(57)【要約】  細胞ベースの免疫療法を増強するために有用な方法および組成物が本明細書に記載されている。増強された細胞ベースの免疫療法は、癌および慢性ウイルス感染症を有する個体を処置するために使用することができる。【選択図】図１２Ｂ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）とインビトロで接触させる工程を含む、細胞ベースの免疫療法を増強するための方法であって、ここで、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド）を含む、
方法。
【請求項２】
前記方法はＴ細胞の疲弊を逆転させる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＨＤＡＣｉの濃度は、ヒストンＨ３のアセチル化を増大させるのに十分な量である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
ＨＤＡＣｉの濃度は、約１マイクロモル未満である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
ＨＤＡＣｉの濃度は少なくとも約４００ナノモルである、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
ＨＤＡＣｉは、少なくとも２時間、細胞ベースの免疫療法と接触させられる、請求項１〜５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項７】
ＨＤＡＣｉは、少なくとも１６時間、細胞ベースの免疫療法と接触させられる、請求項１〜５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項８】
前記方法は、細胞ベースの免疫療法をインターロイキン１５と接触させる工程を含む、請求項１〜７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項９】
インターロイキン１５は、約１〜約１００ｎｇ／ｍＬの濃度で細胞ベースの免疫療法と接触させられる、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
インターロイキン１５は、約５〜約２５ｎｇ／ｍＬの濃度で細胞ベースの免疫療法と接触させられる、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
インターロイキン１５は、約１０ｎｇ／ｍＬの濃度で細胞ベースの免疫療法と接触させられる、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
前記方法は、細胞ベースの免疫療法をチェックポイント阻害剤と接触させる工程を含む、請求項１〜１１のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１３】
チェックポイント阻害剤は、ＰＤＬ−１あるいはＰＤ−１を標的とする抗体である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
細胞ベースの免疫療法はＴ細胞集団を含む、請求項１〜１３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１５】
Ｔ細胞集団は、健康な個体に由来する一次Ｔ細胞集団を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
Ｔ細胞集団は、疾患に罹患している個体に由来する一次Ｔ細胞集団を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
Ｔ細胞集団はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をさらに含む、請求項１４〜１６のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１８】
前記方法は、腫瘍関連抗原でＴ細胞集団を刺激する工程をさらに含む、請求項１４〜１６のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１９】
前記方法は、炎症性サイトカインでＴ細胞集団を刺激する工程をさらに含む、請求項１４〜１６のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２０】
Ｔ細胞集団はＣＤ４陽性Ｔ細胞に富んでいる、請求項１４〜１９のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２１】
Ｔ細胞集団はＣＤ８陽性Ｔ細胞に富んでいる、請求項１４〜１９のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２２】
ＦｏｘＰ３発現は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞集団において減少する、請求項１４〜２１のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２３】
インターフェロンγの分泌は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞集団において増加する、請求項１４〜２１のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２４】
ＣＸＣＲ３の細胞表面発現は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞集団において増加する、請求項１４〜２１のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２５】
細胞ベースの療法はＴ細胞株を含む、請求項１〜１３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２６】
Ｔ細胞株はキメラ抗原受容体を含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
ＦｏｘＰ３発現は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞株において減少する、請求項２５または２６に記載の方法。
【請求項２８】
インターフェロンγの分泌は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞株において増加する、請求項２５または２６に記載の方法。
【請求項２９】
ＣＸＣＲ３の細胞表面発現は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞株において増加する、請求項２５または２６に記載の方法。
【請求項３０】
細胞ベースの免疫療法は、ナチュラルキラー細胞株あるいは初代ナチュラルキラー細胞集団を含む、請求項１〜１３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項３１】
ナチュラルキラー細胞株あるいは初代ナチュラルキラー細胞集団は、キメラ抗原受容体を含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
ナチュラルキラー細胞株あるいは初代ナチュラルキラー細胞集団は、高親和性Ｆｃ受容体を含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
インターフェロンγの分泌は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、ナチュラルキラー細胞株あるいは初代ナチュラルキラー細胞集団において増加する、請求項３０〜３２のいずれか１つに記載の方法。
【請求項３４】
疾患に罹患している個体に細胞ベースの免疫療法を施す工程をさらに含む、請求項１〜３３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項３５】
細胞ベースの免疫療法は、疾患に罹患している個体に由来するものである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
疾患は癌である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
癌は、乳癌、子宮頚癌、結腸癌、頭頚部癌、腎癌、肝臓癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、あるいは前立腺癌である、請求項３６記載の方法。
【請求項３８】
癌は白血病あるいはリンパ腫である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３９】
養子細胞免疫療法の方法であって、前記方法は：
ａ）細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）と接触させる工程であって、ここで、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド）を含む、工程と；
ｂ）疾患に罹患している個体に細胞ベースの免疫療法を施す工程と、
を含む、方法。
【請求項４０】
細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させる工程は、インビトロで実施される、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
ＨＤＡＣｉの濃度は、ヒストンＨ３のアセチル化を増大させるのに十分な量である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
ＨＤＡＣｉの濃度は約１マイクロモル未満である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
少なくとも約４００ナノモルである、請求項４１の方法。
【請求項４４】
ＨＤＡＣｉは、少なくとも２時間、細胞ベースの免疫療法と接触させられる、請求項３９〜４３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項４５】
ＨＤＡＣｉは、少なくとも１６時間、細胞ベースの免疫療法と接触させられる、請求項３９〜４３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項４６】
前記方法は、細胞ベースの免疫療法をインターロイキン１５と接触させる工程を含む、請求項３９〜４５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項４７】
インターロイキン１５は、約１〜約１００ｎｇ／ｍＬの濃度で細胞ベースの免疫療法と接触させられる、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
インターロイキン１５は、約５〜約２５ｎｇ／ｍＬの濃度で細胞ベースの免疫療法と接触させられる、請求項４６に記載の方法。
【請求項４９】
インターロイキン１５は、約１０ｎｇ／ｍＬの濃度で細胞ベースの免疫療法と接触させられる、請求項４６に記載の方法。
【請求項５０】
前記方法は、細胞ベースの免疫療法をチェックポイント阻害剤と接触させる工程を含む、請求項３９〜４９のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５１】
チェックポイント阻害剤は、ＰＤＬ−１あるいはＰＤ−１を標的とする抗体である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
細胞ベースの免疫療法はＴ細胞集団を含む、請求項３９〜５１のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５３】
Ｔ細胞集団は、健康な個体に由来する一次Ｔ細胞集団を含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
Ｔ細胞集団は、疾患に罹患している個体に由来する一次Ｔ細胞集団を含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項５５】
Ｔ細胞集団は、前記疾患に罹患している前記個体に由来する一次Ｔ細胞集団を含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項５６】
Ｔ細胞集団はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をさらに含む、請求項５２〜５５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５７】
前記方法は、腫瘍関連抗原でＴ細胞集団を刺激する工程をさらに含む、請求項５２〜５５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５８】
前記方法は、炎症性サイトカインでＴ細胞集団を刺激する工程をさらに含む、請求項５２〜５５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５９】
Ｔ細胞集団はＣＤ４陽性Ｔ細胞に富んでいる、請求項５２〜５８のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６０】
Ｔ細胞集団はＣＤ８陽性Ｔ細胞に富んでいる、請求項５２〜５８のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６１】
ＦｏｘＰ３発現は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞集団において減少する、請求項５２〜６０のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６２】
インターフェロンγの分泌は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞集団において増加する、請求項５２〜６０のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６３】
ＣＸＣＲ３の細胞表面発現は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞集団において増加する、請求項５２〜６０のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６４】
細胞ベースの免疫療法はＴ細胞株を含む、請求項３９〜５１のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６５】
Ｔ細胞株はキメラ抗原受容体を含む、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
ＦｏｘＰ３発現は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞株において減少する、請求項６４または６５に記載の方法。
【請求項６７】
インターフェロンγの分泌は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞株において増加する、請求項６４または６５に記載の方法。
【請求項６８】
ＣＸＣＲ３の細胞表面発現は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞株において増加する、請求項６４または６５に記載の方法。
【請求項６９】
細胞ベースの免疫療法は、ナチュラルキラー細胞株あるいは初代ナチュラルキラー細胞集団を含む、請求項３９〜５１のいずれか１つに記載の方法。
【請求項７０】
ナチュラルキラー細胞株あるいは初代ナチュラルキラー細胞集団は、キメラ抗原受容体を含む、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
ナチュラルキラー細胞株あるいは初代ナチュラルキラー細胞集団は、高親和性Ｆｃ受容体を含む、請求項６９に記載の方法。
【請求項７２】
インターフェロンγの分泌は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、ナチュラルキラー細胞株あるいは初代ナチュラルキラー細胞集団において増加する、請求項６９〜７１のいずれか１つに記載の方法。
【請求項７３】
疾患は癌である、請求項３９〜７２のいずれか１つに記載の方法。
【請求項７４】
癌は、乳癌、子宮頚癌、結腸癌、頭頚部癌、腎癌、肝臓癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、あるいは前立腺癌である、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
癌は白血病あるいはリンパ腫である、請求項７３に記載の方法。
【請求項７６】
個体のヒト免疫不全（ＨＩＶ）感染症を処置する方法であって、前記方法は：ＨＩＶ感染症を有する個体に有効な量のナナチノスタットを投与する工程であって、ここで、ＨＩＶ感染症を有する個体は、１ミリリットルの血液当たりＨＩＶ  ＲＮＡの１０００未満のコピーのＨＩＶウイルス量を有する、工程を含む、方法。
【請求項７７】
個体は、１ミリリットル当たりＨＩＶ  ＲＮＡの１００未満のコピーのＨＩＶウイルス量を有する、請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】
ナナチノスタットは、１日当たり８０ｍｇ未満の用量で投与される、請求項７６または７７に記載の方法。
【請求項７９】
ナナチノスタットは、１日当たり４０ｍｇ未満の用量で投与される、請求項７６または７７に記載の方法。
【請求項８０】
ナナチノスタットは、１日当たり２０ｍｇ未満の用量で投与される、請求項７６または７７に記載の方法。
【請求項８１】
ＨＩＶ感染症を有する個体に抗ＨＩＶ処置を施す工程をさらに含む、請求項７６〜８０のいずれか１つに記載の方法。
【請求項８２】
抗ＨＩＶ処置は、抗レトロウイルス薬剤あるいはその薬学的に許容可能な塩を含む、請求項８１に記載の方法。
【請求項８３】
抗レトロウイルス薬剤あるいはその薬学的に許容可能な塩は、アバカビル、アタザナビル、ダルナビル、ドルテグラビル、エファビレンツ、エルビテグラビル、エムトリシタビン、エトラビリン、ホスアンプレナビル、ラミブジン、ロピナビル、マラビロク、ネビラピン、ラルテグラビル、リルピビリン、リトナビル、テノホビル、ジドブジン、およびそれらの組み合わせからなるリストから選択される、請求項８２に記載の方法。
【請求項８４】
抗ＨＩＶ処置は免疫療法を含む、請求項８１に記載の方法。
【請求項８５】
免疫療法はＨＩＶポリペプチドに結合する抗体を含む、請求項８４に記載の方法。
【請求項８６】
免疫療法はＴ細胞集団を含む、請求項８４に記載の方法。
【請求項８７】
Ｔ細胞集団は、ＨＩＶ由来ポリペプチドに特異的なキメラ抗原受容体に関してトランスジェニックである、請求項８６に記載の方法。
【請求項８８】
Ｔ細胞集団は、ＨＩＶ感染細胞を特異的に溶解する細胞傷害性Ｔ細胞集団である、請求項８６に記載の方法。
【請求項８９】
免疫療法はナチュラルキラー細胞集団を含む、請求項８４に記載の方法。
【請求項９０】
ナチュラルキラー細胞集団は、ＨＩＶ由来ポリペプチドに特異的なキメラ抗原受容体に関してトランスジェニックである、請求項８９に記載の方法。
【請求項９１】
免疫療法は、ＨＩＶ感染症を有する個体に施される前に、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）とインビトロで接触させられる、請求項８４〜９０のいずれか１つに記載の方法。
【請求項９２】
ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット、キシノスタット（ＪＮＪ−２６４８１５８５（Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド））、Ｒ３０６４６５／ＪＮＪ−１６２４１１９９（Ｎ−ヒドロキシ−５−（４−（ナフタレン−２−イルスルホニル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン−２−カルボキサミド）、ベリノスタット／ＰＸＤ１０１、トリコスタチンＡ／ＴＳＡ（７−［４−（ジメチルアミノ）フェニル］−Ｎ−ヒドロキシ−４，６−ジメチル−７−オキソヘプタ−２，４−ジエンアミド、ＩＴＦ２３５７、ＣＢＨＡ、ギビノスタット／ＩＴＦ２３５７、ロミデプシン、ＰＣＩ−２４７８１、デプシペプチド（ＦＲ９０１２２８またはＦＫ２２８）、ブチレート、フェニルブチレート、バルプロ酸、ＡＮ−９、ＣＩ−９９４、エンチノスタット／ＭＳ−２７５／ＳＮＤＸ−２７５、モセチノスタット／ＭＧＣＤ０１０３（Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−（（４−ピリジン−３−イルピリミジン−２−イルアミノ）メチル）ベンズアミド）、ｍ−カルボキシケイ皮酸、ビスヒドロキサム酸、スベリン・ビスヒドロキサム酸、オキサムフラチン、ＡＢＨＡ、ＳＢ−５５６２９、ピロキサミド、プロペンアミド、アロイルピロリルヒドロキサミド、あるいはＬＡＱ８２４（（（Ｅ）−Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［［２−ヒドロキシエチル−［２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル］アミノ］メチル］フェニル］プロプ−２−エンアミド）、パノビノスタット／ＬＢＨ−５８９、ボリノスタット／ＳＡＨＡ、キダミド、あるいは４ＳＣ−２０２、を含む、請求項９１に記載の方法。
【請求項９３】
ＨＤＡＣｉはナナチノスタットを含む、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
ＨＤＡＣｉの濃度は、ヒストンＨ３のアセチル化を増大させるのに十分な量である、請求項９１〜９３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項９５】
ＨＤＡＣｉの濃度は約１マイクロモル未満である、請求項９１〜９３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項９６】
ＨＤＡＣｉは、少なくとも２時間、免疫療法と接触させられる、請求項９１〜９３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項９７】
ＨＤＡＣｉは、少なくとも１６時間、免疫療法と接触させられる、請求項９１〜９３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項９８】
ＨＩＶ感染症を有する個体は以前に抗ＨＩＶ処置を受けたことがある、請求項７６〜９７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項９９】
抗ＨＩＶの処置は、抗レトロウイルス薬剤またはその薬学的に許容可能な塩である、請求項８１〜９８のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１００】
潜伏ウイルス感染症を有する個体を処置するための方法であって、前記方法は：
ａ）潜伏ウイルス感染症を有する個体に、第１のヒストンデアセチラーゼ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）を投与する工程と；
ｂ）細胞ベースの免疫療法を第２のＨＤＡＣｉとインビトロで接触させる工程であって、ここで、第２のＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミドを含む、工程と；
ｃ）潜伏ウイルス感染症を有する個体に細胞ベースの免疫療法を施す工程と、
を含む、方法。
【請求項１０１】
潜伏ウイルス感染症を有する個体を処置するための方法であって、前記方法は：
ａ）潜伏ウイルス感染症を有する個体に第１のヒストンデアセチラーゼ酵素阻害剤（ＨＤＡＣｉ）を投与する工程であって、ここで、第１のＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド））を含む、工程と；
ｂ）細胞ベースの免疫療法を第２のＨＤＡＣｉとインビトロで接触させる工程と；
ｃ）潜伏ウイルス感染症を有する個体に細胞ベースの免疫療法を施す工程と、
を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
本出願は、２０１８年１月１２日に出願された米国仮特許出願第６２／６１６，７９１号と２０１８年１月１７日に出願された米国仮特許出願第６２／６１８，４５５号の利益を主張し、当該文献は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
免疫療法は、癌および慢性ウイルス性疾患の処置のための新たな方法である。免疫療法は、分子あるいは細胞のいずれかの免疫系の成分の使用に基づく。分子治療は、組換えサイトカイン、ケモカイン、抗体および他の免疫調節ポリペプチド、タンパク質、または小分子を含む。細胞ベースの治療は、患者の免疫応答を調節し、それを慢性ウイルス感染、悪性病変、あるいは腫瘍の除去へと向けるために、抗原提示細胞、ＮＫ細胞、あるいはＴ細胞などのリンパ球集団を投与することを含む。
【発明の概要】
【０００３】
疲弊は、多くの細胞ベースの免疫療法の特徴であり、障害でもある。疲弊は、特異的抗原に対する免疫エフェクター細胞の反応の機能および有効性の低減である。癌または慢性ウイルス感染症を有する個体には通常、抗原特異的Ｔ細胞が存在するが、それは、消費されると増殖し、ヘルパーサイトカイン／ケモカインを分泌し、あるいは抗原を提示する標的細胞を殺す能力を欠く。疲弊はＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞の両方に影響を及ぼす。細胞療法で使用されるＮＫ細胞などの他の細胞は、サイトカイン分泌および標的細胞死滅の減少によって特徴づけられる疲弊の兆候を示す場合がある。通常、疲弊した免疫エフェクター細胞は、疲弊していない細胞と比較した時、エピジェネティックな違いを示す。したがって、適切なＨＤＡＣ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）を用いて疲弊したＴ細胞またはＮＫ細胞を処理することにより、Ｔ細胞疲弊を逆転させ、および、細胞ベースの免疫療法を増強する。細胞ベースの免疫療法と組み合わせてＨＤＡＣｉ  ナナチノスタット（ｎａｎａｔｉｎｏｓｔａｔ）を使用する方法が本明細書に記載され、したがって、免疫細胞疲弊に関連した疾患を処置するために上記療法およびそれらの使用を強化する。
【０００４】
ＨＤＡＣｉを使用して、細胞ベースの免疫療法を増強する方法が本明細書に記載される。本明細書に記載される免疫療法の増強に使用されるＨＤＡＣ阻害剤は、他のＨＤＡＣ阻害剤と比較して、予想外に優れた結果および効力を示す。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、ヒストンＨ３の脱アセチル化を阻害する。（例えば、ヒストンＨ３の定常状態のアセチル化を増大させる）。様々な実施形態において、これらのＨＤＡＣｉは、養子細胞療法で使用されるリンパ球集団（例えば、Ｔ細胞ＮＫ細胞）を処理するためにインビトロで使用される。ある例では、患者自身の細胞は、同じ患者に再投与する前にインビトロで処理することができる。他の実施形態では、処置されている患者から単離されていない初代細胞集団あるいは細胞株を、インビトロで処理することができる。ある実施形態では、ＨＬＡ適合ドナーの細胞は、ＨＤＡＣｉで処理することができる。ある実施形態では、ＨＬＡ不適合ドナーからの細胞あるいは細胞株は、ＨＤＡＣｉで処理することができる。ある特定の実施形態では、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド）である。
【０００５】
ある態様では、インビトロの細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）と接触させる工程を含む、細胞ベースの免疫療法を増強するための方法が本明細書に記載され、ここで、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド）を含む。ある実施形態では、上記方法はＴ細胞疲弊を逆転する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉの濃度は、ヒストンＨ３のアセチル化を増大させるのに十分な量である。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉの濃度は、約１マイクロモル未満である。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉの濃度は、約４００のナノモルを超える。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、少なくとも２時間、細胞ベースの免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、少なくとも１６時間、細胞ベースの免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、上記方法は、細胞ベースの免疫療法をインターロイキン１５と接触させる工程を含む。ある実施形態では、インターロイキン１５は、約１〜約１００ｎｇ／ｍＬの濃度で細胞ベースの免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、インターロイキン１５は、約５〜約２５ｎｇ／ｍＬの濃度で細胞ベースの免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、インターロイキン１５は、約１０ｎｇ／ｍＬの濃度で細胞ベースの免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、上記方法は、細胞ベースの免疫療法をチェックポイント阻害剤と接触させる工程を含む。ある実施形態では、チェックポイント阻害剤は、ＰＤＬ−１あるいはＰＤ−１を標的とする抗体である。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法はＴ細胞集団を含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、健康な個体に由来する一次Ｔ細胞集団を含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、疾患に罹患している個体に由来する一次Ｔ細胞集団を含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をさらに含む。ある実施形態では、上記方法は腫瘍関連抗原でＴ細胞集団を刺激する工程をさらに含む。ある実施形態では、上記方法は、炎症性サイトカインでＴ細胞集団を刺激する工程をさらに含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団はＣＤ４陽性Ｔ細胞に富んでいる。ある実施形態では、Ｔ細胞集団はＣＤ８陽性Ｔ細胞に富んでいる。ある実施形態では、ＦｏｘＰ３発現は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞集団において減少する。ある実施形態では、インターフェロンγの分泌は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞集団において増加する。ある実施形態では、ＣＸＣＲ３の細胞表面発現は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞集団において増加する。ある実施形態では、細胞ベースの療法はＴ細胞株を含む。実施形態では、Ｔ細胞株はキメラ抗原受容体を含む。ある実施形態では、ＦｏｘＰ３発現は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞株において減少する。ある実施形態では、インターフェロンγの分泌は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞株において増加する。ある実施形態では、��ＸＣＲ３の細胞表面発現は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞株において増加する。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は初代ナチュラルキラー細胞集団を含む。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法はナチュラルキラー細胞株を含む。ある実施形態では、ナチュラルキラー細胞株あるいは集団は、キメラ抗原受容体を含む。ある実施形態では、ナチュラルキラー細胞株あるいは集団は、高親和性Ｆｃ受容体を含む。ある実施形態では、インターフェロンγの分泌は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、ナチュラルキラー細胞株または集団において増加する。ある実施形態では、上記方法は、疾患に罹患している個体に細胞ベースの免疫療法を施す工程を含む。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、疾患に罹患している個体に由来するもの（ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ  ｔｏ）である。ある実施形態では、疾病は癌である。ある実施形態では、癌は、乳癌、子宮頚癌、結腸癌（ｃｏｌｏｎ  ｃａｎｃｅｒ）、頭頚部癌、腎癌、肝臓癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、あるいは前立腺癌である。ある実施形態では、癌は白血病あるいはリンパ腫である。ある実施形態では、疾患は慢性ウイルス性疾患である。ある実施形態では、慢性ウイルス性疾患は、ヒト免疫不全ウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、エプスタイン−バーウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、あるいはヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）によって引き起こされる。
