重さ（Ｗ１）を測った。初期重さを測定したハイドロコロイドに３７℃のＰＢＳを吸収力を考慮して添加した。３０分間放置した後、サンプルの重さ（Ｗ２）を測定した。ハイドロコロイドの膨潤度（Ｄｅｇｒｅｅ  ｏｆ  ｓｗｅｌｌｉｎｇ）は、下記数式により計算された。
【００６０】
【数１】
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【００６１】
図８のようにポリビニルアルコールハイドロコロイドの膨潤度は、５重量％であるとき、約４７％であり、７重量％であるとき、約８０％であって、さらに高い膨潤度を示して、７％重量のハイドロコロイドが創傷皮膚の滲出物の吸収にさらに容易なものと判断された（図７）。
【００６２】
［実験例９．前記ベータグルカン、ＴＭＦおよびグリシチンが含有された創傷治癒ハイドロコロイドパッチの創傷治癒効果］
前記製造したハイドロコロイドパッチ型創傷被覆材を用いて創傷治癒効能を比較した。各実験群当たり５匹のＩＣＲマウスを分配し、背中に５ｍｍの生検で傷つけた後、製造した創傷被覆材パッチと非処理群（ｃｏｎｔｒｏｌ）、生理食塩水ガーゼ処理群、一般バンド処理群に区分して、１０日間傷の変化を確認した。傷の回復速度を通じて効能を評価し、ベータグルカン、グリシチンおよびＴＭＦを有効成分として含有するＰＶＡパッチ（ｐａｔｃｈ）組成物が最も優れた効果を示すことを確認した（図８）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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