【０００６】
別の態様では、養子細胞免疫療法の方法が本明細書に記載され、上記方法は：ａ）細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）と接触させる工程であって、ここで、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド）を含む、工程と；ｂ）疾患に罹患している個体に細胞ベースの免疫療法を施す工程と、を含む。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させる工程は、インビトロで実施される。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉの濃度は、ヒストンＨ３のアセチル化を増大させるのに十分な量である。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉの濃度は、約１マイクロモル未満である。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、少なくとも２時間、細胞ベースの免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、少なくとも１６時間、細胞ベースの免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、上記方法は、細胞ベースの免疫療法をインターロイキン１５と接触させる工程を含む。ある実施形態では、インターロイキン１５は、約１〜約１００ｎｇ／ｍＬの濃度で細胞ベースの免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、インターロイキン１５は、約５〜約２５ｎｇ／ｍＬの濃度で細胞ベースの免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、インターロイキン１５は、約１０ｎｇ／ｍＬの濃度で細胞ベースの免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、上記方法は、細胞ベースの免疫療法をチェックポイント阻害剤と接触させる工程を含む。ある実施形態では、チェックポイント阻害剤は、ＰＤＬ−１あるいはＰＤ−１を標的とする抗体である。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法はＴ細胞集団を含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、健康な個体に由来する一次Ｔ細胞集団を含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、疾患に罹患している個体に由来する一次Ｔ細胞集団を含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、疾患に罹患している個体に由来する一次Ｔ細胞集団を含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をさらに含む。ある実施形態では、上記方法は腫瘍関連抗原でＴ細胞集団を刺激する工程をさらに含む。ある実施形態では、上記方法は、炎症性サイトカインでＴ細胞集団を刺激する工程をさらに含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、ＣＤ４陽性Ｔ細胞に富んでいる。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、ＣＤ８陽性Ｔ細胞に富んでいる。ある実施形態では、ＦｏｘＰ３発現は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞集団において減少する。ある実施形態では、インターフェロンγの分泌は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞集団において増加する。ある実施形態では、ＣＸＣＲ３の細胞表面発現は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞集団において増加する。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法はＴ細胞株を含む。実施形態では、Ｔ細胞株はキメラ抗原受容体を含む。ある実施形態では、ＦｏｘＰ３発現は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞株において減少する。あ���実施形態では、インターフェロンγの分泌は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞株において増加する。ある実施形態では、ＣＸＣＲ３の細胞表面発現は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、Ｔ細胞株において増加する。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は初代ナチュラルキラー細胞集団を含む。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法はナチュラルキラー細胞株を含む。ある実施形態では、ナチュラルキラー細胞株あるいは集団は、キメラ抗原受容体を含む。ある実施形態では、ナチュラルキラー細胞株あるいは集団は、高親和性Ｆｃ受容体を含む。ある実施形態では、インターフェロンγの分泌は、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣｉと接触させた後に、ナチュラルキラー細胞株または集団において増加する。ある実施形態では、疾病は癌である。ある実施形態では、癌は、乳癌、子宮頚癌、結腸癌、頭頚部癌、腎癌、肝臓癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、あるいは前立腺癌である。ある実施形態では、癌は白血病あるいはリンパ腫である。ある実施形態では、疾患は慢性ウイルス性疾患である。ある実施形態では、慢性ウイルス性疾患は、ヒト免疫不全ウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、エプスタイン−バーウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、またはＢ型肝炎ウイルス、あるいはヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）によって引き起こされる。
【０００７】
他の態様では、ＨＤＡＣ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）を含む細胞培養培地が本明細書に記載され、ここで、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド）を含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、非ヒト由来の血清を含まない。ある実施形態では、細胞培養培地は血清を含まない。ある実施形態では、細胞培養培地は、細胞ベースの免疫療法をインターロイキン１５と接触させること含む。ある実施形態では、インターロイキン１５は、約１〜約１００ｎｇ／ｍＬの濃度で細胞ベースの免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、インターロイキン１５は、約５〜約２５ｎｇ／ｍＬの濃度で細胞ベースの免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、インターロイキン１５は、約１０ｎｇ／ｍＬの濃度で細胞ベースの免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、細胞培養培地は、細胞ベースの免疫療法をチェックポイント阻害剤と接触させることを含む。ある実施形態では、チェックポイント阻害剤は、ＰＤＬ−１あるいはＰＤ−１を標的とする抗体である。ある実施形態では、細胞培養培地は細胞ベースの免疫療法をさらに含む。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法はＴ細胞集団を含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、健康な個体に由来する一次Ｔ細胞集団を含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、疾患に罹患している個体に由来する一次Ｔ細胞集団を含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、疾患に罹患している個体に由来する一次Ｔ細胞集団を含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をさらに含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、腫瘍関連抗原をさらに含む。ある実施形態では、細胞培養培地は炎症性サイトカインをさらに含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、ＣＤ４陽性Ｔ細胞に富んでいる。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、ＣＤ８陽性Ｔ細胞に富んでいる。ある実施形態では、ＦｏｘＰ３発現は、細胞ベースの免疫療法を細胞培養培地と接触させた後に、Ｔ細胞集団において減少する。ある実施形態では、インターフェロンγの分泌は、細胞ベースの免疫療法を細胞培養培地と接触させた後に、Ｔ細胞集団において増加する。ある実施形態では、ＣＸＣＲ３の細胞表面発現は、細胞ベースの免疫療法を細胞培養培地と接触させた後に、Ｔ細胞集団において増加する。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法はＴ細胞株を含む。実施形態では、Ｔ細胞株はキメラ抗原受容体を含む。ある実施形態では、ＦｏｘＰ３発現は、細胞ベースの免疫療法を細胞培養培地と接触させた後に、Ｔ細胞株において減少する。ある実施形態では、インターフェロンγの分泌は、細胞ベースの免疫療法を細胞培養培地と接触させた後に、Ｔ細胞株において増加する。ある実施形態では、ＣＸＣＲ３の細胞表面発現は、細胞ベースの免疫療法を細胞培養培地と接触させた後に、Ｔ細胞株において増加する。ある実施形態では、細胞ベースの療法は、ナチュラルキラー細胞株あるいは初代ナチュラルキラー細胞集団を含む。ある実施形態では、ナチュラルキラー細胞株あるいは集団は、キメラ抗原受容体を含む。あ��実施形態では、ナチュラルキラー細胞株あるいは集団は、高親和性Ｆｃ受容体を含む。ある実施形態では、インターフェロンγの分泌は、細胞ベースの免疫療法を細胞培養培地と接触させた後に、ナチュラルキラー細胞株において増加する。ある実施形態では、細胞培養培地は、Ｔ細胞疲弊を阻害あるいは逆転するための方法で使用するためのものである。ある実施形態では、細胞培養培地は、疾患に罹患している個体を処置する方法で使用するためのものである。ある実施形態では、疾病は癌である。ある実施形態では、癌は、乳癌、子宮頚癌、大腸癌、頭頚部癌、腎癌、肝臓癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、あるいは前立腺癌である。ある実施形態では、癌は白血病あるいはリンパ腫である。ある実施形態では、疾患は慢性ウイルス性疾患である。ある実施形態では、慢性ウイルス性疾患は、ヒト免疫不全ウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、エプスタイン−バーウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、またはＢ型肝炎ウイルス、あるいはヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）によって引き起こされる。
【０００８】
別の態様では、個体のヒト免疫不全（ＨＩＶ）感染症を処置する方法が本明細書に記載され、上記方法は：ＨＩＶ感染症を有する個体に有効な量のナナチノスタットを投与する工程であって、ここで、ＨＩＶ感染症を有する個体は、１ミリリットルの血液当たりＨＩＶ  ＲＮＡの１０００未満のコピーのＨＩＶウイルス量を有する、工程を含む。ある実施形態では、個体は、１ミリリットル当たりＨＩＶ  ＲＮＡの１００未満のコピーのＨＩＶウイルス量を有する。ある実施形態では、ナナチノスタットは、１日当たり８０ｍｇ未満の用量で投与される。ある実施形態では、ナナチノスタットは、１日当たり４０ｍｇ未満の用量で投与される。ある実施形態では、ナナチノスタットは、１日当たり２０ｍｇ未満の用量で投与される。ある実施形態では、上記方法は、ＨＩＶ感染症を有する個体に抗ＨＩＶ処置を施す工程を含む。ある実施形態では、上記方法は、ＨＩＶ感染症を有する個体に抗ＨＩＶ処置を施す工程を含む。ある実施形態では、抗ＨＩＶ処置は、抗レトロウイルス薬剤あるいはその薬学的に許容可能な塩を含む。ある実施形態では、抗レトロウイルス薬剤あるいはその薬学的に許容可能な塩は、アバカビル、アタザナビル、ダルナビル、ドルテグラビル、エファビレンツ、エルビテグラビル、エムトリシタビン、エトラビリン、ホスアンプレナビル、ラミブジン、ロピナビル、マラビロク、ネビラピン、ラルテグラビル、リルピビリン、リトナビル、テノホビル、ジドブジン、およびそれらの組み合わせからなるリストから選択される。ある実施形態では、抗ＨＩＶ処置は免疫療法を含む。ある実施形態では、免疫療法は、ＨＩＶ由来ポリペプチドに結合する抗体を含む。ある実施形態では、免疫療法はＴ細胞集団を含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、ＨＩＶ由来ポリペプチドに特異的なキメラ抗原受容体に関してトランスジェニック（ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  ｆｏｒ）である。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、ＨＩＶ感染細胞を特異的に溶解する細胞傷害性Ｔ細胞集団である。ある実施形態では、免疫療法はナチュラルキラー細胞集団を含む。ある実施形態では、ナチュラルキラー細胞集団は、ＨＩＶ由来ポリペプチドに特異的なキメラ抗原受容体に関してトランスジェニックである。ある実施形態では、免疫療法は、ＨＩＶ感染症を有する個体に施される前に、インビトロのヒストンデアセチラーゼ阻害剤（ｈｉｓｔｏｎｅ  ｄｅａｃｅｔｙｌａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）（ＨＤＡＣｉ）と接触させられる。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット、キシノスタット（ｑｕｉｓｉｎｏｓｔａｔ）（ＪＮＪ−２６４８１５８５（Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド））、Ｒ３０６４６５／ＪＮＪ−１６２４１１９９（Ｎ−ヒドロキシ−５−（４−（ナフタレン−２−イルスルホニル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン−２−カルボキサミド）、ベリノスタット／ＰＸＤ１０１、トリコスタチンＡ／ＴＳＡ（７−［４−（ジメチルアミノ）フェニル］−Ｎ−ヒドロキシ−４，６−ジメチル−７−オキソヘプタ−２，４−ジエンアミド、ＩＴＦ２３５７、ＣＢＨＡ、��ビノスタット／ＩＴＦ２３５７、ロミデプシン、ＰＣＩ−２４７８１、デプシペプチド（ＦＲ９０１２２８またはＦＫ２２８）、ブチレート、フェニルブチレート、バルプロ酸、ＡＮ−９、ＣＩ−９９４、エンチノスタット／ＭＳ−２７５／ＳＮＤＸ−２７５、モセチノスタット／ＭＧＣＤ０１０３（Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−（（４−ピリジン−３−イルピリミジン−２−イルアミノ）メチル）ベンズアミド、ｍ−カルボキシケイ皮酸、ビスヒドロキサム酸、スベリンビスヒドロキサム酸、オキサムフラチン、ＡＢＨＡ、ＳＢ−５５６２９、ピロキサミド、プロペンアミド、アロイルピロリルヒドロキサミド、またはＬＡＱ８２４（（（Ｅ）−Ｎ−ヒドロキシ−３−［４―［［２−ヒドロキシエチル−［２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル］アミノ］メチル］フェニル］プロプ−２−エンアミド、パノビノスタット／ＬＢＨ−５８９、ボリノスタット／ＳＡＨＡ、キダミド（ｃｈｉｄａｍｉｄｅ）、あるいは４ＳＣ−２０２を含む。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉはナナチノスタットを含む。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉの濃度は、ヒストンＨ３のアセチル化を増大させるのに十分な量である。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉの濃度は、約１マイクロモル未満である。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、少なくとも２時間、免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、少なくとも１６時間、免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、ＨＩＶ感染症を有する個体は以前に抗ＨＩＶ処置を受けたことがある。ある実施形態では、抗ＨＩＶの処置は、抗レトロウイルス薬剤またはその薬学的に許容可能な塩である。
【０００９】
別の態様では、個体のヒト免疫不全（ＨＩＶ）感染症を処置する方法が本明細書に記載され、上記方法は：ＨＩＶ感染症を有する個体に有効な量のヒストンデアセチラーゼ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）を投与する工程を含み、ここで、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット、キシノスタット（ＪＮＪ−２６４８１５８５（Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド））、Ｒ３０６４６５／ＪＮＪ−１６２４１１９９（Ｎ−ヒドロキシ−５−（４−（ナフタレン−２−イルスルホニル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン−２−カルボキサミド）、ベリノスタット／ＰＸＤ１０１、トリコスタチンＡ／ＴＳＡ（７−［４−（ジメチルアミノ）フェニル］−Ｎ−ヒドロキシ−４，６−ジメチル−７−オキソヘプタ−２，４−ジエンアミド）、ＩＴＦ２３５７、ＣＢＨＡ、ギビノスタット／ＩＴＦ２３５７、ロミデプシン、ＰＣＩ−２４７８１、デプシペプチド（ＦＲ９０１２２８またはＦＫ２２８）、ブチレート、フェニルブチレート、バルプロ酸、ＡＮ−９、ＣＩ−９９４、エンチノスタット／ＭＳ−２７５／ＳＮＤＸ−２７５、モセチノスタット／ＭＧＣＤ０１０３（Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−（（４−ピリジン−３−イルピリミジン−２−イルアミノ）メチル）ベンズアミド）、ｍ−カルボキシケイ皮酸、ビスヒドロキサム酸、スベリンビスヒドロキサム酸、オキサムフラチン、ＡＢＨＡ、ＳＢ−５５６２９、ピロキサミド、プロペンアミド、アロイルピロリルヒドロキサミド、またはＬＡＱ８２４（（（Ｅ）−Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［［２−ヒドロキシエチル−［２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル］アミノ］メチル］フェニル］プロプ−２−エンアミド）、パノビノスタット／ＬＢＨ−５８９、ボリノスタット／ＳＡＨＡ、キダミド、あるいは４ＳＣ−２０２を含み、ここで、ＨＩＶ感染症を有する個体は、１ミリリットルの血液当たりＨＩＶ  ＲＮＡの１０００未満のコピーのＨＩＶウイルス量を有する。ある実施形態では、個体は、１ミリリットル当たりＨＩＶ  ＲＮＡの１００未満のコピーのＨＩＶウイルス量を有する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、１日当たり８０ｍｇ未満の用量で投与される。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、１日当たり４０ｍｇ未満の用量で投与される。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、１日当たり２０ｍｇ未満の用量で投与される。ある実施形態では、上記方法は、ＨＩＶ感染症を有する個体に抗ＨＩＶ処置を施す工程を含む。ある実施形態では、抗ＨＩＶ処置は、抗レトロウイルス薬剤あるいはその薬学的に許容可能な塩を含む。ある実施形態では、抗レトロウイルス薬剤あるいはその薬学的に許容可能な塩は、アバカビル、アタザナビル、ダルナビル、ドルテグラビル、エファビレンツ、エルビテグラビル、エムトリシタビン、エトラビリン、ホスアンプレナビル、ラミブジン、ロピナビル、マラビロク、ネビラピン、ラルテグラビル、リルピビリン、リトナビル、テノホビル、ジドブジン、およびそれらの組み合わせからなるリストから選択される。ある実施形態では、抗ＨＩＶ処置は免疫療法を含む。ある実施形態では、免疫療法は、ＨＩ��由来ポリペプチドに結合する抗体を含む。ある実施形態では、免疫療法はＴ細胞集団を含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、ＨＩＶ由来ポリペプチドに特異的なキメラ抗原受容体に関してトランスジェニックである。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、ＨＩＶ感染細胞を特異的に溶解する細胞傷害性Ｔ細胞集団である。ある実施形態では、免疫療法はナチュラルキラー細胞集団を含む。ある実施形態では、ナチュラルキラー細胞集団は、ＨＩＶ由来ポリペプチドに特異的なキメラ抗原受容体に関してトランスジェニックである。ある実施形態では、免疫療法は、ＨＩＶ感染症を有する個体に施される前に、ナナチノスタットとインビトロで接触させられる。ある実施形態では、ナナチノスタットの濃度は、ヒストンＨ３のアセチル化を増大させるのに十分な量である。ある実施形態では、ナナチノスタットの濃度は、約１マイクロモル未満である。ある実施形態では、ナナチノスタットは、少なくとも２時間、免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、ナナチノスタットは、少なくとも１６時間、免疫療法と接触させられる。ある実施形態では、ＨＩＶ感染症を有する個体は以前に抗ＨＩＶ処置を受けたことがある。ある実施形態では、抗ＨＩＶ処置は、抗レトロウイルス薬剤またはその薬学的に許容可能な塩である。
【００１０】
別の態様では、潜伏ウイルス感染症を有する個体を処置するための方法が本明細書に記載され、上記方法は：ａ）潜伏ウイルス感染症を有する個体に、第１のヒストンデアセチラーゼ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）を投与する工程と；ｂ）細胞ベースの免疫療法を第２のＨＤＡＣｉとインビトロで接触させる工程であって、ここで、第２のＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミドを含む、工程と；ｃ）潜伏ウイルス感染症を有する個体に細胞ベースの免疫療法を施す工程と、を含む。
【００１１】
別の態様では、潜伏ウイルス感染症を有する個体を処置するための方法が本明細書に記載され、上記方法は、ａ）潜伏ウイルス感染症を有する個体に第１のヒストンデアセチラーゼ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）を投与する工程であって、ここで、第１のＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド））を含む、工程と、ｂ）細胞ベースの免疫療法を第２のＨＤＡＣｉとインビトロで接触させる工程と、ｃ）潜伏ウイルス感染症を有する個体に細胞ベースの免疫療法を施す工程と、を含む。
【００１２】
引用による組み込み
本明細書で言及される全ての刊行物、特許、および特許出願は、あたかも個々の刊行物、特許、または特許出願が引用によって組み込まれるよう具体的かつ個別に示されるかのように、同じ程度まで引用により本明細書に組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
本明細書に記載される新規な特徴は、とりわけ添付の特許請求の範囲で説明される。本明細書に記載される特徴の原則が用いられている例示的な例を説明する以下の詳細な記載、および以下の添付図面を参照することで、本明細書に記載されている特徴および特徴の利点がより良く理解されるであろう。
【００１４】
【図１Ａ】エンチノスタット（１μＭ）またはナナチノスタット（１μＭ，５００ｎＭ、１００ｎＭ、１ｎＭ）で処理されたＢＡＬＢ／ｃ脾細胞からの、定量化されたＦＡＣデータ（パーセンテージＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＦｏｘＰ３＋）を示す。
【図１Ｂ】１μＭ、５００ｎＭ、あるいは１００ｎＭのナナチノスタットで処理されたＢＡＬＢ／ｃ脾細胞の定量化されたＦＡＣデータを示す。
【図２】ＣＴ２６腫瘍細胞株の接種を受け、かつ抗ＰＤ−１とナナチノスタットの組み合わせにより処置されたマウスについての平均腫瘍体積を示す。
【図３Ａ】４Ｔ１腫瘍細胞株の接種を受け、かつ抗ＰＤ−１とナナチノスタットの組み合わせにより処置されたマウスについての平均腫瘍体積を示す。図３Ａは、１０ｍｇ／ｋｇのナナチノスタットおよび１０ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ−１により処置されたマウスを示す（塗りつぶされた形状）。
【図３Ｂ】４Ｔ１腫瘍細胞株の接種を受け、かつ抗ＰＤ−１とナナチノスタットの組み合わせにより処置されたマウスについての平均腫瘍体積を示す。図３Ｂは、２５ｍｇ／ｋｇのナナチノスタットおよび１０ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ−１により処置されたマウスを示す（塗りつぶされた形状）。
【図４】示されるように処置されたマウスの腫瘍におけるＣＤ８＋Ｔ細胞のパーセンテージを示す。
【図５Ａ】示されるように処置されたマウスの腫瘍におけるＣＤ４＋／ＣＸＣＲ３＋Ｔ細胞のパーセンテージを示す。
【図５Ｂ】示されるように処置されたマウスの腫瘍におけるＣＤ８＋／ＣＸＣＲ３＋Ｔ細胞のパーセンテージを示す。
【図６Ａ】示されるように処置されたマウスの腫瘍におけるＴＧＦβの遺伝子発現を示す。
【図６Ｂ】示されるように処置されたマウスの腫瘍におけるＳｔａｔ６の遺伝子発現を示す。
【図７Ａ】示されるように処置されたマウスの腫瘍におけるＩＦＮ−γの遺伝子発現を示す。
【図７Ｂ】示されるように処置されたマウスの腫瘍におけるＴｂｅｔの遺伝子発現を示す。
【図８】示されるように処置されたマウスの腫瘍におけるＫｌｒｃ２の遺伝子発現を示す。
【図９Ａ】細胞増殖に対する、抗ＰＤ−１およびナナチノスタットの処理の効果を示す。ＣＥＦＴペプチドで１０日間刺激された、単離されたＰＢＭＣを示す。この期間中、細胞が３Ｈチミジンを使用して疲弊するようになるまで、増殖がモニタリングされた。
【図９Ｂ】細胞増殖に対する、抗ＰＤ−１およびナナチノスタットの処理の効果を示す。対照およびエンチノスタットで処理された細胞における増殖性ＣＤ８＋細胞のパーセントを示す。
【図９Ｃ】細胞増殖に対する、抗ＰＤ−１およびナナチノスタットの処理の効果を示す。増殖性ＣＤ８＋細胞のパーセントに対する、αＰＤ１治療を伴う、およびαＰＤ１治療を伴わないナナチノスタットの効果を示す。黒い実線はＣＥＦＴ対照を表し、点線は抗ＰＤ−１で処理された対照を表す。
【図１０Ａ】細胞の生存率に対する、抗ＰＤ−１およびナナチノスタットの処理の効果を示す。図１０Ａは、対照およびエンチノスタットで処理された細胞における生存細胞のパーセントを示す。
【図１０Ｂ】細胞の生存率に対する、抗ＰＤ−１およびナナチノスタットの処理の効果を示す。図１０Ｂは、生存細胞のパーセンテージに対する、抗ＰＤ−１治療を伴う、および抗ＰＤ−１治療を伴わないナナチノスタットの効果を示す。黒色実線はＣＥＦＴ対照を表し、点線は抗ＰＤ−１で処理された対照を表す。
【図１１Ａ】ＣＤ８＋Ｔ細胞によるＩＦＮ−γ放出に対する、抗ＰＤ−１およびナナチノスタットの処理の効果を示す。図１１Ａは、対照およびエンチノスタットで処理された細胞におけるＩＦＮγ分泌ＣＤ８＋細胞のパーセントを示す。
【図１１Ｂ】ＣＤ８＋Ｔ細胞によるＩＦＮ−γ放出に対する、抗ＰＤ−１およびナナチノスタットの処理の効果を示す。図１１Ｂは、ＩＦＮγ分泌ＣＤ８＋細胞のパーセントに対する、抗ＰＤ−１治療を伴う、および抗ＰＤ−１治療を伴わないナナチノスタットの効果を示す。黒い実線はＣＥＦＴ対照を表し、点線は抗ＰＤ−１で処理された対照を表す。
【図１２Ａ】ＩＦＮ−γ、ＴＮＦα、およびＴＧＦβに対する、抗ＰＤ−１およびナナチノスタットの処理の効果を示す。単離されたＰＢＭＣを１０日間のＣＥＦＴ刺激により疲弊させた後、化合物処理によりｎｍｏＤＣおよびＣＥＦＴペプチドでさらに４日間再刺激した。Ｌｕｍｉｎｅｘ分析を実施し、およびＩＦＮ−γ（図１２Ａ）、ＴＮＦα（図１２Ｂ）とＴＧＦβ（図１２Ｃ）のレベル。点線は、示されるように、抗ＰＤ−１対照処理およびビヒクル対照処理を表示する。
【図１２Ｂ】ＩＦＮ−γ、ＴＮＦα、およびＴＧＦβに対する、抗ＰＤ−１およびナナチノスタットの処理の効果を示す。単離されたＰＢＭＣを１０日間のＣＥＦＴ刺激により疲弊させた後、化合物処理によりｎｍｏＤＣおよびＣＥＦＴペプチドでさらに４日間再刺激した。Ｌｕｍｉｎｅｘ分析を実施し、およびＩＦＮ−γ（図１２Ａ）、ＴＮＦα（図１２Ｂ）とＴＧＦβ（図１２Ｃ）のレベル。点線は、示されるように、抗ＰＤ−１対照処理およびビヒクル対照処理を表示する。
【図１２Ｃ】ＩＦＮ−γ、ＴＮＦα、およびＴＧＦβに対する、抗ＰＤ−１およびナナチノスタットの処理の効果を示す。単離されたＰＢＭＣを１０日間のＣＥＦＴ刺激により疲弊させた後、化合物処理によりｎｍｏＤＣおよびＣＥＦＴペプチドでさらに４日間再刺激した。Ｌｕｍｉｎｅｘ分析を実施し、およびＩＦＮ−γ（図１２Ａ）、ＴＮＦα（図１２Ｂ）とＴＧＦβ（図１２Ｃ）のレベル。点線は、示されるように、抗ＰＤ−１対照処理およびビヒクル対照処理を表示する。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
ある態様では、細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）とインビトロで接触させる工程を含む、細胞ベースの免疫療法を増強するための方法が本明細書に記載され、ここで、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド）を含む。
【００１６】
別の態様では、養子細胞免疫療法の方法が本明細書に記載され、上記方法は：ａ）細胞ベースの免疫療法をＨＤＡＣ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）と接触させる工程であって、ここで、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド）を含む、工程と；ｂ）疾患に罹患している個体に細胞ベースの免疫療法を施す工程と、を含む。
【００１７】
他の態様では、ＨＤＡＣ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）を含む細胞培養培地が本明細書に記載され、ここで、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド）を含む。
【００１８】
個体の疾病を処置および／または予防するための方法が本明細書に提供される。ある実施形態では、疾病は癌である。ある実施形態では、上記処置は、細胞ベースの免疫療法を有効な量のＨＤＡＣｉとインビトロで接触させる工程を含む。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、Ｔ細胞（ＣＤ４＋あるいはＣＤ８＋）を含む。ある実施形態では、上記方法は、癌に罹患している患者に、インビトロで接触された細胞ベースの免疫療法を施す工程を含む。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド）を含む。
【００１９】
個体の疾患を処置および／または予防するための組成物および細胞培養培地が本明細書でさらに提供される。ある実施形態では、疾患は癌である。ある実施形態では、疾患は癌に関連する。ある実施形態では、組成物は、細胞培養培地において懸濁されたＨＤＡＣ阻害剤を含む。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド）を含む。ある実施形態では、細胞培養培地は細胞ベースの免疫療法を含む。
【００２０】
別の態様では、個体のヒト免疫不全（ＨＩＶ）感染症を処置する方法が本明細書に記載され、上記方法は：ＨＩＶ感染症を有する個体に有効な量のナナチノスタットを投与する工程であって、ここで、ＨＩＶ感染症を有する個体は、１ミリリットルの血液当たりＨＩＶ  ＲＮＡの１０００未満のコピーのＨＩＶウイルス量を有する、工程を含む。
【００２１】
別の態様では、潜伏ウイルス感染症を有する個体を処置するための方法が本明細書に記載され、上記方法は：ａ）潜伏ウイルス感染症を有する個体に、第１のヒストンデアセチラーゼ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）を投与する工程と；ｂ）細胞ベースの免疫療法を第２のＨＤＡＣｉとインビトロで接触させる工程であって、ここで、第２のＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミドを含む、工程と；ｃ）潜伏ウイルス感染症を有する個体に細胞ベースの免疫療法を施す工程と、を含む。
【００２２】
別の態様では、潜伏ウイルス感染症を有する個体を処置するための方法が本明細書に記載され、上記方法は、ａ）潜伏ウイルス感染症を有する個体に第１のヒストンデアセチラーゼ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）を投与する工程であって、ここで、第１のＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド））を含む、工程と、ｂ）細胞ベースの免疫療法を第２のＨＤＡＣｉとインビトロで接触させる工程と、ｃ）潜伏ウイルス感染症を有する個体に細胞ベースの免疫療法を施す工程と、を含む。
【００２３】
本明細書で使用されるように、用語「約」は、記載される量の１０％以内の数を指す。
【００２４】
用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、それらに起因する広い意味を有するように意図され、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、「含むこと（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」などを意味することができる。
【００２５】
用語「被験体」、「患者」、あるいは「個体」は、本明細書で交換可能に使用され、本明細書に記載される障害を有すると診断され、本明細書に記載される障害に苦しんでおり、本明細書に記載される障害に苦しむリスクがあり、本明細書に記載される障害に苦しんでいる疑いがあるヒト個体を指し、無症状あるいは前駆症状であり得る個体を含む。ある実施形態では、個体は、細胞ベースの療法のドナーあるいは供給源を指す。
【００２６】
本明細書で使用されるように、用語「処置する（ｔｒｅａｔ）」、「処理すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、あるいは「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」、および他の文法的等価物は、症状の緩和、阻害、あるいは軽減、疾患または疾病の症状の重症度の軽減あるいは抑制、疾患または疾病の症状の発生率の低下、疾患または疾病の症状の予防的治療、疾患または疾病の症状の再発率の低下あるいは抑制、疾患または疾病の症状の発症を遅らせること、疾患または疾病の症状の再発を遅らせること、疾患または疾病の症状の軽減あるいは寛解、症状の根本的な代謝原因の改善、疾患または疾病の阻害、例えば、疾患または疾病の発生の抑制、疾患または疾病の軽減、疾患または疾病の退行を引き起すこと、疾患または疾病によって引き起こされた状態の軽減、あるいは疾患または疾病の症状を止めることを含む。上記用語は、治療効果を達成することもさらに含む。治療の有用性とは、処置される根本的な疾病の根絶あるいは改善、および／または、患者の中で改善が見られるような、根本的な疾病に関連する生理的な症状の１つ以上の根絶または改善を意味する。
【００２７】
本明細書で使用されるように、用語は「防ぐ（ｐｒｅｖｅｎｔ）」、「防ぐこと（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」、または「予防（ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）」、および他の文法的等価物は、さらなる症状を防ぐこと、症状の根本的な代謝原因を防ぐこと、疾患または症状を抑えること、例えば、疾患または症状の進行を阻むことを含み、および発症予防を含むことを意図している。上記用語は予防効果を達成することもさらに含む。予防効果のため、特定の疾患を進行する危険のある患者、疾患の１以上の生理学的な症状を報告する患者、または疾患の再発の危険のある患者に、組成物が随意に投与される。
【００２８】
用語「有効な量」または「治療上有効な量」は、本明細書で使用されるように、所望の効果、例えば、処置されている疾患または症状の１つ以上の症状をある程度まで和らげることを達成する、少なくとも１つの薬剤の十分な投与量を指す。特定の例において、結果は、疾患の兆候、症状、あるいは原因の減少および／または軽減、もしくは生物系の任意の他の所望の改変である。特定の例において、治療での使用に「効果的な量」は、疾患を臨床的に著しく軽減するのに必要とされる、本明細書にて説明されるような薬剤を含む組成物の量である。あらゆる個々の場合において適切で「効果的な」量は、用量増加試験などの任意の適切な技術を使用して決定される。
【００２９】
用語は「投与する（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒ）」、「投与すること（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｉｎｇ）」、「投与（ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」などは、本明細書で使用されるように、生物学的作用の所望の部位への薬剤あるいは組成物の送達を可能にするために使用される方法を指す。これらの方法は、限定されないが、経口経路、十二指腸内経路、非経口注入（静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内、血管内、または点滴を含む）、局所投与、および直腸投与を含む。本明細書に記載される薬剤および方法とともに、いくつかの例において使用される投与技術は、例えば、Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ，  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  （ｃｕｒｒｅｎｔ  ｅｄｉｔｉｏｎ），  Ｐｅｒｇａｍｏｎ；  および  Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ，  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  （ｃｕｒｒｅｎｔ  ｅｄｉｔｉｏｎ），  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，  Ｅａｓｔｏｎ，  Ｐａ．において記載される。特定の実施形態において、本明細書に記載される薬剤および組成物は、経口投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるおよび組成物は、非経口的に投与される。
【００３０】
いくつかの実施形態において、本明細書における組成物および方法は、記載される工程あるいは成分から「本質的になる」。本質的になるということは、記載される工程あるいは成分が治療効果あるいは機能効果に寄与し、および、機能効果あるいは治療効果に寄与する他の成分あるいは工程が含まれないことを意味する。本質的になる方法（ｍｅｔｈｏｄ  ｔｈａｔ  ｃｏｎｓｉｓｔｓ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ）は、細胞ベースの免疫療法に対する機能効果または治療効果に必要でない工程を含むことができ；非限定的な例としては、精製／単離の工程、細胞増殖工程、細胞維持工程、化学物質、ある張度を達成するために添加される化学物質、ビタミン剤、ｐＨ緩衝液あるいは修飾因子（ｍｏｄｉｆｉｅｒｓ）、エネルギー源、脂肪酸、糖、ポリペプチド、タンパク質、成長因子、培養中の細胞を維持する／増やすために加えられたフィーダー細胞が挙げられる。本質的になる組成物は、細胞ベースの免疫療法に対する機能効果または治療効果に必要でない成分を含むことができ；非限定的な例としては、化学物質、ある張度を達成するために添加される化学物質、ビタミン剤、ｐＨ緩衝液または修飾因子、エネルギー源、脂肪酸、糖、ポリペプチド、タンパク質、成長因子、および培養中の細胞を維持する／増やすために加えられるフィーダー細胞が挙げられる。
【００３１】
ＨＤＡＣ阻害剤
提供される発明の方法は、ＨＤＡＣ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）を含む、本明細書で提供される１つ以上の組成物の使用あるいは方法を含む。疲弊の現象を逆転させるか、そうでなければ、治療を増強するために、ＨＤＡＣ阻害剤は細胞ベースの免疫療法と接触させられる。ＨＤＡＣｉは、細胞ベースの免疫療法と共培養することができ、あるいは、ＨＤＡＣｉは、個体からリンパ球、Ｔ細胞、あるいはＮＫ細胞を単離させる前に、個体に投与することができる。その後単離されたリンパ球、Ｔ細胞、あるいはＮＫ細胞は、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）から、あるいは腫瘍から直接単離することができる（腫瘍浸潤リンパ球）。
【００３２】
インビトロの用途（例えば、細胞培養における投与）について、細胞ベースの免疫療法は、有効な量のＨＤＡＣｉで処理されるか、あるいは有効な量のＨＤＡＣｉと接触させられ得る。有効な量は、ヒストンアセチル化の増大を結果としてもたらす量である。ある実施形態では、増加したアセチル化を伴うヒストンはヒストンＨ３を含む。ある実施形態では、増加したアセチル化を伴うヒストンは、ヒストンＨ３を含み、および、増加したアセチル化はリジン９にある。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１０μＭ未満のＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約５μＭ未満のＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約２μＭ未満のＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１μＭ未満のＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約９００ｎＭ未満のＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約８００ｎＭ未満のＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約７００ｎＭ未満のＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約６００ｎＭ未満のＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約５００ｎＭ未満のＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約４００ｎＭ未満のＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約３００ｎＭ未満のＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約２００ｎＭ未満のＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１００ｎＭ未満のＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約５０ｎＭ未満のＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１ｎＭを超えるＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約２ｎＭを超えるＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約５ｎＭを超えるＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１０ｎＭを超えるＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１００ｎＭを超えるＨＤＡＣｉの濃度で処理される。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、約１ｎＭ〜約５μＭの間、約１ｎＭ〜約２μＭの間、約１ｎＭ〜約１μＭの間、約１ｎＭ〜約９００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約８００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約７００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約６００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約５００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約４００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約３００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約２００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約１００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約５０ｎＭの間、約１ｎＭ〜約２５ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約５μＭの間、約１０ｎＭ〜約２μＭの間、約１０ｎＭ〜約１μＭの間、約１０ｎＭ〜約９００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約８００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約７００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約６００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約５０���ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約４００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約３００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約２００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約１００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約５０ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約２５ｎＭの間で投与される。ＨＤＡＣｉは、約１、２、４、８、１６、２４、あるいは４８時間、細胞ベースの免疫療法用いてインキュベートすることができる。ＨＤＡＣｉは、少なくとも約１、２、４、８、１６、２４、あるいは４８時間、細胞ベースの免疫療法を用いてインキュベートすることができる。ＨＤＡＣｉは、約１、２、４、８、１６、２４、あるいは４８時間以下にわたって、細胞ベースの免疫療法を用いてインキュベートすることができる。
【００３３】
ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、ヒストンデアセチラーゼ複合体阻害剤（ＨＤＡＣｉ）を含み、ここで、ＨＤＡＣｉは、キシノスタット（ＪＮＪ−２６４８１５８５（Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド）（Ｒ３０６４６５／ＪＮＪ−１６２４１１９９（Ｎ−ヒドロキシ−５−（４−（ナフタレン−２−イルスルホニル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン−２−カルボキサミド）、ベリノスタット／ＰＸＤ１０１、トリコスタチンＡ／ＴＳＡ（７−［４−（ジメチルアミノ）フェニル］−Ｎ−ヒドロキシ−４，６−ジメチル−７−オキソヘプタ−２，４−ジエンアミド）、ＩＴＦ２３５７、ＣＢＨＡ、ギビノスタット／ＩＴＦ２３５７、ロミデプシン、ＰＣＩ−２４７８１、デプシペプチド（ＦＲ９０１２２８またはＦＫ２２８）、ブチレート、フェニルブチレート、バルプロ酸、ＡＮ−９、ＣＩ−９９４、エンチノスタット／ＭＳ−２７５／ＳＮＤＸ−２７５、モセチノスタット／ＭＧＣＤ０１０３（Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−（（４−ピリジン−３−イルピリミジン−２−イルアミノ）メチル）ベンズアミド）、ｍ−カルボキシケイ皮酸、ビスヒドロキサム酸、スベリンビスヒドロキサム酸、オキサムフラチン、ＡＢＨＡ、ＳＢ−５５６２９、ピロキサミド、プロペンアミド、アロイルピロリルヒドロキサミド、またはＬＡＱ８２４（（（Ｅ）−Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［［２−ヒドロキシエチル−［２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル］アミノ］メチル］フェニル］プロプ−２−エンアミド）、パノビノスタット／ＬＢＨ−５８９、ボリノスタット／ＳＡＨＡ、キダミド、あるいは４ＳＣ−２０２を含む。
【００３４】
インビボの用途では、細胞が患者から単離される前に、患者は有効な量のＨＤＡＣｉで処置され得る。ある実施形態では、ＨＤＡＣ阻害剤は、４００ｍｇ／日未満の用量で投与される。いくつかの実施形態において、ＨＤＡＣ阻害剤は、約１ｍｇ／日、約２ｍｇ／日、約５ｍｇ／日、約１０ｍｇ／日、約１５ｍｇ／日、約２０ｍｇ／日、約２５ｍｇ／日、約３０ｍｇ／日、約３５ｍｇ／日、約４０ｍｇ／日、約４５ｍｇ／日、約５０ｍｇ／日、約６０ｍｇ／日、約７０ｍｇ／日、約８０ｍｇ／日、約９０ｍｇ／日、約１００ｍｇ／日、約１２０ｍｇ／日、約１２５ｍｇ／日、約１４０ｍｇ／日、約１５０ｍｇ／日、約１６０ｍｇ／日、約１７５ｍｇ／日、約１８０ｍｇ／日、約１９０ｍｇ／日、約２００ｍｇ／日、約２２５ｍｇ／日、約２５０ｍｇ／日、約２７５ｍｇ／日、約３００ｍｇ／日、約３２５ｍｇ／日、約３５０ｍｇ／日、約３７５ｍｇ／日、約４００ｍｇ／日、約４２５ｍｇ／日、約４５０ｍｇ／日、約４７５ｍｇ／日、あるいは約５００ｍｇ／日の用量で投与される。ある実施形態では、ＨＤＡＣ阻害剤は、２０ｍｇ／日未満、１５ｍｇ／日未満、１０ｍｇ／日未満、５ｍｇ／日未満、２ｍｇ／日未満、１ｍｇ／日未満、５０ｍｇ／日未満、４５ｍｇ／日未満、４０ｍｇ／日未満、３５ｍｇ／日未満、３０ｍｇ／日未満、２５ｍｇ／日未満、７０ｍｇ／日未満、６０ｍｇ／日未満、８０ｍｇ／日未満、９０ｍｇ／日未満、１００ｍｇ／日未満、１２０ｍｇ／日未満、１２５ｍｇ／日未満、１４０ｍｇ／日未満、１５０ｍｇ／日未満、１６０ｍｇ／日未満、１７５ｍｇ／日未満、１８０ｍｇ／日未満、１９０ｍｇ／日未満、２００ｍｇ／日未満、２２５ｍｇ／日未満、２５０ｍｇ／日未満、２７５ｍｇ／日未満、３００ｍｇ／日未満、３２５ｍｇ／日未満、３５０ｍｇ／日未満、３７５ｍｇ／日未満、４００ｍｇ／日未満、４２５ｍｇ／日未満、４５０ｍｇ／日未満、４７５ｍｇ／日未満、あるいは５００ｍｇ／日未満の用量で投与される。いくつかの実施形態において、ＨＤＡＣ阻害剤は、１ｍｇ／日よりも多い、２ｍｇ／日よりも多い、５ｍｇ／日よりも多い、１０ｍｇ／日よりも多い、１５ｍｇ／日よりも多い、２０ｍｇ／日よりも多い、２５ｍｇ／日よりも多い、３０ｍｇ／日よりも多い、３５ｍｇ／日よりも多い、４０ｍｇ／日よりも多い、４５ｍｇ／日よりも多い、５０ｍｇ／日よりも多い、６０ｍｇ／日よりも多い、７０ｍｇ／日よりも多い、８０ｍｇ／日よりも多い、９０ｍｇ／日よりも多い、１００ｍｇ／日よりも多い、１２０ｍｇ／日よりも多い、１２５ｍｇ／日よりも多い、１４０ｍｇ／日よりも多い、１５０ｍｇ／日よりも多い、１６０ｍｇ／日よりも多い、１７５ｍｇ／日よりも多い、１８０ｍｇ／日よりも多い、１９０ｍｇ／日よりも多い、２００ｍｇ／日よりも多い、２２５ｍｇ／日よりも多い、２５０ｍｇ／日よりも多い、２７５ｍｇ／日よりも多い、３００ｍｇ／日よりも多い、３２５ｍｇ／日よりも多い、３５０ｍｇ／日よりも多い、３７５ｍｇ／日よりも多い、４００ｍｇ／日よりも多い、４２５ｍｇ／日よりも多い、４５０ｍｇ／日よりも多い、４７５ｍｇ／日よりも多い、あるいは５００ｍｇ／日よりも多い用量で投与される。ある実施形態では、ＨＤＡＣ阻害剤は、１ｍｇ／日よりも多い〜５００ｍｇ／日未満の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＨＤＡＣ阻害剤は、２０ｍｇ／日よりも多い〜８０ｍｇ／日未満の用量で投与される。ある実施形態では、ＨＤＡＣ阻害剤は、１日１回日（ｑ．ｄ．）１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）、または１日３回（ｔ．ｉ．ｄ．）投与される。いくつかの実施形態では、ＨＤＡＣ阻害剤は、毎日、週１回、週２回、週３回、週４回、または週５回投与される。
【００３５】
ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、ヒストンデアセチラーゼ複合体阻害剤（ＨＤＡＣｉ）を含み、ここで、ＨＤＡＣｉは、キシノスタット（ＪＮＪ−２６４８１５８５（Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド）（Ｒ３０６４６５／ＪＮＪ−１６２４１１９９（Ｎ−ヒドロキシ−５−（４−（ナフタレン−２−イルスルホニル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン−２−カルボキサミド）、ベリノスタット／ＰＸＤ１０１、トリコスタチンＡ／ＴＳＡ（７−［４−（ジメチルアミノ）フェニル］−Ｎ−ヒドロキシ−４，６−ジメチル−７−オキソヘプタ−２，４−ジエンアミド）、ＩＴＦ２３５７、ＣＢＨＡ、ギビノスタット／ＩＴＦ２３５７、ロミデプシン、ＰＣＩ−２４７８１、デプシペプチド（ＦＲ９０１２２８またはＦＫ２２８）、ブチレート、フェニルブチレート、バルプロ酸、ＡＮ−９、ＣＩ−９９４、エンチノスタット／ＭＳ−２７５／ＳＮＤＸ−２７５、モセチノスタット／ＭＧＣＤ０１０３（Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−（（４−ピリジン−３−イルピリミジン−２−イルアミノ）メチル）ベンズアミド）、ｍ−カルボキシケイ皮酸、ビスヒドロキサム酸、スベリンビスヒドロキサム酸、オキサムフラチン、ＡＢＨＡ、ＳＢ−５５６２９、ピロキサミド、プロペンアミド、アロイルピロリルヒドロキサミド、またはＬＡＱ８２４（（（Ｅ）−Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［［２−ヒドロキシエチル−［２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル］アミノ］メチル］フェニル］プロプ−２−エンアミド）、パノビノスタット／ＬＢＨ−５８９、ボリノスタット／ＳＡＨＡ、キダミド、あるいは４ＳＣ−２０２を含む。
【００３６】
インビトロの用途（例えば、細胞培養における投与）では、細胞ベースの免疫療法は、有効な量のクラスＩ  ＨＤＡＣｉで処理されるか、あるいは有効な量のクラスＩ  ＨＤＡＣｉと接触させられ得る。いくつかの実施形態において、クラスＩ  ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（Ｎｓｔａｔ、ｔｒａｃｔｉｎｏｓｔａｔ（トラクチノスタット）、ＶＲｘ−３９９６、あるいはＣＨＲ−３９９６とも呼ばれる）である。ある実施形態では、ナナチノスタットは、（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド）である。ナナチノスタットは、選択的クラスＩ  ＨＤＡＣ阻害剤であり、米国特許第７，９３２，２４６号に開示され、これは、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。有効な量とは、細胞ベースの免疫療法剤において、結果的としてヒストンアセチル化の増大をもたらす量である。ある実施形態では、増加したアセチル化を伴うヒストンはヒストンＨ３を含む。ある実施形態では、増加したアセチル化を伴うヒストンは、ヒストンＨ３を含み、および、増加したアセチル化はリジン９にある。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１０μＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約５μＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約２μＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１μＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約９００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約８００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約７００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約６００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約５００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約４００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約３００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約２００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約５０ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１ｎＭを超えるナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約２ｎＭを超えるナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約５ｎＭを超えるナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１０ｎＭを超えるナナチノスタットの濃度で処理され��。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１００ｎＭを超えるナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、ナナチノスタットは、約１ｎＭ〜約５μＭの間、約１ｎＭ〜約２μＭの間、約１ｎＭ〜約１μＭの間、約１ｎＭ〜約９００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約８００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約７００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約６００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約５００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約４００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約３００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約２００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約１００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約５０ｎＭの間、約１ｎＭ〜約２５ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約５μＭの間、約１０ｎＭ〜約２μＭの間、約１０ｎＭ〜約１μＭの間、約１０ｎＭ〜約９００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約８００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約７００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約６００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約５００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約４００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約３００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約２００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約１００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約５０ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約２５ｎＭの間で投与される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１μＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約９００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約８００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約７００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約６００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約５００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約４００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約３００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約２００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１００ｎＭを超えるナナチノスタットの濃度で処理される。
【００３７】
ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１００ｎＭ〜約１，０００ｎＭのナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１００ｎＭ〜約２００ｎＭ、約１００ｎＭ〜約３００ｎＭ、約１００ｎＭ〜約４００ｎＭ、約１００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約１００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約１００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約１００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約１００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約１００ｎＭ〜約１，０００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約３００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約４００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約１，０００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約４００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約３００ｎＭ〜８００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約１，０００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約１，０００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約１，０００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約１，０００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約１，０００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約１，０００ｎＭ、あるいは約９００ｎＭ〜約１，０００ｎＭのナナチノスタットの濃度で投与される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１００ｎＭ、約２００ｎＭ、約３００ｎＭ、約４００ｎＭ、約５００ｎＭ、約６００ｎＭ、約７００ｎＭ、約８００ｎＭ、約９００ｎＭ、あるいは約１０００ｎＭのナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、少なくとも約１００ｎＭ、約２００ｎＭ、約３００ｎＭ、約４００ｎＭ、約５００ｎＭ、約６００ｎＭ、約７００ｎＭ、約８００ｎＭ、あるいは約９００ｎＭのナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約２００ｎＭ、約３００ｎＭ、約４００ｎＭ、約５００ｎＭ、約６００ｎＭ、約７００ｎＭ、約８００ｎＭ、約９００ｎＭ、あるいは約１，０００ｎＭ以下のナナチノスタットの濃度で処理される。
【００３８】
ナナチノスタットは、約１、２、４、８、１６、２４、あるいは４８時間、細胞ベースの免疫療法を用いてインキュベートすることができる。ナナチノスタットは、少なくとも約１、２、４、８、１６、２４、あるいは４８時間、細胞ベースの免疫療法を用いてインキュベートすることができる。ナナチノスタットは、約１、２、４、８、１６、２４、あるいは４８時間以下にわたって、細胞ベースの免疫療法を用いてインキュベートすることができる。
【００３９】
インビボの用途では、患者は、有効な量のクラスＩ  ＨＤＡＣ阻害剤で治療され得る。いくつかの実施形態において、クラスＩ  ＨＤＡＣｉはナナチノスタットである。ある実施形態では、ナナチノスタットは、４０ｍｇ／日の用量で投与される。いくつかの実施形態において、ナナチノスタットは、約１ｍｇ／日、約２ｍｇ／日、約５ｍｇ／日、約１０ｍｇ／日、約１５ｍｇ／日、約２０ｍｇ／日、約２５ｍｇ／日、約３０ｍｇ／日、約３５ｍｇ／日、約４０ｍｇ／日、約４５ｍｇ／日、約５０ｍｇ／日、約６０ｍｇ／日、約７０ｍｇ／日、約８０ｍｇ／日、約９０ｍｇ／日、あるいは約１００ｍｇ／日の用量で投与される。ある実施形態では、ナナチノスタットは、１ｍｇ／日未満、２ｍｇ／日未満、５ｍｇ／日未満、１０ｍｇ／日未満、１５ｍｇ／日未満、２０ｍｇ／日、２５ｍｇ／日未満、３０ｍｇ／日未満、３５ｍｇ／日未満、４０ｍｇ／日未満、４５ｍｇ／日未満、５０ｍｇ／日未満、６０ｍｇ／日未満、７０ｍｇ／日未満、８０ｍｇ／日未満、９０ｍｇ／日未満、あるいは１００ｍｇ／日未満の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ナナチノスタットは、１ｍｇ／日より多い、２ｍｇ／日より多い、５ｍｇ／日より多い、１０ｍｇ／日より多い、１５ｍｇ／日より多い、２０ｍｇ／日より多い、２５ｍｇ／日より多い、３０ｍｇ／日より多い、３５ｍｇ／日より多い、４０ｍｇ／日より多い、４５ｍｇ／日より多い、５０ｍｇ／日より多い、６０ｍｇ／日より多い、７０ｍｇ／日より多い、８０ｍｇ／日より多い、９０ｍｇ／日より多い、または１００ｍｇ／日より多い用量で投与される。ある実施形態では、ナナチノスタットは、３０ｍｇ／日より多い〜５０ｍｇ／日未満の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ナナチノスタットは、５ｍｇ／日より多い〜８０ｍｇ／日未満の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ナナチノスタットは、１０ｍｇ／日超〜８０ｍｇ／日未満の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ナナチノスタットは、２０ｍｇ／日超〜８０ｍｇ／日未満の用量で投与される。いくつかの実施形態において、ナナチノスタットは、約１ｍｇ／日、約２ｍｇ／日、約５ｍｇ／日、約６ｍｇ／日、約７ｍｇ／日、約８ｍｇ／日、約９ｍｇ／日、約１０ｍｇ／日、約１１ｍｇ／日、約１２ｍｇ／日、約１３ｍｇ／日、約１４ｍｇ／日、約１５ｍｇ／日、約１６ｍｇ／日、約１７ｍｇ／日、約１８ｍｇ／日、約１９ｍｇ／日、約２０ｍｇ／日、約２２ｍｇ／日、約２３ｍｇ／日、約２５ｍｇ／日、約２７ｍｇ／日、約２８ｍｇ／日、約３０ｍｇ／日、約３２ｍｇ／日、約３３ｍｇ／日、約３５ｍｇ／日、約４０ｍｇ／日、約４５ｍｇ／日、約５０ｍｇ／日、約６０ｍｇ／日、約７０ｍｇ／日、約８０ｍｇ／日、約９０ｍｇ／日、または約１００ｍｇ／日の用量で投与される。ある実施形態では、ナナチノスタットは、１日１回（ｑ．ｄ．）、１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）、または１日３回（ｔ．ｉ．ｄ．）投与される。いくつかの実施形態では、ナナチノスタットは、毎日、週１回、週２回、週３回、週４回、または週５回投与される。
【００４０】
細胞ベースの免疫療法
本明細書に記載されるＨＤＡＣｉは、細胞療法を増強する方法で使用するためのものである。ＨＤＡＣｉは、培養中の細胞ベースの免疫療法にインビトロで適用することができる。これらの細胞ベースの免疫療法は、処置される患者あるいはＨＬＡ適合ドナーから単離された細胞集団から製造することができる。ＨＤＡＣｉは、非ＨＬＡ適合ドナーの細胞株あるいは初代細胞集団を処理するために使用することができる。あるいは、ＨＤＡＣｉは、細胞ベースの免疫療法の製造に使用される細胞集団を単離させる前に、患者または健康なドナーを処置するために使用することができる。
【００４１】
ある実施形態では、本明細書に記載される方法は、Ｔ細胞ベースの免疫療法を増強する方法である。ある実施形態では、本明細書に記載される方法は、細胞ベースの免疫療法におけるＩＦＮ−γの発現あるいは分泌を増加させる方法である。ある実施形態では、本明細書に記載される方法は、細胞ベースの免疫療法におけるＴＮＦαの発現あるいは分泌を増加させる方法である。ある実施形態では、本明細書に記載される方法は、細胞ベースの免疫療法におけるＴＧＦβ発現あるいは分泌を減少させる方法である。
【００４２】
細胞ベースの免疫療法は通常、免疫エフェクター細胞、例えば、Ｔ細胞、およびＮＫ細胞、ならびに抗原提示細胞（例えば、マクロファージ、樹状細胞、およびＢ細胞）を含む。本明細書に開示されるＨＤＡＣｉは、これらの細胞ベースの免疫療法を増強するのに有用である。細胞ベースの免疫療法は、１以上の養子導入されたリンパ球集団（ａｄｏｐｔｉｖｅｌｙ  ｔｒａｎｓｆｅｒｒｅｄ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ）、Ｔ細胞、Ｔ細胞集団、あるいはＴ細胞株であり得る。あるいは、細胞ベースの免疫療法は、ＮＫ細胞、ＮＫ細胞集団、あるいはＮＫ細胞株であってもよい。ある実施形態では、増強された細胞ベースの免疫療法は、抗原経験である細胞の集団、および、機能的にアネルギー性にされるか、機能的に欠損しているか、疲弊している細胞の集団である。疲弊（あるいは、機能的欠損）は、標的細胞集団に対する細胞毒性レベルの減少、腫瘍／感染部位への輸送、ＩＦＮ−γの発現／分泌、ＣＸＣＲ３発現、あるいはＴ−ｂｅｔによって、Ｔ細胞において証明され得る。Ｔ細胞あるいはＴ細胞応答の機能的欠損は、ＦｏｘＰ３転写因子の発現によって特徴付けられる、高いレベルの制御性Ｔ細胞（ＴＲＥＧ）によっても証明され得る。疲弊（あるいは機能的欠損）は、標的細胞集団対する細胞毒性レベルの減少、ＩＦＮ−γまたはＧＭＣＳＦの発現／分泌、パーフォリン、あるいはグランザイムＢ；あるいは、ＦａｓＬまたはＴＲＡＩＬの発現の減少によって、ＮＫ細胞において証明され得る。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は治療ワクチンであってもよい。
【００４３】
Ｔ細胞ベースの治療
ある実施形態では、本明細書のＨＤＡＣｉにより処理される細胞ベースの免疫療法は、リンパ球の集団である。ある実施形態では、リンパ球の集団は、個体の循環から単離される末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）に由来する。ある実施形態では、リンパ球の集団は、個体の腫瘍（腫瘍浸潤リンパ球）から単離されたリンパ球に由来する。ある実施形態では、リンパ球の集団はＴリンパ球（Ｔ細胞）を含む。これらの細胞集団は様々なリンパ球で構成された異質性あってもよく、あるいは、それらは、密度遠心分離（例えば、パーコール）、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）、白血球除去、または抗体ベースの選択方法（陽性または陰性）を使用した、単離／精製をさらに受ける場合がある。Ｔ細胞は通常、ＣＤ３の発現によって特徴付けられ、細胞毒性（ＣＤ８＋）集団あるいはヘルパー（ＣＤ４＋）集団へとさらに細分され得る。単離／精製されると、細胞集団は、少なくとも８０％、９０％、あるいは９５％純粋なＣＤ３＋細胞を含み得る。ある実施形態では、集団は、少なくとも８０％、９０％、あるいは９５％純粋なＣＤ３＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞を含む。ある実施形態では、集団は、少なくとも８０％、９０％、あるいは９５％純粋なＣＤ３＋  Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞を含む。Ｔ細胞集団はさらに単離することができ、ＣＴＬＡ４、ＬＡＧ−３、あるいはＰＤ−１などのチェックポイント阻害剤の低発現を選択することができる。
【００４４】
単離および精製された細胞集団は、標準的な分析法、例えば、抗ＣＤ３あるいはＣＤ２８抗体でのインキュベーション、および／またはＩＬ−２、ＩＬ−７および／またはＩＬ−１５などのサイトカインとの共培養を使用して、さらに増やすことができる。ある実施形態では、単離および精製された細胞集団は、特定の抗原特異性を持つ１つ以上のＴ細胞を増やすために、照射されたフィーダー細胞およびペプチド抗原でインキュベートされる。ある実施形態では、ペプチド抗原は腫瘍関連抗原を含む。
【００４５】
異種性の細胞集団は、標準的な分析法、例えば、抗ＣＤ３あるいはＣＤ２８抗体でのインキュベーション、および／またはＩＬ−２、ＩＬ−７および／またはＩＬ−１５などのサイトカインとの共培養を使用して、さらに増やすことができる。ある実施形態では、単離および精製された細胞集団は、特定の抗原特異性を持つ１つ以上のＴ細胞を増やすために、照射されたフィーダー細胞およびペプチド抗原でインキュベートされる。ある実施形態では、ペプチド抗原は腫瘍関連抗原を含む。細胞が増やされた後、細胞は、６０％、７０％、８０％、９０％あるいは９５％を超えるＣＤ３＋細胞、ＣＤ３＋ＣＤ４＋細胞、あるいはＣＤ３＋ＣＤ８＋細胞を含み得る。ある実施形態では、細胞のアリコートを、増殖後に、有効性に関して試験することができる。
【００４６】
個体から得られたＴ細胞あるいはＴ細胞集団を単離するか、あるいは増やすのに利用可能な多数の方法がある。Ｔ細胞集団を増やす、および／または単離するための非限定的な方法は、以下の米国特許および公開された出願で開示され：第５，８２７，６４２号；第６，３１６，２５７号；第６，３９９，０５４号；第７，７４５，１４０号；第８，３８３，０９９号；ＵＳ２００３／０１３４３４１；ＵＳ２００４／０２４１１６２；これら全ては、本明細書の参照によってその全体が組み込まれる。
【００４７】
Ｔ細胞集団は、当技術分野において既知の方法を使用した、造血幹細胞（ＨＳＣ）あるいは人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）由来のものであってもよい。ある実施形態では、Ｔ細胞集団はｉＰＳＣ由来であるか／それから分化される。ｉＰＳＣの源は、自己性（ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ）あるいは異種性（ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓ）であってもよい。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は細胞（ＨＳＣ）由来であるか／それから分化される。ＨＳＣの供給源（ｓｏｕｒｃｅ）は、自己性あるいは異種性であってもよい。
【００４８】
本明細書のＨＤＡＣｉによって処理されるＴ細胞集団は、細胞ベースの免疫療法剤（例えば、自己集団）により最終的に処置される個体、あるいは異なる個体（例えば、異種集団）由来であってもよい。ある実施形態では、自己細胞集団が使用される場合、その細胞集団は、インビトロでＨＤＡＣｉにより処理されている。ある実施形態では、自己細胞集団が使用される場合、その人は、細胞集団の単離前に、１回以上ＨＤＡＣｉを投与されている。ある実施形態では、異種細胞集団が使用される場合、それは、ＨＬＡ適合個体（例えば、同系）あるいはＨＬＡ不適合個体（例えば、同種異系）からのものであってもよい。ある実施形態では、異種細胞集団が使用される場合、それは、ＨＬＡ不適合ドナーからのものである。ある実施形態では、異種細胞集団が使用される場合、それは、自己供給源あるいは異種供給源から確立され得るＴ細胞株である。
【００４９】
Ｔ細胞集団（異種あるいは精製された；自己あるいは異種のいずれか）あるいはＴ細胞株が、本明細書に記載される方法で利用される場合、その集団は、ＨＤＡＣｉによる処理の前あるいは後に、特定の腫瘍関連抗原によって刺激または活性化され得る。腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）は、同じ起原の正常細胞と比較して、新生細胞によって独占的に発現されるか、あるいは高度に発現される抗原である。既知の腫瘍関連抗原は、例えば、神経膠腫に関連する抗原、癌胎児抗原（ＣＥＡ）、β−ヒト絨毛性ゴナドトロピン、αフェトプロテイン（ＡＦＰ）、レクチン反応性ＡＦＰ、チログロブリン、ＲＡＧＥ−１、ＭＮ−ＣＡ  ＩＸ、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、ＲＵ１、ＲＵ２（ＡＳ）、腸カルボキシルエステラーゼ、ｍｕｔ  ｈｓｐ７０−２、Ｍ−ＣＳＦ、プロスターゼ（ｐｒｏｓｔａｓｅ）、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、ＰＡＰ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＬＡＧＥ−１ａ、ｐ５３、プロステイン（ｐｒｏｓｔｅｉｎ）、ＰＳＭＡ、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、サバイビンとテロメラーゼ、前立腺癌腫瘍抗原−１（ＰＣＴＡ−１）、ＭＡＧＥ、ＥＬＦ２Ｍ、好中球エラスターゼ、エフリンＢ２、ＣＤ２２、インスリン成長因子（ＩＧＦ）−Ｉ、ＩＧＦ−ＩＩ、ＩＧＦ−Ｉ受容体とメソテリン、ＭＡＲＴ−１、ルイスＹ抗原（ＬｅＹ）、チロシナーゼとＧＰ  １００、前立腺酸性ホスファターゼ（ＰＡＰ）前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、ＲＯＲ１、ＭＵＣ１６、ＣＤ１７１（ＬＩＣＡＭ）、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）、ＷＴ１、ＨＥＲ−２／Ｎｅｕ／ＥｒｂＢ−２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３７、あるいは患者の特定のイディオタイプを含む。ある実施形態では、Ｔ細胞集団の５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、あるいは９５％より多くが、腫瘍関連抗原（例えば、四量体染色によって定義される）に特異的であり得る。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、ＴＡＡで刺激されなくてもよいが、例えば、四量体染色によって示されるようなＴＡＡに対する特異性を有し得る。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は、ウイルス抗原で刺激されなくてもよいが、例えば、四量体染色によって示されるようなウイルス抗原に対する特異性を有し得る。
【００５０】
Ｔ細胞集団（異種あるいは精製された；自己あるいは異種）またはＴ細胞株が、本明細書に記載される方法で利用される場合、その集団は、ヒトサイトメガロウイルス、エプスタイン−バーウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、あるいはＢ型肝炎ウイルスに由来するウイルス抗原によって刺激あるいは活性化され得る。ある実施形態では、集団は、エプスタイン−バーウイルスに由来する抗原によって刺激される。ある実施形態では、集団は、ヒト−サイトメガロウイルスに由来する抗原によって刺激される。
【００５１】
免疫応答は、ＣＤ４＋制御性Ｔ細胞（ＣＤ４＋  Ｔ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  ｃｅｌｌｓ）により負に調節される。ＣＤ４＋Ｔｒｅｇの減少は、細胞ベースの免疫療法に対する治療反応を増加させるための重要な戦略である。ＦｏｘＰ３は、制御性Ｔ細胞表現型の転写制御因子である。ある実施形態では、本明細書に記載されるＨＤＡＣ阻害剤は、ＦｏｘＰ３＋、ＣＤ４＋制御性Ｔ細胞の集団をインビトロで減少させる。ある実施形態では、本明細書に記載されるＨＤＡＣ阻害剤は、ＦｏｘＰ３＋、ＣＤ４＋制御性Ｔ細胞の集団を、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０、６０％、７０％、またはそれ以上減少させる。これらのＴ細胞集団は、ＨＤＡＣ阻害剤の投与後だが、細胞ベースの免疫療法で使用される細胞の単離の前に、個体において減少し得る。ある実施形態では、本明細書に記載されるＨＤＡＣ阻害剤は、プラセボ処置された個体と比較して、ＨＤＡＣ阻害剤により処置された個体において、ＦｏｘＰ３＋、ＣＤ４＋制御性Ｔ細胞の集団を、１０％、２０％、３０％、４０％、５０、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、またはそれ以上減少させる。ある実施形態では、本明細書に記載されるＨＤＡＣ阻害剤は、ビヒクル対照で処理されたか、または処理されていないままのＰＢＭＣと比較して、エクスビボで培養された末梢血単核球において、ＦｏｘＰ３＋、ＣＤ４＋制御性Ｔ細胞の集団を、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０、６０％、７０％、またはそれ以上減少させる。
【００５２】
本明細書に記載される方法で使用されるＴ細胞集団およびＴ細胞株は、増強された機能能を示す。この機能は、生理機能、例えば、非ＨＤＡＣｉ処理されたＴ細胞集団と比較した、循環における半減期の増加、腫瘍部位へのより高い輸送、細胞毒性活性の増加、あるいはサイトカイン／ケモカインの分泌の増加であり得る。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％長い半減期を示す。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、あるいは５倍長い半減期を示す。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きい、腫瘍部位への輸送を示す。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、あるいは５倍大きい、腫瘍部位への輸送を示す。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きい細胞毒性活性を示す。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、あるいは５倍大きい細胞毒性活性を示す。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きいレベルでＩＦＮ−γを放出する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、あるいは５倍大きいレベルでＩＦＮ−γを放出する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きいレベルでＩＬ−２を放出する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団または細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、あるいは５倍大きいレベルでＩＬ−２を放出する。非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、例えば、処理前と処理後の比較、あるいは、ＨＤＡＣｉ処理を除いて同様に処理された細胞集団との比較であってもよい。
【００５３】
あるいは、Ｔ細胞集団またはＴ細胞株において見られる機能の増大は、細胞あるいは分子の機能、例えば、非ＨＤＡＣｉ処理されたＴ細胞集団と比較した、活性化細胞マーカーの発現の増加、抑制性細胞マーカーの発現の減少、あるいは活性化細胞マーカーの細胞表面発現の増加、制御性細胞マーカーの発現の減少であり得る。ＣＸＣＲ３は、活性化されたＴｈ１細胞上で優先的に発現されるケモカイン受容体である。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きいレベルで、細胞表面でＣＸＣＲ３を発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、あるいは５倍大きいレベルで、細胞表面でＣＸＣＲ３を発現する。ＦｏｘＰ３は制御性Ｔ細胞（ＴＲＥＧ）に関連する転写因子である。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％あるいは７５％少ないレベルでＦｏｘＰ３を発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、あるいは５倍少ないレベルでＦｏｘＰ３を発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きいレベルでＩＦＮ−γｍＲＮＡを発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、５倍、あるいは１０倍大きいレベルでＩＦＮ−γ  ｍＲＮＡを発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きいレベルでＴＮＦα  ｍＲＮＡを発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、５倍、あるいは１０倍大きいレベルでＴＮＦα  ｍＲＮＡを発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％より大きいレベルでＩＬ−２  ｍＲＮＡを発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍大きいレベルでＩＬ−２  ｍＲＮＡを発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きいレベルでＴ−ｂｅｔ  ｍＲＮＡを発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、５倍、あるい���１０倍大きいレベルでＴ−ｂｅｔ  ｍＲＮＡを発現する。非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、例えば、処理前と処理後の比較、あるいは、ＨＤＡＣｉ処理を除いて同様に処理された細胞集団との比較であってもよい。
【００５４】
ＨＤＡＣｉがＴ細胞活性を増強することができる１つの方法は、Ｔ細胞集団の増大あるいはＴ細胞集団の記憶Ｔ細胞への分化による。記憶Ｔ細胞は、同種抗原（ｃｏｇｎａｔｅ  ａｎｔｉｇｅｎ）を発現あるいは表示する標的に対して高活性である。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きいレベルでＣＣＲ７を発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、５倍、あるいは１０倍大きいレベルでＣＣＲ７を発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きいレベルでＣＤ６２Ｌを発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、５倍、あるいは１０倍大きいレベルでＣＤ６２Ｌを発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％少ないレベルでＴＧＦβを発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、５倍、あるいは１０倍少ないレベルでＴＧＦβを発現する。非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、例えば、処理前と処理後の比較、あるいは、ＨＤＡＣｉ処理を除いて同様に処理された細胞集団との比較であってもよい。
【００５５】
Ｔ細胞は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、いわゆる「ＣＡＲ  Ｔ細胞」と組み合わせた、細胞ベースの療法としてさらに適用される。ＣＡＲ  Ｔ細胞は、膜貫通ドメインに融合された標的ドメイン（例えば、抗体Ｆａｂまたは単鎖可変フラグメント）、および、標的ドメインとその標的（例えば、ＣＤ３ゼータのシグナル伝達ドメイン、ＣＤ２８の細胞内ドメイン、４−１ＢＢの細胞内ドメイン）との相互作用の際にＴ細胞の活性化を誘導する細胞内ドメインを発現するように遺伝子的に操作された、Ｔ細胞株あるいはＴ細胞集団である。例えば、レトロウイルス、アデノウイルス、あるいはＡＡＶベクターを使用して、核酸ＣＡＲ構築物を一次Ｔ細胞集団へとウイルス形質導入することによって；あるいは、脂質ベースの試薬またはエレクトロポレーションによるトランスフェクションすることによって、Ｔ細胞をトランスジェニックにすることができる。ある実施形態では、本明細書に記載される方法は、ＨＤＡＣｉによる処理の前に、Ｔ細胞集団をトランスジェニックにすることを含む。ある実施形態では、本明細書に記載される方法は、ＨＤＡＣｉによる処理の後に、Ｔ細胞集団をトランスジェニックにすることを含む。ＣＡＲ  Ｔ細胞が初代リンパ球集団から生成される場合、その細胞はしばしば処置されている患者に由来するものである。ＣＤ３／ＣＤ２８抗体などの従来の方法を使用して、細胞を培養中で単離するか、あるいは増やして、形質導入とその後の投与に十分な細胞を生成する。さらに、安定した細胞株を、ＣＡＲを使用して樹立し、投与することもできる。現在のＦＤＡ承認のＣＡＲ  Ｔ細胞療法は、アキシカブタゲン  シロロイセル（ａｘｉｃａｂｔａｇｅｎｅ  ｃｉｌｏｌｅｕｃｅｌ）（Ｙｅｓｃａｒｔａ（商標））およびチサゲンレクロイセル（ｔｉｓａｇｅｎｌｅｃｌｅｕｃｅｌ）（Ｋｙｍｒｉａｈ（商標））を含む。ＣＡＲ構築物およびその使用の方法は、非限定的な例として、ＵＳ２０１３０２８７７４８Ａ１；ＵＳ  ２０１４／０２３４３４８Ａ１；あるいは、ＵＳ  ２０１４／００５０７０８に記載され、それらのすべては、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【００５６】
ある実施形態では、細胞ベースの治療は、ＣＡＲでトランスジェニックにされたＴ細胞株あるいはＴ細胞集団である。ＣＡＲでトランスジェニックにされたＴ細胞の集団は、ＴＡＡに特異的な標的ドメイン、例えば、神経膠腫関連抗原、癌胎児抗原（ＣＥＡ）、β−ヒト絨毛性ゴナドトロピン、αフェトプロテイン（ＡＦＰ）、レクチン反応性ＡＦＰ、チログロブリン、ＲＡＧＥ−１、ＭＮ−ＣＡ  ＩＸ、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、ＲＵ１、ＲＵ２（ＡＳ）、腸カルボキシルエステラーゼ、ｍｕｔ  ｈｓｐ７０−２、Ｍ−ＣＳＦ、プロスターゼ、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、ＰＡＰ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＬＡＧＥ−１ａ、ｐ５３、プロステイン、ＰＳＭＡ、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、サバイビンとテロメラーゼ、前立腺癌腫瘍抗原−１（ＰＣＴＡ−１）、ＭＡＧＥ、ＥＬＦ２Ｍ、好中球エラスターゼ、エフリンＢ２、ＣＤ２２、インスリン成長因子（ＩＧＦ）−Ｉ、ＩＧＦ−ＩＩ、ＩＧＦ−Ｉ受容体とメソテリン、ＭＡＲＴ−１、ルイスＹ抗原（ＬｅＹ）、チロシナーゼとＧＰ  １００、前立腺酸性ホスファターゼ（ＰＡＰ）前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、ＲＯＲ１、ＭＵＣ１６、ＣＤ１７１（ＬＩＣＡＭ）、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）、ＷＴ１、ＨＥＲ−２／Ｎｅｕ／ＥｒｂＢ−２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、あるいはＣＤ３７を発現することができる。
【００５７】
Ｔ細胞株あるいはＴ細胞集団（異種あるいは精製された；自己あるいは異種）が、ＣＡＲによってトランスジェニックにされる場合、ＣＡＲは、ヒトサイトメガロウイルス、エプスタイン−バーウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、あるいはＢ型肝炎ウイルスに由来するウイルス抗原に特異的であり得る。ある実施形態では、集団は、エプスタイン−バーウイルスに由来する抗原によって刺激される。ある実施形態では、集団は、ヒトサイトメガロウイルスに由来する抗原によって刺激される。
【００５８】
ある実施形態では、ＣＡＲ  Ｔ細胞は、静脈内注入（ｉ．ｖ．  ｉｎｆｕｓｉｏｎ）により投与される。ある実施形態では、約１ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約２ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約３ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約４ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約５ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約６ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約７ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約８ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約９ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約１ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約２ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約３ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約４ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約５ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約６ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約７ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約８ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約９ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約１ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約２ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約３ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約４ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約５ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約６ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約７ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約８ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約９ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。
【００５９】
ある実施形態では、ＣＡＲ  Ｔ細胞は、１日１回投与される。ある実施形態では、ＣＡＲ  Ｔ細胞は、週１回投与される。ある実施形態では、ＣＡＲ  Ｔ細胞は、月１回投与される。ある実施形態では、ＣＡＲ  Ｔ細胞は、週２回投与される。ある実施形態では、ＣＡＲ  Ｔ細胞は、月２回投与される。ある実施形態では、ＣＡＲ  Ｔ細胞は、週３回投与される。ある実施形態では、ＣＡＲ  Ｔ細胞は、月３回投与される。ある実施形態では、ＣＡＲ  Ｔ細胞は、月４回投与される。ある実施形態では、ＣＡＲ  Ｔ細胞は一回投与量として投与される。
【００６０】
細胞ベースの療法で使用される別の戦略は、ＴＡＡに特異的な組換えＴ細胞受容体（ＴＣＲ）に関して、Ｔ細胞集団をトランスジェニックにすることである。ＣＡＲベースの療法と同様に、培養中で増やしたＴ細胞はＴＡＡ特異的ＴＣＲでトランスフェクトおよび形質導入される。ほとんどの場合、これは、培養中で増やした患者の自己細胞を用いる。ある実施形態では、細胞ベースの療法は、組換えＴＣＲを発現するＴ細胞またはＴ細胞集団である。ＴＣＲは、ＴＡＡ、例えば、神経膠腫関連抗原、癌胎児抗原（ＣＥＡ）、β−ヒト絨毛性ゴナドトロピン、αフェトプロテイン（ＡＦＰ）、レクチン反応性ＡＦＰ、チログロブリン、ＲＡＧＥ−１、ＭＮ−ＣＡ  ＩＸ、ヒトテロメラーゼ逆転写酵、ＲＵ１、ＲＵ２（ＡＳ）、腸カルボキシルエステラーゼ、ｍｕｔ  ｈｓｐ７０−２、Ｍ−ＣＳＦ、プロスターゼ、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、ＰＡＰ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＬＡＧＥ−１ａ、ｐ５３、プロステイン、ＰＳＭＡ、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、サバイビンとテロメラーゼ、前立腺癌腫瘍抗原−１（ＰＣＴＡ−１）、ＭＡＧＥ、ＥＬＦ２Ｍ、好中球エラスターゼ、エフリンＢ２、ＣＤ２２、インスリン成長因子（ＩＧＦ）−Ｉ、ＩＧＦ−ＩＩ、ＩＧＦ−Ｉ受容体とメソテリン、ＭＡＲＴ−１、ルイスＹ抗原（ＬｅＹ）、チロシナーゼとＧＰ  １００、前立腺酸性ホスファターゼ（ＰＡＰ）前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、ＲＯＲ１、ＭＵＣ１６、ＣＤ１７１（ＬＩＣＡＭ）、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）、ＷＴ１、ＨＥＲ−２／Ｎｅｕ／ＥｒｂＢ−２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、あるいはＣＤ３７などに特異的であり得る。
【００６１】
ある実施形態では、組換えＴＣＲ  Ｔ細胞は、静脈内注入（ｉ．ｖ．  ｉｎｆｕｓｉｏｎ）により投与される。ある実施形態では、約１ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約２ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約３ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約４ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約５ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約６ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約７ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約８ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約９ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約１ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約２ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約３ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約４ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約５ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約６ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約７ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約８ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約９ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約１ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約２ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約３ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約４ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約５ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約６ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約７ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約８ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約９ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。
【００６２】
ある実施形態では、組換えＴＣＲ  Ｔ細胞は１日１回投与される。ある実施形態では、組換えＴＣＲ  Ｔ細胞は、週１回投与される。ある実施形態では、組換えＴＣＲ  Ｔ細胞は、月１回投与される。ある実施形態では、組換えＴＣＲ  Ｔ細胞は、週２回投与される。ある実施形態では、組換えＴＣＲ  Ｔ細胞は、月２回投与される。ある実施形態では、組換えＴＣＲ  Ｔ細胞は、週３回投与される。ある実施形態では、組換えＴＣＲ  Ｔ細胞は、月３回投与される。ある実施形態では、組換えＴＣＲ  Ｔ細胞は、月４回投与される。
【００６３】
ＨＤＡＣｉを用いたＴ細胞あるいはＴ細胞株のインビトロの処理は、増殖因子または維持促進性因子（ｐｒｏ−ｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ  ｆａｃｔｏｒ）、例えば、サイトカインＩＬ−１５、ＩＬ−７、あるいはそれらの組み合わせなどの追加の薬剤と組み合わせることができる。ある実施形態では、ナナチノスタットを用いたＴ細胞あるいはＴ細胞株のインビトロの処理は、増殖性因子または維持促進性因子、例えば、サイトカインＩＬ−１５、ＩＬ−７、あるいはそれらの組み合わせなどの追加の薬剤と組み合わせることができる。ある実施形態では、ＩＬ−１５の濃度は、約１ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬを含む。ある実施形態では、ＩＬ−１５の濃度は、約１ｎｇ／ｍＬ〜約５ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約１０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約３０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約４０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約５０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約７０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約１０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約３０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約４０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約５０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約７０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約３０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約４０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約５０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約７０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約３０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約４０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約５０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約７０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ〜約４０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ〜約５０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ〜約７０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ〜約５０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ〜約７０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ〜約７０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ〜約７０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ���約７０ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、あるいは約９０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬを含む。ある実施形態では、ＩＬ−１５の濃度は、約１ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬ、あるいは約１００ｎｇ／ｍＬを含む。ある実施形態では、ＩＬ−１５の濃度は、少なくとも約１ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、あるいは約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬを含む。ある実施形態では、ＩＬ−１５の濃度は、最大で約５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬ、あるいは約１００ｎｇ／ｍＬを含む。ある実施形態では、ＩＬ−１５は、約１ｎｇ／ｍＬ、５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬ、あるいは約１００ｎｇ／ｍＬの濃度でＩＬ−７と組み合わされる。
【００６４】
ＨＤＡＣｉを用いたＴ細胞あるいはＴ細胞株のインビトロの処理は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、あるいはＰＤ−Ｌ２に対するアンタゴニスト抗体およびそれらの組み合わせなどのチェックポイント阻害剤である、追加の免疫療法剤と組み合わせることができる。ある実施形態では、チェックポイント阻害剤抗体は、イピリムマブ、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、Ｓｐａｒｔａｌｉｚｕｍａｂ、アテゾリズマブ、アベルマブ、あるいはデュルバルマブを含む。チェックポイント阻害剤抗体は、同じまたは異なる接触工程において、ある量のＩＬ−１５あるいはＩＬ−７のいずれかと共に随意に含まれてもよい。ある実施形態では、本方法においてＴ細胞ベースの免疫療法と接触するチェックポイント阻害剤抗体の濃度は、約１０マイクログラム／ｍＬ〜約１００マイクログラム／ｍＬである。ある実施形態では、本方法においてＴ細胞ベースの免疫療法と接触するチェックポイント阻害剤抗体の濃度は、約１０マイクログラム／ｍＬ〜約２０マイクログラム／ｍＬ、約１０マイクログラム／ｍＬから〜約３０マイクログラム／ｍＬ、約１０マイクログラム／ｍＬ〜約４０マイクログラム／ｍＬ、約１０マイクログラム／ｍＬ〜約５０マイクログラム／ｍＬ、約１０マイクログラム／ｍＬ〜約６０マイクログラム／ｍＬ、約１０マイクログラム／ｍＬ〜約７０マイクログラム／ｍＬ、約１０マイクログラム／ｍＬ〜約８０マイクログラム／ｍＬ、約１０マイクログラム／ｍＬ〜約９０マイクログラム／ｍＬ、約１０マイクログラム／ｍＬ〜約１００マイクログラム／ｍＬ、約２０マイクログラム／ｍＬ〜約３０マイクログラム／ｍＬ、約２０マイクログラム／ｍＬ〜約４０マイクログラム／ｍＬ、約２０マイクログラム／ｍＬ〜約５０マイクログラム／ｍＬ、約２０マイクログラム／ｍＬ〜約６０マイクログラム／ｍＬ、約２０マイクログラム／ｍＬ〜約７０マイクログラム／ｍＬ、約２０マイクログラム／ｍＬ〜約８０マイクログラム／ｍＬ、約２０マイクログラム／ｍＬ〜約９０マイクログラム／ｍＬ、約２０マイクログラム／ｍＬ〜約１００マイクログラム／ｍＬ、約３０マイクログラム／ｍＬ〜約４０マイクログラム／ｍＬ、約３０マイクログラム／ｍＬ〜約５０マイクログラム／ｍＬ、約３０マイクログラム／ｍＬ〜約６０マイクログラム／ｍＬ、約３０マイクログラム／ｍＬ〜約７０マイクログラム／ｍＬ、約３０マイクログラム／ｍＬ〜約８０マイクログラム／ｍＬ、約３０マイクログラム／ｍＬ〜約９０マイクログラム／ｍＬ、約３０マイクログラム／ｍＬ〜約１００マイクログラム／ｍＬ、約４０マイクログラム／ｍＬ〜約５０マイクログラム／ｍＬ、約４０マイクログラム／ｍＬ〜約６０マイクログラム／ｍＬ、約４０マイクログラム／ｍＬ〜ら約７０マイクログラム／ｍＬ、約４０マイクログラム／ｍＬ〜約８０マイクログラム／ｍＬ、約４０マイクログラム／ｍＬ〜約９０マイクログラム／ｍＬ、約４０マイクログラム／ｍＬ〜約１００マイクログラム／ｍＬ、約５０マイクログラム／ｍＬ〜約６０マイクログラム／ｍＬ、約５０マイクログラム／ｍＬ〜約７０マイクログラム／ｍＬ、約５０マイクログラム／ｍＬ〜約８０マイクログラム／ｍＬ、約５０マイクログラム／ｍＬ〜約９０マイクログラム／ｍＬ、約５０マイクログラム／ｍＬ〜約１００マイクログラム／ｍＬ、約６０マイクログラム／ｍＬ〜約７０マイクログラム／ｍＬ、約６０マイクログラム／ｍＬ〜約８０マイクログラム／ｍＬ、約６０マイクログラム／ｍＬ〜約９０マイクログラム／ｍＬ、約６０マイクログラム／ｍＬ〜約１００マイクログラム／ｍＬ、約７０マイクログラム／ｍＬ〜約８０マイクログラム／ｍＬ、約７０マイクログラム／ｍＬ〜約９０マイクログラム／ｍＬ、約７０マイクログラム／ｍＬ〜約１００マイクログラム／ｍＬ、約８０マイクログラム／ｍＬ〜約９０マイクログラム／ｍＬ、約８０マイクログラム／ｍＬ〜〜約１００マイクログラム／ｍＬ、あるいは約９０マイクログラム／ｍＬ〜約１００マイクログラム／ｍＬである。ある実施形態では、本方法においてＴ細胞ベースの免疫療法と接触するチェックポイント阻害剤抗体の濃度は、約１０マイクログラム／ｍＬ、約２０マイクログラム／ｍＬ、約３０マイクログラム／ｍＬ、約４０マイクログラム／ｍＬ、約５０マイクログラム／ｍＬ、約６０マイクログラム／ｍＬ、約７０マイクログラム／ｍＬ、約８０マイクログラム／ｍＬ、約９０マイクログラム／ｍＬ、あるいは約１００マイクログラム／ｍＬである。ある実施形態では、本方法においてＴ細胞ベースの免疫療法と接触するチェックポイント阻害剤抗体の濃度は、少なくとも約１０マイクログラム／ｍＬ、約２０マイクログラム／ｍＬ、約３０マイクログラム／ｍＬ、約４０マイクログラム／ｍＬ、約５０マイクログラム／ｍＬ、約６０マイクログラム／ｍＬ、約７０マイクログラム／ｍＬ、約８０マイクログラム／ｍＬ、あるいは約９０マイクログラム／ｍＬである。ある実施形態では、本方法においてＴ細胞ベースの免疫療法と接触するチェックポイント阻害剤抗体の濃度は、最大で約２０マイクログラム／ｍＬ、約３０マイクログラム／ｍＬ、約４０マイクログラム／ｍＬ、約５０マイクログラム／ｍＬ、約６０マイクログラム／ｍＬ、約７０マイクログラム／ｍＬ、約８０マイクログラム／ｍＬ、約９０マイクログラム／ｍＬ、あるいは約１００マイクログラム／ｍＬである。
【００６５】
ナチュラルキラー細胞ベースの治療
ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞も細胞療法で使用することができる。ＮＫ細胞は、細胞毒性活性を示す自然リンパ球性免疫細胞（ｉｎｎａｔｅ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ  ｉｍｍｕｎｅ  ｃｅｌｌｓ）である。Ｔ細胞と同様に、ＮＫ細胞は、ＣＡＲ（ＣＡＲ  ＮＫ細胞を作る）を用いて形質導入されるか、あるいは形質導入なしで一次集団として使用され得る。ＣＡＲ  ＮＫ細胞は、一次自己集団（ｐｒｉｍａｒｙ  ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ）から樹立され得るか、あるいはＮＫ細胞株を使用して樹立され得る。使用することができる一般のＮＫ細胞株は、ＮＫ−９２細胞株（ＡＴＣＣ；ＣＲＬ−２４９７から利用可能）、あるいはＫＨＹＧ−１細胞株である。ある実施形態では、操作されたＮＫ細胞株は、ＫＨＹＧ−１細胞株から作られる。Ｙａｇｉｔａ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｎａｔｕｒａｌ  ｋｉｌｌｅｒ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ  （ＫＨＹＧ−１）  ｆｒｏｍ  ａ  ｐａｔｉｅｎｔ  ｗｉｔｈ  ａｇｇｒｅｓｓｉｖｅ  ｎａｔｕｒａｌ  ｋｉｌｌｅｒ  ｃｅｌｌ  ｌｅｕｋｅｍｉａ  ｃａｒｒｙｉｎｇ  ａ  ｐ５３  ｐｏｉｎｔ  ｍｕｔａｔｉｏｎ．  ”  Ｌｅｕｋｅｍｉａ  １４（５）：９２２−３０を参照。本開示のＨＤＡＣｉと共に使用されるＮＫ細胞は、初代細胞または樹立細胞株を含む任意のＮＫ細胞集団から作ることができる。ある実施形態では、ＮＫ細胞はヒトＮＫ細胞である。ヒトの初代ナチュラルキラー細胞は、細胞表面マーカーＣＤ５６を発現し、および、ある実施形態では、操作されたナチュラルキラー細胞は、非限定的な例として、フローサイトメトリーによって決定されるＣＤ５６陽性細胞から産生することができる。ある実施形態では、ナチュラルキラー細胞は、自己供給源由来、あるいは異種供給源由来であってもよい。ＮＫ細胞は、細胞選別あるいは磁気ビーズなどの方法を使用して処置されるドナーまたは個体の末梢血から単離される。ドナーから単離されたＮＫ細胞は、７日を超える期間にわたって、インターロイキン２およびインターロイキン１５において培養することによって、エクスビボで増えることができる。ＮＫ細胞集団も、当技術分野において既知の方法を用いて、造血幹細胞（ＨＳＣ）あるいは人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）由来であってもよい。ある実施形態では、Ｔ細胞集団はｉＰＳＣに由来する／ｉＰＳＣから分化する。ｉＰＳＣの源は、自己性あるいは異種性であってもよい。ある実施形態では、Ｔ細胞集団は（ＨＳＣ）細胞に由来する／（ＨＳＣ）細胞から分化する。ＨＳＣの供給源は、自己性あるいは異種性であってもよい。ＮＫ細胞集団はＣＤ５６発現によって特徴づけられ得る。ある実施形態では、本明細書に記載される培地および方法で有用なＮＫ細胞集団は、ＦＡＣＳ染色により、ＣＤ５６に対して少なくとも６０％、７０％、８０％、９０％、あるいは９５％陽性である。
【００６６】
ＣＡＲを発現するＮＫ細胞またはＮＫ細胞集団は、神経膠腫関連抗原、癌胎児抗原（ＣＥＡ）、β−ヒト絨毛性ゴナドトロピン、αフェトプロテイン（ＡＦＰ）、レクチン反応性ＡＦＰ、チログロブリン、ＲＡＧＥ−１、ＭＮ−ＣＡ  ＩＸ、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、ＲＵ１、ＲＵ２（ＡＳ）、腸カルボキシルエステラーゼ、ｍｕｔ  ｈｓｐ７０−２、Ｍ−ＣＳＦ、プロスターゼ（ｐｒｏｓｔａｓｅ）、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、ＰＡＰ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＬＡＧＥ−１ａ、ｐ５３、プロステイン（ｐｒｏｓｔｅｉｎ）、ＰＳＭＡ、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、サバイビンとテロメラーゼ、前立腺癌腫瘍抗原−１（ＰＣＴＡ−１）、ＭＡＧＥ、ＥＬＦ２Ｍ、好中球エラスターゼ、エフリンＢ２、ＣＤ２２、インスリン成長因子（ＩＧＦ）−Ｉ、ＩＧＦ−ＩＩ、ＩＧＦ−Ｉ受容体とメソテリン、ＭＡＲＴ−１、ルイスＹ抗原（ＬｅＹ）、チロシナーゼとＧＰ  １００、前立腺酸性ホスファターゼ（ＰＡＰ）前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、ＲＯＲ１、ＭＵＣ１６、ＣＤ１７１（ＬＩＣＡＭ）、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）、ＷＴ１、ＨＥＲ−２／Ｎｅｕ／ＥｒｂＢ−２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、あるいはＣＤ３７などのＴＡＡに特異的なＣＡＲを発現することができる。
【００６７】
ある実施形態では、ＣＡＲ  ＮＫ細胞は、静脈内注入（ｉ．ｖ．ｉｎｆｕｓｉｏｎ）により投与される。ある実施形態では、約１ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約２ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約３ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約４ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約５ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約６ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約７ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約８ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約９ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約１ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約２ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約３ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約４ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約５ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約６ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約７ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約８ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約９ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約１ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約２ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約３ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約４ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約５ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約６ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約７ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約８ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約９ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。
【００６８】
ある実施形態では、ＣＡＲ  ＮＫ細胞は、１日１回投与される。ある実施形態では、ＣＡＲ  ＮＫ細胞は、週１回投与される。ある実施形態では、ＣＡＲ  ＮＫ細胞は、月１回投与される。ある実施形態では、ＣＡＲ  ＮＫ細胞は、週２回投与される。ある実施形態では、ＣＡＲ  ＮＫ細胞は、月２回投与される。ある実施形態では、ＣＡＲ  ＮＫ細胞は、週３回投与される。ある実施形態では、ＣＡＲ  ＮＫ細胞は、月３回投与される。ある実施形態では、ＣＡＲ  ＮＫ細胞は、月４回投与される。ある実施形態では、ＣＡＲ  ＮＫ細胞は一回投与量として投与される。
【００６９】
さらに、ＮＫ細胞は高親和性Ｆｃ受容体（ＨａＮＫ）を発現するように操作され、腫瘍を標的とする抗体と組み合わせて、インビボの腫瘍細胞の死滅を標的とすることができる。例えば、ＣＤ１６は、Ｆｃ部分を介して抗体に結合する高親和性Ｆｃ受容体であり、Ｆａｂ部分が腫瘍細胞と自由に相互作用することを可能にし、それにより、細胞毒性ＮＫ細胞を腫瘍部位に動員する。高親和性Ｆｃ受容体で改変されたＮＫ細胞は、例えば、米国特許第７，６１８，８１７号および第８，３１３，９４３号に記載され、その全体が本明細書に組み込まれる。高親和性Ｆｃ受容体を発現するＮＫ細胞は、ＴＡＡ特異抗体と組み合わせることがき、例えば、モノクローナル抗体は、ランブロリズマブ、デュピルマブ、タバルマブ、ガリキシマブ、プリツムマブ、トラスツズマブ、アマツキシマブ、コルツキシマブラブタンシン（Ｃｏｌｔｕｘｉｍａｂ  ｒａｖｔａｎｓｉｎｅ）、エンシツキシマブ（Ｅｎｓｉｔｕｘｉｍａｂ）、インダツキシマブラブタンシン（Ｉｎｄａｔｕｘｉｍａｂ  ｒａｖｔａｎｓｉｎｅ）、イサツキシマブ、ミルベツキシマブソラブタンシン（Ｍｉｒｖｅｔｕｘｉｍａｂ  ｓｏｒａｖｔａｎｓｉｎｅ）、シルツキシマブ（Ｓｉｌｔｕｘｉｍａ）、ウブリツキシマブ、ザツキシマブ（Ｚａｔｕｘｉｍａｂ）、オンツキシズマブ（Ｏｎｔｕｘｉｚｕｍａｂ）、パソツキシズマブ（Ｐａｓｏｔｕｘｉｚｕｍａｂ）、アネツマブラブタンシン（Ａｎｅｔｕｍａｂ  ｒａｖｔａｎｓｉｎｅ）、アスクリンバクマブ、コナツムマブ、ダラツムマブ、デュルバルマブ、デュシギツマブ、エルゲムツマブ（Ｅｌｇｅｍｔｕｍａｂ）、ガニツマブ、イマルマブ、インデュサツマブベドチン（Ｉｎｄｕｓａｔｕｍａｂ  ｖｅｄｏｔｉｎ）、レクサツムマブ、マパツズマブ、ナルナツマブ（Ｎａｒｎａｔｕｍａｂ）、ネスバクマブ、ニボルマブ、オララツマブ（Ｏｌａｒａｔｕｍ）、パルサツズマブ（Ｐａｒｓａｔｕｚｕｍａｂ）、パトリツマブ（Ｐａｔｒｉｔｕｍａｂ）、ラドレツマブ（Ｒａｄｒｅｔｕｍａｂ）、ロバツムマブ（Ｒｏｂａｔｕｍｕｍａ）、セリバントマブ、タレクスツマブ（Ｔａｒｅｘｔｕｍａｂ）、チシリムマブ（Ｔｉｃｉｌｉｍｕｍａｂ）（トレメリムマブ）、トベツマブ（Ｔｏｖｅｔｕｍａｂ）、トレメリムマブ、バンチクツマブ（Ｖａｎｔｉｃｔｕｍａｂ）、アビツズマ、アラシズマブペゴール、アテゾリズマブ、ｃＢＲ９６−ドキソルビシン免疫複合体、コドリツズマブ（Ｃｏｄｒｉｔｕｚｕｍａｂ）、デムシズマブ（Ｄｅｍｃｉｚｕｍａｂ）、デニンツズマブマホドチン（Ｄｅｎｉｎｔｕｚｕｍａｂ  ｍａｆｏｄｏｔｉｎ）、エマクツズマブ（Ｅｍａｃｔｕｚｕｍａｂ）、エミベツズマブ、エノブリツズマブ、イムガツズマブ、イノツズマブ  オゾガマイシン、リファスツズマブベドチン（Ｌｉｆａｓｔｕｚｕｍａｂ  ｖｅｄｏｔｉｎ）、リンツズマ（Ｌｉｎｔｕｚｕｍａ）、ロルボツズマブメルタンシン（Ｌｏｒｖｏｔｕｚｕｍａｂ  ｍｅｒｔａｎｓｉｎ）、Ｌｕｍｒｅｔｕｚｕｍａｂ（ルムレツズマブ）、マルジェツキシマブ（Ｍａｒｇｅｔｕｘｉｍａｂ）、モガムリズマブ、オカラツズマブ、オナルツズマブ、オポルツズマブモナトクス（Ｏｐｏｒｔｕｚｕｍａｂ  ｍｏｎａｔｏｘ）、オトレルツズマブ（Ｏｔ���ｅｒｔｕｚｕｍａｂ）、ペルツズマブ、ピナツズマブベドチン（Ｐｉｎａｔｕｚｕｍａｂ  ｖｅｄｏｔｉｎ）、ポラツズマブベドチン、サシツズマブゴビテカン（Ｓａｃｉｔｕｚｕｍａｂ  ｇｏｖｉｔｅｃａｎ）、サマリズマブ（Ｓａｍａｌｉｚｕｍａｂ）、シブロツズマブ（Ｓｉｂｒｏｔｕｚｕｍａｂ）、タカツズマブテトラキセタン（Ｔａｃａｔｕｚｕｍａｂ  ｔｅｔｒａｘｅｔａｎ）、ティガツズマブ、ツコツズマブセルモロイキン、バンドルツズマブベドチン（Ｖａｎｄｏｒｔｕｚｕｍａｂ  ｖｅｄｏｔｉｎ）、バヌシズマブ（Ｖａｎｕｃｉｚｕｍａｂ）、ボルセツズマブマホドチン（Ｖｏｒｓｅｔｕｚｕｍａｂ  ｍａｆｏｄｏｔｉｎ）、ピディリズマブ、ドロジツマブ、クルクマブ（Ｉｃｒｕｃｕｍａｂ）、ウレルマブ、ダロツズマブ（Ｄａｌｏｔｕｚｕｍａｂ）、エナバツズマブ、フィクラツズマブ、ペンブロリズマブ、エンフォルツマブベドチン、バビツキシマブ（Ｂａｖｉｔｕｘｉｍａｂ）、エプラツズマブ、カンツズマブラブタンシン（Ｃａｎｔｕｚｕｍａｂ  ｒａｖｔａｎｓｉｎｅ）、ソネプシズマブ（Ｓｏｎｅｐｃｉｚｕｍａｂ）、ツビルマブ（Ｔｕｖｉｒｕｍａｂ）、ルミリキシマブ、オファツムマブ、ＴＧＮ１４１２、ジレンツキシマブ、パニツムマブ、ラベツズマブ、カンツズマブメルタンシン（Ｃａｎｔｕｚｕｍａｂ  ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ）、ボツムマブ（Ｖｏｔｕｍｕｍａｂ）、マツズマブ、レガビルマブ（Ｒｅｇａｖｉｒｕｍａｂ）、セビルマブ（Ｓｅｖｉｒｕｍａｂ）、オテリキシズマブ、ＩＭＡＢ３６２、ブレンツキシマブ  ベドチン（Ｂｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ  ｖｅｄｏｔｉｎ）、ダセツズマブ、ウロクプルマブ（Ｕｌｏｃｕｐｌｕｍａｂ）、テプロツムマブ、アポリズマブ、アトロリムマブ（Ａｔｏｒｏｌｉｍｕｍａｂ）、イラツムマブ、ＴＮＸ−６５０、アフツズマブ、リツキシマブ、エクロメキシマブ（Ｅｃｒｏｍｅｘｉｍａｂ）、ＴＲＢＳ０７、フランボツマブ、イピリムマブ、グレムバツムマブベドチン（Ｇｌｅｍｂａｔｕｍｕｍａｂ  ｖｅｄｏｔｉｎ）、エタラシズマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、エロツズマブ、ミラツズマブ、ルカツムマブ（Ｌｕｃａｔｕｍｕｍａｂ）、ジヌツキシマブ（Ｄｉｎｕｔｕｘｉｍａｂ）、ベリムマブ、ベルツズマブ、ネシツムマブ、カルルマブ、ロモソズマブ（Ｒｏｍｏｓｏｚｕｍａｂ）、デノスマブ、ファーレツズマブ、パンコマブ（Ｐａｎｋｏｍａｂ）、ソフィツズマブベドチン（Ｓｏｆｉｔｕｚｕｍａｂ  ｖｅｄｏｔｉｎ）、シタツズマブ・ボガトクス、クリバツズマブテトラキセタン（Ｃｌｉｖａｔｕｚｕｍａｂ  ｔｅｔｒａｘｅｔａｎ）、アブシキシマブ、ダクリズマブ、バシリキシマブ、アデカツムマブ、デルロツキシマブビオチン（Ｄｅｒｌｏｔｕｘｉｍａｂ  ｂｉｏｔｉｎ）、ルプリズマブ、クレノリキシマブ、カナキヌマブ、フレチクマブ（Ｆｌｅｔｉｋｕｍａｂ）、マブリリムマブ（Ｍａｖｒｉｌｉｍｕｍａｂ）、シルクマブ（Ｓｉｒｕｋｕｍａｂ）、ＡＬＤ５１８、アトリズマブ（トシリズマブ）、クラザキズマブ（Ｃｌａｚａｋｉｚｕｍａｂ）、インフリキシマブ、オクレリズマブ、ザノリムマブ、ゴリムマブ、サリルマブ（Ｓａｒｉｌｕｍａｂ）、アダリムマブ、フェザキヌマブ（Ｆｅｚａｋｉｎｕｍａｂ）、ボロ��キシマブ、シズツムマブ、ラムシルマブ、リロツムマブ（Ｒｉｌｏｔｕｍｕｍａｂ）、インテツムマブ、ビバツズマブメルタンシン（Ｂｉｖａｔｕｚｕｍａｂ  ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ）、ザルツムマブ、ニモツズマブ、アニフロルマブ（Ａｎｉｆｒｏｌｕｍａｂ）、ロンタリズマブ（Ｒｏｎｔａｌｉｚｕｍａｂ）、メテリムマブ、アレムツズマブ、あるいはパテクリズマブ（Ｐａｔｅｃｌｉｚｕｍａｂ）である。ある実施形態では、モノクローナル抗体は、ＢＳ−９３６５５９、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ、またはＭＥＤＩ４７３６である。
【００７０】
ある実施形態では、ＨａＮＫ細胞は、静脈内注入により投与される。ＨａＮＫ細胞は、投与前（ＨＤＡＣｉ処理前、処理中、または処理後）に抗体と組み合わされてもよいし、あるいはＴＡＡ特異抗体の後に投与されてもよい。ある実施形態では、約１ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約２ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約３ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約４ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約５ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約６ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約７ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約８ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約９ｘ１０５細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約１ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約２ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約３ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約４ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約５ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約６ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約７ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約８ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約９ｘ１０６細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約１ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約２ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約３ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約４ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約５ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約６ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約７ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約８ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。ある実施形態では、約９ｘ１０７細胞／ｍ２の細胞が投与される。
【００７１】
ある実施形態では、ＨａＮＫ細胞は１日１回投与される。ある実施形態では、ＨａＮＫ細胞は、週１回投与される。ある実施形態では、ＨａＮＫ細胞は、月１回投与される。ある実施形態では、ＨａＮＫ細胞は、週２回投与される。ある実施形態では、ＨａＮＫ細胞は、月２回投与される。ある実施形態では、ＨａＮＫ細胞は、週３回投与される。ある実施形態では、ＨａＮＫ細胞は、月３回投与される。ある実施形態では、ＨａＮＫ細胞は、月４回投与される。ある実施形態では、ＨａＮＫ細胞は一回投与量として投与される。
【００７２】
本明細書に記載される方法で使用されるＮＫ細胞集団およびＮＫ細胞株（ＣＡＲ  ＮＫおよびＨａＮＫ細胞を含む）は、増強された機能を示す。この機能は、生理機能、例えば、非ＨＤＡＣｉ処理されたＮＫ細胞集団と比較して、循環における半減期の増加、腫瘍部位へのより高い輸送、細胞毒性活性の増加、あるいはサイトカイン／ケモカイン分泌の増加であり得る。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％長い半減期を示す。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、ＨＤＡＣｉで処理されてない細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、あるいは５倍長い半減期を示す。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きい腫瘍部位への輸送を示す。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、あるいは５倍大きい腫瘍部位への輸送を示す。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きい細胞毒性活性を示す。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、ＨＤＡＣｉで処理されない細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、あるいは５倍大きい細胞毒性活性を示す。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きいレベルでＩＦＮ−γを放出する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団または細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、あるいは５倍大きいレベルでＩＦＮ−γを放出する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きいレベルでＴＲＡＩＬを放出する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団または細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、あるいは５倍大きいレベルでＴＲＡＩＬを放出する。あるいは、ＮＫ細胞集団またはＮＫ細胞株で見られる増強された機能は、細胞あるいは分子の機能、例えば、非ＨＤＡＣｉ処理されたＮＫ細胞集団と比較した、活性化細胞マーカーの発現の増加、抑制性細胞マーカーの発現の減少、あるいは活性化細胞マーカーの細胞表面発現の増加、抑制性細胞マーカーの発現の減少であってもよい。ＦａｓＬは、ＮＫ細胞上で発現され、および細胞毒性に寄与する細胞表面受容体である。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理でされた細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きいレベルで、細胞表面においてＦａｓＬを発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、あるいは５倍大きいレベルで、細胞表面においてＦａｓＬを発現する。ＫＬＲＣ２は、ＮＫ細胞毒性に関連する転写因子である。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きいレベルでＫＬＲＣ２を発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株または細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、あるいは５倍大きいレベルでＫＬＲＣ２を発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きいレベルでＩＦＮ−γｍＲＮＡを発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、５倍、あるいは１０倍大きいレベルでＩＦＮ−γ  ｍＲＮＡを発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きいレベルのパーフォリンｍＲＮＡを発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、５倍、あるいは１０倍大きいレベルでパーフォリンｍＲＮＡを発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、１０％、２５％、５０％、あるいは７５％大きいレベルでグランザイムＢ  ｍＲＮＡを発現する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株よりも、２倍、３倍、４倍、５倍、あるいは１０倍大きいレベルでグランザイムＢ  ｍＲＮＡを発現する。非ＨＤＡＣｉ処理された細胞集団あるいは細胞株は、例えば、処理前と処理後の比較、あるいは、ＨＤＡＣｉ処理を除いて同様に処理された細胞集団との比較であってもよい。
【００７３】
ＨＤＡＣｉを用いたＮＫ細胞のインビトロの処理は、増殖性因子または維持促進性因子、例えば、サイトカインＩＬ−１５、ＩＬ−７あるいはそれらの組み合わせなどの追加の薬剤と組み合わせることができる。ある実施形態では、ナナチノスタットを用いたＮＫ細胞のインビトロの処理は、増殖性因子または維持促進性因子、例えば、サイトカインＩＬ−１５、ＩＬ−７、あるいはそれらの組み合わせなどの追加の薬剤と組み合わせることができる。ある実施形態では、ＩＬ−１５の濃度は、約１ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬを含む。ある実施形態では、ＩＬ−１５の濃度は、約１ｎｇ／ｍＬ〜約５ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約１０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約３０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約４０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約５０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約７０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約１０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約３０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約４０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約５０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約７０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約３０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約４０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約５０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約７０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約３０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約４０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約５０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約７０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ〜約４０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ〜約５０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ〜約７０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ〜約５０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ〜約７０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ〜約７０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ〜約７０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ〜約８０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ〜約９０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬ、あるいは約９０ｎｇ／ｍＬ〜約１００ｎｇ／ｍＬを含む。ある実施形態では、ＩＬ−１５の濃度は、約１ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬ、あるいは約１００ｎｇ／ｍＬを含む。ある実施形態では、ＩＬ−１５の濃度は、少なくとも約１ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、あるいは約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬを含む。ある実施形態では、ＩＬ−１５の濃度は、最大で約５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬ、あるいは約１００ｎｇ／ｍＬを含む。ある実施形態では、ＩＬ−１５は、約１ｎｇ／ｍＬ、５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬ、あるいは約１００ｎｇ／ｍＬの濃度でＩＬ−１７と組み合わされる。
【００７４】
培地
細胞ベースの免疫療法を増強するのに役立つ細胞培養培地も本明細書で開示される。ある実施形態では、培地は、ヒトまたは動物由来の血清を欠いている。ある実施形態では、培地はクラスＩ  ＨＤＡＣｉを含む。いくつかの実施形態において、クラスＩ  ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタットである。ある実施形態では、ＨＤＡＣは、細胞ベースの免疫療法剤においてヒストンアセチル化を増加させる濃度で存在する。ある実施形態では、増大したアセチル化を伴うヒストンはヒストンＨ３を含む。ある実施形態では、増大したアセチル化を伴うヒストンはヒストンＨ３を含み、増大したアセチル化はリジン９にある。ある実施形態では、細胞培養培地は、約１０μＭ未満の濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約５μＭ未満の濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約２μＭ未満の濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約１μＭ未満の濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約９００ｎＭ未満の濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約８００ｎＭ未満の濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約７００ｎＭ未満の濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約６００ｎＭ未満の濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約５００ｎＭ未満の濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約４００ｎＭ未満の濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約３００ｎＭ未満の濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約２００ｎＭ未満の濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約１００ｎＭ未満の濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約５０ｎＭ未満の濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約１ｎＭより大きい濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約２ｎＭより大きい濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約５ｎＭより大きい濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約１０ｎＭより大きい濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、細胞培養培地は、約１００ｎＭより大きい濃度のナナチノスタットを含む。ある実施形態では、ナナチノスタットは、約１ｎＭ〜約５μＭの間、約１ｎＭ〜約２μＭの間、約１ｎＭ〜約１μＭの間、約１ｎＭ〜約９００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約８００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約７００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約６００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約５００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約４００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約３００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約２００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約１００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約５０ｎＭの間、約１ｎＭ〜約２５ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約５μＭの間、約１０ｎＭ〜約２μＭの間、約１０ｎＭ〜約１μＭの間、約１０ｎＭ〜約９００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約８００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約７００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約６００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約５００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約４００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約３００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約２００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約１００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約５０ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約２５ｎＭの間で、細胞培養培地中に存在する。本明細書における培地は、細胞療法の増強に寄与する追加のサイトカイン、ケモカイン、あるいは成長因子なしで、含まれるＨＤＡＣｉおよび培地から本質的になり得る。
【００７５】
細胞培養は、濃縮溶液（例えば、１０倍または１００倍）として、適切な容器中で滅菌蒸留水を用いた再構成のために凍結乾燥されて提供されるか、あるいは無希釈で提供されてもよい。培地は、Ｔ細胞またはＮＫ細胞の単離あるいは拡張に適した試薬を含むキットとして供給することができる。培地は、別個の容器に入ったＨＤＡＣｉおよび培地を含むキットとして供給することができる。培地は、別個の容器中に入ったナナチノスタットおよび培地を含むキットとして供給することができる。
【００７６】
細胞培養培地の特定の実施形態が記載される。１．ＨＤＡＣ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）を含む細胞培養培地であって、ここで、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド）を含む、細胞培養培地。２．非ヒト由来の血清を含まない、実施形態１に記載の細胞培養培地。３．血清を含まない、実施形態１に記載の細胞培養培地。４．細胞ベースの免疫療法をさらに含む、実施形態１〜３のいずれか１つに記載の細胞培養培地。５．細胞ベースの免疫療法はＴ細胞集団を含む、実施形態４に記載の細胞培養培地。６．Ｔ細胞は、健康な個体に由来する一次Ｔ細胞集団を含む、実施形態５に記載の細胞培養培地。７．Ｔ細胞は、疾患に罹患している個体に由来する一次Ｔ細胞集団を含む、実施形態５に記載の細胞培養培地。８．Ｔ細胞は、疾患に罹患している個体に由来する一次Ｔ細胞集団を含む、実施形態５に記載の細胞培養培地。９．Ｔ細胞集団はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をさらに含む、実施形態５〜８のいずれか１つに記載の細胞培養培地。１０．細胞培養培地は腫瘍関連抗原をさらに含む、実施形態５〜９のいずれか１つに記載の細胞培養培地。１１．細胞培養培地は炎症性サイトカインをさらに含む、実施形態５〜９のいずれか１つに記載の細胞培養培地。１２．Ｔ細胞集団はＣＤ４陽性Ｔ細胞に富んでいる、実施形態５〜９のいずれか１つに記載の細胞培養培地。１３．Ｔ細胞集団はＣＤ８陽性Ｔ細胞に富んでいる、実施形態５〜９のいずれか１つに記載の細胞培養培地。１４．細胞ベースの免疫療法を細胞培養培地と接触させた後、Ｔ細胞集団中でＦｏｘＰ３発現が減少する、実施形態５〜１３のいずれか１つに記載の細胞培養培地。１５．細胞ベースの免疫療法を細胞培養培地と接触させた後、Ｔ細胞集団中でインターフェロンγの分泌が増加する、実施形態５〜１３のいずれか１つに記載の細胞培養培地。１６．細胞ベースの免疫療法を細胞培養培地と接触させた後、Ｔ細胞集団中でＣＸＣＲ３の細胞表面発現が増加する、実施形態５〜１３のいずれか１つに記載の細胞培養培地。１７．細胞ベースの免疫療法はＴ細胞株を含む、実施形態４に記載の細胞培養培地。１８．Ｔ細胞株はキメラ抗原受容体を含む、実施形態１７に記載の細胞培養培地。１９．細胞ベースの免疫療法を細胞培養培地と接触させた後、Ｔ細胞株中でＦｏｘＰ３発現が減少する、実施形態１７または１８に記載の細胞培養培地。２０．インターフェロンγの分泌は、細胞ベースの免疫療法を細胞培養培地と接触させた後、Ｔ細胞株が増加する、実施形態１７または１８に記載の細胞培養培地。２１．細胞ベースの免疫療法を細胞培養培地と接触させた後、Ｔ細胞株中でＣＸＣＲ３の細胞表面発現が増加する、実施形態１７または１８に記載の細胞培養培地。２２．細胞ベースの療法はナチュラルキラー細胞株または初代ナチュラルキラー細胞集団を含む、実施形態４に記載の細胞培養培地。２３．ナチュラルキラー細胞株またはナチュラルキラー細胞集団はキメラ抗原受容体を含む、実施形態２２に記載の細胞培養培地。２４．ナチュラルキラー細胞株またはナチュラルキラー��胞集団は高親和性Ｆｃ受容体を含む、実施形態２２に記載の細胞培養培地。２５．細胞ベースの免疫療法を細胞培養培地と接触させた後、ナチュラルキラー細胞株またはナチュラルキラー細胞集団中でインターフェロンγの分泌が増加する、実施形態２２〜２４のいずれか１つに記載の細胞培養培地。２６．Ｔ細胞の疲弊を阻害するか、あるいは逆転させる方法で使用するための、実施形態２２〜２４のいずれか１つに記載の細胞培養培地。２７．疾患に罹患している個体を処置する方法で使用するための、実施形態２２〜２４のいずれか１つに記載の細胞培養培地。２８．疾患は癌である、実施形態２７に記載の細胞培養培地。２９．癌は、乳癌、子宮頚癌、結腸癌、頭頚部癌、腎癌、肝臓癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、あるいは前立腺癌である、実施形態２８に記載の細胞培養培地。３０．癌は白血病またはリンパ腫である、実施形態２９に記載の細胞培養培地。
【００７７】
追加の薬剤
ＨＤＡＣｉは、細胞ベースの免疫療法を増強するために、培養液中で追加の薬剤と組み合わせることができる。ある実施形態では、免疫療法剤は、サイトカインあるいはケモカインである。ある実施形態では、サイトカインは、インターフェロンである。ある実施形態では、サイトカインは、インターフェロンαである。ある実施形態では、サイトカインは、インターフェロンβである。ある実施形態では、サイトカインは、インターフェロンγである。ある実施形態では、サイトカインは、インターロイキンである。ある実施形態では、サイトカインは、インターロイキン１である。ある実施形態では、サイトカインは、インターロイキン２である。ある実施形態では、サイトカインは、インターロイキン７である。ある実施形態では、サイトカインは、インターロイキン１５である。ある実施形態では、サイトカインは、造血成長因子である。
【００７８】
癌
ある実施形態では、この開示の方法は、癌または腫瘍を処置するために癌の処置あるいは薬剤の製造のためのものである。ある実施形態では、本開示の方法は、癌あるいは腫瘍の処置を増強するためのものである。ある実施形態では、癌あるいは腫瘍は、成人急性リンパ芽球性白血病；小児期急性リンパ芽球性白血病；成人急性骨髄白血病；小児期急性骨髄白血病；副腎皮質癌；副腎皮質癌、小児期；青年期、癌；エイズ関連の癌；エイズ関連のリンパ腫；肛門癌；虫垂癌；星細胞腫、小児期；非定型奇形腫様／横紋筋肉腫様腫瘍、小児期、中枢神経系；基底細胞癌；肝外胆管癌；膀胱癌；膀胱癌、小児期；骨肉腫、骨肉腫および悪性線維性組織球腫；脳幹神経膠腫、小児期；脳腫瘍、成人；脳腫瘍、脳幹神経膠腫、小児期；脳腫瘍、中枢神経系非定型奇形腫様／横紋筋肉腫様腫瘍、小児期；脳腫瘍、中枢神経系胚芽腫、小児期；脳腫瘍、星細胞腫、小児期；脳腫瘍、頭蓋咽頭腫、小児期；脳腫瘍、上衣芽細胞腫、小児期；脳腫瘍、上衣腫、小児期；脳腫瘍、髄芽腫、小児期；脳腫瘍、髄様上皮腫、小児期；脳腫瘍、中間分化型の松果体実質腫瘍、小児期；脳腫瘍、テント上原始神経外胚葉腫瘍および松果体芽腫、小児期；脳および脊髄の腫瘍、小児期（他の）；乳癌；乳癌および妊娠；乳癌、小児期；男性乳癌；気管支腫瘍、小児期；バーキットリンパ腫；カルチノイド腫瘍、小児期；カルチノイド腫瘍、消化器系；原発不明癌；中枢神経系非定型奇形腫様／横紋筋肉腫様腫瘍、小児期；中枢神経系胚芽腫、小児期；中枢神経系（ＣＮＳ）リンパ腫、原発性；子宮頚癌；子宮頚癌、小児期；小児癌；脊索腫、小児期；慢性リンパ球性白血病；慢性骨髄性白血病；慢性骨髄増殖症候群；結腸癌；大腸癌、小児期；頭蓋咽頭腫、小児期；悪性皮膚Ｔ細胞リンパ腫；胚芽腫、中枢神経系、小児期；子宮内膜癌；上衣芽細胞腫、小児期；上衣腫、小児期；食道癌；食道癌、小児期；感覚神経芽腫、小児期；ユーイング肉腫ファミリー腫瘍；頭蓋外胚細胞腫瘍、小児期；性腺外胚細胞腫瘍；肝臓外胆管癌；眼癌、眼内黒色腫；眼癌、網膜芽細胞腫；胆嚢癌；胃（Ｇａｓｔｒｉｃ）（胃（Ｓｔｏｍａｃｈ））癌；胃（Ｇａｓｔｒｉｃ）（胃（Ｓｔｏｍａｃｈ））癌、小児期；消化管カルチノイド腫瘍；消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）；消化器間質細胞腫瘍、小児期；胚細胞腫瘍、小児、小児期；性腺外胚細胞腫；卵巣胚細胞腫；妊娠性絨毛腫瘍；神経膠腫、成人；神経膠腫、小児脳幹；ヘアリーセル白血病；頭頸部癌；心臓癌、小児期；肝細胞（肝臓）癌、成人（原発性）；肝細胞（肝臓）癌、小児期（原発性）；組織球増殖症、ランゲルハンス細胞；成人ホジキン・リンパ腫；小児期ホジキン・リンパ腫；下咽頭癌；眼内黒色腫；島細胞腫（内分泌膵）；カポジ肉腫；腎臓（腎細胞）癌；腎癌、小児期；ランゲルハンス細胞組織球症；喉頭癌；小児期喉頭癌；白血病、急性リンパ芽球性、成人；白血病、急性リンパ芽球性、小児期；白血病、急性骨髄性、成人；白血病、急性骨髄性、小児期；白血病、慢性リンパ球性；白血病、慢性骨髄性；白血病、毛様細胞；口唇および口腔の癌；肝臓癌、成人（原発性）；肝臓癌、小児期（原発性）；肺癌、非小細胞性；肺癌、小細胞性；リンパ腫、エイズ関連；リンパ腫、バーキット；リンパ腫、皮膚Ｔ細胞；リンパ腫、ホジキン、成人；リンパ腫、ホジキン、小児期；リンパ腫、非ホジキン、成人；リンパ腫、非ホジキン、小児期；リンパ腫、原発性中枢神経系（ＣＮＳ）；マクログロブリン血症、ワルデンシュトレーム；骨および骨肉腫の悪性線維性組織球腫；髄芽細胞腫、小児期；髄様上皮腫、小児期；黒色腫；黒色腫、眼内（目）；メルケル細胞癌；中皮腫、成人悪性腫瘍；髄芽細胞腫、小児期；原発不明の転移性頸部扁平上皮癌；口腔癌；多発性内分泌腫瘍症候群、小児期；多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍；菌状息肉腫；骨髄異形成症候群；骨髄異形成／骨髄増殖性腫瘍；骨髄性白血病、慢性；骨髄性白血病、成人急性；骨髄性白血病、小児期急性；多発性骨髄腫；骨髄増殖症候群、慢性；鼻腔および副鼻腔の癌；上咽頭癌；上咽頭癌、小児期；神経芽細胞腫；非ホジキン・リンパ腫、成人；非ホジキン・リンパ腫、小児期；非小細胞肺癌；口腔癌、小児期；口腔癌、口唇の癌および；口腔咽頭癌；骨肉腫および骨の悪性線維性組織球腫；卵巣癌、小児期；卵巣上皮癌；卵巣胚細胞腫瘍；卵巣低悪性度腫瘍；膵臓癌；膵臓癌、小児期；膵臓癌、島細胞腫；乳頭腫、小児期；副鼻腔および鼻腔の癌；副甲状腺癌；陰茎癌；咽頭癌；中間分化型の松果体実質腫瘍、小児期；松果体芽腫およびテント上原始神経外胚葉腫瘍、小児期；下垂体腫瘍；形質細胞腫瘍／多発性骨髄腫；胸膜肺芽腫、小児期；妊娠および乳癌；原発性中枢神経系（ＣＮＳ）リンパ腫；前立腺癌；直腸癌；腎細胞（腎臓）癌；腎盂および尿管、移行上皮癌；第１５染色体の変化を伴う呼吸器癌（Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｔｒａｃｔ  Ｃａｎｃｅｒ）；網膜芽細胞腫；横紋筋肉腫、小児期；唾液腺癌；唾液腺癌、小児期；肉腫、ユーイング肉腫ファミリー腫瘍；肉腫、カポジ；肉腫、軟部組織、成人；肉腫、軟部組織、小児期；肉腫、子宮；セザリー症候群；皮膚癌（非黒色腫）；皮膚癌、小児期；皮膚癌（黒色腫）；皮膚癌、メルケル細胞；小細胞肺癌；小腸癌；軟部組織肉腫、成人；軟部組織肉腫、小児期；扁平上皮癌；原発不明の頸部扁平上皮癌、転移性；胃癌；テント上原始神経外胚葉腫瘍、小児期；Ｔ細胞性リンパ腫、皮膚；精巣癌；咽喉癌；胸腺腫および胸腺癌；甲状腺癌；甲状腺癌、小児期；腎盂および尿管の移行上皮癌；絨毛腫瘍、妊娠性；原発部位不明、細胞腫、成人；原発部位不明、癌、小児期；小児の珍しい癌；尿管および腎盂、移行性細胞癌；尿道癌；子宮癌、子宮内膜；子宮肉腫；膣癌；外陰癌；ワルデンストレーム高ガンマグロブリン血症；またはウィルムス腫瘍である。
【００７９】
ウイルスの表示
細胞療法の増強は、慢性ウイルス感染症の処置としても有用であり得る。ある実施形態では、慢性ウイルス感染症を有する個体は、本明細書に記載される方法を使用して処置される。ある実施形態では、慢性ウイルス感染症は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）を含む、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、エプスタイン−バーウイルス、単純ヘルペスＩウイルス、単純ヘルペスＩＩウイルス、ヒトパピローマウイルス感染症（ＨＰＶ）、あるいはヒトサイトメガロウイルス（ｈＣＭＶ）を含む。
【００８０】
潜伏ウイルス性疾患（ＬＡＴＥＮＴ  ＶＩＲＡＬ  ＤＩＳＥＡＳＥ）を処置する方法
本明細書に開示されるＨＤＡＣｉは、潜伏ウイルス性疾患を処置する方法において有用である。ＨＩＶまたはヘルペスなどの多くの潜伏ウイルス性疾患を有効に処置することは可能であるが、これらの疾患を「治療する」（例えば、ウイルスを身体から完全に取り除くか、あるいは個体が抗ウイルス処置を受けるのを中止することを可能にする）ためには大きな障害が残っている。ナナチノスタットなどのクラスＩ  ＨＤＡＣｉを用いた処理は、潜伏ウイルスリザーバー（ｌａｔｅｎｔ  ｖｉｒａｌ  ｒｅｓｅｒｖｏｉｒｓ）から潜伏ウイルスを再活性化し、適切な細胞療法あるいは抗ウイルス薬剤による処理を可能にする。この種の方法は、「除去する（ｐｕｒｇｉｎｇ）」あるいは「キック・アンド・キル（ｋｉｃｋ  ａｎｄ  ｋｉｌｌ）」と呼ばれ得る。ある実施形態では、本明細書の方法によって「除去される」慢性ウイルス感染は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、エプスタイン−バーウイルス、単純ヘルペスＩウイルス、単純ヘルペスＩＩウイルス、あるいはヒトサイトメガロウイルス（ｈＣＭＶ）を含む。
【００８１】
本明細書に開示される方法およびＨＤＡＣｉは、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）を処置する方法において利用することができる。ある実施形態では、方法およびＨＤＡＣｉは、ウイルスの除去を可能にするために、潜伏ウイルスリザーバーを再活性化するのに有用である。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉを個体に投与して潜伏ウイルスを再活性化させ、その後、１以上のＨＩＶの抗レトロウイルス薬剤、免疫療法、細胞ベースの免疫療法、治療ワクチン、あるいはそれらの組み合わせにより処置する。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタットを含むか、ナナチノスタットから本質的になるか、あるいはナナチノスタットからなる。
【００８２】
ＨＩＶ陽性である個体をナナチノスタットなどのＨＤＡＣｉを用いて処置して、その後の抗ウイルス剤処置により「除去する」ために潜伏ＨＩＶ感染症を再活性化させることができる。個体は、抗ウイルスレジメンであらかじめ処置されてもよい。ある実施形態では、個体は、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）などの標準的な実験室試験により検出不可能なウイルス量を有している。ある実施形態では、個体は、１０００コピー／ｍＬより少ないウイルス量を有している。ある実施形態では、個体は、５００コピー／ｍＬより少ないウイルス量を有している。ある実施形態では、個体は、２００コピー／ｍＬより少ないウイルス量を有している。ある実施形態では、個体は、１００コピー／ｍＬより少ないウイルス量を有している。ある実施形態では、個体は、５０コピー／ｍＬより少ないウイルス量を有している。ある実施形態では、個体は、ＨＤＡＣｉなどの潜伏逆転剤（ｌａｔｅｎｃｙ  ｒｅｖｅｒｓｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）による処置前の少なくとも３ヶ月間、６ヶ月間、または一年間、１０００、５００、２００、１００、あるいは５０コピー／ｍＬより少ないウイルス量を有している。
【００８３】
ウイルスの「除去」の用途の場合、患者は、潜伏ウイルスを除去するために設計された処置を施される前に、有効な量のクラスＩ  ＨＤＡＣ阻害剤で前処置されてもよい。いくつかの実施形態において、クラスＩ  ＨＤＡＣｉはナナチノスタットである。ある実施形態では、ナナチノスタットは４０ｍｇ／日の用量で投与される。いくつかの実施形態において、ナナチノスタットは、約１ｍｇ／日、約２ｍｇ／日、約５ｍｇ／日、約１０ｍｇ／日、約１５ｍｇ／日、約２０ｍｇ／日、約２５ｍｇ／日、約３０ｍｇ／日、約３５ｍｇ／日、約４０ｍｇ／日、約４５ｍｇ／日、約５０ｍｇ／日、約６０ｍｇ／日、約７０ｍｇ／日、約８０ｍｇ／日、約９０ｍｇ／日、あるいは約１００ｍｇ／日の用量で投与される。ある実施形態では、ナナチノスタットは、１ｍｇ／日未満、２ｍｇ／日未満、５ｍｇ／日未満、１０ｍｇ／日未満、１５ｍｇ／日未満、２０ｍｇ／日未満、２５ｍｇ／日未満、３０ｍｇ／日未満、３５ｍｇ／日未満、４０ｍｇ／日未満、４５ｍｇ／日未満、５０ｍｇ／日未満、６０ｍｇ／日未満、８０ｍｇ／日未満、７０ｍｇ／日未満、９０ｍｇ／日未満、あるいは１００ｍｇ／日未満の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ナナチノスタットは、１ｍｇ／日より多い、２ｍｇ／日より多い、５ｍｇ／日より多い、１０ｍｇ／日より多い、１５ｍｇ／日より多い、２０ｍｇ／日より多い、２５ｍｇ／日より多い、３０ｍｇ／日より多い、３５ｍｇ／日より多い、４０ｍｇ／日より多い、４５ｍｇ／日より多い、５０ｍｇ／日より多い、６０ｍｇ／日より多い、７０ｍｇ／日より多い、８０ｍｇ／日より多い、９０ｍｇ／日より多い、あるいは１００ｍｇ／日より多い用量で投与される。ある実施形態では、ナナチノスタットは、３０ｍｇ／日より多い〜５０ｍｇ／日未満の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ナナチノスタットは、５ｍｇ／日より多い〜８０ｍｇ／日未満の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ナナチノスタットは、１０ｍｇ／日より多い〜８０ｍｇ／日未満の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ナナチノスタットは、２０ｍｇ／日より多い〜８０ｍｇ／日未満の用量で投与される。いくつかの実施形態において、ナナチノスタットは、約１ｍｇ／日、約２ｍｇ／日、約５ｍｇ／日、約６ｍｇ／日、約７ｍｇ／日、約８ｍｇ／日、約９ｍｇ／日、約１０ｍｇ／日、約１１ｍｇ／日、約１２ｍｇ／日、約１３ｍｇ／日、約１４ｍｇ／日、約１５ｍｇ／日、約１６ｍｇ／日、約１７ｍｇ／日、約１８ｍｇ／日、約１９ｍｇ／日、約２０ｍｇ／日、約２２ｍｇ／日、約２３ｍｇ／日、約２５ｍｇ／日、約２７ｍｇ／日、約２８ｍｇ／日、約３０ｍｇ／日、約３２ｍｇ／日、約３３ｍｇ／日、約３５ｍｇ／日、約４０ｍｇ／日、約４５ｍｇ／日、約５０ｍｇ／日、約６０ｍｇ／日、約７０ｍｇ／日、約８０ｍｇ／日、約９０ｍｇ／日、あるいは約１００ｍｇ／日の用量で投与される。ある実施形態では、ナナチノスタットは、１日１回（ｑ．ｄ．）１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）、あるいは１日３回（ｔ．ｉ．ｄ．）投与される。いくつかの実施形態では、ナナチノスタットは、毎日、週１回、週２回、週３回、週４回、または週５回投与される。ナナチノスタットは、潜伏ウイルス��除去するために設計された処置を施す前に、少なくとも１、２、３、あるいは４週間投与することができる。ナナチノスタットは、潜伏ウイルスを除去するために設計された処置を施す前に、少なくとも１、２、３、あるいは４ヶ月間投与することができる。
【００８４】
ある実施形態では、ナナチノスタットによる処置の後に抗レトロウイルス薬剤が投与されるか、あるいは、同時に投与される。ある実施形態では、抗レトロウイルス薬剤は、アバカビル（ザイアジェン）、アタザナビル（レイアタッツ）、ダルナビル（プレジスタ）、ドルテグラビルｒ（テビケイ）、エファビレンツ（サスティバ）、エルビテグラビル、エムトリシタビン（エムトリバ）、エトラビリン（インテレンス）、ホスアンプレナビル（Ｔｅｌｚｉｒ、Ｌｅｘｉｖａ）、ラミブジン（エピビル）、ロピナビル／リトナビル（カレトラ）、マラビロク（シーエルセントリ（Ｃｅｌｓｅｎｔｒｉ））、ネビラピン（ビラミューン）、ラルテグラビル（アイセントレス（Ｉｓｅｎｔｒｅｓｓ））、リルピビリン（エジュラント）、リトナビル（ノービア）、テノホビル（ビリアード（Ｖｉｒｅａｄ））、ジドブジン（ＡＺＴ、レトロビル）および、これらの組み合わせを含むか、あるいは上記からなる。ある実施形態では、抗レトロウイルス薬剤は、例えば、エファビレンツ／エムトリシタビン／テノホビルジソプロキシルフマル酸塩（アトリプラ（Ａｔｒｉｐｌａ））、アタザナビル／コビシスタット（Ｅｖｏｔａｚ）、エムトリシタビン／テノホビル（デシコビ（Ｄｅｓｃｏｖｙ））、ダルナビル／コビシスタット（Ｒｅｚｏｌｓｔａ）、エルビテグラビル／コビシスタット／エムトリシタビン／テノホビル（スタリビルド）、アバカビル／ドルテグラビル／ラミブジン（トリーメク（Ｔｒｉｕｍｅｑ））、エムトリシタビン／リルピビリン／テノホビル（Ｏｄｅｆｓｅｙ）、リルピビリン／エムトリシタビン／テノホビル（Ｅｖｉｐｌｅｒａ）、アバカビル／ラミブジン（カイベクサ（Ｋｉｖｅｘａ））、およびエルビテグラビル／コビシスタット／エムトリシタビン／テノホビル（ゲンボイヤ（Ｇｅｎｖｏｙａ））を含むか、あるいは上記からなる併用処置である。これらの抗レトロウイルス薬剤のいずれかは、所与の抗レトロウイルスのための投与量と回数の標準で投与され得る。
【００８５】
ある実施形態では、再活性化するためのナナチノスタットによる処置の後に、免疫療法による処置が続くか、あるいは同時に投与される。ある実施形態では、免疫療法は、ＨＩＶポリペプチドに結合する抗体あるいは抗体の混合物である。ある実施形態では、免疫療法は、ＨＩＶ由来のポリペプチドに特異的なＣＡＲに関してトランスジェニックなＣＡＲ  Ｔ細胞、あるいはその集団、ＭＨＣクラスＩあるいはＭＨＣクラスＩＩ分子に結合するＨＩＶポリペプチドに特異的なＴ細胞受容体に関してトランスジェニックなＴ細胞あるいはその集団、あるいは、特異的にＨＩＶ感染細胞を溶解する細胞傷害性Ｔ細胞集団（ＣＤ８＋）含む細胞療法である。ある実施形態では、細胞療法は、消耗を逆転させるか、あるいは機能を増強するためにＨＤＡＣｉにより処理された、自己Ｔ細胞集団であり得る。ある実施形態では、細胞療法は、上に記載されるように、細胞療法を増強するためにＨＤＡＣｉを用いてインビトロで処理されている。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法を増強するために使用されるＨＤＡＣｉはナナチノスタットであり、および、潜伏ウイルスを再活性化するためにＨＤＡＣｉで処置された患者に投与される前に、細胞ベースの療法に適用される。
【００８６】
インビトロでの用途（例えば、細胞培養液における投与）について、細胞ベースの免疫療法は、有効な量のクラスＩ  ＨＤＡＣｉにより処理することができる。いくつかの実施形態において、クラスＩ  ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット（ＶＲｘ−３９９６あるいはＣＨＲ−３９９６とも呼ばれる）である。ナナチノスタットの化学式は、（２−（６−｛［（６−フルオロキノリン−２−イル）メチル］アミノ｝−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド）である。ナナチノスタットは、選択的クラスＩ  ＨＤＡＣ阻害剤であり、米国特許第７，９３２，２４６号に開示され、これは、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる。有効な量は、細胞ベースの免疫療法剤においてヒストンアセチル化の増大を結果としてもたらす量である。ある実施形態では、増大したアセチル化を伴うヒストンはヒストンＨ３を含む。ある実施形態では、増大したアセチル化を伴うヒストンはヒストンＨ３を含み、増大したアセチル化はリジン９にある。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１０μＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約５μＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約２μＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１μＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約９００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約８００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約７００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約６００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約５００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約４００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約３００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約２００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１００ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約５０ｎＭ未満のナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１ｎＭを超えるナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約２ｎＭを超えるナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約５ｎＭを超えるナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１０ｎＭを超えるナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、細胞ベースの免疫療法は、約１００ｎＭを超えるナナチノスタットの濃度で処理される。ある実施形態では、ナナチ���スタットは、約１ｎＭ〜約５μＭの間、約１ｎＭ〜約２μＭの間、約１ｎＭ〜約１μＭの間、約１ｎＭ〜約９００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約８００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約７００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約６００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約５００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約４００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約３００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約２００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約１００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約５０ｎＭの間、約１ｎＭ〜約２５ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約５μＭの間、約１０ｎＭ〜約２μＭの間、約１０ｎＭ〜約１μＭの間、約１０ｎＭ〜約９００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約８００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約７００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約６００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約５００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約４００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約３００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約２００ｎＭの間、約１ｎＭ〜約１００ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約５０ｎＭの間、約１０ｎＭ〜約２５ｎＭの間で投与される。ナナチノスタットは、約１、２、４、８、１６、２４、あるいは４８時間、細胞ベースの免疫療法を用いてインキュベートすることができる。ナナチノスタットは、少なくとも約１、２、４、８、１６、２４、あるいは４８時間、細胞ベースの免疫療法を用いてインキュベートすることができる。ナナチノスタットは、約１、２、４、８、１６、２４、あるいは４８時間以下の間、細胞ベースの免疫療法を用いてインキュベートすることができる。
【００８７】
ある実施形態では、ナナチノスタットでないＨＤＡＣｉは、潜伏ウイルスリザーバーを除去する方法において、ナナチノスタットと組み合わせることができる。ある実施形態では、ナナチノスタットでないＨＤＡＣｉが潜伏ウイルスを再活性化するために使用され、ナナチノスタットはウイルスを標的とする細胞ベースの免疫療法剤を増強するために使用される。ある実施形態では、ナナチノスタットは潜伏ウイルスを再活性化するために使用され、ナナチノスタットでないＨＤＡＣｉは、ウイルスを標的とする細胞ベースの免疫療法剤を増強するために使用される。ある実施形態では、ウイルスはＨＩＶである。ある実施形態では、ナナチノスタットでないＨＤＡＣｉは、キシノスタット（キシノスタット）（ＪＮＪ−２６４８１５８５（Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド）、Ｒ３０６４６５／ＪＮＪ−１６２４１１９９（Ｎ−ヒドロキシ−５−（４−（ナフタレン−２−イルスルホニル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン−２−カルボキサミド、ベリノスタット／ＰＸＤ１０１、トリコスタチンＡ／ＴＳＡ（７−［４−（ジメチルアミノ）フェニル］−Ｎ−ヒドロキシ−４，６−ジメチル−７−オキソヘプタ−２，４−ジエンアミド）、ＩＴＦ２３５７、ＣＢＨＡ、ギビノスタット／ＩＴＦ２３５７、ロミデプシン、ＰＣＩ−２４７８１、デプシペプチド（ＦＲ９０１２２８またはＦＫ２２８）、ブチレート、フェニルブチレート、バルプロ酸、ＡＮ−９、ＣＩ−９９４、エンチノスタット／ＭＳ−２７５／ＳＮＤＸ−２７５、モセチノスタット／ＭＧＣＤ０１０３（Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−（（４−ピリジン−３−イルピリミジン−２−イルアミノ）メチル）ベンズアミド）、ｍ−カルボキシケイ皮酸、ビスヒドロキサム酸、スベリンビスヒドロキサム酸、オキサムフラチン、ＡＢＨＡ、ＳＢ−５５６２９、ピロキサミド、プロペンアミド、アロイルピロリルヒドロキサミド、あるいはＬＡＱ８２４（（（Ｅ）−Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［［２−ヒドロキシエチル−［２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル］アミノ］メチル］フェニル］プロプ−２−エンアミド）パノビノスタット／ＬＢＨ−５８９、ボリノスタット／ＳＡＨＡ、キダミド、あるいは４ＳＣ−２０２を含む。
【００８８】
以下の特定の番号を付けられた実施形態が本明細書に記載される。１．個体のヒト免疫不全（ＨＩＶ）感染症を処置する方法であって、上記方法は：ＨＩＶ感染症を有する個体に有効な量のヒストンデアセチラーゼ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）を投与する工程であって、ここで、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタット、キシノスタット（ＪＮＪ−２６４８１５８５（Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド））、Ｒ３０６４６５／ＪＮＪ−１６２４１１９９（Ｎ−ヒドロキシ−５−（４−（ナフタレン−２−イルスルホニル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン−２−カルボキサミド）、ベリノスタット／ＰＸＤ１０１、トリコスタチンＡ／ＴＳＡ（７−［４−（ジメチルアミノ）フェニル］−Ｎ−ヒドロキシ−４，６−ジメチル−７−オキソヘプタ−２，４−ジエンアミド）、ＩＴＦ２３５７、ＣＢＨＡ、ギビノスタット／ＩＴＦ２３５７、ロミデプシン、ＰＣＩ−２４７８１、デプシペプチド（ＦＲ９０１２２８またはＦＫ２２８）、ブチレート、フェニルブチレート、バルプロ酸、ＡＮ−９、ＣＩ−９９４、エンチノスタット／ＭＳ−２７５／ＳＮＤＸ−２７５、モセチノスタット／ＭＧＣＤ０１０３（Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−（（４−ピリジン−３−イルピリミジン−２−イルアミノ）メチル）ベンズアミド）、ｍ−カルボキシケイ皮酸、ビスヒドロキサム酸、スベリンビスヒドロキサム酸、オキサムフラチン、ＡＢＨＡ、ＳＢ−５５６２９、ピロキサミド、プロペンアミド、アロイルピロリルヒドロキサミド、あるいはＬＡＱ８２４（（（Ｅ）−Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［［２−ヒドロキシエチル−［２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル］アミノ］メチル］フェニル］プロプ−２−エンアミド）、パノビノスタット／ＬＢＨ−５８９、ボリノスタット／ＳＡＨＡ、キダミド、または４ＳＣ−２０２を含み、ここで、ＨＩＶ感染症を有する個体は、１ミリリットルの血液当たりＨＩＶ  ＲＮＡの１０００未満のコピーのＨＩＶウイルス量を有する、方法。２．個体は、１ミリリットル当たりＨＩＶ  ＲＮＡの１００未満のコピーのＨＩＶウイルス量を有する、実施形態１の方法。３．ＨＤＡＣｉは、１日当たり８０ｍｇ未満の用量で投与される、実施形態１または２に記載の方法。４．ＨＤＡＣｉは、１日当たり４０ｍｇ未満の用量で投与される、実施形態１または２に記載の方法。５．ＨＤＡＣｉは、１日当たり２０ｍｇ未満の用量で投与される、実施形態１または２に記載の方法。６．ＨＩＶ感染症を有する個体に抗ＨＩＶ処置を施す工程をさらに含む、実施形態１〜５のいずれか１つに記載の方法。７．抗ＨＩＶ処置は、抗レトロウイルス薬剤またはその薬学的に許容可能な塩を含む、実施形態６に記載の方法。８．抗レトロウイルス薬剤またはその薬学的に許容可能な塩は、アバカビル、アタザナビル、ダルナビル、ドルテグラビル、エファビレンツ、エルビテグラビル、エムトリシタビン、エトラビリン、ホスアンプレナビル、ラミブジン、ロピナビル、マラビロク、ネビラピン、ラルテグラビル、リルピビリン、リトナビル、テノホビル、ジドブジン、およびそれらの組み��わせからなるリストから選択される、実施形態７に記載の方法。９．抗ＨＩＶ処置が免疫療法を含む、実施形態６に記載の方法。１０．免疫療法は、ＨＩＶ由来ポリペプチドに結合する抗体を含む、実施形態９に記載の方法。１１．免疫療法はＴ細胞集団を含む、実施形態９に記載の方法。１２．Ｔ細胞集団は、ＨＩＶ由来ポリペプチドに特異的なキメラ抗原受容体に関してトランスジェニックである、実施形態１１に記載の方法。１３．Ｔ細胞集団は、ＨＩＶ感染細胞を特異的に溶解する細胞傷害性Ｔ細胞集団である、実施形態１１に記載の方法。１４．免疫療法はナチュラルキラー細胞集団を含む、実施形態９に記載の方法。１５．ナチュラルキラー細胞集団は、ＨＩＶ由来ポリペプチドに特異的なキメラ抗原受容体に関してトランスジェニックである、実施形態１４に記載の方法。１６．免疫療法は、ＨＩＶ感染症を有する個体への投与前に、インビトロでナナチノスタットと接触させられる、実施形態９〜１５に記載のいずれか１つの方法。１７．ナナチノスタットの濃度は、ヒストンＨ３のアセチル化を増大させるのに十分な量である、実施形態１６に記載の方法。１８．ナナチノスタットの濃度は約１マイクロモル未満である、実施形態１７に記載の方法。１９．ナナチノスタットは少なくとも２時間、免疫療法と接触させられる、実施形態１７に記載の方法。２０．ナナチノスタットは、少なくとも１６時間、免疫療法と接触させられる、実施形態１７に記載の方法。２１．ＨＩＶ感染症を有する個体は、以前に抗ＨＩＶ処置を受けたことがある、実施形態１〜２０のいずれか１つに記載の方法。２２．抗ＨＩＶ処置は、抗レトロウイルス薬剤あるいはその薬学的に許容可能な塩である、実施形態１〜２０のうちのいずれか１つに記載の方法。
【００８９】
非ＨＤＡＣｉ潜伏逆転剤（ＮＯＮ−ＨＤＡＣｉ  ＬＡＴＥＮＣＹ  ＲＥＶＥＲＳＩＮＧ  ＡＧＥＮＴＳ）
さらに、非ＨＤＡＣｉのウイルスの潜伏逆転薬剤は、免疫療法剤あるいは抗ウイルス薬剤での処置前あるいは処置中に、潜伏ウイルスを再活性化する工程においてＨＤＡＣｉと組み合わせて使用することができる。ある実施形態では、非ＨＤＡＣｉのウイルスの潜伏逆転薬剤は、ブリオスタチン−１あるいはそのアナログなどのプロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）モジュレーターを含むか、またはそれから本質的になる。ある実施形態では、非ＨＤＡＣｉのウイルスの潜伏逆転薬剤は、インターロイキン７（ＩＬ−７）、ＩＬ−７アゴニスト、例えば、ラルテグラビルまたはマラビロクを含むか、あるいはそれから本質的になる。ある実施形態では、非ＨＤＡＣｉのウイルスの潜伏逆転薬剤は、インターロイキン１５（ＩＬ−１５）アゴニストあるいはＩＬ−１５アゴニストを含むか、あるいはそれから本質的になる。ある実施形態では、非ＨＤＡＣｉのウイルスの潜伏逆転薬剤は、ジスルフラムを含むか、あるいはそれから本質的になる。ある実施形態では、非ＨＤＡＣｉのウイルスの潜伏逆転薬剤は、Ｔｏｌｌ様受容体アゴニスト、例えば、ＭＧＮ１７０３を含むか、あるいはそれから本質的になる。ある実施形態では、非ＨＤＡＣｉのウイルスの潜伏逆転薬剤は、インゲノールＢ（ＩｎｇｅｎｏｌＢ）を含むか、あるいはそれから本質的になる。ある実施形態では、非ＨＤＡＣｉのウイルスの潜伏逆転薬剤は、ブロモドメインとエキストラ末端の阻害剤（Ｂｒｏｍｏｄｏｍａｉｎ  ａｎｄ  Ｅｘｔｒａｔｅｒｍｉｎａｌ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）（ＢＥＴｉ）、例えば、ＪＱ１、Ｉ−ＢＥＴ、あるいはＩ−ＢＥＴ１５１を含むか、あるいはそれから本質的になる。
【００９０】
ワクチンアジュバント
本明細書に示されるように、ＨＤＡＣｉは、Ｔ細胞およびＮＫ細胞などの細胞の免疫系の成分の機能面を改善することができるため、ＨＤＡＣｉはワクチンアジュバントとして機能し得る。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、ＨＤＡＣｉおよび予防ワクチン（例えば、感染または症状を防ぐように意図された、細菌またはウイルスによる感染前に投与されるワクチン）を含む製剤に含まれるアジュバントとして機能することができる。ＨＤＡＣｉは、皮下、筋肉内、経口的、あるいは静脈内に投与される予防ワクチンに、アジュバントとして含まれてもよい。ＨＤＡＣｉは、他の一般的なアジュバント、例えば、ミョウバンまたはスクワランオイル（ｓｑｕａｌｅｎｅ  ｏｉｌ）、あるいは注射部位で局所的な炎症を起こすのに適切な他のアジュバントとともに含まれてもよい。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、キシノスタット（ＪＮＪ−２６４８１５８５（Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−（（（（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）アミノ）メチル）ピペリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド））、Ｒ３０６４６５／ＪＮＪ−１６２４１１９９（Ｎ−ヒドロキシ−５−（４−（ナフタレン−２−イルスルホニル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン−２−カルボキサミド）、ベリノスタット／ＰＸＤ１０１、トリコスタチンＡ／ＴＳＡ（７−［４−（ジメチルアミノ）フェニル］−Ｎ−ヒドロキシ−４，６−ジメチル−７−オキソヘプタ−２，４−ジエンアミド）、ＩＴＦ２３５７、ＣＢＨＡ、ギビノスタット／ＩＴＦ２３５７、ロミデプシン、ＰＣＩ−２４７８１、デプシペプチド（ＦＲ９０１２２８またはＦＫ２２８）、ブチレート、フェニルブチレート、バルプロ酸、ＡＮ−９、ＣＩ−９９４、エンチノスタット／ＭＳ−２７５／ＳＮＤＸ−２７５、モセチノスタット／ＭＧＣＤ０１０３（Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−（（４−ピリジン−３−イルピリミジン−２−イルアミノ）メチル）ベンズアミド）、ｍ−カルボキシケイ皮酸、ビスヒドロキサム酸、スベリンビスヒドロキサム酸、オキサムフラチン、ＡＢＨＡ、ＳＢ−５５６２９、ピロキサミド、プロペンアミド、アロイルピロリルヒドロキサミド、またはＬＡＱ８２４（（（Ｅ）−Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［［２−ヒドロキシエチル−［２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル］アミノ］メチル］フェニル］プロプ−２−エンアミド）、パノビノスタット／ＬＢＨ−５８９、ボリノスタット／ＳＡＨＡ、キダミド、ナナチノスタット、あるいは４ＳＣ−２０２を含むか、あるいは上記から本質的になる。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、ナナチノスタットを含むか、あるいはそれから本質的になる。
【００９１】
ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、少なくとも約１ｍｇ／ｍＬ、約２ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約３５ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約４５ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ、約８０ｍｇ／ｍＬ、約９０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬ、２００ｍｇ／ｍＬ、３００ｍｇ／ｍＬ、４００ｍｇ／ｍＬ、あるいは約５００ｍｇ／ｍＬの濃度で製剤に含まれている。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、約１ｍｇ／ｍＬ、約２ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約３５ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約４５ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ、約８０ｍｇ／ｍＬ、約９０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬ、２００ｍｇ／ｍＬ、３００ｍｇ／ｍＬ、４００ｍｇ／ｍＬ、あるいは約５００ｍｇ／ｍＬの濃度でワクチン組成物に含まれている。ある実施形態では、ＨＤＡＣｉは、約１ｍｇ／ｍＬ、約２ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約３５ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約４５ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ、約８０ｍｇ／ｍＬ、約９０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬ、２００ｍｇ／ｍＬ、３００ｍｇ／ｍＬ、４００ｍｇ／ｍＬ、あるいは約５００ｍｇ／ｍＬ以下の濃度でワクチン組成物に含まれている。
【００９２】
ある実施形態では、ナナチノスタットは、少なくとも約１ｍｇ／ｍＬ、約２ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約３５ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約４５ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ、約８０ｍｇ／ｍＬ、約９０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬ、２００ｍｇ／ｍＬ、３００ｍｇ／ｍＬ、４００ｍｇ／ｍＬ、あるいは約５００ｍｇ／ｍＬの濃度で製剤に含まれている。ある実施形態では、ナナチノスタットは、約１ｍｇ／ｍＬ、約２ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約３５ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約４５ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ、約８０ｍｇ／ｍＬ、約９０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬ、２００ｍｇ／ｍＬ、３００ｍｇ／ｍＬ、４００ｍｇ／ｍＬ、あるいは約５００ｍｇ／ｍＬの濃度でワクチン組成物に含まれている。ある実施形態では、ナナチノスタットは、約１ｍｇ／ｍＬ、約２ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約３５ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約４５ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ、約８０ｍｇ／ｍＬ、約９０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬ、２００ｍｇ／ｍＬ、３００ｍｇ／ｍＬ、４００ｍｇ／ｍＬ、あるいは約５００ｍｇ／ｍＬの濃度でワクチン組成物に含まれている。
【実施例】
【００９３】
実施例１−ナナチノスタットによる脾細胞の処理がＦｏｘＰ３＋制御性Ｔ細胞を減少させる。
【００９４】
ナナチノスタットは、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、およびＦｏｘＰ３＋制御性細胞を特異的に減少させる。この減少は、他のＨＤＡＣ阻害剤エンチノスタットと比較した場合に、とりわけ顕著である。
【００９５】
この実験について、７つの処理群を作った（未処処理、ＤＭＳＯ処理、１μＭのエンチノスタット処理、１μＭのナナチノスタット処理、５００ｎＭのナナチノスタット処理、１００ｎＭのナナチノスタット処理、および１ｎＭのナナチノスタット処理）。各処理を、５匹のナイーブＢＡＬＢ／ｃマウス（処理群当たりｎ＝５）から単離した脾細胞に対して実施した。Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｇｅｎｔｌｅｍａｃｓを使用して、脾臓を単個細胞浮遊液へと処理した。ＲＢＣ溶解緩衝液を使用して、赤血球を溶解した。細胞を計数し、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ培地において再懸濁した。各脾臓からの細胞を、以下の表に従って、３ｘ１０６細胞／ウェルで、１２ウェルプレートに播種した。以下の表に示される濃度で検査剤を各プレートに加え、２４時間インキュベートした後にＦＡＣＳ分析を行った。ＦＡＣＳ分析は以下のマーカーからなった：生／死、ＣＤ４５、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ２５、およびＦｏｘＰ３。結果を以下の表８に示す。１μＭのエンチノスタットと比較して、ナナチノスタットは、ＦｏｘＰ３、ＣＤ２５＋Ｔ細胞のほぼ４７倍の減少をもたらした（表１の最後の列および図１Ａ）。この抑制効果は、少なくとも１００ｎＭほど低くても見られた（表１の最後の列および図１Ｂ）。
【００９６】
【表１】
2021511293.tif 000003
【００９７】
実施例２−ナナチノスタットが、マウス異種移植片モデルにおける免疫療法の有効性を高める
制御性Ｔ細胞に対して見られたナナチノスタット（ＣＨＲ−３９９６）の効果は、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１軸を標的とするものなどの免疫療法剤の有効性を増強することができた。この例では、ナナチノスタット処置を、２つの異なる腫瘍異種移植片モデル４Ｔ１およびＣＴ２６において、抗ＰＤ−１抗体処置と組み合わせた。６つの異なる処置群（ビヒクル、１０ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ−１、２５ｍｇ／ｋｇのナナチノスタット、１０ｍｇ／ｋｇのナナチノスタット、２５ｍｇ／ｋｇのナナチノスタットと１０ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ−１、１０ｍｇ／ｋｇのナナチノスタットと１０ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ−１）で各モデルを試験し、各群は、８匹の動物で構成された。４Ｔ１またはＣＴ２６のいずれかを動物の右ひ腹に接種し、腫瘍が６５−９０ｍｍ３になったときに投与を開始し、２１日間継続した。ナナチノスタットを動物に毎日投与し、および抗ＰＤ−１を週２回投与した。図２は、ＣＴ２６腫瘍を受けているマウスが、ＰＤ−１単独またはナナチノスタット単独のいずれかと比較して、抗ＰＤ−１とナナチノスタットの組み合わせ（塗りつぶされた形状）で腫瘍成長のより高い減少を示したことを表す。これは、１０ｍｇ／ｋｇ／日および２５ｍｇ／ｋｇ／日の両方のナナチノスタットの濃度で見られた。図３Ａおよび図３Ｂは、４Ｔ１腫瘍株がこの効果に耐性があったことを示す。実際には、この腫瘍は、抗ＰＤ−１処置単独に対して耐性があり、結果として、ナナチノスタットを用いたＨＤＡＣ処置が、抗ＰＤ−１と、場合によってはすべてのチェックポイント阻害剤などの免疫療法と、特異的に相乗作用することができることを示す。
【００９８】
実施例３−ナナチノスタットが、マウス異種移植片モデルにおけるＴ細胞腫瘍浸潤を増加させる。
ナナチノスタットは、単独で、および抗ｍＰＤ−１と組み合わせて、Ｂａｌｂ／ｃマウスのＣＴ２６皮下腫瘍モデルにおいて評価した。動物に、毎日２５ｍｇ／ｋｇのナナチノスタットを経口投与し、および、隔週ケジュールで１０ｍｇ／ｋｇの抗ｍＰＤ−１を腹腔内に投与した。１つの群当たり８匹の動物を選択し、９日目に、投与の１２〜１３時間後にＦＡＣＳおよびｑＰＣＲ分析のために腫瘍を採取した。残りの動物は、２１日目までそれぞれの処置を受け続けた。ナナチノスタットは耐容が良好であった。９日目に表２に示されるように、併用処置群（ナナチノスタットおよび抗ＰＤ−１）は最も高い腫瘍成長阻害（５７％）を引き起こし、ならびに、抗ＰＤ−１単独群とナナチノスタット単独群は、それぞれ３６％および３３％の部分的な腫瘍成長阻害を引き起こした。
【００９９】
【表２】
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【０１００】
図４に示されるように、Ｔ細胞浸潤は、ビヒクル群または抗ＰＤ−１群（両方で０．００７のｐ値）と比較して、ナナチノスタット処置群で有意に増加した。特に、ビヒクル群と比較して、ナナチノスタット処置群においてＣＤ８＋Ｔ細胞集団はより高かったが、ＣＤ４＋集団および制御性Ｔ細胞集団は群間で有意差はなかった（図示せず）。図５Ａおよび５Ｂに示されるように、ＣＤ４＋Ｔ細胞（図５Ａ；ｐ値対ビヒクル  ０．０１５、ｐ値対抗ＰＤ−１  ０．０７）およびＣＤ８＋Ｔ細胞（図５Ｂ；ｐ値対抗ＰＤ−１  ０．０．２１）において抗ＰＤ−１単独で処置された群と比較して、ＣＸＣＲ３発現細胞集団がナナチノスタットと抗ＰＤ−１で処置された群で有意により高かったが、ビヒクル群と比較して、ナナチノスタット単独で処置された場合、有意差は観察されなかった。
【０１０１】
免疫抑制マーカーＴＧＦｓ１とＳｔａｔ６の遺伝子発現の倍率変化（ビヒクル対照群に対して）は、図６Ａ（ＴＧＦβ１）および６Ｂ（Ｓｔａｔ６）に示される対照群と比較して、処置群において減少する傾向があった。反対に、図７Ａ（ＩＦＮ−γ）、図７Ａ（Ｔｂｅｔ）は、遺伝子発現の倍率変化が組み合わせ群において最も高かったことを示す。
【０１０２】
興味深いことに、図８に示されるように、ナナチノスタットおよびＰＤ−１の両方は、ＮＫ細胞上のＫＬＲＣ２発現を個別に増加させるが、この増加は、組み合わせによって妨げられた。
【０１０３】
方法
動物：試験のために、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した１４４匹の雌のＢａｌｂ／ｃマウス（生年月日：８／１／２０１７）に接種した。接種前の５日の安定化期間の間動物を収容した。個別のＨＥＰＡ換気ケージ（Ｉｎｎｏｃａｇｅ（登録商標）  ＩＶＣ，  Ｉｎｎｏｖｉｖｅ  ＵＳＡ）に動物を収容した。蛍光照明を１２時間サイクルで提供した。温度と湿度を毎日モニタリングおよび記録し、６８〜７４°Ｆ（２０〜２３°Ｃ）および３０〜７０％の湿度で、可能な限り最大限にそれぞれ維持した。２９２０Ｘ．１０  １８％の大豆照射げっ歯類飼料（ｓｏｙ  ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ  ｒｏｄｅｎｔ  ｆｅｅｄ）（Ｅｎｖｉｇｏ）およびオートクレーブ処理された酸性化水（ｐＨ２．５−３）を自由に与えた。
【０１０４】
腫瘍細胞調製：ＡＴＣＣ推奨の培養プロトコルに従ってＣＴ２６細胞を培養した。接種のために、細胞をＰＢＳにおいて洗浄し、計数し、２５０，０００の生存細胞／１００μｌの濃度で冷ＰＢＳにおいて再撹拌した。細胞懸濁液を、動物施設への輸送中に氷上で保管した。２６Ｇ  ７／８（０．５ｍｍＸ２２ｍｍ）針が取り付けられた冷却１ｍｌの注射器へと細胞を引き込むことによって、注射のための細胞を調製した。
【０１０５】
腫瘍生着（Ｔｕｍｏｒ  Ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ）：標準的に承認された麻酔を使用して、注射のために必要に応じて動物を準備し、および、注射前にマウスを剪毛した。一度に１匹のマウスを固定し、注射部位をアルコール消毒綿で消毒した。１００μｌの細胞懸濁液をマウスのひ腹に皮下注射した。耳のタグ付けによってマウスを標識した。
【０１０６】
腫瘍測定：触知できる腫瘍について、あるいは外見および行動のあらゆる変化について、動物を毎日モニタリングした。腫瘍が触知できるようになると、カリパスを使用してそれを測定した。以下の式（最長の直径ｘ最短の直径２）／２を使用して、腫瘍体積を計算した。
【０１０７】
ＦＡＣＳ分析：９日目、最後の投与の１２〜１３時間後に、Ｎ＝８／群からの腫瘍をＰＤ評価のために採取した。ＦＡＣＳ分析のためにトランスファー緩衝液に各腫瘍の半分を入れた。
【０１０８】
ＱＰＣＲ分析：９日目に、Ｎ＝８／群からの腫瘍をＰＤ評価のために採取した。各腫瘍の半分を、後のｑＰＣＲ分析のために急速冷凍した。急速冷凍された腫瘍の断片をＲＬＴ  ＰＬＵＳ緩衝液（Ｑｉａｇｅｎ）に移し、ならびに、標識され、かつあらかじめビーズで充填された管へと充填し、および、最高速度で６０秒間均質化した。メーカーのプロトコルに従って、Ｑｉａｇｅｎから購入したＡｌｌＰｒｅｐ  ＤＮＡ／ＲＮＡ  Ｍｉｎｉキットを用いてＲＮＡを抽出した。Ｂｉｏｔｅｃプロトコルに従って、Ｓｙｎｅｒｇｙ  ２  Ｍｕｌｔｉ−Ｍｏｄｅ  Ｒｅａｄｅｒよって、ＲＮＡの量および純度を評価した。各サンプルからの７５０ｎｇの全ＲＮＡを使用して、２０μｌの反応でｃＤＮＡを生成した。ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒによるＳｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔ  ＩＩＩ  Ｆｉｒｓｔ−Ｓｔｒａｎｄ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓプロトコルの基準に従って、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ  Ｍａｓｔｅｒｃｙｃｌｅｒ  Ｐｒｏを使用することにより、その反応を実施した。逆転写後、メーカーの説明書に従って、Ｅ．Ｃｏｌｉ  ＲＮＡｓｅ  Ｈの使用によりメッセンジャーＲＮＡを消化した。各サンプルの３７．５ｎｇのｃＤＮＡを、１０μｌの反応の総容積で遺伝子発現ＰＣＲのために使用した。各サンプルをそれぞれ３回繰り返して分析し、メーカーによって推奨される標準的なパラメータを使用して、３８４ウェル・プラットフォームＡＢＩ−ＶｉｉＡ７  Ｆａｓｔ  ｒｅａｌ−ｔｉｍｅ  ＰＣＲシステムを用いてｑＲＴ−ＰＣＲを実施した。この試験には、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒから購入した特定のＴａｑＭａｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ａｓｓａｙを使用した。遺伝子発現データを、ＡＢＩ  ２．１ソフトウェアを使用してＶｉｉＡ７システム上で分析し、生データを生成した。マウスβ−アクチンをハウスキーピング遺伝子として使用した。
【０１０９】
実施例４−自家養子Ｔ細胞免疫療法におけるナナチノスタットを用いた腫瘍浸潤リンパ球のインビトロでの処理
乳癌と診断されたか、あるいは乳癌を有する疑いのある患者は、生検組織から単離された腫瘍浸潤リンパ球を有する。ＩＬ−２、抗−ＣＤ３、照射したフィーダー細胞の存在下において、細胞をＸ−ＶＩＶＯ培地（Ｌｏｎｚａ）中で増やした。細胞の十分な数が生成されると（少なくとも１ｘ１０９）、細胞を１００ｎＭのナナチノスタットで２４時間インキュベートした。処理後、Ｔ細胞を採取して、患者に投与した（少なくとも１ｘ１０９）。
【０１１０】
実施例５−ナナチノスタットであらかじめ処置された患者の自家養子Ｔ細胞免疫療法における、ナナチノスタットを用いた腫瘍浸潤リンパ球のインビトロでの処理
この実施例は、患者が、腫瘍浸潤リンパ球の単離前の４週間にわたって毎週２ｍｇのナナチノスタットで経口的に処置されたことを除いて、実施例４に従って行われる。
【０１１１】
実施例６−ナナチノスタットによるＴ細胞疲弊の逆転
ナナチノスタットが、単独で、あるいはＰＤ−１と組み合わせて、逆のＴ細胞疲弊を逆転するために使用することができるか否かを試験するために、標準的なＴ細胞疲弊アッセイを使用した。末梢血単核球（ＰＢＭＣ）を、３つの単一のヒトドナーのバフィーコートから密度勾配で分離した。プールされた病原体特異的クラスＩペプチド（ＣＥＦＴ）でＰＢＭＣを刺激して、疲弊したＴ細胞集団を生成した。その後、ＣＥＦＴおよび自己単球由来樹状細胞（ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ  ｍｏｎｏｃｙｔｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ）で細胞をさらなる時間にわたって再刺激した後、疲弊の逆転をモニタリングするために、補充されたＤＣおよびＣＥＦＴを使用して、最終的な再刺激アッセイで試験した。刺激アッセイを、ＨＤＡＣ阻害剤ナナチノスタット（Ｎｓｔａｔ）単独あるいは抗ＰＤ−１と組み合わせた存在下で、または別のクラスＩ  ＨＤＡＣｉのエンチノスタットの存在下において実行した。１回用量のＨＤＡＣ阻害剤を試験し、単回用量の抗ＰＤ−１を使用した。刺激されていない対照および参照ＨＤＡＣ阻害剤もプレーティングした。培養物を３Ｈチミジンでパルスし、増殖を評価した。マルチプレックスによるサイトカイン分析のために上清を採取した。疲弊した表現型を確認し、および発現レベルは併用療法にさらされた後に改変したか否かを確認するために、フローサイトメトリーを使用して、細胞のサンプルを、ＣＤ４、ＣＤ８、ＰＤ−１、ＩＬ−１５Ｒ、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＣＲ７、ＩＦＮγおよびＣＤ２５に対して向けられる抗体パネルで染色し、特徴づけた。０日目に上記のパネルを使用してＰＢＭＣの表現型を決定し、細胞集団の初期頻度を判定した。
【０１１２】
データは、Ｔ細胞疲弊プロトコルが有効であったことを示す。図９Ａは、ＰＢＭＣ増殖が６日目にピークに達した後、Ｔ細胞が（ＣＥＦＴ）で再刺激された１０日目までに急速に降下したことを示す。図９Ｂおよび９Ｃは、抗ＰＤ−１およびＣＥＦＴが、ＣＥＦＴ単独と比較して、ＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖を回復したことを示す。ナナチノスタット単独ではＣＥＦＴ  ＣＤ８＋Ｔ細胞増殖に対して負の効果を有していたが、抗ＰＤ−１（ペンブロリズマブ）処理と組み合わせた場合、増殖が１０ｎＭおよび１００ｎＭで回復された。ＰＤ−１に応答した増殖のこの減少は、図１０に示されるような減少した細胞の生存率の結果ではなかった。全体的に、ナナチノスタットは、クラスＩ  ＨＤＡＣ１およびＨＤＡＣ３阻害剤エンチノスタットと比較して、細胞によって十分に許容された（図１０Ａおよび１０Ｂを比較する）。図１１に示されるように、ナナチノスタットおよびＰＤ−１阻害剤抗体で処理した再刺激ＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＰＤ−１阻害剤単独あるいはナナチノスタット単独のいずれかよりも多くのＩＮＦ−γを分泌したが（図１１Ｂ）、エンチノスタットは、抗ＰＤ−１単独で、あるいは抗ＰＤ−１と組み合わせて、放出されたＩＦＮ−γの量を実際に減少させた（図１１Ａ）。ナナチノスタット単独では、再刺激されたＣＤ８＋Ｔ細胞（図１１Ｂ）によるＩＦＮ−γ放出に対してほとんど効果がなかった。
【０１１３】
図１２は、再刺激されたＣＤ８＋Ｔ細胞の上清からのサイトカインの分析を示し、この分析は、抗ＰＤ１およびナナチノスタットの組み合わせが、免疫抑制（ｉｍｍｕｎｏｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ）ＩＦＮ−γ（図１２Ａ）およびＴＮＦα（図１２Ｂ）の放出を増加させた一方で、免疫抑制ＴＧＦβ（図１２Ｃ）の放出を減少させたことを示す。
【０１１４】
本発明の好ましい実施形態が本明細書で示され、記載されてきたが、こうした実施形態がほんの一例として提供されているに過ぎないということは当業者にとって明白である。当業者であれば、多くの変更、変化、および置換が、本発明から逸脱することなく思いつくだろう。本明細書に記載される本発明の実施形態の様々な代案が、本発明の実施において利用され得ることを理解されたい。以下の請求項は本発明の範囲を定義するものであり、この請求項とその均等物の範囲内の方法、および構造体がそれによって包含されるものであるということが意図されている。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図９Ｃ】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１２Ｃ】
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【国際調査報告】
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